PL213948B1 - Kompozycje zawierajace glikoproteine, czasteczka kwasu nukleinowego kodujaca te glikoproteine, komórka gospodarza, sposób wytwarzania glikoproteiny, kompozycja do zastosowania do leczenia, zastosowanie kompozycji i zestaw zawierajacy kompozycje - Google Patents

Kompozycje zawierajace glikoproteine, czasteczka kwasu nukleinowego kodujaca te glikoproteine, komórka gospodarza, sposób wytwarzania glikoproteiny, kompozycja do zastosowania do leczenia, zastosowanie kompozycji i zestaw zawierajacy kompozycje

Info

Publication number
PL213948B1
PL213948B1 PL372709A PL37270902A PL213948B1 PL 213948 B1 PL213948 B1 PL 213948B1 PL 372709 A PL372709 A PL 372709A PL 37270902 A PL37270902 A PL 37270902A PL 213948 B1 PL213948 B1 PL 213948B1
Authority
PL
Poland
Prior art keywords
region
glycoprotein
amino acid
composition
antibody
Prior art date
Application number
PL372709A
Other languages
English (en)
Other versions
PL372709A1 (pl
Inventor
Leonard G. Presta
Original Assignee
Genentech Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=26990808&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=PL213948(B1) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Genentech Inc filed Critical Genentech Inc
Publication of PL372709A1 publication Critical patent/PL372709A1/pl
Publication of PL213948B1 publication Critical patent/PL213948B1/pl

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2896—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against molecules with a "CD"-designation, not provided for elsewhere
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/06—Antiasthmatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/12—Drugs for disorders of the urinary system of the kidneys
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/06—Antipsoriatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
    • A61P21/04—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system for myasthenia gravis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/10—Antimycotics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/08—Antiallergic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A61P5/38—Drugs for disorders of the endocrine system of the suprarenal hormones
    • A61P5/40—Mineralocorticosteroids, e.g. aldosterone; Drugs increasing or potentiating the activity of mineralocorticosteroids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/04—Antihaemorrhagics; Procoagulants; Haemostatic agents; Antifibrinolytic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/04—Inotropic agents, i.e. stimulants of cardiac contraction; Drugs for heart failure
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/12—Antihypertensives
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/32—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against translation products of oncogenes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/42—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against immunoglobulins
    • C07K16/4283—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against immunoglobulins against an allotypic or isotypic determinant on Ig
    • C07K16/4291—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against immunoglobulins against an allotypic or isotypic determinant on Ig against IgE
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
    • C07K2317/24—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin containing regions, domains or residues from different species, e.g. chimeric, humanized or veneered
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/40—Immunoglobulins specific features characterized by post-translational modification
    • C07K2317/41—Glycosylation, sialylation, or fucosylation
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/52—Constant or Fc region; Isotype
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/73—Inducing cell death, e.g. apoptosis, necrosis or inhibition of cell proliferation
    • C07K2317/732—Antibody-dependent cellular cytotoxicity [ADCC]

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Transplantation (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)

Description

Niniejszy wynalazek dotyczy kompozycji zawierających glikoproteinę, cząsteczki kwasu nukleinowego kodującej tę glikoproteinę, komórki gospodarza, sposobu wytwarzania glikoproteiny, kompozycji do zastosowania do leczenia, zastosowania kompozycji i zestawu zawierającego kompozycję. W niniejszym wynalazku opisano kompozycję, która zawiera glikoproteiny ze zmodyfikowanymi wzorami glikozylacji.
Stan techniki
Przeciwciała
Przeciwciała są białkami, które wykazują swoistość wiązania z konkretnym antygenem. Przeciwciała natywne są zwykle heterotetramerowymi glikoproteinami o wielkości około 150000 daltonów, składające się z dwóch identycznych łańcuchów lekkich (L) i dwóch identycznych łańcuchów ciężkich (H). Każdy łańcuch lekki jest połączony z łańcuchem ciężkim jednym kowalencyjnym wiązaniem dwusiarczkowym, natomiast liczba wiązań dwusiarczkowych pomiędzy łańcuchami ciężkimi jest różna w różnych izotypach immunoglobulin. Każdy łańcuch ciężki i lekki ma również regularnie rozmieszczone wewnątrzłańcuchowe mostki dwusiarczkowe. Każdy łańcuch ciężki ma na jednym końcu domenę zmienną (VH), po której następuje kilka domen stałych. Każdy łańcuch lekki ma na jednym końcu domenę zmienną (VL), a na drugim końcu domenę stałą; domena stała łańcucha lekkiego pasuje do pierwszej domeny stałej łańcucha ciężkiego, a domena zmienna łańcucha lekkiego pasuje do domeny zmiennej łańcucha ciężkiego. Uważa się, że poszczególne reszty aminokwasowe tworzą połączenie pomiędzy domenami zmiennymi łańcucha lekkiego i łańcucha ciężkiego.
Termin „zmienny” dotyczy faktu, że niektóre części domen zmiennych przeciwciał wykazują bardzo duże różnice w sekwencji pomiędzy przeciwciałami i są wykorzystywane w wiązaniu i specyficzności poszczególnych przeciwciał wobec konkretnego antygenu. Jednakże, zmienność nie jest równomiernie rozmieszczona na przestrzeni domen zmiennych przeciwciał. Zazwyczaj koncentruje się ona w trzech odcinakach zwanych regionami determinującymi dopasowanie (CDR, od ang. complementarity determining region) w domenach zmiennych zarówno łańcucha lekkiego, jak i ciężkiego. Najbardziej zakonserwowane części domen zmiennych są nazywane regionem zrębowym (FR). Każda z domen zmiennych natywnych łańcuchów lekkich i ciężkich zawiera cztery FR, przyjmujące w większości konfigurację β-kartki, połączone przez trzy CDR, które tworzą pętle łączące, a w niektórych przypadkach tworzą część struktury β-kartki. CDR w każdym łańcuchu są utrzymywane razem w bliskości przez regiony FR i, wraz z CDR z innego łańcucha, uczestniczą w tworzeniu się miejsca wiążącego antygen przeciwciał (patrz Kabat i wsp., Sequences of Proteins of Immunological Interest, wyd. 5, Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, MD (1991)].
Domeny stałe nie uczestniczą bezpośrednio w wiązaniu się przeciwciała z antygenem, ale pełnią one funkcje efektorowe. W zależności od sekwencji aminokwasowej domeny stałej łańcuchów ciężkich, przeciwciała i immunoglobuliny można przypisać do różnych „klas”. Istnieje pięć głównych klas immunoglobulin: IgA, IgD, IgE, IgG i IgM, a kilka z nich można dalej podzielić na „podklasy” (izotypy), np. IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgA i IgA2. Regiony domen stałych łańcuchów ciężkich, które odpowiadają różnym klasom przeciwciał są nazywane odpowiednio, α, β, ε, γ i μ. Wiadomo, że spośród różnych klas ludzkich immunoglobulin jedynie ludzkie IgG1, IgG2, IgG3 i IgM aktywują dopełniacz; ludzkie IgG1 i IgG3 pośredniczą w ADCC bardziej skutecznie niż IgG2 i IgG4.
Schematyczne przedstawienie struktury natywnej IgG1 jest pokazane na fig. 1A, gdzie wskazane są różne części natywnej cząsteczki przeciwciała. Trawienie przeciwciał papainą prowadzi do wytworzenia dwóch identycznych fragmentów wiążących antygen, nazywanych fragmentami Fab, każdy z pojedynczym miejscem wiązania antygenu i pozostałego fragmentu „Fc”, którego nazwa odzwierciedla zdolność do łatwej krystalizacji. Struktura krystaliczna regionu Fc ludzkiej IgG została ustalona (Deisenhofer, Biochemistry 20: 2361-2370 (1981)). W cząsteczkach ludzkiej IgG region Fc jest wytwarzany poprzez cięcie papainą po stronie N Cys 226. Region Fc zajmuje centralne miejsce biorąc pod uwagę funkcje efektorowe przeciwciał.
Zostały opisane też inne cząsteczki typu przeciwciała. Przykładowo, opisano w piśmiennictwie „immunoadhezyny”, które łączą w sobie domenę wiązania heterologicznego białka, takiego jak receptor, ligand lub enzym, z funkcjami efektorowymi regionu Fc. Taką przykładową cząsteczką jest immunoadhezyna: receptor czynnika martwicy nowotworów-IgG (TNFR-IgG) opisana w patencie USA nr
610 297. Opisano również immunoadhezyny bispecyficzne i chimery przeciwciało-immunoahezyna.
PL 213 948 B1
Stabila, P., Nature Biotech, 16: 1357 (1998) opisuje inną zakotwiczoną w błonie komórkowej fuzję białkową zawierającą region. Fuzja białkowa w tym odnośniku stanowi połączenie domeny transbłonowej typu II, która lokuje się w błonie komórkowej z końcem N regionu Fc.
Przeciwciała i immunoadhezyny stosowane są jako leki w ludzkich chorobach (Glennie i wsp. Immunol. Today 21: 403-410 (2000); King i wsp. Curr. Opin. Drug Discovery Develop 2: 110-117 (1999); Vaswani i wsp. Ann. Allergy Asthma Immunol. 81: 105-119 (1998) oraz Abraham i wsp. Sec. Intern. Autumnal Them. Meeting on Sepsis, Deauville, France (1995)). Niektóre z tych przeciwciał i immunoadhezyn, np. te, wiążą się z receptorem albo ligandem i blokują w ten sposób oddziaływanie liganda z receptorem mogą działać bez wykorzystywania mechanizmów efektorowych przeciwciała. Inne mogą wymagać zaangażowania układu immunologicznego do zabicia komórki docelowej (Clynes i wsp. Nature Med. 6: 443-446 (2000); Clynes i wsp. PNAS (USA) 95: 652-656 (1998) oraz Anderson i wsp. Biochem. Soc. Trans. 25: 705-708 (1997)).
Funkcje efektorowe przeciwciał
Funkcje efektorowe, w których bierze udział region Fc przeciwciała można podzielić na dwie kategorie: (1) funkcje efektorowe, która działają po związaniu się przeciwciała z antygenem (te funkcje obejmują udział kaskady dopełniacza lub komórek niosących receptor Fc (FcR); i (2) funkcje efektorowe, która działają niezależnie od wiązania antygenu (te funkcje nadają utrzymywanie się w układzie krążenia i zdolność do przenikania przez bariery komórkowe poprzez transcytozę), Ward i Ghetie, Therapeutic Immunology 2: 77-94 (1995).
Podczas gdy wiązanie przeciwciała do odpowiedniego antygenu ma efekt neutralizujący, który mógłby zapobiegać wiązaniu obcego antygenu do jego endogennego celu (np. receptora lub liganda), samo wiązanie może nie usuwać obcego antygenu. Aby być skuteczne w usuwaniu i/lub niszczeniu obcych antygenów, przeciwciało powinno posiadać zarówno wiązanie o wysokim powinowactwie do swego antygenu, jak i wydajne funkcje efektorowe.
Interakcja przeciwciał i kompleksów przeciwciało-antygen z komórkami układu immunologicznego wywołuje różne odpowiedzi, w tym zależną od przeciwciała cytotoksyczność z udziałem komórek (ADCC, od ang. cell-mediated cytotoxicity) i cytotoksyczność zależną od dopełniacza (CDC od ang. complement dependent cytotoxicity) (przegląd w Daeron, Annu. Rev. Immunol. 15: 203-234 (1997); Ward i Ghetie, Therapeutic Immunol. 2: 77-94 (1995) oraz Ravetch i Kinat, Annu. Rev. Immunol. 9: 457-492 (1991)).
W kilku funkcjach efektorowych przeciwciała pośredniczą receptory Fc (FcRs), które wiążą region Fc przeciwciała. FcRs są definiowane przez swoją specyficzność względem izotypów immunoglobulin; receptory Fc dla przeciwciał IgG są określane jako FcyR, dla IgE jako FcsR, dla IgA jako FcaR i tak dalej. Zidentyfikowano trzy podklasy FcyR: FcyRI (CD64), FeyRII (CD32) i FcyRIII (CD16). Ponieważ każda podklasa FcyR jest kodowana przez dwa lub trzy geny i alternatywne składanie RNA prowadzi do wielu transkryptów, istnieje szeroka różnorodność izoform FcyR. Trzy geny kodujące podklasę FeyRI (FcyRIA, FcyRIB i FcyRIC) tworzą skupienie w regionie lq21.1 długiego ramienia chromosomu I; geny kodujące izoformy FcyRII (FcyRIIA, FcyRIIB i FcyRIIC) i dwa geny kodujące FcyRIII (FcyRIIIA i FcyRIIIB) są wszystkie skupione w regionie lq22. Te różne podtypy FcR są wyrażane na różnych typach komórek (przegląd w Ravetch i Kinat, Annu. Rev. Immunol. 9: 457-492 (1991)). Na przykład u ludzi FcyRIIIB znajduje się tylko na neutrofiłach, podczas gdy FcyRIIIA znajduje się na makrofagach, monocytach, komórkach naturalnych zabójcach (NK) i subpopulacji komórek T.
Strukturalnie wszystkie FcyR są członkami nadrodziny immunoglobulin mających łańcuch, a wiążący IgG z zewnętrzną częścią złożoną albo z dwóch (FcyRI i FcyRIII) albo z trzech (FcyRI) domen podobnych do Ig. Dodatkowo, FcyRI i FcyRIII mają dodatkowe łańcuchy białkowe (y, Ζ) związane z łańcuchem α, które działają w transdukcji sygnału. Te receptory także różnią się swym powinowactwem względem IgG. FcyRI wykazuje wysokie powinowactwo względem IgG, Ka = 108-109 M-1 (Ravetch i wsp. Ann. Rev. Immunol. 19: 275-290 (2001)) i może wiązać monomeryczną IgG. Przeciwnie
-1
FcyRII i FcyRIII wykazują stosunkowo słabsze powinowactwo dla monomerycznej IgG Ka < 10 M (Ravetch i wsp. Ann. Rev. Immunol. 19: 275-290 (2001)) i dlatego też oddziałują skutecznie tylko z multimerowymi kompleksami immunologicznymi. Receptory FcyRII obejmują FcyRIIA („receptor aktywujący”) i FcyRIIB („receptor hamujący”), które mają podobne sekwencje aminokwasowe, które przede wszystkim różnią się w swoich domenach cytoplazmatycznych. Receptor aktywujący FcyRIIA zawiera motyw aktywujący immunoreceptora oparty na tyrozynie (ITAM, od ang. immunoreceptor tyrosine-based activation motif) w swojej domenie cytoplazmatycznej. Receptor hamujący FcyRIIB zawiera motyw hamujący immunoreceptora oparty na tyrozynie (tyrosine-based inhibition motif - ITIM)
PL 213 948 B1 w swojej domenie cytoplazmatycznej (patrz przegląd w Daeron, Annu. Rev. Immunol. 15: 203-234 (1997)). Komórki NK niosą tylko FcyRIIIA i wiązanie przeciwciał do FcyRIIIA prowadzi do aktywności ADCC przez komórki NK.
W populacji ludzkiej znaleziono warianty alleliczne kilku ludzkich FcyR. Wykazano, że te alleliczne formy wariantowe wykazują różnice w wiązaniu ludzkiego i mysiego IgG i szereg badań asocjacyjnych korelowało wyniki kliniczne z obecnością specyficznych form allelicznych (przegląd w Lehrnbecher i wsp. Blood 94 (12): 4220-4232 (1999)). Kilka badań dotyczyło dwóch form FcyRIIA, R131 i H131 i ich asocjacji z wynikami klinicznymi (Hatta i wsp. Genes and Immunity 1: 53-60 (1999); Yap i wsp., Lupus 8: 305-310 (1999); i Lorenz i wsp. European J. Immunogenetics 22: 397-401 (1995)). Dwie formy alleliczne FcyRIIIA, F158 i V158, są badane dopiero teraz (Lehrnbecher i wsp., jak wyżej oraz Wu i wsp., J. Clin. Invest. 100 (5): 1059-1070 (1997)). Allotyp FcyRIIIA (Val158) oddziałuje z ludzką IgG lepiej niż allotyp FcyRIIIA (Phe158) (Shields i wsp. J. Biol. Chem. 276: 6591-6604 (2001); Koene i wsp. Blood 90: 1109-1114 (1997) oraz Wu i wsp. J.Clin. Invest. 100: 1059-1070 (1997)).
Innym typem receptora jest noworodkowy receptor Fc (FcRn). FcRn jest strukturalnie podobny do głównego antygenu zgodności tkankowej (MHC) i składa się z łańcucha α niekowalencyjnie powiązanego z p2-mikroglobuliną.
Zaproponowano, że FcRn reguluje homeostazę IgG w krwi, a także być może kontroluje transcytozę przez tkanki (Ghetie i wsp. Annu. Rev. Immunol. 18: 739-766 (2000)).
Miejsca wiązania FcyR na ludzkich i mysich przeciwciałach uprzednio zmapowano do tak zwanego „dolnego regionu zawiasowego” złożonego z reszt 233-239 (numery indeksu EU jak w Kabat i wsp., Sequences of Proteins of Immunological Interest, wyd. 5 Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, MD. (1991)). Woof i wsp. Molec. Immunol. 23: 319-330 (1986); Duncan i wsp. Nature 332: 563 (1988); Canfield i Morrizon, J. Exp. Med. 173: 1483-1491 (1991); Chappel i wsp., Proc. Natl. Acad. Sci USA 88: 9036-9040 (1991). Spośród reszt 233-239, P238 i S239 wymieniano jako możliwie biorące udział w wiązaniu.
Inne uprzednio cytowane obszary być może biorące udział w wiązaniu FcyR to: G316-K338 (ludzka IgG) dla ludzkiego FcyRI (tylko na podstawie porównania sekwencji; nie oceniano mutantów z podstawieniami); (Woof i wsp. Molec. Immunol. 23: 319-330 (1986)); K274-R301 (ludzka IgG1) dla ludzkich FcyRIII (na podstawie peptydów) (Sarmay i wsp. Molec. Immunol. 21: 43-51 (1984)); Y407-R416 (ludzka IgG) dla ludzkiego FcyRIII (na podstawie peptydów) (Gergely i wsp. Biochem. Soc. Trans. 12: 739-743 (1984)); jak i N297 i E318 (mysia IgG2b) dla mysiego FcyRII (Lund i wsp., Molec. Immunol. 29: 53-59 (1992)). Patrz też Armour i wsp. Eur. J. Immunol. 29: 2613-2624 (1999).
W WO 00/42072 (Presta) ujawniono warianty polipeptydów z ulepszonym lub osłabionym wiązaniem FcRs. Zawartość tej publikacji jest tu wyłączona jako odniesienie. Patrz także Shields i wsp. J. Biol. Chem. 9 (2): 6591-6604 (2001).
Clq i dwie proteazy serynowe Clr i Cis, tworzą kompleks Cl, pierwszy składnik szlaku cytotoksyczności zależnej od dopełniacza (CDC). Clq jest cząsteczką sześciowartościową z masą cząsteczkową około 460000 i budową porównywaną z bukietem tulipanów, w którym wszystkie sześć kolagenowych „łodyg” jest połączonych z sześcioma globularnymi regionami głowy. Burton i Woof, Advances in Immunol. 51: 1-84 (1992). Aby zaktywować kaskadę dopełniacza konieczne jest, by Clq związał przynajmniej dwie cząsteczki IgG1, IgG2 lub IgG3 (uważa się, że IgG4 nie aktywuje dopełniacza), ale tylko jedną cząsteczkę IgM, przyłączoną do docelowego antygenu. Ward i Ghetie, Therapeutic Immunology 2: 77-94 (1995) na stronie 80.
W oparciu o wyniki modyfikacji chemicznych i badań krystalograficznych, Burton i wsp. Nature, 288: 338-344 (1980) zaproponowali, że miejsce wiązania dla składnika Clq dopełniacza na IgG obejmuje ostatnie dwie (C-końcowe) nici β domeny CH2. Burton później zasugerował (Molec. Immunol., 22(3): 161-206 (1985)), że region obejmujący reszty aminokwasów 318 do 337 może bierze udział we wiązaniu dopełniacza.
Duncan i Winter, Nature 332: 738-40 (1988), stosując mutagenezę ukierunkowaną donieśli, że Glu318, Lys320 i Lys322 tworzą miejsce wiązania do Clq. Dane Duncan i Winter uzyskano poprzez testowanie wiązania izotypu mysiej IgG2b do Clq świnki morskiej. Rolę reszt Glu318, Lys320 i Lys322 we wiązaniu Clq potwierdzono przez zdolność krótkiego peptydu zawierającego te reszty do hamowania Iizy z udziałem dopełniacza. Podobne wyniki ujawniono w patencie USA nr 5 648 260 wydanym 15 lipca, 1997 i patencie USA nr 5 624 821 wydanym 29 kwietnia, 1997.
Reszta Pro331 jest podejrzewana o wiązanie Clq na podstawie analizy zdolności podklas ludzkiej IgG do przeprowadzenia Iizy komórek z udziałem dopełniacza. Mutacja Ser331 do Pro331 w IgG4
PL 213 948 B1 nadała zdolność do aktywacji dopełniacza (Tao i wsp., J. Exp. Med., 178: 661-667 (1993); Brekke i wsp., Eur. J. Immunol., 24: 2542-47 (1994)).
Z porównania danych grupy Wintera i prac Tao i wsp. i Brekke i wsp., Ward i Ghetie wywnioskowali w swojej pracy przeglądowej, że istnieją przynajmniej dwa różne regiony biorące udział we wiązaniu Clq: jeden na nici β domeny CH2 niosącej reszty Glu318, Lys320 i Lys322 i drugi na skręcie zlokalizowanym bardzo blisko tej samej nici β i zawierającym kluczową resztę aminokwasu w pozycji 331.
Inne prace sugerowały, że ludzkie reszty IgG1 Lys235 i W Gly237 zlokalizowane w dolnym regionie zawiasowym, odgrywają kluczową rolę w wiązaniu i aktywacji dopełniacza. Xu i wsp., J. Immunol. 150:152A (Abstrakt) (1993). W0 94/29351 opublikowany 22 grudnia, 1994, donosi, że reszty aminokwasów potrzebne do wiązania przez Clq i FcR ludzkiej IgG1 są zlokalizowane w N-końcowym regionie domeny CH2, tzn. obejmuje reszty 231 do 238.
Zaproponowano dalej, że zdolność IgG do wiązania Clq i aktywacji kaskady dopełniacza także zależy od obecności, braku lub modyfikacji reszty węglowodanowej umieszczonej między dwiema domenami CH2 (jest ona normalnie zakotwiczona na Asn297). Ward i Ghetie, Therapeutic Immunology 2: 77-94 (1995) na stronie 81.
Warianty polipeptydowe ze zmienionymi sekwencjami aminokwasowymi regionu Fc i zwiększoną lub zmniejszoną zdolnością do wiązania Clq opisano w patencie USA nr 6 194 551 B1 i WO 99/51642. Zawartości tych publikacji patentowych jest tu konkretnie włączona jako odniesienie. Patrz także Idusogie i wsp. J. Immunol. 164: 4178-4184 (2000).
Inne sposoby, które poprawiają angażowanie układu immunologicznego obejmują przeciwciała bispecyficzne, w których jedno ramię przeciwciała wiąże i receptor IgG (Segal i wsp. J. Immunol. Meth. 248: 1-6 (2001) oraz fuzje białowe mi cytokina-IgG (Penichet i wsp. J. Immunol. Meth. 248: 91-101 (2001)).
Glikozylacja przeciwciał
Wiele polipeptydów, w tym przeciwciał, podlega szeregu modyfikacjom potranslacyjnym z udziałem reszt węglowodanowych, takim jak glikozylacja oligosacharydami. Takie glikozylowane polipeptydy są określane jako „glikoproteiny”.
Istnieje kilka czynników, które mogą wpływać na glikozylację. Wykazano, że gatunek, typ tkanki i komórki są ważne dla sposobu, w jaki zachodzi glikozylacja. Dodatkowo, otoczenie zewnątrzkomórkowe przez zmienione warunki hodowli, takie jak stężenie surowicy, może mieć bezpośredni wpływ na glikozylację. (Lifely i wsp. Glycobiology 5 (8): 813-822 (1995)). Zaproponowano różne metody, aby zmienić wzór glikozylacji uzyskiwany w danym organizmie gospodarza obejmujące wprowadzenie lub nadekspresję pewnych enzymów biorących udział w wytwarzaniu oligosacharydów. (Patent USA nr 5 047 335; patent USA nr 5 510 261). Te schematy nie są ograniczane do metod wewnątrzkomórkowych (patent USA nr 5 278 299).
Wszystkie przeciwciała zawierają węglowodany w konserwatywnych pozycjach w regionach stałych łańcucha ciężkiego. Każdy izotyp przeciwciała ma odrębną odmianę struktur węglowodanowych związanych z N. Poza węglowodanem przyłączonym do ciężkiego łańcucha, do 30% ludzkich IgG ma glikozylowany region Fab. IgG ma pojedynczy związany z N dwuantenowy węglowodan na Asn297 domeny CH2. W pełni obrobiona struktura węglowodanu przyłączonego do Asn297 jest przedstawiona na fig. 2. W przypadku IgG z surowicy lub produkowanej ex vivo w hybrydomach lub komórkach poddanych inżynierii genetycznej, IgG są heterogenne pod względem węglowodanu połączonego z Asn297. Jefferis i wsp. Immunol. Rev. 163: 59-76 (1998); i Wright i wsp. Trends Biotech 15: 26-32 (1997). W przypadku IgG, oligosacharyd rdzeniowy normalnie składa się z GlcNAc2Man3-GlcNAc, z różnymi liczbami zewnętrznych reszt. Fig. 2 tutaj przedstawia szlak obróbki oligosacharydu do dojrzałego węglowodanu. Wcześnie syntetyzowana forma Glu3Man9GlcNac2 jest przenoszona na Asn297 w domenie CH2 przeciwciała, gdy wyłania się ono z rybosomu. Po odcięciu trzech końcowych glukoz, gdy glikoproteina przechodzi przez retikulum endoplazmatyczne, glikoproteina przemieszcza się do cis aparatu Golgiego, gdzie reszty mannozy usuwane są enzymatycznie przez α-mannozydazy. Obróbka może zatrzymać się w tym stadium, dając hiper-mannozylowane glikoproteiny. W przeciwnym wypadku obróbka może być kontynuowana do uzyskania Man5GlcNac2. Działanie N-acetyloglikozaminylotransferazy i w środkowym aparacie Golgiego jest etapem zaangażowania w syntezie złożonych oligosacharydów. W aparacie Golgiego, środkowym i trans, oligosacharyd jest poddawany dalszym etapom obróbki, w których reszty mannozy są przycinane i kolejno dodawane są reszty cukrów. Nowo syntetyzowana glikoproteina następnie wychodzi z aparatu Golgiego i jest transportowana do błony komórkowej lub jest wydzielana.
PL 213 948 B1
Zmienność wśród poszczególnych IgG wynika z przyłączenia galaktozy i/lub galaktozy-kwasu sialowego do dwóch końcowych GlcNac lub przyłączenia trzeciego ramienia GlcNAc (rozdzielająca GlcNAc). Badano węglowodan przyłączony do Asn297 IgG. Brak węglowodanu wpływa na wiązanie
Clq i FcyR (i w efekcie wpływa na aktywację dopełniacza i ADCC). Leatherbarrow i wsp. Molec. Immunol. 22: 407-415 (1985); Duncan i wsp. Nature 332: 738-740 (1988); Walker i wsp. Biochem. J. 259: 347-353 (1989); Dorai i wsp. Hybridoma 10: 211-217 (1990) oraz Horan Hand i wsp. Cancer Immunol. Immunother. 35: 165-174 (1992). Podczas gdy brak węglowodanu nie wydaje się wpływać na wiązanie FeRn (Hobbs i wsp. Molec. Immunol. 29: 949-956 (1992) oraz Kim i wsp. Eur. J. Immunol. 24: 542-548 (1994)), wpływ na klirans nie jest pewny (Dorai i wsp. Hybridoma 10: 211-217 (1990); Horan Hand i wsp. Cancer Immunol. Immunother. 35: 165-174 (1992); Hobbs i wsp. Molec. Immunol. 29: 949-956 (1992); Kim i wsp. Eur. J. Immunol. 24: 542-548 (1994); Wawrzynczak i wsp. Biochem. Soc. Trans. 17: 1061-1062 (1989) oraz Tao i wsp. J. Immuno. 143: 2595-2601 (1989)). Gdy węglowodan jest obecny charakter reszt cukrowych może także wpływać na funkcje efektorowe IgG. Doniesiono, że obecność lub brak końcowych reszt galaktozy wpływa na funkcje (Wright i wsp. J. Immunol. 160: 3393-3402 (1998)) i wydaje się korelować z reumatoidalnym zapaleniem stawów (Parekh i wsp. Nature 316: 452-457 (1985)). Ludzka IgG izolowana z surowic pacjentów ze szpiczakiem mnogim wykazuje ekstrema w obecności/braku fukozy, galaktozy i rozdzielającej N-acetyloglikozoaminy (Parekh i wsp. Nature 316: 452-457 (1985)). Raju i wsp. opisują zmienność glikozylacji IgG z różnych gatunków (Raju i wsp. Glycobiology 10 (5): 477-486 (2000)).
Boyd i wsp. stwierdzili, że usunięcie końcowego kwasu sialowego z pochodzących z CHO CAMPATH-1H za pomocą trawienia glikopeptydazą F nie wpływało na żadną z testowanych aktywności IgG, podczas gdy stwierdzono, że usunięcie większości reszt galaktozy z desialylowanych CAMPATH-1H zmniejsza (ale nie znosi) aktywność lityczną dopełniacza. Usunięcie galaktozy nie wpływała na inne aktywności. Boyd i wsp. Molec. Immunol. 32 (17/18): 1311-1318 (1995). Kumpel i wsp., Hum. Antibod. Hybridomas, 5 (3-4): 143-151 (1994) donoszą, że galaktozylacja ludzkiego monoklonalnego przeciwciała IgG wpływa na aktywność funkcjonalną z udziałem Fc.
Rothman i wsp. testowali funkcję ADCC monoklonalnej IgG oczyszczanej z hybrydom traktowanych inhibitorami glikozydazy, które działały w różnych stadiach szlaku obróbki węglowodanów. Rothman i wsp. Molecular Immunol. 26 (12): 1113-1123 (1989). Traktowanie kastanosperminą, która hamuje usuwanie reszt glukozy z tworzącego się oligosacharydu (Kaushal i wsp. Meth. Enzymol. 230: 316-329 (1994)), wykazało zwiększoną ADCC komórek NK, które wyrażają (wykazują ekspresję) tylko FcyRIII, ale nie dla innych typów komórek efektorowych, takich jak monocyty. Analiza wiązania pektyny sugerowała, że w traktowanej kastanosperminą IgG brakowało fukozy; jednak możliwe jest, że IgG będąca wynikiem traktowania kastanosperminą miała inną strukturę węglowodanów, taką jak hipermannozylacja, jak również końcowe reszty glukozy (Kaushal i wsp. Meth. Enzymol. 230: 316-329 (1994); Hashim i wsp. Immunology 63: 383-388 (1988); Hashim i wsp. Molec. Immunol. 24: 1087-1096 (1987)), nie spotykane zazwyczaj na IgG wydzielanej z nietraktowanych komórek lub z surowicy ludzkiej.
WO 97/30087 opisuje przygotowanie glikozylowanych przeciwciał gdzie miejsce N-glikozylacji domeny Fc przeciwciała jest podstawione dwuantenowym oligosacharydem.
Umana i wsp. wprowadzili gen β-(1,4)-N-acetyloglukozaminylotransferazy III (GcTIII), który katalizuje dodatek rozdzielającej GlcNAc do węglowodanowego rdzenia przyłączonego do Asn297 przeciwciała komórek jajnika chomika chińskiego (Chinese hamster ovary CHO). Glikoformy produkowane przez komórki CHO poddane inżynierii genetycznej uważano za posiadające zoptymalizowane ADCC. Patrz WO 99/54342 i Umana i wsp., Nature Biotechnology, 17: 176-180 (1999).
WO 98/58964 (Raju i wsp.) opisuje kompozycje przeciwciał, gdzie zasadniczo cały związany z N oligosacharyd jest oligosacharydem G2. G2 dotyczy dwuantenowej struktury z dwiema końcowymi Gal i brakiem NeuAc. WO 99/22764 (Raju i wsp.) dotyczy kompozycji przeciwciał, które są zasadniczo wolne od glikoprotein mających związany z N oligosacharyd G1, G0 lub G-1 w swojej domenie CH2. G1 dotyczy struktury dwuantenowej mającej jeden Ga1 i pozbawionej NeuAc, G0 dotyczy struktury dwuantenowej, gdzie nie są obecne końcowe NeuAc lub Ga1 i G-1 dotyczy jednostki rdzenia minus jedna GlcNAc.
W WO 0/61739 ujawniono, że 47% przeciwciał anty-hIL-5R wyrażanych przez YB2/0 (szpiczak szczura) ma połączone α-1-6 fukozą łańcuchy cukrowców, w porównaniu z 73% tych przeciwciał wyrażanych przez komórki NSO (szpiczak myszy). Stosunek względny fukozy przeciwciał α-hIL-5R wyrażanych przez różne komórki gospodarza wynosił YB2/0 < CHO/d < NSO.
PL 213 948 B1
Routier i wsp. badali wzór glikozylacji humanizowanego przeciwciała IgG1 (Dl.3) wyrażanego w komórkach CHO-DUKX. Struktury N-glikanów wyrażanych na CHO były dwuantenowymi N-glikanami z rdzeniową fukozą, ale były pozbawione rozdzielającej GlcNAc i kwasu sialowego. Struktury były heterogenne względem końcowej galaktozylacji i zostały więc VB nazwane G2, G1 i G0. Routier i wsp. Glycoconjugate J. 14: 201-207 (1997).
Uprzednio doniesiono, że znaleziono fukozę połączoną z O na szeregu polipeptydów i że przyłączona fukoza jest ważna dla właściwej aktywności polipeptydu. Patrz W098/33924, który opisuje metody glikozylacji resztą O-fukozy. Stankova i wsp. J. Immunol. 135 (6): 3719-3728 (1985) stwierdzili, że fukoza znacząco wzmaga zdolność cytolityczną indukowanych przez mieszaną hodowlę leukocytów (mixed leukocyte culture-MCL) lub przez preinkubowane komórki efektorowe. Cameron i wsp. Immunol. Lett. 11: 39-44 (1985) stwierdzili, że α-L-fukoza wydaje się odgrywać ważną rolę w interakcjach makrofagów z komórkami guza.
Istnieje ciągła potrzeba w tej dziedzinie wytwarzania glikoprotein, takich jak przeciwciała, mających ulepszoną aktywność biologiczną.
Streszczenie wynalazku
Przedmiotem niniejszego wynalazku jest kompozycja, charakteryzująca się tym, że zawiera glikoproteinę posiadającą region Fc ludzkiej IgG, przy czym 51-100% tej glikoproteiny w kompozycji zawiera strukturę dojrzałego rdzenia węglowodanowego, pozbawionego fukozy, przyłączonego do regionu Fc glikoproteiny, przy czym region Fc zawiera sekwencję aminokwasową, która różni się od natywnej sekwencji regionu Fc ludzkiej IgG i gdzie glikoproteina ta:
(a) wiąże się z FcyRIII z większym powinowactwem; lub (b) pośredniczy w zależnej od przeciwciała toksyczności za pośrednictwem komórek (ADCC) bardziej skutecznie niż glikoproteina ze strukturą dojrzałego rdzenia węglowodanowego zawierającego fukozę, przyłączoną do regionu Fc glikoproteiny i fizjologicznie akceptowalny nośnik, zaróbkę lub stabili zator.
Korzystnie, kompozycja według wynalazku charakteryzuje się tym, że wspomniany region Fc zawiera podstawienia aminokwasowe w dowolnej z jednej albo większej liczby pozycji aminokwasowych 256, 290, 298, 312, 326, 330, 333, 334, 360, 378 lub 430, stosując numerację EU dla reszt regionu Fc.
Bardziej korzystnie, region Fc zawiera podstawienia aminokwasowe w dowolnej z jednej albo większej liczby pozycji 298, 333 i 334, a jeszcze bardziej korzystnie region Fc zawiera podstawienia aminokwasowe w pozycjach 298, 333 i 334.
Najkorzystniej zastępującymi resztami w pozycjach 298, 333 i 334 są alaniny.
W kompozycji według wynalazku korzystnie region Fc zawiera podstawienie aminokwasowe w dowolnej z jednej albo większej liczby pozycji aminokwasowych 238, 239, 248, 249, 252, 254, 255, 256, 258, 265, 267 , 268, 269, 270, 272, 276, 278, 280, 283, 285, 286, 289, 290 , 292, 293, 294, 295, 296, 298, 301, 303, 305, 307, 309, 312 , 315, 320, 322, 324, 326, 327, 329, 330, 331, 333, 334, 335, 337, 338, 340, 360, 373, 376, 378, 382, 388, 389, 398, 414 , 416, 419, 430, 434, 435, 437, 438 lub 439 regionu Fc.
Bardziej korzystnie, region Fc zawiera podstawienia aminokwasowe w dowolnej z jednej albo większej liczby pozycji aminokwasowych 238, 239, 248, 249 , 252, 254, 265, 268, 269, 270, 272, 278, 289, 292, 293, 294, 295, 296, 298, 301, 303, 322, 324, 327, 329, 333, 335, 338, 340, 373, 376, 382,
388, 389, 414, 416, 419, 434, 435, 437, 438 lub 439 regionu Fc.
Również korzystnie, region Fc zawiera podstawienie aminokwasowe w dowolnej z jednej albo większej liczby pozycji aminokwasowych 238, 265, 269, 270, 327 lub 329 regionu Fc i tym, że region Fc wykazuje zmniejszone wiązanie do FcyRI w stosunku do regionu Fc o sekwencji natywnej.
W innej korzystnej realizacji wynalazku region Fc zawiera podstawienie aminokwasowe w dowolnej z jednej albo większej liczby pozycji aminokwasowych 238, 265, 269, 270, 292, 294, 295, 298, 303, 324, 327, 329, 333, 335, 338, 373, 376, 414, 416, 419, 435, 438 lub 439 regionu Fc, przy czym region Fc wykazuje zmniejszone wiązanie do FcyRII w stosunku do regionu Fc o sekwencji natywnej.
W następnej korzystnej realizacji wynalazku w kompozycji według wynalazku region Fc zawiera podstawienie aminokwasowe w dowolnej z jednej albo większej liczby pozycji aminokwasowych 238,
239, 248, 249, 252, 254, 265, 268, 269, 270, 272, 278, 289, 293, 294, 295, 296, 301, 303, 322, 327,
329, 338, 340, 373, 376, 382, 388, 389, 416, 434, 435 lub 437 regionu Fc, a region Fc wykazuje zmniejszone wiązanie do FcyRIII w stosunku do regionu Fc o sekwencji natywnej.
PL 213 948 B1
Również korzystnie, kompozycja według wynalazku zawiera glikoproteinę, której region Fc zawiera podstawienie aminokwasowe w dowolnej z jednej albo większej liczby pozycji aminokwasowych
255, 256, 258, 267, 268, 272, 276, 280, 283, 285, 286, 290, 298, 301, 305, 307, 309, 312, 315, 320, 322, 326, 330, 331, 333, 334, 337, 340, 360, 378, 398 lub 430 regionu Fc, przy czym region Fc wykazuje zwiększone wiązanie do jednego lub większej liczby FcyR w stosunku do regionu Fc o sekwencji natywnej.
Bardziej korzystnie, wspomniany region Fc zawiera podstawienie aminokwasowe w pozycji 298 i/lub 333 regionu Fc, przy czym region Fc wykazuje zwiększone wiązanie do FcyRIII w stosunku do regionu Fc o sekwencji natywnej.
Jeszcze bardziej korzystnie, w kompozycji według wynalazku, region Fc wykazuje ponadto zmniejszone wiązanie do FcyRII w stosunku do regionu Fc o sekwencji natywnej.
W innym korzystnym wykonaniu wynalazku region Fc zawiera podstawienie aminokwasowe w dowolnej z jednej albo większej liczby pozycji aminokwasowych 255, 256, 258, 267, 268, 272, 276,
280, 283, 285, 286, 290, 301, 305, 307, 309, 312, 315, 320, 322, 326, 330, 331, 337, 340, 378, 398 lub 430 regionu Fc, przy czym Fc wykazuje zwiększone wiązanie do FcyRII w stosunku do regionu Fc o sekwencji natywnej.
Bardziej korzystnie, region Fc wykazuje zmniejszone wiązanie do FcyRIII.
Jeszcze bardziej korzystnie, region Fc zawiera podstawienie aminokwasowe w dowolnej z jednej albo większej liczby pozycji aminokwasowych 268, 272, 298, 301, 322 lub 340 regionu Fc.
W kompozycji według wynalazku region Fc glikoproteiny ma korzystnie zmienione powinowactwo wiązania do FcRn w stosunku do regionu Fc o sekwencji natywnej.
Bardziej korzystnie, region Fc zawiera podstawienie aminokwasowe w dowolnej z jednej albo większej liczby pozycji aminokwasowych 238, 252, 253, 254, 255, 256, 265, 272, 286, 288, 303, 305, 307, 309, 311, 312, 317, 340, 356, 360, 362, 376, 378, 380, 382, 386, 388, 400, 413, 415, 424, 433, 434, 435, 436, 439 lub 447 regionu Fc.
Również korzystnie, region Fc zawiera podstawienie aminokwasowe w dowolnej z jednej albo większej liczby pozycji aminokwasowych 252, 253, 254, 255, 288, 309, 386, 388, 400, 415, 433, 435, 436, 439 lub 447 regionu Fc i tym, że region Fc wykazuje zmniejszone wiązanie do FcRn w stosunku do regionu Fc o sekwencji natywnej.
Region Fc może także korzystnie zawierać podstawienie aminokwasowe w dowolnej z jednej albo większej liczby pozycji aminokwasowych 238, 256, 265, 272, 286, 303, 305, 307, 311, 312, 317, 340, 356, 360, 362, 376, 378, 380, 382, 413, 424 lub 434 regionu Fc i tym, że region Fc wykazuje zwiększone wiązanie do FcRn w stosunku do regionu Fc o sekwencji natywnej.
Kompozycja według wynalazku korzystnie charakteryzuje się tym, że region Fc ma zmienione wiązanie Clq i/lub funkcję cytotoksyczności zależną od dopełniacza (CDC), a bardziej korzystnie region Fc zawiera podstawienie aminokwasowe w dowolnej z jednej albo większej liczby pozycji aminokwasowych 270, 322, 326, 327, 329, 331, 333 i 334 łańcucha ciężkiego.
W innym korzystnym wykonaniu wynalazku kompozycja charakteryzuje się tym, że sekwencja arainokwasowa regionu Fc zawiera zmianę sekwencji aminokwasowej, która zmienia natywny wzór glikozylacji glikoproteiny.
Korzystnie, glikoproteina w kompozycji według wynalazku jest zasadniczo wolna od rozdzielającej N-acetyloglukozaminy (GlcNAc) przyłączonej do struktury dojrzałego rdzenia węglowodanowego. Glikoproteina w kompozycji według wynalazku ma rozdzielającą N-acetyloglukozaminę (GlcNAc) przyłączoną do struktury dojrzałego rdzenia węglowodanowego.
Również korzystnie, glikoproteina ma jedną lub większą liczbę reszt galaktozy przyłączonych do struktury dojrzałego rdzenia węglowodanowego.
Glikoproteina korzystnie jest zasadniczo wolna od jednej lub większej liczby reszt galaktozy przyłączonych do struktury dojrzałego rdzenia węglowodanowego.
Glikoproteina korzystnie ma jedną lub większą liczbę reszt kwasu sialowego przyłączonych do struktury dojrzałego rdzenia węglowodanowego.
Glikoproteina korzystnie jest zasadniczo wolna od jednej lub większej liczby reszt kwasu sialowego przyłączonych do struktury dojrzałego rdzenia węglowodanowego.
Także korzystnie, 100% glikoproteiny w kompozycji zawiera strukturę dojrzałego rdzenia węglowodanowego, pozbawionego fukozy, przyłączoną do regionu Fc glikoproteiny.
PL 213 948 B1
Kompozycja według wynalazku korzystnie charakteryzuje się tym, że region Fc obejmuje region
Fc ludzkiej IgG, gdzie bardziej korzystnie region Fc ludzkiej IgG obejmuje region Fc ludzkiej IgGx, IgG2, IgG3 lub IgG4.
Bardziej korzystnie, glikoproteina wiąże się z FcyRIII, a jeszcze bardziej korzystnie glikoproteina wiąże się z FcyRIII z lepszym powinowactwem albo pośredniczy w zależnej od przeciwciała toksyczności za pośrednictwem komórek (ADCC) bardziej skutecznie niż glikoproteina ze strukturą dojrzałego rdzenia węglowodanowego zawierającego fukozę, przyłączoną do regionu Fc glikoproteiny.
W następnym korzystnym rozwiązaniu kompozycji według wynalazku glikoproteina obejmuje przeciwciało, przy czym korzystnym przeciwciałem jest przeciwciało chimerowe, humanizowane albo ludzkie. Przeciwciało to wiąże się z antygenem wybranym z grupy składającej się z markera powierzchniowego komórek B, receptora ErbB, antygenu związanego z nowotworem i czynnika angiogennego. Również korzystnie przeciwciało wiąże się z CD20, HER2, czynnikiem wzrostu śródbłonka naczyń (VEGF), CD40 lub antygenem komórek macierzystych prostaty (PSCA). Przeciwciało to także korzystnie obejmuje humanizowane przeciwciało anty-HER2, chimerowe przeciwciało anty-CD20 i humanizowane przeciwciało anty-VEGF.
Kompozycja według wynalazku charakteryzuje się tym ponadto, że 90-99% glikoproteiny w kompozycji zawiera strukturę dojrzałego rdzenia węglowodanowego, pozbawionego fukozy, przyłączoną do regionu Fc glikoproteiny.
Kompozycja według wynalazku charakteryzuje się tym, że glikoproteina została wytworzona przez komórkę jajnika chomika chińskiego (CHO), a korzystniej komórką CHO jest komórka Lec13.
Kompozycja według wynalazku jest preparatem farmaceutycznym, który w korzystnej realizacji może zawierać ponadto dopuszczalny farmaceutycznie nośnik, która to kompozycja korzystnie jest jałowa, i ewentualnie może być korzystnie zliofilizowana.
W kompozycji według wynalazku glikoproteina jest immunoadhezyną.
Kompozycja według wynalazku jest skoniugowana z cząsteczką heterologiczną, którą to cząsteczką heterologiczną korzystnie jest czynnik cytotoksyczny, enzym albo czynnik umożliwiający uzyskanie obrazu.
Przedmiotem wynalazku jest także kompozycja, która zawiera glikoproteinę, która jest immunoadhezyną i która to kompozycja jest koniugowana z cząsteczką heterologiczną, przy czym cząsteczką heterologiczną jest czynnik cytotoksyczny, enzym lub czynnik umożliwiający uzyskanie obrazu, łącznie z dopuszczalnym farmaceutycznie nośnikiem.
Przedmiotem wynalazku jest także cząsteczka kwasu nukleinowego, która koduje glikoproteinę opisaną w wynalazku zawierającą region Fc jak zdefiniowano.
Przedmiotem wynalazku jest również komórka gospodarza zawierająca kwas nukleinowy jak zdefiniowano w powyżej, przy czym 80-100% glikoproteiny wytwarzanej przez komórkę gospodarza zawiera strukturę dojrzałego rdzenia węglowodanowego, pozbawionego fukozy, przyłączoną do regionu Fc glikoproteiny.
Korzystnie, komórka gospodarza jest komórką jajnika chomika chińskiego (CHO), bardziej korzystnie komórką CHO jest komórka Lec13.
Przedmiotem wynalazku jest również sposób wytwarzania glikoproteiny, polegający na tym, że obejmuje hodowanie komórki gospodarza zdefiniowanej powyżej, tak, że kwas nukleinowy podlega ekspresji.
Sposób według wynalazku obejmuje ponadto odzyskanie glikoproteiny z hodowli komórki gospodarza.
Sposób według wynalazku obejmuje ponadto łączenie glikoproteiny z cząsteczką heterologiczną. Korzystną cząsteczką heterologiczną jest czynnik cytotoksyczny, enzym albo czynnik umożliwiający uzyskanie obrazu.
Przedmiotem wynalazku jest kompozycja jak zdefiniowano w powyżej do zastosowania do leczenia ssaka mającego chorobę lub zaburzenie wybrane z grupy składającej się z raka, choroby autoimmunologicznej, choroby zapalnej, infekcji lub innego stanu, gdzie pożądane jest usunięcie komórek albo tkanki. W przypadku kompozycji według wynalazku, korzystnie ssakiem jest człowiek, bardziej korzystnie człowiek u którego zachodzi ekspresja FcyRI11 (F158).
Przedmiotem wynalazku jest także zastosowanie skutecznej terapeutycznie ilości kompozycji jak zdefiniowano powyżej do wytwarzania leku do leczenia ssaka mającego chorobę lub zaburzenie wybrane z grupy składającej się z raka, choroby autoimmunologicznej, choroby zapalnej, infekcji lub innego stanu, gdzie pożądane jest usunięcie komórek albo tkanki.
PL 213 948 B1
W zastosowaniu według wynalazku, korzystnie ssakiem jest człowiek, a bardziej korzystnie człowiek, u którego zachodzi ekspresja FcyRIII (F158).
Przedmiotem wynalazku jest także zestaw terapeutyczny albo diagnostyczny zawierający kompozycję według wynalazku jak zdefiniowano powyżej oraz instrukcję jej użycia.
Wykazano, że kompozycje według wynalazku wykazują zdumiewające, 100-krotne polepszenie wiązania się z FcyRIIIA (F158), które nie jest aż tak efektywne jak oddziaływanie FeyRIIIA (V158) z ludzką IgG. A zatem przewiduje się, że ta kompozycja będzie lepsza od kompozycji opisywanych uprzednio, szczególnie do leczenia pacjentów-ludzi, którzy posiadają ekspresję FcyRIIIA (F158). FcyRIIIA (F158) jest bardziej powszechny niż FcyRIIIA (V158) u normalnych, zdrowych Afroamerykanów i członków rasy kaukaskiej. Patrz Lehrnbecher i wsp. Blood 94: 4220 (1999).
Niniejsze zgłoszenie wykazuje ponadto synergiczny wzrost wiązania FcyRIII i/lub funkcji ADCC, które są wynikiem połączenia ujawnionych tu wariantów glikozylacji z modyfikacją(ami) sekwencji aminokwasowej regionu Fc glikoproteiny. W celu wytworzenia wariantu sekwencji aminokwasowej o zwiększonej aktywności ADCC zwykle konstruuje się wariant regionu Fc o zwiększonym powinowactwie wiązania się z FcyRIII, który uważa się za ważny FcR w pośredniczeniu w ADCC. Przykładowo, można wprowadzić modyfikację aminokwasową (np. podstawienie) do rodzicielskiego regionu Fc w dowolnej, jednej lub większej liczbie pozycji aminokwasowych, 256, 290, 298, 312, 326, 330, 333, 334, 360, 378 lub 430 w celu wytworzenia takiego wariantu. Wariant o zwiększonym powinowactwie wiązania z FcyRIII może mieć ponadto zmniejszone powinowactwo wiązania z FcyRII, a w szczególności zmniejszone powinowactwo hamowania receptora FcyRIIB. W korzystnym wykonaniu, region Fc ma podstawienia aminokwasowe w pozycjach 298, 333 i 334, np. S298A/E333A/K334A. Region Fc o zmienionej sekwencji aminokwasowej obejmuje ponadto wariant glikozylacji, który jeszcze bardziej wzmacnia ADCC. Przykładowo, wariant regionu Fc może mieć przyłączoną strukturę dojrzałego węglowodanu rdzeniowego, w którym brak fukozy.
A zatem, wynalazek dostarcza kompozycji zawierającej glikoproteinę mającą region Fc, gdzie około 51-100% glikoproteiny w kompozycji zawiera strukturę dojrzałego węglowodanu rdzeniowego, w którym brak fukozy, przyłączoną do regionu Fc glikoproteiny i gdzie region Fc zawiera sekwencję aminokwasową, która różni się od natywnej sekwencji regionu Fc.
Korzystniej, jeżeli około 80-100% glikoproteiny w kompozycji zawiera strukturę dojrzałego węglowodanu rdzeniowego, w którym brak fukozy, a najkorzystniej jeżeli około 90-99% glikoproteiny w kompozycji zawiera strukturę dojrzałego węglowodanu rdzeniowego, w którym brak fukozy.
Glikoproteina może obejmować na przykład przeciwciało lub immunoadhezynę. Glikoproteina zawiera generalnie region Fc, korzystnie ludzki region Fc; np. region Fc ludzkiej IgG1, IgG2, IgG3 lub IgG4. Glikoproteina wykazuje zwiększone wiązanie do FcyRIII (takiego jak FcyRIIIA (F158) i/lub Fcy-RIIIA (V158)) i zwiększoną ADCC w stosunku do glikoproteiny z fukozą przyłączoną do struktury dojrzałego węglowodanu rdzeniowego.
Wynalazek dostarcza również kompozycji farmaceutycznej zawierającej glikoproteinę i, ewentualnie, dopuszczalny farmaceutycznie nośnik lub rozcieńczalnik. Ten preparat do potencjalnego użycia terapeutycznego jest jałowy i może być zIiofilizowany.
Rozważa się zastosowania diagnostyczne i terapeutyczne ujawnionej tu glikoproteiny. W zastosowaniu diagnostycznym wynalazek dostarcza sposobu ustalania obecności antygenu będącego przedmiotem zainteresowania, obejmujący wystawienie próbki podejrzewanej o to, że zawiera antygen na działanie glikoproteiny i ustalenie wiązania się glikoproteiny z próbką.
W zastosowaniu terapeutycznym, wynalazek dostarcza sposobu leczenia ssaka cierpiącego albo podatnego na chorobę lub schorzenie, który mógłby odnieść korzyść z takiego leczenia, obejmujący podawanie ssakowi skutecznej terapeutycznie ilości ujawnionej tu kompozycji, szczególnie tam, gdzie kompozycja jest preparatem farmaceutycznym.
Wynalazek dostarcza ponadto komórki gospodarza kodującej glikoproteinę zawierającą region Fc, gdzie około 80-100% glikoproteiny w kompozycji zawiera strukturę dojrzałego węglowodanu rdzeniowego, w którym brak fukozy, przyłączoną do regionu Fc glikoproreiny. Ponadto, wynalazek dostarcza sposobu wytwarzania glikoproteiny obejmujący hodowanie komórki gospodarza w taki sposób, że kwas nukleinowy ulega ekspresji i ewentualnie, odzyskanie glikoproteiny z hodowli komórki gospodarza (np. z pożywki hodowlanej komórki gospodarza).
Wynalazek dostarcza ponadto glikoprotein w artykule przemysłowym albo zestawie, który można zastosować dla celów leczenia choroby albo schorzenia.
PL 213 948 B1
Krótki opis rysunków
Figura 1A to schematyczne przedstawienie natywnej IgG i jej enzymatycznego trawienia z wytworzeniem różnych fragmentów przeciwciała. Mostki dwusiarczkowe są reprezentowane przez podwójne linie pomiędzy domenami CH1 i CL i dwiema domenami CH2. V to domena zmienna; C to domena stała; L oznacza łańcuch lekki, a H oznacza łańcuch ciężki.
Figura 1B przedstawia schematycznie strukturę w pełni obrobionego lub „dojrzałego” węglowodanu rdzeniowego (2100) przyłączonego do Asn297 IgG z surowicy, strukturę dojrzałego węglowodanu rdzeniowego z pojedynczą resztą galaktozy (2110) jak również strukturę węglowodanu rdzeniowego z dwiema resztami galaktozy oraz rozdzielającym GlcNAc (3120). Liczby reszt, odpowiednio, Glc-NAc, fukozy, galaktozy i kwasu sialowego są przedstawione w systemie numeracji czterocyfrowej pokazanym na tej figurze.
Figura 2 ilustruje dodawanie oligosacharydu do Asn297 w domenie CH2 IgG, po którym następuje jej obróbka w aparacie Golgiego, cis, medial i trans, z wytworzeniem złożonej, dwuantenowej, w pełni obrobionej struktury węglowodanu. Kastanospermina hamuje usuwanie reszt z powstającego oligosacharydu.
Figura 3 pokazuje oligosacharydy łańcucha ciężkiego (Fc) znajdujące się na przeciwciałach wyrażanych w komórkach CHO z normalnym metabolizmem fukozy.
W dalszych legendach do figur i przykładach, stosowane są następujące oznaczenia: „Hu4D5” to oznaczenie dla humanizowanego przeciwciała anty-HER2 4D5, jajnik chomika chińskiego jest oznaczony jako „CHO”, komórki CHO-DP12 hodowane w 15 cm płytkach są oznaczone „CHO-P”, komórki CHO-DP12 hodowane w obrotowych butelkach są oznaczone jako „CHO-S”, ludzkie komórki nerki zarodkowej 293 są oznaczone jako „HEK293”, „Lec 13” reprezentuje linię komórkową CHO z defektywnym metabolizmem fukozy otrzymaną od Pamela Stanley z Albert Einstein College of Medicine z Yeshiva University, Bronx, New York, Hu4D5 z podstawieniami S298A/E333A/K334A w jego regionie Fc jest nazywany „Hu4D5-AAA”, „E27” poddane dojrzewaniu pod względem powinowactwa/humanizowane przeciwciało anty-IgE opisane w patencie USA nr 6 172 213, E27 z podstawieniami S298A/E333A/K334A w jego regionie Fc jest nazywany „E27-AAA”, a zależna od przeciwciała cytotoksyczność z udziałem komórek jednojądrzastych komórek z krwi obwodowych jest oznaczona „PBMC ADCC”
Figura 4 pokazuje wiązanie się monomerów Hu4D5 z ludzkim FcyRI. Przeciwciało Hu4D5 wyrażono w komórkach CHO-S, komórkach HEK293, CHO-P lub komórkach Lec13 CHO (dwie różne partie).
Figura 5 pokazuje wiązanie się dimerów Hu4D5 z ludzkim FcyRIIB. Przeciwciało Hu4D5 wyrażono w komórkach CHO-S lub Lec13 (trzy różne partie).
Figura 6 pokazuje wiązanie się dimerów Hu4D5 z ludzkim FcyRIIA (R131). Przeciwciało Hu4D5 wyrażono w komórkach CHO-S lub Lec13 (trzy różne partie).
Figura 7 ilustruje wiązanie się dimerów Hu4D5 z ludzkim FcyRIIA (H131). Przeciwciało Hu4D5 wyrażono w komórkach CHO-S lub Lec13 (trzy różne partie).
Figura 8 pokazuje wiązanie się dimerów Hu4D5 lub Hu4D5-AAA wyrażanych w komórkach CHO-S lub Lec13 komórkach (odpowiednio dwie i trzy różne partie), z ludzkim FcyRIIIA (V158).
Figura 9 pokazuje wiązanie się dimerów Hu4D5 wyrażanych w komórkach CHO-S lub Lec13 (trzy różne partie) albo dimerów Hu4D5-AAA wyrażanych w komórkach Lec13 (dwie różne partie), z ludzkim FcyRIIIA (F158).
Figura 10 przedstawia wiązanie się dimerów anty-IgE (E27) z ludzkim Fc (RIIIA (V158). E27 wyrażane w komórkach HEK293, komórkach CHO-P (dwie partie) lub komórkach Lec13 (dwie partie) testowano w tym badaniu.
Figura 11 przedstawia wiązanie się dimerów anty-IgE (E27) z ludzkim FcyRIIIA (F158). E27 wyrażane w komórkach HEK293, komórkach CHO-P (dwie partie) lub komórkach Lec13 komórkach (dwie partie) testowano w tym badaniu.
Figura 12 ilustruje wiązanie się heksamerów anty-IgE (E27) i E27-AAA do FcyRIIIA (Fl58). Przeciwciała były wyrażane w komórkach CHO-P, Lec13 lub HEK293.
Figura 13 ilustruje wiązanie się heksamerów anty-IgE (E27) i E27-AAA do Fc(RIIIA (V158). Przeciwciała były wyrażane w komórkach CHO-P, Lec13 lub HEK293 komórkach.
Figura 14 przedstawia wiązanie się Hu4D5 wyrażanego w komórkach CHO-P, CHO-S lub Lec13 komórkach z ludzkim FcRn.
PL 213 948 B1
Figura 15 przedstawia wiązanie się Hu4D5 i anty-CD20 (RITUXAN®) z ludzkim Clq. Hu4D5 było ® wyrażane w komórkach CHO-P lub Lec13 komórkach (dwie partie). RITUXAN® było wyrażane w komórkach CHO-P.
®
Figura 16 reprezentuje wiązanie się Hu4D5 lub RITUXAN® z ludzkim Clq. Hu4D5 zastosowane w tym doświadczeniu było wyrażane w komórkach CHO-P, Lec13 (trzy różne partie) lub w komórkach CHO-S. RITUXAN® było wyrażane w komórkach CHO-P.
Figura 17 przedstawia PBMC ADCC wobec komórek raka sutka SKBR3 (E:T 30:1) przy użyciu dawcy FcyRIII VF. Pokazana jest spontaniczna ADCC w porównaniu do tej powodowanej Hu4D5 wyrażanym w komórkach CHO-S lub Lec13.
Figura 18 przedstawia PBMC ADCC wobec komórek raka sutka (E:T 30:1) przy użyciu innego dawcy FcyRIII VF. Pokazana jest spontaniczna ADCC w porównaniu do tej powodowanej Hu4D5 wyrażanym w komórkach CHO-S lub Lec13.
Figura 19 przedstawia PBMC ADCC wobec komórek raka sutka (E:T 30:1) przy użyciu dawcy FcyRIII FF. Pokazana jest spontaniczna ADCC w porównaniu do tej powodowanej Hu4D5 wyrażanym w komórkach CHO-S lub Lec13.
Figura 20 przedstawia PBMC ADCC wobec komórek raka sutka (E:T 30:1) przy użyciu innego dawcy FcyRIII FF. Pokazana jest spontaniczna ADCC w porównaniu do tej powodowanej Hu4D5 wyrażanym w komórkach CHO-S lub Lec13.
Figura 21 przedstawia monocytową ADCC wobec komórek raka sutka (E:T 10:1) przy użyciu dawcy FcyRIIA RR donor. Pokazana jest spontaniczna ADCC w porównaniu do tej powodowanej Hu4D5 wyrażanym w komórkach CHO-S lub Lec13.
Figura 22 przedstawia monocytową ADCC wobec komórek raka sutka (E:T 10:1) przy użyciu dawcy FcyRIIA HH donor. Pokazana jest spontaniczna ADCC w porównaniu do tej powodowanej Hu4D5 wyrażanym w komórkach CHO-S lub Lec13.
Figura 23 przedstawia dopasowanie regionów Fc natywnych sekwencji IgG. Pokazane są sekwencje regionu Fc natywnych sekwencji IgG, humlgGl (nie-A i A allotypy) (odpowiednio, SEK NR ID: 112), humIgG2 (SEK NR ID: 3), humIgG3 (SEK NR ID: 4) i humIgG4 (SEK NR ID: 5). Sekwencja ludzkiej IgG1 jest allotypu nie-A, a różnice pomiędzy tą sekwencją z allotypem A (w pozycjach 356 i 358; system numerowania EU) są pokazane poniżej sekwencji ludzkiej IgG1. Pokazane są również sekwencje regionu Fc natywnych mysich sekwencji IgG, murlgGl (SEK NR ID: 6), murIgG2A (SEK NR ID: 7), murIgG2B (SEK NR ID: 8) i murIgG3 (SEK NR ID: 9).
Figura 24 przedstawia wiązanie się Hu4D5 i Hu4D5-AAA z CD56 dodatnimi komórkami naturalnych zabójców (NK). Testowanymi produktami były: (1) połączona z FITC anty-ludzka IgG, (2) Hu4D5 z CHO-S, (3) Hu4D5 wyrażone w komórkach Lec 13 i (4) Hu4D5-AAA wyrażane komórkach w Lec 13.
Figura 25 pokazuje barwienie fluorescencyjne oczyszczonych komórek NK wyrażających receptory FcyRIII (F/F).
Figura 26 dostarcza porównania aktywności NK ADDC Hu4D5 z CHO-S, Hu4D5 z komórek Lec13, Hu4D5-AAA z komórek Lec 13 i Hu4D5 z komórek HEK293. Dawcą był FcyRIII (F/F).
Figura 27 powtarza doświadczenie z fig. 26 z różnym dawcą FcyRIII (F/F).
Figura 28 przedstawia wiązanie się monomerów Hu4D5anty-HER2 z linią CHO stabilnie stransfekowaną ludzkim łańcuchem α i łańcuchem γ Fc(RIIIA (reprezentatywny wykres dla jednego testu). Hu4D5 CHO-S, otwarte kółka; Hu4D5 Lec13-D, otwarte kwadraty; Hu4D5 Lec13-E, otwarte romby; Hu4D5 Lec13-F, otwarte trójkąty; Hu4D5 HEK293-/y\A, wypełnione otwarte; Hu4D5 Lec13-AAA-B, wypełnione kwadraty; Hu4D5 Lec13-AAA-C, wypełnione romby.
Szczegółowy opis korzystnych wykonań wynalazku
I. Definicje
W niniejszym opisie i zastrzeżeniach, numeracja reszt w łańcuchu ciężkim immunoglobuliny jest tą z indeksu EU, jak w Kabat i wsp., Sequences of Proteins of Immunological Interest, wyd. 5. Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, MD (1991), konkretnie włączone jako odniesienie. „Indeks EU jak w Kabat” dotyczy numerowania reszt w ludzkim przeciwciele IgG1 EU.
Grupy węglowodanowe według niniejszego wynalazku będą opisane w odniesieniu do powszechnie stosowanej nomenklatury dla opisu oligosacharydów. Przegląd chemii węglowodanów który stosuje tę nomenklaturę znajduje się w Hubbard i wsp. Ann. Rev. Biochem. 50: 555-583 (1981).
Nomenklatura ta obejmuje na przykład, Man, która reprezentuje mannozę; GlcNAc, która reprezentuje
2-N-acetyloglukozaminę; Gal, która reprezentuje galaktozę; Fuc dla fukozy; i Gic, która reprezentuje
PL 213 948 B1 glukozę. Kwasy sialowe są opisane przez skróty NeuNAc, dla kwasu 5-N- acetyloneuraminowego i NeuNGc dla 5-glikoliloneuraminowego.
Termin „glikozylacja” oznacza przyłączenie oligosacharydów (węglowodanów zawierających dwa lub większą liczbę cukrów prostych połączonych razem, np. złożonych z dwóch do około dwunastu połączonych razem cukrów prostych) do glikoproteiny. Boczne łańcuchy oligosacharydowe są zazwyczaj przyłączone do szkieletu glikoproteiny poprzez N lub poprzez O. Oligosacharydy według niniejszego wynalazku występują za ogół jako oligosacharydy przyłączone poprzez N do domeny CH2 regionu Fc.
„Glikozykacja poprzez N” dotyczy przyłączenia grupy węglowodanowej do reszty asparaginowej w łańcuchu glikoproteinowym. Specjalista w tej dziedzinie będzie wiedział, że na przykład każda domena CH2 mysiej IgG1, IgG2a, IgG2b i IgG3 jak również ludzkiej IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgA i IgD ma pojedyncze miejsce dla glikozylacji poprzez N przy reszcie aminokwasowej 297 (Kabat i wsp. Sequences of Proteins of Immunological Interest, 1991).
„Glikoproteiny” to polipeptydy mające przyłączony jeden lub większą liczbę bocznych łańcuchów oligosacharydowych.
Dla potrzeb niniejszego wynalazku „struktura dojrzałego węglowodanu rdzeniowego” dotyczy poddanej obróbce struktury węglowodanu rdzeniowego przyłączonej do regionu Fc, która generalnie składa się z następujących struktur węglowodanowych GlcNAc(Fukoza)-GlcNAc-Man-(Man-GlcNAc)2, typowo dwuantenowych oligosacharydów przedstawionych schematycznie poniżej:
Termin ten obejmuje w szczególności formy G1 struktury dojrzałego węglowodanu rdzeniowego, w której brak reszty β1,2 GlcNAc. Korzystne jest, jednakże jeżeli struktura węglowodanu m rdzeniowego zawiera obydwie reszty β1,2 GlcNAc. Struktura dojrzałego węglowodanu rdzeniowego tutaj generalnie nie jest hipermannozylowana.
Struktura dojrzałego węglowodanu rdzeniowego jest przyłączona do regionu Fc glikoproteiny, na ogół poprzez m przyłączenie przez N do Asn297 domeny CH2 regionu Fc.
„Rozdzielająca GlcNAc” to reszta GlcNAc przyłączona do β^4 mannozy w strukturze dojrzałego węglowodanu rdzeniowego. Rozdzielająca GlcNAc może być przyłączona enzymatycznie do struktury dojrzałego węglowodanu rdzeniowego przez enzym β-(1,4)-N-acetyloglukozaminylotransferazę III (GnTIII). Komórki CHO normalnie nie wyrażają GnTIII (Stanley i wsp. J. Biol. Chem. 261: 13370-13378 (1984)), ale mogą być poddane manipulacjom aby to robić (Umana i wsp. Nature Biotech. 17: 176-180 (1999)).
Glikoproteina, która jest „zasadniczo wolna” od jednej lub większej liczby wybranych grup cukrowych (np. rozdzielającej GlcNAc albo jednej lub większej liczby reszt galaktozy albo jednej lub większej liczby reszt kwasu sialowego) jest wytwarzana zazwyczaj w komórce gospodarza, który jest defektywny pod względem dodawania w wybranej(ych) grupy cukrowej do struktury dojrzałego węglowodanu rdzeniowego, tak że około 90-100% glikoproteiny w kompozycji nie będzie miała wybranej (ych) grupy cukrowej przyłączonej do struktury dojrzałego węglowodanu rdzeniowego.
A „glikozydaza” to enzym uczestniczący w biosyntezie połączonych przez asparaginę (połączonych przez N) glikoprotein. Enzym „skracający” to taki, który usuwa oligosacharyd(y), podczas gdy „transferaza” dodaje oligosacharyd(y). Przykłady glikozydaz obejmują glukozydazy skracające, takie jak glukozydaza I i glukozydaza II; skracające mannozydazy takie jak mannozydaza szorstkiego endoplazmatyczego retikulum (mannozydaza rER), mannozydaza IA, mannozydaza IB i mannozydaza II; jak również transferazy takie jak glikosylotransferazy, np. β(1,4)-Ν-acetyloglukozaminylotransferaza III (GnT III), Gal-transferazy, transferazy kwasu sialowegi i fuc-transferazy.
PL 213 948 B1 „Inhibitor glikozydazy” dotyczy związku lub kompozycji, który zmiesza albo zapobiega obróbkce oligosacharydu połączonego poprzez N przez jeden albo większą liczbę glikozydaz. Przykłady obejmują nojirymycynę, 1-deoksynojirymycynę (dNM), N-Metylo-1-deoksynojirymycynę (M-dNM), kastanosperminę, bromokonduritol, 1-deoksymannojirymycynę (dMM), australinę, MDL, lentiginozynę i swainzoninę (Sw). Inhibitory glikozydazy są omówione w Fuhrmann i wsp. Biochim. Biophys. Acta 825: 95-110 (1985); Kaushal i Elbein, Methods in Enzym. 230: 316-329 (1994) oraz Elbein, A. FASEB 5: 3055-3063 (1991).
„Lec13” dotyczy opornej na lektynę zmutowanej linii komórkowej jajnika chomika chińskiego (CHO), która wykazuje defektywny metabolizm fukozy i dlatego ma zmniejszoną zdolność do dodawania fukozy do złożonych węglowodanów. Ta linia jest opisana w Ripka i Stanley, Somatic Cell & Molec. Gen. 12 (1): 51-62 (1986) oraz Ripka i wsp. Arch. Biochem. Biophys. 249 (2): 533-545 (1986) I jest dostępna z Albert Einstein College of Medicine z Yeshiva University, Bronx, New York. Uważa się, że w komórkach Lec13 brak jest transktyptu dla GDP-D-mannozo-4,6-dehydratazy, kluczowego enzymu metabolizmu fukozy. Ohyama i wsp. J. Biol. Chem. 273 (23): 14582-14587 (1988). GDP-D-mannozo-4,6-dehydrataza wytwarza GDP-mannozo-4-keto-6-D-deoksymannozę z GDP-mannozy, która jest następnie przekształcana przez białko FX do GDP-L- fukozy. Ekspresja fukozylowanych oligosacharydów jest zależna od donorowych substratów GDP-L-fukozy i fukozylotransferazy(az).
„Fukozylotransferaza” to enzym, który dodaje jedną lub większą liczbę fucoz do glikoproteiny. Przykłady obejmują a1,6-fukozyoltransferazę, FucTI, FucTII, FucTIII, FucTIV, FucTV, FucTVI i FucTVII. Świńskie i ludzkie Porcine and human a1,6-fukozyoltransferazy są opisane, odpowiednio, w Uozumi i wsp. J. Biol. Chem. 271: 27810-27817 (1996) i Yanagidani i wsp. J. Biochem. 121: 626-632 (1997).
„Sialilotransferaza” to enzym, który dodaje jedną lub większą liczbę reszt kwasu sialowego do glikoproteiny. α2,3-sialilotransferaza może dodawać reszty(ę) kwasu sialowego do reszt(y) galaktozy przyłączonych do struktury dojrzałego węglowodanu rdzeniowego.
„Galaktotransferaza” to enzym, który dodaje jedną lub większą liczbę reszt galaktozy do glikoproteiny. β1,4-galaktozylotransferaza może dodawać reszty(ę) galaktozy do struktury dojrzałego węglowodanu rdzeniowego.
Termin „region Fc zawierający glikoproteinę” dotyczy glikoproteiny, takiej jak przeciwciało albo immunoadhezyna, która zawiera region Fc.
Termin „region Fc” jest stosowany do zdefiniowania regionu C-końcowego łańcucha ciężkiego immunoglobuliny, np. jak pokazano na fig. 1. „Regionem Fc” może być region Fc o sekwencji natywnej albo wariant regionu Fc. Jakkolwiek granice regionu Fc łańcucha ciężkiego immunoglobuliny mogą różnić się, region Fc łańcucha ciężkiego ludzkiej IgG jest zwykle zdefiniowany jako rozciągający się od reszty aminokwasowej w pozycji około Cys226 lub od pozycji około Pro230, do końca karboksylowego regionu Fc. Region Fc immunoglobuliny generalnie zawiera dwie domeny stałe, domenę CH2 i CH3, jak pokazano na przykład na fig. 1A.
„Funkcjonalny region Fc” posiada co najmniej jedną „funkcję efektorową” regionu Fc o sekwencji natywnej. Przykładowe „funkcje efektorowe” obejmują wiązanie Clq, cytotoksyczność zależną od dopełniacza; wiązanie receptora Fc; cytotoksyczność z udziałem komórek zależną od przeciwciała (ADCC); fagocytozę; obniżenie aktywności receptorów powierzchniowych (np. receptora komórek B; BCR), itd. Takie funkcje efektorowe generalnie wymagają, aby region Fc region był połączony z domeną wiążącą (np. domeną zmienną przeciwciała) i mogą być testowane przy zastosowaniu różnych testów, na przykład jak tu ujawnionych.
„Region Fc o sekwencji natywnej” obejmuje sekwencję identyczną z sekwencją aminokwasową regionu Fc znajdywanego w naturze. Ludzkie regiony Fc o sekwencji natywnej są pokazane na fig. 23 i obejmują region Fc ludzkiej IgG1 o sekwencji natywnej (allotypy nie-A i A); region Fc ludzkiej IgG2 o sekwencji natywnej; region Fc ludzkiej IgG3 o sekwencji natywnej i region Fc ludzkiej IgG4 o sekwencji natywnej jak również ich naturalnie występujące warianty. Mysie regiony Fc o sekwencji natywnej są również pokazane na fig. 23. Inne przykłady regionów Fc o sekwencji natywnej obejmują region Fc ludzkiej IgA o sekwencji natywnej i region Fc ludzkiej IgD o sekwencji natywnej.
„Wariant regionu Fc” obejmuje sekwencję aminokwasową, która różni się od sekwencji regionu Fc o sekwencji natywnej co najmniej jedną „modyfikacją aminokwasową”. Korzystne jest, jeżeli wariant regionu Fc ma co najmniej jedno podstawienie aminokwasowe w porównaniu do regionu Fc o sekwencji natywnej albo regionu Fc polipeptydu rodzicielskiego, np. od jednego do około dziesięciu podstawień aminokwasowych, korzystnie od około jednego do około pięciu podstawień aminokwasowych w regionie Fc o sekwencji natywnej albo regionie Fc polipeptydu rodzicielskiego. Korzystnie będzie,
PL 213 948 B1 jeżeli rozważany tu wariant regionu Fc ma co najmniej około 80% identyczności sekwencji z regionem Fc o sekwencji natywnej albo regionem Fc polipeptydu rodzicielskiego, najkorzystniej co najmniej około 90% identyczności, korzystniej co najmniej około 95% identyczności.
„Homologia” jest zdefiniowana jako procent reszt w sekwencji aminokwasowej wariantu, które są identyczne po dopasowaniu sekwencji i wprowadzeniu przerw, jeżeli to konieczne, dla uzyskania maksymalnego procentu homologii. Metody i programy komputerowe do dopasowania są dobrze znane w tej dziedzinie. Jednym z takich programów komputerowych jest „Align 2” autorstwa Genentech, Inc., który został złożony z dokumentacją w biurze United States Copyright Office, Washington, DC 20559, 10 grudnia, 1991.
Terminy „receptor Fc” albo „FcR” są stosowane dla opisania receptora, który wiąże się z regionem Fc przeciwciała. Korzystnym FcR jest ludzki FcR o sekwencji natywnej. Ponadto, korzystnym FcR jest taki, który wiąże się z przeciwciałem IgG (receptorem gamma) i obejmuje receptory podklas FcyRI, FcyRII oraz FcyRIII, włączając w to warianty alleliczne i formy tych receptorów powstałe w wyniku alternatywnego składania. Receptory FcyRII obejmują FcyRIIA („receptor aktywujący”) i FcyRIIB („receptor hamujący”), które mają podobne sekwencje aminokwasowe, różniące się głównie w domenach cytoplazmatycznych. Receptor aktywujący FcyRIIA zawiera w swojej domenie cytoplazmatycznej immunoreceptorowy, oparty o tyrozynę motyw aktywacyjny (ITAM, od ang. immunoreceptor tyrosine-based activation motif). Receptor hamujący FcyRIIB zawiera w swojej domenie cytoplazmatycznej immunoreceptorowy, oparty o tyrozynę motyw hamujący (ITIM, od ang. immunoreceptor tyrosine-based inhibition motif) (patrz praca przeglądowa Daeron, Annu. Rev. Immunol. 15: 203-234 (1997)). Omawiane tu receptory Fc obejmują dwa znane, występujące naturalnie allotypy, FcyRII (H131) i FcyRII (R131), ludzki FcyRII który został zidentyfikowany na podstawie aminokwasu w pozycji 131 (Clark i wsp. J. Immunol. 143: 1731-1734 (1989)) oraz występujące naturalnie allotypy ludzkiego FcyRIIIA. Ludzki FcyRIIIA ma naturalnie występujące allotypy w pozycji 48 (Leu, His lub Arg) i w pozycji 158 (Val lub Phe). Allotyp FcyRIIIA (V158) oddziałuje z ludzką IgG lepiej niż allotyp FcyRIIIA (F158) (Shields i wsp. J. Biol. Chem. 276: 6591-6604 (2001); Koene i wsp. Blood 90: 1109-1114 (1997) oraz Wu i wsp. J. Clin. Invest. 100: 1059-1070 (1997)). Przegląd FcR jest w Ravetch i Kinet, Annu. Rev. Immunol 9: 457-92 (1991); Capel i wsp., Immunomethods 4: 25-34 (1994) oraz de Haas i wsp., J. Lab. Clin. Med. 126: 330-41 (1995). Inne FcR, włączając w to te, które będą zidentyfikowane w przyszłości, są tu objęte terminem „FcR”. Termin obejmuje również receptor noworodkowy, FcRn, który jest odpowiedzialny za przeniesienie matczynych IgG do płodu (Guyer i wsp., J. Immunol. 117: 587 (1976) oraz Kim i wsp., J. Immunol 24: 249 11994)).
„Cytotoksyczność z udziałem komórek zależna od przeciwciała” i „ADCC” dotyczą reakcji z udziałem komórek, w której niespecyficzne komórki cytotoksyczne, które wyrażają receptory Fc (FcR) (np. komórki naturalnych zabójców, ang. Natural Killer (NK), komórki obojętnochłonne i makrofagi) rozpoznają związane przeciwciało na komórce docelowej, a następnie powodują lizę komórki docelowej. Komórki pierwotne uczestniczące w ADCC, komórki NK, wyrażają jedynie FcyRIII, podczas gdy monocyty wyrażają FcyRI, FcyRII i FcyRIII. Ekspresja FcR na komórkach krwiotwórczych jest zestawiona w tabeli 3 na stronie 464 w Ravetch i Kinet, Annu. Rev. Immunol 9: 457-92 (1991).
„Ludzkie komórki efektorowe” to leukocyty, które wyrażają jedną albo większą liczbę FcR i pełnią funkcje efektorowe. Korzystne jest, jeżeli komórki wyrażają co najmniej FcyRIII i pełnią funkcje efektorowe ADCC. Przykłady ludzkich leukocytów, które pośredniczą w ADCC obejmują jednojądrzaste komórki z krwi obwodowej (PBMC), komórki naturalnych zabójców (NK), monocyty, cytotoksyczne komórki T i komórki obojętnochłonne; przy czym korzystne są komórki PBMC i NK. Komórki efektorowe można izolować z naturalnych źródeł, np. z krwi albo PBMC, jak tu opisano.
„Region zawiasowy” jest generalnie zdefiniowany jako rozciągający się od około Glu216 lub od około Cys226 do około Pro230 ludzkiej IgG1 (Burton, Molec. Immunol. 22: 161-206 (1985)). Regiony zawiasowe innych izotypów IgG można dopasować do sekwencji IgG1 poprzez umieszczenie pierwszej i ostatniej cysteiny tworzącej wiązania S-S wewnątrz łańcucha ciężkiego w tej samej pozycji.
„Niższy region zawiasowy” regionu Fc jest normalnie zdefiniowany jako ciąg reszt położony bezpośrednio po stronie C regionu zawiasowego, tj. reszty 233 do 239 regionu Fc.
Termin „domena CH2” jak używa się w niniejszym opisie jest tu stosowany dla opisania domeny
CH2 mającej pojedyncze miejsce przyłączenia co najmniej jednego oligosacharydu poprzez N, generalnie przy Asn297. Jest charakterystyczne dla glikoproteiny według niniejszego wynalazku, że zawiera albo może być tak zmodyfikowana aby zawierać co najmniej jedną domenę CH2 mającą przyłączony poprzez N oligosacharyd domeny CH2 ludzkiej IgG. Korzystne jest, jeżeli domeną CH2 jest dome16
PL 213 948 B1 na CHy2 ludzkiej IgG. Domena CH2 ludzkiej IgG zwykle rozciąga się od aminokwasu około 231 do aminokwasu około 340 regionu Fc, stosując indeks EU do numerowania reszt łańcucha ciężkiego immunoglobuliny.
„Domena CH3” zawiera ciąg reszt C-końcowych w stosunku do domeny CH2 regionu Fc (tj. od reszty aminokwasowej około 341 do reszty aminokwasowej około 447 IgG).
Terminy „aminokwasy” i „aminokwas” dotyczą wszystkich występujących naturalnie alfaaminokwasów, w obydwu formach stereoizomerycznych oraz ich analogów i pochodnych. Analog jest zdefiniowany jako podstawienie atomu w aminokwasie innym atomem, który ma zwykle podobne właściwości. Pochodna jest zdefiniowana jako aminokwas, który ma przyłączoną inną cząsteczkę albo atom. Pochodne będą obejmować, na przykład acetylację grupy aminowej, aminację grupy karboksylowej lub oksydację reszt siarkowych dwóch cząsteczek cysternowych z wytworzeniem cysteiny.
Stosowany tu termin „polipeptyd” dotyczy generalnie peptydów i białek mających więcej niż około dziesięć aminokwasów. Polipeptydy mogą być homologiczne względem komórki gospodarza, w której są wyrażane lub, korzystnie, mogą być egzogenne, co oznacza, że są one heterologiczne, tj. obce względem zastosowanej komórki gospodarza, tak jak w przypadku chimerowych, humanizowanych lub ludzkich przeciwciał wytwarzanych przez komórkę CHO.
Termin „przeciwciało” jest tu stosowany w najszerszym znaczeniu i obejmuje przeciwciała monoklonalne (włączając w to przeciwciała monoklonalne pełnej długości), przeciwciała poliklonałne, przeciwciała multispecyficzne (np. przeciwciała bispecyficzne) i fragmenty przeciwciał o ile wykazują one pożądaną aktywność biologiczną.
„Fragmenty przeciwciał” zdefiniowane dla potrzeb niniejszego wynalazku obejmują część nienaruszonego przeciwciała, na ogół zawierającą miejsce wiązania antygenu nienaruszonego przeciwciała lub region Fc przeciwciała. Przykłady fragmentów przeciwciał obejmują przeciwciała liniowe; cząsteczki przeciwciał jednołańcuchowych i przeciwciała multispecyficzne utworzone z fragmentów przeciwciał.
Stosowany tu termin „przeciwciało monoklonalne” dotyczy przeciwciała otrzymanego z populacji zasadniczo homogennych przeciwciał, tj. poszczególne przeciwciała zawarte w populacji są identyczne z wyjątkiem możliwych naturalnie występujących mutacji, które mogą być obecne w niewielkiej liczbie. Przeciwciała monoklonalne są wysoce specyficzne, będąc skierowanymi wobec pojedynczego miejsca antygenowego. Ponadto, w przeciwieństwie do preparatów przeciwciał poliklonalnych, które zawierają różne przeciwciała skierowane przeciw różnym determinantom (epitopom), każde przeciwciało monoklonalne jest skierowane przeciw pojedynczej determinancie antygenu. Określenie „monoklonalny” nie ma być traktowane jako wymaganie odnośnie wytwarzania przeciwciała jakąś konkretną metodą. Przykładowo, monoklonalne przeciwciała do zastosowania zgodnie z niniejszym wynalazkiem mogą być wytwarzane metodą hybrydom po raz pierwszy opisaną przez Kohler i wsp., Nature, 256: 495 (1975) albo wytwarzane metodami rekombinowania DNA (patrz np. patent USA nr 4 816 567). „Przeciwciała monoklonalne” można również izolować z fagowych bibliotek przeciwciałowych przy zastosowaniu technik opisanych na przykład w Clackson i wsp., Nature, 352: 624-628 (1991) oraz Marks i wsp., J. Mol. Biol., 222: 581-597 (1991).
Stosowane tu przeciwciała monoklonalne obejmują w szczególności przeciwciała (immunoglobuliny) „chimerowe”, w których część łańcucha lekkiego i/lub ciężkiego jest identyczna albo homologiczna z odpowiadającymi im sekwencjami przeciwciał pochodzących z określonych gatunków albo należących do określonej klasy przeciwciał, podczas gdy reszta łańcucha(ów) jest identyczna albo homologiczna z odpowiednimi sekwencjami przeciwciał pochodzących z innego gatunku albo należących do określonej klasy albo podklasy przeciwciał, jak również fragmenty takich przeciwciał tak długo, jak wykazują one pożądaną aktywność biologiczną (patent USA nr 4 816 567 oraz Morrison i wsp., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 81: 6851-6855 (1984)).
„Humanizowane” postaci przeciwciał nie-ludzkich (np. mysich) to chimerowe przeciwciała, które zawierają minimalną sekwencję pochodzącą z immunoglobuliny nie-ludzkiej. W większości przypadków, humanizowane przeciwciała są ludzkimi immunoglobulinami (przeciwciało-biorca), w którym reszty z regionu hiperzmiennego biorcy są zastąpione resztami hiperzmiennego regionu przeciwciała z gatunku innego niż człowiek (przeciwciało donorowe), takiego jak mysz, szczur, królik albo naczelny nie-człowiek, mającego pożądaną specyficzność, powinowactwo i pojemność. W niektórych przypadkach, reszty regionu zrębowego (FR) ludzkiej immunoglobuliny są zastąpione przez odpowiadające im reszty nie-ludzkie. Ponadto humanizowane przeciwciała mogą zawierać reszty, które nie są znajdywane w przeciwciele biorcy ani w przeciwciele donorowym. Tych modyfikacji dokonuje się w celu dalPL 213 948 B1 szej zmiany właściwości przeciwciała. Generalnie, humanizowane przeciwciała będą zawierały zasadniczo wszystkie spośród co najmniej jednej, a typowo dwóch domen zmiennych, w których wszystkie albo zasadniczo wszystkie pętle hiperzmienne odpowiadają tym z immunoglobulin nie-ludzkich i wszystkie albo zasadniczo wszystkie FR są z sekwencji immunoglobuliny ludzkiej. Humanizowane przeciwciała będą ewentualnie zawierały co najmniej cześć regionu stałego immunoglobuliny (Fc), typowo z immunoglobuliny ludzkiej. Dla dalszych szczegółów patrz Jones i wsp., Nature 321: 522-525 (1986); Riechmann i wsp., Nature 332: 323-329 (1988) oraz Presta, Curr. Op. Struct. Biol 2: 593-596 (1992).
„Przeciwciało ludzkie” to takie, które ma sekwencję aminokwasową, która odpowiada sekwencji przeciwciała wytwarzanego przez człowieka i/lub zostało wytworzone przy zastosowaniu dowolnej z ujawnionych tu technik wytwarzania ludzkich przeciwciał. Definicja ludzkiego przeciwciała specyficznie wyklucza przeciwciało humanizowane zawierające nie-ludzkie reszty wiążące antygen. Ludzkie przeciwciała można wytwarzać przy zastosowaniu różnych technik znanych w tej dziedzinie. W jednym z wykonań, ludzkie przeciwciało wybiera się z biblioteki fagowej, gdzie ta biblioteka fagowa wyraża ludzkie przeciwciała (Vaughan i wsp. Nature Biotechnology 14: 309-314 (1996): Sheets i wsp. PNAS (USA) 95: 6157-6162 (1998)); Hoogenboom i Winter, J. Mol. Biol., 227: 381 (1991); Marks i wsp., J. Mol. Biol., 222: 581 (1991)). Ludzkie przeciwciała można również wytwarzać poprzez wprowadzenie ludzkich Ioci immuboglobulinowych do transgenicznych zwierząt np. myszy, u których endogenne geny immuboglobulinowe zostały częściowo albo całkowicie zinaktywowane. Po prowokacji, obserwowane jest wytwarzanie ludzkich przeciwciał ściśle przypominające to, co obserwuje się u ludzi we wszystkich aspektach, włączając w to rearanżację genu, składanie i repetruar przeciwciał. Podejście to jest opisane na przykład w patentach USA nr 5 545 807; nr 5 545 806; nr 5 569 825; nr 5 625 126; nr 5 633 425; nr 5 661 016 oraz następujących publikacjach naukowych: Marks i wsp., Bio/Technology 10: 779-783 (1992); Lonberg i wsp., Nature 368: 856-859 (1994); Morrison, Nature 368: 812-13 (1994); Fishwild i wsp., Nature Biotechnology 14: 845-51 (1996); Neuberger, Nature Biotechnology 14: 826 (1996); Lonberg i Huszar, Intern. Rev. Immunol. 13: 65-93 (1995). Alternatywnie, ludzkie przeciwciało można otrzymać poprzez unieśmiertelnianie ludzkich limfocytów B wytwarzających przeciwciało skierowane wobec docelowego antygenu (takie limfocyty B można pobrać z osobnika albo mogą być iramunizowane in vitro). Patrz np., Cole i wsp., Monoclonal Antibodies and Cancer Therapy, Alan R. Liss, p. 77 (1985); Boerner i wsp., J. Immunol., 147 (1): 86-95 (1991) oraz patent USA nr 5 750 373.
Stosowany tu termin „region hiperzmienny” odnosi się do reszt aminokwasowych przeciwciała, które są odpowiedzialne za wiązanie antygenu. Region hiperzmienny generalnie obejmuje reszty aminokwasowe z „regionu determinującego dopasowanie” albo „CDR” (tj. reszty 24-34 (L1), 50-56 (L2) i 89-97 (L3) w domenie zmiennej łańcucha lekkiego i 31-35 (H1), 50-65 (H2) i 95-102 (H3) w domenie zmiennej łańcucha ciężkiego; Kabat i wsp., Sequences of Proteins of Immunological Interest, wyd. 5, Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, MD. (1991) i/lub reszty z „pętli hiperzmiennej” (tj. reszty 26-32 (L1), 50-52 (L2) i 91-96 (L3) w domenie zmiennej łańcucha lekkiego oraz 26-32 (H1), 53-55 (H2) i 96-101 (H3) w domenie zmiennej łańcucha ciężkiego; Chothia i Lesk, J. Mol. Biol., 196: 901-917 (1987)). Resztami „regionu zrębowego” lub „FR” są reszty domeny zmiennej inne niż zdefiniowane tu reszty regionu hiperzmiennego.
Stosowany tu termin „immunoadhezyna” oznacza cząsteczki typu przeciwciała, które stanowią połączenie „domeny wiążącej” heterologicznego białka „adhezyny” (np. receptora, ligandu lub enzymu) z domeną stałą immunoglobulin. Strukturalnie, immunoadhezyny są fuzją sekwencji aminokwasowej adhezyny z pożądaną specyficznością wiązania, która jest inna niż miejsce rozpoznawania i miejsca wiązania antygenu (miejsca przyłączania antygenu) przeciwciała (tj. jest „heterologiczną”) i sekwencji domeny stałej immunoglobuliny.
Stosowany tu termin „domena wiążąca ligand” dotyczy dowolnego natywnego receptora na powierzchni komórki albo jego dowolnego regionu lub pochodnej zachowującej co najmniej jakościową zdolność wiązania ligandu odpowiadającego mu receptora natywnego. W konkretnym wykonaniu, receptor pochodzi z białka powierzchniowego mającego domenę zewnątrzkomórkową, który jest homologiczny do członka nadrodziny genowej immunoglobulin. Innymi receptorami, które nie są członkami nadrodziny genowej immunoglobulin, ale pomimo tego są objęte tą definicją są receptory dla cytokin, a w szczególności receptory z aktywnością kinazy tyrozynowej (receptorowe kinazy tyrozynowe), przedstawiciele nadrodzin hemopoetyny i receptora czynnika wzrostu nerwów oraz cząsteczki związane z adhezją komórkową, np. selektyny (E-, L- i P).
PL 213 948 B1
Termin „domena wiążąca receptor” jest stosowany dla oznaczenia dowolnego natywnego ligandu dla receptora, włączając w to cząsteczki związane z adhezją komórkową, albo dowolnego regionu lub pochodnej takiego natywnego ligandu, zachowującej co najmniej jakościową zdolność wiązania receptora odpowiadającego mu natywnego ligandu. Ta definicja, miedzy innymi, obejmuje konkretnie sekwencje ligandów dla wspominanych powyżej receptorów.
„Chimera przeciwciało-immunoadhezyna” obejmuje cząsteczkę, która stanowi połączenie co najmniej jednej domeny wiążącej przeciwciała (jak tu zdefiniowano) z co najmniej jedną immunoadhezyną (jak zdefiniowano w tym opisie). Przykładowymi chimerami przeciwciało-immunoadhezyna są bispecyficzne chimery CD4-IgG jak opidsano w Berg i wsp., PNAS (USA) 88: 4723-4727 (1991) oraz Chamow i wsp., J. Immunol. 153: 4268 (1994).
Termin „preparat” jest tu zastosowany dla zdefiniowania kompozycji lub glikoproteiny, która została zidentyfikowana i wydzielona i/lub odzyskana ze składników jego otoczenia. Składniki zanieczyszczające z jego otoczenia to materiały, które przeszkadzałyby w zastosowaniach diagnostycznych i «ft, terapeutycznych kompozycji lub glikoproteiny i mogą obejmować enzymy, hormony i inne białkowe albo niebiałkowe substancje rozpuszczone. Preparat według wynalazku jest zasadniczo wolny od tych zanieczyszczeń. W korzystnych wykonaniach, preparat glikoproteiny będzie oczyszczony (1) do ponad 95% przeciwciała, wagowo, przy określaniu metodą Lowry, a korzystniej do ponad 99% wagowo, (2) do stopnia dostatecznego dla otrzymania co najmniej 15 reszt N-końcowej albo wewnętrznej sekwencji aminokwasowej poprzez zastosowanie separatora wirówkowego albo (3) do homogenności określanej poprzez SDS-PAGE w warunkach redukujących albo nie redukujących przy zastosowaniu barwienia błękitem Coomassie albo korzystniej barwienia srebrem.
Dla obecnych potrzeb „preparat farmaceutyczny” to taki, który jest przystosowany i odpowiedni do podawania ssakowi, a w szczególności człowiekowi. A zatem, kompozycję można zastosować do leczenia choroby albo schorzenia ssaka. Ponadto, glikoproteina, która jest aktywnym składnikiem kompozycji, została poddana jednemu lub większej liczbie etapów oczyszczania lub izolacji tak, że zanieczyszczenie(a), które mogłyby przeszkadzać w jej zastosowaniu terapeutycznemu zostały od niej oddzielone. Generalnie, kompozycja farmaceutyczna zawiera glikoproteinę i dopuszczalny farmaceutycznie nośnik lub rozcieńczalnik, przykłady których są opisane poniżej. Ten preparat jest zazwyczaj jałowy i może być zliofiiizowany.
Dla celów niniejszego wynalazku „glikoproteina rodzicielska” to glikoproteina mająca taką samą sekwencję aminokwasową i strukturę dojrzałego węglowodanu rdzeniowego jak wariant glikoproteiny według niniejszego wynalazku, z tą różnicą, że fukoza jest przyłączona do struktury dojrzałego węglowodanu rdzeniowego. Przykładowo, w kompozycji zawierającej glikoproteinę rodzicielska, około 50-100% albo około 70-100% glikoproteiny rodzicielskiej zawiera strukturę dojrzałego węglowodanu rdzeniowego mającą przyłączoną fukozę.
Wariant glikoproteiny, który wiąże się z FcR z „lepszym powinowactwem” niż rodzicielska glikoproteina, jest takim, który wiąże się z dowolnym, jednym albo większą liczbą zidentyfikowanych powyżej FcR z zasadniczo lepszym powinowactwem wiązania niż rodzicielska glikoproteina, kiedy ilości wariantu glikoproteiny i glikoproteiny rodzicielskiej w teście wiązania są zasadniczo takie same. Przykładowo, wariant o zwiększonym powinowactwie wiązania FcR może wykazywać od około 5-krotnego do około 1000-krotnego, np. od około 10-krotnego do około 500-krotnego polepszenia powinowactwa wiązania FcR w porównaniu z glikoproteiną rodzicielską, gdzie powinowactwa wiązania FcR jest określane na przykład jak ujawniono tu w przykładach.
Wariant glikoproteiny, który „pośredniczy w zależnej od przeciwciała cytotoksyczności z udziałem komórek (ADCC) w obecności ludzkich komórek efektorowych bardziej skutecznie” niż rodzicielski polipeptyd, to taki, który in vitro lub in vivo jest zasadniczo bardziej skuteczny w pośredniczeniu w ADCC, kiedy ilości wariantu glikoproteiny i glikoproteiny rodzicielskiej użyte w teście są zasadniczo takie same. Generalnie, takie warianty glikoproteiny będą zidentyfikowane przy zastosowaniu testu ADCC in vitro jak tu ujawniono, ale bierze się również pod uwagę inne testy i metody określania aktywności ADCC np. w modelach zwierzęcych, itd. Korzystny wariant glikoproteiny jest około 1,5 razy do około 100 razy, np. od około dwóch razy do około pięćdziesięciu razy bardziej skuteczny w pośredniczeniu w ADCC niż glikoproteina rodzicielska, np. w ujawnionym tu teście in vitro.
„Modyfikacja aminokwasowa” dotyczy zmiany w sekwencji aminokwasowej ustalonej uprzednio sekwencji aminokwasowej. Przykładowe modyfikacje obejmują podstawienia, insercje i/lub delecje aminokwasów. Korzystną modyfikacją aminokwasową jest tu podstawienie.
PL 213 948 B1 „Modyfikacja aminokwasowa” w konkretnej pozycji, np. regionu Fc, oznacza podstawienie lub delecję wskazanej reszty albo insercję co najmniej jednej reszty obok wskazanej reszty. Insercja „obok” wskazanej reszty oznacza insercję w odstępie jednej do dwóch reszt. Insercja może być N-końcowe lub C-końcowe w stosunku do wskazanej reszty.
„Podstawienie aminokwasowe” oznacza zastąpienie co najmniej jednej istniejącej reszty aminokwasowej w ustalonej uprzednio sekwencji aminokwasowej inną „zastępującą” resztą aminokwasową. Zastępująca reszta lub reszty mogą być „resztami aminokwasowymi występującymi naturalnie”, (tj. kodowanymi przez kod genetyczny) i wybranymi z grupy składającej się z: alaniny (Ala); argininy (Arg); asparaginy (Asn); kwasu asparaginowego (Asp); cysteiny (Cys); glutaminy (Gln); kwasu glutaminowego (Glu); glicyny (Gly); histydyny (His); izoleucyny (He); leucyny (Leu); lizyny (Lys); metioniny (Met); fenyloalaniny (Phe); proliny (Pro); seryny (Ser); treoniny (Thr); tryptofanu (Trp); tyrozyny (Tyr) i waliny (Val). Korzystne jest, jeżeli zastępującą resztą nie jest cysteina. Podstawienie jedną albo większą liczbą reszt aminokwasowych nie występujących naturalnie jest tu również objęte definicją podstawienia aminokwasowego.
„Reszta aminokwasowa nie występująca naturalnie” dotyczy reszty innej niż występujące naturalnie reszty wymienione powyżej, która ma zdolność do wiązania się kowalencyjnie z sąsiednią resztą(-ami) w łańcuchu polipeptydowym. Przykłady reszt aminokwasowych nie występujących naturalnie obejmują norleucynę, ornitynę, norwalinę, homoserynę i inne analogi reszt aminokwasowych, takie jak te opisane w Ellman i wsp. Meth. Enzym. 202: 301-336 (1991). W celu wytworzenia takich reszt aminokwasowych nie występujących naturalnie można zastosować procedury z Noren i wsp. Science 244: 182 (1989) oraz Ellman i wsp., jak wyżej. Pokrótce, procedury te obejmują, aktywację chemiczną supresorowego tRNA resztą aminokwasową nie występującą naturalnie, a następnie transkrypcję i translację RNA in vitro.
„Insercja aminokwasowa” dotyczy wstawienia co najmniej jednego aminokwasu do ustalonej uprzednio sekwencji aminokwasowej. Jakkolwiek insercja zwykle stanowi wstawienie jednej albo dwóch reszt aminokwasowych, niniejsze zgłoszenie bierze pod uwagę większe „insercje peptydowe”, np. wstawienia od około trzech do około pięciu albo nawet do około dziesięciu reszt aminokwasowych. Wstawiona reszta(y) mogą być występującymi naturalnie albo nie występującymi naturalnie, jak ujawniono powyżej.
„Delecja aminokwasowa” oznacza usunięcie co najmniej jednej reszty aminokwasowej z ustalonej uprzednio sekwencji aminokwasowej.
„Clq” to polipeptyd, który zawiera miejsce wiązania dla regionu Fc immunoglobuliny. Clq razem z dwiema proteazami serynowymi, Clr i Cis, tworzą kompleks Cl, pierwszy składnik szlaku cytotoksyczności zależnej od dopełniacza (CDC, od ang. complement dependent cytotoxicity). Ludzki Clq można kupić, np. z Quidel, San Diego, CA.
„Leczenie” odnosi się zarówno do traktowania terapeutycznego i profilaktycznego albo środków zapobiegawczych. Potrzebujący leczenia obejmują tych, u których już występuje choroba, jak również tych, u których chce się zapobiec chorobie.
„Schorzenie lub choroba” to jakikolwiek stan, w którym odnosi się korzyści z leczenia glikoproteiną. Obejmuje to przewlekłe i ostre choroby i schorzenia, włączając w to stany patologiczne, które predysponują ssaka do wystąpienia choroby będącej przedmiotem zainteresowania. W jednym z wykonań chorobą jest rak, choroba autoimmunologiczna, choroba zapalna, infekcja i inny stan, taki jak wole, gdzie pożądane jest usunięcie niepożądanej tkanki albo komórek. Korzystną chorobą lub schorzeniem, które ma być tu leczone jest rak albo choroba autoimmunologiczna.
Terminy „rak i rakowaty” dotyczą albo opisują stan fizjologiczny u ssaków, który typowo charakteryzuje się nieregulowanym wzrostem komórkowym. Przykłady raka obejmują między innymi raka, chłoniaka, raka z niedojrzałych komórek, mięśniaka oraz białaczkę. Bardziej konkretnie przykłady takich raków obejmują raka płaskokomórkowego, raka płuc z małych komórek, raka płuc nie z małych komórek, gruczolakoraka płuc, płaskokomórkowego raka płuc, raka otrzewnej, raka wątrobokomórkowego, raka żołądka, włączając w to raka żołądkowo-jelitowego, raka trzustki, glejaka, raka szyjki macicy, raka jajnika, raka wątroby, raka pęcherza, wątrobiaka, raka sutka, raka okrężnicy, raka odbytnicy, raka jelita grubego, raka śluzówki macicy lub macicy, raka gruczołu śliniankowego, raka nerki, raka prostaty, raka sromu, raka tarczycy, raka wątroby i różne typy raka głowy i szyi.
„Rak komórek B” obejmuje tu chłoniaka nieziarniczego (NHL, ang. non-Hodkin's lymphoma), włączając w to NHL grudkowego/o niskiej złośliwości; NHL z małych limfocytów (SL, ang. small lymphocytic), grudkowego chłoniaka nieziarniczego (NHL) o średniej złośliwości, rozlanego NHL o śred20
PL 213 948 B1 niej złośliwości, NHL immunoblastycznego o wysokiej złośliwości, NHL Iimfoblastycznego o wysokiej złośliwości, NHL z małych komórek o szczelinowatym jądrze o wysokiej złośliwości, masywną chorobę NHL, chłoniaka z komórek płaszcza, chłoniaka związanego z AIDS oraz makroglobulinemię Waldenstroma); białaczkę, włączając w to ostrą białaczkę Iimfoblastyczną (ALL, ang. acute lymphoblastic leukemia), przewlekłą białaczkę limfocytową (CLL, ang. chronic lymphocytic leukemia), białaczkę kosmatokomórkową, przewlekłą białaczkę szpikową i inne nowotwory hematologiczne. Takie nowotwory można leczyć przeciwciałami skierowanymi przeciw markerom powierzchniowym komórek B, takim jak CD20.
Rak „niezależny od hormonu” to taki, którego proliferacja nie jest zależna od obecności hormonu, który wiąże się z receptorem wyrażanym przez komórki raka. Takie raki nie podlegają klinicznej regresji po zastosowaniu strategii farmakologicznych albo chirurgicznych, które zmniejszają stężenie hormonu w pobliżu guza. Przykłady raków niezależnych od hormonu obejmują niezależnego od androgenu raka prostaty, niezależnego od estrogenu raka sutka, raka śluzówki macicy i raka jajnika. Takie raki mogą zaczynać się jako guzy zależne od hormonu i rozwijać się od stadium zależnego od hormonu do opornego na hormon po terapii przeciwhormonalnej.
„Choroba autoimmunologiczna” jest tu nienowotworową chorobą lub schorzeniem powstającą z i skierowaną przeciw własnym tkankom osobnika. Przykłady chorób i schorzeń autoimmunologicznych obejmują między innymi odpowiedzi zapalne, takie jak choroby zapalne skóry włączając w to łuszczycę i zapalenie skóry (np. atopowe zapalenie skóry); ogólnoustrojową twardzinę i stwardnienie; odpowiedzi związane z chorobą zapalną jelita grubego (takie jak choroba Crohna i wrzodziejące zapalenie okrężnicy); zespół ostrego wyczerpania oddechowego (włączając w to zespół ostrego wyczerpania oddechowego dorosłych; ARDS); zapalenie skóry; zapalenie opon mózgowych; zapalenie mózgu; zapalenie błony naczyniowej oka; zapalenie okrężnicy; zapalenie kłębuszków nerkowych; stany alergiczne, takie jak egzema i astma oraz inne stany związane z naciekaniem komórek T i przewlekłymi odpowiedziami zapalnymi; miażdżycę tętnic; niedobór adhezji leukocytów; reumatoidalne zapalenie stawów; toczeń ogólnoustrojowy (SLE, ang. systemie lupus erythematosus); cukrzycę (np. cukrzycę typu I lub cukrzycę insulinozależną); stwardnienie rozsiane; zespół Reynauda; autoimmunologiczne zapalenie tarczycy; alergiczne zapalenie mózgu i rdzenia; zespół Sjorgena; cukrzycę młodzieńczą i choroby autoimmunologiczne związane z ostrą albo przewlekłą nadwrażliwością z udziałem cytokin i limfocytów T typowo występującą w gruźlicy, sarkoidozie, zapaleniu wielomięśniowym, ziarniniakowatości i zapaleniu naczyń; anemię złośliwą (choroba Addisona)); choroby związane z diapedezą leukocytów; choroby zapalne centralnego układu nerwowego (CNS, ang. central nervous system); zespół uszkodzenia wielonarządowego; anemię hemolityczną (włączając w to między innymi krioglobinemię lub anemię Coombs dodatnią); poważne osłabienie mięśni; choroby z udziałem kompleksu antygen-przeciwciało; chorobę przeciw kłębuszkowej błonie podstawnej; zespół antyfosfolipidowy; alergiczne zapalenie nerwu; chorobę Gravesa; zespół miasteniczny Lamberta-Eatona; pęcherze pęcherzycopodobne; pęcherzycę; autoimmunizacyjne poliendokrynopatie; chorobę Reitera; zespół sztywnienia; chorobę Behceta; wielkokomórkowe zapalenie tętnic; zapalenie nerek związane z kompleksem immunologicznym; nefropatię IgA; polineuropatie IgM; immunologiczną plamicę małopłytkową (ITP, ang. immune thrombocytopenic purpura) lub immunologiczną małopłytkowość, etc.
„Choroba zapalna” dotyczy stanów patologicznych będących wynikiem zapalenia, typowo powodowanego przez chemotaksję komórek obojętnochłonnych. Przykłady takich chorób obejmują choroby zapalne skóry, włączając w to włączając w to łuszczycę i atopowe zapalenie skóry; uogólnioną twardzinę i stwardnienie; odpowiedzi związane z chorobą zapalną jelita grubego (takie jak choroba Crohna i wrzodziejące zapalenie okrężnicy); choroby związane z reperfuzją niedokrwienną obejmujące operacyjne reperfuzyjne uszkodzenie tkanek, stany niedokrwienne serca, takie jak zawał mięśnia sercowego, zatrzymanie serca, reperfuzja po operacji serca i zwężenie po przezświatłowej wieńcowej angioplastyce bez naruszania skóry, udar i tętniak tętnicy brzusznej; obrzęk mózgowy po udarze; uraz czaszki; szok oligemiczny; zamartwicę; zespół ostrego wyczerpania oddechowego dorosłych; ostre uszkodzenie płuc; chorobę Behceta; zapalenie skórno-mięśniowe; zapalenie opon mózgowych; zapalenie mózgu; zapalenie błony naczyniowej oka; gościec zwyradniający; zapalenie nerek w toczniu rumieniowatym układowym; choroby autoimmunologiczne, takie jak reumatoidalne zapalenie stawów, zespół Sjorgena, zapalenie naczyń; choroby związane z diapedezą leukocytów; choroby zapalne centralnego układu nerwowego (CNS, ang. central nervous system); zespół uszkodzenia wielonarządowego po posoczniczy lub urazie; zapalenie wątroby u alkoholików, bakteryjne zapalenie płuc; choroby z udziałem kompleksu antygen-przeciwciało, włączając w to zapalenie kłębuszków nerkowych; poPL 213 948 B1 socznicę; sarkoidozę; immunopatologiczne odpowiedzi na transplantację tkanki/narządu; zapalenia płuc, włączając w to zapalenie opłucnej, zapalenie pęcherzyków płucnych, zapalenie naczyń, zapalenie płuc, przewlekłe zapalenie oskrzeli, rozstrzenie oskrzelowe, rozlane uogólnione zapalenie oskrzeklików, zapalenie płuc związane z nadwrażliwością, samoistne zwóknienie płuc (IPF od ang. idiopathic pulmonary fibrosis) i mukowiscydozę, itd. Korzystne wskazania obejmują ostre uszkodzenie płuc, zespół ostrego wyczerpania oddechowego dorosłych, reperfuzją niedokrwienną (włączając w to operacyjne reperfuzyjne uszkodzenie tkanek, niedokrwienie mięśnia sercowego i ostry zawał mięśnia sercowego), szok oligemiczny, astmę, bakteryjne zapalenie płuc i chorobą zapalną jelit taką jak wrzodziejące zapalenie okrężnicy. Choroby autoimmunologiczne mogą zachodzić na choroby zapalne a może być tak, że choroby zapalne mogą zachodzić na autoimmunologiczne.
„Blokowanie odpowiedzi immunologicznej” na obcy antygen ma oznaczać zmniejszenie albo zapobieganie co najmniej jednej odpowiedzi z udziałem odporności będącej wynikiem wystawienia na antygen, tj. poprzez zapobieganie albo zmniejszenie wytwarzania przeciwciał skierowanych przeciw antygenowi u ssaka. Alternatywnie albo dodatkowo, można poddawać supresji idiotyp, „pacyfikować” usuwanie komórek opłaszczonych przez przeciwciało i/lub wpływać na prezentację alloantygenu poprzez pozbycie się komórek prezentujących antygen.
„Obcy antygen” ma oznaczać cząsteczkę albo cząsteczki, która jest/są nie-endogenna(e) albo natywna(e) dla ssaka, który jest wystawiony na ich działanie. Obcy antygen może wzbudzić odpowiedź immunologiczną, np. odpowiedź humoralną i z udziałem komórek T u ssaka. Generalnie, obcy antygen będzie prowokować wytwarzanie przeciwciał przeciw niemu. Przykłady branych tu pod uwagę obcych przeciwciał obejmują immunogenne czynniki terapeutyczne, np. białka, takie jak przeciwciała, a w szczególności przeciwciała zawierające nie-ludzkie reszty aminokwasowe (np. przeciwciała gryzoni, chimerowe/humanizowane i prymatyzowane); toksyny (ewentualnie skoniugowane z cząsteczką docelową, taką jak przeciwciało, gdzie cząsteczka docelowa może być również immunogenna), wektory wirusowe do terapii genowej, takie jak retrowirusy i adenowirusy; przeszczepy, czynniki infekcyjne (np. bakterie i wirusy); alloantygeny (tj. antygeny, które występują u niektórych, ale nie innych przedstawicieli tego samego gatunku), takie jak różnice w typach krwi, antygeny ludzkich limfocytów (HLA, ang. human lymphocyte antigens), antygeny płytek krwi, antygeny wyrażane na przeszczepianych narządach, składniki krwi, czynniki ciążowe (Rh) i hemofilityczne (np. czynnik VIII i czynnik IX).
„Antygen związany z nowotworem” dla obecnych celów to antygen charakteryzujący się wysoką ekspresją na komórkach nowotworowych w porównaniu z komórkami prawidłowymi. Konkretne przykłady obejmują receptory ErbB, markery powierzchniowe komórek B, gangliozyd GD2, GD3 i GM2 (Ragupathi G., Cancer Immunol. Immunother. 43: 152 (1996)); CD52 (Ginaldi i wsp., Leukemia Research 22: 185 (1998)); antygen komórek macierzystych prostaty (PSCA, od ang. prostate stem cell antigen) oraz MAGE (Kirkin i wsp., APMIS 106: 665 (1998)).
„Czynnik angiogenny”, tutaj, to cząsteczka, która stymuluje angiogenezę. Przykłady obejmują czynnik wzrostu śródbłonka naczyń (VEGF, od ang. vascular endothelial growth factor), zasadowy lub kwaśny czynnik wzrostu fibroblastów (FGF, od ang. basic or acidic fibroblast growth factor) oraz pochodzący z płytek krwi czynnik wzrostu komórek śródbłonka Hft (PD-ECGF, od ang. platelet-derived endothelial cell growth factor).
„Receptor ErbB” to receptorowa kinaza tyrozynowa, która należy do rodziny receptora ErbB i obejmuje receptory EGFR, ErbB2, ErbB3 i ErbB4 oraz innych członków tej rodziny, którzy będą zidentyfikowani w przyszłości. Receptor ErbB będzie generalnie zawierać domenę zewnątrzkomórkową, która może wiązać się z ligandem ErbB; lipofilową domenę transbłonową; konserwowaną wewnątrzkomórkową domenę kinazy tyrozynowej oraz karboksykońcową domenę przekazującą sygnały niosącą kilka m reszt tyrozynowych, które mogą być fosforylowane.
Terminy „ErbB1”, „receptor nabłonkowego czynnika wzrostowego” i „EGFR” są tu stosowane wymiennie i odnoszą się do natywnej sekwencji EGFR ujawnionej na przykład w Carpenter i wsp., Ann. Rev. Biochem. 56: 881-914 (1987), włączając w to występujące naturalnie ich zmutowane postaci (np. mutanta delecyjnego EGFR, jak w Humphrey i wsp., PNAS (USA) 87: 4207-4211 (1990)). erbBl odnosi się do genu kodującego produkt białkowy EGFR.
Wyrażenia „ErbB2” i „HER2” są tu stosowane wymiennie i odnoszą się do natywnej sekwencji ludzkiego białka HER2 opisanej na przykład w Semba i wsp., PNAS (USA) 82: 6497-6501 (1985) oraz
Yamamoto i wsp., Nature 319: 230-234 (1986) (numer dostępu do Genebank X03363). Przykłady przeciwciał, które wiążą się z HER2 obejmują MAbs 4D5, 7C4, 7F3 i 7C2 jak również ich humanizowane warianty, włączając w to huMAb4D5-1, huMAb4D5-2, huMAb4D5-3, huMAb4D5-4, huMAb4 D5-5,
PL 213 948 B1 huMAb4D5-6, huMAb4D5-7 i huMAb4D5-8 jak opisano w tabeli 3 patentu USA nr 5 821 337, włączonego tu dokładnie jako odniesienie; oraz humanizowane zmutowane 2C4 nr 560, 561, 562, 568, 569, 570, 571, 574 lub 56869 jak opisano w W001/00245. 7C2 i 7F3 oraz ich humanizowane warianty są opisane w W098/17797. Korzystnymi przeciwciałami są te zawierające ciężkie i lekkie regiony zmienne huMAb4D5-8 albo mutant 574 humanizowanych 2C4.
„Trastuzumab” (HERCEPTIN®) to humanizowane przeciwciało, pochodzące ze zrekombinowanego DNA, które wiąże się z wysokim powinowactwem w teście opartym na komórkach (Kd = 5 nM) z domeną zewnątrzkomórkową HER2. Przeciwciałem jest przeciwciało IgG1, które zawiera regiony zmienne łańcucha ciężkiego i lekkiego wariantu huMAb4D5-8, jak opisano w tabeli 3 patentu USA nr 5 821 337. Przeciwciało jest wytwarzane przez komórki CHO-DP12.
„ErbB3” i „HER3” odnoszą się do polipeptydu receptorowego, jak ujawniono na przykład w patentach USA nr 5 183 884 i 5 480 968, jak również Kraus i wsp., PNAS (USA) 86: 9193-9197 (1989).
Terminy „ErbB4” i „HER4” odnoszą się tu do receptorowego polipeptydu, jak ujawniony na przykład EP zgłoszeniu patentowym nr 599 274; Plowman i wsp., Proc. Natl Acad. Sci USA, 90: 1746-1750 (1993) oraz Plowman i wsp., Nature, 366: 473-475 (1993), włączając w to jego izoformy, np. ujawnione w WO 99/19488, opublikowanym 22 kwietnia, 1999.
„Marker powierzchniowy komórek B” oznacza tu antygen wyrażany na powierzchni komórek B, który może stanowić cel dla przeciwciała, które się do niego wiąże. Przykładowe markery powierzchniowe komórek B obejmują markery powierzchniowe leukocytów CD10, CD19, CD20, CD21, CD22, CD23, CD24, CD37, CD40, CD53, CD72, CD73, CD74, CDw75, CDw76, CD77, CDw7 8, CD7 9a, CD79b, CD80, CD81, CD82, CD83, CDw84, CD85 i CD86. Marker powierzchniowy komórek B będący przedmiotem szczególnego zainteresowania jest preferencyjnie wyrażany na komórkach B w porównaniu do innych tkanek - nie komórek B ssaków i może być wyrażany zarówno na prekursorowych komórkach B, jak i dojrzałych komórkach B. W jednym z wykonań, markerem jest taki, jak CD20 lub CD19, który znajduje się na komórkach B w czasie różnicowania linii od stadium komórki macierzystej aż do punktu tuż przed ostatecznym różnicowaniem w komórki plazmatyczne. Korzystnymi markerami powierzchniowymi komórek B są tu CD19, CD20, CD22 i CD40.
Antygen „CD20” to nieglikozylowana fosfoproteina o wielkości około 35 kDa znajdująca się na powierzchni ponad 90% komórek B z krwi obwodowej albo narządów Iimfatycznych. CD20 jest wyrażany w czasie wczesnego rozwoju komórek pre-B i pozostaje aż do różnicowania się komórek plazmatycznych. CD20 jest obecny zarówno na prawidłowych komórkach B, jak i nowotworowych komórkach B. Inne nazwy dla CD20 w literaturze obejmują „antygen ograniczony do limfocytów B” i „Bp35”. Antygen CD20 jest opisany na przykład w Clark i wsp. PNAS (USA) 82: 1766 (1985).
Przykłady przeciwciał, które wiążą się antygenem CD20 obejmują: „C2B8” które jest teraz nazywane „Rituximab” („RITUXAN®)”) (patent USA nr 5 736 137, włączony tu dokładnie jako odniesienie); wyznakowane itrem[90] mysie przeciwciało 2B8 oznaczone „Y2B8” (patent USA nr 5 736 137,
131 włączony tu dokładnie jako odniesienie); mysie IgG2a „B1” ewentualnie wyznakowane 131I z wytwo131 ™ rzeniem przeciwciała „131I-B1” (BEXXART™) (patent USA nr 5 595 721, włączony tu dokładnie jako odniesienie); mysie przeciwciało monoklonalne „1F5” (Press i wsp. Blood 69 (2): 584-591 (1987)); przeciwciało „chimerowe 2H7” (patent USA nr 5 677 180, włączony tu dokładnie jako odniesienie) oraz monoklonalne przeciwciała L27, G28-2, 93-1 B3, B-C1 lub NU-B2 dostępne z International Leukocyte Typing Workshop (Valentine i wsp., W: Leukocyte Typing III (McMichael, wyd., str. 440, Oxford University Press (1987)).
®
Terminy „Rituximab” lub „RITUXAN®” oznaczają tu poddane zabiegom inżynierii genetycznej chimerowe mysie/ludzkie przeciwciało monoklonalne skierowane przeciw antygenowi CD20 i oznaczone „C2B8” w patencie USA nr 5 736 137, włączonym tu dokładnie jako odniesienie. Przeciwciałem jest immunoglobulina IgG1 kappa zawierająca mysie sekwencje regionu zmiennego łańcucha lekkiego i ciężkiego oraz ludzkie sekwencje regionu stałego. Rituximab ma powinowactwo wiązania dla antygenu CD20 wynoszące około 8,0 nM. Rituximab jest wytwarzane przez komórki CHO DG44.
Termin „ssak” obejmuje dowolnego zwierzęta zaklasyfikowane jako ssak, włączając w to ludzi, krowy, konie, psy i koty. W korzystnym wykonaniu wynalazku ssakiem jest człowiek.
Stosowane tu określenie „czynnik hamujący wzrost” dotyczy związku albo kompozycji, która hamuje wzrost komórki (np. komórki nowotworowej) in vitro bądź in vivo. A zatem, czynnikiem hamującym wzrost może być taki, który znacząco zmniejsza udział procentowy komórek w fazie S. Przykłady czynników hamujących wzrost obejmują czynniki, które blokują postęp cyklu komórkowego (w punkcje innym niż faza S), takie jak czynniki, które indukują zatrzymanie fazy G1 i M. Klasyczne
PL 213 948 B1 czynniki blokujące fazę M obejmują czynniki winka (winkrystynę i winblastynę), taksany oraz inhibitoty topo II, takie jak doksorubicyna, epirubicyna, daunorubicyna, etopozyd oraz bleomycyna. Te czynniki, które powodują zatrzymanie w fazie Gl wpływają również na zatrzymanie w fazie S, na przykład, czynniki alkilujące DNA, takie jak tamoksifen, prednizon, dakarbazyna, mechloretamina, cisplatyna, metotreksan, 5-fluorouracyl oraz ara-C. Dalsze informacje można znaleźć w The Molecular Basis of Cancer, Mendelsohn i Israel, wyd., Rozdział I, zatytułowany „Cell cycle regulation, oncogenes and antineoplastic drugs” autorstwa Murakami i wsp. (WB Saunders: Philadelphia, 1995), a w szczególności str. 13.
Przykładami przeciwciał „hamujących wzrost” są takie, które wiążą się z antygenem i hamują wzrost komórek nowotworowych z wyrażających ten antygen. Korzystne hamujące wzrost przeciwciała anty-HER2 hamują wzrost komórek raka sutka SK-BR-3 w hodowli komórkowej więcej niż 20%, a korzystnie więcej niż 50% (np. od około 50% do około 100%) przy stężeniu przeciwciał od około 0,5 do 30 μg/ml, gdzie hamowanie wzrostu określa się sześć dni po wystawieniu komórek SK-BR-3 na przeciwciało (patrz patent USA nr 5 677 171 wydany 14 października 1997). Korzystnym hamującym wzrost przeciwciałem jest huMAb4D5-8.
Przeciwciało, które „indukuje śmierć komórki” jest takim, które powoduje, że żywa komórka staje się nieżywą. Komórką jest generalnie taka, która wyraża antygen, z którym wiąże się przeciwciało. Śmierć komórek można określać in vitro w nieobecności dopełniacza i efektorowej komórki immunologicznej w celu rozróżnienia śmierci komórki indukowanej przez zależną od przeciwciała cytotoksyczność z udziałem komórek (ADCC) i cytotoksyczność zależną od dopełniacza (CDC). A zatem, test na śmierć komórek można przeprowadzać przy zastosowaniu surowicy inaktywowanej termicznie (tj. w nieobecności dopełniacza) i w nieobecności immunologicznych komórek efektorowych. W celu określenia, czy przeciwciało ma zdolność do indukowania śmierci komórki, można testować utratę integralności błony, którą ocenia się poprzez pobieranie jodku propidynowego (PI), błękitu trypanowego (patrz Moore i wsp., Cytotechnology 17: 1-11 (1995)) oraz 7AAD w stosunku do komórek nietraktowanych. Korzystnymi przeciwciałami indukującymi śmierć komórki są takie, które indukują pobieranie PI w teście PI w komórkach BT474.
Przeciwciało, które „indukuje apoptozę” to takie, które indukuje programowaną śmierć komórki, co określa się poprzez wiązanie aneksyny V, fragmentację DNA, kurczenie się komórek, rozszerzanie się endoplazmatycznego retikulum, fragmentację komórki i/lub tworzenie się pęcherzyków błonowych (zwanych ciałkami apoptotycznymi). Komórka wyraża antygen, do którego wiąże się przeciwciało. Korzystne jest jeżeli komórką jest komórka nowotworowa. Dostępnych jest wiele metod dla oceniania zdarzeń komórkowych związanych z apoptozą. Przykładowo, można mierzyć przemieszczanie się fosfatydyloseryny (PS) poprzez wiązanie aneksyny; fragmentację DNA można oceniać poprzez obserwację drabinki DNA, jak ujawniono tu w przykładzie; a kondensację jądrowo/chromatynową łącznie z fragmentacją DNA można oceniać poprzez wzrost liczby komórek hipodiploidalnych. Korzystne jest, jeżeli cząsteczką, która indukuje apoptozę jest taka, która prowadzi do około 2- do 50-krotnej, korzystniej 5- do 50-krotnej, a najkorzystniej, około 10- do 50-krotnej indukcji wiązania aneksyny w stosunku do komórek nie traktowanych w teście wiązania aneksyny z zastosowaniem komórek BT474.
Termin „ilość skuteczna terapeutycznie” odnosi się ilości leku skutecznej do leczenia choroby albo schorzenia u ssaka. W przypadku nowotworu, skuteczna terapeutycznie ilość leku może zmniejszyć liczbę komórek nowotworowych; zmniejszyć rozmiar guza; zahamować (tj. zwolnić do pewnego stopnia, a korzystnie zatrzymać) naciekanie komórek nowotworowych do narządów obwodowych; zahamować (tj. zwolnić do pewnego stopnia, a korzystnie zatrzymać) przerzuty raka; zahamować do pewnego stopnia wzrost guza i/lub w pewnym stopniu złagodzić jeden albo więcej objawów związanych z nowotworem. W zakresie, w którym lek może zapobiegać wzrostowi i zabijać istniejące komórki nowotworowe, może być on cytostatyczny i/lub cytotoksyczny. Dla terapii nowotworów skuteczność można mierzyć na przykład poprzez badanie czasu rozwoju choroby (TTP, ang. time to disease progression) i/lub ustalanie szybkości odpowiedzi (RR, ang. response rates).
„Rak wyrażający antygen” jest takim, który zawiera komórki, które mają dostateczne poziomy antygenu na swojej powierzchni komórkowej, aby przeciwciało anty-antygen mogło związać się z nim i mieć efekt terapeutyczny względem nowotworu.
Rak „charakteryzujący się nadmierną aktywacją” receptora jest takim, w którym nadmiar aktywacji receptora w komórkach nowotworowych znacząco przewyższa poziom aktywacji tego receptora w komórkach nienowotworowych z tego samego typu tkanki. Taka nadmierna aktywacja może być spowodowana przez nadekspresję receptora i/lub większe niż normalnie poziomy ligandu dostępnego
PL 213 948 B1 dla aktywacji receptora w komórkach nowotworowych. Taka nadmierna aktywacja może powodować i/lub być spowodowana przez stan rakowy komórki nowotworowej. W niektórych wykonaniach, nowotwór będzie poddany testowi diagnostycznemu lub prognostycznemu, w celu ustalenia, czy następuje amplifikacja i/lub nadekspresja receptora, która prowadzi do takiej nadmiernej aktywacji receptora. Alternatywnie lub dodatkowo, nowotwór może być poddany testowi diagnostycznemu lub prognostycznemu, w celu ustalenia, czy następuje w nowotworze amplifikacja i/lub nadekspresja ligandu, której towarzyszy nadmierna aktywacja receptora. W podzestawie takich nowotworów, nadmierna aktywacja receptora może być wynikiem autokrynnego szlaku stymulacji.
Rak, który „naprodukuje” receptor to taki, który ma znacząco wyższy poziom receptora, takiego jak HER2, na powierzchni swoich komórek w porównaniu w komórkami nierakowymi z tego samego typu tkanki. Taka nadprodukcja może być spowodowana przez amplifikację genu albo poprzez wzrost transkrypcji albo translacji. Nadprodukcja receptora może być oznaczona w teście diagnostycznym albo prognostycznym poprzez określenie wzrostu poziomu białka receptora obecnego na powierzchni komórki np. poprzez zastosowanie testu immunohistochemicznego; IHC). Alternatywnie albo dodatkowo, można zmierzyć poziomy kwasów nukleinowych kodujących receptor w komórce, np. poprzez fluorescencyjną hybrydyzację in situ (FISH; patrz WO 98/45479 opublikowany październik, 1998), analizę Southern albo techniki reakcji łańcuchowej polimerazy (PCR), takie jak ilościowy PCR w czasie rzeczywistym (RT-PCR). Można również badać nadprodukcję receptora poprzez mierzenie wyrzucanych antygenów (np. domeny zewnątrzkomórkowej) w płynach biologicznych, takich jak surowica (patrz np. patent USA nr 4 933 294 wydany 12 czerwca, 1990; WO 91/05264 opublikowany 18 kwietnia, 1991; patent USA nr 5 401 638 wydany 28 marca, 1995 oraz Sias i wsp., J. Immunol. Methods 132: 73-80 (1990)). Poza powyższymi testami dostępne są dla specjalistów różne testy in vivo. Przykładowo, można eksponować komórki wewnątrz ciała pacjenta na przeciwciało, które jest fakultatywnie wyznakowane wykrywalnym znacznikiem np. radioaktywnym izotopem i wiązanie przeciwciała z komórkami u pacjenta można zmierzyć na przykład poprzez zewnętrzne skanowanie radioaktywności albo analizowanie biopsji pobranej od pacjenta wystawionego uprzednio na działanie przeciwciała.
Rak, który „naprodukuje” ligand to taki, który ma znacząco wyższy poziom ligandu, w porównaniu w komórkami nierakowymi z tego samego typu tkanki. Taka nadprodukcja może być spowodowana przez amplifikację genu albo poprzez wzrost transkrypcji albo translacji. Nadprodukcja receptora może być oznaczona diagnostycznie poprzez określenie poziomów ligandu (albo kodującego go kwasu nukleinowego) u pacjenta, np. w biopsji guza nowotworowego albo poprzez zastosowanie różnych testów diagnostycznych, takich jak IHC, FISH, analiza Southern, PCR albo testy in vivo jak opisano powyżej.
Stosowany tu termin „czynnik cytotoksyczny” dotyczy substancji, która hamuje albo przeciwdziała funkcji komórek i/lub powoduje zniszczenie komórek. Termin ma obejmować izotopy radioaktywne (np. At211, I131, I125, Y90, Re186, Re188, Sm153, Bi212, P32 oraz radioaktywne izotopy Lu), czynniki chemioterapeutyczne oraz toksyny, takie jak niskocząsteczkowe toksyny albo enzymatycznie aktywne toksyny pochodzenia bakteryjnego, roślinnego albo zwierzęcego, włączając w to ich fragmenty i/lub warianty.
„Czynnik chemioterapeutyczny” to związek chemiczny przydatny w leczeniu raka. Przykłady czynników chemioterapeutycznych obejmują czynniki alkilujące, takie jak tiotepa i cyklosfosfamid ™ (CYTOXAN™); sulfoniany alkilowe, takie jak busulfan, improsulfan i piposulfan; azyrydyny, takie jak benzodopa, karbokuon, meturedopa i uredopa; etylenoiminy i metylamelaminy, włączając w to altretaminę, trietyIomelaminy, trietylenofosforamid, trietylenotiofosforoamid i trimetylolomelaminę; iperyty azotowe, takie jak chlorambucyl, chloronafazyna, chorofosfamid, estramustyna, ifosfamid, mechloroetamina, chlorowodowek tlenku mechloroetaminy, melfalan, nowembichina, fenesteryna, prednimustyna, trofosfamid, iperyt uraculowy; nitrosury, takie jak karmustyna, chlorozotocyna, fotemustyna, lomustyna, nimustyna, ranimustyna; antybiotyki, takie jak aklacynomyzyny, aktynomycyna, autramycyna, azaseryna, bleomycyny, kaktynomycyna, kalicheamycyna, karabicyna, karminomycyna, karzynofilina, chromomycyny, daktynomycyna, daunorubicyna, detorubicyna, 6-diazo-5-okso-L-norleucyna, doksorubicyna, epirubicyna, ezorubicyna, idarubicyna, marcelomycyna, mitomycyny, kwas mykofenolowy, nogalamycyna, oligomycyny, peplomycyna, potfiromycyna, puromycyna, kelamycyna, rodorubicyna, streptonigryn, streptozocyna, tubercydyna, ubenimeks, zynostatyna, zorubicyna; anty- metabolity, takie jak metotreksan i 5-fluorouracyl (5-FU); analogi kwasu foliowego, takie jak denopteryna, metotreksan, pteropteryna, trimetreksan; analogi puryn, takie jak fludarabina, 6-merkaptopuryna, tiamipryna, tioguanina; analogi pirymidyn, takie jak ancytabina, azacytydyna, 6-azaurydyna, karmofur, cytaraPL 213 948 B1 bina, dideoksyurydyna, doksyflurydyna, enocytabina, floksyurydyna, 5-FU; androgeny takie jak kalusteron, propionian dromostanolonu, epitiostanol, mepitiostan, testolakton; czynniki antyadrenalgiczne, takie jak aminoglutetimid, mitotan, trilostan; dopełniacz dla kwasu foliowego, taki jak kwas frolinowy; aceglaton; glikozyd aldofosfamidu; kwas aminolewulinowy; amsakryna; bestrabucyl; bisantren; edatraksan; defofamina; demekolcyna; diazykuon; elfornityna; octan eliptynowy; etoglucyd; azotan galu; hydrokslomocznik; lentinan; lonidamina; mitoguazon; raitoxantron; mopidamol; nitracrina; pentostatin; fenamet; pirarubicyna; kwas podofilinowy acid; 2-etylohydrazyd; prokarbazyna; PSK; razoksan; sizofiran; spirogermanium; kwas tenuazonowy; triazikon; 2,2',2'-trichlorotrietyloamina; uretan; windesyna;
dakarbazyna; mannomustyna; mitobronitol; mitolaktol; pipobroman; gacytozyna; arabinozyd („Ara-C”);
® cyklofosfamid; tiotepa; taksany, np. paklitaksel (TAXOL®, Bristol-Myers Squibb Oncology, Princeton, ®
NJ) oraz doksetaksel (TAXOTERE®, Rhone-Poulenc Rorer, Antony, France); chlorambucyl; gemcytabina; 6-tioguanina; merkaptopuryna; metotreksan; analogi platyny, takie jak cysplatyna i karboplatyna; winblastyna; platyna; etopozyd (VP-16); ifosfamid; mitomycyna C; mitoksantron; winkrystyna; winorelbina; nawelbina; nowantron; tenipozyd; daunomycyna; aminopteryna; kseloda; ibandronan; CPT-11; inhibitor topoizomerazy RFS 2000; difluorometyloornityna (DMFO); kwas retynowy; esperamycyny; kapecytabina oraz farmaceutycznie dopuszczalne sole, kwasy albo pochodne dowolnej z powyższych. Definicja ta obejmuje również czynniki przeciwhormonalne, które działają regulując albo hamując działanie hormonów na nowotwory, takie jak anty-estrogeny włączając w to na przykład tamoksifen, raloksifen, 4(5)-imidazole hamujące aromatazę, trioksifen, keoksifen, LY117018, onapriston i toremifen (Fareston) oraz antyandrogeny, takie jak flutamid, nilutamid, bikalutamid, leuprolid i goserelin oraz farmaceutycznie dopuszczalne sole, kwasy albo pochodne dowolnej z powyższych.
Stosowany tu termin „lek kierowany przez EGFR” dotyczy czynnika terapeutycznego, który wiąże się z EGFR i, ewentualnie hamuje aktywację EGFR. Przykłady takich czynników obejmują przeciwciała i małe cząsteczki, które wiążą się z EGFR. Przykłady przeciwciał, które wiążą się z EGFR obejmują MAb 579 (ATCC CRL HB 8506), MAb 455 (ATCC CRL HB8507), MAb 225 (ATCC CRL 8508), MAb 528 (ATCC CRL 8509) (patrz patent USA nr 4 943 533, Mendelsohn i wsp.) oraz ich warianty, takie jak chimery 225 (C225) i ludzkie 225 o przywróconym kształcie (H225) (patrz, WO 96/40210, Imclone Systems Inc.); przeciwciał, które wiążą się ze zmutowanym EGFR typu II (US patent nr 5 212 290); humanizowane i chimerowe przeciwciała, które wiążą się z EGFR jak opisano w patencie USA nr 5891996 oraz ludzkie przeciwciała, które wiążą się z EGFR (patrz WO 98/50433, Abgenix). Przeciwciało anty-EGFR może być połączone z czynnikiem cytotoksycznym tworząc immunokoniugat (patrz np. EP659, 439A2, Merck Patent GmbH). Przykłady takich małych cząsteczek, które wiążą się z EGFR obejmują ZD1839 (IRESSA®) (Astra Zeneca), CP-358774 lub OSI-774 (TARCEVA™) (Genentech) i AG1478.
Termin „cytokina” to ogólny termin dla białek uwalnianych przez jedną populację komórek, które działają na inne komórki jako międzykomórkowe przekaźniki. Przykładami takich cytokin są limfokiny, monokiny i tradycyjne hormony peptydowe. Wśród tych cytokin są: hormon wzrostu, taki jak ludzki hormon wzrostu, pochodna N-metionylowa ludzkiego hormonu wzrostu i bydlęcy hormon wzrostu; hormon przytarczycy; tyroksyna; insulina; proinsulina; relaksyna; prorelaksyna; hormony glikoproteinowe takie jak hormon folikulotropowy (FSH), tyrotropina (TSH), hormon luteinizujący (LH); wątrobowy czynnik wzrostowy; fibroblastowy czynnik wzrostowy; prolaktyna; laktogen łożyskowy; czynnik martwicy nowotworów a i β; substancja hamująca mullerian; mysi peptyd związany z gonadotropiną; inhibina; aktywina; naczyniowy śródbłonkowy czynnik wzrostowy; integryna; trombopoetyna (TPO); nerwowe czynniki wzrostowe takie jak NGF-α; czynnik wzrostowy płytek krwi; transformujące czynniki wzrostowe (TGF), takie jak TGF-α i TGF-β; czynnik wzrostowy insulino-podobny I i II; erytropoetyna (EPO); czynniki osteoinduktywne; interferony, takie jak interferon-α, -β i -γ; czynniki stymulujące kolonie (CSF), takie jak CSF makrofagów (M-CSF); CSF granulocytów- makrofagów (GM-CSF); i CSF granulocytów (G-CSF); interleukiny (IL), takie jak IL-1, IL-1a, IL-2, IL-3, IL-4, IL-5, IL-6, IL-7, IL-8, IL-9, IL-10, IL-11, IL-12; czynnik martwicy nowotworów, taki jak TNF-α lub TNF-β oraz inne czynniki polipeptydowe, włączając w to ligand LIF i kit (KL). Stosowany tu termin cytokina obejmuje białka ze źródeł naturalnych albo z hodowli zrekombinowanych komórek albo biologicznie aktywne ekwiwalenty cytokin o sekwencji natywnej.
Termin „prolek” stosowany w tym zgłoszeniu dotyczy formy prekursorowej albo pochodnej aktywnej farmaceutycznie substancji, która jest mniej toksyczna wobec komórek nowotworowych w porównaniu z lekiem rodzicielskim i podlega aktywacji enzymatycznej albo przekształceniu w bardziej aktywną postać rodzicielską. Patrz, np. Wilman, „Prodrugs in Cancer Chemotherapy” Biochemical
PL 213 948 B1
Society Transactions, 14, str. 375-382, 615th Meeting Belfast (1986) oraz Stella i wsp., „Prodrugs: A Chemical Approach to Targeted Drug Delivery” Directed Drug Delivery, Borchardt i wsp., (wyd.), str. 247, 267, Humana Press (1985). Proleki według tego wynalazku obejmują między innymi proleki zawierające tiofosforany, proleki zawierające siarczan, proleki zawierające peptyd, proleki ze zmodyfikowanymi D-aminokwasami, proleki glikozylowane, proleki zawierające laktam, proleki zawierające fenoksyacetamid ewentualnie podstawione albo proleki zawierające fenyloacetamid, ewentualnie podstawione, 5-fluorocytozynę i inne proleki 5-fluorourydynowe, które można przekształcić w bardziej aktywne wolne leki cytotoksyczne. Przykłady leków cytotoksycznych, które można przekształcić w postać proleku do zastosowania w tym wynalazku obejmują miedzy innymi opisane powyżej czynniki chemioterapeutyczne.
„Liposom” to mały pęcherzyk składający się z różnych typów lipidów, fosfolipidów i/lub związków powierzchniowo czynnych, które są przydatne do dostarczania leku (takiego jak ujawniona tu kompozycja glikoproteinowa i, ewentualnie, czynnik chemioterapeutyczny) do ssaka. Składniki liposomu są zwykle zorganizowane w postaci podwójnej warstwy, podobnie do organizacji lipidów w błonach biologicznych.
Termin „dołączona ulotka” jest tu użyty w odniesieniu do instrukcji zwykle dołączanych do handlowych opakowań produktów terapeutycznych, która zawiera informacje o wskazaniach, zastosowaniu, dawkowaniu, podawaniu, przeciwwskazaniach i/lub ostrzeżeniach dotyczących zastosowania takiego produktu terapeutycznego „Wyizolowana” cząsteczka kwasu nukleinowego to cząsteczka kwasu nukleinowego, która jest zidentyfikowana i oddzielona od co najmniej jednej cząsteczki kwasu nukleinowego stanowiącej zanieczyszczenie, z którą występuje normalnie razem w naturalnym źródle kwasu nukleinowego. Wyizolowana cząsteczka kwasu nukleinowego jest odmienna od postaci albo układu, w którym występuje w naturze. Wyizolowane cząsteczki kwasu nukleinowego można zatem odróżnić od cząsteczki kwasu nukleinowego występującej w naturalnych komórkach. Jednakże, wyizolowana cząsteczka kwasu nukleinowego obejmuje cząsteczkę kwasu nukleinowego zawartą w komórkach, które wyrażają przeciwciało, gdzie na przykład cząsteczka kwasu nukleinowego jest w pozycji chromozomowej innej niż w komórkach naturalnych.
Kwas nukleinowy jest „połączony funkcjonalnie”, kiedy jest umieszczony w funkcjonalnym związku z inną sekwencją kwasu nukleinowego. Przykładowo, DNA dla presekwencji albo lidera do sekrecji jest połączony funkcjonalnie z DNA dla polipeptydu, jeżeli jest wyrażany jako prebiałko, które uczestniczy w sekrecji polipeptydu; promotor albo wzmacniacz jest połączony funkcjonalnie z sekwencją kodującą, jeżeli wpływa na transkrypcję sekwencji, albo miejsce wiązania rybosomu jest połączone funkcjonalnie z sekwencją kodującą, jeżeli jest umieszczone tak, aby ułatwić translację. Generalnie, „połączone funkcjonalnie” oznacza, że sekwencje, które podlegają łączeniu są ciągłe, a w przypadku lidera do sekrecji, ciągłe i w fazie odczytu. Jednakże wzmacniacze nie muszą być ciągle. Łączenia dokonuje się poprzez ligację w dogodnych miejscach restrykcyjnych. Jeżeli takie miejsca nie istnieją, używa się syntetycznych oligonukleotydowych adaptorów zgodnie z konwencjonalną praktyką.
„Wyizolowana” cząsteczka kwasu nukleinowego to cząsteczka kwasu nukleinowego, która jest zidentyfikowana i oddzielona od co najmniej jednej cząsteczki kwasu nukleinowego stanowiącej zanieczyszczenie, z którą występuje normalnie razem w naturalnym źródle kwasu nukleinowego. Wyizolowana cząsteczka kwasu nukleinowego jest odmienna od postaci albo układu, w którym występuje w naturze. Wyizolowane cząsteczki kwasu nukleinowego można zatem odróżnić od cząsteczki kwasu nukleinowego występującej w naturalnych komórkach. Jednakże, wyizolowana cząsteczka kwasu nukleinowego obejmuje cząsteczkę kwasu nukleinowego zawartą w komórkach, które wyrażają przeciwciało, gdzie na przykład cząsteczka kwasu nukleinowego jest w pozycji chromosomowej innej niż w komórkach naturalnych.
„Sekwencje kontrolujące” ekspresję dotyczą sekwencji DNA niezbędnych do ekspresji połączonych z nimi funkcjonalnie sekwencji kodujących w danym organizmie gospodarza. Sekwencje kontrolujące, które są odpowiednie dla organizmów prokariotycznych, obejmują promotor, ewentualnie sekwencję operatorową oraz miejsce wiązania rybosomu. Wiadomo, że komórki eukariotyczne wykorzystują promotory, sygnały poliadenylacji i wzmacniacze.
Kwas nukleinowy jest „połączony funkcjonalnie” kiedy jest umieszczony w związku funkcjonalnym z inną sekwencją kwasu nukleinowego. Przykładowo, DNA dla prosekwencji albo lidera sekrecyjnego jest połączony funkcjonalnie z DNA dla polipeptydu jeżeli jest wyrażany jako prebiałko, które uczestniczy w sekrecji polipeptydu; promotor albo wzmacniacz jest połączony funkcjonalnie z sekwenPL 213 948 B1 cją kodującą jeżeli wpływa na transkrypcję sekwencji; albo miejsce wiązania rybosomu jest połączone funkcjonalnie z sekwencją kodującą jeżeli jest umieszczone tak, aby ułatwiać translację. Generalnie, „połączony funkcjonalnie” oznacza, że połączone sekwencje DNA są ciągłe, a w przypadku sekwencji lidera sekrecyjnego ciągłe i w fazie odczytu. Natomiast wzmacniacze nie muszą być ciągłe. Połączenie uzyskuje się poprzez ligację w odpowiednich miejscach restrykcyjnych. Jeżeli takie miejsca nie istnieją, stosowane są syntetyczne oligonukleotydy- adaptory albo łączniki, zgodnie z konwencjonalną praktyką.
Stosowany tu termin ekspresyjna „komórka”, „linia komórkowa” i „hodowla komórkowa” są stosowane wymiennie i wszystkie te określenia obejmują potomstwo. A zatem, słowa „transformant” i „komórki transformanta” obejmują pierwotną komórkę obiektu i hodowle z niej pochodzące niezależnie od liczby transferów. Jest również zrozumiałe, że całe potomstwo nie musi być całkowicie identyczne pod względem zawartości DNA na skutek przemyślanych albo przypadkowych mutacji. Zmutowane potomstwo, które ma taką samą funkcję albo aktywność biologiczną jak poszukiwana przy wyjściowo stransformowanych komórkach, jest również tu włączone. Tam gdzie zamierzone są inne cele, będzie to jasne z kontekstu.
II. Sposoby wykonania wynalazku
Wynalazek ten dotyczy sposobu przygotowania zasadniczo homogennego preparatu glikoproteiny zawierającej region Fc, gdzie około 80-100% glikoproteiny w kompozycji zawiera dojrzały węglowodan rdzeniowy pozbawiony fukozy, przyłączony do regionu Fc glikoproteiny. W korzystnych wykonaniach białko jest przeciwciałem lub immunoadhezyną. Glikoproteiny mogą być przygotowane na przykład przez (a) zastosowanie komórki gospodarza poddanej inżynierii genetycznej lub zmutowanej, w której brak metabolizmu fukozy, tak że ma zmniejszoną zdolność (lub nie jest zdolna) do fukozylacji wyrażanych w niej białek;
(b) hodowanie komórek w warunkach, które zapobiegają lub zmniejszają fukozylację;
(c) potranslacyjne usunięcie fukozy (np. enzymem fukozydazą);
(d) potranslacyjne dodanie pożądanego węglowodanu, np. po zrekombinowanej ekspresji nieglikozylowanej glikoproteiny;
(e) oczyszczenie glikoproteiny tak, by wybrać produkt, który nie jest fukozylowany.
Obecny wynalazek rozważa połączenie dwóch lub więcej z tych przykładowych sposobów (a)-(e).
Najbardziej korzystnie jeżeli, kwas nukleinowy kodujący pożądaną glikoproteinę jest wyrażany w komórce gospodarza, która ma zmniejszoną zdolność (lub nie jest zdolna) do fukozylacji wyrażanych w niej białek. Korzystnie, jeżeli komórka gospodarza jest komórką jajnika chomika chińskiego (CHO) pozbawioną reduktazy dihydrofolianu (DHFR), np. komórką Lec13 CHO lub np. komórką CHO-K1, DUX-B11, CHO-DP12 lub CHO-DG44 CHO, która była zmodyfikowana tak, że wytwarzana w niej glikoproteina nie jest znacząco fukozylowana. Tak więc komórka może wykazywać zmienioną ekspresję lub aktywność enzymu fukozylotransferazy albo inny enzym biorący udział w dodawaniu fukozy do związanego z N oligosacharydu może mieć zmniejszoną aktywność i/lub obniżone poziomy w komórce gospodarza.
Struktura węglowodanu rdzeniowego jest dojrzała, tak więc na ogół należy unikać stosowania inhibitorów, takich jak kastanospermina, które hamują lub przeszkadzają w obróbce dojrzałego węglowodanu. Według jednego z korzystnych wykonań około 80-100% glikoproteiny w kompozycji odzyskanej ze zrekombinowanej komórki gospodarza wytwarzającej glikoproteinę będzie miała strukturę węglowodanu rdzeniowego, która jest pozbawiona fukozy przyłączonej do regionu Fc glikoproteiny, dalej nazywana „kompozycją glikoproteiny wolną od fukozy”. „Odzyskana” ma tu oznaczać materiał uzyskany bezpośrednio z hodowli komórek gospodarza bez poddawania tego materiału etapowi oczyszczania, który wzbogaca w glikoproteinę wolną od fukozy.
Jednak, niniejszy wynalazek rozważa wzbogacanie ilości glikoproteiny wolnej od fukozy za pomocą różnych technik, takich jak oczyszczanie z zastosowaniem substratu lektynowego aby usunąć glikoproteinę zawierająca fukozę z pożądanej kompozycji.
Będzie oczywiste, że ilość wolnej od fukozy glikoprotein z różnych partii zrekombinowanej produkowanej glikoproteiny może być różna. Na przykład, w przykładach poniżej % całkowitego oligosacharydu bez fukozy przyłączonego do glikoproteiny wyrażanej przez komórki CHO-Lec13 był w zakresie 88%-95%.
Korzystnie, jeżeli około 90-99% glikoproteiny w kompozycji zawiera strukturę dojrzałego węglowodanu rdzeniowego, która jest pozbawiona fukozy przyłączonej do regionu Fc glikoproteiny.
PL 213 948 B1
W kompozycji mogą istnieć różne formy struktury węglowodanów. Na przykład, węglowodan przyłączony do glikoproteiny może być przedstawiony za pomocą następującego wzoru:
Χ4 - Χ3- GN - Μ
Χι\μ - GN - GN
Χ4 - Χ3 - Χ2 - Μ / gdzie:
M to mannoza,
GN to GlcNAc,
X1 to ewentualna rozdzielająca reszta GlcNAc, z dodatkowym monosacharydem(ami), ewentualnie przyłączonym do rozdzielającej GlcNAc,
X2 to korzystna reszta GlcNAc,
X3 to ewentualna reszta Ga1, jedna reszta Ga1 może być przyłączona do każdego ramienia GN,
X4 to ewentualne końcowe reszty kwasu sialowego, mogą być przyłączone jedna lub dwie reszty kwasu sialowego.
Wolne od fukozy ujawnione tu kompozycje glikoproteinowe wykazują zwiększone wiązanie jednego lub więcej receptorów FcyRIII w porównaniu z kompozycją tej samej glikoproteiny, ale gdzie większość (np. około 50-100% lub około 70-100%) glikoproteiny w tej kompozycji ma fukozę przyłączoną do struktury dojrzałego rdzeniowego węglowodanu (dalej tu „kompozycja glikoproteiny zawierająca fukozę”). Na przykład, kompozycje glikoproteiny wolne od fukozy tu ujawnione mogą wykazywać 100-1000-krotnie zwiększone wiązanie do FcyRIII, takiego jak FcyRIII (F158), w porównaniu z kompozycjami glikoproteinowymi zawierającymi fukozę. Jako że allotyp F158 jest mniej skuteczny w interakcji z ludzką IgG niż V158, uważa się, że to zapewnia znaczącą przewagę z terapeutycznego punku widzenia, szczególnie u pacjentów, którzy wyrażają FcyRIII (F158). Co więcej, ujawniona tu wolna od fukozy kompozycja glikoproteinowa wykazuje lepszą aktywność ADCC w porównaniu z odpowiednimi kompozycjami glikoproteinowymi zawierającymi fukozę, np. z około 2-20-krotnie polepszoną aktywnością ADCC.
Poza wolną od fukozy strukturą dojrzałego rdzeniowego węglowodanu, dodatkowe oligosacharydy mogą być przyłączone do struktury węglowodanu rdzeniowego. Na przykład rozdzielająca GlcNAc może być przyłączona lub nie. Jako przykład, komórka gospodarza może być pozbawiona enzymu GnTIII i w efekcie glikoproteina może być zasadniczo wolna od rozdzielającej GlcNAc. Alternatywnie, glikoproteina może być wyrażana w komórce gospodarza (np. gospodarza Y0 lub komórce CHO poddanej inżynierii genetycznej), która dodaje rozdzielającą GlcNAc.
Jedna lub więcej (na ogół jedna lub dwie) reszty galaktozy mogą być też przyłączone do struktury węglowodanu rdzeniowego. W końcu jedna lub więcej końcowych reszt kwasu sialowego (na ogół jedna lub dwie) mogą być przyłączone do struktury węglowodanu rdzeniowego, np. przez połączenie z resztą (resztami) galaktozy.
Kompozycje tu ujawnione są w korzystnym wykonaniu wytwarzane i przeznaczone do zastosowań terapeutycznych. Tak więc korzystna kompozycja jest preparatem farmaceutycznym zawierającym glikoproteinę i farmaceutycznie dopuszczalny nośnik lub rozcieńczalnik, tak jak te podane przykładowo poniżej. Takie preparaty są zazwyczaj jałowe i mogą być liofilizowane.
W korzystnym wykonaniu wynalazku glikoproteiną jest przeciwciało i przykładowe sposoby wytwarzania przeciwciał są opisane bardziej szczegółowo w następujących częściach. Glikoproteiną może jednak być dowolna inna glikoproteina zawierająca region Fc, np. immunoadhezyna. Sposoby wytwarzania immunoadhezyn są tu podane bardziej szczegółowo poniżej.
A. Warianty sekwencji regionu Fc
W jednym z wykonań wynalazku, wariant glikozylacji obejmuje ponadto wariant regionu Fc z sekwencją aminokwasową, która różni się od natywnej sekwencji regionu Fc. Tam gdzie region wariantu Fc ma więcej niż jedno podstawienie aminokwasowe, na ogół, ale niekoniecznie, podstawienia aminokwasowe w tej samej klasie są łączone, aby uzyskać pożądany wynik. Różne klasy podstawień aminokwasowych są opisane w następującej tabeli.
PL 213 948 B1
T a b e l a 1
Klasy wariantów regionu Fc
Klasa Zdolność wiązania FcR Pozycja podstawienia (podstawień) w regionie Fc
1A zmniejszone wiązanie do wszystkich FcyR 238, 265, 269, 270, 297*, 327, 329
1B zmniejszone wiązanie do obydwu, FcyRII i FcyRIII 239, 294, 295, 303, 338, 373, 376, 416, 435
2 zwiększone wiązanie do obydwu, FcyRII i FcyRIII 256, 290, 312, 326, 330, 339, 378, 430
3 zwiększone wiązanie do FcyRII i brak wpływu na wiązanie FcyRIII 255, 258, 267, 276, 280, 283, 285, 286, 305, 307, 309, 315, 320, 331, 337, 398
4 zwiększone wiązanie do FcyRII i zmniejszone wiązanie do FcyRIII 268, 272, 301, 322, 340
5 zmniejszone wiązanie do FcyRII i brak wpływu na wiązanie do FcyRIII 292, 324, 335, 414, 419, 438, 439
6 zmniejszone wiązanie do FcyRII i zwiększone wiązanie do FcyRIII 298, 333
7 brak wpływu na wiązanie do FcyRII i zmniejszone wiązanie do FcyRIII 248, 249, 252, 254, 278, 289, 293, 296, 338, 382, 388, 389, 434, 437
8 brak wpływu na wiązanie FcyRII i zwiększone wiązanie do FcyRIII 334, 360
* wersja deglikozylowana
Poza podstawieniami aminokwasowymi, niniejszy obecny wynalazek rozważa inne modyfikacje sekwencji aminokwasowych wyjściowego regionu Fc w celu wytworzenia wariantu regionu Fc ze zmienioną funkcją efektorową.
Można na przykład usunąć jedną lub więcej reszt aminokwasowych z regionu Fc aby zmniejszyć wiązanie się z FcR. Na ogół usuwa się jedną lub więcej reszt regionu Fc tu zidentyfikowanych jako przeprowadzających wiązanie FcR, aby wytworzyć taki wariant regionu Fc. Na ogół nie więcej niż jedna do dziesięciu reszt regionu Fc będzie usunięta według tego wykonania wynalazku. Region Fc zawierający jedną lub więcej delecji aminokwasów będzie korzystnie zachowywał przynajmniej około 80% i korzystnie przynajmniej około 90%, i najbardziej korzystnie przynajmniej około 95% wyjściowego regionu Fc albo natywnej sekwencji ludzkiego regionu Fc.
Można też wytworzyć warianty regionu Fc z insercjami aminokwasów, które to warianty mają zmienioną funkcję efektorową. Na przykład, można wprowadzić przynajmniej jedną resztę aminokwasową (np. jedną do dwóch reszt aminokwasów i na ogół nie więcej niż dziesięć reszt) obok jednej lub więcej pozycji regionu Fc zidentyfikowanych tu jako wpływające na wiązanie FcR. Przez „obok” rozumie się w obrębie jednej do dwóch reszt aminokwasowych w zidentyfikowanych tu resztach regionu Fc. Takie warianty regionu Fc mogą wykazywać zwiększone lub zmniejszone wiązanie FcR i/lub aktywność ADCC. Aby wytworzyć takie warianty insercyjne, można ocenić strukturę ko-kryształu polipeptydu zawierającego region wiązania FcR (np. zewnątrz komórkową domenę FcR będącego przedmiotem zainteresowania) i region Fc, do którego reszta (reszty) aminokwasów mają być wstawione (patrz na przykład, Deisenhofer, Biochemistry 20 (9): 2361-2370 (1981) oraz Burmeister i wsp., Nature 342: 379-383, (1994)) aby racjonalnie zaprojektować wariant regionu Fc z np. poprawioną zdolnością wiązania FcR. Taka insercja (insercje) będą na ogół zrobione w pętli regionu Fc, ale nie w strukturze drugorzędowej (np. w nici β) regionu Fc.
Przez wprowadzenie odpowiedniej sekwencji aminokwasowej w rodzicielskim regionie Fc, można wytworzyć wariant regionu Fc, który (a) pośredniczy w zależnej od przeciwciał cytotoksyczności zależnej od komórek (ADCC) w obecności ludzkich komórek efektorowych bardziej skutecznie i/lub (b) wiąże receptor Fc gamma (FcyR) z lepszym powinowactwem niż wyjściowy polipeptyd. Takie warianty regionu Fc będą na ogół zawierały przynajmniej jedną modyfikację aminokwasową w regionie Fc. Uważa się, że łączenie modyfikacji aminokwasowych jest szczególnie korzystne. Na przykład, wariant region Fc może zawierać dwie, trzy, cztery, pięć itd. podstawień, np. konkretnych, określonych tu pozycji regionu Fc.
PL 213 948 B1
Korzystne jest, jeżeli rodzicielski polipeptyd-region Fc jest ludzkim regionem Fc, np. natywną sekwencją ludzkiego regionu Fc ludzkiej IgG1 (allotypy A i nie-A), IgG2, IgG3 lub IgG4. Takie sekwencje przedstawiono na fig. 23.
Aby wytworzyć region Fc z polepszoną aktywnością ADCC, korzystne jest, jeżeli rodzicielski polipeptyd ma uprzednio istniejącą aktywność ADCC, np. zawiera region Fc ludzkiej IgG1 lub ludzkiej IgG3. W jednym z wykonań, wariant z zwiększoną ADCC pośredniczy w ADCC znacząco bardziej skutecznie niż przeciwciało z regionem Fc IgG1 lub IgG3 o natywnej sekwencji i regionem wiązania antygenu wariantu. Korzystnie, jeżeli wariant zawiera lub jest zasadniczo złożony z, podstawień dwóch lub trzech reszt w pozycjach 298, 333 i 334 regionu Fc. Najkorzystniej, jeżeli reszty w pozycjach 298, 333 i 334 są podstawione (np. resztami alaniny). Co więcej, aby wytworzyć wariant regionu Fc ze zwiększoną aktywnością ADCC na ogół konstruuje się wariant regionu Fc ze zwiększonym powinowactwem wiązania do FcyRIII, który uważa się za ważny FcR w przeprowadzaniu ADCC. Na przykład, można wprowadzić modyfikację aminokwasową (np. podstawienie) do rodzicielskiego regionu Fc w jednym lub więcej aminokwasów w pozycjach 256, 290, 298, 312, 326, 330, 333, 334, 360, 378 lub 430, aby wytworzyć taki wariant. Wariant ze zwiększonym powinowactwem wiązania do FcyRIII może dalej mieć zmniejszone powinowactwo wiązania dla FcyRII, szczególnie zmniejszone powinowactwo do hamującego receptora FcyRIIB.
Modyfikacja(e) aminokwasowe korzystnie wprowadza się do domeny CH2 regionu Fc, ponieważ tu podane eksperymenty m wskazują, że domena CH2 jest ważna dla aktywności wiązania FcR. Co więcej, w odróżnieniu od nauk z tej dziedziny, cytowanych powyżej, obecne zgłoszenie rozważa wprowadzenie modyfikacji do części regionu Fc innego niż w dolnym regionie zawiasowym.
Przydatne pozycje aminokwasowe do modyfikacji w celu wytworzenia wariantu regionu Fc IgG ze zmienionym powinowactwem wiązania lub aktywnością receptora Fc gamma (FcyR) obejmują dowolną jedną lub więcej pozycji aminokwasowych 238, 239, 248, 249, 252, 254, 255, 256, 258, 265, 267, 268, 269, 270, 272, 276, 278, 280, 283, 285, 286, 289, 290, 292, 293, 294, 295, 296, 298, 301, 303, 305, 307, 309, 312, 315, 320, 322, 324, 326, 327, 329, 330, 331, 333, 334, 335, 337, 338, 340, 360, 373, 376, 378, 382, 388, 389, 398, 414, 416, 419, 430, 434, 435, 437, 438 lub 439 regionu Fc.
Korzystnie, jeżeli rodzicielski region Fc stosowany jako matryca do wytworzenia takich wariantów zawiera region Fc ludzkiej IgG. Gdy podstawiona jest reszta 331, rodzicielski region Fc korzystnie nie jest z ludzkiej IgG3 o sekwencji natywnej lub wariant regionu Fc zawierający podstawienie w pozycji 331 korzystnie wykazuje zwiększone wiązanie do FcR, np. do FcyRII.
Aby wytworzyć wariant regionu Fc ze zmniejszonym wiązaniem do FcyR można wprowadzić modyfikację aminokwasową w dowolnej jednej lub więcej pozycji aminokwasowej 238, 239, 248, 249, 252, 254, 265, 268, 269, 270, 272, 278, 289, 292, 293, 294, 295, 296, 298, 301, 303, 322, 324, 327, 329, 333, 335, 338, 340, 373, 376, 382, 388, 389, 414, 416, 419, 434, 435, 437, 438 lub 439 regionu Fc.
Warianty, który wykazują zmniejszone wiązanie do FcyRI, obejmują te zawierające modyfikację aminokwasową regionu Fc w dowolnej jednej lub więcej pozycji aminokwasów 238, 265, 269, 270, 327 lub 329.
Warianty, które wykazują obniżone wiązanie do FcyRII obejmują te zawierające modyfikację aminokwasu regionu Fc w dowolnej jednej lub więcej pozycji aminokwasowych 238, 265, 269, 270, 292, 294, 295, 298, 303, 324, 327, 329, 333, 335, 338, 373, 376, 414, 416, 419, 435, 438 lub 439.
Warianty regionu Fc, które wykazują zmniejszone wiązanie do FcyRIII obejmują te zawierające modyfikację aminokwasową regionu Fc w dowolnej jednej lub więcej pozycji aminokwasowej 238, 239, 248, 249, 252, 254, 265, 268, 269, 270, 272, 278, 289, 293, 294, 295, 296, 301, 303, 322, 327, 329, 338, 340, 373, 376, 382, 388, 389, 416, 434, 435 lub 437.
Można także wytworzyć warianty ze zwiększonym wiązaniem jednego lub więcej FcyR. Takie warianty regionu Fc mogą zawierać modyfikację aminokwasową w dowolnej jednej lub więcej pozycji aminokwasów 255, 256, 258, 267, 268, 272, 276, 280, 283, 285, 286, 290, 298, 301, 305, 307, 309, 312, 315, 320, 322, 326, 330, 331, 333, 334, 337, 340, 360, 378, 398 lub 430 regionu Fc.
Na przykład, wariant ze zwiększoną aktywnością wiązania FcyR może wykazywać zwiększone wiązanie do FcyRIII, i ewentualnie może wykazywać ponadto zmniejszone wiązanie do FcyRII; np. wariant może zawierać modyfikację aminokwasową w pozycji 298 i/lub 333 regionu Fc.
Warianty ze zwiększonym wiązaniem do FcyRII obejmują te zawierające modyfikację aminokwasową w dowolnej jednej lub więcej pozycji aminokwasowych 255, 256, 258, 267, 268, 272, 276,
280, 283, 285, 286, 290, 301, 305, 307, 309, 312, 315, 320, 322, 326, 330, 331, 337, 340, 378, 398 lub 430 regionu Fc. Takie warianty mogą dalej wykazywać zmniejszone wiązanie do FcyRIII. Na przyPL 213 948 B1 kład, mogą zawierać modyfikację aminokwasową regionu Fc w dowolnej jednej lub więcej pozycji aminokwasych 268, 272, 298, 301, 322 lub 340.
Jakkolwiek korzystne jest zmienianie wiązania do FcyR, warianty regionu Fc ze zmienionym powinowactwem wiązania dla receptora noworodkowego (FcRn) są tu także rozważane. Oczekuje się, że warianty regionu Fc ze zwiększonym powinowactwem do FcRn będą miały dłuższy czas półtrwania w surowicy i takie cząsteczki będą miały użyteczne zastosowania w sposobach leczenia zwierząt, gdy długi okres półtrwania podawanego peptydu jest pożądany, np. aby leczyć przewlekłą chorobę lub schorzenie. Przeciwnie, oczekuje się, że warianty regionu Fc ze zmniejszonym powinowactwem wiązania FcRn będą miały krótsze okresy półtrwania i takie cząsteczki mogą, na przykład, być podawane ssakowi wówczas, gdy krótszy czas w krążeniu może być korzystny, np. dla obrazowania diagnostycznego lub dla polipeptydów, które mają toksyczne efekty uboczne gdy krążą w krwiobiegu przez przedłużone okresy czasu itd. Oczekuje się, że warianty regionu Fc ze zmniejszonym powinowactwem wiązania mają mniejszą szansę przechodzenia przez łożysko i mogą więc być stosowane w leczeniu chorób lub schorzeń u kobiet w ciąży.
Warianty regionu Fc ze zmienionym powinowactwem wiązania do FcRn obejmują te zawierające modyfikację aminokwasową regionu Fc dowolnej jednej lub więcej pozycji aminokwasowych 238, 252, 253, 254, 255, 256, 265, 272, 286, 288, 303, 305, 307, 309, 311, 312, 317, 340, 356, 360, 362, 376, 378, 380, 382, 386, 388, 400, 413, 415, 424, 433, 434, 435, 436, 439 lub 447. Te, które wykazują zmniejszone wiązanie do FcRn będą na ogół zawierały modyfikację aminokwasową regionu Fc w dowolnej jednej lub więcej pozycji aminokwasów 252, 253, 254, 255, 288, 309, 386, 388, 400, 415, 433, 435, 436, 439 lub 447; a te ze zwiększonym wiązaniem do FcRn będą zazwyczaj zawierały modyfikację aminokwasową regionu Fc w dowolnej jednej lub więcej pozycji aminokwasowych 238, 256, 265, 272, 286, 303, 305, 307, 311, 312, 317, 340, 356, 360, 362, 376, 378, 380, 382, 413, 424 lub 434.
Wariant(y) polipeptydu wytworzone jak opisano powyżej mogą być poddane dalszym modyfikacjom, często w zależności od przeznaczonego zastosowania polipeptydu. Takie modyfikacje mogą obejmować dalsze zmiany sekwencji aminokwasu (podstawienie, insercja i/lub delecja reszt aminokwasowych), fuzję z heterologicznym polipeptydem(ami) i/lub modyfikacje kowalencyjne. Takie „dalsze modyfikacje” mogą być przeprowadzone przed, równocześnie z lub po modyfikacji aminokwasowej(ych) ujawnionych powyżej, które powodują zmianę wiązania receptora Fc i/lub aktywności ADCC. W jednym z wykonań można połączyć tu podane modyfikacje w regionie Fc z podstawieniami w regionie Fc ujawnionymi w cytowanych odnośnikach w części „Dziedziny pokrewne” tego zgłoszenia.
Alternatywnie lub dodatkowo, może być przydatne połączenie powyższych modyfikacji aminokwasowych z jedną lub więcej modyfikacjami aminokwasowymi, które zmieniają wiązanie Clq i/lub funkcję cytotoksyczności zależnej od dopełniacza regionu Fc.
Wyjściowy polipeptyd będący przedmiotem szczególnego zainteresowania jest zazwyczaj tym, który wiąże Clq i wykazuje cytotoksyczność zależną od dopełniacza (CDC). Dalsze podstawienia aminokwasowe tu opisane będą na ogół służyły do zmiany wyjściowego polipeptydu do wiązania Clq i/lub modyfikowania jego funkcji cytotoksyczności zależnej od dopełniacza, np. zmniejszenie i korzystnie zniesienie tych funkcji efektorowych. Jednak rozważane są tu polipeptydy zawierające podstawienia w jednej lub więcej z opisanych pozycji z polepszonym wiązaniem Clq i/lub funkcją cytotoksyczności zależną od dopełniacza (CDC). Na przykład, wyjściowy polipeptyd może nie być zdolny do wiązania Clq i/lub pośredniczeniu w CDC i może być modyfikowany zależnie od nauk tu podanych tak, że nabiera tych dalszych funkcji efektorowych. Co więcej, polipeptydy z uprzednio istniejącą zdolnością wiązania Clq dowolnie dalej mające zdolność do brania udziału w CDC mogą być modyfikowane tak, że jedna lub obie z tych aktywności są zwiększone.
Aby wytworzyć region Fc ze zmienionym wiązaniem Clq i/lub funkcją cytotoksyczności zależną od dopełniacza (CDC) pozycje aminokwasowe do modyfikowania są na ogół wybierane z pozycji łańcucha ciężkiego 270, 322, 326, 327, 329, 331, 333 i 334, gdzie numerowanie reszt łańcucha ciężkiego IgG jest tym podanym w indeksie EU jak w Kabat i wsp., Sequences of Proteins of Immunological Interest, wyd. 5 Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, MD (1991). W jednym z wykonań tylko jedna z ośmiu zidentyfikowanych powyżej pozycji jest zmieniona aby wytworzyć wariantowy region polipeptydu ze zmienionym wiązaniem Clq i/lub funkcją cytotoksyczność zależną od dopełniacza (CDC).
Korzystnie, tylko reszta 270, 329 lub 322 jest zmieniona w tym przypadku. Alternatywnie, dwie lub więcej z pozycji zidentyfikowanych m powyżej są zmodyfikowane. Jeśli podstawienia mają być łączone, na ogół podstawienia, które zwiększają wiązanie ludzkiego Clq (np. w resztach w pozycjach
PL 213 948 B1
326, 327, 333 i 334) lub te, które zmniejszają wiązanie ludzkiego Clq (np. w resztach w pozycjach 270, 322, 329 i 331) są łączone. W tym ostatnim wykonaniu wszystkie cztery pozycje (tzn. 270, 322, 329 i 331) mogą być podstawione.
Korzystnie, dalsze podstawienia w dwóch, trzech lub wszystkich pozycjach 326, 327, 333 lub 334 są łączone, dowolnie z innymi podstawieniami regionu Fc aby wytworzyć polipeptyd ze zwiększonym wiązaniem ludzkiego Clq i korzystnie zwiększoną aktywnością CDC in vitro lub in vivo.
Prolina jest konserwowana w pozycji 329 w ludzkich IgG. Ta reszta jest korzystnie zastępowana alaniną, jednak podstawienie dowolnym innym aminokwasem jest rozważane, np. seryną, treoniną, asparaginą, glicyną lub waliną.
Prolina jest konserwowana w pozycji 331 w ludzkiej IgG1, IgG2 i IgG3, ale nie TgG4 (która ma resztę seryny w pozycji 331). Reszta 331 jest korzystnie zastępowana przez alaninę lub inny aminokwas, np. serynę (dla regionów IgG innych niż IgG4), glicynę lub walinę.
Lizyna 322 jest konserwowana w ludzkich IgG i ta reszta jest korzystnie zastępowana przez resztę alaniny, ale rozważa się podstawienie dowolną inną resztą aminokwasy np. seryna, treonina, glicyna lub walina.
D270 jest konserwowana w ludzkich IgG i ta reszta może być zastąpiona przez inną resztę aminokwasu np. alanina, seryna, treonina, glicyna, walina lub lizyna.
K326 jest też konserwowana w ludzkich IgG. Ta reszta może być podstawiona przez inną resztę włączając, w to między innymi, walinę, kwas glutaminowy, alaninę, glicynę, kwas asparaginowy, metioninę lub tryptofan, przy czym tryptofan jest korzystny.
Podobnie, E333 jest też konserwowana w ludzkich IgG. E333 jest korzystnie zastępowana przez resztę aminokwasową z mniejszą objętością łańcucha bocznego, taką jak walina, glicyna, alanina lub seryna, przy czym seryna jest korzystna.
K334 jest konserwowana w ludzkich IgG i może być podstawiona przez inną resztę taką jak alanina lub inna reszta.
W ludzkiej IgG1 i IgG3, resztą 327 jest alanina. Aby wytworzyć wariant ze zwiększonym wiązaniem Clq, tę alaninę można podstawić inną resztą taką jak glicyna. W IgG2 i IgG4, resztą 327 jest glicyna i to może być zastąpione przez alaninę (lub inną resztę) aby zmniejszyć wiązanie Clq.
Jak ujawniono powyżej, można zaprojektować region Fc ze zmienioną funkcją efektorową np. przez modyfikację wiązania Clq i/lub wiązania FcR w ten sposób zmieniając aktywność CDC i/lub aktywność ADCC. Na przykład, można wytworzyć wariant regionu Fc ze zwiększonym wiązaniem Clq i zwiększonym wiązaniem FcyRIII np. mającym zarówno zwiększoną aktywność ADCC i zwiększoną aktywność CDC. Alternatywnie, gdy pożądane jest zmniejszenie lub usunięcie funkcji efektorowej można skonstruować wariant region Fc ze zmniejszoną aktywnością CDC i/lub zmniejszoną aktywnością ADCC. W innych wykonaniach można zwiększyć tylko jedną z tych aktywności i dowolnie także zmniejszyć drugą aktywność np. aby wytworzyć wariant regionu Fc ze zwiększoną aktywnością ADCC, ale zmniejszoną aktywnością CDC i vice versa.
Pod względem dalszych zmian sekwencji aminokwasów, dowolna reszta cysteiny nie biorąca udziału w utrzymywaniu właściwej konformacji wariantu polipeptydu może być także podstawiona, na ogół seryną aby poprawić stabilność oksydacyjną cząsteczki i zapobiec błędnemu wiązaniu krzyżowemu.
Inny typ podstawienia aminokwasu służy do zmiany wzoru glikozylacji polipeptydu. Można to uzyskać przez delecję jednej lub więcej reszt węglowodanowych znajdowanych w polipeptydzie i/lub dodanie jednego lub więcej miejsca glikozylacji, które nie są obecne w polipeptydzie. Glikozylacja polipeptydów jest typowo albo jako połączenie przez N albo połączenie przez O. Połączenie przez z N dotyczy przyłączenia reszty węglowodanu do łańcucha bocznego reszty asparaginy. Sekwencja tripeptydu asparagina-X-seryna i asparagina-X-treonina, gdzie X jest dowolnym aminokwasem z wyjątkiem proliny są miejscami rozpoznawania przyłączania enzymatycznego reszty węglowodanu do łańcucha bocznego asparaginy. Tak więc, obecność dowolnej z tych sekwencji tripeptydu w polipeptydzie tworzy potencjalne miejsce glikozylacji. Glikozylacja poprzez O dotyczy przyłączenia jednego z cukrów N-acetylogalaktozaminy, galaktozy lub ksylozy do hydroksyaminokwasu, najczęściej seryny lub treoniny, choć 5-hydroksyprolina lub 5-hydroksylizyna może być też stosowana. Dodanie miejsc glikozylacji do polipeptydu jest dogodnie przeprowadzane przez zmianę sekwencji aminokwasów tak, że zawiera jedną lub więcej z opisanych powyżej sekwencji tripeptydów (dla glikozylacji związanej z N). Ta zmiana może być przeprowadzona przez dodatek lub podstawienie przez jedna lub więcej reszt
PL 213 948 B1 seryny lub treonina do sekwencji oryginalnego polipeptydu (dla miejsc glikozylacji związanych z O). Przykładowy wariant glikozylacji ma podstawienie aminokwasu reszty Asn 297 łańcucha ciężkiego.
Co więcej klasa, podklasa lub allotyp regionu Fc może być zmieniony przez jedno lub więcej kolejnych podstawień aminokwasowych aby wytworzyć region Fc z sekwencją aminokwasową bardziej homologiczną do innej klasy, podklasy lub allotypu w zależności od potrzeby. Mysi region Fc może być zmieniony aby wytworzyć sekwencję aminokwasową bardziej homologiczną do ludzkiego region Fc; ludzki nie będący allotypem A IgG1 region Fc może być zmodyfikowany aby uzyskać allotyp A IgG1 ludzkiego regionu etc. W jednym z wykonań modyfikacje aminowe tu podane, które zmieniają wiązanie FcR i/lub aktywność ADCC są dokonywane w domenie CH2 regionu Fc i domenę CH3 usuwa się lub zastępuje inną domeną dimerizacji. Korzystnie jednak zatrzymuje się domenę CH3 (poza obecnymi w niej modyfikacjami aminokwasowymi, które zmieniają funkcje efektorowe, jak tu ujawniono).
Glikoproteina wytworzona jak opisano powyżej może być poddana dalszym modyfikacjom, często zależnie od planowanego zastosowania glikoproteiny. Takie modyfikacje mogą obejmować dalsze zmiany sekwencji aminokwasów (podstawienie, insercja i/lub deleeja reszt aminokwasowych), fuzję z heterologicznym polipeptydem(ami) i/lub modyfikacje kowalencyjne.
Inny typ podstawienia aminokwasowego służy do zmiany wzoru glikozylacji glikoproteiny. Takie warianty glikozylacji mogą być dodatkowe oprócz wariantów glikozylacji pod względem braku fukozy tu opisanych i mogą być uzyskane przez delecję jednej lub więcej grup węglowodanowych spotykanych w glikoproteinie, i/lub dodanie jednego lub więcej miejsc glikozylacji, które nie są obecne w glikoproteinie. Glikozylacja glikoprotein jest typowo poprzezz N albo poprzez O. Połączenie poprzez N dotyczy przyłączenia reszty węglowodanu do bocznego łańcucha reszty asparaginy. Sekwencje tripeptydu asparagina-X-seryna i asparagina-X-treonina, gdzie X jest dowolnym aminokwasem z wyjątkiem proliny są miejscami rozpoznawania do przyłączania enzymatycznego reszty węglowodanu do bocznego łańcucha asparaginy. Tak więc, obecność dowolnej z tych sekwencji tripeptydów w glikoproteinie tworzy potencjalne miejsce glikozylacji. Glikozylacja poprzez O dotyczy przyłączenia jednego z cukrów, N-acetylogalaktozominy, galaktozy lub ksylozy do hydroksyaminokwasu, najczęściej seryny lub treoniny, choć 5-hydroksyprolina lub 5-hydroksylizyna mogą być także stosowane. Dodanie miejsc glikozylacji do glikoproteiny dogodnie przeprowadza się przez zmianę sekwencji aminokwasów tak, że zawiera ona jedną lub więcej z opisanych powyższej sekwencji tripeptydu (dla miejsca z wiązanego z miejscem N-glikozylacji). Zmiana może być też przeprowadzona przez dodanie lub podstawienie jednej lub więcej reszt seryny lub treoniny do sekwencji oryginalnej glikoproteiny (dla miejsc glikozylacji poprzez O).
B. Badanie aktywności biologicznej
Wariant glikoproteiny może być poddany jednemu lub więcej oznaczeniom aby ocenić ewentualne zmiany aktywności biologicznej w porównaniu z polipeptydem wyjściowym.
Korzystne jest, jeżeli wariant glikoproteiny zasadniczo zachowuje zdolność wiązania antygenu w porównaniu z peptydem nie będącym wariantem tzn. zdolność wiązania jest słabsza mniej niż 20-krotnie, np. jest słabsza nie więcej niż 5-krotnie niż polipeptydu nie będącego wariantem. Zdolność wiązania wariantu polipeptydu można oznaczyć stosując techniki, takie jak na przykład analiza sortowania komórek aktywowanego fluorescencją (FACS) lub radioimmunoprecypitacja (RIA).
Można ocenić zdolność wariantu glikoproteiny do wiązania FcR. Gdy FcR jest receptorem Fc o wysokim powinowactwie, takim jak FcyRI, FcRn, FcyRIIB lub FcyRIIIA, wiązanie można mierzyć przez miareczkowanie wariantu monomerycznej glikoproteiny i pomiar związanego wariantu glikoproteiny stosując przeciwciało, które specyficznie wiąże wariant glikoproteiny w standardowym formacie ELISA (patrz przykłady poniżej). Inne oznaczenie wiązania FcR dla FcR z niskim powinowactwem jest opisane w WO nr 00/42072 (Presta) i patencie USA nr 6 242 195 B1.
Aby ocenić aktywność ADCC wariantu glikoproteiny w oznaczeniu in vitro można przeprowadzić oznaczenie ADCC stosując zmienne stosunki efektor:cel. Przydatne „komórki efektorowe” do takich oznaczeń obejmują jednojądrzaste komórki krwi obwodowej (PBMC) i komórki naturalnych zabójców (NK). Alternatywnie lub dodatkowo aktywność ADCC wariantu glikoproteiny można oszacować in vivo, np. w modelu zwierzęcym, takim jak ujawniono w Clynes i wsp. PNAS (USA) 95: 652-656
Można ocenić zdolność wariantu do wiązania Clq i brania udziału w cytotoksyczności zależnej od dopełniacza (CDC).
Aby oznaczyć wiązanie Clq można przeprowadzić ELISA wiązania Clq. Pokrótce, płytki do oznaczeń można powlec przez noc w 4°C wariantem glikoproteiny lub wyjściowym polipeptydem (kontrola) w buforze do powlekania. Płytki można następnie przepłukać i zablokować. Po płukaniu do każ34
PL 213 948 B1 dej studzienki można dodać próbkę ludzkiego Clq i inkubować przez 2 godz. w temperaturze pokojowej. Po dalszym płukaniu do każdej studzienki można dodać 100 μl przeciwciała Clq skoniugowanego z peroksydazą przeciw dopełniaczowi i inkubować przez 1 godzinę w temperaturze pokojowej. Płytki można ponownie płukać buforem do płukania i do każdej studzienki można dodać 100 μl buforu substratu zawierającego OPD (dichlorowodorek O-fenylenodiaminy (Sigma)). Reakcja utleniania, obserwowana przez pojawianie się żółtej barwy, może przebiegać przez 30 minut i można ją zahamować przez dodanie 100 μl 4,5 N H2SO4. Wówczas można odczytać absorbancję przy (492--405) nm.
Przykładowym wariantem glikoproteiny jest taki, który wykazuje „znaczące obniżenie wiązania Clq” w tym oznaczeniu. To oznacza, że około 100 μg/ml wariantu glikoproteiny wykazuje zmniejszenie około 50-krotne lub większe wiązania Clq w porównaniu ze 100 μg/ml kontrolnego przeciwciała mającego niezmutowany reqion Fc IgG1. W najbardziej korzystnym wykonaniu wariant glikoproteiny „nie wiąże Clq”, tzn. 100 μg/ml wariantu glikoproteiny wykazuje około 100-krotne lub większe zmniejszenie wiązania Clq w porównaniu z 100 μg/ml przeciwciała kontrolnego.
Inny przykładowy wariant to taki, który ma „lepsze powinowactwo wiązania do ludzkiego Clq niż wyjściowy polipeptyd”. Taka cząsteczka może na przykład, wykazywać poprawę dwukrotną lub większą, a korzystnie pięciokrotną lub większą wiązania ludzkiego Clq w porównaniu z wyjściowym polipeptydem (np. przy wartościach IC50 dla tych dwóch cząsteczek). Na przykład, wiązanie ludzkiego Clq może być około dwukrotnie do około 500-krotne, a korzystnie od około dwukrotnie do około pięciokrotnie do około 1000-krotnie poprawione w porównaniu z wyjściowym polipeptydem.
Aby zbadać aktywację dopełniacza, można przeprowadzić oznaczenie cytotoksyczności zależnej od dopełniacza np. jak opisano w Gazzano-Santoro i wsp., J. Immunol. Methods 202: 163 (1996). Pokrótce, różne stężenia wariantu glikoproteiny i ludzki dopełniacz mogą być rozcieńczone buforem. Komórki, które wyrażają antygen, z którym wiąże się wariant glikoproteiny mogą być rozcieńczone do ~ 1 x 106 komórek/ml. Mieszaniny wariantu glikoproteiny, rozcieńczonego ludzkiego dopełniacza i komórek wyrażających antygen można dodać do płytki z 96-płaskodennymi studzienkami i inkubować przez 2 godz. w 37°C i 5% CO2 aby ułatwić lizę komórek z udziałem dopełniacza. Następnie do każdej studzienki można dodać 50 ml błękitu alamar (Accumed International) i inkubować przez noc w 37°C. Absorbancję mierzy się stosując 96-studzienkowy fluorymetr ze wzbudzeniem przy 530 nm i emisji przy 590 nm. Wyniki można wyrazić jako jednostki względnej fluorescencji (relative fluorescence units (RFU)). Stężenia próbki można wyliczyć z krzywej standartowej i podaje się procent aktywności dla wariantu glikoproteiny będącego przedmiotem zainteresowania w porównaniu z polipeptydem nie będącym wariantem.
Jeszcze inny przykładowy wariant „nie aktywuje dopełniacza”. Na przykład, 0,6 μg/ml wariantu glikoproteiny wykazuje około 0-10% aktywności CDC w tym oznaczeniu w porównaniu z 0,6 μg/ml kontrolnego przeciwciała mającego niezmutowany region Fc IgG1. Korzystnie, wariant nie wydaje się mieć żadnej aktywności CDC w powyższym oznaczeniu CDC.
Glikoproteina może być taką, która wykazuje zwiększony CDC w porównaniu z wyjściowym polipeptydem, np. wykazując około dwukrotne do około 100-krotnego zwiększenie aktywności CDC in vitro lub in vivo (np. przy porównywaniu wartości IC50 dla każdej cząsteczki).
Warianty regionu Fc ze zmienionym powinowactwem wiązania dla receptora noworodkowego (FcRn) są tu także rozważane. Oczekuje się, że warianty regionu Fc ze zwiększonym powinowactwem do FcRn będą miały dłuższe okresy półtrwania w surowicy i takie cząsteczki będą miały użyteczne zastosowania w metodach leczenia ssaków, gdy pożądany jest długi okres półtrwania podawanej glikoproteiny, np. by leczyć przewlekła chorobę lub schorzenie. Przeciwne, oczekuje się, że warianty regionu Fc ze zmniejszonym powinowactwem wiązania do FcRn będą miały krótsze okresy półtrwania i takie cząsteczki mogą, na przykład, być podawane ssakowi gdy krótszy czas w krążeniu może być korzystny, np. dla obrazowania diagnostycznego lub dla polipeptydów, które mają toksyczne efekty uboczne gdy krążą w krwiobiegu przez przedłużone okresy czasu itd. Oczekuje się, że warianty regionu Fc ze zmniejszonym powinowactwem wiązania do FcRn mają mniejszą szansę przechodzenia przez łożysko i mogą więc być stosowane w leczeniu chorób lub zaburzeń u kobiet w ciąży.
C. Wytwarzanie przeciwciał
W korzystnym wykonaniu wynalazku, glikoproteiną, która jest zmodyfikowana według nauk tego wynalazku jest przeciwciało. Techniki wytwarzania przeciwciał są jak następuje:
(i) Wybór i wytwarzanie antygenu
Tam gdzie glikoproteiną jest przeciwciało, jest ono skierowane przeciw antygenowi będącemu przedmiotem zainteresowania. Korzystne jest, jeżeli jest ważną biologicznie glikoproteiną i podawanie
PL 213 948 B1 przeciwciała ssakowi cierpiącemu z powodu choroby albo schorzenia może prowadzić do korzyści terapeutycznej u ssaka. Jednakże, przeciwciała skierowane przeciw antygenom niepolipeptydowym (takim jak związane z nowotworem antygeny glikolipidowe; patrz patent USA nr 5 091 178) są również brane pod uwagę.
Tam, gdzie antygenem jest polipeptyd, może to być cząsteczka transbłonowa (np. receptor) albo ligand, taki jak czynnik wzrostu. Przykładowe antygeny obejmują cząsteczki takie jak renina; hormon wzrostu, włączając w to ludzki hormon wzrostu i bydlęcy hormon wzrostu; czynnik uwalniający hormon wzrostu; hormon przytarczycy; tyroksyna; lipoproteiny; alfa-1-antytrypsyna; łańcuch A insuliny; łańcuch B insuliny; proinsulina; hormon folikulotropowy; kalcytonina; hormon luteinizujący; glukagon; czynniki krzepnięcia, takie jak czynnik VIIIC, czynnik IX, czynnik tkankowy (TF) i czynnik von Wiłlebranda; czynnik przeciw-krzepnięciu, taki jak Białko C; przedsionkowy czynnik wydalania sodu z moczem; czynnik powierzchniowo czynny płuc; aktywator plazminogenu, taki jak aktywator plazminogenu urokinazowy albo z ludzkiego moczu albo typu tkankowego (t-PA); bombezyna; trombina; krwiotwórczy czynnik wzrostowy; czynnik martwicy nowotworów alfa i beta; enkefalinaza; RANTES (ang. regulated on activation normally T-cell expressed and secreted, regulowany przy aktywacji, normalnie wyrażany i wydzielany przez komórki T); ludzkie makrofagowe białko zapalne (MIP-1-alfa, ang. macrophage inflammatory protein); albumina z surowicy, taka jak ludzka albumin z surowicy; substancja hamująca Mullerian; łańcuch A relaksyny; łańcuch B relaksyny; prorelaksyna; mysi peptyd związany z gonadotropiną; białko bakteryjne, takie jak beta-laktamaza; DNaza; IgE; antygen związany z cytotoksycznymi limfocytami T (CTLA, ang. cytotoxic T-lymphocyte associated antygen), taki jak CTLA-4; inhibina; aktywina; naczyniowy śródbłonkowy czynnik wzrostowy (VEGF, ang. vascular endothelial growth factor); receptory hormonów lub czynników wzrostowych; białko A lub D; czynniki reumatoidalne; czynnik neurotropowy, taki jak czynnik neurotropowy pochodzący z kości (BDNF, ang. bonederived neurotrophic factor), neurotrofina-3, -4, -5 lub -6 (NT-3, NT-4, NT-5 lub NT-6) albo czynnik wzrostu nerwów, taki jak NGF-β; czynnik wzrostowy pochodzący z płytek krwi (PDGF, ang. plateletderived growth factor); fibroblastowy czynnik wzrostowy taki jak aFGF i bFGF; naskórkowy czynnik wzrostowy (EGF); transformujący czynnik wzrostowy (TGF), taki jak TGF-alfa i TGF-beta, włączając w to TGF^1, TGF-2, TGF3, TGF- β4 lub TGF^5; czynnik wzrostowy insulino-podobny I i II (IGF-I i IGF-II); des(1-3)-IGF-I (mózgowy IGF-I), białka wiążące czynnik wzrostowy insulino-podobny; białka CD, takie jak CD3, CD4, CD8, CD19, CD20 i CD25 (podjednostka Tac receptora IL-2); erytropoetyna; czynniki osteoinduktywne; immunotoksyny; białko morfogenetyczne kości (BMP, ang. bone morphogenetic protein); interferony, takie jak interferon -alfa, -beta i -gamma; czynniki stymulujące klonie (CSF), np. M-CSF, GM-CSF i G-CSF; interleukiny (IL), np., IL-1, IL-2, IL-3, IL-4, IL-5, IL-6, IL-7, IL-8, IL-9 i IL-10; dysmutaza ponadtlenkowa; receptory komórek T; powierzchniowe białka błonowe; czynnik przyśpieszający rozkład; antygen wirusowy, taki jak na przykład, część otoczki AIDS; białka transportowe; receptory zasiedlania; adresyny; białka regulacyjne; integryny, takie jak CD11a, CD11b, CD11c, CD18 oraz ICAM, VLA-4 lub VCAM; antygen związany z nowotworem, taki jak receptor HER2, HER3 lub HER4; oraz fragmenty dowolnego z wymienionych powyżej polipeptydów.
Przykładowe cząsteczki docelowe dla przeciwciał objętych niniejszym wynalazkiem obejmują markery powierzchniowe albo białka CD, takie jak CD3, CD4, CD8, CD19, CD20, CD22, CD34 i CD40; członków rodziny receptora ErbB, takich jak receptor EGF, receptor HER2, receptor HER3 lub receptor HER4; antygen specyficzny dla komórek macierzystych prostaty (PSCA); cząsteczki adhezji komórkowej, takie jak LFA-1, Mac1, pl50.95, VLA-4, ICAM-1, VCAM, integryna α4/β7 i integryna αν/β3, włączając w to jej podjednostki α lub β (np. przeciwciała anty-CD11a, anty-CD18 lub anty-CD11b); czynniki wzrostowe, takie jak VEGF; czynnik tkankowy (TF, ang. tissue factor); interferon alfa (α-IFN); interleukina, taka jak IL-8; IgE; antygeny grupy krwi; receptor flk2/flt3; receptor otyłości (OB); receptor mpl; CTLA-4; białko C, itd.
Rozpuszczalne antygeny lub ich fragmenty, ewentualnie połączone z innymi cząsteczkami, można zastosować jako immunogeny do wytwarzania przeciwciał. Dla cząsteczek transbłonowych, takich jak receptory, jako immunogen można użyć ich fragmenty (np. zewnątrzkomórkową domenę receptora). Alternatywnie, jako immunogen można użyć komórki wyrażające cząsteczkę transbłonową. Takie komórki mogą pochodzić ze źródła naturalnego (np. nowotworowych linii komórkowych) albo mogą być komórkami, które zostały stransformowane technikami rekombinowania DNA w celu uzyskania ekspresji cząsteczki transbłonowej. Inne antygeny i ich postaci przydatne do wytwarzania przeciwciał będą oczywiste dla specjalistów w tej dziedzinie.
PL 213 948 B1 (ii) Przeciwciała poliklonalne
Przeciwciała poliklonalne korzystnie wzbudza się w zwierzętach poprzez wielokrotne podskórne (sc) albo dootrzewnowe (ip) wstrzyknięcie odpowiedniego antygenu i adiuwanta. Może być przydatne sprzężenie odpowiedniego antygenu z białkiem, które jest immunogenne w gatunkach, które mają być immunizowane, np. hemocyjaniną ze skałoczepa, albuminą z surowicy, wołową tyroglobuliną albo inhibitorem trypsyny z ziaren soi, stosując czynnik bifunkcjonalny albo derywatyzujący, na przykład ester maleimidobenzoylosulfosukcynoimidowy (sprzężenie poprzez reszty cysteinowe), N-hydroksysukcynimid (poprzez reszty lizyowe), glutaraldehyd, bezwodnik bursztynianowy, SOCl2 lub
R1N=C=NR, gdzie R i R1 są różnymi grupami alkilowymi.
Zwierzęta immunizuje się przeciw antygenowi, immunogennym koniugatom albo pochodnym poprzez zmieszanie np. 100 μg lub 5 μg białka albo koniugatu (dla królików i myszy, odpowiednio) z 3 objętościami kompletnego adiuwanta Freunda i wstrzykniecie roztworu doskórne w wielu miejscach. Miesiąc później zwierzętom podaje się dawkę przypominającą wstrzykując doskórnie w wielu miejscach 1/5 do 1/10 wyjściowej ilości peptydu albo koniugatu w kompletnym adiuwancie Freunda. Siedem do 14 dni później zwierzęta skrwawia się i surowice testuje pod kątem miana przeciwciała. Zwierzętom podaje się dawki przypominające aż do osiągnięcia plateau. Korzystne jest, jeżeli zwierzętom podaje się dawkę przypominającą z koniugatem tego samego antygenu, ale sprzężonym z różnymi białkami i/lub poprzez inny czynnik łączący krzyżowo. Koniugaty można również wytwarzać w zrekombinowanych hodowlach komórkowych jako fuzje białkowe. Ponadto, czynniki agregujące, takie jak ałun są odpowiednie do zastosowania do wzmacniania odpowiedzi immunologicznej.
(ii) Przeciwciała monoklonalne
Przeciwciała monoklonalne można wytworzyć stosując metodę hybrydom opisaną po raz pierwszy przez Kohler i wsp., Nature, 256: 495 (1975) albo można wytwarzać metodami rekombinowania DNA (patent USA nr 4 816 567).
W metodzie hybrydomy, mysz albo inne odpowiednie zwierzę będące gospodarzem, takie jak chomik, immunizuje się jak opisano powyżej w celu wzbudzenia limfocytów, które wytwarzają albo są zdolne do wytwarzania przeciwciał wiążących się specyficznie z białkiem zastosowanym do immunizacji. Alternatywnie, limfocyty można immunizować in vitro. Limfocyty można następnie poddać fuzji z komórkami szpiczaka stosując odpowiedni czynnik powodujący fuzję, taki jak glikol polietylenowy, do wytwarzania komórek hybrydomy (Goding, Monoclonal Antybodies: Principles and Practice, str. 59-103 (Academic Press, 1986).
Utworzone w ten sposób komórki hybrydomy wysiewa się i hoduje na odpowiedniej pożywce hodowlanej, która korzystnie zawiera jedną albo większą liczbę substancji, które hamują wzrost i przeżycie nie poddanych fuzji rodzicielskich komórek szpiczaka. Przykładowo, jeśli w rodzicielskim szpiczaku brak jest enzymu fosforybozylotransferazy hipokantyno-guaninowej (HGPRT lub HPRT), pożywka hodowlana dla hybrydom zwykle zawiera hipoksantynę, aminopterynę oraz tymidynę (pożywka HAT), które to substancje zapobiegają wzrostowi komórek z brakiem HGPRT.
Korzystnymi komórkami szpiczaka są takie, które podlegają fuzji wydajnie, utrzymują stabilny poziom wytwarzania przeciwciała przez wybrane komórki wytwarzające przeciwciało i są wrażliwe na pożywkę, taką jak HAT. Wśród nich, korzystnymi liniami komórkowymi szpiczaka są linie mysiego szpiczaka, takie jak te pochodzące z mysich nowotworów MOPC-21 i MPC-11 dostępne z Salk Institute Cell Distribution Center, San Diego, California USA oraz komórki SP-2 lub X63-Ag8-653 dostępne z American Type Culture Collection, Rockville, Maryland USA. Zostały również opisane komórki ludzkiego szpiczaka i linie komórkowe mysio-ludzkiego heretoszpiczaka do wytwarzania ludzkich przeciwciał monoklonalnych (Kozbor, J. Immunol., 133: 3001 (1984) oraz Brodeur i wsp., Monoclonal Antybody Production Techniques and Applications, str. 51-63 (Marcel Dekker, Inc., New York, 1987)).
Pożywki hodowlane, w których hoduje się komórki, testuje się pod kątem wytwarzania przeciwciał monoklonalnych skierowanych wobec antygenu. Korzystne jest, jeżeli specyficzność wiązania przeciwciał monoklonalnych wytwarzanych przez komórki hybrydomy określa się poprzez immunoprecypitację albo test wiązania in vitro, taki jak test radioimmunologiczny (RIA) albo enzymatyczny test immunosorpcyjny (ELISA).
Po zidentyfikowaniu komórek hybrydomy, które wytwarzają przeciwciała o pożądanej specyficzności, powinowactwie i/lub aktywności, klon można subklonować poprzez procedurę ograniczonych rozciehczeń i hodować według standardowych metod (Goding, Monoclonal Antybodies: Principles and
Practice, str. 59-103 (Academic Press, 1986). Odpowiednie pożywki hodowlane do tych celów obejPL 213 948 B1 mują na przykład pożywkę, D-MEM lub pożywkę RPMI-1640. Ponadto, komórki hybrydomy można hodować in vivo w nowotworach puchlinowych u zwierząt.
Przeciwciała monoklonalne wydzielane przez subklony dogodnie jest wydzielać z pożywki hodowlanej, płynów puchlinowych albo surowicy poprzez konwencjonalne procedury oczyszczania przeciwciał, takie jak na przykład chromatografia na białku A-sefarozie, hydroksyloapatycie, elektroforeza w żelu, dializa albo chromatografia powinowactwa.
DNA kodujący przeciwciała monoklonalne można łatwo wyizolować i zsekwencjonować stosując konwencjonalne procedury (np. poprzez zastosowanie sond oligonukleotydowych, które mają zdolność wiązania się specyficznie z genami kodującymi lekkie i ciężkie łańcuchy mysich przeciwciał). Komórki hybrydomy służą jako korzystne źródło takiego DNA. Po wyizolowaniu, DNA można umieszczać w wektorach ekspresyjnych, które transfekuje się następnie do komórek gospodarza, takich jak komórki E. coli, małpie komórki COS, komórki jajnika chomika chińskiego (ang. Chinese Hamster Ovary, CHO) lub komórki szpiczaka, które w innym przypadku nie wytwarzają przeciwciała, w celu otrzymania syntezy przeciwciał monoklonalnych w zrekombinowanych komórkach gospodarza. Artykuły przeglądowe na temat rekombinowanej ekspresji w bakteriach DNA kodującego przeciwciała obejmują Skerra i wsp., Curr. Opinion in Immunol, 5: 256-262 (1993) oraz Pluckthun, Immunol. Revs., 130: 151-188 (1992). Rekombinowana ekspresja przeciwciał jest opisana bardziej szczegółowo poniżej.
W dalszym wykonaniu, przeciwciała monoklonalne albo fragmenty przeciwciał można izolować z przeciwciałowych bibliotek fagowych wytworzonych przy zastosowaniu technik opisanych w McCafferty i wsp., Nature, 348: 552-554 (1990). Clackson i wsp., Nature, 352: 624-628 (1991) oraz Marks i wsp., J. Mol. Biol, 222: 581-597 (1991) opisują izolację przeciwciał mysich i ludzkich, odpowiednio, przy zastosowaniu bibliotek fagowych. Kolejne publikacje opisują wytwarzanie ludzkich przeciwciał o wysokim powinowactwie (rzędu nM) poprzez tasowanie łańcuchów (Marks i wsp., Bio/Technology, 10: 779-783 (1992)), jak również kombinatoryczną infekcję i rekombinację in vivo jako strategię konstruowania bardzo dużych bibliotek fagowych (Waterhouse i wsp., Nuc. Acids. Res., 21: 2265-2266 (1993)). A zatem techniki te stanowią atrakcyjną alternatywę wobec tradycyjnych technik hybrydom monoklonalnych przeciwciał do izolacji przeciwciał monoklonalnych.
DNA można również modyfikować, na przykład poprzez podstawienie sekwencji kodującej domen stałych ludzkiego łańcucha ciężkiego i lekkiego w miejsce homologicznych sekwencji mysich (patent USA nr 4 816 567 oraz Morrison i wsp., Proc. Natl Acad. Sci. USA, 81: 6851 (1984)) albo poprzez połączenie kowalencyjne sekwencji kodujących immunoglobulinę, całych albo części, z sekwencją kodującą polipeptydu innego niż immunoglobulina.
Typowo, takim polipeptydem innym niż immunoglobulina zastępuje się domeny regionu stałego przeciwciała albo zastępuje się zmienne miejsca wiązania antygenu w celu wytworzenia chimerowego dwuwartościowego przeciwciała zawierającego jedno miejsce wiązania antygenu mające specyficzność wobec antygenu i inne miejsce wiążące antygen mające specyficzność wobec odmiennego antygenu.
(iv) Przeciwciała humanizowane i ludzkie
Przeciwciało humanizowane ma wprowadzoną jedną albo większą liczbę reszt aminokwasowych ze źródła innego niż człowiek. Te nie-ludzkie reszty aminokwasowe są często określane jako reszty „zaimportowane”, które są typowo wzięte z „zaimportowanej” domeny zmiennej. Humanizację można zasadniczo przeprowadzić według metody Winter i współpracowników (Jones i wsp., Nature, 321: 522-525 (1986); Riechmann i wsp., Nature, 332: 323-327 (1988); Verhoeyen i wsp., Science, 239: 1534-1536 (1988)), poprzez zastąpienie sekwencji jednego lub więcej CDR gryzoni odpowiadającymi im sekwencjami przeciwciała ludzkiego. A zatem, takimi przeciwciałami „humanizowanymi” są przeciwciała chimerowe (patent USA nr 4 816 567), gdzie zasadniczo mniej niż nienaruszona ludzka domena zmienna została zastąpiona odpowiednią sekwencją z gatunku innego niż człowiek. W praktyce, przeciwciałami humanizowanymi są typowo przeciwciała ludzkie, w których niektóre reszty z regionu hiperzmiennego i możliwe że niektóre reszty FR są zastąpione resztami z analogicznych miejsc w przeciwciałach gryzoni.
Wybór ludzkich domen zmiennych, zarówno lekkiej, jak i ciężkiej, która ma być zastosowana do wytwarzania humanizowanych przeciwciał jest bardzo ważna dla zmniejszenia antygenności. Według tak zwanej metody „najlepszego dopasowania” sekwencje domeny zmiennej przeciwciała gryzonia przeszukuje się wobec całej biblioteki znanych ludzkich sekwencji ludzkiej domeny zmiennej. Ludzka sekwencja, która jest najbliższa tej z gryzoni jest następnie zaakceptowana jako ludzki region zrębowy (FA) dla humanizowanego przeciwciała (Sims i wsp., J. Immunol, 151: 2296 (1993); Chothia i wsp.,
PL 213 948 B1
J. Mol Biol, 196: 901 (1987)). Inne metody stosują konkretny region zrębowy pochodzący z sekwencji najwyższej zgodności wszystkich ludzkich przeciwciał z danej podgrupy łańcuchów lekkich i ciężkich. Ten sam region zrębowy może być zastosowany dla kilku różnych przeciwciał humanizowanych (Carter i wsp., Proc. Natl Acad. Sci. USA, 89: 4285 (1992); Presta i wsp., J. Immunol, 151: 2623 (1993)).
Ważne jest ponadto, żeby przeciwciała były humanizowane z zachowaniem wysokiego powinowactwa do antygenu i innych korzystnych właściwości biologicznych. Aby osiągnąć ten cel według korzystnych metod humanizowane przeciwciała wytwarza się poprzez przeprowadzenie analizy sekwencji rodzicielskich I różnych zaprojektowanych produktów humanizowanych przy użyciu trójwymiarowych modeli sekwencji rodzicielskich i humanizowanych. Trójwymiarowe modele immunoglobulin są powszechnie dostępne i są znane specjalistom w tej dziedzinie. Dostępne są programy komputerowe, które ilustrują i pokazują możliwe trójwymiarowe struktury konformacyjne wybranych kandydatów dla sekwencji immunoglobulin. Badanie tych obrazów umożliwia analizę prawdopodobnej roli reszt w funkcjonowaniu sekwencji immunoglobuliny-kandydata, tj. analizę reszt, które wpływają na zdolność immunoglobuliny- kandydata do wiązania się ze swoim antygen. W ten sposób można wybrać reszty FR i połączyć sekwencje biorcy i zaimportowane, uzyskując pożądane właściwości przeciwciała, takie jak zwiększone powinowactwo do docelowych antygenu(ów). Generalnie, reszty regionu CDR mają bezpośredni i najbardziej znaczący wpływ na wiązanie antygenu.
Alternatywnie, możliwe jest obecnie wytwarzanie transgenicznych zwierząt (np. myszy), które po immunizacji są zdolne do wytwarzania pełnego repertuaru ludzkich przeciwciał w nieobecności wytwarzania endogennych immunoglobulin. Przykładowo, opisano, że homozygotyczna delecja regionu łącznikowego łańcucha ciężkiego (JH) przeciwciała w mutancie chimerowym i w linii płciowej myszy prowadzi do całkowitego zahamowania wytwarzania endogennych przeciwciał.
Przeniesienie ludzkiego układu genów z ludzkiej linii płciowej do takiego mutanta w linii płciowej myszy będzie prowadziła do wytwarzania ludzkich przeciwciał po prowokacji antygenem. Patrz np. Jakobovits i wsp., Proc. Natl Acad. Sci USA, 90: 2551 (1993); Jakobovits i wsp., Nature, 362: 255-258 (1993); Bruggermann i wsp., Year in Immuno., 7: 33 (1993) oraz Duchosal i wsp. Nature 355: 258 (1992). Ludzkie przeciwciała mogą również pochodzić z bibliotek z prezentacją na fagach (Hoogenboom i wsp., J. Mol. Biol., 227: 381 (1991); Marks i wsp., J. Mol. Biol., 222: 581-597 (1991); Vaughan I wsp. Nature Biotech 14: 309 (1996)).
(v) Przeciwciała multispecyficzne
Przeciwciała multispecyficzne mają specyficzności wiązania wobec co najmniej dwóch różnych antygenów. Jakkolwiek takie cząsteczki normalnie będą wiązać jedynie dwa antygeny (tj. przeciwciała bispecyficzne, BsAbs), przeciwciała z dodatkowymi specyficznościami, takie jak przeciwciała trispecyficzne, są objęte przez stosowane tu wyrażenie. Przykłady BsAbs obejmują te, które mają jedno ramię skierowane wobec antygenowi komórki nowotworowej, a drugie ramię skierowane wobec cząsteczce
HER2 będącej cytotoksycznym włącznikiem, takie jak anty-FcYRI/anty-CD15, anty-pl85 /FcyRIII (CD16), anty-CD3/anty-rakowa komórka B (1D10), anty-CD3/anty-pl85HER2, anty-CD3/anty-p97, anty-CD3/-anty-rak komórek nerkowych, anty-CD3/anty-OVCAR-3, anty-CD3/L-D1 (anty-rak okrężnicy), anty-CD3/anty-analog hormonu stymulującego melanocyty, anty-receptor EGF/anty-CD3, anty-CD3-antyCAMA1, anty-CD3/anty-CD19, anty-CD3/MoV18, anty-cząsteczka adhezji komórek nerwowych (NCAM)/anty-CD3, anty-białko wiążące folian (FBP)/anty-CD3, anty-antygen związany z uogólnionym rakiem (AMOC-31)/anty-CD3; BsAbs z jednym ramieniem, które wiąże się specyficznie z antygenem nowotworowym i jednym ramieniem, które wiąże się z toksyną, takie jak anty-saporyna/anty-Id-1, anty-CD22/anty-saporyna, anty-CD7/anty-saporyna, anty-CD38/anty-saporyna, anty-CEA/anty-łańcuch A rycyny, anty-interferon-α (FN^/anty-idiotyp hybrydomy, anty-CEA/anty-alkaloid winka; BsAbs dla enzymów - konwertaz aktywujących proleki, takie jak anty-CD30/anty-alkaliczna fosfataza (która katalizuje przekształcenie proleku - fosforanu mitomycyny do alkoholu mitomycyny); BsAbs, które można użyć jako czynniki do lizowania skrzepów, takie jak anty-fibryna/anty-tkankowy aktywator plazminogenu (tPA), anty-fibryna/anty-aktywator plazminogenu typu urokinazy (uPA); BsAbs dla kierowania kompleksów immunologicznych do komórkowych receptorów powierzchniowych, takie jak anty-likporoteina o niskiej gęstości (LDL)/anty-receptor Fc (np. FcyRI, FcyRII lub FcyRIII); BsAbs do zastosowania w terapii chorób infekcyjnych, takie jak anty-CD3/anty-wirus opryszczki pospolitej (HSV), anty kompleks receptora komórek T:CD3/anty-wirus grypy, anty-FcYR/anty-HIV; BsAbs dla wykrywania nowotworu in vitro lub in vivo, takie jak anty-CEA/anty-EOTUBE, anty-CEA/anty-DPTA, anty-p185HER2/anty-hapten; BsAbs jako adiuwanty szczepionkowe oraz BsAbs jako narzędzia diagnostyczne, takie jak
PL 213 948 B1 anty-królicza IgG/anty-ferrytyna, anty-peroksydaza chrzanowa (HRP)/anty-hormon, anty-somatostatyna/anty-substancja P, anty-HRP/anty-FITC, anty-CEA/anty-e-galaktozydaza.
Przykłady przeciwciał trispecicznych obejmują anty-CD3/anty-CD4/anty-CD37, anty-CD3/anty-CD5/anty-CD37 i anty-CD3/anty-CD8/anty-CD37.
Przeciwciała bispecyficzne można wytwarzać jako przeciwciała pełnej długości albo fragmenty przeciwciał (np. przeciwciała bispecyficzne F(ab')2). Przegląd przeciwciał bispecyficznych jest w Segal i wsp. J. Immunol. Methods 248: 1-6 (2001).
Sposoby wytwarzania przeciwciał bispecyficznych są znane w tej dziedzinie. Tradycyjne wytwarzanie bispecyficznych przeciwciał pełnej długości opiera się na jednoczesnej ekspresji dwóch lekkich i ciężkich łańcuchów immunoglobuliny, gdzie te dwa łańcuchy mają różne specyficzności (Miilstein i wsp., Nature, 305: 537-539 (1983)). Dzięki losowemu doborowi łańcuchów lekkich i ciężkich, hybrydomy te (kwadromy) wytwarzają potencjalnie mieszaninę 10 różnych cząsteczek przeciwciał, z których tylko jedna ma prawidłową strukturę bispecyficzną. Oczyszczanie prawidłowej cząsteczki, które zwykle wykonuje się poprzez etapy oczyszczania przez powinowactwo jest raczej kłopotliwe, a wydajność produktów niska. Podobne procedury są ujawnione w WO 93/08829 i Traunecker i wsp., EMBO J., 10: 3655-3659 (1991).
W różnych podejściach domeny zmienne przeciwciała z pożądanymi specyficznościami wiązania (miejsca połączenia przeciwciało-antygen) łączy się z sekwencjami domen stałych immunoglobuliny, zawierającymi co najmniej część regionu zawiasowego, CH2 i CH3. Korzystne jest posiadanie pierwszego regionu stałego łańcucha ciężkiego (CH1) zawierającego miejsce niezbędne do wiązania łańcucha lekkiego, obecnego w co najmniej jednej z fuzji. DNA kodujący fuzję łańcucha ciężkiego immunoglobuliny i jeżeli to pożądane, łańcuch lekki immunoglobuliny, wstawia się do odrębnych wektorów ekspresyjnych i przeprowadza kotransfekcję do odpowiedniego organizmu gospodarza. To daje dużą elastyczność w dobieraniu wzajemnych proporcji trzech fragmentów polipeptydowych w wykonaniach, tam gdzie stosowanie nierównych proporcji trzech fragmentów polipeptydowych przy konstrukcji dostarcza optymalnych wydajności. Możliwe jest jednakże wstawienie sekwencji kodujących dla dwóch albo wszystkich trzech łańcuchów polipeptydowych do jednego wektora ekspresyjnego, kiedy ekspresja co najmniej dwóch łańcuchów polipeptydowych w równych proporcjach prowadzi do wysokich wydajności lub kiedy stosunki nie mają szczególnego znaczenia.
W korzystnym wykonaniu tego podejścia przeciwciała składają się z hybrydowego łańcucha ciężkiego immunoglobuliny z pierwszą specyficznością wiązania w jednym ramieniu i hybrydowej pary łańcuchów lekkich immunoglobuliny (dostarczającego drugiej specyficzności wiązania) w drugim ramieniu. Stwierdzono, że ta niesymetryczna struktura ułatwia rozdzielenie pożądanych bispecyficznych składników od niepożądanej kombinacji łańcuchów immunoglobulinowych, ponieważ obecność łańcucha lekkiego immunoglobuliny tylko w jedynej połowie bispecyficznej cząsteczki dostarcza łatwego sposobu rozdziału. Podejście to jest ujawnione w WO 94/04690. Dla dalszych szczegółów wytwarzania bispecyficznych przeciwciał, patrz na przykład Suresh i wsp., Methods In Enzymology, 121: 210 (1986). Według innego podejścia opisanego w patencie W096/27011, miejsce styku pomiędzy parą cząsteczek przeciwciała można poddać manipulacjom tak, aby zmaksymalizować udział procentowy heterodimerów, które odzyskuje się z hodowli zrekombinowanych komórek. Korzystne miejsce styku obejmuje co najmniej część domeny stałej CH3 przeciwciała. W tej metodzie, jeden albo więcej małych bocznych łańcuchów aminokwasowych z miejsca styku w pierwszej cząsteczce przeciwciała zastępuje się dłuższymi łańcuchami bocznymi (np. tyrozyną albo tryptofanem). Kompensujące „zagłębienia” o identycznych albo podobnych rozmiarach co duży łańcuch(y) boczny(e) wytwarza się w miejscu styku w drugiej cząsteczce przeciwciała poprzez zastąpienie dużego aminokwasowego łańcucha bocznego mniejszym (np. alaniną albo treoniną). Dostarcza to mechanizmu dla zwiększenia wydajności heterodimeru w stosunku do niepożądanych produktów końcowych, takich jak homodimery.
Przeciwciała bispecyficzne obejmują przeciwciała połączone krzyżowo lub „heterokoniugaty”. Przykładowo, jedno z przeciwciał w heterokoniugacie może być połączone z awidyną, a inne z biotyną. Zaproponowano, żeby takie przeciwciała wykorzystać do kierowania komórek układu immunologicznego do niechcianych komórek (patent USA nr 4 676 980) i do leczenia zakażenia HIV (WO 91/00360, WO 92/20373 i EP 03 089). Przeciwciała-immunokoniugaty można wytwarzać stosując dowolne dogodne metody łączenia krzyżowego. Odpowiednie czynniki do łączenia krzyżowego są dobrze znane w tej dziedzinie i są ujawnione w patencie USA nr 4 676 980, razem z wieloma innymi technikami łączenia krzyżowego.
PL 213 948 B1
Bierze się również pod uwagę możliwość zastosowania przeciwciał z więcej niż dwiema wartościowościami. Przykładowo, można wytworzyć przeciwciała trój specyficzne. Tutt i wsp., J. Immunol. 147: 60 (1991).
(vi) Przeciwciała wielowartościowe
Przeciwciało wielowartościowe może być internalizowane (albo katabolizowane) szybciej niż przeciwciało dwuwartościowe przez komórkę wyrażającą antygen, do którego wiążą się przeciwciała. Przeciwciałami według wynalazku mogą być przeciwciała wielowartościowe (które są innymi niż klasy IgM) z trzema albo większą liczbą miejsc wiązania (np. przeciwciała czterowartościowe), które można łatwo wytworzyć poprzez ekspresję zrekombinowanych kwasów nukleinowych kodujących łańcuchy polipeptydowe przeciwciała. Przeciwciało wielowartościowe może zawierać domenę dimeryzacji i trzy lub więcej miejsc wiązania antygenu. Korzystna domena dimeryzacji zawiera (albo składa się z) region Fc albo region zawiasowy. W tym wykonaniu przeciwciało będzie zawierało region Fc i trzy lub więcej miejsc wiązania antygenu po stronie amino-końcowej regionu Fc. Korzystne przeciwciało wielowartościowe tu ujawnione zawiera (albo składa się z) trzech do około ośmiu, ale korzystnie czterech miejsc wiązania antygenu. Przeciwciało wielowartościowe zawiera co najmniej jeden łańcuch polipeptydowy (a korzystnie dwa łańcuchy polipeptydowe) gdzie łańcuch(y) polipeptydowy(e) zawiera dwie lub więcej domen zmiennych. Przykładowo, łańcuch(y) polipeptydowy (e) może zawierać VD1-(X1)n-VD2-(X2)n-Fc, gdzie VD1 jest pierwszą domeną zmienną, VD2 jest drugą domeną zmienną, Fc jest jednym łańcuchem polipeptydowym regionu Fc, X1 i X2 reprezentują aminokwas albo polipeptyd, a n to 0 lub 1. Przykładowo, łańcuch(y) polipeptydowy(e) może zawierać VH-CH1-elastyczny łącznik-VH-CH1-łańcuch regionu Fc albo VH-CH1-VH-CH1-łańcuch regionu Fc. Korzystne jest, jeżeli przeciwciało wielowartościowe tu rozważane zawiera ponadto co najmniej dwa (a korzystnie cztery) polipeptydy domen zmiennych łańcucha lekkiego. Przeciwciało wielowartościowe tu rozważane może zawierać na przykład od około dwóch do około ośmiu polipeptydów domen zmiennych łańcucha lekkiego. Rozważane tu polipeptydy domen zmiennych łańcucha lekkiego zawierają domenę zmiennej łańcucha lekkiego i ewentualnie zawierają ponadto domenę CL. Przeciwciała wielowartościowe są opisane w WO 01/00238 i WO 00/44788.
(vii) Przeciwciała z rozwiniętym powinowactwem
Rozważane tu przeciwciało może być przeciwciałem z rozwiniętym powinowactwem zawierającym podstawienie(a) jednego albo większej liczby reszt regionu hiperzmiennego przeciwciała rodzicielskiego (np. przeciwciała humanizowanego albo ludzkiego). Generalnie, otrzymany w rezultacie wariant(y) wybierane do dalszych badań będą miały polepszone właściwości biologiczne w stosunku do przeciwciał rodzicielskich, z których zostały wytworzone. Dogodny sposób wytwarzania takich wariantów z podstawieniami obejmuje rozwijanie powinowactwa przy zastosowaniu prezentacji na fagach. W skrócie, kilka miejsc w regionach hiperzmiennych (np. 6-7 miejsc) mutuje się w celu wytworzenia wszystkich możliwych podstawień aminokwasowych w każdym miejscu. Wytworzone w ten sposób warianty przeciwciała prezentuje się w sposób monowartościowy na cząstkach fagów nitkowatych jako fuzje z produktem genu III M13 zapakowanym w każdej cząstce. Warianty prezentowane na fagach przeszukuje się następnie pod kątem aktywności biologicznej (np. powinowactwa wiązania) jak tu ujawniono. W celu zidentyfikowania miejsc regionu zmiennego będących kandydatami na modyfikację, przeprowadza się alaninową mutagenezę skaningową w celu zidentyfikowania reszt regionu biorących znaczący udział w wiązaniu antygenu. Alternatywnie albo dodatkowo, może być korzystna analiza struktury krystalicznej kompleksu antygen-przeciwciało w celu zidentyfikowania miejsc styku pomiędzy przeciwciałem i jego antygenem. Takie reszty na styku lub sąsiadujące są kandydatami na podstawienia zgodnie z omówionymi tu technikami. Po wytworzeniu takich wariantów, zestawy wariantów poddaje się przeszukiwaniu jak tu opisano i przeciwciała o lepszych właściwościach w jednym albo większej liczbie odpowiednich testów można wybrać do dalszych badań, (vii) Immunokoniugaty
Wynalazek dotyczy również terapii immunokoniugatami zawierającymi glikoproteinę połączoną z czynnikiem przeciwnowotworowym, takim jak czynnik cytotoksyczny lub czynnik hamujący wzrost.
Czynniki chemioterapeutyczne przydatne do wytwarzania takich immunokoniugatów zostały opisane powyżej.
Koniugaty przeciwciała i jednej albo większej liczby małych cząsteczek toksyn, takich jak kalicheamycyna, maitansynoidy, trichoten i CC1065 oraz pochodne tych toksyn, które mają aktywność toksyny są tu również brane pod uwagę.
PL 213 948 B1
W jednym z korzystnych wykonań wynalazku, glikoproteina według wynalazku jest połączona z jedną albo większą liczbą cząsteczek maitansynoidu.
Koniugaty glikoproteina-maitansynoid można wytwarzać poprzez połączenie chemiczne glikoproteiny (np. przeciwciała) z cząsteczką maitansynoidu bez znaczącego zmniejszenia aktywności biologicznej zarówno glikoproteiny, jak cząsteczki maitansynoidu. Wykazano skuteczność około 3-4 cząsteczek maitansynoidu połączonych z cząsteczką przeciwciała w zwiększaniu cytotoksyczności komórek docelowych bez negatywnego wpływania na funkcję albo rozpuszczalność przeciwciała, jakkolwiek można się spodziewać, że nawet jedna cząsteczka toksyny/przeciwciało będzie zwiększać cytotoksyczność w porównaniu z zastosowaniem nagiego przeciwciała. Maitansynoidy są dobrze znane w tej dziedzinie i mogą być syntetyzowane znanymi technikami albo izolowane z naturalnych źródeł. Przydatne maitansynoidy są ujawnione na przykład w patencie USA nr 5 208 020. Korzystnymi maitansynoidami są maitansynol i analogi maitansynolu zmodyfikowane w pierścieniu aromatycznym albo innych pozycjach cząsteczki maitansynolu, takie jak rozmaite estry maitansynolu. Istnieje wiele grup łączących znanych w dziedzinie wytwarzania koniugatów przeciwciało-maitansynoid, włączając w to między innymi te ujawnione w patencie USA 5208020 lub patencie EP nr 0 425 235 B1 oraz Chari i wsp., Cancer Research 52: 127-131 (1992). Grupy łączące obejmują grupy dwusiarczkowe, grupy tioetereowe, grupy kwasolabilne, grupy fotolabilne, grupy rozkładane przez peptydazy albo grupy rozkładane przez esterazy jak ujawniono w wymienionych powyżej patentach, przy czym korzystne są grupy dwusiarczkowe i tioeterowe. Koniugaty przeciwciała i maitansynoidu można wytwarzać przy użyciu rozmaitych bifunkcjonalnych czynników łączących białka, takich jak N- sukcynimidylo-3-(2-pirydylotio)propionian (SPDP), sukcynimidylo-4-(N-maleimidometylo)cykloheksano-1-karboksylan, iminotiolan (IT), bifunkcjonlne pochodne imidoesterów (takie jak dimetyloadipimidan HCl), aktywne estry (takie jak disukinimidylosuberan), aldehydy (takie jak glutareldehyd), związki bis-azydowe (takie jak bis(p-azydobenzoylo) heksanodiamina), pochodne bis-diazoniowe (takie jak bis-(p-diazoniumbenzoylo)etylenodiamino), diizocyjaniany (takie jak tolieno 2,6-diizocyjanian) oraz bis-aktywne związki fluoru (takie jak 1,5-difluoro-2,4-dinitrobenzen).
Szczególnie korzystnymi czynnikami łączącymi dla dostarczania wiązań dwusiarczkowych są N-sukcynimidylo-3-(2-pirydylotio)propionian (SPDP) (Carlsson i wsp., Biochem. J. 173: 723-737 [1978]) i N-sukcynimidylo-4-(2-pirydylotio)pentanian (SPP). Łącznik może być przyłączony do cząsteczki maitansynoidu w różnych pozycjach, w zależności od typu połączenia. Przykładowo, wiązanie estrowe może być utworzone w pozycji C-3 mającej grypę hydroksylową, w pozycji C-14 zmodyfikowanej hyrdoksymetylem, w pozycji C-15 zmodyfikowanej grupą hydroksylową oraz pozycji C-20 mającej grupę hydroksylową przy zastosowaniu konwencjonalnych technik łączenia. W korzystnym wykonaniu, połączenie jest tworzone w pozycji C-3 maitansynolu albo analogu maitansynolu.
Inny immunokoniugat będący przedmiotem zainteresowania stanowi glikoproteina połączona z jedną albo większą liczbą cząsteczek kalicheamycyny. Rodzina antybiotyków kalicheamycynynowych ma zdolność wytwarzania dwuniciowych pęknięć w DNA przy sub-pikomolowych stężeniach. Po wytwarzanie koniugatów z rodziny kalicheamycyny patrz patenty USA nr nr 5 712 374, 5 714 586, 5 739 116, 5 767 285, 5 770 701, 5 770 710, 5 773 001, 5 877 296 (wszystkie dla American Cyanamid Company). Analogi strukturalne kalicheamycyny, które można zastosować obejmują między innymi γ1 1, α21, α31, N-acetylo-γ-ι1, PSAG i θ1 1 (Hinman i wsp. Cancer Research 53: 3336-3342 (1993) oraz Lode i wsp. Cancer Research 58: 2925-2928 (1998)) i wspomniane powyżej patenty USA dla American Cyanamid Company. Innym lekiem przeciwnowotworowym, z którym glikoproteina może być połączona to QFA, który jest antyfolianem. Zarówno kalicheamycyna, jak i QFA mają wewnątrzkomórkowe miejsce działania i nie przechodzą łatwo przez błonę plazmatyczną. A zatem pobieranie przez komórki tych czynników poprzez internalizację za pośrednictwem przeciwciała znacznie zwiększa ich efekty cytotoksyczne.
Inne czynniki przeciwnowotworowe, które można łączyć z glikoproteinami według wynalazku obejmują BCNU, streptozoicynę, winkrystynę i 5-fluorouracyl, rodzinę czynników znanych wspólnie jako kompleks LL-E33288 opisany w patentach USA nr 5 053 394, nr 5 770 710, jak również esperamycyny (patent USA nr 5 877 296).
Aktywne enzymatycznie toksyny i ich fragmenty, które można zastosować obejmują łańcuch A błonicy, niewiążące się aktywne fragmenty toksyny błonicy, łańcuch A egzotoksyny (z Pseudomonas aeruginosa), łańcuch A rycyny, łańcuch A abryny, łańcuch A modecyny, alfa-sarcynę, białka Aleurites fordii, białka dlantyny, białka Phytolaca americana (PAPI, PAPII i PAP-S), inhibitor Momordica charan42
PL 213 948 B1 tya, kurcynę, krotynę, inhibitor Sapaonaria officinalis, żeloninę, mitożelinę, restriktocynę, fenomycynę, enomycynę oraz trikoteceny. Patrz, na przykład, WO 93/21232 opublikowany 28 października, 1993.
Niniejszy wynalazek bierze ponadto pod uwagę immunokoniugaty utworzone pomiędzy glikoproteiną i związkiem o aktywności nukleolitycznej (np. rybonukleazą albo nukleazą DNA, taką jak deoksyrybonukleaza; DNaza).
Do wybiórczego niszczenia nowotworu, przeciwciało może zawierać wysoce radioaktywny atom. Rozmaite izotopy radioaktywne są dostępne do wytwarzania radiokoniugatów przeciwciał. Przykłady obejmują At211, I131, I125, Y90, Re186, Re188, Sm153, Bi212, P32 oraz radioaktywne izotopy Lu. Kiedy koniugat jest używany do diagnozy, może on zawierać atom radioaktywny do badań scyntygraficznych, na przykład tc99m lub I123, albo znacznik spinowy do obrazowania przy zastosowaniu jądrowego rezonansu magnetycznego (NMR, od ang. nuclear magnetic resonance) (znanego również jako obrazowanie rezonansem magnetycznym, ang. magnetic resonance imaging, mri) taki jak znowu jod-123, jod-131, ind-111, fluor-19, węgiel-13, azot-15, tlen-17, gadolin, mangan lub żelazo.
Znaczniki radioaktywne i inne znaczniki mogą być włączone do koniugatu w różny sposób. Przykładowo, peptyd może być biosyntetyzowany albo może być syntetyzowany poprzez chemiczną syntezę aminokwasu przy zastosowaniu odpowiednich prekursorów aminokwasów, zawierających na przykład fluor-19 w miejsce tlenu. Znaczniki, takie jak tc99m lub I123, Re180, Re188 oraz In111 mogą być przyłączone poprzez resztę cysteinową w peptydzie. Itr-90 może być przyłączony poprzez resztę lizynową. Metodę IODOGEN (Fraker i wsp. Biochem. Biophys. Res. Commun. 80: 49-57 (1978) można zastosować do włączenia jodu-123. „Monoclonal Antibodies in Immunoscintigraphy” (Chatal, CRC Press 1989) opisuje szczegółowo inne metody.
Koniugaty glikoproteiny i czynnika cytotoksycznego można wytwarzać przy użyciu rozmaitych bifunkcjonalnych czynników łączących z białkami, takich jak N-sukcynimidylo-3-(2-pirydylotio)propionian (SPDP), sukcynimidylo-4-(N-maleimidometylo)cykloheksano-1-karboksylan, iminotiolan (IT), bifunkcjonlne pochodne imidoesterów (takie jak dimetyloadipimidan HCl), aktywne estry (takie jak disukcymidylosuberan), aldehydy (takie jak glutareldehyd), związki bis-azydowe (takie jak bis(p-azydobenzoylo) heksanodiamina), pochodne bis-diazoniowe (takie jak bis-(p-diazoniumbenzoylo)etylenodiamina), diizocyjaniany (takie jak tolleno-2,6-diizocyjanian) oraz bis-aktywne związki fluoru (takie jak 1,5-difluoro-2,4-dinitrobenzen). Na przykład, immunotoksynę rycynową można wytworzyć jak opisano w Vitetta i wsp. Science 238: 1098 (1987). Wyznakowany węglem-14 kwas 1-izotiocyjanatobenzylo-3-metylodietylenotriaminopentaoctowy (MX-DTPA) jest przykładowym czynnikiem chelatującym do przyłączania radionukleotydu do przeciwciała. Patrz WO 94/11026. Łącznik może być „łącznikiem podatnym na cięcie” ułatwiającym uwolnienie leku cytotoksycznego w komórce. Przykładowo można zastosować łącznik nietrwały w kwasach, łącznik wrażliwy na peptydazę, łącznik dimetylowy lub łącznik zawierający disiarczek (Chari i wsp. Cancer Research 52: 127- 131 (1992), patent USA nr 5 208 020).
Alternatywnie, można wytworzyć fuzję białkową fest zawierającą glikoproteinę i czynnik cytotoksyczny, np. poprzez techniki rekombinowania DNA albo syntezę peptydów. Odcinek DNA może zawierać odpowiednie regiony kodujące dwie części koniugatu bądź sąsiadujące ze sobą bądź oddzielone przez region kodujący peptydowy łącznik, który nie niszczy pożądanych właściwości koniugatu.
W jeszcze innym wykonaniu, przeciwciało można połączyć z „receptorem” (takim jak streptawidyna) do zastosowania we wstępnym docieraniu do nowotworu, gdzie koniugat receptor-przeciwciało podaje się pacjentowi, po czym usuwa się z układu krążenia niezwiązany koniugat przy zastosowaniu czynnika usuwającego, a następnie podaje „ligand” (np. awidynę), który jest połączony z czynnikiem cytotoksycznym (np. radionukleotydem).
(ix) Zależne od przeciwciała leczenie prolekiem za pośrednictwem enzymu (ADEPT, od ang. Antybody Dependent Enzyme Mediated Prodrug Therapy)
Przeciwciała według niniejszego wynalazku można również użyć w ADEPT poprzez połączenie przeciwciała z aktywującym prolek enzymem, który przekształca prolek (np. peptydylowy czynnik chemioterapeutyczny, patrz WO 81/01145) w aktywny lek przeciwnowotworowy. Patrz na przykład WO 88/07378 i patent USA nr 4 975 278.
Składnik enzymatyczny immunokoniugatu przydatny w ADEPT obejmuje dowolny enzym zdolny do działania na prolek w taki sposób, że przekształca go w bardziej aktywną, cytotoksyczną postać.
Enzymy, które są użyteczne w tej metodzie obejmują między innymi alkaliczną fosfatazę przydatną do przekształcania proleków zawierających fosforan w wolne leki; deaminazę cytozynową przydatną do przekształcania nietoksyczną 5-fluorocytozynę w lek przeciwnowotworowy, 5-fluorouracyl;
PL 213 948 B1 proteazy, takie jak proteaza Serratia, termolizyna, subtilizyna, karboksypeptydazy i katepsyny (takie jak katepsyny B i L), które są przydatne do przekształcania proleków zawierających peptyd w wolne leki; D-alanylokarboksypeptydazy, przydatne do przekształcania proleków, które zawierają podstawniki D-aminokwasowe; enzymy trawiące węglowodan, takie jak beta-galaktozydaza i neuraminidaza przydatne do przekształcania proleków glokozylowanych w wolne leki; betalaktamaza przydatna do przekształcania pochodnych beta-laktamowych leków w wolne leki oraz amidazy penicyliny, takie jak amidaza penicyliny V, amidaza penicyliny V, przydatne do przekształcania w wolne leki pochodnych leków ze przyłączonymi do azotu w aminie grupami fenoksyacetylowymi lub fenyloacetylowymi, odpowiednio. Alternatywnie, przeciwciała z aktywnością enzymatyczną, znane również jako „abzymy” można zastosować do przekształcania proleków według wynalazku w wolne aktywne leki (patrz, np., Massey, Nature 328: 457-458 (1987)). Koniugaty przeciwciało-abzym można wytworzyć jak tu popisano dla dostarczania abzymu do populacji komórek nowotworowych.
Enzymy według tego wynalazku mogą być kowalencyjnie łączone z przeciwciałami technikami dobrze znanymi w tej dziedzinie, takimi jak zastosowanie dyskutowanych powyżej heterobifunkcjonalnych odczynników łączących krzyżowo. Alternatywnie, można skonstruować fuzje białkowe zawierające co najmniej jeden region wiążący antygen przeciwciała według wynalazku połączony z co najmniej funkcjonalnie aktywną częścią enzymu według wynalazku przy zastosowaniu technik rekombinowania DNA dobrze znanych w tej dziedzinie (patrz, np. Neuberger i wsp., Nature, 312: 604608 (1984).
(x) Inne modyfikacje przeciwciał
Brane są tu pod uwagę inne modyfikacje glikoproteiny. Przykładowo, glikoproteina może być połączona z rozmaitymi niebiałkowymi polimerami, np. glikolem polietylenowym, glikolem polipropylenowym, polioksyalkilenami lub kopolimerami glikolu polietylenowego lub glikolu polipropylenowego. Przeciwciało może być również zamknięte w mikrokapsułkach wytworzonych na przykład technikami koacerwacji albo poprzez polimeryzację międzyfazową (na przykład mikrokapsułkach hydroksymetylocelulozowych lub żelatynowych i mikrokapsułkach poli(metylometacylanowych), odpowiednio), w koloidalnych systemach dostarczania leków (na przykład, liposomach, mikrokulkach albuminowych, mikroemulsjach, nanocząstkach i nanokapsułkach) albo w makroemulsjach. Takie techniki są ujawnione w Remington's Pharmaceutical Sciences, wyd. 16, Oslo, A., Wyd., (1980).
Ujawnione tu glikoproteiny mogą również być wytwarzane jako immunoliposomy. „Liposom” to mały pęcherzyk złożony z różnego rodzaju lipidów, fosfolipidów i/lub związków powierzchniowoczynnych, które są przydatne do dostarczania leku ssakowi. Składniki liposomu są zazwyczaj zorganizowane w postaci podwójnej warstwy, podobnie jak przy organizacji lipidów w błonach biologicznych. Liposomy zawierające przeciwciało wytwarza się metodami znanymi w tej dziedzinie, takimi jak opisane w Epstein i wsp., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 82: 3688 (1985); Hwang i wsp., Proc. Natl Acad. Sci. USA, 77: 4030 (1980); pat. USA nr 4 485 045 i 4 544 545 oraz WO 97/38731 opublikowany 23 października, 1997. Liposomy o zwiększonym czasie krążenia są ujawnione w patencie USA nr 5 013 556.
Szczególnie przydatne liposomy można wytworzyć przy zastosowaniu metody odparowania z odwróconą fazą z użyciem kompozycji lipidowej zawierającej fosfatydylcholinę, cholesterol i pochodne PEG fosfatydyloetanolaminy (PEG-PE). Liposomy przetłacza się przez filtry o określonych rozmiarach porów w celu uzyskania liposomów o pożądanej średnicy. Fragmenty Fab' przeciwciała według niniejszego wynalazku można łączyć z liposomami jak opisano w Martin i wsp. J. Biol. Chem. 257: 286-288 (1982) poprzez reakcję wymiany dwusiarczkowej. W liposomie fakultatywnie zawarty jest czynnik chemioterapeutyczny. Patrz Gabizon i wsp. J. National Cancer Inst. 81 (19) 1484 (1989).
(xi) Przykładowe przeciwciała
Korzystne przeciwciała w zakresie niniejszego wynalazku obejmują te zawierające sekwencje aminokwasowe następujących przeciwciał:
przeciwciał anty-HER2, włączając w to przeciwciała zawierające regiony zmienne łańcuchów ciężkich i lekkich huMAb 4D5-8 (Carter i wsp., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 89: 4285-4289 (1992), patent USA nr 5 725 856);
przeciwciał anty-CD20, takich jak chimerowe anty-CD20 „C2B8”, jak w patencie USA nr 5 736 137 (RITUXAN®), chimerowy lub humanizowany wariant przeciwciała 2H7, jak w patencie USA nr 5 721 108 B1 lub Tositumomab (BEXXAR®);
anty-IL-8 (St John i wsp., Chest, 103:932 (1993) i międzynarodowa publikacja nr WO 95/23865);
przeciwciał anty-VEGF, włączając w to przeciwciała anty-VEGF humanizowane i/lub z rozwiniętym powinowactwem, takie jak humanizowane przeciwciało anty-VEGF huA4.6.1 AVASTIN™ (Kim
PL 213 948 B1 i wsp., Growth Factors, 7: 53-64 (1992), międzynarodowa publikacja nr WO 96/30046 oraz WO 98/45331, opublikowane 15 października, 1998); przeciwciał anty-PSCA (W001/40309);
przeciwciał anty-CD40, włączając w to S2C6 i ich humanizowane warianty (WO 00/7 5348); anty-CD11a (patent USA nr 5 622 700, WO 98/23761, Steppe i wsp., Transplant Intl. 4: 3-7 (1991) oraz Hourmant i wsp., Transplantation 58: 377-380 (1994));
anty-IgE (Presta i wsp., J. Immunol. 151: 2623-2632 (1993) i międzynarodowa publikacja nr WO
95/19181; patent USA nr 5 714 338, wydany 3 lutego, 1998 lub patent USA nr 5 091 313, wydany 25 lutego, 1992, WO 93/04173 opublikowane 4 marca, 1993 lub WO 99/01556 opublikowane 14 stycznia, 1999, patent USA nr 5714338);
anty-CD18 (patent USA nr 5 622 700, wydany 22 kwietnia, 1997, albo jak w WO 97/26912, opublikowane 31 lipca, 1997); przeciwciała anty-receptor Apo-2 (WO 98/51793 opublikowane 19 listopada, 1998);
przeciwciał anty-TNF-α, włączając w to cA2 (REMICADE®), CDP571 i MAK-195 (patrz patent USA nr 5 672 347 wydany 30 września, 1997, Lorenz i wsp. J. Immunol., 156 (4): 1646-1653 (1996) oraz Dhainaut i wsp. Crit. Care Med. 23 (9):1461-1469 (1995));
anty-czynnik tkankowy (TF, od ang. Tissue Factor) (patent europejski nr 0 420 937 B1 przyznany 9 listopada, 1994);
anty-ludzka integryna α4-β7 (WO 98/06248 opublikowane 19 lutego, 1998);
anty-EGFR (chimerowe lub humanizowane przeciwciało 225, jak w WO 96/40210 opublikowanym 19 grudnia, 1996);
przeciwciał anty-CD3, takich jak OKT3 (patent USA nr 4 515 893 wydany 7 maja, 1985); przeciwciał anty-CD25 lub anty-tac, takich jak CH1-621 (SIMULECT®) i (ΖΕΝΑΡΑΧ®) (patrz patent USA nr 5 693 762 wydany 2 grudnia, 1997);
przeciwciał anty-CD4, takich jak przeciwciało cM-7412 (Choy i wsp. Arthritis Rheum 39 (1): 52-56 (1996));
przeciwciał anty-CD52, takich jak CAMPATH-1H (Riechmann i wsp. Nature 332: 323-337 (1988);
przeciwciał anty-receptor Fc, takich jak przeciwciało M22 skierowane przeciw FcyRI, jak w Graziano i wsp. J. Immunol. 155 (10): 4996-5002 (1995);
przeciwciał anty-antygen karcynoembrionalny (CEA, od carcinoembryonic antigen), takich jak hMN-14 (Sharkey i wsp. CancerRes. 55 (23 Suppl): 5935s-5945s (1995);
przeciwciał skierowanych przeciw komórkom nabłonkowym sutka, włączając w to huBrE-3, hu-Mc 3 i CHL6 (Ceriani i wsp. Cancer Res. 55 (23): 5852s-5856s (1995) oraz Richman i wsp. Cancer Res. 55 (23 Supp): 5916s-5920s (1995));
przeciwciał, które wiążą się z komórkami raka okrężnicy, takich jak C242 (Litton i wsp. Eur J. Immunol. 26 (1): 1-9 (1996));
przeciwciał anty-CD38, np. AT 13/5 (Ellis i wsp. J. Immunol. 155 (2): 925-937 (1995)); przeciwciał anty-CD33, takich jak Hu M195 (Jurcic i wsp. Cancer Res 55 (23 Suppl): 5908s-5910s (1995) i CMA-676 lub CDP771;
przeciwciał anty-CD22, takich jak LL2 lub LymphoCide (Juweid i wsp. Cancer Res 55 (23 Suppl): 5899s-5907s (1995);
przeciwciał anty-EpCAM, takich jak 17-1A (PAN0REX®);
przeciwciał anty-GpIIb/IIIa, takich jak abciximab lub c7E3 Fab (REOPRO®);
przeciwciał anty-RSV, takich jak MEDI-493 (SYNAGIS®);
przeciwciał anty-CMV, takich jak PROTOVIR®; przeciwciał anty-HIV, takich jak PRO542;
przeciwciał anty-wirus zapalenia wątroby, takich jak przeciwciało przeciw zapaleniu wątroby B,
OSTAVIR®;
przeciwciała OvaRex anty-CA 125; przeciwciała BEC2 anty-idiotypowy epitop GD3; przeciwciała VITAXIN® anty-αvβ3;
przeciwciała anty-ludzkie komórki raka, takiego jak ch-G250; ING-1; przeciwciała anty-ludzki 17-1A (3622W94); przeciwciała anty-ludzki rak okrężnicy i odbytnicy (A33);
przeciwciała anty-ludzki czerniak R24, skierowanego przeciw gangliozydowi GD3; anty-ludzki rak płaskokomórkowy (SF-25); oraz
PL 213 948 B1 przeciwciał anty-ludzki antygen leukocytowy (HLA, human leukocyte antigen), takich jak Smart IDlO i przeciwciało Oncolym (Lym-1) anty-HLA DR.
Jakkolwiek korzystne jest, jeżeli glikoproteina będąca przedmiotem zainteresowania to przeciwciało, bierze się również pod uwagę inne glikoproteiny zawierające region Fc, które można zmodyfikować według opisanych tu metod. Przykładem takiej cząsteczki jest immunoadhezyna.
D. Wytwarzanie immunoadhezyn
Najprostszy i najbardziej oczywisty projekt imunoadhezyny łączy w sobie domenę/y wiążące adhezyny (np. zewnątrzkomórkową domenę (ECD) receptora) z regionem Fc łańcucha ciężkiego immunoglobuliny. Zwykle, podczas wytwarzania immunoadhezyn według niniejszego wynalazku, kwas nukleinowy kodujący domenę wiążącą adhezyny będzie przyłączony w postaci fuzji na końcu C do kwasu nukleinowego kodującego koniec N sekwencji domeny stałej immunoglobuliny, jednak fuzje N-końcowe są także możliwe.
Typowo, w takich fuzjach kodowany chimerowy polipeptyd zachowa przynajmniej funkcjonalnie aktywne domeny zawiasową, CH2 i CH3 regionu stałego łańcucha ciężkiego immunoglobuliny. Robi się także fuzje na końcu C części Fc domeny stałej lub bezpośrednio N-końcowe do CH1 łańcucha ciężkiego lub odpowiedniego regionu łańcucha lekkiego. Dokładne miejsce, w którym zrobiona jest fuzja, nie jest istotne; poszczególne miejsca są dobrze znane i można je wybrać w celu zoptymalizowania aktywności biologicznej, wydzielania lub właściwości wiążących immunoadhezyny.
W korzystnym wykonaniu sekwencja adhezyny jest przyłączona w postaci fuzji do końca N regionu Fc immunoglobuliny Gi (IgG1). Możliwe jest przyłączenie całego regionu stałego łańcucha ciężkiego do sekwencji adhezyny. Jednak, bardziej korzystnie, w fuzji stosuje się sekwencję zaczynającą się w regionie zawiasowym zaraz powyżej miejsca cięcia dla papainy, które określa chemicznie Fc IgG (tj. reszty 216, przyjmując, że pierwszą resztą regionu stałego łańcucha ciężkiego jest 114) lub analogicznego miejsca innych immunoglobulin.
W szczególnie korzystnym wykonaniu sekwencja aminokwasowa immnunoadhezyny jest przyłączona w postaci fuzji do (a) regionu zawiasowego i CH2 oraz CH3 lub (b) domen CH1, zawiasowej, CH2 oraz CH3 łańcucha ciężkiego IgG.
W przypadku immunoadhezyn bispecyficznych immunoadhezyny organizują się w multimery, a w szczególności w heterodimery lub heterotetramery. Ogólnie, te złożone immunoglobuliny będą posiadały znane struktury jednostkowe. Podstawowa czterołańcuchowa jednostka strukturalna jest formą, w której występują IgG, IgD oraz IgE. Czterołańcuchowa jednostka strukturalna jest powtarzana w immunoglobulinach o wyższej masie cząsteczkowej; IgM ogólnie występuje jako pentamer czterech podstawowych jednostek utrzymywany razem przy użyciu wiązań dwusiarczkowych. Globulina IgA, a czasami globulina IgG, także mogą występować w formie multimerycznej w osoczu. W przypadku multimeru każda z czterech jednostek może być taka sama lub inna.
Różne przykładowe złożone immunoadhezyny objęte zakresem niniejszego wynalazku są poniżej schematycznie przedstawione w postaci diagramów:
(a) ACL-ACL;
(b) ACH-(ACh, ACL-ACH,- ACL-VHCH lub VLCL-ACH);
(c) ACL-ACH-(ACL-ACH, ACL-VHCH, VLCL-ACH Lub VLCL-VHCH) (d) ACL-VHCH- (ACH lub ACL-VHCH Lub VLCL-ACH);
(e) VLCL-ACH-(ACL-VHCH Lub VLCL-ACH) oraz (f) (A-Y)n-(VLCL-VHCH)2, gdzie:
każde A oznacza identyczne lub różne sekwencje aminokwasowe adhezyn;
VL to domena zmienna łańcucha lekkiego immunoglobuliny;
VH to domena zmienna łańcucha ciężkiego immunoglobuliny;
CL to domena stała łańcucha lekkiego immunoglobuliny;
CH to domena stała łańcucha ciężkiego immunoglobuliny; n to liczbę całkowita większa niż 1;
Y to reszta czynnika wytwarzającego kowalencyjne wiązania krzyżowe.
Dla zwięzłości opisu powyższe struktury pokazują tylko kluczowe cechy; nie wskazują one domen łączących (J) lub innych domen immunoglobulin, ani nie pokazano wiązań dwusiarczkowych. Jednak, kiedy takie domeny są wymagane do aktywności wiążącej, powinno się całość tak skonstruować, aby były one obecne w swoich zwykłych pozycjach, które zajmują w cząsteczkach immunoglobulin.
PL 213 948 B1
Alternatywnie, sekwencje adhezyn można wstawić pomiędzy sekwencje łańcucha ciężkiego i łańcucha lekkiego immunoglobuliny, tak aby otrzymać immunoglobulinę zawierającą chimerowy łańcuch ciężki. W tym wykonaniu sekwencje adhezyny są przyłączone w postaci fuzji do końca 3' łańcucha ciężkiego immunoglobuliny na każdym ramieniu immunoglobuliny, albo pomiędzy domenę zawiasową i CH2 lub pomiędzy domeny CH2 i CH3. Podobne konstrukty zostały opisane w Hoogenboom i wsp., Mol. Immunol., 28: 1027-1037 (1991).
Jakkolwiek obecność łańcucha lekkiego immunoglobuliny nie jest wymagana w immunoahezynach według niniejszego wynalazku, łańcuch lekki immunoglobuliny może być obecny albo w postaci kowalencyjnie związanej z fuzją polipeptydową adhezyna-łańcuch ciężki immunoglobuliny albo bezpośrednio przyłączony w postaci fuzji do adhezyny. W pierwszym przypadku DNA kodujący łańcuch lekki immunoglobuliny typowo wykazuje koekspresję z DNA kodującym fuzję białkową adhezynałańcuch ciężki immunoglobuliny. W trakcie wydzielania hybrydowy łańcuch ciężki i łańcuch lekki będą kowalencyjnie związane w celu zapewnienia struktury immunoglobulinopodobnej zawierającej dwie połączone przy użyciu wiązania dwusiarczkowego pary łańcuch ciężki immunoglobuliny-łańcuch lekki. Sposoby odpowiednie do wytwarzania takich struktur są ujawnione na przykład w patencie USA nr 4 816 567 wydanym 28 marca 1989.
Immunoadhezyny najdogodniej konstruuje się poprzez połączenie sekwencji cDNA kodującej część adhezyny z sekwencją cDNA immunoglobuliny w ramce odczytu. Jednak można także zastosować fuzję do fragmentów genomowych immunoglobulin (patrz, np., Aruffo i wsp., Cell, 61: 1303-1313 (1990) oraz Stamenkovic i wsp., Cell, 66: 1133-1144 (1991)). Drugi typ fuzji wymaga obecności sekwencji regulatorowych Ig dla ekspresji. cDNA kodujące regiony stałe łańcucha ciężkiego IgG można wyizolować technikami hybrydyzacji lub łańcuchowej reakcji polimerazy (PCR) w oparciu o opublikowane sekwencje z bibliotek cDNA pochodzących z limfocytów śledziony lub krwi obwodowej. cDNA kodujące części „adhezynową” i immunoglobulinową immunoadhezyny są wstawione tandemowo do wektora plazmidowego, który kieruje wydajną ekspresją w wybranych komórkach gospodarza.
E. Wektory, komórki gospodarzy i metody rekombinowania DNA
Wynalazek dostarcza również wyizolowanego kwasu nukleinowego kodującego ujawnioną tu glikoproteinę, wektorów i komórek gospodarzy zawierających kwas nukleinowy oraz technik rekombinowania DNA do wytwarzania glikoproteiny.
Aby wytworzyć glikoproteinę poprzez rekombinowanie DNA, izoluje się kodujący je kwas nukleinowy i wstawia do zdolnego do replikacji wektora w celu dalszego klonowania (powielania DNA) lub do ekspresji. DNA kodujący glikoproteinę można łatwo wyizolować i zsekwencjonować przy zastosowaniu konwencjonalnych procedur (np. poprzez użycie sond oligonukleoytydowych, które są zdolne do specyficznego wiązania się z genami kodującymi glikoproteinę). Dostępnych jest wiele wektorów. Składniki wektorów generalnie obejmują między innymi jeden albo więcej spośród: sekwencji sygnałowej, początku replikacji, jednego albo większej liczby genów markerowych i elementów wzmacniających, promotora oraz sekwencji terminacyjnej dla transkrypcji.
(i) Sekwencja sygnałowa
Glikoproteinę według tego wynalazku można wytwarzać poprzez rekombinowanie DNA nie tylko bezpośrednio, ale również jako fuzję polipeptydową z peptydem heterologicznym, którym jest korzystnie sekwencja sygnałowa albo inny polipeptyd mający specyficzne miejsce cięcia na końcu N dojrzałego białka albo polipeptydu. Korzystne jest, jeżeli wybrana heterologiczną sekwencja sygnałowa jest taką, która jest rozpoznawana i ulega obróbce (tj. cięciu przez peptydazę sygnałową) w komórce gospodarza. W przypadku prokariotycznych komórek gospodarza, które nie rozpoznają i dokonują obróbki sekwencji sygnałowej natywnego polipeptydu, sekwencję sygnałową zastępuje się sekwencją prokariotczną wybraną na przykład z grupy złożonej z liderów alkalicznej fosfatazy, penicylinazy, lpp, wrażliwej na ciepło enterotoksyny II. Do wydzielenia z drożdży natywną sekwencję sygnałową można zastąpić, np. przez lider inwertazy drożdżowej, lider czynnika α (włączając w to lidery czynnika α Saccharomyces i Kluyveromyces) albo lider alkalicznej fosfatazy, lider glukoamylazy C. albicans lub sekwencję sygnałową opisaną w WO 90/13646. Przy ekspresji w komórkach ssaków, dostępne są ssacze sekwencje sygnałowe, jak również wirusowe lidery sekrecyjne, na przykład sekwencja sygnałowa gD wirusa opryszczki pospolitej. DNA dla takiego regionu prekursorowego poddaje się ligacji w ramce odczytu z DNA kodującym polipeptyd.
PL 213 948 B1 (ii) Początek replikacji
Zarówno wektory do ekspresji, jak i klonowania, zawierają sekwencję kwasu nukleinowego, która umożliwia wektorowi replikację w komórkach jednego albo większej liczby wybranych gospodarzy. Generalnie, w wektorach do klonowania sekwencją tą jest taka, która umożliwia wektorowi replikację niezależnie od DNA chromosomowego gospodarza i obejmuje początki replikacji albo autonomicznie replikujące się sekwencje. Takie sekwencje są dobrze znane dla wielu bakterii, drożdży i wirusów. Początek replikacji z plazmidu pBR322 jest odpowiedni dla większości bakterii Gram-ujemnych, początek replikacji plazmidu 2μ jest odpowiedni dla drożdży, a różne początki wirusowe (SV40, polyoma, adenowirusa, VSV lub BPV) są przydatne dla wektorów do klonowania w komórkach ssaczych. Generalnie początek replikacji nie jest potrzebny w ssaczych wektorach ekspresyjnych (początek replikacji SV40 może być typowo używany jedynie dlatego, że zawiera wczesny promotor).
(iii) Gen selekcyjny
Wektory do ekspresji i klonowania mogą zawierać gen selekcyjny, zwany również markerem selekcyjnym. Typowe geny selekcyjne kodują białka, które:
(a) nadają oporność na antybiotyki lub inne toksyny, np., ampicylinę, neomycynę, metotreksan lub tetracyklinę;
(b) komplementują niedobory auksotroficzne albo (c) dostarczają krytycznych składników odżywczych niedostępnych ze złożonej pożywki, np. gen kodujący racemazę D-alaniny dla Bacilli.
Jeden ze schematów selekcji wykorzystuje lek dla zahamowania wzrostu komórki gospodarza. Te komórki, które zostały z powodzeniem stransformowane heterologicznm genem, wytwarzają białko nadające oporność na lek, a zatem przezywają tryb selekcji. W przykładach takiej selekcji dominującej stosuje się leki: neomycynę, kwas mykofenolowy i higromycynę.
Inny przykład odpowiednich markerów selekcyjnych dla komórek ssaczych stanowią te, które umożliwiają identyfikację komórek zdolnych do pobierania kwasu nukleinowego dla polipeptydu, takie jak DHFR, kinaza tymidynowa, metalotioneina-I i -II, korzystnie geny metalotionein naczelnych, deaminaza adenozynowa, dekarboksylaza ornitynowa, etc.
Przykładowo, komórki stransformowane genem selekcyjnym DHFR identyfikuje się najpierw poprzez hodowanie wszystkich transformantów w pożywce hodowlanej, która zawiera metotreksan (Mtx), współzawodniczącego antagonistę DHFR.
Odpowiednimi komórkami gospodarza, kiedy stosuje się DHFR typu dzikiego, jest linia komórkowa jajnika chomika chińskiego (CHO) bez aktywności DHFR.
Alternatywnie, komórki gospodarza (a w szczególności gospodarza typu dzikiego, który zawiera endogenny DHFR) transformowane lub kotransformowane sekwencjami DNA kodującymi polipeptyd, białko DHFR typu dzikiego i inny marker selekcyjny, taki jak 3'-fosfotransferazę aminoglikozydową (APH) można selekcjonować poprzez hodowlę komórek na pożywce zawierającej czynnik selekcyjny dla podlegającego selekcji markera, takiego jak antybiotyk aminoglikozydowy, np. kanamycyna, neomycyna lub G418. Patrz patent USA nr 4 965 199.
Odpowiednim genem selekcyjnym do zastosowania w drożdżach jest gen trpl obecny w plazmidzie YRp7 (Stinchcomb i wsp., Nature, 282: 39 (1979)). Gen trp1 dostarcza markera selekcyjnego dla zmutowanego szczepu drożdży z brakiem zdolności do wzrostu na tryptofanie, na przykład ATCC nr 44076 lub PEP4-1 (Jones, Genetics, 85: 12 (1977). Brak trp1 w genomie komórek gospodarza drożdżowego stwarza odpowiednie środowisko dla wykrywania transformacji poprzez wzrost w nieobecności tryptofanu. Podobnie szczepy drożdży bez Leu2- (ATCC 20622 lub 38626) są komplementowane przez znane plazmidy niosące gen Leu2.
Dodatkowo, wektory pochodzące z 1,6 μm kolistego plazmidu pKD1 można użyć do transformacji drożdży Kluyveromyces. Alternatywnie, doniesiono o systemie ekspresji do wytwarzania na dużą skalę zrekombinowanej chymozyny cielęcej dla K. laetis. Van den Berg, BiolTechnology, 8: 135 (1990). Ujawniono również stabilne wielokopiowe wektory do ekspresji do wydzielenia dojrzałej zrekombinowanej ludzkiej albuminy surowiczej przez przemysłowe szczepy Kluyveromyces. Fleer i wsp., BiolTechnology, 9: 968-975 (1991).
(iv) Składnik promotorowy
Wektory do ekspresji i klonowania zwykle zawierają promotor, który jest rozpoznawalny przez organizm gospodarza i jest połączony funkcjonalnie z kwasem nukleinowym dla polipeptydu. Promotory przydatne do zastosowania z gospodarzami prokariotycznymi obejmują promotor phoA, β-laktamazy oraz systemy promotorowe laktozy, alkalicznej fosfatazy, system promotorowy tryptofanu (trp)
PL 213 948 B1 i promotory hybrydowe, takie jak promotor tac. Jednakże przydatne są inne znane promotory bakteryjne. Promotory do zastosowania w systemach bakteryjnych będą również zawierały sekwencję Shine-Dalgarno (S. D.) połączoną funkcjonalnie z DNA kodującym przeciwciało wielowartościowe.
Sekwencje promotorowe są znane dla organizmów eukariotycznych. W zasadzie wszystkie geny eukariotyczmne mają region AT-bogaty położony około 25 do 30 zasad od miejsca, gdzie rozpoczyna się transkrypcja. Inna sekwencja znajdująca się 70 to 80 zasad od miejsca startu transkrypcji wielu genów to region CNCAAT, gdzie N może być dowolnym nukleotydem. Na końcu 3' większości genów eukariotycznych jest sekwencja AATAAA, która może być sygnałem dla dodania ogona poli A do końca 3' sekwencji kodującej. Wszystkie te sekwencje są odpowiednio wstawione do eukariotycznych wektorów ekspresyjnych.
Przykłady odpowiednich sekwencji promotorowych do zastosowania z gospodarzami drożdżowymi obejmują promotory kinazy 3-fosfoglycerynianowej lub innych enzymów glikolitycznych, takich jak enolaza, dehydrogenaza glyceraldehydo-3-fosforanowa, heksokinaza, dekarboksylaza pirogronianowa, fosfofruktokinaza, izomeraza glukozo-6- fosforanowa, mutaza 3-fosfoglicerynianowa, kinaza pirogronianowa, izomeraza triozofosforanowa, izomeraza fosfoglukozowa i glukokinaza.
Inne promotory drożdżowe, które są promotorami indukowalnymi, mającymi dodatkową zaletę transkrypcji kontrolowanej przez warunki wzrostu to regiony promotorowe dla dehydrogenazy alkoholowej 2, izocytochromu C, kwaśnej fosfatazy, enzymów rozkładających związanych z metabolizmem azotu, metalotioneiny, dehydrogenazy gliceraldehydo-3-fosforanowej oraz enzymów odpowiedzialnych za wykorzystanie maltozy i galaktozy. Odpowiednie wektory i promotory do zastosowania przy ekspresji w drożdżach są opisane ponadto w EP nr 73 657. Wzmacniacze drożdżowe są również korzystnie stosowane z promotorami drożdżowymi.
Transkrypcja polipeptydu z wektorów w ssaczych komórkach gospodarza jest kontrolowana na przykład przez promotory otrzymane z genomów wirusów, takich jak wirus polyoma, wirus ospy drobiu, adenowirus (taki jak Adenowirus 2), bydlęcy wirus brodawczaka, ptasi wirus mięsaka, cytomegalowirus, retrowirus, wirus zapalenia wątroby B, a najkorzystniej Małpi Wirus 40 (SV40), z heterologicznych promotorów ssaczych, np., promotora aktyny lub promotora immunoglobuliny, promotorów szoku cieplnego, przy założeniu, że promotory są zgodne z systemami komórkowymi gospodarza.
Wczesne i późne promotory wirusa SV40 można dogodnie otrzymać z fragmentu restrykcyjnego SV40, który również zawiera wirusowy początek replikacji SV40. Najwcześniejszy promotor ludzkiego cytomegalowirusa dogodnie jest otrzymać jako fragment restrykcyjny HindIII E. System ekspresji DNA w gospodarzach ssaczych przy zastosowaniu jako wektora bydlęcego wirusa brodawczaka jest ujawniony w patencie USA nr 4 419 446. Modyfikacja tego systemu jest opisana w patencie USA nr 4601978. Patrz także Reyes i wsp., Nature 297: 598-601 (1982) na temat ekspresji cDNA ludzkiego β-interferonu w komórkach mysich pod kontrolą promotora kinazy tymidynowej z wirusa opryszczki pospolitej. Alternatywnie jako promotor można zastosować długie odwrócone powtórzenia wirusa mięsaka Rousa.
(v) Element wzmacniacza
Transkrypcja DNA kodującego polipeptyd według tego wynalazku u wyższych Eucaryota jest często wzmacniana poprzez wstawienie do wektora sekwencji wzmacniacza. Znanych jest wiele sekwencji wzmacniaczy z genów ssaczych (globiny, elastazy, albuminy, α-fetoproteiny oraz insuliny). Jednakże, typowo używa się wzmacniacza z wirusa komórek eukariotycznych. Przykłady obejmują wzmacniacz SV40 po stronie późnej początku replikacji (bp 100-270), wzmacniacz wczesnego promotora cytomegalowirusa, wzmacniacz polyoma po stronie późnej początku replikacji oraz wzmacniacze adenowirusa. Patrz także Yaniv, Nature 297: 17-18 (1982) na temat elementów wzmacniających dla aktywacji promotorów eukariotycznych. Wzmacniacz może być wstawiony do wektora w pozycji 5' lub 3' sekwencji kodującej polipeptyd, ale korzystne jest, jeżeli jest położony po stronie 5' promotora.
(vi) Składnik terminacji transkrypcji
Wektory do ekspresji stosowane w komórkach gospodarza eukariotycznego (drożdże, grzyby, rośliny, zwierzęta, człowiek lub komórki jądrzaste innych organizmów wielokomórkowych) będą również sekwencje niezbędne do terminacji transkrypcji i do stabilizowania mRNA. Takie sekwencje są powszechnie dostępne z końców 5', a czasami 3' nie ulegających translacji regionów eukariotycznych albo wirusowych DNA lub cDNA. Regiony te zawierają odcinki nukleotydowe podlegające transkrypcji jako fragmenty poliadenylowane w nie ulegającej translacji części mRNA kodującego polipeptyd. Jednym z przydatnych składników terminacji transkrypcji jest region poliadenylacji bydlęcego hormonu wzrostu. Patrz WO 94/11026 i ujawniony tam wektor ekspresyjny.
PL 213 948 B1 (vii) Selekcja i transformacja komórek gospodarza
Odpowiednie komórki gospodarza do klonowania i ekspresji DNA w rozważanych tu wektorach są opisanymi powyżej komórkami prokariotycznymi, drożdżowymi albo wyższych Eukaryota. Odpowiednie tego celu organizmy prokariotyczne obejmują Eubacteriae, takie jak organizmy Gram ujemne lub Gram dodatnie, na przykład, Enterobacteriaceae, takie jak Escherichia, np., E. coli, Enterobacter, Erwinia, Klebsiella, Proteus, Salmonella, np., Salmonella typhimurium, Serratia, np. Serratia marcescans oraz Shigella, jak również Bacilli, takie jak B. subtilis i B. Iicheniformis (np. B. Iicheniformis 41 P ujawniony w DD 266710 opublikowanym 12 kwietnia 1989), Pseudomonas, takie jak P. aeruginosa i Streptomyces. Jednym z korzystnych gospodarzy do klonowania w E. coli jest E. coli 294 (ATCC 31446), jakkolwiek inne szczepy, takie jak E. coli B, E. coli X1776 (ATCC 31537) i E. coli W3110 (ATCC 27325) są również odpowiednie. Przykłady te stanowią ilustrację, a nie ograniczenie.
Poza organizmami prokariotycznymi, mikroorganizmy eukariotyczne, takie ja grzyby nitkowate albo drożdże są przydatnymi gospodarzami do klonowania i ekspresji dla wektorów kodujących polipeptyd. Saccharomyces cerevisiae albo zwyczajne drożdże piekarnicze, są najpowszechniej używanymi wśród mikroorganizmów gospodarzami - niższymi Eukaryota. Jednakże powszechnie dostępne są i przydatne tu liczne inne rodzaje, gatunki i szczepy, takie jak Schizosaccharomyces pombe; gospodarze Kluyveromyces, tacy jak, np., K. lactis, K. fragilis (ATCC 12424), K. bulgaricus (ATCC 16045), K. wickeramii (ATCC 24,178), K. waltii (ATCC 56500,), K. drosophilarum (ATCC 36906),
K. Thermotolerans oraz K. marxianus; Yarrowia (EP nr 402 226); Pichia pastors (EP nr 183 070); Candida; Trichoderma reesia (EP nr 244 234); Neurospora crassa; Schwanniomyces, taki jak Schwanniomyces occidentalis oraz grzyby nitkowate, takie jak np. Neurospora, Penicillium, Tolypocladium i gospodarze Aspergillus, tacy jak A. nidulans i A. niger.
Odpowiednie komórki gospodarzy do ekspresji glikozylowanego polipeptydu pochodzą z organizmów wielokomórkowych. Przykłady komórek bezkręgowców obejmują komórki roślinne i komórki owadów. Zidentyfikowano liczne szczepy bakulowirusowe i warianty oraz odpowiadające im permisywne komórki gospodarzy owadzich z gospodarzy takich jak Spodoptera frugiperda (gąsienica), Aedes aegypti (komar), Aedes albopictus (komar), Drosophila melanogaster (muszka owocowa) oraz Bombyx mori. Rozmaite szczepy wirusowe do transfekcji są publicznie dostępne, np. wariant L-1 Autographa cali fornica NPV oraz szczep Bm-5 Bombyx mori NPV i takie wirusy można zastosować tu według niniejszego wynalazku, szczególnie do transfekcji komórek Spodoptera frugiperda.
Hodowle komórek roślinnych: bawełny, kukurydzy, ziemniaka, soi, petunii, pomidora i tytoniu można również użyć jako gospodarzy.
Jednakże, główne zainteresowanie dotyczy komórek kręgowców, a namnażanie komórek kręgowców w hodowli (hodowli tkankowej) stało się rutynową procedurą. Przykładami przydatnych linii komórek ssaków-gospodarzy jest linia komórek małpiej nerki CV1 transformowana SV40 (COS-7, ATCC CRL 1651); linia ludzkiej embrionalnej nerki (293 lub komórki 293 subklonowane do wzrostu w hodowli zawiesinowej, Graham i wsp., J. Gen Virol. 36: 59 (1977)); komórki nerki noworodka chomika (BHK, ATCC CCL 10); komórki jajnika chomika chińskiegi/DHFR (CHO, Urlaub i wsp., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 77: 4216 (1980)); mysie komórki sertoli (TM4, Mather, Biol. Reprod. 23: 243-251 (1980)); małpie komórki nerki (CV1 ATCC CCL 70); komórki nerki zielonej małpy afrykańskiej (VERO76, ATCC CRL-1587); ludzkie komórki raka szyjki macicy (HELA, ATCC CCL 2); komórki nerki psa (MDCK, ATCC CCL 34); komórki wątroby szczura buffalo (BRL 3A, ATCC CRL 1442); ludzki komórki płuc (W138, ATCC CCL 75); ludzkie komórki wątroby (Hep G2, HB 8065); mysi rak gruczołu mlecznego (MMT 060562, ATCC CCL51); komórki TRI (Mather i wsp., Annals N. Y. Acad. Sci. 383: 44-68 (1982)); komórki MRC 5; komórki FS4; mysie komórki szpiczaka, takie jak NSO (np. RCB0213, Bebbington i wsp., Bio/Technology 10: 169 (1992)) oraz komórki SP2/0 (np. komórki SP2/0-Ag14, ATCC CRL 1581); szczurze komórki szpiczaka, takie jak komórki YB2/0 np. komórki YB2/3HL.P2.G11.16Ag.20, ATCC CRL 1662); oraz ludzka linia wątrobiaka (Hep G2). Komórki CHO bez reduktazy dihydrofolianowej (DHFR) są korzystną linią komórkową do wykonania wynalazku, z CHO-K1, DUX-B11, CHO-DP12, CHO-DG44 (Urlaub i wsp., Somatic Cell and Molecular Genetics 12: 555 (1986)) oraz Lec 13 będące przykładowymi przykładowymi liniami gospodarzy CHO. Komórki DUX-B11 zostały stransfekowane pSVEHIGNeo niosącym cDNA dla preproinsuliny, z wytworzeniem klonu CHO-DP12. W przypadku komórek gospodarza CHO-K1 (ATCC CRL 61), DUX-B11 (Simonsen i wsp. PNAS (USA) 80: 2495-2499 (1983)), DG44 lub CHO-DP12, mogą być one zmienione w taki sposób, że brak im zdolności do fukozylacji wyrażanych w nich białek.
PL 213 948 B1
Wynalazek można również zastosować do komórek hybrydom. Termin „hybrydoma” dotyczy hybrydowej linii komórkowej wytwarzanej poprzez fuzję nieśmiertelnej linii komórkowej pochodzenia immunologicznego i komórki wytwarzającej przeciwciało. Termin obejmuje potomstwo heterohybrydowych fuzji szpiczaka, które są wynikiem fuzji z komórkami ludzkimi i mysią linia komórkową szpiczaka połączonymi następnie z komórką plazmatyczną, powszechnie znane jako linia komórkowa triomy. Ponadto, termin ma obejmować dowolną unieśmiertelnioną linię komórkową, która wytwarza przeciwciała, taką jak na przykład kwadromy (patrz, np., Milstein i wsp., Nature, 537: 3053 (1983)). Hybrydowe llinie komórkowe mogą być z dowolnego gatunku, włączając w to człowieka i mysz.
W najbardziej korzystnych wykonaniach komórką ssaka jest komórka ssaka inna niż hybrydoma, która została stransformowana egzogennym wyizolowanym kwasem nukleinowym kodującym polipeptyd będący przedmiotem zainteresowania. „Egzogenny kwas nukleinowy” lub „heterologiczny kwas nukleinowy” ma oznaczać sekwencję kwasu nukleinowego, która jest obca dla komórki albo homologiczna dla komórki, ale w pozycji w obrębie kwasu nukleinowego komórki gospodarza, w której kwas nukleinowy normalnie się nie znajduje.
(viii) Hodowanie komórek gospodarzy
Komórki gospodarza transformuje się opisanymi powyżej wektorami do klonowania i ekspresji w celu wytworzenia polipeptydu i hoduje w konwencjonalnej pożywce hodowlanej zmodyfikowanej odpowiednio do indukowania promotorów, selekcjonowania transformantów albo powielania genów kodujących pożądane sekwencje.
Komórki gospodarzy stosowane do wytwarzania polipeptydu według tego wynalazku można hodować w rozmaitych pożywkach. Dostępne handlowo pożywki, takie jak Ham's FlO (Sigma), Minimal Essential Medium ((MEM), (Sigma), RPMI-1640 (Sigma) oraz Dulbecco's Modified Eagle's Medium ((DMEM), Sigma) są przydatne do hodowania komórek gospodarzy. Ponadto, jako pożywkę hodowlaną dla komórek gospodarza można użyć dowolną z pożywek opisanych w Ham i wsp., Meth. Enz. 58: 44 (1979), Barnes i wsp., Anal. Biochem. 102: 255 (1980), pat. USA nr 4 767 704; 4 657 866; 4 927 762; 4 560 655 lub 5 122 469; WO 90/03430; WO 87/00195 lub patent USA nr 30 985. Dowolna z tych pożywek może być uzupełniona, jak potrzeba, hormonami i/lub innymi czynnikami wzrostowymi (takimi jak insulina, transferyna lub nabłonkowy czynni wzrostowy), sole (takie jak chlorek sodu, wapń, magnez i fosforan) bufory (takie jak HEPES), nukleotydy (takie jak adenozyna i tymidyna), antybiotyki (takie jak lek GENTAMYCIN™), elementy śladowe zdefiniowane jako związki nieorganiczne zwykle obecne w stężeniu końcowym w zakresie mikromolarnym) oraz glukoza lub ekwiwalentne źródło energii. Dowolne inne niezbędne uzupełnienia można również dodać w odpowiednich stężeniach, które będą znane specjalistom w tej dziedzinie. Warunki hodowli, takie jak temperatura, pH i temu podobne, są takie, jak stosowane uprzednio dla komórek gospodarza wybranego do ekspresji i będą oczywiste dla przeciętnego specjalisty w tej dziedzinie.
Wszystkie pożywki hodowlane typowo dostarczają co najmniej jednego składnika spośród jednego lub większej liczby następujących kategorii:
1) źródło energii, zwykle w postaci węglowodanu takiego jak glukoza;
2) wszystkie niezbędne aminokwasy i zwykle podstawowy zestaw dwudziestu aminokwasów plus cystyna;
3) witaminy i/lub inne związki organiczne wymagane w niskich stężeniach;
4) wolne kwasy tłuszczowe; oraz
5) elementy śladowe, gdzie elementy śladowe są zdefiniowane jako związki nieorganiczne albo występujące naturalnie elementy, które są typowo wymagane w bardzo niskich stężeniach, zwykle w zakresie mikromolowym.
Korzystne jest, jeżeli pożywka hodowlana jest wolna od surowicy, np. zawiera mniej niż około 5%, korzystnie mniej niż 1%, korzystniej mniej niż 0 do 0,1% surowicy i innych białek pochodzenia zwierzęcego. Jednakże mogą być one stosowane, jeśli potrzeba. W korzystnym wykonaniu wynalazku pożywka do hodowli komórek zawiera nadmiar aminokwasów. Aminokwasy, które są dostarczone w nadmiarze mogą być wybrane spośród Asn, Asp, Gly, He, Leu, Lys, Met, Ser, Thr, Trp, Tyr i Val. Korzystnie, Asn, Asp, Lys, Met, Ser i Trp są dostarczone w nadmiarze. Przykładowo, można użyć aminokwasów, witamin, elementów śladowych i innych składników pożywki w pojedynczym albo dwukrotnym zakresie wyszczególnionym w patencie europejskim EP nr 307 247 lub patencie USA nr 6 180 401. Te dwa dokumenty są tu włączone jako odniesienie.
Do hodowli komórek ssaczych wyrażających pożądane białko i zdolnych do dodawania pożądanych węglowodanów w określonych pozycjach, można użyć wielu warunków hodowli przywiązując
PL 213 948 B1 szczególną uwagę hodowanym komórkom gospodarza. Odpowiednie warunki hodowli dla komórek ssaków są dobrze znane w tej dziedzinie (Cleveland i wsp., J. Immunol. Methods 56: 221-234 (1983)) albo mogą był łatwo ustalone przez specjalistę w tej dziedzinie (patrz na przykład, Animal Cell Culture: A Practical Approach wyd. 2, Rickwood, D. i Hames, B. D., wyd. Oxford University Press, New York (1992)) i różnią się zależnie od konkretnej wybranej komórki gospodarza.
(ix) Oczyszczanie glikoproteiny
Kiedy stosuje się techniki rekombinowania DNA, glikoproteina może być wytwarzana wewnątrzkomórkowo, w przestrzeni periplazmatycznej albo wydzielana bezpośrednio do pożywki. Jeżeli glikoproteina jest wytwarzana wewnątrzkomórkowo, w pierwszym etapie cząsteczkowe resztki, czy to komórki gospodarza czy fragmenty po lizie, usuwa się na przykład poprzez wirowanie albo ultrawirowanie. Carter i wsp., BiolTechnology 10: 163-167 (1992) opisuje procedurę izolowania przeciwciał, które są wydzielane do przestrzeni periplazmatycznej E. coli. Pokrótce, masę komórek rozmraża się w obecności octanu sodowego (pH 3,5), EDTA i fenylometylsulfonylofluorku (PMSF) przez około 30 min. Resztki komórek usuwa się poprzez wirowanie. Tam gdzie glikoproteina jest wydzielana do pożywki, supernatanty z takich systemów ekspresyjnych generalnie najpierw zatęża się przy użyciu dostępnych handlowo filtrów do zatężania białek, na przykład jednostek do ultrafiltracji Amicon lub Millipore Pellicon. Inhibitor proteaz, taki jak PMSF może być dodany na dowolnym z powyższych etapów w celu hamowania proteolizy, a antybiotyki można dodać w celu zapobiegania wzrostu przypadkowych zanieczyszczeń.
Kompozycję glikoproteiny wytworzoną z komórek można oczyścić stosując na przykład chromatografię na hydroksyloapatycie, elektroforezę w żelu, dializę oraz chromatografię powinowactwa, przy czym korzystną techniką oczyszczania jest chromatografia powinowactwa. Przydatność białka A jako ligandu powinowactwa zależy od rodzaju i izotypu regionu Fc immunoglobuliny, który jest obecny w glikoproteinie. Białko A można zastosować do oczyszczania przeciwciał, które opierają się na ludzkich łańcuchach ciężkich γ1, γ2 lub γ4 (Lindmark i wsp., J. Immunol. Meth. 62: 1-13 (1983)). Białko G jest polecane dla wszystkich izotypów mysich i ludzkiej γ3 (Guss i wsp., EMBO J. 5: 1567- 1575 (1986)). Podłożem, do którego ligand powinowactwa jest przytwierdzony jest najczęściej agaroza, ale dostępne są również inne podłoża. Stabilne mechanicznie podłoża, takie jak szkło o określonych porach lub poli(styrenodiwinylo)benzen umożliwiają szybsze tempo przepływu i krótszy czas obróbki niż można uzyskać z agarozą. Tam gdzie glikoproteina zawiera domenę CH3, do oczyszczania przydatna jest żywica Bakerbond ABX™ (J. T. Baker, Phillipsburg, NJ). Dostępne są również inne techniki oczyszczania białka, takie jak frakcjonowanie na kolumnie jonowymiennej, wytrącanie etanolem, HPLC z odwróconymi fazami, chromatografia na krzemionce, chromatografia na heparynaSEPHAROSE™, chromatografia na żywicy jonowymiennej anionowej albo kationowej (takiej jak kolumna z kwasu poliasparaginowego), chromatoognoskowanie, SDS-PAGE oraz wytrącanie siarczanem amonu, zależnie od glikoproteiny, która ma być odzyskana.
W jednym z wykonań glikoproteinę można oczyścić poprzez zastosowanie adsorpcji na substracie lektynowym (np. kolumnie powinowactwa do lektyny) w celu usunięcia z preparatu glikoproteiny zawierającej fukozę i wzbogacić go w glikoproteinę wolną od fukozy.
F. Analiza glikoprotein
Złożoną część węglowodanową glikoproteiny wytwarzanej sposobem według niniejszego wynalazku można łatwo analizować w celu ustalenia, czy reakcja glikozylacji opisana powyżej jest kompletna. Oligosacharydy analizuje się konwencjonalnymi technikami analizy węglowodanów. A zatem, przykładowo, techniki takie jak analiza na filtrach z lektyną, dobrze znane w tej dziedzinie, pokazują proporcje końcowej mannozy lub innych cukrów, takich jak galaktoza.
Korzystne jest, jeżeli węglowodany analizuje się przy zastosowaniu spektralna analizę mas MALD1-T0F jak w przykładzie 1, poniżej oraz Shields i wsp., J. Biol. Chem. 9 (2): 6591-6604 (2001).
Znanych jest w tej dziedzinie kilka metod analizy glikozylacji i są one przydatne w kontekście niniejszego wynalazku. Takie metody dostarczają informacji dotyczącej tożsamości i składu oligosacharydu przyłączonego do peptydu. Sposoby analizy węglowodanu przydatne w niniejszym wynalazku obejmują między innymi chromatografię na HPAEC-PAD, która wykorzystuje chromatografię anionowymienną z wysokim pH w celu rozdzielenia oligosacharydów w oparciu o ładunek; NMR; spektrometrię mas; HPLC; GPC; analizę składu monosacharydów; kolejne trawienia enzymatyczne.
Dodatkowo, znane są sposoby uwalniania oligosacharydów. Metody te obejmują:
1) enzymatyczną, np. z zastosowaniem fukozydazy, takiej jak α-L-fukozydazy w celu usunięcia fukozy;
PL 213 948 B1
2) eliminację poprzez zastosowanie ostrych warunków alkalicznych w celu uwolnienia głównie struktur połączonych przez O;
3) metody chemiczne z użyciem bezwodnej hydrazyny w celu uwolnienia oligosacharydów połączonych, zarówno przez N, jak i przez O;
Cukry obojętne i aminowe można oznaczyć poprzez wysokosprawną chromatografię anionowymienną w połączeniu z pulsową detekcją amperometryczną (HPAE-PAD Carbohydrate System, Dionex Corp.). Przykładowo, cukry można uwalniać poprzez hydrolizę w 20% (obj./obj.) kwasie trifluorooctowym w IOO0C przez 6 godz. Hydrolizaty suszy się następnie poprzez liofilizację lub przy zastosowaniu Speed-Vac (Savant Instruments). Reszty rozpuszcza się następnie w 1% roztworze trójwodnego octanu sodowego i analizuje na kolumnie HPLC-AS6 jak opisano w Anumula i wsp. Anal. Biochem. 195: 269-280 (1991).
Kwas sialowy można oznaczyć oddzielnie poprzez zastosowanie bezpośredniej metody kolorymetrycznej według Yao i wsp. Anal Biochem. 179: 332-335 (1989)) w trzech powtórzeniach próbek. W korzystnych wykonaniach używany jest kwas tiobarbaturowy (TBA) według Warren, L. J. Biol. Chem., 238: (8) (1959).
Alternatywnie, można przeprowadzić analizę węglowodanów na filtrze. Według tej procedury związane z białkiem węglowodany wykrywa się stosując komercyjny system wykrywania glikanów (Boehringer), który opiera się na procedurze oksydacyjnej analizy immunologicznej na filtrze opisanej przez Haselbeck i Hosel (Haselbeck i wsp. Glycoconjugate J., 7: 63 (1990)).
Metody analizy obejmują te opisane dla analizy oligosacharydów związanych z przeciwciałem i opisane na przykład w Wormald i wsp., Biochem. 36: 1370-1380 (1997); Sheeley i wsp. Anal. Biochem. 247: 102-110 (1997) oraz Cant i wsp., Cytotechnology 15: 223-228 (1994), jak również zacytowanych tam odnośnikach.
G. Kompozycje farmaceutyczne
Kompozycje terapeutyczne glikoproteiny można wytwarzać poprzez mieszanie glikoproteiny mającej pożądany stopień czystości z ewentualnymi farmaceutycznie dopuszczalnymi nośnikami, zaróbkami lub stabilizatorami (Remington's Pharmaceutical Sciences wydanie 16, Osol, A. Ed. (1980)), w postaci preparatów liofilizowanych albo roztworów wodnych. Dopuszczalne nośniki, zaróbki lub stabilizatory są nietoksyczne dla biorców w zastosowanych dawkach i stężeniach i obejmują bufory, takie jak fosforan, cytrynian i inne kwasy organiczne, przeciwutleniacze, włączając w to kwas askorbinowy i metioninę; środki konserwujące (takie jak chlorek oktadecylodimetylobenzyloamonowy; chlorek heksametoniowy; chlorek benzalkoniowy, chlorek benzetoniowy; alkohol fenolowy, butylowy lub benzylowy; parabeny alkilowe, takie jak paraben metylowy lub propylowy; katechol; rezorcynol; cycloheksanol; 3-pentanol; oraz m-krezol); polipeptydy o niskiej masie cząsteczkowej (mniej niż około 10 reszt); białka, takie jak albumina z surowicy, żelatyna albo immunoglobuliny; polimery hydrofilowe, takie jak poliwinylopirolidon; aminokwasy takie jak glicyna, glutamina, asparagina, histidyna, arginina lub lizyna; monosaccharydy, disacharydy i inne węglowodany włączając w to glukozę, mannozę lub dekstryny; czynniki chelatujące, takie jak EDTA; cukry, takie jak sacharoza, mannitol, trehaloza lub sorbitol; tworzące sole jony, takie jak sodowe; kompleksy metali (np. kompleksy Zn-białko) i/lub niejonowe związki powierzchniowo czynne, takie jak TWEEN™, PLURONICS™ lub glikol polietylenowy (PEG).
Rozważane tu kompozycje mogą również zawierać jeden albo większą liczbę związków czynnych niezbędnych podczas leczenia przy poszczególnych wskazaniach, korzystnie o uzupełniających się aktywnościach, które nie mają na siebie wzajemnie szkodliwego wpływu. Przykładowo, kombinacja może zawierać ponadto inne przeciwciało albo czynnik chemioterapeutyczny. Takie cząsteczki powinny być obecne w kompozycji w ilościach, które są skuteczne dla zamierzonych potrzeb.
Składniki czynne można również zamykać w mikrokapsułkach wytwarzanych na przykład techniką koacerwacji albo polimeryzacji międzyfazowej, na przykład mikrokapsułkach hydroksymetylocelulozowych albo żelatynowych, odpowiednio i mikrokapsułkach poli(metylometacylanowych), odpowiednio, w koloidalnym systemie dostarczania leków (na przykład liposomy, mikrokulki albuminowe, mikroemulsje, nanocząstki i nanokapsułki) lub w makroemulsjach. Takie techniki są ujawnione w Remington's Pharmaceutical Sciences wyd. 16, Osol, A. Ed. (1980).
Kompozycje do stosowania in vivo muszą być jałowe. To można łatwo osiągnąć poprzez filtrację przez błony filtracyjne.
Można również wytworzyć preparaty o opóźnionym uwalnianiu. Odpowiednie przykłady preparatów o opóźnionym uwalnianiu obejmują półprzepuszczalne podłoża ze stałych hydrofobowych poliPL 213 948 B1 merów zawierających przeciwciało, gdzie podłoża wytwarza się w postaci uformowanych artykułów, np. błon albo mikrokapsułek. Przykłady podłóż o opóźnionym uwalnianiu obejmują poliestry, hydrożele (na przykład, poli(2-hydroksyetylometakrylan) albo poli(winyloalkohol)), polimleczany (patent USA nr 3 773 919), kopolimery kwasu L-glutaminowego oraz γ-etylo-L-glutaminianu, nie podlegający rozkładowi octan etyleno-winylowy, podlegające rozkładowi kopolimery kwas mlekowy-kwas glikolowy, takie jak LUPRON DEPOT™ (wstrzykiwalne mikrokulki składające się kopolimeru kwas mlekowykwas glikolowy i octanu leuprolidowego) oraz kwas poli-D-(-)-3-hydroksymasłowy. Jakkolwiek polimery, takie jak octan etyleno-winylowy i kwas mlekowy-kwas glikolowy umożliwiają uwalnianie cząsteczek na przestrzeni 100 dni, pewne hydrożele uwalniają białka w krótszych okresach czasu. Po zamknięciu w kapsułki przeciwciała pozostają w organizmie przez długi i mogą denaturować albo agregować jako wynik wystawienia na działanie wilgoci w 37°C, co prowadzi do utraty aktywności biologicznej i możliwych zmian w immunogenności. Można zaprojektować racjonalne strategie dla stabilizacji w zależności od mechanizmu, który w tym uczestniczy. Przykładowo, jeżeli odkryty mechanizm agregacji jest tworzeniem się międzycząsteczkowych wiązań S-S poprzez wymianę tio-disiarczkową, stabilizację można uzyskać poprzez modyfikacje reszt sulfhydrylowych, liofilizację z roztworów kwaśnych, kontrolowanie zawartości wilgoci, z zastosowaniem odpowiednich dodatków i opracowywanie specyficznych złóż polimerowych.
Kompozycje farmaceutyczne mogą być liofilizowane. Kompozycje liofilizowanych przeciwciał są opisane w patencie USA nr 6 267 958. Stabilne wodne kompozycje przeciwciał są opisane w patencie USA nr 6 171 586 B1.
H. Nie-terapeutyczne zastosowania glikoproteiny
Glikoproteinę według wynalazku można zastosować jako czynnik do oczyszczania poprzez powinowactwo. W tym procesie, glikoproteinę unieruchamia się na fazie stałej, takiej jak złoże Sephadex albo bibuła filtracyjna stosując metody znane w tej dziedzinie. Doprowadza się do kontaktu unieruchomionej glikoproteiny z próbką zawierającą antygen, który ma być oczyszczony, a następnie podłoże przemywa się odpowiednim roztworem, który będzie usuwać zasadniczo cały materiał z próbki z wyjątkiem antygenu, który ma być oczyszczony, związanym z unieruchomioną glikoproteiną. Na koniec podłoże przemywa się innym odpowiednim roztworem, takim jak bufor glicynowy pH 5,0, który będzie uwalniał antygen z glikoproteiny.
Glikoproteina może być również przydatna w testach diagnostycznych, np. do wykrywania ekspresji antygenu będącego przedmiotem zainteresowania w konkretnych komórkach, tkankach lub surowicy.
Do zastosowań diagnostycznych, glikoproteina będzie typowo wyznakowana wykrywalną resztą. Dostępnych jest wiele znaczników, które generalnie grupuje się w następujące kategorie:
oc -i λ ή o jod (a) Radioizotopy, takie jak 35S, 14C, 125I, 3H i 131I. Glikoproteina może być wyznakowana radioizotopem przy użyciu technik opisanych na przykład w Current Protocols in Immunology, tomy 1 i 2, Coligen i wsp., Wyd. Wiley-Interscience, New York, New York, Wyd. (1991), a radioaktywność można mierzyć przy zastosowaniu zliczania w scyntylatorze.
(b) Znaczniki fluorescencyjne, takie jak chelaty ziem rzadkich (chelaty europu) lub fluoresceina i jej pochodne, rodamina i jej pochodne, dansyl, Lissamina, fikoerytryna i czerwień teksańska są dostępne. Znaczniki fluorescyjne można połączyć z glikoproteiną przy zastosowaniu technik ujawnionych na przykład w Current Protocols in Immunology, jak wyżej. Fluorescencję można oceniać ilościowo przy użyciu fluorymetru.
(c) Różne znaczniki substrat-enzym są dostępne, a patent USA nr 4 275 149 dostarcza przeglądu niektórych spośród nich. Enzym generalnie katalizuje zmianę chemiczną chromogennego substratu, którą można mierzyć przy zastosowaniu różnych technik. Na przykład, enzym może katalizować zmianę koloru substratu, którą można mierzyć spektrofotometrycznie. Alternatywnie, enzym może zmieniać fluorescencję lub chemiluminescencję substratu. Techniki oceny ilościowej zmiany fluorescencji są opisane powyżej. Substrat chemiluminescencyjny staje się wzbudzony elektronicznie przez reakcję chemiczną i może następnie emitować światło, które można mierzyć (stosując na przykład chemiluminometr) albo przekazywać energię do fluorescencyjnego akceptora. Przykłady znaczników fluorescencyjnych obejmują lucyferazy (np. lucyferazę ze świetlika i lucyferazę bakteryjną; patent USA nr 4 737 456), lucyferynę, 2,3-dihydroftalazynodiony, dehydrogenazę jabłczanową, ureazę, peroksydazę, taką jak peroksydaza z chrzanu (HRPO), alkaliczną fosfatazę, β-galaktozydazę, glukoamylazę, lizozym, oksydazy sacharydowe (np. oksydaza glukozy, oksydaza galaktozy oraz dehydrogenaza glukozo-6-fosforanu), oksydazy heterocykliczne (takie jak urykaza i oksydaza ksantynowa), lakto54
PL 213 948 B1 peroksydaza, mikroperoksydaza i temu podobne. Techniki przyłączania enzymów do przeciwciał są opisane w O'Sullivan i wsp., Methods for the Preparation of Enzyme-Antybody Conjugates for use in Enzyme Immunoassay, w Methods in Enzym. Wyd. J. Langone & H. Van Vunakis), Academic Press, New York, 73: 147-166 (1981).
Przykłady połączenia enzym-substrat obejmują na przykład:
(i) Peroksydazę z chrzanu (HRPO) z nadtlenkiem wodoru jako substratem, gdzie peroksydaza nadtlenkowa utlenia prekursor barwnika (np. ortofenylenodiaminę (OPD) lub 3,3',5,5'-tetrametylobenzydynohydrochlorek (TMB));
(ii) alkaliczną fosfatazę (AP) z para-nitrofenylofosforanem jako substratem chromogennym; oraz (iii) β-D-galaktozydazę (β-D-Gal) z chromogennym substratem (np. p-nitrofenylo-D-galaktozydazą) lub fluorogennym substratem 4-metyloumbeliferylo-(3-β-D-galaktozydazą).
Wiele innych kombinacji enzym-substrat dostępnych jest dla specjalistów w tej dziedzinie. Dla ich ogólnego przeglądu patrz patenty USA nr 4 275 149 i nr 4 318 980.
Czasami znacznik jest połączony bezpośrednio z glikoproteiną. Specjalista w tej dziedzinie będzie wiedział o wielu technikach, którymi można to osiągnąć. Przykładowo, glikoproteinę można połączyć z biotyną i dowolny ze znaczników z tych trzech szerokich kategorii wspomnianych powyżej, można połączyć ze awidyną lub vice versa. Biotyna wiąże się wybiórczo z awidyną, a zatem w ten pośredni sposób można połączyć znacznik z glikoproteiną. Alternatywnie, aby uzyskać pośrednie połączenie znacznika z glikoproteiną, glikoproteinę łączy się z małym haptenem (np. digoksyną), a jeden z różnych typów wspomnianych powyżej znaczników łączy się z polipeptydem anty-hapten (np. przeciwciałem anty-digoksyną). A zatem można uzyskać pośrednie połączenie znacznika z glikoproteiną.
W innym wykonaniu wynalazku, glikoproteina nie musi być znakowana, a jego obecność może być wykrywana przy zastosowaniu wyznakowanego przeciwciała, które wiąże się z glikoproteiną.
Glikoproteinę według niniejszego wynalazku można wykorzystać w dowolnym ze znanych testów, takich jak testy współzawodnictwa o wiązanie, bezpośrednie i pośrednie testy kanapkowe i testy immunoprecypitacji. Zola, Monoclonal Antybodies: A Manual of Techniques, str. 147-158 (CRC Press, Inc. 1987).
Glikoproteinę można również zastosować w testach diagnostycznych in vivo. Generalnie, glikoproteinę znakuje się radionuklidem (takim jak 111I, 99Tc, 14C, 131I, 125I, 3H, 32P lub 35S), tak, że antygen albo wyrażające go komórki można zlokalizować przy użyciu immunoscyntografii.
I. Zastosowania glikoproteiny in vivo
Bierze się pod uwagę możliwość zastosowania glikoproteiny według niniejszego wynalazku do leczenia ssaka, np. pacjenta cierpiącego z powodu albo predysponowanego do choroby lub schorzenia, który mógłby odnieść korzyść z podawania glikoproteiny. Stanów, które można leczyć glikoproteiną jest wiele i obejmują nowotwór (np. tam, gdzie glikoproteina wiąże się antygenem związanym z nowotworem, antygenem powierzchniowym komórek B, takim jak CD20, receptorem ErbB, takim jak receptor HER2, czynnikiem angiogennym, takim jak czynnik wzrostu śródbłonka naczyń (VEGF, od ang. vascular endothelial growth factor); stany alergiczne, takie jak astma (z przeciwciałem anty-IgE) oraz choroby, w których pośredniczy LFA-1 (np. gdzie glikoproteiną jest przeciwciało anty-LFA-1 lub anty-ICAM-1) etc. W przypadku przeciwciała, które wiąże się z antygenem powierzchniowym komórek B, takim jak CD20, korzystnymi wskazaniami są nowotwory komórek B (np. chłoniak nieziarniczy), choroba autoimmunologiczna albo do blokowania odpowiedzi immunologicznej na obcy antygen (patrz WO nr 01/03734).
Tam gdzie przeciwciało wiąże się z receptorem ErbB, stanem jest korzystnie nowotwór wyrażający ErbB, np. łagodne i złośliwe guzy charakteryzujące się nadekspresją receptora ErbB. Takie nowotwory obejmują miedzy innymi raka sutka, raka płaskokomórkowego, raka płuc z małych komórek, raka płuc nie z małych komórek, raka żołądkowo-jelitowego, raka trzustki, glejaka, raka szyjki macicy, raka jajnika, raka wątroby, raka pęcherza, wątrobiaka, raka okrężnicy, raka okrężnicy i odbytnicy, raka śluzówki macicy, raka gruczołu śliniankowego, raka nerki, raka wątroby, raka prostaty, raka sromu, raka tarczycy, nowotworów wątroby i różne typy raka głowy i szyi.
Według wskazówek tu zawartych, można wytworzyć glikoproteinę z wariantem regionu Fc o polepszonej aktywności ADCC. Takie cząsteczki znajdą zastosowanie w leczeniu różnych chorób.
Przykładowo, glikoproteinę o polepszonej aktywności ADCC można zastosować do leczenia chorób lub schorzeń, gdzie pożądana jest eliminacja tkanki albo obcego mikroorganizmu. Przykładowo, glikoproteinę można zastosować do leczenia raka; chorób autoimmunologicznych, chorób zapalPL 213 948 B1 nych; infekcji (np. bakteryjnych, wirusowych, grzybowych lub drożdżowych) i innych stanów (takich jak wole) gdzie pożądane jest usunięcie tkanki, itd.
Glikoproteinę podaje się dowolnym z odpowiednich sposobów, włączając w to podawanie pozajelitowe, podskórne, dootrzewnowe, dopłucne, donosowe, a jeśli to pożądane przy miejscowym leczeniu immunosupresyjnym, douszkodzeniowe. Wlewy pozajelitowe obejmują podawanie domięśniowe, dożylne, dotętnicze, dootrzewnowe lub podskórne. Ponadto, dogodne jest podawanie glikoproteiny poprzez pulsowy wlew, najkorzystniej ze zmniejszającymi się dawkami glikoproteinę. Korzystne jest, jeżeli dawki podaje się w zastrzykach, najkorzystniej zastrzykach dożylnych albo podskórnych, w zależności po części od tego, czy podawanie jest krótkie czy długotrwałe.
Dla zapobiegania albo leczenia choroby odpowiednia dawka glikoproteiny będzie zależała od typu choroby, która ma być leczona, ostrości i przebiegu choroby, tego czy przeciwciało jest podawane dla celów zapobiegawczych czy leczniczych, wcześniejszej terapii, historii klinicznej pacjenta i odpowiedzi glikoproteinę oraz opinii prowadzącego lekarza. Dogodne jest podawanie pacjentowi glikoproteiny jednorazowo albo w postaci serii dawek.
W zależności od typu i ostrości choroby, wyjściowa proponowana dawka glikoproteiny do podania pacjentowi, podawana na przykład jednokrotnie więcej razy albo jako ciągły wlew, wynosi około 1 μg/kg do 15 mg/kg (np. 0,1-20 mg/kg). Typowa dzienna dawka może mieścić się w zakresie od około 1 μg/kg do 100 mg/kg lub więcej w zależności od wspomnianych powyżej czynników. Przy podawaniu powtarzanym na przestrzeni kilku dni lub dłużej, zależnie od stanu chorobowego, leczenie podtrzymuje się aż do pożądanego zniesienia objawów chorobowych. Jednakże mogą być użyteczne inne tryby podawania. Postęp tej terapii można łatwo śledzić przy zastosowaniu konwencjonalnych technik i testów. Przykłady tutaj pokazują, że można podawać niższe dawki glikoproteiny (np. przeciwciała wolnego od fukozy), w porównaniu z glikoproteiną zawierającą fukozę.
Kompozycja glikoproteiny będzie wytworzona, dawkowana i podawana w sposób zgodny z dobrą praktyka medyczną. Czynniki brane pod uwagę w tym kontekście obejmują konkretne schorzenia poddawane leczeniu, konkretnego ssaka poddanego leczeniu, stan kliniczny konkretnego pacjenta, przyczyny choroby, miejsca dostarczania czynnika, sposobu podawania, trybu podawania i innych czynników znanych praktykującym lekarzom. „Skuteczna leczniczo ilość” glikoproteiny, która ma być podawana będzie zależeć od takich uwarunkowań i jest minimalna ilością konieczną do zapobiegania, łagodzenia i leczenia choroby albo schorzenia. Glikoproteina nie musi być, ale jest fakultatywnie mieszane z jednym albo większą liczbą czynników obecnie stosowanych do zapobiegania albo leczenia danej choroby. Skuteczna ilość takich innych czynników zależy od ilości glikoproteiny obecnej w kompozycji, typu choroby lub leczenia i innych dyskutowanych powyżej parametrów. Są one generalnie stosowane w tych samych dawkach i tymi samymi drogami podawania jak stosowane tu wcześniej lub około 1 do 99% stosowanych tu uprzednio dawek.
Kompozycje terapeutycznego przeciwciała są generalnie umieszczane w pojemniku mającym jałowy dostęp, na przykład torbie lub fiolce z roztworem dożylnym mającym zatyczkę, którą można przebić igłą do zastrzyków podskórnych.
Pacjent z nowotworem, który ma być traktowany przeciwciałem jako antagonistą jak tu ujawniono, może również otrzymać radioterapię. Alternatywnie albo dodatkowo, pacjentowi można podać środek chemioterapeutyczny. Przygotowanie i schemat podawania środków chemioterapeutycznych można przeprowadzić według instrukcji producenta lub po empirycznym ustaleniu przez specjalistę w tej dziedzinie. Przygotowanie i schemat podawania leku w takiej chemioterapii są także opisane w Chemotherapy Service wyd., M. C. Perry, Williams & Wilkins, Baltimore, MD (1992). Podanie środka chemioterapeutycznego może poprzedzać lub następować po podaniu antagonisty lub można go podać równocześnie. Przy wskazaniach nowotworowych, może być pożądane podawanie również dodatkowych przeciwciał wobec antygenów związanych z nowotworem albo czynników angiogennych, takich jak przeciwciała, które wiążą się z HER2 lub jak czynnik wzrostu śródbłonka naczyń (VEGF). Alternatywnie albo dodatkowo, pacjentowi można podać jednocześnie jedną albo większa liczbę cytokin.
Wynalazek dostarcza ponadto produkt fabryczny zawierający materiały przydatne do leczenia na przykład nowotworu. Produkt fabryczny zawierają pojemnik oraz etykietkę. Odpowiednie pojemniki obejmują na przykład butelki, fiolki i probówki testowe. Pojemniki mogą być wytworzone z rozmaitych materiałów, takich jak szkło albo plastyk. Pojemniki zawierają kompozycję zawierającą opisany tu preparat glikoproteiny. Składnikiem czynnym w kompozycji jest konkretna glikoproteina. Etykietka na pojemniku wskazuje, że kompozycja ma być stosowana do leczenia albo zapobiegania konkretnej choroby albo schorzenia i może również zawierać wskazówki stosowania in vivo, takie jak opisano
PL 213 948 B1 powyżej. Zestaw według wynalazku zawiera pojemnik opisany powyżej i drugi pojemnik zawierający bufor. Może on ponadto zawierać inne materiały pożądane z punktu widzenia handlowego i użytkownika, włączając w to inne bufory, rozcieńczalniki, filtry, igły i strzykawki i wkładki w opakowaniu z instrukcjami stosowania.
Wynalazek został zilustrowany następującymi przykładami.
Przykłady
Aby ocenić rolę fukozylowanego oligosacharydu w funkcji IgG stosowano linię komórkową Lec13 (Ripka i wsp. Arch. Biochem. Biophys. 249: 533-545 (1986)) do wyrażania ludzkiej IgG1. Ta linia komórkowa CHO ma upośledzoną zdolność do dodawania fukozy, ale poza tym dodawała do IgG oligosacharyd, który był podobny do spotykanego w normalnych liniach CHO i w surowicy ludzkiej. Powstałe produkty IgG stosowano do oceny wpływu fukozylowanego węglowodau na funkcje efektorowe przeciwciała, w tym wiązanie ludzkiego FcyR, ludzkiego Clq, ludzkiego FcRn i ADCC stosując ludzkie komórki efektorowe.
P r z y k ł a d 1
Wiązanie do ludzkiego FcR
Konstrukty cDNA do stabilnych linii komórkowych: Łańcuchy ciężki i lekki humanizowanego przeciwciała anty-HER2 (Carter i wsp., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 89: 4285 (1992)), humanizowane, dojrzałe pod względem powinowactwa przeciwciało anty-IgE E27 (patent USA nr 6 172 213) i chimerowe przeciwciało anty-CD20 C2B8 (patent US nr 5 736 137) subklonowano do uprzednio opisanego wektora ekspresyjnego do komórek ssaczych (Lucas i wsp. Nucl. Acid Res. 24, 1774-1779 (1996)).
Stosowano puromycynę jako marker selekcyjny w komórkach DHFR(+), takich jak komórki Lec13 i zatrzymano miejsce DHFR do amplifikacji metotreksatem stabilnej linii komórkowej.
Transfekcja i hodowanie komórek CHO Lec13 i typu dzikiego: linię komórkową CHO ProLec13.6a (Lec13) otrzymano od Profesor Pameli Stanley z Albert Einstein College of Medicine z Yeshiva University. Linie rodzicielskie są Pro- (auksotrof prolinowy) i Gat- (auksotrof glicynowy, adenozynowy i tymidynowy). Linia komórkowa CHO-DP12 stosowana do przeciwciał typu dzikiego jest pochodną linii komórkowej CHO-K1 (ATCC #CCL-61), która ma niedobór reduktazy dihydrofolianu i ma obniżone wymaganie dla insuliny.
Linie komórkowe transfekowano cDNA stosując metodę Superfect (Qiagen, Valencia, CA). Selekcję komórek Lec13 wyrażających transfekowane przeciwciała przeprowadzono stosując dichlorowodorek puromycyny (Calbiochem, San Diego, CA) przy 10 pg/ml w podłożu hodowlanym zawierającym: podłoże MEM Alpha z L-glutaminą, rybonukleozydami i deoksyrybonukleozydami (GIBCO-BRL, Gaithersburg, MD), uzupełnione 10% inaktywowanym FBS (GIBCO), 10 mM HEPES i 1 x penicyliną/streptomycyną (GIBCO). Komórki CHO selekcjonowano podobnie w podłożu wzrostowym zawierającym Hama F12 bez GHT: DMEM z małą ilością glukozy bez glicyny z NaHCO3 uzupełnione 5% FBS (GIBCO), 10 mM HEPES, 2 mM L-glutaminą, 1 x GHT (glicyna, hipoksantyna, tymidyna) i 1 x penicylina/streptomycyna.
Kolonie tworzyły się w ciągu dwóch do trzech tygodni i były łączone do ekspansji i ekspresji białek. Pule komórek pierwotnie zaszczepiano przy 3 x 106 komórek/10 cm płytkę do ekspresji białek na małą skalę. Komórki przenoszono na podłoża bez surowicy po osiągnięciu 90-95% konfluencji i po 3-5 dniach zbierano supernatanty komórek i testowano w ELISA Fc IgG- i nienaruszony IgG aby ocenić poziomy ekspresji białek. Komórki Lec13 i CHO zaszczepiano przy około 8 x 106 komórek/15 cm płytka jednego dnia przed przerzuceniem na podłoże produkcyjne PS24 uzupełnione 10 mg/L zrekombinowanej ludzkiej insuliny i 1 mg/L pierwiastków śladowych.
Ekspresja białek: komórki Lec13 i CHO pozostawały w podłożu produkcyjnym wolnym od surowicy przez 3-5 dni. Supernatanty zbierano i klarowano przez wirowanie w stożkowych probówkach 150 ml aby usunąć komórki i pozostałości. Dodano inhibitory proteaz PMSF i aprotyninę (Sigma, St. Louis, MO) i supernatanty zatężono 5-krotnie na mieszanych komórkach stosując filtry MWCO30 (Amicon, Beverly, MA) przed natychmiastowym oczyszczeniem stosując chromatografię z białkiem G (Amersham Pharmacia Biotech, Piscataway, NJ)). Dla wszystkich białek wymieniono bufor do soli fizjologicznej buforowanej fosforanem (PBS) stosując zatężacze Centripriep-30 (Amicon) i analizowano za pomocą elektroforezy w żelu SDS-poliakryloamid.
Oznaczono stężenia białek stosując A280 i sprawdzono stosując analizę składu aminokwasów.
Średnio komórki Lec13 generowały 10 pg mAb na płytkę 15 cm; ekspresja w kontrolnych komórkach
CHO dla wszystkich przeciwciał była 4-5 razy wyższa niż w komórkach Lec13. Przeciwciała wygenePL 213 948 B1 rowane z CHO-DP12 hodowanych na płytkach będą oznaczane jako CHO-P. Komórki CHO-DP12 5 hodowano także w butelkach do mieszania. Komórki zaszczepiano przy 6 x 105 komórek/ml i hodowano w 37°C przez dwa dni. Trzeciego dnia zmieniono temperaturę na 33°C i pozwolono komórkom na wzrost aż żywotność spadła do 70% ze względu na spadek pH do -6,5. Przeciwciała pochodzące z komórek HO-DP12 hodowanych w butelkach do mieszania będzie określane jako CHO-S.
Analiza poprzez spektrometrię mas przy zastosowaniu laserowej desorpcja/jonizacji z czasem przelotu na matrycy (ang. Matrix-Assisted Laser Desorption/Ionization Time-of-flight, MALDI-TOF) oligosacharydów związanych z asparaginą: oligosacharydy związane przez N uwolniono ze zrekombinowanych glikoprotein stosując procedurę Papac i wsp., Glycobiology 8, 445-454 (1998). Pokrótce, studzienki 96-studzienkowej płytki do mikromiareczkowania wyścielonej PVDF (Millipore, Bedford, MA) kondycjonowano 100 μl metanolu, który był przeciągany przez membrany PDVF przez przyłożenie próżni do wielopróbkowego aparatu próżniowego Millipore Multiscreen. Kondycjonowane membrany PVDF płukano 3 x 250 μl wody.
Między wszystkimi etapami płukania studzienki w pełni opróżniano przykładając niewielką próżnię do aparatu. Membrany płukano buforem do redukcji i karboksymetylacji (RCM) złożonym z 6M chlorowodorku guanidyny, 360 mM Tris, 2 mM EDTA, pH 8,6. Próbki glikoproteiny (50 μg) nanoszono do poszczególnych studzienek, ponownie przeciągano przez membrany PVDF przez zastosowanie niewielkiej próżni i studzienki płukano 2 x 50 μl buforu RCM.
Immobilizowane próbki redukowano przez dodanie 50 μl 0,1M roztworu ditiotreitolu (DTT) do każdej studzienki i inkubację płytki mikrotytracyjnej w 37°C przez 1 godz. DTT usunięto za pomocą próżni i studzienki płukano 4 x 250 μl wody.
Reszty cysteiny karboksymetylowano przez dodatek 50 μl 0,1M roztworu kwasu jodooctowego (IAA), który był świeżo przygotowywany w 1M NaOH i rozcieńczany do 0,1M buforem RCM. Karboksymetylację uzyskano przez inkubację przez 30 min w ciemności w temperaturze otoczenia. Do płytki przyłożono próżnię w celu usunięcia roztworu IAA i studzienki płukano 4 x 250 μl oczyszczonej wody. Membrany PVDF blokowano przez dodatek 100 μl 1% roztworu PVP360 (poliwinylopirolidyna m. cz. 360000) (Sigma) i inkubację przez 1 godz. w temperaturze otoczenia. Usunięto roztwór PVP-360 za pomocą niewielkiej próżni i studzienki przepłukano 4 x 250 μl wody.
Do każdej studzienki dodano roztwór do trawienia PNGase F (New England Biolabs, Beverly, MA), 25 μl roztworu 25 jednostek/ml w 10 mM Tris octan, pH 8,4 i trawiono przez 3 godz. w 37°C. Po trawieniu próbki przeniesiono do 500 ml probówek Eppendorfa i do każdej próbki dodano 2,5 ml roztworu 1,5 M kwasu octowego.
Zakwaszone próbki inkubowano przez 3 godz. w temperaturze otoczenia aby przekształcić oligosacharydy z glikozyloamin do formy hydroksylowej. Przed analizą widm masowych MALDI-TOF uwolnione oligosacharydy odsolono stosując 0,7ml złoże żywicy kationowymiennej (żywica AG50W-X8 w formie wodorowej) (Bio-Rad, Hercules, CA) upakowanej jako zawiesina do zwartych probówek do reakcji (US Biochemical, Cleveland, OH).
Dla analizy spektralnej mas MALDI-TOF próbek na sposób dodatni, odsolone oligosacharydy (próbki 0,5 ml) naniesiono na nierdzewny cel z 0,5 ml matrycy kwasu 2,5 dihydroksybenzoesowego (sDHB), którą przygotowano przez rozpuszczenie 2 mg kwasu 2,5 dihydroksybenzoesowego z 0,1 mg kwasu 5-metoksysalicylowego w 1 ml etanol/10 mM chlorek sodu 1:1 (obj/obj).
Mieszaninę próbka/matryca suszono pod próżnią. W celu analizy w sposobie negatywnym, odsolone oligosacharydy (próbki 0,5 ml) naniesiono na nierdzewny cel z razem z 0,5 ml matrycy 2',4',6'-trihydroksyacetofeno-nowej (THAP) przygotowanej w 1:3 (obj/obj) acetonitryl/13,3 mM bufor cytrynian amonu.
Mieszaninę próbka/matrycę suszono pod próżnią i następnie pozostawiono do wchłonięcia wilgoci z powietrza przed analizą. Uwolnione oligosacharydy analizowano za pomocą MALDI-TOF na spektrometrze masowym PerSeptive BioSystems Voyager-DE. Spektrometr masowy uruchamiano przy 20 kV albo w sposobie dodatnim albo ujemnym z liniową konfiguracją i stosując opóźnioną ekstrakcję. Dane pozyskiwano stosując moc lasera 1300 i w wariancie sumowania danych (240 skany) aby poprawić stosunek sygnału do szumu.
Przyrząd kalibrowano mieszaniną standardowych oligosacharydów i dane wygładzano stosując punktowy algorytm Savitskyego-Golaya przed przypisaniem mas. Integrację danych widm mas uzyskano stosując pakiet oprogramowania Caesar 7.0 (SciBridge Software).
Wyniki podsumowano w następującej tabeli.
PL 213 948 B1
T a b e l a 2
Wiązanie przeciwciał do ludzkiego FcyR
Średnia (S. D.) N %-Fukc % Ga10 %Ga11 %Ga12
1 2 3 4 5 6 7
FYRIa’b
CHO-S 1,00 5 3 53 42 6
HO-P 0,97 (0,07) 5 2 73 25 3
Lec13(A) 1,04 (0,07) 4 92 50 43 1
Lec13(B) 1,04 (0,10) 5 91 55 40 5
FcyRIIA (R131)c
CHO-S 1,00 3 3 53 42 6
CHO-P 0,87 (0,14) 2 2 73 25 3
Lec13(A) 1,70 (0,04) 3 92 50 43 7
Lec13(B) 1,49 (0,16) 3 91 55 40 5
Lec13(C) 1,77 (0,38) 3 93 51 43 7
Lec13(D) 1,71 (0,40) 3 88 51 43 7
Lec13-Avg 1,62 (0,32) 12 91 (2) 52 (2) 42 (2) 7 (1)
FcyRIIA (H131)d
CHO-S 1,00 3 3 53 42 6
CHO-P 0,87 (0,07) 2 2 73 25 3
Lec13(A) 0,93 (0,08) 3 92 50 43 7
Lec13(B) 0,75 (0,07) 3 91 55 40 5
Lec13(C) 0,94 (0,15) 3 93 51 43 7
Lec13(D) 0,91 (0,07) 3 88 51 43 7
Lec13-Avg 0,88 (0,12) 12 91 (2) 52 (2) 42 (2) 7 (1)
FcyRBc
CHO-S 1,00 3 3 53 42 6
CHO-P 0,81 (0,11) 2 2 73 25 3
Lec13(A) 2,27 (0,35) 3 92 50 43 7
Lec13(B) 1,51 (0,22) 3 91 55 40 5
Lec13(C) 2,07 (0,33) 2 93 51 43 7
Lec13(D) 1,60 (0,45) 3 88 51 43 7
Lec13-Avg 1,81 (0,49) 12 91 (2) 52 (2) 42 (2) 7 (1)
FcyRIIIA (F158)e
CHO-S 1,00 3 3 53 42 6
CHO-P 0,94 (0,01) 2 2 73 25 31
Lec13(A) 27,0 (2,1) 3 92 50 43 7
Lec13(B) 22,8 (2,3) 3 91 55 40 5
Lec13(C) 25,1 (2,4) 3 93 51 43 7
Lec13(D) 22,3 (1,0) 3 88 51 43 7,1
Lec13-Avg 24,3 (2,6) 12 91 (2) 52 (2) 42 (2) 7 (1)
PL 213 948 B1 cd tabeli 2
1 2 3 4 5 6 7
HEK2 93-AAA 20,8 (0,9) 2
Lec13-AAA(A) 32,8 1 195 75 22 2
Lec13-AAA(B) 32,9 (2,9) 3 92 75 22 3
Lec13-AAA(C) 34,8 (3,0) 2
Lec13-AAA-Avg 33,5 (2,1) 6
FcyRIIIA (F158)f
HEK293 1,00 2
DP12 0,35 (0,01) 2
Lec13 7,63 (0,20) 2
FcyRIIIA (F158)g
HEK293 1,00 3
CHO-P 0,65 (0,24) 3
Lec13 1,92 (0,39) 3
HEK293-AAA 1,87 (0,24) 3
FcyRIIIA (F158) - transfekowane komórki CHOh
CHO-S 1,00 4
Lec13-D 15,7 2,4 4
Lec13-E 17,0 3,1 3
Lec13-F 15,8 3,2 3
Lec13-Avg 16,1 2,5 10
HEK2 93-AAA 10,7 1,4 3
Lec13-AAA-B 26,8 6,6 3
Lec13-AAA-C 25,9 5,9 3
Lec13-AAA-Avg 26,4 5,6 6
FcyRIIIA (V158)e
CHO 1,00 3 3 53 42 6
DP12 0,61 (0,01) 2 2 73 25 3
Lec13(A) 14,9 (2,9) 3 92 50 43 7
Lec13(B) 12,5 (1,3) 3 91 55 40 5
Lec13(C) 12,6 (3,3) 3 93 51 43 7
Lec13(D) 14,5 (1,9) 3 88 51 43 7
Lec13-Avg 13,6 (2,4) 12 91 (2) 52 (2) 42 (2) 7 (1)
HEK2 93-AAA 9,3 1
Lec13-AAA(A) 25,4 1 95 75 22 2
Lec13-AAA(B) 23,8 (1,1) 3 92 75 22 3
Lec13-AAA(C) 22,5 (0,2) 2
Lec13-AAA-Avg 23,1 (1,4) 6
PL 213 948 B1 cd tabeli 2
1 2 3 4 5 6 7
FcyRIIIA (V158)f
HEK293 1,00 2
CHO-P 0,32 (0,01) 2
Lec13 6,44 (0,19) 2
FcyRIIIA (V158)g
HEK293 1,00 3
CHO-P 1,00 (0,13) 3
Lec13 1,18 (0,10) 3
HEK293-AAA 1,15 (0,05) 3
Wszystkie wartości są stosunkiem A(wariant)/A(standard) mierzonymi przy A490nm<· CHO-S przedstawia IgG wyrażaną przez komórki CHO w butelkach do mieszania, CHO-P przedstawia IgG wyrażaną przez komórki CHO na płytkach 15 cm, Lec13 przedstawia IgG wyrażaną przez komórki Lec 13 na płytkach, HEK293 przedstawia IgG wyrażaną ludzkie komórki nerki 293, AAA przedstawia wariant IgG1 Ser298Ala/Glu333Ala/Lys334Ala, Lec13-S przedstawia IgG wyrażaną przez komórki Lec13 w butelkach do mieszania (zamiast płytek), litery w nawiasach przedstawiają niezależnie wyrażane partie IgG b dimery Hu4D5 przy [mAb] = 0,12 pg/ml c %-Fuk to procent całkowitego oligosacharydu bez fukozy, %Ga10, %Ga11, %Ga12 to procent całkowitego oligosacharydu bez (agalaktozyl), z jedną (monogalaktozyl), lub dwiema (digalaktozyl) resztami galaktozy kowalencyjnie związanymi z końcowymi resztami mannozy. Wartości w nawiasach są odchyleniami od średniej dla czterech niezależnie wyrażanych partii Lec13-Hu4D5 d dimery Hu4D5 przy [mAb] = 3,33 pg/ml e dimery Hu4D5 przy [mAb] = 1,11 pg/ml f dimery Hu4D5 przy [mAb] = 0,12 pg/ml g dimery E27 przy [mAb] = 0,12 pg/ml h heksamery E27 przy [mAb] = 0,12 pg/ml
Oznaczenia do mierzenia wiązania IgG1 do FcYR i FcRn (oparte na ELISA i w komórkach) opisano uprzednio (Shields i wsp. J. Biol. Chem. 27 6: 6591-6604 (2001) i WO 00/42072 (Presta).
Monomeryczna Lec13-Hu4D5 IgG1 wiązała ludzki FcYRI równoważnie do wiązania Hu4D5-CHO-S i CHO-P (fig. 4; tabela 2). Choć obecność węglowodanu jest potrzebna dla wiązania FcYRI (Walker i wsp. Biochem. J. 259: 347-353 (1989)), równoważne wiązanie IgG1 niezależnie od różnic w zawartości fukozy (Lec13 w porównaniu z CHO) lub zawartości galaktozy (CHO-P w porównaniu z CHO-S) wykazuje, że ludzki FcYRI nie jest wrażliwy na obecność tych reszt na węglowodanie. Wpływ galaktozylacji na wiązanie IgG do ludzkiego FcYRI badano uprzednio (Wright i wsp. J. Immunol. 160: 3393-3402 (1998); Kumpel i wsp. Human Antibod. Hybridomas 5: 143-151 (1994); i Tsuchiya i wsp. J. Rheumatol. 16: 285-290 (1989)) i przegląd tych danych sugeruje, że jeśli galaktozylacja ma wpływ na wiązanie FcYRI, jest on subtelny i może być zależny od izotypu (Wright i wsp. J. Immunol. 160: 3393-3402 (1998)).
W przeciwieństwie do monomerycznego wiązania IgG1 do ludzkiego FcYRI oznaczenie wiązania dla ludzkiego FcYR o niskim powinowactwie (FcYRII, FcYRIII) wymagało tworzenia dimerów (Hu4D5, HuE27) lub heksamerów (HuE27) aby spowodować wykrywanie wiązania. Ludzki FcYRIIA ma dwa znane, występujące naturalnie allotypy, które są określane przez aminokwas w pozycji 131 (Clark i wsp. J. Immunol. 143: 1731-1734 (1989)).
Ludzki FcYRIIIA ma naturalnie występujące allotypy w pozycji 48 (Leu, His lub Arg) i w pozycji 158 (Val lub Phe); allotyp FcYRIIIA (Val158) oddziałuje z ludzką IgG lepiej niż allotyp FcYRIIIA (Phel58) (Shields i wsp. J. Biol. Chem. 276: 6591-6604 (2001); Koene i wsp. Blood 90: 1109-1114 (1997); i Wu i wsp. J. Clin. Invest. 100: 1059-1070 (1997)).
Wiązanie dimerów Lec13-Hu4D5 do ludzkiego FcYRIIB i polimorficznej formy R131 ludzkiego FcYRIIA wykazało 1,8-krotną i 1,6-krotną poprawę wiązania, odpowiednio w porównaniu z CHO-Hu4D5 (fig. 5, 6; tabela 2). Przeciwnie, brak fukozy nie wpływał na wiązanie do polimorficznej formy H131 ludzkiego FcYRIIA (fig. 7; tabela 2).
Podobna poprawa wiązania IgG1 bez fukozy do zarówno ludzkiego FcYRIIA (R131) i FcYRIIB, z których każdy ma argininę w pozycji 131, w porównaniu z brakiem efektu na FcYRIIA (H131) sugeruje, że fukoza może albo bezpośrednio oddziaływać z resztą FcYR pozycji 131 lub zmienia konformację
PL 213 948 B1
IgG1 tak, by wywierać subtelny, negatywny wpływ na wiązanie gdy arginina jest obecna w FcyR w pozycji 131.
Obie polimorficzne formy FcyRIIIA wykazały znacząco ulepszone wiązanie do IgG1 pozbawionej fukozy. Wiązanie dimerycznego Lec13-Hu4D5 do FcyRIIIA (V158) wykazało 14-krotną poprawę w stosunku do CHO-Hu4D5 (fig. 8; tabela 2) i wiązanie do FcyRIIIA (F158) wykazało przynajmniej 100-krotną poprawę (fig. 9). Dimery Lec13-HuE27 też wykazały poprawione wiązanie do obu polimorficznych form FcyRIIIA (fig. 10, 11; tabela 2).
W uprzednich badaniach wpływu wariantów sekwencji białka ludzkiej IgG1 na wiązanie do ludzkiego FcyR, stosowano heksameryczne kompleksy złożone z trzech anty-IgE E27 i trzech IgE (Shields i wsp. J. Biol. Chem. 276: 6591-6604 (2001)); stąd też te kompleksy są trimerami w anty-IgE E27. W tamtych badaniach poprawa wiązania wariantu S298A/E333A/K334A-IgG1 do FcyRIIIA (F158) i FcyRIIIA (V158) była 1,5- do 2-krotna i 1,1-krotna, odpowiednio; choć poprawa może wydawać się minimalna, wpływ na ADCC był znaczący (Shields i wsp. J. Biol. Chem. 276: 6591-6604 (2001)).
W obecnych badaniach, heksameryczny kompleks S298A/E333A/K334A-IgG1 wykazał poprawione wiązanie do obu polimorficznych form FcyRIIIA zgodnie z wartościami z poprzednich badań (fig. 12, 13; tabela 2); podobnie heksameryczny kompleks Lec13-HuE27 (natywna IgG1) wykazał polepszone wiązanie około 2-krotne do FcyRIIIA (F158) (tabela 2). Gdy były oznaczane jako dimery, S298A/E333A/K334A-wariant IgG1 z fukozą wykazał 9-krotną i 20-krotną poprawę w wiązaniu FcyRIIIA (V158) i FcyRIIIA (F158), odpowiednio; ten sam wariant bez fukozy wykazał jeszcze większą poprawę wiązania do polimorficznych form 21-krotny i 33-krotny, odpowiednio (tabela 2).
Tak więc, brak fukozy nie tylko zwiększa wiązanie natywnej IgG1 do FcyRIIIA ale także może zwiększyć wiązanie wariantów IgG1. Tak więc, zmiany białka i węglowodanu są synergistyczne.
Dla wszystkich form HuE27 (natywna, S298A/E333A/K334A-IgG1, pochodząca z Lec13), poprawa wiązania większego kompleksu (trimeryczny w HuE27) była znacznie mniejsza niż obserwowana dla tego samego mAb jako kompleksu dimerycznego. Na przykład, wiązanie Lec13-HuE27 jako dimeru wykazało około 20-krotną poprawę, ale tylko 2-krotną poprawę dla większego kompleksu (tabela 2). Sugeruje to, że jako że wielkość kompleksu awidyczności może zacząć dominować nad wiązaniem.
Poprawione wiązanie się IgG1 z brakiem fukozy z FcyRIIIA potwierdzono z pełnej długości łańcuchem a FcyRIIIA (Phe158) wyrażanym razem z łańcuchem y na komórkach CHO (fig. 28; tabela 2). W przypadku samej fuzji białkowej łańcucha α w teście ELISA, niedobór fukozy był synergistyczny z wariantem S298A/E333A/K334A-IgG1.
Oceniano także wiązanie natywnęj i pozbawionej fukozy IgG1 do mysich FcyRII i FcyRIII. Ludzka IgG1, nawet jako dimery, słabo wiąże się do tych receptorów i nie stwierdzono poprawy wiązania z IgG1 bez fukozy. Inny receptor dla IgG, noworodkowy receptor Fc (FcRn), jest strukturalnie niespokrewniony z FcyR (Burmeister i wsp. Nature 372: 379-383 (1994); i Raghavan i wsp. Annu. Rev. Cell Dev. Biol. 12: 181-220 (1996)) i zaproponowano, że bierze udział w szeregu procesów biologicznych, w tym szybkości kliransu IgG (Ghetie i wsp. Annu. Rev. Immunol. 18: 739-766 (2000)).
Wiązanie fukozylowanych i nie-fukozylowanych IgG1 do FcRn było równoważne (fig. 14). To nie jest dziwne ponieważ aglikozylowana IgG1 wiąże ten receptor podobnie do glikozylowana IgG1 (agliko Ab wiąże FcRn).
Brak fukozy na węglowodanie związanym z Asn297 dał znacząco poprawione wiązanie do ludzkiego FcyRIIIA (obu form polimorficznych F158 i V158) w oznaczeniu w formacie ELISA. Zwiększone wiązanie do FcyRIIIA zostało dalej wzmocnione przez zdolność IgG fukoza-minus do wzmagania cytotoksyczności w oznaczeniach ADCC stosujących oczyszczone ludzkie PBMC. Poprawiona cytotoksyczność była szczególnie widoczna przy niższych stężeniach przeciwciała, sugerując, że terapeutyczne przeciwciała, które stosują ADCC mogłyby być podawane przy niższej dawce aby zapewnić ekwiwalentne zabijanie komórek jak wyższa dawka fukozylowanej IgG.
Stwierdzono mniejszą poprawę w wiązaniu IgG fukoza-minus do ludzkiego FcyRIIA (R131) i FcyRIIB; nie stwierdzono różnicy dla ludzkiego FcyRIIA(H131). Dwa pierwsze receptory mają argininę w pozycji 131, implikując, bez ograniczania się do tej teorii, że w fukozylowanej IgG reszta fukozy może albo oddziaływać bezpośrednio (i ewidentnie, negatywnie) z resztą 131 FcyRII lub może subtelnie wpływać na konformację IgG, co daje w efekcie interakcję negatywną.
Chociaż poprawa wiązania IgG fukoza-minus do FcyRIIA (R131) i FcyRIIB w oznaczeniach w formacie ELISA było małe (~ 2-krotne), oznaczenia ADCC stosujące monocyty także wykazały pewną zwiększoną cytotoksyczność przy niższych stężeniach przeciwciała. Monocyty wyrażają FcyRI,
PL 213 948 B1
FcyRIIA, FcyRIIB i tylko subpopulacja monocytów wyraża FcyRIIIA. Ponieważ wiązanie do ludzkiego FcyRI było równoważne dla zarówno fukozylowanej IgG i IgG fukoza-minus, poprawa w ADCC najprawdopodobniej nie jest wynikiem różnicowej interakcji z FcyRI. Zarówno monocyty dawcy FcyRIIA (R131/R131) i FcyRIIA (H131/H131) wykazały pewną poprawę w ADCC (fig. 21, 22) sugerując bez ograniczania się do dowolnej jednej teorii, że:
(1) FcyRIIA może nie być wyrażany na dostateczne wysokim poziomie na monocytach aby wykazać różnicę między dwiema formami polimorficznymi, (2) FcyRIIB może być dominującym wiązaniem FcyR (wpływając ekwiwalentnie na zarówno monocyty R131/R131 i H131/H131) lub (3) subpopulacja monocytów wyrażających FcyRIIA jest odpowiedzialna za poprawiony ADCC.
Porównanie węglowodanu obecnego na natywnej IgG z IgG1 produkowaną przez Lec13 i przez
CHO nie wykazywało wyraźnych różnic w stopniu galaktozylacji i tak więc wyniki mogą być przypisane wyłącznie obecności/brakowi fukozy.
Jednak dla wariantu IgG1 S298A/E333A/K334A produkowana przez Lec13, HEK293 i DP12 IgG1 wykazała zróżnicowaną galaktozylację. Jednak kombinacja wariantów sekwencji białka i braku fukozy nie wydawały się być addytywne.
Uprzednie badania wariantów sekwencji białka ludzkiej IgG wykazały, że podstawienia alaniny (i inne) w niektórych pozycjach Fc mogły zmniejszać lub poprawić wiązanie do FcyR jak i wykazywać poprawione ADCC (Shields i wsp. J. Biol. Chem. 276 (9): 6591-6604 (2001)). Jest interesujące, że niektóre z nich nie były w pobliżu interfejsu interakcji spotykanego w strukturze kryształu kompleksu Fc ludzkiej IgG-ludzki FcyRIIIA (Sondermann i wsp. Nature 406: 267-273 (2000)).
Na przykład, z trzech podstawień alaniną S298A/E333A/K334A stosowanych w tych badaniach tylko S298 jest na złączu Fc-FcyRIIIA w strukturze kryształu. Podobnie w strukturze ko-kryształu żadna z obu reszt fukozy na dwóch ciężkich łańcuchach Fc oddziałuje z FcyRIIIA. Inspekcja struktur kryształów Fc or IgG ludzkich lub gryzoni wykazuje, że fukoza może przyjmować zmienne konformacje i wykazuje wysokie czynniki B, sugerując wysoki stopień mobilności.
Normalne komórki CHO i HEK293 dodają fukozę do oligosacharydu IgG w wysokim stopniu (97-98%). IgG z surowic są także wysoce fukozylowane.
P r z y k ł a d 2
Wiązanie Clq i FcRn
Wiązanie Clq do przeciwciał jest pierwszym etapem w klasycznym szlaku aktywacji dopełniacza (Makrides, S. C. Pharmacol. Rev. 50: 59-87 (1998)). Charakter węglowodanu na IgG wpływa na oddziaływanie z Clq (Wright i wsp. J. Immunol. 160: 3393-3402 (1998); Boyd i wsp. Molec. Immunol. 32: 1311- 1318 (1995); i Tsuchiya i wsp. J. Rheumatol. 16: 285-290 (1989)). Hu4D5 wiąże ludzki Clg słabiej niż RITUXAN©, chimerowa IgG1 mysz/człowiek anty-CD20 (fig. 15, 16) (Idusogie i wsp. J. Immunol. 164: 4178-4184 (2000)) i brak fukozy nie wpływał na zdolność Hu4D5 do interakcji z ludzkim Clq (fig. 15, 16). Podobnie obecność lub brak fukozy nie wydają się wpływać na wiązanie IgG1 do FcRn.
P r z y k ł a d 3
Cytotoksyczność komórkowa zależna od przeciwciała (ADCC)
Wpływ braku fukozy na ADCC oceniano stosując Lec13-Hu4D5 IgG1 na linię ludzką raka piersi SK-BR-3 (Hudziak i wsp. Mol. Cell Biol. 9: 1165-1172 (1989)). PBMC od dwóch dawców Fc(RIIIA (V158/F158) i dwóch dawców FcyRIIIA (F158/F158) stosowano jako komórki efektorowe w stosunku efektor:cel 30:1. U wszystkich dawców IgG1 bez fukozy wykazał znaczącą poprawę w ADCC w porównaniu z IgG1 z fukozą (fig. 17-20). Istotne jest, że dla wszystkich dawców poprawa cytotoksyczności była bardziej widoczna w miarę obniżana stężenia przeciwciała. To może być odbiciem większej poprawy wiązania obserwowanej dla dimerów w porównaniu z heksametrami, tzn. wariant fuktozaminus może wymagać mniej mAb na powierzchni komórki docelowej aby wpłynąć na wiązanie/aktywację komórki efektorowej.
Ludzkie monocyty wyrażają FcyRI, FcyRIIA, FcyRIIB i tylko subpopulacja wyraża FcyRIIIA. Ponieważ brak fukozy nie wpływał na wiązanie do FcyRI ale miał niewielki wpływ na wiązanie do FcyRIIA (R131) i FcyRIIB, przeprowadzono oznaczenia ADCC stosując oczyszczone ludzkie monocyty jako komórki efektorowe przy stosunkach efektor: cel 20:1, 10:1 i 5:1. Oczyszczanie monocytów jest trudniejsze niż oczyszczanie PBMC i z tego powodu oznaczenie ADCC jest trudniejsze. Jak z ADCC PBMC, ADCC monocytów wykazywały poprawioną cytotoksyczność dla IgG1 pozbawionej fukozy choć efekt wydaje się mniej wyraźny i zdolność monocytów do zabijania docelowych komórek jest obniżona w porównaniu z PBMC (fig. 21-22).
PL 213 948 B1
P r z y k ł a d 4
Aktywność ADCC przeciwciał z wariantem Fc
Następujące doświadczenia porównywały:
(1) Hu4D5 wyrażany w komórkach CHO (Hu4D5 CHO-S), (2) wariant Hu4D5 z niedoborem fukozy wyrażany w komórkach Lec13 (hu4D5 Lec13), (3) wariant Hu4D5 z podstawieniem potrójnym alaniny w domenie Fc wyrażany w komórkach 293 HEK (Hu4D5 HEK293-AAA) i (4) wariant Hu4D5 z podstawieniem potrójnym alaniny w domenie Fc wyrażany w komórkach Lec13 (Hu4D5-Lec13-AAA).
Metody ADCC: komórki naturalnych zabójców (NK) oczyszczono z obwodowej krwi 2 dawców stosując negatywną selekcję z paciorkami magnetycznymi (Miltenyi Biotech, Auburn, CA). Dawców wybrano tak, by byli homozygotyczni względem allelu wyrażającego formę F158 FcyR3 (CD16)(F/F158) (Shields i wsp., J. Biol. Chem. 27 6: 6591-6604 (2001)), która wykazuje fenotyp wiązania o niższym powinowactwie dla IgG.
Komórki raka piersi SKBR-3 z nadekspresją HER2 oposonizowano z I ng/ml każdego przeciwciała przez 45 minut w 25°C w podłożach do oznaczeń (50:50 Hams F12: DMEM zawierające 1% inaktywowaną termicznie płodową surowicę bydlęcą i 10 mM bufor Hepes) i następnie traktowano różnymi stężeniami komórek NK ze stosunkiem efektora do celu (E:T) w zakresie od 0:1 do 0,156 przez 5 godzin w 37°C w nawilżanym inkubatorze CO2. Cytotoksyczność mierzono na podstawie uwalniania dehydrogenazy mleczanowej (LDH) stosując handlowy zestaw (Roche Diagnostics, Indianapolis, IN).
Metoda barwienia komórek NK za pomocą pośredniej immunofluorescencji: oczyszczone komórki NK inkubowano z 2 μg/ml każdego wariantu Hu4D5 przez 30 min. w 4°C w buforze do barwienia (sól fizjologiczna buforowana fosforanem, 0,1% bydlęca albumina surowicza, 0,01% azydek sodu). Komórki płukano 3 razy i inkubowano z połączonym z fikoerytryną mysim mab anty-ludzki CD56 (Pharmingen, San Diego, CA) i FITC - kozi F(ab')2 specyficzny wobec ludzkiej IgG (F(ab')2 (Jackson Immunoresearch, West Grove, PA) przez dodatkowe 30 min. w 4°C.
Komórki analizowano pod kątem 2-barwnego barwienia immunofluorescencyjnego na cytometrze przepływowym 2 barwnym FACS-can™ (B. D. Biosciences, San Jose, CA).
Wniosek: u obu dawców (5365 i 7580), wystąpiła zwiększona aktywność ADCC przy stosunkach E/T większych niż 2 (patrz figury 26 i 27) dla formy Hu4D5-Lec13-AAA Hu4D5 względem formy Hu4D5-Lec13, co sugeruje synergistyczne zwiększenie wiązania FcyRIII/ADCC w potrójnym alaninowym wariancie Fc z brakiem fukozy.
To zwiększone wiązanie potwierdzono poprzez barwienie z pośrednią immunofluorescencją komórek NK u dawcy 5365 (patrz figury 24 i 25) w komórkach NK wyrażających CD56/CD16.
PL 213 948 B1
Lista sekwencji <110> Genenteeh, Inc.
<12 0> Kompozycje glikoprotein <130> P1877R1PCT <140> PCT/US02/33739 <141> 2002-10-22 <150> US 60/337,642 <151> 2001-10-25 <150> US 60/347,694 <151> 2002-01-09 <160> 9 <21Q> 1 <211> 218 <212> PRT <213> homo sapiens <400> 1
Pro 1 Ala Pro Glu Leu 5 Leu ciy Gly Pro Ser 10 Val Phe Leu Phe Pro 15
Pro Lys Pro Lys ASp 20 Thr Leu Met Ile Ser 25 Arg Thr Pro Glu Val 30
Thr Cys Val Val Val 35 Asp Val Ser His Glu 40 Asp Pro Glu Val Lys 45
Phe Asn Trp Tyr Val 50 Asp Gly Val Glu Val 55 His Asn Ala Lys Thr 60
Lys Pro Arg Glu Glu 65 Gin Tyr Asn Ser Thr 70 Tyr Arg Val Val Ser 75
Val Leu Thr Val Leu 80 His Gin Asp Trp Leu 85 Asn Gly Lys Glu Tyr 90
Lys Cys Lys Val Ser 95 Asn Lys Ala Leu Pro 100 Ala Pro Ile Glu Lys 105
Thr Ile Ser Lys Ala 110 Lys Gly Gin Pro Arg 115 Glu Pro Gin Val Tyr 120
Thr Leu Pro Pro Ser 125 Arg Glu Glu Met Thr 130 Lys Asn Gin Val Ser 135
Leu Thr Cys Leu Val 140 Lys Gly Phe Tyr Pro 14 5 Ser Asp Ile Ala Val 150
Glu Trp Glu Ser Asn 155 Gly Gin Pro Glu Asn 160 Asn Tyr Lys Thr Thr 165
Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
PL 213 948 B1
Leu Thr Val ASp Lys 185 Ser Arg Trp Gin Gin Gly Asn Val 190 Phe Ser 195
Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gin Lys
200 205 210
Ser Leu. Ser Leu Ser Pro Gly Lys
215
<210> 2
<211> 218
<212> PR?
<213> homo sapiens
<4Q0> 2
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro
1 5 10 15
Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val
20 25 30
Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys
35 40 45
Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr
50 55 60
Lys Pro Arg Glu Glu Gin Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser
65 70 75
Val Leu Thr Val Leu His Gin Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr
80 85 90
Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys
95 100 105
Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gin Pro Arg Glu Pro Gin Val Tyr
110 115 120
Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gin Val Ser
125 130 135
Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Al a Val
140 145 150
Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gin Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr
155 160 165
Pro Pro Val lj O Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
170 175 180
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gin Gin Gly Asn Val Phe Ser
185 190 195
Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gin Lys
200 205 210
Ser Leu Ser L Ser Pro Gly Lys
215 <210> 3
PL 213 948 B1 <211> 217 <212> PRT <213> homo sapiens
<400> 3 Alei Gly Pro Ser Val 10 Phe Leu Phe Pro Pro 15
Pro 1 Ara Pro Pro Vai 5
Lys Pro Lys Asp Thr Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr
20 25 30
Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Gin Phe
35 40 45
Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys
50 55 60
Pro Arg Glu Glu Gin Phe Asn Ser Thr Phe Arg Val Val. Ser Val
65 70 75
Leu Thr Val Val His Gin Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys
80 85 90
Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr
95 100 105
Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gin Pro Arg Glu Pro Gin Val Tyr Thr
110 115 120
Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gin Val Ser Leu
125 130 135
Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Al a Val Glu
140 145 150
Trp Glu Ser Asn Gly Gin Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro
1S5 160 165
Pro Met Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu
170 175 180
Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gin Gin Gly Asn Val Phe Ser Cys
185 190 195
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gin Lys Ser
200 205 210
leu Ser leu Ser Pro Gly Lys
215 <210> 4 <211> 218 <212> PRT <213> homo sapiens <400> 4
Pro 1 Ala Pro Glu Leu 5 Leu Gly Gly Pro Ser 10 Val Phe Leu Phe Pro 15
Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val
25 30
PL 213 948 B1
Thr Cys Val Val Val 35 Asp val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Gin
40 45
Phe Lys Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr
50 55 60
Lys Pro Arg Glu Glu Gin Phe Asn Ser Thr Phe Arg Val Val Ser
65 70 75
Val Łeu Thr Val Leu His Gin ASP Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr
80 85 90
Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys
95 100 105
Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gin Pro Arg Glu Pro Gin Val Tyr
110 115 120
Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gin Val Ser
125 130 135
Leu Thr Cys Leu val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val
140 145 150
Glu Trp Glu Ser Ser Gly Gin Pro Glu Asn Asn Tyr Asn Thr Thr
155 160 165
Pro Pro Met Łeu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
170 175 180
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gin Gin Gly Asn Ile Phe Ser
185 190 195
Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn Arg Phe Thr Gin Lys
200 205 210
Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
215 <210> 5 <211> 218 <212> PRT <213> homo sapiens <400> 5
Pro 1 Ala Pro Glu Phe 5 Leu Gly Gly Pro Ser 10 Val Phe Leu Phe Pro 15
Pro Lys Pro Lys Asp 20 Thr Leu Met Ile Ser 25 Arg Thr Pro Glu Val 30
Thr Cys Val Val Val 35 Asp Val Ser Gin Glu 40 Asp Pro Glu Val Gin 45
Phe Asn Trp Tyr Val 50 Asp Gly Val Glu Val 55 His Asn Ala Lys Thr 60
Lys Pro Arg Glu Glu CjJl π Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser
10 75
PL 213 948 B1
Val Leu Thr Val Leu 80 His Gin Asp Trp Leu 85 Asn Gly Lys Glu Tyr 90
Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys
95 100 105
Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gin Pro Arg Glu Pro Gin Val Tyr
110 115 120
Thr Leu Pro Pro Ser Gin Glu Glu Met Thr Lys Asn Gin Val Ser
125 130 135
Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val
140 145 150
Glu Trp Glx Ser Asn Gly Gin Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr
155 160 165
Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg
17 0 175 180
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gin Glu Gly Asn Val Phe Ser
185 190 195
Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gin Lys
200 205 210
Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys
215 <210> 6 <211> 215 <212> PRT <213> Mus musculus <400> δ
Thr 1 Val Pro Glu Val 5 Ser Ser Val Phe Ile 10 Phe Pro Pro Lys Pro 15
Lys Asp Val Leu Thr 20 Ile Thr Leu Thr Pro 25 Lys Val Thr Cys Val 30
Val Val Asp I le Ser 35 Lys Asp Asp Pro Glu 40 Val Gin Phe Ser Trp 4 5
Phe Val Asp Asp Val 50 Glu Val His Thr Ala 55 Gin Thr Gin Pro Arg 60
Glu Glu Gin Phe Asn 65 Ser Thr Phe Arg Ser 70 Val Ser Glu Leu Pro 75
Ile Met His Gin Asp 80 Cys Leu Asn Gly Lys 85 Glu Phe Lys Cys Arg 90
Val Asn Ser Ala Ala 95 Phe Pro Ala Pro Ile 100 Glu Lys Thr Ile Ser 105
Lys Thr Lys Gly Arg 110 Pro Lys Ala Pro Gin 115 Val Tyr Thr Ile Pro 120
Pro Pro Lys Glu Gin. Met Ala Lys Asp Lys Val Ser Leu Thr Cys
PL 213 948 B1
125 130 135
Met Ile Thr Asp Phe 140 Phe Pro Glu Asp Ile 145 Thr Vai Glu Trp Gin 150
Trp Asn Gly Gin Pro Ala Glu Asn Tyr Lys Asn. Thr Gin Pro Tle
155 160 165
Met Asp Thr Asp Gly Ser Tyr Phe Val Tyr Ser Lys Leu Asn Val
170 175 180
Gin Lys Ser Asn Trp Glu Ala Gly Asn Thr Phe Thr Cys Ser Val
185 190 195
Leu His GXxi Gly Leu His Asn His His Thr Glu Lys Ser Leu Ser
200 205 210
His Ser Pro Gly Lys
215 <210> 7 <211> 218 <212.'- PRT <213> Mus musculus <400> 7
Pro 1 Ala Pro Asn Leu 5 Leu Gly Gly Pro Ser 10 Val Phe Ile Phe Pro 15
Pro Lys Ile Lys Asp 20 Val Leu Met Ile Ser 25 Leu Ser Pro Ile Val 30
Thr Cys Val Val Val 35 Asp Val Ser Glu Asp 40 Asp Pro Asp Val Gin 45
Ile Ser Trp Phe Val 50 Asn Asn Val Glu Val 55 His Thr Ala Gin Thr 60
Gin Thr His Arg Glu 65 Asp Tyr Asn Ser Thr 70 Leu Arg Val Val Ser 75
Ala Leu Pro Ile Gin 80 His Gin Asp Trp Met 85 Ser Gly Lys Glu Phe 90
Lys cys Lys Val Asn 95 Asn Lys Asp Leu Pro 100 Ala Pro Ile Glu Arg 105
Thr Ile Ser Lys Pro 110 Lys Gly Ser Val Arg 115 Ala Pro Gin Val Tyr 120
Va.l Leu Pro Pro Pro 125 Glu Glu Gili Met Thr 130 Lys Lys Gin Val Thr 135
Leu Thr Cys Met Val 140 Thr Asp Phe Met Pro 145 Glu Asp Ile Tyr Val 150
Glu Trp Thr Asn Asn 155 Gly Łys Thr Glu Leu 160 Asn Tyr Lys Asn Thr 165
Glu Pro Val Leu Asp 170 Ser Asp Gly Ser Tyr 175 Phe Met Tyr Ser Lys 180
PL 213 948 B1
Leu Arg Val Glu Lys Lys Asn Trp Val Glu Arg Asn Ser Tyr Ser
185 190 195
Cys Ser val Val His Glu Gly Leu His Asn His His Thr Thr Lys
200 205 210
Ser Phe Ser Arg Thr Pro Gly Lys
215 <210> 8 <2łl> 218 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 8
Pro Ala 1 Pro Asn Leu Glu Gly Gly Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro 15
5 10
Pro Asn Ile Lys Asp Val Leu Met Ile Ser Leu Thr Pro Lys val
20 25 30
Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Glu Asp Asp Pro Asp Val Gin
35 40 45
Ile Ser Trp Phe vai Asn Asn Val Glu Val His Thr Ala Gin Thr
50 55 60
Gin Thr His Arg Glu Asp Tyr Asn Ser Thr Ile Arg Val Val Ser
65 70 75
His Leu Pro Ile Gin His Gin Asp Trp Met Ser Gly Lys Glu Phe
80 85 90
Lys Cys Lys Val Asn Asn Lys Asp Leu Pro Ser Pro Ile Glu Arg
95 100 105
Thr Ile Ser Lys Pro Lys Gly Leu Val Arg Ala Pro Gin Val Tyr
110 115 120
Thr Leu Pro Pro Pro Ala Glu Gin Leu Ser Arg Lys Asp Val Ser
125 130 135
Leu Thr Cys Leu Val Val Gly Phe Asn Pro Gly Asp Ile Ser Val
140 145 150
Glu Trp Thr Ser Asn Gly His Thr Glu Glu Asn Tyr Lys Asp Thr
155 160 165
Ala Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Tyr Phe Ile Ser Lys
170 175 180
Leu Asn Met Lys Thr Ser Lys Trp Glu Lys Thr Asp Ser Phe Ser
185 190 195
Cys Asn Val Arg His Glu Gly Leu Lys Asn Tyr Tyr Leu Lys Lys
200 205 210
Thr Tle Ser Arg Ser Pro Gry Lys
215
PL 213 948 B1 <210> 9 <211> 218 < 212 > PRT <213> Mus musculus <400> 9
Pro 1 Pro Gly Asn Ile 5 Leu Gly Gly Pro Ser 10 Val Phe Ile Phe Pro 15
Pro Lys Pro Lys Asp Ala Leu Met Ile Ser Leu Thr Pro Lys Val
20 25 30
Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Glu Asp Asp Pro Asp Val His
35 40 45
Val Ser Trp Phe Val Asp Asn Lys Glu Val His Thr Ala Trp Thr
50 55 60
Gin Pro Arg Glu Ala Gin Tyr Asn Ser Thr Phe Arg Val Val Ser
65 70 75
Ala Leu Pro Ile Gin His Gin Asp Trp Met Arg dy Lys Glu Phe
80 85 90
Lys Cys Lys Val Asn Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Arg
95 100 105
Thr Ile Ser Lys Pro Lys Gly Arg Ala Gin Thr Pro Gin Val Tyr
110 115 120
Thr Ile Pro Pro Pro Arg Glu Gin Met Ser Lys Lys Lys Val Ser
125 130 135
Leu Thr Cys Leu val Thr Asn Phe Phe Ser Glu Ala Ile Ser Val
140 145 150
Glu Trp Glu Arg Asn Gly Glu Leu Glu Gin Asp Tyr Lys Asn Thr
155 160 165
Pro Pro Ile Leu Asp Ser Asp Gly Thr Tyr Phe Leu Tyr Ser Lys
170 175 180
Leu Thr Val Asp Thr Asp Ser Trp Leu Gin Gly Glu Ile Phe Thr
185 190 195
Cys Ser Val Val His Glu Ala Leu His Asn His His Thr Gin Lys
200 205 210
Asn Leu Ser Arg Ser Pro Gly Lys
215

Claims (65)

1. Kompozycja, znamienna tym, że zawiera glikoproteinę posiadającą region Fc ludzkiej IgG, przy czym 51-100% tej glikoproteiny w kompozycji zawiera strukturę dojrzałego rdzenia węglowodanowego, pozbawionego fukozy, przyłączonego do regionu Fc glikoproteiny, przy czym region Fc zawiera sekwencję aminokwasową, która różni się od natywnej sekwencji regionu Fc ludzkiej IgG i gdzie glikoproteina ta:
(a) wiąże się z FcyRIII z większym powinowactwem; lub (b) pośredniczy w zależnej od przeciwciała toksyczności za pośrednictwem komórek (ADCC) bardziej skutecznie niż glikoproteina ze strukturą dojrzałego rdzenia węglowodanowego zawierającego fukozę, przyłączoną do regionu Fc glikoproteiny i fizjologicznie akceptowalny nośnik, zaróbkę lub stabilizator.
2. Kompozycja według zastrz. 1, znamienna tym, że region Fc zawiera podstawienia aminokwasowe w dowolnej z jednej albo większej liczby pozycji aminokwasowych 256, 290, 298, 312, 326, 330, 333, 334, 360, 378 lub 430, stosując numerację EU dla reszt regionu Fc.
3. Kompozycja według zastrz. 2, znamienna tym, że region Fc zawiera podstawienia aminokwasowe w dowolnej z jednej albo większej liczby pozycji 298, 333 i 334.
4. Kompozycja według zastrz. 3, znamienna tym, że region Fc zawiera podstawienia aminokwasowe w pozycjach 298, 333 i 334.
5. Kompozycja według zastrz. 4, znamienna tym, że zastępującymi resztami w pozycjach 298, 333 i 334 są alaniny.
6. Kompozycja według zastrz. 1, znamienna tym, że region Fc zawiera podstawienie aminokwasowe w dowolnej z jednej albo większej liczby pozycji aminokwasowych 238, 239, 248, 249, 252,
254, 255, 256, 258, 265, 267, 268, 269, 270, 272, 276, 278, 280, 283, 285, 286, 289, 290, 292, 293,
294, 295, 296, 298, 301, 303, 305, 307, 309, 312, 315, 320, 322, 324, 326, 327, 329, 330, 331, 333,
334, 335, 337, 338, 340, 360, 373, 376, 378, 382, 388, 389, 398, 414, 416, 419, 430, 434, 435, 437,
438 lub 439 regionu Fc.
7. Kompozycja według zastrz. 6, znamienna tym, że region Fc zawiera podstawienie aminokwasowe w dowolnej z jednej albo większej liczby pozycji aminokwasowych 238, 239, 248, 249, 252, 254, 265, 268, 269, 270, 272, 278, 289, 292, 293, 294, 295, 296, 298, 301, 303, 322, 324, 327, 329,
333, 335, 338, 340, 373, 376, 382, 388, 389, 414, 416, 419, 434, 435, 437, 438 lub 439 regionu Fc.
8. Kompozycja według zastrz. 6, znamienna tym, że region Fc zawiera podstawienie aminokwasowe w dowolnej z jednej albo większej liczby pozycji aminokwasowych 238, 265, 269, 270, 327 lub 329 regionu Fc i tym, że region Fc wykazuje zmniejszone wiązanie do FcyRI w stosunku do regionu Fc o sekwencji natywnej.
9. Kompozycja według zastrz. 6, znamienna tym, że region Fc zawiera podstawienie aminokwasowe w dowolnej z jednej albo większej liczby pozycji aminokwasowych 238, 265, 269, 270, 292, 294, 295, 298, 303, 324, 327, 329, 333, 335, 338, 373, 376, 414, 416, 419, 435, 438 lub 439 regionu Fc i tym, że region Fc wykazuje zmniejszone wiązanie do FcyRII w stosunku do regionu Fc o sekwencji natywnej.
10. Kompozycja według zastrz. 6, znamienna tym, że region Fc zawiera podstawienie aminokwasowe w dowolnej z jednej albo większej liczby pozycji aminokwasowych 238, 239, 248, 249, 252, 254, 265, 268, 269, 270, 272, 278, 289, 293, 294, 295, 296, 301, 303, 322, 327, 329, 338, 340, 373, 376, 382, 388, 389, 416, 434, 435 lub 437 regionu Fc i tym, że region Fc wykazuje zmniejszone wiązanie do FcyRIII w stosunku do regionu Fc o sekwencji natywnej.
11. Kompozycja według zastrz. 6, znamienna tym, że region Fc zawiera podstawienie aminokwasowe w dowolnej z jednej albo większej liczby pozycji aminokwasowych 255, 256, 258, 267, 268, 272, 276, 280, 283, 285, 286, 290, 298, 301, 305, 307, 309, 312, 315, 320, 322, 326, 330, 331, 333,
334, 337, 340, 360, 378, 398 lub 430 regionu Fc i tym, że region Fc wykazuje zwiększone wiązanie do jednego lub większej liczby FcyR w stosunku do regionu Fc o sekwencji natywnej.
12. Kompozycja według zastrz. 11, znamienna tym, że region Fc zawiera podstawienie aminokwasowe w pozycji 298 i/lub 333 regionu Fc i tym, że region Fc wykazuje zwiększone wiązanie do FcyRIII w stosunku do regionu Fc o sekwencji natywnej.
13. Kompozycja według zastrz. 12, znamienna tym, że region Fc wykazuje ponadto zmniejszone wiązanie do FcyRII w stosunku do regionu Fc o sekwencji natywnej.
PL 213 948 B1
14. Kompozycja według zastrz. 11, znamienna tym, że region Fc zawiera podstawienie aminokwasowe w dowolnej z jednej albo większej liczby pozycji aminokwasowych 255, 256, 258, 267, 268, 272, 276, 280, 283, 285, 286, 290, 301, 305, 307, 309, 312, 315, 320, 322, 326, 330, 331, 337, 340, 378, 398 lub 430 regionu Fc i tym, że region Fc wykazuje zwiększone wiązanie do FcYRII w stosunku do regionu Fc o sekwencji natywnej.
15. Kompozycja według zastrz. 14, znamienna tym, że region Fc wykazuje zmniejszone wiązanie do FcYRIII.
16. Kompozycja według zastrz. 15, znamienna tym, że region Fc zawiera podstawienie aminokwasowe w dowolnej z jednej albo większej liczby pozycji aminokwasowych 268, 272, 298, 301, 322 lub 340 regionu Fc.
17. Kompozycja według zastrz. 1, znamienna tym, że region Fc ma zmienione powinowactwo wiązania do FcRn w stosunku do regionu Fc o sekwencji natywnej.
18. Kompozycja według zastrz. 17, znamienna tym, że region Fc zawiera podstawienie aminokwasowe w dowolnej z jednej albo większej liczby pozycji aminokwasowych 238, 252, 253, 254, 255, 256, 265, 272, 286, 288, 303, 305, 307, 309, 311, 312, 317, 340, 356, 360, 362, 376, 378, 380, 382, 386, 388, 400, 413, 415, 424, 433, 434, 435, 436, 439 lub 447 regionu Fc.
19. Kompozycja według zastrz. 18, znamienna tym, że region Fc zawiera podstawienie aminokwasowe w dowolnej z jednej albo większej liczby pozycji aminokwasowych 252, 253, 254, 255, 288, 309, 386, 388, 400, 415, 433, 435, 436, 439 lub 447 regionu Fc i tym, że region Fc wykazuje zmniejszone wiązanie do FcRn w stosunku do regionu Fc o sekwencji natywnej.
20. Kompozycja według zastrz. 18, znamienna tym, że region Fc zawiera podstawienie aminokwasowe w dowolnej z jednej albo większej liczby pozycji aminokwasowych 238, 256, 265, 272, 286, 303, 305, 307, 311, 312, 317, 340, 356, 360, 362, 376, 378, 380, 382, 413, 424 lub 434 regionu Fc i tym, że region Fc wykazuje zwiększone wiązanie do FcRn w stosunku do regionu Fc o sekwencji natywnej.
21. Kompozycja według zastrz. 1, znamienna tym, że region Fc ma zmienione wiązanie Clq i/lub funkcję cytotoksyczności zależną od dopełniacza (CDC).
22. Kompozycja według zastrz. 21, znamienna tym, że region Fc zawiera podstawienie aminokwasowe w dowolnej z jednej albo większej liczby pozycji aminokwasowych 270, 322, 326, 327, 329, 331, 333 i 334 łańcucha ciężkiego.
23. Kompozycja według zastrz. 1, znamienna tym, że sekwencja aminokwasowa regionu Fc zawiera zmianę sekwencji aminokwasowej, która zmienia natywny wzór glikozylacji glikoproteiny.
24. Kompozycja według zastrz. 1, znamienna tym, że glikoproteina jest zasadniczo wolna od rozdzielającej N- acetyloglukozaminy (GlcNAc) przyłączonej do struktury dojrzałego rdzenia węglowodanowego.
25. Kompozycja według zastrz. 1, znamienna tym, że glikoproteina ma rozdzielającą N acetyloglukozaminę (GlcNAc) przyłączoną do struktury dojrzałego rdzenia węglowodanowego.
26. Kompozycja według zastrz. 1, znamienna tym, że glikoproteina ma jedną lub większą liczbę reszt galaktozy przyłączonych do struktury dojrzałego rdzenia węglowodanowego.
27. Kompozycja według zastrz. 1, znamienna tym, że glikoproteina jest zasadniczo wolna od jednej lub większej liczby reszt galaktozy przyłączonych do struktury dojrzałego rdzenia węglowodanowego.
28. Kompozycja według zastrz. 1, znamienna tym, że glikoproteina ma jedną lub większą liczbę reszt kwasu sialowego przyłączonych do struktury dojrzałego rdzenia węglowodanowego.
29. Kompozycja według zastrz. 1, znamienna tym, że glikoproteina jest zasadniczo wolna od jednej lub większej liczby reszt kwasu sialowego przyłączonych do struktury dojrzałego rdzenia węglowodanowego.
30. Kompozycja według zastrz. 1, znamienna tym, że 80-100% glikoproteiny w kompozycji zawiera strukturę dojrzałego rdzenia węglowodanowego, pozbawionego fukozy, przyłączoną do regionu Fc glikoproteiny.
31. Kompozycja według zastrz. 1, znamienna tym, że region Fc obejmuje region Fc ludzkiej IgG.
32. Kompozycja według zastrz. 31, znamienna tym, że region Fc ludzkiej IgG obejmuje region Fc ludzkiej IgGi, IgG2, IgG3 lub IgG4.
33. Kompozycja według zastrz. 32, znamienna tym, że glikoproteina wiąże się z FcYRIII.
34. Kompozycja według zastrz. 33, znamienna tym, że glikoproteina wiąże się z FcYRIII z lepszym powinowactwem albo pośredniczy w zależnej od przeciwciała toksyczności za pośrednictwem
PL 213 948 B1 komórek (ADCC) bardziej skutecznie niż glikoproteina ze strukturą dojrzałego rdzenia węglowodanowego zawierającego fukozę, przyłączoną do regionu Fc glikoproteiny.
35. Kompozycja według zastrz. 1, znamienna tym, że glikoproteina obejmuje przeciwciało.
36. Kompozycja według zastrz. 35, znamienna tym, że przeciwciałem jest przeciwciało chimerowe, humanizowane albo ludzkie.
37. Kompozycja według zastrz. 35, znamienna tym, że przeciwciało wiąże się z antygenem wybranym z grupy składającej się z markera powierzchniowego komórek B, receptora ErbB, antygenu związanego z nowotworem i czynnika angiogennego.
38. Kompozycja według zastrz. 35, znamienna tym, że przeciwciało wiąże się z CD20, HER2, czynnikiem wzrostu śródbłonka naczyń (VEGF), CD40 lub antygenem komórek macierzystych prostaty (PSCA).
39. Kompozycja według zastrz. 38, znamienna tym, że przeciwciało obejmuje humanizowane przeciwciało anty-HER2, chimerowe przeciwciało anty-CD20 i humanizowane przeciwciało anty-VEGF.
40. Kompozycja według zastrz. 1, znamienna tym, że 90-99% glikoproteiny w kompozycji zawiera strukturę dojrzałego rdzenia węglowodanowego, pozbawionego fukozy, przyłączoną do regionu Fc glikoproteiny.
41. Kompozycja według zastrz. 1, znamienna tym, że glikoproteina została wytworzona przez komórkę jajnika chomika chińskiego (CHO).
42. Kompozycja według zastrz. 41, znamienna tym, że komórką CHO jest komórka Lec13.
43. Kompozycja według zastrz. 1, znamienna tym, że jest preparatem farmaceutycznym.
44. Kompozycja według zastrz. 43, znamienna tym, że zawiera ponadto dopuszczalny farmaceutycznie nośnik.
45. Kompozycja według zastrz. 43, znamienna tym, że jest jałowa.
46. Kompozycja według zastrz. 43 lub zastrz. 44, znamienna tym, że jest zliofilizowana.
47. Kompozycja według zastrz. 1, znamienna tym, że glikoproteina jest immunoadhezyną.
48. Kompozycja według zastrz. 1, znamienna tym, że jest skoniugowana z cząsteczką heterologiczną.
49. Kompozycja według zastrz. 48, znamienna tym, że cząsteczką heterologiczną jest czynnik cytotoksyczny, enzym albo czynnik umożliwiający uzyskanie obrazu.
50. Kompozycja, znamienna tym, że zawiera glikoproteinę jak zdefiniowano w zastrz. od 47 do 49 łącznie z dopuszczalnym farmaceutycznie nośnikiem.
51. Cząsteczka kwasu nukleinowego, znamienna tym, że koduje glikoproteinę zawierającą region Fc jak zdefiniowano w zastrz. 1.
52. Komórka gospodarza, znamienna tym, że zawiera kwas nukleinowy jak zdefiniowano w zastrz. 51, gdzie 80-100% glikoproteiny wytwarzanej przez komórkę gospodarza zawiera strukturę dojrzałego rdzenia węglowodanowego, pozbawionego fukozy, przyłączoną do regionu Fc glikoproteiny.
53. Komórka gospodarza według zastrz. 52, znamienna tym, że jest komórką jajnika chomika chińskiego (CHO).
54. Komórka gospodarza według zastrz. 53, znamienna tym, że komórką CHO jest komórka Lec13.
55. Sposób wytwarzania glikoproteiny, znamienny tym, że obejmuje hodowanie komórki gospodarza zdefiniowanego w zastrz. od 52 do 54, tak, że kwas nukleinowy podlega ekspresji.
56. Sposób według zastrz. 55, znamienny tym, że obejmuje ponadto odzyskanie glikoproteiny z hodowli komórki gospodarza.
57. Sposób według zastrz. 56, znamienny tym, że obejmuje ponadto łączenie glikoproteiny z cząsteczką heterologiczną.
58. Sposób według zastrz. 57, znamienny tym, że cząsteczką heterologiczną jest czynnik cytotoksyczny, enzym albo czynnik umożliwiający uzyskanie obrazu.
59. Kompozycja jak zdefiniowano w zastrz. 1 do zastosowania do leczenia ssaka mającego chorobę lub zaburzenie wybrane z grupy składającej się z raka, choroby autoimmunologicznej, choroby zapalnej, infekcji lub innego stanu, gdzie pożądane jest usunięcie komórek albo tkanki.
60. Kompozycja według zastrz. 59, znamienna tym, że ssakiem jest człowiek.
61. Kompozycja według zastrz. 60, znamienna tym, że człowiek wyraża FcyRI11 (F158).
62. Zastosowanie skutecznej terapeutycznie ilości kompozycji zdefiniowanej w zastrz. 1 do wytwarzania leku do leczenia ssaka mającego chorobę lub zaburzenie wybrane z grupy składającej się
PL 213 948 B1 z raka, choroby autoimmunologicznej, choroby zapalnej, infekcji lub innego stanu, gdzie pożądane jest usunięcie komórek albo tkanki.
63. Zastosowanie według zastrz. 62, znamienne tym, że ssakiem jest człowiek.
64. Zastosowanie według zastrz. 63, znamienne tym, że człowiek wyraża FcYRIII (F158).
65. Zestaw terapeutyczny albo diagnostyczny zawierający kompozycję, jak zdefiniowano w zastrz. 1 oraz instrukcję jej użycia.
PL372709A 2001-10-25 2002-10-22 Kompozycje zawierajace glikoproteine, czasteczka kwasu nukleinowego kodujaca te glikoproteine, komórka gospodarza, sposób wytwarzania glikoproteiny, kompozycja do zastosowania do leczenia, zastosowanie kompozycji i zestaw zawierajacy kompozycje PL213948B1 (pl)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US33764201P 2001-10-25 2001-10-25
US34769402P 2002-01-09 2002-01-09

Publications (2)

Publication Number Publication Date
PL372709A1 PL372709A1 (pl) 2005-07-25
PL213948B1 true PL213948B1 (pl) 2013-05-31

Family

ID=26990808

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PL372709A PL213948B1 (pl) 2001-10-25 2002-10-22 Kompozycje zawierajace glikoproteine, czasteczka kwasu nukleinowego kodujaca te glikoproteine, komórka gospodarza, sposób wytwarzania glikoproteiny, kompozycja do zastosowania do leczenia, zastosowanie kompozycji i zestaw zawierajacy kompozycje

Country Status (18)

Country Link
US (5) US20030157108A1 (pl)
EP (1) EP1443961B1 (pl)
JP (3) JP2005532253A (pl)
KR (1) KR100988949B1 (pl)
CN (1) CN100423777C (pl)
AT (1) ATE430580T1 (pl)
AU (1) AU2002337935B2 (pl)
BR (1) BR0213761A (pl)
CA (1) CA2463879C (pl)
DE (1) DE60232265D1 (pl)
DK (1) DK1443961T3 (pl)
ES (1) ES2326964T3 (pl)
HU (1) HUP0600342A3 (pl)
IL (2) IL161412A0 (pl)
MX (1) MXPA04003798A (pl)
NZ (1) NZ532526A (pl)
PL (1) PL213948B1 (pl)
WO (1) WO2003035835A2 (pl)

Families Citing this family (1762)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6136311A (en) 1996-05-06 2000-10-24 Cornell Research Foundation, Inc. Treatment and diagnosis of cancer
US7183387B1 (en) 1999-01-15 2007-02-27 Genentech, Inc. Polypeptide variants with altered effector function
US6737056B1 (en) * 1999-01-15 2004-05-18 Genentech, Inc. Polypeptide variants with altered effector function
DK1176195T3 (da) 1999-04-09 2013-06-24 Kyowa Hakko Kirin Co Ltd Fremgangsmåde til at kontrollere aktiviteten af immunologisk funktionelt molekyle
EP1176981B1 (en) 1999-05-07 2005-11-30 Genentech, Inc. Treatment of autoimmune diseases with antagonists which bind to b cell surface markers
ATE511857T1 (de) * 2000-02-16 2011-06-15 Genentech Inc Anti-april monoklonaler antikörper und deren verwendung zur behandlung von immunerkrankungen oder krebs
FR2807767B1 (fr) 2000-04-12 2005-01-14 Lab Francais Du Fractionnement Anticorps monoclonaux anti-d
PT1522590E (pt) * 2000-06-28 2009-10-26 Glycofi Inc Métodos para a produção de glicoproteínas modificadas
US7449308B2 (en) 2000-06-28 2008-11-11 Glycofi, Inc. Combinatorial DNA library for producing modified N-glycans in lower eukaryotes
US7598055B2 (en) * 2000-06-28 2009-10-06 Glycofi, Inc. N-acetylglucosaminyltransferase III expression in lower eukaryotes
US20060029604A1 (en) * 2000-06-28 2006-02-09 Gerngross Tillman U Immunoglobulins comprising predominantly a GlcNAc2Man3GlcNAc2 glycoform
US8697394B2 (en) * 2000-06-28 2014-04-15 Glycofi, Inc. Production of modified glycoproteins having multiple antennary structures
US20020058029A1 (en) * 2000-09-18 2002-05-16 Nabil Hanna Combination therapy for treatment of autoimmune diseases using B cell depleting/immunoregulatory antibody combination
US6946292B2 (en) 2000-10-06 2005-09-20 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Cells producing antibody compositions with increased antibody dependent cytotoxic activity
JP4986370B2 (ja) 2000-12-22 2012-07-25 マックス−プランク−ゲゼルシャフト・ツア・フェルデルング・デア・ヴィッセンシャフテン・エー・ファオ Ｒｇｍおよびそのモジュレーターの用途
KR20040019105A (ko) * 2001-08-03 2004-03-04 제넨테크, 인크. ＴＡＣＩｓ 및 ＢＲ3 폴리펩티드 및 이의 용도
CA2463879C (en) * 2001-10-25 2012-12-04 Genentech, Inc. Glycoprotein compositions
US20040093621A1 (en) * 2001-12-25 2004-05-13 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd Antibody composition which specifically binds to CD20
US20060024292A1 (en) * 2001-12-27 2006-02-02 Gerngross Tillman U Immunoglobulins comprising predominantly a Gal2GlcNAc2Man3GlcNAc2 glycoform
KR100668538B1 (ko) * 2002-01-09 2007-01-16 메다렉스, 인코포레이티드 Ｃｄ３０에 대한 인간 모노클로날 항체
US8188231B2 (en) 2002-09-27 2012-05-29 Xencor, Inc. Optimized FC variants
US20080260731A1 (en) * 2002-03-01 2008-10-23 Bernett Matthew J Optimized antibodies that target cd19
US20080254027A1 (en) * 2002-03-01 2008-10-16 Bernett Matthew J Optimized CD5 antibodies and methods of using the same
US20040132101A1 (en) 2002-09-27 2004-07-08 Xencor Optimized Fc variants and methods for their generation
US7317091B2 (en) * 2002-03-01 2008-01-08 Xencor, Inc. Optimized Fc variants
US20100311954A1 (en) * 2002-03-01 2010-12-09 Xencor, Inc. Optimized Proteins that Target Ep-CAM
US20070148171A1 (en) * 2002-09-27 2007-06-28 Xencor, Inc. Optimized anti-CD30 antibodies
US20080152649A1 (en) * 2002-03-01 2008-06-26 Xencor, Inc. Optimized igf-1r antibodies and methods of using the same
US7662925B2 (en) * 2002-03-01 2010-02-16 Xencor, Inc. Optimized Fc variants and methods for their generation
US20090042291A1 (en) * 2002-03-01 2009-02-12 Xencor, Inc. Optimized Fc variants
CA2481925A1 (en) * 2002-04-09 2003-10-16 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Therapeutic agent for patients having human fc.gamma.riiia
AU2003236017B2 (en) * 2002-04-09 2009-03-26 Kyowa Kirin Co., Ltd. Drug containing antibody composition
DE60336548D1 (de) 2002-04-09 2011-05-12 Kyowa Hakko Kirin Co Ltd Zelle mit erniedrigter oder deletierter aktivität eines am gdp-fucosetransport beteiligten proteins
WO2005056606A2 (en) * 2003-12-03 2005-06-23 Xencor, Inc Optimized antibodies that target the epidermal growth factor receptor
MXPA05000940A (es) * 2002-07-25 2005-05-16 Genentech Inc Anticuerpos taci y su uso.
DK1534335T4 (en) 2002-08-14 2015-10-05 Macrogenics Inc FCGAMMARIIB-SPECIFIC ANTIBODIES AND PROCEDURES FOR USE THEREOF
US8946387B2 (en) 2002-08-14 2015-02-03 Macrogenics, Inc. FcγRIIB specific antibodies and methods of use thereof
US8968730B2 (en) 2002-08-14 2015-03-03 Macrogenics Inc. FcγRIIB specific antibodies and methods of use thereof
DK1537419T3 (da) * 2002-09-13 2011-06-27 Lfb Biotechnologies Test for CD16-medieret ADCC effektivitet af monoklonale og polyklonale antistoffer
US20060235208A1 (en) * 2002-09-27 2006-10-19 Xencor, Inc. Fc variants with optimized properties
RS20100366A (sr) * 2002-12-16 2011-04-30 Genentech, Inc. Varijante imunoglobulina i njihova upotreba
US7355008B2 (en) 2003-01-09 2008-04-08 Macrogenics, Inc. Identification and engineering of antibodies with variant Fc regions and methods of using same
US7960512B2 (en) 2003-01-09 2011-06-14 Macrogenics, Inc. Identification and engineering of antibodies with variant Fc regions and methods of using same
EP1596804A4 (en) 2003-01-13 2008-02-06 Macrogenics Inc SOLUBLE FCyR FUSION PROTEINS AND METHODS OF USE
DE10303974A1 (de) 2003-01-31 2004-08-05 Abbott Gmbh & Co. Kg Amyloid-β(1-42)-Oligomere, Verfahren zu deren Herstellung und deren Verwendung
US7332299B2 (en) 2003-02-20 2008-02-19 Glycofi, Inc. Endomannosidases in the modification of glycoproteins in eukaryotes
US8388955B2 (en) * 2003-03-03 2013-03-05 Xencor, Inc. Fc variants
US8084582B2 (en) 2003-03-03 2011-12-27 Xencor, Inc. Optimized anti-CD20 monoclonal antibodies having Fc variants
US20090010920A1 (en) * 2003-03-03 2009-01-08 Xencor, Inc. Fc Variants Having Decreased Affinity for FcyRIIb
US20070275460A1 (en) * 2003-03-03 2007-11-29 Xencor.Inc. Fc Variants With Optimized Fc Receptor Binding Properties
US9051373B2 (en) 2003-05-02 2015-06-09 Xencor, Inc. Optimized Fc variants
KR101351122B1 (ko) * 2003-05-09 2014-01-14 듀크 유니버시티 Ｃｄ２０-특이적 항체 및 이를 이용한 방법
AU2004256042A1 (en) * 2003-06-05 2005-01-20 Genentech, Inc. BlyS antagonists and uses thereof
US20050163775A1 (en) * 2003-06-05 2005-07-28 Genentech, Inc. Combination therapy for B cell disorders
FR2858235B1 (fr) 2003-07-31 2006-02-17 Lab Francais Du Fractionnement Utilisation d'anticorps optimises en adcc pour traiter les patients faibles repondeurs
EP2502935B1 (en) 2003-08-22 2017-03-29 Biogen MA Inc. Improved antibodies having altered effector function and methods for making the same
US20050053602A1 (en) * 2003-08-29 2005-03-10 Genentech, Inc. Therapy of ocular disorders
US9714282B2 (en) 2003-09-26 2017-07-25 Xencor, Inc. Optimized Fc variants and methods for their generation
US8101720B2 (en) 2004-10-21 2012-01-24 Xencor, Inc. Immunoglobulin insertions, deletions and substitutions
US8399618B2 (en) 2004-10-21 2013-03-19 Xencor, Inc. Immunoglobulin insertions, deletions, and substitutions
US8883147B2 (en) 2004-10-21 2014-11-11 Xencor, Inc. Immunoglobulins insertions, deletions, and substitutions
US20060134105A1 (en) * 2004-10-21 2006-06-22 Xencor, Inc. IgG immunoglobulin variants with optimized effector function
US20050287138A1 (en) * 2003-10-08 2005-12-29 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. CCR4-specific antibody composition
EP1688439A4 (en) * 2003-10-08 2007-12-19 Kyowa Hakko Kogyo Kk COMPOSITION OF CONDENSED PROTEINS
US20050226867A1 (en) * 2003-10-08 2005-10-13 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. IL-5R-specific antibody composition
US20060021071A1 (en) * 2003-10-09 2006-01-26 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Cell in which genome is modified
CA2542121A1 (en) * 2003-10-09 2005-04-21 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Genomically modified cell neutralized to serum-free system
US7691810B2 (en) * 2003-10-09 2010-04-06 Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd Method of producing recombinant antithrombin III composition
JP5438880B2 (ja) * 2003-10-10 2014-03-12 中外製薬株式会社 機能蛋白質を代替する二種特異性抗体
JP5490734B2 (ja) * 2003-10-10 2014-05-14 中外製薬株式会社 機能蛋白質を代替する二種特異性抗体
AU2003271174A1 (en) 2003-10-10 2005-04-27 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Double specific antibodies substituting for functional protein
FR2861395B1 (fr) 2003-10-23 2006-02-17 Lab Francais Du Fractionnement Facteur viii viralement securise a faible teneur en multimeres superieurs
HUE042914T2 (hu) * 2003-11-05 2019-07-29 Roche Glycart Ag CD20 antitestek fokozott fc receptorkötõ affinitással és effektorfunkcióval
JPWO2005053742A1 (ja) * 2003-12-04 2007-06-28 協和醗酵工業株式会社 抗体組成物を含有する医薬
BRPI0417429A (pt) 2003-12-10 2007-04-03 Medarex Inc anticorpo monoclonal isolado ou uma porção de ligação de antìgeno deste, composição, imunoconjugado, molécula biespecìfica, vetor de expressão, célula hospedeira, camundongo transgênico, hibridoma, e, métodos de inibir uma resposta inflamatória ou autoimune, de tratar uma doença inflamatória ou autoimune, de tratar uma infecção viral ou bacteriana e de preparar um anticorpo anti-ip-10
IN2009KN02655A (pl) 2003-12-10 2015-10-23 Medarex Inc
CA2549237A1 (en) * 2003-12-19 2005-07-07 Genentech, Inc. Detection of cd20 in transplant rejection
EP1696955A2 (en) * 2003-12-19 2006-09-06 Genentech, Inc. Detection of cd20 in therapy of autoimmune diseases
US20050249723A1 (en) * 2003-12-22 2005-11-10 Xencor, Inc. Fc polypeptides with novel Fc ligand binding sites
EP2053062A1 (en) * 2004-03-24 2009-04-29 Xencor, Inc. Immunoglobin variants outside the Fc region
AU2005233387B2 (en) * 2004-04-15 2011-05-26 Glycofi, Inc. Production of galactosylated glycoproteins in lower eukaryotes
JP2007536246A (ja) * 2004-05-05 2007-12-13 ジェネンテック・インコーポレーテッド 自己免疫疾患の予防法
JP2007536932A (ja) 2004-05-10 2007-12-20 マクロジェニクス，インコーポレーテッド ヒト化ＦｃγＲＩＩＢ特異的抗体とその利用法
BRPI0510915A (pt) * 2004-06-04 2007-11-13 Genentech Inc método para o tratamento da esclerose múltipla e artigo manufaturado
RU2396980C2 (ru) * 2004-06-04 2010-08-20 Дженентек, Инк. Способ лечения волчанки
RU2412202C2 (ru) 2004-06-21 2011-02-20 Медарекс, Инк. Антитела рецептора 1 интерферона альфа и их применение
US20150010550A1 (en) 2004-07-15 2015-01-08 Xencor, Inc. OPTIMIZED Fc VARIANTS
DK2471813T3 (en) * 2004-07-15 2015-03-02 Xencor Inc Optimized Fc variants
US20060062787A1 (en) * 2004-07-22 2006-03-23 Genentech, Inc. Method for treating Sjogren's syndrome
JP5102028B2 (ja) 2004-07-26 2012-12-19 バイオジェン・アイデック・エムエイ・インコーポレイテッド 抗ｃｄ１５４抗体
DK1773884T3 (da) 2004-08-03 2012-05-21 Innate Pharma Terapeutiske og diagnostiske fremgangsmåder og sammensætninger til targeting af 4ig-b7-h3 og dets tilsvarende nk-celle-receptor
EP1778726A4 (en) * 2004-08-16 2009-03-18 Medimmune Inc INTEGRIN ANTAGONISTS WITH IMPROVED ANTIBODY-DEPENDENT CELL-ASSAYED CYTOTOXICITY ACTIVITY
US20060074225A1 (en) * 2004-09-14 2006-04-06 Xencor, Inc. Monomeric immunoglobulin Fc domains
WO2006039644A2 (en) * 2004-10-01 2006-04-13 Medarex, Inc. Methods of treating cd30 positive lymphomas
CN101087807A (zh) * 2004-10-05 2007-12-12 健泰科生物技术公司 治疗血管炎的方法
JO3000B1 (ar) 2004-10-20 2016-09-05 Genentech Inc مركبات أجسام مضادة .
US8367805B2 (en) 2004-11-12 2013-02-05 Xencor, Inc. Fc variants with altered binding to FcRn
DK1817340T3 (da) * 2004-11-12 2012-08-13 Xencor Inc Fc-varianter med ændret binding til fcrn
US8802820B2 (en) 2004-11-12 2014-08-12 Xencor, Inc. Fc variants with altered binding to FcRn
US8546543B2 (en) 2004-11-12 2013-10-01 Xencor, Inc. Fc variants that extend antibody half-life
WO2006060664A2 (en) * 2004-12-03 2006-06-08 The Uab Research Foundation Single-drug multi-ligand conjugates for targeted drug delivery
WO2006076594A2 (en) * 2005-01-12 2006-07-20 Xencor, Inc. Antibodies and fc fusion proteins with altered immunogenicity
DOP2006000013A (es) * 2005-01-13 2006-07-15 Genentech Inc Dosis de anticuerpos en el tratamiento de enfermedades asociadas a las celulas b
PL1846030T3 (pl) 2005-01-21 2019-05-31 Genentech Inc Ustalone dawkowanie przeciwciał her
DOP2006000029A (es) * 2005-02-07 2006-08-15 Genentech Inc Antibody variants and uses thereof. (variantes de un anticuerpo y usos de las mismas)
PT1871805T (pt) 2005-02-07 2019-12-02 Roche Glycart Ag Moléculas de ligação a antigénios que se ligam ao rfce, vetores que as codificam e as suas utilizações
PL1853718T3 (pl) 2005-02-15 2016-01-29 Univ Duke Przeciwciała anty-CD19 i zastosowania w onkologii
US20060263357A1 (en) 2005-05-05 2006-11-23 Tedder Thomas F Anti-CD19 antibody therapy for autoimmune disease
WO2006089231A2 (en) 2005-02-18 2006-08-24 Medarex, Inc. Monoclonal antibodies against prostate specific membrane antigen (psma) lacking in fucosyl residues
NZ560209A (en) * 2005-02-18 2009-04-30 Medarex Inc Monoclonal antibodies against CD30 lacking in fucosyl residues
EP3195879A1 (en) 2005-02-23 2017-07-26 Genentech, Inc. Extending time to disease progression or survival in cancer patients
JP2008533985A (ja) * 2005-03-25 2008-08-28 グリクアート バイオテクノロジー アクチェンゲゼルシャフト ＭＣＳＰを対象とし、且つ、Ｆｃ受容体結合親和性とエフェクター機能を増強した抗原結合分子
TWI671403B (zh) 2005-03-31 2019-09-11 中外製藥股份有限公司 控制組裝之多肽的製造方法
GB0507123D0 (en) * 2005-04-08 2005-05-11 Isis Innovation Method
ES2707152T3 (es) 2005-04-15 2019-04-02 Macrogenics Inc Diacuerpos covalentes y usos de los mismos
AR053579A1 (es) * 2005-04-15 2007-05-09 Genentech Inc Tratamiento de la enfermedad inflamatoria intestinal (eii)
US20090214544A1 (en) * 2005-04-25 2009-08-27 Medarex Method of treating cd30 positive lymphomas
JP5255435B2 (ja) 2005-04-26 2013-08-07 メディミューン，エルエルシー ヒンジドメイン操作による抗体エフェクター機能の調節
WO2007039818A2 (en) * 2005-05-09 2007-04-12 Glycart Biotechnology Ag Antigen binding molecules having modified fc regions and altered binding to fc receptors
MX2007013978A (es) 2005-05-09 2008-02-22 Ono Pharmaceutical Co Anticuerpos monoclonales humanos a muerte programada 1 (pd-1) y metodos para tratamiento de cancer utilizando anticuerpos anti-pd-1 solos o en combinacion con otros inmunoterapeuticos.
AU2006251647A1 (en) * 2005-05-20 2006-11-30 Genentech, Inc. Pretreatment of a biological sample from an autoimmune disease subject
AU2006255085A1 (en) * 2005-06-03 2006-12-14 Genentech, Inc. Method of producing antibodies with modified fucosylation level
KR20080025174A (ko) 2005-06-23 2008-03-19 메디뮨 인코포레이티드 응집 및 단편화 프로파일이 최적화된 항체 제제
CN103145838A (zh) 2005-06-30 2013-06-12 Abbvie公司 Il-12/p40结合蛋白
CN105330741B (zh) 2005-07-01 2023-01-31 E.R.施贵宝&圣斯有限责任公司 抗程序性死亡配体1(pd-l1)的人单克隆抗体
WO2007005612A2 (en) * 2005-07-01 2007-01-11 Medimmune, Inc. An integrated approach for generating multidomain protein therapeutics
WO2007008943A2 (en) 2005-07-08 2007-01-18 Xencor, Inc. Optimized anti-ep-cam antibodies
WO2007009469A2 (en) * 2005-07-21 2007-01-25 Genmab A/S Potency assays for antibody drug substance binding to an fc receptor
US7923538B2 (en) 2005-07-22 2011-04-12 Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd Recombinant antibody composition
PL1919503T3 (pl) 2005-08-10 2015-04-30 Macrogenics Inc Identyfikacja i inżynieria przeciwciał ze zmiennymi regionami FC oraz sposoby ich stosowania
BRPI0614850A2 (pt) * 2005-08-19 2011-04-19 Centocor Inc preparações de anticorpos resistentes a proteólise
US7612181B2 (en) 2005-08-19 2009-11-03 Abbott Laboratories Dual variable domain immunoglobulin and uses thereof
NZ612578A (en) 2005-08-19 2014-11-28 Abbvie Inc Dual variable domain immunoglobin and uses thereof
EP2500359A3 (en) 2005-08-19 2012-10-17 Abbott Laboratories Dual variable domain immunoglobulin and uses thereof
WO2007028144A2 (en) * 2005-09-02 2007-03-08 Glycofi, Inc Immunoglobulins comprising predominantly a glcnacman3glcnac2 glycoform
JP2009510002A (ja) 2005-09-30 2009-03-12 アボット ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング ウント コンパニー コマンディトゲゼルシャフト 反発誘導分子（ｒｇｍ）タンパク質ファミリーのタンパク質の結合ドメイン、及びその機能的断片、及びそれらの使用
CA2624189A1 (en) * 2005-10-03 2007-04-12 Xencor, Inc. Fc variants with optimized fc receptor binding properties
AU2006302254B2 (en) 2005-10-06 2011-05-26 Xencor, Inc. Optimized anti-CD30 antibodies
US7790655B2 (en) 2005-10-14 2010-09-07 Medimmune, Llc Cell display of antibody libraries
KR20080049113A (ko) 2005-10-21 2008-06-03 노파르티스 아게 Ｉｌ-13에 대항한 인간 항체 및 치료적 용도
MY149159A (en) 2005-11-15 2013-07-31 Hoffmann La Roche Method for treating joint damage
WO2007062090A2 (en) * 2005-11-23 2007-05-31 Genentech, Inc. Methods and compositions related to b cell assays
AU2006319358B2 (en) 2005-11-30 2012-01-19 AbbVie Deutschland GmbH & Co. KG Anti-Abeta globulomer antibodies, antigen-binding moieties thereof, corresponding hybridomas, nucleic acids, vectors, host cells, methods of producing said antibodies, compositions comprising said antibodies, uses of said antibodies and methods of using said antibodies
KR20140087058A (ko) 2005-11-30 2014-07-08 애브비 인코포레이티드 아밀로이드 베타 단백질에 대한 모노클로날 항체 및 이의 용도
EP2623516B1 (en) 2005-12-02 2015-07-15 Genentech, Inc. Compositions and methods for the treatment of diseases and disorders associated with cytokine signaling involving antibodies that bind to il-22 and il-22r
EA017491B1 (ru) 2005-12-08 2012-12-28 Медарекс, Инк. Человеческие моноклональные антитела к фукозил-gm1 и способы применения антифукозил-gm1 антител
EP1973950B1 (en) 2006-01-05 2014-09-17 Genentech, Inc. Anti-ephb4 antibodies and methods using the same
US20090060921A1 (en) * 2006-01-17 2009-03-05 Biolex Therapeutics, Inc. Glycan-optimized anti-cd20 antibodies
US20070166306A1 (en) * 2006-01-17 2007-07-19 Fey Georg H M Anti-CD19 antibody composition and method
AU2007205935B2 (en) 2006-01-17 2013-07-11 Synthon Biopharmaceuticals B.V. Compositions and methods for humanization and optimization of N-glycans in plants
ES2396569T3 (es) * 2006-01-17 2013-02-22 Medarex, Inc. Anticuerpos monoclonales contra CD30 que carecen de restos fucosilo y xilosilo
JP2009525986A (ja) * 2006-02-03 2009-07-16 メディミューン，エルエルシー タンパク質製剤
EP1999148B8 (en) 2006-03-06 2014-03-05 Medlmmune, LLC Humanized anti-cd22 antibodies and their use in treatment of oncology, transplantation and autoimmune disease
AR059851A1 (es) 2006-03-16 2008-04-30 Genentech Inc Anticuerpos de la egfl7 y metodos de uso
CA2646329C (en) 2006-03-20 2018-07-03 The Regents Of The University Of California Engineered anti-prostate stem cell antigen (psca) antibodies for cancer targeting
DK2009101T3 (en) 2006-03-31 2018-01-15 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Antibody modification method for purification of a bispecific antibody
DK3056568T3 (da) 2006-03-31 2021-11-01 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Fremgangsmåder til kontrollering af antistoffers blodfarmakokinetik
EP2011870A4 (en) * 2006-04-14 2010-09-15 Medical & Biol Lab Co Ltd MUTANT POLYPEPTIDE WITH EFFECTOR FUNCTION
BRPI0711249A2 (pt) 2006-05-30 2012-03-13 Genentech, Inc. Anticorpos, polinucleotídeos, vetores, células hospedeira, métodos para fabricar um anticorpo, para detectar a presença de cd2 em uma amostra biológica, para tratar uma disfunção proliferativa de células b, para inibir proliferaçõa de células b, para tratar câncer, para fabricar um composto conjugado anti-corpo-droga. imunoconjugados,composições farmacêuticas, formulações farmacêuticas, conjugado anticorpo-droga, compostos conjugados anti-corpo-droga, teste para detectar células b e artigo de fabricação
KR20090027227A (ko) * 2006-06-06 2009-03-16 제넨테크, 인크. 항-ｄｌｌ4 항체 및 이의 사용 방법
TW200817435A (en) * 2006-06-06 2008-04-16 Genentech Inc Compositions and methods for modulating vascular development
JP5764290B2 (ja) 2006-06-26 2015-08-19 マクロジェニクス，インコーポレーテッド ＦｃγＲＩＩＢ特異的抗体およびその使用法
WO2008002933A2 (en) 2006-06-26 2008-01-03 Macrogenics, Inc. Combination of fcgammariib antibodies and cd20-specific antibodies and methods of use thereof
EP1878747A1 (en) 2006-07-11 2008-01-16 greenovation Biotech GmbH Glyco-engineered antibodies
US20100166741A1 (en) * 2006-07-13 2010-07-01 Genentech , Inc. Altered br-3 binding polypeptides
JP2009543579A (ja) 2006-07-19 2009-12-10 ザ・トラスティーズ・オブ・ザ・ユニバーシティ・オブ・ペンシルバニア 抗炎症反応のための標的としてのＷＳＸ−１／ｐ２８
GB0615266D0 (en) * 2006-08-01 2006-09-06 Immunobiology Ltd Composition and method for mediating an immune response
AR062223A1 (es) * 2006-08-09 2008-10-22 Glycart Biotechnology Ag Moleculas de adhesion al antigeno que se adhieren a egfr, vectores que los codifican, y sus usos de estas
ME01786B (me) 2006-08-14 2014-09-20 Xencor Inc Optimizovana antitela usmerena na cd19
MX2009002418A (es) 2006-09-05 2009-04-23 Medarex Inc Anticuerpos para las proteinas morfogenicas oseas y receptores de estas y metodos para su uso.
WO2008031056A2 (en) 2006-09-08 2008-03-13 Medimmune, Llc Humanized anti-cd19 antibodies and their use in treatment of oncology, transplantation and autoimmune disease
ES2902063T3 (es) 2006-09-08 2022-03-24 Abbvie Bahamas Ltd Proteínas de unión a interleucina-13
US8911964B2 (en) 2006-09-13 2014-12-16 Abbvie Inc. Fed-batch method of making human anti-TNF-alpha antibody
CA2842964A1 (en) 2006-09-13 2008-03-20 Abbvie Inc. Cell culture improvements
AU2007299843B2 (en) 2006-09-18 2012-03-08 Xencor, Inc Optimized antibodies that target HM1.24
HUE033630T2 (en) 2006-10-02 2017-12-28 Squibb & Sons Llc CXCR4 binding human antibodies and their use
TWI414531B (zh) 2006-10-12 2013-11-11 Genentech Inc 淋巴毒素α之抗體
WO2008048545A2 (en) * 2006-10-16 2008-04-24 Medimmune, Llc. Molecules with reduced half-lives, compositions and uses thereof
WO2008047925A1 (en) 2006-10-20 2008-04-24 Forerunner Pharma Research Co., Ltd. Pharmaceutical composition comprising anti-hb-egf antibody as active ingredient
US7846434B2 (en) * 2006-10-24 2010-12-07 Trubion Pharmaceuticals, Inc. Materials and methods for improved immunoglycoproteins
JP2010507394A (ja) * 2006-10-24 2010-03-11 トルービオン ファーマスーティカルズ インコーポレイテッド 改良免疫糖タンパク質のための物質および方法
ES2636089T3 (es) 2006-10-27 2017-10-05 Genentech, Inc. Anticuerpos e inmunoconjugados y usos para los mismos
US8618248B2 (en) 2006-10-31 2013-12-31 President And Fellows Of Harvard College Phosphopeptide compositions and anti-phosphopeptide antibody compositions and methods of detecting phosphorylated peptides
CA2669921A1 (en) 2006-11-15 2008-06-26 Medarex, Inc. Human monoclonal antibodies to btla and methods of use
US8455626B2 (en) 2006-11-30 2013-06-04 Abbott Laboratories Aβ conformer selective anti-aβ globulomer monoclonal antibodies
JP5398538B2 (ja) 2006-12-01 2014-01-29 メダレックス・リミテッド・ライアビリティ・カンパニー Ｃｄ２２に結合するヒト抗体およびその使用
US20080127996A1 (en) * 2006-12-04 2008-06-05 Weinhold Dennis G Method and apparatus to remediate an acid and/or liquid spill
WO2008140603A2 (en) 2006-12-08 2008-11-20 Macrogenics, Inc. METHODS FOR THE TREATMENT OF DISEASE USING IMMUNOGLOBULINS HAVING FC REGIONS WITH ALTERED AFFINITIES FOR FCγR ACTIVATING AND FCγR INHIBITING
CL2007003622A1 (es) 2006-12-13 2009-08-07 Medarex Inc Anticuerpo monoclonal humano anti-cd19; composicion que lo comprende; y metodo de inhibicion del crecimiento de celulas tumorales.
EP2097534A4 (en) 2006-12-14 2010-05-12 Medarex Inc HUMAN ANTIBODIES BINDING TO CD70 AND USES THEREOF
JP2010517944A (ja) * 2007-01-26 2010-05-27 バイオインヴェント インターナショナル アーベー Ｄｌｌ４シグナリング阻害薬およびその使用
WO2008100805A2 (en) 2007-02-09 2008-08-21 Genentech, Inc. Anti-robo4 antibodies and uses therefor
US8895004B2 (en) 2007-02-27 2014-11-25 AbbVie Deutschland GmbH & Co. KG Method for the treatment of amyloidoses
WO2008109440A2 (en) 2007-03-02 2008-09-12 Genentech, Inc. Predicting response to a her dimerisation inhibitor based on low her3 expression
CA2679732A1 (en) * 2007-03-07 2008-09-18 Glycofi, Inc. Production of glycoproteins with modified fucosylation
BRPI0809042B1 (pt) 2007-03-22 2021-08-31 Biogen Ma Inc. Proteína de ligação a cd154 isolada, seu uso, e composição
ES2389618T3 (es) * 2007-04-16 2012-10-29 Momenta Pharmaceuticals, Inc. Productos de glucoproteínas definidas y métodos relacionados
KR20100017514A (ko) 2007-05-07 2010-02-16 메디뮨 엘엘씨 항 ｉｃｏｓ 항체, 및 종양, 이식 및 자가면역성 질환 치료에서의 이의 용도
SG10202000728UA (en) 2007-05-14 2020-03-30 Astrazeneca Ab Methods of reducing eosinophil levels
EP3392273A1 (en) 2007-05-30 2018-10-24 Xencor, Inc. Methods and compositions for inhibiting cd32b expressing cells
EP2592156B1 (en) 2007-06-08 2016-04-20 Genentech, Inc. Gene expression markers of tumor resistance to HER2 inhibitor treatment
US7580304B2 (en) * 2007-06-15 2009-08-25 United Memories, Inc. Multiple bus charge sharing
PL2158221T3 (pl) 2007-06-21 2019-02-28 Macrogenics, Inc. Kowalencyjne diaciała i ich zastosowania
JP5469456B2 (ja) 2007-06-25 2014-04-16 中外製薬株式会社 ＡＤＣＣ活性又はＣＤＣ活性を有する抗Ｐｒｏｍｉｎｉｎ−１抗体
US20110077383A1 (en) * 2007-07-03 2011-03-31 Medimmune, Llc Hinge domain engineering
EP2188302B1 (en) 2007-07-09 2017-11-01 Genentech, Inc. Prevention of disulfide bond reduction during recombinant production of polypeptides
WO2009018386A1 (en) 2007-07-31 2009-02-05 Medimmune, Llc Multispecific epitope binding proteins and uses thereof
ES2719728T3 (es) 2007-09-04 2019-07-12 Compugen Ltd Polipéptidos y polinucleótidos, y usos de los mismos como una diana farmacológica para producir fármacos y agentes biológicos
JP6126773B2 (ja) 2007-09-04 2017-05-10 ザ リージェンツ オブ ザ ユニバーシティ オブ カリフォルニア 癌のターゲッティングおよび検出のための高親和性抗前立腺幹細胞抗原（ｐｓｃａ）抗体
EP3689912A1 (en) 2007-09-26 2020-08-05 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Method of modifying isoelectric point of antibody via amino acid substitution in cdr
KR102467302B1 (ko) 2007-09-26 2022-11-14 추가이 세이야쿠 가부시키가이샤 항체 정상영역 개변체
CA2700860C (en) * 2007-10-01 2016-07-19 Jonathan A. Terrett Human antibodies that bind mesothelin, and uses thereof
EP2740490A1 (en) * 2007-10-03 2014-06-11 Cornell University Treatment of proliferative disorders using antibodies to PSMA
TWI489993B (zh) 2007-10-12 2015-07-01 Novartis Ag 骨硬化素（ｓｃｌｅｒｏｓｔｉｎ）抗體組合物及使用方法
PL2233149T3 (pl) 2007-10-16 2016-08-31 Zymogenetics Inc Kombinacja przezbłonowego aktywatora i ligandu cyklofiliny (taci) oraz przeciwciała anty-cd20 do leczenia chorób autoimmunologicznych
ES2663077T3 (es) 2007-11-02 2018-04-11 Novartis Ag Moléculas y métodos de modulación de la proteína 6 relacionada con el receptor de lipoproteína de baja densidad (lrp6)
AU2008323770B2 (en) 2007-11-07 2014-08-07 Genentech, Inc. Compositions and methods for treatment of microbial disorders
US8637435B2 (en) * 2007-11-16 2014-01-28 Merck Sharp & Dohme Corp. Eukaryotic cell display systems
WO2015164330A1 (en) 2014-04-21 2015-10-29 Millennium Pharmaceuticals, Inc. Anti-psyk antibody molecules and use of same for syk-targeted therapy
AR069501A1 (es) 2007-11-30 2010-01-27 Genentech Inc Anticuerpos anti- vegf (factor de crecimiento endotelial vascular)
PT2222706E (pt) 2007-12-14 2014-07-28 Novo Nordisk As Anticorpos contra nkg2d humano e utilizações dos mesmos
US20090162359A1 (en) 2007-12-21 2009-06-25 Christian Klein Bivalent, bispecific antibodies
US9266967B2 (en) 2007-12-21 2016-02-23 Hoffmann-La Roche, Inc. Bivalent, bispecific antibodies
WO2009080278A1 (en) * 2007-12-21 2009-07-02 F. Hoffmann-La Roche Ag Stability testing of antibodies
AU2008339576B2 (en) 2007-12-21 2014-05-22 Medimmune Limited Binding members for interleukin-4 receptor alpha (IL-4Ralpha)
EP2235059B1 (en) 2007-12-26 2015-02-18 Xencor, Inc. Fc variants with altered binding to fcrn
US7914785B2 (en) 2008-01-02 2011-03-29 Bergen Teknologieverforing As B-cell depleting agents, like anti-CD20 antibodies or fragments thereof for the treatment of chronic fatigue syndrome
EP2077281A1 (en) 2008-01-02 2009-07-08 Bergen Teknologioverforing AS Anti-CD20 antibodies or fragments thereof for the treatment of chronic fatigue syndrome
US9274119B2 (en) 2008-01-11 2016-03-01 The University Of Tokyo Anti-CLDN6 antibody
CA2710912A1 (en) * 2008-01-15 2009-07-23 F. Hoffmann-La Roche Ag Afucosylated antibodies against ccr5 and their use
TWI472339B (zh) 2008-01-30 2015-02-11 Genentech Inc 包含結合至ｈｅｒ２結構域ii之抗體及其酸性變異體的組合物
EP2650017A3 (en) 2008-02-05 2014-01-22 Bristol-Myers Squibb Company Alpha 5 - beta 1 antibodies and their uses
US12492253B1 (en) 2008-02-25 2025-12-09 Xencor, Inc. Anti-human C5 antibodies
US8962803B2 (en) 2008-02-29 2015-02-24 AbbVie Deutschland GmbH & Co. KG Antibodies against the RGM A protein and uses thereof
WO2009111183A1 (en) 2008-03-03 2009-09-11 Glycofi, Inc. Surface display of recombinant proteins in lower eukaryotes
AU2009228158B2 (en) * 2008-03-27 2014-02-27 Zymogenetics, Inc. Compositions and methods for inhibiting PDGFRbeta and VEGF-A
CN107236044B (zh) 2008-04-02 2021-07-02 宏观基因有限公司 HER2/neu-特异性抗体和其使用方法
CN102046655B (zh) 2008-04-02 2016-09-14 宏观基因有限公司 Bcr-复合体-特异性抗体和其使用方法
AU2009241589B2 (en) 2008-04-29 2013-10-10 Abbvie Inc. Dual variable domain immunoglobulins and uses thereof
EA201001734A1 (ru) 2008-05-02 2011-10-31 Новартис Аг Улучшенные связывающие молекулы на основе фибронектина и их применение
CN102089430B (zh) 2008-05-09 2015-02-04 Abbvie公司 针对渐进性糖化终极产物受体(rage)的抗体及其用途
EP3002299A1 (en) 2008-06-03 2016-04-06 AbbVie Inc. Dual variable domain immunoglobulins and uses thereof
US9109026B2 (en) 2008-06-03 2015-08-18 Abbvie, Inc. Dual variable domain immunoglobulins and uses thereof
EP2282770B1 (en) 2008-06-04 2018-03-07 MacroGenics, Inc. Antibodies with altered binding to fcrn and methods of using same
JP5425775B2 (ja) 2008-06-30 2014-02-26 協和発酵キリン株式会社 抗ｃｄ２７抗体
JP2011527579A (ja) 2008-07-08 2011-11-04 アボット・ラボラトリーズ プロスタグランジンｅ２結合タンパク質およびこの使用
TW201012475A (en) 2008-07-08 2010-04-01 Abbott Lab Prostaglandin E2 dual variable domain immunoglobulins and uses thereof
US8067339B2 (en) 2008-07-09 2011-11-29 Merck Sharp & Dohme Corp. Surface display of whole antibodies in eukaryotes
AU2009202778B2 (en) * 2008-07-11 2014-05-08 Commonwealth of Australia as represented by and acting through the Department of Climate Change, Energy, the Environment and Water Improved baiting method and composition
SI2328616T1 (sl) 2008-08-05 2015-08-31 Novartis Ag Sestavki in postopki za protitelesa proti komplementnemu proteinu C5
AR072999A1 (es) 2008-08-11 2010-10-06 Medarex Inc Anticuerpos humanos que se unen al gen 3 de activacion linfocitaria (lag-3) y los usos de estos
TW201438738A (zh) 2008-09-16 2014-10-16 建南德克公司 治療進展型多發性硬化症之方法
KR101783272B1 (ko) 2008-09-17 2017-09-29 젠코어 인코포레이티드 ＩｇＥ-매개된 장애를 치료하기 위한 신규 조성물 및 방법
US20100098730A1 (en) 2008-10-14 2010-04-22 Lowman Henry B Immunoglobulin variants and uses thereof
RU2520838C2 (ru) 2008-10-20 2014-06-27 Эббви Инк Выделение и очистка антител с использованием аффинной хроматографии на основе белка а
WO2010048192A2 (en) 2008-10-20 2010-04-29 Abbott Laboratories Viral inactivation during purification of antibodies
US20110293605A1 (en) 2008-11-12 2011-12-01 Hasige Sathish Antibody formulation
SI2361085T2 (sl) 2008-11-22 2018-11-30 F. Hoffmann-La Roche Ag Uporaba protitelesa proti vegf v kombinaciji s kemoterapijo za zdravljenje raka dojk
GB2466025A (en) 2008-12-08 2010-06-09 Univ Francois Rabelais De Tour C3/ITGAM polymorphisms and cancer prognosis
AU2009325878B2 (en) 2008-12-08 2014-01-16 Compugen Ltd. TMEM154 polypeptides and polynucleotides, and uses thereof as a drug target for producing drugs and biologics
US8927249B2 (en) 2008-12-09 2015-01-06 Halozyme, Inc. Extended soluble PH20 polypeptides and uses thereof
AU2009335798B2 (en) 2008-12-19 2014-11-27 Macrogenics, Inc. Covalent diabodies and uses thereof
WO2010075249A2 (en) 2008-12-22 2010-07-01 Genentech, Inc. A method for treating rheumatoid arthritis with b-cell antagonists
KR101812811B1 (ko) 2008-12-23 2017-12-27 제넨테크, 인크. 단백질 ａ에 대해 변경된 결합을 갖는 이뮤노글로불린 변이체
US20110142836A1 (en) * 2009-01-02 2011-06-16 Olav Mella B-cell depleting agents for the treatment of chronic fatigue syndrome
US9181341B2 (en) 2009-01-19 2015-11-10 Innate Pharma Anti-KIR3D antibodies
US9238878B2 (en) 2009-02-17 2016-01-19 Redwood Bioscience, Inc. Aldehyde-tagged protein-based drug carriers and methods of use
EP3495000A1 (en) * 2009-02-17 2019-06-12 Cornell Research Foundation, Inc. Methods and kits for diagnosis of cancer and prediction of therapeutic value
EA201190132A1 (ru) * 2009-02-23 2013-01-30 Гленмарк Фармасьютикалс С.А. Гуманизированные антитела, связывающиеся с cd19, и их применение
US8030026B2 (en) 2009-02-24 2011-10-04 Abbott Laboratories Antibodies to troponin I and methods of use thereof
US20110313137A1 (en) * 2009-02-25 2011-12-22 Dongxing Zha Her2 antibody compositions
KR101769160B1 (ko) 2009-03-05 2017-08-17 옥스포드 바이오테라퓨틱스 리미티드 Ｃａｄｍ１에 특이적인 완전 인간 항체
RU2011140335A (ru) 2009-03-05 2013-04-10 Эбботт Лэборетриз Связывающие il-17 белки
US8283162B2 (en) 2009-03-10 2012-10-09 Abbott Laboratories Antibodies relating to PIVKAII and uses thereof
AR075896A1 (es) 2009-03-20 2011-05-04 Genentech Inc Anticuerpos anti-her (factor de crecimiento epidermico)
MY173526A (en) 2009-03-25 2020-01-31 Genentech Inc Novel anti-?5?1 antibodies and uses thereof
HRP20150965T1 (hr) 2009-03-25 2015-11-06 Genentech, Inc. Anti-fgr3 protutijela i metode koje ih koriste
US20100247484A1 (en) 2009-03-31 2010-09-30 Heinrich Barchet Combination therapy of an afucosylated antibody and one or more of the cytokines gm csf, m csf and/or il3
PE20120591A1 (es) 2009-04-02 2012-05-23 Roche Glycart Ag Anticuerpos multiespecificos que comprenden anticuerpos de longitud completa y fragmentos fab de cadena sencilla
CA2757669A1 (en) 2009-04-07 2010-10-14 Roche Glycart Ag Bispecific anti-erbb-1/anti-c-met antibodies
BRPI1012589A2 (pt) 2009-04-07 2016-03-22 Roche Glycart Ag anticorpos bi-específicos anti-erbb-3/anti-c-met
EP2417156B1 (en) 2009-04-07 2015-02-11 Roche Glycart AG Trivalent, bispecific antibodies
EP3009454A3 (en) 2009-04-20 2016-10-19 Oxford Bio Therapeutics Limited Antibodies specific to cadherin-17
CN102414223A (zh) 2009-04-27 2012-04-11 诺瓦提斯公司 对IL12受体β亚基特异的治疗性抗体的组合物和方法
MX2011011352A (es) 2009-04-27 2011-11-18 Novartis Ag Composiciones y metodos para aumentar el crecimiento muscular.
CA2761233A1 (en) 2009-05-27 2010-12-02 F. Hoffmann-La Roche Ag Tri- or tetraspecific antibodies
WO2010138184A2 (en) * 2009-05-27 2010-12-02 Synageva Biopharma Corp. Avian derived antibodies
CA2764370C (en) 2009-06-02 2018-08-21 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Fucosylation-deficient cells
US20100316639A1 (en) 2009-06-16 2010-12-16 Genentech, Inc. Biomarkers for igf-1r inhibitor therapy
US9676845B2 (en) 2009-06-16 2017-06-13 Hoffmann-La Roche, Inc. Bispecific antigen binding proteins
EP3431501A1 (en) 2009-06-18 2019-01-23 Pfizer Inc Anti notch-1 antibodies
JP2009292822A (ja) * 2009-07-23 2009-12-17 Chugai Pharmaceut Co Ltd 機能蛋白質を代替する二種特異性抗体
TW201106972A (en) 2009-07-27 2011-03-01 Genentech Inc Combination treatments
JP2013500993A (ja) 2009-07-31 2013-01-10 ジェネンテック， インコーポレイテッド Ｂｖ８アンタゴニスト又はｇ−ｃｓｆアンタゴニストを用いた腫瘍転移の阻害
CN102762593B (zh) 2009-07-31 2015-05-20 梅达雷克斯有限责任公司 抗btla的完全人抗体
MX355650B (es) 2009-08-11 2018-04-26 Genentech Inc Produccion de proteinas en medios de cultivo de celulas libres de glutamina.
KR20120054069A (ko) 2009-08-14 2012-05-29 로슈 글리카트 아게 플루다라빈 및/또는 미토잔트론과 어푸코실화된 ｃｄ20 항체의 복합 요법
TWI409079B (zh) 2009-08-14 2013-09-21 Roche Glycart Ag 非典型岩藻醣化ｃｄ２０抗體與苯達莫斯汀（ｂｅｎｄａｍｕｓｔｉｎｅ）之組合療法
WO2011022264A1 (en) 2009-08-15 2011-02-24 Genentech, Inc. Anti-angiogenesis therapy for the treatment of previously treated breast cancer
CN102574917A (zh) 2009-08-17 2012-07-11 株式会社未来创药研究所 含有抗hb-egf抗体作为有效成分的药物组合物
WO2011021146A1 (en) 2009-08-20 2011-02-24 Pfizer Inc. Osteopontin antibodies
TW201113037A (en) 2009-08-28 2011-04-16 Hoffmann La Roche Antibodies against CDCP1 for the treatment of cancer
TWI412375B (zh) 2009-08-28 2013-10-21 Roche Glycart Ag 人類化抗ｃｄｃｐ１抗體
AU2010288469A1 (en) * 2009-08-31 2012-03-01 Roche Glycart Ag Affinity-matured humanized anti CEA monoclonal antibodies
AU2010289527C1 (en) 2009-09-01 2014-10-30 Abbvie Inc. Dual variable domain immunoglobulins and uses thereof
US9493578B2 (en) 2009-09-02 2016-11-15 Xencor, Inc. Compositions and methods for simultaneous bivalent and monovalent co-engagement of antigens
CA2772715C (en) 2009-09-02 2019-03-26 Genentech, Inc. Mutant smoothened and methods of using the same
WO2011029823A1 (en) 2009-09-09 2011-03-17 Novartis Ag Monoclonal antibody reactive with cd63 when expressed at the surface of degranulated mast cells
AR078161A1 (es) 2009-09-11 2011-10-19 Hoffmann La Roche Formulaciones farmaceuticas muy concentradas de un anticuerpo anti cd20. uso de la formulacion. metodo de tratamiento.
AU2010296018B2 (en) 2009-09-16 2016-05-05 Genentech, Inc. Coiled coil and/or tether containing protein complexes and uses thereof
AU2010303415B2 (en) 2009-10-07 2015-02-19 Macrogenics, Inc. Fc region-containing polypeptides that exhibit improved effector function due to alterations of the extent of fucosylation, and methods for their use
BR112012008665A2 (pt) 2009-10-12 2016-11-22 Pfizer tratamento de câncer
US20120231004A1 (en) 2009-10-13 2012-09-13 Oxford Biotherapeutic Ltd. Antibodies
BR112012008833A2 (pt) 2009-10-15 2015-09-08 Abbott Lab imunoglobulinas de dominio variavel duplo e usos das mesmas
MX2012004647A (es) 2009-10-22 2012-06-19 Genentech Inc Anticuerpos antihepsina y metodos para su uso.
ES2788457T3 (es) 2009-10-23 2020-10-21 Millennium Pharm Inc Moléculas de anticuerpo anti-GCC y composiciones y métodos relacionados
WO2011056494A1 (en) 2009-10-26 2011-05-12 Genentech, Inc. Activin receptor-like kinase-1 antagonist and vegfr3 antagonist combinations
WO2011056502A1 (en) 2009-10-26 2011-05-12 Genentech, Inc. Bone morphogenetic protein receptor type ii compositions and methods of use
WO2011056497A1 (en) 2009-10-26 2011-05-12 Genentech, Inc. Activin receptor type iib compositions and methods of use
UY32979A (es) 2009-10-28 2011-02-28 Abbott Lab Inmunoglobulinas con dominio variable dual y usos de las mismas
WO2011051327A2 (en) 2009-10-30 2011-05-05 Novartis Ag Small antibody-like single chain proteins
US8420083B2 (en) 2009-10-31 2013-04-16 Abbvie Inc. Antibodies to receptor for advanced glycation end products (RAGE) and uses thereof
WO2011051466A1 (en) 2009-11-02 2011-05-05 Novartis Ag Anti-idiotypic fibronectin-based binding molecules and uses thereof
US8637019B2 (en) 2009-11-04 2014-01-28 Merck Sharp & Dohme Corp. Engineered anti-TSLP antibody
CA2780221A1 (en) 2009-11-04 2011-05-12 Fabrus Llc Methods for affinity maturation-based antibody optimization
CA2780143A1 (en) 2009-11-05 2011-05-12 Genentech, Inc. Methods and composition for secretion of heterologous polypeptides
EP2507265B1 (en) 2009-12-01 2016-05-11 Compugen Ltd. Antibody specific for heparanase splice variant T5 and its use.
RU2673908C2 (ru) 2009-12-02 2018-12-03 Имэджинэб, Инк. Мини-антитела j591 и цис-диатела для направленной доставки простата-специфичного мембранного антигена (psma) человека и способы их применения
JP5951498B2 (ja) 2009-12-08 2016-07-13 アッヴィ・ドイチュラント・ゲー・エム・ベー・ハー・ウント・コー・カー・ゲー 網膜神経線維層変性の治療に使用するためのｒｇｍａタンパク質に対するモノクローナル抗体
WO2011071577A1 (en) 2009-12-11 2011-06-16 Genentech, Inc. Anti-vegf-c antibodies and methods using same
CA2785139A1 (en) 2009-12-22 2011-06-30 Novartis Ag Tetravalent cd47-antibody constant region fusion protein for use in therapy
WO2011076683A1 (en) 2009-12-22 2011-06-30 Roche Glycart Ag Anti-her3 antibodies and uses thereof
AU2010336485B2 (en) 2009-12-23 2015-03-26 Genentech, Inc. Anti-Bv8 antibodies and uses thereof
WO2011076883A1 (en) 2009-12-23 2011-06-30 4-Antibody Ag Binding members for human cytomegalovirus
WO2011091078A2 (en) 2010-01-19 2011-07-28 Xencor, Inc. Antibody fc variants with enhanced complement activity
WO2011092233A1 (en) 2010-01-29 2011-08-04 Novartis Ag Yeast mating to produce high-affinity combinations of fibronectin-based binders
US20110189178A1 (en) * 2010-02-04 2011-08-04 Xencor, Inc. Immunoprotection of Therapeutic Moieties Using Enhanced Fc Regions
BR112012019902A2 (pt) 2010-02-10 2019-09-24 Novartis Ag "método e compostos para o crescimento muscular"
MX341687B (es) 2010-02-10 2016-08-30 Immunogen Inc "anticuerpos cd20 y su utilización".
CA2784211C (en) 2010-02-18 2019-12-24 Genentech, Inc. Neuregulin antagonists and use thereof in treating cancer
US8859736B2 (en) 2010-02-19 2014-10-14 The Board Of Regents Of The University Of Oklahoma Monoclonal antibodies that inhibit the wnt signaling pathway and methods of production and use thereof
RU2012140447A (ru) 2010-02-23 2014-03-27 Дженентек, Инк. Антиангиогенная терапия для лечения рака яичника
AU2011220878A1 (en) 2010-02-24 2012-08-23 Merck Sharp & Dohme Corp. Method for increasing N-glycosylation site occupancy on therapeutic glycoproteins produced in Pichia pastoris
KR101159068B1 (ko) * 2010-03-03 2012-06-22 사회복지법인 삼성생명공익재단 분자영상 프로브 제조용 신규 리간드, 그 리간드를 포함하는 분자영상 프로브, 그 분자영상 프로브를 포함하는 분자영상 입자, 그 제조방법 및 그것을 포함하는 약학 조성물
PH12012501751A1 (en) 2010-03-04 2012-11-12 Macrogenics Inc Antibodies reactive with b7-h3, immunologically active fragments thereof and uses thereof
LT2542256T (lt) 2010-03-04 2019-10-25 Macrogenics Inc Su b7-h3 reaguojantys antikūnai, jų imunologiškai aktyvūs fragmentai ir jų naudojimas
BR112012022044A2 (pt) 2010-03-24 2020-08-25 Genentech Inc ''anticorpo,imunoconjugado,formulação farmacêutica,uso do anticorpo,método de tratamento,anticorpo biespecifico isolado e célula hospedeira''.
US20150231215A1 (en) 2012-06-22 2015-08-20 Randolph J. Noelle VISTA Antagonist and Methods of Use
KR101882523B1 (ko) 2010-03-26 2018-07-26 트러스티스 오브 다트마우스 칼리지 Ｖｉｓｔａ 조절 ｔ 세포 매개 단백질, ｖｉｓｔａ 결합제 및 그것의 용도
AR080793A1 (es) 2010-03-26 2012-05-09 Roche Glycart Ag Anticuerpos biespecificos
US10745467B2 (en) 2010-03-26 2020-08-18 The Trustees Of Dartmouth College VISTA-Ig for treatment of autoimmune, allergic and inflammatory disorders
CN102971340A (zh) 2010-03-29 2013-03-13 酵活有限公司 具有增强的或抑制的效应子功能的抗体
MX2012011648A (es) 2010-04-07 2012-11-29 Momenta Pharmaceuticals Inc Glicanos de alta manosa.
BR112012025654A2 (pt) * 2010-04-07 2017-07-18 Momenta Pharmaceuticals Inc seleção e uso de células hospedeiras para produção de glicoproteína
CA2796339C (en) 2010-04-15 2020-03-31 Abbott Laboratories Amyloid-beta binding proteins
CN102844049B (zh) 2010-04-27 2016-06-01 罗切格利卡特公司 无岩藻糖基化CD20抗体与mTOR抑制剂的联合疗法
SG185415A1 (en) 2010-05-06 2012-12-28 Novartis Ag Compositions and methods of use for therapeutic low density lipoprotein - related protein 6 (lrp6) multivalent antibodies
WO2011138392A1 (en) 2010-05-06 2011-11-10 Novartis Ag Compositions and methods of use for therapeutic low density lipoprotein -related protein 6 (lrp6) antibodies
KR101539684B1 (ko) 2010-05-14 2015-07-27 애브비 인코포레이티드 Ｉｌ－１ 결합 단백질
WO2011146568A1 (en) 2010-05-19 2011-11-24 Genentech, Inc. Predicting response to a her inhibitor
WO2011147834A1 (en) 2010-05-26 2011-12-01 Roche Glycart Ag Antibodies against cd19 and uses thereof
WO2011153243A2 (en) 2010-06-02 2011-12-08 Genentech, Inc. Anti-angiogenesis therapy for treating gastric cancer
SG185430A1 (en) 2010-06-03 2012-12-28 Genentech Inc Immuno-pet imaging of antibodies and immunoconjugates and uses therefor
CA2794731C (en) 2010-06-18 2019-03-19 Genentech, Inc. Anti-axl antibodies and methods of use
US9315585B2 (en) 2010-06-19 2016-04-19 Memorial Sloan Kettering Cancer Center Anti-GD2 antibodies
WO2011161119A1 (en) 2010-06-22 2011-12-29 F. Hoffmann-La Roche Ag Antibodies against insulin-like growth factor i receptor and uses thereof
US20130189268A1 (en) 2010-06-22 2013-07-25 Precision Biologics, Inc. Colon and pancreas cancer specific antigens and antibodies
WO2011161189A1 (en) 2010-06-24 2011-12-29 F. Hoffmann-La Roche Ag Anti-hepsin antibodies and methods of use
US20120009196A1 (en) 2010-07-08 2012-01-12 Abbott Laboratories Monoclonal antibodies against hepatitis c virus core protein
CN103097418A (zh) 2010-07-09 2013-05-08 霍夫曼-拉罗奇有限公司 抗神经毡蛋白抗体及使用方法
UY33492A (es) 2010-07-09 2012-01-31 Abbott Lab Inmunoglobulinas con dominio variable dual y usos de las mismas
WO2012010582A1 (en) 2010-07-21 2012-01-26 Roche Glycart Ag Anti-cxcr5 antibodies and methods of use
EP2596026B1 (en) 2010-07-23 2020-04-08 Trustees of Boston University Anti-despr inhibitors as therapeutics for inhibition of pathological angiogenesis and tumor cell invasiveness and for molecular imaging and targeted delivery
US9120862B2 (en) 2010-07-26 2015-09-01 Abbott Laboratories Antibodies relating to PIVKA-II and uses thereof
DK3029066T3 (da) 2010-07-29 2019-05-20 Xencor Inc Antistoffer med modificerede isoelektriske punkter
US20140308699A1 (en) 2010-07-30 2014-10-16 Glycode Yeast artificial chromosome carrying the mammalian glycosylation pathway
ES2667100T3 (es) 2010-08-02 2018-05-09 Macrogenics, Inc. Diacuerpos covalentes y sus usos
NZ607480A (en) 2010-08-03 2014-10-31 Abbott Lab Dual variable domain immunoglobulins and uses thereof
WO2012018771A1 (en) 2010-08-03 2012-02-09 Genentech, Inc. Chronic lymphocytic leukemia (cll) biomarkers
WO2012019061A2 (en) 2010-08-05 2012-02-09 Stem Centrx, Inc. Novel effectors and methods of use
BR112013002532A2 (pt) 2010-08-05 2016-05-31 Hoffmann La Roche proteína de fusão de citocina anti-viral do anticorpo anti-mhc
NZ703653A (en) 2010-08-13 2016-09-30 Roche Glycart Ag Anti-fap antibodies and methods of use
MX2013001336A (es) 2010-08-13 2013-03-08 Roche Glycart Ag Anticuerpos ani-tenascina c a2 y metodos de utilizacion.
JP6147665B2 (ja) 2010-08-14 2017-06-14 アッヴィ・インコーポレイテッド アミロイドベータ結合タンパク質
WO2012022734A2 (en) 2010-08-16 2012-02-23 Medimmune Limited Anti-icam-1 antibodies and methods of use
TW201208703A (en) 2010-08-17 2012-03-01 Roche Glycart Ag Combination therapy of an afucosylated CD20 antibody with an anti-VEGF antibody
MY162825A (en) 2010-08-20 2017-07-31 Novartis Ag Antibodies for epidermal growth factor receptor 3 (her3)
JP5758004B2 (ja) 2010-08-24 2015-08-05 エフ．ホフマン−ラ ロシュ アーゲーＦ． Ｈｏｆｆｍａｎｎ−Ｌａ Ｒｏｃｈｅ Ａｋｔｉｅｎｇｅｓｅｌｌｓｃｈａｆｔ ジスルフィドによって安定化されたＦｖ断片を含む二重特異性抗体
TW201215405A (en) 2010-08-25 2012-04-16 Hoffmann La Roche Antibodies against IL-18R1 and uses thereof
PH12013500337A1 (en) 2010-08-26 2017-08-23 Abbvie Inc Dual variable domain immunoglobulins and uses thereof
US20130224191A1 (en) 2010-08-27 2013-08-29 Robert A. Stull Notum protein modulators and methods of use
RU2013114360A (ru) 2010-08-31 2014-10-10 Дженентек, Инк. Биомаркеры и способы лечения
CN106620693A (zh) 2010-09-03 2017-05-10 艾伯维施特姆森特克斯有限责任公司 新型调节剂及使用方法
US8999335B2 (en) 2010-09-17 2015-04-07 Compugen Ltd. Compositions and methods for treatment of drug resistant multiple myeloma
US9068014B2 (en) 2010-09-23 2015-06-30 Precision Biologics, Inc. Colon and pancreas cancer peptidomimetics
WO2012045703A1 (en) 2010-10-05 2012-04-12 Novartis Ag Anti-il12rbeta1 antibodies and their use in treating autoimmune and inflammatory disorders
AU2011312205B2 (en) 2010-10-05 2015-08-13 Curis, Inc. Mutant smoothened and methods of using the same
MX352929B (es) 2010-11-05 2017-12-13 Zymeworks Inc DISEÑO DE ANTICUERPOS HETERODIMÉRICOS ESTABLES CON MUTACIONES EN EL DOMINIO Fc.
KR20220070586A (ko) 2010-11-08 2022-05-31 제넨테크, 인크. 피하 투여용 항―ｉｌ―6 수용체 항체
CA2815840A1 (en) 2010-11-10 2012-05-18 Genentech, Inc. Methods and compositions for neural disease immunotherapy
CA2817964C (en) 2010-11-17 2018-06-12 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Multi-specific antigen-binding molecule having alternative function to function of blood coagulation factor viii
DK2643018T3 (da) 2010-11-23 2021-01-18 Vitaeris Inc Anti-il-6-antistoffer til behandling af oral mucositis
WO2012075037A1 (en) 2010-11-30 2012-06-07 Genentech, Inc. Low affinity blood brain barrier receptor antibodies and uses therefor
FI3434767T3 (fi) 2010-11-30 2026-02-12 Chugai Seiyaku Kk Sytotoksisuutta aiheuttava terapeuttinen aine
AU2011338425A1 (en) 2010-12-08 2013-05-02 Stemcentrx, Inc. Novel modulators and methods of use
US9458240B2 (en) 2010-12-10 2016-10-04 Novartis Pharma Ag Anti-BAFFR antibody formulations
SG191039A1 (en) 2010-12-15 2013-08-30 Wyeth Llc Anti-notch1 antibodies
TWI708944B (zh) 2010-12-16 2020-11-01 美商建南德克公司 關於th2抑制作用之診斷及治療
RU2013131444A (ru) 2010-12-16 2015-01-27 Рош Гликарт Аг Сочетанная терапия афукозилированным антителом к cd20 и ингибитором mdm2
AU2011349443B2 (en) 2010-12-20 2015-12-24 Genentech, Inc. Anti-mesothelin antibodies and immunoconjugates
EP2655417A2 (en) 2010-12-21 2013-10-30 AbbVie Inc. Il-1 -alpha and -beta bispecific dual variable domain immunoglobulins and their use
PH12013501339A1 (en) 2010-12-22 2013-08-28 Genentech Inc Anti-pcsk9 antibodies and methods of use
SG191153A1 (en) 2010-12-23 2013-07-31 Hoffmann La Roche Polypeptide-polynucleotide-complex and its use in targeted effector moiety delivery
WO2012092539A2 (en) 2010-12-31 2012-07-05 Takeda Pharmaceutical Company Limited Antibodies to dll4 and uses thereof
KR20140016262A (ko) 2011-01-14 2014-02-07 레드우드 바이오사이언스 인코포레이티드 알데하이드-태깅된 면역글로불린 폴리펩타이드 및 이의 사용 방법
US9540443B2 (en) 2011-01-26 2017-01-10 Kolltan Pharmaceuticals, Inc. Anti-kit antibodies
AU2012215572A1 (en) 2011-02-10 2013-05-02 Roche Glycart Ag Improved immunotherapy
SA112330278B1 (ar) 2011-02-18 2015-10-09 ستيم سينتركس، انك. مواد ضابطة جديدة وطرق للاستخدام
RU2013141078A (ru) 2011-02-28 2015-04-10 Ф. Хоффманн-Ля Рош Аг Одновалентные антигенсвязывающие белки
MX341921B (es) 2011-02-28 2016-09-07 Hoffmann La Roche Proteinas de union a antigeno.
MY164647A (en) 2011-03-02 2018-01-30 Roche Glycart Ag Cea antibodies
EP2686671A4 (en) 2011-03-12 2015-06-24 Momenta Pharmaceuticals Inc N-GLYCANES CONTAINING N-ACETYLHEXOSAMINE IN GLYCOPROTEIN PRODUCTS
WO2012127045A1 (en) 2011-03-23 2012-09-27 Glycode A yeast recombinant cell capable of producing gdp-fucose
TR201815420T4 (tr) 2011-03-29 2018-11-21 Roche Glycart Ag Antikor fc varyantları.
BR112013024717A2 (pt) 2011-04-07 2017-08-08 Genentech Inc anticorpo isolado, ácido nucleico isolado, célula hospedeira, imunoconjugado, formulação farmacêutica, método de tratar um indivíduo que tem câncer e método de inibir proliferação celular em um indivíduo
NZ713461A (en) 2011-04-15 2017-02-24 Compugen Ltd Polypeptides and polynucleotides, and uses thereof for treatment of immune related disorders and cancer
CN105884900A (zh) 2011-04-19 2016-08-24 梅里麦克制药股份有限公司 单特异性和双特异性抗igf-1r和抗erbb3抗体
CA3019531A1 (en) 2011-04-19 2012-10-26 Pfizer Inc. Combinations of anti-4-1bb antibodies and adcc-inducing antibodies for the treatment of cancer
WO2012149197A2 (en) 2011-04-27 2012-11-01 Abbott Laboratories Methods for controlling the galactosylation profile of recombinantly-expressed proteins
WO2012146630A1 (en) 2011-04-29 2012-11-01 F. Hoffmann-La Roche Ag N-terminal acylated polypeptides, methods for their production and uses thereof
EA201892619A1 (ru) 2011-04-29 2019-04-30 Роше Гликарт Аг Иммуноконъюгаты, содержащие мутантные полипептиды интерлейкина-2
KR101992502B1 (ko) 2011-05-12 2019-06-24 제넨테크, 인크. 프레임워크 시그너처 펩티드를 사용하여 동물 샘플에서 치료 항체를 검출하기 위한 다중 반응 모니터링 lc-ms/ms 방법
WO2012156309A1 (en) 2011-05-13 2012-11-22 Millegen Antibodies against her3
PH12013502294A1 (en) 2011-05-16 2014-01-27 Genentech Inc Fgfr1 agonists and methods of use
JP6145088B2 (ja) 2011-05-21 2017-06-07 マクロジェニクス，インコーポレーテッド 脱免疫化血清結合ドメイン及び血清半減期を延長するためのその使用
CA2837184C (en) 2011-05-25 2021-09-21 Innate Pharma, S.A. Anti-kir antibodies for the treatment of inflammatory and autoimmune disorders
WO2012170740A2 (en) 2011-06-07 2012-12-13 University Of Hawaii Biomarker of asbestos exposure and mesothelioma
WO2012170742A2 (en) 2011-06-07 2012-12-13 University Of Hawaii Treatment and prevention of cancer with hmgb1 antagonists
US20130209449A9 (en) 2011-06-13 2013-08-15 Abgenomics Cooperatief U.A. Anti-psgl-1 antibodies and uses thereof
WO2012172495A1 (en) 2011-06-14 2012-12-20 Novartis Ag Compositions and methods for antibodies targeting tem8
EP2721067B1 (en) 2011-06-15 2019-07-31 F.Hoffmann-La Roche Ag Anti-human epo receptor antibodies and methods of use
CN103635490A (zh) 2011-06-16 2014-03-12 诺瓦提斯公司 用作治疗剂的可溶性蛋白
US20140120555A1 (en) * 2011-06-20 2014-05-01 Pierre Fabre Medicament Anti-cxcr4 antibody with effector functions and its use for the treatment of cancer
AR086982A1 (es) 2011-06-22 2014-02-05 Hoffmann La Roche Eliminacion de celulas diana por parte de celulas t citotoxicas especificas de virus utilizando complejos que comprenden mhc de clase i
CA2839508A1 (en) 2011-06-22 2012-12-27 Inserm (Institut National De La Sante Et De La Recherche Medicale) Anti-axl antibodies and uses thereof
US9409988B2 (en) 2011-06-22 2016-08-09 Inserm (Institut National De La Sante Et De La Recherche Medicale) Anti-Axl antibodies and uses thereof
SMT201700447T1 (it) 2011-06-28 2017-11-15 Oxford Biotherapeutics Ltd Anticorpi nei confronti della adp-ribosil ciclasi 2
WO2013001517A1 (en) 2011-06-30 2013-01-03 Compugen Ltd. Polypeptides and uses thereof for treatment of autoimmune disorders and infection
US20130004484A1 (en) 2011-06-30 2013-01-03 Genentech, Inc. Anti-c-met antibody formulations
DK2726099T3 (en) 2011-07-01 2018-11-05 Novartis Ag Method of treating metabolic disorders
UA117901C2 (uk) 2011-07-06 2018-10-25 Ґенмаб Б.В. Спосіб посилення ефекторної функції вихідного поліпептиду, його варіанти та їх застосування
CA3158257A1 (en) 2011-07-11 2013-01-17 Ichnos Sciences SA Antibodies that bind to ox40 and their uses
WO2013009521A2 (en) 2011-07-13 2013-01-17 Abbvie Inc. Methods and compositions for treating asthma using anti-il-13 antibodies
US9238689B2 (en) 2011-07-15 2016-01-19 Morpho Sys AG Antibodies that are cross-reactive for macrophage migration inhibitory factor (MIF) and D-dopachrome tautomerase (D-DT)
US10221210B2 (en) 2011-07-20 2019-03-05 Zepteon, Incorporated Polypeptide separation methods
WO2013013013A2 (en) * 2011-07-21 2013-01-24 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for producing modified glycoproteins
US20130022551A1 (en) 2011-07-22 2013-01-24 Trustees Of Boston University DEspR ANTAGONISTS AND AGONISTS AS THERAPEUTICS
CN103890007A (zh) 2011-08-17 2014-06-25 霍夫曼-拉罗奇有限公司 神经调节蛋白抗体及其用途
KR20140068877A (ko) 2011-08-17 2014-06-09 제넨테크, 인크. 불응성 종양에서의 혈관신생의 억제
KR101721301B1 (ko) 2011-08-23 2017-03-29 로슈 글리카트 아게 이중특이적 항원 결합 분자
MX2014002053A (es) 2011-08-23 2014-04-25 Roche Glycart Ag Anticuerpos anti -mcsp y metodos de uso.
JP2015527869A (ja) 2011-08-26 2015-09-24 メリマック ファーマシューティカルズ インコーポレーティッド タンデムＦｃ二重特異性抗体
BR112014005720A2 (pt) 2011-09-15 2017-12-12 Genentech Inc método de seleção e/ou identificação de um antagonista de usp1, antagonista de uaf1 e/ou um antagonista de id que promove uma alteração no destino celular do dito método
AR087918A1 (es) 2011-09-19 2014-04-23 Genentech Inc Tratamientos combinados que comprenden antagonistas de c-met y antagonistas de b-raf
RU2014114119A (ru) 2011-09-23 2015-10-27 Рош Гликарт Аг Биспецифические анти-egfr/анти igf-1r-антитела
CN107098967A (zh) 2011-09-30 2017-08-29 达纳-法伯癌症研究所股份有限公司 治疗肽
BR112014008212A2 (pt) 2011-10-05 2017-06-13 Genentech Inc método para tratar uma condição hepática, método de indução por diferenciação hepática e método de redução de proliferação anormal do ducto biliar
US12466897B2 (en) 2011-10-10 2025-11-11 Xencor, Inc. Heterodimeric human IgG1 polypeptides with isoelectric point modifications
KR102102862B1 (ko) 2011-10-14 2020-04-22 제넨테크, 인크. 항-HtrA1 항체 및 사용 방법
EP2766033B1 (en) 2011-10-14 2019-11-20 Novartis AG Antibodies and methods for wnt pathway-related diseases
US9358250B2 (en) 2011-10-15 2016-06-07 Genentech, Inc. Methods of using SCD1 antagonists
WO2013059531A1 (en) 2011-10-20 2013-04-25 Genentech, Inc. Anti-gcgr antibodies and uses thereof
WO2013059740A1 (en) 2011-10-21 2013-04-25 Foundation Medicine, Inc. Novel alk and ntrk1 fusion molecules and uses thereof
SG11201401791WA (en) 2011-10-24 2014-08-28 Abbvie Inc Immunobinders directed against sclerostin
AU2012328980A1 (en) 2011-10-28 2014-04-24 Genentech, Inc. Therapeutic combinations and methods of treating melanoma
JP6371059B2 (ja) 2011-10-31 2018-08-08 中外製薬株式会社 重鎖と軽鎖の会合が制御された抗原結合分子
WO2013067060A1 (en) 2011-11-01 2013-05-10 Bionomics, Inc. Anti-gpr49 antibodies
AU2012332590B2 (en) 2011-11-01 2016-10-20 Bionomics, Inc. Anti-GPR49 antibodies
US10598653B2 (en) 2011-11-01 2020-03-24 Bionomics Inc. Methods of blocking cancer stem cell growth
AU2012332587B2 (en) 2011-11-01 2017-02-23 Bionomics, Inc. Antibodies and methods of treating cancer
WO2013070565A1 (en) 2011-11-07 2013-05-16 Medimmune, Llc Multispecific and multivalent binding proteins and uses thereof
CN104066748A (zh) 2011-11-21 2014-09-24 霍夫曼-拉罗奇有限公司 抗c-met抗体的纯化
US20130302274A1 (en) 2011-11-25 2013-11-14 Roche Glycart Ag Combination therapy
TW201328706A (zh) 2011-12-05 2013-07-16 Novartis Ag 表皮生長因子受體３（ｈｅｒ３）之抗體
IN2014CN04373A (pl) 2011-12-05 2015-09-04 Novartis Ag
EP2788024A1 (en) 2011-12-06 2014-10-15 F.Hoffmann-La Roche Ag Antibody formulation
EP2791164B1 (en) 2011-12-13 2017-08-16 Glykos Finland Oy Non-fucosylated glycoprotein comprising the Fc domain of an antibody
US20150210777A1 (en) * 2011-12-13 2015-07-30 Glykos Finland Oy Glycoprotein
RS60499B1 (sr) 2011-12-20 2020-08-31 Medimmune Llc Modifikovani polipeptidi za bispecifične skelete antitela
EP3330288A1 (en) 2011-12-21 2018-06-06 Novartis AG Compositions and methods for antibodies targeting factor p
SG11201403445YA (en) 2011-12-22 2014-07-30 Hoffmann La Roche Full length antibody display system for eukaryotic cells and its use
SG10201805622QA (en) 2011-12-22 2018-08-30 Hoffmann La Roche Expression Vector Organization, Novel Production Cell Generation Methods And Their Use For The Recombinant Production Of Polypeptides
MX355624B (es) 2011-12-22 2018-04-25 Hoffmann La Roche Combinaciones de elementos de vector de expresion, metodos novedosos de generacion de celulas de produccion y su uso para la produccion recombinante de polipeptidos.
AR089434A1 (es) 2011-12-23 2014-08-20 Genentech Inc Procedimiento para preparar formulaciones con alta concentracion de proteinas
WO2013093809A1 (en) 2011-12-23 2013-06-27 Pfizer Inc. Engineered antibody constant regions for site-specific conjugation and methods and uses therefor
CA2861610A1 (en) 2011-12-30 2013-07-04 Abbvie Inc. Dual specific binding proteins directed against il-13 and/or il-17
WO2013101771A2 (en) 2011-12-30 2013-07-04 Genentech, Inc. Compositions and method for treating autoimmune diseases
CA2861919C (en) 2011-12-30 2019-04-02 Halozyme, Inc. Ph20 polypeptide variants, formulations and uses thereof
US10774132B2 (en) 2012-01-09 2020-09-15 The Scripps Research Instittue Ultralong complementarity determining regions and uses thereof
CN104411717A (zh) 2012-01-09 2015-03-11 斯克利普斯研究所 具有超长cdr3s的人源化抗体
KR20140119114A (ko) 2012-01-18 2014-10-08 제넨테크, 인크. Fgf19 조절제의 사용 방법
EP2804629A1 (en) 2012-01-18 2014-11-26 Genentech, Inc. Anti-lrp5 antibodies and methods of use
GB201201314D0 (en) 2012-01-26 2012-03-07 Isis Innovation Composition
US20130330347A1 (en) 2012-01-27 2013-12-12 Abbvie Inc. Composition and method for the diagnosis and treatment of diseases associated with neurite degeneration
TW201334789A (zh) 2012-01-31 2013-09-01 Genentech Inc 抗ｉｇｅ抗體及其使用方法
CA2848985A1 (en) 2012-02-01 2013-08-08 Compugen Ltd. C10rf32 antibodies, and uses thereof for treatment of cancer
WO2013117647A1 (en) 2012-02-07 2013-08-15 Innate Pharma Mica binding agents
RU2644341C2 (ru) 2012-02-10 2018-02-08 Дженентек, Инк. Одноцепочечные антитела и другие гетеромультимеры
MX366804B (es) 2012-02-11 2019-07-25 Genentech Inc Translocaciones de la r-espondina y sus metodos de uso.
EP2814587B1 (en) 2012-02-15 2018-05-02 F.Hoffmann-La Roche Ag Fc-receptor based affinity chromatography
JP2015514710A (ja) 2012-03-27 2015-05-21 ジェネンテック， インコーポレイテッド Ｈｅｒ３阻害剤に関する診断及び治療
AR090549A1 (es) 2012-03-30 2014-11-19 Genentech Inc Anticuerpos anti-lgr5 e inmunoconjugados
WO2013155346A1 (en) 2012-04-11 2013-10-17 The Regents Of The University Of California Diagnostic tools for response to 6-thiopurine therapy
US9181572B2 (en) 2012-04-20 2015-11-10 Abbvie, Inc. Methods to modulate lysine variant distribution
US9150645B2 (en) 2012-04-20 2015-10-06 Abbvie, Inc. Cell culture methods to reduce acidic species
US9067990B2 (en) 2013-03-14 2015-06-30 Abbvie, Inc. Protein purification using displacement chromatography
US9156915B2 (en) 2012-04-26 2015-10-13 Thomas Jefferson University Anti-GCC antibody molecules
KR20150006000A (ko) 2012-05-01 2015-01-15 제넨테크, 인크. 항-pmel17 항체 및 면역접합체
WO2013170191A1 (en) 2012-05-11 2013-11-14 Genentech, Inc. Methods of using antagonists of nad biosynthesis from nicotinamide
ES2682761T3 (es) 2012-05-18 2018-09-21 Genentech, Inc. Formulaciones de anticuerpos monoclonales de alta concentración
MY181743A (en) 2012-05-21 2021-01-06 Genentech Inc Methods for improving safety of blood-brain barrier transport
DK2852610T3 (en) 2012-05-23 2018-09-03 Glykos Finland Oy PRODUCTION OF FUCOSYLED GLYCOPROTEIN
MX2014014086A (es) 2012-05-23 2015-01-26 Genentech Inc Metodo de seleccion para agentes terapeuticos.
KR20150013188A (ko) 2012-05-24 2015-02-04 에프. 호프만-라 로슈 아게 다중특이적 항체
WO2013176754A1 (en) 2012-05-24 2013-11-28 Abbvie Inc. Novel purification of antibodies using hydrophobic interaction chromatography
WO2013181575A2 (en) 2012-06-01 2013-12-05 Momenta Pharmaceuticals, Inc. Methods related to denosumab
WO2013184514A1 (en) 2012-06-04 2013-12-12 Irm Llc Site-specific labeling methods and molecules produced thereby
KR101549637B1 (ko) 2012-06-08 2015-09-03 국립암센터 신규한 Ｔｈ1 세포 전환용 에피토프 및 이의 용도
US9216219B2 (en) 2012-06-12 2015-12-22 Novartis Ag Anti-BAFFR antibody formulation
KR20150023711A (ko) 2012-06-15 2015-03-05 제넨테크, 인크. 항-pcsk9 항체, 제제, 투여, 및 사용 방법
US9890215B2 (en) 2012-06-22 2018-02-13 King's College London Vista modulators for diagnosis and treatment of cancer
EP3421486B1 (en) 2012-06-22 2023-09-27 The Trustees Of Dartmouth College Novel vista-ig constructs and the use of vista-ig for treatment of autoimmune, allergic and inflammatory disorders
JP6203838B2 (ja) 2012-06-27 2017-09-27 エフ．ホフマン−ラ ロシュ アーゲーＦ． Ｈｏｆｆｍａｎｎ−Ｌａ Ｒｏｃｈｅ Ａｋｔｉｅｎｇｅｓｅｌｌｓｃｈａｆｔ 少なくとも２つの異なる結合実体を含む、テーラーメイドの高度に選択的かつ多重特異的なターゲティング実体を選択および作製するための方法、ならびにその使用
WO2014004549A2 (en) 2012-06-27 2014-01-03 Amgen Inc. Anti-mesothelin binding proteins
EP2867254B1 (en) 2012-06-27 2017-10-25 F. Hoffmann-La Roche AG Method for making antibody fc-region conjugates comprising at least one binding entity that specifically binds to a target and uses thereof
AR091649A1 (es) 2012-07-02 2015-02-18 Bristol Myers Squibb Co Optimizacion de anticuerpos que se fijan al gen de activacion de linfocitos 3 (lag-3) y sus usos
RU2684595C2 (ru) 2012-07-04 2019-04-09 Ф.Хоффманн-Ля Рош Аг Ковалентно связанные конъюгаты антиген-антитело
CA2872192A1 (en) 2012-07-04 2014-01-09 F. Hoffmann-La Roche Ag Anti-biotin antibodies and methods of use
EP3138578B1 (en) 2012-07-04 2022-01-12 F. Hoffmann-La Roche AG Anti-theophylline antibodies and methods of use
CN110042114B (zh) 2012-07-05 2024-09-10 弗·哈夫曼-拉罗切有限公司 表达和分泌系统
IN2014DN10510A (pl) 2012-07-09 2015-08-21 Genentech Inc
US20140030280A1 (en) 2012-07-09 2014-01-30 Genentech, Inc. Anti-cd79b antibodies and immunoconjugates
CN104428007B (zh) 2012-07-09 2018-03-16 基因泰克公司 包含抗cd22抗体的免疫缀合物
TW201408697A (zh) 2012-07-09 2014-03-01 Genentech Inc 抗ｃｄ７９ｂ抗體及免疫結合物
TW201402608A (zh) 2012-07-12 2014-01-16 Abbvie Inc Ｉｌ－１結合蛋白質
DK3495387T3 (da) 2012-07-13 2021-11-08 Roche Glycart Ag Bispecifikke anti-VEGF-/anti-ANG-2-antistoffer og deres anvendelse ved behandling af okulære vaskulære sygdomme
CN104394887A (zh) 2012-07-18 2015-03-04 葛莱高托普有限公司 采用具有低岩藻糖化的抗her2抗体的新治疗性疗法
NZ731881A (en) 2012-07-25 2022-07-29 Celldex Therapeutics Inc Anti-kit antibodies and uses thereof
EP3434695B1 (en) 2012-08-07 2020-12-02 Roche Glycart AG Improved immunotherapy
KR102036262B1 (ko) 2012-08-29 2019-10-24 에프. 호프만-라 로슈 아게 혈액 뇌 장벽 셔틀
HK1211981A1 (en) 2012-09-02 2016-06-03 Abbvie Inc. Methods to control protein heterogeneity
US9512214B2 (en) 2012-09-02 2016-12-06 Abbvie, Inc. Methods to control protein heterogeneity
CA2884704C (en) 2012-09-07 2023-04-04 Randolph J. Noelle Vista modulators for diagnosis and treatment of cancer
JOP20200308A1 (ar) 2012-09-07 2017-06-16 Novartis Ag جزيئات إرتباط il-18
TW201811825A (zh) 2012-11-01 2018-04-01 美商艾伯維有限公司 抗-ｖｅｇｆ／ｄｌｌ４雙重可變區域免疫球蛋白及其用途
EP4223770A3 (en) 2012-11-05 2023-10-18 Foundation Medicine, Inc. Novel fusion molecules and uses thereof
HK1214830A1 (zh) 2012-11-05 2016-08-05 Foundation Medicine, Inc. 新型ntrk1融合分子及其应用
CA2884431A1 (en) 2012-11-08 2014-05-15 F. Hoffmann-La Roche Ag Her3 antigen binding proteins binding to the beta-hairpin of her3
CA2890669A1 (en) 2012-11-13 2014-05-22 Genetech, Inc. Anti-hemagglutinin antibodies and methods of use
EP2733153A1 (en) 2012-11-15 2014-05-21 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods for the preparation of immunoconjugates and uses thereof
WO2014084859A1 (en) 2012-11-30 2014-06-05 Novartis Ag Molecules and methods for modulating tmem16a activities
DK2925350T3 (da) 2012-12-03 2019-05-13 Bristol Myers Squibb Co Øgning af virksomheden mod cancer af immunomodulatoriske fc- fusionsproteiner
EP3851454A1 (en) 2012-12-05 2021-07-21 Novartis AG Compositions and methods for antibodies targeting epo
WO2014100542A1 (en) 2012-12-21 2014-06-26 Abbvie, Inc. High-throughput antibody humanization
KR20150097688A (ko) 2012-12-21 2015-08-26 에프. 호프만-라 로슈 아게 디술피드-연결 다가 ｍｈｃ 클래스 ｉ 포함 다관능 단백질
EP2938636A2 (en) 2012-12-28 2015-11-04 AbbVie Inc. High-throughput system and method for identifying antibodies having specific antigen binding activities
EP2938633B1 (en) 2012-12-28 2018-02-07 Precision Biologics, Inc. Humanized monoclonal antibodies and methods of use for the diagnosis and treatment of colon and pancreas cancer
US9458244B2 (en) 2012-12-28 2016-10-04 Abbvie Inc. Single chain multivalent binding protein compositions and methods
MX360155B (es) 2013-01-02 2018-10-24 Glenmark Pharmaceuticals Sa Anticuerpos que se unen al ligando 1a tipo tnf y sus usos.
KR20220156667A (ko) 2013-01-10 2022-11-25 젠맵 비. 브이 인간 IgG1 Fc 영역 변이체 및 그의 용도
AR094403A1 (es) 2013-01-11 2015-07-29 Hoffmann La Roche Terapia de combinación de anticuerpos anti-her3
US9605084B2 (en) 2013-03-15 2017-03-28 Xencor, Inc. Heterodimeric proteins
US9701759B2 (en) 2013-01-14 2017-07-11 Xencor, Inc. Heterodimeric proteins
US10487155B2 (en) 2013-01-14 2019-11-26 Xencor, Inc. Heterodimeric proteins
AU2014205086B2 (en) 2013-01-14 2019-04-18 Xencor, Inc. Novel heterodimeric proteins
US11053316B2 (en) 2013-01-14 2021-07-06 Xencor, Inc. Optimized antibody variable regions
US9738722B2 (en) 2013-01-15 2017-08-22 Xencor, Inc. Rapid clearance of antigen complexes using novel antibodies
AU2014207342C1 (en) 2013-01-18 2019-04-04 Foundation Medicine, Inc. Methods of treating cholangiocarcinoma
WO2014116596A1 (en) 2013-01-22 2014-07-31 Abbvie, Inc. Methods for optimizing domain stability of binding proteins
WO2014116749A1 (en) 2013-01-23 2014-07-31 Genentech, Inc. Anti-hcv antibodies and methods of using thereof
BR112015017338B1 (pt) 2013-02-08 2022-11-29 Novartis Ag Anticorpo humano terapêutico isolado ou sua porção de ligação ao antígeno do mesmo, seu uso e seu processo de produção, composição farmacêutica, molécula de ácido nucleico isolada, vetor de clonagem ou de expressão e micro-organismo transgênico
DK2953976T3 (da) 2013-02-08 2021-06-21 Novartis Ag Specifikke modificeringssteder i antistoffer til fremstilling af immunkonjugater
WO2015198217A2 (en) 2013-02-08 2015-12-30 Novartis Ag Compositions and methods for long-acting antibodies targeting il-17
WO2014124258A2 (en) 2013-02-08 2014-08-14 Irm Llc Specific sites for modifying antibodies to make immunoconjugates
US10034921B2 (en) 2013-02-13 2018-07-31 Laboratoire Français Du Fractionnement Et Des Biotechnologies Proteins with modified glycosylation and methods of production thereof
BR112015019341A2 (pt) 2013-02-13 2017-08-22 Lab Francais Du Fractionnement Anticorpo anti-tnf-alfa, composição que compreende o anticorpo, método para produzir uma população de anticorpos, células epiteliais da glândula mamária, mamífero não humano transgênico, e, composição de anticorpo anti-tnf monoclonal
ES2747920T3 (es) 2013-02-14 2020-03-12 Innate Pharma Anticuerpo anti-NKP46 para diagnóstico de un linfoma de células T periféricas no cutáneo (PTCL)
ES2878749T3 (es) 2013-02-20 2021-11-19 Innate Pharma Un compuesto que se une específicamente a KIR3DL2 para el uso en el tratamiento de linfoma de células T periférico
JP2016509045A (ja) 2013-02-22 2016-03-24 エフ・ホフマン−ラ・ロシュ・アクチェンゲゼルシャフト がんを治療し、薬剤耐性を防止する方法
WO2014131715A1 (en) 2013-02-26 2014-09-04 Roche Glycart Ag Anti-mcsp antibodies
US9487587B2 (en) 2013-03-05 2016-11-08 Macrogenics, Inc. Bispecific molecules that are immunoreactive with immune effector cells of a companion animal that express an activating receptor and cells that express B7-H3 and uses thereof
WO2014138449A1 (en) 2013-03-06 2014-09-12 Merrimack Pharmaceuticals, Inc. Anti-c-met tandem fc bispecific antibodies
JP2016510751A (ja) 2013-03-06 2016-04-11 ジェネンテック， インコーポレイテッド 抗がん剤耐性を治療及び予防する方法
SG11201507230PA (en) 2013-03-12 2015-10-29 Abbvie Inc Human antibodies that bind human tnf-alpha and methods of preparing the same
US9498532B2 (en) 2013-03-13 2016-11-22 Novartis Ag Antibody drug conjugates
EP2968565A2 (en) 2013-03-14 2016-01-20 Genentech, Inc. Methods of treating cancer and preventing cancer drug resistance
CN105246916A (zh) 2013-03-14 2016-01-13 诺华股份有限公司 针对notch 3的抗体
LT2968520T (lt) 2013-03-14 2021-09-27 Macrogenics, Inc. Bispecifinės molekulės, kurios yra imunoreaktyvios imuninių efektorių ląstelėms, kurios ekspresuoja aktyvuojantį receptorių
US8921526B2 (en) 2013-03-14 2014-12-30 Abbvie, Inc. Mutated anti-TNFα antibodies and methods of their use
EP2968540A2 (en) 2013-03-14 2016-01-20 Genentech, Inc. Combinations of a mek inhibitor compound with an her3/egfr inhibitor compound and methods of use
CN105189552B (zh) 2013-03-14 2019-08-02 基因泰克公司 抗b7-h4抗体和免疫缀合物
CN113549148B (zh) 2013-03-14 2025-11-21 雅培制药有限公司 Hcv核心脂质结合结构域单克隆抗体
WO2014151878A2 (en) 2013-03-14 2014-09-25 Abbvie Inc. Methods for modulating protein glycosylation profiles of recombinant protein therapeutics using monosaccharides and oligosacharides
JP6505076B2 (ja) 2013-03-14 2019-04-24 アボット・ラボラトリーズＡｂｂｏｔｔ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ Ｈｃｖ抗原−抗体組み合わせアッセイおよびこれに使用するための方法および組成物
US9562099B2 (en) 2013-03-14 2017-02-07 Genentech, Inc. Anti-B7-H4 antibodies and immunoconjugates
US9017687B1 (en) 2013-10-18 2015-04-28 Abbvie, Inc. Low acidic species compositions and methods for producing and using the same using displacement chromatography
US9790478B2 (en) 2013-03-14 2017-10-17 Abbott Laboratories HCV NS3 recombinant antigens and mutants thereof for improved antibody detection
JP6568514B2 (ja) 2013-03-15 2019-08-28 エーシー イミューン エス．エー． 抗タウ抗体及び使用方法
US10858417B2 (en) 2013-03-15 2020-12-08 Xencor, Inc. Heterodimeric proteins
EP2970921B1 (en) 2013-03-15 2018-09-19 aTyr Pharma, Inc. Histidyl-trna synthetase-fc conjugates
CN105142668B (zh) 2013-03-15 2018-04-27 达纳-法伯癌症研究院公司 治疗性肽
CA2904448A1 (en) 2013-03-15 2014-09-18 Tariq Ghayur Dual specific binding proteins directed against il-1.beta. and/or il-17
EP3514178A1 (en) 2013-03-15 2019-07-24 Novartis AG Antibody drug conjugates
US9260527B2 (en) 2013-03-15 2016-02-16 Sdix, Llc Anti-human CXCR4 antibodies and methods of making same
JP2016517441A (ja) 2013-03-15 2016-06-16 ジェネンテック， インコーポレイテッド 抗ＣＲＴｈ２抗体及び使用方法
CN105143252A (zh) 2013-03-15 2015-12-09 豪夫迈·罗氏有限公司 IL-22多肽和IL-22Fc融合蛋白及其使用方法
WO2014145907A1 (en) 2013-03-15 2014-09-18 Xencor, Inc. Targeting t cells with heterodimeric proteins
CN105339001A (zh) 2013-03-15 2016-02-17 基因泰克公司 治疗癌症和预防癌症耐药性的方法
US10450361B2 (en) 2013-03-15 2019-10-22 Momenta Pharmaceuticals, Inc. Methods related to CTLA4-Fc fusion proteins
HK1211963A1 (en) 2013-03-15 2016-06-03 豪夫迈．罗氏有限公司 Compositions and methods for diagnosis and treatment of hepatic cancers
WO2014143739A2 (en) 2013-03-15 2014-09-18 Biogen Idec Ma Inc. Anti-alpha v beta 6 antibodies and uses thereof
RU2680267C2 (ru) 2013-03-15 2019-02-19 Мемориал Слоан Кеттеринг Кэнсер Сентер Высокоаффинные антитела к gd2
WO2014151006A2 (en) 2013-03-15 2014-09-25 Genentech, Inc. Biomarkers and methods of treating pd-1 and pd-l1 related conditions
WO2014144466A1 (en) 2013-03-15 2014-09-18 Biogen Idec Ma Inc. Anti-alpha v beta 6 antibodies and uses thereof
US10106624B2 (en) 2013-03-15 2018-10-23 Xencor, Inc. Heterodimeric proteins
KR20150128796A (ko) 2013-03-15 2015-11-18 바이오젠 엠에이 인코포레이티드 항-알파 v 베타 5개 항체를 이용한 급성 신장 손상의 치료 및 예방
UA118028C2 (uk) 2013-04-03 2018-11-12 Рош Глікарт Аг Біспецифічне антитіло, специфічне щодо fap і dr5, антитіло, специфічне щодо dr5, і спосіб їх застосування
AU2014257650A1 (en) 2013-04-22 2015-11-12 Glycotope Gmbh Anti-cancer treatments with anti-EGFR antibodies having a low fucosylation
JP6618893B2 (ja) 2013-04-29 2019-12-11 エフ．ホフマン−ラ ロシュ アーゲーＦ． Ｈｏｆｆｍａｎｎ−Ｌａ Ｒｏｃｈｅ Ａｋｔｉｅｎｇｅｓｅｌｌｓｃｈａｆｔ Ｆｃ受容体結合が変更された非対称抗体および使用方法
WO2014177461A1 (en) 2013-04-29 2014-11-06 F. Hoffmann-La Roche Ag Fcrn-binding abolished anti-igf-1r antibodies and their use in the treatment of vascular eye diseases
PE20151807A1 (es) 2013-04-29 2015-12-02 Hoffmann La Roche Anticuerpos modificados de union a fcrn humano y metodo de utilizacion
US10464996B2 (en) 2013-05-13 2019-11-05 Momenta Pharmaceuticals, Inc. Methods for the treatment of neurodegeneration
HRP20240107T1 (hr) 2013-05-20 2024-04-12 F. Hoffmann - La Roche Ag Protutijela na transferinski receptor i postupci uporabe
CN105358574B (zh) 2013-05-31 2020-10-16 基因泰克公司 抗壁磷壁酸抗体和缀合物
BR112015029788B1 (pt) 2013-05-31 2024-01-02 Zymeworks Inc HETERO-MULTÍMERO, USO E MÉTODO PARA PREPARAR DO MESMO, COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA E MÉTODO PARA REDUZIR FUNÇÃO EFETORA DE UM CONSTRUTO IgG FC
CA2910029A1 (en) 2013-05-31 2014-12-04 Genentech, Inc. Anti-wall teichoic antibodies and conjugates
US9562101B2 (en) 2013-06-21 2017-02-07 Novartis Ag Lectin-like oxidized LDL receptor 1 antibodies and methods of use
AR096601A1 (es) 2013-06-21 2016-01-20 Novartis Ag Anticuerpos del receptor 1 de ldl oxidado similar a lectina y métodos de uso
TW201534726A (zh) 2013-07-03 2015-09-16 Halozyme Inc 熱穩定ｐｈ２０玻尿酸酶變異體及其用途
AU2014290361B2 (en) 2013-07-18 2019-04-18 Taurus Biosciences, Llc Humanized antibodies with ultralong complementarity determining regions
EP3022224A2 (en) 2013-07-18 2016-05-25 Fabrus, Inc. Antibodies with ultralong complementarity determining regions
ES2719103T3 (es) 2013-08-01 2019-07-08 Five Prime Therapeutics Inc Anticuerpos anti-FGFR2IIIB afucosilados
JP6463359B2 (ja) 2013-08-12 2019-01-30 ジェネンテック， インコーポレイテッド 補体関連病態を治療するための組成物及び方法
BR112016002198A2 (pt) 2013-08-14 2017-09-12 Novartis Ag métodos de tratamento de miosite por corpos de inclusão esporádica
AU2014312190A1 (en) 2013-08-28 2016-02-18 Bioasis Technologies Inc. CNS-targeted conjugates of antibodies
JP2016537399A (ja) 2013-09-17 2016-12-01 ジェネンテック， インコーポレイテッド 抗ｌｇｒ５抗体を使用する方法
EP3050896B1 (en) 2013-09-27 2021-07-07 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Method for producing polypeptide heteromultimer
WO2015050959A1 (en) 2013-10-01 2015-04-09 Yale University Anti-kit antibodies and methods of use thereof
EP3733244A1 (en) 2013-10-02 2020-11-04 Medlmmune, LLC Neutralizing anti-influenza a antibodies and uses thereof
US9598667B2 (en) 2013-10-04 2017-03-21 Abbvie Inc. Use of metal ions for modulation of protein glycosylation profiles of recombinant proteins
AU2014331667B2 (en) 2013-10-11 2019-08-22 Biomed Valley Discoveries, Inc. TEM8 antibodies and their use
CN105814078A (zh) 2013-10-11 2016-07-27 豪夫迈·罗氏有限公司 Nsp4抑制剂及其使用方法
RU2016115866A (ru) 2013-10-11 2017-11-16 Ф. Хоффманн-Ля Рош Аг Мультиспецифические антитела с обменянными доменами и одинаковыми вариабельными доменами легкой цепи
EP3058084A4 (en) 2013-10-16 2017-07-05 Momenta Pharmaceuticals, Inc. Sialylated glycoproteins
US9085618B2 (en) 2013-10-18 2015-07-21 Abbvie, Inc. Low acidic species compositions and methods for producing and using the same
US9181337B2 (en) 2013-10-18 2015-11-10 Abbvie, Inc. Modulated lysine variant species compositions and methods for producing and using the same
MX2016004802A (es) 2013-10-18 2016-07-18 Genentech Inc Anticuerpos anti-r-espondina (anti-rspo) y metodos de uso.
WO2015057939A1 (en) 2013-10-18 2015-04-23 Biogen Idec Ma Inc. Anti-s1p4 antibodies and uses thereof
US8946395B1 (en) 2013-10-18 2015-02-03 Abbvie Inc. Purification of proteins using hydrophobic interaction chromatography
AR098155A1 (es) 2013-10-23 2016-05-04 Genentech Inc Métodos para diagnosticar y tratar trastornos eosinofílicos
CN105849125B (zh) 2013-11-07 2020-05-15 国家医疗保健研究所 神经调节蛋白变构抗her3抗体
US20150139988A1 (en) 2013-11-15 2015-05-21 Abbvie, Inc. Glycoengineered binding protein compositions
RU2718990C1 (ru) 2013-11-21 2020-04-15 Ф. Хоффманн-Ля Рош Аг Антитела к альфа-синуклеину и способы применения
WO2015082446A1 (en) 2013-12-02 2015-06-11 F. Hoffmann-La Roche Ag Treatment of cancer using an anti-cdcp1 antibody and a taxane
MX371187B (es) 2013-12-06 2020-01-22 Dana Farber Cancer Inst Inc Péptidos terapéuticos.
AU2014363944B2 (en) 2013-12-09 2020-03-26 Allakos Inc. Anti-Siglec-8 antibodies and methods of use thereof
CN106030310B (zh) 2013-12-13 2019-01-04 通用医疗公司 可溶性高分子量(hmw)tau种类及其应用
PE20160712A1 (es) 2013-12-13 2016-07-26 Genentech Inc Anticuerpos e inmunoconjugados anti-cd33
CN112353943A (zh) 2013-12-17 2021-02-12 豪夫迈·罗氏有限公司 用pd-1轴结合拮抗剂和紫杉烷治疗癌症的方法
JP2017501167A (ja) 2013-12-17 2017-01-12 ジェネンテック， インコーポレイテッド Ｏｘ４０結合アゴニスト及びｐｄ−１軸結合アンタゴニストを含む併用療法
HRP20240939T1 (hr) 2013-12-17 2024-10-25 Genentech, Inc. Anti-cd3 protutijela i metode uporabe
WO2015095410A1 (en) 2013-12-17 2015-06-25 Genentech, Inc. Methods of treating cancer using pd-1 axis binding antagonists and an anti-cd20 antibody
TWI728373B (zh) 2013-12-23 2021-05-21 美商建南德克公司 抗體及使用方法
US11014987B2 (en) 2013-12-24 2021-05-25 Janssen Pharmaceutics Nv Anti-vista antibodies and fragments, uses thereof, and methods of identifying same
AU2014372309C1 (en) 2013-12-24 2017-12-14 Janssen Pharmaceutica Nv Anti-VISTA antibodies and fragments
CA2930154A1 (en) 2014-01-03 2015-07-09 F. Hoffmann-La Roche Ag Covalently linked helicar-anti-helicar antibody conjugates and uses thereof
EP3089759B1 (en) 2014-01-03 2018-12-05 F. Hoffmann-La Roche AG Covalently linked polypeptide toxin-antibody conjugates
WO2015101586A1 (en) 2014-01-03 2015-07-09 F. Hoffmann-La Roche Ag Bispecific anti-hapten/anti-blood brain barrier receptor antibodies, complexes thereof and their use as blood brain barrier shuttles
WO2015103549A1 (en) 2014-01-03 2015-07-09 The United States Of America, As Represented By The Secretary Department Of Health And Human Services Neutralizing antibodies to hiv-1 env and their use
JP6557664B2 (ja) 2014-01-06 2019-08-07 エフ．ホフマン−ラ ロシュ アーゲーＦ． Ｈｏｆｆｍａｎｎ−Ｌａ Ｒｏｃｈｅ Ａｋｔｉｅｎｇｅｓｅｌｌｓｃｈａｆｔ 一価の血液脳関門シャトルモジュール
CA2931986A1 (en) 2014-01-15 2015-07-23 F. Hoffmann-La Roche Ag Fc-region variants with modified fcrn- and maintained protein a-binding properties
WO2015110923A2 (en) 2014-01-21 2015-07-30 Acerta Pharma B.V. Methods of treating chronic lymphocytic leukemia and small lymphocytic leukemia usng a btk inhibitor
JP2017505305A (ja) 2014-01-24 2017-02-16 ジェネンテック， インコーポレイテッド 抗ｓｔｅａｐ１抗体及びイムノコンジュゲートを使用する方法
EP3102197B1 (en) 2014-02-04 2018-08-29 Genentech, Inc. Mutant smoothened and methods of using the same
ES2873248T3 (es) 2014-02-08 2021-11-03 Hoffmann La Roche Métodos para tratar la enfermedad de Alzheimer
KR20160111039A (ko) 2014-02-08 2016-09-23 제넨테크, 인크. 알츠하이머 질환을 치료하는 방법
TR201810635T4 (tr) 2014-02-12 2018-08-27 Hoffmann La Roche Anti-jagged1 antikorları ve kullanım yöntemleri.
SG11201606714TA (en) 2014-02-14 2016-09-29 Andrew S Chi Improved methods for the treatment of vascularizing cancers
KR20160124165A (ko) 2014-02-21 2016-10-26 제넨테크, 인크. 항-il-13/il-17 이중특이적 항체 및 그의 용도
TWI558399B (zh) 2014-02-26 2016-11-21 美國禮來大藥廠 癌症之組合療法
DK3110446T3 (da) 2014-02-28 2022-02-28 Allakos Inc Fremgangsmåder og sammensætninger til behandling af Siglec-8-associerede sygdomme
TW201622744A (zh) 2014-03-04 2016-07-01 美國禮來大藥廠 癌症之組合療法
EP3129407A2 (en) 2014-03-12 2017-02-15 Novartis Ag Specific sites for modifying antibodies to make immunoconjugates
RU2684703C2 (ru) 2014-03-14 2019-04-11 Иннейт Фарма Гуманизированные антитела с повышенной стабильностью
EP3116999B1 (en) 2014-03-14 2021-09-15 F. Hoffmann-La Roche AG Methods and compositions for secretion of heterologous polypeptides
CN106456728A (zh) 2014-03-14 2017-02-22 达纳－法伯癌症研究所公司 恢复对抗癌症的nkg2d通路功能的疫苗组合物和方法
SG11201607746QA (en) 2014-03-21 2016-10-28 Abbvie Inc Anti-egfr antibodies and antibody drug conjugates
US20170107294A1 (en) 2014-03-21 2017-04-20 Nordlandssykehuset Hf Anti-cd14 antibodies and uses thereof
EP3119490B1 (en) 2014-03-21 2021-09-08 F. Hoffmann-La Roche AG In vitro prediction of in vivo half-life of antibodies
CA2943329A1 (en) 2014-03-24 2015-10-01 Genentech, Inc. Cancer treatment with c-met antagonists and correlation of the latter with hgf expression
JP6775422B2 (ja) 2014-03-28 2020-10-28 ゼンコー・インコーポレイテッドＸｅｎｃｏｒ、 Ｉｎｃ． Ｃｄ３８及びｃｄ３に結合する二重特異性抗体
CA2943834A1 (en) 2014-03-31 2015-10-08 Genentech, Inc. Combination therapy comprising anti-angiogenesis agents and ox40 binding agonists
CN106103486B (zh) 2014-03-31 2020-04-21 豪夫迈·罗氏有限公司 抗ox40抗体和使用方法
UA117289C2 (uk) 2014-04-02 2018-07-10 Ф. Хоффманн-Ля Рош Аг Мультиспецифічне антитіло
MX2016012873A (es) 2014-04-04 2017-03-07 Bionomics Inc Anticuerpos humanizados que se unen al receptor 5 acoplado a proteina g que contiene repeticion rica en leucina (lgr5).
TWI726842B (zh) 2014-04-07 2021-05-11 日商中外製藥股份有限公司 免疫活化抗原結合分子
KR20160143808A (ko) 2014-04-11 2016-12-14 메디뮨 엘엘씨 이중특이적 her2 항체
WO2015164615A1 (en) 2014-04-24 2015-10-29 University Of Oslo Anti-gluten antibodies and uses thereof
TW201622746A (zh) 2014-04-24 2016-07-01 諾華公司 改善或加速髖部骨折術後身體復原之方法
SG11201609370QA (en) 2014-05-13 2016-12-29 Chugai Pharmaceutical Co Ltd T cell-redirected antigen-binding molecule for cells having immunosuppression function
KR20170003582A (ko) 2014-05-22 2017-01-09 제넨테크, 인크. 항-gpc3 항체 및 면역접합체
JP2017524371A (ja) 2014-05-23 2017-08-31 ジェネンテック， インコーポレイテッド Ｍｉｔバイオマーカーとその使用方法
AP2016009586A0 (en) 2014-05-29 2016-11-30 Macrogenics Inc Tri-specific binding molecules and methods of use thereof
SMT201900745T1 (it) 2014-05-30 2020-01-14 Henlix Biotech Co Ltd Anticopri anti-recettore del fattore di crescita epidermico (egfr)
PT3151921T (pt) 2014-06-06 2019-11-21 Bristol Myers Squibb Co Anticorpos contra recetor do fator de necrose tumoral induzido por glicocorticoide e utilizações dos mesmos
MX389695B (es) 2014-06-11 2025-03-20 Kathy A Green Uso de agonistas y antagonistas vista para suprimir o aumentar la inmunidad humoral.
CA2949982A1 (en) 2014-06-11 2015-12-17 Genentech, Inc. Anti-lgr5 antibodies and uses thereof
CN107073121A (zh) 2014-06-13 2017-08-18 基因泰克公司 治疗及预防癌症药物抗性的方法
EP3164419B1 (en) 2014-06-26 2024-07-24 F. Hoffmann-La Roche AG Anti-brdu antibodies and methods of use
AU2015279316B2 (en) 2014-06-27 2021-03-04 Innate Pharma Multispecific NKp46 binding proteins
JP6702893B2 (ja) 2014-06-27 2020-06-03 イナート・ファルマ・ソシエテ・アノニムＩｎｎａｔｅ Ｐｈａｒｍａ Ｐｈａｒｍａ Ｓ．Ａ． 多重特異的抗原結合タンパク質
WO2016007775A1 (en) 2014-07-11 2016-01-14 Genentech, Inc. Notch pathway inhibition
RU2715038C2 (ru) 2014-07-11 2020-02-21 Дженентек, Инк. Антитела анти-pd-l1 и способы их диагностического применения
EP3172333B1 (en) 2014-07-21 2020-05-13 Glykos Finland Oy Production of glycoproteins with mammalian-like n-glycans in filamentous fungi
US10786578B2 (en) 2014-08-05 2020-09-29 Novartis Ag CKIT antibody drug conjugates
TW201613977A (en) 2014-08-07 2016-04-16 Novartis Ag Angiopoetin-like 4 (ANGPTL4) antibodies and methods of use
EP3177642B1 (en) 2014-08-07 2021-11-24 Novartis AG Angiopoietin-like 4 antibodies and methods of use
TW201609099A (zh) 2014-08-11 2016-03-16 艾森塔製藥公司 使用布魯頓（Ｂｒｕｔｏｎ）氏酪胺酸激酶（ＢＴＫ）抑制劑以治療慢性淋巴球性白血病和小淋巴球性白血病之方法
SI3179992T1 (sl) 2014-08-11 2022-09-30 Acerta Pharma B.V. Terapevtske kombinacije zaviralca BTK, zaviralca PD-1 in/ali zaviralca PD-L1
EA201790334A1 (ru) 2014-08-12 2017-06-30 Новартис Аг Конъюгаты анти-cdh6 антитела с лекарственным средством
WO2016030488A1 (en) 2014-08-27 2016-03-03 Innate Pharma Treatment of celiac disease
TWI805109B (zh) 2014-08-28 2023-06-11 美商奇諾治療有限公司 對cd19具專一性之抗體及嵌合抗原受體
DK4074735T3 (da) 2014-08-28 2025-07-14 Bioatla Inc Betinget aktive kimæriske antigenreceptorer til modificerede t-celler
USD791796S1 (en) * 2014-09-11 2017-07-11 Express Scripts, Inc. Display screen with a graphical user interface
USD791797S1 (en) * 2014-09-11 2017-07-11 Express Scripts, Inc. Display screen with a graphical user interface
MX2017003126A (es) 2014-09-12 2017-08-28 Genentech Inc Anticuerpos anti-her2 e inmunoconjugados.
SG11201701627PA (en) 2014-09-12 2017-03-30 Genentech Inc Anti-cll-1 antibodies and immunoconjugates
CN113698485A (zh) 2014-09-12 2021-11-26 基因泰克公司 抗-b7-h4抗体及免疫缀合物
RU2727663C2 (ru) 2014-09-17 2020-07-22 Дженентек, Инк. Иммуноконъюгаты, содержащие антитела против her2 и пирролбензодиазепины
RS60349B8 (sr) 2014-09-23 2022-10-31 Hoffmann La Roche Postupak upotrebe anti-cd79b imunokonjugata
MA40764A (fr) 2014-09-26 2017-08-01 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Agent thérapeutique induisant une cytotoxicité
TWI700300B (zh) 2014-09-26 2020-08-01 日商中外製藥股份有限公司 中和具有第ｖｉｉｉ凝血因子（ｆｖｉｉｉ）機能替代活性的物質之抗體
TWI701435B (zh) 2014-09-26 2020-08-11 日商中外製藥股份有限公司 測定ｆｖｉｉｉ的反應性之方法
MX386297B (es) 2014-09-29 2025-03-18 Univ Duke Moleculas biespecificas que comprenden un brazo orientado a la envoltura vih-1.
CA2963470A1 (en) 2014-10-03 2016-04-07 Massachusetts Institute Of Technology Antibodies that bind ebola glycoprotein and uses thereof
MA41044A (fr) 2014-10-08 2017-08-15 Novartis Ag Compositions et procédés d'utilisation pour une réponse immunitaire accrue et traitement contre le cancer
JP2017536102A (ja) 2014-10-16 2017-12-07 ジェネンテック， インコーポレイテッド 抗アルファ−シヌクレイン抗体及び使用方法
MA41480A (fr) 2014-10-17 2017-12-19 Glenmark Pharmaceuticals Sa Anticorps qui se lient au ccr6 et leurs utilisations
EP3209687A1 (en) 2014-10-23 2017-08-30 Innate Pharma Treatment of cancers using anti-nkg2a agents
EP3223865A4 (en) 2014-10-31 2018-10-03 Jounce Therapeutics, Inc. Methods of treating conditions with antibodies that bind b7-h4
RU2017119231A (ru) 2014-11-03 2018-12-06 Дженентек, Инк. Способы и биомаркеры для прогнозирования эффективности и оценки лечения агонистом ох40
KR20170086540A (ko) 2014-11-03 2017-07-26 제넨테크, 인크. T 세포 면역 하위세트를 검출하기 위한 검정 및 그의 사용 방법
MX2017003478A (es) 2014-11-05 2018-02-01 Genentech Inc Anticuerpos anti-fgfr2/3 y metodos para su uso.
PL3215528T3 (pl) 2014-11-06 2020-01-31 F.Hoffmann-La Roche Ag Warianty regionu Fc ze zmodyfikowanym wiązaniem FcRn i sposoby stosowania
RU2017119428A (ru) 2014-11-06 2018-12-06 Дженентек, Инк. Комбинированная терапия, включающая применение агонистов, связывающихся с ох40, и ингибиторов tigit
BR112017006591A2 (pt) 2014-11-06 2018-01-16 Hoffmann La Roche polipeptídeo heterodimérico, formulação farmacêutica e uso de um polipeptídeo heterodimérico
US10093730B2 (en) 2014-11-10 2018-10-09 Genentech, Inc. Anti-interleukin-33 antibodies and uses thereof
WO2016077369A1 (en) 2014-11-10 2016-05-19 Genentech, Inc. Animal model for nephropathy and agents for treating the same
MX391388B (es) 2014-11-14 2025-03-21 Hoffmann La Roche Moléculas de unión a antígeno que comprenden un trímero de ligando de la familia de tnf.
EP3875481B1 (en) 2014-11-14 2025-01-22 The U.S.A. as represented by the Secretary, Department of Health and Human Services Neutralizing antibodies to ebola virus glycoprotein and their use
JP6831783B2 (ja) 2014-11-14 2021-02-17 ノバルティス アーゲー 抗体薬物コンジュゲート
US10752674B2 (en) 2014-11-15 2020-08-25 Zumutor Biologics Inc. DNA-binding domain of CRISPR system, non-fucosylated and partially fucosylated proteins, and methods thereof
KR20170096112A (ko) 2014-11-17 2017-08-23 제넨테크, 인크. Ox40 결합 효능제 및 pd-1 축 결합 길항제를 포함하는 조합 요법
WO2016081643A1 (en) 2014-11-19 2016-05-26 Genentech, Inc. Anti-transferrin receptor antibodies and methods of use
CN107108745B (zh) 2014-11-19 2021-01-12 基因泰克公司 抗bace1的抗体和其用于神经疾病免疫疗法的用途
SI3221349T1 (sl) 2014-11-19 2021-02-26 Axon Neuroscience Se Humanizirano tau protitelo pri alzheimerjevi bolezni
JP6993228B2 (ja) 2014-11-19 2022-03-03 ジェネンテック， インコーポレイテッド 抗トランスフェリン受容体／抗ｂａｃｅ１多重特異性抗体および使用方法
CN107206072B (zh) 2014-11-20 2022-01-21 豪夫迈·罗氏有限公司 T细胞活化性双特异性抗原结合分子CD3 ABD叶酸受体1(FolR1)和PD-1轴结合拮抗剂的组合疗法
EP3221346B1 (en) 2014-11-21 2020-09-02 Bristol-Myers Squibb Company Antibodies comprising modified heavy constant regions
UY36404A (es) 2014-11-21 2016-06-01 Bristol Myers Squibb Company Una Corporación Del Estado De Delaware ANTICUERPOS MONOCLONALES (Ab) COMO DETECTORES DE CD73 E INHIBIDORES DE SU ACTIVIDAD ENZIMÁTICA, Y COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN
US10259887B2 (en) 2014-11-26 2019-04-16 Xencor, Inc. Heterodimeric antibodies that bind CD3 and tumor antigens
US10526417B2 (en) 2014-11-26 2020-01-07 Xencor, Inc. Heterodimeric antibodies that bind CD3 and CD38
AU2015353409B2 (en) 2014-11-26 2019-05-09 Xencor, Inc. Heterodimeric antibodies that bind CD3 and tumor antigens
WO2016090038A1 (en) 2014-12-03 2016-06-09 Genentech, Inc. Anti-staphylococcus aureus antibody rifamycin conjugates and uses thereof
WO2016090040A1 (en) 2014-12-03 2016-06-09 Genentech, Inc. Anti-staphylococcus aureus antibody rifamycin conjugates and uses thereof
JP6721590B2 (ja) 2014-12-03 2020-07-15 エフ．ホフマン−ラ ロシュ アーゲーＦ． Ｈｏｆｆｍａｎｎ−Ｌａ Ｒｏｃｈｅ Ａｋｔｉｅｎｇｅｓｅｌｌｓｃｈａｆｔ 多重特異性抗体
WO2016090347A1 (en) 2014-12-05 2016-06-09 Immunext, Inc. Identification of vsig8 as the putative vista receptor and its use thereof to produce vista/vsig8 modulators
PL3227336T3 (pl) 2014-12-05 2019-11-29 Hoffmann La Roche Przeciwciała anty-CD79b i sposoby stosowania
ES2764299T3 (es) 2014-12-09 2020-06-02 Inst Nat Sante Rech Med Anticuerpos monoclonales humanos contra AXL
KR20170085595A (ko) 2014-12-10 2017-07-24 제넨테크, 인크. 혈뇌 장벽 수용체 항체 및 사용 방법
US10093733B2 (en) 2014-12-11 2018-10-09 Abbvie Inc. LRP-8 binding dual variable domain immunoglobulin proteins
EP4600372A3 (en) 2014-12-19 2025-11-19 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Anti-myostatin antibodies, polypeptides containing variant fc regions, and methods of use
BR112017011235A2 (pt) 2014-12-19 2018-02-06 Chugai Pharmaceutical Co Ltd anticorpos anti-c5 e métodos de uso
DK3233912T3 (da) 2014-12-19 2021-08-02 Regenesance B V Antistoffer, der binder human c6, og anvendelser deraf
UY36449A (es) 2014-12-19 2016-07-29 Novartis Ag Composiciones y métodos para anticuerpos dirigidos a bmp6
EP3237449A2 (en) 2014-12-22 2017-11-01 Xencor, Inc. Trispecific antibodies
US10189902B2 (en) 2014-12-23 2019-01-29 Bristol-Myers Squibb Company Antibodies to TIGIT
JP6885867B2 (ja) 2014-12-31 2021-06-16 チェックメイト ファーマシューティカルズ， インコーポレイテッド 組合せ腫瘍免疫療法
US20160200815A1 (en) 2015-01-05 2016-07-14 Jounce Therapeutics, Inc. Antibodies that inhibit tim-3:lilrb2 interactions and uses thereof
CA2973964A1 (en) 2015-01-16 2016-07-21 Juno Therapeutics, Inc. Antibodies and chimeric antigen receptors specific for ror1
WO2016117346A1 (en) 2015-01-22 2016-07-28 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha A combination of two or more anti-c5 antibodies and methods of use
TWI688572B (zh) 2015-01-26 2020-03-21 美商宏觀基因股份有限公司 包含dr5-結合結構域的多價分子
JP2018506275A (ja) 2015-01-28 2018-03-08 ジェネンテック， インコーポレイテッド 多発性硬化症の遺伝子発現マーカー及び治療
HK1244512A1 (zh) 2015-02-04 2018-08-10 健泰科生物技术公司 突变型smoothened及其使用方法
CN114773469B (zh) 2015-02-05 2025-12-19 中外制药株式会社 包含离子浓度依赖性的抗原结合结构域的抗体，fc区变体，il-8-结合抗体及其应用
CA2976074A1 (en) 2015-02-09 2016-08-18 Memorial Sloan Kettering Cancer Center Multi-specific antibodies with affinity for human a33 antigen and dota metal complex and uses thereof
WO2016128912A1 (en) 2015-02-12 2016-08-18 Acerta Pharma B.V. Therapeutic combinations of a btk inhibitor, a pi3k inhibitor, a jak-2 inhibitor, a pd-1 inhibitor, and/or a pd-l1 inhibitor
HRP20221284T1 (hr) 2015-02-19 2022-12-23 Compugen Ltd. Anti-pvrig antitijela i postupci uporabe
DK3259597T3 (da) 2015-02-19 2022-05-09 Compugen Ltd Pvrig-polypeptider og fremgangsmåder til behandling
US10301377B2 (en) 2015-02-24 2019-05-28 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Middle east respiratory syndrome coronavirus immunogens, antibodies, and their use
WO2016135041A1 (en) 2015-02-26 2016-09-01 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Fusion proteins and antibodies comprising thereof for promoting apoptosis
US10227411B2 (en) 2015-03-05 2019-03-12 Xencor, Inc. Modulation of T cells with bispecific antibodies and FC fusions
WO2016149276A1 (en) 2015-03-16 2016-09-22 Genentech, Inc. Methods of detecting and quantifying il-13 and uses in diagnosing and treating th2-associated diseases
WO2016146833A1 (en) 2015-03-19 2016-09-22 F. Hoffmann-La Roche Ag Biomarkers for nad(+)-diphthamide adp ribosyltransferase resistance
EP3683233A1 (en) 2015-03-20 2020-07-22 The U.S.A. as represented by the Secretary, Department of Health and Human Services Neutralizing antibodies to gp120 and their use
CN114907481A (zh) 2015-03-23 2022-08-16 震动疗法股份有限公司 Icos的抗体
US10472412B2 (en) 2015-03-25 2019-11-12 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Bispecific multivalent fusion proteins
WO2016160976A2 (en) 2015-03-30 2016-10-06 Abbvie Inc. Monovalent tnf binding proteins
EP3279216A4 (en) 2015-04-01 2019-06-19 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha PROCESS FOR PREPARING POLYPEPTIDE HETERO OLIGOMER
CA2979732A1 (en) 2015-04-03 2016-10-06 Eureka Therapeutics, Inc. Constructs targeting afp peptide/mhc complexes and uses thereof
WO2016164637A1 (en) 2015-04-07 2016-10-13 Alector Llc Anti-sortilin antibodies and methods of use thereof
HRP20211159T1 (hr) 2015-04-24 2021-10-29 F. Hoffmann - La Roche Ag Postupci identifikacije bakterija koje sadrže vezujuće polipeptide
JP2018520642A (ja) 2015-05-01 2018-08-02 ジェネンテック， インコーポレイテッド マスク抗ｃｄ３抗体及びその使用方法
WO2016179194A1 (en) 2015-05-04 2016-11-10 Jounce Therapeutics, Inc. Lilra3 and method of using the same
EP3091033A1 (en) 2015-05-06 2016-11-09 Gamamabs Pharma Anti-human-her3 antibodies and uses thereof
HK1248577A1 (zh) 2015-05-11 2018-10-19 F. Hoffmann-La Roche Ag 治疗狼疮性肾炎的组合物和方法
IL295002A (en) 2015-05-12 2022-09-01 Genentech Inc Therapeutic and diagnostic methods for cancer containing a pd–l1 binding antagonist
JP6770533B2 (ja) 2015-05-22 2020-10-14 アンスティチュ ナショナル ドゥ ラ サンテ エ ドゥ ラ ルシェルシュ メディカル Ｃａｔｈ−Ｄの触媒活性と、そのＬＲＰ１レセプターへの結合との両方を阻害するヒトモノクローナル抗体フラグメント
WO2016196228A1 (en) 2015-05-29 2016-12-08 Bristol-Myers Squibb Company Antibodies against ox40 and uses thereof
HK1248773A1 (zh) 2015-05-29 2018-10-19 豪夫迈‧罗氏有限公司 用於癌症的治疗和诊断方法
HK1250723A1 (zh) 2015-05-29 2019-01-11 F. Hoffmann-La Roche Ag 人源化抗埃博拉病毒糖蛋白抗体和使用方法
EP3763827A1 (en) 2015-05-29 2021-01-13 F. Hoffmann-La Roche AG Pd-l1 promoter methylation in cancer
HUE048284T2 (hu) 2015-05-29 2020-07-28 Abbvie Inc Anti-CD40 antitestek és alkalmazásuk
EP3302552A1 (en) 2015-06-02 2018-04-11 H. Hoffnabb-La Roche Ag Compositions and methods for using anti-il-34 antibodies to treat neurological diseases
WO2016196975A1 (en) 2015-06-03 2016-12-08 The United States Of America, As Represented By The Secretary Department Of Health & Human Services Neutralizing antibodies to hiv-1 env and their use
CA2986080C (en) 2015-06-04 2023-12-05 Ospedale San Raffaele Srl Inhibitor of igfbp3 for the treatment of intestinal disorders
CA2988011C (en) 2015-06-04 2021-03-23 Ospedale San Raffaele Srl Inhibitor of igfbp3/tmem219 axis and diabetes
CR20180013A (es) 2015-06-05 2018-12-06 Ac Immune Sa Anticuerpos anti-tau y métodos de uso.
JP2018522540A (ja) 2015-06-05 2018-08-16 ノバルティス アーゲー 骨形成タンパク質９（ｂｍｐ９）を標的とする抗体およびそれらのための方法
EP3303397A1 (en) 2015-06-08 2018-04-11 H. Hoffnabb-La Roche Ag Methods of treating cancer using anti-ox40 antibodies and pd-1 axis binding antagonists
TWI773646B (zh) 2015-06-08 2022-08-11 美商宏觀基因股份有限公司 結合lag-3的分子和其使用方法
MX2017014740A (es) 2015-06-08 2018-08-15 Genentech Inc Métodos de tratamiento del cáncer con anticuerpos anti-ox40.
CA2988768A1 (en) 2015-06-09 2016-12-15 Memorial Sloan Kettering Cancer Center T cell receptor-like antibody agents specific for ebv latent membrane protein 2a peptide presented by human hla
TWI870335B (zh) 2015-06-12 2025-01-21 美商宏觀基因股份有限公司 變異的嵌合4d5抗體及其與抗pd-1抗體聯合用於治療癌症的應用
HK1255483A1 (zh) 2015-06-15 2019-08-16 基因泰克公司 抗体和免疫结合物
TW201710286A (zh) 2015-06-15 2017-03-16 艾伯維有限公司 抗ｖｅｇｆ、ｐｄｇｆ及／或其受體之結合蛋白
JP6871874B2 (ja) 2015-06-16 2021-05-19 ジェネンテック， インコーポレイテッド ＦｃＲＨ５に対するヒト化親和性成熟抗体及び使用方法
US10501545B2 (en) 2015-06-16 2019-12-10 Genentech, Inc. Anti-CLL-1 antibodies and methods of use
EP3310811B1 (en) 2015-06-16 2021-06-16 Genentech, Inc. Anti-cd3 antibodies and methods of use
HK1251493A1 (zh) 2015-06-17 2019-02-01 豪夫迈‧罗氏有限公司 使用pd-1轴结合拮抗剂和紫杉烷治疗局部晚期或转移性乳腺癌的方法
US20190194315A1 (en) 2015-06-17 2019-06-27 Novartis Ag Antibody drug conjugates
EP3310812B1 (en) 2015-06-17 2025-07-30 F. Hoffmann-La Roche AG Anti-her2 antibodies and methods of use
US10774145B2 (en) 2015-06-17 2020-09-15 Allakos Inc. Methods and compositions for treating fibrotic diseases
WO2016207278A1 (en) 2015-06-23 2016-12-29 Innate Pharma Multispecific nk engager proteins
CN107531788B (zh) 2015-06-24 2022-06-21 豪夫迈·罗氏有限公司 对her2和血脑屏障受体特异性的三特异性抗体及使用方法
EP3108897A1 (en) 2015-06-24 2016-12-28 F. Hoffmann-La Roche AG Antibodies against human csf-1r for use in inducing lymphocytosis in lymphomas or leukemias
CN120665195A (zh) 2015-06-24 2025-09-19 豪夫迈·罗氏有限公司 具有定制亲和力的抗转铁蛋白受体抗体
EP3722314A1 (en) 2015-06-24 2020-10-14 Janssen Pharmaceutica NV Anti-vista antibodies and fragments
JOP20200312A1 (ar) 2015-06-26 2017-06-16 Novartis Ag الأجسام المضادة للعامل xi وطرق الاستخدام
CN108473573A (zh) 2015-06-29 2018-08-31 豪夫迈·罗氏有限公司 Ii型抗cd20抗体用于器官移植中
ES2878316T3 (es) 2015-06-29 2021-11-18 Ventana Med Syst Inc Materiales y procedimientos para realizar ensayos histoquímicos de pro-epirregulina y anfirregulina humanas
FR3038517B1 (fr) 2015-07-06 2020-02-28 Laboratoire Francais Du Fractionnement Et Des Biotechnologies Utilisation de fragments fc modifies en immunotherapie
ES2896055T3 (es) 2015-07-13 2022-02-23 Compugen Ltd Composiciones de HIDE1 y métodos
GEAP202215554A (en) 2015-07-30 2022-06-10 Macrogenics Inc Pd-1-binding molecules and methods of use thereof
CN108350072B (zh) 2015-08-03 2022-05-24 诺华股份有限公司 治疗fgf21相关病症的方法
JP7026613B2 (ja) 2015-08-07 2022-02-28 イマジナブ・インコーポレーテッド 標的分子に対する抗原結合コンストラクト
CN105384825B (zh) 2015-08-11 2018-06-01 南京传奇生物科技有限公司 一种基于单域抗体的双特异性嵌合抗原受体及其应用
US20190008859A1 (en) 2015-08-21 2019-01-10 Acerta Pharma B.V. Therapeutic Combinations of a MEK Inhibitor and a BTK Inhibitor
EP3932953A1 (en) 2015-08-28 2022-01-05 F. Hoffmann-La Roche AG Anti-hypusine antibodies and uses thereof
EP3347377B1 (en) 2015-09-09 2021-02-17 Novartis AG Thymic stromal lymphopoietin (tslp)-binding antibodies and methods of using the antibodies
AU2016320748B2 (en) 2015-09-09 2019-05-02 Novartis Ag Thymic stromal lymphopoietin (TSLP)-binding antibodies and methods of using the antibodies
MA44909A (fr) 2015-09-15 2018-07-25 Acerta Pharma Bv Association thérapeutique d'un inhibiteur du cd19 et d'un inhibiteur de la btk
WO2017046746A1 (en) 2015-09-15 2017-03-23 Acerta Pharma B.V. Therapeutic combinations of a btk inhibitor and a gitr binding molecule, a 4-1bb agonist, or an ox40 agonist
US9862760B2 (en) 2015-09-16 2018-01-09 Novartis Ag Polyomavirus neutralizing antibodies
EP3353206A1 (en) 2015-09-22 2018-08-01 Spring Bioscience Corporation Anti-ox40 antibodies and diagnostic uses thereof
RU2763916C2 (ru) 2015-09-23 2022-01-11 Дженентек, Инк. Оптимизированные варианты анти-vegf антител
JP6955487B2 (ja) 2015-09-24 2021-10-27 アブビトロ， エルエルシー Ｈｉｖ抗体組成物および使用方法
HRP20241752T1 (hr) 2015-09-25 2025-02-28 F. Hoffmann - La Roche Ag Anti-tigit protutijela i metode uporabe
AR106188A1 (es) 2015-10-01 2017-12-20 Hoffmann La Roche Anticuerpos anti-cd19 humano humanizados y métodos de utilización
MA43345A (fr) 2015-10-02 2018-08-08 Hoffmann La Roche Conjugués anticorps-médicaments de pyrrolobenzodiazépine et méthodes d'utilisation
AR106189A1 (es) 2015-10-02 2017-12-20 Hoffmann La Roche ANTICUERPOS BIESPECÍFICOS CONTRA EL A-b HUMANO Y EL RECEPTOR DE TRANSFERRINA HUMANO Y MÉTODOS DE USO
MX2018003820A (es) 2015-10-02 2018-12-10 F Hoffmann ­La Roche Ag Anticuerpos biespecificos especificos para un receptor de tnf coestimulador.
AU2016333512B2 (en) 2015-10-02 2022-11-17 F. Hoffmann-La Roche Ag Bispecific anti-human CD20/human transferrin receptor antibodies and methods of use
ES2886569T3 (es) 2015-10-02 2021-12-20 Hoffmann La Roche Anticuerpos biespecíficos específicos para PD1 y TIM3
EP3150636A1 (en) 2015-10-02 2017-04-05 F. Hoffmann-La Roche AG Tetravalent multispecific antibodies
KR20180075537A (ko) 2015-10-06 2018-07-04 제넨테크, 인크. 다발성 경화증을 치료하기 위한 방법
WO2017062748A1 (en) 2015-10-07 2017-04-13 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Il-7r-alpha specific antibodies for treating acute lymphoblastic leukemia
RU2018116402A (ru) 2015-10-07 2019-11-07 Ф. Хоффманн-Ля Рош Аг Биспецифические антитела, четырехвалентные в отношении костимуляторного tnf-рецептора
WO2017066714A1 (en) 2015-10-16 2017-04-20 Compugen Ltd. Anti-vsig1 antibodies and drug conjugates
US10604577B2 (en) 2015-10-22 2020-03-31 Allakos Inc. Methods and compositions for treating systemic mastocytosis
EP3365372A1 (en) 2015-10-22 2018-08-29 Jounce Therapeutics, Inc. Gene signatures for determining icos expression
EP3368568B1 (en) 2015-10-29 2022-04-06 F. Hoffmann-La Roche AG Anti-variant fc-region antibodies and methods of use
MA44334A (fr) 2015-10-29 2018-09-05 Novartis Ag Conjugués d'anticorps comprenant un agoniste du récepteur de type toll
EP3184547A1 (en) 2015-10-29 2017-06-28 F. Hoffmann-La Roche AG Anti-tpbg antibodies and methods of use
WO2017075212A1 (en) 2015-10-30 2017-05-04 Genentech, Inc. Anti-htra1 antibodies and methods of use thereof
EP3368074A2 (en) 2015-10-30 2018-09-05 Hoffmann-La Roche AG Anti-factor d antibodies and conjugates
BR112018007356A2 (pt) 2015-11-02 2018-10-23 Genentech Inc métodos de produção de formas fucosiladas e não fucosiladas de uma proteína
CN115010805B (zh) 2015-11-03 2025-01-28 美国政府(由卫生和人类服务部的部长所代表) Hiv-1 gp41中和抗体及其用途
JP6998869B2 (ja) 2015-11-08 2022-02-04 ジェネンテック， インコーポレイテッド 多重特異性抗体のスクリーニング方法
JP6931329B2 (ja) 2015-11-18 2021-09-01 中外製薬株式会社 免疫抑制機能を有する細胞に対するｔ細胞リダイレクト抗原結合分子を用いた併用療法
WO2017086419A1 (ja) 2015-11-18 2017-05-26 中外製薬株式会社 液性免疫応答の増強方法
AU2016356780A1 (en) 2015-11-19 2018-06-28 Bristol-Myers Squibb Company Antibodies against glucocorticoid-induced tumor necrosis factor receptor (GITR) and uses thereof
AU2016359609B2 (en) 2015-11-23 2023-12-07 Five Prime Therapeutics, Inc. FGFR2 inhibitors alone or in combination with immune stimulating agents in cancer treatment
US10556948B2 (en) 2015-11-30 2020-02-11 Bristol-Myers Squibb Company IP-10 antibodies and their uses
KR102213790B1 (ko) 2015-12-04 2021-02-09 노파르티스 아게 항체 시토카인 그라프트된 조성물 및 면역조절을 위한 사용 방법
US10227410B2 (en) 2015-12-07 2019-03-12 Xencor, Inc. Heterodimeric antibodies that bind CD3 and PSMA
IL313608A (en) 2015-12-09 2024-08-01 Hoffmann La Roche Antibody against CD20 type II to reduce the formation of antibodies against drugs
EP3178848A1 (en) 2015-12-09 2017-06-14 F. Hoffmann-La Roche AG Type ii anti-cd20 antibody for reducing formation of anti-drug antibodies
MX2018007089A (es) 2015-12-14 2019-01-30 Macrogenics Inc Moleculas biespecificas que tienen inmunorreactividad con pd-1 y ctla-4, y metodos de uso de las mismas.
TWI868415B (zh) 2015-12-18 2025-01-01 日商中外製藥股份有限公司 抗肌抑素抗體、含變異fc區之多肽及使用方法
CA3008102A1 (en) 2015-12-18 2017-06-22 Novartis Ag Antibodies targeting cd32b and methods of use thereof
CR20180364A (es) 2015-12-18 2018-08-22 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Anticuerpos anti-c5 y métodos de uso
JP6954842B2 (ja) 2015-12-25 2021-10-27 中外製薬株式会社 増強された活性を有する抗体及びその改変方法
BR112018009312A8 (pt) 2015-12-28 2019-02-26 Chugai Pharmaceutical Co Ltd método para promover eficiência de purificação de polipeptídeo contendo região de fc
ES3038408T3 (en) 2015-12-30 2025-10-13 Hoffmann La Roche Formulations with reduced degradation of polysorbate
EP3400246B1 (en) 2016-01-08 2020-10-21 H. Hoffnabb-La Roche Ag Methods of treating cea-positive cancers using pd-1 axis binding antagonists and anti-cea/anti-cd3 bispecific antibodies
MX2018008310A (es) * 2016-01-11 2019-01-28 Inhibrx Inc Proteinas de fusion de union a ox40 multivalentes y multiespecificas.
WO2017122175A1 (en) 2016-01-13 2017-07-20 Acerta Pharma B.V. Therapeutic combinations of an antifolate and a btk inhibitor
CA3011739A1 (en) 2016-01-20 2017-07-27 Genentech, Inc. High dose treatments for alzheimer's disease
JP2019509721A (ja) 2016-02-04 2019-04-11 キュリス，インコーポレイテッド 突然変異体スムースンド及びその使用方法
KR102185867B1 (ko) 2016-02-06 2020-12-02 에피맙 바이오테라퓨틱스 인코포레이티드 Fabs-인-탠덤 면역글로불린 및 이의 용도
US10899836B2 (en) 2016-02-12 2021-01-26 Janssen Pharmaceutica Nv Method of identifying anti-VISTA antibodies
KR20180107151A (ko) 2016-02-17 2018-10-01 노파르티스 아게 Tgf베타 2 항체
JP6821693B2 (ja) 2016-02-29 2021-01-27 ジェネンテック， インコーポレイテッド がんのための治療方法及び診断方法
EP3423490A1 (en) 2016-03-01 2019-01-09 H. Hoffnabb-La Roche Ag Obinutuzumab and rituximab variants having reduced adcp
CA3016187A1 (en) 2016-03-04 2017-09-08 Bristol-Myers Squibb Company Combination therapy with anti-cd73 antibodies
US10611800B2 (en) 2016-03-11 2020-04-07 Pfizer Inc. Human cytomegalovirus gB polypeptide
BR112018068363A2 (pt) 2016-03-14 2019-01-15 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha fármaco terapêutico indutor de dano celular para uso em terapia de câncer
BR112018068678A2 (pt) 2016-03-15 2019-01-15 Innate Pharma anticorpos anti-mica
EP4112641A1 (en) 2016-03-15 2023-01-04 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Methods of treating cancers using pd-1 axis binding antagonists and anti-gpc3 antibodies
EP3433272A1 (en) 2016-03-22 2019-01-30 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Humanized anti-claudin-1 antibodies and uses thereof
JP2019509322A (ja) 2016-03-22 2019-04-04 バイオノミクス リミテッド 抗ｌｇｒ５モノクローナル抗体の投与
CN108700598A (zh) 2016-03-25 2018-10-23 豪夫迈·罗氏有限公司 多路总抗体和抗体缀合的药物量化测定法
US20170319688A1 (en) 2016-04-14 2017-11-09 Genentech, Inc. Anti-rspo3 antibodies and methods of use
US11104739B2 (en) 2016-04-14 2021-08-31 Bristol-Myers Squibb Company Combination therapy using an anti-fucosyl-GM1 antibody and an anti-CD137 antibody
WO2017181079A2 (en) 2016-04-15 2017-10-19 Genentech, Inc. Methods for monitoring and treating cancer
CN109563164A (zh) 2016-04-15 2019-04-02 生物蛋白有限公司 抗axl抗体、抗体片段和它们的免疫缀合物以及其用途
CA3020864A1 (en) 2016-04-15 2017-10-19 Macrogenics, Inc. Novel b7-h3-binding molecules, antibody drug conjugates thereof and methods of use thereof
CN109154613A (zh) 2016-04-15 2019-01-04 豪夫迈·罗氏有限公司 用于监测和治疗癌症的方法
KR20230119259A (ko) 2016-04-15 2023-08-16 이뮤넥스트, 인크. 항-인간 vista 항체 및 이의 용도
WO2017184562A1 (en) 2016-04-20 2017-10-26 Merck Sharp & Dohme Corp. Cmv neutralizing antigen binding proteins
CN109071634A (zh) 2016-04-26 2018-12-21 R.P.谢勒技术有限责任公司 抗体偶联物及其制备和使用方法
EP3448887A1 (en) 2016-04-27 2019-03-06 Novartis AG Antibodies against growth differentiation factor 15 and uses thereof
MX2018012648A (es) 2016-04-28 2019-01-30 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Preparaciones que contienen anticuerpos.
WO2017192589A1 (en) 2016-05-02 2017-11-09 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Neutralizing antibodies to influenza ha and their use and identification
MX2018013342A (es) 2016-05-02 2019-05-09 Hoffmann La Roche Polipeptido de fusion multicircular "contorsbody" - ligante de diana de cadena sencilla.
EP3243836A1 (en) 2016-05-11 2017-11-15 F. Hoffmann-La Roche AG C-terminally fused tnf family ligand trimer-containing antigen binding molecules
JP7285076B2 (ja) 2016-05-11 2023-06-01 エフ・ホフマン－ラ・ロシュ・アクチェンゲゼルシャフト Ｔｎｆファミリーリガンドトリマーとテネイシン結合部分とを含む抗原結合分子
JP7089483B2 (ja) 2016-05-11 2022-06-22 エフ・ホフマン－ラ・ロシュ・アクチェンゲゼルシャフト 修飾された抗テネイシン抗体及び使用方法
EP3243832A1 (en) 2016-05-13 2017-11-15 F. Hoffmann-La Roche AG Antigen binding molecules comprising a tnf family ligand trimer and pd1 binding moiety
MX394735B (es) 2016-05-13 2025-03-24 Bioatla Llc Anticuerpos anti-ror2, fragmentos de anticuerpos, sus inmunoconjugados y usos de los mismos.
KR20190005998A (ko) 2016-05-18 2019-01-16 젠맵 비. 브이 항체 및 감염성 질환의 치료에서의 그의 사용 방법
ES2858151T3 (es) 2016-05-20 2021-09-29 Hoffmann La Roche Conjugados de PROTAC-anticuerpo y procedimientos de uso
TW201802121A (zh) 2016-05-25 2018-01-16 諾華公司 抗因子XI/XIa抗體之逆轉結合劑及其用途
JP7022080B2 (ja) 2016-05-27 2022-02-17 ジェネンテック， インコーポレイテッド 部位特異的抗体－薬物複合体の特徴付けのための生化学分析的方法
EP3252078A1 (en) 2016-06-02 2017-12-06 F. Hoffmann-La Roche AG Type ii anti-cd20 antibody and anti-cd20/cd3 bispecific antibody for treatment of cancer
CN110603266A (zh) 2016-06-02 2019-12-20 豪夫迈·罗氏有限公司 用于治疗癌症的ii型抗cd20抗体和抗cd20/cd3双特异性抗体
BR112018075645A2 (pt) 2016-06-08 2019-04-09 Abbvie Inc. conjugados de anticorpo fármaco anti-egfr
ES2861499T3 (es) 2016-06-08 2021-10-06 Abbvie Inc Anticuerpos anti-B7-H3 y conjugados anticuerpo-fármaco
MX2018015268A (es) 2016-06-08 2019-08-12 Abbvie Inc Anticuerpos anti-cd98 y conjugados de anticuerpo y farmaco.
MX2018015285A (es) 2016-06-08 2019-09-18 Abbvie Inc Anticuerpos anti-b7-h3 y conjugados de anticuerpo y farmaco.
CA3027044A1 (en) 2016-06-08 2017-12-14 Abbvie Inc. Anti-b7-h3 antibodies and antibody drug conjugates
JP2019521114A (ja) 2016-06-08 2019-07-25 アッヴィ・インコーポレイテッド 抗ｅｇｆｒ抗体薬物コンジュゲート
CN109562168A (zh) 2016-06-08 2019-04-02 艾伯维公司 抗cd98抗体及抗体药物偶联物
DK3468997T5 (da) 2016-06-08 2024-09-09 Xencor Inc Behandling af IgG4-relaterede sygdomme med anti-CD9-antistoffer med tværbinding til CD32B
BR112018075630A2 (pt) 2016-06-08 2019-03-19 Abbvie Inc. anticorpos anti-cd98 e conjugados de fármaco de anticorpo
TW202320860A (zh) 2016-06-08 2023-06-01 美商艾伯維有限公司 抗egfr抗體藥物結合物
CN110352070B (zh) 2016-06-14 2024-09-17 Xencor股份有限公司 双特异性检查点抑制剂抗体
US11434269B2 (en) 2016-06-15 2022-09-06 Novartis Ag Methods for treating disease using inhibitors of bone morphogenetic protein 6 (BMP6)
EP3472200B1 (en) 2016-06-17 2026-01-28 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Anti-myostatin antibodies and methods of use
EP3257866A1 (en) 2016-06-17 2017-12-20 Academisch Medisch Centrum Modified anti-tnf antibody and use thereof in the treatment of ibd
CN109563160B (zh) 2016-06-24 2023-02-28 豪夫迈·罗氏有限公司 抗聚泛素多特异性抗体
EP4050032A1 (en) 2016-06-28 2022-08-31 Xencor, Inc. Heterodimeric antibodies that bind somatostatin receptor 2
AU2017292184A1 (en) 2016-07-08 2019-02-07 Staten Biotechnology B.V. Anti-Apoc3 antibodies and methods of use thereof
BR112019000431A2 (pt) 2016-07-14 2019-07-09 Bristol-Myers Squibb Company anticorpos contra tim3 e usos dos mesmos
WO2018014260A1 (en) 2016-07-20 2018-01-25 Nanjing Legend Biotech Co., Ltd. Multispecific antigen binding proteins and methods of use thereof
BR112019001179A2 (pt) 2016-07-29 2019-04-30 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha anticorpo biespecífico que exibe atividade alternativa aumentada de função de cofator fviii
JP2019525934A (ja) 2016-07-29 2019-09-12 イーライ リリー アンド カンパニー 癌の治療に使用するためのメレスチニブおよび抗ｐｄ−ｌ１または抗ｐｄ−１阻害剤を用いた組み合わせ治療
KR20230107408A (ko) 2016-07-29 2023-07-14 주노 쎄러퓨티크스 인코퍼레이티드 항-cd19 항체에 대한 항-이디오타입 항체
BR112019001693A2 (pt) 2016-07-29 2019-07-02 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) anticorpos direcionados a macrófagos associados a tumores e seus usos
KR102777127B1 (ko) 2016-08-02 2025-03-07 비스테라, 인크. 조작된 폴리펩티드 및 그의 용도
WO2018027042A1 (en) 2016-08-03 2018-02-08 Bio-Techne Corporation Identification of vsig3/vista as a novel immune checkpoint and use thereof for immunotherapy
CA3032437A1 (en) 2016-08-05 2018-02-08 Allakos, Inc. Anti-siglec-7 antibodies for the treatment of cancer
KR102102734B1 (ko) 2016-08-05 2020-04-22 추가이 세이야쿠 가부시키가이샤 Il-8 관련 질환의 치료용 또는 예방용 조성물
WO2018029124A1 (en) 2016-08-08 2018-02-15 F. Hoffmann-La Roche Ag Therapeutic and diagnostic methods for cancer
CA3032430A1 (en) 2016-08-16 2018-02-22 Epimab Biotherapeutics, Inc. Monovalent asymmetric tandem fab bispecific antibodies
ES2774320T3 (es) 2016-08-17 2020-07-20 Compugen Ltd Anticuerpos anti-TIGIT, anticuerpos anti-PVRIG y combinaciones de los mismos
US10793632B2 (en) 2016-08-30 2020-10-06 Xencor, Inc. Bispecific immunomodulatory antibodies that bind costimulatory and checkpoint receptors
CN107384932B (zh) 2016-08-31 2020-10-20 北京天广实生物技术股份有限公司 抗人cd20人源化单克隆抗体mil62、其制备方法及用途
US10981976B2 (en) 2016-08-31 2021-04-20 University Of Rochester Human monoclonal antibodies to human endogenous retrovirus K envelope (HERV-K) and use thereof
WO2018045379A1 (en) 2016-09-02 2018-03-08 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Composition and methods of treating b cell disorders
WO2018047813A1 (en) 2016-09-06 2018-03-15 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Methods of using a bispecific antibody that recognizes coagulation factor ix and/or activated coagulation factor ix and coagulation factor x and/or activated coagulation factor x
US11168148B2 (en) 2016-09-07 2021-11-09 The Regents Of The University Of California Antibodies to oxidation-specific epitopes
SG10201607778XA (en) 2016-09-16 2018-04-27 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Anti-Dengue Virus Antibodies, Polypeptides Containing Variant Fc Regions, And Methods Of Use
EP3515932B1 (en) 2016-09-19 2023-11-22 F. Hoffmann-La Roche AG Complement factor based affinity chromatography
RS64550B1 (sr) 2016-09-23 2023-09-29 Hoffmann La Roche Upotreba il-13 antagonista za lečenje atopičnog dermatitisa
EP3519433A1 (en) 2016-10-03 2019-08-07 Juno Therapeutics, Inc. Hpv-specific binding molecules
CN110139674B (zh) 2016-10-05 2023-05-16 豪夫迈·罗氏有限公司 制备抗体药物缀合物的方法
CA3038712A1 (en) 2016-10-06 2018-04-12 Genentech, Inc. Therapeutic and diagnostic methods for cancer
WO2018068201A1 (en) 2016-10-11 2018-04-19 Nanjing Legend Biotech Co., Ltd. Single-domain antibodies and variants thereof against ctla-4
EP3525815A2 (en) 2016-10-13 2019-08-21 Massachusetts Institute of Technology Antibodies that bind zika virus envelope protein and uses thereof
CR20230179A (es) 2016-10-14 2023-06-12 Xencor Inc PROTEÍNAS DE FUSIÓN FC HETERODIMÉRICAS IL 15/IL15Ra (Divisional 2019-0229)
WO2018073363A1 (en) 2016-10-21 2018-04-26 Innate Pharma Treatment with anti-kir3dl2 agents
KR20190084264A (ko) 2016-10-25 2019-07-16 인쎄름 (엥스띠뛰 나씨오날 드 라 쌍떼 에 드 라 흐쉐르슈 메디깔) Cd160 막 횡단 동형체에 결합하는 단클론 항체
EP3532091A2 (en) 2016-10-29 2019-09-04 H. Hoffnabb-La Roche Ag Anti-mic antibidies and methods of use
TWI788307B (zh) 2016-10-31 2023-01-01 美商艾歐凡斯生物治療公司 用於擴增腫瘤浸潤性淋巴細胞之工程化人造抗原呈現細胞
CA3041988A1 (en) 2016-11-01 2018-05-11 Genmab B.V. Polypeptide variants and uses thereof
MX2019004834A (es) 2016-11-02 2019-06-20 Jounce Therapeutics Inc Anticuerpos de pd-1 y usos de estos.
JP7039582B2 (ja) 2016-11-03 2022-03-22 ブリストル－マイヤーズ スクイブ カンパニー 活性化可能な抗ｃｔｌａ－４抗体およびその使用
JP2020500020A (ja) 2016-11-14 2020-01-09 ノバルティス アーゲー 融合誘導性タンパク質ｍｉｎｉｏｎに関連する組成物、方法、および治療上の使用
CN109923128A (zh) 2016-11-15 2019-06-21 基因泰克公司 用于用抗cd20/抗cd3双特异性抗体进行治疗的给药
JP6709340B2 (ja) 2016-11-16 2020-06-10 イーライ リリー アンド カンパニー エクソン１４スキッピング変異（複数可）またはエクソン１４スキッピング表現型を有するがんの併用療法
JOP20190100A1 (ar) 2016-11-19 2019-05-01 Potenza Therapeutics Inc بروتينات ربط مولد ضد مضاد لـ gitr وطرق استخدامها
JP7313684B2 (ja) 2016-11-21 2023-07-25 キュレアブ ゲーエムベーハー 抗ｇｐ７３抗体及びイムノコンジュゲート
US20230192896A1 (en) 2016-11-23 2023-06-22 Bioverativ Therapeutics Inc. Bispecific antibodies binding to coagulation factor ix and coagulation factor x
JP7274417B2 (ja) 2016-11-23 2023-05-16 イミュノア・セラピューティクス・インコーポレイテッド ４－１ｂｂ結合タンパク質及びその使用
IL266911B2 (en) 2016-12-07 2024-10-01 Genentech Inc Anti-tau antibodies and uses thereof in treating tauopathy, retaining or increasing cognitive memory capacity or slowing memory loss
TWI789371B (zh) 2016-12-07 2023-01-11 美商建南德克公司 抗-ｔａｕ抗體及使用方法
JP2020511408A (ja) 2016-12-12 2020-04-16 ジェネンテック， インコーポレイテッド 抗ｐｄ−ｌ１抗体及び抗アンドロゲン薬を使用してがんを治療する方法
CN110234348B (zh) 2016-12-16 2024-06-25 蓝鳍生物医药公司 抗-含cub结构域蛋白1(cdcp1)抗体、抗体药物缀合物及其使用方法
CN110087682B (zh) 2016-12-19 2023-12-15 豪夫迈·罗氏有限公司 用靶向性4-1bb(cd137)激动剂的组合疗法
EP3559034B1 (en) 2016-12-20 2020-12-02 H. Hoffnabb-La Roche Ag Combination therapy of anti-cd20/anti-cd3 bispecific antibodies and 4-1bb (cd137) agonists
JOP20190134A1 (ar) 2016-12-23 2019-06-02 Potenza Therapeutics Inc بروتينات رابطة لمولد ضد مضادة لنيوروبيلين وطرق استخدامها
CN110325550B (zh) 2016-12-23 2024-03-08 诺华股份有限公司 因子xi抗体和使用方法
WO2018115262A1 (en) 2016-12-23 2018-06-28 Innate Pharma Heterodimeric antigen binding proteins
MX2019007795A (es) 2017-01-03 2019-08-16 Hoffmann La Roche Moleculas de union a antigeno biespecificas que comprenden el clon 20h4.9 anti-4-1bb.
US20180230218A1 (en) 2017-01-04 2018-08-16 Immunogen, Inc. Met antibodies and immunoconjugates and uses thereof
WO2018129332A1 (en) 2017-01-06 2018-07-12 Iovance Biotherapeutics, Inc. Expansion of tumor infiltrating lymphocytes (tils) with tumor necrosis factor receptor superfamily (tnfrsf) agonists and therapeutic combinations of tils and tnfrsf agonists
EP3565586B1 (en) 2017-01-06 2025-10-08 Iovance Biotherapeutics, Inc. Expansion of tumor infiltrating lymphocytes with potassium channel agonists and therapeutic uses thereof
CN112210010B (zh) 2017-01-06 2023-12-05 优特力克斯有限公司 抗-人4-1bb抗体及其应用
US11584733B2 (en) 2017-01-09 2023-02-21 Shuttle Pharmaceuticals, Inc. Selective histone deacetylase inhibitors for the treatment of human disease
EP3565549B1 (en) 2017-01-09 2022-03-09 Shuttle Pharmaceuticals, Inc. Selective histone deacetylase inhibitors for the treatment of human disease
US11274157B2 (en) 2017-01-12 2022-03-15 Eureka Therapeutics, Inc. Constructs targeting histone H3 peptide/MHC complexes and uses thereof
EP3574012A1 (en) 2017-01-27 2019-12-04 Memorial Sloan Kettering Cancer Center Bispecific her2 and cd3 binding molecules
TWI786087B (zh) 2017-02-08 2022-12-11 瑞士商諾華公司 Fgf21模擬抗體及其用途
US11266745B2 (en) 2017-02-08 2022-03-08 Imaginab, Inc. Extension sequences for diabodies
WO2018148660A1 (en) 2017-02-10 2018-08-16 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Neutralizing antibodies to plasmodium falciparum circumsporozoite protein and their use
IL268593B2 (en) 2017-02-10 2025-05-01 Genmab Bv Polypeptides and antibodies having increased cdc and/or agonistic activity and their uses in medicine
EP3580240A1 (en) 2017-02-10 2019-12-18 H. Hoffnabb-La Roche Ag Anti-tryptase antibodies, compositions thereof, and uses thereof
JP7341060B2 (ja) 2017-02-10 2023-09-08 アンスティチュ ナショナル ドゥ ラ サンテ エ ドゥ ラ ルシェルシュ メディカル Ｍａｐｋ経路の活性化に関連付けられる癌の処置のための方法及び医薬組成物
WO2018146549A1 (en) 2017-02-10 2018-08-16 Eutilex Co., Ltd. IFN-γ-INDUCIBLE REGULATORY T CELL CONVERTIBLE ANTI-CANCER (IRTCA) ANTIBODY AND USES THEREOF
EA201991720A1 (ru) 2017-02-17 2020-01-20 Бристол-Маерс Сквибб Компани Антитела к альфа-синуклеину и их применения
CN116440257A (zh) 2017-02-28 2023-07-18 百时美施贵宝公司 具有增强的adcc的抗ctla-4抗体增强对疫苗的免疫应答的用途
EP3589754B1 (en) 2017-03-01 2023-06-28 F. Hoffmann-La Roche AG Diagnostic and therapeutic methods for cancer
WO2018158398A1 (en) 2017-03-02 2018-09-07 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Antibodies having specificity to nectin-4 and uses thereof
KR101994456B1 (ko) * 2017-03-15 2019-06-28 이건무 당 수액제 조성물
MX2019011141A (es) 2017-03-22 2019-11-05 Genentech Inc Composiciones de anticuerpo optimizadas para el tratamiento de trastornos oculares.
IL269083B2 (en) 2017-03-24 2024-12-01 Novartis Ag Methods for preventing and treating heart disease
CN110494446A (zh) 2017-03-28 2019-11-22 基因泰克公司 治疗神经退行性疾病的方法
WO2018178123A1 (en) * 2017-03-29 2018-10-04 Glycotope Gmbh BISPECIFIC MUC-1 x PD-L1 ANTIBODIES
WO2018178055A1 (en) 2017-03-29 2018-10-04 F. Hoffmann-La Roche Ag Bispecific antigen binding molecule for a costimulatory tnf receptor
AU2018241781A1 (en) * 2017-03-29 2019-07-18 Glycotope Gmbh Multispecific antibody constructs binding to MUC1 and CD3
CA3057758A1 (en) * 2017-03-29 2018-10-04 Glycotope Gmbh Pd-l1 and ta-muc1 antibodies
CN110382542B (zh) 2017-03-29 2023-06-09 豪夫迈·罗氏有限公司 针对共刺激性tnf受体的双特异性抗原结合分子
JOP20190203A1 (ar) 2017-03-30 2019-09-03 Potenza Therapeutics Inc بروتينات رابطة لمولد ضد مضادة لـ tigit وطرق استخدامها
WO2018185618A1 (en) 2017-04-03 2018-10-11 Novartis Ag Anti-cdh6 antibody drug conjugates and anti-gitr antibody combinations and methods of treatment
AU2018247767B2 (en) 2017-04-03 2025-01-30 F. Hoffmann-La Roche Ag Antibodies binding to STEAP-1
CA3053358A1 (en) 2017-04-04 2018-10-11 F. Hoffmann-La Roche Ag Novel bispecific antigen binding molecules capable of specific binding to cd40 and to fap
PE20210256A1 (es) 2017-04-05 2021-02-10 Hoffmann La Roche Anticuerpos anti-lag3
TWI690538B (zh) 2017-04-05 2020-04-11 瑞士商赫孚孟拉羅股份公司 特異性結合至pd1至lag3的雙特異性抗體
TWI796329B (zh) 2017-04-07 2023-03-21 美商默沙東有限責任公司 抗－ilt4抗體及抗原結合片段
WO2018191660A1 (en) 2017-04-14 2018-10-18 Genentech, Inc. Diagnostic and therapeutic methods for cancer
EP3612567B1 (en) 2017-04-19 2024-09-11 Bluefin Biomedicine, Inc. Anti-vtcn1 antibodies and antibody drug conjugates
US11767520B2 (en) 2017-04-20 2023-09-26 Atyr Pharma, Inc. Compositions and methods for treating lung inflammation
TW201841656A (zh) 2017-04-21 2018-12-01 美商建南德克公司 Ｋｌｋ５拮抗劑用於治療疾病之用途
WO2018193427A1 (en) 2017-04-21 2018-10-25 Staten Biotechnology B.V. Anti-apoc3 antibodies and methods of use thereof
CA3059820A1 (en) 2017-04-26 2018-11-01 Eureka Therapeutics, Inc. Constructs specifically recognizing glypican 3 and uses thereof
EP3615572A1 (en) 2017-04-27 2020-03-04 Tesaro Inc. Antibody agents directed against lymphocyte activation gene-3 (lag-3) and uses thereof
AR111651A1 (es) 2017-04-28 2019-08-07 Novartis Ag Conjugados de anticuerpos que comprenden agonistas del receptor de tipo toll y terapias de combinación
EP3618868A4 (en) 2017-05-05 2021-02-24 Allakos Inc. METHODS AND COMPOSITIONS FOR TREATING ALLERGIC EYE DISEASES
US11116835B2 (en) 2017-05-10 2021-09-14 Fred Hutchinson Cancer Research Center Epstein Barr virus antibodies, vaccines, and uses of the same
TW201904578A (zh) 2017-05-10 2019-02-01 美商艾歐凡斯生物治療公司 源自液體腫瘤之腫瘤浸潤性淋巴細胞的擴增和該經擴增腫瘤浸潤性淋巴細胞之治療用途
EP3625251A1 (en) 2017-05-15 2020-03-25 University Of Rochester Broadly neutralizing anti-influenza monoclonal antibody and uses thereof
SG10202112636SA (en) 2017-05-16 2021-12-30 Five Prime Therapeutics Inc Anti-fgfr2 antibodies in combination with chemotherapy agents in cancer treatment
WO2018215937A1 (en) 2017-05-24 2018-11-29 Novartis Ag Interleukin-7 antibody cytokine engrafted proteins and methods of use in the treatment of cancer
US20200362058A1 (en) 2017-05-24 2020-11-19 Novartis Ag Antibody-cytokine engrafted proteins and methods of use
CN110662762A (zh) 2017-05-24 2020-01-07 诺华股份有限公司 抗体细胞因子移植蛋白和用于治疗癌症的方法
JOP20190271A1 (ar) 2017-05-24 2019-11-21 Novartis Ag بروتينات مطعّمة بسيتوكين- الجسم المضاد وطرق الاستخدام للاضطرابات المتعلقة بالمناعة
WO2018218056A1 (en) 2017-05-25 2018-11-29 Birstol-Myers Squibb Company Antibodies comprising modified heavy constant regions
JP7348072B2 (ja) 2017-06-01 2023-09-20 コンピュジェン リミテッド 三重併用抗体療法
AU2018281337B2 (en) 2017-06-06 2022-08-25 Relinia, Inc. Single-chain TNF receptor 2 agonist fusion proteins
CN118994394A (zh) 2017-06-12 2024-11-22 蓝鳍生物医药公司 抗-il1rap抗体和抗体药物缀合物
UY37758A (es) 2017-06-12 2019-01-31 Novartis Ag Método de fabricación de anticuerpos biespecíficos, anticuerpos biespecíficos y uso terapéutico de dichos anticuerpos
WO2018229706A1 (en) 2017-06-16 2018-12-20 Novartis Ag Combination therapy for the treatment of cancer
WO2018229715A1 (en) 2017-06-16 2018-12-20 Novartis Ag Compositions comprising anti-cd32b antibodies and methods of use thereof
CN111132733A (zh) 2017-06-30 2020-05-08 Xencor股份有限公司 含有IL-15/IL-15Rα和抗原结合结构域的靶向异源二聚体Fc融合蛋白
TWI823859B (zh) 2017-07-21 2023-12-01 美商建南德克公司 癌症之治療及診斷方法
SG11202000658PA (en) 2017-07-26 2020-02-27 Forty Seven Inc Anti-sirp-alpha antibodies and related methods
EP3684413A1 (en) 2017-09-20 2020-07-29 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Dosage regimen for combination therapy using pd-1 axis binding antagonists and gpc3 targeting agent
UA128389C2 (uk) 2017-09-29 2024-07-03 Чугаі Сейяку Кабусікі Кайся Мультиспецифічна антигензв'язувальна молекула, яка має активність заміщувати кофакторну функцію фактора коагуляції крові viii (fviii), та фармацевтичний склад, який містить згадану молекулу як активний інгредієнт
EP3692063A1 (en) 2017-10-03 2020-08-12 Juno Therapeutics, Inc. Hpv-specific binding molecules
WO2019075090A1 (en) 2017-10-10 2019-04-18 Tilos Therapeutics, Inc. ANTI-LAP ANTIBODIES AND USES THEREOF
CA3185107A1 (en) 2017-10-12 2019-04-18 Immunowake Inc. Vegfr-antibody light chain fusion protein
EP3700933A1 (en) 2017-10-25 2020-09-02 Novartis AG Antibodies targeting cd32b and methods of use thereof
WO2019087115A1 (en) 2017-10-31 2019-05-09 Staten Biotechnology B.V. Anti-apoc3 antibodies and methods of use thereof
US10538583B2 (en) 2017-10-31 2020-01-21 Staten Biotechnology B.V. Anti-APOC3 antibodies and compositions thereof
JP2021500902A (ja) 2017-11-01 2021-01-14 エフ・ホフマン−ラ・ロシュ・アクチェンゲゼルシャフト 新規ｔｎｆファミリーリガンド三量体含有抗原結合分子
CA3080904A1 (en) 2017-11-01 2019-05-09 Juno Therapeutics, Inc. Antibodies and chimeric antigen receptors specific for b-cell maturation antigen
MX2020003472A (es) 2017-11-01 2020-08-03 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Variante e isoforma de anticuerpos con actividad biologica reducida.
MX2020004571A (es) 2017-11-01 2020-08-24 Hoffmann La Roche Contorsbodies 2+1 biespecificos.
TW201930353A (zh) 2017-11-01 2019-08-01 瑞士商赫孚孟拉羅股份公司 使用經靶向之ox40促效劑的組合療法
PL3707510T3 (pl) 2017-11-06 2024-09-30 F. Hoffmann-La Roche Ag Sposoby diagnostyczne i terapeutyczne w chorobach nowotworowych
EP3706793A1 (en) 2017-11-08 2020-09-16 Xencor, Inc. Bispecific and monospecific antibodies using novel anti-pd-1 sequences
US10981992B2 (en) 2017-11-08 2021-04-20 Xencor, Inc. Bispecific immunomodulatory antibodies that bind costimulatory and checkpoint receptors
JP7731196B2 (ja) 2017-11-14 2025-08-29 中外製薬株式会社 抗Ｃ１ｓ抗体および使用方法
US20200325232A1 (en) 2017-11-21 2020-10-15 Innate Pharma Multispecific antigen binding proteins
EP3714041A1 (en) 2017-11-22 2020-09-30 Iovance Biotherapeutics, Inc. Expansion of peripheral blood lymphocytes (pbls) from peripheral blood
CN111902427A (zh) 2017-11-22 2020-11-06 诺华股份有限公司 抗因子XI/XIa抗体的逆转结合剂及其用途
WO2019106578A2 (en) 2017-12-01 2019-06-06 Novartis Ag Polyomavirus neutralizing antibodies
BR112020010753A2 (pt) 2017-12-01 2020-11-24 The Regents Of The University Of California anticorpos anti-cxcr5 e composições e usos dos mesmos
EP3724885A2 (en) 2017-12-15 2020-10-21 Iovance Biotherapeutics, Inc. Systems and methods for determining the beneficial administration of tumor infiltrating lymphocytes, and methods of use thereof and beneficial administration of tumor infiltrating lymphocytes, and methods of use thereof
JP2021506260A (ja) 2017-12-15 2021-02-22 ジュノー セラピューティクス インコーポレイテッド 抗ｃｃｔ５結合分子およびその使用方法
CN111655718B (zh) 2017-12-19 2025-07-22 Xencor股份有限公司 经过工程化的il-2 fc融合蛋白
EP3502140A1 (en) 2017-12-21 2019-06-26 F. Hoffmann-La Roche AG Combination therapy of tumor targeted icos agonists with t-cell bispecific molecules
AR114001A1 (es) 2017-12-21 2020-07-08 Hoffmann La Roche Anticuerpos que se unen a hla- a2 / wt1
EP3728321A1 (en) 2017-12-22 2020-10-28 F. Hoffmann-La Roche AG Use of pilra binding agents for treatment of a disease
EP3728318A2 (en) 2017-12-22 2020-10-28 Jounce Therapeutics, Inc. Antibodies for lilrb2
CN115925943A (zh) 2017-12-27 2023-04-07 信达生物制药(苏州)有限公司 抗pd-l1抗体及其用途
WO2019129136A1 (zh) 2017-12-27 2019-07-04 信达生物制药(苏州)有限公司 抗pd-l1抗体及其用途
WO2019129137A1 (zh) 2017-12-27 2019-07-04 信达生物制药(苏州)有限公司 抗lag-3抗体及其用途
CN111542543B (zh) 2017-12-28 2023-12-22 南京传奇生物科技有限公司 针对pd-l1的抗体及其变体
SG11202004158QA (en) 2017-12-28 2020-06-29 Nanjing Legend Biotech Co Ltd Single-domain antibodies and variants thereof against tigit
EP3731865A1 (en) 2017-12-29 2020-11-04 F. Hoffmann-La Roche AG Method for improving vegf-receptor blocking selectivity of an anti-vegf antibody
EP3732193A1 (en) 2017-12-29 2020-11-04 Alector LLC Anti-tmem106b antibodies and methods of use thereof
US11976109B2 (en) 2018-01-02 2024-05-07 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Neutralizing antibodies to ebola virus glycoprotein and their use
US20220153871A1 (en) 2018-01-04 2022-05-19 Iconic Therapeutics, Inc. Anti-Tissue Factor Antibodies, Antibody-Drug Conjugates, and Related Methods
AU2019205090A1 (en) 2018-01-05 2020-08-06 Ac Immune Sa Misfolded TDP-43 binding molecules
US12247060B2 (en) 2018-01-09 2025-03-11 Marengo Therapeutics, Inc. Calreticulin binding constructs and engineered T cells for the treatment of diseases
CA3087565A1 (en) 2018-01-09 2019-07-18 Shuttle Pharmaceuticals, Inc. Selective histone deacetylase inhibitors for the treatment of human disease
CN111886255B (zh) 2018-01-12 2025-04-04 百时美施贵宝公司 抗tim3抗体及其用途
CA3084518A1 (en) 2018-01-15 2019-07-18 Nanjing Legend Biotech Co., Ltd. Single-domain antibodies and variants thereof against pd-1
CA3088649A1 (en) 2018-01-16 2019-07-25 Lakepharma, Inc. Bispecific antibody that binds cd3 and another target
SI3743088T1 (sl) 2018-01-26 2023-01-31 F. Hoffmann - La Roche Ag Farmacevtski sestavki IL-22 Fc in načini njihove uporabe
EP3743437A1 (en) 2018-01-26 2020-12-02 F. Hoffmann-La Roche AG Il-22 fc fusion proteins and methods of use
EP3746476A1 (en) 2018-01-31 2020-12-09 Alector LLC Anti-ms4a4a antibodies and methods of use thereof
CA3081125C (en) 2018-02-01 2025-09-16 Innovent Biologics (Suzhou) Co., Ltd. All-Human Single-Chain Variable Fragment Anti-Antigen for B Lymphocyte Maturation (BCMA), and Associated Application
CN111868082A (zh) 2018-02-02 2020-10-30 博奥泰克尼公司 调节vista和vsig3的相互作用的化合物及其制备和使用方法
EP3749361A1 (en) 2018-02-08 2020-12-16 F. Hoffmann-La Roche AG Bispecific antigen-binding molecules and methods of use
BR112020016172A2 (pt) 2018-02-09 2020-12-15 Genentech, Inc. Métodos de tratamento, métodos para determinar, métodos para selecionar uma terapia, métodos para avaliar uma resposta e monitorar a resposta, kits para identificar um paciente, agentes selecionados, agentes para uso, uso de um agente selecionado e uso de um antagonista
TWI829667B (zh) 2018-02-09 2024-01-21 瑞士商赫孚孟拉羅股份公司 結合gprc5d之抗體
US12246031B2 (en) 2018-02-13 2025-03-11 Checkmate Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for tumor immunotherapy
MA51875A (fr) 2018-02-13 2020-12-23 Iovance Biotherapeutics Inc Expansion de lymphocytes infiltrant les tumeurs (til) avec des antagonistes du récepteur a2a de l'adénosine et combinaisons thérapeutiques de til et d'antagonistes du récepteur a2a de l'adénosine
CN111757894B (zh) 2018-02-14 2025-02-25 Abba疗法股份公司 抗人类pd-l2抗体
CN111757751A (zh) 2018-02-21 2020-10-09 豪夫迈·罗氏有限公司 用于使用IL-22 Fc融合蛋白的治疗的剂量方案
CA3091437A1 (en) 2018-02-21 2019-08-29 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Neutralizing antibodies to hiv-1 env and their use
CA3092108A1 (en) 2018-02-26 2019-08-29 Genentech, Inc. Dosing for treatment with anti-tigit and anti-pd-l1 antagonist antibodies
US20210017295A1 (en) 2018-03-12 2021-01-21 Memorial Sloan Kettering Cancer Center Bispecific binding agents and uses thereof
CA3092002A1 (en) 2018-03-13 2019-09-19 F. Hoffmann-La Roche Ag Therapeutic combination of 4-1 bb agonists with anti-cd20 antibodies
TWI841551B (zh) 2018-03-13 2024-05-11 瑞士商赫孚孟拉羅股份公司 使用靶向4-1bb (cd137)之促效劑的組合療法
US20200040103A1 (en) 2018-03-14 2020-02-06 Genentech, Inc. Anti-klk5 antibodies and methods of use
CN112566642B (zh) 2018-03-14 2025-01-17 纪念斯隆凯特琳癌症中心 抗聚唾液酸抗体及其用途
US12152073B2 (en) 2018-03-14 2024-11-26 Marengo Therapeutics, Inc. Multifunctional molecules that bind to calreticulin and uses thereof
EP3765522A4 (en) 2018-03-14 2022-05-18 Beijing Xuanyi Pharmasciences Co., Ltd. ANTI-CLAUDIN 18.2 ANTIBODIES
US11891432B2 (en) 2018-03-15 2024-02-06 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Anti-dengue virus antibodies having cross-reactivity to Zika virus and methods of use
TW201945393A (zh) 2018-03-21 2019-12-01 美商戊瑞治療有限公司 在酸性pH結合至VISTA之抗體
CA3093407A1 (en) 2018-03-23 2019-09-26 Bristol-Myers Squibb Company Antibodies against mica and/or micb and uses thereof
SG11202009542PA (en) 2018-03-29 2020-10-29 Genentech Inc Modulating lactogenic activity in mammalian cells
KR102876940B1 (ko) 2018-03-30 2025-10-24 난징 레전드 바이오테크 씨오., 엘티디. Lag-3에 대한 단일-도메인 항체 및 이의 용도
US10982006B2 (en) 2018-04-04 2021-04-20 Xencor, Inc. Heterodimeric antibodies that bind fibroblast activation protein
TW202011029A (zh) 2018-04-04 2020-03-16 美商建南德克公司 偵測及定量fgf21之方法
KR102764123B1 (ko) 2018-04-05 2025-02-05 주노 쎄러퓨티크스 인코퍼레이티드 Τ 세포 수용체 및 이를 발현하는 조작된 세포
US12084655B2 (en) 2018-04-09 2024-09-10 Checkmate Pharmaceuticals Packaging oligonucleotides into virus-like particles
EP3552631A1 (en) 2018-04-10 2019-10-16 Inatherys Antibody-drug conjugates and their uses for the treatment of cancer
AR114284A1 (es) 2018-04-13 2020-08-12 Hoffmann La Roche Moléculas de unión a antígeno dirigidas a her2 que comprenden 4-1bbl
JP2021521784A (ja) 2018-04-18 2021-08-30 ゼンコア インコーポレイテッド ＩＬ−１５／ＩＬ−１５ＲａＦｃ融合タンパク質とＰＤ−１抗原結合ドメインを含むＰＤ−１標的化ヘテロダイマー融合タンパク質およびそれらの使用
US11505595B2 (en) 2018-04-18 2022-11-22 Xencor, Inc. TIM-3 targeted heterodimeric fusion proteins containing IL-15/IL-15RA Fc-fusion proteins and TIM-3 antigen binding domains
CN112074541A (zh) 2018-05-03 2020-12-11 上海岸迈生物科技有限公司 Pd-1和lag-3的高亲和力抗体以及由其制备的双特异性结合蛋白
WO2019211472A1 (en) 2018-05-03 2019-11-07 Genmab B.V. Antibody variant combinations and uses thereof
EP3787678A1 (en) 2018-05-03 2021-03-10 University Of Rochester Anti-influenza neuraminidase monoclonal antibodies and uses thereof
BR112020023118A2 (pt) 2018-05-14 2021-04-13 Werewolf Therapeutics, Inc. Polipeptídeos de interleucina 12 ativáveis e métodos de uso destes
AU2019271148B9 (en) 2018-05-14 2025-05-29 Werewolf Therapeutics, Inc. Activatable interleukin-2 polypeptides and methods of use thereof
PT3794042T (pt) 2018-05-18 2024-06-14 Daiichi Sankyo Co Ltd Conjugado anticorpo-fármaco anti-muc1-exatecano
PE20210342A1 (es) 2018-05-25 2021-02-23 Alector Llc Anticuerpos anti-sirpa y metodos de utilizacion de los mismos
AR126019A1 (es) 2018-05-30 2023-09-06 Novartis Ag Anticuerpos frente a entpd2, terapias de combinación y métodos de uso de los anticuerpos y las terapias de combinación
JP7490574B2 (ja) 2018-05-31 2024-05-27 ノバルティス アーゲー Ｂ型肝炎抗体
CN113039202A (zh) 2018-06-01 2021-06-25 康姆普根有限公司 抗pvrig/抗tigit双特异性抗体和使用方法
WO2019227490A1 (en) 2018-06-01 2019-12-05 Tayu Huaxia Biotech Medical Group Co., Ltd. Compositions and methods for imaging
BR112020024351A2 (pt) 2018-06-01 2021-02-23 Novartis Ag moléculas de ligação contra bcma e usos das mesmas
US11987629B2 (en) 2018-06-01 2024-05-21 Tayu Huaxia Biotech Medical Group Co., Ltd. Compositions and uses thereof for treating disease or condition
AU2019281358A1 (en) 2018-06-03 2021-01-07 Lamkap Bio Beta Ltd. Bispecific antibodies against CEACAM5 and CD47
JP7372237B2 (ja) 2018-06-04 2023-10-31 中外製薬株式会社 細胞質内での半減期が変化した抗原結合分子
TWI851577B (zh) 2018-06-07 2024-08-11 美商思進公司 喜樹鹼結合物
CA3103936A1 (en) 2018-06-18 2019-12-26 Eureka Therapeutics, Inc. Constructs targeting prostate-specific membrane antigen (psma) and uses thereof
MY205645A (en) 2018-06-23 2024-11-02 Genentech Inc Methods of treating lung cancer with a pd-1 axis binding antagonist, a platinum agent, and a topoisomerase ii inhibitor
CN119912569A (zh) 2018-06-29 2025-05-02 艾利妥 抗SIRP-β1抗体及其使用方法
PE20211091A1 (es) 2018-07-02 2021-06-14 Amgen Inc Proteina de union al antigeno anti-steap1
AU2019297451A1 (en) 2018-07-03 2021-01-28 Marengo Therapeutics, Inc. Anti-TCR antibody molecules and uses thereof
TW202035447A (zh) 2018-07-04 2020-10-01 瑞士商赫孚孟拉羅股份公司 新穎雙特異性促效性4-1bb抗原結合分子
SG11202100096XA (en) 2018-07-09 2021-02-25 Five Prime Therapeutics Inc Antibodies binding to ilt4
WO2020014306A1 (en) 2018-07-10 2020-01-16 Immunogen, Inc. Met antibodies and immunoconjugates and uses thereof
CN121203021A (zh) 2018-07-11 2025-12-26 戊瑞治疗有限公司 在酸性pH下结合至VISTA的抗体
MX2019012869A (es) 2018-07-13 2020-01-23 Alector Llc Anticuerpos anti-sortilina y metodos para su uso.
PE20211858A1 (es) 2018-07-13 2021-09-21 Genmab As Variantes de anticuerpos anti-cd38 y sus usos
WO2020012038A1 (en) 2018-07-13 2020-01-16 Genmab A/S Trogocytosis-mediated therapy using cd38 antibodies
AU2019305637A1 (en) 2018-07-18 2021-03-11 Genentech, Inc. Methods of treating lung cancer with a PD-1 axis binding antagonist, an antimetabolite, and a platinum agent
SG11202100373VA (en) 2018-07-20 2021-02-25 Surface Oncology Inc Anti-cd112r compositions and methods
WO2020023918A1 (en) 2018-07-26 2020-01-30 Atyr Pharma, Inc. Compositions and methods for treating nrp2-associated diseases
CN113286824A (zh) 2018-08-03 2021-08-20 中外制药株式会社 包含两个彼此连接的抗原结合结构域的抗原结合分子
EP3608674A1 (en) 2018-08-09 2020-02-12 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods for assessing binding affinity of an antibody variant to the neonatal fc receptor
CN112839960B (zh) 2018-08-10 2024-09-06 中外制药株式会社 抗cd137抗原结合分子及其应用
SG11202101173TA (en) 2018-08-13 2021-03-30 Inhibrx Inc Ox40-binding polypeptides and uses thereof
TW202021618A (zh) 2018-08-17 2020-06-16 美商２３與我有限公司 抗ｉｌ１ｒａｐ抗體及其使用方法
US12259395B2 (en) 2018-08-17 2025-03-25 Ab Studio Inc. Catabodies and methods of use thereof
TW202031273A (zh) 2018-08-31 2020-09-01 美商艾歐凡斯生物治療公司 抗ｐｄ－１抗體難治療性之非小細胞肺癌（ｎｓｃｌｃ）病患的治療
GB201814281D0 (en) 2018-09-03 2018-10-17 Femtogenix Ltd Cytotoxic agents
WO2020052542A1 (en) 2018-09-10 2020-03-19 Nanjing Legend Biotech Co., Ltd. Single-domain antibodies against cll1 and constructs thereof
WO2020053742A2 (en) 2018-09-10 2020-03-19 Novartis Ag Anti-hla-hbv peptide antibodies
EP3849565A4 (en) 2018-09-12 2022-12-28 Fred Hutchinson Cancer Research Center REDUCTION OF CD33 EXPRESSION TO SELECTIVELY PROTECT THERAPEUTIC CELLS
CA3109366A1 (en) 2018-09-13 2020-03-19 The Board Of Regents Of The University Of Texas System Novel lilrb4 antibodies and uses thereof
AU2019342099A1 (en) 2018-09-19 2021-04-08 Genentech, Inc. Therapeutic and diagnostic methods for bladder cancer
US20220073638A1 (en) 2018-09-19 2022-03-10 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale Methods and pharmaceutical composition for the treatment of cancers resistant to immune checkpoint therapy
WO2020061429A1 (en) 2018-09-20 2020-03-26 Iovance Biotherapeutics, Inc. Expansion of tils from cryopreserved tumor samples
JP7475336B2 (ja) 2018-09-21 2024-04-26 ジェネンテック， インコーポレイテッド トリプルネガティブ乳癌のための診断方法
EP3856764A4 (en) 2018-09-27 2022-11-02 Xilio Development, Inc. MASKED CYTOKINE POLYPEPTIDES
EP3861025A1 (en) 2018-10-01 2021-08-11 F. Hoffmann-La Roche AG Bispecific antigen binding molecules with trivalent binding to cd40
MX2021003548A (es) 2018-10-01 2021-05-27 Hoffmann La Roche Moleculas de union a antigeno biespecificas que comprenden el clon 212 anti-fap.
EP3632929A1 (en) 2018-10-02 2020-04-08 Ospedale San Raffaele S.r.l. Antibodies and uses thereof
SG11202103192RA (en) 2018-10-03 2021-04-29 Xencor Inc Il-12 heterodimeric fc-fusion proteins
CR20210217A (es) 2018-10-05 2021-06-18 Five Prime Therapeutics Inc Formulaciones de anticuerpos anti-fgfr2
WO2020076969A2 (en) 2018-10-10 2020-04-16 Tilos Therapeutics, Inc. Anti-lap antibody variants and uses thereof
UY38407A (es) 2018-10-15 2020-05-29 Novartis Ag Anticuerpos estabilizadores de trem2
WO2020081493A1 (en) 2018-10-16 2020-04-23 Molecular Templates, Inc. Pd-l1 binding proteins
KR20210079311A (ko) 2018-10-18 2021-06-29 제넨테크, 인크. 육종성 신장암에 대한 진단과 치료 방법
MA54052A (fr) 2018-10-29 2022-02-09 Hoffmann La Roche Formulation d'anticorps
EP3873532A1 (en) 2018-10-31 2021-09-08 Novartis AG Dc-sign antibody drug conjugates
US12343380B2 (en) 2018-11-05 2025-07-01 Iovance Biotherapeutics, Inc. Expansion of TILs utilizing AKT pathways inhibitors
SG11202104663PA (en) 2018-11-05 2021-06-29 Iovance Biotherapeutics Inc Treatment of nsclc patients refractory for anti-pd-1 antibody
JP2022512860A (ja) 2018-11-06 2022-02-07 アンスティチュ ナショナル ドゥ ラ サンテ エ ドゥ ラ ルシェルシュ メディカル 白血病幹細胞を根絶することによる急性骨髄性白血病の治療のための方法および医薬組成物
MX2021005751A (es) 2018-11-16 2021-10-01 Memorial Sloan Kettering Cancer Center Anticuerpos contra mucina 16 y métodos de uso de los mismos.
CA3120729A1 (en) 2018-11-27 2020-06-04 Staidson (Beijing) Biopharmaceuticals Co., Ltd. Antibodies specifically recognizing granulocyte-macrophage colony stimulating factor receptor alpha and uses thereof
CN113348177A (zh) 2018-11-28 2021-09-03 百时美施贵宝公司 包含经修饰的重链恒定区的抗体
JP7671248B2 (ja) 2018-12-05 2025-05-01 ジェネンテック， インコーポレイテッド がんの免疫療法のための診断方法及び診断用組成物
KR20210100668A (ko) 2018-12-06 2021-08-17 제넨테크, 인크. 항-CD79b 면역접합체, 알킬화제 및 항-CD20 항체를 포함하는 미만성 큰 B-세포 림프종의 조합 요법
WO2020116636A1 (ja) 2018-12-07 2020-06-11 小野薬品工業株式会社 免疫抑制剤
WO2020123275A1 (en) 2018-12-10 2020-06-18 Genentech, Inc. Photocrosslinking peptides for site specific conjugation to fc-containing proteins
US20220064260A1 (en) 2018-12-14 2022-03-03 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Isolated mhc-derived human peptides and uses thereof for stimulating and activating the suppressive function of cd8+cd45rclow tregs
WO2020128863A1 (en) 2018-12-19 2020-06-25 Novartis Ag Anti-tnf-alpha antibodies
AR117327A1 (es) 2018-12-20 2021-07-28 23Andme Inc Anticuerpos anti-cd96 y métodos de uso de estos
US20220089694A1 (en) 2018-12-20 2022-03-24 The U.S.A., As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Ebola virus glycoprotein-specific monoclonal antibodies and uses thereof
TW202035442A (zh) 2018-12-20 2020-10-01 美商建南德克公司 經修飾之抗體Fc及其使用方法
US11629172B2 (en) 2018-12-21 2023-04-18 Pfizer Inc. Human cytomegalovirus gB polypeptide
MX2021007307A (es) 2018-12-21 2021-07-07 Hoffmann La Roche Anticuerpos que se unen a cd3.
EP3898682A1 (en) 2018-12-21 2021-10-27 F. Hoffmann-La Roche AG Tumor-targeted agonistic cd28 antigen binding molecules
JP2022514950A (ja) 2018-12-21 2022-02-16 ２３アンドミー・インコーポレイテッド 抗ｉｌ－３６抗体およびその使用方法
CN113195531B (zh) 2018-12-21 2025-03-04 豪夫迈·罗氏有限公司 与VEGF和IL-1β结合的抗体及其使用方法
CN113286822A (zh) 2018-12-21 2021-08-20 豪夫迈·罗氏有限公司 靶向肿瘤的超激动性cd28抗原结合分子
CN113490687A (zh) 2018-12-26 2021-10-08 西利欧发展公司 抗ctla4抗体和其使用方法
WO2020141145A1 (en) 2018-12-30 2020-07-09 F. Hoffmann-La Roche Ag Anti-rabbit cd19 antibodies and methods of use
CA3125762A1 (en) 2019-01-10 2020-07-16 Iovance Biotherapeutics, Inc. System and methods for monitoring adoptive cell therapy clonality and persistence
MX2021008434A (es) 2019-01-14 2021-09-23 Genentech Inc Metodos para tratar el cancer con un antagonista de union al eje de pd-1 y una vacuna de arn.
WO2020148207A1 (en) 2019-01-14 2020-07-23 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Human monoclonal antibodies binding to hla-a2
CN109762067B (zh) 2019-01-17 2020-02-28 北京天广实生物技术股份有限公司 结合人Claudin 18.2的抗体及其用途
CN118894938A (zh) 2019-01-22 2024-11-05 百时美施贵宝公司 抗IL-7Rα亚基的抗体及其用途
US12263234B2 (en) 2019-01-23 2025-04-01 Tayu Huaxia Biotech Medical Group Co., Ltd. Anti-PD-L1 diabodies and the use thereof
AU2020211407A1 (en) 2019-01-23 2021-08-12 Millennium Pharmaceuticals, Inc. Anti-CD38 antibodies
JPWO2020153467A1 (ja) 2019-01-24 2021-12-02 中外製薬株式会社 新規がん抗原及びそれらの抗原に対する抗体
GB201901197D0 (en) 2019-01-29 2019-03-20 Femtogenix Ltd G-A Crosslinking cytotoxic agents
PE20212198A1 (es) 2019-01-29 2021-11-16 Juno Therapeutics Inc Anticuerpos y receptores quimericos de antigenos especificos para receptor 1 huerfano tipo receptor tirosina-cinasa (ror1)
AU2020224681A1 (en) 2019-02-21 2021-09-16 Marengo Therapeutics, Inc. Antibody molecules that bind to NKp30 and uses thereof
SG11202109061YA (en) 2019-02-21 2021-09-29 Marengo Therapeutics Inc Multifunctional molecules that bind to t cell related cancer cells and uses thereof
KR20210133237A (ko) 2019-02-27 2021-11-05 제넨테크, 인크. 항-tigit 및 항-cd20 또는 항-cd38 항체로 치료를 위한 투약
AU2020232605A1 (en) 2019-03-01 2021-10-21 Xencor, Inc. Heterodimeric antibodies that bind ENPP3 and CD3
WO2020180733A1 (en) 2019-03-01 2020-09-10 Iovance Biotherapeutics, Inc. Expansion of tumor infiltrating lymphocytes from liquid tumors and therapeutic uses thereof
US10570210B1 (en) 2019-03-04 2020-02-25 Beijing Mabworks Biotech Co.Ltd Antibodies binding CD40 and uses thereof
KR102866290B1 (ko) 2019-03-08 2025-10-01 제넨테크, 인크. 세포외 소포 상에서 막 관련 단백질을 검출하고 정량하기 위한 방법
WO2020185763A1 (en) 2019-03-11 2020-09-17 Memorial Sloan Kettering Cancer Center Cd22 antibodies and methods of using the same
JP7730761B2 (ja) 2019-03-14 2025-08-28 ジェネンテック， インコーポレイテッド 抗ＨＥＲ２ ＭＡＢと組み合わせたＨＥＲ２ｘＣＤ３二重特異性抗体によるがんの処置
EP3952996A1 (en) 2019-04-12 2022-02-16 F. Hoffmann-La Roche AG Bispecific antigen binding molecules comprising lipocalin muteins
EP3955960B1 (en) 2019-04-18 2025-01-15 Bristol-Myers Squibb Company Ipilimumab variants with enhanced specificity for binding at low ph
AU2020257748A1 (en) 2019-04-19 2021-11-18 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Chimeric receptor recognizing modification site of antibody
TW202043291A (zh) 2019-04-19 2020-12-01 美商建南德克公司 抗mertk抗體及使用方法
EP3962523A2 (en) 2019-05-03 2022-03-09 The United States of America, as represented by the Secretary, Department of Health and Human Services Neutralizing antibodies to plasmodium falciparum circumsporozoite protein and their use
TWI879768B (zh) 2019-05-03 2025-04-11 美商建南德克公司 用抗pd-l1抗體治療癌症之方法
WO2020232305A1 (en) 2019-05-14 2020-11-19 Werewolf Therapeutics, Inc. Separation moieties and methods and use thereof
AU2020275415B2 (en) 2019-05-14 2026-01-15 Genentech, Inc. Methods of using anti-CD79B immunoconjugates to treat follicular lymphoma
CN119613486A (zh) 2019-05-20 2025-03-14 诺华股份有限公司 具有包含亲水性基团的接头的抗体药物缀合物
CN114630838A (zh) 2019-05-20 2022-06-14 法国国家健康和医学研究院 新的抗cd25抗体
KR20220010743A (ko) 2019-05-21 2022-01-26 노파르티스 아게 Bcma에 대한 삼중특이적 결합 분자 및 이의 용도
CN113874398B (zh) 2019-05-21 2025-08-01 诺华股份有限公司 Cd19结合分子及其用途
US20230085439A1 (en) 2019-05-21 2023-03-16 University Of Georgia Research Foundation, Inc. Antibodies that bind human metapneumovirus fusion protein and their use
WO2020236797A1 (en) 2019-05-21 2020-11-26 Novartis Ag Variant cd58 domains and uses thereof
KR20220012270A (ko) 2019-05-23 2022-02-03 에이씨 이뮨 에스.에이. 항-tdp-43 결합 분자 및 이의 용도
EP3983441A1 (en) 2019-06-11 2022-04-20 Alector LLC Anti-sortilin antibodies for use in therapy
AR119267A1 (es) 2019-06-12 2021-12-09 Novartis Ag Anticuerpos de receptor de péptido natriurético 1 y métodos de uso
CA3141378A1 (en) 2019-06-26 2020-12-30 F. Hoffmann-La Roche Ag Fusion of an antibody binding cea and 4-1bbl
WO2020260326A1 (en) 2019-06-27 2020-12-30 F. Hoffmann-La Roche Ag Novel icos antibodies and tumor-targeted antigen binding molecules comprising them
EP3994173A1 (en) 2019-07-02 2022-05-11 The United States of America, as represented by the Secretary, Department of Health and Human Services Monoclonal antibodies that bind egfrviii and their use
CA3145139A1 (en) 2019-07-09 2021-01-14 Staidson (Beijing) Biopharmaceuticals Co., Ltd. Antibodies specifically recognizing pseudomonas pcrv and uses thereof
MX2022000111A (es) 2019-07-10 2022-02-10 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Moleculas de union a claudina-6 y usos de las mismas.
JPWO2021010326A1 (pl) 2019-07-12 2021-01-21
AR119382A1 (es) 2019-07-12 2021-12-15 Hoffmann La Roche Anticuerpos de pre-direccionamiento y métodos de uso
AR119393A1 (es) 2019-07-15 2021-12-15 Hoffmann La Roche Anticuerpos que se unen a nkg2d
CN114258401B (zh) 2019-07-16 2025-08-12 Inserm(法国国家健康医学研究院) 对cd38具有特异性的抗体及其用途
EP4004044A1 (en) 2019-07-24 2022-06-01 H. Lundbeck A/S Anti-mglur5 antibodies and uses thereof
MX2022001146A (es) 2019-07-29 2022-03-17 Compugen Ltd Formulaciones de anticuerpos anti-pvrig y sus usos.
WO2021018925A1 (en) 2019-07-31 2021-02-04 F. Hoffmann-La Roche Ag Antibodies binding to gprc5d
AU2020321969A1 (en) 2019-07-31 2022-03-17 Alector Llc Anti-MS4A4A antibodies and methods of use thereof
CR20220019A (es) 2019-07-31 2022-02-11 Hoffmann La Roche Anticuerpos que se fijan a gprc5d
CN114641490B (zh) 2019-08-06 2023-06-06 新旭生技股份有限公司 结合至病理性tau种类的抗体及其用途
EP4438057A3 (en) 2019-09-12 2025-01-01 F. Hoffmann-La Roche AG Compositions and methods of treating lupus nephritis
EP4031579A2 (en) 2019-09-18 2022-07-27 F. Hoffmann-La Roche AG Anti-klk7 antibodies, anti-klk5 antibodies, multispecific anti-klk5/klk7 antibodies, and methods of use
TW202124446A (zh) 2019-09-18 2021-07-01 瑞士商諾華公司 與ｅｎｔｐｄ２抗體之組合療法
CN114502590A (zh) 2019-09-18 2022-05-13 诺华股份有限公司 Entpd2抗体、组合疗法、以及使用这些抗体和组合疗法的方法
AU2020350689A1 (en) 2019-09-19 2022-03-31 Bristol-Myers Squibb Company Antibodies binding to VISTA at acidic pH
MX2022003266A (es) 2019-09-20 2022-04-11 Genentech Inc Dosis para anticuerpos anti-triptasa.
AU2020351734A1 (en) 2019-09-27 2022-04-14 Genentech, Inc. Dosing for treatment with anti-TIGIT and anti-PD-L1 antagonist antibodies
EP4037710A1 (en) 2019-10-04 2022-08-10 Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale (INSERM) Methods and pharmaceutical composition for the treatment of ovarian cancer, breast cancer or pancreatic cancer
CA3153880A1 (en) 2019-10-18 2020-06-09 Juana Elva HERNANDEZ MONTALVO Methods of using anti-cd79b immunoconjugates to treat diffuse large b-cell lymphoma
US20220378742A1 (en) 2019-11-04 2022-12-01 Compugen Ltd. Combination therapy with anti-pvrig antibodies formulations and anti-pd-1 antibodies
JP2022553803A (ja) 2019-11-06 2022-12-26 ジェネンテック， インコーポレイテッド 血液がんの処置のための診断方法及び治療方法
WO2021096888A1 (en) 2019-11-12 2021-05-20 Foundation Medicine, Inc. Methods of detecting a fusion gene encoding a neoantigen
EP4058471A1 (en) 2019-11-14 2022-09-21 Werewolf Therapeutics, Inc. Activatable cytokine polypeptides and methods of use thereof
CA3154526A1 (en) 2019-11-15 2021-05-20 Enthera S.R.L. Tmem219 antibodies and therapeutic uses thereof
JP7781746B2 (ja) 2019-11-21 2025-12-08 エンテラ・エッセ・エッレ・エッレ Ｉｇｆｂｐ３抗体及びその治療的使用
EP3831849A1 (en) 2019-12-02 2021-06-09 LamKap Bio beta AG Bispecific antibodies against ceacam5 and cd47
US20230057899A1 (en) 2019-12-05 2023-02-23 Compugen Ltd. Anti-pvrig and anti-tigit antibodies for enhanced nk-cell based tumor killing
WO2021113776A1 (en) 2019-12-06 2021-06-10 Juno Therapeutics, Inc. Anti-idiotypic antibodies to bcma-targeted binding domains and related compositions and methods
WO2021113780A1 (en) 2019-12-06 2021-06-10 Juno Therapeutics, Inc. Anti-idiotypic antibodies to gprc5d-targeted binding domains and related compositions and methods
US20230040928A1 (en) 2019-12-09 2023-02-09 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Antibodies having specificity to her4 and uses thereof
KR20220113790A (ko) 2019-12-13 2022-08-16 제넨테크, 인크. 항-ly6g6d 항체 및 사용 방법
MX2022007231A (es) 2019-12-13 2022-07-12 Alector Llc Anticuerpos anti-mertk y metodos de uso de los mismos.
WO2021122875A1 (en) 2019-12-18 2021-06-24 F. Hoffmann-La Roche Ag Antibodies binding to hla-a2/mage-a4
JP7676408B2 (ja) 2019-12-20 2025-05-14 ブリストル－マイヤーズ スクイブ カンパニー 脱フコシル化抗体を生成するためのフコシル化阻害剤の使用
CN113045655A (zh) 2019-12-27 2021-06-29 高诚生物医药(香港)有限公司 抗ox40抗体及其用途
KR20240035914A (ko) 2019-12-27 2024-03-18 추가이 세이야쿠 가부시키가이샤 항ctla-4 항체 및 그의 사용
TWI877278B (zh) 2019-12-30 2025-03-21 美商思進公司 以非海藻糖苷化抗－ｃｄ７０抗體治療癌症之方法
JP7456075B2 (ja) 2020-01-03 2024-03-27 ビオシオン インコーポレイテッド 抗体結合ｂｃｍａ及びその使用
EP4084823A4 (en) 2020-01-03 2024-05-15 Marengo Therapeutics, Inc. ANTI-TCR ANTIBODY MOLECULES AND THEIR USES
CN114929734A (zh) 2020-01-09 2022-08-19 豪夫迈·罗氏有限公司 新型含有4-1bbl三聚体的抗原结合分子
CN110818795B (zh) 2020-01-10 2020-04-24 上海复宏汉霖生物技术股份有限公司 抗tigit抗体和使用方法
TWI869528B (zh) 2020-01-13 2025-01-11 美商威特拉公司 C5ar1抗體分子及其用途
AU2021208532A1 (en) 2020-01-16 2022-07-07 Genmab A/S Formulations of CD38 antibodies and uses thereof
WO2021194481A1 (en) 2020-03-24 2021-09-30 Genentech, Inc. Dosing for treatment with anti-tigit and anti-pd-l1 antagonist antibodies
WO2022050954A1 (en) 2020-09-04 2022-03-10 Genentech, Inc. Dosing for treatment with anti-tigit and anti-pd-l1 antagonist antibodies
EP4097143A1 (en) 2020-01-31 2022-12-07 The Cleveland Clinic Foundation Anti-müllerian hormone receptor 2 antibodies and methods of use
CN116650628A (zh) 2020-01-31 2023-08-29 基因泰克公司 用pd-1轴结合拮抗剂和rna疫苗诱导新表位特异性t细胞的方法
EP4100435A1 (en) 2020-02-05 2022-12-14 Larimar Therapeutics, Inc. Tat peptide binding proteins and uses thereof
TWI895351B (zh) 2020-02-12 2025-09-01 日商中外製藥股份有限公司 用於癌症之治療的抗cd137抗原結合分子
AU2021219668B2 (en) 2020-02-14 2025-06-12 Gilead Sciences, Inc. Antibodies and fusion proteins that bind to CCR8 and uses thereof
EP3868396A1 (en) 2020-02-20 2021-08-25 Enthera S.R.L. Inhibitors and uses thereof
EP4093762A1 (en) 2020-02-20 2022-11-30 The United States of America, as represented by the Secretary, Department of Health and Human Services Epstein-barr virus monoclonal antibodies and uses thereof
CN119708230A (zh) 2020-02-27 2025-03-28 正大天晴药业集团股份有限公司 结合il4r的抗体及其用途
WO2021170071A1 (en) 2020-02-28 2021-09-02 Shanghai Henlius Biotech, Inc. Anti-cd137 constructs, multispecific antibody and uses thereof
BR112022016491A2 (pt) 2020-02-28 2022-10-11 Shanghai Henlius Biotech Inc Construto anti-cd137 e usos do mesmo
US20230340114A1 (en) 2020-03-12 2023-10-26 Immune-Onc Therapeutics, Inc. Novel anti-lilrb4 antibodies and derivative products
JP7767298B2 (ja) 2020-03-13 2025-11-11 ジェネンテック， インコーポレイテッド 抗インターロイキン－３３抗体及びその使用
KR102811560B1 (ko) 2020-03-19 2025-05-22 제넨테크, 인크. 동종형 선택적 항-tgf-베타 항체 및 이용 방법
WO2021194861A1 (en) 2020-03-23 2021-09-30 Genentech, Inc. Biomarkers for predicting response to il-6 antagonist in covid-19 pneumonia
WO2021194860A1 (en) 2020-03-23 2021-09-30 Genentech, Inc. Tocilizumab and remdesivir combination therapy for covid-19 pneumonia
EP4107184A1 (en) 2020-03-23 2022-12-28 Genentech, Inc. Method for treating pneumonia, including covid-19 pneumonia, with an il6 antagonist
MX2022011752A (es) 2020-03-24 2022-10-18 Genentech Inc Agentes de fijacion a tie2 y metodos de uso.
EP4127153A2 (en) 2020-03-26 2023-02-08 Genentech, Inc. Modified mammalian cells having reduced host cell proteins
JP2023520773A (ja) 2020-03-27 2023-05-19 ノバルティス アーゲー 増殖性疾患及び自己免疫疾患を治療するための二重特異性組合せ治療
JP2023519962A (ja) 2020-03-31 2023-05-15 アレクトル エルエルシー 抗ｍｅｒｔｋ抗体及びその使用方法
AR121706A1 (es) 2020-04-01 2022-06-29 Hoffmann La Roche Moléculas de unión a antígeno biespecíficas dirigidas a ox40 y fap
CA3170570A1 (en) 2020-04-01 2021-10-07 James J. KOBIE Monoclonal antibodies against the hemagglutinin (ha) and neuraminidase (na) of influenza h3n2 viruses
CN115698717A (zh) 2020-04-03 2023-02-03 基因泰克公司 癌症的治疗和诊断方法
EP4132971A1 (en) 2020-04-09 2023-02-15 Merck Sharp & Dohme LLC Affinity matured anti-lap antibodies and uses thereof
WO2021207662A1 (en) 2020-04-10 2021-10-14 Genentech, Inc. Use of il-22fc for the treatment or prevention of pneumonia, acute respiratory distress syndrome, or cytokine release syndrome
BR112022021441A2 (pt) 2020-04-24 2022-12-13 Genentech Inc Métodos para tratar linfoma folicular e linfoma difuso de grandes células b e kits
CA3172880A1 (en) 2020-04-27 2021-11-04 Sotirios Tsimikas Isoform-independent antibodies to lipoprotein(a)
EP3921034A2 (en) 2020-04-28 2021-12-15 The Rockefeller University Neutralizing anti-sars-cov-2 antibodies and methods of use thereof
WO2021222167A1 (en) 2020-04-28 2021-11-04 Genentech, Inc. Methods and compositions for non-small cell lung cancer immunotherapy
IL297830A (en) 2020-05-03 2023-01-01 Levena Suzhou Biopharma Co Ltd Antibody-drug conjugates (adcs) comprising an anti-trop-2 antibody, compositions comprising such adcs, as well as methods of making and using the same
WO2021228956A1 (en) 2020-05-12 2021-11-18 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) New method to treat cutaneous t-cell lymphomas and tfh derived lymphomas
EP4151654A4 (en) 2020-05-12 2024-11-27 Chia Tai Tianqing Pharmaceutical Group Co., Ltd. St2 antigen binding protein
WO2021231976A1 (en) 2020-05-14 2021-11-18 Xencor, Inc. Heterodimeric antibodies that bind prostate specific membrane antigen (psma) and cd3
US20230192867A1 (en) 2020-05-15 2023-06-22 Bristol-Myers Squibb Company Antibodies to garp
US20230220057A1 (en) 2020-05-27 2023-07-13 Staidson (Beijing) Biopharmaceuticals Co., Ltd. Antibodies specifically recognizing nerve growth factor and uses thereof
JP2023528375A (ja) 2020-05-29 2023-07-04 ２３アンドミー・インコーポレイテッド 抗ｃｄ２００ｒ１抗体及びその使用方法
US20230235075A1 (en) 2020-06-02 2023-07-27 Dynamicure Biotechnology Llc Anti-cd93 constructs and uses thereof
CN116529260A (zh) 2020-06-02 2023-08-01 当康生物技术有限责任公司 抗cd93构建体及其用途
JP2023527918A (ja) 2020-06-08 2023-06-30 エフ・ホフマン－ラ・ロシュ・アクチェンゲゼルシャフト 抗ｈｂｖ抗体及び使用方法
WO2021252977A1 (en) 2020-06-12 2021-12-16 Genentech, Inc. Methods and compositions for cancer immunotherapy
MX2022015877A (es) 2020-06-16 2023-01-24 Genentech Inc Metodos y composiciones para tratar cancer de mama triple negativo.
MX2022015881A (es) 2020-06-18 2023-01-24 Genentech Inc Tratamiento con anticuerpos anti-tigit y antagonistas de union al eje de pd-1.
KR20230025673A (ko) 2020-06-19 2023-02-22 에프. 호프만-라 로슈 아게 CD3 및 FolR1에 결합하는 항체
WO2021255146A1 (en) 2020-06-19 2021-12-23 F. Hoffmann-La Roche Ag Antibodies binding to cd3 and cea
KR20230025665A (ko) 2020-06-19 2023-02-22 에프. 호프만-라 로슈 아게 Cd3에 결합하는 항체
EP4168447A1 (en) 2020-06-19 2023-04-26 F. Hoffmann-La Roche AG Antibodies binding to cd3 and cd19
US11857622B2 (en) 2020-06-21 2024-01-02 Pfizer Inc. Human cytomegalovirus GB polypeptide
US20230235040A1 (en) 2020-06-22 2023-07-27 Almirall, S.A. Anti-il-36 antibodies and methods of use thereof
IL297880A (en) 2020-06-23 2023-01-01 Hoffmann La Roche Agonistic cd28 antigen binding molecules targeting her2
JP2023533217A (ja) 2020-06-24 2023-08-02 ジェネンテック， インコーポレイテッド アポトーシス耐性細胞株
IL299292A (en) 2020-06-25 2023-02-01 Merck Sharp & Dohme Llc High-affinity antibodies to tau phosphorylated at serine 413
JP2023531067A (ja) 2020-06-25 2023-07-20 エフ・ホフマン－ラ・ロシュ・アクチェンゲゼルシャフト 抗ｃｄ３／抗ｃｄ２８二重特異性抗原結合分子
KR20230030632A (ko) 2020-06-30 2023-03-06 지앙수 헨그루이 파마슈티컬스 컴퍼니 리미티드 항-cd70 항체 및 이의 적용
MX2023000339A (es) 2020-07-10 2023-02-09 Hoffmann La Roche Anticuerpos que se unen a celulas cancerosas y dirigen radionucleotidos a dichas celulas.
KR102916382B1 (ko) 2020-07-13 2026-01-21 상하이 준스 바이오사이언스 컴퍼니 리미티드 항-cldn-18.2 항체 및 그 용도
CN116406377A (zh) 2020-07-17 2023-07-07 基因泰克公司 抗notch2抗体及其使用方法
GB2597532A (en) 2020-07-28 2022-02-02 Femtogenix Ltd Cytotoxic compounds
EP4188550A1 (en) 2020-07-29 2023-06-07 Dynamicure Biotechnology LLC Anti-cd93 constructs and uses thereof
EP4189121A1 (en) 2020-08-03 2023-06-07 Genentech, Inc. Diagnostic and therapeutic methods for lymphoma
EP4189071A1 (en) 2020-08-03 2023-06-07 Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale (INSERM) Population of treg cells functionally committed to exert a regulatory activity and their use for adoptive therapy
WO2022029660A1 (en) 2020-08-05 2022-02-10 Juno Therapeutics, Inc. Anti-idiotypic antibodies to ror1-targeted binding domains and related compositions and methods
MX2023001440A (es) 2020-08-07 2023-03-06 Genentech Inc Proteinas de fusion del ligando para flt3 y metodos de uso.
EP4196502A1 (en) 2020-08-13 2023-06-21 Bristol-Myers Squibb Company Methods of redirecting of il-2 to target cells of interest
JP2023537761A (ja) 2020-08-14 2023-09-05 エイシー イミューン ソシエテ アノニム ヒト化抗ｔｄｐ－４３結合分子およびその使用
EP4204448A2 (en) 2020-08-27 2023-07-05 cureab GmbH Anti-golph2 antibodies for macrophage and dendritic cell differentiation
JP2023539201A (ja) 2020-08-28 2023-09-13 ジェネンテック， インコーポレイテッド 宿主細胞タンパク質のＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓ９マルチプレックスノックアウト
EP4208201A1 (en) 2020-09-04 2023-07-12 F. Hoffmann-La Roche AG Antibody that binds to vegf-a and ang2 and methods of use
PE20231575A1 (es) 2020-09-14 2023-10-04 Ichnos Sciences SA Anticuerpos que se unen a il1rap y usos de estos
EP4213877A1 (en) 2020-09-17 2023-07-26 Genentech, Inc. Results of empacta: a randomized, double-blind, placebo-controlled, multicenter study to evaluate the efficacy and safety of tocilizumab in hospitalized patients with covid-19 pneumonia
EP4217389A4 (en) 2020-09-28 2025-03-19 Angitia Incorporated Limited ANTI-SCLEROSTIN CONSTRUCTS AND USES THEREOF
US20230365680A1 (en) 2020-09-30 2023-11-16 Compugen Ltd. Combination therapy with anti-pvrig antibodies formulations, anti-tigit antibodies, and anti-pd-1 antibodies
EP4221752A4 (en) 2020-09-30 2024-12-04 Dren Bio, Inc. ANTI-CD94 ANTIBODIES AND METHODS OF USE THEREOF
TWI836278B (zh) 2020-10-05 2024-03-21 美商建南德克公司 用抗fcrh5/抗cd3雙特異性抗體進行治療之給藥
EP4225330A1 (en) 2020-10-06 2023-08-16 Iovance Biotherapeutics, Inc. Treatment of nsclc patients with tumor infiltrating lymphocyte therapies
WO2022076606A1 (en) 2020-10-06 2022-04-14 Iovance Biotherapeutics, Inc. Treatment of nsclc patients with tumor infiltrating lymphocyte therapies
WO2022077006A1 (en) 2020-10-07 2022-04-14 Dren Bio, Inc. Anti-dectin-1 antibodies and methods of use thereof
KR20230086765A (ko) 2020-10-13 2023-06-15 얀센 바이오테크 인코포레이티드 분화 클러스터 iv 및/또는 viii을 조절하기 위한 바이오-조작된 t 세포 매개 면역, 물질 및 기타 방법
EP4228764A1 (en) 2020-10-14 2023-08-23 Five Prime Therapeutics, Inc. Anti-c-c chemokine receptor 8 (ccr8) antibodies and methods of use thereof
CN116685325A (zh) 2020-10-20 2023-09-01 豪夫迈·罗氏有限公司 Pd-1轴结合拮抗剂和lrrk2抑制剂的组合疗法
TW202233671A (zh) 2020-10-20 2022-09-01 美商建南德克公司 Ｐｅｇ結合抗ｍｅｒｔｋ抗體及其使用方法
CA3192306A1 (en) 2020-10-20 2022-04-28 Burkhard Ludewig Antibodies or antigen-binding fragments specifically binding to gremlin-1 and uses thereof
WO2022090801A2 (en) 2020-10-26 2022-05-05 Compugen Ltd. Pvrl2 and/or pvrig as biomarkers for treatment
WO2022093981A1 (en) 2020-10-28 2022-05-05 Genentech, Inc. Combination therapy comprising ptpn22 inhibitors and pd-l1 binding antagonists
CA3196076A1 (en) 2020-11-04 2022-05-12 Chi-Chung Li Subcutaneous dosing of anti-cd20/anti-cd3 bispecific antibodies
IL302217A (en) 2020-11-04 2023-06-01 Genentech Inc Dosage for treatment with bispecific anti-CD20/anti-CD3 antibodies and anti-CD79B drug antibody conjugates
EP4240492A2 (en) 2020-11-04 2023-09-13 Genentech, Inc. Dosing for treatment with anti-cd20/anti-cd3 bispecific antibodies
US11919945B2 (en) 2020-11-04 2024-03-05 The Rockefeller University Neutralizing anti-SARS-CoV-2 antibodies
JP2023548529A (ja) 2020-11-06 2023-11-17 ノバルティス アーゲー Ｃｄ１９結合分子及びその使用
CN116390933A (zh) 2020-11-06 2023-07-04 诺华股份有限公司 治疗b细胞恶性肿瘤的抗cd19剂和b细胞靶向剂组合疗法
CN116390949A (zh) 2020-11-06 2023-07-04 百时美施贵宝公司 作为单一疗法给药和施用非岩藻糖基化抗ctla-4抗体
CN117916261A (zh) 2020-11-16 2024-04-19 豪夫迈·罗氏有限公司 与靶向fap的cd40激动剂的组合疗法
US20240002521A1 (en) 2020-11-20 2024-01-04 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Anti-cd25 antibodies
AR124123A1 (es) 2020-11-20 2023-02-15 Inst Nat Sante Rech Med Anticuerpos anti-cd25
KR20230113581A (ko) 2020-11-25 2023-07-31 실리오 디벨럽먼트, 인크. 종양 특이적 절단성 링커
AU2021391054A1 (en) 2020-12-02 2023-06-22 Shanghai Henlius Biotech, Inc. ANTI-GARP/TGFβ ANTIBODIES AND METHODS OF USE
US20240101681A1 (en) 2020-12-02 2024-03-28 Alector Llc Methods of use of anti-sortilin antibodies
EP4255451A4 (en) 2020-12-03 2025-01-01 The Board Of Regents Of The University Of Texas System Methods for identifying lilrb-blocking antibodies
TW202237639A (zh) 2020-12-09 2022-10-01 日商武田藥品工業股份有限公司 鳥苷酸環化酶ｃ（ｇｃｃ）抗原結合劑之組成物及其使用方法
TW202237638A (zh) 2020-12-09 2022-10-01 日商武田藥品工業股份有限公司 烏苷酸環化酶ｃ（ｇｃｃ）抗原結合劑之組成物及其使用方法
US20240131064A1 (en) 2020-12-11 2024-04-25 Iovance Biotherapeutics, Inc. Treatment of cancer patients with tumor infiltrating lymphocyte therapies in combination with braf inhibitors and/or mek inhibitors
EP4259661A1 (en) 2020-12-14 2023-10-18 Novartis AG Reversal binding agents for anti-natriuretic peptide receptor 1 (npr1) antibodies and uses thereof
US20240123067A1 (en) 2020-12-17 2024-04-18 Iovance Biotherapeutics, Inc. Treatment of cancers with tumor infiltrating lymphocyte therapies
WO2022132904A1 (en) 2020-12-17 2022-06-23 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Human monoclonal antibodies targeting sars-cov-2
WO2022133140A1 (en) 2020-12-17 2022-06-23 Iovance Biotherapeutics, Inc. Treatment with tumor infiltrating lymphocyte therapies in combination with ctla-4 and pd-1 inhibitors
WO2022140797A1 (en) 2020-12-23 2022-06-30 Immunowake Inc. Immunocytokines and uses thereof
CN114685669A (zh) 2020-12-30 2022-07-01 和铂医药(苏州)有限公司 结合trop2的抗体及其用途
JP2024501845A (ja) 2020-12-31 2024-01-16 アイオバンス バイオセラピューティクス，インコーポレイテッド 腫瘍浸潤リンパ球の自動化された産生のためのデバイス及びプロセス
AU2022206061A1 (en) 2021-01-06 2023-07-06 F. Hoffmann-La Roche Ag Combination therapy employing a pd1-lag3 bispecific antibody and a cd20 t cell bispecific antibody
JP7744992B2 (ja) 2021-01-08 2025-09-26 北京韓美薬品有限公司 Ｐｄ－ｌ１と特異的に結合する抗体及びその抗原結合フラグメント
CN116710482A (zh) 2021-01-08 2023-09-05 北京韩美药品有限公司 特异性结合4-1bb的抗体及其抗原结合片段
KR20230129481A (ko) 2021-01-08 2023-09-08 베이징 한미 파마슈티컬 컴퍼니 리미티드 Cd47과 특이적으로 결합하는 항체 및 그 항원 결합단편
JP2024504931A (ja) 2021-01-12 2024-02-02 エフ・ホフマン－ラ・ロシュ・アクチェンゲゼルシャフト がん細胞に結合し、放射性核種を前記細胞に標的化するスプリット抗体
EP4277665A1 (en) 2021-01-13 2023-11-22 Memorial Sloan Kettering Cancer Center Anti-dll3 antibody-drug conjugate
US20240173442A1 (en) 2021-01-13 2024-05-30 Hoffmann-La Roche Inc. Combination therapy
AU2022207985A1 (en) 2021-01-13 2023-07-06 Visterra, Inc. Humanized complement 5a receptor 1 antibodies and methods of use thereof
US20240115720A1 (en) 2021-01-13 2024-04-11 Memorial Sloan Kettering Cancer Center Antibody-pyrrolobenzodiazepine derivative conjugate
EP4277926A1 (en) 2021-01-15 2023-11-22 The Rockefeller University Neutralizing anti-sars-cov-2 antibodies
AR124681A1 (es) 2021-01-20 2023-04-26 Abbvie Inc Conjugados anticuerpo-fármaco anti-egfr
WO2022162203A1 (en) 2021-01-28 2022-08-04 Vaccinvent Gmbh Method and means for modulating b-cell mediated immune responses
WO2022165275A2 (en) 2021-01-28 2022-08-04 Compugen Ltd. Combination therapy with anti-pvrig antibodies formulations and anti-pd-1-antibodies
EP4284422A1 (en) 2021-01-28 2023-12-06 Vaccinvent GmbH Method and means for modulating b-cell mediated immune responses
CN117120084A (zh) 2021-01-28 2023-11-24 维肯芬特有限责任公司 用于调节b细胞介导的免疫应答的方法和手段
US20240082397A1 (en) 2021-01-28 2024-03-14 Compugen Ltd. Anti-pvrig antibodies formulations and uses thereof
TW202241508A (zh) 2021-01-29 2022-11-01 美商艾歐凡斯生物治療公司 細胞介素相關之腫瘤浸潤性淋巴球組合物及方法
EP4288458A1 (en) 2021-02-03 2023-12-13 Genentech, Inc. Multispecific binding protein degrader platform and methods of use
US20240117011A1 (en) 2021-02-09 2024-04-11 The U.S.A., As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Antibodies targeting the spike protein of coronaviruses
CA3210753A1 (en) 2021-02-09 2022-08-18 University Of Georgia Research Foundation, Inc. Human monoclonal antibodies against pneumococcal antigens
MX2023009497A (es) 2021-02-15 2023-08-23 Takeda Pharmaceuticals Co Composiciones y metodos de terapia celular para modular la se?alizacion del factor de crecimiento transformador-beta (tgf-beta).
EP4301467A1 (en) 2021-03-01 2024-01-10 Xilio Development, Inc. Combination of ctla4 and pd1/pdl1 antibodies for treating cancer
US20220340662A1 (en) 2021-03-01 2022-10-27 Xilio Development, Inc. Combination of masked ctla4 and pd1/pdl1 antibodies for treating cancer
EP4301418A1 (en) 2021-03-03 2024-01-10 Sorrento Therapeutics, Inc. Antibody-drug conjugates comprising an anti-bcma antibody
CN117279506A (zh) 2021-03-05 2023-12-22 艾欧凡斯生物治疗公司 肿瘤储存及细胞培养组合物
WO2022187863A1 (en) 2021-03-05 2022-09-09 Dynamicure Biotechnology Llc Anti-vista constructs and uses thereof
JP2024511319A (ja) 2021-03-09 2024-03-13 ゼンコア インコーポレイテッド Ｃｄ３及びｃｌｄｎ６に結合するヘテロ二量体抗体
US20240392004A1 (en) 2021-03-10 2024-11-28 Immunowake Inc. Immunomodulatory molecules and uses thereof
JP2024509274A (ja) 2021-03-10 2024-02-29 ゼンコア インコーポレイテッド Ｃｄ３及びｇｐｃ３に結合するヘテロ二量体抗体
JP2024512377A (ja) 2021-03-12 2024-03-19 ジェネンテック， インコーポレイテッド 抗ｋｌｋ７抗体、抗ｋｌｋ５抗体、多重特異性抗ｋｌｋ５／ｋｌｋ７抗体、及び使用方法
WO2022198192A1 (en) 2021-03-15 2022-09-22 Genentech, Inc. Compositions and methods of treating lupus nephritis
EP4308606A1 (en) 2021-03-18 2024-01-24 Alector LLC Anti-tmem106b antibodies and methods of use thereof
KR102805310B1 (ko) 2021-03-18 2025-05-13 메디뮨 리미티드 Ccr9에 결합하는 치료용 결합 분자
US20240191191A1 (en) 2021-03-19 2024-06-13 Iovance Biotherapeutics, Inc. Methods for infiltrating lymphocyte (til) expansion related to cd39/cd69 selection and gene knockout in tils
WO2022197877A1 (en) 2021-03-19 2022-09-22 Genentech, Inc. Methods and compositions for time delayed bio-orthogonal release of cytotoxic agents
JP2024512567A (ja) 2021-03-23 2024-03-19 インサーム（インスティテュ ナシオナル ドゥ ラ サンテ エ ドゥ ラ ルシェルシェ メディカル） Ｔ細胞リンパ腫の診断および治療方法
EP4314063A1 (en) 2021-03-23 2024-02-07 Alector LLC Anti-tmem106b antibodies for treating and preventing coronavirus infections
WO2022204155A1 (en) 2021-03-23 2022-09-29 Iovance Biotherapeutics, Inc. Cish gene editing of tumor infiltrating lymphocytes and uses of same in immunotherapy
CA3213163A1 (en) 2021-03-25 2022-09-29 Iovance Biotherapeutics, Inc. Methods and compositions for t-cell coculture potency assays and use with cell therapy products
CN117616041A (zh) 2021-03-25 2024-02-27 当康生物技术有限责任公司 抗-igfbp7构建体及其用途
CA3207652A1 (en) 2021-03-26 2022-09-29 Stephanie Cornen Cytokine anchors for nkp46-binding nk cell engager proteins
US20240382592A1 (en) 2021-04-09 2024-11-21 Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale Methods for the treatment of anaplastic large cell lymphoma
AR125344A1 (es) 2021-04-15 2023-07-05 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Anticuerpo anti-c1s
AU2022263418A1 (en) 2021-04-19 2023-10-26 Iovance Biotherapeutics, Inc. Chimeric costimulatory receptors, chemokine receptors, and the use of same in cellular immunotherapies
EP4326855A1 (en) 2021-04-19 2024-02-28 Genentech, Inc. Modified mammalian cells
WO2022223651A1 (en) 2021-04-23 2022-10-27 F. Hoffmann-La Roche Ag Prevention or mitigation of nk cell engaging agent-related adverse effects
CN117321078A (zh) 2021-04-30 2023-12-29 豪夫迈·罗氏有限公司 针对用抗cd20/抗cd3双特异性抗体和抗cd79b抗体药物缀合物进行组合治疗的给药
EP4334343A2 (en) 2021-05-06 2024-03-13 The Rockefeller University Neutralizing anti-sars- cov-2 antibodies and methods of use thereof
KR20240007184A (ko) 2021-05-12 2024-01-16 제넨테크, 인크. 미만성 거대 b세포 림프종을 치료하기 위해 항-cd79b 면역접합체를 사용하는 방법
JP2024518545A (ja) 2021-05-14 2024-05-01 ジェネンテック， インコーポレイテッド Ｔｒｅｍ２のアゴニスト
AU2022273541A1 (en) 2021-05-14 2023-11-30 Genentech, Inc. Methods for treatment of cd20-positive proliferative disorder with mosunetuzumab and polatuzumab vedotin
US20230115257A1 (en) 2021-05-17 2023-04-13 Curia Ip Holdings, Llc Sars-cov-2 spike protein antibodies
US20240269180A1 (en) 2021-05-17 2024-08-15 Iovance Biotherapeutics, Inc. Pd-1 gene-edited tumor infiltrating lymphocytes and uses of same in immunotherapy
US20240239875A1 (en) 2021-05-17 2024-07-18 Curia Ip Holdings, Llc Sars-cov-2 spike protein antibodies
WO2022243261A1 (en) 2021-05-19 2022-11-24 F. Hoffmann-La Roche Ag Agonistic cd40 antigen binding molecules targeting cea
WO2022246259A1 (en) 2021-05-21 2022-11-24 Genentech, Inc. Modified cells for the production of a recombinant product of interest
AR126009A1 (es) 2021-06-02 2023-08-30 Hoffmann La Roche Moléculas agonistas de unión al antígeno cd28 que se dirigen a epcam
TW202306994A (zh) 2021-06-04 2023-02-16 日商中外製藥股份有限公司 抗ddr2抗體及其用途
JP2024521405A (ja) 2021-06-09 2024-05-31 イナート・ファルマ・ソシエテ・アノニム Ｎｋｐ４６、サイトカイン受容体、腫瘍抗原およびｃｄ１６ａに結合する多特異性タンパク質
EP4351582B1 (en) 2021-06-09 2025-10-08 F. Hoffmann-La Roche AG Combination of a particular braf inhibitor (paradox breaker) and a pd-1 axis binding antagonist for use in the treatment of cancer
WO2022258691A1 (en) 2021-06-09 2022-12-15 Innate Pharma Multispecific proteins binding to nkg2d, a cytokine receptor, a tumour antigen and cd16a
WO2022258678A1 (en) 2021-06-09 2022-12-15 Innate Pharma Multispecific proteins binding to nkp30, a cytokine receptor, a tumour antigen and cd16a
CN117529504A (zh) 2021-06-09 2024-02-06 先天制药公司 结合至cd20、nkp46、cd16并缀合至il-2的多特异性抗体
BR112023025863A2 (pt) 2021-06-11 2024-03-05 Genentech Inc Métodos para tratar doença pulmonar obstrutiva crônica (dpoc), para reduzir a frequência de exacerbações moderadas a graves em um paciente com dpoc, para tratar ou prevenir dpoc, para manter e/ou melhorar a função pulmonar, para melhorar a contagem de linha de base de eosinófilos no sangue, kit, antagonistas de st2 e anticorpo anti-st2
JP2024527262A (ja) 2021-06-16 2024-07-24 アレクトル エルエルシー 二重特異性抗ＭｅｒＴＫ及び抗ＰＤＬ１抗体ならびにその使用方法
US20240279358A1 (en) 2021-06-16 2024-08-22 Alector Llc Monovalent anti-mertk antibodies and methods of use thereof
WO2022266660A1 (en) 2021-06-17 2022-12-22 Amberstone Biosciences, Inc. Anti-cd3 constructs and uses thereof
AU2022294106A1 (en) 2021-06-18 2024-01-25 Therini Bio, Inc. ANTIBODIES WHICH BIND HUMAN FIBRIN OR FIBRINOGEN γC DOMAIN AND METHODS OF USE
KR20240023123A (ko) 2021-06-22 2024-02-20 노파르티스 아게 화농성 한선염의 치료에 사용하기 위한 이중특이적 항체
CA3221833A1 (en) 2021-06-25 2022-12-29 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Anti-ctla-4 antibody
MX2023014453A (es) 2021-06-25 2024-01-31 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Uso de anticuerpos anti-antigeno 4 del linfocito t citotoxico (anti-ctla-4).
IL309405A (en) 2021-06-29 2024-02-01 Seagen Inc Methods for treating cancer with a combination of non-fucosylated anti-CD70 antibody and CD47 antagonist
EP4363450A1 (en) 2021-07-01 2024-05-08 Compugen Ltd. Anti-tigit and anti-pvrig in monotherapy and combination treatments
US20250011448A1 (en) 2021-07-08 2025-01-09 Staidson Biopharma Inc. Antibodies specifically recognizing tnfr2 and uses thereof
JP2024530402A (ja) 2021-07-12 2024-08-21 ジェネンテック， インコーポレイテッド 抗体－リパーゼ結合を減少させるための構造
KR20240058075A (ko) 2021-07-14 2024-05-03 스테이드슨 (베이징) 바이오팔마슈티칼스 캄퍼니 리미티드 Cd40을 특이적으로 식별하는 항체 및 이의 응용
EP4370553A1 (en) 2021-07-14 2024-05-22 Genentech, Inc. Anti-c-c motif chemokine receptor 8 (ccr8) antibodies and methods of use
US20240352132A1 (en) 2021-07-14 2024-10-24 Jiangsu Hengrui Pharmaceuticals Co., Ltd. Antigen-binding molecule specifically binding to hgfr and egfr, and pharmaceutical use thereof
JP2024526880A (ja) 2021-07-22 2024-07-19 ジェネンテック， インコーポレイテッド 脳標的化組成物及びその使用方法
WO2023001884A1 (en) 2021-07-22 2023-01-26 F. Hoffmann-La Roche Ag Heterodimeric fc domain antibodies
EP4373270A2 (en) 2021-07-22 2024-05-29 Iovance Biotherapeutics, Inc. Method for cryopreservation of solid tumor fragments
WO2023009716A1 (en) 2021-07-28 2023-02-02 Iovance Biotherapeutics, Inc. Treatment of cancer patients with tumor infiltrating lymphocyte therapies in combination with kras inhibitors
JP2024528217A (ja) 2021-08-03 2024-07-26 エフ・ホフマン－ラ・ロシュ・アクチェンゲゼルシャフト 二重特異性抗体および使用方法
US20240336697A1 (en) 2021-08-07 2024-10-10 Genentech, Inc. Methods of using anti-cd79b immunoconjugates to treat diffuse large b-cell lymphoma
JP2024534004A (ja) 2021-08-13 2024-09-18 ジェネンテック， インコーポレイテッド 抗トリプターゼ抗体のための投与量
WO2023021055A1 (en) 2021-08-19 2023-02-23 F. Hoffmann-La Roche Ag Multivalent anti-variant fc-region antibodies and methods of use
CN118284623A (zh) 2021-08-23 2024-07-02 伊莫尼塔斯治疗公司 抗cd161抗体及其用途
CN116059391B (zh) 2021-08-26 2025-06-24 上海君实生物医药科技股份有限公司 抗cldn-18.2抗体药物偶联物及其用途
IL310382A (en) 2021-08-27 2024-03-01 Genentech Inc Methods for treating tau pathologies
WO2023034750A1 (en) 2021-08-30 2023-03-09 Genentech, Inc. Anti-polyubiquitin multispecific antibodies
JP2024532620A (ja) 2021-08-30 2024-09-05 ラッセン・セラピューティクス１・インコーポレイテッド 抗ＩＬ－１１Ｒα抗体
AU2022338208A1 (en) 2021-09-06 2024-03-21 Genmab A/S Antibodies capable of binding to cd27, variants thereof and uses thereof
CA3231018A1 (en) 2021-09-09 2023-03-16 Iovance Biotherapeutics, Inc. Processes for generating til products using pd-1 talen knockdown
KR20240058167A (ko) 2021-09-17 2024-05-03 더 유나이티드 스테이츠 오브 어메리카, 애즈 리프리젠티드 바이 더 세크러테리, 디파트먼트 오브 헬쓰 앤드 휴먼 서비씨즈 Sars-cov-2 중화 항체 동정을 위한 합성 인간화 라마 나노바디 라이브러리 및 이의 용도
CA3232700A1 (en) 2021-09-24 2023-03-30 Rafael CUBAS Expansion processes and agents for tumor infiltrating lymphocytes
CN118541392A (zh) 2021-09-28 2024-08-23 准星生物医药有限公司 多种形式的分子复合物
JP2024534661A (ja) 2021-09-30 2024-09-20 バイオ－テラ ソリュ－ションズ，エルティーディー． 抗ｂ７－ｈ３抗体及びその応用
WO2023056403A1 (en) 2021-09-30 2023-04-06 Genentech, Inc. Methods for treatment of hematologic cancers using anti-tigit antibodies, anti-cd38 antibodies, and pd-1 axis binding antagonists
AR127269A1 (es) 2021-10-08 2024-01-03 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Formulación de anticuerpo anti-hla-dq2.5
US20250339522A1 (en) 2021-10-15 2025-11-06 Compugen Ltd. Combination therapy with anti-pvrig antibodies formulations, anti-tigit antibodies, and anti-pd-1 antibodies
EP4419558A1 (en) 2021-10-19 2024-08-28 Alector LLC Anti-cd300lb antibodies and methods of use thereof
CA3235824A1 (en) 2021-10-27 2023-05-04 Frederick G. Vogt Systems and methods for coordinating manufacturing of cells for patient-specific immunotherapy
EP4426748A4 (en) 2021-11-05 2025-11-26 Mab Biotec Inc Monoclonal antibodies against carcinomebryonal antigens and their uses
EP4430072A1 (en) 2021-11-10 2024-09-18 Genentech, Inc. Anti-interleukin-33 antibodies and uses thereof
CA3237410A1 (en) 2021-11-10 2023-05-19 Friedrich Graf Finck VON FINCKENSTEIN Methods of expansion treatment utilizing cd8 tumor infiltrating lymphocytes
CA3235206A1 (en) 2021-11-16 2023-05-25 Davide BASCO Novel molecules for therapy and diagnosis
TW202337494A (zh) 2021-11-16 2023-10-01 美商建南德克公司 用莫蘇妥珠單抗治療全身性紅斑狼瘡（ｓｌｅ）之方法及組成物
DK4186529T3 (da) 2021-11-25 2025-08-25 Veraxa Biotech Gmbh Forbedrede antistof-payload-konjugater (apc) fremstillet ved stedspecifik konjugering ved hjælp af genetisk kodeudvidelse
AU2022395626A1 (en) 2021-11-25 2024-05-30 Veraxa Biotech Gmbh Improved antibody-payload conjugates (apcs) prepared by site-specific conjugation utilizing genetic code expansion
CN118159286A (zh) 2021-11-25 2024-06-07 正大天晴药业集团股份有限公司 抗Siglec-15抗体及其应用
EP4437006A1 (en) 2021-11-26 2024-10-02 F. Hoffmann-La Roche AG Combination therapy of anti-tyrp1/anti-cd3 bispecific antibodies and tyrp1-specific antibodies
EP4445911A4 (en) 2021-12-06 2025-10-22 Beijing Solobio Genetechnology Co Ltd BISPECIFIC ANTIBODY THAT BINDS SPECIFICALLY TO KLEBSIELLA PNEUMONIAE O1 AND O2 ANTIGENS AND COMPOSITION
AR127887A1 (es) 2021-12-10 2024-03-06 Hoffmann La Roche Anticuerpos que se unen a cd3 y plap
WO2023110937A1 (en) 2021-12-14 2023-06-22 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Depletion of nk cells for the treatment of adverse post-ischemic cardiac remodeling
WO2023109901A1 (en) 2021-12-17 2023-06-22 Shanghai Henlius Biotech, Inc. Anti-ox40 antibodies and methods of use
EP4448578A4 (en) 2021-12-17 2026-02-18 Shanghai Henlius Biotech Inc ANTI-OX40 ANTIBODIES, MULTI-SPECIFIC ANTIBODIES AND METHODS OF USE
CR20240246A (es) 2021-12-20 2024-07-19 Hoffmann La Roche Anticuerpos agonistas anti-ltbr y anticuerpos biespecificos que los comprenden
UY40097A (es) 2022-01-07 2023-07-14 Johnson & Johnson Entpr Innovation Inc Materiales y métodos de proteínas de unión a il-1b
WO2023141445A1 (en) 2022-01-19 2023-07-27 Genentech, Inc. Anti-notch2 antibodies and conjugates and methods of use
EP4469159A1 (en) 2022-01-27 2024-12-04 The Rockefeller University Broadly neutralizing anti-sars-cov-2 antibodies targeting the n-terminal domain of the spike protein and methods of use thereof
JP2025503987A (ja) 2022-01-28 2025-02-06 アイオバンス バイオセラピューティクス，インコーポレイテッド ペイロードを発現するように操作された腫瘍浸潤リンパ球
JP2025504908A (ja) 2022-01-28 2025-02-19 アイオバンス バイオセラピューティクス，インコーポレイテッド サイトカイン関連腫瘍浸潤リンパ球組成物及び方法
WO2023144303A1 (en) 2022-01-31 2023-08-03 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Cd38 as a biomarker and biotarget in t-cell lymphomas
EP4476251A1 (en) 2022-02-10 2024-12-18 The United States of America, as represented by the Secretary, Department of Health and Human Services Human monoclonal antibodies that broadly target coronaviruses
IL315043A (en) 2022-02-16 2024-10-01 Ac Immune Sa Humanized anti-tdp-43 binding molecules and uses thereof
EP4479431A1 (en) 2022-02-18 2024-12-25 Rakuten Medical, Inc. Anti-programmed death-ligand 1 (pd-l1) antibody molecules, encoding polynucleotides, and methods of use
CA3245693A1 (en) 2022-03-10 2023-09-14 Vivasor, Inc. ANTIBODY-DRUG CONJUGATIONS AND THEIR USES
WO2023175614A1 (en) 2022-03-15 2023-09-21 Yeda Research And Development Co. Ltd. Anti glucocorticoid-induced tnfr-related (gitr) protein antibodies and uses thereof
IL314346A (en) 2022-03-15 2024-09-01 Compugen Ltd Antibodies antagonistic to IL-18BP and their use in monotherapy and combination therapy in cancer treatment
US20240103010A1 (en) 2022-03-18 2024-03-28 Compugen Ltd. Pvrl2 and/or pvrig as biomarkers for treatment
CA3251878A1 (en) 2022-03-23 2023-09-28 Genentech, Inc. COMBINED TREATMENT COMBINING AN ANTI-CD20/ANTI-CD3 BISPECIFIC ANTIBODY AND CHEMOTHERAPY
JP2025514610A (ja) 2022-03-25 2025-05-09 シャンハイ・ヘンリウス・バイオテック・インコーポレイテッド 抗ｍｓｌｎ抗体及び使用方法
US20250197482A1 (en) 2022-03-26 2025-06-19 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Bispecific antibodies to hiv-1 env and their use
EP4499228A1 (en) 2022-03-28 2025-02-05 The United States of America, as represented by the Secretary, Department of Health and Human Services Neutralizing antibodies to hiv-1 env and their use
JP2025511000A (ja) 2022-03-28 2025-04-15 エフ・ホフマン－ラ・ロシュ・アクチェンゲゼルシャフト インターフェロンガンマバリアントおよびこれを含む抗原結合分子
TW202405009A (zh) 2022-03-30 2024-02-01 瑞士商諾華公司 使用抗利尿鈉肽受體１（ｎｐｒ１）抗體治療障礙之方法
WO2023191816A1 (en) 2022-04-01 2023-10-05 Genentech, Inc. Dosing for treatment with anti-fcrh5/anti-cd3 bispecific antibodies
EP4504220A1 (en) 2022-04-06 2025-02-12 Iovance Biotherapeutics, Inc. Treatment of nsclc patients with tumor infiltrating lymphocyte therapies
EP4504775A1 (en) 2022-04-08 2025-02-12 AC Immune SA Anti-tdp-43 binding molecules
WO2023198648A1 (en) 2022-04-11 2023-10-19 Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale Methods for the diagnosis and treatment of t-cell malignancies
EP4508081A1 (en) 2022-04-13 2025-02-19 F. Hoffmann-La Roche AG Pharmaceutical compositions of anti-cd20/anti-cd3 bispecific antibodies and methods of use
JP2025512342A (ja) 2022-04-13 2025-04-17 ジェネンテック， インコーポレイテッド 治療用タンパク質の医薬組成物および使用方法
WO2023198874A1 (en) 2022-04-15 2023-10-19 Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale Methods for the diagnosis and treatment of t cell-lymphomas
CA3248034A1 (en) 2022-04-15 2023-10-19 Iovance Biotherapeutics, Inc. METHODS FOR EXPANSION OF TIL CELLS BY MEANS OF SPECIFIC CYTOKINE COMBINATIONS AND/OR AKT INHIBITOR TREATMENT
EP4511395A1 (en) 2022-04-20 2025-02-26 Kantonsspital St. Gallen Antibodies or antigen-binding fragments pan-specifically binding to gremlin-1 and gremlin-2 and uses thereof
CN119137157A (zh) 2022-05-03 2024-12-13 基因泰克公司 抗Ly6E抗体、免疫缀合物及其用途
EP4524158A4 (en) 2022-05-09 2025-12-17 Staidson Beijing Biopharmaceuticals Co Ltd Antibody that specifically recognizes gdf15 and use thereof
CA3251533A1 (en) 2022-05-10 2023-11-16 Iovance Biotherapeutics, Inc. TREATMENT OF CANCER PATIENTS WITH TUMOR-INFILTRATING LYMPHOCYTE THERAPIES IN COMBINATION WITH AN IL-15R AGONIST
WO2023219613A1 (en) 2022-05-11 2023-11-16 Genentech, Inc. Dosing for treatment with anti-fcrh5/anti-cd3 bispecific antibodies
AR129268A1 (es) 2022-05-11 2024-08-07 Hoffmann La Roche Anticuerpo que se une a vegf-a e il6 y métodos de uso
WO2023222886A1 (en) 2022-05-20 2023-11-23 Depth Charge Ltd Antibody-cytokine fusion proteins
WO2023235699A1 (en) 2022-05-31 2023-12-07 Jounce Therapeutics, Inc. Antibodies to lilrb4 and uses thereof
CN119856056A (zh) 2022-06-07 2025-04-18 基因泰克公司 用于确定包括抗pd-l1拮抗剂和抗tight拮抗剂抗体的肺癌治疗的疗效的方法
WO2023237706A2 (en) 2022-06-08 2023-12-14 Institute For Research In Biomedicine (Irb) Cross-specific antibodies, uses and methods for discovery thereof
WO2024003310A1 (en) 2022-06-30 2024-01-04 Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale Methods for the diagnosis and treatment of acute lymphoblastic leukemia
EP4551681A1 (en) 2022-07-06 2025-05-14 Iovance Biotherapeutics, Inc. Devices and processes for automated production of tumor infiltrating lymphocytes
CA3261147A1 (en) 2022-07-13 2024-01-18 Genentech, Inc. DOSAGE FOR TREATMENT WITH BISOPECIFIC ANTI-FCRH5/ANTI-CD3 ANTIBODIES
US20260035464A1 (en) 2022-07-19 2026-02-05 Staidson Biopharma Inc. Antibodies specifically recognizing b- and t-lymphocyte attenuator (btla) and uses thereof
CN119604530A (zh) 2022-07-19 2025-03-11 基因泰克公司 用抗fcrh5/抗cd3双特异性抗体进行治疗的给药
AU2023312054A1 (en) 2022-07-22 2025-01-23 Bristol-Myers Squibb Company Antibodies binding to human pad4 and uses thereof
EP4558528A1 (en) 2022-07-22 2025-05-28 Genentech, Inc. Anti-steap1 antigen-binding molecules and uses thereof
WO2024018046A1 (en) 2022-07-22 2024-01-25 Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale Garp as a biomarker and biotarget in t-cell malignancies
US20260035460A1 (en) 2022-07-28 2026-02-05 Adeboye Henry ADEWOYE, MD Combination therapy with anti-pvrig antibodies formulations and anti-pd-1 antibodies
WO2024023283A1 (en) 2022-07-29 2024-02-01 Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale Lrrc33 as a biomarker and biotarget in cutaneous t-cell lymphomas
TW202415679A (zh) 2022-07-29 2024-04-16 美商阿列克特有限責任公司 抗ｇｐｎｍｂ抗體及其使用方法
EP4565683A1 (en) 2022-08-01 2025-06-11 Iovance Biotherapeutics, Inc. Chimeric costimulatory receptors, chemokine receptors, and the use of same in cellular immunotherapies
WO2024030829A1 (en) 2022-08-01 2024-02-08 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Monoclonal antibodies that bind to the underside of influenza viral neuraminidase
CN120077064A (zh) 2022-08-05 2025-05-30 詹森生物科技公司 用于治疗脑肿瘤的转铁蛋白受体结合蛋白
CA3263779A1 (en) 2022-08-05 2024-02-08 Janssen Biotech, Inc. CD98 LINKAGE CONSTRUCTIONS FOR THE TREATMENT OF BRAIN TUMORS
WO2024031032A1 (en) 2022-08-05 2024-02-08 Bristol-Myers Squibb Company Anti-ctla-4 antibodies for treatment of kras mutant cancers
IL318702A (en) 2022-08-19 2025-03-01 Evive Biotechnology Shanghai Ltd Compositions containing G-CSF and their uses
TW202423979A (zh) 2022-08-22 2024-06-16 美商雅博得樂醫療公司 Dll3結合分子及其用途
WO2024044675A1 (en) 2022-08-25 2024-02-29 Beigene, Ltd. Methods of cancer treatment using anti-pd1 antibodies in combination with anti-tim3 antibodies
CN120435310A (zh) 2022-08-26 2025-08-05 朱诺治疗学股份有限公司 对δ样配体3（DLL3）具有特异性的抗体和嵌合抗原受体
CN120153254A (zh) 2022-09-01 2025-06-13 基因泰克公司 膀胱癌的治疗和诊断方法
WO2024054822A1 (en) 2022-09-07 2024-03-14 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Engineered sars-cov-2 antibodies with increased neutralization breadth
CN120077071A (zh) 2022-09-07 2025-05-30 当康生物技术有限责任公司 抗vista构建体及其用途
JP2025531832A (ja) 2022-09-08 2025-09-25 アンスティチュ ナショナル ドゥ ラ サンテ エ ドゥ ラ ルシェルシュ メディカル ＬＴＢＰ２（潜在的形質転換増殖因子β結合タンパク質２）に対する特異性を有する抗体及びその使用
WO2024056861A1 (en) 2022-09-15 2024-03-21 Avidicure Ip B.V. Multispecific antigen binding proteins for stimulating nk cells and use thereof
WO2024062072A2 (en) 2022-09-21 2024-03-28 Domain Therapeutics Anti-ccr8 monoclonal antibodies and their therapeutic use
WO2024062082A1 (en) 2022-09-21 2024-03-28 Domain Therapeutics Anti-ccr8 monoclonal antibodies and their therapeutic use
WO2024062076A1 (en) 2022-09-21 2024-03-28 Domain Therapeutics Anti-ccr8 monoclonal antibodies and their therapeutic use
WO2024064826A1 (en) 2022-09-22 2024-03-28 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Neutralizing antibodies to plasmodium falciparum circumsporozoite protein and their use
WO2024067344A1 (zh) 2022-09-27 2024-04-04 舒泰神（北京）生物制药股份有限公司 特异性识别light的抗体及其应用
IL319943A (en) 2022-10-07 2025-05-01 Genentech Inc Methods for treating cancer with anti-C motif chemokine receptor 8 (CCR8) antibodies
JP2025536268A (ja) 2022-10-12 2025-11-05 アンスティチュ ナショナル ドゥ ラ サンテ エ ドゥ ラ ルシェルシュ メディカル Ｔ細胞悪性腫瘍におけるバイオマーカー及びバイオターゲットとしてのｃｄ８１
EP4606886A1 (en) 2022-10-20 2025-08-27 Beijing SoloBio Genetechnology Company Ltd. Antibody combination specifically binding to trail or fasl, and bispecific antibody
WO2024086796A1 (en) 2022-10-20 2024-04-25 Alector Llc Anti-ms4a4a antibodies with amyloid-beta therapies
TW202426505A (zh) 2022-10-25 2024-07-01 美商建南德克公司 癌症之治療及診斷方法
JP2025537155A (ja) 2022-11-04 2025-11-14 アイオバンス バイオセラピューティクス，インコーポレイテッド Ｃｄ３９／ｃｄ１０３選択に関連した腫瘍浸潤リンパ球（ｔｉｌ）拡張のための方法
AU2023373363A1 (en) 2022-11-04 2025-05-08 Gilead Sciences, Inc. Anticancer therapies using anti-ccr8 antibody, chemo and immunotherapy combinations
WO2024098024A1 (en) 2022-11-04 2024-05-10 Iovance Biotherapeutics, Inc. Expansion of tumor infiltrating lymphocytes from liquid tumors and therapeutic uses thereof
AU2023375342A1 (en) 2022-11-08 2025-04-24 F. Hoffmann-La Roche Ag Compositions and methods of treating childhood onset idiopathic nephrotic syndrome
IL320220A (en) 2022-11-09 2025-06-01 Cis Biopharma Ag Antibodies against L1-CAM and their uses for diagnostic and therapeutic applications
WO2024100170A1 (en) 2022-11-11 2024-05-16 F. Hoffmann-La Roche Ag Antibodies binding to hla-a*02/foxp3
KR20250106304A (ko) 2022-11-17 2025-07-09 사노피 Ceacam5 항체-약물 접합체 및 이의 사용 방법
JP2025539712A (ja) 2022-11-21 2025-12-09 アイオバンス バイオセラピューティクス，インコーポレイテッド 遺伝子編集されたｔ細胞の増殖能を評価するための方法
KR20250122544A (ko) 2022-11-21 2025-08-13 이오반스 바이오테라퓨틱스, 인크. 종양 침윤 림프구의 확장을 위한 2차원 공정 및 이를 통한 요법
TW202434306A (zh) 2022-11-24 2024-09-01 瑞士商百濟神州瑞士有限責任公司 抗ｃｅａ抗體藥物軛合物及使用方法
IL320881A (en) 2022-11-25 2025-07-01 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Method for producing protein
WO2024120516A1 (zh) 2022-12-08 2024-06-13 南京诺唯赞生物科技股份有限公司 特异性结合rsv的抗体
CN120958025A (zh) 2022-12-16 2025-11-14 费恩治疗有限公司 针对含cub结构域的蛋白1(cdcp1)的抗体及其用途
WO2024137381A1 (en) 2022-12-19 2024-06-27 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Monoclonal antibodies for treating sars-cov-2 infection
EP4646441A1 (en) 2023-01-06 2025-11-12 Lassen Therapeutics, Inc. Anti-il-11r alpha antibodies for treating thyroid eye disease
CN120858108A (zh) 2023-01-06 2025-10-28 拉森医疗公司 抗il-18bp抗体
JP2026503273A (ja) 2023-01-06 2026-01-28 ラッセン・セラピューティクス・インコーポレイテッド 抗ｉｌ－１８ｂｐ抗体
WO2024148232A2 (en) 2023-01-06 2024-07-11 Alector Llc Anti-il18 binding protein antibodies and methods of use thereof
WO2024151885A1 (en) 2023-01-13 2024-07-18 Iovance Biotherapeutics, Inc. Use of til as maintenance therapy for nsclc patients who achieved pr/cr after prior therapy
TW202432607A (zh) 2023-01-18 2024-08-16 美商建南德克公司 多特異性抗體及其用途
KR20250135302A (ko) 2023-01-19 2025-09-12 비원 메디슨즈 아이 게엠베하 항-cmet 항체 및 사용 방법
WO2024156672A1 (en) 2023-01-25 2024-08-02 F. Hoffmann-La Roche Ag Antibodies binding to csf1r and cd3
WO2024170543A1 (en) 2023-02-14 2024-08-22 Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale Anti-cd44 antibodies and uses thereof
WO2024182443A2 (en) 2023-02-27 2024-09-06 Compugen Ltd. Triple combination therapy with anti-pvrig antibodies, anti-tigit antibodies, and pembrolizumab
AU2024231640A1 (en) 2023-03-03 2025-10-16 Beone Medicines I Gmbh Muc1 and cd16a antibodies and methods of use
WO2024183636A1 (en) 2023-03-03 2024-09-12 Beigene Switzerland Gmbh Cd16a antibodies and methods of use
AR132043A1 (es) 2023-03-03 2025-05-21 Beigene Switzerland Gmbh Anticuerpos muc1 y métodos de uso
WO2024184810A1 (en) 2023-03-06 2024-09-12 Beigene Switzerland Gmbh Anti-cldn6 and anti-cd3 multispecific antibodies and methods of use
AR132064A1 (es) 2023-03-06 2025-05-21 Beigene Switzerland Gmbh Anticuerpos anti-cldn6 y métodos de uso
WO2024184811A1 (en) 2023-03-06 2024-09-12 Beigene Switzerland Gmbh Anti-cd3 multispecific antibodies and methods of use
EP4676596A1 (en) 2023-03-08 2026-01-14 AC Immune SA Anti-tdp-43 binding molecules and uses thereof
EP4428158A1 (en) 2023-03-10 2024-09-11 Istituto Romagnolo per lo Studio dei Tumori "Dino Amadori" - IRST S.r.l. Lung cancer targeting human antibodies and therapeutic uses thereof
WO2024191785A1 (en) 2023-03-10 2024-09-19 Genentech, Inc. Fusions with proteases and uses thereof
EP4428159A1 (en) 2023-03-10 2024-09-11 Istituto Romagnolo per lo Studio dei Tumori "Dino Amadori" - IRST S.r.l. Melanoma targeting human antibodies and therapeutic uses thereof
WO2024188965A1 (en) 2023-03-13 2024-09-19 F. Hoffmann-La Roche Ag Combination therapy employing a pd1-lag3 bispecific antibody and an hla-g t cell bispecific antibody
TW202446789A (zh) 2023-03-31 2024-12-01 美商建南德克公司 抗αｖβ８整合素抗體及使用方法
WO2024206738A1 (en) 2023-03-31 2024-10-03 Immunai Inc. Humanized anti-trem2 antibodies
EP4687997A2 (en) 2023-04-05 2026-02-11 Sorrento Therapeutics, Inc. Antibody-drug conjugates and uses thereof
EP4687996A1 (en) 2023-04-05 2026-02-11 Sorrento Therapeutics, Inc. Antibody-drug conjugates and uses thereof
EP4687995A1 (en) 2023-04-05 2026-02-11 Sorrento Therapeutics, Inc. Antibody-drug conjugates and uses thereof
WO2024212827A1 (en) 2023-04-12 2024-10-17 Shanghai Kangabio Co., Limited Multifunctional molecules comprising masked interleukin 12 and methods of use
CN121263210A (zh) 2023-04-17 2026-01-02 沛科生物公司 抗体和抗体-药物偶联物以及使用方法和合成工艺及中间体
AU2024270495A1 (en) 2023-05-05 2025-10-09 Genentech, Inc. Dosing for treatment with anti-fcrh5/anti-cd3 bispecific antibodies
AU2024269754A1 (en) 2023-05-08 2025-10-23 F. Hoffmann-La Roche Ag Targeted interferon alpha fusion proteins and methods of use
KR20260008790A (ko) 2023-05-10 2026-01-16 제넨테크, 인크. 암 치료 방법 및 조성물
AU2024271605A1 (en) 2023-05-12 2025-11-13 BioNTech SE Antibodies capable of binding to ox40, variants thereof and uses thereof
TW202509065A (zh) 2023-05-16 2025-03-01 瑞士商赫孚孟拉羅股份公司 經ｐｄ－１調節之ｉｌ－２免疫結合物及其用途
WO2024243355A1 (en) 2023-05-24 2024-11-28 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Human monoclonal antibodies that target the rh5 complex of blood-stage plasmodium falciparum
CN121241068A (zh) 2023-06-01 2025-12-30 豪夫迈·罗氏有限公司 靶向bcma和cd28的双特异性抗体
AR132805A1 (es) 2023-06-01 2025-07-30 Hoffmann La Roche Moléculas de unión al antígeno inmunoestimuladoras que se unen específicamente a bcma
CN121285742A (zh) 2023-06-08 2026-01-06 基因泰克公司 用于淋巴瘤的诊断和治疗方法的巨噬细胞特征
WO2024251199A1 (zh) 2023-06-09 2024-12-12 舒泰神（北京）生物制药股份有限公司 特异性结合masp3的抗体以及特异性结合masp3和masp2的多特异性抗体
WO2024251884A1 (en) 2023-06-09 2024-12-12 Innate Pharma Nk cell engager proteins comprising anti-cd20 and ant-nkp46 antibody, linked to il-2 in treatment of r/r b-nhl
EP4477236A1 (en) 2023-06-14 2024-12-18 Inatherys Combination therapy for treating a tumor using adc comprising anti-cd71 antibodies and bh3 mimetics
WO2024255794A1 (zh) 2023-06-16 2024-12-19 舒泰神（北京）生物制药股份有限公司 特异性识别因子XIIa的抗体及其应用
CN121358775A (zh) 2023-06-21 2026-01-16 豪夫迈·罗氏有限公司 利用靶向FAP的淋巴毒素β受体激动剂的组合疗法
CN121443309A (zh) 2023-06-22 2026-01-30 基因泰克公司 多发性骨髓瘤的治疗
WO2024263761A1 (en) 2023-06-22 2024-12-26 Genentech, Inc. Antibodies and uses thereof
TW202515608A (zh) 2023-06-26 2025-04-16 以色列商坎布根有限公司 Ｉｌ—１８ｂｐ拮抗抗體及其於癌症治療之單一療法及組合療法的用途
AU2024309736A1 (en) 2023-06-30 2026-01-15 Evive Biotechnology (Shanghai) Ltd G-csf dimer for use in the treatment or prevention of chemotherapy or radiotherapy induced neutropenia
AU2024296940A1 (en) 2023-07-07 2026-01-29 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Humanized 40h3 antibody
WO2025012417A1 (en) 2023-07-13 2025-01-16 Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale Anti-neurotensin long fragment and anti-neuromedin n long fragment antibodies and uses thereof
AU2024296516A1 (en) 2023-07-13 2026-01-22 Iovance Biotherapeutics, Inc. Cytokine encoding lentiviral vectors and uses thereof for making tumor infiltrating lymphocytes
AU2024292473A1 (en) 2023-07-19 2026-01-29 Iovance Biotherapeutics, Inc. Treatment of cancer patients with tumor infiltrating lymphocyte therapies in combination with trop-2 targeting adc
AU2024300009A1 (en) 2023-07-21 2026-01-08 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Bispecific antibodies that broadly target coronaviruses
WO2025024265A1 (en) 2023-07-21 2025-01-30 Bristol-Myers Squibb Company Methods of assessing citrullination and activity of pad4 modulators
WO2025021790A2 (en) 2023-07-24 2025-01-30 F. Hoffmann-La Roche Ag Multispecific antibodies
AU2024300993A1 (en) 2023-07-26 2026-01-22 F. Hoffmann-La Roche Ag Antibodies binding to cd3
WO2025027529A1 (en) 2023-07-31 2025-02-06 Advesya Anti-il-1rap antibody drug conjugates and methods of use thereof
WO2025034806A1 (en) 2023-08-08 2025-02-13 Wisconsin Alumni Research Foundation Single-domain antibodies and variants thereof against fibroblast activation protein
WO2025032069A1 (en) 2023-08-09 2025-02-13 F. Hoffmann-La Roche Ag Mono and multispecific anti-trem2 antibodies, methods and uses thereof
WO2025032070A1 (en) 2023-08-09 2025-02-13 F. Hoffmann-La Roche Ag Anti-a-beta protein antibodies, methods and uses thereof
WO2025032071A1 (en) 2023-08-09 2025-02-13 F. Hoffmann-La Roche Ag Mono and multispecific anti-trem2 antibodies, methods and uses thereof
WO2025038492A1 (en) 2023-08-11 2025-02-20 Abalytics Oncology, Inc. Anti-ctla-4 antibodies and related binding molecules and methods and uses thereof
WO2025045250A1 (en) 2023-09-03 2025-03-06 Kira Pharmaceuticals (Us) Llc Anti-human factor d antibody constructs and uses thereof
WO2025064539A1 (en) 2023-09-19 2025-03-27 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Dept. Of Health And Human Services Herv-e antibodies and methods of their use
WO2025061994A1 (en) 2023-09-21 2025-03-27 Domain Therapeutics Anti-ccr8 monoclonal antibodies and their therapeutic use
WO2025061993A1 (en) 2023-09-21 2025-03-27 Domain Therapeutics Anti-ccr8 monoclonal antibodies and their therapeutic use
AR133909A1 (es) 2023-09-25 2025-11-12 Hoffmann La Roche ANTICUERPO QUE SE UNE A C3bBb
US20250109187A1 (en) 2023-09-28 2025-04-03 Novavax, Inc. ANTI-SARS-CoV-2 SPIKE (S) ANTIBODIES AND THEIR USE IN TREATING COVID-19
AR133963A1 (es) 2023-09-29 2025-11-19 Trex Bio Inc MOLÉCULAS DE FUSIÓN VARIANTE TNF-a
WO2025068957A1 (en) 2023-09-29 2025-04-03 Novartis Ag Bispecific antibodies for use in lowering the risk of cardiovascular disease events in subjects known to be a carrier of clonal expansion of hematopoietic cell lines with somatic mutations
JP7645562B1 (ja) 2023-10-03 2025-03-14 憲章 喜多村 分泌型タンパク質の合成方法
EP4537907A1 (en) 2023-10-10 2025-04-16 Enthera S.r.l. Cd248 inhibitors and uses thereof
WO2025085489A1 (en) 2023-10-17 2025-04-24 Bristol-Myers Squibb Company Gspt1-degrading compounds, anti-cd33 antibodies and antibody-drug conjugates and uses thereof
WO2025101484A1 (en) 2023-11-06 2025-05-15 Iovance Biotherapeutics, Inc. Treatment of endometrial cancers with tumor infiltrating lymphocyte therapies
WO2025099120A1 (en) 2023-11-09 2025-05-15 F. Hoffmann-La Roche Ag Multispecific antibodies with conditional activity
WO2025106427A1 (en) 2023-11-14 2025-05-22 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Neutralizing and protective monoclonal antibodies against respiratory syncytial virus (rsv)
WO2025106474A1 (en) 2023-11-14 2025-05-22 Genentech, Inc. Therapeutic and diagnostic methods for treating cancer with anti-fcrh5/anti-cd3 bispecific antibodies
WO2025111402A1 (en) 2023-11-21 2025-05-30 Board Of Regents Of The University Of Nebraska Anti-amyloid beta antibodies and related compositions and methods thereof
WO2025117384A1 (en) 2023-12-01 2025-06-05 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Broadly neutralizing influenza hemagglutinin stem-directed antibodies
WO2025120015A1 (en) 2023-12-06 2025-06-12 Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale Cd5 targeting antibodies with depleting and t or b-cell activation effects
WO2025125118A1 (en) 2023-12-11 2025-06-19 F. Hoffmann-La Roche Ag Protease activatable fc domain binding molecules
WO2025125386A1 (en) 2023-12-14 2025-06-19 F. Hoffmann-La Roche Ag Antibodies that bind to folr1 and methods of use
WO2025126157A1 (en) 2023-12-15 2025-06-19 Advesya Anti-il-1rap binding domains and antibody-drug conjugates thereof
WO2025132503A1 (en) 2023-12-20 2025-06-26 F. Hoffmann-La Roche Ag Antibodies binding to ceacam5
WO2025137410A1 (en) 2023-12-20 2025-06-26 Apogee Therapeutics, Inc. Pharmaceutical compositions of anti-il-13 antibodies with and without c-terminal lysine
WO2025137523A2 (en) 2023-12-20 2025-06-26 Apogee Therapeutics, Inc. Pharmaceutical formulations of antibodies that bind interleukin 13
TW202535949A (zh) 2023-12-20 2025-09-16 美商必治妥美雅史谷比公司 靶向IL-18受體β(IL-18RB)之抗體及相關方法
WO2025137284A2 (en) 2023-12-21 2025-06-26 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Broadly neutralizing antibodies against sars-cov-2 and sars-cov variants
WO2025133290A1 (en) 2023-12-21 2025-06-26 Temper Bio Protein for immune regulation
WO2025133042A2 (en) 2023-12-22 2025-06-26 F. Hoffmann-La Roche Ag Activatable fusion proteins and methods of use
US20250215087A1 (en) 2023-12-29 2025-07-03 Bristol-Myers Squibb Company Combination therapy of kras inhibitor and treg depleting agent
WO2025146131A1 (en) 2024-01-05 2025-07-10 Beigene, Ltd. ANTI-FGFR2b ANTIBODIES, CONJUGATES AND METHODS OF USE
WO2025149633A1 (en) 2024-01-12 2025-07-17 Laigo Bio B.V. Bispecific antigen binding proteins
WO2025155877A2 (en) 2024-01-18 2025-07-24 The Regents Of The University Of California Antibodies binding to pad4 and uses thereof
WO2025171182A1 (en) 2024-02-08 2025-08-14 Iovance Biotherapeutics, Inc. Treatment of cancer patients with tumor infiltrating lymphocyte therapies in combination with cancer vaccine
WO2025174974A1 (en) 2024-02-14 2025-08-21 Bristol-Myers Squibb Company Anti-cd33 antibodies and uses thereof
WO2025179281A1 (en) 2024-02-23 2025-08-28 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Treatment of cardiovascular disease with antxr1 antibodies
WO2025184208A1 (en) 2024-02-27 2025-09-04 Bristol-Myers Squibb Company Anti-ceacam5 antibodies and uses thereof
WO2025184416A1 (en) 2024-02-27 2025-09-04 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Single-domain antibodies and bispecific antibodies against hiv-1 and their use
WO2025184211A1 (en) 2024-02-27 2025-09-04 Bristol-Myers Squibb Company Anti-ceacam5 antibody drug conjugates
WO2025184421A1 (en) 2024-02-28 2025-09-04 Juno Therapeutics, Inc. Chimeric antigen receptors and antibodies specific for delta-like ligand 3 (dll3) and related methods
WO2025181189A1 (en) 2024-03-01 2025-09-04 F. Hoffmann-La Roche Ag Antibodies binding to cd3
WO2025191137A1 (en) 2024-03-15 2025-09-18 Avidicure Ip B.V. Conjugates of trop2-specific antigen binding proteins and cytokines
WO2025191133A1 (en) 2024-03-15 2025-09-18 Avidicure Ip B.V. Il-21 muteins, fusion proteins comprising the same and uses thereof
WO2025191136A1 (en) 2024-03-15 2025-09-18 Avidicure Ip B.V. Muteins of 4-1bb ligand extracellular domain, fusion proteins comprising the same and uses thereof
WO2025199352A2 (en) 2024-03-20 2025-09-25 Juno Therapeutics, Inc. Antibodies specific for solute carrier family 34 member 2 (slc34a2)
US20250295801A1 (en) 2024-03-21 2025-09-25 Seagen Inc. Cd25 antibodies, antibody drug conjugates, and uses thereof
WO2025215060A1 (en) 2024-04-11 2025-10-16 F. Hoffmann-La Roche Ag Antibodies that specifically bind modified oligonucleotides
WO2025226808A1 (en) 2024-04-24 2025-10-30 Genentech, Inc. Compositions and methods of treating lupus nephritis
WO2025224297A1 (en) 2024-04-26 2025-10-30 Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale Antibodies having specificity to tgfbi and uses thereof
WO2025238052A1 (en) 2024-05-15 2025-11-20 Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale Depletion of plasmacytoid dendritic cells for the treatment of respiratory viral infections
WO2025240670A2 (en) 2024-05-15 2025-11-20 Abalytics Oncology, Inc. Anti-pd-1 antibodies and related binding molecules and methods and uses thereof
WO2025238187A1 (en) 2024-05-15 2025-11-20 Cis Biopharma Ag Immunoconjugates targeting l1-cam
WO2025242732A1 (en) 2024-05-21 2025-11-27 Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale Pan antibodies against sars-cov-2 spike protein and uses thereof for therapeutical purposes
WO2025245176A1 (en) 2024-05-22 2025-11-27 Bristol-Myers Squibb Company Multispecific antibody constructs
WO2025242909A1 (en) 2024-05-24 2025-11-27 Paul Scherrer Institut CD30-targeting antibody-radioligand conjugates and their therapeutic use
WO2025250969A1 (en) 2024-05-31 2025-12-04 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Anti-cd74 antibodies, conjugates and uses thereof
US20250376536A1 (en) 2024-06-06 2025-12-11 Bristol-Myers Squibb Company Multispecific anti-cd40 / anti-fap antibodies and uses thereof
WO2025255405A1 (en) 2024-06-06 2025-12-11 Bristol-Myers Squibb Company Anti-fap antibodies and uses thereof
WO2025255353A1 (en) 2024-06-06 2025-12-11 Apogee Therapeutics, Inc. Dosage and administration of an anti-ox40l antibody
WO2025257181A1 (en) 2024-06-11 2025-12-18 Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale Antibodies targeting trans-active response dna-binding protein-43 (tdp-43)
WO2025262564A1 (en) 2024-06-17 2025-12-26 Pfizer Inc. Use of anti-cxcr5 antibodies
WO2025264972A1 (en) 2024-06-21 2025-12-26 Apogee Therapeutics, Inc. Antibodies that bind il-4r alpha and antibodies that bind
WO2025264960A1 (en) 2024-06-21 2025-12-26 Apogee Therapeutics, Inc. Antibodies that bind il-13 and antibodies that bind ox40l
WO2026006784A1 (en) 2024-06-28 2026-01-02 Iovance Biotherapeutics, Inc. Methods of making tumor reactive peripheral blood lymphocytes (trpbl)
WO2026013218A1 (en) 2024-07-10 2026-01-15 Ac Immune Sa Anti-tdp-43 vectors, binding molecules and uses thereof
WO2026021476A1 (en) 2024-07-24 2026-01-29 Beone Guangzhou Biologics Manufacturing Co., Ltd. Anti-cmet and anti-egfr multispecific antibody drug conjugates
EP4684803A1 (en) 2024-07-25 2026-01-28 CeMM - Forschungszentrum für Molekulare Medizin GmbH Antibody conjugated chemical inducers of degradation of rbm39 and therapeutic uses thereof
WO2026030464A1 (en) 2024-07-30 2026-02-05 Genentech, Inc. Dosage regimen for reducing cytokine release syndrome (crs) with anti-fcrh5/anti-cd3 bispecific antibodies in multiple myeloma therapy
WO2026030473A1 (en) 2024-07-31 2026-02-05 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services West nile virus neutralizing monoclonal antibodies

Family Cites Families (85)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US627375A (en) * 1899-06-20 Giulio serra zanetti
US4752601A (en) * 1983-08-12 1988-06-21 Immunetech Pharmaceuticals Method of blocking immune complex binding to immunoglobulin FC receptors
US6548640B1 (en) * 1986-03-27 2003-04-15 Btg International Limited Altered antibodies
US5225539A (en) * 1986-03-27 1993-07-06 Medical Research Council Recombinant altered antibodies and methods of making altered antibodies
EP0307434B2 (en) * 1987-03-18 1998-07-29 Scotgen Biopharmaceuticals, Inc. Altered antibodies
US5204244A (en) * 1987-10-27 1993-04-20 Oncogen Production of chimeric antibodies by homologous recombination
US5047335A (en) * 1988-12-21 1991-09-10 The Regents Of The University Of Calif. Process for controlling intracellular glycosylation of proteins
US5419904A (en) * 1990-11-05 1995-05-30 The Regents Of The University Of California Human B-lymphoblastoid cell line secreting anti-ganglioside antibody
US5278299A (en) * 1991-03-18 1994-01-11 Scripps Clinic And Research Foundation Method and composition for synthesizing sialylated glycosyl compounds
US6582959B2 (en) * 1991-03-29 2003-06-24 Genentech, Inc. Antibodies to vascular endothelial cell growth factor
WO1994004679A1 (en) * 1991-06-14 1994-03-03 Genentech, Inc. Method for making humanized antibodies
AU3144193A (en) * 1991-11-21 1993-06-15 Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Controlling degradation of glycoprotein oligosaccharides by extracellular glycosisases
GB9206422D0 (en) * 1992-03-24 1992-05-06 Bolt Sarah L Antibody preparation
US5736137A (en) * 1992-11-13 1998-04-07 Idec Pharmaceuticals Corporation Therapeutic application of chimeric and radiolabeled antibodies to human B lymphocyte restricted differentiation antigen for treatment of B cell lymphoma
US6180377B1 (en) * 1993-06-16 2001-01-30 Celltech Therapeutics Limited Humanized antibodies
US6030613A (en) * 1995-01-17 2000-02-29 The Brigham And Women's Hospital, Inc. Receptor specific transepithelial transport of therapeutics
US6086875A (en) * 1995-01-17 2000-07-11 The Brigham And Women's Hospital, Inc. Receptor specific transepithelial transport of immunogens
US5731168A (en) * 1995-03-01 1998-03-24 Genentech, Inc. Method for making heteromultimeric polypeptides
US5869046A (en) * 1995-04-14 1999-02-09 Genentech, Inc. Altered polypeptides with increased half-life
US5747035A (en) * 1995-04-14 1998-05-05 Genentech, Inc. Polypeptides with increased half-life for use in treating disorders involving the LFA-1 receptor
US5730977A (en) * 1995-08-21 1998-03-24 Mitsui Toatsu Chemicals, Inc. Anti-VEGF human monoclonal antibody
US6277375B1 (en) * 1997-03-03 2001-08-21 Board Of Regents, The University Of Texas System Immunoglobulin-like domains with increased half-lives
CN100480269C (zh) * 1997-04-07 2009-04-22 基因技术股份有限公司 抗-血管内皮生长因子的抗体
US20040191256A1 (en) * 1997-06-24 2004-09-30 Genentech, Inc. Methods and compositions for galactosylated glycoproteins
US6172213B1 (en) * 1997-07-02 2001-01-09 Genentech, Inc. Anti-IgE antibodies and method of improving polypeptides
US6194551B1 (en) * 1998-04-02 2001-02-27 Genentech, Inc. Polypeptide variants
US6242195B1 (en) * 1998-04-02 2001-06-05 Genentech, Inc. Methods for determining binding of an analyte to a receptor
US6528624B1 (en) * 1998-04-02 2003-03-04 Genentech, Inc. Polypeptide variants
DK2180007T4 (da) * 1998-04-20 2017-11-27 Roche Glycart Ag Glycosyleringsteknik for antistoffer til forbedring af antistofafhængig cellecytotoxicitet
MX353234B (es) * 1999-01-15 2018-01-08 Genentech Inc Variantes de polipeptidos con función efectora alterada.
US7183387B1 (en) * 1999-01-15 2007-02-27 Genentech, Inc. Polypeptide variants with altered effector function
US6737056B1 (en) * 1999-01-15 2004-05-18 Genentech, Inc. Polypeptide variants with altered effector function
US6676927B1 (en) * 1999-01-20 2004-01-13 The Rockefeller University Animal model and methods for its use in the selection of cytotoxic antibodies
DK1176195T3 (da) * 1999-04-09 2013-06-24 Kyowa Hakko Kirin Co Ltd Fremgangsmåde til at kontrollere aktiviteten af immunologisk funktionelt molekyle
US6703020B1 (en) * 1999-04-28 2004-03-09 Board Of Regents, The University Of Texas System Antibody conjugate methods for selectively inhibiting VEGF
FR2807767B1 (fr) * 2000-04-12 2005-01-14 Lab Francais Du Fractionnement Anticorps monoclonaux anti-d
JP2003531149A (ja) * 2000-04-13 2003-10-21 ザ・ロツクフエラー・ユニバーシテイ 抗体由来の免疫応答の増強
US20060029604A1 (en) * 2000-06-28 2006-02-09 Gerngross Tillman U Immunoglobulins comprising predominantly a GlcNAc2Man3GlcNAc2 glycoform
US20060034830A1 (en) * 2000-06-28 2006-02-16 Gerngross Tillman U Immunoglobulins comprising predominantly a GalGlcNAcMan5GLcNAc2 glycoform
US7598055B2 (en) * 2000-06-28 2009-10-06 Glycofi, Inc. N-acetylglucosaminyltransferase III expression in lower eukaryotes
US20060024304A1 (en) * 2000-06-28 2006-02-02 Gerngross Tillman U Immunoglobulins comprising predominantly a Man5GlcNAc2 glycoform
US20060034828A1 (en) * 2000-06-28 2006-02-16 Gerngross Tillman U Immunoglobulins comprising predominantly a GlcNAcMAN5GLCNAC2 glycoform
US6946292B2 (en) * 2000-10-06 2005-09-20 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Cells producing antibody compositions with increased antibody dependent cytotoxic activity
US7754208B2 (en) * 2001-01-17 2010-07-13 Trubion Pharmaceuticals, Inc. Binding domain-immunoglobulin fusion proteins
JP4679035B2 (ja) * 2001-04-02 2011-04-27 ジェネンテック， インコーポレイテッド 併用療法
GB0118662D0 (en) * 2001-07-31 2001-09-19 Univ Southampton Binding agents
CA2463879C (en) * 2001-10-25 2012-12-04 Genentech, Inc. Glycoprotein compositions
US20040093621A1 (en) * 2001-12-25 2004-05-13 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd Antibody composition which specifically binds to CD20
US20060024292A1 (en) * 2001-12-27 2006-02-02 Gerngross Tillman U Immunoglobulins comprising predominantly a Gal2GlcNAc2Man3GlcNAc2 glycoform
US20060034829A1 (en) * 2001-12-27 2006-02-16 Gerngross Tillman U Immunoglobulins comprising predominantly a MAN3GLCNAC2 glycoform
US20040002587A1 (en) * 2002-02-20 2004-01-01 Watkins Jeffry D. Fc region variants
US20040132101A1 (en) * 2002-09-27 2004-07-08 Xencor Optimized Fc variants and methods for their generation
US20080152649A1 (en) * 2002-03-01 2008-06-26 Xencor, Inc. Optimized igf-1r antibodies and methods of using the same
US20070148171A1 (en) * 2002-09-27 2007-06-28 Xencor, Inc. Optimized anti-CD30 antibodies
US8188231B2 (en) * 2002-09-27 2012-05-29 Xencor, Inc. Optimized FC variants
US7662925B2 (en) * 2002-03-01 2010-02-16 Xencor, Inc. Optimized Fc variants and methods for their generation
US7317091B2 (en) * 2002-03-01 2008-01-08 Xencor, Inc. Optimized Fc variants
CA2481925A1 (en) * 2002-04-09 2003-10-16 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Therapeutic agent for patients having human fc.gamma.riiia
WO2005056606A2 (en) * 2003-12-03 2005-06-23 Xencor, Inc Optimized antibodies that target the epidermal growth factor receptor
US7217797B2 (en) * 2002-10-15 2007-05-15 Pdl Biopharma, Inc. Alteration of FcRn binding affinities or serum half-lives of antibodies by mutagenesis
US7361740B2 (en) * 2002-10-15 2008-04-22 Pdl Biopharma, Inc. Alteration of FcRn binding affinities or serum half-lives of antibodies by mutagenesis
RS20100366A (sr) * 2002-12-16 2011-04-30 Genentech, Inc. Varijante imunoglobulina i njihova upotreba
US7355008B2 (en) * 2003-01-09 2008-04-08 Macrogenics, Inc. Identification and engineering of antibodies with variant Fc regions and methods of using same
US8084582B2 (en) * 2003-03-03 2011-12-27 Xencor, Inc. Optimized anti-CD20 monoclonal antibodies having Fc variants
US20090010920A1 (en) * 2003-03-03 2009-01-08 Xencor, Inc. Fc Variants Having Decreased Affinity for FcyRIIb
BRPI0411132B8 (pt) * 2003-06-12 2021-05-25 Lilly Co Eli protéina de fusão heteróloga e seus usos
US20050106667A1 (en) * 2003-08-01 2005-05-19 Genentech, Inc Binding polypeptides with restricted diversity sequences
US7758859B2 (en) * 2003-08-01 2010-07-20 Genentech, Inc. Anti-VEGF antibodies
EP2502935B1 (en) * 2003-08-22 2017-03-29 Biogen MA Inc. Improved antibodies having altered effector function and methods for making the same
EP1663306A2 (en) * 2003-09-05 2006-06-07 Genentech, Inc. Antibodies with altered effector functions
GB0324368D0 (en) * 2003-10-17 2003-11-19 Univ Cambridge Tech Polypeptides including modified constant regions
US20050136051A1 (en) * 2003-12-22 2005-06-23 Bernard Scallon Methods for generating multimeric molecules
US20060018911A1 (en) * 2004-01-12 2006-01-26 Dana Ault-Riche Design of therapeutics and therapeutics
WO2005070967A2 (en) * 2004-01-22 2005-08-04 Merck Patent Gmbh Anti-cancer antibodies with reduced complement fixation
US20060009360A1 (en) * 2004-06-25 2006-01-12 Robert Pifer New adjuvant composition
US20060067930A1 (en) * 2004-08-19 2006-03-30 Genentech, Inc. Polypeptide variants with altered effector function
US20060074225A1 (en) * 2004-09-14 2006-04-06 Xencor, Inc. Monomeric immunoglobulin Fc domains
ES2629397T3 (es) * 2004-09-24 2017-08-09 Amgen Inc. Moléculas de Fc modificadas
EP1810035A4 (en) * 2004-11-10 2010-03-17 Macrogenics Inc GENERATION OF FC ANTIBODY REGIONS FOR EFFECTOR FUNCTION
US8367805B2 (en) * 2004-11-12 2013-02-05 Xencor, Inc. Fc variants with altered binding to FcRn
US20070135620A1 (en) * 2004-11-12 2007-06-14 Xencor, Inc. Fc variants with altered binding to FcRn
US8802820B2 (en) * 2004-11-12 2014-08-12 Xencor, Inc. Fc variants with altered binding to FcRn
WO2007008943A2 (en) * 2005-07-08 2007-01-18 Xencor, Inc. Optimized anti-ep-cam antibodies
US7923538B2 (en) * 2005-07-22 2011-04-12 Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd Recombinant antibody composition
US20100098730A1 (en) * 2008-10-14 2010-04-22 Lowman Henry B Immunoglobulin variants and uses thereof

Also Published As

Publication number Publication date
NZ532526A (en) 2007-01-26
US20110086050A1 (en) 2011-04-14
WO2003035835A3 (en) 2003-10-16
HK1076388A1 (zh) 2006-01-20
WO2003035835A2 (en) 2003-05-01
AU2002337935B2 (en) 2008-05-01
EP1443961B1 (en) 2009-05-06
CN100423777C (zh) 2008-10-08
EP1443961A4 (en) 2005-11-23
CA2463879C (en) 2012-12-04
US20100255013A1 (en) 2010-10-07
CN1607960A (zh) 2005-04-20
JP2005532253A (ja) 2005-10-27
HUP0600342A2 (en) 2006-08-28
PL372709A1 (pl) 2005-07-25
BR0213761A (pt) 2005-04-12
ES2326964T3 (es) 2009-10-22
EP1443961A2 (en) 2004-08-11
MXPA04003798A (es) 2004-07-30
US20080095762A1 (en) 2008-04-24
JP2014076997A (ja) 2014-05-01
IL220142A0 (en) 2012-07-31
US20030157108A1 (en) 2003-08-21
KR20040066105A (ko) 2004-07-23
DK1443961T3 (da) 2009-08-24
JP2010248228A (ja) 2010-11-04
CA2463879A1 (en) 2003-05-01
ATE430580T1 (de) 2009-05-15
HUP0600342A3 (en) 2011-03-28
DE60232265D1 (de) 2009-06-18
US20070020260A1 (en) 2007-01-25
IL161412A0 (en) 2004-09-27
KR100988949B1 (ko) 2010-10-20

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR100988949B1 (ko) 당단백질 조성물
AU2002337935A1 (en) Glycoprotein compositions
US20220002430A1 (en) Immunoglobulin variants and uses thereof
ZA200701715B (en) Polypeptide variants with altered effector function
KR20080032065A (ko) 푸코실화 수준이 조절된 항체의 생성 방법
JP2002510481A (ja) 抗体変異体及びその断片
ZA200403000B (en) Glycoprotein compositions.
HK1076388B (en) Glycoprotein compositions
HK1156047A (en) Immunoglobulin variants and uses thereof
HK1074208B (en) Immunoglobulin variants and uses thereof
HK1120058A (en) Immunoglobulin variants and uses thereof
HK1154871A (en) Immunoglobulin variants and uses thereof
HK1129406A (zh) 免疫球蛋白變體及其用途
HK1129406B (en) Immunoglobulin variants and uses thereof