TWI672378B - 最適大豆基因座(一) - Google Patents
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Abstract
如本文揭示,已鑑別出大豆植物之最適原生基因座,該等基因座代表外源性序列靶向插入之最佳位點。
Description
本發明係有關於最適大豆基因座。
本申請案依據35 U.S.C.§119(e)主張2013年11月4日申請之美國臨時專利申請案第61/899,602號的權益,該臨時專利申請案之內容以全文引用的方式併入本申請案中。
序列表之正式文本經由EFS-Web,作為ASCII格式化序列表,以2014年10月31日產生之名為「75608232324seqlist.txt」且大小為13.8百萬位元組之檔案電子提交,且與本說明書同時申請。此ASCII格式化文件中含有之序列表為本說明書之一部分且以全文引用的方式併入本文中。
序列表之正式文本經由EFS-Web,作為PDF格式化列表,以2013年11月4日產生之名為「表3」且大小為12百萬位元組之檔案電子提交,且與本說明書同時申請。此PDF格式化文件中含有之列表為本說明書之一部分且以全
文引用的方式併入本文中。
在1990年代初,許多類型雙子葉植物,例如大豆植物之基因組成功地用轉殖基因轉型。在過去二十年間,已發展許多方法來轉型如大豆之雙子葉植物之基因組,其中轉殖基因穩定地整合至雙子葉植物之基因組中。雙子葉植物轉型方法之此進展使得能夠成功地將包含農藝性狀之轉殖基因引入諸如大豆植物之雙子葉植物之基因組內。在1990年代後期昆蟲抗性及除草劑耐受性性狀引入雙子葉植物內為生產者提供一種新穎便利的用於控制昆蟲及廣譜雜草之技術革新,其在載培耕作方法中為空前的。目前,轉殖基因雙子葉植物在全世界可購得,且諸如EnlistTM
大豆之新轉殖基因產品針對不斷增加之雜草挑戰提供改善的解決方法。若非轉型方法發展及改善,現代農業措施中利用轉殖基因雙子葉植物是不可能的。
然而,當前的轉型方法信賴於轉殖基因隨機插入諸如大豆之雙子葉植物之基因組內。對基因隨機插入基因組中之依賴具有若干缺點。轉殖基因事件可隨機整合在基因轉錄序列內,由此打斷內源性性狀之表現且改變植物之生長及發育。另外,轉殖基因事件可不加區別地整合至基因組中容易基因沉默的位置中,導致第一代或隨後世代之轉殖基因植物中轉殖基因表現降低或完全抑制。最後,轉殖基因隨機整合在植物基因組內需要相當大之努力及成本
來鑑別轉殖基因事件之位置及選擇如所設計進行且未對植物產生農藝學影響之轉殖基因事件。必須不斷地發展新穎分析以確定諸如大豆轉殖基因事件之各轉殖基因事件之整合轉殖基因的準確位置。植物轉型方法之隨機性引起整合轉殖基因之「位置效應」,此阻礙轉型方法之效力及效率。
植物之靶向基因組修飾已成為應用與基礎研究之長期而難以攻克之目標。基因及基因堆靶向諸如大豆植物之雙子葉植物之基因組中特定位置將提高轉殖基因事件之品質,降低與產生轉殖基因事件相關聯之成本,且提供製造諸如依序基因堆疊之轉殖基因植物產品之新方法。總而言之,轉殖基因靶向特定基因組位點在商業上可能為有益的。近些年,藉由位點特異性核酸酶(例如鋅指核酸酶(ZFN)、大範圍核酸酶、轉錄活化樣效應因子核酸酶(TALENS)及成叢的規律間隔之短迴文重複序列/CRISPR相關核酸酶(CRISPR/Cas)與工程改造之crRNA/tracr RNA))靶向及裂解基因組DNA、誘發靶向之突變誘發、誘發靶向之細胞DNA序列缺失及促進預定基因座內外源性供體DNA聚核苷酸之靶向重組的方法及組合物已顯著發展。參見例如美國專利公開案第20030232410號;第20050208489號;第20050026157號;第20050064474號;及第20060188987號,以及國際專利公開案第WO 2007/014275號,其揭示內容以全文引用的方式併入以達成所有目的。美國專利公開案第20080182332號描述非典型鋅指核酸酶(ZFN)用於植物基因組之靶向修飾的用途,且美國專利公開案第20090205083號
描述植物EPSP基因座之ZFN介導之靶向修飾。當前用於外源性DNA靶向插入之方法通常包含植物組織與含有至少一種轉殖基因及位點特異性核酸酶(例如ZFN)之供體DNA聚核苷酸共同轉型,該位點特異性核酸酶經設計以結合及裂解主動轉錄編碼序列之特定基因座。此使得供體DNA聚核苷酸穩定插入裂解之基因座內,使基因靶向添加在包含主動轉錄編碼序列之特定基因座。
一種替代方法為使轉殖基因靶向如大豆之雙子葉植物基因組內的預選標靶非基因基因座。近年來,已發展若干技術且應用於植物細胞,將轉殖基因靶向傳遞於如大豆之雙子葉植物之基因組內。然而,關於適於靶向之基因組位點的屬性知之甚少。歷史上,基因組中非必需基因及病原體(病毒)整合位點已用作靶向基因座。基因組中此類位點之數目相當受限制,且因此需要鑑別及表徵可用於供體聚核苷酸序列靶向之可靶向之最適基因座。除可靶向之外,預期最適基因座為可支持轉殖基因表現及育種應用之中性位點。需要界定鑑別如例如大豆植物之雙子葉植物之基因組內最適非基因基因座以進行轉殖基因靶向整合之標準的組合物及方法。
在一個實施例中,本發明係關於一種重組序列,其包含:至少1Kb且與選自由大豆_OGL_1423(SEQ ID NO:639)、大豆_OGL_1434(SEQ ID NO:137)、大豆
_OGL_4625(SEQ ID NO:76)、大豆_OGL_6362(SEQ ID NO:440)、大豆_OGL_308(SEQ ID NO:43)、大豆_OGL_307(SEQ ID NO:566)、大豆_OGL_310(SEQ ID NO:4236)、大豆_OGL_684(SEQ ID NO:47)、大豆_OGL_682(SEQ ID NO:2101)及大豆_OGL_685(SEQ ID NO:48)組成之群的非基因序列具有至少90%、95%或99%序列一致性的核酸序列。在一個實施例中,感興趣的DNA插入藉由改變與插入位點接近之非基因基因座序列來修飾非基因基因座之初始序列,修飾包括例如非基因基因座序列之缺失、倒置、插入及複製。在另一態樣中,一個實施例係關於一種感興趣的DNA,其中該感興趣的DNA插入該非基因序列中。在另一態樣中,一個實施例包含重組序列,其中感興趣的DNA插入在與鋅指標靶位點接近處。在另一態樣中,一個實施例包含重組序列,其中感興趣的DNA插入在鋅指標靶位點處。在另一實施例中,重組序列包含進一步包含分析結構域之插入之感興趣的DNA。在另一實施例中,重組序列包含不編碼肽之插入之感興趣的DNA。在另一實施例中,重組序列包含編碼肽之感興趣的DNA。在又一實施例中,重組序列包含進一步包含基因表現卡匣之插入之感興趣的DNA。在一個實施例中,基因表現卡匣含有包含殺昆蟲劑抗性基因、除草劑耐受性基因、氮利用效率基因、水利用效率基因、營養品質基因、DNA結合基因及可選擇之標記基因的基因。在另一實施例中,重組序列包含兩個或兩個以上基因表現卡匣。在另一實施例中,重組序列包含兩個
或兩個以上該等非基因序列,該等非基因序列位於同一染色體上。在另一實施例中,重組序列包含感興趣的DNA及/或非基因序列在該感興趣的DNA插入該非基因序列期間經修飾。在另一實施例中,本發明係關於一種包含重組序列之大豆植物、大豆植物部分或大豆植物細胞。
在另一實施例中,本發明係關於一種製造包含感興趣的DNA之轉殖基因植物細胞之方法。在本發明之另一態樣中,該方法包含選擇與選自由大豆_OGL_1423(SEQ ID NO:639)、大豆_OGL_1434(SEQ ID NO:137)、大豆_OGL_4625(SEQ ID NO:76)、大豆_OGL_6362(SEQ ID NO:440)、大豆_OGL_308(SEQ ID NO:43)、大豆_OGL_307(SEQ ID NO:566)、大豆_OGL_310(SEQ ID NO:4236)、大豆_OGL_684(SEQ ID NO:47)、大豆_OGL_682(SEQ ID NO:2101)及大豆_OGL_685(SEQ ID NO:48)組成之群的標靶非基因大豆基因座具有至少90%、95%或99%序列一致性的標靶非基因大豆基因座;選擇特異性結合及裂解該標靶非基因大豆基因座之位點特異性核酸酶;將該位點特異性核酸酶引入大豆植物細胞中;將該感興趣的DNA引入該植物細胞中;將該感興趣的DNA插入該標靶非基因大豆基因座中;以及選擇包含靶向該非基因基因座之感興趣的DNA的轉殖基因植物細胞。在另一態樣中,一個實施例係關於一種製造轉殖基因植物細胞之方法。在另一實施例中,感興趣的DNA包含分析結構域。在一個實施例中,感興趣的DNA不編碼肽。在又一實施例中,感興趣的DNA編碼肽。
在另一實施例中,感興趣的DNA包含含有轉殖基因之基因表現卡匣。在另一實施例中,感興趣的DNA包含兩個或兩個以上基因表現卡匣。在隨後實施例中,位點特異性核酸酶係選自由以下各者組成之群:鋅指核酸酶、CRISPR核酸酶、TALEN、歸巢核酸內切酶或大範圍核酸酶。在一個實施例中,該感興趣的DNA經由同源性介導之修復整合方法整合在該非基因基因座內。在另一實施例中,該感興趣的DNA經由非同源末端接合整合方法整合在該非基因基因座內。在另一實施例中,製造轉殖基因植物細胞之方法提供插入兩個或兩個以上該等標靶非基因大豆基因座中之兩個或兩個以上該感興趣的DNA。在另一實施例中,製造轉殖基因植物細胞之方法包含位於同一染色體上之兩個或兩個以上該等標靶非基因大豆基因座。在另一實施例中,製造轉殖基因植物細胞之方法包含感興趣的DNA及/或在該感興趣的DNA插入該非基因序列期間經修飾之非基因序列。
根據一個實施例,本文揭示經純化之大豆聚核苷酸基因座,其中該經純化之序列包含至少1Kb之非基因序列。在一個實施例中,非基因序列低甲基化,例示重組跡象,且位於與大豆基因組中之表現基因區接近之位置。在一個實施例中,非基因序列具有在約1Kb至約8.4Kb範圍內的長度。在一個實施例中,感興趣的DNA包含外源性DNA序列,其包括例如調節序列、限制裂解位點、RNA編碼區或蛋白質編碼區。在一個實施例中,感興趣的DNA包含含有一或多個轉殖基因之基因表現卡匣。在另一實施例中,
該經純化之序列包含與選自由大豆_OGL_1423(SEQ ID NO:639)、大豆_OGL_1434(SEQ ID NO:137)、大豆_OGL_4625(SEQ ID NO:76)、大豆_OGL_6362(SEQ ID NO:440)、大豆_OGL_308(SEQ ID NO:43)、大豆_OGL_307(SEQ ID NO:566)、大豆_OGL_310(SEQ ID NO:4236)、大豆_OGL_684(SEQ ID NO:47)、大豆_OGL_682(SEQ ID NO:2101)及大豆_OGL_685(SEQ ID NO:48)組成之群的非基因序列具有至少90%、95%或99%序列一致性的非基因序列。在另一實施例中,經純化之非基因大豆基因座包含感興趣的DNA,其中該感興趣的DNA插入該非基因序列中。在另一態樣中,一個實施例包含經純化之非基因大豆基因座,其中該感興趣的DNA插入在與鋅指標靶位點接近處。在一個不同態樣中,一個實施例包含經純化之非基因大豆基因座,其中該感興趣的DNA插入一對鋅指標靶位點之間。在又一態樣中,一個實施例包含經純化之非基因大豆基因座,其中該感興趣的DNA包含分析結構域。在另一個態樣中,一個實施例包含經純化之非基因大豆基因座,其中該感興趣的DNA不編碼肽。在隨後態樣中,一個實施例包含經純化之非基因大豆基因座,其中該感興趣的DNA編碼肽。在一個實施例中,基因表現卡匣含有包含殺昆蟲劑抗性基因、除草劑耐受性基因、氮利用效率基因、水利用效率基因、營養品質基因、DNA結合基因及可選擇之標記基因的基因。在隨後實施例中,該位點特異性核酸酶係選自由以下各者組成之群:鋅指核酸酶、CRISPR核酸酶、
TALEN、歸巢核酸內切酶或大範圍核酸酶。在一個實施例中,該感興趣的DNA經由同源性介導之修復整合方法整合在該非基因序列內。在另一實施例中,該感興趣的DNA經由非同源末端接合整合方法整合在該非基因序列內。在另一實施例中,感興趣的DNA包含兩個或兩個以上基因表現卡匣。在另一實施例中,經純化之非基因大豆基因座提供插入兩個或兩個以上該等標靶非基因大豆基因座中之兩個或兩個以上感興趣的DNA。在另一實施例中,經純化之非基因大豆基因座提供位於同一染色體上之兩個或兩個以上該等標靶非基因大豆基因座。在另一實施例中,經純化之非基因大豆基因組包含感興趣的DNA及/或在該感興趣的DNA插入該非基因序列期間經修飾之非基因序列。在另一實施例中,感興趣的DNA經由同源性介導之修復或非同源末端接合修復機制插入。
在另一實施例中,本發明提供一種包含重組序列之植物,該重組序列包含:與非基因序列具有至少90%、95%或99%序列一致性的核酸序列;及感興趣的DNA,其中該感興趣的DNA插入該非基因序列中。在另一實施例中,非基因序列係選自由以下各者組成之群:大豆_OGL_1423(SEQ ID NO:639)、大豆_OGL_1434(SEQ ID NO:137)、大豆_OGL_4625(SEQ ID NO:76)、大豆_OGL_6362(SEQ ID NO:440)、大豆_OGL_308(SEQ ID NO:43)、大豆_OGL_307(SEQ ID NO:566)、大豆_OGL_310(SEQ ID NO:4236)、大豆_OGL_684(SEQ ID NO:47)、大豆_OGL_682(SEQ ID
NO:2101)及大豆_OGL_685(SEQ ID NO:48)。在另一實施例中,植物包含兩個或兩個以上該等重組序列。在另一態樣中,一個實施例包含植物,其中該等重組序列位於同一染色體上。在另一態樣中,一個實施例包含植物,其中該感興趣的DNA插入在與鋅指標靶位點接近處。在隨後態樣中,一個實施例包含植物,其中該感興趣的DNA插入在一對鋅指標靶位點之間。在一個實施例中,該感興趣的DNA包含分析結構域。在另一實施例中,該感興趣的DNA不編碼肽。在又一實施例中,該感興趣的DNA編碼肽。在隨後實施例中,該感興趣的DNA包含基因表現卡匣,該基因表現卡匣包含殺昆蟲劑抗性基因、除草劑耐受性基因、氮利用效率基因、水利用效率基因、營養品質基因、DNA結合基因及可選擇之標記基因。在另一方面,一個實施例包含植物,其中該感興趣的DNA及/或該非基因序列在該感興趣的DNA插入該非基因序列期間經修飾。
在另一實施例中,經純化之序列包含與選自由大豆_OGL_1423(SEQ ID NO:639)、大豆_OGL_1434(SEQ ID NO:137)、大豆_OGL_308(SEQ ID NO:43)、大豆_OGL_307(SEQ ID NO:566)、大豆_OGL_310(SEQ ID NO:4236)、大豆_OGL_684(SEQ ID NO:47)、大豆_OGL_682(SEQ ID NO:2101)及大豆_OGL_685(SEQ ID NO:48)組成之群的非基因序列具有至少90%、95%或99%序列一致性的非基因序列。
在另一實施例中,經純化之序列包含與選自由大
豆_OGL_1423(SEQ ID NO:639)及大豆_OGL_1434(SEQ ID NO:137)組成之群的非基因序列具有至少90%、95%或99%序列一致性的非基因序列。
在另一實施例中,經純化之序列包含與選自由大豆_OGL_308(SEQ ID NO:43)、大豆_OGL_307(SEQ ID NO:566)及大豆_OGL_310(SEQ ID NO:4236)組成之群的非基因序列具有至少90%、95%或99%序列一致性的非基因序列。
在另一實施例中,經純化之序列包含與選自由大豆_OGL_684(SEQ ID NO:47)、大豆_OGL_682(SEQ ID NO:2101)及大豆_OGL_685(SEQ ID NO:48)組成之群的非基因序列具有至少90%、95%或99%序列一致性的非基因序列。
在另一實施例中,經純化之序列包含與選自由大豆_OGL_1423(SEQ ID NO:639)、大豆_OGL_1434(SEQ ID NO:137)、大豆_OGL_308(SEQ ID NO:43)、大豆_OGL_307(SEQ ID NO:566)及大豆_OGL_310(SEQ ID NO:4236)組成之群的非基因序列具有至少90%、95%或99%序列一致性的非基因序列。
在另一實施例中,經純化之序列包含與選自由大豆_OGL_308(SEQ ID NO:43)、大豆_OGL_307(SEQ ID NO:566)、大豆_OGL_310(SEQ ID NO:4236)、大豆_OGL_684(SEQ ID NO:47)、大豆_OGL_682(SEQ ID NO:2101)及大豆_OGL_685(SEQ ID NO:48)組成之群的非
基因序列具有至少90%、95%或99%序列一致性的非基因序列。
在另一實施例中,經純化之序列包含與選自由大豆_OGL_4625(SEQ ID NO:76)、大豆_OGL_6362(SEQ ID NO:440)及大豆_OGL_308(SEQ ID NO:43)組成之群的非基因序列具有至少90%、95%或99%序列一致性的非基因序列。
圖1.表示叢集成32個叢之7,018個精選基因座的三維圖。該等叢可三維圖示且藉由顏色或其他指示物區分。每個叢分配一個獨特識別符以易於觀測,其中所有具有相同識別符之精選基因座屬於同一叢。在叢集過程之後,自每個簇選擇代表性精選基因座。此藉由在每個簇內選擇最靠近該叢質心之精選基因座來進行。
圖2提供指示針對最靠近32個各別叢每一者之質心而選擇之最適基因座的染色體分佈。
圖3提供指示選擇用於靶向驗證之最適基因座之大豆染色體位置的示意圖。
圖4為用於經由非同源末端接合(NHEJ)來整合之通用供體聚核苷酸序列的圖示。提供兩個所建議之載體,其中感興趣的DNA(DNA X)在感興趣的DNA之任一末端包含一或多個(亦即「1-N」)鋅指結合位點(ZFN BS)。垂直箭頭顯示獨特限制性位點且水平箭頭表示潛在PCR引子位點。
圖5為用於經由同源介導之修復(HDR)來整合之通用供體聚核苷酸序列的圖示。感興趣的DNA(DNA X)包含兩個將感興趣的DNA與鋅指核酸酶結合位點(ZFN)側接之同源序列(HA)區,該等鋅指核酸酶結合位點將DNAX及HA序列括在一起。垂直箭頭顯示獨特限制性位點且水平箭頭表示潛在PCR引子位點。
圖6.使用基於NHEJ之快速靶向分析(RTA)方法驗證大豆所選基因座標靶。
圖7.pDAB124280(SEQ ID NO:7561)之質體圖譜。編號元件(亦即GmPPL01ZF391R及GMPPL01ZF391L)對應於由相應鋅指核酸酶蛋白質識別及裂解之約20至35個鹼基對長之鋅指核酸酶結合序列。此等鋅指結合序列及註釋之「UZI序列」(其為含有限制性位點及用於引子設計或編碼序列之DNA序列的100-150bp模板區)構成通用供體卡匣。此質體設計內進一步包括「104113重疊」,其為與質體載體共享同源性的序列,用於質體載體內通用供體卡匣高通量組裝(亦即經由吉普森組裝(Gibson assembly))。
圖8.pDAB124281(SEQ ID NO:7562)之質體圖譜。編號元件(亦即GmPPL02ZF411R及GMPPL02ZF411L)對應於由相應鋅指核酸酶蛋白質識別及裂解的約20至35個鹼基對長之鋅指核酸酶結合序列。此等鋅指結合序列及註釋之「UZI序列」(其為含有限制性位點及用於引子設計或編碼序列之DNA序列的100-150bp模板區)構成通用供體卡匣。此質體設計內進一步包括「104113重疊」,其為與質體
載體共享同源性的序列,用於質體載體內通用供體卡匣高通量組裝(亦即經由吉普森組裝)。
圖9.pDAB121278(SEQ ID NO:7563)之質體圖譜。編號元件(亦即GmPPL18_4及GMPPL18_3)對應於由相應鋅指核酸酶蛋白質識別及裂解之約20至35個鹼基對長的鋅指核酸酶結合序列。此等鋅指結合序列及註釋之「UZI序列」(其為含有限制性位點及用於引子設計或編碼序列之DNA序列的100-150bp模板區)構成通用供體卡匣。此質體設計內進一步包括「104113重疊」,其為與質體載體共享同源性的序列,用於質體載體內通用供體卡匣高通量組裝(亦即經由吉普森組裝)。
圖10.pDAB123812(SEQ ID NO:7564)之質體圖譜。編號元件(亦即ZF538R及ZF538L)對應於由相應鋅指核酸酶蛋白質識別及裂解之約20至35個鹼基對長的鋅指核酸酶結合序列。此等鋅指結合序列及註釋之「UZI序列」(其為含有限制性位點及用於引子設計或編碼序列之DNA序列的100-150bp模板區)構成通用供體卡匣。此質體設計內進一步包括「104113重疊」,其為與質體載體共享同源性的序列,用於質體載體內通用供體卡匣高通量組裝(亦即經由吉普森組裝)。
圖11.pDAB121937(SEQ ID NO:7565)之質體圖譜。編號元件(亦即GmPPL34ZF598L、GmPPL34ZF598R、GmPPL36ZF599L、GmPPL36ZF599R、GmPPL36ZF600L及GmPPL36ZF600R)對應於由相應鋅指核酸酶蛋白質識別及
裂解之約20至35個鹼基對長的鋅指核酸酶結合序列。此等鋅指結合序列及註釋之「UZI序列」(其為含有限制性位點及用於引子設計或編碼序列之DNA序列的100-150bp模板區)構成通用供體卡匣。此質體設計內進一步包括「104113重疊」,其為與質體載體共享同源性的序列,用於質體載體內通用供體卡匣高通量組裝(亦即經由吉普森組裝)。
圖12.pDAB123811(SEQ ID NO:7566)之質體圖譜。編號元件(亦即ZF 560L及ZF 560R)對應於由相應鋅指核酸酶蛋白質識別及裂解之約20至35個鹼基對長的鋅指核酸酶結合序列。此等鋅指結合序列及註釋之「UZI序列」(其為含有限制性位點及用於引子設計或編碼序列之DNA序列的100-150bp模板區)構成通用供體卡匣。此質體設計內進一步包括「104113重疊」,其為與質體載體共享同源性的序列,用於質體載體內通用供體卡匣高通量組裝(亦即經由吉普森組裝)。
圖13.pDAB124864(SEQ ID NO:7567)之質體圖譜。編號元件(亦即ZF631L及ZF631R)對應於由相應鋅指核酸酶蛋白質識別及裂解之約20至35個鹼基對長的鋅指核酸酶結合序列。此等鋅指結合序列及註釋之「UZI序列」(其為含有限制性位點及用於引子設計或編碼序列之DNA序列的100-150bp模板區)構成通用供體卡匣。此質體設計內進一步包括「104113重疊」,其為與質體載體共享同源性的序列,用於質體載體內通用供體卡匣高通量組裝(亦即經由吉普森組裝)。
圖14.pDAB7221(SEQ ID NO:7569)之質體圖譜。此質體含有木薯脈花葉病毒啟動子(CsVMV),該啟動子驅動GFP蛋白質且由根癌土壤桿菌(AtuORF 24 3'UTR)側接。
圖15A-15C.所鑑別之最適非基因大豆基因座之特徵(長度、基因座40Kb內編碼區之表現及重組頻率)的直方圖。圖15A展示最適基因座(OGL)之聚核苷酸序列長度的分佈。圖15B展示最適非基因玉米基因座相對於其重組頻率之分佈。圖15C展示表現之核酸序列相對於其與最適基因座(OGL)之接近度(log標度)的分佈。
定義
在描述及主張本發明時,以下術語將根據以下闡述之定義使用。
如本文所用之「約」一詞意謂比所陳述之值或值範圍大或小10%,但不欲將任何值或值範圍指定於僅僅此較廣泛定義。前面有「約」一詞之每個值或值範圍亦意欲涵蓋所陳述之絕對值或值範圍的實施例。
如本文所用之「植物」一詞包括整個植物及植物之任何子代、細胞、組織或一部分。一詞「植物部分」包括植物之任何部分,包括例如且不限於:種子(包括成熟種子及未成熟種子);植物插條;植物細胞;植物細胞培養物;植物器官(例如花粉、胚芽、花、果實、芽、葉子、根、莖
及外植體)。植物組織或植物器官可為種子、愈傷組織或組織成結構或功能單元之任何其他植物細胞群。植物細胞或組織培養物能夠再生出自其中獲得細胞或組織的具有植物生理及形態特徵之植物,且再生出具有實質上與植物相同基因型之植物。相比之下,一些植物細胞不能再生以產生植物。植物細胞或組織培養物中之可再生細胞可為胚芽、原生質體、分生細胞、愈傷組織、花粉、葉子、花粉囊、根、根尖、穗絲、花、穀粒、穗、穗軸、皮或桿。
植物部分包括可採伐利用之部分及可用於繁殖子代植物之部分。可用於繁殖之植物部分包括例如且不限於:種子;果實;插條;秧苗;塊莖;及根莖。植物之可採伐利用部分可為植物之任何有用的部分,包括例如且不限於:花;花粉;秧苗;塊莖;葉子;莖;果實;種子;及根。
植物細胞為植物之結構及生理單元。如本文所用之植物細胞包括原生質體及具有細胞壁之原生質體。植物細胞可呈分離之單細胞或細胞聚集物(例如脆弱的愈傷組織及培養細胞)的形式,且可為更高組織單位之一部分(例如植物組織、植物器官及植物)。因此,植物細胞可為原生質體、產生配子之細胞或可再生成整個植物之細胞或細胞群。因而,在本文中之實施例中包含多個植物細胞且能夠再生成整個植物之種子視為「植物部分」。
如本文所用之「原生質體」一詞係指已完全或部分移除細胞壁,使得脂質雙層膜裸露的植物細胞。通常,
原生質體為沒有細胞壁之分離植物細胞,其能夠再生成細胞培養物或整個植物。
如本文所用之「原生」或「天然」一詞定義在自然界中發現之狀態。「原生DNA序列」為在自然界中存在之DNA序列,其由天然方式或傳統的育種技術產生,而非由基因工程改造(例如使用分子生物學/轉型技術)產生。
如本文所用,「內源性序列」定義聚核苷酸、基因或多肽在生物體中或生物體之基因組中之其天然位置時的原生形式。
如本文所用之「分離」一詞意謂已自其天然環境移除。
如本文所用之「純化」一詞係指分子或化合物呈實質上不含通常與原生或天然環境中該分子或化合物相關聯之污染物的形式分離且意謂由於與原始組合物之其他組分分離,純度已增加。「經純化之核酸」一詞在本文中用以描述已與包括(但不限於)多肽、脂質及碳水化合物之其他化合物分離的核酸序列。
「多肽」、「肽」及「蛋白質」等詞在本文中可互換使用,係指胺基酸殘基之聚合物。該詞亦適用於其中一或多個胺基酸為相應天然存在之胺基酸的化學類似物或經修飾之衍生物的胺基酸聚合物。
如本文所用之「最適雙子葉植物基因座」、「最適非基因雙子葉植物基因座」、「最適非基因基因座」或「最適基因座(OGL)」為在雙子葉植物之核基因組中發現的具有
以下特性之原生DNA序列:非基因、低甲基化、可靶向及在與基因區接近之位置中,其中在最適雙子葉植物基因座周圍之基因組區域例示重組跡象。
如本文所用之「最適大豆基因座」、「最適非基因大豆基因座」、「最適非基因基因座」或「最適基因座(OGL)」為在雙子葉植物之核基因組中發現的具有以下特性之原生DNA序列:非基因、低甲基化、可靶向及在與基因區接近之位置中,其中在最適雙子葉基因座周圍之基因組區域例示重組跡象。
如本文所用之「非基因雙子葉植物序列」或「非基因雙子葉植物基因組序列」為在雙子葉植物之核基因組中發現之具有至少1Kb長度且缺少任何開放閱讀框架、基因序列或基因調節序列的原生DNA序列。此外,該非基因雙子葉植物序列不包含任何內含子序列(亦即內含子不包括在非基因之定義內)。非基因序列無法轉錄或轉譯成蛋白質。許多植物基因組含有非基因區。基因組之多達95%可為非基因的,且此等區域可主要由重複DNA構成。
如本文所用之「非基因大豆序列」或「非基因大豆基因組序列」為在大豆植物之核基因組中發現之具有至少1Kb長度且缺少任何開放閱讀框架、基因序列或基因調節序列的原生DNA序列。此外,非基因大豆序列不包含任何內含子序列(亦即內含子被包括在非基因之定義內)。非基因序列無法轉錄或轉譯成蛋白質。許多植物基因組含有非基因區。基因組之多達95%可為非基因的,且此等區域可
主要由重複DNA構成。
如本文所用之「基因區」定義為包含編碼RNA及/或多肽之開放閱讀框架的聚核苷酸序列。基因區亦可涵蓋參與開放閱讀框架表現之調節的任何可鑑別之相鄰5'
及3'
非編碼核苷酸序列,達至編碼區域上游約2Kb及編碼區域下游1Kb,但可能更上游或下游。基因區進一步包括可存在於基因區中之任何內含子。此外,基因區可包含單一基因序列,或經短跨距(小於1Kb)之非基因序列打斷之多基因序列。
如本文所用之「感興趣的核酸」、「感興趣的DNA」或「供體」定義為已選擇用於定點、靶向插入雙子葉植物基因組、如大豆基因組中之核酸/DNA序列。感興趣的核酸可具有任何長度,例如2與50,000個核苷酸之間長度(或其間或超過其的任何整數值),較佳約1,000與5,000個核苷酸之間長度(或其間的任何整數值)。感興趣的核酸可包含一或多個基因表現卡匣,該基因表現卡匣進一步包含主動轉錄及/或轉譯基因序列。相反地,感興趣的核酸可包含不包含功能基因表現卡匣或整個基因(例如可簡單包含調節序列,諸如啟動子)的聚核苷酸序列,或可不含有任何可鑑別之基因表現元件或任何主動轉錄基因序列。感興趣的核酸可視情況含有分析結構域。感興趣的核酸插入例如大豆之雙子葉植物基因組後,插入之序列稱為「插入之感興趣的DNA」。此外,感興趣的核酸可為DNA或RNA,可為線狀或圓形,且可為單股或雙股。其可呈裸核酸,呈與一或多
種傳遞劑(例如脂質體、泊洛沙姆(poloxamer)、用蛋白質囊封之T-股等等)之複合物,或含於細菌或病毒傳遞媒劑(分別諸如根癌土壤桿菌(Agrobacterium tumefaciens
)或腺病毒或腺病毒相關病毒(AAV))中,來傳遞至細胞中。
如本文所用之「分析結構域」一詞定義含有幫助核酸序列靶向插入之功能元件的核酸序列。舉例而言,分析結構域可含有特定設計之限制酶位點、鋅指結合位點、工程改造之著陸墊或工程改造之轉殖基因整合台,且可包含或可不包含基因調節元件或開放閱讀框架。參見例如以全文引用的方式併入本文中之美國專利公開案第20110191899號。
如本文所用之「所選雙子葉植物序列」一詞定義雙子葉植物之原生基因組DNA序列,其已被選擇用於分析以確定該序列是否有資格作為最適非基因雙子葉植物基因座。
如本文所用之「所選大豆序列」一詞定義大豆植物之原生基因組DNA序列,其已被選擇用於分析以確定該序列是否有資格作為最適非基因大豆基因座。
如本文所用,關於DNA序列之「低甲基化(hypomethylation)」或「低甲基化(hypomethylated)」等詞定義DNA之既定序列中甲基化DNA核苷酸殘基之減少狀態。通常,相對於在如大豆植物之雙子葉植物之基因組中存在之非基因序列中發現的平均甲基化程度減少之甲基化與甲基化腺嘌呤或胞嘧啶殘基之數目有關。
如本文所用之「可靶向序列」為在核基因組中足夠獨特而允許感興趣的核酸位點特異性地靶向插入一個特定序列中的聚核苷酸序列。
如本文所用之「非重複」序列一詞定義為與如大豆之雙子葉植物之基因組內任何其他序列共享小於40%一致性的至少1Kb長之序列。序列一致性之計算可使用熟習此項技術者已知之任何標準技術確定,包括例如使用基於BLASTTM
之同源性搜索,使用NCBI BLASTTM
+軟體(2.2.25版),使用預設參數設置操作(Stephen F.Altschul等人(1997),「Gapped BLAST and PSI-BLAST:a new generation of protein database search programs」,Nucleic Acids Res.25:3389-3402),針對雙子葉植物基因組,例如大豆栽培品種Williams82基因組,掃描所選基因組序列。舉例而言,當分析所選大豆序列(來自黃豆(Glycine max
)栽培品種Williams82基因組)時,自此類搜索鑑別之第一個BLASTTM
命中表示雙子葉植物序列,例如大豆栽培品種Williams82序列本身。鑑別每個所選大豆序列之第二BLASTTM
命中且命中之比對覆蓋度(表示為由BLASTTM
命中覆蓋之所選大豆序列之百分比)用作諸如大豆之雙子葉植物之基因組內所選大豆序列之獨特性的量度。第二BLASTTM
命中之此等比對覆蓋度在最小0%至最大39.97%之序列一致性範圍內。不考慮在較高序列一致性位準下比對之任何序列。
當關於非基因序列使用時,「在與基因區接近的位置」一詞定義非基因序列相對於基因區之位置。特定言
之,分析40Kb鄰域內(亦即在所選最適大豆基因座序列之任一末端上的40Kb內)之基因區數。此分析藉由分析自單子葉植物基因組資料庫,例如大豆基因組資料庫提取之已知雙子葉植物(諸如大豆)之基因組中已知基因的基因註釋資訊及位置來完成。對於最適非基因大豆基因座,例如7,018個最適非基因大豆基因座每一者,界定在最適基因座序列周圍之40Kb窗口且對位置與此窗口重疊之註釋基因數目進行計數。基因區數目在40Kb鄰域內最小1個基因至最大18個基因的範圍內。
如本文所用之「已知之大豆編碼序列」一詞係指自包括大豆基因組資料庫(www.soybase.org,Shoemaker,R.C.等人SoyBase,the USDA-ARS soybean genetics and genomics database.Nucleic Acids Res.
2010年1月;38(資料庫發佈):D843-6.)之任何雙子葉植物基因組資料庫鑑別的任何聚核苷酸序列,其在內含子序列加工前或後均包含開放閱讀框架,且當置於適當的遺傳調節元件控制下時轉錄成mRNA且視情況轉譯成蛋白質序列。已知之大豆編碼序列可為cDNA序列或基因組序列。在一些情況下,已知之大豆編碼序列可註釋為功能蛋白。在其他情況下,已知之大豆編碼序列可能未註釋。
如本文所用之「預測之雙子葉植物編碼序列」一詞係指雙子葉植物基因組資料庫,例如大豆基因組資料庫中描述的任何表現序列標籤(EST)聚核苷酸序列,EST係自使用寡(dT)引子介導反轉錄酶之第一股合成所構築的
cDNA文庫鑑別。所得EST為自cDNA插入物之5'
或3'
末端獲得之小於500bp的單程測序讀數。多個EST可比對至單一重疊群中。所鑑別之EST序列上載至雙子葉植物基因組資料庫,例如大豆基因組資料庫,且可經由生物資訊學方法搜索以預測包含當置於適當的基因調節元件控制下時被轉錄成mRNA且視情況轉譯成蛋白質序列之編碼序列的相應基因組聚核苷酸序列。
如本文所用之「預測之大豆編碼序列」一詞係指例如大豆基因組資料庫之大豆基因組資料庫中描述的任何表現序列標籤(EST)聚核苷酸序列。EST係自使用寡(dT)引子介導反轉錄酶之第一股合成所構築的cDNA文庫鑑別。所得EST為自cDNA插入物之5'
或3'
末端獲得之小於500bp的單程測序讀數。多個EST可比對至單一重疊群中。所鑑別之EST序列上載至大豆基因組資料庫,例如大豆基因組資料庫,且可經由生物資訊學方法搜索以預測包含當置於適當的基因調節元件控制下時被轉錄成mRNA且視情況轉譯成蛋白質序列之編碼序列的相應基因組聚核苷酸序列。
如本文所用之「重組跡象」一詞係指跨越包含所選大豆序列之染色體區域,任何一對雙子葉植物基因組標記物(例如大豆基因組標記物)之間的減數分裂重組頻率。重組頻率係基於標記物之間的遺傳距離(分摩(cM))與標記物之間的物理距離(兆鹼基(Mb))的比率計算。對於具有重組跡象之所選大豆序列,所選大豆序列必須含有在側接所選大豆序列之兩個標記物之間的至少一個重組事件,如使用自
多個映射群體產生之高解析度標記物資料集偵測。
如本文所用之「相對位置值」一詞為定義基因座離其相應染色體著絲點之距離的計算值。對於每個所選大豆序列,量測所選大豆序列之原生位置至其位於之染色體之著絲點的基因組距離(Bp)。染色體內所選大豆序列之相對位置表示為其離著絲點之基因組距離相對於其所位於之特定染色體臂之長度(以Bp量測)的比率。最適非基因大豆基因座之此等相對位置值可針對不同雙子葉植物產生,大豆資料集之相對位置值在基因組距離之最小0至最大0.99682比率範圍內。
如本文所用之「外源性DNA序列」一詞為已自其原生位置移除且插入新的位置中,改變側接已移動之核酸序列之序列的任何核酸序列。舉例而言,外源性DNA序列可包含來自另一物種之序列。
「結合」係指大分子之間(例如蛋白質與核酸之間)的序列特異性相互作用。並非結合相互作用之所有組分均需要為序列特異性的(例如與DNA主鏈中之磷酸酯殘基接觸),只要相互作用總體上為序列特異性即可。此類相互作用一般特徵為解離常數(Kd)。「親和力」係指結合強度:結合親和力增加與較低結合常數(Kd)有關。
「結合蛋白」為能夠結合於另一分子之蛋白質。結合蛋白可結合於例如DNA分子(DNA結合蛋白)、RNA分子(RNA結合蛋白)及/或蛋白質分子(蛋白質結合蛋白)。在蛋白質結合蛋白情況下,其可結合於本身(形成同型二聚體、
同型三聚體等)及/或其可結合於不同蛋白質之一或多個分子。結合蛋白可具有超過一種類型之結合活性。舉例而言,鋅指蛋白質具有DNA結合、RNA結合及蛋白質結合活性。
如本文所用之「鋅指」一詞定義DNA結合蛋白結合結構域內的結構經由鋅離子配位而穩定化之胺基酸序列區域。
「鋅指DNA結合蛋白」(或結合結構域)為以序列特異性方式經由一或多個鋅指結合DNA的蛋白質或較大蛋白質內之結構域,鋅指為結合結構域內的結構經由鋅離子配位而穩定化之胺基酸序列區域。鋅指DNA結合蛋白一詞常常縮寫成鋅指蛋白質或ZFP。鋅指結合結構域可經「工程改造」以結合於預定核苷酸序列。設計及選擇用於工程改造鋅指蛋白質之方法之非限制性實例。設計之鋅指蛋白質為設計/組成主要由理性規範得來的非天然存在之蛋白質。設計之理性規範包括應用替代規則及計算機化算法以處理儲存現有ZFP設計及結合資料之資訊之資料庫中的資訊。參見例如美國專利第6,140,081號;第6,453,242號;第6,534,261號及第6,794,136號;亦參見WO 98/53058;WO 98/53059;WO 98/53060;WO 02/016536及WO 03/016496。
「TALE DNA結合結構域」或「TALE」為包含一或多個TALE重複結構域/單元之多肽。重複結構域與TALE結合於其同源標靶DNA序列有關。單一「重複單元」(亦稱為「重複序列」)通常為33-35個胺基酸長,且顯示與天然存在之TAIE蛋白質內之其他TALE重複序列的至少一
些序列同源性。參見例如以全文引用的方式併入本文中之美國專利公開案第20110301073號。
CRISPR(成叢的規律間隔之短迴文重複序列)/Cas(CRISPR相關)核酸酶系統。簡言之,「CRISPR DNA結合結構域」為與CAS酶一致起作用,可選擇性地識別、結合及裂解基因組DNA之短股RNA分子。CRISPR/Cas系統可經工程改造以在基因組中之所希望標靶產生雙股斷裂(DSB),且DSB之修復可通過使用修復抑制劑引起易出錯修復增加來影響。參見例如Jinek等人(2012)Science 337,第816-821頁,Jinek等人(2013),eLife 2:e00471,及David Segal,(2013)eLife 2:e00563)。
鋅指、CRISPR及TALE結合結構域可例如經由工程改造(改變一或多個胺基酸)天然存在之鋅指的識別螺旋區域來「工程改造」以結合於預定核苷酸序列。類似地,TALE可例如藉由工程改造與DNA結合有關之胺基酸(重複可變二殘基或RVD區域)來「工程改造」以結合於預定核苷酸序列。因此,經工程改造之DNA結合蛋白(鋅指或TALE)為非天然存在之蛋白質。設計及選擇用於工程改造DNA結合蛋白之方法之非限制性實例。設計之DNA結合蛋白為設計/組成主要由理性規範得來的非天然存在之蛋白質。設計之理性規範包括應用替代規則及計算機化算法以處理儲存現有ZFP及/或TALE設計及結合資料之資訊之資料庫中的資訊。參見例如美國專利6,140,081;6,453,242;及6,534,261;亦參見WO 98/53058;WO 98/53059;WO
98/53060;WO 02/016536及WO 03/016496及美國公開案第20110301073號、第20110239315號及第20119145940號。
「所選」鋅指蛋白質、CRISPR或TALE為主要由經驗過程,諸如噬菌體呈現、相互作用捕獲或雜交選擇產生的未在自然界中發現之蛋白質。參見例如美國專利第5,789,538號;第US 5,925,523號;第US 6,007,988號;第US 6,013,453號;第US 6,200,759號;WO 95/19431;WO 96/06166;WO 98/53057;WO 98/54311;WO 00/27878;WO 01/60970及WO 01/88197及WO 02/099084以及美國公開案第20110301073號、第20110239315號及第20119145940號。
「重組」係指兩個聚核苷酸之間的遺傳資訊交換的過程,包括(但不限於)藉由非同源末端接合(NHEJ)及同源重組之供體捕捉。出於本發明之目的,「同源重組(HR)」係指例如在細胞中經由同源性介導之修復機理進行雙股斷裂修復期間所發生的此類交換之特定形式。此過程需要核苷酸序列同源性,使用「供體」分子模擬標靶分子(亦即經歷雙股斷裂之核苷酸序列)之修復,且不同地稱為「非交叉基因轉換」或「短暫區域基因轉換」,因為其導致遺傳資訊自供體轉移至標靶。不希望受任何特定理論限制,此類轉移可包含在斷裂標靶與供體之間形成的異源雙鏈DNA之錯配校正及/或其中供體用以再合成將變成標靶一部分之遺傳資訊的「合成依賴性股退火」,及/或相關過程。此類特定HR常常引起標靶分子之序列改變,使得供體聚核苷酸之
部分或所有序列併入標靶聚核苷酸中。對於HR介導之整合,供體分子含有至少2個具有與基因組(「同源性臂」)最小50-100個鹼基對長度之同源性的區域。參見例如美國專利公開案第20110281361號。
在本發明之方法中,一或多個如本文中描述之靶向核酸酶在預定位點產生標靶序列(例如細胞染色質)中之雙股斷裂,且與斷裂區域中之核苷酸序列具有同源性以進行HR介導之整合或與斷裂區域中之核苷酸序列無同源性以進行NHEJ介導之整合的「供體」聚核苷酸可引入細胞中。雙股斷裂之存在已顯示促進供體序列之整合。供體序列可物理整合,或者供體聚核苷酸用作模板以經由同源重組來修復,使得如供體中之所有或一部分核苷酸序列引入細胞染色質中。因此,細胞染色質中之第一序列可改變,且在某些實施例中,可轉變為供體聚核苷酸中存在之序列。因此,可瞭解「置換(replace)」或「置換(replacement)」一詞之使用表示一個核苷酸序列經另一核苷酸序列置換(亦即資訊意義上序列之置換)且不一定需要一個聚核苷酸經另一個聚核苷酸之物理或化學置換。
在本文中描述之任何方法中,其他對之鋅指蛋白質、CRISPRS或TALEN可用於細胞內額外標靶位點之額外雙股裂解。
本文中描述之任何方法可用於藉由破壞感興趣的基因表現之供體序列的靶向整合來插入任何尺寸之供體及/或使細胞中一或多個標靶序列部分或完全失活。亦提供
具有部分或完全失活基因之細胞株。
此外,如本文中描述之靶向整合方法亦可用以整合一或多個外源性序列。外源性核酸序列可包含例如一或多個基因或cDNA分子或任何類型編碼或非編碼序列以及一或多個控制元件(例如啟動子)。另外,外源性核酸序列(轉殖基因)可產生一或多個RNA分子(例如小髮夾RNA(shRNA)、抑制RNA(RNAi)、微型RNA(miRNA)等)或蛋白質。
如本文所用之「裂解」定義DNA分子之磷酸酯-糖主鏈的斷裂。裂解可藉由包括(但不限於)磷酸二酯鍵之酶促或化學水解之各種方法引發。單股裂解與雙股裂解均為可能的,且雙股裂解可作為兩個不同單股裂解事件之結果而發生。DNA裂解可導致鈍端或交錯端產生。在某些實施例中,融合多肽用於靶向之雙股DNA裂解。「裂解結構域」包含具有DNA裂解催化活性之一或多個多肽序列。裂解結構域可含於單一多肽鏈中,或裂解活性可由兩個(兩個以上)多肽締合產生。
「裂解半結構域」為與第二多肽(一致或者不同)一道形成具有裂解活性(較佳雙股裂解活性)之複合物的多肽序列。「第一及第二裂解半結構域」、「+及-裂解半結合域」及「右及左裂解半結合域」等詞可互換使用,係指二聚化之成對裂解半結合域。
「經工程改造之裂解半結構域」為已經修飾以便與另一裂解半結構域(例如另一工程改造之裂解半結構域)
形成專性異型二聚體的裂解半結構域。亦參見美國專利公開案第2005/0064474號、第20070218528號、第2008/0131962號及第2011/0201055號,以全文引用的方式併入本文中。
「標靶位點」或「標靶序列」係指結合分子將結合之核酸一部分,條件為存在足夠進行結合之條件。
核酸包括DNA及RNA,可為單股或雙股;可為線狀、枝狀或圓形;且可具有任何長度。核酸包括能夠形成雙螺旋體之核酸以及形成三螺旋體之核酸。參見例如美國專利第5,176,996號及第5,422,251號。蛋白質包括(但不限於)DNA結合蛋白、轉錄因子、染色質重塑因子、甲基化DNA結合蛋白、聚合酶、甲基酶、去甲基酶、乙醯基酶、去乙醯基酶、激酶、磷酸酶、整合酶、重組酶、連接酶、拓撲異構酶、旋轉酶及解螺旋酶。
「外源性核酸產物」包括聚核苷酸與多肽產物,例如轉錄產物(聚核苷酸,諸如RNA)及轉譯產物(多肽)。
「融合」分子為其中兩個或兩個以上次單元分子例如共價連接之分子。次單元分子可為相同化學類型之分子,或可為不同化學類型之分子。第一類型融合分子之實例包括(但不限於)融合蛋白(例如ZFP DNA結合結構域與裂解結構域之間的融合物)及融合核酸(例如編碼上文描述之融合蛋白的核酸)。第二類型融合分子之實例包括(但不限於)形成三螺旋體之核酸與多肽之間的融合物及小溝結合物與核酸之間的融合物。細胞中融合蛋白之表現可由融合蛋白傳遞至細胞或藉由編碼融合蛋白之聚核苷酸傳遞至細
胞而產生,其中聚核苷酸轉錄,且轉錄本轉譯,產生融合蛋白。反式剪接、多肽裂解及多肽接合亦可與細胞中蛋白質之表現相關。用於聚核苷酸及多肽傳遞至細胞之方法在本發明中別處呈現。
出於本發明之目的,「基因」包括編碼基因產物(參看下文)之DNA區域,以及調節基因產物產生之所有DNA區域,無論此類調節序列是否與編碼及/或轉錄序列相鄰或可操作地連接。因此,基因包括但不一定限於啟動子序列、終止子、轉譯調節序列(諸如核糖體結合位點及內部核糖體進入位點)、強化子、沉默子、絕緣子、邊界元件、複製起點、基質附著位點及基因座控制區域。
「基因表現」係指基因中含有之資訊轉變成基因產物。基因產物可為基因(例如mRNA、tRNA、rRNA、反義RNA、干擾RNA、核糖酶、結構RNA或任何其他類型RNA)之直接轉錄產物或藉由mRNA轉譯產生之蛋白質。基因產物亦包括藉由諸如封端、聚腺苷酸化、甲基化及剪輯之方法修飾的RNA,及藉由例如甲基化、乙醯化、磷酸化、泛素化、ADP核糖基化、肉豆蔻基化及糖基化修飾之蛋白質。
序列一致性:在兩個核酸或多肽序列之情況下如本文所用之「序列一致性」或「一致性」等詞係指兩個序列中當在指定比較窗口上進行比對以求最大對應時相同的殘基。
如本文所用之「序列一致性百分比」一詞係指藉由在比較窗口上比較兩個最佳比對之序列(例如核酸序列
及胺基酸序列)所確定的值,其中為使兩個序列最佳比對,與參考序列(不包含添加或缺失)相比,比較窗口中之序列部分可包含添加或缺失(亦即間隙)。藉由確定兩個序列中存在一致核苷酸或胺基酸殘基之位置的數目以產生匹配位置之數目,將匹配位置之數目除以比較窗口中位置總數且將結果乘以100,得到序列一致性之百分比來計算百分比。
用於比對序列以供比較之方法為此項技術中熟知。各種程式及比對算法描述於例如以下中:Smith及Waterman(1981)Adv.Appl.Math.2:482;Needleman及Wunsch(1970)J.Mol.Biol.48:443;Pearson及Lipman(1988)Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.85:2444;Higgins及Sharp(1988)Gene 73:237-44;Higgins及Sharp(1989)CABIOS 5:151-3;Corpet等人(1988)Nucleic Acids Res.16:10881-90;Huang等人(1992)Comp.Appl.Biosci.8:155-65;Pearson等人(1994)Methods Mol.Biol.24:307-31;Tatiana等人(1999)FEMS Microbiol.Lett.174:247-50。序列比對方法及同源性計算之詳細討論可見於例如Altschul等人(1990)J.Mol.Biol.215:403-10中。美國國家生物技術資訊中心(National Center for Biotechnology Information,NCBI)基本局部比對搜索工具(BLASTTM
;Altschul等人(1990))可得自若干來源,包括美國國家生物技術資訊中心(Bethesda,MD)及網際網路,結合若干序列分析程式使用。如何使用此程式確定序列一致性之描述可得自網際網路BLASTTM
之「幫助」章節。為比較核酸序列,
BLASTTM
(Blastn)程式之「Blast 2序列」功能可使用預設參數採用。當藉由此方法評估時與參考序列更類似之核酸序列將顯示一致性百分比增加。
特異性雜交/特異性互補:如本文所用之「特異性雜交」及「特異性互補」等詞為指示足夠互補程度,使得核酸分子與標靶核酸分子之間進行穩定及特異性結合的詞。兩個核酸分子之間的雜交包含在兩個核酸分子之核酸序列之間形成反向平行比對。接著兩個分子能夠與相對股上之對應鹼基形成氫鍵,從而形成雙螺旋分子,若雙螺旋分子足夠穩定,則可使用此項技術中熟知之方法偵測。核酸分子不需要為特異性雜交而與其標靶序列100%互補。然而,使雜交具有特異性所必須存在之序列互補性的量隨使用之雜交條件而變。
引起特定嚴格度之雜交條件將視選擇之雜交方法的性質以及雜交核酸序列之組成及長度而變化。一般地,雜交溫度及雜交緩衝液之離子強度(尤其Na+及/或Mg++濃度)將決定雜交嚴格性,不過洗滌時間亦影響嚴格性。關於達到特定嚴格度所需之雜交條件的計算為一般技術者已知,且論述於例如Sambrook等人(編輯)Molecular Cloning:A Laboratory Manual,第2版,第1-3卷,Cold Spring Harbor Laboratory Press,Cold Spring Harbor,NY,1989,第9及11章;及Hames及Higgins(編輯)Nucleic Acid Hybridization,IRL Press,Oxford,1985中。關於雜交核酸之進一步詳細說明書及指導可見於例如Tijssen,「Overview of
principles of hybridization and the strategy of nucleic acid probe assays,」Laboratory Techniques in Biochemistry and Molecular Biology-Hybridization with Nucleic Acid Probes,第I部分,第2章,Elsevier,NY,1993;及Ausubel等人編輯,Current Protocols in Molecular Biology,第2章,Greene Publishing and Wiley-Interscience,NY,1995中。
如本文所用,「嚴格條件」涵蓋若雜交分子與標靶核酸分子內之序列之間存在小於20%錯配,則將僅僅發生雜交之條件。「嚴格條件」包括其他特定的嚴格程度。因此,如本文所用,「中等嚴格」條件為使具有超過20%序列錯配之分子不雜交的條件;「高嚴格」條件為使具有超過10%錯配之序列不雜交的條件;且「極高嚴格」條件為使具有超過5%錯配之序列不雜交的條件。以下為代表性的非限制性雜交條件。
高嚴格條件(偵測共享至少90%序列一致性之序列):在5x SSC緩衝液(其中SSC緩衝液含有諸如SDS之清潔劑,及如鮭魚精DNA、EDTA等額外試劑)中在65℃下雜交16小時;在2x SSC緩衝液(其中SSC緩衝液含有諸如SDS之清潔劑,及如鮭魚精DNA、EDTA等額外試劑)中在室溫下洗滌兩次,每次15分鐘;及在0.5x SSC緩衝液(其中SSC緩衝液含有諸如SDS之清潔劑,及如鮭魚精DNA、EDTA等額外試劑)中在65℃下洗滌兩次,每次20分鐘。
中等嚴格條件(偵測共享至少80%序列一致性之序列):在5x-6x SSC緩衝液(其中SSC緩衝液含有諸如SDS之
清潔劑,及如鮭魚精DNA、EDTA等額外試劑)中在65-70℃下雜交16-20小時;在2x SSC緩衝液(其中SSC緩衝液含有諸如SDS之清潔劑,及如鮭魚精DNA、EDTA等額外試劑)中在室溫下洗滌兩次,每次5-20分鐘;及在1x SSC緩衝液(其中SSC緩衝液含有諸如SDS之清潔劑,及如鮭魚精DNA、EDTA等額外試劑)中在55-70℃下洗滌兩次,每次30分鐘。
非嚴格控制條件(共享至少50%序列一致性之序列將雜交):在6x SSC緩衝液(其中SSC緩衝液含有諸如SDS之清潔劑,及如鮭魚精DNA、EDTA等額外試劑)中在室溫至55℃下雜交16-20小時;在2x-3x SSC緩衝液(其中SSC緩衝液含有諸如SDS之清潔劑,及如鮭魚精DNA、EDTA等額外試劑)中在室溫至55℃下洗滌至少兩次,每次20-30分鐘。
如本文所用,關於鄰接核酸序列之「實質上同源」或「實質同源性」等詞係指在嚴格條件下與參考核酸序列雜交之鄰接核苷酸序列。舉例而言,實質上與參考核酸序列同源之核酸序列為在嚴格條件(例如上文闡述之中等嚴格條件)下與參考核酸序列雜交之核酸序列。實質上同源序列可具有至少80%序列一致性。舉例而言,實質上同源序列可具有約80%至100%序列一致性,諸如約81%;約82%;約83%;約84%;約85%;約86%;約87%;約88%;約89%;約90%;約91%;約92%;約93%;約94%約95%;約96%;約97%;約98%;約98.5%;約99%;約99.5%;及約100%。實質同源性之特性與特異性雜交密切相關。舉例而言,當存在足夠互補程度以避免在希望特異性結合之條件下,例
如在嚴格雜交條件下核酸與非標靶序列之非特異性結合時,核酸分子為可特異性雜交的。
在一些情況下「同源」可用於指自共同原始DNA序列繼承之第一基因與第二基因的關係。在此類情況下,同源性一詞指示藉由物種化事件分開之基因之間的關係(參見直系同源)或藉由遺傳複製事件分開之基因之間的關係(參見旁系同源)。在其他情況下,「同源」可用於指在一或多個聚核苷酸序列不一定自共同原始DNA序列繼承之此類情況下一或多個聚核苷酸序列之間的序列一致性程度。熟習此項技術者知道「同源」一詞可互換且瞭解該詞之合理應用。
如本文所用之「直系同源(ortholog)」(或「直系同源(orthologous)」)一詞係指兩種或兩種以上物種中自共同原始核苷酸序列進化而來且可在兩個或兩個以上物種中保留相同功能的基因。
如本文所用之「旁系同源」一詞係指藉由基因組內複製而相關之基因。直系同源在進化過程中保留相同的功能,而旁系同源進化新的功能,即使此等新功能與原始基因功能不相關。
如本文所用,當在5'至3'方向上閱讀之序列之每個核苷酸與在3'至5'方向上閱讀之另一個序列之每個核苷酸互補時,兩個核酸序列分子被認為顯示「完全互補性」。與參考核苷酸序列互補之核苷酸序列將顯示與參考核苷酸序列之反向互補序列一致之序列。此等詞及描述在此項技
術中充分定義且一般技術者容易理解。
當確定胺基酸序列之間的序列一致性百分比時,熟習此項技術者熟知藉由比對提供的既定位置中之胺基酸一致性在不影響包含比對序列之多肽的希望特性下可不同。在此等情況下,序列一致性百分比可調整以說明保守取代胺基酸之間的相似性。此等調整為熟習此項技術者熟知且常用。參見例如Myers及Miller(1988)Computer Applications in Biosciences 4:11-7。統計法為此項技術中已知且可用於分析所鑑別之7,018個最適基因座。
作為一個實施例,所鑑別之包含7,018個個別最適基因座序列之最適基因座可經由F分佈檢驗分析。在概率論及統計學中,F分佈為連續概率分佈。F分佈檢驗為具有F分佈之統計顯著性檢驗,且當比較已與資料集擬合之統計模型時使用以鑑別最佳擬合模型。F分佈為連續概率分佈,且又名斯內德克F分佈(Snedecor's F-distribution)或費歇爾-斯內德克分佈(Fisher-Snedecor distribution)。F分佈常作為檢驗統計量之零分佈出現,在方差分析中最顯著。F分佈為右偏分佈。F分佈為具有最小值0,但無最大值之不對稱分佈。曲線在離0右側不遠處達到峰值,且接著F值愈大,逐漸接近橫軸。F分佈接近,但從不很觸及橫軸。應瞭解,在其他實施例中,此方程式上之變化或實際上不同的方程式可藉由熟習此項技術者衍生及使用,且可應用於7,018個個別最適基因座序列之分析。
可操作地連接:當第一核苷酸序列與第二核苷酸
序列處於功能關係中時,第一核苷酸序列與第二核苷酸序列「可操作地連接」。舉例而言,若啟動子影響編碼序列之轉錄或表現,則啟動子可操作地連接於編碼序列。當重組產生時,可操作地連接之核苷酸序列一般鄰接,且必要時為接合兩個蛋白質編碼區域,在相同的閱讀框中。然而,核苷酸序列無需為可操作地連接而鄰接。
「可操作地連接」一詞當關於調節序列及編碼序列使用時,意謂調節序列影響連接之編碼序列之表現。「調節序列」、「調節元件」或「控制元件」係指影響相關編碼序列轉錄、RNA加工或穩定性或轉譯之時機及程度/量的核苷酸序列。調節序列可包括啟動子;轉譯前導序列;內含子;強化子;莖環結構;阻遏結合序列;終止序列;聚腺苷酸化識別序列等等。特定調節序列可位於可操作地連接於其之編碼序列的上游及/或下游。可操作地連接於編碼序列之特定調節序列亦可位於雙股核酸分子之締合互補股。
當關於兩個或兩個以上胺基酸序列使用時,「可操作地連接」一詞意謂第一胺基酸序列與至少一個其他胺基酸序列處於功能關係。
所揭示之方法及組合物包括融合蛋白,其包含可操作地連接於DNA結合結構域(例如ZFP)之裂解結構域,其中DNA結合結構域藉由結合於大豆最適基因座中之序列而將裂解結構域之活性引導至序列附近,因此誘發最適基因座中之雙股斷裂。如本發明中別處所闡述,鋅指結構域可經工程改造以結合於實際上任何希望之序列。因此,一或
多個DNA結合結構域可經工程改造以結合於最適基因座中之一或多個序列。包含DNA結合結構域及裂解結構域之融合蛋白在細胞中之表現實現在標靶位點上或附近裂解。
實施例
轉殖基因及轉殖基因堆靶向如大豆植物之雙子葉植物之基因組中特定位置將提高轉殖基因事件之品質,降低與轉殖基因事件產生相關聯之成本,且提供製造諸如序列基因堆之轉殖基因植物產品之新方法。總而言之,轉殖基因靶向特定基因組位點在商業上可能為有益的。近些年,諸如ZFN、CRISPR及TALEN之位點特異性核酸酶已有顯著發展,該等核酸酶可促進供體聚核苷酸添加至植物及其他基因組中之預選位點。然而,關於適於靶向之基因組位點的屬性知之甚少。歷史上,基因組中不需要之基因及病原體(病毒)整合位點已用作靶向基因座。基因組中此類位點之數目相當受限制,且因此需要鑑別及表徵可用於供體聚核苷酸序列靶向之最適基因座。除可靶向之外,預期最適基因座為可支持轉殖基因表現及繁殖應用之中性位點。
申請者已認識到對於插入位點需要額外標準,且已將此等標準組合以鑑別及選擇如大豆基因組之雙子葉植物基因組中最適於插入外源性序列之位點。出於靶向目的,所選插入位點需要為獨特的且在如大豆基因組之雙子葉植物基因組的非重複區域中。同樣,最適於插入之基因組位點應具有最小的不合乎需要之表型效應,且易發生重組事件,從而促進使用傳統的育種技術使基因滲入農藝學
上優良株系中。為鑑別滿足所列出之標準的基因座,使用定製之生物信息學方法及基因組規模資料集掃描大豆植物基因組,以鑑別具有有益於聚核苷酸供體序列整合及隨後插入之編碼序列表現之特徵的新穎基因座。
I.非基因大豆基因座之鑑別
根據一個實施例,提供一種鑑別最適非基因大豆基因組序列以插入外源性序列之方法。該方法包含首先鑑別至少1Kb長之低甲基化大豆基因組序列的步驟。在一個實施例中,低甲基化基因組序列為1、1.5、2、2.5、3、3.5、4、4.5、5、5.5、6、6.5、7、7.5、8、8.5、9、10、11、12、13、14、15、16或17Kb長。在一個實施例中,低甲基化基因組序列為約1至約5.7Kb長,且在另一個實施例中為約2Kb長。若其在序列內具有小於1% DNA甲基化,則序列視為低甲基化。在一個實施例中,甲基化狀態係基於相對於在正常對照DNA樣品內對應CpG二核苷酸、CHG或CHH三核苷酸上發現之總胞嘧啶的量,在所選大豆序列內一或多個CpG二核苷酸、CHG或CHH三核苷酸上5-甲基胞嘧啶之存在來量測。更特定言之,在一個實施例中,所選大豆序列每500個所選大豆序列之核苷酸具有小於1、2或3個甲基化核苷酸。在一個實施例中,所選大豆序列每500個所選大豆序列之核苷酸在CpG二核苷酸上具有小於一個、兩個或三個5-甲基胞嘧啶。在一個實施例中,所選大豆序列為1至4Kb長且包含1Kb缺少5-甲基胞嘧啶之序列。在一個實施例中,所選大豆序列為1、1.5、2、2.5、3、3.5、4、4.5、5、
5.5或6Kb長且其整個長度中含有1或0個甲基化核苷酸。在一個實施例中,所選大豆序列為1、1.5、2、2.5、3、3.5、4、4.5、5、5.5或6Kb長且其整個長度中在CpG二核苷酸上不含5-甲基胞嘧啶。根據一個實施例,所選大豆序列之甲基化可基於來源組織變化。在此類實施例中,用於確定序列是否低甲基化之甲基化程度表示自兩個或兩個以上組織(例如自根及芽)分離之序列中甲基化之平均量。
除要求最適基因組位點低甲基化之外,所選大豆序列必須亦為非基因的。因此,所有低甲基化基因組序列進一步篩選以消除含有基因區之低甲基化序列。此包括任何開放閱讀框架,無論轉錄本是否編碼蛋白質。本發明之最適非基因大豆基因座排除包括基因區之低甲基化基因組序列,包括任何可鑑別的參與調節開放閱讀框架表現之相鄰5'
及3'
非編碼核苷酸序列及可存在於基因區中之任何內含子。
最適非基因大豆基因座必須亦為已證明重組跡象之序列。在一個實施例中,所選大豆序列必須如使用自多個映射群體產生之高解析度標記物資料集偵測,在側接所選大豆序列之兩個標記物之間含有至少一個重組事件。在一個實施例中,側接包含所選大豆序列之0.5、1、1.5Mb諸如大豆基因組序列之雙子葉植物基因組序列的該對標記物用以計算所選大豆序列之重組頻率。每對標記物之間的重組頻率(以分摩(cM)量測)比標記物之間的基因組物理距離(Mb)必須超過0.0157cM/Mb。在一個實施例中,1Mb包
含所選大豆序列之大豆基因組序列的重組頻率在約0.01574cM/Mb至約83.52cM/Mb範圍內。在一個實施例中,最適基因座為已在所選大豆序列內偵測到重組事件之基因座。
最適非基因大豆基因座亦將為可靶向序列,亦即在大豆基因組中相對獨特,使得靶向所選大豆序列之基因將僅僅在大豆基因組之一個位置中插入的序列。在一個實施例中,最適基因組序列之整個長度與大豆基因組中含有之類似長度之另一序列共享小於30%、35%或40%序列一致性。因此,在一個實施例中,所選大豆序列不可包含與大豆基因組中含有之另一1Kb序列共享超過25%、30%、35%或40%序列一致性的1Kb序列。在另一個實施例中,所選大豆序列不可包含與大豆基因組中含有之另一500bp序列共享超過30%、35%或40%序列一致性的500bp序列。在一個實施例中,所選大豆序列不可包含與如大豆植物之雙子葉植物基因組中含有之另一1Kb序列共享超過40%序列一致性的1Kb序列。
最適非基因大豆基因座亦將接近基因區。更特定言之,所選大豆序列必須位於基因區附近(例如基因區必須位於側接及鄰接如在原生基因組中發現之所選大豆序列任一末端之基因組序列的40Kb內)。在一個實施例中,基因區位於處於如在原生大豆基因組中發現之所選大豆序列任一末端的鄰接基因組序列之10、20、30或40Kb內。在一個實施例中,兩個或兩個以上基因區位於側接所選大豆序列
兩個末端之鄰接基因組序列之10、20、30或40Kb內。在一個實施例中,1-18個基因區位於側接所選大豆序列兩個末端之鄰接基因組序列之10、20、30或40Kb內。在一個實施例中,兩個或兩個以上基因區位於包含所選大豆序列之20、30或40Kb基因組序列內。在一個實施例中,1-18個基因區位於包含所選大豆序列之40Kb基因組序列內。在一個實施例中,位於側接所選大豆序列之鄰接基因組序列之10、2030或40Kb內的基因區包含在諸如大豆植物之雙子葉植物之基因組中的已知基因。
根據一個實施例,提供經修飾之非基因大豆基因座,其中基因座至少1Kb長,非基因,不包含甲基化胞嘧啶殘基,具有在涵蓋大豆基因座的1Mb基因組區域上超過0.01574cM/Mb之重組頻率,且大豆基因座之1Kb序列與雙子葉植物基因組中含有之任何其他1Kb序列共享小於40%序列一致性,其中藉由插入感興趣的DNA至非基因大豆基因座中來修飾非基因大豆基因座。
提供一種用於鑑別最適非基因大豆基因座的方法。在一些實施例中,該方法首先包含篩選雙子葉植物基因組以產生第一池之所選大豆序列,其具有1Kb之最小長度且低甲基化,視情況其中基因組序列具有小於1%甲基化,視情況其中基因組序列缺乏任何甲基化胞嘧啶殘基。此第一池之所選大豆序列可進一步篩選以消除不滿足對最適非基因大豆基因座之要求的基因座。自第一池之序列消除編碼雙子葉植物轉錄本,與類似長度之另一序列共享超
過40%或更高序列一致性,不顯示重組跡象,且在所選大豆序列之40Kb內不具有已知之開放閱讀框架之雙子葉植物基因組序列(諸如自大豆獲得之基因組序列),剩下第二池之有資格作為最適非基因大豆基因座之序列。在一個實施例中,自第一池之序列消除在該非基因序列一個末端之40Kb內不具有已知雙子葉植物基因(亦即大豆基因)或包含已知雙子葉植物基因之2Kb上游及/或1Kb下游區之序列的任何所選大豆序列。在一個實施例中,消除在所選大豆序列之40Kb內不含表現蛋白質之已知基因的任何所選大豆序列。在一個實施例中,消除不具有超過0.01574cM/Mb之重組頻率的任何所選大豆序列。
使用此等選擇標準,申請者已鑑別出用作最適非基因大豆基因座的諸如大豆之雙子葉植物之精選最適基因座,其序列揭示為SEQ IDNO:1-SEQ ID NO:7,018。本發明亦涵蓋所鑑別之最適非基因大豆基因座的天然變異體或經修飾之衍生物,其中變異或衍生基因座包含與SEQ ID NO:1-SEQ ID NO:7,018之任何序列有1、2、3、4、5、6、7、8、9或10個核苷酸不同的序列。在一個實施例中,根據本發明使用之最適非基因大豆基因座包含選自SEQ ID NO:1-SEQ ID NO:7,018之序列或與選自SEQ ID NO:1-SEQ ID NO:7,018之序列共享90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%序列一致性的序列。
在另一實施例中,用於本發明之雙子葉植物包含選自由以下各者組成之群的任何植物:大豆植物、芥花植
物、油菜植物、芸苔屬(Brassica
)植物、棉花植物及葵花植物。可使用之雙子葉植物之實例包括(但不限於)芥花、棉花、馬鈴薯、奎奴亞藜、莧菜、蕎麥、紅花、大豆、甜菜、葵花、芥花、油菜、菸草、芥菜屬(Arabidopsis
)、芸苔屬及棉花。
在另一個實施例中,根據本發明使用之最適非基因大豆基因座包含選自大豆植物之序列。在另一個實施例中,根據本發明使用之最適非基因大豆基因座包含選自黃豆同系繁殖物之序列。因此,黃豆同系繁殖物包括其農藝學上優良變體。在隨後實施例中,根據本發明使用之最適非基因大豆基因座包含選自可轉型大豆株系之序列。在一個實施例中,代表性的可轉型大豆株系包括;Maverick、Williams82、Merrill JackPeking、Suzuyutaka、Fayette、Enrei、Mikawashima、WaseMidori、Jack、Leculus、Morocco、Serena、Maple prest、Thorne、Bert、Jungery、A3237、Williams、Williams79、AC Colibri、Hefeng 25、Dongnong 42、Hienong 37、Jilin 39、Jiyu 58、A3237、Kentucky Wonder、Minidoka及其衍生物。熟習此項技術者將瞭解,由於種系發生之分歧,各種類型之大豆株系不含一致的基因組DNA序列,且基因組序列內可存在多態現象或對偶基因變異。在一個實施例中,本發明涵蓋所鑑別之最適非基因大豆基因座的此類多態現象或對偶基因變異,其中多態現象或對偶基因變異包含與SEQ ID NO:1-SEQ ID NO:7,018之任何序列有1、2、3、4、5、6、7、8、9或10個核苷酸不同的序
列。在另一個實施例中,本發明涵蓋所鑑別之最適非基因大豆基因座的此類多態現象或對偶基因變異,其中包含多態現象或對偶基因變異之序列與SEQ ID NO:1-SEQ ID NO:7,018之任何序列共享90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%序列一致性。
包含7,018個個別序列之所鑑別之最適基因座可藉由使用多變數分析方法進一步分析而分類為各種子群。任何多變數分析統計程式之應用用於揭示一組變數之潛在結構(尺寸)。可使用大量不同類型之多變數算法,例如可使用多元回歸分析、邏輯回歸分析、辨別分析、多變數方差分析(MANOVA)、因子分析(包括共因子分析及主分量分析)、聚類分析、多維標度、對應分析、聯合分析、典型分析、典型相關及結構方程模型來分析資料集。
根據一個實施例,最適非基因大豆基因座使用諸如主分量分析(PCA)之多變數資料分析進一步分析。此處僅僅將給出簡要說明,更多資訊可見於H.Martens,T.Naes,Multivariate Calibration,Wiley,N.Y.,1989中。PCA評估資料之潛在維度(潛在變數),且概述資料中之主導模式及主要傾向。在一個實施例中,最適非基因大豆基因座可經由主分量分析(PCA)統計方法分選成叢。PCA為使用正交變換將一組可能相關變數之觀測結果轉變成稱為主分量之一組線性不相關變數值的數學程序。主分量數目小於或等於初始變數數目。此變換以如下方式定義:第一主分量具有最大可能方差(亦即解釋資料中儘可能多之變化性),且繼而每個後
續分量具有在其與前述分量正交(亦即不相關)之約束下可能的最高方差。若資料集共同正常分佈,則保證主分量為獨立的。PCA對初始變數之相對定標敏感。PCA基於實體特徵將一組實體叢集之用途的實例包括;Ciampitti,I.等人,(2012)Crop Science,52(6);2728-2742,Chemometrics:A Practical Guide,Kenneth R.Beebe,Randy J.Pell,及Mary Beth Seasholtz,Wiley-Interscience,第1版,1998,美國專利第8,385,662號及歐洲專利第2,340,975號。
根據一個實施例,主分量分析(PCA)在7,018個最適大豆基因座上,針對每個鑑別之最適大豆基因座使用以下10個特徵進行:
1.最適大豆基因座(OGL)周圍低甲基化區域之長度
a.使用高通量全基因組測序方法,構築自雙子葉植物(例如黃豆栽培品種Williams82)分離之根及芽組織之DNA甲基化概況。提取之DNA經受亞硫酸氫鹽處理,該處理使未甲基化胞嘧啶轉化成尿嘧啶,但不影響甲基化之胞嘧啶,且接著使用Illumina HiSeq技術測序(Krueger,F.等人DNA methylome analysis using short bisulfite sequencing data.Nature Methods 9,145-151(2012))。使用BismarkTM
映射軟體,將原始測序讀數與例如黃豆參考序列之雙子葉植物參考序列映射(如Krueger F,Andrews SR(2011)Bismark:a flexible aligner and methylation caller for Bisulfite-Seq applications.(Bioinformatics 27:1571-1572)中所述)。使用描述之甲基化概況計算每一OGL周圍之低甲基化區域的長
度。
2.OGL周圍1MB區域中之重組率
a.對於每個OGL,鑑別1Mb窗口內OGL任一邊緣上之一對標記物。跨越染色體,每對標記物之間的重組頻率係基於標記物之間的遺傳距離(分摩(cM))與標記物之間的基因組物理距離(Mb)的比率計算。
3.OGL序列獨特性程度
a.對於每個OGL,使用基於BLAST之同源性搜索,針對例如大豆栽培品種Williams82基因組之雙子葉植物基因組掃描OGL之核苷酸序列。因為自例如大豆栽培品種Williams82基因組之雙子葉植物基因組鑑別此等OGL序列,所以經由此搜索鑑別之第一BLAST命中代表OGL序列本身。鑑別每個OGL之第二BLAST命中且命中之比對覆蓋度用作例如大豆基因組之雙子葉植物基因組內OGL序列獨特性的量度。
4.OGL與其鄰域中最靠近基因的距離
a.自已知之雙子葉植物基因組資料庫,例如大豆基因組資料庫(www.soybase.org)提取例如大豆栽培品種Williams82基因組之雙子葉植物基因組中已知基因之基因註釋資訊及位置。對於每個OGL,鑑別其上游或下游鄰域中最靠近之註釋基因且量測OGL序列與該基因之間的距離(bp)。
5.OGL鄰域中之GC%
a.對於每個OGL,分析核苷酸序列以估計存在之鳥嘌
呤及胞嘧啶鹼基的數目。此計數表示為每個OGL之序列長度的百分比且提供GC%之量度。
6.OGL周圍40Kb鄰域中之基因數目
a.自已知之雙子葉植物基因組資料庫,例如大豆基因組資料庫(www.soybase.org)提取例如大豆栽培品種Williams82基因組之雙子葉植物基因組中已知基因之基因註釋資訊及位置。對於每個OGL,定義OGL周圍之40Kb窗口,且計數位置與此窗口重疊之註釋基因的數目。
7.OGL周圍40Kb鄰域中之平均基因表現
a.藉由使用RNAseq技術分析由例如大豆栽培品種Williams82之雙子葉植物根及芽組織產生之轉錄組概況分析資料,量測例如大豆基因之雙子葉植物基因之轉錄物表現位準。對於每個OGL,鑑別例如大豆栽培品種Williams82基因組之雙子葉植物基因組內的存在於OGL周圍40Kb鄰域中之註釋基因。自轉錄組概況提取窗口中每個基因之表現位準且計算平均基因表現位準。
8.OGL周圍核小體占位位準
a.瞭解特定核苷酸序列之核小體占位位準提供關於染色體功能及序列之基因組背景的資訊。NuPoPTM
統計套裝軟體提供一種用於預測任何大小之基因組序列的核小體占位率及最可能核小體定位圖譜的用戶親和軟體工具(Xi,L.,Fondufe-Mittendor,Y.,Xia,L.,Flatow,J.,Widom,J.及Wang,J.-P.,Predicting nucleosome positioning using a duration Hidden Markov Model,BMC Bioinformatics,2010,
doi:10.1186/1471-2105-11-346)。對於每個OGL,核苷酸序列提交至NuPoPTM
軟體中且計算核小體占位評分。
9.染色體內相對位置(與著絲點之接近度)
a.自雙子葉植物基因組資料庫,例如大豆基因組資料庫(www.soybase.org)提取關於每個雙子葉植物染色體(例如大豆染色體)中著絲點位置及染色體臂長度之資訊。對於每個OGL,量測OGL序列至其定位之染色體著絲點之基因組距離(bp)。染色體內OGL之相對位置表示為相對於其所處之特定染色體臂之長度,其離著絲點之基因組距離的比率。
10.OGL周圍1MB區域中之OGL數目
a.對於每個OGL,定義OGL位置周圍之1Mb基因組窗口,且計算雙子葉植物1Kb OGL資料集中基因組位置與此窗重疊之OGL數目。
每個最適非基因大豆基因座之特徵及屬性評分的結果或值進一步描述於實例2之表3中。所得資料集用於PCA統計方法中以將7,018個所鑑別之最適非基因大豆基因座叢集成叢。在叢集過程期間,在估計最適基因座之「p」主分量之後,在「p」維歐幾里得空間中將最適基因座分配至32叢之一。每一「p」軸劃分成「k」個間隔。將分配至相同間隔之最適基因座分組在一起以形成叢。使用此分析,將每個PCA軸劃分成兩個間隔,其基於關於實驗性驗證所需要之叢數目的先驗資訊來選擇。所得叢之所有分析及觀測用來自Chemical Computing Group Inc.(Montreal,Quebec,Canada)之Molecular Operating EnvironmentTM
(MOE)軟體進行。PCA方法用於基於上述特徵值叢集一組7,018個最適大豆基因座成32個不同叢。
在PCA過程期間,產生五個主分量(PC),其中頭三個PC含有資料集中約90%總變化(表4)。此三個PC用於以三維曲線圖解表示32個叢(參見圖1)。在完成叢集過程之後,自每個叢選擇一個代表性最適基因座。此藉由在每個叢內,藉由計算方法選擇最靠近叢質心的精選最適基因座來進行(表4)。32個代表性最適基因座之染色體位置均一分佈在大豆染色體組中,如圖2中所示。
根據一個實施例,提供一種經修飾之最適非基因大豆基因座,其中該最適非基因大豆基因座已經修飾且包含一或多種核苷酸取代、缺失或插入。在一個實施例中,最適非基因大豆基因座藉由插入感興趣的DNA來修飾。
在一個實施例中,待修飾之最適非基因大豆基因座為選自實例7之表7及8中所述之任何序列之基因組序列。在一個實施例中,待修飾之最適非基因大豆基因座為選自大豆_OGL_1423(SEQ ID NO:639)、大豆_OGL_1434(SEQ ID NO:137)、大豆_OGL_4625(SEQ ID NO:76)、大豆_OGL_6362(SEQ ID NO:440)、大豆_OGL_308(SEQ ID NO:43)、大豆_OGL_307(SEQ ID NO:566)、大豆_OGL_310(SEQ ID NO:4236)、大豆_OGL_684(SEQ ID NO:47)、大豆_OGL_682(SEQ ID NO:2101)及大豆_OGL_685(SEQ ID NO:48)之基因組序列。在一個實施例中,待修飾之最適非基因大豆基因座為選自大豆_OGL_1423(SEQ ID NO:639)
之基因組序列。在一個實施例中,待修飾之最適非基因大豆基因座為選自大豆_OGL_1434(SEQ ID NO:137)之基因組序列。在一個實施例中,待修飾之最適非基因大豆基因座為選自大豆_OGL_4625(SEQ ID NO:76)之基因組序列。在一個實施例中,待修飾之最適非基因大豆基因座為選自大豆_OGL_6362(SEQ ID NO:440)之基因組序列。在一個實施例中,待修飾之最適非基因大豆基因座為選自大豆_OGL_308(SEQ ID NO:43)之基因組序列。在一個實施例中,待修飾之最適非基因大豆基因座為選自大豆_OGL_307(SEQ ID NO:566)之基因組序列。在一個實施例中,待修飾之最適非基因大豆基因座為選自大豆_OGL_310(SEQ ID NO:4236)之基因組序列。在一個實施例中,待修飾之最適非基因大豆基因座為選自大豆_OGL_684(SEQ ID NO:47)之基因組序列。在一個實施例中,待修飾之最適非基因大豆基因座為選自大豆_OGL_682(SEQ ID NO:2101)之基因組序列。在一個實施例中,待修飾之最適非基因大豆基因座為選自大豆_OGL_685(SEQ ID NO:48)之基因組序列。
在另一實施例中,待修飾之最適非基因大豆基因座為選自大豆_OGL_1423(SEQ ID NO:639)、大豆_OGL_1434(SEQ ID NO:137)及大豆_OGL_4625(SEQ ID NO:76)之基因組序列。在另一實施例中,待修飾之最適非基因大豆基因座為選自基因座_大豆_OGL_6362(SEQ ID NO:440)及大豆_OGL_308(SEQ ID NO:43)之基因組序列。在另一實施例中,待修飾之最適非基因大豆基因座為選自
大豆_OGL_307(SEQ ID NO:566)、大豆_OGL_310(SEQ ID NO:4236)、大豆_OGL_684(SEQ ID NO:47)、大豆_OGL_682(SEQ ID NO:2101)及大豆_OGL_685(SEQ ID NO:48)之基因組序列。在另一實施例中,待修飾之最適非基因大豆基因座為選自基因座大豆_OGL_307(SEQ ID NO:566)、大豆_OGL_310(SEQ ID NO:4236)、大豆_OGL_684(SEQ ID NO:47)及大豆_OGL_682(SEQ ID NO:2101)之基因組序列。在另一實施例中,待修飾之最適非基因大豆基因座為選自基因座大豆_OGL_307(SEQ ID NO:566)、大豆_OGL_310(SEQ ID NO:4236)及大豆_OGL_684(SEQ ID NO:47)之基因組序列。在另一實施例中,待修飾之最適非基因大豆基因座為選自基因座大豆_OGL_307(SEQ ID NO:566)及大豆_OGL_310(SEQ ID NO:4236)之基因組序列。在另一實施例中,待修飾之最適非基因大豆基因座為選自基因座大豆_OGL_310(SEQ ID NO:4236)、大豆_OGL_684(SEQ ID NO:47)、大豆_OGL_682(SEQ ID NO:2101)及大豆_OGL_685(SEQ ID NO:48)之基因組序列。在另一實施例中,待修飾之最適非基因大豆基因座為選自基因座大豆_OGL_684(SEQ ID NO:47)、大豆_OGL_682(SEQ ID NO:2101)及大豆_OGL_685(SEQ ID NO:48)之基因組序列。在另一實施例中,待修飾之最適非基因大豆基因座為選自基因座大豆_OGL_682(SEQ ID NO:2101)及大豆_OGL_685(SEQ ID NO:48)之基因組序列。
在另一實施例中,待修飾之最適非基因大豆基因
座為選自基因座大豆_OGL_307(SEQ ID NO:566)、大豆_OGL_310(SEQ ID NO:4236)及大豆_OGL_308(SEQ ID NO:566)之基因組序列。在另一實施例中,待修飾之最適非基因大豆基因座為選自基因座大豆_OGL_6362(SEQ ID NO:440)、大豆_OGL_4625(SEQ ID NO:76)及大豆_OGL_308(SEQ ID NO:566)之基因組序列。在另一實施例中,待修飾之最適非基因大豆基因座為選自基因座大豆_OGL_1423(SEQ ID NO:639)及大豆_OGL_1434(SEQ ID NO:137)之基因組序列。在另一實施例中,待修飾之最適非基因大豆基因座為選自基因座大豆_OGL_682(SEQ ID NO:47)、大豆_OGL_684(SEQ ID NO:2101)及大豆_OGL_85(SEQ ID NO:48)之基因組序列。
在一個實施例中,最適非基因大豆基因座係選自以下各者之基因組序列:大豆_ogl_2474(SEQ ID NO:1)、大豆_ogl_768(SEQ ID NO:506)、大豆_ogl_2063(SEQ ID NO:2063)、大豆_ogl_1906(SEQ ID NO:1029)、大豆_ogl_1112(SEQ ID NO:1112)、大豆_ogl_3574(SEQ ID NO:1452)、大豆_ogl_2581(SEQ ID NO:1662)、大豆_ogl_3481(SEQ ID NO:1869)、大豆_ogl_1016(SEQ ID NO:2071)、大豆_ogl_937(SEQ ID NO:2481)、大豆_ogl_6684(SEQ ID NO:2614)、大豆_ogl_6801(SEQ ID NO:2874)、大豆_ogl_6636(SEQ ID NO:2970)、大豆_ogl_4665(SEQ ID NO:3508)、大豆_ogl_3399(SEQ ID NO:3676)、大豆_ogl_4222(SEQ ID NO:3993)、大豆_ogl_2543(SEQ ID NO:4050)、
大豆_ogl_275(SEQ ID NO:4106)、大豆_ogl_598(SEQ ID NO:4496)、大豆_ogl_1894(SEQ ID NO:4622)、大豆_ogl_5454(SEQ ID NO:4875)、大豆_ogl_6838(SEQ ID NO:4888)、大豆_ogl_4779(SEQ ID NO:5063)、大豆_ogl_3333(SEQ ID NO:5122)、大豆_ogl_2546(SEQ ID NO:5520)、大豆_ogl_796(SEQ ID NO:5687)、大豆_ogl_873(SEQ ID NO:6087)、大豆_ogl_5475(SEQ ID NO:6321)、大豆_ogl_2115(SEQ ID NO:6520)、大豆_ogl_2518(SEQ ID NO:6574)、大豆_ogl_5551(SEQ ID NO:6775)及大豆_ogl_4563(SEQ ID NO:6859)。
在一個實施例中,最適非基因大豆基因座係選自以下各者之基因組序列:大豆_ogl_308(SEQ ID NO:43)、大豆_ogl_307(SEQ ID NO:566)、大豆_ogl_2063(SEQ ID NO:748)、大豆_ogl_1906(SEQ ID NO:1029)、大豆_ogl_262(SEQ ID NO:1376)、大豆_ogl_5227(SEQ ID NO:1461)、大豆_ogl_4074(SEQ ID NO:1867)、大豆_ogl_3481(SEQ ID NO:1869)、大豆_ogl_1016(SEQ ID NO:2071)、大豆_ogl_937(SEQ ID NO:2481)、大豆_ogl_5109(SEQ ID NO:2639)、大豆_ogl_6801(SEQ ID NO:2874)、大豆_ogl_6636(SEQ ID NO:2970)、大豆_ogl_4665(SEQ ID NO:3508)、大豆_ogl_6189(SEQ ID NO:3682)、大豆_ogl_4222(SEQ ID NO:3993)、大豆_ogl_2543(SEQ ID NO:4050)、大豆_ogl_310(SEQ ID NO:4326)、大豆_ogl_2353(SEQ ID NO:4593)、大豆_ogl_1894(SEQ ID NO:4622)、大豆_ogl_3669
(SEQ ID NO:4879)、大豆_ogl_3218(SEQ ID NO:4932)、大豆_ogl_5689(SEQ ID NO:5102)、大豆_ogl_3333(SEQ ID NO:5122)、大豆_ogl_2546(SEQ ID NO:5520)、大豆_ogl_1208(SEQ ID NO:5698)、大豆_ogl_873(SEQ ID NO:6087)、大豆_ogl_5957(SEQ ID NO:6515)、大豆_ogl_4846(SEQ ID NO:6571)、大豆_ogl_3818(SEQ ID NO:6586)、大豆_ogl_5551(SEQ ID NO:6775)、大豆_ogl_7(SEQ ID NO:6935)、大豆_OGL_684(SEQ ID NO:47)、大豆_OGL_682(SEQ ID NO:2101)、大豆_OGL_685(SEQ ID NO:48)、大豆_OGL_1423(SEQ ID NO:639)、大豆_OGL_1434(SEQ ID NO:137)、大豆_OGL_4625(SEQ ID NO:76)及大豆_OGL_6362(SEQ ID NO:440)。
在一個實施例中,最適非基因大豆基因座用感興趣的DNA靶向,其中感興趣的DNA整合在鋅指核酸酶標靶位點內或與鋅指核酸酶標靶位點接近處。根據一個實施例,最適玉米精選基因座之例示性鋅指標靶位點提供於表8中。根據一個實施例,感興趣的DNA之整合發生在以下例示性標靶位點內或近側:SEQ ID NO:7363及SEQ ID NO:7364、SEQ ID NO:7365及SEQ ID NO:7366、SEQ ID NO:7367及SEQ ID NO:7368、SEQ ID NO:7369及SEQ ID NO:7370、SEQ ID NO:7371及SEQ ID NO:7372、SEQ ID NO:7373及SEQ ID NO:7374、SEQ ID NO:7375及SEQ ID NO:7376、SEQ ID NO:7377及SEQ ID NO:7378、SEQ ID NO:7379及SEQ ID NO:7380、SEQ ID NO:7381及SEQ ID NO:
7382、SEQ ID NO:7383及SEQ ID NO:7384、SEQ ID NO:7385及SEQ ID NO:7386、SEQ ID NO:7387及SEQ ID NO:7388、SEQ ID NO:7389及SEQ ID NO:7390、SEQ ID NO:7391及SEQ ID NO:7392、SEQ ID NO:7393及SEQ ID NO:7394、SEQ ID NO:7395及SEQ ID NO:7396、SEQ ID NO:7397及SEQ ID NO:7398、SEQ ID NO:7399及SEQ ID NO:7400、SEQ ID NO:7401及SEQ ID NO:7402、SEQ ID NO:7403及SEQ ID NO:7404、SEQ ID NO:7405及SEQ ID NO:7406、SEQ ID NO:7407及SEQ ID NO:7408、SEQ ID NO:7409及SEQ ID NO:7410、SEQ ID NO:7411及SEQ ID NO:7412、SEQ ID NO:7413及SEQ ID NO:7414、SEQ ID NO:7415及SEQ ID NO:7416、SEQ ID NO:7417及SEQ ID NO:7418、SEQ ID NO:7419及SEQ ID NO:7420、SEQ ID NO:7421及SEQ ID NO:7422、SEQ ID NO:7423及SEQ ID NO:7424、SEQ ID NO:7425及SEQ ID NO:7426。
在一個實施例中,最適非基因大豆基因座用感興趣的DNA靶向,其中該感興趣的DNA在鋅指核酸酶標靶位點內或近側整合。根據一個實施例,鋅指核酸酶結合於鋅指標靶位點且使獨特的大豆基因組聚核苷酸標靶位點裂解,因此感興趣的DNA在大豆基因組聚核苷酸標靶位點內或近側整合。在一個實施例中,感興趣的DNA在鋅指標靶位點內發生整合可導致重排。根據一個實施例,重排可包含缺失、插入、倒置及重複。在一個實施例中,感興趣的DNA之整合在鋅指標靶位點近側。根據實施例之一態樣,
DNA之整合在鋅指標靶位點近側,且可整合在離鋅指標靶位點1.5Kb、1.25Kb、1.0Kb、0.75Kb、0.5Kb或0.25Kb內。插入與鋅指標靶位點接近之基因組區域內為此項技術中已知,參見美國專利公開案第2010/0257638 A1號(以全文引用的方式併入本文中)。
根據一個實施例,所選非基因序列包含以下特徵:a)該非基因序列在序列內不含超過1% DNA甲基化;b)該非基因序列具有離大豆染色體著絲點之基因組距離0.211至0.976比率之相對位置值;c)該非基因序列具有25.62%至43.76%之鳥嘌呤/胞嘧啶含量百分比;以及d)該非基因序列為約1Kb至約4.4Kb長。
II.所鑑別之最適非基因大豆基因座之重組衍生物
根據一個實施例,已鑑別諸如大豆植物之雙子葉植物之基因座作為插入聚核苷酸供體序列之非常理想位置後,可將一或多個感興趣的核酸插入所鑑別之基因座中。在一個實施例中,感興趣的核酸包含外源性基因序列或其他合乎需要之聚核苷酸供體序列。在另一個實施例中,已鑑別諸如大豆植物之雙子葉植物之基因座作為插入聚核苷酸供體序列之非常理想位置後,可視情況除去、切除或移除一或多個感興趣的核酸或最適非基因大豆基因座,隨後感興趣的DNA整合至所鑑別之基因座中。在一個實施例中,感興趣的核酸插入最適非基因大豆基因座中包含外源
性基因序列或其他合乎需要之聚核苷酸供體序列的移除、缺失或切除。
本發明進一步關於使用ZFN及聚核苷酸供體構築體靶向整合至精選大豆基因座中之方法及組合物。除非另外指明,否則用於將感興趣的核酸序列插入最適非基因大豆基因座中之方法使用如在熟習此項技術者技能內的分子生物學、生物化學、染色質結構及分析、細胞培養、重組DNA及相關領域中之習知技術。此等技術在文獻中充分說明。參見例如Sambrook等人MOLECULAR CLONING:A LABORATORY MANUAL,第二版,Cold Spring Harbor Laboratory Press,1989及第三版,2001;Ausubel等人,CURRENT PROTOCOLS IN MOLECULAR BIOLOGY,John Wiley & Sons,New York,1987及定期修訂;系列METHODS IN ENZYMOLOGY,Academic Press,San Diego;Wolfe,CHROMATIN STRUCTURE AND FUNCTION,第三版,Academic Press,San Diego,1998;METHODS IN ENZYMOLOGY,第304卷,「Chromatin」(P.M.Wassarman及A.P.Wolffe編輯),Academic Press,San Diego,1999;及METHODS IN MOLECULAR BIOLOGY,第119卷,「Chromatin Protocols」(P.B.Becker編輯)Humana Press,Totowa,1999。
核酸插入大豆基因組中之方法
根據本發明可使用任何熟知之用於將聚核苷酸供體序列及核酸酶序列以DNA構築體形式引入宿主細胞中
之程序。此等程序包括使用磷酸鈣轉染、聚凝胺、原生質體融合、PEG、電穿孔、超音波法(例如聲孔效應)、脂質體、顯微注射、裸DNA、質體載體、游離型與整合型病毒性載體以及任何其他熟知之用於選殖基因組DNA、cDNA、合成DNA或其他外來遺傳物質引入宿主細胞中之方法(參見例如Sambrook等人,上文)。僅僅需要所使用之特定核酸插入程序能夠成功地將至少一個基因引入能夠表現所選蛋白質之宿主細胞中。
如上所指出,DNA構築體可藉由各種習知技術引入所需植物物種之基因組中。關於此類技術之評述,參見例如Weissbach & Weissbach Methods for Plant Molecular Biology(1988,Academic Press,N.Y.)第VIII部分,第421-463頁;及Grierson & Corey,Plant Molecular Biology(1988,第2版),Blackie,London,第7-9章。DNA構築體可使用諸如植物細胞原生質體之電穿孔及顯微注射之技術,藉由用碳化矽纖維攪動(參見例如美國專利5,302,523及5,464,765)直接引入植物細胞之基因組DNA中,或DNA構築體可使用基因槍方法,諸如DNA粒子轟擊直接引入植物組織中(參見例如Klein等人(1987)Nature 327:70-73)。或者,DNA構築體可經由奈米粒子轉型引入植物細胞中(參見例如美國專利公開案第20090104700號,其以全文引用的方式併入本文中)。或者,DNA構築體可與適合的T-DNA邊界/側接區域組合且引入習知根癌土壤桿菌宿主載體中。科學文獻中充分描述根癌土壤桿菌介導之轉型技術,包括二元
載體之解除及使用。參見例如Horsch等人(1984)Science 233:496-498,及Fraley等人(1983)Proc.Nat'l.Acad.Sci.USA 80:4803。
另外,可使用非土壤桿菌屬細菌或病毒,諸如根瘤菌屬NGR234、苜蓿中華根瘤菌(Sinorhizoboium meliloti)、百脈根根瘤菌(Mesorhizobium loti)、馬鈴薯病毒X、花椰菜花葉病毒及木薯脈花葉病毒及/或菸草花葉病毒實現基因轉移,參見例如Chung等人(2006)Trends Plant Sci.11(1):1-4。當使用二元T DNA載體(Bevan(1984)Nuc.Acid Res.12:8711-8721)或混合培養程序(Horsch等人(1985)Science 227:1229-1231)使細胞感染細菌時,根癌土壤桿菌宿主之毒性功能將介導含有構築體及相鄰標記物之T-股插入植物細胞DNA中。一般地,土壤桿菌屬轉型系統用以工程改造雙子葉植物(Bevan等人(1982)Ann.Rev.Genet.16:357-384;Rogers等人(1986)Methods Enzymol.118:627-641)。土壤桿菌屬轉型系統亦可用以轉型以及轉移DNA至單子葉植物及植物細胞。參見美國專利第5,591,616號;Hernalsteen等人(1984)EMBO J.3:3039-3041;Hooykass-Van Slogteren等人(1984)Nature 311:763-764;Grimsley等人(1987)Nature 325:1677-179;Boulton等人(1989)Plant Mol.Biol.12:31-40;及Gould等人(1991)Plant Physiol.95:426-434。
替代基因轉移及轉型方法包括(但不限於)經由鈣、聚乙二醇(PEG)或電穿孔介導之裸DNA吸收的原生質體
轉型(參見Paszkowski等人(1984)EMBO J.3:2717-2722,Potrykus等人(1985)Molec.Gen.Genet.199:169-177;Fromm等人(1985)Proc.Nat.Acad.Sci.USA 82:5824-5828;及Shimamoto(1989)Nature 338:274-276)及植物組織之電穿孔(D'Halluin等人(1992)Plant Cell 4:1495-1505)。用於植物細胞轉型之其他方法包括顯微注射、碳化矽介導之DNA吸收(Kaeppler等人(1990)Plant Cell Reporter 9:415-418)及微彈轟擊(參見Klein等人(1988)Proc.Nat.Acad.Sci.USA 85:4305-4309;及Gordon-Kamm等人(1990)Plant Cell 2:603-618)。
在一個實施例中,引入宿主細胞中以靶向插入基因組中之感興趣的核酸在靶向之感興趣的核酸之一或兩個末端上包含同源側接序列。在此類實施例中,同源側接序列含有與雙子葉植物序列(諸如大豆基因組序列)足夠程度的序列一致性,以支持其與同其具有同源性之基因組序列之間的同源重組。供體與基因組序列之間在70%至100%範圍內的大概25、50、100、200、500、750、1000、1500或2000個核苷酸或更多個核苷酸之序列一致性(或10與200個核苷酸之間的任何整數值或更大)將支持其間的同源重組。
在另一個實施例中,靶向之感興趣的核酸缺乏同源側接序列,且靶向之感興趣的核酸與基因組序列共享低至極低程度之序列一致性。
在細胞染色質中感興趣的區域中之序列靶向重組及/或置換及/或改變的其他實施例中,藉由與外源性「供
體」核苷酸序列同源重組,改變染色體序列。若存在與斷裂區域同源之序列,則此類同源重組藉由細胞染色質中雙股斷裂之存在來刺激。細胞染色質中之雙股斷裂亦可刺激非同源末端接合之細胞機制。在本文中描述之任何方法中,第一核苷酸序列(「供體序列」)可含有與感興趣的區域中之基因組序列同源而不一致的序列,由此刺激同源重組,從而在感興趣的區域插入不一致序列。因此,在某些實施例中,與感興趣的區域中之序列同源之供體序列部分顯示與所置換之基因組序列約80、85、90、95、97.5至99%(或其間任何整數)之間的序列一致性。在其他實施例中,供體與基因組序列之間的同源性高於99%,例如只要超過100個鄰接鹼基對之供體與基因組序列之間1個核苷酸不同即可。
在某些情況下,供體序列之非同源部分可含有在感興趣的區域中不存在之序列,使得新序列引入感興趣的區域中。在這些情況下,非同源序列一般側接50至2,000個鹼基對(或其間任何整數值)或超過2,000之任何數目之鹼基對的與感興趣的區域中之序列同源或一致的序列。在其他實施例中,供體序列不與第一序列同源,且藉由非同源重組機制插入基因組中。
根據一個實施例,鋅指核酸酶(ZFN)用以在靶向基因座中引入雙股斷裂以促進感興趣的核酸之插入。可例如根據美國專利6,453,242中公開之方法選擇所選基因座內用於鋅指結構域結合之標靶位點,該專利之揭示內容併入
本文中,其亦揭示用於設計鋅指蛋白質(ZFP)以結合於所選序列之方法。熟習此項技術者將清楚簡單肉眼觀察核苷酸序列亦可用於選擇標靶位點。因此,用於標靶位點選擇之任何方式可用於本文中描述之方法中。
對於ZFP DNA結合結構域,標靶位點一般由複數個相鄰標靶子位點構成。靶向子位點係指可與個別鋅指結合之相鄰四聯體重疊一個核苷酸的序列,通常核苷酸三聯體或者核苷酸四聯體。參見例如WO 02/077227,其揭示內容併入本文中。標靶位點一般具有至少9個核苷酸之長度,且因此由包含至少三個鋅指之鋅指結合結構域結合。然而,例如4指結合結構域與12核苷酸標靶位點、5指結合結構域與15核苷酸標靶位點或6指結合結構域與18核苷酸標靶位點的結合亦為可能的。如將顯而易見,較大結合結構域(例如7、8、9指或更多)與較長標靶位點之結合亦符合本發明。
根據一個實施例,標靶位點不一定為三個核苷酸之倍數。在發生交叉股相互作用之情況下(參見例如美國專利6,453,242及WO 02/077227),多指結合結構域之一或多個個別鋅指可結合於重疊四聯體子位點。因此,三指蛋白質可結合10核苷酸序列,其中第十個核苷酸屬於末端指結合之四聯體,四指蛋白質可結合13核苷酸序列,其中第十三個核苷酸屬於末端指結合之四聯體等等。
多指結合結構域中個別鋅指之間的胺基酸連接子序列之長度及性質亦影響與標靶序列之結合。舉例而
言,多指結合結構域中相鄰鋅指之間的所謂「非典型連接子」、「長連接子」或「結構化連接子」的存在可使該等指結合不緊靠之子位點。此類連接子之非限制性實例描述於例如美國專利第6,479,626號及WO 01/53480中。因此,針對鋅指結合結構域之標靶位點中的一或多個子位點彼此可相隔1、2、3、4、5或5個以上核苷酸。一個非限制性實例將為結合於13核苷酸標靶位點的四指結合結構域,該標靶位點依序包含兩個鄰接3核苷酸子位點、插入核苷酸及兩個鄰接三聯體子位點。
雖然自自然界中存在之蛋白質鑑別之DNA結合多肽通常結合於不連續的核苷酸序列或基元(例如共同識別序列),但此項技術中存在及已知用於修飾許多此類DNA結合多肽以識別不同核苷酸序列或基元之方法。DNA結合多肽包括例如且不限於鋅指DNA結合結構域;白胺酸拉鏈;UPA DNA結合結構域;GAL4;TAL;LexA;Tet阻遏蛋白;LacR;及類固醇激素受體。
在一些實例中,DNA結合多肽為鋅指。個別鋅指基元可設計成能靶向及特異性結合於大範圍DNA位點中之任一者。典型Cys2
His2
(以及非典型Cys3
His)鋅指多肽藉由將α-螺旋插入標靶DNA雙螺旋之大溝中來結合DNA。鋅指對DNA之識別為模組化的;每個指主要接觸標靶中之三個連續鹼基對,且多肽中之幾個關鍵殘基介導識別。藉由在靶向核酸內切酶中包括多個鋅指DNA結合結構域,可進一步增加靶向核酸內切酶之DNA結合特異性(因而亦可增
加由此賦予之任何基因調節作用的特異性)。參見例如Urnov等人(2005)Nature 435:646-51。因此,一或多個鋅指DNA結合多肽可經工程改造及使用,使得引入宿主細胞中之靶向核酸內切酶與宿主細胞之基因組內獨特的DNA序列相互作用。較佳地,鋅指蛋白質為非天然存在的,因為其經工程改造以結合於所選標靶位點。參見例如Beerli等人(2002)Nature Biotechnol.20:135-141;Pabo等人(2001)Ann.Rev.Biochem.70:313-340;Isalan等人(2001)Nature Biotechnol.19:656-660;Segal等人(2001)Curr.Opin.Biotechnol.12:632-637;Choo等人(2000)Curr.Opin.Struct.Biol.10:411-416;美國專利第6,453,242號;第6,534,261號;第6,599,692號;第6,503,717號;第6,689,558號;第7,030,215號;第6,794,136號;第7,067,317號;第7,262,054號;第7,070,934號;第7,361,635號;第7,253,273號;及美國專利公開案第2005/0064474號;第2007/0218528號;第2005/0267061號,均以全文引用的方式併入本文中。
經工程改造之鋅指結合結構域與天然存在之鋅指蛋白質相比,可具有新穎的結合特異性。工程改造方法包括(但不限於)合理設計及各種類型之選擇。合理設計包括例如使用包含三聯體(或四聯體)核苷酸序列及個別鋅指胺基酸序列之資料庫,其中每個三聯體或四聯體核苷酸序列與結合特定三聯體或四聯體序列的鋅指之一或多個胺基酸序列締合。參見例如共同擁有之美國專利6,453,242及6,534,261,以全文引用的方式併入本文中。
或者,DNA結合結構域可來源於核酸酶。舉例而言,已知歸巢核酸內切酶及大範圍核酸酶之識別序列,諸如I-SceI、I-CeuI、PI-PspI、PI-Sce、I-SceIV、I-CsmI、I-PanI、I-SceII、I-PpoI、I-SceIII、I-CreI、I-TevI、I-TevII及I-TevIII。亦參見美國專利第5,420,032號;美國專利第6,833,252號;Belfort等人(1997)Nucleic Acids Res.25:3379-3388;Dujon等人(1989)Gene 82:115-118;Perler等人(1994)Nucleic Acids Res.22,1125-1127;Jasin(1996)Trends Genet.12:224-228;Gimble等人(1996)J.Mol.Biol.263:163-180;Argast等人(1998)J.Mol.Biol.280:345-353及the New England Biolabs目錄。另外,歸巢核酸內切酶及大範圍核酸酶之DNA結合特異性可經工程改造以結合非天然標靶位點。參見例如Chevalier等人(2002)Molec.Cell 10:895-905;Epinat等人(2003)Nucleic Acids Res.31:2952-2962;Ashworth等人(2006)Nature 441:656-659;Paques等人(2007)Current Gene Therapy 7:49-66;美國專利公開案第20070117128號。
作為另一替代物,DNA結合結構域可來源於白胺酸拉鏈蛋白質。白胺酸拉鏈為在作為與基因表現相關聯之重要轉錄因子的許多真核調節蛋白中參與蛋白質-蛋白質相互作用之一類蛋白質。白胺酸拉鏈係指跨越包括動物、植物、酵母等若干領域,在此等轉錄因子中共享之共同結構基元。白胺酸拉鏈藉由結合於特定DNA序列之兩個多肽(同型二聚體或異型二聚體)以白胺酸殘基經由α-螺旋
均勻間隔的方式形成,使得兩個多肽之白胺酸殘基在螺旋之相同面上終止。白胺酸拉鏈之DNA結合特異性可用於本文揭示之DNA結合結構域中。
在一些實施例中,DNA結合結構域為自來源於植物病原體黃單孢菌屬(Xanthomona)之TAL效應子工程改造之結構域(參見Miller等人(2011)Nature Biotechnology 29(2):143-8;Boch等人,(2009)Science 2009年10月29日(10.1126/science.117881)以及Moscou及Bogdanove,(2009)Science 2009年10月29日(10.1126/science.1178817);及美國專利公開案第20110239315號、第20110145940號及第20110301073號)。
CRISPR(成叢的規律間隔之短迴文重複序列)/Cas(CRISPR相關)核酸酶系統為基於可用於基因組工程改造之細菌系統的近來工程改造之核酸酶系統。其係基於許多細菌及古細菌(Archea)之適應性免疫反應的一部分。當病毒或質體侵入細菌時,入侵者之DNA的區段藉由『免疫』反應轉變為CRISPR RNA(crRNA)。接著此crRNA經由部分互補性區域與稱為tracrRNA之另一類型RNA締合,以將Cas9核酸酶引導至標靶DNA中與crRNA同源之稱為「前間區」的區域。Cas9使DNA裂解,在DSB在crRNA轉錄本內含有之20核苷酸引導序列所指定之位點產生鈍端。Cas9需要crRNA與tracrRNA用於位點特異性DNA識別及裂解。此系統現已經工程改造,使得crRNA及tracrRNA可組合成一個分子(「單一引導RNA」),且單一引導RNA
之crRNA同等部分可經工程改造以引導Cas9核酸酶來靶向任何所希望之序列(參見Jinek等人(2012)Science 337,第816-821頁,Jinek等人(2013),eLife 2:e00471,及David Segal,(2013)eLife 2:e00563)。因此,CRISPR/Cas系統可經工程改造以在基因組中之所希望標靶產生雙股斷裂(DSB),且DSB之修復可藉由使用修復抑制劑引起易出錯修復增加來影響。
在某些實施例中,Cas蛋白質可為天然存在之Cas蛋白質的「功能衍生物」。原生序列多肽之「功能衍生物」為具有與原生序列多肽一樣之定性生物學性質的化合物。「功能衍生物」包括(但不限於)原生序列之片段及原生序列多肽及其片段之衍生物,限制條件為其具有與對應原生序列多肽一樣之生物活性。本文中涵蓋之生物活性為功能衍生物能夠將DNA受質水解成片段。「衍生物」一詞涵蓋多肽之胺基酸序列變異體、共價修飾及其融合物。Cas多肽或其片段之適合衍生物包括(但不限於)Cas蛋白質或其片段之突變體、融合物、共價修飾。包括Cas蛋白質或其片段以及Cas蛋白質或其片段之衍生物的Cas蛋白質可自細胞獲得或化學合成或藉由此兩個程序的組合合成。細胞可為天然產生Cas蛋白質之細胞,或天然產生Cas蛋白質之細胞,且經基因工程改造以在較高表現位準下產生內源性Cas蛋白質或自外部引入之核酸產生Cas蛋白質,該核酸編碼與內源性Cas相同或不同的Cas。在一些情況下,細胞不天然產生Cas蛋白質且經基因工程改造以產生Cas蛋白質。Cas蛋白質藉
由用Cas核酸酶與引導RNA共同表現而用於哺乳動物細胞中(及推斷在植物細胞內)。兩種形式之引導RNA可用以促進Cas介導之基因組裂解,如Le Cong,F.,等人,(2013)Science
339(6121):819-823中所揭示。
在其他實施例中,DNA結合結構域可與裂解(核酸酶)結構域締合。舉例而言,歸巢核酸內切酶可在其DNA結合特異性上進行修飾,同時保留核酸酶功能。另外,鋅指蛋白質亦可與裂解結構域融合以形成鋅指核酸酶(ZFN)。本文揭示之融合蛋白的裂解結構域部分可自任何核酸內切酶或核酸外切酶獲得。裂解結構域可源自之例示性核酸內切酶包括(但不限於)限制核酸內切酶及歸巢核酸內切酶。參見例如2002-2003 Catalogue,New England Biolabs,Beverly,MA;及Belfort等人(1997)Nucleic Acids Res.25:3379-3388。已知使DNA裂解之其他酶(例如S1核酸酶;綠豆核酸酶;胰腺DNase I;雙子葉植物核酸酶;酵母HO核酸內切酶;亦參見Linn等人(編輯)Nucleases,Cold Spring Harbor Laboratory Press,1993)。已知歸巢核酸內切酶及大範圍核酸酶之非限制性實例包括I-SceI、I-CeuI、PI-PspI、PI-Sce、I-SceIV、I-CsmI、I-PanI、I-SceII、I-PpoI、I-SceIII、I-CreI、I-TevI、I-TevII及I-TevIII。亦參見美國專利第5,420,032號;美國專利第6,833,252號;Belfort等人(1997)Nucleic Acids Res.25:3379-3388;Dujon等人(1989)Gene 82:115-118;Perler等人(1994)Nucleic Acids Res.22,1125-1127;Jasin(1996)Trends Genet.12:224-228;Gimble
等人(1996)J.Mol.Biol.263:163-180;Argast等人(1998)J.Mol.Biol.280:345-353及the New England Biolabs目錄。此等酶中之一或多者(或其功能性片段)可用作裂解結構域及裂解半結構域之來源。
限制核酸內切酶(限制酶)存在於許多物種中且能夠序列特異性結合於DNA(在識別位點),且在結合位點上或附近使DNA裂解。某些限制酶(例如IIS類型)使DNA在自識別位點移除之位點裂解且具有可分離的結合及裂解結構域。舉例而言,IIS類型酶FokI催化DNA在一股上自其識別位點9個核苷酸及另一股上自其識別位點13個核苷酸處進行雙股裂解。參見例如美國專利5,356,802;5,436,150及5,487,994;以及Li等人(1992)Proc.Natl.Acad.Sci.USA 89:4275-4279;Li等人(1993)Proc.Natl.Acad.Sci.USA 90:2764-2768;Kim等人(1994a)Proc.Natl.Acad.Sci.USA 91:883-887;Kim等人(1994b)J.Biol.Chem.269:31,978-31,982。因此,在一個實施例中,融合蛋白包含來自至少一種類型IIS限制酶之裂解結構域(或裂解半結構域)及可工程改造或可未工程改造之一或多個鋅指結合結構域。
裂解結構域可與結合結構域分離的一種例示性IIS類型限制酶為FokI。此特定的酶作為二聚體為活性的。Bitinaite等人(1998)Proc.Natl.Acad.Sci.USA 95:10,570-10,575。因此,出於本發明之目的,用於所揭示之融合蛋白的FokI酶部分視為裂解半結構域。因此,對於使
用鋅指-FokI融合物之細胞序列的靶向雙股裂解及/或靶向置換,每一者包含FokI裂解半結構域之兩種融合蛋白可用於復原催化活性之裂解結構域。或者,亦可使用含有鋅指結合結構域及兩個FokI裂解半結構域之單一多肽分子。本發明其他地方提供使用鋅指-FokI融合物之靶向裂解及靶向序列改變的參數。
裂解結構域或裂解半結構域可為保留裂解活性,或保留多聚(例如二聚)能力以形成功能性裂解結構域的蛋白質任何部分。例示性IIS類型限制酶描述於以全文引用的方式併入本文中之國際公開案WO 2007/014275中。
為增強裂解特異性,亦可修飾裂解結構域。在某些實施例中,採用裂解半結構域之變異體,此等變異體使裂解半結構域之均二聚減至最少或防止均二聚。此類經修飾之裂解半結構域的非限制性實例詳細描述於以全文引用的方式併入本文中的WO 2007/014275中。在某些實施例中,裂解結構域包含將均二聚減至最少或防止均二聚的經工程改造之裂解半結構域(亦稱為二聚化結構域突變體)。熟習此項技術者已知此類實施例且例如描述於美國專利公開案第20050064474號、第20060188987號、第20070305346號及第20080131962號中,其揭示內容均以全文引用的方式併入本文中。FokI之位置446、447、479、483、484、486、487、490、491、496、498、499、500、531、534、537及538上之胺基酸殘基為影響FokI裂解半結構域之二聚化的所有標靶。
形成專性異型二聚體之FokI的其他工程改造裂解半結構域亦可用於本文中描述之ZFN中。形成專性異型二聚體之FokI之例示性工程改造裂解半結構域包括一對裂解半結構域,其中第一裂解半結構域包括FokI之位置490及538上之胺基酸殘基上的突變且第二裂解半結構域包括胺基酸殘基486及499上之突變。在一個實施例中,490上之突變用Lys(K)置換Glu(E),538上之突變用Lys(K)置換Iso(I);486上之突變用Glu(E)置換Gln(Q);且位置499上之突變用Lys(K)置換Iso(I)。特定言之,本文中描述之工程改造裂解半結構域藉由在一個裂解半結構域中使位置490(E→K)及538(I→K)突變以產生稱為「E490K:I538K」之工程改造之裂解半結構域且藉由在另一個裂解半結構域中使位置486(Q→E)及499(I→L)突變以產生稱為「Q486E:I499L」之工程改造之裂解半結構域來製備。本文中描述之工程改造之裂解半結構域為專性異型二聚體突變體,其中異常裂解減至最少或消除。參見例如美國專利公開案第2008/0131962號,其揭示內容以全文引用的方式併入以達成所有目的。在某些實施例中,工程改造之裂解半結構域包含位置486、499及496(相對於野生型FokI編號)上突變,例如在位置486上用Glu(E)殘基置換野生型Gln(Q)殘基、在位置499上用Leu(L)殘基置換野生型Iso(I)殘基及在位置496上用Asp(D)或Glu(E)殘基置換野生型Asn(N)殘基之突變(分別亦稱為「ELD」及「ELE」結構域)。在其他實施例中,工程改造之裂解半結構域包含位置490、538及
537(相對於野生型FokI編號)上突變,例如在位置490上用Lys(K)殘基置換野生型Glu(E)殘基、在位置538上用Lys(K)殘基置換野生型Iso(I)殘基及在位置537上用Lys(K)或Arg(R)殘基置換野生型His(H)殘基之突變(分別亦稱為「KKK」及「KKR」結構域)。在其他實施例中,工程改造之裂解半結構域包含位置490及537(相對於野生型FokI編號)上突變,例如在位置490上用Lys(K)殘基置換野生型Glu(E)殘基及在位置537上用Lys(K)殘基或Arg(R)殘基置換野生型His(H)殘基之突變(分別亦稱為「KIK」及「KIR」結構域)。(參見美國專利公開案第20110201055號)。在其他實施例中,工程改造之裂解半結構域包含「Sharkey」及/或「Sharkey」突變(參見Guo等人,(2010)J.Mol.Biol.400(1):96-107)。
本文中描述之工程改造之裂解半結構域可使用任何適合的方法,例如藉由如美國專利公開案第20050064474號、第20080131962號及第20110201055號中所描述之野生型裂解半結構域(FokI)之定點突變誘發製備。或者,核酸酶可在核酸標靶位點使用所謂的「分裂酶」技術活體內組裝(參見例如美國專利公開案第20090068164號)。此類分裂酶之組分可在分開的表現構築體上表現,或可連接在一個開放閱讀框架中,其中個別組分例如藉由自我裂解2A肽或IRES序列分離。組分可為個別鋅指結合結構域或大範圍核酸酶核酸結合結構域之結構域。
核酸酶可在使用之前,例如在如WO 2009/042163及20090068164中所描述之基於酵母之染色體
系統中針對活性篩選。可使用此項技術中已知之方法容易地設計核酸酶表現構築體。參見例如美國專利公開案20030232410;20050208489;20050026157;20050064474;20060188987;20060063231;及國際公開案WO 07/014275。核酸酶之表現可在組成性啟動子或可誘導啟動子,例如半乳糖激酶啟動子(其在棉子糖及/或半乳糖存在下活化(去阻遏)且在葡萄糖存在下阻遏)的控制下。
標靶位點之間的距離係指在兩個標靶位點之間,如自彼此最靠近的序列邊緣量測,所插入之核苷酸或核苷酸對的數目。在裂解視兩個鋅指結構域/裂解半結構域融合分子之結合而定以分隔標靶位點的某些實施例中,兩個標靶位點可在相對的DNA股上。在其他實施例中,兩個標靶位點在相同的DNA股上。對於靶向整合至最適基因座,一或多個ZFP經工程改造以結合預定裂解位點上或附近之標靶位點,且在細胞中表現包含工程改造之DNA結合結構域及裂解結構域的融合蛋白。在融合蛋白之鋅指部分結合於標靶位點時,DNA較佳經由雙股斷裂,接近標靶位點,藉由裂解結構域裂解。
最適基因座中之雙股斷裂的存在促進經由同源重組之外源性序列整合。因此,在一個實施例中,包含待插入靶向基因座中之感興趣的核酸序列的聚核苷酸將包括一或多個與靶向基因座具有同源性之區域以促進同源重組。
除本文中描述之融合分子之外,所選基因組序列
之靶向置換亦包含供體序列之引入。聚核苷酸供體序列可在融合蛋白表現之前、與其同時或在其之後引入細胞中。供體聚核苷酸與最適基因座具有足夠同源性以支持該供體聚核苷酸與同其具有同源性之最適基因座基因組序列之間的同源重組。供體與基因組序列之間大概25、50、100、200、500、750、1,000、1,500、2,000個核苷酸或更多個核苷酸或10與2,000個核苷酸之間的任何整數值或更大之序列同源性將支持同源重組。在某些實施例中,同源性臂長度小於1,000個鹼基對。在其他實施例中,同源性臂長度小於750個鹼基對。此外,供體聚核苷酸序列可包含含有不與細胞染色質中之感興趣的區域同源之序列的載體分子。供體聚核苷酸分子可含有若干與細胞染色質具有同源性之不連續區域。舉例而言,對於通常不存在於感興趣的區域中之序列的靶向插入,該等序列可存在於供體核酸分子中且側接感興趣的區域中與序列同源之區域。供體聚核苷酸可為DNA或RNA、單股或雙股,且可呈線狀或圓形引入細胞中。參見例如美國專利公開案第20100047805號、第20110281361號、第20110207221號及美國申請案第13/889,162號。若呈線狀形式引入,則可藉由熟習此項技術者已知之方法保護供體序列之末端(例如核酸外切降解)。舉例而言,一或多個二去氧核苷酸殘基添加至線狀分子之3'端及/或自補寡核苷酸接合至一個或兩個末端。參見例如Chang等人(1987)Proc.Natl.Acad.Sci.USA
84:4959-4963;Nehls等人(1996)Science
272:886-889。
用於保護外源性聚核苷酸免於降解的其他方法包括(但不限於)添加末端胺基及使用經修飾之核苷酸間鍵(諸如硫代磷酸酯、胺基磷酸酯及O-甲基核糖或去氧核糖殘基)。
根據一個實施例,提供一種製備諸如大豆植物之轉殖基因雙子葉植物之方法,其中感興趣的DNA已插入最適非基因大豆基因座中。該方法包含以下步驟:a.選擇最適非基因大豆基因座作為感興趣的核酸插入之標靶;b.將位點特異性核酸酶引入諸如大豆植物細胞之雙子葉植物細胞中,其中該位點特異性核酸酶使該非基因序列裂解;c.將該感興趣的DNA引入該植物細胞中;以及d.選擇包含靶向該非基因序列之感興趣的DNA之轉殖基因植物細胞。
根據一個實施例,提供一種製備如大豆原生質體細胞之轉殖基因雙子葉植物原生質體細胞之方法,其中感興趣的DNA已插入最適非基因大豆基因座中。該方法包含以下步驟:a.選擇最適非基因大豆基因座作為感興趣的核酸插入之標靶;b.將位點特異性核酸酶引入如大豆原生質體細胞之雙子葉植物原生質體細胞中,其中該位點特異性核酸酶使該非基因序列裂解;c.將該感興趣的DNA引入如大豆原生質體細胞之雙子
葉植物原生質體細胞中;以及d.選擇包含靶向該非基因序列之感興趣的DNA之轉殖基因雙子葉植物原生質體細胞,如大豆原生質體細胞。
在一個實施例中,位點特異性核酸酶係選自由以下組成之群:鋅指核酸酶、CRISPR核酸酶、TALEN核酸酶或大範圍核酸酶,且更特定言之,在一個實施例中,位點特異性核酸酶為鋅指核酸酶。根據一個實施例,感興趣的DNA經由同源性介導之修復整合方法整合在該非基因序列內。或者,在一些實施例中,感興趣的DNA經由非同源末端接合整合方法整合在該非基因序列內。在其他實施例中,感興趣的DNA經先前未描述之整合方法整合在該非基因序列內。在一個實施例中,該方法包含選擇最適非基因大豆基因座用於感興趣的DNA之靶向插入,該最適非基因大豆基因座具有以下特徵:a.該非基因序列至少1Kb長且在序列內不含超過1% DNA甲基化;b.該非基因序列顯示如大豆基因組之雙子葉植物基因組內0.01574至83.52cM/Mb之重組率;c.該非基因序列顯示如大豆基因組之雙子葉植物基因組的0至0.494之核小體占位位準;d.該非基因序列與如大豆基因組之雙子葉植物基因組中含有之任何其他序列共享小於40%序列一致性;e.該非基因序列具有離如大豆之雙子葉植物染色體著絲點之基因組距離0至0.99682比率之相對位置值;
f.該非基因序列具有14.4%至45.9%之鳥嘌呤/胞嘧啶含量百分比;g.該非基因序列位於與基因序列接近處;以及h.包含該非基因序列之雙子葉植物基因組序列(如大豆基因組序列)的1Mb區域包含一或多個其他非基因序列。在一個實施例中,最適非基因大豆基因座係選自叢1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、2、3、4、5、6、7、8、9、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31或32之基因座。
傳遞
本文所揭示之供者分子經由靶向、同源非依賴性和/或同源依賴性方法整合至細胞之基因組中。對於此類靶向整合,使用核酸酶,例如DNA結合結構域(例如鋅指結合域、CRISPR或TAL效應結構域經工程改造以在預定裂解位點或附近結合標靶位點)與核酸酶結構域(例如裂解結構域或裂解半結構域)之間的融合物,使基因組在所希望之位置(或位置)裂解。在某些實施例中,各包含DNA結合結構域及裂解半結構域之兩個融合蛋白在細胞中表現,且結合於標靶位點,該等標靶位點以使得復原功能性裂解結構域且DNA在標靶位點附近裂解的方式並列。在一個實施例中,在兩個DNA結合結構域之標靶位點之間出現裂解。DNA結合結構域中之一或兩者可經工程改造。亦參見美國專利第7,888,121號;美國專利公開案20050064474及國際專利公開案WO05/084190、WO05/014791及WO 03/080809。
如本文中所述之核酸酶可作為多肽和/或聚核苷酸引入。舉例而言,各包含編碼前述多肽之一之序列的兩個聚核苷酸可引入細胞中,且當多肽表現且各結合於其標靶序列時,在標靶序列或附近出現裂解。或者,包含編碼兩個融合多肽之序列的單一聚核苷酸引入細胞中。聚核苷酸可為DNA、RNA或任何經修飾之形式或類似物或DNA和/或RNA。
在感興趣的區域中引入雙股斷裂後,經由非同源依賴性方法(例如非同源末端接合(NHEJ)),在如本文中所述之雙股供體分子線性化後,以靶向方式將轉殖基因整合至感興趣的區域中。雙股供體較佳在活體內用核酸酶,例如一或多種用於將雙股斷裂引入基因組中之相同或不同核酸酶線性化。細胞中染色體及供體之同步裂解可限制供體DNA降解(與引入細胞之前供體分子之線性化相比)。用於供體線性化之核酸酶標靶位點較佳不破壞轉殖基因序列。
轉殖基因可在藉由核酸酶突出物之簡單接合所預期的方向上(稱為「前向」或「AB」取向)或在替代方向上(稱為「反向」或「BA」取向)整合至基因組中。在某些實施例中,在供體及染色體突出物準確接合後,整合轉殖基因。在其他實施例中,BA或AB取向上轉殖基因之整合引起若干核苷酸缺失。
經由諸如此等技術之技術的應用,幾乎任何物種之細胞均可穩定轉型。在一些實施例中,轉型DNA整合至宿主細胞之基因組中。在多細胞物種之情況下,轉殖基因
細胞可再生至轉殖基因生物體中。任何此等技術均可用於產生例如在轉殖基因植物之基因組中包含一或多個供體聚核苷酸序列之轉殖基因植物。
在本發明之實施例中,核酸之傳遞可在傳遞DNA、RNA、肽及/或蛋白質或核酸及肽組合至植物細胞的方法中,藉由熟習此項技術者已知之包括例如且(不限於)以下之任何方法引入植物細胞中:原生質體轉型(參見例如美國專利5,508,184);乾燥/抑制介導之DNA吸收(參見例如Potrykus等人(1985)Mol.Gen.Genet.199:183-8);電穿孔(參見例如美國專利5,384,253);用碳化矽纖維攪動(參見例如美國專利5,302,523及5,464,765);土壤桿菌屬介導之轉型(參見例如美國專利5,563,055、5,591,616、5,693,512、5,824,877、5,981,840及6,384,301);加速DNA塗佈之粒子(參見例如美國專利5,015,580、5,550,318、5,538,880、6,160,208、6,399,861及6,403,865)及奈米粒子、奈米載體及細胞穿透肽(WO201126644A2;WO2009046384A1;WO2008148223A1)。
最廣泛用於將表現載體引入植物中之方法係基於土壤桿菌屬之天然轉型系統。根癌土壤桿菌及毛根土壤桿菌為使植物細胞在基因上轉型之植物病原性土壤細菌。根癌土壤桿菌及毛根土壤桿菌之Ti
及Ri
質體分別運載負責植物基因轉型之基因。Ti
(腫瘤誘發)質體含有稱為T-DNA之大區段,其轉移至轉型植物中。Ti
質體之另一區段vir區域負責T-DNA轉移。T-DNA區域以各由末端重複核苷酸序
列構成之左側及右側邊界為邊界。在一些經修飾之二元載體中,腫瘤誘發基因已缺失,且vir區域之功能用於轉移以T-DNA邊界序列為邊界之外來DNA。T-區域亦可含有例如用於有效回收轉殖基因植物及細胞之可選標記物及用於插入用於轉移諸如編碼本發明融合蛋白之核酸之序列的多選殖位點。
因而,在一些實施例中,植物轉型載體來源於根癌土壤桿菌之Ti
質體(參見例如美國專利第4,536,475號、第4,693,977號、第4,886,937號及第5,501,967號;以及歐洲專利EP 0 122 791)或毛根土壤桿菌之Ri
質體。其他植物轉型載體包括例如且(不限於)Herrera-Estrella等人(1983)Nature 303:209-13;Bevan等人(1983),上文;Klee等人(1985)Bio/Technol.3:637-42;以及歐洲專利EP 0 120 516中描述之載體,及來源於任何上述之載體。諸如中華根瘤菌、根瘤菌屬及中生根瘤菌屬之與植物天然相互作用之其他細菌可經修飾以介導基因轉移至大量不同植物。可使此等植物相關之共生細菌能夠藉由獲取卸甲Ti
質體與適合二元載體來轉移基因。
感興趣的核酸
用於靶向插入如大豆植物之雙子葉植物基因座中的聚核苷酸供體序列長度通常在約10至約5,000個核苷酸範圍內。然而,可使用實質上更長之核苷酸,高達20,000個核苷酸,包括長約5、6、7、8、9、10、11及12Kb之序列。此外,供體序列可包含含有不與置換區域同源之序列
的載體分子。在一個實施例中,感興趣的核酸將包括一或多個與靶向基因座共享同源性之區域。一般而言,感興趣的核酸序列之同源區域將與希望重組之基因組序列具有至少50%序列一致性。在某些實施例中,感興趣的核酸之同源區域與位於靶向基因座之序列共享60%、70%、80%、90%、95%、98%、99%或99.9%序列一致性。然而,可存在1%與100%之間的任何值之序列一致性,視感興趣的核酸之長度而定。
感興趣的核酸可含有序列與細胞染色質共享相對高之序列一致性的若干不連續區域。舉例而言,對於靶向基因座中不通常存在之序列的靶向插入,獨特序列可存在於供體核酸分子中且側接與靶向基因座中存在之序列共享相對高之序列一致性的序列區域。
感興趣的核酸亦可插入靶向基因座中以充當後面使用之儲集器。舉例而言,包含與如大豆植物之雙子葉植物之基因組的非基因區域同源之序列,但含有感興趣的核酸(視情況在誘導性啟動子控制下編碼ZFN)的第一核酸序列可插入靶向基因座中。隨後,第二核酸序列引入細胞中以誘發感興趣的DNA插入如大豆植物之雙子葉植物之最適非基因基因座中。第一核酸序列包含對最適非基因大豆基因座具有特異性之ZFN且第二核酸序列包含感興趣的DNA序列,或反之亦然。在一個實施例中,ZFN將使最適非基因大豆基因座及感興趣的核酸裂解。基因組中之所得雙股斷裂可接著變成自最適基因座釋放之感興趣的核酸之
整合位點。或者,可在引入感興趣的DNA之後誘發已位於基因組中之ZFN的表現,以誘發基因組中之雙股斷裂,其接著可變成所引入之感興趣的核酸的整合位點。以此方式,可提高任何感興趣的區域感興趣的DNA之靶向整合的效率,因為該方法不依賴於編碼ZFN之核酸與感興趣的DNA的同時吸收。
感興趣的核酸亦可插入最適非基因大豆基因座中以充當隨後插入之標靶位點。舉例而言,由含有其他ZFN設計之識別位點之DNA序列構成的感興趣的核酸可插入基因座中。隨後,可產生其他ZFN設計且在細胞中表現,使得感興趣的初始核酸裂解且藉由修復或同源重組進行修飾。以此方式,感興趣的核酸之迭代整合可發生在如大豆植物之雙子葉植物之最適非基因基因座。
可插入最適非基因大豆基因座中之示例性外源性序列包括(但不限於)任何多肽編碼序列(例如cDNA)、啟動子、強化子及其他調節序列(例如干擾RNA序列、shRNA表現卡匣、抗原決定基標籤、標記基因、裂解酶識別位點及各種類型之表現構築體)。此類序列可容易使用標準分子生物學技術(選殖、合成等)獲得及/或可購得。
為表現ZFN,編碼融合蛋白之序列通常次選殖至含有啟動子以引導轉錄之表現載體中。適合原核及真核啟動子為此項技術中所熟知且描述於例如Sambrook等人,Molecular Cloning,A Laboratory Manual(第2版1989;第3版,2001);Kriegler,Gene Transfer and Expression:A
Laboratory Manual(1990);以及Current Protocols in Molecular Biology(Ausubel等人,上文)。用於表現ZFN之細菌表現系統可用於例如大腸桿菌(E.coli)、芽孢桿菌屬(Bacillus sp.)及沙門氏菌(Salmonella)中(Palva等人,Gene 22:229-235(1983))。用於此類表現系統之套組可購得。用於哺乳動物細胞、酵母及昆蟲細胞之真核表現系統為熟習此項技術者所熟知且亦可購得。
用於將遺傳物質輸送至細胞中之特定表現載體係根據融合蛋白之預期用途,例如在植物、動物、細菌、真菌、原蟲等中之表現來選擇(參見下文描述之表現載體)。標準細菌及動物表現載體為此項技術中已知且詳細描述於例如美國專利公開案20050064474A1及國際專利公開案WO05/084190、WO05/014791及WO03/080809中。
標準轉染方法可用於產生表現大量蛋白質之細菌、哺乳動物、酵母或昆蟲細胞株,該等蛋白質可接著使用標準技術純化(參見例如Colley等人,J.Biol.Chem.264:17619-17622(1989);Guide to Protein Purification,in Methods in Enzymology,第182卷(Deutscher編,1990))。根據標準技術進行真核及原核細胞之轉型(參見例如Morrison,J.Bact.132:349-351(1977);Clark-Curtiss & Curtiss,Methods in Enzymology 101:347-362(Wu等人編,1983))。
所揭示之方法及組合物可用於將聚核苷酸供體序列插入預定位置,諸如最適非基因大豆基因座之一。此
為適用的,因為引入大豆基因組之轉殖基因的表現關鍵視其整合位點而定。因此,編碼除草劑耐受性、昆蟲抗性、養分、抗生素或治療分子之基因可藉由靶向重組插入。
在一個實施例中,感興趣的核酸與提供對草甘膦(glyphosate)或另一除草劑之額外抗性或耐受性及/或提供對精選昆蟲或疾病之抗性及/或營養增強及/或改善農藝特徵及/或提供適用於餵料、食品、工業、藥學或其他用途之蛋白質或其他產物的基因編碼序列組合或「堆疊」。植物基因組內兩個或兩個以上感興趣的核酸序列之「堆疊」可例如經由習知植物育種,使用用含有感興趣的序列之構築體轉型植物、轉殖基因植物之再轉型或經由同源重組之靶向整合添加新性狀中的兩個或兩個以上事件來實現。
此類感興趣的聚核苷酸供體核苷酸序列包括(但不限於)以下提供之彼等實例:
1.賦予對害蟲或疾病之抗性的基因或編碼序列(例如iRNA)
(A)植物疾病抗性基因。植物防禦常常由植物中疾病抗性基因(R)之產物與病原體中對應無毒(Avr)基因之產物之間的特定相互作用活化。植物品種可用選殖之抗性基因轉型以工程改造對特定病原體菌株具抗性之植物。此類基因之實例包括針對葉黴病(Cladosporium fulvum)抗性之番茄Cf-9基因(Jones等人,1994 Science 266:789)、針對丁香假單胞菌(Pseudomonas syringae)致病變種番茄抗性之編碼蛋白激酶之番茄Pto基因(Martin等人,1993 Science
262:1432)及針對丁香假單胞菌抗性之擬南芥屬(Arabidopsis)RSSP2基因(Mindrinos等人,1994 Cell 78:1089)。
(B)蘇雲金桿菌(Bacillus thuringiensis)蛋白質、其衍生物或在其上模型化之合成多肽,諸如Bt δ-內毒素基因之核苷酸序列(Geiser等人,1986 Gene 48:109)及營養期殺蟲(VIP)基因(參見例如Estruch等人(1996)Proc.Natl.Acad.Sci.93:5389-94)。此外,編碼δ-內毒素基因之DNA分子可購自美國菌種保藏中心(American Type Culture Collection)(Rockville,Md.)ATCC寄存編號40098、67136、31995及31998下。
(C)凝集素,諸如若干大花君子蘭結合凝集素基因之核苷酸序列(Van Damme等人,1994 Plant Molec.Biol.24:825)。
(D)維生素結合蛋白,諸如適用作針對昆蟲害蟲之殺幼蟲劑的抗生物素蛋白及抗生物素蛋白同源物。參見美國專利第5,659,026號。
(E)酶抑制劑,例如蛋白酶抑制劑或澱粉酶抑制劑。此類基因之實例包括稻穀半胱胺酸蛋白酶抑制劑(Abe等人,1987 J.Biol.Chem.262:16793)、菸草蛋白酶抑制劑I(Huub等人,1993 Plant Molec.Biol.21:985)及α-澱粉酶抑制劑(Sumitani等人,1993 Biosci.Biotech.Biochem.57:1243)。
(F)昆蟲特異性激素或費洛蒙,諸如脫皮素及保幼激素、其變異體、基於其之模擬劑或其拮抗劑或促效劑,
諸如選殖之保幼激素酯酶(保幼激素之一種失活劑)之桿狀病毒表現(Hammock等人,1990 Nature 344:458)。
(G)昆蟲特異性肽或神經肽,其在表現時干擾受影響害蟲之生理學(J.Biol.Chem.269:9)。此類基因之實例包括昆蟲利尿激素受體(Regan,1994)、在斑點甲蠊(Diploptera punctata)中鑑別之咽側體抑制素(allostatin)(Pratt,1989)及昆蟲特異性之麻痹性神經毒素(美國專利第5,266,361號)。
(H)由蛇、蜂等天然產生之昆蟲特異性毒液,諸如蠍昆蟲毒性肽(Pang,1992 Gene 116:165)。
(I)負責單萜、倍半萜、類固醇、異羥肟酸、苯丙素衍生物或具有殺蟲活性之另一非蛋白質分子的超積累之酶。
(J)與生物活性分子之修飾,包括轉譯後修飾有關之酶:例如糖分解酶、蛋白分解酶、脂解酶、核酸酶、環化酶、轉胺酶、酯酶、水解酶、磷酸酶、激酶、磷酸化酶、聚合酶、彈性蛋白酶、殼質酶及葡聚糖酶,無論天然還是合成。此類基因之實例包括callas基因(PCT公開申請案WO93/02197)、殼質酶編碼序列(其可為例如自ATCC寄存編號3999637及67152獲得)、菸草鉤蟲殼質酶(Kramer等人,1993 Insect Molec.Biol.23:691)及歐芹ubi4-2聚泛素基因(Kawalleck等人,1993 Plant Molec.Biol.21:673)。
(K)刺激信號轉導之分子。此類分子之實例包括綠豆調鈣蛋白cDNA純系之核苷酸序列(Botella等人,1994
Plant Molec.Biol.24:757)及大豆調鈣蛋白cDNA純系之核苷酸序列(Griess等人,1994 Plant Physiol.104:1467)。
(L)疏水性力矩肽。參見美國專利第5,659,026號及第5,607,914號;後者教示賦予疾病抗性之合成抗微生物肽。
(M)膜透性酶、通道形成劑或通道阻斷劑,諸如殺菌肽-β溶解肽類似物(Jaynes等人,1993 Plant Sci.89:43),其產生對菸草青枯病菌(Pseudomonas solanacearum)具抗性之轉殖基因菸草植物。
(N)病毒侵襲性蛋白質或自其衍生之複合毒素。舉例而言,轉型植物細胞中病毒外殼蛋白之累積賦予對由外殼蛋白基因來源於之病毒以及由相關病毒實現之病毒感染及/或疾病發展的抗性。在針對苜蓿花葉病毒、胡瓜花葉病毒、菸草線條病毒、馬鈴薯病毒X、馬鈴薯病毒Y、菸草蝕刻病毒、菸草皺屈病害及菸草花葉病毒轉型植物時已賦予外殼蛋白介導之抗性。參見例如Beachy等人(1990)Ann.Rev.Phytopathol.28:451。
(O)昆蟲特異性抗體或自其衍生之免疫毒素。因而,靶向昆蟲腸中關鍵代謝功能之抗體將使受影響酶不活化,從而殺死昆蟲。舉例而言,Taylor等人(1994)Abstract #497,Seventh Int'l.Symposium on Molecular Plant-Microbe Interactions展示經由產生單鏈抗體片段之轉殖基因菸草之酶促失活。
(P)病毒特異性抗體。參見例如Tavladoraki等人
(1993)Nature 266:469,其展示保護表現重組抗體基因之轉殖基因植物避免病毒侵襲。
(Q)在自然界中藉由病原體或寄生蟲產生之發育阻滯蛋白。因而,真菌內α-1,4-D聚半乳糖醛酶藉由使植物細胞壁同-α-1,4-D-半乳糖醛酶增溶來促進真菌定殖及植物養分釋放(Lamb等人,1992)Bio/Technology 10:1436。編碼豆內聚半乳糖醛酶抑制蛋白質之基因的選殖及表徵由Toubart等人(1992 Plant J.2:367)描述。
(R)在自然界中藉由植物產生之發育阻滯蛋白,諸如提供對真菌疾病之增加抗性的大麥核糖體不活化基因(Longemann等人,1992).Bio/Technology 10:3305。
(S)RNA干擾,其中RNA分子用於抑制標靶基因之表現。在一個實例中RNA分子為部分或完全雙股,其觸發沉默反應,引起dsRNA裂解成小干擾RNA,隨後併入破壞同源mRNA之靶向複合物中。參見例如Fire等人,美國專利6,506,559;Graham等人美國專利6,573,099。
2.賦予除草劑抗性之基因
(A)編碼對抑制生長點或分生組織之除草劑(諸如咪唑啉酮(imidazalinone)、硫醯苯胺(sulfonanilide)或磺醯脲(sulfonylurea)除草劑)之抗性或耐受性的基因。此類別中之示例性基因編碼突變乙醯乳酸酯合成酶(ALS)(Lee等人,1988 EMBOJ.7:1241),亦稱為乙醯羥基酸合成酶(AHAS)(Miki等人,1990 Theor.Appl.Genet.80:449)。
(B)編碼對草甘膦之抗性或耐受性的一或多個其
他基因,該抗性或耐受性藉由突變EPSP合成酶及aroA基因,或經由代謝失活,藉由諸如DGT-28、2mEPSPS、GAT(草甘膦乙醯基轉移酶)或GOX(草甘膦氧化酶)之基因及其他膦醯基化合物(諸如草銨膦(pat、bar及dsm-2基因)及芳氧基苯氧基丙酸及環己二酮(ACC酶抑制劑編碼基因)賦予。參見例如美國專利第4,940,835號,其揭示可賦予草甘膦抗性之EPSP形式之核苷酸序列。編碼突變aroA基因之DNA分子可在ATCC寄存編號39256下獲得,且突變基因之核苷酸序列揭示於美國專利第4,769,061號中。歐洲專利申請案第0 333 033號及美國專利第4,975,374號揭示賦予諸如L-草胺膦之除草劑抗性之麩醯胺酸合成酶基因的核苷酸序列。草胺膦乙醯轉移酶基因之核苷酸序列提供於歐洲申請案第0 242 246號中。De Greef等人(1989)Bio/Technology 7:61描述表現編碼草胺膦乙醯轉移酶活性之嵌合bar基因的轉殖基因植物之產生。賦予芳氧基苯氧基丙酸及環己二酮(諸如西殺草(sethoxydim)及精吡氟氯禾靈(haloxyfop))抗性之示例性基因為Marshall等人(1992)Theor.Appl.Genet.83:435描述之Accl-S1、Accl-S2及Accl-S3基因。
(C)編碼對抑制光合成之除草劑(諸如三嗪(psbA及gs+基因)及苯基腈(腈水解酶基因))之抗性或耐受性的基因。Przibilla等人(1991)Plant Cell 3:169描述編碼突變psbA基因之質體用以轉型衣藻屬(Chlamydomona)之用途。用於腈水解酶基因之核苷酸序列揭示於美國專利第4,810,648號中,且含有此等基因之DNA分子可自ATCC寄存編號
53435、67441及67442獲得。編碼麩胱甘肽S-轉移酶之DNA的選殖及表現由Hayes等人(1992)Biochem.J.285:173描述。
(D)編碼對結合於羥基苯基丙酮酸雙加氧酶(HPPD)(催化對羥基苯基丙酮酸(HPP)轉化成尿黑酸之反應的酶)之除草劑之抗性或耐受性的基因。此包括除草劑,諸如異噁唑(EP418175、EP470856、EP487352、EP527036、EP560482、EP682659、美國專利第5,424,276號),尤其異噁唑草酮(isoxaflutole)(一種用於大豆之選擇性除草劑)、二酮腈(diketonitrile)(EP496630、EP496631),尤其2-氰基-3-環丙基-1-(2-SO2CH3-4-CF3苯基)丙-1,3-二酮及2-氰基-3-環丙基-1-(2-SO2CH3-4-2,3Cl2苯基)丙-1,3-二酮、三酮(EP625505、EP625508、美國專利第5,506,195號),尤其磺草酮(sulcotrione)及吡唑啉酯(pyrazolinate)。在植物中產生過多HPPD之基因可提供對此類除草劑之耐受性或抗性,包括例如美國專利第6,268,549號及第6,245,968號及美國專利申請公開案第20030066102號中所描述之基因。
(E)編碼對苯氧基生長素除草劑(諸如2,4-二氯苯氧基乙酸(2,4-D))之抗性或耐受性且亦可賦予對芳氧基苯氧基丙酸酯(AOPP)除草劑之抗性或耐受性的基因。此類基因之實例包括α-酮戊二酸依賴性二加氧酶(aad-1)基因,描述於美國專利第7,838,733號中。
(F)編碼對苯氧基生長素除草劑(諸如2,4-二氯苯氧基乙酸(2,4-D))之抗性或耐受性且亦可賦予對吡啶氧基
生長素除草劑(諸如氟草定(fluroxypyr)或綠草定(triclopyr))抗性或耐受性的基因。此類基因之實例包括α-酮戊二酸依賴性二加氧酶基因(aad-12),描述於WO 2007/053482 A2中。
(G)編碼對麥草畏(dicamba)之抗性或耐受性的基因(參見例如美國專利公開案第20030135879號)。
(H)提供對抑制原卟啉原氧化酶(PPO)之除草劑之抗性或耐受性的基因(參見美國專利第5,767,373號)。
(I)提供對結合於光合體系中心(PS II)核心蛋白質之三嗪除草劑(諸如莠去津(atrazine))及脲衍生物(諸如達有龍(diuron))除草劑之抗性或耐受性的基因(Brussian等人,(1989)EMBO J.1989,8(4):1237-1245)。
3.賦予或促成增加價值性狀之基因(A)經修飾之脂肪酸代謝,例如藉由用反義基因或硬脂醯基-ACP去飽和酶使大豆或芸苔屬轉型以增加植物之硬脂酸含量(Knultzon等人,1992)Proc.Nat.Acad.Sci.USA 89:2624。
(B)減少植酸酯含量
(1)引入植酸酶編碼基因,諸如黑麴菌植酸酶基因(Van Hartingsveldt等人,1993 Gene 127:87),增強植酸酯之分解,為轉型植物添加更多游離磷酸鹽。
(2)可引入減少植酸酯含量之基因。在雙子葉植物中,此例如可藉由選殖,接著再引入與負責產生特徵在於低含量植酸之大豆突變體之單對偶基因相關的DNA來實現(Raboy等人,1990 Maydica 35:383)。
(C)例如藉由用編碼改變澱粉支化模式之酶的基因轉型植物所實現的經修飾之碳水化合物組合物。此類酶之實例包括鏈球菌屬黏液果糖基轉移酶基因(Shiroza等人,1988)J.Bacteriol.170:810、枯草桿菌果聚糖蔗糖酶基因(Steinmetz等人,1985 Mol.Gen.Genel.200:220)、地衣芽孢桿菌α-澱粉酶(Pen等人,1992 Bio/Technology 10:292)、番茄轉化酶基因(Elliot等人,1993)、大麥澱粉酶基因(Sogaard等人,1993 J.Biol.Chem.268:22480)及大豆內胚乳澱粉支化酶II(Fisher等人,1993 Plant Physiol.102:10450)。
III.重組構築體
如本文所揭示,本發明提供重組基因組序列,其包含至少1Kb之最適非基因大豆基因組序列及感興趣的DNA,其中插入之感興趣的DNA插入該非基因序列中。在一個實施例中,感興趣的DNA為分析結構域、賦予害蟲或疾病抗性之基因或編碼序列(例如iRNA)、賦予除草劑抗性之基因或賦予或產生增加價值性狀之基因,且該最適非基因大豆基因組序列包含以下特徵:a.該非基因序列為約1Kb至約5.7Kb長且不含甲基化聚核苷酸;b.該非基因序列顯示如大豆植物之雙子葉植物之基因組內0.01574至83.52cM/Mb之重組率;c.該非基因序列顯示如大豆基因組之雙子葉植物基因組的0至0.494之核小體占位位準;d.該非基因序列與如大豆基因組之雙子葉植物基因組
中含有之任何其他序列共享小於40%序列一致性;e.該非基因序列具有離雙子葉植物染色體著絲點(如大豆染色體著絲點)之基因組距離0至0.99682比率之相對位置值;f.該非基因序列具有14.4%至45.9%之鳥嘌呤/胞嘧啶含量百分比;g.該非基因序列位於與包含已知或預測之雙子葉植物編碼序列(諸如大豆編碼序列)之基因序列接近處,在包含原生非基因序列之鄰接基因組DNA之40Kb內;以及h.該非基因序列位於包含至少第二非基因序列之雙子葉植物基因組序列(諸如基因組序列)之1Mb區域中。
在一個實施例中,該最適非基因大豆基因組序列進一步表徵為包含1至18個已知或預測之大豆編碼序列之基因區在包含原生非基因序列之鄰接基因組DNA之40Kb內。在一個實施例中,最適非基因大豆基因座係選自叢1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、2、3、4、5、6、7、8、9、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31或32之基因座。
IV.轉殖基因植物
根據本發明之一個實施例,亦提供包含重組最適非基因大豆基因座之轉殖基因植物。此類轉殖基因植物可使用熟習此項技術者已知之技術製備。
轉型雙子葉植物細胞、愈傷組織、組織或植物(亦即大豆細胞、愈傷組織、組織或植物)可藉由針對由轉型
DNA上存在之標記基因編碼的性狀,選擇或篩選經工程改造之植物材料來鑑別及分離。舉例而言,可藉由使經工程改造之植物材料在含有抑制量之抗生素或除草劑的培養基上生長來選擇,轉型基因構築體賦予對該抗生素或除草劑之抗性。此外,轉型細胞亦可藉由針對可存在於重組核酸構築體上之任何可見標記基因(例如黃色螢光蛋白質、綠色螢光蛋白質、紅色螢光蛋白質、β-葡糖醛酸酶、螢光素酶、B或C1基因)之活性篩選來鑑別。此類選擇及篩選方法為熟習此項技術者所熟知。
物理及生物化學方法亦可用來鑑別含有插入之基因構築體的植物或植物細胞轉型體。此等方法包括(但不限於):1)南方分析或PCR擴增,用於偵測及確定重組DNA插入物之結構;2)北方墨點、S1 RNA酶保護、引子延伸或逆轉錄酶-PCR擴增,用於偵測及檢查基因構築體之RNA轉錄物;3)酶分析,用於偵測酶或核糖核酸酶活性,其中此類基因產物由基因構築體編碼;4)蛋白質凝膠電泳、西方墨點技術、免疫沈澱或酶聯免疫分析(ELISA),其中基因構築體產物為蛋白質。諸如原位雜交、酶染色及免疫染色之其他技術亦可用來偵測特定植物器官及組織中重組構築體之存在或表現。用於進行所有此等分析之方法為熟習此項技術者所熟知。
可藉由例如自感興趣的組織中分離之RNA(例如mRNA)之北方墨點法觀測使用本文所揭示之方法之基因操縱的作用。通常,若mRNA存在或mRNA量已增加,則可
假設,正表現對應轉殖基因。可使用量測基因及/或編碼多肽活性之其他方法。可使用不同類型之酶分析,視所用受質及偵測反應產物或副產物增加或減少之方法而定。此外,表現之多肽的含量可以免疫化學方式,亦即ELISA、RIA、EIA及熟習此項技術者熟知之其他基於抗體之分析,諸如藉由電泳偵測分析(用染色或西方墨點法)量測。作為一個非限制性實例,使用ELISA分析偵測AAD-12(芳氧基烷酸酯二加氧酶;參見WO 2011/066360)及PAT(草胺膦-N-乙醯基-轉移酶(PAT))蛋白質描述於以全文引用的方式併入本文中之美國專利公開案第20090093366號中。轉殖基因可選擇性地在一些植物組織中或在一些發育階段表現,或轉殖基因可在實質上所有植物組織中,實質上沿著其整個生命週期表現。然而,任何組合表現模式亦為適用的。
熟習此項技術者將認識到在外源性聚核苷酸供體序列穩定併入轉殖基因植物中且確定可操作之後,其可藉由有性雜交引入其他植物中。可使用大量標準育種技術中之任一者,視雜交之物種而定。
本發明亦涵蓋上述轉殖基因植物之種子,其中種子具有轉殖基因或基因構築體。本發明進一步涵蓋上述轉殖基因植物之子代、純系、細胞株或細胞,其中子代、純系、細胞株或細胞具有轉殖基因或基因構築體。
藉由任何以上轉型技術產生之轉型植物細胞可經培養以再生整個植物,其具有轉型基因型且因此具有所希望之表現型。此類再生技術依賴於組織培養生長培養基
中某些植物激素之操縱,通常依賴於已與所希望之核苷酸序列一起引入之殺生物劑及/或除草劑標記物。自培養之原生質體再生的植物描述於Evans等人,「Protoplasts Isolation and Culture」in Handbook of Plant Cell Culture,第124-176頁,Macmillian Publishing Company,New York,1983;及Binding,Regeneration of Plants,Plant Protoplasts,第21-73頁,CRC Press,Boca Raton,1985中。亦可自植物愈傷組織、外植體、器官、花粉、胚或其部分獲得再生。此類再生技術一般描述於Klee等人(1987)Ann.Rev.of Plant Phys.38:467-486中。
在一些實施例中,包含編碼多肽之核苷酸序列的轉殖基因植物或植物材料展現一或多個以下特徵:在植物細胞中表現多肽;在植物細胞之色素體中表現多肽一部分;將多肽自植物細胞之細胞溶質引至細胞色素體中;多肽在植物細胞中進行色素體特異性表現;及/或多肽定位在植物細胞中。除表現所編碼之多肽外,此類植物可另外具有一或多種所需要之性狀。此類性狀可包括例如:對昆蟲、其他害蟲及致病劑之抗性;對除草劑之耐受性;增強之穩定性、產率或存放期;環境耐受性;醫藥生產;工業產品生產;以及增強營養。
根據一個實施例,提供一種轉殖基因雙子葉植物原生質體(亦即大豆原生質體),其包含重組最適非基因大豆基因座。更特定言之,提供一種雙子葉植物原生質體,諸如大豆原生質體,其包含插入雙子葉植物原生質體(亦即大
豆原生質體)之最適非基因大豆基因座中的感興趣的DNA,其中該非基因大豆基因座為約1Kb至約5.7Kb長且缺乏任何甲基化核苷酸。在一個實施例中,轉殖基因雙子葉植物原生質體(亦即轉殖基因大豆原生質體)包含插入最適非基因大豆基因座中之感興趣的DNA,其中該感興趣的DNA包含分析結構域及/或開放閱讀框架。在一個實施例中,插入之感興趣的DNA編碼肽,且在另一實施例中,感興趣的DNA包含至少一種包含轉殖基因之基因表現卡匣。
根據一個實施例,提供一種轉殖基因雙子葉植物、雙子葉植物部分或雙子葉植物細胞(亦即轉殖基因大豆植物、大豆植物部分或大豆植物細胞),其包含重組最適非基因大豆基因座。更特定言之,提供一種雙子葉植物、雙子葉植物部分或雙子葉植物細胞(亦即大豆植物、大豆植物部分或大豆植物細胞),其包含插入雙子葉植物、雙子葉植物部分或雙子葉植物細胞(亦即大豆植物、大豆植物部分或大豆植物細胞)之最適非基因大豆基因座中的感興趣的DNA,其中該非基因大豆基因座為約1Kb至約5.7Kb長且缺乏任何甲基化核苷酸。在一個實施例中,轉殖基因雙子葉植物、雙子葉植物部分或雙子葉植物細胞(亦即轉殖基因大豆植物、大豆植物部分或大豆植物細胞)包含插入最適非基因大豆基因座中之感興趣的DNA,其中該感興趣的DNA包含分析結構域及/或開放閱讀框架。在一個實施例中,插入之感興趣的DNA編碼肽,且在另一實施例中,感興趣的DNA包含至少一種包含轉殖基因之基因表現卡匣。
實例
實例1:鑑別大豆中之可靶向基因座
用生物資訊學方法,使用特定標準,篩選大豆基因組,以選擇最適基因座用於聚核苷酸供體靶向。使用關於轉殖基因在植物基因組內最佳表現之考慮因素、關於位點特異性DNA結合蛋白對基因組DNA之最佳結合的考慮因素以及轉殖基因植物產品發展需求,來發展用於選擇基因座之特定標準。為鑑別及選擇基因座,使用生物資訊學方法掃描大豆基因組之基因組及表觀基因組資料集。篩選基因組及表觀基因組資料集產生符合以下標準之精選基因座:1)低甲基化及超過1Kb長;2)經由位點特異性核酸酶介導之聚核苷酸供體整合,為可靶向的;3)農藝學上中性或非基因的;4)可表現整合之轉殖基因的區域;以及5)在該基因座內/周圍具有重組之區域。因此,使用此等特定標準,鑑別總共7,018個基因座(SEQ ID NO:1-SEQ ID NO:7,018)。特定標準進一步詳細描述於下文中。
低甲基化
掃描大豆基因組以選擇大於1Kb之DNA低甲基化的最適基因座。使用高通量全基因組測序方法,構築自黃豆栽培品種Williams82分離之根及芽組織之DNA甲基化概況。提取之DNA經受亞硫酸氫鹽處理,該處理使未甲基化胞嘧啶轉化成尿嘧啶,但不影響甲基化之胞嘧啶,且接著使用Illumina HiSeq技術測序(Krueger,F.等人DNA methylome analysis using short bisulfite sequencing data.
Nature Methods 9,145-151(2012))。收集原始測序讀數且使用如Krueger F,Andrews SR(2011)Bismark:a flexible aligner and methylation caller for Bisulfite-Seq applications.Bioinformatics
27:1571-1572中所描述之BismarkTM
映射軟體,與大豆栽培品種Williams82參考基因組映射。
因為在亞硫酸氫鹽轉化過程期間DNA序列中甲基化之胞嘧啶不會轉化成尿嘧啶,所以測序資料中出現胞嘧啶鹼基指示存在DNA甲基化。對與參考序列映射之讀數進行分析以鑑別胞嘧啶殘基之基因組位置以證明DNA甲基化。基因組中之各胞嘧啶鹼基的甲基化程度計算為映射特定胞嘧啶鹼基位置的甲基化讀數數目相對於映射該位置之讀數總數的百分比。以下假設解釋如何計算大豆基因組內各鹼基的甲基化程度。舉例而言,考慮在大豆栽培品種Williams82參考序列之染色體1中之位置100存在胞嘧啶鹼基。若在位置100總共存在20個映射於胞嘧啶鹼基的讀數且此等讀數中之10個甲基化,則在染色體1中之位置100胞嘧啶鹼基的甲基化程度估計為50%。因此,計算自大豆之根及芽組織獲得之所有基因組DNA鹼基對的甲基化程度概況。無法恰當地映射大豆基因組中之獨特位置的讀數匹配大豆基因組中普遍之重複序列,且在此項技術中稱為顯著甲基化。
使用上述方案,量測大豆栽培品種Williams82基因組之甲基化程度。因而,含有甲基化讀數之大豆基因組區域指示此等大豆基因組區域甲基化。相反,缺乏甲基化
讀數之大豆基因組區域指示此等大豆基因組區域非甲基化。來自芽及根組織之非甲基化且不含任何甲基化讀數的大豆基因組區域視為「低甲基化」區域。為使根及芽甲基化概況可用於觀測,針對每一大豆栽培品種Williams82染色體產生波形曲線(http://useast.ensembl.org/info/website/upload/wig.html)。
如上文所描述,在根及芽組織中單一鹼基對之解析度下獲得DNA甲基化程度之後,使用100bp窗口篩選大豆基因組以鑑別甲基化之基因組區域。對於基因組中篩選之每個窗口,DNA甲基化程度藉由計算該窗口中每一胞嘧啶鹼基之平均甲基化程度來獲得。DNA甲基化程度超過1%之基因組窗口稱為甲基化之基因組區域。將根及芽概況中鑑別之甲基化窗口組合以產生共同甲基化概況。相反,共同概況中未滿足此等標準且未被鑑別為甲基化區域之基因組中之區域稱為低甲基化區。表1概述經鑑別之低甲基化區域。
大豆栽培品種Williams82基因組之此等低甲基化區域經進一步表徵以鑑別及選擇特定基因座,因為此等區域之無甲基化背景指示存在空的染色質。因而,所有隨
後分析均在所鑑別之低甲基化區域上進行。
可靶向性
大豆栽培品種Williams82中經鑑別之低甲基化位點經進一步分析以確定哪些位點經由聚核苷酸供體之位點特異性核酸酶介導之整合可靶向。已知黃豆為一種古多倍體作物,其在其基因組歷史中經歷基因組複製(Jackson等人Genome sequence of the palaeopolyploid soybean,Nature
463,178-183(2010))。此項技術中已知大豆基因組含有甲基化且具有高序列複製位準之高度重複的長DNA區段。自大豆基因組資料庫收集大豆基因組中之已知重複區域的註釋資訊(www.soybase.org,Shoemaker,R.C.等人SoyBase,the USDA-ARS soybean genetics and genomics database.Nucleic Acids Res.2010年1月;38(資料庫發佈):D843-6.)。
因此,篩選以上鑑別之低甲基化位點以移除與大豆基因組上所註釋之已知重複區域對準的任何位點。通過此第一次篩選之剩餘低甲基化位點隨後使用大豆基因組資料庫之基於BLASTTM
之同源性搜索,經由NCBIBLASTTM
+軟體(2.2.25版)操作,使用預設參數設置來掃描(Stephen F.Altschul等人(1997)Gapped BLAST and PSI-BLAST:a new generation of protein database search programs.Nucleic Acids Res.
25:3389-3402)。作為BLASTTM
篩選的結果,自進一步分析移除與基因組中之其他地方顯著匹配,具有超過40%之序列比對覆蓋度的任何低甲基化位點。
農藝學上中性或非基因
大豆栽培品種Williams82中鑑別之低甲基化位點經進一步分析以確定哪些位點為農藝學上中性或非基因的。因而,對上述低甲基化位點進行篩選以移除重疊或含有任何已知或預測內源性大豆栽培品種Williams82編碼序列的任何位點。出於此目的,自大豆基因組資料庫收集已知基因之註釋資料及表現序列標籤(EST)資料之映射資訊(www.soybase.org-使用1.1版基因模型,Jackson等人Genome sequence of the palaeopolyploid soybean Nature 463,178-183(2010))。亦考慮緊靠開放閱讀框架上游2Kb及下游1Kb的任何基因組區域。此等上游及下游區域可含有已知或未知之對基因功能而言不可或缺之保守調節元件。分析上述低甲基化位點中已知基因(包括2Kb上游及1Kb下游區域)及EST之存在。自下游分析移除與已知基因(包括2Kb上游及1Kb下游區域)或EST對準或重疊的任何低甲基化位點。
表現
大豆栽培品種Williams82中鑑別之低甲基化位點經進一步分析以確定哪些位點接近表現之大豆基因。藉由分析使用如下所描述之RNAseqTM
技術,自大豆栽培品種Williams82根及芽組織產生之轉錄組概況分析資料,量測大豆基因之轉錄物表現位準:Mortazavi等人,
Mapping and quantifying mammalian transcriptomes by RNA-Seq.Nat Methods.
2008;5(7):621-628,及Shoemaker RC等人,
RNA-Seq Atlas of Glycine max:a guide to the soybean Transcriptome.BMC Plant Biol.
2010年8月5日;10:160。針對各低甲基化位點,完成分析以鑑別接近低甲基化位點之40Kb區域內存在之任何註釋基因及位於與低甲基化位點接近處之註釋基因的平均表現位準。確定離註釋基因超過40Kb之具有非零平均表現位準的低甲基化位點不接近表現之大豆基因且自進一步分析移除。
重組
在大豆栽培品種Williams82中鑑別之低甲基化位點經進一步分析以確定哪些位點具有重組跡象且可促進最適基因座經由習知育種而基因滲入大豆之其他株系。在習知育種期間不同的大豆基因型按常規雜交以研發含有農藝學上感興趣之性狀的新穎且改善之大豆株系。因而,經由植物介導之轉殖基因轉型,基因滲入大豆株系內最適基因座中的農藝性狀應能夠經由在習知植物育種期間進行減數分裂重組而進一步基因滲入其他大豆株系,尤其優良株系。篩選上述低甲基化位點以鑑別及選擇具有一定減數分裂重組位準之位點。鑑別及移除染色體區域內存在之表徵為重組「冷點」的任何低甲基化位點。在大豆中,此等冷點係使用自重組同系繁殖映射群體產生之標記物資料集定義(Williams 82 x PI479752)。此資料集由約16,600個SNP標記物組成,其可實體映射黃豆參考基因組序列。
基於標記物之間的遺傳距離(分摩(cM))與標記物之間的物理距離(兆鹼基(Mb))之比率計算跨越染色體,任
何一對大豆基因組標記物之間的減數分裂重組頻率。舉例而言,若一對標記物之間的遺傳距離為1cM且同一對標記物之間的物理距離為2Mb,則確定計算之重組頻率為0.5cM/Mb。對於以上鑑別之各低甲基化位點,選擇一對相隔至少1Mb之標記物且計算重組頻率。此方法用於計算低甲基化位點之重組頻率。藉由進一步分析鑑別及移除重組頻率為0cM/Mb之任何低甲基化位點。選擇包含超過0cM/Mb之重組頻率的剩餘低甲基化區域用於進一步分析。
最適基因座之鑑別
上述選擇標準之應用可鑑別總共90,325個來自大豆基因組之最適基因座。表2概述所鑑別之最適基因座之長度。此等最適基因座具有以下特徵:1)長度超過1Kb之低甲基化基因座;2)經由位點特異性核酸酶介導之聚核苷酸供體整合可靶向的基因座;3)在農藝學上中性或非基因的基因座;4)轉殖基因可表現之基因座;以及5)基因座內有重組跡象。表2中描述之所有最適基因座中,僅僅進一步分析超過1Kb之最適基因座且用於供體聚核苷酸序列靶向。此等最適基因座之序列揭示為SEQ ID NO:1-SEQ ID NO:7,018。總體而言,此等最適基因座為大豆基因組內可由供體聚核苷酸序列靶向的位置,如下文進一步證實。
實例2:針對來自大豆之叢最適基因座的F分佈及主分量分析
使用F分佈及主分量分析統計方法進一步分析7,018個所鑑別之最適基因座(SEQ ID NO:1-SEQ ID NO:7,018),以定義代表性群體及叢用於最適基因座分組。
F分佈分析
使用連續概率分佈統計分析在統計學上分析所鑑別之7,018個最適基因座。作為連續概率分佈統計分析之一個實施例,完成F分佈檢驗以確定最適基因座之代表性數目。使用熟習此項技術者已知之方程式及方法完成F分佈檢驗分析。關於更多的指導,如K.M Remund,D.Dixon,DL.Wright及LR.Holden.Statistical considerations in seed purity testing for transgenic traits.Seed Science Research(2001)11,101-119(以引用的方式併入本文中)中所描述之F分佈檢驗分析為F分佈檢驗之一非限制性實例。F分佈檢驗採用最適基因座之隨機取樣,使得跨越7,018個最適基因座,任何無效基因座均勻分佈,且取樣之最適基因座數目為7,018個最適基因座總群體的10%或10%以下。
F分佈分析指示7,018個最適基因座中之32個提供7,018個最適基因座之代表性數目,信賴水準為95%。因此,F分佈分析展示若測試32個最適基因座且所有用供體聚核苷酸序列均可靶向,則此等結果將指示在95%信賴水準下7,018個最適基因座中之91%或91%以上為正的。驗證7,018個最適基因座之總百分比的最佳估計將為32個所測
試之最適基因座是否100%可靶向。因此,91%實際上為在95%信賴水準下證實之真實百分比的下限。對於95%信賴水準,此下限係基於F分佈之0.95分位數。(Remund K,Dixon D,Wright D,及Holden L.Statistical considerations in seed purity testing for transgenic traits.Seed Science Research
(2001)11,101-119)。
主分量分析
隨後,完成主分量分析(PCA)統計方法以進一步評估及觀測包含7,018個鑑別之最適基因座之資料集的類似性及差異以能夠取樣不同的基因座進行靶向驗證。PCA涉及將較大數目之相關變數變換成較小數目之稱為主分量之不相關變數的數學算法。
在7,018個鑑別之最適基因座上,藉由產生一組可用於描述7,018個鑑別之最適基因座的可計算之特徵或屬性完成PCA。每個特徵在數值上可計算,且特別定義以收集7,018個鑑別之最適基因座的基因組及表觀基因組背景。鑑別每個大豆最適基因座的一組10個特徵且下文更詳細地描述。
1.最適基因座之長度
a.此資料集中最適基因座之長度在最小1,000Bp至最大5,713Bp範圍內。
2.最適基因座周圍1MB區域中之重組頻率
a.在大豆中,染色體位置之重組頻率係使用自多個映射群體產生之固有高解析度標記物資料集定義。
b.跨越染色體,任何一對標記物之間的重組頻率係基於標記物之間的遺傳距離(分摩(cM))與標記物之間的物理距離(Mb)的比率計算。舉例而言,若一對標記物之間的遺傳距離為1cM且同一對標記物之間的物理距離為2Mb,則計算之重組頻率為0.5cM/Mb。對於每一個最適基因座,選擇一對相隔至少1Mb之標記物且以此方式計算重組頻率。此等重組值在最小0.01574cM/Mb至最大83.52cM/Mb範圍內。
3.最適基因座序列獨特性之程度
a.對於每個最適基因座,使用基於BLASTTM
之同源性搜索,使用NCBI BLASTTM
+軟體(2.2.25版)操作,使用預設參數設置,針對大豆栽培品種Williams82基因組掃描最適基因座之核苷酸序列(Stephen F.Altschul等人(1997),「Gapped BLAST and PSI-BLAST:a new generation of protein database search programs」,Nucleic Acids Res.25:3389-3402)。因為自大豆栽培品種Williams82基因組鑑別此等最適基因座序列,所以經由此搜索鑑別之第一BLASTTM
命中代表大豆栽培品種Williams82序列本身。鑑別每個最適基因座序列之第二BLASTTM
命中且命中之比對覆蓋度(表示為藉由BLASTTM
命中覆蓋之最適基因座百分比)用作大豆基因組內最適基因座序列獨特性的量度。第二BLASTTM
命中之此等比對覆蓋值在最小0%至最大39.97%序列一致性範圍內。不考慮在較高序列一致性位準下比對之任何序列。
4.最適基因座至其鄰域中最近基因之距離
a.自大豆基因組資料庫提取大豆基因組中已知基因之基因註釋資訊及位置(可得自www.soybase.org-使用1.1版基因模型,Jackson等人Genome sequence of the palaeopolyploid soybean,Nature
463,178-183(2010))。對於每個最適基因座,考慮上游與下游位置,鑑別最近註釋基因且量測最適基因座序列與該基因之間的距離(Bp)。舉例而言,若最適基因座位於染色體Gm01位置2,500至位置3,500且與此最適基因座最靠近之基因位於染色體Gm01位置5,000至位置6,000,則最適基因座至此最靠近基因之距離計算為1500Bp。最適基因座資料集之所有7,018個最適基因座的此等值在最小1,001Bp至最大39,482Bp範圍內。
5.最適基因座序列中之GC%
a.對於每個最適基因座,分析核苷酸序列以估計存在之鳥嘌呤及胞嘧啶鹼基的數目。此數表示為每個最適基因座之序列長度的百分比且提供GC%之量度。大豆最適基因座資料集之此等GC%值在14.4%至45.9%範圍內。
6.最適基因座序列周圍40Kb鄰域中之基因數目
a.自大豆基因組資料庫提取大豆栽培品種Williams82基因組中已知基因之基因註釋資訊及位置。對於7,018個最適基因座序列中之每一個,界定最適基因座序列周圍之40Kb窗口且計數位置與此窗口重疊之註釋基因的數目。此等值在40Kb鄰域內最小1個基因至最大18個基因範圍內。
7.最適基因座周圍40Kb鄰域中之平均基因表現
a.藉由使用RNAseqTM
技術,分析由大豆栽培品種Williams82根及芽組織產生之可用的轉錄組概況分析資料,量測大豆基因之轉錄物表現位準。針對每個最適基因座,自大豆基因組資料庫提取大豆栽培品種Williams82基因組中已知基因之基因註釋資訊及位置,鑑別大豆栽培品種Williams82基因組內存在於最適基因座周圍40Kb鄰域中之註釋基因。自描述於以上提及之引用中的轉錄組概況提取每個基因之表現位準且計算平均基因表現位準。大豆基因組內所有基因之表現值變化很大。7,018個最適基因座資料集所有的平均表現值在最小0.00415至最大872.7198範圍內。
8.最適基因座周圍之核小體占位位準
a.瞭解特定核苷酸序列之核小體占位位準提供關於染色體功能及序列之基因組背景的資訊。NuPoPTM
統計套裝軟體用於預測任何大小之基因組序列的核小體占位率及最可能核小體定位圖譜(Xi,L.,Fondufe-Mittendor,Y.,Xia,L.,Flatow,J.,Widom,J.及Wang,J.-P.,Predicting nucleosome positioning using a duration Hidden Markov Model,BMC Bioinformatics
,2010,doi:10.1186/1471-2105-11-346.)。對於7,018個最適基因座中之每一者,提交核苷酸序列用於用NuPoPTM
軟體分析且計算核小體占位評分。大豆最適基因座資料集之此等核小體占位評分在最小0至最大0.494範圍內。
9.染色體內相對位置(與著絲點之接近度)
a.著絲點為染色體上接合兩個姊妹染色分體之區域。著絲點任一邊緣上之染色體部分稱為染色體臂。在公開之大豆栽培品種Williams82參考序列中鑑別所有20個大豆染色體上著絲點之基因組位置(Jackson等人Genome sequence of the palaeopolyploid soybeanNature
463,178-183(2010))。自大豆基因組資料庫提取關於每一大豆染色體中著絲點之位置及染色體臂長度的資訊。對於每一最適基因座,量測最適基因座序列至其所位於之染色體之著絲點的基因組距離(Bp)。染色體內最適基因座之相對位置表示為其與著絲點之基因組距離相對於其處於之特定染色體臂長度的比率。大豆最適基因座資料集之此等相對位置值在基因組距離之最小0至最大0.99682比率範圍內。
10.1Mb區域中之最適基因座數目
a.對於每一最適基因座,界定最適基因座位置周圍1Mb基因組窗口且計算此區域內存在或與其重疊之其他額外最適基因座的數目,包括研究中之最適基因座。1Mb中最適基因座數目在最小1至最大49範圍內。
所有7,018個最適基因座均使用上述特徵及屬性分析。每一最適基因座之特徵及屬性評分的結果或值進一步描述於表3中(作為分開的電子申請,以引用的方式併入本文中)。所得資料集用於PCA統計方法中以將7,018個鑑別之最適基因座叢集成叢。在叢集過程期間,在估計最適基因座之「p」主分量之後,在「p」維歐幾里得空間中將最適基因座分配至32叢之一。每一「p」軸劃分成「k」個間
隔。將分配至相同間隔之最適基因座分組在一起以形成叢。使用此分析,將每個PCA軸劃分成兩個間隔,其係基於關於實驗性驗證所需要之叢數目的先驗資訊來選擇。所得叢之所有分析及觀測均用來自Chemical Computing Group Inc.(Montreal,Quebec,Canada)之Molecular OperatingEnvironmentTM
(MOE)軟體進行。
PCA方法用於基於上述特徵值將該組7,018個鑑別之最適基因座叢集成32個不同叢。在PCA過程期間,產生五個主分量(PC),其中頭三個PC含有資料集中約90%總變化(表4)。此三個PCA用於以三維曲線圖解表示32個叢(參見圖1)。在完成叢集過程之後,自每個叢選擇一個代表性最適基因座。此藉由在每個叢內選擇最靠近叢質心之精選最適基因座進行(表4)。20個大豆染色體中32個代表性最適基因座的染色體位置均一地分佈且不偏向任何特定基因組位置,如圖2中所示。
用於聚核苷酸供體聚核苷酸序列靶向之基因座的最終選擇
自叢集在32個不同叢內之7,018個基因座鑑別總共32個基因座且選擇用於由供體聚核苷酸序列靶向。對於32個叢中之每一者,選擇代表性基因座(最接近如上文表4中所描述之叢質心)或與靶向株系具有同源性之額外基因座。藉由首先針對由黃豆栽培品種Maverick(轉型及靶向篩選株系)及黃豆栽培品種Williams82(參考株系)之基因組DNA序列資料組成之整個基因組資料庫,篩選所有7,018個所選最適基因組序列,選擇額外最適基因座,以確定來自兩個株系之基因組中之覆蓋度(多少最適基因座存在於兩個基因組中)及序列一致性百分比。選擇Williams82基因組資料庫中具有100%覆蓋度(在兩個基因組之間比對之最適基因座之整個序列長度)及100%一致性之最適基因座用於靶向驗證在選擇額外最適基因座上,亦考慮其他標準,諸如基因座大小、獨特性程度、GC%含量及最適基因座之染
色體分佈。32個所選最適基因座之染色體位置及每個大豆最適基因座之特定基因組組態分別展示在圖3及表5中。
使用精確基因組工程改造技術已在大豆基因組中鑑別出一大批7,018個基因組位置為最適基因座以由供體聚核苷酸序列靶向。統計分析方法用以將7,018個所選基因座分組成32個具有類似基因組內容之叢,且鑑別一小類32個所選基因座,代表該組7,018個所選基因座。經由供體聚核苷酸序列靶向,32個代表性基因座證實為最適基因座。藉由針對對上述十組特徵或屬性所產生之數值進行PCA統計分析,將十個特徵或屬性計算成較少維度之PCA分量。因而,PCA分量減少至五個維度,其代表上述十個特徵或屬性(表6)。每一PCA分量相當於上述十個特徵或屬性之組合。自包含五個維度之此等PCA分量,如使用PCA統計分析所計算,確定32個叢。
實例3:大豆中結合基因座之鋅指的設計
針對代表性基因座之所鑑別DNA序列的鋅指蛋白質如先前所描述來設計。參見例如Urnov等人,
(2005)Nature 435:646-551。示例性標靶序列及識別螺旋展示在表7(識別螺旋區域設計)及表8(標靶位點)中。表8中,由ZFP識別螺旋接觸的標靶位點中之核苷酸以大寫字母指示,且非接觸核苷酸以小寫字母指示。針對所有上述32個所選最適基因座,設計鋅指核酸酶(ZFN)標靶位點。發展許多ZFP設計且進行測試以鑑別在最高效率位準下與32個如上文所描述在大豆中鑑別及選擇之不同代表性基因座標靶位點結合的指。在最高效率位準下與鋅指識別序列結合之特定ZFP識別螺旋(表7)用於大豆基因組內供體序列之靶向及整合。
將大豆代表性基因座鋅指設計併入編碼具有至少一個具有CCHC結構之指之蛋白質的鋅指表現載體中。參見美國專利公開案第2008/0182332號。特定言之,每種蛋白質中之剛剛所述指具有用於識別螺旋之CCHC主鏈。非典型鋅指編碼序列經由針對大豆最佳化之四胺基酸ZC連接子及opaque
-2核定位信號融合至IIS型限制酶Fok
I之核酸酶結構域(Wah等人,(1998)Proc.Natl.Acad.Sci.USA 95:10564-10569序列之胺基酸384-579),以形成鋅指核酸酶(ZFN)。參見美國專利第7,888,121號。選擇各種功能性結構域之鋅指用於活體內使用。在設計、產生及測試以結合於假定基因組標靶位點之許多ZFN中,以上表8中描述之ZFN被鑑別為具有活體內活性且表徵為能夠有效結合植物中獨特大豆基因組聚核苷酸標靶位點且使其斷裂。
ZFN構築體組裝
使用此項技術中通常已知之技能及技術(參見例如Ausubel或Maniatis)設計及完成含有ZFN基因表現構築體之質體載體。每個ZFN編碼序列融合至編碼opaque
-2核定位
信號之序列(Maddaloni等人,(1989)Nuc.Acids Res.17:7532),該序列位於鋅指核酸酶之上游。非典型鋅指編碼序列融合至IIS型限制酶FokI之核酸酶結構域(Wah等人(1998)Proc.Natl.Acad.Sci.USA 95:10564-10569之序列之胺基酸384-579)。融合蛋白之表現由來自木薯脈花葉病毒之強組成性啟動子驅動。表現卡匣亦包括來自根癌土壤桿菌ORF23之3'UTR。在選殖至構築體中之兩個鋅指核酸酶融合蛋白之間添加來自明脈扁刺蛾β四體病毒(Thosea asigna virus)之編碼核苷酸序列的自我水解2A(Szymczak等人,(2004)Nat Biotechnol.22:760-760)。
使用IN-FUSIONTM
Advantage Technology(Clontech,View,CA)組裝質體載體。自New England BioLabs(Ipswich,MA)獲得限制核酸內切酶且T4 DNA接合酶(Invitrogen,Carlsbad,CA)用於DNA接合。按照供應商說明書,使用NUCLEOSPIN® Plasmid Kit(Macherey-Nagel Inc.,Bethlehem,PA)或Plasmid Midi Kit(Qiagen)進行質體製備。在瓊脂糖三乙酸鹽凝膠電泳之後使用QIAQUICK GEL EXTRACTIONKITTM
(Qiagen)分離DNA片段。最初藉由小規模製備DNA之限制消化篩選所有接合反應純系。藉由商業測序供應商(Eurofins MWG Operon,Huntsville,AL)對所選純系之質體DNA測序。使用SEQUENCHERTM
軟體(Gene Codes Corp.,Ann Arbor,MI)組裝及分析序列資料。經由限制酶消化及經由DNA測序構築及確定質體。
經由自動工作流進行鋅指選殖
經由自動DNA構築管道選殖一小類鋅指核酸酶載體。總體而言,自動管道產生具有與先前所述一致之ZFN架構的載體構築。賦予ZFN之DNA結合特異性的每個鋅指單體在KPF胺基酸基元分成2-3個獨特序列。ZFN片段之5'與3'末端均藉由包括BsaI識別位點(GGTCTCN)及衍生之突出物修飾。突出物分佈使得6-8部分組裝將僅僅產生所希望之全長表現純系。經修飾之DNA片段重新合成(Synthetic Genomics Incorporated,La Jolla,CA)。單一雙子葉植物主鏈pDAB118796用於所有大豆ZFN構建體中。其含有木薯花葉病毒啟動子及Opaque2 NLS以及FokI結構域及來自根癌土壤桿菌之Orf23 3'UTR。選殖在Opaque 2 NLS與FokI結構域之間的為來自枯草桿菌(Bacillus subtilis)之BsaI側接之SacB基因。當假定接合事件塗鋪於含有蔗糖之培養基上時,SacB卡匣充當陰性選擇劑,減少或消除載體主鏈污染。在所有構建體中重複利用之第二部分為pDAB117443。此載體含有均由BsaI位點側接之第一單體Fok1結構域、T2A反向螺旋序列及第2單體Opaque2 NLS。
使用此等材料作為ZFN DNA部分庫,Freedom Evo 150®(TECAN,Mannedorf,Switzerland)操縱75-100ng每一DNA質體之或自2D bar編碼管合成之片段添加至PCR板(ThermoFisher,Waltham,MA)。將補充有牛血清白蛋白(NEB,Ipswich,MA)及T4 DNA接合酶緩衝液(NEB,Ipswich,MA)之BsaI(NEB,Ipswich,MA)及T4 DNA接合酶(NEB,Ipswich,MA)增加至反應物中。反應物在C1000 Touch
Thermo Cycler®(BioRad,Hercules CA)中循環(25次),其中在37℃下培育3分鐘且在16℃下培育4分鐘。手動或使用Qpix460群落挑選機及LabChip GX®(Perkin Elmer,Waltham,MA)將接合材料轉型於Top10 cells®(Life Technologies Carlsbad,CA)中且篩選。恰當消化之群落為確定提供用於植物轉型之序列。
通用供體構築體組裝
為支持大多數標靶基因座之快速測試,設計及構築一種新穎的靈活通用之供體系統序列。該通用供體聚核苷酸序列與高通量載體構築方法及分析相容。通用供體系統由至少三個模組化結構域構成:可變ZFN結合結構域、非可變分析及使用者定義特徵之結構域以及用於載體按比例增加之簡單質體主鏈。非可變通用供體聚核苷酸序列為所有供體所共用,且允許設計一組有限的分析,該等分析可跨越所有大豆標靶位點使用,因而提供靶向評估之一致性且減少分析循環次數。此等結構域之模組化性質允許高通量供體組裝。另外,通用供體聚核苷酸序列具有旨在簡化下游分析及加強結果解釋之其他獨特特徵。其含有允許PCR產物消化成診斷上所預測之大小的不對稱限制位點序列。移除預期在PCR擴增中有問題的包含二級結構之序列。通用供體聚核苷酸序列的尺寸小(低於3.0Kb)。最終,通用供體聚核苷酸序列構建在高複本pUC19主鏈上,允許大量測試DNA以及時方式積聚。
作為一個實施例,包含通用供體聚核苷酸序列之
示例質體提供為pDAB124280(SEQ ID NO:7561及圖7)。在另一個實施例中,通用供體聚核苷酸序列提供為:pDAB124281,SEQ ID NO:7562,圖8;pDAB121278,SEQ ID NO:7563,圖9;pDAB123812,SEQ ID NO:7564,圖10;pDAB121937,SEQ ID NO:7565,圖11;pDAB123811,SEQ ID NO:7566,圖12;及pDAB124864,SEQ ID NO:7567,圖13。在另一實施例中,可構築包含具有功能表現編碼序列或非功能性(無啟動子)表現編碼序列之通用供體聚核苷酸序列的額外序列(表11)。
通用供體聚核苷酸序列為作為質體傳遞之小2-3Kb模組化供體系統。此為最小供體,包含1、2、3、4、5、6、7、8、9或更多個ZFN結合位點、稱為「DNA X」或「UZI序列」(SEQ ID NO:7568)之攜有限制位點及用於引物設計或編碼序列之DNA序列的短100-150bp模板區域以及簡單質體主鏈(圖4)。在適當ZFN結合位點DNA雙股斷裂後,整個質體經由NHEJ插入;可串聯併入ZFN結合位點。通用供體聚核苷酸序列之此實施例最適合於快速篩選標靶位點及
ZFN,且難以擴增之序列在供體中減至最少。亦已產生無「UZI」序列但攜有一或多個ZFN位點之通用供體。
在另一實施例中,通用供體聚核苷酸序列由至少4個模組組成且攜有ZFN結合位點、同源性臂、具有僅約100bp分析片或編碼序列之DNA X。通用供體聚核苷酸序列之此實施例適合於用若干ZFN詢問在多種標靶位點HDR介導之基因插入(圖5)。
在兩種靶向供體插入模式(NHEJ/HDR)下,通用供體聚核苷酸序列可用於具有界定DNA結合結構域之所有靶向分子。因而,當通用供體聚核苷酸序列與適當ZFN表現構築體共同傳遞時,供體載體及大豆基因組在由特定ZFN結合所指定之一個特定位置切割。一旦線性化,供體可藉由NHEJ或HDR併入基因組中。接著載體設計中之不同分析考慮因素可用以確定最大化靶向整合之有效傳遞的鋅指。
實例4:大豆轉型程序
在傳遞至黃豆栽培品種Maverick原生質體前,按照供應商之說明書,使用PURE YIELD PLASMID MAXIPREP SYSTEM®(Promega Corporation,Madison,WI)或PLASMID MAXI KIT®(Qiagen,Valencia,CA),自大腸桿菌培養物製備每一ZFN構築體之質體DNA。
原生質體分離
自來源於自葉外植體產生之愈傷組織的Maverick懸浮培養物分離原生質體。每7天,懸浮液在含有
3%(w/v)蔗糖、0.5mg/L 2,4-D及7g細菌瓊脂粉pH 5.7之新製LS培養基(Linsmaier及Skoog 1965)中繼代培養。為分離,繼代培養7天後,將三十毫升Maverick懸浮培養物轉移至50ml錐形管中且在200g下離心3分鐘,得到每管約10ml沈降細胞體積(SCV)。移除上清液,且針對每4 SCV之懸浮細胞,添加二十毫升含酶溶液(0.3%果膠酶(320952;MP Biomedicals)、3%纖維素酶(「Onozuka」R10TM
;Yakult Pharmaceuticals,Japan)之MMG溶液(4mM MES、0.6M甘露醇、15mM MgCl2
,pH 6.0),且用ParafilmTM
包裹管。將管置放在平台搖椅上隔夜(約16-18小時)且用顯微鏡觀測消化細胞之等分試樣以確保單元壁足夠被消化。
原生質體純化
繼代培養7天後三十毫升大豆栽培品種Maverick懸浮培養物轉移至50ml錐形離心管中,且在200g下離心3分鐘,得到每管約10ml沈降細胞體積(SCV)。在不干擾細胞小球下移除上清液。針對每4 SCV之懸浮細胞,添加二十毫升含酶溶液(0.3%果膠酶(320952;MP Biomedicals)、3%纖維素酶(「Onozuka」R10TM
;Yakult Pharmaceuticals,Japan)之MMG溶液(4mM MES、0.6M甘露醇、15mM MgCl2
,pH 6.0),且用ParafilmTM
包裹管。管置放在平台搖椅上隔夜(約16-18小時)。次日早晨,用顯微鏡觀測消化細胞之以確保細胞壁足夠被消化。
原生質體純化
經由100μM細胞過濾器緩慢過濾細胞/酶溶液。
細胞過濾器用10ml W5+培養基(1.82mM MES、192mM NaCl、154mM CaCl2
、4.7mM KCl,pH 6.0)沖洗。使用70μM篩網重複過濾步驟。藉由添加10ml W5+培養基使最終體積達至40ml。藉由倒置管使細胞混合。藉由添加緩衝溶液至含有細胞之50ml錐形離心管底部,將原生質體緩慢分層至8ml蔗糖襯墊溶液(500蔗糖、1mM CaCl2
、5mM MES-KOH,pH 6.0)上。管在浮桶式轉頭中在350 x g下離心15分鐘。5ml移液管尖端用於緩慢移除原生質體條帶(約7-8ml)。隨後將原生質體轉移至50ml錐形管中且添加25ml W5+洗滌液。管緩慢倒置且在200g下離心10分鐘。移除上清液,添加10ml MMG溶液且管緩慢倒置以再懸浮原生質體。使用血球計或流式細胞儀測定原生質體密度。通常,4PCV細胞懸浮液產生約2百萬原生質體。
使用PEG轉型原生質體
原生質體濃度用MMG調整至每毫升160萬。300μl之原生質體等分試樣(約500,000個原生質體)轉移至2ml無菌管中。原生質體懸浮液在原生質體轉移至管期間定期混合。根據實驗設計將質體DNA添加至原生質體等分試樣中。含有原生質體管之托架緩慢倒置3次,每次1分鐘,以混合DNA與原生質體。原生質體在室溫下培育5分鐘。三百微升聚乙二醇(PEG 4000)溶液(40%乙二醇(81240-Sigma Aldrich)、0.3M甘露醇、0.4M CaCl2
)添加至原生質體中且管之托架混合1分鐘且培育5分鐘,在培育期間輕輕倒置兩次。一毫升W5+緩慢添加至管中且管之托架倒置15-20次。
隨後管在350g下離心5分鐘,且在不干擾小球下移除上清液。一毫升WI培養基(4mM MES、0.6M甘露醇、20mM KCl,pH 6.0)添加至每個管中且托架輕輕倒置以使小球再懸浮。托架用鋁箔覆蓋且放在其邊緣上以在23℃下培育隔夜。
量測轉型頻率及捕獲原生質體
使用Quanta FlowCytometerTM
(Beckman-Coulter Inc)量測原生質體之定量及轉型效率。轉型約16-18小時後,自每個複製品取樣100μl,置放於96孔盤中且用WI溶液1:1稀釋。使複製品再懸浮3次,且使用流動式細胞測量術定量100μl。在提交樣品用於分析之前,樣品在200g下離心5分鐘,移除上清液且樣品在液氮中速凍。隨後樣品置放於-80℃冷凍機中直至加工用於分子分析。
ZFN及供體之轉型
對於表5之每個所選基因座,大豆原生質體用包含綠色螢光蛋白(gfp
)基因表現對照、單獨ZFN、單獨供體及ZFN與供體DNA 1:10比率(按重量計)之混合物轉染。用於轉染50萬原生質體之DNA總量為80μg。所有處理均在3個複製品中進行。所用之gfp
基因表現對照為pDAB7221(圖14,SEQ ID NO:7569),其含有木薯脈花葉病毒啟動子-綠色螢光蛋白質編碼序列-根癌土壤桿菌ORF243'UTR基因表現卡匣。為提供每個轉染一致量的總DNA,需要時,鮭魚精或含有gfp
基因之質體用作填充劑。在一個典型靶向實驗中,單獨或具有36μg供體質體之4μg ZFN經轉染且添加適當量之鮭魚精或pUC19質體DNA以使DNA之整體量達至80
μg之最終量。包括gfp
基因表現質體作為填充劑允許跨越多個基因座及複製處理評估轉染品質。
實例5:經由鋅指核酸酶使大豆中之基因座裂解
精選基因座之靶向藉由ZFN誘發之DNA裂解及供體插入,使用基於原生質體之快速靶向系統(RTA)來證實。對於每個大豆精選基因座,產生高達六個ZFN設計且單獨或在通用供體聚核苷酸下轉型至原生質體中,且分別使用下一代測序(NGS)或接合(進退)量測PCRZFN介導之裂解及插入。
在轉染後24小時,藉由在2ml EPPENDORFTM
管中在1600rpm下離心來收穫ZFN轉染之大豆栽培品種Hi-II原生質體,且完全移除上清液。使用QIAGEN PLANT DNA EXTRACTION KITTM
(Qiagen,Valencia,CA)自原生質體離心塊提取基因組DNA。所分離之DNA再懸浮於50μL水中且藉由NANODROP®
(Invitrogen,Grand Island,NY)測定濃度。藉由樣品在0.8%瓊脂糖凝膠電泳上跑動,評估DNA之完整性。所有樣品均正規化(20-25ng/μL)用於PCR擴增,以產生用於測序之擴增子(Illumina,Inc.,SanDiego,CA)。設計用於自經處理及對照樣品擴增涵蓋每一測試ZFN識別序列之區域的bar編碼之PCR引子且購自IDT(Coralville,IA,HPLC純化)。最佳擴增條件藉由梯度PCR,使用0.2μM適當bar編碼之引子、ACCUPRIME PFXSUPERMIXTM
(Invitrogen,Carlsbad,CA)及100ng模板基因組DNA,在23.5μL反應物中鑑別。循環參數為在95℃下初始變性(5分鐘),
接著35個變性循環(95℃,15秒)、退火(55-72℃,30秒)、延伸(68℃,1分鐘)及最終延伸(68℃,7分鐘)。在3.5% TAE瓊脂糖凝膠上分析擴增產物且確定每一引物組合之適當退火溫度,且如上文所描述,用於擴增來自對照及ZFN處理之樣品的擴增子。所有擴增子在3.5%瓊脂糖凝膠上純化,於水中溶離且藉由NANODROPTM
確定濃度。對於下一代測序,將來自ZFN處理及對應未處理大豆原生質體對照之100ng PCR擴增子彙集在一起且使用llumina下一代測序(NGS)測序。
分析適當ZFN在每一大豆最適基因座之裂解活性。涵蓋ZFN裂解位點之短擴增子自基因組DNA擴增且自ZFN處理及對照原生質體進行Illumina NGS。藉由細胞NHEJ修復路徑,藉由核苷酸在裂解位點之插入或缺失(插入缺失),解析ZFN誘發之裂解或DNA雙股斷裂,因而插入缺失在裂解位點之存在為ZFN活性之量度且藉由NGS測定。使用NGS分析軟體(專利公開案2012-0173,153,DNA序列資料分析)評估標靶特異性ZFN之裂解活性為每1百萬高品質序列具有插入缺失之序列數目。針對大豆所選基因座標靶,觀測到活性,且藉由展示每一ZFN裂解位點之插入缺失不同佔據面積的序列比對進一步確定。此資料表明大豆所選基因座經受ZFN裂解。在每一標靶之不同活性反映其染色質狀態及裂解能力以及每一ZFN之表現效率。
實例6:聚核苷酸供體整合之快速靶向分析
使用基於半通量原生質體之快速測試分析方
法,驗證大豆所選基因座標靶內通用供體聚核苷酸序列經由非同源末端接合(NHEJ)介導之供體插入的靶向。對於每一大豆所選基因座標靶,測試約3-6個ZFN設計且藉由下一代測序方法量測ZFN介導之裂解及藉由接合進退PCR量測供體插入來評估靶向(圖6)。在兩個分析中為陽性之大豆所選基因座被鑑別為可靶向基因座。
ZFN供體插入快速測試分析
為確定大豆所選基因座標靶是否可靶向用於供體插入,ZFN構築體及通用供體聚核苷酸構築體共同傳遞至大豆原生質體,其培育24小時,接著提取基因組DNA用於分析。若表現之ZFN能夠在大豆所選基因座標靶及供體中切割標靶結合位點,則線性化供體將隨後經由非同源末端接合(NHEJ)路徑插入大豆基因組中裂解之標靶位點中。基於「進退」PCR策略,證實大豆所選基因座標靶之靶向整合,其中「進」引子識別原生最適基因座上之序列且「退」引子結合於供體DNA內之序列。引子以僅僅當供體DNA插入大豆所選基因座標靶時,PCR分析將產生具有預期大小之擴增產物的方式設計。在插入接面之5'及3'末端進行進退PCR分析。用於分析整合之聚核苷酸供體序列的引子提供於表9中。
使用巢式「進退」PCR之標靶基因座上ZFN供體插入
使用TAKARA EX TAQHSTM
套組(Clonetech,Mountain View,CA)進行所有PCR擴增。第一進退PCR在含有1X TAKARA EX TAQ HSTM
緩衝液、0.2mM dNTPs、0.2μM
「退」引子、0.05μM「進」引子(自上述通用供體卡匣設計)、0.75單元TAKARA EX TAQ HSTM
聚合酶及6ng提取之大豆原生質體DNA的25μL最終反應體積中進行。隨後使用PCR程式完成反應,該PCR程式由94℃3分鐘、14個98℃12秒、60℃30秒及72℃1分鐘、接著72℃10分鐘之循環及保持在4℃下組成。最終PCR產物與1KB PLUS DNA LADDERTM
(Life Technologies,Grand Island,NY)一起在瓊脂糖凝膠上跑動以進行觀測。
巢式進退PCR在含有1X TAKARA EX TAQ HSTM
緩衝液、0.2mM dNTPs、0.2μM「退」引子(表9)、0.1μM「進」引子(自上述通用供體卡匣設計,表10)、0.75單元之TAKARA EX TAQ HSTM
聚合酶及1μL第一PCR產物的25μL最終反應體積中進行。隨後使用PCR程式進行反應,該PCR程式由94℃3分鐘、30個98℃12秒、60℃30秒及72℃45秒、接著72℃10分鐘之循環及保持在4℃下組成。最終PCR產物與1KB PLUS DNA LADDERTM
(Life Technologies,Grand Island,NY)一起在瓊脂糖凝膠上跑動以進行觀測。
在原生質體靶向系統中採用進退PCR分析特別
具挑戰性,因為大量質體DNA用於轉染,且大量DNA仍然在原生質體靶向系統中,且隨後與細胞基因組DNA一起提取。殘餘質體DNA可稀釋相對濃度之基因組DNA且減小偵測之整體靈敏度,且亦可為非特異性之異常PCR反應之顯著原因。ZFN誘發之基於NHEJ之供體插入通常以前向或反向取向進行。用於前向取向插入之DNA的進退PCR分析常展現假陽性條帶,可能歸因於標靶及供體中ZFN結合位點周圍之共享同源性區域,此可能引起擴增過程期間未整合供體DNA之引發及延伸。在探測反向取向插入產物之分析中未見到假陽性,且因此進行所有靶向供體整合分析以詢問RTA中之反向供體插入。為進一步增加特異性及減弱背景,亦採用巢式PCR策略。巢式PCR策略使用第二PCR擴增反應,該反應擴增第一PCR反應之第一擴增產物內的較短區域。使用不對稱量之「進」及「退」引子使接合PCR最佳化,進一步用於在所選基因座之快速靶向分析。
在瓊脂糖凝膠上目測進退PCR分析結果。對於表12之所有大豆所選基因座,「ZFN+供體處理」在5'及3'末端產生近乎預期大小之條帶。對照ZFN或單獨供體處理在PCR中為陰性的,表明該方法針對最適非基因大豆基因座中之至少32個基因座之標靶位點的供體整合特定評分。所有處理均在3-6個複製品中進行且多個複製品中預期PCR產物之存在(在兩個末端1)用於證實靶向。經由NHEJ插入供體常產生較低強度之副產物,其係因在標靶及/或供體ZFN位點加工線性化末端而產生。此外,觀測到不同ZFN進行靶向
整合之效率位準不同,其中一些ZFN產生一致高位準之供體整合,一些ZFN產生低於一致位準之供體整合,且其他ZFN無整合。總體而言,對於所測試之每一大豆所選基因座標靶,證實在大豆代表性基因座標靶內一或多個ZFN靶向整合,此證實此等基因座之每一者為可靶向的。此外,每個大豆所選基因座均適合於精確基因轉型。此等大豆所選基因座標靶重複驗證多次,結果類似,因而證實驗證過程之再現性,包括質體設計及構築、原生質體轉型、樣品加工、樣品分析。
結論
供體質體及設計成特異性裂解大豆所選基因座標靶之一個ZFN轉染至大豆原生質體中且24小時後收穫細胞。藉由進退接合PCR分析自對照、ZFN處理及ZFN與供體處理之原生質體分離的基因組DNA展示作為ZFN裂解基因組DNA之結果,通用供體聚核苷酸靶向插入(表12)。此等研究展示通用供體聚核苷酸系統可用於評估在內源性位點靶向及篩選候選ZFN。最終,基於原生質體之快速靶向分析及新穎通用供體聚核苷酸序列系統提供一種快速篩選基因組標靶及ZFN用於植物中精確基因組工程改造之方法。該等方法可延伸以使用任何引入DNA雙或單股斷裂之核酸酶評估任何相關系統中基因組標靶之位點特異性裂解及供體插入。
藉由以上詳述之各種標準鑑別超過7,018個所選基因座。使用主分量分析,基於用於界定所選基因座之十
個參數將所選基因座叢集。除一些其他感興趣的基因座之外,亦證實代表性叢集為可靶向的。
實例7:轉殖基因整合之最適非基因大豆基因座
自7,018個最適非基因大豆基因座鑑別出一批最適非基因大豆基因座以選擇多個基因座用於基因表現卡匣之位點特異性靶向及產生基因表現卡匣之堆疊。所得一組三個最適非基因大豆基因座在本文中稱為「兆基因座」。以下標準用於過濾該池最適非基因大豆基因座且選擇一批最適非基因大豆基因座:1)至少3個最適非基因大豆基因座位於同一染色體上,彼此接近(中心最適非基因大豆基因座之500Kb內);2)超過2Kb長且在彼此50Kb內之最適非基因大豆基
因座;以及3)中心/中部最適非基因大豆基因座超過4Kb長。
應用每一上述標準以選擇一批最適非基因大豆基因座。所鑑別之最適非基因大豆基因座展示在表13中。
亦選擇超過2Kb且在經由隨機整合T股插入物(例如AAD-12事件416:位於大豆染色體位置Gm04:46002956..46005750,如國際專利申請案第WO2011066384A1號中所描述)所產生的已知轉殖基因基因組事件之500Kb內的兩個額外最適非基因大豆基因座以用於靶向基因堆疊。所選最適非基因大豆基因座展示在表14中。
自7,018個最適非基因大豆基因座鑑別出三個一
批最適非基因大豆基因座以選擇一批基因座用於基因表現卡匣之位點特異性靶向及產生基因表現卡匣之堆疊。以下標準用於過濾該池最適非基因大豆基因座且選擇一批最適非基因大豆基因座:1)鑑別超過3Kb長之最適非基因大豆基因座;2)根及芽組織中40Kb區域內鄰近基因之平均表現超過7.46,其為所有最適非基因大豆基因座之第47.7%百分位數;3)0.5-4之重組頻率,其低於所有最適非基因大豆基因座之平均值/中位值;4)GC含量超過25%。
應用每個上述標準以選擇一批最適非基因大豆基因座。所鑑別之最適非基因大豆基因座展示在表15中。針對與已知之大豆QTL的接近度篩選所有選擇之最適非基因大豆基因座。可依序靶向內源性序列上超過3Kb之基因座。
使用上述標準選擇之最適非基因大豆基因座藉由整合含有可選/可報導標記物之基因表現構築體來證實。此基因表現卡匣經由使用位點特異性核酸酶進行基因組靶向而穩定地整合至大豆植物。分析所產生且含有可表
現轉殖基因之靶向之最適非基因大豆基因座以鑑別含有全長整合基因表現卡匣之單一複本事件。經由qRT-PCR、西方墨點、ELISA、LC-MS MS及其他已知之RNA或蛋白質偵測方法對多代植物(例如T1
及T2
代)分析最適非基因大豆基因座之表現概況。此外,分析最適非基因大豆基因座內之轉殖基因表現卡匣整合對鄰近基因表現的影響。最終,分析最適非基因大豆基因座內之轉殖基因表現卡匣整合對大豆植物之農藝特性的影響。
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<223> 大豆_ogl_4526 Gm13:37650701..37652500
叢1
<400> 36
<210> 37
<211> 2100
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6200 Gm18:561901..56451700
叢1
<400> 37
<210> 38
<211> 2264
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6583 Gm19:44975737..44978000
叢1
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5173 Gm15:49307801..49310000
叢1
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_236 Gm01:49809370..49812645
叢1
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<210> 41
<211> 3100
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢1
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢1
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢1
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢1
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<212> DNA
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<220>
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<220>
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<212> DNA
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<220>
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叢1
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<212> DNA
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<220>
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叢1
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<220>
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叢1
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<212> DNA
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<220>
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叢1
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<212> DNA
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<220>
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叢1
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<212> DNA
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<220>
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<220>
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<220>
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<220>
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<212> DNA
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叢1
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4473 Gm13:36080901..36082852 叢1
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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<220>
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<220>
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叢1
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<220>
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<212> DNA
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<220>
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叢1
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<220>
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<212> DNA
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<212> DNA
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<212> DNA
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<220>
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叢1
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<212> DNA
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<220>
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叢1
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<212> DNA
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<220>
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叢1
<400> 109
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<212> DNA
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<220>
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<212> DNA
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<220>
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叢1
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<212> DNA
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<220>
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叢1
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<220>
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叢1
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<220>
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叢1
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叢1
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<213> 黃豆
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叢1
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叢1
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<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5974 Gm18:7113901..7116551
叢1
<400> 119
<210> 120
<211> 2378
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6304 Gm19:349524..351901
叢1
<400> 120
<210> 121
<211> 1753
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6447 Gm19:39201741..39203493
叢1
<400> 121
<210> 122
<211> 1500
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6764 Gm20:35055901..35057400
叢1
<400> 122
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6769 Gm20:35201701..35203500
叢1
<400> 123
<210> 124
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6864 Gm20:39379135..39381200
叢1
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<211> 2200
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1098 Gm03:45486701..45488900
叢1
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢1
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2469 Gm08:2578569..2580700
叢1
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3630 Gm10:48710889..48713401
叢1
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<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_825 Gm03:3529801..3531600
叢1
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢1
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢1
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢1
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_345 Gm02:3300001..3303486 叢1
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢1
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢1
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢1
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢1
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢1
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢1
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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<212> DNA
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<220>
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叢1
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢1
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<212> DNA
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<220>
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<220>
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叢1
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<212> DNA
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<220>
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叢1
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<212> DNA
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<220>
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<220>
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<220>
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<220>
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<212> DNA
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<220>
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<212> DNA
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<220>
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<212> DNA
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<220>
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<212> DNA
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<220>
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<212> DNA
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<220>
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<220>
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<220>
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<220>
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<220>
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<220>
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<220>
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叢1
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叢1
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<212> DNA
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<212> DNA
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叢1
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<212> DNA
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<212> DNA
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<212> DNA
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叢1
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叢1
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<212> DNA
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<220>
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叢1
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<212> DNA
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叢1
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<212> DNA
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<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1769 Gm06:2797255..2799300
叢1
<400> 201
<210> 202
<211> 1389
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3220 Gm09:40193601..40194989
叢1
<400> 202
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<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3476 Gm10:40570501..40571856
叢1
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<213> 黃豆
<220>
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叢1
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢1
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<220>
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叢1
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叢1
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<220>
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叢1
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<220>
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<220>
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叢1
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<212> DNA
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<220>
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叢1
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<220>
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<220>
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<220>
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<220>
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叢1
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<220>
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叢1
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<220>
<223> 大豆_ogl_295 Gm01:52487141..52488400
叢1
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<213> 黃豆
<220>
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叢1
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<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2156 Gm07:3253301..3255000
叢1
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<213> 黃豆
<220>
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叢1
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<213> 黃豆
<220>
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<213> 黃豆
<220>
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<220>
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<220>
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叢1
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<220>
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6990 Gm20:44600101..44601800
叢1
<400> 365
<210> 366
<211> 1875
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1474 Gm04:47670343..47672217
叢1
<400> 366
<210> 367
<211> 1309
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2124 Gm07:2130287..2131595
叢1
<400> 367
<210> 368
<211> 1377
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2160 Gm07:3366801..3368177
叢1
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<211> 1400
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6199 Gm18:56439201..56440600
叢1
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6205 Gm18:56681282..56682573
叢1
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6622 Gm19:49311501..49313200
叢1
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢1
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢1
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<220>
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<220>
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叢1
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<220>
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叢1
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<212> DNA
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<220>
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叢1
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<220>
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叢1
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢1
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<212> DNA
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<220>
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叢1
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢1
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢1
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<212> DNA
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<220>
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<212> DNA
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<220>
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叢1
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<212> DNA
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<220>
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢1
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢1
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢1
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<212> DNA
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<220>
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<212> DNA
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<212> DNA
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<220>
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<220>
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<220>
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叢1
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<220>
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叢1
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<212> DNA
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<220>
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<212> DNA
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<220>
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<220>
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<220>
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<212> DNA
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<220>
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<220>
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<220>
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叢1
<400> 445
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<223> 大豆_ogl_667 Gm02:45072702..45074790
叢1
<400> 446
<210> 447
<211> 2150
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_832 Gm03:3652151..3654300
叢1
<400> 447
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2483 Gm08:3220801..3222310
叢1
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<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3910 Gm11:35838401..35840400
叢1
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<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5484 Gm17:3557201..3558600
叢1
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_922 Gm03:37249001..37250510
叢1
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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<220>
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<220>
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叢1
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<220>
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<220>
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<220>
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<220>
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叢1
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<220>
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叢1
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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<220>
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<220>
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<220>
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<220>
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叢1
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<220>
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<220>
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<220>
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<220>
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<220>
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<220>
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叢1
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<212> DNA
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<220>
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<220>
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<212> DNA
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<220>
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<220>
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<220>
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<220>
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<220>
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<212> DNA
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<220>
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<212> DNA
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<220>
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<220>
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<220>
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<220>
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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<220>
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叢2
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢2
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<212> DNA
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<220>
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叢2
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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<220>
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<220>
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<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6944 Gm20:43169666..43171100
叢2
<400> 528
<210> 529
<211> 2496
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1251 Gm04:6247501..6249996
叢2
<400> 529
<210> 530
<211> 1943
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2265 Gm07:7918758..7920700
叢2
<400> 530
<210> 531
<211> 2392
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2286 Gm07:8239201..8241592
叢2
<400> 531
<210> 532
<211> 2420
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2406 Gm07:38058581..38061000
叢2
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<210> 533
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_11 Gm08:11678701..11681600
叢2
<400> 533
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3214 Gm09:40024801..40026900
叢2
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3311 Gm10:1972120..1974000
叢2
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4424 Gm13:33454896..33458600
叢2
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4700 Gm14:5919901..5921074
叢2
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5215 Gm16:795585..798900
叢2
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<210> 539
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢2
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢2
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<211> 1200
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢2
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6522 Gm19:42842389..42844900
叢2
<400> 542
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢2
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢2
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢2
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢2
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢2
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<213> 黃豆
<220>
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叢2
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢2
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<212> DNA
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<220>
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叢2
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢2
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢2
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<212> DNA
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<220>
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叢2
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<212> DNA
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<220>
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叢2
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<212> DNA
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<220>
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叢2
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<220>
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<220>
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<220>
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叢2
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢2
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<212> DNA
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<220>
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叢2
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<212> DNA
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<220>
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<212> DNA
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<220>
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叢2
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢2
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢2
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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<212> DNA
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<220>
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叢2
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<212> DNA
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<220>
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叢2
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<212> DNA
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<220>
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<220>
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<220>
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叢2
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<220>
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<220>
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<220>
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<220>
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<220>
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<220>
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<220>
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叢2
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<220>
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<220>
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<212> DNA
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<220>
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<220>
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<212> DNA
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<220>
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<220>
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<220>
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<220>
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<220>
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<220>
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叢2
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<220>
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<212> DNA
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叢2
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<212> DNA
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<220>
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叢2
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<212> DNA
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<220>
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叢2
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<212> DNA
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<220>
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叢2
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<212> DNA
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<220>
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叢2
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2667 Gm08:13741501..13743200
叢2
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1761 Gm06:1295723..1296900
叢2
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<212> DNA
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<220>
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叢2
<400> 600
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<212> DNA
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<220>
<223> 大豆_ogl_32 Gm10:42951623..42952800
叢2
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<211> 2000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4632 Gm14:3900701..3902700
叢2
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<212> DNA
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<220>
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叢2
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叢2
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<212> DNA
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<220>
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叢2
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<212> DNA
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<220>
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<212> DNA
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<220>
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叢2
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<220>
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<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3503 Gm10:42793601..42794800
叢2
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<211> 1595
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3509 Gm10:430718..43075700
叢2
<400> 611
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<211> 2000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5925 Gm18:4429301..4431300
叢2
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<213> 黃豆
<220>
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叢2
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<213> 黃豆
<220>
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叢2
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢2
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叢2
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叢2
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<220>
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<220>
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<212> DNA
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<220>
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<220>
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叢2
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<220>
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叢2
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<212> DNA
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<220>
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<220>
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叢2
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叢2
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<212> DNA
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<220>
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叢2
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<220>
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叢2
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<220>
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叢2
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<220>
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叢2
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<220>
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叢2
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2294 Gm07:8535801..8537800
叢2
<400> 683
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4517 Gm13:37400901..37403101
叢2
<400> 684
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1833 Gm06:7503001..7504400
叢2
<400> 685
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<211> 1802
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3021 Gm09:5805199..5807000
叢2
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<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4433 Gm13:33646601..33648600
叢2
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<220>
<223> 大豆_ogl_5014 Gm15:12468701..12470942
叢2
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<220>
<223> 大豆_ogl_688 Gm02:46131801..46133430
叢2
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<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1389 Gm04:441101..44262931
叢2
<400> 690
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<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1404 Gm04:44812034..44813200
叢2
<400> 691
<210> 692
<211> 1126
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2269 Gm07:7944501..7945626
叢2
<400> 692
<210> 693
<211> 1137
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6440 Gm19:38813764..38814900
叢2
<400> 693
<210> 694
<211> 1500
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6515 Gm19:42461801..42463300
叢2
<400> 694
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<211> 2191
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6894 Gm20:40676001..40678191
叢2
<400> 695
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<211> 2126
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3350 Gm10:3342075..3344200
叢2
<400> 696
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<211> 2500
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4531 Gm13:37913801..37916300
叢2
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6437 Gm19:38789467..38791600
叢2
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6956 Gm20:43531301..43533600
叢2
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<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_342 Gm02:3169901..3171074
叢2
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_373 Gm02:4309101..4310575
叢2
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2120 Gm07:1810701..1812282
叢2
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢2
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2939 Gm09:1766423..1768697
叢2
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢2
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢2
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢2
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢2
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<213> 黃豆
<220>
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叢2
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢2
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4914 Gm15:8405501..8406800
叢2
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢2
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢2
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<220>
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叢2
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢2
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<220>
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叢2
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<213> 黃豆
<220>
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<220>
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叢2
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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<220>
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叢2
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<212> DNA
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<220>
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叢2
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<212> DNA
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<220>
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢2
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<212> DNA
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<220>
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叢2
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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<220>
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叢2
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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<220>
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叢2
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<212> DNA
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<220>
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<220>
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<220>
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<220>
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<220>
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<220>
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叢2
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<210> ..739
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<220>
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叢2
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<220>
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叢2
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<212> DNA
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<220>
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叢2
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<220>
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叢2
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<220>
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<220>
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<220>
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叢2
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<212> DNA
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<220>
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叢2
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<220>
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<220>
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<212> DNA
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<220>
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<220>
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<212> DNA
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<220>
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<220>
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<212> DNA
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<220>
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<212> DNA
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<220>
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叢3
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<212> DNA
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<220>
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叢3
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<212> DNA
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<220>
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叢3
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢3
<400> 760
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢3
<400> 761
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<211> 2047
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢3
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<213> 黃豆
<220>
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叢3
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<213> 黃豆
<220>
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叢3
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_900 Gm03:36357954..36359500
叢3
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<211> 2000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1957 Gm06:15130201..15132200
叢3
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<220>
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<220>
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叢3
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_499 Gm02:11682801..11684500
叢3
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<220>
<223> 大豆_ogl_811 Gm03:2379501..2381700
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<223> 大豆_ogl_2412 Gm07:381201..38152000
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2427 Gm07:38505111..382762
叢3
<400> 773
<210> 774
<211> 1991
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2596 Gm08:10593301..10595291
叢3
<400> 774
<210> 775
<211> 2850
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3131 Gm09:36580401..36583250
叢3
<400> 775
<210> 776
<211> 2043
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3138 Gm09:36694001..36696043
叢3
<400> 776
<210> 777
<211> 2297
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4215 Gm13:23165036..23167332
叢3
<400> 777
<210> 778
<211> 1200
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5679 Gm17:13890401..13891600
叢3
<400> 778
<210> 779
<211> 3467
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6092 Gm18:43731334..43734800
叢3
<400> 779
<210> 780
<211> 2199
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6138 Gm18:52562502..52564700
叢3
<400> 780
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<211> 1200
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6337 Gm19:2285601..2286800
叢3
<400> 781
<210> 782
<211> 1463
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2425 Gm07:38489531..38490993
叢3
<400> 782
<210> 783
<211> 2458
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_59 Gm01:2617543..2620000
叢3
<400> 783
<210> 784
<211> 2100
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_418 Gm02:6494701..6496800
叢3
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<210> 785
<211> 2200
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_886 Gm03:35779801..35782000
叢3
<400> 785
<210> 786
<211> 2811
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1823 Gm06:7199890..7202700
叢3
<400> 786
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<211> 1800
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3370 Gm10:4870501..4872300
叢3
<400> 787
<210> 788
<211> 1714
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3383 Gm10:6111001..6112714
叢3
<400> 788
<210> 789
<211> 1600
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4220 Gm13:23387201..23388800
叢3
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<211> 1900
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5241 Gm16:1954101..1956000
叢3
<400> 790
<210> 791
<211> 2359
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢3
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5948 Gm18:5629601..5631100
叢3
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<211> 2035
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢3
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢3
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<211> 1900
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢3
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<211> 1503
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢3
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<211> 2535
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢3
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<211> 2300
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢3
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_500 Gm02:11709516..11711222
叢3
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<211> 2101
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_545 Gm02:14238800..14240900
叢3
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<211> 1400
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢3
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<211> 1200
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢3
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢3
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<212> DNA
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<220>
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叢3
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢3
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<211> 1400
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢3
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢3
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢3
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1620 Gm05:27259901..271141
叢3
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<211> 1400
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢3
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢3
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢3
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<212> DNA
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<220>
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叢3
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢3
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢3
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢3
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<212> DNA
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<220>
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叢3
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<212> DNA
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<220>
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<212> DNA
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<220>
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叢3
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<212> DNA
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<220>
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<212> DNA
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<220>
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叢3
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢3
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<212> DNA
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<220>
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叢3
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<212> DNA
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<220>
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<212> DNA
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<220>
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<212> DNA
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<220>
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叢3
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<212> DNA
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<220>
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<212> DNA
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<220>
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<220>
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<220>
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<220>
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<212> DNA
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<220>
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<212> DNA
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<220>
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叢3
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<212> DNA
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<220>
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叢3
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<212> DNA
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<220>
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<212> DNA
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<220>
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<212> DNA
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<220>
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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<212> DNA
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<220>
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<211> 2400
<212> DNA
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<220>
<223> 大豆_ogl_5646 Gm17:12089701..12092100
叢3
<400> 840
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<212> DNA
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<220>
<223> 大豆_ogl_5727 Gm17:35367901..35370200
叢3
<400> 841
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5735 Gm17:36701101..36702273
叢3
<400> 842
<210> 843
<211> 1400
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6053 Gm18:16560701..16562100
叢3
<400> 843
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6093 Gm18:43809301..43811204
叢3
<400> 844
<210> 845
<211> 1900
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6214 Gm18:56797301..56799200
叢3
<400> 845
<210> 846
<211> 1600
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6354 Gm19:2918801..2920400
叢3
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6673 Gm20:1309189..1311828
叢3
<400> 847
<210> 848
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6683 Gm20:1751101..1753400
叢3
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢3
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6717 Gm20:30991701..30993400
叢3
<400> 850
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_828 Gm03:3565101..3566742
叢3
<400> 851
<210> 852
<211> 2300
<212> DNA
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<220>
<223> 大豆_ogl_853 Gm03:5168101..5170400
叢3
<400> 852
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1822 Gm06:7197036..7198400
叢3
<400> 853
<210> 854
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2282 Gm07:8168401..8170100
叢3
<400> 854
<210> 855
<211> 2200
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3143 Gm09:36904601..36906800
叢3
<400> 855
<210> 856
<211> 1400
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3378 Gm10:5360401..5361800
叢3
<400> 856
<210> 857
<211> 1300
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4982 Gm15:11080001..11081300
叢3
<400> 857
<210> 858
<211> 2281
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5342 Gm16:7853801..7856081
叢3
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<210> 859
<211> 1538
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2185 Gm07:4465401..4466938
叢3
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<211> 1300
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5964 Gm18:6519001..29300
叢3
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<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1368 Gm04:43764101..43766400
叢3
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<220>
<223> 大豆_ogl_2500 Gm08:45311..4576324
叢3
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<220>
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叢3
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<213> 黃豆
<220>
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叢3
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<213> 黃豆
<220>
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<220>
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<220>
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叢3
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<220>
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叢3
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<220>
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叢3
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<220>
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叢3
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢3
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<213> 黃豆
<220>
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叢3
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<213> 黃豆
<220>
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叢3
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_167 Gm01:45137101..45138200
叢3
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢3
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<220>
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<220>
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叢3
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<213> 黃豆
<220>
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叢3
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<220>
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<213> 黃豆
<220>
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叢3
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<220>
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<220>
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<220>
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<220>
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叢3
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<220>
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<220>
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<213> 黃豆
<220>
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<220>
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<220>
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叢3
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<212> DNA
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<220>
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<220>
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<212> DNA
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<220>
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<220>
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<220>
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<220>
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<220>
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<220>
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<220>
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<220>
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叢3
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<220>
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<220>
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<212> DNA
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<220>
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<220>
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<220>
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<212> DNA
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<220>
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢3
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢3
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<212> DNA
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<220>
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5361 Gm16:29041301..29042800
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢3
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<220>
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叢3
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢3
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2377 Gm07:34828901..34830400
叢3
<400> 929
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2831 Gm08:40915201..40916586
叢3
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢3
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<212> DNA
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<220>
<223> 大豆_ogl_6048 Gm18:153689..15749900
叢3
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<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6370 Gm19:8675301..8676386
叢3
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<212> DNA
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<220>
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2314 Gm07:9746001..93100
叢3
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2716 Gm08:15824701..15826607
叢3
<400> 936
<210> 937
<211> 2200
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4364 Gm13:30555801..30558000
叢3
<400> 937
<210> 938
<211> 2792
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6145 Gm18:52862609..52865400
叢3
<400> 938
<210> 939
<211> 1400
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3135 Gm09:36653701..36655100
叢3
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<210> 940
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6113 Gm18:50172606..50175732
叢3
<400> 940
<210> 941
<211> 2021
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_474 Gm02:10392880..10394900
叢3
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<213> 黃豆
<220>
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叢3
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢3
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<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2736 Gm08:16933101..16935000
叢3
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢3
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢3
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<220>
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叢3
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<220>
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<220>
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叢3
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<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6336 Gm19:2281897..2283200
叢3
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢3
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<212> DNA
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<220>
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叢3
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢3
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<212> DNA
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<220>
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叢3
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<212> DNA
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<220>
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叢3
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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<212> DNA
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<220>
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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<212> DNA
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<220>
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<220>
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<212> DNA
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<220>
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<220>
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<220>
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<220>
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<220>
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<220>
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<220>
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<220>
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<212> DNA
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<220>
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<220>
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<220>
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<220>
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<220>
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<220>
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<220>
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<212> DNA
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<220>
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叢3
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<220>
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叢3
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<220>
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<220>
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<220>
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<220>
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<220>
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<212> DNA
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<212> DNA
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<220>
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<212> DNA
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<220>
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<220>
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<220>
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<220>
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<212> DNA
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<212> DNA
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<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6061 Gm18:182475..18507715
叢3
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<213> 黃豆
<220>
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叢3
<400> 1018
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<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2764 Gm08:19180594..19182300
叢3
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<213> 黃豆
<220>
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叢3
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<213> 黃豆
<220>
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叢3
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<213> 黃豆
<220>
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叢3
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<220>
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叢3
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<220>
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叢3
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叢3
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叢3
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叢3
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<220>
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叢4
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<220>
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叢4
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<212> DNA
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<220>
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叢4
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<220>
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叢4
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<220>
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<212> DNA
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<220>
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叢4
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<212> DNA
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<220>
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叢4
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<212> DNA
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<220>
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<213> 黃豆
<220>
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<220>
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叢4
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<220>
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叢4
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<220>
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叢4
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叢4
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<220>
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<212> DNA
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<220>
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叢4
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<220>
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<220>
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<220>
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叢4
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<212> DNA
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<220>
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<220>
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叢4
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<220>
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叢4
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叢4
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叢4
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叢4
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<220>
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叢4
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<212> DNA
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<220>
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<212> DNA
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<220>
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<212> DNA
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<220>
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叢4
<400> 1082
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<211> 2021
<212> DNA
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<220>
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叢4
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<212> DNA
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<220>
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叢4
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢4
<400> 1085
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<212> DNA
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<220>
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叢4
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<212> DNA
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<220>
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叢4
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<213> 黃豆
<220>
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叢4
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢4
<400> 1089
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢4
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢4
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叢4
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<212> DNA
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1466 Gm04:47332101..47333900
叢4
<400> 1097
<210> 1098
<211> 1100
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3045 Gm09:7754501..7755600
叢4
<400> 1098
<210> 1099
<211> 1398
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3233 Gm09:40477601..40478998
叢4
<400> 1099
<210> 1100
<211> 1500
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2613 Gm08:57601..59100
叢4
<400> 1100
<210> 1101
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2672 Gm08:14135301..14136880
叢4
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<211> 1100
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5857 Gm18:1063001..1064100
叢4
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢4
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<213> 黃豆
<220>
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叢4
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢4
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<213> 黃豆
<220>
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叢4
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<220>
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叢4
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<220>
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叢4
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<212> DNA
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<220>
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叢4
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<220>
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叢4
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢4
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢4
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<212> DNA
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<220>
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叢4
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<212> DNA
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<220>
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叢4
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<211> 2200
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢4
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢4
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢4
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢4
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<212> DNA
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<220>
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叢4
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢4
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢4
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<212> DNA
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<220>
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叢4
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<212> DNA
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<220>
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叢4
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<212> DNA
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<220>
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叢4
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<212> DNA
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<220>
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<220>
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叢4
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<220>
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叢4
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<220>
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叢4
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<220>
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叢4
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<212> DNA
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<220>
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<212> DNA
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<220>
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<212> DNA
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<220>
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叢4
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢4
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢4
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<212> DNA
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<220>
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<212> DNA
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<220>
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叢4
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<212> DNA
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<220>
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叢4
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<212> DNA
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<220>
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叢4
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<212> DNA
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<220>
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叢4
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<212> DNA
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<220>
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叢4
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<220>
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叢4
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<220>
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叢4
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<220>
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叢4
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<220>
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叢4
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<220>
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<220>
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<212> DNA
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<212> DNA
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<212> DNA
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<212> DNA
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<212> DNA
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<220>
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<212> DNA
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<220>
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<212> DNA
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<220>
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叢5
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢5
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6572 Gm19:44766301..44767500
叢5
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<211> 1100
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4114 Gm12:37245201..37246300
叢5
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<212> DNA
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叢5
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢5
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<212> DNA
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<220>
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<212> DNA
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<220>
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叢5
<400> 1176
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<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1566 Gm05:3067207..3068600
叢5
<400> 1177
<210> 1178
<211> 2010
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3602 Gm10:47321098..47323107
叢5
<400> 1178
<210> 1179
<211> 1500
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3994 Gm12:4495601..4497100
叢5
<400> 1179
<210> 1180
<211> 1397
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4618 Gm14:3586490..3587886
叢5
<400> 1180
<210> 1181
<211> 1500
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5947 Gm18:5554801..5556300
叢5
<400> 1181
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<211> 1822
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_803 Gm03:2010808..2012629
叢5
<400> 1182
<210> 1183
<211> 1545
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4150 Gm12:38422228..38423772
叢5
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢5
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5868 Gm18:1550201..1551615
叢5
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<213> 黃豆
<220>
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叢5
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<213> 黃豆
<220>
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叢5
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<213> 黃豆
<220>
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叢5
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<213> 黃豆
<220>
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叢5
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4407 Gm13:32297501..32299147
叢5
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢5
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢5
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<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3584 Gm10:46577901..46579500
叢5
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢5
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<211> 1284
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢5
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢5
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<220>
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叢5
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<220>
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叢5
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<220>
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叢5
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢5
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢5
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<220>
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叢5
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<220>
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叢5
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<220>
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叢5
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<220>
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叢5
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<220>
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叢5
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<220>
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<220>
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<220>
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<220>
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叢5
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<220>
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叢5
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<220>
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叢5
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<220>
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叢5
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<220>
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叢5
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<212> DNA
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<220>
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叢5
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<220>
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叢5
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<220>
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叢5
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<220>
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叢5
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<220>
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<220>
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叢5
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<212> DNA
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<220>
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叢5
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<212> DNA
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<220>
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<212> DNA
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<220>
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叢5
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<220>
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<212> DNA
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<220>
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叢5
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<220>
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叢5
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<220>
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叢5
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<220>
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<220>
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叢5
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<220>
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叢5
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<212> DNA
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<220>
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<212> DNA
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<220>
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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<220>
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叢5
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<220>
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3517 Gm10:43500501..43501700
叢5
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3631 Gm10:48714101..48716200
叢5
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<211> 1900
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢5
<400> 1250
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4930 Gm15:8921701..8923774
叢5
<400> 1251
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<212> DNA
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<220>
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<212> DNA
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<220>
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<220>
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叢5
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<220>
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叢5
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叢5
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叢5
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<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1241 Gm04:52796..5610300
叢5
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<210> 1339
<211> 1100
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2143 Gm07:3019401..3020500
叢5
<400> 1339
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢5
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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<213> 黃豆
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叢5
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<220>
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叢5
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叢5
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叢5
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叢5
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<220>
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叢5
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叢5
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叢5
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<220>
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叢5
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叢5
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<220>
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<220>
<223> 大豆_ogl_91 Gm01:3756901..3758200
叢5
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_775 Gm03:712601..714172
叢5
<400> 1419
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_792 Gm03:1603201..1604300
叢5
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<213> 黃豆
<220>
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叢5
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<213> 黃豆
<220>
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叢5
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<213> 黃豆
<220>
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叢5
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<220>
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叢5
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<220>
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<220>
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<220>
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<220>
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<220>
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叢5
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<220>
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<220>
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<220>
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叢5
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<220>
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<220>
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叢6
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叢6
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<220>
<223> 大豆_ogl_5235 Gm16:16158..1637900
叢6
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<213> 黃豆
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叢6
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<213> 黃豆
<220>
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叢6
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<213> 黃豆
<220>
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<213> 黃豆
<220>
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叢6
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叢6
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<223> 大豆_ogl_4172 Gm13:20532901..20534200
叢6
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<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_17 Gm01:1269858..1271194
叢6
<400> 1579
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1156 Gm04:1106177..1107641
叢6
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<213> 黃豆
<220>
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叢6
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<220>
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叢6
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<213> 黃豆
<220>
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叢6
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<220>
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叢6
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<220>
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叢6
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叢6
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叢6
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<220>
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叢6
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叢6
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叢6
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叢6
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叢6
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<220>
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叢6
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叢6
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叢6
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叢6
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叢6
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叢6
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叢6
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<220>
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叢6
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<212> DNA
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叢6
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叢6
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<220>
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叢6
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叢6
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<213> 黃豆
<220>
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叢6
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3782 Gm11:7061772..7062922
叢6
<400> 1660
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<213> 黃豆
<220>
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叢6
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<213> 黃豆
<220>
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叢7
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<213> 黃豆
<220>
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叢7
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<220>
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叢7
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叢7
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叢7
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<220>
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叢7
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叢7
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叢7
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叢7
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叢7
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叢7
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叢7
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<220>
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叢7
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叢7
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叢7
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<220>
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叢7
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<213> 黃豆
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叢7
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叢7
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<213> 黃豆
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叢7
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叢7
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叢7
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<213> 黃豆
<220>
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叢7
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<213> 黃豆
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叢7
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叢7
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叢7
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叢8
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<220>
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叢8
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叢8
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<211> 2008
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<213> 黃豆
<220>
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叢8
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叢8
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<213> 黃豆
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叢8
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叢8
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叢8
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叢8
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叢8
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<220>
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叢8
<400> 1964
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叢8
<400> 1965
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<213> 黃豆
<220>
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叢8
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<212> DNA
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叢8
<400> 1967
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<220>
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叢8
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叢8
<400> 1969
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叢8
<400> 1970
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<213> 黃豆
<220>
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叢8
<400> 1971
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叢8
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<213> 黃豆
<220>
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叢8
<400> 1973
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<213> 黃豆
<220>
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叢8
<400> 1974
<210> 1975
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<220>
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叢8
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<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2517 Gm08:5130101..5131300
叢8
<400> 1976
<210> 1977
<211> 1300
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3326 Gm10:2671001..2672300
叢8
<400> 1977
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叢8
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叢8
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<213> 黃豆
<220>
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叢8
<400> 1980
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<213> 黃豆
<220>
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叢8
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<220>
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叢8
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<213> 黃豆
<220>
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叢8
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<220>
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叢8
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<220>
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叢8
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叢8
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叢8
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<220>
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叢8
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叢8
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叢8
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叢8
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叢8
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2408 Gm07:38105101..38106100
叢9
<400> 2139
<210> 2140
<211> 1122
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4530 Gm13:37909201..37910322
叢9
<400> 2140
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<211> 1500
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5579 Gm17:8161301..8162800
叢9
<400> 2141
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<211> 1755
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3182 Gm09:38929160..38930914
叢9
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<211> 1500
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢9
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3651 Gm10:49399101..49400700
叢9
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢9
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢9
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<220>
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叢9
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<220>
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叢9
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<220>
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叢9
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<220>
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叢9
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<213> 黃豆
<220>
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叢9
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<213> 黃豆
<220>
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叢9
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<212> DNA
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<220>
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叢9
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<213> 黃豆
<220>
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叢9
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<212> DNA
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<220>
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叢9
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<220>
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叢9
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢9
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<212> DNA
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<220>
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叢9
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<212> DNA
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<220>
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叢9
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<220>
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叢9
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<220>
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叢9
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叢9
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<220>
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<220>
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叢9
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叢9
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叢9
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<220>
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叢9
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<220>
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叢9
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叢9
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叢9
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<220>
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<220>
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叢9
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<220>
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<220>
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<220>
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叢9
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<220>
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<220>
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<220>
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<220>
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叢9
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<220>
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叢9
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<212> DNA
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<212> DNA
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<212> DNA
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<220>
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6266 Gm18:59057801..59059000
叢9
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<211> 1171
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6569 Gm19:44707640..44708810
叢9
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<211> 1100
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_285 Gm01:52161801..52162900
叢9
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2873 Gm08:43495362..43496470
叢9
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<213> 黃豆
<220>
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叢9
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢9
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<213> 黃豆
<220>
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叢9
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<220>
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叢9
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<220>
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叢9
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<220>
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叢9
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<220>
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叢9
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<220>
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叢9
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<220>
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叢9
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<220>
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叢9
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<220>
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叢9
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<220>
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叢9
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<220>
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叢9
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<220>
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叢9
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<220>
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叢9
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<220>
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叢9
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叢9
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叢9
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叢9
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叢9
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叢9
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叢9
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叢9
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<220>
<223> 大豆_ogl_4391 Gm13:31730101..31731800
叢9
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_222 Gm01:49238201..49239800
叢9
<400> 2300
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1378 Gm04:43934701..43936100
叢9
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1459 Gm04:47259001..47260400
叢9
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<213> 黃豆
<220>
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叢9
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<220>
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叢9
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叢9
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叢9
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叢9
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叢9
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<220>
<223> 大豆_ogl_2755 Gm08:18302601..18304338
叢9
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<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4971 Gm15:10234707..10236202
叢9
<400> 2380
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5032 Gm15:13049492..13050567
叢9
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4293 Gm13:27076289..27077837
叢9
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<213> 黃豆
<220>
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叢9
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<213> 黃豆
<220>
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叢9
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<213> 黃豆
<220>
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叢9
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叢9
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叢9
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<220>
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<220>
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<220>
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<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6454 Gm19:39415759..39416800
叢9
<400> 2459
<210> 2460
<211> 1174
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3851 Gm11:16607616..162789
叢9
<400> 2460
<210> 2461
<211> 1241
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_776 Gm03:733060..734300
叢9
<400> 2461
<210> 2462
<211> 1294
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2699 Gm08:15219201..15220494
叢9
<400> 2462
<210> 2463
<211> 1341
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2865 Gm08:43132701..43134041
叢9
<400> 2463
<210> 2464
<211> 1242
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3494 Gm10:41158559..41159800
叢9
<400> 2464
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<211> 1222
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_174 Gm01:46779501..46780722
叢9
<400> 2465
<210> 2466
<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4782 Gm14:45857801..45858800
叢9
<400> 2466
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3127 Gm09:36483201..36484411
叢9
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4430 Gm13:33484601..33485804
叢9
<400> 2468
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4966 Gm15:10104001..10105200
叢9
<400> 2469
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<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4189 Gm13:21701202..21702400
叢9
<400> 2470
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<211> 1200
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢9
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<211> 1200
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3251 Gm09:40980201..40981400
叢9
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<211> 1200
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_328 Gm02:2602801..2604000
叢9
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<211> 1435
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5968 Gm18:6648566..6650000
叢9
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_540 Gm02:14167733..14169000
叢9
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<220>
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叢9
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<211> 1213
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢9
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢9
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢9
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢9
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<212> DNA
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<220>
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叢10
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢10
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢10
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<220>
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叢10
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢10
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<212> DNA
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<220>
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叢10
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<220>
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叢10
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<220>
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叢10
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叢10
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<220>
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叢10
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<212> DNA
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<220>
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叢10
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<220>
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叢10
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢10
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<220>
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叢10
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<213> 黃豆
<220>
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叢10
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢10
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢10
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<212> DNA
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<220>
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叢10
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<220>
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叢10
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<220>
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叢10
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<220>
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叢10
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叢10
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<220>
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叢10
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叢10
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<220>
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叢10
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<220>
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叢10
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<220>
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叢10
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<220>
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叢10
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<220>
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叢10
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<220>
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叢10
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叢10
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叢10
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<220>
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叢10
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叢10
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<220>
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叢10
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<220>
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叢10
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叢10
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<212> DNA
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<220>
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叢10
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<212> DNA
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<220>
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叢10
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叢10
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<212> DNA
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<220>
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叢10
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<210> 2525
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢10
<400> 2525
<210> 2526
<211> 1180
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢10
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<212> DNA
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<220>
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叢10
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<212> DNA
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<220>
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叢10
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢10
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢10
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<211> 1305
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3360 Gm10:4164623..4165927
叢10
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢10
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<210> 2533
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢10
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<220>
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叢10
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叢10
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叢10
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叢10
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叢10
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叢10
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叢10
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<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3844 Gm11:11084201..11085236
叢11
<400> 2618
<210> 2619
<211> 1200
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3072 Gm09:28657501..28658700
叢11
<400> 2619
<210> 2620
<211> 1434
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5692 Gm17:15535467..15536900
叢11
<400> 2620
<210> 2621
<211> 1100
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2799 Gm08:34788101..34789200
叢11
<400> 2621
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<211> 1314
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2803 Gm08:34856801..34858114
叢11
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<211> 1100
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5111 Gm15:42804401..42805500
叢11
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6005 Gm18:9081901..9083133
叢11
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6372 Gm19:12165701..12166897
叢11
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4088 Gm12:34320101..34321700
叢11
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<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6691 Gm20:2120919..2122700
叢11
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<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_529 Gm02:13647008..13648900
叢11
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<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_632 Gm02:43601501..43603200
叢11
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢11
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4395 Gm13:31866601..31868100
叢11
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4048 Gm12:15445599..15447500
叢11
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<213> 黃豆
<220>
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叢11
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢11
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢11
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢11
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<220>
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叢11
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<213> 黃豆
<220>
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叢11
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢11
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<220>
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叢11
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<213> 黃豆
<220>
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叢11
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<220>
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叢11
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢11
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<220>
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叢11
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<220>
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叢11
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<220>
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叢11
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<220>
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叢11
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<220>
<223> 大豆_ogl_4317 Gm13:28045301..28046600
叢11
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<220>
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叢11
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<220>
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叢11
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<220>
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叢11
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<220>
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叢11
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<212> DNA
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<220>
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叢11
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<220>
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叢11
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<220>
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<220>
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叢11
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叢11
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<220>
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叢11
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叢11
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叢11
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<220>
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叢11
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叢11
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<213> 黃豆
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<212> DNA
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<212> DNA
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<220>
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叢11
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<212> DNA
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叢11
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢11
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2810 Gm08:36032601..36034100
叢11
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3074 Gm09:28863401..28864600
叢11
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<213> 黃豆
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叢11
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<212> DNA
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叢11
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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<212> DNA
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<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6098 Gm18:47922901..47924110
叢11
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<211> 1400
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6386 Gm19:33082301..33083700
叢11
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<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_142 Gm01:42292401..42293452
叢11
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<213> 黃豆
<220>
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叢11
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢11
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<213> 黃豆
<220>
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叢11
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<220>
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叢11
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叢11
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叢11
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叢11
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叢11
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<220>
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叢11
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<220>
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叢11
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<220>
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叢11
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叢11
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叢11
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<220>
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叢11
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叢11
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<220>
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<220>
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叢11
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叢11
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<220>
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叢11
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<213> 黃豆
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<220>
<223> 大豆_ogl_6668 Gm20:1212701..1214300
叢11
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<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6686 Gm20:1775977..1777184
叢11
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<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_546 Gm02:14241001..14242000
叢11
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<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_860 Gm03:5324306..5325600
叢11
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<213> 黃豆
<220>
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叢11
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<220>
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叢11
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叢11
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叢11
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<220>
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<220>
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叢11
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叢11
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<220>
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叢11
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<220>
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叢11
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<220>
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叢11
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<220>
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<220>
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<220>
<223> 大豆_ogl_3879 Gm11:18515301..18516700
叢11
<400> 2855
<210> 2856
<211> 1117
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2340 Gm07:14961801..14962917
叢11
<400> 2856
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<211> 1100
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2993 Gm09:4525601..4526700
叢11
<400> 2857
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6662 Gm20:999701..1000860
叢11
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2025 Gm06:20865101..20866171
叢11
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2797 Gm08:34461462..34462500
叢11
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢11
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<213> 黃豆
<220>
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叢11
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢11
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢11
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<220>
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叢11
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<213> 黃豆
<220>
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叢11
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<220>
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<213> 黃豆
<220>
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叢11
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢11
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢11
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<213> 黃豆
<220>
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叢11
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<213> 黃豆
<220>
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叢11
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢11
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢12
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢12
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢12
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<213> 黃豆
<220>
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叢12
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<220>
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叢12
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<220>
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叢12
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<220>
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<220>
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<220>
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叢12
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<212> DNA
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<220>
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叢12
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<220>
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叢12
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<220>
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叢12
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<220>
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叢12
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<220>
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叢12
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<212> DNA
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<220>
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叢12
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<220>
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叢12
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<220>
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<220>
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<220>
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<212> DNA
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<220>
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<212> DNA
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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<212> DNA
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叢12
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<213> 黃豆
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叢12
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢12
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<213> 黃豆
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叢12
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2673 Gm08:14141501..14143100
叢12
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<210> 2935
<211> 1500
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4023 Gm12:8022301..8023800
叢12
<400> 2935
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<211> 1800
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3835 Gm11:10692401..10694200
叢12
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3054 Gm09:9994601..9995874
叢12
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2527 Gm08:6231301..6232900
叢12
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_868 Gm03:33092801..33094400
叢12
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<213> 黃豆
<220>
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叢12
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<213> 黃豆
<220>
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叢12
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<220>
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叢12
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢12
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<213> 黃豆
<220>
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叢12
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<220>
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叢12
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<220>
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叢12
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<220>
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叢12
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<213> 黃豆
<220>
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叢12
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<213> 黃豆
<220>
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叢12
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢12
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢12
<400> 2951
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢12
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢12
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<213> 黃豆
<220>
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叢12
<400> 2954
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<213> 黃豆
<220>
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叢12
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<220>
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叢12
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<220>
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叢12
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<220>
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叢12
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<220>
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<220>
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<220>
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<220>
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<220>
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<220>
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<220>
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<220>
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<212> DNA
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<220>
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叢13
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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<220>
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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<220>
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<212> DNA
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<220>
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<213> 黃豆
<220>
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<220>
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<220>
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<220>
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<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6995 Gm20:44693708..44694800
叢13
<400> 3013
<210> 3014
<211> 1082
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1120 Gm03:47095501..47096582
叢13
<400> 3014
<210> 3015
<211> 1321
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1110 Gm03:45968380..45969700
叢13
<400> 3015
<210> 3016
<211> 1100
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1188 Gm04:2477201..2478300
叢13
<400> 3016
<210> 3017
<211> 1073
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5869 Gm18:1566443..1567515
叢13
<400> 3017
<210> 3018
<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1006 Gm03:40779801..40780800
叢13
<400> 3018
<210> 3019
<211> 1257
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5440 Gm17:1251428..1252684
叢13
<400> 3019
<210> 3020
<211> 1164
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_742 Gm02:49117001..49118164
叢13
<400> 3020
<210> 3021
<211> 1400
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1416 Gm04:45450701..45452100
叢13
<400> 3021
<210> 3022
<211> 1028
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1540 Gm05:2084637..2085664
叢13
<400> 3022
<210> 3023
<211> 1122
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1839 Gm06:7899579..7900700
叢13
<400> 3023
<210> 3024
<211> 1032
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3708 Gm11:3796469..3797500
叢13
<400> 3024
<210> 3025
<211> 1300
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4005 Gm12:5071501..5072800
叢13
<400> 3025
<210> 3026
<211> 1045
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4441 Gm13:34025501..34026545
叢13
<400> 3026
<210> 3027
<211> 1216
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4647 Gm14:4329485..4330700
叢13
<400> 3027
<210> 3028
<211> 1167
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5001 Gm15:11567134..11568300
叢13
<400> 3028
<210> 3029
<211> 1268
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6176 Gm18:54807203..54808470
叢13
<400> 3029
<210> 3030
<211> 1119
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6839 Gm20:38295011..38296129
叢13
<400> 3030
<210> 3031
<211> 1142
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1091 Gm03:44905689..44906830
叢13
<400> 3031
<210> 3032
<211> 1100
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1104 Gm03:45628601..456130
叢13
<400> 3032
<210> 3033
<211> 1100
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1656 Gm05:32172601..32173700
叢13
<400> 3033
<210> 3034
<211> 1050
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2512 Gm08:5023501..5024550
叢13
<400> 3034
<210> 3035
<211> 1042
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3451 Gm10:39122101..39123142
叢13
<400> 3035
<210> 3036
<211> 1055
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4421 Gm13:33359312..33360366
叢13
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<211> 1200
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6805 Gm20:37188101..37189300
叢13
<400> 3037
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<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2886 Gm08:44373501..44374500
叢13
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6936 Gm20:42449155..42450181
叢13
<400> 3039
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<211> 1183
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2696 Gm08:15071863..15073045
叢13
<400> 3040
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<211> 1100
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4010 Gm12:7635401..7636500
叢13
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<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5378 Gm16:30638401..30639400
叢13
<400> 3042
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<211> 1086
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_609 Gm02:42514415..42515500
叢13
<400> 3043
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<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3485 Gm10:40829101..40830100
叢13
<400> 3044
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<211> 1112
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1820 Gm06:7119101..7120212
叢13
<400> 3045
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<211> 1100
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6326 Gm19:1904401..1905500
叢13
<400> 3046
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<211> 1011
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1205 Gm04:3921190..3922200
叢13
<400> 3047
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<211> 1400
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2442 Gm08:847101..848500
叢13
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<211> 1290
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_183 Gm01:47163824..47165113
叢13
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<211> 1117
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2607 Gm08:11357301..11358417
叢13
<400> 3050
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<211> 1100
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4342 Gm13:29251101..29252200
叢13
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢13
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<211> 1200
<212> DNA
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<220>
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叢13
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢13
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<212> DNA
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<220>
<223> 大豆_ogl_643 Gm02:44458301..44459403
叢13
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<212> DNA
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<220>
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叢13
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<213> 黃豆
<220>
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叢13
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<220>
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叢13
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢13
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<211> 1100
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6345 Gm19:2473001..2474100
叢13
<400> 3060
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<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_743 Gm02:49316401..49317400
叢13
<400> 3061
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢13
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢13
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢13
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<211> 1300
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢13
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<212> DNA
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<220>
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叢13
<400> 3066
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢13
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢13
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<220>
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叢13
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叢13
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<212> DNA
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<220>
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叢13
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<212> DNA
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<220>
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叢13
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<212> DNA
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<220>
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叢13
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<212> DNA
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<220>
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叢13
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢13
<400> 3075
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<212> DNA
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<220>
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叢13
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<212> DNA
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<220>
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叢13
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<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_393 Gm02:5227501..5228500
叢13
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<210> 3079
<211> 1033
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4322 Gm13:28225252..38226284
叢13
<400> 3079
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<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4892 Gm15:3561801..3562800
叢13
<400> 3080
<210> 3081
<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6462 Gm19:39659001..39660000
叢13
<400> 3081
<210> 3082
<211> 1390
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2883 Gm08:44284210..44285599
叢13
<400> 3082
<210> 3083
<211> 1227
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3717 Gm11:4044974..4046200
叢13
<400> 3083
<210> 3084
<211> 1558
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4588 Gm14:1801..412158
叢13
<400> 3084
<210> 3085
<211> 1433
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_654 Gm02:44743268..44744700
叢13
<400> 3085
<210> 3086
<211> 1249
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1067 Gm03:43182101..43183349
叢13
<400> 3086
<210> 3087
<211> 1300
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6768 Gm20:35199201..35200500
叢13
<400> 3087
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<211> 1344
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4571 Gm13:39391601..39392944
叢13
<400> 3088
<210> 3089
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3566 Gm10:46193774..46195124
叢13
<400> 3089
<210> 3090
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_63 Gm01:2693801..2695292
叢13
<400> 3090
<210> 3091
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1148 Gm04:896501..897900
叢13
<400> 3091
<210> 3092
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1431 Gm04:46071143..46072602
叢13
<400> 3092
<210> 3093
<211> 1185
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1569 Gm05:3232981..3234165
叢13
<400> 3093
<210> 3094
<211> 1239
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2176 Gm07:4146262..4147500
叢13
<400> 3094
<210> 3095
<211> 1546
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3312 Gm10:1981401..1982946
叢13
<400> 3095
<210> 3096
<211> 1300
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3531 Gm10:44846701..44848000
叢13
<400> 3096
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<211> 1264
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4123 Gm12:37441224..37442487
叢13
<400> 3097
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<211> 1419
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6924 Gm20:42050582..42052000
叢13
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<211> 1300
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6974 Gm20:44101601..44400
叢13
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_269 Gm01:51504867..512391
叢13
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_702 Gm02:46907601..46909069
叢13
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2257 Gm07:7668401..7669749
叢13
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<220>
<223> 大豆_ogl_3490 Gm10:40906041..40907600
叢13
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<220>
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叢13
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6316 Gm19:1202301..1203600
叢13
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<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1182 Gm04:2272286..2273487
叢13
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1395 Gm04:44352027..44353339
叢13
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3247 Gm09:40714435..40715700
叢13
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<213> 黃豆
<220>
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叢13
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<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6759 Gm20:34829215..34830220
叢13
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<212> DNA
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<220>
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叢13
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<211> 1203
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4122 Gm12:37388401..37389603
叢13
<400> 3112
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1538 Gm05:1994300..1995508
叢13
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4135 Gm12:37824001..37825200
叢13
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢13
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<220>
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叢13
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6537 Gm19:43799101..43800300
叢13
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<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2171 Gm07:3933813..3935453
叢13
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<220>
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叢13
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<213> 黃豆
<220>
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叢13
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<213> 黃豆
<220>
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叢13
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<211> 1200
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢13
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2951 Gm09:2482701..2484188
叢13
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1655 Gm05:32136402..32137777
叢13
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6862 Gm20:39359601..39360900
叢13
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢13
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<213> 黃豆
<220>
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叢13
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢13
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2459 Gm08:1986901..1988400
叢13
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<213> 黃豆
<220>
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叢13
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<220>
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叢13
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<220>
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叢13
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<213> 黃豆
<220>
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<220>
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叢13
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<212> DNA
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<220>
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叢13
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<220>
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<220>
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叢13
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<220>
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叢13
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<220>
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叢13
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4577 Gm13:39615301..39616700
叢13
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<213> 黃豆
<220>
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叢13
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<220>
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<220>
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叢13
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<220>
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叢13
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<220>
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叢13
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<212> DNA
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<220>
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叢13
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<220>
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<220>
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<212> DNA
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<220>
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叢13
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<220>
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<220>
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叢13
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢13
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢13
<400> 3157
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4460 Gm13:35408935..35410400
叢13
<400> 3158
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4856 Gm15:1565890..1567200
叢13
<400> 3159
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<211> 1035
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢13
<400> 3160
<210> 3161
<211> 1060
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5870 Gm18:1598101..1599160
叢13
<400> 3161
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6315 Gm19:1138503..1139600
叢13
<400> 3162
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6780 Gm20:36078816..36080500
叢13
<400> 3163
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<211> 1050
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6819 Gm20:37881081..37882130
叢13
<400> 3164
<210> 3165
<211> 1100
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6925 Gm20:42088401..42089500
叢13
<400> 3165
<210> 3166
<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_18 Gm01:1329801..1330800
叢13
<400> 3166
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1119 Gm03:47012445..47013470
叢13
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<213> 黃豆
<220>
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叢13
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1161 Gm04:1331201..1332400
叢13
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1392 Gm04:44272601..44273600
叢13
<400> 3170
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1760 Gm06:1292377..1293700
叢13
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<213> 黃豆
<220>
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叢13
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1863 Gm06:8647811..8648900
叢13
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<213> 黃豆
<220>
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叢13
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<220>
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叢13
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<213> 黃豆
<220>
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叢13
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢13
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叢13
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<220>
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叢13
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<220>
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<220>
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叢13
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<220>
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<220>
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叢13
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<220>
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叢13
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<220>
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叢13
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<220>
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叢13
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<220>
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叢13
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<213> 黃豆
<220>
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叢13
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<220>
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叢13
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<220>
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叢13
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<220>
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<220>
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<220>
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<220>
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<220>
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叢13
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<220>
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叢13
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<220>
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<220>
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叢13
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<220>
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叢13
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<220>
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<220>
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<220>
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叢13
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<212> DNA
<213> 黃豆
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叢13
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<213> 黃豆
<220>
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2511 Gm08:5019720..5020868
叢13
<400> 3251
<210> 3252
<211> 1087
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_773 Gm03:633714..634800
叢13
<400> 3252
<210> 3253
<211> 1236
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1795 Gm06:5424901..5426136
叢13
<400> 3253
<210> 3254
<211> 1200
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4885 Gm15:2990501..2991700
叢13
<400> 3254
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<211> 1275
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6297 Gm18:60185201..60186475
叢13
<400> 3255
<210> 3256
<211> 1048
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_949 Gm03:38702353..38703400
叢13
<400> 3256
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<211> 1200
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1670 Gm05:34572201..34573400
叢13
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2111 Gm07:1314601..1315914
叢13
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3609 Gm10:47704501..47705662
叢13
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<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_202 Gm01:48488686..48489755
叢13
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4466 Gm13:35901301..35902537
叢13
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<213> 黃豆
<220>
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叢13
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<220>
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叢13
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢13
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_221 Gm01:49228301..49229400
叢13
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢13
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<213> 黃豆
<220>
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叢13
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<213> 黃豆
<220>
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叢13
<400> 3268
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢13
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<213> 黃豆
<220>
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叢13
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<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢13
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢13
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<213> 黃豆
<220>
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叢13
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<220>
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叢13
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢13
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<220>
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叢13
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<220>
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叢13
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<220>
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叢13
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<220>
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<220>
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叢13
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<220>
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叢13
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<220>
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叢13
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<220>
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<220>
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叢13
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<220>
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叢13
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<212> DNA
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<220>
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叢13
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<213> 黃豆
<220>
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叢13
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<220>
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叢13
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<220>
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叢13
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<220>
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叢13
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<220>
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<220>
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<220>
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<220>
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<220>
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叢13
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<220>
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<220>
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<220>
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叢13
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<212> DNA
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<220>
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<220>
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叢13
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢13
<400> 3322
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<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢13
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叢13
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢13
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<211> 1324
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<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1092 Gm03:45009901..45011224
叢13
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<210> 3332
<211> 1439
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2451 Gm08:1468462..1469900
叢13
<400> 3332
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3752 Gm11:5522401..5524000
叢13
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2116 Gm07:1392001..1393300
叢13
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<211> 1030
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6837 Gm20:38249771..38250800
叢13
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4568 Gm13:39348401..39349400
叢13
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<213> 黃豆
<220>
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叢13
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<220>
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叢13
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<213> 黃豆
<220>
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叢13
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<213> 黃豆
<220>
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叢13
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<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_8 Gm01:686501..687667
叢13
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<212> DNA
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<220>
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叢13
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢13
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<213> 黃豆
<220>
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叢13
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢13
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2700 Gm08:15235901..15237156
叢13
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢13
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<213> 黃豆
<220>
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叢13
<400> 3348
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<213> 黃豆
<220>
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叢13
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_20 Gm14:3711601..3712921
叢13
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢13
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<213> 黃豆
<220>
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叢13
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<220>
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叢13
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<212> DNA
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<220>
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叢13
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<220>
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叢13
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<220>
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叢13
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<220>
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叢13
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<220>
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叢13
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<220>
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叢13
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<220>
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叢13
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢13
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<213> 黃豆
<220>
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叢13
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<213> 黃豆
<220>
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叢13
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<220>
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叢13
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<220>
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叢13
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<212> DNA
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<220>
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叢13
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<220>
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叢13
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<220>
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叢13
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<212> DNA
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<220>
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叢13
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<220>
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<220>
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<220>
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<220>
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<220>
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<220>
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<220>
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<220>
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叢13
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<220>
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叢13
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<220>
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<220>
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叢13
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<220>
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叢13
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<213> 黃豆
<220>
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叢13
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2978 Gm09:3973401..3974700
叢13
<400> 3404
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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<220>
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<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6310 Gm19:910201..911300
叢13
<400> 3410
<210> 3411
<211> 1100
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6449 Gm19:39210801..39211900
叢13
<400> 3411
<210> 3412
<211> 1209
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6499 Gm19:42216001..42217209
叢13
<400> 3412
<210> 3413
<211> 1098
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6507 Gm19:42315303..42316400
叢13
<400> 3413
<210> 3414
<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6592 Gm19:45342801..45343800
叢13
<400> 3414
<210> 3415
<211> 1097
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_672 Gm02:45285404..45286500
叢13
<400> 3415
<210> 3416
<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_800 Gm03:1926301..1927300
叢13
<400> 3416
<210> 3417
<211> 1012
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1271 Gm04:7131318..7132329
叢13
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<211> 1400
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1666 Gm05:32840701..32842100
叢13
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<211> 1100
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1972 Gm06:15789601..15790700
叢13
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<211> 1084
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2298 Gm07:8699801..8700884
叢13
<400> 3420
<210> 3421
<211> 1100
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3548 Gm10:45365901..45367000
叢13
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<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3905 Gm11:35550401..35551400
叢13
<400> 3422
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<211> 1572
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4330 Gm13:28623901..28625472
叢13
<400> 3423
<210> 3424
<211> 1100
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4970 Gm15:10230101..10231200
叢13
<400> 3424
<210> 3425
<211> 1018
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5643 Gm17:12011601..12012618
叢13
<400> 3425
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<211> 1400
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6137 Gm18:52509801..52511200
叢13
<400> 3426
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<211> 1100
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_653 Gm02:44741501..44742600
叢13
<400> 3427
<210> 3428
<211> 1297
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_909 Gm03:36588604..36589900
叢13
<400> 3428
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<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3488 Gm10:40897901..40898900
叢13
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<211> 1200
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4434 Gm13:33679501..33680700
叢13
<400> 3430
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<211> 1329
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4789 Gm14:46609672..46611000
叢13
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<211> 1200
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_912 Gm03:36725701..36726900
叢13
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<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1550 Gm05:2369801..2370800
叢13
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5194 Gm15:50433540..50434700
叢13
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<211> 1400
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5257 Gm16:2450201..2451600
叢13
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<212> DNA
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<220>
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叢13
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<211> 1400
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢13
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<220>
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叢13
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢13
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4388 Gm13:31494112..31495300
叢13
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<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2651 Gm08:13325319..13326400
叢13
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢13
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢13
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_493 Gm02:11510501..11511800
叢13
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<211> 1274
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6188 Gm18:55681127..55682400
叢13
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢13
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢13
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢13
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<212> DNA
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<220>
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叢13
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢13
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢13
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_556 Gm02:14960322..14961500
叢13
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢13
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<212> DNA
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<220>
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叢13
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢13
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢13
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢13
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢13
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢13
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢13
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢13
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢13
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<212> DNA
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<220>
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叢13
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<220>
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叢13
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢13
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<212> DNA
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叢13
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<220>
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叢13
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<212> DNA
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<220>
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<212> DNA
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<220>
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叢13
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢13
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢13
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢13
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<220>
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<220>
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叢13
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1636 Gm05:31169601..31170800
叢13
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<210> 3476
<211> 1015
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3267 Gm09:43334301..43335315
叢13
<400> 3476
<210> 3477
<211> 1100
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢13
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<211> 1161
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3526 Gm10:43846901..43848061
叢13
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢13
<400> 3479
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<211> 1109
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢13
<400> 3480
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<211> 1146
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5383 Gm16:30916901..30918046
叢13
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<211> 1098
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6486 Gm19:41248503..41249600
叢13
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢13
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<211> 1100
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢13
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢13
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢13
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<213> 黃豆
<220>
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叢13
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<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1650 Gm05:31980001..31981078
叢13
<400> 3489
<210> 3490
<211> 1041
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1886 Gm06:10113701..10114741
叢13
<400> 3490
<210> 3491
<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2554 Gm08:8016801..8017800
叢13
<400> 3491
<210> 3492
<211> 1100
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2666 Gm08:13664401..13665500
叢13
<400> 3492
<210> 3493
<211> 1041
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2979 Gm09:3980860..3981900
叢13
<400> 3493
<210> 3494
<211> 1084
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3371 Gm10:4983901..4984984
叢13
<400> 3494
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<211> 1100
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3440 Gm10:38052101..38053200
叢13
<400> 3495
<210> 3496
<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4770 Gm14:44220901..44221900
叢13
<400> 3496
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<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4996 Gm15:11413301..11414300
叢13
<400> 3497
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<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_565 Gm02:15311101..15312100
叢13
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<211> 1170
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5585 Gm17:8338906..8340075
叢13
<400> 3499
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<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5929 Gm18:48291..4866200
叢13
<400> 3500
<210> 3501
<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6349 Gm19:2531601..2532600
叢13
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<210> 3502
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6918 Gm20:41904668..41905902
叢13
<400> 3502
<210> 3503
<211> 1488
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2090 Gm06:46287613..46289100
叢13
<400> 3503
<210> 3504
<211> 1200
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4725 Gm14:6737201..6738400
叢13
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<210> 3505
<211> 1018
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_235 Gm01:49789283..49790300
叢13
<400> 3505
<210> 3506
<211> 1234
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1000 Gm03:40531704..40532937
叢13
<400> 3506
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<211> 1087
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6488 Gm19:41263714..41264800
叢13
<400> 3507
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4665 Gm14:5050547..5051556
叢14
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<211> 1192
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6934 Gm20:42360784..42361975
叢14
<400> 3509
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<211> 1010
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_638 Gm02:44073101..44074110
叢14
<400> 3510
<210> 3511
<211> 1032
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_409 Gm02:5911601..5912632
叢14
<400> 3511
<210> 3512
<211> 1100
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4794 Gm14:46890601..46891700
叢14
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢14
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4392 Gm13:31798501..31799500
叢14
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢14
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<211> 1200
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_738 Gm02:48871301..48872500
叢14
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<220>
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叢14
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<220>
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叢14
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢14
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5480 Gm17:14801..3510400
叢14
<400> 3520
<210> 3521
<211> 1100
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢14
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢14
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢14
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3997 Gm12:4554212..4555274
叢14
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1762 Gm06:1331701..1332991
叢14
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3308 Gm10:8001..1870100
叢14
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<212> DNA
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<220>
<223> 大豆_ogl_230 Gm01:49588004..49589100
叢14
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1470 Gm04:47523401..47524521
叢14
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢14
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<212> DNA
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<220>
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叢14
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<212> DNA
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<220>
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叢14
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<220>
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叢14
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<220>
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叢14
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<220>
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叢14
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<213> 黃豆
<220>
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叢14
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢14
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<213> 黃豆
<220>
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叢14
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢14
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<212> DNA
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<220>
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叢14
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<212> DNA
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<220>
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叢14
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<220>
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叢14
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<220>
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叢14
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<220>
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叢14
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<213> 黃豆
<220>
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叢14
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<220>
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叢14
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<220>
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叢14
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<212> DNA
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<220>
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<220>
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叢14
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<220>
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叢14
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<220>
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叢14
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<212> DNA
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<220>
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叢14
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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<212> DNA
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<220>
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叢14
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<212> DNA
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<220>
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叢14
<400> 3555
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<212> DNA
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<220>
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叢14
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<220>
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叢14
<400> 3557
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<213> 黃豆
<220>
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叢14
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<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1080 Gm03:44053501..44054500
叢14
<400> 3559
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<211> 1343
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3153 Gm09:37317421..37318763
叢14
<400> 3560
<210> 3561
<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3345 Gm10:3199001..3200000
叢14
<400> 3561
<210> 3562
<211> 1067
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3750 Gm11:5337334..5338400
叢14
<400> 3562
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4099 Gm12:35710201..35711300
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4136 Gm12:37825501..37826673
叢14
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4519 Gm13:37437901..37439000
叢14
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4793 Gm14:46888501..46889600
叢14
<400> 3566
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1437 Gm04:46500563..46501700
叢14
<400> 3567
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<212> DNA
<213> 黃豆
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<223> 大豆_ogl_3760 Gm11:5952899..5954100
叢14
<400> 3568
<210> 3569
<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1153 Gm04:923401..924400
叢14
<400> 3569
<210> 3570
<211> 1277
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1658 Gm05:32217101..32218377
叢14
<400> 3570
<210> 3571
<211> 1019
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3931 Gm11:36867250..36868268
叢14
<400> 3571
<210> 3572
<211> 1123
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4403 Gm13:32037301..32038423
叢14
<400> 3572
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<211> 1041
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2898 Gm08:45039601..45040641
叢14
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<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_423 Gm02:6761501..6762500
叢14
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<211> 1244
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1918 Gm06:13391997..13393240
叢14
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5517 Gm17:5076601..5077600
叢14
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1410 Gm04:45050701..45052000
叢14
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2139 Gm07:2775001..2776556
叢14
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2284 Gm07:8200365..8201413
叢14
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<211> 1300
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢14
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6869 Gm20:39505601..39507400
叢14
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<211> 1100
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5303 Gm16:4864801..4865900
叢14
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<211> 1200
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3353 Gm10:3768201..3769400
叢14
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<211> 1440
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_107 Gm01:4396101..4397540
叢14
<400> 3584
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1709 Gm05:37587216..37588564
叢14
<400> 3585
<210> 3586
<211> 1328
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1710 Gm05:37626473..37627800
叢14
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3304 Gm10:1499801..1500989
叢14
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<210> 3588
<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4920 Gm15:8565801..8566800
叢14
<400> 3588
<210> 3589
<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5228 Gm16:1322701..1323700
叢14
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<211> 1218
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5876 Gm18:1897183..1898400
叢14
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<211> 1200
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6546 Gm19:43994101..43995300
叢14
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<211> 1311
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1432 Gm04:46091659..46092969
叢14
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1447 Gm04:46853301..46854400
叢14
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<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1728 Gm05:38204901..38206043
叢14
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<220>
<223> 大豆_ogl_4953 Gm15:9515849..9516900
叢14
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<213> 黃豆
<220>
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叢14
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5777 Gm17:39332416..39333485
叢14
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5802 Gm17:39749199..39750200
叢14
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<210> 3599
<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5296 Gm16:4461201..42000
叢14
<400> 3599
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<211> 1001
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2287 Gm07:8242901..8243901
叢14
<400> 3600
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4834 Gm14:49099510..49100900
叢14
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3945 Gm11:37295455..37296500
叢14
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4633 Gm14:3969987..3971000
叢14
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5626 Gm17:10052928..10054000
叢14
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5829 Gm17:40862501..40863500
叢14
<400> 3605
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<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5889 Gm18:2237201..2238200
叢14
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢14
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<212> DNA
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<220>
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叢14
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢14
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<212> DNA
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<220>
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叢14
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1108 Gm03:45872468..45873800
叢14
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢14
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<220>
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叢14
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<220>
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叢14
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢14
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢14
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢14
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢14
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<220>
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叢14
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<213> 黃豆
<220>
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叢14
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<213> 黃豆
<220>
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叢14
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢14
<400> 3622
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<213> 黃豆
<220>
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叢14
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<220>
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叢14
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<220>
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叢14
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叢14
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢14
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<212> DNA
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<220>
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叢14
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<212> DNA
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<220>
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<212> DNA
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<220>
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叢14
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<212> DNA
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<220>
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢14
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢14
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2147 Gm07:3143301..3144300
叢14
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4901 Gm15:4104101..4105314
叢14
<400> 3635
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<211> 1104
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6868 Gm20:39425301..39426404
叢14
<400> 3636
<210> 3637
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6911 Gm20:41727178..41728300
叢14
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<211> 1200
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢14
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<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4468 Gm13:35939401..35940539
叢14
<400> 3639
<210> 3640
<211> 1068
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5287 Gm16:4283201..4284268
叢14
<400> 3640
<210> 3641
<211> 1100
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5841 Gm17:41443101..41444200
叢14
<400> 3641
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<211> 1187
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1902 Gm06:11334701..11335887
叢14
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2919 Gm09:815501..816560
叢14
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<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4001 Gm12:4742821..4743885
叢14
<400> 3644
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5832 Gm17:41246054..41247110
叢14
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5864 Gm18:1333280..1334300
叢14
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<212> DNA
<213> 黃豆
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<223> 大豆_ogl_4140 Gm12:38097101..38098100
叢14
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<210> 3648
<211> 1100
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5583 Gm17:8330101..8331200
叢14
<400> 3648
<210> 3649
<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2138 Gm07:2772601..2773600
叢14
<400> 3649
<210> 3650
<211> 1084
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3492 Gm10:41001317..41002400
叢14
<400> 3650
<210> 3651
<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5258 Gm16:2757301..2758300
叢14
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1563 Gm05:2941901..2942915
叢14
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<211> 1400
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3339 Gm10:3083301..3084700
叢14
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<213> 黃豆
<220>
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叢14
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<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1433 Gm04:46094582..46095585
叢14
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<213> 黃豆
<220>
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叢14
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<213> 黃豆
<220>
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叢14
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<213> 黃豆
<220>
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叢14
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<220>
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叢14
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢14
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢14
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<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢14
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<211> 1200
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢14
<400> 3663
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢14
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4543 Gm13:38347201..38348700
叢14
<400> 3665
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<211> 1100
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢14
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<211> 1100
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢14
<400> 3667
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<211> 1500
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢14
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<220>
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叢14
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<213> 黃豆
<220>
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叢14
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<211> 1096
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_821 Gm03:3296501..3297596
叢14
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢14
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<220>
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叢14
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<220>
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叢14
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<220>
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叢14
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<220>
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<220>
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叢15
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<213> 黃豆
<220>
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叢15
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<220>
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叢15
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<213> 黃豆
<220>
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叢15
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<220>
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叢15
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<212> DNA
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<220>
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叢15
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢15
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<212> DNA
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<220>
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叢15
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<212> DNA
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<220>
<223> 大豆_ogl_1330 Gm04:40900901..40902200
叢15
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<212> DNA
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<220>
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叢15
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<220>
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叢15
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<220>
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叢15
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<212> DNA
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<220>
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叢15
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢15
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢15
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<220>
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叢15
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<220>
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叢15
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<220>
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叢15
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<220>
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叢15
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<220>
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叢15
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<220>
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<220>
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<220>
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<220>
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叢15
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<220>
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叢15
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<220>
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叢15
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<220>
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叢15
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<220>
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<212> DNA
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<220>
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叢15
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<220>
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<220>
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叢15
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<213> 黃豆
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<212> DNA
<213> 黃豆
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<212> DNA
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<220>
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<212> DNA
<213> 黃豆
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叢15
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<212> DNA
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<220>
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<213> 黃豆
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<212> DNA
<213> 黃豆
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叢15
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<213> 黃豆
<220>
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<213> 黃豆
<220>
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叢15
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<211> 1084
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3069 Gm09:233201..23351684
叢15
<400> 3720
<210> 3721
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4747 Gm14:28927901..28929000
叢15
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢15
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6407 Gm19:37116781..37117841
叢15
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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<212> DNA
<213> 黃豆
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叢15
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4359 Gm13:30050101..30051348
叢15
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢15
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<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6121 Gm18:50970801..50971904
叢15
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2757 Gm08:18307101..18308147
叢15
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2653 Gm08:13337001..13338049
叢15
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<213> 黃豆
<220>
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叢15
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<220>
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叢15
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<220>
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叢15
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<220>
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叢15
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<220>
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叢15
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<220>
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叢15
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叢15
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<220>
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叢15
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<220>
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叢15
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<220>
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叢15
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<213> 黃豆
<220>
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叢15
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<220>
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叢15
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<220>
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叢15
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<220>
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叢15
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<212> DNA
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<220>
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<220>
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叢15
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<220>
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叢15
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叢15
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<220>
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叢15
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<220>
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叢15
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叢15
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叢15
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<220>
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叢15
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叢15
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<220>
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<220>
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叢15
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<220>
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叢15
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叢15
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叢15
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3447 Gm10:38729001..38730200
叢15
<400> 3806
<210> 3807
<211> 1100
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3856 Gm11:16908901..16910000
叢15
<400> 3807
<210> 3808
<211> 1100
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3915 Gm11:35952001..35953100
叢15
<400> 3808
<210> 3809
<211> 1149
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4340 Gm13:29127812..29128960
叢15
<400> 3809
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<211> 1044
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4775 Gm14:44421001..44422044
叢15
<400> 3810
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<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5392 Gm16:31397901..31398900
叢15
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<211> 1024
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6172 Gm18:54503977..54505000
叢15
<400> 3812
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6664 Gm20:1041184..1042513
叢15
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3268 Gm09:43369201..43370600
叢15
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4710 Gm14:6271701..6272900
叢15
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_928 Gm03:37430101..37431109
叢15
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2402 Gm07:37747801..373800
叢15
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<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_13 Gm09:3519101..3520100
叢15
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3025 Gm09:5888801..5890002
叢15
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<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3146 Gm09:37137801..37138800
叢15
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3174 Gm09:386366..38675900
叢15
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢15
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢15
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢15
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢15
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<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6255 Gm18:58724801..58725800
叢15
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢15
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢15
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<213> 黃豆
<220>
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叢15
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢15
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢15
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢15
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢15
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<220>
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叢15
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢15
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢15
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢15
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢15
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢15
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢15
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢15
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_888 Gm03:35878605..35879635
叢15
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢15
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<212> DNA
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<220>
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叢15
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<220>
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叢15
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<220>
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叢15
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叢15
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<212> DNA
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<220>
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叢15
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<220>
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<220>
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叢15
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<220>
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叢15
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<220>
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叢15
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<212> DNA
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<220>
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叢15
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<220>
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叢15
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<220>
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叢15
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<220>
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叢15
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叢15
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<220>
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<220>
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叢15
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<220>
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<212> DNA
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<220>
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<220>
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叢15
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<212> DNA
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<220>
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<212> DNA
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<220>
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叢15
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<213> 黃豆
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叢15
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5371 Gm16:29655100..29656400
叢15
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<220>
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<212> DNA
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<220>
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢15
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢15
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<213> 黃豆
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<220>
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<220>
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<220>
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<220>
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叢15
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<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1322 Gm04:39411801..39412827
叢15
<400> 3885
<210> 3886
<211> 1181
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2350 Gm07:16880601..16881781
叢15
<400> 3886
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2354 Gm07:17242601..17243835
叢15
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3889 Gm11:30039901..30041400
叢15
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<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4192 Gm13:21793101..21794156
叢15
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5353 Gm16:26822422..26823493
叢15
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<220>
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叢15
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<220>
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叢15
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<220>
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叢15
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<220>
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叢15
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<220>
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叢15
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<220>
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叢15
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<220>
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叢15
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<220>
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叢15
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<220>
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叢15
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<213> 黃豆
<220>
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叢15
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<220>
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<220>
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叢15
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<220>
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叢15
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<220>
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叢15
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<220>
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叢15
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<220>
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叢15
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<220>
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叢15
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<220>
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叢15
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<220>
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叢15
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<220>
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叢15
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<220>
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<220>
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叢15
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叢15
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<220>
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叢15
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<220>
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<220>
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叢15
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<220>
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<220>
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<220>
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<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3849 Gm11:16481601..16482600
叢15
<400> 3964
<210> 3965
<211> 1400
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4242 Gm13:23867701..23869100
叢15
<400> 3965
<210> 3966
<211> 1037
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3790 Gm11:7972864..7973900
叢15
<400> 3966
<210> 3967
<211> 1100
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6181 Gm18:55072301..55073400
叢15
<400> 3967
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_898 Gm03:36350901..36352036
叢15
<400> 3968
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2590 Gm08:10230201..10231333
叢15
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6344 Gm19:2470601..2471700
叢15
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2023 Gm06:20671433..20672600
叢15
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3079 Gm09:29366701..29367800
叢15
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3433 Gm10:37348508..37349768
叢15
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<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_24 Gm15:70901..71972
叢15
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<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_908 Gm03:330001..36575000
叢15
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢15
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5370 Gm16:29614803..29616000
叢15
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢15
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢15
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_449 Gm02:9067308..9068400
叢15
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<211> 1100
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2346 Gm07:15606401..15607500
叢15
<400> 3981
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<211> 1515
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3845 Gm11:13797686..13799200
叢15
<400> 3982
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<211> 1084
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6042 Gm18:15302701..15303784
叢15
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<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2631 Gm08:12410901..12411900
叢15
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6601 Gm19:46925301..46926300
叢15
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_581 Gm02:37827601..37828785
叢15
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢15
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢15
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢15
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢15
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢15
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<212> DNA
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<220>
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叢15
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<220>
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叢16
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<212> DNA
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<220>
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叢16
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<212> DNA
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<220>
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叢16
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<212> DNA
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<220>
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叢16
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<220>
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叢16
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<220>
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叢16
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<212> DNA
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<220>
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叢16
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<220>
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叢16
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢16
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<212> DNA
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<220>
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叢16
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<220>
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<220>
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叢16
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<212> DNA
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<220>
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叢16
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<220>
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<220>
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叢16
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<220>
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叢16
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<220>
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叢16
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<220>
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叢16
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<220>
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叢16
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叢16
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<220>
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叢16
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<220>
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<220>
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叢16
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<220>
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叢16
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<212> DNA
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<220>
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叢16
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<220>
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叢16
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叢16
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<213> 黃豆
<220>
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢16
<400> 4030
<210> 4031
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3869 Gm11:17408850..17409900
叢16
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢16
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢16
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢16
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢16
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢16
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢16
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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<212> DNA
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<220>
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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<212> DNA
<213> 黃豆
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<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2677 Gm08:14215101..14216200
叢16
<400> 4043
<210> 4044
<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2994 Gm09:4531001..4532000
叢16
<400> 4044
<210> 4045
<211> 1408
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5401 Gm16:31914701..31916108
叢16
<400> 4045
<210> 4046
<211> 1300
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1225 Gm04:5251901..5253200
叢16
<400> 4046
<210> 4047
<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4235 Gm13:23796801..23797800
叢16
<400> 4047
<210> 4048
<211> 1028
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4302 Gm13:27307973..27309000
叢16
<400> 4048
<210> 4049
<211> 1300
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5006 Gm15:11950001..11951300
叢16
<400> 4049
<210> 4050
<211> 2800
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2543 Gm08:7532001..7534800
叢17
<400> 4050
<210> 4051
<211> 2825
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_753 Gm02:49919476..49922300
叢17
<400> 4051
<210> 4052
<211> 2519
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4889 Gm15:3086780..3089298
叢17
<400> 4052
<210> 4053
<211> 1360
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3655 Gm10:49634941..49636300
叢17
<400> 4053
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<211> 1758
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_777 Gm03:736257..738014
叢17
<400> 4054
<210> 4055
<211> 2053
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4873 Gm15:2543601..2545653
叢17
<400> 4055
<210> 4056
<211> 2800
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5206 Gm16:493701..496500
叢17
<400> 4056
<210> 4057
<211> 2300
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5591 Gm17:8781901..8784200
叢17
<400> 4057
<210> 4058
<211> 2111
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_282 Gm01:52126990..52129100
叢17
<400> 4058
<210> 4059
<211> 2700
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1515 Gm05:1479101..1481800
叢17
<400> 4059
<210> 4060
<211> 2531
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1782 Gm06:3231170..3233700
叢17
<400> 4060
<210> 4061
<211> 2500
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1783 Gm06:3242401..3244900
叢17
<400> 4061
<210> 4062
<211> 2630
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3679 Gm11:1511401..1514030
叢17
<400> 4062
<210> 4063
<211> 2717
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5459 Gm17:2321485..2324201
叢17
<400> 4063
<210> 4064
<211> 1200
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6831 Gm20:38084501..38085700
叢17
<400> 4064
<210> 4065
<211> 2023
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_745 Gm02:49321478..49323500
叢17
<400> 4065
<210> 4066
<211> 1387
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2107 Gm07:946514..947900
叢17
<400> 4066
<210> 4067
<211> 1543
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1477 Gm04:47850358..47851900
叢17
<400> 4067
<210> 4068
<211> 1560
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_350 Gm02:3436241..3437800
叢17
<400> 4068
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<211> 2313
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4881 Gm15:2889988..2892300
叢17
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<210> 4070
<211> 1518
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2842 Gm08:41105801..41107318
叢17
<400> 4070
<210> 4071
<211> 1765
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2462 Gm08:2147001..2148765
叢17
<400> 4071
<210> 4072
<211> 1598
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_286 Gm01:52194503..52196100
叢17
<400> 4072
<210> 4073
<211> 1900
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4420 Gm13:33332901..33334800
叢17
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<211> 1894
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6589 Gm19:45280107..45282000
叢17
<400> 4074
<210> 4075
<211> 2800
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_814 Gm03:3144901..3147700
叢17
<400> 4075
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2841 Gm08:41072865..41074200
叢17
<400> 4076
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<211> 1498
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3685 Gm11:2267401..2268898
叢17
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<211> 1628
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_7007 Gm20:45644701..45646328
叢17
<400> 4078
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<211> 1700
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1803 Gm06:6425301..6427000
叢17
<400> 4079
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<211> 1395
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4382 Gm13:31171901..31173295
叢17
<400> 4080
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<211> 1788
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4621 Gm14:3655701..36538
叢17
<400> 4081
<210> 4082
<211> 1300
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3264 Gm09:43266801..43268100
叢17
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1020 Gm03:41574571..41576000
叢17
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6167 Gm18:54214401..54215597
叢17
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<211> 2000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1777 Gm06:3171601..3173600
叢17
<400> 4085
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1912 Gm06:11945856..11947700
叢17
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_763 Gm02:51040101..51042027
叢17
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<211> 1800
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢17
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5982 Gm18:39601..7492000
叢17
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_320 Gm02:1980343..1982300
叢17
<400> 4090
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_571 Gm02:15635001..15637600
叢17
<400> 4091
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<211> 1980
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2737 Gm08:16937001..16938980
叢17
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5962 Gm18:6403401..6405500
叢17
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2232 Gm07:6354801..63528
叢17
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢17
<400> 4095
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<211> 1825
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_767 Gm02:51446201..51448025
叢17
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢17
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢17
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢17
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢17
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5594 Gm17:8943201..8945368
叢17
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<211> 2500
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢17
<400> 4102
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<211> 2000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢17
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<211> 2675
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2544 Gm08:7639401..7642075
叢17
<400> 4104
<210> 4105
<211> 3300
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢17
<400> 4105
<210> 4106
<211> 1200
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
<400> 4106
<210> 4107
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
<400> 4107
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<211> 2124
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_378 Gm02:4646001..4648124
叢18
<400> 4108
<210> 4109
<211> 2300
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_384 Gm02:4930501..4932800
叢18
<400> 4109
<210> 4110
<211> 1441
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1696 Gm05:37254360..37255800
叢18
<400> 4110
<210> 4111
<211> 1400
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3207 Gm09:39836901..39838300
叢18
<400> 4111
<210> 4112
<211> 1700
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3208 Gm09:39844701..39846400
叢18
<400> 4112
<210> 4113
<211> 1400
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4535 Gm13:38064401..38065800
叢18
<400> 4113
<210> 4114
<211> 1700
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4623 Gm14:3758701..3760400
叢18
<400> 4114
<210> 4115
<211> 2400
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6992 Gm20:44636201..44638600
叢18
<400> 4115
<210> 4116
<211> 1813
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_279 Gm01:52110701..52112513
叢18
<400> 4116
<210> 4117
<211> 2700
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_390 Gm02:5147201..5149900
叢18
<400> 4117
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<211> 1240
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3573 Gm10:46263201..46264440
叢18
<400> 4118
<210> 4119
<211> 2400
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3724 Gm11:4279201..4281600
叢18
<400> 4119
<210> 4120
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3909 Gm11:35798193..35800000
叢18
<400> 4120
<210> 4121
<211> 1497
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4565 Gm13:39231504..39233000
叢18
<400> 4121
<210> 4122
<211> 1875
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5270 Gm16:3382626..3384500
叢18
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<210> 4123
<211> 1500
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6269 Gm18:59192901..59194400
叢18
<400> 4123
<210> 4124
<211> 1587
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6562 Gm19:44438201..44439787
叢18
<400> 4124
<210> 4125
<211> 1500
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6976 Gm20:44115501..44117000
叢18
<400> 4125
<210> 4126
<211> 1293
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1035 Gm03:42089215..42090507
叢18
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<210> 4127
<211> 1400
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<211> 1800
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2164 Gm07:3571601..3573400
叢18
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<211> 1800
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2902 Gm09:368401..370200
叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3012 Gm09:5372992..5374608
叢18
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<211> 1620
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4646 Gm14:4318401..4320020
叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<211> 2204
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<211> 2200
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<211> 1780
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6 Gm04:46950721..46952500
叢18
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<210> 4138
<211> 2153
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1500 Gm04:48825548..48827700
叢18
<400> 4138
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<211> 1700
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2914 Gm09:702201..704100
叢18
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<210> 4141
<211> 1400
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<211> 1833
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3951 Gm11:37592068..37593900
叢18
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<211> 1400
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<211> 1890
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<211> 1500
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6608 Gm19:47249501..47250900
叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1825 Gm06:7248867..7250500
叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<212> DNA
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<220>
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叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<220>
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叢18
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<212> DNA
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<220>
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叢18
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<212> DNA
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<220>
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叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<212> DNA
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<220>
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叢18
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<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<212> DNA
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<220>
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叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<211> 1300
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<211> 1431
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
<400> 4190
<210> 4191
<211> 2021
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<211> 1330
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6203 Gm18:56485401..56486730
叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6561 Gm19:44431161..44432700
叢18
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<211> 1563
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_729 Gm02:48140701..48142263
叢18
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<211> 1500
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6854 Gm20:38922101..38923600
叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2907 Gm09:451624..453300
叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3530 Gm10:44783059..44785100
叢18
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<210> 4201
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<213> 黃豆
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叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6284 Gm18:59811696..59813161
叢18
<400> 4202
<210> 4203
<211> 1200
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6927 Gm20:42162301..42163500
叢18
<400> 4203
<210> 4204
<211> 1612
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6626 Gm19:49563514..49565125
叢18
<400> 4204
<210> 4205
<211> 1657
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5554 Gm17:6878850..68802
叢18
<400> 4205
<210> 4206
<211> 1313
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6610 Gm19:47349688..47351000
叢18
<400> 4206
<210> 4207
<211> 1453
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_341 Gm02:3098848..3100300
叢18
<400> 4207
<210> 4208
<211> 1800
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_695 Gm02:46285701..46287500
叢18
<400> 4208
<210> 4209
<211> 1376
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5222 Gm16:1078701..1080076
叢18
<400> 4209
<210> 4210
<211> 1007
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5806 Gm17:39855869..398265
叢18
<400> 4210
<210> 4211
<211> 1615
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_333 Gm02:2757086..2758700
叢18
<400> 4211
<210> 4212
<211> 1852
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1509 Gm05:1248801..12252
叢18
<400> 4212
<210> 4213
<211> 1400
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1542 Gm05:2087901..2089300
叢18
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<211> 1570
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2561 Gm08:8409601..8411170
叢18
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<210> 4215
<211> 1125
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3767 Gm11:6240243..6241367
叢18
<400> 4215
<210> 4216
<211> 1187
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5238 Gm16:1865056..1866242
叢18
<400> 4216
<210> 4217
<211> 1505
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5559 Gm17:7163296..7164800
叢18
<400> 4217
<210> 4218
<211> 1500
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6627 Gm19:49632801..49634300
叢18
<400> 4218
<210> 4219
<211> 1261
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6968 Gm20:44003840..44005100
叢18
<400> 4219
<210> 4220
<211> 1485
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6987 Gm20:44499316..44500800
叢18
<400> 4220
<210> 4221
<211> 2164
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5540 Gm17:5818601..5820764
叢18
<400> 4221
<210> 4222
<211> 1494
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1160 Gm04:1257901..1259394
叢18
<400> 4222
<210> 4223
<211> 1439
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1733 Gm05:38592101..38593539
叢18
<400> 4223
<210> 4224
<211> 1974
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2133 Gm07:2431901..2433874
叢18
<400> 4224
<210> 4225
<211> 1600
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2177 Gm07:4148501..4150100
叢18
<400> 4225
<210> 4226
<211> 1900
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3674 Gm11:1331201..1333100
叢18
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<211> 1300
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3952 Gm11:37746801..373100
叢18
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<211> 1238
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5892 Gm18:2244401..2245638
叢18
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<211> 1401
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5602 Gm17:9217038..9218438
叢18
<400> 4229
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<211> 1500
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2966 Gm09:3438301..3439800
叢18
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<210> 4231
<211> 2200
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4422 Gm13:33363701..33365900
叢18
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<210> 4232
<211> 1405
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3926 Gm11:36771096..36772500
叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_707 Gm02:47081907..47083000
叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5017 Gm15:12651001..12652197
叢18
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<210> 4235
<211> 1475
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1934 Gm06:13939126..13940600
叢18
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<211> 1300
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3536 Gm10:44970101..44971400
叢18
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<211> 1415
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6617 Gm19:47691901..47693315
叢18
<400> 4237
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<211> 1500
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1201 Gm04:3812101..3813600
叢18
<400> 4238
<210> 4239
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2504 Gm08:4706456..4708300
叢18
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<211> 1500
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2464 Gm08:2285711..2287210
叢18
<400> 4240
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_662 Gm02:44950746..44951941
叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4792 Gm14:432224..46860500
叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1177 Gm04:2173101..2174300
叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3751 Gm11:52147..5488556
叢18
<400> 4245
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<212> DNA
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<220>
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叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1007 Gm03:40817901..40819800
叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
<400> 4250
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<211> 1600
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
<400> 4260
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
<400> 4261
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
<400> 4263
<210> 4264
<211> 1631
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
<400> 4264
<210> 4265
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
<400> 4266
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
<400> 4267
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1137 Gm04:508660..511132
叢18
<400> 4268
<210> 4269
<211> 1900
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1143 Gm04:654901..656800
叢18
<400> 4269
<210> 4270
<211> 2200
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1523 Gm05:1613501..1615700
叢18
<400> 4270
<210> 4271
<211> 1200
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1524 Gm05:1627401..1628600
叢18
<400> 4271
<210> 4272
<211> 1781
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1680 Gm05:323720..325500
叢18
<400> 4272
<210> 4273
<211> 1584
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1779 Gm06:3181917..3183500
叢18
<400> 4273
<210> 4274
<211> 1442
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1864 Gm06:8714359..8715800
叢18
<400> 4274
<210> 4275
<211> 1304
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1877 Gm06:9005201..9006504
叢18
<400> 4275
<210> 4276
<211> 2104
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2129 Gm07:2356701..2358804
叢18
<400> 4276
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2132 Gm07:2402201..2404131
叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2206 Gm07:5190001..5191300
叢18
<400> 4278
<210> 4279
<211> 1700
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2446 Gm08:1033001..1034700
叢18
<400> 4279
<210> 4280
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
<400> 4280
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2584 Gm08:9859076..9861556
叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2901 Gm09:358701..360800
叢18
<400> 4282
<210> 4283
<211> 1811
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2927 Gm09:1202001..1203811
叢18
<400> 4283
<210> 4284
<211> 1950
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3230 Gm09:40437332..40439281
叢18
<400> 4284
<210> 4285
<211> 1667
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3242 Gm09:40626841..40628507
叢18
<400> 4285
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<211> 1834
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3263 Gm09:43243829..43245662
叢18
<400> 4286
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<211> 1476
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3291 Gm10:845075..846550
叢18
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<211> 1800
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3342 Gm10:3161290..3163000
叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<220>
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叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3747 Gm11:5215799..5217597
叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4554 Gm13:38576801..38578388
叢18
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<211> 2000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<211> 2000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<210> 4301
<211> 1400
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<211> 2209
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4895 Gm15:3752201..3754409
叢18
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<211> 1500
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5494 Gm17:3831501..3833000
叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_52 Gm17:4467001..4469100
叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5877 Gm18:1899901..1901298
叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<211> 1500
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<212> DNA
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<220>
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叢18
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<220>
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叢18
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<220>
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<220>
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叢18
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<212> DNA
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<220>
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叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<212> DNA
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<220>
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叢18
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<220>
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叢18
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<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<220>
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叢18
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<212> DNA
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<220>
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叢18
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<212> DNA
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<220>
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叢18
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<220>
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叢18
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<220>
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叢18
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<220>
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叢18
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<220>
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叢18
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<220>
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叢18
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<212> DNA
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<220>
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叢18
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<212> DNA
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<220>
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叢18
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<220>
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<220>
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叢18
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<220>
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叢18
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<220>
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<212> DNA
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叢18
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叢18
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<220>
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<212> DNA
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叢18
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<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<212> DNA
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叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
<400> 4349
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<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5263 Gm16:3020201..3022400
叢18
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<211> 2100
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5272 Gm16:3455301..3457400
叢18
<400> 4353
<210> 4354
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<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<211> 2100
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5470 Gm17:3169601..3171700
叢18
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<210> 4356
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5891 Gm18:2242701..2244000
叢18
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<220>
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叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<213> 黃豆
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<223> 大豆_ogl_6771 Gm20:35280701..35282345
叢18
<400> 4361
<210> 4362
<211> 2100
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6846 Gm20:384291..38467300
叢18
<400> 4362
<210> 4363
<211> 1462
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6943 Gm20:43048607..43050068
叢18
<400> 4363
<210> 4364
<211> 1200
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6980 Gm20:44203901..44205100
叢18
<400> 4364
<210> 4365
<211> 1700
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_7006 Gm20:45440401..45442100
叢18
<400> 4365
<210> 4366
<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_227 Gm01:49462601..49463600
叢18
<400> 4366
<210> 4367
<211> 1880
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4345 Gm13:29498901..29500780
叢18
<400> 4367
<210> 4368
<211> 1485
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5899 Gm18:2420416..2421900
叢18
<400> 4368
<210> 4369
<211> 1168
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3695 Gm11:2583701..2584868
叢18
<400> 4369
<210> 4370
<211> 1828
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4879 Gm15:2786873..2788700
叢18
<400> 4370
<210> 4371
<211> 1326
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5503 Gm17:4171601..4172926
叢18
<400> 4371
<210> 4372
<211> 1312
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5885 Gm18:2101489..2102800
叢18
<400> 4372
<210> 4373
<211> 1300
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2547 Gm08:7767601..7768900
叢18
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<210> 4374
<211> 1200
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6797 Gm20:36882601..36883800
叢18
<400> 4374
<210> 4375
<211> 1760
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_332 Gm02:2744701..2746460
叢18
<400> 4375
<210> 4376
<211> 1505
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_348 Gm02:3415901..3417405
叢18
<400> 4376
<210> 4377
<211> 1300
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1394 Gm04:44349201..44350500
叢18
<400> 4377
<210> 4378
<211> 1400
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1503 Gm04:48892601..48894000
叢18
<400> 4378
<210> 4379
<211> 1223
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1815 Gm06:6996401..6997623
叢18
<400> 4379
<210> 4380
<211> 1528
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2871 Gm08:43416449..43417976
叢18
<400> 4380
<210> 4381
<211> 1543
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3203 Gm09:39767226..39768768
叢18
<400> 4381
<210> 4382
<211> 1266
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3239 Gm09:40600901..40602166
叢18
<400> 4382
<210> 4383
<211> 1500
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3971 Gm12:1661001..7500
叢18
<400> 4383
<210> 4384
<211> 1800
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3995 Gm12:4516401..4518200
叢18
<400> 4384
<210> 4385
<211> 1670
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4536 Gm13:38073357..38075026
叢18
<400> 4385
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<211> 1247
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4537 Gm13:38092354..38093600
叢18
<400> 4386
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<211> 1100
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5879 Gm18:1977101..1978200
叢18
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<210> 4388
<211> 1100
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5881 Gm18:2005201..2006300
叢18
<400> 4388
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<211> 1600
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6277 Gm18:59545001..59546600
叢18
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<211> 1200
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1519 Gm05:1535001..1536200
叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6852 Gm20:38863201..38864745
叢18
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<210> 4392
<211> 1284
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1090 Gm03:44804941..44806224
叢18
<400> 4392
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1482 Gm04:47966870..47968600
叢18
<400> 4393
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1785 Gm06:3419401..3420757
叢18
<400> 4394
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<211> 1500
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3612 Gm10:47822601..47824100
叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5384 Gm16:30952228..30953700
叢18
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<211> 1258
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5441 Gm17:1253201..1254458
叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5850 Gm17:41668701..41670500
叢18
<400> 4398
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6296 Gm18:60179001..60180274
叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6907 Gm20:41080768..41082290
叢18
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<211> 1200
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_313 Gm02:1459001..1460300
叢18
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<211> 1410
<212> DNA
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<220>
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叢18
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<211> 1200
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_758 Gm02:50331601..50332800
叢18
<400> 4404
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_778 Gm03:777001..778700
叢18
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<211> 1400
<212> DNA
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<220>
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叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1158 Gm04:1151709..1152742
叢18
<400> 4408
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1240 Gm04:5598401..5600000
叢18
<400> 4409
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<211> 1878
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1486 Gm04:48293356..48295233
叢18
<400> 4410
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1559 Gm05:2724520..2726100
叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2485 Gm08:3239801..3241405
叢18
<400> 4414
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<211> 1300
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2958 Gm09:13201..2971500
叢18
<400> 4415
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3200 Gm09:39744701..39745800
叢18
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<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<212> DNA
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<220>
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叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3587 Gm10:46693101..46694100
叢18
<400> 4420
<210> 4421
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3734 Gm11:4889185..4890700
叢18
<400> 4421
<210> 4422
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
<400> 4422
<210> 4423
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
<400> 4423
<210> 4424
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
<400> 4424
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6985 Gm20:44426566..44428005
叢18
<400> 4425
<210> 4426
<211> 1182
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
<400> 4426
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<211> 1441
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4450 Gm13:34533801..34535241
叢18
<400> 4427
<210> 4428
<211> 1300
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5444 Gm17:1309701..1311000
叢18
<400> 4428
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<211> 1062
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6190 Gm18:55838439..55839500
叢18
<400> 4429
<210> 4430
<211> 1264
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_33 Gm01:1718001..1719264
叢18
<400> 4430
<210> 4431
<211> 1486
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_276 Gm01:51897101..51898586
叢18
<400> 4431
<210> 4432
<211> 1362
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_437 Gm02:7235005..7236366
叢18
<400> 4432
<210> 4433
<211> 1254
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_896 Gm03:36255647..36256900
叢18
<400> 4433
<210> 4434
<211> 1300
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1375 Gm04:43873001..43874300
叢18
<400> 4434
<210> 4435
<211> 1600
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1561 Gm05:2926601..2928200
叢18
<400> 4435
<210> 4436
<211> 1600
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2106 Gm07:864701..866300
叢18
<400> 4436
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<211> 1226
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2126 Gm07:2162070..2163295
叢18
<400> 4437
<210> 4438
<211> 1400
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2211 Gm07:5371401..5372800
叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3329 Gm10:2723301..2724500
叢18
<400> 4439
<210> 4440
<211> 1200
<212> DNA
<213> 黃豆
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<223> 大豆_ogl_3545 Gm10:45231801..45233000
叢18
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<210> 4441
<211> 1246
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3642 Gm10:49096901..49098146
叢18
<400> 4441
<210> 4442
<211> 1639
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5020 Gm15:12678862..12680500
叢18
<400> 4442
<210> 4443
<211> 2163
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5242 Gm16:1969101..1971263
叢18
<400> 4443
<210> 4444
<211> 1212
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5321 Gm16:25201..5521412
叢18
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<210> 4445
<211> 1200
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5466 Gm17:2725701..2726900
叢18
<400> 4445
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<211> 1132
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5516 Gm17:4961401..4962532
叢18
<400> 4446
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5576 Gm17:8041801..8043760
叢18
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<210> 4448
<211> 1081
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6444 Gm19:39029771..39030851
叢18
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<211> 1600
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6508 Gm19:42385101..42386700
叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6842 Gm20:38428001..38429100
叢18
<400> 4450
<210> 4451
<211> 1480
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6922 Gm20:42017335..42018814
叢18
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<211> 1605
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<211> 1200
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<211> 1366
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_760 Gm02:50421301..50422666
叢18
<400> 4454
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<211> 1200
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1069 Gm03:43286601..43287800
叢18
<400> 4455
<210> 4456
<211> 1200
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1490 Gm04:48514401..48515600
叢18
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<211> 1430
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2121 Gm07:1828571..1830000
叢18
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<211> 1372
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<211> 1900
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3667 Gm11:487601..489500
叢18
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<210> 4460
<211> 1600
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
<400> 4460
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<211> 1293
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6629 Gm19:49747108..493400
叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_405 Gm02:5601101..5602400
叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<211> 1300
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4556 Gm13:38767301..38768600
叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5548 Gm17:6445919..6447104
叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<211> 1127
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1412 Gm04:45147301..45148427
叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<211> 1900
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
<400> 4483
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
<400> 4488
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<212> DNA
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<220>
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叢18
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<212> DNA
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<220>
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叢18
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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<213> 黃豆
<220>
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叢18
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<213> 黃豆
<220>
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叢19
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<212> DNA
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<220>
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叢19
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢19
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢19
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢19
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢19
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢19
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<212> DNA
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<220>
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叢19
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢19
<400> 4504
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢19
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢19
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<210> 4507
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢19
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢19
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢19
<400> 4509
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢19
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢19
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢19
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢19
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<212> DNA
<213> 黃豆
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<212> DNA
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5110 Gm15:42715501..42716700
叢19
<400> 4520
<210> 4521
<211> 1696
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5121 Gm15:43674601..415296
叢19
<400> 4521
<210> 4522
<211> 1550
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_111 Gm01:20036551..20038100
叢19
<400> 4522
<210> 4523
<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2801 Gm08:34794201..34795200
叢19
<400> 4523
<210> 4524
<211> 1510
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6063 Gm18:18572191..18573700
叢19
<400> 4524
<210> 4525
<211> 1959
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_835 Gm03:3860742..3862700
叢19
<400> 4525
<210> 4526
<211> 1649
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5053 Gm15:15006652..15008300
叢19
<400> 4526
<210> 4527
<211> 1642
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1333 Gm04:41220459..41222100
叢19
<400> 4527
<210> 4528
<211> 1219
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4783 Gm14:45865301..45866519
叢19
<400> 4528
<210> 4529
<211> 1300
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2573 Gm08:9121201..9122500
叢19
<400> 4529
<210> 4530
<211> 1856
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2728 Gm08:16464122..16465977
叢19
<400> 4530
<210> 4531
<211> 1500
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_380 Gm02:4701701..4703200
叢19
<400> 4531
<210> 4532
<211> 1241
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_510 Gm02:12062101..12063341
叢19
<400> 4532
<210> 4533
<211> 1693
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_116 Gm01:37064808..37066500
叢19
<400> 4533
<210> 4534
<211> 1900
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_877 Gm03:34768801..34770700
叢19
<400> 4534
<210> 4535
<211> 1300
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2361 Gm07:18836401..18837700
叢19
<400> 4535
<210> 4536
<211> 1500
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3417 Gm10:10080001..10081500
叢19
<400> 4536
<210> 4537
<211> 1088
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3423 Gm10:33831589..33832676
叢19
<400> 4537
<210> 4538
<211> 1368
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4046 Gm12:15426401..15427768
叢19
<400> 4538
<210> 4539
<211> 1815
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4164 Gm13:8976601..8978415
叢19
<400> 4539
<210> 4540
<211> 1492
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2093 Gm06:46341409..46342900
叢19
<400> 4540
<210> 4541
<211> 1444
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2094 Gm06:46347057..46348500
叢19
<400> 4541
<210> 4542
<211> 1605
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2791 Gm08:22493901..22495505
叢19
<400> 4542
<210> 4543
<211> 2000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4043 Gm12:15321401..15323400
叢19
<400> 4543
<210> 4544
<211> 1104
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5104 Gm15:42197897..42199000
叢19
<400> 4544
<210> 4545
<211> 1036
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6099 Gm18:48059565..48060600
叢19
<400> 4545
<210> 4546
<211> 1400
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2746 Gm08:17436701..17438100
叢19
<400> 4546
<210> 4547
<211> 1422
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4721 Gm14:6610479..6611900
叢19
<400> 4547
<210> 4548
<211> 1187
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4765 Gm14:43218501..43219687
叢19
<400> 4548
<210> 4549
<211> 1200
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3857 Gm11:16927901..16929100
叢19
<400> 4549
<210> 4550
<211> 1400
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4578 Gm13:39634301..39635700
叢19
<400> 4550
<210> 4551
<211> 1100
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2821 Gm08:38717701..38718800
叢19
<400> 4551
<210> 4552
<211> 1121
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_17 Gm12:15761070..15762190
叢19
<400> 4552
<210> 4553
<211> 1200
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2840 Gm08:41052501..41053700
叢19
<400> 4553
<210> 4554
<211> 1200
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6140 Gm18:52616001..52617200
叢19
<400> 4554
<210> 4555
<211> 1722
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3120 Gm09:36000401..36002122
叢19
<400> 4555
<210> 4556
<211> 1500
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5980 Gm18:7445701..7447200
叢19
<400> 4556
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<211> 2219
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1594 Gm05:4908241..4910459
叢19
<400> 4557
<210> 4558
<211> 3270
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4051 Gm12:15762318..15765587
叢19
<400> 4558
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<211> 2606
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_139 Gm01:41734595..41737200
叢19
<400> 4559
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<211> 2480
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1317 Gm04:39295189..39297668
叢19
<400> 4560
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<211> 1213
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1323 Gm04:39412888..39414100
叢19
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<211> 1700
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1341 Gm04:41944701..41946400
叢19
<400> 4562
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<211> 1300
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2035 Gm06:38792001..38793300
叢19
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<211> 1700
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2812 Gm08:36255701..36257400
叢19
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4030 Gm12:9443495..9445400
叢19
<400> 4565
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<211> 2000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4039 Gm12:14932801..14934800
叢19
<400> 4566
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4047 Gm12:15435254..15437600
叢19
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<211> 1500
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4733 Gm14:12922901..12924400
叢19
<400> 4568
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5087 Gm15:25121635..25123430
叢19
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢19
<400> 4570
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢19
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6083 Gm18:23708389..23709700
叢19
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6110 Gm18:48994501..48995500
叢19
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢19
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢19
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢19
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢19
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢19
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢19
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_156 Gm01:416701..43996171
叢19
<400> 4580
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<211> 1200
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢19
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢19
<400> 4582
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢19
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<211> 3008
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢19
<400> 4584
<210> 4585
<211> 1400
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢19
<400> 4585
<210> 4586
<211> 1071
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4041 Gm12:14955094..14956164
叢19
<400> 4586
<210> 4587
<211> 1089
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3098 Gm09:32965101..32966189
叢19
<400> 4587
<210> 4588
<211> 1102
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_485 Gm02:10892278..10893379
叢19
<400> 4588
<210> 4589
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢19
<400> 4589
<210> 4590
<211> 2209
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_115 Gm01:37002092..37004300
叢19
<400> 4590
<210> 4591
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1318 Gm04:39302583..39304576
叢19
<400> 4591
<210> 4592
<211> 1800
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1623 Gm05:28197001..28198800
叢19
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2353 Gm07:17194522..17196553
叢19
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2818 Gm08:38045859..38047800
叢19
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3100 Gm09:33089301..33090322
叢19
<400> 4595
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<211> 1200
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3105 Gm09:33857301..33858500
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<211> 1400
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3899 Gm11:34168901..34170300
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<212> DNA
<213> 黃豆
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<223> 大豆_ogl_4049 Gm12:15650470..15651500
叢19
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6011 Gm18:9762101..9763600
叢19
<400> 4599
<210> 4600
<211> 1300
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6015 Gm18:10370101..10371400
叢19
<400> 4600
<210> 4601
<211> 1875
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6090 Gm18:43708001..43709875
叢19
<400> 4601
<210> 4602
<211> 1140
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6132 Gm18:51929461..51930600
叢19
<400> 4602
<210> 4603
<211> 2000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6371 Gm19:8881201..8883200
叢19
<400> 4603
<210> 4604
<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2012 Gm06:18984001..18985000
叢19
<400> 4604
<210> 4605
<211> 1400
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2784 Gm08:21923401..21924800
叢19
<400> 4605
<210> 4606
<211> 1100
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3097 Gm09:32088401..32089500
叢19
<400> 4606
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<211> 1669
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4268 Gm13:25782432..25784100
叢19
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<211> 1200
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5091 Gm15:33304501..33305700
叢19
<400> 4608
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<211> 1670
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2064 Gm06:43581901..43583570
叢19
<400> 4609
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5990 Gm18:8258218..8259974
叢19
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<210> 4611
<211> 2100
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3521 Gm10:43698501..43700600
叢19
<400> 4611
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<211> 2352
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_158 Gm01:44059601..44061952
叢19
<400> 4612
<210> 4613
<211> 2149
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2069 Gm06:44080652..44082800
叢19
<400> 4613
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<211> 2449
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4756 Gm14:40559152..40561600
叢19
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<211> 1700
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5147 Gm15:48093101..48094800
叢19
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_837 Gm03:4421201..4424788
叢19
<400> 4616
<210> 4617
<211> 2101
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_842 Gm03:4579043..4581143
叢19
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<210> 4618
<211> 2400
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢19
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_119 Gm01:38609901..38611210
叢19
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5102 Gm15:40835673..40837000
叢19
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<211> 1387
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5043 Gm15:13426014..13427400
叢19
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1894 Gm06:10540801..10542300
叢20
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<210> 4623
<211> 2000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4082 Gm12:34056101..34058100
叢20
<400> 4623
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<211> 1944
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5143 Gm15:47789201..47791144
叢20
<400> 4624
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<211> 1208
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_830 Gm03:3579100..3580307
叢20
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<211> 1300
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢20
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3801 Gm11:8744195..8745641
叢20
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<211> 2200
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_555 Gm02:14933101..14935300
叢20
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<211> 1200
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_911 Gm03:36609101..36610300
叢20
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<211> 1264
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6428 Gm19:38543537..38544800
叢20
<400> 4630
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2545 Gm08:7684374..7685600
叢20
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6461 Gm19:39615001..39616554
叢20
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_74 Gm01:3203810..3205300
叢20
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<211> 1500
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1379 Gm04:43948601..43950100
叢20
<400> 4634
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3929 Gm11:36814612..36815900
叢20
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<211> 1200
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6865 Gm20:39381401..39382600
叢20
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢20
<400> 4637
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢20
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<212> DNA
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<220>
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叢20
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<212> DNA
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<220>
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叢20
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<212> DNA
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<220>
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叢20
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<212> DNA
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<220>
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叢20
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<212> DNA
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<220>
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叢20
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<212> DNA
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<220>
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叢20
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<212> DNA
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<220>
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叢20
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢20
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<212> DNA
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<220>
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叢20
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<212> DNA
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<220>
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叢20
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<212> DNA
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<220>
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叢20
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<212> DNA
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<220>
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叢20
<400> 4650
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<212> DNA
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<220>
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叢20
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<212> DNA
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<220>
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叢20
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<212> DNA
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<220>
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叢20
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢20
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<212> DNA
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<220>
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叢20
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<212> DNA
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<220>
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叢20
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<212> DNA
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<220>
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叢20
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<212> DNA
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<220>
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叢20
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<212> DNA
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<220>
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叢20
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<212> DNA
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<220>
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叢20
<400> 4660
<210> 4661
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢20
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<212> DNA
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<220>
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叢20
<400> 4662
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢20
<400> 4663
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<211> 1500
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢20
<400> 4664
<210> 4665
<211> 1400
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1868 Gm06:8812301..8813700
叢20
<400> 4665
<210> 4666
<211> 1300
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢20
<400> 4666
<210> 4667
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2316 Gm07:9967214..9968581
叢20
<400> 4667
<210> 4668
<211> 1900
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3005 Gm09:5044701..5046600
叢20
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3564 Gm10:46169701..46170900
叢20
<400> 4669
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<211> 1456
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4719 Gm14:6448601..6450056
叢20
<400> 4670
<210> 4671
<211> 1200
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5483 Gm17:3554401..3555600
叢20
<400> 4671
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6474 Gm19:40558401..40560100
叢20
<400> 4672
<210> 4673
<211> 1701
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6493 Gm19:41740618..41742318
叢20
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1253 Gm04:6333701..6335200
叢20
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢20
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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<212> DNA
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<220>
<223> 大豆_ogl_2319 Gm07:10198669..10200200
叢20
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<212> DNA
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叢20
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叢20
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<213> 黃豆
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叢20
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叢20
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<213> 黃豆
<220>
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叢20
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叢20
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<213> 黃豆
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叢20
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<213> 黃豆
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叢20
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叢20
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叢20
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叢20
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叢20
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<220>
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叢20
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叢20
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叢20
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<220>
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叢20
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<213> 黃豆
<220>
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叢20
<400> 4838
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<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3890 Gm11:30095337..30097400
叢20
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<213> 黃豆
<220>
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叢20
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<213> 黃豆
<220>
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叢20
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<213> 黃豆
<220>
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叢20
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<220>
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叢20
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叢20
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<220>
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叢20
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<220>
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叢20
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<220>
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叢20
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<220>
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叢20
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<220>
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叢20
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<220>
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叢20
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<220>
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叢20
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<213> 黃豆
<220>
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叢20
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢20
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<213> 黃豆
<220>
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叢20
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<212> DNA
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<220>
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叢20
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢20
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<220>
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叢20
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<220>
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叢20
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<220>
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叢20
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<220>
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叢20
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<220>
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叢20
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<220>
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叢20
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<220>
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叢20
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叢20
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<220>
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叢20
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<212> DNA
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<220>
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叢20
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叢20
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<220>
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叢20
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叢20
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叢20
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<220>
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叢20
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<220>
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叢20
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<220>
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叢20
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<220>
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叢21
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<220>
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叢21
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<220>
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叢21
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<220>
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叢21
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<220>
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叢21
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<220>
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叢21
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<220>
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叢21
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<220>
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叢21
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<220>
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叢21
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<220>
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叢21
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<220>
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叢21
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<220>
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叢21
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叢21
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<220>
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<220>
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<220>
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叢22
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<220>
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<220>
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<220>
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<212> DNA
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<220>
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叢22
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<212> DNA
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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<212> DNA
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<220>
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叢22
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叢22
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叢22
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<220>
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叢22
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<220>
<223> 大豆_ogl_280 Gm01:52113501..52114700
叢22
<400> 4916
<210> 4917
<211> 1359
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4 Gm03:41909342..41910700
叢22
<400> 4917
<210> 4918
<211> 1100
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1703 Gm05:37349501..373200
叢22
<400> 4918
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<211> 1100
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2197 Gm07:4896301..4897400
叢22
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2930 Gm09:1334101..1335400
叢22
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<211> 1400
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4098 Gm12:35676701..35678100
叢22
<400> 4921
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4539 Gm13:38161125..38162373
叢22
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢22
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<213> 黃豆
<220>
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叢22
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢22
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<220>
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叢22
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<220>
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叢22
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<220>
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叢22
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢22
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<220>
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叢22
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2945 Gm09:2184701..2186400
叢22
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢22
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢22
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<213> 黃豆
<220>
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叢22
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢22
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4125 Gm12:37549418..37550500
叢22
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢22
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<220>
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叢22
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<220>
<223> 大豆_ogl_3289 Gm10:833901..835100
叢22
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<213> 黃豆
<220>
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叢22
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<220>
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叢22
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<220>
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叢22
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<213> 黃豆
<220>
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叢22
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<213> 黃豆
<220>
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叢22
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<220>
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叢22
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<213> 黃豆
<220>
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叢22
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<220>
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叢22
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<213> 黃豆
<220>
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叢22
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<220>
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叢22
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<212> DNA
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<220>
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<213> 黃豆
<220>
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叢22
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<213> 黃豆
<220>
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叢22
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<220>
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叢22
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢22
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<213> 黃豆
<220>
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叢22
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<220>
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<220>
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叢22
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<220>
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<220>
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叢22
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<220>
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叢22
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<220>
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<220>
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叢22
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<220>
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叢22
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<213> 黃豆
<220>
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叢22
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<220>
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叢22
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<220>
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叢22
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<220>
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叢22
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<220>
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叢22
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<220>
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叢22
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<220>
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<220>
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叢22
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<220>
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<220>
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<213> 黃豆
<220>
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叢22
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<220>
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<212> DNA
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<220>
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叢22
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<213> 黃豆
<220>
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叢22
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢22
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢22
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<212> DNA
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<220>
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叢22
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<220>
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叢22
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<220>
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叢22
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<220>
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叢22
<400> 4987
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢22
<400> 4988
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<213> 黃豆
<220>
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叢22
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<213> 黃豆
<220>
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叢22
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<220>
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叢22
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<213> 黃豆
<220>
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叢22
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<220>
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<220>
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叢22
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢22
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<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1774 Gm06:3140707..3141799
叢22
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<213> 黃豆
<220>
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<213> 黃豆
<220>
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叢22
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢22
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<220>
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叢22
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<220>
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叢22
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叢22
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<220>
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叢22
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<220>
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叢22
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<220>
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叢22
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<220>
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叢22
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<220>
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<220>
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叢22
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<220>
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<220>
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叢22
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<220>
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叢22
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<220>
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叢22
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<220>
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<220>
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叢22
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<220>
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<220>
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<220>
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<220>
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<220>
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叢22
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<220>
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叢22
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<220>
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<220>
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叢22
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<220>
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叢22
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<220>
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叢22
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叢22
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叢22
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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<220>
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叢22
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<220>
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<220>
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叢23
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<212> DNA
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<220>
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<220>
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<213> 黃豆
<220>
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叢23
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<220>
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<220>
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<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6126 Gm18:51139179..51140700
叢23
<400> 5075
<210> 5076
<211> 1051
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2539 Gm08:73291..7366251
叢23
<400> 5076
<210> 5077
<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_112 Gm01:36169101..36170100
叢23
<400> 5077
<210> 5078
<211> 1406
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2375 Gm07:29399995..29401400
叢23
<400> 5078
<210> 5079
<211> 1186
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4029 Gm12:9437615..9438800
叢23
<400> 5079
<210> 5080
<211> 1652
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_149 Gm01:43458401..43460052
叢23
<400> 5080
<210> 5081
<211> 1092
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1596 Gm05:4941209..4942300
叢23
<400> 5081
<210> 5082
<211> 1111
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1331 Gm04:40998201..40999311
叢23
<400> 5082
<210> 5083
<211> 1400
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4066 Gm12:334131..33431100
叢23
<400> 5083
<210> 5084
<211> 1137
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6243 Gm18:58133948..581144
叢23
<400> 5084
<210> 5085
<211> 1100
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3894 Gm11:32895601..32896700
叢23
<400> 5085
<210> 5086
<211> 1200
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_464 Gm02:9982701..9983900
叢23
<400> 5086
<210> 5087
<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_470 Gm02:10284901..10285900
叢23
<400> 5087
<210> 5088
<211> 1144
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3385 Gm10:6272357..6273500
叢23
<400> 5088
<210> 5089
<211> 1107
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1300 Gm04:37898401..37899507
叢23
<400> 5089
<210> 5090
<211> 1322
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5126 Gm15:44931201..44932522
叢23
<400> 5090
<210> 5091
<211> 1050
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_521 Gm02:12825951..12827000
叢23
<400> 5091
<210> 5092
<211> 1235
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_522 Gm02:12875661..12876895
叢23
<400> 5092
<210> 5093
<211> 1073
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4761 Gm14:42685479..42686551
叢23
<400> 5093
<210> 5094
<211> 1033
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3900 Gm11:34239668..34240700
叢23
<400> 5094
<210> 5095
<211> 1208
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_597 Gm02:41328601..41329808
叢23
<400> 5095
<210> 5096
<211> 1100
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_879 Gm03:34787101..34788200
叢23
<400> 5096
<210> 5097
<211> 1164
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1325 Gm04:39564101..39565264
叢23
<400> 5097
<210> 5098
<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2055 Gm06:42571301..42572300
叢23
<400> 5098
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<211> 1358
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6363 Gm19:5326201..5327558
叢23
<400> 5099
<210> 5100
<211> 1281
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3527 Gm10:43857901..43859181
叢23
<400> 5100
<210> 5101
<211> 1243
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3525 Gm10:43827443..43828685
叢23
<400> 5101
<210> 5102
<211> 1800
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5689 Gm17:15291601..15293400
叢23
<400> 5102
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<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_131 Gm01:40073201..40074200
叢23
<400> 5103
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<211> 1354
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3407 Gm10:7735464..7736817
叢23
<400> 5104
<210> 5105
<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6043 Gm18:15442301..15443300
叢23
<400> 5105
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<211> 1100
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6394 Gm19:34910101..34911200
叢23
<400> 5106
<210> 5107
<211> 1564
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6152 Gm18:53322737..53324300
叢23
<400> 5107
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<211> 1300
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4357 Gm13:29954601..29955900
叢23
<400> 5108
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<211> 1489
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_752 Gm02:49911912..49913400
叢23
<400> 5109
<210> 5110
<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_140 Gm01:41920201..41921200
叢23
<400> 5110
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<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_589 Gm02:40363901..40364900
叢23
<400> 5111
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<211> 1200
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1632 Gm05:29653301..29654500
叢23
<400> 5112
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<211> 1014
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2825 Gm08:39215336..39216349
叢23
<400> 5113
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5376 Gm16:30188341..30190200
叢23
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_123 Gm01:38781601..38783200
叢23
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢23
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2303 Gm07:9185001..9186500
叢23
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2009 Gm06:82693..83700
叢23
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<210> 5119
<211> 1570
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2747 Gm08:17573701..17575270
叢23
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<211> 1437
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3384 Gm10:6269764..6271200
叢23
<400> 5120
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1804 Gm06:6582401..6583440
叢23
<400> 5121
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<211> 1100
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3333 Gm10:2950701..2951800
叢24
<400> 5122
<210> 5123
<211> 1913
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6614 Gm19:47397701..47399613
叢24
<400> 5123
<210> 5124
<211> 1100
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6959 Gm20:43616701..43617800
叢24
<400> 5124
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<211> 1200
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_411 Gm02:6032401..6033600
叢24
<400> 5125
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<211> 1445
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_924 Gm03:37351201..37352645
叢24
<400> 5126
<210> 5127
<211> 1260
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4436 Gm13:33695741..33697000
叢24
<400> 5127
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<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4437 Gm13:33697501..33698500
叢24
<400> 5128
<210> 5129
<211> 1400
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4715 Gm14:6389601..6391000
叢24
<400> 5129
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<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5792 Gm17:39659401..39660400
叢24
<400> 5130
<210> 5131
<211> 1100
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5584 Gm17:8331301..8332400
叢24
<400> 5131
<210> 5132
<211> 1363
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_612 Gm02:42628501..42629863
叢24
<400> 5132
<210> 5133
<211> 1647
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_386 Gm02:4990654..4992300
叢24
<400> 5133
<210> 5134
<211> 1473
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1255 Gm04:6529901..6531373
叢24
<400> 5134
<210> 5135
<211> 1286
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1397 Gm04:443015..44658700
叢24
<400> 5135
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6533 Gm19:43524201..43526100
叢24
<400> 5136
<210> 5137
<211> 1389
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_225 Gm01:49409263..491851
叢24
<400> 5137
<210> 5138
<211> 1068
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_330 Gm02:2707226..2708293
叢24
<400> 5138
<210> 5139
<211> 1019
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_368 Gm02:4068082..4069100
叢24
<400> 5139
<210> 5140
<211> 1254
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_696 Gm02:46291516..46292769
叢24
<400> 5140
<210> 5141
<211> 1348
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_722 Gm02:47724906..47726253
叢24
<400> 5141
<210> 5142
<211> 1412
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1237 Gm04:5543589..5545000
叢24
<400> 5142
<210> 5143
<211> 1100
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1493 Gm04:48615901..48617000
叢24
<400> 5143
<210> 5144
<211> 1400
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1859 Gm06:8525101..8526500
叢24
<400> 5144
<210> 5145
<211> 1567
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2482 Gm08:3207901..3209467
叢24
<400> 5145
<210> 5146
<211> 1099
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3759 Gm11:5840602..5841700
叢24
<400> 5146
<210> 5147
<211> 1300
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4574 Gm13:39494401..39495700
叢24
<400> 5147
<210> 5148
<211> 1397
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5016 Gm15:12517604..12519000
叢24
<400> 5148
<210> 5149
<211> 1035
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5490 Gm17:3632001..3633035
叢24
<400> 5149
<210> 5150
<211> 1024
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5774 Gm17:39204401..39205424
叢24
<400> 5150
<210> 5151
<211> 1300
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6653 Gm20:255701..257000
叢24
<400> 5151
<210> 5152
<211> 1396
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_7004 Gm20:45276805..45278200
叢24
<400> 5152
<210> 5153
<211> 1113
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_779 Gm03:836301..837413
叢24
<400> 5153
<210> 5154
<211> 1370
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5818 Gm17:40425931..40427300
叢24
<400> 5154
<210> 5155
<211> 1284
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6845 Gm20:38455717..38457000
叢24
<400> 5155
<210> 5156
<211> 1377
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_86 Gm01:3375924..3377300
叢24
<400> 5156
<210> 5157
<211> 1592
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4890 Gm15:3558101..3559692
叢24
<400> 5157
<210> 5158
<211> 2000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5205 Gm16:486301..488300
叢24
<400> 5158
<210> 5159
<211> 1400
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1057 Gm03:42905601..42907000
叢24
<400> 5159
<210> 5160
<211> 1300
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1176 Gm04:2171201..2172500
叢24
<400> 5160
<210> 5161
<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3588 Gm10:46711001..46712000
叢24
<400> 5161
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<211> 1300
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4112 Gm12:37015501..37016800
叢24
<400> 5162
<210> 5163
<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_32 Gm20:39167801..39168800
叢24
<400> 5163
<210> 5164
<211> 1400
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_435 Gm02:7225301..7226700
叢24
<400> 5164
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<211> 1100
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1567 Gm05:3070101..3071200
叢24
<400> 5165
<210> 5166
<211> 1024
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1824 Gm06:7210694..7211717
叢24
<400> 5166
<210> 5167
<211> 1300
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3493 Gm10:41100601..41101900
叢24
<400> 5167
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<211> 1800
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3974 Gm12:2255701....2257500
叢24
<400> 5168
<210> 5169
<211> 1584
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4810 Gm14:47752872..47754455
叢24
<400> 5169
<210> 5170
<211> 1900
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6173 Gm18:54514701..54516600
叢24
<400> 5170
<210> 5171
<211> 2000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6735 Gm20:33947401..33949400
叢24
<400> 5171
<210> 5172
<211> 1200
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_802 Gm03:1987101..1988300
叢24
<400> 5172
<210> 5173
<211> 1781
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1498 Gm04:48807120..48808900
叢24
<400> 5173
<210> 5174
<211> 1332
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2430 Gm07:38620686..38622017
叢24
<400> 5174
<210> 5175
<211> 1516
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3715 Gm11:3916201..3917716
叢24
<400> 5175
<210> 5176
<211> 1400
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_354 Gm02:3584101..3585500
叢24
<400> 5176
<210> 5177
<211> 1409
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2510 Gm08:4975224..4976632
叢24
<400> 5177
<210> 5178
<211> 1500
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6767 Gm20:35179201..35180700
叢24
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<211> 1567
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_261 Gm01:51045823..51047389
叢24
<400> 5179
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<211> 1600
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1861 Gm06:8555301..8556900
叢24
<400> 5180
<210> 5181
<211> 1300
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2169 Gm07:3831101..3832400
叢24
<400> 5181
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<211> 1100
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2491 Gm08:3464901..3466000
叢24
<400> 5182
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2742 Gm08:17216678..17217900
叢24
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3987 Gm12:3250201..3251442
叢24
<400> 5184
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<211> 1126
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5269 Gm16:3369701..3370826
叢24
<400> 5185
<210> 5186
<211> 1391
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5575 Gm17:8038910..8040300
叢24
<400> 5186
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<211> 1003
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_190 Gm01:47988..47919700
叢24
<400> 5187
<210> 5188
<211> 1038
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5026 Gm15:12902163..12903200
叢24
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<211> 1017
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2669 Gm08:13996701..13997717
叢24
<400> 5189
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5012 Gm15:12401785..12402800
叢24
<400> 5190
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5966 Gm18:6600601..6601938
叢24
<400> 5191
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<211> 1400
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_466 Gm02:9991601..9993000
叢24
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<211> 1400
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢24
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢24
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1961 Gm06:15514847..15515939
叢24
<400> 5195
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2321 Gm07:10333701..10334781
叢24
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<211> 1100
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢24
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2652 Gm08:133131..13330700
叢24
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢24
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<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5739 Gm17:37187101..37188100
叢24
<400> 5200
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6495 Gm19:41771733..41773000
叢24
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<211> 1100
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1939 Gm06:14173901..14175000
叢24
<400> 5202
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<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3017 Gm09:5680101..5681100
叢24
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<211> 1100
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2393 Gm07:36333801..36334900
叢24
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2709 Gm08:15681709..15682798
叢24
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢24
<400> 5206
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢24
<400> 5207
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<211> 1580
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6468 Gm19:40172401..40173980
叢24
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_845 Gm03:4605501..4606500
叢24
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<212> DNA
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<220>
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叢24
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<212> DNA
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<220>
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叢24
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_625 Gm02:43220315..43221316
叢24
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1358 Gm04:43037701..43038900
叢24
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2227 Gm07:6078301..6079719
叢24
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<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢24
<400> 5215
<210> 5216
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢24
<400> 5216
<210> 5217
<211> 1045
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6147 Gm18:53101556..53102600
叢24
<400> 5217
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<211> 1081
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6494 Gm19:41756201..41757281
叢24
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2244 Gm07:6972601..6973655
叢24
<400> 5219
<210> 5220
<211> 1100
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6347 Gm19:2508901..2510000
叢24
<400> 5220
<210> 5221
<211> 1088
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4369 Gm13:30696970..30698057
叢24
<400> 5221
<210> 5222
<211> 1197
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2333 Gm07:14500804..14502000
叢24
<400> 5222
<210> 5223
<211> 1382
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_627 Gm02:43327719..43329100
叢24
<400> 5223
<210> 5224
<211> 1157
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2323 Gm07:10438444..10439600
叢24
<400> 5224
<210> 5225
<211> 1300
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5665 Gm17:13124001..13125300
叢24
<400> 5225
<210> 5226
<211> 1075
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3874 Gm11:17720201..17721275
叢24
<400> 5226
<210> 5227
<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4095 Gm12:35533401..35534400
叢24
<400> 5227
<210> 5228
<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4239 Gm13:23832001..23833000
叢24
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<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5141 Gm15:47663001..47664000
叢24
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5339 Gm16:7503801..7505000
叢24
<400> 5230
<210> 5231
<211> 1200
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2182 Gm07:4405401..4406600
叢24
<400> 5231
<210> 5232
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3766 Gm11:6162101..6163157
叢24
<400> 5232
<210> 5233
<211> 1200
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4650 Gm14:4399201..4400400
叢24
<400> 5233
<210> 5234
<211> 1501
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6902 Gm20:40875985..408735
叢24
<400> 5234
<210> 5235
<211> 1125
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4709 Gm14:6262001..6263125
叢24
<400> 5235
<210> 5236
<211> 1142
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6826 Gm20:38000059..38001200
叢24
<400> 5236
<210> 5237
<211> 1055
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5203 Gm16:447101..448155
叢24
<400> 5237
<210> 5238
<211> 1100
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5934 Gm18:5138742..5139841
叢24
<400> 5238
<210> 5239
<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4480 Gm13:36216001..36217000
叢24
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5320 Gm16:5474001..5475059
叢24
<400> 5240
<210> 5241
<211> 1092
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1275 Gm04:7224501..7225592
叢24
<400> 5241
<210> 5242
<211> 1194
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1922 Gm06:13540207..13541400
叢24
<400> 5242
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<211> 1199
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3446 Gm10:38695913..38697111
叢24
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<211> 1300
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5390 Gm16:31193901..31195200
叢24
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<211> 1100
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6253 Gm18:58693201..58694300
叢24
<400> 5245
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<211> 1374
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4968 Gm15:10116301..10117674
叢24
<400> 5246
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<211> 1109
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2962 Gm09:3247301..3248409
叢24
<400> 5247
<210> 5248
<211> 1100
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_701 Gm02:46875101..46876200
叢24
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<210> 5249
<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_434 Gm02:7208201..7209200
叢24
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<210> 5250
<211> 1300
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_705 Gm02:47061701..47063000
叢24
<400> 5250
<210> 5251
<211> 1100
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2529 Gm08:6596401..6597500
叢24
<400> 5251
<210> 5252
<211> 1111
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1684 Gm05:35389590..35390700
叢24
<400> 5252
<210> 5253
<211> 1100
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6480 Gm19:41045401..41046500
叢24
<400> 5253
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<211> 1062
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1245 Gm04:5806254..5807315
叢24
<400> 5254
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢24
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<211> 1400
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3739 Gm11:5059401..20800
叢24
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4693 Gm14:5894601..5895756
叢24
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢24
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢24
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<211> 1130
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5504 Gm17:4377195..4378324
叢24
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢24
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢24
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢24
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<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6 Gm01:533101..534100
叢24
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4869 Gm15:2305383..2306429
叢24
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5446 Gm17:1325501..1326557
叢24
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2575 Gm08:9257634..9259026
叢24
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<212> DNA
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<220>
<223> 大豆_ogl_52 Gm01:2421450..2422500
叢24
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_370 Gm02:4074501..4075800
叢24
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<212> DNA
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<220>
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叢24
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2218 Gm07:5451701..5452800
叢24
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<212> DNA
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<220>
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叢24
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<220>
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叢24
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<220>
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叢24
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<212> DNA
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<220>
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叢24
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<212> DNA
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<220>
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叢24
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<220>
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叢24
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<220>
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叢24
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<220>
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叢24
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<212> DNA
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<220>
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叢24
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<213> 黃豆
<220>
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叢24
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<212> DNA
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<220>
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叢24
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<212> DNA
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<220>
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叢24
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<220>
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叢24
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<220>
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叢24
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<220>
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叢24
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢24
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<220>
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叢24
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<220>
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叢24
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<212> DNA
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<220>
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叢24
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<212> DNA
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<220>
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叢24
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢24
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢24
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<212> DNA
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<220>
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叢24
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢24
<400> 5295
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢24
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢24
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢24
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢24
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5578 Gm17:8097201..8098268
叢24
<400> 5300
<210> 5301
<211> 1060
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_359 Gm02:3714401..3715460
叢24
<400> 5301
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<211> 1143
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1854 Gm06:8335058..8336200
叢24
<400> 5302
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<211> 1410
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2089 Gm06:46269053..46270462
叢24
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<210> 5304
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2876 Gm08:43741701..43742704
叢24
<400> 5304
<210> 5305
<211> 1134
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2948 Gm09:2403867..21700
叢24
<400> 5305
<210> 5306
<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3827 Gm11:10437301..10438300
叢24
<400> 5306
<210> 5307
<211> 1004
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4626 Gm14:3822601..3823604
叢24
<400> 5307
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<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5915 Gm18:3032201..3033200
叢24
<400> 5308
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6611 Gm19:47353301..47354310
叢24
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1930 Gm06:13800101..13801300
叢24
<400> 5310
<210> 5311
<211> 1102
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_923 Gm03:37291201..37292302
叢24
<400> 5311
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<211> 1110
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<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2159 Gm07:3328301..3329410
叢24
<400> 5312
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<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3126 Gm09:36415801..36416800
叢24
<400> 5313
<210> 5314
<211> 1300
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1560 Gm05:2728401..27130
叢24
<400> 5314
<210> 5315
<211> 1200
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5570 Gm17:7659801..7661000
叢24
<400> 5315
<210> 5316
<211> 1394
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5253 Gm16:2309407..2310800
叢24
<400> 5316
<210> 5317
<211> 1343
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6966 Gm20:43992158..416500
叢24
<400> 5317
<210> 5318
<211> 1074
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4652 Gm14:4410327..4411400
叢24
<400> 5318
<210> 5319
<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_233 Gm01:49717101..49718100
叢24
<400> 5319
<210> 5320
<211> 1146
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1045 Gm03:42508301..42509446
叢24
<400> 5320
<210> 5321
<211> 1100
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6726 Gm20:33483401..33484500
叢24
<400> 5321
<210> 5322
<211> 1162
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1855 Gm06:8342839..8344000
叢24
<400> 5322
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<211> 1200
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2117 Gm07:1592001..1593200
叢24
<400> 5323
<210> 5324
<211> 1100
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2861 Gm08:42962101..42963200
叢24
<400> 5324
<210> 5325
<211> 1300
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3553 Gm10:45461701..45463000
叢24
<400> 5325
<210> 5326
<211> 1074
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3953 Gm11:38017401..38018474
叢24
<400> 5326
<210> 5327
<211> 1400
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4884 Gm15:2972401..2973800
叢24
<400> 5327
<210> 5328
<211> 1300
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6290 Gm18:60085201..60086500
叢24
<400> 5328
<210> 5329
<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1012 Gm03:41301201..41302200
叢24
<400> 5329
<210> 5330
<211> 1106
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1194 Gm04:2672868..2673973
叢24
<400> 5330
<210> 5331
<211> 1344
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4576 Gm13:39590557..39591900
叢24
<400> 5331
<210> 5332
<211> 1190
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1277 Gm04:7340711..7341900
叢24
<400> 5332
<210> 5333
<211> 1310
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3817 Gm11:10125101..10126410
叢24
<400> 5333
<210> 5334
<211> 1100
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4561 Gm13:38846801..38847900
叢24
<400> 5334
<210> 5335
<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6418 Gm19:38415101..38416100
叢24
<400> 5335
<210> 5336
<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_231 Gm01:49604301..49605300
叢24
<400> 5336
<210> 5337
<211> 1100
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_756 Gm02:50187001..50188100
叢24
<400> 5337
<210> 5338
<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1772 Gm06:3036501..3037500
叢24
<400> 5338
<210> 5339
<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1942 Gm06:14320401..14321400
叢24
<400> 5339
<210> 5340
<211> 1511
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2536 Gm08:7001501..7003011
叢24
<400> 5340
<210> 5341
<211> 1160
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4614 Gm14:2863933..2865092
叢24
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<211> 1100
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6178 Gm18:54859401..54860500
叢24
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<210> 5343
<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6431 Gm19:38618001..38619000
叢24
<400> 5343
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4724 Gm14:6718428..6719500
叢24
<400> 5344
<210> 5345
<211> 1200
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_657 Gm02:44756801..44758000
叢24
<400> 5345
<210> 5346
<211> 1198
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1890 Gm06:102272..10262069
叢24
<400> 5346
<210> 5347
<211> 1100
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6160 Gm18:53672001..53673100
叢24
<400> 5347
<210> 5348
<211> 1200
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3682 Gm11:1581601..1582800
叢24
<400> 5348
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<211> 1100
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_480 Gm02:10544401..10545500
叢24
<400> 5349
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<211> 1400
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1362 Gm04:43613801..43615200
叢24
<400> 5350
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<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1865 Gm06:8796201..8797200
叢24
<400> 5351
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4286 Gm13:26770344..26771600
叢24
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4217 Gm13:23277301..23278304
叢24
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢24
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<211> 1100
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢24
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3912 Gm11:35863401..35864600
叢24
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢24
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢24
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5592 Gm17:8787101..8788100
叢24
<400> 5359
<210> 5360
<211> 1009
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4995 Gm15:11412192..11413200
叢24
<400> 5360
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<211> 1043
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2084 Gm06:46160358..46161400
叢24
<400> 5361
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<211> 1200
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2247 Gm07:7422301..7423500
叢24
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2004 Gm06:17215576..17216657
叢24
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢24
<400> 5364
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2317 Gm07:10024801..10025800
叢24
<400> 5365
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢24
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<211> 1200
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢24
<400> 5367
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢24
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢24
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢24
<400> 5370
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<211> 1200
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢24
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<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3850 Gm11:16533301..16534300
叢24
<400> 5372
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢24
<400> 5373
<210> 5374
<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢24
<400> 5374
<210> 5375
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4356 Gm13:29934530..29936000
叢24
<400> 5375
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢24
<400> 5376
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢24
<400> 5377
<210> 5378
<211> 1200
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢24
<400> 5378
<210> 5379
<211> 1455
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_163 Gm01:44509046..44510500
叢24
<400> 5379
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<211> 1034
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6119 Gm18:50890001..50891034
叢24
<400> 5380
<210> 5381
<211> 1014
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5150 Gm15:48185187..48186200
叢24
<400> 5381
<210> 5382
<211> 1059
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1914 Gm06:12032925..12033983
叢24
<400> 5382
<210> 5383
<211> 1034
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6019 Gm18:11712867..11713900
叢24
<400> 5383
<210> 5384
<211> 1048
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1270 Gm04:7128012..7129059
叢24
<400> 5384
<210> 5385
<211> 1300
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1965 Gm06:152701..15610000
叢24
<400> 5385
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<211> 1258
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2315 Gm07:9896901..9898158
叢24
<400> 5386
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<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4121 Gm12:37369401..37370400
叢24
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<211> 1200
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4306 Gm13:232801..234000
叢24
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<211> 1400
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6198 Gm18:56268001..56269400
叢24
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2824 Gm08:39101601..39102700
叢24
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3085 Gm09:29896845..29898065
叢24
<400> 5391
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_840 Gm03:4504213..4505227
叢24
<400> 5392
<210> 5393
<211> 1044
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_889 Gm03:35987401..35988444
叢24
<400> 5393
<210> 5394
<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2225 Gm07:6003701..6004700
叢24
<400> 5394
<210> 5395
<211> 1100
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2239 Gm07:6751801..6752900
叢24
<400> 5395
<210> 5396
<211> 1200
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2857 Gm08:41791401..41792600
叢24
<400> 5396
<210> 5397
<211> 1111
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3795 Gm11:8087453..8088563
叢24
<400> 5397
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<211> 1058
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6649 Gm20:1301..175858
叢24
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<210> 5399
<211> 1300
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3111 Gm09:35509601..35510900
叢24
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<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4272 Gm13:26120301..26121300
叢24
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<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5057 Gm15:15206801..15207800
叢24
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_894 Gm03:36231201..36232479
叢24
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<211> 1058
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6509 Gm19:42401801..42402858
叢24
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<211> 1100
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_616 Gm02:42916601..42917700
叢24
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<211> 1200
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1967 Gm06:15653301..15654500
叢24
<400> 5405
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<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2838 Gm08:40989501..40990500
叢24
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<211> 1300
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4308 Gm13:27601301..27602600
叢24
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<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4377 Gm13:31004101..31005100
叢24
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<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1218 Gm04:4278401..4279400
叢24
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<211> 1049
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4379 Gm13:31025801..31026849
叢24
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<210> 5411
<211> 1100
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4580 Gm13:39694301..39695400
叢24
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<211> 1100
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6476 Gm19:40852201..40853300
叢24
<400> 5412
<210> 5413
<211> 1100
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6594 Gm19:45392101..45393200
叢24
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2579 Gm08:9330701..9332000
叢24
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<211> 1500
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2860 Gm08:41866701..41868200
叢24
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<211> 1148
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1595 Gm05:4912401..4913548
叢24
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_626 Gm02:43253901..43254930
叢24
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3660 Gm11:241801..242885
叢24
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<212> DNA
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<220>
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叢24
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢24
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<212> DNA
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<220>
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叢24
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢24
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3275 Gm10:199501..200500
叢24
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢24
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢24
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢24
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5145 Gm15:47940315..47941500
叢24
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5603 Gm17:9221401..9222400
叢24
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1328 Gm04:39841601..39842629
叢24
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢24
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢24
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<212> DNA
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<220>
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叢24
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<220>
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叢24
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<212> DNA
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<220>
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叢24
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<220>
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叢24
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<220>
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叢24
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<220>
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叢24
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<220>
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叢24
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢24
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<220>
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叢24
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢24
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<212> DNA
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<220>
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叢24
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<220>
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叢24
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<220>
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叢24
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<220>
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叢24
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<212> DNA
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<220>
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叢24
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<212> DNA
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<220>
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叢24
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<213> 黃豆
<220>
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叢24
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<212> DNA
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<220>
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叢24
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<212> DNA
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<220>
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叢24
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢24
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<212> DNA
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<220>
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叢24
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<212> DNA
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<220>
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叢24
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢24
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢24
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢24
<400> 5456
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<211> 1371
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢24
<400> 5457
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢24
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢24
<400> 5459
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1809 Gm06:6675301..6676379
叢24
<400> 5460
<210> 5461
<211> 1200
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2391 Gm07:36234501..36235700
叢24
<400> 5461
<210> 5462
<211> 1300
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3934 Gm11:37057001..37058300
叢24
<400> 5462
<210> 5463
<211> 1300
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4999 Gm15:11468201..11469500
叢24
<400> 5463
<210> 5464
<211> 1160
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1178 Gm04:2184601..2185760
叢24
<400> 5464
<210> 5465
<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2975 Gm09:3917301..3918300
叢24
<400> 5465
<210> 5466
<211> 1177
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5907 Gm18:2687324..2688500
叢24
<400> 5466
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1040 Gm03:42261701..42262800
叢24
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5007 Gm15:11961301..11962670
叢24
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_55 Gm01:2467519..2468600
叢24
<400> 5469
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_419 Gm02:6528401..6529438
叢24
<400> 5470
<210> 5471
<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_798 Gm03:1858401..1859400
叢24
<400> 5471
<210> 5472
<211> 1098
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2478 Gm08:2871501..2872598
叢24
<400> 5472
<210> 5473
<211> 1347
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3474 Gm10:40551554..40552900
叢24
<400> 5473
<210> 5474
<211> 1100
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3560 Gm10:46074201..46075300
叢24
<400> 5474
<210> 5475
<211> 1300
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4848 Gm15:1021701..1023000
叢24
<400> 5475
<210> 5476
<211> 1200
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6270 Gm18:59195101..59196300
叢24
<400> 5476
<210> 5477
<211> 1339
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6550 Gm19:44088758..44090096
叢24
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<210> 5478
<211> 1392
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6884 Gm20:40282401..40283792
叢24
<400> 5478
<210> 5479
<211> 1398
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2198 Gm07:4938803..4940200
叢24
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<210> 5480
<211> 1026
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1386 Gm04:44218275..44219300
叢24
<400> 5480
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<211> 1300
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_903 Gm03:36495101..36496400
叢24
<400> 5481
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<211> 1214
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3147 Gm09:37140810..37142023
叢24
<400> 5482
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<211> 1054
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_930 Gm03:37510347..37511400
叢24
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_941 Gm03:37739896..37740900
叢24
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<210> 5485
<211> 1202
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_945 Gm03:38092699..38093900
叢24
<400> 5485
<210> 5486
<211> 1097
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1100 Gm03:45535504..45536600
叢24
<400> 5486
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<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6217 Gm18:56848201..56849200
叢24
<400> 5487
<210> 5488
<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_241 Gm01:49933301..49934300
叢24
<400> 5488
<210> 5489
<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_902 Gm03:36365901..36366900
叢24
<400> 5489
<210> 5490
<211> 1055
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1422 Gm04:45808246..45809300
叢24
<400> 5490
<210> 5491
<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2982 Gm09:4082301..4083300
叢24
<400> 5491
<210> 5492
<211> 1200
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3164 Gm09:37949001..37950200
叢24
<400> 5492
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<211> 1300
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3662 Gm11:274501..275800
叢24
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<211> 1100
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3972 Gm12:1665301..1666400
叢24
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<211> 1300
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5569 Gm17:7655601..7656900
叢24
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<211> 1130
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6843 Gm20:38444001..38445130
叢24
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<211> 1100
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2190 Gm07:4565501..4566600
叢24
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<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3234 Gm09:40491201..40492200
叢24
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<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4910 Gm15:8291901..8292900
叢24
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢24
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<211> 1100
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3050 Gm09:9378701..9379800
叢24
<400> 5501
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<211> 1460
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6697 Gm20:3052584..3054043
叢24
<400> 5502
<210> 5503
<211> 1087
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_283 Gm01:52131314..52132400
叢24
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3794 Gm11:8046005..8047053
叢24
<400> 5504
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5364 Gm16:29249601..29250926
叢24
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5394 Gm16:31419385..31420600
叢24
<400> 5506
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<211> 1301
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5556 Gm17:6984501..6985801
叢24
<400> 5507
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6576 Gm19:44796601..44797700
叢24
<400> 5508
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4277 Gm13:228301..26322563
叢24
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢24
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<212> DNA
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<220>
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叢24
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<211> 1100
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢24
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<212> DNA
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<220>
<223> 大豆_ogl_2599 Gm08:10780560..10781579
叢24
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3027 Gm09:5938501..5939700
叢24
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<220>
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叢24
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<212> DNA
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<220>
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叢24
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<212> DNA
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<220>
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叢24
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢24
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3867 Gm11:17347001..17348000
叢24
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2546 Gm08:7765875..7767500
叢25
<400> 5520
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4872 Gm15:2521616..2523245
叢25
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢25
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢25
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢25
<400> 5524
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢25
<400> 5525
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4867 Gm15:2299512..2301500
叢25
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢25
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6732 Gm20:33879601..33881535
叢25
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<212> DNA
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<220>
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叢25
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2172 Gm07:4019801..4021100
叢25
<400> 5530
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<211> 1700
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4993 Gm15:11307101..11308800
叢25
<400> 5531
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢25
<400> 5532
<210> 5533
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5605 Gm17:9297801..9298998
叢25
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<210> 5534
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6908 Gm20:41111101..41112201
叢25
<400> 5534
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<211> 1401
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_7010 Gm20:45972401..45973801
叢25
<400> 5535
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<211> 1500
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢25
<400> 5536
<210> 5537
<211> 1354
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2486 Gm08:3272047..3273400
叢25
<400> 5537
<210> 5538
<211> 1549
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4853 Gm15:1419701..1421249
叢25
<400> 5538
<210> 5539
<211> 1597
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_603 Gm02:42093304..42094900
叢25
<400> 5539
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2475 Gm08:2780860..2782320
叢25
<400> 5540
<210> 5541
<211> 1467
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2743 Gm08:17226334..17227800
叢25
<400> 5541
<210> 5542
<211> 1600
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5918 Gm18:3061601..3063200
叢25
<400> 5542
<210> 5543
<211> 1350
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3922 Gm11:36189501..36190850
叢25
<400> 5543
<210> 5544
<211> 1206
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_673 Gm02:45292001..45293206
叢25
<400> 5544
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<211> 1400
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_228 Gm01:49571301..49572700
叢25
<400> 5545
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_288 Gm01:52277740..52279100
叢25
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<220>
<223> 大豆_ogl_389 Gm02:5107901..5108960
叢25
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2226 Gm07:6005701..6007500
叢25
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2956 Gm09:2833801..2835200
叢25
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<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5866 Gm18:1426701..1428200
叢25
<400> 5551
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2629 Gm08:12390492..12391900
叢25
<400> 5552
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<213> 黃豆
<220>
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叢25
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢25
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢25
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<213> 黃豆
<220>
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叢25
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<220>
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叢25
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叢25
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<220>
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叢25
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<213> 黃豆
<220>
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叢25
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<220>
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<220>
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叢25
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<212> DNA
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<220>
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叢25
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<220>
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叢25
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<220>
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叢25
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<220>
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叢25
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<212> DNA
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<220>
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叢25
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<220>
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叢25
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<220>
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叢25
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢25
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<212> DNA
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<220>
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叢25
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<220>
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叢25
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<220>
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叢25
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<220>
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叢25
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<220>
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叢25
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<220>
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叢25
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<220>
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叢25
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叢25
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<220>
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叢25
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叢25
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<212> DNA
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<220>
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叢25
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<220>
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<220>
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叢25
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叢25
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叢25
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<220>
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叢25
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<220>
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叢25
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<220>
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叢25
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<220>
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叢25
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叢25
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<220>
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<212> DNA
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<220>
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叢25
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<220>
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叢25
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<220>
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叢25
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<220>
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叢25
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<220>
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叢25
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<220>
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叢25
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<220>
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叢25
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<220>
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叢25
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<220>
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叢25
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<220>
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叢25
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<220>
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叢25
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<212> DNA
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<220>
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叢25
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<220>
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叢25
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叢25
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叢25
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<220>
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叢25
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<220>
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<212> DNA
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叢25
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叢25
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<220>
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<220>
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<212> DNA
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<220>
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叢25
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<220>
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叢25
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢25
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢25
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢25
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6355 Gm19:2973901..2975600
叢25
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<220>
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<220>
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<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6301 Gm19:166301..167363
叢25
<400> 5630
<210> 5631
<211> 1800
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_165 Gm01:44891101..44892900
叢25
<400> 5631
<210> 5632
<211> 2400
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4195 Gm13:21990801..21993200
叢25
<400> 5632
<210> 5633
<211> 1800
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4328 Gm13:28481601..28483400
叢25
<400> 5633
<210> 5634
<211> 2100
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2739 Gm08:17002401..17004500
叢25
<400> 5634
<210> 5635
<211> 1261
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4336 Gm13:29003401..29004661
叢25
<400> 5635
<210> 5636
<211> 1400
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4778 Gm14:45199801..45201200
叢25
<400> 5636
<210> 5637
<211> 1818
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5052 Gm15:14963101..14964918
叢25
<400> 5637
<210> 5638
<211> 1700
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5358 Gm16:27070801..27072500
叢25
<400> 5638
<210> 5639
<211> 1100
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6400 Gm19:36552201..36553300
叢25
<400> 5639
<210> 5640
<211> 1100
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2578 Gm08:9302701..9303800
叢25
<400> 5640
<210> 5641
<211> 1200
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4316 Gm13:27951801..27953000
叢25
<400> 5641
<210> 5642
<211> 1407
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2440 Gm08:740994..742400
叢25
<400> 5642
<210> 5643
<211> 1066
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1066 Gm03:43178235..43179300
叢25
<400> 5643
<210> 5644
<211> 1116
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_12 Gm05:1140301..1141416
叢25
<400> 5644
<210> 5645
<211> 1455
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4607 Gm14:2192001..2193455
叢25
<400> 5645
<210> 5646
<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4903 Gm15:4259101..4260100
叢25
<400> 5646
<210> 5647
<211> 1235
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5458 Gm17:2305101..2306335
叢25
<400> 5647
<210> 5648
<211> 1200
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3963 Gm12:780101..781300
叢25
<400> 5648
<210> 5649
<211> 1400
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1740 Gm06:381701..383100
叢25
<400> 5649
<210> 5650
<211> 1319
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3656 Gm10:49675382..49676700
叢25
<400> 5650
<210> 5651
<211> 1200
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3273 Gm10:174501..175700
叢25
<400> 5651
<210> 5652
<211> 1106
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_677 Gm02:45339586..45340691
叢25
<400> 5652
<210> 5653
<211> 1200
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1770 Gm06:2801001..2802200
叢25
<400> 5653
<210> 5654
<211> 1618
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3678 Gm11:1460383..1462000
叢25
<400> 5654
<210> 5655
<211> 1400
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4866 Gm15:2239201..2240600
叢25
<400> 5655
<210> 5656
<211> 1360
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6245 Gm18:58183831..58185190
叢25
<400> 5656
<210> 5657
<211> 1066
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6633 Gm19:49835435..49836500
叢25
<400> 5657
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<211> 1317
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1071 Gm03:43597284..43598600
叢25
<400> 5658
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<211> 1090
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1787 Gm06:3526644..3527733
叢25
<400> 5659
<210> 5660
<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2135 Gm07:2608901..2609900
叢25
<400> 5660
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<211> 1083
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4553 Gm13:38569218..38570300
叢25
<400> 5661
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<211> 1215
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5453 Gm17:1940286..1941500
叢25
<400> 5662
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<211> 1200
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4366 Gm13:30606401..30607600
叢25
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<211> 1260
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4416 Gm13:32918141..32919400
叢25
<400> 5664
<210> 5665
<211> 1762
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6156 Gm18:53538305..53540066
叢25
<400> 5665
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<211> 1200
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2087 Gm06:46249701..46250900
叢25
<400> 5666
<210> 5667
<211> 1244
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4349 Gm13:29737501..29738744
叢25
<400> 5667
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<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5009 Gm15:12049901..12050900
叢25
<400> 5668
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5553 Gm17:6619901..6621100
叢25
<400> 5669
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6179 Gm18:54931477..54932500
叢25
<400> 5670
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2383 Gm07:35735101..35736229
叢25
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1635 Gm05:30736632..30737800
叢25
<400> 5672
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3032 Gm09:6507601..6508718
叢25
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4267 Gm13:25779797..25780800
叢25
<400> 5674
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<211> 1200
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢25
<400> 5675
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<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6307 Gm19:372101..373100
叢25
<400> 5676
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2710 Gm08:15724601..15726164
叢25
<400> 5677
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<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_457 Gm02:9599401..9600400
叢25
<400> 5678
<210> 5679
<211> 1034
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_186 Gm01:47553967..47555000
叢25
<400> 5679
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<211> 1400
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_704 Gm02:47041101..47042500
叢25
<400> 5680
<210> 5681
<211> 1298
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1578 Gm05:3494703..3496000
叢25
<400> 5681
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<211> 1200
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6325 Gm19:1902301..1903500
叢25
<400> 5682
<210> 5683
<211> 1200
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1882 Gm06:9645801..9647000
叢25
<400> 5683
<210> 5684
<211> 1300
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_441 Gm02:7729601..7730900
叢25
<400> 5684
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<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5046 Gm15:13763501..13764500
叢25
<400> 5685
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<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_443 Gm02:8389101..8390100
叢25
<400> 5686
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<211> 1100
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_796 Gm03:1725501..1726600
叢26
<400> 5687
<210> 5688
<211> 1100
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3628 Gm10:48647201..48648300
叢26
<400> 5688
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<211> 1412
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3954 Gm11:38090489..38091900
叢26
<400> 5689
<210> 5690
<211> 1618
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3964 Gm12:1184501..1186118
叢26
<400> 5690
<210> 5691
<211> 1761
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4387 Gm13:311501..31369361
叢26
<400> 5691
<210> 5692
<211> 1463
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5854 Gm18:1046601..1048063
叢26
<400> 5692
<210> 5693
<211> 1506
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6832 Gm20:38097301..38098806
叢26
<400> 5693
<210> 5694
<211> 1289
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_992 Gm03:39906955..39908243
叢26
<400> 5694
<210> 5695
<211> 1349
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4962 Gm15:9865901..9867249
叢26
<400> 5695
<210> 5696
<211> 1500
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6794 Gm20:36722601..36724100
叢26
<400> 5696
<210> 5697
<211> 1600
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3743 Gm11:5159201..5160800
叢26
<400> 5697
<210> 5698
<211> 1997
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1208 Gm04:4023654..4025650
叢26
<400> 5698
<210> 5699
<211> 1139
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1239 Gm04:5591001..5592139
叢26
<400> 5699
<210> 5700
<211> 1177
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1551 Gm05:2373224..2374400
叢26
<400> 5700
<210> 5701
<211> 1026
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5782 Gm17:39489401..39490426
叢26
<400> 5701
<210> 5702
<211> 1042
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5834 Gm17:41311159..41312200
叢26
<400> 5702
<210> 5703
<211> 1100
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6962 Gm20:43687701..43688800
叢26
<400> 5703
<210> 5704
<211> 1200
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1403 Gm04:44791001..44792200
叢26
<400> 5704
<210> 5705
<211> 1233
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3306 Gm10:1801935..1803167
叢26
<400> 5705
<210> 5706
<211> 1229
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4461 Gm13:35610701..35611929
叢26
<400> 5706
<210> 5707
<211> 1338
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4009 Gm12:5182763..5184100
叢26
<400> 5707
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3780 Gm11:6949446..6951200
叢26
<400> 5708
<210> 5709
<211> 1300
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4818 Gm14:48380001..48381300
叢26
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<210> 5710
<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5298 Gm16:4704901..4705900
叢26
<400> 5710
<210> 5711
<211> 1153
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6416 Gm19:38399248..38400400
叢26
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<211> 1200
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<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3453 Gm10:39179601..39180800
叢26
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<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2935 Gm09:1648922..1649968
叢26
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<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6618 Gm19:49102189..49103500
叢26
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<220>
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叢26
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<220>
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叢26
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叢26
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<220>
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叢26
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<220>
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叢26
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<220>
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叢26
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<220>
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<220>
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叢26
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<220>
<223> 大豆_ogl_3768 Gm11:6289962..6291300
叢26
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<220>
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叢26
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<220>
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叢26
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<220>
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<220>
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<220>
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叢26
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<220>
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叢26
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<220>
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叢26
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<220>
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叢26
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<220>
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<220>
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<220>
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叢26
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<220>
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叢26
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<220>
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叢26
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<220>
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叢26
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<220>
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叢26
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<220>
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叢26
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<213> 黃豆
<220>
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叢26
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<220>
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<220>
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<220>
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<220>
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<220>
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<220>
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<220>
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<220>
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叢26
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<220>
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叢26
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<220>
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叢26
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<220>
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<220>
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叢26
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叢26
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<220>
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叢26
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<220>
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<212> DNA
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<213> 黃豆
<220>
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叢26
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<220>
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叢26
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<220>
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<213> 黃豆
<220>
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叢26
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<211> 1500
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢26
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<213> 黃豆
<220>
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叢26
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叢26
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叢26
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<220>
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叢26
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<220>
<223> 大豆_ogl_6643 Gm19:50156701..50157900
叢26
<400> 5868
<210> 5869
<211> 1176
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4113 Gm12:37191301..37192476
叢26
<400> 5869
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<211> 1300
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_305 Gm02:1030901..1032200
叢26
<400> 5870
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<211> 1200
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_791 Gm03:1580201..1581400
叢26
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<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1065 Gm03:43114801..43116700
叢26
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<213> 黃豆
<220>
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叢26
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<213> 黃豆
<220>
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叢26
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<220>
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叢26
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<220>
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叢26
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<220>
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叢26
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叢26
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<220>
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叢26
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<220>
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<220>
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叢26
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<213> 黃豆
<220>
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叢26
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<220>
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叢26
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<220>
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叢26
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<220>
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<220>
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叢26
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<220>
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叢26
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<220>
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叢26
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<220>
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叢26
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<220>
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叢26
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<220>
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叢26
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<212> DNA
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<220>
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叢26
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<220>
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<220>
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<220>
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<220>
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叢26
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<220>
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叢26
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<220>
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<220>
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<220>
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<220>
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叢26
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<220>
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<220>
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<220>
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叢26
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叢26
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<212> DNA
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<220>
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<220>
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叢26
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<211> 1035
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢26
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<220>
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叢26
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叢26
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<213> 黃豆
<220>
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叢26
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<220>
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叢26
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<212> DNA
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叢26
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5468 Gm17:3092401..3093700
叢26
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<220>
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<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6581 Gm19:44891101..44892100
叢26
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢26
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6619 Gm19:49196539..49197700
叢26
<400> 5950
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6903 Gm20:40878588..40879800
叢26
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<213> 黃豆
<220>
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叢26
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<220>
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叢26
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<220>
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叢26
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<220>
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叢26
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叢26
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<220>
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叢26
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<220>
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叢26
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<220>
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叢26
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<220>
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叢26
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<220>
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叢26
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<220>
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叢26
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<220>
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叢26
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<213> 黃豆
<220>
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叢26
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<220>
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叢26
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<220>
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叢26
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<220>
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叢26
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<220>
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叢26
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<220>
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叢26
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<220>
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<220>
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叢26
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<220>
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叢26
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<220>
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叢26
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<220>
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<220>
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叢26
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<220>
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叢26
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叢26
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叢26
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<220>
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叢26
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<220>
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<220>
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叢26
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<220>
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叢26
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<220>
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<220>
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叢26
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叢26
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<220>
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叢26
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<220>
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叢26
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<220>
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<220>
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叢26
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<220>
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叢26
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<220>
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叢26
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<220>
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叢26
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<220>
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叢26
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<220>
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叢26
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<220>
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叢26
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<220>
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叢26
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<220>
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<220>
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叢26
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叢26
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叢26
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<220>
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叢26
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<220>
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叢26
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<220>
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叢26
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叢26
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<220>
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<212> DNA
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<220>
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叢26
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<213> 黃豆
<220>
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<220>
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<220>
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叢26
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<220>
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叢26
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<220>
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<212> DNA
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<220>
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<220>
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叢26
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<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3205 Gm09:39812401..39813456
叢26
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<220>
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<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4940 Gm15:9241601..9242600
叢26
<400> 6027
<210> 6028
<211> 1089
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6300 Gm18:60226951..60228039
叢26
<400> 6028
<210> 6029
<211> 1003
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1167 Gm04:1833205..1834207
叢26
<400> 6029
<210> 6030
<211> 1139
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2875 Gm08:43718062..43719200
叢26
<400> 6030
<210> 6031
<211> 1121
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1564 Gm05:2983880..2985000
叢26
<400> 6031
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<211> 1200
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4905 Gm15:4438001..4439200
叢26
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<211> 1037
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3673 Gm11:1317964..1319000
叢26
<400> 6033
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6276 Gm18:59440074..59441299
叢26
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<211> 1300
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_363 Gm02:3862501..3863800
叢26
<400> 6035
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<211> 1122
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_366 Gm02:3961872..3962993
叢26
<400> 6036
<210> 6037
<211> 1516
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1078 Gm03:44018485..44020000
叢26
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<211> 1300
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2114 Gm07:1381701..1383000
叢26
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<211> 1300
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢26
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6940 Gm20:42592969..42594000
叢26
<400> 6040
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<211> 1344
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_187 Gm01:47709757..47711100
叢26
<400> 6041
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<211> 1100
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_325 Gm02:2460001..2461100
叢26
<400> 6042
<210> 6043
<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3188 Gm09:39190301..39191300
叢26
<400> 6043
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<211> 1161
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5329 Gm16:5756740..5757900
叢26
<400> 6044
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5867 Gm18:12401..1507600
叢26
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<211> 1250
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢26
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<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6642 Gm19:50135701..50136700
叢26
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<211> 1100
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6827 Gm20:38003901..38005000
叢26
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢26
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<220>
<223> 大豆_ogl_2630 Gm08:12393101..12394468
叢26
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<212> DNA
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<220>
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叢26
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1111 Gm03:46173401..46174996
叢26
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<213> 黃豆
<220>
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叢26
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<220>
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叢26
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<220>
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叢26
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<220>
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叢26
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<212> DNA
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<220>
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叢26
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<220>
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叢26
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢26
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1462 Gm04:47265239..47266330
叢26
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<212> DNA
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<220>
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叢26
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1537 Gm05:1968101..1969113
叢26
<400> 6062
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢26
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4842 Gm15:844104..845300
叢26
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<212> DNA
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<220>
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叢26
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<212> DNA
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<220>
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叢26
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<212> DNA
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<220>
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叢26
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<220>
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叢26
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<220>
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叢26
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<220>
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叢26
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<220>
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叢26
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<212> DNA
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<220>
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<220>
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叢26
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<220>
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叢26
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<212> DNA
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<220>
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叢26
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<220>
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叢26
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<220>
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叢26
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<220>
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叢26
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<220>
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叢26
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<220>
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叢26
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<212> DNA
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<220>
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叢26
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<212> DNA
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<220>
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叢26
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<212> DNA
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<220>
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叢26
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<212> DNA
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<220>
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叢26
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<211> 1100
<212> DNA
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<220>
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叢26
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<212> DNA
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<220>
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叢26
<400> 6086
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<220>
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叢27
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<212> DNA
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<220>
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叢27
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<212> DNA
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<220>
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叢27
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<212> DNA
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<220>
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叢27
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<212> DNA
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<220>
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<212> DNA
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<220>
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叢27
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<212> DNA
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<220>
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叢27
<400> 6093
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<211> 1100
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1295 Gm04:35842501..35843600
叢27
<400> 6094
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<211> 1400
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4037 Gm12:14313401..14314800
叢27
<400> 6095
<210> 6096
<211> 1300
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5691 Gm17:15333901..15335200
叢27
<400> 6096
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<211> 2100
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢27
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6075 Gm18:20572301..20574100
叢27
<400> 6098
<210> 6099
<211> 1500
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6107 Gm18:48687501..48689000
叢27
<400> 6099
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢27
<400> 6100
<210> 6101
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢27
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢27
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6696 Gm20:2495201..2496800
叢27
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4767 Gm14:43307001..43308200
叢27
<400> 6104
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5999 Gm18:8720500..8721801
叢27
<400> 6105
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<223> 大豆_ogl_2371 Gm07:19879701..19880900
叢27
<400> 6106
<210> 6107
<211> 1222
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3116 Gm09:35744379..35745600
叢27
<400> 6107
<210> 6108
<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5344 Gm16:8086701..8087700
叢27
<400> 6108
<210> 6109
<211> 1320
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6081 Gm18:23148401..23149720
叢27
<400> 6109
<210> 6110
<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6374 Gm19:13511501..13512500
叢27
<400> 6110
<210> 6111
<211> 1300
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6062 Gm18:18540101..18541400
叢27
<400> 6111
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<211> 1130
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6490 Gm19:41485101..41486230
叢27
<400> 6112
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5640 Gm17:11997601..11998621
叢27
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5965 Gm18:6594801..6595800
叢27
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<211> 1554
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6142 Gm18:52640847..52642400
叢27
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<211> 1200
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2859 Gm08:41863601..41864800
叢27
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<211> 1200
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_874 Gm03:33657801..33659000
叢27
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<213> 黃豆
<220>
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叢27
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<211> 1500
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_118 Gm01:37222601..37224100
叢27
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<211> 1700
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1312 Gm04:38737301..38739000
叢27
<400> 6120
<210> 6121
<211> 1434
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2761 Gm08:19121630..19123063
叢27
<400> 6121
<210> 6122
<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4012 Gm12:7695101..7696100
叢27
<400> 6122
<210> 6123
<211> 1300
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4766 Gm14:43220001..43221300
叢27
<400> 6123
<210> 6124
<211> 1450
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5685 Gm17:14369601..14371050
叢27
<400> 6124
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<211> 1500
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5690 Gm17:15298201..15299700
叢27
<400> 6125
<210> 6126
<211> 1200
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_452 Gm02:9148201..9149400
叢27
<400> 6126
<210> 6127
<211> 1200
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3415 Gm10:9996301..9997500
叢27
<400> 6127
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<211> 1280
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3429 Gm10:159729..36771008
叢27
<400> 6128
<210> 6129
<211> 1312
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4193 Gm13:21870189..21871500
叢27
<400> 6129
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<211> 1539
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4254 Gm13:24839962..24841500
叢27
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<211> 1200
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2014 Gm06:19087201..19088400
叢27
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2366 Gm07:19191501..19193772
叢27
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2372 Gm07:20315201..20316600
叢27
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<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2781 Gm08:21868342..28681
叢27
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2809 Gm08:35500001..35501500
叢27
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<211> 1435
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3878 Gm11:18121101..18122535
叢27
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<211> 1300
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4044 Gm12:15367801..15369100
叢27
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4205 Gm13:22288401..22289400
叢27
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<213> 黃豆
<220>
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叢27
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4742 Gm14:27233701..27234700
叢27
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6052 Gm18:16314301..16315600
叢27
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6055 Gm18:16794501..16796200
叢27
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6085 Gm18:37792172..37793300
叢27
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢27
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢27
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<220>
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叢27
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<220>
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叢27
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<220>
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叢27
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<220>
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<212> DNA
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<220>
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叢27
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<220>
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叢27
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢27
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢27
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4745 Gm14:28797928..28799100
叢27
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢27
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢27
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<212> DNA
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<220>
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叢27
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<212> DNA
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<220>
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叢27
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5707 Gm17:19696201..19697400
叢27
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<220>
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叢27
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<220>
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叢27
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<220>
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<220>
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<220>
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢27
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<212> DNA
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<220>
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<212> DNA
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<220>
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叢27
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<212> DNA
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<220>
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叢27
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢27
<400> 6169
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1316 Gm04:39290001..39291812
叢27
<400> 6170
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<211> 1172
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1631 Gm05:29471243..29472414
叢27
<400> 6171
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<211> 1776
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2052 Gm06:41401001..41402776
叢27
<400> 6172
<210> 6173
<211> 1179
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2378 Gm07:34833901..34835079
叢27
<400> 6173
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<211> 1500
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3103 Gm09:33592101..33593600
叢27
<400> 6174
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3896 Gm11:32922498..32923851
叢27
<400> 6175
<210> 6176
<211> 1347
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4758 Gm14:40858755..40860101
叢27
<400> 6176
<210> 6177
<211> 1119
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5123 Gm15:43843482..43844600
叢27
<400> 6177
<210> 6178
<211> 1194
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5352 Gm16:26819807..26821000
叢27
<400> 6178
<210> 6179
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6030 Gm18:12370101..12371348
叢27
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6032 Gm18:12534275..12536893
叢27
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<212> DNA
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<220>
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叢27
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_172 Gm01:45729101..45730300
叢27
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢27
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<223> 大豆_ogl_2026 Gm06:21193201..21194500
叢27
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2056 Gm06:42645901..42647100
叢27
<400> 6185
<210> 6186
<211> 1400
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2334 Gm07:14541701..14543100
叢27
<400> 6186
<210> 6187
<211> 1526
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2769 Gm08:19388736..19390261
叢27
<400> 6187
<210> 6188
<211> 1352
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2779 Gm08:21436359..21437710
叢27
<400> 6188
<210> 6189
<211> 1417
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4059 Gm12:17619838..17621254
叢27
<400> 6189
<210> 6190
<211> 1300
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5680 Gm17:13950201..13951500
叢27
<400> 6190
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<211> 1346
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6714 Gm20:30951601..30952946
叢27
<400> 6191
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<211> 1447
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2776 Gm08:20790716..20792162
叢27
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4728 Gm14:7027201..7028219
叢27
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<211> 1400
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1642 Gm05:31556901..31558300
叢27
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<211> 1300
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3413 Gm10:8672601..8673900
叢27
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_573 Gm02:15753501..15754783
叢27
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<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_582 Gm02:39508232..39509487
叢27
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<211> 1500
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2365 Gm07:19080201..19081700
叢27
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3430 Gm10:36959101..36960520
叢27
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<211> 1332
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4738 Gm14:13150069..13151400
叢27
<400> 6200
<210> 6201
<211> 1100
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4781 Gm14:45674301..45675400
叢27
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<211> 1326
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5413 Gm16:33856301..33857626
叢27
<400> 6202
<210> 6203
<211> 1400
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6705 Gm20:23501101..23502500
叢27
<400> 6203
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<211> 1100
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2433 Gm07:39112301..39113400
叢27
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<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2072 Gm06:44324701..44325700
叢27
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<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢27
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<220>
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叢27
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<220>
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叢27
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<212> DNA
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<220>
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叢27
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<220>
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叢27
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢27
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<220>
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叢27
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<220>
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叢27
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<220>
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叢27
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<213> 黃豆
<220>
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叢27
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<220>
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<220>
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叢27
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<213> 黃豆
<220>
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叢27
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<213> 黃豆
<220>
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叢27
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢27
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢27
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<213> 黃豆
<220>
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叢27
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<220>
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<220>
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<220>
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<220>
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<220>
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<220>
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叢27
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<220>
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叢27
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<220>
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叢27
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<212> DNA
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<220>
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叢27
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢27
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<212> DNA
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<220>
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叢27
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<212> DNA
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<220>
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叢27
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<212> DNA
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<220>
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叢27
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<220>
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叢27
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<220>
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<220>
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叢27
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<220>
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<220>
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<220>
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<220>
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<220>
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<220>
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叢27
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢27
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1626 Gm05:29016063..29017200
叢27
<400> 6250
<210> 6251
<211> 1500
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2030 Gm06:22581101..22582600
叢27
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<211> 1210
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2047 Gm06:41199901..41201110
叢27
<400> 6252
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢27
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢27
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢27
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4065 Gm12:33413701..33414700
叢27
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢27
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<220>
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叢27
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢27
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5075 Gm15:20641623..20642700
叢27
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5090 Gm15:32478101..32479500
叢27
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<212> DNA
<213> 黃豆
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<223> 大豆_ogl_6089 Gm18:43706901..43707900
叢27
<400> 6262
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6091 Gm18:43729801..43730900
叢27
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_574 Gm02:21962201..21963400
叢27
<400> 6264
<210> 6265
<211> 1362
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2032 Gm06:37758819..37760180
叢27
<400> 6265
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<211> 1321
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2373 Gm07:20589301..20590621
叢27
<400> 6266
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<211> 1100
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2778 Gm08:21353201..21354300
叢27
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢27
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢27
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<213> 黃豆
<220>
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叢27
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<213> 黃豆
<220>
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叢27
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<220>
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叢27
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<220>
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叢27
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<220>
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叢27
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<220>
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叢27
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<220>
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叢27
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<220>
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叢27
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<220>
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叢27
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<220>
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叢27
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<220>
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叢27
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<220>
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<220>
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叢27
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<220>
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叢27
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<220>
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<212> DNA
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<220>
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<220>
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<220>
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<220>
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叢27
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叢27
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<220>
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<220>
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<220>
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<220>
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<220>
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<220>
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<212> DNA
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<220>
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<220>
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<220>
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<220>
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<220>
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叢27
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<220>
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<220>
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<220>
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叢27
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<220>
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<220>
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<212> DNA
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<220>
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<212> DNA
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢28
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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<220>
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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<400> 6335
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<220>
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4186 Gm13:21494501..21495900
叢28
<400> 6343
<210> 6344
<211> 1068
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5572 Gm17:7798901..7799968
叢28
<400> 6344
<210> 6345
<211> 1500
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5969 Gm18:6658101..6659600
叢28
<400> 6345
<210> 6346
<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1072 Gm03:43621001..43622000
叢28
<400> 6346
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<211> 1100
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1393 Gm04:44292101..44293200
叢28
<400> 6347
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<211> 1200
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2559 Gm08:8341701..8342900
叢28
<400> 6348
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<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3183 Gm09:38951201..38952200
叢28
<400> 6349
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<211> 1100
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3249 Gm09:40917001..40918100
叢28
<400> 6350
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<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3277 Gm10:244101..245100
叢28
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<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5273 Gm16:3528301..3529300
叢28
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6228 Gm18:57307401..57308600
叢28
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<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4448 Gm13:34382531..34383600
叢28
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<211> 1010
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6242 Gm18:58123401..58124410
叢28
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<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢28
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<211> 1063
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2720 Gm08:16190338..16191400
叢28
<400> 6357
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<211> 1218
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4228 Gm13:23596283..23597500
叢28
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<211> 1200
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢28
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<211> 1100
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3044 Gm09:7665001..7666100
叢28
<400> 6360
<210> 6361
<211> 1148
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3184 Gm09:39048801..39049948
叢28
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<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢28
<400> 6362
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<211> 1018
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3681 Gm11:1551783..1552800
叢28
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<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢28
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4090 Gm12:35247201..35248500
叢28
<400> 6365
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢28
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<211> 1400
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5149 Gm15:48156301..48157700
叢28
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<211> 1400
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢28
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<211> 1500
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢28
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<211> 1200
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢28
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4314 Gm13:27814942..27816036
叢28
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<211> 1300
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3802 Gm11:8755401..8756700
叢28
<400> 6372
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<211> 1489
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢28
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<211> 1100
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1975 Gm06:15861101..15862200
叢28
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<211> 1300
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6165 Gm18:54019401..54020700
叢28
<400> 6375
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6469 Gm19:40191001..40192100
叢28
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<211> 1500
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2005 Gm06:17360901..17362400
叢28
<400> 6377
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<211> 1100
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3369 Gm10:4788501..4789600
叢28
<400> 6378
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3083 Gm09:29728201..29729350
叢28
<400> 6379
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<211> 1111
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6663 Gm20:1030975..1032085
叢28
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢28
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<211> 1400
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢28
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<211> 1421
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢28
<400> 6383
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢28
<400> 6384
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢28
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢28
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢28
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢28
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢28
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2702 Gm08:15313779..15315300
叢28
<400> 6390
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2952 Gm09:2673901..2674971
叢28
<400> 6391
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<211> 1400
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢28
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<212> DNA
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<220>
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叢28
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢28
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢28
<400> 6395
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢28
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢28
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢28
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢28
<400> 6399
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<211> 1200
<212> DNA
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<220>
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叢28
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢28
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢28
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<212> DNA
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<220>
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叢28
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<212> DNA
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叢28
<400> 6404
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢28
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢28
<400> 6406
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢28
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<211> 1300
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢28
<400> 6408
<210> 6409
<211> 1100
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3395 Gm10:6575001..6576100
叢28
<400> 6409
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<211> 1200
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3426 Gm10:36673001..36674200
叢28
<400> 6410
<210> 6411
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_460 Gm02:9843901..9845152
叢28
<400> 6411
<210> 6412
<211> 1470
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1687 Gm05:35475313..35476782
叢28
<400> 6412
<210> 6413
<211> 1400
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢28
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<211> 1200
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2597 Gm08:10646201..10647400
叢28
<400> 6414
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<211> 1200
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3519 Gm10:43675501..415700
叢28
<400> 6415
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<211> 1400
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3864 Gm11:17286701..17288100
叢28
<400> 6416
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢28
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4226 Gm13:23523701..23524900
叢28
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5647 Gm17:12107901..12109114
叢28
<400> 6419
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6399 Gm19:36523101..36524400
叢28
<400> 6420
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<211> 1300
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6466 Gm19:40065501..40066800
叢28
<400> 6421
<210> 6422
<211> 1900
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2335 Gm07:14551401..14553300
叢28
<400> 6422
<210> 6423
<211> 1800
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3088 Gm09:30431601..30433400
叢28
<400> 6423
<210> 6424
<211> 1200
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3386 Gm10:6289101..6290300
叢28
<400> 6424
<210> 6425
<211> 2100
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3409 Gm10:8406501..8408600
叢28
<400> 6425
<210> 6426
<211> 1058
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3434 Gm10:37661543..37662600
叢28
<400> 6426
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<211> 1400
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4307 Gm13:27598701..27600100
叢28
<400> 6427
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4374 Gm13:30975501..30976509
叢28
<400> 6428
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<211> 1400
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6690 Gm20:1925101..1926500
叢28
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<211> 1300
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2329 Gm07:10531701..10533000
叢28
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<211> 1300
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2301 Gm07:9036101..9037400
叢28
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5992 Gm18:8441601..8442600
叢28
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<211> 1200
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5366 Gm16:29487401..29488600
叢28
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<211> 1500
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1338 Gm04:41538401..41539900
叢28
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<211> 1100
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2771 Gm08:19813001..19814100
叢28
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<211> 1128
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4031 Gm12:9476401..9477528
叢28
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<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4168 Gm13:13193701..13194700
叢28
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<211> 1100
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5152 Gm15:48193201..48194300
叢28
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<211> 1200
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5713 Gm17:30800401..30801600
叢28
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<211> 1061
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1281 Gm04:7635140..7636200
叢28
<400> 6440
<210> 6441
<211> 1346
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2080 Gm06:45239426..45240771
叢28
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4722 Gm14:6650001..6651000
叢28
<400> 6442
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<211> 1100
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2338 Gm07:14796901..14798000
叢28
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2591 Gm08:40801..41900
叢28
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<211> 1089
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4274 Gm13:26245101..26246189
叢28
<400> 6445
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<211> 1095
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5414 Gm16:33875206..33876300
叢28
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<211> 1200
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢28
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<211> 1400
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢28
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢28
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢28
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5995 Gm18:8452429..8453900
叢28
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<211> 1800
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢28
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢28
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<211> 1500
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1638 Gm05:31300301..31301800
叢28
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<211> 1200
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3445 Gm10:38492601..38493800
叢28
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<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3464 Gm10:40081401..40082400
叢28
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢28
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢28
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<211> 1200
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_265 Gm01:51447501..51448700
叢28
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<212> DNA
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<220>
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叢28
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<212> DNA
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<220>
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叢28
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<212> DNA
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<220>
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叢28
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<212> DNA
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<220>
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叢28
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢28
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢28
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢28
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<212> DNA
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<220>
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叢28
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢28
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢28
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢28
<400> 6470
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<211> 1200
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢28
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<212> DNA
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<220>
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叢28
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<212> DNA
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<220>
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叢28
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<212> DNA
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<220>
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叢28
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<212> DNA
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<220>
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叢28
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<212> DNA
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<220>
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叢28
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<220>
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叢28
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<212> DNA
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<220>
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叢28
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<212> DNA
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<220>
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叢28
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<212> DNA
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<220>
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢28
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢28
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<212> DNA
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<220>
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叢28
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<212> DNA
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<220>
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叢28
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<212> DNA
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<220>
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叢28
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<212> DNA
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<220>
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叢28
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢28
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢28
<400> 6488
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢28
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢28
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢28
<400> 6491
<210> 6492
<211> 1124
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢28
<400> 6492
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<211> 1100
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2322 Gm07:10407801..10408900
叢28
<400> 6493
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<211> 1100
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢28
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢28
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<220>
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叢28
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢28
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<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5977 Gm18:7338238..7339300
叢28
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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<213> 黃豆
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<223> 大豆_ogl_607 Gm02:422901..42507989
叢28
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<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4974 Gm15:10382801..10383899
叢28
<400> 6501
<210> 6502
<211> 1276
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5005 Gm15:11846025..11847300
叢28
<400> 6502
<210> 6503
<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5233 Gm16:6301..1453300
叢28
<400> 6503
<210> 6504
<211> 1178
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5431 Gm17:546201..547378
叢28
<400> 6504
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<211> 1100
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_622 Gm02:43084101..43085200
叢28
<400> 6505
<210> 6506
<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2 Gm02:11978601..11979600
叢28
<400> 6506
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<211> 1200
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_602 Gm02:41893601..41894800
叢28
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<211> 1000
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<213> 黃豆
<220>
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叢28
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1630 Gm05:29413773..29414900
叢28
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3053 Gm09:9619266..9620538
叢28
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<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_501 Gm02:11802101..11803100
叢28
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2384 Gm07:35771401..35772738
叢28
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<212> DNA
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<220>
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叢28
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢28
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<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5957 Gm18:6057701..6059100
叢28
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<213> 黃豆
<220>
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叢28
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢28
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<211> 1000
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<213> 黃豆
<220>
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叢28
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5956 Gm18:6056601..6057600
叢28
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<211> 1200
<212> DNA
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<220>
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叢29
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5199 Gm16:242910..244500
叢29
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<211> 1100
<212> DNA
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<220>
<223> 大豆_ogl_2525 Gm08:6062301..6063400
叢29
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<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1512 Gm05:1311618..1312877
叢29
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢29
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2514 Gm08:5042101..5043485
叢29
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<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3986 Gm12:3050101..3051500
叢29
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<213> 黃豆
<220>
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叢29
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<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4 Gm01:325901..327083
叢29
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<220>
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叢29
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<220>
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叢29
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<220>
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叢29
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1123 Gm03:47145101..47146200
叢29
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢29
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1027 Gm03:41825901..41826900
叢29
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢29
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢29
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<220>
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叢29
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<220>
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叢29
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<220>
<223> 大豆_ogl_765 Gm02:51196301..51197314
叢29
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<220>
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<212> DNA
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<220>
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叢29
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<220>
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叢29
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<220>
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叢29
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<220>
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叢29
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<220>
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叢29
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<220>
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叢29
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<220>
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叢29
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<220>
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叢29
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<220>
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叢29
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<220>
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叢29
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<212> DNA
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<220>
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叢29
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<220>
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叢29
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<220>
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叢29
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<220>
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叢29
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢29
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢29
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<213> 黃豆
<220>
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叢29
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<212> DNA
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<220>
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叢29
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<220>
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叢29
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<212> DNA
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<220>
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叢29
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<212> DNA
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<220>
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<212> DNA
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<220>
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叢29
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<212> DNA
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<220>
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叢29
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<211> 1300
<212> DNA
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<220>
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叢29
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<220>
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叢29
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢29
<400> 6566
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3444 Gm10:38178344..38179400
叢29
<400> 6567
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<211> 1057
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6463 Gm19:39661301..39662357
叢29
<400> 6568
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1798 Gm06:5732601..5733700
叢29
<400> 6569
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<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢29
<400> 6570
<210> 6571
<211> 1300
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4846 Gm15:924901..926200
叢29
<400> 6571
<210> 6572
<211> 1077
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_7016 Gm20:46358689..46359765
叢29
<400> 6572
<210> 6573
<211> 1300
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4415 Gm13:327301..32776100
叢29
<400> 6573
<210> 6574
<211> 1167
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2518 Gm08:5229501..5230667
叢30
<400> 6574
<210> 6575
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2947 Gm09:23215..2325266
叢30
<400> 6575
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<211> 1100
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_994 Gm03:40022901..40024000
叢30
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5448 Gm17:1382631..1383800
叢30
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6997 Gm20:44731159..44732505
叢30
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<213> 黃豆
<220>
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叢30
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<213> 黃豆
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<223> 大豆_ogl_1876 Gm06:8984501..8985900
叢30
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6781 Gm20:36125601..36126788
叢30
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<210> 6582
<211> 1100
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4952 Gm15:9436301..9437400
叢30
<400> 6582
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<211> 1134
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1714 Gm05:37709288..37710421
叢30
<400> 6583
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<213> 黃豆
<220>
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叢30
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢30
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<213> 黃豆
<220>
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叢30
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叢30
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<220>
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叢30
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<220>
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叢30
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<220>
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叢30
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<220>
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叢30
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<220>
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<220>
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<220>
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<220>
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叢30
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<220>
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<220>
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叢30
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<220>
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<220>
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叢30
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<212> DNA
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<220>
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<220>
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<220>
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叢30
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<220>
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叢30
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<220>
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叢30
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<220>
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叢30
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<220>
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<220>
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叢30
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<220>
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<220>
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<220>
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叢30
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<220>
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<220>
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<220>
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<220>
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<220>
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<220>
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<220>
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<220>
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叢30
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<220>
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叢30
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<220>
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<220>
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<220>
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叢30
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<220>
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<220>
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<220>
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<220>
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叢30
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<220>
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<220>
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叢30
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<212> DNA
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<220>
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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<220>
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叢30
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<220>
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<220>
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叢30
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<212> DNA
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢30
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<220>
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<220>
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<220>
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叢30
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<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5563 Gm17:7352701..7353921
叢30
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<213> 黃豆
<220>
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叢30
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<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6318 Gm19:1331601..1332632
叢30
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<220>
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叢30
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<220>
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叢30
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<220>
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<220>
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叢30
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<220>
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<220>
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<220>
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<220>
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叢30
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<220>
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<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5541 Gm17:6057101..6058400
叢30
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<220>
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叢30
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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<213> 黃豆
<220>
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叢30
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<220>
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叢30
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<213> 黃豆
<220>
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叢30
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<213> 黃豆
<220>
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叢30
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<211> 1057
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1234 Gm04:5462444..5463500
叢30
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4418 Gm13:33018155..33019200
叢30
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叢30
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叢30
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<213> 黃豆
<220>
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叢30
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<213> 黃豆
<220>
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<213> 黃豆
<220>
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叢30
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<220>
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叢31
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<220>
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叢31
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<212> DNA
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<220>
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<213> 黃豆
<220>
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<220>
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<220>
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6106 Gm18:48533043..48534100
叢31
<400> 6819
<210> 6820
<211> 1200
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_176 Gm01:46818401..46819600
叢31
<400> 6820
<210> 6821
<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3056 Gm09:11177701..11178700
叢31
<400> 6821
<210> 6822
<211> 1236
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4327 Gm13:28480065..28481300
叢31
<400> 6822
<210> 6823
<211> 1300
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6379 Gm19:29997701..29999000
叢31
<400> 6823
<210> 6824
<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4027 Gm12:9314801..9315800
叢31
<400> 6824
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<211> 1100
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6079 Gm18:23111301..23112400
叢31
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2787 Gm08:22319101..22320166
叢31
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<220>
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叢31
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<220>
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叢31
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<220>
<223> 大豆_ogl_4270 Gm13:25897101..25898222
叢31
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<220>
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叢31
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<220>
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叢31
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢31
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢31
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<213> 黃豆
<220>
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叢31
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<211> 1200
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3096 Gm09:32022001..32023200
叢31
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<211> 1200
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_143 Gm01:411801..42616000
叢31
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<211> 1300
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢31
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<211> 1200
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢31
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<213> 黃豆
<220>
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叢31
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<213> 黃豆
<220>
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叢31
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<220>
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叢31
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢31
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<213> 黃豆
<220>
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叢31
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<220>
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<220>
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叢31
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<220>
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<220>
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叢31
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叢31
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<220>
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<220>
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<220>
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叢31
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<220>
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叢31
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<220>
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叢31
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<212> DNA
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<220>
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<212> DNA
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<220>
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<212> DNA
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<220>
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<220>
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<220>
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叢32
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<220>
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叢32
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<212> DNA
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<220>
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叢32
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<220>
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叢32
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<220>
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<220>
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<220>
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叢32
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<220>
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<220>
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<220>
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<212> DNA
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叢32
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<220>
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叢32
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<220>
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叢32
<400> 6880
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢32
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<220>
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<212> DNA
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<220>
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<211> 1050
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_746 Gm02:49325151..49326200
叢32
<400> 6884
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<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_785 Gm03:1264801..1265800
叢32
<400> 6885
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<211> 1063
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1085 Gm03:44403338..44404400
叢32
<400> 6886
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢32
<400> 6887
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4153 Gm12:38614001..38615000
叢32
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3372 Gm10:5019572..5020581
叢32
<400> 6890
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4837 Gm15:350901..352300
叢32
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<211> 1200
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_5916 Gm18:3050201..3051400
叢32
<400> 6892
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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<212> DNA
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<220>
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<220>
<223> 大豆_ogl_1116 Gm03:46846293..46847600
叢32
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_1800 Gm06:5984728..5985800
叢32
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3610 Gm10:47739301..47740400
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<220>
<223> 大豆_ogl_3707 Gm11:3706347..3707400
叢32
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<210> 6899
<211> 1100
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4469 Gm13:35959401..35960500
叢32
<400> 6899
<210> 6900
<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6497 Gm19:42129601..42130600
叢32
<400> 6900
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<211> 1200
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2592 Gm08:10336101..10337300
叢32
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<211> 1000
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2855 Gm08:41749501..41750500
叢32
<400> 6902
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<211> 1059
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2420 Gm07:38333942..38335000
叢32
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4406 Gm13:32254801..32255877
叢32
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<211> 1100
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_395 Gm02:5237601..5238700
叢32
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<220>
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叢32
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<220>
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叢32
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<220>
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叢32
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<220>
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叢32
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<220>
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叢32
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<220>
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叢32
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<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_364 Gm02:3870601..3871671
叢32
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<211> 1073
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢32
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<220>
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叢32
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<220>
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叢32
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<220>
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叢32
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<220>
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叢32
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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<220>
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<212> DNA
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<220>
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<213> 黃豆
<220>
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叢32
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<220>
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<220>
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叢32
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<220>
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叢32
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<213> 黃豆
<220>
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叢32
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<220>
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叢32
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叢32
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<213> 黃豆
<220>
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叢32
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<213> 黃豆
<220>
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3258 Gm09:42944101..42945300
叢32
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢32
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢32
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢32
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<212> DNA
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<220>
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<220>
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叢32
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<212> DNA
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<220>
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叢32
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<220>
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叢32
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<220>
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叢32
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<220>
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<220>
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叢32
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<212> DNA
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<220>
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<220>
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叢32
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<220>
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叢32
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<220>
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叢32
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<220>
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叢32
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢32
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<213> 黃豆
<220>
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叢32
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<220>
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<220>
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叢32
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<220>
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<213> 黃豆
<220>
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叢32
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<213> 黃豆
<220>
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<220>
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<220>
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<212> DNA
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<220>
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叢32
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<212> DNA
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<220>
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叢32
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<220>
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叢32
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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<212> DNA
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<220>
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<211> 1200
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_2644 Gm08:12931401..12932600
叢32
<400> 6964
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<211> 1134
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_6028 Gm18:12102567..12103700
叢32
<400> 6965
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<211> 1101
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢32
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢32
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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<211> 1052
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢32
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢32
<400> 6970
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_3406 Gm10:7499601..7500600
叢32
<400> 6971
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4323 Gm13:28392619..28393737
叢32
<400> 6972
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<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
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叢32
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<213> 黃豆
<220>
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<220>
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<220>
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叢32
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<213> 黃豆
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叢32
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<211> 1100
<212> DNA
<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4025 Gm12:8283801..8284900
叢32
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<213> 黃豆
<220>
<223> 大豆_ogl_4266 Gm13:25754201..257250
叢32
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<223> 人工序列之描述:合成肽
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<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列之描述:合成引子
<400> 7513
<210> 7514
<211> 24
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列之描述:合成引子
<400> 7514
<210> 7515
<211> 23
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列之描述:合成引子
<400> 7515
<210> 7516
<211> 23
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列之描述:合成引子
<400> 7516
<210> 7517
<211> 18
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列之描述:合成引子
<400> 7517
<210> 7518
<211> 21
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列之描述:合成引子
<400> 7518
<210> 7519
<211> 21
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列之描述:合成引子
<400> 7519
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<211> 24
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列之描述:合成引子
<400> 7520
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<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列之描述:合成引子
<400> 7521
<210> 7522
<211> 23
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列之描述:合成引子
<400> 7522
<210> 7523
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列之描述:合成引子
<400> 7523
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<211> 16
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列之描述:合成引子
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<211> 19
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列之描述:合成引子
<400> 7525
<210> 7526
<211> 21
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列之描述:合成引子
<400> 7526
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<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列之描述:合成引子
<400> 7527
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<211> 17
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列之描述:合成引子
<400> 7528
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<211> 25
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列之描述:合成引子
<400> 7529
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<212> DNA
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<220>
<223> 人工序列之描述:合成引子
<400> 7530
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<211> 24
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列之描述:合成引子
<400> 7531
<210> 7532
<211> 23
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列之描述:合成引子
<400> 7532
<210> 7533
<211> 19
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列之描述:合成引子
<400> 7533
<210> 7534
<211> 24
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列之描述:合成引子
<400> 7534
<210> 7535
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列之描述:合成引子
<400> 7535
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<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列之描述:合成引子
<400> 7536
<210> 7537
<211> 19
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列之描述:合成引子
<400> 7537
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<211> 19
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列之描述:合成引子
<400> 7538
<210> 7539
<211> 16
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列之描述:合成引子
<400> 7539
<210> 7540
<211> 22
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列之描述:合成引子
<400> 7540
<210> 7541
<211> 19
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列之描述:合成引子
<400> 7541
<210> 7542
<211> 25
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列之描述:合成引子
<400> 7542
<210> 7543
<211> 21
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列之描述:合成引子
<400> 7543
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<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列之描述:合成引子
<400> 7544
<210> 7545
<211> 18
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列之描述:合成引子
<400> 7545
<210> 7546
<211> 25
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列之描述:合成引子
<400> 7546
<210> 7547
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列之描述:合成引子
<400> 7547
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<211> 20
<212> DNA
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<220>
<223> 人工序列之描述:合成引子
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<211> 21
<212> DNA
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<220>
<223> 人工序列之描述:合成引子
<400> 7549
<210> 7550
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列之描述:合成引子
<400> 7550
<210> 7551
<211> 22
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列之描述:合成引子
<400> 7551
<210> 7552
<211> 24
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列之描述:合成引子
<400> 7552
<210> 7553
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列之描述:合成引子
<400> 7553
<210> 7554
<211> 21
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列之描述:合成引子
<400> 7554
<210> 7555
<211> 17
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列之描述:合成引子
<400> 7555
<210> 7556
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列之描述:合成引子
<400> 7556
<210> 7557
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列之描述:合成引子
<400> 7557
<210> 7558
<211> 17
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列之描述:合成引子
<400> 7558
<210> 7559
<211> 19
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列之描述:合成引子
<400> 7559
<210> 7560
<211> 18
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列之描述:合成引子
<400> 7560
<210> 7561
<211> 2457
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> pDAB124280質體圖譜
<400> 7561
<210> 7562
<211> 2401
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> pDAB124281
<400> 7562
<210> 7563
<211> 2315
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> pDAB121278之質體圖譜
<400> 7563
<210> 7564
<211> 2322
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> pDAB123812之質體圖譜
<400> 7564
<210> 7565
<211> 2322
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> pDAB123812之質體圖譜
<400> 7565
<210> 7566
<211> 2272
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> pDAB121837之質體圖譜
<400> 7566
<210> 7567
<211> 2220
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> pDAB124864之質體圖譜
<400> 7567
<210> 7568
<211> 110
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 通用結構域序列或分析結構域
<400> 7568
<210> 7569
<211> 4505
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> pDAB7221之質體圖譜
<400> 7569
<210> 7570
<211> 21
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> PCR引子
<400> 7570
<210> 7571
<211> 16
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> PCR引子
<400> 7571
<210> 7572
<211> 17
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> PCR引子
<400> 7572
<210> 7573
<211> 19
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> PCR引子
<400> 7573
<210> 7574
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 鋅指蛋白結合基元
<400> 7574
<210> 7575
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 鋅指蛋白結合基元
<400> 7575
<210> 7576
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 鋅指蛋白結合基元
<400> 7576
<210> 7577
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 鋅指蛋白結合基元
<400> 7577
<210> 7578
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 鋅指蛋白結合基元
<400> 7578
<210> 7579
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 鋅指蛋白結合基元
<400> 7579
<210> 7580
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 鋅指蛋白結合基元
<400> 7580
<210> 7581
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 鋅指蛋白結合基元
<400> 7581
<210> 7582
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 鋅指蛋白結合基元
<400> 7582
<210> 7583
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 鋅指蛋白結合基元
<400> 7583
<210> 7584
<211> 35
<212> DNA
<213> 玉蜀黍
<220>
<221> misc_feature
<222> (15)..(15)
<223> n為a、c、g或t
<400> 7584
Claims (10)
- 一種包含一重組核酸分子的大豆植物細胞,該重組核酸分子包含:一至少1Kb之非基因核酸分子,其中:a.該非基因核酸分子的甲基化程度係為1%或更少;b.該非基因核酸分子與大豆基因組中所含有的任何其他核酸分子共享小於40%序列一致性;c.該非基因核酸分子位於一已知或預期會表現的大豆編碼核酸分子之40Kb區內;以及d.該非基因核酸分子顯示在大豆基因組內超過0.01574cM/Mb之重組率;其中該非基因核酸分子與選自由以下各者組成之群的核酸分子具有至少95%序列一致性:大豆_OGL_1423(SEQ ID NO:639),大豆_OGL_1434(SEQ ID NO:137),大豆_OGL_4625(SEQ ID NO:76),大豆_OGL_6362(SEQ ID NO:440),大豆_OGL_308(SEQ ID NO:43),大豆_OGL_307(SEQ ID NO:566),大豆_OGL_310(SEQ ID NO:4326),大豆_OGL_684(SEQ ID NO:47),大豆_OGL_682(SEQ ID NO:2101),以及大豆_OGL_685(SEQ ID NO:48);以及一感興趣的DNA,其中該感興趣的DNA被插入於該非基因核酸分子中,以產生該重組核酸分子。
- 如請求項1之大豆植物細胞,其中該重組核酸分子滿足以下至少一者:i)該感興趣的DNA插入在一鋅指標靶位點之近側,ii)該感興趣的DNA插入在一對鋅指標靶位點之間,iii)該感興趣的DNA包含分析結構域,iv)該感興趣的DNA不編碼肽,v)該感興趣的DNA編碼肽,vi)該感興趣的DNA包含一含有殺昆蟲劑抗性基因、除草劑耐受性基因、氮利用效率基因、水利用效率基因、營養品質基因、DNA結合基因及可選擇之標記基因的基因表現卡匣,vii)該感興趣的DNA包含兩個或兩個以上基因表現卡匣,viii)兩個或兩個以上該等非基因核酸分子各自包含插入之感興趣的DNA,以產生兩個或兩個以上重組核酸分子,其中該等兩個或兩個以上重組核酸分子係位於同一染色體上,ix)該感興趣的DNA在該感興趣的DNA插入該非基因核酸分子的期間被修飾。
- 如請求項1至2中任一項之大豆植物細胞,其中該非基因核酸分子與選自由以下各者組成之群的核酸分子具有至少95%序列一致性:大豆_OGL_1423(SEQ ID NO:639),大豆_OGL_1434(SEQ ID NO:137),大豆_OGL_4625(SEQ ID NO:76),大豆_OGL_6362(SEQ ID NO:440),大豆_OGL_308(SEQ ID NO:43),大豆_OGL_307(SEQ ID NO:566),及大豆_OGL_310(SEQ ID NO:4326)。
- 如請求項1至2中任一項之大豆植物細胞,其中該非基因核酸分子與選自由以下各者組成之群的核酸分子具有至少95%序列一致性:大豆_OGL_308(SEQ ID NO:43),大豆_OGL_307(SEQ ID NO:566),及大豆_OGL_310(SEQ ID NO:4326)。
- 一種製造包含一感興趣的DNA之轉殖基因植物細胞的方法,該方法包含:a.選擇一標靶非基因大豆基因座,其與選自於由以下各者組成之群的核酸具有至少95%序列一致性:大豆_OGL_1423(SEQ ID NO:639),大豆_OGL_1434(SEQ ID NO:137),大豆_OGL_4625(SEQ ID NO:76),大豆_OGL_6362(SEQ ID NO:440),大豆_OGL_308(SEQ ID NO:43),大豆_OGL_307(SEQ ID NO:566),大豆_OGL_310(SEQ ID NO:4326),大豆_OGL_684(SEQ ID NO:47),大豆_OGL_682(SEQ ID NO:2101),及大豆_OGL_685(SEQ ID NO:48),更進一步,其中:i)該非基因核酸分子的甲基化程度係為1%或更少;ii)該非基因核酸分子與大豆基因組中所含有的任何其他核酸分子共享小於40%序列一致性;iii)該非基因核酸分子位於一已知或預期會表現的大豆編碼核酸分子之40Kb區內;以及iv)該非基因核酸分子顯示在大豆基因組內超過0.01574cM/Mb之重組率;b.選擇特異性結合及裂解該標靶非基因大豆基因座之位點特異性核酸酶;c.將該位點特異性核酸酶引入大豆植物細胞中;d.將該感興趣的DNA引入該植物細胞中;e.將該感興趣的DNA插入該等標靶非基因大豆基因座中;以及f.選擇包含插入該非基因基因座之該感興趣的DNA的轉殖基因植物細胞。
- 如請求項5之製造轉殖基因植物細胞之方法,其中方法包括以下至少一者:i)該感興趣的DNA包含分析結構域ii)該感興趣的DNA不編碼肽,iii)該感興趣的DNA編碼肽,iv)該感興趣的DNA包含一含有轉殖基因之基因表現卡匣,v)該感興趣的DNA包含兩個或兩個以上基因表現卡匣,vi)該位點特異性核酸酶係選自由以下各者組成之群:鋅指核酸酶、CRISPR核酸酶、TALEN、歸巢核酸內切酶及大範圍核酸酶,vii)該感興趣的DNA經由同源性介導之修復整合方法整合在該非基因基因座內,viii)該感興趣的DNA經由非同源末端接合整合方法整合在該非基因基因座內,ix)兩個或兩個以上該等感興趣的DNA插入兩個或兩個以上該等標靶非基因大豆基因座中,其中該等兩個或兩個以上該等標靶非基因大豆基因座位於同一染色體上,x)該感興趣的DNA在該感興趣的DNA插入該等標靶非基因大豆基因座的期間被修飾。
- 如請求項5至6中任一項之製造轉殖基因植物細胞之方法,其中該非基因大豆基因座與選自由以下各者組成之群的核酸分子具有至少95%序列一致性:大豆_OGL_1423(SEQ ID NO:639),大豆_OGL_1434(SEQ ID NO:137),大豆_OGL_4625(SEQ ID NO:76),大豆_OGL_6362(SEQ ID NO:440),大豆_OGL_308(SEQ ID NO:43),大豆_OGL_307(SEQ ID NO:566),及大豆_OGL_310(SEQ ID NO:4326)。
- 如請求項5至6中任一項之製造轉殖基因植物細胞之方法,其中該非基因大豆基因座與選自由以下各者組成之群的核酸分子具有至少95%序列一致性:大豆_OGL_308(SEQ ID NO:43),大豆_OGL_307(SEQ ID NO:566),及大豆_OGL_310(SEQ ID NO:4326)。
- 一種包含一重組核酸分子之植物細胞,該重組核酸分子包含:i)一非基因核酸分子,其與選自於由下列所組成之群組的核酸分子具有至少95%序列一致性:大豆_OGL_1423(SEQ ID NO:639),大豆_OGL_1434(SEQ ID NO:137),大豆_OGL_4625(SEQ ID NO:76),大豆_OGL_6362(SEQ ID NO:440),大豆_OGL_308(SEQ ID NO:43),大豆_OGL_307(SEQ ID NO:566),大豆_OGL_310(SEQ ID NO:4326),大豆_OGL_684(SEQ ID NO:47),大豆_OGL_682(SEQ ID NO:2101),及大豆_OGL_685(SEQ ID NO:48),更進一步,其中:a.該非基因核酸分子的甲基化程度係為1%或更少;b.該非基因核酸分子與大豆基因組中所含有的任何其他核酸分子共享小於40%序列一致性;c.該非基因核酸分子位於一已知或預期會表現的大豆編碼核酸分子之40Kb區內;以及d.該非基因核酸分子顯示在大豆基因組內超過0.01574cM/Mb之重組率;以及一感興趣的DNA,其中該感興趣的DNA插入該非基因核酸分子中,更進一步,其中該感興趣的DNA包含一含有殺昆蟲劑抗性基因、除草劑耐受性基因、氮利用效率基因、水利用效率基因、營養品質基因、DNA結合基因或可選擇之標記基因的基因表現卡匣。
- 如請求項9之植物細胞,其中該植物細胞滿足以下至少一者:i)該植物細胞包含兩個或兩個以上該等重組核酸分子,其中該等重組核酸分子位於同一染色體上,ii)該感興趣的DNA插入在一鋅指標靶位點之近側,iii)該感興趣的DNA插入在一對鋅指標靶位點之間,iv)該感興趣的DNA包含分析結構域,v)該感興趣的DNA不編碼肽,vi)該感興趣的DNA編碼肽,vii)該感興趣的DNA包含一含有殺昆蟲劑抗性基因或除草劑耐受性基因的基因表現卡匣。
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