KR20160050068A - 스위칭가능한 cas9 뉴클레아제 및 그의 용도 - Google Patents
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Abstract
본 개시내용의 일부 측면은 RNA-프로그램가능한 엔도뉴클레아제, 예컨대 Cas9의 활성을 제어하고/거나 이의 특이성을 개선시키기 위한 조성물, 방법, 시스템 및 키트를 제공한다. 예를 들어, RNA-프로그램가능한 엔도뉴클레아제의 결합을 제어하고, 따라서 이의 절단 활성을 제어하는, "온" 또는 "오프" 상태로 존재하도록 조작된 가이드 RNA (gRNA)가 제공된다. 본 개시내용의 일부 측면은 표적 mRNA의 존재 또는 부재에 기초하여 RNA-프로그램가능한 엔도뉴클레아제의 활성을 조절하는 mRNA-센싱 gRNA를 제공한다. 본 개시내용의 일부 측면은 연장된 DNA (xDNA)의 존재 또는 부재에 기초하여 RNA-프로그램가능한 엔도뉴클레아제의 활성을 조절하는 gRNA를 제공한다.
Description
관련 출원
본 출원은 2014년 7월 8일에 출원된 미국 출원 U.S.S.N. 14/326,329, 2014년 7월 8일에 출원된 미국 출원 U.S.S.N. 14/326,340, 2014년 7월 8일에 출원된 미국 출원 U.S.S.N. 14/326,361에 대해 35 U.S.C.§ 365(c) 하의 우선권을 주장하고, 또한 2013년 9월 6일에 출원된 미국 가 출원 U.S.S.N. 61/874,682에 대해 35 U.S.C.§ 119(e) 하의 우선권을 주장하며, 이들 각각은 본원에 참조로 포함된다.
부위-특이적 엔도뉴클레아제는 이론적으로 게놈 내의 단일 부위의 표적화된 조작을 허용하며, 유전자 표적화의 맥락에서 뿐만 아니라 치료적 적용에 유용하다. 포유동물을 비롯한 다양한 유기체에서, 부위-특이적 엔도뉴클레아제는 비-상동성 말단 연결 또는 상동성 재조합 중 하나를 자극하는 것을 통해 게놈 조작에 사용된 바 있다. 강력한 연구 도구를 제공하는 것에 더하여, 부위-특이적 뉴클레아제는 또한 유전자 요법제로서 잠재성을 가지며, 2개의 부위-특이적 엔도뉴클레아제는 최근 임상 시험에 들어갔다: 한 가지인 CCR5-2246은 항-HIV 치료 접근법 (NCT00842634, NCT01044654, NCT01252641)의 일부로서 인간 CCR-5 대립유전자를 표적화하며, 다른 한 가지인 VF24684는 항암 치료 접근법 (NCT01082926)의 일부로서 인간 VEGF-A 프로모터를 표적화한다.
오프-타겟 활성(off-target activity)을 갖지 않거나 단지 최소만을 갖는 의도된 뉴클레아제 표적 부위의 특이적 절단은 부위-특이적 엔도뉴클레아제의 임상적 적용에 대한, 및 또한 기본적 연구 적용에서의 고-효율 게놈 조작에 대한 전제조건이다. 예를 들어, 조작된 부위-특이적 결합 도메인의 불완전한 특이성은 세포 독성 및 의도된 표적 이외의 게놈 좌위의 바람직하지 않은 변경과 연관이 있다. 그러나, 오늘날 이용가능한 대부분의 뉴클레아제는 유의한 오프-타겟 활성을 나타내며, 따라서 임상적 적용에 적합하지 않을 수 있다. 임상적 및 연구 환경에 사용하기 위한 신생 뉴클레아제 플랫폼은 RNA-가이드된 뉴클레아제, 예컨대 Cas9이다. 이들 뉴클레아제는 특이적 표적 부위의 절단을 지정하는 가이드 RNA (gRNA)에 결합할 수 있는 한편, 오프-타겟 활성은 여전히 특정 Cas9:gRNA 복합체에 대해 관찰된다 (Pattanayak et al., "High-throughput profiling of off-target DNA cleavage reveals RNA-programmed Cas9 nuclease specificity." Nat Biotechnol. 2013; doi: 10.1038/nbt.2673). 따라서, 개선된 특이성을 갖는 뉴클레아제를 조작하기 위한 기술이 필요하다.
발명의 요약
본 개시내용의 일부 측면은 일부 조작된 부위-특이적 엔도뉴클레아제의 보고된 독성이 오프-타겟 DNA 절단에 기초한다는 인식에 기초한다. 또한, 기존의 RNA-가이드된 뉴클레아제의 활성은 일반적으로 예를 들어 뉴클레아제를 "오프"에서 "온" 상태로 스위칭하도록 분자 수준에서 제어될 수 없다. 뉴클레아제의 활성의 제어는 오프-타겟 효과의 발생 가능성을 감소시킬 수 있다. 본 개시내용의 일부 측면은 RNA-프로그램가능한 엔도뉴클레아제, 예컨대 Cas9 엔도뉴클레아제의 결합 및/또는 절단 활성을 제어하는 전략, 조성물, 시스템 및 방법을 제공한다.
따라서, 본 개시내용의 한 실시양태는 "스위칭가능한" 가이드 RNA (gRNA)를 포함하는 RNA-가이드된 뉴클레아제 복합체를 제공한다. 예를 들어, 일부 실시양태에서, 본 발명은 (i) 압타머를 포함하며, 압타머에 결합된 특이적 리간드의 부재 하에서는 표적 핵산에 혼성화하지 않는 gRNA; 및 (ii) Cas9 단백질을 포함하는 복합체를 제공한다. 일부 실시양태에서, 압타머는 리간드에 의해 결합된다. 일부 측면에서, 리간드는 임의의 분자이다. 일부 측면에서, 리간드는 소분자, 대사물, 탄수화물, 펩티드, 단백질 또는 핵산이다. 일부 실시양태에서, gRNA:리간드:Cas9 복합체는 표적 핵산에 결합하며 이의 절단을 매개한다. 예를 들어, 도 1을 참조한다.
또다른 실시양태에 따르면, 압타머를 포함하는 gRNA가 제공된다. 일부 실시양태에서, gRNA는 압타머에 결합된 리간드의 부재 하에서는 표적 핵산에 혼성화하지 않는다. 이러한 gRNA는 "스위칭가능한 gRNA"로 지칭될 수 있다. 예를 들어, 일부 측면에서, gRNA는 압타머에 결합된 리간드의 부재 하에서는 Cas9에 결합하지 않는다. 예를 들어 도 1a 내지 b를 참조한다. 일부 실시양태에서, gRNA는 압타머가 압타머에 특이적인 리간드에 의해 결합될 경우 Cas9에 결합한다. 일부 실시양태에서, gRNA는 압타머에 결합된 리간드의 부재 또는 존재 하에서 Cas9에 결합하지만, 표적 핵산에는 압타머에 결합된 리간드의 존재 하에서만 결합한다. 일부 측면에서, 리간드는 임의의 분자이다. 일부 측면에서, 리간드는 소분자, 대사물, 탄수화물, 펩티드, 단백질 또는 핵산이다. 일부 실시양태에서, 압타머는 RNA 압타머, 예를 들어, 리보스위치로부터 유래된 RNA 압타머이다. 일부 실시양태에서, 압타머가 유래되는 리보스위치는 테오필린 리보스위치, 티아민 피로포스페이트 (TPP) 리보스위치, 아데노신 코발라민 (AdoCbl) 리보스위치, S-아데노실 메티오닌 (SAM) 리보스위치, SAH 리보스위치, 플라빈 모노뉴클레오티드 (FMN) 리보스위치, 테트라히드로폴레이트 리보스위치, 리신 리보스위치, 글리신 리보스위치, 퓨린 리보스위치, GlmS 리보스위치 또는 프리-퀘오신1 (PreQ1) 리보스위치로부터 선택된다. 일부 실시양태에서, 압타머는 테오필린 리보스위치로부터 유래되고, 서열 3을 포함한다. 다른 실시양태에서, 압타머는 비-천연 발생적인 것이며, 일부 측면에서, 지수적 풍부화에 의한 리간드의 계통적 진화 (SELEX) 플랫폼을 사용하여 특이적 리간드에 결합하도록 조작된다. 일부 실시양태에서, gRNA의 비-압타머 부분은 적어도 50개, 적어도 60개, 적어도 70개, 적어도 80개, 적어도 90개, 적어도 100개, 적어도 110개, 적어도 120개, 적어도 130개, 적어도 140개 또는 적어도 150개의 뉴클레오티드를 포함하고, 압타머는 적어도 20개, 적어도 30개, 적어도 40개, 적어도 50개, 적어도 60개, 적어도 70개, 적어도 80개, 적어도 90개, 적어도 100개, 적어도 110개, 적어도 120개, 적어도 130개, 적어도 140개, 적어도 150개, 적어도 175개, 적어도 200개, 적어도 250개 또는 적어도 300개의 뉴클레오티드를 포함한다.
또다른 실시양태에 따르면, 본 발명의 Cas9 변이체를 사용한 부위-특이적 DNA 절단 방법이 제공된다. 예를 들어, 일부 측면에서, 상기 방법은 (i) DNA의 부분에 결합하는 서열을 포함하는, 압타머를 포함하는 gRNA, (ii) gRNA의 압타머에 결합된 특이적 리간드, 및 (iii) Cas9 단백질을 포함하는 복합체와 DNA를 Cas9 단백질이 DNA를 절단하는 조건 하에서 접촉시키는 것을 포함한다.
또다른 실시양태에 따르면, 세포에서의 부위-특이적 DNA 절단의 유도 방법이 제공된다. 예를 들어, 일부 실시양태에서, 상기 방법은 (a) DNA 표적 서열에 결합할 수 있는 서열을 포함하는, 압타머를 포함하는 gRNA를 세포와 접촉시키거나 세포 내에서 발현시키고; (b) Cas9 단백질을 세포와 접촉시키거나 세포 내에서 발현시키고; (c) gRNA의 압타머에 결합하는 리간드와 세포를 접촉시켜 DNA 표적을 절단하는 gRNA:리간드:Cas9 복합체의 형성을 초래하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 세포는 리간드를 세포내로, 예를 들어 생리학적 또는 병리생리학적 과정의 일부로서 생성한다. 일부 실시양태에서, 상기 방법은 (a) Cas9 단백질, 및 DNA 표적 서열에 결합할 수 있는 서열을 포함하는, 압타머를 포함하는 gRNA를 포함하는 복합체와 세포를 접촉시키고, (b) gRNA의 압타머에 결합하는 리간드와 세포를 접촉시켜 DNA 표적을 절단하는 gRNA:리간드:Cas9 복합체의 형성을 초래하는 것을 포함한다. 일부 측면에서, 단계 (a) 및 (b)는 동시에 또는 임의의 순서로 순차적으로 수행된다. 일부 실시양태에서, 상기 방법은 시험관내에서 수행되는 반면, 다른 실시양태에서 상기 방법은 생체내에서 수행된다.
또다른 실시양태에 따르면, mRNA-센싱 gRNA를 포함하는 RNA-가이드된 뉴클레아제 복합체가 제공된다. 예를 들어, 일부 실시양태에서, 복합체는 Cas9 단백질, 및 (i) 표적 핵산의 영역에 혼성화하는 영역; (ii) 영역 (i)의 서열에 부분적으로 또는 완전히 혼성화하는 또다른 영역; 및 (iii) 전사체 (mRNA)의 영역에 혼성화하는 영역을 포함하는 gRNA를 포함한다.
또다른 실시양태에 따르면, 예를 들어 (i) 표적 핵산의 영역에 혼성화하는 영역; (ii) 영역 (i)의 서열에 부분적으로 또는 완전히 혼성화하는 또다른 영역; 및 (iii) 전사체 (mRNA)의 영역에 혼성화하는 영역을 포함하는 mRNA-센싱 gRNA가 제공된다. 예를 들어, 도 2를 참조한다. 일부 실시양태에서, 영역 (i), (ii) 및 (iii)의 각각의 서열은 적어도 5개, 적어도 10개, 적어도 15개, 적어도 20개 또는 적어도 25개의 뉴클레오티드를 포함한다. 일부 측면에서, gRNA는 줄기-고리 구조를 형성하며, 줄기는 영역 (ii)의 서열의 일부 또는 전부에 혼성화된 영역 (i)의 서열을 포함하고, 고리는 영역 (iii)의 서열의 일부 또는 전부에 의해 형성된다. 일부 실시양태에서, 영역 (ii) 및 (iii)은 둘 다 영역 (i)에 대해 5' 또는 3' 중 하나이다. 예를 들어, 도 2a 대 2c를 참조한다. 일부 실시양태에서, 줄기-고리 구조는 영역 (iii)의 서열에 혼성화하는 전사체의 부재 하에서 형성된다. 이 예에서, gRNA는 "오프" 상태인 것으로 언급된다. 예를 들어, 도 2a, 2c를 참조한다. 일부 실시양태에서, 영역 (iii)의 서열에의 전사체의 결합은 영역 (ii)의 서열이 영역 (i)의 서열에 혼성화하지 않도록, 줄기-고리 구조의 풀림을 초래하거나, 줄기-고리 구조의 형성을 방지한다. 이 예에서, gRNA는 "온" 상태인 것으로 언급된다. 예를 들어, 도 2b, 2d를 참조한다. 일부 실시양태에서, gRNA는 Cas9 단백질에 결합하고, 영역 (i)의 서열은 영역 (iii)의 서열이 전사체에 결합할 (예를 들어, "센싱할") 경우 표적 핵산에 혼성화한다.
또다른 실시양태에 따르면, 예를 들어 mRNA-센싱 gRNA와 회합된 Cas9 단백질을 포함하는 복합체와 DNA를 접촉시키는 것을 포함하며, mRNA-센싱 gRNA가 mRNA에 의해 결합됨으로써 복합체가 DNA에 결합하고 이를 절단하는 것을 허용하는 것인 부위 특이적 DNA 절단 방법이 제공된다.
또다른 실시양태에 따르면, 연장된 DNA 인식 (xDNA-센싱) gRNA가 제공된다. 예를 들어, 도 3을 참조한다. 일부 실시양태에서, xDNA-센싱 gRNA는 (i) 표적 핵산의 영역에 혼성화하는 영역; (ii) 영역 (i)의 서열에 부분적으로 또는 완전히 혼성화하는 또다른 영역; 및 (iii) 표적 핵산의 또다른 영역에 혼성화하는 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 영역 (i) 및 (ii)의 각각의 서열은 적어도 5개, 적어도 10개, 적어도 15개, 적어도 20개 또는 적어도 25개의 뉴클레오티드를 포함하고; 영역 (iii)의 서열은 적어도 5개, 적어도 10개, 적어도 15개, 적어도 20개, 적어도 25개, 적어도 30개, 적어도 40개, 적어도 50개, 적어도 75개 또는 적어도 100개의 뉴클레오티드를 포함한다. 일부 실시양태에서, gRNA는 줄기-고리 구조를 형성하며, 줄기는 영역 (ii)의 서열의 일부 또는 전부에 혼성화된 영역 (i)의 서열을 포함하고, 고리는 영역 (iii)의 서열의 일부 또는 전부에 의해 형성된다. 일부 실시양태에서, 영역 (ii) 및 (iii)은 둘 다 영역 (i)에 대해 5' 또는 3' 중 하나이다. 예를 들어, 도 3a 대 3c를 참조한다. 일부 실시양태에서, 줄기-고리 구조는 영역 (iii)에서의 서열에 상보적이며 이에 결합하는 표적 핵산의 영역의 부재 하에서 형성된다. 예를 들어, 도 3a, c를 참조한다. 일부 실시양태에서, 영역 (iii)의 서열에의 표적 핵산의 영역의 혼성화는 영역 (ii)의 서열이 영역 (i)의 서열에 혼성화하지 않도록, 줄기-고리 구조의 풀림을 초래하거나, 줄기-고리 구조의 형성을 방지한다. 예를 들어, 도 3b, d를 참조한다. 일부 실시양태에서, gRNA는 Cas9 단백질에 결합하고, (i)에서의 서열은 영역 (iii)에서의 서열이 표적 핵산에 결합할 경우 표적 핵산에 결합한다.
또다른 실시양태에 따르면, xDNA-센싱 gRNA 및 Cas9 단백질을 포함하며, 임의로 표적 핵산을 포함하는 복합체가 제공된다. 일부 실시양태에서, 복합체의 형성은 표적 핵산의 절단을 초래한다.
또다른 실시양태에 따르면, xDNA-센싱 gRNA 및 Cas9 단백질을 포함하는 복합체와 DNA를 접촉시키는 것을 포함하는 부위-특이적 DNA 절단 방법이 제공된다.
본원에서 제공된 임의의 방법은 세포, 예를 들어 시험관내 또는 생체내 세포에서의 DNA 상에서 수행될 수 있다. 일부 실시양태에서, 본원에서 제공된 임의의 방법은 진핵 세포에서의 DNA 상에서 수행된다. 일부 실시양태에서, 진핵 세포는 개체, 예를 들어, 인간에 있다.
또다른 실시양태에 따르면, 예를 들어 본원에 기재된 임의의 gRNA, 복합체 또는 단백질 (예를 들어, Cas9 단백질)을 코딩하는 폴리뉴클레오티드가 제공된다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 폴리뉴클레오티드를 포함하는 벡터가 제공된다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 임의의 gRNA, 복합체 또는 단백질 (예를 들어, Cas9 단백질)의 재조합 발현용 벡터가 제공된다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 임의의 gRNA, 복합체 또는 단백질 (예를 들어, Cas9 단백질)을 발현시키기 위한 유전적 구축물을 포함하는 세포가 제공된다.
일부 실시양태에서, 키트가 제공된다. 예를 들어, 본원에 기재된 임의의 gRNA, 복합체 또는 단백질 (예를 들어, Cas9 단백질)을 포함하는 키트가 제공된다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 임의의 폴리뉴클레오티드를 포함하는 키트가 제공된다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 임의의 gRNA, 복합체 또는 단백질 (예를 들어, Cas9 단백질)을 코딩하는 폴리뉴클레오티드를 포함하는 재조합 발현용 벡터를 포함하는 키트가 제공된다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 임의의 gRNA, 복합체 또는 단백질 (예를 들어, Cas9 단백질)을 발현시키기 위한 유전적 구축물을 포함하는 세포를 포함하는 키트가 제공된다.
본 발명의 다른 이점, 특징 및 용도는 발명의 특정 실시양태의 상세한 설명; 개략적이며 일정한 비례로 도시되는 것을 의도하지 않는 도면; 및 청구범위로부터 명백할 것이다.
도 1a 내지 d는 압타머에 연결된 gRNA에 관한 본 발명의 특정 실시양태를 나타낸다. (a) 이 도면에서, 압타머를 포함하는 스위칭가능한 gRNA가 개략적으로 나타나 있다. 압타머에 결합하는 특이적 리간드 (여기서, 대사물)의 부재 하에서, 표적 핵산의 결합을 담당하는 서열은 압타머의 측면에 혼성화된다 (가장 좌측, "스위칭 서열"로 나타내어진 영역 참조). 대사물의 결합 시, 압타머는 표적 핵산의 결합을 담당하는 서열이 더 이상 압타머 서열에 혼성화하지 않도록 형태적 변화를 겪어, 이것이 표적에 혼성화하도록 한다. (b) "온" 상태로 스위칭 시, gRNA는 Cas9에 결합될 경우, 뉴클레아제를 이것이 표적 부위에 혼성화하는 표적 부위로 향하게 하여, Cas9가 표적 핵산의 각각의 가닥을 절단하도록 한다. (c 내지 d) 이 도면에서, gRNA에 연결된 압타머는 테오필린 리보스위치로부터 유래된다. 테오필린의 부재 하에서 (c), 압타머의 측면 ("테오필린 리보스위치"로 나타내어짐)은 표적 핵산 (패널의 상부에 이중-가닥 서열에 의해 나타내어짐)의 결합을 담당하는 서열 ("표적을 절단하는 가이드"로 나타내어짐)의 측면에 결합함으로써, gRNA가 표적 핵산에 혼성화하지 못하게 한다. 도 1c에서, 서열은 상부에서 하부로 서열 4 내지 6에 상응한다. 압타머가 테오필린 (압타머 서열에 결합하는 고체 소분자로 나타내어짐)에 의해 결합될 경우 (d), 이는 형태적 변화를 겪어 "가이드" 서열이 자유롭게 표적 핵산에 혼성화하는 것을 초래한다. 도 1d에서, 서열은 상부에서 하부로 서열 4, 5 및 11에 상응한다.
도 2a 내지 d는 mRNA-센싱 gRNA에 관한 본 발명의 특정 실시양태를 나타낸다. (a 내지 b) 이 도면에서, 5' 전사체 센서/가이드 블록 모티프를 포함하는 gRNA가 나타나 있다. 특정 mRNA의 부재 하에서 (a), 전사체 센서의 측면은 비결합된 채로 잔류하여 표적 핵산 (패널의 상부에 이중-가닥 서열에 의해 나타내어짐)의 결합을 담당하는 서열 ("표적을 절단하는 가이드"로 나타내어짐)의 특정 측면을 차단하는 줄기-고리 구조의 형성을 초래함으로써, gRNA가 표적 핵산에 혼성화하는 것을 방지한다. 도 2a에서, 서열은 상부에서 하부로 서열 4, 5 및 7에 상응한다. 전사체 센서가 혼성화하는 mRNA의 존재 하에서 (b), gRNA는 형태적 변화를 겪어 "가이드" 서열이 자유롭게 표적 핵산에 혼성화하는 것을 초래하며, 서열은 상부에서 하부로 서열 4, 5, 7 및 12에 상응한다. (c 내지 d) 유사하게, 상기 전략은 mRNA의 부재 하에서 (c), gRNA가 "오프" 상태 (서열은 상부에서 하부로 서열 4, 5 및 8에 상응함)이고, mRNA의 존재 하에서 (d), gRNA가 "온" 상태 (서열은 상부에서 하 부로 서열 4, 5 및 12에 상응함)이도록, 3' 전사체 센서/가이드 블록을 포함하는 gRNA에 적용될 수 있다.
도 3a 내지 d는 연장된 DNA (xDNA) 인식 전략에 관한 본 발명의 특정 실시양태를 나타낸다. (a 내지 b) 이 실시양태에서, 5' xDNA 센서/가이드 블록 모티프를 포함하는 gRNA가 나타나 있다. xDNA 센서 모티프는 표적 핵산의 다른 측면 (예를 들어, "표적을 절단하는 가이드" 서열 이외)과 상보적이며 이에 혼성화한다. (a) 정확한 표적 서열 (예를 들어, "가이드" 서열의 표적 뿐만 아니라 xDNA 센서 서열의 표적 둘 다를 포함함)의 부재 하에서, xDNA 센서의 측면은 비결합된 채로 잔류하여 표적 핵산 (패널의 상부에 이중-가닥 서열에 의해 나타내어짐)의 결합을 담당하는 서열 ("표적을 절단하는 가이드"로 나타내어짐)의 특정 측면을 차단하는 줄기-고리 구조의 형성을 초래함으로써, gRNA가 표적 핵산에 혼성화하는 것을 방지하며, 서열은 상부에서 하부로 서열 4, 5 및 9에 상응한다. xDNA 센서의 부분(들)이 혼성화하는 정확한 표적 핵산의 존재 하에서 (b), gRNA는 형태적 변화를 겪어 "가이드" 서열이 자유롭게 표적 핵산에 혼성화하는 것을 초래하며, 서열은 상부에서 하부로 서열 13, 14 및 9에 상응한다. 따라서, 정확한 표적 핵산의 존재 하에서만 gRNA (및 회합된 Cas9 단백질)의 결합이 일어난다. 이는 예를 들어 특이성을 증가시키는 Cas9:gRNA 복합체에 의해 인식되는 표적 뉴클레오티드의 수를 효과적으로 증가시킨다 (즉, 연장한다). (c 내지 d) 유사하게, 상기 전략은 표적 핵산의 부재 하에서 (c), gRNA가 "오프" 상태 (서열은 상부에서 하부로 서열 4, 5 및 10에 상응함)이고, 표적 핵산의 존재 하에서 (d), gRNA가 "온" 상태 (서열은 상부에서 하부로 및 좌측에서 우측으로 서열 4, 15, 5, 16 및 10에 상응함)이도록, 3' xDNA 센서/가이드 블록을 포함하는 gRNA에 적용될 수 있다.
도 2a 내지 d는 mRNA-센싱 gRNA에 관한 본 발명의 특정 실시양태를 나타낸다. (a 내지 b) 이 도면에서, 5' 전사체 센서/가이드 블록 모티프를 포함하는 gRNA가 나타나 있다. 특정 mRNA의 부재 하에서 (a), 전사체 센서의 측면은 비결합된 채로 잔류하여 표적 핵산 (패널의 상부에 이중-가닥 서열에 의해 나타내어짐)의 결합을 담당하는 서열 ("표적을 절단하는 가이드"로 나타내어짐)의 특정 측면을 차단하는 줄기-고리 구조의 형성을 초래함으로써, gRNA가 표적 핵산에 혼성화하는 것을 방지한다. 도 2a에서, 서열은 상부에서 하부로 서열 4, 5 및 7에 상응한다. 전사체 센서가 혼성화하는 mRNA의 존재 하에서 (b), gRNA는 형태적 변화를 겪어 "가이드" 서열이 자유롭게 표적 핵산에 혼성화하는 것을 초래하며, 서열은 상부에서 하부로 서열 4, 5, 7 및 12에 상응한다. (c 내지 d) 유사하게, 상기 전략은 mRNA의 부재 하에서 (c), gRNA가 "오프" 상태 (서열은 상부에서 하부로 서열 4, 5 및 8에 상응함)이고, mRNA의 존재 하에서 (d), gRNA가 "온" 상태 (서열은 상부에서 하 부로 서열 4, 5 및 12에 상응함)이도록, 3' 전사체 센서/가이드 블록을 포함하는 gRNA에 적용될 수 있다.
도 3a 내지 d는 연장된 DNA (xDNA) 인식 전략에 관한 본 발명의 특정 실시양태를 나타낸다. (a 내지 b) 이 실시양태에서, 5' xDNA 센서/가이드 블록 모티프를 포함하는 gRNA가 나타나 있다. xDNA 센서 모티프는 표적 핵산의 다른 측면 (예를 들어, "표적을 절단하는 가이드" 서열 이외)과 상보적이며 이에 혼성화한다. (a) 정확한 표적 서열 (예를 들어, "가이드" 서열의 표적 뿐만 아니라 xDNA 센서 서열의 표적 둘 다를 포함함)의 부재 하에서, xDNA 센서의 측면은 비결합된 채로 잔류하여 표적 핵산 (패널의 상부에 이중-가닥 서열에 의해 나타내어짐)의 결합을 담당하는 서열 ("표적을 절단하는 가이드"로 나타내어짐)의 특정 측면을 차단하는 줄기-고리 구조의 형성을 초래함으로써, gRNA가 표적 핵산에 혼성화하는 것을 방지하며, 서열은 상부에서 하부로 서열 4, 5 및 9에 상응한다. xDNA 센서의 부분(들)이 혼성화하는 정확한 표적 핵산의 존재 하에서 (b), gRNA는 형태적 변화를 겪어 "가이드" 서열이 자유롭게 표적 핵산에 혼성화하는 것을 초래하며, 서열은 상부에서 하부로 서열 13, 14 및 9에 상응한다. 따라서, 정확한 표적 핵산의 존재 하에서만 gRNA (및 회합된 Cas9 단백질)의 결합이 일어난다. 이는 예를 들어 특이성을 증가시키는 Cas9:gRNA 복합체에 의해 인식되는 표적 뉴클레오티드의 수를 효과적으로 증가시킨다 (즉, 연장한다). (c 내지 d) 유사하게, 상기 전략은 표적 핵산의 부재 하에서 (c), gRNA가 "오프" 상태 (서열은 상부에서 하부로 서열 4, 5 및 10에 상응함)이고, 표적 핵산의 존재 하에서 (d), gRNA가 "온" 상태 (서열은 상부에서 하부로 및 좌측에서 우측으로 서열 4, 15, 5, 16 및 10에 상응함)이도록, 3' xDNA 센서/가이드 블록을 포함하는 gRNA에 적용될 수 있다.
정의
본원 및 청구범위에 사용된 바와 같은, 단수 형태는 문맥상 달리 명백하게 표시하지 않는 한은 단수 및 복수의 언급 대상을 포함한다. 따라서, 예를 들어, "작용제"에 대한 언급은 단일 작용제 및 복수 개의 상기 작용제를 포함한다.
용어 "압타머"는 특이적 표적 분자, 예를 들어 특이적 리간드에 결합하는 핵산 또는 펩티드 분자를 지칭한다. 일부 실시양태에서, 압타머에의 리간드의 결합은 압타머, 및 예를 들어 압타머에 컨쥬게이션된 또는 연결된 다른 분자에서의 형태적 변화를 유도한다. 일부 실시양태에서, 핵산 (예를 들어, DNA 또는 RNA) 압타머는 다양한 분자 표적, 예를 들어, 소분자, 거대분자, 대사물, 단백질, 단백질, 탄수화물, 금속, 핵산, 세포, 조직 및 유기체에 결합하도록 시험관내 선택 또는 등가적으로 SELEX (지수적 풍부화에 의한 리간드의 계통적 진화)의 반복된 라운드를 통해 조작된다. 소분자에 결합하도록 압타머를 조작하는 방법은 관련 기술분야에 공지되어 있고, 미국 특허 제5,580,737호 및 제8,492,082호; 문헌 [Ellington and Szostak, "In vitro selection of RNA molecules that bind specific ligands." Nature . 1990; 346:818-822]; [Tuerk and Gold, "Systematic evolution of ligands by exponential enrichment: RNA ligands to bacteriophage T4 DNA polymerase." Science. 1990; 249:505-510]; [Burke and Gold, "RNA aptamers to the adenosine moiety of S-adenosyl methionine: structural inferences from variations on a theme and the reproducibility of SELEX." Nucleic Acids Res. 1997; 25(10):2020-4]; [Ulrich et al., "DNA and RNA aptamers: from tools for basic research towards therapeutic applications." Comb Chem High Throughput Screen. 2006; 9(8):619-32]; [Svobodova et al., "Comparison of different methods for generation of single-stranded DNA for SELEX processes. Anal Bioanal Chem . 2012; 404:835-842]에 기재된 것들을 들 수 있으며; 각각의 전체 내용은 본원에 참조로 포함된다. 핵산 압타머는 또한 자연에서 발견되며, 예를 들어 리보스위치의 일부를 형성하는 것들이다. "리보스위치"는 소분자, 예를 들어 대사물에 결합하여 mRNA에 의해 코딩되는 단백질(들) (예를 들어, 리보스위치에 결합하는 대사물의 생성에 관련된 단백질)의 생성의 변화를 초래하는 mRNA 분자의 조절 절편이다. 리보스위치는 종종 개념적으로 2개의 부분으로 나누어진다: 압타머 및 발현 플랫폼 (예를 들어, mRNA). 압타머는 소분자 (예를 들어, 대사물)에 직접적으로 결합하며, mRNA는 압타머의 변화에 반응하여 구조적 변화를 겪는다. 전형적으로, mRNA의 구조적 변화는 단백질 발현의 감소 또는 억제를 초래한다. 압타머는 리보스위치로부터 클로닝되고 (예를 들어, 분리되고), 관련 기술분야에서 통상적인 방법을 사용하여 그에 연결된 다른 분자 (예를 들어, RNA, DNA)의 활성을 제어하는 데 사용될 수 있다. 또한, 자연에서 발견되는 압타머는 공지된 방법을 사용하여 그에 연결된 다른 분자의 활성을 제어하는 합성 비-천연 소분자 리간드에 결합하도록 재-조작될 수 있다. 예를 들어, 문헌 [Dixon et al., "Reengineering orthogonally selective riboswitches." PNAS 2010; 107 (7): 2830-2835]을 참조하며, 그의 전체 내용은 본원에 참조로 포함된다. 하기는 압타머를 포함하는 리보스위치의 비-제한적 목록이다:
코발라민 리보스위치 (또한 B 12 -요소), 이는 아데노실코발라민 (비타민 B12의 조효소 형태)에 결합하여 코발라민 생합성 및 코발라민 및 유사한 대사물, 및 다른 유전자의 수송을 조절한다. 예를 들어, 문헌 [Nahvi et al., "Coenzyme B12 riboswitches are widespread genetic control elements in prokaryotes." Nucleic Acids Res. 2004; 32: 143-150]; [Vitreschak et al., "Regulation of the vitamin B12 metabolism and transport in bacteria by a conserved RNA structural element." RNA. 2003; 9:1084-1097]을 참조하며; 각각의 전체 내용은 본원에 참조로 포함된다.
시클릭 디-GMP 리보스위치는 신호화 분자 시클릭 디-GMP에 결합하여 이 제2 메신저에 의해 제어되는 다양한 유전자를 조절한다. 적어도 2개의 부류의 시클릭 디-GMP 리보스위치가 공지되어 있다: 시클릭 디-GMP-I 리보스위치 및 시클릭 디-GMP-II 리보스위치. 예를 들어, 문헌 [Sudarsan et al., "Riboswitches in eubacteria sense the second messenger cyclic di-GMP." Science . 2008; 321 (5887): 411-3]; [Lee et al., "An allosteric self-splicing ribozyme triggered by a bacterial second messenger." Science . 2010; 329 (5993): 845-8]을 참조하며; 각각의 전체 내용은 본원에 참조로 포함된다.
FMN 리보스위치 (또한 RFN -요소)는 플라빈 모노뉴클레오티드 (FMN)에 결합하여 리보플라빈 생합성 및 수송을 조절한다. 예를 들어, 문헌 [Winkler et al., "An mRNA structure that controls gene expression by binding FMN." Proc Natl Acad Sci USA. 2002; 99 (25): 15908-15913]; [Serganov et al., "Coenzyme recognition and gene regulation by a flavin mononucleotide riboswitch." Nature . 2009; 458 (7235): 233-7]을 참조하며; 각각의 전체 내용은 본원에 참조로 포함된다.
GlmS 리보스위치는 글루코사민-6-포스페이트에 결합될 경우 자신을 절단하는 리보자임이다. 예를 들어, 문헌 [Winkler et al., "Control of gene expression by a natural metabolite-responsive ribozyme." Nature. 2004; 428: 281-286]; [Jansen et al., "Backbone and nucleobase contacts to glucosamine-6-phosphate in the glmS ribozyme." Nat Struct Mol Biol. 2006; 13: 517-523]; [Hampel and Tinsley, "Evidence for preorganization of the glmS ribozyme ligand binding pocket." Biochemistry. 2006; 45: 7861-7871]을 참조하며; 각각의 전체 내용은 본원에 참조로 포함된다.
글리신 리보스위치는 글리신에 결합하여 에너지원으로서 글리신의 사용을 포함하여 글리신 대사 유전자를 조절한다. 예를 들어, 문헌 [Mandal et al., "A glycine-dependent riboswitch that uses cooperative binding to control gene expression." Science. 2004; 306 (5694): 275-279]; [Kwon and Strobel, "Chemical basis of glycine riboswitch cooperativity." RNA. 2008; 14 (1): 25-34]을 참조하며; 각각의 전체 내용은 본원에 참조로 포함된다.
리신 리보스위치 (또한 L -박스)는 리신에 결합하여 리신 생합성, 이화작용 및 수송을 조절한다. 예를 들어, 문헌 [Sudarsan et al., "An mRNA structure in bacteria that controls gene expression by binding lysine." Genes Dev. 2003;17:2688-2697]; [Grundy et al., "The L box regulon: Lysine sensing by leader RNAs of bacterial lysine biosynthesis genes." Proc . Natl . Acad . Sci . USA. 2003; 100:12057-12062]을 참조하며; 각각의 전체 내용은 본원에 참조로 포함된다.
PreQ1 리보스위치는 프리-퀘우오신1에 결합하여 이 전구체의 퀘우오신으로의 합성 또는 수송과 관련된 유전자를 조절한다. 적어도 2개의 별개의 부류의 PreQ1 리보스위치가 공지되어 있다: PreQ1-I 리보스위치 및 PreQ1-II 리보스위치. 예를 들어, 문헌 [Roth et al., "A roboswitch selective for the queuosine precursor preQ1 contains an unusually small aptamer domain," Nat Struct Mol Biol . 2007; 14 (4): 308-317]; [Klein et al., "Cocrystal structure of a class I preQ1 riboswitch reveals a pseudoknot recognizing an essential hypermodified nucleobase," Nat. Struct . Mol . Biol . 2009; 16 (3): 343-344]; [Kang et al., "Structural Insights into riboswitch control of the biosynthesis of queuosine, a modified nucleotide found in the anticodon of tRNA." Mol . Cell 33 2009; (6): 784-90]; [Meyer et al., "Confirmation of a second natural preQ1 aptamer class in Streptococcaceae bacteria." RNA 2008; 14 (4): 685]을 참조하며; 각각의 전체 내용은 본원에 참조로 포함된다.
퓨린 리보스위치는 퓨린에 결합하여 퓨린 대사 및 수송을 조절한다. 상이한 형태의 퓨린 리보스위치는 구아닌 (원래 G-박스로서 공지된 형태) 또는 아데노신에 결합한다. 구아닌 또는 아데노신 중 하나에 대한 특이성은 특정 위치, 예를 들어, Y74에서 리보스위치에서의 단일 피리미딘과의 왓슨-크릭 (Watson-Crick) 상호작용에 완전히 의존한다. 구아닌 리보스위치에서, 이 잔기는 전형적으로 시토신 (예를 들어, C74)이고, 아데닌 리보스위치에서, 이는 전형적으로 우라실 (예를 들어, U74)이다. 퓨린 리보스위치의 상동성 유형은 데옥시구아노신에 결합하지만, 단일 뉴클레오티드 돌연변이보다 더 중요한 차이를 갖는다. 예를 들어, 문헌 [Serganov et al., "Structural basis for discriminative regulation of gene expression by adenine- and guanine-sensing mRNAs." Chem Biol . 2004; 11 (12): 1729-41]; [Batey et al., "Structure of a natural guanine-responsive riboswitch complexed with the metabolite hypoxanthine." Nature . 2004; 432 (7015): 411-415]; [Mandal and Breaker, "Adenine riboswitches and gene activation by disruption of a transcription terminator." Nat Struct Mol Biol . 2004; 11 (1): 29-35]을 참조하며; 각각의 전체 내용은 본원에 참조로 포함된다.
SAH 리보스위치는 S-아데노실호모시스테인에 결합하여 S-아데노실메티오닌이 메틸화 반응에 사용될 경우 생성되는 이 대사물의 재생에 관련된 유전자를 조절한다. 예를 들어, 문헌 [Wang et al., "Riboswitches that Sense S-adenosylhomocysteine and Activate Genes Involved in Coenzyme Recycling." Mol . Cell 2008; 29 (6): 691-702]; [Edwards et al., "Structural basis for recognition of S-adenosylhomocysteine by riboswitches." RNA 2010; 16 (11): 2144-2155]을 참조하며; 각각의 전체 내용은 본원에 참조로 포함된다.
SAM 리보스위치는 S-아데노실 메티오닌 (SAM)에 결합하여 메티오닌 및 SAM 생합성 및 수송을 조절한다. 적어도 4개의 SAM 리보스위치가 공지되어 있다: SAM-I (원래 S-박스로 지칭됨), SAM-II, S MK 박스 리보스위치 및 Sam- IV. SAM-I은 박테리아에 보편화되어 있으나, SAM-II는 알파-, 베타- 및 소수의 감마-프로테오박테리아에서만 발견된다. SMK 박스 리보스위치는 락토바실루스 (Lactobacillales) 목에서만 발견되는 것으로 믿어진다. SAM-IV 리보스위치는 별개의 스캐폴드의 내용에서이지만 SAM-I 리보스위치와 유사한 리간드-결합 코어를 갖는다. 예를 들어, 문헌 [Montange et al., "Structure of the S-adenosyl methionine riboswitch regulatory mRNA element." Nature. 2006; 441:1172 -1175; Winkler et al., "An mRNA structure that controls gene expression by binding Sadenosylmethionine." Nat Struct Biol. 2003; 10: 701-707]; [Zasha et al., "The aptamer core of SAM-IV riboswitches mimics the ligand-binding site of SAM-I riboswitches." RNA. 2008; 14(5): 822-828]을 참조하며; 각각의 전체 내용은 본원에 참조로 포함된다.
테트라히드로폴레이트 리보스위치는 테트라히드로폴레이트에 결합하여 합성 및 수송 유전자를 조절한다. 예를 들어, 문헌 [Ames et al., "A eubacterial riboswitch class that senses the coenzyme tetrahydrofolate." Chem . Biol . 2010; 17 (7): 681-5]; [Huang et al., "Long-range pseudoknot interactions dictate the regulatory response in the tetrahydrofolate riboswitch." Proc . Natl. Acad . Sci . U.S.A . 2011; 108 (36): 14801-6]; [Trausch et al., "The structure of a tetrahydrofolate-sensing riboswitch reveals two ligand binding sites in a single aptamer." Structure . 2011; 19 (10): 1413-23]을 참조하며; 각각의 전체 내용은 본원에 참조로 포함된다.
테오필린 리보스위치는 SELEX에 의해 확인되었으며, 소분자 테오필린에 선택적으로 결합한다. 압타머는 테오필린 결합에 요구되는 15-뉴클레오티드 코어 모티프를 포함한다. 예를 들어, 문헌 [Jenison et al., "High-resolution molecular discrimination by RNA." Science. 1994; 263:1425-1429]; [Zimmerman et al., "Molecular interactions and metal binding in the theophylline-binding core of an RNA aptamer." RNA. 2000; 6(5):659-67]; [Suess et al., "A theophylline responsive riboswitch based on helix slipping controls gene expression in vivo." Necleic Acids Res. 2004; 32(4): 1610-1614]을 참조하며; 각각의 전체 내용은 본원에 참조로 포함된다. 또한, 예를 들어, 도 1c 내지 d를 참조한다.
TPP 리보스위치 (또한 THI-박스)는 티아민 피로포스페이트 (TPP)에 결합하여 티아민 생합성 및 수송, 뿐만 아니라 유사한 대사물의 수송을 조절한다. 이는 지금까지 진핵생물에서 발견된 유일한 리보스위치인 것으로 믿어진다. 예를 들어, 문헌 [Edwards et al., "Crystal structures of the thi-box riboswitch bound to thiamine pyrophosphate analogs reveal adaptive RNA-small molecule recognition." Structure 2006; 14 (9): 1459-68]; [Winkler et al., "Thiamine derivatives bind messenger RNAs directly to regulate bacterial gene expression." Nature. 2002; 419 (6910): 952-956]; [Serganov et al., "Structural basis for gene regulation by a thiamine pyrophosphate-sensing riboswitch." Nature. 2006; 441 (7097): 1167-1171]을 참조하며; 각각의 전체 내용은 본원에 참조로 포함된다.
용어 "Cas9" 또는 "Cas9 뉴클레아제"는 Cas9 단백질, 또는 그의 단편을 포함하는 RNA-가이드된 뉴클레아제를 지칭한다. Cas9 뉴클레아제는 또한 때때로 casn1 뉴클레아제 또는 CRISPR (클러스터링된 규칙적 간격의 짧은 회문식 반복부)-회합된 뉴클레아제로 지칭된다. CRISPR은 이동성 유전 요소 (예를 들어, 바이러스, 수송성 요소 및 접합성 플라스미드)에 대한 보호를 제공하는 적응 면역 체계이다. CRISPR 클러스터는 스페이서, 선행 이동 요소에 상보적인 서열, 및 표적 침입 핵산을 함유한다. CRISPR 클러스터는 CRISPR RNA (crRNA)로 전사 및 프로세싱된다. 유형 II CRISPR 시스템에서, pre-crRNA의 정확한 프로세싱은 트랜스-코딩된 소형 RNA (tracrRNA), 내인성 리보뉴클레아제 3 (rnc) 및 Cas9 단백질이 필요하다. tracrRNA는 pre-crRNA의 리보뉴클레아제 3-지원 프로세싱을 위한 가이드로서 기능한다. 이어서, Cas9/crRNA/tracrRNA는 스페이서에 상보적인 선형 또는 원형 dsDNA 표적을 내부핵산분해적으로 절단한다. crRNA에 상보적이지 않은 표적 가닥은 먼저 내부핵산분해적으로 절단된 후, 3'-5' 외부핵산분해적으로 트리밍된다. 특성상, DNA-결합 및 절단은 전형적으로 단백질 및 둘 다의 RNA 종을 요구한다. 그러나, 단일 가이드 RNA ("sgRNA", 또는 간단히 "gNRA")는 crRNA 및 tracrRNA 둘 다의 측면이 단일 RNA 분자 내로 혼입되도록 조작될 수 있다. 예를 들어, 문헌 [Jinek M., Chylinski K., Fonfara I., Hauer M., Doudna J.A., Charpentier E. Science 337:816-821(2012)]을 참조하며, 그의 전체 내용은 본원에 참조로 포함된다. Cas9는 CRISPR 반복 서열에서의 짧은 모티프 (PAM 또는 프로토스페이서 인접 모티프)를 인식하여 자기 대 비-자기를 구분하는 것을 돕는다. Cas9 뉴클레아제 서열 및 구조는 관련 기술분야의 통상의 기술자에게 널리 공지되어 있다 (예를 들어, 문헌 ["Complete genome sequence of an M1 strain of Streptococcus pyogenes." Ferretti J.J., McShan W.M., Ajdic D.J., Savic D.J., Savic G., Lyon K., Primeaux C., Sezate S., Suvorov A.N., Kenton S., Lai H.S., Lin S.P., Qian Y., Jia H.G., Najar F.Z., Ren Q., Zhu H., Song L. expand/collapse author list McLaughlin R.E., Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 98:4658-4663(2001)]; ["CRISPR RNA maturation by trans-encoded small RNA and host factor RNase III." Deltcheva E., Chylinski K., Sharma C.M., Gonzales K., Chao Y., Pirzada Z.A., Eckert M.R., Vogel J., Charpentier E., Nature 471:602-607(2011)]; 및 ["A programmable dual-RNA-guided DNA endonuclease in adaptive bacterial immunity." Jinek M., Chylinski K., Fonfara I., Hauer M., Doudna J.A., Charpentier E. Science 337:816-821(2012)] 참조, 각각의 전체 내용은 본원에 참조로 포함됨). Cas9 오르소로그는 에스. 피오게네스 (S. pyogenes) 및 에스. 테르모필루스 (S. thermophilus)를 포함하나 이에 제한되지 않는 다양한 종에서 기재되었다. 추가의 적합한 Cas9 뉴클레아제 및 서열은 본 개시내용에 기초하여 관련 기술분야의 통상의 기술자에게 명백할 것이며, 이러한 Cas9 뉴클레아제 및 서열로는 문헌 [Chylinski, Rhun, and Charpentier, "The tracrRNA and Cas9 families of type II CRISPR-Cas immunity systems" (2013) RNA Biology 10:5, 726-737]에 개시된 유기체 및 좌위로부터의 Cas9 서열을 들 수 있고; 그의 전체 내용은 본원에 참조로 포함된다. 일부 실시양태에서, Cas9 또는 그의 단편을 포함하는 단백질은 "Cas9 변이체"로 지칭된다. Cas9 변이체는 Cas9, 또는 그의 단편에 대한 상동성을 공유한다. 예를 들어, Cas9 변이체는 야생형 Cas9와 적어도 약 70% 동일하거나, 적어도 약 80% 동일하거나, 적어도 약 90% 동일하거나, 적어도 약 95% 동일하거나, 적어도 약 98% 동일하거나, 적어도 약 99% 동일하거나, 적어도 약 99.5% 동일하거나, 적어도 약 99.9%이다. 일부 실시양태에서, Cas9 변이체는 Cas9의 단편 (예를 들어, gRNA 결합 도메인 또는 DNA-절단 도메인)을 포함하며, 단편은 야생형 Cas9의 상응하는 단편과 적어도 약 70% 동일하거나, 적어도 약 80% 동일하거나, 적어도 약 90% 동일하거나, 적어도 약 95% 동일하거나, 적어도 약 98% 동일하거나, 적어도 약 99% 동일하거나, 적어도 약 99.5% 동일하거나, 적어도 약 99.9%이다. 일부 실시양태에서, 야생형 Cas9는 스트렙토코쿠스 피오게네스 (Streptococcus pyogenes)로부터의 Cas9 (NCBI 참조 서열: NC_017053.1, 서열 1 (뉴클레오티드); 서열 2 (아미노산))에 상응한다.
용어 "접합하는", "접합된" 및 "접합"은 2개의 실체의, 예를 들어 2개의 분자, 예컨대 2개의 단백질, 2개의 도메인 (예를 들어, 결합 도메인 및 절단 도메인), 또는 단백질 또는 제제, 예를 들어 단백질 결합 도메인 및 소분자의 회합을 지칭한다. 일부 측면에서, 회합은 단백질 (예를 들어, RNA-프로그램가능한 뉴클레아제) 및 핵산 (예를 들어, 가이드 RNA) 사이이다. 회합은 예를 들어 직접 또는 간접 (예를 들어, 링커를 통해) 공유 연결을 통해서일 수 있다. 일부 실시양태에서, 회합은 공유이다. 일부 실시양태에서, 2개의 분자는 둘 다의 분자를 연결하는 링커를 통해 접합된다. 예를 들어, RNA의 2개의 부분이 서로, 예를 들어 압타머 (또는 핵산 센싱 도메인) 및 gRNA에 접합되는 일부 실시양태에서, 2개의 RNA는 폴리뉴클레오티드 링커, 예를 들어 하나의 RNA의 3' 말단을 다른 RNA의 5' 말단에 연결하는 뉴클레오티드 서열을 통해 접합될 수 있다. 일부 실시양태에서, 링커는 적어도 1개, 적어도 2개, 적어도 3개, 적어도 4개, 적어도 5개, 적어도 6개, 적어도 7개, 적어도 8개, 적어도 9개, 적어도 10개, 적어도 15개, 적어도 20개, 적어도 25개 또는 적어도 30개의 뉴클레오티드를 포함한다.
핵산 서열의 내용에서 본원에 사용된 용어 "컨센서스 서열"은 복수의 유사한 서열에서 각각의 위치에서 발견되는 가장 빈번한 뉴클레오티드 잔기를 나타내는 계산된 서열을 지칭한다. 전형적으로, 컨센서스 서열은 유사한 서열을 서로 비교하고, 유사한 서열 모티프를 계산하는 서열 정렬에 의해 결정된다.
본원에 사용된 용어 "유효량"은 바람직한 생물학적 반응을 유발하는 데 충분한 생물학적 활성제의 양을 지칭한다. 예를 들어, 일부 실시양태에서, 뉴클레아제의 유효량은 바람직하게는 오프-타겟 절단이 최소로 또는 없이 특이적으로 결합되고 뉴클레아제에 의해 절단되는 바람직한 표적 부위의 절단을 유도하는 데 충분한 뉴클레아제의 양을 지칭할 수 있다. 통상의 기술자에 의해 이해될 것인 바와 같이, 제제, 예를 들어 뉴클레아제, 하이브리드 단백질, 융합 단백질, 단백질 이량체, 단백질 (또는 단백질 이량체) 및 폴리뉴클레오티드의 복합체, 또는 폴리뉴클레오티드의 유효량은 다양한 인자에 따라, 예를 들어 바람직한 생물학적 반응, 특이적 대립유전자, 게놈, 표적 부위, 세포, 또는 표적화되는 조직, 및 사용되는 제제에 따라 다양할 수 있다.
본원에 사용된 용어 "조작된"은 인간에 의해 설계, 생성, 제조, 합성 및/또는 제작된 핵산 분자, 단백질 분자, 복합체, 물질 또는 실체를 지칭한다. 따라서, 조작된 생성물은 자연에서는 존재하지 않는 생성물이다.
본원에 사용된 용어 "링커"는 2개의 인접한 분자 또는 모이어티, 예를 들어 압타머 (또는 핵산 센싱 도메인) 및 gRNA를 연결하는 화학적 기 또는 분자를 지칭한다. 전형적으로, 링커는 2개의 기, 분자 또는 다른 모이어티 사이에 위치하거나, 이에 의해 플랭킹되며, 공유 결합을 통해 서로 연결되고, 따라서 2개를 연결한다. 일부 실시양태에서, 링커는 뉴클레오티드 링커이다. 일부 실시양태에서, 뉴클레오티드 링커는 적어도 1개, 적어도 2개, 적어도 3개, 적어도 4개, 적어도 5개, 적어도 6개, 적어도 7개, 적어도 8개, 적어도 9개, 적어도 10개, 적어도 15개, 적어도 20개, 적어도 25개 또는 적어도 30개의 뉴클레오티드를 포함한다. 일부 실시양태에서, 링커는 아미노산 또는 복수의 아미노산 (예를 들어, 펩티드 또는 단백질)이다. 일부 실시양태에서, 링커는 유기 분자, 기, 중합체 또는 화학적 모이어티이다.
본원에 사용된 용어 "돌연변이"는 서열, 예를 들어 핵산 또는 아미노산 서열 내의 잔기의 또다른 잔기로의 치환, 또는 서열 내의 하나 이상의 잔기의 결실 또는 삽입을 지칭한다. 돌연변이는 전형적으로 원래 잔기를 확인한 후, 서열 내의 잔기를 위치시키고, 새롭게 치환된 잔기를 확인함으로써 본원에 기재된다. 본원에서 제공된 아미노산 치환 (돌연변이)의 제조 방법은 관련 기술분야에 공지되어 있으며, 예를 들어, 문헌 [Green and Sambrook, Molecular Cloning: A Laboratory Manual (4th ed., Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, N.Y. (2012))]에 의해 제공된다.
본원에 사용된 용어 "뉴클레아제"는 핵산 분자에서 뉴클레오티드 잔기를 연결하는 포스포디에스테르 결합을 절단할 수 있는 제제, 예를 들어 단백질 또는 소분자를 지칭한다. 일부 실시양태에서, 뉴클레아제는 핵산 분자에 결합하고, 핵산 분자 내의 뉴클레오티드 잔기를 연결하는 포스포디에스테르 결합을 절단할 수 있는 단백질, 예를 들어 효소이다. 뉴클레아제는 폴리뉴클레오티드 쇄 내의 포스포디에스테르 결합을 절단하는 엔도뉴클레아제, 또는 폴리뉴클레오티드 쇄의 말단에서 포스포디에스테르 결합을 절단하는 엑소뉴클레아제일 수 있다. 일부 실시양태에서, 뉴클레아제는 본원에서 또한 "인식 서열", "뉴클레아제 표적 부위" 또는 "표적 부위"로 지칭되는 특이적 뉴클레오티드 서열 내의 특이적 포스포디에스테르 결합을 결합 및/또는 절단하는 부위-특이적 뉴클레아제이다. 일부 실시양태에서, 뉴클레아제는 표적 부위에 상보적인 서열을 갖는 RNA (예를 들어, 가이드 RNA, "gRNA")와 복합체화 (예를 들어, 결합)함으로써 뉴클레아제의 서열 특이성을 제공하는 RNA-가이드된 (즉, RNA-프로그램가능한) 뉴클레아제이다. 일부 실시양태에서, 뉴클레아제는 단일 가닥 표적 부위를 인식한다. 다른 실시양태에서, 뉴클레아제는 이중-가닥 표적 부위, 예를 들어 이중-가닥 DNA 표적 부위를 인식한다. 많은 천연 발생 뉴클레아제, 예를 들어 많은 천연 발생 DNA 제한 뉴클레아제의 표적 부위는 관련 기술분야의 통상의 기술자에게 널리 공지되어 있다. 많은 경우, DNA 뉴클레아제, 예컨대 EcoRI, HindIII 또는 BamHI은 길이로 4 내지 10 염기쌍의 회귀성 이중-가닥 DNA 표적 부위를 인식하며, 표적 부위 내의 특이적 위치에서 2개의 DNA 가닥의 각각을 절단한다. 일부 엔도뉴클레아제는 이중-가닥 핵산 표적 부위를 대칭적으로 절단하며, 즉 말단이 본원에서 또한 블런트 말단으로 지칭되는 염기-쌍형성된 뉴클레오티드를 포함하도록 동일한 위치에서 둘 다의 가닥을 절단한다. 다른 엔도뉴클레아제는 이중-가닥 핵산 표적 부위를 비대칭적으로 절단하며, 즉 말단이 쌍형성되지 않은 뉴클레오티드를 포함하도록 상이한 위치에서 각각의 가닥을 절단한다. 이중-가닥 DNA 분자의 말단에서 쌍형성되지 않은 뉴클레오티드는 또한 "오버행"으로 지칭되며, 예를 들어 쌍형성되지 않은 뉴클레오티드(들)이 각각의 DNA 가닥의 5' 또는 5' 말단을 형성하는 지에 따라 "5'-오버행" 또는 "3'-오버행"으로 지칭된다. 쌍형성되지 않은 뉴클레오티드(들)로 종결되는 이중-가닥 DNA 분자 말단은 또한 이들이 상보적인 쌍형성되지 않은 뉴클레오티드(들)를 포함하는 다른 이중-가닥 DNA 분자 말단에 "점착할" 수 있기 때문에 점착성 말단으로 지칭된다. 뉴클레아제 단백질은 전형적으로 핵산 기질과 단백질의 상호작용을 매개하며, 또한 일부의 경우 표적 부위에 특이적으로 결합하는 "결합 도메인", 및 핵산 골격 내의 포스포디에스테르 결합의 절단을 촉매하는 "절단 도메인"을 포함한다. 일부 실시양태에서, 뉴클레아제 단백질은 단량체 형태로 핵산 분자에 결합하고 이를 절단할 수 있는 반면, 다른 실시양태에서, 뉴클레아제 단백질은 표적 핵산 분자를 절단하기 위해 이량체화 또는 다량체화해야 한다. 천연 발생 뉴클레아제의 결합 도메인 및 절단 도메인, 뿐만 아니라 특이적 표적 부위에 결합하는 뉴클레아제를 생성하기 위해 융합될 수 있는 모듈러 결합 도메인 및 절단 도메인은 관련 기술분야의 통상의 기술자에게 널리 공지되어 있다. 예를 들어, RNA-프로그램가능한 뉴클레아제 (예를 들어, Cas9)의 결합 도메인, 또는 불활성 DNA 절단 도메인을 갖는 Cas9 단백질은 바람직한 표적 부위에 특이적으로 결합하는 결합 도메인 (예를 들어, 표적 부위에의 결합을 지정하는 gRNA에 결합함)으로서 사용되고, 절단 도메인, 예를 들어 FokI의 절단 도메인에 융합 또는 접합되어 표적 부위를 절단하는 조작된 뉴클레아제를 생성할 수 있다.
본원에 사용된 용어 "핵산" 및 "핵산 분자"는 핵염기 및 산성 모이어티, 예를 들어 뉴클레오시드, 뉴클레오티드, 또는 뉴클레오티드의 중합체를 포함하는 화합물을 지칭한다. 전형적으로, 중합체성 핵산, 예를 들어 3개 이상의 뉴클레오티드를 포함하는 핵산 분자는 인접한 뉴클레오티드가 포스포디에스테르 연결을 통해 서로 연결된 선형 분자이다. 일부 실시양태에서, "핵산"은 개별 핵산 잔기 (예를 들어 뉴클레오티드 및/또는 뉴클레오시드)를 지칭한다. 일부 실시양태에서, "핵산"은 3개 이상의 개별 뉴클레오티드 잔기를 포함하는 올리고뉴클레오티드 쇄를 지칭한다. 본원에 사용된 용어 "올리고뉴클레오티드" 및 "폴리뉴클레오티드"는 호환적으로 사용되어 뉴클레오티드의 중합체 (예를 들어, 적어도 3개의 뉴클레오티드의 스트링)를 지칭한다. 일부 실시양태에서, "핵산"은 RNA 뿐만 아니라 단일 및/또는 이중-가닥 DNA를 포함한다. 핵산은 예를 들어 게놈, 전사체, mRNA, tRNA, rRNA, siRNA, snRNA, 플라스미드, 코스미드, 염색체, 크로마티드, 또는 다른 천연 발생 핵산 분자의 내용에서 천연 발생적일 수 있다. 한편, 핵산 분자는 비-천연 발생 분자, 예를 들어 재조합 DNA 또는 RNA, 인공 염색체, 조작된 게놈, 또는 그의 단편, 또는 합성 DNA, RNA, DNA/RNA 하이브리드, 또는 비-천연 발생 뉴클레오티드 또는 뉴클레오시드일 수 있다. 또한, 용어 "핵산", "DNA", "RNA" 및/또는 유사한 용어는 핵산 유사체, 즉 포스포디에스테르 골격 이외를 갖는 유사체를 포함한다. 핵산은 자연 공급원으로부터 정제되고, 재조합 발현 시스템을 사용하여 생성되고, 임의로 정제되고, 화학적으로 합성되는 등을 할 수 있다. 적절할 경우, 예를 들어 화학적으로 합성된 분자의 경우, 핵산은 뉴클레오시드 유사체, 예컨대 화학적으로 변형된 염기 또는 당, 및 골격 변형을 갖는 유사체를 포함할 수 있다. 핵산 서열은 달리 지시되지 않는다면 5'에서 3' 방향으로 제시된다. 일부 실시양태에서, 핵산은 천연 뉴클레오시드 (예를 들어 아데노신, 티미딘, 구아노신, 시티딘, 우리딘, 데옥시아데노신, 데옥시티미딘, 데옥시구아노신 및 데옥시시티딘); 뉴클레오시드 유사체 (예를 들어, 2-아미노아데노신, 2-티오티미딘, 이노신, 피롤로-피리미딘, 3-메틸 아데노신, 5-메틸시티딘, 2-아미노아데노신, C5-브로모우리딘, C5-플루오로우리딘, C5-아이오도우리딘, C5-프로피닐-우리딘, C5-프로피닐-시티딘, C5-메틸시티딘, 2-아미노아데노신, 7-데아자아데노신, 7-데아자구아노신, 8-옥소아데노신, 8-옥소구아노신, O(6)-메틸구아닌 및 2-티오시티딘); 화학적으로 변형된 염기; 생물학적으로 변형된 염기 (예를 들어, 메틸화된 염기); 개재된 염기; 변형된 당 (예를 들어, 2'-플루오로리보스, 리보스, 2'-데옥시리보스, 아라비노스 및 헥소스); 및/또는 변형된 포스페이트 기 (예를 들어, 포스포로티오에이트 및 5'-N-포스포르아미다이트 연결)이거나 이를 포함한다.
본원에 사용된 용어 "제약 조성물"은 질환 또는 장애의 치료의 내용에서 대상체에게 투여될 수 있는 조성물을 지칭한다. 일부 실시양태에서, 제약 조성물은 활성 성분, 예를 들어 뉴클레아제 또는 뉴클레아제를 코딩하는 핵산, 및 제약학적으로 허용되는 부형제를 포함한다.
본원에 사용된 용어 "증식성 질환"은 세포 또는 세포 집단이 비정상적으로 상승된 증식 속도를 나타낸다는 점에서 세포 또는 조직 항상성이 교란된 임의의 질환을 지칭한다. 증식성 질환은 과증식성 질환, 예컨대 전-신생물성 증식 상태 및 신생물성 질환을 포함한다. 신생물성 질환은 세포의 비정상적 증식을 특징으로 하며, 양성 및 악성 신생물 둘 다를 포함한다. 악성 신생물은 또한 암으로 지칭된다.
용어 "단백질", "펩티드" 및 "폴리펩티드"는 본원에서 호환적으로 사용되며, 펩티드 (아미드) 결합에 의해 함께 연결된 아미노산 잔기의 중합체를 지칭한다. 상기 용어는 임의의 크기, 구조 또는 기능의 단백질, 펩티드 또는 폴리펩티드를 지칭한다. 전형적으로, 단백질, 펩티드 또는 폴리펩티드는 적어도 3개의 아미노산 길이일 것이다. 단백질, 펩티드 또는 폴리펩티드는 개별 단백질 또는 단백질의 집합을 지칭할 수 있다. 단백질, 펩티드 또는 폴리펩티드에서 하나 이상의 아미노산은 예를 들어 화학적 실체, 예컨대 탄수화물 기, 히드록실 기, 포스페이트 기, 파르네실 기, 이소파르네실 기, 지방산 기, 접합을 위한 링커의 첨가, 관능화 또는 다른 변형 등에 의해 변형될 수 있다. 단백질, 펩티드 또는 폴리펩티드는 또한 단일 분자일 수 있거나, 다중-분자 복합체일 수 있다. 단백질, 펩티드 또는 폴리펩티드는 단지 천연 발생 단백질 또는 펩티드의 단편일 수 있다. 단백질, 펩티드 또는 폴리펩티드는 천연 발생, 재조합 또는 합성, 또는 이들의 임의의 조합일 수 있다. 본원에 사용된 용어 "융합 단백질"은 적어도 2개의 상이한 단백질로부터의 단백질 도메인을 포함하는 하이브리드 폴리펩티드를 지칭한다. 한 단백질은 융합 단백질의 아미노-말단 (N-말단) 부분에 또는 카르복시-말단 (C-말단) 부분에 위치할 수 있으며, 따라서 각각 "아미노-말단 융합 단백질" 또는 "카르복시-말단 융합 단백질"을 형성할 수 있다. 단백질은 상이한 도메인, 예를 들어 핵산 결합 도메인 (예를 들어, 표적 부위에의 단백질의 결합을 지정하는 Cas9의 gRNA 결합 도메인) 및 핵산 절단 도메인을 포함할 수 있다. 일부 실시양태에서, 단백질은 단백질성 부분, 예를 들어 핵산 결합 도메인을 구성하는 아미노산 서열, 및 유기 화합물, 예를 들어 핵산 절단 제제로서 작용할 수 있는 화합물을 포함한다. 일부 실시양태에서, 단백질은 핵산, 예를 들어 RNA와 복합체일 수 있거나, 이와 회합될 수 있다. 본원에서 제공된 임의의 단백질은 관련 기술분야에 공지된 임의의 방법에 의해 생성될 수 있다. 예를 들어, 본원에서 제공된 단백질은 펩티드 링커를 포함하는 융합 단백질에 특히 적합한 재조합 단백질 발현 및 정제를 통해 생성될 수 있다. 재조합 단백질 발현 및 정제 방법은 널리 공지되어 있으며, 문헌 [Green and Sambrook, Molecular Cloning: A Laboratory Manual (4th ed., Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, N.Y. (2012))]에 기재된 것들을 들 수 있고, 그의 전체 내용은 본원에 참조로 포함된다.
용어 "RNA-프로그램가능한 뉴클레아제" 및 "RNA-가이드된 뉴클레아제"는 본원에서 호환적으로 사용되며, 절단을 위한 표적이 아닌 하나 이상의 RNA와 복합체를 형성하는 (예를 들어, 그와 결합하거나 회합하는) 뉴클레아제를 지칭한다. 일부 실시양태에서, RNA-프로그램가능한 뉴클레아제는 RNA와 복합체인 경우 뉴클레아제:RNA 복합체로 지칭될 수 있다. 전형적으로, 결합된 RNA(들)는 가이드 RNA (gRNA)로 지칭된다. gRNA는 2개 이상의 RNA의 복합체로서 또는 단일 RNA 분자로서 존재할 수 있다. 단일 RNA 분자로서 존재하는 gRNA는 단일-가이드 RNA (sgRNA)로 지칭될 수 있지만, "gRNA"는 하나의 단일 분자로서 또는 2개 이상의 분자의 복합체로서 존재하는 가이드 RNA를 지칭하기 위해 호환적으로 사용된다. 전형적으로, 단일 RNA 종으로서 존재하는 gRNA는 적어도 2개의 도메인을 포함한다: (1) 표적 핵산과 상동성을 공유하는 (예를 들어, 그리고 표적에의 Cas9 복합체의 결합을 지시하는) 도메인; 및 (2) Cas9 단백질에 결합하는 도메인. 일부 실시양태에서, 도메인 (2)는 도 1 내지 4 중 어느 하나에 나타내어진 바와 같은 "sgRNA 골격"이다. 일부 실시양태에서, 도메인 (2)는 tracrRNA로서 공지된 서열에 상응하며, 줄기-고리 구조를 포함한다. 예를 들어, 일부 실시양태에서, 도메인 (2)는 문헌 [Jinek et al., Science 337:816-821(2012)]의 도 1E에 나타내어진 바와 같은 tracrRNA와 상동성이며, 그의 전체 내용은 본원에 참조로 포함된다. 일부 실시양태에서, 도메인 2는 도 1 내지 4 중 어느 하나의 "sgRNA 골격" 또는 문헌 [Jinek et al., Science 337:816-821(2012)]에 기재된 바와 같은 tracrRNA와 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99% 동일하다. 일부 실시양태에서, gRNA는 2개 이상의 도메인 (1) 및 (2)를 포함하며, "연장된 gRNA"로 지칭될 수 있다. 예를 들어, 연장된 gRNA는 2개 이상의 Cas9 단백질에 결합하고, 2개 이상의 별개의 영역에서 표적 핵산에 결합할 것이다. gRNA는 표적 부위에의 뉴클레아제/RNA 복합체의 결합 및 뉴클레아제:RNA 복합체의 서열 특이성의 제공을 매개하는 상기 표적 부위와 상보적인 뉴클레오티드 서열을 포함한다. 표적 핵산에 결합하는 gRNA의 서열은 표적의 영역에 상보적이며, 뉴클레아제:RNA 복합체가 결합하는 데 적합한 임의의 서열을 포함할 수 있다. 일부 실시양태에서, RNA-프로그램가능한 뉴클레아제는 (CRISPR-회합된 시스템) (CRISPR-associated system) Cas9 엔도뉴클레아제, 예를 들어 스트렙토코쿠스 피오게네스로부터의 Cas9 (Csn1)이다 (예를 들어, 문헌 ["Complete genome sequence of an M1 strain of Streptococcus pyogenes." Ferretti J.J., McShan W.M., Ajdic D.J., Savic D.J., Savic G., Lyon K., Primeaux C., Sezate S., Suvorov A.N., Kenton S., Lai H.S., Lin S.P., Qian Y., Jia H.G., Najar F.Z., Ren Q., Zhu H., Song L. expand/collapse author list McLaughlin R.E., Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 98:4658-4663(2001)]; ["CRISPR RNA maturation by trans-encoded small RNA and host factor RNase III." Deltcheva E., Chylinski K., Sharma C.M., Gonzales K., Chao Y., Pirzada Z.A., Eckert M.R., Vogel J., Charpentier E., Nature 471:602-607(2011)]; 및 ["A programmable dual-RNA-guided DNA endonuclease in adaptive bacterial immunity." Jinek M., Chylinski K., Fonfara I., Hauer M., Doudna J.A., Charpentier E. Science 337:816-821(2012)] 참조, 그의 각각의 전체 내용은 본원에 참조로 포함됨).
RNA-프로그램가능한 뉴클레아제 (예를 들어, Cas9)는 RNA:DNA 혼성화를 사용하여 표적 DNA 절단 부위를 결정하기 때문에, 이들 단백질은 원칙적으로 가이드 RNA에 의해 특정화된 임의의 서열을 절단할 수 있다. 부위-특이적 절단을 위한 (예를 들어, 게놈을 변형하기 위한) RNA-프로그램가능한 뉴클레아제, 예컨대 Cas9의 사용 방법은 관련 기술분야에 공지되어 있다 (예를 들어, 문헌 [Cong, L. et al. Multiplex genome engineering using CRISPR/Cas systems. Science 339, 819-823 (2013)]; [Mali, P. et al. RNA-guided human genome engineering via Cas9. Science 339, 823-826 (2013)]; [Hwang, W.Y. et al. Efficient genome editing in zebrafish using a CRISPR-Cas system. Nature biotechnology 31, 227-229 (2013)]; [Jinek, M. et al. RNA-programmed genome editing in human cells. eLife 2, e00471 (2013)]; [Dicarlo, J.E. et al. Genome engineering in Saccharomyces cerevisiae using CRISPR-Cas systems. Nucleic acids research (2013)]; [Jiang, W. et al. RNA-guided editing of bacterial genomes using CRISPR-Cas systems. Nature biotechnology 31, 233-239 (2013)] 참조; 그의 각각의 전체 내용은 본원에 참조로 포함됨).
용어 "소분자" 및 "유기 화합물"은 본원에서 호환적으로 사용되며, 각각 저 분자량을 갖는 천연-발생 또는 인공적으로 생성된 (예를 들어, 화학적 합성을 통해) 분자를 지칭한다. 전형적으로, 유기 화합물은 탄소를 함유한다. 유기 화합물은 다중 탄소-탄소 결합, 입체중심 및 다른 관능기 (예를 들어, 아민, 히드록실, 카르보닐 또는 헤테로시클릭 고리)를 함유할 수 있다. 일부 실시양태에서, 유기 화합물은 단량체성이며, 약 1500 g/mol 미만의 분자량을 갖는다. 특정 실시양태에서, 소분자의 분자량은 약 1000 g/mol 미만 또는 약 500 g/mol 미만이다. 특정 실시양태에서, 소분자는 약물, 예를 들어 적절한 정부 기관 또는 규제 조직에 의해 이미 인간 또는 동물에 사용하기에 안전하고 효과적이라고 간주된 약물이다. 특정 실시양태에서, 소분자는 압타머에 결합하는 것으로 공지되어 있다. 일부 실시양태에서, 유기 화합물은 항생제 약물, 예를 들어 항암 항생제, 예컨대 다이네미신, 네오카르지노스타틴, 칼리케아미신, 에스페라미신, 블레오마이신 또는 그의 유도체이다.
본원에 사용된 용어 "대상체"는 개별 유기체, 예를 들어 개별 포유동물을 지칭한다. 일부 실시양태에서, 대상체는 인간이다. 일부 실시양태에서, 대상체는 비-인간 포유동물이다. 일부 실시양태에서, 대상체는 비-인간 영장류이다. 일부 실시양태에서, 대상체는 설치류이다. 일부 실시양태에서, 대상체는 양, 염소, 소, 고양이 또는 개이다. 일부 실시양태에서, 대상체는 척추동물, 양서류, 파충류, 어류, 곤충류, 날벌레 또는 선충류이다. 일부 실시양태에서, 대상체는 연구용 동물이다. 일부 실시양태에서, 대상체는 유전적으로 조작된, 예를 들어 유전적으로 조작된 비-인간 대상체이다. 대상체는 임의의 성별 및 임의의 발달 단계의 것일 수 있다.
뉴클레아제의 내용에서 본원에 사용된 용어 "표적 핵산" 및 "표적 게놈"은 각각 주어진 뉴클레아제의 적어도 하나의 표적 부위를 포함하는 핵산 분자 또는 게놈을 지칭한다.
본원에서 용어 "뉴클레아제 표적 부위"와 호환적으로 사용된 용어 "표적 부위"는 뉴클레아제에 의해 결합 및 절단되는 핵산 분자 내의 서열을 지칭한다. 표적 부위는 단일-가닥 또는 이중-가닥일 수 있다. RNA-가이드된 (예를 들어, RNA-프로그램가능한) 뉴클레아제 (예를 들어, Cas9 gRNA 결합 도메인 및 활성 Cas9 DNA 절단 도메인을 포함하는 단백질 이량체)의 내용에서, 표적 부위는 전형적으로 RNA-프로그램가능한 뉴클레아제의 gRNA에 상보적인 뉴클레오티드 서열, 및 gRNA-상보적 서열에 인접한 3' 말단에 프로토스페이서 인접 모티프 (PAM)를 포함한다. RNA-가이드된 뉴클레아제 Cas9에 대해, 표적 부위는 일부 실시양태에서 20 염기쌍 플러스 3 염기쌍 PAM (예를 들어, NNN, 여기서 N은 임의의 뉴클레오티드를 나타냄)일 수 있다. 전형적으로, PAM의 제1 뉴클레오티드는 임의의 뉴클레오티드인 반면, 2개의 하류 뉴클레오티드는 특이적 RNA-가이드된 뉴클레아제에 따라 특정화된다. RNA-가이드된 뉴클레아제, 예컨대 Cas9에 대한 예시적인 표적 부위는 관련 기술분야의 통상의 기술자에게 공지되어 있으며, 제한 없이 NNG, NGN, NAG 및 NGG를 들 수 있고, 여기서 N은 임의의 뉴클레오티드를 나타낸다. 또한, 상이한 종 (예를 들어, 에스. 피오게네스 대신 에스. 테르모필루스)으로부터의 Cas9 뉴클레아제는 서열: NGGNG를 포함하는 PAM을 인식한다. NNAGAAW 및 NAAR을 포함하나 이에 제한되지 않는 추가의 PAM 서열이 공지되어 있다 (예를 들어, 문헌 [Esvelt and Wang, Molecular Systems Biology, 9:641 (2013)] 참조, 그의 전체 내용은 본원에 참조로 포함됨). 예를 들어, RNA-가이드된 뉴클레아제, 예를 들어 Cas9의 표적 부위는 구조 [NZ]-[PAM]을 포함할 수 있으며, 여기서 각각의 N은 독립적으로 임의의 뉴클레오티드이고, Z는 1 내지 50의 정수이다. 일부 실시양태에서, Z는 적어도 2, 적어도 3, 적어도 4, 적어도 5, 적어도 6, 적어도 7, 적어도 8, 적어도 9, 적어도 10, 적어도 11, 적어도 12, 적어도 13, 적어도 14, 적어도 15, 적어도 16, 적어도 17, 적어도 18, 적어도 19, 적어도 20, 적어도 25, 적어도 30, 적어도 35, 적어도 40, 적어도 45 또는 적어도 50이다. 일부 실시양태에서, Z는 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49 또는 50이다. 일부 실시양태에서, Z는 20이다. 일부 실시양태에서, "표적 부위"는 또한 뉴클레아제에 의해 결합되지만 절단되지 않는 핵산 분자 내의 서열을 지칭할 수 있다.
용어 "치료", "치료하다" 및 "치료하는"은 본원에 기재된 바와 같은 질환 또는 장애, 또는 그의 하나 이상의 증상의 반전, 경감, 발생의 지연, 또는 진행의 억제를 목표로 하는 임상적 개입을 지칭한다. 본원에 사용된 용어 "치료", "치료하다" 및 "치료하는"은 본원에 기재된 바와 같은 질환 또는 장애, 또는 그의 하나 이상의 증상의 반전, 완화, 발생의 지연, 또는 진행의 억제를 목표로 하는 임상적 개입을 지칭한다. 일부 실시양태에서, 치료는 하나 이상의 증상이 발달한 후에 및/또는 질환이 진단된 후에 투여될 수 있다. 다른 실시양태에서, 치료는 증상의 부재 하에서, 예를 들어 증상의 발생을 방지 또는 지연시키거나 질환의 발생 또는 진행을 억제하기 위해 투여될 수 있다. 예를 들어, 치료는 증상의 발생 전에 감수성 개체에게 (예를 들어, 증상의 병력을 고려하여 및/또는 유전적 또는 다른 감수성 인자를 고려하여) 투여될 수 있다. 치료는 또한 증상이 해결된 후에, 예를 들어 그의 재발을 방지하거나 지연시키기 위해 계속될 수 있다.
용어 "벡터"는 본 발명의 하나 이상의 재조합 폴리뉴클레오티드, 예를 들어 본원에서 제공된 gRNA 및/또는 Cas9 단백질을 코딩하는 것들을 포함하는 폴리뉴클레오티드를 지칭한다. 벡터로는 플라스미드, 바이러스 벡터, 코스미드, 인공 염색체 및 파지미드를 들 수 있으나, 이에 제한되지는 않는다. 벡터는 숙주 세포에서 복제할 수 있으며, 또한 벡터가 절단될 수 있고 바람직한 핵산 서열이 그에 삽입될 수 있는 하나 이상의 엔도뉴클레아제 제한 부위를 특징으로 하는 것이다. 벡터는 벡터로 형질전환되거나 유전적으로 변형된, 또는 그렇지 않은 세포의 확인 및/또는 선택에 사용하는 데 적합한 하나 이상의 마커 서열을 함유할 수 있다. 마커는 예를 들어 항생제 (예를 들어, 카나마이신, 암피실린) 또는 다른 화합물에 대한 저항성 또는 감수성 중 하나를 증가 또는 감소시키는 단백질을 코딩하는 유전자, 그의 활성이 관련 기술분야에 공지된 표준 어세이에 의해 검출가능한 효소 (예를 들어, β-갈락토시다제, 알칼리성 포스파타제 또는 루시페라제)를 코딩하는 유전자, 및 형질전환된 또는 형질감염된 세포, 숙주, 콜로니 또는 플라크의 표현형에 가시적으로 영향을 주는 유전자를 포함한다. 임의의 벡터, 예를 들어 pUC 계열, pGEM 계열, pET 계열, pBAD 계열, pTET 계열 또는 pGEX 계열에 속하는 벡터는 본 발명에 의해 포함되는 바와 같은 숙주 세포 (예를 들어, 이. 콜라이 (E. coli), 포유동물 세포, 예컨대 CHO 세포, 곤충 세포 등)의 형질전환에 적합하다. 일부 실시양태에서, 벡터는 재조합 단백질 생성을 위한 숙주 세포의 형질전환에 적합하다. gRNA 및/또는 단백질 (예를 들어, 본원에서 제공된 것들)의 발현을 위한 벡터 및 숙주 세포의 선택 및 조작, 세포의 형질전환, 및 재조합 단백질의 발현/정제 방법은 관련 기술분야에 널리 공지되어 있으며, 예를 들어, 문헌 [Green and Sambrook, Molecular Cloning: A Laboratory Manual (4th ed., Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, N.Y. (2012))]에 의해 제공된다.
발명의 특정 실시양태의 상세한 설명
부위-특이적 뉴클레아제는 시험관내 및 생체내에서 표적화된 게놈 변형을 위한 강력한 도구이다. 일부 부위-특이적 뉴클레아제는 임의의 다른 게놈 부위에 영향을 주지 않고 절단을 위한 게놈의 단일 고유 부위를 표적화하는 것을 허용하는 표적 절단 부위에 대한 특이성의 수준을 이론적으로 달성할 수 있다. 살아있는 세포에서의 뉴클레아제 절단은 예를 들어 상동성 재조합 또는 비-상동성 말단-결합을 통해 절단된 및 복구된 게놈 서열의 변형을 빈번히 초래하는 DNA 복구 메커니즘을 촉발하는 것으로 보고되었다. 따라서, 게놈 내의 특이적 고유 서열의 표적화된 절단은 통상적인 유전자 표적화 방법으로 조작하기 어려운 세포, 예컨대 많은 인간 체세포 또는 배아 줄기 세포를 포함하는 살아있는 세포에서의 유전자 표적화 및 유전자 변형을 위한 새로운 길을 열고 있다. 질환-관련 서열, 예를 들어 HIV/AIDS 환자에서의 CCR-5 대립유전자의, 또는 종양 혈관신생에 필요한 유전자의 뉴클레아제-매개된 변형은 임상적 내용에서 사용될 수 있으며, 2개의 부위 특이적 뉴클레아제는 현재 임상 시험중이다 (Perez, E.E. et al., "Establishment of HIV-1 resistance in CD4+ T cells by genome editing using zinc-finger nucleases." Nature Biotechnology. 26, 808-816 (2008); ClinicalTrials.gov identifiers: NCT00842634, NCT01044654, NCT01252641, NCT01082926). 부위-특이적 뉴클레아제를 사용하여 치료될 수 있는 다른 질환으로는 예를 들어 트리플렛 확대와 관련된 질환 (예를 들어, 헌팅톤병, 근긴장성 이영양증, 척수소뇌성 실조증 등), 낭성 섬유증 (CFTR 유전자를 표적화함으로써), 암, 자가면역 질환 및 바이러스 감염을 들 수 있다.
부위-특이적 뉴클레아제-매개된 변형에 관한 한 가지 중요한 과제는 오프-타겟 뉴클레아제 효과, 예를 들어 의도된 표적 서열과 하나 이상의 뉴클레오티드가 상이한 게놈 서열의 절단이다. 오프-타겟 절단의 바람직하지 않은 부작용은 유전자 표적화 사건 동안 원하지 않는 좌위 내로의 삽입부터 임상적 시나리오에서의 심각한 합병증에 이른다. 대상체에 투여된 엔도뉴클레아제에 의한 필수적인 유전자 기능 또는 종양 억제자 유전자를 코딩하는 서열의 오프-타겟 절단은 질환 또는 심지어 대상체의 사망을 초래할 수 있다. 따라서, 오프-타겟 효과를 최소화하는 가장 큰 가능성을 갖는 뉴클레아제를 설계하는 데 있어서 새로운 전략을 채용하는 것이 바람직하다.
본 개시내용의 방법 및 조성물은 일부 측면에서 RNA-가이드된 뉴클레아제의 일시적 활성을 제어하고/거나 특이성을 증가시키는 수단을 제공함으로써 이전의 방법 및 조성물에 대해 개선을 나타낸다. 예를 들어, 천연 발생 및 조작된 것들 둘 다의 관련 기술분야에 공지된 RNA-가이드된 뉴클레아제는 전형적으로 표적에 상보적인 RNA (예를 들어, gRNA)와의 복합체의 형성 시 DNA에 결합하고 이를 절단한다. 본 발명의 측면은 그의 표적에의 RNA-가이드된 뉴클레아제:RNA 복합체의 결합의 시기에 대한 일시적인 제어가, 복합체가 표적에 결합하고 이를 절단할 수 있는 시간의 양을 최소화하거나 제어함으로써 오프-타겟 효과의 가능성을 감소시킬 것이라는 인식에 관한 것이다. 또한, 예를 들어 표적의 부재 하에서 결합을 차단하는 연장된 표적 인식 도메인을 갖는 gRNA를 사용하여, 단지 절단되는 표적 부위에 결합하는 gRNA를 조작하는 것은 RNA-가이드된 뉴클레아제의 특이성을 개선시키고, 오프-타겟 효과의 가능성을 감소시킨다.
본원에서 제공된 전략, 방법, 조성물, 키트 및 시스템은 임의의 RNA-가이드된 뉴클레아제 (예를 들어, Cas9)의 활성을 제어하고/거나 특이성을 개선시키는 데 사용될 수 있다. 본원에 기재된 바와 같은 변형된 gRNA와 함께 사용하는 데 적합한 뉴클레아제는 본 개시내용에 기초하여 관련 기술분야의 통상의 기술자에게 명백할 것이다.
특정 실시양태에서, 본원에서 제공된 전략, 방법, 조성물, 키트 및 시스템은 RNA-가이드된 (예를 들어, RNA-프로그램가능한) 뉴클레아제 활성의 시기를 제어하는 데 이용된다. 전형적인 RNA-가이드된 뉴클레아제는 뉴클레아제:RNA 복합체의 형성 시 표적 서열을 인식하고 이를 절단하는 반면, 본원에서 제공된 변형된 gRNA는 표적 결합 및 절단에 대한 제어를 허용한다. 다른 측면은 의도된 표적 부위가 존재하는 경우에만 표적 부위에 결합함으로써 RNA-가이드된 뉴클레아제의 특이성을 개선시키도록 조작된 gRNA를 제공한다. Cas9:gRNA 복합체는 세포 (Cong, L. et al. Multiplex genome engineering using CRISPR/Cas systems. Science. 339, 819-823 (2013); Mali, P. et al. RNA-guided human genome engineering via Cas9. Science. 339, 823-826 (2013); Jinek, M. et al. RNA-programmed genome editing in human cells. eLife 2, e00471 (2013)) 및 유기체 (Hwang, W.Y. et al. Efficient genome editing in zebrafish using a CRISPR-Cas system. Nature Biotechnology. 31, 227-229 (2013)) 둘 다를 변형하는 데 성공적으로 사용된 반면, Cas9:가이드 RNA 복합체를 제브라피쉬 배아를 변형하는 데 사용한 연구는 ZFN 및 TALEN의 것과 유사한 속도로 독성 (예를 들어, 오프-타겟 효과)을 관찰하였다 (Hwang, W.Y. et al. Nature Biotechnology. 31, 227-229 (2013)). 따라서, 본 개시내용의 측면은 표적 결합 및 절단의 시기를 제어하고/거나 RNA-가이드된 뉴클레아제의 특이성을 개선시키는 신규한 gRNA 플랫폼을 사용하여 Cas9 오프-타겟 효과에 대한 가능성을 감소시키는 것을 목표로 한다.
DNA 및 DNA-절단 뉴클레아제, 예컨대 Cas9에 대한 특정 관련성 중, 본원에서 제공된 본 발명의 개념, 방법, 조성물, 전략, 키트 및 시스템은 이 점에 제한되지 않지만, 핵산 주형, 예컨대 RNA를 표적 핵산에의 결합을 지정하는 데 이용하는 임의의 핵산:뉴클레아제 시스템에 적용될 수 있다.
변형된
가이드 RNA (
gRNA
)
본 개시내용의 일부 측면은 "온" 및 "오프" 상태 둘 다를 갖도록 조작된 gRNA를 제공한다. 일부 측면에서, 그러면, gRNA는 집합적으로 "스위칭가능한 gRNA"로 지칭될 수 있다. 예를 들어, 스위칭가능한 gRNA는 gRNA가 표적 핵산에의 gRNA의 결합을 방지하는 구조적 상태인 경우 "오프" 상태인 것으로 언급된다. 일부 측면에서, "오프" 상태의 gRNA는 그의 동족 RNA-가이드된 뉴클레아제 (예를 들어, Cas9)에 결합할 수 있지만, 뉴클레아제:gRNA 복합체 (gRNA가 "오프" 상태인 경우)는 표적 핵산에 결합하여 절단을 매개할 수 없다. 다른 측면에서 "오프" 상태인 gRNA는 그의 표적 서열 또는 RNA-가이드된 뉴클레아제, 예컨대 Cas9에 결합할 수 없다. 반대로, 스위칭가능한 gRNA는 gRNA가 표적 핵산에의 gRNA의 결합을 허용하는 구조적 상태인 경우 (예를 들어, RNA-가이드된 뉴클레아제, 예컨대 Cas9와의 복합체로서) "온" 상태인 것으로 언급된다. 본 개시내용의 일부 실시양태는 RNA-가이드된 뉴클레아제, 예컨대 Cas9와 회합된 본 발명의 gRNA를 포함하는 복합체, 및 그의 사용 방법을 제공한다. 본 개시내용의 일부 실시양태는 이러한 gRNA 및/또는 RNA-가이드된 뉴클레아제 (예를 들어, Cas9)를 코딩하는 핵산을 제공한다. 본 개시내용의 일부 실시양태는 이러한 코딩 핵산을 포함하는 발현 구축물을 제공한다.
압타머
기재
gRNA
한 실시양태에서, 압타머를 포함하는 gRNA가 제공된다. 예를 들어, 도 1을 참조한다. 예를 들어, 일부 실시양태에서, gRNA는 본원에 기재된 바와 같이 뉴클레오티드 링커를 통해 압타머에 연결된다. 압타머는 전형적으로 예를 들어 항체:항원 상호작용에 필적하는 친화도로 특이적 리간드에 결합하는 RNA 또는 펩티드 기재 분자이다. 일부 실시양태에서, 압타머는 약 1 nM 내지 10 μM, 약 1 nM 내지 1 μM, 약 1 nM 내지 500 nM, 또는 약 1 nM 내지 100 nM의 K d 로 그의 리간드에 결합한다. RNA-기재 압타머, 예를 들어 mRNA의 리보스위치에서 발견되는 것들로, 압타머 도메인에의 리간드의 결합은 mRNA의 발현 (예를 들어, 전사)을 제어하는 형태적 변화를 초래한다. RNA 압타머는 성공적으로 클로닝되고, 예를 들어 유전자 발현을 제어하는 다른 분자에 적응되었거나, SELEX를 사용하여 특정 리간드에 대해 조작/선택되었다 (예를 들어, 문헌 [Dixon et al., "Reengineering orthogonally selective riboswitches." PNAS 2010; 107 (7): 2830-2835]; [Suess et al., "A theophylline responsive riboswitch based on helix slipping controls gene expression in vivo." Nucleic Acids Res. 2004; 32(4): 1610-1614]; [Ellington and Szostak, "In vitro selection of RNA molecules that bind specific ligands." Nature. 1990; 346:818-822]; [Tuerk and Gold, "Systematic evolution of ligands by exponential enrichment: RNA ligands to bacteriophage T4 DNA polymerase." Science. 1990; 249:505-510]; [Burke and Gold, "RNA aptamers to the adenosine moiety of S-adenosyl methionine: structural inferences from variations on a theme and the reproducibility of SELEX." Nucleic Acids Res. 1997; 25(10):2020-4]; [Ulrich et al., "DNA and RNA aptamers: from tools for basic research towards therapeutic applications." Comb Chem High Throughput Screen. 2006; 9(8):619-32]; [Svobodova et al., "Comparison of different methods for generation of single-stranded DNA for SELEX processes. Anal Bioanal Chem . 2012; 404:835-842] 참조; 각각의 전체 내용은 본원에 참조로 포함됨). 압타머에 결합하는 리간드로는 소분자, 대사물, 탄수화물, 단백질, 펩티드 또는 핵산을 들 수 있으나, 이에 제한되지는 않는다. 도 1에 나타난 바와 같이, 압타머에 연결된 gRNA는 압타머에 결합하는 특이적 리간드의 부재 하에서 "오프" 상태로 존재한다. 전형적으로, "오프" 상태는 표적 핵산에 혼성화하는 gRNA의 서열의 전부 또는 일부가 자유롭게 표적 핵산에 혼성화하는 것을 방지하는 구조적 특징에 의해 매개된다. 예를 들어, 일부 측면에서, 압타머를 포함하는 gRNA는 압타머 서열의 일부가 표적에 혼성화하는 gRNA 서열의 일부 또는 전부에 혼성화하도록 설계된다. 표적에 결합하는 gRNA의 서열 (예를 들어, 도 1c, d에서 "표적을 절단하는 가이드"로 나타내어짐, 본원에서 "가이드" 서열로 지칭됨)은 관련 기술분야에 공지된 방법을 사용하여 임의의 바람직한 핵산 표적을 표적화하는 임의의 서열을 포함하도록 조작될 수 있으며, 따라서 예시적인 도면에 나타낸 서열(들)에 제한되지 않는다. 유사하게, 임의의 적합한 압타머는 gRNA 서열에 5' 또는 3' 연결되고, 관련 기술분야에서 통상적인 방법을 사용하여 gRNA에서의 특정 가이드 서열에 혼성화하게 될 뉴클레오티드를 포함하도록 변형될 수 있다. 일부 실시양태에서, 본원에서 제공된 임의의 gRNA에 연결된 압타머는 본원에 기재된 바와 같은 RNA 압타머이다. 일부 실시양태에서, RNA 압타머는 리보스위치로부터 유래된다 (예를 들어, 클로닝된다). 임의의 리보스위치는 RNA 압타머에 사용될 수 있다. 예시적인 리보스위치로는 테오필린 리보스위치, 티아민 피로포스페이트 (TPP) 리보스위치, 아데노신 코발라민 (AdoCbl) 리보스위치, S-아데노실 메티오닌 (SAM) 리보스위치, SAH 리보스위치, 플라빈 모노뉴클레오티드 (FMN) 리보스위치, 테트라히드로폴레이트 리보스위치, 리신 리보스위치, 글리신 리보스위치, 퓨린 리보스위치, GlmS 리보스위치 및 프리-퀘오신1 (PreQ1) 리보스위치를 들 수 있으나, 이에 제한되지는 않는다. 일부 실시양태에서, RNA 압타머는 테오필린 리보스위치로부터 유래된다. 일부 실시양태에서, 테오필린 리보스위치로부터 유래된 압타머는 서열 3을 포함한다. 일부 실시양태에서, 서열 3의 밑줄친 볼드체 부분은 그 안의 임의의 뉴클레오티드가 임의의 다른 뉴클레오티드로 대체되도록 변형될 수 있고/거나, 하나 이상의 뉴클레오티드를 부가하거나 결실시킴으로써 변형될 수 있다. 예를 들어, 밑줄친 볼드체 부분은 표적 핵산에 혼성화하는 gRNA의 서열의 일부 또는 전부에 혼성화하는 서열을 포함하도록 변형될 수 있다. 예를 들어, 도 1c를 참조한다. 일부 실시양태에서, RNA 압타머는 서열 3과 적어도 80%, 적어도 85%, 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99% 동일하다.
5' - GGUGAUACCAG CAUCGUCUUGAUG CCCUUGGCAGCACC - 3' (서열 3)
일부 실시양태에서, 압타머는 비-천연 발생적이다 (예를 들어, 자연에서 발견되지 않음). 예를 들어, 일부 실시양태에서, 압타머는 SELEX를 사용하여 라이브러리로부터 조작되거나 선택된다. 일부 실시양태에서, 압타머는 적어도 20개, 적어도 30개, 적어도 40개, 적어도 50개, 적어도 60개, 적어도 70개, 적어도 80개, 적어도 90개, 적어도 100개, 적어도 110개, 적어도 120개, 적어도 130개, 적어도 140개, 적어도 150개, 적어도 175개, 적어도 200개, 적어도 250개 또는 적어도 300개의 뉴클레오티드를 포함한다. 일부 실시양태에서, 압타머는 20 내지 200개, 20 내지 150개, 20 내지 100개 또는 20 내지 80개의 뉴클레오티드를 포함한다. 일부 실시양태에서, 제공된 RNA (예를 들어, 압타머에 연결된 gRNA를 포함하는 RNA)의 gRNA 부분은 적어도 50개, 적어도 60개, 적어도 70개, 적어도 80개, 적어도 90개, 적어도 100개, 적어도 110개, 적어도 120개, 적어도 130개, 적어도 140개, 적어도 150개, 적어도 175개 또는 적어도 200개의 뉴클레오티드를 포함한다. 일부 실시양태에서, gRNA 부분은 60 내지 150개, 60 내지 100개 또는 60 내지 80개의 뉴클레오티드를 포함한다.
mRNA
-
센싱
gRNA
또다른 실시양태에 따르면, 특정 조건 하에서 (예를 들어, 대사물, 소분자, 핵산 등의 존재 하에서) 표적 핵산에 결합하는 gRNA가 제공된다. 일부 실시양태에서, gRNA는 또다른 분자가 gRNA에 결합하지 (예를 들어, 혼성화하지) 않는다면 구조적으로 표적에 결합하지 (예를 들어, 혼성화하지) 못하게 하여 (예를 들어, "오프" 상태임) "온" 상태에 상응하는 구조적 재배열을 초래한다. 일부 실시양태에서, gRNA에의 특정 전사체 (예를 들어, mRNA)의 결합은 gRNA를 "오프" 상태에서 "온" 상태로 바꾼다. 예를 들어, 도 2를 참조한다. 이러한 gRNA는 "mRNA-센싱" gRNA로 지칭된다. 예를 들어, 일부 측면에서, (i) 표적 핵산의 영역에 혼성화하는 영역 (예를 들어, "가이드" 서열); (ii) 영역 (i)의 서열에 부분적으로 또는 완전히 혼성화하는 또다른 영역 (예를 들어, "가이드 블록" 서열); 및 (iii) 전사체 (mRNA)의 영역에 혼성화하는 영역 (예를 들어, the "전사체 센서")을 포함하는 gRNA가 제공된다. 일부 실시양태에서, 각각의 영역 (예를 들어, i 내지 iii)은 적어도 5개, 적어도 10개, 적어도 15개, 적어도 20개 또는 적어도 25개의 뉴클레오티드를 포함한다. 일부 실시양태에서, gRNA는 줄기-고리 구조를 형성한다. 일부 실시양태에서, 줄기는 영역 (ii)의 서열의 일부 또는 전부에 혼성화된 영역 (i)의 서열을 포함하고, 고리는 영역 (iii)의 서열의 일부 또는 전부에 의해 형성된다. 일부 실시양태에서, 영역 (ii) 및 (iii)은 둘 다 영역 (i)에 대해 5' 또는 3' 중 하나이다. 예를 들어, 도 2a 대 도 2c를 참조한다. 표적에 결합하는 gRNA의 서열 (예를 들어, "가이드" 서열)은 관련 기술분야에 공지된 방법을 사용하여 임의의 바람직한 핵산 표적을 표적화하는 임의의 서열을 포함하도록 조작될 수 있으며, 따라서, 예시적인 도면에 나타낸 서열(들)에 제한되지는 않는다. 유사하게, 영역 (iii) (예를 들어, 전사체 센서)은 관련 기술분야에서 통상적인 방법을 사용하여 관심의 mRNA를 혼성화하는 임의의 서열을 포함하도록 조작될 수 있다. 마찬가지로, 영역 (ii)는 관련 기술분야에서 통상적인 방법을 사용하여 "가이드" 서열의 일부 또는 전부에 혼성화하는 서열을 포함하도록 조작될 수 있다. 예를 들어, 일부 측면에서, mRNA는 세포에서 발현될 경우, 표적 핵산 (예를 들어, 유전자)의 게놈 변형이 바람직한 것이다. 따라서, mRNA의 부재 하에서, gRNA는 세포로 전달될 (또는 이에서 발현될) 경우, "오프" 상태로 잔류한다. mRNA가 존재할 (예를 들어, 발현될) 경우, 이는 gRNA의 전사체 센서에 결합하여, 표적 핵산에의 "가이드" 서열의 혼성화를 방지하는 줄기-고리 구조의 풀림을 초래함으로써, gRNA를 "온"으로 바꾼다. 예를 들어, 도 2b 및 2d를 참조한다. "온" 상태로 제공된 gRNA는 RNA-가이드된 뉴클레아제 (예를 들어, Cas9 단백질)와 회합하고, 이를 표적 핵산에 결합하도록 가이드할 수 있다.
연장된-DNA-
센싱
(
xDNA
-
센싱
)
gRNA
또다른 실시양태에 따르면, gRNA가 적어도 2개의 별개의 영역에서 표적 핵산에 혼성화하지 않는다면 "오프" 상태로 잔류하는 변형된 gRNA가 제공된다. 예를 들어, 도 3을 참조한다. 이러한 gRNA는 이들이 특정 gRNA/표적 상호작용의 인식 서열을 효과적으로 연장하기 때문에 RNA-가이드된 뉴클레아제 (예를 들어, Cas9)에 대한 개선된 특이성을 제공한다. 이러한 gRNA는 "xDNA-센싱" gRNA ("x"는 "연장된" DNA 인식에 대한 약어임)로 지칭된다. 예를 들어, (i) 표적 핵산의 영역에 혼성화하는 영역 (예를 들어, "가이드" 서열); (ii) 영역 (i)에 부분적으로 또는 완전히 혼성화하는 또다른 영역 (예를 들어, "가이드 블록"); 및 (iii) 표적 핵산의 또다른 영역에 혼성화하는 영역 (예를 들어, "xDNA 센서")을 포함하는 gRNA가 제공된다. 일부 실시양태에서, xDNA 센서는 가이드 서열이 표적에 결합할 수 있기 전에 먼저 표적 핵산에 결합해야 한다. 일부 실시양태에서, xDNA 센서는 가이드 서열이 결합하는 표적의 동일한 가닥에 결합한다. 일부 실시양태에서, xDNA 센서 및 가이드 서열은 표적 핵산의 상이한 가닥에 결합한다. 일부 실시양태에서, 영역 (i) 및 (ii)의 서열은 적어도 5개, 적어도 10개, 적어도 15개, 적어도 20개 또는 적어도 25개의 뉴클레오티드를 포함한다. 일부 실시양태에서, 영역 (iii)의 서열은 적어도 5개, 적어도 10개, 적어도 15개, 적어도 20개, 적어도 25개, 적어도 30개, 적어도 40개, 적어도 50개, 적어도 75개 또는 적어도 100개의 뉴클레오티드를 포함한다. 일부 실시양태에서, gRNA는 줄기-고리 구조를 형성한다. 예를 들어, 일부 실시양태에서, 줄기는 영역 (ii)의 서열의 일부 또는 전부에 혼성화된 영역 (i)의 서열을 포함하고, 고리는 영역 (iii)의 서열의 일부 또는 전부에 의해 형성된다. 일부 실시양태에서, 영역 (i) 및 (iii)은 gRNA에 인접한 서열을 포함한다. 일부 실시양태에서, 영역 (ii) 및 (iii)은 둘 다 영역 (i)에 대해 5' 또는 3' 중 하나이다. 예를 들어, 도 3a 대 도 3c를 참조한다. 일부 실시양태에서, 영역 (ii)는 영역 (i)과 (iii) 사이에 위치한다. 표적에 결합하는 gRNA의 서열 (예를 들어, "가이드" 서열)은 관련 기술분야에 공지된 방법을 사용하여 임의의 바람직한 핵산 표적을 표적화하는 임의의 서열을 포함하도록 조작될 수 있으며, 따라서, 예시적인 도면에 나타낸 서열(들)에 제한되지는 않는다. 유사하게, 영역 (iii) (예를 들어, xDNA 센서)은 관련 기술분야에서 통상적인 방법을 사용하여 표적 핵산의 또다른 영역 (예를 들어, "가이드" 서열에 의해 표적화된 것과 상이한 영역)에 혼성화하는 임의의 서열을 포함하도록 조작될 수 있다. 마찬가지로, 영역 (ii)는 관련 기술분야에서 통상적인 방법을 사용하여 "가이드" 서열의 일부 또는 전부에 혼성화하는 서열을 포함하도록 조작될 수 있다. 따라서, 정확한 표적 핵산 (예를 들어, gRNA가 혼성화하도록 설계된 둘 다의 영역을 포함하는 표적)의 부재 하에서, gRNA는 세포에 전달될 (또는 이에서 발현될) 경우 "오프" 상태로 잔류한다. 임의의 특정 이론에 구애되기를 원하는 것은 아니지만, gRNA가 표적 핵산과 접촉할 경우 (예를 들어, Cas9와 회합될 경우), xDNA 센서는 표적에 혼성화하고, 이번에는 "가이드" 서열을 차단하는 줄기-고리 구조를 풀어 gRNA를 "온"으로 바꿀 것으로 예상된다. 이것이 정확한 표적 핵산인 경우, 가이드 서열은 표적에 혼성화할 것이고, 임의로 복합체는 표적 핵산을 절단할 것이다. 예를 들어, 도 3b 및 3d를 참조한다.
복합체
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 임의의 RNA/gRNA (예를 들어, 압타머에 연결된 gRNA를 포함하는 RNA, mRNA를 센싱하는 gRNA, 또는 xDNA 센서를 포함하는 gRNA)를 포함하는 복합체가 제공된다. 일부 측면에서, RNA-가이드된 뉴클레아제와 회합된 제공된 RNA/gRNA를 포함하는 복합체가 제공된다. 일부 실시양태에서, RNA-가이드된 뉴클레아제는 예를 들어 본원에 기재된 바와 같은 Cas9, Cas9의 변이체, 또는 Cas9의 단편이다. 일부 실시양태에서, RNA-가이드된 뉴클레아제는 2013년 9월 6일에 출원된 "Cas9 변이체 및 그의 용도"라는 표제의 미국 가 특허 출원 U.S.S.N. 61/874,609, 및 2013년 9월 6일에 출원된 "기능적 뉴클레아제에 대한 전달 시스템"이라는 표제의 미국 가 특허 출원 U.S.S.N. 61/874,746에서 제공된 바와 같은 Cas9 단백질의 임의의 형태이며, 각각의 전체 내용은 그 전문이 본원에 참조로 포함된다.
일부 실시양태에서, 복합체는 리간드, 예를 들어 본원에 기재된 바와 같은 RNA-가이드된 뉴클레아제와 회합된 RNA의 압타머에 결합하는 리간드를 더 포함한다. 일부 실시양태에서, 복합체 (예를 들어, 제공된 RNA (gRNA):리간드:Cas9 단백질을 포함함)는 표적 핵산에 결합하고, 임의로 이를 절단한다. 일부 측면에서, "센싱" gRNA (예를 들어, mRNA 또는 xDNA) 및 Cas9를 포함하는 복합체는 표적 핵산에 결합하고, 임의로 이를 절단한다.
제약 조성물
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 임의의 gRNA는 제약 조성물의 일부로서 제공된다. 일부 실시양태에서, 제약 조성물은 본 발명의 gRNA와 복합체를 형성하는 RNA-가이드된 뉴클레아제 (예를 들어, Cas9)를 더 포함한다. 예를 들어, 일부 실시양태는 본원에 기재된 바와 같은 gRNA 및 RNA-가이드된 뉴클레아제, 또는 이러한 gRNA 및/또는 뉴클레아제를 코딩하는 핵산, 및 제약학적으로 허용되는 부형제를 포함하는 제약 조성물을 제공한다. 제약 조성물은 임의로 1종 이상의 추가의 치료 활성 물질을 포함할 수 있다.
일부 실시양태에서, 본원에서 제공된 조성물은 대상체 내에서 표적화된 게놈 변형을 수행하기 위해 대상체, 예를 들어 인간 대상체에게 투여된다. 일부 실시양태에서, 세포는 대상체로부터 수득되고, RNA-가이드된 뉴클레아제와 회합된 제공된 gRNA 또는 이를 코딩하는 핵산(들)과 생체외에서 접촉된다. 일부 실시양태에서, 대상체로부터 제거되고, 생체외에서 본 발명의 gRNA:뉴클레아제 복합체와 접촉된 세포는 임의로 바람직한 게놈 변형이 세포에서 수행되거나 검출된 후, 대상체 내로 재-도입된다. 뉴클레아제를 포함하는 제약 조성물의 전달 방법은 공지되어 있으며, 예를 들어, 미국 특허 제6,453,242호; 제6,503,717호; 제6,534,261호; 제6,599,692호; 제6,607,882호; 제6,689,558호; 제6,824,978호; 제6,933,113호; 제6,979,539호; 제7,013,219호; 및 제7,163,824호에 기재되어 있고, 그의 모두의 개시내용은 그 전문이 본원에 참조로 포함된다. 본원에서 제공된 제약 조성물의 설명은 원칙적으로 인간에의 투여에 적합한 제약 조성물에 관한 것이지만, 이러한 조성물은 일반적으로 모든 종류의 동물 또는 유기체에의 투여에 적합함이 통상의 기술자에 의해 이해될 것이다. 조성물을 다양한 동물에의 투여에 적합하게 하기 위한 인간에의 투여에 적합한 제약 조성물의 변형은 널리 이해되어 있으며, 통상의 숙련된 수의학 약리학자는 존재할 경우 단지 통상적인 실험으로 이러한 변형을 설계 및/또는 수행할 수 있다. 제약 조성물의 투여가 고려되는 대상체로는 인간 및/또는 다른 영장류; 포유동물, 가축, 애완동물 및 상업적으로 관련된 포유동물, 예컨대 소, 돼지, 말, 양, 고양이, 개, 마우스 및/또는 래트; 및/또는 상업적으로 관련된 조류, 예컨대 닭, 오리, 거위 및/또는 칠면조를 포함하는 조류를 들 수 있으나, 이에 제한되지는 않는다.
본원에 기재된 제약 조성물의 제제는 공지된 임의의 방법에 의해 제조되거나, 이후로 약리학의 기술분야에서 개발될 수 있다. 일반적으로, 이러한 제조 방법은 활성 성분(들)을 부형제 및/또는 1종 이상의 보조 성분과 회합시킨 후, 필요할 경우 및/또는 바람직할 경우, 생성물을 바람직한 단일- 또는 다중-투여 단위로 성형 및/또는 패키징하는 단계를 포함한다.
제약 제제는 본원에서 사용된 바와 같이 바람직한 특정 투여 형태에 적합한 바와 같은 임의의 및 모든 용매, 분산 매질, 희석제, 또는 다른 액체 비히클, 분산액 또는 현탁액 보조제, 표면 활성제, 등장화제, 증점제 또는 유화제, 보존제, 고체 결합제, 윤활제 등을 포함하는 제약학적으로 허용되는 부형제를 추가로 포함할 수 있다. 문헌 [Remington's The Science and Practice of Pharmacy, 21st Edition, A. R. Gennaro (Lippincott, Williams & Wilkins, Baltimore, MD, 2006]; 그 전문이 본원에 참조로 포함됨)에는 제약 조성물을 제제화하는 데 사용되는 다양한 부형제 및 그의 제조를 위한 공지된 기술이 개시되어 있다. 또한, 뉴클레아제를 포함하는 제약 조성물을 제조하기 위한 추가의 적합한 방법, 시약, 부형제 및 용매에 대해 PCT 출원 PCT/US2010/055131 (공개 번호 WO2011053982 A8, 2010년 11월 2일에 출원됨) (그 전문이 본원에 참조로 포함됨)을 참조한다. 임의의 통상적인 부형제 매질이 예컨대 임의의 바람직한 생물학적 효과를 생성함으로써 또는 다르게는 제약 조성물의 임의의 다른 성분(들)과 유해한 방식으로 상호작용함으로써와 같이, 물질 또는 그의 유도체와 비상용성인 한을 제외하고는, 그의 사용은 본 개시내용의 범위 내인 것으로 고려된다.
일부 실시양태에서, 본 발명에 따른 조성물은 하기 중 하나 이상을 포함하나 이에 제한되지 않는 임의의 다양한 질환, 장애 및/또는 상태의 치료에 사용될 수 있다: 자가면역 장애 (예를 들어 당뇨병, 루푸스, 다발 경화증, 건선, 류마티스성 관절염); 염증성 장애 (예를 들어 관절염, 골반 염증성 질환); 감염성 질환 (예를 들어 바이러스 감염 (예를 들어, HIV, HCV, RSV), 박테리아 감염, 진균 감염, 패혈증); 신경학적 장애 (예를 들어 알츠하이머병, 헌팅톤병; 자폐증; 듀시엔형 근육 이영양증; 심혈관 장애 (예를 들어 아테롬성경화증, 고콜레스테롤혈증, 혈전증, 응고 장애, 혈관신생 장애, 예컨대 황반 변성); 증식성 장애 (예를 들어 암, 양성 신생물); 호흡 장애 (예를 들어 만성 폐쇄성 폐 질환); 소화 장애 (예를 들어 염증성 장 질환, 궤양); 근골격 장애 (예를 들어 섬유근육통, 관절염); 내분비, 대사 및 영양 장애 (예를 들어 당뇨병, 골다공증); 비뇨기과 장애 (예를 들어 신장 질환); 정신과 장애 (예를 들어 우울증, 정신분열병); 피부 장애 (예를 들어 창상, 습진); 혈액 및 림프 장애 (예를 들어 빈혈, 혈우병); 등.
부위-특이적 핵산 절단 방법
본 개시내용의 또다른 실시양태에서, 부위-특이적 핵산 (예를 들어, DNA) 절단 방법이 제공된다. 일부 실시양태에서, 상기 방법은 본원에 기재된 임의의 Cas9:RNA 복합체와 DNA를 접촉시키는 것을 포함한다. 예를 들어, 일부 실시양태에서, 상기 방법은 (i) DNA의 일부에 결합하는 서열을 포함하는, 본원에 기재된 바와 같은 압타머에 연결된 gRNA; (ii) gRNA의 압타머에 결합된 리간드; 및 (iii) RNA-가이드된 뉴클레아제 (예를 들어, Cas9 단백질)를 포함하는 복합체와 DNA를 Cas9 뉴클레아제가 DNA를 절단하는 데 적합한 조건 하에서 접촉시키는 것을 포함한다.
일부 실시양태에서, 세포에서의 부위-특이적 DNA 절단의 유도 방법이 제공된다. 일부 실시양태에서, 상기 방법은 (a) DNA 표적 서열에 결합할 수 있는 서열을 포함하는, 본원에 기재된 바와 같은 압타머를 포함하는 gRNA를 세포와 접촉시키거나 세포 내에서 발현시키고; (b) RNA-가이드된 뉴클레아제 (예를 들어, Cas9 단백질)를 세포와 접촉시키거나 세포 내에서 발현시키고; (c) gRNA의 압타머에 결합하는 특이적 리간드와 세포를 접촉시켜 DNA 표적을 절단하는 gRNA:리간드:Cas9 복합체의 형성을 초래하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 상기 방법은 (a) Cas9 단백질, 및 DNA 표적 서열에 결합할 수 있는 서열을 포함하는, 본원에 기재된 바와 같은 압타머를 포함하는 gRNA를 포함하는 복합체와 세포를 접촉시키고; (b) gRNA의 압타머에 결합하는 특이적 리간드와 세포를 접촉시켜 DNA 표적을 절단하는 gRNA:리간드:Cas9 복합체의 형성을 초래하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 단계 (a) 및 (b)는 동시에 수행된다. 일부 실시양태에서, 단계 (a) 및 (b)는 순차적으로 수행된다. 따라서, 세포가 복합체와 접촉된 후에 세포가 리간드와 접촉하는 일부 실시양태에서, 절단은 단지 일단 리간드가 세포에 전달된 후에 일어나기 때문에 절단의 제어가 달성된다. 이들 방법의 일부 실시양태에서, 리간드는 세포에 전달되지 않지만, 세포에 의해 내부적으로, 예를 들어 생리학적 또는 병리생리학적 과정의 일부로서 생성된다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 바와 같은 mRNA-센싱 gRNA를 이용하는 부위-특이적 DNA 절단 방법이 제공된다. 예를 들어, 일부 실시양태에서, 상기 방법은 RNA-가이드된 뉴클레아제 (예를 들어, Cas9 단백질) 및 mRNA-센싱 gRNA를 포함하는 복합체와 DNA를 접촉시키는 것을 포함하며, gRNA는 (i) 표적 핵산의 영역에 혼성화하는 영역; (ii) 영역 (i)의 서열에 부분적으로 또는 완전히 혼성화하는 또다른 영역; 및 (iii) 전사체 (mRNA)의 영역에 혼성화하는 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 절단은 영역 (iii)에서의 서열이 mRNA에 혼성화한 후에 일어난다.
다른 실시양태에서, 본원에 기재된 바와 같은 xDNA-센싱 gRNA를 이용하는 부위-특이적 DNA 절단 방법이 제공된다. 예를 들어, 일부 실시양태에서, 상기 방법은 RNA-가이드된 뉴클레아제 (예를 들어, Cas9 단백질) 및 xDNA-센싱 gRNA를 포함하는 복합체와 DNA를 접촉시키는 것을 포함하며, gRNA는 (i) 표적 핵산의 영역에 혼성화하는 영역; (ii) 영역 (i)의 서열에 부분적으로 또는 완전히 혼성화하는 또다른 영역; 및 (iii) 표적 핵산의 또다른 영역에 혼성화하는 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 절단은 영역 (iii)에서의 서열이 "가이드" 서열에 의해 표적화되지 않는 표적 핵산의 영역에 혼성화한 후에 일어난다.
일부 실시양태에서, 본원에서 제공된 임의의 방법은 세포에서의 DNA 상에서 수행될 수 있다. 예를 들어, 일부 실시양태에서, 본원에서 제공된 임의의 RNA/gRNA-포함 복합체에 의해 접촉된 DNA는 진핵 세포에 있다. 일부 실시양태에서, 진핵 세포는 개체에 있다. 일부 실시양태에서, 개체는 인간이다. 일부 실시양태에서, 본원에서 제공된 임의의 방법은 시험관내에서 수행된다. 일부 실시양태에서, 본원에서 제공된 임의의 방법은 생체내에서 수행된다.
폴리뉴클레오티드, 벡터, 세포,
키트
본 개시내용의 또다른 실시양태에서, 본원에 기재된 임의의 gRNA (및 임의로 임의의 Cas9 단백질)를 코딩하는 폴리뉴클레오티드가 제공된다. 예를 들어, 예를 들어 본 발명의 gRNA, 또는 이를 포함하는 복합체, 예를 들어 본 발명의 gRNA 및 RNA-가이드된 뉴클레아제 (예를 들어, Cas9 단백질)를 포함하는 복합체의 재조합 발현 및 정제를 위한 본원에 기재된 임의의 gRNA 및/또는 Cas9 단백질을 코딩하는 폴리뉴클레오티드가 제공된다. 일부 실시양태에서, 제공된 폴리뉴클레오티드는 gRNA를 코딩하는 하나 이상의 서열을 단독으로 또는 본원에 기재된 임의의 Cas9 단백질을 코딩하는 서열과 조합으로 포함한다.
일부 실시양태에서, 예를 들어 본 발명의 gRNA, 또는 본 발명의 gRNA 및 RNA-가이드된 뉴클레아제 (예를 들어, Cas9 단백질)를 포함하는 복합체의 재조합 발현 및 정제를 위한 본원에 기재된 임의의 gRNA (및 임의로 임의의 Cas9 단백질)를 코딩하는 벡터가 제공된다. 일부 실시양태에서, 벡터는 폴리뉴클레오티드, 예를 들어 본원에 기재된 것들을 포함하거나, 이를 포함하도록 조작된다. 일부 실시양태에서, 벡터는 gRNA 및/또는 임의의 Cas9 단백질 (예를 들어, 본원에 기재된 바와 같음)을 코딩하는 하나 이상의 서열을 포함한다. 전형적으로, 벡터는 gRNA가 숙주 세포에서 발현되도록 프로모터에 작동적으로 연결된 본 발명의 gRNA를 코딩하는 서열을 포함한다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 임의의 gRNA (및 임의로 임의의 Cas9 단백질)의 재조합 발현 및 정제를 위한 세포가 제공된다. 세포는 재조합 RNA 발현 및 임의로 단백질 발현에 적합한 임의의 세포, 예를 들어, 본 발명의 gRNA를 발현하거나 발현할 수 있는 유전적 구축물을 포함하는 세포 (예를 들어, 본원에 기재된 하나 이상의 벡터로 형질전환된 세포, 또는 본원에서 제공된 본 발명의 gRNA 및 임의로 임의의 Cas9 단백질을 세포의 게놈에 혼입된 대립유전자로부터 발현하는 게놈 변형을 갖는 세포)를 포함한다. 세포의 형질전환, 세포의 유전적 변형, 및 이러한 세포에서의 유전자 및 단백질의 발현 방법은 관련 기술분야에 널리 공지되어 있으며, 예를 들어, 문헌 [Green and Sambrook, Molecular Cloning: A Laboratory Manual (4th ed., Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, N.Y. (2012))] 및 [Friedman and Rossi, Gene Transfer: Delivery and Expression of DNA and RNA, A Laboratory Manual (1st ed., Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, N.Y. (2006))]에 의해 제공된 것을 들 수 있다.
본 개시내용의 일부 측면은 본원에서 제공된 임의의 본 발명의 gRNA 또는 복합체 및 임의로 본원에 기재된 임의의 Cas9 단백질을 포함하는 키트를 제공한다. 일부 실시양태에서, 키트는 제공된 gRNA를 코딩하는 임의의 폴리뉴클레오티드, 및 임의로 임의의 Cas9 단백질을 포함한다. 일부 실시양태에서, 키트는 임의의 본 발명의 gRNA 및 임의로 임의의 Cas9 단백질의 재조합 발현을 위한 벡터를 포함한다. 일부 실시양태에서, 키트는 본원에서 제공된 임의의 본 발명의 gRNA, 복합체, 및 임의로 임의의 Cas9 단백질을 발현시키기 위한 유전적 구축물을 포함하는 세포를 포함한다. 일부 실시양태에서, 키트는 부형제, 및 임의의 본 발명의 조성물을 부형제와 접촉시켜, 핵산을 예를 들어 본 발명의 gRNA 및 RNA-가이드된 뉴클레아제, 예컨대 Cas9의 복합체와 접촉시키는 데 적합한 조성물을 생성하기 위한 지시서를 포함한다. 일부 실시양태에서, 조성물은 게놈 내에서 핵산을 접촉시키는 데 적합하다. 일부 실시양태에서, 조성물은 본 발명의 조성물 (예를 들어, gRNA, 그와 Cas9의 복합체)을 세포에 전달하는 데 적합하다. 일부 실시양태에서, 조성물은 본 발명의 조성물 (예를 들어, gRNA, 그와 Cas9의 복합체)을 대상체에 전달하는 데 적합하다. 일부 실시양태에서, 부형제는 제약학적으로 허용되는 부형제이다.
등가 및 범위
관련 기술분야의 통상의 기술자는 단지 통상적인 실험을 이용하여, 본원에 기재된 본 발명의 구체적 실시양태에 대한 많은 등가내용을 인식하거나 또는 확인할 수 있을 것이다. 본 발명의 범위는 상기 설명으로 제한되지 않고, 오히려 첨부된 청구범위에 제시된 바와 같다.
청구범위에서, 단수 형태는 달리 표시되지 않거나 또는 문맥상 달리 명백하지 않는 한 하나 이상을 의미한다. 특정 군의 하나 이상의 구성원들 간의 "또는"을 포함하는 청구범위 또는 설명은 이러한 군 구성원 중 하나, 2개 이상, 또는 모두가 달리 표시되지 않거나 또는 문맥상 달리 명백하지 않는 한은 소정의 생성물 또는 공정에 존재하거나, 이용되거나 또는 달리 관련되는 경우에 만족되는 것으로 간주된다. 본 발명은 상기 군의 바로 하나의 구성원이 소정의 생성물 또는 공정에 존재하거나, 이용되거나 또는 달리 관련되는 실시양태를 포함한다. 본 발명은 또한, 상기 군 구성원의 2개 이상 또는 모두가 소정의 생성물 또는 공정에 존재하거나, 이용되거나 또는 달리 관련되는 실시양태를 포함한다.
더욱이, 본 발명이 청구항들 중 하나 이상으로부터, 또는 상기 설명의 관련 부분으로부터의 하나 이상의 제한, 요소, 절, 기술적 용어 등이 또 다른 청구항 내로 도입되는 모든 변동, 조합 및 순열을 포괄하는 것으로 이해되어야 한다. 예를 들어, 또 다른 청구항에 종속항인 어떠한 청구항도 동일한 기본 청구항에 종속적인 다른 청구항에서 발견된 하나 이상의 제한을 포함하도록 변형될 수 있다. 더욱이, 청구항이 조성물을 인용하는 경우, 달리 표시되지 않는 한 또는 모순이나 불일치가 발생할 것으로 관련 기술분야의 통상의 기술자에게 명백하지 않는 한은, 본원에 개시된 목적 중 어느 것을 위하여 이러한 조성물을 사용하는 방법이 포함되고, 본원에 개시된 제조 방법 또는 관련 기술분야에 공지된 다른 방법 중 어느 것에 따라서 상기 조성물을 제조하는 방법이 포함되는 것으로 이해되어야 한다.
요소들이 목록으로서, 예를 들어 마쿠쉬(Markush) 군 형식으로 제시되는 경우에는, 이러한 요소들의 각 하위군이 또한 개시되고, 임의의 요소(들)가 이러한 군으로부터 제거될 수 있는 것으로 이해되어야 한다. 또한, 용어 "포함하는"은 개방형으로 의도되며 추가의 요소 또는 단계의 포함을 허용함에 유의해야 한다. 일반적으로, 본 발명 또는 본 발명의 측면이 특별한 요소, 특징, 단계 등을 포함하는 것으로 지칭되는 경우, 본 발명 또는 본 발명의 측면의 특정 실시양태는 이러한 요소, 특징, 단계 등으로 이루어지거나 또는 본질적으로 이루어지는 것으로 이해되어야 한다. 편의상, 이들 실시양태는 본원에서 그대로 구체적으로 제시되지는 않았다. 따라서, 하나 이상의 요소, 특징, 단계 등을 포함하는 본 발명의 각 실시양태에 대하여, 본 발명은 또한, 이러한 요소, 특징, 단계 등으로 이루어지거나 본질적으로 이루어지는 실시양태를 제공한다.
범위가 제공되는 경우에는, 종말점이 포함된다. 더욱이, 달리 표시되지 않거나 또는 관련 기술분야의 통상의 기술자의 맥락 및/또는 이해로부터 달리 명백하지 않는 한, 범위로서 표현되는 값은 본 발명의 상이한 실시양태에서 언급된 범위 내의 모든 구체적 값 내지 문맥상 달리 명확하게 지시하지 않는 한은 이러한 범위의 하한치의 단위의 1/10을 추정할 수 있는 것으로 이해되어야 한다. 또한, 달리 표시되지 않거나 또는 관련 기술분야의 통상의 기술자의 맥락 및/또는 이해로부터 달리 명백하지 않는 한, 범위로서 표현되는 값은 소정의 범위 내의 모든 하위범위를 추정할 수 있는 것으로 이해되어야 하는데, 여기서 이러한 아범위의 종말점은 상기 범위의 하한치의 단위의 1/10과 동일한 정확도로 표현된다.
또한, 본 발명의 특별한 어떠한 실시양태도 어느 하나 이상의 청구항으로부터 명시적으로 배제될 수 있는 것으로 이해되어야 한다. 범위가 제공되는 경우, 이러한 범위 내의 어떠한 값도 어느 하나 이상의 청구항으로부터 명시적으로 배제될 수 있다. 본 발명의 조성물 및/또는 방법의 모든 실시양태, 요소, 특징, 적용 또는 측면이 어느 하나 이상의 청구항으로부터 배제될 수 있다. 간결성을 위해, 하나 이상의 요소, 특징, 목적 또는 측면이 배제되는 모든 실시양태가 본원에 명시적으로 제시되지 않는다.
상기 열거된 항목을 포함한, 본원에 언급된 모든 공개 공보, 특허 및 서열 데이터베이스 목록은 마치 각각의 개별 간행물 또는 특허가 구체적으로 및 개별적으로 참조로 포함되는 것으로 표시되었던 것처럼 그들의 전문이 본원에 참조로 포함된다. 충돌이 있는 경우, 본원의 모든 정의를 비롯하여 본 출원이 우선할 것이다.
SEQUENCE LISTING
<110> President and Fellows of Harvard College
<120> SWITCHABLE CAS9 NUCLEASES AND USES THEREOF
<130> H0824.70148WO00
<140> PCT/US2014/054252
<141> 2014-09-05
<150> US 14/326,329
<151> 2014-07-08
<150> US 14/326,340
<151> 2014-07-08
<150> US 14/326,361
<151> 2014-07-08
<150> US 61/874,682
<151> 2013-09-06
<160> 16
<170> PatentIn version 3.5
<210> 1
<211> 4104
<212> DNA
<213> Streptococcus pyogenes
<400> 1
atggataaga aatactcaat aggcttagat atcggcacaa atagcgtcgg atgggcggtg 60
atcactgatg attataaggt tccgtctaaa aagttcaagg ttctgggaaa tacagaccgc 120
cacagtatca aaaaaaatct tataggggct cttttatttg gcagtggaga gacagcggaa 180
gcgactcgtc tcaaacggac agctcgtaga aggtatacac gtcggaagaa tcgtatttgt 240
tatctacagg agattttttc aaatgagatg gcgaaagtag atgatagttt ctttcatcga 300
cttgaagagt cttttttggt ggaagaagac aagaagcatg aacgtcatcc tatttttgga 360
aatatagtag atgaagttgc ttatcatgag aaatatccaa ctatctatca tctgcgaaaa 420
aaattggcag attctactga taaagcggat ttgcgcttaa tctatttggc cttagcgcat 480
atgattaagt ttcgtggtca ttttttgatt gagggagatt taaatcctga taatagtgat 540
gtggacaaac tatttatcca gttggtacaa atctacaatc aattatttga agaaaaccct 600
attaacgcaa gtagagtaga tgctaaagcg attctttctg cacgattgag taaatcaaga 660
cgattagaaa atctcattgc tcagctcccc ggtgagaaga gaaatggctt gtttgggaat 720
ctcattgctt tgtcattggg attgacccct aattttaaat caaattttga tttggcagaa 780
gatgctaaat tacagctttc aaaagatact tacgatgatg atttagataa tttattggcg 840
caaattggag atcaatatgc tgatttgttt ttggcagcta agaatttatc agatgctatt 900
ttactttcag atatcctaag agtaaatagt gaaataacta aggctcccct atcagcttca 960
atgattaagc gctacgatga acatcatcaa gacttgactc ttttaaaagc tttagttcga 1020
caacaacttc cagaaaagta taaagaaatc ttttttgatc aatcaaaaaa cggatatgca 1080
ggttatattg atgggggagc tagccaagaa gaattttata aatttatcaa accaatttta 1140
gaaaaaatgg atggtactga ggaattattg gtgaaactaa atcgtgaaga tttgctgcgc 1200
aagcaacgga cctttgacaa cggctctatt ccccatcaaa ttcacttggg tgagctgcat 1260
gctattttga gaagacaaga agacttttat ccatttttaa aagacaatcg tgagaagatt 1320
gaaaaaatct tgacttttcg aattccttat tatgttggtc cattggcgcg tggcaatagt 1380
cgttttgcat ggatgactcg gaagtctgaa gaaacaatta ccccatggaa ttttgaagaa 1440
gttgtcgata aaggtgcttc agctcaatca tttattgaac gcatgacaaa ctttgataaa 1500
aatcttccaa atgaaaaagt actaccaaaa catagtttgc tttatgagta ttttacggtt 1560
tataacgaat tgacaaaggt caaatatgtt actgagggaa tgcgaaaacc agcatttctt 1620
tcaggtgaac agaagaaagc cattgttgat ttactcttca aaacaaatcg aaaagtaacc 1680
gttaagcaat taaaagaaga ttatttcaaa aaaatagaat gttttgatag tgttgaaatt 1740
tcaggagttg aagatagatt taatgcttca ttaggcgcct accatgattt gctaaaaatt 1800
attaaagata aagatttttt ggataatgaa gaaaatgaag atatcttaga ggatattgtt 1860
ttaacattga ccttatttga agataggggg atgattgagg aaagacttaa aacatatgct 1920
cacctctttg atgataaggt gatgaaacag cttaaacgtc gccgttatac tggttgggga 1980
cgtttgtctc gaaaattgat taatggtatt agggataagc aatctggcaa aacaatatta 2040
gattttttga aatcagatgg ttttgccaat cgcaatttta tgcagctgat ccatgatgat 2100
agtttgacat ttaaagaaga tattcaaaaa gcacaggtgt ctggacaagg ccatagttta 2160
catgaacaga ttgctaactt agctggcagt cctgctatta aaaaaggtat tttacagact 2220
gtaaaaattg ttgatgaact ggtcaaagta atggggcata agccagaaaa tatcgttatt 2280
gaaatggcac gtgaaaatca gacaactcaa aagggccaga aaaattcgcg agagcgtatg 2340
aaacgaatcg aagaaggtat caaagaatta ggaagtcaga ttcttaaaga gcatcctgtt 2400
gaaaatactc aattgcaaaa tgaaaagctc tatctctatt atctacaaaa tggaagagac 2460
atgtatgtgg accaagaatt agatattaat cgtttaagtg attatgatgt cgatcacatt 2520
gttccacaaa gtttcattaa agacgattca atagacaata aggtactaac gcgttctgat 2580
aaaaatcgtg gtaaatcgga taacgttcca agtgaagaag tagtcaaaaa gatgaaaaac 2640
tattggagac aacttctaaa cgccaagtta atcactcaac gtaagtttga taatttaacg 2700
aaagctgaac gtggaggttt gagtgaactt gataaagctg gttttatcaa acgccaattg 2760
gttgaaactc gccaaatcac taagcatgtg gcacaaattt tggatagtcg catgaatact 2820
aaatacgatg aaaatgataa acttattcga gaggttaaag tgattacctt aaaatctaaa 2880
ttagtttctg acttccgaaa agatttccaa ttctataaag tacgtgagat taacaattac 2940
catcatgccc atgatgcgta tctaaatgcc gtcgttggaa ctgctttgat taagaaatat 3000
ccaaaacttg aatcggagtt tgtctatggt gattataaag tttatgatgt tcgtaaaatg 3060
attgctaagt ctgagcaaga aataggcaaa gcaaccgcaa aatatttctt ttactctaat 3120
atcatgaact tcttcaaaac agaaattaca cttgcaaatg gagagattcg caaacgccct 3180
ctaatcgaaa ctaatgggga aactggagaa attgtctggg ataaagggcg agattttgcc 3240
acagtgcgca aagtattgtc catgccccaa gtcaatattg tcaagaaaac agaagtacag 3300
acaggcggat tctccaagga gtcaatttta ccaaaaagaa attcggacaa gcttattgct 3360
cgtaaaaaag actgggatcc aaaaaaatat ggtggttttg atagtccaac ggtagcttat 3420
tcagtcctag tggttgctaa ggtggaaaaa gggaaatcga agaagttaaa atccgttaaa 3480
gagttactag ggatcacaat tatggaaaga agttcctttg aaaaaaatcc gattgacttt 3540
ttagaagcta aaggatataa ggaagttaaa aaagacttaa tcattaaact acctaaatat 3600
agtctttttg agttagaaaa cggtcgtaaa cggatgctgg ctagtgccgg agaattacaa 3660
aaaggaaatg agctggctct gccaagcaaa tatgtgaatt ttttatattt agctagtcat 3720
tatgaaaagt tgaagggtag tccagaagat aacgaacaaa aacaattgtt tgtggagcag 3780
cataagcatt atttagatga gattattgag caaatcagtg aattttctaa gcgtgttatt 3840
ttagcagatg ccaatttaga taaagttctt agtgcatata acaaacatag agacaaacca 3900
atacgtgaac aagcagaaaa tattattcat ttatttacgt tgacgaatct tggagctccc 3960
gctgctttta aatattttga tacaacaatt gatcgtaaac gatatacgtc tacaaaagaa 4020
gttttagatg ccactcttat ccatcaatcc atcactggtc tttatgaaac acgcattgat 4080
ttgagtcagc taggaggtga ctga 4104
<210> 2
<211> 1367
<212> PRT
<213> Streptococcus pyogenes
<400> 2
Met Asp Lys Lys Tyr Ser Ile Gly Leu Asp Ile Gly Thr Asn Ser Val
1 5 10 15
Gly Trp Ala Val Ile Thr Asp Asp Tyr Lys Val Pro Ser Lys Lys Phe
20 25 30
Lys Val Leu Gly Asn Thr Asp Arg His Ser Ile Lys Lys Asn Leu Ile
35 40 45
Gly Ala Leu Leu Phe Gly Ser Gly Glu Thr Ala Glu Ala Thr Arg Leu
50 55 60
Lys Arg Thr Ala Arg Arg Arg Tyr Thr Arg Arg Lys Asn Arg Ile Cys
65 70 75 80
Tyr Leu Gln Glu Ile Phe Ser Asn Glu Met Ala Lys Val Asp Asp Ser
85 90 95
Phe Phe His Arg Leu Glu Glu Ser Phe Leu Val Glu Glu Asp Lys Lys
100 105 110
His Glu Arg His Pro Ile Phe Gly Asn Ile Val Asp Glu Val Ala Tyr
115 120 125
His Glu Lys Tyr Pro Thr Ile Tyr His Leu Arg Lys Lys Leu Ala Asp
130 135 140
Ser Thr Asp Lys Ala Asp Leu Arg Leu Ile Tyr Leu Ala Leu Ala His
145 150 155 160
Met Ile Lys Phe Arg Gly His Phe Leu Ile Glu Gly Asp Leu Asn Pro
165 170 175
Asp Asn Ser Asp Val Asp Lys Leu Phe Ile Gln Leu Val Gln Ile Tyr
180 185 190
Asn Gln Leu Phe Glu Glu Asn Pro Ile Asn Ala Ser Arg Val Asp Ala
195 200 205
Lys Ala Ile Leu Ser Ala Arg Leu Ser Lys Ser Arg Arg Leu Glu Asn
210 215 220
Leu Ile Ala Gln Leu Pro Gly Glu Lys Arg Asn Gly Leu Phe Gly Asn
225 230 235 240
Leu Ile Ala Leu Ser Leu Gly Leu Thr Pro Asn Phe Lys Ser Asn Phe
245 250 255
Asp Leu Ala Glu Asp Ala Lys Leu Gln Leu Ser Lys Asp Thr Tyr Asp
260 265 270
Asp Asp Leu Asp Asn Leu Leu Ala Gln Ile Gly Asp Gln Tyr Ala Asp
275 280 285
Leu Phe Leu Ala Ala Lys Asn Leu Ser Asp Ala Ile Leu Leu Ser Asp
290 295 300
Ile Leu Arg Val Asn Ser Glu Ile Thr Lys Ala Pro Leu Ser Ala Ser
305 310 315 320
Met Ile Lys Arg Tyr Asp Glu His His Gln Asp Leu Thr Leu Leu Lys
325 330 335
Ala Leu Val Arg Gln Gln Leu Pro Glu Lys Tyr Lys Glu Ile Phe Phe
340 345 350
Asp Gln Ser Lys Asn Gly Tyr Ala Gly Tyr Ile Asp Gly Gly Ala Ser
355 360 365
Gln Glu Glu Phe Tyr Lys Phe Ile Lys Pro Ile Leu Glu Lys Met Asp
370 375 380
Gly Thr Glu Glu Leu Leu Val Lys Leu Asn Arg Glu Asp Leu Leu Arg
385 390 395 400
Lys Gln Arg Thr Phe Asp Asn Gly Ser Ile Pro His Gln Ile His Leu
405 410 415
Gly Glu Leu His Ala Ile Leu Arg Arg Gln Glu Asp Phe Tyr Pro Phe
420 425 430
Leu Lys Asp Asn Arg Glu Lys Ile Glu Lys Ile Leu Thr Phe Arg Ile
435 440 445
Pro Tyr Tyr Val Gly Pro Leu Ala Arg Gly Asn Ser Arg Phe Ala Trp
450 455 460
Met Thr Arg Lys Ser Glu Glu Thr Ile Thr Pro Trp Asn Phe Glu Glu
465 470 475 480
Val Val Asp Lys Gly Ala Ser Ala Gln Ser Phe Ile Glu Arg Met Thr
485 490 495
Asn Phe Asp Lys Asn Leu Pro Asn Glu Lys Val Leu Pro Lys His Ser
500 505 510
Leu Leu Tyr Glu Tyr Phe Thr Val Tyr Asn Glu Leu Thr Lys Val Lys
515 520 525
Tyr Val Thr Glu Gly Met Arg Lys Pro Ala Phe Leu Ser Gly Glu Gln
530 535 540
Lys Lys Ala Ile Val Asp Leu Leu Phe Lys Thr Asn Arg Lys Val Thr
545 550 555 560
Val Lys Gln Leu Lys Glu Asp Tyr Phe Lys Lys Ile Glu Cys Phe Asp
565 570 575
Ser Val Glu Ile Ser Gly Val Glu Asp Arg Phe Asn Ala Ser Leu Gly
580 585 590
Ala Tyr His Asp Leu Leu Lys Ile Ile Lys Asp Lys Asp Phe Leu Asp
595 600 605
Asn Glu Glu Asn Glu Asp Ile Leu Glu Asp Ile Val Leu Thr Leu Thr
610 615 620
Leu Phe Glu Asp Arg Gly Met Ile Glu Glu Arg Leu Lys Thr Tyr Ala
625 630 635 640
His Leu Phe Asp Asp Lys Val Met Lys Gln Leu Lys Arg Arg Arg Tyr
645 650 655
Thr Gly Trp Gly Arg Leu Ser Arg Lys Leu Ile Asn Gly Ile Arg Asp
660 665 670
Lys Gln Ser Gly Lys Thr Ile Leu Asp Phe Leu Lys Ser Asp Gly Phe
675 680 685
Ala Asn Arg Asn Phe Met Gln Leu Ile His Asp Asp Ser Leu Thr Phe
690 695 700
Lys Glu Asp Ile Gln Lys Ala Gln Val Ser Gly Gln Gly His Ser Leu
705 710 715 720
His Glu Gln Ile Ala Asn Leu Ala Gly Ser Pro Ala Ile Lys Lys Gly
725 730 735
Ile Leu Gln Thr Val Lys Ile Val Asp Glu Leu Val Lys Val Met Gly
740 745 750
His Lys Pro Glu Asn Ile Val Ile Glu Met Ala Arg Glu Asn Gln Thr
755 760 765
Thr Gln Lys Gly Gln Lys Asn Ser Arg Glu Arg Met Lys Arg Ile Glu
770 775 780
Glu Gly Ile Lys Glu Leu Gly Ser Gln Ile Leu Lys Glu His Pro Val
785 790 795 800
Glu Asn Thr Gln Leu Gln Asn Glu Lys Leu Tyr Leu Tyr Tyr Leu Gln
805 810 815
Asn Gly Arg Asp Met Tyr Val Asp Gln Glu Leu Asp Ile Asn Arg Leu
820 825 830
Ser Asp Tyr Asp Val Asp His Ile Val Pro Gln Ser Phe Ile Lys Asp
835 840 845
Asp Ser Ile Asp Asn Lys Val Leu Thr Arg Ser Asp Lys Asn Arg Gly
850 855 860
Lys Ser Asp Asn Val Pro Ser Glu Glu Val Val Lys Lys Met Lys Asn
865 870 875 880
Tyr Trp Arg Gln Leu Leu Asn Ala Lys Leu Ile Thr Gln Arg Lys Phe
885 890 895
Asp Asn Leu Thr Lys Ala Glu Arg Gly Gly Leu Ser Glu Leu Asp Lys
900 905 910
Ala Gly Phe Ile Lys Arg Gln Leu Val Glu Thr Arg Gln Ile Thr Lys
915 920 925
His Val Ala Gln Ile Leu Asp Ser Arg Met Asn Thr Lys Tyr Asp Glu
930 935 940
Asn Asp Lys Leu Ile Arg Glu Val Lys Val Ile Thr Leu Lys Ser Lys
945 950 955 960
Leu Val Ser Asp Phe Arg Lys Asp Phe Gln Phe Tyr Lys Val Arg Glu
965 970 975
Ile Asn Asn Tyr His His Ala His Asp Ala Tyr Leu Asn Ala Val Val
980 985 990
Gly Thr Ala Leu Ile Lys Lys Tyr Pro Lys Leu Glu Ser Glu Phe Val
995 1000 1005
Tyr Gly Asp Tyr Lys Val Tyr Asp Val Arg Lys Met Ile Ala Lys
1010 1015 1020
Ser Glu Gln Glu Ile Gly Lys Ala Thr Ala Lys Tyr Phe Phe Tyr
1025 1030 1035
Ser Asn Ile Met Asn Phe Phe Lys Thr Glu Ile Thr Leu Ala Asn
1040 1045 1050
Gly Glu Ile Arg Lys Arg Pro Leu Ile Glu Thr Asn Gly Glu Thr
1055 1060 1065
Gly Glu Ile Val Trp Asp Lys Gly Arg Asp Phe Ala Thr Val Arg
1070 1075 1080
Lys Val Leu Ser Met Pro Gln Val Asn Ile Val Lys Lys Thr Glu
1085 1090 1095
Val Gln Thr Gly Gly Phe Ser Lys Glu Ser Ile Leu Pro Lys Arg
1100 1105 1110
Asn Ser Asp Lys Leu Ile Ala Arg Lys Lys Asp Trp Asp Pro Lys
1115 1120 1125
Lys Tyr Gly Gly Phe Asp Ser Pro Thr Val Ala Tyr Ser Val Leu
1130 1135 1140
Val Val Ala Lys Val Glu Lys Gly Lys Ser Lys Lys Leu Lys Ser
1145 1150 1155
Val Lys Glu Leu Leu Gly Ile Thr Ile Met Glu Arg Ser Ser Phe
1160 1165 1170
Glu Lys Asn Pro Ile Asp Phe Leu Glu Ala Lys Gly Tyr Lys Glu
1175 1180 1185
Val Lys Lys Asp Leu Ile Ile Lys Leu Pro Lys Tyr Ser Leu Phe
1190 1195 1200
Glu Leu Glu Asn Gly Arg Lys Arg Met Leu Ala Ser Ala Gly Glu
1205 1210 1215
Leu Gln Lys Gly Asn Glu Leu Ala Leu Pro Ser Lys Tyr Val Asn
1220 1225 1230
Phe Leu Tyr Leu Ala Ser His Tyr Glu Lys Leu Lys Gly Ser Pro
1235 1240 1245
Glu Asp Asn Glu Gln Lys Gln Leu Phe Val Glu Gln His Lys His
1250 1255 1260
Tyr Leu Asp Glu Ile Ile Glu Gln Ile Ser Glu Phe Ser Lys Arg
1265 1270 1275
Val Ile Leu Ala Asp Ala Asn Leu Asp Lys Val Leu Ser Ala Tyr
1280 1285 1290
Asn Lys His Arg Asp Lys Pro Ile Arg Glu Gln Ala Glu Asn Ile
1295 1300 1305
Ile His Leu Phe Thr Leu Thr Asn Leu Gly Ala Pro Ala Ala Phe
1310 1315 1320
Lys Tyr Phe Asp Thr Thr Ile Asp Arg Lys Arg Tyr Thr Ser Thr
1325 1330 1335
Lys Glu Val Leu Asp Ala Thr Leu Ile His Gln Ser Ile Thr Gly
1340 1345 1350
Leu Tyr Glu Thr Arg Ile Asp Leu Ser Gln Leu Gly Gly Asp
1355 1360 1365
<210> 3
<211> 38
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic Polynucleotide
<400> 3
ggugauacca gcaucgucuu gaugcccuug gcagcacc 38
<210> 4
<211> 24
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic Polynucleotide
<400> 4
ggcagatgta gtgtttccac aggg 24
<210> 5
<211> 24
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic Polynucleotide
<400> 5
ccctgtggaa acactacatc tgcc 24
<210> 6
<211> 133
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic Polynucleotide
<400> 6
ggugauacca gcaucgucuu gaugcccuug gcagcacccg cugcgcaggg gguaucaggc 60
agauguagug uuuccacagu uuuagagcua ugcugaaaag cauagcaagu uaaaauaagg 120
cuaguccguu auc 133
<210> 7
<211> 107
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic Polynucleotide
<400> 7
uacaucugcc uugugagagu ugaaguugua uggcagaugu aguguuucca caguuuuaga 60
gcuaugcuga aaagcauagc aaguuaaaau aaggcuaguc cguuauc 107
<210> 8
<211> 90
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic Polynucleotide
<400> 8
ggcagaugua guguuuccac aguuuuagag cuaugcugaa aagcauagca aguuaaaauu 60
auguugaagu ugagaguguu uacaucugcc 90
<210> 9
<211> 107
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic Polynucleotide
<400> 9
uacaucugcc uugugagagu ugaaguugua uggcagaugu aguguuucca caguuuuaga 60
gcuaugcuga aaagcauagc aaguuaaaau aaggcuaguc cguuauc 107
<210> 10
<211> 117
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic Polynucleotide
<400> 10
ggcagaugua guguuuccac aguuuuagag cuaugcugaa aagcauagca aguuaaaaua 60
aggcuagucc guuaucaacu ugaaaaagug gugaaguuga gaguguuuac aucugcc 117
<210> 11
<211> 134
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic Polynucleotide
<400> 11
ggugauacca gcaucguuug augcccuugg cagcaccgcu gcgcaggggg uaucaacagg 60
cagauguagu guuuccacag uuuuagagcu augcugaaaa gcauagcaag uuaaaauaag 120
gcuaguccgu uauc 134
<210> 12
<211> 21
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic Polynucleotide
<400> 12
auacaacuuc aacucucaca a 21
<210> 13
<211> 45
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic Polynucleotide
<400> 13
ttgtgagagt tgaagttgta tggcagatgt agtgtttcca caggg 45
<210> 14
<211> 45
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic Polynucleotide
<400> 14
ccctgtggaa acactacatc tgccatacaa cttcaactct cacaa 45
<210> 15
<211> 21
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic Polynucleotide
<400> 15
tatgttgaag ttgagagtgt t 21
<210> 16
<211> 21
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Synthetic Polynucleotide
<400> 16
aacactctca acttcaacat a 21
Claims (113)
- (i) 압타머를 포함하며, 압타머에 결합된 특이적 리간드의 부재 하에서는 표적 핵산에 혼성화하지 않는 gRNA; 및 (ii) Cas9 단백질을 포함하는 복합체.
- 제1항에 있어서, 압타머가 리간드에 의해 결합된 것인 복합체.
- 제2항에 있어서, 리간드가 소분자, 대사물, 펩티드 또는 핵산인 복합체.
- 제3항에 있어서, gRNA:리간드:Cas9 복합체가 표적 핵산에 결합하는 것인 복합체.
- 압타머를 포함하며, 압타머에 결합된 특이적 리간드의 부재 하에서는 표적 핵산에 혼성화하지 않는 gRNA.
- 제5항에 있어서, 압타머에 결합된 특이적 리간드의 부재 하에서는 Cas9에 결합하지 않는 gRNA.
- 제5항 또는 제6항에 있어서, 압타머가 압타머에 특이적인 리간드에 의해 결합될 경우 Cas9에 결합하는 gRNA.
- 제5항에 있어서, 압타머에 결합된 특이적 리간드의 부재 또는 존재 하에서 Cas9에 결합하지만, 표적 핵산에는 압타머에 결합된 특이적 리간드의 존재 하에서만 결합하는 gRNA.
- 제5항 내지 제8항 중 어느 한 항에 있어서, 리간드가 소분자, 대사물, 펩티드 또는 핵산인 gRNA.
- 제5항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서, 압타머가 RNA 압타머인 gRNA.
- 제10항에 있어서, RNA 압타머가 리보스위치로부터 유래되는 것인 gRNA.
- 제11항에 있어서, 압타머가 유래되는 리보스위치가 테오필린 리보스위치, 티아민 피로포스페이트 (TPP) 리보스위치, 아데노신 코발라민 (AdoCbl) 리보스위치, S-아데노실 메티오닌 (SAM) 리보스위치, SAH 리보스위치, 플라빈 모노뉴클레오티드 (FMN) 리보스위치, 테트라히드로폴레이트 리보스위치, 리신 리보스위치, 글리신 리보스위치, 퓨린 리보스위치, GlmS 리보스위치 또는 프리-퀘오신1 (PreQ1) 리보스위치로부터 선택되는 것인 gRNA.
- 제12항에 있어서, 압타머가 테오필린 리보스위치로부터 유래되고, 서열 3을 포함하는 것인 gRNA.
- 제10항에 있어서, 압타머가 비-천연 발생적인 것인 gRNA.
- 제14항에 있어서, 압타머가 지수적 풍부화에 의한 리간드의 계통적 진화 (SELEX) 플랫폼을 사용하여 특이적 리간드에 결합하도록 조작된 것인 gRNA.
- 제5항 내지 제15항 중 어느 한 항에 있어서, 비-압타머 부분이 적어도 50개, 적어도 60개, 적어도 70개, 적어도 80개, 적어도 90개, 적어도 100개, 적어도 110개, 적어도 120개, 적어도 130개, 적어도 140개 또는 적어도 150개의 뉴클레오티드를 포함하고, 압타머가 적어도 20개, 적어도 30개, 적어도 40개, 적어도 50개, 적어도 60개, 적어도 70개, 적어도 80개, 적어도 90개, 적어도 100개, 적어도 110개, 적어도 120개, 적어도 130개, 적어도 140개, 적어도 150개, 적어도 175개, 적어도 200개, 적어도 250개 또는 적어도 300개의 뉴클레오티드를 포함하는 것인 gRNA.
- 제5항 내지 제16항 중 어느 한 항의 gRNA를 코딩하는 폴리뉴클레오티드.
- 제17항의 폴리뉴클레오티드를 포함하는 벡터.
- 제5항 내지 제16항 중 어느 한 항의 gRNA를 코딩하는 폴리뉴클레오티드를 포함하는 재조합 발현용 벡터.
- 제5항 내지 제16항 중 어느 한 항의 gRNA를 발현시키기 위한 유전적 구축물을 포함하는 세포.
- 제20항에 있어서, Cas9 단백질을 발현하는 세포.
- (i) DNA의 부분에 결합하는 서열을 포함하는 제5항 내지 제16항 중 어느 한 항의 gRNA, (ii) gRNA의 압타머에 결합된 특이적 리간드, 및 (iii) Cas9 단백질을 포함하는 복합체와 DNA를 Cas9 단백질이 DNA를 절단하는 조건 하에서 접촉시키는 것을 포함하는 부위-특이적 DNA 절단 방법.
- 제22항에 있어서, DNA가 세포에 있는 것인 방법.
- 제23항에 있어서, 세포가 진핵 세포인 방법.
- 제24항에 있어서, 세포가 개체에 있는 것인 방법.
- 제25항에 있어서, 개체가 인간인 방법.
- (a) DNA 표적 서열에 결합할 수 있는 서열을 포함하는 제5항 내지 제16항 중 어느 한 항의 gRNA를 세포와 접촉시키거나 세포 내에서 발현시키고;
(b) Cas9 단백질을 세포와 접촉시키거나 세포 내에서 발현시키고;
(c) gRNA의 압타머에 결합하는 특이적 리간드와 세포를 접촉시켜 DNA 표적을 절단하는 gRNA:리간드:Cas9 복합체의 형성을 초래하는 것
을 포함하는, 세포에서의 부위-특이적 DNA 절단의 유도 방법. - (a) Cas9 단백질, 및 DNA 표적 서열에 결합할 수 있는 서열을 포함하는 제5항 내지 제16항 중 어느 한 항의 gRNA를 포함하는 복합체와 세포를 접촉시키고, (b) gRNA의 압타머에 결합하는 특이적 리간드와 세포를 접촉시켜 DNA 표적을 절단하는 gRNA:리간드:Cas9 복합체의 형성을 초래하는 것을 포함하는, 세포에서의 부위-특이적 DNA 절단의 유도 방법.
- 제28항에 있어서, 단계 (a) 및 (b)가 동시에 또는 임의의 순서로 순차적으로 수행되는 것인 방법.
- 제27항 내지 제29항 중 어느 한 항에 있어서, 세포가 진핵 세포인 방법.
- 제30항에 있어서, 진핵 세포가 시험관내에 있는 것인 방법.
- 제30항에 있어서, 진핵 세포가 생체내에 있는 것인 방법.
- 제32항에 있어서, 세포가 개체에 있는 것인 방법.
- 제33항에 있어서, 개체가 인간인 방법.
- 제5항 내지 제16항 중 어느 한 항의 gRNA를 포함하는 키트.
- 제5항 내지 제16항 중 어느 한 항의 gRNA를 코딩하는 폴리뉴클레오티드를 포함하는 키트.
- 제5항 내지 제16항 중 어느 한 항의 gRNA를 코딩하는 폴리뉴클레오티드를 포함하는 재조합 발현용 벡터를 포함하는 키트.
- 제5항 내지 제16항 중 어느 한 항의 gRNA 및 임의로 Cas9 단백질을 발현시키기 위한 유전적 구축물을 포함하는 세포를 포함하는 키트.
- 제35항 내지 제38항 중 어느 한 항에 있어서, 하나 이상의 Cas9 단백질을 더 포함하는 키트.
- Cas9 단백질, 및 (i) 표적 핵산의 영역에 혼성화하는 영역; (ii) 영역 (i)의 서열에 부분적으로 또는 완전히 혼성화하는 또다른 영역; 및 (iii) 전사체 (mRNA)의 영역에 혼성화하는 영역을 포함하는 gRNA를 포함하는 복합체.
- (i) 표적 핵산의 영역에 혼성화하는 영역; (ii) 영역 (i)의 서열에 부분적으로 또는 완전히 혼성화하는 또다른 영역; 및 (iii) 전사체 (mRNA)의 영역에 혼성화하는 영역을 포함하는 gRNA.
- 제41항에 있어서, 영역 (i), (ii) 및 (iii)의 각각의 서열이 적어도 5개, 적어도 10개, 적어도 15개, 적어도 20개 또는 적어도 25개의 뉴클레오티드를 포함하는 것인 gRNA.
- 제41항 또는 제42항에 있어서, gRNA가 줄기-고리 구조를 형성하며, 줄기가 영역 (ii)의 서열의 일부 또는 전부에 혼성화된 영역 (i)의 서열을 포함하고, 고리가 영역 (iii)의 서열의 일부 또는 전부에 의해 형성되는 것인 gRNA.
- 제43항에 있어서, 영역 (ii) 및 (iii)이 둘 다 영역 (i)에 대해 5' 또는 3' 중 하나인 gRNA.
- 제44항에 있어서, 줄기-고리 구조가 영역 (iii)의 서열에 혼성화하는 전사체의 부재 하에서 형성되는 것인 gRNA.
- 제45항에 있어서, 영역 (ii)의 서열이 영역 (i)의 서열에 혼성화하지 않도록, 영역 (iii)의 서열에의 전사체의 결합이 줄기-고리 구조의 풀림을 초래하거나, 줄기-고리 구조의 형성을 방지하는 것인 gRNA.
- 제45항에 있어서, gRNA가 Cas9 단백질에 결합하고, 영역 (iii)의 서열이 전사체에 결합할 경우 영역 (i)의 서열이 표적 핵산에 혼성화하는 것인 gRNA.
- 제42항 내지 제47항 중 어느 한 항의 gRNA를 코딩하는 폴리뉴클레오티드.
- 제48항의 폴리뉴클레오티드 및 임의로 Cas9 단백질을 코딩하는 폴리뉴클레오티드를 포함하는 벡터.
- 제42항 내지 제47항 중 어느 한 항의 gRNA를 코딩하는 폴리뉴클레오티드 및 임의로 Cas9 단백질을 코딩하는 폴리뉴클레오티드를 포함하는 재조합 발현용 벡터.
- 제42항 내지 제47항 중 어느 한 항의 gRNA 및 임의로 Cas9 단백질을 발현시키기 위한 유전적 구축물을 포함하는 세포.
- 제42항 내지 제47항 중 어느 한 항의 gRNA를 포함하는 키트.
- 제42항 내지 제47항 중 어느 한 항의 gRNA를 코딩하는 폴리뉴클레오티드를 포함하는 키트.
- 제42항 내지 제47항 중 어느 한 항의 gRNA를 코딩하는 폴리뉴클레오티드를 포함하는 재조합 발현용 벡터를 포함하는 키트.
- 제42항 내지 제47항 중 어느 한 항의 gRNA를 발현시키기 위한 유전적 구축물을 포함하는 세포를 포함하는 키트.
- 제52항 내지 제55항 중 어느 한 항에 있어서, 하나 이상의 Cas9 단백질 또는 하나 이상의 Cas9 단백질을 발현시키기 위한 벡터를 더 포함하는 키트.
- 제40항의 복합체와 DNA를 접촉시키는 것을 포함하는 부위 특이적 DNA 절단 방법.
- 제57항에 있어서, DNA가 세포에 있는 것인 방법.
- 제58항에 있어서, 세포가 시험관내에 있는 것인 방법.
- 제57항에 있어서, 세포가 생체내에 있는 것인 방법.
- 제59항 또는 제60항에 있어서, 세포가 진핵 세포인 방법.
- 제61항에 있어서, 세포가 개체에서의 진핵 세포인 방법.
- 제62항에 있어서, 개체가 인간인 방법.
- (i) 표적 핵산의 영역에 혼성화하는 영역; (ii) 영역 (i)의 서열에 부분적으로 또는 완전히 혼성화하는 또다른 영역; 및 (iii) 표적 핵산의 또다른 영역에 혼성화하는 영역을 포함하는 gRNA.
- 제64항에 있어서, 영역 (i) 및 (ii)의 각각의 서열이 적어도 5개, 적어도 10개, 적어도 15개, 적어도 20개 또는 적어도 25개의 뉴클레오티드를 포함하고; 영역 (iii)의 서열이 적어도 5개, 적어도 10개, 적어도 15개, 적어도 20개, 적어도 25개, 적어도 30개, 적어도 40개, 적어도 50개, 적어도 75개 또는 적어도 100개의 뉴클레오티드를 포함하는 것인 gRNA.
- 제64항 또는 제65항에 있어서, gRNA가 줄기-고리 구조를 형성하며, 줄기가 영역 (ii)의 서열의 일부 또는 전부에 혼성화된 영역 (i)의 서열을 포함하고, 고리가 영역 (iii)의 서열의 일부 또는 전부에 의해 형성되는 것인 gRNA.
- 제66항에 있어서, 영역 (ii) 및 (iii)이 둘 다 영역 (i)에 대해 5' 또는 3' 중 하나인 gRNA.
- 제67항에 있어서, 줄기-고리 구조가 (iii)에서 서열에 상보적이며 이에 결합하는 표적 핵산의 영역의 부재 하에서 형성되는 것인 gRNA.
- 제68항에 있어서, 영역 (ii)의 서열이 영역 (i)의 서열에 혼성화하지 않도록, 영역 (iii)의 서열에의 표적 핵산의 영역의 혼성화가 줄기-고리 구조의 풀림을 초래하거나, 줄기-고리 구조의 형성을 방지하는 것인 gRNA.
- 제68항에 있어서, gRNA가 Cas9 단백질에 결합하고, (iii)에서의 서열이 표적 핵산에 결합할 경우 (i)에서의 서열이 표적 핵산에 결합하는 것인 gRNA.
- 제64항 내지 제70항 중 어느 한 항의 gRNA 및 Cas9 단백질을 포함하며, 임의로 표적 핵산을 포함하는 복합체.
- 제71항에 있어서, 복합체의 형성이 표적 핵산의 절단을 초래하는 것인 복합체.
- 제64항 내지 제70항 중 어느 한 항의 gRNA를 코딩하는 단리된 폴리뉴클레오티드.
- 제73항의 폴리뉴클레오티드 및 임의로 Cas9 단백질을 코딩하는 폴리뉴클레오티드를 포함하는 벡터.
- 제64항 내지 제70항 중 어느 한 항의 gRNA를 코딩하는 폴리뉴클레오티드 및 임의로 Cas9 단백질을 코딩하는 폴리뉴클레오티드를 포함하는 재조합 발현용 벡터.
- 제64항 내지 제70항 중 어느 한 항의 gRNA 및 임의로 Cas9 단백질을 발현시키기 위한 유전적 구축물을 포함하는 세포.
- 제64항 내지 제70항 중 어느 한 항의 gRNA를 포함하는 키트.
- 제64항 내지 제70항 중 어느 한 항의 gRNA를 코딩하는 단리된 폴리뉴클레오티드를 포함하는 키트.
- 제64항 내지 제70항 중 어느 한 항의 gRNA를 코딩하는 폴리뉴클레오티드를 포함하는 재조합 발현용 벡터를 포함하는 키트.
- 제64항 내지 제70항 중 어느 한 항의 gRNA를 발현시키기 위한 유전적 구축물을 포함하는 세포를 포함하는 키트.
- 제77항 내지 제80항 중 어느 한 항에 있어서, 하나 이상의 Cas9 단백질 또는 하나 이상의 Cas9 단백질을 코딩하는 벡터를 더 포함하는 키트.
- 제71항의 복합체와 DNA를 접촉시키는 것을 포함하는 부위 특이적 DNA 절단 방법.
- 제82항에 있어서, DNA가 세포에 있는 것인 방법.
- 제83항에 있어서, 세포가 시험관내에 있는 것인 방법.
- 제83항에 있어서, 세포가 생체내에 있는 것인 방법.
- 제84항 또는 제85항에 있어서, 세포가 진핵 세포인 방법.
- 제85항에 있어서, 세포가 개체에서의 진핵 세포인 방법.
- 제87항에 있어서, 개체가 인간인 방법.
- (i) 표적 핵산의 영역에 혼성화하는 영역; (ii) 영역 (i)의 서열에 부분적으로 또는 완전히 혼성화하는 또다른 영역; 및 (iii) 표적 핵산의 또다른 영역에 혼성화하는 영역을 포함하는 연장된 DNA (xDNA)-센싱 gRNA.
- 제89항에 있어서, 영역 (i) 및 (ii)의 각각의 서열이 적어도 5개, 적어도 10개, 적어도 15개, 적어도 20개 또는 적어도 25개의 뉴클레오티드를 포함하고; 영역 (iii)의 서열이 적어도 5개, 적어도 10개, 적어도 15개, 적어도 20개, 적어도 25개, 적어도 30개, 적어도 40개, 적어도 50개, 적어도 75개 또는 적어도 100개의 뉴클레오티드를 포함하는 것인 xDNA-센싱 gRNA.
- 제89항 또는 제90항에 있어서, xDNA-센싱 gRNA가 줄기-고리 구조를 형성하며, 줄기가 영역 (ii)의 서열의 일부 또는 전부에 혼성화된 영역 (i)의 서열을 포함하고, 고리가 영역 (iii)의 서열의 일부 또는 전부에 의해 형성되는 것인 xDNA-센싱 gRNA.
- 제91항에 있어서, 영역 (ii) 및 (iii)이 둘 다 영역 (i)에 대해 5' 또는 3' 중 하나인 xDNA-센싱 gRNA.
- 제92항에 있어서, 줄기-고리 구조가 (iii)에서의 서열에 상보적이며 이에 결합하는 표적 핵산의 영역의 부재 하에서 형성되는 것인 xDNA-센싱 gRNA.
- 제93항에 있어서, 영역 (ii)의 서열이 영역 (i)의 서열에 혼성화하지 않도록, 영역 (iii)의 서열에의 표적 핵산의 영역의 혼성화가 줄기-고리 구조의 풀림을 초래하거나, 줄기-고리 구조의 형성을 방지하는 것인 xDNA-센싱 gRNA.
- 제94항에 있어서, gRNA가 Cas9 단백질에 결합하고, (iii)에서의 서열이 표적 핵산에 결합할 경우 (i)에서의 서열이 표적 핵산에 결합하는 것인 xDNA-센싱 gRNA.
- 제89항 내지 제95항 중 어느 한 항의 xDNA-센싱 gRNA 및 Cas9 단백질을 포함하며, 임의로 표적 핵산을 포함하는 복합체.
- 제96항에 있어서, 복합체의 형성이 표적 핵산의 절단을 초래하는 것인 복합체.
- 제89항 내지 제95항 중 어느 한 항의 xDNA-센싱 gRNA를 코딩하는 단리된 폴리뉴클레오티드.
- 제98항의 폴리뉴클레오티드 및 임의로 Cas9 단백질을 코딩하는 폴리뉴클레오티드를 포함하는 벡터.
- 제89항 내지 제95항 중 어느 한 항의 xDNA-센싱 gRNA를 코딩하는 폴리뉴클레오티드 및 임의로 Cas9 단백질을 코딩하는 폴리뉴클레오티드를 포함하는 재조합 발현용 벡터.
- 제89항 내지 제95항 중 어느 한 항의 xDNA-센싱 gRNA 및 임의로 Cas9 단백질을 발현시키기 위한 유전적 구축물을 포함하는 세포.
- Cas9 및 xDNA-센싱 gRNA를 포함하는 복합체와 DNA를 접촉시키는 것을 포함하며, DNA에의 복합체의 결합이 DNA 절단을 초래하는 것인 부위 특이적 DNA 절단 방법.
- 제102항에 있어서, DNA가 세포에 있는 것인 방법.
- 제103항에 있어서, 세포가 시험관내에 있는 것인 방법.
- 제104항에 있어서, 세포가 생체내에 있는 것인 방법.
- 제105항에 있어서, 세포가 진핵 세포인 방법.
- 제106항에 있어서, 세포가 개체에서의 진핵 세포인 방법.
- 제107항에 있어서, 개체가 인간인 방법.
- 제89항 내지 제95항 중 어느 한 항의 xDNA-센싱 gRNA를 포함하는 키트.
- 제89항 내지 제95항 중 어느 한 항의 xDNA-센싱 gRNA를 코딩하는 단리된 폴리뉴클레오티드를 포함하는 키트.
- 제89항 내지 제95항 중 어느 한 항의 xDNA-센싱 gRNA를 코딩하는 폴리뉴클레오티드를 포함하는 재조합 발현용 벡터를 포함하는 키트.
- 제89항 내지 제95항 중 어느 한 항의 xDNA-센싱 gRNA를 발현시키기 위한 유전적 구축물을 포함하는 세포를 포함하는 키트.
- 제112항에 있어서, 하나 이상의 Cas9 단백질 또는 하나 이상의 Cas9 단백질을 코딩하는 벡터를 더 포함하는 키트.
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WO2016022866A1 (en) * | 2014-08-07 | 2016-02-11 | Agilent Technologies, Inc. | Cis-blocked guide rna |
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US10920208B2 (en) | 2014-10-22 | 2021-02-16 | President And Fellows Of Harvard College | Evolution of proteases |
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EP3280803B1 (en) | 2015-04-06 | 2021-05-26 | The Board of Trustees of the Leland Stanford Junior University | Chemically modified guide rnas for crispr/cas-mediated gene regulation |
GB201506509D0 (en) | 2015-04-16 | 2015-06-03 | Univ Wageningen | Nuclease-mediated genome editing |
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US20180258411A1 (en) * | 2015-09-25 | 2018-09-13 | Tarveda Therapeutics, Inc. | Compositions and methods for genome editing |
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US11427837B2 (en) * | 2016-01-12 | 2022-08-30 | The Regents Of The University Of California | Compositions and methods for enhanced genome editing |
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WO2018209320A1 (en) * | 2017-05-12 | 2018-11-15 | President And Fellows Of Harvard College | Aptazyme-embedded guide rnas for use with crispr-cas9 in genome editing and transcriptional activation |
WO2018231730A2 (en) * | 2017-06-12 | 2018-12-20 | California Institute Of Technology | Conditional guide rnas |
US20200123567A1 (en) * | 2017-06-26 | 2020-04-23 | Samira Kiani | A universal platform to enhance crispr-based gene editing for in vivo therapies |
WO2019005856A1 (en) * | 2017-06-26 | 2019-01-03 | Arizona Board Of Regents On Behalf Of Arizona State University | CRISPR LOGIC CIRCUITS FOR SAFER AND CONTROLLABLE GENE THERAPIES |
WO2019010164A1 (en) | 2017-07-06 | 2019-01-10 | President And Fellows Of Harvard College | EVOLUTION OF ARNT SYNTHÉTASES |
EP3652312A1 (en) | 2017-07-14 | 2020-05-20 | Editas Medicine, Inc. | Systems and methods for targeted integration and genome editing and detection thereof using integrated priming sites |
WO2019023680A1 (en) | 2017-07-28 | 2019-01-31 | President And Fellows Of Harvard College | METHODS AND COMPOSITIONS FOR EVOLUTION OF BASIC EDITORS USING PHAGE-ASSISTED CONTINUOUS EVOLUTION (PACE) |
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WO2019051097A1 (en) | 2017-09-08 | 2019-03-14 | The Regents Of The University Of California | RNA-GUIDED ENDONUCLEASE FUSION POLYPEPTIDES AND METHODS OF USING SAME |
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CN111373041A (zh) * | 2017-09-26 | 2020-07-03 | 伊利诺伊大学理事会 | 用于基因组编辑和调节转录的crispr/cas系统和方法 |
JP2021500036A (ja) | 2017-10-16 | 2021-01-07 | ザ ブロード インスティテュート, インコーポレーテッドThe Broad Institute, Inc. | アデノシン塩基編集因子の使用 |
US11268092B2 (en) | 2018-01-12 | 2022-03-08 | GenEdit, Inc. | Structure-engineered guide RNA |
WO2019161251A1 (en) | 2018-02-15 | 2019-08-22 | The Broad Institute, Inc. | Cell data recorders and uses thereof |
EP3759225A1 (en) | 2018-03-02 | 2021-01-06 | Sixfold Bioscience Ltd. | Compositions for delivery of cargo to cells |
CN111885915B (zh) | 2018-03-19 | 2023-04-28 | 瑞泽恩制药公司 | 使用crispr/cas系统对动物进行转录调制 |
CN112899350B (zh) * | 2018-05-14 | 2023-01-24 | 北京艾克伦医疗科技有限公司 | 核酸检测方法和试剂盒 |
WO2019226603A1 (en) * | 2018-05-22 | 2019-11-28 | The Regents Of The University Of California | Trna/pre-mirna compositions and use in treating cancer |
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WO2020097475A1 (en) * | 2018-11-08 | 2020-05-14 | Regents Of The University Of Minnesota | Programmable nucleases and base editors for modifying nucleic acid duplexes |
EP3877398A4 (en) * | 2018-11-08 | 2022-08-17 | Arizona Board of Regents on behalf of Arizona State University | SYNTHETIC IMMUNOMODULATION WITH A CRISPR SUPER REPRESSOR IN VIVO |
WO2020102659A1 (en) | 2018-11-15 | 2020-05-22 | The Broad Institute, Inc. | G-to-t base editors and uses thereof |
CN109811010B (zh) * | 2019-01-15 | 2021-02-19 | 浙江大学 | 一种增强放线菌基因编辑效率的方法及其应用 |
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WO2021158995A1 (en) | 2020-02-05 | 2021-08-12 | The Broad Institute, Inc. | Base editor predictive algorithm and method of use |
EP4100519A2 (en) | 2020-02-05 | 2022-12-14 | The Broad Institute, Inc. | Adenine base editors and uses thereof |
WO2021183693A1 (en) | 2020-03-11 | 2021-09-16 | The Broad Institute, Inc. | Stat3-targeted based editor therapeutics for the treatment of melanoma and other cancers |
CN115667505A (zh) | 2020-03-19 | 2023-01-31 | 因特利亚治疗公司 | 用于定向基因组编辑的方法和组合物 |
CN115997016A (zh) | 2020-04-27 | 2023-04-21 | 西克斯福德生物科学有限公司 | 包含具有模块化官能团的核酸纳米颗粒的组合物 |
WO2021222318A1 (en) | 2020-04-28 | 2021-11-04 | The Broad Institute, Inc. | Targeted base editing of the ush2a gene |
CN116096873A (zh) | 2020-05-08 | 2023-05-09 | 布罗德研究所股份有限公司 | 同时编辑靶标双链核苷酸序列的两条链的方法和组合物 |
WO2022087235A1 (en) | 2020-10-21 | 2022-04-28 | Massachusetts Institute Of Technology | Systems, methods, and compositions for site-specific genetic engineering using programmable addition via site-specific targeting elements (paste) |
EP4267743A2 (en) | 2020-12-22 | 2023-11-01 | Chroma Medicine, Inc. | Compositions and methods for epigenetic editing |
EP4284925A1 (en) | 2021-01-26 | 2023-12-06 | California Institute of Technology | Allosteric conditional guide rnas for cell-selective regulation of crispr/cas |
WO2022261509A1 (en) | 2021-06-11 | 2022-12-15 | The Broad Institute, Inc. | Improved cytosine to guanine base editors |
WO2023019203A1 (en) | 2021-08-11 | 2023-02-16 | Sana Biotechnology, Inc. | Inducible systems for altering gene expression in hypoimmunogenic cells |
AU2022343300A1 (en) | 2021-09-10 | 2024-04-18 | Agilent Technologies, Inc. | Guide rnas with chemical modification for prime editing |
AU2022375820A1 (en) | 2021-11-01 | 2024-06-13 | Tome Biosciences, Inc. | Single construct platform for simultaneous delivery of gene editing machinery and nucleic acid cargo |
WO2023122764A1 (en) | 2021-12-22 | 2023-06-29 | Tome Biosciences, Inc. | Co-delivery of a gene editor construct and a donor template |
WO2023196802A1 (en) | 2022-04-04 | 2023-10-12 | The Broad Institute, Inc. | Cas9 variants having non-canonical pam specificities and uses thereof |
WO2023205744A1 (en) | 2022-04-20 | 2023-10-26 | Tome Biosciences, Inc. | Programmable gene insertion compositions |
WO2023212715A1 (en) | 2022-04-28 | 2023-11-02 | The Broad Institute, Inc. | Aav vectors encoding base editors and uses thereof |
WO2023215711A1 (en) | 2022-05-01 | 2023-11-09 | Chroma Medicine, Inc. | Compositions and methods for epigenetic regulation of pcsk9 expression |
WO2023225670A2 (en) | 2022-05-20 | 2023-11-23 | Tome Biosciences, Inc. | Ex vivo programmable gene insertion |
WO2023230613A1 (en) | 2022-05-27 | 2023-11-30 | The Broad Institute, Inc. | Improved mitochondrial base editors and methods for editing mitochondrial dna |
WO2023250512A1 (en) | 2022-06-23 | 2023-12-28 | Chroma Medicine, Inc. | Compositions and methods for epigenetic regulation of ciita expression |
WO2023250509A1 (en) | 2022-06-23 | 2023-12-28 | Chroma Medicine, Inc. | Compositions and methods for epigenetic regulation of b2m expression |
WO2023250490A1 (en) | 2022-06-23 | 2023-12-28 | Chroma Medicine, Inc. | Compositions and methods for epigenetic regulation of trac expression |
WO2024020587A2 (en) | 2022-07-22 | 2024-01-25 | Tome Biosciences, Inc. | Pleiopluripotent stem cell programmable gene insertion |
WO2024030432A1 (en) | 2022-08-01 | 2024-02-08 | Gensaic, Inc. | Therapeutic phage-derived particles |
WO2024040083A1 (en) | 2022-08-16 | 2024-02-22 | The Broad Institute, Inc. | Evolved cytosine deaminases and methods of editing dna using same |
WO2024052681A1 (en) | 2022-09-08 | 2024-03-14 | The University Court Of The University Of Edinburgh | Rett syndrome therapy |
WO2024064910A1 (en) | 2022-09-23 | 2024-03-28 | Chroma Medicine, Inc. | Compositions and methods for epigenetic regulation of hbv gene expression |
WO2024081879A1 (en) | 2022-10-14 | 2024-04-18 | Chroma Medicine, Inc. | Compositions and methods for epigenetic regulation of cd247 expression |
CN117106751B (zh) * | 2023-07-14 | 2024-05-24 | 华南师范大学 | 一种斑马鱼胞嘧啶碱基编辑器及其构建方法与应用 |
Family Cites Families (1707)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4217344A (en) | 1976-06-23 | 1980-08-12 | L'oreal | Compositions containing aqueous dispersions of lipid spheres |
US4235871A (en) | 1978-02-24 | 1980-11-25 | Papahadjopoulos Demetrios P | Method of encapsulating biologically active materials in lipid vesicles |
US4186183A (en) | 1978-03-29 | 1980-01-29 | The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Army | Liposome carriers in chemotherapy of leishmaniasis |
US4182449A (en) | 1978-04-18 | 1980-01-08 | Kozlow William J | Adhesive bandage and package |
US4261975A (en) | 1979-09-19 | 1981-04-14 | Merck & Co., Inc. | Viral liposome particle |
US4663290A (en) | 1982-01-21 | 1987-05-05 | Molecular Genetics, Inc. | Production of reverse transcriptase |
US4485054A (en) | 1982-10-04 | 1984-11-27 | Lipoderm Pharmaceuticals Limited | Method of encapsulating biologically active materials in multilamellar lipid vesicles (MLV) |
US4501728A (en) | 1983-01-06 | 1985-02-26 | Technology Unlimited, Inc. | Masking of liposomes from RES recognition |
US4880635B1 (en) | 1984-08-08 | 1996-07-02 | Liposome Company | Dehydrated liposomes |
US4946787A (en) | 1985-01-07 | 1990-08-07 | Syntex (U.S.A.) Inc. | N-(ω,(ω-1)-dialkyloxy)- and N-(ω,(ω-1)-dialkenyloxy)-alk-1-yl-N,N,N-tetrasubstituted ammonium lipids and uses therefor |
US4897355A (en) | 1985-01-07 | 1990-01-30 | Syntex (U.S.A.) Inc. | N[ω,(ω-1)-dialkyloxy]- and N-[ω,(ω-1)-dialkenyloxy]-alk-1-yl-N,N,N-tetrasubstituted ammonium lipids and uses therefor |
US5049386A (en) | 1985-01-07 | 1991-09-17 | Syntex (U.S.A.) Inc. | N-ω,(ω-1)-dialkyloxy)- and N-(ω,(ω-1)-dialkenyloxy)Alk-1-YL-N,N,N-tetrasubstituted ammonium lipids and uses therefor |
US4797368A (en) | 1985-03-15 | 1989-01-10 | The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services | Adeno-associated virus as eukaryotic expression vector |
US4921757A (en) | 1985-04-26 | 1990-05-01 | Massachusetts Institute Of Technology | System for delayed and pulsed release of biologically active substances |
US4774085A (en) | 1985-07-09 | 1988-09-27 | 501 Board of Regents, Univ. of Texas | Pharmaceutical administration systems containing a mixture of immunomodulators |
US5139941A (en) | 1985-10-31 | 1992-08-18 | University Of Florida Research Foundation, Inc. | AAV transduction vectors |
US4737323A (en) | 1986-02-13 | 1988-04-12 | Liposome Technology, Inc. | Liposome extrusion method |
US5017492A (en) | 1986-02-27 | 1991-05-21 | Life Technologies, Inc. | Reverse transcriptase and method for its production |
DE122007000007I2 (de) | 1986-04-09 | 2010-12-30 | Genzyme Corp | Genetisch transformierte Tiere, die ein gewünschtes Protein in Milch absondern |
US5374553A (en) | 1986-08-22 | 1994-12-20 | Hoffmann-La Roche Inc. | DNA encoding a thermostable nucleic acid polymerase enzyme from thermotoga maritima |
US5079352A (en) | 1986-08-22 | 1992-01-07 | Cetus Corporation | Purified thermostable enzyme |
US4889818A (en) | 1986-08-22 | 1989-12-26 | Cetus Corporation | Purified thermostable enzyme |
US4920016A (en) | 1986-12-24 | 1990-04-24 | Linear Technology, Inc. | Liposomes with enhanced circulation time |
US4837028A (en) | 1986-12-24 | 1989-06-06 | Liposome Technology, Inc. | Liposomes with enhanced circulation time |
JPH0825869B2 (ja) | 1987-02-09 | 1996-03-13 | 株式会社ビタミン研究所 | 抗腫瘍剤包埋リポソ−ム製剤 |
US4911928A (en) | 1987-03-13 | 1990-03-27 | Micro-Pak, Inc. | Paucilamellar lipid vesicles |
US4917951A (en) | 1987-07-28 | 1990-04-17 | Micro-Pak, Inc. | Lipid vesicles formed of surfactants and steroids |
RO108522B1 (ro) | 1987-04-23 | 1994-06-30 | Fmc Corp | Derivati de di(aril)-cilopropil substituiti si intermediari ai acestora |
US4873316A (en) | 1987-06-23 | 1989-10-10 | Biogen, Inc. | Isolation of exogenous recombinant proteins from the milk of transgenic mammals |
US5244797B1 (en) | 1988-01-13 | 1998-08-25 | Life Technologies Inc | Cloned genes encoding reverse transcriptase lacking rnase h activity |
US4965185A (en) | 1988-06-22 | 1990-10-23 | Grischenko Valentin I | Method for low-temperature preservation of embryos |
US5223409A (en) | 1988-09-02 | 1993-06-29 | Protein Engineering Corp. | Directed evolution of novel binding proteins |
DE68927933T2 (de) | 1988-09-02 | 1997-08-14 | Dyax Corp | Herstellung und auswahl von rekombinantproteinen mit verschiedenen bindestellen |
US5270179A (en) | 1989-08-10 | 1993-12-14 | Life Technologies, Inc. | Cloning and expression of T5 DNA polymerase reduced in 3'- to-5' exonuclease activity |
US5047342A (en) | 1989-08-10 | 1991-09-10 | Life Technologies, Inc. | Cloning and expression of T5 DNA polymerase |
US5264618A (en) | 1990-04-19 | 1993-11-23 | Vical, Inc. | Cationic lipids for intracellular delivery of biologically active molecules |
US5427908A (en) | 1990-05-01 | 1995-06-27 | Affymax Technologies N.V. | Recombinant library screening methods |
WO1991017424A1 (en) | 1990-05-03 | 1991-11-14 | Vical, Inc. | Intracellular delivery of biologically active substances by means of self-assembling lipid complexes |
US5637459A (en) | 1990-06-11 | 1997-06-10 | Nexstar Pharmaceuticals, Inc. | Systematic evolution of ligands by exponential enrichment: chimeric selex |
US5580737A (en) | 1990-06-11 | 1996-12-03 | Nexstar Pharmaceuticals, Inc. | High-affinity nucleic acid ligands that discriminate between theophylline and caffeine |
ATE181106T1 (de) | 1990-09-28 | 1999-06-15 | Hoffmann La Roche | Mutationen in der 5'-3'-exonukleaseaktivität thermostabiler dna-polymerasen |
DE553264T1 (de) | 1990-10-05 | 1994-04-28 | Wayne M Barnes | Thermostabile dna polymerase. |
US5173414A (en) | 1990-10-30 | 1992-12-22 | Applied Immune Sciences, Inc. | Production of recombinant adeno-associated virus vectors |
WO1992018619A1 (en) | 1991-04-10 | 1992-10-29 | The Scripps Research Institute | Heterodimeric receptor libraries using phagemids |
US6872816B1 (en) | 1996-01-24 | 2005-03-29 | Third Wave Technologies, Inc. | Nucleic acid detection kits |
JPH05274181A (ja) | 1992-03-25 | 1993-10-22 | Nec Corp | ブレークポイント設定・解除方式 |
US5587308A (en) | 1992-06-02 | 1996-12-24 | The United States Of America As Represented By The Department Of Health & Human Services | Modified adeno-associated virus vector capable of expression from a novel promoter |
US5834247A (en) | 1992-12-09 | 1998-11-10 | New England Biolabs, Inc. | Modified proteins comprising controllable intervening protein sequences or their elements methods of producing same and methods for purification of a target protein comprised by a modified protein |
US5496714A (en) | 1992-12-09 | 1996-03-05 | New England Biolabs, Inc. | Modification of protein by use of a controllable interveining protein sequence |
US5434058A (en) | 1993-02-09 | 1995-07-18 | Arch Development Corporation | Apolipoprotein B MRNA editing protein compositions and methods |
US5436149A (en) | 1993-02-19 | 1995-07-25 | Barnes; Wayne M. | Thermostable DNA polymerase with enhanced thermostability and enhanced length and efficiency of primer extension |
AU680921B2 (en) | 1993-05-17 | 1997-08-14 | Regents Of The University Of California, The | Ribozyme gene therapy for HIV infection and AIDS |
US5512462A (en) | 1994-02-25 | 1996-04-30 | Hoffmann-La Roche Inc. | Methods and reagents for the polymerase chain reaction amplification of long DNA sequences |
US5651981A (en) | 1994-03-29 | 1997-07-29 | Northwestern University | Cationic phospholipids for transfection |
US5912155A (en) | 1994-09-30 | 1999-06-15 | Life Technologies, Inc. | Cloned DNA polymerases from Thermotoga neapolitana |
US5614365A (en) | 1994-10-17 | 1997-03-25 | President & Fellow Of Harvard College | DNA polymerase having modified nucleotide binding site for DNA sequencing |
US5449639A (en) | 1994-10-24 | 1995-09-12 | Taiwan Semiconductor Manufacturing Company Ltd. | Disposable metal anti-reflection coating process used together with metal dry/wet etch |
US5767099A (en) | 1994-12-09 | 1998-06-16 | Genzyme Corporation | Cationic amphiphiles containing amino acid or dervatized amino acid groups for intracellular delivery of therapeutic molecules |
US6057153A (en) | 1995-01-13 | 2000-05-02 | Yale University | Stabilized external guide sequences |
US5795587A (en) | 1995-01-23 | 1998-08-18 | University Of Pittsburgh | Stable lipid-comprising drug delivery complexes and methods for their production |
US5830430A (en) | 1995-02-21 | 1998-11-03 | Imarx Pharmaceutical Corp. | Cationic lipids and the use thereof |
US5851548A (en) | 1995-06-07 | 1998-12-22 | Gen-Probe Incorporated | Liposomes containing cationic lipids and vitamin D |
US5773258A (en) | 1995-08-25 | 1998-06-30 | Roche Molecular Systems, Inc. | Nucleic acid amplification using a reversibly inactivated thermostable enzyme |
US5962313A (en) | 1996-01-18 | 1999-10-05 | Avigen, Inc. | Adeno-associated virus vectors comprising a gene encoding a lyosomal enzyme |
US6887707B2 (en) | 1996-10-28 | 2005-05-03 | University Of Washington | Induction of viral mutation by incorporation of miscoding ribonucleoside analogs into viral RNA |
GB9701425D0 (en) | 1997-01-24 | 1997-03-12 | Bioinvent Int Ab | A method for in vitro molecular evolution of protein function |
US5981182A (en) | 1997-03-13 | 1999-11-09 | Albert Einstein College Of Medicine Of Yeshiva University | Vector constructs for the selection and identification of open reading frames |
US20040203109A1 (en) | 1997-06-06 | 2004-10-14 | Incyte Corporation | Human regulatory proteins |
US5849528A (en) | 1997-08-21 | 1998-12-15 | Incyte Pharmaceuticals, Inc.. | Polynucleotides encoding a human S100 protein |
US6156509A (en) | 1997-11-12 | 2000-12-05 | Genencor International, Inc. | Method of increasing efficiency of directed evolution of a gene using phagemid |
US6183998B1 (en) | 1998-05-29 | 2001-02-06 | Qiagen Gmbh Max-Volmer-Strasse 4 | Method for reversible modification of thermostable enzymes |
US8097648B2 (en) | 1998-06-17 | 2012-01-17 | Eisai R&D Management Co., Ltd. | Methods and compositions for use in treating cancer |
AU1115300A (en) | 1998-10-13 | 2000-05-01 | Advanced Research And Technology Institute, Inc. | Assays for identifying functional alterations in the p53 tumor suppressor |
EP1829856A3 (en) | 1998-11-12 | 2009-02-25 | Invitrogen Corporation | Transfection reagents |
US7013219B2 (en) | 1999-01-12 | 2006-03-14 | Sangamo Biosciences, Inc. | Regulation of endogenous gene expression in cells using zinc finger proteins |
US6534261B1 (en) | 1999-01-12 | 2003-03-18 | Sangamo Biosciences, Inc. | Regulation of endogenous gene expression in cells using zinc finger proteins |
US6599692B1 (en) | 1999-09-14 | 2003-07-29 | Sangamo Bioscience, Inc. | Functional genomics using zinc finger proteins |
US6453242B1 (en) | 1999-01-12 | 2002-09-17 | Sangamo Biosciences, Inc. | Selection of sites for targeting by zinc finger proteins and methods of designing zinc finger proteins to bind to preselected sites |
US20090130718A1 (en) | 1999-02-04 | 2009-05-21 | Diversa Corporation | Gene site saturation mutagenesis |
AU3330700A (en) | 1999-03-29 | 2000-10-16 | Tasuku Honjo | Novel cytidine deaminase |
US6365410B1 (en) | 1999-05-19 | 2002-04-02 | Genencor International, Inc. | Directed evolution of microorganisms |
GB9920194D0 (en) | 1999-08-27 | 1999-10-27 | Advanced Biotech Ltd | A heat-stable thermostable DNA polymerase for use in nucleic acid amplification |
DK1230268T3 (da) | 1999-11-18 | 2010-02-08 | Epimmune Inc | Heteroklitiske analoger af klasse I-epitoper |
CA2392490A1 (en) | 1999-11-24 | 2001-05-31 | Mcs Micro Carrier Systems Gmbh | Polypeptides comprising multimers of nuclear localization signals or of protein transduction domains and their use for transferring molecules into cells |
CA2394850C (en) | 1999-12-06 | 2012-02-07 | Sangamo Biosciences, Inc. | Methods of using randomized libraries of zinc finger proteins for the identification of gene function |
DE60143192D1 (de) | 2000-02-08 | 2010-11-18 | Sangamo Biosciences Inc | Zellen zur entdeckung von medikamenten |
US7078208B2 (en) | 2000-05-26 | 2006-07-18 | Invitrogen Corporation | Thermostable reverse transcriptases and uses thereof |
US6573092B1 (en) | 2000-10-10 | 2003-06-03 | Genvec, Inc. | Method of preparing a eukaryotic viral vector |
HU230686B1 (en) | 2000-10-30 | 2017-08-28 | Euro Celtique Sa | Controlled release hydrocodone compositions |
US20040003420A1 (en) | 2000-11-10 | 2004-01-01 | Ralf Kuhn | Modified recombinase |
AU2002227882B2 (en) | 2001-01-25 | 2007-06-28 | Evolva Ltd | Concatemers of differentially expressed multiple genes |
US20050222030A1 (en) | 2001-02-21 | 2005-10-06 | Anthony Allison | Modified annexin proteins and methods for preventing thrombosis |
DE60227069D1 (de) | 2001-02-27 | 2008-07-24 | Univ Rochester | VERFAHREN UND ZUSAMMENSETZUNGEN ZUR MODIFIKATION DER BEARBEITUNG VON APOLIPOPROTEIN B-mRNA |
ES2271306T5 (es) | 2001-03-19 | 2013-10-16 | President And Fellows Of Harvard College | Evolución de una nueva función molecular |
WO2002074978A2 (en) | 2001-03-19 | 2002-09-26 | President And Fellows Of Harvard College | Nucleic acid shuffling |
US7476500B1 (en) | 2001-03-19 | 2009-01-13 | President And Fellows Of Harvard College | In vivo selection system for enzyme activity |
US7807408B2 (en) | 2001-03-19 | 2010-10-05 | President & Fellows Of Harvard College | Directed evolution of proteins |
JP2005502322A (ja) | 2001-04-19 | 2005-01-27 | ザ スクリップス リサーチ インスティテュート | 非天然アミノ酸のインビボ組込み |
EP1446757A2 (en) | 2001-05-30 | 2004-08-18 | Biomedical Center | In silico screening for phenotype-associated expressed sequences |
US8067556B2 (en) | 2001-07-26 | 2011-11-29 | Agilent Technologies, Inc. | Multi-site mutagenesis |
US20030167533A1 (en) | 2002-02-04 | 2003-09-04 | Yadav Narendra S. | Intein-mediated protein splicing |
EP1506288B1 (en) | 2002-05-10 | 2013-04-17 | Medical Research Council | Activation induced deaminase (aid) |
US9388459B2 (en) | 2002-06-17 | 2016-07-12 | Affymetrix, Inc. | Methods for genotyping |
AU2003251905A1 (en) | 2002-07-12 | 2004-02-02 | Affymetrix, Inc. | Synthetic tag genes |
JP4657919B2 (ja) | 2002-08-19 | 2011-03-23 | プレジデント アンド フェローズ オブ ハーバード カレッジ | 進化する新しい分子機能 |
WO2004027035A2 (en) * | 2002-09-20 | 2004-04-01 | Yale University | Riboswitches, methods for their use, and compositions for use with riboswitches. |
US8017323B2 (en) | 2003-03-26 | 2011-09-13 | President And Fellows Of Harvard College | Free reactant use in nucleic acid-templated synthesis |
CA2515850A1 (en) | 2003-04-14 | 2004-10-28 | Caliper Life Sciences, Inc. | Reduction of migration shift assay interference |
US8017755B2 (en) | 2003-05-23 | 2011-09-13 | President And Fellows Of Harvard College | RNA-based transcriptional regulators |
US20050136429A1 (en) | 2003-07-03 | 2005-06-23 | Massachusetts Institute Of Technology | SIRT1 modulation of adipogenesis and adipose function |
PT1914314E (pt) | 2003-07-07 | 2010-09-08 | Scripps Research Inst | Composições de pares ortogonais de lisil-arnt e aminoacil-arnt-sintetase e suas utilizações |
EP2927318B1 (en) | 2003-08-08 | 2020-05-20 | Sangamo Therapeutics, Inc. | Methods and compositions for targeted cleavage and recombination |
US7670807B2 (en) | 2004-03-10 | 2010-03-02 | East Tennessee State Univ. Research Foundation | RNA-dependent DNA polymerase from Geobacillus stearothermophilus |
US7192739B2 (en) | 2004-03-30 | 2007-03-20 | President And Fellows Of Harvard College | Ligand-dependent protein splicing |
US7595179B2 (en) | 2004-04-19 | 2009-09-29 | Applied Biosystems, Llc | Recombinant reverse transcriptases |
US7919277B2 (en) | 2004-04-28 | 2011-04-05 | Danisco A/S | Detection and typing of bacterial strains |
US7476734B2 (en) | 2005-12-06 | 2009-01-13 | Helicos Biosciences Corporation | Nucleotide analogs |
WO2006002547A1 (en) | 2004-07-06 | 2006-01-12 | UNIVERSITé DE SHERBROOKE | A target-dependent nucleic acid adapter |
US7851658B2 (en) | 2004-08-17 | 2010-12-14 | President And Fellows Of Harvard College | Palladium-catalyzed carbon-carbon bond forming reactions |
US8728526B2 (en) | 2004-08-19 | 2014-05-20 | The United States of America, Represented by Secretary of Department of Health and Human Services, NIH | Coacervate microparticles useful for the sustained release administration of therapeutic agents |
JP5101288B2 (ja) * | 2004-10-05 | 2012-12-19 | カリフォルニア インスティテュート オブ テクノロジー | アプタマー調節される核酸及びその利用 |
JP2006248978A (ja) | 2005-03-10 | 2006-09-21 | Mebiopharm Co Ltd | 新規なリポソーム製剤 |
US8183178B2 (en) | 2005-06-17 | 2012-05-22 | President And Fellows Of Harvard College | Iterated branching reaction pathways via nucleic acid-mediated chemistry |
WO2007011722A2 (en) | 2005-07-15 | 2007-01-25 | President And Fellows Of Harvard College | Reaction discovery system |
AU2012244264B2 (en) | 2005-08-26 | 2015-08-06 | Dupont Nutrition Biosciences Aps | Use |
AU2006282983B2 (en) | 2005-08-26 | 2012-08-02 | Dupont Nutrition Biosciences Aps | Use |
AU2015252023B2 (en) | 2005-08-26 | 2017-06-29 | Dupont Nutrition Biosciences Aps | Use |
KR100784478B1 (ko) | 2005-12-05 | 2007-12-11 | 한국과학기술원 | 기능요소의 동시 삽입에 의한 신기능을 갖는 단백질을제조하는 방법 |
US20080051317A1 (en) | 2005-12-15 | 2008-02-28 | George Church | Polypeptides comprising unnatural amino acids, methods for their production and uses therefor |
CA2651389C (en) | 2006-05-05 | 2017-04-25 | Molecular Transfer, Inc. | Novel reagents for transfection of eukaryotic cells |
PL2018441T3 (pl) | 2006-05-19 | 2012-03-30 | Dupont Nutrition Biosci Aps | Mikroorganizmy znakowane i sposoby znakowania |
AU2007256780B2 (en) | 2006-06-02 | 2013-08-29 | President And Fellows Of Harvard College | Protein surface remodeling |
WO2008005529A2 (en) | 2006-07-07 | 2008-01-10 | The Trustees Columbia University In The City Of New York | Cell-mediated directed evolution |
NZ579002A (en) | 2007-03-02 | 2012-03-30 | Danisco | Cultures with improved phage resistance |
US8183221B2 (en) | 2007-09-05 | 2012-05-22 | Medtronic, Inc. | Suppression of SCN9A gene expression and/or function for the treatment of pain |
AU2008305567B2 (en) | 2007-09-27 | 2014-04-10 | Sangamo Therapeutics, Inc. | Rapid in vivo identification of biologically active nucleases |
WO2010102257A2 (en) | 2009-03-06 | 2010-09-10 | Synthetic Genomics, Inc. | Methods for cloning and manipulating genomes |
US9029524B2 (en) | 2007-12-10 | 2015-05-12 | California Institute Of Technology | Signal activated RNA interference |
EP2087789A1 (en) | 2008-02-06 | 2009-08-12 | Heinrich-Heine-Universität Düsseldorf | Fto-modified non-human mammal |
US20090215878A1 (en) | 2008-02-08 | 2009-08-27 | Sangamo Biosciences, Inc. | Treatment of chronic pain with zinc finger proteins |
WO2009146179A1 (en) | 2008-04-15 | 2009-12-03 | University Of Iowa Research Foundation | Zinc finger nuclease for the cftr gene and methods of use thereof |
JP2011523353A (ja) | 2008-04-28 | 2011-08-11 | プレジデント アンド フェロウズ オブ ハーバード カレッジ | 細胞透過のための過剰に荷電されたタンパク質 |
WO2009132455A1 (en) | 2008-04-30 | 2009-11-05 | Paul Xiang-Qin Liu | Protein splicing using short terminal split inteins |
US8546553B2 (en) | 2008-07-25 | 2013-10-01 | University Of Georgia Research Foundation, Inc. | Prokaryotic RNAi-like system and methods of use |
JP2010033344A (ja) | 2008-07-29 | 2010-02-12 | Azabu Jui Gakuen | 核酸構成塩基の偏在性を表す方法 |
EP2159286A1 (en) | 2008-09-01 | 2010-03-03 | Consiglio Nazionale Delle Ricerche | Method for obtaining oligonucleotide aptamers and uses thereof |
JP5723774B2 (ja) | 2008-09-05 | 2015-05-27 | プレジデント アンド フェローズ オブ ハーバード カレッジ | タンパク質および核酸の連続的指向性進化 |
US8790664B2 (en) | 2008-09-05 | 2014-07-29 | Institut National De La Sante Et De La Recherche Medicale (Inserm) | Multimodular assembly useful for intracellular delivery |
US8636884B2 (en) | 2008-09-15 | 2014-01-28 | Abbott Diabetes Care Inc. | Cationic polymer based wired enzyme formulations for use in analyte sensors |
US20100076057A1 (en) | 2008-09-23 | 2010-03-25 | Northwestern University | TARGET DNA INTERFERENCE WITH crRNA |
US9404098B2 (en) | 2008-11-06 | 2016-08-02 | University Of Georgia Research Foundation, Inc. | Method for cleaving a target RNA using a Cas6 polypeptide |
MX337838B (es) | 2008-11-07 | 2016-03-22 | Dupont Nutrition Biosci Aps | Secuencias de repetidos palindromicos cortos regularmente intercalados agrupados de bifidobacterias. |
US20110016540A1 (en) | 2008-12-04 | 2011-01-20 | Sigma-Aldrich Co. | Genome editing of genes associated with trinucleotide repeat expansion disorders in animals |
US9175341B2 (en) | 2008-12-11 | 2015-11-03 | Pacific Biosciences Of California, Inc. | Methods for identifying nucleic acid modifications |
US9175338B2 (en) | 2008-12-11 | 2015-11-03 | Pacific Biosciences Of California, Inc. | Methods for identifying nucleic acid modifications |
WO2010075424A2 (en) | 2008-12-22 | 2010-07-01 | The Regents Of University Of California | Compositions and methods for downregulating prokaryotic genes |
US20100305197A1 (en) | 2009-02-05 | 2010-12-02 | Massachusetts Institute Of Technology | Conditionally Active Ribozymes And Uses Thereof |
US8389679B2 (en) | 2009-02-05 | 2013-03-05 | The Regents Of The University Of California | Targeted antimicrobial moieties |
US8501405B2 (en) | 2009-04-27 | 2013-08-06 | Pacific Biosciences Of California, Inc. | Real-time sequencing methods and systems |
JP2012525146A (ja) | 2009-04-28 | 2012-10-22 | プレジデント アンド フェロウズ オブ ハーバード カレッジ | 細胞透過のための過剰に荷電されたタンパク質 |
WO2010132092A2 (en) | 2009-05-12 | 2010-11-18 | The Scripps Research Institute | Cytidine deaminase fusions and related methods |
US9063156B2 (en) | 2009-06-12 | 2015-06-23 | Pacific Biosciences Of California, Inc. | Real-time analytical methods and systems |
AU2010266705B2 (en) | 2009-06-30 | 2014-06-05 | Sangamo Therapeutics, Inc. | Rapid screening of biologically active nucleases and isolation of nuclease-modified cells |
WO2011000106A1 (en) | 2009-07-01 | 2011-01-06 | Protiva Biotherapeutics, Inc. | Improved cationic lipids and methods for the delivery of therapeutic agents |
US20120178647A1 (en) | 2009-08-03 | 2012-07-12 | The General Hospital Corporation | Engineering of zinc finger arrays by context-dependent assembly |
ES2550202T3 (es) | 2009-08-03 | 2015-11-05 | Recombinetics, Inc. | Métodos y composiciones para la modificación dirigida de genes |
GB0913681D0 (en) | 2009-08-05 | 2009-09-16 | Glaxosmithkline Biolog Sa | Immunogenic composition |
US8889394B2 (en) | 2009-09-07 | 2014-11-18 | Empire Technology Development Llc | Multiple domain proteins |
DK2494060T3 (en) | 2009-10-30 | 2016-08-01 | Synthetic Genomics Inc | Coding of text for nucleic acid sequences |
KR102378465B1 (ko) | 2009-11-02 | 2022-03-28 | 유니버시티 오브 워싱톤 스루 이츠 센터 포 커머셜리제이션 | 치료학적 뉴클레아제 조성물 및 방법 |
US9175340B2 (en) | 2009-11-04 | 2015-11-03 | President And Fellows Of Harvard College | Reactivity-dependent and interaction-dependent PCR |
US20110104787A1 (en) | 2009-11-05 | 2011-05-05 | President And Fellows Of Harvard College | Fusion Peptides That Bind to and Modify Target Nucleic Acid Sequences |
US20110142886A1 (en) | 2009-12-01 | 2011-06-16 | Intezyne Technologies, Incorporated | Pegylated polyplexes for polynucleotide delivery |
RS58405B1 (sr) | 2009-12-01 | 2019-04-30 | Translate Bio Inc | Stereoidni derivati za isporuku irnk u humanim genetskim oboljenjima |
AU2010327998B2 (en) | 2009-12-10 | 2015-11-12 | Iowa State University Research Foundation, Inc. | TAL effector-mediated DNA modification |
US20130011380A1 (en) | 2009-12-18 | 2013-01-10 | Blau Helen M | Use of Cytidine Deaminase-Related Agents to Promote Demethylation and Cell Reprogramming |
EP2526112B1 (en) | 2010-01-22 | 2018-10-17 | Dow AgroSciences LLC | Targeted genomic alteration |
WO2011091311A2 (en) | 2010-01-22 | 2011-07-28 | Dow Agrosciences Llc | Excision of transgenes in genetically modified organisms |
JP2013520989A (ja) | 2010-03-05 | 2013-06-10 | シンセティック ジェノミクス インコーポレーテッド | ゲノムのクローニングおよび操作のための方法 |
US8557961B2 (en) | 2010-04-02 | 2013-10-15 | Amunix Operating Inc. | Alpha 1-antitrypsin compositions and methods of making and using same |
CA2798703A1 (en) | 2010-05-10 | 2011-11-17 | The Regents Of The University Of California | Endoribonuclease compositions and methods of use thereof |
CA2798988C (en) | 2010-05-17 | 2020-03-10 | Sangamo Biosciences, Inc. | Tal-effector (tale) dna-binding polypeptides and uses thereof |
GB201008267D0 (en) | 2010-05-18 | 2010-06-30 | Univ Edinburgh | Cationic lipids |
WO2011147590A2 (en) | 2010-05-27 | 2011-12-01 | Heinrich-Pette-Institut | Tailored recombinase for recombining asymmetric target sites in a plurality of retrovirus strains |
EP2575767B1 (en) | 2010-06-04 | 2017-01-04 | Sirna Therapeutics, Inc. | Novel low molecular weight cationic lipids for oligonucleotide delivery |
EP2580331A4 (en) | 2010-06-14 | 2013-11-27 | Univ Iowa State Res Found Inc | NUCLEASE ACTIVITY OF THE TAL EFFECTOR AND FUSION PROTEIN FOKI |
WO2012016186A1 (en) | 2010-07-29 | 2012-02-02 | President And Fellows Of Harvard College | Macrocyclic kinase inhibitors and uses thereof |
EP3578205A1 (en) | 2010-08-06 | 2019-12-11 | ModernaTX, Inc. | A pharmaceutical formulation comprising engineered nucleic acids and medical use thereof |
WO2012020759A1 (ja) | 2010-08-13 | 2012-02-16 | 国立大学法人京都大学 | 変異型逆転写酵素 |
MX364560B (es) | 2010-09-20 | 2019-05-02 | Spi Pharma Inc Star | Proceso de microencapsulacion y producto. |
EA201390586A1 (ru) | 2010-10-20 | 2014-11-28 | ДюПон НЬЮТРИШН БАЙОСАЙЕНСИЗ АпС | Последовательности crispr-cas lactococcus |
JP2013543886A (ja) | 2010-11-26 | 2013-12-09 | ユニバーシティ・オブ・ザ・ウィットウォータースランド・ヨハネスブルグ | 医薬投与形態としてのポリマー−脂質ナノ粒子のポリマーマトリックス |
KR101255338B1 (ko) | 2010-12-15 | 2013-04-16 | 포항공과대학교 산학협력단 | 표적 세포에 대한 폴리뉴클레오티드 전달체 |
CA2821805A1 (en) | 2010-12-16 | 2012-06-21 | Celgene Corporation | Controlled release oral dosage forms of poorly soluble drugs and uses thereof |
CA2825370A1 (en) | 2010-12-22 | 2012-06-28 | President And Fellows Of Harvard College | Continuous directed evolution |
US9499592B2 (en) | 2011-01-26 | 2016-11-22 | President And Fellows Of Harvard College | Transcription activator-like effectors |
US20140201857A1 (en) | 2013-01-14 | 2014-07-17 | Recombinetics, Inc. | Hornless livestock |
US9528124B2 (en) | 2013-08-27 | 2016-12-27 | Recombinetics, Inc. | Efficient non-meiotic allele introgression |
US9200045B2 (en) | 2011-03-11 | 2015-12-01 | President And Fellows Of Harvard College | Small molecule-dependent inteins and uses thereof |
US9164079B2 (en) | 2011-03-17 | 2015-10-20 | Greyledge Technologies Llc | Systems for autologous biological therapeutics |
US20120244601A1 (en) * | 2011-03-22 | 2012-09-27 | Bertozzi Carolyn R | Riboswitch based inducible gene expression platform |
JP2012210172A (ja) | 2011-03-30 | 2012-11-01 | Japan Science & Technology Agency | 外部環境に応答して内部の物質組成を変えるリポソーム |
US8709466B2 (en) | 2011-03-31 | 2014-04-29 | International Business Machines Corporation | Cationic polymers for antimicrobial applications and delivery of bioactive materials |
CA2832534C (en) | 2011-04-05 | 2022-01-04 | Julien Valton | Method for the generation of compact tale-nucleases and uses thereof |
US10092660B2 (en) | 2011-04-25 | 2018-10-09 | Stc.Unm | Solid compositions for pharmaceutical use |
JP6158170B2 (ja) | 2011-04-27 | 2017-07-12 | アミリス, インコーポレイテッド | ゲノム修飾のための方法 |
US20140201858A1 (en) | 2011-05-17 | 2014-07-17 | Transposagen Biopharmaceuticals, Inc | Methods for site-specific genetic modification in stem cells using xanthomonas tal nucleases (xtn) for the creation of model organisms |
WO2012158985A2 (en) | 2011-05-17 | 2012-11-22 | Transposagen Biopharmaceuticals, Inc. | Methods for site-specific genetic modification in spermatogonial stem cells using zinc finger nuclease (zfn) for the creation of model organisms |
US8691750B2 (en) | 2011-05-17 | 2014-04-08 | Axolabs Gmbh | Lipids and compositions for intracellular delivery of biologically active compounds |
US20140113376A1 (en) | 2011-06-01 | 2014-04-24 | Rotem Sorek | Compositions and methods for downregulating prokaryotic genes |
RS59037B1 (sr) | 2011-06-08 | 2019-08-30 | Translate Bio Inc | Kompozicije lipidnih nanočestica i postupci za isporuku irnk |
US9243038B2 (en) | 2011-07-01 | 2016-01-26 | President And Fellows Of Harvard College | Macrocyclic insulin-degrading enzyme (IDE) inhibitors and uses thereof |
AU2012284365B2 (en) | 2011-07-15 | 2017-04-20 | The General Hospital Corporation | Methods of transcription activator like effector assembly |
CN103857797A (zh) | 2011-07-19 | 2014-06-11 | 帷幄生物技术公司 | 用于修复软骨损伤的非遗传修饰性重编程细胞的组合物和方法 |
CA2853829C (en) | 2011-07-22 | 2023-09-26 | President And Fellows Of Harvard College | Evaluation and improvement of nuclease cleavage specificity |
EP3384938A1 (en) | 2011-09-12 | 2018-10-10 | Moderna Therapeutics, Inc. | Engineered nucleic acids and methods of use thereof |
WO2013039857A1 (en) | 2011-09-12 | 2013-03-21 | modeRNA Therapeutics | Engineered nucleic acids and methods of use thereof |
CA2850411C (en) | 2011-09-28 | 2023-08-15 | Era Biotech, S.A. | Split inteins and uses thereof |
ES2687154T3 (es) | 2011-09-28 | 2018-10-23 | Ribomic Inc. | Aptámero para NGF y sus aplicaciones |
GB2496687A (en) | 2011-11-21 | 2013-05-22 | Gw Pharma Ltd | Tetrahydrocannabivarin (THCV) in the protection of pancreatic islet cells |
PL2788487T3 (pl) | 2011-12-08 | 2018-10-31 | Sarepta Therapeutics, Inc. | Analogi oligonukleotydów ukierunkowane na ludzki LMNA |
EP2791160B1 (en) | 2011-12-16 | 2022-03-02 | ModernaTX, Inc. | Modified mrna compositions |
BR112014014105B1 (pt) | 2011-12-16 | 2023-10-10 | Targetgene Biotechnologies Ltd | Método para modificar um sítio-alvo predeterminado no interior de um ácido nucleico genômico ou organelar alvo em uma célula hospedeira eucariótica por um complexo núcleoproteína |
GB201122458D0 (en) | 2011-12-30 | 2012-02-08 | Univ Wageningen | Modified cascade ribonucleoproteins and uses thereof |
KR101884048B1 (ko) | 2012-01-30 | 2018-07-31 | 텔레호낙티에볼라게트 엘엠 에릭슨(피유비엘) | 네트워크 자원들을 관리하기 위한 방법들과 노드들, 및 상응하는 시스템과 컴퓨터 프로그램 |
WO2013119602A1 (en) | 2012-02-06 | 2013-08-15 | President And Fellows Of Harvard College | Arrdc1-mediated microvesicles (armms) and uses thereof |
BR112014020625A2 (pt) | 2012-02-24 | 2017-07-04 | Hutchinson Fred Cancer Res | polinucleotídeo, polipeptídeo, composição, célula e célula tronco editada por genoma |
WO2013130824A1 (en) | 2012-02-29 | 2013-09-06 | Sangamo Biosciences, Inc. | Methods and compositions for treating huntington's disease |
EP2825676B1 (en) | 2012-03-17 | 2017-12-20 | The Regents of The University of California | Fast diagnosis and personalized treatments for acne |
US9637739B2 (en) | 2012-03-20 | 2017-05-02 | Vilnius University | RNA-directed DNA cleavage by the Cas9-crRNA complex |
WO2013141680A1 (en) | 2012-03-20 | 2013-09-26 | Vilnius University | RNA-DIRECTED DNA CLEAVAGE BY THE Cas9-crRNA COMPLEX |
WO2013152359A1 (en) | 2012-04-06 | 2013-10-10 | The Regents Of The University Of California | Novel tetrazines and method of synthesizing the same |
WO2013160230A1 (en) | 2012-04-23 | 2013-10-31 | Bayer Cropscience Nv | Targeted genome engineering in plants |
AU2013256240B2 (en) | 2012-05-02 | 2018-09-20 | Corteva Agriscience Llc | Targeted modification of malate dehydrogenase |
BR112014027813A2 (pt) | 2012-05-07 | 2017-08-08 | Dow Agrosciences Llc | métodos e composições para integração de transgenes direcionada mediada por nuclease |
US11120889B2 (en) | 2012-05-09 | 2021-09-14 | Georgia Tech Research Corporation | Method for synthesizing a nuclease with reduced off-site cleavage |
IN2014DN10991A (ko) | 2012-05-25 | 2015-09-25 | Cellectis | |
MX362866B (es) | 2012-05-25 | 2019-02-20 | Univ California | Metodos y composiciones para la modificacion de adn objetivo dirigida por arn y para la modulacion de la transcripcion dirigida por arn. |
US20150017136A1 (en) | 2013-07-15 | 2015-01-15 | Cellectis | Methods for engineering allogeneic and highly active t cell for immunotherapy |
CA2876860A1 (en) | 2012-05-30 | 2013-12-05 | Baylor College Of Medicine | Supercoiled minivectors as a tool for dna repair, alteration and replacement |
WO2013188037A2 (en) | 2012-06-11 | 2013-12-19 | Agilent Technologies, Inc | Method of adaptor-dimer subtraction using a crispr cas6 protein |
US20150128300A1 (en) | 2012-06-12 | 2015-05-07 | Genentech, Inc. | Methods and compositions for generating conditional knock-out alleles |
EP2674501A1 (en) | 2012-06-14 | 2013-12-18 | Agence nationale de sécurité sanitaire de l'alimentation,de l'environnement et du travail | Method for detecting and identifying enterohemorrhagic Escherichia coli |
WO2013188638A2 (en) | 2012-06-15 | 2013-12-19 | The Regents Of The University Of California | Endoribonucleases and methods of use thereof |
US20150225734A1 (en) | 2012-06-19 | 2015-08-13 | Regents Of The University Of Minnesota | Gene targeting in plants using dna viruses |
US9267127B2 (en) | 2012-06-21 | 2016-02-23 | President And Fellows Of Harvard College | Evolution of bond-forming enzymes |
EP2877490B1 (en) | 2012-06-27 | 2018-09-05 | The Trustees of Princeton University | Split inteins, conjugates and uses thereof |
ES2663424T3 (es) | 2012-06-29 | 2018-04-12 | Massachusetts Institute Of Technology | Genética combinatoria masivamente en paralelo |
US9125508B2 (en) | 2012-06-30 | 2015-09-08 | Seasons 4, Inc. | Collapsible tree system |
US10883119B2 (en) | 2012-07-11 | 2021-01-05 | Sangamo Therapeutics, Inc. | Methods and compositions for delivery of biologics |
EP3444342B1 (en) | 2012-07-11 | 2020-05-27 | Sangamo Therapeutics, Inc. | Methods and compositions for the treatment of lysosomal storage diseases |
EP3808844A1 (en) | 2012-07-25 | 2021-04-21 | The Broad Institute, Inc. | Inducible dna binding proteins and genome perturbation tools and applications thereof |
US10058078B2 (en) | 2012-07-31 | 2018-08-28 | Recombinetics, Inc. | Production of FMDV-resistant livestock by allele substitution |
JP6340366B2 (ja) | 2012-07-31 | 2018-06-06 | イェダ リサーチ アンド デベロップメント カンパニー リミテッド | 運動ニューロン疾患を診断および処置する方法 |
WO2014022702A2 (en) | 2012-08-03 | 2014-02-06 | The Regents Of The University Of California | Methods and compositions for controlling gene expression by rna processing |
UA118957C2 (uk) | 2012-08-29 | 2019-04-10 | Сангамо Біосайєнсиз, Інк. | Спосіб і композиція для лікування генетичного захворювання |
WO2014039513A2 (en) | 2012-09-04 | 2014-03-13 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Inhibition of diacylglycerol kinase to augment adoptive t cell transfer |
KR102141259B1 (ko) | 2012-09-04 | 2020-08-05 | 셀렉티스 | 멀티―체인 키메라 항원 수용체 및 그것의 용도들 |
KR102201867B1 (ko) | 2012-09-04 | 2021-01-12 | 더 스크립스 리서치 인스티튜트 | 표적화된 바인딩 특이도를 갖는 키메라 폴리펩타이드들 |
AR092482A1 (es) | 2012-09-07 | 2015-04-22 | Dow Agrosciences Llc | Enriquecimiento de la clasificacion de las celulas activadas por fluorescencia (facs) para generar plantas |
UA118090C2 (uk) | 2012-09-07 | 2018-11-26 | ДАУ АГРОСАЙЄНСІЗ ЕлЕлСі | Спосіб інтегрування послідовності нуклеїнової кислоти, що представляє інтерес, у ген fad2 у клітині сої та специфічний для локусу fad2 білок, що зв'язується, здатний індукувати спрямований розрив |
UA119135C2 (uk) | 2012-09-07 | 2019-05-10 | ДАУ АГРОСАЙЄНСІЗ ЕлЕлСі | Спосіб отримання трансгенної рослини |
RU2665811C2 (ru) | 2012-09-07 | 2018-09-04 | ДАУ АГРОСАЙЕНСИЗ ЭлЭлСи | Локусы fad3 для выполнения операций и соответствующие связывающиеся со специфическими сайтами-мишенями белки, способные к вызову направленных разрывов |
WO2014043143A1 (en) | 2012-09-11 | 2014-03-20 | Life Technologies Corporation | Nucleic acid amplification |
GB201216564D0 (en) | 2012-09-17 | 2012-10-31 | Univ Edinburgh | Genetically edited animal |
US10612053B2 (en) | 2012-09-18 | 2020-04-07 | The Translational Genomics Research Institute | Isolated genes and transgenic organisms for producing biofuels |
US9181535B2 (en) | 2012-09-24 | 2015-11-10 | The Chinese University Of Hong Kong | Transcription activator-like effector nucleases (TALENs) |
AU2013326968B2 (en) | 2012-10-03 | 2019-08-08 | Agrivida, Inc. | Multiprotein expression cassettes |
CA2886684C (en) | 2012-10-10 | 2023-09-19 | Sangamo Biosciences, Inc. | T cell modifying compounds and uses thereof |
EP3789405A1 (en) | 2012-10-12 | 2021-03-10 | The General Hospital Corporation | Transcription activator-like effector (tale) - lysine-specific demethylase 1 (lsd1) fusion proteins |
EP3372679A1 (en) | 2012-10-23 | 2018-09-12 | Toolgen Incorporated | Composition for cleaving a target dna comprising a guide rna specific for the target dna and cas protein-encoding nucleic acid or cas protein, and use thereof |
US20140115728A1 (en) | 2012-10-24 | 2014-04-24 | A. Joseph Tector | Double knockout (gt/cmah-ko) pigs, organs and tissues |
CN105073981A (zh) | 2012-10-30 | 2015-11-18 | 重组股份有限公司 | 动物中性成熟的控制 |
BR112015009931A2 (pt) | 2012-10-31 | 2017-12-05 | Two Blades Found | gene, proteína, molécula de ácido nucleico, vetor, célula hospedeira, métodos para a preparação in vitro de um gene mutante e para gerar uma planta, planta mutante, produto, semente de planta mutante, anticorpo, uso de um anticorpo, sonda genética, par de oligonucleotídeos iniciadores, e, uso de sonda genética |
CA2890160A1 (en) | 2012-10-31 | 2014-05-08 | Cellectis | Coupling herbicide resistance with targeted insertion of transgenes in plants |
WO2014071235A1 (en) | 2012-11-01 | 2014-05-08 | Massachusetts Institute Of Technology | Genetic device for the controlled destruction of dna |
AU2013337651B2 (en) | 2012-11-01 | 2018-12-13 | Factor Bioscience Inc. | Methods and products for expressing proteins in cells |
US20140127752A1 (en) | 2012-11-07 | 2014-05-08 | Zhaohui Zhou | Method, composition, and reagent kit for targeted genomic enrichment |
US9879227B2 (en) | 2012-11-09 | 2018-01-30 | Marco Archetti | Diffusible factors and cancer cells |
US20140140969A1 (en) | 2012-11-20 | 2014-05-22 | Sangamo Biosciences, Inc. | Methods and compositions for muscular dystrophies |
JP2015534834A (ja) | 2012-11-20 | 2015-12-07 | ジェイ.アール.シンプロット カンパニー | Talにより媒介されるトランファーdna挿入 |
EP2922960A4 (en) | 2012-11-20 | 2016-06-29 | Cold Spring Harbor Lab | MUTATIONS FOR SOLANACEAE PLANTS FOR MODULATING SPRING ARCHITECTURE AND IMPROVING PERFORMANCE-RELATED PHENOTYPES |
BR112015011995B1 (pt) | 2012-11-27 | 2023-02-07 | Children's Medical Center Corporation | Método para a produção de uma célula progenitora hematopoiética tendo bcl11a diminuído ou para aumentar seus níveis de hemoglobina fetal, composição e uso das mesmas |
CA2892551A1 (en) | 2012-11-29 | 2014-06-05 | North Carolina State University | Synthetic pathway for biological carbon dioxide sequestration |
WO2014085830A2 (en) | 2012-11-30 | 2014-06-05 | The Parkinson's Institute | Screening assays for therapeutics for parkinson's disease |
EP2925866B1 (en) | 2012-11-30 | 2018-07-25 | Aarhus Universitet | Circular rna for inhibition of microrna |
US9255250B2 (en) | 2012-12-05 | 2016-02-09 | Sangamo Bioscience, Inc. | Isolated mouse or human cell having an exogenous transgene in an endogenous albumin gene |
WO2014089513A1 (en) | 2012-12-06 | 2014-06-12 | Synthetic Genomics, Inc. | Autonomous replication sequences and episomal dna molecules |
PT3138910T (pt) | 2012-12-06 | 2017-10-18 | Sigma Aldrich Co Llc | Modificação e regulação de genoma baseado em crispr |
US9982272B2 (en) | 2012-12-06 | 2018-05-29 | Synthetic Genomics, Inc. | Algal mutants having a locked-in high light acclimated phenotype |
US9914931B2 (en) | 2012-12-07 | 2018-03-13 | Synthetic Genomics, Inc. | Nannochloropsis spliced leader sequences and uses therefor |
EP2928303A4 (en) | 2012-12-07 | 2016-07-13 | Haplomics Inc | FACTOR VIII MUTATION REPAIR AND TOLERANCE INDUCTION |
WO2014093479A1 (en) | 2012-12-11 | 2014-06-19 | Montana State University | Crispr (clustered regularly interspaced short palindromic repeats) rna-guided control of gene regulation |
US20140189896A1 (en) | 2012-12-12 | 2014-07-03 | Feng Zhang | Crispr-cas component systems, methods and compositions for sequence manipulation |
EP3434776A1 (en) | 2012-12-12 | 2019-01-30 | The Broad Institute, Inc. | Methods, models, systems, and apparatus for identifying target sequences for cas enzymes or crispr-cas systems for target sequences and conveying results thereof |
WO2014093701A1 (en) | 2012-12-12 | 2014-06-19 | The Broad Institute, Inc. | Functional genomics using crispr-cas systems, compositions, methods, knock out libraries and applications thereof |
US20140310830A1 (en) | 2012-12-12 | 2014-10-16 | Feng Zhang | CRISPR-Cas Nickase Systems, Methods And Compositions For Sequence Manipulation in Eukaryotes |
US8993233B2 (en) | 2012-12-12 | 2015-03-31 | The Broad Institute Inc. | Engineering and optimization of systems, methods and compositions for sequence manipulation with functional domains |
EP2931897B1 (en) | 2012-12-12 | 2017-11-01 | The Broad Institute, Inc. | Delivery, engineering and optimization of systems, methods and compositions for sequence manipulation and therapeutic applications |
EP2932421A1 (en) | 2012-12-12 | 2015-10-21 | The Broad Institute, Inc. | Methods, systems, and apparatus for identifying target sequences for cas enzymes or crispr-cas systems for target sequences and conveying results thereof |
CN113528577A (zh) | 2012-12-12 | 2021-10-22 | 布罗德研究所有限公司 | 用于序列操纵的系统、方法和优化的指导组合物的工程化 |
AU2013359212B2 (en) | 2012-12-12 | 2017-01-19 | Massachusetts Institute Of Technology | Engineering and optimization of improved systems, methods and enzyme compositions for sequence manipulation |
DK2825654T3 (en) | 2012-12-12 | 2017-08-21 | Broad Inst Inc | SYSTEMS, PROCEDURES, AND COMPOSITIONS WITH CRISPR-CAS COMPONENTS FOR SEQUENCE MANIPULATION. |
US8697359B1 (en) | 2012-12-12 | 2014-04-15 | The Broad Institute, Inc. | CRISPR-Cas systems and methods for altering expression of gene products |
JP6473419B2 (ja) | 2012-12-13 | 2019-02-20 | ダウ アグロサイエンシィズ エルエルシー | 部位特異的ヌクレアーゼ活性のdna検出方法 |
CN105378088A (zh) | 2012-12-13 | 2016-03-02 | 陶氏益农公司 | 对玉米中的特定基因座的精确基因靶向 |
EP2932443B1 (en) | 2012-12-13 | 2018-10-10 | Massachusetts Institute of Technology | Recombinase-based logic and memory systems |
KR20150095861A (ko) | 2012-12-17 | 2015-08-21 | 프레지던트 앤드 펠로우즈 오브 하바드 칼리지 | Rna-가이드된 인간 게놈 조작 |
US20140178561A1 (en) | 2012-12-21 | 2014-06-26 | Cellectis | Potatoes with reduced cold-induced sweetening |
DK2938184T3 (en) | 2012-12-27 | 2018-12-17 | Keygene Nv | Method of removing a genetic linkage in a plant |
AU2014205648B2 (en) | 2013-01-10 | 2017-05-04 | Dharmacon, Inc. | Templates, libraries, kits and methods for generating molecules |
EP2946015B1 (en) | 2013-01-16 | 2021-05-26 | Emory University | Cas9-nucleic acid complexes and uses related thereto |
CN103233028B (zh) | 2013-01-25 | 2015-05-13 | 南京徇齐生物技术有限公司 | 一种无物种限制无生物安全性问题的真核生物基因打靶方法及螺旋结构dna序列 |
CA2899928A1 (en) | 2013-02-05 | 2014-08-14 | University Of Georgia Research Foundation, Inc. | Cell lines for virus production and methods of use |
WO2014124226A1 (en) | 2013-02-07 | 2014-08-14 | The Rockefeller University | Sequence specific antimicrobials |
WO2014127287A1 (en) | 2013-02-14 | 2014-08-21 | Massachusetts Institute Of Technology | Method for in vivo tergated mutagenesis |
US11466306B2 (en) | 2013-02-14 | 2022-10-11 | Osaka University | Method for isolating specific genomic regions with use of molecule capable of specifically binding to endogenous DNA sequence |
SG11201505968WA (en) | 2013-02-20 | 2015-08-28 | Regeneron Pharma | Genetic modification of rats |
WO2014128659A1 (en) | 2013-02-21 | 2014-08-28 | Cellectis | Method to counter-select cells or organisms by linking loci to nuclease components |
ES2522765B2 (es) | 2013-02-22 | 2015-03-18 | Universidad De Alicante | Método para dectectar inserciones de espaciadores en estructuras CRISPR |
WO2014130955A1 (en) | 2013-02-25 | 2014-08-28 | Sangamo Biosciences, Inc. | Methods and compositions for enhancing nuclease-mediated gene disruption |
WO2014131833A1 (en) | 2013-02-27 | 2014-09-04 | Helmholtz Zentrum München Deutsches Forschungszentrum Für Gesundheit Und Umwelt (Gmbh) | Gene editing in the oocyte by cas9 nucleases |
WO2014138379A1 (en) | 2013-03-06 | 2014-09-12 | The Johns Hopkins University | The telomerator-a tool for chromosome engineering |
US10612043B2 (en) | 2013-03-09 | 2020-04-07 | Agilent Technologies, Inc. | Methods of in vivo engineering of large sequences using multiple CRISPR/cas selections of recombineering events |
CN105283539A (zh) | 2013-03-12 | 2016-01-27 | 桑格摩生物科学股份有限公司 | 用于hla的修饰的方法和组合物 |
WO2014164466A1 (en) | 2013-03-12 | 2014-10-09 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | Methods for the identification of variant recognition sites for rare-cutting engineered double-strand-break-inducing agents and compositions and uses thereof |
US9777262B2 (en) | 2013-03-13 | 2017-10-03 | President And Fellows Of Harvard College | Mutants of Cre recombinase |
US20160138027A1 (en) | 2013-03-14 | 2016-05-19 | The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University | Treatment of diseases and conditions associated with dysregulation of mammalian target of rapamycin complex 1 (mtorc1) |
ES2692363T3 (es) | 2013-03-14 | 2018-12-03 | Translate Bio, Inc. | Composiciones terapéuticas de ARNm y su uso para tratar enfermedades y trastornos |
JP2016519652A (ja) | 2013-03-14 | 2016-07-07 | カリブー・バイオサイエンシーズ・インコーポレイテッド | 核酸ターゲティング核酸の組成物および方法 |
US10760064B2 (en) | 2013-03-15 | 2020-09-01 | The General Hospital Corporation | RNA-guided targeting of genetic and epigenomic regulatory proteins to specific genomic loci |
US20140273235A1 (en) | 2013-03-15 | 2014-09-18 | Regents Of The University Of Minnesota | ENGINEERING PLANT GENOMES USING CRISPR/Cas SYSTEMS |
US20140349400A1 (en) | 2013-03-15 | 2014-11-27 | Massachusetts Institute Of Technology | Programmable Modification of DNA |
RS63427B1 (sr) | 2013-03-15 | 2022-08-31 | Cibus Us Llc | Postupci i kompozicije za povećanje efikasnosti modifikacije ciljnog gena korišćenjem genske reparacije posredovane oligonukleotidom |
WO2014145736A2 (en) | 2013-03-15 | 2014-09-18 | Transposagen Biopharmaceuticals, Inc. | Reproducible method for testis-mediated genetic modification (tgm) and sperm-mediated genetic modification (sgm) |
US11332719B2 (en) | 2013-03-15 | 2022-05-17 | The Broad Institute, Inc. | Recombinant virus and preparations thereof |
US9234213B2 (en) | 2013-03-15 | 2016-01-12 | System Biosciences, Llc | Compositions and methods directed to CRISPR/Cas genomic engineering systems |
US20140273230A1 (en) | 2013-03-15 | 2014-09-18 | Sigma-Aldrich Co., Llc | Crispr-based genome modification and regulation |
EP3988667A1 (en) | 2013-03-15 | 2022-04-27 | The General Hospital Corporation | Using truncated guide rnas (tru-grnas) to increase specificity for rna-guided genome editing |
US20140363561A1 (en) | 2013-03-15 | 2014-12-11 | J.R. Simplot Company | Tal-mediated transfer dna insertion |
US9937207B2 (en) | 2013-03-21 | 2018-04-10 | Sangamo Therapeutics, Inc. | Targeted disruption of T cell receptor genes using talens |
CN105121650A (zh) | 2013-04-02 | 2015-12-02 | 拜尔作物科学公司 | 真核生物中的靶向基因组工程 |
PT2981607T (pt) | 2013-04-03 | 2020-11-20 | Memorial Sloan Kettering Cancer Center | Geração eficaz de células t direcionadas a tumores, derivadas de células estaminais pluripotentes |
JP2016522679A (ja) | 2013-04-04 | 2016-08-04 | プレジデント アンド フェローズ オブ ハーバード カレッジ | CRISPR/Cas系を用いたゲノム編集の治療的使用 |
EP2981612B1 (en) | 2013-04-04 | 2019-07-03 | Trustees of Dartmouth College | Compositions and methods for in vivo excision of hiv-1 proviral dna |
CA2908512C (en) | 2013-04-05 | 2023-10-24 | Dow Agrosciences Llc | Methods and compositions for integration of an exogenous sequence within the genome of plants |
US20150056629A1 (en) | 2013-04-14 | 2015-02-26 | Katriona Guthrie-Honea | Compositions, systems, and methods for detecting a DNA sequence |
SG11201508028QA (en) | 2013-04-16 | 2015-10-29 | Regeneron Pharma | Targeted modification of rat genome |
WO2014172470A2 (en) | 2013-04-16 | 2014-10-23 | Whitehead Institute For Biomedical Research | Methods of mutating, modifying or modulating nucleic acid in a cell or nonhuman mammal |
EP2986709A4 (en) | 2013-04-16 | 2017-03-15 | University Of Washington Through Its Center For Commercialization | Activating an alternative pathway for homology-directed repair to stimulate targeted gene correction and genome engineering |
EP2989214A4 (en) | 2013-04-23 | 2016-12-28 | Harvard College | IN SITU INTERACTION DETERMINATION |
EP2796558A1 (en) | 2013-04-23 | 2014-10-29 | Rheinische Friedrich-Wilhelms-Universität Bonn | Improved gene targeting and nucleic acid carrier molecule, in particular for use in plants |
CN103224947B (zh) * | 2013-04-28 | 2015-06-10 | 陕西师范大学 | 一种基因打靶系统 |
WO2014183071A2 (en) | 2013-05-10 | 2014-11-13 | Whitehead Institute For Biomedical Research | In vitro production of red blood cells with sortaggable proteins |
CA2910427C (en) | 2013-05-10 | 2024-02-20 | Sangamo Biosciences, Inc. | Delivery methods and compositions for nuclease-mediated genome engineering |
RU2725542C2 (ru) | 2013-05-13 | 2020-07-02 | Селлектис | Способы конструирования высокоактивных т-клеток для иммунотерапии |
MX2015015662A (es) | 2013-05-13 | 2016-09-16 | Cellectis | Receptor quimérico de antígeno especifico para cd19 y sus usos. |
US9873894B2 (en) | 2013-05-15 | 2018-01-23 | Sangamo Therapeutics, Inc. | Methods and compositions for treatment of a genetic condition |
WO2014186686A2 (en) | 2013-05-17 | 2014-11-20 | Two Blades Foundation | Targeted mutagenesis and genome engineering in plants using rna-guided cas nucleases |
EP3778899A1 (en) | 2013-05-22 | 2021-02-17 | Northwestern University | Rna-directed dna cleavage and gene editing by cas9 enzyme from neisseria meningitidis |
DK3309248T3 (da) | 2013-05-29 | 2021-08-02 | Cellectis | Fremgangsmåde til manipulering af T-celler til immunterapi under anvendelse af et RNA-guidet CAS-nuklease-system |
JP7065564B2 (ja) | 2013-05-29 | 2022-05-12 | セレクティス | Cas9ニッカーゼ活性を用いて正確なdna切断をもたらすための方法 |
US9873907B2 (en) | 2013-05-29 | 2018-01-23 | Agilent Technologies, Inc. | Method for fragmenting genomic DNA using CAS9 |
JP6670743B2 (ja) | 2013-05-29 | 2020-03-25 | セレクティスCellectis | Ii型crisprシステムにおける新規のコンパクトなcas9足場 |
US20150067922A1 (en) | 2013-05-30 | 2015-03-05 | The Penn State Research Foundation | Gene targeting and genetic modification of plants via rna-guided genome editing |
EP3004149B1 (en) | 2013-05-31 | 2018-12-19 | Cellectis S.A. | A laglidadg homing endonuclease cleaving the c-c chemokine receptor type-5 (ccr5) gene and uses thereof |
DK3004338T3 (en) | 2013-05-31 | 2019-04-08 | Cellectis Sa | LAGLIDADG HOMING ENDONUCLEASE DIVERSE T-CELL RECEPTOR ALPHA GENET AND APPLICATIONS THEREOF |
US20140359796A1 (en) | 2013-05-31 | 2014-12-04 | Recombinetics, Inc. | Genetically sterile animals |
EP3603679B1 (en) | 2013-06-04 | 2022-08-10 | President and Fellows of Harvard College | Rna-guided transcriptional regulation |
US20140356956A1 (en) | 2013-06-04 | 2014-12-04 | President And Fellows Of Harvard College | RNA-Guided Transcriptional Regulation |
EP4389903A2 (en) | 2013-06-05 | 2024-06-26 | Duke University | Rna-guided gene editing and gene regulation |
EP3008181B1 (en) | 2013-06-11 | 2019-11-06 | The Regents of The University of California | Methods and compositions for target dna modification |
US20150315252A1 (en) | 2013-06-11 | 2015-11-05 | Clontech Laboratories, Inc. | Protein enriched microvesicles and methods of making and using the same |
US9593356B2 (en) | 2013-06-11 | 2017-03-14 | Takara Bio Usa, Inc. | Protein enriched microvesicles and methods of making and using the same |
WO2014199358A1 (en) | 2013-06-14 | 2014-12-18 | Cellectis | Methods for non-transgenic genome editing in plants |
CN106062197A (zh) | 2013-06-17 | 2016-10-26 | 布罗德研究所有限公司 | 用于序列操纵的串联指导系统、方法和组合物的递送、工程化和优化 |
AU2014281027A1 (en) | 2013-06-17 | 2016-01-28 | Massachusetts Institute Of Technology | Optimized CRISPR-Cas double nickase systems, methods and compositions for sequence manipulation |
CN107995927B (zh) | 2013-06-17 | 2021-07-30 | 布罗德研究所有限公司 | 用于肝靶向和治疗的crispr-cas系统、载体和组合物的递送与用途 |
WO2014204723A1 (en) | 2013-06-17 | 2014-12-24 | The Broad Institute Inc. | Oncogenic models based on delivery and use of the crispr-cas systems, vectors and compositions |
BR112015031611A2 (pt) | 2013-06-17 | 2017-12-12 | Massachusetts Inst Technology | aplicação, manipulação e otimização de sistemas, métodos e composições para direcionamento e modelação de doenças e distúrbios de células pós-mitóticas |
EP3725885A1 (en) | 2013-06-17 | 2020-10-21 | The Broad Institute, Inc. | Functional genomics using crispr-cas systems, compositions methods, screens and applications thereof |
KR20160056869A (ko) | 2013-06-17 | 2016-05-20 | 더 브로드 인스티튜트, 인코퍼레이티드 | 바이러스 구성성분을 사용하여 장애 및 질환을 표적화하기 위한 crispr-cas 시스템 및 조성물의 전달, 용도 및 치료 적용 |
WO2014205192A2 (en) | 2013-06-19 | 2014-12-24 | Sigma-Aldrich Co. Llc | Targeted integration |
US10011850B2 (en) | 2013-06-21 | 2018-07-03 | The General Hospital Corporation | Using RNA-guided FokI Nucleases (RFNs) to increase specificity for RNA-Guided Genome Editing |
US10087453B2 (en) | 2013-06-25 | 2018-10-02 | Cellectis | Modified diatoms for biofuel production |
WO2015002780A1 (en) | 2013-07-01 | 2015-01-08 | The Board Of Regents Of The University Of Texas System | Transcription activator-like effector (tale) libraries and methods of synthesis and use |
IL243475B2 (en) | 2013-07-09 | 2023-11-01 | Harvard College | Multiplex RNA-guided genome engineering |
JP2016528890A (ja) | 2013-07-09 | 2016-09-23 | プレジデント アンド フェローズ オブ ハーバード カレッジ | CRISPR/Cas系を用いるゲノム編集の治療用の使用 |
CN105980552A (zh) | 2013-07-10 | 2016-09-28 | 诺华股份有限公司 | 多种蛋白酶缺陷的丝状真菌细胞及其使用方法 |
JP6443811B2 (ja) | 2013-07-10 | 2018-12-26 | エフストック リミテッド ライアビリティ カンパニー | Mrap2ノックアウト |
CN110819658B (zh) | 2013-07-10 | 2024-03-22 | 哈佛大学校长及研究员协会 | 用于RNA向导的基因调节和编辑的正交Cas9蛋白 |
EP3971287A1 (en) | 2013-07-11 | 2022-03-23 | ModernaTX, Inc. | Compositions comprising synthetic polynucleotides encoding crispr related proteins and synthetic sgrnas and methods of use |
WO2015007194A1 (zh) | 2013-07-16 | 2015-01-22 | 中国科学院上海生命科学研究院 | 植物基因组定点修饰方法 |
EP3022304B1 (en) | 2013-07-19 | 2018-12-26 | Larix Biosciences LLC | Methods and compositions for producing double allele knock outs |
GB201313235D0 (en) | 2013-07-24 | 2013-09-04 | Univ Edinburgh | Antiviral Compositions Methods and Animals |
CN103388006B (zh) | 2013-07-26 | 2015-10-28 | 华东师范大学 | 一种基因定点突变的构建方法 |
US11306328B2 (en) | 2013-07-26 | 2022-04-19 | President And Fellows Of Harvard College | Genome engineering |
US10421957B2 (en) | 2013-07-29 | 2019-09-24 | Agilent Technologies, Inc. | DNA assembly using an RNA-programmable nickase |
CA2920253A1 (en) | 2013-08-02 | 2015-02-05 | Enevolv, Inc. | Processes and host cells for genome, pathway, and biomolecular engineering |
ITTO20130669A1 (it) | 2013-08-05 | 2015-02-06 | Consiglio Nazionale Ricerche | Vettore adeno-associato ricombinante muscolo-specifico e suo impiego nel trattamento di patologie muscolari |
US20150044772A1 (en) | 2013-08-09 | 2015-02-12 | Sage Labs, Inc. | Crispr/cas system-based novel fusion protein and its applications in genome editing |
US20150044192A1 (en) | 2013-08-09 | 2015-02-12 | President And Fellows Of Harvard College | Methods for identifying a target site of a cas9 nuclease |
WO2015021990A1 (en) | 2013-08-16 | 2015-02-19 | University Of Copenhagen | Rna probing method and reagents |
WO2015024017A2 (en) | 2013-08-16 | 2015-02-19 | President And Fellows Of Harvard College | Rna polymerase, methods of purification and methods of use |
US9821004B2 (en) | 2013-08-20 | 2017-11-21 | Vib Vzw | Inhibition of a lncRNA for treatment of melanoma |
MX361154B (es) | 2013-08-22 | 2018-11-28 | Pioneer Hi Bred Int | Modificación del genoma usando sistemas guía de polinucleótido/cas endonucleasa y métodos de uso. |
US9359599B2 (en) | 2013-08-22 | 2016-06-07 | President And Fellows Of Harvard College | Engineered transcription activator-like effector (TALE) domains and uses thereof |
AU2014312295C1 (en) | 2013-08-28 | 2020-08-13 | Sangamo Therapeutics, Inc. | Compositions for linking DNA-binding domains and cleavage domains |
GB201315321D0 (en) | 2013-08-28 | 2013-10-09 | Koninklijke Nederlandse Akademie Van Wetenschappen | Transduction Buffer |
EA037850B1 (ru) | 2013-08-29 | 2021-05-27 | Тэмпл Юниверсити Оф Зе Коммонвэлс Систем Оф Хайе Эдьюкейшн | Способы и композиции для рнк-направленного лечения вич-инфекции |
KR102238137B1 (ko) | 2013-09-04 | 2021-04-09 | 다우 아그로사이언시즈 엘엘씨 | 공여자 삽입을 결정하기 위한 작물에서의 신속 표적화 분석 |
JP6535333B2 (ja) | 2013-09-04 | 2019-06-26 | シーエスアイアール | 遺伝子発現をサイレンシングする遺伝子制御エレメントを標的とする部位特異的ヌクレアーゼ単一細胞アッセイ |
US10897862B2 (en) | 2013-09-04 | 2021-01-26 | KWS SAAT SE & Co. KGaA | Plant resistant to Helminthosporium turcicum |
DK3041498T3 (da) | 2013-09-05 | 2022-05-09 | Massachusetts Inst Technology | Afstemning af mikrobielle populationer med programmerbare nukleaser |
WO2016070129A1 (en) | 2014-10-30 | 2016-05-06 | President And Fellows Of Harvard College | Delivery of negatively charged proteins using cationic lipids |
US9388430B2 (en) | 2013-09-06 | 2016-07-12 | President And Fellows Of Harvard College | Cas9-recombinase fusion proteins and uses thereof |
US9340800B2 (en) | 2013-09-06 | 2016-05-17 | President And Fellows Of Harvard College | Extended DNA-sensing GRNAS |
US9526784B2 (en) | 2013-09-06 | 2016-12-27 | President And Fellows Of Harvard College | Delivery system for functional nucleases |
TW201542816A (zh) | 2013-09-18 | 2015-11-16 | Kymab Ltd | 方法、細胞與生物體 |
WO2015040075A1 (en) | 2013-09-18 | 2015-03-26 | Genome Research Limited | Genomic screening methods using rna-guided endonucleases |
US10202593B2 (en) | 2013-09-20 | 2019-02-12 | President And Fellows Of Harvard College | Evolved sortases and uses thereof |
JP6595459B2 (ja) | 2013-09-23 | 2019-10-23 | レンセラール ポリテクニック インスティチュート | 種々の細胞集団におけるナノ粒子媒介遺伝子送達、ゲノム編集およびリガンド標的化修飾 |
US20160237455A1 (en) | 2013-09-27 | 2016-08-18 | Editas Medicine, Inc. | Crispr-related methods and compositions |
WO2015048690A1 (en) | 2013-09-27 | 2015-04-02 | The Regents Of The University Of California | Optimized small guide rnas and methods of use |
US20160237451A1 (en) | 2013-09-30 | 2016-08-18 | Regents Of The University Of Minnesota | Conferring resistance to geminiviruses in plants using crispr/cas systems |
US20160368995A1 (en) | 2013-09-30 | 2016-12-22 | The Regents Of The University Of California | Identification of cxcr8, a novel chemokine receptor |
CN105934512A (zh) | 2013-10-02 | 2016-09-07 | 东北大学 | 用于在核基因转移的受体中产生没有发育能力的卵子的方法和组合物 |
JP5774657B2 (ja) | 2013-10-04 | 2015-09-09 | 国立大学法人京都大学 | エレクトロポレーションを利用した哺乳類の遺伝子改変方法 |
US20160237402A1 (en) | 2013-10-07 | 2016-08-18 | Northeastern University | Methods and Compositions for Ex Vivo Generation of Developmentally Competent Eggs from Germ Line Cells Using Autologous Cell Systems |
US20150098954A1 (en) | 2013-10-08 | 2015-04-09 | Elwha Llc | Compositions and Methods Related to CRISPR Targeting |
WO2015052231A2 (en) | 2013-10-08 | 2015-04-16 | Technical University Of Denmark | Multiplex editing system |
DE102013111099B4 (de) | 2013-10-08 | 2023-11-30 | Eberhard Karls Universität Tübingen Medizinische Fakultät | Permanente Genkorrektur mittels nukleotidmodifizierter messenger RNA |
AU2014333776B2 (en) | 2013-10-11 | 2021-01-28 | Cellectis | Methods and kits for detecting nucleic acid sequences of interest using DNA-binding protein domain |
WO2015057671A1 (en) | 2013-10-14 | 2015-04-23 | The Broad Institute, Inc. | Artificial transcription factors comprising a sliding domain and uses thereof |
KR102339240B1 (ko) | 2013-10-15 | 2021-12-15 | 더 스크립스 리서치 인스티튜트 | 펩타이드 키메라 항원 수용체 t 세포 스위치 및 이의 용도 |
CA2926698C (en) | 2013-10-15 | 2021-06-22 | The California Institute For Biomedical Research | Chimeric antigen receptor t cell switches and uses thereof |
CA2926078C (en) | 2013-10-17 | 2021-11-16 | Sangamo Biosciences, Inc. | Delivery methods and compositions for nuclease-mediated genome engineering in hematopoietic stem cells |
DK3441468T3 (da) | 2013-10-17 | 2021-07-26 | Sangamo Therapeutics Inc | Afgivelsesfremgangsmåder og sammensætninger til nukleasemedieret genom-manipulation |
US10508289B2 (en) | 2013-10-25 | 2019-12-17 | Cellectis | Rare-cutting endonucleases for efficient and specific targeting DNA sequences comprising highly repetitive motives |
WO2015065964A1 (en) | 2013-10-28 | 2015-05-07 | The Broad Institute Inc. | Functional genomics using crispr-cas systems, compositions, methods, screens and applications thereof |
US10584358B2 (en) | 2013-10-30 | 2020-03-10 | North Carolina State University | Compositions and methods related to a type-II CRISPR-Cas system in Lactobacillus buchneri |
CN106164085A (zh) | 2013-11-04 | 2016-11-23 | 美国陶氏益农公司 | 最优玉米座位 |
AR098283A1 (es) | 2013-11-04 | 2016-05-26 | Dow Agrosciences Llc | Polinucleótido donante universal para reconocimiento de genes |
CN105980395A (zh) | 2013-11-04 | 2016-09-28 | 美国陶氏益农公司 | 最优大豆座位 |
BR102014027438B1 (pt) | 2013-11-04 | 2022-09-27 | Dow Agrosciences Llc | Molécula de ácido nucleico recombinante e método de produção de uma célula vegetal transgênica |
TWI672378B (zh) | 2013-11-04 | 2019-09-21 | 陶氏農業科學公司 | 最適大豆基因座(一) |
WO2015069682A2 (en) | 2013-11-05 | 2015-05-14 | President And Fellows Of Harvard College | Precise microbiota engineering at the cellular level |
KR102380245B1 (ko) | 2013-11-07 | 2022-03-30 | 에디타스 메디신, 인코포레이티드 | 지배적인 gRNA를 이용하는 CRISPR-관련 방법 및 조성물 |
WO2015077058A2 (en) | 2013-11-08 | 2015-05-28 | The Broad Institute, Inc. | Compositions and methods for selecting a treatment for b-cell neoplasias |
CN105934524A (zh) | 2013-11-11 | 2016-09-07 | 桑格摩生物科学股份有限公司 | 用于治疗亨廷顿氏病的方法和组合物 |
WO2015070193A1 (en) | 2013-11-11 | 2015-05-14 | Liu Oliver | Compositions and methods for targeted gene disruption in prokaryotes |
EP3492593B1 (en) | 2013-11-13 | 2021-08-18 | Children's Medical Center Corporation | Nuclease-mediated regulation of gene expression |
WO2015073867A1 (en) | 2013-11-15 | 2015-05-21 | The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health & Human Services | Engineering neural stem cells using homologous recombination |
JP2016537028A (ja) | 2013-11-18 | 2016-12-01 | クリスパー セラピューティクス アーゲー | Crispr−casシステムの材料及び方法 |
CN106103703A (zh) | 2013-11-18 | 2016-11-09 | 耶鲁大学 | 使用转座子的组合物和方法 |
WO2015075056A1 (en) | 2013-11-19 | 2015-05-28 | Thermo Fisher Scientific Baltics Uab | Programmable enzymes for isolation of specific dna fragments |
US9074199B1 (en) | 2013-11-19 | 2015-07-07 | President And Fellows Of Harvard College | Mutant Cas9 proteins |
US10787684B2 (en) | 2013-11-19 | 2020-09-29 | President And Fellows Of Harvard College | Large gene excision and insertion |
CA2930282A1 (en) | 2013-11-20 | 2015-05-28 | Fondazione Telethon | Artificial dna-binding proteins and uses thereof |
CA2931267C (en) | 2013-11-22 | 2023-08-15 | Cellectis | A method of engineering allogenic and drug resistant t-cells for immunotherapy |
SI3594348T1 (sl) | 2013-11-22 | 2022-04-29 | Mina Therapeutics Limited | Sestavki kratko aktivirajoče rna c/ebp alfa in postopki uporabe |
AU2014351871B2 (en) | 2013-11-22 | 2020-02-13 | Cellectis | Method for generating batches of allogeneic T-cells with averaged potency |
CN103642836A (zh) | 2013-11-26 | 2014-03-19 | 苏州同善生物科技有限公司 | 一种基于crispr基因敲除技术建立脆性x综合症灵长类动物模型的方法 |
CN103614415A (zh) | 2013-11-27 | 2014-03-05 | 苏州同善生物科技有限公司 | 一种基于crispr基因敲除技术建立肥胖症大鼠动物模型的方法 |
AU2014356400A1 (en) | 2013-11-28 | 2016-06-02 | Horizon Discovery Limited | Somatic haploid human cell line |
CA2931637C (en) | 2013-12-09 | 2023-10-10 | Sangamo Biosciences, Inc. | Methods and compositions for treating hemophilia |
CN105980568B (zh) | 2013-12-11 | 2019-12-03 | 瑞泽恩制药公司 | 用于靶向修饰基因组的方法和组合物 |
JP2017503485A (ja) | 2013-12-12 | 2017-02-02 | ザ・ブロード・インスティテュート・インコーポレイテッド | 遺伝子産物の発現、構造情報、及び誘導性モジュラーcas酵素を変更するためのcrispr−cas系並びに方法 |
BR112016013213A2 (pt) | 2013-12-12 | 2017-12-05 | Massachusetts Inst Technology | administração, uso e aplicações terapêuticas dos sistemas crispr-cas e composições para visar distúrbios e doenças usando componentes de administração de partículas |
CN105899658B (zh) | 2013-12-12 | 2020-02-18 | 布罗德研究所有限公司 | 针对hbv和病毒性疾病以及障碍的crispr-cas系统和组合物的递送、用途和治疗应用 |
EP3080266B1 (en) | 2013-12-12 | 2021-02-03 | The Regents of The University of California | Methods and compositions for modifying a single stranded target nucleic acid |
EP3080259B1 (en) | 2013-12-12 | 2023-02-01 | The Broad Institute, Inc. | Engineering of systems, methods and optimized guide compositions with new architectures for sequence manipulation |
MX2016007325A (es) | 2013-12-12 | 2017-07-19 | Broad Inst Inc | Composiciones y metodos de uso de sistemas crispr-cas en desordenes debidos a repeticion de nucleotidos. |
CA2932478A1 (en) | 2013-12-12 | 2015-06-18 | Massachusetts Institute Of Technology | Delivery, use and therapeutic applications of the crispr-cas systems and compositions for genome editing |
EP3080271B1 (en) | 2013-12-12 | 2020-02-12 | The Broad Institute, Inc. | Systems, methods and compositions for sequence manipulation with optimized functional crispr-cas systems |
WO2015089364A1 (en) | 2013-12-12 | 2015-06-18 | The Broad Institute Inc. | Crystal structure of a crispr-cas system, and uses thereof |
US20150166982A1 (en) | 2013-12-12 | 2015-06-18 | President And Fellows Of Harvard College | Methods for correcting pi3k point mutations |
AU2014363479A1 (en) | 2013-12-13 | 2016-06-23 | Cellectis | New method of selection of algal-transformed cells using nuclease |
AU2014363476A1 (en) | 2013-12-13 | 2016-06-23 | Cellectis | Cas9 nuclease platform for microalgae genome engineering |
US20150191744A1 (en) | 2013-12-17 | 2015-07-09 | University Of Massachusetts | Cas9 effector-mediated regulation of transcription, differentiation and gene editing/labeling |
PT3083958T (pt) | 2013-12-19 | 2019-06-27 | Amyris Inc | Métodos de integração genómica |
CA2935032C (en) | 2013-12-26 | 2024-01-23 | The General Hospital Corporation | Multiplex guide rnas |
CA2935216C (en) | 2013-12-30 | 2021-11-09 | University Of Pittsburgh - Of The Commonwealth System Of Higher Education | Fusion genes associated with progressive prostate cancer |
CN103668472B (zh) | 2013-12-31 | 2014-12-24 | 北京大学 | 利用CRISPR/Cas9系统构建真核基因敲除文库的方法 |
WO2015103153A1 (en) | 2013-12-31 | 2015-07-09 | The Regents Of The University Of California | Cas9 crystals and methods of use thereof |
SG11201605550QA (en) | 2014-01-08 | 2016-08-30 | Harvard College | Rna-guided gene drives |
RU2016133286A (ru) | 2014-01-14 | 2018-02-20 | Лэм Терапьютикс, Инк. | Способы мутагенеза |
US10774338B2 (en) | 2014-01-16 | 2020-09-15 | The Regents Of The University Of California | Generation of heritable chimeric plant traits |
US10179911B2 (en) | 2014-01-20 | 2019-01-15 | President And Fellows Of Harvard College | Negative selection and stringency modulation in continuous evolution systems |
US10557146B2 (en) | 2014-01-21 | 2020-02-11 | The Institute Of Genetics And Developmental Biology, Chinese Academy Of Sciences | Modified plants |
GB201400962D0 (en) | 2014-01-21 | 2014-03-05 | Kloehn Peter C | Screening for target-specific affinity binders using RNA interference |
US10034463B2 (en) | 2014-01-24 | 2018-07-31 | Children's Medical Center Corporation | High-throughput mouse model for optimizing antibody affinities |
JP2017503514A (ja) | 2014-01-24 | 2017-02-02 | ノースカロライナ ステート ユニバーシティーNorth Carolina State University | Cas9ターゲッティングをガイドする配列に関する方法および組成物 |
WO2015113063A1 (en) | 2014-01-27 | 2015-07-30 | Georgia Tech Research Corporation | Methods and systems for identifying crispr/cas off-target sites |
CN104805078A (zh) | 2014-01-28 | 2015-07-29 | 北京大学 | 用于高效基因组编辑的rna分子的设计、合成及其应用 |
WO2015116686A1 (en) | 2014-01-29 | 2015-08-06 | Agilent Technologies, Inc. | Cas9-based isothermal method of detection of specific dna sequence |
WO2015116969A2 (en) | 2014-01-30 | 2015-08-06 | The Board Of Trustees Of The University Of Arkansas | Method, vectors, cells, seeds and kits for stacking genes into a single genomic site |
US20150291969A1 (en) | 2014-01-30 | 2015-10-15 | Chromatin, Inc. | Compositions for reduced lignin content in sorghum and improving cell wall digestibility, and methods of making the same |
EP4249036A3 (en) | 2014-01-31 | 2023-10-25 | Factor Bioscience Inc. | Methods and products for nucleic acid production and delivery |
GB201401707D0 (en) | 2014-01-31 | 2014-03-19 | Sec Dep For Health The | Adeno-associated viral vectors |
HUE051232T2 (hu) | 2014-02-03 | 2021-03-01 | Sangamo Therapeutics Inc | Béta-talasszémia kezelésére szolgáló eljárások és készítmények |
WO2015115903A1 (en) | 2014-02-03 | 2015-08-06 | Academisch Ziekenhuis Leiden H.O.D.N. Lumc | Site-specific dna break-induced genome editing using engineered nucleases |
WO2015119941A2 (en) | 2014-02-04 | 2015-08-13 | Igenomx International Genomics Corporation | Genome fractioning |
CA2937058C (en) | 2014-02-07 | 2022-07-19 | Vib Vzw | Inhibition of neat1 for treatment of solid tumors |
KR102496984B1 (ko) | 2014-02-11 | 2023-02-06 | 더 리전츠 오브 더 유니버시티 오브 콜로라도, 어 바디 코퍼레이트 | Crispr 이용의 다중화된 게놈 조작 |
EP3105325B1 (en) | 2014-02-13 | 2019-12-04 | Takara Bio USA, Inc. | Methods of depleting a target molecule from an initial collection of nucleic acids, and compositions and kits for practicing the same |
RU2714258C2 (ru) | 2014-02-14 | 2020-02-13 | Селлектис | Клетки для иммунотерапии, сконструированные для нацеливания на антиген, присутствующий одновременно на иммунных клетках и на патологических клетках |
MX2016010781A (es) | 2014-02-18 | 2017-02-15 | Univ Duke | Composiciones para la inactivacion de la replicacion de virus y metodos de fabricacion y uso de las mismas. |
DK3116994T3 (da) | 2014-02-20 | 2019-10-21 | Dsm Ip Assets Bv | Phage-ufølsom streptococcus thermophilus |
EP3107552B1 (en) | 2014-02-21 | 2018-03-28 | Cellectis | Method for in situ inhibition of regulatory t cells |
WO2015127428A1 (en) | 2014-02-24 | 2015-08-27 | Massachusetts Institute Of Technology | Methods for in vivo genome editing |
AU2015218576B2 (en) | 2014-02-24 | 2020-02-27 | Sangamo Therapeutics, Inc. | Methods and compositions for nuclease-mediated targeted integration |
JP6521669B2 (ja) | 2014-02-25 | 2019-05-29 | 国立研究開発法人農業・食品産業技術総合研究機構 | 標的dnaに変異が導入された植物細胞、及びその製造方法 |
WO2015131101A1 (en) | 2014-02-27 | 2015-09-03 | Monsanto Technology Llc | Compositions and methods for site directed genomic modification |
CN103820441B (zh) | 2014-03-04 | 2017-05-17 | 黄行许 | CRISPR‑Cas9特异性敲除人CTLA4基因的方法以及用于特异性靶向CTLA4基因的sgRNA |
CN103820454B (zh) | 2014-03-04 | 2016-03-30 | 上海金卫生物技术有限公司 | CRISPR-Cas9特异性敲除人PD1基因的方法以及用于特异性靶向PD1基因的sgRNA |
WO2015134812A1 (en) | 2014-03-05 | 2015-09-11 | Editas Medicine, Inc. | Crispr/cas-related methods and compositions for treating usher syndrome and retinitis pigmentosa |
CN111471675A (zh) | 2014-03-05 | 2020-07-31 | 国立大学法人神户大学 | 特异性转变靶向dna序列的核酸碱基的基因组序列的修饰方法、及其使用的分子复合体 |
EP3553176A1 (en) | 2014-03-10 | 2019-10-16 | Editas Medicine, Inc. | Crispr/cas-related methods and compositions for treating leber's congenital amaurosis 10 (lca10) |
CN106103475B (zh) | 2014-03-11 | 2021-01-12 | 塞勒克提斯公司 | 产生同种异体移植相容的t细胞的方法 |
EP3116533B1 (en) | 2014-03-12 | 2020-08-12 | Precision Biosciences, Inc. | Dystrophin gene exon deletion using engineered nucleases |
WO2015138870A2 (en) | 2014-03-13 | 2015-09-17 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Compositions and methods for targeted epigenetic modification |
WO2015138855A1 (en) | 2014-03-14 | 2015-09-17 | The Regents Of The University Of California | Vectors and methods for fungal genome engineering by crispr-cas9 |
UA124375C2 (uk) | 2014-03-14 | 2021-09-08 | Кібус Юс Ллс | Спосіб здійснення спрямованої генетичної зміни днк в клітині рослини з використанням нуклеази crispr і модифікованого gron |
CA2942762C (en) | 2014-03-18 | 2023-10-17 | Sangamo Biosciences, Inc. | Methods and compositions for regulation of zinc finger protein expression |
WO2015139139A1 (en) | 2014-03-20 | 2015-09-24 | UNIVERSITé LAVAL | Crispr-based methods and products for increasing frataxin levels and uses thereof |
KR20160135729A (ko) | 2014-03-21 | 2016-11-28 | 더 보드 어브 트러스티스 어브 더 리랜드 스탠포드 주니어 유니버시티 | 뉴클레아제 없는 게놈 편집 |
AU2015236327B2 (en) | 2014-03-24 | 2019-10-10 | IMMCO Diagnostics, Inc. | Improved anti-nuclear antibody detection and diagnostics for systemic and non-systemic autoimmune disorders |
CA2943775A1 (en) | 2014-03-25 | 2015-10-01 | Ginkgo Bioworks, Inc. | Methods and genetic systems for cell engineering |
EP3129484A1 (en) | 2014-03-25 | 2017-02-15 | Editas Medicine, Inc. | Crispr/cas-related methods and compositions for treating hiv infection and aids |
EP3981876A1 (en) | 2014-03-26 | 2022-04-13 | Editas Medicine, Inc. | Crispr/cas-related methods and compositions for treating sickle cell disease |
WO2015148860A1 (en) | 2014-03-26 | 2015-10-01 | Editas Medicine, Inc. | Crispr/cas-related methods and compositions for treating beta-thalassemia |
MX2016012492A (es) | 2014-03-26 | 2017-06-26 | Univ Maryland | Edicion de genoma dirigida en cigotos de animales grandes domesticos. |
WO2015145417A1 (en) | 2014-03-28 | 2015-10-01 | Ilan Ziv | Compounds and methods for trans-membrane delivery of molecules |
US9993563B2 (en) | 2014-03-28 | 2018-06-12 | Aposense Ltd. | Compounds and methods for trans-membrane delivery of molecules |
EP3126497B1 (en) | 2014-04-01 | 2018-12-12 | Editas Medicine, Inc. | Crispr/cas-related methods and compositions for treating herpes simplex virus type 1 (hsv-1) |
WO2015153791A1 (en) | 2014-04-01 | 2015-10-08 | Editas Medicine, Inc. | Crispr/cas-related methods and compositions for treating herpes simplex virus type 2 (hsv-2) |
WO2015153760A2 (en) | 2014-04-01 | 2015-10-08 | Sangamo Biosciences, Inc. | Methods and compositions for prevention or treatment of a nervous system disorder |
US10507232B2 (en) | 2014-04-02 | 2019-12-17 | University Of Florida Research Foundation, Incorporated | Materials and methods for the treatment of latent viral infection |
EP3540061A1 (en) | 2014-04-02 | 2019-09-18 | Editas Medicine, Inc. | Crispr/cas-related methods and compositions for treating primary open angle glaucoma |
JP2017509350A (ja) | 2014-04-03 | 2017-04-06 | マサチューセッツ インスティテュート オブ テクノロジー | ガイドrnaの生成のための方法および組成物 |
CN103911376B (zh) | 2014-04-03 | 2017-02-15 | 黄行许 | CRISPR‑Cas9靶向敲除乙肝病毒cccDNA及其特异性sgRNA |
US11439712B2 (en) | 2014-04-08 | 2022-09-13 | North Carolina State University | Methods and compositions for RNA-directed repression of transcription using CRISPR-associated genes |
EP3556858A3 (en) | 2014-04-09 | 2020-01-22 | Editas Medicine, Inc. | Crispr/cas-related methods and compositions for treating cystic fibrosis |
US10253311B2 (en) | 2014-04-10 | 2019-04-09 | The Regents Of The University Of California | Methods and compositions for using argonaute to modify a single stranded target nucleic acid |
US10765728B2 (en) | 2014-04-11 | 2020-09-08 | Cellectis | Method for generating immune cells resistant to arginine and/or tryptophan depleted microenvironment |
CN103923911B (zh) | 2014-04-14 | 2016-06-08 | 上海金卫生物技术有限公司 | CRISPR-Cas9特异性敲除人CCR5基因的方法以及用于特异性靶向CCR5基因的sgRNA |
EP3132034B1 (en) | 2014-04-14 | 2020-08-19 | Nemesis Bioscience Ltd. | Therapeutic |
US20170029805A1 (en) | 2014-04-14 | 2017-02-02 | Maxcyte, Inc. | Methods and compositions for modifying genomic dna |
GB201406970D0 (en) | 2014-04-17 | 2014-06-04 | Green Biologics Ltd | Targeted mutations |
GB201406968D0 (en) | 2014-04-17 | 2014-06-04 | Green Biologics Ltd | Deletion mutants |
AU2015247323B2 (en) | 2014-04-18 | 2021-07-01 | Editas Medicine, Inc. | CRISPR-Cas-related methods, compositions and components for cancer immunotherapy |
CN105039399A (zh) | 2014-04-23 | 2015-11-11 | 复旦大学 | 多能干细胞-遗传性心肌病心肌细胞及其制备方法 |
WO2015164748A1 (en) | 2014-04-24 | 2015-10-29 | Sangamo Biosciences, Inc. | Engineered transcription activator like effector (tale) proteins |
WO2015163733A1 (en) | 2014-04-24 | 2015-10-29 | Institute For Basic Science | A method of selecting a nuclease target sequence for gene knockout based on microhomology |
KR20200138445A (ko) | 2014-04-24 | 2020-12-09 | 보드 오브 리전츠, 더 유니버시티 오브 텍사스 시스템 | 입양 세포 요법 생성물을 생성하기 위한 유도 만능 줄기 세포의 응용 |
CN106455512A (zh) | 2014-04-28 | 2017-02-22 | 美国陶氏益农公司 | 单倍体玉米转化 |
WO2015168158A1 (en) | 2014-04-28 | 2015-11-05 | Fredy Altpeter | Targeted genome editing to modify lignin biosynthesis and cell wall composition |
AP2016009588A0 (en) | 2014-04-28 | 2016-11-30 | Recombinetics Inc | Multiplex gene editing in swine |
US10494422B2 (en) | 2014-04-29 | 2019-12-03 | Seattle Children's Hospital | CCR5 disruption of cells expressing anti-HIV chimeric antigen receptor (CAR) derived from broadly neutralizing antibodies |
WO2015168404A1 (en) | 2014-04-30 | 2015-11-05 | Massachusetts Institute Of Technology | Toehold-gated guide rna for programmable cas9 circuitry with rna input |
WO2015165275A1 (zh) | 2014-04-30 | 2015-11-05 | 清华大学 | 利用tale转录抑制子在哺乳动物细胞中模块化构建合成基因线路 |
WO2015165276A1 (zh) | 2014-04-30 | 2015-11-05 | 清华大学 | 利用tale转录抑制子在哺乳动物细胞中模块化构建合成基因线路的试剂盒 |
CN104178506B (zh) | 2014-04-30 | 2017-03-01 | 清华大学 | Taler蛋白通过空间位阻发挥转录抑制作用及其应用 |
EP3137120A4 (en) | 2014-05-01 | 2018-03-14 | University Of Washington | In vivo gene engineering with adenoviral vectors |
GB201407852D0 (en) | 2014-05-02 | 2014-06-18 | Iontas Ltd | Preparation of libraries od protein variants expressed in eukaryotic cells and use for selecting binding molecules |
WO2015171603A1 (en) | 2014-05-06 | 2015-11-12 | Two Blades Foundation | Methods for producing plants with enhanced resistance to oomycete pathogens |
RU2691102C2 (ru) | 2014-05-08 | 2019-06-11 | Сангамо Байосайенсиз, Инк. | Способы и композиции для лечения болезни хантингтона |
AU2015255656A1 (en) | 2014-05-09 | 2016-11-10 | Assembly Biosciences, Inc. | Methods and compositions for treating hepatitis B virus infections |
WO2015171894A1 (en) | 2014-05-09 | 2015-11-12 | The Regents Of The University Of California | Methods for selecting plants after genome editing |
EP3140403A4 (en) | 2014-05-09 | 2017-12-20 | Université Laval | Prevention and treatment of alzheimer's disease by genome editing using the crispr/cas system |
WO2015175642A2 (en) | 2014-05-13 | 2015-11-19 | Sangamo Biosciences, Inc. | Methods and compositions for prevention or treatment of a disease |
CN104004782B (zh) | 2014-05-16 | 2016-06-08 | 安徽省农业科学院水稻研究所 | 一种延长水稻生育期的育种方法 |
CN103981211B (zh) | 2014-05-16 | 2016-07-06 | 安徽省农业科学院水稻研究所 | 一种创制闭颖授粉水稻材料的育种方法 |
CN103981212B (zh) | 2014-05-16 | 2016-06-01 | 安徽省农业科学院水稻研究所 | 将黄色颖壳的水稻品种的颖壳颜色改为褐色的育种方法 |
CN104017821B (zh) | 2014-05-16 | 2016-07-06 | 安徽省农业科学院水稻研究所 | 定向编辑颖壳颜色决定基因OsCHI创制褐壳水稻材料的方法 |
WO2015173436A1 (en) | 2014-05-16 | 2015-11-19 | Vrije Universiteit Brussel | Genetic correction of myotonic dystrophy type 1 |
CA2949697A1 (en) | 2014-05-20 | 2015-11-26 | Regents Of The University Of Minnesota | Method for editing a genetic sequence |
CA2852593A1 (en) | 2014-05-23 | 2015-11-23 | Universite Laval | Methods for producing dopaminergic neurons and uses thereof |
WO2015183885A1 (en) | 2014-05-27 | 2015-12-03 | Dana-Farber Cancer Institute, Inc. | Methods and compositions for perturbing gene expression in hematopoietic stem cell lineages in vivo |
US20170191123A1 (en) | 2014-05-28 | 2017-07-06 | Toolgen Incorporated | Method for Sensitive Detection of Target DNA Using Target-Specific Nuclease |
WO2015184268A1 (en) | 2014-05-30 | 2015-12-03 | The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University | Compositions and methods of delivering treatments for latent viral infections |
EP3152319A4 (en) | 2014-06-05 | 2017-12-27 | Sangamo BioSciences, Inc. | Methods and compositions for nuclease design |
CA2950173C (en) | 2014-06-06 | 2023-10-10 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Methods and compositions for modifying a targeted locus |
US20170198307A1 (en) | 2014-06-06 | 2017-07-13 | President And Fellows Of Harvard College | Methods for targeted modification of genomic dna |
CN104004778B (zh) | 2014-06-06 | 2016-03-02 | 重庆高圣生物医药有限责任公司 | 含有CRISPR/Cas9系统的靶向敲除载体及其腺病毒和应用 |
AU2015269210A1 (en) | 2014-06-06 | 2016-12-08 | The California Institute For Biomedical Research | Methods of constructing amino terminal immunoglobulin fusion proteins and compositions thereof |
EP3155018A4 (en) | 2014-06-06 | 2018-01-10 | The California Institute for Biomedical Research | Constant region antibody fusion proteins and compositions thereof |
US11030531B2 (en) | 2014-06-06 | 2021-06-08 | Trustees Of Boston University | DNA recombinase circuits for logical control of gene expression |
CA2951707A1 (en) | 2014-06-10 | 2015-12-17 | Massachusetts Institute Of Technology | Method for gene editing |
US11274302B2 (en) | 2016-08-17 | 2022-03-15 | Diacarta Ltd | Specific synthetic chimeric Xenonucleic acid guide RNA; s(XNA-gRNA) for enhancing CRISPR mediated genome editing efficiency |
CA2951882A1 (en) | 2014-06-11 | 2015-12-17 | Tom E. HOWARD | Factor viii mutation repair and tolerance induction and related cdnas, compositions, methods and systems |
JP6730199B2 (ja) | 2014-06-11 | 2020-07-29 | デューク ユニバーシティ | 合成代謝弁を用いた迅速かつ動的なフラックス制御のための組成物及び方法 |
WO2015191911A2 (en) | 2014-06-12 | 2015-12-17 | Clontech Laboratories, Inc. | Protein enriched microvesicles and methods of making and using the same |
WO2015189693A1 (en) | 2014-06-12 | 2015-12-17 | King Abdullah University Of Science And Technology | Targeted viral-mediated plant genome editing using crispr/cas9 |
WO2015195621A1 (en) | 2014-06-16 | 2015-12-23 | The Johns Hopkins University | Compositions and methods for the expression of crispr guide rnas using the h1 promoter |
WO2015195547A1 (en) | 2014-06-16 | 2015-12-23 | University Of Washington | Methods for controlling stem cell potential and for gene editing in stem cells |
JP2017518082A (ja) | 2014-06-17 | 2017-07-06 | ポセイダ セラピューティクス, インコーポレイテッド | ゲノム中の特異的遺伝子座にタンパク質を指向させるための方法およびその使用 |
EP3158072B1 (en) | 2014-06-20 | 2021-01-13 | Cellectis | Potatoes with reduced granule-bound starch synthase |
SG10201803444YA (en) | 2014-06-23 | 2018-06-28 | Regeneron Pharma | Nuclease-mediated dna assembly |
EP3919621A1 (en) | 2014-06-23 | 2021-12-08 | The General Hospital Corporation | Genomewide unbiased identification of dsbs evaluated by sequencing (guide-seq) |
WO2015200555A2 (en) | 2014-06-25 | 2015-12-30 | Caribou Biosciences, Inc. | Rna modification to engineer cas9 activity |
GB201411344D0 (en) | 2014-06-26 | 2014-08-13 | Univ Leicester | Cloning |
RU2771532C2 (ru) | 2014-06-26 | 2022-05-05 | Регенерон Фармасьютикалз, Инк. | Способы и композиции для нацеленных генетических модификаций и способы их применения |
EP3162328B1 (en) | 2014-06-30 | 2022-01-19 | Kao Corporation | Adhesive sheet for cooling |
JP6090535B2 (ja) | 2014-06-30 | 2017-03-08 | 日産自動車株式会社 | 内燃機関 |
US20180187172A1 (en) | 2014-07-01 | 2018-07-05 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Regulated gene expression from viral vectors |
CN114344275A (zh) | 2014-07-02 | 2022-04-15 | 川斯勒佰尔公司 | 信使rna的包封 |
WO2016007604A1 (en) | 2014-07-09 | 2016-01-14 | Gen9, Inc. | Compositions and methods for site-directed dna nicking and cleaving |
EP2966170A1 (en) | 2014-07-10 | 2016-01-13 | Heinrich-Pette-Institut Leibniz-Institut für experimentelle Virologie-Stiftung bürgerlichen Rechts - | HBV inactivation |
US10676754B2 (en) | 2014-07-11 | 2020-06-09 | E I Du Pont De Nemours And Company | Compositions and methods for producing plants resistant to glyphosate herbicide |
BR122023024818A2 (pt) | 2014-07-11 | 2023-12-26 | Pioneer Hi-Bred International, Inc. | Rna guia, polinucleotídeo e complexo de ribonucleoproteínas |
US11254933B2 (en) | 2014-07-14 | 2022-02-22 | The Regents Of The University Of California | CRISPR/Cas transcriptional modulation |
CN104109687A (zh) | 2014-07-14 | 2014-10-22 | 四川大学 | 运动发酵单胞菌CRISPR-Cas9系统的构建与应用 |
MX2017000646A (es) | 2014-07-15 | 2017-04-27 | Juno Therapeutics Inc | Celulas geneticamente modificadas para terapia celular adoptiva. |
US9944933B2 (en) | 2014-07-17 | 2018-04-17 | Georgia Tech Research Corporation | Aptamer-guided gene targeting |
EP3193944B1 (en) | 2014-07-17 | 2021-04-07 | University of Pittsburgh - Of the Commonwealth System of Higher Education | Methods of treating cells containing fusion genes |
US10975406B2 (en) | 2014-07-18 | 2021-04-13 | Massachusetts Institute Of Technology | Directed endonucleases for repeatable nucleic acid cleavage |
US20160053304A1 (en) | 2014-07-18 | 2016-02-25 | Whitehead Institute For Biomedical Research | Methods Of Depleting Target Sequences Using CRISPR |
US20160053272A1 (en) | 2014-07-18 | 2016-02-25 | Whitehead Institute For Biomedical Research | Methods Of Modifying A Sequence Using CRISPR |
RU2751660C2 (ru) | 2014-07-21 | 2021-07-15 | Новартис Аг | Лечение злокачественного новообразования с использованием гуманизированного химерного антигенного рецептора против всма |
WO2016014409A1 (en) | 2014-07-21 | 2016-01-28 | Illumina, Inc. | Polynucleotide enrichment using crispr-cas systems |
US10210987B2 (en) | 2014-07-22 | 2019-02-19 | Panasonic Intellectual Property Management Co., Ltd. | Composite magnetic material, coil component using same, and composite magnetic material manufacturing method |
EP3172315B1 (en) | 2014-07-24 | 2020-09-30 | DSM IP Assets B.V. | Phage resistant lactic acid bacteria |
EP3172316A2 (en) | 2014-07-25 | 2017-05-31 | Boehringer Ingelheim International GmbH | Enhanced reprogramming to ips cells |
WO2016014794A1 (en) | 2014-07-25 | 2016-01-28 | Sangamo Biosciences, Inc. | Methods and compositions for modulating nuclease-mediated genome engineering in hematopoietic stem cells |
WO2016014837A1 (en) | 2014-07-25 | 2016-01-28 | Sangamo Biosciences, Inc. | Gene editing for hiv gene therapy |
WO2016016119A1 (en) | 2014-07-26 | 2016-02-04 | Consiglio Nazionale Delle Ricerche | Compositions and methods for treatment of muscular dystrophy |
US9616090B2 (en) | 2014-07-30 | 2017-04-11 | Sangamo Biosciences, Inc. | Gene correction of SCID-related genes in hematopoietic stem and progenitor cells |
US10077453B2 (en) | 2014-07-30 | 2018-09-18 | President And Fellows Of Harvard College | CAS9 proteins including ligand-dependent inteins |
FR3024464A1 (fr) | 2014-07-30 | 2016-02-05 | Centre Nat Rech Scient | Ciblage de vecteurs integratifs non-viraux dans les sequences d'adn nucleolaires chez les eucaryotes |
US9850521B2 (en) | 2014-08-01 | 2017-12-26 | Agilent Technologies, Inc. | In vitro assay buffer for Cas9 |
EP2982758A1 (en) | 2014-08-04 | 2016-02-10 | Centre Hospitalier Universitaire Vaudois (CHUV) | Genome editing for the treatment of huntington's disease |
US20160076093A1 (en) | 2014-08-04 | 2016-03-17 | University Of Washington | Multiplex homology-directed repair |
ES2865275T3 (es) | 2014-08-06 | 2021-10-15 | College Of Medicine Pochon Cha Univ Industry Academic Cooperation Foundation | Células inmunocompatibles creadas por edición mediada por nucleasas, de genes que codifican HLA |
CN106922154B (zh) | 2014-08-06 | 2022-01-07 | 基因工具股份有限公司 | 使用空肠弯曲杆菌crispr/cas系统衍生的rna引导的工程化核酸酶的基因编辑 |
WO2016022866A1 (en) | 2014-08-07 | 2016-02-11 | Agilent Technologies, Inc. | Cis-blocked guide rna |
WO2016022931A1 (en) | 2014-08-07 | 2016-02-11 | The Rockefeller University | Compositions and methods for transcription-based crispr-cas dna editing |
CA2959130A1 (en) | 2014-08-11 | 2016-02-18 | The Board Of Regents Of The University Of Texas System | Prevention of muscular dystrophy by crispr/cas9-mediated gene editing |
US10513711B2 (en) | 2014-08-13 | 2019-12-24 | Dupont Us Holding, Llc | Genetic targeting in non-conventional yeast using an RNA-guided endonuclease |
CN104178461B (zh) | 2014-08-14 | 2017-02-01 | 北京蛋白质组研究中心 | 携带cas9的重组腺病毒及其应用 |
WO2016025759A1 (en) | 2014-08-14 | 2016-02-18 | Shen Yuelei | Dna knock-in system |
US9879270B2 (en) | 2014-08-15 | 2018-01-30 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Constructs and methods for genome editing and genetic engineering of fungi and protists |
DK3180426T3 (da) | 2014-08-17 | 2020-03-30 | Broad Inst Inc | Genomredigering ved anvendelse af cas9-nickaser |
WO2016028887A1 (en) | 2014-08-19 | 2016-02-25 | Pacific Biosciences Of California, Inc. | Compositions and methods for enrichment of nucleic acids |
CN107075546B (zh) | 2014-08-19 | 2021-08-31 | 哈佛学院董事及会员团体 | 用于对核酸探测并作图的rna-引导的系统 |
US20190045758A1 (en) | 2014-08-20 | 2019-02-14 | Shanghai Institutes For Biological Sciences, Chinese Academy Of Sciences | Biomarker and Therapeutic Target for Triple Negative Breast Cancer |
TW201614073A (en) | 2014-08-25 | 2016-04-16 | Geneweave Biosciences Inc | Non-replicative transduction particles and transduction particle-based reporter systems |
WO2016033230A1 (en) | 2014-08-26 | 2016-03-03 | The Regents Of The University Of California | Hypersensitive aba receptors |
EP3186376B1 (en) | 2014-08-27 | 2019-03-20 | Caribou Biosciences, Inc. | Methods for increasing cas9-mediated engineering efficiency |
EP3186375A4 (en) | 2014-08-28 | 2019-03-13 | North Carolina State University | NEW CAS9 PROTEINS AND GUIDING ELEMENTS FOR DNA TARGETING AND THE GENOME EDITION |
WO2016036754A1 (en) | 2014-09-02 | 2016-03-10 | The Regents Of The University Of California | Methods and compositions for rna-directed target dna modification |
WO2016035044A1 (en) | 2014-09-05 | 2016-03-10 | Vilnius University | Programmable rna shredding by the type iii-a crispr-cas system of streptococcus thermophilus |
WO2016037157A2 (en) | 2014-09-05 | 2016-03-10 | The Johns Hopkins University | Targeting capn9/capns2 activity as a therapeutic strategy for the treatment of myofibroblast differentiation and associated pathologies |
WO2016040594A1 (en) | 2014-09-10 | 2016-03-17 | The Regents Of The University Of California | Reconstruction of ancestral cells by enzymatic recording |
RU2017112324A (ru) | 2014-09-12 | 2018-10-15 | Пайонир Хай-Бред Интернэшнл, Инк. | Создание сайтов сайт-специфической интеграции для сложных локусов признаков в кукурузе и сое, а также способы применения |
HUE055583T2 (hu) | 2014-09-16 | 2021-12-28 | Sangamo Therapeutics Inc | Eljárások és készítmények nukleáz által közvetített genommódosításhoz és -javításhoz hematopoetikus õssejtekben |
PT3194401T (pt) | 2014-09-16 | 2020-12-23 | Gilead Sciences Inc | Formas sólidas de modulador de recetor tipo toll |
WO2016049251A1 (en) | 2014-09-24 | 2016-03-31 | The Broad Institute Inc. | Delivery, use and therapeutic applications of the crispr-cas systems and compositions for modeling mutations in leukocytes |
WO2016049024A2 (en) | 2014-09-24 | 2016-03-31 | The Broad Institute Inc. | Delivery, use and therapeutic applications of the crispr-cas systems and compositions for modeling competition of multiple cancer mutations in vivo |
WO2016049163A2 (en) | 2014-09-24 | 2016-03-31 | The Broad Institute Inc. | Use and production of chd8+/- transgenic animals with behavioral phenotypes characteristic of autism spectrum disorder |
PT3198018T (pt) | 2014-09-24 | 2021-02-24 | Hope City | Variantes dos vetores de vírus adenoassociados para edição do genoma de alta eficácia e métodos da mesma |
WO2016046635A1 (en) | 2014-09-25 | 2016-03-31 | Institut Pasteur | Methods for characterizing human papillomavirus associated cervical lesions |
WO2016049258A2 (en) | 2014-09-25 | 2016-03-31 | The Broad Institute Inc. | Functional screening with optimized functional crispr-cas systems |
WO2016054225A1 (en) | 2014-09-30 | 2016-04-07 | Stc.Unm | Plasmid delivery in the treatment of cancer and other disease states |
EP3845655A1 (en) | 2014-10-01 | 2021-07-07 | The General Hospital Corporation | Methods for increasing efficiency of nuclease-induced homology-directed repair |
US9943612B2 (en) | 2014-10-09 | 2018-04-17 | Seattle Children's Hospital | Long poly(A) plasmids and methods for introduction of long poly(A) sequences into the plasmid |
CN113930455A (zh) | 2014-10-09 | 2022-01-14 | 生命技术公司 | Crispr寡核苷酸和基因剪辑 |
AU2015330699B2 (en) | 2014-10-10 | 2021-12-02 | Editas Medicine, Inc. | Compositions and methods for promoting homology directed repair |
WO2016057061A2 (en) | 2014-10-10 | 2016-04-14 | Massachusetts Eye And Ear Infirmary | Efficient delivery of therapeutic molecules in vitro and in vivo |
WO2016061073A1 (en) | 2014-10-14 | 2016-04-21 | Memorial Sloan-Kettering Cancer Center | Composition and method for in vivo engineering of chromosomal rearrangements |
BR112017007770A2 (pt) | 2014-10-15 | 2018-01-16 | Regeneron Pharma | cultura in vitro, população de hipscs, método para modificar um locus-alvo genômico, e, hipsc. |
CN104342457A (zh) | 2014-10-17 | 2015-02-11 | 杭州师范大学 | 一种将外源基因定点整合到靶标基因的方法 |
US11174506B2 (en) | 2014-10-17 | 2021-11-16 | Howard Hughes Medical Institute | Genomic probes |
CN107027313B (zh) | 2014-10-17 | 2021-09-07 | 宾州研究基金会 | 用于多元rna引导的基因组编辑和其它rna技术的方法和组合物 |
CA2965137A1 (en) | 2014-10-20 | 2016-04-28 | Envirologix, Inc. | Compositions and methods for detecting an rna virus |
US20170306306A1 (en) | 2014-10-24 | 2017-10-26 | Life Technologies Corporation | Compositions and Methods for Enhancing Homologous Recombination |
WO2016069591A2 (en) | 2014-10-27 | 2016-05-06 | The Broad Institute Inc. | Compositions, methods and use of synthetic lethal screening |
CN107075491B (zh) | 2014-10-28 | 2021-07-06 | 谷万达公司 | 用于稳定反式剪接的内含肽修饰的蛋白酶的方法和组合物 |
US10258697B2 (en) | 2014-10-29 | 2019-04-16 | Massachusetts Eye And Ear Infirmary | Efficient delivery of therapeutic molecules in vitro and in vivo |
MA40880A (fr) | 2014-10-30 | 2017-09-05 | Temple Univ Of The Commonwealth | Éradication guidée par l'arn du virus jc humain et d'autres polyomavirus |
EP3212789B1 (en) | 2014-10-31 | 2020-04-22 | Massachusetts Institute of Technology | Massively parallel combinatorial genetics for crispr |
US9816080B2 (en) | 2014-10-31 | 2017-11-14 | President And Fellows Of Harvard College | Delivery of CAS9 via ARRDC1-mediated microvesicles (ARMMs) |
JP6879910B2 (ja) | 2014-10-31 | 2021-06-02 | ザ トラスティーズ オブ ザ ユニバーシティ オブ ペンシルバニア | Cart細胞における遺伝子発現の改変およびその使用 |
CN104404036B (zh) | 2014-11-03 | 2017-12-01 | 赛业(苏州)生物科技有限公司 | 基于CRISPR/Cas9技术的条件性基因敲除方法 |
WO2016072936A1 (en) | 2014-11-03 | 2016-05-12 | Nanyang Technological University | Novel recombinant expression systems |
CN104504304B (zh) | 2014-11-03 | 2017-08-25 | 深圳先进技术研究院 | 一种成簇的规律间隔的短回文重复序列识别方法及装置 |
WO2016072399A1 (ja) | 2014-11-04 | 2016-05-12 | 国立大学法人神戸大学 | 脱塩基反応により標的化したdna配列に特異的に変異を導入する、ゲノム配列の改変方法、並びにそれに用いる分子複合体 |
WO2016073559A1 (en) | 2014-11-05 | 2016-05-12 | The Regents Of The University Of California | Methods for autocatalytic genome editing and neutralizing autocatalytic genome editing |
EP3597740B1 (en) | 2014-11-06 | 2022-03-23 | DuPont US Holding, LLC | Peptide-mediated delivery of rna-guided endonuclease into cells |
WO2016073990A2 (en) | 2014-11-07 | 2016-05-12 | Editas Medicine, Inc. | Methods for improving crispr/cas-mediated genome-editing |
CA2967351A1 (en) | 2014-11-11 | 2016-05-19 | Illumina, Inc. | Polynucleotide amplification using crispr-cas systems |
WO2016077273A1 (en) | 2014-11-11 | 2016-05-19 | Q Therapeutics, Inc. | Engineering mesenchymal stem cells using homologous recombination |
WO2016076672A1 (ko) | 2014-11-14 | 2016-05-19 | 기초과학연구원 | 유전체에서 유전자 가위의 비표적 위치를 검출하는 방법 |
ES2712303T3 (es) | 2014-11-15 | 2019-05-10 | Zumutor Biologics Inc | Dominio de unión a ADN del sistema CRISPR para la producción de proteínas no fucosiladas y parcialmente fucosiladas |
JP6190995B2 (ja) | 2014-11-17 | 2017-09-06 | 国立大学法人 東京医科歯科大学 | 簡便で高効率の遺伝子改変非ヒト哺乳動物の作製方法 |
US10858662B2 (en) | 2014-11-19 | 2020-12-08 | Institute For Basic Science | Genome editing with split Cas9 expressed from two vectors |
WO2016081924A1 (en) | 2014-11-20 | 2016-05-26 | Duke University | Compositions, systems and methods for cell therapy |
CN113444747A (zh) | 2014-11-21 | 2021-09-28 | 瑞泽恩制药公司 | 使用成对向导rna进行靶向遗传修饰的方法和组合物 |
US10227661B2 (en) | 2014-11-21 | 2019-03-12 | GeneWeave Biosciences, Inc. | Sequence-specific detection and phenotype determination |
WO2016086177A2 (en) | 2014-11-25 | 2016-06-02 | Drexel University | Compositions and methods for hiv quasi-species excision from hiv-1-infected patients |
CN107208070B (zh) | 2014-11-26 | 2021-09-07 | 技术创新动力基金(以色列)有限合伙公司 | 细菌基因的靶向消除 |
GB201421096D0 (en) | 2014-11-27 | 2015-01-14 | Imp Innovations Ltd | Genome editing methods |
CN105695485B (zh) | 2014-11-27 | 2020-02-21 | 中国科学院上海生命科学研究院 | 一种用于丝状真菌Crispr-Cas系统的Cas9编码基因及其应用 |
WO2016082135A1 (zh) | 2014-11-27 | 2016-06-02 | 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所 | 一种利用定点切割系统对猪h11位点定点插入的方法 |
JP2017535296A (ja) | 2014-11-27 | 2017-11-30 | ダンツィガー イノベイションズ リミテッドDanziger Innovations Ltd. | ゲノム編集のための核酸構築物 |
WO2016089866A1 (en) | 2014-12-01 | 2016-06-09 | President And Fellows Of Harvard College | Rna-guided systems for in vivo gene editing |
WO2016089883A1 (en) | 2014-12-01 | 2016-06-09 | Novartis Ag | Compositions and methods for diagnosis and treatment of prostate cancer |
US10900034B2 (en) | 2014-12-03 | 2021-01-26 | Agilent Technologies, Inc. | Guide RNA with chemical modifications |
CN104450774A (zh) | 2014-12-04 | 2015-03-25 | 中国农业科学院作物科学研究所 | 一种大豆CRISPR/Cas9体系的构建及其在大豆基因修饰中的应用 |
WO2016090385A1 (en) | 2014-12-05 | 2016-06-09 | Applied Stemcell, Inc. | Site-directed crispr/recombinase compositions and methods of integrating transgenes |
CN104531704B (zh) | 2014-12-09 | 2019-05-21 | 中国农业大学 | 利用CRISPR-Cas9系统敲除动物FGF5基因的方法 |
CN104531705A (zh) | 2014-12-09 | 2015-04-22 | 中国农业大学 | 利用CRISPR-Cas9系统敲除动物myostatin基因的方法 |
KR102656470B1 (ko) | 2014-12-10 | 2024-04-09 | 리전츠 오브 더 유니버스티 오브 미네소타 | 질환을 치료하기 위한 유전적으로 변형된 세포, 조직 및 장기 |
CN104480144B (zh) | 2014-12-12 | 2017-04-12 | 武汉大学 | 用于艾滋病基因治疗的CRISPR/Cas9重组慢病毒载体及其慢病毒 |
WO2016094880A1 (en) | 2014-12-12 | 2016-06-16 | The Broad Institute Inc. | Delivery, use and therapeutic applications of crispr systems and compositions for genome editing as to hematopoietic stem cells (hscs) |
WO2016094874A1 (en) | 2014-12-12 | 2016-06-16 | The Broad Institute Inc. | Escorted and functionalized guides for crispr-cas systems |
EP3230445B1 (en) | 2014-12-12 | 2024-01-24 | Tod M. Woolf | Compositions and methods for editing nucleic acids in cells utilizing oligonucleotides |
EP3230460B2 (en) | 2014-12-12 | 2023-11-29 | James Zhu | Methods and compositions for selectively eliminating cells of interest |
EP3985115A1 (en) | 2014-12-12 | 2022-04-20 | The Broad Institute, Inc. | Protected guide rnas (pgrnas) |
WO2016094872A1 (en) | 2014-12-12 | 2016-06-16 | The Broad Institute Inc. | Dead guides for crispr transcription factors |
CN107667171A (zh) | 2014-12-16 | 2018-02-06 | 丹尼斯科美国公司 | 真菌基因组修饰系统及使用方法 |
EA038595B1 (ru) | 2014-12-16 | 2021-09-21 | Си3Джей ТЕРАПЬЮТИКС, ИНК. | Композиции и способы для конструирования вирусного генома in vitro |
WO2016099887A1 (en) | 2014-12-17 | 2016-06-23 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | Compositions and methods for efficient gene editing in e. coli using guide rna/cas endonuclease systems in combination with circular polynucleotide modification templates |
WO2016097231A2 (en) | 2014-12-17 | 2016-06-23 | Cellectis | INHIBITORY CHIMERIC ANTIGEN RECEPTOR (iCAR OR N-CAR) EXPRESSING NON-T CELL TRANSDUCTION DOMAIN |
AU2015367378A1 (en) | 2014-12-17 | 2017-06-15 | Proqr Therapeutics Ii B.V. | Targeted RNA editing |
WO2016097751A1 (en) | 2014-12-18 | 2016-06-23 | The University Of Bath | Method of cas9 mediated genome engineering |
CN112877327A (zh) | 2014-12-18 | 2021-06-01 | 综合基因技术公司 | 基于crispr的组合物和使用方法 |
CN104745626B (zh) | 2014-12-19 | 2018-05-01 | 中国航天员科研训练中心 | 一种条件性基因敲除动物模型的快速构建方法及应用 |
EP3234192B1 (en) | 2014-12-19 | 2021-07-14 | The Broad Institute, Inc. | Unbiased identification of double-strand breaks and genomic rearrangement by genome-wide insert capture sequencing |
JP6947638B2 (ja) | 2014-12-20 | 2021-10-13 | アーク バイオ, エルエルシー | Crispr/cas系タンパク質を使用する核酸の標的化枯渇、富化および分割のための組成物および方法 |
CN104560864B (zh) | 2014-12-22 | 2017-08-11 | 中国科学院微生物研究所 | 利用CRISPR‑Cas9系统构建的敲除IFN‑β基因的293T细胞系 |
US10190106B2 (en) | 2014-12-22 | 2019-01-29 | Univesity Of Massachusetts | Cas9-DNA targeting unit chimeras |
US11053271B2 (en) | 2014-12-23 | 2021-07-06 | The Regents Of The University Of California | Methods and compositions for nucleic acid integration |
WO2016106236A1 (en) | 2014-12-23 | 2016-06-30 | The Broad Institute Inc. | Rna-targeting system |
WO2016106244A1 (en) | 2014-12-24 | 2016-06-30 | The Broad Institute Inc. | Crispr having or associated with destabilization domains |
CN104651398A (zh) | 2014-12-24 | 2015-05-27 | 杭州师范大学 | 利用CRISPR-Cas9特异敲出microRNA基因家族的方法 |
EP3237017A4 (en) | 2014-12-24 | 2018-08-01 | Dana-Farber Cancer Institute, Inc. | Systems and methods for genome modification and regulation |
AU2015101792A4 (en) | 2014-12-24 | 2016-01-28 | Massachusetts Institute Of Technology | Engineering of systems, methods and optimized enzyme and guide scaffolds for sequence manipulation |
US10863730B2 (en) | 2014-12-26 | 2020-12-15 | Riken | Gene knockout method |
WO2016109255A1 (en) | 2014-12-30 | 2016-07-07 | University Of South Florida | Methods and compositions for cloning into large vectors |
WO2016108926A1 (en) | 2014-12-30 | 2016-07-07 | The Broad Institute Inc. | Crispr mediated in vivo modeling and genetic screening of tumor growth and metastasis |
CN104498493B (zh) | 2014-12-30 | 2017-12-26 | 武汉大学 | CRISPR/Cas9特异性敲除乙型肝炎病毒的方法以及用于特异性靶向HBV DNA的gRNA |
CN104651399B (zh) | 2014-12-31 | 2018-11-16 | 广西大学 | 一种利用CRISPR/Cas系统在猪胚胎细胞中实现基因敲除的方法 |
SG10201906070XA (en) | 2014-12-31 | 2019-08-27 | Synthetic Genomics Inc | Compositions and methods for high efficiency in vivo genome editing |
DK3242949T3 (da) | 2015-01-06 | 2022-01-24 | Dsm Ip Assets Bv | Crispr-cas-system til en gærværtscelle |
EP3498843B1 (en) | 2015-01-06 | 2021-06-23 | Industry-Academic Cooperation Foundation, Yonsei University | Endonuclease targeting blood coagulation factor viii gene and composition for treating hemophilia comprising same |
WO2016110511A1 (en) | 2015-01-06 | 2016-07-14 | Dsm Ip Assets B.V. | A crispr-cas system for a lipolytic yeast host cell |
CN104651392B (zh) | 2015-01-06 | 2018-07-31 | 华南农业大学 | 一种利用CRISPR/Cas9系统定点突变P/TMS12-1获得温敏不育系的方法 |
EP3242950B1 (en) | 2015-01-06 | 2021-10-06 | DSM IP Assets B.V. | A crispr-cas system for a filamentous fungal host cell |
CN104593422A (zh) | 2015-01-08 | 2015-05-06 | 中国农业大学 | 一种抗蓝耳病克隆猪的制备方法 |
US20180155708A1 (en) | 2015-01-08 | 2018-06-07 | President And Fellows Of Harvard College | Split Cas9 Proteins |
CN113388670B (zh) | 2015-01-09 | 2024-02-02 | 生物辐射实验室股份有限公司 | 检测基因组编辑 |
US11208638B2 (en) | 2015-01-12 | 2021-12-28 | The Regents Of The University Of California | Heterodimeric Cas9 and methods of use thereof |
WO2016115179A1 (en) | 2015-01-12 | 2016-07-21 | Massachusetts Institute Of Technology | Gene editing through microfluidic delivery |
WO2016112963A1 (en) | 2015-01-13 | 2016-07-21 | Riboxx Gmbh | Delivery of biomolecules into cells |
EP3244909B1 (en) | 2015-01-14 | 2019-10-09 | Université d'Aix-Marseille | Proteasome inhibitors for treating a disorder related to an accumulation of non-degraded abnormal protein or a cancer |
MA41349A (fr) | 2015-01-14 | 2017-11-21 | Univ Temple | Éradication de l'herpès simplex de type i et d'autres virus de l'herpès associés guidée par arn |
CN107429263A (zh) | 2015-01-15 | 2017-12-01 | 斯坦福大学托管董事会 | 调控基因组编辑的方法 |
CN104611370A (zh) | 2015-01-16 | 2015-05-13 | 深圳市科晖瑞生物医药有限公司 | 一种剔除β2-微球蛋白基因片段的方法 |
US20180073035A1 (en) | 2015-01-19 | 2018-03-15 | Institute Of Genetics And Developmental Biology, Chinese Academy Of Sciences | A method for precise modification of plant via transient gene expression |
CN104725626B (zh) | 2015-01-22 | 2016-06-29 | 漳州亚邦化学有限公司 | 一种适用于人造石英石的不饱和树脂的制备方法 |
CN105821072A (zh) | 2015-01-23 | 2016-08-03 | 深圳华大基因研究院 | 用于DNA组装的CRISPR-Cas9系统及DNA组装方法 |
WO2016123071A1 (en) | 2015-01-26 | 2016-08-04 | Cold Spring Harbor Laboratory | Methods of identifying essential protein domains |
CN104561095B (zh) | 2015-01-27 | 2017-08-22 | 深圳市国创纳米抗体技术有限公司 | 一种能够生产人神经生长因子的转基因小鼠的制备方法 |
US10059940B2 (en) | 2015-01-27 | 2018-08-28 | Minghong Zhong | Chemically ligated RNAs for CRISPR/Cas9-lgRNA complexes as antiviral therapeutic agents |
FI3250691T3 (fi) | 2015-01-28 | 2023-08-24 | Caribou Biosciences Inc | Crispr hybridi dna/rna polynukleotidit ja käyttömenetelmät |
WO2016123243A1 (en) | 2015-01-28 | 2016-08-04 | The Regents Of The University Of California | Methods and compositions for labeling a single-stranded target nucleic acid |
AU2016211118B2 (en) | 2015-01-29 | 2022-03-31 | Centre National De La Recherche Scientifique | Method for inducing targeted meiotic recombinations |
JP6886404B2 (ja) | 2015-01-30 | 2021-06-16 | ザ リージェンツ オブ ザ ユニバーシティ オブ カリフォルニアThe Regents Of The University Of California | 初代造血細胞におけるタンパク質送達 |
RS61924B1 (sr) | 2015-02-02 | 2021-06-30 | Meiragtx Uk Ii Ltd | Regulacija genske ekspresije putem aptamerom posredovane modulacije alternativnog splajsovanja |
CN104593418A (zh) | 2015-02-06 | 2015-05-06 | 中国医学科学院医学实验动物研究所 | 一种人源化大鼠药物评价动物模型建立的方法 |
WO2016130600A2 (en) | 2015-02-09 | 2016-08-18 | Duke University | Compositions and methods for epigenome editing |
KR101584933B1 (ko) | 2015-02-10 | 2016-01-13 | 성균관대학교산학협력단 | 항생제 내성 억제용 재조합 벡터 및 이의 용도 |
WO2016130697A1 (en) | 2015-02-11 | 2016-08-18 | Memorial Sloan Kettering Cancer Center | Methods and kits for generating vectors that co-express multiple target molecules |
CN104726494B (zh) | 2015-02-12 | 2018-10-23 | 中国人民解放军第二军医大学 | CRISPR-Cas9技术构建染色体易位干细胞及动物模型的方法 |
CN104928321B (zh) | 2015-02-12 | 2018-06-01 | 中国科学院西北高原生物研究所 | 一种由Crispr/Cas9诱导的鳞片缺失斑马鱼模式及建立方法 |
WO2016131009A1 (en) | 2015-02-13 | 2016-08-18 | University Of Massachusetts | Compositions and methods for transient delivery of nucleases |
US20160244784A1 (en) | 2015-02-15 | 2016-08-25 | Massachusetts Institute Of Technology | Population-Hastened Assembly Genetic Engineering |
WO2016132122A1 (en) | 2015-02-17 | 2016-08-25 | University Of Edinburgh | Assay construct |
US20180064073A1 (en) | 2015-02-19 | 2018-03-08 | Tokushima University | Method for Transferring Cas9 mRNA Into Mammalian Fertilized Egg by Electroporation |
CN107532182A (zh) | 2015-02-23 | 2018-01-02 | 克里斯珀医疗股份公司 | 治疗血红蛋白病的材料和方法 |
EP3262173A2 (en) | 2015-02-23 | 2018-01-03 | Crispr Therapeutics AG | Materials and methods for treatment of human genetic diseases including hemoglobinopathies |
WO2016137949A1 (en) | 2015-02-23 | 2016-09-01 | Voyager Therapeutics, Inc. | Regulatable expression using adeno-associated virus (aav) |
KR20160103953A (ko) | 2015-02-25 | 2016-09-02 | 연세대학교 산학협력단 | Crispr 시스템을 이용한 다중 위치 염기서열의 동시 포획 방법 |
CA2985991A1 (en) | 2015-02-25 | 2016-09-01 | Andrew Mark CIGAN | Composition and methods for regulated expression of a guide rna/cas endonuclease complex |
WO2016135507A1 (en) | 2015-02-27 | 2016-09-01 | University Of Edinburgh | Nucleic acid editing systems |
CN104805099B (zh) | 2015-03-02 | 2018-04-13 | 中国人民解放军第二军医大学 | 一种安全编码Cas9蛋白的核酸分子及其表达载体 |
CN107532161A (zh) | 2015-03-03 | 2018-01-02 | 通用医疗公司 | 具有改变的PAM特异性的工程化CRISPR‑Cas9核酸酶 |
CN104673816A (zh) | 2015-03-05 | 2015-06-03 | 广东医学院 | 一种pCr-NHEJ载体及其构建方法及其用于细菌基因定点敲除的应用 |
CN104651401B (zh) | 2015-03-05 | 2019-03-08 | 东华大学 | 一种mir-505双等位基因敲除的方法 |
EP3268044A2 (en) | 2015-03-11 | 2018-01-17 | The Broad Institute Inc. | Prmt5 inhibitors for the treatment of cancer with reduced mtap activty |
GB201504223D0 (en) | 2015-03-12 | 2015-04-29 | Genome Res Ltd | Biallelic genetic modification |
AU2016228599A1 (en) | 2015-03-12 | 2017-08-17 | Institute Of Genetics And Developmental Biology, Chinese Academy Of Sciences | Method for increasing ability of plant to resist invading DNA virus |
CA3091771A1 (en) | 2015-03-13 | 2016-09-22 | The Jackson Laboratory | A three-component crispr/cas complex system and uses thereof |
CN106032540B (zh) | 2015-03-16 | 2019-10-25 | 中国科学院上海生命科学研究院 | CRISPR/Cas9核酸内切酶体系的腺相关病毒载体构建及其用途 |
UA125246C2 (uk) | 2015-03-16 | 2022-02-09 | Інстітьют Оф Генетікс Енд Дівелопментл Байолоджі, Чайніз Екадемі Оф Сайнсис | Спосіб здійснення сайт-спрямованої модифікації рослинних геномів із застосуванням неуспадковуваних матеріалів |
WO2016149484A2 (en) | 2015-03-17 | 2016-09-22 | Temple University Of The Commonwealth System Of Higher Education | Compositions and methods for specific reactivation of hiv latent reservoir |
US10066256B2 (en) | 2015-03-17 | 2018-09-04 | Bio-Rad Laboratories, Inc. | Detection of genome editing |
US20180163196A1 (en) | 2015-03-20 | 2018-06-14 | Danmarks Tekniske Universitet | Crispr/cas9 based engineering of actinomycetal genomes |
MA41382A (fr) | 2015-03-20 | 2017-11-28 | Univ Temple | Édition génique basée sur le système crispr/endonucléase à induction par tat |
CN104726449A (zh) | 2015-03-23 | 2015-06-24 | 国家纳米科学中心 | 一种用于预防和/或治疗HIV的CRISPR-Cas9系统及其制备方法和用途 |
CN106148416B (zh) | 2015-03-24 | 2019-12-17 | 华东师范大学 | Cyp基因敲除大鼠的培育方法及其肝微粒体的制备方法 |
EP3274454B1 (en) | 2015-03-25 | 2021-08-25 | Editas Medicine, Inc. | Crispr/cas-related methods, compositions and components |
EP3274453B1 (en) | 2015-03-26 | 2021-01-27 | Editas Medicine, Inc. | Crispr/cas-mediated gene conversion |
CA2981509A1 (en) | 2015-03-30 | 2016-10-06 | The Board Of Regents Of The Nevada System Of Higher Educ. On Behalf Of The University Of Nevada, La | Compositions comprising talens and methods of treating hiv |
JP2018513681A (ja) | 2015-03-31 | 2018-05-31 | エクセリゲン サイエンティフィック, インコーポレイテッドExeligen Scientific, Inc. | 細胞または生物のゲノムへのDNA配列の標的化組み込みのためのCas9レトロウイルスインテグラーゼおよびCas9レコンビナーゼ系 |
EP3748004A1 (en) | 2015-04-01 | 2020-12-09 | Editas Medicine, Inc. | Crispr/cas-related methods and compositions for treating duchenne muscular dystrophy and becker muscular dystrophy |
CA3000187A1 (en) | 2015-04-02 | 2016-10-06 | Agenovir Corporation | Gene delivery methods and compositions |
US20170166928A1 (en) | 2015-04-03 | 2017-06-15 | Whitehead Institute For Biomedical Research | Compositions And Methods For Genetically Modifying Yeast |
US20180094243A1 (en) | 2015-04-03 | 2018-04-05 | Dana-Farber Cancer Institute, Inc. | Composition and methods of genome editing of b-cells |
CN106434737A (zh) | 2015-04-03 | 2017-02-22 | 内蒙古中科正标生物科技有限责任公司 | 基于CRISPR/Cas9技术的单子叶植物基因敲除载体及其应用 |
EP3280803B1 (en) | 2015-04-06 | 2021-05-26 | The Board of Trustees of the Leland Stanford Junior University | Chemically modified guide rnas for crispr/cas-mediated gene regulation |
US11214779B2 (en) | 2015-04-08 | 2022-01-04 | University of Pittsburgh—of the Commonwealth System of Higher Education | Activatable CRISPR/CAS9 for spatial and temporal control of genome editing |
JP6892642B2 (ja) | 2015-04-13 | 2021-06-23 | 国立大学法人 東京大学 | 光依存的に又は薬物存在下でヌクレアーゼ活性若しくはニッカーゼ活性を示す、又は標的遺伝子の発現を抑制若しくは活性化するポリペプチドのセット |
US10155938B2 (en) | 2015-04-14 | 2018-12-18 | City Of Hope | Coexpression of CAS9 and TREX2 for targeted mutagenesis |
GB201506509D0 (en) | 2015-04-16 | 2015-06-03 | Univ Wageningen | Nuclease-mediated genome editing |
US11299729B2 (en) | 2015-04-17 | 2022-04-12 | President And Fellows Of Harvard College | Vector-based mutagenesis system |
US10738290B2 (en) | 2015-04-21 | 2020-08-11 | Novartis Ag | RNA-guided gene editing system and uses thereof |
CN104805118A (zh) | 2015-04-22 | 2015-07-29 | 扬州大学 | 一种苏禽黄鸡胚胎干细胞特定基因进行靶向敲除方法 |
CN104762321A (zh) | 2015-04-22 | 2015-07-08 | 东北林业大学 | 基于CRISPR/Cas9系统靶向敲除KHV基因的敲除载体构建方法及其crRNA原件 |
EP3286571B1 (en) | 2015-04-24 | 2021-08-18 | Editas Medicine, Inc. | Evaluation of cas9 molecule/guide rna molecule complexes |
CN107614012A (zh) | 2015-04-24 | 2018-01-19 | 加利福尼亚大学董事会 | 使用工程化的细胞检测、监测或治疗疾病或病况的系统及制备和使用它们的方法 |
US11268158B2 (en) | 2015-04-24 | 2022-03-08 | St. Jude Children's Research Hospital, Inc. | Assay for safety assessment of therapeutic genetic manipulations, gene therapy vectors and compounds |
US11104897B2 (en) | 2015-04-27 | 2021-08-31 | Genethon | Compositions and methods for the treatment of nucleotide repeat expansion disorders |
WO2016176191A1 (en) | 2015-04-27 | 2016-11-03 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Dual aav vector system for crispr/cas9 mediated correction of human disease |
EP3087974A1 (en) | 2015-04-29 | 2016-11-02 | Rodos BioTarget GmbH | Targeted nanocarriers for targeted drug delivery of gene therapeutics |
EP3289080B1 (en) | 2015-04-30 | 2021-08-25 | The Trustees of Columbia University in the City of New York | Gene therapy for autosomal dominant diseases |
WO2016176404A1 (en) | 2015-04-30 | 2016-11-03 | The Brigham And Women's Hospital, Inc. | Methods and kits for cloning-free genome editing |
US20160346359A1 (en) | 2015-05-01 | 2016-12-01 | Spark Therapeutics, Inc. | Adeno-associated Virus-Mediated CRISPR-Cas9 Treatment of Ocular Disease |
US20180344817A1 (en) | 2015-05-01 | 2018-12-06 | Precision Biosciences, Inc. | Precise deletion of chromosomal sequences in vivo and treatment of nucleotide repeat expansion disorders using engineered nucleases |
EP3292219B9 (en) | 2015-05-04 | 2022-05-18 | Ramot at Tel-Aviv University Ltd. | Methods and kits for fragmenting dna |
CN104894068A (zh) | 2015-05-04 | 2015-09-09 | 南京凯地生物科技有限公司 | 一种利用CRISPR/Cas9制备CAR-T细胞的方法 |
GB2531454A (en) | 2016-01-10 | 2016-04-20 | Snipr Technologies Ltd | Recombinogenic nucleic acid strands in situ |
IL283877B (en) | 2015-05-06 | 2022-07-01 | Snipr Tech Ltd | Changing bacterial populations and microbiota adaptation |
ES2835861T3 (es) | 2015-05-08 | 2021-06-23 | Childrens Medical Ct Corp | Direccionamiento de regiones funcionales del potenciador de BCL11A para la reinducción de hemoglobina fetal |
WO2016182893A1 (en) | 2015-05-08 | 2016-11-17 | Teh Broad Institute Inc. | Functional genomics using crispr-cas systems for saturating mutagenesis of non-coding elements, compositions, methods, libraries and applications thereof |
CA2986310A1 (en) | 2015-05-11 | 2016-11-17 | Editas Medicine, Inc. | Optimized crispr/cas9 systems and methods for gene editing in stem cells |
EP3294888A1 (en) | 2015-05-11 | 2018-03-21 | Editas Medicine, Inc. | Crispr/cas-related methods and compositions for treating hiv infection and aids |
WO2016183298A2 (en) | 2015-05-12 | 2016-11-17 | Sangamo Biosciences, Inc. | Nuclease-mediated regulation of gene expression |
KR101785847B1 (ko) | 2015-05-12 | 2017-10-17 | 연세대학교 산학협력단 | 선형 이중가닥 DNA를 활용한 CRISPR/Cas9 시스템을 이용한 표적 유전체 교정 |
CA2985650A1 (en) | 2015-05-13 | 2016-11-17 | Seattle Children's Hospital (dba Seattle Children's Research Institute) | Enhancing endonuclease based gene editing in primary cells |
US10920221B2 (en) | 2015-05-13 | 2021-02-16 | President And Fellows Of Harvard College | Methods of making and using guide RNA for use with Cas9 systems |
JP6587696B2 (ja) | 2015-05-13 | 2019-10-09 | ズムトール バイオロジクス、インコーポレイテッド | アフコシル化タンパク質、前記タンパク質を発現する細胞、及び関連する方法 |
CN105886498A (zh) | 2015-05-13 | 2016-08-24 | 沈志荣 | CRISPR-Cas9特异性敲除人PCSK9基因的方法以及用于特异性靶向PCSK9基因的sgRNA |
US20180291372A1 (en) | 2015-05-14 | 2018-10-11 | Massachusetts Institute Of Technology | Self-targeting genome editing system |
CN107614680A (zh) | 2015-05-14 | 2018-01-19 | 南加利福尼亚大学 | 利用重组核酸内切酶系统的最佳化基因编辑 |
US20190136248A1 (en) | 2015-05-15 | 2019-05-09 | Pioneer Hi-Bred International, Inc. | Novel guide rna/cas endonuclease systems |
EP3294880A4 (en) | 2015-05-15 | 2018-12-26 | Dharmacon, Inc. | Synthetic single guide rna for cas9-mediated gene editing |
JP6985250B2 (ja) | 2015-05-16 | 2021-12-22 | ジェンザイム・コーポレーション | 深部イントロン突然変異の遺伝子編集 |
WO2016185411A1 (en) | 2015-05-18 | 2016-11-24 | King Abdullah University Of Science And Technology | Method of inhibiting plant virus pathogen infections by crispr/cas9-mediated interference |
CN104846010B (zh) | 2015-05-18 | 2018-07-06 | 安徽省农业科学院水稻研究所 | 一种删除转基因水稻筛选标记基因的方法 |
EP3095870A1 (en) | 2015-05-19 | 2016-11-23 | Kws Saat Se | Methods for the in planta transformation of plants and manufacturing processes and products based and obtainable therefrom |
CN106011104B (zh) | 2015-05-21 | 2019-09-27 | 清华大学 | 利用拆分Cas系统进行基因编辑和表达调控方法 |
CN105518135B (zh) | 2015-05-22 | 2020-11-24 | 深圳市第二人民医院 | CRISPR-Cas9特异性敲除猪CMAH基因的方法及用于特异性靶向CMAH基因的sgRNA |
WO2016187904A1 (zh) | 2015-05-22 | 2016-12-01 | 深圳市第二人民医院 | CRISPR-Cas9特异性敲除猪CMAH基因的方法及用于特异性靶向CMAH基因的sgRNA |
WO2016187717A1 (en) | 2015-05-26 | 2016-12-01 | Exerkine Corporation | Exosomes useful for genome editing |
CN105624146B (zh) | 2015-05-28 | 2019-02-15 | 中国科学院微生物研究所 | 基于CRISPR/Cas9和酿酒酵母细胞内源的同源重组的分子克隆方法 |
CN104894075B (zh) | 2015-05-28 | 2019-08-06 | 华中农业大学 | CRISPR/Cas9和Cre/lox系统编辑伪狂犬病毒基因组制备疫苗方法和应用 |
US20180148711A1 (en) | 2015-05-28 | 2018-05-31 | Coda Biotherapeutics, Inc. | Genome editing vectors |
CA3000189A1 (en) | 2015-05-29 | 2016-12-08 | Agenovir Corporation | Compositions and methods to treat viral infections |
US20160346360A1 (en) | 2015-05-29 | 2016-12-01 | Agenovir Corporation | Compositions and methods for cell targeted hpv treatment |
WO2016196283A1 (en) | 2015-05-29 | 2016-12-08 | Agenovir Corporation | Antiviral methods and compositions |
US20160346362A1 (en) | 2015-05-29 | 2016-12-01 | Agenovir Corporation | Methods and compositions for treating cytomegalovirus infections |
WO2016196499A1 (en) | 2015-05-29 | 2016-12-08 | Clark Atlanta University | Human cell lines mutant for zic2 |
US10117911B2 (en) | 2015-05-29 | 2018-11-06 | Agenovir Corporation | Compositions and methods to treat herpes simplex virus infections |
KR20220139447A (ko) | 2015-05-29 | 2022-10-14 | 노쓰 캐롤라이나 스테이트 유니버시티 | 크리스퍼 핵산을 사용하여 박테리아, 고세균, 조류 및 효모를 스크리닝하는 방법 |
CA3000182A1 (en) | 2015-05-29 | 2016-12-08 | Agenovir Corporation | Methods and compositions for treating cells for transplant |
PL3302709T3 (pl) | 2015-06-01 | 2021-12-06 | Temple University - Of The Commonwealth System Of Higher Education | Sposoby i kompozycje do leczenia zakażenia HIV przy użyciu RNA naprowadzającego |
CA2987684A1 (en) | 2015-06-01 | 2016-12-08 | The Hospital For Sick Children | Delivery of structurally diverse polypeptide cargo into mammalian cells by a bacterial toxin |
CN105112445B (zh) | 2015-06-02 | 2018-08-10 | 广州辉园苑医药科技有限公司 | 一种基于CRISPR-Cas9基因敲除技术的miR-205基因敲除试剂盒 |
EP3303585A4 (en) | 2015-06-03 | 2018-10-31 | Board of Regents of the University of Nebraska | Dna editing using single-stranded dna |
US10392607B2 (en) | 2015-06-03 | 2019-08-27 | The Regents Of The University Of California | Cas9 variants and methods of use thereof |
WO2016197132A1 (en) | 2015-06-04 | 2016-12-08 | Protiva Biotherapeutics Inc. | Treating hepatitis b virus infection using crispr |
US10626393B2 (en) | 2015-06-04 | 2020-04-21 | Arbutus Biopharma Corporation | Delivering CRISPR therapeutics with lipid nanoparticles |
CN105039339B (zh) | 2015-06-05 | 2017-12-19 | 新疆畜牧科学院生物技术研究所 | 一种以RNA介导的特异性敲除绵羊FecB基因的方法及其专用sgRNA |
EP3334823B1 (en) | 2015-06-05 | 2024-05-22 | The Regents of The University of California | Method and kit for generating crispr/cas guide rnas |
JP7396783B2 (ja) | 2015-06-09 | 2023-12-12 | エディタス・メディシン、インコーポレイテッド | 移植を改善するためのcrispr/cas関連方法および組成物 |
CN107820516B (zh) | 2015-06-10 | 2022-03-04 | 弗门尼舍有限公司 | 鉴定麝香化合物的方法 |
WO2016198500A1 (en) | 2015-06-10 | 2016-12-15 | INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) | Methods and compositions for rna-guided treatment of human cytomegalovirus (hcmv) infection |
US20160362667A1 (en) | 2015-06-10 | 2016-12-15 | Caribou Biosciences, Inc. | CRISPR-Cas Compositions and Methods |
EP3726218B1 (en) | 2015-06-10 | 2023-08-09 | Firmenich Sa | Cell lines for screening odorant and aroma receptors |
CN105518140A (zh) | 2015-06-11 | 2016-04-20 | 深圳市第二人民医院 | CRISPR-Cas9特异性敲除猪vWF基因的方法及用于特异性靶向vWF基因的sgRNA |
CN105518138B (zh) | 2015-06-11 | 2021-07-27 | 深圳市第二人民医院 | CRISPR-Cas9特异性敲除猪GFRA1基因的方法及用于特异性靶向GFRA1基因的sgRNA |
CN105518139B (zh) | 2015-06-11 | 2021-02-02 | 深圳市第二人民医院 | CRISPR-Cas9特异性敲除猪FGL2基因的方法及用于特异性靶向FGL2基因的sgRNA |
WO2016197357A1 (zh) | 2015-06-11 | 2016-12-15 | 深圳市第二人民医院 | CRISPR-Cas9特异性敲除猪SLA-3基因的方法及用于特异性靶向SLA-3基因的sgRNA |
CN105518137B (zh) | 2015-06-11 | 2021-04-30 | 深圳市第二人民医院 | CRISPR-Cas9特异性敲除猪SALL1基因的方法及用于特异性靶向SALL1基因的sgRNA |
WO2016197354A1 (zh) | 2015-06-11 | 2016-12-15 | 深圳市第二人民医院 | CRISPR-Cas9特异性敲除猪PDX1基因的方法及用于特异性靶向PDX1基因的sgRNA |
WO2016197359A1 (zh) | 2015-06-11 | 2016-12-15 | 深圳市第二人民医院 | CRISPR-Cas9特异性敲除猪SLA-1基因的方法及用于特异性靶向SLA-1基因的sgRNA |
WO2016197356A1 (zh) | 2015-06-11 | 2016-12-15 | 深圳市第二人民医院 | CRISPR-Cas9特异性敲除猪SLA-2基因的方法及用于特异性靶向SLA-2基因的sgRNA |
WO2016197361A1 (zh) | 2015-06-11 | 2016-12-15 | 深圳市第二人民医院 | CRISPR-Cas9特异性敲除猪GGTA1基因的方法及用于特异性靶向GGTA1基因的sgRNA |
GB201510296D0 (en) | 2015-06-12 | 2015-07-29 | Univ Wageningen | Thermostable CAS9 nucleases |
EP3307888A1 (en) | 2015-06-12 | 2018-04-18 | Erasmus University Medical Center Rotterdam | New crispr assays |
WO2016201138A1 (en) | 2015-06-12 | 2016-12-15 | The Regents Of The University Of California | Reporter cas9 variants and methods of use thereof |
CN115537421A (zh) | 2015-06-15 | 2022-12-30 | 北卡罗来纳州立大学 | 有效递送核酸和基于rna的抗微生物剂的方法和组合物 |
WO2016205703A1 (en) | 2015-06-17 | 2016-12-22 | The Uab Research Foundation | Crispr/cas9 complex for genomic editing |
WO2016205728A1 (en) | 2015-06-17 | 2016-12-22 | Massachusetts Institute Of Technology | Crispr mediated recording of cellular events |
WO2016205623A1 (en) | 2015-06-17 | 2016-12-22 | North Carolina State University | Methods and compositions for genome editing in bacteria using crispr-cas9 systems |
CN108026545A (zh) | 2015-06-17 | 2018-05-11 | Uab研究基金会 | 用于将功能性多肽引入到血细胞谱系细胞中的crispr/cas9复合物 |
WO2016205745A2 (en) | 2015-06-18 | 2016-12-22 | The Broad Institute Inc. | Cell sorting |
WO2016205759A1 (en) | 2015-06-18 | 2016-12-22 | The Broad Institute Inc. | Engineering and optimization of systems, methods, enzymes and guide scaffolds of cas9 orthologs and variants for sequence manipulation |
US9790490B2 (en) | 2015-06-18 | 2017-10-17 | The Broad Institute Inc. | CRISPR enzymes and systems |
CA3012607A1 (en) | 2015-06-18 | 2016-12-22 | The Broad Institute Inc. | Crispr enzymes and systems |
EP4159856A1 (en) | 2015-06-18 | 2023-04-05 | The Broad Institute, Inc. | Novel crispr enzymes and systems |
EP3800255A3 (en) | 2015-06-18 | 2021-06-23 | Robert D. Bowles | Rna-guided transcriptional regulation and methods of using the same for the treatment of back pain |
TWI813532B (zh) | 2015-06-18 | 2023-09-01 | 美商博得學院股份有限公司 | 降低脱靶效應的crispr酶突變 |
US9957501B2 (en) | 2015-06-18 | 2018-05-01 | Sangamo Therapeutics, Inc. | Nuclease-mediated regulation of gene expression |
GB201511376D0 (en) | 2015-06-29 | 2015-08-12 | Ecolab Usa Inc | Process for the treatment of produced water from chemical enhanced oil recovery |
US11279928B2 (en) | 2015-06-29 | 2022-03-22 | Massachusetts Institute Of Technology | Compositions comprising nucleic acids and methods of using the same |
WO2017004261A1 (en) | 2015-06-29 | 2017-01-05 | Ionis Pharmaceuticals, Inc. | Modified crispr rna and modified single crispr rna and uses thereof |
US20180171298A1 (en) | 2015-06-30 | 2018-06-21 | Cellectis | Methods for improving functionality in nk cell by gene inactivation using specific endonuclease |
CN108350446A (zh) | 2015-07-02 | 2018-07-31 | 约翰霍普金斯大学 | 基于crispr/cas9的治疗 |
WO2017005807A1 (en) | 2015-07-06 | 2017-01-12 | Dsm Ip Assets B.V. | Guide rna assembly vector |
US20170009242A1 (en) | 2015-07-06 | 2017-01-12 | Whitehead Institute For Biomedical Research | CRISPR-Mediated Genome Engineering for Protein Depletion |
CN105132451B (zh) | 2015-07-08 | 2019-07-23 | 电子科技大学 | 一种CRISPR/Cas9单一转录单元定向修饰骨架载体及其应用 |
WO2017009399A1 (en) | 2015-07-13 | 2017-01-19 | Institut Pasteur | Improving sequence-specific antimicrobials by blocking dna repair |
US20170014449A1 (en) | 2015-07-13 | 2017-01-19 | Elwha LLC, a limited liability company of the State of Delaware | Site-specific epigenetic editing |
US10450585B2 (en) | 2015-07-13 | 2019-10-22 | Sangamo Therapeutics, Inc. | Delivery methods and compositions for nuclease-mediated genome engineering |
US11390865B2 (en) | 2015-07-14 | 2022-07-19 | Fukuoka University | Method for introducing site-directed RNA mutation, target editing guide RNA used in the method and target RNA-target editing guide RNA complex |
JP7044373B2 (ja) | 2015-07-15 | 2022-03-30 | ラトガース,ザ ステート ユニバーシティ オブ ニュージャージー | ヌクレアーゼ非依存的な標的化遺伝子編集プラットフォームおよびその用途 |
MA42895A (fr) | 2015-07-15 | 2018-05-23 | Juno Therapeutics Inc | Cellules modifiées pour thérapie cellulaire adoptive |
US20170020922A1 (en) | 2015-07-16 | 2017-01-26 | Batu Biologics Inc. | Gene editing for immunological destruction of neoplasia |
WO2017015101A1 (en) | 2015-07-17 | 2017-01-26 | University Of Washington | Methods for maximizing the efficiency of targeted gene correction |
WO2017015015A1 (en) | 2015-07-17 | 2017-01-26 | Emory University | Crispr-associated protein from francisella and uses related thereto |
WO2017015545A1 (en) | 2015-07-22 | 2017-01-26 | President And Fellows Of Harvard College | Evolution of site-specific recombinases |
WO2017015637A1 (en) | 2015-07-22 | 2017-01-26 | Duke University | High-throughput screening of regulatory element function with epigenome editing technologies |
WO2017015567A1 (en) | 2015-07-23 | 2017-01-26 | Mayo Foundation For Medical Education And Research | Editing mitochondrial dna |
AU2016299271B2 (en) | 2015-07-25 | 2022-09-22 | Habib FROST | A system, device and a method for providing a therapy or a cure for cancer and other pathological states |
CN106399360A (zh) | 2015-07-27 | 2017-02-15 | 上海药明生物技术有限公司 | 基于crispr技术敲除fut8基因的方法 |
JP6937740B2 (ja) | 2015-07-28 | 2021-09-22 | ダニスコ・ユーエス・インク | ゲノム編集システムおよび使用方法 |
CN105063061B (zh) | 2015-07-28 | 2018-10-30 | 华南农业大学 | 一种水稻千粒重基因tgw6突变体及其制备方法与应用 |
CN106701808A (zh) | 2015-07-29 | 2017-05-24 | 深圳华大基因研究院 | Dna聚合酶i缺陷型菌株及其构建方法 |
US10612011B2 (en) | 2015-07-30 | 2020-04-07 | President And Fellows Of Harvard College | Evolution of TALENs |
JP7409773B2 (ja) | 2015-07-31 | 2024-01-09 | リージェンツ オブ ザ ユニバーシティ オブ ミネソタ | 改変された細胞および治療の方法 |
US20200123533A1 (en) | 2015-07-31 | 2020-04-23 | The Trustees Of Columbia University In The City Of New York | High-throughput strategy for dissecting mammalian genetic interactions |
WO2017024047A1 (en) | 2015-08-03 | 2017-02-09 | Emendobio Inc. | Compositions and methods for increasing nuclease induced recombination rate in cells |
WO2017023974A1 (en) | 2015-08-03 | 2017-02-09 | President And Fellows Of Harvard College | Cas9 genome editing and transcriptional regulation |
EP3331905B1 (en) | 2015-08-06 | 2022-10-05 | Dana-Farber Cancer Institute, Inc. | Targeted protein degradation to attenuate adoptive t-cell therapy associated adverse inflammatory responses |
BR112018002558A2 (pt) | 2015-08-07 | 2018-09-25 | Commw Scient Ind Res Org | método para produção de um animal compreendendo uma modificação genética na linhagem germinativa |
CN104962523B (zh) | 2015-08-07 | 2018-05-25 | 苏州大学 | 一种测定非同源末端连接修复活性的方法 |
US9580727B1 (en) | 2015-08-07 | 2017-02-28 | Caribou Biosciences, Inc. | Compositions and methods of engineered CRISPR-Cas9 systems using split-nexus Cas9-associated polynucleotides |
EP3334442A1 (en) | 2015-08-11 | 2018-06-20 | Cellectis | Cells for immunotherapy engineered for targeting cd38 antigen and for cd38 gene inactivation |
CN105255937A (zh) | 2015-08-14 | 2016-01-20 | 西北农林科技大学 | 一种真核细胞III型启动子表达CRISPR sgRNA的方法及其应用 |
BR112018002026A2 (pt) | 2015-08-14 | 2018-09-18 | Institute Of Genetics And Developmental Biology, Chinese Academy Of Sciences | método para se obter arroz resistente a glifosato através da substituição de nucleotídeo direcionada ao sítio |
US10538758B2 (en) | 2015-08-19 | 2020-01-21 | Arc Bio, Llc | Capture of nucleic acids using a nucleic acid-guided nuclease-based system |
CN105112519A (zh) | 2015-08-20 | 2015-12-02 | 郑州大学 | 一种基于crispr的大肠杆菌o157:h7菌株检测试剂盒及检测方法 |
US11339408B2 (en) | 2015-08-20 | 2022-05-24 | Applied Stemcell, Inc. | Nuclease with enhanced efficiency of genome editing |
CN105177126B (zh) | 2015-08-21 | 2018-12-04 | 东华大学 | 一种利用荧光pcr技术对小鼠的分型鉴定方法 |
MX2018002339A (es) | 2015-08-25 | 2018-12-19 | Univ Duke | Composiciones y metodos de mejora de la especificidad en ingenieria genomica usando endonucleasas guiadas por arn. |
CN106480083B (zh) | 2015-08-26 | 2021-12-14 | 中国科学院分子植物科学卓越创新中心 | CRISPR/Cas9介导的大片段DNA拼接方法 |
US9926546B2 (en) | 2015-08-28 | 2018-03-27 | The General Hospital Corporation | Engineered CRISPR-Cas9 nucleases |
EP3341477B1 (en) | 2015-08-28 | 2022-03-23 | The General Hospital Corporation | Engineered crispr-cas9 nucleases |
US9512446B1 (en) | 2015-08-28 | 2016-12-06 | The General Hospital Corporation | Engineered CRISPR-Cas9 nucleases |
US20170058272A1 (en) | 2015-08-31 | 2017-03-02 | Caribou Biosciences, Inc. | Directed nucleic acid repair |
US10526590B2 (en) | 2015-08-31 | 2020-01-07 | Agilent Technologies, Inc. | Compounds and methods for CRISPR/Cas-based genome editing by homologous recombination |
CN105087620B (zh) | 2015-08-31 | 2017-12-29 | 中国农业大学 | 一种过表达猪共刺激受体4‑1bb载体及其应用 |
WO2017040793A1 (en) | 2015-09-01 | 2017-03-09 | Dana-Farber Cancer Institute Inc. | Systems and methods for selection of grna targeting strands for cas9 localization |
US11390908B2 (en) | 2015-09-02 | 2022-07-19 | University Of Massachusetts | Detection of gene loci with CRISPR arrayed repeats and/or polychromatic single guide ribonucleic acids |
WO2017040786A1 (en) | 2015-09-04 | 2017-03-09 | Massachusetts Institute Of Technology | Multilayer genetic safety kill circuits based on single cas9 protein and multiple engineered grna in mammalian cells |
CN105400810B (zh) | 2015-09-06 | 2019-05-07 | 吉林大学 | 采用敲除技术建立低磷性佝偻病模型的方法 |
CA3036409C (en) | 2015-09-08 | 2023-07-11 | Erik J. Sontheimer | Dnase h activity of neisseria meningitidis cas9 |
JP6664693B2 (ja) | 2015-09-09 | 2020-03-13 | 国立大学法人神戸大学 | 標的化したdna配列の核酸塩基を特異的に変換する、グラム陽性菌のゲノム配列の変換方法、及びそれに用いる分子複合体 |
WO2017043573A1 (ja) | 2015-09-09 | 2017-03-16 | 国立大学法人神戸大学 | 標的化したdna配列の核酸塩基を特異的に変換するゲノム配列の改変方法及びそれに用いる分子複合体 |
WO2017044776A1 (en) | 2015-09-10 | 2017-03-16 | Texas Tech University System | Single-guide rna (sgrna) with improved knockout efficiency |
EP3347469A4 (en) | 2015-09-10 | 2019-02-27 | Youhealth Biotech, Limited | METHOD AND COMPOSITIONS FOR TREATING GLAUCOMA |
CN105274144A (zh) | 2015-09-14 | 2016-01-27 | 徐又佳 | 通过CRISPR/Cas9技术得到敲除铁调素基因斑马鱼的制备方法 |
CN105210981B (zh) | 2015-09-15 | 2018-09-28 | 中国科学院生物物理研究所 | 建立可应用于人类疾病研究的雪貂模型的方法及其应用 |
US10301613B2 (en) | 2015-09-15 | 2019-05-28 | Arizona Board Of Regents On Behalf Of Arizona State University | Targeted remodeling of prokaryotic genomes using CRISPR-nickases |
CN105112422B (zh) | 2015-09-16 | 2019-11-08 | 中山大学 | 基因miR408和UCL在培育高产水稻中的应用 |
WO2017049129A2 (en) | 2015-09-18 | 2017-03-23 | President And Fellows Of Harvard College | Methods of making guide rna |
EP3352795B1 (en) | 2015-09-21 | 2020-08-12 | The Regents of The University of California | Compositions and methods for target nucleic acid modification |
CN105132427B (zh) | 2015-09-21 | 2019-01-08 | 新疆畜牧科学院生物技术研究所 | 一种以RNA介导的特异性敲除双基因获得基因编辑绵羊的方法及其专用sgRNA |
JP6799058B2 (ja) | 2015-09-21 | 2020-12-09 | アークトゥラス・セラピューティクス・インコーポレイテッドArcturus Therapeutics,Inc. | アレル選択的な遺伝子編集およびその使用 |
US10435441B2 (en) | 2015-09-23 | 2019-10-08 | Sangamo Therapeutics, Inc. | HTT repressors and uses thereof |
AU2016339053A1 (en) | 2015-09-24 | 2018-04-12 | Crispr Therapeutics Ag | Novel family of RNA-programmable endonucleases and their uses in genome editing and other applications |
US11268144B2 (en) | 2015-09-24 | 2022-03-08 | Sigma-Aldrich Co. Llc | Methods and reagents for molecular proximity detection using RNA-guided nucleic acid binding proteins |
CA2999500A1 (en) | 2015-09-24 | 2017-03-30 | Editas Medicine, Inc. | Use of exonucleases to improve crispr/cas-mediated genome editing |
US20180258411A1 (en) | 2015-09-25 | 2018-09-13 | Tarveda Therapeutics, Inc. | Compositions and methods for genome editing |
WO2017053729A1 (en) | 2015-09-25 | 2017-03-30 | The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University | Nuclease-mediated genome editing of primary cells and enrichment thereof |
KR101745863B1 (ko) | 2015-09-25 | 2017-06-12 | 전남대학교산학협력단 | Crispr/cas9 시스템을 이용한 프로히비틴2 유전자 제거용 시발체 |
KR101795999B1 (ko) | 2015-09-25 | 2017-11-09 | 전남대학교산학협력단 | Crispr/cas9 시스템을 이용한 베타2-마이크로글로불린 유전자 제거용 시발체 |
EP3147363B1 (en) | 2015-09-26 | 2019-10-16 | B.R.A.I.N. Ag | Activation of taste receptor genes in mammalian cells using crispr-cas-9 |
JP2018527943A (ja) | 2015-09-28 | 2018-09-27 | テンプル ユニバーシティー オブ ザ コモンウェルス システム オブ ハイヤー エデュケーション | Rna誘導性の、hiv感染の処置のための、方法および組成物 |
WO2017058796A1 (en) | 2015-09-29 | 2017-04-06 | Agenovir Corporation | Antiviral fusion proteins and genes |
US20170088828A1 (en) | 2015-09-29 | 2017-03-30 | Agenovir Corporation | Compositions and methods for treatment of latent viral infections |
CN108601883A (zh) | 2015-09-29 | 2018-09-28 | 埃吉诺维亚公司 | 递送方法和组合物 |
CA2999923A1 (en) | 2015-09-29 | 2017-04-06 | Agenovir Corporation | Compositions and methods for latent viral transcription regulation |
CN105177038B (zh) | 2015-09-29 | 2018-08-24 | 中国科学院遗传与发育生物学研究所 | 一种高效定点编辑植物基因组的CRISPR/Cas9系统 |
CN105331627B (zh) | 2015-09-30 | 2019-04-02 | 华中农业大学 | 一种利用内源CRISPR-Cas系统进行原核生物基因组编辑的方法 |
WO2017059241A1 (en) | 2015-10-02 | 2017-04-06 | The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services | Lentiviral protein delivery system for rna-guided genome editing |
CA3004710A1 (en) | 2015-10-06 | 2017-04-13 | The Children's Hospital Of Philadelphia | Compositions and methods for treating fragile x syndrome and related syndromes |
WO2017062754A1 (en) | 2015-10-07 | 2017-04-13 | New York University | Compositions and methods for enhancing crispr activity by polq inhibition |
WO2017062723A1 (en) | 2015-10-08 | 2017-04-13 | President And Fellows Of Harvard College | Multiplexed genome editing |
WO2017062886A1 (en) | 2015-10-08 | 2017-04-13 | Cellink Corporation | Battery interconnects |
AU2016334225B2 (en) | 2015-10-09 | 2022-11-10 | Monsanto Technology Llc | Novel RNA-guided nucleases and uses thereof |
US11473084B2 (en) | 2015-10-09 | 2022-10-18 | The Children's Hospital Of Philadelphia | Compositions and methods for treating Huntington's disease and related disorders |
EP4144844A1 (en) | 2015-10-12 | 2023-03-08 | DuPont US Holding, LLC | Protected dna templates for gene modification and increased homologous recombination in cells and methods of use |
EP4089175A1 (en) | 2015-10-13 | 2022-11-16 | Duke University | Genome engineering with type i crispr systems in eukaryotic cells |
US10829787B2 (en) | 2015-10-14 | 2020-11-10 | Life Technologies Corporation | Ribonucleoprotein transfection agents |
CN105400779A (zh) | 2015-10-15 | 2016-03-16 | 芜湖医诺生物技术有限公司 | 嗜热链球菌CRISPR-Cas9系统识别的人CCR5基因的靶序列和sgRNA及其应用 |
FR3042506B1 (fr) | 2015-10-16 | 2018-11-30 | IFP Energies Nouvelles | Outil genetique de transformation de bacteries clostridium |
US10947559B2 (en) | 2015-10-16 | 2021-03-16 | Astrazeneca Ab | Inducible modification of a cell genome |
WO2017066588A2 (en) | 2015-10-16 | 2017-04-20 | Temple University - Of The Commonwealth System Of Higher Education | Methods and compositions utilizing cpf1 for rna-guided gene editing |
EP3365269A4 (en) | 2015-10-19 | 2019-06-19 | The Methodist Hospital | DISTRIBUTION, BY MEMBRANE DEFORMATION, FROM CRISPR-CAS9 TO DIFFICULT CELLS TO BE TRANSFERRED |
CN105331607A (zh) | 2015-10-19 | 2016-02-17 | 芜湖医诺生物技术有限公司 | 嗜热链球菌CRISPR-Cas9系统识别的人CCR5基因的靶序列和sgRNA及其应用 |
JP7059179B2 (ja) | 2015-10-20 | 2022-04-25 | アンスティチュ ナショナル ドゥ ラ サンテ エ ドゥ ラ ルシェルシュ メディカル | 遺伝子操作のための方法及び製品 |
CN105316324A (zh) | 2015-10-20 | 2016-02-10 | 芜湖医诺生物技术有限公司 | 嗜热链球菌CRISPR-Cas9系统识别的人CXCR4基因的靶序列和sgRNA及其应用 |
BR112018008109A2 (pt) | 2015-10-20 | 2018-11-06 | Pioneer Hi Bred Int | métodos para modificar uma sequência de nucleotídeos no genoma de uma célula vegetal, produzir uma planta, produzir tecido de calo de planta que tem uma sequência de nucleotídeos modificada em seu genoma sem o uso de um marcador selecionável, e planta de progênie da planta |
CN105331609A (zh) | 2015-10-20 | 2016-02-17 | 芜湖医诺生物技术有限公司 | 脑膜炎双球菌CRISPR-Cas9系统识别的人CCR5基因的靶序列和sgRNA及其应用 |
CN105331608A (zh) | 2015-10-20 | 2016-02-17 | 芜湖医诺生物技术有限公司 | 脑膜炎双球菌CRISPR-Cas9系统识别的人CXCR4基因的靶序列和sgRNA及其应用 |
CN105316337A (zh) | 2015-10-20 | 2016-02-10 | 芜湖医诺生物技术有限公司 | 嗜热链球菌CRISPR-Cas9系统识别的人CXCR4基因的靶序列和sgRNA及其应用 |
EP3365447A1 (en) | 2015-10-21 | 2018-08-29 | Editas Medicine, Inc. | Crispr/cas-related methods and compositions for treating hepatitis b virus |
US20170211142A1 (en) | 2015-10-22 | 2017-07-27 | The Broad Institute, Inc. | Novel crispr enzymes and systems |
CN105219799A (zh) | 2015-10-22 | 2016-01-06 | 天津吉诺沃生物科技有限公司 | 一种基于CRISPR/Cas系统的多年生黑麦草的育种方法 |
EP4269577A3 (en) | 2015-10-23 | 2024-01-17 | President and Fellows of Harvard College | Nucleobase editors and uses thereof |
EP3159407A1 (en) | 2015-10-23 | 2017-04-26 | Silence Therapeutics (London) Ltd | Guide rnas, methods and uses |
US9677090B2 (en) | 2015-10-23 | 2017-06-13 | Caribou Biosciences, Inc. | Engineered nucleic-acid targeting nucleic acids |
TW201715041A (zh) | 2015-10-26 | 2017-05-01 | 國立清華大學 | 細菌基因編輯方法 |
US9988637B2 (en) | 2015-10-26 | 2018-06-05 | National Tsing Hua Univeristy | Cas9 plasmid, genome editing system and method of Escherichia coli |
US10280411B2 (en) | 2015-10-27 | 2019-05-07 | Pacific Biosciences of California, In.c | Methods, systems, and reagents for direct RNA sequencing |
KR20180091821A (ko) | 2015-10-27 | 2018-08-16 | 리컴비네틱스 인코포레이티드 | 유전적 상보성에 의한 인간화 car t-세포 및 혈소판의 조작방법 |
WO2017075335A1 (en) | 2015-10-28 | 2017-05-04 | Voyager Therapeutics, Inc. | Regulatable expression using adeno-associated virus (aav) |
JP2019507579A (ja) | 2015-10-28 | 2019-03-22 | クリスパー セラピューティクス アーゲー | デュシェンヌ型筋ジストロフィーの処置のための材料および方法 |
AU2016343887B2 (en) | 2015-10-28 | 2023-04-06 | Sangamo Therapeutics, Inc. | Liver-specific constructs, factor VIII expression cassettes and methods of use thereof |
US11111508B2 (en) | 2015-10-30 | 2021-09-07 | Brandeis University | Modified CAS9 compositions and methods of use |
EP3368670A1 (en) | 2015-10-30 | 2018-09-05 | Editas Medicine, Inc. | Crispr/cas-related methods and compositions for treating herpes simplex virus |
CN105238806B (zh) | 2015-11-02 | 2018-11-27 | 中国科学院天津工业生物技术研究所 | 一种用于微生物的CRISPR/Cas9基因编辑载体的构建及其应用 |
CN105316327B (zh) | 2015-11-03 | 2019-01-29 | 中国农业科学院作物科学研究所 | 小麦TaAGO4a基因CRISPR/Cas9载体及其应用 |
PT3371314T (pt) | 2015-11-04 | 2023-08-31 | Fate Therapeutics Inc | Modificação genómica de células pluripotentes |
SG11201803701YA (en) | 2015-11-04 | 2018-06-28 | Univ Pennsylvania | Methods and compositions for gene editing in hematopoietic stem cells |
WO2017079428A1 (en) | 2015-11-04 | 2017-05-11 | President And Fellows Of Harvard College | Site specific germline modification |
GB2544270A (en) | 2015-11-05 | 2017-05-17 | Fundació Centre De Regulació Genòmica | Nucleic acids, peptides and methods |
AU2016348782A1 (en) | 2015-11-05 | 2018-05-31 | Cellectis | Process of gene-editing of cells isolated from a subject suffering from a metabolic disease affecting the erythroid lineage, cells obtained by said process and uses thereof. |
AU2016349738A1 (en) | 2015-11-06 | 2018-05-24 | The Jackson Laboratory | Large genomic DNA knock-in and uses thereof |
WO2017078751A1 (en) | 2015-11-06 | 2017-05-11 | The Methodist Hospital | Micoluidic cell deomailiy assay for enabling rapid and efficient kinase screening via the crispr-cas9 system |
US20180340176A1 (en) | 2015-11-09 | 2018-11-29 | Ifom Fondazione Istituto Firc Di Oncologia Molecolare | Crispr-cas sgrna library |
EP3374501B1 (en) | 2015-11-11 | 2023-07-12 | Lonza Ltd | Crispr-associated (cas) proteins with reduced immunogenicity |
EP3374494A4 (en) | 2015-11-11 | 2019-05-01 | Coda Biotherapeutics, Inc. | CRISPR COMPOSITIONS AND METHODS OF USE FOR GENE THERAPY |
JP2018537448A (ja) | 2015-11-12 | 2018-12-20 | ファイザー・インコーポレイテッド | CRISPR−Cas9を用いた組織特異的ゲノム操作 |
KR101885901B1 (ko) | 2015-11-13 | 2018-08-07 | 기초과학연구원 | 5' 말단의 인산기가 제거된 rna를 포함하는 리보핵산단백질 전달용 조성물 |
US11306308B2 (en) | 2015-11-13 | 2022-04-19 | Massachusetts Institute Of Technology | High-throughput CRISPR-based library screening |
US20170191047A1 (en) | 2015-11-13 | 2017-07-06 | University Of Georgia Research Foundation, Inc. | Adenosine-specific rnase and methods of use |
IL259441B2 (en) | 2015-11-16 | 2024-01-01 | Res Inst Nationwide Childrens Hospital | Materials and methods for the treatment of titin-based myopathies and other titinopathy |
US11905521B2 (en) | 2015-11-17 | 2024-02-20 | The Chinese University Of Hong Kong | Methods and systems for targeted gene manipulation |
SG11201804372PA (en) | 2015-11-23 | 2018-06-28 | Univ California | Tracking and manipulating cellular rna via nuclear delivery of crispr/cas9 |
CN105602987A (zh) | 2015-11-23 | 2016-05-25 | 深圳市默赛尔生物医学科技发展有限公司 | 一种高效的dc细胞xbp1基因敲除方法 |
US20170145438A1 (en) | 2015-11-24 | 2017-05-25 | University Of South Carolina | Viral Vectors for Gene Editing |
EP3382018B1 (en) | 2015-11-25 | 2022-03-30 | National University Corporation Gunma University | Dna methylation editing kit and dna methylation editing method |
US10240145B2 (en) | 2015-11-25 | 2019-03-26 | The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University | CRISPR/Cas-mediated genome editing to treat EGFR-mutant lung cancer |
WO2017091510A1 (en) | 2015-11-27 | 2017-06-01 | The Regents Of The University Of California | Compositions and methods for the production of hydrocarbons, hydrogen and carbon monoxide using engineered azotobacter strains |
CN105505979A (zh) | 2015-11-28 | 2016-04-20 | 湖北大学 | 一种以CRISPR/Cas9基因编辑技术打靶Badh2基因获得香稻品系的方法 |
CN106811479B (zh) | 2015-11-30 | 2019-10-25 | 中国农业科学院作物科学研究所 | 利用CRISPR/Cas9系统定点修饰ALS基因获得抗除草剂水稻的系统及其应用 |
WO2017095111A1 (ko) | 2015-11-30 | 2017-06-08 | 기초과학연구원 | F. novicida 유래 Cas9을 포함하는 유전체 교정용 조성물 |
RU2634395C1 (ru) | 2015-12-01 | 2017-10-26 | Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Балтийский Федеральный Университет имени Иммануила Канта" (БФУ им. И. Канта) | Генетическая конструкция на основе системы редактирования генома crispr/cas9, кодирующая нуклеазу cas9, специфически импортируемую в митохондрии клеток человека |
CN105296518A (zh) | 2015-12-01 | 2016-02-03 | 中国农业大学 | 一种用于CRISPR/Cas9技术的同源臂载体构建方法 |
US11085057B2 (en) | 2015-12-02 | 2021-08-10 | The Regents Of The University Of California | Compositions and methods for modifying a target nucleic acid |
MX2018006814A (es) | 2015-12-02 | 2019-08-05 | Ceres Inc | Metodos para la modificacion genetica de plantas. |
WO2017093370A1 (en) | 2015-12-03 | 2017-06-08 | Technische Universität München | T-cell specific genome editing |
CN105779449B (zh) | 2015-12-04 | 2018-11-27 | 新疆农业大学 | 一种棉花启动子GbU6-5PS及应用 |
CN105779448B (zh) | 2015-12-04 | 2018-11-27 | 新疆农业大学 | 一种棉花启动子GbU6-7PS及应用 |
CN106845151B (zh) | 2015-12-07 | 2019-03-26 | 中国农业大学 | CRISPR-Cas9系统sgRNA作用靶点的筛选方法及装置 |
CN105462968B (zh) | 2015-12-07 | 2018-10-16 | 北京信生元生物医学科技有限公司 | 一种靶向apoCⅢ的CRISPR-Cas9系统及其应用 |
CA3006305A1 (en) | 2015-12-09 | 2017-06-15 | Excision Biotherapeutics, Inc. | Gene editing methods and compositions for eliminating risk of jc virus activation and pml (progressive multifocal leukoencephalopathy) during immunosuppressive therapy |
CN105463003A (zh) | 2015-12-11 | 2016-04-06 | 扬州大学 | 一种消除卡那霉素耐药基因活性的重组载体及其构建方法 |
US20180362961A1 (en) | 2015-12-11 | 2018-12-20 | Danisco Us Inc. | Methods and compositions for enhanced nuclease-mediated genome modification and reduced off-target site effects |
CN105296537A (zh) | 2015-12-12 | 2016-02-03 | 西南大学 | 一种基于睾丸内注射的基因定点编辑技术 |
WO2017105350A1 (en) | 2015-12-14 | 2017-06-22 | Cellresearch Corporation Pte Ltd | A method of generating a mammalian stem cell carrying a transgene, a mammalian stem cell generated by the method and pharmaceuticals uses of the mammalian stem cell |
CN105400773B (zh) | 2015-12-14 | 2018-06-26 | 同济大学 | 应用于大规模筛选癌症基因的CRISPR/Cas9富集测序方法 |
CN105463027A (zh) | 2015-12-17 | 2016-04-06 | 中国农业大学 | 一种高肌肉量及肥厚型心肌病模型克隆猪的制备方法 |
WO2017106616A1 (en) | 2015-12-17 | 2017-06-22 | The Regents Of The University Of Colorado, A Body Corporate | Varicella zoster virus encoding regulatable cas9 nuclease |
NO343153B1 (en) | 2015-12-17 | 2018-11-19 | Hydra Systems As | A method of assessing the integrity status of a barrier plug |
WO2017105991A1 (en) | 2015-12-18 | 2017-06-22 | Danisco Us Inc. | Methods and compositions for t-rna based guide rna expression |
US20190233814A1 (en) | 2015-12-18 | 2019-08-01 | The Broad Institute, Inc. | Novel crispr enzymes and systems |
WO2017106414A1 (en) | 2015-12-18 | 2017-06-22 | Danisco Us Inc. | Methods and compositions for polymerase ii (pol-ii) based guide rna expression |
IL297018A (en) | 2015-12-18 | 2022-12-01 | Sangamo Therapeutics Inc | Directed cleavage of cell mhc receptor |
AU2016369490C1 (en) | 2015-12-18 | 2021-12-23 | Sangamo Therapeutics, Inc. | Targeted disruption of the T cell receptor |
US11761007B2 (en) | 2015-12-18 | 2023-09-19 | The Scripps Research Institute | Production of unnatural nucleotides using a CRISPR/Cas9 system |
US11118194B2 (en) | 2015-12-18 | 2021-09-14 | The Regents Of The University Of California | Modified site-directed modifying polypeptides and methods of use thereof |
WO2017104404A1 (ja) | 2015-12-18 | 2017-06-22 | 国立研究開発法人科学技術振興機構 | 遺伝子改変非ヒト生物、卵細胞、受精卵、及び標的遺伝子の改変方法 |
AU2016375021B2 (en) | 2015-12-22 | 2022-02-03 | CureVac SE | Method for producing RNA molecule compositions |
WO2017112620A1 (en) | 2015-12-22 | 2017-06-29 | North Carolina State University | Methods and compositions for delivery of crispr based antimicrobials |
WO2017109757A1 (en) | 2015-12-23 | 2017-06-29 | Crispr Therapeutics Ag | Materials and methods for treatment of amyotrophic lateral sclerosis and/or frontal temporal lobular degeneration |
CN105543270A (zh) | 2015-12-24 | 2016-05-04 | 中国农业科学院作物科学研究所 | 双抗性CRISPR/Cas9载体及应用 |
CN105543266A (zh) | 2015-12-25 | 2016-05-04 | 安徽大学 | 一种维吉尼亚链霉菌IBL14中的CRISPR-Cas系统及应用其进行基因编辑的方法 |
CN105505976A (zh) | 2015-12-25 | 2016-04-20 | 安徽大学 | 一种维吉尼亚链霉菌ibl14产青霉素重组菌株的构建方法 |
IL260257B2 (en) | 2015-12-28 | 2024-05-01 | Novartis Ag | Preparations and methods for the treatment of hemoglobinopathies |
EP4159848A1 (en) | 2015-12-29 | 2023-04-05 | Monsanto Technology LLC | Novel crispr-associated transposases and uses thereof |
CN105441451B (zh) | 2015-12-31 | 2019-03-22 | 暨南大学 | 一种特异靶向人ABCB1基因的sgRNA导向序列及应用 |
CN105567735A (zh) | 2016-01-05 | 2016-05-11 | 华东师范大学 | 一种凝血因子基因突变的定点修复载体系统及方法 |
EP3400296A1 (en) | 2016-01-08 | 2018-11-14 | Novozymes A/S | Genome editing in bacillus host cells |
CN105647922A (zh) | 2016-01-11 | 2016-06-08 | 中国人民解放军疾病预防控制所 | 基于一种新gRNA序列的CRISPR-Cas9系统在制备乙肝治疗药物中的应用 |
US11441146B2 (en) | 2016-01-11 | 2022-09-13 | Christiana Care Health Services, Inc. | Compositions and methods for improving homogeneity of DNA generated using a CRISPR/Cas9 cleavage system |
US11427837B2 (en) | 2016-01-12 | 2022-08-30 | The Regents Of The University Of California | Compositions and methods for enhanced genome editing |
WO2017123910A1 (en) | 2016-01-14 | 2017-07-20 | The Brigham And Women's Hospital, Inc. | Genome editing for treating glioblastoma |
AU2017208094A1 (en) | 2016-01-14 | 2018-08-09 | Upside Foods, Inc. | Methods for extending the replicative capacity of somatic cells during an ex vivo cultivation process |
KR20180097756A (ko) | 2016-01-15 | 2018-08-31 | 더 잭슨 래보라토리 | Cas9 단백질의 다중-주기 전기천공법에 의한 유전자 조작된 비-사람 포유동물 |
WO2017126987A1 (ru) | 2016-01-18 | 2017-07-27 | Анатолий Викторович ЗАЗУЛЯ | Эритроциты для направленного транспорта лекарственного средства |
CN105567734A (zh) | 2016-01-18 | 2016-05-11 | 丹弥优生物技术(湖北)有限公司 | 一种基因组dna序列精准编辑方法 |
CN105567738A (zh) | 2016-01-18 | 2016-05-11 | 南开大学 | 使用基因组编辑技术CRISPR-Cas9诱导CCR5Δ32缺失的方法 |
EP3405570A1 (en) | 2016-01-22 | 2018-11-28 | The Broad Institute, Inc. | Crystal structure of crispr cpf1 |
CN105567689B (zh) | 2016-01-25 | 2019-04-09 | 重庆威斯腾生物医药科技有限责任公司 | CRISPR/Cas9靶向敲除人TCAB1基因及其特异性gRNA |
CN105543228A (zh) | 2016-01-25 | 2016-05-04 | 宁夏农林科学院 | 一种快速将水稻转化为香稻的方法 |
WO2017132112A1 (en) | 2016-01-25 | 2017-08-03 | Excision Biotherapeutics | Methods and compositions for rna-guided treatment of hiv infection |
CN108603196A (zh) | 2016-01-25 | 2018-09-28 | 酶切生物技术公司 | Rna向导的对人类jc病毒和其他多瘤病毒的根除 |
EP3199632A1 (en) | 2016-01-26 | 2017-08-02 | ACIB GmbH | Temperature-inducible crispr/cas system |
CN105567688A (zh) | 2016-01-27 | 2016-05-11 | 武汉大学 | 一种可用于艾滋病基因治疗的CRISPR/SaCas9系统 |
CN108884154A (zh) | 2016-01-29 | 2018-11-23 | 普林斯顿大学理事会 | 具有独特剪接活性的断裂内含肽 |
CA3013179A1 (en) | 2016-01-30 | 2017-08-03 | Bonac Corporation | Artificial single guide rna and use thereof |
CN105647968B (zh) | 2016-02-02 | 2019-07-23 | 浙江大学 | 一种CRISPR/Cas9工作效率快速测试系统及其应用 |
CN107022562B (zh) | 2016-02-02 | 2020-07-17 | 中国种子集团有限公司 | 利用CRISPR/Cas9系统对玉米基因定点突变的方法 |
WO2017136794A1 (en) | 2016-02-03 | 2017-08-10 | Massachusetts Institute Of Technology | Structure-guided chemical modification of guide rna and its applications |
CN105671083B (zh) | 2016-02-03 | 2017-09-29 | 安徽柯顿生物科技有限公司 | PD‑1基因重组病毒质粒及构建、重组逆转录病毒Lenti‑PD‑1‑Puro及包装与应用 |
US11208652B2 (en) | 2016-02-04 | 2021-12-28 | President And Fellows Of Harvard College | Mitochondrial genome editing and regulation |
US20190038780A1 (en) | 2016-02-05 | 2019-02-07 | Regents Of The University Of Minnesota | Vectors and system for modulating gene expression |
US11746349B2 (en) | 2016-02-09 | 2023-09-05 | President And Fellows Of Harvard College | DNA-guided gene editing and regulation |
RU2016104674A (ru) | 2016-02-11 | 2017-08-16 | Анатолий Викторович Зазуля | Устройство модификации эритроцита с механизмом направленного транспорта лекарственного средства для функций генной терапии crispr/cas9 |
US11666666B2 (en) | 2016-02-11 | 2023-06-06 | The Regents Of The University Of California | Methods and compositions for modifying a mutant dystrophin gene in a cell's genome |
US20190225963A1 (en) | 2016-02-15 | 2019-07-25 | Temple University - Of The Commonwealth System Of Higher Education | Excision of retroviral nucleic acid sequences |
US9896696B2 (en) | 2016-02-15 | 2018-02-20 | Benson Hill Biosystems, Inc. | Compositions and methods for modifying genomes |
CN105647962A (zh) | 2016-02-15 | 2016-06-08 | 浙江大学 | 运用CRISPR-Cas9系统敲除水稻MIRNA393b茎环序列的基因编辑方法 |
CN105594664B (zh) | 2016-02-16 | 2018-10-02 | 湖南师范大学 | 一种基因敲除选育stat1a基因缺失型斑马鱼的方法 |
CN105647969B (zh) | 2016-02-16 | 2020-12-15 | 湖南师范大学 | 一种基因敲除选育stat1a基因缺失型斑马鱼的方法 |
WO2017143042A2 (en) | 2016-02-16 | 2017-08-24 | Yale University | Compositions for enhancing targeted gene editing and methods of use thereof |
CN105624187A (zh) | 2016-02-17 | 2016-06-01 | 天津大学 | 酿酒酵母基因组定点突变的方法 |
CN109072243A (zh) | 2016-02-18 | 2018-12-21 | 哈佛学院董事及会员团体 | 通过crispr-cas系统进行的分子记录的方法和系统 |
CN105646719B (zh) | 2016-02-24 | 2019-12-20 | 无锡市妇幼保健院 | 一种高效定点转基因的工具及其应用 |
US20170246260A1 (en) | 2016-02-25 | 2017-08-31 | Agenovir Corporation | Modified antiviral nuclease |
US20170247703A1 (en) | 2016-02-25 | 2017-08-31 | Agenovir Corporation | Antiviral nuclease methods |
EP3420077A4 (en) | 2016-02-25 | 2019-12-25 | Agenovir Corporation | VIRAL AND ONCOVIRAL NUCLEASE TREATMENT |
WO2017147278A1 (en) | 2016-02-25 | 2017-08-31 | The Children's Medical Center Corporation | Customized class switch of immunoglobulin genes in lymphoma and hybridoma by crispr/cas9 technology |
CN114908093A (zh) | 2016-02-26 | 2022-08-16 | 朗泽科技新西兰有限公司 | 用于c1固定菌的crispr/cas系统 |
US10538750B2 (en) | 2016-02-29 | 2020-01-21 | Agilent Technologies, Inc. | Methods and compositions for blocking off-target nucleic acids from cleavage by CRISPR proteins |
CN105671070B (zh) | 2016-03-03 | 2019-03-19 | 江南大学 | 一种用于枯草芽孢杆菌基因组编辑的CRISPRCas9系统及其构建方法 |
CN109312340A (zh) | 2016-03-04 | 2019-02-05 | 爱迪塔斯医药公司 | 用于癌症免疫疗法的crispr-cpf1相关方法、组合物和组分 |
CN107177591A (zh) | 2016-03-09 | 2017-09-19 | 北京大学 | 利用CRISPR技术编辑CCR5基因的sgRNA序列及其用途 |
CN105821040B (zh) | 2016-03-09 | 2018-12-14 | 李旭 | 联合免疫基因抑制高危型HPV表达的sgRNA、基因敲除载体及其应用 |
CN105821039B (zh) | 2016-03-09 | 2020-02-07 | 李旭 | 联合免疫基因抑制HBV复制的特异性sgRNA、表达载体及其应用 |
CN105861547A (zh) | 2016-03-10 | 2016-08-17 | 黄捷 | 身份证号码永久嵌入基因组的方法 |
CA3010628A1 (en) | 2016-03-11 | 2017-09-14 | Pioneer Hi-Bred International, Inc. | Novel cas9 systems and methods of use |
WO2017160752A1 (en) | 2016-03-14 | 2017-09-21 | Intellia Therapeutics, Inc. | Methods and compositions for gene editing |
CN109153994A (zh) | 2016-03-14 | 2019-01-04 | 爱迪塔斯医药公司 | 用于治疗β-血红蛋白病的CRISPR/CAS相关方法和组合物 |
WO2017160689A1 (en) | 2016-03-15 | 2017-09-21 | University Of Massachusetts | Anti-crispr compounds and methods of use |
WO2017157422A1 (en) | 2016-03-15 | 2017-09-21 | Carrier Corporation | Refrigerated sales cabinet |
EP3219799A1 (en) | 2016-03-17 | 2017-09-20 | IMBA-Institut für Molekulare Biotechnologie GmbH | Conditional crispr sgrna expression |
WO2017161068A1 (en) | 2016-03-18 | 2017-09-21 | President And Fellows Of Harvard College | Mutant cas proteins |
US11512311B2 (en) | 2016-03-25 | 2022-11-29 | Editas Medicine, Inc. | Systems and methods for treating alpha 1-antitrypsin (A1AT) deficiency |
WO2017165826A1 (en) | 2016-03-25 | 2017-09-28 | Editas Medicine, Inc. | Genome editing systems comprising repair-modulating enzyme molecules and methods of their use |
WO2017172645A2 (en) | 2016-03-28 | 2017-10-05 | The Charles Stark Draper Laboratory, Inc. | Bacteriophage engineering methods |
CN106047803A (zh) | 2016-03-28 | 2016-10-26 | 青岛市胶州中心医院 | CRISPR/Cas9靶向敲除兔BMP2基因的细胞模型及其应用 |
WO2017173004A1 (en) | 2016-03-30 | 2017-10-05 | Mikuni Takayasu | A method for in vivo precise genome editing |
WO2017173054A1 (en) | 2016-03-30 | 2017-10-05 | Intellia Therapeutics, Inc. | Lipid nanoparticle formulations for crispr/cas components |
WO2017172860A1 (en) | 2016-03-31 | 2017-10-05 | President And Fellows Of Harvard College | Methods and compositions for the single tube preparation of sequencing libraries using cas9 |
CN109073212B (zh) | 2016-03-31 | 2019-12-31 | 埃克森美孚化学专利公司 | 燃烧器、炉,以及使用这种炉的蒸汽裂化工艺 |
WO2017173092A1 (en) | 2016-03-31 | 2017-10-05 | The Regents Of The University Of California | Methods for genome editing in zygotes |
US10301619B2 (en) | 2016-04-01 | 2019-05-28 | New England Biolabs, Inc. | Compositions and methods relating to synthetic RNA polynucleotides created from synthetic DNA oligonucleotides |
CN106167525B (zh) | 2016-04-01 | 2019-03-19 | 北京康明百奥新药研发有限公司 | 筛选超低岩藻糖细胞系的方法和应用 |
CN109072191B (zh) | 2016-04-04 | 2024-03-22 | 苏黎世联邦理工学院 | 用于蛋白生产和文库产生的哺乳动物细胞系 |
US20190093091A1 (en) | 2016-04-06 | 2019-03-28 | Temple University - Of The Commonwealth System Of Higher Education | Compositions for eradicating flavivirus infections in subjects |
CN105802980A (zh) | 2016-04-08 | 2016-07-27 | 北京大学 | Gateway兼容性CRISPR/Cas9系统及其应用 |
CN106399306B (zh) | 2016-04-12 | 2019-11-05 | 西安交通大学第一附属医院 | 靶向人lncRNA-UCA1抑制膀胱癌的sgRNA、基因载体及其应用 |
WO2017180915A2 (en) | 2016-04-13 | 2017-10-19 | Duke University | Crispr/cas9-based repressors for silencing gene targets in vivo and methods of use |
EP4047092A1 (en) | 2016-04-13 | 2022-08-24 | Editas Medicine, Inc. | Cas9 fusion molecules, gene editing systems, and methods of use thereof |
WO2017180711A1 (en) | 2016-04-13 | 2017-10-19 | Editas Medicine, Inc. | Grna fusion molecules, gene editing systems, and methods of use thereof |
CN109312308A (zh) | 2016-04-14 | 2019-02-05 | 亿阳集团美国硅谷公司 | 通过使用核酸酶来进行人神经干细胞的基因组编辑 |
WO2017178590A1 (en) | 2016-04-14 | 2017-10-19 | Université de Lausanne | Treatment and/or prevention of dna-triplet repeat diseases or disorders |
CN105821116A (zh) | 2016-04-15 | 2016-08-03 | 扬州大学 | 一种绵羊mstn基因定向敲除及其影响成肌分化的检测方法 |
US20200172935A1 (en) | 2016-04-16 | 2020-06-04 | Ohio State Innovation Foundation | Modified cpf1 mrna, modified guide rna, and uses thereof |
US20190119678A1 (en) | 2016-04-18 | 2019-04-25 | Ruprecht-Karls-Universität Heidelberg | Means and methods for inactivating therapeutic dna in a cell |
WO2017184334A1 (en) | 2016-04-18 | 2017-10-26 | The Board Of Regents Of The University Of Texas System | Generation of genetically engineered animals by crispr/cas9 genome editing in spermatogonial stem cells |
CN106086062A (zh) | 2016-04-19 | 2016-11-09 | 上海市农业科学院 | 一种获得番茄基因组定点敲除突变体的方法 |
WO2017184786A1 (en) | 2016-04-19 | 2017-10-26 | The Broad Institute Inc. | Cpf1 complexes with reduced indel activity |
AU2017257274B2 (en) | 2016-04-19 | 2023-07-13 | Massachusetts Institute Of Technology | Novel CRISPR enzymes and systems |
KR102670601B1 (ko) | 2016-04-19 | 2024-05-29 | 더 브로드 인스티튜트, 인코퍼레이티드 | 신규한 crispr 효소 및 시스템 |
CN105886616B (zh) | 2016-04-20 | 2020-08-07 | 广东省农业科学院农业生物基因研究中心 | 一种用于猪基因编辑的高效特异性sgRNA识别位点引导序列及其筛选方法 |
CN105821075B (zh) | 2016-04-22 | 2017-09-12 | 湖南农业大学 | 一种茶树咖啡因合成酶CRISPR/Cas9基因组编辑载体的构建方法 |
CN107304435A (zh) | 2016-04-22 | 2017-10-31 | 中国科学院青岛生物能源与过程研究所 | 一种Cas9/RNA系统及其应用 |
US11248216B2 (en) | 2016-04-25 | 2022-02-15 | The Regents Of The University Of California | Methods and compositions for genomic editing |
CN105861552B (zh) | 2016-04-25 | 2019-10-11 | 西北农林科技大学 | 一种T7 RNA聚合酶介导的CRISPR/Cas9基因编辑系统的构建方法 |
CN107326046A (zh) | 2016-04-28 | 2017-11-07 | 上海邦耀生物科技有限公司 | 一种提高外源基因同源重组效率的方法 |
US11608499B2 (en) | 2016-04-29 | 2023-03-21 | Basf Plant Science Company Gmbh | Methods for modification of target nucleic acids |
CN105886534A (zh) | 2016-04-29 | 2016-08-24 | 苏州溯源精微生物科技有限公司 | 一种抑制肿瘤转移的方法 |
CN105821049B (zh) | 2016-04-29 | 2019-06-04 | 中国农业大学 | 一种Fbxo40基因敲除猪的制备方法 |
GB201819504D0 (en) | 2016-05-01 | 2019-01-16 | Neemo Inc | Harnessing heterologous and endogenous crispr-cas machineries for efficient markerless genome editing in clostridium |
WO2017192544A1 (en) | 2016-05-02 | 2017-11-09 | Massachusetts Institute Of Technology | AMPHIPHILIC NANOPARTICLES FOR CODELIVERY OF WATER-INSOLUBLE SMALL MOLECULES AND RNAi |
WO2017191210A1 (en) | 2016-05-04 | 2017-11-09 | Novozymes A/S | Genome editing by crispr-cas9 in filamentous fungal host cells |
CN105950639A (zh) | 2016-05-04 | 2016-09-21 | 广州美格生物科技有限公司 | 金黄色葡萄球菌CRISPR/Cas9系统的制备及其在构建小鼠模型中的应用 |
CN106244591A (zh) | 2016-08-23 | 2016-12-21 | 苏州吉玛基因股份有限公司 | 修饰crRNA在CRISPR/Cpf1基因编辑系统中的应用 |
EP3452498B1 (en) | 2016-05-05 | 2023-07-05 | Duke University | Crispr/cas-related compositions for treating duchenne muscular dystrophy |
CN105907785B (zh) | 2016-05-05 | 2020-02-07 | 苏州吉玛基因股份有限公司 | 化学合成的crRNA用于CRISPR/Cpf1系统在基因编辑中的应用 |
WO2017190664A1 (zh) | 2016-05-05 | 2017-11-09 | 苏州吉玛基因股份有限公司 | 化学合成的crRNA和修饰crRNA在CRISPR/Cpf1基因编辑系统中的应用 |
WO2017192172A1 (en) | 2016-05-05 | 2017-11-09 | Temple University - Of The Commonwealth System Of Higher Education | Rna guided eradication of varicella zoster virus |
EP3452055A4 (en) | 2016-05-06 | 2019-11-06 | Tod M. Woolf | IMPROVED METHODS OF GENOME EDITING WITH AND WITHOUT PROGRAMMABLE NUCLEASES |
CN105985985B (zh) | 2016-05-06 | 2019-12-31 | 苏州大学 | Crispr技术编辑并用igf优化的异体间充质干细胞的制备方法及在治疗心梗中应用 |
WO2017196768A1 (en) | 2016-05-09 | 2017-11-16 | President And Fellows Of Harvard College | Self-targeting guide rnas in crispr system |
CN105861554B (zh) | 2016-05-10 | 2020-01-31 | 华南农业大学 | 一种基于对Rbmy基因进行编辑来实现动物性别控制的方法和应用 |
US20190225956A1 (en) | 2016-05-10 | 2019-07-25 | United States Government As Represented By The Department Of Veterans Affairs | Lentiviral delivery of crispr/cas constructs that cleave genes essential for hiv-1 infection and replication |
US20190345483A1 (en) | 2016-05-12 | 2019-11-14 | President And Fellows Of Harvard College | AAV Split Cas9 Genome Editing and Transcriptional Regulation |
JP2019519501A (ja) | 2016-05-12 | 2019-07-11 | ブライアン ピー. ハンリーBrian P. HANLEY | ヒトおよび動物における体細胞の大部分へのcrisprおよび他の遺伝子治療薬の安全な送達 |
CN107365786A (zh) | 2016-05-12 | 2017-11-21 | 中国科学院微生物研究所 | 一种将spacer序列克隆至CRISPR-Cas9系统中的方法及其应用 |
CN106011171B (zh) | 2016-05-18 | 2019-10-11 | 西北农林科技大学 | 一种利用CRISPR/Cas9技术基于SSA修复的基因无缝编辑方法 |
CN105907758B (zh) | 2016-05-18 | 2020-06-05 | 世翱(上海)生物医药科技有限公司 | CRISPR-Cas9引导序列及其引物、转基因表达载体及其构建方法 |
CN105838733A (zh) | 2016-05-18 | 2016-08-10 | 云南省农业科学院花卉研究所 | Cas9 介导的香石竹基因编辑载体和应用 |
CN106446600B (zh) | 2016-05-20 | 2019-10-18 | 同济大学 | 一种基于CRISPR/Cas9的sgRNA的设计方法 |
EP3457840B1 (en) | 2016-05-20 | 2024-04-10 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Methods for breaking immunological tolerance using multiple guide rnas |
US20190201551A1 (en) | 2016-05-23 | 2019-07-04 | Washington University | Pulmonary targeted cas9/crispr for in vivo editing of disease genes |
WO2017205290A1 (en) | 2016-05-23 | 2017-11-30 | The Trustees Of Columbia University In The City Of New York | Bypassing the pam requirement of the crispr-cas system |
CN105950560B (zh) | 2016-05-24 | 2019-07-23 | 苏州系统医学研究所 | 人源化pd-l1肿瘤细胞系及具有该细胞系的动物模型与应用 |
CN106011167B (zh) | 2016-05-27 | 2019-11-01 | 上海交通大学 | 雄性不育基因OsDPW2的应用及水稻育性恢复的方法 |
EP3464594A1 (en) | 2016-06-01 | 2019-04-10 | Kws Saat Se | Hybrid nucleic acid sequences for genome engineering |
WO2017208247A1 (en) | 2016-06-02 | 2017-12-07 | Yissum Research Development Company Of The Hebrew University Of Jerusalem Ltd. | Assay for the removal of methyl-cytosine residues from dna |
GB2552861B (en) | 2016-06-02 | 2019-05-15 | Sigma Aldrich Co Llc | Using programmable DNA binding proteins to enhance targeted genome modification |
US11140883B2 (en) | 2016-06-03 | 2021-10-12 | Auburn University | Gene editing of reproductive hormones to sterilize aquatic animals |
CA3026332A1 (en) | 2016-06-03 | 2017-12-14 | Temple University - Of The Commonwealth System Of Higher Education | Negative feedback regulation of hiv-1 by gene editing strategy |
WO2017213898A2 (en) | 2016-06-07 | 2017-12-14 | Temple University - Of The Commonwealth System Of Higher Education | Rna guided compositions for preventing and treating hepatitis b virus infections |
CN106119275A (zh) | 2016-06-07 | 2016-11-16 | 湖北大学 | 基于CRISPR/Cas9技术将非糯性水稻株系改造成糯性株系的打靶载体和方法 |
US10767175B2 (en) | 2016-06-08 | 2020-09-08 | Agilent Technologies, Inc. | High specificity genome editing using chemically modified guide RNAs |
CN106086008B (zh) | 2016-06-10 | 2019-03-12 | 中国农业科学院植物保护研究所 | 烟粉虱MED隐种TRP基因的CRISPR/cas9系统及其应用 |
WO2017222834A1 (en) | 2016-06-10 | 2017-12-28 | City Of Hope | Compositions and methods for mitochondrial genome editing |
BR112018076027A2 (pt) | 2016-06-14 | 2019-03-26 | Pioneer Hi-Bred International, Inc. | método para modificar uma sequência-alvo no genoma de uma célula vegetal; método para editar uma sequência de nucleotídeos no genoma de uma célula vegetal; método para modificar simultaneamente múltiplas sequências-alvo no genoma de uma célula vegetal; método para modificar uma sequênciaalvo de dna no genoma de uma célula vegetal e modelo de modificação de polinucleotídeo |
CN106434752A (zh) | 2016-06-14 | 2017-02-22 | 南通大学附属医院 | 敲除Wnt3a基因的过程及其验证方法 |
CN105950633B (zh) | 2016-06-16 | 2019-05-03 | 复旦大学 | 基因OsARF4在控制水稻粒长和千粒重中的应用 |
CN106167808A (zh) | 2016-06-16 | 2016-11-30 | 郑州大学 | 一种基于CRISPR/Cas9技术消除mecA质粒的方法 |
CN106167821A (zh) | 2016-06-16 | 2016-11-30 | 郑州大学 | 一种金黄色葡萄球菌crispr位点检测试剂盒及检测方法 |
WO2017219033A1 (en) | 2016-06-17 | 2017-12-21 | Montana State University | Bidirectional targeting for genome editing |
KR20230156150A (ko) | 2016-06-17 | 2023-11-13 | 더 브로드 인스티튜트, 인코퍼레이티드 | 제vi형 crispr 오솔로그 및 시스템 |
CN105950626B (zh) | 2016-06-17 | 2018-09-28 | 新疆畜牧科学院生物技术研究所 | 基于CRISPR/Cas9获得不同毛色绵羊的方法及靶向ASIP基因的sgRNA |
US20190330603A1 (en) | 2016-06-17 | 2019-10-31 | Genesis Technologies Limited | Crispr-cas system, materials and methods |
US20170362635A1 (en) | 2016-06-20 | 2017-12-21 | University Of Washington | Muscle-specific crispr/cas9 editing of genes |
WO2017223107A1 (en) | 2016-06-20 | 2017-12-28 | Unity Biotechnology, Inc. | Genome modifying enzyme therapy for diseases modulated by senescent cells |
EP3472310A1 (en) | 2016-06-20 | 2019-04-24 | Pioneer Hi-Bred International, Inc. | Novel cas systems and methods of use |
JP7160465B2 (ja) | 2016-06-20 | 2022-10-25 | キージーン ナムローゼ フェンノートシャップ | 植物細胞における標的化dna変更のための方法 |
CN106148370A (zh) | 2016-06-21 | 2016-11-23 | 苏州瑞奇生物医药科技有限公司 | 肥胖症大鼠动物模型和构建方法 |
JP2019522481A (ja) | 2016-06-22 | 2019-08-15 | アイカーン スクール オブ メディシン アット マウント サイナイ | 自己切断リボザイムを利用したrnaのウイルス送達およびそのcrisprベースの適用 |
EP3475424A1 (en) | 2016-06-22 | 2019-05-01 | ProQR Therapeutics II B.V. | Single-stranded rna-editing oligonucleotides |
CN106119283A (zh) | 2016-06-24 | 2016-11-16 | 广西壮族自治区水牛研究所 | 一种利用CRISPR‑Cas9靶向敲除MSTN基因的方法 |
CN106047877B (zh) | 2016-06-24 | 2019-01-11 | 中山大学附属第一医院 | 一种靶向敲除FTO基因的sgRNA及CRISPR/Cas9慢病毒系统与应用 |
CN105925608A (zh) | 2016-06-24 | 2016-09-07 | 广西壮族自治区水牛研究所 | 一种利用CRISPR-Cas9靶向敲除ALK6基因的方法 |
WO2018005691A1 (en) | 2016-06-29 | 2018-01-04 | The Regents Of The University Of California | Efficient genetic screening method |
CN106148286B (zh) | 2016-06-29 | 2019-10-29 | 牛刚 | 一种用于检测热原的细胞模型的构建方法和细胞模型及热原检测试剂盒 |
WO2018005873A1 (en) | 2016-06-29 | 2018-01-04 | The Broad Institute Inc. | Crispr-cas systems having destabilization domain |
AU2017286835B2 (en) | 2016-06-29 | 2023-12-14 | Crispr Therapeutics Ag | Compositions and methods for gene editing |
US10927383B2 (en) | 2016-06-30 | 2021-02-23 | Ethris Gmbh | Cas9 mRNAs |
WO2018005117A1 (en) | 2016-07-01 | 2018-01-04 | Microsoft Technology Licensing, Llc | Storage through iterative dna editing |
US10892034B2 (en) | 2016-07-01 | 2021-01-12 | Microsoft Technology Licensing, Llc | Use of homology direct repair to record timing of a molecular event |
US20180004537A1 (en) | 2016-07-01 | 2018-01-04 | Microsoft Technology Licensing, Llc | Molecular State Machines |
WO2018009562A1 (en) | 2016-07-05 | 2018-01-11 | The Johns Hopkins University | Crispr/cas9-based compositions and methods for treating retinal degenerations |
WO2018009520A1 (en) | 2016-07-06 | 2018-01-11 | Novozymes A/S | Improving a microorganism by crispr-inhibition |
CN106191057B (zh) | 2016-07-06 | 2018-12-25 | 中山大学 | 一种用于敲除人CYP2E1基因的sgRNA序列、CYP2E1基因缺失细胞株的构建方法及其应用 |
CN106051058A (zh) | 2016-07-07 | 2016-10-26 | 上海格昆机电科技有限公司 | 用于航天贮箱和粒子治疗仪的旋转机架及其传动机构 |
US11845929B2 (en) | 2016-07-08 | 2023-12-19 | Ohio State Innovation Foundation | Modified nucleic acids, hybrid guide RNAs, and uses thereof |
CN107586777A (zh) | 2016-07-08 | 2018-01-16 | 上海吉倍生物技术有限公司 | 人PDCD1基因sgRNA的用途及其相关药物 |
CN106047930B (zh) | 2016-07-12 | 2020-05-19 | 北京百奥赛图基因生物技术有限公司 | 一种PS1基因条件性敲除flox大鼠的制备方法 |
WO2018013821A1 (en) | 2016-07-13 | 2018-01-18 | Dsm Ip Assets B.V. | A crispr-cas system for an algal host cell |
WO2018013990A1 (en) | 2016-07-15 | 2018-01-18 | Zymergen Inc. | Scarless dna assembly and genome editing using crispr/cpf1 and dna ligase |
CN106191062B (zh) | 2016-07-18 | 2019-06-14 | 广东华南疫苗股份有限公司 | 一种tcr-/pd-1-双阴性t细胞及其构建方法 |
CN106190903B (zh) | 2016-07-18 | 2019-04-02 | 华中农业大学 | 鸭疫里氏杆菌Cas9基因缺失突变株及其应用 |
CN106191061B (zh) | 2016-07-18 | 2019-06-18 | 暨南大学 | 一种特异靶向人ABCG2基因的sgRNA导向序列及其应用 |
CN106434651B (zh) | 2016-07-19 | 2021-05-18 | 广西大学 | 根癌农杆菌和CRISPR-Cas9介导的基因定点插入失活方法及其应用 |
EP3487523B1 (en) | 2016-07-19 | 2023-09-06 | Duke University | Therapeutic applications of cpf1-based genome editing |
KR20190031306A (ko) | 2016-07-21 | 2019-03-25 | 맥스시티 인코포레이티드 | 게놈 dna를 변경하기 위한 방법 및 조성물 |
CN106191064B (zh) | 2016-07-22 | 2019-06-07 | 中国农业大学 | 一种制备mc4r基因敲除猪的方法 |
WO2018015444A1 (en) | 2016-07-22 | 2018-01-25 | Novozymes A/S | Crispr-cas9 genome editing with multiple guide rnas in filamentous fungi |
CN106191107B (zh) | 2016-07-22 | 2020-03-20 | 湖南农业大学 | 一种降低水稻籽粒落粒性的分子改良方法 |
WO2018022480A1 (en) | 2016-07-25 | 2018-02-01 | Mayo Foundation For Medical Education And Research | Treating cancer |
CN106222193B (zh) | 2016-07-26 | 2019-09-20 | 浙江大学 | 一种重组载体及无转基因基因编辑植株的筛选方法 |
WO2018018979A1 (zh) | 2016-07-26 | 2018-02-01 | 浙江大学 | 植物重组载体及无转基因成分的基因编辑植株的筛选方法 |
WO2018022634A1 (en) | 2016-07-26 | 2018-02-01 | The General Hospital Corporation | Variants of crispr from prevotella and francisella 1 (cpf1) |
CN106191099A (zh) | 2016-07-27 | 2016-12-07 | 苏州泓迅生物科技有限公司 | 一种基于CRISPR‑Cas9系统的酿酒酵母基因组并行多重编辑载体及其应用 |
CN106086061A (zh) | 2016-07-27 | 2016-11-09 | 苏州泓迅生物科技有限公司 | 一种基于CRISPR‑Cas9系统的酿酒酵母基因组编辑载体及其应用 |
CN106434748A (zh) | 2016-07-29 | 2017-02-22 | 中国科学院重庆绿色智能技术研究院 | 一种热激诱导型 Cas9 酶转基因斑马鱼的研制及应用 |
CN106191124B (zh) | 2016-07-29 | 2019-10-11 | 中国科学院重庆绿色智能技术研究院 | 一种利用鱼卵保存液提高CRISPR-Cas9基因编辑和传代效率的鱼类育种方法 |
CN106191113B (zh) | 2016-07-29 | 2020-01-14 | 中国农业大学 | 一种mc3r基因敲除猪的制备方法 |
CN106191114B (zh) | 2016-07-29 | 2020-02-11 | 中国科学院重庆绿色智能技术研究院 | 利用CRISPR-Cas9系统敲除鱼类MC4R基因的育种方法 |
GB201613135D0 (en) | 2016-07-29 | 2016-09-14 | Medical Res Council | Genome editing |
CN106434688A (zh) | 2016-08-01 | 2017-02-22 | 云南纳博生物科技有限公司 | 一种水稻直立密穗dep1基因人工定点突变体及其应用 |
EP3491134B1 (en) | 2016-08-01 | 2023-10-11 | University of Pittsburgh - of The Commonwealth System of Higher Education | Human induced pluripotent stem cells for high efficiency genetic engineering |
CN106011150A (zh) | 2016-08-01 | 2016-10-12 | 云南纳博生物科技有限公司 | 一种水稻穗粒数Gn1a基因人工定点突变体及其应用 |
JP7184364B2 (ja) | 2016-08-02 | 2022-12-06 | 国立大学法人京都大学 | ゲノム編集のための方法 |
EP3494220A1 (en) | 2016-08-02 | 2019-06-12 | Editas Medicine, Inc. | Compositions and methods for treating cep290 associated disease |
SG11201900907YA (en) | 2016-08-03 | 2019-02-27 | Harvard College | Adenosine nucleobase editors and uses thereof |
CN106282241A (zh) | 2016-08-05 | 2017-01-04 | 无锡市第二人民医院 | 通过CRISPR/Cas9得到敲除bmp2a基因的斑马鱼的方法 |
WO2018031683A1 (en) | 2016-08-09 | 2018-02-15 | President And Fellows Of Harvard College | Programmable cas9-recombinase fusion proteins and uses thereof |
CN106222203A (zh) | 2016-08-10 | 2016-12-14 | 云南纳博生物科技有限公司 | 利用CRISPR/Cas技术获得家蚕丝素重链基因突变体及突变方法和应用 |
KR101710026B1 (ko) | 2016-08-10 | 2017-02-27 | 주식회사 무진메디 | Cas9 단백질 및 가이드 RNA의 혼성체를 함유하는 나노 리포좀 전달체 조성물 |
CN106172238B (zh) | 2016-08-12 | 2019-01-22 | 中南大学 | miR-124基因敲除小鼠动物模型的构建方法和应用 |
CN106222177B (zh) | 2016-08-13 | 2018-06-26 | 江苏集萃药康生物科技有限公司 | 一种靶向人STAT6的CRISPR-Cas9系统及其用于治疗过敏性疾病的应用 |
WO2018035300A1 (en) | 2016-08-17 | 2018-02-22 | The Regents Of The University Of California | Split trans-complementing gene-drive system for suppressing aedes aegypti mosquitos |
US11810649B2 (en) | 2016-08-17 | 2023-11-07 | The Broad Institute, Inc. | Methods for identifying novel gene editing elements |
US20210166783A1 (en) | 2016-08-17 | 2021-06-03 | The Broad Institute, Inc. | Methods for identifying class 2 crispr-cas systems |
KR20190065251A (ko) | 2016-08-18 | 2019-06-11 | 더 리젠츠 오브 더 유니버시티 오브 캘리포니아 | 모듈러 AAV 전달 시스템을 통한 CRISPR-Cas 게놈 가공 |
WO2018035423A1 (en) | 2016-08-19 | 2018-02-22 | Bluebird Bio, Inc. | Genome editing enhancers |
CN109963945A (zh) | 2016-08-20 | 2019-07-02 | 阿维利诺美国实验室股份有限公司 | 单一向导rna、crispr/cas9系统及其使用方法 |
CN106191071B (zh) | 2016-08-22 | 2018-09-04 | 广州资生生物科技有限公司 | 一种CRISPR-Cas9系统及其用于治疗乳腺癌疾病的应用 |
CN106191116B (zh) | 2016-08-22 | 2019-10-08 | 西北农林科技大学 | 基于CRISPR/Cas9的外源基因敲入整合系统及其建立方法和应用 |
CN106244555A (zh) | 2016-08-23 | 2016-12-21 | 广州医科大学附属第三医院 | 一种提高基因打靶的效率的方法及β‑球蛋白基因位点的碱基原位修复方法 |
CN106086028B (zh) | 2016-08-23 | 2019-04-23 | 中国农业科学院作物科学研究所 | 一种通过基因组编辑提高水稻抗性淀粉含量的方法及其专用sgRNA |
MY193234A (en) | 2016-08-24 | 2022-09-27 | Sangamo Therapeutics Inc | Regulation of gene expression using engineered nucleases |
KR101856345B1 (ko) | 2016-08-24 | 2018-06-20 | 경상대학교산학협력단 | CRISPR/Cas9 시스템을 이용하여 APOBEC3H 및 APOBEC3CH 이중-넉아웃 고양이를 제조하는 방법 |
US11542509B2 (en) | 2016-08-24 | 2023-01-03 | President And Fellows Of Harvard College | Incorporation of unnatural amino acids into proteins using base editing |
SG10201913948PA (en) | 2016-08-24 | 2020-03-30 | Sangamo Therapeutics Inc | Engineered target specific nucleases |
CN106109417A (zh) | 2016-08-24 | 2016-11-16 | 李因传 | 一种肝细胞膜仿生脂质体药物载体、制作方法及其应用 |
CN106244609A (zh) | 2016-08-24 | 2016-12-21 | 浙江理工大学 | 一种调节pi3k‑akt信号通路的非编码基因的筛选系统及筛选方法 |
CN106544357B (zh) | 2016-08-25 | 2018-08-21 | 湖南杂交水稻研究中心 | 一种培育镉低积累籼稻品种的方法 |
CN107784200B (zh) | 2016-08-26 | 2020-11-06 | 深圳华大生命科学研究院 | 一种筛选新型CRISPR-Cas系统的方法和装置 |
CN106350540A (zh) | 2016-08-26 | 2017-01-25 | 苏州系统医学研究所 | 一种由慢病毒介导的高效可诱导型CRISPR/Cas9基因敲除载体及其应用 |
CN106318973B (zh) | 2016-08-26 | 2019-09-13 | 深圳市第二人民医院 | 一种基于CRISPR-Cas9的基因调控装置及基因调控方法 |
CN106399375A (zh) | 2016-08-31 | 2017-02-15 | 南京凯地生物科技有限公司 | 利用CRISPR/Cas9敲除人PD‑1基因构建靶向CD19CAR‑T细胞的方法 |
CN106480097A (zh) | 2016-10-13 | 2017-03-08 | 南京凯地生物科技有限公司 | 利用CRISPR/Cas9技术敲除人PD‑1基因构建可靶向MSLN新型CAR‑T细胞的方法及其应用 |
CN106399367A (zh) | 2016-08-31 | 2017-02-15 | 深圳市卫光生物制品股份有限公司 | 提高crispr介导的同源重组效率的方法 |
CN107794272B (zh) | 2016-09-06 | 2021-10-12 | 中国科学院上海营养与健康研究所 | 一种高特异性的crispr基因组编辑体系 |
CN106367435B (zh) | 2016-09-07 | 2019-11-08 | 电子科技大学 | 一种水稻miRNA定向敲除的方法 |
CN106399311A (zh) | 2016-09-07 | 2017-02-15 | 同济大学 | 用于Chip‑seq全基因组结合谱的内源蛋白标记的方法 |
CN106399377A (zh) | 2016-09-07 | 2017-02-15 | 同济大学 | 一种基于CRISPR/Cas9高通量技术筛选药物靶点基因的方法 |
WO2018048827A1 (en) | 2016-09-07 | 2018-03-15 | Massachusetts Institute Of Technology | Rna-guided endonuclease-based dna assembly |
WO2018049168A1 (en) | 2016-09-09 | 2018-03-15 | The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University | High-throughput precision genome editing |
CN107574179B (zh) | 2016-09-09 | 2018-07-10 | 康码(上海)生物科技有限公司 | 一种为克鲁维酵母优化的CRISPR/Cas9高效基因编辑系统 |
EP3512943B1 (en) | 2016-09-14 | 2023-04-12 | Yeda Research and Development Co. Ltd. | Crisp-seq, an integrated method for massively parallel single cell rna-seq and crispr pooled screens |
CN106318934B (zh) | 2016-09-21 | 2020-06-05 | 上海交通大学 | 胡萝卜β(1,2)木糖转移酶的基因全序列及用于转染双子叶植物的CRISPR/CAS9的质粒构建 |
CN106957858A (zh) | 2016-09-23 | 2017-07-18 | 西北农林科技大学 | 一种利用CRISPR/Cas9系统共同敲除绵羊MSTN、ASIP、BCO2基因的方法 |
US20180127786A1 (en) | 2016-09-23 | 2018-05-10 | Casebia Therapeutics Limited Liability Partnership | Compositions and methods for gene editing |
CN109715804A (zh) | 2016-09-23 | 2019-05-03 | 帝斯曼知识产权资产管理有限公司 | 用于宿主细胞的指导rna表达系统 |
EP3497215B1 (en) | 2016-09-28 | 2024-01-10 | Cellivery Therapeutics, Inc. | Cell-permeable (cp)-cas9 recombinant protein and uses thereof |
CN107881184B (zh) | 2016-09-30 | 2021-08-27 | 中国科学院分子植物科学卓越创新中心 | 一种基于Cpf1的DNA体外拼接方法 |
CN107880132B (zh) | 2016-09-30 | 2022-06-17 | 北京大学 | 一种融合蛋白及使用其进行同源重组的方法 |
EA201990861A1 (ru) | 2016-09-30 | 2019-09-30 | Те Риджентс Оф Те Юниверсити Оф Калифорния | Рнк-направляемые модифицирующие нуклеиновые кислоты ферменты и способы их применения |
EP3518656A4 (en) | 2016-09-30 | 2020-09-30 | Monsanto Technology LLC | METHOD OF SELECTING TARGETS FOR SITE-SPECIFIC GENOME MODIFICATION IN PLANTS |
CN106480027A (zh) | 2016-09-30 | 2017-03-08 | 重庆高圣生物医药有限责任公司 | CRISPR/Cas9 靶向敲除人PD‑1基因及其特异性gRNA |
CA3038982A1 (en) | 2016-09-30 | 2018-04-05 | The Regents Of The University Of California | Rna-guided nucleic acid modifying enzymes and methods of use thereof |
US11730823B2 (en) | 2016-10-03 | 2023-08-22 | President And Fellows Of Harvard College | Delivery of therapeutic RNAs via ARRDC1-mediated microvesicles |
US20190241899A1 (en) | 2016-10-05 | 2019-08-08 | President And Fellows Of Harvard College | Methods of Crispr Mediated Genome Modulation in V. Natriegens |
US10669539B2 (en) | 2016-10-06 | 2020-06-02 | Pioneer Biolabs, Llc | Methods and compositions for generating CRISPR guide RNA libraries |
US10717978B2 (en) | 2016-10-07 | 2020-07-21 | Integrated Dna Technologies, Inc. | S. pyogenes CAS9 mutant genes and polypeptides encoded by same |
CN106479985A (zh) | 2016-10-09 | 2017-03-08 | 上海吉玛制药技术有限公司 | 病毒介导的Cpf1蛋白在CRISPR/Cpf1基因编辑系统中的应用 |
US20190365862A1 (en) | 2016-10-12 | 2019-12-05 | Temple University - Of The Commonwealth System Of Higher Education | Combination therapies for eradicating flavivirus infections in subjects |
IT201600102542A1 (it) | 2016-10-12 | 2018-04-12 | Univ Degli Studi Di Trento | Plasmide e sistema lentivirale contenente un circuito autolimitante della Cas9 che ne incrementa la sicurezza. |
CN106434663A (zh) | 2016-10-12 | 2017-02-22 | 遵义医学院 | CRISPR/Cas9靶向敲除人ezrin基因增强子关键区的方法及其特异性gRNA |
CN106434782B (zh) | 2016-10-14 | 2020-01-10 | 南京工业大学 | 一种产顺式-4-羟脯氨酸的方法 |
CN110214180A (zh) | 2016-10-14 | 2019-09-06 | 哈佛大学的校长及成员们 | 核碱基编辑器的aav递送 |
CA3040481A1 (en) | 2016-10-14 | 2018-04-19 | The General Hospital Corporation | Epigenetically regulated site-specific nucleases |
US20190330620A1 (en) | 2016-10-14 | 2019-10-31 | Emendobio Inc. | Rna compositions for genome editing |
US11840694B2 (en) | 2016-10-17 | 2023-12-12 | Nanyang Technological University | Truncated CRISPR-Cas proteins for DNA targeting |
US10640810B2 (en) | 2016-10-19 | 2020-05-05 | Drexel University | Methods of specifically labeling nucleic acids using CRISPR/Cas |
US20180127759A1 (en) | 2016-10-28 | 2018-05-10 | Massachusetts Institute Of Technology | Dynamic genome engineering |
WO2018081534A1 (en) | 2016-10-28 | 2018-05-03 | President And Fellows Of Harvard College | Assay for exo-site binding molecules |
US20180119141A1 (en) | 2016-10-28 | 2018-05-03 | Massachusetts Institute Of Technology | Crispr/cas global regulator screening platform |
WO2018081504A1 (en) | 2016-10-28 | 2018-05-03 | Editas Medicine, Inc. | Crispr/cas-related methods and compositions for treating herpes simplex virus |
WO2018081728A1 (en) | 2016-10-31 | 2018-05-03 | Emendobio Inc. | Compositions for genome editing |
KR20190026828A (ko) | 2016-10-31 | 2019-03-13 | 가부시키가이샤 에구치 고오슈우하 | 리액터 |
US11787795B2 (en) | 2016-11-01 | 2023-10-17 | President And Fellows Of Harvard College | Inhibitors of RNA guided nucleases and uses thereof |
US20180245065A1 (en) | 2016-11-01 | 2018-08-30 | Novartis Ag | Methods and compositions for enhancing gene editing |
US11732258B2 (en) | 2016-11-02 | 2023-08-22 | President And Fellows Of Harvard College | Engineered guide RNA sequences for in situ detection and sequencing |
GB201618507D0 (en) | 2016-11-02 | 2016-12-14 | Stichting Voor De Technische Wetenschappen And Wageningen Univ | Microbial genome editing |
CN106544353A (zh) | 2016-11-08 | 2017-03-29 | 宁夏医科大学总医院 | 一种利用CRISPR‑Cas9清除鲍曼不动杆菌耐药性基因的方法 |
EP3538561A4 (en) | 2016-11-11 | 2020-10-21 | The Regents of The University of California | RNA-GUIDED POLYPEPTIDE VARIANTS AND METHOD OF USING |
CN106755088A (zh) | 2016-11-11 | 2017-05-31 | 广东万海细胞生物科技有限公司 | 一种自体car‑t细胞制备方法及应用 |
AU2017358264A1 (en) | 2016-11-14 | 2019-02-21 | Institute Of Genetics And Developmental Biology, Chinese Academy Of Sciences | A method for base editing in plants |
CN106566838B (zh) | 2016-11-14 | 2019-11-01 | 上海伯豪生物技术有限公司 | 一种基于CRISPR-Cas9技术的miR-126全长基因敲除试剂盒及其应用 |
CN106554969A (zh) | 2016-11-15 | 2017-04-05 | 陕西理工学院 | 基于抑菌杀菌的多靶点CRISPR/Cas9表达载体 |
CN106754912B (zh) | 2016-11-16 | 2019-11-08 | 上海交通大学 | 一类定向清除肝细胞中HBVcccDNA的质粒及制剂 |
US11485760B2 (en) | 2016-11-16 | 2022-11-01 | The Regents Of The University Of California | Inhibitors of CRISPR-Cas9 |
US20180282722A1 (en) | 2016-11-21 | 2018-10-04 | Massachusetts Institute Of Technology | Chimeric DNA:RNA Guide for High Accuracy Cas9 Genome Editing |
CN106480067A (zh) | 2016-11-21 | 2017-03-08 | 中国农业科学院烟草研究所 | 烟草NtNAC096基因控制烟草衰老的应用 |
CN110402287A (zh) | 2016-11-22 | 2019-11-01 | 综合Dna技术公司 | CRISPR/Cpf1系统和方法 |
CN106755091A (zh) | 2016-11-28 | 2017-05-31 | 中国人民解放军第三军医大学第附属医院 | 基因敲除载体,mh7a细胞nlrp1基因敲除方法 |
EP3545090A1 (en) | 2016-11-28 | 2019-10-02 | The Board of Regents of The University of Texas System | Prevention of muscular dystrophy by crispr/cpf1-mediated gene editing |
CN106480036B (zh) | 2016-11-30 | 2019-04-09 | 华南理工大学 | 一种具有启动子功能的dna片段及其应用 |
CA3045335A1 (en) | 2016-12-01 | 2018-06-07 | Universite Laval | Crispr-based treatment of friedreich ataxia |
CN106834323A (zh) | 2016-12-01 | 2017-06-13 | 安徽大学 | 一种基于维吉尼亚链霉菌IBL14基因cas7‑5‑3的基因编辑方法 |
CN107043779B (zh) | 2016-12-01 | 2020-05-12 | 中国农业科学院作物科学研究所 | 一种CRISPR/nCas9介导的定点碱基替换在植物中的应用 |
US9816093B1 (en) | 2016-12-06 | 2017-11-14 | Caribou Biosciences, Inc. | Engineered nucleic acid-targeting nucleic acids |
CN108165573B (zh) | 2016-12-07 | 2022-01-14 | 中国科学院分子植物科学卓越创新中心 | 叶绿体基因组编辑方法 |
CN106701830B (zh) | 2016-12-07 | 2020-01-03 | 湖南人文科技学院 | 一种敲除猪胚胎p66shc基因的方法 |
TWI835719B (zh) | 2016-12-08 | 2024-03-21 | 美商英特利亞醫療公司 | 經修飾之嚮導rna |
CN106544351B (zh) | 2016-12-08 | 2019-09-10 | 江苏省农业科学院 | CRISPR-Cas9体外敲除耐药基因mcr-1的方法及其专用细胞穿透肽 |
US11192929B2 (en) | 2016-12-08 | 2021-12-07 | Regents Of The University Of Minnesota | Site-specific DNA base editing using modified APOBEC enzymes |
BR112018015871B1 (pt) | 2016-12-09 | 2021-12-07 | The Broad Institute, Inc. | Sistema, método e dispositivo para detectar a presença de uma sequência alvo de ácido nucleico em uma amostra |
WO2018107103A1 (en) | 2016-12-09 | 2018-06-14 | The Broad Institute, Inc. | Crispr-systems for modifying a trait of interest in a plant |
WO2018111946A1 (en) | 2016-12-12 | 2018-06-21 | Integrated Dna Technologies, Inc. | Genome editing detection |
US11293022B2 (en) | 2016-12-12 | 2022-04-05 | Integrated Dna Technologies, Inc. | Genome editing enhancement |
CN107893074A (zh) | 2016-12-13 | 2018-04-10 | 广东赤萌医疗科技有限公司 | 一种用于敲除CXCR4基因的gRNA、表达载体、敲除系统、试剂盒 |
EA201991443A1 (ru) | 2016-12-14 | 2020-01-14 | Вагенинген Университейт | ТЕРМОСТАБИЛЬНЫЕ НУКЛЕАЗЫ Cas9 |
WO2018109101A1 (en) | 2016-12-14 | 2018-06-21 | Wageningen Universiteit | Thermostable cas9 nucleases |
KR101748575B1 (ko) | 2016-12-16 | 2017-06-20 | 주식회사 엠젠플러스 | Ins 유전자 녹아웃 당뇨병 또는 당뇨병 합병증 동물모델 및 이의 제조방법 |
WO2018112336A1 (en) | 2016-12-16 | 2018-06-21 | Ohio State Innovation Foundation | Systems and methods for dna-guided rna cleavage |
US20190338363A1 (en) | 2016-12-18 | 2019-11-07 | Selonterra, Inc. | Use of apoe4 motif-mediated genes for diagnosis and treatment of alzheimer's disease |
CN106755026A (zh) | 2016-12-18 | 2017-05-31 | 吉林大学 | sgRNA表达载体的构建及牙釉质钙化不全模型的建立 |
JP7456605B2 (ja) | 2016-12-23 | 2024-03-27 | プレジデント アンド フェローズ オブ ハーバード カレッジ | Pcsk9の遺伝子編集 |
US10745677B2 (en) | 2016-12-23 | 2020-08-18 | President And Fellows Of Harvard College | Editing of CCR5 receptor gene to protect against HIV infection |
CN107354173A (zh) | 2016-12-26 | 2017-11-17 | 浙江省医学科学院 | 基于crispr技术和水动力尾静脉注射建立肝脏特异性敲除小鼠模型的方法 |
CN106755424B (zh) | 2016-12-26 | 2020-11-06 | 郑州大学 | 一种基于crispr的大肠杆菌st131系菌株检测引物、试剂盒及检测方法 |
CN106834347A (zh) | 2016-12-27 | 2017-06-13 | 安徽省农业科学院畜牧兽医研究所 | 一种山羊cdk2基因敲除载体及其构建方法 |
CN106755097A (zh) | 2016-12-27 | 2017-05-31 | 安徽省农业科学院畜牧兽医研究所 | 一种山羊tlr4基因敲除载体及其构建方法 |
CN106868008A (zh) | 2016-12-30 | 2017-06-20 | 重庆高圣生物医药有限责任公司 | CRISPR/Cas9靶向敲除人Lin28A基因及其特异性gRNA |
CN106755077A (zh) | 2016-12-30 | 2017-05-31 | 华智水稻生物技术有限公司 | 利用crispr‑cas9技术对水稻cenh3基因定点突变的方法 |
CN106701763B (zh) | 2016-12-30 | 2019-07-19 | 重庆高圣生物医药有限责任公司 | CRISPR/Cas9靶向敲除人乙肝病毒P基因及其特异性gRNA |
CN106834341B (zh) | 2016-12-30 | 2020-06-16 | 中国农业大学 | 一种基因定点突变载体及其构建方法和应用 |
CN106701818B (zh) | 2017-01-09 | 2020-04-24 | 湖南杂交水稻研究中心 | 一种培育水稻普通核不育系的方法 |
EP3568476A1 (en) | 2017-01-11 | 2019-11-20 | Oxford University Innovation Limited | Crispr rna |
CN107012164B (zh) | 2017-01-11 | 2023-03-03 | 电子科技大学 | CRISPR/Cpf1植物基因组定向修饰功能单元、包含该功能单元的载体及其应用 |
CN110234770A (zh) | 2017-01-17 | 2019-09-13 | 基础科学研究院 | 通过dna单链断裂识别碱基编辑脱靶位点的方法 |
CN107058372A (zh) | 2017-01-18 | 2017-08-18 | 四川农业大学 | 一种应用于植物上的CRISPR/Cas9载体的构建方法 |
US20180201921A1 (en) | 2017-01-18 | 2018-07-19 | Excision Biotherapeutics, Inc. | CRISPRs |
CN106701823A (zh) | 2017-01-18 | 2017-05-24 | 上海交通大学 | 生产无岩藻糖单克隆抗体的cho细胞系建立及其应用 |
CN106801056A (zh) | 2017-01-24 | 2017-06-06 | 中国科学院广州生物医药与健康研究院 | 一种sgRNA及其构建的慢病毒载体和应用 |
JP2020505074A (ja) | 2017-01-30 | 2020-02-20 | カー・ヴェー・エス ザート エス・エー ウント コー. カー・ゲー・アー・アーKWS SAAT SE & Co. KGaA | ゲノム工学のためのエンドヌクレアーゼに対する修復鋳型の結合 |
TWI608100B (zh) | 2017-02-03 | 2017-12-11 | 國立清華大學 | Cas9表達質體、大腸桿菌基因剪輯系統及其方法 |
AU2018218280A1 (en) | 2017-02-07 | 2019-08-29 | The Regents Of The University Of California | Gene therapy for haploinsufficiency |
US20190345501A1 (en) | 2017-02-07 | 2019-11-14 | Massachusetts Institute Of Technology | Methods and compositions for rna-guided genetic circuits |
WO2018148647A2 (en) | 2017-02-10 | 2018-08-16 | Lajoie Marc Joseph | Genome editing reagents and their use |
IT201700016321A1 (it) | 2017-02-14 | 2018-08-14 | Univ Degli Studi Di Trento | Mutanti di cas9 ad alta specificita' e loro applicazioni. |
US20200063127A1 (en) | 2017-02-15 | 2020-02-27 | Massachusetts Institute Of Technology | Dna writers, molecular recorders and uses thereof |
CN106957855B (zh) | 2017-02-16 | 2020-04-17 | 上海市农业科学院 | 使用CRISPR/Cas9技术靶向敲除水稻矮杆基因SD1的方法 |
US20190367924A1 (en) | 2017-02-17 | 2019-12-05 | Temple University - Of The Commonwealth System Of Higher Education | Gene editing therapy for hiv infection via dual targeting of hiv genome and ccr5 |
AU2018222092A1 (en) | 2017-02-20 | 2019-09-05 | Suzhou Qi Biodesign Biotechnology Company Limited | Genome editing system and method |
WO2018156372A1 (en) | 2017-02-22 | 2018-08-30 | The Regents Of The University Of California | Genetically modified non-human animals and products thereof |
US11920148B2 (en) | 2017-02-22 | 2024-03-05 | Crispr Therapeutics Ag | Compositions and methods for gene editing |
CA3053709A1 (en) | 2017-02-22 | 2018-08-30 | Crispr Therapeutics Ag | Compositions and methods for treatment of proprotein convertase subtilisin/kexin type 9 (pcsk9)-related disorders |
WO2018154459A1 (en) | 2017-02-22 | 2018-08-30 | Crispr Therapeutics Ag | Materials and methods for treatment of primary hyperoxaluria type 1 (ph1) and other alanine-glyoxylate aminotransferase (agxt) gene related conditions or disorders |
US20190365929A1 (en) | 2017-02-22 | 2019-12-05 | Crispr Therapeutics Ag | Materials and methods for treatment of dystrophic epidermolysis bullosa (deb) and other collagen type vii alpha 1 chain (col7a1) gene related conditions or disorders |
US20200095579A1 (en) | 2017-02-22 | 2020-03-26 | Crispr Therapeutics Ag | Materials and methods for treatment of merosin-deficient cogenital muscular dystrophy (mdcmd) and other laminin, alpha 2 (lama2) gene related conditions or disorders |
EP3585898A1 (en) | 2017-02-22 | 2020-01-01 | CRISPR Therapeutics AG | Materials and methods for treatment of spinocerebellar ataxia type 1 (sca1) and other spinocerebellar ataxia type 1 protein (atxn1) gene related conditions or disorders |
EP3585807A1 (en) | 2017-02-22 | 2020-01-01 | CRISPR Therapeutics AG | Materials and methods for treatment of early onset parkinson's disease (park1) and other synuclein, alpha (snca) gene related conditions or disorders |
WO2018154462A2 (en) | 2017-02-22 | 2018-08-30 | Crispr Therapeutics Ag | Materials and methods for treatment of spinocerebellar ataxia type 2 (sca2) and other spinocerebellar ataxia type 2 protein (atxn2) gene related conditions or disorders |
CN106868031A (zh) | 2017-02-24 | 2017-06-20 | 北京大学 | 一种基于分级组装的多个sgRNA串联并行表达的克隆方法及应用 |
WO2018161009A1 (en) | 2017-03-03 | 2018-09-07 | Yale University | Aav-mediated direct in vivo crispr screen in glioblastoma |
US11111492B2 (en) | 2017-03-06 | 2021-09-07 | Florida State University Research Foundation, Inc. | Genome engineering methods using a cytosine-specific Cas9 |
EP3592853A1 (en) | 2017-03-09 | 2020-01-15 | President and Fellows of Harvard College | Suppression of pain by gene editing |
CN110662556A (zh) | 2017-03-09 | 2020-01-07 | 哈佛大学的校长及成员们 | 癌症疫苗 |
EP3592777A1 (en) | 2017-03-10 | 2020-01-15 | President and Fellows of Harvard College | Cytosine to guanine base editor |
GB2574561A (en) | 2017-03-14 | 2019-12-11 | Univ California | Engineering CRISPR CAS9 immune stealth |
BR112019019087A2 (pt) | 2017-03-15 | 2020-05-12 | The Broad Institute, Inc. | Diagnóstico baseado em sistema efetor de crispr para detecção de vírus |
CN106978428A (zh) | 2017-03-15 | 2017-07-25 | 上海吐露港生物科技有限公司 | 一种Cas蛋白特异结合靶标DNA、调控靶标基因转录的方法及试剂盒 |
CN106906242A (zh) | 2017-03-16 | 2017-06-30 | 重庆高圣生物医药有限责任公司 | 一种提高CRIPSR/Cas9靶向敲除基因产生非同源性末端接合效率的方法 |
WO2018175502A2 (en) | 2017-03-21 | 2018-09-27 | Shuber Anthony P | Treating cancer with cas endonuclease complexes |
CN110914426A (zh) | 2017-03-23 | 2020-03-24 | 哈佛大学的校长及成员们 | 包含核酸可编程dna结合蛋白的核碱基编辑器 |
CN107012213A (zh) | 2017-03-24 | 2017-08-04 | 南开大学 | 结直肠癌的生物标记物 |
CN106947780A (zh) | 2017-03-28 | 2017-07-14 | 扬州大学 | 一种兔mstn基因的编辑方法 |
CA3084252A1 (en) | 2017-03-28 | 2018-10-04 | Caribou Biosciences, Inc. | Crispr-associated (cas) protein |
CN106906240A (zh) | 2017-03-29 | 2017-06-30 | 浙江大学 | 运用CRISPR‑Cas9系统敲除大麦VE合成通路中的关键基因HPT的方法 |
KR20190134673A (ko) | 2017-03-30 | 2019-12-04 | 고쿠리츠 다이가쿠 호진 교토 다이가쿠 | 게놈 편집에 의한 엑손 스키핑 유도 방법 |
CN108660161B (zh) | 2017-03-31 | 2023-05-09 | 中国科学院脑科学与智能技术卓越创新中心 | 基于CRISPR/Cas9技术的制备无嵌合基因敲除动物的方法 |
CN107058358B (zh) | 2017-04-01 | 2020-06-09 | 中国科学院微生物研究所 | 一种双spacer序列识别切割CRISPR-Cas9载体构建及其在疣孢菌中的应用 |
CN106967726B (zh) | 2017-04-05 | 2020-12-29 | 华南农业大学 | 一种创建亚洲栽培稻与非洲栽培稻种间杂种亲和系的方法和应用 |
US9938288B1 (en) | 2017-04-05 | 2018-04-10 | President And Fellows Of Harvard College | Macrocyclic compound and uses thereof |
CN107142282A (zh) | 2017-04-06 | 2017-09-08 | 中山大学 | 一种利用CRISPR/Cas9在哺乳动物细胞中实现大片段DNA定点整合的方法 |
CN107034229A (zh) | 2017-04-07 | 2017-08-11 | 江苏贝瑞利生物科技有限公司 | 一种植物中高效筛选CRISPR/CAS9基因编辑系统候选sgRNA系统及应用 |
CN107058320B (zh) | 2017-04-12 | 2019-08-02 | 南开大学 | Il7r基因缺失斑马鱼突变体的制备及其应用 |
CN106916852B (zh) | 2017-04-13 | 2020-12-04 | 上海科技大学 | 一种碱基编辑系统及其构建和应用方法 |
CN108728476A (zh) | 2017-04-14 | 2018-11-02 | 复旦大学 | 一种利用crispr系统产生多样性抗体文库的方法 |
CN107298701B (zh) | 2017-04-18 | 2020-10-30 | 上海大学 | 玉米转录因子ZmbZIP22及其应用 |
CN106957844A (zh) | 2017-04-20 | 2017-07-18 | 华侨大学 | 一种能有效敲除HTLV‑1病毒基因组的CRISPR/Cas9的gRNA序列 |
CA3059956A1 (en) | 2017-04-21 | 2018-10-25 | The General Hospital Corporation | Variants of cpf1 (cas12a) with altered pam specificity |
WO2018195555A1 (en) | 2017-04-21 | 2018-10-25 | The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University | Crispr/cas 9-mediated integration of polynucleotides by sequential homologous recombination of aav donor vectors |
CN107043775B (zh) | 2017-04-24 | 2020-06-16 | 中国农业科学院生物技术研究所 | 一种能促进棉花侧根发育的sgRNA及其应用 |
EP3615665A1 (en) | 2017-04-24 | 2020-03-04 | DuPont Nutrition Biosciences ApS | Novel anti-crispr genes and proteins and methods of use |
CN206970581U (zh) | 2017-04-26 | 2018-02-06 | 重庆威斯腾生物医药科技有限责任公司 | 一种用于辅助CRISPR/cas9基因敲除的试剂盒 |
WO2018197020A1 (en) | 2017-04-27 | 2018-11-01 | Novozymes A/S | Genome editing by crispr-cas9 using short donor oligonucleotides |
US20200407737A1 (en) | 2017-05-03 | 2020-12-31 | KWS SAAT SE & Co. KGaA | Use of crispr-cas endonucleases for plant genome engineering |
CN107012174A (zh) | 2017-05-04 | 2017-08-04 | 昆明理工大学 | CRISPR/Cas9技术在获得家蚕锌指蛋白基因突变体中的应用 |
JP7292213B2 (ja) | 2017-05-04 | 2023-06-16 | ザ トラスティーズ オブ ザ ユニバーシティ オブ ペンシルバニア | Crispr/cpf1を用いる、t細胞における遺伝子編集のための組成物および方法 |
CN107254485A (zh) | 2017-05-08 | 2017-10-17 | 南京农业大学 | 一种能够快速构建植物基因定点敲除载体的新反应体系 |
WO2018208755A1 (en) | 2017-05-09 | 2018-11-15 | The Regents Of The University Of California | Compositions and methods for tagging target proteins in proximity to a nucleotide sequence of interest |
CN107129999A (zh) | 2017-05-09 | 2017-09-05 | 福建省农业科学院畜牧兽医研究所 | 利用稳转CRISPR/Cas9系统对病毒基因组进行靶向编辑的方法 |
CA3062595A1 (en) | 2017-05-10 | 2018-11-15 | The Regents Of The University Of California | Directed editing of cellular rna via nuclear delivery of crispr/cas9 |
EP3622070A2 (en) | 2017-05-10 | 2020-03-18 | Editas Medicine, Inc. | Crispr/rna-guided nuclease systems and methods |
WO2018209320A1 (en) | 2017-05-12 | 2018-11-15 | President And Fellows Of Harvard College | Aptazyme-embedded guide rnas for use with crispr-cas9 in genome editing and transcriptional activation |
CN107130000B (zh) | 2017-05-12 | 2019-12-17 | 浙江卫未生物医药科技有限公司 | 一种同时敲除KRAS基因和EGFR基因的CRISPR-Cas9系统及其应用 |
CN106967697B (zh) | 2017-05-16 | 2021-03-26 | 上海交通大学 | 一种Cas9核酸酶G915F及其用途 |
CN106916820B (zh) | 2017-05-16 | 2019-09-27 | 吉林大学 | 能有效编辑猪ROSA26基因的sgRNA及其应用 |
CN106947750B (zh) | 2017-05-16 | 2020-12-08 | 上海交通大学 | 一种Cas9核酸酶Q920P及其用途 |
CN106987570A (zh) | 2017-05-16 | 2017-07-28 | 上海交通大学 | 一种Cas9核酸酶R780A及其用途 |
CN106957831B (zh) | 2017-05-16 | 2021-03-12 | 上海交通大学 | 一种Cas9核酸酶K918A及其用途 |
CN107012250B (zh) | 2017-05-16 | 2021-01-29 | 上海交通大学 | 一种适用于CRISPR/Cas9系统的基因组DNA片段编辑精准度的分析方法及应用 |
CN106939303B (zh) | 2017-05-16 | 2021-02-23 | 上海交通大学 | 一种Cas9核酸酶R919P及其用途 |
CN106957830B (zh) | 2017-05-16 | 2020-12-25 | 上海交通大学 | 一种Cas9核酸酶ΔF916及其用途 |
CN107326042A (zh) | 2017-05-16 | 2017-11-07 | 上海交通大学 | 水稻tms10基因的定点敲除系统及其应用 |
CA3063739A1 (en) | 2017-05-18 | 2018-11-22 | The Broad Institute, Inc. | Systems, methods, and compositions for targeted nucleic acid editing |
EP3625359A4 (en) | 2017-05-18 | 2021-03-03 | Children's National Medical Center | APTAMERIC AND NUCLEIC ACID PAYLOAD COMPOSITIONS AND METHODS OF USE |
EP3625342B1 (en) | 2017-05-18 | 2022-08-24 | The Broad Institute, Inc. | Systems, methods, and compositions for targeted nucleic acid editing |
WO2018213771A1 (en) | 2017-05-18 | 2018-11-22 | Cargill, Incorporated | Genome editing system |
CN107043787B (zh) | 2017-05-19 | 2017-12-26 | 南京医科大学 | 一种基于CRISPR/Cas9获得MARF1定点突变小鼠模型的构建方法和应用 |
CN107236737A (zh) | 2017-05-19 | 2017-10-10 | 上海交通大学 | 特异靶向拟南芥ILK2基因的sgRNA序列及其应用 |
WO2018217852A1 (en) | 2017-05-23 | 2018-11-29 | Gettysburg College | Crispr based tool for characterizing bacterial serovar diversity |
CN107034188B (zh) | 2017-05-24 | 2018-07-24 | 中山大学附属口腔医院 | 一种靶向骨的外泌体载体、CRISPR/Cas9基因编辑系统及应用 |
US20200140842A1 (en) | 2017-05-25 | 2020-05-07 | The General Hospital Corporation | Bipartite base editor (bbe) architectures and type-ii-c-cas9 zinc finger editing |
WO2018217981A1 (en) | 2017-05-26 | 2018-11-29 | North Carolina State University | Altered guide rnas for modulating cas9 activity and methods of use |
CN107287245B (zh) | 2017-05-27 | 2020-03-17 | 南京农业大学 | 一种基于CRISPR/Cas9技术的Glrx1基因敲除动物模型的构建方法 |
CN107142272A (zh) | 2017-06-05 | 2017-09-08 | 南京金斯瑞生物科技有限公司 | 一种控制大肠杆菌中质粒复制的方法 |
CN107034218A (zh) | 2017-06-07 | 2017-08-11 | 浙江大学 | 用于猪APN基因编辑的靶向sgRNA、修饰载体及其制备方法和应用 |
CN107177595A (zh) | 2017-06-07 | 2017-09-19 | 浙江大学 | 用于猪CD163基因编辑的靶向sgRNA、修饰载体及其制备方法和应用 |
CN107119071A (zh) | 2017-06-07 | 2017-09-01 | 江苏三黍生物科技有限公司 | 一种降低植物直链淀粉含量的方法及应用 |
CN106987757A (zh) | 2017-06-12 | 2017-07-28 | 苏州双金实业有限公司 | 一种耐腐蚀型奥氏体镍基合金 |
CN107236739A (zh) | 2017-06-12 | 2017-10-10 | 上海捷易生物科技有限公司 | CRISPR/SaCas9特异性敲除人CXCR4基因的方法 |
CN107227352A (zh) | 2017-06-13 | 2017-10-03 | 西安医学院 | 基于eGFP的GPR120基因表达的检测方法及应用 |
CN107083392B (zh) | 2017-06-13 | 2020-09-08 | 中国医学科学院病原生物学研究所 | 一种CRISPR/Cpf1基因编辑系统及其在分枝杆菌中的应用 |
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CN107312798B (zh) | 2017-06-16 | 2020-06-23 | 武汉大学 | 含特异靶向CCR5基因的gRNA序列的CRISPR/Cas9重组慢病毒载体及应用 |
CN107099850B (zh) | 2017-06-19 | 2018-05-04 | 东北农业大学 | 一种通过酶切基因组构建CRISPR/Cas9基因组敲除文库的方法 |
CN107266541B (zh) | 2017-06-20 | 2021-06-04 | 上海大学 | 玉米转录因子ZmbHLH167及其应用 |
CN107446951B (zh) | 2017-06-20 | 2021-01-08 | 温氏食品集团股份有限公司 | 一种通过CRISPR/Cas9系统快速筛选重组鸡痘病毒的方法及其应用 |
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US9982279B1 (en) | 2017-06-23 | 2018-05-29 | Inscripta, Inc. | Nucleic acid-guided nucleases |
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US20200248169A1 (en) | 2017-06-26 | 2020-08-06 | The Broad Institute, Inc. | Crispr/cas-cytidine deaminase based compositions, systems, and methods for targeted nucleic acid editing |
CN107177631B (zh) | 2017-06-26 | 2020-11-24 | 中国农业大学 | 利用CRISPR-CAS9技术敲除NRK细胞Slc22a2基因的方法 |
CN107217075B (zh) | 2017-06-28 | 2021-07-02 | 西安交通大学医学院第一附属医院 | 一种构建epo基因敲除斑马鱼动物模型的方法及引物、质粒与制备方法 |
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WO2019023680A1 (en) | 2017-07-28 | 2019-01-31 | President And Fellows Of Harvard College | METHODS AND COMPOSITIONS FOR EVOLUTION OF BASIC EDITORS USING PHAGE-ASSISTED CONTINUOUS EVOLUTION (PACE) |
CN107418974A (zh) | 2017-07-28 | 2017-12-01 | 新乡医学院 | 一种利用单克隆细胞分选快速获得CRISPR/Cas9基因敲除稳定细胞株的方法 |
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CN107312785B (zh) | 2017-08-09 | 2019-12-06 | 四川农业大学 | OsKTN80b基因在降低水稻株高方面的应用 |
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CN107446924B (zh) | 2017-08-16 | 2020-01-14 | 中国科学院华南植物园 | 一种基于CRISPR-Cas9的猕猴桃基因AcPDS编辑载体及其构建方法和应用 |
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CN107384894B (zh) | 2017-08-21 | 2019-10-22 | 华南师范大学 | 功能化氧化石墨烯高效运载CRISPR/Cas9用于基因编辑的方法 |
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CN107488649A (zh) | 2017-08-25 | 2017-12-19 | 南方医科大学 | 一种Cpf1和p300核心结构域的融合蛋白、相应的DNA靶向激活系统和应用 |
CN107460196A (zh) | 2017-08-25 | 2017-12-12 | 同济大学 | 一种免疫缺陷小鼠动物模型的构建方法及应用 |
CN107541525B (zh) | 2017-08-26 | 2021-12-10 | 内蒙古大学 | 一种基于CRISPR/Cas9技术介导山羊Tβ4基因定点敲入的方法 |
CN107446932B (zh) | 2017-08-29 | 2020-02-21 | 江西省农业科学院 | 一个控制水稻雄性生殖发育基因及其应用 |
US11319532B2 (en) | 2017-08-30 | 2022-05-03 | President And Fellows Of Harvard College | High efficiency base editors comprising Gam |
CN107519492B (zh) | 2017-09-06 | 2019-01-25 | 武汉迈特维尔生物科技有限公司 | 使用CRISPR技术敲除miR-3187-3p在冠状动脉粥样硬化性心脏病中的应用 |
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CN107641631A (zh) | 2017-09-07 | 2018-01-30 | 浙江工业大学 | 一种由化学转化介导的基于CRISPR/Cas9系统敲除大肠杆菌基因的方法 |
CN107502608B (zh) | 2017-09-08 | 2020-10-16 | 中山大学 | 用于敲除人ALDH2基因的sgRNA、ALDH2基因缺失细胞株的构建方法及应用 |
CN107557455A (zh) | 2017-09-15 | 2018-01-09 | 国家纳米科学中心 | 一种基于CRISPR‑Cas13a的特异性核酸片段的检测方法 |
US11624130B2 (en) | 2017-09-18 | 2023-04-11 | President And Fellows Of Harvard College | Continuous evolution for stabilized proteins |
CN107557390A (zh) | 2017-09-18 | 2018-01-09 | 江南大学 | 一种筛选cho细胞系高表达位点的方法 |
CN107475300B (zh) | 2017-09-18 | 2020-04-21 | 上海市同济医院 | Ifit3-eKO1基因敲除小鼠动物模型的构建方法和应用 |
CN107630041A (zh) | 2017-09-19 | 2018-01-26 | 安徽大学 | 一种基于维吉尼亚链霉菌IBL14 I‑B型Cas系统的真核基因编辑方法 |
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CN107513531B (zh) | 2017-09-21 | 2020-02-21 | 无锡市妇幼保健院 | 用于内源性过表达lncRNA-XIST的gRNA靶点序列及其应用 |
CN107686848A (zh) | 2017-09-26 | 2018-02-13 | 中山大学孙逸仙纪念医院 | 转座子协同CRISPR/Cas9系统的稳定敲除单质粒载体及其应用 |
CN107557394A (zh) | 2017-09-29 | 2018-01-09 | 南京鼓楼医院 | 降低CRISPR/Cas9介导的胚胎基因编辑脱靶率的方法 |
CN107760652A (zh) | 2017-09-29 | 2018-03-06 | 华南理工大学 | CRISPR/CAS9介导药物转运体靶向性敲除的caco‑2细胞模型及其方法 |
CN107760663A (zh) | 2017-09-30 | 2018-03-06 | 新疆大学 | 油莎草pepc基因的克隆及表达载体的构建和应用 |
CN107630006B (zh) | 2017-09-30 | 2020-09-11 | 山东兴瑞生物科技有限公司 | 一种制备tcr与hla双基因敲除的t细胞的方法 |
CN107828794A (zh) | 2017-09-30 | 2018-03-23 | 上海市农业生物基因中心 | 一种水稻耐盐基因OsRR22突变体、其编码的氨基酸序列、植株及该突变体的创制方法 |
CN107604003A (zh) | 2017-10-10 | 2018-01-19 | 南方医科大学 | 一种基于线性化crispr‑cas9慢病毒载体基因敲除试剂盒及其应用 |
CN107474129B (zh) | 2017-10-12 | 2018-10-19 | 江西汉氏联合干细胞科技有限公司 | 特异性增强crispr-cas系统基因编辑效率的方法 |
CN108102940B (zh) | 2017-10-12 | 2021-07-13 | 中石化上海工程有限公司 | 一株利用CRISPR/Cas9系统敲除XKS1基因的工业酿酒酵母菌株及构建方法 |
CN107557381A (zh) | 2017-10-12 | 2018-01-09 | 南京农业大学 | 一种白菜CRISPR‑Cas9基因编辑体系的建立及其应用 |
CN108103586A (zh) | 2017-10-13 | 2018-06-01 | 上海科技大学 | 一种CRISPR/Cas9随机文库及其构建和应用 |
CN107586779B (zh) | 2017-10-14 | 2018-08-28 | 天津金匙生物科技有限公司 | 使用crispr-cas系统对间充质干细胞进行casp3基因敲除的方法 |
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JP2021500036A (ja) | 2017-10-16 | 2021-01-07 | ザ ブロード インスティテュート, インコーポレーテッドThe Broad Institute, Inc. | アデノシン塩基編集因子の使用 |
CN107523567A (zh) | 2017-10-16 | 2017-12-29 | 遵义医学院 | 一种敲除人ezrin基因增强子的食管癌细胞株的构建方法 |
CN107760715B (zh) | 2017-10-17 | 2021-12-10 | 张业胜 | 一种转基因载体及其构建方法和应用 |
CN107937427A (zh) | 2017-10-20 | 2018-04-20 | 广东石油化工学院 | 一种基于CRISPR/Cas9体系的同源修复载体构建方法 |
EP3701025A4 (en) | 2017-10-23 | 2021-07-28 | The Broad Institute, Inc. | SYSTEMS, PROCEDURES AND COMPOSITIONS FOR TARGETED NUCLEIC ACID EDITING |
CN107893086B (zh) | 2017-10-24 | 2021-09-03 | 中国科学院武汉植物园 | 快速构建配对sgRNA的Cas9双元表达载体文库的方法 |
CN107760684B (zh) | 2017-11-03 | 2018-09-25 | 上海拉德钫斯生物科技有限公司 | 使用crispr-cas系统对间充质干细胞进行rbm17基因敲除的方法 |
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CN107794276A (zh) | 2017-11-08 | 2018-03-13 | 中国农业科学院作物科学研究所 | 一种crispr介导快速有效的农作物定点基因片段或等位基因替换方法和体系 |
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CN108441519A (zh) | 2017-11-15 | 2018-08-24 | 中国农业大学 | 在crispr/cas9基因编辑中提高同源修复效率的方法 |
CN107858373B (zh) | 2017-11-16 | 2020-03-17 | 山东省千佛山医院 | 内皮细胞条件性敲除ccr5基因小鼠模型的构建方法 |
CN108192956B (zh) | 2017-11-17 | 2021-06-01 | 东南大学 | 一种基于Cas9核酸酶的DNA检测分析方法及其应用 |
CN107893075A (zh) | 2017-11-17 | 2018-04-10 | 和元生物技术(上海)股份有限公司 | CRISPR‑Cas9靶向敲除人肠癌细胞RITA基因及其特异性的sgRNA |
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CN107653256A (zh) | 2017-11-21 | 2018-02-02 | 云南省烟草农业科学研究院 | 一种烟草多酚氧化酶基因NtPPO1及其定点突变方法与应用 |
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CN107937501A (zh) | 2017-11-24 | 2018-04-20 | 安徽师范大学 | 一种快速简便的筛选CRISPR/Cas基因编辑阳性对象的方法 |
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CN108570479B (zh) | 2017-12-06 | 2020-04-03 | 内蒙古大学 | 一种基于CRISPR/Cas9技术介导绒山羊VEGF基因定点敲入的方法 |
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CN107974466B (zh) | 2017-12-07 | 2020-09-29 | 中国科学院水生生物研究所 | 一种鲟鱼CRISPR/Cas9基因编辑方法 |
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CN108315330B (zh) | 2017-12-07 | 2020-05-19 | 嘉兴市第一医院 | CRISPR-Cas9系统特异性靶向人RSPO2基因的sgRNA及敲除方法和应用 |
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WO2019118949A1 (en) | 2017-12-15 | 2019-06-20 | The Broad Institute, Inc. | Systems and methods for predicting repair outcomes in genetic engineering |
CN107988268A (zh) | 2017-12-18 | 2018-05-04 | 湖南师范大学 | 一种基因敲除选育tcf25基因缺失型斑马鱼的方法 |
CN108018316A (zh) | 2017-12-20 | 2018-05-11 | 湖南师范大学 | 一种基因敲除选育rmnd5b基因缺失型斑马鱼的方法 |
CN108048466B (zh) | 2017-12-21 | 2020-02-07 | 嘉兴市第一医院 | CRISPR-Cas13a系统特异性靶向人RSPO2基因的crRNA及系统和应用 |
RU2652899C1 (ru) | 2017-12-28 | 2018-05-03 | Федеральное бюджетное учреждение науки "Центральный научно-исследовательский институт эпидемиологии" Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (ФБУН ЦНИИ Эпидемиологии Роспотребнадзора) | РНК-проводники для подавления репликации вируса гепатита B и для элиминации вируса гепатита B из клетки-хозяина |
CN107893080A (zh) | 2017-12-29 | 2018-04-10 | 江苏省农业科学院 | 一种靶向大鼠Inhba基因的sgRNA及其应用 |
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CN108251451A (zh) | 2018-01-16 | 2018-07-06 | 西南大学 | HTT的CRISPR/Cas9-gRNA打靶序列对、质粒及其应用 |
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WO2021108717A2 (en) | 2019-11-26 | 2021-06-03 | The Broad Institute, Inc | Systems and methods for evaluating cas9-independent off-target editing of nucleic acids |
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Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
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AMND | Amendment | ||
E902 | Notification of reason for refusal | ||
AMND | Amendment | ||
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J201 | Request for trial against refusal decision | ||
J301 | Trial decision |
Free format text: TRIAL NUMBER: 2022101000464; TRIAL DECISION FOR APPEAL AGAINST DECISION TO DECLINE REFUSAL REQUESTED 20220302 Effective date: 20230130 |