PL213948B1 - Kompozycje zawierajace glikoproteine, czasteczka kwasu nukleinowego kodujaca te glikoproteine, komórka gospodarza, sposób wytwarzania glikoproteiny, kompozycja do zastosowania do leczenia, zastosowanie kompozycji i zestaw zawierajacy kompozycje - Google Patents

Kompozycje zawierajace glikoproteine, czasteczka kwasu nukleinowego kodujaca te glikoproteine, komórka gospodarza, sposób wytwarzania glikoproteiny, kompozycja do zastosowania do leczenia, zastosowanie kompozycji i zestaw zawierajacy kompozycje

Info

Publication number
PL213948B1
PL213948B1 PL372709A PL37270902A PL213948B1 PL 213948 B1 PL213948 B1 PL 213948B1 PL 372709 A PL372709 A PL 372709A PL 37270902 A PL37270902 A PL 37270902A PL 213948 B1 PL213948 B1 PL 213948B1
Authority
PL
Poland
Prior art keywords
region
glycoprotein
amino acid
composition
antibody
Prior art date
Application number
PL372709A
Other languages
English (en)
Other versions
PL372709A1 (pl
Inventor
Leonard G. Presta
Original Assignee
Genentech Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=26990808&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=PL213948(B1) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Genentech Inc filed Critical Genentech Inc
Publication of PL372709A1 publication Critical patent/PL372709A1/pl
Publication of PL213948B1 publication Critical patent/PL213948B1/pl

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2896—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against molecules with a "CD"-designation, not provided for elsewhere
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/06—Antiasthmatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/12—Drugs for disorders of the urinary system of the kidneys
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/06—Antipsoriatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
    • A61P21/04—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system for myasthenia gravis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/10—Antimycotics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/08—Antiallergic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A61P5/38—Drugs for disorders of the endocrine system of the suprarenal hormones
    • A61P5/40—Mineralocorticosteroids, e.g. aldosterone; Drugs increasing or potentiating the activity of mineralocorticosteroids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/04—Antihaemorrhagics; Procoagulants; Haemostatic agents; Antifibrinolytic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/04—Inotropic agents, i.e. stimulants of cardiac contraction; Drugs for heart failure
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/12—Antihypertensives
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/32—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against translation products of oncogenes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/42—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against immunoglobulins
    • C07K16/4283—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against immunoglobulins against an allotypic or isotypic determinant on Ig
    • C07K16/4291—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against immunoglobulins against an allotypic or isotypic determinant on Ig against IgE
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
    • C07K2317/24—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin containing regions, domains or residues from different species, e.g. chimeric, humanized or veneered
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/40—Immunoglobulins specific features characterized by post-translational modification
    • C07K2317/41—Glycosylation, sialylation, or fucosylation
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/52—Constant or Fc region; Isotype
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/73—Inducing cell death, e.g. apoptosis, necrosis or inhibition of cell proliferation
    • C07K2317/732—Antibody-dependent cellular cytotoxicity [ADCC]

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Transplantation (AREA)

Description

Niniejszy wynalazek dotyczy kompozycji zawierających glikoproteinę, cząsteczki kwasu nukleinowego kodującej tę glikoproteinę, komórki gospodarza, sposobu wytwarzania glikoproteiny, kompozycji do zastosowania do leczenia, zastosowania kompozycji i zestawu zawierającego kompozycję. W niniejszym wynalazku opisano kompozycję, która zawiera glikoproteiny ze zmodyfikowanymi wzorami glikozylacji.
Stan techniki
Przeciwciała
Przeciwciała są białkami, które wykazują swoistość wiązania z konkretnym antygenem. Przeciwciała natywne są zwykle heterotetramerowymi glikoproteinami o wielkości około 150000 daltonów, składające się z dwóch identycznych łańcuchów lekkich (L) i dwóch identycznych łańcuchów ciężkich (H). Każdy łańcuch lekki jest połączony z łańcuchem ciężkim jednym kowalencyjnym wiązaniem dwusiarczkowym, natomiast liczba wiązań dwusiarczkowych pomiędzy łańcuchami ciężkimi jest różna w różnych izotypach immunoglobulin. Każdy łańcuch ciężki i lekki ma również regularnie rozmieszczone wewnątrzłańcuchowe mostki dwusiarczkowe. Każdy łańcuch ciężki ma na jednym końcu domenę zmienną (VH), po której następuje kilka domen stałych. Każdy łańcuch lekki ma na jednym końcu domenę zmienną (VL), a na drugim końcu domenę stałą; domena stała łańcucha lekkiego pasuje do pierwszej domeny stałej łańcucha ciężkiego, a domena zmienna łańcucha lekkiego pasuje do domeny zmiennej łańcucha ciężkiego. Uważa się, że poszczególne reszty aminokwasowe tworzą połączenie pomiędzy domenami zmiennymi łańcucha lekkiego i łańcucha ciężkiego.
Termin „zmienny” dotyczy faktu, że niektóre części domen zmiennych przeciwciał wykazują bardzo duże różnice w sekwencji pomiędzy przeciwciałami i są wykorzystywane w wiązaniu i specyficzności poszczególnych przeciwciał wobec konkretnego antygenu. Jednakże, zmienność nie jest równomiernie rozmieszczona na przestrzeni domen zmiennych przeciwciał. Zazwyczaj koncentruje się ona w trzech odcinakach zwanych regionami determinującymi dopasowanie (CDR, od ang. complementarity determining region) w domenach zmiennych zarówno łańcucha lekkiego, jak i ciężkiego. Najbardziej zakonserwowane części domen zmiennych są nazywane regionem zrębowym (FR). Każda z domen zmiennych natywnych łańcuchów lekkich i ciężkich zawiera cztery FR, przyjmujące w większości konfigurację β-kartki, połączone przez trzy CDR, które tworzą pętle łączące, a w niektórych przypadkach tworzą część struktury β-kartki. CDR w każdym łańcuchu są utrzymywane razem w bliskości przez regiony FR i, wraz z CDR z innego łańcucha, uczestniczą w tworzeniu się miejsca wiążącego antygen przeciwciał (patrz Kabat i wsp., Sequences of Proteins of Immunological Interest, wyd. 5, Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, MD (1991)].
Domeny stałe nie uczestniczą bezpośrednio w wiązaniu się przeciwciała z antygenem, ale pełnią one funkcje efektorowe. W zależności od sekwencji aminokwasowej domeny stałej łańcuchów ciężkich, przeciwciała i immunoglobuliny można przypisać do różnych „klas”. Istnieje pięć głównych klas immunoglobulin: IgA, IgD, IgE, IgG i IgM, a kilka z nich można dalej podzielić na „podklasy” (izotypy), np. IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgA i IgA2. Regiony domen stałych łańcuchów ciężkich, które odpowiadają różnym klasom przeciwciał są nazywane odpowiednio, α, β, ε, γ i μ. Wiadomo, że spośród różnych klas ludzkich immunoglobulin jedynie ludzkie IgG1, IgG2, IgG3 i IgM aktywują dopełniacz; ludzkie IgG1 i IgG3 pośredniczą w ADCC bardziej skutecznie niż IgG2 i IgG4.
Schematyczne przedstawienie struktury natywnej IgG1 jest pokazane na fig. 1A, gdzie wskazane są różne części natywnej cząsteczki przeciwciała. Trawienie przeciwciał papainą prowadzi do wytworzenia dwóch identycznych fragmentów wiążących antygen, nazywanych fragmentami Fab, każdy z pojedynczym miejscem wiązania antygenu i pozostałego fragmentu „Fc”, którego nazwa odzwierciedla zdolność do łatwej krystalizacji. Struktura krystaliczna regionu Fc ludzkiej IgG została ustalona (Deisenhofer, Biochemistry 20: 2361-2370 (1981)). W cząsteczkach ludzkiej IgG region Fc jest wytwarzany poprzez cięcie papainą po stronie N Cys 226. Region Fc zajmuje centralne miejsce biorąc pod uwagę funkcje efektorowe przeciwciał.
Zostały opisane też inne cząsteczki typu przeciwciała. Przykładowo, opisano w piśmiennictwie „immunoadhezyny”, które łączą w sobie domenę wiązania heterologicznego białka, takiego jak receptor, ligand lub enzym, z funkcjami efektorowymi regionu Fc. Taką przykładową cząsteczką jest immunoadhezyna: receptor czynnika martwicy nowotworów-IgG (TNFR-IgG) opisana w patencie USA nr
610 297. Opisano również immunoadhezyny bispecyficzne i chimery przeciwciało-immunoahezyna.
PL 213 948 B1
Stabila, P., Nature Biotech, 16: 1357 (1998) opisuje inną zakotwiczoną w błonie komórkowej fuzję białkową zawierającą region. Fuzja białkowa w tym odnośniku stanowi połączenie domeny transbłonowej typu II, która lokuje się w błonie komórkowej z końcem N regionu Fc.
Przeciwciała i immunoadhezyny stosowane są jako leki w ludzkich chorobach (Glennie i wsp. Immunol. Today 21: 403-410 (2000); King i wsp. Curr. Opin. Drug Discovery Develop 2: 110-117 (1999); Vaswani i wsp. Ann. Allergy Asthma Immunol. 81: 105-119 (1998) oraz Abraham i wsp. Sec. Intern. Autumnal Them. Meeting on Sepsis, Deauville, France (1995)). Niektóre z tych przeciwciał i immunoadhezyn, np. te, wiążą się z receptorem albo ligandem i blokują w ten sposób oddziaływanie liganda z receptorem mogą działać bez wykorzystywania mechanizmów efektorowych przeciwciała. Inne mogą wymagać zaangażowania układu immunologicznego do zabicia komórki docelowej (Clynes i wsp. Nature Med. 6: 443-446 (2000); Clynes i wsp. PNAS (USA) 95: 652-656 (1998) oraz Anderson i wsp. Biochem. Soc. Trans. 25: 705-708 (1997)).
Funkcje efektorowe przeciwciał
Funkcje efektorowe, w których bierze udział region Fc przeciwciała można podzielić na dwie kategorie: (1) funkcje efektorowe, która działają po związaniu się przeciwciała z antygenem (te funkcje obejmują udział kaskady dopełniacza lub komórek niosących receptor Fc (FcR); i (2) funkcje efektorowe, która działają niezależnie od wiązania antygenu (te funkcje nadają utrzymywanie się w układzie krążenia i zdolność do przenikania przez bariery komórkowe poprzez transcytozę), Ward i Ghetie, Therapeutic Immunology 2: 77-94 (1995).
Podczas gdy wiązanie przeciwciała do odpowiedniego antygenu ma efekt neutralizujący, który mógłby zapobiegać wiązaniu obcego antygenu do jego endogennego celu (np. receptora lub liganda), samo wiązanie może nie usuwać obcego antygenu. Aby być skuteczne w usuwaniu i/lub niszczeniu obcych antygenów, przeciwciało powinno posiadać zarówno wiązanie o wysokim powinowactwie do swego antygenu, jak i wydajne funkcje efektorowe.
Interakcja przeciwciał i kompleksów przeciwciało-antygen z komórkami układu immunologicznego wywołuje różne odpowiedzi, w tym zależną od przeciwciała cytotoksyczność z udziałem komórek (ADCC, od ang. cell-mediated cytotoxicity) i cytotoksyczność zależną od dopełniacza (CDC od ang. complement dependent cytotoxicity) (przegląd w Daeron, Annu. Rev. Immunol. 15: 203-234 (1997); Ward i Ghetie, Therapeutic Immunol. 2: 77-94 (1995) oraz Ravetch i Kinat, Annu. Rev. Immunol. 9: 457-492 (1991)).
W kilku funkcjach efektorowych przeciwciała pośredniczą receptory Fc (FcRs), które wiążą region Fc przeciwciała. FcRs są definiowane przez swoją specyficzność względem izotypów immunoglobulin; receptory Fc dla przeciwciał IgG są określane jako FcyR, dla IgE jako FcsR, dla IgA jako FcaR i tak dalej. Zidentyfikowano trzy podklasy FcyR: FcyRI (CD64), FeyRII (CD32) i FcyRIII (CD16). Ponieważ każda podklasa FcyR jest kodowana przez dwa lub trzy geny i alternatywne składanie RNA prowadzi do wielu transkryptów, istnieje szeroka różnorodność izoform FcyR. Trzy geny kodujące podklasę FeyRI (FcyRIA, FcyRIB i FcyRIC) tworzą skupienie w regionie lq21.1 długiego ramienia chromosomu I; geny kodujące izoformy FcyRII (FcyRIIA, FcyRIIB i FcyRIIC) i dwa geny kodujące FcyRIII (FcyRIIIA i FcyRIIIB) są wszystkie skupione w regionie lq22. Te różne podtypy FcR są wyrażane na różnych typach komórek (przegląd w Ravetch i Kinat, Annu. Rev. Immunol. 9: 457-492 (1991)). Na przykład u ludzi FcyRIIIB znajduje się tylko na neutrofiłach, podczas gdy FcyRIIIA znajduje się na makrofagach, monocytach, komórkach naturalnych zabójcach (NK) i subpopulacji komórek T.
Strukturalnie wszystkie FcyR są członkami nadrodziny immunoglobulin mających łańcuch, a wiążący IgG z zewnętrzną częścią złożoną albo z dwóch (FcyRI i FcyRIII) albo z trzech (FcyRI) domen podobnych do Ig. Dodatkowo, FcyRI i FcyRIII mają dodatkowe łańcuchy białkowe (y, Ζ) związane z łańcuchem α, które działają w transdukcji sygnału. Te receptory także różnią się swym powinowactwem względem IgG. FcyRI wykazuje wysokie powinowactwo względem IgG, Ka = 108-109 M-1 (Ravetch i wsp. Ann. Rev. Immunol. 19: 275-290 (2001)) i może wiązać monomeryczną IgG. Przeciwnie
-1
FcyRII i FcyRIII wykazują stosunkowo słabsze powinowactwo dla monomerycznej IgG Ka < 10 M (Ravetch i wsp. Ann. Rev. Immunol. 19: 275-290 (2001)) i dlatego też oddziałują skutecznie tylko z multimerowymi kompleksami immunologicznymi. Receptory FcyRII obejmują FcyRIIA („receptor aktywujący”) i FcyRIIB („receptor hamujący”), które mają podobne sekwencje aminokwasowe, które przede wszystkim różnią się w swoich domenach cytoplazmatycznych. Receptor aktywujący FcyRIIA zawiera motyw aktywujący immunoreceptora oparty na tyrozynie (ITAM, od ang. immunoreceptor tyrosine-based activation motif) w swojej domenie cytoplazmatycznej. Receptor hamujący FcyRIIB zawiera motyw hamujący immunoreceptora oparty na tyrozynie (tyrosine-based inhibition motif - ITIM)
PL 213 948 B1 w swojej domenie cytoplazmatycznej (patrz przegląd w Daeron, Annu. Rev. Immunol. 15: 203-234 (1997)). Komórki NK niosą tylko FcyRIIIA i wiązanie przeciwciał do FcyRIIIA prowadzi do aktywności ADCC przez komórki NK.
W populacji ludzkiej znaleziono warianty alleliczne kilku ludzkich FcyR. Wykazano, że te alleliczne formy wariantowe wykazują różnice w wiązaniu ludzkiego i mysiego IgG i szereg badań asocjacyjnych korelowało wyniki kliniczne z obecnością specyficznych form allelicznych (przegląd w Lehrnbecher i wsp. Blood 94 (12): 4220-4232 (1999)). Kilka badań dotyczyło dwóch form FcyRIIA, R131 i H131 i ich asocjacji z wynikami klinicznymi (Hatta i wsp. Genes and Immunity 1: 53-60 (1999); Yap i wsp., Lupus 8: 305-310 (1999); i Lorenz i wsp. European J. Immunogenetics 22: 397-401 (1995)). Dwie formy alleliczne FcyRIIIA, F158 i V158, są badane dopiero teraz (Lehrnbecher i wsp., jak wyżej oraz Wu i wsp., J. Clin. Invest. 100 (5): 1059-1070 (1997)). Allotyp FcyRIIIA (Val158) oddziałuje z ludzką IgG lepiej niż allotyp FcyRIIIA (Phe158) (Shields i wsp. J. Biol. Chem. 276: 6591-6604 (2001); Koene i wsp. Blood 90: 1109-1114 (1997) oraz Wu i wsp. J.Clin. Invest. 100: 1059-1070 (1997)).
Innym typem receptora jest noworodkowy receptor Fc (FcRn). FcRn jest strukturalnie podobny do głównego antygenu zgodności tkankowej (MHC) i składa się z łańcucha α niekowalencyjnie powiązanego z p2-mikroglobuliną.
Zaproponowano, że FcRn reguluje homeostazę IgG w krwi, a także być może kontroluje transcytozę przez tkanki (Ghetie i wsp. Annu. Rev. Immunol. 18: 739-766 (2000)).
Miejsca wiązania FcyR na ludzkich i mysich przeciwciałach uprzednio zmapowano do tak zwanego „dolnego regionu zawiasowego” złożonego z reszt 233-239 (numery indeksu EU jak w Kabat i wsp., Sequences of Proteins of Immunological Interest, wyd. 5 Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, MD. (1991)). Woof i wsp. Molec. Immunol. 23: 319-330 (1986); Duncan i wsp. Nature 332: 563 (1988); Canfield i Morrizon, J. Exp. Med. 173: 1483-1491 (1991); Chappel i wsp., Proc. Natl. Acad. Sci USA 88: 9036-9040 (1991). Spośród reszt 233-239, P238 i S239 wymieniano jako możliwie biorące udział w wiązaniu.
Inne uprzednio cytowane obszary być może biorące udział w wiązaniu FcyR to: G316-K338 (ludzka IgG) dla ludzkiego FcyRI (tylko na podstawie porównania sekwencji; nie oceniano mutantów z podstawieniami); (Woof i wsp. Molec. Immunol. 23: 319-330 (1986)); K274-R301 (ludzka IgG1) dla ludzkich FcyRIII (na podstawie peptydów) (Sarmay i wsp. Molec. Immunol. 21: 43-51 (1984)); Y407-R416 (ludzka IgG) dla ludzkiego FcyRIII (na podstawie peptydów) (Gergely i wsp. Biochem. Soc. Trans. 12: 739-743 (1984)); jak i N297 i E318 (mysia IgG2b) dla mysiego FcyRII (Lund i wsp., Molec. Immunol. 29: 53-59 (1992)). Patrz też Armour i wsp. Eur. J. Immunol. 29: 2613-2624 (1999).
W WO 00/42072 (Presta) ujawniono warianty polipeptydów z ulepszonym lub osłabionym wiązaniem FcRs. Zawartość tej publikacji jest tu wyłączona jako odniesienie. Patrz także Shields i wsp. J. Biol. Chem. 9 (2): 6591-6604 (2001).
Clq i dwie proteazy serynowe Clr i Cis, tworzą kompleks Cl, pierwszy składnik szlaku cytotoksyczności zależnej od dopełniacza (CDC). Clq jest cząsteczką sześciowartościową z masą cząsteczkową około 460000 i budową porównywaną z bukietem tulipanów, w którym wszystkie sześć kolagenowych „łodyg” jest połączonych z sześcioma globularnymi regionami głowy. Burton i Woof, Advances in Immunol. 51: 1-84 (1992). Aby zaktywować kaskadę dopełniacza konieczne jest, by Clq związał przynajmniej dwie cząsteczki IgG1, IgG2 lub IgG3 (uważa się, że IgG4 nie aktywuje dopełniacza), ale tylko jedną cząsteczkę IgM, przyłączoną do docelowego antygenu. Ward i Ghetie, Therapeutic Immunology 2: 77-94 (1995) na stronie 80.
W oparciu o wyniki modyfikacji chemicznych i badań krystalograficznych, Burton i wsp. Nature, 288: 338-344 (1980) zaproponowali, że miejsce wiązania dla składnika Clq dopełniacza na IgG obejmuje ostatnie dwie (C-końcowe) nici β domeny CH2. Burton później zasugerował (Molec. Immunol., 22(3): 161-206 (1985)), że region obejmujący reszty aminokwasów 318 do 337 może bierze udział we wiązaniu dopełniacza.
Duncan i Winter, Nature 332: 738-40 (1988), stosując mutagenezę ukierunkowaną donieśli, że Glu318, Lys320 i Lys322 tworzą miejsce wiązania do Clq. Dane Duncan i Winter uzyskano poprzez testowanie wiązania izotypu mysiej IgG2b do Clq świnki morskiej. Rolę reszt Glu318, Lys320 i Lys322 we wiązaniu Clq potwierdzono przez zdolność krótkiego peptydu zawierającego te reszty do hamowania Iizy z udziałem dopełniacza. Podobne wyniki ujawniono w patencie USA nr 5 648 260 wydanym 15 lipca, 1997 i patencie USA nr 5 624 821 wydanym 29 kwietnia, 1997.
Reszta Pro331 jest podejrzewana o wiązanie Clq na podstawie analizy zdolności podklas ludzkiej IgG do przeprowadzenia Iizy komórek z udziałem dopełniacza. Mutacja Ser331 do Pro331 w IgG4
PL 213 948 B1 nadała zdolność do aktywacji dopełniacza (Tao i wsp., J. Exp. Med., 178: 661-667 (1993); Brekke i wsp., Eur. J. Immunol., 24: 2542-47 (1994)).
Z porównania danych grupy Wintera i prac Tao i wsp. i Brekke i wsp., Ward i Ghetie wywnioskowali w swojej pracy przeglądowej, że istnieją przynajmniej dwa różne regiony biorące udział we wiązaniu Clq: jeden na nici β domeny CH2 niosącej reszty Glu318, Lys320 i Lys322 i drugi na skręcie zlokalizowanym bardzo blisko tej samej nici β i zawierającym kluczową resztę aminokwasu w pozycji 331.
Inne prace sugerowały, że ludzkie reszty IgG1 Lys235 i W Gly237 zlokalizowane w dolnym regionie zawiasowym, odgrywają kluczową rolę w wiązaniu i aktywacji dopełniacza. Xu i wsp., J. Immunol. 150:152A (Abstrakt) (1993). W0 94/29351 opublikowany 22 grudnia, 1994, donosi, że reszty aminokwasów potrzebne do wiązania przez Clq i FcR ludzkiej IgG1 są zlokalizowane w N-końcowym regionie domeny CH2, tzn. obejmuje reszty 231 do 238.
Zaproponowano dalej, że zdolność IgG do wiązania Clq i aktywacji kaskady dopełniacza także zależy od obecności, braku lub modyfikacji reszty węglowodanowej umieszczonej między dwiema domenami CH2 (jest ona normalnie zakotwiczona na Asn297). Ward i Ghetie, Therapeutic Immunology 2: 77-94 (1995) na stronie 81.
Warianty polipeptydowe ze zmienionymi sekwencjami aminokwasowymi regionu Fc i zwiększoną lub zmniejszoną zdolnością do wiązania Clq opisano w patencie USA nr 6 194 551 B1 i WO 99/51642. Zawartości tych publikacji patentowych jest tu konkretnie włączona jako odniesienie. Patrz także Idusogie i wsp. J. Immunol. 164: 4178-4184 (2000).
Inne sposoby, które poprawiają angażowanie układu immunologicznego obejmują przeciwciała bispecyficzne, w których jedno ramię przeciwciała wiąże i receptor IgG (Segal i wsp. J. Immunol. Meth. 248: 1-6 (2001) oraz fuzje białowe mi cytokina-IgG (Penichet i wsp. J. Immunol. Meth. 248: 91-101 (2001)).
Glikozylacja przeciwciał
Wiele polipeptydów, w tym przeciwciał, podlega szeregu modyfikacjom potranslacyjnym z udziałem reszt węglowodanowych, takim jak glikozylacja oligosacharydami. Takie glikozylowane polipeptydy są określane jako „glikoproteiny”.
Istnieje kilka czynników, które mogą wpływać na glikozylację. Wykazano, że gatunek, typ tkanki i komórki są ważne dla sposobu, w jaki zachodzi glikozylacja. Dodatkowo, otoczenie zewnątrzkomórkowe przez zmienione warunki hodowli, takie jak stężenie surowicy, może mieć bezpośredni wpływ na glikozylację. (Lifely i wsp. Glycobiology 5 (8): 813-822 (1995)). Zaproponowano różne metody, aby zmienić wzór glikozylacji uzyskiwany w danym organizmie gospodarza obejmujące wprowadzenie lub nadekspresję pewnych enzymów biorących udział w wytwarzaniu oligosacharydów. (Patent USA nr 5 047 335; patent USA nr 5 510 261). Te schematy nie są ograniczane do metod wewnątrzkomórkowych (patent USA nr 5 278 299).
Wszystkie przeciwciała zawierają węglowodany w konserwatywnych pozycjach w regionach stałych łańcucha ciężkiego. Każdy izotyp przeciwciała ma odrębną odmianę struktur węglowodanowych związanych z N. Poza węglowodanem przyłączonym do ciężkiego łańcucha, do 30% ludzkich IgG ma glikozylowany region Fab. IgG ma pojedynczy związany z N dwuantenowy węglowodan na Asn297 domeny CH2. W pełni obrobiona struktura węglowodanu przyłączonego do Asn297 jest przedstawiona na fig. 2. W przypadku IgG z surowicy lub produkowanej ex vivo w hybrydomach lub komórkach poddanych inżynierii genetycznej, IgG są heterogenne pod względem węglowodanu połączonego z Asn297. Jefferis i wsp. Immunol. Rev. 163: 59-76 (1998); i Wright i wsp. Trends Biotech 15: 26-32 (1997). W przypadku IgG, oligosacharyd rdzeniowy normalnie składa się z GlcNAc2Man3-GlcNAc, z różnymi liczbami zewnętrznych reszt. Fig. 2 tutaj przedstawia szlak obróbki oligosacharydu do dojrzałego węglowodanu. Wcześnie syntetyzowana forma Glu3Man9GlcNac2 jest przenoszona na Asn297 w domenie CH2 przeciwciała, gdy wyłania się ono z rybosomu. Po odcięciu trzech końcowych glukoz, gdy glikoproteina przechodzi przez retikulum endoplazmatyczne, glikoproteina przemieszcza się do cis aparatu Golgiego, gdzie reszty mannozy usuwane są enzymatycznie przez α-mannozydazy. Obróbka może zatrzymać się w tym stadium, dając hiper-mannozylowane glikoproteiny. W przeciwnym wypadku obróbka może być kontynuowana do uzyskania Man5GlcNac2. Działanie N-acetyloglikozaminylotransferazy i w środkowym aparacie Golgiego jest etapem zaangażowania w syntezie złożonych oligosacharydów. W aparacie Golgiego, środkowym i trans, oligosacharyd jest poddawany dalszym etapom obróbki, w których reszty mannozy są przycinane i kolejno dodawane są reszty cukrów. Nowo syntetyzowana glikoproteina następnie wychodzi z aparatu Golgiego i jest transportowana do błony komórkowej lub jest wydzielana.
PL 213 948 B1
Zmienność wśród poszczególnych IgG wynika z przyłączenia galaktozy i/lub galaktozy-kwasu sialowego do dwóch końcowych GlcNac lub przyłączenia trzeciego ramienia GlcNAc (rozdzielająca GlcNAc). Badano węglowodan przyłączony do Asn297 IgG. Brak węglowodanu wpływa na wiązanie
Clq i FcyR (i w efekcie wpływa na aktywację dopełniacza i ADCC). Leatherbarrow i wsp. Molec. Immunol. 22: 407-415 (1985); Duncan i wsp. Nature 332: 738-740 (1988); Walker i wsp. Biochem. J. 259: 347-353 (1989); Dorai i wsp. Hybridoma 10: 211-217 (1990) oraz Horan Hand i wsp. Cancer Immunol. Immunother. 35: 165-174 (1992). Podczas gdy brak węglowodanu nie wydaje się wpływać na wiązanie FeRn (Hobbs i wsp. Molec. Immunol. 29: 949-956 (1992) oraz Kim i wsp. Eur. J. Immunol. 24: 542-548 (1994)), wpływ na klirans nie jest pewny (Dorai i wsp. Hybridoma 10: 211-217 (1990); Horan Hand i wsp. Cancer Immunol. Immunother. 35: 165-174 (1992); Hobbs i wsp. Molec. Immunol. 29: 949-956 (1992); Kim i wsp. Eur. J. Immunol. 24: 542-548 (1994); Wawrzynczak i wsp. Biochem. Soc. Trans. 17: 1061-1062 (1989) oraz Tao i wsp. J. Immuno. 143: 2595-2601 (1989)). Gdy węglowodan jest obecny charakter reszt cukrowych może także wpływać na funkcje efektorowe IgG. Doniesiono, że obecność lub brak końcowych reszt galaktozy wpływa na funkcje (Wright i wsp. J. Immunol. 160: 3393-3402 (1998)) i wydaje się korelować z reumatoidalnym zapaleniem stawów (Parekh i wsp. Nature 316: 452-457 (1985)). Ludzka IgG izolowana z surowic pacjentów ze szpiczakiem mnogim wykazuje ekstrema w obecności/braku fukozy, galaktozy i rozdzielającej N-acetyloglikozoaminy (Parekh i wsp. Nature 316: 452-457 (1985)). Raju i wsp. opisują zmienność glikozylacji IgG z różnych gatunków (Raju i wsp. Glycobiology 10 (5): 477-486 (2000)).
Boyd i wsp. stwierdzili, że usunięcie końcowego kwasu sialowego z pochodzących z CHO CAMPATH-1H za pomocą trawienia glikopeptydazą F nie wpływało na żadną z testowanych aktywności IgG, podczas gdy stwierdzono, że usunięcie większości reszt galaktozy z desialylowanych CAMPATH-1H zmniejsza (ale nie znosi) aktywność lityczną dopełniacza. Usunięcie galaktozy nie wpływała na inne aktywności. Boyd i wsp. Molec. Immunol. 32 (17/18): 1311-1318 (1995). Kumpel i wsp., Hum. Antibod. Hybridomas, 5 (3-4): 143-151 (1994) donoszą, że galaktozylacja ludzkiego monoklonalnego przeciwciała IgG wpływa na aktywność funkcjonalną z udziałem Fc.
Rothman i wsp. testowali funkcję ADCC monoklonalnej IgG oczyszczanej z hybrydom traktowanych inhibitorami glikozydazy, które działały w różnych stadiach szlaku obróbki węglowodanów. Rothman i wsp. Molecular Immunol. 26 (12): 1113-1123 (1989). Traktowanie kastanosperminą, która hamuje usuwanie reszt glukozy z tworzącego się oligosacharydu (Kaushal i wsp. Meth. Enzymol. 230: 316-329 (1994)), wykazało zwiększoną ADCC komórek NK, które wyrażają (wykazują ekspresję) tylko FcyRIII, ale nie dla innych typów komórek efektorowych, takich jak monocyty. Analiza wiązania pektyny sugerowała, że w traktowanej kastanosperminą IgG brakowało fukozy; jednak możliwe jest, że IgG będąca wynikiem traktowania kastanosperminą miała inną strukturę węglowodanów, taką jak hipermannozylacja, jak również końcowe reszty glukozy (Kaushal i wsp. Meth. Enzymol. 230: 316-329 (1994); Hashim i wsp. Immunology 63: 383-388 (1988); Hashim i wsp. Molec. Immunol. 24: 1087-1096 (1987)), nie spotykane zazwyczaj na IgG wydzielanej z nietraktowanych komórek lub z surowicy ludzkiej.
WO 97/30087 opisuje przygotowanie glikozylowanych przeciwciał gdzie miejsce N-glikozylacji domeny Fc przeciwciała jest podstawione dwuantenowym oligosacharydem.
Umana i wsp. wprowadzili gen β-(1,4)-N-acetyloglukozaminylotransferazy III (GcTIII), który katalizuje dodatek rozdzielającej GlcNAc do węglowodanowego rdzenia przyłączonego do Asn297 przeciwciała komórek jajnika chomika chińskiego (Chinese hamster ovary CHO). Glikoformy produkowane przez komórki CHO poddane inżynierii genetycznej uważano za posiadające zoptymalizowane ADCC. Patrz WO 99/54342 i Umana i wsp., Nature Biotechnology, 17: 176-180 (1999).
WO 98/58964 (Raju i wsp.) opisuje kompozycje przeciwciał, gdzie zasadniczo cały związany z N oligosacharyd jest oligosacharydem G2. G2 dotyczy dwuantenowej struktury z dwiema końcowymi Gal i brakiem NeuAc. WO 99/22764 (Raju i wsp.) dotyczy kompozycji przeciwciał, które są zasadniczo wolne od glikoprotein mających związany z N oligosacharyd G1, G0 lub G-1 w swojej domenie CH2. G1 dotyczy struktury dwuantenowej mającej jeden Ga1 i pozbawionej NeuAc, G0 dotyczy struktury dwuantenowej, gdzie nie są obecne końcowe NeuAc lub Ga1 i G-1 dotyczy jednostki rdzenia minus jedna GlcNAc.
W WO 0/61739 ujawniono, że 47% przeciwciał anty-hIL-5R wyrażanych przez YB2/0 (szpiczak szczura) ma połączone α-1-6 fukozą łańcuchy cukrowców, w porównaniu z 73% tych przeciwciał wyrażanych przez komórki NSO (szpiczak myszy). Stosunek względny fukozy przeciwciał α-hIL-5R wyrażanych przez różne komórki gospodarza wynosił YB2/0 < CHO/d < NSO.
PL 213 948 B1
Routier i wsp. badali wzór glikozylacji humanizowanego przeciwciała IgG1 (Dl.3) wyrażanego w komórkach CHO-DUKX. Struktury N-glikanów wyrażanych na CHO były dwuantenowymi N-glikanami z rdzeniową fukozą, ale były pozbawione rozdzielającej GlcNAc i kwasu sialowego. Struktury były heterogenne względem końcowej galaktozylacji i zostały więc VB nazwane G2, G1 i G0. Routier i wsp. Glycoconjugate J. 14: 201-207 (1997).
Uprzednio doniesiono, że znaleziono fukozę połączoną z O na szeregu polipeptydów i że przyłączona fukoza jest ważna dla właściwej aktywności polipeptydu. Patrz W098/33924, który opisuje metody glikozylacji resztą O-fukozy. Stankova i wsp. J. Immunol. 135 (6): 3719-3728 (1985) stwierdzili, że fukoza znacząco wzmaga zdolność cytolityczną indukowanych przez mieszaną hodowlę leukocytów (mixed leukocyte culture-MCL) lub przez preinkubowane komórki efektorowe. Cameron i wsp. Immunol. Lett. 11: 39-44 (1985) stwierdzili, że α-L-fukoza wydaje się odgrywać ważną rolę w interakcjach makrofagów z komórkami guza.
Istnieje ciągła potrzeba w tej dziedzinie wytwarzania glikoprotein, takich jak przeciwciała, mających ulepszoną aktywność biologiczną.
Streszczenie wynalazku
Przedmiotem niniejszego wynalazku jest kompozycja, charakteryzująca się tym, że zawiera glikoproteinę posiadającą region Fc ludzkiej IgG, przy czym 51-100% tej glikoproteiny w kompozycji zawiera strukturę dojrzałego rdzenia węglowodanowego, pozbawionego fukozy, przyłączonego do regionu Fc glikoproteiny, przy czym region Fc zawiera sekwencję aminokwasową, która różni się od natywnej sekwencji regionu Fc ludzkiej IgG i gdzie glikoproteina ta:
(a) wiąże się z FcyRIII z większym powinowactwem; lub (b) pośredniczy w zależnej od przeciwciała toksyczności za pośrednictwem komórek (ADCC) bardziej skutecznie niż glikoproteina ze strukturą dojrzałego rdzenia węglowodanowego zawierającego fukozę, przyłączoną do regionu Fc glikoproteiny i fizjologicznie akceptowalny nośnik, zaróbkę lub stabili zator.
Korzystnie, kompozycja według wynalazku charakteryzuje się tym, że wspomniany region Fc zawiera podstawienia aminokwasowe w dowolnej z jednej albo większej liczby pozycji aminokwasowych 256, 290, 298, 312, 326, 330, 333, 334, 360, 378 lub 430, stosując numerację EU dla reszt regionu Fc.
Bardziej korzystnie, region Fc zawiera podstawienia aminokwasowe w dowolnej z jednej albo większej liczby pozycji 298, 333 i 334, a jeszcze bardziej korzystnie region Fc zawiera podstawienia aminokwasowe w pozycjach 298, 333 i 334.
Najkorzystniej zastępującymi resztami w pozycjach 298, 333 i 334 są alaniny.
W kompozycji według wynalazku korzystnie region Fc zawiera podstawienie aminokwasowe w dowolnej z jednej albo większej liczby pozycji aminokwasowych 238, 239, 248, 249, 252, 254, 255, 256, 258, 265, 267 , 268, 269, 270, 272, 276, 278, 280, 283, 285, 286, 289, 290 , 292, 293, 294, 295, 296, 298, 301, 303, 305, 307, 309, 312 , 315, 320, 322, 324, 326, 327, 329, 330, 331, 333, 334, 335, 337, 338, 340, 360, 373, 376, 378, 382, 388, 389, 398, 414 , 416, 419, 430, 434, 435, 437, 438 lub 439 regionu Fc.
Bardziej korzystnie, region Fc zawiera podstawienia aminokwasowe w dowolnej z jednej albo większej liczby pozycji aminokwasowych 238, 239, 248, 249 , 252, 254, 265, 268, 269, 270, 272, 278, 289, 292, 293, 294, 295, 296, 298, 301, 303, 322, 324, 327, 329, 333, 335, 338, 340, 373, 376, 382,
388, 389, 414, 416, 419, 434, 435, 437, 438 lub 439 regionu Fc.
Również korzystnie, region Fc zawiera podstawienie aminokwasowe w dowolnej z jednej albo większej liczby pozycji aminokwasowych 238, 265, 269, 270, 327 lub 329 regionu Fc i tym, że region Fc wykazuje zmniejszone wiązanie do FcyRI w stosunku do regionu Fc o sekwencji natywnej.
W innej korzystnej realizacji wynalazku region Fc zawiera podstawienie aminokwasowe w dowolnej z jednej albo większej liczby pozycji aminokwasowych 238, 265, 269, 270, 292, 294, 295, 298, 303, 324, 327, 329, 333, 335, 338, 373, 376, 414, 416, 419, 435, 438 lub 439 regionu Fc, przy czym region Fc wykazuje zmniejszone wiązanie do FcyRII w stosunku do regionu Fc o sekwencji natywnej.
W następnej korzystnej realizacji wynalazku w kompozycji według wynalazku region Fc zawiera podstawienie aminokwasowe w dowolnej z jednej albo większej liczby pozycji aminokwasowych 238,
239, 248, 249, 252, 254, 265, 268, 269, 270, 272, 278, 289, 293, 294, 295, 296, 301, 303, 322, 327,
329, 338, 340, 373, 376, 382, 388, 389, 416, 434, 435 lub 437 regionu Fc, a region Fc wykazuje zmniejszone wiązanie do FcyRIII w stosunku do regionu Fc o sekwencji natywnej.
PL 213 948 B1
Również korzystnie, kompozycja według wynalazku zawiera glikoproteinę, której region Fc zawiera podstawienie aminokwasowe w dowolnej z jednej albo większej liczby pozycji aminokwasowych
255, 256, 258, 267, 268, 272, 276, 280, 283, 285, 286, 290, 298, 301, 305, 307, 309, 312, 315, 320, 322, 326, 330, 331, 333, 334, 337, 340, 360, 378, 398 lub 430 regionu Fc, przy czym region Fc wykazuje zwiększone wiązanie do jednego lub większej liczby FcyR w stosunku do regionu Fc o sekwencji natywnej.
Bardziej korzystnie, wspomniany region Fc zawiera podstawienie aminokwasowe w pozycji 298 i/lub 333 regionu Fc, przy czym region Fc wykazuje zwiększone wiązanie do FcyRIII w stosunku do regionu Fc o sekwencji natywnej.
Jeszcze bardziej korzystnie, w kompozycji według wynalazku, region Fc wykazuje ponadto zmniejszone wiązanie do FcyRII w stosunku do regionu Fc o sekwencji natywnej.
W innym korzystnym wykonaniu wynalazku region Fc zawiera podstawienie aminokwasowe w dowolnej z jednej albo większej liczby pozycji aminokwasowych 255, 256, 258, 267, 268, 272, 276,
280, 283, 285, 286, 290, 301, 305, 307, 309, 312, 315, 320, 322, 326, 330, 331, 337, 340, 378, 398 lub 430 regionu Fc, przy czym Fc wykazuje zwiększone wiązanie do FcyRII w stosunku do regionu Fc o sekwencji natywnej.
Bardziej korzystnie, region Fc wykazuje zmniejszone wiązanie do FcyRIII.
Jeszcze bardziej korzystnie, region Fc zawiera podstawienie aminokwasowe w dowolnej z jednej albo większej liczby pozycji aminokwasowych 268, 272, 298, 301, 322 lub 340 regionu Fc.
W kompozycji według wynalazku region Fc glikoproteiny ma korzystnie zmienione powinowactwo wiązania do FcRn w stosunku do regionu Fc o sekwencji natywnej.
Bardziej korzystnie, region Fc zawiera podstawienie aminokwasowe w dowolnej z jednej albo większej liczby pozycji aminokwasowych 238, 252, 253, 254, 255, 256, 265, 272, 286, 288, 303, 305, 307, 309, 311, 312, 317, 340, 356, 360, 362, 376, 378, 380, 382, 386, 388, 400, 413, 415, 424, 433, 434, 435, 436, 439 lub 447 regionu Fc.
Również korzystnie, region Fc zawiera podstawienie aminokwasowe w dowolnej z jednej albo większej liczby pozycji aminokwasowych 252, 253, 254, 255, 288, 309, 386, 388, 400, 415, 433, 435, 436, 439 lub 447 regionu Fc i tym, że region Fc wykazuje zmniejszone wiązanie do FcRn w stosunku do regionu Fc o sekwencji natywnej.
Region Fc może także korzystnie zawierać podstawienie aminokwasowe w dowolnej z jednej albo większej liczby pozycji aminokwasowych 238, 256, 265, 272, 286, 303, 305, 307, 311, 312, 317, 340, 356, 360, 362, 376, 378, 380, 382, 413, 424 lub 434 regionu Fc i tym, że region Fc wykazuje zwiększone wiązanie do FcRn w stosunku do regionu Fc o sekwencji natywnej.
Kompozycja według wynalazku korzystnie charakteryzuje się tym, że region Fc ma zmienione wiązanie Clq i/lub funkcję cytotoksyczności zależną od dopełniacza (CDC), a bardziej korzystnie region Fc zawiera podstawienie aminokwasowe w dowolnej z jednej albo większej liczby pozycji aminokwasowych 270, 322, 326, 327, 329, 331, 333 i 334 łańcucha ciężkiego.
W innym korzystnym wykonaniu wynalazku kompozycja charakteryzuje się tym, że sekwencja arainokwasowa regionu Fc zawiera zmianę sekwencji aminokwasowej, która zmienia natywny wzór glikozylacji glikoproteiny.
Korzystnie, glikoproteina w kompozycji według wynalazku jest zasadniczo wolna od rozdzielającej N-acetyloglukozaminy (GlcNAc) przyłączonej do struktury dojrzałego rdzenia węglowodanowego. Glikoproteina w kompozycji według wynalazku ma rozdzielającą N-acetyloglukozaminę (GlcNAc) przyłączoną do struktury dojrzałego rdzenia węglowodanowego.
Również korzystnie, glikoproteina ma jedną lub większą liczbę reszt galaktozy przyłączonych do struktury dojrzałego rdzenia węglowodanowego.
Glikoproteina korzystnie jest zasadniczo wolna od jednej lub większej liczby reszt galaktozy przyłączonych do struktury dojrzałego rdzenia węglowodanowego.
Glikoproteina korzystnie ma jedną lub większą liczbę reszt kwasu sialowego przyłączonych do struktury dojrzałego rdzenia węglowodanowego.
Glikoproteina korzystnie jest zasadniczo wolna od jednej lub większej liczby reszt kwasu sialowego przyłączonych do struktury dojrzałego rdzenia węglowodanowego.
Także korzystnie, 100% glikoproteiny w kompozycji zawiera strukturę dojrzałego rdzenia węglowodanowego, pozbawionego fukozy, przyłączoną do regionu Fc glikoproteiny.
PL 213 948 B1
Kompozycja według wynalazku korzystnie charakteryzuje się tym, że region Fc obejmuje region
Fc ludzkiej IgG, gdzie bardziej korzystnie region Fc ludzkiej IgG obejmuje region Fc ludzkiej IgGx, IgG2, IgG3 lub IgG4.
Bardziej korzystnie, glikoproteina wiąże się z FcyRIII, a jeszcze bardziej korzystnie glikoproteina wiąże się z FcyRIII z lepszym powinowactwem albo pośredniczy w zależnej od przeciwciała toksyczności za pośrednictwem komórek (ADCC) bardziej skutecznie niż glikoproteina ze strukturą dojrzałego rdzenia węglowodanowego zawierającego fukozę, przyłączoną do regionu Fc glikoproteiny.
W następnym korzystnym rozwiązaniu kompozycji według wynalazku glikoproteina obejmuje przeciwciało, przy czym korzystnym przeciwciałem jest przeciwciało chimerowe, humanizowane albo ludzkie. Przeciwciało to wiąże się z antygenem wybranym z grupy składającej się z markera powierzchniowego komórek B, receptora ErbB, antygenu związanego z nowotworem i czynnika angiogennego. Również korzystnie przeciwciało wiąże się z CD20, HER2, czynnikiem wzrostu śródbłonka naczyń (VEGF), CD40 lub antygenem komórek macierzystych prostaty (PSCA). Przeciwciało to także korzystnie obejmuje humanizowane przeciwciało anty-HER2, chimerowe przeciwciało anty-CD20 i humanizowane przeciwciało anty-VEGF.
Kompozycja według wynalazku charakteryzuje się tym ponadto, że 90-99% glikoproteiny w kompozycji zawiera strukturę dojrzałego rdzenia węglowodanowego, pozbawionego fukozy, przyłączoną do regionu Fc glikoproteiny.
Kompozycja według wynalazku charakteryzuje się tym, że glikoproteina została wytworzona przez komórkę jajnika chomika chińskiego (CHO), a korzystniej komórką CHO jest komórka Lec13.
Kompozycja według wynalazku jest preparatem farmaceutycznym, który w korzystnej realizacji może zawierać ponadto dopuszczalny farmaceutycznie nośnik, która to kompozycja korzystnie jest jałowa, i ewentualnie może być korzystnie zliofilizowana.
W kompozycji według wynalazku glikoproteina jest immunoadhezyną.
Kompozycja według wynalazku jest skoniugowana z cząsteczką heterologiczną, którą to cząsteczką heterologiczną korzystnie jest czynnik cytotoksyczny, enzym albo czynnik umożliwiający uzyskanie obrazu.
Przedmiotem wynalazku jest także kompozycja, która zawiera glikoproteinę, która jest immunoadhezyną i która to kompozycja jest koniugowana z cząsteczką heterologiczną, przy czym cząsteczką heterologiczną jest czynnik cytotoksyczny, enzym lub czynnik umożliwiający uzyskanie obrazu, łącznie z dopuszczalnym farmaceutycznie nośnikiem.
Przedmiotem wynalazku jest także cząsteczka kwasu nukleinowego, która koduje glikoproteinę opisaną w wynalazku zawierającą region Fc jak zdefiniowano.
Przedmiotem wynalazku jest również komórka gospodarza zawierająca kwas nukleinowy jak zdefiniowano w powyżej, przy czym 80-100% glikoproteiny wytwarzanej przez komórkę gospodarza zawiera strukturę dojrzałego rdzenia węglowodanowego, pozbawionego fukozy, przyłączoną do regionu Fc glikoproteiny.
Korzystnie, komórka gospodarza jest komórką jajnika chomika chińskiego (CHO), bardziej korzystnie komórką CHO jest komórka Lec13.
Przedmiotem wynalazku jest również sposób wytwarzania glikoproteiny, polegający na tym, że obejmuje hodowanie komórki gospodarza zdefiniowanej powyżej, tak, że kwas nukleinowy podlega ekspresji.
Sposób według wynalazku obejmuje ponadto odzyskanie glikoproteiny z hodowli komórki gospodarza.
Sposób według wynalazku obejmuje ponadto łączenie glikoproteiny z cząsteczką heterologiczną. Korzystną cząsteczką heterologiczną jest czynnik cytotoksyczny, enzym albo czynnik umożliwiający uzyskanie obrazu.
Przedmiotem wynalazku jest kompozycja jak zdefiniowano w powyżej do zastosowania do leczenia ssaka mającego chorobę lub zaburzenie wybrane z grupy składającej się z raka, choroby autoimmunologicznej, choroby zapalnej, infekcji lub innego stanu, gdzie pożądane jest usunięcie komórek albo tkanki. W przypadku kompozycji według wynalazku, korzystnie ssakiem jest człowiek, bardziej korzystnie człowiek u którego zachodzi ekspresja FcyRI11 (F158).
Przedmiotem wynalazku jest także zastosowanie skutecznej terapeutycznie ilości kompozycji jak zdefiniowano powyżej do wytwarzania leku do leczenia ssaka mającego chorobę lub zaburzenie wybrane z grupy składającej się z raka, choroby autoimmunologicznej, choroby zapalnej, infekcji lub innego stanu, gdzie pożądane jest usunięcie komórek albo tkanki.
PL 213 948 B1
W zastosowaniu według wynalazku, korzystnie ssakiem jest człowiek, a bardziej korzystnie człowiek, u którego zachodzi ekspresja FcyRIII (F158).
Przedmiotem wynalazku jest także zestaw terapeutyczny albo diagnostyczny zawierający kompozycję według wynalazku jak zdefiniowano powyżej oraz instrukcję jej użycia.
Wykazano, że kompozycje według wynalazku wykazują zdumiewające, 100-krotne polepszenie wiązania się z FcyRIIIA (F158), które nie jest aż tak efektywne jak oddziaływanie FeyRIIIA (V158) z ludzką IgG. A zatem przewiduje się, że ta kompozycja będzie lepsza od kompozycji opisywanych uprzednio, szczególnie do leczenia pacjentów-ludzi, którzy posiadają ekspresję FcyRIIIA (F158). FcyRIIIA (F158) jest bardziej powszechny niż FcyRIIIA (V158) u normalnych, zdrowych Afroamerykanów i członków rasy kaukaskiej. Patrz Lehrnbecher i wsp. Blood 94: 4220 (1999).
Niniejsze zgłoszenie wykazuje ponadto synergiczny wzrost wiązania FcyRIII i/lub funkcji ADCC, które są wynikiem połączenia ujawnionych tu wariantów glikozylacji z modyfikacją(ami) sekwencji aminokwasowej regionu Fc glikoproteiny. W celu wytworzenia wariantu sekwencji aminokwasowej o zwiększonej aktywności ADCC zwykle konstruuje się wariant regionu Fc o zwiększonym powinowactwie wiązania się z FcyRIII, który uważa się za ważny FcR w pośredniczeniu w ADCC. Przykładowo, można wprowadzić modyfikację aminokwasową (np. podstawienie) do rodzicielskiego regionu Fc w dowolnej, jednej lub większej liczbie pozycji aminokwasowych, 256, 290, 298, 312, 326, 330, 333, 334, 360, 378 lub 430 w celu wytworzenia takiego wariantu. Wariant o zwiększonym powinowactwie wiązania z FcyRIII może mieć ponadto zmniejszone powinowactwo wiązania z FcyRII, a w szczególności zmniejszone powinowactwo hamowania receptora FcyRIIB. W korzystnym wykonaniu, region Fc ma podstawienia aminokwasowe w pozycjach 298, 333 i 334, np. S298A/E333A/K334A. Region Fc o zmienionej sekwencji aminokwasowej obejmuje ponadto wariant glikozylacji, który jeszcze bardziej wzmacnia ADCC. Przykładowo, wariant regionu Fc może mieć przyłączoną strukturę dojrzałego węglowodanu rdzeniowego, w którym brak fukozy.
A zatem, wynalazek dostarcza kompozycji zawierającej glikoproteinę mającą region Fc, gdzie około 51-100% glikoproteiny w kompozycji zawiera strukturę dojrzałego węglowodanu rdzeniowego, w którym brak fukozy, przyłączoną do regionu Fc glikoproteiny i gdzie region Fc zawiera sekwencję aminokwasową, która różni się od natywnej sekwencji regionu Fc.
Korzystniej, jeżeli około 80-100% glikoproteiny w kompozycji zawiera strukturę dojrzałego węglowodanu rdzeniowego, w którym brak fukozy, a najkorzystniej jeżeli około 90-99% glikoproteiny w kompozycji zawiera strukturę dojrzałego węglowodanu rdzeniowego, w którym brak fukozy.
Glikoproteina może obejmować na przykład przeciwciało lub immunoadhezynę. Glikoproteina zawiera generalnie region Fc, korzystnie ludzki region Fc; np. region Fc ludzkiej IgG1, IgG2, IgG3 lub IgG4. Glikoproteina wykazuje zwiększone wiązanie do FcyRIII (takiego jak FcyRIIIA (F158) i/lub Fcy-RIIIA (V158)) i zwiększoną ADCC w stosunku do glikoproteiny z fukozą przyłączoną do struktury dojrzałego węglowodanu rdzeniowego.
Wynalazek dostarcza również kompozycji farmaceutycznej zawierającej glikoproteinę i, ewentualnie, dopuszczalny farmaceutycznie nośnik lub rozcieńczalnik. Ten preparat do potencjalnego użycia terapeutycznego jest jałowy i może być zIiofilizowany.
Rozważa się zastosowania diagnostyczne i terapeutyczne ujawnionej tu glikoproteiny. W zastosowaniu diagnostycznym wynalazek dostarcza sposobu ustalania obecności antygenu będącego przedmiotem zainteresowania, obejmujący wystawienie próbki podejrzewanej o to, że zawiera antygen na działanie glikoproteiny i ustalenie wiązania się glikoproteiny z próbką.
W zastosowaniu terapeutycznym, wynalazek dostarcza sposobu leczenia ssaka cierpiącego albo podatnego na chorobę lub schorzenie, który mógłby odnieść korzyść z takiego leczenia, obejmujący podawanie ssakowi skutecznej terapeutycznie ilości ujawnionej tu kompozycji, szczególnie tam, gdzie kompozycja jest preparatem farmaceutycznym.
Wynalazek dostarcza ponadto komórki gospodarza kodującej glikoproteinę zawierającą region Fc, gdzie około 80-100% glikoproteiny w kompozycji zawiera strukturę dojrzałego węglowodanu rdzeniowego, w którym brak fukozy, przyłączoną do regionu Fc glikoproreiny. Ponadto, wynalazek dostarcza sposobu wytwarzania glikoproteiny obejmujący hodowanie komórki gospodarza w taki sposób, że kwas nukleinowy ulega ekspresji i ewentualnie, odzyskanie glikoproteiny z hodowli komórki gospodarza (np. z pożywki hodowlanej komórki gospodarza).
Wynalazek dostarcza ponadto glikoprotein w artykule przemysłowym albo zestawie, który można zastosować dla celów leczenia choroby albo schorzenia.
PL 213 948 B1
Krótki opis rysunków
Figura 1A to schematyczne przedstawienie natywnej IgG i jej enzymatycznego trawienia z wytworzeniem różnych fragmentów przeciwciała. Mostki dwusiarczkowe są reprezentowane przez podwójne linie pomiędzy domenami CH1 i CL i dwiema domenami CH2. V to domena zmienna; C to domena stała; L oznacza łańcuch lekki, a H oznacza łańcuch ciężki.
Figura 1B przedstawia schematycznie strukturę w pełni obrobionego lub „dojrzałego” węglowodanu rdzeniowego (2100) przyłączonego do Asn297 IgG z surowicy, strukturę dojrzałego węglowodanu rdzeniowego z pojedynczą resztą galaktozy (2110) jak również strukturę węglowodanu rdzeniowego z dwiema resztami galaktozy oraz rozdzielającym GlcNAc (3120). Liczby reszt, odpowiednio, Glc-NAc, fukozy, galaktozy i kwasu sialowego są przedstawione w systemie numeracji czterocyfrowej pokazanym na tej figurze.
Figura 2 ilustruje dodawanie oligosacharydu do Asn297 w domenie CH2 IgG, po którym następuje jej obróbka w aparacie Golgiego, cis, medial i trans, z wytworzeniem złożonej, dwuantenowej, w pełni obrobionej struktury węglowodanu. Kastanospermina hamuje usuwanie reszt z powstającego oligosacharydu.
Figura 3 pokazuje oligosacharydy łańcucha ciężkiego (Fc) znajdujące się na przeciwciałach wyrażanych w komórkach CHO z normalnym metabolizmem fukozy.
W dalszych legendach do figur i przykładach, stosowane są następujące oznaczenia: „Hu4D5” to oznaczenie dla humanizowanego przeciwciała anty-HER2 4D5, jajnik chomika chińskiego jest oznaczony jako „CHO”, komórki CHO-DP12 hodowane w 15 cm płytkach są oznaczone „CHO-P”, komórki CHO-DP12 hodowane w obrotowych butelkach są oznaczone jako „CHO-S”, ludzkie komórki nerki zarodkowej 293 są oznaczone jako „HEK293”, „Lec 13” reprezentuje linię komórkową CHO z defektywnym metabolizmem fukozy otrzymaną od Pamela Stanley z Albert Einstein College of Medicine z Yeshiva University, Bronx, New York, Hu4D5 z podstawieniami S298A/E333A/K334A w jego regionie Fc jest nazywany „Hu4D5-AAA”, „E27” poddane dojrzewaniu pod względem powinowactwa/humanizowane przeciwciało anty-IgE opisane w patencie USA nr 6 172 213, E27 z podstawieniami S298A/E333A/K334A w jego regionie Fc jest nazywany „E27-AAA”, a zależna od przeciwciała cytotoksyczność z udziałem komórek jednojądrzastych komórek z krwi obwodowych jest oznaczona „PBMC ADCC”
Figura 4 pokazuje wiązanie się monomerów Hu4D5 z ludzkim FcyRI. Przeciwciało Hu4D5 wyrażono w komórkach CHO-S, komórkach HEK293, CHO-P lub komórkach Lec13 CHO (dwie różne partie).
Figura 5 pokazuje wiązanie się dimerów Hu4D5 z ludzkim FcyRIIB. Przeciwciało Hu4D5 wyrażono w komórkach CHO-S lub Lec13 (trzy różne partie).
Figura 6 pokazuje wiązanie się dimerów Hu4D5 z ludzkim FcyRIIA (R131). Przeciwciało Hu4D5 wyrażono w komórkach CHO-S lub Lec13 (trzy różne partie).
Figura 7 ilustruje wiązanie się dimerów Hu4D5 z ludzkim FcyRIIA (H131). Przeciwciało Hu4D5 wyrażono w komórkach CHO-S lub Lec13 (trzy różne partie).
Figura 8 pokazuje wiązanie się dimerów Hu4D5 lub Hu4D5-AAA wyrażanych w komórkach CHO-S lub Lec13 komórkach (odpowiednio dwie i trzy różne partie), z ludzkim FcyRIIIA (V158).
Figura 9 pokazuje wiązanie się dimerów Hu4D5 wyrażanych w komórkach CHO-S lub Lec13 (trzy różne partie) albo dimerów Hu4D5-AAA wyrażanych w komórkach Lec13 (dwie różne partie), z ludzkim FcyRIIIA (F158).
Figura 10 przedstawia wiązanie się dimerów anty-IgE (E27) z ludzkim Fc (RIIIA (V158). E27 wyrażane w komórkach HEK293, komórkach CHO-P (dwie partie) lub komórkach Lec13 (dwie partie) testowano w tym badaniu.
Figura 11 przedstawia wiązanie się dimerów anty-IgE (E27) z ludzkim FcyRIIIA (F158). E27 wyrażane w komórkach HEK293, komórkach CHO-P (dwie partie) lub komórkach Lec13 komórkach (dwie partie) testowano w tym badaniu.
Figura 12 ilustruje wiązanie się heksamerów anty-IgE (E27) i E27-AAA do FcyRIIIA (Fl58). Przeciwciała były wyrażane w komórkach CHO-P, Lec13 lub HEK293.
Figura 13 ilustruje wiązanie się heksamerów anty-IgE (E27) i E27-AAA do Fc(RIIIA (V158). Przeciwciała były wyrażane w komórkach CHO-P, Lec13 lub HEK293 komórkach.
Figura 14 przedstawia wiązanie się Hu4D5 wyrażanego w komórkach CHO-P, CHO-S lub Lec13 komórkach z ludzkim FcRn.
PL 213 948 B1
Figura 15 przedstawia wiązanie się Hu4D5 i anty-CD20 (RITUXAN®) z ludzkim Clq. Hu4D5 było ® wyrażane w komórkach CHO-P lub Lec13 komórkach (dwie partie). RITUXAN® było wyrażane w komórkach CHO-P.
®
Figura 16 reprezentuje wiązanie się Hu4D5 lub RITUXAN® z ludzkim Clq. Hu4D5 zastosowane w tym doświadczeniu było wyrażane w komórkach CHO-P, Lec13 (trzy różne partie) lub w komórkach CHO-S. RITUXAN® było wyrażane w komórkach CHO-P.
Figura 17 przedstawia PBMC ADCC wobec komórek raka sutka SKBR3 (E:T 30:1) przy użyciu dawcy FcyRIII VF. Pokazana jest spontaniczna ADCC w porównaniu do tej powodowanej Hu4D5 wyrażanym w komórkach CHO-S lub Lec13.
Figura 18 przedstawia PBMC ADCC wobec komórek raka sutka (E:T 30:1) przy użyciu innego dawcy FcyRIII VF. Pokazana jest spontaniczna ADCC w porównaniu do tej powodowanej Hu4D5 wyrażanym w komórkach CHO-S lub Lec13.
Figura 19 przedstawia PBMC ADCC wobec komórek raka sutka (E:T 30:1) przy użyciu dawcy FcyRIII FF. Pokazana jest spontaniczna ADCC w porównaniu do tej powodowanej Hu4D5 wyrażanym w komórkach CHO-S lub Lec13.
Figura 20 przedstawia PBMC ADCC wobec komórek raka sutka (E:T 30:1) przy użyciu innego dawcy FcyRIII FF. Pokazana jest spontaniczna ADCC w porównaniu do tej powodowanej Hu4D5 wyrażanym w komórkach CHO-S lub Lec13.
Figura 21 przedstawia monocytową ADCC wobec komórek raka sutka (E:T 10:1) przy użyciu dawcy FcyRIIA RR donor. Pokazana jest spontaniczna ADCC w porównaniu do tej powodowanej Hu4D5 wyrażanym w komórkach CHO-S lub Lec13.
Figura 22 przedstawia monocytową ADCC wobec komórek raka sutka (E:T 10:1) przy użyciu dawcy FcyRIIA HH donor. Pokazana jest spontaniczna ADCC w porównaniu do tej powodowanej Hu4D5 wyrażanym w komórkach CHO-S lub Lec13.
Figura 23 przedstawia dopasowanie regionów Fc natywnych sekwencji IgG. Pokazane są sekwencje regionu Fc natywnych sekwencji IgG, humlgGl (nie-A i A allotypy) (odpowiednio, SEK NR ID: 112), humIgG2 (SEK NR ID: 3), humIgG3 (SEK NR ID: 4) i humIgG4 (SEK NR ID: 5). Sekwencja ludzkiej IgG1 jest allotypu nie-A, a różnice pomiędzy tą sekwencją z allotypem A (w pozycjach 356 i 358; system numerowania EU) są pokazane poniżej sekwencji ludzkiej IgG1. Pokazane są również sekwencje regionu Fc natywnych mysich sekwencji IgG, murlgGl (SEK NR ID: 6), murIgG2A (SEK NR ID: 7), murIgG2B (SEK NR ID: 8) i murIgG3 (SEK NR ID: 9).
Figura 24 przedstawia wiązanie się Hu4D5 i Hu4D5-AAA z CD56 dodatnimi komórkami naturalnych zabójców (NK). Testowanymi produktami były: (1) połączona z FITC anty-ludzka IgG, (2) Hu4D5 z CHO-S, (3) Hu4D5 wyrażone w komórkach Lec 13 i (4) Hu4D5-AAA wyrażane komórkach w Lec 13.
Figura 25 pokazuje barwienie fluorescencyjne oczyszczonych komórek NK wyrażających receptory FcyRIII (F/F).
Figura 26 dostarcza porównania aktywności NK ADDC Hu4D5 z CHO-S, Hu4D5 z komórek Lec13, Hu4D5-AAA z komórek Lec 13 i Hu4D5 z komórek HEK293. Dawcą był FcyRIII (F/F).
Figura 27 powtarza doświadczenie z fig. 26 z różnym dawcą FcyRIII (F/F).
Figura 28 przedstawia wiązanie się monomerów Hu4D5anty-HER2 z linią CHO stabilnie stransfekowaną ludzkim łańcuchem α i łańcuchem γ Fc(RIIIA (reprezentatywny wykres dla jednego testu). Hu4D5 CHO-S, otwarte kółka; Hu4D5 Lec13-D, otwarte kwadraty; Hu4D5 Lec13-E, otwarte romby; Hu4D5 Lec13-F, otwarte trójkąty; Hu4D5 HEK293-/y\A, wypełnione otwarte; Hu4D5 Lec13-AAA-B, wypełnione kwadraty; Hu4D5 Lec13-AAA-C, wypełnione romby.
Szczegółowy opis korzystnych wykonań wynalazku
I. Definicje
W niniejszym opisie i zastrzeżeniach, numeracja reszt w łańcuchu ciężkim immunoglobuliny jest tą z indeksu EU, jak w Kabat i wsp., Sequences of Proteins of Immunological Interest, wyd. 5. Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, MD (1991), konkretnie włączone jako odniesienie. „Indeks EU jak w Kabat” dotyczy numerowania reszt w ludzkim przeciwciele IgG1 EU.
Grupy węglowodanowe według niniejszego wynalazku będą opisane w odniesieniu do powszechnie stosowanej nomenklatury dla opisu oligosacharydów. Przegląd chemii węglowodanów który stosuje tę nomenklaturę znajduje się w Hubbard i wsp. Ann. Rev. Biochem. 50: 555-583 (1981).
Nomenklatura ta obejmuje na przykład, Man, która reprezentuje mannozę; GlcNAc, która reprezentuje
2-N-acetyloglukozaminę; Gal, która reprezentuje galaktozę; Fuc dla fukozy; i Gic, która reprezentuje
PL 213 948 B1 glukozę. Kwasy sialowe są opisane przez skróty NeuNAc, dla kwasu 5-N- acetyloneuraminowego i NeuNGc dla 5-glikoliloneuraminowego.
Termin „glikozylacja” oznacza przyłączenie oligosacharydów (węglowodanów zawierających dwa lub większą liczbę cukrów prostych połączonych razem, np. złożonych z dwóch do około dwunastu połączonych razem cukrów prostych) do glikoproteiny. Boczne łańcuchy oligosacharydowe są zazwyczaj przyłączone do szkieletu glikoproteiny poprzez N lub poprzez O. Oligosacharydy według niniejszego wynalazku występują za ogół jako oligosacharydy przyłączone poprzez N do domeny CH2 regionu Fc.
„Glikozykacja poprzez N” dotyczy przyłączenia grupy węglowodanowej do reszty asparaginowej w łańcuchu glikoproteinowym. Specjalista w tej dziedzinie będzie wiedział, że na przykład każda domena CH2 mysiej IgG1, IgG2a, IgG2b i IgG3 jak również ludzkiej IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgA i IgD ma pojedyncze miejsce dla glikozylacji poprzez N przy reszcie aminokwasowej 297 (Kabat i wsp. Sequences of Proteins of Immunological Interest, 1991).
„Glikoproteiny” to polipeptydy mające przyłączony jeden lub większą liczbę bocznych łańcuchów oligosacharydowych.
Dla potrzeb niniejszego wynalazku „struktura dojrzałego węglowodanu rdzeniowego” dotyczy poddanej obróbce struktury węglowodanu rdzeniowego przyłączonej do regionu Fc, która generalnie składa się z następujących struktur węglowodanowych GlcNAc(Fukoza)-GlcNAc-Man-(Man-GlcNAc)2, typowo dwuantenowych oligosacharydów przedstawionych schematycznie poniżej:
Termin ten obejmuje w szczególności formy G1 struktury dojrzałego węglowodanu rdzeniowego, w której brak reszty β1,2 GlcNAc. Korzystne jest, jednakże jeżeli struktura węglowodanu m rdzeniowego zawiera obydwie reszty β1,2 GlcNAc. Struktura dojrzałego węglowodanu rdzeniowego tutaj generalnie nie jest hipermannozylowana.
Struktura dojrzałego węglowodanu rdzeniowego jest przyłączona do regionu Fc glikoproteiny, na ogół poprzez m przyłączenie przez N do Asn297 domeny CH2 regionu Fc.
„Rozdzielająca GlcNAc” to reszta GlcNAc przyłączona do β^4 mannozy w strukturze dojrzałego węglowodanu rdzeniowego. Rozdzielająca GlcNAc może być przyłączona enzymatycznie do struktury dojrzałego węglowodanu rdzeniowego przez enzym β-(1,4)-N-acetyloglukozaminylotransferazę III (GnTIII). Komórki CHO normalnie nie wyrażają GnTIII (Stanley i wsp. J. Biol. Chem. 261: 13370-13378 (1984)), ale mogą być poddane manipulacjom aby to robić (Umana i wsp. Nature Biotech. 17: 176-180 (1999)).
Glikoproteina, która jest „zasadniczo wolna” od jednej lub większej liczby wybranych grup cukrowych (np. rozdzielającej GlcNAc albo jednej lub większej liczby reszt galaktozy albo jednej lub większej liczby reszt kwasu sialowego) jest wytwarzana zazwyczaj w komórce gospodarza, który jest defektywny pod względem dodawania w wybranej(ych) grupy cukrowej do struktury dojrzałego węglowodanu rdzeniowego, tak że około 90-100% glikoproteiny w kompozycji nie będzie miała wybranej (ych) grupy cukrowej przyłączonej do struktury dojrzałego węglowodanu rdzeniowego.
A „glikozydaza” to enzym uczestniczący w biosyntezie połączonych przez asparaginę (połączonych przez N) glikoprotein. Enzym „skracający” to taki, który usuwa oligosacharyd(y), podczas gdy „transferaza” dodaje oligosacharyd(y). Przykłady glikozydaz obejmują glukozydazy skracające, takie jak glukozydaza I i glukozydaza II; skracające mannozydazy takie jak mannozydaza szorstkiego endoplazmatyczego retikulum (mannozydaza rER), mannozydaza IA, mannozydaza IB i mannozydaza II; jak również transferazy takie jak glikosylotransferazy, np. β(1,4)-Ν-acetyloglukozaminylotransferaza III (GnT III), Gal-transferazy, transferazy kwasu sialowegi i fuc-transferazy.
PL 213 948 B1 „Inhibitor glikozydazy” dotyczy związku lub kompozycji, który zmiesza albo zapobiega obróbkce oligosacharydu połączonego poprzez N przez jeden albo większą liczbę glikozydaz. Przykłady obejmują nojirymycynę, 1-deoksynojirymycynę (dNM), N-Metylo-1-deoksynojirymycynę (M-dNM), kastanosperminę, bromokonduritol, 1-deoksymannojirymycynę (dMM), australinę, MDL, lentiginozynę i swainzoninę (Sw). Inhibitory glikozydazy są omówione w Fuhrmann i wsp. Biochim. Biophys. Acta 825: 95-110 (1985); Kaushal i Elbein, Methods in Enzym. 230: 316-329 (1994) oraz Elbein, A. FASEB 5: 3055-3063 (1991).
„Lec13” dotyczy opornej na lektynę zmutowanej linii komórkowej jajnika chomika chińskiego (CHO), która wykazuje defektywny metabolizm fukozy i dlatego ma zmniejszoną zdolność do dodawania fukozy do złożonych węglowodanów. Ta linia jest opisana w Ripka i Stanley, Somatic Cell & Molec. Gen. 12 (1): 51-62 (1986) oraz Ripka i wsp. Arch. Biochem. Biophys. 249 (2): 533-545 (1986) I jest dostępna z Albert Einstein College of Medicine z Yeshiva University, Bronx, New York. Uważa się, że w komórkach Lec13 brak jest transktyptu dla GDP-D-mannozo-4,6-dehydratazy, kluczowego enzymu metabolizmu fukozy. Ohyama i wsp. J. Biol. Chem. 273 (23): 14582-14587 (1988). GDP-D-mannozo-4,6-dehydrataza wytwarza GDP-mannozo-4-keto-6-D-deoksymannozę z GDP-mannozy, która jest następnie przekształcana przez białko FX do GDP-L- fukozy. Ekspresja fukozylowanych oligosacharydów jest zależna od donorowych substratów GDP-L-fukozy i fukozylotransferazy(az).
„Fukozylotransferaza” to enzym, który dodaje jedną lub większą liczbę fucoz do glikoproteiny. Przykłady obejmują a1,6-fukozyoltransferazę, FucTI, FucTII, FucTIII, FucTIV, FucTV, FucTVI i FucTVII. Świńskie i ludzkie Porcine and human a1,6-fukozyoltransferazy są opisane, odpowiednio, w Uozumi i wsp. J. Biol. Chem. 271: 27810-27817 (1996) i Yanagidani i wsp. J. Biochem. 121: 626-632 (1997).
„Sialilotransferaza” to enzym, który dodaje jedną lub większą liczbę reszt kwasu sialowego do glikoproteiny. α2,3-sialilotransferaza może dodawać reszty(ę) kwasu sialowego do reszt(y) galaktozy przyłączonych do struktury dojrzałego węglowodanu rdzeniowego.
„Galaktotransferaza” to enzym, który dodaje jedną lub większą liczbę reszt galaktozy do glikoproteiny. β1,4-galaktozylotransferaza może dodawać reszty(ę) galaktozy do struktury dojrzałego węglowodanu rdzeniowego.
Termin „region Fc zawierający glikoproteinę” dotyczy glikoproteiny, takiej jak przeciwciało albo immunoadhezyna, która zawiera region Fc.
Termin „region Fc” jest stosowany do zdefiniowania regionu C-końcowego łańcucha ciężkiego immunoglobuliny, np. jak pokazano na fig. 1. „Regionem Fc” może być region Fc o sekwencji natywnej albo wariant regionu Fc. Jakkolwiek granice regionu Fc łańcucha ciężkiego immunoglobuliny mogą różnić się, region Fc łańcucha ciężkiego ludzkiej IgG jest zwykle zdefiniowany jako rozciągający się od reszty aminokwasowej w pozycji około Cys226 lub od pozycji około Pro230, do końca karboksylowego regionu Fc. Region Fc immunoglobuliny generalnie zawiera dwie domeny stałe, domenę CH2 i CH3, jak pokazano na przykład na fig. 1A.
„Funkcjonalny region Fc” posiada co najmniej jedną „funkcję efektorową” regionu Fc o sekwencji natywnej. Przykładowe „funkcje efektorowe” obejmują wiązanie Clq, cytotoksyczność zależną od dopełniacza; wiązanie receptora Fc; cytotoksyczność z udziałem komórek zależną od przeciwciała (ADCC); fagocytozę; obniżenie aktywności receptorów powierzchniowych (np. receptora komórek B; BCR), itd. Takie funkcje efektorowe generalnie wymagają, aby region Fc region był połączony z domeną wiążącą (np. domeną zmienną przeciwciała) i mogą być testowane przy zastosowaniu różnych testów, na przykład jak tu ujawnionych.
„Region Fc o sekwencji natywnej” obejmuje sekwencję identyczną z sekwencją aminokwasową regionu Fc znajdywanego w naturze. Ludzkie regiony Fc o sekwencji natywnej są pokazane na fig. 23 i obejmują region Fc ludzkiej IgG1 o sekwencji natywnej (allotypy nie-A i A); region Fc ludzkiej IgG2 o sekwencji natywnej; region Fc ludzkiej IgG3 o sekwencji natywnej i region Fc ludzkiej IgG4 o sekwencji natywnej jak również ich naturalnie występujące warianty. Mysie regiony Fc o sekwencji natywnej są również pokazane na fig. 23. Inne przykłady regionów Fc o sekwencji natywnej obejmują region Fc ludzkiej IgA o sekwencji natywnej i region Fc ludzkiej IgD o sekwencji natywnej.
„Wariant regionu Fc” obejmuje sekwencję aminokwasową, która różni się od sekwencji regionu Fc o sekwencji natywnej co najmniej jedną „modyfikacją aminokwasową”. Korzystne jest, jeżeli wariant regionu Fc ma co najmniej jedno podstawienie aminokwasowe w porównaniu do regionu Fc o sekwencji natywnej albo regionu Fc polipeptydu rodzicielskiego, np. od jednego do około dziesięciu podstawień aminokwasowych, korzystnie od około jednego do około pięciu podstawień aminokwasowych w regionie Fc o sekwencji natywnej albo regionie Fc polipeptydu rodzicielskiego. Korzystnie będzie,
PL 213 948 B1 jeżeli rozważany tu wariant regionu Fc ma co najmniej około 80% identyczności sekwencji z regionem Fc o sekwencji natywnej albo regionem Fc polipeptydu rodzicielskiego, najkorzystniej co najmniej około 90% identyczności, korzystniej co najmniej około 95% identyczności.
„Homologia” jest zdefiniowana jako procent reszt w sekwencji aminokwasowej wariantu, które są identyczne po dopasowaniu sekwencji i wprowadzeniu przerw, jeżeli to konieczne, dla uzyskania maksymalnego procentu homologii. Metody i programy komputerowe do dopasowania są dobrze znane w tej dziedzinie. Jednym z takich programów komputerowych jest „Align 2” autorstwa Genentech, Inc., który został złożony z dokumentacją w biurze United States Copyright Office, Washington, DC 20559, 10 grudnia, 1991.
Terminy „receptor Fc” albo „FcR” są stosowane dla opisania receptora, który wiąże się z regionem Fc przeciwciała. Korzystnym FcR jest ludzki FcR o sekwencji natywnej. Ponadto, korzystnym FcR jest taki, który wiąże się z przeciwciałem IgG (receptorem gamma) i obejmuje receptory podklas FcyRI, FcyRII oraz FcyRIII, włączając w to warianty alleliczne i formy tych receptorów powstałe w wyniku alternatywnego składania. Receptory FcyRII obejmują FcyRIIA („receptor aktywujący”) i FcyRIIB („receptor hamujący”), które mają podobne sekwencje aminokwasowe, różniące się głównie w domenach cytoplazmatycznych. Receptor aktywujący FcyRIIA zawiera w swojej domenie cytoplazmatycznej immunoreceptorowy, oparty o tyrozynę motyw aktywacyjny (ITAM, od ang. immunoreceptor tyrosine-based activation motif). Receptor hamujący FcyRIIB zawiera w swojej domenie cytoplazmatycznej immunoreceptorowy, oparty o tyrozynę motyw hamujący (ITIM, od ang. immunoreceptor tyrosine-based inhibition motif) (patrz praca przeglądowa Daeron, Annu. Rev. Immunol. 15: 203-234 (1997)). Omawiane tu receptory Fc obejmują dwa znane, występujące naturalnie allotypy, FcyRII (H131) i FcyRII (R131), ludzki FcyRII który został zidentyfikowany na podstawie aminokwasu w pozycji 131 (Clark i wsp. J. Immunol. 143: 1731-1734 (1989)) oraz występujące naturalnie allotypy ludzkiego FcyRIIIA. Ludzki FcyRIIIA ma naturalnie występujące allotypy w pozycji 48 (Leu, His lub Arg) i w pozycji 158 (Val lub Phe). Allotyp FcyRIIIA (V158) oddziałuje z ludzką IgG lepiej niż allotyp FcyRIIIA (F158) (Shields i wsp. J. Biol. Chem. 276: 6591-6604 (2001); Koene i wsp. Blood 90: 1109-1114 (1997) oraz Wu i wsp. J. Clin. Invest. 100: 1059-1070 (1997)). Przegląd FcR jest w Ravetch i Kinet, Annu. Rev. Immunol 9: 457-92 (1991); Capel i wsp., Immunomethods 4: 25-34 (1994) oraz de Haas i wsp., J. Lab. Clin. Med. 126: 330-41 (1995). Inne FcR, włączając w to te, które będą zidentyfikowane w przyszłości, są tu objęte terminem „FcR”. Termin obejmuje również receptor noworodkowy, FcRn, który jest odpowiedzialny za przeniesienie matczynych IgG do płodu (Guyer i wsp., J. Immunol. 117: 587 (1976) oraz Kim i wsp., J. Immunol 24: 249 11994)).
„Cytotoksyczność z udziałem komórek zależna od przeciwciała” i „ADCC” dotyczą reakcji z udziałem komórek, w której niespecyficzne komórki cytotoksyczne, które wyrażają receptory Fc (FcR) (np. komórki naturalnych zabójców, ang. Natural Killer (NK), komórki obojętnochłonne i makrofagi) rozpoznają związane przeciwciało na komórce docelowej, a następnie powodują lizę komórki docelowej. Komórki pierwotne uczestniczące w ADCC, komórki NK, wyrażają jedynie FcyRIII, podczas gdy monocyty wyrażają FcyRI, FcyRII i FcyRIII. Ekspresja FcR na komórkach krwiotwórczych jest zestawiona w tabeli 3 na stronie 464 w Ravetch i Kinet, Annu. Rev. Immunol 9: 457-92 (1991).
„Ludzkie komórki efektorowe” to leukocyty, które wyrażają jedną albo większą liczbę FcR i pełnią funkcje efektorowe. Korzystne jest, jeżeli komórki wyrażają co najmniej FcyRIII i pełnią funkcje efektorowe ADCC. Przykłady ludzkich leukocytów, które pośredniczą w ADCC obejmują jednojądrzaste komórki z krwi obwodowej (PBMC), komórki naturalnych zabójców (NK), monocyty, cytotoksyczne komórki T i komórki obojętnochłonne; przy czym korzystne są komórki PBMC i NK. Komórki efektorowe można izolować z naturalnych źródeł, np. z krwi albo PBMC, jak tu opisano.
„Region zawiasowy” jest generalnie zdefiniowany jako rozciągający się od około Glu216 lub od około Cys226 do około Pro230 ludzkiej IgG1 (Burton, Molec. Immunol. 22: 161-206 (1985)). Regiony zawiasowe innych izotypów IgG można dopasować do sekwencji IgG1 poprzez umieszczenie pierwszej i ostatniej cysteiny tworzącej wiązania S-S wewnątrz łańcucha ciężkiego w tej samej pozycji.
„Niższy region zawiasowy” regionu Fc jest normalnie zdefiniowany jako ciąg reszt położony bezpośrednio po stronie C regionu zawiasowego, tj. reszty 233 do 239 regionu Fc.
Termin „domena CH2” jak używa się w niniejszym opisie jest tu stosowany dla opisania domeny
CH2 mającej pojedyncze miejsce przyłączenia co najmniej jednego oligosacharydu poprzez N, generalnie przy Asn297. Jest charakterystyczne dla glikoproteiny według niniejszego wynalazku, że zawiera albo może być tak zmodyfikowana aby zawierać co najmniej jedną domenę CH2 mającą przyłączony poprzez N oligosacharyd domeny CH2 ludzkiej IgG. Korzystne jest, jeżeli domeną CH2 jest dome16
PL 213 948 B1 na CHy2 ludzkiej IgG. Domena CH2 ludzkiej IgG zwykle rozciąga się od aminokwasu około 231 do aminokwasu około 340 regionu Fc, stosując indeks EU do numerowania reszt łańcucha ciężkiego immunoglobuliny.
„Domena CH3” zawiera ciąg reszt C-końcowych w stosunku do domeny CH2 regionu Fc (tj. od reszty aminokwasowej około 341 do reszty aminokwasowej około 447 IgG).
Terminy „aminokwasy” i „aminokwas” dotyczą wszystkich występujących naturalnie alfaaminokwasów, w obydwu formach stereoizomerycznych oraz ich analogów i pochodnych. Analog jest zdefiniowany jako podstawienie atomu w aminokwasie innym atomem, który ma zwykle podobne właściwości. Pochodna jest zdefiniowana jako aminokwas, który ma przyłączoną inną cząsteczkę albo atom. Pochodne będą obejmować, na przykład acetylację grupy aminowej, aminację grupy karboksylowej lub oksydację reszt siarkowych dwóch cząsteczek cysternowych z wytworzeniem cysteiny.
Stosowany tu termin „polipeptyd” dotyczy generalnie peptydów i białek mających więcej niż około dziesięć aminokwasów. Polipeptydy mogą być homologiczne względem komórki gospodarza, w której są wyrażane lub, korzystnie, mogą być egzogenne, co oznacza, że są one heterologiczne, tj. obce względem zastosowanej komórki gospodarza, tak jak w przypadku chimerowych, humanizowanych lub ludzkich przeciwciał wytwarzanych przez komórkę CHO.
Termin „przeciwciało” jest tu stosowany w najszerszym znaczeniu i obejmuje przeciwciała monoklonalne (włączając w to przeciwciała monoklonalne pełnej długości), przeciwciała poliklonałne, przeciwciała multispecyficzne (np. przeciwciała bispecyficzne) i fragmenty przeciwciał o ile wykazują one pożądaną aktywność biologiczną.
„Fragmenty przeciwciał” zdefiniowane dla potrzeb niniejszego wynalazku obejmują część nienaruszonego przeciwciała, na ogół zawierającą miejsce wiązania antygenu nienaruszonego przeciwciała lub region Fc przeciwciała. Przykłady fragmentów przeciwciał obejmują przeciwciała liniowe; cząsteczki przeciwciał jednołańcuchowych i przeciwciała multispecyficzne utworzone z fragmentów przeciwciał.
Stosowany tu termin „przeciwciało monoklonalne” dotyczy przeciwciała otrzymanego z populacji zasadniczo homogennych przeciwciał, tj. poszczególne przeciwciała zawarte w populacji są identyczne z wyjątkiem możliwych naturalnie występujących mutacji, które mogą być obecne w niewielkiej liczbie. Przeciwciała monoklonalne są wysoce specyficzne, będąc skierowanymi wobec pojedynczego miejsca antygenowego. Ponadto, w przeciwieństwie do preparatów przeciwciał poliklonalnych, które zawierają różne przeciwciała skierowane przeciw różnym determinantom (epitopom), każde przeciwciało monoklonalne jest skierowane przeciw pojedynczej determinancie antygenu. Określenie „monoklonalny” nie ma być traktowane jako wymaganie odnośnie wytwarzania przeciwciała jakąś konkretną metodą. Przykładowo, monoklonalne przeciwciała do zastosowania zgodnie z niniejszym wynalazkiem mogą być wytwarzane metodą hybrydom po raz pierwszy opisaną przez Kohler i wsp., Nature, 256: 495 (1975) albo wytwarzane metodami rekombinowania DNA (patrz np. patent USA nr 4 816 567). „Przeciwciała monoklonalne” można również izolować z fagowych bibliotek przeciwciałowych przy zastosowaniu technik opisanych na przykład w Clackson i wsp., Nature, 352: 624-628 (1991) oraz Marks i wsp., J. Mol. Biol., 222: 581-597 (1991).
Stosowane tu przeciwciała monoklonalne obejmują w szczególności przeciwciała (immunoglobuliny) „chimerowe”, w których część łańcucha lekkiego i/lub ciężkiego jest identyczna albo homologiczna z odpowiadającymi im sekwencjami przeciwciał pochodzących z określonych gatunków albo należących do określonej klasy przeciwciał, podczas gdy reszta łańcucha(ów) jest identyczna albo homologiczna z odpowiednimi sekwencjami przeciwciał pochodzących z innego gatunku albo należących do określonej klasy albo podklasy przeciwciał, jak również fragmenty takich przeciwciał tak długo, jak wykazują one pożądaną aktywność biologiczną (patent USA nr 4 816 567 oraz Morrison i wsp., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 81: 6851-6855 (1984)).
„Humanizowane” postaci przeciwciał nie-ludzkich (np. mysich) to chimerowe przeciwciała, które zawierają minimalną sekwencję pochodzącą z immunoglobuliny nie-ludzkiej. W większości przypadków, humanizowane przeciwciała są ludzkimi immunoglobulinami (przeciwciało-biorca), w którym reszty z regionu hiperzmiennego biorcy są zastąpione resztami hiperzmiennego regionu przeciwciała z gatunku innego niż człowiek (przeciwciało donorowe), takiego jak mysz, szczur, królik albo naczelny nie-człowiek, mającego pożądaną specyficzność, powinowactwo i pojemność. W niektórych przypadkach, reszty regionu zrębowego (FR) ludzkiej immunoglobuliny są zastąpione przez odpowiadające im reszty nie-ludzkie. Ponadto humanizowane przeciwciała mogą zawierać reszty, które nie są znajdywane w przeciwciele biorcy ani w przeciwciele donorowym. Tych modyfikacji dokonuje się w celu dalPL 213 948 B1 szej zmiany właściwości przeciwciała. Generalnie, humanizowane przeciwciała będą zawierały zasadniczo wszystkie spośród co najmniej jednej, a typowo dwóch domen zmiennych, w których wszystkie albo zasadniczo wszystkie pętle hiperzmienne odpowiadają tym z immunoglobulin nie-ludzkich i wszystkie albo zasadniczo wszystkie FR są z sekwencji immunoglobuliny ludzkiej. Humanizowane przeciwciała będą ewentualnie zawierały co najmniej cześć regionu stałego immunoglobuliny (Fc), typowo z immunoglobuliny ludzkiej. Dla dalszych szczegółów patrz Jones i wsp., Nature 321: 522-525 (1986); Riechmann i wsp., Nature 332: 323-329 (1988) oraz Presta, Curr. Op. Struct. Biol 2: 593-596 (1992).
„Przeciwciało ludzkie” to takie, które ma sekwencję aminokwasową, która odpowiada sekwencji przeciwciała wytwarzanego przez człowieka i/lub zostało wytworzone przy zastosowaniu dowolnej z ujawnionych tu technik wytwarzania ludzkich przeciwciał. Definicja ludzkiego przeciwciała specyficznie wyklucza przeciwciało humanizowane zawierające nie-ludzkie reszty wiążące antygen. Ludzkie przeciwciała można wytwarzać przy zastosowaniu różnych technik znanych w tej dziedzinie. W jednym z wykonań, ludzkie przeciwciało wybiera się z biblioteki fagowej, gdzie ta biblioteka fagowa wyraża ludzkie przeciwciała (Vaughan i wsp. Nature Biotechnology 14: 309-314 (1996): Sheets i wsp. PNAS (USA) 95: 6157-6162 (1998)); Hoogenboom i Winter, J. Mol. Biol., 227: 381 (1991); Marks i wsp., J. Mol. Biol., 222: 581 (1991)). Ludzkie przeciwciała można również wytwarzać poprzez wprowadzenie ludzkich Ioci immuboglobulinowych do transgenicznych zwierząt np. myszy, u których endogenne geny immuboglobulinowe zostały częściowo albo całkowicie zinaktywowane. Po prowokacji, obserwowane jest wytwarzanie ludzkich przeciwciał ściśle przypominające to, co obserwuje się u ludzi we wszystkich aspektach, włączając w to rearanżację genu, składanie i repetruar przeciwciał. Podejście to jest opisane na przykład w patentach USA nr 5 545 807; nr 5 545 806; nr 5 569 825; nr 5 625 126; nr 5 633 425; nr 5 661 016 oraz następujących publikacjach naukowych: Marks i wsp., Bio/Technology 10: 779-783 (1992); Lonberg i wsp., Nature 368: 856-859 (1994); Morrison, Nature 368: 812-13 (1994); Fishwild i wsp., Nature Biotechnology 14: 845-51 (1996); Neuberger, Nature Biotechnology 14: 826 (1996); Lonberg i Huszar, Intern. Rev. Immunol. 13: 65-93 (1995). Alternatywnie, ludzkie przeciwciało można otrzymać poprzez unieśmiertelnianie ludzkich limfocytów B wytwarzających przeciwciało skierowane wobec docelowego antygenu (takie limfocyty B można pobrać z osobnika albo mogą być iramunizowane in vitro). Patrz np., Cole i wsp., Monoclonal Antibodies and Cancer Therapy, Alan R. Liss, p. 77 (1985); Boerner i wsp., J. Immunol., 147 (1): 86-95 (1991) oraz patent USA nr 5 750 373.
Stosowany tu termin „region hiperzmienny” odnosi się do reszt aminokwasowych przeciwciała, które są odpowiedzialne za wiązanie antygenu. Region hiperzmienny generalnie obejmuje reszty aminokwasowe z „regionu determinującego dopasowanie” albo „CDR” (tj. reszty 24-34 (L1), 50-56 (L2) i 89-97 (L3) w domenie zmiennej łańcucha lekkiego i 31-35 (H1), 50-65 (H2) i 95-102 (H3) w domenie zmiennej łańcucha ciężkiego; Kabat i wsp., Sequences of Proteins of Immunological Interest, wyd. 5, Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, MD. (1991) i/lub reszty z „pętli hiperzmiennej” (tj. reszty 26-32 (L1), 50-52 (L2) i 91-96 (L3) w domenie zmiennej łańcucha lekkiego oraz 26-32 (H1), 53-55 (H2) i 96-101 (H3) w domenie zmiennej łańcucha ciężkiego; Chothia i Lesk, J. Mol. Biol., 196: 901-917 (1987)). Resztami „regionu zrębowego” lub „FR” są reszty domeny zmiennej inne niż zdefiniowane tu reszty regionu hiperzmiennego.
Stosowany tu termin „immunoadhezyna” oznacza cząsteczki typu przeciwciała, które stanowią połączenie „domeny wiążącej” heterologicznego białka „adhezyny” (np. receptora, ligandu lub enzymu) z domeną stałą immunoglobulin. Strukturalnie, immunoadhezyny są fuzją sekwencji aminokwasowej adhezyny z pożądaną specyficznością wiązania, która jest inna niż miejsce rozpoznawania i miejsca wiązania antygenu (miejsca przyłączania antygenu) przeciwciała (tj. jest „heterologiczną”) i sekwencji domeny stałej immunoglobuliny.
Stosowany tu termin „domena wiążąca ligand” dotyczy dowolnego natywnego receptora na powierzchni komórki albo jego dowolnego regionu lub pochodnej zachowującej co najmniej jakościową zdolność wiązania ligandu odpowiadającego mu receptora natywnego. W konkretnym wykonaniu, receptor pochodzi z białka powierzchniowego mającego domenę zewnątrzkomórkową, który jest homologiczny do członka nadrodziny genowej immunoglobulin. Innymi receptorami, które nie są członkami nadrodziny genowej immunoglobulin, ale pomimo tego są objęte tą definicją są receptory dla cytokin, a w szczególności receptory z aktywnością kinazy tyrozynowej (receptorowe kinazy tyrozynowe), przedstawiciele nadrodzin hemopoetyny i receptora czynnika wzrostu nerwów oraz cząsteczki związane z adhezją komórkową, np. selektyny (E-, L- i P).
PL 213 948 B1
Termin „domena wiążąca receptor” jest stosowany dla oznaczenia dowolnego natywnego ligandu dla receptora, włączając w to cząsteczki związane z adhezją komórkową, albo dowolnego regionu lub pochodnej takiego natywnego ligandu, zachowującej co najmniej jakościową zdolność wiązania receptora odpowiadającego mu natywnego ligandu. Ta definicja, miedzy innymi, obejmuje konkretnie sekwencje ligandów dla wspominanych powyżej receptorów.
„Chimera przeciwciało-immunoadhezyna” obejmuje cząsteczkę, która stanowi połączenie co najmniej jednej domeny wiążącej przeciwciała (jak tu zdefiniowano) z co najmniej jedną immunoadhezyną (jak zdefiniowano w tym opisie). Przykładowymi chimerami przeciwciało-immunoadhezyna są bispecyficzne chimery CD4-IgG jak opidsano w Berg i wsp., PNAS (USA) 88: 4723-4727 (1991) oraz Chamow i wsp., J. Immunol. 153: 4268 (1994).
Termin „preparat” jest tu zastosowany dla zdefiniowania kompozycji lub glikoproteiny, która została zidentyfikowana i wydzielona i/lub odzyskana ze składników jego otoczenia. Składniki zanieczyszczające z jego otoczenia to materiały, które przeszkadzałyby w zastosowaniach diagnostycznych i «ft, terapeutycznych kompozycji lub glikoproteiny i mogą obejmować enzymy, hormony i inne białkowe albo niebiałkowe substancje rozpuszczone. Preparat według wynalazku jest zasadniczo wolny od tych zanieczyszczeń. W korzystnych wykonaniach, preparat glikoproteiny będzie oczyszczony (1) do ponad 95% przeciwciała, wagowo, przy określaniu metodą Lowry, a korzystniej do ponad 99% wagowo, (2) do stopnia dostatecznego dla otrzymania co najmniej 15 reszt N-końcowej albo wewnętrznej sekwencji aminokwasowej poprzez zastosowanie separatora wirówkowego albo (3) do homogenności określanej poprzez SDS-PAGE w warunkach redukujących albo nie redukujących przy zastosowaniu barwienia błękitem Coomassie albo korzystniej barwienia srebrem.
Dla obecnych potrzeb „preparat farmaceutyczny” to taki, który jest przystosowany i odpowiedni do podawania ssakowi, a w szczególności człowiekowi. A zatem, kompozycję można zastosować do leczenia choroby albo schorzenia ssaka. Ponadto, glikoproteina, która jest aktywnym składnikiem kompozycji, została poddana jednemu lub większej liczbie etapów oczyszczania lub izolacji tak, że zanieczyszczenie(a), które mogłyby przeszkadzać w jej zastosowaniu terapeutycznemu zostały od niej oddzielone. Generalnie, kompozycja farmaceutyczna zawiera glikoproteinę i dopuszczalny farmaceutycznie nośnik lub rozcieńczalnik, przykłady których są opisane poniżej. Ten preparat jest zazwyczaj jałowy i może być zliofiiizowany.
Dla celów niniejszego wynalazku „glikoproteina rodzicielska” to glikoproteina mająca taką samą sekwencję aminokwasową i strukturę dojrzałego węglowodanu rdzeniowego jak wariant glikoproteiny według niniejszego wynalazku, z tą różnicą, że fukoza jest przyłączona do struktury dojrzałego węglowodanu rdzeniowego. Przykładowo, w kompozycji zawierającej glikoproteinę rodzicielska, około 50-100% albo około 70-100% glikoproteiny rodzicielskiej zawiera strukturę dojrzałego węglowodanu rdzeniowego mającą przyłączoną fukozę.
Wariant glikoproteiny, który wiąże się z FcR z „lepszym powinowactwem” niż rodzicielska glikoproteina, jest takim, który wiąże się z dowolnym, jednym albo większą liczbą zidentyfikowanych powyżej FcR z zasadniczo lepszym powinowactwem wiązania niż rodzicielska glikoproteina, kiedy ilości wariantu glikoproteiny i glikoproteiny rodzicielskiej w teście wiązania są zasadniczo takie same. Przykładowo, wariant o zwiększonym powinowactwie wiązania FcR może wykazywać od około 5-krotnego do około 1000-krotnego, np. od około 10-krotnego do około 500-krotnego polepszenia powinowactwa wiązania FcR w porównaniu z glikoproteiną rodzicielską, gdzie powinowactwa wiązania FcR jest określane na przykład jak ujawniono tu w przykładach.
Wariant glikoproteiny, który „pośredniczy w zależnej od przeciwciała cytotoksyczności z udziałem komórek (ADCC) w obecności ludzkich komórek efektorowych bardziej skutecznie” niż rodzicielski polipeptyd, to taki, który in vitro lub in vivo jest zasadniczo bardziej skuteczny w pośredniczeniu w ADCC, kiedy ilości wariantu glikoproteiny i glikoproteiny rodzicielskiej użyte w teście są zasadniczo takie same. Generalnie, takie warianty glikoproteiny będą zidentyfikowane przy zastosowaniu testu ADCC in vitro jak tu ujawniono, ale bierze się również pod uwagę inne testy i metody określania aktywności ADCC np. w modelach zwierzęcych, itd. Korzystny wariant glikoproteiny jest około 1,5 razy do około 100 razy, np. od około dwóch razy do około pięćdziesięciu razy bardziej skuteczny w pośredniczeniu w ADCC niż glikoproteina rodzicielska, np. w ujawnionym tu teście in vitro.
„Modyfikacja aminokwasowa” dotyczy zmiany w sekwencji aminokwasowej ustalonej uprzednio sekwencji aminokwasowej. Przykładowe modyfikacje obejmują podstawienia, insercje i/lub delecje aminokwasów. Korzystną modyfikacją aminokwasową jest tu podstawienie.
PL 213 948 B1 „Modyfikacja aminokwasowa” w konkretnej pozycji, np. regionu Fc, oznacza podstawienie lub delecję wskazanej reszty albo insercję co najmniej jednej reszty obok wskazanej reszty. Insercja „obok” wskazanej reszty oznacza insercję w odstępie jednej do dwóch reszt. Insercja może być N-końcowe lub C-końcowe w stosunku do wskazanej reszty.
„Podstawienie aminokwasowe” oznacza zastąpienie co najmniej jednej istniejącej reszty aminokwasowej w ustalonej uprzednio sekwencji aminokwasowej inną „zastępującą” resztą aminokwasową. Zastępująca reszta lub reszty mogą być „resztami aminokwasowymi występującymi naturalnie”, (tj. kodowanymi przez kod genetyczny) i wybranymi z grupy składającej się z: alaniny (Ala); argininy (Arg); asparaginy (Asn); kwasu asparaginowego (Asp); cysteiny (Cys); glutaminy (Gln); kwasu glutaminowego (Glu); glicyny (Gly); histydyny (His); izoleucyny (He); leucyny (Leu); lizyny (Lys); metioniny (Met); fenyloalaniny (Phe); proliny (Pro); seryny (Ser); treoniny (Thr); tryptofanu (Trp); tyrozyny (Tyr) i waliny (Val). Korzystne jest, jeżeli zastępującą resztą nie jest cysteina. Podstawienie jedną albo większą liczbą reszt aminokwasowych nie występujących naturalnie jest tu również objęte definicją podstawienia aminokwasowego.
„Reszta aminokwasowa nie występująca naturalnie” dotyczy reszty innej niż występujące naturalnie reszty wymienione powyżej, która ma zdolność do wiązania się kowalencyjnie z sąsiednią resztą(-ami) w łańcuchu polipeptydowym. Przykłady reszt aminokwasowych nie występujących naturalnie obejmują norleucynę, ornitynę, norwalinę, homoserynę i inne analogi reszt aminokwasowych, takie jak te opisane w Ellman i wsp. Meth. Enzym. 202: 301-336 (1991). W celu wytworzenia takich reszt aminokwasowych nie występujących naturalnie można zastosować procedury z Noren i wsp. Science 244: 182 (1989) oraz Ellman i wsp., jak wyżej. Pokrótce, procedury te obejmują, aktywację chemiczną supresorowego tRNA resztą aminokwasową nie występującą naturalnie, a następnie transkrypcję i translację RNA in vitro.
„Insercja aminokwasowa” dotyczy wstawienia co najmniej jednego aminokwasu do ustalonej uprzednio sekwencji aminokwasowej. Jakkolwiek insercja zwykle stanowi wstawienie jednej albo dwóch reszt aminokwasowych, niniejsze zgłoszenie bierze pod uwagę większe „insercje peptydowe”, np. wstawienia od około trzech do około pięciu albo nawet do około dziesięciu reszt aminokwasowych. Wstawiona reszta(y) mogą być występującymi naturalnie albo nie występującymi naturalnie, jak ujawniono powyżej.
„Delecja aminokwasowa” oznacza usunięcie co najmniej jednej reszty aminokwasowej z ustalonej uprzednio sekwencji aminokwasowej.
„Clq” to polipeptyd, który zawiera miejsce wiązania dla regionu Fc immunoglobuliny. Clq razem z dwiema proteazami serynowymi, Clr i Cis, tworzą kompleks Cl, pierwszy składnik szlaku cytotoksyczności zależnej od dopełniacza (CDC, od ang. complement dependent cytotoxicity). Ludzki Clq można kupić, np. z Quidel, San Diego, CA.
„Leczenie” odnosi się zarówno do traktowania terapeutycznego i profilaktycznego albo środków zapobiegawczych. Potrzebujący leczenia obejmują tych, u których już występuje choroba, jak również tych, u których chce się zapobiec chorobie.
„Schorzenie lub choroba” to jakikolwiek stan, w którym odnosi się korzyści z leczenia glikoproteiną. Obejmuje to przewlekłe i ostre choroby i schorzenia, włączając w to stany patologiczne, które predysponują ssaka do wystąpienia choroby będącej przedmiotem zainteresowania. W jednym z wykonań chorobą jest rak, choroba autoimmunologiczna, choroba zapalna, infekcja i inny stan, taki jak wole, gdzie pożądane jest usunięcie niepożądanej tkanki albo komórek. Korzystną chorobą lub schorzeniem, które ma być tu leczone jest rak albo choroba autoimmunologiczna.
Terminy „rak i rakowaty” dotyczą albo opisują stan fizjologiczny u ssaków, który typowo charakteryzuje się nieregulowanym wzrostem komórkowym. Przykłady raka obejmują między innymi raka, chłoniaka, raka z niedojrzałych komórek, mięśniaka oraz białaczkę. Bardziej konkretnie przykłady takich raków obejmują raka płaskokomórkowego, raka płuc z małych komórek, raka płuc nie z małych komórek, gruczolakoraka płuc, płaskokomórkowego raka płuc, raka otrzewnej, raka wątrobokomórkowego, raka żołądka, włączając w to raka żołądkowo-jelitowego, raka trzustki, glejaka, raka szyjki macicy, raka jajnika, raka wątroby, raka pęcherza, wątrobiaka, raka sutka, raka okrężnicy, raka odbytnicy, raka jelita grubego, raka śluzówki macicy lub macicy, raka gruczołu śliniankowego, raka nerki, raka prostaty, raka sromu, raka tarczycy, raka wątroby i różne typy raka głowy i szyi.
„Rak komórek B” obejmuje tu chłoniaka nieziarniczego (NHL, ang. non-Hodkin's lymphoma), włączając w to NHL grudkowego/o niskiej złośliwości; NHL z małych limfocytów (SL, ang. small lymphocytic), grudkowego chłoniaka nieziarniczego (NHL) o średniej złośliwości, rozlanego NHL o śred20
PL 213 948 B1 niej złośliwości, NHL immunoblastycznego o wysokiej złośliwości, NHL Iimfoblastycznego o wysokiej złośliwości, NHL z małych komórek o szczelinowatym jądrze o wysokiej złośliwości, masywną chorobę NHL, chłoniaka z komórek płaszcza, chłoniaka związanego z AIDS oraz makroglobulinemię Waldenstroma); białaczkę, włączając w to ostrą białaczkę Iimfoblastyczną (ALL, ang. acute lymphoblastic leukemia), przewlekłą białaczkę limfocytową (CLL, ang. chronic lymphocytic leukemia), białaczkę kosmatokomórkową, przewlekłą białaczkę szpikową i inne nowotwory hematologiczne. Takie nowotwory można leczyć przeciwciałami skierowanymi przeciw markerom powierzchniowym komórek B, takim jak CD20.
Rak „niezależny od hormonu” to taki, którego proliferacja nie jest zależna od obecności hormonu, który wiąże się z receptorem wyrażanym przez komórki raka. Takie raki nie podlegają klinicznej regresji po zastosowaniu strategii farmakologicznych albo chirurgicznych, które zmniejszają stężenie hormonu w pobliżu guza. Przykłady raków niezależnych od hormonu obejmują niezależnego od androgenu raka prostaty, niezależnego od estrogenu raka sutka, raka śluzówki macicy i raka jajnika. Takie raki mogą zaczynać się jako guzy zależne od hormonu i rozwijać się od stadium zależnego od hormonu do opornego na hormon po terapii przeciwhormonalnej.
„Choroba autoimmunologiczna” jest tu nienowotworową chorobą lub schorzeniem powstającą z i skierowaną przeciw własnym tkankom osobnika. Przykłady chorób i schorzeń autoimmunologicznych obejmują między innymi odpowiedzi zapalne, takie jak choroby zapalne skóry włączając w to łuszczycę i zapalenie skóry (np. atopowe zapalenie skóry); ogólnoustrojową twardzinę i stwardnienie; odpowiedzi związane z chorobą zapalną jelita grubego (takie jak choroba Crohna i wrzodziejące zapalenie okrężnicy); zespół ostrego wyczerpania oddechowego (włączając w to zespół ostrego wyczerpania oddechowego dorosłych; ARDS); zapalenie skóry; zapalenie opon mózgowych; zapalenie mózgu; zapalenie błony naczyniowej oka; zapalenie okrężnicy; zapalenie kłębuszków nerkowych; stany alergiczne, takie jak egzema i astma oraz inne stany związane z naciekaniem komórek T i przewlekłymi odpowiedziami zapalnymi; miażdżycę tętnic; niedobór adhezji leukocytów; reumatoidalne zapalenie stawów; toczeń ogólnoustrojowy (SLE, ang. systemie lupus erythematosus); cukrzycę (np. cukrzycę typu I lub cukrzycę insulinozależną); stwardnienie rozsiane; zespół Reynauda; autoimmunologiczne zapalenie tarczycy; alergiczne zapalenie mózgu i rdzenia; zespół Sjorgena; cukrzycę młodzieńczą i choroby autoimmunologiczne związane z ostrą albo przewlekłą nadwrażliwością z udziałem cytokin i limfocytów T typowo występującą w gruźlicy, sarkoidozie, zapaleniu wielomięśniowym, ziarniniakowatości i zapaleniu naczyń; anemię złośliwą (choroba Addisona)); choroby związane z diapedezą leukocytów; choroby zapalne centralnego układu nerwowego (CNS, ang. central nervous system); zespół uszkodzenia wielonarządowego; anemię hemolityczną (włączając w to między innymi krioglobinemię lub anemię Coombs dodatnią); poważne osłabienie mięśni; choroby z udziałem kompleksu antygen-przeciwciało; chorobę przeciw kłębuszkowej błonie podstawnej; zespół antyfosfolipidowy; alergiczne zapalenie nerwu; chorobę Gravesa; zespół miasteniczny Lamberta-Eatona; pęcherze pęcherzycopodobne; pęcherzycę; autoimmunizacyjne poliendokrynopatie; chorobę Reitera; zespół sztywnienia; chorobę Behceta; wielkokomórkowe zapalenie tętnic; zapalenie nerek związane z kompleksem immunologicznym; nefropatię IgA; polineuropatie IgM; immunologiczną plamicę małopłytkową (ITP, ang. immune thrombocytopenic purpura) lub immunologiczną małopłytkowość, etc.
„Choroba zapalna” dotyczy stanów patologicznych będących wynikiem zapalenia, typowo powodowanego przez chemotaksję komórek obojętnochłonnych. Przykłady takich chorób obejmują choroby zapalne skóry, włączając w to włączając w to łuszczycę i atopowe zapalenie skóry; uogólnioną twardzinę i stwardnienie; odpowiedzi związane z chorobą zapalną jelita grubego (takie jak choroba Crohna i wrzodziejące zapalenie okrężnicy); choroby związane z reperfuzją niedokrwienną obejmujące operacyjne reperfuzyjne uszkodzenie tkanek, stany niedokrwienne serca, takie jak zawał mięśnia sercowego, zatrzymanie serca, reperfuzja po operacji serca i zwężenie po przezświatłowej wieńcowej angioplastyce bez naruszania skóry, udar i tętniak tętnicy brzusznej; obrzęk mózgowy po udarze; uraz czaszki; szok oligemiczny; zamartwicę; zespół ostrego wyczerpania oddechowego dorosłych; ostre uszkodzenie płuc; chorobę Behceta; zapalenie skórno-mięśniowe; zapalenie opon mózgowych; zapalenie mózgu; zapalenie błony naczyniowej oka; gościec zwyradniający; zapalenie nerek w toczniu rumieniowatym układowym; choroby autoimmunologiczne, takie jak reumatoidalne zapalenie stawów, zespół Sjorgena, zapalenie naczyń; choroby związane z diapedezą leukocytów; choroby zapalne centralnego układu nerwowego (CNS, ang. central nervous system); zespół uszkodzenia wielonarządowego po posoczniczy lub urazie; zapalenie wątroby u alkoholików, bakteryjne zapalenie płuc; choroby z udziałem kompleksu antygen-przeciwciało, włączając w to zapalenie kłębuszków nerkowych; poPL 213 948 B1 socznicę; sarkoidozę; immunopatologiczne odpowiedzi na transplantację tkanki/narządu; zapalenia płuc, włączając w to zapalenie opłucnej, zapalenie pęcherzyków płucnych, zapalenie naczyń, zapalenie płuc, przewlekłe zapalenie oskrzeli, rozstrzenie oskrzelowe, rozlane uogólnione zapalenie oskrzeklików, zapalenie płuc związane z nadwrażliwością, samoistne zwóknienie płuc (IPF od ang. idiopathic pulmonary fibrosis) i mukowiscydozę, itd. Korzystne wskazania obejmują ostre uszkodzenie płuc, zespół ostrego wyczerpania oddechowego dorosłych, reperfuzją niedokrwienną (włączając w to operacyjne reperfuzyjne uszkodzenie tkanek, niedokrwienie mięśnia sercowego i ostry zawał mięśnia sercowego), szok oligemiczny, astmę, bakteryjne zapalenie płuc i chorobą zapalną jelit taką jak wrzodziejące zapalenie okrężnicy. Choroby autoimmunologiczne mogą zachodzić na choroby zapalne a może być tak, że choroby zapalne mogą zachodzić na autoimmunologiczne.
„Blokowanie odpowiedzi immunologicznej” na obcy antygen ma oznaczać zmniejszenie albo zapobieganie co najmniej jednej odpowiedzi z udziałem odporności będącej wynikiem wystawienia na antygen, tj. poprzez zapobieganie albo zmniejszenie wytwarzania przeciwciał skierowanych przeciw antygenowi u ssaka. Alternatywnie albo dodatkowo, można poddawać supresji idiotyp, „pacyfikować” usuwanie komórek opłaszczonych przez przeciwciało i/lub wpływać na prezentację alloantygenu poprzez pozbycie się komórek prezentujących antygen.
„Obcy antygen” ma oznaczać cząsteczkę albo cząsteczki, która jest/są nie-endogenna(e) albo natywna(e) dla ssaka, który jest wystawiony na ich działanie. Obcy antygen może wzbudzić odpowiedź immunologiczną, np. odpowiedź humoralną i z udziałem komórek T u ssaka. Generalnie, obcy antygen będzie prowokować wytwarzanie przeciwciał przeciw niemu. Przykłady branych tu pod uwagę obcych przeciwciał obejmują immunogenne czynniki terapeutyczne, np. białka, takie jak przeciwciała, a w szczególności przeciwciała zawierające nie-ludzkie reszty aminokwasowe (np. przeciwciała gryzoni, chimerowe/humanizowane i prymatyzowane); toksyny (ewentualnie skoniugowane z cząsteczką docelową, taką jak przeciwciało, gdzie cząsteczka docelowa może być również immunogenna), wektory wirusowe do terapii genowej, takie jak retrowirusy i adenowirusy; przeszczepy, czynniki infekcyjne (np. bakterie i wirusy); alloantygeny (tj. antygeny, które występują u niektórych, ale nie innych przedstawicieli tego samego gatunku), takie jak różnice w typach krwi, antygeny ludzkich limfocytów (HLA, ang. human lymphocyte antigens), antygeny płytek krwi, antygeny wyrażane na przeszczepianych narządach, składniki krwi, czynniki ciążowe (Rh) i hemofilityczne (np. czynnik VIII i czynnik IX).
„Antygen związany z nowotworem” dla obecnych celów to antygen charakteryzujący się wysoką ekspresją na komórkach nowotworowych w porównaniu z komórkami prawidłowymi. Konkretne przykłady obejmują receptory ErbB, markery powierzchniowe komórek B, gangliozyd GD2, GD3 i GM2 (Ragupathi G., Cancer Immunol. Immunother. 43: 152 (1996)); CD52 (Ginaldi i wsp., Leukemia Research 22: 185 (1998)); antygen komórek macierzystych prostaty (PSCA, od ang. prostate stem cell antigen) oraz MAGE (Kirkin i wsp., APMIS 106: 665 (1998)).
„Czynnik angiogenny”, tutaj, to cząsteczka, która stymuluje angiogenezę. Przykłady obejmują czynnik wzrostu śródbłonka naczyń (VEGF, od ang. vascular endothelial growth factor), zasadowy lub kwaśny czynnik wzrostu fibroblastów (FGF, od ang. basic or acidic fibroblast growth factor) oraz pochodzący z płytek krwi czynnik wzrostu komórek śródbłonka Hft (PD-ECGF, od ang. platelet-derived endothelial cell growth factor).
„Receptor ErbB” to receptorowa kinaza tyrozynowa, która należy do rodziny receptora ErbB i obejmuje receptory EGFR, ErbB2, ErbB3 i ErbB4 oraz innych członków tej rodziny, którzy będą zidentyfikowani w przyszłości. Receptor ErbB będzie generalnie zawierać domenę zewnątrzkomórkową, która może wiązać się z ligandem ErbB; lipofilową domenę transbłonową; konserwowaną wewnątrzkomórkową domenę kinazy tyrozynowej oraz karboksykońcową domenę przekazującą sygnały niosącą kilka m reszt tyrozynowych, które mogą być fosforylowane.
Terminy „ErbB1”, „receptor nabłonkowego czynnika wzrostowego” i „EGFR” są tu stosowane wymiennie i odnoszą się do natywnej sekwencji EGFR ujawnionej na przykład w Carpenter i wsp., Ann. Rev. Biochem. 56: 881-914 (1987), włączając w to występujące naturalnie ich zmutowane postaci (np. mutanta delecyjnego EGFR, jak w Humphrey i wsp., PNAS (USA) 87: 4207-4211 (1990)). erbBl odnosi się do genu kodującego produkt białkowy EGFR.
Wyrażenia „ErbB2” i „HER2” są tu stosowane wymiennie i odnoszą się do natywnej sekwencji ludzkiego białka HER2 opisanej na przykład w Semba i wsp., PNAS (USA) 82: 6497-6501 (1985) oraz
Yamamoto i wsp., Nature 319: 230-234 (1986) (numer dostępu do Genebank X03363). Przykłady przeciwciał, które wiążą się z HER2 obejmują MAbs 4D5, 7C4, 7F3 i 7C2 jak również ich humanizowane warianty, włączając w to huMAb4D5-1, huMAb4D5-2, huMAb4D5-3, huMAb4D5-4, huMAb4 D5-5,
PL 213 948 B1 huMAb4D5-6, huMAb4D5-7 i huMAb4D5-8 jak opisano w tabeli 3 patentu USA nr 5 821 337, włączonego tu dokładnie jako odniesienie; oraz humanizowane zmutowane 2C4 nr 560, 561, 562, 568, 569, 570, 571, 574 lub 56869 jak opisano w W001/00245. 7C2 i 7F3 oraz ich humanizowane warianty są opisane w W098/17797. Korzystnymi przeciwciałami są te zawierające ciężkie i lekkie regiony zmienne huMAb4D5-8 albo mutant 574 humanizowanych 2C4.
„Trastuzumab” (HERCEPTIN®) to humanizowane przeciwciało, pochodzące ze zrekombinowanego DNA, które wiąże się z wysokim powinowactwem w teście opartym na komórkach (Kd = 5 nM) z domeną zewnątrzkomórkową HER2. Przeciwciałem jest przeciwciało IgG1, które zawiera regiony zmienne łańcucha ciężkiego i lekkiego wariantu huMAb4D5-8, jak opisano w tabeli 3 patentu USA nr 5 821 337. Przeciwciało jest wytwarzane przez komórki CHO-DP12.
„ErbB3” i „HER3” odnoszą się do polipeptydu receptorowego, jak ujawniono na przykład w patentach USA nr 5 183 884 i 5 480 968, jak również Kraus i wsp., PNAS (USA) 86: 9193-9197 (1989).
Terminy „ErbB4” i „HER4” odnoszą się tu do receptorowego polipeptydu, jak ujawniony na przykład EP zgłoszeniu patentowym nr 599 274; Plowman i wsp., Proc. Natl Acad. Sci USA, 90: 1746-1750 (1993) oraz Plowman i wsp., Nature, 366: 473-475 (1993), włączając w to jego izoformy, np. ujawnione w WO 99/19488, opublikowanym 22 kwietnia, 1999.
„Marker powierzchniowy komórek B” oznacza tu antygen wyrażany na powierzchni komórek B, który może stanowić cel dla przeciwciała, które się do niego wiąże. Przykładowe markery powierzchniowe komórek B obejmują markery powierzchniowe leukocytów CD10, CD19, CD20, CD21, CD22, CD23, CD24, CD37, CD40, CD53, CD72, CD73, CD74, CDw75, CDw76, CD77, CDw7 8, CD7 9a, CD79b, CD80, CD81, CD82, CD83, CDw84, CD85 i CD86. Marker powierzchniowy komórek B będący przedmiotem szczególnego zainteresowania jest preferencyjnie wyrażany na komórkach B w porównaniu do innych tkanek - nie komórek B ssaków i może być wyrażany zarówno na prekursorowych komórkach B, jak i dojrzałych komórkach B. W jednym z wykonań, markerem jest taki, jak CD20 lub CD19, który znajduje się na komórkach B w czasie różnicowania linii od stadium komórki macierzystej aż do punktu tuż przed ostatecznym różnicowaniem w komórki plazmatyczne. Korzystnymi markerami powierzchniowymi komórek B są tu CD19, CD20, CD22 i CD40.
Antygen „CD20” to nieglikozylowana fosfoproteina o wielkości około 35 kDa znajdująca się na powierzchni ponad 90% komórek B z krwi obwodowej albo narządów Iimfatycznych. CD20 jest wyrażany w czasie wczesnego rozwoju komórek pre-B i pozostaje aż do różnicowania się komórek plazmatycznych. CD20 jest obecny zarówno na prawidłowych komórkach B, jak i nowotworowych komórkach B. Inne nazwy dla CD20 w literaturze obejmują „antygen ograniczony do limfocytów B” i „Bp35”. Antygen CD20 jest opisany na przykład w Clark i wsp. PNAS (USA) 82: 1766 (1985).
Przykłady przeciwciał, które wiążą się antygenem CD20 obejmują: „C2B8” które jest teraz nazywane „Rituximab” („RITUXAN®)”) (patent USA nr 5 736 137, włączony tu dokładnie jako odniesienie); wyznakowane itrem[90] mysie przeciwciało 2B8 oznaczone „Y2B8” (patent USA nr 5 736 137,
131 włączony tu dokładnie jako odniesienie); mysie IgG2a „B1” ewentualnie wyznakowane 131I z wytwo131 ™ rzeniem przeciwciała „131I-B1” (BEXXART™) (patent USA nr 5 595 721, włączony tu dokładnie jako odniesienie); mysie przeciwciało monoklonalne „1F5” (Press i wsp. Blood 69 (2): 584-591 (1987)); przeciwciało „chimerowe 2H7” (patent USA nr 5 677 180, włączony tu dokładnie jako odniesienie) oraz monoklonalne przeciwciała L27, G28-2, 93-1 B3, B-C1 lub NU-B2 dostępne z International Leukocyte Typing Workshop (Valentine i wsp., W: Leukocyte Typing III (McMichael, wyd., str. 440, Oxford University Press (1987)).
®
Terminy „Rituximab” lub „RITUXAN®” oznaczają tu poddane zabiegom inżynierii genetycznej chimerowe mysie/ludzkie przeciwciało monoklonalne skierowane przeciw antygenowi CD20 i oznaczone „C2B8” w patencie USA nr 5 736 137, włączonym tu dokładnie jako odniesienie. Przeciwciałem jest immunoglobulina IgG1 kappa zawierająca mysie sekwencje regionu zmiennego łańcucha lekkiego i ciężkiego oraz ludzkie sekwencje regionu stałego. Rituximab ma powinowactwo wiązania dla antygenu CD20 wynoszące około 8,0 nM. Rituximab jest wytwarzane przez komórki CHO DG44.
Termin „ssak” obejmuje dowolnego zwierzęta zaklasyfikowane jako ssak, włączając w to ludzi, krowy, konie, psy i koty. W korzystnym wykonaniu wynalazku ssakiem jest człowiek.
Stosowane tu określenie „czynnik hamujący wzrost” dotyczy związku albo kompozycji, która hamuje wzrost komórki (np. komórki nowotworowej) in vitro bądź in vivo. A zatem, czynnikiem hamującym wzrost może być taki, który znacząco zmniejsza udział procentowy komórek w fazie S. Przykłady czynników hamujących wzrost obejmują czynniki, które blokują postęp cyklu komórkowego (w punkcje innym niż faza S), takie jak czynniki, które indukują zatrzymanie fazy G1 i M. Klasyczne
PL 213 948 B1 czynniki blokujące fazę M obejmują czynniki winka (winkrystynę i winblastynę), taksany oraz inhibitoty topo II, takie jak doksorubicyna, epirubicyna, daunorubicyna, etopozyd oraz bleomycyna. Te czynniki, które powodują zatrzymanie w fazie Gl wpływają również na zatrzymanie w fazie S, na przykład, czynniki alkilujące DNA, takie jak tamoksifen, prednizon, dakarbazyna, mechloretamina, cisplatyna, metotreksan, 5-fluorouracyl oraz ara-C. Dalsze informacje można znaleźć w The Molecular Basis of Cancer, Mendelsohn i Israel, wyd., Rozdział I, zatytułowany „Cell cycle regulation, oncogenes and antineoplastic drugs” autorstwa Murakami i wsp. (WB Saunders: Philadelphia, 1995), a w szczególności str. 13.
Przykładami przeciwciał „hamujących wzrost” są takie, które wiążą się z antygenem i hamują wzrost komórek nowotworowych z wyrażających ten antygen. Korzystne hamujące wzrost przeciwciała anty-HER2 hamują wzrost komórek raka sutka SK-BR-3 w hodowli komórkowej więcej niż 20%, a korzystnie więcej niż 50% (np. od około 50% do około 100%) przy stężeniu przeciwciał od około 0,5 do 30 μg/ml, gdzie hamowanie wzrostu określa się sześć dni po wystawieniu komórek SK-BR-3 na przeciwciało (patrz patent USA nr 5 677 171 wydany 14 października 1997). Korzystnym hamującym wzrost przeciwciałem jest huMAb4D5-8.
Przeciwciało, które „indukuje śmierć komórki” jest takim, które powoduje, że żywa komórka staje się nieżywą. Komórką jest generalnie taka, która wyraża antygen, z którym wiąże się przeciwciało. Śmierć komórek można określać in vitro w nieobecności dopełniacza i efektorowej komórki immunologicznej w celu rozróżnienia śmierci komórki indukowanej przez zależną od przeciwciała cytotoksyczność z udziałem komórek (ADCC) i cytotoksyczność zależną od dopełniacza (CDC). A zatem, test na śmierć komórek można przeprowadzać przy zastosowaniu surowicy inaktywowanej termicznie (tj. w nieobecności dopełniacza) i w nieobecności immunologicznych komórek efektorowych. W celu określenia, czy przeciwciało ma zdolność do indukowania śmierci komórki, można testować utratę integralności błony, którą ocenia się poprzez pobieranie jodku propidynowego (PI), błękitu trypanowego (patrz Moore i wsp., Cytotechnology 17: 1-11 (1995)) oraz 7AAD w stosunku do komórek nietraktowanych. Korzystnymi przeciwciałami indukującymi śmierć komórki są takie, które indukują pobieranie PI w teście PI w komórkach BT474.
Przeciwciało, które „indukuje apoptozę” to takie, które indukuje programowaną śmierć komórki, co określa się poprzez wiązanie aneksyny V, fragmentację DNA, kurczenie się komórek, rozszerzanie się endoplazmatycznego retikulum, fragmentację komórki i/lub tworzenie się pęcherzyków błonowych (zwanych ciałkami apoptotycznymi). Komórka wyraża antygen, do którego wiąże się przeciwciało. Korzystne jest jeżeli komórką jest komórka nowotworowa. Dostępnych jest wiele metod dla oceniania zdarzeń komórkowych związanych z apoptozą. Przykładowo, można mierzyć przemieszczanie się fosfatydyloseryny (PS) poprzez wiązanie aneksyny; fragmentację DNA można oceniać poprzez obserwację drabinki DNA, jak ujawniono tu w przykładzie; a kondensację jądrowo/chromatynową łącznie z fragmentacją DNA można oceniać poprzez wzrost liczby komórek hipodiploidalnych. Korzystne jest, jeżeli cząsteczką, która indukuje apoptozę jest taka, która prowadzi do około 2- do 50-krotnej, korzystniej 5- do 50-krotnej, a najkorzystniej, około 10- do 50-krotnej indukcji wiązania aneksyny w stosunku do komórek nie traktowanych w teście wiązania aneksyny z zastosowaniem komórek BT474.
Termin „ilość skuteczna terapeutycznie” odnosi się ilości leku skutecznej do leczenia choroby albo schorzenia u ssaka. W przypadku nowotworu, skuteczna terapeutycznie ilość leku może zmniejszyć liczbę komórek nowotworowych; zmniejszyć rozmiar guza; zahamować (tj. zwolnić do pewnego stopnia, a korzystnie zatrzymać) naciekanie komórek nowotworowych do narządów obwodowych; zahamować (tj. zwolnić do pewnego stopnia, a korzystnie zatrzymać) przerzuty raka; zahamować do pewnego stopnia wzrost guza i/lub w pewnym stopniu złagodzić jeden albo więcej objawów związanych z nowotworem. W zakresie, w którym lek może zapobiegać wzrostowi i zabijać istniejące komórki nowotworowe, może być on cytostatyczny i/lub cytotoksyczny. Dla terapii nowotworów skuteczność można mierzyć na przykład poprzez badanie czasu rozwoju choroby (TTP, ang. time to disease progression) i/lub ustalanie szybkości odpowiedzi (RR, ang. response rates).
„Rak wyrażający antygen” jest takim, który zawiera komórki, które mają dostateczne poziomy antygenu na swojej powierzchni komórkowej, aby przeciwciało anty-antygen mogło związać się z nim i mieć efekt terapeutyczny względem nowotworu.
Rak „charakteryzujący się nadmierną aktywacją” receptora jest takim, w którym nadmiar aktywacji receptora w komórkach nowotworowych znacząco przewyższa poziom aktywacji tego receptora w komórkach nienowotworowych z tego samego typu tkanki. Taka nadmierna aktywacja może być spowodowana przez nadekspresję receptora i/lub większe niż normalnie poziomy ligandu dostępnego
PL 213 948 B1 dla aktywacji receptora w komórkach nowotworowych. Taka nadmierna aktywacja może powodować i/lub być spowodowana przez stan rakowy komórki nowotworowej. W niektórych wykonaniach, nowotwór będzie poddany testowi diagnostycznemu lub prognostycznemu, w celu ustalenia, czy następuje amplifikacja i/lub nadekspresja receptora, która prowadzi do takiej nadmiernej aktywacji receptora. Alternatywnie lub dodatkowo, nowotwór może być poddany testowi diagnostycznemu lub prognostycznemu, w celu ustalenia, czy następuje w nowotworze amplifikacja i/lub nadekspresja ligandu, której towarzyszy nadmierna aktywacja receptora. W podzestawie takich nowotworów, nadmierna aktywacja receptora może być wynikiem autokrynnego szlaku stymulacji.
Rak, który „naprodukuje” receptor to taki, który ma znacząco wyższy poziom receptora, takiego jak HER2, na powierzchni swoich komórek w porównaniu w komórkami nierakowymi z tego samego typu tkanki. Taka nadprodukcja może być spowodowana przez amplifikację genu albo poprzez wzrost transkrypcji albo translacji. Nadprodukcja receptora może być oznaczona w teście diagnostycznym albo prognostycznym poprzez określenie wzrostu poziomu białka receptora obecnego na powierzchni komórki np. poprzez zastosowanie testu immunohistochemicznego; IHC). Alternatywnie albo dodatkowo, można zmierzyć poziomy kwasów nukleinowych kodujących receptor w komórce, np. poprzez fluorescencyjną hybrydyzację in situ (FISH; patrz WO 98/45479 opublikowany październik, 1998), analizę Southern albo techniki reakcji łańcuchowej polimerazy (PCR), takie jak ilościowy PCR w czasie rzeczywistym (RT-PCR). Można również badać nadprodukcję receptora poprzez mierzenie wyrzucanych antygenów (np. domeny zewnątrzkomórkowej) w płynach biologicznych, takich jak surowica (patrz np. patent USA nr 4 933 294 wydany 12 czerwca, 1990; WO 91/05264 opublikowany 18 kwietnia, 1991; patent USA nr 5 401 638 wydany 28 marca, 1995 oraz Sias i wsp., J. Immunol. Methods 132: 73-80 (1990)). Poza powyższymi testami dostępne są dla specjalistów różne testy in vivo. Przykładowo, można eksponować komórki wewnątrz ciała pacjenta na przeciwciało, które jest fakultatywnie wyznakowane wykrywalnym znacznikiem np. radioaktywnym izotopem i wiązanie przeciwciała z komórkami u pacjenta można zmierzyć na przykład poprzez zewnętrzne skanowanie radioaktywności albo analizowanie biopsji pobranej od pacjenta wystawionego uprzednio na działanie przeciwciała.
Rak, który „naprodukuje” ligand to taki, który ma znacząco wyższy poziom ligandu, w porównaniu w komórkami nierakowymi z tego samego typu tkanki. Taka nadprodukcja może być spowodowana przez amplifikację genu albo poprzez wzrost transkrypcji albo translacji. Nadprodukcja receptora może być oznaczona diagnostycznie poprzez określenie poziomów ligandu (albo kodującego go kwasu nukleinowego) u pacjenta, np. w biopsji guza nowotworowego albo poprzez zastosowanie różnych testów diagnostycznych, takich jak IHC, FISH, analiza Southern, PCR albo testy in vivo jak opisano powyżej.
Stosowany tu termin „czynnik cytotoksyczny” dotyczy substancji, która hamuje albo przeciwdziała funkcji komórek i/lub powoduje zniszczenie komórek. Termin ma obejmować izotopy radioaktywne (np. At211, I131, I125, Y90, Re186, Re188, Sm153, Bi212, P32 oraz radioaktywne izotopy Lu), czynniki chemioterapeutyczne oraz toksyny, takie jak niskocząsteczkowe toksyny albo enzymatycznie aktywne toksyny pochodzenia bakteryjnego, roślinnego albo zwierzęcego, włączając w to ich fragmenty i/lub warianty.
„Czynnik chemioterapeutyczny” to związek chemiczny przydatny w leczeniu raka. Przykłady czynników chemioterapeutycznych obejmują czynniki alkilujące, takie jak tiotepa i cyklosfosfamid ™ (CYTOXAN™); sulfoniany alkilowe, takie jak busulfan, improsulfan i piposulfan; azyrydyny, takie jak benzodopa, karbokuon, meturedopa i uredopa; etylenoiminy i metylamelaminy, włączając w to altretaminę, trietyIomelaminy, trietylenofosforamid, trietylenotiofosforoamid i trimetylolomelaminę; iperyty azotowe, takie jak chlorambucyl, chloronafazyna, chorofosfamid, estramustyna, ifosfamid, mechloroetamina, chlorowodowek tlenku mechloroetaminy, melfalan, nowembichina, fenesteryna, prednimustyna, trofosfamid, iperyt uraculowy; nitrosury, takie jak karmustyna, chlorozotocyna, fotemustyna, lomustyna, nimustyna, ranimustyna; antybiotyki, takie jak aklacynomyzyny, aktynomycyna, autramycyna, azaseryna, bleomycyny, kaktynomycyna, kalicheamycyna, karabicyna, karminomycyna, karzynofilina, chromomycyny, daktynomycyna, daunorubicyna, detorubicyna, 6-diazo-5-okso-L-norleucyna, doksorubicyna, epirubicyna, ezorubicyna, idarubicyna, marcelomycyna, mitomycyny, kwas mykofenolowy, nogalamycyna, oligomycyny, peplomycyna, potfiromycyna, puromycyna, kelamycyna, rodorubicyna, streptonigryn, streptozocyna, tubercydyna, ubenimeks, zynostatyna, zorubicyna; anty- metabolity, takie jak metotreksan i 5-fluorouracyl (5-FU); analogi kwasu foliowego, takie jak denopteryna, metotreksan, pteropteryna, trimetreksan; analogi puryn, takie jak fludarabina, 6-merkaptopuryna, tiamipryna, tioguanina; analogi pirymidyn, takie jak ancytabina, azacytydyna, 6-azaurydyna, karmofur, cytaraPL 213 948 B1 bina, dideoksyurydyna, doksyflurydyna, enocytabina, floksyurydyna, 5-FU; androgeny takie jak kalusteron, propionian dromostanolonu, epitiostanol, mepitiostan, testolakton; czynniki antyadrenalgiczne, takie jak aminoglutetimid, mitotan, trilostan; dopełniacz dla kwasu foliowego, taki jak kwas frolinowy; aceglaton; glikozyd aldofosfamidu; kwas aminolewulinowy; amsakryna; bestrabucyl; bisantren; edatraksan; defofamina; demekolcyna; diazykuon; elfornityna; octan eliptynowy; etoglucyd; azotan galu; hydrokslomocznik; lentinan; lonidamina; mitoguazon; raitoxantron; mopidamol; nitracrina; pentostatin; fenamet; pirarubicyna; kwas podofilinowy acid; 2-etylohydrazyd; prokarbazyna; PSK; razoksan; sizofiran; spirogermanium; kwas tenuazonowy; triazikon; 2,2',2'-trichlorotrietyloamina; uretan; windesyna;
dakarbazyna; mannomustyna; mitobronitol; mitolaktol; pipobroman; gacytozyna; arabinozyd („Ara-C”);
® cyklofosfamid; tiotepa; taksany, np. paklitaksel (TAXOL®, Bristol-Myers Squibb Oncology, Princeton, ®
NJ) oraz doksetaksel (TAXOTERE®, Rhone-Poulenc Rorer, Antony, France); chlorambucyl; gemcytabina; 6-tioguanina; merkaptopuryna; metotreksan; analogi platyny, takie jak cysplatyna i karboplatyna; winblastyna; platyna; etopozyd (VP-16); ifosfamid; mitomycyna C; mitoksantron; winkrystyna; winorelbina; nawelbina; nowantron; tenipozyd; daunomycyna; aminopteryna; kseloda; ibandronan; CPT-11; inhibitor topoizomerazy RFS 2000; difluorometyloornityna (DMFO); kwas retynowy; esperamycyny; kapecytabina oraz farmaceutycznie dopuszczalne sole, kwasy albo pochodne dowolnej z powyższych. Definicja ta obejmuje również czynniki przeciwhormonalne, które działają regulując albo hamując działanie hormonów na nowotwory, takie jak anty-estrogeny włączając w to na przykład tamoksifen, raloksifen, 4(5)-imidazole hamujące aromatazę, trioksifen, keoksifen, LY117018, onapriston i toremifen (Fareston) oraz antyandrogeny, takie jak flutamid, nilutamid, bikalutamid, leuprolid i goserelin oraz farmaceutycznie dopuszczalne sole, kwasy albo pochodne dowolnej z powyższych.
Stosowany tu termin „lek kierowany przez EGFR” dotyczy czynnika terapeutycznego, który wiąże się z EGFR i, ewentualnie hamuje aktywację EGFR. Przykłady takich czynników obejmują przeciwciała i małe cząsteczki, które wiążą się z EGFR. Przykłady przeciwciał, które wiążą się z EGFR obejmują MAb 579 (ATCC CRL HB 8506), MAb 455 (ATCC CRL HB8507), MAb 225 (ATCC CRL 8508), MAb 528 (ATCC CRL 8509) (patrz patent USA nr 4 943 533, Mendelsohn i wsp.) oraz ich warianty, takie jak chimery 225 (C225) i ludzkie 225 o przywróconym kształcie (H225) (patrz, WO 96/40210, Imclone Systems Inc.); przeciwciał, które wiążą się ze zmutowanym EGFR typu II (US patent nr 5 212 290); humanizowane i chimerowe przeciwciała, które wiążą się z EGFR jak opisano w patencie USA nr 5891996 oraz ludzkie przeciwciała, które wiążą się z EGFR (patrz WO 98/50433, Abgenix). Przeciwciało anty-EGFR może być połączone z czynnikiem cytotoksycznym tworząc immunokoniugat (patrz np. EP659, 439A2, Merck Patent GmbH). Przykłady takich małych cząsteczek, które wiążą się z EGFR obejmują ZD1839 (IRESSA®) (Astra Zeneca), CP-358774 lub OSI-774 (TARCEVA™) (Genentech) i AG1478.
Termin „cytokina” to ogólny termin dla białek uwalnianych przez jedną populację komórek, które działają na inne komórki jako międzykomórkowe przekaźniki. Przykładami takich cytokin są limfokiny, monokiny i tradycyjne hormony peptydowe. Wśród tych cytokin są: hormon wzrostu, taki jak ludzki hormon wzrostu, pochodna N-metionylowa ludzkiego hormonu wzrostu i bydlęcy hormon wzrostu; hormon przytarczycy; tyroksyna; insulina; proinsulina; relaksyna; prorelaksyna; hormony glikoproteinowe takie jak hormon folikulotropowy (FSH), tyrotropina (TSH), hormon luteinizujący (LH); wątrobowy czynnik wzrostowy; fibroblastowy czynnik wzrostowy; prolaktyna; laktogen łożyskowy; czynnik martwicy nowotworów a i β; substancja hamująca mullerian; mysi peptyd związany z gonadotropiną; inhibina; aktywina; naczyniowy śródbłonkowy czynnik wzrostowy; integryna; trombopoetyna (TPO); nerwowe czynniki wzrostowe takie jak NGF-α; czynnik wzrostowy płytek krwi; transformujące czynniki wzrostowe (TGF), takie jak TGF-α i TGF-β; czynnik wzrostowy insulino-podobny I i II; erytropoetyna (EPO); czynniki osteoinduktywne; interferony, takie jak interferon-α, -β i -γ; czynniki stymulujące kolonie (CSF), takie jak CSF makrofagów (M-CSF); CSF granulocytów- makrofagów (GM-CSF); i CSF granulocytów (G-CSF); interleukiny (IL), takie jak IL-1, IL-1a, IL-2, IL-3, IL-4, IL-5, IL-6, IL-7, IL-8, IL-9, IL-10, IL-11, IL-12; czynnik martwicy nowotworów, taki jak TNF-α lub TNF-β oraz inne czynniki polipeptydowe, włączając w to ligand LIF i kit (KL). Stosowany tu termin cytokina obejmuje białka ze źródeł naturalnych albo z hodowli zrekombinowanych komórek albo biologicznie aktywne ekwiwalenty cytokin o sekwencji natywnej.
Termin „prolek” stosowany w tym zgłoszeniu dotyczy formy prekursorowej albo pochodnej aktywnej farmaceutycznie substancji, która jest mniej toksyczna wobec komórek nowotworowych w porównaniu z lekiem rodzicielskim i podlega aktywacji enzymatycznej albo przekształceniu w bardziej aktywną postać rodzicielską. Patrz, np. Wilman, „Prodrugs in Cancer Chemotherapy” Biochemical
PL 213 948 B1
Society Transactions, 14, str. 375-382, 615th Meeting Belfast (1986) oraz Stella i wsp., „Prodrugs: A Chemical Approach to Targeted Drug Delivery” Directed Drug Delivery, Borchardt i wsp., (wyd.), str. 247, 267, Humana Press (1985). Proleki według tego wynalazku obejmują między innymi proleki zawierające tiofosforany, proleki zawierające siarczan, proleki zawierające peptyd, proleki ze zmodyfikowanymi D-aminokwasami, proleki glikozylowane, proleki zawierające laktam, proleki zawierające fenoksyacetamid ewentualnie podstawione albo proleki zawierające fenyloacetamid, ewentualnie podstawione, 5-fluorocytozynę i inne proleki 5-fluorourydynowe, które można przekształcić w bardziej aktywne wolne leki cytotoksyczne. Przykłady leków cytotoksycznych, które można przekształcić w postać proleku do zastosowania w tym wynalazku obejmują miedzy innymi opisane powyżej czynniki chemioterapeutyczne.
„Liposom” to mały pęcherzyk składający się z różnych typów lipidów, fosfolipidów i/lub związków powierzchniowo czynnych, które są przydatne do dostarczania leku (takiego jak ujawniona tu kompozycja glikoproteinowa i, ewentualnie, czynnik chemioterapeutyczny) do ssaka. Składniki liposomu są zwykle zorganizowane w postaci podwójnej warstwy, podobnie do organizacji lipidów w błonach biologicznych.
Termin „dołączona ulotka” jest tu użyty w odniesieniu do instrukcji zwykle dołączanych do handlowych opakowań produktów terapeutycznych, która zawiera informacje o wskazaniach, zastosowaniu, dawkowaniu, podawaniu, przeciwwskazaniach i/lub ostrzeżeniach dotyczących zastosowania takiego produktu terapeutycznego „Wyizolowana” cząsteczka kwasu nukleinowego to cząsteczka kwasu nukleinowego, która jest zidentyfikowana i oddzielona od co najmniej jednej cząsteczki kwasu nukleinowego stanowiącej zanieczyszczenie, z którą występuje normalnie razem w naturalnym źródle kwasu nukleinowego. Wyizolowana cząsteczka kwasu nukleinowego jest odmienna od postaci albo układu, w którym występuje w naturze. Wyizolowane cząsteczki kwasu nukleinowego można zatem odróżnić od cząsteczki kwasu nukleinowego występującej w naturalnych komórkach. Jednakże, wyizolowana cząsteczka kwasu nukleinowego obejmuje cząsteczkę kwasu nukleinowego zawartą w komórkach, które wyrażają przeciwciało, gdzie na przykład cząsteczka kwasu nukleinowego jest w pozycji chromozomowej innej niż w komórkach naturalnych.
Kwas nukleinowy jest „połączony funkcjonalnie”, kiedy jest umieszczony w funkcjonalnym związku z inną sekwencją kwasu nukleinowego. Przykładowo, DNA dla presekwencji albo lidera do sekrecji jest połączony funkcjonalnie z DNA dla polipeptydu, jeżeli jest wyrażany jako prebiałko, które uczestniczy w sekrecji polipeptydu; promotor albo wzmacniacz jest połączony funkcjonalnie z sekwencją kodującą, jeżeli wpływa na transkrypcję sekwencji, albo miejsce wiązania rybosomu jest połączone funkcjonalnie z sekwencją kodującą, jeżeli jest umieszczone tak, aby ułatwić translację. Generalnie, „połączone funkcjonalnie” oznacza, że sekwencje, które podlegają łączeniu są ciągłe, a w przypadku lidera do sekrecji, ciągłe i w fazie odczytu. Jednakże wzmacniacze nie muszą być ciągle. Łączenia dokonuje się poprzez ligację w dogodnych miejscach restrykcyjnych. Jeżeli takie miejsca nie istnieją, używa się syntetycznych oligonukleotydowych adaptorów zgodnie z konwencjonalną praktyką.
„Wyizolowana” cząsteczka kwasu nukleinowego to cząsteczka kwasu nukleinowego, która jest zidentyfikowana i oddzielona od co najmniej jednej cząsteczki kwasu nukleinowego stanowiącej zanieczyszczenie, z którą występuje normalnie razem w naturalnym źródle kwasu nukleinowego. Wyizolowana cząsteczka kwasu nukleinowego jest odmienna od postaci albo układu, w którym występuje w naturze. Wyizolowane cząsteczki kwasu nukleinowego można zatem odróżnić od cząsteczki kwasu nukleinowego występującej w naturalnych komórkach. Jednakże, wyizolowana cząsteczka kwasu nukleinowego obejmuje cząsteczkę kwasu nukleinowego zawartą w komórkach, które wyrażają przeciwciało, gdzie na przykład cząsteczka kwasu nukleinowego jest w pozycji chromosomowej innej niż w komórkach naturalnych.
„Sekwencje kontrolujące” ekspresję dotyczą sekwencji DNA niezbędnych do ekspresji połączonych z nimi funkcjonalnie sekwencji kodujących w danym organizmie gospodarza. Sekwencje kontrolujące, które są odpowiednie dla organizmów prokariotycznych, obejmują promotor, ewentualnie sekwencję operatorową oraz miejsce wiązania rybosomu. Wiadomo, że komórki eukariotyczne wykorzystują promotory, sygnały poliadenylacji i wzmacniacze.
Kwas nukleinowy jest „połączony funkcjonalnie” kiedy jest umieszczony w związku funkcjonalnym z inną sekwencją kwasu nukleinowego. Przykładowo, DNA dla prosekwencji albo lidera sekrecyjnego jest połączony funkcjonalnie z DNA dla polipeptydu jeżeli jest wyrażany jako prebiałko, które uczestniczy w sekrecji polipeptydu; promotor albo wzmacniacz jest połączony funkcjonalnie z sekwenPL 213 948 B1 cją kodującą jeżeli wpływa na transkrypcję sekwencji; albo miejsce wiązania rybosomu jest połączone funkcjonalnie z sekwencją kodującą jeżeli jest umieszczone tak, aby ułatwiać translację. Generalnie, „połączony funkcjonalnie” oznacza, że połączone sekwencje DNA są ciągłe, a w przypadku sekwencji lidera sekrecyjnego ciągłe i w fazie odczytu. Natomiast wzmacniacze nie muszą być ciągłe. Połączenie uzyskuje się poprzez ligację w odpowiednich miejscach restrykcyjnych. Jeżeli takie miejsca nie istnieją, stosowane są syntetyczne oligonukleotydy- adaptory albo łączniki, zgodnie z konwencjonalną praktyką.
Stosowany tu termin ekspresyjna „komórka”, „linia komórkowa” i „hodowla komórkowa” są stosowane wymiennie i wszystkie te określenia obejmują potomstwo. A zatem, słowa „transformant” i „komórki transformanta” obejmują pierwotną komórkę obiektu i hodowle z niej pochodzące niezależnie od liczby transferów. Jest również zrozumiałe, że całe potomstwo nie musi być całkowicie identyczne pod względem zawartości DNA na skutek przemyślanych albo przypadkowych mutacji. Zmutowane potomstwo, które ma taką samą funkcję albo aktywność biologiczną jak poszukiwana przy wyjściowo stransformowanych komórkach, jest również tu włączone. Tam gdzie zamierzone są inne cele, będzie to jasne z kontekstu.
II. Sposoby wykonania wynalazku
Wynalazek ten dotyczy sposobu przygotowania zasadniczo homogennego preparatu glikoproteiny zawierającej region Fc, gdzie około 80-100% glikoproteiny w kompozycji zawiera dojrzały węglowodan rdzeniowy pozbawiony fukozy, przyłączony do regionu Fc glikoproteiny. W korzystnych wykonaniach białko jest przeciwciałem lub immunoadhezyną. Glikoproteiny mogą być przygotowane na przykład przez (a) zastosowanie komórki gospodarza poddanej inżynierii genetycznej lub zmutowanej, w której brak metabolizmu fukozy, tak że ma zmniejszoną zdolność (lub nie jest zdolna) do fukozylacji wyrażanych w niej białek;
(b) hodowanie komórek w warunkach, które zapobiegają lub zmniejszają fukozylację;
(c) potranslacyjne usunięcie fukozy (np. enzymem fukozydazą);
(d) potranslacyjne dodanie pożądanego węglowodanu, np. po zrekombinowanej ekspresji nieglikozylowanej glikoproteiny;
(e) oczyszczenie glikoproteiny tak, by wybrać produkt, który nie jest fukozylowany.
Obecny wynalazek rozważa połączenie dwóch lub więcej z tych przykładowych sposobów (a)-(e).
Najbardziej korzystnie jeżeli, kwas nukleinowy kodujący pożądaną glikoproteinę jest wyrażany w komórce gospodarza, która ma zmniejszoną zdolność (lub nie jest zdolna) do fukozylacji wyrażanych w niej białek. Korzystnie, jeżeli komórka gospodarza jest komórką jajnika chomika chińskiego (CHO) pozbawioną reduktazy dihydrofolianu (DHFR), np. komórką Lec13 CHO lub np. komórką CHO-K1, DUX-B11, CHO-DP12 lub CHO-DG44 CHO, która była zmodyfikowana tak, że wytwarzana w niej glikoproteina nie jest znacząco fukozylowana. Tak więc komórka może wykazywać zmienioną ekspresję lub aktywność enzymu fukozylotransferazy albo inny enzym biorący udział w dodawaniu fukozy do związanego z N oligosacharydu może mieć zmniejszoną aktywność i/lub obniżone poziomy w komórce gospodarza.
Struktura węglowodanu rdzeniowego jest dojrzała, tak więc na ogół należy unikać stosowania inhibitorów, takich jak kastanospermina, które hamują lub przeszkadzają w obróbce dojrzałego węglowodanu. Według jednego z korzystnych wykonań około 80-100% glikoproteiny w kompozycji odzyskanej ze zrekombinowanej komórki gospodarza wytwarzającej glikoproteinę będzie miała strukturę węglowodanu rdzeniowego, która jest pozbawiona fukozy przyłączonej do regionu Fc glikoproteiny, dalej nazywana „kompozycją glikoproteiny wolną od fukozy”. „Odzyskana” ma tu oznaczać materiał uzyskany bezpośrednio z hodowli komórek gospodarza bez poddawania tego materiału etapowi oczyszczania, który wzbogaca w glikoproteinę wolną od fukozy.
Jednak, niniejszy wynalazek rozważa wzbogacanie ilości glikoproteiny wolnej od fukozy za pomocą różnych technik, takich jak oczyszczanie z zastosowaniem substratu lektynowego aby usunąć glikoproteinę zawierająca fukozę z pożądanej kompozycji.
Będzie oczywiste, że ilość wolnej od fukozy glikoprotein z różnych partii zrekombinowanej produkowanej glikoproteiny może być różna. Na przykład, w przykładach poniżej % całkowitego oligosacharydu bez fukozy przyłączonego do glikoproteiny wyrażanej przez komórki CHO-Lec13 był w zakresie 88%-95%.
Korzystnie, jeżeli około 90-99% glikoproteiny w kompozycji zawiera strukturę dojrzałego węglowodanu rdzeniowego, która jest pozbawiona fukozy przyłączonej do regionu Fc glikoproteiny.
PL 213 948 B1
W kompozycji mogą istnieć różne formy struktury węglowodanów. Na przykład, węglowodan przyłączony do glikoproteiny może być przedstawiony za pomocą następującego wzoru:
Χ4 - Χ3- GN - Μ
Χι\μ - GN - GN
Χ4 - Χ3 - Χ2 - Μ / gdzie:
M to mannoza,
GN to GlcNAc,
X1 to ewentualna rozdzielająca reszta GlcNAc, z dodatkowym monosacharydem(ami), ewentualnie przyłączonym do rozdzielającej GlcNAc,
X2 to korzystna reszta GlcNAc,
X3 to ewentualna reszta Ga1, jedna reszta Ga1 może być przyłączona do każdego ramienia GN,
X4 to ewentualne końcowe reszty kwasu sialowego, mogą być przyłączone jedna lub dwie reszty kwasu sialowego.
Wolne od fukozy ujawnione tu kompozycje glikoproteinowe wykazują zwiększone wiązanie jednego lub więcej receptorów FcyRIII w porównaniu z kompozycją tej samej glikoproteiny, ale gdzie większość (np. około 50-100% lub około 70-100%) glikoproteiny w tej kompozycji ma fukozę przyłączoną do struktury dojrzałego rdzeniowego węglowodanu (dalej tu „kompozycja glikoproteiny zawierająca fukozę”). Na przykład, kompozycje glikoproteiny wolne od fukozy tu ujawnione mogą wykazywać 100-1000-krotnie zwiększone wiązanie do FcyRIII, takiego jak FcyRIII (F158), w porównaniu z kompozycjami glikoproteinowymi zawierającymi fukozę. Jako że allotyp F158 jest mniej skuteczny w interakcji z ludzką IgG niż V158, uważa się, że to zapewnia znaczącą przewagę z terapeutycznego punku widzenia, szczególnie u pacjentów, którzy wyrażają FcyRIII (F158). Co więcej, ujawniona tu wolna od fukozy kompozycja glikoproteinowa wykazuje lepszą aktywność ADCC w porównaniu z odpowiednimi kompozycjami glikoproteinowymi zawierającymi fukozę, np. z około 2-20-krotnie polepszoną aktywnością ADCC.
Poza wolną od fukozy strukturą dojrzałego rdzeniowego węglowodanu, dodatkowe oligosacharydy mogą być przyłączone do struktury węglowodanu rdzeniowego. Na przykład rozdzielająca GlcNAc może być przyłączona lub nie. Jako przykład, komórka gospodarza może być pozbawiona enzymu GnTIII i w efekcie glikoproteina może być zasadniczo wolna od rozdzielającej GlcNAc. Alternatywnie, glikoproteina może być wyrażana w komórce gospodarza (np. gospodarza Y0 lub komórce CHO poddanej inżynierii genetycznej), która dodaje rozdzielającą GlcNAc.
Jedna lub więcej (na ogół jedna lub dwie) reszty galaktozy mogą być też przyłączone do struktury węglowodanu rdzeniowego. W końcu jedna lub więcej końcowych reszt kwasu sialowego (na ogół jedna lub dwie) mogą być przyłączone do struktury węglowodanu rdzeniowego, np. przez połączenie z resztą (resztami) galaktozy.
Kompozycje tu ujawnione są w korzystnym wykonaniu wytwarzane i przeznaczone do zastosowań terapeutycznych. Tak więc korzystna kompozycja jest preparatem farmaceutycznym zawierającym glikoproteinę i farmaceutycznie dopuszczalny nośnik lub rozcieńczalnik, tak jak te podane przykładowo poniżej. Takie preparaty są zazwyczaj jałowe i mogą być liofilizowane.
W korzystnym wykonaniu wynalazku glikoproteiną jest przeciwciało i przykładowe sposoby wytwarzania przeciwciał są opisane bardziej szczegółowo w następujących częściach. Glikoproteiną może jednak być dowolna inna glikoproteina zawierająca region Fc, np. immunoadhezyna. Sposoby wytwarzania immunoadhezyn są tu podane bardziej szczegółowo poniżej.
A. Warianty sekwencji regionu Fc
W jednym z wykonań wynalazku, wariant glikozylacji obejmuje ponadto wariant regionu Fc z sekwencją aminokwasową, która różni się od natywnej sekwencji regionu Fc. Tam gdzie region wariantu Fc ma więcej niż jedno podstawienie aminokwasowe, na ogół, ale niekoniecznie, podstawienia aminokwasowe w tej samej klasie są łączone, aby uzyskać pożądany wynik. Różne klasy podstawień aminokwasowych są opisane w następującej tabeli.
PL 213 948 B1
T a b e l a 1
Klasy wariantów regionu Fc
Klasa Zdolność wiązania FcR Pozycja podstawienia (podstawień) w regionie Fc
1A zmniejszone wiązanie do wszystkich FcyR 238, 265, 269, 270, 297*, 327, 329
1B zmniejszone wiązanie do obydwu, FcyRII i FcyRIII 239, 294, 295, 303, 338, 373, 376, 416, 435
2 zwiększone wiązanie do obydwu, FcyRII i FcyRIII 256, 290, 312, 326, 330, 339, 378, 430
3 zwiększone wiązanie do FcyRII i brak wpływu na wiązanie FcyRIII 255, 258, 267, 276, 280, 283, 285, 286, 305, 307, 309, 315, 320, 331, 337, 398
4 zwiększone wiązanie do FcyRII i zmniejszone wiązanie do FcyRIII 268, 272, 301, 322, 340
5 zmniejszone wiązanie do FcyRII i brak wpływu na wiązanie do FcyRIII 292, 324, 335, 414, 419, 438, 439
6 zmniejszone wiązanie do FcyRII i zwiększone wiązanie do FcyRIII 298, 333
7 brak wpływu na wiązanie do FcyRII i zmniejszone wiązanie do FcyRIII 248, 249, 252, 254, 278, 289, 293, 296, 338, 382, 388, 389, 434, 437
8 brak wpływu na wiązanie FcyRII i zwiększone wiązanie do FcyRIII 334, 360
* wersja deglikozylowana
Poza podstawieniami aminokwasowymi, niniejszy obecny wynalazek rozważa inne modyfikacje sekwencji aminokwasowych wyjściowego regionu Fc w celu wytworzenia wariantu regionu Fc ze zmienioną funkcją efektorową.
Można na przykład usunąć jedną lub więcej reszt aminokwasowych z regionu Fc aby zmniejszyć wiązanie się z FcR. Na ogół usuwa się jedną lub więcej reszt regionu Fc tu zidentyfikowanych jako przeprowadzających wiązanie FcR, aby wytworzyć taki wariant regionu Fc. Na ogół nie więcej niż jedna do dziesięciu reszt regionu Fc będzie usunięta według tego wykonania wynalazku. Region Fc zawierający jedną lub więcej delecji aminokwasów będzie korzystnie zachowywał przynajmniej około 80% i korzystnie przynajmniej około 90%, i najbardziej korzystnie przynajmniej około 95% wyjściowego regionu Fc albo natywnej sekwencji ludzkiego regionu Fc.
Można też wytworzyć warianty regionu Fc z insercjami aminokwasów, które to warianty mają zmienioną funkcję efektorową. Na przykład, można wprowadzić przynajmniej jedną resztę aminokwasową (np. jedną do dwóch reszt aminokwasów i na ogół nie więcej niż dziesięć reszt) obok jednej lub więcej pozycji regionu Fc zidentyfikowanych tu jako wpływające na wiązanie FcR. Przez „obok” rozumie się w obrębie jednej do dwóch reszt aminokwasowych w zidentyfikowanych tu resztach regionu Fc. Takie warianty regionu Fc mogą wykazywać zwiększone lub zmniejszone wiązanie FcR i/lub aktywność ADCC. Aby wytworzyć takie warianty insercyjne, można ocenić strukturę ko-kryształu polipeptydu zawierającego region wiązania FcR (np. zewnątrz komórkową domenę FcR będącego przedmiotem zainteresowania) i region Fc, do którego reszta (reszty) aminokwasów mają być wstawione (patrz na przykład, Deisenhofer, Biochemistry 20 (9): 2361-2370 (1981) oraz Burmeister i wsp., Nature 342: 379-383, (1994)) aby racjonalnie zaprojektować wariant regionu Fc z np. poprawioną zdolnością wiązania FcR. Taka insercja (insercje) będą na ogół zrobione w pętli regionu Fc, ale nie w strukturze drugorzędowej (np. w nici β) regionu Fc.
Przez wprowadzenie odpowiedniej sekwencji aminokwasowej w rodzicielskim regionie Fc, można wytworzyć wariant regionu Fc, który (a) pośredniczy w zależnej od przeciwciał cytotoksyczności zależnej od komórek (ADCC) w obecności ludzkich komórek efektorowych bardziej skutecznie i/lub (b) wiąże receptor Fc gamma (FcyR) z lepszym powinowactwem niż wyjściowy polipeptyd. Takie warianty regionu Fc będą na ogół zawierały przynajmniej jedną modyfikację aminokwasową w regionie Fc. Uważa się, że łączenie modyfikacji aminokwasowych jest szczególnie korzystne. Na przykład, wariant region Fc może zawierać dwie, trzy, cztery, pięć itd. podstawień, np. konkretnych, określonych tu pozycji regionu Fc.
PL 213 948 B1
Korzystne jest, jeżeli rodzicielski polipeptyd-region Fc jest ludzkim regionem Fc, np. natywną sekwencją ludzkiego regionu Fc ludzkiej IgG1 (allotypy A i nie-A), IgG2, IgG3 lub IgG4. Takie sekwencje przedstawiono na fig. 23.
Aby wytworzyć region Fc z polepszoną aktywnością ADCC, korzystne jest, jeżeli rodzicielski polipeptyd ma uprzednio istniejącą aktywność ADCC, np. zawiera region Fc ludzkiej IgG1 lub ludzkiej IgG3. W jednym z wykonań, wariant z zwiększoną ADCC pośredniczy w ADCC znacząco bardziej skutecznie niż przeciwciało z regionem Fc IgG1 lub IgG3 o natywnej sekwencji i regionem wiązania antygenu wariantu. Korzystnie, jeżeli wariant zawiera lub jest zasadniczo złożony z, podstawień dwóch lub trzech reszt w pozycjach 298, 333 i 334 regionu Fc. Najkorzystniej, jeżeli reszty w pozycjach 298, 333 i 334 są podstawione (np. resztami alaniny). Co więcej, aby wytworzyć wariant regionu Fc ze zwiększoną aktywnością ADCC na ogół konstruuje się wariant regionu Fc ze zwiększonym powinowactwem wiązania do FcyRIII, który uważa się za ważny FcR w przeprowadzaniu ADCC. Na przykład, można wprowadzić modyfikację aminokwasową (np. podstawienie) do rodzicielskiego regionu Fc w jednym lub więcej aminokwasów w pozycjach 256, 290, 298, 312, 326, 330, 333, 334, 360, 378 lub 430, aby wytworzyć taki wariant. Wariant ze zwiększonym powinowactwem wiązania do FcyRIII może dalej mieć zmniejszone powinowactwo wiązania dla FcyRII, szczególnie zmniejszone powinowactwo do hamującego receptora FcyRIIB.
Modyfikacja(e) aminokwasowe korzystnie wprowadza się do domeny CH2 regionu Fc, ponieważ tu podane eksperymenty m wskazują, że domena CH2 jest ważna dla aktywności wiązania FcR. Co więcej, w odróżnieniu od nauk z tej dziedziny, cytowanych powyżej, obecne zgłoszenie rozważa wprowadzenie modyfikacji do części regionu Fc innego niż w dolnym regionie zawiasowym.
Przydatne pozycje aminokwasowe do modyfikacji w celu wytworzenia wariantu regionu Fc IgG ze zmienionym powinowactwem wiązania lub aktywnością receptora Fc gamma (FcyR) obejmują dowolną jedną lub więcej pozycji aminokwasowych 238, 239, 248, 249, 252, 254, 255, 256, 258, 265, 267, 268, 269, 270, 272, 276, 278, 280, 283, 285, 286, 289, 290, 292, 293, 294, 295, 296, 298, 301, 303, 305, 307, 309, 312, 315, 320, 322, 324, 326, 327, 329, 330, 331, 333, 334, 335, 337, 338, 340, 360, 373, 376, 378, 382, 388, 389, 398, 414, 416, 419, 430, 434, 435, 437, 438 lub 439 regionu Fc.
Korzystnie, jeżeli rodzicielski region Fc stosowany jako matryca do wytworzenia takich wariantów zawiera region Fc ludzkiej IgG. Gdy podstawiona jest reszta 331, rodzicielski region Fc korzystnie nie jest z ludzkiej IgG3 o sekwencji natywnej lub wariant regionu Fc zawierający podstawienie w pozycji 331 korzystnie wykazuje zwiększone wiązanie do FcR, np. do FcyRII.
Aby wytworzyć wariant regionu Fc ze zmniejszonym wiązaniem do FcyR można wprowadzić modyfikację aminokwasową w dowolnej jednej lub więcej pozycji aminokwasowej 238, 239, 248, 249, 252, 254, 265, 268, 269, 270, 272, 278, 289, 292, 293, 294, 295, 296, 298, 301, 303, 322, 324, 327, 329, 333, 335, 338, 340, 373, 376, 382, 388, 389, 414, 416, 419, 434, 435, 437, 438 lub 439 regionu Fc.
Warianty, który wykazują zmniejszone wiązanie do FcyRI, obejmują te zawierające modyfikację aminokwasową regionu Fc w dowolnej jednej lub więcej pozycji aminokwasów 238, 265, 269, 270, 327 lub 329.
Warianty, które wykazują obniżone wiązanie do FcyRII obejmują te zawierające modyfikację aminokwasu regionu Fc w dowolnej jednej lub więcej pozycji aminokwasowych 238, 265, 269, 270, 292, 294, 295, 298, 303, 324, 327, 329, 333, 335, 338, 373, 376, 414, 416, 419, 435, 438 lub 439.
Warianty regionu Fc, które wykazują zmniejszone wiązanie do FcyRIII obejmują te zawierające modyfikację aminokwasową regionu Fc w dowolnej jednej lub więcej pozycji aminokwasowej 238, 239, 248, 249, 252, 254, 265, 268, 269, 270, 272, 278, 289, 293, 294, 295, 296, 301, 303, 322, 327, 329, 338, 340, 373, 376, 382, 388, 389, 416, 434, 435 lub 437.
Można także wytworzyć warianty ze zwiększonym wiązaniem jednego lub więcej FcyR. Takie warianty regionu Fc mogą zawierać modyfikację aminokwasową w dowolnej jednej lub więcej pozycji aminokwasów 255, 256, 258, 267, 268, 272, 276, 280, 283, 285, 286, 290, 298, 301, 305, 307, 309, 312, 315, 320, 322, 326, 330, 331, 333, 334, 337, 340, 360, 378, 398 lub 430 regionu Fc.
Na przykład, wariant ze zwiększoną aktywnością wiązania FcyR może wykazywać zwiększone wiązanie do FcyRIII, i ewentualnie może wykazywać ponadto zmniejszone wiązanie do FcyRII; np. wariant może zawierać modyfikację aminokwasową w pozycji 298 i/lub 333 regionu Fc.
Warianty ze zwiększonym wiązaniem do FcyRII obejmują te zawierające modyfikację aminokwasową w dowolnej jednej lub więcej pozycji aminokwasowych 255, 256, 258, 267, 268, 272, 276,
280, 283, 285, 286, 290, 301, 305, 307, 309, 312, 315, 320, 322, 326, 330, 331, 337, 340, 378, 398 lub 430 regionu Fc. Takie warianty mogą dalej wykazywać zmniejszone wiązanie do FcyRIII. Na przyPL 213 948 B1 kład, mogą zawierać modyfikację aminokwasową regionu Fc w dowolnej jednej lub więcej pozycji aminokwasych 268, 272, 298, 301, 322 lub 340.
Jakkolwiek korzystne jest zmienianie wiązania do FcyR, warianty regionu Fc ze zmienionym powinowactwem wiązania dla receptora noworodkowego (FcRn) są tu także rozważane. Oczekuje się, że warianty regionu Fc ze zwiększonym powinowactwem do FcRn będą miały dłuższy czas półtrwania w surowicy i takie cząsteczki będą miały użyteczne zastosowania w sposobach leczenia zwierząt, gdy długi okres półtrwania podawanego peptydu jest pożądany, np. aby leczyć przewlekłą chorobę lub schorzenie. Przeciwnie, oczekuje się, że warianty regionu Fc ze zmniejszonym powinowactwem wiązania FcRn będą miały krótsze okresy półtrwania i takie cząsteczki mogą, na przykład, być podawane ssakowi wówczas, gdy krótszy czas w krążeniu może być korzystny, np. dla obrazowania diagnostycznego lub dla polipeptydów, które mają toksyczne efekty uboczne gdy krążą w krwiobiegu przez przedłużone okresy czasu itd. Oczekuje się, że warianty regionu Fc ze zmniejszonym powinowactwem wiązania mają mniejszą szansę przechodzenia przez łożysko i mogą więc być stosowane w leczeniu chorób lub schorzeń u kobiet w ciąży.
Warianty regionu Fc ze zmienionym powinowactwem wiązania do FcRn obejmują te zawierające modyfikację aminokwasową regionu Fc dowolnej jednej lub więcej pozycji aminokwasowych 238, 252, 253, 254, 255, 256, 265, 272, 286, 288, 303, 305, 307, 309, 311, 312, 317, 340, 356, 360, 362, 376, 378, 380, 382, 386, 388, 400, 413, 415, 424, 433, 434, 435, 436, 439 lub 447. Te, które wykazują zmniejszone wiązanie do FcRn będą na ogół zawierały modyfikację aminokwasową regionu Fc w dowolnej jednej lub więcej pozycji aminokwasów 252, 253, 254, 255, 288, 309, 386, 388, 400, 415, 433, 435, 436, 439 lub 447; a te ze zwiększonym wiązaniem do FcRn będą zazwyczaj zawierały modyfikację aminokwasową regionu Fc w dowolnej jednej lub więcej pozycji aminokwasowych 238, 256, 265, 272, 286, 303, 305, 307, 311, 312, 317, 340, 356, 360, 362, 376, 378, 380, 382, 413, 424 lub 434.
Wariant(y) polipeptydu wytworzone jak opisano powyżej mogą być poddane dalszym modyfikacjom, często w zależności od przeznaczonego zastosowania polipeptydu. Takie modyfikacje mogą obejmować dalsze zmiany sekwencji aminokwasu (podstawienie, insercja i/lub delecja reszt aminokwasowych), fuzję z heterologicznym polipeptydem(ami) i/lub modyfikacje kowalencyjne. Takie „dalsze modyfikacje” mogą być przeprowadzone przed, równocześnie z lub po modyfikacji aminokwasowej(ych) ujawnionych powyżej, które powodują zmianę wiązania receptora Fc i/lub aktywności ADCC. W jednym z wykonań można połączyć tu podane modyfikacje w regionie Fc z podstawieniami w regionie Fc ujawnionymi w cytowanych odnośnikach w części „Dziedziny pokrewne” tego zgłoszenia.
Alternatywnie lub dodatkowo, może być przydatne połączenie powyższych modyfikacji aminokwasowych z jedną lub więcej modyfikacjami aminokwasowymi, które zmieniają wiązanie Clq i/lub funkcję cytotoksyczności zależnej od dopełniacza regionu Fc.
Wyjściowy polipeptyd będący przedmiotem szczególnego zainteresowania jest zazwyczaj tym, który wiąże Clq i wykazuje cytotoksyczność zależną od dopełniacza (CDC). Dalsze podstawienia aminokwasowe tu opisane będą na ogół służyły do zmiany wyjściowego polipeptydu do wiązania Clq i/lub modyfikowania jego funkcji cytotoksyczności zależnej od dopełniacza, np. zmniejszenie i korzystnie zniesienie tych funkcji efektorowych. Jednak rozważane są tu polipeptydy zawierające podstawienia w jednej lub więcej z opisanych pozycji z polepszonym wiązaniem Clq i/lub funkcją cytotoksyczności zależną od dopełniacza (CDC). Na przykład, wyjściowy polipeptyd może nie być zdolny do wiązania Clq i/lub pośredniczeniu w CDC i może być modyfikowany zależnie od nauk tu podanych tak, że nabiera tych dalszych funkcji efektorowych. Co więcej, polipeptydy z uprzednio istniejącą zdolnością wiązania Clq dowolnie dalej mające zdolność do brania udziału w CDC mogą być modyfikowane tak, że jedna lub obie z tych aktywności są zwiększone.
Aby wytworzyć region Fc ze zmienionym wiązaniem Clq i/lub funkcją cytotoksyczności zależną od dopełniacza (CDC) pozycje aminokwasowe do modyfikowania są na ogół wybierane z pozycji łańcucha ciężkiego 270, 322, 326, 327, 329, 331, 333 i 334, gdzie numerowanie reszt łańcucha ciężkiego IgG jest tym podanym w indeksie EU jak w Kabat i wsp., Sequences of Proteins of Immunological Interest, wyd. 5 Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, MD (1991). W jednym z wykonań tylko jedna z ośmiu zidentyfikowanych powyżej pozycji jest zmieniona aby wytworzyć wariantowy region polipeptydu ze zmienionym wiązaniem Clq i/lub funkcją cytotoksyczność zależną od dopełniacza (CDC).
Korzystnie, tylko reszta 270, 329 lub 322 jest zmieniona w tym przypadku. Alternatywnie, dwie lub więcej z pozycji zidentyfikowanych m powyżej są zmodyfikowane. Jeśli podstawienia mają być łączone, na ogół podstawienia, które zwiększają wiązanie ludzkiego Clq (np. w resztach w pozycjach
PL 213 948 B1
326, 327, 333 i 334) lub te, które zmniejszają wiązanie ludzkiego Clq (np. w resztach w pozycjach 270, 322, 329 i 331) są łączone. W tym ostatnim wykonaniu wszystkie cztery pozycje (tzn. 270, 322, 329 i 331) mogą być podstawione.
Korzystnie, dalsze podstawienia w dwóch, trzech lub wszystkich pozycjach 326, 327, 333 lub 334 są łączone, dowolnie z innymi podstawieniami regionu Fc aby wytworzyć polipeptyd ze zwiększonym wiązaniem ludzkiego Clq i korzystnie zwiększoną aktywnością CDC in vitro lub in vivo.
Prolina jest konserwowana w pozycji 329 w ludzkich IgG. Ta reszta jest korzystnie zastępowana alaniną, jednak podstawienie dowolnym innym aminokwasem jest rozważane, np. seryną, treoniną, asparaginą, glicyną lub waliną.
Prolina jest konserwowana w pozycji 331 w ludzkiej IgG1, IgG2 i IgG3, ale nie TgG4 (która ma resztę seryny w pozycji 331). Reszta 331 jest korzystnie zastępowana przez alaninę lub inny aminokwas, np. serynę (dla regionów IgG innych niż IgG4), glicynę lub walinę.
Lizyna 322 jest konserwowana w ludzkich IgG i ta reszta jest korzystnie zastępowana przez resztę alaniny, ale rozważa się podstawienie dowolną inną resztą aminokwasy np. seryna, treonina, glicyna lub walina.
D270 jest konserwowana w ludzkich IgG i ta reszta może być zastąpiona przez inną resztę aminokwasu np. alanina, seryna, treonina, glicyna, walina lub lizyna.
K326 jest też konserwowana w ludzkich IgG. Ta reszta może być podstawiona przez inną resztę włączając, w to między innymi, walinę, kwas glutaminowy, alaninę, glicynę, kwas asparaginowy, metioninę lub tryptofan, przy czym tryptofan jest korzystny.
Podobnie, E333 jest też konserwowana w ludzkich IgG. E333 jest korzystnie zastępowana przez resztę aminokwasową z mniejszą objętością łańcucha bocznego, taką jak walina, glicyna, alanina lub seryna, przy czym seryna jest korzystna.
K334 jest konserwowana w ludzkich IgG i może być podstawiona przez inną resztę taką jak alanina lub inna reszta.
W ludzkiej IgG1 i IgG3, resztą 327 jest alanina. Aby wytworzyć wariant ze zwiększonym wiązaniem Clq, tę alaninę można podstawić inną resztą taką jak glicyna. W IgG2 i IgG4, resztą 327 jest glicyna i to może być zastąpione przez alaninę (lub inną resztę) aby zmniejszyć wiązanie Clq.
Jak ujawniono powyżej, można zaprojektować region Fc ze zmienioną funkcją efektorową np. przez modyfikację wiązania Clq i/lub wiązania FcR w ten sposób zmieniając aktywność CDC i/lub aktywność ADCC. Na przykład, można wytworzyć wariant regionu Fc ze zwiększonym wiązaniem Clq i zwiększonym wiązaniem FcyRIII np. mającym zarówno zwiększoną aktywność ADCC i zwiększoną aktywność CDC. Alternatywnie, gdy pożądane jest zmniejszenie lub usunięcie funkcji efektorowej można skonstruować wariant region Fc ze zmniejszoną aktywnością CDC i/lub zmniejszoną aktywnością ADCC. W innych wykonaniach można zwiększyć tylko jedną z tych aktywności i dowolnie także zmniejszyć drugą aktywność np. aby wytworzyć wariant regionu Fc ze zwiększoną aktywnością ADCC, ale zmniejszoną aktywnością CDC i vice versa.
Pod względem dalszych zmian sekwencji aminokwasów, dowolna reszta cysteiny nie biorąca udziału w utrzymywaniu właściwej konformacji wariantu polipeptydu może być także podstawiona, na ogół seryną aby poprawić stabilność oksydacyjną cząsteczki i zapobiec błędnemu wiązaniu krzyżowemu.
Inny typ podstawienia aminokwasu służy do zmiany wzoru glikozylacji polipeptydu. Można to uzyskać przez delecję jednej lub więcej reszt węglowodanowych znajdowanych w polipeptydzie i/lub dodanie jednego lub więcej miejsca glikozylacji, które nie są obecne w polipeptydzie. Glikozylacja polipeptydów jest typowo albo jako połączenie przez N albo połączenie przez O. Połączenie przez z N dotyczy przyłączenia reszty węglowodanu do łańcucha bocznego reszty asparaginy. Sekwencja tripeptydu asparagina-X-seryna i asparagina-X-treonina, gdzie X jest dowolnym aminokwasem z wyjątkiem proliny są miejscami rozpoznawania przyłączania enzymatycznego reszty węglowodanu do łańcucha bocznego asparaginy. Tak więc, obecność dowolnej z tych sekwencji tripeptydu w polipeptydzie tworzy potencjalne miejsce glikozylacji. Glikozylacja poprzez O dotyczy przyłączenia jednego z cukrów N-acetylogalaktozaminy, galaktozy lub ksylozy do hydroksyaminokwasu, najczęściej seryny lub treoniny, choć 5-hydroksyprolina lub 5-hydroksylizyna może być też stosowana. Dodanie miejsc glikozylacji do polipeptydu jest dogodnie przeprowadzane przez zmianę sekwencji aminokwasów tak, że zawiera jedną lub więcej z opisanych powyżej sekwencji tripeptydów (dla glikozylacji związanej z N). Ta zmiana może być przeprowadzona przez dodatek lub podstawienie przez jedna lub więcej reszt
PL 213 948 B1 seryny lub treonina do sekwencji oryginalnego polipeptydu (dla miejsc glikozylacji związanych z O). Przykładowy wariant glikozylacji ma podstawienie aminokwasu reszty Asn 297 łańcucha ciężkiego.
Co więcej klasa, podklasa lub allotyp regionu Fc może być zmieniony przez jedno lub więcej kolejnych podstawień aminokwasowych aby wytworzyć region Fc z sekwencją aminokwasową bardziej homologiczną do innej klasy, podklasy lub allotypu w zależności od potrzeby. Mysi region Fc może być zmieniony aby wytworzyć sekwencję aminokwasową bardziej homologiczną do ludzkiego region Fc; ludzki nie będący allotypem A IgG1 region Fc może być zmodyfikowany aby uzyskać allotyp A IgG1 ludzkiego regionu etc. W jednym z wykonań modyfikacje aminowe tu podane, które zmieniają wiązanie FcR i/lub aktywność ADCC są dokonywane w domenie CH2 regionu Fc i domenę CH3 usuwa się lub zastępuje inną domeną dimerizacji. Korzystnie jednak zatrzymuje się domenę CH3 (poza obecnymi w niej modyfikacjami aminokwasowymi, które zmieniają funkcje efektorowe, jak tu ujawniono).
Glikoproteina wytworzona jak opisano powyżej może być poddana dalszym modyfikacjom, często zależnie od planowanego zastosowania glikoproteiny. Takie modyfikacje mogą obejmować dalsze zmiany sekwencji aminokwasów (podstawienie, insercja i/lub deleeja reszt aminokwasowych), fuzję z heterologicznym polipeptydem(ami) i/lub modyfikacje kowalencyjne.
Inny typ podstawienia aminokwasowego służy do zmiany wzoru glikozylacji glikoproteiny. Takie warianty glikozylacji mogą być dodatkowe oprócz wariantów glikozylacji pod względem braku fukozy tu opisanych i mogą być uzyskane przez delecję jednej lub więcej grup węglowodanowych spotykanych w glikoproteinie, i/lub dodanie jednego lub więcej miejsc glikozylacji, które nie są obecne w glikoproteinie. Glikozylacja glikoprotein jest typowo poprzezz N albo poprzez O. Połączenie poprzez N dotyczy przyłączenia reszty węglowodanu do bocznego łańcucha reszty asparaginy. Sekwencje tripeptydu asparagina-X-seryna i asparagina-X-treonina, gdzie X jest dowolnym aminokwasem z wyjątkiem proliny są miejscami rozpoznawania do przyłączania enzymatycznego reszty węglowodanu do bocznego łańcucha asparaginy. Tak więc, obecność dowolnej z tych sekwencji tripeptydów w glikoproteinie tworzy potencjalne miejsce glikozylacji. Glikozylacja poprzez O dotyczy przyłączenia jednego z cukrów, N-acetylogalaktozominy, galaktozy lub ksylozy do hydroksyaminokwasu, najczęściej seryny lub treoniny, choć 5-hydroksyprolina lub 5-hydroksylizyna mogą być także stosowane. Dodanie miejsc glikozylacji do glikoproteiny dogodnie przeprowadza się przez zmianę sekwencji aminokwasów tak, że zawiera ona jedną lub więcej z opisanych powyższej sekwencji tripeptydu (dla miejsca z wiązanego z miejscem N-glikozylacji). Zmiana może być też przeprowadzona przez dodanie lub podstawienie jednej lub więcej reszt seryny lub treoniny do sekwencji oryginalnej glikoproteiny (dla miejsc glikozylacji poprzez O).
B. Badanie aktywności biologicznej
Wariant glikoproteiny może być poddany jednemu lub więcej oznaczeniom aby ocenić ewentualne zmiany aktywności biologicznej w porównaniu z polipeptydem wyjściowym.
Korzystne jest, jeżeli wariant glikoproteiny zasadniczo zachowuje zdolność wiązania antygenu w porównaniu z peptydem nie będącym wariantem tzn. zdolność wiązania jest słabsza mniej niż 20-krotnie, np. jest słabsza nie więcej niż 5-krotnie niż polipeptydu nie będącego wariantem. Zdolność wiązania wariantu polipeptydu można oznaczyć stosując techniki, takie jak na przykład analiza sortowania komórek aktywowanego fluorescencją (FACS) lub radioimmunoprecypitacja (RIA).
Można ocenić zdolność wariantu glikoproteiny do wiązania FcR. Gdy FcR jest receptorem Fc o wysokim powinowactwie, takim jak FcyRI, FcRn, FcyRIIB lub FcyRIIIA, wiązanie można mierzyć przez miareczkowanie wariantu monomerycznej glikoproteiny i pomiar związanego wariantu glikoproteiny stosując przeciwciało, które specyficznie wiąże wariant glikoproteiny w standardowym formacie ELISA (patrz przykłady poniżej). Inne oznaczenie wiązania FcR dla FcR z niskim powinowactwem jest opisane w WO nr 00/42072 (Presta) i patencie USA nr 6 242 195 B1.
Aby ocenić aktywność ADCC wariantu glikoproteiny w oznaczeniu in vitro można przeprowadzić oznaczenie ADCC stosując zmienne stosunki efektor:cel. Przydatne „komórki efektorowe” do takich oznaczeń obejmują jednojądrzaste komórki krwi obwodowej (PBMC) i komórki naturalnych zabójców (NK). Alternatywnie lub dodatkowo aktywność ADCC wariantu glikoproteiny można oszacować in vivo, np. w modelu zwierzęcym, takim jak ujawniono w Clynes i wsp. PNAS (USA) 95: 652-656
Można ocenić zdolność wariantu do wiązania Clq i brania udziału w cytotoksyczności zależnej od dopełniacza (CDC).
Aby oznaczyć wiązanie Clq można przeprowadzić ELISA wiązania Clq. Pokrótce, płytki do oznaczeń można powlec przez noc w 4°C wariantem glikoproteiny lub wyjściowym polipeptydem (kontrola) w buforze do powlekania. Płytki można następnie przepłukać i zablokować. Po płukaniu do każ34
PL 213 948 B1 dej studzienki można dodać próbkę ludzkiego Clq i inkubować przez 2 godz. w temperaturze pokojowej. Po dalszym płukaniu do każdej studzienki można dodać 100 μl przeciwciała Clq skoniugowanego z peroksydazą przeciw dopełniaczowi i inkubować przez 1 godzinę w temperaturze pokojowej. Płytki można ponownie płukać buforem do płukania i do każdej studzienki można dodać 100 μl buforu substratu zawierającego OPD (dichlorowodorek O-fenylenodiaminy (Sigma)). Reakcja utleniania, obserwowana przez pojawianie się żółtej barwy, może przebiegać przez 30 minut i można ją zahamować przez dodanie 100 μl 4,5 N H2SO4. Wówczas można odczytać absorbancję przy (492--405) nm.
Przykładowym wariantem glikoproteiny jest taki, który wykazuje „znaczące obniżenie wiązania Clq” w tym oznaczeniu. To oznacza, że około 100 μg/ml wariantu glikoproteiny wykazuje zmniejszenie około 50-krotne lub większe wiązania Clq w porównaniu ze 100 μg/ml kontrolnego przeciwciała mającego niezmutowany reqion Fc IgG1. W najbardziej korzystnym wykonaniu wariant glikoproteiny „nie wiąże Clq”, tzn. 100 μg/ml wariantu glikoproteiny wykazuje około 100-krotne lub większe zmniejszenie wiązania Clq w porównaniu z 100 μg/ml przeciwciała kontrolnego.
Inny przykładowy wariant to taki, który ma „lepsze powinowactwo wiązania do ludzkiego Clq niż wyjściowy polipeptyd”. Taka cząsteczka może na przykład, wykazywać poprawę dwukrotną lub większą, a korzystnie pięciokrotną lub większą wiązania ludzkiego Clq w porównaniu z wyjściowym polipeptydem (np. przy wartościach IC50 dla tych dwóch cząsteczek). Na przykład, wiązanie ludzkiego Clq może być około dwukrotnie do około 500-krotne, a korzystnie od około dwukrotnie do około pięciokrotnie do około 1000-krotnie poprawione w porównaniu z wyjściowym polipeptydem.
Aby zbadać aktywację dopełniacza, można przeprowadzić oznaczenie cytotoksyczności zależnej od dopełniacza np. jak opisano w Gazzano-Santoro i wsp., J. Immunol. Methods 202: 163 (1996). Pokrótce, różne stężenia wariantu glikoproteiny i ludzki dopełniacz mogą być rozcieńczone buforem. Komórki, które wyrażają antygen, z którym wiąże się wariant glikoproteiny mogą być rozcieńczone do ~ 1 x 106 komórek/ml. Mieszaniny wariantu glikoproteiny, rozcieńczonego ludzkiego dopełniacza i komórek wyrażających antygen można dodać do płytki z 96-płaskodennymi studzienkami i inkubować przez 2 godz. w 37°C i 5% CO2 aby ułatwić lizę komórek z udziałem dopełniacza. Następnie do każdej studzienki można dodać 50 ml błękitu alamar (Accumed International) i inkubować przez noc w 37°C. Absorbancję mierzy się stosując 96-studzienkowy fluorymetr ze wzbudzeniem przy 530 nm i emisji przy 590 nm. Wyniki można wyrazić jako jednostki względnej fluorescencji (relative fluorescence units (RFU)). Stężenia próbki można wyliczyć z krzywej standartowej i podaje się procent aktywności dla wariantu glikoproteiny będącego przedmiotem zainteresowania w porównaniu z polipeptydem nie będącym wariantem.
Jeszcze inny przykładowy wariant „nie aktywuje dopełniacza”. Na przykład, 0,6 μg/ml wariantu glikoproteiny wykazuje około 0-10% aktywności CDC w tym oznaczeniu w porównaniu z 0,6 μg/ml kontrolnego przeciwciała mającego niezmutowany region Fc IgG1. Korzystnie, wariant nie wydaje się mieć żadnej aktywności CDC w powyższym oznaczeniu CDC.
Glikoproteina może być taką, która wykazuje zwiększony CDC w porównaniu z wyjściowym polipeptydem, np. wykazując około dwukrotne do około 100-krotnego zwiększenie aktywności CDC in vitro lub in vivo (np. przy porównywaniu wartości IC50 dla każdej cząsteczki).
Warianty regionu Fc ze zmienionym powinowactwem wiązania dla receptora noworodkowego (FcRn) są tu także rozważane. Oczekuje się, że warianty regionu Fc ze zwiększonym powinowactwem do FcRn będą miały dłuższe okresy półtrwania w surowicy i takie cząsteczki będą miały użyteczne zastosowania w metodach leczenia ssaków, gdy pożądany jest długi okres półtrwania podawanej glikoproteiny, np. by leczyć przewlekła chorobę lub schorzenie. Przeciwne, oczekuje się, że warianty regionu Fc ze zmniejszonym powinowactwem wiązania do FcRn będą miały krótsze okresy półtrwania i takie cząsteczki mogą, na przykład, być podawane ssakowi gdy krótszy czas w krążeniu może być korzystny, np. dla obrazowania diagnostycznego lub dla polipeptydów, które mają toksyczne efekty uboczne gdy krążą w krwiobiegu przez przedłużone okresy czasu itd. Oczekuje się, że warianty regionu Fc ze zmniejszonym powinowactwem wiązania do FcRn mają mniejszą szansę przechodzenia przez łożysko i mogą więc być stosowane w leczeniu chorób lub zaburzeń u kobiet w ciąży.
C. Wytwarzanie przeciwciał
W korzystnym wykonaniu wynalazku, glikoproteiną, która jest zmodyfikowana według nauk tego wynalazku jest przeciwciało. Techniki wytwarzania przeciwciał są jak następuje:
(i) Wybór i wytwarzanie antygenu
Tam gdzie glikoproteiną jest przeciwciało, jest ono skierowane przeciw antygenowi będącemu przedmiotem zainteresowania. Korzystne jest, jeżeli jest ważną biologicznie glikoproteiną i podawanie
PL 213 948 B1 przeciwciała ssakowi cierpiącemu z powodu choroby albo schorzenia może prowadzić do korzyści terapeutycznej u ssaka. Jednakże, przeciwciała skierowane przeciw antygenom niepolipeptydowym (takim jak związane z nowotworem antygeny glikolipidowe; patrz patent USA nr 5 091 178) są również brane pod uwagę.
Tam, gdzie antygenem jest polipeptyd, może to być cząsteczka transbłonowa (np. receptor) albo ligand, taki jak czynnik wzrostu. Przykładowe antygeny obejmują cząsteczki takie jak renina; hormon wzrostu, włączając w to ludzki hormon wzrostu i bydlęcy hormon wzrostu; czynnik uwalniający hormon wzrostu; hormon przytarczycy; tyroksyna; lipoproteiny; alfa-1-antytrypsyna; łańcuch A insuliny; łańcuch B insuliny; proinsulina; hormon folikulotropowy; kalcytonina; hormon luteinizujący; glukagon; czynniki krzepnięcia, takie jak czynnik VIIIC, czynnik IX, czynnik tkankowy (TF) i czynnik von Wiłlebranda; czynnik przeciw-krzepnięciu, taki jak Białko C; przedsionkowy czynnik wydalania sodu z moczem; czynnik powierzchniowo czynny płuc; aktywator plazminogenu, taki jak aktywator plazminogenu urokinazowy albo z ludzkiego moczu albo typu tkankowego (t-PA); bombezyna; trombina; krwiotwórczy czynnik wzrostowy; czynnik martwicy nowotworów alfa i beta; enkefalinaza; RANTES (ang. regulated on activation normally T-cell expressed and secreted, regulowany przy aktywacji, normalnie wyrażany i wydzielany przez komórki T); ludzkie makrofagowe białko zapalne (MIP-1-alfa, ang. macrophage inflammatory protein); albumina z surowicy, taka jak ludzka albumin z surowicy; substancja hamująca Mullerian; łańcuch A relaksyny; łańcuch B relaksyny; prorelaksyna; mysi peptyd związany z gonadotropiną; białko bakteryjne, takie jak beta-laktamaza; DNaza; IgE; antygen związany z cytotoksycznymi limfocytami T (CTLA, ang. cytotoxic T-lymphocyte associated antygen), taki jak CTLA-4; inhibina; aktywina; naczyniowy śródbłonkowy czynnik wzrostowy (VEGF, ang. vascular endothelial growth factor); receptory hormonów lub czynników wzrostowych; białko A lub D; czynniki reumatoidalne; czynnik neurotropowy, taki jak czynnik neurotropowy pochodzący z kości (BDNF, ang. bonederived neurotrophic factor), neurotrofina-3, -4, -5 lub -6 (NT-3, NT-4, NT-5 lub NT-6) albo czynnik wzrostu nerwów, taki jak NGF-β; czynnik wzrostowy pochodzący z płytek krwi (PDGF, ang. plateletderived growth factor); fibroblastowy czynnik wzrostowy taki jak aFGF i bFGF; naskórkowy czynnik wzrostowy (EGF); transformujący czynnik wzrostowy (TGF), taki jak TGF-alfa i TGF-beta, włączając w to TGF^1, TGF-2, TGF3, TGF- β4 lub TGF^5; czynnik wzrostowy insulino-podobny I i II (IGF-I i IGF-II); des(1-3)-IGF-I (mózgowy IGF-I), białka wiążące czynnik wzrostowy insulino-podobny; białka CD, takie jak CD3, CD4, CD8, CD19, CD20 i CD25 (podjednostka Tac receptora IL-2); erytropoetyna; czynniki osteoinduktywne; immunotoksyny; białko morfogenetyczne kości (BMP, ang. bone morphogenetic protein); interferony, takie jak interferon -alfa, -beta i -gamma; czynniki stymulujące klonie (CSF), np. M-CSF, GM-CSF i G-CSF; interleukiny (IL), np., IL-1, IL-2, IL-3, IL-4, IL-5, IL-6, IL-7, IL-8, IL-9 i IL-10; dysmutaza ponadtlenkowa; receptory komórek T; powierzchniowe białka błonowe; czynnik przyśpieszający rozkład; antygen wirusowy, taki jak na przykład, część otoczki AIDS; białka transportowe; receptory zasiedlania; adresyny; białka regulacyjne; integryny, takie jak CD11a, CD11b, CD11c, CD18 oraz ICAM, VLA-4 lub VCAM; antygen związany z nowotworem, taki jak receptor HER2, HER3 lub HER4; oraz fragmenty dowolnego z wymienionych powyżej polipeptydów.
Przykładowe cząsteczki docelowe dla przeciwciał objętych niniejszym wynalazkiem obejmują markery powierzchniowe albo białka CD, takie jak CD3, CD4, CD8, CD19, CD20, CD22, CD34 i CD40; członków rodziny receptora ErbB, takich jak receptor EGF, receptor HER2, receptor HER3 lub receptor HER4; antygen specyficzny dla komórek macierzystych prostaty (PSCA); cząsteczki adhezji komórkowej, takie jak LFA-1, Mac1, pl50.95, VLA-4, ICAM-1, VCAM, integryna α4/β7 i integryna αν/β3, włączając w to jej podjednostki α lub β (np. przeciwciała anty-CD11a, anty-CD18 lub anty-CD11b); czynniki wzrostowe, takie jak VEGF; czynnik tkankowy (TF, ang. tissue factor); interferon alfa (α-IFN); interleukina, taka jak IL-8; IgE; antygeny grupy krwi; receptor flk2/flt3; receptor otyłości (OB); receptor mpl; CTLA-4; białko C, itd.
Rozpuszczalne antygeny lub ich fragmenty, ewentualnie połączone z innymi cząsteczkami, można zastosować jako immunogeny do wytwarzania przeciwciał. Dla cząsteczek transbłonowych, takich jak receptory, jako immunogen można użyć ich fragmenty (np. zewnątrzkomórkową domenę receptora). Alternatywnie, jako immunogen można użyć komórki wyrażające cząsteczkę transbłonową. Takie komórki mogą pochodzić ze źródła naturalnego (np. nowotworowych linii komórkowych) albo mogą być komórkami, które zostały stransformowane technikami rekombinowania DNA w celu uzyskania ekspresji cząsteczki transbłonowej. Inne antygeny i ich postaci przydatne do wytwarzania przeciwciał będą oczywiste dla specjalistów w tej dziedzinie.
PL 213 948 B1 (ii) Przeciwciała poliklonalne
Przeciwciała poliklonalne korzystnie wzbudza się w zwierzętach poprzez wielokrotne podskórne (sc) albo dootrzewnowe (ip) wstrzyknięcie odpowiedniego antygenu i adiuwanta. Może być przydatne sprzężenie odpowiedniego antygenu z białkiem, które jest immunogenne w gatunkach, które mają być immunizowane, np. hemocyjaniną ze skałoczepa, albuminą z surowicy, wołową tyroglobuliną albo inhibitorem trypsyny z ziaren soi, stosując czynnik bifunkcjonalny albo derywatyzujący, na przykład ester maleimidobenzoylosulfosukcynoimidowy (sprzężenie poprzez reszty cysteinowe), N-hydroksysukcynimid (poprzez reszty lizyowe), glutaraldehyd, bezwodnik bursztynianowy, SOCl2 lub
R1N=C=NR, gdzie R i R1 są różnymi grupami alkilowymi.
Zwierzęta immunizuje się przeciw antygenowi, immunogennym koniugatom albo pochodnym poprzez zmieszanie np. 100 μg lub 5 μg białka albo koniugatu (dla królików i myszy, odpowiednio) z 3 objętościami kompletnego adiuwanta Freunda i wstrzykniecie roztworu doskórne w wielu miejscach. Miesiąc później zwierzętom podaje się dawkę przypominającą wstrzykując doskórnie w wielu miejscach 1/5 do 1/10 wyjściowej ilości peptydu albo koniugatu w kompletnym adiuwancie Freunda. Siedem do 14 dni później zwierzęta skrwawia się i surowice testuje pod kątem miana przeciwciała. Zwierzętom podaje się dawki przypominające aż do osiągnięcia plateau. Korzystne jest, jeżeli zwierzętom podaje się dawkę przypominającą z koniugatem tego samego antygenu, ale sprzężonym z różnymi białkami i/lub poprzez inny czynnik łączący krzyżowo. Koniugaty można również wytwarzać w zrekombinowanych hodowlach komórkowych jako fuzje białkowe. Ponadto, czynniki agregujące, takie jak ałun są odpowiednie do zastosowania do wzmacniania odpowiedzi immunologicznej.
(ii) Przeciwciała monoklonalne
Przeciwciała monoklonalne można wytworzyć stosując metodę hybrydom opisaną po raz pierwszy przez Kohler i wsp., Nature, 256: 495 (1975) albo można wytwarzać metodami rekombinowania DNA (patent USA nr 4 816 567).
W metodzie hybrydomy, mysz albo inne odpowiednie zwierzę będące gospodarzem, takie jak chomik, immunizuje się jak opisano powyżej w celu wzbudzenia limfocytów, które wytwarzają albo są zdolne do wytwarzania przeciwciał wiążących się specyficznie z białkiem zastosowanym do immunizacji. Alternatywnie, limfocyty można immunizować in vitro. Limfocyty można następnie poddać fuzji z komórkami szpiczaka stosując odpowiedni czynnik powodujący fuzję, taki jak glikol polietylenowy, do wytwarzania komórek hybrydomy (Goding, Monoclonal Antybodies: Principles and Practice, str. 59-103 (Academic Press, 1986).
Utworzone w ten sposób komórki hybrydomy wysiewa się i hoduje na odpowiedniej pożywce hodowlanej, która korzystnie zawiera jedną albo większą liczbę substancji, które hamują wzrost i przeżycie nie poddanych fuzji rodzicielskich komórek szpiczaka. Przykładowo, jeśli w rodzicielskim szpiczaku brak jest enzymu fosforybozylotransferazy hipokantyno-guaninowej (HGPRT lub HPRT), pożywka hodowlana dla hybrydom zwykle zawiera hipoksantynę, aminopterynę oraz tymidynę (pożywka HAT), które to substancje zapobiegają wzrostowi komórek z brakiem HGPRT.
Korzystnymi komórkami szpiczaka są takie, które podlegają fuzji wydajnie, utrzymują stabilny poziom wytwarzania przeciwciała przez wybrane komórki wytwarzające przeciwciało i są wrażliwe na pożywkę, taką jak HAT. Wśród nich, korzystnymi liniami komórkowymi szpiczaka są linie mysiego szpiczaka, takie jak te pochodzące z mysich nowotworów MOPC-21 i MPC-11 dostępne z Salk Institute Cell Distribution Center, San Diego, California USA oraz komórki SP-2 lub X63-Ag8-653 dostępne z American Type Culture Collection, Rockville, Maryland USA. Zostały również opisane komórki ludzkiego szpiczaka i linie komórkowe mysio-ludzkiego heretoszpiczaka do wytwarzania ludzkich przeciwciał monoklonalnych (Kozbor, J. Immunol., 133: 3001 (1984) oraz Brodeur i wsp., Monoclonal Antybody Production Techniques and Applications, str. 51-63 (Marcel Dekker, Inc., New York, 1987)).
Pożywki hodowlane, w których hoduje się komórki, testuje się pod kątem wytwarzania przeciwciał monoklonalnych skierowanych wobec antygenu. Korzystne jest, jeżeli specyficzność wiązania przeciwciał monoklonalnych wytwarzanych przez komórki hybrydomy określa się poprzez immunoprecypitację albo test wiązania in vitro, taki jak test radioimmunologiczny (RIA) albo enzymatyczny test immunosorpcyjny (ELISA).
Po zidentyfikowaniu komórek hybrydomy, które wytwarzają przeciwciała o pożądanej specyficzności, powinowactwie i/lub aktywności, klon można subklonować poprzez procedurę ograniczonych rozciehczeń i hodować według standardowych metod (Goding, Monoclonal Antybodies: Principles and
Practice, str. 59-103 (Academic Press, 1986). Odpowiednie pożywki hodowlane do tych celów obejPL 213 948 B1 mują na przykład pożywkę, D-MEM lub pożywkę RPMI-1640. Ponadto, komórki hybrydomy można hodować in vivo w nowotworach puchlinowych u zwierząt.
Przeciwciała monoklonalne wydzielane przez subklony dogodnie jest wydzielać z pożywki hodowlanej, płynów puchlinowych albo surowicy poprzez konwencjonalne procedury oczyszczania przeciwciał, takie jak na przykład chromatografia na białku A-sefarozie, hydroksyloapatycie, elektroforeza w żelu, dializa albo chromatografia powinowactwa.
DNA kodujący przeciwciała monoklonalne można łatwo wyizolować i zsekwencjonować stosując konwencjonalne procedury (np. poprzez zastosowanie sond oligonukleotydowych, które mają zdolność wiązania się specyficznie z genami kodującymi lekkie i ciężkie łańcuchy mysich przeciwciał). Komórki hybrydomy służą jako korzystne źródło takiego DNA. Po wyizolowaniu, DNA można umieszczać w wektorach ekspresyjnych, które transfekuje się następnie do komórek gospodarza, takich jak komórki E. coli, małpie komórki COS, komórki jajnika chomika chińskiego (ang. Chinese Hamster Ovary, CHO) lub komórki szpiczaka, które w innym przypadku nie wytwarzają przeciwciała, w celu otrzymania syntezy przeciwciał monoklonalnych w zrekombinowanych komórkach gospodarza. Artykuły przeglądowe na temat rekombinowanej ekspresji w bakteriach DNA kodującego przeciwciała obejmują Skerra i wsp., Curr. Opinion in Immunol, 5: 256-262 (1993) oraz Pluckthun, Immunol. Revs., 130: 151-188 (1992). Rekombinowana ekspresja przeciwciał jest opisana bardziej szczegółowo poniżej.
W dalszym wykonaniu, przeciwciała monoklonalne albo fragmenty przeciwciał można izolować z przeciwciałowych bibliotek fagowych wytworzonych przy zastosowaniu technik opisanych w McCafferty i wsp., Nature, 348: 552-554 (1990). Clackson i wsp., Nature, 352: 624-628 (1991) oraz Marks i wsp., J. Mol. Biol, 222: 581-597 (1991) opisują izolację przeciwciał mysich i ludzkich, odpowiednio, przy zastosowaniu bibliotek fagowych. Kolejne publikacje opisują wytwarzanie ludzkich przeciwciał o wysokim powinowactwie (rzędu nM) poprzez tasowanie łańcuchów (Marks i wsp., Bio/Technology, 10: 779-783 (1992)), jak również kombinatoryczną infekcję i rekombinację in vivo jako strategię konstruowania bardzo dużych bibliotek fagowych (Waterhouse i wsp., Nuc. Acids. Res., 21: 2265-2266 (1993)). A zatem techniki te stanowią atrakcyjną alternatywę wobec tradycyjnych technik hybrydom monoklonalnych przeciwciał do izolacji przeciwciał monoklonalnych.
DNA można również modyfikować, na przykład poprzez podstawienie sekwencji kodującej domen stałych ludzkiego łańcucha ciężkiego i lekkiego w miejsce homologicznych sekwencji mysich (patent USA nr 4 816 567 oraz Morrison i wsp., Proc. Natl Acad. Sci. USA, 81: 6851 (1984)) albo poprzez połączenie kowalencyjne sekwencji kodujących immunoglobulinę, całych albo części, z sekwencją kodującą polipeptydu innego niż immunoglobulina.
Typowo, takim polipeptydem innym niż immunoglobulina zastępuje się domeny regionu stałego przeciwciała albo zastępuje się zmienne miejsca wiązania antygenu w celu wytworzenia chimerowego dwuwartościowego przeciwciała zawierającego jedno miejsce wiązania antygenu mające specyficzność wobec antygenu i inne miejsce wiążące antygen mające specyficzność wobec odmiennego antygenu.
(iv) Przeciwciała humanizowane i ludzkie
Przeciwciało humanizowane ma wprowadzoną jedną albo większą liczbę reszt aminokwasowych ze źródła innego niż człowiek. Te nie-ludzkie reszty aminokwasowe są często określane jako reszty „zaimportowane”, które są typowo wzięte z „zaimportowanej” domeny zmiennej. Humanizację można zasadniczo przeprowadzić według metody Winter i współpracowników (Jones i wsp., Nature, 321: 522-525 (1986); Riechmann i wsp., Nature, 332: 323-327 (1988); Verhoeyen i wsp., Science, 239: 1534-1536 (1988)), poprzez zastąpienie sekwencji jednego lub więcej CDR gryzoni odpowiadającymi im sekwencjami przeciwciała ludzkiego. A zatem, takimi przeciwciałami „humanizowanymi” są przeciwciała chimerowe (patent USA nr 4 816 567), gdzie zasadniczo mniej niż nienaruszona ludzka domena zmienna została zastąpiona odpowiednią sekwencją z gatunku innego niż człowiek. W praktyce, przeciwciałami humanizowanymi są typowo przeciwciała ludzkie, w których niektóre reszty z regionu hiperzmiennego i możliwe że niektóre reszty FR są zastąpione resztami z analogicznych miejsc w przeciwciałach gryzoni.
Wybór ludzkich domen zmiennych, zarówno lekkiej, jak i ciężkiej, która ma być zastosowana do wytwarzania humanizowanych przeciwciał jest bardzo ważna dla zmniejszenia antygenności. Według tak zwanej metody „najlepszego dopasowania” sekwencje domeny zmiennej przeciwciała gryzonia przeszukuje się wobec całej biblioteki znanych ludzkich sekwencji ludzkiej domeny zmiennej. Ludzka sekwencja, która jest najbliższa tej z gryzoni jest następnie zaakceptowana jako ludzki region zrębowy (FA) dla humanizowanego przeciwciała (Sims i wsp., J. Immunol, 151: 2296 (1993); Chothia i wsp.,
PL 213 948 B1
J. Mol Biol, 196: 901 (1987)). Inne metody stosują konkretny region zrębowy pochodzący z sekwencji najwyższej zgodności wszystkich ludzkich przeciwciał z danej podgrupy łańcuchów lekkich i ciężkich. Ten sam region zrębowy może być zastosowany dla kilku różnych przeciwciał humanizowanych (Carter i wsp., Proc. Natl Acad. Sci. USA, 89: 4285 (1992); Presta i wsp., J. Immunol, 151: 2623 (1993)).
Ważne jest ponadto, żeby przeciwciała były humanizowane z zachowaniem wysokiego powinowactwa do antygenu i innych korzystnych właściwości biologicznych. Aby osiągnąć ten cel według korzystnych metod humanizowane przeciwciała wytwarza się poprzez przeprowadzenie analizy sekwencji rodzicielskich I różnych zaprojektowanych produktów humanizowanych przy użyciu trójwymiarowych modeli sekwencji rodzicielskich i humanizowanych. Trójwymiarowe modele immunoglobulin są powszechnie dostępne i są znane specjalistom w tej dziedzinie. Dostępne są programy komputerowe, które ilustrują i pokazują możliwe trójwymiarowe struktury konformacyjne wybranych kandydatów dla sekwencji immunoglobulin. Badanie tych obrazów umożliwia analizę prawdopodobnej roli reszt w funkcjonowaniu sekwencji immunoglobuliny-kandydata, tj. analizę reszt, które wpływają na zdolność immunoglobuliny- kandydata do wiązania się ze swoim antygen. W ten sposób można wybrać reszty FR i połączyć sekwencje biorcy i zaimportowane, uzyskując pożądane właściwości przeciwciała, takie jak zwiększone powinowactwo do docelowych antygenu(ów). Generalnie, reszty regionu CDR mają bezpośredni i najbardziej znaczący wpływ na wiązanie antygenu.
Alternatywnie, możliwe jest obecnie wytwarzanie transgenicznych zwierząt (np. myszy), które po immunizacji są zdolne do wytwarzania pełnego repertuaru ludzkich przeciwciał w nieobecności wytwarzania endogennych immunoglobulin. Przykładowo, opisano, że homozygotyczna delecja regionu łącznikowego łańcucha ciężkiego (JH) przeciwciała w mutancie chimerowym i w linii płciowej myszy prowadzi do całkowitego zahamowania wytwarzania endogennych przeciwciał.
Przeniesienie ludzkiego układu genów z ludzkiej linii płciowej do takiego mutanta w linii płciowej myszy będzie prowadziła do wytwarzania ludzkich przeciwciał po prowokacji antygenem. Patrz np. Jakobovits i wsp., Proc. Natl Acad. Sci USA, 90: 2551 (1993); Jakobovits i wsp., Nature, 362: 255-258 (1993); Bruggermann i wsp., Year in Immuno., 7: 33 (1993) oraz Duchosal i wsp. Nature 355: 258 (1992). Ludzkie przeciwciała mogą również pochodzić z bibliotek z prezentacją na fagach (Hoogenboom i wsp., J. Mol. Biol., 227: 381 (1991); Marks i wsp., J. Mol. Biol., 222: 581-597 (1991); Vaughan I wsp. Nature Biotech 14: 309 (1996)).
(v) Przeciwciała multispecyficzne
Przeciwciała multispecyficzne mają specyficzności wiązania wobec co najmniej dwóch różnych antygenów. Jakkolwiek takie cząsteczki normalnie będą wiązać jedynie dwa antygeny (tj. przeciwciała bispecyficzne, BsAbs), przeciwciała z dodatkowymi specyficznościami, takie jak przeciwciała trispecyficzne, są objęte przez stosowane tu wyrażenie. Przykłady BsAbs obejmują te, które mają jedno ramię skierowane wobec antygenowi komórki nowotworowej, a drugie ramię skierowane wobec cząsteczce
HER2 będącej cytotoksycznym włącznikiem, takie jak anty-FcYRI/anty-CD15, anty-pl85 /FcyRIII (CD16), anty-CD3/anty-rakowa komórka B (1D10), anty-CD3/anty-pl85HER2, anty-CD3/anty-p97, anty-CD3/-anty-rak komórek nerkowych, anty-CD3/anty-OVCAR-3, anty-CD3/L-D1 (anty-rak okrężnicy), anty-CD3/anty-analog hormonu stymulującego melanocyty, anty-receptor EGF/anty-CD3, anty-CD3-antyCAMA1, anty-CD3/anty-CD19, anty-CD3/MoV18, anty-cząsteczka adhezji komórek nerwowych (NCAM)/anty-CD3, anty-białko wiążące folian (FBP)/anty-CD3, anty-antygen związany z uogólnionym rakiem (AMOC-31)/anty-CD3; BsAbs z jednym ramieniem, które wiąże się specyficznie z antygenem nowotworowym i jednym ramieniem, które wiąże się z toksyną, takie jak anty-saporyna/anty-Id-1, anty-CD22/anty-saporyna, anty-CD7/anty-saporyna, anty-CD38/anty-saporyna, anty-CEA/anty-łańcuch A rycyny, anty-interferon-α (FN^/anty-idiotyp hybrydomy, anty-CEA/anty-alkaloid winka; BsAbs dla enzymów - konwertaz aktywujących proleki, takie jak anty-CD30/anty-alkaliczna fosfataza (która katalizuje przekształcenie proleku - fosforanu mitomycyny do alkoholu mitomycyny); BsAbs, które można użyć jako czynniki do lizowania skrzepów, takie jak anty-fibryna/anty-tkankowy aktywator plazminogenu (tPA), anty-fibryna/anty-aktywator plazminogenu typu urokinazy (uPA); BsAbs dla kierowania kompleksów immunologicznych do komórkowych receptorów powierzchniowych, takie jak anty-likporoteina o niskiej gęstości (LDL)/anty-receptor Fc (np. FcyRI, FcyRII lub FcyRIII); BsAbs do zastosowania w terapii chorób infekcyjnych, takie jak anty-CD3/anty-wirus opryszczki pospolitej (HSV), anty kompleks receptora komórek T:CD3/anty-wirus grypy, anty-FcYR/anty-HIV; BsAbs dla wykrywania nowotworu in vitro lub in vivo, takie jak anty-CEA/anty-EOTUBE, anty-CEA/anty-DPTA, anty-p185HER2/anty-hapten; BsAbs jako adiuwanty szczepionkowe oraz BsAbs jako narzędzia diagnostyczne, takie jak
PL 213 948 B1 anty-królicza IgG/anty-ferrytyna, anty-peroksydaza chrzanowa (HRP)/anty-hormon, anty-somatostatyna/anty-substancja P, anty-HRP/anty-FITC, anty-CEA/anty-e-galaktozydaza.
Przykłady przeciwciał trispecicznych obejmują anty-CD3/anty-CD4/anty-CD37, anty-CD3/anty-CD5/anty-CD37 i anty-CD3/anty-CD8/anty-CD37.
Przeciwciała bispecyficzne można wytwarzać jako przeciwciała pełnej długości albo fragmenty przeciwciał (np. przeciwciała bispecyficzne F(ab')2). Przegląd przeciwciał bispecyficznych jest w Segal i wsp. J. Immunol. Methods 248: 1-6 (2001).
Sposoby wytwarzania przeciwciał bispecyficznych są znane w tej dziedzinie. Tradycyjne wytwarzanie bispecyficznych przeciwciał pełnej długości opiera się na jednoczesnej ekspresji dwóch lekkich i ciężkich łańcuchów immunoglobuliny, gdzie te dwa łańcuchy mają różne specyficzności (Miilstein i wsp., Nature, 305: 537-539 (1983)). Dzięki losowemu doborowi łańcuchów lekkich i ciężkich, hybrydomy te (kwadromy) wytwarzają potencjalnie mieszaninę 10 różnych cząsteczek przeciwciał, z których tylko jedna ma prawidłową strukturę bispecyficzną. Oczyszczanie prawidłowej cząsteczki, które zwykle wykonuje się poprzez etapy oczyszczania przez powinowactwo jest raczej kłopotliwe, a wydajność produktów niska. Podobne procedury są ujawnione w WO 93/08829 i Traunecker i wsp., EMBO J., 10: 3655-3659 (1991).
W różnych podejściach domeny zmienne przeciwciała z pożądanymi specyficznościami wiązania (miejsca połączenia przeciwciało-antygen) łączy się z sekwencjami domen stałych immunoglobuliny, zawierającymi co najmniej część regionu zawiasowego, CH2 i CH3. Korzystne jest posiadanie pierwszego regionu stałego łańcucha ciężkiego (CH1) zawierającego miejsce niezbędne do wiązania łańcucha lekkiego, obecnego w co najmniej jednej z fuzji. DNA kodujący fuzję łańcucha ciężkiego immunoglobuliny i jeżeli to pożądane, łańcuch lekki immunoglobuliny, wstawia się do odrębnych wektorów ekspresyjnych i przeprowadza kotransfekcję do odpowiedniego organizmu gospodarza. To daje dużą elastyczność w dobieraniu wzajemnych proporcji trzech fragmentów polipeptydowych w wykonaniach, tam gdzie stosowanie nierównych proporcji trzech fragmentów polipeptydowych przy konstrukcji dostarcza optymalnych wydajności. Możliwe jest jednakże wstawienie sekwencji kodujących dla dwóch albo wszystkich trzech łańcuchów polipeptydowych do jednego wektora ekspresyjnego, kiedy ekspresja co najmniej dwóch łańcuchów polipeptydowych w równych proporcjach prowadzi do wysokich wydajności lub kiedy stosunki nie mają szczególnego znaczenia.
W korzystnym wykonaniu tego podejścia przeciwciała składają się z hybrydowego łańcucha ciężkiego immunoglobuliny z pierwszą specyficznością wiązania w jednym ramieniu i hybrydowej pary łańcuchów lekkich immunoglobuliny (dostarczającego drugiej specyficzności wiązania) w drugim ramieniu. Stwierdzono, że ta niesymetryczna struktura ułatwia rozdzielenie pożądanych bispecyficznych składników od niepożądanej kombinacji łańcuchów immunoglobulinowych, ponieważ obecność łańcucha lekkiego immunoglobuliny tylko w jedynej połowie bispecyficznej cząsteczki dostarcza łatwego sposobu rozdziału. Podejście to jest ujawnione w WO 94/04690. Dla dalszych szczegółów wytwarzania bispecyficznych przeciwciał, patrz na przykład Suresh i wsp., Methods In Enzymology, 121: 210 (1986). Według innego podejścia opisanego w patencie W096/27011, miejsce styku pomiędzy parą cząsteczek przeciwciała można poddać manipulacjom tak, aby zmaksymalizować udział procentowy heterodimerów, które odzyskuje się z hodowli zrekombinowanych komórek. Korzystne miejsce styku obejmuje co najmniej część domeny stałej CH3 przeciwciała. W tej metodzie, jeden albo więcej małych bocznych łańcuchów aminokwasowych z miejsca styku w pierwszej cząsteczce przeciwciała zastępuje się dłuższymi łańcuchami bocznymi (np. tyrozyną albo tryptofanem). Kompensujące „zagłębienia” o identycznych albo podobnych rozmiarach co duży łańcuch(y) boczny(e) wytwarza się w miejscu styku w drugiej cząsteczce przeciwciała poprzez zastąpienie dużego aminokwasowego łańcucha bocznego mniejszym (np. alaniną albo treoniną). Dostarcza to mechanizmu dla zwiększenia wydajności heterodimeru w stosunku do niepożądanych produktów końcowych, takich jak homodimery.
Przeciwciała bispecyficzne obejmują przeciwciała połączone krzyżowo lub „heterokoniugaty”. Przykładowo, jedno z przeciwciał w heterokoniugacie może być połączone z awidyną, a inne z biotyną. Zaproponowano, żeby takie przeciwciała wykorzystać do kierowania komórek układu immunologicznego do niechcianych komórek (patent USA nr 4 676 980) i do leczenia zakażenia HIV (WO 91/00360, WO 92/20373 i EP 03 089). Przeciwciała-immunokoniugaty można wytwarzać stosując dowolne dogodne metody łączenia krzyżowego. Odpowiednie czynniki do łączenia krzyżowego są dobrze znane w tej dziedzinie i są ujawnione w patencie USA nr 4 676 980, razem z wieloma innymi technikami łączenia krzyżowego.
PL 213 948 B1
Bierze się również pod uwagę możliwość zastosowania przeciwciał z więcej niż dwiema wartościowościami. Przykładowo, można wytworzyć przeciwciała trój specyficzne. Tutt i wsp., J. Immunol. 147: 60 (1991).
(vi) Przeciwciała wielowartościowe
Przeciwciało wielowartościowe może być internalizowane (albo katabolizowane) szybciej niż przeciwciało dwuwartościowe przez komórkę wyrażającą antygen, do którego wiążą się przeciwciała. Przeciwciałami według wynalazku mogą być przeciwciała wielowartościowe (które są innymi niż klasy IgM) z trzema albo większą liczbą miejsc wiązania (np. przeciwciała czterowartościowe), które można łatwo wytworzyć poprzez ekspresję zrekombinowanych kwasów nukleinowych kodujących łańcuchy polipeptydowe przeciwciała. Przeciwciało wielowartościowe może zawierać domenę dimeryzacji i trzy lub więcej miejsc wiązania antygenu. Korzystna domena dimeryzacji zawiera (albo składa się z) region Fc albo region zawiasowy. W tym wykonaniu przeciwciało będzie zawierało region Fc i trzy lub więcej miejsc wiązania antygenu po stronie amino-końcowej regionu Fc. Korzystne przeciwciało wielowartościowe tu ujawnione zawiera (albo składa się z) trzech do około ośmiu, ale korzystnie czterech miejsc wiązania antygenu. Przeciwciało wielowartościowe zawiera co najmniej jeden łańcuch polipeptydowy (a korzystnie dwa łańcuchy polipeptydowe) gdzie łańcuch(y) polipeptydowy(e) zawiera dwie lub więcej domen zmiennych. Przykładowo, łańcuch(y) polipeptydowy (e) może zawierać VD1-(X1)n-VD2-(X2)n-Fc, gdzie VD1 jest pierwszą domeną zmienną, VD2 jest drugą domeną zmienną, Fc jest jednym łańcuchem polipeptydowym regionu Fc, X1 i X2 reprezentują aminokwas albo polipeptyd, a n to 0 lub 1. Przykładowo, łańcuch(y) polipeptydowy(e) może zawierać VH-CH1-elastyczny łącznik-VH-CH1-łańcuch regionu Fc albo VH-CH1-VH-CH1-łańcuch regionu Fc. Korzystne jest, jeżeli przeciwciało wielowartościowe tu rozważane zawiera ponadto co najmniej dwa (a korzystnie cztery) polipeptydy domen zmiennych łańcucha lekkiego. Przeciwciało wielowartościowe tu rozważane może zawierać na przykład od około dwóch do około ośmiu polipeptydów domen zmiennych łańcucha lekkiego. Rozważane tu polipeptydy domen zmiennych łańcucha lekkiego zawierają domenę zmiennej łańcucha lekkiego i ewentualnie zawierają ponadto domenę CL. Przeciwciała wielowartościowe są opisane w WO 01/00238 i WO 00/44788.
(vii) Przeciwciała z rozwiniętym powinowactwem
Rozważane tu przeciwciało może być przeciwciałem z rozwiniętym powinowactwem zawierającym podstawienie(a) jednego albo większej liczby reszt regionu hiperzmiennego przeciwciała rodzicielskiego (np. przeciwciała humanizowanego albo ludzkiego). Generalnie, otrzymany w rezultacie wariant(y) wybierane do dalszych badań będą miały polepszone właściwości biologiczne w stosunku do przeciwciał rodzicielskich, z których zostały wytworzone. Dogodny sposób wytwarzania takich wariantów z podstawieniami obejmuje rozwijanie powinowactwa przy zastosowaniu prezentacji na fagach. W skrócie, kilka miejsc w regionach hiperzmiennych (np. 6-7 miejsc) mutuje się w celu wytworzenia wszystkich możliwych podstawień aminokwasowych w każdym miejscu. Wytworzone w ten sposób warianty przeciwciała prezentuje się w sposób monowartościowy na cząstkach fagów nitkowatych jako fuzje z produktem genu III M13 zapakowanym w każdej cząstce. Warianty prezentowane na fagach przeszukuje się następnie pod kątem aktywności biologicznej (np. powinowactwa wiązania) jak tu ujawniono. W celu zidentyfikowania miejsc regionu zmiennego będących kandydatami na modyfikację, przeprowadza się alaninową mutagenezę skaningową w celu zidentyfikowania reszt regionu biorących znaczący udział w wiązaniu antygenu. Alternatywnie albo dodatkowo, może być korzystna analiza struktury krystalicznej kompleksu antygen-przeciwciało w celu zidentyfikowania miejsc styku pomiędzy przeciwciałem i jego antygenem. Takie reszty na styku lub sąsiadujące są kandydatami na podstawienia zgodnie z omówionymi tu technikami. Po wytworzeniu takich wariantów, zestawy wariantów poddaje się przeszukiwaniu jak tu opisano i przeciwciała o lepszych właściwościach w jednym albo większej liczbie odpowiednich testów można wybrać do dalszych badań, (vii) Immunokoniugaty
Wynalazek dotyczy również terapii immunokoniugatami zawierającymi glikoproteinę połączoną z czynnikiem przeciwnowotworowym, takim jak czynnik cytotoksyczny lub czynnik hamujący wzrost.
Czynniki chemioterapeutyczne przydatne do wytwarzania takich immunokoniugatów zostały opisane powyżej.
Koniugaty przeciwciała i jednej albo większej liczby małych cząsteczek toksyn, takich jak kalicheamycyna, maitansynoidy, trichoten i CC1065 oraz pochodne tych toksyn, które mają aktywność toksyny są tu również brane pod uwagę.
PL 213 948 B1
W jednym z korzystnych wykonań wynalazku, glikoproteina według wynalazku jest połączona z jedną albo większą liczbą cząsteczek maitansynoidu.
Koniugaty glikoproteina-maitansynoid można wytwarzać poprzez połączenie chemiczne glikoproteiny (np. przeciwciała) z cząsteczką maitansynoidu bez znaczącego zmniejszenia aktywności biologicznej zarówno glikoproteiny, jak cząsteczki maitansynoidu. Wykazano skuteczność około 3-4 cząsteczek maitansynoidu połączonych z cząsteczką przeciwciała w zwiększaniu cytotoksyczności komórek docelowych bez negatywnego wpływania na funkcję albo rozpuszczalność przeciwciała, jakkolwiek można się spodziewać, że nawet jedna cząsteczka toksyny/przeciwciało będzie zwiększać cytotoksyczność w porównaniu z zastosowaniem nagiego przeciwciała. Maitansynoidy są dobrze znane w tej dziedzinie i mogą być syntetyzowane znanymi technikami albo izolowane z naturalnych źródeł. Przydatne maitansynoidy są ujawnione na przykład w patencie USA nr 5 208 020. Korzystnymi maitansynoidami są maitansynol i analogi maitansynolu zmodyfikowane w pierścieniu aromatycznym albo innych pozycjach cząsteczki maitansynolu, takie jak rozmaite estry maitansynolu. Istnieje wiele grup łączących znanych w dziedzinie wytwarzania koniugatów przeciwciało-maitansynoid, włączając w to między innymi te ujawnione w patencie USA 5208020 lub patencie EP nr 0 425 235 B1 oraz Chari i wsp., Cancer Research 52: 127-131 (1992). Grupy łączące obejmują grupy dwusiarczkowe, grupy tioetereowe, grupy kwasolabilne, grupy fotolabilne, grupy rozkładane przez peptydazy albo grupy rozkładane przez esterazy jak ujawniono w wymienionych powyżej patentach, przy czym korzystne są grupy dwusiarczkowe i tioeterowe. Koniugaty przeciwciała i maitansynoidu można wytwarzać przy użyciu rozmaitych bifunkcjonalnych czynników łączących białka, takich jak N- sukcynimidylo-3-(2-pirydylotio)propionian (SPDP), sukcynimidylo-4-(N-maleimidometylo)cykloheksano-1-karboksylan, iminotiolan (IT), bifunkcjonlne pochodne imidoesterów (takie jak dimetyloadipimidan HCl), aktywne estry (takie jak disukinimidylosuberan), aldehydy (takie jak glutareldehyd), związki bis-azydowe (takie jak bis(p-azydobenzoylo) heksanodiamina), pochodne bis-diazoniowe (takie jak bis-(p-diazoniumbenzoylo)etylenodiamino), diizocyjaniany (takie jak tolieno 2,6-diizocyjanian) oraz bis-aktywne związki fluoru (takie jak 1,5-difluoro-2,4-dinitrobenzen).
Szczególnie korzystnymi czynnikami łączącymi dla dostarczania wiązań dwusiarczkowych są N-sukcynimidylo-3-(2-pirydylotio)propionian (SPDP) (Carlsson i wsp., Biochem. J. 173: 723-737 [1978]) i N-sukcynimidylo-4-(2-pirydylotio)pentanian (SPP). Łącznik może być przyłączony do cząsteczki maitansynoidu w różnych pozycjach, w zależności od typu połączenia. Przykładowo, wiązanie estrowe może być utworzone w pozycji C-3 mającej grypę hydroksylową, w pozycji C-14 zmodyfikowanej hyrdoksymetylem, w pozycji C-15 zmodyfikowanej grupą hydroksylową oraz pozycji C-20 mającej grupę hydroksylową przy zastosowaniu konwencjonalnych technik łączenia. W korzystnym wykonaniu, połączenie jest tworzone w pozycji C-3 maitansynolu albo analogu maitansynolu.
Inny immunokoniugat będący przedmiotem zainteresowania stanowi glikoproteina połączona z jedną albo większą liczbą cząsteczek kalicheamycyny. Rodzina antybiotyków kalicheamycynynowych ma zdolność wytwarzania dwuniciowych pęknięć w DNA przy sub-pikomolowych stężeniach. Po wytwarzanie koniugatów z rodziny kalicheamycyny patrz patenty USA nr nr 5 712 374, 5 714 586, 5 739 116, 5 767 285, 5 770 701, 5 770 710, 5 773 001, 5 877 296 (wszystkie dla American Cyanamid Company). Analogi strukturalne kalicheamycyny, które można zastosować obejmują między innymi γ1 1, α21, α31, N-acetylo-γ-ι1, PSAG i θ1 1 (Hinman i wsp. Cancer Research 53: 3336-3342 (1993) oraz Lode i wsp. Cancer Research 58: 2925-2928 (1998)) i wspomniane powyżej patenty USA dla American Cyanamid Company. Innym lekiem przeciwnowotworowym, z którym glikoproteina może być połączona to QFA, który jest antyfolianem. Zarówno kalicheamycyna, jak i QFA mają wewnątrzkomórkowe miejsce działania i nie przechodzą łatwo przez błonę plazmatyczną. A zatem pobieranie przez komórki tych czynników poprzez internalizację za pośrednictwem przeciwciała znacznie zwiększa ich efekty cytotoksyczne.
Inne czynniki przeciwnowotworowe, które można łączyć z glikoproteinami według wynalazku obejmują BCNU, streptozoicynę, winkrystynę i 5-fluorouracyl, rodzinę czynników znanych wspólnie jako kompleks LL-E33288 opisany w patentach USA nr 5 053 394, nr 5 770 710, jak również esperamycyny (patent USA nr 5 877 296).
Aktywne enzymatycznie toksyny i ich fragmenty, które można zastosować obejmują łańcuch A błonicy, niewiążące się aktywne fragmenty toksyny błonicy, łańcuch A egzotoksyny (z Pseudomonas aeruginosa), łańcuch A rycyny, łańcuch A abryny, łańcuch A modecyny, alfa-sarcynę, białka Aleurites fordii, białka dlantyny, białka Phytolaca americana (PAPI, PAPII i PAP-S), inhibitor Momordica charan42
PL 213 948 B1 tya, kurcynę, krotynę, inhibitor Sapaonaria officinalis, żeloninę, mitożelinę, restriktocynę, fenomycynę, enomycynę oraz trikoteceny. Patrz, na przykład, WO 93/21232 opublikowany 28 października, 1993.
Niniejszy wynalazek bierze ponadto pod uwagę immunokoniugaty utworzone pomiędzy glikoproteiną i związkiem o aktywności nukleolitycznej (np. rybonukleazą albo nukleazą DNA, taką jak deoksyrybonukleaza; DNaza).
Do wybiórczego niszczenia nowotworu, przeciwciało może zawierać wysoce radioaktywny atom. Rozmaite izotopy radioaktywne są dostępne do wytwarzania radiokoniugatów przeciwciał. Przykłady obejmują At211, I131, I125, Y90, Re186, Re188, Sm153, Bi212, P32 oraz radioaktywne izotopy Lu. Kiedy koniugat jest używany do diagnozy, może on zawierać atom radioaktywny do badań scyntygraficznych, na przykład tc99m lub I123, albo znacznik spinowy do obrazowania przy zastosowaniu jądrowego rezonansu magnetycznego (NMR, od ang. nuclear magnetic resonance) (znanego również jako obrazowanie rezonansem magnetycznym, ang. magnetic resonance imaging, mri) taki jak znowu jod-123, jod-131, ind-111, fluor-19, węgiel-13, azot-15, tlen-17, gadolin, mangan lub żelazo.
Znaczniki radioaktywne i inne znaczniki mogą być włączone do koniugatu w różny sposób. Przykładowo, peptyd może być biosyntetyzowany albo może być syntetyzowany poprzez chemiczną syntezę aminokwasu przy zastosowaniu odpowiednich prekursorów aminokwasów, zawierających na przykład fluor-19 w miejsce tlenu. Znaczniki, takie jak tc99m lub I123, Re180, Re188 oraz In111 mogą być przyłączone poprzez resztę cysteinową w peptydzie. Itr-90 może być przyłączony poprzez resztę lizynową. Metodę IODOGEN (Fraker i wsp. Biochem. Biophys. Res. Commun. 80: 49-57 (1978) można zastosować do włączenia jodu-123. „Monoclonal Antibodies in Immunoscintigraphy” (Chatal, CRC Press 1989) opisuje szczegółowo inne metody.
Koniugaty glikoproteiny i czynnika cytotoksycznego można wytwarzać przy użyciu rozmaitych bifunkcjonalnych czynników łączących z białkami, takich jak N-sukcynimidylo-3-(2-pirydylotio)propionian (SPDP), sukcynimidylo-4-(N-maleimidometylo)cykloheksano-1-karboksylan, iminotiolan (IT), bifunkcjonlne pochodne imidoesterów (takie jak dimetyloadipimidan HCl), aktywne estry (takie jak disukcymidylosuberan), aldehydy (takie jak glutareldehyd), związki bis-azydowe (takie jak bis(p-azydobenzoylo) heksanodiamina), pochodne bis-diazoniowe (takie jak bis-(p-diazoniumbenzoylo)etylenodiamina), diizocyjaniany (takie jak tolleno-2,6-diizocyjanian) oraz bis-aktywne związki fluoru (takie jak 1,5-difluoro-2,4-dinitrobenzen). Na przykład, immunotoksynę rycynową można wytworzyć jak opisano w Vitetta i wsp. Science 238: 1098 (1987). Wyznakowany węglem-14 kwas 1-izotiocyjanatobenzylo-3-metylodietylenotriaminopentaoctowy (MX-DTPA) jest przykładowym czynnikiem chelatującym do przyłączania radionukleotydu do przeciwciała. Patrz WO 94/11026. Łącznik może być „łącznikiem podatnym na cięcie” ułatwiającym uwolnienie leku cytotoksycznego w komórce. Przykładowo można zastosować łącznik nietrwały w kwasach, łącznik wrażliwy na peptydazę, łącznik dimetylowy lub łącznik zawierający disiarczek (Chari i wsp. Cancer Research 52: 127- 131 (1992), patent USA nr 5 208 020).
Alternatywnie, można wytworzyć fuzję białkową fest zawierającą glikoproteinę i czynnik cytotoksyczny, np. poprzez techniki rekombinowania DNA albo syntezę peptydów. Odcinek DNA może zawierać odpowiednie regiony kodujące dwie części koniugatu bądź sąsiadujące ze sobą bądź oddzielone przez region kodujący peptydowy łącznik, który nie niszczy pożądanych właściwości koniugatu.
W jeszcze innym wykonaniu, przeciwciało można połączyć z „receptorem” (takim jak streptawidyna) do zastosowania we wstępnym docieraniu do nowotworu, gdzie koniugat receptor-przeciwciało podaje się pacjentowi, po czym usuwa się z układu krążenia niezwiązany koniugat przy zastosowaniu czynnika usuwającego, a następnie podaje „ligand” (np. awidynę), który jest połączony z czynnikiem cytotoksycznym (np. radionukleotydem).
(ix) Zależne od przeciwciała leczenie prolekiem za pośrednictwem enzymu (ADEPT, od ang. Antybody Dependent Enzyme Mediated Prodrug Therapy)
Przeciwciała według niniejszego wynalazku można również użyć w ADEPT poprzez połączenie przeciwciała z aktywującym prolek enzymem, który przekształca prolek (np. peptydylowy czynnik chemioterapeutyczny, patrz WO 81/01145) w aktywny lek przeciwnowotworowy. Patrz na przykład WO 88/07378 i patent USA nr 4 975 278.
Składnik enzymatyczny immunokoniugatu przydatny w ADEPT obejmuje dowolny enzym zdolny do działania na prolek w taki sposób, że przekształca go w bardziej aktywną, cytotoksyczną postać.
Enzymy, które są użyteczne w tej metodzie obejmują między innymi alkaliczną fosfatazę przydatną do przekształcania proleków zawierających fosforan w wolne leki; deaminazę cytozynową przydatną do przekształcania nietoksyczną 5-fluorocytozynę w lek przeciwnowotworowy, 5-fluorouracyl;
PL 213 948 B1 proteazy, takie jak proteaza Serratia, termolizyna, subtilizyna, karboksypeptydazy i katepsyny (takie jak katepsyny B i L), które są przydatne do przekształcania proleków zawierających peptyd w wolne leki; D-alanylokarboksypeptydazy, przydatne do przekształcania proleków, które zawierają podstawniki D-aminokwasowe; enzymy trawiące węglowodan, takie jak beta-galaktozydaza i neuraminidaza przydatne do przekształcania proleków glokozylowanych w wolne leki; betalaktamaza przydatna do przekształcania pochodnych beta-laktamowych leków w wolne leki oraz amidazy penicyliny, takie jak amidaza penicyliny V, amidaza penicyliny V, przydatne do przekształcania w wolne leki pochodnych leków ze przyłączonymi do azotu w aminie grupami fenoksyacetylowymi lub fenyloacetylowymi, odpowiednio. Alternatywnie, przeciwciała z aktywnością enzymatyczną, znane również jako „abzymy” można zastosować do przekształcania proleków według wynalazku w wolne aktywne leki (patrz, np., Massey, Nature 328: 457-458 (1987)). Koniugaty przeciwciało-abzym można wytworzyć jak tu popisano dla dostarczania abzymu do populacji komórek nowotworowych.
Enzymy według tego wynalazku mogą być kowalencyjnie łączone z przeciwciałami technikami dobrze znanymi w tej dziedzinie, takimi jak zastosowanie dyskutowanych powyżej heterobifunkcjonalnych odczynników łączących krzyżowo. Alternatywnie, można skonstruować fuzje białkowe zawierające co najmniej jeden region wiążący antygen przeciwciała według wynalazku połączony z co najmniej funkcjonalnie aktywną częścią enzymu według wynalazku przy zastosowaniu technik rekombinowania DNA dobrze znanych w tej dziedzinie (patrz, np. Neuberger i wsp., Nature, 312: 604608 (1984).
(x) Inne modyfikacje przeciwciał
Brane są tu pod uwagę inne modyfikacje glikoproteiny. Przykładowo, glikoproteina może być połączona z rozmaitymi niebiałkowymi polimerami, np. glikolem polietylenowym, glikolem polipropylenowym, polioksyalkilenami lub kopolimerami glikolu polietylenowego lub glikolu polipropylenowego. Przeciwciało może być również zamknięte w mikrokapsułkach wytworzonych na przykład technikami koacerwacji albo poprzez polimeryzację międzyfazową (na przykład mikrokapsułkach hydroksymetylocelulozowych lub żelatynowych i mikrokapsułkach poli(metylometacylanowych), odpowiednio), w koloidalnych systemach dostarczania leków (na przykład, liposomach, mikrokulkach albuminowych, mikroemulsjach, nanocząstkach i nanokapsułkach) albo w makroemulsjach. Takie techniki są ujawnione w Remington's Pharmaceutical Sciences, wyd. 16, Oslo, A., Wyd., (1980).
Ujawnione tu glikoproteiny mogą również być wytwarzane jako immunoliposomy. „Liposom” to mały pęcherzyk złożony z różnego rodzaju lipidów, fosfolipidów i/lub związków powierzchniowoczynnych, które są przydatne do dostarczania leku ssakowi. Składniki liposomu są zazwyczaj zorganizowane w postaci podwójnej warstwy, podobnie jak przy organizacji lipidów w błonach biologicznych. Liposomy zawierające przeciwciało wytwarza się metodami znanymi w tej dziedzinie, takimi jak opisane w Epstein i wsp., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 82: 3688 (1985); Hwang i wsp., Proc. Natl Acad. Sci. USA, 77: 4030 (1980); pat. USA nr 4 485 045 i 4 544 545 oraz WO 97/38731 opublikowany 23 października, 1997. Liposomy o zwiększonym czasie krążenia są ujawnione w patencie USA nr 5 013 556.
Szczególnie przydatne liposomy można wytworzyć przy zastosowaniu metody odparowania z odwróconą fazą z użyciem kompozycji lipidowej zawierającej fosfatydylcholinę, cholesterol i pochodne PEG fosfatydyloetanolaminy (PEG-PE). Liposomy przetłacza się przez filtry o określonych rozmiarach porów w celu uzyskania liposomów o pożądanej średnicy. Fragmenty Fab' przeciwciała według niniejszego wynalazku można łączyć z liposomami jak opisano w Martin i wsp. J. Biol. Chem. 257: 286-288 (1982) poprzez reakcję wymiany dwusiarczkowej. W liposomie fakultatywnie zawarty jest czynnik chemioterapeutyczny. Patrz Gabizon i wsp. J. National Cancer Inst. 81 (19) 1484 (1989).
(xi) Przykładowe przeciwciała
Korzystne przeciwciała w zakresie niniejszego wynalazku obejmują te zawierające sekwencje aminokwasowe następujących przeciwciał:
przeciwciał anty-HER2, włączając w to przeciwciała zawierające regiony zmienne łańcuchów ciężkich i lekkich huMAb 4D5-8 (Carter i wsp., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 89: 4285-4289 (1992), patent USA nr 5 725 856);
przeciwciał anty-CD20, takich jak chimerowe anty-CD20 „C2B8”, jak w patencie USA nr 5 736 137 (RITUXAN®), chimerowy lub humanizowany wariant przeciwciała 2H7, jak w patencie USA nr 5 721 108 B1 lub Tositumomab (BEXXAR®);
anty-IL-8 (St John i wsp., Chest, 103:932 (1993) i międzynarodowa publikacja nr WO 95/23865);
przeciwciał anty-VEGF, włączając w to przeciwciała anty-VEGF humanizowane i/lub z rozwiniętym powinowactwem, takie jak humanizowane przeciwciało anty-VEGF huA4.6.1 AVASTIN™ (Kim
PL 213 948 B1 i wsp., Growth Factors, 7: 53-64 (1992), międzynarodowa publikacja nr WO 96/30046 oraz WO 98/45331, opublikowane 15 października, 1998); przeciwciał anty-PSCA (W001/40309);
przeciwciał anty-CD40, włączając w to S2C6 i ich humanizowane warianty (WO 00/7 5348); anty-CD11a (patent USA nr 5 622 700, WO 98/23761, Steppe i wsp., Transplant Intl. 4: 3-7 (1991) oraz Hourmant i wsp., Transplantation 58: 377-380 (1994));
anty-IgE (Presta i wsp., J. Immunol. 151: 2623-2632 (1993) i międzynarodowa publikacja nr WO
95/19181; patent USA nr 5 714 338, wydany 3 lutego, 1998 lub patent USA nr 5 091 313, wydany 25 lutego, 1992, WO 93/04173 opublikowane 4 marca, 1993 lub WO 99/01556 opublikowane 14 stycznia, 1999, patent USA nr 5714338);
anty-CD18 (patent USA nr 5 622 700, wydany 22 kwietnia, 1997, albo jak w WO 97/26912, opublikowane 31 lipca, 1997); przeciwciała anty-receptor Apo-2 (WO 98/51793 opublikowane 19 listopada, 1998);
przeciwciał anty-TNF-α, włączając w to cA2 (REMICADE®), CDP571 i MAK-195 (patrz patent USA nr 5 672 347 wydany 30 września, 1997, Lorenz i wsp. J. Immunol., 156 (4): 1646-1653 (1996) oraz Dhainaut i wsp. Crit. Care Med. 23 (9):1461-1469 (1995));
anty-czynnik tkankowy (TF, od ang. Tissue Factor) (patent europejski nr 0 420 937 B1 przyznany 9 listopada, 1994);
anty-ludzka integryna α4-β7 (WO 98/06248 opublikowane 19 lutego, 1998);
anty-EGFR (chimerowe lub humanizowane przeciwciało 225, jak w WO 96/40210 opublikowanym 19 grudnia, 1996);
przeciwciał anty-CD3, takich jak OKT3 (patent USA nr 4 515 893 wydany 7 maja, 1985); przeciwciał anty-CD25 lub anty-tac, takich jak CH1-621 (SIMULECT®) i (ΖΕΝΑΡΑΧ®) (patrz patent USA nr 5 693 762 wydany 2 grudnia, 1997);
przeciwciał anty-CD4, takich jak przeciwciało cM-7412 (Choy i wsp. Arthritis Rheum 39 (1): 52-56 (1996));
przeciwciał anty-CD52, takich jak CAMPATH-1H (Riechmann i wsp. Nature 332: 323-337 (1988);
przeciwciał anty-receptor Fc, takich jak przeciwciało M22 skierowane przeciw FcyRI, jak w Graziano i wsp. J. Immunol. 155 (10): 4996-5002 (1995);
przeciwciał anty-antygen karcynoembrionalny (CEA, od carcinoembryonic antigen), takich jak hMN-14 (Sharkey i wsp. CancerRes. 55 (23 Suppl): 5935s-5945s (1995);
przeciwciał skierowanych przeciw komórkom nabłonkowym sutka, włączając w to huBrE-3, hu-Mc 3 i CHL6 (Ceriani i wsp. Cancer Res. 55 (23): 5852s-5856s (1995) oraz Richman i wsp. Cancer Res. 55 (23 Supp): 5916s-5920s (1995));
przeciwciał, które wiążą się z komórkami raka okrężnicy, takich jak C242 (Litton i wsp. Eur J. Immunol. 26 (1): 1-9 (1996));
przeciwciał anty-CD38, np. AT 13/5 (Ellis i wsp. J. Immunol. 155 (2): 925-937 (1995)); przeciwciał anty-CD33, takich jak Hu M195 (Jurcic i wsp. Cancer Res 55 (23 Suppl): 5908s-5910s (1995) i CMA-676 lub CDP771;
przeciwciał anty-CD22, takich jak LL2 lub LymphoCide (Juweid i wsp. Cancer Res 55 (23 Suppl): 5899s-5907s (1995);
przeciwciał anty-EpCAM, takich jak 17-1A (PAN0REX®);
przeciwciał anty-GpIIb/IIIa, takich jak abciximab lub c7E3 Fab (REOPRO®);
przeciwciał anty-RSV, takich jak MEDI-493 (SYNAGIS®);
przeciwciał anty-CMV, takich jak PROTOVIR®; przeciwciał anty-HIV, takich jak PRO542;
przeciwciał anty-wirus zapalenia wątroby, takich jak przeciwciało przeciw zapaleniu wątroby B,
OSTAVIR®;
przeciwciała OvaRex anty-CA 125; przeciwciała BEC2 anty-idiotypowy epitop GD3; przeciwciała VITAXIN® anty-αvβ3;
przeciwciała anty-ludzkie komórki raka, takiego jak ch-G250; ING-1; przeciwciała anty-ludzki 17-1A (3622W94); przeciwciała anty-ludzki rak okrężnicy i odbytnicy (A33);
przeciwciała anty-ludzki czerniak R24, skierowanego przeciw gangliozydowi GD3; anty-ludzki rak płaskokomórkowy (SF-25); oraz
PL 213 948 B1 przeciwciał anty-ludzki antygen leukocytowy (HLA, human leukocyte antigen), takich jak Smart IDlO i przeciwciało Oncolym (Lym-1) anty-HLA DR.
Jakkolwiek korzystne jest, jeżeli glikoproteina będąca przedmiotem zainteresowania to przeciwciało, bierze się również pod uwagę inne glikoproteiny zawierające region Fc, które można zmodyfikować według opisanych tu metod. Przykładem takiej cząsteczki jest immunoadhezyna.
D. Wytwarzanie immunoadhezyn
Najprostszy i najbardziej oczywisty projekt imunoadhezyny łączy w sobie domenę/y wiążące adhezyny (np. zewnątrzkomórkową domenę (ECD) receptora) z regionem Fc łańcucha ciężkiego immunoglobuliny. Zwykle, podczas wytwarzania immunoadhezyn według niniejszego wynalazku, kwas nukleinowy kodujący domenę wiążącą adhezyny będzie przyłączony w postaci fuzji na końcu C do kwasu nukleinowego kodującego koniec N sekwencji domeny stałej immunoglobuliny, jednak fuzje N-końcowe są także możliwe.
Typowo, w takich fuzjach kodowany chimerowy polipeptyd zachowa przynajmniej funkcjonalnie aktywne domeny zawiasową, CH2 i CH3 regionu stałego łańcucha ciężkiego immunoglobuliny. Robi się także fuzje na końcu C części Fc domeny stałej lub bezpośrednio N-końcowe do CH1 łańcucha ciężkiego lub odpowiedniego regionu łańcucha lekkiego. Dokładne miejsce, w którym zrobiona jest fuzja, nie jest istotne; poszczególne miejsca są dobrze znane i można je wybrać w celu zoptymalizowania aktywności biologicznej, wydzielania lub właściwości wiążących immunoadhezyny.
W korzystnym wykonaniu sekwencja adhezyny jest przyłączona w postaci fuzji do końca N regionu Fc immunoglobuliny Gi (IgG1). Możliwe jest przyłączenie całego regionu stałego łańcucha ciężkiego do sekwencji adhezyny. Jednak, bardziej korzystnie, w fuzji stosuje się sekwencję zaczynającą się w regionie zawiasowym zaraz powyżej miejsca cięcia dla papainy, które określa chemicznie Fc IgG (tj. reszty 216, przyjmując, że pierwszą resztą regionu stałego łańcucha ciężkiego jest 114) lub analogicznego miejsca innych immunoglobulin.
W szczególnie korzystnym wykonaniu sekwencja aminokwasowa immnunoadhezyny jest przyłączona w postaci fuzji do (a) regionu zawiasowego i CH2 oraz CH3 lub (b) domen CH1, zawiasowej, CH2 oraz CH3 łańcucha ciężkiego IgG.
W przypadku immunoadhezyn bispecyficznych immunoadhezyny organizują się w multimery, a w szczególności w heterodimery lub heterotetramery. Ogólnie, te złożone immunoglobuliny będą posiadały znane struktury jednostkowe. Podstawowa czterołańcuchowa jednostka strukturalna jest formą, w której występują IgG, IgD oraz IgE. Czterołańcuchowa jednostka strukturalna jest powtarzana w immunoglobulinach o wyższej masie cząsteczkowej; IgM ogólnie występuje jako pentamer czterech podstawowych jednostek utrzymywany razem przy użyciu wiązań dwusiarczkowych. Globulina IgA, a czasami globulina IgG, także mogą występować w formie multimerycznej w osoczu. W przypadku multimeru każda z czterech jednostek może być taka sama lub inna.
Różne przykładowe złożone immunoadhezyny objęte zakresem niniejszego wynalazku są poniżej schematycznie przedstawione w postaci diagramów:
(a) ACL-ACL;
(b) ACH-(ACh, ACL-ACH,- ACL-VHCH lub VLCL-ACH);
(c) ACL-ACH-(ACL-ACH, ACL-VHCH, VLCL-ACH Lub VLCL-VHCH) (d) ACL-VHCH- (ACH lub ACL-VHCH Lub VLCL-ACH);
(e) VLCL-ACH-(ACL-VHCH Lub VLCL-ACH) oraz (f) (A-Y)n-(VLCL-VHCH)2, gdzie:
każde A oznacza identyczne lub różne sekwencje aminokwasowe adhezyn;
VL to domena zmienna łańcucha lekkiego immunoglobuliny;
VH to domena zmienna łańcucha ciężkiego immunoglobuliny;
CL to domena stała łańcucha lekkiego immunoglobuliny;
CH to domena stała łańcucha ciężkiego immunoglobuliny; n to liczbę całkowita większa niż 1;
Y to reszta czynnika wytwarzającego kowalencyjne wiązania krzyżowe.
Dla zwięzłości opisu powyższe struktury pokazują tylko kluczowe cechy; nie wskazują one domen łączących (J) lub innych domen immunoglobulin, ani nie pokazano wiązań dwusiarczkowych. Jednak, kiedy takie domeny są wymagane do aktywności wiążącej, powinno się całość tak skonstruować, aby były one obecne w swoich zwykłych pozycjach, które zajmują w cząsteczkach immunoglobulin.
PL 213 948 B1
Alternatywnie, sekwencje adhezyn można wstawić pomiędzy sekwencje łańcucha ciężkiego i łańcucha lekkiego immunoglobuliny, tak aby otrzymać immunoglobulinę zawierającą chimerowy łańcuch ciężki. W tym wykonaniu sekwencje adhezyny są przyłączone w postaci fuzji do końca 3' łańcucha ciężkiego immunoglobuliny na każdym ramieniu immunoglobuliny, albo pomiędzy domenę zawiasową i CH2 lub pomiędzy domeny CH2 i CH3. Podobne konstrukty zostały opisane w Hoogenboom i wsp., Mol. Immunol., 28: 1027-1037 (1991).
Jakkolwiek obecność łańcucha lekkiego immunoglobuliny nie jest wymagana w immunoahezynach według niniejszego wynalazku, łańcuch lekki immunoglobuliny może być obecny albo w postaci kowalencyjnie związanej z fuzją polipeptydową adhezyna-łańcuch ciężki immunoglobuliny albo bezpośrednio przyłączony w postaci fuzji do adhezyny. W pierwszym przypadku DNA kodujący łańcuch lekki immunoglobuliny typowo wykazuje koekspresję z DNA kodującym fuzję białkową adhezynałańcuch ciężki immunoglobuliny. W trakcie wydzielania hybrydowy łańcuch ciężki i łańcuch lekki będą kowalencyjnie związane w celu zapewnienia struktury immunoglobulinopodobnej zawierającej dwie połączone przy użyciu wiązania dwusiarczkowego pary łańcuch ciężki immunoglobuliny-łańcuch lekki. Sposoby odpowiednie do wytwarzania takich struktur są ujawnione na przykład w patencie USA nr 4 816 567 wydanym 28 marca 1989.
Immunoadhezyny najdogodniej konstruuje się poprzez połączenie sekwencji cDNA kodującej część adhezyny z sekwencją cDNA immunoglobuliny w ramce odczytu. Jednak można także zastosować fuzję do fragmentów genomowych immunoglobulin (patrz, np., Aruffo i wsp., Cell, 61: 1303-1313 (1990) oraz Stamenkovic i wsp., Cell, 66: 1133-1144 (1991)). Drugi typ fuzji wymaga obecności sekwencji regulatorowych Ig dla ekspresji. cDNA kodujące regiony stałe łańcucha ciężkiego IgG można wyizolować technikami hybrydyzacji lub łańcuchowej reakcji polimerazy (PCR) w oparciu o opublikowane sekwencje z bibliotek cDNA pochodzących z limfocytów śledziony lub krwi obwodowej. cDNA kodujące części „adhezynową” i immunoglobulinową immunoadhezyny są wstawione tandemowo do wektora plazmidowego, który kieruje wydajną ekspresją w wybranych komórkach gospodarza.
E. Wektory, komórki gospodarzy i metody rekombinowania DNA
Wynalazek dostarcza również wyizolowanego kwasu nukleinowego kodującego ujawnioną tu glikoproteinę, wektorów i komórek gospodarzy zawierających kwas nukleinowy oraz technik rekombinowania DNA do wytwarzania glikoproteiny.
Aby wytworzyć glikoproteinę poprzez rekombinowanie DNA, izoluje się kodujący je kwas nukleinowy i wstawia do zdolnego do replikacji wektora w celu dalszego klonowania (powielania DNA) lub do ekspresji. DNA kodujący glikoproteinę można łatwo wyizolować i zsekwencjonować przy zastosowaniu konwencjonalnych procedur (np. poprzez użycie sond oligonukleoytydowych, które są zdolne do specyficznego wiązania się z genami kodującymi glikoproteinę). Dostępnych jest wiele wektorów. Składniki wektorów generalnie obejmują między innymi jeden albo więcej spośród: sekwencji sygnałowej, początku replikacji, jednego albo większej liczby genów markerowych i elementów wzmacniających, promotora oraz sekwencji terminacyjnej dla transkrypcji.
(i) Sekwencja sygnałowa
Glikoproteinę według tego wynalazku można wytwarzać poprzez rekombinowanie DNA nie tylko bezpośrednio, ale również jako fuzję polipeptydową z peptydem heterologicznym, którym jest korzystnie sekwencja sygnałowa albo inny polipeptyd mający specyficzne miejsce cięcia na końcu N dojrzałego białka albo polipeptydu. Korzystne jest, jeżeli wybrana heterologiczną sekwencja sygnałowa jest taką, która jest rozpoznawana i ulega obróbce (tj. cięciu przez peptydazę sygnałową) w komórce gospodarza. W przypadku prokariotycznych komórek gospodarza, które nie rozpoznają i dokonują obróbki sekwencji sygnałowej natywnego polipeptydu, sekwencję sygnałową zastępuje się sekwencją prokariotczną wybraną na przykład z grupy złożonej z liderów alkalicznej fosfatazy, penicylinazy, lpp, wrażliwej na ciepło enterotoksyny II. Do wydzielenia z drożdży natywną sekwencję sygnałową można zastąpić, np. przez lider inwertazy drożdżowej, lider czynnika α (włączając w to lidery czynnika α Saccharomyces i Kluyveromyces) albo lider alkalicznej fosfatazy, lider glukoamylazy C. albicans lub sekwencję sygnałową opisaną w WO 90/13646. Przy ekspresji w komórkach ssaków, dostępne są ssacze sekwencje sygnałowe, jak również wirusowe lidery sekrecyjne, na przykład sekwencja sygnałowa gD wirusa opryszczki pospolitej. DNA dla takiego regionu prekursorowego poddaje się ligacji w ramce odczytu z DNA kodującym polipeptyd.
PL 213 948 B1 (ii) Początek replikacji
Zarówno wektory do ekspresji, jak i klonowania, zawierają sekwencję kwasu nukleinowego, która umożliwia wektorowi replikację w komórkach jednego albo większej liczby wybranych gospodarzy. Generalnie, w wektorach do klonowania sekwencją tą jest taka, która umożliwia wektorowi replikację niezależnie od DNA chromosomowego gospodarza i obejmuje początki replikacji albo autonomicznie replikujące się sekwencje. Takie sekwencje są dobrze znane dla wielu bakterii, drożdży i wirusów. Początek replikacji z plazmidu pBR322 jest odpowiedni dla większości bakterii Gram-ujemnych, początek replikacji plazmidu 2μ jest odpowiedni dla drożdży, a różne początki wirusowe (SV40, polyoma, adenowirusa, VSV lub BPV) są przydatne dla wektorów do klonowania w komórkach ssaczych. Generalnie początek replikacji nie jest potrzebny w ssaczych wektorach ekspresyjnych (początek replikacji SV40 może być typowo używany jedynie dlatego, że zawiera wczesny promotor).
(iii) Gen selekcyjny
Wektory do ekspresji i klonowania mogą zawierać gen selekcyjny, zwany również markerem selekcyjnym. Typowe geny selekcyjne kodują białka, które:
(a) nadają oporność na antybiotyki lub inne toksyny, np., ampicylinę, neomycynę, metotreksan lub tetracyklinę;
(b) komplementują niedobory auksotroficzne albo (c) dostarczają krytycznych składników odżywczych niedostępnych ze złożonej pożywki, np. gen kodujący racemazę D-alaniny dla Bacilli.
Jeden ze schematów selekcji wykorzystuje lek dla zahamowania wzrostu komórki gospodarza. Te komórki, które zostały z powodzeniem stransformowane heterologicznm genem, wytwarzają białko nadające oporność na lek, a zatem przezywają tryb selekcji. W przykładach takiej selekcji dominującej stosuje się leki: neomycynę, kwas mykofenolowy i higromycynę.
Inny przykład odpowiednich markerów selekcyjnych dla komórek ssaczych stanowią te, które umożliwiają identyfikację komórek zdolnych do pobierania kwasu nukleinowego dla polipeptydu, takie jak DHFR, kinaza tymidynowa, metalotioneina-I i -II, korzystnie geny metalotionein naczelnych, deaminaza adenozynowa, dekarboksylaza ornitynowa, etc.
Przykładowo, komórki stransformowane genem selekcyjnym DHFR identyfikuje się najpierw poprzez hodowanie wszystkich transformantów w pożywce hodowlanej, która zawiera metotreksan (Mtx), współzawodniczącego antagonistę DHFR.
Odpowiednimi komórkami gospodarza, kiedy stosuje się DHFR typu dzikiego, jest linia komórkowa jajnika chomika chińskiego (CHO) bez aktywności DHFR.
Alternatywnie, komórki gospodarza (a w szczególności gospodarza typu dzikiego, który zawiera endogenny DHFR) transformowane lub kotransformowane sekwencjami DNA kodującymi polipeptyd, białko DHFR typu dzikiego i inny marker selekcyjny, taki jak 3'-fosfotransferazę aminoglikozydową (APH) można selekcjonować poprzez hodowlę komórek na pożywce zawierającej czynnik selekcyjny dla podlegającego selekcji markera, takiego jak antybiotyk aminoglikozydowy, np. kanamycyna, neomycyna lub G418. Patrz patent USA nr 4 965 199.
Odpowiednim genem selekcyjnym do zastosowania w drożdżach jest gen trpl obecny w plazmidzie YRp7 (Stinchcomb i wsp., Nature, 282: 39 (1979)). Gen trp1 dostarcza markera selekcyjnego dla zmutowanego szczepu drożdży z brakiem zdolności do wzrostu na tryptofanie, na przykład ATCC nr 44076 lub PEP4-1 (Jones, Genetics, 85: 12 (1977). Brak trp1 w genomie komórek gospodarza drożdżowego stwarza odpowiednie środowisko dla wykrywania transformacji poprzez wzrost w nieobecności tryptofanu. Podobnie szczepy drożdży bez Leu2- (ATCC 20622 lub 38626) są komplementowane przez znane plazmidy niosące gen Leu2.
Dodatkowo, wektory pochodzące z 1,6 μm kolistego plazmidu pKD1 można użyć do transformacji drożdży Kluyveromyces. Alternatywnie, doniesiono o systemie ekspresji do wytwarzania na dużą skalę zrekombinowanej chymozyny cielęcej dla K. laetis. Van den Berg, BiolTechnology, 8: 135 (1990). Ujawniono również stabilne wielokopiowe wektory do ekspresji do wydzielenia dojrzałej zrekombinowanej ludzkiej albuminy surowiczej przez przemysłowe szczepy Kluyveromyces. Fleer i wsp., BiolTechnology, 9: 968-975 (1991).
(iv) Składnik promotorowy
Wektory do ekspresji i klonowania zwykle zawierają promotor, który jest rozpoznawalny przez organizm gospodarza i jest połączony funkcjonalnie z kwasem nukleinowym dla polipeptydu. Promotory przydatne do zastosowania z gospodarzami prokariotycznymi obejmują promotor phoA, β-laktamazy oraz systemy promotorowe laktozy, alkalicznej fosfatazy, system promotorowy tryptofanu (trp)
PL 213 948 B1 i promotory hybrydowe, takie jak promotor tac. Jednakże przydatne są inne znane promotory bakteryjne. Promotory do zastosowania w systemach bakteryjnych będą również zawierały sekwencję Shine-Dalgarno (S. D.) połączoną funkcjonalnie z DNA kodującym przeciwciało wielowartościowe.
Sekwencje promotorowe są znane dla organizmów eukariotycznych. W zasadzie wszystkie geny eukariotyczmne mają region AT-bogaty położony około 25 do 30 zasad od miejsca, gdzie rozpoczyna się transkrypcja. Inna sekwencja znajdująca się 70 to 80 zasad od miejsca startu transkrypcji wielu genów to region CNCAAT, gdzie N może być dowolnym nukleotydem. Na końcu 3' większości genów eukariotycznych jest sekwencja AATAAA, która może być sygnałem dla dodania ogona poli A do końca 3' sekwencji kodującej. Wszystkie te sekwencje są odpowiednio wstawione do eukariotycznych wektorów ekspresyjnych.
Przykłady odpowiednich sekwencji promotorowych do zastosowania z gospodarzami drożdżowymi obejmują promotory kinazy 3-fosfoglycerynianowej lub innych enzymów glikolitycznych, takich jak enolaza, dehydrogenaza glyceraldehydo-3-fosforanowa, heksokinaza, dekarboksylaza pirogronianowa, fosfofruktokinaza, izomeraza glukozo-6- fosforanowa, mutaza 3-fosfoglicerynianowa, kinaza pirogronianowa, izomeraza triozofosforanowa, izomeraza fosfoglukozowa i glukokinaza.
Inne promotory drożdżowe, które są promotorami indukowalnymi, mającymi dodatkową zaletę transkrypcji kontrolowanej przez warunki wzrostu to regiony promotorowe dla dehydrogenazy alkoholowej 2, izocytochromu C, kwaśnej fosfatazy, enzymów rozkładających związanych z metabolizmem azotu, metalotioneiny, dehydrogenazy gliceraldehydo-3-fosforanowej oraz enzymów odpowiedzialnych za wykorzystanie maltozy i galaktozy. Odpowiednie wektory i promotory do zastosowania przy ekspresji w drożdżach są opisane ponadto w EP nr 73 657. Wzmacniacze drożdżowe są również korzystnie stosowane z promotorami drożdżowymi.
Transkrypcja polipeptydu z wektorów w ssaczych komórkach gospodarza jest kontrolowana na przykład przez promotory otrzymane z genomów wirusów, takich jak wirus polyoma, wirus ospy drobiu, adenowirus (taki jak Adenowirus 2), bydlęcy wirus brodawczaka, ptasi wirus mięsaka, cytomegalowirus, retrowirus, wirus zapalenia wątroby B, a najkorzystniej Małpi Wirus 40 (SV40), z heterologicznych promotorów ssaczych, np., promotora aktyny lub promotora immunoglobuliny, promotorów szoku cieplnego, przy założeniu, że promotory są zgodne z systemami komórkowymi gospodarza.
Wczesne i późne promotory wirusa SV40 można dogodnie otrzymać z fragmentu restrykcyjnego SV40, który również zawiera wirusowy początek replikacji SV40. Najwcześniejszy promotor ludzkiego cytomegalowirusa dogodnie jest otrzymać jako fragment restrykcyjny HindIII E. System ekspresji DNA w gospodarzach ssaczych przy zastosowaniu jako wektora bydlęcego wirusa brodawczaka jest ujawniony w patencie USA nr 4 419 446. Modyfikacja tego systemu jest opisana w patencie USA nr 4601978. Patrz także Reyes i wsp., Nature 297: 598-601 (1982) na temat ekspresji cDNA ludzkiego β-interferonu w komórkach mysich pod kontrolą promotora kinazy tymidynowej z wirusa opryszczki pospolitej. Alternatywnie jako promotor można zastosować długie odwrócone powtórzenia wirusa mięsaka Rousa.
(v) Element wzmacniacza
Transkrypcja DNA kodującego polipeptyd według tego wynalazku u wyższych Eucaryota jest często wzmacniana poprzez wstawienie do wektora sekwencji wzmacniacza. Znanych jest wiele sekwencji wzmacniaczy z genów ssaczych (globiny, elastazy, albuminy, α-fetoproteiny oraz insuliny). Jednakże, typowo używa się wzmacniacza z wirusa komórek eukariotycznych. Przykłady obejmują wzmacniacz SV40 po stronie późnej początku replikacji (bp 100-270), wzmacniacz wczesnego promotora cytomegalowirusa, wzmacniacz polyoma po stronie późnej początku replikacji oraz wzmacniacze adenowirusa. Patrz także Yaniv, Nature 297: 17-18 (1982) na temat elementów wzmacniających dla aktywacji promotorów eukariotycznych. Wzmacniacz może być wstawiony do wektora w pozycji 5' lub 3' sekwencji kodującej polipeptyd, ale korzystne jest, jeżeli jest położony po stronie 5' promotora.
(vi) Składnik terminacji transkrypcji
Wektory do ekspresji stosowane w komórkach gospodarza eukariotycznego (drożdże, grzyby, rośliny, zwierzęta, człowiek lub komórki jądrzaste innych organizmów wielokomórkowych) będą również sekwencje niezbędne do terminacji transkrypcji i do stabilizowania mRNA. Takie sekwencje są powszechnie dostępne z końców 5', a czasami 3' nie ulegających translacji regionów eukariotycznych albo wirusowych DNA lub cDNA. Regiony te zawierają odcinki nukleotydowe podlegające transkrypcji jako fragmenty poliadenylowane w nie ulegającej translacji części mRNA kodującego polipeptyd. Jednym z przydatnych składników terminacji transkrypcji jest region poliadenylacji bydlęcego hormonu wzrostu. Patrz WO 94/11026 i ujawniony tam wektor ekspresyjny.
PL 213 948 B1 (vii) Selekcja i transformacja komórek gospodarza
Odpowiednie komórki gospodarza do klonowania i ekspresji DNA w rozważanych tu wektorach są opisanymi powyżej komórkami prokariotycznymi, drożdżowymi albo wyższych Eukaryota. Odpowiednie tego celu organizmy prokariotyczne obejmują Eubacteriae, takie jak organizmy Gram ujemne lub Gram dodatnie, na przykład, Enterobacteriaceae, takie jak Escherichia, np., E. coli, Enterobacter, Erwinia, Klebsiella, Proteus, Salmonella, np., Salmonella typhimurium, Serratia, np. Serratia marcescans oraz Shigella, jak również Bacilli, takie jak B. subtilis i B. Iicheniformis (np. B. Iicheniformis 41 P ujawniony w DD 266710 opublikowanym 12 kwietnia 1989), Pseudomonas, takie jak P. aeruginosa i Streptomyces. Jednym z korzystnych gospodarzy do klonowania w E. coli jest E. coli 294 (ATCC 31446), jakkolwiek inne szczepy, takie jak E. coli B, E. coli X1776 (ATCC 31537) i E. coli W3110 (ATCC 27325) są również odpowiednie. Przykłady te stanowią ilustrację, a nie ograniczenie.
Poza organizmami prokariotycznymi, mikroorganizmy eukariotyczne, takie ja grzyby nitkowate albo drożdże są przydatnymi gospodarzami do klonowania i ekspresji dla wektorów kodujących polipeptyd. Saccharomyces cerevisiae albo zwyczajne drożdże piekarnicze, są najpowszechniej używanymi wśród mikroorganizmów gospodarzami - niższymi Eukaryota. Jednakże powszechnie dostępne są i przydatne tu liczne inne rodzaje, gatunki i szczepy, takie jak Schizosaccharomyces pombe; gospodarze Kluyveromyces, tacy jak, np., K. lactis, K. fragilis (ATCC 12424), K. bulgaricus (ATCC 16045), K. wickeramii (ATCC 24,178), K. waltii (ATCC 56500,), K. drosophilarum (ATCC 36906),
K. Thermotolerans oraz K. marxianus; Yarrowia (EP nr 402 226); Pichia pastors (EP nr 183 070); Candida; Trichoderma reesia (EP nr 244 234); Neurospora crassa; Schwanniomyces, taki jak Schwanniomyces occidentalis oraz grzyby nitkowate, takie jak np. Neurospora, Penicillium, Tolypocladium i gospodarze Aspergillus, tacy jak A. nidulans i A. niger.
Odpowiednie komórki gospodarzy do ekspresji glikozylowanego polipeptydu pochodzą z organizmów wielokomórkowych. Przykłady komórek bezkręgowców obejmują komórki roślinne i komórki owadów. Zidentyfikowano liczne szczepy bakulowirusowe i warianty oraz odpowiadające im permisywne komórki gospodarzy owadzich z gospodarzy takich jak Spodoptera frugiperda (gąsienica), Aedes aegypti (komar), Aedes albopictus (komar), Drosophila melanogaster (muszka owocowa) oraz Bombyx mori. Rozmaite szczepy wirusowe do transfekcji są publicznie dostępne, np. wariant L-1 Autographa cali fornica NPV oraz szczep Bm-5 Bombyx mori NPV i takie wirusy można zastosować tu według niniejszego wynalazku, szczególnie do transfekcji komórek Spodoptera frugiperda.
Hodowle komórek roślinnych: bawełny, kukurydzy, ziemniaka, soi, petunii, pomidora i tytoniu można również użyć jako gospodarzy.
Jednakże, główne zainteresowanie dotyczy komórek kręgowców, a namnażanie komórek kręgowców w hodowli (hodowli tkankowej) stało się rutynową procedurą. Przykładami przydatnych linii komórek ssaków-gospodarzy jest linia komórek małpiej nerki CV1 transformowana SV40 (COS-7, ATCC CRL 1651); linia ludzkiej embrionalnej nerki (293 lub komórki 293 subklonowane do wzrostu w hodowli zawiesinowej, Graham i wsp., J. Gen Virol. 36: 59 (1977)); komórki nerki noworodka chomika (BHK, ATCC CCL 10); komórki jajnika chomika chińskiegi/DHFR (CHO, Urlaub i wsp., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 77: 4216 (1980)); mysie komórki sertoli (TM4, Mather, Biol. Reprod. 23: 243-251 (1980)); małpie komórki nerki (CV1 ATCC CCL 70); komórki nerki zielonej małpy afrykańskiej (VERO76, ATCC CRL-1587); ludzkie komórki raka szyjki macicy (HELA, ATCC CCL 2); komórki nerki psa (MDCK, ATCC CCL 34); komórki wątroby szczura buffalo (BRL 3A, ATCC CRL 1442); ludzki komórki płuc (W138, ATCC CCL 75); ludzkie komórki wątroby (Hep G2, HB 8065); mysi rak gruczołu mlecznego (MMT 060562, ATCC CCL51); komórki TRI (Mather i wsp., Annals N. Y. Acad. Sci. 383: 44-68 (1982)); komórki MRC 5; komórki FS4; mysie komórki szpiczaka, takie jak NSO (np. RCB0213, Bebbington i wsp., Bio/Technology 10: 169 (1992)) oraz komórki SP2/0 (np. komórki SP2/0-Ag14, ATCC CRL 1581); szczurze komórki szpiczaka, takie jak komórki YB2/0 np. komórki YB2/3HL.P2.G11.16Ag.20, ATCC CRL 1662); oraz ludzka linia wątrobiaka (Hep G2). Komórki CHO bez reduktazy dihydrofolianowej (DHFR) są korzystną linią komórkową do wykonania wynalazku, z CHO-K1, DUX-B11, CHO-DP12, CHO-DG44 (Urlaub i wsp., Somatic Cell and Molecular Genetics 12: 555 (1986)) oraz Lec 13 będące przykładowymi przykładowymi liniami gospodarzy CHO. Komórki DUX-B11 zostały stransfekowane pSVEHIGNeo niosącym cDNA dla preproinsuliny, z wytworzeniem klonu CHO-DP12. W przypadku komórek gospodarza CHO-K1 (ATCC CRL 61), DUX-B11 (Simonsen i wsp. PNAS (USA) 80: 2495-2499 (1983)), DG44 lub CHO-DP12, mogą być one zmienione w taki sposób, że brak im zdolności do fukozylacji wyrażanych w nich białek.
PL 213 948 B1
Wynalazek można również zastosować do komórek hybrydom. Termin „hybrydoma” dotyczy hybrydowej linii komórkowej wytwarzanej poprzez fuzję nieśmiertelnej linii komórkowej pochodzenia immunologicznego i komórki wytwarzającej przeciwciało. Termin obejmuje potomstwo heterohybrydowych fuzji szpiczaka, które są wynikiem fuzji z komórkami ludzkimi i mysią linia komórkową szpiczaka połączonymi następnie z komórką plazmatyczną, powszechnie znane jako linia komórkowa triomy. Ponadto, termin ma obejmować dowolną unieśmiertelnioną linię komórkową, która wytwarza przeciwciała, taką jak na przykład kwadromy (patrz, np., Milstein i wsp., Nature, 537: 3053 (1983)). Hybrydowe llinie komórkowe mogą być z dowolnego gatunku, włączając w to człowieka i mysz.
W najbardziej korzystnych wykonaniach komórką ssaka jest komórka ssaka inna niż hybrydoma, która została stransformowana egzogennym wyizolowanym kwasem nukleinowym kodującym polipeptyd będący przedmiotem zainteresowania. „Egzogenny kwas nukleinowy” lub „heterologiczny kwas nukleinowy” ma oznaczać sekwencję kwasu nukleinowego, która jest obca dla komórki albo homologiczna dla komórki, ale w pozycji w obrębie kwasu nukleinowego komórki gospodarza, w której kwas nukleinowy normalnie się nie znajduje.
(viii) Hodowanie komórek gospodarzy
Komórki gospodarza transformuje się opisanymi powyżej wektorami do klonowania i ekspresji w celu wytworzenia polipeptydu i hoduje w konwencjonalnej pożywce hodowlanej zmodyfikowanej odpowiednio do indukowania promotorów, selekcjonowania transformantów albo powielania genów kodujących pożądane sekwencje.
Komórki gospodarzy stosowane do wytwarzania polipeptydu według tego wynalazku można hodować w rozmaitych pożywkach. Dostępne handlowo pożywki, takie jak Ham's FlO (Sigma), Minimal Essential Medium ((MEM), (Sigma), RPMI-1640 (Sigma) oraz Dulbecco's Modified Eagle's Medium ((DMEM), Sigma) są przydatne do hodowania komórek gospodarzy. Ponadto, jako pożywkę hodowlaną dla komórek gospodarza można użyć dowolną z pożywek opisanych w Ham i wsp., Meth. Enz. 58: 44 (1979), Barnes i wsp., Anal. Biochem. 102: 255 (1980), pat. USA nr 4 767 704; 4 657 866; 4 927 762; 4 560 655 lub 5 122 469; WO 90/03430; WO 87/00195 lub patent USA nr 30 985. Dowolna z tych pożywek może być uzupełniona, jak potrzeba, hormonami i/lub innymi czynnikami wzrostowymi (takimi jak insulina, transferyna lub nabłonkowy czynni wzrostowy), sole (takie jak chlorek sodu, wapń, magnez i fosforan) bufory (takie jak HEPES), nukleotydy (takie jak adenozyna i tymidyna), antybiotyki (takie jak lek GENTAMYCIN™), elementy śladowe zdefiniowane jako związki nieorganiczne zwykle obecne w stężeniu końcowym w zakresie mikromolarnym) oraz glukoza lub ekwiwalentne źródło energii. Dowolne inne niezbędne uzupełnienia można również dodać w odpowiednich stężeniach, które będą znane specjalistom w tej dziedzinie. Warunki hodowli, takie jak temperatura, pH i temu podobne, są takie, jak stosowane uprzednio dla komórek gospodarza wybranego do ekspresji i będą oczywiste dla przeciętnego specjalisty w tej dziedzinie.
Wszystkie pożywki hodowlane typowo dostarczają co najmniej jednego składnika spośród jednego lub większej liczby następujących kategorii:
1) źródło energii, zwykle w postaci węglowodanu takiego jak glukoza;
2) wszystkie niezbędne aminokwasy i zwykle podstawowy zestaw dwudziestu aminokwasów plus cystyna;
3) witaminy i/lub inne związki organiczne wymagane w niskich stężeniach;
4) wolne kwasy tłuszczowe; oraz
5) elementy śladowe, gdzie elementy śladowe są zdefiniowane jako związki nieorganiczne albo występujące naturalnie elementy, które są typowo wymagane w bardzo niskich stężeniach, zwykle w zakresie mikromolowym.
Korzystne jest, jeżeli pożywka hodowlana jest wolna od surowicy, np. zawiera mniej niż około 5%, korzystnie mniej niż 1%, korzystniej mniej niż 0 do 0,1% surowicy i innych białek pochodzenia zwierzęcego. Jednakże mogą być one stosowane, jeśli potrzeba. W korzystnym wykonaniu wynalazku pożywka do hodowli komórek zawiera nadmiar aminokwasów. Aminokwasy, które są dostarczone w nadmiarze mogą być wybrane spośród Asn, Asp, Gly, He, Leu, Lys, Met, Ser, Thr, Trp, Tyr i Val. Korzystnie, Asn, Asp, Lys, Met, Ser i Trp są dostarczone w nadmiarze. Przykładowo, można użyć aminokwasów, witamin, elementów śladowych i innych składników pożywki w pojedynczym albo dwukrotnym zakresie wyszczególnionym w patencie europejskim EP nr 307 247 lub patencie USA nr 6 180 401. Te dwa dokumenty są tu włączone jako odniesienie.
Do hodowli komórek ssaczych wyrażających pożądane białko i zdolnych do dodawania pożądanych węglowodanów w określonych pozycjach, można użyć wielu warunków hodowli przywiązując
PL 213 948 B1 szczególną uwagę hodowanym komórkom gospodarza. Odpowiednie warunki hodowli dla komórek ssaków są dobrze znane w tej dziedzinie (Cleveland i wsp., J. Immunol. Methods 56: 221-234 (1983)) albo mogą był łatwo ustalone przez specjalistę w tej dziedzinie (patrz na przykład, Animal Cell Culture: A Practical Approach wyd. 2, Rickwood, D. i Hames, B. D., wyd. Oxford University Press, New York (1992)) i różnią się zależnie od konkretnej wybranej komórki gospodarza.
(ix) Oczyszczanie glikoproteiny
Kiedy stosuje się techniki rekombinowania DNA, glikoproteina może być wytwarzana wewnątrzkomórkowo, w przestrzeni periplazmatycznej albo wydzielana bezpośrednio do pożywki. Jeżeli glikoproteina jest wytwarzana wewnątrzkomórkowo, w pierwszym etapie cząsteczkowe resztki, czy to komórki gospodarza czy fragmenty po lizie, usuwa się na przykład poprzez wirowanie albo ultrawirowanie. Carter i wsp., BiolTechnology 10: 163-167 (1992) opisuje procedurę izolowania przeciwciał, które są wydzielane do przestrzeni periplazmatycznej E. coli. Pokrótce, masę komórek rozmraża się w obecności octanu sodowego (pH 3,5), EDTA i fenylometylsulfonylofluorku (PMSF) przez około 30 min. Resztki komórek usuwa się poprzez wirowanie. Tam gdzie glikoproteina jest wydzielana do pożywki, supernatanty z takich systemów ekspresyjnych generalnie najpierw zatęża się przy użyciu dostępnych handlowo filtrów do zatężania białek, na przykład jednostek do ultrafiltracji Amicon lub Millipore Pellicon. Inhibitor proteaz, taki jak PMSF może być dodany na dowolnym z powyższych etapów w celu hamowania proteolizy, a antybiotyki można dodać w celu zapobiegania wzrostu przypadkowych zanieczyszczeń.
Kompozycję glikoproteiny wytworzoną z komórek można oczyścić stosując na przykład chromatografię na hydroksyloapatycie, elektroforezę w żelu, dializę oraz chromatografię powinowactwa, przy czym korzystną techniką oczyszczania jest chromatografia powinowactwa. Przydatność białka A jako ligandu powinowactwa zależy od rodzaju i izotypu regionu Fc immunoglobuliny, który jest obecny w glikoproteinie. Białko A można zastosować do oczyszczania przeciwciał, które opierają się na ludzkich łańcuchach ciężkich γ1, γ2 lub γ4 (Lindmark i wsp., J. Immunol. Meth. 62: 1-13 (1983)). Białko G jest polecane dla wszystkich izotypów mysich i ludzkiej γ3 (Guss i wsp., EMBO J. 5: 1567- 1575 (1986)). Podłożem, do którego ligand powinowactwa jest przytwierdzony jest najczęściej agaroza, ale dostępne są również inne podłoża. Stabilne mechanicznie podłoża, takie jak szkło o określonych porach lub poli(styrenodiwinylo)benzen umożliwiają szybsze tempo przepływu i krótszy czas obróbki niż można uzyskać z agarozą. Tam gdzie glikoproteina zawiera domenę CH3, do oczyszczania przydatna jest żywica Bakerbond ABX™ (J. T. Baker, Phillipsburg, NJ). Dostępne są również inne techniki oczyszczania białka, takie jak frakcjonowanie na kolumnie jonowymiennej, wytrącanie etanolem, HPLC z odwróconymi fazami, chromatografia na krzemionce, chromatografia na heparynaSEPHAROSE™, chromatografia na żywicy jonowymiennej anionowej albo kationowej (takiej jak kolumna z kwasu poliasparaginowego), chromatoognoskowanie, SDS-PAGE oraz wytrącanie siarczanem amonu, zależnie od glikoproteiny, która ma być odzyskana.
W jednym z wykonań glikoproteinę można oczyścić poprzez zastosowanie adsorpcji na substracie lektynowym (np. kolumnie powinowactwa do lektyny) w celu usunięcia z preparatu glikoproteiny zawierającej fukozę i wzbogacić go w glikoproteinę wolną od fukozy.
F. Analiza glikoprotein
Złożoną część węglowodanową glikoproteiny wytwarzanej sposobem według niniejszego wynalazku można łatwo analizować w celu ustalenia, czy reakcja glikozylacji opisana powyżej jest kompletna. Oligosacharydy analizuje się konwencjonalnymi technikami analizy węglowodanów. A zatem, przykładowo, techniki takie jak analiza na filtrach z lektyną, dobrze znane w tej dziedzinie, pokazują proporcje końcowej mannozy lub innych cukrów, takich jak galaktoza.
Korzystne jest, jeżeli węglowodany analizuje się przy zastosowaniu spektralna analizę mas MALD1-T0F jak w przykładzie 1, poniżej oraz Shields i wsp., J. Biol. Chem. 9 (2): 6591-6604 (2001).
Znanych jest w tej dziedzinie kilka metod analizy glikozylacji i są one przydatne w kontekście niniejszego wynalazku. Takie metody dostarczają informacji dotyczącej tożsamości i składu oligosacharydu przyłączonego do peptydu. Sposoby analizy węglowodanu przydatne w niniejszym wynalazku obejmują między innymi chromatografię na HPAEC-PAD, która wykorzystuje chromatografię anionowymienną z wysokim pH w celu rozdzielenia oligosacharydów w oparciu o ładunek; NMR; spektrometrię mas; HPLC; GPC; analizę składu monosacharydów; kolejne trawienia enzymatyczne.
Dodatkowo, znane są sposoby uwalniania oligosacharydów. Metody te obejmują:
1) enzymatyczną, np. z zastosowaniem fukozydazy, takiej jak α-L-fukozydazy w celu usunięcia fukozy;
PL 213 948 B1
2) eliminację poprzez zastosowanie ostrych warunków alkalicznych w celu uwolnienia głównie struktur połączonych przez O;
3) metody chemiczne z użyciem bezwodnej hydrazyny w celu uwolnienia oligosacharydów połączonych, zarówno przez N, jak i przez O;
Cukry obojętne i aminowe można oznaczyć poprzez wysokosprawną chromatografię anionowymienną w połączeniu z pulsową detekcją amperometryczną (HPAE-PAD Carbohydrate System, Dionex Corp.). Przykładowo, cukry można uwalniać poprzez hydrolizę w 20% (obj./obj.) kwasie trifluorooctowym w IOO0C przez 6 godz. Hydrolizaty suszy się następnie poprzez liofilizację lub przy zastosowaniu Speed-Vac (Savant Instruments). Reszty rozpuszcza się następnie w 1% roztworze trójwodnego octanu sodowego i analizuje na kolumnie HPLC-AS6 jak opisano w Anumula i wsp. Anal. Biochem. 195: 269-280 (1991).
Kwas sialowy można oznaczyć oddzielnie poprzez zastosowanie bezpośredniej metody kolorymetrycznej według Yao i wsp. Anal Biochem. 179: 332-335 (1989)) w trzech powtórzeniach próbek. W korzystnych wykonaniach używany jest kwas tiobarbaturowy (TBA) według Warren, L. J. Biol. Chem., 238: (8) (1959).
Alternatywnie, można przeprowadzić analizę węglowodanów na filtrze. Według tej procedury związane z białkiem węglowodany wykrywa się stosując komercyjny system wykrywania glikanów (Boehringer), który opiera się na procedurze oksydacyjnej analizy immunologicznej na filtrze opisanej przez Haselbeck i Hosel (Haselbeck i wsp. Glycoconjugate J., 7: 63 (1990)).
Metody analizy obejmują te opisane dla analizy oligosacharydów związanych z przeciwciałem i opisane na przykład w Wormald i wsp., Biochem. 36: 1370-1380 (1997); Sheeley i wsp. Anal. Biochem. 247: 102-110 (1997) oraz Cant i wsp., Cytotechnology 15: 223-228 (1994), jak również zacytowanych tam odnośnikach.
G. Kompozycje farmaceutyczne
Kompozycje terapeutyczne glikoproteiny można wytwarzać poprzez mieszanie glikoproteiny mającej pożądany stopień czystości z ewentualnymi farmaceutycznie dopuszczalnymi nośnikami, zaróbkami lub stabilizatorami (Remington's Pharmaceutical Sciences wydanie 16, Osol, A. Ed. (1980)), w postaci preparatów liofilizowanych albo roztworów wodnych. Dopuszczalne nośniki, zaróbki lub stabilizatory są nietoksyczne dla biorców w zastosowanych dawkach i stężeniach i obejmują bufory, takie jak fosforan, cytrynian i inne kwasy organiczne, przeciwutleniacze, włączając w to kwas askorbinowy i metioninę; środki konserwujące (takie jak chlorek oktadecylodimetylobenzyloamonowy; chlorek heksametoniowy; chlorek benzalkoniowy, chlorek benzetoniowy; alkohol fenolowy, butylowy lub benzylowy; parabeny alkilowe, takie jak paraben metylowy lub propylowy; katechol; rezorcynol; cycloheksanol; 3-pentanol; oraz m-krezol); polipeptydy o niskiej masie cząsteczkowej (mniej niż około 10 reszt); białka, takie jak albumina z surowicy, żelatyna albo immunoglobuliny; polimery hydrofilowe, takie jak poliwinylopirolidon; aminokwasy takie jak glicyna, glutamina, asparagina, histidyna, arginina lub lizyna; monosaccharydy, disacharydy i inne węglowodany włączając w to glukozę, mannozę lub dekstryny; czynniki chelatujące, takie jak EDTA; cukry, takie jak sacharoza, mannitol, trehaloza lub sorbitol; tworzące sole jony, takie jak sodowe; kompleksy metali (np. kompleksy Zn-białko) i/lub niejonowe związki powierzchniowo czynne, takie jak TWEEN™, PLURONICS™ lub glikol polietylenowy (PEG).
Rozważane tu kompozycje mogą również zawierać jeden albo większą liczbę związków czynnych niezbędnych podczas leczenia przy poszczególnych wskazaniach, korzystnie o uzupełniających się aktywnościach, które nie mają na siebie wzajemnie szkodliwego wpływu. Przykładowo, kombinacja może zawierać ponadto inne przeciwciało albo czynnik chemioterapeutyczny. Takie cząsteczki powinny być obecne w kompozycji w ilościach, które są skuteczne dla zamierzonych potrzeb.
Składniki czynne można również zamykać w mikrokapsułkach wytwarzanych na przykład techniką koacerwacji albo polimeryzacji międzyfazowej, na przykład mikrokapsułkach hydroksymetylocelulozowych albo żelatynowych, odpowiednio i mikrokapsułkach poli(metylometacylanowych), odpowiednio, w koloidalnym systemie dostarczania leków (na przykład liposomy, mikrokulki albuminowe, mikroemulsje, nanocząstki i nanokapsułki) lub w makroemulsjach. Takie techniki są ujawnione w Remington's Pharmaceutical Sciences wyd. 16, Osol, A. Ed. (1980).
Kompozycje do stosowania in vivo muszą być jałowe. To można łatwo osiągnąć poprzez filtrację przez błony filtracyjne.
Można również wytworzyć preparaty o opóźnionym uwalnianiu. Odpowiednie przykłady preparatów o opóźnionym uwalnianiu obejmują półprzepuszczalne podłoża ze stałych hydrofobowych poliPL 213 948 B1 merów zawierających przeciwciało, gdzie podłoża wytwarza się w postaci uformowanych artykułów, np. błon albo mikrokapsułek. Przykłady podłóż o opóźnionym uwalnianiu obejmują poliestry, hydrożele (na przykład, poli(2-hydroksyetylometakrylan) albo poli(winyloalkohol)), polimleczany (patent USA nr 3 773 919), kopolimery kwasu L-glutaminowego oraz γ-etylo-L-glutaminianu, nie podlegający rozkładowi octan etyleno-winylowy, podlegające rozkładowi kopolimery kwas mlekowy-kwas glikolowy, takie jak LUPRON DEPOT™ (wstrzykiwalne mikrokulki składające się kopolimeru kwas mlekowykwas glikolowy i octanu leuprolidowego) oraz kwas poli-D-(-)-3-hydroksymasłowy. Jakkolwiek polimery, takie jak octan etyleno-winylowy i kwas mlekowy-kwas glikolowy umożliwiają uwalnianie cząsteczek na przestrzeni 100 dni, pewne hydrożele uwalniają białka w krótszych okresach czasu. Po zamknięciu w kapsułki przeciwciała pozostają w organizmie przez długi i mogą denaturować albo agregować jako wynik wystawienia na działanie wilgoci w 37°C, co prowadzi do utraty aktywności biologicznej i możliwych zmian w immunogenności. Można zaprojektować racjonalne strategie dla stabilizacji w zależności od mechanizmu, który w tym uczestniczy. Przykładowo, jeżeli odkryty mechanizm agregacji jest tworzeniem się międzycząsteczkowych wiązań S-S poprzez wymianę tio-disiarczkową, stabilizację można uzyskać poprzez modyfikacje reszt sulfhydrylowych, liofilizację z roztworów kwaśnych, kontrolowanie zawartości wilgoci, z zastosowaniem odpowiednich dodatków i opracowywanie specyficznych złóż polimerowych.
Kompozycje farmaceutyczne mogą być liofilizowane. Kompozycje liofilizowanych przeciwciał są opisane w patencie USA nr 6 267 958. Stabilne wodne kompozycje przeciwciał są opisane w patencie USA nr 6 171 586 B1.
H. Nie-terapeutyczne zastosowania glikoproteiny
Glikoproteinę według wynalazku można zastosować jako czynnik do oczyszczania poprzez powinowactwo. W tym procesie, glikoproteinę unieruchamia się na fazie stałej, takiej jak złoże Sephadex albo bibuła filtracyjna stosując metody znane w tej dziedzinie. Doprowadza się do kontaktu unieruchomionej glikoproteiny z próbką zawierającą antygen, który ma być oczyszczony, a następnie podłoże przemywa się odpowiednim roztworem, który będzie usuwać zasadniczo cały materiał z próbki z wyjątkiem antygenu, który ma być oczyszczony, związanym z unieruchomioną glikoproteiną. Na koniec podłoże przemywa się innym odpowiednim roztworem, takim jak bufor glicynowy pH 5,0, który będzie uwalniał antygen z glikoproteiny.
Glikoproteina może być również przydatna w testach diagnostycznych, np. do wykrywania ekspresji antygenu będącego przedmiotem zainteresowania w konkretnych komórkach, tkankach lub surowicy.
Do zastosowań diagnostycznych, glikoproteina będzie typowo wyznakowana wykrywalną resztą. Dostępnych jest wiele znaczników, które generalnie grupuje się w następujące kategorie:
oc -i λ ή o jod (a) Radioizotopy, takie jak 35S, 14C, 125I, 3H i 131I. Glikoproteina może być wyznakowana radioizotopem przy użyciu technik opisanych na przykład w Current Protocols in Immunology, tomy 1 i 2, Coligen i wsp., Wyd. Wiley-Interscience, New York, New York, Wyd. (1991), a radioaktywność można mierzyć przy zastosowaniu zliczania w scyntylatorze.
(b) Znaczniki fluorescencyjne, takie jak chelaty ziem rzadkich (chelaty europu) lub fluoresceina i jej pochodne, rodamina i jej pochodne, dansyl, Lissamina, fikoerytryna i czerwień teksańska są dostępne. Znaczniki fluorescyjne można połączyć z glikoproteiną przy zastosowaniu technik ujawnionych na przykład w Current Protocols in Immunology, jak wyżej. Fluorescencję można oceniać ilościowo przy użyciu fluorymetru.
(c) Różne znaczniki substrat-enzym są dostępne, a patent USA nr 4 275 149 dostarcza przeglądu niektórych spośród nich. Enzym generalnie katalizuje zmianę chemiczną chromogennego substratu, którą można mierzyć przy zastosowaniu różnych technik. Na przykład, enzym może katalizować zmianę koloru substratu, którą można mierzyć spektrofotometrycznie. Alternatywnie, enzym może zmieniać fluorescencję lub chemiluminescencję substratu. Techniki oceny ilościowej zmiany fluorescencji są opisane powyżej. Substrat chemiluminescencyjny staje się wzbudzony elektronicznie przez reakcję chemiczną i może następnie emitować światło, które można mierzyć (stosując na przykład chemiluminometr) albo przekazywać energię do fluorescencyjnego akceptora. Przykłady znaczników fluorescencyjnych obejmują lucyferazy (np. lucyferazę ze świetlika i lucyferazę bakteryjną; patent USA nr 4 737 456), lucyferynę, 2,3-dihydroftalazynodiony, dehydrogenazę jabłczanową, ureazę, peroksydazę, taką jak peroksydaza z chrzanu (HRPO), alkaliczną fosfatazę, β-galaktozydazę, glukoamylazę, lizozym, oksydazy sacharydowe (np. oksydaza glukozy, oksydaza galaktozy oraz dehydrogenaza glukozo-6-fosforanu), oksydazy heterocykliczne (takie jak urykaza i oksydaza ksantynowa), lakto54
PL 213 948 B1 peroksydaza, mikroperoksydaza i temu podobne. Techniki przyłączania enzymów do przeciwciał są opisane w O'Sullivan i wsp., Methods for the Preparation of Enzyme-Antybody Conjugates for use in Enzyme Immunoassay, w Methods in Enzym. Wyd. J. Langone & H. Van Vunakis), Academic Press, New York, 73: 147-166 (1981).
Przykłady połączenia enzym-substrat obejmują na przykład:
(i) Peroksydazę z chrzanu (HRPO) z nadtlenkiem wodoru jako substratem, gdzie peroksydaza nadtlenkowa utlenia prekursor barwnika (np. ortofenylenodiaminę (OPD) lub 3,3',5,5'-tetrametylobenzydynohydrochlorek (TMB));
(ii) alkaliczną fosfatazę (AP) z para-nitrofenylofosforanem jako substratem chromogennym; oraz (iii) β-D-galaktozydazę (β-D-Gal) z chromogennym substratem (np. p-nitrofenylo-D-galaktozydazą) lub fluorogennym substratem 4-metyloumbeliferylo-(3-β-D-galaktozydazą).
Wiele innych kombinacji enzym-substrat dostępnych jest dla specjalistów w tej dziedzinie. Dla ich ogólnego przeglądu patrz patenty USA nr 4 275 149 i nr 4 318 980.
Czasami znacznik jest połączony bezpośrednio z glikoproteiną. Specjalista w tej dziedzinie będzie wiedział o wielu technikach, którymi można to osiągnąć. Przykładowo, glikoproteinę można połączyć z biotyną i dowolny ze znaczników z tych trzech szerokich kategorii wspomnianych powyżej, można połączyć ze awidyną lub vice versa. Biotyna wiąże się wybiórczo z awidyną, a zatem w ten pośredni sposób można połączyć znacznik z glikoproteiną. Alternatywnie, aby uzyskać pośrednie połączenie znacznika z glikoproteiną, glikoproteinę łączy się z małym haptenem (np. digoksyną), a jeden z różnych typów wspomnianych powyżej znaczników łączy się z polipeptydem anty-hapten (np. przeciwciałem anty-digoksyną). A zatem można uzyskać pośrednie połączenie znacznika z glikoproteiną.
W innym wykonaniu wynalazku, glikoproteina nie musi być znakowana, a jego obecność może być wykrywana przy zastosowaniu wyznakowanego przeciwciała, które wiąże się z glikoproteiną.
Glikoproteinę według niniejszego wynalazku można wykorzystać w dowolnym ze znanych testów, takich jak testy współzawodnictwa o wiązanie, bezpośrednie i pośrednie testy kanapkowe i testy immunoprecypitacji. Zola, Monoclonal Antybodies: A Manual of Techniques, str. 147-158 (CRC Press, Inc. 1987).
Glikoproteinę można również zastosować w testach diagnostycznych in vivo. Generalnie, glikoproteinę znakuje się radionuklidem (takim jak 111I, 99Tc, 14C, 131I, 125I, 3H, 32P lub 35S), tak, że antygen albo wyrażające go komórki można zlokalizować przy użyciu immunoscyntografii.
I. Zastosowania glikoproteiny in vivo
Bierze się pod uwagę możliwość zastosowania glikoproteiny według niniejszego wynalazku do leczenia ssaka, np. pacjenta cierpiącego z powodu albo predysponowanego do choroby lub schorzenia, który mógłby odnieść korzyść z podawania glikoproteiny. Stanów, które można leczyć glikoproteiną jest wiele i obejmują nowotwór (np. tam, gdzie glikoproteina wiąże się antygenem związanym z nowotworem, antygenem powierzchniowym komórek B, takim jak CD20, receptorem ErbB, takim jak receptor HER2, czynnikiem angiogennym, takim jak czynnik wzrostu śródbłonka naczyń (VEGF, od ang. vascular endothelial growth factor); stany alergiczne, takie jak astma (z przeciwciałem anty-IgE) oraz choroby, w których pośredniczy LFA-1 (np. gdzie glikoproteiną jest przeciwciało anty-LFA-1 lub anty-ICAM-1) etc. W przypadku przeciwciała, które wiąże się z antygenem powierzchniowym komórek B, takim jak CD20, korzystnymi wskazaniami są nowotwory komórek B (np. chłoniak nieziarniczy), choroba autoimmunologiczna albo do blokowania odpowiedzi immunologicznej na obcy antygen (patrz WO nr 01/03734).
Tam gdzie przeciwciało wiąże się z receptorem ErbB, stanem jest korzystnie nowotwór wyrażający ErbB, np. łagodne i złośliwe guzy charakteryzujące się nadekspresją receptora ErbB. Takie nowotwory obejmują miedzy innymi raka sutka, raka płaskokomórkowego, raka płuc z małych komórek, raka płuc nie z małych komórek, raka żołądkowo-jelitowego, raka trzustki, glejaka, raka szyjki macicy, raka jajnika, raka wątroby, raka pęcherza, wątrobiaka, raka okrężnicy, raka okrężnicy i odbytnicy, raka śluzówki macicy, raka gruczołu śliniankowego, raka nerki, raka wątroby, raka prostaty, raka sromu, raka tarczycy, nowotworów wątroby i różne typy raka głowy i szyi.
Według wskazówek tu zawartych, można wytworzyć glikoproteinę z wariantem regionu Fc o polepszonej aktywności ADCC. Takie cząsteczki znajdą zastosowanie w leczeniu różnych chorób.
Przykładowo, glikoproteinę o polepszonej aktywności ADCC można zastosować do leczenia chorób lub schorzeń, gdzie pożądana jest eliminacja tkanki albo obcego mikroorganizmu. Przykładowo, glikoproteinę można zastosować do leczenia raka; chorób autoimmunologicznych, chorób zapalPL 213 948 B1 nych; infekcji (np. bakteryjnych, wirusowych, grzybowych lub drożdżowych) i innych stanów (takich jak wole) gdzie pożądane jest usunięcie tkanki, itd.
Glikoproteinę podaje się dowolnym z odpowiednich sposobów, włączając w to podawanie pozajelitowe, podskórne, dootrzewnowe, dopłucne, donosowe, a jeśli to pożądane przy miejscowym leczeniu immunosupresyjnym, douszkodzeniowe. Wlewy pozajelitowe obejmują podawanie domięśniowe, dożylne, dotętnicze, dootrzewnowe lub podskórne. Ponadto, dogodne jest podawanie glikoproteiny poprzez pulsowy wlew, najkorzystniej ze zmniejszającymi się dawkami glikoproteinę. Korzystne jest, jeżeli dawki podaje się w zastrzykach, najkorzystniej zastrzykach dożylnych albo podskórnych, w zależności po części od tego, czy podawanie jest krótkie czy długotrwałe.
Dla zapobiegania albo leczenia choroby odpowiednia dawka glikoproteiny będzie zależała od typu choroby, która ma być leczona, ostrości i przebiegu choroby, tego czy przeciwciało jest podawane dla celów zapobiegawczych czy leczniczych, wcześniejszej terapii, historii klinicznej pacjenta i odpowiedzi glikoproteinę oraz opinii prowadzącego lekarza. Dogodne jest podawanie pacjentowi glikoproteiny jednorazowo albo w postaci serii dawek.
W zależności od typu i ostrości choroby, wyjściowa proponowana dawka glikoproteiny do podania pacjentowi, podawana na przykład jednokrotnie więcej razy albo jako ciągły wlew, wynosi około 1 μg/kg do 15 mg/kg (np. 0,1-20 mg/kg). Typowa dzienna dawka może mieścić się w zakresie od około 1 μg/kg do 100 mg/kg lub więcej w zależności od wspomnianych powyżej czynników. Przy podawaniu powtarzanym na przestrzeni kilku dni lub dłużej, zależnie od stanu chorobowego, leczenie podtrzymuje się aż do pożądanego zniesienia objawów chorobowych. Jednakże mogą być użyteczne inne tryby podawania. Postęp tej terapii można łatwo śledzić przy zastosowaniu konwencjonalnych technik i testów. Przykłady tutaj pokazują, że można podawać niższe dawki glikoproteiny (np. przeciwciała wolnego od fukozy), w porównaniu z glikoproteiną zawierającą fukozę.
Kompozycja glikoproteiny będzie wytworzona, dawkowana i podawana w sposób zgodny z dobrą praktyka medyczną. Czynniki brane pod uwagę w tym kontekście obejmują konkretne schorzenia poddawane leczeniu, konkretnego ssaka poddanego leczeniu, stan kliniczny konkretnego pacjenta, przyczyny choroby, miejsca dostarczania czynnika, sposobu podawania, trybu podawania i innych czynników znanych praktykującym lekarzom. „Skuteczna leczniczo ilość” glikoproteiny, która ma być podawana będzie zależeć od takich uwarunkowań i jest minimalna ilością konieczną do zapobiegania, łagodzenia i leczenia choroby albo schorzenia. Glikoproteina nie musi być, ale jest fakultatywnie mieszane z jednym albo większą liczbą czynników obecnie stosowanych do zapobiegania albo leczenia danej choroby. Skuteczna ilość takich innych czynników zależy od ilości glikoproteiny obecnej w kompozycji, typu choroby lub leczenia i innych dyskutowanych powyżej parametrów. Są one generalnie stosowane w tych samych dawkach i tymi samymi drogami podawania jak stosowane tu wcześniej lub około 1 do 99% stosowanych tu uprzednio dawek.
Kompozycje terapeutycznego przeciwciała są generalnie umieszczane w pojemniku mającym jałowy dostęp, na przykład torbie lub fiolce z roztworem dożylnym mającym zatyczkę, którą można przebić igłą do zastrzyków podskórnych.
Pacjent z nowotworem, który ma być traktowany przeciwciałem jako antagonistą jak tu ujawniono, może również otrzymać radioterapię. Alternatywnie albo dodatkowo, pacjentowi można podać środek chemioterapeutyczny. Przygotowanie i schemat podawania środków chemioterapeutycznych można przeprowadzić według instrukcji producenta lub po empirycznym ustaleniu przez specjalistę w tej dziedzinie. Przygotowanie i schemat podawania leku w takiej chemioterapii są także opisane w Chemotherapy Service wyd., M. C. Perry, Williams & Wilkins, Baltimore, MD (1992). Podanie środka chemioterapeutycznego może poprzedzać lub następować po podaniu antagonisty lub można go podać równocześnie. Przy wskazaniach nowotworowych, może być pożądane podawanie również dodatkowych przeciwciał wobec antygenów związanych z nowotworem albo czynników angiogennych, takich jak przeciwciała, które wiążą się z HER2 lub jak czynnik wzrostu śródbłonka naczyń (VEGF). Alternatywnie albo dodatkowo, pacjentowi można podać jednocześnie jedną albo większa liczbę cytokin.
Wynalazek dostarcza ponadto produkt fabryczny zawierający materiały przydatne do leczenia na przykład nowotworu. Produkt fabryczny zawierają pojemnik oraz etykietkę. Odpowiednie pojemniki obejmują na przykład butelki, fiolki i probówki testowe. Pojemniki mogą być wytworzone z rozmaitych materiałów, takich jak szkło albo plastyk. Pojemniki zawierają kompozycję zawierającą opisany tu preparat glikoproteiny. Składnikiem czynnym w kompozycji jest konkretna glikoproteina. Etykietka na pojemniku wskazuje, że kompozycja ma być stosowana do leczenia albo zapobiegania konkretnej choroby albo schorzenia i może również zawierać wskazówki stosowania in vivo, takie jak opisano
PL 213 948 B1 powyżej. Zestaw według wynalazku zawiera pojemnik opisany powyżej i drugi pojemnik zawierający bufor. Może on ponadto zawierać inne materiały pożądane z punktu widzenia handlowego i użytkownika, włączając w to inne bufory, rozcieńczalniki, filtry, igły i strzykawki i wkładki w opakowaniu z instrukcjami stosowania.
Wynalazek został zilustrowany następującymi przykładami.
Przykłady
Aby ocenić rolę fukozylowanego oligosacharydu w funkcji IgG stosowano linię komórkową Lec13 (Ripka i wsp. Arch. Biochem. Biophys. 249: 533-545 (1986)) do wyrażania ludzkiej IgG1. Ta linia komórkowa CHO ma upośledzoną zdolność do dodawania fukozy, ale poza tym dodawała do IgG oligosacharyd, który był podobny do spotykanego w normalnych liniach CHO i w surowicy ludzkiej. Powstałe produkty IgG stosowano do oceny wpływu fukozylowanego węglowodau na funkcje efektorowe przeciwciała, w tym wiązanie ludzkiego FcyR, ludzkiego Clq, ludzkiego FcRn i ADCC stosując ludzkie komórki efektorowe.
P r z y k ł a d 1
Wiązanie do ludzkiego FcR
Konstrukty cDNA do stabilnych linii komórkowych: Łańcuchy ciężki i lekki humanizowanego przeciwciała anty-HER2 (Carter i wsp., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 89: 4285 (1992)), humanizowane, dojrzałe pod względem powinowactwa przeciwciało anty-IgE E27 (patent USA nr 6 172 213) i chimerowe przeciwciało anty-CD20 C2B8 (patent US nr 5 736 137) subklonowano do uprzednio opisanego wektora ekspresyjnego do komórek ssaczych (Lucas i wsp. Nucl. Acid Res. 24, 1774-1779 (1996)).
Stosowano puromycynę jako marker selekcyjny w komórkach DHFR(+), takich jak komórki Lec13 i zatrzymano miejsce DHFR do amplifikacji metotreksatem stabilnej linii komórkowej.
Transfekcja i hodowanie komórek CHO Lec13 i typu dzikiego: linię komórkową CHO ProLec13.6a (Lec13) otrzymano od Profesor Pameli Stanley z Albert Einstein College of Medicine z Yeshiva University. Linie rodzicielskie są Pro- (auksotrof prolinowy) i Gat- (auksotrof glicynowy, adenozynowy i tymidynowy). Linia komórkowa CHO-DP12 stosowana do przeciwciał typu dzikiego jest pochodną linii komórkowej CHO-K1 (ATCC #CCL-61), która ma niedobór reduktazy dihydrofolianu i ma obniżone wymaganie dla insuliny.
Linie komórkowe transfekowano cDNA stosując metodę Superfect (Qiagen, Valencia, CA). Selekcję komórek Lec13 wyrażających transfekowane przeciwciała przeprowadzono stosując dichlorowodorek puromycyny (Calbiochem, San Diego, CA) przy 10 pg/ml w podłożu hodowlanym zawierającym: podłoże MEM Alpha z L-glutaminą, rybonukleozydami i deoksyrybonukleozydami (GIBCO-BRL, Gaithersburg, MD), uzupełnione 10% inaktywowanym FBS (GIBCO), 10 mM HEPES i 1 x penicyliną/streptomycyną (GIBCO). Komórki CHO selekcjonowano podobnie w podłożu wzrostowym zawierającym Hama F12 bez GHT: DMEM z małą ilością glukozy bez glicyny z NaHCO3 uzupełnione 5% FBS (GIBCO), 10 mM HEPES, 2 mM L-glutaminą, 1 x GHT (glicyna, hipoksantyna, tymidyna) i 1 x penicylina/streptomycyna.
Kolonie tworzyły się w ciągu dwóch do trzech tygodni i były łączone do ekspansji i ekspresji białek. Pule komórek pierwotnie zaszczepiano przy 3 x 106 komórek/10 cm płytkę do ekspresji białek na małą skalę. Komórki przenoszono na podłoża bez surowicy po osiągnięciu 90-95% konfluencji i po 3-5 dniach zbierano supernatanty komórek i testowano w ELISA Fc IgG- i nienaruszony IgG aby ocenić poziomy ekspresji białek. Komórki Lec13 i CHO zaszczepiano przy około 8 x 106 komórek/15 cm płytka jednego dnia przed przerzuceniem na podłoże produkcyjne PS24 uzupełnione 10 mg/L zrekombinowanej ludzkiej insuliny i 1 mg/L pierwiastków śladowych.
Ekspresja białek: komórki Lec13 i CHO pozostawały w podłożu produkcyjnym wolnym od surowicy przez 3-5 dni. Supernatanty zbierano i klarowano przez wirowanie w stożkowych probówkach 150 ml aby usunąć komórki i pozostałości. Dodano inhibitory proteaz PMSF i aprotyninę (Sigma, St. Louis, MO) i supernatanty zatężono 5-krotnie na mieszanych komórkach stosując filtry MWCO30 (Amicon, Beverly, MA) przed natychmiastowym oczyszczeniem stosując chromatografię z białkiem G (Amersham Pharmacia Biotech, Piscataway, NJ)). Dla wszystkich białek wymieniono bufor do soli fizjologicznej buforowanej fosforanem (PBS) stosując zatężacze Centripriep-30 (Amicon) i analizowano za pomocą elektroforezy w żelu SDS-poliakryloamid.
Oznaczono stężenia białek stosując A280 i sprawdzono stosując analizę składu aminokwasów.
Średnio komórki Lec13 generowały 10 pg mAb na płytkę 15 cm; ekspresja w kontrolnych komórkach
CHO dla wszystkich przeciwciał była 4-5 razy wyższa niż w komórkach Lec13. Przeciwciała wygenePL 213 948 B1 rowane z CHO-DP12 hodowanych na płytkach będą oznaczane jako CHO-P. Komórki CHO-DP12 5 hodowano także w butelkach do mieszania. Komórki zaszczepiano przy 6 x 105 komórek/ml i hodowano w 37°C przez dwa dni. Trzeciego dnia zmieniono temperaturę na 33°C i pozwolono komórkom na wzrost aż żywotność spadła do 70% ze względu na spadek pH do -6,5. Przeciwciała pochodzące z komórek HO-DP12 hodowanych w butelkach do mieszania będzie określane jako CHO-S.
Analiza poprzez spektrometrię mas przy zastosowaniu laserowej desorpcja/jonizacji z czasem przelotu na matrycy (ang. Matrix-Assisted Laser Desorption/Ionization Time-of-flight, MALDI-TOF) oligosacharydów związanych z asparaginą: oligosacharydy związane przez N uwolniono ze zrekombinowanych glikoprotein stosując procedurę Papac i wsp., Glycobiology 8, 445-454 (1998). Pokrótce, studzienki 96-studzienkowej płytki do mikromiareczkowania wyścielonej PVDF (Millipore, Bedford, MA) kondycjonowano 100 μl metanolu, który był przeciągany przez membrany PDVF przez przyłożenie próżni do wielopróbkowego aparatu próżniowego Millipore Multiscreen. Kondycjonowane membrany PVDF płukano 3 x 250 μl wody.
Między wszystkimi etapami płukania studzienki w pełni opróżniano przykładając niewielką próżnię do aparatu. Membrany płukano buforem do redukcji i karboksymetylacji (RCM) złożonym z 6M chlorowodorku guanidyny, 360 mM Tris, 2 mM EDTA, pH 8,6. Próbki glikoproteiny (50 μg) nanoszono do poszczególnych studzienek, ponownie przeciągano przez membrany PVDF przez zastosowanie niewielkiej próżni i studzienki płukano 2 x 50 μl buforu RCM.
Immobilizowane próbki redukowano przez dodanie 50 μl 0,1M roztworu ditiotreitolu (DTT) do każdej studzienki i inkubację płytki mikrotytracyjnej w 37°C przez 1 godz. DTT usunięto za pomocą próżni i studzienki płukano 4 x 250 μl wody.
Reszty cysteiny karboksymetylowano przez dodatek 50 μl 0,1M roztworu kwasu jodooctowego (IAA), który był świeżo przygotowywany w 1M NaOH i rozcieńczany do 0,1M buforem RCM. Karboksymetylację uzyskano przez inkubację przez 30 min w ciemności w temperaturze otoczenia. Do płytki przyłożono próżnię w celu usunięcia roztworu IAA i studzienki płukano 4 x 250 μl oczyszczonej wody. Membrany PVDF blokowano przez dodatek 100 μl 1% roztworu PVP360 (poliwinylopirolidyna m. cz. 360000) (Sigma) i inkubację przez 1 godz. w temperaturze otoczenia. Usunięto roztwór PVP-360 za pomocą niewielkiej próżni i studzienki przepłukano 4 x 250 μl wody.
Do każdej studzienki dodano roztwór do trawienia PNGase F (New England Biolabs, Beverly, MA), 25 μl roztworu 25 jednostek/ml w 10 mM Tris octan, pH 8,4 i trawiono przez 3 godz. w 37°C. Po trawieniu próbki przeniesiono do 500 ml probówek Eppendorfa i do każdej próbki dodano 2,5 ml roztworu 1,5 M kwasu octowego.
Zakwaszone próbki inkubowano przez 3 godz. w temperaturze otoczenia aby przekształcić oligosacharydy z glikozyloamin do formy hydroksylowej. Przed analizą widm masowych MALDI-TOF uwolnione oligosacharydy odsolono stosując 0,7ml złoże żywicy kationowymiennej (żywica AG50W-X8 w formie wodorowej) (Bio-Rad, Hercules, CA) upakowanej jako zawiesina do zwartych probówek do reakcji (US Biochemical, Cleveland, OH).
Dla analizy spektralnej mas MALDI-TOF próbek na sposób dodatni, odsolone oligosacharydy (próbki 0,5 ml) naniesiono na nierdzewny cel z 0,5 ml matrycy kwasu 2,5 dihydroksybenzoesowego (sDHB), którą przygotowano przez rozpuszczenie 2 mg kwasu 2,5 dihydroksybenzoesowego z 0,1 mg kwasu 5-metoksysalicylowego w 1 ml etanol/10 mM chlorek sodu 1:1 (obj/obj).
Mieszaninę próbka/matryca suszono pod próżnią. W celu analizy w sposobie negatywnym, odsolone oligosacharydy (próbki 0,5 ml) naniesiono na nierdzewny cel z razem z 0,5 ml matrycy 2',4',6'-trihydroksyacetofeno-nowej (THAP) przygotowanej w 1:3 (obj/obj) acetonitryl/13,3 mM bufor cytrynian amonu.
Mieszaninę próbka/matrycę suszono pod próżnią i następnie pozostawiono do wchłonięcia wilgoci z powietrza przed analizą. Uwolnione oligosacharydy analizowano za pomocą MALDI-TOF na spektrometrze masowym PerSeptive BioSystems Voyager-DE. Spektrometr masowy uruchamiano przy 20 kV albo w sposobie dodatnim albo ujemnym z liniową konfiguracją i stosując opóźnioną ekstrakcję. Dane pozyskiwano stosując moc lasera 1300 i w wariancie sumowania danych (240 skany) aby poprawić stosunek sygnału do szumu.
Przyrząd kalibrowano mieszaniną standardowych oligosacharydów i dane wygładzano stosując punktowy algorytm Savitskyego-Golaya przed przypisaniem mas. Integrację danych widm mas uzyskano stosując pakiet oprogramowania Caesar 7.0 (SciBridge Software).
Wyniki podsumowano w następującej tabeli.
PL 213 948 B1
T a b e l a 2
Wiązanie przeciwciał do ludzkiego FcyR
Średnia (S. D.) N %-Fukc % Ga10 %Ga11 %Ga12
1 2 3 4 5 6 7
FYRIa’b
CHO-S 1,00 5 3 53 42 6
HO-P 0,97 (0,07) 5 2 73 25 3
Lec13(A) 1,04 (0,07) 4 92 50 43 1
Lec13(B) 1,04 (0,10) 5 91 55 40 5
FcyRIIA (R131)c
CHO-S 1,00 3 3 53 42 6
CHO-P 0,87 (0,14) 2 2 73 25 3
Lec13(A) 1,70 (0,04) 3 92 50 43 7
Lec13(B) 1,49 (0,16) 3 91 55 40 5
Lec13(C) 1,77 (0,38) 3 93 51 43 7
Lec13(D) 1,71 (0,40) 3 88 51 43 7
Lec13-Avg 1,62 (0,32) 12 91 (2) 52 (2) 42 (2) 7 (1)
FcyRIIA (H131)d
CHO-S 1,00 3 3 53 42 6
CHO-P 0,87 (0,07) 2 2 73 25 3
Lec13(A) 0,93 (0,08) 3 92 50 43 7
Lec13(B) 0,75 (0,07) 3 91 55 40 5
Lec13(C) 0,94 (0,15) 3 93 51 43 7
Lec13(D) 0,91 (0,07) 3 88 51 43 7
Lec13-Avg 0,88 (0,12) 12 91 (2) 52 (2) 42 (2) 7 (1)
FcyRBc
CHO-S 1,00 3 3 53 42 6
CHO-P 0,81 (0,11) 2 2 73 25 3
Lec13(A) 2,27 (0,35) 3 92 50 43 7
Lec13(B) 1,51 (0,22) 3 91 55 40 5
Lec13(C) 2,07 (0,33) 2 93 51 43 7
Lec13(D) 1,60 (0,45) 3 88 51 43 7
Lec13-Avg 1,81 (0,49) 12 91 (2) 52 (2) 42 (2) 7 (1)
FcyRIIIA (F158)e
CHO-S 1,00 3 3 53 42 6
CHO-P 0,94 (0,01) 2 2 73 25 31
Lec13(A) 27,0 (2,1) 3 92 50 43 7
Lec13(B) 22,8 (2,3) 3 91 55 40 5
Lec13(C) 25,1 (2,4) 3 93 51 43 7
Lec13(D) 22,3 (1,0) 3 88 51 43 7,1
Lec13-Avg 24,3 (2,6) 12 91 (2) 52 (2) 42 (2) 7 (1)
PL 213 948 B1 cd tabeli 2
1 2 3 4 5 6 7
HEK2 93-AAA 20,8 (0,9) 2
Lec13-AAA(A) 32,8 1 195 75 22 2
Lec13-AAA(B) 32,9 (2,9) 3 92 75 22 3
Lec13-AAA(C) 34,8 (3,0) 2
Lec13-AAA-Avg 33,5 (2,1) 6
FcyRIIIA (F158)f
HEK293 1,00 2
DP12 0,35 (0,01) 2
Lec13 7,63 (0,20) 2
FcyRIIIA (F158)g
HEK293 1,00 3
CHO-P 0,65 (0,24) 3
Lec13 1,92 (0,39) 3
HEK293-AAA 1,87 (0,24) 3
FcyRIIIA (F158) - transfekowane komórki CHOh
CHO-S 1,00 4
Lec13-D 15,7 2,4 4
Lec13-E 17,0 3,1 3
Lec13-F 15,8 3,2 3
Lec13-Avg 16,1 2,5 10
HEK2 93-AAA 10,7 1,4 3
Lec13-AAA-B 26,8 6,6 3
Lec13-AAA-C 25,9 5,9 3
Lec13-AAA-Avg 26,4 5,6 6
FcyRIIIA (V158)e
CHO 1,00 3 3 53 42 6
DP12 0,61 (0,01) 2 2 73 25 3
Lec13(A) 14,9 (2,9) 3 92 50 43 7
Lec13(B) 12,5 (1,3) 3 91 55 40 5
Lec13(C) 12,6 (3,3) 3 93 51 43 7
Lec13(D) 14,5 (1,9) 3 88 51 43 7
Lec13-Avg 13,6 (2,4) 12 91 (2) 52 (2) 42 (2) 7 (1)
HEK2 93-AAA 9,3 1
Lec13-AAA(A) 25,4 1 95 75 22 2
Lec13-AAA(B) 23,8 (1,1) 3 92 75 22 3
Lec13-AAA(C) 22,5 (0,2) 2
Lec13-AAA-Avg 23,1 (1,4) 6
PL 213 948 B1 cd tabeli 2
1 2 3 4 5 6 7
FcyRIIIA (V158)f
HEK293 1,00 2
CHO-P 0,32 (0,01) 2
Lec13 6,44 (0,19) 2
FcyRIIIA (V158)g
HEK293 1,00 3
CHO-P 1,00 (0,13) 3
Lec13 1,18 (0,10) 3
HEK293-AAA 1,15 (0,05) 3
Wszystkie wartości są stosunkiem A(wariant)/A(standard) mierzonymi przy A490nm<· CHO-S przedstawia IgG wyrażaną przez komórki CHO w butelkach do mieszania, CHO-P przedstawia IgG wyrażaną przez komórki CHO na płytkach 15 cm, Lec13 przedstawia IgG wyrażaną przez komórki Lec 13 na płytkach, HEK293 przedstawia IgG wyrażaną ludzkie komórki nerki 293, AAA przedstawia wariant IgG1 Ser298Ala/Glu333Ala/Lys334Ala, Lec13-S przedstawia IgG wyrażaną przez komórki Lec13 w butelkach do mieszania (zamiast płytek), litery w nawiasach przedstawiają niezależnie wyrażane partie IgG b dimery Hu4D5 przy [mAb] = 0,12 pg/ml c %-Fuk to procent całkowitego oligosacharydu bez fukozy, %Ga10, %Ga11, %Ga12 to procent całkowitego oligosacharydu bez (agalaktozyl), z jedną (monogalaktozyl), lub dwiema (digalaktozyl) resztami galaktozy kowalencyjnie związanymi z końcowymi resztami mannozy. Wartości w nawiasach są odchyleniami od średniej dla czterech niezależnie wyrażanych partii Lec13-Hu4D5 d dimery Hu4D5 przy [mAb] = 3,33 pg/ml e dimery Hu4D5 przy [mAb] = 1,11 pg/ml f dimery Hu4D5 przy [mAb] = 0,12 pg/ml g dimery E27 przy [mAb] = 0,12 pg/ml h heksamery E27 przy [mAb] = 0,12 pg/ml
Oznaczenia do mierzenia wiązania IgG1 do FcYR i FcRn (oparte na ELISA i w komórkach) opisano uprzednio (Shields i wsp. J. Biol. Chem. 27 6: 6591-6604 (2001) i WO 00/42072 (Presta).
Monomeryczna Lec13-Hu4D5 IgG1 wiązała ludzki FcYRI równoważnie do wiązania Hu4D5-CHO-S i CHO-P (fig. 4; tabela 2). Choć obecność węglowodanu jest potrzebna dla wiązania FcYRI (Walker i wsp. Biochem. J. 259: 347-353 (1989)), równoważne wiązanie IgG1 niezależnie od różnic w zawartości fukozy (Lec13 w porównaniu z CHO) lub zawartości galaktozy (CHO-P w porównaniu z CHO-S) wykazuje, że ludzki FcYRI nie jest wrażliwy na obecność tych reszt na węglowodanie. Wpływ galaktozylacji na wiązanie IgG do ludzkiego FcYRI badano uprzednio (Wright i wsp. J. Immunol. 160: 3393-3402 (1998); Kumpel i wsp. Human Antibod. Hybridomas 5: 143-151 (1994); i Tsuchiya i wsp. J. Rheumatol. 16: 285-290 (1989)) i przegląd tych danych sugeruje, że jeśli galaktozylacja ma wpływ na wiązanie FcYRI, jest on subtelny i może być zależny od izotypu (Wright i wsp. J. Immunol. 160: 3393-3402 (1998)).
W przeciwieństwie do monomerycznego wiązania IgG1 do ludzkiego FcYRI oznaczenie wiązania dla ludzkiego FcYR o niskim powinowactwie (FcYRII, FcYRIII) wymagało tworzenia dimerów (Hu4D5, HuE27) lub heksamerów (HuE27) aby spowodować wykrywanie wiązania. Ludzki FcYRIIA ma dwa znane, występujące naturalnie allotypy, które są określane przez aminokwas w pozycji 131 (Clark i wsp. J. Immunol. 143: 1731-1734 (1989)).
Ludzki FcYRIIIA ma naturalnie występujące allotypy w pozycji 48 (Leu, His lub Arg) i w pozycji 158 (Val lub Phe); allotyp FcYRIIIA (Val158) oddziałuje z ludzką IgG lepiej niż allotyp FcYRIIIA (Phel58) (Shields i wsp. J. Biol. Chem. 276: 6591-6604 (2001); Koene i wsp. Blood 90: 1109-1114 (1997); i Wu i wsp. J. Clin. Invest. 100: 1059-1070 (1997)).
Wiązanie dimerów Lec13-Hu4D5 do ludzkiego FcYRIIB i polimorficznej formy R131 ludzkiego FcYRIIA wykazało 1,8-krotną i 1,6-krotną poprawę wiązania, odpowiednio w porównaniu z CHO-Hu4D5 (fig. 5, 6; tabela 2). Przeciwnie, brak fukozy nie wpływał na wiązanie do polimorficznej formy H131 ludzkiego FcYRIIA (fig. 7; tabela 2).
Podobna poprawa wiązania IgG1 bez fukozy do zarówno ludzkiego FcYRIIA (R131) i FcYRIIB, z których każdy ma argininę w pozycji 131, w porównaniu z brakiem efektu na FcYRIIA (H131) sugeruje, że fukoza może albo bezpośrednio oddziaływać z resztą FcYR pozycji 131 lub zmienia konformację
PL 213 948 B1
IgG1 tak, by wywierać subtelny, negatywny wpływ na wiązanie gdy arginina jest obecna w FcyR w pozycji 131.
Obie polimorficzne formy FcyRIIIA wykazały znacząco ulepszone wiązanie do IgG1 pozbawionej fukozy. Wiązanie dimerycznego Lec13-Hu4D5 do FcyRIIIA (V158) wykazało 14-krotną poprawę w stosunku do CHO-Hu4D5 (fig. 8; tabela 2) i wiązanie do FcyRIIIA (F158) wykazało przynajmniej 100-krotną poprawę (fig. 9). Dimery Lec13-HuE27 też wykazały poprawione wiązanie do obu polimorficznych form FcyRIIIA (fig. 10, 11; tabela 2).
W uprzednich badaniach wpływu wariantów sekwencji białka ludzkiej IgG1 na wiązanie do ludzkiego FcyR, stosowano heksameryczne kompleksy złożone z trzech anty-IgE E27 i trzech IgE (Shields i wsp. J. Biol. Chem. 276: 6591-6604 (2001)); stąd też te kompleksy są trimerami w anty-IgE E27. W tamtych badaniach poprawa wiązania wariantu S298A/E333A/K334A-IgG1 do FcyRIIIA (F158) i FcyRIIIA (V158) była 1,5- do 2-krotna i 1,1-krotna, odpowiednio; choć poprawa może wydawać się minimalna, wpływ na ADCC był znaczący (Shields i wsp. J. Biol. Chem. 276: 6591-6604 (2001)).
W obecnych badaniach, heksameryczny kompleks S298A/E333A/K334A-IgG1 wykazał poprawione wiązanie do obu polimorficznych form FcyRIIIA zgodnie z wartościami z poprzednich badań (fig. 12, 13; tabela 2); podobnie heksameryczny kompleks Lec13-HuE27 (natywna IgG1) wykazał polepszone wiązanie około 2-krotne do FcyRIIIA (F158) (tabela 2). Gdy były oznaczane jako dimery, S298A/E333A/K334A-wariant IgG1 z fukozą wykazał 9-krotną i 20-krotną poprawę w wiązaniu FcyRIIIA (V158) i FcyRIIIA (F158), odpowiednio; ten sam wariant bez fukozy wykazał jeszcze większą poprawę wiązania do polimorficznych form 21-krotny i 33-krotny, odpowiednio (tabela 2).
Tak więc, brak fukozy nie tylko zwiększa wiązanie natywnej IgG1 do FcyRIIIA ale także może zwiększyć wiązanie wariantów IgG1. Tak więc, zmiany białka i węglowodanu są synergistyczne.
Dla wszystkich form HuE27 (natywna, S298A/E333A/K334A-IgG1, pochodząca z Lec13), poprawa wiązania większego kompleksu (trimeryczny w HuE27) była znacznie mniejsza niż obserwowana dla tego samego mAb jako kompleksu dimerycznego. Na przykład, wiązanie Lec13-HuE27 jako dimeru wykazało około 20-krotną poprawę, ale tylko 2-krotną poprawę dla większego kompleksu (tabela 2). Sugeruje to, że jako że wielkość kompleksu awidyczności może zacząć dominować nad wiązaniem.
Poprawione wiązanie się IgG1 z brakiem fukozy z FcyRIIIA potwierdzono z pełnej długości łańcuchem a FcyRIIIA (Phe158) wyrażanym razem z łańcuchem y na komórkach CHO (fig. 28; tabela 2). W przypadku samej fuzji białkowej łańcucha α w teście ELISA, niedobór fukozy był synergistyczny z wariantem S298A/E333A/K334A-IgG1.
Oceniano także wiązanie natywnęj i pozbawionej fukozy IgG1 do mysich FcyRII i FcyRIII. Ludzka IgG1, nawet jako dimery, słabo wiąże się do tych receptorów i nie stwierdzono poprawy wiązania z IgG1 bez fukozy. Inny receptor dla IgG, noworodkowy receptor Fc (FcRn), jest strukturalnie niespokrewniony z FcyR (Burmeister i wsp. Nature 372: 379-383 (1994); i Raghavan i wsp. Annu. Rev. Cell Dev. Biol. 12: 181-220 (1996)) i zaproponowano, że bierze udział w szeregu procesów biologicznych, w tym szybkości kliransu IgG (Ghetie i wsp. Annu. Rev. Immunol. 18: 739-766 (2000)).
Wiązanie fukozylowanych i nie-fukozylowanych IgG1 do FcRn było równoważne (fig. 14). To nie jest dziwne ponieważ aglikozylowana IgG1 wiąże ten receptor podobnie do glikozylowana IgG1 (agliko Ab wiąże FcRn).
Brak fukozy na węglowodanie związanym z Asn297 dał znacząco poprawione wiązanie do ludzkiego FcyRIIIA (obu form polimorficznych F158 i V158) w oznaczeniu w formacie ELISA. Zwiększone wiązanie do FcyRIIIA zostało dalej wzmocnione przez zdolność IgG fukoza-minus do wzmagania cytotoksyczności w oznaczeniach ADCC stosujących oczyszczone ludzkie PBMC. Poprawiona cytotoksyczność była szczególnie widoczna przy niższych stężeniach przeciwciała, sugerując, że terapeutyczne przeciwciała, które stosują ADCC mogłyby być podawane przy niższej dawce aby zapewnić ekwiwalentne zabijanie komórek jak wyższa dawka fukozylowanej IgG.
Stwierdzono mniejszą poprawę w wiązaniu IgG fukoza-minus do ludzkiego FcyRIIA (R131) i FcyRIIB; nie stwierdzono różnicy dla ludzkiego FcyRIIA(H131). Dwa pierwsze receptory mają argininę w pozycji 131, implikując, bez ograniczania się do tej teorii, że w fukozylowanej IgG reszta fukozy może albo oddziaływać bezpośrednio (i ewidentnie, negatywnie) z resztą 131 FcyRII lub może subtelnie wpływać na konformację IgG, co daje w efekcie interakcję negatywną.
Chociaż poprawa wiązania IgG fukoza-minus do FcyRIIA (R131) i FcyRIIB w oznaczeniach w formacie ELISA było małe (~ 2-krotne), oznaczenia ADCC stosujące monocyty także wykazały pewną zwiększoną cytotoksyczność przy niższych stężeniach przeciwciała. Monocyty wyrażają FcyRI,
PL 213 948 B1
FcyRIIA, FcyRIIB i tylko subpopulacja monocytów wyraża FcyRIIIA. Ponieważ wiązanie do ludzkiego FcyRI było równoważne dla zarówno fukozylowanej IgG i IgG fukoza-minus, poprawa w ADCC najprawdopodobniej nie jest wynikiem różnicowej interakcji z FcyRI. Zarówno monocyty dawcy FcyRIIA (R131/R131) i FcyRIIA (H131/H131) wykazały pewną poprawę w ADCC (fig. 21, 22) sugerując bez ograniczania się do dowolnej jednej teorii, że:
(1) FcyRIIA może nie być wyrażany na dostateczne wysokim poziomie na monocytach aby wykazać różnicę między dwiema formami polimorficznymi, (2) FcyRIIB może być dominującym wiązaniem FcyR (wpływając ekwiwalentnie na zarówno monocyty R131/R131 i H131/H131) lub (3) subpopulacja monocytów wyrażających FcyRIIA jest odpowiedzialna za poprawiony ADCC.
Porównanie węglowodanu obecnego na natywnej IgG z IgG1 produkowaną przez Lec13 i przez
CHO nie wykazywało wyraźnych różnic w stopniu galaktozylacji i tak więc wyniki mogą być przypisane wyłącznie obecności/brakowi fukozy.
Jednak dla wariantu IgG1 S298A/E333A/K334A produkowana przez Lec13, HEK293 i DP12 IgG1 wykazała zróżnicowaną galaktozylację. Jednak kombinacja wariantów sekwencji białka i braku fukozy nie wydawały się być addytywne.
Uprzednie badania wariantów sekwencji białka ludzkiej IgG wykazały, że podstawienia alaniny (i inne) w niektórych pozycjach Fc mogły zmniejszać lub poprawić wiązanie do FcyR jak i wykazywać poprawione ADCC (Shields i wsp. J. Biol. Chem. 276 (9): 6591-6604 (2001)). Jest interesujące, że niektóre z nich nie były w pobliżu interfejsu interakcji spotykanego w strukturze kryształu kompleksu Fc ludzkiej IgG-ludzki FcyRIIIA (Sondermann i wsp. Nature 406: 267-273 (2000)).
Na przykład, z trzech podstawień alaniną S298A/E333A/K334A stosowanych w tych badaniach tylko S298 jest na złączu Fc-FcyRIIIA w strukturze kryształu. Podobnie w strukturze ko-kryształu żadna z obu reszt fukozy na dwóch ciężkich łańcuchach Fc oddziałuje z FcyRIIIA. Inspekcja struktur kryształów Fc or IgG ludzkich lub gryzoni wykazuje, że fukoza może przyjmować zmienne konformacje i wykazuje wysokie czynniki B, sugerując wysoki stopień mobilności.
Normalne komórki CHO i HEK293 dodają fukozę do oligosacharydu IgG w wysokim stopniu (97-98%). IgG z surowic są także wysoce fukozylowane.
P r z y k ł a d 2
Wiązanie Clq i FcRn
Wiązanie Clq do przeciwciał jest pierwszym etapem w klasycznym szlaku aktywacji dopełniacza (Makrides, S. C. Pharmacol. Rev. 50: 59-87 (1998)). Charakter węglowodanu na IgG wpływa na oddziaływanie z Clq (Wright i wsp. J. Immunol. 160: 3393-3402 (1998); Boyd i wsp. Molec. Immunol. 32: 1311- 1318 (1995); i Tsuchiya i wsp. J. Rheumatol. 16: 285-290 (1989)). Hu4D5 wiąże ludzki Clg słabiej niż RITUXAN©, chimerowa IgG1 mysz/człowiek anty-CD20 (fig. 15, 16) (Idusogie i wsp. J. Immunol. 164: 4178-4184 (2000)) i brak fukozy nie wpływał na zdolność Hu4D5 do interakcji z ludzkim Clq (fig. 15, 16). Podobnie obecność lub brak fukozy nie wydają się wpływać na wiązanie IgG1 do FcRn.
P r z y k ł a d 3
Cytotoksyczność komórkowa zależna od przeciwciała (ADCC)
Wpływ braku fukozy na ADCC oceniano stosując Lec13-Hu4D5 IgG1 na linię ludzką raka piersi SK-BR-3 (Hudziak i wsp. Mol. Cell Biol. 9: 1165-1172 (1989)). PBMC od dwóch dawców Fc(RIIIA (V158/F158) i dwóch dawców FcyRIIIA (F158/F158) stosowano jako komórki efektorowe w stosunku efektor:cel 30:1. U wszystkich dawców IgG1 bez fukozy wykazał znaczącą poprawę w ADCC w porównaniu z IgG1 z fukozą (fig. 17-20). Istotne jest, że dla wszystkich dawców poprawa cytotoksyczności była bardziej widoczna w miarę obniżana stężenia przeciwciała. To może być odbiciem większej poprawy wiązania obserwowanej dla dimerów w porównaniu z heksametrami, tzn. wariant fuktozaminus może wymagać mniej mAb na powierzchni komórki docelowej aby wpłynąć na wiązanie/aktywację komórki efektorowej.
Ludzkie monocyty wyrażają FcyRI, FcyRIIA, FcyRIIB i tylko subpopulacja wyraża FcyRIIIA. Ponieważ brak fukozy nie wpływał na wiązanie do FcyRI ale miał niewielki wpływ na wiązanie do FcyRIIA (R131) i FcyRIIB, przeprowadzono oznaczenia ADCC stosując oczyszczone ludzkie monocyty jako komórki efektorowe przy stosunkach efektor: cel 20:1, 10:1 i 5:1. Oczyszczanie monocytów jest trudniejsze niż oczyszczanie PBMC i z tego powodu oznaczenie ADCC jest trudniejsze. Jak z ADCC PBMC, ADCC monocytów wykazywały poprawioną cytotoksyczność dla IgG1 pozbawionej fukozy choć efekt wydaje się mniej wyraźny i zdolność monocytów do zabijania docelowych komórek jest obniżona w porównaniu z PBMC (fig. 21-22).
PL 213 948 B1
P r z y k ł a d 4
Aktywność ADCC przeciwciał z wariantem Fc
Następujące doświadczenia porównywały:
(1) Hu4D5 wyrażany w komórkach CHO (Hu4D5 CHO-S), (2) wariant Hu4D5 z niedoborem fukozy wyrażany w komórkach Lec13 (hu4D5 Lec13), (3) wariant Hu4D5 z podstawieniem potrójnym alaniny w domenie Fc wyrażany w komórkach 293 HEK (Hu4D5 HEK293-AAA) i (4) wariant Hu4D5 z podstawieniem potrójnym alaniny w domenie Fc wyrażany w komórkach Lec13 (Hu4D5-Lec13-AAA).
Metody ADCC: komórki naturalnych zabójców (NK) oczyszczono z obwodowej krwi 2 dawców stosując negatywną selekcję z paciorkami magnetycznymi (Miltenyi Biotech, Auburn, CA). Dawców wybrano tak, by byli homozygotyczni względem allelu wyrażającego formę F158 FcyR3 (CD16)(F/F158) (Shields i wsp., J. Biol. Chem. 27 6: 6591-6604 (2001)), która wykazuje fenotyp wiązania o niższym powinowactwie dla IgG.
Komórki raka piersi SKBR-3 z nadekspresją HER2 oposonizowano z I ng/ml każdego przeciwciała przez 45 minut w 25°C w podłożach do oznaczeń (50:50 Hams F12: DMEM zawierające 1% inaktywowaną termicznie płodową surowicę bydlęcą i 10 mM bufor Hepes) i następnie traktowano różnymi stężeniami komórek NK ze stosunkiem efektora do celu (E:T) w zakresie od 0:1 do 0,156 przez 5 godzin w 37°C w nawilżanym inkubatorze CO2. Cytotoksyczność mierzono na podstawie uwalniania dehydrogenazy mleczanowej (LDH) stosując handlowy zestaw (Roche Diagnostics, Indianapolis, IN).
Metoda barwienia komórek NK za pomocą pośredniej immunofluorescencji: oczyszczone komórki NK inkubowano z 2 μg/ml każdego wariantu Hu4D5 przez 30 min. w 4°C w buforze do barwienia (sól fizjologiczna buforowana fosforanem, 0,1% bydlęca albumina surowicza, 0,01% azydek sodu). Komórki płukano 3 razy i inkubowano z połączonym z fikoerytryną mysim mab anty-ludzki CD56 (Pharmingen, San Diego, CA) i FITC - kozi F(ab')2 specyficzny wobec ludzkiej IgG (F(ab')2 (Jackson Immunoresearch, West Grove, PA) przez dodatkowe 30 min. w 4°C.
Komórki analizowano pod kątem 2-barwnego barwienia immunofluorescencyjnego na cytometrze przepływowym 2 barwnym FACS-can™ (B. D. Biosciences, San Jose, CA).
Wniosek: u obu dawców (5365 i 7580), wystąpiła zwiększona aktywność ADCC przy stosunkach E/T większych niż 2 (patrz figury 26 i 27) dla formy Hu4D5-Lec13-AAA Hu4D5 względem formy Hu4D5-Lec13, co sugeruje synergistyczne zwiększenie wiązania FcyRIII/ADCC w potrójnym alaninowym wariancie Fc z brakiem fukozy.
To zwiększone wiązanie potwierdzono poprzez barwienie z pośrednią immunofluorescencją komórek NK u dawcy 5365 (patrz figury 24 i 25) w komórkach NK wyrażających CD56/CD16.
PL 213 948 B1
Lista sekwencji <110> Genenteeh, Inc.
<12 0> Kompozycje glikoprotein <130> P1877R1PCT <140> PCT/US02/33739 <141> 2002-10-22 <150> US 60/337,642 <151> 2001-10-25 <150> US 60/347,694 <151> 2002-01-09 <160> 9 <21Q> 1 <211> 218 <212> PRT <213> homo sapiens <400> 1
Pro 1 Ala Pro Glu Leu 5 Leu ciy Gly Pro Ser 10 Val Phe Leu Phe Pro 15
Pro Lys Pro Lys ASp 20 Thr Leu Met Ile Ser 25 Arg Thr Pro Glu Val 30
Thr Cys Val Val Val 35 Asp Val Ser His Glu 40 Asp Pro Glu Val Lys 45
Phe Asn Trp Tyr Val 50 Asp Gly Val Glu Val 55 His Asn Ala Lys Thr 60
Lys Pro Arg Glu Glu 65 Gin Tyr Asn Ser Thr 70 Tyr Arg Val Val Ser 75
Val Leu Thr Val Leu 80 His Gin Asp Trp Leu 85 Asn Gly Lys Glu Tyr 90
Lys Cys Lys Val Ser 95 Asn Lys Ala Leu Pro 100 Ala Pro Ile Glu Lys 105
Thr Ile Ser Lys Ala 110 Lys Gly Gin Pro Arg 115 Glu Pro Gin Val Tyr 120
Thr Leu Pro Pro Ser 125 Arg Glu Glu Met Thr 130 Lys Asn Gin Val Ser 135
Leu Thr Cys Leu Val 140 Lys Gly Phe Tyr Pro 14 5 Ser Asp Ile Ala Val 150
Glu Trp Glu Ser Asn 155 Gly Gin Pro Glu Asn 160 Asn Tyr Lys Thr Thr 165
Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
PL 213 948 B1
Leu Thr Val ASp Lys 185 Ser Arg Trp Gin Gin Gly Asn Val 190 Phe Ser 195
Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gin Lys
200 205 210
Ser Leu. Ser Leu Ser Pro Gly Lys
215
<210> 2
<211> 218
<212> PR?
<213> homo sapiens
<4Q0> 2
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro
1 5 10 15
Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val
20 25 30
Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys
35 40 45
Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr
50 55 60
Lys Pro Arg Glu Glu Gin Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser
65 70 75
Val Leu Thr Val Leu His Gin Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr
80 85 90
Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys
95 100 105
Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gin Pro Arg Glu Pro Gin Val Tyr
110 115 120
Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gin Val Ser
125 130 135
Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Al a Val
140 145 150
Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gin Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr
155 160 165
Pro Pro Val lj O Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
170 175 180
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gin Gin Gly Asn Val Phe Ser
185 190 195
Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gin Lys
200 205 210
Ser Leu Ser L Ser Pro Gly Lys
215 <210> 3
PL 213 948 B1 <211> 217 <212> PRT <213> homo sapiens
<400> 3 Alei Gly Pro Ser Val 10 Phe Leu Phe Pro Pro 15
Pro 1 Ara Pro Pro Vai 5
Lys Pro Lys Asp Thr Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr
20 25 30
Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Gin Phe
35 40 45
Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys
50 55 60
Pro Arg Glu Glu Gin Phe Asn Ser Thr Phe Arg Val Val. Ser Val
65 70 75
Leu Thr Val Val His Gin Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys
80 85 90
Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr
95 100 105
Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gin Pro Arg Glu Pro Gin Val Tyr Thr
110 115 120
Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gin Val Ser Leu
125 130 135
Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Al a Val Glu
140 145 150
Trp Glu Ser Asn Gly Gin Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro
1S5 160 165
Pro Met Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu
170 175 180
Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gin Gin Gly Asn Val Phe Ser Cys
185 190 195
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gin Lys Ser
200 205 210
leu Ser leu Ser Pro Gly Lys
215 <210> 4 <211> 218 <212> PRT <213> homo sapiens <400> 4
Pro 1 Ala Pro Glu Leu 5 Leu Gly Gly Pro Ser 10 Val Phe Leu Phe Pro 15
Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val
25 30
PL 213 948 B1
Thr Cys Val Val Val 35 Asp val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Gin
40 45
Phe Lys Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr
50 55 60
Lys Pro Arg Glu Glu Gin Phe Asn Ser Thr Phe Arg Val Val Ser
65 70 75
Val Łeu Thr Val Leu His Gin ASP Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr
80 85 90
Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys
95 100 105
Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gin Pro Arg Glu Pro Gin Val Tyr
110 115 120
Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gin Val Ser
125 130 135
Leu Thr Cys Leu val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val
140 145 150
Glu Trp Glu Ser Ser Gly Gin Pro Glu Asn Asn Tyr Asn Thr Thr
155 160 165
Pro Pro Met Łeu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
170 175 180
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gin Gin Gly Asn Ile Phe Ser
185 190 195
Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn Arg Phe Thr Gin Lys
200 205 210
Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
215 <210> 5 <211> 218 <212> PRT <213> homo sapiens <400> 5
Pro 1 Ala Pro Glu Phe 5 Leu Gly Gly Pro Ser 10 Val Phe Leu Phe Pro 15
Pro Lys Pro Lys Asp 20 Thr Leu Met Ile Ser 25 Arg Thr Pro Glu Val 30
Thr Cys Val Val Val 35 Asp Val Ser Gin Glu 40 Asp Pro Glu Val Gin 45
Phe Asn Trp Tyr Val 50 Asp Gly Val Glu Val 55 His Asn Ala Lys Thr 60
Lys Pro Arg Glu Glu CjJl π Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser
10 75
PL 213 948 B1
Val Leu Thr Val Leu 80 His Gin Asp Trp Leu 85 Asn Gly Lys Glu Tyr 90
Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys
95 100 105
Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gin Pro Arg Glu Pro Gin Val Tyr
110 115 120
Thr Leu Pro Pro Ser Gin Glu Glu Met Thr Lys Asn Gin Val Ser
125 130 135
Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val
140 145 150
Glu Trp Glx Ser Asn Gly Gin Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr
155 160 165
Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg
17 0 175 180
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gin Glu Gly Asn Val Phe Ser
185 190 195
Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gin Lys
200 205 210
Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys
215 <210> 6 <211> 215 <212> PRT <213> Mus musculus <400> δ
Thr 1 Val Pro Glu Val 5 Ser Ser Val Phe Ile 10 Phe Pro Pro Lys Pro 15
Lys Asp Val Leu Thr 20 Ile Thr Leu Thr Pro 25 Lys Val Thr Cys Val 30
Val Val Asp I le Ser 35 Lys Asp Asp Pro Glu 40 Val Gin Phe Ser Trp 4 5
Phe Val Asp Asp Val 50 Glu Val His Thr Ala 55 Gin Thr Gin Pro Arg 60
Glu Glu Gin Phe Asn 65 Ser Thr Phe Arg Ser 70 Val Ser Glu Leu Pro 75
Ile Met His Gin Asp 80 Cys Leu Asn Gly Lys 85 Glu Phe Lys Cys Arg 90
Val Asn Ser Ala Ala 95 Phe Pro Ala Pro Ile 100 Glu Lys Thr Ile Ser 105
Lys Thr Lys Gly Arg 110 Pro Lys Ala Pro Gin 115 Val Tyr Thr Ile Pro 120
Pro Pro Lys Glu Gin. Met Ala Lys Asp Lys Val Ser Leu Thr Cys
PL 213 948 B1
125 130 135
Met Ile Thr Asp Phe 140 Phe Pro Glu Asp Ile 145 Thr Vai Glu Trp Gin 150
Trp Asn Gly Gin Pro Ala Glu Asn Tyr Lys Asn. Thr Gin Pro Tle
155 160 165
Met Asp Thr Asp Gly Ser Tyr Phe Val Tyr Ser Lys Leu Asn Val
170 175 180
Gin Lys Ser Asn Trp Glu Ala Gly Asn Thr Phe Thr Cys Ser Val
185 190 195
Leu His GXxi Gly Leu His Asn His His Thr Glu Lys Ser Leu Ser
200 205 210
His Ser Pro Gly Lys
215 <210> 7 <211> 218 <212.'- PRT <213> Mus musculus <400> 7
Pro 1 Ala Pro Asn Leu 5 Leu Gly Gly Pro Ser 10 Val Phe Ile Phe Pro 15
Pro Lys Ile Lys Asp 20 Val Leu Met Ile Ser 25 Leu Ser Pro Ile Val 30
Thr Cys Val Val Val 35 Asp Val Ser Glu Asp 40 Asp Pro Asp Val Gin 45
Ile Ser Trp Phe Val 50 Asn Asn Val Glu Val 55 His Thr Ala Gin Thr 60
Gin Thr His Arg Glu 65 Asp Tyr Asn Ser Thr 70 Leu Arg Val Val Ser 75
Ala Leu Pro Ile Gin 80 His Gin Asp Trp Met 85 Ser Gly Lys Glu Phe 90
Lys cys Lys Val Asn 95 Asn Lys Asp Leu Pro 100 Ala Pro Ile Glu Arg 105
Thr Ile Ser Lys Pro 110 Lys Gly Ser Val Arg 115 Ala Pro Gin Val Tyr 120
Va.l Leu Pro Pro Pro 125 Glu Glu Gili Met Thr 130 Lys Lys Gin Val Thr 135
Leu Thr Cys Met Val 140 Thr Asp Phe Met Pro 145 Glu Asp Ile Tyr Val 150
Glu Trp Thr Asn Asn 155 Gly Łys Thr Glu Leu 160 Asn Tyr Lys Asn Thr 165
Glu Pro Val Leu Asp 170 Ser Asp Gly Ser Tyr 175 Phe Met Tyr Ser Lys 180
PL 213 948 B1
Leu Arg Val Glu Lys Lys Asn Trp Val Glu Arg Asn Ser Tyr Ser
185 190 195
Cys Ser val Val His Glu Gly Leu His Asn His His Thr Thr Lys
200 205 210
Ser Phe Ser Arg Thr Pro Gly Lys
215 <210> 8 <2łl> 218 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 8
Pro Ala 1 Pro Asn Leu Glu Gly Gly Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro 15
5 10
Pro Asn Ile Lys Asp Val Leu Met Ile Ser Leu Thr Pro Lys val
20 25 30
Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Glu Asp Asp Pro Asp Val Gin
35 40 45
Ile Ser Trp Phe vai Asn Asn Val Glu Val His Thr Ala Gin Thr
50 55 60
Gin Thr His Arg Glu Asp Tyr Asn Ser Thr Ile Arg Val Val Ser
65 70 75
His Leu Pro Ile Gin His Gin Asp Trp Met Ser Gly Lys Glu Phe
80 85 90
Lys Cys Lys Val Asn Asn Lys Asp Leu Pro Ser Pro Ile Glu Arg
95 100 105
Thr Ile Ser Lys Pro Lys Gly Leu Val Arg Ala Pro Gin Val Tyr
110 115 120
Thr Leu Pro Pro Pro Ala Glu Gin Leu Ser Arg Lys Asp Val Ser
125 130 135
Leu Thr Cys Leu Val Val Gly Phe Asn Pro Gly Asp Ile Ser Val
140 145 150
Glu Trp Thr Ser Asn Gly His Thr Glu Glu Asn Tyr Lys Asp Thr
155 160 165
Ala Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Tyr Phe Ile Ser Lys
170 175 180
Leu Asn Met Lys Thr Ser Lys Trp Glu Lys Thr Asp Ser Phe Ser
185 190 195
Cys Asn Val Arg His Glu Gly Leu Lys Asn Tyr Tyr Leu Lys Lys
200 205 210
Thr Tle Ser Arg Ser Pro Gry Lys
215
PL 213 948 B1 <210> 9 <211> 218 < 212 > PRT <213> Mus musculus <400> 9
Pro 1 Pro Gly Asn Ile 5 Leu Gly Gly Pro Ser 10 Val Phe Ile Phe Pro 15
Pro Lys Pro Lys Asp Ala Leu Met Ile Ser Leu Thr Pro Lys Val
20 25 30
Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Glu Asp Asp Pro Asp Val His
35 40 45
Val Ser Trp Phe Val Asp Asn Lys Glu Val His Thr Ala Trp Thr
50 55 60
Gin Pro Arg Glu Ala Gin Tyr Asn Ser Thr Phe Arg Val Val Ser
65 70 75
Ala Leu Pro Ile Gin His Gin Asp Trp Met Arg dy Lys Glu Phe
80 85 90
Lys Cys Lys Val Asn Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Arg
95 100 105
Thr Ile Ser Lys Pro Lys Gly Arg Ala Gin Thr Pro Gin Val Tyr
110 115 120
Thr Ile Pro Pro Pro Arg Glu Gin Met Ser Lys Lys Lys Val Ser
125 130 135
Leu Thr Cys Leu val Thr Asn Phe Phe Ser Glu Ala Ile Ser Val
140 145 150
Glu Trp Glu Arg Asn Gly Glu Leu Glu Gin Asp Tyr Lys Asn Thr
155 160 165
Pro Pro Ile Leu Asp Ser Asp Gly Thr Tyr Phe Leu Tyr Ser Lys
170 175 180
Leu Thr Val Asp Thr Asp Ser Trp Leu Gin Gly Glu Ile Phe Thr
185 190 195
Cys Ser Val Val His Glu Ala Leu His Asn His His Thr Gin Lys
200 205 210
Asn Leu Ser Arg Ser Pro Gly Lys
215

Claims (65)

1. Kompozycja, znamienna tym, że zawiera glikoproteinę posiadającą region Fc ludzkiej IgG, przy czym 51-100% tej glikoproteiny w kompozycji zawiera strukturę dojrzałego rdzenia węglowodanowego, pozbawionego fukozy, przyłączonego do regionu Fc glikoproteiny, przy czym region Fc zawiera sekwencję aminokwasową, która różni się od natywnej sekwencji regionu Fc ludzkiej IgG i gdzie glikoproteina ta:
(a) wiąże się z FcyRIII z większym powinowactwem; lub (b) pośredniczy w zależnej od przeciwciała toksyczności za pośrednictwem komórek (ADCC) bardziej skutecznie niż glikoproteina ze strukturą dojrzałego rdzenia węglowodanowego zawierającego fukozę, przyłączoną do regionu Fc glikoproteiny i fizjologicznie akceptowalny nośnik, zaróbkę lub stabilizator.
2. Kompozycja według zastrz. 1, znamienna tym, że region Fc zawiera podstawienia aminokwasowe w dowolnej z jednej albo większej liczby pozycji aminokwasowych 256, 290, 298, 312, 326, 330, 333, 334, 360, 378 lub 430, stosując numerację EU dla reszt regionu Fc.
3. Kompozycja według zastrz. 2, znamienna tym, że region Fc zawiera podstawienia aminokwasowe w dowolnej z jednej albo większej liczby pozycji 298, 333 i 334.
4. Kompozycja według zastrz. 3, znamienna tym, że region Fc zawiera podstawienia aminokwasowe w pozycjach 298, 333 i 334.
5. Kompozycja według zastrz. 4, znamienna tym, że zastępującymi resztami w pozycjach 298, 333 i 334 są alaniny.
6. Kompozycja według zastrz. 1, znamienna tym, że region Fc zawiera podstawienie aminokwasowe w dowolnej z jednej albo większej liczby pozycji aminokwasowych 238, 239, 248, 249, 252,
254, 255, 256, 258, 265, 267, 268, 269, 270, 272, 276, 278, 280, 283, 285, 286, 289, 290, 292, 293,
294, 295, 296, 298, 301, 303, 305, 307, 309, 312, 315, 320, 322, 324, 326, 327, 329, 330, 331, 333,
334, 335, 337, 338, 340, 360, 373, 376, 378, 382, 388, 389, 398, 414, 416, 419, 430, 434, 435, 437,
438 lub 439 regionu Fc.
7. Kompozycja według zastrz. 6, znamienna tym, że region Fc zawiera podstawienie aminokwasowe w dowolnej z jednej albo większej liczby pozycji aminokwasowych 238, 239, 248, 249, 252, 254, 265, 268, 269, 270, 272, 278, 289, 292, 293, 294, 295, 296, 298, 301, 303, 322, 324, 327, 329,
333, 335, 338, 340, 373, 376, 382, 388, 389, 414, 416, 419, 434, 435, 437, 438 lub 439 regionu Fc.
8. Kompozycja według zastrz. 6, znamienna tym, że region Fc zawiera podstawienie aminokwasowe w dowolnej z jednej albo większej liczby pozycji aminokwasowych 238, 265, 269, 270, 327 lub 329 regionu Fc i tym, że region Fc wykazuje zmniejszone wiązanie do FcyRI w stosunku do regionu Fc o sekwencji natywnej.
9. Kompozycja według zastrz. 6, znamienna tym, że region Fc zawiera podstawienie aminokwasowe w dowolnej z jednej albo większej liczby pozycji aminokwasowych 238, 265, 269, 270, 292, 294, 295, 298, 303, 324, 327, 329, 333, 335, 338, 373, 376, 414, 416, 419, 435, 438 lub 439 regionu Fc i tym, że region Fc wykazuje zmniejszone wiązanie do FcyRII w stosunku do regionu Fc o sekwencji natywnej.
10. Kompozycja według zastrz. 6, znamienna tym, że region Fc zawiera podstawienie aminokwasowe w dowolnej z jednej albo większej liczby pozycji aminokwasowych 238, 239, 248, 249, 252, 254, 265, 268, 269, 270, 272, 278, 289, 293, 294, 295, 296, 301, 303, 322, 327, 329, 338, 340, 373, 376, 382, 388, 389, 416, 434, 435 lub 437 regionu Fc i tym, że region Fc wykazuje zmniejszone wiązanie do FcyRIII w stosunku do regionu Fc o sekwencji natywnej.
11. Kompozycja według zastrz. 6, znamienna tym, że region Fc zawiera podstawienie aminokwasowe w dowolnej z jednej albo większej liczby pozycji aminokwasowych 255, 256, 258, 267, 268, 272, 276, 280, 283, 285, 286, 290, 298, 301, 305, 307, 309, 312, 315, 320, 322, 326, 330, 331, 333,
334, 337, 340, 360, 378, 398 lub 430 regionu Fc i tym, że region Fc wykazuje zwiększone wiązanie do jednego lub większej liczby FcyR w stosunku do regionu Fc o sekwencji natywnej.
12. Kompozycja według zastrz. 11, znamienna tym, że region Fc zawiera podstawienie aminokwasowe w pozycji 298 i/lub 333 regionu Fc i tym, że region Fc wykazuje zwiększone wiązanie do FcyRIII w stosunku do regionu Fc o sekwencji natywnej.
13. Kompozycja według zastrz. 12, znamienna tym, że region Fc wykazuje ponadto zmniejszone wiązanie do FcyRII w stosunku do regionu Fc o sekwencji natywnej.
PL 213 948 B1
14. Kompozycja według zastrz. 11, znamienna tym, że region Fc zawiera podstawienie aminokwasowe w dowolnej z jednej albo większej liczby pozycji aminokwasowych 255, 256, 258, 267, 268, 272, 276, 280, 283, 285, 286, 290, 301, 305, 307, 309, 312, 315, 320, 322, 326, 330, 331, 337, 340, 378, 398 lub 430 regionu Fc i tym, że region Fc wykazuje zwiększone wiązanie do FcYRII w stosunku do regionu Fc o sekwencji natywnej.
15. Kompozycja według zastrz. 14, znamienna tym, że region Fc wykazuje zmniejszone wiązanie do FcYRIII.
16. Kompozycja według zastrz. 15, znamienna tym, że region Fc zawiera podstawienie aminokwasowe w dowolnej z jednej albo większej liczby pozycji aminokwasowych 268, 272, 298, 301, 322 lub 340 regionu Fc.
17. Kompozycja według zastrz. 1, znamienna tym, że region Fc ma zmienione powinowactwo wiązania do FcRn w stosunku do regionu Fc o sekwencji natywnej.
18. Kompozycja według zastrz. 17, znamienna tym, że region Fc zawiera podstawienie aminokwasowe w dowolnej z jednej albo większej liczby pozycji aminokwasowych 238, 252, 253, 254, 255, 256, 265, 272, 286, 288, 303, 305, 307, 309, 311, 312, 317, 340, 356, 360, 362, 376, 378, 380, 382, 386, 388, 400, 413, 415, 424, 433, 434, 435, 436, 439 lub 447 regionu Fc.
19. Kompozycja według zastrz. 18, znamienna tym, że region Fc zawiera podstawienie aminokwasowe w dowolnej z jednej albo większej liczby pozycji aminokwasowych 252, 253, 254, 255, 288, 309, 386, 388, 400, 415, 433, 435, 436, 439 lub 447 regionu Fc i tym, że region Fc wykazuje zmniejszone wiązanie do FcRn w stosunku do regionu Fc o sekwencji natywnej.
20. Kompozycja według zastrz. 18, znamienna tym, że region Fc zawiera podstawienie aminokwasowe w dowolnej z jednej albo większej liczby pozycji aminokwasowych 238, 256, 265, 272, 286, 303, 305, 307, 311, 312, 317, 340, 356, 360, 362, 376, 378, 380, 382, 413, 424 lub 434 regionu Fc i tym, że region Fc wykazuje zwiększone wiązanie do FcRn w stosunku do regionu Fc o sekwencji natywnej.
21. Kompozycja według zastrz. 1, znamienna tym, że region Fc ma zmienione wiązanie Clq i/lub funkcję cytotoksyczności zależną od dopełniacza (CDC).
22. Kompozycja według zastrz. 21, znamienna tym, że region Fc zawiera podstawienie aminokwasowe w dowolnej z jednej albo większej liczby pozycji aminokwasowych 270, 322, 326, 327, 329, 331, 333 i 334 łańcucha ciężkiego.
23. Kompozycja według zastrz. 1, znamienna tym, że sekwencja aminokwasowa regionu Fc zawiera zmianę sekwencji aminokwasowej, która zmienia natywny wzór glikozylacji glikoproteiny.
24. Kompozycja według zastrz. 1, znamienna tym, że glikoproteina jest zasadniczo wolna od rozdzielającej N- acetyloglukozaminy (GlcNAc) przyłączonej do struktury dojrzałego rdzenia węglowodanowego.
25. Kompozycja według zastrz. 1, znamienna tym, że glikoproteina ma rozdzielającą N acetyloglukozaminę (GlcNAc) przyłączoną do struktury dojrzałego rdzenia węglowodanowego.
26. Kompozycja według zastrz. 1, znamienna tym, że glikoproteina ma jedną lub większą liczbę reszt galaktozy przyłączonych do struktury dojrzałego rdzenia węglowodanowego.
27. Kompozycja według zastrz. 1, znamienna tym, że glikoproteina jest zasadniczo wolna od jednej lub większej liczby reszt galaktozy przyłączonych do struktury dojrzałego rdzenia węglowodanowego.
28. Kompozycja według zastrz. 1, znamienna tym, że glikoproteina ma jedną lub większą liczbę reszt kwasu sialowego przyłączonych do struktury dojrzałego rdzenia węglowodanowego.
29. Kompozycja według zastrz. 1, znamienna tym, że glikoproteina jest zasadniczo wolna od jednej lub większej liczby reszt kwasu sialowego przyłączonych do struktury dojrzałego rdzenia węglowodanowego.
30. Kompozycja według zastrz. 1, znamienna tym, że 80-100% glikoproteiny w kompozycji zawiera strukturę dojrzałego rdzenia węglowodanowego, pozbawionego fukozy, przyłączoną do regionu Fc glikoproteiny.
31. Kompozycja według zastrz. 1, znamienna tym, że region Fc obejmuje region Fc ludzkiej IgG.
32. Kompozycja według zastrz. 31, znamienna tym, że region Fc ludzkiej IgG obejmuje region Fc ludzkiej IgGi, IgG2, IgG3 lub IgG4.
33. Kompozycja według zastrz. 32, znamienna tym, że glikoproteina wiąże się z FcYRIII.
34. Kompozycja według zastrz. 33, znamienna tym, że glikoproteina wiąże się z FcYRIII z lepszym powinowactwem albo pośredniczy w zależnej od przeciwciała toksyczności za pośrednictwem
PL 213 948 B1 komórek (ADCC) bardziej skutecznie niż glikoproteina ze strukturą dojrzałego rdzenia węglowodanowego zawierającego fukozę, przyłączoną do regionu Fc glikoproteiny.
35. Kompozycja według zastrz. 1, znamienna tym, że glikoproteina obejmuje przeciwciało.
36. Kompozycja według zastrz. 35, znamienna tym, że przeciwciałem jest przeciwciało chimerowe, humanizowane albo ludzkie.
37. Kompozycja według zastrz. 35, znamienna tym, że przeciwciało wiąże się z antygenem wybranym z grupy składającej się z markera powierzchniowego komórek B, receptora ErbB, antygenu związanego z nowotworem i czynnika angiogennego.
38. Kompozycja według zastrz. 35, znamienna tym, że przeciwciało wiąże się z CD20, HER2, czynnikiem wzrostu śródbłonka naczyń (VEGF), CD40 lub antygenem komórek macierzystych prostaty (PSCA).
39. Kompozycja według zastrz. 38, znamienna tym, że przeciwciało obejmuje humanizowane przeciwciało anty-HER2, chimerowe przeciwciało anty-CD20 i humanizowane przeciwciało anty-VEGF.
40. Kompozycja według zastrz. 1, znamienna tym, że 90-99% glikoproteiny w kompozycji zawiera strukturę dojrzałego rdzenia węglowodanowego, pozbawionego fukozy, przyłączoną do regionu Fc glikoproteiny.
41. Kompozycja według zastrz. 1, znamienna tym, że glikoproteina została wytworzona przez komórkę jajnika chomika chińskiego (CHO).
42. Kompozycja według zastrz. 41, znamienna tym, że komórką CHO jest komórka Lec13.
43. Kompozycja według zastrz. 1, znamienna tym, że jest preparatem farmaceutycznym.
44. Kompozycja według zastrz. 43, znamienna tym, że zawiera ponadto dopuszczalny farmaceutycznie nośnik.
45. Kompozycja według zastrz. 43, znamienna tym, że jest jałowa.
46. Kompozycja według zastrz. 43 lub zastrz. 44, znamienna tym, że jest zliofilizowana.
47. Kompozycja według zastrz. 1, znamienna tym, że glikoproteina jest immunoadhezyną.
48. Kompozycja według zastrz. 1, znamienna tym, że jest skoniugowana z cząsteczką heterologiczną.
49. Kompozycja według zastrz. 48, znamienna tym, że cząsteczką heterologiczną jest czynnik cytotoksyczny, enzym albo czynnik umożliwiający uzyskanie obrazu.
50. Kompozycja, znamienna tym, że zawiera glikoproteinę jak zdefiniowano w zastrz. od 47 do 49 łącznie z dopuszczalnym farmaceutycznie nośnikiem.
51. Cząsteczka kwasu nukleinowego, znamienna tym, że koduje glikoproteinę zawierającą region Fc jak zdefiniowano w zastrz. 1.
52. Komórka gospodarza, znamienna tym, że zawiera kwas nukleinowy jak zdefiniowano w zastrz. 51, gdzie 80-100% glikoproteiny wytwarzanej przez komórkę gospodarza zawiera strukturę dojrzałego rdzenia węglowodanowego, pozbawionego fukozy, przyłączoną do regionu Fc glikoproteiny.
53. Komórka gospodarza według zastrz. 52, znamienna tym, że jest komórką jajnika chomika chińskiego (CHO).
54. Komórka gospodarza według zastrz. 53, znamienna tym, że komórką CHO jest komórka Lec13.
55. Sposób wytwarzania glikoproteiny, znamienny tym, że obejmuje hodowanie komórki gospodarza zdefiniowanego w zastrz. od 52 do 54, tak, że kwas nukleinowy podlega ekspresji.
56. Sposób według zastrz. 55, znamienny tym, że obejmuje ponadto odzyskanie glikoproteiny z hodowli komórki gospodarza.
57. Sposób według zastrz. 56, znamienny tym, że obejmuje ponadto łączenie glikoproteiny z cząsteczką heterologiczną.
58. Sposób według zastrz. 57, znamienny tym, że cząsteczką heterologiczną jest czynnik cytotoksyczny, enzym albo czynnik umożliwiający uzyskanie obrazu.
59. Kompozycja jak zdefiniowano w zastrz. 1 do zastosowania do leczenia ssaka mającego chorobę lub zaburzenie wybrane z grupy składającej się z raka, choroby autoimmunologicznej, choroby zapalnej, infekcji lub innego stanu, gdzie pożądane jest usunięcie komórek albo tkanki.
60. Kompozycja według zastrz. 59, znamienna tym, że ssakiem jest człowiek.
61. Kompozycja według zastrz. 60, znamienna tym, że człowiek wyraża FcyRI11 (F158).
62. Zastosowanie skutecznej terapeutycznie ilości kompozycji zdefiniowanej w zastrz. 1 do wytwarzania leku do leczenia ssaka mającego chorobę lub zaburzenie wybrane z grupy składającej się
PL 213 948 B1 z raka, choroby autoimmunologicznej, choroby zapalnej, infekcji lub innego stanu, gdzie pożądane jest usunięcie komórek albo tkanki.
63. Zastosowanie według zastrz. 62, znamienne tym, że ssakiem jest człowiek.
64. Zastosowanie według zastrz. 63, znamienne tym, że człowiek wyraża FcYRIII (F158).
65. Zestaw terapeutyczny albo diagnostyczny zawierający kompozycję, jak zdefiniowano w zastrz. 1 oraz instrukcję jej użycia.
PL372709A 2001-10-25 2002-10-22 Kompozycje zawierajace glikoproteine, czasteczka kwasu nukleinowego kodujaca te glikoproteine, komórka gospodarza, sposób wytwarzania glikoproteiny, kompozycja do zastosowania do leczenia, zastosowanie kompozycji i zestaw zawierajacy kompozycje PL213948B1 (pl)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US33764201P 2001-10-25 2001-10-25
US34769402P 2002-01-09 2002-01-09

Publications (2)

Publication Number Publication Date
PL372709A1 PL372709A1 (pl) 2005-07-25
PL213948B1 true PL213948B1 (pl) 2013-05-31

Family

ID=26990808

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PL372709A PL213948B1 (pl) 2001-10-25 2002-10-22 Kompozycje zawierajace glikoproteine, czasteczka kwasu nukleinowego kodujaca te glikoproteine, komórka gospodarza, sposób wytwarzania glikoproteiny, kompozycja do zastosowania do leczenia, zastosowanie kompozycji i zestaw zawierajacy kompozycje

Country Status (18)

Country Link
US (5) US20030157108A1 (pl)
EP (1) EP1443961B1 (pl)
JP (3) JP2005532253A (pl)
KR (1) KR100988949B1 (pl)
CN (1) CN100423777C (pl)
AT (1) ATE430580T1 (pl)
AU (1) AU2002337935B2 (pl)
BR (1) BR0213761A (pl)
CA (1) CA2463879C (pl)
DE (1) DE60232265D1 (pl)
DK (1) DK1443961T3 (pl)
ES (1) ES2326964T3 (pl)
HU (1) HUP0600342A3 (pl)
IL (2) IL161412A0 (pl)
MX (1) MXPA04003798A (pl)
NZ (1) NZ532526A (pl)
PL (1) PL213948B1 (pl)
WO (1) WO2003035835A2 (pl)

Families Citing this family (1770)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6136311A (en) 1996-05-06 2000-10-24 Cornell Research Foundation, Inc. Treatment and diagnosis of cancer
US6737056B1 (en) * 1999-01-15 2004-05-18 Genentech, Inc. Polypeptide variants with altered effector function
US7183387B1 (en) 1999-01-15 2007-02-27 Genentech, Inc. Polypeptide variants with altered effector function
EP2264166B1 (en) * 1999-04-09 2016-03-23 Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd. Method for controlling the activity of immunologically functional molecule
EP1637160A3 (en) 1999-05-07 2006-05-03 Genentech, Inc. Treatment of autoimmune diseases with antagonists which bind to B cell surface markers
ATE511857T1 (de) * 2000-02-16 2011-06-15 Genentech Inc Anti-april monoklonaler antikörper und deren verwendung zur behandlung von immunerkrankungen oder krebs
FR2807767B1 (fr) 2000-04-12 2005-01-14 Lab Francais Du Fractionnement Anticorps monoclonaux anti-d
US8697394B2 (en) * 2000-06-28 2014-04-15 Glycofi, Inc. Production of modified glycoproteins having multiple antennary structures
US7598055B2 (en) * 2000-06-28 2009-10-06 Glycofi, Inc. N-acetylglucosaminyltransferase III expression in lower eukaryotes
US7449308B2 (en) 2000-06-28 2008-11-11 Glycofi, Inc. Combinatorial DNA library for producing modified N-glycans in lower eukaryotes
US20060029604A1 (en) * 2000-06-28 2006-02-09 Gerngross Tillman U Immunoglobulins comprising predominantly a GlcNAc2Man3GlcNAc2 glycoform
KR100787073B1 (ko) * 2000-06-28 2007-12-21 글리코파이, 인크. 변형된 당단백질의 제조방법
CN1592645A (zh) * 2000-09-18 2005-03-09 拜奥根Idec公司 使用b细胞耗尽/免疫调节抗体组合治疗自身免疫病的联合疗法
US6946292B2 (en) 2000-10-06 2005-09-20 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Cells producing antibody compositions with increased antibody dependent cytotoxic activity
WO2002051438A2 (en) 2000-12-22 2002-07-04 MAX-PLANCK-Gesellschaft zur Förderung der Wissenschaften e.V. Use of repulsive guidance molecule (rgm) and its modulators
IL160127A0 (en) * 2001-08-03 2004-06-20 Genentech Inc Tacis and br3 polypeptides and uses thereof
CA2463879C (en) * 2001-10-25 2012-12-04 Genentech, Inc. Glycoprotein compositions
US20040093621A1 (en) * 2001-12-25 2004-05-13 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd Antibody composition which specifically binds to CD20
US20060024292A1 (en) * 2001-12-27 2006-02-02 Gerngross Tillman U Immunoglobulins comprising predominantly a Gal2GlcNAc2Man3GlcNAc2 glycoform
KR100668538B1 (ko) * 2002-01-09 2007-01-16 메다렉스, 인코포레이티드 Ｃｄ３０에 대한 인간 모노클로날 항체
US20080260731A1 (en) * 2002-03-01 2008-10-23 Bernett Matthew J Optimized antibodies that target cd19
US7317091B2 (en) 2002-03-01 2008-01-08 Xencor, Inc. Optimized Fc variants
US20080254027A1 (en) * 2002-03-01 2008-10-16 Bernett Matthew J Optimized CD5 antibodies and methods of using the same
US20070148171A1 (en) * 2002-09-27 2007-06-28 Xencor, Inc. Optimized anti-CD30 antibodies
US20080152649A1 (en) * 2002-03-01 2008-06-26 Xencor, Inc. Optimized igf-1r antibodies and methods of using the same
US20040132101A1 (en) 2002-09-27 2004-07-08 Xencor Optimized Fc variants and methods for their generation
US20090042291A1 (en) * 2002-03-01 2009-02-12 Xencor, Inc. Optimized Fc variants
US8093357B2 (en) 2002-03-01 2012-01-10 Xencor, Inc. Optimized Fc variants and methods for their generation
US8188231B2 (en) 2002-09-27 2012-05-29 Xencor, Inc. Optimized FC variants
US20100311954A1 (en) * 2002-03-01 2010-12-09 Xencor, Inc. Optimized Proteins that Target Ep-CAM
US20050031613A1 (en) * 2002-04-09 2005-02-10 Kazuyasu Nakamura Therapeutic agent for patients having human FcgammaRIIIa
AU2003236017B2 (en) * 2002-04-09 2009-03-26 Kyowa Kirin Co., Ltd. Drug containing antibody composition
DE60336548D1 (de) 2002-04-09 2011-05-12 Kyowa Hakko Kirin Co Ltd Zelle mit erniedrigter oder deletierter aktivität eines am gdp-fucosetransport beteiligten proteins
CA2492447A1 (en) * 2002-07-25 2004-02-05 Genentech, Inc. Taci antibodies and uses thereof
US8946387B2 (en) 2002-08-14 2015-02-03 Macrogenics, Inc. FcγRIIB specific antibodies and methods of use thereof
US8968730B2 (en) 2002-08-14 2015-03-03 Macrogenics Inc. FcγRIIB specific antibodies and methods of use thereof
AU2003262650B2 (en) 2002-08-14 2009-10-29 Macrogenics, Inc. FcgammaRIIB-specific antibodies and methods of use thereof
WO2004024768A2 (fr) * 2002-09-13 2004-03-25 Laboratoire Francais Du Fractionnement Et Des Biotechnologies Anticorps induisant la production de cytokines
US20060235208A1 (en) * 2002-09-27 2006-10-19 Xencor, Inc. Fc variants with optimized properties
CN103833854B (zh) * 2002-12-16 2017-12-12 健泰科生物技术公司 免疫球蛋白变体及其用途
EP2368578A1 (en) 2003-01-09 2011-09-28 Macrogenics, Inc. Identification and engineering of antibodies with variant Fc regions and methods of using same
US7960512B2 (en) 2003-01-09 2011-06-14 Macrogenics, Inc. Identification and engineering of antibodies with variant Fc regions and methods of using same
AU2004204817C1 (en) 2003-01-13 2011-01-20 Macrogenics, Inc. Soluble FcyR fusion proteins and methods of use thereof
DE10303974A1 (de) 2003-01-31 2004-08-05 Abbott Gmbh & Co. Kg Amyloid-β(1-42)-Oligomere, Verfahren zu deren Herstellung und deren Verwendung
US7332299B2 (en) 2003-02-20 2008-02-19 Glycofi, Inc. Endomannosidases in the modification of glycoproteins in eukaryotes
US8388955B2 (en) * 2003-03-03 2013-03-05 Xencor, Inc. Fc variants
US20070275460A1 (en) * 2003-03-03 2007-11-29 Xencor.Inc. Fc Variants With Optimized Fc Receptor Binding Properties
US20090010920A1 (en) 2003-03-03 2009-01-08 Xencor, Inc. Fc Variants Having Decreased Affinity for FcyRIIb
US8084582B2 (en) 2003-03-03 2011-12-27 Xencor, Inc. Optimized anti-CD20 monoclonal antibodies having Fc variants
US9051373B2 (en) 2003-05-02 2015-06-09 Xencor, Inc. Optimized Fc variants
CN1802388B (zh) * 2003-05-09 2011-01-05 杜克大学 Cd20特异抗体及使用它们的方法
EP1629001A2 (en) 2003-06-05 2006-03-01 Genentech, Inc. Blys antagonists and uses thereof
US20050163775A1 (en) * 2003-06-05 2005-07-28 Genentech, Inc. Combination therapy for B cell disorders
FR2858235B1 (fr) 2003-07-31 2006-02-17 Lab Francais Du Fractionnement Utilisation d'anticorps optimises en adcc pour traiter les patients faibles repondeurs
NZ545776A (en) 2003-08-22 2009-05-31 Biogen Idec Inc Improved antibodies having altered effector function and methods for making the same
ZA200601218B (en) * 2003-08-29 2007-05-30 Genentech Inc Anti-CD20 therapy of ocular disorders
US20060134105A1 (en) * 2004-10-21 2006-06-22 Xencor, Inc. IgG immunoglobulin variants with optimized effector function
US8883147B2 (en) 2004-10-21 2014-11-11 Xencor, Inc. Immunoglobulins insertions, deletions, and substitutions
US9714282B2 (en) 2003-09-26 2017-07-25 Xencor, Inc. Optimized Fc variants and methods for their generation
US8101720B2 (en) 2004-10-21 2012-01-24 Xencor, Inc. Immunoglobulin insertions, deletions and substitutions
US8399618B2 (en) 2004-10-21 2013-03-19 Xencor, Inc. Immunoglobulin insertions, deletions, and substitutions
US20050287138A1 (en) * 2003-10-08 2005-12-29 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. CCR4-specific antibody composition
US20080241884A1 (en) * 2003-10-08 2008-10-02 Kenya Shitara Fused Protein Composition
US20050226867A1 (en) * 2003-10-08 2005-10-13 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. IL-5R-specific antibody composition
US20060021071A1 (en) * 2003-10-09 2006-01-26 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Cell in which genome is modified
US7691810B2 (en) * 2003-10-09 2010-04-06 Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd Method of producing recombinant antithrombin III composition
JPWO2005035740A1 (ja) * 2003-10-09 2006-12-21 協和醗酵工業株式会社 無血清馴化したゲノム改変細胞
JP5438880B2 (ja) * 2003-10-10 2014-03-12 中外製薬株式会社 機能蛋白質を代替する二種特異性抗体
JP5490734B2 (ja) * 2003-10-10 2014-05-14 中外製薬株式会社 機能蛋白質を代替する二種特異性抗体
WO2005035753A1 (ja) 2003-10-10 2005-04-21 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha 機能蛋白質を代替する二重特異性抗体
FR2861395B1 (fr) 2003-10-23 2006-02-17 Lab Francais Du Fractionnement Facteur viii viralement securise a faible teneur en multimeres superieurs
LT2077282T (lt) 2003-11-05 2017-03-10 Roche Glycart Ag Antigeną surišančios molekulės su padidintu fc receptoriaus surišimo giminingumu ir efektoriaus funkcija
EP1701979A2 (en) * 2003-12-03 2006-09-20 Xencor, Inc. Optimized antibodies that target the epidermal growth factor receptor
JPWO2005053742A1 (ja) * 2003-12-04 2007-06-28 協和醗酵工業株式会社 抗体組成物を含有する医薬
ES2388435T3 (es) 2003-12-10 2012-10-15 Medarex, Inc. Anticuerpos de IP-10 y sus usos
KR101225299B1 (ko) 2003-12-10 2013-01-24 메다렉스, 인코포레이티드 인터페론 알파 항체 및 그의 용도
CA2549237A1 (en) * 2003-12-19 2005-07-07 Genentech, Inc. Detection of cd20 in transplant rejection
JP2007514787A (ja) * 2003-12-19 2007-06-07 ジェネンテック・インコーポレーテッド 自己免疫疾患の治療におけるｃｄ２０の検出
US20050249723A1 (en) * 2003-12-22 2005-11-10 Xencor, Inc. Fc polypeptides with novel Fc ligand binding sites
EP1737890A2 (en) * 2004-03-24 2007-01-03 Xencor, Inc. Immunoglobulin variants outside the fc region
AU2005233387B2 (en) * 2004-04-15 2011-05-26 Glycofi, Inc. Production of galactosylated glycoproteins in lower eukaryotes
BRPI0510224A (pt) * 2004-05-05 2007-10-23 Genentech Inc métodos de prevenção de doença autoimunológica e artigo industrializado
MXPA06012601A (es) 2004-05-10 2007-05-10 Macrogenics Inc Anticuerpos especificos de fcy riib humanizados y metodos de uso de los mismos.
US20060024295A1 (en) * 2004-06-04 2006-02-02 Genentech, Inc. Method for treating lupus
TW201422238A (zh) * 2004-06-04 2014-06-16 Genentech Inc Ｃｄ２０抗體於治療多發性硬化症之用途及用於該用途之物品
EP2662390B1 (en) 2004-06-21 2017-08-02 E. R. Squibb & Sons, L.L.C. Interferon alpha receptor 1 antibodies and their uses
AU2005272993B2 (en) * 2004-07-15 2010-02-11 Xencor, Inc. Optimized Fc variants
US20150010550A1 (en) 2004-07-15 2015-01-08 Xencor, Inc. OPTIMIZED Fc VARIANTS
CA2573359A1 (en) * 2004-07-22 2006-02-02 Genentech, Inc. Method of treating sjogren's syndrome
CZ200755A3 (cs) 2004-07-26 2007-04-11 Biogen Idec Ma Inc. Peptidy protilátek anti-CD154
EP1773884B1 (en) 2004-08-03 2012-03-07 Innate Pharma Therapeutic and diagnostic methods and compositions targeting 4ig-b7-h3 and its counterpart nk cell receptor
EP1778726A4 (en) * 2004-08-16 2009-03-18 Medimmune Inc INTEGRIN ANTAGONISTS WITH IMPROVED ANTIBODY-DEPENDENT CELL-ASSAYED CYTOTOXICITY ACTIVITY
WO2006031994A2 (en) * 2004-09-14 2006-03-23 Xencor, Inc. Monomeric immunoglobulin fc domains
AU2005292227A1 (en) * 2004-10-01 2006-04-13 Medarex, Inc. Methods of treating CD30 positive lymphomas
BRPI0516297A (pt) * 2004-10-05 2008-09-02 Genentech Inc métodos de tratamento de vasculite e artigos de fabricação
JO3000B1 (ar) 2004-10-20 2016-09-05 Genentech Inc مركبات أجسام مضادة .
EP2332985A3 (en) * 2004-11-12 2012-01-25 Xencor, Inc. Fc variants with altered binding to FcRn
US8367805B2 (en) 2004-11-12 2013-02-05 Xencor, Inc. Fc variants with altered binding to FcRn
US8546543B2 (en) 2004-11-12 2013-10-01 Xencor, Inc. Fc variants that extend antibody half-life
US8802820B2 (en) 2004-11-12 2014-08-12 Xencor, Inc. Fc variants with altered binding to FcRn
US20100166654A1 (en) * 2004-12-03 2010-07-01 The Uab Research Foundation Single-Drug Multi-Ligand Conjugates for Targeted Drug Delivery
WO2006076594A2 (en) * 2005-01-12 2006-07-20 Xencor, Inc. Antibodies and fc fusion proteins with altered immunogenicity
ZA200705459B (en) * 2005-01-13 2008-09-25 Genentech Inc Treatment method
CA2592177A1 (en) 2005-01-21 2006-07-27 Genentech, Inc. Fixed dosing of her antibodies
DOP2006000029A (es) * 2005-02-07 2006-08-15 Genentech Inc Antibody variants and uses thereof. (variantes de un anticuerpo y usos de las mismas)
MX2007008619A (es) 2005-02-07 2007-09-11 Glycart Biotechnology Ag Moleculas de union al antigeno que fijan egfr, vectores que las codifican y usos de las mismas.
CN105535967B (zh) 2005-02-15 2022-05-03 杜克大学 抗cd19抗体及其在肿瘤学中的应用
AU2006214032B2 (en) * 2005-02-18 2012-03-08 E. R. Squibb & Sons, L.L.C. Monoclonal antibodies against prostate specific membrane antigen (PSMA) lacking in fucosyl residues
MX2007009940A (es) * 2005-02-18 2007-10-10 Medarex Inc Anticuerpos monoclonales que carecen de residuos fucosilo contra cd30.
ZA200707078B (en) 2005-02-23 2008-11-26 Genentech Inc Extending time to disease progression or survival in cancer patients
RU2007139283A (ru) * 2005-03-25 2009-04-27 Гликарт Биотехнологи Аг (Ch) АНТИГЕНСВЯЗЫВАЮЩИЕ МОЛЕКУЛЫ, НАПРАВЛЕННЫЕ К MCSP И ОБЛАДАЮЩИЕ ПОВЫШЕННОЙ АФФИННОСТЬЮ СВЯЗЫВАНИЯ Fc-РЕЦЕПТОРА И ЭФФЕКТОРНОЙ ФУНКЦИЕЙ
TWI544076B (zh) 2005-03-31 2016-08-01 中外製藥股份有限公司 A method of manufacturing a polypeptide that controls assembly
GB0507123D0 (en) * 2005-04-08 2005-05-11 Isis Innovation Method
AR053579A1 (es) * 2005-04-15 2007-05-09 Genentech Inc Tratamiento de la enfermedad inflamatoria intestinal (eii)
CA2605024C (en) 2005-04-15 2018-05-22 Macrogenics, Inc. Covalent diabodies and uses thereof
US20090214544A1 (en) * 2005-04-25 2009-08-27 Medarex Method of treating cd30 positive lymphomas
WO2006116260A2 (en) 2005-04-26 2006-11-02 Medimmune, Inc. Modulation of antibody effector function by hinge domain engineering
EP1885755A4 (en) 2005-05-05 2009-07-29 Univ Duke CD19 ANTIBODY THERAPY FOR AUTOIMMUNE DISEASES
BRPI0611445A2 (pt) * 2005-05-09 2010-09-08 Glycart Biotechnology Ag molécula de ligação a antìgeno glicomanipulada, polinucleotìdeo, polipeptìdeo, vetor, célula hospedeira, método para produção, uso e composição farmacêutica
CN103059138B (zh) 2005-05-09 2015-10-28 小野药品工业株式会社 程序性死亡-1(pd-1)的人单克隆抗体及使用抗pd-1抗体来治疗癌症的方法
MX2007014497A (es) * 2005-05-20 2008-02-07 Genentech Inc Pretratamiento de una muestra biologica de un sujeto con enfermedad autoinmune.
CA2608818A1 (en) * 2005-06-03 2006-12-14 Genentech, Inc. Method of producing antibodies with modified fucosylation level
AU2006261920A1 (en) 2005-06-23 2007-01-04 Medimmune, Llc Antibody formulations having optimized aggregation and fragmentation profiles
NZ596992A (en) 2005-06-30 2013-07-26 Abbott Lab Il-12/p40 binding proteins
WO2007005874A2 (en) 2005-07-01 2007-01-11 Medarex, Inc. Human monoclonal antibodies to programmed death ligand 1 (pd-l1)
EP1899477A4 (en) * 2005-07-01 2010-01-20 Medimmune Inc INTEGRATED APPROACH FOR GENERATING MULTIDOMAIN PROTEIN THERAPEUTIC APPLICATIONS
US7557190B2 (en) 2005-07-08 2009-07-07 Xencor, Inc. Optimized proteins that target Ep-CAM
JP2009501913A (ja) * 2005-07-21 2009-01-22 ゲンマブ エー／エス Ｆｃ受容体と結合する抗体原薬に関する効力アッセイ
US7923538B2 (en) 2005-07-22 2011-04-12 Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd Recombinant antibody composition
SI2573114T1 (sl) 2005-08-10 2016-08-31 Macrogenics, Inc. Identifikacija in inženiring protiteles z variantnimi fc regijami in postopki za njih uporabo
CA2619825A1 (en) * 2005-08-19 2007-03-01 Centocor, Inc. Proteolysis resistant antibody preparations
US7612181B2 (en) 2005-08-19 2009-11-03 Abbott Laboratories Dual variable domain immunoglobulin and uses thereof
EP2500355A3 (en) 2005-08-19 2012-10-24 Abbott Laboratories Dual variable domain immunoglobulin and uses thereof
KR20140053410A (ko) 2005-08-19 2014-05-07 아보트 러보러터리즈 이원 가변 도메인 면역글로불린 및 이의 용도
JP2009507040A (ja) * 2005-09-02 2009-02-19 グライコフィ， インコーポレイテッド 主としてｇｌｃｎａｃｍａｎ３ｇｌｃｎａｃ２糖形態を含む免疫グロブリン
EP1928905B1 (de) 2005-09-30 2015-04-15 AbbVie Deutschland GmbH & Co KG Bindungsdomänen von proteinen der repulsive guidance molecule (rgm) proteinfamilie und funktionale fragmente davon sowie deren verwendung
CA2624189A1 (en) 2005-10-03 2007-04-12 Xencor, Inc. Fc variants with optimized fc receptor binding properties
AU2006302254B2 (en) 2005-10-06 2011-05-26 Xencor, Inc. Optimized anti-CD30 antibodies
EP1943332A4 (en) 2005-10-14 2011-04-13 Medimmune Inc CELLULAR DISPLAY OF ANTIBODY LIBRARIES
CA2625664C (en) 2005-10-21 2016-01-05 Novartis Ag Human antibodies against il13 and therapeutic uses
MY149159A (en) 2005-11-15 2013-07-31 Hoffmann La Roche Method for treating joint damage
CA2629306A1 (en) * 2005-11-23 2007-05-31 Genentech, Inc. Methods and compositions related to b cell assays
KR101667623B1 (ko) 2005-11-30 2016-10-19 애브비 인코포레이티드 아밀로이드 베타 단백질에 대한 모노클로날 항체 및 이의 용도
EP2289909B1 (en) 2005-11-30 2014-10-29 AbbVie Inc. Screening method, process for purifying of non-diffusible a-beta oligomers, selective antibodies against said non-diffusible a-beta oligomers and a process for manufacturing of said antibodies
EP2623516B1 (en) 2005-12-02 2015-07-15 Genentech, Inc. Compositions and methods for the treatment of diseases and disorders associated with cytokine signaling involving antibodies that bind to il-22 and il-22r
NZ568551A (en) 2005-12-08 2012-03-30 Medarex Inc Human monoclonal antibodies to Fucosyl-GM1 and methods using anti-Fucosyl-GM1
RU2450020C2 (ru) 2006-01-05 2012-05-10 Дженентек, Инк. АНТИТЕЛА ПРОТИВ EphB4 И СПОСОБЫ ИХ ПРИМЕНЕНИЯ
US20070166306A1 (en) * 2006-01-17 2007-07-19 Fey Georg H M Anti-CD19 antibody composition and method
EP1973940A2 (en) 2006-01-17 2008-10-01 Biolex Therapeutics, Inc. Compositions and methods for humanization and optimization of n-glycans in plants
US20090060921A1 (en) * 2006-01-17 2009-03-05 Biolex Therapeutics, Inc. Glycan-optimized anti-cd20 antibodies
WO2007084672A2 (en) * 2006-01-17 2007-07-26 Medarex, Inc. Monoclonal antibodies against cd30 lacking in fucosyl and xylosyl residues
CA2638811A1 (en) * 2006-02-03 2007-08-16 Medimmune, Llc Protein formulations
WO2007103469A2 (en) 2006-03-06 2007-09-13 Aeres Biomedical Ltd. Humanized anti-cd22 antibodies and their use in treatment of oncology, transplantation and autoimmune disease
AR059851A1 (es) 2006-03-16 2008-04-30 Genentech Inc Anticuerpos de la egfl7 y metodos de uso
WO2007109321A2 (en) 2006-03-20 2007-09-27 The Regents Of The University Of California Engineered anti-prostate stem cell antigen (psca) antibodies for cancer targeting
CA2647846C (en) 2006-03-31 2016-06-21 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Methods for controlling blood pharmacokinetics of antibodies
JP5144499B2 (ja) 2006-03-31 2013-02-13 中外製薬株式会社 二重特異性抗体を精製するための抗体改変方法
EP2011870A4 (en) * 2006-04-14 2010-09-15 Medical & Biol Lab Co Ltd MUTANT POLYPEPTIDE WITH EFFECTOR FUNCTION
PL2032606T3 (pl) 2006-05-30 2014-04-30 Genentech Inc Przeciwciała i immunokoniugaty oraz ich zastosowania
EP2032604A2 (en) * 2006-06-06 2009-03-11 Genentech, Inc. Anti-dll4 antibodies and methods using same
RU2008152435A (ru) * 2006-06-06 2010-07-20 Дженентек, Инк. (Us) Композиции и способы регулирования развития сосудов
LT2029173T (lt) 2006-06-26 2016-11-10 Macrogenics, Inc. Fc riib specifiniai antikūnai ir jų panaudojimo būdai
CA2656224C (en) 2006-06-26 2018-01-09 Macrogenics, Inc. Combination of fc.gamma.riib antibodies and cd20-specific antibodies and methods of use thereof
EP1878747A1 (en) 2006-07-11 2008-01-16 greenovation Biotech GmbH Glyco-engineered antibodies
WO2008008482A2 (en) * 2006-07-13 2008-01-17 Genentech, Inc. Altered br3-binding polypeptides
ES2612383T3 (es) 2006-07-19 2017-05-16 The Trustees Of The University Of Pennsylvania WSX-1/IL-27 como una diana para respuestas antiinflamatorias
GB0615266D0 (en) * 2006-08-01 2006-09-06 Immunobiology Ltd Composition and method for mediating an immune response
AR062223A1 (es) * 2006-08-09 2008-10-22 Glycart Biotechnology Ag Moleculas de adhesion al antigeno que se adhieren a egfr, vectores que los codifican, y sus usos de estas
SI2383297T1 (sl) * 2006-08-14 2013-06-28 Xencor Inc. Optimizirana antitelesa, ki ciljajo cd19
US20110182904A1 (en) 2006-09-05 2011-07-28 Deborah Zimmerman Antibodies to bone morphogenic proteins and receptors therefor and methods for their use
ES2661032T3 (es) 2006-09-08 2018-03-27 Abbvie Bahamas Ltd. Proteínas de unión a interleucina-13
CN103694349A (zh) 2006-09-08 2014-04-02 米迪缪尼有限公司 人源化抗cd19抗体及其在治疗癌症、移植病和自身免疫病中的应用
NZ597334A (en) 2006-09-13 2014-02-28 Abbott Lab Cell culture improvements
US8911964B2 (en) 2006-09-13 2014-12-16 Abbvie Inc. Fed-batch method of making human anti-TNF-alpha antibody
WO2008036688A2 (en) 2006-09-18 2008-03-27 Xencor, Inc. Optimized antibodies that target hm1.24
AR063086A1 (es) 2006-10-02 2008-12-23 Medarex Inc Anticuerpos humanos que se unen a cxcr4 y usos de los mismos
CL2007002926A1 (es) 2006-10-12 2008-05-16 Genentech Inc Anticuerpo antilinfotoxina alfa (lt-alfa); composicion con el anticuerpo; hibridoma pta-7538; acido nucleico codificante del anticuerpo; vector y celula huesped que comprenden el acido nucleico; metodo para inhibir la proliferacion celular activada p
WO2008048545A2 (en) * 2006-10-16 2008-04-24 Medimmune, Llc. Molecules with reduced half-lives, compositions and uses thereof
CA2666559A1 (en) 2006-10-20 2008-04-24 Forerunner Pharma Research Co., Ltd. Pharmaceutical composition comprising anti-hb-egf antibody as active ingredient
AU2007308983B2 (en) * 2006-10-24 2012-12-06 Emergent Product Development Seattle, Llc A method for increasing antibody-dependent cytotoxicity with castanospermine
US7846434B2 (en) * 2006-10-24 2010-12-07 Trubion Pharmaceuticals, Inc. Materials and methods for improved immunoglycoproteins
NZ576132A (en) 2006-10-27 2012-04-27 Genentech Inc Antibodies and immunoconjugates and uses therefor
US8618248B2 (en) 2006-10-31 2013-12-31 President And Fellows Of Harvard College Phosphopeptide compositions and anti-phosphopeptide antibody compositions and methods of detecting phosphorylated peptides
WO2008076560A2 (en) 2006-11-15 2008-06-26 Medarex, Inc. Human monoclonal antibodies to btla and methods of use
US8455626B2 (en) 2006-11-30 2013-06-04 Abbott Laboratories Aβ conformer selective anti-aβ globulomer monoclonal antibodies
ES2678060T3 (es) 2006-12-01 2018-08-08 E. R. Squibb & Sons, L.L.C. Anticuerpos, en particular, anticuerpos humanos, que se unen a CD22 y usos de los mismos
US20080127996A1 (en) * 2006-12-04 2008-06-05 Weinhold Dennis G Method and apparatus to remediate an acid and/or liquid spill
WO2008140603A2 (en) 2006-12-08 2008-11-20 Macrogenics, Inc. METHODS FOR THE TREATMENT OF DISEASE USING IMMUNOGLOBULINS HAVING FC REGIONS WITH ALTERED AFFINITIES FOR FCγR ACTIVATING AND FCγR INHIBITING
CL2007003622A1 (es) 2006-12-13 2009-08-07 Medarex Inc Anticuerpo monoclonal humano anti-cd19; composicion que lo comprende; y metodo de inhibicion del crecimiento de celulas tumorales.
NZ578354A (en) 2006-12-14 2012-01-12 Medarex Inc Antibody-partner molecule conjugates that bind cd70 and uses thereof
WO2009077483A1 (en) 2007-12-14 2009-06-25 Novo Nordisk A/S Antibodies against human nkg2d and uses thereof
EP2125013A4 (en) * 2007-01-26 2010-04-07 Bioinvent Int Ab DLL4 SIGNALING INHIBITOR AND ITS USES
NZ578701A (en) 2007-02-09 2012-02-24 Genentech Inc Anti-robo4 antibodies and uses therefor
EP2486928A1 (en) 2007-02-27 2012-08-15 Abbott GmbH & Co. KG Method for the treatment of amyloidoses
DK2132573T3 (da) 2007-03-02 2014-07-14 Genentech Inc Forudsigelse af respons på en her-dimeriseringsinhibitor på basis af lav her3-ekspression
WO2008112092A2 (en) * 2007-03-07 2008-09-18 Glycofi, Inc. Production of glycoproteins with modified fucosylation
SI2125894T1 (sl) 2007-03-22 2019-05-31 Biogen Ma Inc. Vezavne beljakovine, vključno s protitelesi, derivati protiteles in fragmenti protiteles, ki specifično vežejo CD154, ter njihove uporabe
RU2009141965A (ru) * 2007-04-16 2011-05-27 Момента Фармасьютикалз, Инк. (Us) Определенные продукты гликопротеина и способы их производства
EP2737907A3 (en) 2007-05-07 2014-11-05 MedImmune, LLC Anti-icos antibodies and their use in treatment of oncology, transplantation and autoimmune disease
CA2685222C (en) 2007-05-14 2017-12-19 Medimmune, Llc Methods of reducing eosinophil levels
LT2176298T (lt) 2007-05-30 2018-04-10 Xencor, Inc. Būdai ir kompozicijos, skirti cd32b ekspresuojančių ląstelių slopinimui
CA2917355C (en) 2007-06-08 2018-07-17 Genentech, Inc. Gene expression markers of tumor resistance to her2 inhibitor treatment
US7580304B2 (en) * 2007-06-15 2009-08-25 United Memories, Inc. Multiple bus charge sharing
EP2158221B1 (en) 2007-06-21 2018-08-29 MacroGenics, Inc. Covalent diabodies and uses thereof
US8722858B2 (en) 2007-06-25 2014-05-13 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Anti-Prominin-1 antibody having ADCC activity or CDC activity
US20110077383A1 (en) * 2007-07-03 2011-03-31 Medimmune, Llc Hinge domain engineering
HUE061746T2 (hu) 2007-07-09 2023-08-28 Genentech Inc Diszulfidkötés redukciójának megelõzése polipeptidek rekombináns elõállítása során
WO2009018386A1 (en) 2007-07-31 2009-02-05 Medimmune, Llc Multispecific epitope binding proteins and uses thereof
WO2009032949A2 (en) 2007-09-04 2009-03-12 The Regents Of The University Of California High affinity anti-prostate stem cell antigen (psca) antibodies for cancer targeting and detection
HRP20150512T1 (hr) 2007-09-04 2015-06-19 Compugen Ltd. Polipeptidi i polinukleotidi, te njihova uporaba kao ciljnih molekula za proizvodnju lijekova i bioloških sredstava
RU2510400C9 (ru) 2007-09-26 2014-07-20 Чугаи Сейяку Кабусики Кайся Способ модификации изоэлектрической точки антитела с помощью аминокислотных замен в cdr
SG193868A1 (en) 2007-09-26 2013-10-30 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Modified antibody constant region
EA018396B1 (ru) * 2007-10-01 2013-07-30 Бристоль-Мейерз Сквибб Компани Антитела человека, которые связывают мезотелин, и применение таких антител
CA2700410C (en) * 2007-10-03 2020-10-06 Cornell University Treatment of proliferative disorders using antibodies to psma
AR068767A1 (es) 2007-10-12 2009-12-02 Novartis Ag Anticuerpos contra esclerostina, composiciones y metodos de uso de estos anticuerpos para tratar un trastorno patologico mediado por esclerostina
ES2565202T3 (es) 2007-10-16 2016-04-01 Zymogenetics, Inc. Combinación de activador transmembrana y modulador de calcio e interactor de ligando de ciclofilina (TACI) y agentes anti-CD20 para tratamiento de enfermedades autoinmunitarias
AU2008320823B2 (en) 2007-11-02 2013-01-17 Novartis Ag Molecules and methods for modulating low-density-lipoprotein receptor-related protein 6 (LRP6)
EP3360567A1 (en) 2007-11-07 2018-08-15 Genentech, Inc. Amp for use in treating microbial disorders
US8637435B2 (en) * 2007-11-16 2014-01-28 Merck Sharp & Dohme Corp. Eukaryotic cell display systems
TWI468417B (zh) 2007-11-30 2015-01-11 Genentech Inc 抗－ｖｅｇｆ抗體
US9266967B2 (en) 2007-12-21 2016-02-23 Hoffmann-La Roche, Inc. Bivalent, bispecific antibodies
US20090162359A1 (en) 2007-12-21 2009-06-25 Christian Klein Bivalent, bispecific antibodies
JP5571567B2 (ja) 2007-12-21 2014-08-13 メディミューン リミテッド インターロイキン−４受容体α（ＩＬ−４Ｒα）−１７３に対する結合メンバー
US20100261216A1 (en) * 2007-12-21 2010-10-14 Bianca Eser Stability testing of antibodies
DK2235059T3 (en) 2007-12-26 2015-03-30 Xencor Inc FC-VERSIONS OF MODIFIED BINDING TO FcRn
EP2077281A1 (en) 2008-01-02 2009-07-08 Bergen Teknologioverforing AS Anti-CD20 antibodies or fragments thereof for the treatment of chronic fatigue syndrome
US7914785B2 (en) 2008-01-02 2011-03-29 Bergen Teknologieverforing As B-cell depleting agents, like anti-CD20 antibodies or fragments thereof for the treatment of chronic fatigue syndrome
CN101918450A (zh) 2008-01-11 2010-12-15 国立大学法人东京大学 抗cldn6抗体
CA2710912A1 (en) * 2008-01-15 2009-07-23 F. Hoffmann-La Roche Ag Afucosylated antibodies against ccr5 and their use
TWI472339B (zh) 2008-01-30 2015-02-11 Genentech Inc 包含結合至ｈｅｒ２結構域ii之抗體及其酸性變異體的組合物
CA2714071A1 (en) 2008-02-05 2009-08-13 Bristol-Myers Squibb Company Alpha 5 - beta 1 antibodies and their uses
US12492253B1 (en) 2008-02-25 2025-12-09 Xencor, Inc. Anti-human C5 antibodies
US8962803B2 (en) 2008-02-29 2015-02-24 AbbVie Deutschland GmbH & Co. KG Antibodies against the RGM A protein and uses thereof
EP2263089B1 (en) 2008-03-03 2015-01-28 GlycoFi, Inc. Surface display of recombinant proteins in lower eukaryotes
ES2456296T3 (es) * 2008-03-27 2014-04-21 Zymogenetics, Inc. Composiciones y procedimientos para inhibir PDGFR beta y VEGF-A
SG189730A1 (en) 2008-04-02 2013-05-31 Macrogenics Inc Her2/neu-specific antibodies and methods of using same
CA2720365C (en) 2008-04-02 2019-01-15 Macrogenics, Inc. Bcr-complex-specific antibodies and methods of using same
AU2009241589B2 (en) 2008-04-29 2013-10-10 Abbvie Inc. Dual variable domain immunoglobulins and uses thereof
JP6192891B2 (ja) 2008-05-02 2017-09-06 ノバルティス アーゲー 改善されたフィブロネクチンベースの結合分子およびそれらの使用
KR101649168B1 (ko) 2008-05-09 2016-08-18 애브비 인코포레이티드 최종 당화 산물의 수용체(ｒａｇｅ)에 대한 항체 및 이의 용도
RU2010153580A (ru) 2008-06-03 2012-07-20 Эбботт Лэборетриз (Us) Иммуноглобулины с двумя вариабельными доменами и их применение
UY31861A (es) 2008-06-03 2010-01-05 Abbott Lab Inmunoglobulina con dominio variable dual y usos de la misma
ES2675730T3 (es) 2008-06-04 2018-07-12 Macrogenics, Inc. Anticuerpos con unión alterada a FcRn y métodos de uso de los mismos
EP2314628A4 (en) 2008-06-30 2013-07-10 Kyowa Hakko Kirin Co Ltd ANTI-CD27 ANTIBODIES
WO2010006060A2 (en) 2008-07-08 2010-01-14 Abbott Laboratories Prostaglandin e2 dual variable domain immunoglobulins and uses thereof
US8624002B2 (en) 2008-07-08 2014-01-07 Abbvie, Inc. Prostaglandin E2 binding proteins and uses thereof
US8067339B2 (en) 2008-07-09 2011-11-29 Merck Sharp & Dohme Corp. Surface display of whole antibodies in eukaryotes
AU2009202778B2 (en) * 2008-07-11 2014-05-08 Commonwealth of Australia as represented by and acting through the Department of Climate Change, Energy, the Environment and Water Improved baiting method and composition
PY09026846A (es) 2008-08-05 2015-09-01 Novartis Ag Composiciones y métodos para anticuerpos que se dirigen a la proteína de complemento c5
AR072999A1 (es) 2008-08-11 2010-10-06 Medarex Inc Anticuerpos humanos que se unen al gen 3 de activacion linfocitaria (lag-3) y los usos de estos
TW201014605A (en) 2008-09-16 2010-04-16 Genentech Inc Methods for treating progressive multiple sclerosis
EP3190128B1 (en) 2008-09-17 2018-11-14 Xencor, Inc. Compositions and methods for treating ige-mediated disorders
KR101834999B1 (ko) 2008-10-14 2018-03-06 제넨테크, 인크. 이뮤노글로불린 변이체 및 그의 용도
AU2009347206C1 (en) 2008-10-20 2016-12-08 Abbvie Inc. Isolation and purification of antibodies using Protein A affinity chromatography
MX2011004201A (es) 2008-10-20 2011-05-24 Abbott Lab Desactivacion viral durante purificacion de anticuerpos.
EP2358392B1 (en) 2008-11-12 2019-01-09 MedImmune, LLC Antibody formulation
HUE032693T2 (en) 2008-11-22 2017-10-30 Hoffmann La Roche Use of anti-vegf antibody in combination with chemotherapy for treating breast cancer
GB2466025A (en) 2008-12-08 2010-06-09 Univ Francois Rabelais De Tour C3/ITGAM polymorphisms and cancer prognosis
US20110311450A1 (en) 2008-12-08 2011-12-22 Zurit Levine Polypeptides and polynucleotides, and uses thereof as a drug target for producing drugs and biologics
SI3037529T1 (sl) 2008-12-09 2019-06-28 Halozyme, Inc. Razširjeni topni polipeptidi PH20 in njihove uporabe
CN102369021B (zh) 2008-12-19 2016-09-07 宏观基因有限公司 共价双抗体及其用途
WO2010075249A2 (en) 2008-12-22 2010-07-01 Genentech, Inc. A method for treating rheumatoid arthritis with b-cell antagonists
KR101812811B1 (ko) 2008-12-23 2017-12-27 제넨테크, 인크. 단백질 ａ에 대해 변경된 결합을 갖는 이뮤노글로불린 변이체
US20110142836A1 (en) * 2009-01-02 2011-06-16 Olav Mella B-cell depleting agents for the treatment of chronic fatigue syndrome
WO2010081890A1 (en) 2009-01-19 2010-07-22 Innate Pharma Anti-kir3d antibodies
WO2010096394A2 (en) 2009-02-17 2010-08-26 Redwood Biosciences, Inc. Aldehyde-tagged protein-based drug carriers and methods of use
ES2712732T3 (es) * 2009-02-17 2019-05-14 Cornell Res Foundation Inc Métodos y kits para el diagnóstico de cáncer y la predicción de valor terapéutico
AU2010215239A1 (en) 2009-02-23 2011-09-15 Glenmark Pharmaceuticals S.A. Humanized antibodies that bind to CD19 and their uses
US8030026B2 (en) 2009-02-24 2011-10-04 Abbott Laboratories Antibodies to troponin I and methods of use thereof
WO2010099186A1 (en) * 2009-02-25 2010-09-02 Merck Sharp & Dohme Corp. Her2 antibody compositions
CN102341412B (zh) 2009-03-05 2018-01-05 梅达雷克斯有限责任公司 特异于cadm1 的全人抗体
EP3235509A1 (en) 2009-03-05 2017-10-25 AbbVie Inc. Il-17 binding proteins
US8283162B2 (en) 2009-03-10 2012-10-09 Abbott Laboratories Antibodies relating to PIVKAII and uses thereof
WO2010108127A1 (en) 2009-03-20 2010-09-23 Genentech, Inc. Bispecific anti-her antibodies
HRP20150965T1 (hr) * 2009-03-25 2015-11-06 Genentech, Inc. Anti-fgr3 protutijela i metode koje ih koriste
AR075925A1 (es) 2009-03-25 2011-05-04 Genentech Inc Anticuerpos anti-alfa5beta1 (alfa5beta1: glicoproteina integrina) y sus usos
US20100247484A1 (en) 2009-03-31 2010-09-30 Heinrich Barchet Combination therapy of an afucosylated antibody and one or more of the cytokines gm csf, m csf and/or il3
JP5501439B2 (ja) 2009-04-02 2014-05-21 ロシュ グリクアート アクチェンゲゼルシャフト 完全長抗体と単鎖Ｆａｂフラグメントとを含む多重特異的抗体
EP2417164A1 (en) 2009-04-07 2012-02-15 Roche Glycart AG Bispecific anti-erbb-2/anti-c-met antibodies
SG175077A1 (en) 2009-04-07 2011-11-28 Roche Glycart Ag Trivalent, bispecific antibodies
BRPI1012589A2 (pt) 2009-04-07 2016-03-22 Roche Glycart Ag anticorpos bi-específicos anti-erbb-3/anti-c-met
ES2574236T3 (es) 2009-04-20 2016-06-16 Oxford Biotherapeutics Ltd Anticuerpos específicos para cadherina-17
BRPI1016055A2 (pt) 2009-04-27 2016-05-10 Novartis Ag composição e métodos de uso para anticorpos terapêuticos específicos para a subunidade beta i do receptor de il-12
RS56661B1 (sr) 2009-04-27 2018-03-30 Novartis Ag Kompozicije i postupci za povećanje rasta mišića
TW201100543A (en) 2009-05-27 2011-01-01 Hoffmann La Roche Tri-or tetraspecific antibodies
WO2010138184A2 (en) * 2009-05-27 2010-12-02 Synageva Biopharma Corp. Avian derived antibodies
CN102459603B (zh) 2009-06-02 2013-11-06 瑞泽恩制药公司 岩藻糖基化缺陷型细胞
WO2010146059A2 (en) 2009-06-16 2010-12-23 F. Hoffmann-La Roche Ag Biomarkers for igf-1r inhibitor therapy
US9676845B2 (en) 2009-06-16 2017-06-13 Hoffmann-La Roche, Inc. Bispecific antigen binding proteins
US9090690B2 (en) 2009-06-18 2015-07-28 Pfizer Inc. Anti Notch-1 antibodies
JP2009292822A (ja) * 2009-07-23 2009-12-17 Chugai Pharmaceut Co Ltd 機能蛋白質を代替する二種特異性抗体
WO2011014457A1 (en) 2009-07-27 2011-02-03 Genentech, Inc. Combination treatments
SG178177A1 (en) 2009-07-31 2012-03-29 Genentech Inc Inhibition of tumor metastasis using bv8- or g-csf-antagonists
CA2769473A1 (en) 2009-07-31 2011-02-03 N.V. Organon Fully human antibodies to btla
AU2010282733B2 (en) 2009-08-11 2016-07-14 Genentech, Inc. Production of proteins in glutamine-free cell culture media
TWI409079B (zh) 2009-08-14 2013-09-21 Roche Glycart Ag 非典型岩藻醣化ｃｄ２０抗體與苯達莫斯汀（ｂｅｎｄａｍｕｓｔｉｎｅ）之組合療法
MX2012001783A (es) 2009-08-14 2012-05-22 Roche Glycart Ag Terapia combinatoria de un anticuerpo anti-cd20 afucosilado con fludarabina y/o mitoxantrona.
SG194395A1 (en) 2009-08-15 2013-11-29 Genentech Inc Anti-angiogenesis therapy for the treatment of previously treated breast cancer
WO2011021381A1 (ja) 2009-08-17 2011-02-24 株式会社未来創薬研究所 抗hb-egf抗体を有効成分として含む医薬組成物
WO2011021146A1 (en) 2009-08-20 2011-02-24 Pfizer Inc. Osteopontin antibodies
TWI412375B (zh) 2009-08-28 2013-10-21 Roche Glycart Ag 人類化抗ｃｄｃｐ１抗體
TW201113037A (en) 2009-08-28 2011-04-16 Hoffmann La Roche Antibodies against CDCP1 for the treatment of cancer
SG178567A1 (en) * 2009-08-31 2012-04-27 Roche Glycart Ag Affinity-matured humanized anti cea monoclonal antibodies
SG178602A1 (en) 2009-09-01 2012-04-27 Abbott Lab Dual variable domain immunoglobulins and uses thereof
WO2011028952A1 (en) 2009-09-02 2011-03-10 Xencor, Inc. Compositions and methods for simultaneous bivalent and monovalent co-engagement of antigens
US9321823B2 (en) 2009-09-02 2016-04-26 Genentech, Inc. Mutant smoothened and methods of using the same
WO2011029823A1 (en) 2009-09-09 2011-03-17 Novartis Ag Monoclonal antibody reactive with cd63 when expressed at the surface of degranulated mast cells
AR078161A1 (es) 2009-09-11 2011-10-19 Hoffmann La Roche Formulaciones farmaceuticas muy concentradas de un anticuerpo anti cd20. uso de la formulacion. metodo de tratamiento.
SG10201408401RA (en) 2009-09-16 2015-01-29 Genentech Inc Coiled coil and/or tether containing protein complexes and uses thereof
CA2776385C (en) 2009-10-07 2019-04-09 Macrogenics, Inc. Fc region-containing polypeptides that exhibit improved effector function due to alterations of the extent of fucosylation, and methods for their use
AU2010308030B2 (en) 2009-10-12 2014-05-29 Pfizer Inc. Cancer treatment
EP2470569A1 (en) 2009-10-13 2012-07-04 Oxford Biotherapeutics Ltd. Antibodies against epha10
KR20140015139A (ko) 2009-10-15 2014-02-06 애브비 인코포레이티드 이원 가변 도메인 면역글로불린 및 이의 용도
NZ599337A (en) 2009-10-22 2013-05-31 Genentech Inc Anti-hepsin antibodies and methods using same
US8785600B2 (en) 2009-10-23 2014-07-22 Millennium Pharmaceuticals, Inc. Anti-GCC antibody molecules and related compositions and methods
WO2011056502A1 (en) 2009-10-26 2011-05-12 Genentech, Inc. Bone morphogenetic protein receptor type ii compositions and methods of use
WO2011056494A1 (en) 2009-10-26 2011-05-12 Genentech, Inc. Activin receptor-like kinase-1 antagonist and vegfr3 antagonist combinations
WO2011056497A1 (en) 2009-10-26 2011-05-12 Genentech, Inc. Activin receptor type iib compositions and methods of use
UY32979A (es) 2009-10-28 2011-02-28 Abbott Lab Inmunoglobulinas con dominio variable dual y usos de las mismas
WO2011051327A2 (en) 2009-10-30 2011-05-05 Novartis Ag Small antibody-like single chain proteins
US8420083B2 (en) 2009-10-31 2013-04-16 Abbvie Inc. Antibodies to receptor for advanced glycation end products (RAGE) and uses thereof
WO2011051466A1 (en) 2009-11-02 2011-05-05 Novartis Ag Anti-idiotypic fibronectin-based binding molecules and uses thereof
US20120316071A1 (en) 2009-11-04 2012-12-13 Vaughn Smider Methods for affinity maturation-based antibody optimization
ES2784123T3 (es) 2009-11-04 2020-09-22 Merck Sharp & Dohme Anticuerpo anti TSLP genomodificado
MX2012005168A (es) 2009-11-05 2012-06-08 Genentech Inc Metodos y composicion para secrecion de polipeptidos heterologos.
WO2011067711A2 (en) 2009-12-01 2011-06-09 Compugen Ltd Novel heparanase splice variant
MX354143B (es) 2009-12-02 2018-02-14 Imaginab Inc Minicuerpos j591 y diacuerpos-cys para apuntar con especificidad de objetivo a un antígeno de membrana específico para próstata de humano (psma) y métodos para su uso.
BR112012013734A2 (pt) 2009-12-08 2017-01-10 Abbott Gmbh & Co Kg anticorpos monoclonais contra a proteína rgm a para uso no tratamento da degeneração da camada de fibras nervosas da retina.
ES2565208T3 (es) 2009-12-11 2016-04-01 F. Hoffmann-La Roche Ag Anticuerpos anti-VEGF-C y métodos de uso de los mismos
CA2785139A1 (en) 2009-12-22 2011-06-30 Novartis Ag Tetravalent cd47-antibody constant region fusion protein for use in therapy
HUE029026T2 (en) 2009-12-22 2017-01-30 Roche Glycart Ag ANTI-HER3 Antibodies and uses thereof
TW201130971A (en) 2009-12-23 2011-09-16 Genentech Inc Anti-Bv8 antibodies and uses thereof
WO2011076883A1 (en) 2009-12-23 2011-06-30 4-Antibody Ag Binding members for human cytomegalovirus
US8362210B2 (en) 2010-01-19 2013-01-29 Xencor, Inc. Antibody variants with enhanced complement activity
WO2011092233A1 (en) 2010-01-29 2011-08-04 Novartis Ag Yeast mating to produce high-affinity combinations of fibronectin-based binders
US20110189178A1 (en) * 2010-02-04 2011-08-04 Xencor, Inc. Immunoprotection of Therapeutic Moieties Using Enhanced Fc Regions
JP5841072B2 (ja) 2010-02-10 2016-01-06 イミュノジェン・インコーポレーテッド Ｃｄ２０抗体およびその使用
AU2011214465A1 (en) 2010-02-10 2012-08-30 Novartis Ag Methods and compounds for muscle growth
US9556249B2 (en) 2010-02-18 2017-01-31 Genentech, Inc. Neuregulin antagonists and use thereof in treating cancer
EP2536761B1 (en) 2010-02-19 2017-09-20 The Board Of Regents Of The University Of Oklahoma Monoclonal antibodies that inhibit the wnt signaling pathway and methods of production and use thereof
KR102104197B1 (ko) 2010-02-23 2020-04-24 제넨테크, 인크. 난소암의 치료를 위한 항혈관신생 요법
WO2011106389A1 (en) 2010-02-24 2011-09-01 Merck Sharp & Dohme Corp. Method for increasing n-glycosylation site occupancy on therapeutic glycoproteins produced in pichia pastoris
KR101159068B1 (ko) * 2010-03-03 2012-06-22 사회복지법인 삼성생명공익재단 분자영상 프로브 제조용 신규 리간드, 그 리간드를 포함하는 분자영상 프로브, 그 분자영상 프로브를 포함하는 분자영상 입자, 그 제조방법 및 그것을 포함하는 약학 조성물
PH12012501751A1 (en) 2010-03-04 2012-11-12 Macrogenics Inc Antibodies reactive with b7-h3, immunologically active fragments thereof and uses thereof
LT2542256T (lt) 2010-03-04 2019-10-25 Macrogenics Inc Su b7-h3 reaguojantys antikūnai, jų imunologiškai aktyvūs fragmentai ir jų naudojimas
RU2587625C2 (ru) 2010-03-24 2016-06-20 Дженентек, Инк. Анти-lrp6 антитела
US20150231215A1 (en) 2012-06-22 2015-08-20 Randolph J. Noelle VISTA Antagonist and Methods of Use
US10745467B2 (en) 2010-03-26 2020-08-18 The Trustees Of Dartmouth College VISTA-Ig for treatment of autoimmune, allergic and inflammatory disorders
AR080793A1 (es) 2010-03-26 2012-05-09 Roche Glycart Ag Anticuerpos biespecificos
CA2794483C (en) 2010-03-26 2020-07-07 Trustees Of Dartmouth College Vista regulatory t cell mediator protein, vista binding agents and use thereof
EP3208281A1 (en) 2010-03-29 2017-08-23 Zymeworks, Inc. Antibodies with enhanced or suppressed effector function
EP2555801A4 (en) * 2010-04-07 2014-02-26 Momenta Pharmaceuticals Inc SELECTION AND USE OF HOST CELLS FOR THE MANUFACTURE OF GLYCOPROTEINS
US9921210B2 (en) 2010-04-07 2018-03-20 Momenta Pharmaceuticals, Inc. High mannose glycans
EP2558494B1 (en) 2010-04-15 2018-05-23 AbbVie Inc. Amyloid-beta binding proteins
CN102844049B (zh) 2010-04-27 2016-06-01 罗切格利卡特公司 无岩藻糖基化CD20抗体与mTOR抑制剂的联合疗法
WO2011138392A1 (en) 2010-05-06 2011-11-10 Novartis Ag Compositions and methods of use for therapeutic low density lipoprotein -related protein 6 (lrp6) antibodies
MA34287B1 (fr) 2010-05-06 2013-06-01 Novartis Ag Compositions et méthodes d'utilisation d'anticorps multivalents thérapeutiques de faible densité de la protéine apparentée à la lipoprotéine 6 (lrp6)
MY161302A (en) 2010-05-14 2017-04-14 Abbvie Inc IL-1 binding proteins
WO2011146568A1 (en) 2010-05-19 2011-11-24 Genentech, Inc. Predicting response to a her inhibitor
WO2011147834A1 (en) 2010-05-26 2011-12-01 Roche Glycart Ag Antibodies against cd19 and uses thereof
WO2011153243A2 (en) 2010-06-02 2011-12-08 Genentech, Inc. Anti-angiogenesis therapy for treating gastric cancer
RU2613886C2 (ru) 2010-06-03 2017-03-21 Дженентек, Инк. Антитела и иммуноконъюгаты, визуализируемые при помощи иммуно-позитрон-эмиссионной томографии, и способы их применения
KR101885388B1 (ko) 2010-06-18 2018-08-03 제넨테크, 인크. 항-Ａｘｌ 항체 및 사용 방법
CA2801210C (en) 2010-06-19 2020-07-21 Memorial Sloan-Kettering Cancer Center Anti-gd2 antibodies
WO2011161119A1 (en) 2010-06-22 2011-12-29 F. Hoffmann-La Roche Ag Antibodies against insulin-like growth factor i receptor and uses thereof
EP3327035A1 (en) 2010-06-22 2018-05-30 Precision Biologics Inc. Colon and pancreas cancer specific antigens and antibodies
WO2011161189A1 (en) 2010-06-24 2011-12-29 F. Hoffmann-La Roche Ag Anti-hepsin antibodies and methods of use
US20120009196A1 (en) 2010-07-08 2012-01-12 Abbott Laboratories Monoclonal antibodies against hepatitis c virus core protein
UY33492A (es) 2010-07-09 2012-01-31 Abbott Lab Inmunoglobulinas con dominio variable dual y usos de las mismas
CN103097418A (zh) 2010-07-09 2013-05-08 霍夫曼-拉罗奇有限公司 抗神经毡蛋白抗体及使用方法
WO2012010582A1 (en) 2010-07-21 2012-01-26 Roche Glycart Ag Anti-cxcr5 antibodies and methods of use
US20130177500A1 (en) 2010-07-23 2013-07-11 Trustee Of Boston University Anti-despr inhibitors as therapeutics for inhibition of pathological angiogenesis and tumor cell invasiveness and for molecular imaging and targeted delivery
US9120862B2 (en) 2010-07-26 2015-09-01 Abbott Laboratories Antibodies relating to PIVKA-II and uses thereof
US8637641B2 (en) 2010-07-29 2014-01-28 Xencor, Inc. Antibodies with modified isoelectric points
JP2013535198A (ja) 2010-07-30 2013-09-12 グリコド 哺乳類のグリコシル化経路を有する酵母人工染色体
CN103154025B (zh) 2010-08-02 2015-07-01 宏观基因有限公司 共价双抗体及其用途
CA2807014A1 (en) 2010-08-03 2012-02-09 Abbvie Inc. Dual variable domain immunoglobulins and uses thereof
BR112013002535A2 (pt) 2010-08-03 2019-09-24 F. Hoffmann - La Roche Ag biomarcadores de leucemia linfocítica crônica (cll)
WO2012019061A2 (en) 2010-08-05 2012-02-09 Stem Centrx, Inc. Novel effectors and methods of use
CA2805564A1 (en) 2010-08-05 2012-02-09 Stefan Jenewein Anti-mhc antibody anti-viral cytokine fusion protein
EA034742B1 (ru) 2010-08-13 2020-03-16 Роше Гликарт Аг Антитела к fap, полинуклеотид, вектор и клетка для их получения и их применения
KR101653030B1 (ko) 2010-08-13 2016-08-31 로슈 글리카트 아게 항-테나신-c a２ 항체 및 이의 사용 방법
MX358739B (es) 2010-08-14 2018-09-03 Abbvie Inc Star Proteinas de union a amiloide beta.
WO2012022734A2 (en) 2010-08-16 2012-02-23 Medimmune Limited Anti-icam-1 antibodies and methods of use
AR082693A1 (es) 2010-08-17 2012-12-26 Roche Glycart Ag Terapia de combinacion de un anticuerpo anti-cd20 afucosilado con un anticuerpo anti-vegf
AU2011290672B2 (en) 2010-08-20 2015-07-09 Novartis Ag Antibodies for epidermal growth factor receptor 3 (HER3)
WO2012025530A1 (en) 2010-08-24 2012-03-01 F. Hoffmann-La Roche Ag Bispecific antibodies comprising a disulfide stabilized - fv fragment
AR082518A1 (es) 2010-08-25 2012-12-12 Hoffmann La Roche Anticuerpos contra il-18r1 y usos de los mismos
SG187938A1 (en) 2010-08-26 2013-04-30 Abbvie Inc Dual variable domain immunoglobulins and uses thereof
SG10201506782XA (en) 2010-08-27 2015-10-29 Stem Centrx Inc Notum protein modulators and methods of use
JP2013537966A (ja) 2010-08-31 2013-10-07 ジェネンテック， インコーポレイテッド バイオマーカー及び治療の方法
WO2012031273A2 (en) 2010-09-03 2012-03-08 Stem Centrx, Inc. Novel modulators and methods of use
US8999335B2 (en) 2010-09-17 2015-04-07 Compugen Ltd. Compositions and methods for treatment of drug resistant multiple myeloma
US9068014B2 (en) 2010-09-23 2015-06-30 Precision Biologics, Inc. Colon and pancreas cancer peptidomimetics
CN103154037A (zh) 2010-10-05 2013-06-12 诺瓦提斯公司 抗IL12Rβ1抗体及它们在治疗自身免疫病和炎性疾病中的用途
JP5974012B2 (ja) 2010-10-05 2016-08-23 ジェネンテック， インコーポレイテッド 突然変異体スムースンド及びその使用方法
CA2815266C (en) 2010-11-05 2023-09-05 Zymeworks Inc. Stable heterodimeric antibody design with mutations in the fc domain
KR102116202B1 (ko) 2010-11-08 2020-05-28 제넨테크, 인크. 피하 투여용 항―ｉｌ―6 수용체 항체
EA201390669A1 (ru) 2010-11-10 2013-11-29 Дженентек, Инк. Способы и композиции для иммунотерапии заболеваний нервной системы
KR101398290B1 (ko) 2010-11-17 2014-05-22 추가이 세이야쿠 가부시키가이샤 혈액응고 제viii 인자의 기능을 대체하는 기능을 갖는 다중특이성 항원 결합 분자
WO2012071554A2 (en) 2010-11-23 2012-05-31 Alder Biopharmaceuticals, Inc. Anti-il-6 antibodies for the treatment of oral mucositis
MX349057B (es) 2010-11-30 2017-07-07 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Agente terapeutico que induce citotoxicidad.
AR084020A1 (es) 2010-11-30 2013-04-17 Genentech Inc Anticuerpos para el receptor de la barrera hematoencefalica de baja afinidad y sus usos
SG10201601792UA (en) 2010-12-08 2016-04-28 Stemcentrx Inc Novel modulators and methods of use
EP2648750B1 (en) 2010-12-10 2017-01-25 Novartis AG Antibody formulation
PE20141109A1 (es) 2010-12-15 2014-09-24 Wyeth Llc Anticuerpos anti-notch 1
RU2013131444A (ru) 2010-12-16 2015-01-27 Рош Гликарт Аг Сочетанная терапия афукозилированным антителом к cd20 и ингибитором mdm2
KR101615420B1 (ko) 2010-12-16 2016-04-26 제넨테크, 인크. Th2 억제에 관한 진단 및 치료
MA34881B1 (fr) 2010-12-20 2014-02-01 Genentech Inc Anticorps et immunoconjugués anti-mésothéline
MY163368A (en) 2010-12-21 2017-09-15 Abbvie Inc Il-1-alpha and -beta bispecific dual variable domain immunoglobulins and their use
JP2014511106A (ja) 2010-12-22 2014-05-08 ジェネンテック， インコーポレイテッド 抗ｐｃｓｋ９抗体及び使用方法
EP2655413B1 (en) 2010-12-23 2019-01-16 F.Hoffmann-La Roche Ag Polypeptide-polynucleotide-complex and its use in targeted effector moiety delivery
WO2012092539A2 (en) 2010-12-31 2012-07-05 Takeda Pharmaceutical Company Limited Antibodies to dll4 and uses thereof
AU2012205301B2 (en) 2011-01-14 2017-01-05 Redwood Bioscience, Inc. Aldehyde-tagged immunoglobulin polypeptides and method of use thereof
AR085091A1 (es) 2011-01-26 2013-09-11 Kolltan Pharmaceuticals Inc Anticuerpos anti-kit y sus usos
MX2013009151A (es) 2011-02-10 2013-08-29 Roche Glycart Ag Inmunoterapia mejorada.
SA112330278B1 (ar) 2011-02-18 2015-10-09 ستيم سينتركس، انك. مواد ضابطة جديدة وطرق للاستخدام
CN103403025B (zh) 2011-02-28 2016-10-12 弗·哈夫曼-拉罗切有限公司 单价抗原结合蛋白
ES2549638T3 (es) 2011-02-28 2015-10-30 F. Hoffmann-La Roche Ag Proteínas de unión a antígeno
EP2681244B1 (en) 2011-03-02 2017-11-29 Roche Glycart AG Cea antibodies
US9170249B2 (en) 2011-03-12 2015-10-27 Momenta Pharmaceuticals, Inc. N-acetylhexosamine-containing N-glycans in glycoprotein products
EP2895592A1 (en) 2011-03-23 2015-07-22 Société Industrielle Limousine d'Application Biologique (SILAB) A yeast recombinant cell capable of producing gdp-fucose
HUE041335T2 (hu) 2011-03-29 2019-05-28 Roche Glycart Ag Antitest FC-variánsok
JP2014516511A (ja) 2011-04-07 2014-07-17 ジェネンテック， インコーポレイテッド 抗ｆｇｆｒ４抗体及び使用方法
NZ713461A (en) 2011-04-15 2017-02-24 Compugen Ltd Polypeptides and polynucleotides, and uses thereof for treatment of immune related disorders and cancer
TWI631136B (zh) 2011-04-19 2018-08-01 莫瑞麥克製藥公司 單特異性及雙特異性抗ｉｇｆ－１ｒ及抗ｅｒｂｂ３抗體
TR201905909T4 (tr) 2011-04-19 2019-05-21 Pfizer Kanser tedavisi için anti-4-1bb antikorlarının ve adcc indükleyici antikorların kombinasyonları.
EP2702077A2 (en) 2011-04-27 2014-03-05 AbbVie Inc. Methods for controlling the galactosylation profile of recombinantly-expressed proteins
EA201892619A1 (ru) 2011-04-29 2019-04-30 Роше Гликарт Аг Иммуноконъюгаты, содержащие мутантные полипептиды интерлейкина-2
WO2012146630A1 (en) 2011-04-29 2012-11-01 F. Hoffmann-La Roche Ag N-terminal acylated polypeptides, methods for their production and uses thereof
CA2833212C (en) 2011-05-12 2020-06-09 Genentech, Inc. Multiple reaction monitoring lc-ms/ms method to detect therapeutic antibodies in animal samples using framework signature peptides
ES2657862T3 (es) 2011-05-13 2018-03-07 Gamamabs Pharma Anticuerpos contra HER3
TWI547500B (zh) 2011-05-16 2016-09-01 建南德克公司 Ｆｇｆｒ１促效劑及其使用方法
JP6145088B2 (ja) 2011-05-21 2017-06-07 マクロジェニクス，インコーポレーテッド 脱免疫化血清結合ドメイン及び血清半減期を延長するためのその使用
WO2012160448A2 (en) 2011-05-25 2012-11-29 Innate Pharma, S.A. Anti-kir antibodies for the treatment of inflammatory disorders
WO2012170742A2 (en) 2011-06-07 2012-12-13 University Of Hawaii Treatment and prevention of cancer with hmgb1 antagonists
WO2012170740A2 (en) 2011-06-07 2012-12-13 University Of Hawaii Biomarker of asbestos exposure and mesothelioma
EP2718325A4 (en) 2011-06-13 2015-03-11 ABGENOMICS COöPERATIEF U A ANTI-PSGL-1 ANTIBODIES AND USES THEREOF
WO2012172495A1 (en) 2011-06-14 2012-12-20 Novartis Ag Compositions and methods for antibodies targeting tem8
CA2837914A1 (en) 2011-06-15 2012-12-20 F. Hoffmann-La Roche Ag Anti-human epo receptor antibodies and methods of use
US20140193408A1 (en) 2011-06-16 2014-07-10 Novartis Ag Soluble proteins for use as therapeutics
US20140120555A1 (en) * 2011-06-20 2014-05-01 Pierre Fabre Medicament Anti-cxcr4 antibody with effector functions and its use for the treatment of cancer
AU2012273954A1 (en) 2011-06-22 2014-01-09 Inserm (Institut National De La Sante Et De La Recherche Medicale) Anti-Axl antibodies and uses thereof
CN103649125A (zh) 2011-06-22 2014-03-19 霍夫曼-拉罗奇有限公司 利用包含mhc i类的复合物通过循环中的病毒特异性细胞毒性t细胞清除靶细胞
EP2723377B1 (en) 2011-06-22 2018-06-13 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Anti-axl antibodies and uses thereof
HUE034921T2 (en) 2011-06-28 2018-03-28 Oxford Biotherapeutics Ltd Antibodies against ADP-ribozil cyclase-2
AU2012277376B2 (en) 2011-06-30 2016-11-24 Compugen Ltd. Polypeptides and uses thereof for treatment of autoimmune disorders and infection
US20130004484A1 (en) 2011-06-30 2013-01-03 Genentech, Inc. Anti-c-met antibody formulations
ES2692519T3 (es) 2011-07-01 2018-12-04 Novartis Ag Método para tratar trastornos metabólicos
UA117901C2 (uk) 2011-07-06 2018-10-25 Ґенмаб Б.В. Спосіб посилення ефекторної функції вихідного поліпептиду, його варіанти та їх застосування
KR20200067220A (ko) 2011-07-11 2020-06-11 아이크노스 사이언스 에스. 아. Ox40에 결합하는 항체 및 이들의 용도
HK1198328A1 (zh) 2011-07-13 2015-04-02 Abbvie Inc. 使用抗il-13抗體治療哮喘的方法和組合物
WO2013010955A1 (en) 2011-07-15 2013-01-24 Morphosys Ag Antibodies that are cross-reactive for macrophage migration inhibitory factor (mif) and d-dopachrome tautomerase (d-dt)
US10221210B2 (en) 2011-07-20 2019-03-05 Zepteon, Incorporated Polypeptide separation methods
WO2013013013A2 (en) * 2011-07-21 2013-01-24 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for producing modified glycoproteins
US20130022551A1 (en) 2011-07-22 2013-01-24 Trustees Of Boston University DEspR ANTAGONISTS AND AGONISTS AS THERAPEUTICS
US20140363438A1 (en) 2011-08-17 2014-12-11 Genentech, Inc. Neuregulin antibodies and uses thereof
MX2014001736A (es) 2011-08-17 2014-03-31 Genentech Inc Inhibicion de angiogenesis en tumores refractarios.
RU2014109038A (ru) 2011-08-23 2015-09-27 Рош Гликарт Аг Антитела к хондроитинсульфат протеогликану меланомы
HUE039703T2 (hu) 2011-08-23 2019-01-28 Roche Glycart Ag Bispecifikus antigénkötõ molekulák
JP2015527869A (ja) 2011-08-26 2015-09-24 メリマック ファーマシューティカルズ インコーポレーティッド タンデムＦｃ二重特異性抗体
BR112014005720A2 (pt) 2011-09-15 2017-12-12 Genentech Inc método de seleção e/ou identificação de um antagonista de usp1, antagonista de uaf1 e/ou um antagonista de id que promove uma alteração no destino celular do dito método
AR087918A1 (es) 2011-09-19 2014-04-23 Genentech Inc Tratamientos combinados que comprenden antagonistas de c-met y antagonistas de b-raf
MX2014002996A (es) 2011-09-23 2014-05-28 Roche Glycart Ag Anticuerpos anti - egfr/anti - igf-1r bisespecificos.
NZ721184A (en) 2011-09-30 2018-08-31 Dana Farber Cancer Inst Inc Therapeutic peptides
US20130089562A1 (en) 2011-10-05 2013-04-11 Genenthech, Inc. Methods of treating liver conditions using notch2 antagonists
US12466897B2 (en) 2011-10-10 2025-11-11 Xencor, Inc. Heterodimeric human IgG1 polypeptides with isoelectric point modifications
SI2766393T1 (sl) 2011-10-14 2018-10-30 F. Hoffmann-La Roche Ag Protitelesa Anti-HtrA1 in postopki uporabe
JP2014530816A (ja) 2011-10-14 2014-11-20 ノバルティスアーゲー Ｗｎｔ経路関連疾患のための抗体および方法
WO2013056148A2 (en) 2011-10-15 2013-04-18 Genentech, Inc. Methods of using scd1 antagonists
WO2013059531A1 (en) 2011-10-20 2013-04-25 Genentech, Inc. Anti-gcgr antibodies and uses thereof
WO2013059740A1 (en) 2011-10-21 2013-04-25 Foundation Medicine, Inc. Novel alk and ntrk1 fusion molecules and uses thereof
US8999331B2 (en) 2011-10-24 2015-04-07 Abbvie Inc. Immunobinders directed against sclerostin
EP2776051A4 (en) 2011-10-28 2015-06-17 Hoffmann La Roche THERAPEUTIC COMBINATIONS AND METHOD FOR THE TREATMENT OF MELANOMA
MX359775B (es) 2011-10-31 2018-10-10 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Molecula enlazada al antigeno que tiene conjugacion regulada entre cadena ligera y cadena pesada.
WO2013067060A1 (en) 2011-11-01 2013-05-10 Bionomics, Inc. Anti-gpr49 antibodies
AU2012332590B2 (en) 2011-11-01 2016-10-20 Bionomics, Inc. Anti-GPR49 antibodies
ES2697674T3 (es) 2011-11-01 2019-01-25 Bionomics Inc Procedimientos para bloquear el crecimiento de células madre cancerosas
JP2014533247A (ja) 2011-11-01 2014-12-11 バイオノミクス インコーポレイテッド 抗体および癌を治療する方法
JP2014533249A (ja) 2011-11-07 2014-12-11 メディミューン，エルエルシー 多重特異性を持つ多価結合タンパク質およびその使用
CN104066748A (zh) 2011-11-21 2014-09-24 霍夫曼-拉罗奇有限公司 抗c-met抗体的纯化
US20130302274A1 (en) 2011-11-25 2013-11-14 Roche Glycart Ag Combination therapy
US9192663B2 (en) 2011-12-05 2015-11-24 Novartis Ag Antibodies for epidermal growth factor receptor 3 (HER3)
CA2857601A1 (en) 2011-12-05 2013-06-13 Novartis Ag Antibodies for epidermal growth factor receptor 3 (her3) directed to domain ii of her3
US20140335084A1 (en) 2011-12-06 2014-11-13 Hoffmann-La Roche Inc. Antibody formulation
US20150210777A1 (en) * 2011-12-13 2015-07-30 Glykos Finland Oy Glycoprotein
WO2013087993A1 (en) 2011-12-13 2013-06-20 Glykos Finland Oy Glycoprotein
SI2794905T1 (sl) 2011-12-20 2020-08-31 Medimmune, Llc Modificirani polipeptidi za ogrodja bispecifičnega protitelesa
SG10201703249PA (en) 2011-12-21 2017-05-30 Novartis Ag Compositions and methods for antibodies targeting factor p
JP2015503907A (ja) 2011-12-22 2015-02-05 エフ．ホフマン−ラ ロシュ アーゲーＦ． Ｈｏｆｆｍａｎｎ−Ｌａ Ｒｏｃｈｅ Ａｋｔｉｅｎｇｅｓｅｌｌｓｃｈａｆｔ 真核細胞のための全長抗体提示システムおよびその使用
SG11201403223PA (en) 2011-12-22 2014-07-30 Hoffmann La Roche Expression vector organization, novel production cell generation methods and their use for the recombinant production of polypeptides
CN104011075B (zh) 2011-12-22 2017-06-06 弗·哈夫曼-拉罗切有限公司 表达载体元件组合、新的生产用细胞产生方法及其在重组产生多肽中的用途
WO2013096791A1 (en) 2011-12-23 2013-06-27 Genentech, Inc. Process for making high concentration protein formulations
CA3111357A1 (en) 2011-12-23 2013-06-27 Pfizer Inc. Engineered antibody constant regions for site-specific conjugation and methods and uses therefor
CN104159920A (zh) 2011-12-30 2014-11-19 艾伯维公司 针对il-13和/或il-17的双重可变结构域免疫球蛋白
ES2609582T3 (es) 2011-12-30 2017-04-21 Halozyme, Inc. Variantes de polipéptidos de PH20, formulaciones y usos de los mismos
WO2013101771A2 (en) 2011-12-30 2013-07-04 Genentech, Inc. Compositions and method for treating autoimmune diseases
US20150011431A1 (en) 2012-01-09 2015-01-08 The Scripps Research Institute Humanized antibodies
EP2802603A4 (en) 2012-01-09 2015-11-04 Scripps Research Inst REGIONS DETERMINING ULTRALONGUAL COMPLEMENTARYITY AND USES THEREOF
JP2015506944A (ja) 2012-01-18 2015-03-05 ジェネンテック， インコーポレイテッド Ｆｇｆ１９修飾薬を使用する方法
PE20141561A1 (es) 2012-01-18 2014-11-12 Genentech Inc Anticuerpos anti-lrp5 y metodos de uso
GB201201314D0 (en) 2012-01-26 2012-03-07 Isis Innovation Composition
RS57603B1 (sr) 2012-01-27 2018-11-30 Abbvie Deutschland Sastav i metod za dijagnozu i tretiranje bolesti povezanih sa degeneracijom neurita
SG11201404486QA (en) 2012-01-31 2014-11-27 Genentech Inc Anti-ig-e m1' antibodies and methods using same
KR20140126357A (ko) 2012-02-01 2014-10-30 컴퓨젠 엘티디. C1orf32 항체 및 이의 암 치료를 위한 용도
CA2862101A1 (en) 2012-02-07 2013-08-15 Innate Pharma Mica binding agents
CN104105711B (zh) 2012-02-10 2018-11-30 弗·哈夫曼-拉罗切有限公司 单链抗体及其他异多聚体
SG11201404703WA (en) 2012-02-11 2014-09-26 Genentech Inc R-spondin translocations and methods using the same
ES2676031T3 (es) 2012-02-15 2018-07-16 F. Hoffmann-La Roche Ag Cromatografía de afinidad basada en el receptor Fc
AU2013240261A1 (en) 2012-03-27 2014-09-18 Genentech, Inc. Diagnosis and treatments relating to HER3 inhibitors
AR090549A1 (es) 2012-03-30 2014-11-19 Genentech Inc Anticuerpos anti-lgr5 e inmunoconjugados
US10385395B2 (en) 2012-04-11 2019-08-20 The Regents Of The University Of California Diagnostic tools for response to 6-thiopurine therapy
US9067990B2 (en) 2013-03-14 2015-06-30 Abbvie, Inc. Protein purification using displacement chromatography
US9181572B2 (en) 2012-04-20 2015-11-10 Abbvie, Inc. Methods to modulate lysine variant distribution
US9334319B2 (en) 2012-04-20 2016-05-10 Abbvie Inc. Low acidic species compositions
US9156915B2 (en) 2012-04-26 2015-10-13 Thomas Jefferson University Anti-GCC antibody molecules
AR090903A1 (es) 2012-05-01 2014-12-17 Genentech Inc Anticuerpos e inmunoconjugados anti-pmel17
WO2013170191A1 (en) 2012-05-11 2013-11-14 Genentech, Inc. Methods of using antagonists of nad biosynthesis from nicotinamide
JP6254581B2 (ja) 2012-05-18 2017-12-27 ジェネンテック， インコーポレイテッド 高濃度モノクローナル抗体製剤
KR102031317B1 (ko) 2012-05-21 2019-10-14 제넨테크, 인크. 혈액-뇌 장벽 수송의 안전성을 개선하는 방법
DK2852610T3 (en) 2012-05-23 2018-09-03 Glykos Finland Oy PRODUCTION OF FUCOSYLED GLYCOPROTEIN
CA2870876C (en) 2012-05-23 2019-10-01 Genentech, Inc. Selection method for therapeutic agents
CN104379604A (zh) 2012-05-24 2015-02-25 弗·哈夫曼-拉罗切有限公司 多特异性抗体
US9249182B2 (en) 2012-05-24 2016-02-02 Abbvie, Inc. Purification of antibodies using hydrophobic interaction chromatography
EP2856159A4 (en) 2012-06-01 2016-04-13 Momenta Pharmaceuticals Inc METHODS RELATING TO DENOSUMAB
KR20150027072A (ko) 2012-06-04 2015-03-11 아이알엠 엘엘씨 부위-특이적 표지 방법 및 이에 의해 생산된 분자
KR101566538B1 (ko) 2012-06-08 2015-11-05 국립암센터 신규한 Ｔｈ17 세포 전환용 에피토프 및 이의 용도
US9216219B2 (en) 2012-06-12 2015-12-22 Novartis Ag Anti-BAFFR antibody formulation
CA2875096A1 (en) 2012-06-15 2013-12-19 Genentech, Inc. Anti-pcsk9 antibodies, formulations, dosing, and methods of use
FI3421486T3 (fi) 2012-06-22 2023-12-15 Dartmouth College Uusia vista-ig-rakenteita ja vista-ig:n käyttö autoimmuuni-, allergia- ja tulehdushäiriöiden hoitamiseksi
US9890215B2 (en) 2012-06-22 2018-02-13 King's College London Vista modulators for diagnosis and treatment of cancer
US20140004121A1 (en) 2012-06-27 2014-01-02 Amgen Inc. Anti-mesothelin binding proteins
MX2014014804A (es) 2012-06-27 2015-02-12 Hoffmann La Roche Metodo para la elaboracion de conjugados de la region fc de anticuerpos que comprenden por lo menos una entidad de union que se une especificamente a un objetivo y usos del mismo.
HK1207864A1 (zh) 2012-06-27 2016-02-12 F. Hoffmann-La Roche Ag 用於选择并产生含有至少两种不同结合实体的定制高度选择性和多特异性靶向实体的方法及其用途
UY34887A (es) 2012-07-02 2013-12-31 Bristol Myers Squibb Company Una Corporacion Del Estado De Delaware Optimización de anticuerpos que se fijan al gen de activación de linfocitos 3 (lag-3) y sus usos
MX353951B (es) 2012-07-04 2018-02-07 Hoffmann La Roche Anticuerpos de anti-teofilina y metodos de uso.
WO2014006124A1 (en) 2012-07-04 2014-01-09 F. Hoffmann-La Roche Ag Covalently linked antigen-antibody conjugates
BR112014030844A2 (pt) 2012-07-04 2019-10-15 Hoffmann La Roche anticorpo anti-biotina humanizado, formulação farmacêutica e uso do anticorpo
CA2877009C (en) 2012-07-05 2023-10-03 Devin TESAR Expression and secretion system
JP6297549B2 (ja) 2012-07-09 2018-03-20 ジェネンテック， インコーポレイテッド 抗ｃｄ２２抗体および免疫複合体
MX2015000357A (es) 2012-07-09 2015-05-12 Genentech Inc Anticuerpos e inmunoconjugados anti-cd22.
BR112015000437A2 (pt) 2012-07-09 2017-06-27 Genentech Inc imunoconjugados, formulação farmacêutica, métodos de tratamento e de inbir a proliferação de uma célula
AR091702A1 (es) 2012-07-09 2015-02-25 Genentech Inc Anticuerpos anti-cd79b e inmunoconjugados
UY34905A (es) 2012-07-12 2014-01-31 Abbvie Inc Proteínas de unión a il-1
WO2014009465A1 (en) 2012-07-13 2014-01-16 Roche Glycart Ag Bispecific anti-vegf/anti-ang-2 antibodies and their use in the treatment of ocular vascular diseases
EP2874658A1 (en) 2012-07-18 2015-05-27 Glycotope GmbH Novel therapeutic treatments with anti-her2 antibodies having a low fucosylation
EP3381943B1 (en) 2012-07-25 2022-03-16 Celldex Therapeutics, Inc. Anti-kit antibodies and uses thereof
EP4397768A3 (en) 2012-07-26 2024-12-18 Momenta Pharmaceuticals, Inc. Glycoproteins with anti-inflammatory properties
AR092044A1 (es) 2012-08-07 2015-03-18 Roche Glycart Ag Inmunoterapia mejorada
PL2890712T3 (pl) 2012-08-29 2019-09-30 F.Hoffmann-La Roche Ag Przenośnik wahadłowy przez barierę krew-mózg
KR20150043523A (ko) 2012-09-02 2015-04-22 애브비 인코포레이티드 단백질 불균일성의 제어 방법
US9512214B2 (en) 2012-09-02 2016-12-06 Abbvie, Inc. Methods to control protein heterogeneity
EP2892558B1 (en) 2012-09-07 2019-04-10 The Trustees Of Dartmouth College Vista modulators for diagnosis and treatment of cancer
US9376489B2 (en) 2012-09-07 2016-06-28 Novartis Ag IL-18 binding molecules
PE20151179A1 (es) 2012-11-01 2015-09-12 Abbvie Inc Inmunoglobulinas de dominio variable dual anti-vegf/dll4 y usos de las mismas
WO2014071358A2 (en) 2012-11-05 2014-05-08 Foundation Medicine, Inc. Novel ntrk1 fusion molecules and uses thereof
ES2949394T3 (es) 2012-11-05 2023-09-28 Found Medicine Inc Moléculas de fusión novedosas y usos de las mismas
AU2013343667A1 (en) 2012-11-08 2015-04-02 F. Hoffmann-La Roche Ag HER3 antigen binding proteins binding to the beta-hairpin of HER3
US9284365B2 (en) 2012-11-13 2016-03-15 Genentech, Inc. Anti-hemagglutinin antibodies and methods of use
EP2733153A1 (en) 2012-11-15 2014-05-21 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods for the preparation of immunoconjugates and uses thereof
WO2014084859A1 (en) 2012-11-30 2014-06-05 Novartis Ag Molecules and methods for modulating tmem16a activities
RS58528B1 (sr) 2012-12-03 2019-04-30 Bristol Myers Squibb Co Poboljšanje anti-kancerske aktivnosti imunomodulatornih fc fuzionih proteina
SI2928921T1 (sl) 2012-12-05 2021-05-31 Novartis Ag Sestavki in postopki za protitelesa, ki ciljajo epo
RU2015129640A (ru) 2012-12-21 2017-01-26 Ф.Хоффманн-Ля Рош Аг Связанные дисульфидом мультивалентные многофункциональные белки, содержащие молекулы гкгс класса 1
WO2014100542A1 (en) 2012-12-21 2014-06-26 Abbvie, Inc. High-throughput antibody humanization
WO2014106015A2 (en) 2012-12-28 2014-07-03 Abbvie, Inc. Multivalent binding protein compositions
US9458244B2 (en) 2012-12-28 2016-10-04 Abbvie Inc. Single chain multivalent binding protein compositions and methods
EP2938633B1 (en) 2012-12-28 2018-02-07 Precision Biologics, Inc. Humanized monoclonal antibodies and methods of use for the diagnosis and treatment of colon and pancreas cancer
ES2689080T3 (es) 2013-01-02 2018-11-08 Glenmark Pharmaceuticals S.A. Anticuerpos que se unen a TL1A y sus usos
US20150353636A1 (en) 2013-01-10 2015-12-10 Genmab B.V. Human igg1 fc region variants and uses thereof
US9180185B2 (en) 2013-01-11 2015-11-10 Hoffman-La Roche Inc. Combination therapy of anti-HER3 antibodies
LT2943511T (lt) 2013-01-14 2019-11-11 Xencor Inc Nauji heterodimeriniai baltymai
US10487155B2 (en) 2013-01-14 2019-11-26 Xencor, Inc. Heterodimeric proteins
US9605084B2 (en) 2013-03-15 2017-03-28 Xencor, Inc. Heterodimeric proteins
US11053316B2 (en) 2013-01-14 2021-07-06 Xencor, Inc. Optimized antibody variable regions
US9701759B2 (en) 2013-01-14 2017-07-11 Xencor, Inc. Heterodimeric proteins
EP2945969A1 (en) 2013-01-15 2015-11-25 Xencor, Inc. Rapid clearance of antigen complexes using novel antibodies
CA3150658A1 (en) 2013-01-18 2014-07-24 Foundation Medicine, Inc. Methods of treating cholangiocarcinoma
WO2014116596A1 (en) 2013-01-22 2014-07-31 Abbvie, Inc. Methods for optimizing domain stability of binding proteins
WO2014116749A1 (en) 2013-01-23 2014-07-31 Genentech, Inc. Anti-hcv antibodies and methods of using thereof
WO2014122613A1 (en) 2013-02-08 2014-08-14 Novartis Ag Anti-il-17a antibodies and their use in treating autoimmune and inflammatory disorders
PT2953976T (pt) 2013-02-08 2021-06-23 Novartis Ag Sítios específicos de modificação de anticorpos para preparar imunoconjugados
WO2014124258A2 (en) 2013-02-08 2014-08-14 Irm Llc Specific sites for modifying antibodies to make immunoconjugates
BR112015019348A2 (pt) 2013-02-13 2017-08-22 Lab Francais Du Fractionnement Métodos para produção de proteína com glicosilação modificada e com sialilação aumentada, para aumentar a atividade de sialil transferase na glândula mamária e para produzir sialil transferase, proteína com glicosilação modificada ou proteína com sialilação aumentada, composição, sialil transferase, mamífero transgênico, e, célula epitelial mamária
KR20160002713A (ko) 2013-02-13 2016-01-08 라보라토이레 프란카이즈 듀 프락티온네먼트 에트 데스 바이오테크놀로지스 고도로 갈락토실화된 항-tnf-알파 항체 및 이의 용도
ES2637151T3 (es) 2013-02-14 2017-10-11 Innate Pharma Tratamiento del linfoma de células T periféricas
ES2878749T3 (es) 2013-02-20 2021-11-19 Innate Pharma Un compuesto que se une específicamente a KIR3DL2 para el uso en el tratamiento de linfoma de células T periférico
HK1211235A1 (en) 2013-02-22 2016-05-20 霍夫曼-拉罗奇有限公司 Methods of treating cancer and preventing drug resistance
EP2961772A1 (en) 2013-02-26 2016-01-06 Roche Glycart AG Anti-mcsp antibodies
US9487587B2 (en) 2013-03-05 2016-11-08 Macrogenics, Inc. Bispecific molecules that are immunoreactive with immune effector cells of a companion animal that express an activating receptor and cells that express B7-H3 and uses thereof
KR20150143458A (ko) 2013-03-06 2015-12-23 메리맥 파마슈티컬즈, 인크. 항-C-MET 탠덤 Fc 이중특이적 항체
JP2016510751A (ja) 2013-03-06 2016-04-11 ジェネンテック， インコーポレイテッド 抗がん剤耐性を治療及び予防する方法
WO2014143205A1 (en) 2013-03-12 2014-09-18 Abbvie Inc. Human antibodies that bind human tnf-alpha and methods of preparing the same
US9498532B2 (en) 2013-03-13 2016-11-22 Novartis Ag Antibody drug conjugates
EP3564384A1 (en) 2013-03-14 2019-11-06 Abbott Laboratories Hcv core lipid binding domain monoclonal antibodies
US9194873B2 (en) 2013-03-14 2015-11-24 Abbott Laboratories HCV antigen-antibody combination assay and methods and compositions for use therein
WO2014159239A2 (en) 2013-03-14 2014-10-02 Novartis Ag Antibodies against notch 3
EP2970947A4 (en) 2013-03-14 2016-10-12 Abbott Lab RECOMBINANT HCV NS3 ANTIGENS AND THEIR MUTANTS FOR ENHANCED ANTIBODY DETECTION
EA201591750A1 (ru) 2013-03-14 2016-05-31 Дженентек, Инк. Антитела против b7-h4 и иммуноконъюгаты
BR112015022576A2 (pt) 2013-03-14 2017-10-24 Genentech Inc produto farmacêutico e seu uso, kit e método para tratar uma disfunção hiperproliferativa
US9562099B2 (en) 2013-03-14 2017-02-07 Genentech, Inc. Anti-B7-H4 antibodies and immunoconjugates
HK1220916A1 (zh) 2013-03-14 2017-05-19 基因泰克公司 治疗癌症和预防癌症药物抗性的方法
US8921526B2 (en) 2013-03-14 2014-12-30 Abbvie, Inc. Mutated anti-TNFα antibodies and methods of their use
US9017687B1 (en) 2013-10-18 2015-04-28 Abbvie, Inc. Low acidic species compositions and methods for producing and using the same using displacement chromatography
PT2968520T (pt) 2013-03-14 2021-08-19 Macrogenics Inc Moléculas biespecíficas que são imunorreativas com células efetoras imunitárias que expressam um recetor de ativação
US9499614B2 (en) 2013-03-14 2016-11-22 Abbvie Inc. Methods for modulating protein glycosylation profiles of recombinant protein therapeutics using monosaccharides and oligosaccharides
WO2014144466A1 (en) 2013-03-15 2014-09-18 Biogen Idec Ma Inc. Anti-alpha v beta 6 antibodies and uses thereof
US9260527B2 (en) 2013-03-15 2016-02-16 Sdix, Llc Anti-human CXCR4 antibodies and methods of making same
US9062108B2 (en) 2013-03-15 2015-06-23 Abbvie Inc. Dual specific binding proteins directed against IL-1 and/or IL-17
WO2014143739A2 (en) 2013-03-15 2014-09-18 Biogen Idec Ma Inc. Anti-alpha v beta 6 antibodies and uses thereof
SG11201506395RA (en) 2013-03-15 2015-09-29 Novartis Ag Antibody drug conjugates
EP2968537A1 (en) 2013-03-15 2016-01-20 Genentech, Inc. Methods of treating cancer and preventing cancer drug resistance
EA201591806A1 (ru) 2013-03-15 2016-01-29 Байоджен Ма Инк. Лечение и профилактика острой почечной недостаточности с применением анти-альфа-v-бета-5 антител
US10106624B2 (en) 2013-03-15 2018-10-23 Xencor, Inc. Heterodimeric proteins
US10858417B2 (en) 2013-03-15 2020-12-08 Xencor, Inc. Heterodimeric proteins
US10544187B2 (en) 2013-03-15 2020-01-28 Xencor, Inc. Targeting regulatory T cells with heterodimeric proteins
CN105142668B (zh) 2013-03-15 2018-04-27 达纳-法伯癌症研究院公司 治疗性肽
JP6397479B2 (ja) 2013-03-15 2018-09-26 エータイアー ファーマ， インコーポレイテッド ヒスチジル−ｔＲＮＡシンテターゼＦｃコンジュゲート
MA38495A1 (fr) 2013-03-15 2017-08-31 Genentech Inc Compositions et méthodes pour le diagnostic et le traitement de cancers hépatiques
MX374811B (es) 2013-03-15 2025-03-06 Ac Immune Sa Anticuerpos anti-tau y métodos de uso.
PL2972373T3 (pl) 2013-03-15 2020-03-31 F. Hoffmann-La Roche Ag Biomarkery i sposoby leczenia stanów związanych z PD-1 i PD-L1
KR20150131177A (ko) 2013-03-15 2015-11-24 제넨테크, 인크. 항-CRTh2 항체 및 그의 용도
EP2968545B1 (en) 2013-03-15 2019-03-06 Memorial Sloan Kettering Cancer Center High affinity anti-gd2 antibodies
ES2676023T3 (es) 2013-03-15 2018-07-16 F. Hoffmann-La Roche Ag Polipéptidos de IL-22 y proteínas de fusión de IL-22 Fc y métodos de uso
WO2014149067A1 (en) 2013-03-15 2014-09-25 Momenta Pharmaceuticals, Inc. Methods related to ctla4-fc fusion proteins
UA118028C2 (uk) 2013-04-03 2018-11-12 Рош Глікарт Аг Біспецифічне антитіло, специфічне щодо fap і dr5, антитіло, специфічне щодо dr5, і спосіб їх застосування
WO2014173886A1 (en) 2013-04-22 2014-10-30 Glycotope Gmbh Anti-cancer treatments with anti-egfr antibodies having a low fucosylation
US20160068613A1 (en) 2013-04-29 2016-03-10 Hoffmann-La Roche Inc. Fc-receptor binding modified asymmetric antibodies and methods of use
SG11201508911PA (en) 2013-04-29 2015-11-27 Hoffmann La Roche Human fcrn-binding modified antibodies and methods of use
CN105164158A (zh) 2013-04-29 2015-12-16 豪夫迈·罗氏有限公司 消除对FcRn-结合的抗-IGF-1R抗体及其在血管性眼病治疗中的用途
EP2996772B1 (en) 2013-05-13 2018-12-19 Momenta Pharmaceuticals, Inc. Methods for the treatment of neurodegeneration
EP4324480A3 (en) 2013-05-20 2024-05-08 F. Hoffmann-La Roche AG Anti-transferrin receptor antibodies and methods of use
LT3004162T (lt) 2013-05-31 2020-06-10 Genentech, Inc. Antikūnai prieš ląstelės sienelės teicho rūgštį ir konjugatai
AU2014273817B2 (en) 2013-05-31 2019-03-14 Zymeworks Bc Inc. Heteromultimers with reduced or silenced effector function
RU2687044C2 (ru) 2013-05-31 2019-05-06 Дженентек, Инк. Антитела против стеночной тейхоевой кислоты и их конъюгаты
US9562101B2 (en) 2013-06-21 2017-02-07 Novartis Ag Lectin-like oxidized LDL receptor 1 antibodies and methods of use
AR096601A1 (es) 2013-06-21 2016-01-20 Novartis Ag Anticuerpos del receptor 1 de ldl oxidado similar a lectina y métodos de uso
TW201534726A (zh) 2013-07-03 2015-09-16 Halozyme Inc 熱穩定ｐｈ２０玻尿酸酶變異體及其用途
CN111518199A (zh) 2013-07-18 2020-08-11 图鲁斯生物科学有限责任公司 具有超长互补决定区的人源化抗体
US20160168231A1 (en) 2013-07-18 2016-06-16 Fabrus, Inc. Antibodies with ultralong complementarity determining regions
PE20160190A1 (es) 2013-08-01 2016-04-28 Five Prime Therapeutics Inc Anticuerpos anti-fgfr2iiib afucosilados
US10093978B2 (en) 2013-08-12 2018-10-09 Genentech, Inc. Compositions for detecting complement factor H (CFH) and complement factor I (CFI) polymorphisms
WO2015022658A2 (en) 2013-08-14 2015-02-19 Novartis Ag Methods of treating sporadic inclusion body myositis
AU2014312190A1 (en) 2013-08-28 2016-02-18 Bioasis Technologies Inc. CNS-targeted conjugates of antibodies
RU2016109247A (ru) 2013-09-17 2017-10-19 Дженентек, Инк. Способы применения антител к lgr5
AU2014325063B2 (en) 2013-09-27 2019-10-31 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Method for producing polypeptide heteromultimer
WO2015050959A1 (en) 2013-10-01 2015-04-09 Yale University Anti-kit antibodies and methods of use thereof
BR112016006999B1 (pt) 2013-10-02 2023-11-14 Medimmune, Llc Anticorpos neutralizantes antiinfluenza a seus usos, seu método de produção, composição que os compreendem, ácido nucleico e vetor
WO2015051293A2 (en) 2013-10-04 2015-04-09 Abbvie, Inc. Use of metal ions for modulation of protein glycosylation profiles of recombinant proteins
KR20160044060A (ko) 2013-10-11 2016-04-22 에프. 호프만-라 로슈 아게 다중특이적 도메인 교환된 통상의 가변 경쇄 항체
CA2926084A1 (en) 2013-10-11 2015-04-16 Genentech, Inc. Nsp4 inhibitors and methods of use
EP3054987B1 (en) 2013-10-11 2019-10-09 The United States of America, represented by the Secretary, Department of Health and Human Services Tem8 antibodies and their use
EP3058084A4 (en) 2013-10-16 2017-07-05 Momenta Pharmaceuticals, Inc. Sialylated glycoproteins
US9085618B2 (en) 2013-10-18 2015-07-21 Abbvie, Inc. Low acidic species compositions and methods for producing and using the same
WO2015057939A1 (en) 2013-10-18 2015-04-23 Biogen Idec Ma Inc. Anti-s1p4 antibodies and uses thereof
US9181337B2 (en) 2013-10-18 2015-11-10 Abbvie, Inc. Modulated lysine variant species compositions and methods for producing and using the same
US8946395B1 (en) 2013-10-18 2015-02-03 Abbvie Inc. Purification of proteins using hydrophobic interaction chromatography
TWI658052B (zh) 2013-10-18 2019-05-01 美商建南德克公司 抗－ｒｓｐｏ抗體及使用方法
MX2016005159A (es) 2013-10-23 2016-07-05 Genentech Inc Metodos de diagnostico y tratamiento de trastornos eosinofilicos.
US10196455B2 (en) 2013-11-07 2019-02-05 Inserm (Institut National De La Sante Et De La Recherche Medicale) Neuregulin allosteric anti-HER3 antibody
US20150139988A1 (en) 2013-11-15 2015-05-21 Abbvie, Inc. Glycoengineered binding protein compositions
MY176237A (en) 2013-11-21 2020-07-24 Hoffmann La Roche Anti-alpha-synuclein antibodies and methods of use
WO2015082446A1 (en) 2013-12-02 2015-06-11 F. Hoffmann-La Roche Ag Treatment of cancer using an anti-cdcp1 antibody and a taxane
KR20160090904A (ko) 2013-12-06 2016-08-01 다나-파버 캔서 인스티튜트 인크. 치료 펩티드
HRP20192052T1 (hr) * 2013-12-09 2020-02-07 Allakos Inc. Protutijela anti-siglec-8 te njihovi postupci i uporabe
JP2017505756A (ja) 2013-12-13 2017-02-23 ザ ジェネラル ホスピタル コーポレイション 可溶性高分子量（ｈｍｗ）タウ種およびその用途
AR098743A1 (es) 2013-12-13 2016-06-08 Genentech Inc Anticuerpos e inmunoconjugados anti-cd33
WO2015095423A2 (en) 2013-12-17 2015-06-25 Genentech, Inc. Combination therapy comprising ox40 binding agonists and pd-1 axis binding antagonists
EP3647324A1 (en) 2013-12-17 2020-05-06 F. Hoffmann-La Roche AG Methods of treating cancers using pd-1 axis binding antagonists and taxanes
KR102357961B1 (ko) 2013-12-17 2022-02-08 제넨테크, 인크. 항-cd3 항체 및 이의 사용 방법
SG11201604875PA (en) 2013-12-17 2016-07-28 Genentech Inc Methods of treating cancer using pd-1 axis binding antagonists and an anti-cd20 antibody
TWI728373B (zh) 2013-12-23 2021-05-21 美商建南德克公司 抗體及使用方法
US11014987B2 (en) 2013-12-24 2021-05-25 Janssen Pharmaceutics Nv Anti-vista antibodies and fragments, uses thereof, and methods of identifying same
CN114163529B (zh) 2013-12-24 2024-12-13 杨森制药公司 抗vista抗体及片段
CN105873616B (zh) 2014-01-03 2020-06-05 豪夫迈·罗氏有限公司 共价连接的多肽毒素-抗体缀合物
WO2015103549A1 (en) 2014-01-03 2015-07-09 The United States Of America, As Represented By The Secretary Department Of Health And Human Services Neutralizing antibodies to hiv-1 env and their use
CA2930154A1 (en) 2014-01-03 2015-07-09 F. Hoffmann-La Roche Ag Covalently linked helicar-anti-helicar antibody conjugates and uses thereof
MX373097B (es) 2014-01-03 2020-04-27 Hoffmann La Roche Anticuerpos biespecíficos anti-hapteno/anti-receptor de barrera hematoencefálica, complejos de los mismos y su uso como transportadores a través de la barrera hematoencefálica.
CA2932547C (en) 2014-01-06 2023-05-23 F. Hoffmann-La Roche Ag Monovalent blood brain barrier shuttle modules
CA2931986A1 (en) 2014-01-15 2015-07-23 F. Hoffmann-La Roche Ag Fc-region variants with modified fcrn- and maintained protein a-binding properties
WO2015110923A2 (en) 2014-01-21 2015-07-30 Acerta Pharma B.V. Methods of treating chronic lymphocytic leukemia and small lymphocytic leukemia usng a btk inhibitor
WO2015112909A1 (en) 2014-01-24 2015-07-30 Genentech, Inc. Methods of using anti-steap1 antibodies and immunoconjugates
JP6736467B2 (ja) 2014-02-04 2020-08-05 ジェネンテック， インコーポレイテッド 平滑化変異体及びその使用方法
AU2015213741B2 (en) 2014-02-08 2020-10-08 Genentech, Inc. Methods of treating Alzheimer's Disease
EP3102231B1 (en) 2014-02-08 2019-09-11 F.Hoffmann-La Roche Ag Methods of treating alzheimer's disease
CN111499741A (zh) 2014-02-12 2020-08-07 豪夫迈·罗氏有限公司 抗锯齿蛋白1抗体及使用方法
EP3104880B1 (en) 2014-02-14 2020-03-25 MacroGenics, Inc. Improved methods for the treatment of vascularizing cancers
PE20161171A1 (es) 2014-02-21 2016-11-08 Genentech Inc Anticuerpos bioespecificos anti-il-13/il-17 y sus usos referencia cruzada a solicitudes relacionadas
TWI558399B (zh) 2014-02-26 2016-11-21 美國禮來大藥廠 癌症之組合療法
US10183996B2 (en) 2014-02-28 2019-01-22 Allakos Inc. Methods and compositions for treating Siglec-8 associated diseases
TW201622744A (zh) 2014-03-04 2016-07-01 美國禮來大藥廠 癌症之組合療法
AU2015229463A1 (en) 2014-03-12 2016-09-15 Novartis Ag Specific sites for modifying antibodies to make immunoconjugates
ES2747799T3 (es) 2014-03-14 2020-03-11 Innate Pharma Anticuerpos para KIR3DL2 humanizados
EP3925973A1 (en) 2014-03-14 2021-12-22 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Vaccine compositions and methods for restoring nkg2d pathway function against cancers
MX2016011637A (es) 2014-03-14 2017-04-13 Genentech Inc Metodos y composiciones para secrecion de polipeptidos heterologos.
TW202330606A (zh) 2014-03-21 2023-08-01 美商艾伯維有限公司 抗-egfr抗體及抗體藥物結合物
JP6744855B2 (ja) 2014-03-21 2020-08-19 エフ．ホフマン−ラ ロシュ アーゲーＦ． Ｈｏｆｆｍａｎｎ−Ｌａ Ｒｏｃｈｅ Ａｋｔｉｅｎｇｅｓｅｌｌｓｃｈａｆｔ 抗体のｉｎ ｖｉｖｏでの半減期のｉｎ ｖｉｔｒｏでの予測
US20170107294A1 (en) 2014-03-21 2017-04-20 Nordlandssykehuset Hf Anti-cd14 antibodies and uses thereof
CA2943329A1 (en) 2014-03-24 2015-10-01 Genentech, Inc. Cancer treatment with c-met antagonists and correlation of the latter with hgf expression
AU2015237184B2 (en) 2014-03-28 2020-11-26 Xencor, Inc. Bispecific antibodies that bind to CD38 and CD3
KR20160146747A (ko) 2014-03-31 2016-12-21 제넨테크, 인크. 항혈관신생제 및 ox40 결합 효능제를 포함하는 조합 요법
HUE046767T2 (hu) 2014-03-31 2020-03-30 Hoffmann La Roche Anti-OX40 antitestek és alkalmazási eljárások
UA117289C2 (uk) 2014-04-02 2018-07-10 Ф. Хоффманн-Ля Рош Аг Мультиспецифічне антитіло
KR102352573B1 (ko) 2014-04-04 2022-01-18 바이오노믹스 인코포레이티드 Ｌｇｒ５에 결합하는 인간화된 항체들
SG11201607434WA (en) 2014-04-07 2016-10-28 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Immunoactivating antigen-binding molecule
SG11201608192SA (en) 2014-04-11 2016-10-28 Medimmune Llc Bispecific her2 antibodies
JP2017518737A (ja) 2014-04-21 2017-07-13 ミレニアム ファーマシューティカルズ， インコーポレイテッドＭｉｌｌｅｎｎｉｕｍ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ， Ｉｎｃ． ＳＹＫ標的治療薬のための抗ｐＳＹＫ抗体分子及びその使用
WO2015164615A1 (en) 2014-04-24 2015-10-29 University Of Oslo Anti-gluten antibodies and uses thereof
TW201622746A (zh) 2014-04-24 2016-07-01 諾華公司 改善或加速髖部骨折術後身體復原之方法
EA201692287A1 (ru) 2014-05-13 2017-06-30 Чугаи Сеияку Кабушики Каиша Антигенсвязывающая молекула, перенаправляющая т-клетки на клетки, обладающие иммуносупрессорной функцией
RU2016150370A (ru) 2014-05-22 2018-06-26 Дженентек, Инк. Антитела и иммуноконъюгаты против GPC3
BR112016025040A2 (en) 2014-05-23 2018-02-20 Genentech, Inc. methods to determine mit biomarker expression, to treat cancer, to identify an individual with cancer, to predict whether an individual with cancer is more or less likely to respond effectively to treatment, to inhibit cell proliferation, and to treat nccrcc in an individual
NZ726514A (en) 2014-05-29 2019-01-25 Macrogenics Inc Tri-specific binding molecules and methods of use thereof
SG11201609959UA (en) 2014-05-30 2016-12-29 Henlius Biotech Co Ltd Anti-epidermal growth factor receptor (egfr) antibodies
EP3151921B1 (en) 2014-06-06 2019-08-28 Bristol-Myers Squibb Company Antibodies against glucocorticoid-induced tumor necrosis factor receptor (gitr) and uses thereof
EP3155015A1 (en) 2014-06-11 2017-04-19 F. Hoffmann-La Roche AG Anti-lgr5 antibodies and uses thereof
JP6997619B2 (ja) 2014-06-11 2022-01-17 キャシー・エイ・グリーン 液性免疫の抑制または増進のための、ｖｉｓｔａアゴニスト及びｖｉｓｔａアンタゴニストの使用
CN107073121A (zh) 2014-06-13 2017-08-18 基因泰克公司 治疗及预防癌症药物抗性的方法
US20170291939A1 (en) 2014-06-25 2017-10-12 Novartis Ag Antibodies specific for il-17a fused to hyaluronan binding peptide tags
EP3164419B1 (en) 2014-06-26 2024-07-24 F. Hoffmann-La Roche AG Anti-brdu antibodies and methods of use
CA2952532A1 (en) 2014-06-27 2015-12-30 Innate Pharma Multispecific antigen binding proteins
AU2015279316B2 (en) 2014-06-27 2021-03-04 Innate Pharma Multispecific NKp46 binding proteins
EP3166627A1 (en) 2014-07-11 2017-05-17 Genentech, Inc. Notch pathway inhibition
ES2916923T3 (es) 2014-07-11 2022-07-06 Ventana Med Syst Inc Anticuerpos anti-PD-L1 y usos diagnósticos de los mismos
AU2015293949B2 (en) 2014-07-21 2019-07-25 Teknologian Tutkimuskeskus Vtt Oy Production of glycoproteins with mammalian-like N-glycans in filamentous fungi
WO2016020791A1 (en) 2014-08-05 2016-02-11 Novartis Ag Ckit antibody drug conjugates
BR112017002173B1 (pt) 2014-08-07 2023-11-21 Novartis Ag Anticorpo isolado anti-angptl4, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, seu uso, e composição farmacêutica
EP3194437B1 (en) 2014-08-07 2021-01-20 Novartis AG Angiopoietin-like 4 (angptl4) antibodies and methods of use
SMT202200285T1 (it) 2014-08-11 2022-09-14 Acerta Pharma Bv Combinazioni terapeutiche di un inibitore di btk, un inibitore di pd-1 e/o un inibitore di pd-l1
TW201609099A (zh) 2014-08-11 2016-03-16 艾森塔製藥公司 使用布魯頓（Ｂｒｕｔｏｎ）氏酪胺酸激酶（ＢＴＫ）抑制劑以治療慢性淋巴球性白血病和小淋巴球性白血病之方法
US10238748B2 (en) 2014-08-12 2019-03-26 Novartis Ag Anti-CDH6 antibody drug conjugates
WO2016030488A1 (en) 2014-08-27 2016-03-03 Innate Pharma Treatment of celiac disease
TWI751102B (zh) 2014-08-28 2022-01-01 美商奇諾治療有限公司 對ｃｄ１９具專一性之抗體及嵌合抗原受體
ES3034398T3 (en) 2014-08-28 2025-08-18 Bioatla Inc Conditionally active chimeric antigen receptors for modified t-cells
USD791797S1 (en) * 2014-09-11 2017-07-11 Express Scripts, Inc. Display screen with a graphical user interface
USD791796S1 (en) * 2014-09-11 2017-07-11 Express Scripts, Inc. Display screen with a graphical user interface
TWI758784B (zh) 2014-09-12 2022-03-21 美商建南德克公司 抗her2抗體及免疫結合物
EP3191518B1 (en) 2014-09-12 2020-01-15 Genentech, Inc. Anti-b7-h4 antibodies and immunoconjugates
SG11201701627PA (en) 2014-09-12 2017-03-30 Genentech Inc Anti-cll-1 antibodies and immunoconjugates
HK1243629A1 (zh) 2014-09-17 2018-07-20 基因泰克公司 包含抗her2抗体和吡咯并苯并二氮杂䓬的免疫缀合物
WO2016049214A1 (en) 2014-09-23 2016-03-31 Genentech, Inc. METHOD OF USING ANTI-CD79b IMMUNOCONJUGATES
MA40764A (fr) 2014-09-26 2017-08-01 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Agent thérapeutique induisant une cytotoxicité
TWI700300B (zh) 2014-09-26 2020-08-01 日商中外製藥股份有限公司 中和具有第ｖｉｉｉ凝血因子（ｆｖｉｉｉ）機能替代活性的物質之抗體
TWI701435B (zh) 2014-09-26 2020-08-11 日商中外製藥股份有限公司 測定ｆｖｉｉｉ的反應性之方法
CN107108721B (zh) 2014-09-29 2021-09-07 杜克大学 包含hiv-1包膜靶向臂的双特异性分子
SG10201902924RA (en) 2014-10-03 2019-05-30 Massachusetts Inst Technology Antibodies that bind ebola glycoprotein and uses thereof
MA41044A (fr) 2014-10-08 2017-08-15 Novartis Ag Compositions et procédés d'utilisation pour une réponse immunitaire accrue et traitement contre le cancer
WO2016061389A2 (en) 2014-10-16 2016-04-21 Genentech, Inc. Anti-alpha-synuclein antibodies and methods of use
MA41480A (fr) 2014-10-17 2017-12-19 Glenmark Pharmaceuticals Sa Anticorps qui se lient au ccr6 et leurs utilisations
RU2721271C2 (ru) 2014-10-23 2020-05-18 Иннейт Фарма Лечение раковых заболеваний с применением анти-nkg2a средств
EP3223865A4 (en) 2014-10-31 2018-10-03 Jounce Therapeutics, Inc. Methods of treating conditions with antibodies that bind b7-h4
US20160160290A1 (en) 2014-11-03 2016-06-09 Genentech, Inc. Methods and biomarkers for predicting efficacy and evaluation of an ox40 agonist treatment
CN106796235B (zh) 2014-11-03 2021-01-29 豪夫迈·罗氏有限公司 用于检测t细胞免疫子集的测定法及其使用方法
CA2961439A1 (en) 2014-11-05 2016-05-12 Genentech, Inc. Anti-fgfr2/3 antibodies and methods using same
DK3215528T3 (da) 2014-11-06 2019-10-07 Hoffmann La Roche Fc-regionvarianter med modificeret FcRn-binding og anvendelsesfremgangsmåder
EP3215536A1 (en) 2014-11-06 2017-09-13 F. Hoffmann-La Roche AG Combination therapy comprising ox40 binding agonists and tigit inhibitors
EP3842453A1 (en) 2014-11-06 2021-06-30 F. Hoffmann-La Roche AG Fc-region variants with modified fcrn- and protein a-binding properties
TWI705976B (zh) 2014-11-10 2020-10-01 美商建南德克公司 抗介白素-33抗體及其用途
WO2016077369A1 (en) 2014-11-10 2016-05-19 Genentech, Inc. Animal model for nephropathy and agents for treating the same
AU2015347015B2 (en) 2014-11-14 2019-02-14 Novartis Ag Antibody drug conjugates
EA037557B1 (ru) 2014-11-14 2021-04-14 Ф. Хоффманн-Ля Рош Аг Антигенсвязывающие молекулы, содержащие тримерный лиганд семейства tnf
US10160795B2 (en) 2014-11-14 2018-12-25 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Neutralizing antibodies to Ebola virus glycoprotein and their use
JP7090421B2 (ja) * 2014-11-15 2022-06-24 ズムトール バイオロジクス、インコーポレイテッド Ｄｎａ結合ドメイン、非フコシル化及び部分的フコシル化タンパク質、並びにその方法
BR112017010198A2 (pt) 2014-11-17 2017-12-26 Genentech Inc terapia de combinação compreendendo agonistas de ligação a ox40 e antagonistas de ligação ao eixo de pd-1
US11008403B2 (en) 2014-11-19 2021-05-18 Genentech, Inc. Anti-transferrin receptor / anti-BACE1 multispecific antibodies and methods of use
EP3221364B1 (en) 2014-11-19 2020-12-16 Genentech, Inc. Antibodies against bace1 and use thereof for neural disease immunotherapy
RU2730668C2 (ru) 2014-11-19 2020-08-24 Аксон Ньюросайенс Се Гуманизированные тау-антитела при болезни альцгеймера
CN107001473B (zh) 2014-11-19 2021-07-09 豪夫迈·罗氏有限公司 抗-运铁蛋白受体抗体及使用方法
DK3789402T3 (da) 2014-11-20 2022-09-19 Hoffmann La Roche Kombinationsbehandling med T-celleaktiverende bispecifikke antigenbindende molekyler og PD-1-aksebindende antagonister
CN113929770A (zh) 2014-11-21 2022-01-14 百时美施贵宝公司 包含修饰的重链恒定区的抗体
KR102569813B1 (ko) 2014-11-21 2023-08-24 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 Cd73에 대항한 항체 및 그의 용도
KR102689285B1 (ko) 2014-11-26 2024-07-31 젠코어 인코포레이티드 Ｃｄ3 및 종양 항원과 결합하는 이종이량체 항체
MA41019A (fr) 2014-11-26 2021-05-05 Xencor Inc Anticorps hétérodimériques se liant aux antigènes cd3 et cd38
US10259887B2 (en) 2014-11-26 2019-04-16 Xencor, Inc. Heterodimeric antibodies that bind CD3 and tumor antigens
HK1243931A1 (zh) 2014-12-03 2018-07-27 F. Hoffmann-La Roche Ag 抗金黄色葡萄球菌抗体利福霉素缀合物及其用途
ES2764111T3 (es) 2014-12-03 2020-06-02 Hoffmann La Roche Anticuerpos multiespecíficos
WO2016090040A1 (en) 2014-12-03 2016-06-09 Genentech, Inc. Anti-staphylococcus aureus antibody rifamycin conjugates and uses thereof
JP2018505911A (ja) 2014-12-05 2018-03-01 イミュネクスト，インコーポレーテッド 推定上のｖｉｓｔａ受容体としてのｖｓｉｇ８の同定と、ｖｉｓｔａ／ｖｓｉｇ８調節剤を産生するためのその使用
AR102918A1 (es) 2014-12-05 2017-04-05 Genentech Inc Anticuerpos anti-cd79b y métodos de uso
WO2016091891A1 (en) 2014-12-09 2016-06-16 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Human monoclonal antibodies against axl
CN107207591A (zh) 2014-12-10 2017-09-26 豪夫迈·罗氏有限公司 血脑屏障受体抗体及使用方法
US10093733B2 (en) 2014-12-11 2018-10-09 Abbvie Inc. LRP-8 binding dual variable domain immunoglobulin proteins
JP6738348B2 (ja) 2014-12-19 2020-08-12 リジェネサンス ベスローテン フェンノートシャップ ヒトｃ６に結合する抗体およびその使用
WO2016098356A1 (en) 2014-12-19 2016-06-23 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Anti-c5 antibodies and methods of use
UY36449A (es) 2014-12-19 2016-07-29 Novartis Ag Composiciones y métodos para anticuerpos dirigidos a bmp6
KR102650420B1 (ko) 2014-12-19 2024-03-21 추가이 세이야쿠 가부시키가이샤 항-마이오스타틴 항체, 변이체 Fc 영역을 함유하는 폴리펩타이드, 및 사용 방법
US10428155B2 (en) 2014-12-22 2019-10-01 Xencor, Inc. Trispecific antibodies
EA039219B1 (ru) 2014-12-23 2021-12-20 Бристол-Майерс Сквибб Компани Антитела к tigit
CN107428813B (zh) 2014-12-31 2021-08-03 查克美特制药公司 组合肿瘤免疫疗法
WO2016111947A2 (en) 2015-01-05 2016-07-14 Jounce Therapeutics, Inc. Antibodies that inhibit tim-3:lilrb2 interactions and uses thereof
US20160208018A1 (en) 2015-01-16 2016-07-21 Juno Therapeutics, Inc. Antibodies and chimeric antigen receptors specific for ror1
JP2018511557A (ja) 2015-01-22 2018-04-26 中外製薬株式会社 ２種以上の抗ｃ５抗体の組み合わせおよび使用方法
TWI688572B (zh) 2015-01-26 2020-03-21 美商宏觀基因股份有限公司 包含dr5-結合結構域的多價分子
JP2018506275A (ja) 2015-01-28 2018-03-08 ジェネンテック， インコーポレイテッド 多発性硬化症の遺伝子発現マーカー及び治療
HK1244512A1 (zh) 2015-02-04 2018-08-10 健泰科生物技术公司 突变型smoothened及其使用方法
CN112142844B (zh) 2015-02-05 2025-07-25 中外制药株式会社 包含离子浓度依赖性的抗原结合结构域的抗体，fc区变体，il-8-结合抗体及其应用
CA2976074A1 (en) 2015-02-09 2016-08-18 Memorial Sloan Kettering Cancer Center Multi-specific antibodies with affinity for human a33 antigen and dota metal complex and uses thereof
WO2016128912A1 (en) 2015-02-12 2016-08-18 Acerta Pharma B.V. Therapeutic combinations of a btk inhibitor, a pi3k inhibitor, a jak-2 inhibitor, a pd-1 inhibitor, and/or a pd-l1 inhibitor
US10550173B2 (en) 2015-02-19 2020-02-04 Compugen, Ltd. PVRIG polypeptides and methods of treatment
KR102669294B1 (ko) 2015-02-19 2024-05-23 컴퓨젠 엘티디. 항-pvrig 항체 및 사용 방법
WO2016138160A1 (en) 2015-02-24 2016-09-01 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Middle east respiratory syndrome coronavirus immunogens, antibodies, and their use
WO2016135041A1 (en) 2015-02-26 2016-09-01 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Fusion proteins and antibodies comprising thereof for promoting apoptosis
US10227411B2 (en) 2015-03-05 2019-03-12 Xencor, Inc. Modulation of T cells with bispecific antibodies and FC fusions
CA2977285A1 (en) 2015-03-16 2016-09-22 F. Hoffmann-La Roche Ag Methods of detecting and quantifying il-13 and uses in diagnosing and treating th2-associated diseases
WO2016146833A1 (en) 2015-03-19 2016-09-22 F. Hoffmann-La Roche Ag Biomarkers for nad(+)-diphthamide adp ribosyltransferase resistance
HRP20200583T1 (hr) 2015-03-20 2020-07-10 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Protutijela koja neutraliziraju gp120 i njihova upotreba
WO2016154177A2 (en) 2015-03-23 2016-09-29 Jounce Therapeutics, Inc. Antibodies to icos
EP3590961A1 (en) 2015-03-25 2020-01-08 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Bispecific multivalent fusion proteins
WO2016160976A2 (en) 2015-03-30 2016-10-06 Abbvie Inc. Monovalent tnf binding proteins
JP7082484B2 (ja) 2015-04-01 2022-06-08 中外製薬株式会社 ポリペプチド異種多量体の製造方法
SG10201913158PA (en) 2015-04-03 2020-02-27 Eureka Therapeutics Inc Constructs targeting afp peptide/mhc complexes and uses thereof
SI3280441T1 (sl) 2015-04-07 2022-01-31 Alector Llc Protitelesa anti-sortilin in metoda njihove uporabe
PL3286315T3 (pl) 2015-04-24 2021-11-02 F. Hoffmann-La Roche Ag Sposoby identyfikacji bakterii zawierających polipeptydy wiążące
EP3778640A1 (en) 2015-05-01 2021-02-17 Genentech, Inc. Masked anti-cd3 antibodies and methods of use
WO2016179194A1 (en) 2015-05-04 2016-11-10 Jounce Therapeutics, Inc. Lilra3 and method of using the same
EP3091033A1 (en) 2015-05-06 2016-11-09 Gamamabs Pharma Anti-human-her3 antibodies and uses thereof
CN116196414A (zh) 2015-05-11 2023-06-02 豪夫迈·罗氏有限公司 治疗狼疮性肾炎的组合物和方法
JP7048319B2 (ja) 2015-05-12 2022-04-05 ジェネンテック， インコーポレイテッド 癌のための治療方法及び診断方法
ES2898023T3 (es) 2015-05-22 2022-03-03 Inst Nat Sante Rech Med Fragmentos de anticuerpos monoclonales humanos que inhiben tanto la actividad catalítica de Cath-D como su unión al receptor LRP1
JP6797137B2 (ja) 2015-05-29 2020-12-09 ブリストル−マイヤーズ スクイブ カンパニーＢｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ Ｃｏｍｐａｎｙ Ｏｘ４０に対する抗体およびその使用
WO2016196343A1 (en) 2015-05-29 2016-12-08 Genentech, Inc. Humanized anti-ebola virus glycoprotein antibodies and methods of use
PL3303632T5 (pl) 2015-05-29 2023-07-03 F. Hoffmann-La Roche Ag Terapeutyczne i diagnostyczne sposoby stosowane w nowotworze
PL3303619T3 (pl) 2015-05-29 2020-10-05 F. Hoffmann-La Roche Ag Metylacja promotora PD-L1 w chorobach nowotworowych
EP3303395B1 (en) 2015-05-29 2019-12-11 AbbVie Inc. Anti-cd40 antibodies and uses thereof
EP3302552A1 (en) 2015-06-02 2018-04-11 H. Hoffnabb-La Roche Ag Compositions and methods for using anti-il-34 antibodies to treat neurological diseases
WO2016196975A1 (en) 2015-06-03 2016-12-08 The United States Of America, As Represented By The Secretary Department Of Health & Human Services Neutralizing antibodies to hiv-1 env and their use
CN107921094B (zh) 2015-06-04 2022-03-01 圣拉斐尔医院有限公司 Igfbp3及其用途
AU2016272045B2 (en) 2015-06-04 2018-04-19 Ospedale San Raffaele Srl Inhibitor of IGFBP3/TMEM219 axis and diabetes
BR112017021484A2 (pt) 2015-06-05 2018-07-03 Novartis Ag anticorpos de direcionamento à proteína morfogenética óssea 9 (bmp9) e métodos para os mesmos
CA3258972A1 (en) 2015-06-05 2025-04-17 Ac Immune Sa TAU ANTIBODIES AND METHODS OF USING THEM
WO2016200835A1 (en) 2015-06-08 2016-12-15 Genentech, Inc. Methods of treating cancer using anti-ox40 antibodies and pd-1 axis binding antagonists
TWI773646B (zh) 2015-06-08 2022-08-11 美商宏觀基因股份有限公司 結合lag-3的分子和其使用方法
CA2985483A1 (en) 2015-06-08 2016-12-15 Genentech, Inc. Methods of treating cancer using anti-ox40 antibodies
SG10202110887PA (en) 2015-06-09 2021-11-29 Memorial Sloan Kettering Cancer Center T cell receptor-like antibody agents specific for ebv latent membrane protein 2a peptide presented by human hla
TWI870335B (zh) 2015-06-12 2025-01-21 美商宏觀基因股份有限公司 變異的嵌合4d5抗體及其與抗pd-1抗體聯合用於治療癌症的應用
TW201710286A (zh) 2015-06-15 2017-03-16 艾伯維有限公司 抗ｖｅｇｆ、ｐｄｇｆ及／或其受體之結合蛋白
AR104987A1 (es) 2015-06-15 2017-08-30 Genentech Inc Inmunoconjugados anticuerpo-fármaco unidos por enlazadores no peptídicos
EP3310378B1 (en) 2015-06-16 2024-01-24 F. Hoffmann-La Roche AG Anti-cll-1 antibodies and methods of use
CA2986928A1 (en) 2015-06-16 2016-12-22 Genentech, Inc. Humanized and affinity matured antibodies to fcrh5 and methods of use
JP2018526972A (ja) 2015-06-16 2018-09-20 ジェネンテック， インコーポレイテッド 抗ｃｄ３抗体及び使用方法
KR102689256B1 (ko) 2015-06-17 2024-07-30 제넨테크, 인크. Pd-1 축 결합 길항제 및 탁산을 사용하여 국소적 진행성 또는 전이성 유방암을 치료하는 방법
US20190194315A1 (en) 2015-06-17 2019-06-27 Novartis Ag Antibody drug conjugates
CN107787331B (zh) 2015-06-17 2022-01-11 豪夫迈·罗氏有限公司 抗her2抗体和使用方法
JP6846362B2 (ja) 2015-06-17 2021-03-24 アラコス インコーポレイテッド 線維性疾患を処置するための方法および組成物
WO2016207278A1 (en) 2015-06-23 2016-12-29 Innate Pharma Multispecific nk engager proteins
CN107922497B (zh) 2015-06-24 2022-04-12 詹森药业有限公司 抗vista抗体和片段
JP6691144B2 (ja) 2015-06-24 2020-04-28 エフ．ホフマン−ラ ロシュ アーゲーＦ． Ｈｏｆｆｍａｎｎ−Ｌａ Ｒｏｃｈｅ Ａｋｔｉｅｎｇｅｓｅｌｌｓｃｈａｆｔ 目的に合わせた親和性を有する抗トランスフェリンレセプター抗体
EP3108897A1 (en) 2015-06-24 2016-12-28 F. Hoffmann-La Roche AG Antibodies against human csf-1r for use in inducing lymphocytosis in lymphomas or leukemias
JP7021955B2 (ja) 2015-06-24 2022-03-03 エフ・ホフマン－ラ・ロシュ・アクチェンゲゼルシャフト Ｈｅｒ２及び血液脳関門受容体に特異的な三重特異性抗体及び使用方法
UY36751A (es) 2015-06-26 2017-01-31 Novartis Ag Anticuerpos de factor xi y métodos de uso
WO2017001350A1 (en) 2015-06-29 2017-01-05 Ventana Medical Systems, Inc. Materials and methods for performing histochemical assays for human pro-epiregulin and amphiregulin
CN108473573A (zh) 2015-06-29 2018-08-31 豪夫迈·罗氏有限公司 Ii型抗cd20抗体用于器官移植中
FR3038517B1 (fr) 2015-07-06 2020-02-28 Laboratoire Francais Du Fractionnement Et Des Biotechnologies Utilisation de fragments fc modifies en immunotherapie
EP3971211A1 (en) 2015-07-13 2022-03-23 Compugen Ltd. Hide1 compositions and methods
MA58293B1 (fr) 2015-07-30 2024-11-29 Macrogenics, Inc. Molécules de liaison pd-1 et leurs procédés d'utilisation
CA2994516C (en) 2015-08-03 2025-12-09 Novartis Ag Methods of treating fgf21-associated disorders
KR102749049B1 (ko) 2015-08-07 2025-01-02 이미지냅 인코포레이티드 분자를 표적화하기 위한 항원 결합 구조체
CN105384825B (zh) 2015-08-11 2018-06-01 南京传奇生物科技有限公司 一种基于单域抗体的双特异性嵌合抗原受体及其应用
WO2017033113A1 (en) 2015-08-21 2017-03-02 Acerta Pharma B.V. Therapeutic combinations of a mek inhibitor and a btk inhibitor
EP3341415B1 (en) 2015-08-28 2021-03-24 H. Hoffnabb-La Roche Ag Anti-hypusine antibodies and uses thereof
US10000561B2 (en) 2015-09-09 2018-06-19 Novartis Ag Thymic stromal lymphopoietin (TSLP)-binding molecules and methods of using the molecules
CA2996635A1 (en) 2015-09-09 2017-03-16 Novartis Ag Thymic stromal lymphopoietin (tslp)-binding molecules and methods of using the molecules
FI3747472T3 (fi) 2015-09-15 2024-06-03 Acerta Pharma Bv Cd19-inhibiittorin ja btk-inhibiittorin terapeuttiset yhdistelmät
WO2017046746A1 (en) 2015-09-15 2017-03-23 Acerta Pharma B.V. Therapeutic combinations of a btk inhibitor and a gitr binding molecule, a 4-1bb agonist, or an ox40 agonist
US9862760B2 (en) 2015-09-16 2018-01-09 Novartis Ag Polyomavirus neutralizing antibodies
EP3353206A1 (en) 2015-09-22 2018-08-01 Spring Bioscience Corporation Anti-ox40 antibodies and diagnostic uses thereof
UA125432C2 (uk) 2015-09-23 2022-03-09 Дженентек, Інк. Оптимізовані варіанти анти-vegf антитіл
EP3352791B1 (en) 2015-09-24 2019-10-30 AbVitro LLC Hiv antibody compositions and methods of use
CN113912724B (zh) 2015-09-25 2025-03-14 豪夫迈·罗氏有限公司 抗tigit抗体和使用方法
AR106188A1 (es) 2015-10-01 2017-12-20 Hoffmann La Roche Anticuerpos anti-cd19 humano humanizados y métodos de utilización
EP3150636A1 (en) 2015-10-02 2017-04-05 F. Hoffmann-La Roche AG Tetravalent multispecific antibodies
MY198560A (en) 2015-10-02 2023-09-05 Hoffmann La Roche Bispecific antibodies specific for a costimulatory tnf receptor
EP3356406A1 (en) 2015-10-02 2018-08-08 H. Hoffnabb-La Roche Ag Bispecific anti-human cd20/human transferrin receptor antibodies and methods of use
MY192202A (en) 2015-10-02 2022-08-06 Hoffmann La Roche Bispecific antibodies specific for pd1 and tim3
AU2016331931C1 (en) 2015-10-02 2020-01-16 Genentech, Inc. Pyrrolobenzodiazepine antibody drug conjugates and methods of use
AR106189A1 (es) 2015-10-02 2017-12-20 Hoffmann La Roche ANTICUERPOS BIESPECÍFICOS CONTRA EL A-b HUMANO Y EL RECEPTOR DE TRANSFERRINA HUMANO Y MÉTODOS DE USO
WO2017062682A2 (en) 2015-10-06 2017-04-13 Genentech, Inc. Method for treating multiple sclerosis
AU2016335750B2 (en) 2015-10-07 2023-05-25 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services IL-7R-alpha specific antibodies for treating acute lymphoblastic leukemia
KR20180054877A (ko) 2015-10-07 2018-05-24 에프. 호프만-라 로슈 아게 공자극 tnf 수용체에 대해 4가를 갖는 이중특이적 항체
WO2017066714A1 (en) 2015-10-16 2017-04-20 Compugen Ltd. Anti-vsig1 antibodies and drug conjugates
EP3365372A1 (en) 2015-10-22 2018-08-29 Jounce Therapeutics, Inc. Gene signatures for determining icos expression
US10604577B2 (en) 2015-10-22 2020-03-31 Allakos Inc. Methods and compositions for treating systemic mastocytosis
MX2018005036A (es) 2015-10-29 2018-08-01 Hoffmann La Roche Anticuerpos y metodos de uso de anti-regiones de fragmentos cristalizables (fc) variantes.
EP3368092B9 (en) 2015-10-29 2020-07-29 Novartis AG Antibody conjugates comprising toll-like receptor agonist
EP3184547A1 (en) 2015-10-29 2017-06-28 F. Hoffmann-La Roche AG Anti-tpbg antibodies and methods of use
PE20181009A1 (es) 2015-10-30 2018-06-26 Genentech Inc ANTICUERPOS ANTI-HtrA1 Y METODOS DE USO DE LOS MISMOS
CN108289951A (zh) 2015-10-30 2018-07-17 豪夫迈·罗氏有限公司 抗-因子d抗体和缀合物
SG11201802773RA (en) 2015-11-02 2018-05-30 Genentech Inc Methods of making fucosylated and afucosylated forms of a protein
CN108884149B (zh) 2015-11-03 2022-07-01 美国政府(由卫生和人类服务部的部长所代表) Hiv-1 gp41中和抗体及其用途
CN108602884B (zh) 2015-11-08 2024-06-25 豪夫迈·罗氏有限公司 筛选多特异性抗体的方法
US11649293B2 (en) 2015-11-18 2023-05-16 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Method for enhancing humoral immune response
US11660340B2 (en) 2015-11-18 2023-05-30 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Combination therapy using T cell redirection antigen binding molecule against cell having immunosuppressing function
BR112018010172A2 (pt) 2015-11-19 2018-11-21 Bristol Myers Squibb Co anticorpos contra receptor de fator de necrose de tumor induzido por glicocorticoide (gitr) e usos dos mesmos
JP7349787B2 (ja) 2015-11-23 2023-09-25 ファイヴ プライム セラピューティクス インク 癌治療におけるｆｇｆｒ２阻害剤単独または免疫刺激剤との組み合わせ
EP3383903A1 (en) 2015-11-30 2018-10-10 Bristol-Myers Squibb Company Anti human ip-10 antibodies and their uses
CA3006477A1 (en) 2015-12-04 2017-06-08 Novartis Ag Antibody cytokine engrafted compositions and methods of use for immunoregulation
WO2017100372A1 (en) 2015-12-07 2017-06-15 Xencor, Inc. Heterodimeric antibodies that bind cd3 and psma
EP3178848A1 (en) 2015-12-09 2017-06-14 F. Hoffmann-La Roche AG Type ii anti-cd20 antibody for reducing formation of anti-drug antibodies
IL313608A (en) 2015-12-09 2024-08-01 Hoffmann La Roche Antibody against CD20 type II to reduce the formation of antibodies against drugs
CN108367069B (zh) 2015-12-14 2022-08-23 宏观基因有限公司 对于pd-1和ctla-4具有免疫反应性的双特异性分子及其使用方法
CA3002422C (en) 2015-12-18 2024-04-16 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Anti-myostatin antibodies, polypeptides containing variant fc regions, and methods of use
RU2742606C2 (ru) 2015-12-18 2021-02-09 Чугаи Сейяку Кабусики Кайся Антитела к с5 и способы их применения
US20170198040A1 (en) 2015-12-18 2017-07-13 Novartis Ag ANTIBODIES TARGETING CD32b AND METHODS OF USE THEREOF
US20200270363A1 (en) 2015-12-25 2020-08-27 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Antibody having enhanced activity, and method for modifying same
AU2016381992B2 (en) 2015-12-28 2024-01-04 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Method for promoting efficiency of purification of Fc region-containing polypeptide
IL299759A (en) 2015-12-30 2023-03-01 Genentech Inc Formulations with reduced polysorbate dissolution
AU2017205089B2 (en) 2016-01-08 2023-10-05 F. Hoffmann-La Roche Ag Methods of treating CEA-positive cancers using PD-1 axis binding antagonists and anti-CEA/anti-CD3 bispecific antibodies
MX2018008310A (es) 2016-01-11 2019-01-28 Inhibrx Inc Proteinas de fusion de union a ox40 multivalentes y multiespecificas.
WO2017122175A1 (en) 2016-01-13 2017-07-20 Acerta Pharma B.V. Therapeutic combinations of an antifolate and a btk inhibitor
CA3011739A1 (en) 2016-01-20 2017-07-27 Genentech, Inc. High dose treatments for alzheimer's disease
AU2017213826A1 (en) 2016-02-04 2018-08-23 Curis, Inc. Mutant smoothened and methods of using the same
JP7014724B2 (ja) 2016-02-06 2022-02-01 エピムアブ バイオセラピューティクス インコーポレイテッド タンデム型Ｆａｂ免疫グロブリンおよびその使用
WO2017137830A1 (en) 2016-02-12 2017-08-17 Janssen Pharmaceutica Nv Anti-vista (b7h5) antibodies
EA201891724A1 (ru) 2016-02-17 2019-01-31 Новартис Аг Антитела к tgf-бета2
CN114395624A (zh) 2016-02-29 2022-04-26 基因泰克公司 用于癌症的治疗和诊断方法
EP3423490A1 (en) 2016-03-01 2019-01-09 H. Hoffnabb-La Roche Ag Obinutuzumab and rituximab variants having reduced adcp
US20190284293A1 (en) 2016-03-04 2019-09-19 Bristol-Myers Squibb Company Combination therapy with anti-cd73 antibodies
US10611800B2 (en) 2016-03-11 2020-04-07 Pfizer Inc. Human cytomegalovirus gB polypeptide
KR20180116215A (ko) 2016-03-14 2018-10-24 추가이 세이야쿠 가부시키가이샤 암의 치료에 이용하기 위한 세포상해 유도 치료제
PL3430054T3 (pl) 2016-03-15 2022-05-23 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Sposoby leczenia nowotworów z zastosowaniem antagonistów wiązania z osią PD-1 i przeciwciał anty-GPC3
JP2019517993A (ja) 2016-03-15 2019-06-27 イナート・ファルマ・ソシエテ・アノニムＩｎｎａｔｅ Ｐｈａｒｍａ Ｐｈａｒｍａ Ｓ．Ａ． 抗ｍｉｃａ抗体
CN114907483B (zh) 2016-03-22 2024-07-26 国家医疗保健研究所 人源化抗claudin-1抗体及其用途
AU2017239038B2 (en) 2016-03-22 2024-06-27 Bionomics Inc Administration of an anti-LGR5 monoclonal antibody
CN121431692A (zh) 2016-03-25 2026-01-30 豪夫迈·罗氏有限公司 多路总抗体和抗体缀合的药物量化测定法
EP3443004A1 (en) 2016-04-14 2019-02-20 H. Hoffnabb-La Roche Ag Anti-rspo3 antibodies and methods of use
WO2017181034A1 (en) 2016-04-14 2017-10-19 Bristol-Myers Squibb Company Combination therapy using an anti-fucosyl-gm1 antibody and an anti-cd137 antibody
CN109154027A (zh) 2016-04-15 2019-01-04 豪夫迈·罗氏有限公司 用于监测和治疗癌症的方法
AU2017250294B2 (en) 2016-04-15 2022-07-21 Immunext Inc. Anti-human VISTA antibodies and use thereof
AU2017248644B2 (en) 2016-04-15 2019-10-31 Bioatla, Llc Anti-Axl antibodies, antibody fragments and their immunoconjugates and uses thereof
KR20190003958A (ko) 2016-04-15 2019-01-10 제넨테크, 인크. 암의 치료 및 모니터링 방법
PE20190353A1 (es) 2016-04-15 2019-03-07 Macrogenics Inc Moleculas de union b7-h3 novedosas, conjugados anticuerpo-farmaco de los mismos y metodos de uso de los mismos
EP3445393B1 (en) 2016-04-20 2026-01-14 Merck Sharp & Dohme LLC Cmv neutralizing antigen binding proteins
CA3019398A1 (en) 2016-04-26 2017-11-02 R.P. Scherer Technologies, Llc Antibody conjugates and methods of making and using the same
JP7138567B2 (ja) 2016-04-27 2022-09-16 ノバルティス アーゲー 成長分化因子１５に対する抗体およびそれらの使用
CR20180554A (es) 2016-04-28 2019-01-10 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Preparaciones que contienen anticuerpos
EP3889175A1 (en) 2016-05-02 2021-10-06 F. Hoffmann-La Roche AG The contorsbody - a single chain target binder
WO2017192589A1 (en) 2016-05-02 2017-11-09 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Neutralizing antibodies to influenza ha and their use and identification
JP7089483B2 (ja) 2016-05-11 2022-06-22 エフ・ホフマン－ラ・ロシュ・アクチェンゲゼルシャフト 修飾された抗テネイシン抗体及び使用方法
WO2017194442A1 (en) 2016-05-11 2017-11-16 F. Hoffmann-La Roche Ag Antigen binding molecules comprising a tnf family ligand trimer and a tenascin binding moiety
EP3243836A1 (en) 2016-05-11 2017-11-15 F. Hoffmann-La Roche AG C-terminally fused tnf family ligand trimer-containing antigen binding molecules
EP3243832A1 (en) 2016-05-13 2017-11-15 F. Hoffmann-La Roche AG Antigen binding molecules comprising a tnf family ligand trimer and pd1 binding moiety
LT3455261T (lt) 2016-05-13 2022-11-10 Bioatla, Inc. Antikūnai prieš ror2, antikūnų fragmentai, jų imunokonjugatai ir panaudojimas
MA45031A (fr) 2016-05-18 2019-03-27 Genmab Bv Anticorps et leurs procédés d'utilisation dans le traitement de maladies infectieuses
EP3458101B1 (en) 2016-05-20 2020-12-30 H. Hoffnabb-La Roche Ag Protac antibody conjugates and methods of use
TW201802121A (zh) 2016-05-25 2018-01-16 諾華公司 抗因子XI/XIa抗體之逆轉結合劑及其用途
CN109313200B (zh) 2016-05-27 2022-10-04 豪夫迈·罗氏有限公司 用于表征位点特异性抗体-药物缀合物的生物分析性方法
EP3252078A1 (en) 2016-06-02 2017-12-06 F. Hoffmann-La Roche AG Type ii anti-cd20 antibody and anti-cd20/cd3 bispecific antibody for treatment of cancer
CA3059010A1 (en) 2016-06-02 2018-12-06 F. Hoffmann-La Roche Ag Type ii anti-cd20 antibody and anti-cd20/cd3 bispecific antibody for treatment of cancer
US20190343961A1 (en) 2016-06-08 2019-11-14 Abbvie Inc. Anti-egfr antibody drug conjugates
US20190153107A1 (en) 2016-06-08 2019-05-23 Abbvie Inc. Anti-egfr antibody drug conjugates
MX2018015268A (es) 2016-06-08 2019-08-12 Abbvie Inc Anticuerpos anti-cd98 y conjugados de anticuerpo y farmaco.
BR112018075644A2 (pt) 2016-06-08 2019-04-09 Abbvie Inc. anticorpos anti-cd98 e conjugados de anticorpo e fármaco
PL3458479T4 (pl) 2016-06-08 2021-07-26 Abbvie Inc. Przeciwciała anty-b7-h3 i koniugaty przeciwciało-lek
CN109563167A (zh) 2016-06-08 2019-04-02 艾伯维公司 抗b7-h3抗体和抗体药物偶联物
MX2018015274A (es) 2016-06-08 2019-10-07 Abbvie Inc Anticuerpos anti-cd98 y conjugados de anticuerpo y farmaco.
MX2018015285A (es) 2016-06-08 2019-09-18 Abbvie Inc Anticuerpos anti-b7-h3 y conjugados de anticuerpo y farmaco.
CN109562190A (zh) 2016-06-08 2019-04-02 艾伯维公司 抗egfr抗体药物偶联物
ES2963807T3 (es) 2016-06-08 2024-04-02 Xencor Inc Tratamiento de enfermedades relacionadas con la IgG4 con anticuerpos anti-CD19 de reticulación a CD32B
KR102838691B1 (ko) 2016-06-14 2025-07-25 젠코어 인코포레이티드 이중특이적 체크포인트 억제제 항체
CA3027651A1 (en) 2016-06-15 2017-12-21 Novartis Ag Methods for treating disease using inhibitors of bone morphogenetic protein 6 (bmp6)
EP3257866A1 (en) 2016-06-17 2017-12-20 Academisch Medisch Centrum Modified anti-tnf antibody and use thereof in the treatment of ibd
KR102680483B1 (ko) 2016-06-17 2024-07-01 추가이 세이야쿠 가부시키가이샤 항-마이오스타틴 항체 및 사용 방법
EP3475298A1 (en) 2016-06-24 2019-05-01 H. Hoffnabb-La Roche Ag Anti-polyubiquitin multispecific antibodies
CN116063545A (zh) 2016-06-28 2023-05-05 Xencor股份有限公司 结合生长抑素受体2的异源二聚抗体
KR20190039937A (ko) 2016-07-08 2019-04-16 스태튼 바이오테크놀로지 비.브이. 항-ApoC3 항체 및 이의 사용 방법
CN117683135A (zh) 2016-07-14 2024-03-12 百时美施贵宝公司 针对tim3的抗体及其用途
WO2018014260A1 (en) 2016-07-20 2018-01-25 Nanjing Legend Biotech Co., Ltd. Multispecific antigen binding proteins and methods of use thereof
CN109562282A (zh) 2016-07-29 2019-04-02 伊莱利利公司 用于治疗癌症的使用merestinib和抗-pd-l1或抗-pd-1抑制剂的组合疗法
EP3491022B1 (en) 2016-07-29 2025-09-10 Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale (INSERM) Antibodies targeting tumor associated macrophages and uses thereof
EP3492496A4 (en) 2016-07-29 2020-07-29 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha BISPECIFIC ANTIBODIES PRESENTING AN INCREASED ALTERNATIVE FUNCTIONAL ACTIVITY OF COFACTOR FVIII
KR20230107408A (ko) 2016-07-29 2023-07-14 주노 쎄러퓨티크스 인코퍼레이티드 항-cd19 항체에 대한 항-이디오타입 항체
CA3032820A1 (en) 2016-08-02 2018-03-22 Visterra, Inc. Engineered polypeptides and uses thereof
US11649285B2 (en) 2016-08-03 2023-05-16 Bio-Techne Corporation Identification of VSIG3/VISTA as a novel immune checkpoint and use thereof for immunotherapy
MX2019001448A (es) 2016-08-05 2019-09-13 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Composicion para profilaxis o tratamiento de enfermedades relacionadas con interleucina 8 (il-8).
WO2018027203A1 (en) 2016-08-05 2018-02-08 Allakos, Inc. Anti-siglec-7 antibodies for the treatment of cancer
CN109476748B (zh) 2016-08-08 2023-05-23 豪夫迈·罗氏有限公司 用于癌症的治疗和诊断方法
RS64925B1 (sr) 2016-08-10 2023-12-29 Legend Biotech Ireland Ltd Himerni antigenski receptori koji ciljaju bcma i postupci njihove upotrebe
TWI672317B (zh) 2016-08-16 2019-09-21 Epimab Biotherapeutics, Inc. 單價不對稱串聯Fab雙特異性抗體
SI3347379T1 (sl) 2016-08-17 2020-04-30 Compugen Ltd. ANTI-TIGIT protitelesa, ANTI-PVRIG protitelesa in njihove kombinacije
US10793632B2 (en) 2016-08-30 2020-10-06 Xencor, Inc. Bispecific immunomodulatory antibodies that bind costimulatory and checkpoint receptors
CN107384932B (zh) 2016-08-31 2020-10-20 北京天广实生物技术股份有限公司 抗人cd20人源化单克隆抗体mil62、其制备方法及用途
WO2018044970A1 (en) 2016-08-31 2018-03-08 University Of Rochester Human monoclonal antibodies to human endogenous retrovirus k envelope (herv-k) and uses thereof
AU2017321973B2 (en) 2016-09-02 2024-09-05 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Composition and methods of treating B cell disorders
AU2017325240B9 (en) 2016-09-06 2025-02-13 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Methods of using a bispecific antibody that recognizes coagulation factor IX and/or activated coagulation factor IX and coagulation factor X and/or activated coagulation factor X
US11168148B2 (en) 2016-09-07 2021-11-09 The Regents Of The University Of California Antibodies to oxidation-specific epitopes
SG10201607778XA (en) 2016-09-16 2018-04-27 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Anti-Dengue Virus Antibodies, Polypeptides Containing Variant Fc Regions, And Methods Of Use
CN109689682B (zh) 2016-09-19 2022-11-29 豪夫迈·罗氏有限公司 基于补体因子的亲和层析
JP6995844B2 (ja) 2016-09-23 2022-02-04 ジェネンテック， インコーポレイテッド アトピー性皮膚炎を治療するためのｉｌ－１３アンタゴニストの使用
CN110139873A (zh) 2016-10-03 2019-08-16 朱诺治疗学股份有限公司 Hpv特异性结合分子
JP7050770B2 (ja) 2016-10-05 2022-04-08 エフ・ホフマン－ラ・ロシュ・アクチェンゲゼルシャフト 抗体薬物コンジュゲートの調製方法
AU2017339517B2 (en) 2016-10-06 2024-03-14 Foundation Medicine, Inc. Therapeutic and diagnostic methods for cancer
WO2018068201A1 (en) 2016-10-11 2018-04-19 Nanjing Legend Biotech Co., Ltd. Single-domain antibodies and variants thereof against ctla-4
CR20210094A (es) 2016-10-13 2021-03-31 Massachusetts Inst Technology ANTICUERPOS QUE SE UNEN A LA PROTEÍNA DE ENVOLTURA DEL VIRUS ZIKA Y USOS DE LOS MISMOS (Divisional 2019-0193)
US10550185B2 (en) 2016-10-14 2020-02-04 Xencor, Inc. Bispecific heterodimeric fusion proteins containing IL-15-IL-15Rα Fc-fusion proteins and PD-1 antibody fragments
AU2017345203B2 (en) 2016-10-21 2024-08-01 Innate Pharma Treatment with anti-KIR3DL2 agents
CN110121508A (zh) 2016-10-25 2019-08-13 法国国家健康和医学研究院 与cd160跨膜同种型结合的单克隆抗体
US11555076B2 (en) 2016-10-29 2023-01-17 Genentech, Inc. Anti-MIC antibodies and methods of use
TWI788307B (zh) 2016-10-31 2023-01-01 美商艾歐凡斯生物治療公司 用於擴增腫瘤浸潤性淋巴細胞之工程化人造抗原呈現細胞
EP3535291A1 (en) 2016-11-01 2019-09-11 Genmab B.V. Polypeptide variants and uses thereof
HUE057559T2 (hu) 2016-11-02 2022-06-28 Jounce Therapeutics Inc PD-1 elleni antitestek és alkalmazásaik
BR112019008223A2 (pt) 2016-11-03 2019-07-16 Bristol-Myers Squibb Company anticorpos anti-ctla-4 ativáveis e usos dos mesmos
WO2018087720A1 (en) 2016-11-14 2018-05-17 Novartis Ag Compositions, methods, and therapeutic uses related to fusogenic protein minion
MX2019005438A (es) 2016-11-15 2019-08-16 Genentech Inc Dosificacion para tratamiento con anticuerpos bispecificos anti-cd20 / anti-cd3.
ES2866348T3 (es) 2016-11-16 2021-10-19 Lilly Co Eli Terapia de combinación para el cáncer con mutación o mutaciones de omisión del exón 14 o fenotipo de omisión del exón 14
JOP20190100A1 (ar) 2016-11-19 2019-05-01 Potenza Therapeutics Inc بروتينات ربط مولد ضد مضاد لـ gitr وطرق استخدامها
CA3036983A1 (en) 2016-11-21 2018-05-24 Cureab Gmbh Anti-gp73 antibodies and immunoconjugates
JP7274417B2 (ja) 2016-11-23 2023-05-16 イミュノア・セラピューティクス・インコーポレイテッド ４－１ｂｂ結合タンパク質及びその使用
TN2019000164A1 (en) 2016-11-23 2020-10-05 Bioverativ Therapeutics Inc Mono- and bispecific antibodies binding to coagulation factor ix and coagulation factor x
CN117820467A (zh) 2016-12-07 2024-04-05 基因泰克公司 抗tau抗体和使用方法
UA128383C2 (uk) 2016-12-07 2024-07-03 Дженентек, Інк. Антитіло до тау-білка та спосіб його застосування
KR20190095921A (ko) 2016-12-12 2019-08-16 제넨테크, 인크. 항-pd-l1 항체 및 안티안드로겐을 사용하여 암을 치료하는 방법
JP7350313B2 (ja) 2016-12-16 2023-09-26 ブルーフィン バイオメディシン， インコーポレイテッド 抗ｃｕｂドメイン含有タンパク質１（ｃｄｃｐ１）抗体、抗体薬物コンジュゲート、およびその使用方法
KR102669762B1 (ko) 2016-12-19 2024-05-30 에프. 호프만-라 로슈 아게 표적화된 4-1bb(cd137) 작용물질과의 병용 요법
MX2019006954A (es) 2016-12-20 2019-08-01 Hoffmann La Roche Terapia de combinacion de anticuerpos biespecificos anti-cd20/anti-cd3 y agonistas de 4-1bb (cd137).
WO2018116255A1 (en) 2016-12-23 2018-06-28 Novartis Ag Factor xi antibodies and methods of use
US20190322767A1 (en) 2016-12-23 2019-10-24 Innate Pharma Heterodimeric antigen binding proteins
JOP20190134A1 (ar) 2016-12-23 2019-06-02 Potenza Therapeutics Inc بروتينات رابطة لمولد ضد مضادة لنيوروبيلين وطرق استخدامها
BR112019013189A2 (pt) 2017-01-03 2019-12-10 Hoffmann La Roche moléculas de ligação ao antígeno biespecífica, polinucleotídeo, célula hospedeira, método de produção da molécula de ligação ao antígeno biespecífica, composição farmacêutica, uso, métodos para inibir o crescimento de células tumorais em um indivíduo e para tratar o câncer ou uma doença infecciosa
TW201825515A (zh) 2017-01-04 2018-07-16 美商伊繆諾金公司 Ｍｅｔ抗體以及其免疫結合物及用途
ES3055314T3 (en) 2017-01-06 2026-02-11 Iovance Biotherapeutics Inc Expansion of tumor infiltrating lymphocytes with potassium channel agonists and therapeutic uses thereof
BR112019007714B1 (pt) 2017-01-06 2022-01-18 Eutilex Co., Ltd Anticorpos anti-4-1bb, uso do mesmo, composição farmacêutica, métodos para determinar uma dose, para aumentar a secreção de ifn-gama por uma célula in vitro e para proliferação ex vivo ou isolamento de células t ativadas e uso das mesmas
TWI902654B (zh) 2017-01-06 2025-11-01 美商艾歐凡斯生物治療公司 以腫瘤壞死因子受體超家族（ｔｎｆｒｓｆ）促效劑使腫瘤浸潤淋巴球（ｔｉｌ）擴增及ｔｉｌ與ｔｎｆｒｓｆ促效劑的治療組合
US11034667B2 (en) 2017-01-09 2021-06-15 Shuttle Pharmaceuticals, Inc. Selective histone deacetylase inhibitors for the treatment of human disease
US11584733B2 (en) 2017-01-09 2023-02-21 Shuttle Pharmaceuticals, Inc. Selective histone deacetylase inhibitors for the treatment of human disease
US11274157B2 (en) 2017-01-12 2022-03-15 Eureka Therapeutics, Inc. Constructs targeting histone H3 peptide/MHC complexes and uses thereof
EP3574012A1 (en) 2017-01-27 2019-12-04 Memorial Sloan Kettering Cancer Center Bispecific her2 and cd3 binding molecules
DK3580237T3 (da) 2017-02-08 2025-06-30 Novartis Ag Fgf21-mimetiske antistoffer og anvendelser deraf
WO2018147960A1 (en) 2017-02-08 2018-08-16 Imaginab, Inc. Extension sequences for diabodies
MX2019009619A (es) 2017-02-10 2019-12-18 Eutilex Co Ltd Anticuerpo anti-cancer convertible de celula t regulatoria inducible por ifn-gamma (irtca) y usos del mismo.
JP7341060B2 (ja) 2017-02-10 2023-09-08 アンスティチュ ナショナル ドゥ ラ サンテ エ ドゥ ラ ルシェルシュ メディカル Ｍａｐｋ経路の活性化に関連付けられる癌の処置のための方法及び医薬組成物
MY197534A (en) 2017-02-10 2023-06-21 Genentech Inc Anti-tryptase antibodies, compositions thereof, and uses thereof
EA201991879A1 (ru) 2017-02-10 2020-02-03 Генмаб Б.В. Варианты полипептидов и их применение
WO2018148660A1 (en) 2017-02-10 2018-08-16 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Neutralizing antibodies to plasmodium falciparum circumsporozoite protein and their use
EA201991720A1 (ru) 2017-02-17 2020-01-20 Бристол-Маерс Сквибб Компани Антитела к альфа-синуклеину и их применения
AU2018227428A1 (en) 2017-02-28 2019-10-17 Bristol-Myers Squibb Company Use of anti-CTLA-4 antibodies with enhanced ADCC to enhance immune response to a vaccine
MX2019010295A (es) 2017-03-01 2019-11-21 Genentech Inc Métodos de diagnóstico y terapéuticos para el cáncer.
EP3589654A1 (en) 2017-03-02 2020-01-08 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Antibodies having specificity to nectin-4 and uses thereof
KR101994456B1 (ko) * 2017-03-15 2019-06-28 이건무 당 수액제 조성물
MX2019011141A (es) 2017-03-22 2019-11-05 Genentech Inc Composiciones de anticuerpo optimizadas para el tratamiento de trastornos oculares.
CA3054837A1 (en) 2017-03-24 2018-09-27 Novartis Ag Methods for preventing and treating heart disease
SG10201911225WA (en) 2017-03-28 2020-01-30 Genentech Inc Methods of treating neurodegenerative diseases
JP7205995B2 (ja) 2017-03-29 2023-01-17 エフ・ホフマン－ラ・ロシュ・アクチェンゲゼルシャフト 共刺激性ｔｎｆ受容体に対する二重特異性抗原結合分子
US20200131275A1 (en) * 2017-03-29 2020-04-30 Glycotope Gmbh Multispecific antibody constructs binding to muc1 and cd3
JP7196094B2 (ja) 2017-03-29 2022-12-26 エフ・ホフマン－ラ・ロシュ・アクチェンゲゼルシャフト 共刺激ｔｎｆ受容体のための二重特異性抗原結合分子
EP3601349A1 (en) * 2017-03-29 2020-02-05 Glycotope GmbH Pd-l1 and ta-muc1 antibodies
WO2018178123A1 (en) * 2017-03-29 2018-10-04 Glycotope Gmbh BISPECIFIC MUC-1 x PD-L1 ANTIBODIES
JOP20190203A1 (ar) 2017-03-30 2019-09-03 Potenza Therapeutics Inc بروتينات رابطة لمولد ضد مضادة لـ tigit وطرق استخدامها
WO2018185618A1 (en) 2017-04-03 2018-10-11 Novartis Ag Anti-cdh6 antibody drug conjugates and anti-gitr antibody combinations and methods of treatment
BR112019018767A2 (pt) 2017-04-03 2020-05-05 Hoffmann La Roche anticorpos, molécula de ligação ao antígeno biespecífica, um ou mais polinucleotídeos isolados, um ou mais vetores, célula hospedeira, método para produzir um anticorpo, composição farmacêutica, usos, método para tratar uma doença em um indivíduo e invenção
KR102364599B1 (ko) 2017-04-04 2022-02-21 에프. 호프만-라 로슈 아게 Cd40 및 fap에 특이적으로 결합할 수 있는 새로운 이중특이적 항원 결합 분자
US11285207B2 (en) 2017-04-05 2022-03-29 Hoffmann-La Roche Inc. Bispecific antibodies specifically binding to PD1 and LAG3
SG11201909344SA (en) 2017-04-05 2019-11-28 Hoffmann La Roche Anti-lag3 antibodies
TWI796329B (zh) 2017-04-07 2023-03-21 美商默沙東有限責任公司 抗－ilt4抗體及抗原結合片段
CA3058478A1 (en) 2017-04-14 2018-10-18 Genentech, Inc. Diagnostic and therapeutic methods for cancer
WO2018195302A1 (en) 2017-04-19 2018-10-25 Bluefin Biomedicine, Inc. Anti-vtcn1 antibodies and antibody drug conjugates
AU2018256435B2 (en) 2017-04-20 2025-03-13 Atyr Pharma, Inc. Compositions and methods for treating lung inflammation
SG11201909048TA (en) 2017-04-21 2019-11-28 Genentech Inc Use of klk5 antagonists for treatment of a disease
CA3059133A1 (en) 2017-04-21 2018-10-25 Staten Biotechnology B.V. Anti-apoc3 antibodies and methods of use thereof
IL270138B2 (en) 2017-04-26 2025-08-01 Eureka Therapeutics Inc Structures that specifically recognize glypican 3 and their uses
KR102769634B1 (ko) 2017-04-27 2025-02-19 테사로, 인코포레이티드 림프구 활성화 유전자-3 (lag-3)에 대한 항체 작용제 및 그의 용도
AR111651A1 (es) 2017-04-28 2019-08-07 Novartis Ag Conjugados de anticuerpos que comprenden agonistas del receptor de tipo toll y terapias de combinación
AU2018261887A1 (en) 2017-05-05 2019-12-05 Allakos Inc. Methods and compositions for treating allergic ocular diseases
MX2019013202A (es) 2017-05-10 2020-01-21 Iovance Biotherapeutics Inc Expansion de linfocitos de infiltracion de tumor a partir de tumores liquidos y usos terapeuticos de los mismos.
US11116835B2 (en) 2017-05-10 2021-09-14 Fred Hutchinson Cancer Research Center Epstein Barr virus antibodies, vaccines, and uses of the same
US11168129B2 (en) 2017-05-15 2021-11-09 University Of Rochester Broadly neutralizing anti-influenza human monoclonal antibody and uses thereof
WO2018213304A1 (en) 2017-05-16 2018-11-22 Five Prime Therapeutics, Inc. Anti-fgfr2 antibodies in combination with chemotherapy agents in cancer treatment
WO2018215937A1 (en) 2017-05-24 2018-11-29 Novartis Ag Interleukin-7 antibody cytokine engrafted proteins and methods of use in the treatment of cancer
CN111107868A (zh) 2017-05-24 2020-05-05 诺华股份有限公司 抗体细胞因子移植蛋白及使用方法
JOP20190271A1 (ar) 2017-05-24 2019-11-21 Novartis Ag بروتينات مطعّمة بسيتوكين- الجسم المضاد وطرق الاستخدام للاضطرابات المتعلقة بالمناعة
JP7791642B2 (ja) 2017-05-24 2025-12-24 ノバルティス アーゲー 抗体－サイトカイングラフト化タンパク質及び癌の治療における使用方法
BR112019024419A2 (pt) 2017-05-25 2020-07-14 Bristol-Myers Squibb Company anticorpos compreendendo regiões constantes pesadas modificadas
US11225523B2 (en) 2017-06-01 2022-01-18 Compugen Ltd. Triple combination antibody therapies
AU2018281337B2 (en) 2017-06-06 2022-08-25 Relinia, Inc. Single-chain TNF receptor 2 agonist fusion proteins
UY37758A (es) 2017-06-12 2019-01-31 Novartis Ag Método de fabricación de anticuerpos biespecíficos, anticuerpos biespecíficos y uso terapéutico de dichos anticuerpos
JP7657440B2 (ja) 2017-06-12 2025-04-07 ブルーフィン バイオメディシン， インコーポレイテッド 抗－ｉｌ１ｒａｐ抗体および抗体薬物コンジュゲート
WO2018229706A1 (en) 2017-06-16 2018-12-20 Novartis Ag Combination therapy for the treatment of cancer
WO2018229715A1 (en) 2017-06-16 2018-12-20 Novartis Ag Compositions comprising anti-cd32b antibodies and methods of use thereof
JP2020529832A (ja) 2017-06-30 2020-10-15 ゼンコア インコーポレイテッド ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒαおよび抗原結合ドメインを含む標的化ヘテロダイマーＦｃ融合タンパク質
AU2018304458B2 (en) 2017-07-21 2021-12-09 Foundation Medicine, Inc. Therapeutic and diagnostic methods for cancer
US10961318B2 (en) 2017-07-26 2021-03-30 Forty Seven, Inc. Anti-SIRP-α antibodies and related methods
EP3684413A1 (en) 2017-09-20 2020-07-29 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Dosage regimen for combination therapy using pd-1 axis binding antagonists and gpc3 targeting agent
CN111108202B (zh) 2017-09-29 2024-10-22 中外制药株式会社 具有凝血因子viii(fviii)辅因子功能替代活性的多特异性抗原结合分子及含有所述分子作为活性成分的药物制剂
MA50613A (fr) 2017-10-03 2020-08-12 Editas Medicine Inc Molécules de liaison spécifique à l'hpv
EP3694552A1 (en) 2017-10-10 2020-08-19 Tilos Therapeutics, Inc. Anti-lap antibodies and uses thereof
JP2020536967A (ja) 2017-10-12 2020-12-17 イミュノウェイク インコーポレイテッド Ｖｅｇｆｒ−抗体軽鎖融合タンパク質
WO2019081983A1 (en) 2017-10-25 2019-05-02 Novartis Ag CD32B TARGETING ANTIBODIES AND METHODS OF USE
US10538583B2 (en) 2017-10-31 2020-01-21 Staten Biotechnology B.V. Anti-APOC3 antibodies and compositions thereof
KR20200074975A (ko) 2017-10-31 2020-06-25 스태튼 바이오테크놀로지 비.브이. 항-ApoC3 항체 및 이의 사용 방법
CN119161488A (zh) 2017-11-01 2024-12-20 中外制药株式会社 具有降低的生物活性的抗体变体和同种型
EP3704155A2 (en) 2017-11-01 2020-09-09 F. Hoffmann-La Roche AG Combination therapy with targeted ox40 agonists
SG11202003501XA (en) 2017-11-01 2020-05-28 Juno Therapeutics Inc Antibodies and chimeric antigen receptors specific for b-cell maturation antigen
US12227594B2 (en) 2017-11-01 2025-02-18 Hoffmann-La Roche Inc. Bispecific 2+1 contorsbodies
CN111246884A (zh) 2017-11-01 2020-06-05 豪夫迈·罗氏有限公司 新颖的含有tnf家族配体三聚体的抗原结合分子
JP7544597B2 (ja) 2017-11-06 2024-09-03 ジェネンテック， インコーポレイテッド がんの診断及び療法
US11312770B2 (en) 2017-11-08 2022-04-26 Xencor, Inc. Bispecific and monospecific antibodies using novel anti-PD-1 sequences
US10981992B2 (en) 2017-11-08 2021-04-20 Xencor, Inc. Bispecific immunomodulatory antibodies that bind costimulatory and checkpoint receptors
EP3710589A4 (en) 2017-11-14 2021-11-10 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha ANTI-C1S ANTIBODIES AND METHOD OF USING
EP3713959A1 (en) 2017-11-21 2020-09-30 Innate Pharma Multispecific antigen binding proteins
CA3083118A1 (en) 2017-11-22 2019-05-31 Iovance Biotherapeutics, Inc. Expansion of peripheral blood lymphocytes (pbls) from peripheral blood
JP2021503891A (ja) 2017-11-22 2021-02-15 ノバルティス アーゲー 抗第ＸＩ／ＸＩａ因子抗体に対する反転結合剤およびそれらの使用
CN111417651B (zh) 2017-12-01 2023-09-29 诺华股份有限公司 多瘤病毒中和抗体
BR112020010753A2 (pt) 2017-12-01 2020-11-24 The Regents Of The University Of California anticorpos anti-cxcr5 e composições e usos dos mesmos
KR20200110745A (ko) 2017-12-15 2020-09-25 주노 쎄러퓨티크스 인코퍼레이티드 항 - ｃｃｔ5 결합 분자 및 이의 사용 방법
US20210369775A1 (en) 2017-12-15 2021-12-02 Iovance Biotherapeutics, Inc. Systems and methods for determining the beneficial administration of tumor infiltrating lymphocytes, and methods of use thereof and beneficial administration of tumor infiltrating lymphocytes, and methods of use thereof
IL275426B2 (en) 2017-12-19 2025-03-01 Xencor Inc Engineered il-2 fc fusion proteins
EP3502140A1 (en) 2017-12-21 2019-06-26 F. Hoffmann-La Roche AG Combination therapy of tumor targeted icos agonists with t-cell bispecific molecules
CA3084105A1 (en) 2017-12-21 2019-06-27 F. Hoffmann-La Roche Ag Antibodies binding to hla-a2/wt1
SG11202004806SA (en) 2017-12-22 2020-06-29 Jounce Therapeutics Inc Antibodies to lilrb2
EP3728321A1 (en) 2017-12-22 2020-10-28 F. Hoffmann-La Roche AG Use of pilra binding agents for treatment of a disease
WO2019129136A1 (zh) 2017-12-27 2019-07-04 信达生物制药(苏州)有限公司 抗pd-l1抗体及其用途
WO2019129137A1 (zh) 2017-12-27 2019-07-04 信达生物制药(苏州)有限公司 抗lag-3抗体及其用途
CN115925943A (zh) 2017-12-27 2023-04-07 信达生物制药(苏州)有限公司 抗pd-l1抗体及其用途
AU2018396964C1 (en) 2017-12-28 2024-10-03 Nanjing Legend Biotech Co., Ltd. Antibodies and variants thereof against PD-L1
SG11202004158QA (en) 2017-12-28 2020-06-29 Nanjing Legend Biotech Co Ltd Single-domain antibodies and variants thereof against tigit
JP2021508471A (ja) 2017-12-29 2021-03-11 エフ．ホフマン−ラ ロシュ アーゲーＦ． Ｈｏｆｆｍａｎｎ−Ｌａ Ｒｏｃｈｅ Ａｋｔｉｅｎｇｅｓｅｌｌｓｃｈａｆｔ 抗ｖｅｇｆ抗体のｖｅｇｆ受容体遮断選択性を改善する方法
JP7490565B2 (ja) 2017-12-29 2024-05-27 アレクトル エルエルシー 抗ｔｍｅｍ１０６ｂ抗体及びその使用方法
WO2019136029A1 (en) 2018-01-02 2019-07-11 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Neutralizing antibodies to ebola virus glycoprotein and their use
MX2020007077A (es) 2018-01-04 2020-10-28 Iconic Therapeutics Inc Anticuerpos anti-factor tisular, conjugados anticuerpo-farmaco y metodos relacionados.
MX2020006956A (es) 2018-01-05 2020-11-06 Ac Immune Sa Moleculas de union a tdp-43 mal plegadas.
US12247060B2 (en) 2018-01-09 2025-03-11 Marengo Therapeutics, Inc. Calreticulin binding constructs and engineered T cells for the treatment of diseases
ES2983284T3 (es) 2018-01-09 2024-10-22 Shuttle Pharmaceuticals Inc Inhibidores selectivos de histona deacetilasa para el tratamiento de enfermedades humanas
KR102813913B1 (ko) 2018-01-12 2025-05-30 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 Tim3에 대한 항체 및 그의 용도
US11713353B2 (en) 2018-01-15 2023-08-01 Nanjing Legend Biotech Co., Ltd. Single-domain antibodies and variants thereof against PD-1
EP3740505A1 (en) 2018-01-16 2020-11-25 Lakepharma Inc. Bispecific antibody that binds cd3 and another target
AU2019212709A1 (en) 2018-01-26 2020-08-13 Genentech, Inc. IL-22 Fc fusion proteins and methods of use
KR20200125590A (ko) 2018-01-26 2020-11-04 제넨테크, 인크. 조성물 및 사용 방법
US11472874B2 (en) 2018-01-31 2022-10-18 Alector Llc Anti-MS4A4A antibodies and methods of use thereof
TWI860665B (zh) 2018-02-01 2024-11-01 大陸商信達生物製藥（蘇州）有限公司 全人源的抗ｂ細胞成熟抗原（ｂｃｍａ）單鏈抗體及其應用
CN111868082A (zh) 2018-02-02 2020-10-30 博奥泰克尼公司 调节vista和vsig3的相互作用的化合物及其制备和使用方法
PE20211116A1 (es) 2018-02-08 2021-06-23 Genentech Inc Moleculas biespecificas de union al antigeno y metodos de uso
SG11202007564VA (en) 2018-02-09 2020-09-29 Genentech Inc Therapeutic and diagnostic methods for mast cell-mediated inflammatory diseases
TWI829667B (zh) 2018-02-09 2024-01-21 瑞士商赫孚孟拉羅股份公司 結合gprc5d之抗體
JP2021512962A (ja) 2018-02-13 2021-05-20 アイオバンス バイオセラピューティクス，インコーポレイテッド アデノシンａ２ａ受容体アンタゴニストによる腫瘍浸潤性リンパ球（ｔｉｌ）の拡大培養並びにｔｉｌ及びアデノシンａ２ａ受容体アンタゴニストの治療的組み合わせ
EP3752194A4 (en) 2018-02-13 2022-03-16 Checkmate Pharmaceuticals, Inc. COMPOSITIONS AND METHODS FOR TUMOR IMMUNOTHERAPY
WO2019158645A1 (en) 2018-02-14 2019-08-22 Abba Therapeutics Ag Anti-human pd-l2 antibodies
KR20200123118A (ko) 2018-02-21 2020-10-28 제넨테크, 인크. IL-22 Fc 융합 단백질로 치료를 위한 투약
RU2020130795A (ru) 2018-02-21 2022-03-21 Дзе Юнайтед Стэйтс Оф Америка, Эс Репрезентед Бай Дзе Секретэри, Департмент Оф Хелт Энд Хьюман Сервисиз Нейтрализующие антитела к env вич-1 и их применение
CN111836831A (zh) 2018-02-26 2020-10-27 豪夫迈·罗氏有限公司 用于抗tigit拮抗剂抗体和抗pd-l1拮抗剂抗体治疗的给药
CN112088169A (zh) 2018-03-12 2020-12-15 纪念斯隆凯特琳癌症中心 双特异性结合剂及其用途
IL277174B2 (en) 2018-03-13 2025-12-01 Hoffmann La Roche Therapeutic combination of 4-1 bb agonists with anti-cd20 antibodies
TWI841551B (zh) 2018-03-13 2024-05-11 瑞士商赫孚孟拉羅股份公司 使用靶向4-1bb (cd137)之促效劑的組合療法
WO2019178218A1 (en) 2018-03-14 2019-09-19 Memorial Sloan Kettering Cancer Center Anti-polysialic acid antibodies and uses thereof
WO2019178362A1 (en) 2018-03-14 2019-09-19 Elstar Therapeutics, Inc. Multifunctional molecules that bind to calreticulin and uses thereof
US20200040103A1 (en) 2018-03-14 2020-02-06 Genentech, Inc. Anti-klk5 antibodies and methods of use
CA3087423A1 (en) 2018-03-14 2019-09-19 Beijing Xuanyi Pharmasciences Co., Ltd. Anti-claudin 18.2 antibodies
CN116327926A (zh) 2018-03-15 2023-06-27 中外制药株式会社 对寨卡病毒具有交叉反应性的抗登革热病毒抗体及使用方法
EP3768716A1 (en) 2018-03-21 2021-01-27 Five Prime Therapeutics, Inc. Antibodies binding to vista at acidic ph
BR112020018539A2 (pt) 2018-03-23 2020-12-29 Bristol-Myers Squibb Company Anticorpos contra mica e/ou micb e usos dos mesmos
EP3775184B1 (en) 2018-03-29 2025-12-10 F. Hoffmann-La Roche AG Modulating lactogenic activity in mammalian cells
US11958903B2 (en) 2018-03-30 2024-04-16 Nanjing Legend Biotech Co., Ltd. Single-domain antibodies against LAG-3 and uses thereof
TW202011029A (zh) 2018-04-04 2020-03-16 美商建南德克公司 偵測及定量fgf21之方法
EP3773911A2 (en) 2018-04-04 2021-02-17 Xencor, Inc. Heterodimeric antibodies that bind fibroblast activation protein
US11471489B2 (en) 2018-04-05 2022-10-18 Juno Therapeutics, Inc. T cell receptors and engineered cells expressing same
KR102890791B1 (ko) 2018-04-09 2025-11-24 체크메이트 파마슈티칼스, 인크. 바이러스-유사 입자 내로의 올리고뉴클레오타이드의 포장
EP3552631A1 (en) 2018-04-10 2019-10-16 Inatherys Antibody-drug conjugates and their uses for the treatment of cancer
SG11202007961QA (en) 2018-04-13 2020-09-29 Hoffmann La Roche Her2-targeting antigen binding molecules comprising 4-1bbl
US11505595B2 (en) 2018-04-18 2022-11-22 Xencor, Inc. TIM-3 targeted heterodimeric fusion proteins containing IL-15/IL-15RA Fc-fusion proteins and TIM-3 antigen binding domains
WO2019204665A1 (en) 2018-04-18 2019-10-24 Xencor, Inc. Pd-1 targeted heterodimeric fusion proteins containing il-15/il-15ra fc-fusion proteins and pd-1 antigen binding domains and uses thereof
WO2019210848A1 (en) 2018-05-03 2019-11-07 Shanghai Epimab Biotherapeutics Co., Ltd. High affinity antibodies to pd-1 and lag-3 and bispecific binding proteins made therefrom
MX2020011552A (es) 2018-05-03 2020-11-24 Genmab Bv Combinaciones de variantes de anticuerpos y usos de las mismas.
EP3787678A1 (en) 2018-05-03 2021-03-10 University Of Rochester Anti-influenza neuraminidase monoclonal antibodies and uses thereof
CA3100005A1 (en) 2018-05-14 2019-11-21 Werewolf Therapeutics, Inc. Activatable cytokine polypeptides and methods of use thereof
EP3794024B1 (en) 2018-05-14 2023-05-10 Werewolf Therapeutics, Inc. Activatable interleukin-2 polypeptides and methods of use thereof
SMT202300227T1 (it) 2018-05-18 2023-09-06 Glycotope Gmbh Anticorpo anti-muc1
US11319373B2 (en) 2018-05-25 2022-05-03 Alector Llc Anti-SIRPA antibodies and methods of use thereof
TWI869346B (zh) 2018-05-30 2025-01-11 瑞士商諾華公司 Ｅｎｔｐｄ２抗體、組合療法、及使用該等抗體和組合療法之方法
US11932681B2 (en) 2018-05-31 2024-03-19 Novartis Ag Hepatitis B antibodies
BR112020023505A2 (pt) 2018-06-01 2021-03-30 Tayu Huaxia Biotech Medical Group Co., Ltd. Composições e usos das mesmas para tratamento de doença ou condição
WO2019232484A1 (en) 2018-06-01 2019-12-05 Compugen Ltd Anti-pvrig/anti-tigit bispecific antibodies and methods of use
UY38251A (es) 2018-06-01 2019-12-31 Novartis Ag Moléculas de unión contra bcma y usos de las mismas
WO2019227490A1 (en) 2018-06-01 2019-12-05 Tayu Huaxia Biotech Medical Group Co., Ltd. Compositions and methods for imaging
US20210221908A1 (en) 2018-06-03 2021-07-22 Lamkap Bio Beta Ltd. Bispecific antibodies against ceacam5 and cd47
US20210238308A1 (en) 2018-06-04 2021-08-05 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Antigen-binding molecule showing changed half-life in cytoplasm
TWI851577B (zh) 2018-06-07 2024-08-11 美商思進公司 喜樹鹼結合物
CN112469440B (zh) 2018-06-18 2024-09-06 优瑞科生物技术公司 靶向前列腺特异性膜抗原(psma)的构建体和其用途
TWI890148B (zh) 2018-06-23 2025-07-11 美商建南德克公司 以pd-1軸結合拮抗劑、鉑劑及拓撲異構酶ii抑制劑治療肺癌之方法
MX2020013324A (es) 2018-06-29 2021-05-12 Alector Llc Anticuerpos anti proteína reguladora de señales beta 1 (sirp-beta1) y métodos de uso de los mismos.
CR20210047A (es) 2018-07-02 2021-05-21 Amgen Inc Proteína de unión al antígeno anti-steap1
JP7554742B2 (ja) 2018-07-03 2024-09-20 マレンゴ・セラピューティクス，インコーポレーテッド 抗ｔｃｒ抗体分子およびその使用
JP2021528988A (ja) 2018-07-04 2021-10-28 エフ・ホフマン−ラ・ロシュ・アクチェンゲゼルシャフト 新規の二重特異性アゴニスト４−１ｂｂ抗原結合分子
AU2019302454A1 (en) 2018-07-09 2021-02-25 Bristol-Myers Squibb Company Antibodies binding to ILT4
WO2020014306A1 (en) 2018-07-10 2020-01-16 Immunogen, Inc. Met antibodies and immunoconjugates and uses thereof
CN112638948B (zh) 2018-07-11 2025-08-15 戊瑞治疗有限公司 在酸性pH下结合至VISTA的抗体
CN112513082B (zh) 2018-07-13 2025-08-12 根马布股份公司 Cd38抗体变体及其用途
FI3618928T3 (fi) 2018-07-13 2023-04-21 Alector Llc Anti-sortiliini-vasta-aineita ja menetelmiä niiden käyttämiseksi
WO2020012038A1 (en) 2018-07-13 2020-01-16 Genmab A/S Trogocytosis-mediated therapy using cd38 antibodies
MX2021000558A (es) 2018-07-18 2021-04-13 Genentech Inc Metodos para tratar el cancer de pulmon con un antagonista de fijacion al eje pd-1, un antimetabolito y un agente de platino.
MY204773A (en) 2018-07-20 2024-09-12 Surface Oncology Inc Anti-cd112r compositions and methods
CN112512559B (zh) 2018-07-26 2025-02-28 Atyr医药公司 用于治疗nrp2相关疾病的组合物和方法
SG11202101152QA (en) 2018-08-03 2021-03-30 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Antigen-binding molecule containing two antigen-binding domains that are linked to each other
EP3608674A1 (en) 2018-08-09 2020-02-12 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods for assessing binding affinity of an antibody variant to the neonatal fc receptor
PE20210343A1 (es) 2018-08-10 2021-02-23 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Molecula de union al antigeno anti grupo de diferenciacion 137 (cd137) y su uso
KR20210044243A (ko) 2018-08-13 2021-04-22 인히브릭스, 인크. Ox40 결합 폴리펩티드 및 이의 용도
TW202021618A (zh) 2018-08-17 2020-06-16 美商２３與我有限公司 抗ｉｌ１ｒａｐ抗體及其使用方法
US12259395B2 (en) 2018-08-17 2025-03-25 Ab Studio Inc. Catabodies and methods of use thereof
TW202031273A (zh) 2018-08-31 2020-09-01 美商艾歐凡斯生物治療公司 抗ｐｄ－１抗體難治療性之非小細胞肺癌（ｎｓｃｌｃ）病患的治療
GB201814281D0 (en) 2018-09-03 2018-10-17 Femtogenix Ltd Cytotoxic agents
WO2020052542A1 (en) 2018-09-10 2020-03-19 Nanjing Legend Biotech Co., Ltd. Single-domain antibodies against cll1 and constructs thereof
WO2020053742A2 (en) 2018-09-10 2020-03-19 Novartis Ag Anti-hla-hbv peptide antibodies
EP4268831A3 (en) 2018-09-12 2024-05-22 Fred Hutchinson Cancer Center Reducing cd33 expression to selectively protect therapeutic cells
WO2020056077A1 (en) 2018-09-13 2020-03-19 The Board Of Regents Of The University Of Texas System Novel lilrb4 antibodies and uses thereof
JP7618950B2 (ja) 2018-09-19 2025-01-22 インサーム （インスティテュート ナショナル デ ラ サンテ エ デ ラ ルシェルシェ メディカル） 免疫チェックポイント治療に抵抗性のある癌の治療のための方法および医薬組成物
KR20210063330A (ko) 2018-09-19 2021-06-01 제넨테크, 인크. 방광암에 대한 치료 및 진단 방법
CN112930114B (zh) 2018-09-20 2023-10-03 艾欧凡斯生物治疗公司 由冷冻保存的肿瘤样品扩增til
KR102739487B1 (ko) 2018-09-21 2024-12-10 제넨테크, 인크. 3중-음성 유방암에 대한 진단 방법
CA3112989A1 (en) 2018-09-27 2020-04-02 Xilio Development, Inc. Masked cytokine polypeptides
CN112654641A (zh) 2018-10-01 2021-04-13 豪夫迈·罗氏有限公司 具有与cd40的三价结合的双特异性抗原结合分子
CR20210154A (es) 2018-10-01 2021-04-21 Hoffmann La Roche Moléculas de unión a antígeno bioespecíficas que comprenden el clon 212 anti-fap
EP3632929A1 (en) 2018-10-02 2020-04-08 Ospedale San Raffaele S.r.l. Antibodies and uses thereof
JP7612571B2 (ja) 2018-10-03 2025-01-14 ゼンコア インコーポレイテッド Ｉｌ－１２ヘテロ二量体ｆｃ－融合タンパク質
EP3860563A1 (en) 2018-10-05 2021-08-11 Five Prime Therapeutics, Inc. Anti-fgfr2 antibody formulations
WO2020076969A2 (en) 2018-10-10 2020-04-16 Tilos Therapeutics, Inc. Anti-lap antibody variants and uses thereof
UY38407A (es) 2018-10-15 2020-05-29 Novartis Ag Anticuerpos estabilizadores de trem2
WO2020081493A1 (en) 2018-10-16 2020-04-23 Molecular Templates, Inc. Pd-l1 binding proteins
MX2021004348A (es) 2018-10-18 2021-05-28 Genentech Inc Procedimientos de diagnóstico y terapéuticos para el cáncer de riñón sarcomatoide.
MA54052A (fr) 2018-10-29 2022-02-09 Hoffmann La Roche Formulation d'anticorps
EP3873532A1 (en) 2018-10-31 2021-09-08 Novartis AG Dc-sign antibody drug conjugates
EP3877511A1 (en) 2018-11-05 2021-09-15 Iovance Biotherapeutics, Inc. Expansion of tils utilizing akt pathway inhibitors
TW202039831A (zh) 2018-11-05 2020-11-01 美商艾歐凡斯生物治療公司 對抗ｐｄ－１抗體呈現難治性之非小細胞肺癌（ｎｓｃｌｃ）病患之治療
JP2022512860A (ja) 2018-11-06 2022-02-07 アンスティチュ ナショナル ドゥ ラ サンテ エ ドゥ ラ ルシェルシュ メディカル 白血病幹細胞を根絶することによる急性骨髄性白血病の治療のための方法および医薬組成物
SG11202105010UA (en) 2018-11-16 2021-06-29 Memorial Sloan Kettering Cancer Center Antibodies to mucin-16 and methods of use thereof
CA3120729A1 (en) 2018-11-27 2020-06-04 Staidson (Beijing) Biopharmaceuticals Co., Ltd. Antibodies specifically recognizing granulocyte-macrophage colony stimulating factor receptor alpha and uses thereof
US20220106400A1 (en) 2018-11-28 2022-04-07 Bristol-Myers Squibb Company Antibodies comprising modified heavy constant regions
EP3891185A2 (en) 2018-12-05 2021-10-13 F. Hoffmann-La Roche AG Diagnostic methods and compositions for cancer immunotherapy
MX2021006573A (es) 2018-12-06 2021-07-15 Genentech Inc Tratamiento conjunto de linfoma difuso de linfocitos b grandes que comprende un inmunoconjugado anti-cd79b, un agente alquilante y un anticuerpo anti-cd20.
US12234289B2 (en) 2018-12-07 2025-02-25 Ono Pharmaceutical Co., Ltd. Immunosuppresive agent
JP2022513198A (ja) 2018-12-10 2022-02-07 ジェネンテック， インコーポレイテッド Ｆｃ含有タンパク質への部位特異的コンジュゲーションのための光架橋性ペプチド
JP7609775B2 (ja) 2018-12-14 2025-01-07 インセルム（インスティチュート ナショナル デ ラ サンテ エ デ ラ リシェルシェ メディカル） 単離されたＭＨＣ由来ヒトペプチドおよびＣＤ８＋ＣＤ４５ＲＣｌｏｗＴｒｅｇの抑制機能を刺激し、かつ活性化するためのその使用
TW202039554A (zh) 2018-12-19 2020-11-01 瑞士商諾華公司 抗ＴＮＦ－α抗體
JP2022514290A (ja) 2018-12-20 2022-02-10 ジェネンテック， インコーポレイテッド 改変抗体ｆｃおよび使用方法
AR117327A1 (es) 2018-12-20 2021-07-28 23Andme Inc Anticuerpos anti-cd96 y métodos de uso de estos
WO2020132214A2 (en) 2018-12-20 2020-06-25 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Ebola virus glycoprotein-specific monoclonal antibodies and uses thereof
CN119708246A (zh) 2018-12-21 2025-03-28 豪夫迈·罗氏有限公司 与VEGF和IL-1β结合的抗体及其使用方法
EP3898673A1 (en) 2018-12-21 2021-10-27 23Andme, Inc. Anti-il-36 antibodies and methods of use thereof
AR117727A1 (es) 2018-12-21 2021-08-25 Hoffmann La Roche Anticuerpos que se unen a cd3
US11629172B2 (en) 2018-12-21 2023-04-18 Pfizer Inc. Human cytomegalovirus gB polypeptide
WO2020127628A1 (en) 2018-12-21 2020-06-25 F. Hoffmann-La Roche Ag Tumor-targeted superagonistic cd28 antigen binding molecules
SG11202105093RA (en) 2018-12-21 2021-06-29 Hoffmann La Roche Tumor-targeted agonistic cd28 antigen binding molecules
SG11202106498XA (en) 2018-12-26 2021-07-29 Xilio Development Inc Anti-ctla4 antibodies and methods of use thereof
CN113272327A (zh) 2018-12-30 2021-08-17 豪夫迈·罗氏有限公司 抗兔cd19抗体及其使用方法
US20220112557A1 (en) 2019-01-10 2022-04-14 Iovance Biotherapeutics, Inc. System and methods for monitoring adoptive cell therapy clonality and persistence
WO2020148207A1 (en) 2019-01-14 2020-07-23 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Human monoclonal antibodies binding to hla-a2
TWI872040B (zh) 2019-01-14 2025-02-11 美商建南德克公司 用於癌症療法之ｒｎａ分子
CN109762067B (zh) 2019-01-17 2020-02-28 北京天广实生物技术股份有限公司 结合人Claudin 18.2的抗体及其用途
PH12021551783A1 (en) 2019-01-22 2022-05-30 Bristol Myers Squibb Co Antibodies against il-7r alpha subunit and uses thereof
AU2020211407A1 (en) 2019-01-23 2021-08-12 Millennium Pharmaceuticals, Inc. Anti-CD38 antibodies
WO2020151572A1 (en) 2019-01-23 2020-07-30 Tayu Huaxia Biotech Medical Group Co., Ltd. Anti-pd-l1 diabodies and the use thereof
JPWO2020153467A1 (ja) 2019-01-24 2021-12-02 中外製薬株式会社 新規がん抗原及びそれらの抗原に対する抗体
AU2020215576A1 (en) 2019-01-29 2021-07-08 Juno Therapeutics, Inc. Antibodies and chimeric antigen receptors specific for receptor tyrosine kinase like orphan receptor 1 (ROR1)
GB201901197D0 (en) 2019-01-29 2019-03-20 Femtogenix Ltd G-A Crosslinking cytotoxic agents
AU2020226893B2 (en) 2019-02-21 2025-02-27 Marengo Therapeutics, Inc. Multifunctional molecules that bind to T cell related cancer cells and uses thereof
GB2597851B (en) 2019-02-21 2024-05-29 Marengo Therapeutics Inc Antibody molecules that bind to NKP30 and uses thereof
CN113710706A (zh) 2019-02-27 2021-11-26 豪夫迈·罗氏有限公司 用于抗tigit抗体和抗cd20抗体或抗cd38抗体治疗的给药
BR112021016955A2 (pt) 2019-03-01 2021-11-23 Xencor Inc Composição, composição de ácido nucleico, composição de vetor de expressão, vetor de expressão, célula hospedeira, métodos de produção de um domínio de ligação de membro de família 3 de pirofosfatase/fosfodiesterase de ectonucleotídeo e de tratamento de um câncer, anticorpo anti-enpp3, e, anticorpo heterodimérico
AU2020233284A1 (en) 2019-03-01 2021-09-16 Iovance Biotherapeutics, Inc. Expansion of tumor infiltrating lymphocytes from liquid tumors and therapeutic uses thereof
US10570210B1 (en) 2019-03-04 2020-02-25 Beijing Mabworks Biotech Co.Ltd Antibodies binding CD40 and uses thereof
KR102866290B1 (ko) 2019-03-08 2025-10-01 제넨테크, 인크. 세포외 소포 상에서 막 관련 단백질을 검출하고 정량하기 위한 방법
US12509515B2 (en) 2019-03-11 2025-12-30 Memorial Sloan Kettering Cancer Center CD22 antibodies and methods of using the same
MY206650A (en) 2019-03-14 2024-12-30 Genentech Inc Treatment of cancer with her2xcd3 bispecific antibodies in combination with anti-her2 mab
CN113677403B (zh) 2019-04-12 2024-12-27 豪夫迈·罗氏有限公司 包含脂质运载蛋白突变蛋白的双特异性抗原结合分子
CN113924118A (zh) 2019-04-18 2022-01-11 百时美施贵宝公司 在低ph下具有增强的结合特异性的伊匹单抗变体
JPWO2020213724A1 (pl) 2019-04-19 2020-10-22
JP7593939B2 (ja) 2019-04-19 2024-12-03 ジェネンテック， インコーポレイテッド 抗ｍｅｒｔｋ抗体及びその使用方法
US12269872B2 (en) 2019-05-03 2025-04-08 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Neutralizing antibodies to Plasmodium falciparum circumsporozoite protein and their use
AU2020270376A1 (en) 2019-05-03 2021-10-07 Genentech, Inc. Methods of treating cancer with an anti-PD-L1 antibody
JP7550794B2 (ja) 2019-05-14 2024-09-13 ジェネンテック， インコーポレイテッド 濾胞性リンパ腫を処置するための抗ｃｄ７９ｂ免疫複合体の使用方法
CA3137512A1 (en) 2019-05-14 2020-11-19 Werewolf Therapeutics, Inc. Separation moieties and methods and use thereof
AU2020275348A1 (en) 2019-05-15 2021-12-09 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha An antigen-binding molecule, a pharmaceutical composition, and a method
CN114630838A (zh) 2019-05-20 2022-06-14 法国国家健康和医学研究院 新的抗cd25抗体
CN113853219B (zh) 2019-05-20 2025-01-07 诺华股份有限公司 具有包含亲水性基团的接头的抗体药物缀合物
WO2020236795A2 (en) 2019-05-21 2020-11-26 Novartis Ag Trispecific binding molecules against bcma and uses thereof
EP3972993A1 (en) 2019-05-21 2022-03-30 Novartis AG Variant cd58 domains and uses thereof
TWI905099B (zh) 2019-05-21 2025-11-21 瑞士商諾華公司 Cd19 結合分子及其用途
EP3972995A1 (en) 2019-05-21 2022-03-30 University Of Georgia Research Foundation, Inc. Antibodies that bind human metapneumovirus fusion protein and their use
PH12021552938A1 (en) 2019-05-23 2022-07-25 Ac Immune Sa Anti-tdp-43 binding molecules and uses thereof
BR112021025077A2 (pt) 2019-06-11 2022-05-03 Alector Llc Anticorpos anti-sortilina para uso em terapia
AU2020291821B2 (en) 2019-06-12 2025-01-30 Novartis Ag Natriuretic Peptide Receptor 1 antibodies and methods of use
CN114127123A (zh) 2019-06-26 2022-03-01 豪夫迈·罗氏有限公司 结合cea的抗体与4-1bbl的融合
JP7354306B2 (ja) 2019-06-27 2023-10-02 エフ・ホフマン－ラ・ロシュ・アクチェンゲゼルシャフト 新規ｉｃｏｓ抗体及びそれらを含む腫瘍標的化抗原結合分子
MX2022000174A (es) 2019-07-02 2022-05-20 Us Health Anticuerpos monoclonales que se enlazan a egfrviii y sus usos.
JP7478807B2 (ja) 2019-07-09 2024-05-07 北京三▲諾▼佳邑生物技▲術▼有限▲責▼任公司 シュードモナス菌ＰｃｒＶを特異的に認識する抗体及びその使用
CR20220049A (es) 2019-07-10 2022-03-02 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Moléculas de unión a claudina-6 y usos de las mismas
JPWO2021010326A1 (pl) 2019-07-12 2021-01-21
AR119382A1 (es) 2019-07-12 2021-12-15 Hoffmann La Roche Anticuerpos de pre-direccionamiento y métodos de uso
AR119393A1 (es) 2019-07-15 2021-12-15 Hoffmann La Roche Anticuerpos que se unen a nkg2d
US12319745B2 (en) 2019-07-16 2025-06-03 Inserm (Institut National De La Sante Et De La Recherche Medicale) Antibodies having specificity for CD38 and uses thereof
EP4004044A1 (en) 2019-07-24 2022-06-01 H. Lundbeck A/S Anti-mglur5 antibodies and uses thereof
JP2022542505A (ja) 2019-07-29 2022-10-04 コンピュジェン リミテッド 抗ｐｖｒｉｇ抗体製剤およびそれらの使用
AU2020321969A1 (en) 2019-07-31 2022-03-17 Alector Llc Anti-MS4A4A antibodies and methods of use thereof
WO2021018925A1 (en) 2019-07-31 2021-02-04 F. Hoffmann-La Roche Ag Antibodies binding to gprc5d
BR112022001460A2 (pt) 2019-07-31 2022-03-22 Hoffmann La Roche Moléculas de ligação ao antígeno biespecíficas, um ou mais polinucleotídeos isolados, célula hospedeira, método para produzir uma molécula de ligação ao antígeno biespecífica e para tratar uma doença em um indivíduo, composição farmacêutica, uso da molécula de ligação ao antígeno biespecífica e invenção
WO2021024209A1 (en) 2019-08-06 2021-02-11 Aprinoia Therapeutics Inc. Antibodies that bind to pathological tau species and uses thereof
AU2020345913B2 (en) 2019-09-12 2026-02-12 Genentech, Inc. Compositions and methods of treating lupus nephritis
TW202124446A (zh) 2019-09-18 2021-07-01 瑞士商諾華公司 與ｅｎｔｐｄ２抗體之組合療法
WO2021053559A1 (en) 2019-09-18 2021-03-25 Novartis Ag Entpd2 antibodies, combination therapies, and methods of using the antibodies and combination therapies
US12312414B2 (en) 2019-09-18 2025-05-27 Genentech, Inc. Anti-KLK7 antibodies, anti-KLK5 antibodies, multispecific anti-KLK5/KLK7 antibodies, and methods of use
AU2020350689A1 (en) 2019-09-19 2022-03-31 Bristol-Myers Squibb Company Antibodies binding to VISTA at acidic pH
CR20220149A (es) 2019-09-20 2022-05-23 Genentech Inc Dosis para anticuerpos anti-triptasa
CR20220127A (es) 2019-09-27 2022-05-27 Genentech Inc Administración de dosis para tratamiento con anticuerpos antagonistas anti-tigit y anti-pd-l1
WO2021064184A1 (en) 2019-10-04 2021-04-08 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods and pharmaceutical composition for the treatment of ovarian cancer, breast cancer or pancreatic cancer
AU2020365836A1 (en) 2019-10-18 2022-04-28 F. Hoffmann-La Roche Ag Methods of using anti-CD79b immunoconjugates to treat diffuse large B-cell lymphoma
WO2021091605A1 (en) 2019-11-04 2021-05-14 Compugen Ltd. Combination therapy with anti-pvrig antibodies formulations and anti-pd-1 antibodies
CA3155922A1 (en) 2019-11-06 2021-05-14 Huang Huang Diagnostic and therapeutic methods for treatment of hematologic cancers
TWI895295B (zh) 2019-11-12 2025-09-01 美商方得生醫療公司 偵測編碼新生抗原之融合基因之方法
CN115175926A (zh) 2019-11-14 2022-10-11 狼人治疗公司 可激活细胞因子多肽及其使用方法
CN116478292A (zh) 2019-11-15 2023-07-25 恩瑟拉有限责任公司 Tmem219抗体及其治疗性用途
JP7781746B2 (ja) 2019-11-21 2025-12-08 エンテラ・エッセ・エッレ・エッレ Ｉｇｆｂｐ３抗体及びその治療的使用
EP3831849A1 (en) 2019-12-02 2021-06-09 LamKap Bio beta AG Bispecific antibodies against ceacam5 and cd47
WO2021113831A1 (en) 2019-12-05 2021-06-10 Compugen Ltd. Anti-pvrig and anti-tigit antibodies for enhanced nk-cell based tumor killing
CN115916817A (zh) 2019-12-06 2023-04-04 朱诺治疗学股份有限公司 针对bcma靶向结合结构域的抗独特型抗体及相关组合物和方法
US12570749B2 (en) 2019-12-06 2026-03-10 Juno Therapeutics, Inc. Anti-idiotypic antibodies to GPRC5D-targeted binding domains and related compositions and methods
US12577324B2 (en) 2019-12-09 2026-03-17 Inserm (Institut National De La Sante Et De La Recherche Medicale) Antibodies having specificity to HER4 and uses thereof
IL293423A (en) 2019-12-13 2022-07-01 Genentech Inc Anti-ly6g6d antibodies and methods of use
BR112022011570A2 (pt) 2019-12-13 2022-12-13 Alector Llc Anticorpos anti-mertk e métodos de uso dos mesmos
CR20220256A (es) 2019-12-18 2022-08-31 Hoffmann La Roche Anticuerpos que se unen a hla-a2/mage-a4
EP4076490A1 (en) 2019-12-20 2022-10-26 Bristol-Myers Squibb Company Use of fucosylation inhibitor for producing afucosylated antibody
CR20220357A (es) 2019-12-27 2022-08-24 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Anticuerpo anti antígeno-4 asociado al linfocito t citotóxico (ctla-4) y uso del mismo
CN113045655A (zh) 2019-12-27 2021-06-29 高诚生物医药(香港)有限公司 抗ox40抗体及其用途
TWI877278B (zh) 2019-12-30 2025-03-21 美商思進公司 以非海藻糖苷化抗－ｃｄ７０抗體治療癌症之方法
KR102837521B1 (ko) 2020-01-03 2025-07-22 바이오션, 인코포레이티드 Bcma에 결합하는 항체 및 이의 용도
GB2609554B (en) 2020-01-03 2025-08-20 Marengo Therapeutics Inc Anti-TCR antibody molecules and uses thereof
CA3162009A1 (en) 2020-01-09 2021-07-15 F. Hoffmann-La Roche Ag New 4-1bbl trimer-containing antigen binding molecules
CN110818795B (zh) 2020-01-10 2020-04-24 上海复宏汉霖生物技术股份有限公司 抗tigit抗体和使用方法
TWI869528B (zh) 2020-01-13 2025-01-11 美商威特拉公司 C5ar1抗體分子及其用途
EP4090366A1 (en) 2020-01-16 2022-11-23 Genmab A/S Formulations of cd38 antibodies and uses thereof
WO2021194481A1 (en) 2020-03-24 2021-09-30 Genentech, Inc. Dosing for treatment with anti-tigit and anti-pd-l1 antagonist antibodies
WO2022050954A1 (en) 2020-09-04 2022-03-10 Genentech, Inc. Dosing for treatment with anti-tigit and anti-pd-l1 antagonist antibodies
AU2021214795A1 (en) 2020-01-31 2022-08-18 The Cleveland Clinic Foundation Anti-Müllerian Hormone Receptor 2 antibodies and methods of use
BR112022015077A2 (pt) 2020-01-31 2022-10-04 Genentech Inc Métodos para induzir células t cd8+ específicas de neoepítopos em um indivíduo com um tumor e para induzir o tráfico de células t cd8+, vacinas de rna, vacina de rna para uso e antagonistas de ligação
IL295387A (en) 2020-02-05 2022-10-01 Larimar Therapeutics Inc Tat peptide binding proteins and uses thereof
TWI895351B (zh) 2020-02-12 2025-09-01 日商中外製藥股份有限公司 用於癌症之治療的抗cd137抗原結合分子
WO2021163064A2 (en) 2020-02-14 2021-08-19 Jounce Therapeutics, Inc. Antibodies and fusion proteins that bind to ccr8 and uses thereof
EP3868396A1 (en) 2020-02-20 2021-08-25 Enthera S.R.L. Inhibitors and uses thereof
WO2021168292A1 (en) 2020-02-20 2021-08-26 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Epstein-barr virus monoclonal antibodies and uses thereof
CN115087673B (zh) 2020-02-27 2025-02-18 正大天晴药业集团股份有限公司 结合il4r的抗体及其用途
CN115066440A (zh) 2020-02-28 2022-09-16 上海复宏汉霖生物技术股份有限公司 抗cd137构建体及其用途
JP7791826B2 (ja) 2020-02-28 2025-12-24 上海復宏漢霖生物技術股▲フン▼有限公司 抗ｃｄ１３７コンストラクト、多重特異性抗体及びその使用
CN115551894A (zh) 2020-03-12 2022-12-30 以明生物免疫医疗公司 新型抗lilrb4抗体和衍生产物
AU2021236306A1 (en) 2020-03-13 2022-09-15 Genentech, Inc. Anti-interleukin-33 antibodies and uses thereof
US11919948B2 (en) 2020-03-19 2024-03-05 Genentech, Inc. Isoform-selective anti-TGFβ antibodies and methods of use
JP2023518814A (ja) 2020-03-23 2023-05-08 ジェネンテック， インコーポレイテッド Ｃｏｖｉｄ－１９肺炎における、ｉｌ－６アンタゴニストに対する応答を予測するためのバイオマーカー
JP2023518812A (ja) 2020-03-23 2023-05-08 ジェネンテック， インコーポレイテッド Ｃｏｖｉｄ１９肺炎を治療するための、トシリズマブとレムデシビルとの組み合わせ
EP4107184A1 (en) 2020-03-23 2022-12-28 Genentech, Inc. Method for treating pneumonia, including covid-19 pneumonia, with an il6 antagonist
WO2021194913A1 (en) 2020-03-24 2021-09-30 Genentech, Inc. Tie2-binding agents and methods of use
JP2023518841A (ja) 2020-03-26 2023-05-08 ジェネンテック， インコーポレイテッド 宿主細胞タンパク質が減少した修飾哺乳動物細胞
CN116249549A (zh) 2020-03-27 2023-06-09 诺华股份有限公司 用于治疗增殖性疾病和自身免疫病症的双特异性组合疗法
WO2021202590A1 (en) 2020-03-31 2021-10-07 Alector Llc Anti-mertk antibodies and methods of use thereof
WO2021202235A1 (en) 2020-04-01 2021-10-07 University Of Rochester Monoclonal antibodies against the hemagglutinin (ha) and neuraminidase (na) of influenza h3n2 viruses
AR121706A1 (es) 2020-04-01 2022-06-29 Hoffmann La Roche Moléculas de unión a antígeno biespecíficas dirigidas a ox40 y fap
EP4127724A1 (en) 2020-04-03 2023-02-08 Genentech, Inc. Therapeutic and diagnostic methods for cancer
EP4132971A1 (en) 2020-04-09 2023-02-15 Merck Sharp & Dohme LLC Affinity matured anti-lap antibodies and uses thereof
WO2021207662A1 (en) 2020-04-10 2021-10-14 Genentech, Inc. Use of il-22fc for the treatment or prevention of pneumonia, acute respiratory distress syndrome, or cytokine release syndrome
IL297541A (en) 2020-04-24 2022-12-01 Genentech Inc Methods for using anti-cd79b immunoconjugates
EP4143225A4 (en) 2020-04-27 2024-05-15 The Regents of the University of California ISOFORM-INDEPENDENT ANTIBODIES AGAINST LIPOPROTEIN(A)
WO2021222935A2 (en) 2020-04-28 2021-11-04 The Rockefeller University Neutralizing anti-sars-cov-2 antibodies and methods of use thereof
WO2021222167A1 (en) 2020-04-28 2021-11-04 Genentech, Inc. Methods and compositions for non-small cell lung cancer immunotherapy
TW202200212A (zh) 2020-05-03 2022-01-01 中國大陸商聯寧（蘇州）生物製藥有限公司 包含抗-trop-2抗體之抗體藥物結合物
EP4149558A1 (en) 2020-05-12 2023-03-22 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) New method to treat cutaneous t-cell lymphomas and tfh derived lymphomas
CA3178564A1 (en) 2020-05-12 2021-11-18 Zhengping Zhang St2 antigen binding protein
WO2021231976A1 (en) 2020-05-14 2021-11-18 Xencor, Inc. Heterodimeric antibodies that bind prostate specific membrane antigen (psma) and cd3
WO2021231732A1 (en) 2020-05-15 2021-11-18 Bristol-Myers Squibb Company Antibodies to garp
US20230220057A1 (en) 2020-05-27 2023-07-13 Staidson (Beijing) Biopharmaceuticals Co., Ltd. Antibodies specifically recognizing nerve growth factor and uses thereof
CA3178417A1 (en) 2020-05-29 2021-12-02 Yu Chen Anti-cd200r1 antibodies and methods of use thereof
US20230235075A1 (en) 2020-06-02 2023-07-27 Dynamicure Biotechnology Llc Anti-cd93 constructs and uses thereof
CN116529260A (zh) 2020-06-02 2023-08-01 当康生物技术有限责任公司 抗cd93构建体及其用途
US20230340081A1 (en) 2020-06-08 2023-10-26 Hoffmann-La Roche Inc. Anti-hbv antibodies and methods of use
WO2021252977A1 (en) 2020-06-12 2021-12-16 Genentech, Inc. Methods and compositions for cancer immunotherapy
JP2023531406A (ja) 2020-06-16 2023-07-24 ジェネンテック， インコーポレイテッド トリプルネガティブ乳がんを処置するための方法および組成物
CA3181672A1 (en) 2020-06-18 2021-12-23 Shi Li Treatment with anti-tigit antibodies and pd-1 axis binding antagonists
TW202216767A (zh) 2020-06-19 2022-05-01 瑞士商赫孚孟拉羅股份公司 與ＣＤ３及ＦｏｌＲ１結合之抗體
WO2021255146A1 (en) 2020-06-19 2021-12-23 F. Hoffmann-La Roche Ag Antibodies binding to cd3 and cea
TWI811703B (zh) 2020-06-19 2023-08-11 瑞士商赫孚孟拉羅股份公司 與ｃｄ３及ｃｄ１９結合之抗體
PH12022500027A1 (en) 2020-06-19 2024-03-25 Hoffmann La Roche Antibodies binding to cd3
TWI810589B (zh) 2020-06-21 2023-08-01 美商輝瑞股份有限公司 人巨細胞病毒糖蛋白Ｂ（ｇＢ）多肽
CA3183475A1 (en) 2020-06-22 2021-12-30 Thomas Huber Anti-il-36 antibodies and methods of use thereof
US12049515B2 (en) 2020-06-23 2024-07-30 Hoffmann-La Roche Inc. Agonistic CD28 antigen binding molecules targeting Her2
US20220041672A1 (en) 2020-06-24 2022-02-10 Genentech, Inc. Apoptosis resistant cell lines
BR112022026575A2 (pt) 2020-06-25 2023-01-17 Merck Sharp & Dohme Llc Anticorpos de alta afinidade que alvejam tau fosforilado em serina 413
JP2023531067A (ja) 2020-06-25 2023-07-20 エフ・ホフマン－ラ・ロシュ・アクチェンゲゼルシャフト 抗ｃｄ３／抗ｃｄ２８二重特異性抗原結合分子
JP2023532197A (ja) 2020-06-30 2023-07-27 江蘇恒瑞医薬股▲ふん▼有限公司 抗ｃｄ７０抗体及びその応用
IL298921A (en) 2020-07-10 2023-02-01 Hoffmann La Roche Antibodies which bind to cancer cells and target radionuclides to said cells
BR112023000657A2 (pt) 2020-07-13 2023-01-31 Shanghai Junshi Biosciences Co Ltd Anticorpo anti-cldn-18.2 e uso do mesmo
PH12023550112A1 (en) 2020-07-17 2024-06-24 Genentech Inc Anti-notch2 antibodies and methods of use
GB2597532A (en) 2020-07-28 2022-02-02 Femtogenix Ltd Cytotoxic compounds
CA3190328A1 (en) 2020-07-29 2022-02-03 Dynamicure Biotechnology Llc Anti-cd93 constructs and uses thereof
WO2022029080A1 (en) 2020-08-03 2022-02-10 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Population of treg cells functionally committed to exert a regulatory activity and their use for adoptive therapy
EP4189121A1 (en) 2020-08-03 2023-06-07 Genentech, Inc. Diagnostic and therapeutic methods for lymphoma
KR20230095918A (ko) 2020-08-05 2023-06-29 주노 쎄러퓨티크스 인코퍼레이티드 Ror1-표적 결합 도메인에 대한 항이디오타입 항체 및 관련 조성물 및 방법
EP4192854A1 (en) 2020-08-07 2023-06-14 Genentech, Inc. Flt3 ligand fusion proteins and methods of use
EP4196502A1 (en) 2020-08-13 2023-06-21 Bristol-Myers Squibb Company Methods of redirecting of il-2 to target cells of interest
JP2023537761A (ja) 2020-08-14 2023-09-05 エイシー イミューン ソシエテ アノニム ヒト化抗ｔｄｐ－４３結合分子およびその使用
EP4204448A2 (en) 2020-08-27 2023-07-05 cureab GmbH Anti-golph2 antibodies for macrophage and dendritic cell differentiation
JP2023539201A (ja) 2020-08-28 2023-09-13 ジェネンテック， インコーポレイテッド 宿主細胞タンパク質のＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓ９マルチプレックスノックアウト
CR20230114A (es) 2020-09-04 2023-05-18 Hoffmann La Roche Anticuerpo que se une a vegf-a y ang2, y métodos de uso
WO2022053715A1 (en) 2020-09-14 2022-03-17 Ichnos Sciences SA Antibodies that bind to il1rap and uses thereof
JP2023541921A (ja) 2020-09-17 2023-10-04 ジェネンテック， インコーポレイテッド Ｃｏｖｉｄ－１９肺炎を有する入院患者におけるトシリズマブの有効性及び安全性を評価するためのランダム化二重盲検プラセボ対照多施設試験（ｅｍｐａｃｔａ）の結果
CN118126189A (zh) 2020-09-28 2024-06-04 安济盛生物医药有限公司 抗硬骨抑素构建体及其用途
WO2022072508A1 (en) 2020-09-30 2022-04-07 Dren Bio, Inc. Anti-cd94 antibodies and methods of use thereof
US20230365680A1 (en) 2020-09-30 2023-11-16 Compugen Ltd. Combination therapy with anti-pvrig antibodies formulations, anti-tigit antibodies, and anti-pd-1 antibodies
TWI836278B (zh) 2020-10-05 2024-03-21 美商建南德克公司 用抗fcrh5/抗cd3雙特異性抗體進行治療之給藥
WO2022076606A1 (en) 2020-10-06 2022-04-14 Iovance Biotherapeutics, Inc. Treatment of nsclc patients with tumor infiltrating lymphocyte therapies
US20230372397A1 (en) 2020-10-06 2023-11-23 Iovance Biotherapeutics, Inc. Treatment of nsclc patients with tumor infiltrating lymphocyte therapies
IL301956A (en) 2020-10-07 2023-06-01 Dren Bio Inc Antibodies against dectin-1 and methods of using them
EP4228693A4 (en) 2020-10-13 2024-12-18 Janssen Biotech, Inc. BIOTECHNOLOGICALLY ENGINEERED T-CELL-MEDIATED IMMUNITY, MATERIALS AND OTHER METHODS FOR MODULATING A CLUSTER OF DIFFERENTIATION IV AND/OR VIII
EP4228764A1 (en) 2020-10-14 2023-08-23 Five Prime Therapeutics, Inc. Anti-c-c chemokine receptor 8 (ccr8) antibodies and methods of use thereof
MX2023004342A (es) 2020-10-20 2023-05-04 Hoffmann La Roche Politerapia de antagonistas de union al eje de pd-1 e inhibidores de lrrk2.
TW202233671A (zh) 2020-10-20 2022-09-01 美商建南德克公司 Ｐｅｇ結合抗ｍｅｒｔｋ抗體及其使用方法
AU2021366287A1 (en) 2020-10-20 2023-04-13 Kantonsspital St. Gallen Antibodies or antigen-binding fragments specifically binding to Gremlin-1 and uses thereof
US20230400467A1 (en) 2020-10-26 2023-12-14 Compugen Ltd. Pvrl2 and/or pvrig as biomarkers for treatment
WO2022093981A1 (en) 2020-10-28 2022-05-05 Genentech, Inc. Combination therapy comprising ptpn22 inhibitors and pd-l1 binding antagonists
WO2022098628A2 (en) 2020-11-04 2022-05-12 Genentech, Inc. Subcutaneous dosing of anti-cd20/anti-cd3 bispecific antibodies
MX2023005132A (es) 2020-11-04 2023-05-25 Genentech Inc Dosificacion para el tratamiento con anticuerpos biespecificos anti-cd20/anti-cd3.
KR20230095113A (ko) 2020-11-04 2023-06-28 제넨테크, 인크. 항-cd20/항-cd3 이중특이적 항체들과 항-cd79b 항체 약물 접합체들을 이용한 치료를 위한 투약
WO2022098870A1 (en) 2020-11-04 2022-05-12 The Rockefeller University Neutralizing anti-sars-cov-2 antibodies
AU2021374083A1 (en) 2020-11-06 2023-06-01 Novartis Ag Anti-cd19 agent and b cell targeting agent combination therapy for treating b cell malignancies
KR20230097156A (ko) 2020-11-06 2023-06-30 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 단독요법으로서 비-푸코실화 항-ctla-4 항체의 투약 및 투여
JP2023548529A (ja) 2020-11-06 2023-11-17 ノバルティス アーゲー Ｃｄ１９結合分子及びその使用
WO2022101458A1 (en) 2020-11-16 2022-05-19 F. Hoffmann-La Roche Ag Combination therapy with fap-targeted cd40 agonists
CA3199006A1 (en) 2020-11-20 2022-05-27 Inserm (Institut National De La Sante Et De La Recherche Medicale) Anti-cd25 antibodies
JP2024504547A (ja) 2020-11-20 2024-02-01 インセルム（インスティチュート ナショナル デ ラ サンテ エ デ ラ リシェルシェ メディカル） 抗ｃｄ２５抗体
EP4251187A4 (en) 2020-11-25 2025-09-10 Xilio Dev Inc TUMOR-SPECIFIC CLASSIBLE LINKERS
IL303349A (en) 2020-12-02 2023-08-01 Shanghai Henlius Biotech Inc ANTI-GARP/TGFβ ANTIBODIES AND METHODS OF USE
US20240101681A1 (en) 2020-12-02 2024-03-28 Alector Llc Methods of use of anti-sortilin antibodies
US20240101667A1 (en) 2020-12-03 2024-03-28 The Board Of Regents Of The University Of Texas System Methods for identifying lilrb-blocking antibodies
TW202237638A (zh) 2020-12-09 2022-10-01 日商武田藥品工業股份有限公司 烏苷酸環化酶ｃ（ｇｃｃ）抗原結合劑之組成物及其使用方法
TW202237639A (zh) 2020-12-09 2022-10-01 日商武田藥品工業股份有限公司 鳥苷酸環化酶ｃ（ｇｃｃ）抗原結合劑之組成物及其使用方法
JP2024501452A (ja) 2020-12-11 2024-01-12 アイオバンス バイオセラピューティクス，インコーポレイテッド Ｂｒａｆ阻害剤及び／またはｍｅｋ阻害剤と併用した腫瘍浸潤リンパ球治療によるがん患者の治療
US20240052042A1 (en) 2020-12-14 2024-02-15 Novartis Ag Reversal binding agents for anti-natriuretic peptide receptor i (npri) antibodies and uses thereof
CA3202473A1 (en) 2020-12-17 2022-06-23 Friedrich Graf Finckenstein Treatment of cancers with tumor infiltrating lymphocytes
CA3202483A1 (en) 2020-12-17 2022-06-23 Maria Fardis Treatment with tumor infiltrating lymphocyte therapies in combination with ctla-4 and pd-1 inhibitors
WO2022132904A1 (en) 2020-12-17 2022-06-23 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Human monoclonal antibodies targeting sars-cov-2
WO2022140797A1 (en) 2020-12-23 2022-06-30 Immunowake Inc. Immunocytokines and uses thereof
CN114685669A (zh) 2020-12-30 2022-07-01 和铂医药(苏州)有限公司 结合trop2的抗体及其用途
CA3203382A1 (en) 2020-12-31 2022-07-07 Adrian Emanual Wells Devices and processes for automated production of tumor infiltrating lymphocytes
WO2022148732A1 (en) 2021-01-06 2022-07-14 F. Hoffmann-La Roche Ag Combination therapy employing a pd1-lag3 bispecific antibody and a cd20 t cell bispecific antibody
CN116670290A (zh) 2021-01-08 2023-08-29 北京韩美药品有限公司 特异性结合pd-l1的抗体及其抗原结合片段
KR20230129484A (ko) 2021-01-08 2023-09-08 베이징 한미 파마슈티컬 컴퍼니 리미티드 4-1bb와 특이적으로 결합하는 항체 및 그 항원 결합단편
CN116635426A (zh) 2021-01-08 2023-08-22 北京韩美药品有限公司 特异性结合cd47的抗体及其抗原结合片段
PE20240690A1 (es) 2021-01-12 2024-04-10 Hoffmann La Roche Anticuerpos split que se unen a celulas cancerosas y dirigen radionuclidos a dichas celulas
KR20230146521A (ko) 2021-01-13 2023-10-19 메모리얼 슬로안 케터링 캔서 센터 항체-피롤로벤조디아제핀 유도체 접합체
TW202245844A (zh) 2021-01-13 2022-12-01 紀念斯隆凱特琳癌症中心 抗dll3抗體-藥物結合物
KR20230142831A (ko) 2021-01-13 2023-10-11 비스테라, 인크. 인간화된 보체 5a 수용체 1 항체 및 이의 사용 방법
JP2024503654A (ja) 2021-01-13 2024-01-26 エフ・ホフマン－ラ・ロシュ・アクチェンゲゼルシャフト 併用療法
WO2022155324A1 (en) 2021-01-15 2022-07-21 The Rockefeller University Neutralizing anti-sars-cov-2 antibodies
UY39610A (es) 2021-01-20 2022-08-31 Abbvie Inc Conjugados anticuerpo-fármaco anti-egfr
WO2022162203A1 (en) 2021-01-28 2022-08-04 Vaccinvent Gmbh Method and means for modulating b-cell mediated immune responses
US20250270311A1 (en) 2021-01-28 2025-08-28 Vaccinvent Gmbh Method and means for modulating b-cell mediated immune responses
CN117120084A (zh) 2021-01-28 2023-11-24 维肯芬特有限责任公司 用于调节b细胞介导的免疫应答的方法和手段
EP4284516A1 (en) 2021-01-28 2023-12-06 Compugen Ltd. Anti-pvrig antibodies formulations and uses thereof
US20240076373A1 (en) 2021-01-28 2024-03-07 Compugen Ltd. Combination therapy with anti-pvrig antibodies formulations and anti-pd-1 antibodies
WO2022165260A1 (en) 2021-01-29 2022-08-04 Iovance Biotherapeutics, Inc. Methods of making modified tumor infiltrating lymphocytes and their use in adoptive cell therapy
JP2024509695A (ja) 2021-02-03 2024-03-05 ジェネンテック， インコーポレイテッド 多重特異性結合タンパク質分解プラットフォームおよび使用方法
WO2022173670A1 (en) 2021-02-09 2022-08-18 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Antibodies targeting the spike protein of coronaviruses
AU2022220611A1 (en) 2021-02-09 2023-08-24 University Of Georgia Research Foundation, Inc. Human monoclonal antibodies against pneumococcal antigens
IL305181A (en) 2021-02-15 2023-10-01 Takeda Pharmaceuticals Co Cell therapy compositions and methods for modulating tgf-b signaling
AU2022230384A1 (en) 2021-03-01 2023-09-07 Xilio Development, Inc. Combination of masked ctla4 and pd1/pdl1 antibodies for treating cancer
TW202317612A (zh) 2021-03-01 2023-05-01 美商艾希利歐發展股份有限公司 用於治療癌症的ｃｔｌａ４及ｐｄ１／ｐｄｌ１抗體之組合
WO2022184082A1 (en) 2021-03-03 2022-09-09 Sorrento Therapeutics, Inc. Antibody-drug conjugates comprising an anti-bcma antibody
TW202302646A (zh) 2021-03-05 2023-01-16 美商當康生物科技有限公司 抗vista構築體及其用途
TW202300014A (zh) 2021-03-05 2023-01-01 美商艾歐凡斯生物治療公司 腫瘤儲存及細胞培養組成物
JP2024511319A (ja) 2021-03-09 2024-03-13 ゼンコア インコーポレイテッド Ｃｄ３及びｃｌｄｎ６に結合するヘテロ二量体抗体
KR20230148226A (ko) 2021-03-10 2023-10-24 이뮤노웨이크 인크. 면역조절 분자 및 이의 용도
JP2024509274A (ja) 2021-03-10 2024-02-29 ゼンコア インコーポレイテッド Ｃｄ３及びｇｐｃ３に結合するヘテロ二量体抗体
JP2024512377A (ja) 2021-03-12 2024-03-19 ジェネンテック， インコーポレイテッド 抗ｋｌｋ７抗体、抗ｋｌｋ５抗体、多重特異性抗ｋｌｋ５／ｋｌｋ７抗体、及び使用方法
TW202300521A (zh) 2021-03-15 2023-01-01 美商建南德克公司 治療狼瘡性腎炎的組成物及方法
IL318237A (en) 2021-03-18 2025-03-01 Medimmune Ltd A therapeutic binding molecule that binds to CCR9
JP2024512002A (ja) 2021-03-18 2024-03-18 アレクトル エルエルシー 抗ｔｍｅｍ１０６ｂ抗体、及び、その使用方法
WO2022197877A1 (en) 2021-03-19 2022-09-22 Genentech, Inc. Methods and compositions for time delayed bio-orthogonal release of cytotoxic agents
US20240191191A1 (en) 2021-03-19 2024-06-13 Iovance Biotherapeutics, Inc. Methods for infiltrating lymphocyte (til) expansion related to cd39/cd69 selection and gene knockout in tils
WO2022204155A1 (en) 2021-03-23 2022-09-29 Iovance Biotherapeutics, Inc. Cish gene editing of tumor infiltrating lymphocytes and uses of same in immunotherapy
KR20240012352A (ko) 2021-03-23 2024-01-29 인쎄름 (엥스띠뛰 나씨오날 드 라 쌍떼 에 드 라 흐쉐르슈 메디깔) T 세포 림프종의 진단 및 치료 방법
WO2022204274A1 (en) 2021-03-23 2022-09-29 Alector Llc Anti-tmem106b antibodies for treating and preventing coronavirus infections
WO2022204564A2 (en) 2021-03-25 2022-09-29 Iovance Biotherapeutics, Inc. Methods and compositions for t-cell coculture potency assays and use with cell therapy products
JP2024511424A (ja) 2021-03-25 2024-03-13 ダイナミキュア バイオテクノロジー エルエルシー 抗ｉｇｆｂｐ７構築物およびその使用
IL305847A (en) 2021-03-26 2023-11-01 Innate Pharma Multispecific proteins that contain a binding site for NKP46, a binding site for a cancer antigen that is fused to a cytokine to attract NK cells
WO2022214681A1 (en) 2021-04-09 2022-10-13 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods for the treatment of anaplastic large cell lymphoma
AR125344A1 (es) 2021-04-15 2023-07-05 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Anticuerpo anti-c1s
EP4326855A1 (en) 2021-04-19 2024-02-28 Genentech, Inc. Modified mammalian cells
TW202308669A (zh) 2021-04-19 2023-03-01 美商艾歐凡斯生物治療公司 嵌合共刺激性受體、趨化激素受體及彼等於細胞免疫治療之用途
EP4326271A1 (en) 2021-04-23 2024-02-28 F. Hoffmann-La Roche AG Prevention or mitigation of nk cell engaging agent-related adverse effects
CA3213632A1 (en) 2021-04-30 2022-11-03 F. Hoffmann-La Roche Ag Dosing for combination treatment with anti-cd20/anti-cd3 bispecific antibody and anti-cd79b antibody drug conjugate
WO2022235867A2 (en) 2021-05-06 2022-11-10 The Rockefeller University Neutralizing anti-sars- cov-2 antibodies and methods of use thereof
MX2023013264A (es) 2021-05-12 2023-11-30 Genentech Inc Metodos para usar inmunoconjugados anti-cd79b para tratar linfoma difuso de linfocitos b grandes.
WO2022241235A1 (en) 2021-05-14 2022-11-17 Genentech, Inc. Methods for treatment of cd20-positive proliferative disorder with mosunetuzumab and polatuzumab vedotin
US12384844B2 (en) 2021-05-14 2025-08-12 Genentech, Inc. Agonists of TREM2
JP2024519029A (ja) 2021-05-17 2024-05-08 アイオバンス バイオセラピューティクス，インコーポレイテッド Ｐｄ－１遺伝子編集された腫瘍浸潤リンパ球及び免疫療法におけるその使用
US20230115257A1 (en) 2021-05-17 2023-04-13 Curia Ip Holdings, Llc Sars-cov-2 spike protein antibodies
US20240239875A1 (en) 2021-05-17 2024-07-18 Curia Ip Holdings, Llc Sars-cov-2 spike protein antibodies
WO2022243261A1 (en) 2021-05-19 2022-11-24 F. Hoffmann-La Roche Ag Agonistic cd40 antigen binding molecules targeting cea
EP4341385A1 (en) 2021-05-21 2024-03-27 Genentech, Inc. Modified cells for the production of a recombinant product of interest
AR126009A1 (es) 2021-06-02 2023-08-30 Hoffmann La Roche Moléculas agonistas de unión al antígeno cd28 que se dirigen a epcam
EP4155321A1 (en) 2021-06-04 2023-03-29 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Anti-ddr2 antibodies and uses thereof
MX2023014645A (es) 2021-06-09 2024-01-31 Innate Pharma Proteinas acopladoras de celulas nk de union a nkp46 especificas de cd20.
WO2022258691A1 (en) 2021-06-09 2022-12-15 Innate Pharma Multispecific proteins binding to nkg2d, a cytokine receptor, a tumour antigen and cd16a
WO2022258678A1 (en) 2021-06-09 2022-12-15 Innate Pharma Multispecific proteins binding to nkp30, a cytokine receptor, a tumour antigen and cd16a
EP4351582B1 (en) 2021-06-09 2025-10-08 F. Hoffmann-La Roche AG Combination of a particular braf inhibitor (paradox breaker) and a pd-1 axis binding antagonist for use in the treatment of cancer
AU2022288123A1 (en) 2021-06-09 2023-11-30 Innate Pharma Multispecific proteins binding to nkp46, a cytokine receptor, a tumour antigen and cd16a
CA3221924A1 (en) 2021-06-11 2022-12-15 Genentech, Inc. Method for treating chronic obstructive pulmonary disease with an st2 antagonist
CN117642426A (zh) 2021-06-16 2024-03-01 艾莱克特有限责任公司 双特异性抗MerTK和抗PDL1抗体及其使用方法
JP2024527493A (ja) 2021-06-16 2024-07-25 アレクトル エルエルシー 一価の抗ＭｅｒＴＫ抗体及びその使用方法
EP4355785A1 (en) 2021-06-17 2024-04-24 Amberstone Biosciences, Inc. Anti-cd3 constructs and uses thereof
KR20240049265A (ko) 2021-06-18 2024-04-16 테리니 바이오, 인코포레이티드 인간 피브린 또는 피브리노겐 γC 도메인에 결합하는 항체 및 사용 방법
CA3219360A1 (en) 2021-06-22 2022-12-29 Novartis Ag Bispecific antibodies for use in treatment of hidradenitis suppurativa
TWI879694B (zh) 2021-06-25 2025-04-01 日商中外製藥股份有限公司 抗ctla-4抗體的用途
IL309115A (en) 2021-06-25 2024-02-01 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Anti-CTLA-4 antibodies
IL309405A (en) 2021-06-29 2024-02-01 Seagen Inc Methods for treating cancer with a combination of non-fucosylated anti-CD70 antibody and CD47 antagonist
EP4363450A1 (en) 2021-07-01 2024-05-08 Compugen Ltd. Anti-tigit and anti-pvrig in monotherapy and combination treatments
EP4367139A1 (en) 2021-07-08 2024-05-15 Staidson Biopharma Inc. Antibodies specifically recognizing tnfr2 and uses thereof
EP4370545A1 (en) 2021-07-12 2024-05-22 Genentech, Inc. Structures for reducing antibody-lipase binding
KR20240032889A (ko) 2021-07-14 2024-03-12 제넨테크, 인크. 항-c-c 모티프 케모카인 수용체 8(ccr8) 항체 및 사용 방법
WO2023284714A1 (zh) 2021-07-14 2023-01-19 舒泰神（北京）生物制药股份有限公司 特异性识别cd40的抗体及其应用
KR20240032959A (ko) 2021-07-14 2024-03-12 지앙수 헨그루이 파마슈티컬스 컴퍼니 리미티드 Hgfr 및 egfr에 특이적으로 결합하는 항원-결합 분자, 및 이의 약학적 용도
JP2024526898A (ja) 2021-07-22 2024-07-19 アイオバンス バイオセラピューティクス，インコーポレイテッド 固形腫瘍断片の凍結保存のための方法
WO2023004386A1 (en) 2021-07-22 2023-01-26 Genentech, Inc. Brain targeting compositions and methods of use thereof
AU2022315528A1 (en) 2021-07-22 2023-10-19 F. Hoffmann-La Roche Ag Heterodimeric fc domain antibodies
JP2024527961A (ja) 2021-07-28 2024-07-26 アイオバンス バイオセラピューティクス，インコーポレイテッド Ｋｒａｓ阻害剤と併用した腫瘍浸潤リンパ球療法によるがん患者の治療
JP2024528217A (ja) 2021-08-03 2024-07-26 エフ・ホフマン－ラ・ロシュ・アクチェンゲゼルシャフト 二重特異性抗体および使用方法
US20240336697A1 (en) 2021-08-07 2024-10-10 Genentech, Inc. Methods of using anti-cd79b immunoconjugates to treat diffuse large b-cell lymphoma
WO2023019239A1 (en) 2021-08-13 2023-02-16 Genentech, Inc. Dosing for anti-tryptase antibodies
EP4388014A1 (en) 2021-08-19 2024-06-26 F. Hoffmann-La Roche AG Multivalent anti-variant fc-region antibodies and methods of use
JP2024534265A (ja) 2021-08-23 2024-09-18 イミュニタス セラピューティクス，インコーポレーテッド 抗ｃｄ１６１抗体及びその使用
EP4393515A1 (en) 2021-08-26 2024-07-03 Shanghai Junshi Biosciences Co., Ltd. Anti-cldn-18.2 antibody-drug conjugate and use thereof
IL310382A (en) 2021-08-27 2024-03-01 Genentech Inc Methods for treating tau pathologies
TW202325727A (zh) 2021-08-30 2023-07-01 美商建南德克公司 抗聚泛素多特異性抗體
WO2023034809A1 (en) 2021-08-30 2023-03-09 Lassen Therapeutics 1, Inc. Anti-il-11rα antibodies
CA3231003A1 (en) 2021-09-06 2023-03-09 Genmab A/S Antibodies capable of binding to cd27, variants thereof and uses thereof
IL311333A (en) 2021-09-09 2024-05-01 Iovance Biotherapeutics Inc Processes for generating til products using pd-1 talen knockdown
JP2024535249A (ja) 2021-09-17 2024-09-30 ザ ユナイテッド ステイツ オブ アメリカ， アズ リプレゼンテッド バイ ザ セクレタリー， デパートメント オブ ヘルス アンド ヒューマン サービシーズ 合成ヒト化ラマナノボディライブラリーおよびｓａｒｓ－ｃｏｖ－２中和抗体を同定するためのその使用
EP4404969A1 (en) 2021-09-24 2024-07-31 Iovance Biotherapeutics, Inc. Expansion processes and agents for tumor infiltrating lymphocytes
WO2023056240A2 (en) 2021-09-28 2023-04-06 Frontaim Biomedicines, Inc. Multiple formats of molecular complexes
WO2023056403A1 (en) 2021-09-30 2023-04-06 Genentech, Inc. Methods for treatment of hematologic cancers using anti-tigit antibodies, anti-cd38 antibodies, and pd-1 axis binding antagonists
WO2023051663A1 (zh) 2021-09-30 2023-04-06 百奥泰生物制药股份有限公司 抗b7-h3抗体及其应用
US20240404622A1 (en) 2021-10-08 2024-12-05 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Method for preparing prefilled syringe formulation
US20250339522A1 (en) 2021-10-15 2025-11-06 Compugen Ltd. Combination therapy with anti-pvrig antibodies formulations, anti-tigit antibodies, and anti-pd-1 antibodies
EP4419558A1 (en) 2021-10-19 2024-08-28 Alector LLC Anti-cd300lb antibodies and methods of use thereof
US20230187042A1 (en) 2021-10-27 2023-06-15 Iovance Biotherapeutics, Inc. Systems and methods for coordinating manufacturing of cells for patient-specific immunotherapy
JP2024540374A (ja) 2021-11-05 2024-10-31 アメリカン ダイアグノスティックス アンド セラピー， エルエルシー （エーディーエックスアールエックス） がん胎児性抗原に対するモノクローナル抗体、及びそれらの使用
AU2022388729A1 (en) 2021-11-10 2024-05-16 Iovance Biotherapeutics, Inc. Methods of expansion treatment utilizing cd8 tumor infiltrating lymphocytes
JP2024544885A (ja) 2021-11-10 2024-12-05 ジェネンテック， インコーポレイテッド 抗インターロイキン－３３抗体及びその使用
WO2023091887A1 (en) 2021-11-16 2023-05-25 Genentech, Inc. Methods and compositions for treating systemic lupus erythematosus (sle) with mosunetuzumab
CR20240231A (es) 2021-11-16 2024-07-09 Ac Immune Sa Moléculas novedosas para terapias y diagnósticos
ES3039688T3 (en) 2021-11-25 2025-10-23 Veraxa Biotech Gmbh Improved antibody-payload conjugates (apcs) prepared by site-specific conjugation utilizing genetic code expansion
JP2024543916A (ja) 2021-11-25 2024-11-26 ヴェラクサ バイオテック ゲーエムベーハー 遺伝暗号拡張を利用した部位特異的結合によって調製された改良された抗体ペイロード複合体（ａｐｃ）
WO2023093816A1 (zh) 2021-11-25 2023-06-01 诺纳生物（苏州）有限公司 抗Siglec-15抗体及其应用
EP4437006A1 (en) 2021-11-26 2024-10-02 F. Hoffmann-La Roche AG Combination therapy of anti-tyrp1/anti-cd3 bispecific antibodies and tyrp1-specific antibodies
WO2023103788A1 (zh) 2021-12-06 2023-06-15 北京三诺佳邑生物技术有限责任公司 特异性结合肺炎克雷伯菌o2抗原和o1抗原的双特异性抗体以及组合物
AR127887A1 (es) 2021-12-10 2024-03-06 Hoffmann La Roche Anticuerpos que se unen a cd3 y plap
US20250051440A1 (en) 2021-12-14 2025-02-13 Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale Depletion of nk cells for the treatment of adverse post-ischemic cardiac remodeling
AU2022411573A1 (en) 2021-12-17 2024-06-27 Shanghai Henlius Biologics Co., Ltd. Anti-ox40 antibodies and methods of use
KR20240116755A (ko) 2021-12-17 2024-07-30 상하이 헨리우스 바이오테크, 인크. 항-ox40 항체, 다중 특이적 항체 및 이의 사용 방법
CR20240246A (es) 2021-12-20 2024-07-19 Hoffmann La Roche Anticuerpos agonistas anti-ltbr y anticuerpos biespecificos que los comprenden
UY40097A (es) 2022-01-07 2023-07-14 Johnson & Johnson Entpr Innovation Inc Materiales y métodos de proteínas de unión a il-1b
WO2023141445A1 (en) 2022-01-19 2023-07-27 Genentech, Inc. Anti-notch2 antibodies and conjugates and methods of use
EP4469159A1 (en) 2022-01-27 2024-12-04 The Rockefeller University Broadly neutralizing anti-sars-cov-2 antibodies targeting the n-terminal domain of the spike protein and methods of use thereof
CA3243419A1 (en) 2022-01-28 2023-08-03 Iovance Biotherapeutics, Inc. CYTOKINE-ASSOCIATED TUMOR-INFILTRATING LYMPHOCYTE COMPOSITIONS AND PROCESSES
EP4469066A1 (en) 2022-01-28 2024-12-04 Iovance Biotherapeutics, Inc. Tumor infiltrating lymphocytes engineered to express payloads
EP4472740A1 (en) 2022-01-31 2024-12-11 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Cd38 as a biomarker and biotarget in t-cell lymphomas
CN118984836A (zh) 2022-02-10 2024-11-19 美国政府(由卫生和人类服务部的部长所代表) 广泛靶向冠状病毒的人单克隆抗体
TW202342519A (zh) 2022-02-16 2023-11-01 瑞士商Ａｃ 免疫有限公司 人源化抗ｔｄｐ－４３結合分子及其用途
KR20240158391A (ko) 2022-02-18 2024-11-04 라쿠텐 메디칼, 인크. 항-프로그래밍된 사멸-리간드 1(pd-l1) 항체 분자, 암호화 폴리뉴클레오티드 및 사용 방법
EP4489790A1 (en) 2022-03-10 2025-01-15 Vivasor, Inc. Antibody-drug conjugates and uses thereof
US20250297018A1 (en) 2022-03-15 2025-09-25 Compugen Ltd. Il-18bp antagonist antibodies and their use in monotherapy and combination therapy in the treatment of cancer
EP4493278A1 (en) 2022-03-15 2025-01-22 Yeda Research and Development Co. Ltd Anti glucocorticoid-induced tnfr-related (gitr) protein antibodies and uses thereof
EP4245374A3 (en) 2022-03-18 2024-07-10 Compugen Ltd. Pvrl2 and/or pvrig as biomarkers for treatment
WO2023180353A1 (en) 2022-03-23 2023-09-28 F. Hoffmann-La Roche Ag Combination treatment of an anti-cd20/anti-cd3 bispecific antibody and chemotherapy
JP2025514610A (ja) 2022-03-25 2025-05-09 シャンハイ・ヘンリウス・バイオテック・インコーポレイテッド 抗ｍｓｌｎ抗体及び使用方法
CA3246703A1 (en) 2022-03-26 2023-10-05 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services HIV-1 BISPECIFIC ENVELOPE ANTIBODIES AND THEIR USE
EP4499228A1 (en) 2022-03-28 2025-02-05 The United States of America, as represented by the Secretary, Department of Health and Human Services Neutralizing antibodies to hiv-1 env and their use
WO2023186756A1 (en) 2022-03-28 2023-10-05 F. Hoffmann-La Roche Ag Interferon gamma variants and antigen binding molecules comprising these
EP4499221A1 (en) 2022-03-30 2025-02-05 Novartis AG Methods of treating disorders using anti-natriuretic peptide receptor 1 (npr1) antibodies
AU2022450448A1 (en) 2022-04-01 2024-10-10 Genentech, Inc. Dosing for treatment with anti-fcrh5/anti-cd3 bispecific antibodies
JP2025512313A (ja) 2022-04-06 2025-04-17 アイオバンス バイオセラピューティクス，インコーポレイテッド 腫瘍浸潤リンパ球療法によるｎｓｃｌｃ患者の治療
CN119156401A (zh) 2022-04-08 2024-12-17 Ac免疫有限公司 抗tdp-43结合分子
EP4508432A1 (en) 2022-04-11 2025-02-19 Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale Methods for the diagnosis and treatment of t-cell malignancies
TW202404637A (zh) 2022-04-13 2024-02-01 瑞士商赫孚孟拉羅股份公司 抗ｃｄ２０／抗ｃｄ３雙特異性抗體之醫藥組成物及使用方法
US20230406930A1 (en) 2022-04-13 2023-12-21 Genentech, Inc. Pharmaceutical compositions of therapeutic proteins and methods of use
WO2023201369A1 (en) 2022-04-15 2023-10-19 Iovance Biotherapeutics, Inc. Til expansion processes using specific cytokine combinations and/or akti treatment
WO2023198874A1 (en) 2022-04-15 2023-10-19 Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale Methods for the diagnosis and treatment of t cell-lymphomas
US20250257123A1 (en) 2022-04-20 2025-08-14 Kantonsspital St. Gallen Antibodies or antigen-binding fragments pan-specifically binding to gremlin-1 and gremlin-2 and uses thereof
TW202406934A (zh) 2022-05-03 2024-02-16 美商建南德克公司 抗Ｌｙ６Ｅ抗體、免疫結合物及其用途
CN119487065A (zh) 2022-05-09 2025-02-18 舒泰神（北京）生物制药股份有限公司 特异性识别gdf15的抗体及其应用
US20250281537A1 (en) 2022-05-10 2025-09-11 Iovance Biotherapeutics, Inc. Treatment of cancer patients with tumor infiltrating lymphocyte therapies in combination with an il-15r agonist
AR129268A1 (es) 2022-05-11 2024-08-07 Hoffmann La Roche Anticuerpo que se une a vegf-a e il6 y métodos de uso
WO2023219613A1 (en) 2022-05-11 2023-11-16 Genentech, Inc. Dosing for treatment with anti-fcrh5/anti-cd3 bispecific antibodies
WO2023222886A1 (en) 2022-05-20 2023-11-23 Depth Charge Ltd Antibody-cytokine fusion proteins
WO2023235699A1 (en) 2022-05-31 2023-12-07 Jounce Therapeutics, Inc. Antibodies to lilrb4 and uses thereof
CA3257760A1 (en) 2022-06-07 2023-12-14 Genentech, Inc. PROGNOSTIC AND THERAPEUTIC METHODS FOR CANCER
US20250382354A1 (en) 2022-06-08 2025-12-18 Institute For Research In Biomedicine (Irb) Cross-specific antibodies, uses and methods for discovery thereof
WO2024003310A1 (en) 2022-06-30 2024-01-04 Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale Methods for the diagnosis and treatment of acute lymphoblastic leukemia
WO2024011114A1 (en) 2022-07-06 2024-01-11 Iovance Biotherapeutics, Inc. Devices and processes for automated production of tumor infiltrating lymphocytes
WO2024015897A1 (en) 2022-07-13 2024-01-18 Genentech, Inc. Dosing for treatment with anti-fcrh5/anti-cd3 bispecific antibodies
AU2023309556A1 (en) 2022-07-19 2025-01-23 F. Hoffmann-La Roche Ag Dosing for treatment with anti-fcrh5/anti-cd3 bispecific antibodies
TW202417503A (zh) 2022-07-19 2024-05-01 美商舒泰神（加州）生物科技有限公司 特異性識別ｂ和ｔ淋巴細胞衰減器（ｂｔｌａ）的抗體及其應用
WO2024020564A1 (en) 2022-07-22 2024-01-25 Genentech, Inc. Anti-steap1 antigen-binding molecules and uses thereof
EP4558823A1 (en) 2022-07-22 2025-05-28 Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale Garp as a biomarker and biotarget in t-cell malignancies
WO2024020579A1 (en) 2022-07-22 2024-01-25 Bristol-Myers Squibb Company Antibodies binding to human pad4 and uses thereof
US20260035460A1 (en) 2022-07-28 2026-02-05 Adeboye Henry ADEWOYE, MD Combination therapy with anti-pvrig antibodies formulations and anti-pd-1 antibodies
WO2024023283A1 (en) 2022-07-29 2024-02-01 Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale Lrrc33 as a biomarker and biotarget in cutaneous t-cell lymphomas
WO2024026447A1 (en) 2022-07-29 2024-02-01 Alector Llc Anti-gpnmb antibodies and methods of use thereof
WO2024030829A1 (en) 2022-08-01 2024-02-08 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Monoclonal antibodies that bind to the underside of influenza viral neuraminidase
US20260021181A1 (en) 2022-08-01 2026-01-22 Iovance Biotherapeutics, Inc. Chimeric costimulatory receptors, chemokine receptors, and the use of same in cellular immunotherapies
US20260048119A1 (en) 2022-08-05 2026-02-19 Bristol-Myers Squibb Company Anti-ctla4 antibodies for treatment of kras mutant cancers
CN120051495A (zh) 2022-08-05 2025-05-27 詹森生物科技公司 用于治疗脑肿瘤的cd98结合构建体
CA3263784A1 (en) 2022-08-05 2024-02-08 Janssen Biotech, Inc. TRANSFERRIN RECEPTOR BINDING PROTEINS FOR THE TREATMENT OF BRAIN TUMORS
KR20250049554A (ko) 2022-08-19 2025-04-11 이바이브 바이오테크놀로지 (상하이) 엘티디 G-csf를 포함하는 제형 및 이의 용도
KR20250071294A (ko) 2022-08-22 2025-05-21 압데라 테라퓨틱스 인크. Dll3 결합 분자 및 이의 용도
WO2024044675A1 (en) 2022-08-25 2024-02-29 Beigene, Ltd. Methods of cancer treatment using anti-pd1 antibodies in combination with anti-tim3 antibodies
CN120435310A (zh) 2022-08-26 2025-08-05 朱诺治疗学股份有限公司 对δ样配体3（DLL3）具有特异性的抗体和嵌合抗原受体
JP2025531738A (ja) 2022-09-01 2025-09-25 ジェネンテック， インコーポレイテッド 膀胱がんの治療方法及び診断方法
US20260078185A1 (en) 2022-09-07 2026-03-19 Dynamicure Biotechnology Llc Anti-vista constructs and uses thereof
WO2024054822A1 (en) 2022-09-07 2024-03-14 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Engineered sars-cov-2 antibodies with increased neutralization breadth
WO2024052503A1 (en) 2022-09-08 2024-03-14 Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale Antibodies having specificity to ltbp2 and uses thereof
KR20250068626A (ko) 2022-09-15 2025-05-16 아비디큐어 아이피 비.브이. Nk 세포 자극을 위한 다중특이적 항원 결합 단백질 및 이의 용도
EP4590705A1 (en) 2022-09-21 2025-07-30 Domain Therapeutics Anti-ccr8 monoclonal antibodies and their therapeutic use
WO2024062076A1 (en) 2022-09-21 2024-03-28 Domain Therapeutics Anti-ccr8 monoclonal antibodies and their therapeutic use
WO2024062072A2 (en) 2022-09-21 2024-03-28 Domain Therapeutics Anti-ccr8 monoclonal antibodies and their therapeutic use
WO2024064826A1 (en) 2022-09-22 2024-03-28 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Neutralizing antibodies to plasmodium falciparum circumsporozoite protein and their use
WO2024067344A1 (zh) 2022-09-27 2024-04-04 舒泰神（北京）生物制药股份有限公司 特异性识别light的抗体及其应用
IL319943A (en) 2022-10-07 2025-05-01 Genentech Inc Methods for treating cancer with anti-C motif chemokine receptor 8 (CCR8) antibodies
EP4602372A1 (en) 2022-10-12 2025-08-20 Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale Cd81 as a biomarker and biotarget in t-cell malignancies
WO2024086796A1 (en) 2022-10-20 2024-04-25 Alector Llc Anti-ms4a4a antibodies with amyloid-beta therapies
EP4606886A4 (en) 2022-10-20 2026-03-25 Beijing Solobio Genetechnology Co Ltd Combination of antibodies specifically binding to Trail or FASL, and bispecific antibodies
IL320355A (en) 2022-10-25 2025-06-01 Genentech Inc Therapeutic and diagnostic methods for multiple myeloma
WO2024098024A1 (en) 2022-11-04 2024-05-10 Iovance Biotherapeutics, Inc. Expansion of tumor infiltrating lymphocytes from liquid tumors and therapeutic uses thereof
JP2025537155A (ja) 2022-11-04 2025-11-14 アイオバンス バイオセラピューティクス，インコーポレイテッド Ｃｄ３９／ｃｄ１０３選択に関連した腫瘍浸潤リンパ球（ｔｉｌ）拡張のための方法
CN120051301A (zh) 2022-11-04 2025-05-27 吉利德科学公司 使用抗ccr8抗体、化学疗法和免疫疗法组合的抗癌疗法
WO2024102734A1 (en) 2022-11-08 2024-05-16 Genentech, Inc. Compositions and methods of treating childhood onset idiopathic nephrotic syndrome
CN120322457A (zh) 2022-11-09 2025-07-15 Cis生物制药股份公司 抗l1-cam抗体及其在诊断和治疗应用中的用途
WO2024100170A1 (en) 2022-11-11 2024-05-16 F. Hoffmann-La Roche Ag Antibodies binding to hla-a*02/foxp3
AU2023379743A1 (en) 2022-11-17 2025-07-03 Sanofi Ceacam5 antibody-drug conjugates and methods of use thereof
WO2024112571A2 (en) 2022-11-21 2024-05-30 Iovance Biotherapeutics, Inc. Two-dimensional processes for the expansion of tumor infiltrating lymphocytes and therapies therefrom
WO2024112711A2 (en) 2022-11-21 2024-05-30 Iovance Biotherapeutics, Inc. Methods for assessing proliferation potency of gene-edited t cells
TW202434306A (zh) 2022-11-24 2024-09-01 瑞士商百濟神州瑞士有限責任公司 抗ｃｅａ抗體藥物軛合物及使用方法
EP4624489A1 (en) 2022-11-25 2025-10-01 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Method for producing protein
JP2025528316A (ja) 2022-12-08 2025-08-28 ナンジン、バザイム、バイオテック、カンパニー、リミテッド Ｒｓｖに特異的に結合する抗体
EP4634226A1 (en) 2022-12-16 2025-10-22 Pheon Therapeutics Ltd Antibodies to cub domain-containing protein 1 (cdcp1) and uses thereof
WO2024137381A1 (en) 2022-12-19 2024-06-27 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Monoclonal antibodies for treating sars-cov-2 infection
CN120858108A (zh) 2023-01-06 2025-10-28 拉森医疗公司 抗il-18bp抗体
JP2026503002A (ja) 2023-01-06 2026-01-27 アレクトル エルエルシー 抗ｉｌ１８結合タンパク質抗体及びその使用方法
WO2024148243A1 (en) 2023-01-06 2024-07-11 Lassen Therapeutics 1, Inc. Anti-il-18bp antibodies
CN120787238A (zh) 2023-01-06 2025-10-14 拉森医疗公司 用于治疗甲状腺眼病的抗IL-11Rα抗体
WO2024151885A1 (en) 2023-01-13 2024-07-18 Iovance Biotherapeutics, Inc. Use of til as maintenance therapy for nsclc patients who achieved pr/cr after prior therapy
PE20252286A1 (es) 2023-01-18 2025-09-18 Genentech Inc Anticuerpos multiespecificos y usos de estos
TW202430570A (zh) 2023-01-19 2024-08-01 英屬開曼群島商百濟神州有限公司 抗cmet抗體及使用方法
JP2026505747A (ja) 2023-01-25 2026-02-18 エフ・ホフマン－ラ・ロシュ・アクチェンゲゼルシャフト Ｃｓｆ１ｒおよびｃｄ３に結合する抗体
WO2024170543A1 (en) 2023-02-14 2024-08-22 Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale Anti-cd44 antibodies and uses thereof
WO2024182443A2 (en) 2023-02-27 2024-09-06 Compugen Ltd. Triple combination therapy with anti-pvrig antibodies, anti-tigit antibodies, and pembrolizumab
TW202436357A (zh) 2023-03-03 2024-09-16 瑞士商百濟神州瑞士有限責任公司 Ｍｕｃ１抗體及使用方法
JP2026506241A (ja) 2023-03-03 2026-02-20 ビーワン メディシンズ ワン ゲーエムベーハー Ｃｄ１６ａ抗体及び使用方法
KR20250156802A (ko) 2023-03-03 2025-11-03 비원 메디슨즈 아이 게엠베하 Muc1 및 cd16a 항체 및 사용 방법
TW202436354A (zh) 2023-03-06 2024-09-16 瑞士商百濟神州瑞士有限責任公司 抗cldn6抗體以及其使用方法
TW202436345A (zh) 2023-03-06 2024-09-16 瑞士商百濟神州瑞士有限責任公司 抗ｃｄ３多特異性抗體及使用方法
AR132063A1 (es) 2023-03-06 2025-05-21 Beigene Switzerland Gmbh Anticuerpos multiespecíficos anti-cldn6 y anti-cd3 y métodos de uso
CN120917043A (zh) 2023-03-08 2025-11-07 Ac免疫有限公司 抗tdp-43结合分子及其用途
WO2024191785A1 (en) 2023-03-10 2024-09-19 Genentech, Inc. Fusions with proteases and uses thereof
EP4428158A1 (en) 2023-03-10 2024-09-11 Istituto Romagnolo per lo Studio dei Tumori "Dino Amadori" - IRST S.r.l. Lung cancer targeting human antibodies and therapeutic uses thereof
EP4428159A1 (en) 2023-03-10 2024-09-11 Istituto Romagnolo per lo Studio dei Tumori "Dino Amadori" - IRST S.r.l. Melanoma targeting human antibodies and therapeutic uses thereof
EP4680635A1 (en) 2023-03-13 2026-01-21 F. Hoffmann-La Roche AG Combination therapy employing a pd1-lag3 bispecific antibody and an hla-g t cell bispecific antibody
WO2024206738A1 (en) 2023-03-31 2024-10-03 Immunai Inc. Humanized anti-trem2 antibodies
AU2024248331A1 (en) 2023-03-31 2025-10-09 Genentech, Inc. Anti-alpha v beta 8 integrin antibodies and methods of use
WO2024211234A1 (en) 2023-04-05 2024-10-10 Sorrento Therapeutics, Inc. Antibody-drug conjugates and uses thereof
EP4687995A1 (en) 2023-04-05 2026-02-11 Sorrento Therapeutics, Inc. Antibody-drug conjugates and uses thereof
EP4687997A2 (en) 2023-04-05 2026-02-11 Sorrento Therapeutics, Inc. Antibody-drug conjugates and uses thereof
EP4695282A1 (en) 2023-04-12 2026-02-18 Shanghai Kangabio Co., Limited Multifunctional molecules comprising masked interleukin 12 and methods of use
CN121263210A (zh) 2023-04-17 2026-01-02 沛科生物公司 抗体和抗体-药物偶联物以及使用方法和合成工艺及中间体
WO2024233341A1 (en) 2023-05-05 2024-11-14 Genentech, Inc. Dosing for treatment with anti-fcrh5/anti-cd3 bispecific antibodies
AU2024269754A1 (en) 2023-05-08 2025-10-23 F. Hoffmann-La Roche Ag Targeted interferon alpha fusion proteins and methods of use
KR20260008790A (ko) 2023-05-10 2026-01-16 제넨테크, 인크. 암 치료 방법 및 조성물
EP4709411A1 (en) 2023-05-12 2026-03-18 Genmab A/S Antibodies capable of binding to ox40, variants thereof and uses thereof
WO2024238537A1 (en) 2023-05-16 2024-11-21 F. Hoffmann-La Roche Ag Pd-1 -regulated il-2 immunocytokine and uses thereof
WO2024243355A1 (en) 2023-05-24 2024-11-28 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Human monoclonal antibodies that target the rh5 complex of blood-stage plasmodium falciparum
WO2024246086A1 (en) 2023-06-01 2024-12-05 F. Hoffmann-La Roche Ag Immunostimulatory antigen binding molecules that specifically bind to bcma
CN121241068A (zh) 2023-06-01 2025-12-30 豪夫迈·罗氏有限公司 靶向bcma和cd28的双特异性抗体
IL324958A (en) 2023-06-08 2026-01-01 Genentech Inc Macrophage signatures for diagnostic and therapeutic approaches for lymphoma
CN121311247A (zh) 2023-06-09 2026-01-09 舒泰神（北京）生物制药股份有限公司 特异性结合masp3的抗体以及特异性结合masp3和masp2的多特异性抗体
WO2024251884A1 (en) 2023-06-09 2024-12-12 Innate Pharma Nk cell engager proteins comprising anti-cd20 and ant-nkp46 antibody, linked to il-2 in treatment of r/r b-nhl
EP4477236A1 (en) 2023-06-14 2024-12-18 Inatherys Combination therapy for treating a tumor using adc comprising anti-cd71 antibodies and bh3 mimetics
WO2024255794A1 (zh) 2023-06-16 2024-12-19 舒泰神（北京）生物制药股份有限公司 特异性识别因子XIIa的抗体及其应用
WO2024261013A1 (en) 2023-06-21 2024-12-26 F. Hoffmann-La Roche Ag Combination therapy with fap-targeted lymphotoxin beta receptor agonists
CN121443309A (zh) 2023-06-22 2026-01-30 基因泰克公司 多发性骨髓瘤的治疗
WO2024263761A1 (en) 2023-06-22 2024-12-26 Genentech, Inc. Antibodies and uses thereof
TW202515608A (zh) 2023-06-26 2025-04-16 以色列商坎布根有限公司 Ｉｌ—１８ｂｐ拮抗抗體及其於癌症治療之單一療法及組合療法的用途
AU2024309736A1 (en) 2023-06-30 2026-01-15 Evive Biotechnology (Shanghai) Ltd G-csf dimer for use in the treatment or prevention of chemotherapy or radiotherapy induced neutropenia
WO2025014896A1 (en) 2023-07-07 2025-01-16 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Humanized 40h3 antibody
WO2025012417A1 (en) 2023-07-13 2025-01-16 Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale Anti-neurotensin long fragment and anti-neuromedin n long fragment antibodies and uses thereof
WO2025015318A2 (en) 2023-07-13 2025-01-16 Iovance Biotherapeutics, Inc. Cytokine encoding lentiviral vectors and uses thereof for making tumor infiltrating lymphocytes
WO2025019790A1 (en) 2023-07-19 2025-01-23 Iovance Biotherapeutics, Inc. Treatment of cancer patients with tumor infiltrating lymphocyte therapies in combination with trop-2 targeting adc
WO2025024265A1 (en) 2023-07-21 2025-01-30 Bristol-Myers Squibb Company Methods of assessing citrullination and activity of pad4 modulators
AU2024300009A1 (en) 2023-07-21 2026-01-08 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Bispecific antibodies that broadly target coronaviruses
WO2025021790A2 (en) 2023-07-24 2025-01-30 F. Hoffmann-La Roche Ag Multispecific antibodies
WO2025021838A1 (en) 2023-07-26 2025-01-30 F. Hoffmann-La Roche Ag Antibodies binding to cd3
WO2025027529A1 (en) 2023-07-31 2025-02-06 Advesya Anti-il-1rap antibody drug conjugates and methods of use thereof
WO2025034806A1 (en) 2023-08-08 2025-02-13 Wisconsin Alumni Research Foundation Single-domain antibodies and variants thereof against fibroblast activation protein
WO2025032069A1 (en) 2023-08-09 2025-02-13 F. Hoffmann-La Roche Ag Mono and multispecific anti-trem2 antibodies, methods and uses thereof
CN121666400A (zh) 2023-08-09 2026-03-13 豪夫迈·罗氏有限公司 单特异性和多特异性抗trem2抗体、其方法和用途
WO2025032070A1 (en) 2023-08-09 2025-02-13 F. Hoffmann-La Roche Ag Anti-a-beta protein antibodies, methods and uses thereof
AU2024324215A1 (en) 2023-08-11 2026-02-26 Abalytics Oncology, Inc. Anti-ctla-4 antibodies and related binding molecules and methods and uses thereof
WO2025045250A1 (en) 2023-09-03 2025-03-06 Kira Pharmaceuticals (Us) Llc Anti-human factor d antibody constructs and uses thereof
WO2025064539A1 (en) 2023-09-19 2025-03-27 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Dept. Of Health And Human Services Herv-e antibodies and methods of their use
WO2025061994A1 (en) 2023-09-21 2025-03-27 Domain Therapeutics Anti-ccr8 monoclonal antibodies and their therapeutic use
WO2025061993A1 (en) 2023-09-21 2025-03-27 Domain Therapeutics Anti-ccr8 monoclonal antibodies and their therapeutic use
AR133909A1 (es) 2023-09-25 2025-11-12 Hoffmann La Roche ANTICUERPO QUE SE UNE A C3bBb
US20250109187A1 (en) 2023-09-28 2025-04-03 Novavax, Inc. ANTI-SARS-CoV-2 SPIKE (S) ANTIBODIES AND THEIR USE IN TREATING COVID-19
WO2025068957A1 (en) 2023-09-29 2025-04-03 Novartis Ag Bispecific antibodies for use in lowering the risk of cardiovascular disease events in subjects known to be a carrier of clonal expansion of hematopoietic cell lines with somatic mutations
TW202519543A (zh) 2023-09-29 2025-05-16 美商崔克斯生物公司 TNF-α變體融合分子
JP7645562B1 (ja) 2023-10-03 2025-03-14 憲章 喜多村 分泌型タンパク質の合成方法
EP4537907A1 (en) 2023-10-10 2025-04-16 Enthera S.r.l. Cd248 inhibitors and uses thereof
WO2025085489A1 (en) 2023-10-17 2025-04-24 Bristol-Myers Squibb Company Gspt1-degrading compounds, anti-cd33 antibodies and antibody-drug conjugates and uses thereof
WO2025101484A1 (en) 2023-11-06 2025-05-15 Iovance Biotherapeutics, Inc. Treatment of endometrial cancers with tumor infiltrating lymphocyte therapies
WO2025099120A1 (en) 2023-11-09 2025-05-15 F. Hoffmann-La Roche Ag Multispecific antibodies with conditional activity
WO2025106427A1 (en) 2023-11-14 2025-05-22 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Neutralizing and protective monoclonal antibodies against respiratory syncytial virus (rsv)
WO2025106474A1 (en) 2023-11-14 2025-05-22 Genentech, Inc. Therapeutic and diagnostic methods for treating cancer with anti-fcrh5/anti-cd3 bispecific antibodies
WO2025111402A1 (en) 2023-11-21 2025-05-30 Board Of Regents Of The University Of Nebraska Anti-amyloid beta antibodies and related compositions and methods thereof
WO2025117384A1 (en) 2023-12-01 2025-06-05 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Broadly neutralizing influenza hemagglutinin stem-directed antibodies
WO2025120015A1 (en) 2023-12-06 2025-06-12 Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale Cd5 targeting antibodies with depleting and t or b-cell activation effects
WO2025125118A1 (en) 2023-12-11 2025-06-19 F. Hoffmann-La Roche Ag Protease activatable fc domain binding molecules
WO2025125386A1 (en) 2023-12-14 2025-06-19 F. Hoffmann-La Roche Ag Antibodies that bind to folr1 and methods of use
TW202530255A (zh) 2023-12-15 2025-08-01 法商亞維西亞有限公司 抗ｉｌ－１ｒａｐ結合結構域及其抗體－藥物偶聯物
US20260071002A1 (en) 2023-12-20 2026-03-12 Hoffmann-La Roche Inc. Antibodies binding to ceacam5
US20250230251A1 (en) 2023-12-20 2025-07-17 Bristol-Myers Squibb Company Antibodies targeting il-18 receptor beta (il-18rb) and related methods
TW202535935A (zh) 2023-12-20 2025-09-16 美商艾普吉醫療股份有限公司 結合介白素13之抗體之醫藥組合物
WO2025137523A2 (en) 2023-12-20 2025-06-26 Apogee Therapeutics, Inc. Pharmaceutical formulations of antibodies that bind interleukin 13
WO2025133290A1 (en) 2023-12-21 2025-06-26 Temper Bio Protein for immune regulation
WO2025137284A2 (en) 2023-12-21 2025-06-26 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Broadly neutralizing antibodies against sars-cov-2 and sars-cov variants
TW202542177A (zh) 2023-12-22 2025-11-01 瑞士商赫孚孟拉羅股份公司 可活化融合蛋白及使用方法
US20250215087A1 (en) 2023-12-29 2025-07-03 Bristol-Myers Squibb Company Combination therapy of kras inhibitor and treg depleting agent
WO2025146131A1 (en) 2024-01-05 2025-07-10 Beigene, Ltd. ANTI-FGFR2b ANTIBODIES, CONJUGATES AND METHODS OF USE
WO2025149633A1 (en) 2024-01-12 2025-07-17 Laigo Bio B.V. Bispecific antigen binding proteins
WO2025155877A2 (en) 2024-01-18 2025-07-24 The Regents Of The University Of California Antibodies binding to pad4 and uses thereof
WO2025171182A1 (en) 2024-02-08 2025-08-14 Iovance Biotherapeutics, Inc. Treatment of cancer patients with tumor infiltrating lymphocyte therapies in combination with cancer vaccine
WO2025174974A1 (en) 2024-02-14 2025-08-21 Bristol-Myers Squibb Company Anti-cd33 antibodies and uses thereof
WO2025179281A1 (en) 2024-02-23 2025-08-28 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Treatment of cardiovascular disease with antxr1 antibodies
WO2025184416A1 (en) 2024-02-27 2025-09-04 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Single-domain antibodies and bispecific antibodies against hiv-1 and their use
US20250361320A1 (en) 2024-02-27 2025-11-27 Bristol-Myers Squibb Company Anti-ceacam5 antibodies and uses thereof
US12521446B2 (en) 2024-02-27 2026-01-13 Bristol-Myers Squibb Company Anti-CEACAM5 antibody drug conjugates
WO2025184421A1 (en) 2024-02-28 2025-09-04 Juno Therapeutics, Inc. Chimeric antigen receptors and antibodies specific for delta-like ligand 3 (dll3) and related methods
WO2025181189A1 (en) 2024-03-01 2025-09-04 F. Hoffmann-La Roche Ag Antibodies binding to cd3
WO2025191133A1 (en) 2024-03-15 2025-09-18 Avidicure Ip B.V. Il-21 muteins, fusion proteins comprising the same and uses thereof
WO2025191136A1 (en) 2024-03-15 2025-09-18 Avidicure Ip B.V. Muteins of 4-1bb ligand extracellular domain, fusion proteins comprising the same and uses thereof
WO2025191139A1 (en) 2024-03-15 2025-09-18 Avidicure Ip B.V. Conjugates of her2-specific antigen binding proteins and cytokines
WO2025199352A2 (en) 2024-03-20 2025-09-25 Juno Therapeutics, Inc. Antibodies specific for solute carrier family 34 member 2 (slc34a2)
US20250295801A1 (en) 2024-03-21 2025-09-25 Seagen Inc. Cd25 antibodies, antibody drug conjugates, and uses thereof
WO2025215060A1 (en) 2024-04-11 2025-10-16 F. Hoffmann-La Roche Ag Antibodies that specifically bind modified oligonucleotides
WO2025226808A1 (en) 2024-04-24 2025-10-30 Genentech, Inc. Compositions and methods of treating lupus nephritis
WO2025224297A1 (en) 2024-04-26 2025-10-30 Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale Antibodies having specificity to tgfbi and uses thereof
WO2025240670A2 (en) 2024-05-15 2025-11-20 Abalytics Oncology, Inc. Anti-pd-1 antibodies and related binding molecules and methods and uses thereof
WO2025238187A1 (en) 2024-05-15 2025-11-20 Cis Biopharma Ag Immunoconjugates targeting l1-cam
WO2025238052A1 (en) 2024-05-15 2025-11-20 Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale Depletion of plasmacytoid dendritic cells for the treatment of respiratory viral infections
WO2025242732A1 (en) 2024-05-21 2025-11-27 Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale Pan antibodies against sars-cov-2 spike protein and uses thereof for therapeutical purposes
WO2025245176A1 (en) 2024-05-22 2025-11-27 Bristol-Myers Squibb Company Multispecific antibody constructs
WO2025242909A1 (en) 2024-05-24 2025-11-27 Paul Scherrer Institut CD30-targeting antibody-radioligand conjugates and their therapeutic use
WO2025250969A1 (en) 2024-05-31 2025-12-04 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Anti-cd74 antibodies, conjugates and uses thereof
WO2025255405A1 (en) 2024-06-06 2025-12-11 Bristol-Myers Squibb Company Anti-fap antibodies and uses thereof
US20250376536A1 (en) 2024-06-06 2025-12-11 Bristol-Myers Squibb Company Multispecific anti-cd40 / anti-fap antibodies and uses thereof
WO2025255353A1 (en) 2024-06-06 2025-12-11 Apogee Therapeutics, Inc. Dosage and administration of an anti-ox40l antibody
WO2025257181A1 (en) 2024-06-11 2025-12-18 Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale Antibodies targeting trans-active response dna-binding protein-43 (tdp-43)
WO2025262564A1 (en) 2024-06-17 2025-12-26 Pfizer Inc. Use of anti-cxcr5 antibodies
WO2025264960A1 (en) 2024-06-21 2025-12-26 Apogee Therapeutics, Inc. Antibodies that bind il-13 and antibodies that bind ox40l
WO2025264972A1 (en) 2024-06-21 2025-12-26 Apogee Therapeutics, Inc. Antibodies that bind il-4r alpha and antibodies that bind
WO2026006784A1 (en) 2024-06-28 2026-01-02 Iovance Biotherapeutics, Inc. Methods of making tumor reactive peripheral blood lymphocytes (trpbl)
WO2026013218A1 (en) 2024-07-10 2026-01-15 Ac Immune Sa Anti-tdp-43 vectors, binding molecules and uses thereof
WO2026021476A1 (en) 2024-07-24 2026-01-29 Beone Guangzhou Biologics Manufacturing Co., Ltd. Anti-cmet and anti-egfr multispecific antibody drug conjugates
EP4684803A1 (en) 2024-07-25 2026-01-28 CeMM - Forschungszentrum für Molekulare Medizin GmbH Antibody conjugated chemical inducers of degradation of rbm39 and therapeutic uses thereof
WO2026030464A1 (en) 2024-07-30 2026-02-05 Genentech, Inc. Dosage regimen for reducing cytokine release syndrome (crs) with anti-fcrh5/anti-cd3 bispecific antibodies in multiple myeloma therapy
WO2026030473A1 (en) 2024-07-31 2026-02-05 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services West nile virus neutralizing monoclonal antibodies
WO2026035986A1 (en) 2024-08-07 2026-02-12 Bighat Biosciences, Inc. Humanized anti-cdh17 antibodies and use of the same
WO2026035866A1 (en) 2024-08-07 2026-02-12 Iovance Biotherapeutics, Inc. Treatment of cancer patients with tumor infiltrating lymphocyte therapies in combination with a lag-3 inhibitor and a pd-1 inhibitor
WO2026041568A1 (en) 2024-08-20 2026-02-26 F. Hoffmann-La Roche Ag Antibodies binding to cd3 and dotam
WO2026050244A1 (en) 2024-08-26 2026-03-05 Angitia Incorporated Limited Methods of treating or preventing osteoporosis and low bone mass
WO2026052839A1 (en) 2024-09-06 2026-03-12 Hone Bio Limited Targeting fusion proteins

Family Cites Families (85)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US627375A (en) * 1899-06-20 Giulio serra zanetti
US4752601A (en) * 1983-08-12 1988-06-21 Immunetech Pharmaceuticals Method of blocking immune complex binding to immunoglobulin FC receptors
US6548640B1 (en) * 1986-03-27 2003-04-15 Btg International Limited Altered antibodies
US5225539A (en) * 1986-03-27 1993-07-06 Medical Research Council Recombinant altered antibodies and methods of making altered antibodies
AU600575B2 (en) * 1987-03-18 1990-08-16 Sb2, Inc. Altered antibodies
US5204244A (en) * 1987-10-27 1993-04-20 Oncogen Production of chimeric antibodies by homologous recombination
US5047335A (en) * 1988-12-21 1991-09-10 The Regents Of The University Of Calif. Process for controlling intracellular glycosylation of proteins
US5419904A (en) * 1990-11-05 1995-05-30 The Regents Of The University Of California Human B-lymphoblastoid cell line secreting anti-ganglioside antibody
US5278299A (en) * 1991-03-18 1994-01-11 Scripps Clinic And Research Foundation Method and composition for synthesizing sialylated glycosyl compounds
US6582959B2 (en) * 1991-03-29 2003-06-24 Genentech, Inc. Antibodies to vascular endothelial cell growth factor
WO1994004679A1 (en) * 1991-06-14 1994-03-03 Genentech, Inc. Method for making humanized antibodies
AU3144193A (en) * 1991-11-21 1993-06-15 Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Controlling degradation of glycoprotein oligosaccharides by extracellular glycosisases
GB9206422D0 (en) * 1992-03-24 1992-05-06 Bolt Sarah L Antibody preparation
US5736137A (en) * 1992-11-13 1998-04-07 Idec Pharmaceuticals Corporation Therapeutic application of chimeric and radiolabeled antibodies to human B lymphocyte restricted differentiation antigen for treatment of B cell lymphoma
US6180377B1 (en) * 1993-06-16 2001-01-30 Celltech Therapeutics Limited Humanized antibodies
US6030613A (en) * 1995-01-17 2000-02-29 The Brigham And Women's Hospital, Inc. Receptor specific transepithelial transport of therapeutics
US6086875A (en) * 1995-01-17 2000-07-11 The Brigham And Women's Hospital, Inc. Receptor specific transepithelial transport of immunogens
US5731168A (en) * 1995-03-01 1998-03-24 Genentech, Inc. Method for making heteromultimeric polypeptides
US5869046A (en) * 1995-04-14 1999-02-09 Genentech, Inc. Altered polypeptides with increased half-life
US5747035A (en) * 1995-04-14 1998-05-05 Genentech, Inc. Polypeptides with increased half-life for use in treating disorders involving the LFA-1 receptor
US5730977A (en) * 1995-08-21 1998-03-24 Mitsui Toatsu Chemicals, Inc. Anti-VEGF human monoclonal antibody
US6277375B1 (en) * 1997-03-03 2001-08-21 Board Of Regents, The University Of Texas System Immunoglobulin-like domains with increased half-lives
WO1998045331A2 (en) * 1997-04-07 1998-10-15 Genentech, Inc. Anti-vegf antibodies
US20040191256A1 (en) * 1997-06-24 2004-09-30 Genentech, Inc. Methods and compositions for galactosylated glycoproteins
US6172213B1 (en) * 1997-07-02 2001-01-09 Genentech, Inc. Anti-IgE antibodies and method of improving polypeptides
US6528624B1 (en) * 1998-04-02 2003-03-04 Genentech, Inc. Polypeptide variants
US6242195B1 (en) * 1998-04-02 2001-06-05 Genentech, Inc. Methods for determining binding of an analyte to a receptor
US6194551B1 (en) * 1998-04-02 2001-02-27 Genentech, Inc. Polypeptide variants
EP1071700B1 (en) * 1998-04-20 2010-02-17 GlycArt Biotechnology AG Glycosylation engineering of antibodies for improving antibody-dependent cellular cytotoxicity
US6737056B1 (en) * 1999-01-15 2004-05-18 Genentech, Inc. Polypeptide variants with altered effector function
US7183387B1 (en) * 1999-01-15 2007-02-27 Genentech, Inc. Polypeptide variants with altered effector function
HUP0104865A3 (en) * 1999-01-15 2004-07-28 Genentech Inc Polypeptide variants with altered effector function
US6676927B1 (en) * 1999-01-20 2004-01-13 The Rockefeller University Animal model and methods for its use in the selection of cytotoxic antibodies
EP2264166B1 (en) * 1999-04-09 2016-03-23 Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd. Method for controlling the activity of immunologically functional molecule
US6703020B1 (en) * 1999-04-28 2004-03-09 Board Of Regents, The University Of Texas System Antibody conjugate methods for selectively inhibiting VEGF
FR2807767B1 (fr) * 2000-04-12 2005-01-14 Lab Francais Du Fractionnement Anticorps monoclonaux anti-d
JP2003531149A (ja) * 2000-04-13 2003-10-21 ザ・ロツクフエラー・ユニバーシテイ 抗体由来の免疫応答の増強
US7598055B2 (en) * 2000-06-28 2009-10-06 Glycofi, Inc. N-acetylglucosaminyltransferase III expression in lower eukaryotes
US20060029604A1 (en) * 2000-06-28 2006-02-09 Gerngross Tillman U Immunoglobulins comprising predominantly a GlcNAc2Man3GlcNAc2 glycoform
US20060024304A1 (en) * 2000-06-28 2006-02-02 Gerngross Tillman U Immunoglobulins comprising predominantly a Man5GlcNAc2 glycoform
US20060034828A1 (en) * 2000-06-28 2006-02-16 Gerngross Tillman U Immunoglobulins comprising predominantly a GlcNAcMAN5GLCNAC2 glycoform
US20060034830A1 (en) * 2000-06-28 2006-02-16 Gerngross Tillman U Immunoglobulins comprising predominantly a GalGlcNAcMan5GLcNAc2 glycoform
US6946292B2 (en) * 2000-10-06 2005-09-20 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Cells producing antibody compositions with increased antibody dependent cytotoxic activity
US7754208B2 (en) * 2001-01-17 2010-07-13 Trubion Pharmaceuticals, Inc. Binding domain-immunoglobulin fusion proteins
WO2002078766A2 (en) * 2001-04-02 2002-10-10 Genentech, Inc. Combination therapy
GB0118662D0 (en) * 2001-07-31 2001-09-19 Univ Southampton Binding agents
CA2463879C (en) * 2001-10-25 2012-12-04 Genentech, Inc. Glycoprotein compositions
US20040093621A1 (en) * 2001-12-25 2004-05-13 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd Antibody composition which specifically binds to CD20
US20060024292A1 (en) * 2001-12-27 2006-02-02 Gerngross Tillman U Immunoglobulins comprising predominantly a Gal2GlcNAc2Man3GlcNAc2 glycoform
US20060034829A1 (en) * 2001-12-27 2006-02-16 Gerngross Tillman U Immunoglobulins comprising predominantly a MAN3GLCNAC2 glycoform
US20040002587A1 (en) * 2002-02-20 2004-01-01 Watkins Jeffry D. Fc region variants
US20080152649A1 (en) * 2002-03-01 2008-06-26 Xencor, Inc. Optimized igf-1r antibodies and methods of using the same
US20040132101A1 (en) * 2002-09-27 2004-07-08 Xencor Optimized Fc variants and methods for their generation
US8093357B2 (en) * 2002-03-01 2012-01-10 Xencor, Inc. Optimized Fc variants and methods for their generation
US7317091B2 (en) * 2002-03-01 2008-01-08 Xencor, Inc. Optimized Fc variants
US8188231B2 (en) * 2002-09-27 2012-05-29 Xencor, Inc. Optimized FC variants
US20070148171A1 (en) * 2002-09-27 2007-06-28 Xencor, Inc. Optimized anti-CD30 antibodies
US20050031613A1 (en) * 2002-04-09 2005-02-10 Kazuyasu Nakamura Therapeutic agent for patients having human FcgammaRIIIa
US7361740B2 (en) * 2002-10-15 2008-04-22 Pdl Biopharma, Inc. Alteration of FcRn binding affinities or serum half-lives of antibodies by mutagenesis
US7217797B2 (en) * 2002-10-15 2007-05-15 Pdl Biopharma, Inc. Alteration of FcRn binding affinities or serum half-lives of antibodies by mutagenesis
CN103833854B (zh) * 2002-12-16 2017-12-12 健泰科生物技术公司 免疫球蛋白变体及其用途
EP2368578A1 (en) * 2003-01-09 2011-09-28 Macrogenics, Inc. Identification and engineering of antibodies with variant Fc regions and methods of using same
US20090010920A1 (en) * 2003-03-03 2009-01-08 Xencor, Inc. Fc Variants Having Decreased Affinity for FcyRIIb
US8084582B2 (en) * 2003-03-03 2011-12-27 Xencor, Inc. Optimized anti-CD20 monoclonal antibodies having Fc variants
ES2371072T3 (es) * 2003-06-12 2011-12-27 Eli Lilly And Company Proteínas de fusión análogas de glp-1.
US7758859B2 (en) * 2003-08-01 2010-07-20 Genentech, Inc. Anti-VEGF antibodies
US20050106667A1 (en) * 2003-08-01 2005-05-19 Genentech, Inc Binding polypeptides with restricted diversity sequences
NZ545776A (en) * 2003-08-22 2009-05-31 Biogen Idec Inc Improved antibodies having altered effector function and methods for making the same
AU2004273791A1 (en) * 2003-09-05 2005-03-31 Genentech, Inc. Antibodies with altered effector functions
GB0324368D0 (en) * 2003-10-17 2003-11-19 Univ Cambridge Tech Polypeptides including modified constant regions
EP1701979A2 (en) * 2003-12-03 2006-09-20 Xencor, Inc. Optimized antibodies that target the epidermal growth factor receptor
WO2005062916A2 (en) * 2003-12-22 2005-07-14 Centocor, Inc. Methods for generating multimeric molecules
US20060018911A1 (en) * 2004-01-12 2006-01-26 Dana Ault-Riche Design of therapeutics and therapeutics
PL1706428T3 (pl) * 2004-01-22 2010-02-26 Merck Patent Gmbh Przeciwciała przeciwnowotworowe o zredukowanym wiązaniu dopełniacza
US20060009360A1 (en) * 2004-06-25 2006-01-12 Robert Pifer New adjuvant composition
EP1778728A2 (en) * 2004-08-19 2007-05-02 Genentech, Inc. Polypeptide variants with altered effector function
WO2006031994A2 (en) * 2004-09-14 2006-03-23 Xencor, Inc. Monomeric immunoglobulin fc domains
AU2005289685B2 (en) * 2004-09-24 2009-07-16 Amgen Inc. Modified Fc molecules
US7632497B2 (en) * 2004-11-10 2009-12-15 Macrogenics, Inc. Engineering Fc Antibody regions to confer effector function
US8367805B2 (en) * 2004-11-12 2013-02-05 Xencor, Inc. Fc variants with altered binding to FcRn
US8802820B2 (en) * 2004-11-12 2014-08-12 Xencor, Inc. Fc variants with altered binding to FcRn
US20070135620A1 (en) * 2004-11-12 2007-06-14 Xencor, Inc. Fc variants with altered binding to FcRn
US7557190B2 (en) * 2005-07-08 2009-07-07 Xencor, Inc. Optimized proteins that target Ep-CAM
US7923538B2 (en) * 2005-07-22 2011-04-12 Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd Recombinant antibody composition
KR101834999B1 (ko) * 2008-10-14 2018-03-06 제넨테크, 인크. 이뮤노글로불린 변이체 및 그의 용도

Also Published As

Publication number Publication date
HK1076388A1 (zh) 2006-01-20
US20110086050A1 (en) 2011-04-14
IL161412A0 (en) 2004-09-27
HUP0600342A2 (en) 2006-08-28
KR100988949B1 (ko) 2010-10-20
HUP0600342A3 (en) 2011-03-28
CN1607960A (zh) 2005-04-20
PL372709A1 (pl) 2005-07-25
US20100255013A1 (en) 2010-10-07
EP1443961A2 (en) 2004-08-11
WO2003035835A3 (en) 2003-10-16
NZ532526A (en) 2007-01-26
US20070020260A1 (en) 2007-01-25
ES2326964T3 (es) 2009-10-22
US20080095762A1 (en) 2008-04-24
DE60232265D1 (de) 2009-06-18
KR20040066105A (ko) 2004-07-23
BR0213761A (pt) 2005-04-12
IL220142A0 (en) 2012-07-31
CA2463879A1 (en) 2003-05-01
MXPA04003798A (es) 2004-07-30
DK1443961T3 (da) 2009-08-24
US20030157108A1 (en) 2003-08-21
ATE430580T1 (de) 2009-05-15
JP2010248228A (ja) 2010-11-04
EP1443961B1 (en) 2009-05-06
JP2005532253A (ja) 2005-10-27
EP1443961A4 (en) 2005-11-23
CN100423777C (zh) 2008-10-08
JP2014076997A (ja) 2014-05-01
WO2003035835A2 (en) 2003-05-01
AU2002337935B2 (en) 2008-05-01
CA2463879C (en) 2012-12-04

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR100988949B1 (ko) 당단백질 조성물
AU2002337935A1 (en) Glycoprotein compositions
US20220002430A1 (en) Immunoglobulin variants and uses thereof
ZA200701715B (en) Polypeptide variants with altered effector function
KR20080032065A (ko) 푸코실화 수준이 조절된 항체의 생성 방법
JP2002510481A (ja) 抗体変異体及びその断片
ZA200403000B (en) Glycoprotein compositions.
HK1076388B (en) Glycoprotein compositions
HK1156047A (en) Immunoglobulin variants and uses thereof
HK1074208B (en) Immunoglobulin variants and uses thereof
HK1120058A (en) Immunoglobulin variants and uses thereof
HK1154871A (en) Immunoglobulin variants and uses thereof
HK1129406A (zh) 免疫球蛋白變體及其用途
HK1129406B (en) Immunoglobulin variants and uses thereof