JP2024512377A - 抗ｋｌｋ７抗体、抗ｋｌｋ５抗体、多重特異性抗ｋｌｋ５／ｋｌｋ７抗体、及び使用方法 - Google Patents

抗ｋｌｋ７抗体、抗ｋｌｋ５抗体、多重特異性抗ｋｌｋ５／ｋｌｋ７抗体、及び使用方法 Download PDF

Info

Publication number
JP2024512377A
JP2024512377A JP2023554905A JP2023554905A JP2024512377A JP 2024512377 A JP2024512377 A JP 2024512377A JP 2023554905 A JP2023554905 A JP 2023554905A JP 2023554905 A JP2023554905 A JP 2023554905A JP 2024512377 A JP2024512377 A JP 2024512377A
Authority
JP
Japan
Prior art keywords
seq
amino acid
acid sequence
antibody
cdr
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
JP2023554905A
Other languages
English (en)
Inventor
ジェームズ トーマス ケルバー，
ワイン プン リー，
タンション イー，
チュアン チャン，
キャリー ディーン オースティン，
セシリア プイ チー チウ，
ジョセフ エドワード チャバリア－スミス，
ジャワハル スダムス，
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Genentech Inc
Original Assignee
Genentech Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Genentech Inc filed Critical Genentech Inc
Publication of JP2024512377A publication Critical patent/JP2024512377A/ja
Pending legal-status Critical Current

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/46—Hybrid immunoglobulins
    • C07K16/468—Immunoglobulins having two or more different antigen binding sites, e.g. multifunctional antibodies
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/40—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against enzymes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/10—Immunoglobulins specific features characterized by their source of isolation or production
    • C07K2317/14—Specific host cells or culture conditions, e.g. components, pH or temperature
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
    • C07K2317/24—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin containing regions, domains or residues from different species, e.g. chimeric, humanized or veneered
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
    • C07K2317/31—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency multispecific
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C07K2317/565—Complementarity determining region [CDR]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/76—Antagonist effect on antigen, e.g. neutralization or inhibition of binding
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
    • C07K2317/92—Affinity (KD), association rate (Ka), dissociation rate (Kd) or EC50 value

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)

Abstract

本発明は、抗ＫＬＫ７抗体、抗ＫＬＫ５抗体、抗ＫＬＫ５／ＫＬＫ７多重特異性抗体、及びそれらの使用方法を提供する。【選択図】図１５

Description

関連出願の相互参照
［００１］本出願は、２０２１年０３月１２日に出願された米国仮特許出願第６３／１６０，４３４号の優先権の利益を主張するものであり、その全体があらゆる目的のために参照により本明細書に組み込まれる。
分野
［００２］本発明は、抗ＫＬＫ７抗体、抗ＫＬＫ５抗体、抗ＫＬＫ５／ＫＬＫ７多重特異性抗体、及びそれらの使用方法に関する。
背景
［００３］ヒトカリクレイン関連ペプチダーゼ（ＫＬＫ）は、前立腺、卵巣、乳房、精巣、脳、及び皮膚などの様々な組織で発現する（キモ）－トリプシン様セリンプロテアーゼである。ＫＬＫは、ｃｌａｎ ＰＡ（Ｓ）のキモトリプシン様セリンプロテアーゼファミリーＳ１Ａのサブグループに属する。１５のヒトＫＬＫ遺伝子は、染色体１９ｑ１３．４上に位置し、ヒトゲノム中で最大の連続セリンプロテアーゼクラスターを構成する。これらの遺伝子は一般に５つのコード化エクソンからなり、場合によっては、１つ又は２つの５’非コード化エクソンからなり、カリクレイン関連ペプチダーゼＫＬＫ１～ＫＬＫ１５をコードする。全てのＫＬＫ遺伝子は、ＫＬＫ４～ＫＬＫ１５の間でおよそ４０％のアミノ酸配列同一性を有する２２４～２３７残基のキモトリプシン様又はトリプシン様触媒ドメインを含有する、一本鎖プレプロタンパク質をコードする。ＫＬＫ１並びにその近縁の相同体であるＫＬＫ２及びＫＬＫ３はそれら自身のクレードを形成し、ＫＬＫ４、５、及び７は別のサブグループに属するが、一方でＫＬＫ６はＫＬＫ１３及びＫＬＫ１４とより類似している。Ｄｅｂｅｌａら、「Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ」、第３８９巻第６２３～６３２頁（２００８年）を参照のこと。
［００４］ＫＬＫ５は分泌型のトリプシン様セリンプロテアーゼであり、ヒトの皮膚、特に皮膚の上部の棘層及び顆粒層で最も豊富に発現しているようであり、ここで、ケラチノサイトは最終分化を経て、角質層、最外表皮層、及び外部環境に対するバリアを形成する、扁平なレンガ様構造に変化する。Ｄｅｂｅｌａら、「Ｊ Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ」、第３７３巻第１０１７～１０３１頁（２００７年）、及びＴａｎら、「Ｊ Ｍｅｄ Ｃｈｅｍ．」、２０１５年１月２２日、第５８巻第２号第５９８～６１２頁（２０１４年）を参照のこと。ＫＬＫ７は、皮膚にも発現するキモトリプシン様セリンプロテアーゼである。ＫＬＫ５がネザートン症候群などの皮膚障害において病理学的役割を果たすことが記載されている。Ｆｕｒｉｏら、「ＰＬＯＳ Ｇｅｎｅｔ」、第１１巻第９号、ｅ１００５３８９（２０１５年）を参照のこと。ネザートン症候群は、Ｋａｚａｌ型セリンプロテアーゼ阻害剤５（ＳＰＩＮＫ５）をコードするＳＰＩＮＫ５遺伝子の機能欠失型変異によって引き起こされる。Ｄｅｓｃａｒｇｕｅｓら、「Ｎａｔ Ｇｅｎｅｔ．」、２００５年１月、第３７巻第１号第５６～６５頁（２００４年）を参照のこと。ＳＰＩＮＫ５がＫＬＫセリンプロテアーゼファミリー（例えば、ＫＬＫ５及びＫＬＫ７）のいくつかのメンバを阻害することが示されている。Ｗａｎｇ ｅｔ ａｌ．，Ｅｘｐ Ｄｅｒｍａｔｏｌ．Ｊｕｌ；２３（７）：５２４－６（２０１４）を参照のこと。ネザートン症候群におけるＳＰＩＮＫ５の欠如は、拮抗されないＫＬＫ活性を生じる。ＫＬＫ５活動亢進は、ＫＬＫ５が表皮におけるタンパク質分解の調節因子であるため、ネザートン症候群の病態生理における重要な要素であると考えられている。ＫＬＫ５及びＫＬＫ７の除去は、ネザートン症候群様表現型の致死性を救済する。Ｂｒｉｏｔら、「Ｊ Ｅｘｐ Ｍｅｄ．」、５月１１日、第２０６巻第５号第１１３５～４７頁（２００９年）、Ｆｕｒｉｏら、「Ｊ Ｅｘｐ Ｍｅｄ．」、３月１０日、第２１１巻第３号第４９９～５１３頁（２０１４年）、及びＫａｓｐａｒｅｋら、「ＰＬｏＳ Ｇｅｎｅｔ．」、２０１７年１月１７日、第１３巻第１号、ｅ１００６５６６（２０１７年）を参照のこと。ネザートン症候群は、複数の作用を有する複雑な全身性疾患であり、現在のところ満足な治療法はない。
［００５］喘息は、遺伝的及び環境的危険因子の両方に関連する臨床的に不均一な障害である。喘息双生児研究からの遺伝率の推定値は３５％～８０％にわたり、遺伝的リスクの重要な役割を示唆している。例えば、Ｕｌｌｅｍａｒら、「Ａｌｌｅｒｇｙ」、第７１巻第２３０～２３８頁（２０１６年）を参照のこと。喘息及び喘息関連表現型に対していくつかの大規模ＧＷＡＳが実施されており、ＯＲＭＤＬ３、ＩＬ１３、ＩＬ１ＲＬ１、及びＴＳＬＰ遺伝子近傍の遺伝子といった同定された遺伝子座の多くが、複数の研究集団で確認されている。例えば、Ｂｏｎｎｅｌｙｋｋｅら、「Ｎａｔ Ｇｅｎｅｔ」、第４６巻第５１～５５頁（２０１４年）を参照のこと。最近の研究では、低ペリオスチン喘息又は２型低炎症喘息に関するリスクを保護するＫＬＫ４／５遺伝子座のＳＮＰが同定された。同じ研究で、ＫＬＫ５量は重度喘息患者の気管支肺胞洗浄で増加することが発見され、ＫＬＫ５が気管支閉塞及び喘息病因において役割を担うという仮説を支持した。
［００６］ネザートン症候群及び喘息のような疾患の分野における進歩にもかかわらず、標的を同定し、且つ既存の治療法の有効性を補完又は増強できる手段を開発する必要がある。
［００７］本発明は、抗ＫＬＫ７抗体、抗ＫＬＫ５抗体、抗ＫＬＫ５／ＫＬＫ７多重特異性抗体、及びそれらの使用方法を提供する。
実施態様１．ヒトＫＬＫ７に結合する抗体であって、該抗体が、
（ａ）配列番号７のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号８のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２、及び（ｃ）配列番号２００のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３を含む重鎖可変ドメイン（ＶＨ）、並びに（ｄ）配列番号２０１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１、（ｅ）配列番号１１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２、及び（ｆ）配列番号１２のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３を含む軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）；又は
（ｂ）配列番号７のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号８のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２、及び（ｃ）配列番号９のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３を含む重鎖可変ドメイン（ＶＨ）、並びに（ｄ）配列番号２０１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１、（ｅ）配列番号１１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２、及び（ｆ）配列番号１２のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３を含む軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）；又は
（ｃ）配列番号７のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号８のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２、及び（ｃ）配列番号２００のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３を含む重鎖可変ドメイン（ＶＨ）、並びに（ｄ）配列番号１０のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１、（ｅ）配列番号１１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２、及び（ｆ）配列番号１２のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３を含む軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）
を含む、抗体。
実施態様２．モノクローナル抗体である、実施態様１に記載の抗体。
実施態様３．ヒト化又はキメラ抗体である、実施態様１又は実施態様２に記載の抗体。
実施態様４．ヒトＫＬＫ７に結合する抗体断片である、実施態様１～３のいずれか一項に記載の抗体。
実施態様５．抗体が、表面プラズモン共鳴によって測定した場合、１０ｐＭ未満、若しくは９ｐＭ未満、若しくは８ｐＭ未満、若しくは７ｐＭ未満、若しくは６ｐＭ未満、若しくは５ｐＭ未満のＫＤでヒトＫＬＫ７に結合し；且つ／又は表面プラズモン共鳴によって測定した場合、１０ｐＭ未満、若しくは９ｐＭ未満、若しくは８ｐＭ未満、若しくは７ｐＭ未満、若しくは６ｐＭ未満、若しくは５ｐＭ未満のＫＤでカニクイザルＫＬＫ７に結合する、実施態様１～４のいずれかに記載の抗体。
実施態様６．重鎖可変領域が、配列番号１２３～１２８から選択されるアミノ酸配列を含むＦＲ１、配列番号１３０～１３３から選択されるアミノ酸配列を含むＦＲ２、配列番号１３５～１４３のアミノ酸配列を含むＦＲ３、及び／又は配列番号１４４～１４５から選択されるアミノ酸配列を含むＦＲ４を含む、実施態様１～５のいずれか一項に記載の抗体。
実施態様７．軽鎖可変領域が、配列番号１４７～１５０から選択されるアミノ酸配列を含むＦＲ１、配列番号１５２～１５４から選択されるアミノ酸配列を含むＦＲ２、配列番号１５６～１５８から選択されるアミノ酸配列を含むＦＲ３、及び／又は配列番号１６０から選択されるアミノ酸配列を含むＦＲ４を含む、実施態様１～６のいずれか一項に記載の抗体。
実施態様８．
（ａ）配列番号１５～３０及び２０２から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するＶＨ配列；
（ｂ）配列番号３１～３８及び２０３から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するＶＬ配列；並びに
（ｃ）（ａ）で規定されるＶＨ配列及び（ｂ）で規定されるＶＬ配列
から選択される配列を含む、実施態様１～７のいずれかに記載の抗体。
実施態様９．
（ａ）配列番号１５～３０及び２０２から選択されるアミノ酸配列を含むＶＨ配列；
（ｂ）配列番号３１～３８及び２０３から選択されるアミノ酸配列を含むＶＬ配列；並びに
（ｃ）（ａ）で規定されるＶＨ配列及び（ｂ）で規定されるＶＬ配列
から選択される配列を含む、実施態様１～１０のいずれかに記載の抗体。
実施態様１０．配列番号２０２のＶＨ配列及び配列番号２０３のＶＬ配列を含む、実施態様１～１１のいずれかに記載の抗体。
実施態様１１．配列番号２０２のＶＨ配列及び配列番号２０３のＶＬ配列を含む、ヒトＫＬＫ７に特異的に結合する抗体。
実施態様１２．抗体が重鎖定常領域及び軽鎖定常領域を含み、重鎖定常領域が、Ｓ１８３Ｋ置換（ＥＵ番号付け）及び／若しくはＳ１８３Ｅ置換（ＥＵ番号付け）を含み；且つ／又は軽鎖定常領域が、Ｖ１３３Ｋ置換（ＥＵ番号付け）及び／若しくはＶ１３３Ｅ置換（ＥＵ番号付け）を含む、実施態様１～１１のいずれか一項に記載の抗体。
実施態様１３．完全長ＩｇＧ１抗体である、実施態様１～１２のいずれかに記載の抗体。
実施態様１４．抗体が、Ｎ２９７Ｇ置換（ＥＵ番号付け）又はＬ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、及びＰ３２９Ｇ置換（ＥＵ番号付け）を含む重鎖定数領域を含む、実施態様１３に記載の抗体。
実施態様１５．抗体が、Ｍ４２８Ｌ置換（ＥＵ番号付け）及び／又はＮ４３４Ｓ置換（ＥＵ番号付け）を含む重鎖定常領域を含む、実施態様１２～１４のいずれか一項に記載の抗体。
実施態様１６．抗体が、表面プラズモン共鳴によって測定した場合、２０ｐＭ未満、又は１５ｐＭ未満、又は１０ｐＭ未満、５ｐＭ未満、又は３ｐＭ未満、又は２ｐＭ未満、又は１ｐＭ未満のＫＤでヒトＫＬＫ７に結合する、実施態様１～１５のいずれか一項に記載の抗体。
実施態様１７．抗体が、５ｎＭ未満、又は３ｎＭ未満、又は２ｎＭ未満、又は１ｎＭ未満のＩＣ５０でヒトＫＬＫ７プロテアーゼ活性を阻害する、実施態様１～１６のいずれか一項に記載の抗体。
実施態様１８．抗体が、表面プラズモン共鳴によって測定した場合、２０ｐＭ未満、又は１５ｐＭ未満、又は１０ｐＭ未満、５ｐＭ未満、又は３ｐＭ未満、又は２ｐＭ未満、又は１ｐＭ未満のＫＤでヒトＫＬＫ７に結合し；且つ抗体が、５ｎＭ未満、又は３ｎＭ未満、又は２ｎＭ未満、又は１ｎＭ未満のＩＣ５０でヒトＫＬＫ７プロテアーゼ活性を阻害する、実施態様１～１９のいずれか一項に記載の抗体。
実施態様１９．ヒトＫＬＫ７プロテアーゼ活性の阻害が、アミノ酸配列ＲＰＫＰＶＥ－Ｎｖａｌ－ＷＲＫ（配列番号１２１）を含む基質のヒトＫＬＫ７媒介切断の阻害であり、Ｎｖａｌがノルバリンである、実施態様１７又は実施態様１８に記載の抗体。
実施態様２０．抗体が多重特異性抗体である、実施態様１～２１のいずれかに記載の抗体。
実施態様２１．二重特異性抗体である、実施態様２０に記載の抗体。
実施態様２２．実施態様１～２１のいずれかに記載の抗体をコードする、単離された核酸。
実施態様２３．実施態様２２に記載の核酸を含む、単離された宿主細胞。
実施態様２４．実施態様１～２１のいずれか一項に記載の抗体を発現する、単離された宿主細胞。
実施態様２５．ヒトＫＬＫ７に結合する抗体を産生する方法であって、抗体の発現に適した条件下で実施態様２３又は実施態様２４に記載の宿主細胞を培養することを含む方法。
実施態様２６．抗体を宿主細胞から回収することをさらに含む、実施態様２５に記載の方法。
実施態様２７．実施態様２６に記載の方法によって産生される抗体。
実施態様２８．ヒトＫＬＫ５に結合する抗体であって、（ａ）配列番号３９又は１０７のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号４０又は４１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２、及び（ｃ）配列番号２０４のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３を含む重鎖可変ドメイン（ＶＨ）、並びに（ｄ）配列番号４３又は４４のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１、（ｅ）配列番号４５のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２、及び（ｆ）配列番号４７のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３を含む軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）を含む、抗体。
実施態様２９．抗体が、（ａ）配列番号３９のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号４１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２、及び（ｃ）配列番号２０４のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３を含む重鎖可変ドメイン（ＶＨ）、並びに（ｄ）配列番号４３のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１、（ｅ）配列番号４５のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２、及び（ｆ）配列番号４７のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３を含む軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）を含む、実施態様２８に記載の抗体。
実施態様３０．モノクローナル抗体である、実施態様２８又は実施態様２９に記載の抗体。
実施態様３１．ヒト化又はキメラ抗体である、実施態様２８～３０のいずれか一項に記載の抗体。
実施態様３２．ヒトＫＬＫ５に結合する抗体断片である、実施態様２８～３１のいずれか一項に記載の抗体。
実施態様３３．抗体が、表面プラズモン共鳴によって測定した場合、１ｎＭ未満、若しくは５００ｐＭ未満、若しくは３００ｐＭ未満、若しくは２００ｐＭ未満、若しくは１００ｐＭ未満、若しくは５０ｐＭ未満のＫＤでヒトＫＬＫ５に結合し；且つ／又は表面プラズモン共鳴によって測定した場合、１ｎＭ未満、若しくは５００ｐＭ未満、若しくは３００ｐＭ未満、若しくは２００ｐＭ未満、若しくは１００ｐＭ未満、若しくは５０ｐＭ未満のＫＤでカニクイザルＫＬＫ５に結合する、実施態様２８～３２のいずれかに記載の抗体。
実施態様３４．重鎖可変領域が、配列番号１６１のアミノ酸配列を含むＦＲ１、配列番号１６２～１６３のアミノ酸配列を含むＦＲ２、配列番号１６４のアミノ酸配列を含むＦＲ３、及び／又は配列番号１６５のアミノ酸配列を含むＦＲ４を含む、実施態様２８～３３のいずれか一項に記載の抗体。
実施態様３５．軽鎖可変領域が、配列番号１６６のアミノ酸配列を含むＦＲ１、配列番号１６７～１６８から選択されるアミノ酸配列を含むＦＲ２、配列番号１６９のアミノ酸配列を含むＦＲ３、及び／又は配列番号１７０のアミノ酸配列を含むＦＲ４を含む、実施態様２８～３４のいずれか一項に記載の抗体。
実施態様３６．
（ａ）配列番号２０５のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するＶＨ配列；
（ｂ）配列番号５１及び５４～６７から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するＶＬ配列；並びに
（ｃ）（ａ）で規定されるＶＨ配列及び（ｂ）で規定されるＶＬ配列
から選択される配列を含む、実施態様２８～３５のいずれかに記載の抗体。
実施態様３７．
（ａ）配列番号２０５のアミノ酸配列を含むＶＨ配列；
（ｂ）配列番号５１及び５４～６７から選択されるアミノ酸配列を含むＶＬ配列；並びに
（ｃ）（ａ）で規定されるＶＨ配列及び（ｂ）で規定されるＶＬ配列
から選択される配列を含む、実施態様２８～３６のいずれかに記載の抗体。
実施態様３８．配列番号２０５のＶＨ配列及び配列番号６２のＶＬ配列を含む、実施態様２８～３７のいずれかに記載の抗体。
実施態様３９．配列番号２０５のＶＨ配列及び配列番号６２のＶＬ配列を含む、ヒトＫＬＫ５に特異的に結合する抗体。
実施態様４０．抗体が重鎖定常領域及び軽鎖定常領域を含み、重鎖定常領域が、Ｓ１８３Ｋ置換（ＥＵ番号付け）及び／若しくはＳ１８３Ｅ置換（ＥＵ番号付け）を含み；且つ／又は軽鎖定常領域が、Ｖ１３３Ｋ置換（ＥＵ番号付け）及び／若しくはＶ１３３Ｅ置換（ＥＵ番号付け）を含む、実施態様２８～３９のいずれか一項に記載の抗体。
実施態様４１．完全長ＩｇＧ１抗体である、実施態様２８～４０のいずれかに記載の抗体。
実施態様４２．抗体が、Ｎ２９７Ｇ置換（ＥＵ番号付け）又はＬ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、及びＰ３２９Ｇ置換（ＥＵ番号付け）を含む重鎖定数領域を含む、実施態様４１に記載の抗体。
実施態様４３．抗体が、Ｍ４２８Ｌ置換（ＥＵ番号付け）及び／又はＮ４３４Ｓ置換（ＥＵ番号付け）を含む重鎖定常領域を含む、実施態様４０～４２のいずれか一項に記載の抗体。
実施態様４４．抗体が、表面プラズモン共鳴によって測定した場合、６０ｐＭ未満、３０ｐＭ未満、２０ｐＭ未満、１０ｐＭ未満、又は５ｐＭ未満のＫＤでヒトＫＬＫ５に結合する、実施態様２８～４３のいずれかに記載の抗体。
実施態様４５．抗体が、５ｎＭ未満、又は３ｎＭ未満、又は２ｎＭ未満、又は１ｎＭ未満のＩＣ５０でヒトＫＬＫ５プロテアーゼ活性を阻害する、実施態様２８～４４のいずれか一項に記載の抗体。
実施態様４６．抗体が、表面プラズモン共鳴によって測定した場合、６０ｐＭ未満、３０ｐＭ未満、２０ｐＭ未満、１０ｐＭ未満、又は５ｐＭ未満のＫＤでヒトＫＬＫ５に結合し；且つ抗体が、５ｎＭ未満、又は３ｎＭ未満、又は２ｎＭ未満、又は１ｎＭ未満のＩＣ５０でヒトＫＬＫ５プロテアーゼ活性を阻害する、実施態様２８～４５のいずれか一項に記載の抗体。
実施態様４７．ヒトＫＬＫ５プロテアーゼ活性の阻害が、基質Ｂｏｃ－Ｖａｌ－Ｐｒｏ－Ａｒｇ－ＡＭＣのヒトＫＬＫ５媒介切断の阻害である、実施態様４５又は実施態様４６に記載の抗体。
実施態様４８．抗体が多重特異性抗体である、実施態様２８～４７のいずれかに記載の抗体。
実施態様４９．抗体が二重特異性抗体である、実施態様４８に記載の抗体。
実施態様５０．実施態様２８～４９のいずれかに記載の抗体をコードする、単離された核酸。
実施態様５１．実施態様６１に記載の核酸を含む、単離された宿主細胞。
実施態様５２．実施態様２８～５１のいずれか一項に記載の抗体を発現する、単離された宿主細胞。
実施態様５３．ヒトＫＬＫ５に結合する抗体を産生する方法であって、抗体の発現に適した条件下で実施態様５１又は実施態様５２に記載の宿主細胞を培養することを含む方法。
実施態様５４．抗体を宿主細胞から回収することをさらに含む、実施態様５３に記載の方法。
実施態様５５．実施態様５４に記載の方法によって産生される抗体。
実施態様５６．第１の結合ドメイン及び第２の結合ドメインを含む二重特異性抗体であって、第１の結合ドメインがヒトＫＬＫ７に結合し、第２の結合ドメインがヒトＫＬＫ５に結合し、第１の結合ドメインが、
（ａ）配列番号７のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号８のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２、及び（ｃ）配列番号２００のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３、並びに（ｄ）配列番号２０１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１、（ｅ）配列番号１１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２、及び（ｆ）配列番号１２のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３を含む軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）；又は
（ｂ）配列番号７のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号８のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２、及び（ｃ）配列番号９のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３、並びに（ｄ）配列番号２０１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１、（ｅ）配列番号１１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２、及び（ｆ）配列番号１２のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３を含む軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）；又は
（ｃ）配列番号７のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号８のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２、及び（ｃ）配列番号２００のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３、並びに（ｄ）配列番号１０のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１、（ｅ）配列番号１１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２、及び（ｆ）配列番号１２のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３を含む軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）
を含む、二重特異性抗体。
実施態様５７．第１の結合ドメインがヒト化されている、実施態様５６に記載の二重特異性抗体。
実施態様５８．第１の結合ドメインが、
（ａ）配列番号１５～３０及び２０２から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するＶＨ配列；
（ｂ）配列番号３１～３８及び２０３から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するＶＬ配列；並びに
（ｃ）（ａ）で規定されるＶＨ配列及び（ｂ）で規定されるＶＬ配列
から選択される配列を含む、実施態様５６又は実施態様５７に記載の二重特異性抗体。
実施態様５９．第１の結合ドメインが、
（ａ）配列番号１５～３０及び２０２から選択されるアミノ酸配列を含むＶＨ配列；
（ｂ）配列番号３１～３８及び２０３から選択されるアミノ酸配列を含むＶＬ配列；並びに
（ｃ）（ａ）で規定されるＶＨ配列及び（ｂ）で規定されるＶＬ配列
から選択される配列を含む、実施態様５６～５８のいずれか一項に記載の二重特異性抗体。
実施態様６０．第１の結合ドメインが、配列番号２０２のＶＨ配列及び配列番号２０３のＶＬ配列を含む、実施態様５６～５９のいずれか一項に記載の二重特異性抗体。
実施態様６１．第２の結合ドメインが、
（ａ）（ａ）配列番号３９及び１０７から選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号４０及び４１から選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２、及び（ｃ）配列番号４２又は２０４のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３を含む重鎖可変ドメイン（ＶＨ）並びに（ｄ）配列番号４３及び４４から選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１、（ｅ）配列番号４５のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２、及び（ｆ）配列番号４６～４９から選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３を含む軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）；又は
（ｂ）（ａ）配列番号６８のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号６９及び７０から選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２、及び（ｃ）配列番号７１及び７２から選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３を含む重鎖可変ドメイン（ＶＨ）並びに（ｄ）配列番号７３のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１、（ｅ）配列番号７４のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２、及び（ｆ）配列番号７５～７８から選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３を含む軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）
を含む、実施態様５６～６０のいずれか一項に記載の二重特異性抗体。
実施態様６２．第２の結合ドメインが、（ａ）配列番号３９のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号４１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２、及び（ｃ）配列番号２０４のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３を含む重鎖可変ドメイン（ＶＨ）、並びに（ｄ）配列番号４３のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１、（ｅ）配列番号４５のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２、及び（ｆ）配列番号４７のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３を含む軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）を含む、実施態様５６～６１のいずれか一項に記載の二重特異性抗体。
実施態様６３．第２の結合ドメインがヒト化されている、実施態様５６～６２のいずれか一項に記載の二重特異性抗体。
実施態様６４．第２の結合ドメインが、
（ａ）配列番号５０、５２、５３、１０５、１０６及び２０５から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するＶＨ配列；
（ｂ）配列番号５１及び５４～６７から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するＶＬ配列；並びに
（ｃ）（ａ）で規定されるＶＨ配列及び（ｂ）で規定されるＶＬ配列；
（ｄ）配列番号７９及び８１～８７から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するＶＨ配列；
（ｅ）配列番号８０及び８８～９４から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するＶＬ配列；並びに
（ｆ）（ｄ）で規定されるＶＨ配列及び（ｅ）で規定されるＶＬ配列
から選択される配列を含む、実施態様６１又は実施態様６２に記載の二重特異性抗体。
実施態様６５．第２の結合ドメインが、
（ａ）配列番号５２、５３、１０５、１０６及び２０５から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するＶＨ配列；
（ｂ）配列番号５４～６７から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するＶＬ配列；並びに
（ｃ）（ａ）で規定されるＶＨ配列及び（ｂ）で規定されるＶＬ配列
から選択される配列を含む、実施態様６１～６３のいずれか一項に記載の二重特異性抗体。
実施態様６６．第２の結合ドメインが、
（ａ）配列番号５０、５２、５３、１０５、１０６、及び２０５から選択されるアミノ酸配列を含むＶＨ配列；
（ｂ）配列番号５１及び５４～６７から選択されるアミノ酸配列を含むＶＬ配列；並びに
（ｃ）（ａ）で規定されるＶＨ配列及び（ｂ）で規定されるＶＬ配列；
（ｄ）配列番号７９及び８１～８７から選択されるアミノ酸配列を含むＶＨ配列；
（ｅ）配列番号８０及び８８～９４から選択されるアミノ酸配列を含むＶＬ配列；並びに
（ｆ）（ｄ）で規定されるＶＨ配列及び（ｅ）で規定されるＶＬ配列
から選択される配列を含む、実施態様５６～６３のいずれか一項に記載の二重特異性抗体。
実施態様６７．第２の結合ドメインが、
（ａ）配列番号５２、５３、１０５、１０６、及び２０５から選択されるアミノ酸配列を含むＶＨ配列；
（ｂ）配列番号５４～６７から選択されるアミノ酸配列を含むＶＬ配列；並びに
（ｃ）（ａ）で規定されるＶＨ配列及び（ｂ）で規定されるＶＬ配列；
（ｄ）配列番号８１～８７から選択されるアミノ酸配列を含むＶＨ配列；
（ｅ）配列番号８８～９４から選択されるアミノ酸配列を含むＶＬ配列；並びに
（ｆ）（ｄ）で規定されるＶＨ配列及び（ｅ）で規定されるＶＬ配列
から選択される配列を含む、実施態様５６～６３のいずれか一項に記載の二重特異性抗体。
実施態様６８．第１の結合ドメインが、配列番号２０２のＶＨアミノ酸配列及び配列番号２０３のＶＬアミノ酸配列を含み、第２の結合ドメインが、配列番号２０５のＶＨ配列及び配列番号６２のＶＬアミノ酸配列を含む、実施態様５６～６７のいずれか一項に記載の二重特異性抗体。
実施態様６９．第１の結合ドメイン及び第２の結合ドメインを含む二重特異性抗体であって、ここで、第１の結合ドメインがヒトＫＬＫ７に結合し、第２の結合ドメインがヒトＫＬＫ５に結合し、第１の結合ドメインが、配列番号２０２の重鎖可変ドメイン（ＶＨ）アミノ酸配列及び配列番号２０３の軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）アミノ酸配列を含み、第２の結合ドメインが、配列番号２０５のＶＨアミノ酸配列及び配列番号６２のＶＬアミノ酸配列を含む、二重特異性抗体。
実施態様７０．第１の結合ドメインが第１の重鎖可変ドメイン及び第１の軽鎖可変ドメインを含み、ここで、第１の重鎖可変ドメインが第１の重鎖定常領域に連結され、第１の軽鎖可変ドメインが第１の軽鎖定常領域に連結され；第２の結合ドメインが第２の重鎖可変ドメイン及び第２の軽鎖可変ドメインを含み、ここで、第２の重鎖可変ドメインが第２の重鎖定常領域に連結され、第２の軽鎖可変ドメインが第２の軽鎖定常領域に連結される、実施態様５６～６９のいずれか一項に記載の二重特異性抗体。
実施態様７１．第１の重鎖定常領域がノブ変異を含み、第２の重鎖定常領域がホール変異を含み；又は第１の重鎖定常領域がホール変異を含み、第２の重鎖定常領域がノブ変異を含む、実施態様７０に記載の二重特異性抗体。
実施態様７２．抗体がＩｇＧ１抗体であり、ノブ変異がＴ３６６Ｗ置換を含む、実施態様７１に記載の二重特異性抗体。
実施態様７３．抗体がＩｇＧ１抗体であり、ホール変異が、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、及びＹ４０７Ｖから選択される少なくとも１つ、少なくとも２つ、又は３つの置換を含む、実施態様７１又は実施態様７２に記載の二重特異性抗体。
実施態様７４．抗体がＩｇＧ１抗体であり、ホール変異がＴ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、及びＹ４０７Ｖ置換を含む、実施態様７３に記載の二重特異性抗体。
実施態様７５．第１の重鎖定常領域及び／又は第２の重鎖定常領域が、Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、及びＰ３２９Ｇ置換（ＥＵ番号付け）を含む、実施態様７０～７４のいずれか一項に記載の二重特異性抗体。
実施態様７６．第１の重鎖定常領域及び第２の重鎖定常領域がそれぞれ、Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、及びＰ３２９Ｇ置換（ＥＵ番号付け）を含む、実施態様７５に記載の二重特異性抗体。
実施態様７７．
（ａ）第１の重鎖定常領域がＳ１８３Ｋ置換（ＥＵ番号付け）をさらに含み、第１の軽鎖定常領域がＶ１３３Ｅ置換（ＥＵ番号付け）を含み、第２の重鎖定常領域がＳ１８３Ｅ置換（ＥＵ番号付け）をさらに含み、第２の軽鎖定常領域がＶ１３３Ｋ置換（ＥＵ番号付け）を含み；又は
（ｂ）第１の重鎖定常領域がＳ１８３Ｅ置換（ＥＵ番号付け）をさらに含み、第１の軽鎖定常領域がＶ１３３Ｋ置換（ＥＵ番号付け）を含み、第２の重鎖定常領域がＳ１８３Ｋ置換（ＥＵ番号付け）をさらに含み、第２の軽鎖定常領域がＶ１３３Ｅ置換（ＥＵ番号付け）を含む
実施態様７０～７６のいずれか一項に記載の二重特異性抗体。
実施態様７８．第１の重鎖定常領域及び／又は第２の重鎖定常領域が、Ｍ４２８Ｌ及びＮ４３４Ｓ（ＥＵ番号付け）から選択される少なくとも１つの置換をさらに含む、実施態様７０～７７のいずれか一項に記載の二重特異性抗体。
実施態様７９．第１の重鎖定常領域及び第２の重鎖定常領域がそれぞれ、Ｍ４２８Ｌ及びＮ４３４Ｓ（ＥＵ番号付け）から選択される少なくとも１つの置換をさらに含む、実施態様７８に記載の二重特異性抗体。
実施態様８０．第１の重鎖定常領域及び第２の重鎖定常領域がそれぞれ、Ｍ４２８Ｌ及びＮ４３４Ｓ置換（ＥＵ番号付け）をさらに含む、実施態様７９に記載の二重特異性抗体。
実施態様８１．
（ａ）第１の重鎖定常領域が、配列番号９６、１８４、９８、１８６、１１７、１８８、１１９、１９０、２１１、２１２、２１５、２１６、２１９、２２０、２２３、及び２２４から選択されるアミノ酸配列を含み、第１の軽鎖定常領域が配列番号１０３のアミノ酸配列を含み；第２の重鎖定常領域が、配列番号９７、１８５、９９、１８７、１１８、１８９、１２０、１９１、２１３、２１４、２１７、２１８、２２１、２２２、２２５、及び２２６から選択されるアミノ酸配列を含み、第２の軽鎖定常領域が配列番号１０４のアミノ酸配列を含み；又は
（ｂ）第２の重鎖定常領域が、配列番号９６、１８４、９８、１８６、１１７、１８８、１１９、１９０、２１１、２１２、２１５、２１６、２１９、２２０、２２３、及び２２４から選択されるアミノ酸配列を含み、第２の軽鎖定常領域が配列番号１０３のアミノ酸配列を含み；第１の重鎖定常領域が、配列番号９７、１８５、９９、１８７、１１８、１８９、１２０、１９１、２１３、２１４、２１７、２１８、２２１、２２２、２２５、及び２２６から選択されるアミノ酸配列を含み、第１の軽鎖定常領域が配列番号１０４のアミノ酸配列を含む
実施態様７０～８０のいずれか一項に記載の二重特異性抗体。
実施態様８２．
（ａ）第１の重鎖定常領域が、配列番号９６、１８４、２１１、若しくは２１２のアミノ酸配列を含み、第１の軽鎖定常領域が配列番号１０３のアミノ酸配列を含み、第２の重鎖定常領域が、配列番号９７、１８５、２１３、若しくは２１４のアミノ酸配列を含み、第２の軽鎖定常領域が配列番号１０４のアミノ酸配列を含み；又は
（ｂ）第１の重鎖定常領域が、配列番号９８、１８６、２１５、若しくは２１６のアミノ酸配列を含み、第１の軽鎖定常領域が配列番号１０３のアミノ酸配列を含み、第２の重鎖定常領域が、配列番号９９、１８７、２１７、若しくは２１８のアミノ酸配列を含み、第２の軽鎖定常領域が配列番号１０４のアミノ酸配列を含み；又は
（ｃ）第２の重鎖定常領域が、配列番号９６、１８４、２１１、若しくは２１２のアミノ酸配列を含み、第２の軽鎖定常領域が配列番号１０３のアミノ酸配列を含み、第１の重鎖定常領域が、配列番号９７、１８５、２１３、若しくは２１４のアミノ酸配列を含み、第１の軽鎖定常領域が配列番号１０４のアミノ酸配列を含み；又は
（ｄ）第２の重鎖定常領域が、配列番号９８、１８６、２１５、若しくは２１６のアミノ酸配列を含み、第２の軽鎖定常領域が配列番号１０３のアミノ酸配列を含み、第１の重鎖定常領域が、配列番号９９、１８７、２１７、若しくは２１８のアミノ酸配列を含み、第１の軽鎖定常領域が配列番号１０４のアミノ酸配列を含み；又は
（ｅ）第１の重鎖定常領域が、配列番号１１８、１８９、２２１、若しくは２２２のアミノ酸配列を含み、第１の軽鎖定常領域が配列番号１０３のアミノ酸配列を含み、第２の重鎖定常領域が、配列番号１１７、１８８、２１９、若しくは２２０のアミノ酸配列を含み、第２の軽鎖定常領域が配列番号１０４のアミノ酸配列を含み；又は
（ｆ）第１の重鎖定常領域が、配列番号１２０、１９１、２２５、若しくは２２６のアミノ酸配列を含み、第１の軽鎖定常領域が配列番号１０３のアミノ酸配列を含み、第２の重鎖定常領域が、配列番号１１９、１９０、２２３、若しくは２２４のアミノ酸配列を含み、第２の軽鎖定常領域が配列番号１０４のアミノ酸配列を含み；又は
（ｇ）第２の重鎖定常領域が、配列番号１１８、１８９、２２１、若しくは２２２のアミノ酸配列を含み、第２の軽鎖定常領域が配列番号１０３のアミノ酸配列を含み、第１の重鎖定常領域が、配列番号１１７、１８８、２１９、若しくは２２０のアミノ酸配列を含み、第１の軽鎖定常領域が配列番号１０４のアミノ酸配列を含み；又は
（ｈ）第２の重鎖定常領域が、配列番号１２０、１９１、２２５、若しくは２２６のアミノ酸配列を含み、第２の軽鎖定常領域が配列番号１０３のアミノ酸配列を含み、第１の重鎖定常領域が、配列番号１１９、１９０、２２３、若しくは２２４のアミノ酸配列を含み、第１の軽鎖定常領域が配列番号１０４のアミノ酸配列を含む
実施態様９８に記載の二重特異性抗体。
実施態様８３．第１の結合ドメイン及び第２の結合ドメインを含む二重特異性抗体であって、ここで、第１の結合ドメインがヒトＫＬＫ７に結合し、第２の結合ドメインがヒトＫＬＫ５に結合し、第１の結合ドメインが、配列番号２０６又は２０９の重鎖アミノ酸配列及び配列番号２０７の軽鎖アミノ酸配列を含み、第２の結合ドメインが、配列番号２０８又は２１０の重鎖アミノ酸配列及び配列番号１１５の軽鎖アミノ酸配列を含む、二重特異性抗体。
実施態様８４．第１の結合ドメイン及び第２の結合ドメインを含む二重特異性抗体であって、ここで、第１の結合ドメインがヒトＫＬＫ７に結合し、第２の結合ドメインがヒトＫＬＫ５に結合し、第２の結合ドメインが、（ａ）配列番号３９又は１０７のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号４０又は４１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２、及び（ｃ）配列番号２０４のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３を含む重鎖可変ドメイン（ＶＨ）、並びに（ｄ）配列番号４３又は４４のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１、（ｅ）配列番号４５のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２、及び（ｆ）配列番号４７のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３を含む軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）を含む、二重特異性抗体。
実施態様８５．第２の結合ドメインが、（ａ）配列番号３９のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号４１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２、及び（ｃ）配列番号２０４のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３を含む重鎖可変ドメイン（ＶＨ）、並びに（ｄ）配列番号４３のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１、（ｅ）配列番号４５のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２、及び（ｆ）配列番号４７のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３を含む軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）を含む、実施態様８５に記載の二重特異性抗体。
実施態様８６．第２の結合ドメインがヒト化されている、実施態様８４又は実施態様８５に記載の二重特異性抗体。
実施態様８７．第２の結合ドメインが、
（ａ）配列番号２０５のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するＶＨ配列；
（ｂ）配列番号５１及び５４～６７から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するＶＬ配列；並びに
（ｃ）（ａ）で規定されるＶＨ配列及び（ｂ）で規定されるＶＬ配列
から選択される配列を含む、実施態様８４～８６のいずれか一項に記載の二重特異性抗体。
実施態様８８．第２の結合ドメインが、
（ａ）配列番号２０５のアミノ酸配列を含むＶＨ配列；
（ｂ）配列番号５１及び５４～６７から選択されるアミノ酸配列を含むＶＬ配列；並びに
（ｃ）（ａ）で規定されるＶＨ配列及び（ｂ）で規定されるＶＬ配列
から選択される配列を含む、実施態様８４～８６のいずれか一項に記載の二重特異性抗体。
実施態様８９．第２の結合ドメインが、配列番号２０５のＶＨ配列及び配列番号６２のＶＬアミノ酸配列を含む、実施態様８４～８６のいずれか一項に記載の二重特異性抗体。
実施態様９０．第１の結合ドメインがヒト化されている、実施態様８４～８９のいずれか一項に記載の二重特異性抗体。
実施態様９１．第１の結合ドメインが第１の重鎖可変ドメイン及び第１の軽鎖可変ドメインを含み、ここで、第１の重鎖可変ドメインが第１の重鎖定常領域に連結され、第１の軽鎖可変ドメインが第１の軽鎖定常領域に連結され；第２の結合ドメインが第２の重鎖可変ドメイン及び第２の軽鎖可変ドメインを含み、ここで、第２の重鎖可変ドメインが第２の重鎖定常領域に連結され、第２の軽鎖可変ドメインが第２の軽鎖定常領域に連結される、実施態様８４～９０のいずれか一項に記載の二重特異性抗体。
実施態様９２．第１の重鎖定常領域がノブ変異を含み、第２の重鎖定常領域がホール変異を含み；又は第１の重鎖定常領域がホール変異を含み、第２の重鎖定常領域がノブ変異を含む、実施態様９１に記載の二重特異性抗体。
実施態様９３．抗体がＩｇＧ１抗体であり、ノブ変異がＴ３６６Ｗ変異を含む、実施態様９２に記載の二重特異性抗体。
実施態様９４．抗体がＩｇＧ１抗体であり、ホール変異が、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、及びＹ４０７Ｖから選択される少なくとも１つ、少なくとも２つ、又は３つの変異を含む、実施態様９２又は実施態様９３に記載の二重特異性抗体。
実施態様９５．抗体がＩｇＧ１抗体であり、ホール変異がＴ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、及びＹ４０７Ｖ変異を含む、実施態様９４に記載の二重特異性抗体。
実施態様９６．第１の重鎖定常領域及び／又は第２の重鎖定常領域が、Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、及びＰ３２９Ｇ置換（ＥＵ番号付け）を含む、実施態様９１～９５のいずれか一項に記載の二重特異性抗体。
実施態様９７．第１の重鎖定常領域及び第２の重鎖定常領域がそれぞれ、Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、及びＰ３２９Ｇ置換（ＥＵ番号付け）を含む、実施態様９６に記載の二重特異性抗体。
実施態様９８．
（ａ）第１の重鎖定常領域がＳ１８３Ｋ置換（ＥＵ番号付け）をさらに含み、第１の軽鎖定常領域がＶ１３３Ｅ置換（ＥＵ番号付け）を含み、第２の重鎖定常領域がＳ１８３Ｅ置換（ＥＵ番号付け）をさらに含み、第２の軽鎖定常領域がＶ１３３Ｋ置換（ＥＵ番号付け）を含み；又は
（ｂ）第１の重鎖定常領域がＳ１８３Ｅ置換（ＥＵ番号付け）をさらに含み、第１の軽鎖定常領域がＶ１３３Ｋ置換（ＥＵ番号付け）を含み、第２の重鎖定常領域がＳ１８３Ｋ置換（ＥＵ番号付け）をさらに含み、第２の軽鎖定常領域がＶ１３３Ｅ置換（ＥＵ番号付け）を含む
実施態様９１～９７のいずれか一項に記載の二重特異性抗体。
実施態様９９．第１の重鎖定常領域及び／又は第２の重鎖定常領域が、Ｍ４２８Ｌ及びＮ４３４Ｓ（ＥＵ番号付け）から選択される少なくとも１つの置換をさらに含む、実施態様９１～９８のいずれか一項に記載の二重特異性抗体。
実施態様１００．第１の重鎖定常領域及び第２の重鎖定常領域がそれぞれ、Ｍ４２８Ｌ及びＮ４３４Ｓ（ＥＵ番号付け）から選択される少なくとも１つの置換をさらに含む、実施態様９９に記載の二重特異性抗体。
実施態様１０１．第１の重鎖定常領域及び第２の重鎖定常領域がそれぞれ、Ｍ４２８Ｌ及びＮ４３４Ｓ置換（ＥＵ番号付け）をさらに含む、実施態様１００に記載の二重特異性抗体。
実施態様１０２．
（ａ）第１の重鎖定常領域が、配列番号９６、１８４、９８、１８６、１１７、１８８、１１９、１９０、２１１、２１２、２１５、２１６、２１９、２２０、２２３、及び２２４から選択されるアミノ酸配列を含み、第１の軽鎖定常領域が配列番号１０３のアミノ酸配列を含み；且つ重鎖定常領域が、配列番号９７、１８５、９９、１８７、１１８、１８９、１２０、１９１、２１３、２１４、２１７、２１８、２２１、２２２、２２５、及び２２６から選択されるアミノ酸配列を含み、第２の軽鎖定常領域が配列番号１０４のアミノ酸配列を含み；又は
（ｂ）第２の重鎖定常領域が、配列番号９６、１８４、９８、１８６、１１７、１８８、１１９、１９０、２１１、２１２、２１５、２１６、２１９、２２０、２２３、及び２２４から選択されるアミノ酸配列を含み、第２の軽鎖定常領域が配列番号１０３のアミノ酸配列を含み；第１の重鎖定常領域が、配列番号９７、１８５、９９、１８７、１１８、１８９、１２０、１９１、２１３、２１４、２１７、２１８、２２１、２２２、２２５、及び２２６から選択されるアミノ酸配列を含み、第１の軽鎖定常領域が配列番号１０４のアミノ酸配列を含む
実施態様９１～１０１のいずれか一項に記載の二重特異性抗体。
実施態様１０３．
（ａ）第１の重鎖定常領域が、配列番号９６、１８４、２１１、若しくは２１２のアミノ酸配列を含み、第１の軽鎖定常領域が配列番号１０３のアミノ酸配列を含み、第２の重鎖定常領域が、配列番号９７、１８５、２１３、若しくは２１４のアミノ酸配列を含み、第２の軽鎖定常領域が配列番号１０４のアミノ酸配列を含み；又は
（ｂ）第１の重鎖定常領域が、配列番号９８、１８６、２１５、若しくは２１６のアミノ酸配列を含み、第１の軽鎖定常領域が配列番号１０３のアミノ酸配列を含み、第２の重鎖定常領域が、配列番号９９、１８７、２１７、若しくは２１８のアミノ酸配列を含み、第２の軽鎖定常領域が配列番号１０４のアミノ酸配列を含み；又は
（ｃ）第２の重鎖定常領域が、配列番号９６、１８４、２１１、若しくは２１２のアミノ酸配列を含み、第２の軽鎖定常領域が配列番号１０３のアミノ酸配列を含み、第１の重鎖定常領域が、配列番号９７、１８５、２１３、若しくは２１４のアミノ酸配列を含み、第１の軽鎖定常領域が配列番号１０４のアミノ酸配列を含み；又は
（ｄ）第２の重鎖定常領域が、配列番号９８、１８６、２１５、若しくは２１６のアミノ酸配列を含み、第２の軽鎖定常領域が配列番号１０３のアミノ酸配列を含み、第１の重鎖定常領域が、配列番号９９、１８７、２１７、若しくは２１８のアミノ酸配列を含み、第１の軽鎖定常領域が配列番号１０４のアミノ酸配列を含み；又は
（ｅ）第１の重鎖定常領域が、配列番号１１８、１８９、２２１、若しくは２２２のアミノ酸配列を含み、第１の軽鎖定常領域が配列番号１０３のアミノ酸配列を含み、第２の重鎖定常領域が、配列番号１１７、１８８、２１９、若しくは２２０のアミノ酸配列を含み、第２の軽鎖定常領域が配列番号１０４のアミノ酸配列を含み；又は
（ｆ）第１の重鎖定常領域が、配列番号１２０、１９１、２２５、若しくは２２６のアミノ酸配列を含み、第１の軽鎖定常領域が配列番号１０３のアミノ酸配列を含み、第２の重鎖定常領域が、配列番号１１９、１９０、２２３、若しくは２２４のアミノ酸配列を含み、第２の軽鎖定常領域が配列番号１０４のアミノ酸配列を含み；又は
（ｇ）第２の重鎖定常領域が、配列番号１１８、１８９、２２１、若しくは２２２のアミノ酸配列を含み、第２の軽鎖定常領域が配列番号１０３のアミノ酸配列を含み、第１の重鎖定常領域が、配列番号１１７、１８８、２１９、若しくは２２０のアミノ酸配列を含み、第１の軽鎖定常領域が配列番号１０４のアミノ酸配列を含み；又は
（ｈ）第２の重鎖定常領域が、配列番号１２０、１９１、２２５、若しくは２２６のアミノ酸配列を含み、第２の軽鎖定常領域が配列番号１０３のアミノ酸配列を含み、第１の重鎖定常領域が、配列番号１１９、１９０、２２３、若しくは２２４のアミノ酸配列を含み、第１の軽鎖定常領域が配列番号１０４のアミノ酸配列を含む
実施態様１０２に記載の二重特異性抗体。
実施態様１０４．抗体が、表面プラズモン共鳴によって測定した場合、６０ｐＭ未満、３０ｐＭ未満、２０ｐＭ未満、１０ｐＭ未満、又は５ｐＭ未満のＫＤでヒトＫＬＫ５に結合する、実施態様５６～１０３のいずれか一項に記載の二重特異性抗体。
実施態様１０５．抗体が、５ｎＭ未満、又は３ｎＭ未満、又は２ｎＭ未満、又は１ｎＭ未満のＩＣ５０でヒトＫＬＫ５プロテアーゼ活性を阻害する、実施態様５６～１０４のいずれか一項に記載の二重特異性抗体。
実施態様１０６．抗体が、表面プラズモン共鳴によって測定した場合、６０ｐＭ未満、３０ｐＭ未満、２０ｐＭ未満、１０ｐＭ未満、又は５ｐＭ未満のＫＤでヒトＫＬＫ５に結合し；且つ抗体が、５ｎＭ未満、又は３ｎＭ未満、又は２ｎＭ未満、又は１ｎＭ未満のＩＣ５０でヒトＫＬＫ５プロテアーゼ活性を阻害する、実施態様５６～１０５のいずれか一項に記載の抗体。
実施態様１０７．ヒトＫＬＫ５プロテアーゼ活性の阻害が、基質Ｂｏｃ－Ｖａｌ－Ｐｒｏ－Ａｒｇ－ＡＭＣのヒトＫＬＫ５媒介切断の阻害である、実施態様１０５又は実施態様１０６に記載の二重特異性抗体。
実施態様１０８．抗体が、表面プラズモン共鳴によって測定した場合、２０ｐＭ未満、又は１５ｐＭ未満、又は１０ｐＭ未満、５ｐＭ未満、又は３ｐＭ未満、又は２ｐＭ未満、又は１ｐＭ未満のＫＤでヒトＫＬＫ７に結合する、実施態様５６～１０７のいずれか一項に記載の二重特異性抗体。
実施態様１０９．抗体が、５ｎＭ未満、又は３ｎＭ未満、又は２ｎＭ未満、又は１ｎＭ未満のＩＣ５０でヒトＫＬＫ７プロテアーゼ活性を阻害する、実施態様５６～１０８のいずれか一項に記載の二重特異性抗体。
実施態様１１０．抗体が、表面プラズモン共鳴によって測定した場合、２０ｐＭ未満、又は１５ｐＭ未満、又は１０ｐＭ未満、５ｐＭ未満、又は３ｐＭ未満、又は２ｐＭ未満、又は１ｐＭ未満のＫＤでヒトＫＬＫ７に結合し；且つ抗体が、５ｎＭ未満、又は３ｎＭ未満、又は２ｎＭ未満、又は１ｎＭ未満のＩＣ５０でヒトＫＬＫ７プロテアーゼ活性を阻害する、実施態様５６～１０９のいずれか一項に記載の二重特異性抗体。
実施態様１１１．ヒトＫＬＫ７プロテアーゼ活性の阻害が、アミノ酸配列ＲＰＫＰＶＥ－Ｎｖａｌ－ＷＲＫ（配列番号１２１）を含む基質のヒトＫＬＫ７媒介切断の阻害であり、Ｎｖａｌがノルバリンである、実施態様１０９又は実施態様１１０に記載の二重特異性抗体。
実施態様１１２．ヒトＫＬＫ５に対する二重特異性抗体のＫＤ及びヒトＫＬＫ７に対する抗体のＫＤが、互いの３倍以内、又は２．５倍以内、又は２倍以内、又は１．５倍以内である、実施態様５６～１１１のいずれか一項に記載の二重特異性抗体。
実施態様１１３．実施態様５６～１１２のいずれか一項に記載の二重特異性抗体をコードする単離された核酸。
実施態様１１４．実施態様５６～１１２のいずれか一項に記載の二重特異性抗体の第１の結合ドメインをコードする単離された核酸。
実施態様１１５．実施態様５６～１１２のいずれか一項に記載の二重特異性抗体の第２の結合ドメインをコードする単離された核酸。
実施態様１１６．実施態様１１３に記載の単離された核酸を含む単離された宿主細胞。
実施態様１１７．実施態様１１４に記載の単離された核酸を含む単離された宿主細胞。
実施態様１１８．実施態様１１５に記載の単離された核酸を含む単離された宿主細胞。
実施態様１１９．実施態様５６～１１２のいずれか一項に記載の二重特異性抗体を発現する単離された宿主細胞。
実施態様１２０．実施態様５６～１１２のいずれか一項に記載の二重特異性抗体の第１の結合ドメインを発現する単離された宿主細胞。
実施態様１２１．実施態様５６～１１２のいずれか一項に記載の二重特異性抗体の第２の結合ドメインを発現する単離された宿主細胞。
実施態様１２２．ヒトＫＬＫ５及びヒトＫＬＫ７に結合する二重特異性抗体を産生する方法であって、抗体の発現に適した条件下で実施態様１１６又は実施態様１１９に記載の宿主細胞を培養することを含む方法。
実施態様１２３．抗体を宿主細胞から回収することをさらに含む、実施態様１２２に記載の方法。
実施態様１２４．ヒトＫＬＫ５及びヒトＫＬＫ７に結合する二重特異性抗体を産生する方法であって、（ｉ）第１の結合ドメインの発現に適した条件下で実施態様１１７又は実施態様１２０に記載の宿主細胞を培養すること；及び（ｉｉ）第２の結合ドメインの発現に適した条件下で、実施態様１１８又は実施態様１２１に記載の宿主細胞を培養すること、を含む方法。
実施態様１２５．第１の結合ドメイン及び第２の結合ドメインを回収すること、並びに二重特異性抗体を組み立てることをさらに含む、実施態様１２４に記載の方法。
実施態様１２６．実施態様１～２１のいずれかに記載の抗体と薬学的に許容される担体とを含む薬学的組成物。
実施態様１２７．追加の治療剤をさらに含む、実施態様１２６に記載の薬学的組成物。
実施態様１２８．追加の治療剤がＫＬＫ５阻害剤である、実施態様１２７に記載の薬学的組成物。
実施態様１２９．ＫＬＫ５阻害剤が抗ＫＬＫ５抗体である、実施態様１２８に記載の薬学的組成物。
実施態様１３０．抗ＫＬＫ５抗体が、
（ａ）（ａ）配列番号３９及び１０７から選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号４０及び４１から選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２、及び（ｃ）配列番号４２又は２０４のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３を含む重鎖可変ドメイン（ＶＨ）並びに（ｄ）配列番号４３及び４４から選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１、（ｅ）配列番号４５のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２、及び（ｆ）配列番号４６～４９から選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３を含む軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）；又は
（ｂ）（ａ）配列番号６８のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号６９及び７０から選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２、及び（ｃ）配列番号７１及び７２から選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３を含む重鎖可変ドメイン（ＶＨ）並びに（ｄ）配列番号７３のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１、（ｅ）配列番号７４のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２、及び（ｆ）配列番号７５～７８から選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３を含む軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）
を含む、実施態様１２９に記載の二重特異性抗体。
実施態様１３１．抗ＫＬＫ５抗体が、（ａ）配列番号３９のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号４１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２、及び（ｃ）配列番号２０４のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３を含む重鎖可変ドメイン（ＶＨ）、並びに（ｄ）配列番号４３のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１、（ｅ）配列番号４５のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２、及び（ｆ）配列番号４７のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３を含む軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）を含む、実施態様１２９又は実施態様１３０に記載の薬学的組成物。
実施態様１３２．抗ＫＬＫ５抗体がモノクローナル抗体である、実施態様１２９～１３１のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
実施態様１３３．抗ＫＬＫ５抗体がヒト化又はキメラ抗体である、実施態様１２９～１３２のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
実施態様１３４．抗ＫＬＫ５抗体がヒトＫＬＫ５に結合する抗体断片である、実施態様１２９～１３３のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
実施態様１３５．抗ＫＬＫ５抗体が、
（ａ）配列番号５０、５２、５３、１０５、１０６、及び２０５のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するＶＨ配列；
（ｂ）配列番号５１及び５４～６７から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するＶＬ配列；並びに
（ｃ）（ａ）で規定されるＶＨ配列及び（ｂ）で規定されるＶＬ配列；
（ｄ）配列番号７９及び８１～８７から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するＶＨ配列；
（ｅ）配列番号８０及び８８～９４から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するＶＬ配列；並びに
（ｆ）（ｄ）で規定されるＶＨ配列及び（ｅ）で規定されるＶＬ配列
から選択される配列を含む、実施態様１２９～１３４のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
実施態様１３６．抗ＫＬＫ５抗体が、
（ａ）配列番号２０５のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するＶＨ配列；
（ｂ）配列番号５４～６７から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するＶＬ配列；並びに
（ｃ）（ａ）で規定されるＶＨ配列及び（ｂ）で規定されるＶＬ配列
から選択される配列を含む、実施態様１２９～１３４のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
実施態様１３７．抗ＫＬＫ５抗体が、
（ａ）配列番号５０、５２、５３、１０５、１０６、及び２０５から選択されるアミノ酸配列を含むＶＨ配列；
（ｂ）配列番号５１及び５４～６７から選択されるアミノ酸配列を含むＶＬ配列；並びに
（ｃ）（ａ）で規定されるＶＨ配列及び（ｂ）で規定されるＶＬ配列；
（ｄ）配列番号７９及び８１～８７から選択されるアミノ酸配列を含むＶＨ配列；
（ｅ）配列番号８０及び８８～９４から選択されるアミノ酸配列を含むＶＬ配列；並びに
（ｆ）（ｄ）で規定されるＶＨ配列及び（ｅ）で規定されるＶＬ配列
から選択される配列を含む、実施態様１２９～１３４のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
実施態様１３８．抗ＫＬＫ５抗体が、
（ａ）配列番号５２、５３、１０５、１０６、及び２０５から選択されるアミノ酸配列を含むＶＨ配列；
（ｂ）配列番号５４～６７から選択されるアミノ酸配列を含むＶＬ配列；並びに
（ｃ）（ａ）で規定されるＶＨ配列及び（ｂ）で規定されるＶＬ配列
から選択される配列を含む、実施態様１２９～１３４のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
実施態様１３９．抗ＫＬＫ５抗体が実施態様２８～４９のいずれか一項に記載の抗体である、実施態様１２９に記載の薬学的組成物。
実施態様１４０．実施態様２８～４９のいずれかに記載の抗体と薬学的に許容される担体とを含む薬学的組成物。
実施態様１４１．追加の治療剤をさらに含む、実施態様１４０に記載の薬学的組成物。
実施態様１４２．追加の治療剤がＫＬＫ７阻害剤である、実施態様１４１に記載の薬学的組成物。
実施態様１４３．ＫＬＫ７阻害剤が抗ＫＬＫ７抗体である、実施態様１４２に記載の薬学的組成物。
実施態様１４４．抗ＫＬＫ７抗体が実施態様１～２１のいずれか一項に記載の抗体である、実施態様１４３に記載の薬学的組成物。
実施態様１４５．実施態様１～２１のいずれかに記載の抗体及び実施態様２８～４９のいずれか一項に記載の抗体、並びに薬学的に許容される担体を含む薬学的組成物。
実施態様１４６．抗炎症剤及び抗生物質から選択される追加の治療剤を含む、実施態様１２６～１４５のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
実施態様１４７．実施態様５６～１１２のいずれか一項に記載の二重特異性抗体を含む薬学的組成物。
実施態様１４８．追加の治療剤をさらに含む、実施態様１４７に記載の薬学的組成物。
実施態様１４９．追加の治療剤が抗炎症剤である、実施態様１４８に記載の薬学的組成物。
実施態様１５０．薬学的組成物が局所投与用である、実施態様１２６～１４９のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
実施態様１５１．薬学的組成物が、皮下投与又は静脈内投与用である、実施態様１２６～１４９のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
実施態様１５２．医薬としての使用のための、実施態様１～２１及び２８～４９のいずれか一項に記載の抗体、実施態様５６～１１２のいずれか一項に記載の二重特異性抗体、又は実施態様１２６～１４９のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
実施態様１５３．ネザートン症候群、喘息、アトピー性皮膚炎、乾癬、好酸球性食道炎、及び酒さから選択される疾患の治療における使用のための、実施態様１～２１及び２８～４９のいずれか一項に記載の抗体、実施態様５６～１１２のいずれか一項に記載の二重特異性抗体、又は実施態様１２６～１４９のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
実施態様１５４．喘息が、アトピー性喘息、アレルギー性喘息、非アレルギー性喘息、運動誘発喘息、アスピリン感受性／増悪喘息（ａｓｐｉｒｉｎ ｓｅｎｓｉｔｉｖｅ／ｅｘａｃｅｒｂａｔｅｄ ａｓｔｈｍａ）、軽度の喘息、中等度～重度の喘息、コルチコステロイド未処置喘息、慢性喘息、コルチコステロイド抵抗性喘息、コルチコステロイド不応性喘息、新たに診断された未治療喘息、喫煙に起因する喘息、コルチコステロイドで制御不能な喘息、Ｔヘルパーリンパ球２型（Ｔｈ２）喘息若しくは２型（Ｔｈ２）高値喘息又は２型（Ｔ２）駆動喘息、好酸球性喘息、高ペリオスチン喘息、高好酸球性喘息、Ｔｈ２低値喘息又は非Ｔｈ２駆動喘息、低ペリオスチン喘息、及び低好酸球性喘息から選択される、実施態様１５３に記載の使用のための抗体、二重特異性抗体、又は薬学的組成物。
実施態様１５５．喘息が低好酸球性喘息である、実施態様１５４に記載の使用のための抗体、二重特異性抗体、又は薬学的組成物。
実施態様１５６．医薬としての使用のための、実施態様１～２１のいずれか一項に記載の抗体と実施態様２８～４９のいずれか一項に記載の抗体との組み合わせ。
実施態様１５７．ネザートン症候群、喘息、アトピー性皮膚炎、乾癬、好酸球性食道炎、及び酒さから選択される疾患の治療における使用のための、実施態様１～２１のいずれか一項に記載の抗体と実施態様２８～４９のいずれか一項に記載の抗体との組み合わせ。
実施態様１５８．喘息が、アトピー性喘息、アレルギー性喘息、非アレルギー性喘息、運動誘発喘息、アスピリン感受性／増悪喘息（ａｓｐｉｒｉｎ ｓｅｎｓｉｔｉｖｅ／ｅｘａｃｅｒｂａｔｅｄ ａｓｔｈｍａ）、軽度の喘息、中等度～重度の喘息、コルチコステロイド未処置喘息、慢性喘息、コルチコステロイド抵抗性喘息、コルチコステロイド不応性喘息、新たに診断された未治療喘息、喫煙に起因する喘息、コルチコステロイドで制御不能な喘息、Ｔヘルパーリンパ球２型（Ｔｈ２）喘息若しくは２型（Ｔｈ２）高値喘息又は２型（Ｔ２）駆動喘息、好酸球性喘息、高ペリオスチン喘息、高好酸球性喘息、Ｔｈ２低値喘息又は非Ｔｈ２駆動喘息、低ペリオスチン喘息、及び低好酸球性喘息から選択される、実施態様１５７に記載の使用のための組み合わせ。
実施態様１５９．喘息が、低好酸球性喘息である、実施態様１５８に記載の組み合わせ。
実施態様１６０．ネザートン症候群、喘息、アトピー性皮膚炎、乾癬、好酸球性食道炎、及び酒さから選択される疾患を治療するための医薬の製造における、実施態様１～２１及び２８～４９のいずれか一項に記載の抗体、実施態様５６～１１２のいずれか一項に記載の二重特異性抗体、又は実施態様１２６～１４９のいずれか一項に記載の薬学的組成物の使用。
実施態様１６１．喘息が、アトピー性喘息、アレルギー性喘息、非アレルギー性喘息、運動誘発喘息、アスピリン感受性／増悪喘息（ａｓｐｉｒｉｎ ｓｅｎｓｉｔｉｖｅ／ｅｘａｃｅｒｂａｔｅｄ ａｓｔｈｍａ）、軽度の喘息、中等度～重度の喘息、コルチコステロイド未処置喘息、慢性喘息、コルチコステロイド抵抗性喘息、コルチコステロイド不応性喘息、新たに診断された未治療喘息、喫煙に起因する喘息、コルチコステロイドで制御不能な喘息、Ｔヘルパーリンパ球２型（Ｔｈ２）喘息若しくは２型（Ｔｈ２）高値喘息又は２型（Ｔ２）駆動喘息、好酸球性喘息、高ペリオスチン喘息、高好酸球性喘息、Ｔｈ２低値喘息又は非Ｔｈ２駆動喘息、低ペリオスチン喘息、及び低好酸球性喘息から選択される、実施態様１６０に記載の使用。
実施態様１６２．喘息が、低好酸球性喘息である、実施態様１６１に記載の使用。
実施態様１６３．ネザートン症候群、喘息、アトピー性皮膚炎、乾癬、好酸球性食道炎、及び酒さから選択される疾患の治療のための医薬の製造における、実施態様１～２１のいずれか一項に記載の抗体と実施態様２８～４９のいずれか一項に記載の抗体との組み合わせの使用。
実施態様１６４．喘息が、アトピー性喘息、アレルギー性喘息、非アレルギー性喘息、運動誘発喘息、アスピリン感受性／増悪喘息（ａｓｐｉｒｉｎ ｓｅｎｓｉｔｉｖｅ／ｅｘａｃｅｒｂａｔｅｄ ａｓｔｈｍａ）、軽度の喘息、中等度～重度の喘息、コルチコステロイド未処置喘息、慢性喘息、コルチコステロイド抵抗性喘息、コルチコステロイド不応性喘息、新たに診断された未治療喘息、喫煙に起因する喘息、コルチコステロイドで制御不能な喘息、Ｔヘルパーリンパ球２型（Ｔｈ２）喘息若しくは２型（Ｔｈ２）高値喘息又は２型（Ｔ２）駆動喘息、好酸球性喘息、高ペリオスチン喘息、高好酸球性喘息、Ｔｈ２低値喘息又は非Ｔｈ２駆動喘息、低ペリオスチン喘息、及び低好酸球性喘息から選択される、実施態様１６３に記載の使用。
実施態様１６５．喘息が、低好酸球性喘息である、実施態様１６４に記載の使用。
実施態様１６６．上皮炎症を減少させ、上皮透過性を減少させ、経表皮水分喪失を減少させ、真皮内浸潤を減少させ、不全角化を減少させ、上皮バリアを回復させ、及び／又は皮膚炎症性サイトカインを減少させるための医薬の製造における、実施態様１～２１及び２８～４９のいずれか一項に記載の抗体、実施態様５６～１１２のいずれか一項に記載の二重特異性抗体、又は実施態様１２６～１４９のいずれか一項に記載の薬学的組成物の使用。
実施態様１６７．上皮炎症を減少させ、上皮透過性を減少させ、経表皮水分喪失を減少させ、真皮内浸潤を減少させ、不全角化を減少させ、上皮バリアを回復させ、及び／又は皮膚炎症性サイトカインを減少させるための医薬の製造における、実施態様１～２１のいずれか一項に記載の抗体と実施態様２８～４９のいずれか一項に記載の抗体との組み合わせの使用。
実施態様１６８．ネザートン症候群、喘息、アトピー性皮膚炎、乾癬、好酸球性食道炎、及び酒さから選択される疾患を有する個体を治療する方法であって、実施態様１～２１及び２８～４９のいずれか一項に記載の抗体、実施態様５６～１１２のいずれか一項に記載の二重特異性抗体、又は実施態様１２６～１４９のいずれか一項に記載の薬学的組成物の有効量を個体に投与することを含む、方法。
実施態様１６９．ネザートン症候群、喘息、アトピー性皮膚炎、乾癬、好酸球性食道炎、及び酒さから選択される疾患を有する個体を治療する方法であって、ａ）実施態様１～２１のいずれか一項に記載の抗体の有効量；及びｂ）実施態様２８～４９のいずれか一項に記載の抗体の有効量を個体に投与することを含む、方法。
実施態様１７０．（ａ）の抗体及び（ｂ）の抗体が同時に投与される、実施態様１６９に記載の方法。
実施態様１７１．（ａ）の抗体及び（ｂ）の抗体が連続的に投与される、実施態様１６９に記載の方法。
実施態様１７２．ネザートン症候群、喘息、アトピー性皮膚炎、乾癬、好酸球性食道炎、及び酒さから選択される疾患を有する個体を治療する方法であって、実施態様５６～１１２のいずれか一項に記載の二重特異性抗体の有効量、又は実施態様１２６～１４９のいずれか一項に記載の薬学的組成物の有効量を個体に投与することを含む、方法。
実施態様１７３．喘息が、アトピー性喘息、アレルギー性喘息、非アレルギー性喘息、運動誘発喘息、アスピリン感受性／増悪喘息（ａｓｐｉｒｉｎ ｓｅｎｓｉｔｉｖｅ／ｅｘａｃｅｒｂａｔｅｄ ａｓｔｈｍａ）、軽度の喘息、中等度～重度の喘息、コルチコステロイド未処置喘息、慢性喘息、コルチコステロイド抵抗性喘息、コルチコステロイド不応性喘息、新たに診断された未治療喘息、喫煙に起因する喘息、コルチコステロイドで制御不能な喘息、Ｔヘルパーリンパ球２型（Ｔｈ２）喘息若しくは２型（Ｔｈ２）高値喘息又は２型（Ｔ２）駆動喘息、好酸球性喘息、高ペリオスチン喘息、高好酸球性喘息、Ｔｈ２低値喘息又は非Ｔｈ２駆動喘息、低ペリオスチン喘息、及び低好酸球性喘息から選択される、実施態様１６８～１７２のいずれか一項に記載の方法。
実施態様１７４．喘息が、低好酸球性喘息である、実施態様１７３に記載の方法。
実施態様１７５．個体がネザートン症候群を有する、実施態様１６８～１７２のいずれか一項に記載の方法。
実施態様１７６．個体が酒さを有する、実施態様１６８～１７２のいずれか一項に記載の方法。
実施態様１７７．個体に、追加の治療剤を投与することをさらに含む、実施態様１６８～１７６のいずれか一項に記載の方法。
実施態様１７８．追加の治療剤が抗炎症剤である、実施態様１７７に記載の方法。
実施態様１７９．個体における上皮炎症を減少させ、上皮透過性を減少させ、経表皮水分喪失を減少させ、真皮内浸潤を減少させ、不全角化を減少させ、上皮バリアを回復させ、及び／又は皮膚炎症性サイトカインを減少させる方法であって、上皮炎症を減少させ、上皮透過性を減少させ、経表皮水分喪失を減少させ、真皮内浸潤を減少させ、不全角化を減少させ、及び／又は上皮バリアを回復させるために、実施態様１～２１及び２８～４９のいずれか一項に記載の抗体、実施態様５６～１１２のいずれか一項に記載の二重特異性抗体、又は実施態様１２６～１４９のいずれか一項に記載の薬学的組成物の有効量を個体に投与することを含む、方法。
実施態様１８０．個体における上皮炎症を減少させ、上皮透過性を減少させ、経表皮水分喪失を減少させ、真皮内浸潤を減少させ、不全角化を減少させ、上皮バリアを回復させ、及び／又は皮膚炎症性サイトカインを減少させる方法であって、上皮炎症を減少させ、上皮透過性を減少させ、経表皮水分喪失を減少させ、真皮内浸潤を減少させ、不全角化を減少させ、及び／又は上皮バリアを回復させるために、ａ）実施態様１～２１のいずれか一項に記載の抗体の有効量；及びｂ）実施態様２８～４９のいずれか一項に記載の抗体の有効量を個体に投与することを含む、方法。
実施態様１８１．（ａ）の抗体及び（ｂ）の抗体が同時に投与される、実施態様１８０に記載の方法。
実施態様１８２．（ａ）の抗体及び（ｂ）の抗体が連続的に投与される、実施態様１８０に記載の方法。
実施態様１８３．個体における上皮炎症を減少させ、上皮透過性を減少させ、経表皮水分喪失を減少させ、真皮内浸潤を減少させ、不全角化を減少させ、上皮バリアを回復させ、及び／又は皮膚炎症性サイトカインを減少させる方法であって、上皮炎症を減少させ、上皮透過性を減少させ、経表皮水分喪失を減少させ、真皮内浸潤を減少させ、不全角化を減少させ、及び／又は上皮バリアを回復させるために、実施態様５６～１１２のいずれか一項に記載の二重特異性抗体、又は実施態様１２６～１４９のいずれか一項に記載の薬学的組成物の有効量を個体に投与することを含む、方法。
実施態様１８４．投与が皮下投与又は静脈内投与である、実施態様１６８～１８３のいずれか一項に記載の方法。
実施態様１８５．投与が局所投与である、実施態様１６８～１８３のいずれか一項に記載の方法。
実施態様１８６．投与が局所投与である、実施態様１６８～１８３のいずれか一項に記載の方法。
実施態様１８７．疾患がネザートン症候群である、実施態様１５３に記載の使用のための抗体、二重特異性抗体、又は薬学的組成物。
実施態様１８８．疾患がネザートン症候群である、実施態様１５７に記載の使用のための組み合わせ。
実施態様１８９．疾患がネザートン症候群である、実施態様１６０～１６３のいずれか一項に記載の使用。
実施態様１９０．医薬が、ネザートン症候群を有する個体における上皮炎症を減少させ、上皮透過性を減少させ、経表皮水分喪失を減少させ、真皮内浸潤を減少させ、不全角化を減少させ、上皮バリアを回復させ、及び／又は皮膚炎症性サイトカインを減少させるためのものである、実施態様１６６又は１６７のいずれか一項に記載の使用。
実施態様１９１．ネザートン症候群の治療における使用のための二重特異性抗体であって、該二重特異性抗体が、第１の結合ドメイン及び第２の結合ドメインを含み、ここで、第１の結合ドメインがヒトＫＬＫ７に結合し、第２の結合ドメインがヒトＫＬＫ５に結合し、第１の結合ドメインが、配列番号２０６又は２０９の重鎖アミノ酸配列及び配列番号２０７の軽鎖アミノ酸配列を含み、第２の結合ドメインが、配列番号２０８又は２１０の重鎖アミノ酸配列及び配列番号１１５の軽鎖アミノ酸配列を含む、二重特異性抗体。
実施態様１９２．ネザートン症候群の治療における使用のための抗ＫＬＫ５抗体であって、配列番号２０５のＶＨ配列及び配列番号６２のＶＬ配列を含む、抗ＫＬＫ５抗体。
実施態様１９３．ネザートン症候群の治療における使用のための抗ＫＬＫ７抗体であって、配列番号２０２のＶＨ配列及び配列番号２０３のＶＬ配列を含む、抗ＫＬＫ７抗体。
実施態様１９４．ネザートン症候群の治療における使用のための抗体の組み合わせであって、
ここで、抗体の組み合わせは、抗ＫＬＫ５抗体及び抗ＫＬＫ７抗体を含み、抗ＫＬＫ５抗体が、配列番号２０５のＶＨ配列及び配列番号６２のＶＬ配列を含み；抗ＫＬＫ７抗体が、配列番号２０２のＶＨ配列及び配列番号２０３のＶＬ配列を含む、抗体の組み合わせ。
実施態様１９５．皮膚炎症性サイトカインが、ＩＬ－８、ＴＮＦα、ＩＬ－６、ＩＬ－４、及び／又はＧ－ＣＳＦのうちの１つ又は複数である、実施態様１６６若しくは１６７に記載の使用、又は実施態様１７９、１８０、及び１８３のいずれか一項に記載の方法、又は実施態様２３７に記載の使用のための抗体、二重特異性抗体若しくは薬学的組成物。
［００８］図１Ａは、抗ＫＬＫ７抗体ｒｂ．１４Ｈ１１ｃ－ＬＣ軽鎖可変領域と軽鎖可変領域の特定のヒト化バージョンとのアラインメント（１Ａ）を示す。Ｃｈｏｔｈｉａ、ＫａｂａｔによるＣＤＲ、及び接触残基を示す。ウサギの親可変領域と比較したヒト化バージョンの違いは、黒の背景に白で示されている。 図１Ａは、抗ＫＬＫ７抗体ｒｂ．１４Ｈ１１ｃ－ＬＣ軽鎖可変領域と軽鎖可変領域の特定のヒト化バージョンとのアラインメント（１Ａ）を示す。Ｃｈｏｔｈｉａ、ＫａｂａｔによるＣＤＲ、及び接触残基を示す。ウサギの親可変領域と比較したヒト化バージョンの違いは、黒の背景に白で示されている。 図１Ｂは、抗ＫＬＫ７抗体ｒｂ．１４Ｈ１１ｃ－ＨＣ重鎖可変領域と重鎖可変領域の特定のヒト化バージョンとのアラインメント（１Ｂ）を示す。Ｃｈｏｔｈｉａ、ＫａｂａｔによるＣＤＲ、及び接触残基を示す。ウサギの親可変領域と比較したヒト化バージョンの違いは、黒の背景に白で示されている。 図１Ｂは、抗ＫＬＫ７抗体ｒｂ．１４Ｈ１１ｃ－ＨＣ重鎖可変領域と重鎖可変領域の特定のヒト化バージョンとのアラインメント（１Ｂ）を示す。Ｃｈｏｔｈｉａ、ＫａｂａｔによるＣＤＲ、及び接触残基を示す。ウサギの親可変領域と比較したヒト化バージョンの違いは、黒の背景に白で示されている。 図１Ｂは、抗ＫＬＫ７抗体ｒｂ．１４Ｈ１１ｃ－ＨＣ重鎖可変領域と重鎖可変領域の特定のヒト化バージョンとのアラインメント（１Ｂ）を示す。Ｃｈｏｔｈｉａ、ＫａｂａｔによるＣＤＲ、及び接触残基を示す。ウサギの親可変領域と比較したヒト化バージョンの違いは、黒の背景に白で示されている。 ［００９］図２Ａは、ヒト化抗ＫＬＫ５抗体ｈｕ．１０Ｃ５－Ｈ２８Ｌ５軽鎖可変領域と軽鎖可変領域の特定の改変ヒト化バージョンとのアラインメント（２Ａ）を示す。Ｃｈｏｔｈｉａ、ＫａｂａｔによるＣＤＲ、及び接触残基を示す。親可変領域と比較したヒト化バージョンの違いは、黒の背景に白で示されている。 図２Ａは、ヒト化抗ＫＬＫ５抗体ｈｕ．１０Ｃ５－Ｈ２８Ｌ５軽鎖可変領域と軽鎖可変領域の特定の改変ヒト化バージョンとのアラインメント（２Ａ）を示す。Ｃｈｏｔｈｉａ、ＫａｂａｔによるＣＤＲ、及び接触残基を示す。親可変領域と比較したヒト化バージョンの違いは、黒の背景に白で示されている。 図２Ａは、ヒト化抗ＫＬＫ５抗体ｈｕ．１０Ｃ５－Ｈ２８Ｌ５軽鎖可変領域と軽鎖可変領域の特定の改変ヒト化バージョンとのアラインメント（２Ａ）を示す。Ｃｈｏｔｈｉａ、ＫａｂａｔによるＣＤＲ、及び接触残基を示す。親可変領域と比較したヒト化バージョンの違いは、黒の背景に白で示されている。 図２Ｂは、ヒト化抗ＫＬＫ５抗体ｈｕ．１０Ｃ５－Ｈ２８Ｌ５重鎖可変領域と重鎖可変領域の特定の改変ヒト化バージョンとのアラインメント（２Ｂ）を示す。Ｃｈｏｔｈｉａ、ＫａｂａｔによるＣＤＲ、及び接触残基を示す。親可変領域と比較したヒト化バージョンの違いは、黒の背景に白で示されている。 ［００１０］図３Ａは、ヒト化抗ＫＬＫ５抗体ｈｕ．９Ｈ５－Ｈ１４Ｌ４軽鎖可変領域と、軽鎖可変領域の特定の改変ヒト化バージョンとのアラインメント（３Ａ）を示す。Ｃｈｏｔｈｉａ、ＫａｂａｔによるＣＤＲ、及び接触残基を示す。親可変領域と比較したヒト化バージョンの違いは、黒の背景に白で示されている。 図３Ａは、ヒト化抗ＫＬＫ５抗体ｈｕ．９Ｈ５－Ｈ１４Ｌ４軽鎖可変領域と軽鎖可変領域の特定の改変ヒト化バージョンとのアラインメント（３Ａ）を示す。Ｃｈｏｔｈｉａ、ＫａｂａｔによるＣＤＲ、及び接触残基を示す。親可変領域と比較したヒト化バージョンの違いは、黒の背景に白で示されている。 図３Ｂは、ヒト化抗ＫＬＫ５抗体ｈｕ．９Ｈ５－Ｈ１４Ｌ４重鎖可変領域と重鎖可変領域の特定の改変ヒト化バージョンとのアラインメント（３Ｂ）を示す。Ｃｈｏｔｈｉａ、ＫａｂａｔによるＣＤＲ、及び接触残基を示す。親可変領域と比較したヒト化バージョンの違いは、黒の背景に白で示されている。 図３Ｂは、ヒト化抗ＫＬＫ５抗体ｈｕ．９Ｈ５－Ｈ１４Ｌ４重鎖可変領域と重鎖可変領域の特定の改変ヒト化バージョンとのアラインメント（３Ｂ）を示す。Ｃｈｏｔｈｉａ、ＫａｂａｔによるＣＤＲ、及び接触残基を示す。親可変領域と比較したヒト化バージョンの違いは、黒の背景に白で示されている。 ［００１１］図４は、ヒト化抗ＫＬＫ５抗体ｈｕ．１０Ｃ５．Ｌ５Ｈ２８重鎖及び軽鎖バリアント並びに親ｈｕ．１０Ｃ５．Ｌ５Ｈ２８の親和性を示す。 ［００１２］図５は、ヒト化抗ＫＬＫ５抗体ｈｕ．９Ｈ５．Ｌ４Ｈ１４重鎖及び軽鎖バリアントの会合速度（ｋａ）及び解離速度（ｋｄ）の散布図を示す。 ［００１３］図６Ａは、ヒトＫＬＫ５（図６Ａ）についての、示されたｈｕ．１０Ｃ５．Ｌ５Ｈ２８バリアントの表面プラズモン共鳴トレースを示す。 図６Ｂは、カニクイザルＫＬＫ５（図６Ｂ）についての、示されたｈｕ．１０Ｃ５．Ｌ５Ｈ２８バリアントの表面プラズモン共鳴トレースを示す。 ［００１４］図７Ａは、ヒトＫＬＫ５（図７Ａ）についての、示されたｈｕ．９Ｈ５．Ｌ４Ｈ１４バリアントの表面プラズモン共鳴トレースを示す。 図７Ａは、ヒトＫＬＫ５（図７Ａ）についての、示されたｈｕ．９Ｈ５．Ｌ４Ｈ１４バリアントの表面プラズモン共鳴トレースを示す。 図７Ａは、ヒトＫＬＫ５（図７Ａ）についての、示されたｈｕ．９Ｈ５．Ｌ４Ｈ１４バリアントの表面プラズモン共鳴トレースを示す。 図７Ａは、ヒトＫＬＫ５（図７Ａ）についての、示されたｈｕ．９Ｈ５．Ｌ４Ｈ１４バリアントの表面プラズモン共鳴トレースを示す。 図７Ｂは、カニクイザルＫＬＫ５（図７Ｂ）についての、示されたｈｕ．９Ｈ５．Ｌ４Ｈ１４バリアントの表面プラズモン共鳴トレースを示す。 図７Ｂは、カニクイザルＫＬＫ５（図７Ｂ）についての、示されたｈｕ．９Ｈ５．Ｌ４Ｈ１４バリアントの表面プラズモン共鳴トレースを示す。 図７Ｂは、カニクイザルＫＬＫ５（図７Ｂ）についての、示されたｈｕ．９Ｈ５．Ｌ４Ｈ１４バリアントの表面プラズモン共鳴トレースを示す。 図７Ｂは、カニクイザルＫＬＫ５（図７Ｂ）についての、示されたｈｕ．９Ｈ５．Ｌ４Ｈ１４バリアントの表面プラズモン共鳴トレースを示す。 ［００１５］図８は、ヒトの正常皮膚、アトピー性皮膚炎、及び酒さにおける代表的なＫＬＫ５タンパク質発現を示す。 ［００１６］図９は、ヒトの正常皮膚、アトピー性皮膚炎、酒さ、及び乾癬における代表的なＫＬＫ７ ｍＲＮＡ染色を示す。 ［００１７］図１０Ａ～１０Ｃは、ヒトの正常皮膚、局所性皮膚炎、酒さ、及び乾癬におけるＫＬＫ５発現深度（１０Ａ）、ＫＬＫ７発現深度（１０Ｂ）、及びＳＰＩＮＫ５発現深度（１０Ｃ）を示す。 ［００１８］図１１は、生理食塩水、ＫＬＫ５、又はＫＬＫ７を投与されたマウスにおける経表皮水分喪失を示す。 ［００１９］図１２Ａは、ＳＤＳ／Ｓにおける毎日の臨床スコア（１２Ａ）を示す。黄色ブドウ球菌プロテインＡアトピー性皮膚炎モデルマウスに、アイソタイプ対照抗体、抗マウスＫＬＫ５抗体、抗マウスＫＬＫ７抗体、抗ＫＬＫ５抗体と抗ＫＬＫ７抗体の組み合わせ、又はＳＰＩＮＫ５－Ｆｃを投与した。 図１２Ｂは、総末期アトピー性皮膚炎スコア（１２Ｂ）を示す。黄色ブドウ球菌プロテインＡアトピー性皮膚炎モデルマウスに、アイソタイプ対照抗体、抗マウスＫＬＫ５抗体、抗マウスＫＬＫ７抗体、抗ＫＬＫ５抗体と抗ＫＬＫ７抗体の組み合わせ、又はＳＰＩＮＫ５－Ｆｃを投与した。 図１２Ｃは、ＡＵＣ皮膚スコア（１２Ｃ）を示す。黄色ブドウ球菌プロテインＡアトピー性皮膚炎モデルマウスに、アイソタイプ対照抗体、抗マウスＫＬＫ５抗体、抗マウスＫＬＫ７抗体、抗ＫＬＫ５抗体と抗ＫＬＫ７抗体の組み合わせ、又はＳＰＩＮＫ５－Ｆｃを投与した。 ［００２０］図１３は、ＳＤＳ／Ｓにおける総末期アトピー性皮膚炎スコア、経表皮水分喪失、及び組織学的疾患重症度スコアを示す。黄色ブドウ球菌プロテインＡアトピー性皮膚炎モデルマウスに、アイソタイプ対照抗体、抗マウスＫＬＫ５抗体、抗マウスＫＬＫ７抗体、抗ＫＬＫ５抗体と抗ＫＬＫ７抗体の組み合わせ、又は抗ＩＬ－１３抗体を投与した。 ［００２１］図１４は、ＳＤＳ／Ｓからの皮膚の代表的なヘマトキシリン及びエオシン染色を示す。黄色ブドウ球菌プロテインＡアトピー性皮膚炎モデルマウスに、アイソタイプ対照抗体、抗ＫＬＫ５抗体と抗ＫＬＫ７抗体の組み合わせ、又は抗ＩＬ－１３抗体を投与した。 ［００２２］図１５は、適切な重鎖／軽鎖対合を促進するための置換及び／又はエフェクター機能を低下させるための置換を含む、本明細書で提供される例示的な二重特異性抗ＫＬＫ５／ＫＬＫ７抗体の概略図を示す。別のフォーマットでは、ノブが抗ＫＬＫ５アームに存在し、ホールが抗ＫＬＫ７アームに存在してもよい。 ［００２３］図１６Ａ～１６Ｄは、抗ｍＫＬＫ５／ｍＫＬＫ７二重特異性抗体で処置したＳｐｉｎｋ５欠損マウスにおける皮膚発疹及び鱗屑の減少を示す。Ｓｐｉｎｋ５ ｆ／ｆ Ｃｒｅ－ＥＲＴ２陰性対照マウスは１６ｍｇ／ｋｇタモキシフェン（１６Ａ）で処置され、Ｓｐｉｎｋ５ ｆ／ｆ Ｃｒｅ－ＥＲＴ２＋マウスは、１６ｍｇ／ｋｇ（１６Ｂ）、８ｍｇ／ｋｇ（１６Ｃ）、又は４ｍｇ／ｋｇ（１６Ｄ）のタモキシフェンが注射され、次いで、２．５ｍｇの抗ｇｐ１２０アイソタイプ対照抗体又は２．５ｍｇの抗ｍＫＬＫ５／ｍＫＬＫ７二重特異性抗体で１日おきに処置された。背中の皮膚は注射後６日目に分析された。 ［００２４］図１７Ａ～１７Ｅは、Ｓｐｉｎｋ５欠損マウスの背部皮膚から調製した溶解物中のサイトカインＩＬ－８（１７Ａ）、ＴＮＦ－α（１７Ｂ）、ＩＬ－６（１７Ｃ）、ＩＬ－４（１７Ｄ）及びＧ－ＣＳＦ（１７Ｅ）の、アイソタイプ対照抗体処置と比較した抗ｍＫＬＫ５／ｍＫＬＫ７二特異性抗体処置後の減少を示す。 ［００２５］図１８は、１６ｍｇ／ｋｇのタモキシフェンで処置したＳｐｉｎｋ５ ｆ／ｆ Ｃｒｅ－ＥＲＴ２陰性対照マウス、及び１６ｍｇ／ｋｇのタモキシフェンとアイソタイプ対照抗体又は抗ｍＫＬＫ５／ｍＫＬＫ７二重特異性抗体で処置したＳｐｉｎｋ５ ｆ／ｆ Ｃｒｅ－ＥＲＴ２＋マウスのヘマトキシリン及びエオシン染色した皮膚の代表的な断面を示す。 ［００２６］図１９Ａ～１９Ｂは、ＫＬＫ５、ＫＬＫ７、ＫＬＫ５＋ＫＬＫ７、及びＫＬＫ５＋ＫＬＫ７＋抗ＫＬＫ５／ＫＬＫ７二重特異性抗体で処置したヒト表皮角化細胞における経上皮電気抵抗（ＴＥＥＲ）によって測定した上皮透過性を示す。 ［００２７］図２０Ａは、ＫＬＫ７に結合した抗ＫＬＫ７ ｒｂ．１４Ｈ１１ｃ Ｆａｂの結晶構造を示す。ＫＬＫ７に結合した完全なＦａｂを、ＫＬＫ７単独の重ね合わせとともに図２０Ａに示す。ｒｂ１４Ｈ１１ｃ重鎖の部分は濃青色で示される。 図２０Ｂは、ＫＬＫ７に結合した抗ＫＬＫ７ ｒｂ．１４Ｈ１１ｃ Ｆａｂの結晶構造を示す。図２０Ｂは、ＫＬＫ７－Ｆａｂ接触面を示す。ｒｂ１４Ｈ１１ｃ重鎖の部分は濃青色で示される。 図２０Ｃは、ＫＬＫ７に結合した抗ＫＬＫ７ ｒｂ．１４Ｈ１１ｃ Ｆａｂの結晶構造を示す。図２０Ｃは、天然立体構造のＫＬＫ７（黄色）及びｒｂ．１４Ｈ１１ｃ Ｆａｂに結合したＫＬＫ７（シアン）の重ね合わせを示す。ｒｂ１４Ｈ１１ｃ重鎖の部分は濃青色で示される。 ［００２８］図２１は、抗ＫＬＫ５抗体ｈｕ．１０Ｃ５．ＶＹ．Ａ及び抗ＫＬＫ７抗体ｈｕ．１４Ｈ１１ｃ．ＫＲの重鎖可変領域配列及び軽鎖可変領域配列を示す。ｈｕ．１４Ｈ１１ｃ－Ｈ１１．Ｑ３９Ｅ ＶＨ、ｈｕ．１４Ｈ１１ｃ－Ｌ２．Ｑ３８Ｋ ＶＬ、及びｈｕ．１０Ｃ５－Ｈ２８．Ｑ３９Ｋ．Ｎ５３Ｖ ＶＨと比較して置換されているアミノ酸が強調表示されている。 図２１は、抗ＫＬＫ５抗体ｈｕ．１０Ｃ５．ＶＹ．Ａ及び抗ＫＬＫ７抗体ｈｕ．１４Ｈ１１ｃ．ＫＲの重鎖可変領域配列及び軽鎖可変領域配列を示す。ｈｕ．１４Ｈ１１ｃ－Ｈ１１．Ｑ３９Ｅ ＶＨ、ｈｕ．１４Ｈ１１ｃ－Ｌ２．Ｑ３８Ｋ ＶＬ、及びｈｕ．１０Ｃ５－Ｈ２８．Ｑ３９Ｋ．Ｎ５３Ｖ ＶＨと比較して置換されているアミノ酸が強調表示されている。
Ｉ．定義
［００２９］本明細書の目的では、「アクセプターヒトフレームワーク」とは、下記に定義されるように、ヒト免疫グロブリンフレームワーク又はヒトコンセンサスフレームワークに由来する軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）フレームワーク又は重鎖可変ドメイン（ＶＨ）フレームワークのアミノ酸配列を含むフレームワークである。ヒト免疫グロブリンフレームワーク又はヒトコンセンサスフレームワーク「に由来する」アクセプターヒトフレームワークは、その同一のアミノ酸配列を含んでもよく、又はそれはアミノ酸配列の変化を含んでもよい。いくつかの態様では、アミノ酸変化の数は、１０以下、９以下、８以下、７以下、６以下、５以下、４以下、３以下、又は２以下である。いくつかの態様では、ＶＬアクセプターヒトフレームワークは、ＶＬヒト免疫グロブリンフレームワーク配列又はヒトコンセンサスフレームワーク配列と配列が同一である。
［００３０］「親和性」は、分子（例えば、抗体）の単一の結合部位とその結合パートナー（例えば、抗原）との間の非共有相互作用の総和の強度を指す。特に断りのない限り、本明細書で使用される場合、「結合親和性」は、結合対のメンバー（例えば、抗体及び抗原）間の１：１の相互作用を反映する固有の結合親和性を指す。分子ＸのそのパートナーＹに対する親和性は、一般に、解離定数（ＫＤ）によって表され得る。親和性は、本明細書に記載のものを含む、当技術分野で公知の一般的な方法によって測定することができる。結合親和性を測定するための具体的な実例となる例示的な方法を以下に記載する。
［００３１］「親和性成熟」抗体とは、１つ又は複数の相補性決定領域（ＣＤＲ）において１つ又は複数の改変を有する抗体を指し、そのような改変を有しない親抗体と比較して、そのような改変は、抗原に対する抗体の親和性の改善をもたらす。
［００３２］「抗ＫＬＫ７抗体」及び「ＫＬＫ７に結合する抗体」という用語は、抗体がＫＬＫ７を標的とする診断剤及び／又は治療剤として有用であるように、十分な親和性でヒトＫＬＫ７などのＫＬＫ７に結合することができる抗体を指す。一態様では、抗ＫＬＫ７抗体の無関係の非ＫＬＫ７タンパク質への結合の程度は、例えば表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）によって測定される場合、抗体のＫＬＫ７への結合の約１０％未満である。特定の態様では、ＫＬＫ７に結合する抗体は、≦１μＭ、≦１００ｎＭ、≦１０ｎＭ、≦１ｎＭ、≦０．１ｎＭ、≦０．０１ｎＭ、又は≦０．００１ｎＭ（例えば１０－８Ｍ以下、例えば、１０－８Ｍ～１０－１３Ｍ、例えば１０－９Ｍ～１０－１３Ｍ）の解離定数（ＫＤ）を有する。抗体が１μＭ以下のＫＤを有する場合、抗体はＫＬＫ７に「特異的に結合」すると言われる。特定の態様では、抗ＫＬＫ７抗体は、異なる種由来のＫＬＫ７の中で保存されているＫＬＫ７のエピトープに結合する。
［００３３］「抗ＫＬＫ５抗体」及び「ＫＬＫ５に結合する抗体」という用語は、抗体がＫＬＫ５を標的とする診断剤及び／又は治療剤として有用であるように、十分な親和性でヒトＫＬＫ５などのＫＬＫ５に結合することができる抗体を指す。一態様では、抗ＫＬＫ５抗体の無関係の非ＫＬＫ５タンパク質への結合の程度は、例えば表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）によって測定される場合、抗体のＫＬＫ５への結合の約１０％未満である。特定の態様では、ＫＬＫ５に結合する抗体は、≦１μＭ、≦１００ｎＭ、≦１０ｎＭ、≦１ｎＭ、≦０．１ｎＭ、≦０．０１ｎＭ、又は≦０．００１ｎＭ（例えば１０－８Ｍ以下、例えば、１０－８Ｍ～１０－１３Ｍ、例えば１０－９Ｍ～１０－１３Ｍ）の解離定数（ＫＤ）を有する。抗体が１μＭ以下のＫＤを有する場合、抗体はＫＬＫ５に「特異的に結合」すると言われる。特定の態様では、抗ＫＬＫ５抗体は、異なる種由来のＫＬＫ５の中で保存されているＫＬＫ５のエピトープに結合する。
［００３４］「抗ＫＬＫ５／ＫＬＫ７抗体」及び「ＫＬＫ５及びＫＬＫ７に結合する抗体」という用語は、抗体が、ＫＬＫ７及び／又はＫＬＫ５を標的とする診断剤及び／又は治療剤として有用であるように、十分な親和性でＫＬＫ７及びＫＬＫ５に結合することができる多重特異性抗体を指す。一態様では、抗ＫＬＫ５／ＫＬＫ７抗体の無関係な非ＫＬＫ７／非ＫＬＫ５タンパク質への結合の程度は、例えば表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）によって測定される場合、抗体のＫＬＫ７又はＫＬＫ５への結合の約１０％未満である。特定の態様では、ＫＬＫ７及びＫＬＫ５に結合する多重特異性抗体は、ＫＬＫ５及びＫＬＫ７の各々に対して≦１μＭ、≦１００ｎＭ、≦１０ｎＭ、≦１ｎＭ、≦０．１ｎＭ、≦０．０１ｎＭ、又は≦０．００１ｎＭ（例えば１０－８Ｍ以下、例えば、１０－８Ｍ～１０－１３Ｍ、例えば１０－９Ｍ～１０－１３Ｍ）の解離定数（ＫＤ）を有する。抗体が１μＭ以下のＫＤを有する場合、抗体は標的タンパク質に「特異的に結合」すると言われる。特定の態様では、抗ＫＬＫ５／ＫＬＫ７抗体は、異なる種由来のＫＬＫ７の中で保存されているＫＬＫ７のエピトープに結合する。特定の態様では、抗ＫＬＫ５／ＫＬＫ７抗体は、異なる種由来のＫＬＫ５の中で保存されているＫＬＫ５のエピトープに結合する。
［００３５］本明細書における「抗体」という用語は、最も広い意味で使用され、所望の抗原結合活性を示す限り、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、多重特異性抗体（例えば、二重特異性抗体）、及び抗体断片を含むがこれらに限定されない、様々な抗体構造を包含する。
［００３６］「抗体断片」とは、インタクトな抗体が結合する抗原に結合するインタクトな抗体の一部を含む、インタクトな抗体以外の分子を指す。抗体断片の例としては、限定されないが、Ｆｖ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆａｂ’－ＳＨ、Ｆ（ａｂ’）２；ダイアボディ；直鎖状抗体；一本鎖抗体分子（例えば、ｓｃＦｖ及びｓｃＦａｂ）；単一ドメイン抗体（ｄＡｂｓ）；及び抗体断片から形成される多重特異性抗体が含まれる。特定の抗体断片の総説については、Ｈｏｌｌｉｇｅｒ ａｎｄ Ｈｕｄｓｏｎ，Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ２３：１１２６－１１３６（２００５）を参照のこと。
［００３７］抗体の「結合ドメイン」とは、本明細書で使用される場合、抗原と結合するのに十分な可変ドメインの部分を指す。いくつかの実施態様では、結合ドメインは、重鎖（ＨＣ）ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３、並びに軽鎖（ＬＣ）ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３からなる。いくつかの実施態様では、結合ドメインは、重鎖（ＨＣ）ＣＤＲ１、ＦＲ２、ＣＤＲ２、ＦＲ３、及びＣＤＲ３、並びに軽鎖（ＬＣ）ＣＤＲ１、ＦＲ２、ＣＤＲ２、ＦＲ３、及びＣＤＲ３を含む。
［００３８］「エピトープ」という用語は、抗ＫＬＫ７抗体又は抗ＫＬＫ５抗体が結合する、タンパク質性又は非タンパク質性の抗原上の部位を意味する。エピトープは、連続したアミノ酸ストレッチから形成される場合（線状エピトープ）、又は、例えば、抗原のフォールディングに起因して、すなわち、タンパク質性抗原の三次フォールディングによって空間的に近接している非連続のアミノ酸を含む場合（立体構造エピトープ）の両方がある。線状エピトープは、典型的には、タンパク質性抗原を変性剤に曝露した後も依然として抗体によって結合されているが、立体構造エピトープは、典型的には、変性剤での処理により破壊される。エピトープは、少なくとも３個、少なくとも４個、少なくとも５個、少なくとも６個、少なくとも７個、又は８～１０個のアミノ酸を、独特な空間的コンフォメーションで含む。
［００３９］特定のエピトープに結合する抗体（すなわち、同じエピトープに結合する抗体）のスクリーニングは、例えば、限定されないが、アラニンスキャニング、ペプチドブロット（Ｍｅｔｈ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２４８（２００４）４４３－４６３を参照）、ペプチド切断分析、エピトープ切除、エピトープ抽出、抗原の化学修飾（Ｐｒｏｔ．Ｓｃｉ．９（２０００）４８７－４９６を参照）、及びクロスブロッキング（“Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ”，Ｈａｒｌｏｗ ａｎｄ Ｌａｎｅ（Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｐｒｅｓｓ，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂ．，ＮＹを参照）などの、当技術分野で慣用の方法を用いて行われ得る。
［００４０］抗原構造ベースの抗体プロファイリング（ＡＳＡＰ）は、修飾支援プロファイリング（ＭＡＰ）とも呼ばれ、ＫＬＫ７又はＫＬＫ５に特異的に結合する多数のモノクローナル抗体を、化学的又は酵素的に修飾された抗原表面に対する多数の抗体のそれぞれの結合プロファイルに基づいて区分けすることができる（例えば、米国特許第２００４／０１０１９２０号を参照）。各ｂｉｎ内の抗体は同じエピトープに結合するが、このエピトープは、別のｂｉｎで表されるエピトープとは明確に異なるか、又は部分的に重複する独特なエピトープであり得る。
［００４１］また、競合結合は、抗体がＫＬＫ７の同じエピトープに結合するか、抗ＫＬＫ７抗体と結合を競合するかを容易に決定するために使用することができる。例えば、参照抗ＫＬＫ７抗体と「同じエピトープに結合する抗体」とは、競合アッセイにおいて参照抗ＫＬＫ７抗体のその抗原への結合をそれぞれ５０％以上ブロックする抗体を指し、逆に、参照抗体は、競合アッセイにおいて抗体の抗原への結合を５０％以上ブロックする。また例えば、抗体が参照抗ＫＬＫ７抗体と同じエピトープに結合するかどうかを決定するために、参照抗体を飽和状態でＫＬＫ７に結合させることができる。過剰な参照抗ＫＬＫ７抗体を除去した後、問題の抗ＫＬＫ７抗体のＫＬＫ７に結合する能力が評価される。参照抗ＫＬＫ７抗体の飽和結合後に、抗ＫＬＫ７抗体がＫＬＫ７に結合できる場合、この抗ＫＬＫ７抗体は、参照抗ＫＬＫ７抗体とは異なるエピトープに結合すると結論づけることができる。しかし、参照抗ＫＬＫ７抗体の飽和結合後に、問題の抗ＫＬＫ７抗体がＫＬＫ７に結合できない場合、問題の抗ＫＬＫ７抗体は、参照抗ＫＬＫ７抗体が結合するエピトープと同じエピトープに結合している可能性がある。問題の抗体が同じエピトープに結合しているのか、又は立体的な理由で結合が妨害されているだけなのかを確認するためには、慣用的な実験を用いることができる（例えば、ペプチド変異、及びＥＬＩＳＡ、ＲＩＡ、表面プラズモン共鳴、フローサイトメトリー、又は当技術分野で利用可能な任意の他の定量的若しくは定性的な抗体結合アッセイを用いた結合分析）。このアッセイは、２つの設定で、すなわち、両方の抗体が飽和抗体である状態で実施されるべきである。両方の設定において、第１の（飽和）抗体のみがＫＬＫ７に結合可能な場合、この抗ＫＬＫ７抗体と参照抗ＫＬＫ７抗体は、ＫＬＫ７への結合について競合していると結論づけることができる。
［００４２］同様に、競合結合は、抗体がＫＬＫ５の同じエピトープに結合するか、抗ＫＬＫ５抗体と結合を競合するかを容易に決定するために使用することができる。例えば、参照抗ＫＬＫ５抗体と「同じエピトープに結合する抗体」とは、競合アッセイにおいて参照抗ＫＬＫ５抗体のその抗原への結合をそれぞれ５０％以上ブロックする抗体を指し、逆に、参照抗体は、競合アッセイにおいて抗体の抗原への結合を５０％以上ブロックする。また例えば、抗体が参照抗ＫＬＫ５抗体と同じエピトープに結合するかどうかを決定するために、参照抗体を飽和状態でＫＬＫ５に結合させることができる。過剰な参照抗ＫＬＫ５抗体を除去した後、問題の抗ＫＬＫ５抗体のＫＬＫ５に結合する能力が評価される。参照抗ＫＬＫ５抗体の飽和結合後に、抗ＫＬＫ５抗体がＫＬＫ５に結合できる場合、この抗ＫＬＫ５抗体は、参照抗ＫＬＫ５抗体とは異なるエピトープに結合すると結論づけることができる。しかし、参照抗ＫＬＫ５抗体の飽和結合後に、問題の抗ＫＬＫ５抗体がＫＬＫ５に結合できない場合、問題の抗ＫＬＫ５抗体は、参照抗ＫＬＫ５抗体が結合するエピトープと同じエピトープに結合している可能性がある。問題の抗体が同じエピトープに結合しているのか、又は立体的な理由で結合が妨害されているだけなのかを確認するためには、慣用的な実験を用いることができる（例えば、ペプチド変異、及びＥＬＩＳＡ、ＲＩＡ、表面プラズモン共鳴、フローサイトメトリー、又は当技術分野で利用可能な任意の他の定量的若しくは定性的な抗体結合アッセイを用いた結合分析）。このアッセイは、２つの設定で、すなわち、両方の抗体が飽和抗体である状態で実施されるべきである。両方の設定において、第１の（飽和）抗体のみがＫＬＫ５に結合可能な場合、この抗ＫＬＫ５抗体と参照抗ＫＬＫ５抗体は、ＫＬＫ５への結合について競合していると結論づけることができる。
［００４３］いくつかの態様では、２つの抗体は、１、５、１０、２０又は１００倍過剰の一方の抗体が、競合結合アッセイにおける測定で、他方の結合を少なくとも５０％、少なくとも７５％、少なくとも９０％、又はさらには９９％以上阻害する場合、同じ又は重複するエピトープに結合するとみなされる（例えば、Ｊｕｎｇｈａｎｓ ｅｔ ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．５０（１９９０）１４９５－１５０２を参照）。
［００４４］いくつかの態様では、２つの抗体は、一方の抗体の結合を低下させるか又は排除する抗原の本質的に全てのアミノ酸変異が、他方の抗体の結合も低下させるか又は排除する場合、同じエピトープに結合するとみなされる。２つの抗体は、一方の抗体の結合を低下させるか又は排除するアミノ酸変異のサブセットのみが、他方の抗体の結合を低下させるか又は排除する場合、「重複エピトープ」を有するとみなされる。
［００４５］「キメラ」抗体という用語は、重鎖及び／又は軽鎖の一部分が特定の供給源又は種に由来し、重鎖及び／又は軽鎖の残りの部分が異なる供給源又は種に由来する抗体を指す。
［００４６］抗体の「クラス」は、その重鎖が有する定常ドメイン又は定常領域の種類を指す。抗体には、５つの主要なクラス：ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧ、及びＩｇＭがあり、これらのうちのいくつかは、サブクラス（アイソタイプ）、例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１、及びＩｇＡ２にさらに分けられ得る。特定の態様では、抗体は、ＩｇＧ１アイソタイプのものである。特定の態様では、抗体は、Ｆｃ領域エフェクター機能を低下させるためのＬ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、及びＰ３２９Ｇ変異（「ＬＡＬＡＰＧ」）を有するＩｇＧ１アイソタイプのものである。他の態様では、抗体は、ＩｇＧ２アイソタイプのものである。特定の態様では、抗体は、ＩｇＧ４抗体の安定性を改善するためのヒンジ領域にＳ２２８Ｐ変異を有するＩｇＧ４アイソタイプのものである。免疫グロブリンの異なるクラスに対応する重鎖定常ドメインは、それぞれα、δ、ε、γ、及びμと呼ばれる。抗体の軽鎖は、その定常ドメインのアミノ酸配列に基づいて、カッパ（κ）及びラムダ（λ）と呼ばれる２つのタイプのうちの１つに割り当てられ得る。
［００４７］「エフェクター機能」とは、抗体のアイソタイプにより変わる、抗体のＦｃ領域に起因する生物活性を指す。抗体エフェクター機能の例としては、Ｃ１ｑ結合及び補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）；Ｆｃ受容体結合；抗体依存性細胞媒介細胞傷害（ＡＤＣＣ）；食作用；細胞表面受容体（例えば、Ｂ細胞受容体）のダウンレギュレーション；並びにＢ細胞活性化が挙げられる。
［００４８］薬剤、例えば、薬学的組成物の「有効量」は、所望の治療結果又は予防結果を達成するために必要な投与量及び期間で有効な量を指す。
［００４９］本明細書における「Ｆｃ領域」という用語は、定常領域の少なくとも一部分を含む免疫グロブリン重鎖のＣ末端領域を定義するために使用される。この用語は、天然配列Ｆｃ領域及びバリアントＦｃ領域を包含する。一態様では、ヒトＩｇＧ重鎖Ｆｃ領域は、Ｃｙｓ２２６から、又はＰｒｏ２３０から、重鎖のカルボキシル末端までに及ぶ。しかしながら、宿主細胞によって産生される抗体は、重鎖のＣ末端から１つ又は複数、特に１つ又は２つのアミノ酸の翻訳後切断を受けることがある。したがって、完全長重鎖をコードする特定の核酸分子の発現によって、宿主細胞によって産生する抗体は、完全長重鎖を含んでいてもよく、又は完全長重鎖の開裂したバリアントを含んでいてもよい。これは、重鎖の最後の２つのＣ末端アミノ酸がグリシン（Ｇ４４６）及びリジン（Ｋ４４７、番号付けはＥＵインデックスに従う）である場合であり得る。したがって、Ｆｃ領域のＣ末端リジン（Ｌｙｓ４４７）、又はＣ末端グリシン（Ｇｌｙ４４６）及びリジン（Ｌｙｓ４４７）は、存在することも存在しないこともあり得る。したがって、「完全長ＩｇＧ１」には、例えば、Ｇｌｙ４４６及びＬｙｓ４４７を有するＩｇＧ１、又はＬｙｓ４４７を有さないＩｇＧ１、又はＧｌｙ４４６及びＬｙｓ４４７の両方を有さないＩｇＧ１が含まれる。Ｆｃ領域を含む重鎖のアミノ酸配列は、特に断らない限り、本明細書ではＣ末端グリシン－リジンジペプチドなしで示される。一態様では、本発明による抗体に含まれる、本明細書で特定されるＦｃ領域を含む重鎖は、Ｇｌｙ４４６及びＬｙｓ４４７（ＥＵインデックスに基づく番号付け）を含み得る。一態様では、本発明による抗体に含まれる、本明細書で特定されるＦｃ領域を含む重鎖は、Ｇｌｙ４４６（ＥＵインデックスに基づく番号付け）を含み得る。本明細書に明記されていない限り、Ｆｃ領域又は定常領域内のアミノ酸残基の番号付けは、Ｋａｂａｔ ｅｔ ａｌ．， Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ， ５ｔｈ Ｅｄ．Ｐｕｂｌｉｃ Ｈｅａｌｔｈ Ｓｅｒｖｉｃｅ，Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，ＭＤ，１９９１に記載のように、ＥＵインデックスとも呼ばれるＥＵ番号付けシステムに従う。
［００５０］「フレームワーク」又は「ＦＲ」は、相補性決定領域（ＣＤＲ）以外の可変ドメイン残基を指す。可変ドメインのＦＲは、一般に、４つのＦＲドメイン：ＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３、及びＦＲ４からなる。したがって、ＣＤＲ及びＦＲ配列は、一般に、ＶＨ（又はＶＬ）中で以下の配列：ＦＲ１－ＣＤＲ－Ｈ１（ＣＤＲ－Ｌ１）－ＦＲ２－ＣＤＲ－Ｈ２（ＣＤＲ－Ｌ２）－ＦＲ３－ＣＤＲ－Ｈ３（ＣＤＲ－Ｌ３）－ＦＲ４で現れる。
［００５１］「完全長抗体」、「インタクトな抗体」及び「全抗体」という用語は、本明細書で互換的に使用され、天然抗体構造と実質的に類似した構造を有する抗体、又は本明細書で定義されるＦｃ領域を含む重鎖を有する抗体を指す。
［００５２］「宿主細胞」、「宿主細胞株」、及び「宿主細胞培養物」という用語は、互換的に使用され、外因性核酸が導入された細胞を指し、かかる細胞の子孫を含む。宿主細胞には、「形質転換体」及び「形質転換細胞」が含まれ、これらには、初代形質転換細胞と、継代の数に関係なく、それに由来する子孫とが含まれる。子孫は、核酸の含有量が親細胞と完全に同一でなくてもよく、変異を含んでいてもよい。元の形質転換細胞においてスクリーニング又は選択されたのと同じ機能又は生物活性を有する変異子孫が、本明細書に含まれる。
［００５３］「ヒト抗体」は、ヒト若しくはヒト細胞により産生された抗体のアミノ酸配列、又はヒト抗体レパートリーを利用する非ヒト源に由来するアミノ酸配列、又は他のヒト抗体をコードする配列に対応するアミノ酸配列を有する抗体である。ヒト抗体のこの定義は、非ヒト抗原結合残基を含むヒト化抗体を特に除外する。
［００５４］「ヒトコンセンサスフレームワーク」は、ヒト免疫グロブリンＶＬフレームワーク配列又はＶＨフレームワーク配列の選択において最も一般的に存在するアミノ酸残基を表すフレームワークである。一般に、ヒト免疫グロブリンＶＬ配列又はＶＨ配列の選択は、可変ドメイン配列のサブグループからのものである。一般的には、配列のサブグループは、 Ｋａｂａｔら，Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，第５版，ＮＩＨ Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ ９１－３２４２，Ｂｅｔｈｅｓｄａ ＭＤ（１９９１），１－３巻にあるようなサブグループである。一態様では、ＶＬについて、該サブグループは上掲のＫａｂａｔらにあるようなサブグループカッパＩである。一態様では、ＶＨについて、該サブグループは上掲のＫａｂａｔらにあるようなサブグループＩＩＩである。
［００５５］「ヒト化」抗体とは、非ヒトＣＤＲ由来のアミノ酸残基及びヒトＦＲ由来のアミノ酸残基を含むキメラ抗体を指す。特定の態様では、ヒト化抗体は、少なくとも１つ、典型的には２つの可変ドメインの実質的に全てを含み、ＣＤＲの全て又は実質的に全てが非ヒト抗体のＣＤＲに対応し、ＦＲの全て又は実質的に全てがヒト抗体のＦＲに対応する。ヒト化抗体は、任意に、ヒト抗体由来の抗体定常領域の少なくとも一部分を含んでよい。抗体、例えば非ヒト抗体の「ヒト化型」とは、ヒト化を受けた抗体を指す。
［００５６］本明細書で使用される「超可変領域」又は「ＨＶＲ」という用語は、配列が超可変であり、且つ抗原結合特異性を決定する抗体可変ドメインの各領域、例えば「相補性決定領域」（「ＣＤＲ」）を指す。
［００５７］一般に、抗体は、６つのＣＤＲ：ＶＨに３つ（ＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３）、ＶＬに３つ（ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、ＣＤＲ－Ｌ３）を含む。本明細書における例示的なＣＤＲとしては、以下のものが挙げられる。
（ａ）アミノ酸残基２６－３２（Ｌ１）、５０－５２（Ｌ２）、９１－９６（Ｌ３）、２６－３２（Ｈ１）、５３－５５（Ｈ２）、及び９６－１０１（Ｈ３）に生じる超可変ループ（Ｃｈｏｔｈｉａ ａｎｄ Ｌｅｓｋ，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１９６：９０１－９１７（１９８７））；
（ｂ）アミノ酸残基２４－３４（Ｌ１）、５０－５６（Ｌ２）、８９－９７（Ｌ３）、３１－３５ｂ（Ｈ１）、５０－６５（Ｈ２）及び９５－１０２（Ｈ３）に生じるＣＤＲ（Ｋａｂａｔ ｅｔ ａｌ．，Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，５ｔｈ Ｅｄ．Ｐｕｂｌｉｃ Ｈｅａｌｔｈ Ｓｅｒｖｉｃｅ，Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，ＭＤ（１９９１））；及び
（ｃ）アミノ酸残基２７ｃ－３６（Ｌ１）、４６－５５（Ｌ２）、８９－９６（Ｌ３）、３０－３５ｂ（Ｈ１）、４７－５８（Ｈ２）、及び９３－１０１（Ｈ３）に生じる抗原接触（ＭａｃＣａｌｌｕｍ ｅｔ ａｌ．Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２６２：７３２７４５（１９９６））。
［００５８］特に断りのない限り、ＣＤＲは、上掲のＫａｂａｔらに従って決定される。当業者であれば、ＣＤＲの呼称はまた、上掲のＣｈｏｔｈｉａ、上掲のＭｃＣａｌｌｕｍ、又は任意の他の科学的に認められた命名法に従って決定され得ることを理解するであろう。一態様では、ＣＤＲ残基は、配列表又は本明細書の他の箇所で同定されたものを含む。
［００５９］「イムノコンジュゲート」とは、細胞傷害性剤を含むがそれに限定されない、１つ又は複数の異種分子にコンジュゲートされた抗体である。
［００６０］「個体」又は「対象」は、哺乳動物である。哺乳動物としては、家畜動物（例えば、ウシ、ヒツジ、ネコ、イヌ、及びウマ）、霊長類（例えば、ヒト及び非ヒト霊長類、例えば、サル）、ウサギ、及びげっ歯類（例えば、マウス及びラット）が含まれるが、これらに限定されない。特定の態様では、個体又は対象は、ヒトである。
［００６１］「単離された」抗体は、その天然環境の成分から分離された抗体である。いくつかの態様では、抗体は、例えば電気泳動（例えば、ＳＤＳ－ＰＡＧＥ、等電点電気泳動（ＩＥＦ）、キャピラリー電気泳動）又はクロマトグラフィー（例えば、イオン交換又は逆相ＨＰＬＣ）法により決定されるように、９５％超又は９９％超の純度に精製される。抗体純度の評価のための方法の総説については、例えば、Ｆｌａｔｍａｎ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒ．Ｂ ８４８：７９－８７（２００７）を参照のこと。
［００６２］「連結された」という用語は、２つのポリペプチドに関して使用される場合、ポリペプチドが同じアミノ酸配列の一部であることを意味する。連結された２つのポリペプチドは、追加のアミノ酸配列によって分離されていてもよく；つまり、互いに連続している必要も、直接連結している必要もない。
［００６３］「核酸分子」又は「ポリヌクレオチド」という用語は、ヌクレオチドのポリマーを含む任意の化合物及び／又は物質を含む。各ヌクレオチドは、塩基で構成され、具体的には、プリン塩基又はピリミジン塩基（すなわち、シトシン（Ｃ）、グアニン（Ｇ）、アデニン（Ａ）、チミン（Ｔ）又はウラシル（Ｕ））、糖（すなわち、デオキシリボース又はリボース）、及びリン酸基から構成される。多くの場合、核酸分子は塩基の配列によって記述され、それにより前記塩基は核酸分子の一次構造（線状構造）を表す。塩基の配列は、典型的には、５’から３’へと表される。ここで、核酸分子という用語は、例えば相補的ＤＮＡ（ｃＤＮＡ及びゲノムＤＮＡを含むデオキシリボ核酸（ＤＮＡ）、リボ核酸（ＲＮＡ）、特にメッセンジャーＲＮＡ（ｍＲＮＡ）、ＤＮＡ又はＲＮＡの合成形態、並びにこれらの２つ以上の分子を含む混合ポリマーを包含する。核酸分子は、線状又は環状であり得る。加えて、核酸分子という用語には、センス鎖及びアンチセンス鎖の双方、並びに一本鎖形態及び二本鎖形態が含まれる。さらに、本明細書に記載の核酸分子は、天然に存在するヌクレオチド又は天然に存在しないヌクレオチドを含むことができる。天然に存在しないヌクレオチドの例としては、誘導体化された糖若しくはリン酸骨格連結を有する修飾ヌクレオチド塩基、又は化学的に修飾された残基が含まれる。核酸分子はまた、例えば、宿主又は患者において、ｉｎ ｖｉｔｒｏ及び／又はｉｎ ｖｉｖｏで本発明の抗体の直接的な発現のためのベクターとして好適なＤＮＡ分子及びＲＮＡ分子を包含する。そのようなＤＮＡ（例えば、ｃＤＮＡ）又はＲＮＡ（例えば、ｍＲＮＡ）ベクターは、非修飾であり得るか、又は修飾され得る。例えば、ｍＲＮＡは、ｉｎ ｖｉｖｏで抗体を産生するために対象にｍＲＮＡを注入することができるように、ＲＮＡベクターの安定性及び／又はコードされた分子の発現を高めるように化学的に修飾され得る（例えば、Ｓｔａｄｌｅｒ ｅｔ ａｌ，Ｎａｔｕｒｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ ２０１７，ｐｕｂｌｉｓｈｅｄ ｏｎｌｉｎｅ １２ Ｊｕｎｅ ２０１７，ｄｏｉ：１０．１０３８／ｎｍ．４３５６又は欧州特許第２１０１８２３（Ｂ１）号を参照）。
［００６４］「単離された」核酸は、その天然環境の成分から分離された核酸分子を指す。単離された核酸には、通常核酸分子を含有する細胞内に含有される核酸分子が含まれるが、核酸分子は、染色体外、又はその天然の染色体位置とは異なる染色体位置に存在する。
［００６５］「抗ＫＬＫ７抗体をコードする単離された核酸」とは、抗ＫＬＫ７抗体の重鎖及び軽鎖（又はそれらの断片）をコードする１つ又は複数の核酸分子を指し、単一のベクター又は別個のベクター内のそのような核酸分子（複数可）を含み、そのような核酸分子（複数可）は、宿主細胞内の１つ又は複数の場所に存在する。
［００６６］「抗ＫＬＫ５抗体をコードする単離された核酸」とは、抗ＫＬＫ５抗体の重鎖及び軽鎖（又はそれらの断片）をコードする１つ又は複数の核酸分子を指し、単一のベクター又は別個のベクター内のそのような核酸分子（複数可）を含み、そのような核酸分子（複数可）は、宿主細胞内の１つ又は複数の場所に存在する。
［００６７］「抗ＫＬＫ５／ＫＬＫ７二重特異性抗体をコードする単離された核酸」とは、抗ＫＬＫ５／ＫＬＫ７二重特異性抗体の重鎖及び軽鎖（又はそれらの断片）をコードする１つ又は複数の核酸分子を指し、単一のベクター又は別個のベクター内のそのような核酸分子（複数可）を含み、そのような核酸分子（複数可）は、宿主細胞内の１つ又は複数の場所に存在する。
［００６８］本明細書で使用される「モノクローナル抗体」という用語は、実質的に均一な抗体の集団から得られる抗体を指し、すなわち、該集団を構成する個々の抗体が、あり得るバリアント抗体（これらは例えば天然に存在する変異を含むか、又はモノクローナル抗体調製物の製造中に生じ、通常少量存在する）を除き、同一であり、且つ／又は同じエピトープに結合する。異なる決定基（エピトープ）に対する異なる抗体を通常含むポリクローナル抗体調製物とは対照的に、モノクローナル抗体調製物の各モノクローナル抗体は、抗原上の単一の決定基を対象とする。したがって、修飾語「モノクローナル」は、実質的に均一な抗体の集団から得られる抗体の特徴を示し、任意の特定の方法による抗体の製造を必要とするものとして解釈されるべきではない。例えば、本発明によるモノクローナル抗体は、ハイブリドーマ法、組み換えＤＮＡ法、ファージディスプレイ法、及びヒト免疫グロブリン遺伝子座の全部又は一部を含有するトランスジェニック動物を利用する方法を含むがこれらに限定されない様々な技術によって製造され得、このような方法及びモノクローナル抗体を製造するためのその他の例示的な方法は、本明細書に記載されている。
［００６９］「ネイキッド抗体」とは、異種の部分（例えば、細胞傷害性部分）又は放射性標識にコンジュゲートしていない抗体を指す。ネイキッド抗体は、薬学的組成物中に存在してもよい。
［００７０］「天然抗体」は、様々な構造を有する天然に存在する免疫グロブリン分子を指す。例えば、天然ＩｇＧ抗体は、ジスルフィド結合している２つの同一の軽鎖及び２つの同一の重鎖から構成される約１５０，０００ダルトンのヘテロ四量体糖タンパク質である。Ｎ末端からＣ末端にかけて、各重鎖は、可変重鎖ドメイン又は重鎖可変領域とも呼ばれる可変ドメイン（ＶＨ）と、それに続く３つの定常重鎖ドメイン（ＣＨ１、ＣＨ２及びＣＨ３）とを有する。同様に、Ｎ末端からＣ末端にかけて、各軽鎖は、可変軽鎖ドメイン又は軽鎖可変領域とも呼ばれる可変ドメイン（ＶＬ）と、それに続く定常軽鎖（ＣＬ）ドメインとを有する。
［００７１］「添付文書」という用語は、治療用製品の市販パッケージに通例含まれる説明書であって、そのような治療用製品の使用に関する適応症、用法、用量、投与、併用療法、禁忌及び／又は警告についての情報を含む説明書を指すために使用される。
［００７２］参照ポリペプチド配列に対する「アミノ酸配列同一性パーセント（％）」とは、配列をアラインメントし、最大の配列同一性パーセントを達成するために必要ならばギャップを導入した後の、アラインメントのためにいかなる保存的置換も配列同一性の一部として考慮しない場合の、参照ポリペプチド配列中のアミノ酸残基と同一である候補配列中のアミノ酸残基のパーセンテージと定義される。アミノ酸配列同一性パーセントを決定するためのアラインメントは、当分野の技術の範囲内にある様々な方法で、例えば、ＢＬＡＳＴ、ＢＬＡＳＴ－２、Ｃｌｕｓｔａｌ Ｗ、Ｍｅｇａｌｉｇｎ（ＤＮＡＳＴＡＲ）ソフトウェア又はＦＡＳＴＡプログラムパッケージなどの公的に入手可能なコンピュータソフトウェアを使用して達成され得る。当業者であれば、比較される配列の完全長にわたる最大のアラインメントを達成するために必要な任意のアルゴリズムを含む、配列をアラインメントするための適切なパラメータを決定することができる。あるいは、配列比較コンピュータプログラムＡＬＩＧＮ－２を用いて、同一性パーセント値を生成することもできる。ＡＬＩＧＮ－２配列比較コンピュータプログラムは、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ，Ｉｎｃ．によって作成されたものであり、そのソースコードは、ユーザ文書と共に米国著作権局（ワシントンＤ．Ｃ．，２０５５９）に提出されており、そこで米国著作権登録番号ＴＸＵ５１００８７として登録されており、且つ国際公開第２００１／００７６１１号に記載されている。
［００７３］特に断りのない限り、本明細書の目的のために、アミノ酸配列同一性パーセント値は、ＢＬＯＳＵＭ５０比較行列と共にバージョン３６．３．８ｃ以降のＦＡＳＴＡパッケージのｇｇｓｅａｒｃｈプログラムを用いて生成される。ＦＡＳＴＡプログラムパッケージは、Ｗ．Ｒ．Ｐｅａｒｓｏｎ ａｎｄ Ｄ．Ｊ．Ｌｉｐｍａｎ（１９８８），“Ｉｍｐｒｏｖｅｄ Ｔｏｏｌｓ ｆｏｒ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｓｅｑｕｅｎｃｅ Ａｎａｌｙｓｉｓ”，ＰＮＡＳ ８５：２４４４－２４４８；Ｗ．Ｒ．Ｐｅａｒｓｏｎ（１９９６）“Ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ ｐｒｏｔｅｉｎ ｓｅｑｕｅｎｃｅ ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ”Ｍｅｔｈ．Ｅｎｚｙｍｏｌ．２６６：２２７－２５８；及びＰｅａｒｓｏｎ ｅｔ．ａｌ．（１９９７） Ｇｅｎｏｍｉｃｓ ４６：２４－３６によって作成され、ｗｗｗ．ｆａｓｔａ．ｂｉｏｃｈ．ｖｉｒｇｉｎｉａ．ｅｄｕ／ｆａｓｔａ＿ｗｗｗ２／ｆａｓｔａ＿ｄｏｗｎ．ｓｈｔｍｌ又はｗｗｗ．ｅｂｉ．ａｃ．ｕｋ／Ｔｏｏｌｓ／ｓｓｓ／ｆａｓｔａから公的に入手可能である。代替的に、ｆａｓｔａ．ｂｉｏｃｈ．ｖｉｒｇｉｎｉａ．ｅｄｕ／ｆａｓｔａ＿ｗｗｗ２／ｉｎｄｅｘ．ｃｇｉでアクセス可能な公的なサーバーを使用して、ｇｇｓｅａｒｃｈ（ｇｌｏｂａｌ ｐｒｏｔｅｉｎ：ｐｒｏｔｅｉｎ）プログラム及びデフォルトオプション（ＢＬＯＳＵＭ５０；オープン：－１０；ｅｘｔ：－２；Ｋｔｕｐ＝２）を用い、ローカルではなくグローバルのアラインメントを確実に行い、配列を比較することができる。アミノ酸同一性パーセントは、出力アラインメントヘッダに示される。
［００７４］「薬学的組成物」又は「薬学的製剤」という用語は、調製物に含まれる有効成分の生物活性が有効になるような形態であり、薬学的組成物が投与されるであろう対象に対して容認できないほど毒性のある追加の成分を含まない調製物を指す。
［００７５］「薬学的に許容される担体」は、薬学的組成物中の活性成分以外の成分であり、対象に対して非毒性である成分を指す。薬学的に許容される担体には、限定されないが、緩衝液、添加物、安定剤又は保存剤が含まれる。
［００７６］本明細書で使用される場合、「ＫＬＫ５」及び「カリクレイン関連ペプチダーゼ５」という用語は、特に示されない限り、霊長類（例えば、ヒト）及びげっ歯類（例えば、マウス及びラット）などの哺乳動物を含む、任意の脊椎動物源に由来する任意の天然ＫＬＫ５を指す。この用語は、「完全長」の未プロセシングのＫＬＫ５だけでなく、細胞内でのプロセシングによって生じる任意の形態のＫＬＫ５を包含する。この用語は、天然に存在するＫＬＫ５のバリアント、例えば、スプライスバリアント又は対立遺伝子バリアントも包含する。例示的なヒト前駆体ＫＬＫ５タンパク質のアミノ酸配列を配列番号１に示す（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ／Ｓｗｉｓｓ－Ｐｒｏｔ：Ｑ９Ｙ３３７．３）。シグナルペプチド（アミノ酸１～２２）及びプロペプチド（アミノ酸２３～６６）を欠く、例示的なヒト成熟ＫＬＫ５タンパク質のアミノ酸配列を配列番号２に示す。例示的なカニクイザル前駆体ＫＬＫ５タンパク質のアミノ酸配列を配列番号１００に示す（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ：Ａ０Ａ２Ｋ５Ｗ０Ｔ６）。シグナルペプチド（アミノ酸１～２２）及びプロペプチド（アミノ酸２３～６４）を欠く、例示的なカニクイザル成熟ＫＬＫ５タンパク質のアミノ酸配列を配列番号１０１に示す。
［００７７］本明細書で使用される場合、「ＫＬＫ７」及び「カリクレイン関連ペプチダーゼ７」という用語は、特に示されない限り、霊長類（例えば、ヒト）及びげっ歯類（例えば、マウス及びラット）などの哺乳動物を含む、任意の脊椎動物源に由来する任意の天然ＫＬＫ７を指す。この用語は、「完全長」の未プロセシングのＫＬＫ７だけでなく、細胞内でのプロセシングによって生じる任意の形態のＫＬＫ７を包含する。この用語は、天然に存在するＫＬＫ７のバリアント、例えば、スプライスバリアント又は対立遺伝子バリアントも包含する。例示的なヒト前駆体ＫＬＫ７タンパク質のアミノ酸配列を配列番号３に示す（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ／Ｓｗｉｓｓ－Ｐｒｏｔ：Ｐ４９８６２．１）。シグナルペプチド（アミノ酸１～２２）及びプロペプチド（アミノ酸２３～２９）を欠く、例示的なヒト成熟ＫＬＫ７タンパク質のアミノ酸配列を配列番号４に示す。例示的なカニクイザル前駆体ＫＬＫ７タンパク質のアミノ酸配列を配列番号５に示す（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ：Ｇ７ＰＹＧ２）。シグナルペプチド（アミノ酸１～２１）及びプロペプチド（アミノ酸２２～２９）を欠く、例示的なカニクイザル成熟ＫＬＫ７タンパク質のアミノ酸配列を配列番号６に示す。
［００７８］本明細書で使用される場合、「治療（ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）」（及びその文法的な変化形、例えば、「治療する（ｔｒｅａｔ）」又は「治療すること（ｔｒｅａｔｉｎｇ）」）は、治療される個体の疾患の自然経過を変えようと試みる臨床的介入を指し、予防のために、又は臨床病理の過程の中で実施され得る。治療の所望の効果としては、疾患の発症又は再発を予防すること、症状の軽減、疾患の任意の直接的又は間接的な病理学的結果の減弱、転移を予防すること、疾患進行率を低下させること、病状の寛解又は緩和、及び回復又は予後の改善が挙げられるが、これらに限定されない。いくつかの態様では、本発明の抗体は、疾患の発症を遅延させるために、又は疾患の進行を遅らせるために使用される。
［００７９］「可変領域」又は「可変ドメイン」という用語は、抗体の抗原への結合に関与する抗体重鎖又は軽鎖のドメインを指す。天然抗体の重鎖及び軽鎖の可変ドメイン（それぞれＶＨ及びＶＬ）は、一般に類似の構造を有し、各ドメインが４つの保存されたフレームワーク領域（ＦＲ）と３つの相補性決定領域（ＣＤＲ）とを含む。例えば、Ｋｉｎｄｔ ｅｔ ａｌ．，Ｋｕｂｙ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，６ｔｈ、Ｗ．Ｈ．Ｆｒｅｅｍａｎ ａｎｄ Ｃｏ．，ｐａｇｅ ９１（２００７）を参照のこと。可変ドメインは、ＦＲ１及び／又はＦＲ４の全部又は一部を有するか又は有しない重鎖（ＨＣ）ＣＤＲ１－ＦＲ２－ＣＤＲ２－ＦＲ３－ＣＤＲ３；及びＦＲ１及び／又はＦＲ４の全部又は一部を有するか又は有しない軽鎖（ＬＣ）ＣＤＲ１－ＦＲ２－ＣＤＲ２－ＦＲ３－ＣＤＲ３から構成され得る。すなわち、可変ドメインは、抗原結合活性を保持している限り、ＦＲ１及び／又はＦＲ４の一部を欠いていてもよい。抗原結合特異性を付与するには、単一のＶＨドメイン又はＶＬドメインで十分であり得る。さらに、特定の抗原に結合する抗体を、その抗原に結合する抗体のＶＨドメイン又はＶＬドメインを用いて単離し、相補的なＶＬドメイン又はＶＨドメインそれぞれのライブラリーをスクリーニングしてもよい。例えば、Ｐｏｒｔｏｌａｎｏ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５０：８８０－８８７（１９９３）；Ｃｌａｒｋｓｏｎ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ ３５２：６２４－６２８（１９９１）を参照のこと。
［００８０］本明細書で使用される「ベクター」という用語は、自身が連結されている別の核酸を伝播することができる核酸分子を指す。この用語は、自己複製核酸構造体としてのベクター、及びそれが導入された宿主細胞のゲノムに組み込まれたベクターを含む。ある種のベクターは、それが作動可能に連結されている核酸の発現を誘導することができる。このようなベクターは、本明細書では「発現ベクター」と呼ばれる。
ｉｉ．組成物及び方法
［００８１］一態様では、本発明は、ＫＬＫ５及びＫＬＫ７の両方が上皮バリア透過性において役割を果たし得るという発見に部分的に基づいている。したがって、ＫＬＫ５とＫＬＫ７の両方を阻害すると、過剰な上皮バリア透過性に関連する症状の治療において有効性が向上する可能性がある。特定の態様では、ＫＬＫ５に結合する抗体が提供される。特定の態様では、ＫＬＫ７に結合する抗体が提供される。特定の態様では、ＫＬＫ５及びＫＬＫ７に結合する多重特異性抗体が提供される。本発明の抗体は、例えば、ネザートン症候群、喘息、アトピー性皮膚炎、乾癬、好酸球性食道炎、及び酒さの診断又は治療に有用である。
Ａ．例示的な抗ＫＬＫ７抗体
［００８２］一態様では、本発明は、ＫＬＫ７に結合する抗体を提供する。一態様では、ＫＬＫ７に結合する単離された抗体が提供される。一態様では、本発明は、ＫＬＫ７に特異的に結合する抗体を提供する。特定の態様では、抗ＫＬＫ７抗体はＫＬＫ７プロテアーゼ活性を阻害する。いくつかの実施態様では、抗ＫＬＫ７抗体は、Ｎｖａｌがノルバリンである、アミノ酸配列ＲＰＫＰＶＥ－Ｎｖａｌ－ＷＲＫ（配列番号１２１）を含む基質のヒトＫＬＫ７媒介切断を阻害する。いくつかの実施態様では、抗ＫＬＫ７抗体は、アミノ酸配列ＲＰＫＰＶＥ－Ｎｖａｌ－ＷＲＫ（配列番号１２１）（Ｎｖａｌはノルバリンである）を含む基質のヒトＫＬＫ７媒介切断を、５ｎＭ未満、又は３ｎＭ未満、又は２ｎＭ未満、又は１ｎＭ未満のＩＣ５０で阻害する。いくつかの実施態様では、抗ＫＬＫ７抗体は、アミノ酸配列ＲＰＫＰＶＥ－Ｎｖａｌ－ＷＲＫ（配列番号１２１）（Ｎｖａｌはノルバリンである）を含む基質のヒトＫＬＫ７媒介切断を、５ｎＭ以下、又は３ｎＭ以下、又は２ｎＭ以下、又は１ｎＭ以下のＩＣ５０で阻害する。いくつかの実施態様では、抗ＫＬＫ７抗体は、表面プラズモン共鳴によって測定した場合、２０ｐＭ未満、１０ｐＭ未満、又は９ｐＭ未満、又は８ｐＭ未満、又は７ｐＭ未満、又は６ｐＭ未満、又は５ｐＭ未満、又は３ｐＭ未満、又は２ｐＭ未満、又は１ｐＭ未満のＫＤでヒトＫＬＫ７に結合する。いくつかの実施態様では、抗ＫＬＫ７抗体は、表面プラズモン共鳴によって測定した場合、２０ｐＭ以下、１０ｐＭ以下、又は９ｐＭ以下、又は８ｐＭ以下、又は７ｐＭ以下、又は６ｐＭ以下、又は５ｐＭ以下、又は３ｐＭ以下、又は２ｐＭ以下、又は１ｐＭ以下のＫＤでヒトＫＬＫ７に結合する。
［００８３］いくつかの実施態様では、抗ＫＬＫ７抗体は、ＫＬＫ７のアミノ酸Ｒ７１～Ｎ８２、Ｋ１５２～Ｓ１５８、及び／又はＱ２１１～Ｋ２２２内のエピトープに結合し、ここでアミノ酸は配列番号４に従って番号付けされる。いくつかの実施態様では、抗ＫＬＫ７抗体は、配列番号４に従って番号付けされた、ＫＬＫ７のアミノ酸Ｒ７１～Ｎ８２内の少なくとも１つのアミノ酸と接触し、アミノ酸Ｋ１５２～Ｓ１５８内の少なくとも１つのアミノ酸と接触し、アミノ酸Ｑ２１１～Ｋ２２２内の少なくとも１つのアミノ酸と接触する。いくつかの実施態様では、抗ＫＬＫ７抗体は、配列番号４に従って番号付けされた、ＫＬＫ７のアミノ酸Ｈ７２、Ｐ７３、Ｇ７４、Ｓ７６、Ｑ７８、Ｎ８２、Ｎ１５７、Ｋ２１１、及び／又はＴ２１３のうちの１つ又は複数を含むエピトープに結合する。いくつかの実施態様では、抗ＫＬＫ７抗体は、キモトリプシン番号付けによって、ＫＬＫ７のアミノ酸Ｈ９１、Ｐ９２、Ｇ９３、Ｓ９５、Ｑ９７、Ｎ１０１、Ｎ１７８、Ｋ２３３、及び／又はＴ２３５のうちの１つ又は複数を含むエピトープに結合する。いくつかの実施態様では、抗ＫＬＫ７抗体は、配列番号４に従って番号付けされた、ＫＬＫ７のアミノ酸Ｈ７２、Ｐ７３、Ｇ７４、Ｓ７６、Ｑ７８、Ｎ８２、Ｎ１５７、Ｋ２１１、及びＴ２１３を含むエピトープに結合する。いくつかの実施態様では、抗ＫＬＫ７抗体は、キモトリプシン番号付けによって、ＫＬＫ７のアミノ酸Ｈ９１、Ｐ９２、Ｇ９３、Ｓ９５、Ｑ９７、Ｎ１０１、Ｎ１７８、Ｋ２３３、及びＴ２３５を含むエピトープに結合する。
［００８４］いくつかの実施態様では、抗ＫＬＫ７抗体は、ＫＬＫ７に結合すると、ヒトＫＬＫ７の構造変化をもたらし、この構造変化は、アロステリックにヒトＫＬＫ７の基質結合部位及び／又は活性部位の破壊をもたらす。
［００８５］いくつかの実施態様では、抗ＫＬＫ７抗体はＫＬＫ５に結合しない。いくつかの実施態様では、抗ＫＬＫ７抗体は、ＫＬＫ１、ＫＬＫ４、ＫＬＫ５、ＫＬＫ１１、及びＫＬＫ１４に結合しない。いくつかの実施態様では、抗ＫＬＫ７抗体はヒトＫＬＫ７及びカニクイザルＫＬＫ７に結合する。
［００８６］一態様では、本発明は、（ａ）配列番号７のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１；（ｂ）配列番号８のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２；（ｃ）配列番号９又は２００のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３；（ｄ）配列番号１０又は２０１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１；（ｅ）配列番号１１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２；及び（ｆ）配列番号１２のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３から選択される少なくとも１つ、少なくとも２つ、少なくとも３つ、少なくとも４つ、少なくとも５つ、又は６つ全てのＣＤＲを含む抗ＫＬＫ７抗体を提供する。
［００８７］一態様では、本発明は、（ａ）配列番号７のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１；（ｂ）配列番号８のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２；及び（ｃ）配列番号９又は２００のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３から選択される少なくとも１つ、少なくとも２つ、又は３つ全てのＶＨ ＣＤＲ配列を含む抗体を提供する。一態様では、抗体は、配列番号９又は２００のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３を含む。別の態様では、抗体は、配列番号９又は２００のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３及び配列番号１２のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３を含む。さらなる態様では、抗体は、配列番号９又は２００のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３、配列番号１２のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３、及び配列番号８のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２を含む。さらなる態様では、抗体は、（ａ）配列番号７のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１；（ｂ）配列番号８のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２；及び（ｃ）配列番号９又はは２００のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３を含む。
［００８８］別の態様では、本発明は、（ａ）配列番号１０又は２０１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１；（ｂ）配列番号１１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２；及び（ｃ）配列番号１２のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３から選択される少なくとも１つ、少なくとも２つ、又は３つ全てのＶＬ ＣＤＲ配列を含む抗体を提供する。一態様では、抗体は、（ａ）配列番号１０又は２０１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１；（ｂ）配列番号１１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２；及び（ｃ）配列番号１２のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３を含む。
［００８９］別の態様では、本発明の抗体は、（ａ）（ｉ）配列番号７のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、（ｉｉ）配列番号８のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２、及び（ｉｉｉ）配列番号９又は２００のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３から選択される少なくとも１つ、少なくとも２つ、又は３つ全てのＶＨ ＣＤＲ配列を含むＶＨドメインと；（ｂ）（ｉ）配列番号１０又は２０１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１、（ｉｉ）配列番号１１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２、及び（ｃ）配列番号１２のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３から選択される少なくとも１つ、少なくとも２つ、又は３つ全てのＶＬ ＣＤＲ配列を含むＶＬドメインとを含む。
［００９０］別の態様では、本発明は、（ａ）配列番号７のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１；（ｂ）配列番号８のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２；（ｃ）配列番号９のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３；（ｄ）配列番号１０のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１；（ｅ）配列番号１１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２；及び（ｆ）配列番号１２のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３を含む抗体を提供する。
［００９１］別の態様では、本発明は、（ａ）配列番号７のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１；（ｂ）配列番号８のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２；（ｃ）配列番号２００のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３；（ｄ）配列番号２０１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１；（ｅ）配列番号１１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２；及び（ｆ）配列番号１２のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３を含む抗体を提供する。
［００９２］本明細書で提供される態様のいずれかにおいて、抗ＫＬＫ７抗体はヒト化されている。一態様では、抗ＫＬＫ７抗体は、アクセプターヒトフレームワーク、例えば、ヒト免疫グロブリンフレームワーク又はヒトコンセンサスフレームワークをさらに含む。
一態様では、抗ＫＬＫ７抗体は、（ａ）配列番号１２３～１２８から選択される重鎖フレームワーク領域１（ＨＣ－ＦＲ１）、（ｂ）配列番号１３０～１３３から選択される重鎖フレームワーク領域２（ＨＣ－ＦＲ２）、（ｃ）配列番号１３５～１４３から選択される重鎖フレームワーク領域３（ＨＣ－ＦＲ３）、及び（ｄ）配列番号１４４～１４５から選択される重鎖フレームワーク領域４（ＨＣ－ＦＲ４）から選択される１つ又は複数の重鎖フレームワーク配列を含むＶＨドメインを含む。
［００９４］別の態様では、抗ＫＬＫ７抗体は、配列番号１２３～１２８から選択されるＨＣ－ＦＲ１を含むＶＨドメインを含む。別の態様では、抗ＫＬＫ７抗体は、配列番号１３０～１３３から選択されるＨＣ－ＦＲ２を含むＶＨドメインを含む。別の態様では、抗ＫＬＫ７抗体は、配列番号１３５～１４３から選択されるＨＣ－ＦＲ３を含むＶＨドメインを含む。別の態様では、抗ＫＬＫ７抗体は、配列番号１４４～１４５から選択されるＨＣ－ＦＲ４を含むＶＨドメインを含む。
［００９５］別の態様では、抗ＫＬＫ７抗体は、配列番号１２３～１２８から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するＨＣ－ＦＲ１を含むＶＨドメインを含む。一態様では、ＶＨドメインは、配列番号１２３～１２８から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するＨＣ－ＦＲ１を含む。別の態様では、ＶＨドメインは、配列番号１２３～１２８から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも９８％の配列同一性を有するＨＣ－ＦＲ１を含む。
［００９６］別の態様では、抗ＫＬＫ７抗体は、配列番号１３０～１３３から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するＨＣ－ＦＲ２を含むＶＨドメインを含む。一態様では、ＶＨドメインは、配列番号１３０～１３３から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するＨＣ－ＦＲ２を含む。別の態様では、ＶＨドメインは、配列番号１３０～１３３から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも９８％の配列同一性を有するＨＣ－ＦＲ２を含む。
［００９７］別の態様では、抗ＫＬＫ７抗体は、配列番号１３５～１４３から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するＨＣ－ＦＲ３を含むＶＨドメインを含む。一態様では、ＶＨドメインは、配列番号１３５～１４３から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するＨＣ－ＦＲ３を含む。別の態様では、ＶＨドメインは、配列番号１３５～１４３から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも９８％の配列同一性を有するＨＣ－ＦＲ３を含む。
［００９８］別の態様では、抗ＫＬＫ７抗体は、配列番号１４４～１４５から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するＨＣ－ＦＲ４を含むＶＨドメインを含む。一態様では、ＶＨドメインは、配列番号１４４～１４５から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するＨＣ－ＦＲ４を含む。別の態様では、ＶＨドメインは、配列番号１４４～１４５から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも９８％の配列同一性を有するＨＣ－ＦＲ４を含む。
［００９９］一態様では、抗ＫＬＫ７抗体は、（ａ）配列番号１４７～１５０から選択される軽鎖フレームワーク領域１（ＬＣ－ＦＲ１）、（ｂ）配列番号１５２～１５４から選択される軽鎖フレームワーク領域２（ＬＣ－ＦＲ２）、（ｃ）配列番号１５６～１５８から選択される軽鎖フレームワーク領域３（ＬＣ－ＦＲ３）、及び（ｄ）配列番号１６０の軽鎖フレームワーク領域４（ＬＣ－ＦＲ４）から選択される１つ又は複数の軽鎖フレームワーク配列を含むＶＬドメインを含む。
［００１００］別の態様では、抗ＫＬＫ７抗体は、配列番号１４７～１５０から選択されるＬＣ－ＦＲ１を含むＶＬドメインを含む。別の態様では、抗ＫＬＫ７抗体は、配列番号１５２～１５４から選択されるＬＣ－ＦＲ２を含むＶＬドメインを含む。別の態様では、抗ＫＬＫ７抗体は、配列番号１５６～１５８から選択されるＬＣ－ＦＲ３を含むＶＬドメインを含む。別の態様では、抗ＫＬＫ７抗体は、配列番号１６０のＬＣ－ＦＲ４を含むＶＬドメインを含む。
［００１０１］別の態様では、抗ＫＬＫ７抗体は、配列番号１４７～１５０から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するＬＣ－ＦＲ１を含むＶＬドメインを含む。一態様では、ＶＬドメインは、配列番号１４７～１５０から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するＬＣ－ＦＲ１を含む。別の態様では、ＶＬドメインは、配列番号１４７～１５０から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも９８％の配列同一性を有するＬＣ－ＦＲ１を含む。
［００１０２］別の態様では、抗ＫＬＫ７抗体は、配列番号１５２～１５４から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するＬＣ－ＦＲ２を含むＶＬドメインを含む。一態様では、ＶＬドメインは、配列番号１５２～１５４から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するＬＣ－ＦＲ２を含む。別の態様では、ＶＬドメインは、配列番号１５２～１５４から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも９８％の配列同一性を有するＬＣ－ＦＲ２を含む。
［００１０３］別の態様では、抗ＫＬＫ７抗体は、配列番号１５６～１５８から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するＬＣ－ＦＲ３を含むＶＬドメインを含む。一態様では、ＶＬドメインは、配列番号１５６～１５８から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するＬＣ－ＦＲ３を含む。別の態様では、ＶＬドメインは、配列番号１５６～１５８から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも９８％の配列同一性を有するＬＣ－ＦＲ３を含む。
［００１０４］別の態様では、抗ＫＬＫ７抗体は、配列番号１６０に対して少なくとも８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するＬＣ－ＦＲ４を含むＶＬドメインを含む。一態様では、ＶＬドメインは、配列番号１６０と少なくとも９５％の配列同一性を有するＬＣ－ＦＲ１を含む。別の態様では、ＶＬドメインは、配列番号１６０と少なくとも９８％の配列同一性を有するＬＣ－ＦＲ１を含む。
［００１０５］別の態様では、抗ＫＬＫ７抗体は、配列番号１３及び１５～３０から選択されるＶＨのＣＤＲ配列のうちの１つ又は複数を含む。別の実施態様では、抗ＫＬＫ７抗体は、配列番号１４、３１～３８、及び２０３から選択されるＶＬのＣＤＲ配列のうちの１つ又は複数を含む。別の実施態様では、抗ＫＬＫ７抗体は、配列番号１３及び１５～３０から選択されるＶＨのＣＤＲ配列、並びに配列番号１４、３１～３８、及び２０３から選択されるＶＬのＣＤＲ配列を含む。
［００１０６］さらなる態様では、抗ＫＬＫ７抗体は、配列番号１３及び１５～３０から選択されるＶＨのＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、及びＣＤＲ－Ｈ３アミノ酸配列と、配列番号１４、３１～３８、及び２０３から選択されるＶＬのＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３アミノ酸配列とを含む。
［００１０７］一態様では、抗ＫＬＫ７抗体は、配列番号１３、１５～３０、及び２０２から選択されるＶＨの重鎖ＣＤＲアミノ酸配列のうちの１つ又は複数と、配列番号１３、１５～３０、及び２０２から選択されるＶＨのフレームワークアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％の配列同一性を有するフレームワークとを含む。一態様では、抗ＫＬＫ７抗体は、配列番号１３、１５～３０、及び２０２から選択されるＶＨの３つの重鎖ＣＤＲアミノ酸配列と、配列番号１３、１５～３０、及び２０２から選択されるＶＨのフレームワークアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％の配列同一性を有するフレームワークとを含む。一態様では、抗ＫＬＫ７抗体は、配列番号１３、１５～３０、及び２０２から選択されるＶＨの３つの重鎖ＣＤＲアミノ酸配列と、配列番号１３、１５～３０、及び２０２から選択されるＶＨのフレームワークアミノ酸配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するフレームワークとを含む。別の態様では、抗ＫＬＫ７抗体は、配列番号１３、１５～３０、及び２０２から選択されるＶＨの３つの重鎖ＣＤＲアミノ酸配列と、配列番号１３、１５～３０、及び２０２から選択されるＶＨのフレームワークアミノ酸配列に対して少なくとも９８％の配列同一性を有するフレームワークとを含む。
［００１０８］一態様では、抗ＫＬＫ７抗体は、配列番号１４、３１～３８、及び２０３から選択されるＶＬの軽鎖ＣＤＲアミノ酸配列のうちの１つ又は複数と、配列番号１４、３１～３８、及び２０３から選択されるＶＬのフレームワークアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％の配列同一性を有するフレームワークとを含む。一態様では、抗ＫＬＫ７抗体は、配列番号１４、３１～３８、及び２０３から選択されるＶＬの３つの軽鎖ＣＤＲアミノ酸配列と、配列番号１４、３１～３８、及び２０３から選択されるＶＬのフレームワークアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％の配列同一性を有するフレームワークとを含む。一態様では、抗ＫＬＫ７抗体は、配列番号１４、３１～３８、及び２０３から選択されるＶＬの３つの軽鎖ＣＤＲアミノ酸配列と、配列番号１４、３１～３８、及び２０３から選択されるＶＬのフレームワークアミノ酸配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するフレームワークとを含む。別の態様では、抗ＫＬＫ７抗体は、配列番号１４、３１～３８、及び２０３から選択されるＶＬの３つの軽鎖ＣＤＲアミノ酸配列と、配列番号１４、３１～３８、及び２０３から選択されるＶＬのフレームワークアミノ酸配列に対して少なくとも特に少なくとも９８％の配列同一性を有するフレームワークとを含む。
［００１０９］一態様では、抗ＫＬＫ７抗体は、（ａ）配列番号７のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１；（ｂ）配列番号８のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２；（ｃ）配列番号９のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３；（ｄ）配列番号１０のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１；（ｅ）配列番号１１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２；及び（ｆ）配列番号１２のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３、並びに配列番号１３、１５～３０、及び２０２から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又は１００％の配列同一性を有するＶＨドメイン、並びに配列番号１４、３１～３８、及び２０３から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又は１００％の配列同一性を有するＶＬドメインを含む。一態様では、ＶＨドメインは、配列番号１３、１５～３０、及び２０２から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有する。一態様では、ＶＬドメインは、配列番号１４、３１～３８、及び２０３から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有する。
［００１１０］一態様では、抗ＫＬＫ７抗体は、（ａ）配列番号７のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１；（ｂ）配列番号８のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２；（ｃ）配列番号９のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３；（ｄ）配列番号１０のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１；（ｅ）配列番号１１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２；及び（ｆ）配列番号１２のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３、並びに配列番号１３、１５～３０、及び２０２から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又は１００％の配列同一性を有するＶＨドメイン、並びに配列番号１４、３１～３８、及び２０３から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又は１００％の配列同一性を有するＶＬドメインを含み、ここで、該抗体はＫＬＫ７に特異的に結合する。一態様では、ＶＨドメインは、配列番号１３、１５～３０、及び２０２から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有する。一態様では、ＶＬドメインは、配列番号１４、３１～３８、及び２０３から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有する。
［００１１１］一態様では、抗体は、表面プラズモン共鳴によって測定した場合、１０ｐＭ未満、又は９ｐＭ未満、又は８ｐＭ未満、又は７ｐＭ未満、又は６ｐＭ未満、又は５ｐＭ未満の解離定数（ＫＤ）を有するＫＬＫ７に結合する。一態様では、抗体は、表面プラズモン共鳴によって測定した場合、１０ｐＭ以下、又は９ｐＭ以下、又は８ｐＭ以下、又は７ｐＭ以下、又は６ｐＭ以下、又は５ｐＭ以下の解離定数（ＫＤ）を有するＫＬＫ７に結合する。
［００１１２］別の態様では、抗ＫＬＫ７抗体は、配列番号１３、１５～３０、及び２０２から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又は１００％の配列同一性を有する重鎖可変ドメイン（ＶＨ）配列を含む。一態様では、抗ＫＬＫ７抗体は、配列番号１３及び１５～３０から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有する重鎖可変ドメイン（ＶＨ）配列を含む。特定の態様では、少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の同一性を有するＶＨ配列は、参照配列に対して置換（例えば保存的置換）、挿入又は欠失を含むが、その配列を含む抗ＫＬＫ７抗体は、ＫＬＫ７に結合する能力を保持する。特定の態様では、配列番号１３、１５～３０、又は２０２から選択されるアミノ酸配列において、合計１～１０個のアミノ酸が置換、挿入及び／又は欠失されている。特定の態様では、置換、挿入、又は欠失は、ＣＤＲの外側の領域（すなわち、ＦＲ）で起こる。任意に、抗ＫＬＫ７抗体は、配列番号１３、１５～３０、及び２０２から選択されるアミノ酸配列のＶＨ配列を含み、これにはその配列の翻訳後修飾が含まれる。任意に、抗ＫＬＫ７抗体は、配列番号２９、３０、又は２０２のＶＨ配列を含み、これにはその配列の翻訳後修飾が含まれる。特定の態様では、ＶＨは、（ａ）配列番号７のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１；（ｂ）配列番号８のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２；及び（ｃ）配列番号９のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３から選択される、１つ、２つ又は３つのＣＤＲを含む。別の態様では、抗ＫＬＫ７抗体が提供され、ここで該抗体は、配列番号１４、３１～３８、及び２０３から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又は１００％の配列同一性を有する軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）配列を含む。一態様では、抗ＫＬＫ７抗体は、配列番号１４、３１～３８、及び２０３から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有する軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）配列を含む。特定の態様では、少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の同一性を有するＶＬ配列は、参照配列に対して置換（例えば保存的置換）、挿入又は欠失を含むが、その配列を含む抗ＫＬＫ７抗体は、ＫＬＫ７に結合する能力を保持する。特定の態様では、配列番号１４、３１～３８、及び２０３から選択されるアミノ酸配列において、合計１～１０個のアミノ酸が置換、挿入及び／又は欠失されている。特定の態様では、置換、挿入、又は欠失は、ＣＤＲの外側の領域（すなわち、ＦＲ）で起こる。任意に、抗ＫＬＫ７抗体は、配列番号１４、３１～３８、及び２０３から選択されるアミノ酸配列のＶＬ配列を含み、これにはその配列の翻訳後修飾が含まれる。任意に、抗ＫＬＫ７抗体は、配列番号３２又は３８のＶＬ配列を含み、これにはその配列の翻訳後修飾が含まれる。特定の態様では、ＶＬは、（ａ）配列番号１０のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１；（ｂ）配列番号１１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２；及び（ｃ）配列番号１２のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３から選択される、１つ、２つ又は３つのＣＤＲを含む。
［００１１３］別の態様では、抗ＫＬＫ７抗体が提供され、ここで該抗体は、上で提供される態様のいずれかにおけるようなＶＨ配列、及び上で提供される態様のいずれかにおけるようなＶＬ配列を含む。一態様では、抗体は、配列番号２９及び配列番号３２のＶＨ配列及びＶＬ配列をそれぞれ含み、これらにはそれらの配列の翻訳後修飾が含まれる。一態様では、抗体は、配列番号３０及び配列番号３８のＶＨ配列及びＶＬ配列をそれぞれ含み、これらにはそれらの配列の翻訳後修飾が含まれる。一態様では、抗体は、配列番号２０２及び配列番号２０３のＶＨ配列及びＶＬ配列をそれぞれ含み、これらにはそれらの配列の翻訳後修飾が含まれる。
［００１１４］さらなる態様では、本発明は、本明細書で提供される抗ＫＬＫ７抗体と同じエピトープに結合する抗体を提供する。例えば、特定の態様では、配列番号２９のＶＨ配列及び配列番号３２のＶＬ配列を含む抗ＫＬＫ７抗体と同じエピトープに結合する抗体が提供される。例えば、特定の態様では、配列番号２０２のＶＨ配列及び配列番号２０３のＶＬ配列を含む抗ＫＬＫ７抗体と同じエピトープに結合する抗体が提供される。
［００１１５］さらなる態様では、本発明は、ＫＬＫ７への結合に関して、本明細書で提供される抗ＫＬＫ７抗体と競合する抗体を提供する。
［００１１６］本発明のさらなる態様では、上記態様のいずれかによる抗ＫＬＫ７抗体は、キメラ抗体、ヒト化抗体、又はヒト抗体を含むモノクローナル抗体である。一態様では、抗ＫＬＫ７抗体は、抗体断片、例えば、Ｆｖ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、ｓｃＦｖ、ダイアボディ、又はＦ（ａｂ’）２断片である。別の態様では、抗体は、完全長抗体、例えば、本明細書において定義されるインタクトなＩｇＧ１抗体又は他の抗体クラス若しくはアイソタイプである。
［００１１７］さらなる態様では、上記の態様のいずれかによる抗ＫＬＫ７抗体は、以下のセクション１～８に記載されているように、任意の特徴を単独で又は組み合わせて組み込んでもよい。
Ｂ．例示的な抗ＫＬＫ５抗体
［００１１８］一態様では、本発明は、ＫＬＫ５に結合する抗体を提供する。一態様では、ＫＬＫ５に結合する単離された抗体が提供される。一態様では、本発明は、ＫＬＫ５に特異的に結合する抗体を提供する。特定の態様では、抗ＫＬＫ５抗体はＫＬＫ５プロテアーゼ活性を阻害する。いくつかの実施態様では、抗ＫＬＫ５抗体は、基質Ｂｏｃ－Ｖａｌ－Ｐｒｏ－Ａｒｇ－ＡＭＣのヒトＫＬＫ５媒介切断を阻害する。いくつかの実施態様では、抗ＫＬＫ５抗体は、５ｎＭ未満、又は３ｎＭ未満、又は２ｎＭ未満、又は１ｎＭ未満のＩＣ５０で、基質Ｂｏｃ－Ｖａｌ－Ｐｒｏ－Ａｒｇ－ＡＭＣのヒトＫＬＫ５媒介切断を阻害する。いくつかの実施態様では、抗ＫＬＫ５抗体は、５ｎＭ以下、又は３ｎＭ以下、又は２ｎＭ以下、又は１ｎＭ以下のＩＣ５０で、基質Ｂｏｃ－Ｖａｌ－Ｐｒｏ－Ａｒｇ－ＡＭＣのヒトＫＬＫ５媒介切断を阻害する。いくつかの実施態様では、抗ＫＬＫ５抗体は、表面プラズモン共鳴によって測定した場合、６０ｐＭ未満、３０ｐＭ未満、２０ｐＭ未満、１０ｐＭ未満、又は５ｐＭ未満のＫＤでＫＬＫ５に結合する。いくつかの実施態様では、抗ＫＬＫ５抗体は、表面プラズモン共鳴によって測定した場合、６０ｐＭ以下、３０ｐＭ以下、２０ｐＭ以下、１０ｐＭ以下、又は５ｐＭ以下のＫＤでＫＬＫ５に結合する。
［００１１９］いくつかの実施態様では、抗ＫＬＫ５抗体は、ヒトＫＬＫ５に結合すると、ヒトＫＬＫ５の構造変化をもたらし、この構造変化は、アロステリックにヒトＫＬＫ５の基質結合部位及び／又は活性部位の破壊をもたらす。
いくつかの実施態様では、抗ＫＬＫ５抗体は、標準的プロテアーゼ番号付け（Ｐ１１３、Ｓ１１４、Ａ１１５、Ｇ１１６、Ｖ１４５、Ｌ１４６、Ｓ１４７、Ｑ１４８、Ｋ１４９、Ｒ１５０、Ｅ１５２、Ｄ１５３、Ａ１５４、Ｙ１５５、Ｐ１５６、Ｒ１５７、Ｑ１５８、Ｉ１５９、Ｄ１６０、Ｄ１６１、Ｇ１６７、Ｄ１６８、Ｋ１６９、Ａ１７０、Ｒ１７２、Ｎ２０４、Ｒ２０５、Ｐ２０６、及びＫ２１４（配列番号２の連続番号による））に従って、Ｐｒｏ１３０、Ｓｅｒ１３１、Ａｌａ１３２、Ｇｌｙ１３３、Ｖａｌ１６２、Ｌｅｕ１６３、Ｓｅｒ１６４、Ｇｌｎ１６５、Ｌｙｓ１６６、Ａｒｇ１６７、Ｇｌｕ１６９、Ａｓｐ１７０、Ａｌａ１７１、Ｔｙｒ１７２、Ｐｒｏ１７３、Ａｒｇ１７４、Ｇｌｎ１７４Ａ、Ｉｌｅ１７６、Ａｓｐ１７７、Ａｓｐ１７８、Ｇｌｙ１８４、Ａｓｐ１８５、Ｌｙｓ１８６、Ａｌａ１８６Ａ、Ａｒｇ１８８、Ａｓｎ２２３、Ａｒｇ２２４、Ｐｒｏ２２５、及びＬｙｓ２３３から選択される１つ又は複数のアミノ酸残基を含むヒトＫＬＫ５上のエピトープに結合する。例えば、ＰＣＴ公開番号ＷＯ２０１９／１７８３１６Ａ１を参照のこと。いくつかの実施態様では、抗ＫＬＫ５抗体は、標準的プロテアーゼ番号付けによる、Ｐｒｏ１３０、Ｓｅｒ１３１、Ａｌａ１３２、Ｖａｌ１６２、Ｌｅｕ１６３、Ｓｅｒ１６４、Ｇｌｎ１６５、Ｌｙｓ１６６、Ａｒｇ１６７、Ｇｌｕ１６９、Ａｓｐ１７０、Ａｌａ１７１、Ｔｙｒ１７２、Ｐｒｏ１７３、Ａｒｇ１７４、Ｇｌｎ１７４Ａ、Ｉｌｅ１７６、Ａｓｐ１７７、Ａｓｐ１７８、Ａｒｇ２２４、及びＬｙｓ２３３からなる群から選択される１つ又は複数のアミノ酸残基を含むヒトＫＬＫ５上のエピトープに結合する。いくつかの実施態様では、抗ＫＬＫ５抗体は、標準的プロテアーゼ番号付けによる、Ｐｒｏ１３０、Ｓｅｒ１３１、Ａｌａ１３２、Ｇｌｙ１３３、Ｖａｌ１６２、Ｌｅｕ１６３、Ｓｅｒ１６４、Ｇｌｎ１６５、Ｌｙｓ１６６、Ａｒｇ１６７、Ｇｌｕ１６９、Ａｓｐ１７０、Ａｌａ１７１、Ｔｙｒ１７２、Ｐｒｏ１７３、Ａｒｇ１７４、Ｇｌｎ１７４Ａ、Ｉｌｅ１７６、Ａｓｐ１７７、及びＬｙｓ２３３から選択される１つ又は複数のアミノ酸残基を含むヒトＫＬＫ５上のエピトープに結合する。いくつかの実施態様では、抗ＫＬＫ５抗体は、標準的プロテアーゼ番号付けによる、Ｓｅｒ１３１、Ａｌａ１３２、Ｇｌｙ１３３、Ｌｅｕ１６３、Ｓｅｒ１６４、Ｇｌｎ１６５、Ｌｙｓ１６６、Ａｒｇ１６７、Ｇｌｕ１６９、Ａｓｐ１７０、Ａｌａ１７１、Ｐｒｏ１７３、Ａｒｇ１７４、Ｇｌｙ１８４、Ａｓｐ１８５、Ｌｙｓ１８６、Ａｌａ１８６Ａ、Ａｒｇ１８８、Ａｓｎ２２３、Ａｒｇ２２４、及びＰｒｏ２２５から選択される１つ又は複数のアミノ酸残基を含むヒトＫＬＫ５上のエピトープに結合する。
［００１２１］いくつかの実施態様では、抗ＫＬＫ５抗体はＫＬＫ７に結合しない。いくつかの実施態様では、抗ＫＬＫ５抗体は、ＫＬＫ１、ＫＬＫ４、ＫＬＫ７、ＫＬＫ１１、又はＫＬＫ１４に結合しない。いくつかの実施態様では、抗ＫＬＫ５抗体はヒトＫＬＫ５及びカニクイザルＫＬＫ５に結合する。
抗体ｈｕ．１０Ｃ５－Ｈ２８Ｌ５及びそのバリアント
［００１２２］一態様では、本発明は、（ａ）配列番号３９及び１０７のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１；（ｂ）配列番号４０及び４１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２；（ｃ）配列番号４２及び２０４のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３；（ｄ）配列番号４３及び４４のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１；（ｅ）配列番号４５のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２；及び（ｆ）配列番号４６～４９のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３から選択される少なくとも１つ、少なくとも２つ、少なくとも３つ、少なくとも４つ、少なくとも５つ、又は６つ全てのＣＤＲを含む抗ＫＬＫ５抗体を提供する。
［００１２３］一態様では、本発明は、（ａ）配列番号３９のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１；（ｂ）配列番号４１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２；及び（ｃ）配列番号４２のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３から選択される少なくとも１つ、少なくとも２つ、又は３つ全てのＶＨ ＣＤＲ配列を含む抗体を提供する。さらなる態様では、抗体は、（ａ）配列番号３９のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号４１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２、及び（ｃ）配列番号４２のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３を含む。別の態様では、本発明は、（ａ）配列番号４３のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１、（ｂ）配列番号４５のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２、及び（ｃ）配列番号４７のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３から選択される、少なくとも１つ、少なくとも２つ、又は３つ全てのＶＬ ＣＤＲ配列を含む抗体を提供する。一態様では、抗体は、（ａ）配列番号４３のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１；（ｂ）配列番号４５のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２；及び（ｃ）配列番号４７のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３を含む。
［００１２４］一態様では、本発明は、（ａ）配列番号３９のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１；（ｂ）配列番号４１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２；及び（ｃ）配列番号２０４のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３から選択される少なくとも１つ、少なくとも２つ、又は３つ全てのＶＨ ＣＤＲ配列を含む抗体を提供する。さらなる態様では、抗体は、（ａ）配列番号３９のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号４１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２、及び（ｃ）配列番号２０４のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３を含む。別の態様では、本発明は、（ａ）配列番号４３のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１、（ｂ）配列番号４５のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２、及び（ｃ）配列番号４７のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３から選択される、少なくとも１つ、少なくとも２つ、又は３つ全てのＶＬ ＣＤＲ配列を含む抗体を提供する。一態様では、抗体は、（ａ）配列番号４３のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１；（ｂ）配列番号４５のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２；及び（ｃ）配列番号４７のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３を含む。
［００１２５］一態様では、本発明は、（ａ）配列番号３９又は１０７のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１；（ｂ）配列番号４０又は４１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２；及び（ｃ）配列番号４２又は２０４のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３から選択される少なくとも１つ、少なくとも２つ、又は３つ全てのＶＨ ＣＤＲ配列を含む抗体を提供する。別の態様では、抗体は、配列番号３９のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、配列番号４１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２、及び配列番号４２又は２０４のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３を含む。
［００１２６］別の態様では、本発明は、（ａ）配列番号４３又は４４のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１；（ｂ）配列番号４５のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２；及び（ｃ）配列番号４６～４９から選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３から選択される少なくとも１つ、少なくとも２つ、又は３つ全てのＶＬ ＣＤＲ配列を含む抗体を提供する。一態様では、抗体は、（ａ）配列番号４３のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１；（ｂ）配列番号４５のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２；及び（ｃ）配列番号４７のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３を含む。別の態様では、本発明の抗体は、（ａ）（ｉ）配列番号３９及び１０７から選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、（ｉｉ）配列番号４０及び４１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２、及び（ｉｉｉ）配列番号４２又は２０４のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３から選択される少なくとも１つ、少なくとも２つ、又は３つ全てのＶＨ ＣＤＲ配列を含むＶＨドメインと；（ｂ）（ｉ）配列番号４３又は４４のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１、（ｉｉ）配列番号４５のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２、及び（ｃ）配列番号４６～４９から選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３から選択される少なくとも１つ、少なくとも２つ、又は３つ全てのＶＬ ＣＤＲ配列を含むＶＬドメインとを含む。
［００１２７］別の態様では、本発明は、（ａ）配列番号３９のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１；（ｂ）配列番号４１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２；（ｃ）配列番号４２のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３；（ｄ）配列番号４３のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１；（ｅ）配列番号４５のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２；及び（ｆ）配列番号４７のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３を含む抗体を提供する。
［００１２８］別の態様では、本発明は、（ａ）配列番号３９のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１；（ｂ）配列番号４１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２；（ｃ）配列番号２０４のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３；（ｄ）配列番号４３のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１；（ｅ）配列番号４５のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２；及び（ｆ）配列番号４７のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３を含む抗体を提供する。
［００１２９］本明細書で提供される態様のいずれかにおいて、抗ＫＬＫ５抗体はヒト化されている。一態様では、抗ＫＬＫ５抗体は、アクセプターヒトフレームワーク、例えば、ヒト免疫グロブリンフレームワーク又はヒトコンセンサスフレームワークをさらに含む。
［００１３０］一態様では、抗ＫＬＫ５抗体は、（ａ）配列番号１６１の重鎖フレームワーク領域１（ＨＣ－ＦＲ１）、（ｂ）配列番号１６２又は１６３の重鎖フレームワーク領域２（ＨＣ－ＦＲ２）、（ｃ）配列番号１６４の重鎖フレームワーク領域３（ＨＣ－ＦＲ３）、及び（ｄ）配列番号１６５の重鎖フレームワーク領域４（ＨＣ－ＦＲ４）から選択される１つ又は複数の重鎖フレームワーク配列を含むＶＨドメインを含む。
［００１３１］別の態様では、抗ＫＬＫ５抗体は、配列番号１６１のＨＣ－ＦＲ１を含むＶＨドメインを含む。別の態様では、抗ＫＬＫ５抗体は、配列番号１６２又は１６３のＨＣ－ＦＲ２を含むＶＨドメインを含む。別の態様では、抗ＫＬＫ５抗体は、配列番号１６４のＨＣ－ＦＲ３を含むＶＨドメインを含む。別の態様では、抗ＫＬＫ５抗体は、配列番号１６５のＨＣ－ＦＲ４を含むＶＨドメインを含む。
［００１３２］別の態様では、抗ＫＬＫ５抗体は、配列番号１６１と少なくとも８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するＨＣ－ＦＲ１を含むＶＨドメインを含む。一態様では、ＶＨドメインは、配列番号１６１と少なくとも９５％の配列同一性を有するＨＣ－ＦＲ１を含む。別の態様では、ＶＨドメインは、配列番号１６１と少なくとも９８％の配列同一性を有するＨＣ－ＦＲ１を含む。
［００１３３］別の態様では、抗ＫＬＫ５抗体は、配列番号１６２又は１６３に対して少なくとも８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するＨＣ－ＦＲ２を含むＶＨドメインを含む。一態様では、ＶＨドメインは、配列番号１６２又は１６３と少なくとも９５％の配列同一性を有するＨＣ－ＦＲ２を含む。別の態様では、ＶＨドメインは、配列番号１６２又は１６３と少なくとも９８％の配列同一性を有するＨＣ－ＦＲ２を含む。
［００１３４］別の態様では、抗ＫＬＫ５抗体は、配列番号１６４に対して少なくとも８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するＨＣ－ＦＲ３を含むＶＨドメインを含む。一態様では、ＶＨドメインは、配列番号１６４と少なくとも９５％の配列同一性を有するＨＣ－ＦＲ３を含む。別の態様では、ＶＨドメインは、配列番号１６４と少なくとも９８％の配列同一性を有するＨＣ－ＦＲ３を含む。
［００１３５］別の態様では、抗ＫＬＫ５抗体は、配列番号１６５に対して少なくとも８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するＨＣ－ＦＲ４を含むＶＨドメインを含む。一態様では、ＶＨドメインは、配列番号１６５と少なくとも９５％の配列同一性を有するＨＣ－ＦＲ４を含む。別の態様では、ＶＨドメインは、配列番号１６５と少なくとも９８％の配列同一性を有するＨＣ－ＦＲ４を含む。
［００１３６］一態様では、抗ＫＬＫ５抗体は、（ａ）配列番号１６６の軽鎖フレームワーク領域１（ＬＣ－ＦＲ１）、（ｂ）配列番号１６７～１６８の軽鎖フレームワーク領域２（ＬＣ－ＦＲ２）、（ｃ）配列番号１６９の軽鎖フレームワーク領域３（ＬＣ－ＦＲ３）、及び（ｄ）配列番号１７０の軽鎖フレームワーク領域４（ＬＣ－ＦＲ４）から選択される１つ又は複数の軽鎖フレームワーク配列を含むＶＬドメインを含む。
［００１３７］別の態様では、抗ＫＬＫ５抗体は、配列番号１６６のＬＣ－ＦＲ１を含むＶＬドメインを含む。別の態様では、抗ＫＬＫ５抗体は、配列番号１６７又は１６８のＬＣ－ＦＲ２を含むＶＬドメインを含む。別の態様では、抗ＫＬＫ５抗体は、配列番号１６９のＬＣ－ＦＲ３を含むＶＬドメインを含む。別の態様では、抗ＫＬＫ５抗体は、配列番号１７０のＬＣ－ＦＲ４を含むＶＬドメインを含む。
［００１３８］別の態様では、抗ＫＬＫ５抗体は、配列番号１６６に対して少なくとも８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するＬＣ－ＦＲ１を含むＶＬドメインを含む。一態様では、ＶＬドメインは、配列番号１６６と少なくとも９５％の配列同一性を有するＬＣ－ＦＲ１を含む。別の態様では、ＶＬドメインは、配列番号１６６と少なくとも９８％の配列同一性を有するＬＣ－ＦＲ１を含む。
［００１３９］別の態様では、抗ＫＬＫ５抗体は、配列番号１６７～１６８に対して少なくとも８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するＬＣ－ＦＲ２を含むＶＬドメインを含む。一態様では、ＶＬドメインは、配列番号１６７又は１６８と少なくとも９５％の配列同一性を有するＬＣ－ＦＲ２を含む。別の態様では、ＶＬドメインは、配列番号１６７又は１６８と少なくとも９８％の配列同一性を有するＬＣ－ＦＲ２を含む。
［００１４０］別の態様では、抗ＫＬＫ５抗体は、配列番号１６９に対して少なくとも８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するＬＣ－ＦＲ３を含むＶＬドメインを含む。一態様では、ＶＬドメインは、配列番号１６９と少なくとも９５％の配列同一性を有するＬＣ－ＦＲ３を含む。別の態様では、ＶＬドメインは、配列番号１６９と少なくとも９８％の配列同一性を有するＬＣ－ＦＲ３を含む。
［００１４１］別の態様では、抗ＫＬＫ５抗体は、配列番号１７０に対して少なくとも８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するＬＣ－ＦＲ４を含むＶＬドメインを含む。一態様では、ＶＬドメインは、配列番号１７０と少なくとも９５％の配列同一性を有するＬＣ－ＦＲ４を含む。別の態様では、ＶＬドメインは、配列番号１７０と少なくとも９８％の配列同一性を有するＬＣ－ＦＲ４を含む。
［００１４２］別の態様では、抗ＫＬＫ５抗体は、配列番号５０、５２、５３、１０５、１０６、又は２０５のＶＨのＣＤＲ配列のうちの１つ又は複数を含む。別の実施態様では、抗ＫＬＫ５抗体は、配列番号５１又は５４～５７のＶＬのＣＤＲ配列のうちの１つ又は複数を含む。別の実施態様では、抗ＫＬＫ５抗体は、配列番号５０、５２、５３、１０５、１０６、又は２０５のＶＨのＣＤＲ配列、及び配列番号５１又は５４～５７のＶＬのＣＤＲ配列を含む。
［００１４３］さらなる態様では、抗ＫＬＫ５抗体は、配列番号５０、５２、５３、１０５、１０６、又は２０５のＶＨドメインのＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、及びＣＤＲ－Ｈ３アミノ酸配列、並びに配列番号５１又は５４～５７のＶＬドメインのＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２及びＣＤＲ－Ｌ３アミノ酸配列を含む。
［００１４４］一態様では、抗ＫＬＫ５抗体は、配列番号５０、５２、５３、１０５、１０６、又は２０５のＶＨドメインの重鎖ＣＤＲアミノ酸配列のうちの１つ又は複数と、配列番号５０、５２、５３、１０５、１０６、又は２０５のＶＨドメインのフレームワークアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％の配列同一性を有するフレームワークとを含む。一態様では、抗ＫＬＫ５抗体は、配列番号５０、５２、５３、１０５、１０６、又は２０５のＶＨドメインの３つの重鎖ＣＤＲアミノ酸配列と、配列番号５０、５２、５３、１０５、１０６、又は２０５のＶＨドメインのフレームワークアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％の配列同一性を有するフレームワークとを含む。一態様では、抗ＫＬＫ５抗体は、配列番号５０、５２、５３、１０５、１０６、又は２０５のＶＨドメインの３つの重鎖ＣＤＲアミノ酸配列と、配列番号５０、５２、５３、１０５、１０６、又は２０５のＶＨドメインのフレームワークアミノ酸配列に対して少なくとも９５％の配列同一性のフレームワークとを含む。別の態様では、抗ＫＬＫ５抗体は、配列番号５０、５２、５３、１０５、１０６、又は２０５のＶＨドメインの３つの重鎖ＣＤＲアミノ酸配列と、配列番号５０、５２、５３、１０５、１０６、又は２０５のＶＨドメインのフレームワークアミノ酸配列に対して少なくとも９８％の配列同一性のフレームワークとを含む。
［００１４５］一態様では、抗ＫＬＫ５抗体は、配列番号５１又は５４～５７のＶＬドメインの軽鎖ＣＤＲアミノ酸配列のうちの１つ又は複数と、配列番号５１又は５４～５７のＶＬドメインのフレームワークアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％の配列同一性を有するフレームワークとを含む。一態様では、抗ＫＬＫ５抗体は、配列番号５１又は５４～５７のＶＬドメインの３つの軽鎖ＣＤＲアミノ酸配列と、配列番号５１又は５４～５７のＶＬドメインのフレームワークアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％の配列同一性を有するフレームワークとを含む。一態様では、抗ＫＬＫ５抗体は、配列番号５１又は５４～５７のＶＬドメインの３つの軽鎖ＣＤＲアミノ酸配列と、配列番号５１又は５４～５７のＶＬドメインのフレームワークアミノ酸配列に対して少なくとも９５％の配列同一性のフレームワークとを含む。別の態様では、抗ＫＬＫ５抗体は、配列番号５１又は５４～５７のＶＬドメインの３つの軽鎖ＣＤＲアミノ酸配列と、配列番号５０、５２、５３、１０５、１０６、又は２０５のＶＨドメインのフレームワークアミノ酸配列に対して少なくとも特に少なくとも９８％の配列同一性のフレームワークとを含む。
［００１４６］一態様では、抗ＫＬＫ５抗体は、（ａ）配列番号３９又は１０７のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１；（ｂ）配列番号４０又は４１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２；（ｃ）配列番号４２又は２０４のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３；（ｄ）配列番号４３又は４４のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１；（ｅ）配列番号４５のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２；及び（ｆ）配列番号４６～４９のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３、並びに配列番号５０、５２、５３、１０５、１０６、又は２０５のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又は１００％の配列同一性を有するＶＨドメイン、並びに配列番号５１又は５４～６７のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又は１００％の配列同一性を有するＶＬドメインを含む。一態様では、ＶＨドメインは、配列番号５０、５２、５３、１０５、１０６、又は２０５のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有する。一態様では、ＶＬドメインは、配列番号５１又は５４～６７のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有する。
［００１４７］一態様では、抗ＫＬＫ５抗体は、（ａ）配列番号３９又は１０７のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１；（ｂ）配列番号４０又は４１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２；（ｃ）配列番号４２又は２０４のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３；（ｄ）配列番号４３又は４４のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１；（ｅ）配列番号４５のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２；及び（ｆ）配列番号４６～４９のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３、並びに配列番号５０、５２、５３、１０５、１０６、及び２０５から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又は１００％の配列同一性を有するＶＨドメイン、並びに配列番号５１及び５４～６７から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又は１００％の配列同一性を有するＶＬドメインを含み、ここで、該抗体はＫＬＫ５に特異的に結合する。一態様では、ＶＨドメインは、配列番号５０、５２、５３、１０５、１０６、又は２０５のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有する。一態様では、ＶＬドメインは、配列番号５１及び５４～６７から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有する。一態様では、配列番号５０、５２、５３、１０５、１０６、及び２０５から選択されるＶＨ配列と、配列番号５１及び５４～６７から選択されるＶＬ配列とを含む抗体の解離定数（ＫＤ）と比較した場合、最大１０倍減少又は最大１０倍増加した解離定数（ＫＤ）を有するＫＬＫ５に結合する。
［００１４８］別の態様では、抗ＫＬＫ５抗体は、配列番号５０、５２、５３、１０５、１０６、及び２０５から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又は１００％の配列同一性を有する重鎖可変ドメイン（ＶＨ）配列を含む。一態様では、抗ＫＬＫ５抗体は、配列番号５０、５２、５３、１０５、１０６、及び２０５から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を重鎖可変ドメイン（ＶＨ）配列を含む。特定の態様では、少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の同一性を有するＶＨ配列は、参照配列に対して置換（例えば保存的置換）、挿入又は欠失を含むが、その配列を含む抗ＫＬＫ５抗体は、ＫＬＫ５に結合する能力を保持する。特定の態様では、配列番号５０、５２、５３、１０５、１０６、又は２０５において合計１～１０個のアミノ酸が置換、挿入及び／又は欠失されている。特定の態様では、置換、挿入、又は欠失は、ＣＤＲの外側の領域（すなわち、ＦＲ）で起こる。任意に、抗ＫＬＫ５抗体は、配列番号５０、５２、５３、１０５、１０６、又は２０５のＶＨ配列を含み、これにはその配列の翻訳後修飾が含まれる。特定の態様では、ＶＨは、（ａ）配列番号３９又は１０７のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号４０又は４１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２、及び（ｃ）配列番号４２又は２０４のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３から選択される、１つ、２つ又は３つのＣＤＲを含む。別の態様では、抗ＫＬＫ５抗体が提供され、ここで該抗体は、配列番号５１又は５４～６７のアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又は１００％の配列同一性を有する軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）配列を含む。一態様では、抗ＫＬＫ５抗体は、配列番号５１又は５４～６７のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有する軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）配列を含む。特定の態様では、少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の同一性を有するＶＬ配列は、参照配列に対して置換（例えば保存的置換）、挿入又は欠失を含むが、その配列を含む抗ＫＬＫ５抗体は、ＫＬＫ５に結合する能力を保持する。特定の態様では、配列番号５１又は５４～６７において合計１～１０個のアミノ酸が置換、挿入及び／又は欠失されている。特定の態様では、置換、挿入、又は欠失は、ＣＤＲの外側の領域（すなわち、ＦＲ）で起こる。任意に、抗ＫＬＫ５抗体は、配列番号５１及び５４～６７から選択されるＶＬ配列を含み、これにはその配列の翻訳後修飾が含まれる。特定の態様では、ＶＬは、（ａ）配列番号４３又は４４のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１、（ｂ）配列番号４５のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２、及び（ｃ）配列番号４６～４９から選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３から選択される、１つ、２つ又は３つのＣＤＲを含む。
［００１４９］別の態様では、抗ＫＬＫ５抗体が提供され、ここで該抗体は、上で提供される態様のいずれかにおけるようなＶＨ配列、及び上で提供される態様のいずれかにおけるようなＶＬ配列を含む。一態様では、抗体は、配列番号５０、５２、５３、１０５、１０６又は２０５、及び配列番号５１又は５４～６７のＶＨ配列及びＶＬ配列をそれぞれ含み、これらにはそれらの配列の翻訳後修飾が含まれる。
［００１５０］さらなる態様では、本発明は、本明細書で提供される抗ＫＬＫ５抗体と同じエピトープに結合する抗体を提供する。例えば、特定の態様では、配列番号５０、５２、５３、１０５、１０６、及び２０５から選択されるＶＨ配列及び配列番号５１及び５４～６７から選択されるＶＬ配列を含む抗ＫＬＫ５抗体と同じエピトープに結合する抗体が提供される。
［００１５１］本発明のさらなる態様では、上記態様のいずれかによる抗ＫＬＫ５抗体は、キメラ抗体、ヒト化抗体、又はヒト抗体を含むモノクローナル抗体である。一態様では、抗ＫＬＫ５抗体は、抗体断片、例えば、Ｆｖ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、ｓｃＦｖ、ダイアボディ、又はＦ（ａｂ’）２断片である。別の態様では、抗体は、完全長抗体、例えば、本明細書において定義されるインタクトなＩｇＧ１抗体又は他の抗体クラス若しくはアイソタイプである。
［００１５２］さらなる態様では、上記の態様のいずれかによる抗ＫＬＫ５抗体は、以下のセクション１～８に記載されているように、任意の特徴を単独で又は組み合わせて組み込んでもよい。
抗体ｈｕ．９Ｈ５－Ｈ１４Ｌ４及びそのバリアント
［００１５３］一態様では、本発明は、（ａ）配列番号６８のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１；（ｂ）配列番号６９又は７０のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２；（ｃ）配列番号７１又は７２のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３；（ｄ）配列番号７３のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１；（ｅ）配列番号７４のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２；及び（ｆ）配列番号７５～７８から選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３から選択される少なくとも１つ、少なくとも２つ、少なくとも３つ、少なくとも４つ、少なくとも５つ、又は６つ全てのＣＤＲを含む抗ＫＬＫ５抗体を提供する。
［００１５４］一態様では、本発明は、（ａ）配列番号６８のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１；（ｂ）配列番号７０のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２；及び（ｃ）配列番号７２のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３から選択される少なくとも１つ、少なくとも２つ、又は３つ全てのＶＨ ＣＤＲ配列を含む抗体を提供する。さらなる態様では、抗体は、（ａ）配列番号６８のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号７０のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２、及び（ｃ）配列番号７２のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３を含む。
［００１５５］別の態様では、本発明は、（ａ）配列番号７３のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１、（ｂ）配列番号７４のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２、及び（ｃ）配列番号７６のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３から選択される、少なくとも１つ、少なくとも２つ、又は３つ全てのＶＬ ＣＤＲ配列を含む抗体を提供する。一態様では、抗体は、（ａ）配列番号７３のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１；（ｂ）配列番号７４のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２；及び（ｃ）配列番号７６のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３を含む。
［００１５６］別の態様では、本発明の抗体は、（ａ）（ｉ）配列番号６８のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、（ｉｉ）配列番号６９又は７０のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２、及び（ｉｉｉ）配列番号７１又は７２のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３から選択される少なくとも１つ、少なくとも２つ、又は３つ全てのＶＨ ＣＤＲ配列を含むＶＨドメインと；（ｂ）（ｉ）配列番号７３のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１、（ｉｉ）配列番号７４のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２、及び（ｃ）配列番号７５～７８から選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３から選択される少なくとも１つ、少なくとも２つ、又は３つ全てのＶＬ ＣＤＲ配列を含むＶＬドメインとを含む。
［００１５７］別の態様では、本発明は、（ａ）配列番号６８のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１；（ｂ）配列番号７０のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２；（ｃ）配列番号７２のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３；（ｄ）配列番号７３のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１；（ｅ）配列番号７４のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２；及び（ｆ）配列番号７６のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３を含む抗体を提供する。
［００１５８］本明細書で提供される態様のいずれかにおいて、抗ＫＬＫ５抗体はヒト化されている。一態様では、抗ＫＬＫ５抗体は、アクセプターヒトフレームワーク、例えば、ヒト免疫グロブリンフレームワーク又はヒトコンセンサスフレームワークをさらに含む。
［００１５９］一態様では、抗ＫＬＫ５抗体は、（ａ）配列番号１７１の重鎖フレームワーク領域１（ＨＣ－ＦＲ１）、（ｂ）配列番号１７２又は１７３の重鎖フレームワーク領域２（ＨＣ－ＦＲ２）、（ｃ）配列番号１７４の重鎖フレームワーク領域３（ＨＣ－ＦＲ３）、及び（ｄ）配列番号１７５の重鎖フレームワーク領域４（ＨＣ－ＦＲ４）から選択される１つ又は複数の重鎖フレームワーク配列を含むＶＨドメインを含む。
［００１６０］別の態様では、抗ＫＬＫ５抗体は、配列番号１７１のＨＣ－ＦＲ１を含むＶＨドメインを含む。別の態様では、抗ＫＬＫ５抗体は、配列番号１７２又は１７３のＨＣ－ＦＲ２を含むＶＨドメインを含む。別の態様では、抗ＫＬＫ５抗体は、配列番号１７４のＨＣ－ＦＲ３を含むＶＨドメインを含む。別の態様では、抗ＫＬＫ５抗体は、配列番号１７５のＨＣ－ＦＲ４を含むＶＨドメインを含む。
［００１６１］別の態様では、抗ＫＬＫ５抗体は、配列番号１７１と少なくとも８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するＨＣ－ＦＲ１を含むＶＨドメインを含む。一態様では、ＶＨドメインは、配列番号１７１と少なくとも９５％の配列同一性を有するＨＣ－ＦＲ１を含む。別の態様では、ＶＨドメインは、配列番号１７１と少なくとも９８％の配列同一性を有するＨＣ－ＦＲ１を含む。
［００１６２］別の態様では、抗ＫＬＫ５抗体は、配列番号１７２又は１７３に対して少なくとも８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するＨＣ－ＦＲ２を含むＶＨドメインを含む。一態様では、ＶＨドメインは、配列番号１７２又は１７３と少なくとも９５％の配列同一性を有するＨＣ－ＦＲ２を含む。別の態様では、ＶＨドメインは、配列番号１７２又は１７３と少なくとも９８％の配列同一性を有するＨＣ－ＦＲ２を含む。
［００１６３］別の態様では、抗ＫＬＫ５抗体は、配列番号１７４に対して少なくとも８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するＨＣ－ＦＲ３を含むＶＨドメインを含む。一態様では、ＶＨドメインは、配列番号１７４と少なくとも９５％の配列同一性を有するＨＣ－ＦＲ３を含む。別の態様では、ＶＨドメインは、配列番号１７４と少なくとも９８％の配列同一性を有するＨＣ－ＦＲ３を含む。
［００１６４］別の態様では、抗ＫＬＫ５抗体は、配列番号１７５に対して少なくとも８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するＨＣ－ＦＲ４を含むＶＨドメインを含む。一態様では、ＶＨドメインは、配列番号１７５と少なくとも９５％の配列同一性を有するＨＣ－ＦＲ４を含む。別の態様では、ＶＨドメインは、配列番号１７５と少なくとも９８％の配列同一性を有するＨＣ－ＦＲ４を含む。
［００１６５］一態様では、抗ＫＬＫ５抗体は、（ａ）配列番号１７６の軽鎖フレームワーク領域１（ＬＣ－ＦＲ１）、（ｂ）配列番号１７７又は１７８の軽鎖フレームワーク領域２（ＬＣ－ＦＲ２）、（ｃ）配列番号１７９の軽鎖フレームワーク領域３（ＬＣ－ＦＲ３）、及び（ｄ）配列番号１８０の軽鎖フレームワーク領域４（ＬＣ－ＦＲ４）から選択される１つ又は複数の軽鎖フレームワーク配列を含むＶＬドメインを含む。
［００１６６］別の態様では、抗ＫＬＫ５抗体は、配列番号１７６のＬＣ－ＦＲ１を含むＶＬドメインを含む。別の態様では、抗ＫＬＫ５抗体は、配列番号１７７又は１７８のＬＣ－ＦＲ２を含むＶＬドメインを含む。別の態様では、抗ＫＬＫ５抗体は、配列番号１７９のＬＣ－ＦＲ３を含むＶＬドメインを含む。別の態様では、抗ＫＬＫ５抗体は、配列番号１８０のＬＣ－ＦＲ４を含むＶＬドメインを含む。
［００１６７］別の態様では、抗ＫＬＫ５抗体は、配列番号１７６に対して少なくとも８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するＬＣ－ＦＲ１を含むＶＬドメインを含む。一態様では、ＶＬドメインは、配列番号１７６と少なくとも９５％の配列同一性を有するＬＣ－ＦＲ１を含む。別の態様では、ＶＬドメインは、配列番号１７６と少なくとも９８％の配列同一性を有するＬＣ－ＦＲ１を含む。
［００１６８］別の態様では、抗ＫＬＫ５抗体は、配列番号１７７又は１７８に対して少なくとも８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するＬＣ－ＦＲ２を含むＶＬドメインを含む。一態様では、ＶＬドメインは、配列番号１７７又は１７８と少なくとも９５％の配列同一性を有するＬＣ－ＦＲ２を含む。別の態様では、ＶＬドメインは、配列番号１７７又は１７８と少なくとも９８％の配列同一性を有するＬＣ－ＦＲ２を含む。
［００１６９］別の態様では、抗ＫＬＫ５抗体は、配列番号１７９に対して少なくとも８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するＬＣ－ＦＲ３を含むＶＬドメインを含む。一態様では、ＶＬドメインは、配列番号１７９と少なくとも９５％の配列同一性を有するＬＣ－ＦＲ３を含む。別の態様では、ＶＬドメインは、配列番号１７９と少なくとも９８％の配列同一性を有するＬＣ－ＦＲ３を含む。
［００１７０］別の態様では、抗ＫＬＫ５抗体は、配列番号１８０に対して少なくとも８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するＬＣ－ＦＲ４を含むＶＬドメインを含む。一態様では、ＶＬドメインは、配列番号１８０と少なくとも９５％の配列同一性を有するＬＣ－ＦＲ１を含む。別の態様では、ＶＬドメインは、配列番号１８０と少なくとも９８％の配列同一性を有するＬＣ－ＦＲ１を含む。
［００１７１］別の態様では、抗ＫＬＫ５抗体は、配列番号７９又は８１～８７のＶＨのＣＤＲ配列のうちの１つ又は複数を含む。別の実施態様では、抗ＫＬＫ５抗体は、配列番号８０又は８８～９４のＶＬのＣＤＲ配列のうちの１つ又は複数を含む。別の実施態様では、抗ＫＬＫ５抗体は、配列番号７９又は８１～８７のＶＨのＣＤＲ配列、及び配列番号８０又は８８～９４のＶＬのＣＤＲ配列を含む。
［００１７２］さらなる態様では、抗ＫＬＫ５抗体は、配列番号７９又は８１～８７のＶＨドメインのＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、及びＣＤＲ－Ｈ３アミノ酸配列、並びに配列番号８０又は８８～９４のＶＬドメインのＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２及びＣＤＲ－Ｌ３アミノ酸配列を含む。
［００１７３］一態様では、抗ＫＬＫ５抗体は、配列番号７９又は８１～８７のＶＨドメインの重鎖ＣＤＲアミノ酸配列のうちの１つ又は複数と、配列番号７９又は８１～８７のＶＨドメインのフレームワークアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％の配列同一性を有するフレームワークとを含む。一態様では、抗ＫＬＫ５抗体は、配列番号７９又は８１～８７のＶＨドメインの３つの重鎖ＣＤＲアミノ酸配列と、配列番号７９又は８１～８７のＶＨドメインのフレームワークアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％の配列同一性を有するフレームワークとを含む。一態様では、抗ＫＬＫ５抗体は、配列番号７９又は８１～８７のＶＨドメインの３つの重鎖ＣＤＲアミノ酸配列と、配列番号７９又は８１～８７のＶＨドメインのフレームワークアミノ酸配列に対して少なくとも９５％の配列同一性のフレームワークとを含む。別の態様では、抗ＫＬＫ５抗体は、配列番号７９又は８１～８７のＶＨドメインの３つの重鎖ＣＤＲアミノ酸配列と、配列番号７９又は８１～８７のＶＨドメインのフレームワークアミノ酸配列に対して少なくとも９８％の配列同一性のフレームワークとを含む。
［００１７４］一態様では、抗ＫＬＫ５抗体は、配列番号８０又は８８～９４のＶＬドメインの軽鎖ＣＤＲアミノ酸配列のうちの１つ又は複数と、配列番号８０又は８８～９４のＶＬドメインのフレームワークアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％の配列同一性を有するフレームワークとを含む。一態様では、抗ＫＬＫ５抗体は、配列番号８０又は８８～９４のＶＬドメインの３つの軽鎖ＣＤＲアミノ酸配列と、配列番号８０又は８８～９４のＶＬドメインのフレームワークアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％の配列同一性を有するフレームワークとを含む。一態様では、抗ＫＬＫ５抗体は、配列番号８０又は８８～９４のＶＬドメインの３つの軽鎖ＣＤＲアミノ酸配列と、配列番号８０又は８８～９４のＶＬドメインのフレームワークアミノ酸配列に対して少なくとも９５％の配列同一性のフレームワークとを含む。別の態様では、抗ＫＬＫ５抗体は、配列番号８０又は８８～９４のＶＬドメインの３つの軽鎖ＣＤＲアミノ酸配列と、配列番号８０又は８８～９４のＶＨドメインのフレームワークアミノ酸配列に対して少なくとも特に少なくとも９８％の配列同一性のフレームワークとを含む。
［００１７５］一態様では、抗ＫＬＫ５抗体は、（ａ）配列番号６８のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１；（ｂ）配列番号６９又は７０のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２；（ｃ）配列番号７１又は７２のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３；（ｄ）配列番号７３のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１；（ｅ）配列番号７４のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２；及び（ｆ）配列番号７５～７８から選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３、並びに配列番号７９又は８１～８７のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又は１００％の配列同一性を有するＶＨドメイン、並びに配列番号８０又は８８～９４のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又は１００％の配列同一性を有するＶＬドメインを含む。一態様では、ＶＨドメインは、配列番号７９又は８１～８７のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有する。一態様では、ＶＬドメインは、配列番号８０又は８８～９４のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有する。
［００１７６］一態様では、抗ＫＬＫ５抗体は、（ａ）配列番号６８のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１；（ｂ）配列番号６９又は７０のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２；（ｃ）配列番号７１～７２のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３；（ｄ）配列番号７３のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１；（ｅ）配列番号７４のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２；及び（ｆ）配列番号７５～７８から選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３、並びに配列番号７９又は８１～８７のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又は１００％の配列同一性を有するＶＨドメイン、並びに配列番号８０又は８８～９４のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又は１００％の配列同一性を有するＶＬドメインを含み、ここで、該抗体はＫＬＫ５に特異的に結合する。一態様では、ＶＨドメインは、配列番号７９又は８１～８７のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有する。一態様では、ＶＬドメインは、配列番号８０又は８８～９４のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有する。一態様では、配列番号７９又は８１～８７のＶＨ配列及び配列番号８０又は８８～９４のＶＬ配列を含む抗体の解離定数（ＫＤ）と比較した場合、最大１０倍減少又は最大１０倍増加した解離定数（ＫＤ）を有するＫＬＫ５に結合する。
［００１７７］別の態様では、抗ＫＬＫ５抗体は、配列番号７９又は８１～８７のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又は１００％の配列同一性を有する重鎖可変ドメイン（ＶＨ）配列を含む。一態様では、抗ＫＬＫ５抗体は、配列番号７９又は８１～８７のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有する重鎖可変ドメイン（ＶＨ）配列を含む。特定の態様では、少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の同一性を有するＶＨ配列は、参照配列に対して置換（例えば保存的置換）、挿入又は欠失を含むが、その配列を含む抗ＫＬＫ５抗体は、ＫＬＫ５に結合する能力を保持する。特定の態様では、配列番号７９又は８１～８７において合計１～１０個のアミノ酸が置換、挿入及び／又は欠失されている。特定の態様では、置換、挿入、又は欠失は、ＣＤＲの外側の領域（すなわち、ＦＲ）で起こる。任意に、抗ＫＬＫ５抗体は、配列番号７９又は８１～８７のＶＨ配列を含み、これにはその配列の翻訳後修飾が含まれる。特定の態様では、ＶＨは、（ａ）配列番号６８のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号６９又は７０のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２、及び（ｃ）配列番号７１又は７２のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３から選択される、１つ、２つ又は３つのＣＤＲを含む。別の態様では、抗ＫＬＫ５抗体が提供され、ここで該抗体は、配列番号８０又は８８～９４のアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又は１００％の配列同一性を有する軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）配列を含む。一態様では、抗ＫＬＫ５抗体は、配列番号８０又は８８～９４のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有する軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）配列を含む。特定の態様では、少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の同一性を有するＶＬ配列は、参照配列に対して置換（例えば保存的置換）、挿入又は欠失を含むが、その配列を含む抗ＫＬＫ５抗体は、ＫＬＫ５に結合する能力を保持する。特定の態様では、配列番号８０又は８８～９４において合計１～１０個のアミノ酸が置換、挿入及び／又は欠失されている。特定の態様では、置換、挿入、又は欠失は、ＣＤＲの外側の領域（すなわち、ＦＲ）で起こる。任意に、抗ＫＬＫ５抗体は、配列番号８０又は８８～９４のＶＬ配列を含み、これにはその配列の翻訳後修飾が含まれる。特定の態様では、ＶＬは、（ａ）配列番号７３のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１、（ｂ）配列番号７４のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２、及び（ｃ）配列番号７５～７８から選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３から選択される、１つ、２つ又は３つのＣＤＲを含む。
［００１７８］別の態様では、抗ＫＬＫ５抗体が提供され、ここで該抗体は、上で提供される態様のいずれかにおけるようなＶＨ配列、及び上で提供される態様のいずれかにおけるようなＶＬ配列を含む。一態様では、抗体は、配列番号７９又は８１～８７及び配列番号８０又は８８～９４のＶＨ配列及びＶＬ配列をそれぞれ含み、これらにはそれらの配列の翻訳後修飾が含まれる。
［００１７９］さらなる態様では、本発明は、本明細書で提供される抗ＫＬＫ５抗体と同じエピトープに結合する抗体を提供する。例えば、特定の態様では、配列番号７９又は８１～７９のＶＨ配列及び配列番号８０又は８８～９４のＶＬ配列を含む抗ＫＬＫ５抗体と同じエピトープに結合する抗体が提供される。
［００１８０］本発明のさらなる態様では、上記態様のいずれかによる抗ＫＬＫ５抗体は、キメラ抗体、ヒト化抗体、又はヒト抗体を含むモノクローナル抗体である。一態様では、抗ＫＬＫ５抗体は、抗体断片、例えば、Ｆｖ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、ｓｃＦｖ、ダイアボディ、又はＦ（ａｂ’）２断片である。別の態様では、抗体は、完全長抗体、例えば、本明細書において定義されるインタクトなＩｇＧ１抗体又は他の抗体クラス若しくはアイソタイプである。
［００１８１］さらなる態様では、上記の態様のいずれかによる抗ＫＬＫ５抗体は、以下のセクション１～８に記載されているように、任意の特徴を単独で又は組み合わせて組み込んでもよい。
Ｃ．例示的な抗ＫＬＫ５／ＫＬＫ７多重特異性抗体
［００１８２］一態様では、本発明は、ＫＬＫ５及びＫＬＫ７の両方に結合する多重特異性抗体を提供する。いくつかの実施態様では、ＫＬＫ５及びＫＬＫ７の両方に結合する二重特異性抗体が提供される。いくつかの実施態様では、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体は、ＫＬＫ５プロテアーゼ活性とＫＬＫ７プロテアーゼ活性の両方を阻害する。いくつかの実施態様では、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体は、表面プラズモン共鳴によって測定した場合、６０ｐＭ未満、３０ｐＭ未満、２０ｐＭ未満、１０ｐＭ未満、又は５ｐＭ未満のＫＤでＫＬＫ５に結合する。いくつかの実施態様では、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体は、表面プラズモン共鳴によって測定した場合、２０ｐＭ未満、１０ｐＭ未満、又は９ｐＭ未満、又は８ｐＭ未満、又は７ｐＭ未満、又は６ｐＭ未満、又は５ｐＭ未満、又は３ｐＭ未満、又は２ｐＭ未満、又は１ｐＭ未満のＫＤでＫＬＫ７に結合する。いくつかの実施態様では、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体は、表面プラズモン共鳴によって測定した場合、６０ｐＭ以下、３０ｐＭ以下、２０ｐＭ以下、１０ｐＭ以下、又は５ｐＭ以下のＫＤでＫＬＫ５に結合する。いくつかの実施態様では、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体は、表面プラズモン共鳴によって測定した場合、２０ｐＭ以下、１０ｐＭ以下、又は９ｐＭ以下、又は８ｐＭ以下、又は７ｐＭ以下、又は６ｐＭ以下、又は５ｐＭ以下、又は３ｐＭ以下、又は２ｐＭ以下、又は１ｐＭ以下のＫＤでＫＬＫ７に結合する。
［００１８３］いくつかの実施態様では、抗ＫＬＫ５／ＫＬＫ７多重特異性抗体は、ヒトＫＬＫ７プロテアーゼ活性を阻害し、且つヒトＫＬＫ５プロテアーゼ活性を阻害する。いくつかの実施態様では、抗ＫＬＫ５／ＫＬＫ７多重特異性抗体は、アミノ酸配列ＲＰＫＰＶＥ－Ｎｖａｌ－ＷＲＫ（配列番号１２１）（Ｎｖａｌはノルバリンである）を含む基質のヒトＫＬＫ７媒介切断を、５ｎＭ未満、又は３ｎＭ未満、又は２ｎＭ未満、又は１ｎＭ未満のＩＣ５０で阻害する。いくつかの実施態様では、抗ＫＬＫ５／ＫＬＫ７多重特異性抗体は、５ｎＭ未満、又は３ｎＭ未満、又は２ｎＭ未満、又は１ｎＭ未満のＩＣ５０で、基質Ｂｏｃ－Ｖａｌ－Ｐｒｏ－Ａｒｇ－ＡＭＣのヒトＫＬＫ５媒介切断を阻害する。いくつかの実施態様では、抗ＫＬＫ５／ＫＬＫ７多重特異性抗体は、アミノ酸配列ＲＰＫＰＶＥ－Ｎｖａｌ－ＷＲＫ（配列番号１２１）（Ｎｖａｌはノルバリンである）を含む基質のヒトＫＬＫ７媒介切断を、５ｎＭ以下、又は３ｎＭ以下、又は２ｎＭ以下、又は１ｎＭ以下のＩＣ５０で阻害する。いくつかの実施態様では、抗ＫＬＫ５／ＫＬＫ７多重特異性抗体は、５ｎＭ以下、又は３ｎＭ以下、又は２ｎＭ以下、又は１ｎＭ以下のＩＣ５０で、基質Ｂｏｃ－Ｖａｌ－Ｐｒｏ－Ａｒｇ－ＡＭＣのヒトＫＬＫ５媒介切断を阻害する。いくつかの実施態様では、ヒトＫＬＫ５に対する多重特異性抗体のＫＤ及びヒトＫＬＫ７に対する抗体のＫＤは、互いの３倍以内、又は２．５倍以内、又は２倍以内、又は１．５倍以内である。
［００１８４］いくつかの態様では、ＫＬＫ５及びＫＬＫ７の両方に結合する多重特異性抗体は、ＫＬＫ７に結合する第１の結合ドメイン及びＫＬＫ５に結合する第２の結合ドメインを含む。
［００１８５］いくつかの実施態様では、ＫＬＫ５及びＫＬＫ７の両方に結合する多重特異性抗体は、ヒトＫＬＫ５に結合すると、ヒトＫＬＫ５の構造変化をもたらし、この構造変化は、アロステリックにヒトＫＬＫ５の基質結合部位及び／又は活性部位の破壊をもたらす。いくつかの実施態様では、ＫＬＫ５及びＫＬＫ７の両方に結合する多重特異性抗体は、ヒトＫＬＫ７に結合すると、ヒトＫＬＫ７の構造変化をもたらし、この構造変化は、アロステリックにヒトＫＬＫ７の基質結合部位及び／又は活性部位の破壊をもたらす。
［００１８６］いくつかの実施態様では、第１の結合ドメインは、本明細書に記載の抗ＫＬＫ７抗体結合ドメインを含む。例えば、いくつかの実施態様では、第１の結合ドメインは、（ａ）配列番号７のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１；（ｂ）配列番号８のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２；（ｃ）配列番号９のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３；（ｄ）配列番号１０のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１；（ｅ）配列番号１１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２；及び（ｆ）配列番号１２のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３を含む。さらなる非限定的な例として、いくつかの実施態様では、第１の結合ドメインは、（ａ）配列番号７のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１；（ｂ）配列番号８のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２；（ｃ）配列番号９のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３；（ｄ）配列番号１０のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１；（ｅ）配列番号１１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２；及び（ｆ）配列番号１２のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３、並びに配列番号１３、１５～３０、及び２０２から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又は１００％の配列同一性を有するＶＨドメイン、並びに配列番号１４、３１～３８、及び２０３から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又は１００％の配列同一性を有するＶＬドメインを含む。いくつかの実施態様では、第１の結合ドメインは、それぞれ、配列番号２９及び配列番号３２のＶＨ配列及びＶＬ配列を含み、それらの配列の翻訳後修飾を含む。いくつかの実施態様では、第１の結合ドメインは、それぞれ、配列番号３０及び配列番号３８のＶＨ配列及びＶＬ配列を含み、それらの配列の翻訳後修飾を含む。いくつかの実施態様では、第１の結合ドメインは、それぞれ、配列番号２０２及び配列番号２０３のＶＨ配列及びＶＬ配列を含み、それらの配列の翻訳後修飾を含む。
［００１８７］いくつかの実施態様では、第２の結合ドメインは、本明細書に記載の抗ＫＬＫ５抗体結合ドメインを含む。例えば、いくつかのそのような実施態様では、第２の結合ドメインは、（ａ）配列番号３９及び１０７から選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号４０及び４１から選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２、及び（ｃ）配列番号４２及び２０４から選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３を含む重鎖可変ドメイン（ＶＨ）、並びに（ｄ）配列番号４３及び４４から選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１、（ｅ）配列番号４５のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２、及び（ｆ）配列番号４６～４９から選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３を含む軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）を含む。さらなる非限定的な例として、いくつかの実施態様では、第２の結合ドメインは、（ａ）配列番号３９及び１０７から選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１；（ｂ）配列番号４０及び４１から選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２；（ｃ）配列番号４２及び２０４から選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３；（ｄ）配列番号４３及び４４から選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１；（ｅ）配列番号４５のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２；及び（ｆ）配列番号４６～４９から選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３、並びに配列番号５０、５２、５３、１０５、１０６、及び２０５から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又は１００％の配列同一性を有するＶＨドメイン、並びに配列番号５１、及び５４～６７から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又は１００％の配列同一性を有するＶＬドメインを含む。いくつかの実施態様では、第２の結合ドメインは、それぞれ、配列番号５２及び配列番号５５のＶＨ配列及びＶＬ配列を含み、それらの配列の翻訳後修飾を含む。いくつかの実施態様では、第２の結合ドメインは、それぞれ、配列番号５３及び配列番号６２のＶＨ配列及びＶＬ配列を含み、それらの配列の翻訳後修飾を含む。いくつかの実施態様では、第２の結合ドメインは、それぞれ、配列番号２０５及び配列番号６２のＶＨ配列及びＶＬ配列を含み、それらの配列の翻訳後修飾を含む。
［００１８８］いくつかの実施態様では、第２の結合ドメインは、（ａ）配列番号６８のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号６９及び７０から選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２、及び（ｃ）配列番号７１及び７２から選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３を含む重鎖可変ドメイン（ＶＨ）並びに（ｄ）配列番号７３のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１、（ｅ）配列番号７４のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２、及び（ｆ）配列番号７５～７８から選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３を含む軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）を含む。さらなる非限定的な例として、いくつかの実施態様では、第２の結合ドメインは、（ａ）配列番号６８のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１；（ｂ）配列番号６９及び７０から選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２；（ｃ）配列番号７１及び７２から選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３；（ｄ）配列番号７３のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１；（ｅ）配列番号７４のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２；及び（ｆ）配列番号７５～７８から選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３、並びに配列番号７９及び８１～８７から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又は１００％の配列同一性を有するＶＨドメイン、並びに配列番号８０及び８８～９４から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又は１００％の配列同一性を有するＶＬドメインを含む。いくつかの実施態様では、第２の結合ドメインは、それぞれ、配列番号８３及び配列番号８８のＶＨ配列及びＶＬ配列を含み、それらの配列の翻訳後修飾を含む。いくつかの実施態様では、第２の結合ドメインは、それぞれ、配列番号８７及び配列番号９２のＶＨ配列及びＶＬ配列を含み、それらの配列の翻訳後修飾を含む。
［００１８９］いくつかの実施態様では、多重特異性抗体（二重特異性抗体など）が提供され、ここで、第１の結合ドメインはＫＬＫ７に結合し、第２の結合ドメインはＫＬＫ５に結合し、第１の結合ドメインは本明細書に提供される抗ＫＬＫ７抗体結合ドメインであり、第２の結合ドメインは本明細書に提供される抗ＫＬＫ５結合ドメインである。いくつかの実施態様では、第１の結合ドメインは
［００１９０］いくつかの実施態様では、第１の結合ドメインは、（ａ）配列番号７のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１；（ｂ）配列番号８のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２；（ｃ）配列番号９又は２００のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３；（ｄ）配列番号１０又は２０１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１；（ｅ）配列番号１１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２；及び（ｆ）配列番号１２のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３を含み；第２の結合ドメインは、（ａ）配列番号３９及び１０７から選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号４０及び４１から選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２、及び（ｃ）配列番号４２及び２０４から選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３、並びに（ｄ）配列番号４３及び４４から選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１、（ｅ）配列番号４５のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２、及び（ｆ）配列番号４６～４９から選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３を含む軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）を含む。いくつかの実施態様では、第１の結合ドメインは、（ａ）配列番号７のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１；（ｂ）配列番号８のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２；（ｃ）配列番号９又は２００のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３；（ｄ）配列番号１０又は２０１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１；（ｅ）配列番号１１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２；及び（ｆ）配列番号１２のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３を含み；第２の結合ドメインは、（ａ）配列番号６８のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号６９及び７０から選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２、及び（ｃ）配列番号７１及び７２から選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３、並びに（ｄ）配列番号７３のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１、（ｅ）配列番号７４のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２、及び（ｆ）配列番号７５～７８から選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３を含む軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）を含む。
［００１９１］いくつかの実施態様では、第１の結合ドメインは、（ａ）配列番号７のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１；（ｂ）配列番号８のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２；（ｃ）配列番号９のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３；（ｄ）配列番号１０のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１；（ｅ）配列番号１１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２；及び（ｆ）配列番号１２のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３、並びに配列番号１３、１５～３０、及び２０２から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又は１００％の配列同一性を有するＶＨドメイン、並びに配列番号１４、３１～３８、及び２０３から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又は１００％の配列同一性を有するＶＬドメインを含み；第２の結合ドメインは、（ａ）配列番号３９及び１０７から選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号４０及び４１から選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２、及び（ｃ）配列番号４２又は２０４のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３、並びに（ｄ）配列番号４３及び４４から選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１、（ｅ）配列番号４５のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２、及び（ｆ）配列番号４６～４９から選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３を含む軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）、並びに配列番号５０、５２、５３、１０５、１０６、及び２０５から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又は１００％の配列同一性を有するＶＨドメイン、並びに配列番号５１及び５４～６７から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又は１００％の配列同一性を有するＶＬドメインを含む。
［００１９２］いくつかの実施態様では、第１の結合ドメインは、（ａ）配列番号７のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１；（ｂ）配列番号８のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２；（ｃ）配列番号９のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３；（ｄ）配列番号１０のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１；（ｅ）配列番号１１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２；及び（ｆ）配列番号１２のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３、並びに配列番号１３、１５～３０、及び２０２から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又は１００％の配列同一性を有するＶＨドメイン、並びに配列番号１４、３１～３８、及び２０３から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又は１００％の配列同一性を有するＶＬドメインを含み；第２の結合ドメインは、（ａ）配列番号６８のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号６９及び７０から選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２、及び（ｃ）配列番号７１及び７２から選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３、並びに（ｄ）配列番号７３のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１、（ｅ）配列番号７４のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２、及び（ｆ）配列番号７５～７８から選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３を含む軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）、並びに配列番号７９及び８１～８７から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又は１００％の配列同一性を有するＶＨドメイン、並びに配列番号８０及び８８～９４から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又は１００％の配列同一性を有するＶＬドメインを含む。
いくつかの実施態様では、二重特異性抗ＫＬＫ５／ＫＬＫ７抗体は、第１の結合ドメイン及び第２の結合ドメインを含み、第１の結合ドメインはヒトＫＬＫ７に結合し、第２の結合ドメインはヒトＫＬＫ５に結合し、第１の結合ドメインは、（ａ）配列番号７のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号８のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２、及び（ｃ）配列番号９又は２００のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３を含む重鎖可変ドメイン（ＶＨ）、並びに（ｄ）配列番号１０又は２０１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１、（ｅ）配列番号１１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２、及び（ｆ）配列番号１２のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３を含む軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）を含み；第２の結合ドメインは、（ａ）配列番号３９のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号４１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２、及び（ｃ）配列番号４２及び２０４のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３を含む重鎖可変ドメイン（ＶＨ）、並びに（ｄ）配列番号４３のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１、（ｅ）配列番号４５のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２、及び（ｆ）配列番号４７のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３を含む軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）を含む。
［００１９４］いくつかの実施態様では、二重特異性抗ＫＬＫ５／ＫＬＫ７抗体は、第１の結合ドメイン及び第２の結合ドメインを含み、第１の結合ドメインはヒトＫＬＫ７に結合し、第２の結合ドメインはヒトＫＬＫ５に結合し、第１の結合ドメインは、（ａ）配列番号７のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号８のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２、及び（ｃ）配列番号９又は２００のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３を含む重鎖可変ドメイン（ＶＨ）、並びに（ｄ）配列番号１０又は２０１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１、（ｅ）配列番号１１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２、及び（ｆ）配列番号１２のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３を含む軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）を含み；第２の結合ドメインは、（ａ）配列番号６８のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号７０のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２、及び（ｃ）配列番号７２のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３を含む重鎖可変ドメイン（ＶＨ）、並びに（ｄ）配列番号７３のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１、（ｅ）配列番号７４のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２、及び（ｆ）配列番号７６のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３を含む軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）を含む。
［００１９５］いくつかの実施態様では、二重特異性抗ＫＬＫ５／ＫＬＫ７抗体は、第１の結合ドメイン及び第２の結合ドメインを含み、第１の結合ドメインはヒトＫＬＫ７に結合し、第２の結合ドメインはヒトＫＬＫ５に結合し、（ｉ）第１の結合ドメインは、配列番号２９のＶＨアミノ酸配列及び配列番号３２のＶＬアミノ酸配列又は配列番号３０若しくは２０２のＶＨアミノ酸配列及び配列番号３８若しくは２０３のＶＬアミノ酸配列を含み；（ｉｉ）第２の結合ドメインは、配列番号５２のＶＨ配列及び配列番号５５のＶＬアミノ酸配列；又は配列番号５３若しくは２０５のＶＨ配列及び配列番号６２のＶＬアミノ酸配列を含む。いくつかの実施態様では、第１の結合ドメインは配列番号３０又は２０２のＶＨ配列及び配列番号３８又は２０３のＶＬ配列を含み、第２の結合ドメインは配列番号５３又は２０５のＶＨ配列及び配列番号６２のＶＬ配列を含む。
［００１９６］いくつかの実施態様では、二重特異性抗ＫＬＫ５／ＫＬＫ７抗体は、第１の結合ドメイン及び第２の結合ドメインを含み、第１の結合ドメインはヒトＫＬＫ７に結合し、第２の結合ドメインはヒトＫＬＫ５に結合し、（ｉ）第１の結合ドメインは、配列番号２９のＶＨアミノ酸配列及び配列番号３２のＶＬアミノ酸配列又は配列番号３０若しくは２０２のＶＨアミノ酸配列及び配列番号３８若しくは２０３のＶＬアミノ酸配列を含み；（ｉｉ）第２の結合ドメインは、配列番号８３のＶＨ配列及び配列番号８８のＶＬアミノ酸配列；又は配列番号８７のＶＨ配列及び配列番号９２のＶＬアミノ酸配列を含む。いくつかの実施態様では、第１の結合ドメインは配列番号３０又は２０２のＶＨ配列及び配列番号３８又は２０３のＶＬ配列を含み、第２の結合ドメインは配列番号８７のＶＨ配列及び配列番号９２のＶＬ配列を含む。
［００１９７］いくつかの実施態様では、二重特異性抗ＫＬＫ５／ＫＬＫ７抗体は、ＫＬＫ７に結合する第１の結合ドメイン及びＫＬＫ５に結合する第２の結合ドメインを含み、第１の結合ドメインは第１の重鎖可変領域及び第１の軽鎖可変領域を含み、第２の結合ドメインは第２の重鎖可変領域及び第２の軽鎖可変領域を含む。いくつかのそのような実施態様では、第１の重鎖可変領域はＱ３９Ｅ置換（Ｋａｂａｔ番号付け）を含み、第１の軽鎖可変領域はＱ３８Ｋ置換（Ｋａｂａｔ番号付け）を含み、第２の重鎖可変領域はＱ３９Ｋ置換（Ｋａｂａｔ番号付け）を含み、第２の軽鎖可変領域はＱ３８Ｅ置換（Ｋａｂａｔ番号付け）を含む。いくつかの実施態様では、第１の重鎖可変領域はＱ３９Ｋ置換（Ｋａｂａｔ番号付け）を含み、第１の軽鎖可変領域はＱ３８Ｅ置換（Ｋａｂａｔ番号付け）を含み；第２の重鎖可変領域はＱ３９Ｅ置換（Ｋａｂａｔ番号付け）を含み、第２の軽鎖可変領域はＱ３８Ｋ置換（Ｋａｂａｔ番号付け）を含む。いくつかの実施態様では、Ｑ３９Ｅ／Ｑ３８Ｋ及びＱ３９Ｋ／Ｑ３８Ｅ置換は、二重特異性抗体の重鎖及び軽鎖の誤対合を減少させる。
［００１９８］いくつかの実施態様では、第１の結合ドメインは、第１の重鎖定常領域に連結された第１の重鎖可変ドメイン、及び第１の軽鎖定常領域に連結された第１の軽鎖可変ドメインを含み；第２の結合ドメインは、第２の重鎖定常領域に連結された第２の重鎖可変ドメイン、及び第２の軽鎖定常領域に連結された第２の軽鎖可変ドメインを含む。いくつかのそのような実施態様では、第１の重鎖定常領域はＳ１８３Ｋ置換（ＥＵ番号付け）を含み、第１の軽鎖定常領域はＶ１３３Ｅ置換（ＥＵ番号付け）を含み、第２の重鎖定常領域はＳ１８３Ｅ置換（ＥＵ番号付け）を含み、第２の軽鎖定常領域はＶ１３３Ｋ置換（ＥＵ番号付け）を含む。いくつかの実施態様では、第１の重鎖定常領域はＳ１８３Ｅ置換（ＥＵ番号付け）を含み、第１の軽鎖定常領域はＶ１３３Ｋ置換（ＥＵ番号付け）を含み、第２の重鎖定常領域はＳ１８３Ｋ置換（ＥＵ番号付け）を含み、第２の軽鎖定常領域はＶ１３３Ｅ置換（ＥＵ番号付け）を含む。いくつかの実施態様では、Ｓ１８３Ｋ／Ｖ１３３Ｅ及びＳ１８３Ｅ／Ｖ１３３Ｋ置換は、二重特異性抗体の重鎖及び軽鎖の誤対合を減少させる。
［００１９９］いくつかの実施態様では、二重特異性抗ＫＬＫ５／ＫＬＫ７抗体は、結合ドメインにＱ３９Ｅ／Ｑ３８Ｋ及びＱ３９Ｋ／Ｑ３８Ｅ置換を含み、定常領域にＳ１８３Ｋ／Ｖ１３３Ｅ及びＳ１８３Ｅ／Ｖ１３３Ｋ置換を含む。例えば、任意の目的のためにその全体が参照により本明細書に組み込まれる国際公開第２０１６／１７２４８５号を参照のこと。二重特異性抗体の非限定的な例示的な概略図を図１５に示す。
［００２００］いくつかの実施態様では、二重特異性抗ＫＬＫ５／ＫＬＫ７抗体が提供され、ここで、該二重特異性抗体は第１の結合ドメイン及び第２の結合ドメインを含み、第１の結合ドメインはヒトＫＬＫ７に結合し、第２の結合ドメインはヒトＫＬＫ５に結合し、第１の結合ドメインは、配列番号１０８又は１９２の重鎖アミノ酸配列及び配列番号１０９の軽鎖アミノ酸配列を含み、第２の結合ドメインは、配列番号１１０又は１９３の重鎖アミノ酸配列及び配列番号１１１の軽鎖アミノ酸配列を含む。いくつかの実施態様では、二重特異性抗ＫＬＫ５／ＫＬＫ７抗体が提供され、ここで、該二重特異性抗体は第１の結合ドメイン及び第２の結合ドメインを含み、第１の結合ドメインはヒトＫＬＫ７に結合し、第２の結合ドメインはヒトＫＬＫ５に結合し、第１の結合ドメインは、配列番号１１２、１９４、２０６、又は２０９の重鎖アミノ酸配列、及び配列番号１１３又は２０７の軽鎖アミノ酸配列を含み、第２の結合ドメインは、配列番号１１４、１９５、２０８、又は２１０の重鎖アミノ酸配列及び配列番号１１５の軽鎖アミノ酸配列を含む。いくつかの実施態様では、二重特異性抗ＫＬＫ５／ＫＬＫ７抗体が提供され、ここで、該二重特異性抗体は第１の結合ドメイン及び第２の結合ドメインを含み、第１の結合ドメインはヒトＫＬＫ７に結合し、第２の結合ドメインはヒトＫＬＫ５に結合し、第１の結合ドメインは、配列番号２０６又は２０９の重鎖アミノ酸配列及び配列番号２０７の軽鎖アミノ酸配列を含み、第２の結合ドメインは、配列番号２０８又は２１０の重鎖アミノ酸配列及び配列番号１１５の軽鎖アミノ酸配列を含む。
［００２０１］いくつかの実施態様では、二重特異性抗ＫＬＫ５／ＫＬＫ７抗体が提供され、ここで、該二重特異性抗体は第１の結合ドメイン及び第２の結合ドメインを含み、第１の結合ドメインはヒトＫＬＫ７に結合し、第２の結合ドメインはヒトＫＬＫ５に結合し、第１の結合ドメインは、配列番号１０８又は１９２の重鎖アミノ酸配列、及び配列番号１０９の軽鎖アミノ酸配列を含み、第２の結合ドメインは、配列番号１１４、１９５、２０８、又は２１０の重鎖アミノ酸配列、及び配列番号１１１又はは１１５の軽鎖アミノ酸配列を含む。いくつかの実施態様では、二重特異性抗ＫＬＫ５／ＫＬＫ７抗体が提供され、ここで、該二重特異性抗体は第１の結合ドメイン及び第２の結合ドメインを含み、第１の結合ドメインはヒトＫＬＫ７に結合し、第２の結合ドメインはヒトＫＬＫ５に結合し、第１の結合ドメインは、配列番号１１２、１９４、２０６、又は２０９の重鎖アミノ酸配列及び配列番号１１３又は２０７の軽鎖アミノ酸配列を含み、第２の結合ドメインは、配列番号１１０又は１９３の重鎖アミノ酸配列及び配列番号１１５の軽鎖アミノ酸配列を含む。
［００２０２］いくつかの実施態様では、二重特異性抗ＫＬＫ５／ＫＬＫ７抗体が提供され、ここで、該二重特異性抗体は第１の結合ドメイン及び第２の結合ドメインを含み、第１の結合ドメインはヒトＫＬＫ７に結合し、第２の結合ドメインはヒトＫＬＫ５に結合し、第１の結合ドメインは、配列番号１９４の重鎖アミノ酸配列及び配列番号１１３の軽鎖アミノ酸配列を含み、第２の結合ドメインは、配列番号１９５の重鎖アミノ酸配列及び配列番号１１５の軽鎖アミノ酸配列を含む。
［００２０３］いくつかの実施態様では、二重特異性抗ＫＬＫ５／ＫＬＫ７抗体が提供され、ここで、該二重特異性抗体は第１の結合ドメイン及び第２の結合ドメインを含み、第１の結合ドメインはヒトＫＬＫ７に結合し、第２の結合ドメインはヒトＫＬＫ５に結合し、第１の結合ドメインは、配列番号１１２の重鎖アミノ酸配列及び配列番号１１３の軽鎖アミノ酸配列を含み、第２の結合ドメインは、配列番号１９５の重鎖アミノ酸配列及び配列番号１１５の軽鎖アミノ酸配列を含む。
［００２０４］いくつかの実施態様では、二重特異性抗ＫＬＫ５／ＫＬＫ７抗体が提供され、ここで、該二重特異性抗体は第１の結合ドメイン及び第２の結合ドメインを含み、第１の結合ドメインはヒトＫＬＫ７に結合し、第２の結合ドメインはヒトＫＬＫ５に結合し、第１の結合ドメインは、配列番号２０６又は２０９の重鎖アミノ酸配列及び配列番号２０７の軽鎖アミノ酸配列を含み、第２の結合ドメインは、配列番号２０８又は２１０の重鎖アミノ酸配列及び配列番号１１５の軽鎖アミノ酸配列を含む。
［００２０５］いくつかの実施態様では、二重特異性抗ＫＬＫ５／ＫＬＫ７抗体が提供され、ここで、該二重特異性抗体は第１の結合ドメイン及び第２の結合ドメインを含み、第１の結合ドメインはヒトＫＬＫ７に結合し、第２の結合ドメインはヒトＫＬＫ５に結合し、第１の結合ドメインは、配列番号１９４の重鎖アミノ酸配列及び配列番号１１３の軽鎖アミノ酸配列を含み、第２の結合ドメインは、配列番号１１４の重鎖アミノ酸配列及び配列番号１１５の軽鎖アミノ酸配列を含む。
［００２０６］さらなる態様では、上記の態様のいずれかによる多重特異性抗体は、以下のセクション１～８に記載されているように、任意の特徴を単独で又は組み合わせて組み込んでもよい。
１．抗体親和性
［００２０７］特定の態様では、本明細書において提供される抗体は、≦１μＭ、≦１００ｎＭ、≦１０ｎＭ、≦１ｎＭ、≦０．１ｎＭ、≦０．０１ｎＭ、又は≦０．００１ｎＭ（例えば１０－８Ｍ以下、例えば、１０－８Ｍ～１０－１３Ｍ、例えば１０－９Ｍ～１０－１３Ｍ）の解離定数（ＫＤ）を有する。
［００２０８］一態様では、ＫＤは、表面プラズモン共鳴を使用して測定される。一態様では、ＫＤは、ＢＩＡｃｏｒｅ（商標）Ｔ２００又はＢＩＡｃｏｒｅ（商標）８ＫアッセイなどのＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）表面プラズモン共鳴アッセイを使用して測定される。例えば、ＢＩＡｃｏｒｅ（商標）８Ｋ（ＢＩＡｃｏｒｅ，Ｉｎｃ．，Ｐｉｓｃａｔａｗａｙ，ＮＪ）を使用したアッセイは、プロテインＡチップ上の固定化抗体を用いて約３００反応単位（ＲＵ）で２５℃又は３７℃で行われる。抗原（ヒトＫＬＫ７又はヒトＫＬＫ５など）の１０倍段階希釈液を、３７℃で１００μＬ／分の流量でＨＢＳ－Ｐ緩衝液中に注入した。あるいは、抗原の１０倍段階希釈液を、２５℃で３０μＬ／分の流量でＨＢＳ－Ｐ緩衝液中に注入した。会合速度（ｋａ）及び解離速度（ｋｄ）を、１対１Ｌａｎｇｍｕｉｒ結合モデルを使用して（例えば、ＢＩＡｃｏｒｅ（商標）Ｔ２００ Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ Ｓｏｆｔｗａｒｅバージョン２．０を使用して）計算する。平衡解離定数（ＫＤ）を、比率ｋｄ／ｋａとして計算する。
［００２０９］別の方法では、ＫＤは、放射標識抗原結合アッセイ（ＲＩＡ）によって測定される。一態様では、ＲＩＡは、目的の抗体及びその抗原のＦａｂバージョンを用いて実施される。例えば、抗原に対するＦａｂの溶液結合親和性は、標識されていない抗原の滴定系列の存在下で、最小濃度の（１２５Ｉ）標識された抗原でＦａｂを平衡化し、次いで、抗Ｆａｂ抗体でコーティングされたプレートで結合した抗原を捕捉することによって測定される（例えば、Ｃｈｅｎら、「Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．」第２９３巻第８６５～８８１頁（１９９９年）を参照）。アッセイの条件を確立するために、ＭＩＣＲＯＴＩＴＥＲ（登録商標）マルチウェルプレート（Ｔｈｅｒｍｏ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）を、５０ｍＭの炭酸ナトリウム（ｐＨ９．６）中の５μｇ／ｍＬの捕捉用抗Ｆａｂ抗体（Ｃａｐｐｅｌ Ｌａｂｓ）で一晩コーティングし、その後、ＰＢＳ中の２％（ｗ／ｖ）ウシ血清アルブミンで２～５時間にわたって室温（およそ２３℃）でブロッキングする。非吸着性プレート（Ｎｕｎｃ＃２６９６２０）中で、１００ｐＭ又は２６ｐＭの［１２５Ｉ］－抗原を、目的のＦａｂの段階希釈物と混合する（例えば、Ｐｒｅｓｔａ ｅｔ ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．５７：４５９３－４５９９（１９９７）における抗ＶＥＧＦ抗体Ｆａｂ－１２の評価と一致する）。その後、目的のＦａｂを一晩インキュベートするが、インキュベーションをより長い期間（例えば、約６５時間）続けて、平衡に達することを確実にしてもよい。その後、室温でのインキュベーション（例えば、１時間）のために混合物を捕捉プレートに移す。次に、溶液を除去し、プレートを、ＰＢＳ中０．１％のポリソルベート２０（ＴＷＥＥＮ－２０（登録商標））で８回洗浄する。プレートが乾燥したら、１５０μＬ／ウェルのシンチラント（ｓｃｉｎｔｉｌｌａｎｔ）（ＭＩＣＲＯＳＣＩＮＴ－２０（商標）、Ｐａｃｋａｒｄ）を付加し、プレートをＴＯＰＣＯＵＮＴ（商標）ガンマ計数器（Ｐａｃｋａｒｄ）上で１０分間、計数する。最大結合の２０％以下をもたらす各Ｆａｂの濃度が、競合結合アッセイにおける使用のために選択される。
２．抗体断片
［００２１０］特定の態様では、本明細書で提供される抗体は抗体断片である。
［００２１１］一態様では、抗体断片は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆａｂ’－ＳＨ、又はＦ（ａｂ’）２断片、特にＦａｂ断片である。インタクトな抗体のパパイン消化は、重鎖及び軽鎖の可変ドメイン（それぞれ順にＶＨ及びＶＬ）に加えて、軽鎖の定常ドメイン（ＣＬ）及び重鎖の第１定常ドメイン（ＣＨ１）もそれぞれが含む、２つの同一の抗原結合断片（いわゆる「Ｆａｂ」断片）を産生する。よって「Ｆａｂ断片」とは、ＶＬドメイン及びＣＬドメインを含む軽鎖と、ＶＨドメイン及びＣＨ１ドメインを含む重鎖断片を有する抗体断片のことである。「Ｆａｂ’断片」は、抗体ヒンジ領域からの１つ又は複数のシステインを含む、ＣＨ１ドメインのカルボキシ末端における残基の付加によりＦａｂ断片と異なる。Ｆａｂ’－ＳＨは、定常ドメインのシステイン残基（複数可）が遊離チオール基を持つＦａｂ’断片である。ペプシン処理により、２つの抗原結合部位（２つのＦａｂ断片）と、Ｆｃ領域の一部とを有するＦ（ａｂ’）２断片が得られる。サルベージ受容体結合エピトープ残基を含み、ｉｎ ｖｉｖｏ半減期が長くなったＦａｂ及びＦ（ａｂ’）２断片の説明については、米国特許第５，８６９，０４６号を参照のこと。
［００２１２］別の態様では、抗体断片は、ダイアボディ、トリアボディ、又はテトラボディである。「ダイアボディ」は、二価又は二重特異性であり得る２つの抗原結合部位を有する抗体断片である。例えば、ＥＰ４０４，０９７、国際公開第１９９３／０１１６１号、Ｈｕｄｓｏｎ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔ．Ｍｅｄ．９：１２９－１３４（２００３）、及びＨｏｌｌｉｎｇｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ９０：６４４４－６４４８（１９９３）を参照のこと。トリアボディ及びテトラボディはまた、Ｈｕｄｓｏｎ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔ．Ｍｅｄ．９：１２９－１３４（２００３）にも記載されている。
［００２１３］さらなる態様では、抗体断片は一本鎖Ｆａｂ断片である。「一本鎖Ｆａｂ断片」又は「ｓｃＦａｂ」は、抗体重鎖可変ドメイン（ＶＨ）、抗体重鎖定常ドメイン１（ＣＨ１）、抗体軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）、抗体軽鎖定常ドメイン（ＣＬ）、及びリンカーからなるポリペプチドであり、当該抗体ドメイン及び当該リンカーは、Ｎ末端からＣ末端方向に、以下の順序：ａ）ＶＨ－ＣＨ１－リンカー－ＶＬ－ＣＬ、ｂ）ＶＬ－ＣＬ－リンカー－ＶＨ－ＣＨ１、ｃ）ＶＨ－ＣＬ－リンカー－ＶＬ－ＣＨ１、又はｄ）ＶＬ－ＣＨ１－リンカー－ＶＨ－ＣＬのうちの１つを有する。特に、前記リンカーは、少なくとも３０個のアミノ酸、好ましくは３２～５０個のアミノ酸のポリペプチドである。前記単鎖Ｆａｂ断片は、ＣＬドメインとＣＨ１ドメインとの間の天然のジスルフィド結合を介して安定化されている。さらに、これらの一本鎖Ｆａｂ断片は、システイン残基（例えば、Ｋａｂａｔの番号付けによる可変重鎖の４４位及び可変軽鎖の１００位）の挿入による鎖間ジスルフィド結合の生成によってさらに安定化される可能性がある。
［００２１４］別の態様では、抗体断片は一本鎖可変断片（ｓｃＦｖ）である。「一本鎖可変断片」又は「ｓｃＦｖ」は、リンカーにより接続された、抗体の重鎖（ＶＨ）及び軽鎖（ＶＬ）の可変ドメインの融合タンパク質である。特に、リンカーは１０～２５個のアミノ酸の短いポリペプチドであり、通常、柔軟性のためにグリシンが豊富であり、溶解性のためにセリン又はトレオニンが豊富であり、ＶＨのＮ末端をＶＬのＣ末端に接続することも、その逆も可能である。このタンパク質は、定常領域が取り除かれ、リンカーが導入されているにもかかわらず、元の抗体の特異性を保持している。ｓｃＦｖ断片の総説については、例えば、Ｐｌｕｃｋｔｈｕｎ，Ｔｈｅ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ ｏｆ Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ，ｖｏｌ．１１３，Ｒｏｓｅｎｂｕｒｇ ａｎｄ Ｍｏｏｒｅ ｅｄｓ．，（Ｓｐｒｉｎｇｅｒ－Ｖｅｒｌａｇ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ），ｐｐ．２６９－３１５（１９９４）を参照のこと。また、国際公開第９３／１６１８５号並びに米国特許第５，５７１，８９４号及び同第５，５８７，４５８号を参照のこと。
［００２１５］別の態様では、抗体断片は単一ドメイン抗体である。「単一ドメイン抗体」は、抗体の重鎖可変ドメインの全部若しくは一部、又は軽鎖可変ドメインの全部若しくは一部を含む抗体断片である。特定の態様では、単一ドメイン抗体はヒト単一ドメイン抗体である（Ｄｏｍａｎｔｉｓ，Ｉｎｃ．，Ｗａｌｔｈａｍ，ＭＡ；例えば、米国特許第６，２４８，５１６ Ｂ１号を参照）。
［００２１６］抗体断片は、本明細書に記載のように、無傷の抗体のタンパク質分解消化、並びに組み換え宿主細胞（例えば、大腸菌）による組み換え産生を含むがこれらに限定されない様々な技術によって作製することができる。
３．キメラ抗体及びヒト化抗体
［００２１７］特定の態様では、本明細書で提供される抗体はキメラ抗体である。ある特定のキメラ抗体は、例えば、米国特許第４，８１６，５６７号；及びＭｏｒｒｉｓｏｎ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，８１：６８５１－６８５５（１９８４））に記載されている。一例では、キメラ抗体は、非ヒト可変領域（例えば、マウス、ラット、ハムスター、ウサギ、又はサル等の非ヒト霊長類に由来する可変領域）とヒト定常領域を含む。さらなる例では、キメラ抗体は、クラス又はサブクラスが親抗体のクラス又はサブクラスから変更された「クラススイッチ」抗体である。キメラ抗体は、その抗原結合断片を含む。
［００２１８］特定の態様では、キメラ抗体はヒト化抗体である。典型的には、非ヒト抗体は、親の非ヒト抗体の特異性と親和性を保持しながら、ヒトに対する免疫原性を低下させるためにヒト化される。一般に、ヒト化抗体は、ＣＤＲ（又はその一部）が非ヒト抗体に由来し、ＦＲ（又はその一部）がヒト抗体配列に由来する１つ又は複数の可変ドメインを含む。ヒト化抗体は、任意に、ヒト定常領域の少なくとも一部も含む。いくつかの態様では、ヒト化抗体のいくつかのＦＲ残基は、例えば、抗体の特異性又は親和性を回復又は改善するために、非ヒト抗体（例えば、ＣＤＲ残基が由来する抗体）からの対応する残基で置換される。
［００２１９］ヒト化された抗体及びその作製方法については、Ａｌｍａｇｒｏ ａｎｄ Ｆｒａｎｓｓｏｎ，Ｆｒｏｎｔ．Ｂｉｏｓｃｉ．１３：１６１９－１６３３（２００８）で総説され、さらに以下に記載されている：Ｒｉｅｃｈｍａｎｎ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ ３３２：３２３－３２９（１９８８）、Ｑｕｅｅｎ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８６：１００２９－１００３３（１９８９）、米国特許第５，８２１，３３７号、同第７，５２７，７９１号、同第６，９８２，３２１号、及び同第７，０８７，４０９号、Ｋａｓｈｍｉｒｉ ｅｔ ａｌ．，Ｍｅｔｈｏｄｓ ３６：２５－３４（２００５）（特異性決定領域（ＳＤＲ）移植を記載する）、Ｐａｄｌａｎ，Ｍｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２８：４８９－４９８（１９９１）（リサーフェシングを記載する）、Ｄａｌｌ’Ａｃｑｕａ ｅｔ ａｌ．，Ｍｅｔｈｏｄｓ ３６：４３－６０（２００５）（「ＦＲシャッフリング」を記載する）、並びにＯｓｂｏｕｒｎ ｅｔ ａｌ．，Ｍｅｔｈｏｄｓ ３６：６１－６８（２００５）及びＫｌｉｍｋａ ｅｔ ａｌ．，Ｂｒ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ，８３：２５２－２６０（２０００）（ＦＲシャッフルの「ガイド付き選択アプローチを記載する）。
［００２２０］ヒト化に使用可能なフレームワーク領域としては、限定されないが、「ベストフィット」方法を用いて選択されるフレームワーク領域（例えば、Ｓｉｍｓ ｅｔ ａｌ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５１：２２９６（１９９３）を参照）；軽鎖又は重鎖可変領域の特定のサブグループのヒト抗体のコンセンサス配列から誘導されるフレームワーク領域（例えば、Ｃａｒｔｅｒ ｅｔ ａｌ．Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，８９：４２８５（１９９２）；及びＰｒｅｓｔａ ｅｔ ａｌ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１５１：２６２３（１９９３）を参照）；ヒト成熟（体細胞性変異を受けた）フレームワーク領域又はヒト生殖系フレームワーク領域（例えば、Ａｌｍａｇｒｏ ａｎｄ Ｆｒａｎｓｓｏｎ，Ｆｒｏｎｔ．Ｂｉｏｓｃｉ．１３：１６１９－１６３３（２００８）を参照）；及びＦＲライブラリのスクリーニングから誘導されるフレームワーク領域（例えば、Ｂａｃａ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７２：１０６７８－１０６８４（１９９７）及びＲｏｓｏｋ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７１：２２６１１－２２６１８（１９９６）を参照）が挙げられる。
４．ヒト抗体
［００２２１］特定の態様では、本明細書で提供される抗体はヒト抗体である。ヒト抗体は、当技術分野で知られている様々な技術を使用して産生することができる。ヒト抗体は一般的に、ｖａｎ Ｄｉｊｋ ａｎｄ ｖａｎ ｄｅ Ｗｉｎｋｅｌ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．５：３６８－７４（２００１）及びＬｏｎｂｅｒｇ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２０：４５０－４５９（２００８）に記載されている。
［００２２２］ヒト抗体は、抗原チャレンジに応答して、インタクトなヒト抗体又はヒト可変領域を有するインタクトな抗体を産生するように改変されたトランスジェニック動物に免疫原を投与することによって調製してもよい。このような動物は、典型的には、内因性免疫グロブリン遺伝子座に取って代わるか、又は染色体外に存在するか、又は動物の染色体にランダムに組み込まれるヒト免疫グロブリン遺伝子座の全部又は一部を含有する。このようなトランスジェニックマウスでは、内因性免疫グロブリン遺伝子座は、一般的に不活性化されている。トランスジェニック動物からヒト抗体を得るための方法の総説については、Ｌｏｎｂｅｒｇ，Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈ．２３：１１１７－１１２５（２００５）を参照のこと。また、例えば、ＸＥＮＯＭＯＵＳＥ（商標）技術を記載する米国特許第６，０７５，１８１号及び米国特許第６，１５０，５８４号、ＨｕＭａｂ（登録商標）技術を記載する米国特許第５，７７０，４２９号、Ｋ－Ｍ ＭＯＵＳＥ（登録商標）技術を記載する米国特許第７，０４１，８７０号、及び、ＶｅｌｏｃｉＭｏｕｓｅ（登録商標）技術を記載する米国特許出願公開第２００７／００６１９００号も参照されたい。このような動物によって生成されたインタクトな抗体からのヒト可変領域は、例えば、異なるヒト定常領域と組み合わせることによって、さらに改変されてもよい。
［００２２３］ヒト抗体は、ハイブリドーマに基づく方法によっても作製することができる。ヒトモノクローナル抗体を産生するためのヒト骨髄腫細胞株及びマウス－ヒト異種骨髄腫細胞株が記載されている。（例えば、Ｋｏｚｂｏｒ Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１３３：３００１（１９８４）、Ｂｒｏｄｅｕｒ ｅｔ ａｌ．，Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｙ Ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ ａｎｄ Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ，ｐｐ．５１－６３（Ｍａｒｃｅｌ Ｄｅｋｋｅｒ，Ｉｎｃ．，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，１９８７）及びＢｏｅｒｎｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１４７：８６（１９９１）を参照）。ヒトＢ細胞ハイブリドーマ技術を介して生成されたヒト抗体もまた、Ｌｉ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，１０３：３５５７－３５６２（２００６）に記載されている。追加の方法としては、例えば、米国特許第７，１８９，８２６号（ハイブリドーマ細胞株由来のモノクローナルヒトＩｇＭ抗体の産生を記載する）、及びＮｉ，Ｘｉａｎｄａｉ Ｍｉａｎｙｉｘｕｅ，２６（４）：２６５－２６８（２００６）（ヒト－ヒトハイブリドーマを記載する）が挙げられる。ヒトハイブリドーマ技術（トリオーマ技術）はまた、Ｈｉｓｔｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｈｉｓｔｏｐａｔｈｏｌｏｇｙ，２０（３）：９２７－９３７（２００５）及びＶｏｌｌｍｅｒｓ ａｎｄ Ｂｒａｎｄｌｅｉｎ，Ｍｅｔｈｏｄｓ ａｎｄ Ｆｉｎｄｉｎｇｓ ｉｎ Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ａｎｄ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，２７（３）：１８５－９１（２００５）にも記載されている。
［００２２４］ヒト抗体はまた、ヒト由来のファージディスプレイライブラリーから選択される可変ドメイン配列を単離することによって生成することができる。次いで、そのような可変ドメイン配列を所望のヒト定常ドメインと組み合わせることができる。抗体ライブラリーからヒト抗体を選択するための技術を以下に記載する。
５．ライブラリー由来の抗体
［００２２５］特定の態様では、本明細書に提供される抗体はライブラリーから得られる。本発明の抗体は、１つ又は複数の所望の活性を有する抗体についてコンビナトリアルライブラリーをスクリーニングすることによって単離され得る。コンビナトリアルライブラリーをスクリーニングするための方法は、例えば、Ｎａｔｕｒｅ Ｒｅｖｉｅｗｓ １６：４９８－５０８（２０１６）におけるＬｅｒｎｅｒらにおいて総説されている。例えば、ファージディスプレイライブラリを作成し、所望の結合特性を有する抗体についてこのようなライブラリをスクリーニングするための様々な方法が当技術分野で知られている。かかる方法は、例えば、ＦｒｅｎｚｅｌらのｍＡｂｓ ８：１１７７－１１９４（２０１６）；Ｂａｚａｎ ｅｔ ａｌ．のＨｕｍａｎ Ｖａｃｃｉｎｅｓ ａｎｄ Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ ８：１８１７－１８２８（２０１２）、及びＺｈａｏらのＣｒｉｔｉｃａｌ Ｒｅｖｉｅｗｓ ｉｎ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ３６：２７６－２８９（２０１６）、並びに、ＨｏｏｇｅｎｂｏｏｍらのＭｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ １７８：１－３７（Ｏ’Ｂｒｉｅｎ ｅｔ ａｌ．，ｅｄ．，Ｈｕｍａｎ Ｐｒｅｓｓ，Ｔｏｔｏｗａ，ＮＪ，２００１）、及びＭａｒｋｓ ａｎｄ ＢｒａｄｂｕｒｙのＭｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ ２４８：１６１－１７５（Ｌｏ，ｅｄ．，Ｈｕｍａｎ Ｐｒｅｓｓ，Ｔｏｔｏｗａ，ＮＪ，２００３）に見られる。
［００２２６］特定のファージディスプレイ法において、ＶＨ遺伝子及びＶＬ遺伝子のレパートリーは、ポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）によって個別にクローニングされ、ファージライブラリーにおいて無作為に組み換えられ、次いで、Ａｎｎｕａｌ Ｒｅｖｉｅｗ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ １２：４３３－４５５（１９９４）におけるＷｉｎｔｅｒらにおいて説明されたように、抗原結合ファージについてスクリーニングすることができる。ファージは、一般的には、単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）断片として、又はＦａｂ断片として、抗体断片を提示する。免疫源からのライブラリーは、ハイブリドーマを構築する必要なしに、免疫原に対する高親和性抗体を提供する。あるいはまた、ナイーブなレパートリーをクローン化し（例えば、ヒトから）、Ｇｒｉｆｆｉｔｈｓ ｅｔ ａｌ．のＥＭＢＯ Ｊｏｕｒｎａｌ １２：７２５－７３４（１９９３）に記載されるように、免疫化することなく、非自己から自己抗原までの広範囲に対する単一の抗体源を得ることができる。さらに、ナイーブなライブラリーはまた、Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍ ａｎｄ ＷｉｎｔｅｒのＪｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ ２２７：３８１－３８８（１９９２）によって説明されるように、再整列していないＶ遺伝子セグメントを幹細胞からクローニングすること、及びランダム配列を含有するＰＣＲプライマーを用いて、高度に可変性のＣＤＲ３領域をコードし、ｉｎ ｖｉｔｒｏでの再整列を達成することによって、合成により作成することができる。ヒト抗体ファージライブラリーについて記載する特許公報としては、例えば：米国特許第５，７５０，３７３号、同第７，９８５，８４０号、同第７，７８５，９０３号及び同第８，６７９，４９０号、並びに米国特許出願公開第２００５／００７９５７４号、同第２００７／０１１７１２６号、同第２００７／０２３７７６４号及び同第２００７／０２９２９３６号が挙げられる。
［００２２７］所望の活性又は複数の活性を有する抗体についてコンビナトリアルライブラリーをスクリーニングするための当技術分野で知られている方法のさらなる例としては、リボソーム及びｍＲＮＡディスプレイ、並びに細菌、哺乳動物細胞、昆虫細胞又は酵母細胞における抗体ディスプレイ及び選択のための方法が挙げられる。酵母表面ディスプレイのための方法は、例えば、Ｓｃｈｏｌｌｅｒ ｅｔ ａｌ．ｉｎ Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ ５０３：１３５－５６（２０１２）及びＣｈｅｒｆ ｅｔ ａｌ．ｉｎ Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｂｉｏｌｏｇｙ １３１９：１５５－１７５（２０１５）並びにＺｈａｏ ｅｔ ａｌ．ｉｎ Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ ８８９：７３－８４（２０１２）に概説がある。リボソームディスプレイのための方法は、例えば、ＨｅらのＮｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ２５：５１３２－５１３４（１９９７）及びＨａｎｅｓらのＰＮＡＳ ９４：４９３７－４９４２（１９９７）に記載されている。
［００２２８］ヒト抗体ライブラリーから単離された抗体又は抗体断片は、本明細書ではヒト抗体又はヒト抗体断片とみなされる。
６．多重特異性抗体
［００２２９］特定の態様では、本明細書で提供される抗体は、多重特異性抗体、例えば、二重特異性抗体である。「多重特異性抗体」は、少なくとも２つの異なる部位、すなわち、異なる抗原上の異なるエピトープ又は同じ抗原上の異なるエピトープに対して結合特異性を有するモノクローナル抗体である。特定の態様では、多重特異性抗体は３つ以上の結合特異性を有する。特定の態様では、結合特異性の１つはＫＬＫ７に対するものであり、もう１つの特異性は他の任意の抗原に対するものである。特定の態様では、結合特異性の１つはＫＬＫ７に対するものであり、もう１つの特異性はＫＬＫ５に対するものである。特定の態様では、二重特異性抗体は、抗原の２つ（又はそれ以上）の異なるエピトープに結合し得る。多重特異性抗体は、完全長抗体又は抗体断片として調製することができる。
［００２３０］多重特異性抗体を作製する技術としては、異なる特異性を有する２つの免疫グロブリン重鎖－軽鎖対の組み換え共発現が含まれるが、これらに限定されない（Ｍｉｌｓｔｅｉｎ ａｎｄ Ｃｕｅｌｌｏ，Ｎａｔｕｒｅ ３０５：５３７（１９８３）を参照）及び「ノブインホール」エンジニアリング（例えば、米国特許第５，７３１，１６８号、及びＡｔｗｅｌｌ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２７０：２６（１９９７）を参照）。非限定的な例示的なノブ・イン・ホール置換には、Ｔ３６６Ｗ（ノブ）及びＴ３６６Ｓ／Ｌ３６８Ａ／Ｙ４０７Ｖ（ホール）が含まれる。いくつかの実施態様では、ノブ・イン・ホール置換は、ＩｇＧ１定常ドメイン内にある。
［００２３１］多重特異性抗体は、抗体Ｆｃヘテロ二量体分子を作成するための静電ステアリング効果を操作することによっても作成することができる。例えば、国際公開第２００９／０８９００４号；Ｄｉｌｌｏｎ ｅｔ ａｌ．，Ｍａｂｓ ９（２）：２１３－２３０（２０１７）を参照のこと。非限定的な例として、２つの重鎖可変領域及び２つの軽鎖可変領域を含む二重特異性抗体において、第１の重鎖可変領域はＱ３９Ｅ置換（Ｋａｂａｔ番号付け）を含み得、第１の軽鎖可変領域はＱ３８Ｋ置換（Ｋａｂａｔ番号付け）を含み得、第２の重鎖可変領域はＱ３９Ｋ置換（Ｋａｂａｔ番号付け）を含み得、第２の軽鎖可変領域はＱ３８Ｅ置換（Ｋａｂａｔ番号付け）を含み得る。いくつかの実施態様では、Ｑ３９Ｅ／Ｑ３８Ｋ及びＱ３９Ｋ／Ｑ３８Ｅ置換は、二重特異性抗体の重鎖及び軽鎖の誤対合を減少させる。同様に、第１の重鎖定常領域はＳ１８３Ｋ置換（ＥＵ番号付け）を含み得、第１の軽鎖定常領域は、Ｖ１３３Ｅ置換（ＥＵ番号付け）を含み得、第２の重鎖定常領域はＳ１８３Ｅ置換（ＥＵ番号付け）を含み得、第２の軽鎖定常領域は、Ｖ１３３Ｋ置換（ＥＵ番号付け）を含み得る。いくつかの実施態様では、Ｓ１８３Ｋ／Ｖ１３３Ｅ及びＳ１８３Ｅ／Ｖ１３３Ｋ置換は、二重特異性抗体の重鎖及び軽鎖の誤対合を減少させる。
［００２３２］いくつかの実施態様では、二重特異性抗体は、結合ドメインにＱ３９Ｅ／Ｑ３８Ｋ及びＱ３９Ｋ／Ｑ３８Ｅ置換を含み、定常領域にＳ１８３Ｋ／Ｖ１３３Ｅ及びＳ１８３Ｅ／Ｖ１３３Ｋ置換を含む。いくつかの実施態様では、二重特異性抗体は、ノブ・イン・ホール置換と静電置換の両方を含む。例えば、任意の目的のためにその全体が参照により本明細書に組み込まれる国際公開第２０１６／１７２４８５号を参照のこと。二重特異性抗体の非限定的な例示的な概略図を図１５に示す。
［００２３３］したがって、いくつかの実施態様では、多重特異性抗体が提供され、該多重特異性抗体は、ａ）第１の重鎖ポリペプチド（Ｈ１）及び第１の軽鎖ポリペプチド（Ｌ１）を含む第１の抗原に結合する第１の重鎖／軽鎖対と、ｂ）第２の重鎖ポリペプチド（Ｈ２）及び第２の軽鎖ポリペプチド（Ｌ２）を含む第２の抗原に結合する第２の重鎖／軽鎖対とを含み、ここで、各Ｈ１及びＨ２は重鎖可変ドメイン（ＶＨ）及び重鎖定常ドメイン（ＣＨ１）を含み、各Ｌ１及びＬ２は軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）及び軽鎖定常ドメイン（ＣＬ）を含み；Ｈ１のＣＨ１ドメインはＳ１８３（ＥＵ番号付け）にアミノ酸置換を含み、Ｌ１のＣＬドメインはＶ１３３（ＥＵ番号付け）にアミノ酸置換を含み；Ｈ１のＶＨドメインは位置Ｑ３９にアミノ酸置換を含み、Ｌ１のＶＬドメインは位置Ｑ３８にアミノ酸置換を含み、且つ／又はＨ２のＶＨドメインは位置Ｑ３９にアミノ酸置換を含み、Ｌ２のＶＬドメインは位置Ｑ３８にアミノ酸置換を含む（全てＫａｂａｔ番号付け）。いくつかの実施態様では、Ｈ１のＶＨドメインはＱ３９（Ｋａｂａｔ番号付け）にアミノ酸置換を含み、Ｌ１のＶＬドメインはＱ３８（Ｋａｂａｔ番号付け）にアミノ酸置換を含む。いくつかの実施態様では、Ｈ２のＣＨ１ドメインはＳ１８３（ＥＵ番号付け）にアミノ酸置換を含み、Ｌ２のＣＬドメインはＶ１３３（ＥＵ番号付け）にアミノ酸置換を含む。いくつかの実施態様では、Ｈ２のＶＨドメインは位置Ｑ３９にアミノ酸置換をさらに含み、Ｌ２のＶＬドメインは位置Ｑ３８（Ｋａｂａｔ番号付け）にアミノ酸置換をさらに含む。いくつかの実施態様では、Ｈ１のＣＨ１ドメインはＳ１８３Ｋ変異を含み、Ｌ１のＣＬはＶ１３３Ｅ変異を含み、Ｈ２のＣＨ１はＳ１８３Ｅ変異を含み、Ｌ２のＣＬドメインはＶ１３３Ｋ変異を含む。いくつかの実施態様では、Ｈ１のＶＨドメインはＱ３９Ｅ変異を含み、Ｌ１のＶＬドメインはＱ３８Ｋ変異を含み、Ｈ２のＶＨドメインはＱ３９Ｋ変異を含み、Ｌ２のＶＬドメインはＱ３８Ｅ変異を含む（全てＫａｂａｔ番号付け）。
［００２３４］多重特異性抗体はまた、２つ以上の抗体若しくは断片の架橋（例えば、米国特許第４，６７６，９８０号及びＢｒｅｎｎａｎ ｅｔ ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２２９：８１（１９８５）を参照）、ロイシンジッパーを使用した二重特異性抗体の産生（例えば、Ｋｏｓｔｅｌｎｙ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１４８（５）：１５４７１５５３（１９９２）及び国際公開第２０１１／０３４６０５号を参照）、軽鎖の誤対合問題を回避するための一般的な軽鎖技術の使用（例えば、国際公開第９８／５０４３１号を参照）、二重特異性抗体断片を作製するための「ダイアボディ」技術の使用（例えば、Ｈｏｌｌｉｎｇｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，９０：６４４４－６４４８（１９９３）を参照）、及び一本鎖Ｆｖ（ｓＦｖ）二量体の使用（例えば、Ｇｒｕｂｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１５２：５３６８（１９９４）を参照）、並びに例えばＴｕｔｔ ｅｔ ａｌ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４７：６０（１９９１）に記載されている三重特異性抗体の調製によって作製することができる。
［００２３５］例えば、「オクトパス（Ｏｃｔｏｐｕｓ）抗体」を含む３つ以上の抗原結合部位を有する操作された抗体、又はＤＶＤ－Ｉｇも本明細書に含まれる（例えば、国際公開第２００１／７７３４２号及び国際公開第２００８／０２４７１５号を参照）。３つ以上の抗原結合部位を有する多重特異性抗体の他の例は、国際公開第２０１０／１１５５８９号、国際公開第２０１０／１１２１９３号、国際公開第２０１０／１３６１７２号、国際公開第２０１０／１４５７９２号、及び国際公開第２０１３／０２６８３１号に見出され得る。二重特異性抗体又はその抗原結合断片には、ＫＬＫ７及びＫＬＫ５などの別の異なる抗原に結合する抗原結合部位を含む「二重作用ＦＡｂ」又は「ＤＡＦ」も含まれる（例えば、米国特許出願公開第２００８／００６９８２０号明細書及び国際公開第２０１５／０９５５３９号を参照）。
［００２３６］多重特異性抗体はまた、同じ抗原特異性の１つ又は複数の結合アームにドメインクロスオーバーを持つ非対称の形態で、すなわちＶＨ／ＶＬドメイン（例えば、国際公開第２００９／０８０２５２号及び国際公開第２０１５／１５０４４７号を参照）、ＣＨ１／ＣＬドメイン（国際公開第２００９／０８０２５３号を参照）又は完全なＦａｂアーム（国際公開第２００９／０８０２５１号、国際公開第２０１６／０１６２９９号を参照、Ｓｃｈａｅｆｅｒ ｅｔ ａｌ，ＰＮＡＳ，１０８（２０１１）１１８７－１１９１，及びＫｌｅｉｎ ａｔ ａｌ．，ＭＡｂｓ ８（２０１６）１０１０－２０）も参照）を交換することによってもたらされ得る。一態様では、多重特異性抗体はｃｒｏｓｓ－Ｆａｂ断片を含む。「ｃｒｏｓｓ－Ｆａｂ断片」又は「ｘＦａｂ断片」又は「クロスオーバーＦａｂ断片」という用語は、重鎖及び軽鎖の可変領域又は定常領域のいずれかが交換されたＦａｂ断片を指す。ｃｒｏｓｓ－Ｆａｂ断片は、軽鎖可変領域（ＶＬ）及び重鎖定常領域１（ＣＨ１）から構成されるポリペプチド鎖と、重鎖可変領域（ＶＨ）及び軽鎖定常領域（ＣＬ）から構成されるポリペプチド鎖とを含む。非対称Ｆａｂアームは、ドメイン界面に荷電又は非荷電アミノ酸変異を導入して正しいＦａｂ対合を誘導することによって操作することもできる。例えば、国際公開第２０１６／１７２４８５号を参照。
［００２３７］多重特異性抗体のさらなる様々な分子フォーマットが当技術分野で知られており、本明細書に含まれる（例えば、Ｓｐｉｅｓｓ ｅｔ ａｌ．，Ｍｏｌ Ｉｍｍｕｎｏｌ ６７（２０１５）９５－１０６を参照）。
［００２３８］この目的のために有用であり得る二重特異性抗体フォーマットの例には、２つのｓｃＦｖ分子が柔軟なリンカーによって融合されている、いわゆる「ＢｉＴＥ」（二重特異性Ｔ細胞エンゲージャー（ｅｎｇａｇｅｒ））分子（例えば、国際公開第２００４／１０６３８１号、同第２００５／０６１５４７号、同第２００７／０４２２６１号及び同第２００８／１１９５６７号、Ｎａｇｏｒｓｅｎ ａｎｄ Ｂａｅｕｅｒｌｅ，Ｅｘｐ Ｃｅｌｌ Ｒｅｓ ３１７，１２５５－１２６０ （２０１１）参照）；ダイアボディ（Ｈｏｌｌｉｇｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｔ Ｅｎｇ ９，２９９－３０５（１９９６））及びその誘導体、例えばタンデムダイアボディ（「ＴａｎｄＡｂ」；Ｋｉｐｒｉｙａｎｏｖ ｅｔ ａｌ．，Ｊ Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ ２９３，４１－５６（１９９９））；ダイアボディフォーマットに基づくが、安定化付加のためのＣ末端ジスルフィド架橋を特徴とする「ＤＡＲＴ」（二重親和性再標的化）分子（Ｊｏｈｎｓｏｎ ｅｔ ａｌ．，Ｊ Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ ３９９，４３６－４４９（２０１０））、並びに全ハイブリッドマウス／ラットＩｇＧ分子であるいわゆるトリオマブ（ｔｒｉｏｍａｂ）（Ｓｅｉｍｅｔｚ ｅｔ ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ Ｔｒｅａｔ Ｒｅｖ ３６，４５８－４６７（２０１０）に概説）が含まれるが、これらに限定されない。本明細書に含まれる、特定のＴ細胞二重特異性抗体形式は、国際公開第２０１３／０２６８３３号、国際公開第２０１３／０２６８３９号、国際公開第２０１６／０２０３０９号；Ｂａｃａｃ ｅｔ ａｌ．，Ｏｎｃｏｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ ５（８）（２０１６）ｅ１２０３４９８に記載されている。
７．抗体バリアント
［００２３９］特定の態様では、本明細書に提供される抗体のアミノ酸配列バリアントが企図される。例えば、抗体の結合親和性及び／又は他の生物学的性質を変化させることが望ましい場合がある。抗体のアミノ酸配列バリアントは、抗体をコードするヌクレオチド配列中に適切な修飾を導入することによって、又はペプチド合成によって調製されてもよい。このような修飾としては、例えば、抗体のアミノ酸配列内の残基からの欠失、及び／又は抗体のアミノ酸配列内の残基への挿入、及び／又は抗体のアミノ酸配列内の残基の置換が挙げられる。欠失、挿入、及び置換の任意の組み合わせは、最終構築物が、所望の特徴（例えば、抗原結合）を有する限り、最終構築物に到達するように行われ得る。
ａ）置換、挿入、及び欠失バリアント
［００２４０］特定の態様では、１つ又は複数のアミノ酸置換を有する抗体バリアントが提供される。置換変異誘発に関心のある部位には、ＣＤＲ及びＦＲが含まれる。保存的置換は、表１において、「好ましい置換」の見出しの下に示される。より実質的な変化は、表１において、「例示的な置換」の見出しの下に提供され、またアミノ酸側鎖クラスを参照して以下にさらに記載されるとおりである。アミノ酸置換が目的とする抗体に導入され、生成物が所望の活性、例えば、抗原結合の保持／改善、免疫原性の低減、又はＡＤＣＣ又はＣＤＣの改善についてスクリーニングされ得る。
Figure 2024512377000002
［００２４１］アミノ酸は、一般的な側鎖特性に従って分類され得る。
（１）疎水性：ノルロイシン、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ；
（２）中性親水性：Ｃｙｓ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ；
（３）酸性：Ａｓｐ、Ｇｌｕ；
（４）塩基性：Ｈｉｓ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ；
（５）鎖配向に影響を及ぼす残基：Ｇｌｙ、Ｐｒｏ；
（６）芳香族：Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｐｈｅ。
［００２４２］非保存的置換は、これらのクラスのうちの１つのメンバーを別のクラスのメンバーと交換することを伴うことになる。
［００２４３］ある種の置換バリアントは、親抗体（例えば、ヒト化抗体又はヒト抗体）の１つ又は複数の超可変領域残基を置換することを含む。一般に、さらなる試験のために選択される結果として生じるバリアント（複数可）は、親抗体と比較して特定の生物学的特性（例えば、親和性の増加、免疫原性の低減）の修飾（例えば、改善）を有し、且つ／又は親抗体の実質的に保持された特定の生物学的特性を有するであろう。例示的な置換バリアントは、親和性成熟抗体であり、例えば、本明細書に記載のようなファージディスプレイに基づく親和性成熟技術を使用して、好都合に生成され得る。簡潔には、１つ又は複数のＣＤＲ残基が変異され、バリアント抗体がファージ上にディスプレイされ、特定の生物活性（例えば、結合親和性）についてスクリーニングされる。
［００２４４］例えば、抗体親和性を改善するために、ＣＤＲにおいて改変（例えば、置換）を行ってもよい。そのような改変は、ＣＤＲ「ホットスポット」、すなわち、体細胞成熟プロセス中に高頻度で変異を受けるコドンによってコードされる残基（例えば、Ｃｈｏｗｄｈｕｒｙ，Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２０７：１７９－１９６（２００８）を参照）、及び／又は抗原に接触する残基で行われてもよく、結果として生じるバリアントＶＨ又はＶＬは、結合親和性について試験される。二次ライブラリーの構築及びそこからの再選択による親和性成熟は、例えば、Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍ ｅｔ ａｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ １７８：１－３７（Ｏ’Ｂｒｉｅｎ ｅｔ ａｌ．，ｅｄ．，Ｈｕｍａｎ Ｐｒｅｓｓ，Ｔｏｔｏｗａ，ＮＪ，（２００１））に記載されている。親和性成熟のいくつかの態様では、多様な方法（例えば、エラープローンＰＣＲ、鎖シャッフリング、又はオリゴヌクレオチド指向性変異誘発）のいずれかによって、成熟のために選択される可変遺伝子に多様性が導入される。次いで、二次ライブラリーが作製される。次いで、このライブラリーをスクリーニングして、所望の親和性を有する任意の抗体バリアントを同定する。多様性を導入するための別の方法は、いくつかのＣＤＲ残基（例えば、一度に４～６残基）をランダム化する、ＣＤＲ指向性アプローチを含む。抗原結合に関与するＣＤＲ残基は、例えば、アラニンスキャニング変異誘発又はモデリングを使用して、特異的に同定され得る。特にＣＤＲ－Ｈ３及びＣＤＲ－Ｌ３が標的とされることが多い。
［００２４５］特定の態様では、置換、挿入、又は欠失は、そのような改変が抗体の抗原に結合する能力を実質的に低下させない限り、１つ又は複数のＣＤＲ内で生じ得る。例えば、結合親和性を実質的に低下させない保存的改変（例えば、本明細書に提供されるような保存的置換）は、ＣＤＲにおいて行われてもよい。そのような改変は、例えば、ＣＤＲ中の抗原接触残基の外側であってもよい。上記に提供される特定のバリアントＶＨ及びＶＬ配列において、各ＣＤＲは、改変されていないか、又は１つ、２つ若しくは３つ以下のアミノ酸置換を含むかのいずれかである。
［００２４６］変異誘発の標的となり得る抗体の残基又は領域を同定するための有用な方法は、Ｃｕｎｎｉｎｇｈａｍ ａｎｄ Ｗｅｌｌｓ（１９８９）Ｓｃｉｅｎｃｅ，２４４：１０８１－１０８５に記載されているように「アラニンスキャニング変異誘発」と呼ばれる。この方法では、残基又は標的残基（例えば、ａｒｇ、ａｓｐ、ｈｉｓ、ｌｙｓ、及びｇｌｕなどの荷電残基）のグループを同定し、中性又は負に荷電したアミノ酸（例えば、アラニン又はポリアラニン）で置換して、抗体と抗原との相互作用が影響を受けるかどうかを決定する。さらなる置換が、最初の置換に対する機能的感受性を示すアミノ酸の位置に導入されてもよい。代替的に、又は追加的に、抗原－抗体複合体の結晶構造を使用して、抗体と抗原との間の接触点を特定してもよい。そのような接触残基及び隣接残基は、置換の候補として標的にしても排除してもよい。バリアントは、所望の特性を含むかどうかを判定するためにスクリーニングされ得る。
［００２４７］アミノ酸配列挿入としては、１個の残基から１００個以上の残基を含むポリペプチドまでの長さの範囲のアミノ末端及び／又はカルボキシル末端融合、並びに単一若しくは複数のアミノ酸残基の配列内挿入が挙げられる。末端挿入の例としては、Ｎ末端メチオニル残基を有する抗体が挙げられる。抗体分子の他の挿入バリアントとしては、酵素（例えば、ＡＤＥＰＴ（抗体指向性酵素プロドラッグ療法）のための）又は抗体の血清半減期を増大させるポリペプチドに対する抗体のＮ末端又はＣ末端への融合が挙げられる。
ｂ）グリコシル化バリアント
［００２４８］特定の態様では、本明細書に提供される抗体は、抗体がグリコシル化される程度を増加又は減少させるように改変される。抗体へのグリコシル化部位の付加又は欠失は、１つ又は複数のグリコシル化部位が作り出されるか、又は除去されるようにアミノ酸配列を改変することによって、好都合に達成され得る。
［００２４９］抗体がＦｃ領域を含む場合、それに結合するオリゴ糖は改変され得る。哺乳動物細胞によって産生される天然抗体は、典型的には、Ｎ結合によってＦｃ領域のＣＨ２ドメインのＡｓｎ２９７に一般に結合される分岐状の二分岐オリゴ糖を含む。例えば、Ｗｒｉｇｈｔ ｅｔ ａｌ．ＴＩＢＴＥＣＨ １５：２６－３２（１９９７）を参照のこと。オリゴ糖には、様々な炭水化物、例えば、マンノース、Ｎ－アセチルグルコサミン（ＧｌｃＮＡｃ）、ガラクトース、及びシアル酸、並びに二分岐オリゴ糖構造の「幹」のＧｌｃＮＡｃに結合したフコースが含まれ得る。いくつかの態様では、本発明の抗体におけるオリゴ糖の修飾は、特定の改善された特性を有する抗体バリアントを作製するために行われ得る。
［００２５０］一態様では、非フコシル化オリゴ糖、すなわちＦｃ領域に（直接的又は間接的に）結合したフコースを欠くオリゴ糖構造を有する抗体バリアントが提供される。このような非フコシル化オリゴ糖（「アフコシル化」オリゴ糖とも呼ばれる）は特に、二分岐オリゴ糖構造の幹の第１のＧｌｃＮＡｃに結合したフコース残基を欠く、Ｎ結合オリゴ糖である。一態様では、天然抗体又は親抗体と比較して、Ｆｃ領域における非フコシル化オリゴ糖の割合が増加した抗体バリアントが提供される。例えば、非フコシル化オリゴ糖の割合は、少なくとも約２０％、少なくとも約４０％、少なくとも約６０％、少なくとも約８０％、又はさらには約１００％（すなわち、フコシル化オリゴ糖が存在しない）であり得る。非フコシル化オリゴ糖の割合は、例えば、国際公開第２００６／０８２５１５号に記載されているように、ＭＡＬＤＩ－ＴＯＦ質量分析法により測定された、Ａｓｎ２９７に結合した全てのオリゴ糖の合計（例えば、複合体、ハイブリッド、及びハイマンノース構造）に対する、フコース残基を欠くオリゴ糖の（平均）量である。Ａｓｎ２９７とは、Ｆｃ領域内の約２９７位（ＥＵ番号付けのＦｃ領域残基）に位置するアスパラギン残基を指すが、Ａｓｎ２９７は、抗体におけるわずかな配列のバリエーションに起因して、２９７位から上流又は下流に±３アミノ酸、すなわち２９４位から３００位の間に位置する場合もある。Ｆｃ領域における非フコシル化オリゴ糖の割合が増加したそのような抗体は、改善されたＦｃγＲＩＩＩａ受容体結合及び／又は改善されたエフェクター機能、特に改善されたＡＤＣＣ機能を有し得る。例えば、米国特許出願公開第２００３／０１５７１０８号、同第２００４／００９３６２１号を参照のこと。
［００２５１］フコシル化が低下した抗体を産生することができる細胞株の例としては、タンパク質フコシル化が不足しているＬｅｃ１３ＣＨＯ細胞（Ｒｉｐｋａ ｅｔ ａｌ．Ａｒｃｈ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．２４９：５３３－５４５（１９８６）、米国特許出願公開第２００３／０１５７１０８号、及び国際公開第２００４／０５６３１２号、特に実施例１１）、及びノックアウト細胞株、例えばアルファ－１，６－フコシルトランスフェラーゼ遺伝子ＦＵＴ８ノックアウトＣＨＯ細胞（例えば、Ｙａｍａｎｅ－Ｏｈｎｕｋｉ ｅｔ ａｌ．Ｂｉｏｔｅｃｈ．Ｂｉｏｅｎｇ．８７：６１４－６２２（２００４）、Ｋａｎｄａ，Ｙ．ｅｔ ａｌ．，Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．Ｂｉｏｅｎｇ．，９４（４）：６８０－６８８（２００６）、及び国際公開第２００３／０８５１０７号を参照）、又はＧＤＰ－フコース合成若しくはトランスポータータンパク質の活性が低下若しくは消失した細胞（例えば、米国特許出願公開第２００４２５９１５０号、同第２００５０３１６１３号、同第２００４１３２１４０号、同第２００４１１０２８２号を参照）が挙げられる。
［００２５２］さらなる態様では、抗体バリアントは、例えば、抗体のＦｃ領域に結合した二分岐オリゴ糖がＧｌｃＮＡｃによって二分されている二分オリゴ糖と共に提供される。そのような抗体バリアントは、上記のように、低下したフコシル化及び／又は改善されたＡＤＣＣ機能を有し得る。そのような抗体バリアントの例は、例えば、Ｕｍａｎａ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ １７，１７６－１８０（１９９９）、Ｆｅｒｒａｒａ ｅｔ ａｌ．，Ｂｉｏｔｅｃｈｎ Ｂｉｏｅｎｇ ９３，８５１－８６１（２００６）、国際公開第９９／５４３４２号、同第２００４／０６５５４０号、同第２００３／０１１８７８号に記載されている。
［００２５３］Ｆｃ領域に接続したオリゴ糖中に少なくとも１つのガラクトース残基を有するバリアントも提供される。そのような抗体バリアントは、改善されたＣＤＣ機能を有し得る。そのような抗体バリアントは、例えば、国際公開第１９９７／３００８７号、同第１９９８／５８９６４号、及び同第１９９９／２２７６４号に記載されている。
ｃ）Ｆｃ領域バリアント
［００２５４］特定の態様では、１つ又は複数のアミノ酸改変が、本明細書で提供される抗体のＦｃ領域に導入され得、それにより、Ｆｃ領域バリアントが生成され得る。Ｆｃ領域バリアントは、１つ又は複数のアミノ酸位置にアミノ酸改変（例えば、置換）を含むヒトＦｃ領域配列（例えば、ヒトＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、又はＩｇＧ４Ｆｃ領域）を含み得る。
［００２５５］特定の態様では、本発明は、全てではないがいくつかのエフェクター機能を有することで、抗体のｉｎ ｖｉｖｏ半減期が重要でありながら、特定のエフェクター機能（例えば補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）及び抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ））が不必要、又は有害である用途に対して望ましい候補となる、抗体バリアントを企図する。ＣＤＣ及び／又はＡＤＣＣ活性の低下／枯渇を確認するために、ｉｎ ｖｉｔｒｏ及び／又はｉｎ ｖｉｖｏの細胞傷害アッセイを実施することができる。例えば、Ｆｃ受容体（ＦｃＲ）結合アッセイを実行して、抗体がＦｃγＲ結合を欠いている（そのため、ＡＤＣＣ活性を欠いている可能性が高い）が、ＦｃＲｎ結合能力を保持することを確認することができる。ＡＤＣＣを媒介するための主要な細胞であるＮＫ細胞は、ＦｃγＲＩＩＩのみを発現するが、一方で単球は、ＦｃγＲＩ、ＦｃγＲＩＩ、及びＦｃγＲＩＩＩを発現する。造血細胞上のＦｃＲの発現については、Ｒａｖｅｔｃｈ ａｎｄ Ｋｉｎｅｔ，Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．９：４５７－４９２（１９９１）の４６４頁の表３に要約されている。目的の分子のＡＤＣＣ活性を評価するためのｉｎ ｖｉｔｒｏアッセイの非限定的な例は、米国特許第５，５００，３６２号（例えば、Ｈｅｌｌｓｔｒｏｍ，Ｉ．ｅｔ ａｌ．Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８３：７０５９－７０６３（１９８６）を参照）及びＨｅｌｌｓｔｒｏｍ，Ｉ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８２：１４９９－１５０２（１９８５）、５，８２１，３３７（Ｂｒｕｇｇｅｍａｎｎ，Ｍ．ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．１６６：１３５１－１３６１（１９８７）を参照）に記載されている。あるいは、非放射性アッセイ方法を使用してもよい（例えば、フローサイトメトリーのためのＡＣＴＩ（商標）非放射性細胞傷害アッセイ（ＣｅｌｌＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｉｎｃ．カリフォルニア州マウンテンビュー）、及びＣｙｔｏＴｏｘ９６（登録商標）非放射性細胞傷害性アッセイ（Ｐｒｏｍｅｇａ、ウィスコンシン州マディソン））。このようなアッセイに有用なエフェクター細胞は、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）及びナチュラルキラー（ＮＫ）細胞を含む。代替的に、又は追加的に、目的の分子のＡＤＣＣ活性は、例えば、Ｃｌｙｎｅｓ ｅｔ ａｌ．Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ９５：６５２－６５６（１９９８）に開示されるような動物モデルにおいて、ｉｎ ｖｉｖｏで評価され得る。また、抗体がＣ１ｑに結合することができず、したがってＣＤＣ活性を欠くことを確認するために、Ｃ１ｑ結合アッセイを実施してもよい。例えば、国際公開第２００６／０２９８７９号及び国際公開第２００５／１００４０２号における、Ｃ１ｑ及びＣ３ｃ結合ＥＬＩＳＡを参照のこと。補体活性化を評価するために、ＣＤＣアッセイを行ってもよい（例えば、Ｇａｚｚａｎｏ－Ｓａｎｔｏｒｏ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ ２０２：１６３（１９９６）、Ｃｒａｇｇ，Ｍ．Ｓ．ｅｔ ａｌ．，Ｂｌｏｏｄ １０１：１０４５－１０５２（２００３）、及びＣｒａｇｇ，Ｍ．Ｓ．ａｎｄ Ｍ．Ｊ．Ｇｌｅｎｎｉｅ，Ｂｌｏｏｄ １０３：２７３８－２７４３（２００４）を参照）。ＦｃＲｎ結合及びｉｎ ｖｉｖｏクリアランス／半減期の決定も、当技術分野で公知の方法を使用して行うことができる（例えば、Ｐｅｔｋｏｖａ，Ｓ．Ｂ．ｅｔ ａｌ．，Ｉｎｔ’ｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１８（１２）：１７５９－１７６９（２００６）；国際公開第２０１３／１２０９２９号Ａｌを参照）。
［００２５６］エフェクター機能が低下した抗体としては、Ｆｃ領域の残基２３８、２６５、２６９、２７０、２９７、３２７及び３２９の１つ又は複数の置換を有するものが挙げられる（米国特許第６，７３７，０５６号）。このようなＦｃ変異体としては、残基２６５及び２９７のアラニンへの置換を有するいわゆる「ＤＡＮＡ」Ｆｃ変異体（米国特許第７，３３２，５８１号）を含む、アミノ酸２６５位、２６９位、２７０位、２９７位及び３２７位のうちの２つ以上に置換を有するＦｃ変異体が挙げられる。
［００２５７］ＦｃＲへの結合が改善又は減少した特定の抗体バリアントが記載されている。（例えば、米国特許第６，７３７，０５６号、国際公開第２００４／０５６３１２号、及びＳｈｉｅｌｄｓ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．９（２）：６５９１－６６０４（２００１）を参照のこと。）
［００２５８］特定の態様では、抗体バリアントは、ＡＤＣＣを改善する１つ又は複数のアミノ酸置換、例えば、Ｆｃ領域の２９８、３３３、及び／又は３３４位（残基のＥＵ番号付け）での置換を有するＦｃ領域を含む。
［００２５９］特定の態様では、抗体バリアントは、ＦｃγＲ結合を減少させる１つ又は複数のアミノ酸置換、例えば、Ｆｃ領域の２３４位及び２３５位（ＥＵ番号付けの残基）における置換を有するＦｃ領域を含む。一態様では、置換は、Ｌ２３４Ａ及びＬ２３５Ａ（ＬＡＬＡ）である。特定の態様では、抗体バリアントは、ヒトＩｇＧ１Ｆｃ領域に由来するＦｃ領域に、Ｄ２６５Ａ及び／又はＰ３２９Ｇをさらに含む。一態様では、置換は、ヒトＩｇＧ１Ｆｃ領域に由来するＦｃ領域における、Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、及びＰ３２９Ｇ（ＬＡＬＡ－ＰＧ）である。（例えば、国際公開第２０１２／１３０８３１号を参照）。別の態様では、置換は、ヒトＩｇＧ１Ｆｃ領域に由来するＦｃ領域における、Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、及びＤ２６５Ａ（ＬＡＬＡ－ＤＡ）である。
［００２６０］いくつかの態様では、例えば、米国特許第６，１９４，５５１号、国際公開第９９／５１６４２号及びＩｄｕｓｏｇｉｅ ｅｔ ａｌ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６４：４１７８－４１８４（２０００）に開示されているように、Ｃ１ｑ結合及び／又は補体依存性細胞障害（ＣＤＣ）の変更（すなわち、改善又は減少のいずれか）をもたらすＦｃ領域において変更がなされる。
［００２６１］母体ＩｇＧの胎児への移入の原因である、増加した半減期及び新生児型Ｆｃ受容体（ＦｃＲｎ）への改善された結合を有する抗体（Ｇｕｙｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．ＩｍｍｕｎｏｌＩｍｍｕｎｏｌ．：５８７（１９７６）ａｎｄ Ｋｉｍ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．ＩｍｍｕｎｏｌＩｍｍｕｎｏｌ．：２４９（１９９４））は、米国特許出願公開第２００５／００１４９３４号（Ｈｉｎｔｏｎ ｅｔ ａｌ．）に記載される。それらの抗体は、Ｆｃ領域とＦｃＲｎとの結合を改善する１つ又は複数の置換をその中に有するＦｃ領域を含む。このようなＦｃバリアントとしては、Ｆｃ領域残基：２３８、２３８、２５２、２５４、２５６、２６５、２７２、２８６、３０３、３０５、３０７、３１１、３１２、３１７、３４０、３５６、３６０、３６２、３７６、３７８、３８０、３８２、４１３、４２４、又は４３４の１つ又は複数において置換、例えば、Ｆｃ領域残基４３４の置換を有するものが挙げられる（例えば、米国特許第７，３７１，８２６号；Ｄａｌｌ’Ａｃｑｕａ，Ｗ．Ｆ．，ｅｔ ａｌ．Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２８１（２００６）２３５１４－２３５２４を参照）。いくつかの実施態様では、本明細書で提供される抗体は、置換Ｍ４２８Ｌ及び／又はＮ４３４Ｓ、例えばＭ４２８Ｌ及びＮ４３４Ｓ（「ＬＳ」）を含む。
［００２６２］マウスＦｃマウスＦｃＲｎ相互作用に決定的なＦｃ領域残基は、部位特異的突然変異誘発により同定されている（例えば、Ｄａｌｌ’Ａｃｑｕａ，Ｗ．Ｆ．，ｅｔ ａｌ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ １６９（２００２）５１７１－５１８０を参照）。残基Ｉ２５３、Ｈ３１０、Ｈ４３３、Ｎ４３４、及びＨ４３５（ＥＵインデックス番号付け）が、相互作用に関与する（Ｍｅｄｅｓａｎ，Ｃ．，ｅｔ ａｌ．，Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２６（１９９６）２５３３；Ｆｉｒａｎ，Ｍ．，ｅｔ ａｌ．，Ｉｎｔ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１３（２００１）９９３；Ｋｉｍ，Ｊ．Ｋ．，ｅｔ ａｌ．，Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２４（１９９４）５４２）。残基Ｉ２５３、Ｈ３１０、及びＨ４３５が、ヒトＦｃとマウスＦｃＲｎの相互作用に決定的であることが発見された（Ｋｉｍ，Ｊ．Ｋ．，ｅｔ ａｌ．，Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２９（１９９９）２８１９）。ヒトＦｃ－ヒトＦｃＲｎ複合体の研究により、残基Ｉ２５３、Ｓ２５４、Ｈ４３５、及びＹ４３６が相互作用に決定的であることが示されている（Ｆｉｒａｎ，Ｍ．，ｅｔ ａｌ．，Ｉｎｔ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１３（２００１）９９３；Ｓｈｉｅｌｄｓ，Ｒ．Ｌ．，ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７６（２００１）６５９１－６６０４）。Ｙｅｕｎｇ，Ｙ．Ａ．，ｅｔ ａｌ．（Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１８２（２００９）７６６７－７６７１）において、残基２４８～２５９、及び３０１～３１７、及び３７６～３８２、及び４２４～４３７の様々な突然変異が報告され、調査されている。
［００２６３］特定の態様では、抗体バリアントは、ＦｃＲｎ結合を低下させる１つ又は複数のアミノ酸置換、例えば、Ｆｃの領域の２５３位、及び／又は３１０位、及び／又は４３５位（ＥＵ番号付けの残基）における置換を有するＦｃ領域を含む。特定の態様では、抗体バリアントは、２５３位、３１０位及び４３５位にアミノ酸置換を有するＦｃ領域を含む。一態様では、置換は、ヒトＩｇＧ１ Ｆｃ領域に由来するＦｃ領域におけるＩ２５３Ａ、Ｈ３１０Ａ、及びＨ４３５Ａである。例えば、Ｇｒｅｖｙｓ，Ａ．，ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１９４（２０１５）５４９７－５５０８を参照のこと。
［００２６４］特定の態様では、抗体バリアントは、ＦｃＲｎ結合を低下させる１つ又は複数のアミノ酸置換、例えば、Ｆｃ領域の３１０位、及び／又は４３３位、及び／又は４３６位（ＥＵ番号付けの残基）における置換を有するＦｃ領域を含む。特定の態様では、抗体バリアントは、３１０位、４３３位及び４３６位におけるアミノ酸置換を有するＦｃ領域を含む。一態様では、置換は、ヒトＩｇＧ１ Ｆｃ領域に由来するＦｃ領域における、Ｈ３１０Ａ、Ｈ４３３Ａ及びＹ４３６Ａである。（例えば、国際公開第２０１４／１７７４６０号Ａ１を参照）。
［００２６５］特定の態様では、抗体バリアントは、ＦｃＲｎ結合を増加させる１つ又は複数のアミノ酸置換、例えば、Ｆｃ領域の位置２５２、及び／又は２５４、及び／又は２５６（ＥＵ番号付けの残基）における置換を有するＦｃ領域を含む。特定の態様では、抗体バリアントは、位置２５２、２５４、及び２５６におけるアミノ酸置換を有するＦｃ領域を含む。一態様では、置換は、ヒトＩｇＧ１ Ｆｃ領域に由来するＦｃ領域におけるＭ２５２Ｙ、Ｓ２５４Ｔ、及びＴ２５６Ｅである。Ｆｃ領域バリアントの他の例に関しては、Ｄｕｎｃａｎ＆Ｗｉｎｔｅｒ，Ｎａｔｕｒｅ ３２２：７３８－４０（１９８８）、米国特許第５，６４８，２６０号、米国特許第５，６２４，８２１号、及び国際公開第９４／２９３５１号も参照されたい。
［００２６６］本明細書に報告されるような抗体の重鎖のＣ末端は、アミノ酸残基ＰＧＫで終わる完全なＣ末端であり得る。重鎖のＣ末端は、Ｃ末端アミノ酸残基のうちの１つ又は２つが除去された、短縮されたＣ末端であり得る。１つの好ましい態様では、重鎖のＣ末端は、短縮されたＣ末端で終わるＰＧである。本明細書に報告される全ての態様のうちの１つの態様では、本明細書に明記されるＣ末端のＣＨ３ドメインを含む重鎖を含む抗体は、Ｃ末端グリシン－リシンジペプチドを含む（Ｇ４４６及びＫ４４７、ＥＵインデックス番号付けのアミノ酸位置）。本明細書に報告される全ての態様のうちの一態様では、本明細書で明記されるＣ末端のＣＨ３ドメインを含む重鎖を含む抗体は、Ｃ末端グリシン残基（Ｇ４４６、ＥＵインデックス番号付けのアミノ酸位置）を含む。
ｄ）システイン操作抗体バリアント
［００２６７］特定の態様では、システイン操作抗体、例えば、抗体の１つ又は複数の残基がシステイン残基で置換されているＴＨＩＯＭＡＢ（商標）抗体を作製することが望ましい場合がある。特定の態様では、置換された残基は、抗体の利用しやすい部位で生じる。これらの残基をシステインで置換することにより、反応性チオール基が抗体のアクセス可能な部位に配置され、本明細書でさらに記載されるように、抗体を薬物部分又はリンカー－薬物部分などの他の部分にコンジュゲートさせてイムノコンジュゲートを作成するために使用することができる。システイン操作抗体は、例えば、米国特許第７，５２１，５４１号、第８，３０，９３０号、第７，８５５，２７５号、第９，０００，１３０号、又は国際公開第２０１６０４０８５６号に記載されている。
ｅ）抗体誘導体
［００２６８］特定の態様では、本明細書で提供される抗体は、当技術分野で知られており、容易に入手可能な追加の非タンパク質性部分を含むように改変されてもよい。抗体の誘導体化に好適な部分としては、水溶性ポリマーが挙げられるが、これに限定されない。水溶性ポリマーの非限定的な例としては、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、エチレングリコール／プロピレングリコールのコポリマー、カルボキシメチルセルロース、デキストラン、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、ポリ－１，３－ジオキソラン、ポリ－１，３，６－トリオキサン、エチレン／無水マレイン酸コポリマー、ポリアミノ酸（ホモポリマー又はランダムコポリマーのいずれか）、及びデキストラン又はポリ（ｎ－ビニルピロリドン）ポリエチレングリコール、プロピレングリコールホモポリマー、プロリプロピレン（ｐｒｏｌｙｐｒｏｐｙｌｅｎｅ）オキシド／エチレンオキシドコポリマー、ポリオキシエチル化ポリオール（例えば、グリセロール）、ポリビニルアルコール、並びにそれらの混合物が挙げられるが、これらに限定されない。ポリエチレングリコールプロピオンアルデヒドは、水中でのその安定性のため、製造における利点を有し得る。ポリマーは、任意の分子量であってもよく、分岐していても、分岐していなくてもよい。抗体に付着するポリマーの数は変化し得て、１つを超えるポリマーが付着する場合、ポリマーは、同じ分子であってもよく、又は異なる分子であってもよい。一般に、誘導体化のために使用されるポリマーの数及び／又はタイプは、限定するものではないが、改善される抗体の特定の特性又は機能、抗体誘導体が定義された条件下で治療に使用されるかどうかなどの考慮事項に基づいて決定され得る。
８．イムノコンジュゲート
［００２６９］本発明はまた、細胞傷害性薬剤、化学療法剤、薬物、成長阻害剤、毒素（例えば、タンパク質毒素、細菌、真菌、植物、若しくは動物起源の酵素活性毒素、又はそれらの断片）、又は放射性同位体などの１つ又は複数の治療剤にコンジュゲート（化学的に結合）された本明細書の抗体を含む、イムノコンジュゲートを提供する。
［００２７０］一態様では、イムノコンジュゲートは、前述の治療剤の１つ又は複数に抗体がコンジュゲートした、抗体薬物コンジュゲート（ＡＤＣ）である。抗体は典型的には、リンカーを使用して、１つ又は複数の治療剤に接続される。治療剤及び治療薬及びリンカーの例を含む、ＡＤＣ技術の概説は、Ｐｈａｒｍａｃｏｌ Ｒｅｖｉｅｗ ６８：３－１９（２０１６）に記載されている。
［００２７１］別の態様では、イムノコンジュゲートは、本明細書に記載されるように、酵素活性毒素又はこれらの断片に結合する抗体を含む。これらは以下に限定されるわけではないが、ジフテリアＡ鎖、ジフテリア毒素の非結合活性断片、エキソトキシンＡ鎖（緑膿菌からのもの）、リシンＡ鎖、アブリンＡ鎖、モデシンＡ鎖、αサルシン、シナアブラギリのタンパク質、ジアンチンタンパク質、ヨウシュヤマゴボウのタンパク質（ＰＡＰＩ、ＰＡＰＩＩ、及びＰＡＰ－Ｓ）、ツルレイシ阻害剤、クルシン、クロチン、サボンソウ阻害剤、ゲロニン、ミトゲリン、レストリクトシン、フェノマイシン、エノマイシン（ｅｎｏｍｙｃｉｎ）、並びにトリコテセンを含む。
［００２７２］別の態様では、イムノコンジュゲートは、放射性原子にコンジュゲートして放射性コンジュゲートを形成する、本明細書に記載される抗体を含む。放射性コンジュゲートの生成には、様々な放射性同位体が利用可能である。例としては、Ａｔ２１１、Ｉ１３１、Ｉ１２５、Ｙ９０、Ｒｅ１８６、Ｒｅ１８８、Ｓｍ１５３、Ｂｉ２１２、Ｐ３２、Ｐｂ２１２、及びＬｕの放射性同位元素が挙げられる。検出のために用いられる場合、放射性コンジュゲートは、シンチグラフ検査用の放射性原子、例えばｔｃ９９ｍ又はＩ１２３、或いは核磁気共鳴（ＮＭＲ）イメージング（磁気共鳴イメージング、ｍｒｉとしても知られる）のためのスピン標識（ここでもヨウ素－１２３、ヨウ素－１３１、インジウム－１１１、フッ素－１９、炭素－１３、窒素－１５、酸素－１７、ガドリニウム、マンガン又は鉄等）を含み得る。
［００２７３］抗体と細胞傷害性剤とのコンジュゲートは、Ｎ－スクシンイミジル－３－（２－ピリジルジチオ）プロピオネート（ＳＰＤＰ）、スクシンイミジル－４－（Ｎ－マレイミドメチル）シクロヘキサン－１－カルボキシレート（ＳＭＣＣ）、イミノチオラン（ＩＴ）、イミドエステルの二官能性誘導体（ジメチルアジピミデートＨＣｌなど）、活性エステル（スベリン酸ジスクシンイミジルなど）、アルデヒド（グルタルアルデヒドなど）、ビスアジド化合物（ビス（ｐ－アジドベンゾイル）ヘキサンジアミンなど）、ビス－ジアゾニウム誘導体（ビス－（ｐ－ジアゾニウムベンゾイル）－エチレンジアミンなど）、ジイソシアネート（トルエン２，６－ジイソシアネートなど）、及びビス活性フッ素化合物（１，５－ジフルオロ－２，４－ジニトロベンゼンなど）などの、様々な二官能性タンパク質カップリング剤を使用して作製することができる。例えば、リシンイムノトキシンは、Ｖｉｔｅｔｔａ ｅｔ ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ ２３８：１０９８（１９８７）に記載されるように調製することができる。炭素１４標識１－イソチオシアナトベンジル－３－メチルジエチレントリアミンペンタ酢酸（ＭＸ－ＤＴＰＡ）は、抗体への放射性ヌクレオチドのコンジュゲーションのための例示的なキレート剤である。国際公開第９４／１１０２６号を参照のこと。リンカーは、細胞内での細胞傷害性薬物の放出を促進する「開裂性リンカー」であってもよい。例えば、酸不安定性リンカー、ペプチダーゼ感受性リンカー、光不安定性リンカー、ジメチルリンカー又はジスルフィド含有リンカー（Ｃｈａｒｉ ｅｔ ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．５２：１２７－１３１（１９９２）；米国特許第５２０８０２０号）が使用され得る。
［００２７４］本明細書のイムノコンジュゲート又はＡＤＣは、市販されている（例えば、Ｐｉｅｒｃｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｉｎｃ．，Ｒｏｃｋｆｏｒｄ、ＩＬ．，Ｕ．Ｓ．Ａから）、ＢＭＰＳ、ＥＭＣＳ、ＧＭＢＳ、ＨＢＶＳ、ＬＣ－ＳＭＣＣ、ＭＢＳ、ＭＰＢＨ、ＳＢＡＰ、ＳＩＡ、ＳＩＡＢ、ＳＭＣＣ、ＳＭＰＢ、ＳＭＰＨ、スルホ－ＥＭＣＳ、スルホ－ＧＭＢＳ、スルホ－ＫＭＵＳ、スルホ－ＭＢＳ、スルホ－ＳＩＡＢ、スルホ－ＳＭＣＣ、及びスルホ－ＳＭＰＢ、並びにＳＶＳＢ（スクシンイミジル－（４－ビニルスルホン）ベンゾエート）を含むが、これらに限定されない架橋剤試薬で調製されるこのようなコンジュゲートを明確に意図するが、これらに限定されない。
Ｄ．組み換え方法及び組成物
［００２７５］抗体は、例えば、米国特許第４，８１６，５６７号に記載されているように、組み換え方法及び組成物を使用して産生することができる。これらの方法のために、抗体をコードする１つ又は複数の単離された核酸（複数可）が提供される。
［００２７６］天然抗体又は天然抗体断片の場合、２つの核酸が必要であり、１つは軽鎖又はその断片用で、もう１つは重鎖又はその断片用である。そのような核酸（複数可）は、抗体のＶＬを含むアミノ酸配列及び／又はＶＨを含むアミノ酸配列（例えば、抗体の軽鎖及び／又は重鎖（複数可））をコードする。これらの核酸は、同じ発現ベクター上にあっても、異なる発現ベクター上にあってもよい。
［００２７７］４つの核酸が必要とされるヘテロ二量体の重鎖を有する二重特異性抗体の場合、１つは第１の軽鎖のため、１つは第１のヘテロモノマーＦｃ領域ポリペプチドを含む第１の重鎖のため、１つは第２の軽鎖のため、及び１つは第２のヘテロモノマーＦｃ領域ポリペプチドを含む第２の重鎖のためのものである。４つの核酸は、１つ又は複数の核酸分子又は発現ベクターの中に含まれ得る。このような核酸は、第１のＶＬを含むアミノ酸配列及び／又は第１のヘテロモノマーＦｃ領域を含む第１のＶＨを含むアミノ酸配列及び／又は第２のＶＬを含むアミノ酸配列及び／又は抗体の第２のヘテロモノマーＦｃ領域を含む第２のＶＨを含むアミノ酸配列（例えば、抗体の第１及び／若しくは第２の軽鎖並びに／又は第１及び／若しくは第２の重鎖）をコードする。これらの核酸は、同じ発現ベクター上にあっても、異なる発現ベクター上にあってもよく、通常、これらの核酸は、２つ又は３つの発現ベクター上に位置し、すなわち、１つのベクターがこれらの核酸を２つ以上含んでいてもよい。これらの二重特異性抗体の例は、ＣｒｏｓｓＭａｂである（例えば、Ｓｃｈａｅｆｅｒ，Ｗ．ｅｔ ａｌ，ＰＮＡＳ，１０８（２０１１）１１１８７－１１９１を参照）。例えば、ヘテロモノマー重鎖の１つは、ＥＵインデックス番号付けに従って、いわゆる「ノブ変異」（Ｔ３６６Ｗと、場合により、Ｓ３５４Ｃ又はＹ３４９Ｃのうち１つ）を含み、他方は、いわゆる「ホール変異」（Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ及びＹ４０７Ｖと、場合により、Ｙ３４９Ｃ又はＳ３５４Ｃ）を含む（例えば、Ｃａｒｔｅｒ，Ｐ．ｅｔ ａｌ．，Ｉｍｍｕｎｏｔｅｃｈｎｏｌ．２（１９９６）７３を参照）。
［００２７８］一態様では、本明細書で報告される方法で使用される抗体をコードする単離された核酸が提供される。
［００２７９］一態様では、抗体を作製する方法であって、抗体をコードする核酸を含む宿主細胞を、抗体の発現に好適な条件下で培養することと、任意に、抗体を宿主細胞（又は宿主細胞培養物）から回収することとを含む、方法が提供される。
［００２８０］抗体の組み換え産生の場合、例えば上記のように、抗体をコードする核酸が単離され、さらなるクローニング及び／又は宿主細胞内での発現のために１つ又は複数のベクターに挿入される。このような核酸は、従来の手順を使用して（例えば、抗体の重鎖と軽鎖をコードする遺伝子に特異的に結合できるオリゴヌクレオチドプローブを使用することによって）、容易に単離及び配列決定され得るか、又は組み換え法によって産生され得るか、又は化学合成によって得られ得る。
［００２８１］抗体をコードするベクターのクローニング又は発現のための好適な宿主細胞には、本明細書に記載される原核細胞又は真核細胞が含まれる。例えば、抗体は、特に、グリコシル化及びＦｃエフェクター機能が必要とされていない場合には、細菌中で産生されてもよい。細菌中の抗体断片及びポリペプチドの発現については、例えば、米国特許第５，６４８，２３７号、米国特許第５，７８９，１９９号、及び米国特許第５，８４０，５２３号を参照のこと。（また、大腸菌における抗体断片の発現を記載しているＣｈａｒｌｔｏｎ，Ｋ．Ａ．，Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｖｏｌ．２４８，Ｌｏ，Ｂ．Ｋ．Ｃ．（ｅｄ．），Ｈｕｍａｎａ Ｐｒｅｓｓ，Ｔｏｔｏｗａ，ＮＪ（２００３），ｐ．２４５－２５４も参照）。発現後、抗体は、可溶性画分中の細菌細胞ペーストから単離されてもよく、さらに精製され得る。
［００２８２］原核生物に加えて、糸状菌や酵母等の真核生物は、抗体をコードするベクターのクローニング又は発現宿主として適しており、その中には、グリコシル化経路が「ヒト化」された真菌及び酵母株が含まれ、部分的又は完全にヒトのグリコシル化パターンを有する抗体の産生をもたらす。Ｇｅｒｎｇｒｏｓｓ，Ｔ．Ｕ．，Ｎａｔ．ＢｉｏｔｅｃｈＢｉｏｔｅｃｈ．（２００４）１４０９－１４１４、及びＬｉ，Ｈ．ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔ．ＢｉｏｔｅｃｈＢｉｏｔｅｃｈ．（２００６）２１０－２１５を参照のこと。
［００２８３］（グリコシル化）抗体の発現に適した宿主細胞は、多細胞生物（無脊椎動物及び脊椎動物）にも由来する。無脊椎動物細胞の例としては、植物細胞及び昆虫細胞が挙げられる。多くのバキュロウイルス株が同定されており、特に、Ｓｐｏｄｏｐｔｅｒａ ｆｒｕｇｉｐｅｒｄａ細胞のトランスフェクションのために、これを昆虫細胞と組み合わせて使用してもよい。
［００２８４］植物細胞培養物も、宿主として利用することができる。例えば、米国特許第５，９５９，１７７号、米国特許第６，０４０，４９８号、米国特許第６，４２０，５４８号、米国特許第７，１２５，９７８号及び米国特許第６，４１７，４２９号（トランスジェニック植物において抗体を産生するためのＰＬＡＮＴＩＢＯＤＩＥＳ（商標）技術を記載している）を参照。
［００２８５］脊椎動物細胞も、宿主として使用され得る。例えば、懸濁液中で増殖するように適合されている哺乳動物細胞株は、有用であり得る。有用な哺乳動物宿主細胞株の他の例は、ＳＶ４０によって形質転換されたサル腎臓ＣＶ１株（ＣＯＳ－７）；ヒト胚腎臓株（例えば、Ｇｒａｈａｍ，Ｆ．Ｌ．ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｇｅｎ Ｖｉｒｏｌ．３６（１９７７）５９－７４に記載されているような、２９３又は２９３Ｔ細胞）；ベビーハムスター腎臓細胞（ＢＨＫ）；マウスセルトリ細胞（例えば、Ｍａｔｈｅｒ，Ｊ．Ｐ．，Ｂｉｏｌ．Ｒｅｐｒｏｄ．２３（１９８０）２４３－２５２に記載されているようなＴＭ４細胞）；サル腎臓細胞（ＣＶ１）；アフリカミドリザル腎臓細胞（ＶＥＲＯ－７６）；ヒト子宮頸癌腫細胞（ＨＥＬＡ）；イヌ腎臓細胞（ＭＤＣＫ；バッファローラット肝臓細胞（ＢＲＬ ３Ａ）；ヒト肺細胞（Ｗ１３８）；ヒト肝臓細胞（Ｈｅｐ Ｇ２）；マウス乳腺腫瘍（ＭＭＴ０６０５６２）；ＴＲＩ細胞（例えば、Ｍａｔｈｅｒ，Ｊ．Ｐ．ｅｔ ａｌ．，Ａｎｎａｌｓ Ｎ．Ｙ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．３８３（１９８２）４４－６８に記載される）；ＭＲＣ５細胞；及びＦＳ４細胞である。他の有用な哺乳動物宿主細胞株としては、ＤＨＦＲ－ＣＨＯ細胞を含む、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞（Ｕｒｌａｕｂ，Ｇ．ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ７７（１９８０）４２１６－４２２０）；並びに骨髄腫細胞株、例えば、Ｙ０、ＮＳ０及びＳｐ２／０が挙げられる。抗体産生に適した特定の哺乳動物宿主細胞の総説については、例えば、Ｙａｚａｋｉ，Ｐ．ａｎｄ Ｗｕ，Ａ．Ｍ．，Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｖｏｌ．２４８，Ｌｏ，Ｂ．Ｋ．Ｃ．（ｅｄ．），Ｈｕｍａｎａ Ｐｒｅｓｓ，Ｔｏｔｏｗａ，ＮＪ（２００４），ｐｐ．２５５－２６８を参照のこと。
［００２８６］一態様では、宿主細胞は、真核生物、例えば、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞又はリンパ球細胞（例えば、Ｙ０、ＮＳ０、Ｓｐ２０細胞）である。
Ｅ．アッセイ
［００２８７］本明細書に提供される抗ＫＬＫ７抗体及び抗ＫＬＫ５抗体は、それらの物理的／化学的特性及び／又は生物活性について、当技術分野で既知の様々なアッセイによって、特定され得るか、スクリーニングされ得るか、又は特徴付けられ得る。
１．結合アッセイ及びその他のアッセイ
［００２８８］一態様では、本発明の抗体を、例えばＥＬＩＳＡ、ウエスタンブロットなどの公知の方法によって、その抗原結合活性について試験する。
［００２８９］別の態様では、競合アッセイを使用して、ＫＬＫ７への結合に関して、ｈｕ．１４１１ｃ－Ｈ１１Ｌ２などの本明細書に提供される抗体と競合する抗体を同定することができる。特定の態様では、かかる競合抗体は、ｈｕ．１４１１ｃ又はＨ１１Ｌ２により結合されるのと同じエピトープ（例えば、線状又は立体構造エピトープ）に結合する。特定の態様では、かかる競合抗体は、ｈｕ．１４１１ｃ又はＨ１１Ｌ２により結合されるのと同じエピトープ（例えば、線状又は立体構造エピトープ）に結合する。いくつかの実施態様では、競合アッセイを使用して、ＫＬＫ５への結合に関して、ｈｕ．１０Ｃ５－Ｈ２８Ｌ５又はｈｕ．９Ｈ５－Ｈ１４Ｌ４などの、本明細書に提供される抗体と競合する抗体を同定することができる。特定の態様では、かかる競合抗体は、ｈｕ．１０Ｃ５－Ｈ２８Ｌ５又はｈｕ．９Ｈ５－Ｈ１４Ｌ４により結合されるのと同じエピトープ（例えば、線状又は立体構造エピトープ）に結合する。抗体が結合するエピトープをマッピングするための詳細な例示の方法が、Ｍｏｒｒｉｓ（１９９６）「Ｅｐｉｔｏｐｅ Ｍａｐｐｉｎｇ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ」，ｉｎ Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ ｖｏｌ．６６（Ｈｕｍａｎａ Ｐｒｅｓｓ，Ｔｏｔｏｗａ，ＮＪ）に提供されている。
［００２９０］例示的な競合アッセイにおいて、固定化抗原（例えばＫＬＫ５又はＫＬＫ７）は、抗原に結合する第１の標識抗体（例えば、ｈｕ．１４１１ｃ－Ｈ１１Ｌ２、ｈｕ．１０Ｃ５－Ｈ２８Ｌ５又はｈｕ．９Ｈ５－Ｈ１４Ｌ４）と、抗原への結合について第１の抗体と競合する能力について試験される第２の非標識抗体とを含む溶液中でインキュベートされる。第２の抗体は、ハイブリドーマ上清中に存在し得る。コントロールとして、固定化抗原が、第１の標識抗体を含むが第２の非標識抗体は含まない溶液中でインキュベートされる。第１の抗体の抗原への結合を許容する条件下でのインキュベーション後、過剰な非結合抗体を除去し、固定化された抗原に関連する標識の量を測定する。固定化された抗原に関連する標識の量が、対照試料と比較して試験試料中で実質的に減少している場合、それは、第２の抗体が抗原への結合について第１の抗体と競合していることを示す。Ｈａｒｌｏｗ ａｎｄ Ｌａｎｅ（１９８８）Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ」、第１４章、（Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ、ニューヨーク州コールド・スプリング・ハーバー）を参照のこと。
２．活性アッセイ
［００２９１］ＫＬＫ７はキモトリプシン様セリンプロテアーゼである。いくつかの実施態様では、ＫＬＫ７は、芳香族アミノ酸及び／又は疎水性アミノ酸の後、例えばチロシン、フェニルアラニン、及び／又はロイシンの後でポリペプチドを切断する。一態様では、ヒトＫＬＫ７活性を阻害する抗ＫＬＫ７抗体を同定するためのアッセイが提供される。生物活性には、例えばＫＬＫ７プロテアーゼ活性が含まれ得る。そのような生物活性をｉｎ ｖｉｖｏ及び／又はｉｎ ｖｉｔｒｏで有する抗体も提供される。
［００２９２］特定の態様では、本発明の抗体は、そのような生物活性について試験される。ＫＬＫ７プロテアーゼ活性を決定するためのアッセイは当技術分野で知られており、典型的には、基質及び試験分子（抗ＫＬＫ７抗体など）の存在下でＫＬＫ７をインキュベートすることが含まれる。抗ＫＬＫ７抗体（又は抗ＫＬＫ７結合アームを含む多重特異性抗体）がＫＬＫ７プロテアーゼ活性を阻害するかどうかを試験するための非限定的なアッセイは以下の通りである：ＫＬＫ７直接機能アッセイを、３８４ウェルプレート中で室温において最終反応体積１５μＬで行うことができる。阻害剤試料を、アッセイ緩衝液（７５ｍＭのトリス、ｐＨ８．０、１５０ｍＭのＮａＣｌ、０．０１％のＴｗｅｅｎ２０）中において、３倍の最終濃度に希釈する。阻害剤（例えば、抗ＫＬＫ７抗体）又は対照試料（５μＬ）をプレートに加え、続いてアッセイ緩衝液中にヒトＫＬＫ７（配列番号４）を最終濃度０．５ｎＭで５μＬ加える。４０分後、アッセイ緩衝液中最終濃度１０μＭのＭｃａ－ＲＰＫＰＶＥ－Ｎｖａｌ－ＷＲＫ（Ｄｎｐ）（配列番号１２１；Ｂａｃｈｅｍ Ｍ－２１１０、ＤＭＳＯ中４．３ｍＭ原液）５μＬを加える。基質を加えた後、ゲインを０％に設定した光モジュールＦＩ ３２０ ４０５を用いて、プレートをＰＨＥＲＡｓｔａｒ（登録商標）マイクロプレートリーダーで読み取る。測定は１００秒ごとに約１．５時間行われる。反応速度（ＲＦＵ／ｓとして表される）は、線形範囲内の線形回帰によって計算される。反応速度は０％及び１００％の活性対照の値に対して正規化され、ＩＣ５０値を計算するために４パラメータ方程式で適合させることができる。二価の阻害剤の場合、生のＩＣ５０を２倍することができる。
［００２９３］ＫＬＫ５はトリプシン様セリンプロテアーゼである。一態様では、ヒトＫＬＫ５活性を阻害する抗ＫＬＫ５抗体を同定するためのアッセイが提供される。生物活性には、例えばＫＬＫ５プロテアーゼ活性が含まれ得る。一実施態様では、抗ＫＬＫ５抗体は、ＫＬＫ５のセリンプロテアーゼ活性を阻害する。そのような生物活性をｉｎ ｖｉｖｏ及び／又はｉｎ ｖｉｔｒｏで有する抗体も提供される。
［００２９４］特定の態様では、本発明の抗体は、そのような生物活性について試験される。ＫＬＫ５プロテアーゼ活性を決定するためのアッセイは当技術分野で知られており、例えば、基質及び試験分子（抗ＫＬＫ５抗体など）の存在下でＫＬＫ５をインキュベートすることが含まれ得る。いくつかの実施態様では、抗ＫＬＫ５抗体の生物活性は、直接活性アッセイ、蛍光ペプチドアッセイ、ＬＣ／ＭＳアッセイ、及びＫｉ（ａｐｐ）アッセイから選択される１つ又は複数の方法によって試験される。いくつかの実施態様では、生物活性は、組み換えＫＬＫ５直接活性アッセイ、結合ｐｒｏ－ＫＬＫ１蛍光ペプチドアッセイ、結合ｐｒｏ－ＫＬＫ７蛍光ペプチドアッセイ、ｐｒｏ－ＫＬＫ１ ＬＣ／ＭＳアッセイ、ｐｒｏ－ＫＬＫ７ ＬＣ／ＭＳアッセイ、及びＫｉ（ａｐｐ）アッセイから選択される１つ又は複数の方法によって測定される。いくつかの実施態様では、ＩＣ５０値は、本明細書に記載のアッセイによって測定される。いくつかの実施態様では、本発明の抗ＫＬＫ５抗体は、組み換えＫＬＫ５直接活性アッセイ、結合ｐｒｏ－ＫＬＫ１蛍光ペプチドアッセイ、結合ｐｒｏ－ＫＬＫ７蛍光ペプチドアッセイ、ｐｒｏ－ＫＬＫ１ ＬＣ／ＭＳアッセイ、ｐｒｏ－ＫＬＫ７ ＬＣ／ＭＳアッセイ、及びＫｉ（ａｐｐ）アッセイから選択される１つ又は複数の方法によって測定されるように、ＫＬＫ５の生物活性を少なくとも５０％阻害する。いくつかの実施態様では、生物活性は、ＫＬＫ５のセリンプロテアーゼ活性である。いくつかの実施態様では、ＩＣ５０値は、本明細書に記載のアッセイによって測定される。
［００２９５］抗ＫＬＫ５抗体（又は抗ＫＬＫ５結合アームを含む多重特異性抗体）がＫＬＫ５プロテアーゼ活性を阻害するかどうかを試験するための非限定的なアッセイは以下の通りである：ＫＬＫ５直接機能アッセイを、３８４ウェルプレート中で室温において最終反応体積１５μＬで行うことができる。阻害剤試料を、アッセイ緩衝液（７５ｍＭのトリス、ｐＨ８．０、１５０ｍＭのＮａＣｌ、０．０１％のＴｗｅｅｎ２０）中において、３倍の最終濃度に希釈する。阻害剤（例えば、抗ＫＬＫ５抗体）又は対照試料（５μＬ）をプレートに加え、続いてアッセイ緩衝液中のヒトＫＬＫ５（配列番号２）を最終濃度０．５ｎＭで５μＬ加える。４０分後、アッセイ緩衝液中最終濃度５０μＭのＢｏｃ－Ｖａｌ－Ｐｒｏ－Ａｒｇ－ＡＭＣ（Ｂａｃｈｅｍ Ｉ－１１２０、水中３１．３ｍＭ原液）５μＬを加える。基質を加えた後、ゲインを０％に設定した光モジュールＦＩ ３２０ ４０５を用いて、プレートをＰＨＥＲＡｓｔａｒ（登録商標）マイクロプレートリーダーで読み取る。測定は１００秒ごとに約１．５時間行われる。反応速度（ＲＦＵ／ｓとして表される）は、線形範囲内の線形回帰によって計算される。反応速度は０％及び１００％の活性対照の値に対して正規化され、ＩＣ５０値を計算するために４パラメータ方程式に適合させることができる。二価の阻害剤の場合、生のＩＣ５０を２倍することができる。
Ｆ．診断及び検出のための方法及び組成物
［００２９６］特定の態様では、本明細書で提供される抗体のいずれも、生物学的試料中の抗原の存在を検出するために有用である。本明細書で使用される「検出する」という用語は、定量的又は定性的な検出を包含する。特定の態様では、生物学的試料は、皮膚試料などの細胞又は組織を含む。
［００２９７］一態様では、診断又は検出の方法で使用するための抗体が提供される。さらなる態様では、生物学的試料中のＫＬＫ５及び／又はＫＬＫ７の存在を検出する方法が提供される。特定の態様では、該方法は、生物学的試料を本明細書に記載される抗ＫＬＫ５抗体又は抗ＫＬＫ７抗体とその抗原への抗体の結合を許容する条件下で接触させること、及び複合体が抗体とその抗原との間で形成されるかどうかを検出することを含む。そのような方法は、ｉｎ ｖｉｔｒｏ又はｉｎ ｖｉｖｏの方法であり得る。いくつかの実施態様では、本明細書で提供される抗体による治療のために患者を選択する方法は、患者からの試料中のＫＬＫ５及び／又はＫＬＫ７発現を測定することを含む。
［００２９８］特定の態様では、標識された抗ＫＬＫ７抗体が提供される。特定の態様では、標識された抗ＫＬＫ５抗体が提供される。特定の態様では、標識された抗ＫＬＫ５／ＫＬＫ７抗体が提供される。標識には、直接検出される標識又は部分（蛍光、発色団、高電子密度、化学発光、及び放射性標識など）、並びに間接的に検出される、例えば、酵素反応又は分子相互作用による酵素又はリガンドなどの部分が含まれるが、これらに限定されない。例示的な標識には、放射性同位元素３２Ｐ、１４Ｃ、１２５Ｉ、３Ｈ、及び１３１Ｉ、希土類キレート又はフルオレセイン及びその誘導体などのフルオロフォア、ローダミン及びその誘導体、ダンシル、ウンベリフェロン、ルセリフェラーゼ、例えば、ホタルルシフェラーゼ及び細菌ルシフェラーゼ（米国特許第４，７３７，４５６号）、ルシフェリン、２，３－ジヒドロフタラジンジオン、西洋ワサビペルオキシダーゼ（ＨＲＰ）、アルカリホスファターゼ、β－ガラクトシダーゼ、グルコアミラーゼ、リゾチーム、糖オキシダーゼ、例えばグルコースオキシダーゼ、ガラクトースオキシダーゼ、グルコース－６－リン酸デヒドロゲナーゼ、ウリカーゼやキサンチンオキシダーゼなどの複素環式オキシダーゼを、ＨＲＰ、ラクトペルオキシダーゼ、又はミクロペルオキシダーゼ、ビオチン／アビジン、スピン標識、バクテリオファージ標識、安定したフリーラジカルなどの色素前駆体を酸化するために過酸化水素を使用する酵素と結合したものなどが含まれるが、これらに限定されない。
Ｇ．薬学的組成物
［００２９９］さらなる態様では、例えば、以下の治療方法のいずれかにおける使用のための、本明細書に提供される抗体のいずれかを含む、薬学的組成物が提供される。一態様では、薬学的組成物は、本明細書に提供される抗体のいずれか及び薬学的に許容される担体を含む。別の態様では、薬学的組成物は、本明細書に提供される抗体のいずれかと、例えば以下に記載されるような少なくとも１つの追加の治療剤とを含む。
［００３００］本明細書に記載の抗ＫＬＫ７抗体及び／又は抗ＫＬＫ５抗体及び／又は抗ＫＬＫ５／ＫＬＫ７抗体の薬学的組成物は、所望の程度の純度を有するそのような抗体若しくは抗体（複数）を１つ又は複数の任意の薬学的に許容される担体（Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ １６ｔｈ ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｏｓｏｌ，Ａ．Ｅｄ．（１９８０））と混合することによって、凍結乾燥組成物又は水溶液の形態で調製される。薬学的に許容され得る担体は、一般的に、用いられる投薬量及び濃度でレシピエントに対して非毒性であり、ヒスチジン、ホスファート、シトラート、アセタート及び他の有機酸などの緩衝剤；アスコルビン酸及びメチオニンを含む抗酸化剤；防腐剤（塩化オクタデシルジメチルベンジルアンモニウム；塩化ヘキサメトニウム；塩化ベンザルコニウム；塩化ベンゼトニウム；フェノール、ブチル若しくはベンジルアルコール；メチル若しくはプロピルパラベンなどのアルキルパラベン；カテコール；レゾルシノール；シクロヘキサノール；３－ペンタノール；及びｍ－クレゾール等）；低分子量（約１０残基未満）のポリペプチド；血清アルブミン、ゼラチン若しくは免疫グロブリンなどのタンパク質；ポリビニルピロリドンなどの親水性ポリマー；グリシン、グルタミン、アスパラギン、ヒスチジン、アルギニン若しくはリジンなどのアミノ酸；単糖類、二糖類、及びグルコース、マンノース若しくはデキストリンを含む他の炭水化物；ＥＤＴＡなどのキレート剤；スクロース、マンニトール、トレハロース若しくはソルビトールなどの糖類；ナトリウムなどの塩形成対イオン；金属錯体（例えば、Ｚｎ－タンパク質錯体）、並びに／又はポリエチレングリコール（ＰＥＧ）などの非イオン性界面活性剤を含むが、これらに限定されない。本明細書における例示的な薬学的に許容され得る担体には、可溶性の中性活性ヒアルロニダーゼ糖タンパク質（ｓＨＡＳＥＧＰ）、例えば、ｒＨｕＰＨ２０（ＨＹＬＥＮＥＸ（登録商標）、Ｈａｌｏｚｙｍｅ、Ｉｎｃ．）などのヒト可溶性ＰＨ－２０ヒアルロニダーゼ糖タンパク質などの間質性（ｉｎｔｅｒｓｔｉｔｉａｌ）薬物分散剤がさらに含まれる。ｒＨｕＰＨ２０を含む、特定の例示的なｓＨＡＳＥＧＰ及び使用方法は、米国特許出願公開第２００５／０２６０１８６号及び同第２００６／０１０４９６８号に記載されている。一態様では、ｓＨＡＳＥＧＰは、１つ又は複数のさらなるグリコサミノグリカナーゼ（例えば、コンドロイチナーゼ）と組み合わされる。
［００３０１］いくつかの実施態様では、本明細書で提供される抗体若しくは抗体（複数）は皮下投与用に製剤化される。いくつかの実施態様では、本明細書で提供される抗体若しくは抗体（複数）は静脈内投与用に製剤化される。いくつかの実施態様では、本明細書で提供される抗体若しくは抗体（複数）は局所投与用に製剤化される。
［００３０２］例示的な凍結乾燥抗体組成物は、米国特許第６，２６７，９５８号に記載されている。水性抗体組成物としては、米国特許第６，１７１，５８６号及び国際公開第２００６／０４４９０８号に記載のものが挙げられ、後者の組成物はヒスチジン－酢酸緩衝液を含む。
［００３０３］本明細書の薬学的組成物は、治療されている特定の適応症に必要な２つ以上の有効成分、好ましくは互いに悪影響を及ぼさない相補的活性を有する有効成分も含み得る。例えば、いくつかの実施態様では、薬学的組成物は、抗ＫＬＫ５抗体と組み合わせた抗ＫＬＫ７抗体を含む。かかる有効成分は、意図される目的に有効な量で組み合わせて好適に存在する。
［００３０４］有効成分はまた、例えば、コアセルベーション技術によって、又は界面重合によって調製されたマイクロカプセル、例えば、それぞれ、ヒドロキシメチルセルロース若しくはゼラチンマイクロカプセル及びポリ－（メチルメタクリレート）マイクロカプセルにより、コロイド薬物送達系（例えば、リポソーム、アルブミンマイクロスフェア、マイクロ乳濁液、ナノ粒子、及びナノカプセル）内、又はマクロ乳濁液中に取り込まれ得る。このような技術は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ １６ｔｈ ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｏｓｏｌ，Ａ．Ｅｄ．（１９８０）に開示されている。
［００３０５］徐放性の薬学的組成物を調製することができる。徐放性製剤の好適な例としては、抗体を含有する固体疎水性ポリマーの半透性マトリクスが含まれ、これらのマトリクスは、成形物品、例えば、フィルム又はマイクロカプセルの形態である。
［００３０６］ｉｎ ｖｉｖｏでの投与に用いられる薬学的組成物は、一般に無菌である。無菌は、例えば無菌濾過膜による濾過によって容易に達成され得る。
Ｈ．治療方法及び投与経路
［００３０７］本明細書で提供される抗体のいずれも、単独又は組み合わせて治療方法に使用することができる。
［００３０８］一態様では、医薬としての使用のための抗ＫＬＫ７抗体が提供される。一態様では、医薬としての使用のための抗ＫＬＫ５抗体が提供される。一態様では、医薬としての使用のための多重特異性抗ＫＬＫ５／ＫＬＫ７抗体が提供される。一態様では、医薬としての使用のための抗ＫＬＫ７抗体と抗ＫＬＫ５抗体の組み合わせが提供される。さらなる態様では、ネザートン症候群、喘息、アトピー性皮膚炎、乾癬、好酸球性食道炎、及び／又は酒さの治療における使用のためのそのような抗体が提供される。特定の態様では、治療方法における使用のための抗ＫＬＫ７抗体が提供される。特定の態様では、治療方法における使用のための抗ＫＬＫ５抗体が提供される。特定の態様では、治療方法における使用のための多重特異性抗ＫＬＫ５／ＫＬＫ７抗体が提供される。特定の態様では、治療方法における使用のための抗ＫＬＫ７抗体と抗ＫＬＫ５抗体の組み合わせが提供される。特定の態様では、本発明は、有効量の抗体又は抗体（複数）を個体に投与することを含む、ネザートン症候群、喘息、アトピー性皮膚炎、乾癬、好酸球性食道炎、及び／又は酒さを有する個体を治療する方法における使用のためのそのような抗体を提供する。そのような一態様では、本方法は、例えば以下に記載されるように、有効量の少なくとも１つの追加の治療剤（例えば、１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、又は６つの追加の治療剤）を個体に投与することをさらに含む。
［００３０９］さらなる態様では、本発明は、上皮炎症を減少させ、上皮透過性を減少させ、経表皮水分喪失を減少させ、真皮内浸潤を減少させ、不全角化を減少させ、上皮バリアを回復させ、及び／又は皮膚炎症性サイトカインを減少させることにおける使用のための抗ＫＬＫ７抗体及び／又は抗ＫＬＫ５抗体及び／又は多重特異性抗ＫＬＫ５／ＫＬＫ５抗体を提供する。特定の態様では、本発明は、個体における上皮炎症を減少させ、上皮透過性を減少させ、経表皮水分喪失を減少させ、真皮内浸潤を減少させ、不全角化を減少させ、及び／又は上皮バリアを回復させるための有効量の抗体又は抗体（複数）を個体に投与することを含む、個体における上皮炎症を減少させ、上皮透過性を減少させ、経表皮水分喪失を減少させ、真皮内浸潤を減少させ、不全角化を減少させ、上皮バリアを回復させ、及び／又は皮膚炎症性サイトカインを減少させる方法における使用のための抗ＫＬＫ７抗体及び／又は抗ＫＬＫ５抗体及び／又は多重特異性抗ＫＬＫ５／ＫＬＫ５抗体を提供する。上記の態様のいずれかによる「個体」は、好ましくはヒトである。
［００３１０］さらなる態様では、本発明は、医薬の製造又は調製における抗ＫＬＫ７抗体及び／又は抗ＫＬＫ５抗体及び／又は多重特異性抗ＫＬＫ５／ＫＬＫ５抗体の使用を提供する。一態様では、医薬は、ネザートン症候群、喘息、アトピー性皮膚炎、乾癬、好酸球性食道炎、及び／又は酒さを治療するためのものである。さらなる態様では、医薬は、ネザートン症候群、喘息、アトピー性皮膚炎、乾癬、好酸球性食道炎、及び／又は酒さを有する個体に有効量の医薬を投与することを含む、ネザートン症候群、喘息、アトピー性皮膚炎、乾癬、好酸球性食道炎、及び／又は酒さを治療する方法における使用のためのものである。そのような一態様では、本方法は、有効量の少なくとも１つの追加の治療剤、例えば、以下に記載されるものを個体に投与することをさらに含む。さらなる態様では、医薬は、上皮炎症を減少させ、上皮透過性を減少させ、経表皮水分喪失を減少させ、真皮内浸潤を減少させ、不全角化を減少させ、上皮バリアを回復させ、及び／又は皮膚炎症性サイトカインを減少させるためのものである。さらなる態様では、医薬は、上皮炎症を減少させ、上皮透過性を減少させ、経表皮水分喪失を減少させ、真皮内浸潤を減少させ、不全角化を減少させ、及び／又は上皮バリアを回復させるための有効量の
医薬を個体に投与することを含む、個体における上皮炎症を減少させ、上皮透過性を減少させ、経表皮水分喪失を減少させ、真皮内浸潤を減少させ、不全角化を減少させ、上皮バリアを回復させ、及び／又は皮膚炎症性サイトカインを減少させる方法における使用のためのものである。上記の態様のいずれかによる「個体」は、ヒトであってもよい。
［００３１１］さらなる態様では、本発明は、ネザートン症候群、喘息、アトピー性皮膚炎、乾癬、好酸球性食道炎、及び／又は酒さを治療するための方法を提供する。一態様では、方法は、ネザートン症候群、喘息、アトピー性皮膚炎、乾癬、好酸球性食道炎、及び／又は酒さを有する個体に、有効量の抗ＫＬＫ７抗体及び／又は抗ＫＬＫ５抗体及び／又は多重特異性抗ＫＬＫ５／ＫＬＫ５抗体を投与することを含む。そのような一態様では、本方法は、以下に記載されるように、有効量の少なくとも１つの追加の治療剤を個体に投与することをさらに含む。
［００３１２］いくつかの実施態様では、ネザートン症候群を有する個体における皮膚発疹及び／又は鱗屑を寛解する方法であって、有効量の抗ＫＬＫ７抗体及び／又は抗ＫＬＫ５抗体及び／又は多重特異性抗ＫＬＫ５／ＫＬＫ５抗体を個体に投与することを含む方法が提供される。
［００３１３］上記の態様のいずれかによる「個体」は、ヒトであってもよい。
［００３１４］さらなる態様では、本発明は、個体において上皮炎症を減少させ、上皮透過性を減少させ、経表皮水分喪失を減少させ、真皮内浸潤を減少させ、不全角化を減少させ、上皮バリアを回復させ、及び／又は皮膚炎症性サイトカインを減少させるための方法を提供する。一態様では、本方法は、上皮炎症を減少させ、上皮透過性を減少させ、経表皮水分喪失を減少させ、真皮内浸潤を減少させ、不全角化を減少させ、上皮バリアを回復させ、及び／又は皮膚炎症性サイトカインを減少させるために、有効量の抗ＫＬＫ７抗体及び／又は抗ＫＬＫ５抗体及び／又は多重特異性抗ＫＬＫ５／ＫＬＫ５抗体を個体に投与することを含む。非限定的な例示的な皮膚炎症性サイトカインには、ＩＬ－８、ＴＮＦα、ＩＬ－６、ＩＬ－４、及びＧ－ＣＳＦが含まれる。一態様では、「個体」はヒトである。
［００３１５］さらなる態様では、本発明は、例えば上記の治療方法のいずれかにおける使用のための、本明細書に提供される抗体のいずれかを含む薬学的組成物を提供する。一態様では、薬学的組成物は、本明細書に提供される抗体のいずれか及び薬学的に許容される担体を含む。別の態様では、薬学的組成物は、本明細書に提供される抗体のいずれかと、例えば以下に記載されるような少なくとも１つの追加の治療剤とを含む。
［００３１６］本発明の抗体は、単独で投与することも、併用療法で使用することもできる。例えば、併用療法には、本発明の抗体を投与することと、少なくとも１の追加の治療剤（例えば、１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、又は６つの追加の治療剤）を投与することとが含まれる。特定の態様では、併用療法は、本発明の抗体を投与すること、及び抗炎症剤などの少なくとも１つの追加の治療剤を投与することを含む。いくつかの実施態様では、抗炎症剤は経口投与される。いくつかの実施態様では、抗炎症剤は局所的に投与される。抗炎症剤としては、低用量抗生物質、ステロイド、コルチコステロイド、タクロリムス、抗ＩＬ４Ｒ抗体、ＴＮＦ阻害剤、ＩＬ－１２／２３阻害剤、ＩＬ－１７阻害剤、及びＩＬ－４受容体阻害剤が挙げられるが、これらに限定されない。非限定的な例示的抗炎症剤としては、ドキシサイクリン、メトトレキサート、プレドニゾン、シクロスポリン、ミコフェノール酸モフェチル、デュピルマブ、セルトリズマブペゴル、エタネルセプト、アダリムマブ、インフリキシマブ、ゴリムマブ、ウステキヌマブ、セクキヌマブ、イケキズマブ、ブロダルマブ、アバタセプト、チルドラキズマブ－ａｓｍｎ、リサンキスマブ（ｒｉｓａｎｋｉｓｕｍａｂ）－ｒｚａａ、及びグセルクマブが挙げられる。
［００３１７］いくつかの実施態様では、例えば酒さの治療において、追加の治療薬は経口投与されるドキシサイクリンである。いくつかの実施態様では、例えばアトピー性皮膚炎の治療において、追加の治療薬は皮下投与されるデュピルマブ；及び／又は局所投与されるステロイドである。いくつかの実施態様では、例えば、酒さの治療において、追加の治療薬は、局所投与されるステロイド；経口投与されるメトトレキサート；経口投与されるシクロスポリン；及び典型的には皮下投与されるＴＮＦ阻害剤から選択される。
［００３１８］上記の併用療法は、併用投与（２つ以上の治療剤が同じ又は別個の薬学的組成物に含まれる場合）、及び別個の投与を包含しており、この場合、本発明の抗体の投与は、１つ又は複数の追加の治療剤の投与前、投与と同時、及び／又は投与後に行うことができる。一態様では、本発明の抗体若しくは抗体（複数）の投与及び追加の治療剤の投与は、互いに約１ヶ月以内、又は約１、２、若しくは３週間以内、又は約１、２、３、４、５、若しくは６日以内に行われる。一態様では、抗体及び追加の治療剤は、治療の１日目に患者に投与される。
［００３１９］本発明の抗体（及び任意の追加の治療剤）は、非経口、肺内、及び鼻腔内、並びに局所治療のために望まれる場合、病変内投与を含む、任意の適切な手段によって投与することができる。非経口注入には、筋肉内、静脈内、動脈内、腹腔内、又は皮下投与が含まれる。投薬は、その投与が短期か又は長期かに部分的に依存して、任意の適切な経路、例えば、静脈内又は皮下注射などの注射により行うことができる。本明細書では、単回投与又は様々な時点にわたる複数回投与、ボーラス投与、及びパルス注入を含むがこれらに限定されない種々の投薬スケジュールが企図される。
いくつかの実施態様では、本発明の抗体は皮下投与される。いくつかの実施態様では、抗体は４週間ごと又は１ヵ月ごとに投与される。いくつかの実施態様では、本発明の抗体は静脈内に投与される。いくつかの実施態様では、抗体は４週間ごと又は１ヵ月ごとに投与される。いくつかの実施態様では、例えば、抗体がＭ４２８Ｌ（ＥＵ番号付け）及びＮ４３４Ｓ（ＥＵ番号付け）などの半減期延長置換を含む場合、抗体は８週間ごとに投与される。
［００３２１］本発明の抗体は、良好な医療行為と一貫する様式で、製剤化され、投薬され、且つ投与されるだろう。これに関連して考慮すべき要因としては、処置される特定の疾患、処置される特定の哺乳動物、個々の患者の臨床状態、疾患の原因、薬剤の送達部位、投与方法、投与スケジュール、及び医療従事者に既知である他の要因が挙げられる。抗体は、必ずしもそうである必要はないが、任意選択的に、問題の障害を予防又は治療するために現在使用されている１つ又は複数の薬剤とともに処方される。このような他の薬剤の有効量は、薬学的組成物中に存在する抗体の量、疾患又は治療法の種類、及び上述した他の要因に依存する。これらは、一般に、本明細書に記載のものと同投薬量及び投与経路によって、又は本明細書に記載の投薬量の約１～９９％、又は適切であると経験的／臨床的に判断される任意の投薬量及び任意の経路で使用される。
［００３２２］疾患の予防又は治療について、本発明の抗体の適切な投薬量は（単独で、又は１つ若しくは複数の他の追加の治療剤と組み合わせて使用される場合）、治療される疾患の種類、抗体の種類、疾患の重症度及び経過、抗体が予防目的又は治療目的で投与されるかどうか、以前の療法、患者の病歴及び抗体への応答、並びに主治医の裁量に依存するだろう。抗体は、適切には、患者に一度に又は一連の治療にわたって投与される。疾患の種類及び重篤度に応じて、約１μｇ／ｋｇ～１５ｍｇ／ｋｇ（例えば、０．１ｍｇ／ｋｇ～１０ｍｇ／ｋｇ）の抗体を、例えば、１回の又は複数回の別個の投与によるか、又は連続的な注入によるかに関わらず、患者に投与するための初期の候補投薬量とすることができる。上記の要因に応じて、典型的な１日あたりの投薬量は、約１μｇ／ｋｇ～１００ｍｇ／ｋｇ又はそれ以上の範囲である可能性がある。数日間又はそれ以上にわたる反復投与の場合、治療は通常、状態に応じて、疾患症状の所望の抑制が生じるまで続けられる。抗体の１つの例示的な投薬量は、約０．０５ｍｇ／ｋｇ～約１０ｍｇ／ｋｇの範囲であろう。したがって、約０．５ｍｇ／ｋｇ、２．０ｍｇ／ｋｇ、４．０ｍｇ／ｋｇ、又は１０ｍｇ／ｋｇ（又はこれらの任意の組み合わせ）のうちの１つ又は複数の用量が、患者に投与され得る。かかる用量は、間欠的に、例えば、毎週又は３週間に１回（例えば、患者が約２～約２０回、又は例えば約６回用量の抗体を受けるように）投与され得る。最初のより高い負荷用量、続いて１回以上のより低い用量を投与することができる。しかしながら、他の投与レジメンが有用であってもよい。この治療法の進行は、従来の技術及びアッセイによって容易にモニターされる。
［００３２３］様々な実施態様において、本明細書の方法で使用される抗ＫＬＫ５抗体は、ＫＬＫ５アンタゴニストと置き換えることができ、ここで、ＫＬＫ５アンタゴニストは、ＫＬＫ５プロテアーゼ活性を阻害する。様々な実施態様において、本明細書の方法で使用される抗ＫＬＫ７抗体は、ＫＬＫ５プロテアーゼ活性を阻害するＫＬＫ７アンタゴニストと置き換えることができる。様々な実施態様において、本明細書の方法で使用される二重特異性抗ＫＬＫ５．ＫＬＫ７抗体は、ＫＬＫ５／ＫＬＫ７アンタゴニストと置き換えられてもよく、ここで、ＫＬＫ５／ＫＬＫ７アンタゴニストは、ＫＬＫ５プロテアーゼ活性及びＫＬＫ７プロテアーゼ活性を阻害する。
Ｉ．製造品
［００３２４］本発明の別の態様では、上述の障害の治療、予防及び／又は診断に有用な材料を含む製造品が提供される。製造品は、容器と、容器上の又は容器に関連付けられたラベル又は添付文書を含む。適切な容器としては、例えば、ボトル、バイアル、注射器、ＩＶ溶液バッグなどが挙げられる。容器は、ガラス又はプラスチックなどの様々な材料から形成され得る。容器は、症状を処置、予防、及び／又は診断するのに有効な別の組成物と単独で又は組み合わせて使用される組成物を保持し、無菌アクセスポートを有していてもよい（例えば、容器は、静脈内溶液バッグ又は皮下注射針によって穿孔可能なストッパーを有するバイアルであってもよい）。組成物中の少なくとも１つの活性剤は、本発明の抗体である。ラベル又は添付文書は、組成物が選択された状態の治療のために使用されることを示す。さらに、製造品は、（ａ）本発明の抗体を含む組成物が中に収容されている第１の容器；及び（ｂ）さらなる細胞傷害性又はその他の治療剤を含む組成物が中に収容されている第２の容器を含んでもよい。本発明のこの態様における製品は、組成物が特定の状態を治療するために使用できることを示す添付文書をさらに含んでもよい。代替的に又は追加的に、製造品は、薬学的に許容される緩衝剤、例えば注射用静菌水（ＢＷＦＩ）、リン酸緩衝生理食塩水、リンゲル液及びデキストロース溶液を含む第２（又は第３）の容器をさらに含んでもよい。製造品は、他の緩衝剤、希釈剤、フィルター、針及びシリンジを含む、商業的観点及び使用者の観点から望ましい他の材料をさらに含んでもよい。
ＩＩＩ．実施例
［００３２５］以下は、本発明の方法及び組成物の例である。上記に提供される一般的な説明を考慮すると、種々の他の実施態様が実施されてもよいことが理解される。
実施例１：抗ＫＬＫ７抗体の生成
［００３２６］ニュージーランド白ウサギをヒトＫＬＫ７（配列番号４）で免疫し、出版された文献に関連する修正プロトコールを使用して単一のＢ細胞を単離した。例えば、Ｏｆｆｎｅｒ ｅｔ ａｌ．，ＰＬｏＳ ＯＮＥ ９（２），２０１４を参照のこと。この修飾されたワークフローは、ＩｇＧ＋ｈｕＫＬＫ７＋Ｂ細胞の単一ウェルへの直接ＦＡＣＳソーティングを含んだ。Ｂ細胞培養上清を、ヒトＫＬＫ７及び無関係な対照タンパク質への結合について、ＥＬＩＳＡによりアッセイした。ＫＬＫ７特異的Ｂ細胞を溶解し、直ちに－８０℃で凍結し、分子クローニングまで保存した。ウサギＢ細胞由来の各モノクローナル抗体の可変領域（ＶＨ及びＶＬ）を、先に記載したように、抽出したｍＲＮＡ由来の発現ベクターにクローニングした。文献参照。個々の組み換えウサギ抗体をＥｘｐｉ２９３細胞で発現させ、その後プロテインＡで精製した。ヒト及びカニクイザルの両方のＫＬＫ７に結合する約２４４個の抗ＫＬＫ７抗体が得られた。さらなる特徴づけのために、１７１個の抗体がクローン化及び発現された。精製された抗ＫＬＫ７抗体は、ｈｕＫＬＫ７に対する結合親和性、ｈｕＫＬＫ７に対する選択性、及び機能活性についてスクリーニングされた。
［００３２７］抗体の結合親和性を、ＢＩＡｃｏｒｅ（商標）Ｔ２００装置によって決定した。ウサギ抗体は組み換え的に発現させた。速度論的測定のために、抗体を研究グレードのプロテインＡチップ（ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ、ＵＳＡ）で捕捉して、約３００ＲＵを達成した。ヒト及びカニクイザルＫＬＫ７の１０倍段階希釈液を、２５℃で３０μＬ／分の流量でＨＢＳ－Ｐ緩衝液中に注入した。会合速度（ｋａ）及び解離速度（ｋｄ）を、１対１Ｌａｎｇｍｕｉｒ結合モデル（ＢＩＡｃｏｒｅ（商標）Ｔ２００ Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ Ｓｏｆｔｗａｒｅバージョン２．０）を使用して計算した。平衡解離定数（ＫＤ）を、比率ｋｄ／ｋａとして計算した。
［００３２８］最も強力な抗体のサブセットについての、ヒトＫＬＫ７及びカニクイザルＫＬＫ７に対する解離速度の結果を表１に示す。ｈｕＫＬＫ１、ｈｕＫＬＫ４、ｈｕＫＬＫ５、又はｈｕＫＬＫ１１に対する結合は観察されず、これらの抗体が特異的であることが確認された。
表１
Figure 2024512377000003
［００３２９］ＫＬＫ７直接機能アッセイを、３８４ウェルプレート（黒、低容量、丸底、Ｃｏｒｎｉｎｇ、＃４５１４）中で室温において、最終反応体積１５μＬで行った。阻害剤試料を、アッセイ緩衝液（７５ｍＭのトリス、ｐＨ８．０、１５０ｍＭのＮａＣｌ、０．０１％のＴｗｅｅｎ２０）中において、３倍の最終濃度に希釈した。阻害剤を欠く反応及び最終濃度２００ｎＭのＳＦＴＩ ２１７０５（Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ、ＤＭＳＯ中の１０ｍＭストック；ＳＦＴＩ－ＫＬＫ７とも呼ばれる；配列ＧＫＣＬＦＳＮＰＰＩＣＦＰＮ（配列番号１９６）；例えば、ｄｅ Ｖｅｅｒ ｅｔ ａｌ．，２０１７，Ｊ．Ｉｎｖｅｓｔｉｇ．Ｄｅｒｍａｔｏｌ．，１３７：４３０－４３９を参照）を含む反応を、それぞれ１００％及び０％の活性対照として使用した。阻害剤又は対照試料（５μＬ）をプレートに加え、続いてアッセイ緩衝液中に５μＬのヒトＫＬＫ７（配列番号４とＣ末端ＦＬＡＧタグ；Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ）又は５μＬのカニクイザルＫＬＫ７）（配列番号６とＣ末端ＦＬＡＧタグ；Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ）を最終濃度０．５ｎＭで加えた（Ｍｃａ基質アッセイ）。４０分後、アッセイ緩衝液中の最終濃度１０μＭ基質のＭｃａ－ＲＰＫＰＶＥ－Ｎｖａｌ－ＷＲＫ（Ｄｎｐ）（配列番号１２１；Ｂａｃｈｅｍ Ｍ－２１１０、ＤＭＳＯ中４．３ｍＭ原液）５μＬを加えた。基質を加えた後、ゲインを０％に設定した光モジュールＦＩ ３２０ ４０５を用いて、プレートをＰＨＥＲＡｓｔａｒ（登録商標）マイクロプレートリーダーで読み取った。測定は１００秒ごとに約１．５時間行われた。反応速度（ＲＦＵ／ｓとして表される）は、線形範囲内の線形回帰によって計算した。反応速度を０％及び１００％の活性対照の値に正規化し、ＩＣ５０値を計算するために４パラメータ方程式に適合させた。二価阻害剤に関する特定のデータについては、以下に示すように、生のＩＣ５０を２倍した。
［００３３０］各時点で測定された相対蛍光単位（ＲＦＵ）の線形回帰によって、各アッセイウェルについて初速度を計算した。最初の２つの時点は通常無視される。パーセント対照活性は、阻害なし及び完全阻害対照の平均に対して計算された。これらのパーセント対照活性を阻害剤濃度に対してプロットし、４パラメータ方程式を使用して適合させ、ＩＣ５０値を決定した。表２は、特定の抗体クローンに対するヒトＫＬＫ７及びカニクイザルＫＬＫ７阻害アッセイの結果を示す。表２では、全てのクローンが二価であるため、ＩＣ５０は二価について補正されていない。
Figure 2024512377000004
実施例２：抗ＫＬＫ７抗体のヒト化
［００３３１］実施例１に記載されたようにスクリーニングした後、最も優れた阻害活性を有する１７個の抗体を、さらなる特徴づけのために選択した。最も強い結合親和性、阻害活性を持ち、製造上の問題が最も少ない抗体（１４Ｈ１１）がヒト化用に選択された。抗体１４Ｈ１１重鎖可変領域（配列番号１１６）は、まず、Ｃ３５ａをＳで置換して不対システインを除去することによって修飾され、その結果、抗体１４Ｈ１１ｃ（ＶＨ、配列番号１３；ＶＬ、配列番号１４）が得られた。
［００３３２］ウサギモノクローナル抗体１４Ｈ１１ｃを以下のようにヒト化した。残基番号は、Ｋａｂａｔ ｅｔ ａｌ．，Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ ｉｎｔｅｒｅｓｔ，５ｔｈ Ｅｄ．，Ｐｕｂｌｉｃ Ｈｅａｌｔｈ Ｓｅｒｖｉｃｅ，Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，Ｍｄ．（１９９１）による。
［００３３３］１４Ｈ１１ｃのヒト化中に構築されたバリアントは、ヒトＩｇＧ１の形態で評価された。ウサギ抗体の超可変領域、ＶＬドメインの２４－３４位（Ｌ１；配列番号１０）、５０－５６位（Ｌ２；配列番号１１）及び８９－９７位（Ｌ３；配列番号１２）を、ヒトＫＶ１Ｄ－３９＊０１フレームワークに移植した：ＶＨドメインの３１－３５ｂ位（Ｈ１；配列番号７）、５０－６５位（Ｈ２；配列番号８）及び９５－１０２位（Ｈ３；配列番号９）を、ヒトＨＶ３－５３＊０１フレームワークに移植した。ウサギ抗体からの全てのＶＬ及びＶＨ Ｖｅｒｎｉｅｒ位置もまた、それぞれのヒト生殖細胞系フレームワークに移植した。全てのウサギアミノ酸がＶｅｒｎｉｅｒ位置にある移植片は、Ｌ１Ｈ１（ｈｕ．１４Ｈ１１ｃ．Ｌ１Ｈ１；配列番号１５（ＶＨ）及び３１（ＶＬ））と呼ばれる。
［００３３４］ヒト化抗体の結合親和性を、ＢＩＡｃｏｒｅ（商標）Ｔ２００装置によって決定した。速度論的測定のために、抗体を研究グレードのプロテインＡチップ（ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）で捕捉して、約３００ＲＵを達成した。ヒトＫＬＫ７の１０倍段階希釈液を、３７℃で１００μＬ／分の流量でＨＢＳ－Ｐ緩衝液中に注入した。会合速度（ｋａ）及び解離速度（ｋｄ）を、１対１Ｌａｎｇｍｕｉｒ結合モデル（ＢＩＡｃｏｒｅ Ｉｎｓｉｇｈｔ Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ Ｓｏｆｔｗａｒｅバージョン２．０）を使用して計算した。平衡解離定数（ＫＤ）を、比率ｋｄ／ｋａとして計算した。
［００３３５］ｈｕ．１４Ｈ１１ｃ．Ｌ１Ｈ１抗体の結合親和性をそのキメラ親クローンと比較した。ｈｕ．１４Ｈ１１ｃ．Ｌ１Ｈ１抗体のウサギＶｅｒｎｉｅｒ位置をヒト残基に戻して、ｈＫＬＫ７への結合親和性に対する各ウサギＶｅｒｎｉｅｒ位置の寄与を評価した。３つの追加の軽鎖（Ｌ２：Ｌ１＋Ａｌａ４３（配列番号３２）、Ｌ３：Ｌ１＋Ｐｈｅ７１（配列番号３３）、Ｌ４：Ｌ１＋Ａｌａ４３＋Ｐｈｅ７１（配列番号３４））及び９つの追加の重鎖（Ｈ２：Ｈ１＋Ｖａｌ２（配列番号１６）、Ｈ３：Ｈ１＋Ｖａｌ４８（配列番号１７）、Ｈ４：Ｈ１＋Ｓｅｒ４９（配列番号１８）、Ｈ５：Ｈ１＋Ａｒｇ７１（配列番号：１９）、Ｈ６：Ｈ１＋Ａｓｎ７３（配列番号：２０）、Ｈ７：Ｈ１＋Ｌｅｕ７８（配列番号２１）、Ｈ８：Ｈ１＋Ｔｙｒ９１（配列番号２２）、Ｈ９：Ｈ１＋Ｇｌｎ１０５（配列番号：２３）、Ｈ１０：Ｖｅｒｎｉｅｒ位置にウサギ残基（配列番号２４）は作製されなかった。図１Ａ～１Ｂを参照のこと。軽鎖（Ｌ２；配列番号３２）上のＴｙｒ７１、並びに重鎖（Ｈ１１；配列番号２９）上のＧｌｎ２及びＰｒｏ１０５は、上記のバリアント抗体の結合親和性評価に基づいて、重要なウサギｖｅｒｎｉｅｒ残基であると決定された（データは示さず）。キメラ１４Ｈ１１ｃは１ｐＭ未満のＫＤで結合したが、ｈｕ．１４Ｈ１１ｃ．Ｌ２Ｈ１１は０．４ｐＭのＫＤで結合した。
Figure 2024512377000005
実施例３：抗ＫＬＫ５抗体の親和性の最適化
［００３３６］抗ＫＬＫ５抗体ｈｕ．９Ｈ５．Ｌ４Ｈ１４及びｈｕ．１０Ｃ５．Ｌ５Ｈ２８の親和性を高めるために、それぞれ５４４個及び５７６個の単一点変異バリアントが生成された。得られた抗体を表面プラズモン共鳴によってスクリーニングし、解離速度に従ってランク付けした。図４（ｈｕ．１０Ｃ５．Ｌ５Ｈ２８バリアント）及び図５（ｈｕ．９Ｈ５．Ｌ４Ｈ１４バリアント）を参照。ｈｕ．１０Ｃ５．Ｌ５Ｈ２８では、解離速度が有意に遅くなる変異は５つだけであった。これらは、ＬＣ．Ｓ３４Ｋ（配列番号５４）、ＬＣ．Ｆ９２Ｙ（配列番号５５）、ＬＣ．Ｓ９５Ｆ（配列番号５６）、ＨＣ．Ｇ３３Ｐ（配列番号１０５）、及びＨＣ．Ｎ５３Ｖ（配列番号５２）であった。図２Ａ～２Ｂを参照のこと。ｈｕ．９Ｈ５．Ｌ４Ｈ１４の場合、親抗体よりも解離速度が遅い変異は４つだけであった：ＬＣ．Ｈ８９Ｖ（配列番号８８）、ＬＣ．Ｓ９５Ｙ（配列番号８９）、ＨＣ．Ｇ５４Ａ（配列番号８１）、及びＨＣ．Ｇ９８Ｑ（配列番号８２）。図３Ａ～３Ｂを参照のこと。
［００３３７］バリアントの良好な組み合わせを同定するために、個々の変異セットと組み合わせた変異セットとの両方を含むヒトＩｇＧ１ Ｆｃを含む１アーム（ＯＡ）一価抗体を生成した。良好な組み合わせは、表面プラズモン共鳴特徴づけによって同定された。表４～７は、１アーム（ＯＡ）一価抗体の速度論的特性を示している。
Figure 2024512377000006
Figure 2024512377000007
Figure 2024512377000008
Figure 2024512377000009
［００３３８］図６は、ヒトＫＬＫ５（図６Ａ）及びカニクイザルＫＬＫ５（図６Ｂ）についての、示されたｈｕ．１０Ｃ５．Ｌ５Ｈ２８バリアントの表面プラズモン共鳴トレースを示す。図７は、ヒトＫＬＫ５（図７Ａ）及びカニクイザルＫＬＫ５（図７Ｂ）についての、示されたｈｕ．９Ｈ５．Ｌ４Ｈ１４バリアントの表面プラズモン共鳴トレースを示す。
実施例４：抗ＫＬＫ５／ＫＬＫ７二重特異性抗体の生成及び特徴づけ
［００３３９］二重特異性抗体において抗ＫＬＫ７アームと対になる１０Ｃ５．Ｌ５Ｈ２８バリアントの良好な組み合わせを選択するために、我々は、ＫＬＫ５阻害活性、バキュロウイルス結合アッセイにおける非特異的結合、及び単一細胞内での抗ＫＬＫ７アームとの共発現時の正しい二重特異性生成について各バリアントを評価した。各バリアントは、単一細胞二重特異性組み立てのための正しい鎖対合を強化するために、以前に記載された変異を用いて構築された。Ｄｉｌｌｏｎ ｅｔ ａｌ．，Ｍａｂｓ ９（２）：２１３－２３０（２０１７）を参照。抗ＫＬＫ５ ＬＣはＱ３８Ｅ及びＶ１３３Ｋを含み、ＨＣはＱ３９Ｋ及びＳ１８３Ｅを含んでいた。抗ＫＬＫ７ ＬＣはＱ３８Ｋ及びＶ１３３Ｅを含み、ＨＣはＱ３９Ｅ及びＳ１８３Ｋを含んでいた。
［００３４０］全ての１アーム抗ＫＬＫ５抗体バリアントは、ＫＬＫ５阻害アッセイにおいて同様の効力を示し、ＩＣ５０は１．１４ｎＭから２．３０ｎＭの範囲であった（データは示さず）。
［００３４１］実質的にＨｏｔｚｅｌ ｅｔ ａｌ．，Ｍａｂｓ ４（６）：７５３－７６０（２０１２）に記載されているように、各抗ＫＬＫ５抗体バリアントの非特異的結合を、バキュロウイルス粒子を使用するＥＬＩＳＡで測定した。
［００３４２］２つのバリアント（Ｎ５３Ｖ／Ｓ３４Ｋ及びＮ５３Ｖ／Ｓ３４Ｋ／Ｆ９２Ｙ／Ｓ９５Ｆ）は、非特異的結合が高く、薬物動態特性の低下につながる可能性があるため、バキュロウイルス結合アッセイ後に除去された。表８及び９を参照のこと。
Figure 2024512377000010
Figure 2024512377000011
［００３４３］ＨＥＫ２９３細胞における共発現時に、抗ＫＬＫ７アームと正しく対合する各バリアントの能力を評価した。表１０に示すように、ＬＣ．Ｓ３４Ｋを持つ全てのバリアントは組み立て特性が悪かった。
Figure 2024512377000012
［００３４４］組み合わせた特性に基づいて、Ｑ３９Ｋ／Ｑ３８Ｅ変異を有するｈｕ．１０Ｃ５．Ｌ５Ｈ２８．Ｎ５３Ｖ．Ｆ９２Ｙ（ＶＨ、配列番号５３；ＶＬ、配列番号６２）を、Ｑ３９Ｅ／Ｑ３８Ｋ変異を有するｈｕ１４Ｈ１１ｃ．Ｌ２Ｈ１１（ＶＨ、配列番号３０；ＶＬ、配列番号３８）抗ＫＬＫ７アームと対合する抗ＫＬＫ５アームとして選択した。二重特異性抗体の２つのバージョンは、エフェクター機能が減弱された ｈＩｇＧ１ Ｎ２９７Ｇを使用して生成された。バージョンの１つは、ｉｎ ｖｉｖｏで抗体の半減期を延長することが示されている２つの変異（Ｍ４２８Ｌ／Ｎ４３４Ｓ）を含んでいた。Ｚａｌｅｖｓｋｙ ｅｔ ａｌ．Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈ，２０１０，２８：１５７－９；Ｋｏ ｅｔ ａｌ．Ｎａｔｕｒｅ，２０１４，５１４：６４２－５；Ｇａｕｄｉｎｓｋｉ ｅｔ ａｌ．ＰＬＯＳ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，２０１８，１５：ｅ１００２４９３を参照。
［００３４５］Ｍ４２８Ｌ／Ｎ４３４Ｓ（「ＬＳ」）変異の有無にかかわらず、抗ＫＬＫ５／ＫＬＫ７二重特異性抗体の親和性を、ヒト及びカニクイザルのＫＬＫ５及びＫＬＫ７について決定した。
Figure 2024512377000013
Figure 2024512377000014
［００３４６］二重特異性抗体の活性を、実質的に実施例１に記載したように、ＫＬＫ７及びＫＬＫ５直接機能アッセイを使用してアッセイした。ＫＬＫ５機能アッセイについては、ＫＬＫ７の代わりにヒト又はカニクイザルＫＬＫ５（それぞれ配列番号２及び１０１）、及び最終濃度５０μＭの基質Ｂｏｃ－Ｖａｌ－Ｐｒｏ－Ａｒｇ－ＡＭＣ（Ｂａｃｈｅｍ Ｉ－１１２０、水中３１．３ｍＭ原液）を使用するように、実施例１のアッセイを改変した。２００ｎＭのＳＰＩＮＫ９．ＳＲＥ．Ｆｃ（配列番号１９７；Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ；例えば、Ｂｒａｎｎｓｔｒｏｍ ｅｔ ａｌ．，２０１２，Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．３９３：３６９－３７７を参照）を０％活性対照として使用した。結果を表１３及び表１４に示す。
Figure 2024512377000015
Figure 2024512377000016
実施例５：アトピー性皮膚炎、酒さ、乾癬におけるＫＬＫ５及びＫＬＫ７の発現
［００３４７］免疫化学を使用して、ヒトの酒さとアトピー性皮膚炎の試料におけるＫＬＫ５の発現を測定した。図８に示すように、ヒトの酒さ及びアトピー性皮膚炎では、正常な皮膚と比較してＫＬＫ５タンパク質が増加している。
［００３４８］ＫＬＫ７がヒトの皮膚炎状態でも発現するかどうかを決定するために、アンチセンスＲＮＡプローブをｉｎ ｓｉｔｕハイブリダイゼーションに使用して、ＫＬＫ５及びＫＬＫ７の発現を視覚化した。図９は、正常皮膚と比較した、アトピー性皮膚炎、酒さ、及び乾癬における代表的なＫＬＫ７ ｍＲＮＡ染色を示す。図１０は、ＫＬＫ５（１０Ａ）及びＫＬＫ７（１０Ｂ）ｍＲＮＡがヒト皮膚において同様の解剖学的発現を示し、両方ともアトピー性皮膚炎、酒さ、及び乾癬において上方制御されることを示す。ＳＰＩＮＫ５の発現増加は、アトピー性皮膚炎や酒さでは有意ではなかったが、乾癬では有意であった。図１０のデータは、病理学者による二重盲検定量化を示している。
実施例６：ＫＬＫ５又はＫＬＫ７の皮内注射は経表皮水分喪失を増加させる
［００３４９］ＫＬＫ５又はＫＬＫ７が上皮バリア調節不全を直接促進し、経表皮水分喪失を増加させるかどうかを試験するために、２μｇの組み換えＫＬＫ５又はＫＬＫ７をＢａｌｂ／ｃマウスの背部皮膚に皮内注射した。
［００３５０］図１１に示すように、注射６時間後、携帯用皮膚蒸気計（Ｄｅｌｆｉｎ ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）で測定したところ、ＫＬＫ５及びＫＬＫ７を注射した動物の両方で経表皮水分喪失を増加させた。これらのデータは、ＫＬＫ５及びＫＬＫ７はそれぞれ上皮透過性の増加を促進する可能性があることを示唆した。
実施例７：ＫＬＫ５及びＫＬＫ７の阻害はマウス炎症性皮膚炎を改善する
［００３５１］マウスアトピー性皮膚炎におけるＫＬＫ５及びＫＬＫ７阻害の治療効果を試験するために、代用の抗マウスＫＬＫ５及び抗マウスＫＬＫ７阻害抗体を生成した。マウスのアトピー性皮膚炎は、ＳＤＳ及び黄色ブドウ球菌プロテインＡによる局所治療によって誘発された。次に、炎症性皮膚炎のマウスに、２５０μｇのアイソタイプ対照（抗ｇｐ１２０）、抗マウスＫＬＫ５抗体、抗マウスＫＬＫ７抗体、又は抗ＫＬＫ５抗体と抗ＫＬＫ７抗体との組み合わせを腹腔内注射した。ここでは、マウスＳＰＩＮＫ５－Ｆｃ融合タンパク質を、複数のＫＬＫ（ＫＬＫ５、ＫＬＫ７、及びＫＬＫ１４を含む）に対する非特異的阻害剤として使用した。
［００３５２］図１２に示すように、ＫＬＫ５又はＫＬＫ７の単独阻害は、日常皮膚炎臨床スコア（１２Ａ）、総末期アトピー性皮膚炎スコア（１２Ｂ）、及びＡＵＣ皮膚スコア（１２Ｃ）において中程度の保護を与えるが、ＫＬＫ５とＫＬＫ７の同時阻害により、ＳＰＩＮＫ５－Ｆｃと同様に優れた治療効果が得られる。ＳＰＩＮＫ５はＫＬＫ５とＫＬＫ７に加えて他のＫＬＫも阻害するので、このデータはＫＬＫ５とＫＬＫ７の阻害が治療有効性に十分であることを示唆している。
［００３５３］炎症性アトピー性皮膚炎は、Ｔ細胞の浸潤及びＩＬ－１３の産生と関連している。ＩＬ－１３を中和すると、マウス動物モデル及びヒトアトピー性皮膚炎患者においてアトピー性皮膚炎が改善する。２番目の実験では、ＳＤＳ／Ｓ．ａｕｒｅｕｓ ｐｒｏｔｅｉｎ Ａアトピー性皮膚炎モデルにおいて、陽性対照として抗ＩＬ－１３抗体を使用した。図１３に示すように、抗ＫＬＫ５抗体と抗ＫＬＫ７抗体の組み合わせは、抗ＩＬ－１３抗体と同程度に、総末期ＡＤスコアを減少させ、経表皮水分喪失（ＴＥＷＬ）を減少させ、組織学的疾患重症度スコアを減少させた。図１４は、代表的なヘマトキシリン及びエオシン染色を示し、抗ＫＬＫ５及びＫＬＫ７抗体の組み合わせが、抗ＩＬ－１３抗体と同程度に皮膚炎症及び不全角化を軽減することを実証している。
［００３５４］総合すると、これらの結果は、上皮バリア透過性の促進におけるＫＬＫ５とＫＬＫ７の重複した役割を示唆している。したがって、ＫＬＫ５とＫＬＫ７の組み合わせ阻害は、ＫＬＫ５又はＫＬＫ７単独の阻害と比較して、皮膚炎の臨床スコア、皮膚バリア機能、及び組織病理学的症状の改善をもたらすことが期待される。
実施例８：Ｓｐｉｎｋ５欠損マウスの皮膚発疹及び鱗屑は、抗ｍＫＬＫ５／ｍＫＬＫ７二重特異性抗体治療又は抗ｍＫＬＫ５抗体／抗ｍＫＬＫ７抗体の併用治療で改善する
［００３５５］Ｓｐｉｎｋ５ ｆ／ｆ Ｃｒｅ－ＥＲＴ２＋マウスに、１６ｍｇ／ｋｇ、８ｍｇ／ｋｇ、又は４ｍｇ／ｋｇのタモキシフェンを腹腔内注射し、Ｓｐｉｎｋ５遺伝子を欠失させた。タモキシフェン治療の１日前、抗マウスＫＬＫ５抗体（マウスあたり２．５ｍｇ）及び抗マウスＫＬＫ７抗体（マウスあたり０．５ｍｇ）又はアイソタイプ対照抗体（マウスあたり２．５ｍｇ）。抗ｍＫＬＫ７抗体のＩＣ５０が０．４８ｎＭであったのに対し、抗ｍＫＬＫ５抗体のＩＣ５０は４．７８ｎＭであり、抗ｍＫＬＫ５抗体は抗ｍＫＬＫ７抗体よりも１００倍作用が弱いと判定されたため、抗ｍＫＬＫ７抗体と比較して過剰の抗ｍＫＬＫ５抗体が使用された。タモキシフェンの注射後６日目に背中の皮膚を分析した。Ｓｐｉｎｋ５ｆ／ｆＣｒｅ－ＥＲＴ２陰性マウスも、対照として１６ｍｇ／ｋｇのタモキシフェンで治療された。
［００３５６］感染後６日目のマウスの背中の皮膚を図１６Ａ～１６Ｄに示す。アイソタイプ対照で治療したＳｐｉｎｋ５欠損マウスの皮膚は、乾燥し、鱗状になり、炎症を起こし、赤くなった。これらの外部ネザートン症候群様の症状は、異なるタモキシフェン用量にわたる抗ｍＫＬＫ５抗体と抗ｍＫＬＫ７抗体の併用注射により有意に改善された。
［００３５７］マウスの背中の皮膚をリン酸緩衝生理食塩水中で均質化し、皮膚溶解物を得た。溶解物は、Ｂｉｏ－Ｐｌｅｘ Ｍｕｌｔｉｐｌｅｘ Ｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙｓ（ＢｉｏＲａｄ）を使用して、サイトカインレベルを分析した。
［００３５８］サイトカインアッセイの結果を図１７Ａ～１７Ｅに示す。サイトカインＩＬ－８（１７Ａ）、ＴＮＦ－α（１７Ｂ）、ＩＬ－６（１７Ｃ）、ＩＬ－４（１７Ｄ）、及びＧ－ＣＳＦ（１７Ｅ）のレベルは、アイソタイプ対照抗体治療と比較して、抗ｍＫＬＫ５／ｍＫＬＫ７二重特異性抗体治療によって減少した。
［００３５９］図１８は、１６ｍｇ／ｋｇのタモキシフェン及びアイソタイプ対照抗体又は抗ｍＫＬＫ５抗体／抗ｍＫＬＫ７抗体の組み合わせで治療したＳｐｉｎｋ５欠損マウスからのヘマトキシリン及びエオシンで染色した皮膚の代表的な断面を示す。アイソタイプ対照抗体で治療したＳｐｉｎｋ５欠損マウスの皮膚では、顕著な白血球浸潤、表皮層の肥厚、及び表皮の落屑を示すが、ｍＫＬＫ５とｍＫＬＫ７を組み合わせて遮断すると、病理学的所見が有意に減少した。
実施例９：抗ＫＬＫ５／ＫＬＫ７二重特異性抗体は、ＫＬＫ５及びＫＬＫ７誘導性上皮透過性を阻害する
［００３６０］ヒト表皮ケラチノサイトを、コラーゲンでコーティングされた組織培養トランスウェルプレートに播種し、１．５ｍＭ ＣａＣｌ２で２日間分化させた。分化後、ＣａＣｌ２を０．１ｍＭまで減少させた。単層膜の頂端側をＫＬＫ５（５μｇ／ｍｌ）、ＫＬＫ７（５μｇ／ｍｌ）、ＫＬＫ５＋ＫＬＫ７（各５μｇ／ｍｌ）、又はＫＬＫ５＋ＫＬＫ７（各５μｇ／ｍｌ）＋１００μｇ／ｍｌ抗ＫＬＫ５／ＫＬＫ７二特異性抗体（ｈｕ．１０Ｃ５ＶＹ．ｈｕ１４Ｈ１１ｃ．Ｌ２Ｈ１１ ＬＳ）で７２時間又は９６時間処理した。各時点で、経上皮電気抵抗（ＴＥＥＲ）をボルト／オーム計で測定した。
［００３６１］結果を図２２Ａ～２２Ｂに示す。組み換えＫＬＫ５、ＫＬＫ７、又はＫＬＫ５／ＫＬＫ７を一緒に添加すると、上皮透過性が誘導され、経上皮電気抵抗によって定量化された。抗ＫＬＫ５／ＫＬＫ７二重特異性抗体は、ＫＬＫ５及びＫＬＫ７によって誘導される上皮透過性を有意に減少させた。
実施例１０：ＫＬＫ７に結合した抗ＫＬＫ７抗体１４Ｈ１１ｃの構造決定
［００３６２］組み換えＫＬＫ７残基Ｉ３０～Ｒ２５３（配列番号４）を、哺乳動物発現系（ＣＨＯ細胞）で発現させ、Ｎ末端にＨｉｓタグを付け、ＨｉｓタグとＫＬＫ７との間にエンテロキナーゼ切断部位を作製した。ＣＨＯ細胞を、１ｍｇ／ｍＬのキフネンシンと共にＥｎｄｏＨと共発現させた。発現培地を収集し、第１の工程としてＮｉ－ＮＴＡを用いて精製した。Ｎｉ－ＮＴＡカラムから溶出されたタンパク質は、Ｓｕｐｅｒｄｅｘ ２００（Ｓ２００）サイズ排除カラムでさらに精製した。ＫＬＫ７上のＨｉｓタグをエンテロキナーゼで一晩処理することによって除去し、ＫＬＫ７を、２５ｍＭ Ｈｅｐｅｓ ｐＨ７．８及び０～８００ｍＭ ＮａＣｌの勾配を用いるＳＰ ＨＰ陽イオン交換カラムでさらに精製した。
［００３６３］抗ＫＬＫ７抗体ｒｂ．１４Ｈ１１ｃの重鎖及び軽鎖を含むＦａｂ断片をＨＥＫ２９３細胞で発現させた。Ｎｉ－ＮＴＡ樹脂を使用した精製を容易にするため、重鎖のＣ末端にＨｉｓタグを付加し、その後ＰＢＳ中でサイズ排除クロマトグラフィーを行った。重鎖及び軽鎖の配列をそれぞれ配列番号１９８及び１９９に示す。この例の目的のために、配列にはシグナル配列から始まる番号が付けられている。したがって、配列番号１９８に示されるＦａｂ重鎖の番号付けは２０で始まり（アミノ酸２０～２５６）、したがって配列番号１９９に示されるＦａｂ軽鎖の番号付けは２３で始まる（アミノ酸２３～２３７）。
［００３６４］ＫＬＫ７を、１：１．５のＫＬＫ７：Ｆａｂのモル比で１４Ｈ１１ｃ Ｆａｂと混合し、複合体を、２５ｍＭ ＨＥＰＥＳ ｐＨ７．８、１５０ｍＭ ＮａＣｌ中でのサイズ排除クロマトグラフィーによって精製した。ＫＬＫ７：Ｆａｂ複合体を含むピークをリジン上でメチル化し（Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ，２００６，１４，１６１７－１６２２）、２５ｍＭ ＴＲＩＳ ｐＨ７．８及び１５０ｍＭ ＮａＣｌを使用するＳ２００カラム上でさらに精製した。複合体を１０ｍｇ／ｍＬまで濃縮し、タンパク質１μＬ、１０％ＰＥＧ４Ｋ及び０．２Ｍ硫酸アンモニウム１μＬを含むハンギングドロップによって結晶を成長させた。結晶は３日後に現れ、さらに２～３日かけて成長した。次いで、データ収集のために結晶を回収した。
［００３６５］Ｘ線回折データを、標準的な方法に従って、Ａｄｖａｎｃｅｄ Ｌｉｇｈｔ Ｓｏｕｒｃｅ（カリフォルニア州バークレー）における様々なシンクロトロンＸ線放射を使用して、１００ケルビンで低温冷却条件下において収集した。データ処理ソフトＸＤＳを使用して回折像を処理・縮小した（Ｋａｂｓｃｈ，Ｗ．ＸＤＳ．Ａｃｔａ Ｃｒｙｓｔ．Ｄ６６，１２５－１３２（２０１０））。モデルはプログラムＰＨＡＳＥＲによる分子置換法を用いて作成した。ヒトＫＬＫ７の構造（Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ １０４：１６０８６－１６０９１（２００７））及びＦａｂ抗体モデルを検索モデルとして使用した。構造は、ＣＯＯＴプログラムを使用したモデル調整、及びＰｈｅｎｉｘ．ｒｅｆｉｎｅ又はＰＨＥＮＩＸプログラムを使用した精密化の反復ラウンドを受けた。モデルを、許容可能なＲ及びＲｆｒｅｅ値並びにＲａｍａｃｈａｎｄｒａｎ統計（モル確率で算出）へと精密化した。ＫＬＫ７のアミノ酸残基番号付けはキモトリプシン番号付けシステム（ＫＬＫ７についてＰｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ １０４：１６０８６－１６０９１（２００７）、参照用のＰＤＢコード２ＱＸＩ；「標準プロテアーゼ番号付け」とも呼ばれる）に基づいていた。
［００３６６］ヒトＫＬＫ７に結合した１４Ｈ１１ｃ Ｆａｂの構造を図２０Ａ～２０Ｂに示す。ＫＬＫ７に結合した完全なＦａｂを、ＫＬＫ７単独の重ね合わせとともに図２０Ａに示す。図２０Ｂは、ＫＬＫ７－Ｆａｂ接触面を示す。
［００３６７］表１５は、Ｆａｂ－ＫＬＫ７接触面に関与する１４Ｈ１１ｃ重鎖アミノ酸及びＫＬＫ７アミノ酸を列挙する。
Figure 2024512377000017
［００３６８］表１６は、Ｆａｂ－ＫＬＫ７接触面に関与する１４Ｈ１１ｃ軽鎖アミノ酸及びＫＬＫ７アミノ酸を列挙する。
Figure 2024512377000018
［００３６９］表１７は、構造内で水素結合を形成する１４Ｈ１１ｃ重鎖アミノ酸及びＫＬＫ７アミノ酸を列挙し、表１８は、塩橋を形成する１４Ｈ１１ｃ重鎖アミノ酸及びＫＬＫ７アミノ酸を列挙する。
Figure 2024512377000019
Figure 2024512377000020
［００３７０］表１９は、構造内で水素結合を形成する１４Ｈ１１ｃ重鎖アミノ酸及びＫＬＫ７アミノ酸を列挙する。
Figure 2024512377000021
結晶構造に基づいて、抗ＫＬＫ７抗体ｒｂ．１４Ｈ１１ｃは、ＫＬＫ７の領域Ｒ７１～Ｎ８２、Ｋ１５２～Ｓ１５８、及びＱ２１１～Ｋ２２２（配列番号４）を含む接触面で、ＫＬＫ７の不連続エピトープに結合する。ｒｂ．１４Ｈ１１ｃは、配列番号４（Ｈ９１、Ｐ９２、Ｇ９３、Ｓ９５、Ｑ９７、Ｎ１０１、Ｎ１７８、Ｋ２３３、及びＴ２３５、キモトリプシン番号付けによる）に従って番号付けされたＫＬＫ７のアミノ酸Ｈ７２、Ｐ７３、Ｇ７４、Ｓ７６、Ｑ７８、Ｎ８２、Ｎ１５７、Ｋ２１１、及びＴ２１３と水素結合及び／又は塩橋を形成する。
［００３７２］図２０Ｃに示すように、１４Ｈ１１ｃ ＦａｂがＫＬＫ７の１７０ｓループ（キモトリプシン番号付け）に結合すると、１７０ｓループにおいて協調した構造変化が生じ、Ｌ１７６（配列番号４のＬ１５５）及びＤ１７４（配列番号４のＤ１５３）の立体構造における最も有意な変化を伴う。天然状態ではＫＬＫ７の疎水性コアにあるＬ１７６はＦａｂに面している（且つＦａｂとの相互作用によって安定化されている）。Ｆａｂとの立体衝突により、Ｄ１７４は基質結合領域に近い領域に移動し、その結果、Ｙ１７２（配列番号４のＹ１５１）及びＷ２１５（配列番号４のＷ１９２）が移動し、１８０ｓループと衝突し、その結果、１８０ｓループと２２０ｓループの両方がアンフォールディングし、基質結合部位が狭まる。このような構造変化がＫＬＫ７酵素の不活性化をもたらすと考えられている。
［００３７３］上述の発明を、理解を明確にする目的で、説明及び実施例によって、ある程度詳細に説明してきたが、説明及び実施例は、本発明の範囲を限定するものと解釈されるべきではない。本明細書に引用される全ての特許及び科学文献の開示は、参照によりその全体が明示的に組み込まれる。
ＩＶ．特定の配列の表
Figure 2024512377000022
Figure 2024512377000023
Figure 2024512377000024
Figure 2024512377000025
Figure 2024512377000026
Figure 2024512377000027
Figure 2024512377000028
Figure 2024512377000029
Figure 2024512377000030
Figure 2024512377000031
Figure 2024512377000032
Figure 2024512377000033
Figure 2024512377000034
Figure 2024512377000035
Figure 2024512377000036
Figure 2024512377000037
Figure 2024512377000038
Figure 2024512377000039
Figure 2024512377000040
Figure 2024512377000041
Figure 2024512377000042
Figure 2024512377000043
Figure 2024512377000044
Figure 2024512377000045
Figure 2024512377000046
Figure 2024512377000047
Figure 2024512377000048
Figure 2024512377000049
Figure 2024512377000050
Figure 2024512377000051
Figure 2024512377000052
Figure 2024512377000053
Figure 2024512377000054
Figure 2024512377000055
Figure 2024512377000056
Figure 2024512377000057
Figure 2024512377000058

Claims (195)

  1. ヒトＫＬＫ７に結合する抗体であって、該抗体が、
    （ａ）配列番号７のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号８のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２、及び（ｃ）配列番号２００のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３を含む重鎖可変ドメイン（ＶＨ）、並びに（ｄ）配列番号２０１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１、（ｅ）配列番号１１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２、及び（ｆ）配列番号１２のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３を含む軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）；又は
    （ｂ）配列番号７のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号８のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２、及び（ｃ）配列番号９のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３を含む重鎖可変ドメイン（ＶＨ）、並びに（ｄ）配列番号２０１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１、（ｅ）配列番号１１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２、及び（ｆ）配列番号１２のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３を含む軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）；又は
    （ｃ）配列番号７のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号８のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２、及び（ｃ）配列番号２００のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３を含む重鎖可変ドメイン（ＶＨ）、並びに（ｄ）配列番号１０のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１、（ｅ）配列番号１１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２、及び（ｆ）配列番号１２のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３を含む軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）
    を含む、ヒトＫＬＫ７に結合する抗体。
  2. モノクローナル抗体である、請求項１に記載の抗体。
  3. ヒト化又はキメラ抗体である、請求項１又は請求項２に記載の抗体。
  4. ヒトＫＬＫ７に結合する抗体断片である、請求項１～３のいずれか一項に記載の抗体。
  5. 抗体が、表面プラズモン共鳴によって測定した場合、１０ｐＭ未満、若しくは９ｐＭ未満、若しくは８ｐＭ未満、若しくは７ｐＭ未満、若しくは６ｐＭ未満、若しくは５ｐＭ未満のＫＤでヒトＫＬＫ７に結合し；且つ／又は表面プラズモン共鳴によって測定した場合、１０ｐＭ未満、若しくは９ｐＭ未満、若しくは８ｐＭ未満、若しくは７ｐＭ未満、若しくは６ｐＭ未満、若しくは５ｐＭ未満のＫＤでカニクイザルＫＬＫ７に結合する、請求項１～４のいずれかに記載の抗体。
  6. 重鎖可変領域が、配列番号１２３～１２８から選択されるアミノ酸配列を含むＦＲ１、配列番号１３０～１３３から選択されるアミノ酸配列を含むＦＲ２、配列番号１３５～１４３のアミノ酸配列を含むＦＲ３、及び／又は配列番号１４４～１４５から選択されるアミノ酸配列を含むＦＲ４を含む、請求項１～５のいずれか一項に記載の抗体。
  7. 軽鎖可変領域が、配列番号１４７～１５０から選択されるアミノ酸配列を含むＦＲ１、配列番号１５２～１５４から選択されるアミノ酸配列を含むＦＲ２、配列番号１５６～１５８から選択されるアミノ酸配列を含むＦＲ３、及び／又は配列番号１６０から選択されるアミノ酸配列を含むＦＲ４を含む、請求項１～６のいずれか一項に記載の抗体。
  8. （ａ）配列番号１５～３０及び２０２から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するＶＨ配列；
    （ｂ）配列番号３１～３８及び２０３から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するＶＬ配列；並びに
    （ｃ）（ａ）で規定されるＶＨ配列及び（ｂ）で規定されるＶＬ配列
    から選択される配列を含む、請求項１～７のいずれかに記載の抗体。
  9. （ａ）配列番号１５～３０及び２０２から選択されるアミノ酸配列を含むＶＨ配列；
    （ｂ）配列番号３１～３８及び２０３から選択されるアミノ酸配列を含むＶＬ配列；並びに
    （ｃ）（ａ）で規定されるＶＨ配列及び（ｂ）で規定されるＶＬ配列
    から選択される配列を含む、請求項１～１０のいずれかに記載の抗体。
  10. 配列番号２０２のＶＨ配列及び配列番号２０３のＶＬ配列を含む、請求項１～１１のいずれかに記載の抗体。
  11. 配列番号２０２のＶＨ配列及び配列番号２０３のＶＬ配列を含む、ヒトＫＬＫ７に特異的に結合する抗体。
  12. 抗体が重鎖定常領域及び軽鎖定常領域を含み、重鎖定常領域が、Ｓ１８３Ｋ置換（ＥＵ番号付け）及び／若しくはＳ１８３Ｅ置換（ＥＵ番号付け）を含み；且つ／又は軽鎖定常領域が、Ｖ１３３Ｋ置換（ＥＵ番号付け）及び／若しくはＶ１３３Ｅ置換（ＥＵ番号付け）を含む、請求項１～１１のいずれか一項に記載の抗体。
  13. 完全長ＩｇＧ１抗体である、請求項１～１２のいずれかに記載の抗体。
  14. 抗体が、Ｎ２９７Ｇ置換（ＥＵ番号付け）又はＬ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、及びＰ３２９Ｇ置換（ＥＵ番号付け）を含む重鎖定数領域を含む、請求項１３に記載の抗体。
  15. 抗体が、Ｍ４２８Ｌ置換（ＥＵ番号付け）及び／又はＮ４３４Ｓ置換（ＥＵ番号付け）を含む重鎖定常領域を含む、請求項１２～１４のいずれか一項に記載の抗体。
  16. 抗体が、表面プラズモン共鳴によって測定した場合、２０ｐＭ未満、又は１５ｐＭ未満、又は１０ｐＭ未満、５ｐＭ未満、又は３ｐＭ未満、又は２ｐＭ未満、又は１ｐＭ未満のＫＤでヒトＫＬＫ７に結合する、請求項１～１５のいずれか一項に記載の抗体。
  17. 抗体が、５ｎＭ未満、又は３ｎＭ未満、又は２ｎＭ未満、又は１ｎＭ未満のＩＣ５０でヒトＫＬＫ７プロテアーゼ活性を阻害する、請求項１～１６のいずれか一項に記載の抗体。
  18. 抗体が、表面プラズモン共鳴によって測定した場合、２０ｐＭ未満、又は１５ｐＭ未満、又は１０ｐＭ未満、５ｐＭ未満、又は３ｐＭ未満、又は２ｐＭ未満、又は１ｐＭ未満のＫＤでヒトＫＬＫ７に結合し；且つ抗体が、５ｎＭ未満、又は３ｎＭ未満、又は２ｎＭ未満、又は１ｎＭ未満のＩＣ５０でヒトＫＬＫ７プロテアーゼ活性を阻害する、請求項１～１９のいずれか一項に記載の抗体。
  19. ヒトＫＬＫ７プロテアーゼ活性の阻害が、アミノ酸配列ＲＰＫＰＶＥ－Ｎｖａｌ－ＷＲＫ（配列番号１２１）を含む基質のヒトＫＬＫ７媒介切断の阻害であり、Ｎｖａｌがノルバリンである、請求項１７又は請求項１８に記載の抗体。
  20. 抗体が多重特異性抗体である、請求項１～２１のいずれかに記載の抗体。
  21. 二重特異性抗体である、請求項２０に記載の抗体。
  22. 請求項１～２１のいずれかに記載の抗体をコードする、単離された核酸。
  23. 請求項２２に記載の核酸を含む、単離された宿主細胞。
  24. 請求項１～２１のいずれか一項に記載の抗体を発現する、単離された宿主細胞。
  25. ヒトＫＬＫ７に結合する抗体を産生する方法であって、抗体の発現に適した条件下で請求項２３又は請求項２４に記載の宿主細胞を培養することを含む方法。
  26. 抗体を宿主細胞から回収することをさらに含む、請求項２５に記載の方法。
  27. 請求項２６に記載の方法によって産生される抗体。
  28. ヒトＫＬＫ５に結合する抗体であって、（ａ）配列番号３９又は１０７のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号４０又は４１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２、及び（ｃ）配列番号２０４のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３を含む重鎖可変ドメイン（ＶＨ）、並びに（ｄ）配列番号４３又は４４のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１、（ｅ）配列番号４５のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２、及び（ｆ）配列番号４７のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３を含む軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）を含む、抗体。
  29. 抗体が、（ａ）配列番号３９のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号４１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２、及び（ｃ）配列番号２０４のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３を含む重鎖可変ドメイン（ＶＨ）、並びに（ｄ）配列番号４３のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１、（ｅ）配列番号４５のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２、及び（ｆ）配列番号４７のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３を含む軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）を含む、請求項２８に記載の抗体。
  30. モノクローナル抗体である、請求項２８又は請求項２９に記載の抗体。
  31. ヒト化又はキメラ抗体である、請求項２８～３０のいずれか一項に記載の抗体。
  32. ヒトＫＬＫ５に結合する抗体断片である、請求項２８～３１のいずれか一項に記載の抗体。
  33. 抗体が、表面プラズモン共鳴によって測定した場合、１ｎＭ未満、若しくは５００ｐＭ未満、若しくは３００ｐＭ未満、若しくは２００ｐＭ未満、若しくは１００ｐＭ未満、若しくは５０ｐＭ未満のＫＤでヒトＫＬＫ５に結合し；且つ／又は表面プラズモン共鳴によって測定した場合、１ｎＭ未満、若しくは５００ｐＭ未満、若しくは３００ｐＭ未満、若しくは２００ｐＭ未満、若しくは１００ｐＭ未満、若しくは５０ｐＭ未満のＫＤでカニクイザルＫＬＫ５に結合する、請求項２８～３２のいずれかに記載の抗体。
  34. 重鎖可変領域が、配列番号１６１のアミノ酸配列を含むＦＲ１、配列番号１６２～１６３のアミノ酸配列を含むＦＲ２、配列番号１６４のアミノ酸配列を含むＦＲ３、及び／又は配列番号１６５のアミノ酸配列を含むＦＲ４を含む、請求項２８～３３のいずれか一項に記載の抗体。
  35. 軽鎖可変領域が、配列番号１６６のアミノ酸配列を含むＦＲ１、配列番号１６７～１６８から選択されるアミノ酸配列を含むＦＲ２、配列番号１６９のアミノ酸配列を含むＦＲ３、及び／又は配列番号１７０のアミノ酸配列を含むＦＲ４を含む、請求項２８～３４のいずれか一項に記載の抗体。
  36. （ａ）配列番号２０５のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するＶＨ配列；
    （ｂ）配列番号５１及び５４～６７から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するＶＬ配列；並びに
    （ｃ）（ａ）で規定されるＶＨ配列及び（ｂ）で規定されるＶＬ配列
    から選択される配列を含む、請求項２８～３５のいずれかに記載の抗体。
  37. （ａ）配列番号２０５のアミノ酸配列を含むＶＨ配列；
    （ｂ）配列番号５１及び５４～６７から選択されるアミノ酸配列を含むＶＬ配列；並びに
    （ｃ）（ａ）で規定されるＶＨ配列及び（ｂ）で規定されるＶＬ配列
    から選択される配列を含む、請求項２８～３６のいずれかに記載の抗体。
  38. 配列番号２０５のＶＨ配列及び配列番号６２のＶＬ配列を含む、請求項２８～３７のいずれかに記載の抗体。
  39. 配列番号２０５のＶＨ配列及び配列番号６２のＶＬ配列を含む、ヒトＫＬＫ５に特異的に結合する抗体。
  40. 抗体が重鎖定常領域及び軽鎖定常領域を含み、重鎖定常領域が、Ｓ１８３Ｋ置換（ＥＵ番号付け）及び／若しくはＳ１８３Ｅ置換（ＥＵ番号付け）を含み；且つ／又は軽鎖定常領域が、Ｖ１３３Ｋ置換（ＥＵ番号付け）及び／若しくはＶ１３３Ｅ置換（ＥＵ番号付け）を含む、請求項２８～３９のいずれか一項に記載の抗体。
  41. 完全長ＩｇＧ１抗体である、請求項２８～４０のいずれかに記載の抗体。
  42. 抗体が、Ｎ２９７Ｇ置換（ＥＵ番号付け）又はＬ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、及びＰ３２９Ｇ置換（ＥＵ番号付け）を含む重鎖定数領域を含む、請求項４１に記載の抗体。
  43. 抗体が、Ｍ４２８Ｌ置換（ＥＵ番号付け）及び／又はＮ４３４Ｓ置換（ＥＵ番号付け）を含む重鎖定常領域を含む、請求項４０～４２のいずれか一項に記載の抗体。
  44. 抗体が、表面プラズモン共鳴によって測定した場合、６０ｐＭ未満、３０ｐＭ未満、２０ｐＭ未満、１０ｐＭ未満、又は５ｐＭ未満のＫＤでヒトＫＬＫ５に結合する、請求項２８～４３のいずれかに記載の抗体。
  45. 抗体が、５ｎＭ未満、又は３ｎＭ未満、又は２ｎＭ未満、又は１ｎＭ未満のＩＣ５０でヒトＫＬＫ５プロテアーゼ活性を阻害する、請求項２８～４４のいずれか一項に記載の抗体。
  46. 抗体が、表面プラズモン共鳴によって測定した場合、６０ｐＭ未満、３０ｐＭ未満、２０ｐＭ未満、１０ｐＭ未満、又は５ｐＭ未満のＫＤでヒトＫＬＫ５に結合し；且つ抗体が、５ｎＭ未満、又は３ｎＭ未満、又は２ｎＭ未満、又は１ｎＭ未満のＩＣ５０でヒトＫＬＫ５プロテアーゼ活性を阻害する、請求項２８～４５のいずれか一項に記載の抗体。
  47. ヒトＫＬＫ５プロテアーゼ活性の阻害が、基質Ｂｏｃ－Ｖａｌ－Ｐｒｏ－Ａｒｇ－ＡＭＣのヒトＫＬＫ５媒介切断の阻害である、請求項４５又は請求項４６に記載の抗体。
  48. 抗体が多重特異性抗体である、請求項２８～４７のいずれかに記載の抗体。
  49. 抗体が二重特異性抗体である、請求項４８に記載の抗体。
  50. 請求項２８～４９のいずれかに記載の抗体をコードする、単離された核酸。
  51. 請求項６１に記載の核酸を含む、単離された宿主細胞。
  52. 請求項２８～５１のいずれか一項に記載の抗体を発現する、単離された宿主細胞。
  53. ヒトＫＬＫ５に結合する抗体を産生する方法であって、抗体の発現に適した条件下で請求項５１又は請求項５２に記載の宿主細胞を培養することを含む方法。
  54. 抗体を宿主細胞から回収することをさらに含む、請求項５３に記載の方法。
  55. 請求項５４に記載の方法によって産生される、抗体。
  56. 第１の結合ドメイン及び第２の結合ドメインを含む二重特異性抗体であって、第１の結合ドメインがヒトＫＬＫ７に結合し、第２の結合ドメインがヒトＫＬＫ５に結合し、第１の結合ドメインが、
    （ａ）配列番号７のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号８のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２、及び（ｃ）配列番号２００のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３、並びに（ｄ）配列番号２０１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１、（ｅ）配列番号１１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２、及び（ｆ）配列番号１２のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３を含む軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）；又は
    （ｂ）配列番号７のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号８のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２、及び（ｃ）配列番号９のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３、並びに（ｄ）配列番号２０１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１、（ｅ）配列番号１１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２、及び（ｆ）配列番号１２のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３を含む軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）；又は
    （ｃ）配列番号７のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号８のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２、及び（ｃ）配列番号２００のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３、並びに（ｄ）配列番号１０のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１、（ｅ）配列番号１１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２、及び（ｆ）配列番号１２のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３を含む軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）
    を含む、二重特異性抗体。
  57. 第１の結合ドメインがヒト化されている、請求項５６に記載の二重特異性抗体。
  58. 第１の結合ドメインが、
    （ａ）配列番号１５～３０及び２０２から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するＶＨ配列；
    （ｂ）配列番号３１～３８及び２０３から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するＶＬ配列；並びに
    （ｃ）（ａ）で規定されるＶＨ配列及び（ｂ）で規定されるＶＬ配列
    から選択される配列を含む、請求項５６又は請求項５７に記載の二重特異性抗体。
  59. 第１の結合ドメインが、
    （ａ）配列番号１５～３０及び２０２から選択されるアミノ酸配列を含むＶＨ配列；
    （ｂ）配列番号３１～３８及び２０３から選択されるアミノ酸配列を含むＶＬ配列；並びに
    （ｃ）（ａ）で規定されるＶＨ配列及び（ｂ）で規定されるＶＬ配列
    から選択される配列を含む、請求項５６～５８のいずれか一項に記載の二重特異性抗体。
  60. 第１の結合ドメインが、配列番号２０２のＶＨ配列及び配列番号２０３のＶＬ配列を含む、請求項５６～５９のいずれか一項に記載の二重特異性抗体。
  61. 第２の結合ドメインが、
    （ａ）（ａ）配列番号３９及び１０７から選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号４０及び４１から選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２、及び（ｃ）配列番号４２又は２０４のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３を含む重鎖可変ドメイン（ＶＨ）並びに（ｄ）配列番号４３及び４４から選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１、（ｅ）配列番号４５のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２、及び（ｆ）配列番号４６～４９から選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３を含む軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）；又は
    （ｂ）（ａ）配列番号６８のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号６９及び７０から選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２、及び（ｃ）配列番号７１及び７２から選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３を含む重鎖可変ドメイン（ＶＨ）並びに（ｄ）配列番号７３のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１、（ｅ）配列番号７４のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２、及び（ｆ）配列番号７５～７８から選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３を含む軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）
    を含む、請求項５６～６０のいずれか一項に記載の二重特異性抗体。
  62. 第２の結合ドメインが、（ａ）配列番号３９のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号４１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２、及び（ｃ）配列番号２０４のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３を含む重鎖可変ドメイン（ＶＨ）、並びに（ｄ）配列番号４３のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１、（ｅ）配列番号４５のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２、及び（ｆ）配列番号４７のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３を含む軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）を含む、請求項５６～６１のいずれか一項に記載の二重特異性抗体。
  63. 第２の結合ドメインがヒト化されている、請求項５６～６２のいずれか一項に記載の二重特異性抗体。
  64. 第２の結合ドメインが、
    ａ）配列番号５０、５２、５３、１０５、１０６及び２０５から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するＶＨ配列；
    ｂ）配列番号５１及び５４～６７から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するＶＬ配列；並びに
    ｃ）（ａ）で規定されるＶＨ配列及び（ｂ）で規定されるＶＬ配列；
    ｄ）配列番号７９及び８１～８７から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するＶＨ配列；
    ｅ）配列番号８０及び８８～９４から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するＶＬ配列；並びに
    ｆ）（ｄ）で規定されるＶＨ配列及び（ｅ）で規定されるＶＬ配列
    から選択される配列を含む、請求項６１又は請求項６２に記載の二重特異性抗体。
  65. 第２の結合ドメインが、
    ａ）配列番号５２、５３、１０５、１０６及び２０５から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するＶＨ配列；
    ｂ）配列番号５４～６７から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するＶＬ配列；並びに
    ｃ）（ａ）で規定されるＶＨ配列及び（ｂ）で規定されるＶＬ配列
    から選択される配列を含む、請求項６１～６３のいずれか一項に記載の二重特異性抗体。
  66. 第２の結合ドメインが、
    ａ）配列番号５０、５２、５３、１０５、１０６、及び２０５から選択されるアミノ酸配列を含むＶＨ配列；
    ｂ）配列番号５１及び５４～６７から選択されるアミノ酸配列を含むＶＬ配列；並びに
    ｃ）（ａ）で規定されるＶＨ配列及び（ｂ）で規定されるＶＬ配列；
    ｄ）配列番号７９及び８１～８７から選択されるアミノ酸配列を含むＶＨ配列；
    ｅ）配列番号８０及び８８～９４から選択されるアミノ酸配列を含むＶＬ配列；並びに
    ｆ）（ｄ）で規定されるＶＨ配列及び（ｅ）で規定されるＶＬ配列
    から選択される配列を含む、請求項５６～６３のいずれか一項に記載の二重特異性抗体。
  67. 第２の結合ドメインが、
    ａ）配列番号５２、５３、１０５、１０６、及び２０５から選択されるアミノ酸配列を含むＶＨ配列；
    ｂ）配列番号５４～６７から選択されるアミノ酸配列を含むＶＬ配列；並びに
    ｃ）（ａ）で規定されるＶＨ配列及び（ｂ）で規定されるＶＬ配列；
    ｄ）配列番号８１～８７から選択されるアミノ酸配列を含むＶＨ配列；
    ｅ）配列番号８８～９４から選択されるアミノ酸配列を含むＶＬ配列；並びに
    ｆ）（ｄ）で規定されるＶＨ配列及び（ｅ）で規定されるＶＬ配列
    から選択される配列を含む、請求項５６～６３のいずれか一項に記載の二重特異性抗体。
  68. 第１の結合ドメインが、配列番号２０２のＶＨアミノ酸配列及び配列番号２０３のＶＬアミノ酸配列を含み、第２の結合ドメインが、配列番号２０５のＶＨ配列及び配列番号６２のＶＬアミノ酸配列を含む、請求項５６～６７のいずれか一項に記載の二重特異性抗体。
  69. 第１の結合ドメイン及び第２の結合ドメインを含む二重特異性抗体であって、ここで、第１の結合ドメインがヒトＫＬＫ７に結合し、第２の結合ドメインがヒトＫＬＫ５に結合し、第１の結合ドメインが、配列番号２０２の重鎖可変ドメイン（ＶＨ）アミノ酸配列及び配列番号２０３の軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）アミノ酸配列を含み、第２の結合ドメインが、配列番号２０５のＶＨアミノ酸配列及び配列番号６２のＶＬアミノ酸配列を含む、二重特異性抗体。
  70. 第１の結合ドメインが第１の重鎖可変ドメイン及び第１の軽鎖可変ドメインを含み、ここで、第１の重鎖可変ドメインが第１の重鎖定常領域に連結され、第１の軽鎖可変ドメインが第１の軽鎖定常領域に連結され；第２の結合ドメインが第２の重鎖可変ドメイン及び第２の軽鎖可変ドメインを含み、ここで、第２の重鎖可変ドメインが第２の重鎖定常領域に連結され、第２の軽鎖可変ドメインが第２の軽鎖定常領域に連結される、請求項５６～６９のいずれか一項に記載の二重特異性抗体。
  71. 第１の重鎖定常領域がノブ変異を含み、第２の重鎖定常領域がホール変異を含み；又は第１の重鎖定常領域がホール変異を含み、第２の重鎖定常領域がノブ変異を含む、請求項７０に記載の二重特異性抗体。
  72. 抗体がＩｇＧ１抗体であり、ノブ変異がＴ３６６Ｗ置換を含む、請求項７１に記載の二重特異性抗体。
  73. 抗体がＩｇＧ１抗体であり、ホール変異が、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、及びＹ４０７Ｖから選択される少なくとも１つ、少なくとも２つ、又は３つの置換を含む、請求項７１又は請求項７２に記載の二重特異性抗体。
  74. 抗体がＩｇＧ１抗体であり、ホール変異がＴ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、及びＹ４０７Ｖ置換を含む、請求項７３に記載の二重特異性抗体。
  75. 第１の重鎖定常領域及び／又は第２の重鎖定常領域が、Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、及びＰ３２９Ｇ置換（ＥＵ番号付け）を含む、請求項７０～７４のいずれか一項に記載の二重特異性抗体。
  76. 第１の重鎖定常領域及び第２の重鎖定常領域がそれぞれ、Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、及びＰ３２９Ｇ置換（ＥＵ番号付け）を含む、請求項７５に記載の二重特異性抗体。
  77. （ａ）第１の重鎖定常領域がＳ１８３Ｋ置換（ＥＵ番号付け）をさらに含み、第１の軽鎖定常領域がＶ１３３Ｅ置換（ＥＵ番号付け）を含み、第２の重鎖定常領域がＳ１８３Ｅ置換（ＥＵ番号付け）をさらに含み、第２の軽鎖定常領域がＶ１３３Ｋ置換（ＥＵ番号付け）を含み；又は
    （ｂ）第１の重鎖定常領域がＳ１８３Ｅ置換（ＥＵ番号付け）をさらに含み、第１の軽鎖定常領域がＶ１３３Ｋ置換（ＥＵ番号付け）を含み、第２の重鎖定常領域がＳ１８３Ｋ置換（ＥＵ番号付け）をさらに含み、第２の軽鎖定常領域がＶ１３３Ｅ置換（ＥＵ番号付け）を含む
    請求項７０～７６のいずれか一項に記載の二重特異性抗体。
  78. 第１の重鎖定常領域及び／又は第２の重鎖定常領域が、Ｍ４２８Ｌ及びＮ４３４Ｓ（ＥＵ番号付け）から選択される少なくとも１つの置換をさらに含む、請求項７０～７７のいずれか一項に記載の二重特異性抗体。
  79. 第１の重鎖定常領域及び第２の重鎖定常領域がそれぞれ、Ｍ４２８Ｌ及びＮ４３４Ｓ（ＥＵ番号付け）から選択される少なくとも１つの置換をさらに含む、請求項７８に記載の二重特異性抗体。
  80. 第１の重鎖定常領域及び第２の重鎖定常領域がそれぞれ、Ｍ４２８Ｌ及びＮ４３４Ｓ置換（ＥＵ番号付け）をさらに含む、請求項７９に記載の二重特異性抗体。
  81. （ａ）第１の重鎖定常領域が、配列番号９６、１８４、９８、１８６、１１７、１８８、１１９、１９０、２１１、２１２、２１５、２１６、２１９、２２０、２２３、及び２２４から選択されるアミノ酸配列を含み、第１の軽鎖定常領域が配列番号１０３のアミノ酸配列を含み；第２の重鎖定常領域が、配列番号９７、１８５、９９、１８７、１１８、１８９、１２０、１９１、２１３、２１４、２１７、２１８、２２１、２２２、２２５、及び２２６から選択されるアミノ酸配列を含み、第２の軽鎖定常領域が配列番号１０４のアミノ酸配列を含み；又は
    （ｂ）第２の重鎖定常領域が、配列番号９６、１８４、９８、１８６、１１７、１８８、１１９、１９０、２１１、２１２、２１５、２１６、２１９、２２０、２２３、及び２２４から選択されるアミノ酸配列を含み、第２の軽鎖定常領域が配列番号１０３のアミノ酸配列を含み；第１の重鎖定常領域が、配列番号９７、１８５、９９、１８７、１１８、１８９、１２０、１９１、２１３、２１４、２１７、２１８、２２１、２２２、２２５、及び２２６から選択されるアミノ酸配列を含み、第１の軽鎖定常領域が配列番号１０４のアミノ酸配列を含む
    請求項７０～８０のいずれか一項に記載の二重特異性抗体。
  82. （ａ）第１の重鎖定常領域が、配列番号９６、１８４、２１１、若しくは２１２のアミノ酸配列を含み、第１の軽鎖定常領域が配列番号１０３のアミノ酸配列を含み、第２の重鎖定常領域が、配列番号９７、１８５、２１３、若しくは２１４のアミノ酸配列を含み、第２の軽鎖定常領域が配列番号１０４のアミノ酸配列を含み；又は
    （ｂ）第１の重鎖定常領域が、配列番号９８、１８６、２１５、若しくは２１６のアミノ酸配列を含み、第１の軽鎖定常領域が配列番号１０３のアミノ酸配列を含み、第２の重鎖定常領域が、配列番号９９、１８７、２１７、若しくは２１８のアミノ酸配列を含み、第２の軽鎖定常領域が配列番号１０４のアミノ酸配列を含み；又は
    （ｃ）第２の重鎖定常領域が、配列番号９６、１８４、２１１、若しくは２１２のアミノ酸配列を含み、第２の軽鎖定常領域が配列番号１０３のアミノ酸配列を含み、第１の重鎖定常領域が、配列番号９７、１８５、２１３、若しくは２１４のアミノ酸配列を含み、第１の軽鎖定常領域が配列番号１０４のアミノ酸配列を含み；又は
    （ｄ）第２の重鎖定常領域が、配列番号９８、１８６、２１５、若しくは２１６のアミノ酸配列を含み、第２の軽鎖定常領域が配列番号１０３のアミノ酸配列を含み、第１の重鎖定常領域が、配列番号９９、１８７、２１７、若しくは２１８のアミノ酸配列を含み、第１の軽鎖定常領域が配列番号１０４のアミノ酸配列を含み；又は
    （ｅ）第１の重鎖定常領域が、配列番号１１８、１８９、２２１、若しくは２２２のアミノ酸配列を含み、第１の軽鎖定常領域が配列番号１０３のアミノ酸配列を含み、第２の重鎖定常領域が、配列番号１１７、１８８、２１９、若しくは２２０のアミノ酸配列を含み、第２の軽鎖定常領域が配列番号１０４のアミノ酸配列を含み；又は
    （ｆ）第１の重鎖定常領域が、配列番号１２０、１９１、２２５、若しくは２２６のアミノ酸配列を含み、第１の軽鎖定常領域が配列番号１０３のアミノ酸配列を含み、第２の重鎖定常領域が、配列番号１１９、１９０、２２３、若しくは２２４のアミノ酸配列を含み、第２の軽鎖定常領域が配列番号１０４のアミノ酸配列を含み；又は
    （ｇ）第２の重鎖定常領域が、配列番号１１８、１８９、２２１、若しくは２２２のアミノ酸配列を含み、第２の軽鎖定常領域が配列番号１０３のアミノ酸配列を含み、第１の重鎖定常領域が、配列番号１１７、１８８、２１９、若しくは２２０のアミノ酸配列を含み、第１の軽鎖定常領域が配列番号１０４のアミノ酸配列を含み；又は
    （ｈ）第２の重鎖定常領域が、配列番号１２０、１９１、２２５、若しくは２２６のアミノ酸配列を含み、第２の軽鎖定常領域が配列番号１０３のアミノ酸配列を含み、第１の重鎖定常領域が、配列番号１１９、１９０、２２３、若しくは２２４のアミノ酸配列を含み、第１の軽鎖定常領域が配列番号１０４のアミノ酸配列を含む
    請求項９８に記載の二重特異性抗体。
  83. 第１の結合ドメイン及び第２の結合ドメインを含む二重特異性抗体であって、ここで、第１の結合ドメインがヒトＫＬＫ７に結合し、第２の結合ドメインがヒトＫＬＫ５に結合し、第１の結合ドメインが、配列番号２０６又は２０９の重鎖アミノ酸配列及び配列番号２０７の軽鎖アミノ酸配列を含み、第２の結合ドメインが、配列番号２０８又は２１０の重鎖アミノ酸配列及び配列番号１１５の軽鎖アミノ酸配列を含む、二重特異性抗体。
  84. 第１の結合ドメイン及び第２の結合ドメインを含む二重特異性抗体であって、ここで、第１の結合ドメインがヒトＫＬＫ７に結合し、第２の結合ドメインがヒトＫＬＫ５に結合し、第２の結合ドメインが、（ａ）配列番号３９又は１０７のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号４０又は４１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２、及び（ｃ）配列番号２０４のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３を含む重鎖可変ドメイン（ＶＨ）、並びに（ｄ）配列番号４３又は４４のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１、（ｅ）配列番号４５のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２、及び（ｆ）配列番号４７のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３を含む軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）を含む、二重特異性抗体。
  85. 第２の結合ドメインが、（ａ）配列番号３９のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号４１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２、及び（ｃ）配列番号２０４のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３を含む重鎖可変ドメイン（ＶＨ）、並びに（ｄ）配列番号４３のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１、（ｅ）配列番号４５のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２、及び（ｆ）配列番号４７のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３を含む軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）を含む、請求項８５に記載の二重特異性抗体。
  86. 第２の結合ドメインがヒト化されている、請求項８４又は請求項８５に記載の二重特異性抗体。
  87. 第２の結合ドメインが、
    ａ）配列番号２０５のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するＶＨ配列；
    ｂ）配列番号５１及び５４～６７から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するＶＬ配列；並びに
    ｃ）（ａ）で規定されるＶＨ配列及び（ｂ）で規定されるＶＬ配列
    から選択される配列を含む、請求項８４～８６のいずれか一項に記載の二重特異性抗体。
  88. 第２の結合ドメインが、
    ａ）配列番号２０５のアミノ酸配列を含むＶＨ配列；
    ｂ）配列番号５１及び５４～６７から選択されるアミノ酸配列を含むＶＬ配列；並びに
    ｃ）（ａ）で規定されるＶＨ配列及び（ｂ）で規定されるＶＬ配列
    から選択される配列を含む、請求項８４～８６のいずれか一項に記載の二重特異性抗体。
  89. 第２の結合ドメインが、配列番号２０５のＶＨ配列及び配列番号６２のＶＬアミノ酸配列を含む、請求項８４～８６のいずれか一項に記載の二重特異性抗体。
  90. 第１の結合ドメインがヒト化されている、請求項８４～８９のいずれか一項に記載の二重特異性抗体。
  91. 第１の結合ドメインが第１の重鎖可変ドメイン及び第１の軽鎖可変ドメインを含み、ここで、第１の重鎖可変ドメインが第１の重鎖定常領域に連結され、第１の軽鎖可変ドメインが第１の軽鎖定常領域に連結され；第２の結合ドメインが第２の重鎖可変ドメイン及び第２の軽鎖可変ドメインを含み、ここで、第２の重鎖可変ドメインが第２の重鎖定常領域に連結され、第２の軽鎖可変ドメインが第２の軽鎖定常領域に連結される、請求項８４～９０のいずれか一項に記載の二重特異性抗体。
  92. 第１の重鎖定常領域がノブ変異を含み、第２の重鎖定常領域がホール変異を含み；又は第１の重鎖定常領域がホール変異を含み、第２の重鎖定常領域がノブ変異を含む、請求項９１に記載の二重特異性抗体。
  93. 抗体がＩｇＧ１抗体であり、ノブ変異がＴ３６６Ｗ変異を含む、請求項９２に記載の二重特異性抗体。
  94. 抗体がＩｇＧ１抗体であり、ホール変異が、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、及びＹ４０７Ｖから選択される少なくとも１つ、少なくとも２つ、又は３つの変異を含む、請求項９２又は請求項９３に記載の二重特異性抗体。
  95. 抗体がＩｇＧ１抗体であり、ホール変異がＴ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、及びＹ４０７Ｖ変異を含む、請求項９４に記載の二重特異性抗体。
  96. 第１の重鎖定常領域及び／又は第２の重鎖定常領域が、Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、及びＰ３２９Ｇ置換（ＥＵ番号付け）を含む、請求項９１～９５のいずれか一項に記載の二重特異性抗体。
  97. 第１の重鎖定常領域及び第２の重鎖定常領域がそれぞれ、Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、及びＰ３２９Ｇ置換（ＥＵ番号付け）を含む、請求項９６に記載の二重特異性抗体。
  98. （ａ）第１の重鎖定常領域がＳ１８３Ｋ置換（ＥＵ番号付け）をさらに含み、第１の軽鎖定常領域がＶ１３３Ｅ置換（ＥＵ番号付け）を含み、第２の重鎖定常領域がＳ１８３Ｅ置換（ＥＵ番号付け）をさらに含み、第２の軽鎖定常領域がＶ１３３Ｋ置換（ＥＵ番号付け）を含み；又は
    （ｂ）第１の重鎖定常領域がＳ１８３Ｅ置換（ＥＵ番号付け）をさらに含み、第１の軽鎖定常領域がＶ１３３Ｋ置換（ＥＵ番号付け）を含み、第２の重鎖定常領域がＳ１８３Ｋ置換（ＥＵ番号付け）をさらに含み、第２の軽鎖定常領域がＶ１３３Ｅ置換（ＥＵ番号付け）を含む
    請求項９１～９７のいずれか一項に記載の二重特異性抗体。
  99. 第１の重鎖定常領域及び／又は第２の重鎖定常領域が、Ｍ４２８Ｌ及びＮ４３４Ｓ（ＥＵ番号付け）から選択される少なくとも１つの置換をさらに含む、請求項９１～９８のいずれか一項に記載の二重特異性抗体。
  100. 第１の重鎖定常領域及び第２の重鎖定常領域がそれぞれ、Ｍ４２８Ｌ及びＮ４３４Ｓ（ＥＵ番号付け）から選択される少なくとも１つの置換をさらに含む、請求項９９に記載の二重特異性抗体。
  101. 第１の重鎖定常領域及び第２の重鎖定常領域がそれぞれ、Ｍ４２８Ｌ及びＮ４３４Ｓ置換（ＥＵ番号付け）をさらに含む、請求項１００に記載の二重特異性抗体。
  102. （ａ）第１の重鎖定常領域が、配列番号９６、１８４、９８、１８６、１１７、１８８、１１９、１９０、２１１、２１２、２１５、２１６、２１９、２２０、２２３、及び２２４から選択されるアミノ酸配列を含み、第１の軽鎖定常領域が配列番号１０３のアミノ酸配列を含み；且つ重鎖定常領域が、配列番号９７、１８５、９９、１８７、１１８、１８９、１２０、１９１、２１３、２１４、２１７、２１８、２２１、２２２、２２５、及び２２６から選択されるアミノ酸配列を含み、第２の軽鎖定常領域が配列番号１０４のアミノ酸配列を含み；又は
    （ｂ）第２の重鎖定常領域が、配列番号９６、１８４、９８、１８６、１１７、１８８、１１９、１９０、２１１、２１２、２１５、２１６、２１９、２２０、２２３、及び２２４から選択されるアミノ酸配列を含み、第２の軽鎖定常領域が配列番号１０３のアミノ酸配列を含み；第１の重鎖定常領域が、配列番号９７、１８５、９９、１８７、１１８、１８９、１２０、１９１、２１３、２１４、２１７、２１８、２２１、２２２、２２５、及び２２６から選択されるアミノ酸配列を含み、第１の軽鎖定常領域が配列番号１０４のアミノ酸配列を含む
    請求項９１～１０１のいずれか一項に記載の二重特異性抗体。
  103. （ａ）第１の重鎖定常領域が、配列番号９６、１８４、２１１、若しくは２１２のアミノ酸配列を含み、第１の軽鎖定常領域が配列番号１０３のアミノ酸配列を含み、第２の重鎖定常領域が、配列番号９７、１８５、２１３、若しくは２１４のアミノ酸配列を含み、第２の軽鎖定常領域が配列番号１０４のアミノ酸配列を含み；又は
    （ｂ）第１の重鎖定常領域が、配列番号９８、１８６、２１５、若しくは２１６のアミノ酸配列を含み、第１の軽鎖定常領域が配列番号１０３のアミノ酸配列を含み、第２の重鎖定常領域が、配列番号９９、１８７、２１７、若しくは２１８のアミノ酸配列を含み、第２の軽鎖定常領域が配列番号１０４のアミノ酸配列を含み；又は
    （ｃ）第２の重鎖定常領域が、配列番号９６、１８４、２１１、若しくは２１２のアミノ酸配列を含み、第２の軽鎖定常領域が配列番号１０３のアミノ酸配列を含み、第１の重鎖定常領域が、配列番号９７、１８５、２１３、若しくは２１４のアミノ酸配列を含み、第１の軽鎖定常領域が配列番号１０４のアミノ酸配列を含み；又は
    （ｄ）第２の重鎖定常領域が、配列番号９８、１８６、２１５、若しくは２１６のアミノ酸配列を含み、第２の軽鎖定常領域が配列番号１０３のアミノ酸配列を含み、第１の重鎖定常領域が、配列番号９９、１８７、２１７、若しくは２１８のアミノ酸配列を含み、第１の軽鎖定常領域が配列番号１０４のアミノ酸配列を含み；又は
    （ｅ）第１の重鎖定常領域が、配列番号１１８、１８９、２２１、若しくは２２２のアミノ酸配列を含み、第１の軽鎖定常領域が配列番号１０３のアミノ酸配列を含み、第２の重鎖定常領域が、配列番号１１７、１８８、２１９、若しくは２２０のアミノ酸配列を含み、第２の軽鎖定常領域が配列番号１０４のアミノ酸配列を含み；又は
    （ｆ）第１の重鎖定常領域が、配列番号１２０、１９１、２２５、若しくは２２６のアミノ酸配列を含み、第１の軽鎖定常領域が配列番号１０３のアミノ酸配列を含み、第２の重鎖定常領域が、配列番号１１９、１９０、２２３、若しくは２２４のアミノ酸配列を含み、第２の軽鎖定常領域が配列番号１０４のアミノ酸配列を含み；又は
    （ｇ）第２の重鎖定常領域が、配列番号１１８、１８９、２２１、若しくは２２２のアミノ酸配列を含み、第２の軽鎖定常領域が配列番号１０３のアミノ酸配列を含み、第１の重鎖定常領域が、配列番号１１７、１８８、２１９、若しくは２２０のアミノ酸配列を含み、第１の軽鎖定常領域が配列番号１０４のアミノ酸配列を含み；又は
    （ｈ）第２の重鎖定常領域が、配列番号１２０、１９１、２２５、若しくは２２６のアミノ酸配列を含み、第２の軽鎖定常領域が配列番号１０３のアミノ酸配列を含み、第１の重鎖定常領域が、配列番号１１９、１９０、２２３、若しくは２２４のアミノ酸配列を含み、第１の軽鎖定常領域が配列番号１０４のアミノ酸配列を含む
    請求項１０２に記載の二重特異性抗体。
  104. 抗体が、表面プラズモン共鳴によって測定した場合、６０ｐＭ未満、３０ｐＭ未満、２０ｐＭ未満、１０ｐＭ未満、又は５ｐＭ未満のＫＤでヒトＫＬＫ５に結合する、請求項５６～１０３のいずれか一項に記載の二重特異性抗体。
  105. 抗体が、５ｎＭ未満、又は３ｎＭ未満、又は２ｎＭ未満、又は１ｎＭ未満のＩＣ５０でヒトＫＬＫ５プロテアーゼ活性を阻害する、請求項５６～１０４のいずれか一項に記載の二重特異性抗体。
  106. 抗体が、表面プラズモン共鳴によって測定した場合、６０ｐＭ未満、３０ｐＭ未満、２０ｐＭ未満、１０ｐＭ未満、又は５ｐＭ未満のＫＤでヒトＫＬＫ５に結合し；且つ抗体が、５ｎＭ未満、又は３ｎＭ未満、又は２ｎＭ未満、又は１ｎＭ未満のＩＣ５０でヒトＫＬＫ５プロテアーゼ活性を阻害する、請求項５６～１０５のいずれか一項に記載の抗体。
  107. ヒトＫＬＫ５プロテアーゼ活性の阻害が、基質Ｂｏｃ－Ｖａｌ－Ｐｒｏ－Ａｒｇ－ＡＭＣのヒトＫＬＫ５媒介切断の阻害である、請求項１０５又は請求項１０６に記載の二重特異性抗体。
  108. 抗体が、表面プラズモン共鳴によって測定した場合、２０ｐＭ未満、又は１５ｐＭ未満、又は１０ｐＭ未満、５ｐＭ未満、又は３ｐＭ未満、又は２ｐＭ未満、又は１ｐＭ未満のＫＤでヒトＫＬＫ７に結合する、請求項５６～１０７のいずれか一項に記載の二重特異性抗体。
  109. 抗体が、５ｎＭ未満、又は３ｎＭ未満、又は２ｎＭ未満、又は１ｎＭ未満のＩＣ５０でヒトＫＬＫ７プロテアーゼ活性を阻害する、請求項５６～１０８のいずれか一項に記載の二重特異性抗体。
  110. 抗体が、表面プラズモン共鳴によって測定した場合、２０ｐＭ未満、又は１５ｐＭ未満、又は１０ｐＭ未満、５ｐＭ未満、又は３ｐＭ未満、又は２ｐＭ未満、又は１ｐＭ未満のＫＤでヒトＫＬＫ７に結合し；且つ抗体が、５ｎＭ未満、又は３ｎＭ未満、又は２ｎＭ未満、又は１ｎＭ未満のＩＣ５０でヒトＫＬＫ７プロテアーゼ活性を阻害する、請求項５６～１０９のいずれか一項に記載の二重特異性抗体。
  111. ヒトＫＬＫ７プロテアーゼ活性の阻害が、アミノ酸配列ＲＰＫＰＶＥ－Ｎｖａｌ－ＷＲＫ（配列番号１２１）を含む基質のヒトＫＬＫ７媒介切断の阻害であり、Ｎｖａｌがノルバリンである、請求項１０９又は請求項１１０に記載の二重特異性抗体。
  112. ヒトＫＬＫ５に対する二重特異性抗体のＫＤ及びヒトＫＬＫ７に対する抗体のＫＤが、互いの３倍以内、又は２．５倍以内、又は２倍以内、又は１．５倍以内である、請求項５６～１１１のいずれか一項に記載の二重特異性抗体。
  113. 請求項５６～１１２のいずれか一項に記載の二重特異性抗体をコードする単離された核酸。
  114. 請求項５６～１１２のいずれか一項に記載の二重特異性抗体の第１の結合ドメインをコードする単離された核酸。
  115. 請求項５６～１１２のいずれか一項に記載の二重特異性抗体の第２の結合ドメインをコードする単離された核酸。
  116. 請求項１１３に記載の単離された核酸を含む単離された宿主細胞。
  117. 請求項１１４に記載の単離された核酸を含む単離された宿主細胞。
  118. 請求項１１５に記載の単離された核酸を含む単離された宿主細胞。
  119. 請求項５６～１１２のいずれか一項に記載の二重特異性抗体を発現する単離された宿主細胞。
  120. 請求項５６～１１２のいずれか一項に記載の二重特異性抗体の第１の結合ドメインを発現する単離された宿主細胞。
  121. 請求項５６～１１２のいずれか一項に記載の二重特異性抗体の第２の結合ドメインを発現する単離された宿主細胞。
  122. ヒトＫＬＫ５及びヒトＫＬＫ７に結合する二重特異性抗体を産生する方法であって、抗体の発現に適した条件下で請求項１１６又は請求項１１９に記載の宿主細胞を培養することを含む方法。
  123. 抗体を宿主細胞から回収することをさらに含む、請求項１２２に記載の方法。
  124. ヒトＫＬＫ５及びヒトＫＬＫ７に結合する二重特異性抗体を産生する方法であって、（ｉ）第１の結合ドメインの発現に適した条件下で請求項１１７又は請求項１２０に記載の宿主細胞を培養すること；及び（ｉｉ）第２の結合ドメインの発現に適した条件下で、請求項１１８又は請求項１２１に記載の宿主細胞を培養すること、を含む方法。
  125. 第１の結合ドメイン及び第２の結合ドメインを回収すること、並びに二重特異性抗体を組み立てることをさらに含む、請求項１２４に記載の方法。
  126. 請求項１～２１のいずれかに記載の抗体と薬学的に許容される担体とを含む薬学的組成物。
  127. 追加の治療剤をさらに含む、請求項１２６に記載の薬学的組成物。
  128. 追加の治療剤がＫＬＫ５阻害剤である、請求項１２７に記載の薬学的組成物。
  129. ＫＬＫ５阻害剤が抗ＫＬＫ５抗体である、請求項１２８に記載の薬学的組成物。
  130. 抗ＫＬＫ５抗体が、
    （ａ）（ａ）配列番号３９及び１０７から選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号４０及び４１から選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２、及び（ｃ）配列番号４２又は２０４のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３を含む重鎖可変ドメイン（ＶＨ）並びに（ｄ）配列番号４３及び４４から選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１、（ｅ）配列番号４５のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２、及び（ｆ）配列番号４６～４９から選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３を含む軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）；又は
    （ｂ）（ａ）配列番号６８のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号６９及び７０から選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２、及び（ｃ）配列番号７１及び７２から選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３を含む重鎖可変ドメイン（ＶＨ）並びに（ｄ）配列番号７３のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１、（ｅ）配列番号７４のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２、及び（ｆ）配列番号７５～７８から選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３を含む軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）
    を含む、請求項１２９に記載の薬学的組成物。
  131. 抗ＫＬＫ５抗体が、（ａ）配列番号３９のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号４１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２、及び（ｃ）配列番号２０４のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３を含む重鎖可変ドメイン（ＶＨ）、並びに（ｄ）配列番号４３のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１、（ｅ）配列番号４５のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２、及び（ｆ）配列番号４７のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３を含む軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）を含む、請求項１２９又は請求項１３０に記載の薬学的組成物。
  132. 抗ＫＬＫ５抗体がモノクローナル抗体である、請求項１２９～１３１のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
  133. 抗ＫＬＫ５抗体がヒト化又はキメラ抗体である、請求項１２９～１３２のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
  134. 抗ＫＬＫ５抗体がヒトＫＬＫ５に結合する抗体断片である、請求項１２９～１３３のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
  135. 抗ＫＬＫ５抗体が、
    ａ）配列番号５０、５２、５３、１０５、１０６、及び２０５のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するＶＨ配列；
    ｂ）配列番号５１及び５４～６７から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するＶＬ配列；並びに
    ｃ）（ａ）で規定されるＶＨ配列及び（ｂ）で規定されるＶＬ配列；
    ｄ）配列番号７９及び８１～８７から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するＶＨ配列；
    ｅ）配列番号８０及び８８～９４から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するＶＬ配列；並びに
    ｆ）（ｄ）で規定されるＶＨ配列及び（ｅ）で規定されるＶＬ配列
    から選択される配列を含む、請求項１２９～１３４のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
  136. 抗ＫＬＫ５抗体が、
    ａ）配列番号２０５のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するＶＨ配列；
    ｂ）配列番号５４～６７から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するＶＬ配列；並びに
    ｃ）（ａ）で規定されるＶＨ配列及び（ｂ）で規定されるＶＬ配列
    から選択される配列を含む、請求項１２９～１３４のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
  137. 抗ＫＬＫ５抗体が、
    ａ）配列番号５０、５２、５３、１０５、１０６、及び２０５から選択されるアミノ酸配列を含むＶＨ配列；
    ｂ）配列番号５１及び５４～６７から選択されるアミノ酸配列を含むＶＬ配列；並びに
    ｃ）（ａ）で規定されるＶＨ配列及び（ｂ）で規定されるＶＬ配列；
    ｄ）配列番号７９及び８１～８７から選択されるアミノ酸配列を含むＶＨ配列；
    ｅ）配列番号８０及び８８～９４から選択されるアミノ酸配列を含むＶＬ配列；並びに
    ｆ）（ｄ）で規定されるＶＨ配列及び（ｅ）で規定されるＶＬ配列
    から選択される配列を含む、請求項１２９～１３４のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
  138. 抗ＫＬＫ５抗体が、
    ａ）配列番号５２、５３、１０５、１０６、及び２０５から選択されるアミノ酸配列を含むＶＨ配列；
    ｂ）配列番号５４～６７から選択されるアミノ酸配列を含むＶＬ配列；並びに
    ｃ）（ａ）で規定されるＶＨ配列及び（ｂ）で規定されるＶＬ配列
    から選択される配列を含む、請求項１２９～１３４のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
  139. 抗ＫＬＫ５抗体が請求項２８～４９のいずれか一項に記載の抗体である、請求項１２９に記載の薬学的組成物。
  140. 請求項２８～４９のいずれかに記載の抗体と薬学的に許容される担体とを含む薬学的組成物。
  141. 追加の治療剤をさらに含む、請求項１４０に記載の薬学的組成物。
  142. 追加の治療剤がＫＬＫ７阻害剤である、請求項１４１に記載の薬学的組成物。
  143. ＫＬＫ７阻害剤が抗ＫＬＫ７抗体である、請求項１４２に記載の薬学的組成物。
  144. 抗ＫＬＫ７抗体が請求項１～２１のいずれか一項に記載の抗体である、請求項１４３に記載の薬学的組成物。
  145. 請求項１～２１のいずれかに記載の抗体及び請求項２８～４９のいずれか一項に記載の抗体、並びに薬学的に許容される担体を含む薬学的組成物。
  146. 抗炎症剤及び抗生物質から選択される追加の治療剤を含む、請求項１２６～１４５のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
  147. 請求項５６～１１２のいずれか一項に記載の二重特異性抗体を含む薬学的組成物。
  148. 追加の治療剤をさらに含む、請求項１４７に記載の薬学的組成物。
  149. 追加の治療剤が抗炎症剤である、請求項１４８に記載の薬学的組成物。
  150. 薬学的組成物が局所投与用である、請求項１２６～１４９のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
  151. 薬学的組成物が、皮下投与又は静脈内投与用である、請求項１２６～１４９のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
  152. 医薬としての使用のための、請求項１～２１及び２８～４９のいずれか一項に記載の抗体、請求項５６～１１２のいずれか一項に記載の二重特異性抗体、又は請求項１２６～１４９のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
  153. ネザートン症候群、喘息、アトピー性皮膚炎、乾癬、好酸球性食道炎、及び酒さから選択される疾患の治療における使用のための、請求項１～２１及び２８～４９のいずれか一項に記載の抗体、請求項５６～１１２のいずれか一項に記載の二重特異性抗体、又は請求項１２６～１４９のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
  154. 喘息が、アトピー性喘息、アレルギー性喘息、非アレルギー性喘息、運動誘発喘息、アスピリン感受性／増悪喘息（ａｓｐｉｒｉｎ ｓｅｎｓｉｔｉｖｅ／ｅｘａｃｅｒｂａｔｅｄ ａｓｔｈｍａ）、軽度の喘息、中等度～重度の喘息、コルチコステロイド未処置喘息、慢性喘息、コルチコステロイド抵抗性喘息、コルチコステロイド不応性喘息、新たに診断された未治療喘息、喫煙に起因する喘息、コルチコステロイドで制御不能な喘息、Ｔヘルパーリンパ球２型（Ｔｈ２）喘息若しくは２型（Ｔｈ２）高値喘息又は２型（Ｔ２）駆動喘息、好酸球性喘息、高ペリオスチン喘息、高好酸球性喘息、Ｔｈ２低値喘息又は非Ｔｈ２駆動喘息、低ペリオスチン喘息、及び低好酸球性喘息から選択される、請求項１５３に記載の使用のための抗体、二重特異性抗体、又は薬学的組成物。
  155. 喘息が低好酸球性喘息である、請求項１５４に記載の使用のための抗体、二重特異性抗体、又は薬学的組成物。
  156. 医薬としての使用のための、請求項１～２１のいずれか一項に記載の抗体と請求項２８～４９のいずれか一項に記載の抗体との組み合わせ。
  157. ネザートン症候群、喘息、アトピー性皮膚炎、乾癬、好酸球性食道炎、及び酒さから選択される疾患の治療における使用のための、請求項１～２１のいずれか一項に記載の抗体と請求項２８～４９のいずれか一項に記載の抗体との組み合わせ。
  158. 喘息が、アトピー性喘息、アレルギー性喘息、非アレルギー性喘息、運動誘発喘息、アスピリン感受性／増悪喘息（ａｓｐｉｒｉｎ ｓｅｎｓｉｔｉｖｅ／ｅｘａｃｅｒｂａｔｅｄ ａｓｔｈｍａ）、軽度の喘息、中等度～重度の喘息、コルチコステロイド未処置喘息、慢性喘息、コルチコステロイド抵抗性喘息、コルチコステロイド不応性喘息、新たに診断された未治療喘息、喫煙に起因する喘息、コルチコステロイドで制御不能な喘息、Ｔヘルパーリンパ球２型（Ｔｈ２）喘息若しくは２型（Ｔｈ２）高値喘息又は２型（Ｔ２）駆動喘息、好酸球性喘息、高ペリオスチン喘息、高好酸球性喘息、Ｔｈ２低値喘息又は非Ｔｈ２駆動喘息、低ペリオスチン喘息、及び低好酸球性喘息から選択される、請求項１５７に記載の使用のための組み合わせ。
  159. 喘息が、低好酸球性喘息である、請求項１５８に記載の組み合わせ。
  160. ネザートン症候群、喘息、アトピー性皮膚炎、乾癬、好酸球性食道炎、及び酒さから選択される疾患を治療するための医薬の製造における、請求項１～２１及び２８～４９のいずれか一項に記載の抗体、請求項５６～１１２のいずれか一項に記載の二重特異性抗体、又は請求項１２６～１４９のいずれか一項に記載の薬学的組成物の使用。
  161. 喘息が、アトピー性喘息、アレルギー性喘息、非アレルギー性喘息、運動誘発喘息、アスピリン感受性／増悪喘息（ａｓｐｉｒｉｎ ｓｅｎｓｉｔｉｖｅ／ｅｘａｃｅｒｂａｔｅｄ ａｓｔｈｍａ）、軽度の喘息、中等度～重度の喘息、コルチコステロイド未処置喘息、慢性喘息、コルチコステロイド抵抗性喘息、コルチコステロイド不応性喘息、新たに診断された未治療喘息、喫煙に起因する喘息、コルチコステロイドで制御不能な喘息、Ｔヘルパーリンパ球２型（Ｔｈ２）喘息若しくは２型（Ｔｈ２）高値喘息又は２型（Ｔ２）駆動喘息、好酸球性喘息、高ペリオスチン喘息、高好酸球性喘息、Ｔｈ２低値喘息又は非Ｔｈ２駆動喘息、低ペリオスチン喘息、及び低好酸球性喘息から選択される、請求項１６０に記載の使用。
  162. 喘息が、低好酸球性喘息である、請求項１６１に記載の使用。
  163. ネザートン症候群、喘息、アトピー性皮膚炎、乾癬、好酸球性食道炎、及び酒さから選択される疾患の治療のための医薬の製造における、請求項１～２１のいずれか一項に記載の抗体と請求項２８～４９のいずれか一項に記載の抗体との組み合わせの使用。
  164. 喘息が、アトピー性喘息、アレルギー性喘息、非アレルギー性喘息、運動誘発喘息、アスピリン感受性／増悪喘息（ａｓｐｉｒｉｎ ｓｅｎｓｉｔｉｖｅ／ｅｘａｃｅｒｂａｔｅｄ ａｓｔｈｍａ）、軽度の喘息、中等度～重度の喘息、コルチコステロイド未処置喘息、慢性喘息、コルチコステロイド抵抗性喘息、コルチコステロイド不応性喘息、新たに診断された未治療喘息、喫煙に起因する喘息、コルチコステロイドで制御不能な喘息、Ｔヘルパーリンパ球２型（Ｔｈ２）喘息若しくは２型（Ｔｈ２）高値喘息又は２型（Ｔ２）駆動喘息、好酸球性喘息、高ペリオスチン喘息、高好酸球性喘息、Ｔｈ２低値喘息又は非Ｔｈ２駆動喘息、低ペリオスチン喘息、及び低好酸球性喘息から選択される、請求項１６３に記載の使用。
  165. 喘息が、低好酸球性喘息である、請求項１６４に記載の使用。
  166. 上皮炎症を減少させ、上皮透過性を減少させ、経表皮水分喪失を減少させ、真皮内浸潤を減少させ、不全角化を減少させ、上皮バリアを回復させ、及び／又は皮膚炎症性サイトカインを減少させるための医薬の製造における、請求項１～２１及び２８～４９のいずれか一項に記載の抗体、請求項５６～１１２のいずれか一項に記載の二重特異性抗体、又は請求項１２６～１４９のいずれか一項に記載の薬学的組成物の使用。
  167. 上皮炎症を減少させ、上皮透過性を減少させ、経表皮水分喪失を減少させ、真皮内浸潤を減少させ、不全角化を減少させ、上皮バリアを回復させ、及び／又は皮膚炎症性サイトカインを減少させるための医薬の製造における、請求項１～２１のいずれか一項に記載の抗体と請求項２８～４９のいずれか一項に記載の抗体との組み合わせの使用。
  168. ネザートン症候群、喘息、アトピー性皮膚炎、乾癬、好酸球性食道炎、及び酒さから選択される疾患を有する個体を治療する方法であって、請求項１～２１及び２８～４９のいずれか一項に記載の抗体、請求項５６～１１２のいずれか一項に記載の二重特異性抗体、又は請求項１２６～１４９のいずれか一項に記載の薬学的組成物の有効量を個体に投与することを含む、方法。
  169. ネザートン症候群、喘息、アトピー性皮膚炎、乾癬、好酸球性食道炎、及び酒さから選択される疾患を有する個体を治療する方法であって、ａ）請求項１～２１のいずれか一項に記載の抗体の有効量；及びｂ）請求項２８～４９のいずれか一項に記載の抗体の有効量を個体に投与することを含む、方法。
  170. （ａ）の抗体及び（ｂ）の抗体が同時に投与される、請求項１６９に記載の方法。
  171. （ａ）の抗体及び（ｂ）の抗体が連続的に投与される、請求項１６９に記載の方法。
  172. ネザートン症候群、喘息、アトピー性皮膚炎、乾癬、好酸球性食道炎、及び酒さから選択される疾患を有する個体を治療する方法であって、請求項５６～１１２のいずれか一項に記載の二重特異性抗体の有効量、又は請求項１２６～１４９のいずれか一項に記載の薬学的組成物の有効量を個体に投与することを含む、方法。
  173. 喘息が、アトピー性喘息、アレルギー性喘息、非アレルギー性喘息、運動誘発喘息、アスピリン感受性／増悪喘息（ａｓｐｉｒｉｎ ｓｅｎｓｉｔｉｖｅ／ｅｘａｃｅｒｂａｔｅｄ ａｓｔｈｍａ）、軽度の喘息、中等度～重度の喘息、コルチコステロイド未処置喘息、慢性喘息、コルチコステロイド抵抗性喘息、コルチコステロイド不応性喘息、新たに診断された未治療喘息、喫煙に起因する喘息、コルチコステロイドで制御不能な喘息、Ｔヘルパーリンパ球２型（Ｔｈ２）喘息若しくは２型（Ｔｈ２）高値喘息又は２型（Ｔ２）駆動喘息、好酸球性喘息、高ペリオスチン喘息、高好酸球性喘息、Ｔｈ２低値喘息又は非Ｔｈ２駆動喘息、低ペリオスチン喘息、及び低好酸球性喘息から選択される、請求項１６８～１７２のいずれか一項に記載の方法。
  174. 喘息が、低好酸球性喘息である、請求項１７３に記載の方法。
  175. 個体がネザートン症候群を有する、請求項１６８～１７２のいずれか一項に記載の方法。
  176. 個体が酒さを有する、請求項１６８～１７２のいずれか一項に記載の方法。
  177. 個体に、追加の治療剤を投与することをさらに含む、請求項１６８～１７６のいずれか一項に記載の方法。
  178. 追加の治療剤が抗炎症剤である、請求項１７７に記載の方法。
  179. 個体における上皮炎症を減少させ、上皮透過性を減少させ、経表皮水分喪失を減少させ、真皮内浸潤を減少させ、不全角化を減少させ、上皮バリアを回復させ、及び／又は皮膚炎症性サイトカインを減少させる方法であって、上皮炎症を減少させ、上皮透過性を減少させ、経表皮水分喪失を減少させ、真皮内浸潤を減少させ、不全角化を減少させ、及び／又は上皮バリアを回復させるために、請求項１～２１及び２８～４９のいずれか一項に記載の抗体、請求項５６～１１２のいずれか一項に記載の二重特異性抗体、又は請求項１２６～１４９のいずれか一項に記載の薬学的組成物の有効量を個体に投与することを含む、方法。
  180. 個体における上皮炎症を減少させ、上皮透過性を減少させ、経表皮水分喪失を減少させ、真皮内浸潤を減少させ、不全角化を減少させ、上皮バリアを回復させ、及び／又は皮膚炎症性サイトカインを減少させる方法であって、上皮炎症を減少させ、上皮透過性を減少させ、経表皮水分喪失を減少させ、真皮内浸潤を減少させ、不全角化を減少させ、及び／又は上皮バリアを回復させるために、ａ）請求項１～２１のいずれか一項に記載の抗体の有効量；及びｂ）請求項２８～４９のいずれか一項に記載の抗体の有効量を個体に投与することを含む、方法。
  181. （ａ）の抗体及び（ｂ）の抗体が同時に投与される、請求項１８０に記載の方法。
  182. （ａ）の抗体及び（ｂ）の抗体が連続的に投与される、請求項１８０に記載の方法。
  183. 個体における上皮炎症を減少させ、上皮透過性を減少させ、経表皮水分喪失を減少させ、真皮内浸潤を減少させ、不全角化を減少させ、上皮バリアを回復させ、及び／又は皮膚炎症性サイトカインを減少させる方法であって、上皮炎症を減少させ、上皮透過性を減少させ、経表皮水分喪失を減少させ、真皮内浸潤を減少させ、不全角化を減少させ、及び／又は上皮バリアを回復させるために、請求項５６～１１２のいずれか一項に記載の二重特異性抗体、又は請求項１２６～１４９のいずれか一項に記載の薬学的組成物の有効量を個体に投与することを含む、方法。
  184. 投与が皮下投与又は静脈内投与である、請求項１６８～１８３のいずれか一項に記載の方法。
  185. 投与が局所投与である、請求項１６８～１８３のいずれか一項に記載の方法。
  186. 投与が局所投与である、請求項１６８～１８３のいずれか一項に記載の方法。
  187. 疾患がネザートン症候群である、請求項１５３に記載の使用のための抗体、二重特異性抗体、又は薬学的組成物。
  188. 疾患がネザートン症候群である、請求項１５７に記載の使用のための組み合わせ。
  189. 疾患がネザートン症候群である、請求項１６０又は１６３のいずれか一項に記載の使用。
  190. 医薬が、ネザートン症候群を有する個体における上皮炎症を減少させ、上皮透過性を減少させ、経表皮水分喪失を減少させ、真皮内浸潤を減少させ、不全角化を減少させ、上皮バリアを回復させ、及び／又は皮膚炎症性サイトカインを減少させるためのものである、請求項１６６又は１６７のいずれか一項に記載の使用。
  191. ネザートン症候群の治療における使用のための二重特異性抗体であって、該二重特異性抗体が、第１の結合ドメイン及び第２の結合ドメインを含み、ここで、第１の結合ドメインがヒトＫＬＫ７に結合し、第２の結合ドメインがヒトＫＬＫ５に結合し、第１の結合ドメインが、配列番号２０６又は２０９の重鎖アミノ酸配列及び配列番号２０７の軽鎖アミノ酸配列を含み、第２の結合ドメインが、配列番号２０８又は２１０の重鎖アミノ酸配列及び配列番号１１５の軽鎖アミノ酸配列を含む、二重特異性抗体。
  192. ネザートン症候群の治療における使用のための抗ＫＬＫ５抗体であって、配列番号２０５のＶＨ配列及び配列番号６２のＶＬ配列を含む、抗ＫＬＫ５抗体。
  193. ネザートン症候群の治療における使用のための抗ＫＬＫ７抗体であって、配列番号２０２のＶＨ配列及び配列番号２０３のＶＬ配列を含む、抗ＫＬＫ７抗体。
  194. ネザートン症候群の治療における使用のための抗体の組み合わせであって、
    ここで、抗体の組み合わせは、抗ＫＬＫ５抗体及び抗ＫＬＫ７抗体を含み、抗ＫＬＫ５抗体が、配列番号２０５のＶＨ配列及び配列番号６２のＶＬ配列を含み；抗ＫＬＫ７抗体が、配列番号２０２のＶＨ配列及び配列番号２０３のＶＬ配列を含む、抗体の組み合わせ。
  195. 皮膚炎症性サイトカインが、ＩＬ－８、ＴＮＦα、ＩＬ－６、ＩＬ－４、及び／又はＧ－ＣＳＦのうちの１つ又は複数である、請求項１６６若しくは１６７に記載の使用、又は請求項１７９、１８０、及び１８３のいずれか一項に記載の方法、又は請求項２３７に記載の使用のための抗体、二重特異性抗体若しくは薬学的組成物。
JP2023554905A 2021-03-12 2022-03-11 抗ｋｌｋ７抗体、抗ｋｌｋ５抗体、多重特異性抗ｋｌｋ５／ｋｌｋ７抗体、及び使用方法 Pending JP2024512377A (ja)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US202163160434P 2021-03-12 2021-03-12
US63/160,434 2021-03-12
PCT/US2022/019912 WO2022192647A1 (en) 2021-03-12 2022-03-11 Anti-klk7 antibodies, anti-klk5 antibodies, multispecific anti-klk5/klk7 antibodies, and methods of use

Publications (1)

Publication Number Publication Date
JP2024512377A true JP2024512377A (ja) 2024-03-19

Family

ID=81325041

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP2023554905A Pending JP2024512377A (ja) 2021-03-12 2022-03-11 抗ｋｌｋ７抗体、抗ｋｌｋ５抗体、多重特異性抗ｋｌｋ５／ｋｌｋ７抗体、及び使用方法

Country Status (6)

Country Link
US (1) US20240084042A1 (ja)
EP (1) EP4304732A1 (ja)
JP (1) JP2024512377A (ja)
CN (1) CN117062839A (ja)
AR (1) AR125074A1 (ja)
WO (1) WO2022192647A1 (ja)

Family Cites Families (107)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US830930A (en) 1905-11-22 1906-09-11 E & T Fairbanks & Co Weighing-scale.
US4816567A (en) 1983-04-08 1989-03-28 Genentech, Inc. Recombinant immunoglobin preparations
US4737456A (en) 1985-05-09 1988-04-12 Syntex (U.S.A.) Inc. Reducing interference in ligand-receptor binding assays
US4676980A (en) 1985-09-23 1987-06-30 The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services Target specific cross-linked heteroantibodies
US6548640B1 (en) 1986-03-27 2003-04-15 Btg International Limited Altered antibodies
IL85035A0 (en) 1987-01-08 1988-06-30 Int Genetic Eng Polynucleotide molecule,a chimeric antibody with specificity for human b cell surface antigen,a process for the preparation and methods utilizing the same
EP0307434B2 (en) 1987-03-18 1998-07-29 Scotgen Biopharmaceuticals, Inc. Altered antibodies
DE68913658T3 (de) 1988-11-11 2005-07-21 Stratagene, La Jolla Klonierung von Immunglobulin Sequenzen aus den variablen Domänen
DE3920358A1 (de) 1989-06-22 1991-01-17 Behringwerke Ag Bispezifische und oligospezifische, mono- und oligovalente antikoerperkonstrukte, ihre herstellung und verwendung
US5208020A (en) 1989-10-25 1993-05-04 Immunogen Inc. Cytotoxic agents comprising maytansinoids and their therapeutic use
US5959177A (en) 1989-10-27 1999-09-28 The Scripps Research Institute Transgenic plants expressing assembled secretory antibodies
US6075181A (en) 1990-01-12 2000-06-13 Abgenix, Inc. Human antibodies derived from immunized xenomice
US6150584A (en) 1990-01-12 2000-11-21 Abgenix, Inc. Human antibodies derived from immunized xenomice
US5770429A (en) 1990-08-29 1998-06-23 Genpharm International, Inc. Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies
ATE164395T1 (de) 1990-12-03 1998-04-15 Genentech Inc Verfahren zur anreicherung von proteinvarianten mit geänderten bindungseigenschaften
US5571894A (en) 1991-02-05 1996-11-05 Ciba-Geigy Corporation Recombinant antibodies specific for a growth factor receptor
EP0940468A1 (en) 1991-06-14 1999-09-08 Genentech, Inc. Humanized antibody variable domain
GB9114948D0 (en) 1991-07-11 1991-08-28 Pfizer Ltd Process for preparing sertraline intermediates
WO1993006217A1 (en) 1991-09-19 1993-04-01 Genentech, Inc. EXPRESSION IN E. COLI OF ANTIBODY FRAGMENTS HAVING AT LEAST A CYSTEINE PRESENT AS A FREE THIOL, USE FOR THE PRODUCTION OF BIFUNCTIONAL F(ab')2 ANTIBODIES
US5587458A (en) 1991-10-07 1996-12-24 Aronex Pharmaceuticals, Inc. Anti-erbB-2 antibodies, combinations thereof, and therapeutic and diagnostic uses thereof
WO1993016185A2 (en) 1992-02-06 1993-08-19 Creative Biomolecules, Inc. Biosynthetic binding protein for cancer marker
DE69329503T2 (de) 1992-11-13 2001-05-03 Idec Pharma Corp Therapeutische Verwendung von chimerischen und markierten Antikörpern, die gegen ein Differenzierung-Antigen gerichtet sind, dessen Expression auf menschliche B Lymphozyt beschränkt ist, für die Behandlung von B-Zell-Lymphoma
WO1994029351A2 (en) 1993-06-16 1994-12-22 Celltech Limited Antibodies
DK72593D0 (da) * 1993-06-18 1993-06-18 Symbicom Ab Rekombinant protein
US5789199A (en) 1994-11-03 1998-08-04 Genentech, Inc. Process for bacterial production of polypeptides
US5840523A (en) 1995-03-01 1998-11-24 Genetech, Inc. Methods and compositions for secretion of heterologous polypeptides
US5731168A (en) 1995-03-01 1998-03-24 Genentech, Inc. Method for making heteromultimeric polypeptides
US5869046A (en) 1995-04-14 1999-02-09 Genentech, Inc. Altered polypeptides with increased half-life
US6267958B1 (en) 1995-07-27 2001-07-31 Genentech, Inc. Protein formulation
GB9603256D0 (en) 1996-02-16 1996-04-17 Wellcome Found Antibodies
DE69830901T2 (de) 1997-05-02 2006-05-24 Genentech Inc., San Francisco ein verfahren zur herstellung multispezifischer antikörper die heteromultimere und gemeinsame komponenten besitzen
US6171586B1 (en) 1997-06-13 2001-01-09 Genentech, Inc. Antibody formulation
DE69830315T2 (de) 1997-06-24 2006-02-02 Genentech Inc., San Francisco Galactosylierte glykoproteine enthaltende zusammensetzungen und verfahren zur deren herstellung
US6040498A (en) 1998-08-11 2000-03-21 North Caroline State University Genetically engineered duckweed
ATE419009T1 (de) 1997-10-31 2009-01-15 Genentech Inc Methoden und zusammensetzungen bestehend aus glykoprotein-glykoformen
US6610833B1 (en) 1997-11-24 2003-08-26 The Institute For Human Genetics And Biochemistry Monoclonal human natural antibodies
DK1034298T3 (da) 1997-12-05 2012-01-30 Scripps Research Inst Humanisering af murint antistof
WO1999051642A1 (en) 1998-04-02 1999-10-14 Genentech, Inc. Antibody variants and fragments thereof
US6194551B1 (en) 1998-04-02 2001-02-27 Genentech, Inc. Polypeptide variants
ES2434961T5 (es) 1998-04-20 2018-01-18 Roche Glycart Ag Ingeniería de glicosilación de anticuerpos para mejorar la citotoxicidad celular dependiente del anticuerpo
KR100887482B1 (ko) 1999-01-15 2009-03-10 제넨테크, 인크. 효과기 기능이 변화된 폴리펩티드 변이체
US6737056B1 (en) 1999-01-15 2004-05-18 Genentech, Inc. Polypeptide variants with altered effector function
JP2003505082A (ja) 1999-07-26 2003-02-12 ジェネンテック・インコーポレーテッド 新規なポリヌクレオチドとその使用法
DE60022369T2 (de) 1999-10-04 2006-05-18 Medicago Inc., Sainte Foy Verfahren zur regulation der transkription von fremden genen in gegenwart von stickstoff
US7125978B1 (en) 1999-10-04 2006-10-24 Medicago Inc. Promoter for regulating expression of foreign genes
IL149809A0 (en) 1999-12-15 2002-11-10 Genentech Inc Shotgun scanning, a combinatorial method for mapping functional protein epitopes
AU2001247616B2 (en) 2000-04-11 2007-06-14 Genentech, Inc. Multivalent antibodies and uses therefor
US6596541B2 (en) 2000-10-31 2003-07-22 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods of modifying eukaryotic cells
KR100857943B1 (ko) 2000-11-30 2008-09-09 메다렉스, 인코포레이티드 인간 항체의 제조를 위한 형질전환 트랜스염색체 설치류
NZ581474A (en) 2001-08-03 2011-04-29 Glycart Biotechnology Ag Antibody glycosylation variants having increased antibody-dependent cellular cytotoxicity
CA2463879C (en) 2001-10-25 2012-12-04 Genentech, Inc. Glycoprotein compositions
US20040093621A1 (en) 2001-12-25 2004-05-13 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd Antibody composition which specifically binds to CD20
CA2481658A1 (en) 2002-04-09 2003-10-16 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Method of enhancing of binding activity of antibody composition to fcy receptor iiia
WO2003085118A1 (fr) 2002-04-09 2003-10-16 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Procede de production de composition anticorps
AU2003236020B2 (en) 2002-04-09 2009-03-19 Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd. Cell with depression or deletion of the activity of protein participating in GDP-fucose transport
EP1498485A4 (en) 2002-04-09 2006-09-06 Kyowa Hakko Kogyo Kk CELLS WITH MODIFIED GENOM
WO2003084570A1 (fr) 2002-04-09 2003-10-16 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Medicament contenant une composition d'anticorps appropriee au patient souffrant de polymorphisme fc$g(g)riiia
CA2488441C (en) 2002-06-03 2015-01-27 Genentech, Inc. Synthetic antibody phage libraries
US7361740B2 (en) 2002-10-15 2008-04-22 Pdl Biopharma, Inc. Alteration of FcRn binding affinities or serum half-lives of antibodies by mutagenesis
US20040101920A1 (en) 2002-11-01 2004-05-27 Czeslaw Radziejewski Modification assisted profiling (MAP) methodology
DK1572744T3 (da) 2002-12-16 2010-09-20 Genentech Inc Immunoglobulinvarianter og deres anvendelser
AU2004205631A1 (en) 2003-01-16 2004-08-05 Genentech, Inc. Synthetic antibody phage libraries
SG2013005590A (en) 2003-01-22 2015-06-29 Roche Glycart Ag Fusion constructs and use of same to produce antibodies with increased fc receptor binding affinity and effector function
US20060104968A1 (en) 2003-03-05 2006-05-18 Halozyme, Inc. Soluble glycosaminoglycanases and methods of preparing and using soluble glycosaminogly ycanases
US7871607B2 (en) 2003-03-05 2011-01-18 Halozyme, Inc. Soluble glycosaminoglycanases and methods of preparing and using soluble glycosaminoglycanases
RU2005141512A (ru) 2003-05-31 2007-07-20 Микромет Аг (De) Фармацевтические композиции, включающие биспецифические анти-cd3, анти-cd19 конструкции антител для лечения расстройств, связанных с b-клетками
US7235641B2 (en) 2003-12-22 2007-06-26 Micromet Ag Bispecific antibodies
US7527791B2 (en) 2004-03-31 2009-05-05 Genentech, Inc. Humanized anti-TGF-beta antibodies
US7785903B2 (en) 2004-04-09 2010-08-31 Genentech, Inc. Variable domain library and uses
EP2357201B1 (en) 2004-04-13 2017-08-30 F. Hoffmann-La Roche AG Anti-P-selectin antibodies
TWI380996B (zh) 2004-09-17 2013-01-01 Hoffmann La Roche 抗ｏｘ４０ｌ抗體
PL1791565T3 (pl) 2004-09-23 2016-10-31 Modyfikowane cysteiną przeciwciała i koniugaty
JO3000B1 (ar) 2004-10-20 2016-09-05 Genentech Inc مركبات أجسام مضادة .
EP1871805B1 (en) 2005-02-07 2019-09-25 Roche Glycart AG Antigen binding molecules that bind egfr, vectors encoding same, and uses thereof
EP1940881B1 (en) 2005-10-11 2016-11-30 Amgen Research (Munich) GmbH Compositions comprising cross-species-specific antibodies and uses thereof
US8679490B2 (en) 2005-11-07 2014-03-25 Genentech, Inc. Binding polypeptides with diversified and consensus VH/VL hypervariable sequences
EP1973951A2 (en) 2005-12-02 2008-10-01 Genentech, Inc. Binding polypeptides with restricted diversity sequences
AR060871A1 (es) 2006-05-09 2008-07-16 Genentech Inc Union de polipeptidos con supercontigos optimizados
US20080044455A1 (en) 2006-08-21 2008-02-21 Chaim Welczer Tonsillitus Treatment
DK2059533T3 (da) 2006-08-30 2013-02-25 Genentech Inc Multispecifikke antistoffer
DE102007001370A1 (de) 2007-01-09 2008-07-10 Curevac Gmbh RNA-kodierte Antikörper
ES2695047T3 (es) 2007-04-03 2018-12-28 Amgen Research (Munich) Gmbh Dominio de unión específico entre especies
US8242247B2 (en) 2007-12-21 2012-08-14 Hoffmann-La Roche Inc. Bivalent, bispecific antibodies
US20090162359A1 (en) 2007-12-21 2009-06-25 Christian Klein Bivalent, bispecific antibodies
US9266967B2 (en) 2007-12-21 2016-02-23 Hoffmann-La Roche, Inc. Bivalent, bispecific antibodies
EP2235064B1 (en) 2008-01-07 2015-11-25 Amgen Inc. Method for making antibody fc-heterodimeric molecules using electrostatic steering effects
BRPI1014089A2 (pt) 2009-04-02 2016-04-19 Roche Glycart Ag anticorpos multiespecíficos que compreendem anticorpos de comprimento completo e fragmentos fab de cadeia simples
WO2010115589A1 (en) 2009-04-07 2010-10-14 Roche Glycart Ag Trivalent, bispecific antibodies
JP5719354B2 (ja) 2009-05-27 2015-05-20 エフ・ホフマン−ラ・ロシュ・アクチェンゲゼルシャフト 三重又は四重特異性抗体
US9676845B2 (en) 2009-06-16 2017-06-13 Hoffmann-La Roche, Inc. Bispecific antigen binding proteins
RU2573915C2 (ru) 2009-09-16 2016-01-27 Дженентек, Инк. Содержащие суперспираль и/или привязку белковые комплексы и их применение
MX336540B (es) 2010-06-08 2016-01-22 Genentech Inc Conjugados y anticuerpos manipulados geneticamente con cisteina.
CN105949313B (zh) 2011-03-29 2021-06-15 罗切格利卡特公司 抗体Fc变体
CA2844540C (en) 2011-08-23 2018-10-16 Roche Glycart Ag Bispecific antibodies specific for t-cell activating antigens and a tumor antigen and methods of use
ES2686327T3 (es) 2011-08-23 2018-10-17 Roche Glycart Ag Moléculas de unión a antígeno biespecíficas
ES2857734T3 (es) 2011-08-23 2021-09-29 Roche Glycart Ag Moléculas de unión a antígeno activadoras de linfocitos T biespecíficas
KR102069397B1 (ko) 2012-02-15 2020-01-22 에프. 호프만-라 로슈 아게 Ｆｃ-수용체 기재 친화성 크로마토그래피
PE20151807A1 (es) 2013-04-29 2015-12-02 Hoffmann La Roche Anticuerpos modificados de union a fcrn humano y metodo de utilizacion
CA2931113C (en) 2013-12-20 2023-07-11 Genentech, Inc. Antibodies comprising an antigen-binding site that specifically binds to two different epitopes and methods of making them
UA117289C2 (uk) 2014-04-02 2018-07-10 Ф. Хоффманн-Ля Рош Аг Мультиспецифічне антитіло
WO2016016299A1 (en) 2014-07-29 2016-02-04 F. Hoffmann-La Roche Ag Multispecific antibodies
UA124254C2 (uk) 2014-08-04 2021-08-18 Ф. Хоффманн-Ля Рош Аг Біспецифічна антигензв'язувальна молекула, яка активує t-клітини
CA2957354A1 (en) 2014-09-12 2016-03-17 Genentech, Inc. Cysteine engineered antibodies and conjugates
JP6952605B2 (ja) 2015-04-24 2021-10-20 ジェネンテック， インコーポレイテッド 多特異性抗原結合タンパク質
US20200040103A1 (en) 2018-03-14 2020-02-06 Genentech, Inc. Anti-klk5 antibodies and methods of use
CN114423791A (zh) * 2019-09-18 2022-04-29 豪夫迈·罗氏有限公司 抗klk7抗体、抗klk5抗体、多特异性抗klk5/klk7抗体及使用方法
BR102020009679A2 (pt) * 2020-05-14 2021-11-23 Fundação Universidade Federal Do Abc - Ufabc Anticorpos recombinantes humanos para inibição da calicreína tecidual humana 7 (klk7) e uso em doenças relacionadas ao processo de descamação da pele

Also Published As

Publication number Publication date
EP4304732A1 (en) 2024-01-17
WO2022192647A1 (en) 2022-09-15
CN117062839A (zh) 2023-11-14
US20240084042A1 (en) 2024-03-14
AR125074A1 (es) 2023-06-07

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP6787888B2 (ja) 抗ｉｌ−１ベータ抗体及び使用方法
EP3083680B1 (en) Humanized anti-tau(ps422) antibodies and methods of use
US20210130492A1 (en) Anti-klk7 antibodies, anti-klk5 antibodies, multispecific anti-klk5/klk7 antibodies, and methods of use
EP3545002A2 (en) Mono- and bispecific antibodies binding to coagulation factor ix and coagulation factor x
JP7422671B2 (ja) 抗ｋｌｋ５抗体及び使用方法
CN114828965A (zh) 与hla-a2/mage-a4结合的抗体
JP7248761B2 (ja) 抗ｂｒｄｕ抗体および使用方法
RU2630664C2 (ru) Антитела к теофиллину и способы их применения
US11820816B2 (en) Anti-VEGF antibodies and methods of use
US20230303682A1 (en) Anti-Notch2 Antibodies and Methods of Use
JP2024512377A (ja) 抗ｋｌｋ７抗体、抗ｋｌｋ５抗体、多重特異性抗ｋｌｋ５／ｋｌｋ７抗体、及び使用方法
JP2016537965A (ja) Ｎｓｐ４阻害剤及び使用方法
WO2023141445A1 (en) Anti-notch2 antibodies and conjugates and methods of use