TW202320860A - 抗egfr抗體藥物結合物 - Google Patents

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Abstract

本發明係關於抑制Bcl-xL之抗表皮生長因子受體(EGFR)抗體藥物結合物(ADC)，包括使用該等ADC之組合物及方法。

Description

抗EGFR抗體藥物結合物
人類表皮生長因子受體(又稱為HER-1或Erb-B1，且在本文中稱作「EGFR」)係由c-erbB原致癌基因編碼之170 kDa跨膜受體，且展現固有酪胺酸激酶活性(Modjtahedi等人, Br. J. Cancer 73:228-235 (1996)；Herbst及Shin, Cancer 94:1593-1611 (2002))。SwissProt資料庫條目P00533提供人類EGFR序列。EGFR經由酪胺酸激酶介導之信號轉導路徑調控多個細胞過程，包括(但不限於)控制細胞增殖、分化、細胞存活、細胞凋亡、血管生成、致有絲分裂及轉移之信號轉導路徑的活化(Atalay等人, Ann. Oncology 14:1346-1363 (2003)；Tsao及Herbst, Signal 4:4-9 (2003)；Herbst及Shin, Cancer 94:1593-1611 (2002)；Modjtahedi等人, Br. J. Cancer 73:228-235 (1996))。 已知的EGFR配位體包括EGF、TGFA/TGF-α、雙調蛋白、上皮絲裂原(epigen)/EPGN、BTC/β細胞調節素、表皮調節素/EREG及HBEGF/肝素結合EGF。EGFR結合配位體觸發受體同源二聚化及/或異源二聚化以及關鍵細胞質殘基之自體磷酸化。磷酸化之EGFR募集銜接蛋白，如GRB2，該等銜接蛋白繼而活化複雜的下游信號傳導級聯，至少包括以下重要的下游信號傳導級聯：RAS-RAF-MEK-ERK、PI3激酶-AKT、PLCγ-PKC及STAT模組。此自體磷酸化又藉由經自身磷酸酪胺酸結合SH2結構域與磷酸化酪胺酸締合之若干其他蛋白質引起下游活化及信號傳導。此等下游信號傳導蛋白質起始若干信號轉導級聯，主要是MAPK、Akt及JNK路徑，由此引起細胞增殖。EGFR結合配位體亦可活化NF-κ-B信號傳導級聯。配位體結合亦直接使如RGS16之其他蛋白質磷酸化，由此活化其GTP酶活性並潛在地將EGF受體信號傳導與G蛋白質偶合受體信號傳導相關聯。配位體結合亦使MUC1磷酸化並增加其與SRC及CTNNB1/β-連環蛋白之相互作用。 在包括膀胱癌、腦癌、頭頸癌、胰臟癌、肺癌、乳癌、卵巢癌、結腸癌、前列腺癌及腎癌在內的眾多人類惡性病況中已報導EGFR之過度表現。(Atalay等人, Ann. Oncology 14:1346-1363 (2003)；Herbst及Shin, Cancer 94:1593-1611 (2002)；及Modjtahedi等人, Br. J. Cancer 73:228-235 (1996))。在許多此等病況中，EGFR之過度表現與患者之較差預後相關或關聯。(Herbst及Shin, Cancer 94:1593-1611 (2002)；及Modjtahedi等人, Br. J. Cancer 73:228-235 (1996))。EGFR亦在正常組織，特別是皮膚、肝及胃腸道之上皮組織的細胞中表現，不過表現量一般低於惡性細胞中之表現量(Herbst及Shin, Cancer 94:1593-1611 (2002))。 含有EGFR基因擴增的相當大一部分腫瘤亦共表現該受體之截短型式(Wikstrand等人(1998) J. Neurovirol. 4, 148-158)，稱為de2-7 EGFR、ΔEGFR、EGFRvIII或Δ2-7(術語在本文中可互換使用) (Olapade-Olaopa等人(2000) Br. J. Cancer. 82, 186-94)。在de2-7 EGFR中所見之重排產生缺乏跨外顯子2-7之801個核苷酸的框內成熟mRNA(Wong等人(1992) Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 89, 2965-9；Yamazaki等人(1990) Jpn. J. Cancer Res. 81, 773-9；Yamazaki等人(1988) Mol. Cell. Biol. 8, 1816-20；及Sugawa等人(1990) Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 87, 8602-6)。相應EGFR蛋白具有含細胞外結構域殘基6-273之267個胺基酸缺失及在融合接點處之新穎甘胺酸殘基(Sugawa等人, 1990)。此缺失連同甘胺酸殘基插入一起在缺失界面處產生獨特的接合肽(Sugawa等人, 1990)。 在包括神經膠質瘤、乳房腫瘤、肺腫瘤、卵巢腫瘤及前列腺腫瘤在內的多種腫瘤類型中已報導EGFRvIII (Wikstrand等人(1997) Cancer Res. 57, 4130-40；Olapade-Olaopa等人(2000) Br. J. Cancer. 82, 186-94；Wikstrand等人(1995) Cancer Res. 55, 3140-8；Garcia de Palazzo等人(1993) Cancer Res. 53, 3217-20)。儘管此截短之受體不結合配位體，但其具有低組成性活性且賦予在裸小鼠中作為腫瘤異種移植物生長之神經膠質瘤細胞顯著生長益處(Nishikawa等人(1994) Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 91, 7727-31)且能夠轉型NIH3T3細胞(Batra等人(1995) Cell Growth Differ. 6, 1251-9)及MCF-7細胞。神經膠質瘤細胞中de2-7 EGFR所利用的細胞機制尚未完全確定，但據報導，其包括減少細胞凋亡(Nagane等人(1996) Cancer Res. 56, 5079-86)及小幅增進增殖(Nagane等人, 1996)。由於此截短之受體的表現侷限於腫瘤細胞，故其表示抗體療法之具有高度特異性之靶。 抗體藥物結合物(ADC)代表包含經由化學連接子結合至細胞毒性藥物之抗體的一類新穎治療劑。ADC之治療概念組合了抗體與藥物之結合能力，其中使用抗體，藉助於結合至靶表面抗原將藥物遞送至腫瘤細胞。鑒於EGFR在癌症中之作用，此項技術中仍需要可以用於治療癌症之抗EGFR ADC。
已發現，小分子Bcl-xL抑制劑當以結合至在細胞，例如表現EGFR之細胞的表面上表現之抗原的抗體藥物結合物(ADC)形式投與時係有效的，其中抑制Bcl-xL及由此引起的細胞凋亡之誘導將係有益的。此發現能夠使Bcl-xL抑制療法靶向表現EGFR之特定細胞及/或組織，由此使Bcl-xL抑制劑在內部遞送至表現EGFR之經轉化癌細胞。本發明之一優勢在於，有可能降低實現所需治療益處所需的血清含量，及/或避免及/或改善與全身投與小分子Bcl-xL抑制劑本身有關之潛在副作用。 由於ADC能夠將一或多個藥物部分選擇性遞送至靶組織，諸如腫瘤相關抗原，例如表現EGFR之腫瘤，故ADC可以增加抗體治療疾病，例如治療癌症之治療功效。因此，在某些實施例中，本發明提供用於治療用途，例如用於治療癌症之抗EGFR ADC。 在一個態樣中，本發明之特徵在於一種抗人類表皮生長因子受體(hEGFR)抗體藥物結合物(ADC)，其包含連接至一或多種Bcl-xL抑制劑之抗hEGFR抗體，亦即，特異性結合至人類EGFR之抗體。 在另一態樣中，本發明之特徵在於一種抗人類表皮生長因子受體(hEGFR)抗體藥物結合物(ADC)，其包含藥物經由連接子連接至抗人類表皮生長因子(hEGFR)抗體，其中該藥物係根據結構式(IIa)、(IIb)、(IIc)或(IId)之Bcl-xL抑制劑：
Figure 02_image009
Figure 02_image011
其中： Ar 1係選自
Figure 02_image013
、
Figure 02_image015
、
Figure 02_image017
、
Figure 02_image019
、
Figure 02_image021
、
Figure 02_image023
、
Figure 02_image025
、
Figure 02_image027
及
Figure 02_image029
，且視情況經一或多個獨立地選自以下之取代基取代：鹵基、羥基、硝基、低碳數烷基、低碳數雜烷基、C 1-4烷氧基、胺基、氰基及鹵甲基； Ar 2係選自
Figure 02_image031
、
Figure 02_image033
、
Figure 02_image035
、
Figure 02_image037
、
Figure 02_image039
、
Figure 02_image041
、
Figure 02_image043
、
Figure 02_image045
、
Figure 02_image047
、
Figure 02_image049
及
Figure 02_image051
或其N-氧化物，且視情況經一或多個獨立地選自以下之取代基取代：鹵基、羥基、硝基、低碳數烷基、低碳數雜烷基、C 1-4烷氧基、胺基、氰基及鹵甲基，其中R 12-Z 2b-、R'-Z 2b-、#-N(R 4)-R 13-Z 2b-或#-R'-Z 2b-取代基在能夠經取代之任何Ar 2原子處連接至Ar 2； Z 1係選自N、CH、C-鹵基、C-CH 3及C-CN； Z 2a及Z 2b各自彼此獨立地選自一鍵、NR 6、CR 6aR 6b、O、S、S(O)、S(O) 2、-NR 6C(O)-、-NR 6aC(O)NR 6b-及-NR 6C(O)O-； R'係
Figure 02_image053
或
Figure 02_image055
，其中#當連接至R'時係在能夠經取代之任何R'原子處連接至R'； X'在每次出現時係選自-N(R 10)-、-N(R 10)C(O)-、-N(R 10)S(O) 2-、-S(O) 2N(R 10)-及-O-； n係選自0-3； R 10在每次出現時係獨立地選自氫、低碳數烷基、雜環、胺基烷基、G-烷基及-(CH 2) 2-O-(CH 2) 2-O-(CH 2) 2-NH 2； G在每次出現時係獨立地選自多元醇、具有在4與30個之間之重複單元的聚乙二醇、鹽及在生理pH下帶電的部分； SP a在每次出現時係獨立地選自氧、-S(O) 2N(H)-、-N(H)S(O) 2-、-N(H)C(O)-、-C(O)N(H)-、-N(H)-、伸芳基、伸雜環及視情況經取代之亞甲基；其中亞甲基視情況經-NH(CH 2) 2G、NH 2、C 1-8烷基及羰基中之一或多個取代； m 2係選自0-12； R 1係選自氫、甲基、鹵基、鹵甲基、乙基及氰基； R 2係選自氫、甲基、鹵基、鹵甲基及氰基； R 3係選自氫、甲基、乙基、鹵甲基及鹵乙基； R 4係選自氫、低碳數烷基及低碳數雜烷基，或與R 13之原子一起形成具有在3與7個之間之環原子的環烷基或雜環基環； R 6、R 6a及R 6b各自彼此獨立地選自氫、視情況經取代之低碳數烷基、視情況經取代之低碳數雜烷基、視情況經取代之環烷基及視情況經取代之雜環基，或與R 4之原子及R 13之原子一起形成具有3與7個之間之環原子的環烷基或雜環基環； R 11a及R 11b各自彼此獨立地選自氫、鹵基、甲基、乙基、鹵甲基、羥基、甲氧基、CN及SCH 3； R 12視情況為R'或係選自氫、鹵基、氰基、視情況經取代之烷基、視情況經取代之雜烷基、視情況經取代之雜環基及視情況經取代之環烷基； R 13係選自視情況經取代之C 1-8伸烷基、視情況經取代之伸雜烷基、視情況經取代之伸雜環及視情況經取代之伸環烷基；且 #表示與連接子L之連接點； 其中該hEGFR抗體具有以下特徵： 結合至胺基酸序列CGADSYEMEEDGVRKC(SEQ ID NO:45)內之抗原決定基或在競爭性結合分析中與第二抗hEGFR抗體競爭結合至表皮生長因子受體變異體III(EGFRvIII)(SEQ ID NO: 33)，其中該第二抗EGFR抗體包括含SEQ ID NO: 1中所述之胺基酸序列的重鏈可變結構域及含SEQ ID NO: 5中所述之胺基酸序列的輕鏈可變結構域；以及 如藉由表面電漿子共振所測定，以約1×10 - 6M或更低之解離常數(K d)結合至EGFR(1-525)(SEQ ID NO:47)。 在一個實施例中，ADC係根據結構式(I)之化合物：
Figure 02_image057
其中： D係式(IIa)、(IIb)、(IIc)或(IId)之Bcl-xL抑制劑藥物； L係連接子； Ab係抗hEGFR抗體； LK表示將該連接子(L)連接至該抗hEGFR抗體(Ab)之共價鍵聯；且 m係在1至20範圍內之整數。 在一個實施例中，G在每次出現時係鹽或在生理pH下帶電之部分。在另一實施例中，G在每次出現時係羧酸鹽、磺酸鹽、膦酸鹽或銨鹽。在另一實施例中，G在每次出現時係選自由以下組成之群的在生理pH下帶電之部分：羧酸基、磺酸基、膦酸基及胺。在另一實施例中，G在每次出現時係含有具有在4與30個之間之重複單元之聚乙二醇，或多元醇的部分。在另一實施例中，該多元醇係糖。 在本文任一態樣及實施例之一個實施例中，本發明之特徵在於式(IIa)或式(IId)之ADC，其中R'包括至少一個適於連接至連接子的可取代氮。 在另一實施例中，G在每次出現時選自：
Figure 02_image059
Figure 02_image061
，其中M係氫或帶正電之相對離子。 在本文任一態樣及實施例之一個實施例中，R'係選自
Figure 02_image063
Figure 02_image065
Figure 02_image067
Figure 02_image069
Figure 02_image071
、
Figure 02_image073
及
Figure 02_image075
，其中#表示式(IIb)或(IIc)之ADC之Bcl-xL抑制劑藥物中的氫，或式(IIa)或(IId)之ADC之Bcl-xL抑制劑藥物中與連接子L的連接點。 在本文任一態樣及實施例之一個實施例中，Ar 1係選自
Figure 02_image077
、
Figure 02_image079
及
Figure 02_image081
，且視情況經一或多個獨立地選自鹵基、氰基、甲基及鹵甲基之取代基取代。 在另一實施例中，Ar 1係
Figure 02_image083
。 在本文任一態樣及實施例之一個實施例中，Ar 2係
Figure 02_image085
，視情況經一或多個取代基取代。 在本文任一態樣及實施例之一個實施例中，Ar 2係選自
Figure 02_image087
、
Figure 02_image089
、
Figure 02_image091
、
Figure 02_image093
、
Figure 02_image095
、
Figure 02_image097
、
Figure 02_image099
、
Figure 02_image101
、
Figure 02_image103
及
Figure 02_image105
；且視情況經一或多個取代基取代。 在另一實施例中，Ar 2經一或多個增溶基團取代。 在另一實施例中，每個增溶基團彼此獨立地選自含有多元醇之部分、具有在4與30個之間之重複單元的聚乙二醇、鹽或在生理pH下帶電之部分。 在另一實施例中，Ar 2經一或多個增溶基團取代。 在另一實施例中，每個增溶基團彼此獨立地選自含有多元醇之部分、具有在4與30個之間之重複單元的聚乙二醇、鹽或在生理pH下帶電之部分。 在本文任一態樣及實施例之一個實施例中，Z 1係N。 在本文任一態樣及實施例之一個實施例中，Z 2a係O。 在本文任一態樣及實施例之一個實施例中，R 1係甲基或氯。 在本文任一態樣及實施例之一個實施例中，R 2係氫或甲基。 在本文任一態樣及實施例之一個實施例中，R 2係氫。 在本文任一態樣及實施例之一個實施例中，Z 2b係O。 在本文任一態樣及實施例之一個實施例中，Z 2b係NH或CH 2。 在本文任一態樣及實施例之一個實施例中，該ADC係根據結構式(IIa)之化合物。 在另一實施例中，該ADC包括選自結構(C.1)-(C.21)之核心：
Figure 02_image107
Figure 02_image109
Figure 02_image111
Figure 02_image113
Figure 02_image115
Figure 02_image117
Figure 02_image119
。 在又另一實施例中，該ADC係根據結構式(IIa.1)之化合物：
Figure 02_image121
其中： Y係視情況經取代之C 1-C 8伸烷基； r係0或1；且 s係1、2或3。 在又另一實施例中，該ADC係根據結構式(IIa.2)之化合物：
Figure 02_image123
其中： U係選自N、O及CH，其限制條件為，當U係O時，則V a及R 21a不存在； R 20係選自H及C 1-C 4烷基； R 21a及R 21b各自彼此獨立地不存在或選自H、C 1-C 4烷基及G，其中G係選自多元醇、PEG4-30、鹽及在生理pH下帶電的部分； V a及V b各自彼此獨立地不存在或選自一鍵，及視情況經取代之伸烷基； R 20係選自H及C 1-C 4烷基；且 s係1、2或3。 在又另一實施例中，該ADC係根據結構式(IIa.3)之化合物：
Figure 02_image125
其中： R b係選自H、C 1-C 4烷基及J b-G或視情況與T之原子一起形成具有3個與7個之間之原子的環； J a及J b各自彼此獨立地選自視情況經取代之C 1-C 8伸烷基及視情況經取代之伸苯基； T係選自視情況經取代之C 1-C 8伸烷基、CH 2CH 2OCH 2CH 2OCH 2CH 2、CH 2CH 2OCH 2CH 2OCH 2CH 2OCH 2及含有4至10個乙二醇單元之聚乙二醇； G係選自多元醇、PEG4-30、鹽及在生理pH下帶電的部分；且 s係1、2或3。 在本文任一態樣及實施例之一個實施例中，該ADC係根據結構式(IIb)之化合物。 在另一實施例中，該ADC係根據結構式(IIb.1)之化合物：
Figure 02_image127
其中： Y係視情況經取代之C 1-C 8伸烷基； G係選自多元醇、PEG4-30、鹽及在生理pH下帶電的部分； r係0或1；且 s係1、2或3。 在本文任一態樣及實施例之一個實施例中，該ADC係根據結構式(IIc)之化合物。 在另一實施例中，該ADC係根據結構式(IIc.1)之化合物：
Figure 02_image129
其中： Y a係視情況經取代之C 1-C 8伸烷基； Y b係視情況經取代之C 1-C 8伸烷基； R 23係選自H及C 1-C 4烷基；且 G係選自多元醇、PEG4-30、鹽及在生理pH下帶電的部分。 在又另一實施例中，該ADC係根據結構式(IIc.2)之化合物：
Figure 02_image131
其中： Y a係視情況經取代之C 1-C 8伸烷基； Y b係視情況經取代之C 1-C 8伸烷基； Y c係視情況經取代之C 1-C 8伸烷基； R 23係選自H及C 1-C 4烷基； R 25係Y b-G或與Y c之原子一起形成具有4至6個環原子之環；且 G係選自多元醇、PEG4-30、鹽及在生理pH下帶電的部分。 在本文任一態樣及實施例之一個實施例中，Bcl-xL抑制劑係選自由以下化合物組成之群，該等化合物之改良之處在於，對應於結構式(IIa)、(IIb)、(IIc)或(IId)之#位置的氫不存在，從而形成單價基團： 6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-3-[1-({3-[2-({2-[2-(羧基甲氧基)乙氧基]乙基}胺基)乙氧基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}甲基)-5-甲基-1H-吡唑-4-基]吡啶-2-甲酸； 6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-3-{1-[(3,5-二甲基-7-{2-[(2-磺基乙基)胺基]乙氧基}三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}吡啶-2-甲酸； 2-{[(2-{[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基]胺基}乙基)磺醯基]胺基}-2-脫氧-D-葡萄哌喃糖； 6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-3-{1-[(3,5-二甲基-7-{2-[(4-{[(3R,4R,5S,6R)-3,4,5-三羥基-6-(羥基甲基)四氫-2H-哌喃-2-基]甲基}苯甲基)胺基]乙氧基}三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基 }吡啶-2-甲酸； 6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-3-{1-[(3,5-二甲基-7-{2-[(3-磺基丙基)胺基]乙氧基}三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基 }吡啶-2-甲酸； 6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-3-{1-[(3-{2-[(2,3-二羥基丙基)胺基]乙氧基}-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}吡啶-2-甲酸； 2-({[4-({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基]胺基}甲基)苯基]磺醯基}胺基)-2-脫氧-β-D-葡萄哌喃糖； 8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-2-{6-羧基-5-[1-({3-[2-({2-[1-(β-D-葡萄哌喃糖醛醯基)-1H-1,2,3-三唑-4-基]乙基}胺基)乙氧基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}甲基)-5-甲基-1H-吡唑-4-基]吡啶-2-基}-1,2,3,4-四氫異喹啉； 3-[1-({3-[2-(2-{[4-(β-D-阿洛哌喃糖基氧基)苯甲基]胺基}乙氧基)乙氧基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}甲基)-5-甲基-1H-吡唑-4-基]-6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]吡啶-2-甲酸； 6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-3-(1-{[3,5-二甲基-7-(2-{2-[(2-磺基乙基)胺基]乙氧基}乙氧基)三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基]甲基}-5-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-甲酸； 6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-3-{1-[(3,5-二甲基-7-{2-[(2-膦醯基乙基)胺基]乙氧基}三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}吡啶-2-甲酸； 6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-3-{1-[(3,5-二甲基-7-{2-[甲基(3-磺基-L-丙胺醯基)胺基]乙氧基}三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}吡啶-2-甲酸； 6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-3-{1-[(3,5-二甲基-7-{2-[(3-膦醯基丙基)胺基]乙氧基}三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}吡啶-2-甲酸； 6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-3-{1-[(3,5-二甲基-7-{2-[(3-磺基-L-丙胺醯基)胺基]乙氧基}三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}吡啶-2-甲酸； 6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-3-(1-{[3,5-二甲基-7-(2-{2-[(3-膦醯基丙基)胺基]乙氧基}乙氧基)三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基]甲基}-5-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-甲酸； 3-{1-[(3-{2-[L-α-天冬胺醯基(甲基)胺基]乙氧基}-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}-6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]吡啶-2-甲酸； 6-{4-[({2-[2-(2-胺基乙氧基)乙氧基]乙基}[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2( 1H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基]胺基)甲基]苯甲基}-2,6-去水-L-古洛糖酸； 4-({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基]胺基}甲基)苯基哌喃己糖苷醛酸； 6-[1-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-1,2,3,4-四氫喹啉-7-基]-3-{1-[(3,5-二甲基-7-{2-[(2-膦醯基乙基)胺基]乙氧基}三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}吡啶-2-甲酸； 6-[1-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-1,2,3,4-四氫喹啉-7-基]-3-{1-[(3,5-二甲基-7-{2-[甲基(3-磺基-L-丙胺醯基)胺基]乙氧基}三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}吡啶-2-甲酸； 3-{1-[(3,5-二甲基-7-{2-[(2-磺基乙基)胺基]乙氧基}三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}-6-[8-([1,3]噻唑并[5,4-b]吡啶-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]吡啶-2-甲酸； 3-{1-[(3,5-二甲基-7-{2-[(2-磺基乙基)胺基]乙氧基}三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}-6-[8-([1,3]噻唑并[4,5-b]吡啶-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]吡啶-2-甲酸； 6-[1-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-1,2,3,4-四氫喹啉-7-基]-3-{1-[(3,5-二甲基-7-{2-[(2-磺基乙基)胺基]乙氧基}三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}吡啶-2-甲酸； 6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-3-{1-[(3-{2-[(2-羧基乙基)胺基]乙氧基}-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}吡啶-2-甲酸； 6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-3-{1-[(3,5-二甲基-7-{2-[(3-膦醯基丙基)(哌啶-4-基)胺基]乙氧基}三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}吡啶-2-甲酸； 3-{1-[(3-{2-[D-α-天冬胺醯基(甲基)胺基]乙氧基}-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}-6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]吡啶-2-甲酸； 6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-3-(1-{[3-(2-{[1-(羧基甲基)哌啶-4-基]胺基}乙氧基)-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基]甲基}-5-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-甲酸； N-[(5S)-5-胺基-6-{[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基](甲基)胺基}-6-側氧基己基]-N,N-二甲基甲銨； 6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-3-{1-[(3,5-二甲基-7-{2-[哌啶-4-基(2-磺基乙基)胺基]乙氧基}三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}吡啶-2-甲酸； 6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-5-(3-膦醯基丙氧基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-3-[1-({3,5-二甲基-7-[2-(甲基胺基)乙氧基]三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}甲基)-5-甲基-1H-吡唑-4-基]吡啶-2-甲酸； 6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-3-(1-{[3-(2-{[N-(2-羧基乙基)-L-α-天冬胺醯基]胺基}乙氧基)-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基]甲基}-5-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-甲酸； 3-{1-[(3-{2-[(2-胺基乙基)(2-磺基乙基)胺基]乙氧基}-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}-6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]吡啶-2-甲酸； 6-[5-(2-胺基乙氧基)-8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-3-[1-({3,5-二甲基-7-[2-(甲基胺基)乙氧基]三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}甲基)-5-甲基-1H-吡唑-4-基]吡啶-2-甲酸； 6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)萘-2-基]-3-{1-[(3,5-二甲基-7-{2-[(3-磺基丙基)胺基]乙氧基}三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}吡啶-2-甲酸； 6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-3-{1-[(3-{2-[(2-羧基乙基)(哌啶-4-基)胺基]乙氧基}-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}吡啶-2-甲酸； 6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-3-{1-[(3,5-二甲基-7-{2-[(3-磺基-L-丙胺醯基)(2-磺基乙基)胺基]乙氧基}三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}吡啶-2-甲酸； 6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-3-{1-[(3-{2-[{2-[(2-羧基乙基)胺基]乙基}(2-磺基乙基)胺基]乙氧基}-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}吡啶-2-甲酸； 3-{1-[(3,5-二甲基-7-{2-[(3-膦醯基丙基)胺基]乙氧基}三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}-6-[8-([1,3]噻唑并[4,5-b]吡啶-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]吡啶-2-甲酸； 3-{1-[(3,5-二甲基-7-{2-[(3-膦醯基丙基)胺基]乙氧基}三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}-6-[8-([1,3]噻唑并[5,4-b]吡啶-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]吡啶-2-甲酸； 6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-5-(羧基甲氧基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-3-[1-({3,5-二甲基-7-[2-(甲基胺基)乙氧基]三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}甲基)-5-甲基-1H-吡唑-4-基]吡啶-2-甲酸； 6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-3-{1-[(3-{2-[(3-羧基丙基)(哌啶-4-基)胺基]乙氧基}-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}吡啶-2-甲酸； 6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)萘-2-基]-3-{1-[(3,5-二甲基-7-{2-[(2-磺基乙基)胺基]乙氧基}三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}吡啶-2-甲酸； 3-{1-[(3-{2-[L-α-天冬胺醯基(2-磺基乙基)胺基]乙氧基}-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}-6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]吡啶-2-甲酸； 6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-3-{1-[(3-{2-[(1,3-二羥基丙-2-基)胺基]乙氧基}-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}吡啶-2-甲酸； 6-[5-(2-胺基乙氧基)-8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-3-{1-[(3,5-二甲基-7-{2-[甲基(2-磺基乙基)胺基]乙氧基}三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}吡啶-2-甲酸； 6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-5-{2-[(2-磺基乙基)胺基]乙氧基}-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-3-{1-[(3,5-二甲基-7-{2-[甲基(2-磺基乙基)胺基]乙氧基}三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}吡啶-2-甲酸； 6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-3-{1-[(3,5-二甲基-7-{2-[(2-磺基乙基) {2-[(2-磺基乙基)胺基]乙基}胺基]乙氧基}三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}吡啶-2-甲酸； 6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-5-{2-[(2-羧基乙基)胺基]乙氧基}-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-3-{1-[(3,5-二甲基-7-{2-[甲基(2-磺基乙基)胺基]乙氧基}三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}吡啶-2-甲酸； 3-{1-[(3,5-二甲基-7-{2-[(3-膦醯基丙基)(哌啶-4-基)胺基]乙氧基}三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}-6-[8-([1,3]噻唑并[4,5-b]吡啶-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]吡啶-2-甲酸； 6-[4-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫-2H-1,4-苯并噁嗪-6-基]-3-{1-[(3,5-二甲基-7-{2-[(2-磺基乙基)胺基]乙氧基}三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}吡啶-2-甲酸； 6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-5-(3-磺基丙氧基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-3-[1-({3,5-二甲基-7-[2-(甲基胺基)乙氧基]三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}甲基)-5-甲基-1H-吡唑-4-基]吡啶-2-甲酸； 3-{1-[(3,5-二甲基-7-{2-[(2-磺基乙基)胺基]乙氧基}三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}-6-[1-([1,3]噻唑并[4,5-b]吡啶-2-基胺甲醯基)-1,2,3,4-四氫喹啉-7-基]吡啶-2-甲酸； 3-{1-[(3,5-二甲基-7-{2-[(2-磺基乙基)胺基]乙氧基}三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}-6-[8-([1,3]噻唑并[4,5-b]吡啶-2-基胺甲醯基)萘-2-基]吡啶-2-甲酸； (1ξ)-1-({2-[5-(1-{[3-(2-胺基乙氧基)-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基]甲基}-5-甲基-1H-吡唑-4-基)-6-羧基吡啶-2-基]-8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基}甲基)-1,5-去水-D-葡萄糖醇； 6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-3-{1-[(3-{2-[(3-羧基丙基)胺基]乙氧基}-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-3-基}吡啶-2-甲酸； 6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)萘-2-基]-3-{1-[(3,5-二甲基-7-{2-[(3-膦醯基丙基)胺基]乙氧基}三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}吡啶-2-甲酸； 6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-3-(1-{[3-(2-{[4-(β-D-葡萄哌喃糖基氧基)苯甲基]胺基}乙氧基)-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基]甲基}-5-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-甲酸； 3-(1-{[3-(2-{[4-(β-D-阿洛哌喃糖基氧基)苯甲基]胺基}乙氧基)-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基]甲基}-5-甲基-1H-吡唑-4-基)-6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]吡啶-2-甲酸； 3-{1-[(3-{2-[氮雜環丁烷-3-基(2-磺基乙基)胺基]乙氧基}-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}-6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]吡啶-2-甲酸； 3-{1-[(3-{2-[(3-胺基丙基)(2-磺基乙基)胺基]乙氧基}-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}-6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]吡啶-2-甲酸； 6-[1-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-1,2,3,4-四氫喹啉-7-基]-3-{1-[(3-{2-[(2-羧基乙基)胺基]乙氧基}-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}吡啶-2-甲酸； 6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-3-{1-[(3-{2-[(N 6,N 6-二甲基-L-離胺醯基)(甲基)胺基]乙氧基}-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}吡啶-2-甲酸； 3-{1-[(3-{2-[(3-胺基丙基)(甲基)胺基]乙氧基}-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}-6-[1-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-1,2,3,4-四氫喹啉-7-基]吡啶-2-甲酸； 3-{1-[(3-{2-[氮雜環丁烷-3-基(甲基)胺基]乙氧基}-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}-6-[1-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-1,2,3,4-四氫喹啉-7-基]吡啶-2-甲酸； N 6-(37-側氧基-2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32,35-十二氧雜三十七烷-37-基)-L-離胺醯基-N-[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基]-L-丙胺醯胺； 甲基6-[4-(3-{[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基]胺基}丙基)-1H-1,2,3-三唑-1-基]-6-脫氧-β-L-葡萄哌喃糖苷； 6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)萘-2-基]-3-{1-[(3-{2-[(2-羧基乙基)胺基]乙氧基}-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}吡啶-2-甲酸； 6-[5-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)喹啉-3-基]-3-{1-[(3,5-二甲基-7-{2-[(2-磺基乙基)胺基]乙氧基}三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}吡啶-2-甲酸； 6-[4-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)喹啉-6-基]-3-{1-[(3,5-二甲基-7-{2-[(2-磺基乙基)胺基]乙氧基}三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}吡啶-2-甲酸； 6-[5-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)喹啉-3-基]-3-{1-[(3-{2-[(2-羧基乙基)胺基]乙氧基}-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}吡啶-2-甲酸； 6-[1-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-5,6-二氫咪唑并[1,5-a]吡嗪-7(8H)-基]-3-{1-[(3,5-二甲基-7-{2-[(2-磺基乙基)胺基]乙氧基}三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}吡啶-2-甲酸； 8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-2-{6-羧基-5-[1-({3-[2-({3-[1-(β-D-葡萄哌喃糖醛醯基)-1H-1,2,3-三唑-4-基]丙基}胺基)乙氧基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}甲基)-5-甲基-1H-吡唑-4-基]吡啶-2-基}-1,2,3,4-四氫異喹啉； 6-[7-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-1H-吲哚-2-基]-3-{1-[(3,5-二甲基-7-{2-[(2-磺基乙基)胺基]乙氧基}三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}吡啶-2-甲酸； 6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-6-[3-(甲基胺基)丙基]-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-3-{1-[(3,5-二甲基-7-{2-[(2-磺基乙基)胺基]乙氧基}三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}吡啶-2-甲酸； 5-{[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基]胺基}-5-脫氧-D-阿拉伯糖醇； 1-{[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基]胺基}-1,2-二脫氧-D-阿拉伯-己糖醇； 6-[4-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)異喹啉-6-基]-3-{1-[(3,5-二甲基-7-{2-[(2-磺基乙基)胺基]乙氧基}三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}吡啶-2-甲酸； 6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-3-(1-{[3-(2-{[3-羥基-2-(羥基甲基)丙基]胺基}乙氧基)-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基]甲基}-5-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-甲酸； 1-{[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基]胺基}-1,2-二脫氧-D-赤式-戊糖醇； 6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-3-(1-{[3,5-二甲基-7-(2-{[(2S,3S)-2,3,4-三羥基丁基]胺基}乙氧基)三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基]甲基}-5-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-甲酸； 6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-3-(1-{[3-(2-{[(2S,3S,4R,5R,6R)-2,3,4,5,6,7-六羥基庚基]胺基}乙氧基)-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基]甲基}-5-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-甲酸； 6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-3-{1-[(3-{2-[({3-[(1,3-二羥基丙-2-基)胺基]丙基}磺醯基)胺基]乙氧基}-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}吡啶-2-甲酸； 6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-3-{1-[(3-{2-[(3-{[1,3-二羥基-2-(羥基甲基)丙-2-基]胺基}-3-側氧基丙基)胺基]乙氧基}-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}吡啶-2-甲酸； 6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1 H)-基]-3-(1-{[3-(2-{[(35)-3,4-二羥基丁基]胺基}乙氧基)-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基]甲基}-5-甲基-1 H-吡唑-4-基)吡啶-2-甲酸； 4-({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基]胺基}甲基)苯基β-D-葡萄哌喃糖苷醛酸； 3-{[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)萘-2-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基]胺基}丙基β-D-葡萄哌喃糖苷醛酸； 6-[4-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-2-氧離子基異喹啉-6-基]-3-[1-({3,5-二甲基-7-[2-(甲基胺基)乙氧基]三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}甲基)-5-甲基-1H-吡唑-4-基]吡啶-2-甲酸； 6-{8-[(1,3-苯并噻唑-2-基)胺甲醯基]-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基}-3-{1-[(3,5-二甲基-7-{2-[(2-磺基乙基)胺基]乙醯胺基}三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}吡啶-2-甲酸； 6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1 H)-基]-3-(1-{[3,5-二甲基-7-({2-[(2-磺基乙基)胺基]乙基}硫基)三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基]甲基}-5-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-甲酸；及 6-{8-[(1,3-苯并噻唑-2-基)胺甲醯基]-3,4-二氫異喹啉-2(1 H)-基}-3-{1-(3,5-二甲基-7-{3-[(2-磺基乙基)胺基]丙基}三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1 H-吡唑-4-基}吡啶-2-甲酸。 在本文任一態樣及實施例之一個實施例中，該連接子可藉由溶酶體酶裂解。在另一實施例中，溶酶體酶係組織蛋白酶B。 在本文任一態樣及實施例之一個實施例中，連接子包含根據結構式(IVa)、(IVb)、(IVc)或(IVd)之區段：
Figure 02_image133
Figure 02_image135
其中： 肽表示可藉由溶酶體酶裂解之肽(以N→C說明，其中肽包括胺基及羧基「端」)； T表示包含一或多個乙二醇單元或一個伸烷基鏈或其組合之聚合物； R a係選自氫、C 1 - 6烷基、SO 3H及CH 2SO 3H； R y係氫或C 1 - 4烷基-(O) r-(C 1 - 4伸烷基) s-G 1或C 1 - 4烷基-(N)-[(C 1 - 4伸烷基)-G 1] 2； R z係C 1 - 4烷基-(O) r-(C 1 - 4伸烷基) s-G 2； G 1係SO 3H、CO 2H、PEG 4-32或糖部分； G 2係SO 3H、CO 2H或PEG 4-32部分； r係0或1； s係0或1； p係在0至5範圍內之整數； q係0或1； x係0或1； y係0或1；
Figure 02_image137
表示該連接子與該Bcl-xL抑制劑之連接點；且 *表示與該連接子之其餘部分之連接點。 在另一實施例中，該肽係選自由以下組成之群：Val-Cit；Cit-Val；Ala-Ala；Ala-Cit；Cit-Ala；Asn-Cit；Cit-Asn；Cit-Cit；Val-Glu；Glu-Val；Ser-Cit；Cit-Ser；Lys-Cit；Cit-Lys；Asp-Cit；Cit-Asp；Ala-Val；Val-Ala；Phe-Lys；Lys-Phe；Val-Lys；Lys-Val；Ala-Lys；Lys-Ala；Phe-Cit；Cit-Phe；Leu-Cit；Cit-Leu；Ile-Cit；Cit-Ile；Phe-Arg；Arg-Phe；Cit-Trp；及Trp-Cit。 在另一實施例中，溶酶體酶係β-葡糖醛酸苷酶或β半乳糖苷酶。 在本文任一態樣及實施例之一個實施例中，該連接子包含根據結構式(Va)、(Vb)、(Vc)、(Vd)或(Ve)之區段：
Figure 02_image139
Figure 02_image141
其中： q係0或1； r係0或1； X 1係CH 2、O或NH；
Figure 02_image143
表示該連接子與該藥物之連接點；且 *表示與該連接子之其餘部分之連接點。 在本文任一態樣及實施例之一個實施例中，該連接子包含根據結構式(VIIIa)、(VIIIb)或(VIIIc)之區段：
Figure 02_image145
Figure 02_image147
或其水解衍生物，其中： R q係H或-O-(CH 2CH 2O) 11-CH 3； x係0或1； y係0或1； G 3係-CH 2CH 2CH 2SO 3H或-CH 2CH 2O-(CH 2CH 2O) 11-CH 3； R w係-O-CH 2CH 2SO 3H或-NH(CO)-CH 2CH 2O-(CH 2CH 2O) 12-CH 3； *表示與該連接子之其餘部分之連接點；且
Figure 02_image149
表示該連接子與該抗體之連接點。 在本文任一態樣及實施例之一個實施例中，該連接子包含具有1至6個乙二醇單元之聚乙二醇區段。 在本文任一態樣及實施例之一個實施例中，m係2、3或4。在另一實施例中，連接子L係選自IVa或IVb。 在本文任一態樣及實施例之一個實施例中，連接子L係選自由呈封閉形式或開放形式之以下各物組成之群：IVa.1-IVa.8、IVb.1-IVb.19、IVc.1-IVc.7、IVd.1-IVd.4、Va.1-Va.12、Vb.1-Vb.10、Vc.1-Vc.11、Vd.1-Vd.6、Ve.1-Ve.2、VIa.1、VIc.1-V1c.2、VId.1-VId.4、VIIa.1-VIIa.4、VIIb.1-VIIb.8、VIIc.1-VIIc.6。 在本文任一態樣及實施例之一個實施例中，連接子L係選自由以下組成之群：IVb.2、IVc.5、IVc.6、IVc.7、IVd.4、Vb.9、VIIa.1、VIIa.3、VIIc.1、VIIc.4及VIIc.5，其中各連接子之順丁烯二醯亞胺與抗體Ab反應，形成呈琥珀醯亞胺形式(封閉形式)或琥珀醯胺形式(開放形式)之共價連接。 在本文任一態樣及實施例之一個實施例中，連接子L係選自由以下組成之群：IVb.2、IVc.5、IVc.6、IVd.4、VIIa.1、VIIa.3、VIIc.1、VIIc.4、VIIc.5，其中各連接子之順丁烯二醯亞胺與抗體Ab反應，形成呈琥珀醯亞胺形式(封閉形式)或琥珀醯胺形式(開放形式)之共價連接。 在本文任一態樣及實施例之一個實施例中，連接子L係選自由IVb.2、VIIa.3、IVc.6及VIIc.1組成之群，其中
Figure 02_image151
係與藥物D之連接點且@係與LK之連接點，其中當該連接子係呈如下所示之開放形式時，@可以在緊鄰其之羧酸的α位或β位：
Figure 02_image153
Figure 02_image155
在本文任一態樣及實施例之一個實施例中，LK係與抗hEGFR抗體Ab上之胺基形成的鍵聯。 在另一實施例中，LK係醯胺或硫脲。 在本文任一態樣及實施例之一個實施例中，LK係與抗hEGFR抗體Ab上之硫氫基形成的鍵聯。在另一實施例中，LK係硫醚。 在一個實施例中，本發明之特徵在於本文所述之態樣及實施例之ADC，其中： LK係選自由醯胺、硫脲及硫醚組成之群；且 m係在1至8範圍內之整數。 在一個實施例中，本發明之特徵在於本文所述之態樣及實施例之ADC，其中： D係如技術方案35中所定義之Bcl-xL抑制劑； L係選自由以下連接子組成之群：IVa.1-IVa.8、IVb.1-IVb.19、IVc.1-IVc.7、IVd.1-IVd.4、Va.1-Va.12、Vb.1-Vb.10、Vc.1-Vc.11、Vd.1-Vd.6、Ve.1-Ve.2、VIa.1、VIc.1-V1c.2、VId.1-VId.4、VIIa.1-VIIa.4、VIIb.1-VIIb.8及VIIc.1-VIIc.6，其中各連接子與抗體Ab反應，形成共價連接； LK係硫醚；且 m係在1至8範圍內之整數。 在一個實施例中，本發明之特徵在於本文所述之態樣及實施例之ADC，其中： D係選自由以下化合物組成之群的Bcl-xL抑制劑，該等化合物之改良之處在於，對應於結構式(IIa)、(IIb)、(IIc)或(IId)之#位置的氫並不存在，從而形成單價基團： 6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-3-{1-[(3,5-二甲基-7-{2-[(2-磺基乙基)胺基]乙氧基}三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}吡啶-2-甲酸； 6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-3-{1-[(3-{2-[(2-羧基乙基)胺基]乙氧基}-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}吡啶-2-甲酸； 6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)萘-2-基]-3-{1-[(3,5-二甲基-7-{2-[(2-磺基乙基)胺基]乙氧基}三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}吡啶-2-甲酸； 1-{[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基]胺基}-1,2-二脫氧-D-阿拉伯-己糖醇； 6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-3-(1-{[3-(2-{[3-羥基-2-(羥基甲基)丙基]胺基}乙氧基)-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基]甲基}-5-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-甲酸；及 6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1 H)-基]-3-(1-{[3-(2-{[(3S)-3,4-二羥基丁基]胺基}乙氧基)-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基]甲基}-5-甲基-1 H-吡唑-4-基)吡啶-2-甲酸； L係選自由呈封閉形式或開放形式之以下連接子組成之群：IVb.2、IVc.5、IVc.6、IVc.7、IVd.4、Vb.9、Vc.11、VIIa.1、VIIa.3、VIIc.1、VIIc.4及VIIc.5； LK係硫醚；且 m係在2至4之範圍內的整數。 在一個實施例中，該ADC係選自由以下組成之群：AbA-CZ、AbA-TX、AbA-TV、AbA-YY、AbA-AAA、AbA-AAD、AbB-CZ、AbB-TX、AbB-TV、AbB-YY、AbB-AAD、AbG-CZ、AbG-TX、AbG-TV、AbG-YY、AbG-AAA、AbG-AAD、AbK-CZ、AbK-TX、AbK-TV、AbK-YY、AbK-AAA、AbK-AAD，其中CZ、TX、TV、YY、AAA及AAD係表5中所揭示之合成子，且其中該等合成子係呈開放或封閉形式。 在一個實施例中，本文所述之態樣及實施例之ADC係選自由式i-vi組成之群：
Figure 02_image157
(i)、
Figure 02_image159
(ii)、
Figure 02_image161
(iii)、
Figure 02_image163
(iv)、
Figure 02_image165
(v)及
Figure 02_image167
(vi)， 其中m係1至6之整數；視情況為2至6。在一具體實施例中，m係2。在一具體實施例中，Ab係hEGFR抗體，其中該hEGFR抗體包含AbA之重鏈及輕鏈CDR。在其他實施例中，該hEGFR ADC包含一種抗體，該抗體包括含SEQ ID NO: 12中所述之胺基酸序列之重鏈CDR3結構域、含SEQ ID NO: 11中所述之胺基酸序列之重鏈CDR2結構域及含SEQ ID NO:10中所述之胺基酸序列之重鏈CDR1結構域；以及含SEQ ID NO: 8中所述之胺基酸序列之輕鏈CDR3結構域、含SEQ ID NO: 7中所述之胺基酸序列之輕鏈CDR2結構域及含SEQ ID NO: 6中所述之胺基酸序列之輕鏈CDR1結構域。在又一實施例中，該hEGFR ADC包含一種抗體，該抗體包括含SEQ ID NO: 9中所述之胺基酸序列之重鏈可變區及含SEQ ID NO: 5中所述之胺基酸序列之輕鏈可變區。在其他實施例中，該hEGFR ADC包含一種抗體，該抗體包括含SEQ ID NO:41中所述之胺基酸序列之重鏈恆定區及/或含SEQ ID NO:43中所述之胺基酸序列之輕鏈恆定區。在另一實施例中，該hEGFR ADC包含一種抗體，該抗體包括含SEQ ID NO: 15中所述之胺基酸序列之重鏈及含SEQ ID NO: 13中所述之胺基酸序列之輕鏈。在另一實施例中，該hEGFR ADC包含一種抗體，該抗體包括含SEQ ID NO: 102中所述之胺基酸序列之重鏈及含SEQ ID NO: 13中所述之胺基酸序列之輕鏈。在另一個具體實施例中，Ab係該hEGFR抗體，其中該hEGFR抗體包含AbG之重鏈及輕鏈CDR。在其他實施例中，該hEGFR ADC包含一種抗體，該抗體包括含SEQ ID NO: 18中所述之胺基酸序列之重鏈CDR3結構域、含SEQ ID NO: 17中所述之胺基酸序列之重鏈CDR2結構域及含SEQ ID NO:16中所述之胺基酸序列之重鏈CDR1結構域；以及含SEQ ID NO: 25中所述之胺基酸序列之輕鏈CDR3結構域、含SEQ ID NO: 24中所述之胺基酸序列之輕鏈CDR2結構域及含SEQ ID NO: 23中所述之胺基酸序列之輕鏈CDR1結構域。在又一實施例中，該hEGFR ADC包含一種抗體，該抗體包括含SEQ ID NO: 72中所述之胺基酸序列之重鏈可變區及含SEQ ID NO: 73中所述之胺基酸序列之輕鏈可變區。在其他實施例中，該hEGFR ADC包含一種抗體，該抗體包括含SEQ ID NO:41中所述之胺基酸序列之重鏈恆定區及/或含SEQ ID NO:43中所述之胺基酸序列之輕鏈恆定區。在另一實施例中，該hEGFR ADC包含一種抗體，該抗體包括含SEQ ID NO: 93中所述之胺基酸序列之重鏈及含SEQ ID NO: 95中所述之胺基酸序列之輕鏈。在另一實施例中，該hEGFR ADC包含一種抗體，該抗體包括含SEQ ID NO: 94中所述之胺基酸序列之重鏈及含SEQ ID NO: 95中所述之胺基酸序列之輕鏈。 在本文任一態樣及實施例之一個實施例中，如藉由表面電漿子共振所測定，該抗體以介於約1×10 - 6M與約1×10 - 10M之間的K d結合至EGFR(1-525)(SEQ ID NO:47)。 在本文任一態樣及實施例之一個實施例中，如藉由表面電漿子共振所測定，該抗體以介於約1×10 - 6M與約1×10 - 7M之間的K d結合至EGFR(1-525)(SEQ ID NO:47)。 在本文任一態樣及實施例之一個實施例中，如藉由表面電漿子共振所測定，該抗體以約8.2×10 - 9M或更小的K d結合至EGFRvIII(SEQ ID NO:33)。 在本文任一態樣及實施例之一個實施例中，如藉由表面電漿子共振所測定，該抗體以介於約8.2×10 - 9M與約6.3×10 - 10M之間的K d結合至EGFRvIII(SEQ ID NO:33)。 在本文任一態樣及實施例之一個實施例中，如藉由表面電漿子共振所測定，該抗體以介於約8.2×10 - 9M與約2.0×10 - 9M之間的K d結合至EGFRvIII(SEQ ID NO:33)。 在本文任一態樣及實施例之一個實施例中，抗hEGFR抗體包括含SEQ ID NO: 12中所述之胺基酸序列之重鏈CDR3結構域、含SEQ ID NO: 11中所述之胺基酸序列之重鏈CDR2結構域及含SEQ ID NO:10中所述之胺基酸序列之重鏈CDR1結構域；含SEQ ID NO: 8中所述之胺基酸序列之輕鏈CDR3結構域、含SEQ ID NO: 7中所述之胺基酸序列之輕鏈CDR2結構域及含SEQ ID NO: 6中所述之胺基酸序列之輕鏈CDR1結構域。 在本文任一態樣及實施例之一個實施例中，該抗體包括含SEQ ID NO: 9中所述之胺基酸序列之重鏈可變區及含SEQ ID NO: 5中所述之胺基酸序列之輕鏈可變區。 在本文任一態樣及實施例之一個實施例中，該抗體包括含SEQ ID NO: 15中所述之胺基酸序列之重鏈及含SEQ ID NO: 13中所述之胺基酸序列之輕鏈。 在本文任一態樣及實施例之一個實施例中，該抗體包括含SEQ ID NO:40中所述之胺基酸序列之輕鏈CDR3結構域、含SEQ ID NO: 39中所述之胺基酸序列之輕鏈CDR2結構域及含SEQ ID NO: 38中所述之胺基酸序列之輕鏈CDR1結構域；以及含SEQ ID NO: 37中所述之胺基酸序列之重鏈CDR3結構域、含SEQ ID NO:36中所述之胺基酸序列之重鏈CDR2結構域及含SEQ ID NO:35中所述之胺基酸序列之重鏈CDR1結構域。 在本文任一態樣及實施例之一個實施例中，該抗體包括含選自由以下組成之群之胺基酸序列的重鏈可變區：50、52、54、56、58、60、62、64、66、68、70、72、74、76及78；以及含選自由以下組成之群之胺基酸序列的輕鏈可變區：51、53、55、57、59、61、63、65、67、69、71、73、75、77及79。 在本文任一態樣及實施例之一個實施例中，該抗體包括選自由以下組成之群的重鏈CDR組(CDR1、CDR2及CDR3)：SEQ ID NO: 10、11及12；SEQ ID NO: 16、17及18；SEQ ID NO: 10、11及19；SEQ ID NO: 20、11及12；SEQ ID NO: 21、3及22；SEQ ID NO: 16、17及19；SEQ ID NO: 2、3及4；SEQ ID NO: 10、3及12；SEQ ID NO: 80、11及18；SEQ ID NO: 80、3及18；SEQ ID NO: 20、3及12；SEQ ID NO: 80、11及12；以及SEQ ID NO: 81、11及22；及選自由以下組成之群之輕鏈CDR組(CDR1、CDR2及CDR3)：SEQ ID NO: 6、7及8；SEQ ID NO: 23、24及25；SEQ ID NO: 26、27及28；SEQ ID NO: 29、30及31；SEQ ID NO: 6、7及84；SEQ ID NO: 82、83及31；以及SEQ ID NO: 82、27及85，其中該抗體不包含重鏈CDR組SEQ ID NO:2、3及4及輕鏈CDR組SEQ ID NO:6、7及8。 在本文任一態樣及實施例之一個實施例中，該抗體包括含SEQ ID NO:8中所述之胺基酸序列之輕鏈CDR3結構域、含SEQ ID NO: 7中所述之胺基酸序列之輕鏈CDR2結構域及含SEQ ID NO: 6中所述之胺基酸序列之輕鏈CDR1結構域；以及含SEQ ID NO: 19中所述之胺基酸序列之重鏈CDR3結構域、含SEQ ID NO:17中所述之胺基酸序列之重鏈CDR2結構域及含SEQ ID NO:16中所述之胺基酸序列之重鏈CDR1結構域。 在本文任一態樣及實施例之一個實施例中，該抗體包括含SEQ ID NO:25中所述之胺基酸序列之輕鏈CDR3結構域、含SEQ ID NO: 24中所述之胺基酸序列之輕鏈CDR2結構域及含SEQ ID NO: 23中所述之胺基酸序列之輕鏈CDR1結構域；以及含SEQ ID NO: 18中所述之胺基酸序列之重鏈CDR3結構域、含SEQ ID NO:17中所述之胺基酸序列之重鏈CDR2結構域及含SEQ ID NO:16中所述之胺基酸序列之重鏈CDR1結構域。 在本文任一態樣及實施例之一個實施例中，該抗體包括含SEQ ID NO:28中所述之胺基酸序列之輕鏈CDR3結構域、含SEQ ID NO: 27中所述之胺基酸序列之輕鏈CDR2結構域及含SEQ ID NO: 26中所述之胺基酸序列之輕鏈CDR1結構域；以及含SEQ ID NO: 19中所述之胺基酸序列之重鏈CDR3結構域、含SEQ ID NO:11中所述之胺基酸序列之重鏈CDR2結構域及含SEQ ID NO:10中所述之胺基酸序列之重鏈CDR1結構域。 在本文任一態樣及實施例之一個實施例中，該抗體包括含SEQ ID NO: 64中所述之胺基酸序列之重鏈可變區及含SEQ ID NO: 65中所述之胺基酸序列之輕鏈可變區。 在本文任一態樣及實施例之一個實施例中，該抗體包括含SEQ ID NO: 72中所述之胺基酸序列之重鏈可變區及含SEQ ID NO: 73中所述之胺基酸序列之輕鏈可變區。 在本文任一態樣及實施例之一個實施例中，該抗體包括含SEQ ID NO: 74中所述之胺基酸序列之重鏈可變區及含SEQ ID NO: 75中所述之胺基酸序列之輕鏈可變區。 在另一態樣中，本發明之特徵在於一種抗hEGFR ADC，其係選自由以下組成之群：Ab-CZ、Ab-TX、Ab-TV、Ab-YY、Ab-AAA及Ab-AAD，其中CZ、TX、TV、YY、AAA及AAD係表5中所揭示之合成子，且其中該等合成子係呈開放或封閉形式，且其中該Ab係IgG1且包含AbA、AbB、AbG或AbK之可變輕鏈及重鏈CDR。 在一個實施例中，Ab包括含如SEQ ID NO: 5、65、73或75中所述之胺基酸序列之可變輕鏈區，及含如SEQ ID NO: 9、64、72或74中所述之胺基酸序列之可變重鏈區。 在一個實施例中，該抗體係具有四條多肽鏈，即兩條重鏈及兩條輕鏈之IgG，例如IgG1。 在一個實施例中，抗體係單株抗體。 在另一態樣中，本發明之特徵在於一種醫藥組合物，其包含有效量的根據本文任一態樣及實施例之ADC，及醫藥學上可接受之載劑。 在另一態樣中，本發明之特徵在於一種醫藥組合物，其包括含複數種本文任一態樣或實施例之ADC的ADC混合物，及醫藥學上可接受之載劑。 在一個實施例中，該ADC混合物具有2至4之平均藥物與抗體比率(DAR)。 在一個實施例中，該ADC混合物包含各自具有2至8之DAR的ADC。 在另一態樣中，本發明之特徵在於一種用於治療癌症之方法，其包含向有需要之個體投與治療有效量的本文任一實施例或態樣之ADC。 在一個實施例中，該癌症係選自由以下組成之群：非小細胞肺癌、乳癌、卵巢癌、神經膠母細胞瘤、前列腺癌、胰臟癌、結腸癌、頭頸癌及腎癌。 在一個實施例中，該癌症係鱗狀細胞癌。在另一實施例中，該鱗狀細胞癌係肺鱗狀細胞癌或頭頸鱗狀細胞癌。 在一個實施例中，癌症係三陰性乳癌。 在一個實施例中，該癌症係非小細胞肺癌。在另一實施例中，ADC係與紫杉烷一起投與。 在一個實施例中，該癌症係非小細胞肺癌。在另一實施例中，ADC係與維奈托克(venetoclax)一起投與。 在本文任一態樣及實施例之一個實施例中，該癌症以具有EGFR表現或呈EGFRvIII陽性為特徵。 在本文任一態樣及實施例之一個實施例中，該癌症係以具有EGFR過度表現或EGFR擴增為特徵。 在本文任一態樣及實施例之一個實施例中，該癌症係以具有活化EGFR突變為特徵。在另一實施例中，該EGFR突變係選自由以下組成之群：外顯子19缺失突變、外顯子21中之單點取代突變L858R、T790M點突變及其組合。 在另一態樣中，本發明之特徵在於一種用於抑制或減少具有實體腫瘤之個體之實體腫瘤生長的方法，該方法包含向該具有實體腫瘤之個體投與本文任一態樣或實施例之ADC，由此抑制或減少該實體腫瘤生長。 在一個實施例中，該實體腫瘤係選自由以下組成之群：非小細胞肺癌、乳癌、卵巢癌及神經膠母細胞瘤。 在一個實施例中，該實體腫瘤係鱗狀細胞癌。 在本文任一態樣及實施例之一個實施例中，該實體腫瘤係EGFRvIII陽性實體腫瘤、以具有EGFR擴增為特徵之實體腫瘤或以具有EGFR過度表現為特徵之實體腫瘤。 在本文任一態樣及實施例之一個實施例中，該ADC係與另外藥劑或另外療法組合投與。 在另一個實施例中，該另外藥劑係選自由以下組成之群：抗PD1抗體(例如派立珠單抗(pembrolizumab))、抗PD-L1抗體((例如阿特珠單抗(atezolizumab))、抗CTLA-4抗體(例如伊派利單抗(ipilimumab))、MEK抑制劑(例如曲美替尼(trametinib))、ERK抑制劑、BRAF抑制劑(例如達拉菲尼(dabrafenib))、奧希替尼(osimertinib)、埃羅替尼(erlotinib)、吉非替尼(gefitinib)、索拉非尼(sorafenib)、CDK9抑制劑(例如戴那西里(dinaciclib))、MCL-1抑制劑、替莫唑胺(temozolomide)、Bcl-2抑制劑(例如維奈托克)、Bcl-xL抑制劑、依魯替尼(ibrutinib)、mTOR抑制劑(例如依維莫司(everolimus))、PI3K抑制劑(例如布帕昔布(buparlisib))、杜維力絲(duvelisib)、艾德斯布(idelalisib)、AKT抑制劑、HER2抑制劑(例如拉帕替尼(lapatinib))、紫杉烷(例如多西他賽(docetaxel)、太平洋紫杉醇(paclitaxel)、奈米顆粒白蛋白結合型太平洋紫杉醇(nab-paclitaxel))、包含奧瑞他汀(auristatin)之ADC、包含PBD之ADC(例如羅匹妥珠單抗特斯林(rovalpituzumab tesirine))、包含類美登素之ADC(例如，TDM1)、TRAIL促效劑、蛋白酶體抑制劑(例如硼替佐米(bortezomib))及菸鹼醯胺磷酸核糖轉移酶(NAMPT)抑制劑。 在另一實施例中，該另外療法係放射。 在另一實施例中，該另外藥劑係化學治療劑。 在另一態樣中，本發明之特徵在於一種用於製備根據結構式(I)之ADC的方法：
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其中： D係如本文所揭示之式(IIa)、(IIb)、(IIc)或(IId)的Bcl-xL抑制劑藥物； L係如本文所揭示之連接子； Ab係hEGFR抗體，其中該hEGFR抗體包含AbA、AbB、AbG或AbK之重鏈及輕鏈CDR； LK表示將連接子L連接至抗體Ab之共價鍵聯；且 m係在1至20範圍內之整數； 該方法包含： 在30至40℃下，用有效量之二硫化物還原劑處理抗體水溶液至少15分鐘，且接著將該抗體溶液冷卻至20-27℃； 將包含選自2.1至2.176(表5)之群之合成子的水/二甲亞碸溶液添加至該經還原抗體溶液中； 將該溶液之pH值調至pH 7.5至8.5； 使該反應進行48至80小時以形成該ADC； 其中如藉由電噴霧質譜法所量測，對於琥珀醯亞胺各自水解成琥珀醯胺，質量移位18±2 amu；且 其中該ADC視情況藉由疏水相互作用層析法純化。 在一個實施例中，m係2。 在另一態樣中，本發明之特徵在於一種藉由如上文所描述之方法製備的ADC。
相關申請案 本申請案要求2016年6月8日提交的美國臨時申請案第62/347,416號之優先權，該案之完整內容明確地以引用之方式併入本文中。 已經開發出多種Bcl-xL抑制劑用於治療涉及失調之細胞凋亡路徑的疾病(例如癌症)。然而，Bcl-xL抑制劑可以作用於除靶細胞(例如癌細胞)外之細胞。舉例而言，臨床前研究顯示，使Bcl-xL藥理學失活會降低血小板半衰期且引起血小板減少(參見Mason等人, 2007, Cell 128:1173-1186)。 鑒於Bcl-xL在調控細胞凋亡方面之重要性，此項技術中需要選擇性或非選擇性抑制Bcl-xL活性的藥劑作為治療經由諸如Bcl-xL之抗細胞凋亡Bcl-2家族蛋白質表現或過度表現而使細胞凋亡失調之疾病的方法。因此，需要具有降低之劑量限制性毒性的新Bcl-xL抑制劑。 將藥物遞送至尚未用Bcl-xL抑制劑進行探索之細胞的一種可能方式係使用抗體藥物結合物(ADC)進行遞送。抗體藥物結合物(ADC)表示包含經由化學連接子結合至細胞毒性藥物之抗體的一類新穎治療劑。ADC之治療概念係組合抗體與藥物之結合能力，其中使用抗體，藉助於結合至靶表面抗原將該藥物遞送至腫瘤細胞。 因此，可以將Bcl-xL選擇性遞送至靶癌細胞，例如表現EGFRvIII之細胞的新ADC之開發將係一重大發現。 本發明各種態樣係關於新抗EGFR抗體藥物結合物(ADC；亦稱為免疫結合物)及其醫藥組合物。確切地說，本發明涉及包含Bcl-xL抑制劑之新抗EGFR ADC、可用於合成該等ADC之合成子、包含該等ADC之組合物、製備該等ADC之方法及使用該等ADC之各種方法。 熟習此項技術者應瞭解，本文所揭示之ADC實質上係「模組化的」。在本發明通篇，描述了包含該等ADC之各種「模組」的各種具體實施例，以及可用於合成該等ADC之合成子。作為特定非限制性實例，描述了可以構成該等ADC及合成子之抗體、連接子及Bcl-xL抑制劑的具體實施例。預期所有所描述之具體實施例可以彼此組合，就如同明確地個別描述每一特定組合。 熟習此項技術者亦應理解，本文所描述的各種Bcl-xL抑制劑、ADC及/或ADC合成子可以呈鹽形式，且在某些實施例中，特別是呈醫藥學上可接受之鹽形式。具有足夠酸性、足夠鹼性或兩種官能基的本發明之化合物可以與多種無機鹼以及無機酸及有機酸反應，形成鹽。或者，固有地帶電荷之化合物，諸如具有四級氮之該等化合物可以與適當相對離子，例如鹵離子，諸如溴離子、氯離子或氟離子形成鹽。 常用於形成酸加成鹽之酸有無機酸，諸如鹽酸、氫溴酸、氫碘酸、硫酸、磷酸及類似物；及有機酸，諸如對甲苯磺酸、甲烷磺酸、草酸、對溴苯磺酸、碳酸、琥珀酸、檸檬酸等。鹼加成鹽包括衍生自無機鹼，諸如銨及鹼金屬或鹼土金屬氫氧化物、碳酸鹽、碳酸氫鹽及類似物之鹽。 在以下揭示內容中，若同時包括結構圖式及命名法且若命名法與結構圖式相矛盾，則以結構圖式為準。 1. 定義為了使本發明更易於理解，首先對某些術語進行定義。此外，應注意，不論何時敍述參數值或值之範圍，預期各值及所述值範圍內之中間值亦意欲為本發明之一部分。另外，除非本文中另外定義，否則結合本發明使用之科學與技術術語應具有由一般熟習此項技術者通常所理解之含義。 以下定義各種化學取代基。在一些情況下，取代基(例如烷基(alkyl)、烷基(alkanyl)、烯基、炔基、環烷基、雜環基、雜芳基及芳基)中之碳原子數係藉由前綴「C x-C y」或「C x - y」指示，其中x係最少碳原子數量且y係最大碳原子數量。因此，例如「C 1-C 6烷基」係指含有1至6個碳原子之烷基。另外示出，「C 3-C 8環烷基」意謂含有3至8個碳環原子之飽和烴環。若將取代基描述為「經取代」，則在碳或氮上之氫原子經非氫基團置換。舉例而言，經取代烷基取代基係烷基上之至少一個氫原子經非氫基團置換的烷基取代基。舉例而言，單氟烷基係經一個氟基取代之烷基，且二氟烷基係經兩個氟基取代之烷基。應認識到，若取代基上存在一個以上取代，則各取代可相同或不同(除非另外規定)。若將取代基描述為「視情況經取代」，則該取代基可以為(1)未經取代的或(2)經取代的。可能的取代基包括(但不限於)C 1-C 6烷基、C 2-C 6烯基、C 2-C 6炔基、芳基、環烷基、雜環基、雜芳基、鹵素、C 1-C 6鹵代烷基、側氧基、-CN、NO 2、-OR xa、-OC(O)R xz、-OC(O)N(R xa) 2、-SR xa、-S(O) 2R xa、-S(O) 2N(R xa) 2、-C(O)R xa、-C(O)OR xa、-C(O)N(R xa) 2、-C(O)N(R xa)S(O) 2R xz、-N(R xa) 2、-N(R xa)C(O)R xz、-N(R xa)S(O) 2R xz、-N(R xa)C(O)O(R xz)、-N(R xa)C(O)N(R xa) 2、-N(R xa)S(O) 2N(R xa) 2、-(C 1-C 6伸烷基)-CN、-(C 1-C 6伸烷基)-OR xa、-(C 1-C 6伸烷基)-OC(O)R xz、-(C 1-C 6伸烷基)-OC(O)N(R xa) 2、-(C 1-C 6伸烷基)-SR xa、-(C 1-C 6伸烷基)-S(O) 2R xa、-(C 1-C 6伸烷基)-S(O) 2N(R xa) 2、-(C 1-C 6伸烷基)-C(O)R xa、-(C 1-C 6伸烷基)-C(O)OR xa、-(C 1-C 6伸烷基)-C(O)N(R xa) 2、-(C 1-C 6伸烷基)-C(O)N(R xa)S(O) 2R xz、-(C 1-C 6伸烷基)-N(R xa) 2、-(C 1-C 6伸烷基)-N(R xa)C(O)R xz、-(C 1-C 6伸烷基)-N(R xa)S(O) 2R xz、-(C 1-C 6伸烷基)-N(R xa)C(O)O(R xz)、-(C 1-C 6伸烷基)-N(R xa)C(O)N(R xa) 2或-(C 1-C 6伸烷基)-N(R xa)S(O) 2N(R xa) 2；其中R xa在每次出現時獨立地為氫、芳基、環烷基、雜環基、雜芳基、C 1-C 6烷基或C 1-C 6鹵代烷基；且R xz在每次出現時獨立地為芳基、環烷基、雜環基、雜芳基、C 1-C 6烷基或C 1-C 6鹵代烷基。 各種ADC、合成子及構成該等ADC及/或合成子之Bcl-xL抑制劑在本文一些實施例中係參照包括取代基之結構式描述。應理解，若價態及穩定性允許，則包含取代基之各種基團可以組合。本發明所預見之取代基及變數之組合僅為使得形成穩定化合物之該等組合。如本文所使用，術語「穩定」係指化合物具有足以允許製造之穩定性且維持該化合物之完整性一段足夠之時間以便用於本文中詳述之目的。 如本文所使用，以下術語意欲具有以下含義： 術語「烷氧基」係指式-OR xa之基團，其中R xa係烷基。代表性烷氧基包括甲氧基、乙氧基、丙氧基、第三丁氧基及類似基團。 術語「烷氧基烷基」係指經烷氧基取代之烷基且可以由通式-R bOR xa表示，其中R b係伸烷基且R xa係烷基。 單獨或作為另一取代基之一部分的術語「烷基」係指藉由自母烷烴、烯烴或炔烴之單一碳原子移除一個氫原子得到的飽和或不飽和分支鏈、直鏈或環狀單價烴基。典型烷基包括(但不限於)甲基；乙基，諸如乙烷基、乙烯基、乙炔基；丙基，諸如丙-1-基、丙-2-基、環丙-1-基、丙-1-烯-1-基、丙-1-烯-2-基、丙-2-烯-1-基、環丙-1-烯-1-基；環丙-2-烯-1-基、丙-1-炔-1-基、丙-2-炔-1-基等；丁基，諸如丁-1-基、丁-2-基、2-甲基-丙-1-基、2-甲基-丙-2-基、環丁-1-基、丁-1-烯-1-基、丁-1-烯-2-基、2-甲基-丙-1-烯-1-基、丁-2-烯-1-基、丁-2-烯-2-基、丁-1,3-二烯-1-基、丁-1,3-二烯-2-基、環丁-1-烯-1-基、環丁-1-烯-3-基、環丁-1,3-二烯-1-基、丁-1-炔-1-基、丁-1-炔-3-基、丁-3-炔-1-基等；及類似基團。在預定特定飽和程度之情況下，使用命名法「烷基」、「烯基」及/或「炔基」，如下所定義。術語「低碳數烷基」係指具有1至6個碳之烷基。 單獨或作為另一取代基之一部分的術語「烷基」係指藉由自母烷烴之單一碳原子移除一個氫原子得到的飽和分支鏈、直鏈或環狀烷基。典型烷基包括(但不限於)甲基；乙烷基；丙烷基，諸如丙-1-基、丙-2-基(異丙基)、環丙-1-基等；丁烷基，諸如丁-1-基、丁-2-基(第二丁基)、2-甲基-丙-1-基(異丁基)、2-甲基-丙-2-基(第三丁基)、環丁-1-基等；及類似基團。 單獨或作為另一取代基之一部分的術語「烯基」係指藉由自母烯烴之單一碳原子移除一個氫原子得到的具有至少一個碳碳雙鍵之不飽和分支鏈、直鏈或環狀烷基。典型烯基包括(但不限於)乙烯基；丙烯基，諸如丙-1-烯-1-基、丙-1-烯-2-基、丙-2-烯-1-基、丙-2-烯-2-基、環丙-1-烯-1-基、環丙-2-烯-1-基；丁烯基，諸如丁-1-烯-1-基、丁-1-烯-2-基、2-甲基-丙-1-烯-1-基、丁-2-烯-1-基、丁-2-烯-2-基、丁-1,3-二烯-1-基、丁-1,3-二烯-2-基、環丁-1-烯-1-基、環丁-1-烯-3-基、環丁-1,3-二烯-1-基等；及類似基團。 單獨或作為另一取代基之一部分的術語「炔基」係指藉由自母炔烴之單一碳原子移除一個氫原子得到的具有至少一個碳-碳參鍵之不飽和分支鏈、直鏈或環狀烷基。典型炔基包括(但不限於)乙炔基；丙炔基，諸如丙-1-炔-1-基、丙-2-炔-1-基等；丁炔基，諸如丁-1-炔-1-基、丁-1-炔-3-基、丁-3-炔-1-基等；及類似基團。 術語「烷基胺」係指式-NHR xa之基團且「二烷基胺」係指式-NR xaR xa之基團，其中R xa各自彼此獨立地為烷基。 術語「伸烷基」係指藉由自兩個末端碳原子分別移除一個氫原子得到的具有兩個末端單價基團中心之烷烴、烯烴或炔烴基團。典型伸烷基包括(但不限於)亞甲基；以及飽和或不飽和伸乙基；伸丙基；伸丁基；及類似基團。術語「低碳數伸烷基」係指具有1至6個碳之伸烷基。 術語「伸雜烷基」係指一或多個-CH 2-基團經硫基、氧基或-NR x3-置換之二價伸烷基，其中R x3係選自氫、低碳數烷基及低碳數雜烷基。伸雜烷基可以為直鏈、分支、環狀、雙環的或其組合且可以包括至多10個碳原子及至多4個雜原子。術語「低碳數伸雜烷基」係指1至4個碳原子及1至3個雜原子之伸烷基。 術語「芳基」意謂含有6至14個碳環原子之芳族碳環基。芳基可以為單環或多環的(亦即，可以含有多於一個環)。在多環芳族環之情況下，該多環系統中僅需要一個環為芳族環，而其餘環可以為飽和、部分飽和或不飽和的。芳基之實例包括苯基、萘基、茚基、茚滿基及四氫萘基。 術語「伸芳基」係指具有藉由自兩個環碳各移除一個氫原子得到之兩個單價基團中心的芳基。例示性伸芳基係伸苯基。 烷基可以經「羰基」取代，「羰基」意謂移除單一伸烷基碳原子之兩個氫原子且用連至氧原子之雙鍵置換。 前綴「鹵代」指示包括該前綴之取代基係經一或多個獨立選擇之鹵素基團取代。舉例而言，鹵代烷基意思指至少一個氫基經鹵素基團置換之烷基取代基。典型鹵素基團包括氯、氟、溴及碘。鹵代烷基之實例包括氯甲基、1-溴乙基、氟甲基、二氟甲基、三氟甲基及1,1,1-三氟乙基。應認識到，若取代基經一個以上鹵素基團取代，則該等鹵素基團可以相同或不同(除非另外規定)。 術語「鹵代烷氧基」係指式-OR c之基團，其中R c係鹵代烷基。 術語「雜烷基(heteroalkyl)」、「雜烷基(heteroalkanyl)」、「雜烯基」、「雜炔基」及「伸雜烷基」分別指一或多個碳原子，例如1、2或3個碳原子各自獨立地經相同或不同雜原子或雜原子基團置換的烷基(alkyl)、烷基(alkanyl)、烯基、炔基及伸烷基。可以置換碳原子之典型雜原子及/或雜原子基團包括(但不限於)-O-、-S-、-S-O-、-NR c-、-PH、-S(O)-、-S(O) 2-、-S(O)NR c-、-S(O) 2NR c-及類似物，包括其組合，其中R c各自獨立地為氫或C 1-C 6烷基。術語「低碳數雜烷基」係指介於1與4個之間的碳原子及介於1與3個之間的雜原子。 術語「環烷基」及「雜環基」分別指「烷基」及「雜烷基」之環狀形式。對於雜環基，雜原子可以佔據連接至分子其餘部分之位置。環烷基或雜環基環可以為單一環(單環)或具有兩個或多於兩個環(雙環或多環)。 單環環烷基及雜環基通常含有3至7個環原子，更通常含有3至6個環原子，且即使更通常含有5至6個環原子。環烷基之實例包括(但不限於)環丙基；環丁基，諸如環丁烷基及環丁烯基；環戊基，諸如環戊烷基及環戊烯基；環己基，諸如環己烷基及環己烯基；及類似基團。單環雜環基之實例包括(但不限於)氧雜環丁烷、呋喃基、二氫呋喃基、四氫呋喃基、四氫哌喃基、噻吩基(硫代呋喃基)、二氫噻吩基、四氫噻吩基、吡咯基、吡咯啉基、吡咯啶基、咪唑基、二氫咪唑基、咪唑啶基、吡唑基、吡唑啉基、吡唑啶基、三唑基、四唑基、噁唑基、噁唑啶基、異噁唑啶基、異噁唑基、噻唑基、異噻唑基、噻唑啉基、異噻唑啉基、噻唑啶基、異噻唑啶基、噻二唑基、噁二唑基(包括1,2,3-噁二唑基、1,2,4-噁二唑基、1,2,5-噁二唑基(呋吖基)或1,3,4-噁二唑基)、噁三唑基(包括1,2,3,4-噁三唑基或1,2,3,5-噁三唑基)、二噁唑基(包括1,2,3-二噁唑基、1,2,4-二噁唑基、1,3,2-二噁唑基或1,3,4-二噁唑基)、1,4-二氧雜環己烷基、二氧硫代嗎啉基、氧噻唑基、氧硫雜環戊烯基、氧硫雜環戊烷基、哌喃基、二氫哌喃基、硫代哌喃基、四氫硫代哌喃基、吡啶基(吖嗪基)、哌啶基、二嗪基(包括噠嗪基(1,2-二嗪基)、嘧啶基(1,3-二嗪基)或吡嗪基(1,4-二嗪基))、哌嗪基、三嗪基包括1,3,5-三嗪基、1,2,4-三嗪基及1,2,3-三嗪基))、噁嗪基(包括1,2-噁嗪基、1,3-噁嗪基或1,4-噁嗪基))、噁噻嗪基(包括1,2,3-噁噻嗪基、1,2,4-噁噻嗪基、1,2,5-噁噻嗪基或1,2,6-噁噻嗪基))、噁二嗪基(包括1,2,3-噁二嗪基、1,2,4-噁二嗪基、1,4,2-噁二嗪基或1,3,5-噁二嗪基))、嗎啉基、氮呯基、氧呯基、噻呯基、二氮呯基、吡啶酮基(包括吡啶-2(1H)-酮基及吡啶-4(1H)-酮基)、呋喃-2(5H)-酮基、嘧啶基(包括嘧啶-2(1H)-酮基及嘧啶-4(3H)-酮基)、噁唑-2(3H)-酮基、1H-咪唑-2(3H)-酮基、噠嗪-3(2H)-酮基及吡嗪-2(1H)-酮基。 多環環烷基及雜環基含有多於一個環，且雙環環烷基及雜環基含有兩個環。該等環可以呈橋連、稠合或螺環取向。多環環烷基及雜環基可以包括橋連環、稠合環及/或螺環之組合。在螺環環烷基或雜環基中，兩個不同環共用一個原子。螺環烷基之實例有螺[4.5]癸烷且螺雜環烷基之實例有螺吡唑啉。 在橋連環烷基或雜環基中，該等環共有至少兩個共用不相鄰原子。橋連環烷基之實例包括(但不限於)金剛烷基及降冰片烷基環。橋連雜環基之實例包括(但不限於)2-氧雜三環[3.3.1.1 3 , 7]癸基。 在稠環環烷基或雜環基中，兩個或多於兩個環稠合在一起，由此兩個環共有一個共用鍵。稠環環烷基之實例包括十氫萘、萘、萘滿及蒽。含有兩或三個環之稠環雜環基的實例包括咪唑并吡嗪基(包括咪唑并[1,2-a]吡嗪基)、咪唑并吡啶基(包括咪唑并[1,2-a]吡啶基)、咪唑并噠嗪基(包括咪唑并[1,2-b]噠嗪基)、噻唑并吡啶基(包括噻唑并[5,4 -c]吡啶基、噻唑并[5,4-b]吡啶基、噻唑并[4,5-b]吡啶基及噻唑并[4,5-c]吡啶基)、吲哚嗪基、哌喃并吡咯基、4H-喹嗪基、嘌呤基、萘啶基、吡啶并吡啶基(包括吡啶并[3,4-b]-吡啶基、吡啶并[3,2-b]-吡啶基或吡啶并[4,3-b]-吡啶基)及喋啶基。稠環雜環基之其他實例包括苯并稠合的雜環基，諸如二氫𠳭烯基、四氫異喹啉基、吲哚基、異吲哚基(異苯并唑基、假異吲哚基)、假吲哚基(indoleninyl/pseudoindolyl)、異吲唑基(苯并吡唑基)、苯并吡啶基(包括喹啉基(1-苯并吖嗪基)或異喹啉基(2-苯并吖嗪基))、酞嗪基、喹喏啉基、喹唑啉基、苯并二嗪基(包括㖕啉基(1,2-苯并二嗪基)或喹唑啉基(1,3-苯并二嗪基))、苯并哌喃基(包括𠳭烷基或異𠳭烷基)、苯并噁嗪基(包括1,3,2-苯并噁嗪基、1,4,2-苯并噁嗪基、2,3,1-苯并噁嗪基或3,1,4-苯并噁嗪基)、苯并[d]噻唑基及苯并異噁嗪基(包括1,2-苯并異噁嗪基或1,4-苯并異噁嗪基)。 術語「伸環烷基」係指具有藉由自兩個環碳分別移除一個氫原子得到之兩個單價基團中心的環烷基。例示性環伸烷基包括：
Figure 02_image171
、
Figure 02_image173
及
Figure 02_image175
。 術語「雜芳基」係指含有5至14個環原子之芳族雜環基。雜芳基可以為單環或者2個或3個稠合環。雜芳基之實例包括6員環，諸如吡啶基、吡唑基、嘧啶基、噠嗪基及1,3,5-三嗪基、1,2,4-三嗪基或1,2,3-三嗪基；5員環取代基，諸如三唑基、吡咯基、咪唑基、呋喃基、噻吩基、吡唑基、噁唑基、異噁唑基、噻唑基、1,2,3-噁二唑基、1,2,4-噁二唑基、1,2,5-噁二唑基或1,3,4-噁二唑基及異噻唑基；6員/5員稠合環取代基，諸如咪唑并吡嗪基(包括咪唑并[1,2-a]吡嗪基)咪唑并吡啶基(包括咪唑并[1,2-a]吡啶基)、咪唑并噠嗪基(包括咪唑并[1,2-b]噠嗪基)、噻唑并吡啶基(包括噻唑并[5,4-c]吡啶基、噻唑并[5,4-b]吡啶基、噻唑并[4,5-b]吡啶基及噻唑并[4,5-c]吡啶基)、苯并[d]噻唑基、苯并硫代呋喃基、苯并異噁唑基、苯并噁唑基嘌呤基及鄰胺基苯甲醯基；以及6/6員稠合環，諸如苯并哌喃基、喹啉基、異喹啉基、㖕啉基、喹唑啉基及苯并噁嗪基。雜芳基亦可為具有芳族(4N+2π電子)共振貢獻因素之雜環，諸如吡啶酮基(包括吡啶-2(1H)-酮基及吡啶-4(1H)-酮基)、嘧啶基(包括嘧啶-2(1H)-酮基及嘧啶-4(3H)-酮基)、噠嗪-3(2H)-酮基及吡嗪-2(1H)-酮基。 如本文所使用，術語「磺酸鹽(酯)」意思指磺酸之鹽或酯。 如本文所使用，術語「磺酸甲酯」意思指磺酸基團之甲酯。 如本文所使用，術語「羧酸鹽(酯)」意思指羧酸之鹽或酯。 如本文所使用，術語「多元醇」意思指含有超過兩個單獨或作為單體單元之一部分之羥基的基團。多元醇包括(但不限於)經還原C 2-C 6碳水化合物、乙二醇及甘油。 術語「糖」當在「G 1」之情形中使用時包括單醣類及雙醣類之O-糖苷、 N-糖苷、 S-糖苷及 C-糖苷( C-糖基)碳水化合物衍生物且可以來源於天然存在之來源或可以為合成來源。舉例而言，「糖」當在「G 1」之情形中使用時包括衍生物，諸如(但不限於)衍生自葡糖醛酸、半乳糖醛酸、半乳糖及葡萄糖之糖等等。適合糖取代包括(但不限於)羥基、胺、羧酸、磺酸、膦酸、酯及醚。 術語「NHS酯」意思指羧酸之N-羥基琥珀醯亞胺酯衍生物。 術語「胺」包括一級、二級及三級脂族胺，包括環狀形式。 當在「或其鹽」之情形中使用時，術語鹽包括常用於形成鹼金屬鹽及形成游離酸或游離鹼之加成鹽的鹽。一般而言，此等鹽通常可以利用習知方式，藉由使例如適當酸或鹼與本發明化合物反應來製備。 在意圖將鹽投與患者(與例如在活體外情況下使用相對)時，該鹽較佳係醫藥學上可接受的及/或生理上相容的。術語「醫藥學上可接受的」在本專利申請案中係作為形容詞使用，意謂經修飾名詞適合用作醫藥產品或用作醫藥產品之一部分。術語「醫藥學上可接受之鹽」包括常用於形成鹼金屬鹽及形成游離酸或游離鹼之加成鹽的鹽。一般而言，此等鹽通常可以利用習知方式，藉由使例如適當酸或鹼與本發明化合物反應來製備。 如本文所使用，術語「抗表皮生長因子受體(EGFR)抗體」係指特異性結合至EGFR之抗體。「結合」所關注抗原，亦即EGFR之抗體係能夠以足夠親和力結合該抗原，由此使抗體可用於靶向表現該抗原之細胞的抗體。在一個較佳實施例中，該抗體特異性結合至人類EGFR(hEGFR)。抗EGFR抗體之實例揭示於下。除非另外指明，否則術語「抗EGFR抗體」意欲指結合至野生型EGFR或任何EGFR之變異體，諸如EGFRvIII之抗體。 野生型人類EGFR之胺基酸序列在下文以SEQ ID NO: 32提供，其中信號肽(胺基酸殘基1-24)加下劃線，且細胞外結構域之胺基酸殘基(ECD，胺基酸殘基25-645)以粗體突出顯示。截短的野生型EGFR(在本文中又稱為EGFR(1-525))之ECD對應於SEQ ID NO:47且相當於SEQ ID NO: 32之胺基酸1-525。野生型EGFR之成熟形式對應於不含信號肽之蛋白質，亦即，SEQ ID NO: 32之胺基酸殘基25至1210。
Figure 02_image177
Figure 02_image179
人類EGFR之ECD的胺基酸序列在下文以SEQ ID NO: 34提供，且包括信號序列(加下劃線)。
Figure 02_image181
Figure 02_image183
EGFR之整體結構描述於圖1中。EGFR之ECD具有四個結構域(Cochran等人 (2004) J. Immunol. Methods,287, 147-158)。已提出結構域I及III促使形成配位體之高親和力結合位點。結構域II及IV係富含半胱胺酸的類層黏連蛋白區域，其使蛋白質摺疊穩定並含有可能的EGFR二聚合界面。 EGFR變異體可以由基因重排伴隨EGFR基因擴增得到。 EGFRvIII係人類癌症中最常出現的EGFR變異體(Kuan等人, Endocr Relat Cancer. 8(2):83-96 (2001))。在基因擴增過程期間，EGFR之細胞外結構域缺失267個胺基酸且在融合接合點插入一個甘胺酸殘基。因此，EGFRvIII不具有野生型EGFR細胞外結構域之胺基酸6-273且在接合點包括一個甘胺酸殘基插入。EGFR之EGFRvIII變異體在細胞外結構域中含有267個胺基酸殘基缺失，其中在該缺失接合點插入一個甘胺酸。EGFRvIII胺基酸序列在下文以SEQ ID NO: 33顯示(ECD以粗體突出顯示且對應於SEQ ID NO:46，信號序列加下劃線)。
Figure 02_image185
EGFRvIII經由以不依賴配位體之方式進行之組成性信號傳導來促進腫瘤進展。EGFRvIII在正常組織中之表現尚不瞭解(Wikstrand等人, Cancer Research 55(14): 3140-3148 (1995)；Olapade-Olaopa等人, Br J Cancer. 82(1): 186-94 (2000))，但顯示其在腫瘤細胞，包括乳癌、神經膠質瘤、NSCL癌症、卵巢癌及前列腺癌中大量表現(Wikstrand等人, Cancer Research 55(14): 3140-3148 (1995)； Ge等人, Int J Cancer. 98(3):357-61 (2002)；Wikstrand等人, Cancer Research 55(14): 3140-3148 (1995)；Moscatello等人, Cancer Res. 55(23):5536-9 (1995)；Garcia de Palazzo等人, Cancer Res. 53(14):3217-20 (1993)；Moscatello等人, Cancer Res. 55(23):5536-9 (1995)；及Olapade-Olaopa等人, 2(1):186-94 (2000))。 如本文所使用，「EGFR之生物活性」係指EGFR之所有固有生物特性，包括(但不限於)結合至表皮生長因子(EGF)、結合至腫瘤生長因子α(TGFα)、同源二聚化、活化JAK2激酶活性、活化MAPK激酶活性及活化跨膜受體蛋白質酪胺酸激酶活性。 如本文所使用，術語「基因擴增」係指以產生任何特定DNA片段之多個複本為特徵的細胞過程。舉例而言，腫瘤細胞可能由於細胞信號且有時由於環境事件而擴增或複製染色體區段。基因擴增過程使得產生該基因之另外複本。在一個實施例中，該基因係EGFR，亦即，「EGFR擴增」。在一個實施例中，使用本文揭示之組合物及方法治療患有EGFR擴增性癌症的個體。 如本文關於抗體或ADC與第二化學物種之相互作用所使用之術語「特異性結合」或「特異性地結合」意謂該相互作用取決於化學化學物種上特定結構(例如，抗原決定子或抗原決定基)之存在；舉例而言，抗體識別且結合至特定蛋白質結構而非一般性地結合至蛋白質。若抗體或ADC對於抗原決定基「A」具有特異性，則在含經標記「A」及該抗體之反應中，含抗原決定基A (或未經標記之游離A)之分子的存在將減少結合至該抗體或ADC之經標記A的量。 如本文所使用，短語「特異性地結合至hEGFR」或「特異性結合至hEGFR」係指抗EGFR抗體或ADC以至少約1×10 - 6M、1×10 - 7M、1×10 - 8M、1×10 - 9M、1×10 - 10M、1×10 - 11M、1×10 - 12M或更高之Kd結合至hEGFR，及/或以比其對非特異性抗原之親和力高至少兩倍之親和力結合至抗原的能力。然而，應理解，該抗體或ADC能夠特異性結合至序列相關之兩個或多於兩個抗原。舉例而言，在一個實施例中，抗體可以特異性結合至人類及非人類(例如小鼠或非人類靈長類動物)之EGFR直系同源物。在一個實施例中，抗原係EGFR(1-525)。 術語「抗體」係指特異性結合至抗原且包含重(H)鏈及輕(L)鏈之免疫球蛋白分子。每一重鏈由重鏈可變區(本文中縮寫為HCVR或VH)及重鏈恆定區構成。重鏈恆定區由三個結構域，即CH1、CH2及CH3構成。每一輕鏈由輕鏈可變區(在本文中縮寫為LCVR或VL)及輕鏈恆定區。輕鏈恆定區由一個結構域，即CL構成。VH及VL區可以進一步再分成高變區，稱為互補決定區(CDR)，間雜有稱為構架區(FR)之較保守區域。各VH及VL由自胺基末端至羧基末端按以下順序排列之三個CDR及四個FR構成：FR1、CDR1、FR2、CDR2、FR3、CDR3、FR4。抗體可以為任何類型(例如IgG、IgE、IgM、IgD、IgA及IgY)及類別(例如IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgA1及IgA2)或子類。儘管術語「抗體」不打算包括抗體之抗原結合部分(於以下定義)，但預期在某些實施例中，其包括自重鏈之羧基端缺失少數胺基酸。在一個實施例中，抗體包含自重鏈之羧基端缺失1-5個胺基酸之重鏈。在一個實施例中，抗體係可以結合至hEGFR之單株抗體，即IgG，其具有四條多肽鏈，即兩條重(H)鏈及兩條輕(L)鏈。在一個實施例中，抗體係包含λ或κ輕鏈之單株IgG抗體。 如本文所使用，術語抗體之「抗原結合部分」(或簡稱「抗體部分」)係指保持特異性結合至抗原(例如hEGFR)之能力的一或多個抗體片段。經顯示，抗體之抗原結合功能可以由全長抗體之片段執行。此類抗體實施例亦可為雙特異性、雙重特異性或多特異性形式；特異性結合至兩個或多於兩個不同抗原。術語抗體之「抗原結合部分」內涵蓋的結合片段之實例包括(i) Fab片段，一種由VL、VH、CL及CH1結構域組成之單價片段；(ii) F(ab') 2片段，一種包含在鉸鏈區藉由二硫橋鍵連接之兩個Fab片段的二價片段；(iii)由VH及CH1結構域組成之Fd片段；(iv)由抗體單臂之VL及VH結構域組成之Fv片段；(v)dAb片段(Ward等人 (1989) Nature 341:544-546；Winter等人, PCT公開案WO 90/05144 A1，以引用的方式併入本文中)，其包含單一可變結構域；以及(vi)分離之互補決定區(CDR)。此外，儘管Fv片段之兩個結構域VL及VH係由獨立基因編碼，但其可以使用重組方法，藉由使其能夠製備成單一蛋白質鏈形式的合成連接子接合，其中VL與VH區配對形成單價分子(稱為單鏈Fv(scFv)；參見例如，Bird等人(1988) Science 242:423-426；及Huston等人(1988) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85:5879-5883)。此類單鏈抗體亦意欲涵蓋在術語抗體之「抗原結合部分」內。在本發明之某些實施例中，scFv分子可以併入融合蛋白中。亦涵蓋單鏈抗體之其他形式，諸如雙功能抗體。雙功能抗體係二價雙特異性抗體，其中VH及VL結構域表現於單一多肽鏈上，但使用太短而不允許同一鏈上之兩個結構域之間配對的連接子，由此迫使該等結構域與另一鏈之互補結構域配對且產生兩個抗原結合位點(參見例如，Holliger, P.等人 (1993) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90:6444-6448；Poljak, R.J.等人(1994) Structure 2:1121-1123)。此類抗體結合部分係此項技術中已知的(Kontermann及Dubel編, Antibody Engineering(2001) Springer-Verlag. New York. 第790頁(ISBN 3-540-41354-5)。 IgG係包含呈Y形佈置之兩條重鏈及兩條輕鏈的一類抗體。例示性人類IgG重鏈及輕鏈恆定結構域胺基酸序列係此項技術中已知的且呈現於下表1中。 表 1 ： 人類 IgG 重鏈恆定結構域及輕鏈恆定結構域之序列
蛋白質 序列標識符 序列
Ig γ-1恆定區 SEQ ID NO:41 ASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
Ig γ-1恆定區突變體 SEQ ID NO:42 ASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
Ig κ恆定區 SEQ ID NO:43 RTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
Ig λ恆定區 SEQ ID NO:4 4 QPKAAPSVTLFPPSSEELQANKATLVCLISDFYPGAVTVAWKADSSPVKAGVETTTPSKQSNNKYAASSYLSLTPEQWKSHRSYSCQVTHEGSTVEKTVAPTECS
如本文所使用，「分離之抗體」意欲指基本上不含具有不同抗原特異性之其他抗體的抗體(例如特異性結合EGFR的分離之抗體基本上不含特異性結合除EGFR以外之抗原的抗體)。然而，特異性結合EGFR的分離之抗體可以與其他抗原，諸如來自其他物種之EGFR分子具有交叉反應性。另外，分離之抗體可以基本上不含其他細胞物質及/或化學物質。 術語「人類化抗體」係指這樣一類抗體，該等抗體包含來自非人類物種(例如小鼠)之重鏈及輕鏈可變區序列但該VH及/或VL序列之至少一部分已改變成更「像人類」，亦即，更類似於人類生殖系可變序列。詳言之，術語「人類化抗體」係免疫特異性結合至所關注抗原且包含具有基本上人類抗體之胺基酸序列之構架(FR)區及具有基本上非人類抗體之胺基酸序列之互補決定區的抗體或其變異體、衍生物、類似物或片段。如本文所使用，術語「基本上」在CDR之情況下係指CDR之胺基酸序列與非人類抗體CDR之胺基酸序列至少80%，較佳至少85%、至少90%、至少95%、至少98%或至少99%一致。人類化抗體包含至少一個且通常兩個可變結構域(Fab、Fab'、F(ab') 2、FabC、Fv)之基本上全部，其中所有或基本上所有CDR區均對應於非人類免疫球蛋白(亦即，供體抗體)之CDR區且所有或基本上所有構架區均係具有人類免疫球蛋白共同序列之構架區。較佳地，人類化抗體亦包含免疫球蛋白恆定區(Fc)，通常人類免疫球蛋白恆定區之至少一部分。在一些實施例中，人類化抗體含有輕鏈以及至少重鏈可變結構域。抗體亦可包括重鏈之CH1區、鉸鏈區、CH2區、CH3區及CH4區。在一些實施例中，人類化抗體僅含人類化輕鏈。在其他實施例中，人類化抗體僅含人類化重鏈。在特定實施例中，人類化抗體僅含輕鏈之人類化可變結構域及/或人類化重鏈。 人類化抗體可以選自任何免疫球蛋白種類，包括IgM、IgG、IgD、IgA及IgE，及任何同型，包括(但不限於)IgG1、IgG2、IgG3及IgG4。人類化抗體可以包含來自一種以上類別或同型之序列，且可以使用此項技術中熟知的技術選擇特定恆定結構域以使所需效應功能最佳化。 術語「Kabat編號」、「Kabat定義」與「Kabat標記」在本文中可互換使用。此項技術中公認此等術語係指相較於抗體重鏈及輕鏈可變區或其抗原結合部分中之其他胺基酸殘基具有較大變化性(亦即，高變)之胺基酸殘基的編號系統(Kabat等人 (1971) Ann. NY Acad, Sci.190:382-391；及Kabat, E.A.等人 (1991) Sequences of Proteins of Immunological Interest, 第五版 ,U.S. Department of Health and Human Services, NIH出版號91-3242)。對於重鏈可變區，高變區對於CDR1在胺基酸位置31至35範圍內，對於CDR2在胺基酸位置50至65範圍內，且對於CDR3在胺基酸位置95至102範圍內。對於輕鏈可變區，高變區對於CDR1在胺基酸位置24至34範圍內，對於CDR2在胺基酸位置50至56範圍內，且對於CDR3在胺基酸位置89至97範圍內。 如本文所使用，術語「CDR」係指在抗體可變序列內之互補決定區。在重鏈(HC)及輕鏈(LC)之可變區中各自存在三個CDR，針對各可變區命名為CDR1、CDR2及CDR3(或具體言之HC CDR1、HC CDR2、HC CDR3、LC CDR1、LC CDR2及LC CDR3)。如本文所使用，術語「CDR組」係指存在於能夠結合抗原之單一可變區中的一組三個CDR。此等CDR之確切邊界已根據不同系統以不同方式定義。藉由Kabat (Kabat等人, Sequences of Proteins of Immunological Interest (National Institutes of Health, Bethesda, Md. (1987)及(1991))描述之系統不僅提供適用於抗體任何可變區的明確殘基編號系統，而且亦提供界定該三個CDR之精確殘基邊界。此等CDR可以稱為Kabat CDR。Chothia及同事(Chothia及Lesk, J. Mol. Biol. 196:901-917 (1987)；及Chothia等人, Nature 342:877-883 (1989))發現，Kabat CDR內之某些子部分呈現幾乎一致的肽主鏈構象，不過在胺基酸序列層面上具有極大多樣性。此等子部分稱為L1、L2及L3或H1、H2及H3，其中「L」及「H」分別表示輕鏈區及重鏈區。此等區域可以稱為Chothia CDR，其具有與Kabat CDR重疊之邊界。界定與Kabat CDR重疊之CDR的其他邊界已由Padlan (FASEB J. 9:133-139 (1995))及MacCallum (J Mol Biol 262(5):732-45 (1996))描述。又其他CDR邊界之界定可能不嚴格遵循以上系統中之一，但仍然會與Kabat CDR重疊，不過根據特定殘基或殘基組或甚至整個CDR不顯著影響抗原結合之預測或實驗結果，其可以縮短或延長。本文中所用之方法可以利用根據此等系統中之任一個界定之CDR，但較佳實施例使用Kabat或Chothia界定之CDR。 如本文所使用，術語「構架」或「構架序列」係指可變區減去CDR之剩餘序列。因為CDR序列之確切界定可以藉由不同系統確定，所以構架序列之含義相應地有不同解釋。六個CDR (輕鏈之CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3，及重鏈之CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3)亦將輕鏈及重鏈上之構架區在各鏈上分成四個子區(FR1、FR2、FR3及FR4)，其中CDR1位於FR1與FR2之間，CDR2位於FR2與FR3之間，且CDR3位於FR3與FR4之間。在不將特定子區指定為FR1、FR2、FR3或FR4的情況下，藉由其他方式提及之構架區代表單一、天然存在之免疫球蛋白鏈之可變區內的組合FR。如本文所使用，FR表示四個子區之一，且FRs表示構成構架區之四個子區中之兩個或多於兩個子區。 人類化抗體之構架及CDR區不必精確對應於親本序列，例如，供體抗體CDR或共同構架可以藉由至少一個胺基酸殘基之取代、插入及/或缺失進行誘變，以使得CDR或構架殘基在該位點處不對應於該供體抗體或該共同構架。然而，在一個較佳實施例中，該等突變不多。通常，至少80%、較佳至少85%、更佳至少90%且最佳至少95%之人類化抗體殘基將對應於親本FR及CDR序列之殘基。如本文所使用，術語「共同構架」係指共同免疫球蛋白序列中之構架區。如本文所使用，術語「共同免疫球蛋白序列」係指由一組相關免疫球蛋白序列中最頻繁出現之胺基酸(或核苷酸)形成的序列(參見例如，Winnaker, From Genes to Clones (Verlagsgesellschaft, Weinheim, Germany 1987)。在一組免疫球蛋白中，共同序列中之每個位置係由該組中最頻繁出現於該位置之胺基酸佔據。若兩個胺基酸同等頻繁地出現，則共同序列中可以包括任一個。 關於肽或多肽序列之「胺基酸序列一致性百分比(%)」定義為在對準各序列並在必要時引入空位以獲得最大序列一致性百分比之後，且不考慮任何保守取代作為序列一致性之一部分，候選序列中與特定肽或多肽序列中之胺基酸殘基一致的胺基酸殘基之百分含量。出於測定胺基酸序列一致性百分比之目的進行之比對可以藉由在此項技術之技能範圍內的各種方式實現，例如使用公開可得的電腦軟體，諸如BLAST、BLAST-2、ALIGN或Megalign(DNASTAR)軟體。熟習此項技術者可以確定用於量測比對之適當參數，包括在所比較序列之全長內達成最大比對所需的任何算法。在一個實施例中，本發明包括與SEQ ID NO: 1至31、35至40或50至85中之任一個中所述之胺基酸序列具有至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%一致性的胺基酸序列。 術語「多價抗體」在本文中用於表示包含兩個或多於兩個抗原結合位點之抗體。在某些實施例中，多價抗體可以經工程改造成具有三個或超過三個抗原結合位點，且一般不為天然存在之抗體。 術語「多特異性抗體」係指能夠結合兩個或多於兩個不相關抗原之抗體。在一個實施例中，多特異性抗體係能夠結合至兩個不相關抗原之雙特異性抗體，例如結合EGFR(例如EGFRvIII)及CD3之雙特異性抗體，或其抗原結合部分。 術語「活性」包括以下活性，諸如抗體或ADC對於抗原之結合特異性/親和力，例如抗hEGFR抗體結合至hEGFR抗原，及/或抗體之中和效力，例如結合至hEGFR之抗hEGFR抗體抑制hEGFR之生物活性，例如抑制表現EGFR之細胞株，例如人類肺癌細胞株H292中EGFR之磷酸化，或抑制表現EGFR之細胞株，例如人類H292肺癌細胞、人類H1703肺癌細胞或人類EBC1肺癌細胞之增殖。 如本文所使用，術語「非小細胞肺癌(NSCLC)異種移植物分析」係指用於確定抗EGFR抗體或ADC是否能抑制藉由將NSCLC細胞移植至免疫缺陷小鼠中所引起之腫瘤生長(例如進一步生長)及/或減少該腫瘤生長的一種活體內分析。NSCLC異種移植物分析包括將NSCLC細胞移植至免疫缺陷小鼠中使得腫瘤生長至所需大小，例如200-250 mm 3，此時向小鼠投與該抗體或ADC以確定該抗體或ADC是否能抑制及/或減少腫瘤生長。在某些實施例中，該抗體或ADC之活性係根據相對於對照抗體，例如不特異性結合腫瘤細胞，例如針對與癌症不相關之抗原或自非癌性來源(例如正常人類血清)獲得的人類IgG抗體(或其集合)之腫瘤生長抑制百分比(%TGI)測定。在此類實施例中，以相同頻率且經由相同途徑向小鼠投與相同劑量之該抗體(或ADC)及對照抗體。在一個實施例中，NSCLC異種移植物分析中使用之小鼠係嚴重聯合免疫缺陷(SCID)小鼠及/或無胸腺CD-1裸小鼠。可用於NSCLC異種移植物分析中之NSCLC細胞之實例包括(但不限於)H292細胞(例如，NCIH292 [H292] (ATCC CRL1848)。 術語「抗原決定基」係指抗體或ADC所結合的抗原區域。在某些實施例中，抗原決定基決定子包括分子之化學活性表面群組，諸如胺基酸、糖側鏈、磷醯基或磺醯基，且在某些實施例中，其可以具有特定三維結構特徵及/或比電荷特徵。在某些實施例中，當抗體在蛋白質及/或大分子之複雜混合物中優先識別其靶抗原時，認為該抗體特異性結合抗原。在一個實施例中，本發明抗體結合至由胺基酸序列CGADSYEMEEDGVRKC(SEQ ID NO:45)(對應於hEGFR成熟形式之胺基酸殘基287-302)所定義之抗原決定基。 如本文所使用，術語「表面電漿子共振」係指允許藉由例如使用BIAcore系統(Pharmacia Biosensor AB, Uppsala, Sweden and Piscataway, NJ)偵測生物感測器基質內蛋白質濃度之變化來分析即時生物特異性相互作用的一種光學現象。有關進一步描述，參見Jӧnsson, U.等人 (1993) Ann. Biol. Clin.51:19-26；Jӧnsson, U.等人 (1991) Biotechniques11:620-627；Johnsson, B. 等人(1995) J. Mol. Recognit. 8:125-131；及Johnnson, B. 等人(1991) Anal. Biochem.198:268-277。在一個實施例中，表面電漿子共振係根據實例2中描述之方法測定。 如本文所使用，術語「k on」或「k a」意圖指抗體與抗原締合形成抗體/抗原複合物之締合速率常數。 如本文所使用，術語「k off」或「k d」意圖指抗體自抗體/抗原複合物解離之解離速率常數。 如本文所使用，術語「K D」意圖指特定抗體-抗原相互作用(例如AbA抗體與EGFR)之平衡解離常數。K D係由k a/k d計算。 如本文所使用，術語「競爭性結合」係指第一抗體與第二抗體競爭第三分子，例如抗原上之結合位點的情形。在一個實施例中，兩種抗體之間的競爭性結合係使用FACS分析測定。 術語「競爭性結合分析」係用於確定兩種或超過兩種抗體是否結合至同一抗原決定基之分析。在一個實施例中，競爭性結合分析係藉由確定經標記抗體之螢光信號是否因未標記抗體之引入而降低來確定兩種或超過兩種抗體是否結合至同一抗原決定基所使用的競爭性螢光活化細胞分選(FACS)分析，其中關於同一抗原決定基之競爭將降低螢光量。 術語「抗體-藥物結合物」或「ADC」係指以化學方式連接至可視情況作為治療劑或細胞毒性劑之一或多種化學藥物(在本文中又稱為藥劑、彈頭(warhead)或有效負載)的結合蛋白，諸如抗體或其抗原結合片段。在一個較佳實施例中，ADC包括抗體、細胞毒性或治療性藥物，及能夠將藥物連接或結合至抗體之連接子。ADC通常具有結合至抗體之約1至8種藥物，包括2、4、6或8個載藥物種。在一個較佳實施例中，本發明之ADC包含經由連接子結合至Bcl-xL抑制劑之抗EGFR抗體。 術語「抗表皮生長因子抗體藥物結合物」、「抗EGFR抗體藥物結合物」或「抗EGFR ADC」在本文中可互換使用，指包含特異性結合至EGFR之抗體之ADC，其中該抗體結合至一或多種化學試劑。在一個實施例中，抗EGFR ADC包含結合至Bcl-xL抑制劑之抗體AbA。在一個實施例中，抗EGFR ADC包含結合至Bcl-xL抑制劑之抗體AbB。在一個實施例中，抗EGFR ADC包含結合至Bcl-xL抑制劑之抗體AbK。在一個實施例中，抗EGFR ADC包含結合至Bcl-xL抑制劑之抗體AbG。 術語「藥物與抗體比」或「DAR」係指ADC中連接至抗體之藥物，例如Bcl-xL抑制劑的數量。ADC之DAR可以在1至8之範圍內，不過取決於抗體上鍵聯位點之數量，亦可能有更高裝載量，例如20。術語DAR可以參照裝載於個別抗體上之藥物的數量使用，或替代地，可以參照一組ADC之平均或均值DAR使用。 如本文所使用，術語「非所需ADC物種」係指擬自具有不同載藥量之ADC物種分離的任何載藥物種。在一個實施例中，術語非所需ADC物種可以指6個或更多載藥物種，亦即，DAR係6或更高，包括DAR6、DAR7、DAR8及DAR大於8 (亦即，6、7、8或超過8個載藥物種)之ADC。在一個獨立實施例中，術語非所需ADC物種可以指8個或更多載藥物種，亦即，DAR係8或更高，包括DAR8及DAR大於8 (亦即，8或超過8個載藥物種)之ADC。 如本文所使用，術語「ADC混合物」係指含有不均勻DAR分佈之ADC之組合物。在一個實施例中，ADC混合物含有DAR分佈為1至8，例如2、4、6及8(亦即，2、4、6及8個載藥物種)之ADC。值得注意的是，可以得到降解產物，因此1、3、5及7之DAR亦可包括在該混合物內。另外，在該混合物內之ADC亦可具有大於8之DAR。ADC混合物係由鏈間二硫化物還原隨後結合得到。在一個實施例中，ADC混合物包含DAR為4或更小(亦即，4個或更少載藥物種)之ADC及DAR為6或更大(亦即，6個或更多載藥物種)之ADC。 術語「癌症」意圖指或描述哺乳動物中通常以不受調控之細胞生長為特徵之生理病狀。癌症之實例包括(但不限於)癌瘤、淋巴瘤、母細胞瘤、肉瘤及白血病或淋巴惡性病。更特定言之，此類癌症之實例包括神經膠母細胞瘤、非小細胞肺癌、肺癌、結腸癌、結腸直腸癌、頭頸癌、乳癌(例如三陰性乳癌)、胰臟癌、鱗狀細胞腫瘤、鱗狀細胞癌(例如鱗狀細胞肺癌或鱗狀細胞頭頸癌)、肛門癌、皮膚癌及外陰癌。在一個實施例中，將本發明之ADC投與具有含EGFR基因擴增之腫瘤的患者，其中該腫瘤表現截短型EGFR，即EGFRvIII。在一個實施例中，將本發明之ADC投與具有可能過度表現EGFR之實體腫瘤的患者。在一個實施例中，將本發明之ADC投與患有鱗狀細胞非小細胞肺癌(NSCLC)之患者。在一個實施例中，將本發明之ADC投與具有實體腫瘤，包括晚期實體腫瘤之患者。 如本文所使用，術語「表現EGFR之腫瘤」係指表現EGFR蛋白之腫瘤。在一個實施例中，腫瘤中之EGFR表現係使用腫瘤細胞膜之免疫組織化學染色確定，其中腫瘤樣品中超過背景水準之任何免疫組織化學染色均指示該腫瘤係表現EGFR之腫瘤。用於偵測腫瘤中EGFR之表現的方法係此項技術中已知的，例如EGFR pharmDx™套組(Dako)。相比之下，「EGFR陰性腫瘤」定義為如藉由免疫組織化學技術所測定，在腫瘤樣品中缺乏超過背景之EGFR膜染色的腫瘤。 如本文所使用，術語「EGFRvIII陽性腫瘤」係指表現EGFRvIII蛋白之腫瘤。在一個實施例中，腫瘤中之EGFRvIII表現係使用腫瘤細胞膜之免疫組織化學染色確定，其中腫瘤樣品中超過背景水準之任何免疫組織化學染色均指示該腫瘤係表現EGFRvIII之腫瘤。用於偵測腫瘤中EGFR之表現的方法係此項技術中已知的，且包括免疫組織化學分析。相比之下，「EGFRvIII陰性腫瘤」定義為如藉由免疫組織化學技術所測定，在腫瘤樣品中缺乏超過背景之EGFRvIII膜染色的腫瘤。 術語「過度表現(overexpress/overexpression/overexpressed)」互換地指相較於正常細胞，基因通常在癌細胞中以可偵測地較高水準轉錄或轉譯。因此，過度表現係指蛋白質及RNA兩者之過度表現(歸因於增加之轉錄、轉錄後加工、轉譯、轉譯後加工、改變之穩定性及改變之蛋白質降解)，以及由於蛋白質運輸模式改變(核定位增加)及功能活性增強(例如，如在酶水解受質增加中)引起之局部過度表現。因此，過度表現係指蛋白質或RNA含量。過度表現亦可為比正常細胞或比較細胞高50%、60%、70%、80%、90%或更高。在某些實施例中，使用本發明之抗EGFR ADC治療可能過度表現EGFR之實體腫瘤。 如本文所使用，術語「投與」意欲指遞送一種物質(例如抗EGFR ADC)以實現治療目的(例如治療EGFR相關病症)。投藥模式可以為非經腸、經腸及表面投藥。非經腸投藥通常藉由注射進行，且包括(但不限於)靜脈內、肌肉內、動脈內、鞘內、囊內、眶內、心內、皮內、腹膜內、經氣管、皮下、表皮下、關節內、囊下、蛛膜下、脊柱內及胸骨內注射及輸注。 如本文所使用，術語「組合療法」係指投與兩種或超過兩種治療物質，例如抗EGFR ADC及另外治療劑。該另外治療劑可以在投與抗EGFR ADC之同時、之前或之後投與。 如本文所使用，術語「有效量」或「治療有效量」係指足以降低或改善病症(例如癌症)或其一或多種症狀之嚴重程度及/或持續時間；防止病症進展；使病症消退；防止與病症有關之一或多種症狀復發、發生、起始或進展；偵測病症；或者增強或改進另一療法(例如預防劑或治療劑)之預防或治療作用的藥物，例如抗體或ADC之量。有效量之抗體或ADC可以例如抑制腫瘤生長(例如，抑制腫瘤體積增加)、減慢腫瘤生長(例如減小腫瘤體積)、減少癌細胞數量，及/或在一定程度上緩解與癌症有關之一或多種症狀。該有效量可以例如提高無疾病存活期(DFS)、提高總體存活率(OS)或降低復發可能性。 在以下子部分中進一步詳細描述本發明之各種態樣。 2. 抗 EGFR 抗體藥物結合物 ( ADC ) ： 抗 EGFR 抗體本發明之一態樣特徵在於一種抗人類表皮生長因子受體(抗hEGFR)抗體藥物結合物(ADC)，其包含經由連接子結合至藥物之抗hEGFR抗體，其中該藥物係Bcl-xL抑制劑。可以用於本文所述之ADC中的例示性抗EGFR抗體(及其序列)描述於下，以及US 2015-0337042中，該案以全文引用的方式併入本文中。 本文所描述的抗EGFR抗體使本發明之ADC能夠結合至EGFR，由此可以將連接至該抗體之細胞毒性Bcl-xL藥物遞送至表現EGFR之細胞。 當在通篇使用術語「抗體」時，應注意抗體片段(亦即，抗EGFR抗體之抗原結合部分)亦可結合至本文所描述的Bcl-xL抑制劑。因此，在某些實施例中，本文所描述的抗EGFR抗體之抗體片段經由連接子(包括以下第4部分中所描述之連接子)結合至Bcl-xL抑制劑(包括以下在第3部分中所描述之抑制劑)係在本發明之範疇內。在某些實施例中，抗EGFR抗體結合部分係Fab、Fab'、F(ab')2、Fv、二硫鍵連接之Fv、scFv、單結構域抗體或雙功能抗體。 可用於本發明之ADC中的抗EGFR抗體具有使其適宜用於ADC中的特徵。在一個實施例中，抗EGFR抗體之特徵包括(但不限於)結合至表現EGFRvIII之腫瘤細胞、結合至表現EGFR之腫瘤細胞上的野生型EGFR、識別EGFR上的抗原決定基CGADSYEMEEDGVRKC(SEQ ID NO:45)、結合至正常人類上皮角質細胞上之EGFR，及減少或抑制小鼠模型中之異種移植腫瘤生長。在一個實施例中，可以用於本發明之ADC中的抗EGFR抗體能夠結合由SEQ ID NO:45定義之人類EGFR之抗原決定基及/或能夠與本文所揭示之任何抗體(例如Ab1、AbA、AbB、AbC、AbD、AbE、AbF、AbG、AbH、AbJ、AbK)競爭結合至人類EGFR。抗體與EGFR之結合可以根據例如US 2015-0337042 A1(以全文引用的方式併入本文中)中所描述之競爭分析評估。在本發明之一個實施例中，如藉由表面電漿子共振所測定，可用於本發明之ADC中的抗EGFR抗體與EGFR 1-525(SEQ ID NO:47)之解離常數(K d)介於約1×10 - 6M與約1×10 - 10M之間。在前述態樣之其他實施例中，本發明之ADC包含結合EGFRvIII、結合過度表現EGFR之細胞上之EGFR及識別EGFR上之抗原決定基CGADSYEMEEDGVRKC(SEQ ID NO:45)的抗EGFR抗體。在另一實施例中，抗EGFR抗體結合EGFRvIII上不同於EGFRvIII接合肽之抗原決定基。在前述態樣之另外實施例中，用於本發明之ADC中的抗EGFR抗體不與西妥昔單抗(cetuximab)競爭結合至人類EGFR。 在一個實施例中，本發明之ADC包含如藉由表面電漿子共振所測定，以約1×10 - 6M或更小解離常數(K d)結合至EGFR(1-525)(SEQ ID NO:47)之抗EGFR抗體。或者，如藉由表面電漿子共振所測定，抗EGFR抗體可以在約1×10 - 6與約1×10 - 10M之間之K d結合至EGFR(1-525)(SEQ ID NO:47)。在另一替代方案中，如藉由表面電漿子共振所測定，抗EGFR抗體以在約1×10 - 6M與約1×10 - 7M之間之K d結合至EGFR(1-525)(SEQ ID NO:47)。或者，如藉由表面電漿子共振所測定，用於本發明中之抗體可以在約1×10 - 6M與約5×10 - 10M之間之K d；在約1×10 - 6M與約1×10 - 9M之間之K d；在約1×10 - 6M與約5×10 - 9M之間之K d；在約1×10 - 6M與約1×10 - 8M之間之K d；在約1×10 - 6M與約5×10 - 8M之間之K d；在約5.9×10 - 7M與約1.7×10 - 9M之間之K d；在約5.9×10 - 7M與約2.2×10 - 7M之間之K d結合至EGFR(1-525)(SEQ ID NO:47)。在某些實施例中，用於本發明之ADC中的抗hEGFR抗體之解離常數(K d)低於Ab1之解離常數，但高於抗EGFR抗體西妥昔單抗之解離常數(亦即，該抗體與EGFR之結合比Ab1緊密，但不如西妥昔單抗緊密)。 本文所描述之抗EGFR抗體的一個優勢在於，該等抗體能夠結合至表現EGFRvIII之腫瘤細胞，由此使本發明之ADC對惡性細胞具有特異性。儘管EGFRvIII與某些類型之癌症相關，但此項技術中已知之許多抗EGFR抗體，例如西妥昔單抗，不能有效抑制或減少表現EGFRvIII之腫瘤中的腫瘤生長。因此，在一個實施例中，如藉由表面電漿子共振所測定，用於本發明之ADC中的抗體以約8.2×10 - 9M或更小K d結合至EGFRvIII(SEQ ID NO: 33)。或者，如藉由表面電漿子共振所測定，用於本發明之ADC中的抗體以在約8.2×10 - 9M與約6.3×10 - 10M之間之K d；在約8.2×10 - 9M與約2.0×10 - 9M之間之K d；在約2.3×10 - 9M與約1.5×10 - 10M之間之K d結合至EGFRvIII(SEQ ID NO: 33)。 在一個實施例中，用於本發明之ADC中的抗EGFR抗體能夠在活體內異種移植物小鼠模型中抑制或減少腫瘤生長。舉例而言，在某些實施例中，相對於對EGFR不具特異性的人類IgG抗體，抗EGFR抗體在活體內人類非小細胞肺癌(NSCLC)異種移植物分析中能夠抑制至少約50%的腫瘤生長。在某些實施例中，當以相同劑量及給藥週期投與時，相對於對EGFR不具特異性的人類IgG抗體，抗EGFR抗體在活體內人類非小細胞肺癌(NSCLC)異種移植物分析中能夠抑制或減少至少約55%、至少約60%、至少約65%、至少約70%、至少約75%或至少約80%的腫瘤生長。 如本文所使用，術語「異種移植物分析」係指人類腫瘤異種移植物分析，其中將人類腫瘤細胞移植於皮膚之下或腫瘤起源之器官類型中、不排斥人類細胞之免疫功能不全小鼠中。 應注意，具有前述特徵組合之抗EGFR抗體亦視為本發明之實施例。舉例而言，抗EGFR抗體可以如藉由表面電漿子共振所測定的約1×10 - 6M或更小解離常數(K d)結合至EGFR(1-525)(SEQ ID NO:47)，且結合至胺基酸序列CGADSYEMEEDGVRKC(SEQ ID NO:45)內之抗原決定基並在競爭性結合分析中與Ab1(或包括含SEQ ID NO: 1中所述之胺基酸序列之重鏈可變結構域及含SEQ ID NO: 5中所述之胺基酸序列之輕鏈可變結構域的抗EGFR抗體)競爭結合至EGFRvIII(SEQ ID NO: 33)。在某些實施例中，本發明之抗EGFR ADC包含抗EGFR抗體，其結合至胺基酸序列CGADSYEMEEDGVRKC(SEQ ID NO:45)內之抗原決定基且在競爭性結合分析中與Ab1(或包括含SEQ ID NO: 1中所述之胺基酸序列之重鏈可變結構域及含SEQ ID NO: 5中所述之胺基酸序列之輕鏈可變結構域的抗EGFR抗體)競爭結合至EGFRvIII(SEQ ID NO: 33)；以及如藉由表面電漿子共振所測定，以約8.2×10 - 9M或更小K d結合至EGFRvIII(SEQ ID NO: 33)。 在一個實施例中，例如，如藉由此項技術中已知之若干活體外及活體內分析中之任一種所評估，用於本發明之ADC中之抗EGFR抗體展現較高的降低或中和EGFR活性之能力。舉例而言，可以量測表現EGFR之細胞株，例如h292細胞株中EGFR磷酸化之抑制。在某些實施例中，抗EGFR抗體結合人類EGFR，其中如藉由表面電漿子共振所測定，該抗體以約5.9×10 - 7M或更小K D速率常數自人類EGFR(EGFR 1-525)解離。在另一實施例中，如藉由表面電漿子共振所測定，該抗體可以約4.2×10 - 7M之K D速率常數自人類EGFR(1-525)解離。或者，如藉由表面電漿子共振所測定，該抗體可以約2.5×10 - 7M之K D速率常數自人類EGFR(1-525)解離。在某些實施例中，本發明之抗EGFR抗體具有在5.9×10 - 7M與5×10 - 9M之間之K D速率常數。或者，如藉由表面電漿子共振所測定，該抗體可以約6.1×10 - 9M或更小K D速率常數自人類EGFRvIII解離。或者，如藉由表面電漿子共振所測定，該抗體可以約3.9×10 - 9M或更小K D速率常數自人類EGFRvIII解離。或者，如藉由表面電漿子共振所測定，該抗體可以約2.3×10 - 9M或更小K D速率常數自人類EGFRvIII解離。 可用於本文所描述之ADC中的例示性抗EGFR抗體包括(但不限於)抗體1(Ab1)、抗體A(AbA)、抗體B(AbB)、抗體C(AbC)、抗體D(AbD)、抗體E(AbE)、抗體F(AbF)、抗體G(AbG)、抗體H(AbH)、抗體J(AbJ)、抗體K(AbK)、抗體L(AbL)、抗體M(AbM)、抗體N(AbN)、抗體O(AbO)、抗體P(AbP)及抗體Q(AbQ)。 在一個實施例中，本發明特徵在於一種抗EGFR ADC，其包含經由連接子結合至Bcl-xL抑制劑之Ab1。Ab1係人類化抗EGFR抗體。Ab1之輕鏈及重鏈序列分別描述於SEQ ID NO: 13及SEQ ID NO: 14中(亦參見美國專利申請公開案第20120183471號，以引用的方式併入本文中)。Ab1之輕鏈可變區描述於SEQ ID NO: 5中，且包含SEQ ID NO: 6中所述之CDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 7中所述之CDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 8中所述之CDR3胺基酸序列。Ab1之重鏈可變區描述於SEQ ID NO: 1中，且包含SEQ ID NO: 2中所述之CDR1胺基酸序列、SEQ ID NO: 3中所述之CDR2胺基酸序列及SEQ ID NO: 4中所述之CDR3胺基酸序列。在一個實施例中，本發明之ADC包含抗EGFR抗體，其結合至SEQ ID NO:45中所述之胺基酸序列內之抗原決定基且在競爭性結合分析中與包括含SEQ ID NO: 1中所述之胺基酸序列之重鏈可變結構域及含SEQ ID NO: 5中所述之胺基酸序列之輕鏈可變結構域的抗EGFR抗體競爭結合至EGFRvIII。 在一個實施例中，本發明特徵在於一種抗hEGFR ADC，其包含經由連接子結合至Bcl-xL抑制劑之抗hEGFR抗體，該抗體係抗體AbA。術語「AbA」意欲包括至少具有AbA之六個CDR的IgG抗體。AbA抗體具有與Ab1相同之輕鏈，但具有相對於親本抗體Ab1含有六個胺基酸序列變化之重鏈(四個胺基酸變化在重鏈可變區中且兩個變化在恆定區中)。AbA抗體包含：重鏈可變區，其包括含胺基酸序列SEQ ID NO:12之CDR3結構域、含胺基酸序列SEQ ID NO:11之CDR2結構域及含胺基酸序列SEQ ID NO:10之CDR1結構域；及輕鏈可變區，其包括含胺基酸序列SEQ ID NO:8之CDR3結構域、含胺基酸序列SEQ ID NO:7之CDR2結構域及含胺基酸序列SEQ ID NO:6之CDR1結構域。AbA之重鏈可變區係藉由SEQ ID NO: 9中所述之胺基酸序列定義且輕鏈可變區包含胺基酸序列SEQ ID NO:5。抗體AbA之全長重鏈闡述於SEQ ID NO: 15中所描述之胺基酸序列中，而抗體AbA之全長輕鏈闡述於SEQ ID NO: 13中所描述之胺基酸序列中(參見圖3)。AbA重鏈之核酸序列提供於下：
Figure 02_image187
AbA輕鏈之核酸序列提供於下：
Figure 02_image189
AbA重鏈之胺基酸序列提供於下：
Figure 02_image191
在另一個實施例中，AbA重鏈之胺基酸序列提供於下：
Figure 02_image193
AbA輕鏈之胺基酸序列提供於下：
Figure 02_image195
圖2及3提供Ab1與AbA之VH及VL區(圖2)以及完整重鏈及輕鏈(圖3)之胺基酸序列比對。Ab1與AbA之輕鏈胺基酸序列相同(SEQ ID NO: 13)。然而，Ab1與AbA之重鏈胺基酸序列在兩個序列之間具有六個胺基酸之差異，其中三個係在CDR中。Ab1 VH胺基酸序列與AbA VH胺基酸序列之間的差異在圖2中加陰影且見於各VH CDR中。AbA可變重鏈之CDR1結構域包括絲胺酸(Ab1)變為精胺酸之胺基酸變化。可變重鏈之CDR2結構域包括Ab1中之絲胺酸變為AbA中之天冬醯胺的胺基酸變化。最後，可變重鏈之CDR3結構域包括Ab1中之甘胺酸變為AbA中之絲胺酸的胺基酸變化。AbA內之胺基酸變化中有兩個係在重鏈恆定區中(D354E及L356M)。AbA中之Fc區胺基酸突變表示自z, a異型變為z,非a異型之人類IgG異型變化。除其他變化外，第一胺基酸係自麩醯胺酸(Q)變為麩胺酸(E)，如例如圖3中所描述。 因此，在一個實施例中，本發明特徵在於一種ADC，其包含經由連接子結合至Bcl-xL抑制劑之抗hEGFR抗體，其中該抗體包含：重鏈可變區，其包括含胺基酸序列SEQ ID NO:12之CDR3結構域、含胺基酸序列SEQ ID NO: 11之CDR2結構域及含胺基酸序列SEQ ID NO:10之CDR1結構域；及輕鏈可變區，其包括含胺基酸序列SEQ ID NO: 8之CDR3結構域、含胺基酸序列SEQ ID NO: 7之CDR2結構域及含胺基酸序列SEQ ID NO: 6之CDR1結構域。在一個實施例中，本發明特徵在於一種ADC，其包含經由連接子結合至Bcl-xL抑制劑之抗hEGFR抗體，其中該抗體包括含SEQ ID NO: 9中所述之胺基酸序列之重鏈可變區及含胺基酸序列SEQ ID NO: 5之輕鏈可變區。 在一個實施例中，本發明特徵在於一種抗EGFR ADC，其包含經由連接子結合至Bcl-xL抑制劑之抗體AbB。AbB抗體包含：重鏈可變區，其包括含胺基酸序列SEQ ID NO: 19之CDR3結構域、含胺基酸序列SEQ ID NO: 17之CDR2結構域及含胺基酸序列SEQ ID NO: 16之CDR1結構域；及輕鏈可變區，其包括含胺基酸序列SEQ ID NO: 8之CDR3結構域、含胺基酸序列SEQ ID NO: 7之CDR2結構域及含胺基酸序列SEQ ID NO: 6之CDR1結構域。在其他實施例中，本發明提供一種抗體，其具有包含胺基酸序列SEQ ID NO:64之重鏈可變區及包含胺基酸序列SEQ ID NO:65之輕鏈可變區。因此，在一個實施例中，本發明之ADC包含具有AbB之CDR胺基酸序列的抗hEGFR抗體。在一個獨立實施例中，本發明之ADC包含具有含AbB之胺基酸序列之重鏈及輕鏈可變區的抗hEGFR抗體。 在一個實施例中，本發明特徵在於一種抗EGFR ADC，其包含經由連接子結合至Bcl-xL抑制劑之抗體AbC。AbC抗體包含：重鏈可變區，其包括含胺基酸序列SEQ ID NO: 4之CDR3結構域、含胺基酸序列SEQ ID NO: 3之CDR2結構域及含胺基酸序列SEQ ID NO: 2之CDR1結構域；及輕鏈可變區，其包括含胺基酸序列SEQ ID NO:84之CDR3結構域、含胺基酸序列SEQ ID NO: 7之CDR2結構域及含胺基酸序列SEQ ID NO: 6之CDR1結構域。在其他實施例中，本發明提供一種抗體，其具有包含胺基酸序列SEQ ID NO:66之重鏈可變區及包含胺基酸序列SEQ ID NO:67之輕鏈可變區。因此，在一個實施例中，本發明之ADC包含具有AbC之CDR胺基酸序列的抗hEGFR抗體。在一個獨立實施例中，本發明之ADC包含具有含AbC之胺基酸序列之重鏈及輕鏈可變區的抗hEGFR抗體。 在一個實施例中，本發明特徵在於一種抗EGFR ADC，其包含經由連接子結合至Bcl-xL抑制劑之抗體AbD。AbD抗體包含：重鏈可變區，其包括含胺基酸序列SEQ ID NO: 4之CDR3結構域、含胺基酸序列SEQ ID NO: 3之CDR2結構域及含胺基酸序列SEQ ID NO: 2之CDR1結構域；及輕鏈可變區，其包括含胺基酸序列SEQ ID NO: 31之CDR3結構域、含胺基酸序列SEQ ID NO:83之CDR2結構域及含胺基酸序列SEQ ID NO: 82之CDR1結構域。在其他實施例中，本發明提供一種抗體，其具有包含胺基酸序列SEQ ID NO:68之重鏈可變區及包含胺基酸序列SEQ ID NO:69之輕鏈可變區。因此，在一個實施例中，本發明之ADC包含具有AbD之胺基酸序列的抗hEGFR抗體。在一個獨立實施例中，本發明之ADC包含具有含AbD之胺基酸序列之重鏈及輕鏈可變區的抗hEGFR抗體。 在一個實施例中，本發明特徵在於一種抗EGFR ADC，其包含經由連接子結合至Bcl-xL抑制劑之抗體AbE。AbE抗體包含：重鏈可變區，其包括含胺基酸序列SEQ ID NO: 4之CDR3結構域、含胺基酸序列SEQ ID NO: 3之CDR2結構域及含胺基酸序列SEQ ID NO: 2之CDR1結構域；及輕鏈可變區，其包括含胺基酸序列SEQ ID NO:85之CDR3結構域、含胺基酸序列SEQ ID NO:27之CDR2結構域及含胺基酸序列SEQ ID NO: 82之CDR1結構域。在其他實施例中，本發明提供一種抗體，其具有包含胺基酸序列SEQ ID NO:50之重鏈可變區及包含胺基酸序列SEQ ID NO:51之輕鏈可變區。因此，在一個實施例中，本發明之ADC包含具有AbE之CDR胺基酸序列的抗hEGFR抗體。在一個獨立實施例中，本發明之ADC包含具有含AbE之胺基酸序列之重鏈及輕鏈可變區的抗hEGFR抗體。 在一個實施例中，本發明特徵在於一種抗EGFR ADC，其包含經由連接子結合至Bcl-xL抑制劑之抗體AbF。AbF抗體包含：重鏈可變區，其包括含胺基酸序列SEQ ID NO: 12之CDR3結構域、含胺基酸序列SEQ ID NO: 3之CDR2結構域及含胺基酸序列SEQ ID NO:10之CDR1結構域；及輕鏈可變區，其包括含胺基酸序列SEQ ID NO: 8之CDR3結構域、含胺基酸序列SEQ ID NO: 7之CDR2結構域及含胺基酸序列SEQ ID NO: 6之CDR1結構域。在其他實施例中，本發明提供一種抗體，其具有包含胺基酸序列SEQ ID NO:52之重鏈可變區及包含胺基酸序列SEQ ID NO:53之輕鏈可變區。因此，在一個實施例中，本發明之ADC包含具有AbF之CDR胺基酸序列的抗hEGFR抗體。在一個獨立實施例中，本發明之ADC包含具有含AbF之胺基酸序列之重鏈及輕鏈可變區的抗hEGFR抗體。 在一個實施例中，本發明特徵在於一種抗EGFR ADC，其包含經由連接子結合至Bcl-xL抑制劑之抗體AbG。AbG抗體包含：重鏈可變區，其包括含胺基酸序列SEQ ID NO: 18之CDR3結構域、含胺基酸序列SEQ ID NO: 17之CDR2結構域及含胺基酸序列SEQ ID NO: 16之CDR1結構域；及輕鏈可變區，其包括含胺基酸序列SEQ ID NO:25之CDR3結構域、含胺基酸序列SEQ ID NO:24之CDR2結構域及含胺基酸序列SEQ ID NO: 23之CDR1結構域。在其他實施例中，本發明提供一種抗體，其具有包含胺基酸序列SEQ ID NO:72之重鏈可變區及包含胺基酸序列SEQ ID NO:73之輕鏈可變區。因此，在一個實施例中，本發明之ADC包含具有AbG之CDR胺基酸序列的抗hEGFR抗體。在一個獨立實施例中，本發明之ADC包含具有含AbG之胺基酸序列之重鏈及輕鏈可變區的抗hEGFR抗體。 在一個實施例中，本發明特徵在於一種抗EGFR ADC，其包含經由連接子結合至Bcl-xL抑制劑之抗體AbH。AbH抗體包含：重鏈可變區，其包括含胺基酸序列SEQ ID NO: 18之CDR3結構域、含胺基酸序列SEQ ID NO: 11之CDR2結構域及含胺基酸序列SEQ ID NO:80之CDR1結構域；及輕鏈可變區，其包括含胺基酸序列SEQ ID NO:25之CDR3結構域、含胺基酸序列SEQ ID NO:24之CDR2結構域及含胺基酸序列SEQ ID NO: 23之CDR1結構域。在其他實施例中，本發明提供一種抗體，其具有包含胺基酸序列SEQ ID NO:54之重鏈可變區及包含胺基酸序列SEQ ID NO:55之輕鏈可變區。因此，在一個實施例中，本發明之ADC包含具有AbH之CDR胺基酸序列的抗hEGFR抗體。在一個獨立實施例中，本發明之ADC包含具有含AbH之胺基酸序列之重鏈及輕鏈可變區的抗hEGFR抗體。 在一個實施例中，本發明特徵在於一種抗EGFR ADC，其包含經由連接子結合至Bcl-xL抑制劑之抗體AbJ。AbJ抗體包含：重鏈可變區，其包括含胺基酸序列SEQ ID NO: 18之CDR3結構域、含胺基酸序列SEQ ID NO: 3之CDR2結構域及含胺基酸序列SEQ ID NO:80之CDR1結構域；及輕鏈可變區，其包括含胺基酸序列SEQ ID NO:25之CDR3結構域、含胺基酸序列SEQ ID NO:24之CDR2結構域及含胺基酸序列SEQ ID NO: 23之CDR1結構域。在其他實施例中，本發明提供一種抗體，其具有包含胺基酸序列SEQ ID NO:56之重鏈可變區及包含胺基酸序列SEQ ID NO:57之輕鏈可變區。因此，在一個實施例中，本發明之ADC包含具有AbJ之CDR胺基酸序列的抗hEGFR抗體。在一個獨立實施例中，本發明之ADC包含具有含AbJ之胺基酸序列之重鏈及輕鏈可變區的抗hEGFR抗體。 在一個實施例中，本發明特徵在於一種抗EGFR ADC，其包含經由連接子結合至Bcl-xL抑制劑之抗體AbK。AbK抗體包含：重鏈可變區，其包括含胺基酸序列SEQ ID NO: 19之CDR3結構域、含胺基酸序列SEQ ID NO: 11之CDR2結構域及含胺基酸序列SEQ ID NO:10之CDR1結構域；及輕鏈可變區，其包括含胺基酸序列SEQ ID NO:28之CDR3結構域、含胺基酸序列SEQ ID NO:27之CDR2結構域及含胺基酸序列SEQ ID NO:26之CDR1結構域。在其他實施例中，本發明提供一種抗體，其具有包含胺基酸序列SEQ ID NO:74之重鏈可變區及包含胺基酸序列SEQ ID NO:75之輕鏈可變區。因此，在一個實施例中，本發明之ADC包含具有AbK之CDR胺基酸序列的抗hEGFR抗體。在一個獨立實施例中，本發明之ADC包含具有含AbK之胺基酸序列之重鏈及輕鏈可變區的抗hEGFR抗體。 在一個實施例中，本發明特徵在於一種抗EGFR ADC，其包含經由連接子結合至Bcl-xL抑制劑之抗體AbL。AbL抗體包含：重鏈可變區，其包括含胺基酸序列SEQ ID NO: 18之CDR3結構域、含胺基酸序列SEQ ID NO: 11之CDR2結構域及含胺基酸序列SEQ ID NO:80之CDR1結構域；及輕鏈可變區，其包括含胺基酸序列SEQ ID NO:28之CDR3結構域、含胺基酸序列SEQ ID NO:27之CDR2結構域及含胺基酸序列SEQ ID NO:26之CDR1結構域。在其他實施例中，本發明提供一種抗體，其具有包含胺基酸序列SEQ ID NO:58之重鏈可變區及包含胺基酸序列SEQ ID NO:59之輕鏈可變區。因此，在一個實施例中，本發明之ADC包含具有AbL之CDR胺基酸序列的抗hEGFR抗體。在一個獨立實施例中，本發明之ADC包含具有含AbL之胺基酸序列之重鏈及輕鏈可變區的抗hEGFR抗體。 在一個實施例中，本發明特徵在於一種抗EGFR ADC，其包含經由連接子結合至Bcl-xL抑制劑之抗體AbM。AbM抗體包含：重鏈可變區，其包括含胺基酸序列SEQ ID NO: 12之CDR3結構域、含胺基酸序列SEQ ID NO: 11之CDR2結構域及含胺基酸序列SEQ ID NO:20之CDR1結構域；及輕鏈可變區，其包括含胺基酸序列SEQ ID NO:28之CDR3結構域、含胺基酸序列SEQ ID NO:27之CDR2結構域及含胺基酸序列SEQ ID NO:26之CDR1結構域。在其他實施例中，本發明提供一種抗體，其具有包含胺基酸序列SEQ ID NO:76之重鏈可變區及包含胺基酸序列SEQ ID NO:77之輕鏈可變區。因此，在一個實施例中，本發明之ADC包含具有AbM之CDR胺基酸序列的抗hEGFR抗體。在一個獨立實施例中，本發明之ADC包含具有含AbM之胺基酸序列之重鏈及輕鏈可變區的抗hEGFR抗體。 在一個實施例中，本發明特徵在於一種抗EGFR ADC，其包含經由連接子結合至Bcl-xL抑制劑之抗體AbN。AbN抗體包含：重鏈可變區，其包括含胺基酸序列SEQ ID NO: 12之CDR3結構域、含胺基酸序列SEQ ID NO: 3之CDR2結構域及含胺基酸序列SEQ ID NO:20之CDR1結構域；及輕鏈可變區，其包括含胺基酸序列SEQ ID NO:28之CDR3結構域、含胺基酸序列SEQ ID NO:27之CDR2結構域及含胺基酸序列SEQ ID NO:26之CDR1結構域。在其他實施例中，本發明提供一種抗體，其具有包含胺基酸序列SEQ ID NO:60之重鏈可變區及包含胺基酸序列SEQ ID NO:61之輕鏈可變區。因此，在一個實施例中，本發明之ADC包含具有AbN之CDR胺基酸序列的抗hEGFR抗體。在一個獨立實施例中，本發明之ADC包含具有含AbN之胺基酸序列之重鏈及輕鏈可變區的抗hEGFR抗體。 在一個實施例中，本發明特徵在於一種抗EGFR ADC，其包含經由連接子結合至Bcl-xL抑制劑之抗體AbO。AbO抗體包含：重鏈可變區，其包括含胺基酸序列SEQ ID NO: 12之CDR3結構域、含胺基酸序列SEQ ID NO: 11之CDR2結構域及含胺基酸序列SEQ ID NO:80之CDR1結構域；及輕鏈可變區，其包括含胺基酸序列SEQ ID NO:28之CDR3結構域、含胺基酸序列SEQ ID NO:27之CDR2結構域及含胺基酸序列SEQ ID NO:26之CDR1結構域。在其他實施例中，本發明提供一種抗體，其具有包含胺基酸序列SEQ ID NO:62之重鏈可變區及包含胺基酸序列SEQ ID NO:63之輕鏈可變區。因此，在一個實施例中，本發明之ADC包含具有AbO之CDR胺基酸序列的抗hEGFR抗體。在一個獨立實施例中，本發明之ADC包含具有含AbO之胺基酸序列之重鏈及輕鏈可變區的抗hEGFR抗體。 在一個實施例中，本發明特徵在於一種抗EGFR ADC，其包含經由連接子結合至Bcl-xL抑制劑之抗體AbP。AbP抗體包含：重鏈可變區，其包括含胺基酸序列SEQ ID NO: 22之CDR3結構域、含胺基酸序列SEQ ID NO: 3之CDR2結構域及含胺基酸序列SEQ ID NO:21之CDR1結構域；及輕鏈可變區，其包括含胺基酸序列SEQ ID NO:31之CDR3結構域、含胺基酸序列SEQ ID NO:30之CDR2結構域及含胺基酸序列SEQ ID NO:29之CDR1結構域。在其他實施例中，本發明提供一種抗體，其具有包含胺基酸序列SEQ ID NO:78之重鏈可變區及包含胺基酸序列SEQ ID NO:79之輕鏈可變區。因此，在一個實施例中，本發明之ADC包含具有AbP之CDR胺基酸序列的抗hEGFR抗體。在一個獨立實施例中，本發明之ADC包含具有含AbP之胺基酸序列之重鏈及輕鏈可變區的抗hEGFR抗體。 在一個實施例中，本發明特徵在於一種抗EGFR ADC，其包含經由連接子結合至Bcl-xL抑制劑之抗體AbQ。AbQ抗體包含：重鏈可變區，其包括含胺基酸序列SEQ ID NO: 22之CDR3結構域、含胺基酸序列SEQ ID NO: 11之CDR2結構域及含胺基酸序列SEQ ID NO:81之CDR1結構域；及輕鏈可變區，其包括含胺基酸序列SEQ ID NO:31之CDR3結構域、含胺基酸序列SEQ ID NO:30之CDR2結構域及含胺基酸序列SEQ ID NO:29之CDR1結構域。在其他實施例中，本發明提供一種抗體，其具有包含胺基酸序列SEQ ID NO:70之重鏈可變區及包含胺基酸序列SEQ ID NO:71之輕鏈可變區。因此，在一個實施例中，本發明之ADC包含具有AbQ之胺基酸序列的抗hEGFR抗體。在一個獨立實施例中，本發明之ADC包含具有含AbQ之胺基酸序列之重鏈及輕鏈可變區的抗hEGFR抗體。 如以下顯示之表2中所描述，本文所揭示之抗體序列提供了胺基酸共同序列，該等序列表示引起與Ab1 EGFR抗原決定基之結合改善之CDR結構域。因此，在一個實施例中，本發明特徵在於一種抗EGFR抗體，該抗EGFR抗體包括：輕鏈可變區，其包括含如SEQ ID NO:40所述之胺基酸序列的CDR3結構域、含如SEQ ID NO: 39所述之胺基酸序列的CDR2結構域及含如SEQ ID NO: 38所述之胺基酸序列的CDR1結構域；以及重鏈可變區，其包括含如SEQ ID NO: 37所述之胺基酸序列的CDR3結構域、含如SEQ ID NO:36所述之胺基酸序列的CDR2結構域及含如SEQ ID NO:35所述之胺基酸序列的CDR1結構域。在另一實施例中，本發明之抗EGFR抗體包含：重鏈可變區，其包括含如SEQ ID NO: 12、18、19及22中所述之胺基酸序列的CDR3結構域；含如SEQ ID NO: 11或17中所述之胺基酸序列的CDR2結構域；及含如SEQ ID NO:10、16、20及21中所述之胺基酸序列的CDR1結構域；以及輕鏈可變區，其包括含如SEQ ID NO: 8、25、28及31中所述之胺基酸序列的CDR3結構域；含如SEQ ID NO: 7、24、27及30中所述之胺基酸序列的CDR2結構域；及含如SEQ ID NO: 6、23、26及29中所述之胺基酸序列的CDR1結構域。 表 2 ： Ab1 與 AbA 、 AbG 、 AbK 、 AbM 及 AbP 變異體之重鏈及輕鏈 CDR 序列比較
重鏈CDRS
   可變重鏈(VH) CDR1 SEQ ID NO: VH CDR2 SEQ ID NO: VH CDR3 SEQ ID NO:
Ab1 G Y S I S S D F A W N 2 Y I S Y S G N T R Y Q P S L K S 3       A G R G F P Y 4
AbA                R                10             N                                  11          S                12
AbG                N                16             K                                  17          S       L       18
AbK                R                10             N                                  11          S             W 19
AbM             G R                20             N                                  11          S                12
AbP             H                   21                                                 3          S W    L    W 22
輕鏈CDRS
   可變輕鏈(VL) CDR1 SEQ ID NO: VL CDR2 SEQ ID NO: VL CDR3 SEQ ID NO:
Ab1 H S S Q D I N S N I G 6 H G T N L D D 7 V Q Y A Q F P W T 8
AbA                                  6                      7                            8
AbG                   T Y          23       A             24          D E             25
AbK                   T Y    V    26       S          H 27          D D             28
AbM                   T Y    V    26       S          H 27          D D             28
AbP                      M    V    29       A I          30             E             31
在一個實施例中，本發明之ADC包括抗hEGFR抗體，其包括含選自由以下組成之群之胺基酸序列的重鏈可變區：50、52、53、56、58、60、62、64、66及68；以及含選自由以下組成之群之胺基酸序列的輕鏈可變區：51、53、55、57、59、61、63、65、67及69。 前述抗EGFR抗體CDR序列產生根據本發明分離且包括含表2-4中所列CDR序列之多肽的一組新穎EGFR結合蛋白。 上表2提供Ab1變異體抗體AbA、AbG、AbK、AbM及AbP相較於Ab1之重鏈及輕鏈CDR之胺基酸序列比對。 如下表3中所描述，Ab1變異體抗體AbA、AbG、AbK、AbM、AbP各自在可變重鏈CDR3中具有絲胺酸殘基代替甘胺酸(在表3中以粗體/加下劃線顯示)。 表 3 ： 表 2 中 Ab1 變異體之 CDR 共同序列
CDR區 SEQ ID NO: Ab1變異體之CDR共同序列
VH CDR1 SEQ ID NO:35 G Y S I (S/G/H) (S/R/N) D F A W N
VH CDR2 SEQ ID NO:36 Y I S Y (S/N/K) G N T R Y Q P S L K S
VH CDR3 SEQ ID NO:37 A S (R/W) G (F/L) P (Y/W)
VL CDR1 SEQ ID NO:38 H S S Q D I (N/T) (Y/M/S) N (I/V) G
VL CDR2 SEQ ID NO:39 H G (T/A/S) (N/I) L D (D/H)
VL CDR3 SEQ ID NO:40 V Q Y (A/D) (Q/E/D) F P W T
Ab1與抗體AbB、AbC、AbD、AbE、AbF、AbH、AbJ、AbL、AbN、AbO及AbQ之VH及VL CDR序列的比較描述於表4中。除下表4中所描述之CDR變化外，AbG在VH之構架2區內還具有胺基酸殘基變化。 在一個實施例中，本發明包括抗hEGFR抗體，其包括含選自由以下組成之群之胺基酸序列的重鏈可變區：50、52、54、56、58、60、62、64、66、68、70、72、74、76及78；以及含選自由以下組成之群之胺基酸序列的輕鏈可變區：51、53、55、57、59、61、63、65、67、69、71、73、75、77及79。 在一個實施例中，本發明包括一種抗hEGFR抗體，其包含選自由以下組成之群的HC CDR組(CDR1、CDR2及CDR3)：SEQ ID NO: 10、11及12；SEQ ID NO: 16、17及18；SEQ ID NO: 10、11及19；SEQ ID NO: 20、11及12；SEQ ID NO: 21、3及22；SEQ ID NO: 16、17及19；SEQ ID NO: 2、3及4；SEQ ID NO: 10、3及12；SEQ ID NO: 80、11及18；SEQ ID NO: 80、3及18；SEQ ID NO: 20、3及12；SEQ ID NO: 80、11及12；以及SEQ ID NO: 81、11及22；及選自由以下組成之群之LC輕鏈CDR組(CDR1、CDR2及CDR3)：SEQ ID NO: 6、7及8；SEQ ID NO: 23、24及25；SEQ ID NO: 26、27及28；SEQ ID NO: 29、30及31；SEQ ID NO: 6、7及84；SEQ ID NO: 82、83及31；以及SEQ ID NO: 82、27及85，其中該抗體或其抗原結合部分不包含HC CDR組SEQ ID NO:2、3及4及LC CDR組SEQ ID NO:6、7及8。在一個實施例中，本發明包括抗hEGFR抗體，其包括含SEQ ID NO:40中所述之胺基酸序列的LC CDR3結構域、含SEQ ID NO: 39中所述之胺基酸序列的LC CDR2結構域及含SEQ ID NO: 38中所述之胺基酸序列的LC CDR1結構域；以及含SEQ ID NO: 37中所述之胺基酸序列的HC CDR3結構域、含SEQ ID NO:36中所述之胺基酸序列的HC CDR2結構域及含SEQ ID NO:35中所述之胺基酸序列的HC CDR1結構域。 表 4 . Ab1 與 某些 Ab1 變異體之重鏈及輕鏈 CDR 序列比較
重鏈CDRS  
   可變重鏈(VH) CDR1 SEQ ID NO: VH CDR2 SEQ ID NO: VH CDR3 SEQ ID NO:  
Ab1 G Y S I S S D F A W N 2 Y I S Y S G N T R Y Q P S L K S 3       A G R G F P Y 4
AbB                N                16             K                                  17          S             W 19
AbC                                  2                                                 3                            4
AbD                                  2                                                 3                            4
AbE                                  2                                                 3                            4
AbF                R                10                                                 3          S                12
AbH             G K                80             N                                  11          S       L       18
AbJ             G K                80                                                 3          S       L       18
AbL             G K                80             N                                  11          S       L       18
AbN             G R                20                                                 3          S                12
AbO             G K                80             N                                  11          S                12
AbQ                H                81             N                                  11          S W    L    W 22
表 4 ( 續 )
輕鏈CDRS
   可變輕鏈(VL) CDR1 SEQ ID NO: VL CDR2 SEQ ID NO: VL CDR3 SEQ ID NO:
Ab1 H S S Q D I N S N I G 6 H G T N L D D 7 V Q Y A Q F P W T 8  
AbB                                  6                      7                            8  
AbC                                  6                      7          E                84  
AbD                            L    82       A       H    83             E             31  
AbE                            L    82       S          H 27          D                85  
AbF                                  6                      7                            8  
AbH                   T Y          23       A             24          D E             25  
AbJ                   T Y          23       A             24          D E             25  
AbL                   T Y    V    26       S          H 27          D D             28  
AbN                   T Y    V    26       S          H 27          D D             28  
AbO                   T Y    V    26       S          H 27          D D             28  
AbQ                      M    V    29       A I          30             E             31  
AbB之全長重鏈及輕鏈序列提供於下： AbB 重鏈
Figure 02_image197
在一個實施例中，以上AbB重鏈序列在用兩個粗體白胺酸標出之位置處含有兩個丙胺酸取代(亦參見SEQ ID NO:91)。 AbB輕鏈
Figure 02_image199
在一個實施例中，ADC包括一種抗EGFR抗體，其包括含SEQ ID NO: 90或91之重鏈及含 SEQ ID NO: 92之輕鏈。 AbG之全長重鏈及輕鏈序列提供於下： AbG 重鏈
Figure 02_image201
Figure 02_image203
在一個實施例中，以上AbG重鏈序列在用兩個粗體白胺酸標出之位置處含有兩個丙胺酸取代(亦參見SEQ ID NO:94)。 輕鏈
Figure 02_image205
在一個實施例中，ADC包括一種抗EGFR抗體，其包括含SEQ ID NO: 93或94之重鏈及含 SEQ ID NO: 95之輕鏈。 AbK之全長重鏈及輕鏈序列提供於下： AbK 重鏈
Figure 02_image207
在一個實施例中，以上AbK重鏈序列在用兩個粗體白胺酸標出之位置處含有兩個丙胺酸取代(亦參見SEQ ID NO:97)。 輕鏈
Figure 02_image209
在一個實施例中，ADC包括一種抗EGFR抗體，其包括含SEQ ID NO: 96或97之重鏈及含 SEQ ID NO: 98之輕鏈。 為了產生並選擇針對hEGFR具有較佳EGFR結合及/或中和活性的CDR，可以使用此項技術中已知用於產生抗體或其抗原結合部分及評估該等抗體之EGFR結合及/或中和特徵的標準方法，包括(但不限於)本文具體描述之該等方法。 在某些實施例中，抗體包含重鏈恆定區，諸如IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgA、IgE、IgM或IgD恆定區。在某些實施例中，抗EGFR抗體包含選自由以下組成之群之重鏈免疫球蛋白恆定結構域：人類IgG恆定結構域、人類IgM恆定結構域、人類IgE恆定結構域及人類IgA恆定結構域。在其他實施例中，抗體或其抗原結合部分具有IgG1重鏈恆定區、IgG2重鏈恆定區、IgG3恆定區或IgG4重鏈恆定區。較佳地，重鏈恆定區係IgG1重鏈恆定區或IgG4重鏈恆定區。此外，抗體可包含輕鏈恆定區，即κ輕鏈恆定區或λ輕鏈恆定區。在一個實施例中，抗體包含κ輕鏈恆定區。 在某些實施例中，抗EGFR抗體係多特異性抗體，例如雙特異性抗體。 在某些實施例中，抗EGFR抗體包括含SEQ ID NO:41中所述之胺基酸序列的重鏈恆定區及/或含SEQ ID NO:43中所述之胺基酸序列的輕鏈恆定區。 已經描述Fc部分中改變抗體效應功能之胺基酸殘基置換(Winter等人, 美國專利第5,648,260號及第5,624,821號，以引用的方式併入本文中)。抗體之Fc部分介導若干重要的效應功能，例如細胞因子誘導、ADCC、吞噬作用、補體依賴性細胞毒性(CDC)以及抗體及抗原-抗體複合物之半衰期/清除率。在一些情況下，此等效應功能係治療性抗體所需的，但在其他情況下，取決於治療目的，可能為不必要的或甚至有害的。某些人類IgG同型，尤其是IgG1及IgG3，分別經由結合至FcγR及補體C1q來介導ADCC及CDC。新生兒Fc受體(FcRn)係決定抗體循環半衰期的關鍵組分。在又另一實施例中，抗體恆定區(例如抗體Fc區)中之至少一個胺基酸殘基發生置換，使得抗體之效應功能改變。 本發明的一個實施例包括經標記抗EGFR抗體，其中該抗體經衍生化或連接至除以下描述之Bcl-xL抑制劑外的一或多個功能分子(例如另一肽或蛋白質)。舉例而言，經標記抗體可以藉由將本發明之抗體或抗體部分(藉由化學偶合、基因融合、非共價締合或以其他方式)功能性連接至一或多個其他分子實體，諸如另一抗體(例如雙特異性抗體或雙功能抗體)、可偵測試劑、藥劑、可以介導抗體或抗體部分與另一分子之締合的蛋白質或肽(諸如抗生蛋白鏈菌素核心區或聚組胺酸標籤)，及/或細胞毒性劑或治療劑來衍生化，該細胞毒性劑或治療劑選自由以下組成之群：有絲分裂抑制劑、抗腫瘤抗生素、免疫調節劑、用於基因療法之載體、烷基化劑、抗血管生成劑、抗代謝物、含硼試劑、化學保護劑、激素、抗激素劑、皮質類固醇、光活性治療劑、寡核苷酸、放射性核種試劑、拓樸異構酶抑制劑、激酶抑制劑、放射增敏劑及其組合。 可用於使抗體或ADC衍生化的有用可偵測試劑包括螢光化合物。例示性螢光可偵測試劑包括螢光素、異硫氰酸螢光素、若丹明(rhodamine)、5-二甲胺-1-萘磺醯氯、藻紅素及類似物。亦可用可偵測酶，諸如鹼性磷酸酶、辣根過氧化酶、葡萄糖氧化酶及類似物使抗體衍生化。當抗體用可偵測酶衍生化時，其係藉由添加另外試劑使該酶用於產生可偵測反應產物來偵測。舉例而言，當可偵測劑辣根過氧化酶存在時，添加過氧化氫及二胺基聯苯胺產生可偵測的有色反應產物。抗體亦可用生物素衍生化，且經由間接量測抗生物素蛋白或抗生蛋白鏈菌素結合來偵測。 在一個實施例中，該抗體或ADC係結合至顯影劑。可用於本文所描述之組合物及方法中的顯影劑之實例包括(但不限於)放射性標記(例如銦)、酶、螢光標記、發光標記、生物發光標記、磁性標記及生物素。 在一個實施例中，該等抗體係連接至放射性標記，諸如(但不限於)銦( 111In)。 111銦可以用於標記本文所描述之抗體及ADC以鑑別EGFR陽性腫瘤。在某一實施例中，本文所描述之抗EGFR抗體(或ADC)係經由雙官能螯合劑用 111I標記，該雙官能螯合劑係雙官能環己基二伸乙三胺五乙酸(DTPA)螯合劑(參見美國專利第5,124,471號、第5,434,287號；以及第5,286,850號，其各自以引用之方式併入本文中)。 本發明之另一實施例提供一種糖基化結合蛋白，其中抗EGFR抗體包含一或多個碳水化合物殘基。新生的活體內蛋白質產生可以經歷進一步加工，稱為轉譯後修飾。詳言之，可以藉助於酶添加糖(糖基)殘基，此過程稱為糖基化。由此得到的帶有共價連接之寡醣側鏈之蛋白質稱為糖基化蛋白質或糖蛋白。抗體係在Fc結構域以及可變結構域中含有一或多個碳水化合物殘基的糖蛋白。Fc結構域中的碳水化合物殘基對Fc結構域之效應功能具有重要影響，且對於抗體之抗原結合或半衰期具有極小影響(R. Jefferis, Biotechnol. Prog.21 (2005), 第11-16頁)。相比之下，可變結構域之糖基化可能對於抗體之抗原結合活性具有影響。可變結構域中之糖基化可能由於位阻而對於抗體結合親和力具有負面影響(Co, M.S.等人, Mol. Immunol.(1993) 30:1361- 1367)，或可能增加對於抗原之親和力(Wallick, S.C.等人, Exp. Med.(1988) 168:1099-1109；Wright, A.等人, EMBO J .(1991) 10:2717-2723)。 本發明之一態樣係針對產生糖基化位點突變體，其中結合蛋白之O連接或N連接之糖基化位點發生突變。熟習此項技術者可以使用標準熟知技術產生該等突變體。保留生物活性，但具有增加或降低之結合活性的糖基化位點突變體係本發明之另一目的。 在又另一實施例中，抗EGFR抗體之糖基化經改良。舉例而言，可以產生去糖基化抗體(亦即，缺乏糖基化之抗體)。糖基化可以經改變以例如增加抗體對於抗原之親和力。此類碳水化合物修飾可以藉由例如改變抗體序列內之一或多個糖基化位點來完成。舉例而言，可以進行一或多個胺基酸取代，以去除一或多個可變區糖基化位點，藉此消除該位點之糖基化。此類去糖基化可以增加抗體對於抗原之親和力。此類方法進一步詳細描述於PCT公開案WO2003016466A2及美國專利第5,714,350號及第6,350,861號中，其各自以全文引用之方式併入本文中。 另外或可替代地，可以製得糖基化類型改變之經修飾抗EGFR抗體，諸如具有較少量海藻糖基殘基之低海藻糖基化抗體或具有增加之等分GlcNAc結構之抗體。經顯示，此類改變之糖基化模式可增加抗體之ADCC能力。此類碳水化合物修飾可以藉由例如在糖基化機制改變之宿主細胞中表現抗體來實現。糖基化機制改變之細胞在此項技術中已有描述且可以用作宿主細胞以在其中表現本發明之重組抗體，藉此產生糖基化改變之抗體。參見例如，Shields, R. L.等人 (2002) J. Biol. Chem.277:26733-26740；Umana等人 (1999) Nat. Biotech.17:176-1，以及歐洲專利號：EP 1,176,195；PCT公開案WO 03/035835；WO 99/54342 80，其各自以全文引用之方式併入本文中。 蛋白質糖基化取決於所關注蛋白質之胺基酸序列以及表現蛋白質之宿主細胞。不同生物體可以產生不同糖基化酶(例如，糖基轉移酶及醣苷酶)，且具有不同的可用受質(核苷酸糖)。歸因於該等因素，蛋白質糖基化模式及糖基殘基之組成可以取決於表現特定蛋白質之宿主系統而不同。可用於本發明中之糖基殘基可以包括(但不限於)葡萄糖、半乳糖、甘露糖、海藻糖、n-乙醯葡萄糖胺及唾液酸。較佳該糖基化結合蛋白包含糖基殘基以使得糖基化模式係人類的。 不同的蛋白質糖基化可以引起不同蛋白質特徵。舉例而言，在諸如酵母之微生物宿主中產生且利用酵母內源性路徑糖基化的治療性蛋白質之功效可能低於在諸如CHO細胞株之哺乳動物細胞中表現的相同蛋白質之功效。該等糖蛋白亦可在人體中具有免疫原性且在投與之後顯示縮短的活體內半衰期。在人類及其他動物體內之特定受體可以識別特定糖基殘基且促進該蛋白質自血流中快速清除。其他不良影響可以包括蛋白質摺疊、溶解度、對蛋白酶之敏感性、運輸、轉運、區室化、分泌、由其他蛋白質或因子識別、抗原性或過敏原性之改變。因此，從業者可能偏好具有特定組成及糖基化模式之治療性蛋白質，例如與在人類細胞中或在既定個體動物之物種特異性細胞中產生的糖基化組成及模式相同或至少類似的糖基化組成及模式。 表現不同於宿主細胞蛋白質之糖基化蛋白質可以藉由對宿主細胞進行遺傳修飾以使其表現異源糖基化酶來達成。使用重組技術，從業者可以產生展現人類蛋白質糖基化之抗體或其抗原結合部分。舉例而言，已對酵母菌株進行遺傳修飾以使其表現非天然存在之糖基化酶，由此使得在此等酵母菌株中產生之糖基化蛋白質(糖蛋白)展現與動物細胞、尤其人類細胞之蛋白質糖基化相同的蛋白質糖基化(美國專利公開案第20040018590號及第20020137134號及PCT公開案WO2005100584 A2)。 抗體可以藉由多種技術產生。舉例而言，由宿主細胞表現，其中藉由標準技術將編碼重鏈及輕鏈之表現載體轉染至宿主細胞中。術語「轉染」之各種形式意欲涵蓋常用於將外源性DNA引入至原核或真核宿主細胞中的多種技術，例如電穿孔、磷酸鈣沈澱、DEAE-聚葡萄糖轉染及類似技術。儘管有可能在原核或真核宿主細胞中表現抗體，但較佳在真核細胞中表現抗體，且在哺乳動物宿主細胞中最佳，因為該等真核細胞(且尤其哺乳動物細胞)比原核細胞更可能組裝且分泌適當摺疊且具免疫活性之抗體。 用於表現本發明之重組抗體的較佳哺乳動物宿主細胞包括中國倉鼠卵巢(CHO細胞)(包括dhfr- CHO細胞，描述於Urlaub及Chasin, (1980) Proc. Natl. Acad. Sci. USA77:4216-4220中，與DHFR選擇性標記物一起使用，例如，如R.J. Kaufman及P.A. Sharp (1982) Mol. Biol.159:601-621中所描述)、 NS0骨髓瘤細胞、COS細胞及SP2細胞。當將編碼抗體基因之重組表現載體引入哺乳動物宿主細胞中時，藉由培養宿主細胞一段足以允許在宿主細胞中表現抗體，或更佳地，將抗體分泌至生長宿主細胞之培養基中之時間來產生抗體。可以使用標準蛋白質純化方法自培養基回收抗體。 宿主細胞亦可用於產生功能性抗體片段，諸如Fab片段或scFv分子。應瞭解，以上程序之變化形式係在本發明之範疇內。舉例而言，可能需要用編碼本發明抗體之輕鏈及/或重鏈之功能片段的DNA轉染宿主細胞。亦可使用重組DNA技術來移除一些或所有並非結合至所關注抗原所需的編碼輕鏈及重鏈中之任一者或兩者之DNA。本發明抗體亦涵蓋由該等截短之DNA分子表現之分子。此外，可以藉由標準化學交聯方法使本發明抗體與第二抗體交聯而產生雙功能抗體，其中一條重鏈及一條輕鏈係本發明抗體且另一條重鏈及輕鏈對除所關注抗原以外之抗原具有特異性。 在用於重組表現抗體或其抗原結合部分之較佳系統中，藉由磷酸鈣介導之轉染將編碼抗體重鏈及抗體輕鏈之重組表現載體引入dhfr- CHO細胞中。在重組表現載體內，將抗體重鏈及輕鏈基因各自可操作地連接至CMV強化子/AdMLP啟動子調控元件以驅動高水準基因轉錄。重組表現載體亦攜帶DHFR基因，由此允許使用甲胺喋呤選擇/擴增來選擇經該載體轉染之CHO細胞。培養所選轉型體宿主細胞以允許其表現抗體重鏈及輕鏈，且自培養基回收完整抗體。使用標準分子生物學技術來製備重組表現載體，轉染宿主細胞，選擇轉型體，培養宿主細胞及自培養基回收抗體。又另外，本發明提供一種合成本發明之重組抗體的方法，該方法係藉由在適合培養基中培養宿主細胞直至合成重組抗體來實現。本發明之重組抗體可以使用對應於本文所揭示之胺基酸序列的核酸分子產生。在一個實施例中，使用SEQ ID NO:86及/或87中闡述之核酸分子產生重組抗體。該方法可以進一步包含自培養基分離重組抗體。 3. 抗 EGFR 抗體藥物結合物 ( ADC ) ： Bcl - xL 抑制劑及連接子失調之細胞凋亡路徑亦牽涉到癌症之病理中。癌性惡性疾病之起始涉及到細胞凋亡下調(且更特定言之Bcl-2家族蛋白質下調)的推論揭露一種靶向此種仍難以處理之疾病的新穎方式。研究顯示，例如抗細胞凋亡蛋白質Bcl 2及Bcl-xL在許多癌細胞類型中過度表現。參見Zhang, 2002, Nature Reviews/Drug Discovery 1:101；Kirkin等人, 2004, Biochimica Biophysica Acta 1644:229-249；及Amundson等人, 2000, Cancer Research 60:6101-6110。此失調之影響係經改變細胞之存活，否則該等細胞在正常情況下將經歷細胞凋亡。此等與不受調控之增殖有關的缺陷重複發生被視為癌症進化之起始點。 本發明之態樣係關於包含經由連接子結合至藥物之抗hEGFR抗體的抗hEGFR ADC，其中該藥物係Bcl-xL抑制劑。在具體實施例中，ADC係根據以下結構式(I)之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中Ab表示抗hEGFR抗體，D表示Bcl-xL抑制劑藥物(亦即，如下文所示之式(IIa)、(IIb)、(IIc)或(IId)之化合物)，L表示連接子，LK表示將連接子(L)連接至抗hEGFR抗體(Ab)之共價鍵聯且m表示連接至抗體之D-L-LK單元之數量，其係在1至20範圍內之整數。在一些實施例中，m在1至8、1至7、1至6、2至6、1至5、1至4、2至4或1至3之範圍內。在某些實施例中，m係2、3或4。 在一些實施例中，ADC具有下式(式I)：
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其中Ab係抗體，例如抗EGFR抗體AbA、AbB、AbG或AbK，且(D-L-LK)係藥物-連接子-共價鍵聯。藥物-連接子部分係由連接子L-及藥物部分-D構成，該藥物部分針對靶細胞，例如表現EGFR之細胞具有例如細胞生長抑制、細胞毒性或其他治療活性；且m係1至20之整數。在一些實施例中，m在1至8、1至7、1至6、2至6、1至5、1至4、1至3、1至2、1.5至8、1.5至7、1.5至6、1.5至5、1.5至4、2至6、1至5、1至4、1至3、1至2或2至4之範圍內。ADC之DAR相當於式I中提及的「m」。在一個實施例中，ADC具有式Ab-(LK-L-D) m ，其中Ab係抗EGFR抗體，例如AbA、AbB、AbG或AbK，L係連接子，D係藥物，例如Bcl-xL抑制劑，LK係共價連接子，例如-S-，且m係1至8(或2-4之DAR)。以下描述關於可用於本發明ADC中之藥物(式I之D)及連接子(式I之L)的另外細節以及替代性ADC結構。 各種Bcl-xL抑制劑本身，以及可以構成本文所描述之ADC的各種Bcl-xL抑制劑(D)、連接子(L)及抗EGFR抗體(Ab)的具體實施例，以及連接至ADC之Bcl-xL抑制劑之數量更詳細地描述於下。 可用於本發明之抗EGFR ADC中的Bcl-xL抑制劑以及可以用於結合抗體及一或多種Bcl-xL抑制劑之連接子的實例提供於下。術語「連接」與「結合」在本文中亦可互換使用且指示該抗體及部分係共價連接。 可用於本文所描述之ADC中的Bcl-xL抑制劑及連接子及其製備方法描述於US 2016-0339117 (AbbVie Inc.)中，其以引用的方式併入本文中。 3.1. Bcl-xL抑制劑 本發明之一態樣關於具有低細胞滲透性之Bcl-xL抑制劑。該等化合物一般實質上為雜環的且包括一或多個賦予該等化合物高水溶性及低細胞滲透性的增溶基團。增溶基團一般係能夠形成氫鍵，形成偶極子-偶極子相互作用的基團，及/或其包括含有1至30個單元之聚乙二醇聚合物、一或多種多元醇、一或多種鹽或一或多個在生理pH下帶電之基團。 Bcl-xL抑制劑可以在本文所描述的各種方法中用作化合物或鹽本身，或可以經包括作為ADC之組成部分。 可以未結合形式使用或可以包括作為ADC之一部分的Bcl-xL抑制劑之具體實施例包括根據結構式(IIa)、(IIb)、(IIc)或(IId)之化合物。在本發明中，當包括Bcl-xL抑制劑作為ADC之一部分時，以下結構式(IIa)、(IIb)、(IIc)或(IId)中所示之#表示與連接子之連接點，由此指示其呈單價基團形式，
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或其醫藥學上可接受之鹽，其中： Ar 1係選自
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、
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、
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、
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、
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、
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、
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、
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及
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，且視情況經一或多個獨立地選自以下之取代基取代：鹵基、羥基、硝基、低碳數烷基、低碳數雜烷基、C 1-4烷氧基、胺基、氰基及鹵甲基； Ar 2係選自
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、
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、
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、
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、
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、
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、
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、
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、
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、
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，且視情況經一或多個獨立地選自以下之取代基取代：鹵基、羥基、硝基、低碳數烷基、低碳數雜烷基、C 1-4烷氧基、胺基、氰基及鹵甲基，其中R 12-Z 2b-、R'-Z 2b-、#-N(R 4)-R 13-Z 2b-或#-R'-Z 2b-取代基在能夠經取代之任何Ar 2原子處連接至Ar 2； Z 1係選自N、CH、C-鹵基、C-CH 3及C-CN； Z 2a及Z 2b各自彼此獨立地選自一鍵、NR 6、CR 6aR 6b、O、S、S(O)、S(O) 2、-NR 6C(O)-、-NR 6aC(O)NR 6b-及-NR 6C(O)O-； R'係伸烷基、伸雜烷基、伸環烷基、伸雜環、芳基或雜芳基，其在一或多個碳或雜原子處獨立地經含有選自以下之基團的增溶部分取代：多元醇、含有4至30個乙二醇單元的聚乙二醇、鹽及在生理pH下帶電之基團及其組合，其中#當連接至R'時係在能夠經取代之任何R'原子處連接至R'； R 1係選自氫、甲基、鹵基、鹵甲基、乙基及氰基； R 2係選自氫、甲基、鹵基、鹵甲基及氰基； R 3係選自氫、甲基、乙基、鹵甲基及鹵乙基； R 4係選自氫、低碳數烷基及低碳數雜烷基，或與R 13之原子一起形成具有在3與7個之間之環原子的環烷基或雜環基環； R 6、R 6a及R 6b各自彼此獨立地選自氫、視情況經取代之低碳數烷基、視情況經取代之低碳數雜烷基、視情況經取代之環烷基及視情況經取代之雜環基，或與R 4之原子及R 13之原子一起形成具有3與7個之間之環原子的環烷基或雜環基環； R 11a及R 11b各自彼此獨立地選自氫、鹵基、甲基、乙基、鹵甲基、羥基、甲氧基、CN及SCH 3； R 12視情況為R'或係選自氫、鹵基、氰基、視情況經取代之烷基、視情況經取代之雜烷基、視情況經取代之雜環基及視情況經取代之環烷基； R 13係選自視情況經取代之C 1-8伸烷基、視情況經取代之伸雜烷基、視情況經取代之伸雜環及視情況經取代之伸環烷基；且 #表示與連接子L之連接點。 可以未結合形式使用或可以包括作為ADC之一部分的Bcl-xL抑制劑之一個實施例包括根據結構式(IIa)、(IIb)、(IIc)或(IId)之化合物：
Figure 02_image253
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或其醫藥學上可接受之鹽，其中： Ar 1係選自
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、
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、
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、
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、
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、
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、
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、
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及
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，且視情況經一或多個獨立地選自以下之取代基取代：鹵基、羥基、硝基、低碳數烷基、低碳數雜烷基、C 1-4烷氧基、胺基、氰基及鹵甲基； Ar 2係選自
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、
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、
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、
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、
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、
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、
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、
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、
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、
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、
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及
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或其N-氧化物，且視情況經一或多個獨立地選自以下之取代基取代：鹵基、羥基、硝基、低碳數烷基、低碳數雜烷基、C 1-4烷氧基、胺基、氰基及鹵甲基、其中R 12-Z 2b-、R'-Z 2b-、#-N(R 4)-R 13-Z 2b-或#-R'-Z 2b-取代基在能夠經取代之任何Ar 2原子處連接至Ar 2； Z 1係選自N、CH、C-鹵基、C-CH 3及C-CN； Z 2a及Z 2b各自彼此獨立地選自一鍵、NR 6、CR 6aR 6b、O、S、S(O)、S(O) 2、-NR 6C(O)-、-NR 6aC(O)NR 6b-及-NR 6C(O)O-； R'係
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或
Figure 02_image301
，其中#當連接至R'時係在能夠經取代之任何R'原子處連接至R'； X'在每次出現時係選自-N(R 10)-、-N(R 10)C(O)-、-N(R 10)S(O) 2-、-S(O) 2N(R 10)-及-O-； n係選自0至3； R 10在每次出現時係獨立地選自氫、低碳數烷基、雜環、胺基烷基、G-烷基及-(CH 2) 2-O-(CH 2) 2-O-(CH 2) 2-NH 2； G在每次出現時係獨立地選自多元醇、具有在4與30個之間之重複單元的聚乙二醇、鹽及在生理pH下帶電的部分； SP a在每次出現時係獨立地選自氧、-S(O) 2N(H)-、-N(H)S(O) 2-、-N(H)C(O)-、-C(O)N(H)-、-N(H)-、伸芳基、伸雜環及視情況經取代之亞甲基；其中亞甲基視情況經-NH(CH 2) 2G、NH 2、C 1-8烷基及羰基中之一或多個取代； m 2係選自0至12； R 1係選自氫、甲基、鹵基、鹵甲基、乙基及氰基； R 2係選自氫、甲基、鹵基、鹵甲基及氰基； R 3係選自氫、甲基、乙基、鹵甲基及鹵乙基； R 4係選自氫、低碳數烷基及低碳數雜烷基，或與R 13之原子一起形成具有在3與7個之間之環原子的環烷基或雜環基環； R 6、R 6a及R 6b各自彼此獨立地選自氫、視情況經取代之低碳數烷基、視情況經取代之低碳數雜烷基、視情況經取代之環烷基及視情況經取代之雜環基，或與R 4之原子及R 13之原子一起形成具有3與7個之間之環原子的環烷基或雜環基環； R 11a及R 11b各自彼此獨立地選自氫、鹵基、甲基、乙基、鹵甲基、羥基、甲氧基、CN及SCH 3； R 12視情況為R'或係選自氫、鹵基、氰基、視情況經取代之烷基、視情況經取代之雜烷基、視情況經取代之雜環基及視情況經取代之環烷基； R 13係選自視情況經取代之C 1-8伸烷基、視情況經取代之伸雜烷基、視情況經取代之伸雜環及視情況經取代之伸環烷基；且 #表示與連接子L之連接點。 當結構式(IIa)至(IId)之Bcl-xL抑制劑並非ADC之組分時，式(IIa)至(IId)中之#表示與氫原子之連接點。當Bcl-xL抑制劑係ADC之組分時，式(IIa)至(IId)中之#表示與連接子之連接點。當Bcl-xL抑制劑係ADC之組分時，ADC可以包含一或多種Bcl-xL抑制劑，該等抑制劑可以相同或不同，但通常係相同的。 在某些實施例中，R'係經一或多個含有鹽及/或生理pH下帶電之基團之部分取代的C 2-C 8伸雜烷基。該鹽可以例如選自羧酸鹽、磺酸鹽、膦酸鹽及銨離子鹽。舉例而言，該鹽可以為鈉或鉀之羧酸鹽、磺酸鹽或膦酸鹽，或銨離子之氯化物鹽。在生理pH下帶電之基團可以為在生理pH下帶電之任何基團，包括例如(且非限制)兩性離子基團。在某些實施例中，作為鹽之基團係偶極部分，諸如(但不限於)胺之N-氧化物，包括某些雜環基，諸如(但不限於)吡啶及喹啉。在具體實施例中，在生理pH下帶電之基團在每次出現時獨立地選自羧酸基、磺酸基、膦酸基及胺。 在某些實施例中，R'係經一或多個含有聚乙二醇或多元醇(諸如二醇或糖部分)之部分取代的C 2-C 8伸雜烷基。 在某些實施例中，R'可以經除增溶部分外之基團取代。舉例而言，R'可以經一或多個相同或不同的烷基、雜烷基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基或鹵基取代。 在某些實施例中，R'係由下式表示：
Figure 02_image303
或其醫藥學上可接受之鹽，其中： X'在每次出現時係選自-N(R 10)-及-O-； n係選自1至3； R 10在每次出現時獨立地選自氫、烷基、雜環、胺基烷基、G-烷基、雜環及-(CH 2) 2-O-(CH 2) 2-O-(CH 2) 2-NH 2； G在每次出現時係獨立地選自多元醇、具有在4與30個之間之重複單元的聚乙二醇(在本文中稱為PEG4-30)、鹽及在生理pH下帶電的部分； SP a在每次出現時係獨立地選自氧、磺醯胺、伸芳基、伸雜環及視情況經取代之亞甲基；其中亞甲基視情況經-NH(CH 2) 2G、胺及羰基中之一或多個取代；且 m 2係選自0至6， 其中在R'中存在至少一個可取代氮，其在R'之可取代氮處連接至連接子或氫原子。 在某些實施例中，R'係
Figure 02_image305
或
Figure 02_image307
； X'在每次出現時係選自-N(R 10)-、-N(R 10)C(O)-、-N(R 10)S(O) 2-、-S(O) 2N(R 10)-及-O-； n係選自0至3； R 10在每次出現時係獨立地選自氫、烷基、雜環、胺基烷基、G-烷基、雜環及-(CH 2) 2-O-(CH 2) 2-O-(CH 2) 2-NH 2； G在每次出現時係獨立地選自多元醇、具有在4與30個之間之重複單元的聚乙二醇、鹽及在生理pH下帶電的部分； SP a在每次出現時係獨立地選自氧-S(O) 2N(H)-、-N(H)S(O) 2-、-N(H)C(O)-、-C(O)N(H)-、-N(H)-、伸芳基、伸雜環及視情況經取代之亞甲基；其中亞甲基視情況經-NH(CH 2) 2G、胺、烷基及羰基中之一或多個取代； m 2係選自0至12，且 #當連接至R'時係在能夠經取代之任何R'原子處連接至R'。 在某些實施例中，G在每次出現時係鹽或在生理pH下帶電之部分。 在某些實施例中，G在每次出現時係羧酸鹽、磺酸鹽、膦酸鹽或銨鹽。 在某些實施例中，G在每次出現時係選自由以下組成之群的在生理pH下帶電之部分：羧酸酯、膦酸酯及胺。 在某些實施例中，G在每次出現時係含具有在4與30個之間之重複單元的聚乙二醇，或多元醇之部分。 在某些實施例中，該多元醇係糖。 在某些實施例中，式(IIa)或(IId)之R'包括至少一個適於連接至連接子的可取代氮。 在某些實施例中，G在每次出現時獨立地選自：
Figure 02_image309
、
Figure 02_image311
、
Figure 02_image313
、
Figure 02_image315
、
Figure 02_image317
、
Figure 02_image319
、
Figure 02_image321
、
Figure 02_image323
、
Figure 02_image325
及
Figure 02_image327
，其中M係氫或帶正電之相對離子。在某些實施例中，M係Na +、K +或Li +。在某些實施例中，M係氫。在特定實施例中，G係SO 3H。 在某些實施例中，G在每次出現時獨立地選自：
Figure 02_image329
、
Figure 02_image331
、
Figure 02_image333
、
Figure 02_image335
、
Figure 02_image337
、
Figure 02_image339
、
Figure 02_image341
、
Figure 02_image343
、
Figure 02_image345
、
Figure 02_image347
、
Figure 02_image349
、
Figure 02_image351
、
Figure 02_image353
、
Figure 02_image355
、
Figure 02_image357
、
Figure 02_image359
及
Figure 02_image361
，其中M係氫或帶正電之相對離子。在某些實施例中，M係氫。在特定實施例中，G係SO 3H。 在某些實施例中，R'係選自：
Figure 02_image363
、
Figure 02_image365
、
Figure 02_image367
、
Figure 02_image369
Figure 02_image371
Figure 02_image373
及
Figure 02_image375
，或其鹽。當ADC中包括本實施例之Bcl-xL抑制劑時，ADC之連接子係連接至可用一級胺基或二級胺基之氮原子。 在某些實施例中，R'係選自：
Figure 02_image377
Figure 02_image379
Figure 02_image381
Figure 02_image383
Figure 02_image385
，或其鹽。當ADC中包括本實施例之Bcl-xL抑制劑時，ADC之連接子係連接至可用一級胺基或二級胺基之氮原子。 在某些實施例中，R'係選自
Figure 02_image387
、
Figure 02_image389
Figure 02_image391
Figure 02_image393
Figure 02_image395
Figure 02_image397
及
Figure 02_image399
，其中#表示式(IIb)或(IIc)之ADC之Bcl-xL抑制劑藥物中的氫原子或式(IIa)或(IId)之ADC之Bcl-xL抑制劑藥物中與連接子L之連接點。 在某些實施例中，式(IIa)-(IId)之Ar 1係選自
Figure 02_image401
、
Figure 02_image403
及
Figure 02_image405
。在某些實施例中，式(IIa)-(IId)之Ar 1係選自
Figure 02_image407
、
Figure 02_image409
及
Figure 02_image411
且視情況經一或多個獨立地選自以下之取代基取代：鹵基、氰基、甲基及鹵甲基。在特定實施例中，Ar 1係
Figure 02_image413
。 在某些實施例中，Ar 2係
Figure 02_image415
，其視情況經一或多個取代基取代，其中R 12-Z 2b-、R'-Z 2b-、#-N(R 4)-R 13-Z 2b-或#-R'-Z 2b-取代基在能夠經取代之任何Ar 2原子處連接至Ar 2。 在某些實施例中，Ar 2係選自：
Figure 02_image417
、
Figure 02_image419
、
Figure 02_image421
、
Figure 02_image423
、
Figure 02_image425
、
Figure 02_image427
、
Figure 02_image429
、
Figure 02_image431
及
Figure 02_image433
且視情況經一或多個取代基取代，其中R 12-Z 2b-、R'-Z 2b-、#-N(R 4)-R 13-Z 2b-或#-R'-Z 2b-取代基在能夠經取代之任何Ar 2原子處連接至Ar 2。在某些實施例中，Ar 2係選自：
Figure 02_image435
、
Figure 02_image437
、
Figure 02_image439
、
Figure 02_image441
、
Figure 02_image443
、
Figure 02_image445
、
Figure 02_image447
、
Figure 02_image449
及
Figure 02_image451
；且視情況經一或多個取代基取代，其中R 12-Z 2b-、R'-Z 2b-、#-N(R 4)-R 13-Z 2b-或#-R'-Z 2b-取代基在能夠經取代之任何Ar 2原子處連接至Ar 2。在某些實施例中，Ar 2經一或多個增溶基團取代。在某些實施例中，每個增溶基團彼此獨立地選自含有多元醇之部分、具有在4與30個之間之重複單元的聚乙二醇、鹽或在生理pH下帶電之部分。 在某些實施例中，式(IIa)-(IId)之Z 1係N。 在某些實施例中，式(IIa)-(IId)之Z 2a係O。在某些實施例中，式(IIa)-(IId)之Z 2a係CR 6aR 6b。在某些實施例中，式(IIa)-(IId)之Z 2a係S。在某些實施例中，式(IIa)-(IId)之Z 2a係-NR 6C(O)-。在特定實施例中，R 6係氫。 在某些實施例中，式(IIa)-(IId)之Z 2b係O。在某些實施例中，式(IIa)-(IId)之Z 2b係NH或CH 2。 在某些實施例中，式(IIa)-(IId)之R 1係選自甲基及氯。 在某些實施例中，式(IIa)-(IId)之R 2係選自氫及甲基。在特定實施例中，R 2係氫。 在某些實施例中，Bcl-xL抑制劑係式(IIa)之化合物。在Bcl-xL抑制劑係式(IIa)之化合物的某些實施例中，該化合物具有結構式(IIa.1)，
Figure 02_image453
或其鹽，其中： Ar 1、Ar 2、Z 1、Z 2a、Z 2b、R 1、R 2、R 11a、R 11b、R 12、G及#如上文所定義； Y係視情況經取代之C 1-C 8伸烷基； r係0或1；且 s係1、2或3。 在Bcl-xL抑制劑係式(IIa.1)之化合物的某些實施例中，r係0且s係1。 在Bcl-xL抑制劑係式(IIa.1)之化合物的某些實施例中，r係0且s係2。 在Bcl-xL抑制劑係式(IIa.1)之化合物的某些實施例中，r係1且s係2。 在Bcl-xL抑制劑係式(IIa.1)之化合物的某些實施例中，Z 2a係選自O、NH、CH 2及S。在特定實施例中，Z 2a係O。在某些實施例中，式(IIa.1)之Z 2a係-CR 6aR 6b-。在某些實施例中，式(IIa.1)之Z 2a係CH 2。在某些實施例中，式(IIa.1)之Z 2a係S。在某些實施例中，式(IIa.1)之Z 2a係-NR 6C(O)-。 在Bcl-xL抑制劑係式(IIa.1)之化合物的某些實施例中，Y係選自伸乙基、伸丙基及伸丁基。在特定實施例中，Y係選自伸乙基及伸丙基。 在Bcl-xL抑制劑係式(IIa.1)之化合物的某些實施例中，G係選自
Figure 02_image455
、
Figure 02_image457
、
Figure 02_image459
及
Figure 02_image461
，其中M係氫或帶正電之相對離子。在特定實施例中，G係
Figure 02_image463
。在特定實施例中，G係SO 3H。 在Bcl-xL抑制劑係式(IIa.1)之化合物的某些實施例中，Ar 2係選自
Figure 02_image465
、
Figure 02_image467
、
Figure 02_image469
Figure 02_image471
、
Figure 02_image473
及
Figure 02_image475
，其中R 12-Z 2b-取代基係在能夠經取代之任何Ar 2原子處連接至Ar 2。 在Bcl-xL抑制劑係式(IIa.1)之化合物的某些實施例中，Ar 2係選自
Figure 02_image477
、
Figure 02_image479
、
Figure 02_image481
、
Figure 02_image483
、
Figure 02_image485
、
Figure 02_image487
及
Figure 02_image489
，其中R 12-Z 2b-取代基係在係在能夠經取代之任何Ar 2原子處連接至Ar 2。 在Bcl-xL抑制劑係式(IIa.1)之化合物的特定實施例中，Ar 2係
Figure 02_image491
。在Bcl-xL抑制劑係式(IIa.1)之化合物的特定實施例中，Ar 2係
Figure 02_image493
。 在Bcl-xL抑制劑係式(IIa.1)之化合物的某些實施例中，Z 2b-R 12係選自H、F、CN、OCH 3、OH、NH 2、OCH 2CH 2OCH 3、N(CH 3)C(=O)CH 3、CH 2N(CH 3)C(=O)CH 3SCH 3、C(=O)N(CH 3) 2及OCH 2CH 2N(CH 3)(C(=O)CH 3)。在特定實施例中，Z 2b-R 12係選自H、F及CN。在特定實施例中，Z 2b-R 12係H。 在Z 2b-R 12經羥基(OH)取代之實施例中，氧可以用作與連接基團(參看第4.4.1.1部分)之連接點。 在Bcl-xL抑制劑係式(IIa.1)之化合物的某些實施例中，Ar 1係
Figure 02_image495
。 在Bcl-xL抑制劑係式(IIa.1)之化合物的某些實施例中，鍵結至金剛烷環之基團
Figure 02_image497
係選自：
Figure 02_image499
、
Figure 02_image501
、
Figure 02_image503
、
Figure 02_image505
、
Figure 02_image507
、
Figure 02_image509
、
Figure 02_image511
、
Figure 02_image513
及
Figure 02_image515
。 在某些實施例中，式(IIa.1)之化合物可以轉化成式IIa.1.1之化合物，其中n係選自1-3：
Figure 02_image517
。 在某些實施例中，式IIa.1.1之化合物可以轉化成式IIa.1.2之化合物，其中L表示連接子且LK表示在連接子L之反應性官能基與抗體上之互補官能基之間形成的鍵聯。
Figure 02_image519
在Bcl-xL抑制劑係式(IIa)之化合物的某些實施例中，該化合物具有結構式(IIa.2)，
Figure 02_image521
或其鹽，其中： Ar 1、Ar 2、Z 1、Z 2a、Z 2b、R 1、R 2、R 11a、R 11b、R 12及#如上文所定義； U係選自N、O及CH，其限制條件為，當U係O時，則V a及R 21a不存在； R 20係選自H及C 1-C 4烷基； R 21a及R 21b各自彼此獨立地不存在或選自H、C 1-C 4烷基及G，其中G係選自多元醇、PEG4-30、鹽及在生理pH下帶電的部分； V a及V b各自彼此獨立地不存在或選自一鍵及視情況經取代之伸烷基； R 20係選自H及C 1-C 4烷基；且 s係1、2或3。 在Bcl-xL抑制劑係式(IIa.2)之化合物的某些實施例中，s係2。 在Bcl-xL抑制劑係式(IIa.2)之化合物的某些實施例中，Z 2a係選自O、NH、CH 2及S。在特定實施例中，Z 2a係O。在某些實施例中，式(IIa.2)之Z 2a係CR 6aR 6b。在某些實施例中，式(IIa.2)之Z 2a係CH 2。在某些實施例中，式(IIa.2)之Z 2a係S。在某些實施例中，式(IIa.2)之Z 2a係-NR 6C(O)-。 在Bcl-xL抑制劑係式(IIa.2)之化合物的某些實施例中，U係選自N及O。在特定實施例中，U係O。 在Bcl-xL抑制劑係式(IIa.2)之化合物的某些實施例中，V a係一鍵，R 21a係C 1-C 4烷基，V b係選自亞甲基及伸乙基且R 21b係G。在特定實施例中，V a係一鍵，R 21a係甲基且V b係選自亞甲基及伸乙基，且R 21b係G。 在Bcl-xL抑制劑係式(IIa.2)之化合物的某些實施例中，V a係選自亞甲基及伸乙基，R 21a係G，V b係選自亞甲基及伸乙基且R 21b係G。在特定實施例中，V a係伸乙基，R 21a係G，V b係選自亞甲基及伸乙基且R 21b係G。 在Bcl-xL抑制劑係式(IIa.2)之化合物的某些實施例中，G係選自
Figure 02_image523
、
Figure 02_image525
、
Figure 02_image527
及
Figure 02_image529
，其中M係氫或帶正電之相對離子。在特定實施例中，G係
Figure 02_image531
。在特定實施例中，G係SO 3H。 在Bcl-xL抑制劑係式(IIa.2)之化合物的某些實施例中，R 20係選自氫及甲基。 在Bcl-xL抑制劑係式(IIa.2)之化合物的某些實施例中，Ar 2係選自
Figure 02_image533
、
Figure 02_image535
、
Figure 02_image537
、
Figure 02_image539
、
Figure 02_image541
及
Figure 02_image543
，其中R 12-Z 2b-取代基係在能夠經取代之任何Ar 2原子處連接至Ar 2。 在Bcl-xL抑制劑係式(IIa.2)之化合物的某些實施例中，Ar 2係選自
Figure 02_image545
、
Figure 02_image547
、
Figure 02_image549
、
Figure 02_image551
Figure 02_image553
、
Figure 02_image555
及
Figure 02_image557
，其中R 12-Z 2b-取代基係在能夠經取代之任何Ar 2原子處連接至Ar 2。 在Bcl-xL抑制劑係式(IIa.2)之化合物的特定實施例中，Ar 2係
Figure 02_image559
，其中R 12-Z 2b-取代基係在能夠經取代之任何Ar 2原子處連接至Ar 2。 在Bcl-xL抑制劑係式(IIa.2)之化合物的某些實施例中，Z 2b-R 12係選自H、F、CN、OCH 3、OH、NH 2、OCH 2CH 2OCH 3、N(CH 3)C(=O)CH 3、CH 2N(CH 3)C(=O)CH 3SCH 3、C(=O)N(CH 3) 2及OCH 2CH 2N(CH 3)(C(=O)CH 3)。在特定實施例中，Z 2b-R 12係選自H、F及CN。在特定實施例中，Z 2b-R 12係H。在Bcl-xL抑制劑係式(IIa.2)之化合物的某些實施例中，Ar 1係
Figure 02_image561
。在Bcl-xL抑制劑係式(IIa.2)之化合物的特定實施例中，Ar 2係
Figure 02_image563
，其中R 12-Z 2b-取代基係在能夠經取代之任何Ar 2原子處連接至Ar 2。 在Bcl-xL抑制劑係式(IIa)之化合物的某些實施例中，該化合物具有結構式(IIa.3)，
Figure 02_image565
Figure 02_image567
或其鹽，其中： Ar 1、Ar 2、Z 1、Z 2a、Z 2b、R 1、R 2、R 11a、R 11b、R 12及#如上文所定義； R b係選自H、C 1-C 4烷基及J b-G，或視情況與T之原子一起形成具有在3個與7個之間之原子的環； J a及J b各自彼此獨立地選自視情況經取代之C 1-C 8伸烷基及視情況經取代之伸苯基； T係選自視情況經取代之C 1-C 8伸烷基、CH 2CH 2OCH 2CH 2OCH 2CH 2、CH 2CH 2OCH 2CH 2OCH 2CH 2OCH 2及含有4至10個乙二醇單元之聚乙二醇； G係選自多元醇、PEG4-30、鹽及在生理pH下帶電的部分；且 s係1、2或3。 在Bcl-xL抑制劑係式(IIa.3)之化合物的某些實施例中，s係1。在Bcl-xL抑制劑係式(IIa.3)之化合物的某些實施例中，s係2。 在Bcl-xL抑制劑係式(IIa.3)之化合物的某些實施例中，Z 2a係選自O、CH 2及S。在特定實施例中，Z 2a係O。在某些實施例中，式(IIa.3)之Z 2a係CR 6aR 6b。在某些實施例中，式(IIa.3)之Z 2a係CH 2。在某些實施例中，式(IIa.3)之Z 2a係S。在某些實施例中，式(IIa.3)之Z 2a係-NR 6C(O)-。 在Bcl-xL抑制劑係式(IIa.3)之化合物的某些實施例中，J a係選自亞甲基及伸乙基且R b係J b-G，其中J b係亞甲基或伸乙基。在一些此類實施例中，T係伸乙基。在其他此類實施例中，T係CH 2CH 2OCH 2CH 2OCH 2CH 2。在其他此類實施例中，T係含有4至10個乙二醇單元之聚乙二醇。 在Bcl-xL抑制劑係式(IIa.3)之化合物的某些實施例中，J a係選自亞甲基及伸乙基且R b與T之原子一起形成具有4至6個環原子之環。 在Bcl-xL抑制劑係式(IIa.3)之化合物的某些實施例中，J a係選自亞甲基及伸乙基且R b係H或烷基。在一些此類實施例中，T係伸乙基。在其他此類實施例中，T係CH 2CH 2OCH 2CH 2OCH 2CH 2。 在Bcl-xL抑制劑係式(IIa.3)之化合物的某些實施例中，G係選自
Figure 02_image569
、
Figure 02_image571
、
Figure 02_image573
及
Figure 02_image575
，其中M係氫或帶正電之相對離子。在特定實施例中，G係
Figure 02_image577
。在特定實施例中，G係SO 3H。 在Bcl-xL抑制劑係式(IIa.3)之化合物的某些實施例中，R 20係選自氫及甲基。 在Bcl-xL抑制劑係式(IIa.3)之化合物的某些實施例中，Ar 2係選自
Figure 02_image579
、
Figure 02_image581
、
Figure 02_image583
Figure 02_image585
、
Figure 02_image587
及
Figure 02_image589
，其中R 12-Z 2b-取代基係在能夠經取代之任何Ar 2原子處連接至Ar 2。 在Bcl-xL抑制劑係式(IIa.3)之化合物的特定實施例中，Ar 2係
Figure 02_image591
，其中R 12-Z 2b-取代基係在能夠經取代之任何Ar 2原子處連接至Ar 2。在Bcl-xL抑制劑係式(IIa.3)之化合物的某些實施例中，Ar 2係選自
Figure 02_image593
、
Figure 02_image595
、
Figure 02_image597
、
Figure 02_image599
Figure 02_image601
、
Figure 02_image603
及
Figure 02_image605
，其中R 12-Z 2b-取代基係在能夠經取代之任何Ar 2原子處連接至Ar 2。在Bcl-xL抑制劑係式(IIa.3)之化合物的特定實施例中，Ar 2係
Figure 02_image607
，其中R 12-Z 2b-取代基係在能夠經取代之任何Ar 2原子處連接至Ar 2。 在Bcl-xL抑制劑係式(IIa.3)之化合物的某些實施例中，Z 2b-R 12係選自H、F、CN、OCH 3、OH、NH 2、OCH 2CH 2OCH 3、N(CH 3)C(=O)CH 3、CH 2N(CH 3)C(=O)CH 3SCH 3、C(=O)N(CH 3) 2及OCH 2CH 2N(CH 3)(C(=O)CH 3)。在特定實施例中，Z 2b-R 12係選自H、F及CN。在特定實施例中，Z 2b-R 12係H。 在Bcl-xL抑制劑係式(IIa.3)之化合物的某些實施例中，Ar 1係
Figure 02_image609
。 在Bcl-xL抑制劑係式(IIa.3)之化合物的某些實施例中，基團
Figure 02_image611
係選自：
Figure 02_image613
及
Figure 02_image615
。 在Bcl-xL抑制劑係式(IIa.3)之化合物的某些實施例中，基團
Figure 02_image617
係選自：
Figure 02_image619
、
Figure 02_image621
及
Figure 02_image623
。 在某些實施例中，Bcl-xL抑制劑係式(IIb)之化合物。在Bcl-xL抑制劑係式(IIb)之化合物的某些實施例中，該化合物具有結構式(IIb.1)，
Figure 02_image625
或其鹽，其中： Ar 1、Ar 2、Z 1、Z 2a、Z 2b、R 1、R 2、R 4、R 11a、R 11b及#如上文所定義； Y係視情況經取代之C 1-C 8伸烷基； G係選自多元醇、PEG4-30、鹽及在生理pH下帶電的部分； r係0或1；且 s係1、2或3。 在Bcl-xL抑制劑係式(IIb.1)之化合物的某些實施例中，s係1。在Bcl-xL抑制劑係式(IIb.1)之化合物的某些實施例中，s係2。在Bcl-xL抑制劑係式(IIb.1)之化合物的某些實施例中，s係3。 在Bcl-xL抑制劑係式(IIb.1)之化合物的某些實施例中，Z 2a係選自O、CH 2、NH及S。在特定實施例中，Z 2a係O。在某些實施例中，式(IIb.1)之Z 2a係CR 6aR 6b。在某些實施例中，式(IIb.1)之Z 2a係CH 2。在某些實施例中，式(IIb.1)之Z 2a係S。在某些實施例中，式(IIb.1)之Z 2a係-NR 6C(O)-。 在Bcl-xL抑制劑係式(IIb.1)之化合物的某些實施例中，Z 2b係選自O、CH 2、NH、NCH 3及S。在特定實施例中，Z 2b係O。在特定實施例中，Z 2b係NH。在特定實施例中，Z 2b係NCH 3。 在Bcl-xL抑制劑係式(IIb.1)之化合物的某些實施例中，Y係伸乙基且r係0。 在Bcl-xL抑制劑係式(IIb.1)之化合物的某些實施例中，Y係伸乙基且r係1。 在Bcl-xL抑制劑係式(IIb.1)之化合物的某些實施例中，R 4係H或甲基。在特定實施例中，R 4係甲基。在其他實施例中，R 4係H。 在Bcl-xL抑制劑係式(IIb.1)之化合物的某些實施例中，R 4與Y之原子一起形成具有4至6個環原子之環。在特定實施例中，該環係環丁烷環。在其他實施例中，該環係哌嗪環。在其他實施例中，該環係嗎啉環。 在Bcl-xL抑制劑係式(IIb.1)之化合物的某些實施例中，G係選自
Figure 02_image627
、
Figure 02_image629
、
Figure 02_image631
及
Figure 02_image633
，其中M係氫或帶正電之相對離子。在特定實施例中，G係
Figure 02_image635
。在其他實施例中，G係SO 3H。在特定實施例中，G係NH 2。在其他實施例中，G係PO 3H 2。在特定實施例中，G係NH 2。在特定實施例中，G係C(O)OH。在特定實施例中，G係多元醇。 在Bcl-xL抑制劑係式(IIb.1)之化合物的某些實施例中，Ar 2係選自
Figure 02_image637
、
Figure 02_image639
、
Figure 02_image641
、
Figure 02_image643
、
Figure 02_image645
及
Figure 02_image647
，其中G-(CH 2) s-Z 2b-取代基係在能夠經取代之任何Ar 2原子處連接至Ar 2。 在Bcl-xL抑制劑係式(IIb.1)之化合物的特定實施例中，Ar 2係
Figure 02_image649
，其中G-(CH 2) s-Z 2b-取代基係在能夠經取代之任何Ar 2原子處連接至Ar 2。在Bcl-xL抑制劑係式(IIb.1)之化合物的某些實施例中，Ar 2係選自
Figure 02_image651
、
Figure 02_image653
、
Figure 02_image655
、
Figure 02_image657
、
Figure 02_image659
、
Figure 02_image661
及
Figure 02_image663
，其中G-(CH 2) s-Z 2b-取代基係在能夠經取代之任何Ar 2原子處連接至Ar 2。在Bcl-xL抑制劑係式(IIb.1)之化合物的特定實施例中，Ar 2係
Figure 02_image665
，其中G-(CH 2) s-Z 2b-取代基係在能夠經取代之任何Ar 2原子處連接至Ar 2。 在Bcl-xL抑制劑係式(IIb.1)之化合物的某些實施例中，Ar 1係
Figure 02_image667
。 在Bcl-xL抑制劑係式(IIb.1)之化合物的某些實施例中，基團
Figure 02_image669
係選自：
Figure 02_image671
、
Figure 02_image673
、
Figure 02_image675
及
Figure 02_image677
。 在Bcl-xL抑制劑係式(IIb.1)之化合物的某些實施例中，基團
Figure 02_image679
係選自：
Figure 02_image681
、
Figure 02_image683
及
Figure 02_image685
。 在Bcl-xL抑制劑係式(IIb.1)之化合物的某些實施例中，基團
Figure 02_image687
係選自：
Figure 02_image689
Figure 02_image691
、
Figure 02_image693
及
Figure 02_image695
。 在某些實施例中，Bcl-xL抑制劑係式(IIc)之化合物。在Bcl-xL抑制劑係式(IIc)之化合物的某些實施例中，該化合物具有結構式(IIc.1)
Figure 02_image697
或其鹽，其中： Ar 1、Ar 2、Z 1、Z 2a、Z 2b、R 1、R 2、R 4、R 11a、R 11b及#如上文所定義； Y a係視情況經取代之C 1-C 8伸烷基； Y b係視情況經取代之C 1-C 8伸烷基； R 23係選自H及C 1-C 4烷基；且 G係選自多元醇、PEG4-30、鹽及在生理pH下帶電的部分； 在Bcl-xL抑制劑係式(IIc.1)之化合物的某些實施例中，Z 2a係選自O、CH 2、NH及S。在特定實施例中，Z 2a係O。在某些實施例中，式(IIc.1)之Z 2a係CR 6aR 6b。在某些實施例中，式(IIc.1)之Z 2a係S。在某些實施例中，式(IIc.1)之Z 2a係-NR 6C(O)-。 在Bcl-xL抑制劑係式(IIc.1)之化合物的某些實施例中，Z 2b係選自O、CH 2、NH、NCH 3及S。在特定實施例中，Z 2b係O。在特定實施例中，Z 2b係NH。在特定實施例中，Z 2b係NCH 3。 在Bcl-xL抑制劑係式(IIc.1)之化合物的某些實施例中，Z 2b係一鍵。在一些此類實施例中，Y a係亞甲基或伸乙基。 在Bcl-xL抑制劑係式(IIc.1)之化合物的某些實施例中，Z 2b係O。在一些此類實施例中，Y a係亞甲基、伸乙基或伸丙基。 在Bcl-xL抑制劑係式(IIc.1)之化合物的某些實施例中，Z 2b係NR 6，其中R 6如上文所定義。在一些此類實施例中，R 6與來自Y a之原子一起形成具有在3與7個之間之環原子的環烷基或雜環基環。在一些此類實施例中，該環具有5個原子。 在Bcl-xL抑制劑係式(IIc.1)之化合物的某些實施例中，Y a係伸乙基。 在Bcl-xL抑制劑係式(IIc.1)之化合物的某些實施例中，Y a係亞甲基。 在Bcl-xL抑制劑係式(IIc.1)之化合物的某些實施例中，Y a係伸丙基。 在Bcl-xL抑制劑係式(IIc.1)之化合物的某些實施例中，R 4係H或甲基。在特定實施例中，R 4係H。 在Bcl-xL抑制劑係式(IIc.1)之化合物的某些實施例中，Y b係伸乙基或伸丙基。在特定實施例中，Y b係伸乙基。 在Bcl-xL抑制劑係式(IIc.1)之化合物的某些實施例中，R 23係甲基。 在Bcl-xL抑制劑係式(IIc.1)之化合物的某些實施例中，R 23係H。 在Bcl-xL抑制劑係式(IIc.1)之化合物的某些實施例中，G係選自
Figure 02_image699
、
Figure 02_image701
、
Figure 02_image703
及
Figure 02_image705
，其中M係氫或帶正電之相對離子。在特定實施例中，G係
Figure 02_image707
。在特定實施例中，G係SO 3H。 在Bcl-xL抑制劑係式(IIc.1)之化合物的某些實施例中，Ar 2係選自
Figure 02_image709
、
Figure 02_image711
、
Figure 02_image713
Figure 02_image715
、
Figure 02_image717
及
Figure 02_image719
，其中#-N(R 4)-Y a-Z 2b-取代基係在能夠經取代之任何Ar 2原子處連接至Ar 2。 在Bcl-xL抑制劑係式(IIc.1)之化合物的特定實施例中，Ar 2係
Figure 02_image721
，其中#-N(R 4)-Y a-Z 2b-取代基係在能夠經取代之任何Ar 2原子處連接至Ar 2。在Bcl-xL抑制劑係式(IIc.1)之化合物的某些實施例中，Ar 2係選自
Figure 02_image723
、
Figure 02_image725
、
Figure 02_image727
、
Figure 02_image729
、
Figure 02_image731
、
Figure 02_image733
及
Figure 02_image735
，其中#-N(R 4)-Y a-Z 2b-取代基係在能夠經取代之任何Ar 2原子處連接至Ar 2。在Bcl-xL抑制劑係式(IIc.1)之化合物的特定實施例中，Ar 2係
Figure 02_image737
，其中#-N(R 4)-Y a-Z 2b-取代基係在能夠經取代之任何Ar 2原子處連接至Ar 2。 在Bcl-xL抑制劑係式(IIc.1)之化合物的某些實施例中，Ar 1係
Figure 02_image739
。 在Bcl-xL抑制劑係式(IIc.1)之化合物的某些實施例中，基團
Figure 02_image741
係選自：
Figure 02_image743
及
Figure 02_image745
。 在Bcl-xL抑制劑係式(IIc.1)之化合物的其他實施例中，基團
Figure 02_image747
係選自：
Figure 02_image749
及
Figure 02_image751
。 在Bcl-xL抑制劑係式(IIc)之化合物的某些實施例中，該化合物具有結構式(IIc.2)，
Figure 02_image753
或其鹽，其中： Ar 1、Ar 2、Z 1、Z 2a、Z 2b、R 1、R 2、R 4、R 11a、R 11b及#如上文所定義； Y a係視情況經取代之C 1-C 8伸烷基； Y b係視情況經取代之C 1-C 8伸烷基； Y c係視情況經取代之C 1-C 8伸烷基； R 23係選自H及C 1-C 4烷基； R 25係Y b-G或與Y c之原子一起形成具有4至6個環原子之環；且 G係選自多元醇、PEG4-30、鹽及在生理pH下帶電的部分。 在Bcl-xL抑制劑係式(IIc.2)之化合物的某些實施例中，Z 2a係選自O、CH 2、NH及S。在特定實施例中，Z 2a係O。在某些實施例中，式(IIc.2)之Z 2a係CR 6aR 6b。在某些實施例中，式(IIc.2)之Z 2a係S。在某些實施例中，式(IIc.2)之Z 2a係-NR 6C(O)-。在Bcl-xL抑制劑係式(IIc.2)之化合物的某些實施例中，Z 2b係選自O、CH 2、NH、NCH 3及S。在特定實施例中，Z 2b係O。在特定實施例中，Z 2b係NH。在特定實施例中，Z 2b係NCH 3。 在Bcl-xL抑制劑係式(IIc.2)之化合物的某些實施例中，Z 2b係一鍵。在一些此類實施例中，Y a係亞甲基或伸乙基。 在Bcl-xL抑制劑係式(IIc.2)之化合物的某些實施例中，Z 2b係NR 6，其中R 6如上文所定義。在一些此類實施例中，R 6與來自Y a之原子一起形成具有在3與7個之間之環原子的環烷基或雜環基環。在一些此類實施例中，該環具有5個原子。 在Bcl-xL抑制劑係式(IIc.2)之化合物的某些實施例中，Y a係伸乙基。 在Bcl-xL抑制劑係式(IIc.2)之化合物的某些實施例中，Y a係亞甲基。 在Bcl-xL抑制劑係式(IIc.2)之化合物的某些實施例中，R 4係H或甲基。 在Bcl-xL抑制劑係式(IIc.2)之化合物的某些實施例中，Y b係伸乙基或伸丙基。在特定實施例中，Y b係伸乙基。 在Bcl-xL抑制劑係式(IIc.2)之化合物的某些實施例中，Y c係伸乙基或伸丙基。在特定實施例中，Y b係伸乙基。 在Bcl-xL抑制劑係式(IIc.2)之化合物的某些實施例中，R 25與Y c之原子一起形成具有4或5個環原子之環。 在Bcl-xL抑制劑係式(IIc.2)之化合物的某些實施例中，R 23係甲基。 在Bcl-xL抑制劑係式(IIc.2)之化合物的某些實施例中，G係選自
Figure 02_image755
、
Figure 02_image757
、
Figure 02_image759
及
Figure 02_image761
，其中M係氫或帶正電之相對離子。在特定實施例中，G係
Figure 02_image763
。在特定實施例中，G係SO 3H。 在Bcl-xL抑制劑係式(IIc.2)之化合物的某些實施例中，Ar 2係選自
Figure 02_image765
、
Figure 02_image767
、
Figure 02_image769
、
Figure 02_image771
、
Figure 02_image773
及
Figure 02_image775
，其中#-N(R 4)-Y a-Z 2b-取代基係在能夠經取代之任何Ar 2原子處連接至Ar 2。 在Bcl-xL抑制劑係式(IIc.2)之化合物的特定實施例中，Ar 2係
Figure 02_image777
，其中#-N(R 4)-Y a-Z 2b-取代基係在能夠經取代之任何Ar 2原子處連接至Ar 2。在Bcl-xL抑制劑係式(IIc.2)之化合物的某些實施例中，Ar 2係選自
Figure 02_image779
、
Figure 02_image781
、
Figure 02_image783
、
Figure 02_image785
Figure 02_image787
、
Figure 02_image789
及
Figure 02_image791
，其中#-N(R 4)-Y a-Z 2b-取代基係在能夠經取代之任何Ar 2原子處連接至Ar 2。在Bcl-xL抑制劑係式(IIc.2)之化合物的特定實施例中，Ar 2係
Figure 02_image793
，其中#-N(R 4)-Y a-Z 2b-取代基係在能夠經取代之任何Ar 2原子處連接至Ar 2。 在Bcl-xL抑制劑係式(IIc.2)之化合物的某些實施例中，Ar 1係
Figure 02_image795
。 在Bcl-xL抑制劑係式(IIc.2)之化合物的某些實施例中，基團
Figure 02_image797
係選自：
Figure 02_image799
及
Figure 02_image801
。 在Bcl-xL抑制劑係式(IId)之化合物的某些實施例中，該化合物具有結構式(IId.1)，
Figure 02_image803
或其鹽，其中： Ar 1、Ar 2、Z 1、Z 2a、Z 2b、R 1、R 2、R 11a、R 11b及#如上文所定義； Y a係視情況經取代之伸烷基； Y b係視情況經取代之伸烷基； R 23係選自H及C 1-C 4烷基； G a係選自多元醇、PEG4-30、鹽及在生理pH下帶電的部分； G b係選自多元醇、PEG4-30、鹽及在生理pH下帶電的部分； 在Bcl-xL抑制劑係式(IId.1)之化合物的某些實施例中，s係1。 在Bcl-xL抑制劑係式(IId.1)之化合物的某些實施例中，s係2。 在Bcl-xL抑制劑係式(IId.1)之化合物的某些實施例中，Z 2a係選自O、NH、CH 2及S。在特定實施例中，Z 2a係O。在某些實施例中，式(IId.1)之Z 2a係CR 6aR 6b。在某些實施例中，式(IId.1)之Z 2a係S。在某些實施例中，式(IId.1)之Z 2a係-NR 6C(O)-。 在Bcl-xL抑制劑係式(IId.1)之化合物的某些實施例中，Z 2b係選自O、NH、CH 2及S。在特定實施例中，Z 2b係O。 在Bcl-xL抑制劑係式(IId.1)之化合物的某些實施例中，Y a係選自伸乙基、伸丙基及伸丁基。在特定實施例中，Y係伸乙基。 在Bcl-xL抑制劑係式(IId.1)之化合物的某些實施例中，Y a係選自伸乙基、伸丙基及伸丁基。在特定實施例中，Y係伸乙基。 在Bcl-xL抑制劑係式(IId.1)之化合物的某些實施例中，G a係選自
Figure 02_image805
、
Figure 02_image807
、
Figure 02_image809
及
Figure 02_image811
，其中M係氫或帶正電之相對離子。在特定實施例中，G a係
Figure 02_image813
。在特定實施例中，G a係SO 3H。在特定實施例中，G a係CO 2H。 在Bcl-xL抑制劑係式(IId.1)之化合物的某些實施例中，G b係選自
Figure 02_image815
、
Figure 02_image817
、
Figure 02_image819
及
Figure 02_image821
，其中M係氫或帶正電之相對離子。在特定實施例中，G b係
Figure 02_image823
。在特定實施例中，G b係SO 3H。在特定實施例中，G b係CO 2H。 在Bcl-xL抑制劑係式(IId.1)之化合物的某些實施例中，R 23係甲基。 在Bcl-xL抑制劑係式(IId.1)之化合物的某些實施例中，Ar 2係選自
Figure 02_image825
、
Figure 02_image827
、
Figure 02_image829
Figure 02_image831
、
Figure 02_image833
及
Figure 02_image835
，其中G a-Y a-N(#)-(CH 2) s-Z 2b-取代基係在能夠經取代之任何Ar 2原子處連接至Ar 2。 在Bcl-xL抑制劑係式(IId.1)之化合物的特定實施例中，Ar 2係
Figure 02_image837
，其中G a-Y a-N(#)-(CH 2) s-Z 2b-取代基係在能夠經取代之任何Ar 2原子處連接至Ar 2。在Bcl-xL抑制劑係式(IId.1)之化合物的某些實施例中，Ar 2係選自
Figure 02_image839
、
Figure 02_image841
、
Figure 02_image843
、
Figure 02_image845
Figure 02_image847
、
Figure 02_image849
及
Figure 02_image851
，其中G a-Y a-N(#)-(CH 2) s-Z 2b-取代基係在能夠經取代之任何Ar 2原子處連接至Ar 2。在Bcl-xL抑制劑係式(IId.1)之化合物的特定實施例中，Ar 2係
Figure 02_image853
，其中G a-Y a-N(#)-(CH 2) s-Z 2b-取代基係在能夠經取代之任何Ar 2原子處連接至Ar 2。 在Bcl-xL抑制劑係式(IId.1)之化合物的某些實施例中，Ar 1係
Figure 02_image855
。 在某些實施例中，式(IIa)-(IId)之R 11a及R 11b相同。在一特定實施例中，R 11a及R 11b各自為甲基。 在某些實施例中，式(IIa)-(IId)之化合物包括以下核心(C.1)-(C.21)之一：
Figure 02_image857
Figure 02_image859
Figure 02_image861
Figure 02_image863
Figure 02_image865
Figure 02_image867
可以未結合形式用於本文所述之方法中及/或包括在本文所述之ADC中的根據結構式(IIa)-(IId)之例示性Bcl-xL抑制劑包括以下化合物及/或其鹽：
應用實例編號 Bcl-xL 抑制劑化合物編號
1.1 W2.01
1.2 W2.02
1.3 W2.03
1.5 W2.05
1.6 W2.06
1.7 W2.07
1.8 W2.08
1.9 W2.09
1.10 W2.10
1.11 W2.11
1.12 W2.12
1.13 W2.13
1.14 W2.14
1.15 W2.15
1.16 W2.16
1.17 W2.17
1.18 W2.18
1.19 W2.19
1.20 W2.20
1.21 W2.21
1.22 W2.22
1.23 W2.23
1.24 W2.24
1.25 W2.25
1.26 W2.26
1.27 W2.27
1.28 W2.28
1.29 W2.29
1.30 W2.30
1.31 W2.31
1.32 W2.32
1.33 W2.33
1.34 W2.34
1.35 W2.35
1.36 W2.36
1.37 W2.37
1.38 W2.38
1.39 W2.39
1.40 W2.40
1.41 W2.41
1.42 W2.42
1.43 W2.43
1.44 W2.44
1.45 W2.45
1.46 W2.46
1.47 W2.47
1.48 W2.48
1.49 W2.49
1.50 W2.50
1.51 W2.51
1.52 W2.52
1.53 W2.53
1.54 W2.54
1.55 W2.55
1.56 W2.56
1.57 W2.57
1.58 W2.58
1.59 W2.59
1.60 W2.60
1.61 W2.61
1.62 W2.62
1.63 W2.63
1.64 W2.64
1.65 W2.65
1.66 W2.66
1.67 W2.67
1.68 W2.68
1.69 W2.69
1.70 W2.70
1.71 W2.71
1.72 W2.72
1.73 W2.73
1.74 W2.74
1.75 W2.75
1.76 W2.76
1.77 W2.77
1.78 W2.78
1.79 W2.79
1.80 W2.80
1.81 W2.81
1.82 W2.82
1.83 W2.83
1.84 W2.84
1.85 W2.85
1.86 W2.86
1.87 W2.87
1.88 W2.88
1.89 W2.89
1.90 W2.90
1.91 W2.91
值得注意的是，當本申請案之Bcl-xL抑制劑係呈結合形式時，對應於結構式(IIa)或(IIb)之#位置的氫不存在，由此形成單價基團。舉例而言，化合物W2.01(實例1.1)係6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-3-[1-({3-[2-({2-[2-(羧基甲氧基)乙氧基]乙基}胺基)乙氧基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3 , 7]癸-1-基}甲基)-5-甲基-1H-吡唑-4-基]吡啶-2-甲酸。 當其係呈未結合形式時，其具有以下結構：
Figure 02_image869
。 當ADC中包括如結構式(IIa)或(IIb)中所示之化合物時，對應於#位置之氫不存在，由此形成單價基團。
Figure 02_image871
在某些實施例中，根據結構式(IIa)至(IId)之Bcl-xL抑制劑係選自由以下組成之群：W2.01、W2.02、W2.03、W2.04、W2.05、W2.06、W2.07、W2.08、W2.09、W2.10、W2.11、W2.12、W2.13、W2.14、W2.15、W2.16、W2.17、W2.18、W2.19、W2.20、W2.21、W2.22、W2.23、W2.24、W2.25、W2.26、W2.27、W2.28、W2.29、W2.30、W2.31、W2.32、W2.33、W2.34、W2.35、W2.36、W2.37、W2.38、W2.39、W2.40、W2.41、W2.42、W2.43、W2.44、W2.45、W2.46、W2.47、W2.48、W2.49、W2.50、W2.51、W2.52、W2.53、W2.54、W2.55、W2.56、W2.57、W2.58、W2.59、W2.60、W2.61、W2.62、W2.63、W2.64、W2.65、W2.66、W2.67、W2.68、W2.69、W2.70、W2.71、W2.72、W2.73、W2.74、W2.75、W2.76、W2.77、W2.78、W2.79、W2.80、W2.81、W2.82、W2.83、W2.84、W2.85、W2.86、W2.87、W2.88、W2.89、W2.90及W2.91，或其醫藥學上可接受之鹽。 在某些實施例中，ADC或其醫藥學上可接受之鹽包含藉助於連接子連接至抗體之藥物，其中該藥物係選自由以下組成之群之Bcl-xL抑制劑：W2.01、W2.02、W2.03、W2.04、W2.05、W2.06、W2.07、W2.08、W2.09、W2.10、W2.11、W2.12、W2.13、W2.14、W2.15、W2.16、W2.17、W2.18、W2.19、W2.20、W2.21、W2.22、W2.23、W2.24、W2.25、W2.26、W2.27、W2.28、W2.29、W2.30、W2.31、W2.32、W2.33、W2.34、W2.35、W2.36、W2.37、W2.38、W2.39、W2.40、W2.41、W2.42、W2.43、W2.44、W2.45、W2.46、W2.47、W2.48、W2.49、W2.50、W2.51、W2.52、W2.53、W2.54、W2.55、W2.56、W2.57、W2.58、W2.59、W2.60、W2.61、W2.62、W2.63、W2.64、W2.65、W2.66、W2.67、W2.68、W2.69、W2.70、W2.71、W2.72、W2.73、W2.74、W2.75、W2.76、W2.77、W2.78、W2.79、W2.80、W2.81、W2.82、W2.83、W2.84、W2.85、W2.86、W2.87、W2.88、W2.89、W2.90及W2.91。 在某些實施例中，ADC或其醫藥學上可接受之鹽包含藉助於連接子連接至抗體之藥物，其中該藥物係選自由以下化合物所組成之群之Bcl-xL抑制劑，該等化合物之改良在於對應於結構式(IIa)、(IIb)、(IIc)或(IId)之#位置的氫不存在，形成單價基團： 6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-3-[1-({3-[2-({2-[2-(羧基甲氧基)乙氧基]乙基}胺基)乙氧基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}甲基)-5-甲基-1H-吡唑-4-基]吡啶-2-甲酸； 6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-3-{1-[(3,5-二甲基-7-{2-[(2-磺基乙基)胺基]乙氧基}三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}吡啶-2-甲酸； 2-{[(2-{[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基]胺基}乙基)磺醯基]胺基}-2-脫氧-D-葡萄哌喃糖； 6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1 H)-基]-3-{1-[(3,5-二甲基-7-{2-[(4-{[(3R,4R,5S,6R)-3,4,5-三羥基-6-(羥基甲基)四氫-2 H-哌喃-2-基]甲基}苯甲基)胺基]乙氧基}三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1 H-吡唑-4-基}吡啶-2-甲酸 6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-3-{1-[(3,5-二甲基-7-{2-[(3-磺基丙基)胺基]乙氧基}三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}吡啶-2-甲酸； 6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-3-{1-[(3-{2-[(2,3-二羥基丙基)胺基]乙氧基}-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}吡啶-2-甲酸； 2-({[4-({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基]胺基}甲基)苯基]磺醯基}胺基)-2-脫氧-β-D-葡萄哌喃糖； 8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-2-{6-羧基-5-[1-({3-[2-({2-[1-(β-D-葡萄哌喃糖醛醯基)-1H-1,2,3-三唑-4-基]乙基}胺基)乙氧基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}甲基)-5-甲基-1H-吡唑-4-基]吡啶-2-基}-1,2,3,4-四氫異喹啉； 3-[1-({3-[2-(2-{[4-(β-D-阿洛哌喃糖基氧基)苯甲基]胺基}乙氧基)乙氧基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}甲基)-5-甲基-1H-吡唑-4-基]-6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]吡啶-2-甲酸； 6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-3-(1-{[3,5-二甲基-7-(2-{2-[(2-磺基乙基)胺基]乙氧基}乙氧基)三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基]甲基}-5-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-甲酸； 6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-3-{1-[(3,5-二甲基-7-{2-[(2-膦醯基乙基)胺基]乙氧基}三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}吡啶-2-甲酸； 6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-3-{1-[(3,5-二甲基-7-{2-[甲基(3-磺基-L-丙胺醯基)胺基]乙氧基}三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}吡啶-2-甲酸； 6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-3-{1-[(3,5-二甲基-7-{2-[(3-膦醯基丙基)胺基]乙氧基}三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}吡啶-2-甲酸； 6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-3-{1-[(3,5-二甲基-7-{2-[(3-磺基-L-丙胺醯基)胺基]乙氧基}三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}吡啶-2-甲酸； 6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-3-(1-{[3,5-二甲基-7-(2-{2-[(3-膦醯基丙基)胺基]乙氧基}乙氧基)三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基]甲基}-5-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-甲酸； 3-{1-[(3-{2-[L-α-天冬胺醯基(甲基)胺基]乙氧基}-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}-6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]吡啶-2-甲酸； 6-{4-[({2-[2-(2-胺基乙氧基)乙氧基]乙基}[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基]胺基)甲基]苯甲基}-2,6-去水-L-古洛糖酸； 4-({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基]胺基}甲基)苯基哌喃己糖苷醛酸； 6-[1-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-1,2,3,4-四氫喹啉-7-基]-3-{1-[(3,5-二甲基-7-{2-[(2-膦醯基乙基)胺基]乙氧基}三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}吡啶-2-甲酸； 6-[1-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-1,2,3,4-四氫喹啉-7-基]-3-{1-[(3,5-二甲基-7-{2-[甲基(3-磺基-L-丙胺醯基)胺基]乙氧基}三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}吡啶-2-甲酸； 3-{1-[(3,5-二甲基-7-{2-[(2-磺基乙基)胺基]乙氧基}三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}-6-[8-([1,3]噻唑并[5,4-b]吡啶-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]吡啶-2-甲酸； 3-{1-[(3,5-二甲基-7-{2-[(2-磺基乙基)胺基]乙氧基}三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}-6-[8-([1,3]噻唑并[4,5-b]吡啶-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]吡啶-2-甲酸； 6-[1-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-1,2,3,4-四氫喹啉-7-基]-3-{1-[(3,5-二甲基-7-{2-[(2-磺基乙基)胺基]乙氧基}三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}吡啶-2-甲酸； 6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-3-{1-[(3-{2-[(2-羧基乙基)胺基]乙氧基}-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}吡啶-2-甲酸； 6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-3-{1-[(3,5-二甲基-7-{2-[(3-膦醯基丙基)(哌啶-4-基)胺基]乙氧基}三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}吡啶-2-甲酸； 3-{1-[(3-{2-[D-α-天冬胺醯基(甲基)胺基]乙氧基}-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基) 甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}-6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]吡啶-2-甲酸； 6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-3-(1-{[3-(2-{[1-(羧基甲基)哌啶-4-基]胺基}乙氧基)-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基]甲基}-5-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-甲酸； N-[(5S)-5-胺基-6-{[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基](甲基)胺基}-6-側氧基己基]-N,N-二甲基甲銨； 6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-3-{1-[(3,5-二甲基-7-{2-[哌啶-4-基(2-磺基乙基)胺基]乙氧基}三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}吡啶-2-甲酸； 6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-5-(3-膦醯基丙氧基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-3-[1-({3,5-二甲基-7-[2-(甲基胺基)乙氧基]三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}甲基)-5-甲基-1H-吡唑-4-基]吡啶-2-甲酸； 6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-3-(1-{[3-(2-{[N-(2-羧基乙基)-L-α-天冬胺醯基]胺基}乙氧基)-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基]甲基}-5-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-甲酸； 3-{1-[(3-{2-[(2-胺基乙基)(2-磺基乙基)胺基]乙氧基}-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}-6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]吡啶-2-甲酸； 6-[5-(2-胺基乙氧基)-8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-3-[1-({3,5-二甲基-7-[2-(甲基胺基)乙氧基]三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}甲基)-5-甲基-1H-吡唑-4-基]吡啶-2-甲酸； 6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)萘-2-基]-3-{1-[(3,5-二甲基-7-{2-[(3-磺基丙基)胺基]乙氧基}三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}吡啶-2-甲酸； 6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-3-{1-[(3-{2-[(2-羧基乙基)(哌啶-4-基)胺基]乙氧基}-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}吡啶-2-甲酸； 6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-3-{1-[(3,5-二甲基-7-{2-[(3-磺基-L-丙胺醯基)(2-磺基乙基)胺基]乙氧基}三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}吡啶-2-甲酸； 6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-3-{1-[(3-{2-[{2-[(2-羧基乙基)胺基]乙基}(2-磺基乙基)胺基]乙氧基}-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}吡啶-2-甲酸； 3-{1-[(3,5-二甲基-7-{2-[(3-膦醯基丙基)胺基]乙氧基}三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}-6-[8-([1,3]噻唑并[4,5-b]吡啶-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]吡啶-2-甲酸； 3-{1-[(3,5-二甲基-7-{2-[(3-膦醯基丙基)胺基]乙氧基}三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}-6-[8-([1,3]噻唑并[5,4-b]吡啶-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]吡啶-2-甲酸； 6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-5-(羧基甲氧基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-3-[1-({3,5-二甲基-7-[2-(甲基胺基)乙氧基]三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}甲基)-5-甲基-1H-吡唑-4-基]吡啶-2-甲酸； 6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-3-{1-[(3-{2-[(3-羧基丙基)(哌啶-4-基)胺基]乙氧基}-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}吡啶-2-甲酸； 6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)萘-2-基]-3-{1-[(3,5-二甲基-7-{2-[(2-磺基乙基)胺基]乙氧基}三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}吡啶-2-甲酸； 3-{1-[(3-{2-[L-α-天冬胺醯基(2-磺基乙基)胺基]乙氧基}-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}-6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]吡啶-2-甲酸； 6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-3-{1-[(3-{2-[(1,3-二羥基丙-2-基)胺基]乙氧基}-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}吡啶-2-甲酸； 6-[5-(2-胺基乙氧基)-8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-3-{1-[(3,5-二甲基-7-{2-[甲基(2-磺基乙基)胺基]乙氧基}三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基) 甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}吡啶-2-甲酸； 6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-5-{2-[(2-磺基乙基)胺基]乙氧基}-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-3-{1-[(3,5-二甲基-7-{2-[甲基(2-磺基乙基)胺基]乙氧基}三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}吡啶-2-甲酸； 6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-3-{1-[(3,5-二甲基-7-{2-[(2-磺基乙基){2-[(2-磺基乙基)胺基]乙基}胺基]乙氧基}三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}吡啶-2-甲酸； 6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-5-{2-[(2-羧基乙基)胺基]乙氧基}-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-3-{1-[(3,5-二甲基-7-{2-[甲基(2-磺基乙基)胺基]乙氧基}三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}吡啶-2-甲酸； 3-{1-[(3,5-二甲基-7-{2-[(3-膦醯基丙基)(哌啶-4-基)胺基]乙氧基}三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}-6-[8-([1,3]噻唑并[4,5-b]吡啶-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]吡啶-2-甲酸； 6-[4-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫-2H-1,4-苯并噁嗪-6-基]-3-{1-[(3,5-二甲基-7-{2-[(2-磺基乙基)胺基]乙氧基}三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}吡啶-2-甲酸； 6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-5-(3-磺基丙氧基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-3-[1-({3,5-二甲基-7-[2-(甲基胺基)乙氧基]三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}甲基)-5-甲基-1H-吡唑-4-基]吡啶-2-甲酸； 3-{1-[(3,5-二甲基-7-{2-[(2-磺基乙基)胺基]乙氧基}三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}-6-[1-([1,3]噻唑并[4,5-b]吡啶-2-基胺甲醯基)-1,2,3,4-四氫喹啉-7-基]吡啶-2-甲酸； 3-{1-[(3,5-二甲基-7-{2-[(2-磺基乙基)胺基]乙氧基}三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}-6-[8-([1,3]噻唑并[4,5-b]吡啶-2-基胺甲醯基)萘-2-基]吡啶-2-甲酸； (1ξ)-1-({2-[5-(1-{[3-(2-胺基乙氧基)-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基]甲基}-5-甲基-1H-吡唑-4-基)-6-羧基吡啶-2-基]-8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基}甲基)-1,5-去水-D-葡萄糖醇； 6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-3-{1-[(3-{2-[(3-羧基丙基)胺基]乙氧基}-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-3-基}吡啶-2-甲酸； 6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)萘-2-基]-3-{1-[(3,5-二甲基-7-{2-[(3-膦醯基丙基)胺基]乙氧基}三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}吡啶-2-甲酸； 6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-3-(1-{[3-(2-{[4-(β-D-葡萄哌喃糖基氧基)苯甲基]胺基}乙氧基)-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基]甲基}-5-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-甲酸； 3-(1-{[3-(2-{[4-(β-D-阿洛哌喃糖基氧基)苯甲基]胺基}乙氧基)-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基]甲基}-5-甲基-1H-吡唑-4-基)-6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]吡啶-2-甲酸； 3-{1-[(3-{2-[氮雜環丁烷-3-基(2-磺基乙基)胺基]乙氧基}-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}-6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]吡啶-2-甲酸； 3-{1-[(3-{2-[(3-胺基丙基)(2-磺基乙基)胺基]乙氧基}-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}-6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]吡啶-2-甲酸； 6-[1-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-1,2,3,4-四氫喹啉-7-基]-3-{1-[(3-{2-[(2-羧基乙基)胺基]乙氧基}-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}吡啶-2-甲酸； 6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-3-{1-[(3-{2-[(N 6,N 6-二甲基-L-離胺醯基)(甲基)胺基]乙氧基}-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}吡啶-2-甲酸； 3-{1-[(3-{2-[(3-胺基丙基)(甲基)胺基]乙氧基}-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基) 甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}-6-[1-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-1,2,3,4-四氫喹啉-7-基]吡啶-2-甲酸； 3-{1-[(3-{2-[氮雜環丁烷-3-基(甲基)胺基]乙氧基}-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基) 甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}-6-[1-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-1,2,3,4-四氫喹啉-7-基]吡啶-2-甲酸； N 6-(37-側氧基-2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32,35-十二氧雜三十七烷-37-基)-L-離胺醯基-N-[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基]-L-丙胺醯胺； 甲基6-[4-(3-{[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基]胺基}丙基)-1H-1,2,3-三唑-1-基]-6-脫氧-β-L-葡萄哌喃糖苷； 6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)萘-2-基]-3-{1-[(3-{2-[(2-羧基乙基)胺基]乙氧基}-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}吡啶-2-甲酸； 6-[5-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)喹啉-3-基]-3-{1-[(3,5-二甲基-7-{2-[(2-磺基乙基)胺基]乙氧基}三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}吡啶-2-甲酸； 6-[4-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)喹啉-6-基]-3-{1-[(3,5-二甲基-7-{2-[(2-磺基乙基)胺基]乙氧基}三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}吡啶-2-甲酸； 6-[5-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)喹啉-3-基]-3-{1-[(3-{2-[(2-羧基乙基)胺基]乙氧基}-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}吡啶-2-甲酸； 6-[1-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-5,6-二氫咪唑并[1,5-a]吡嗪-7(8H)-基]-3-{1-[(3,5-二甲基-7-{2-[(2-磺基乙基)胺基]乙氧基}三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}吡啶-2-甲酸； 8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-2-{6-羧基-5-[1-({3-[2-({3-[1-(β-D-葡萄哌喃糖醛醯基)-1H-1,2,3-三唑-4-基]丙基}胺基)乙氧基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}甲基)-5-甲基-1H-吡唑-4-基]吡啶-2-基}-1,2,3,4-四氫異喹啉； 6-[7-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-1H-吲哚-2-基]-3-{1-[(3,5-二甲基-7-{2-[(2-磺基乙基)胺基]乙氧基}三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}吡啶-2-甲酸； 6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-6-[3-(甲基胺基)丙基]-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-3-{1-[(3,5-二甲基-7-{2-[(2-磺基乙基)胺基]乙氧基}三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}吡啶-2-甲酸； 5-{[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基]胺基}-5-脫氧-D-阿拉伯糖醇； 1-{[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基]胺基}-1,2-二脫氧-D-阿拉伯-己糖醇； 6-[4-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)異喹啉-6-基]-3-{1-[(3,5-二甲基-7-{2-[(2-磺基乙基)胺基]乙氧基}三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}吡啶-2-甲酸； 6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-3-(1-{[3-(2-{[3-羥基-2-(羥基甲基)丙基]胺基}乙氧基)-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基]甲基}-5-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-甲酸； 1-{[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基]胺基}-1,2-二脫氧-D-赤式-戊糖醇； 6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-3-(1-{[3,5-二甲基-7-(2-{[(2S,3S)-2,3,4-三羥基丁基]胺基}乙氧基)三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基]甲基}-5-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-甲酸； 6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-3-(1-{[3-(2-{[(2S,3S,4R,5R,6R)-2,3,4,5,6,7-六羥基庚基]胺基}乙氧基)-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基]甲基}-5-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-甲酸； 6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-3-{1-[(3-{2-[({3-[(1,3-二羥基丙-2-基)胺基]丙基}磺醯基)胺基]乙氧基}-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}吡啶-2-甲酸； 6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-3-{1-[(3-{2-[(3-{[1,3-二羥基-2-(羥基甲基)丙-2-基]胺基}-3-側氧基丙基)胺基]乙氧基}-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}吡啶-2-甲酸； 6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-3-(1-{[3-(2-{[(3S)-3,4-二羥基丁基]胺基}乙氧基)-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基]甲基}-5-甲基-1 H-吡唑-4-基)吡啶-2-甲酸； 4-({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基]胺基}甲基)苯基β-D-葡萄哌喃糖苷醛酸； 3-{[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)萘-2-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基]胺基}丙基β-D-葡萄哌喃糖苷醛酸； 6-[4-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-2-氧離子基異喹啉-6-基]-3-[1-({3,5-二甲基-7-[2-(甲基胺基)乙氧基]三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}甲基)-5-甲基-1H-吡唑-4-基]吡啶-2-甲酸； 6-{8-[(1,3-苯并噻唑-2-基)胺甲醯基]-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基}-3-{1-[(3,5-二甲基-7-{2-[(2-磺基乙基)胺基]乙醯胺基}三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}吡啶-2-甲酸； 6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1 H)-基]-3-(1-{[3,5-二甲基-7-({2-[(2-磺基乙基)胺基]乙基}硫基)三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基]甲基}-5-甲基-1 H-吡唑-4-基)吡啶-2-甲酸；及 6-{8-[(1,3-苯并噻唑-2-基)胺甲醯基]-3,4-二氫異喹啉-2(1 H)-基}-3-{1-[(3,5-二甲基-7-{3-[(2-磺基乙基)胺基]丙基}三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1 H-吡唑-4-基}吡啶-2-甲酸； 及其醫藥學上可接受之鹽。 Bcl-xL抑制劑結合至並抑制抗細胞凋亡Bcl-xL蛋白質，由此誘導細胞凋亡。根據結構式(IIa)至(IId)之特定Bcl-xL抑制劑結合至及抑制Bcl-xL活性的能力可以在標準結合及活性分析中確定，包括例如Tao等人, 2014, ACS Med. Chem.Lett., 5:1088-1093中描述之TR-FRET Bcl-xL結合分析。可以用以確定Bcl-xL結合之特定TR-FRET Bcl-xL結合分析提供於以下實例4中。通常，可用作抑制劑本身且可用於本文所描述之ADC中的Bcl-xL抑制劑將在實例5之結合分析中展現小於約1 nM之K i，而且可以展現明顯更小的K i，例如小於約1、0.1或甚至0.01 nM之K i。 亦可以在基於細胞之標準細胞毒性分析，諸如Tao等人, 2014, ACS Med. Chem.Lett., 5:1088-1093中描述之FL5.12細胞及Molt-4細胞毒性分析中確定Bcl-xL抑制活性。可以用於確定能夠滲透細胞膜之特定Bcl-xL抑制劑之Bcl-xL抑制活性的特定Molt-4細胞之細胞毒性分析提供於以下實例5及6中。通常，此類可滲透細胞之Bcl-xL抑制劑將在實例5及6之Molt-4細胞毒性分析中展現小於約500 nM之EC 50，而且可以展現明顯更低之EC 50，例如小於約250、100、50、20、10或甚至5 nM之EC 50。 歸因於增溶基團之存在，預期本文所描述的許多Bcl-xL抑制劑展現較低或極低細胞滲透性，且因此將由於化合物無法跨越細胞膜而在某些細胞分析，包括實例5及6之Molt-4細胞毒性分析中不能產生相當大活性。無法自由跨越細胞膜之化合物的Bcl-xL抑制活性可以在用透性化細胞之細胞分析中確定。粒線體外膜透性化(MOMP)之過程受Bcl-2家族蛋白質控制。確切地說，促細胞凋亡Bcl-2家族蛋白質Bax及Bak促進MOMP，該等蛋白質當活化時在粒線體外膜上發生寡聚合反應並形成孔，從而引起細胞色素c(cyt c)之釋放。cyt c之釋放觸發凋亡小體之形成，而凋亡小體之形成又引起半胱天冬酶活化及使細胞經歷計劃性細胞死亡之其他事件(參見Goldstein等人 ,2005, Cell Death and Differentiation12:453-462)。Bax及Bak之寡聚合作用受抗細胞凋亡Bcl-2家庭成員，包括Bcl-2及Bcl-xL之拮抗。在依賴於Bcl-xL存活之細胞中，Bcl-xL抑制劑可以引起Bax及/或Bak之活化、MOMP、cyt c之釋放及導致細胞凋亡之下游事件。cyt c釋放之過程可以經由細胞之粒線體及胞質部分之西方墨點量測且用作細胞中細胞凋亡之替代量測方法。 作為偵測具有低細胞滲透性之Bcl-xL抑制劑的Bcl-xL抑制活性及由此引起之cyt c釋放的方式，可以用選擇性在質膜而非粒線體膜中形成孔的試劑處理細胞。確切地說，相較於粒線體膜，質膜中膽固醇/磷脂比率要高得多。因此，與低濃度的針對膽固醇之洗滌劑毛地黃皂苷一起短時間培育來選擇性透性化質膜，而不顯著影響粒線體膜。此試劑與膽固醇形成不可溶複合物，使得膽固醇與其正常磷脂結合位點隔離。此作用繼而導致在脂質雙層中形成約40-50 Å寬的孔。一旦質膜透性化，就可以洗掉能夠越過毛地黃皂苷形成之孔的胞質組分，包括細胞凋亡細胞中自粒線體釋放至細胞溶質的細胞色素C(Campos, 2006, Cytometry A 69(6):515- 523)。 通常，Bcl-xL抑制劑在實例5及6之Molt-4細胞透性化cyt c分析中將得到小於約10 nM之EC 50，儘管該等化合物可展現明顯更低之EC 50，例如小於約5、1或甚至0.5 nM。如實例6中所示，在利用非透性化細胞之標準Molt-4細胞毒性分析中不展現活性的具有低或極低細胞滲透性之Bcl-xL抑制劑，在利用透性化細胞的細胞毒性分析中展現有效功能活性，如由cyt c之釋放所量測。除細胞色素c釋放外，經歷細胞凋亡之粒線體常常損失其跨膜粒線體膜電位(Bouchier-Hayes等人, 2008, Methods 44(3): 222-228)。JC-1係一種陽離子性羰花青染料，積累於粒線體中，當粒線體健康時發紅色螢光，而當粒線體膜受損時喪失(去極化百分比；Smiley等人 ,1991, Proc . Natl . Acad . Sci . USA ,88: 3671-3675；Reers等人 ,1991: Biochemistry ,30: 4480-4486)。此信號喪失可以使用螢光計(545 nm激發及590 nm發射)於透性化細胞中偵測到且因此完全定量，增大再現性及通量。通常，Bcl-xL抑制劑在實例5及6之Molt-4細胞透性化JC-1分析中將得到小於約10 nM之EC 50，儘管該等化合物可展現明顯更低之EC 50，例如小於約5、1、0.5或甚至0.05 nM。如實例6中所展示，在用未透性化細胞之標準Molt-4細胞毒性分析中不展現活性的具有低或極低細胞滲透性之Bcl-xL抑制劑，在用透性化細胞之細胞毒性分析中，如藉由JC-1分析中跨膜粒線體膜電位之損失所量測，展現強效功能活性。低滲透性Bcl-xL抑制劑當以ADC形式投與細胞時亦展現強效活性(參見例如實例8)。 儘管相對於其他抗細胞凋亡Bcl-2家族蛋白質，結構式(IIa)至(IId)之許多Bcl-xL抑制劑選擇性或特異性抑制Bcl-xL，但Bcl-xL之選擇性及/或特異性抑制並非必然。Bcl-xL抑制劑及包含該等化合物之ADC除抑制Bcl-xL外，亦可抑制一或多種其他抗細胞凋亡Bcl-2家族蛋白質，諸如Bcl-2。在一些實施例中，Bcl-xL抑制劑及/或ADC對Bcl-xL具有選擇性及/或特異性。特異性或選擇性意為，在相同分析條件下，特定Bcl-xL抑制劑及/或ADC結合或抑制Bcl-xL之程度大於Bcl-2。在特定實施例中，Bcl-xL抑制劑及/或ADC在結合分析中對Bcl-xL展現的特異性或選擇性為Bcl-2的約10倍、100倍或甚至更高倍數。 3.2. 連接子在本文所描述之ADC中，Bcl-xL抑制劑係藉助於連接子連接至抗體。ADC中將Bcl-xL抑制劑連接至抗體之連接子可能較短、較長、呈疏水性、親水性、柔性或剛性，或者可以由各自獨立地具有一或多種以上所提到之特性的區段構成以使得該連接子可以包括具有不同特性之區段。該等連接子可以為多價的，由此使其將超過一種Bcl-xL抑制劑共價連接至抗體上之單一位點，或為單價的，由此使其將單一Bcl-xL抑制劑共價連接至抗體上之單一位點。 熟習此項技術者應瞭解，該等連接子藉由在一個位置與Bcl-xL抑制劑形成共價鍵聯且在另一位置與抗體形成共價鍵聯來將Bcl-xL抑制劑連接至抗體。該等共價鍵聯係藉由連接子上之官能基與抑制劑及抗體上之官能基之間反應而形成。如本文所使用，表述「連接子」意欲包括(i)連接子之未結合形式，其包括能夠將該連接子共價連接至Bcl-xL抑制劑之官能基及能夠將該連接子共價連接至抗體之官能基；(ii)連接子之部分結合形式，其包括能夠將該連接子共價連接至抗體之官能基且其共價連接至Bcl-xL抑制劑，或反之亦然；以及(iii)連接子之完全結合形式，其共價連接至Bcl-xL抑制劑及抗體兩者。在本文所描述之中間合成子及ADC的一些具體實施例中，包含連接子上之官能基的部分及在連接子與抗體之間形成的共價鍵聯分別以R x 及LK具體說明。 連接子較佳(但未必)對於細胞外部之條件化學穩定，且可以經設計以在細胞內部裂解、消除及/或以其他方式特異性降解。或者，可以使用未設計成在細胞內部特異性裂解或降解之連接子。在ADC之情況下，可用於將藥物連接至抗體之多種連接子係此項技術中已知的。此等連接子中之任一個，以及其他連接子，均可以用於在本文所描述之ADC中將Bcl-xL抑制劑連接至抗體。 可以用於將許多Bcl-xL抑制劑連接至抗體之例示性多價連接子描述於例如美國專利第8,399,512號；美國公開之申請案第2010/0152725號；美國專利第8,524,214號；美國專利第8,349,308號；美國公開之申請案第2013/189218號；美國公開之申請案第2014/017265號；WO 2014/093379；WO 2014/093394；WO 2014/093640中，其內容以全文引用之方式併入本文中。舉例而言，由Mersana等人開發之Fleximer®連接子技術有可能實現具有良好物理化學特性之高DAR ADC。如下文所示，Fleximer®連接子技術係基於經由一系列酯鍵將藥物分子併入溶解之聚縮醛主鏈中。該方法獲得高負載之ADC(DAR多達20)，同時維持良好物理化學特性。如以下流程中所示，此方法可以用於Bcl-xL抑制劑。
Figure 02_image873
為了利用以上流程中描繪之Fleximer®連接子技術，脂族醇可以存在於或引入Bcl-xL抑制劑中。該醇部分接著結合至丙胺酸部分，其接著以合成方式併入Fleximer®連接子中。ADC之脂質體加工在活體外釋放母體含醇藥物。 樹突狀型連接子之另外實例可以見於US 2006/116422；US 2005/271615；de Groot等人(2003) Angew. Chem. Int. Ed.42:4490-4494；Amir等人 (2003) Angew. Chem. Int. Ed.42:4494-4499；Shamis等人 (2004) J. Am. Chem. Soc.126:1726-1731；Sun等人 (2002) Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters12:2213-2215；Sun等人, (2003) Bioorganic & Medicinal Chemistry11:1761-1768；King等人 (2002) Tetrahedron Letters 43:1987-1990。 可以使用之例示性單價連接子描述於例如以下中：Nolting, 2013, Antibody-Drug Conjugates, Methods in Molecular Biology 1045:71-100；Kitson等人, 2013, CROs/CMOs - Chemica Oggi - Chemistry Today31(4): 30-36；Ducry等人, 2010, Bioconjugate Chem.21:5-13；Zhao等人, 2011, J. Med. Chem. 54:3606-3623；美國專利第7,223,837號；美國專利第8,568,728號；美國專利第8,535,678號；及WO2004010957，其各自之內容以全文引用之方式併入本文中。 藉助於實例(且非限制)，可以包括在本文所描述之ADC中的一些可裂解及不可裂解連接子描述於下。 3.2.1 可裂解連接子在某些實施例中，所選連接子係在活體外及活體內可裂解的。可裂解連接子可以包括化學或酶不穩定或可降解鍵聯。可裂解連接子一般依賴於細胞內部之過程來釋放藥物，諸如細胞質中之還原、暴露於溶酶體中之酸性條件，或經細胞內之特定蛋白酶或其他酶裂解。可裂解連接子一般併入一或多個化學或酶可裂解之化學鍵，而連接子其餘部分係不可裂解的。 在某些實施例中，連接子包含化學不穩定基團，諸如腙基及/或二硫基。包含化學不穩定基團之連接子在血漿與一些細胞質隔室之間呈現不同特性。有助於含腙連接子釋放藥物的細胞內條件係內體及溶酶體之酸性環境，而含二硫基之連接子在含有高硫醇濃度(例如麩胱甘肽)之細胞溶質中還原。在某些實施例中，包含化學不穩定基團之連接子的血漿穩定性可以藉由使用靠近該化學不穩定基團之取代基引入位阻而增加。 酸不穩定基團，諸如腙，在血液中性pH環境(pH 7.3-7.5)中全身循環期間保持完整，且在ADC內化至細胞之弱酸性內體(pH 5.0-6.5)及溶酶體(pH 4.5-5.0)隔室中後，經歷水解並釋放藥物。此pH依賴性釋放機制與藥物之非特異性釋放有關。為了增加連接子之腙基的穩定性，可以藉由化學修飾，例如取代來改變該連接子，由此允許調諧以實現在溶酶體中之較高效釋放，同時使循環中之損失減到最少。 含腙連接子可以含有另外裂解位點，諸如另外的酸不穩定裂解位點及/或酶不穩定裂解位點。包括例示性含腙連接子之ADC包括以下結構：
Figure 02_image875
其中D及Ab分別表示藥物及Ab，且n表示連接至抗體之藥物-連接子之數量。在某些連接子，諸如連接子(Ig)中，連接子包含兩個可裂解基團，即二硫基及腙部分。對於此類連接子，未修飾之游離藥物的有效釋放需要酸性pH或二硫化物還原及酸性pH。經顯示，具有單一腙裂解位點之連接子，諸如(Ih)及(Ii)係有效的。 可以包括在連接子中之其他酸不穩定基團包括含順-烏頭醯基之連接子。順-烏頭醯基化學物質使用毗鄰醯胺鍵之羧酸，在酸性條件下加速醯胺水解。 可裂解連接子亦可包括二硫基。二硫化物在生理pH下係熱力學穩定的且經設計以在內化至細胞內部時釋放藥物，其中細胞溶質提供的還原性環境明顯強於細胞外環境。二硫鍵之斷裂一般需要存在細胞質硫醇輔因子，諸如(還原)麩胱甘肽(GSH)，以使得含二硫基之連接子在循環中適度的穩定，從而在細胞溶質中選擇性釋放藥物。細胞內酶蛋白質二硫化物異構酶，或能夠裂解二硫鍵之類似酶亦可促成細胞內部二硫鍵之優先裂解。據報導，GSH在細胞中之存在濃度在0.5-10 mM範圍內，與循環中約5 μM的濃度明顯較低之GSH或半胱胺酸(含量最豐富之低分子量硫醇)形成對比。腫瘤細胞中不規律血流導致低氧狀態，使還原酶活性增強且因此具有甚至更高之麩胱甘肽濃度。在某些實施例中，可以藉由對連接子進行化學修飾，例如使用二硫鍵附近之位阻來增強含二硫基連接子之活體內穩定性。 包括例示性含二硫基連接子之ADC包括以下結構：
Figure 02_image877
其中D及Ab分別表示藥物及抗體，n表示連接至抗體之藥物-連接子的數量且R在每次出現時獨立地選自例如氫或烷基。在某些實施例中，增加二硫鍵附近之位阻將增加連接子之穩定性。當一或多個R基團係選自低碳數烷基，諸如甲基時，諸如(Ij)及(Il)之結構顯示增加之活體內穩定性。 可以使用之另一類型連接子係由酶特異性裂解之連接子。此類連接子通常係基於肽的或包括充當酶受質之肽區。基於肽之連接子在血漿及細胞外環境中往往比化學不穩定連接子穩定。肽鍵一般具有良好的血清穩定性，因為溶酶體蛋白水解酶由於內源性抑制劑及相較於溶酶體之不利地高血液pH值而在血液中具有極低活性。藥物自抗體釋放之發生尤其歸因於溶酶體蛋白酶，例如組織蛋白酶及纖維蛋白溶酶之作用。此等蛋白酶在某些腫瘤組織可以較高含量存在。在某些實施例中，連接子可藉由溶酶體酶裂解。在某些實施例中，連接子可藉由溶酶體酶裂解，且該溶酶體酶係組織蛋白酶B。在某些實施例中，連接子可藉由溶酶體酶裂解，且該溶酶體酶係β-葡糖醛酸酶或β-半乳糖苷酶。在某些實施例中，連接子可藉由溶酶體酶裂解，且該溶酶體酶係β-葡糖醛酸酶。在某些實施例中，連接子可藉由溶酶體酶裂解，且該溶酶體酶係β-半乳糖苷酶。 熟習此項技術者認識到在血漿中穩定且又易於經溶酶體酶裂解之可裂解連接子的重要性。在某些實施例中，本文揭示可藉由溶酶體酶β-葡糖醛酸酶或β-半乳糖苷酶裂解之連接子，該等連接子顯示改善之血漿穩定性及減少的小分子藥物之非特異性釋放。 在例示性實施例中，可裂解肽係選自四肽，諸如Gly-Phe-Leu-Gly、Ala-Leu-Ala-Leu；或二肽，諸如Val-Cit、Val-Ala及Phe-Lys。在某些實施例中，由於較長肽具有疏水性，故相對於較長多肽，二肽較佳。 已經描述可用於將藥物，諸如多柔比星、絲裂黴素、喜樹鹼、他利黴素(tallysomycin)及奧瑞他汀(auristatin)/奧瑞他汀家族成員連接至抗體的多種基於二肽之可裂解連接子(參見Dubowchik等人, 1998, J. Org. Chem.67:1866-1872；Dubowchik等人, 1998, Bioorg. Med. Chem. Lett.8:3341-3346；Walker等人, 2002, Bioorg. Med. Chem. Lett.12:217-219；Walker等人, 2004, Bioorg. Med. Chem. Lett.14:4323-4327；及Francisco等人, 2003, Blood102:1458-1465，其各自之內容以引用之方式併入本文中)。所有此等二肽連接子，或此等二肽連接子之修飾形式，均可以用於本文所描述之ADC中。可以使用之其他二肽連接子包括ADC，諸如Seattle Genetics之本妥昔單抗(Brentuximab Vendotin) SGN-35(Adcetris™)、Seattle Genetics SGN-75(抗CD-70，MC-單甲基奧瑞他汀F(MMAF)、Celldex Therapeutics之吉巴妥木單抗(glembatumumab)(CDX-011)(抗NMB，Val-Cit-單甲基奧瑞他汀E(MMAE)及Cytogen PSMA-ADC(PSMA-ADC-1301)(抗PSMA，Val-Cit-MMAE)中所發現之連接子。 酶可裂解連接子可以包括自分解型間隔基以將藥物與酶裂解位點空間分離。藥物與肽連接子之直接連接可以引起藥物之胺基酸加合物的蛋白質水解釋放，由此削弱其活性。使用自分解型間隔基允許在醯胺鍵水解時消除具有完全活性的未化學修飾之藥物。 一種自分解型間隔基係雙官能對胺基苯甲醇基團，其經由胺基連接至肽，形成醯胺鍵，同時含有胺之藥物可以經由胺基甲酸酯官能基連接至連接子之苯甲基羥基(得到胺基甲酸對醯胺基苯甲酯，PABC)。所得前藥在蛋白酶介導之裂解後活化，引起1,6-消除反應，釋放未修飾之藥物、二氧化碳及剩餘連接基團。以下流程描繪胺基甲酸對胺基苯甲酯之斷裂及藥物之釋放：
Figure 02_image879
其中X-D表示未修飾之藥物。此自分解型基團之雜環變體亦已描述。參見美國專利第7,989,434號。 在某些實施例中，酶可裂解連接子係基於β-葡糖醛酸之連接子。經由溶酶體酶β-葡糖醛酸酶裂解β-葡糖醛酸糖苷鍵可以促進藥物之釋放。此酶在溶酶體內大量存在且在一些腫瘤類型中過度表現，而在細胞外部酶活性較低。基於β-葡糖醛酸之連接子可以用於避開ADC由於β-葡糖醛酸之親水性而經歷聚集之傾向。在某些實施例中，較佳將基於β-葡糖醛酸之連接子作為連接至疏水性藥物之ADC的連接子。以下流程描繪藥物自含有基於β-葡糖醛酸之連接子之ADC釋放：
Figure 02_image881
已經描述可用於將藥物，諸如奧瑞他汀、喜樹鹼及多柔比星類似物、CBI小溝結合物及匹斯伯林(psymberin)連接至抗體的多種基於β-葡糖醛酸之可裂解連接子(參見Jeffrey等人, 2006, Bioconjug. Chem.17:831-840；Jeffrey等人, Bioorg. Med. Chem. Lett.17:2278-2280；及Jiang等人, 2005, J. Am. Chem. Soc.127:11254-11255，其各自之內容以引用之方式併入本文中)。所有此等基於β-葡糖醛酸之連接子均可以用於本文所描述之ADC中。在某些實施例中，酶可裂解連接子係基於β-半乳糖苷之連接子。β-半乳糖苷在溶酶體內大量存在，而在細胞外部酶活性較低。另外，含有酚基之Bcl-xL抑制劑可以經由酚類氧與連接子共價鍵結。美國公開之申請案第2009/0318668號中描述的一個此類連接子依賴於這樣一種方法，在該方法中使用二胺基乙烷「SpaceLink」結合傳統的基於「PABO」之自分解型基團來遞送酚類。以下使用本發明之Bcl-xL抑制劑示意性描繪連接子之裂解。
Figure 02_image883
可裂解連接子可以包括不可裂解部分或區段，及/或可裂解區段或部分可以包括在另外的不可裂解連接子中以使其可裂解。僅舉例而言，聚乙二醇(PEG)及相關聚合物可以在聚合物主鏈中包括可裂解基團。舉例而言，聚乙二醇或聚合物連接子可以包括一或多個可裂解基團，諸如二硫基、腙或二肽。 可以包括在連接子中的其他可降解鍵聯包括(但不限於)由PEG羧酸或活化PEG羧酸與生物活性劑上之醇基反應形成的酯鍵聯，其中此類酯基一般在生理條件下水解以釋放生物活性劑。水解可降解鍵聯包括(但不限於)碳酸酯鍵聯；由胺與醛反應產生之亞胺鍵聯；由醇與磷酸基團反應形成之磷酸酯鍵聯；作為醛與醇之反應產物的縮醛鍵聯；作為甲酸與醇之反應產物之原酸酯鍵聯；以及由胺基磷酸酯基團(包括(但不限於)在聚合物末端)及寡核苷酸之5'羥基形成之寡核苷酸鍵聯。 在某些實施例中，連接子包含酶可裂解肽部分，例如包含結構式(IVa)、(IVb)、(IVc)或(IVd)之連接子：
Figure 02_image885
或其醫藥學上可接受之鹽，其中： 肽表示可藉由溶酶體酶裂解之肽(以N→C說明，其中肽包括胺基及羧基「末端」)； T表示包含一或多個乙二醇單元或一個伸烷基鏈或其組合之聚合物； R a係選自氫、C 1 - 6烷基、SO 3H及CH 2SO 3H； R y係氫或C 1 - 4烷基-(O) r-(C 1 - 4伸烷基) s-G 1或C 1 - 4烷基-(N)-[(C 1 - 4伸烷基)-G 1] 2； R z係C 1 - 4烷基-(O) r-(C 1 - 4伸烷基) s-G 2； G 1係SO 3H、CO 2H、PEG 4-32或糖部分； G 2係SO 3H、CO 2H或PEG 4-32部分； r為0或1； s為0或1； p係在0至5範圍內之整數； q為0或1； x為0或1； y為0或1；
Figure 02_image887
表示該連接子與該Bcl-xL抑制劑之連接點；且 *指示與該連接子之其餘部分之連接點。 在某些實施例中，連接子包含酶可裂解肽部分，例如包含結構式(IVa)、(IVb)(IVc)或(IVd)之連接子，或其醫藥學上可接受之鹽。 在某些實施例中，該肽係選自三肽或二肽。在特定實施例中，該二肽係選自：Val-Cit；Cit-Val；Ala-Ala；Ala-Cit；Cit-Ala；Asn-Cit；Cit-Asn；Cit-Cit；Val-Glu；Glu-Val；Ser-Cit；Cit-Ser；Lys-Cit；Cit-Lys；Asp-Cit；Cit-Asp；Ala-Val；Val-Ala；Phe-Lys；Lys-Phe；Val-Lys；Lys-Val；Ala-Lys；Lys-Ala；Phe-Cit；Cit-Phe；Leu-Cit；Cit-Leu；Ile-Cit；Cit-Ile；Phe-Arg；Arg-Phe；Cit-Trp；及Trp-Cit；或其醫藥學上可接受之鹽。 可以包括在本文所描述之ADC中的根據結構式(IVa)之連接子之例示性實施例包括以下所示之連接子(如所示，該等連接子包括適於將連接子共價連接至抗體之基團)：
Figure 02_image889
Figure 02_image891
Figure 02_image893
可以包括在本文所描述之ADC中的根據結構式(IVb)、(IVc)或(IVd)之連接子之例示性實施例包括以下所示之連接子(如所示，該等連接子包括適於將連接子共價連接至抗體之基團)：
Figure 02_image895
Figure 02_image897
Figure 02_image899
Figure 02_image901
Figure 02_image903
Figure 02_image905
在某些實施例中，連接子包含酶可裂解肽部分，例如包含結構式(Va)、(Vb)、(Vc)、(Vd)或(Ve)之連接子：
Figure 02_image907
Figure 02_image909
或其醫藥學上可接受之鹽，其中： q為0或1； r為0或1； X 1係CH 2、O或NH；
Figure 02_image911
表示該連接子與該藥物之連接點；且 *指示與該連接子之其餘部分之連接點。 可以包括在本文所描述之ADC中的根據結構式(Va)之連接子之例示性實施例包括以下所示之連接子(如所示，該等連接子包括適於將連接子共價連接至抗體之基團)：
Figure 02_image913
Figure 02_image915
Figure 02_image917
Figure 02_image919
Figure 02_image921
可以包括在本文所描述之ADC中的根據結構式(Vb)之連接子之例示性實施例包括以下所示之連接子(如所示，該等連接子包括適於將連接子共價連接至抗體之基團)：
Figure 02_image923
Figure 02_image925
Figure 02_image927
可以包括在本文所描述之ADC中的根據結構式(Vc)之連接子之例示性實施例包括以下所示之連接子(如所示，該等連接子包括適於將連接子共價連接至抗體之基團)：
Figure 02_image929
Figure 02_image931
Figure 02_image933
可以包括在本文所描述之ADC中的根據結構式(Vd)之連接子之例示性實施例包括以下所示之連接子(如所示，該等連接子包括適於將連接子共價連接至抗體之基團)：
Figure 02_image935
Figure 02_image937
可以包括在本文所描述之ADC中的根據結構式(Ve)之連接子之例示性實施例包括以下所示之連接子(如所示，該等連接子包括適於將連接子共價連接至抗體之基團)：
Figure 02_image939
3.2.2 不可裂解連接子儘管可裂解連接子可以提供某些益處，但構成本文所描述之ADC的連接子不必為可裂解的。對於不可裂解連接子，藥物釋放不取決於血漿與一些細胞質隔室之間的特性差異。假定藥物之釋放係在ADC經由抗原介導之內吞作用內化之後發生且遞送至溶酶體隔室，在該隔室中，抗體經由細胞內蛋白質水解降解而降解成胺基酸層面。此過程釋放藥物衍生物，該衍生物係由藥物、連接子及與該連接子共價連接之胺基酸殘基形成。相較於含可裂解連接子之結合物，由含不可裂解連接子之結合物得到的胺基酸藥物代謝物具有較高親水性及一般較低之膜滲透性，由此產生較弱旁側效應及較低毒性。一般而言，含不可裂解連接子之ADC在循環中之穩定性大於含可裂解連接子之ADC。不可裂解連接子可以為伸烷基鏈，或可以具有聚合物性質，諸如基於聚烷二醇聚合物、醯胺聚合物，或可以包括由伸烷基鏈、聚烷二醇及/或醯胺聚合物構成之區段。在某些實施例中，連接子包含具有1至6個乙二醇單元之聚乙二醇區段。 已經描述用於將藥物連接至抗體之多種不可裂解連接子。(參見，Jeffrey等人, 2006, Bioconjug. Chem.17;831-840；Jeffrey等人, 2007, Bioorg. Med. Chem. Lett.17:2278-2280；及Jiang等人, 2005, J. Am. Chem. Soc.127:11254-11255，其內容以引用之方式併入本文中)。所有此等連接子均可包括在本文所描述之ADC中。 在某些實施例中，該連接子係在活體內不可裂解的，例如根據結構式(VIa)、(VIb)、(VIc)或(VId)之連接子(如所示，連接子包括適於將連接子共價連接至抗體之基團)：
Figure 02_image941
Figure 02_image943
或其醫藥學上可接受之鹽，其中： R a係選自氫、烷基、磺酸酯及甲基磺酸酯； R x 係包括能夠將連接子共價連接至抗體之官能基的部分；且
Figure 02_image945
表示連接子與Bcl-xL抑制劑之連接點。 可以包括在本文所描述之ADC中的根據結構式(VIa)至(VId)之連接子之例示性實施例包括以下所示之連接子(如所示，該等連接子包括適於將連接子共價連接至抗體之基團，且「
Figure 02_image947
」表示與Bcl-xL抑制劑之連接點)：
Figure 02_image949
3.2.3 用於將連接子連接至抗 EGFR 抗體之基團連接基團可以具有親電子性且包括：順丁烯二醯亞胺基、活化之二硫化物、活性酯(諸如NHS酯及HOBt酯)、鹵代甲酸酯、酸鹵化物、烷基及苯甲基鹵化物，諸如鹵代乙醯胺。如下文所論述，亦存在可以根據本發明使用的有關「自穩定」順丁烯二醯亞胺及「橋連二硫化物」之新興技術。 據觀察，ADC中藥物-連接子之損失歸因於順丁烯二醯亞胺與白蛋白、半胱胺酸或麩胱甘肽之交換過程(Alley等人, 2008, Bioconjugate Chem.19: 759-769)。此在溶劑可及結合位點尤為常見，而部分可及且具有帶正電環境之位點促進順丁烯二醯亞胺環水解(Junutula等人, 2008, Nat. Biotechnol.26: 925-932)。公認的解決方法係水解由結合形成之琥珀醯亞胺，因為其對自抗體解離具有抗性，由此使ADC在血清中穩定。先前已報導，琥珀醯亞胺環在鹼性條件下將經歷水解(Kalia等人, 2007, Bioorg. Med. Chem. Lett. 17 :6286-6289)。在抗體結合條件下自發水解得到穩定性改善之ADC物種的「自穩定」順丁烯二醯亞胺基之一個實例示意性描繪於下。參見美國公開之申請案第2013/0309256號；國際申請公開案第WO 2013/173337號；Tumey等人, 2014, Bioconjugate Chem. 25: 1871-1880；及Lyon等人, 2014, Nat. Biotechnol.32: 1059-1062。因此，順丁烯二醯亞胺連接基團與抗體之硫氫基反應，得到中間物琥珀醯亞胺環。該連接基團之水解形式對在血漿蛋白質存在下之解離具有抗性。
Figure 02_image951
如以上所示，連接子之順丁烯二醯亞胺環可以與抗體Ab反應，形成呈琥珀醯亞胺形式(封閉形式)或琥珀醯胺形式(開放形式)之共價連接。 Polytherics揭示一種用於橋連由天然鉸鏈二硫鍵還原得到的一對硫氫基之方法。參見Badescu等人, 2014, Bioconjugate Chem.25:1124-1136。以下示意性描繪該反應。此方法之益處係能夠藉由IgG之完全還原(得到4對硫氫基)，隨後與4當量烷基化劑反應而合成均質的DAR4 ADC。亦要求含有「橋連之二硫化物」之ADC具有增加之穩定性。
Figure 02_image953
類似地，如以下所描繪，已開發出能夠橋連一對硫氫基之順丁烯二醯亞胺衍生物。參見美國公開之申請案第2013/0224228號。
Figure 02_image955
在某些實施例中，連接部分包含結構式(VIIa)、(VIIb)或(VIIc)：
Figure 02_image957
或其醫藥學上可接受之鹽，其中： R q係H或-O-(CH 2CH 2O) 11-CH 3； x係0或1； y係0或1； G 3係-CH 2CH 2CH 2SO 3H或-CH 2CH 2O-(CH 2CH 2O) 11-CH 3； R w係-O-CH 2CH 2SO 3H或-NH(CO)-CH 2CH 2O-(CH 2CH 2O) 12-CH 3；且 *指示與該連接子之其餘部分之連接點。 在某些實施例中，連接子包含根據結構式(VIIIa)、(VIIIb)或(VIIIc)之區段：
Figure 02_image959
或其水解衍生物或醫藥學上可接受之鹽，其中： R q係H或-O-(CH 2CH 2O) 11-CH 3； x係0或1； y係0或1； G 3係-CH 2CH 2CH 2SO 3H或-CH 2CH 2O-(CH 2CH 2O) 11-CH 3； R w係-O-CH 2CH 2SO 3H或-NH(CO)-CH 2CH 2O-(CH 2CH 2O) 12-CH 3； *表示與該連接子之其餘部分之連接點；且
Figure 02_image961
表示該連接子與該抗體之連接點。 可以包括在本文所描述之ADC中的根據結構式(VIIa)及(VIIb)之連接子之例示性實施例包括以下所示之連接子(如所示，該等連接子包括適於將連接子共價連接至抗體之基團)：
Figure 02_image963
Figure 02_image965
Figure 02_image967
Figure 02_image969
Figure 02_image971
Figure 02_image973
可以包括在本文所描述之ADC中的根據結構式(VIIc)之連接子之例示性實施例包括以下所示之連接子(如所示，該等連接子包括適於將連接子共價連接至抗體之基團)：
Figure 02_image975
Figure 02_image977
在某些實施例中，L係選自由呈封閉形式或開放形式之以下各物組成之群：IVa.1-IVa.8、IVb.1-IVb.19、IVc.1-IVc.7、IVd.1-IVd.4、Va.1-Va.12、Vb.1-Vb.10、Vc.1-Vc.11、Vd.1-Vd.6、Ve.1-Ve.2、VIa.1、VIc.1-VIc.2、VId.1-VId.4、VIIa.1-VIIa.4、VIIb.1-VIIb.8、VIIc.1-VIIc.6，及其醫藥學上可接受之鹽。 在某些實施例中，L係選自由以下組成之群：IVb.2、IVc.5、IVc.6、IVc.7、IVd.4、Vb.9、VIIa.1、VIIa.3、VIIc.1、VIIc.4及VIIc.5，其中各連接子之順丁烯二醯亞胺與該抗體Ab反應，形成呈琥珀醯亞胺形式(封閉形式)或琥珀醯胺形式(開放形式)之共價連接，及其醫藥學上可接受之鹽。 在某些實施例中，L係選自由以下組成之群：IVb.2、IVc.5、IVc.6、IVd.4、VIIa.1、VIIa.3、VIIc.1、VIIc.4、VIIc.5，其中各連接子之順丁烯二醯亞胺與抗體Ab反應，形成呈琥珀醯亞胺形式(封閉形式)或琥珀醯胺形式(開放形式)之共價連接，及其醫藥學上可接受之鹽。 在某些實施例中，L係選自由以下組成之群：IVb.2、VIIa.3、IVc.6及VIIc.1，其中
Figure 02_image979
係與藥物D之連接點且@係與LK之連接點，其中當該連接子係呈如下文所示開放形式時，@可以在緊鄰其之羧酸的α位或β位：
Figure 02_image981
Figure 02_image983
3.2.3 連接子選擇之考慮因素如熟習此項技術者所知，選擇用於特定ADC之連接子可能受多種因素影響，包括(但不限於)與抗體之連接位點(例如lys、cys或其他胺基酸殘基)、藥物藥效基團之結構限制及藥物之親脂性。選擇用於ADC之具體連接子應當尋求平衡此等有關特定抗體/藥物組合之不同因素。有關受ADC中連接子選擇影響之因素的評述，參見Nolting, 第5章「Linker Technology in Antibody-Drug Conjugates」, Antibody-Drug Conjugates: Methods in Molecular Biology,第1045卷, 第71-100頁, Laurent Ducry (編), Springer Science & Business Medica, LLC, 2013。 舉例而言，據觀察ADC可殺滅抗原陽性腫瘤細胞附近存在的旁側抗原陰性細胞。ADC殺滅旁側細胞之機制表明，在ADC細胞內加工期間形成之代謝產物可能起到作用。由ADC在抗原陽性細胞中代謝產生的中性細胞毒性代謝物看來在旁側細胞殺滅方面起到作用，而帶電代謝物受阻止而無法擴散穿過膜進入介質中並因此不會影響旁側殺滅作用。在某些實施例中，選擇的連接子會減弱由ADC之細胞代謝物引起的旁側殺滅作用。在某些實施例中，選擇的連接子可增加旁側殺滅作用。 連接子之特性亦可能影響在使用及/或儲存條件下ADC之聚集。通常，文獻中報導的ADC含有每個抗體分子不超過3-4個藥物分子(參見例如，Chari, 2008, Acc Chem Res41:98-107)。獲得更高藥物與抗體比(「DAR」)之嘗試由於ADC之聚集而常常失敗，特別是當藥物及連接子均具有疏水性時(King等人, 2002, J Med Chem45:4336-4343；Hollander等人, 2008, Bioconjugate Chem19:358-361；Burke等人, 2009 Bioconjugate Chem20:1242-1250)。在許多情況下，DAR高於3-4可以有利地作為增加效力之方式。在Bcl-xL抑制劑具有疏水性之情況下，可能需要選擇親水性相對較強之連接子作為減少ADC聚集之方式，尤其是在希望DAR大於3-4之情況下。因此，在某些實施例中，連接子併入減少在儲存及/或使用期間ADC之聚集的化學部分。連接子可以併入極性或親水性基團，諸如帶電基團或在生理pH下變得帶電的基團，以減少ADC之聚集。舉例而言，連接子可以併入帶電基團，諸如鹽或在生理pH下去質子化(例如羧酸酯)或質子化(例如胺)之基團。 據報導可得到高達20之DAR且可以用於將多種Bcl-xL抑制劑連接至抗體的例示性多價連接子描述於以下中：美國專利第8,399,512號；美國公開之申請案第2010/0152725號；美國專利第8,524,214號；美國專利第8,349,308號；美國公開之申請案第2013/189218號；美國公開之申請案第2014/017265號；WO 2014/093379；WO 2014/093394；WO 2014/093640，其內容以全文引用之方式併入本文中。 在特定實施例中，如藉由尺寸排阻層析法(SEC)所測定，在儲存或使用期間ADC之聚集小於約40%。在特定實施例中，如藉由尺寸排阻層析法(SEC)所測定，在儲存或使用期間ADC之聚集小於35%，諸如小於約30%，諸如小於約25%，諸如小於約20%，諸如小於約15%，諸如小於約10%，諸如小於約5%，諸如小於約4%，或甚至更低。 4. ADC 合成子抗體-藥物結合物合成子係用於形成ADC之合成中間物。該等合成子一般係根據結構式(III)之化合物：
Figure 02_image985
或其醫藥學上可接受之鹽，其中D係如先前所描述之Bcl-xL抑制劑，L係如先前所描述之連接子，且R x 係適於將合成子共價連接至抗體之反應性基團。 在具體實施例中，該等中間物合成子係根據以下結構式(IIIa)、(IIIb)、(IIIc)及(IIId)之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中Ar 1、Ar 2、Z 1、Z 2a、Z 2b、R'、R 1、R 2、R 4、R 11a、R 11b、R 12及R 13分別如先前關於結構式(IIa)、(IIb)、(IIc)及(IId)所定義，L係如先前所描述之連接子且R x係如以上所描述之官能基：
Figure 02_image987
Figure 02_image989
為了合成ADC，使根據結構式(III)之中間物合成子或其鹽與所關注抗體在使官能基R x 與抗體上之「互補」官能基F x反應形成共價鍵聯的條件下接觸。
Figure 02_image991
基團R x及F x之身分將取決於用於將合成子連接至抗體之化學物質。一般而言，所用化學物質不應改變抗體之完整性，例如其結合其靶之能力。較佳地，經結合抗體之結合特性與未結合抗體之結合特性極其類似。用於將分子結合至諸如抗體之生物分子的多種化學物質及技術係此項技術中已知的且特別是結合至抗體之化學物質及技術係眾所周知的。參見例如，Amon等人, 「Monoclonal Antibodies For Immunotargeting Of Drugs In Cancer Therapy」, Monoclonal Antibodies And Cancer Therapy, Reisfeld等人編, Alan R. Liss, Inc., 1985；Hellstrom等人, 「Antibodies For Drug Delivery」, Controlled Drug Delivery, Robinson等人編, Marcel Dekker, Inc., 第2版, 1987；Thorpe, 「Antibody Carriers Of Cytotoxic Agents In Cancer Therapy: A Review」, Monoclonal Antibodies '84: Biological And Clinical Applications, Pinchera等人編, 1985；「Analysis, Results, and Future Prospective of the Therapeutic Use of Radiolabeled Antibody In Cancer Therapy」, Monoclonal Antibodies For Cancer Detection And Therapy, Baldwin等人編, Academic Press, 1985；Thorpe等人, 1982, Immunol. Rev. 62:119-58；PCT公開案WO 89/12624。此等化學物質中之任一種均可以用於將合成子連接至抗體。 通常，合成子係連接至抗體胺基酸殘基之側鏈，包括例如可及離胺酸殘基之一級胺基或可及半胱胺酸殘基之硫氫基。游離硫氫基可以藉由還原鏈間二硫鍵獲得。在某些實施例中，LK係與抗hEGFR抗體Ab上之胺基形成的鍵聯。在某些實施例中，LK係醯胺、硫醚或硫脲。在某些實施例中，LK係醯胺或硫脲。在某些實施例中，LK係與抗hEGFR抗體Ab上之硫氫基形成的鍵聯。在某些實施例中，LK係硫醚。在某些實施例中，LK係醯胺、硫醚或硫脲；且m係在1至8範圍內之整數。 可用於將合成子連接至可及離胺酸殘基之多種官能基R x及化學物質係已知的，且包括例如(但不限於)NHS-酯及異硫氰酸酯。 可用於將合成子連接至可及半胱胺酸殘基之游離硫氫基的多種官能基R x及化學物質係已知的，且包括例如(但不限於)鹵代乙醯基及順丁烯二醯亞胺。 然而，結合化學反應不限於可用的側鏈基團。側鏈，諸如胺，可以藉由將適當小分子連接至該胺而轉化成其他有用基團，諸如羥基。可以使用此策略，藉由將多官能小分子結合至抗體之可及胺基酸殘基之側鏈來增加抗體上可用連接位點之數量。接著，適於將合成子共價連接至此等「經轉化」官能基之官能基R x 被包括在合成子中。 抗體亦可經工程改造成包括供結合之胺基酸殘基。將抗體工程改造成包括可用於在ADC之情況下結合藥物之非基因編碼之胺基酸殘基的方法，以及可用於將合成子連接至該等非編碼胺基酸之化學物質及官能基描述於Axup等人, 2003, Proc Natl Acad Sci109:16101-16106及Tian等人, 2014, Proc Natl Acad Sci111:1776-1771中。 可用於製備本文所描述之ADC的例示性合成子包括(但不限於)下表5中所列之以下合成子。 表 5
實例編號 合成子代碼 合成子結構
2.1 CZ
Figure 02_image993
2.2 DH
Figure 02_image995
2.4 EP
Figure 02_image997
2.5 EF
Figure 02_image999
2.6 EG
Figure 02_image1001
2.7 EH
Figure 02_image1003
2.8 ER
Figure 02_image1005
2.9 ES
Figure 02_image1007
2.10 EQ
Figure 02_image1009
2.11 EU
Figure 02_image1011
2.12 EV
Figure 02_image1013
2.13 EW
Figure 02_image1015
2.14 EX
Figure 02_image1017
2.15 EY
Figure 02_image1019
2.16 EZ
Figure 02_image1021
2.17 FD
Figure 02_image1023
2.18 FS
Figure 02_image1025
2.19 FI
Figure 02_image1027
2.20 FV
Figure 02_image1029
2.21 GC
Figure 02_image1031
2.22 GB
Figure 02_image1033
2.23 FW
Figure 02_image1035
2.24 GD
Figure 02_image1037
2.25 GK
Figure 02_image1039
2.26 GJ
Figure 02_image1041
2.27 GW
Figure 02_image1043
2.28 HF
Figure 02_image1045
2.29 HG
Figure 02_image1047
2.30 HP
Figure 02_image1049
2.31 HR
Figure 02_image1051
2.32 HU
Figure 02_image1053
2.33 HT
Figure 02_image1055
2.34 HV
Figure 02_image1057
2.35 HZ
Figure 02_image1059
2.36 IA
Figure 02_image1061
2.37 IF
Figure 02_image1063
2.38 IG
Figure 02_image1065
2.39 IH
Figure 02_image1067
2.40 IJ
Figure 02_image1069
2.41 IK
Figure 02_image1071
2.42 IL
Figure 02_image1073
2.43 IM
Figure 02_image1075
2.44 IO
Figure 02_image1077
2.45 IP
Figure 02_image1079
2.46 IS
Figure 02_image1081
2.47 IU
Figure 02_image1083
2.48 IV
Figure 02_image1085
2.49 IZ
Figure 02_image1087
2.50 JD
Figure 02_image1089
2.51 JF
Figure 02_image1091
2.52 JK
Figure 02_image1093
2.53 JJ
Figure 02_image1095
2.54 JL
Figure 02_image1097
2.55 FE
Figure 02_image1099
2.56 GG
Figure 02_image1101
2.57 GM
Figure 02_image1103
2.58 HD
Figure 02_image1105
2.59 HS
Figure 02_image1107
2.60 HW
Figure 02_image1109
2.61 HX
Figure 02_image1111
2.62 HY
Figure 02_image1113
2.63 IB
Figure 02_image1115
2.64 IE
Figure 02_image1117
2.65 II
Figure 02_image1119
2.66 KY
Figure 02_image1121
2.67 IW
Figure 02_image1123
2.68 IY
Figure 02_image1125
2.69 JA
Figure 02_image1127
2.77 FA
Figure 02_image1129
2.78 FJ
Figure 02_image1131
2.79 FK
Figure 02_image1133
2.80 FQ
Figure 02_image1135
2.81 FR
Figure 02_image1137
2.82 JE
Figure 02_image1139
2.83 JM
Figure 02_image1141
2.84 LE
Figure 02_image1143
2.85 LH
Figure 02_image1145
2.86 LJ
Figure 02_image1147
2.87 MA
Figure 02_image1149
2.88 MD
Figure 02_image1151
2.89 MG
Figure 02_image1153
2.90 MS
Figure 02_image1155
2.91 MR
Figure 02_image1157
2.92 MQ
Figure 02_image1159
2.93 MZ
Figure 02_image1161
2.94 NA
Figure 02_image1163
2.95 NB
Figure 02_image1165
2.96 NP
Figure 02_image1167
2.97 NN
Figure 02_image1169
2.98 NO
Figure 02_image1171
2.101 OK
Figure 02_image1173
2.102 OW
Figure 02_image1175
2.103 PC
Figure 02_image1177
2.104 PI
Figure 02_image1179
2.105 PJ
Figure 02_image1181
2.106 PU
Figure 02_image1183
2.107 PV
Figure 02_image1185
2.108 PW
Figure 02_image1187
2.109 QW
Figure 02_image1189
2.110 RM
Figure 02_image1191
2.111 RR
Figure 02_image1193
2.112 SJ
Figure 02_image1195
2.113 SM
Figure 02_image1197
2.114 SN
Figure 02_image1199
2.115 SS
Figure 02_image1201
2.116 TA
Figure 02_image1203
2.117 TW
Figure 02_image1205
2.118 ST
Figure 02_image1207
2.119 ZL
Figure 02_image1209
2.120 SX
Figure 02_image1211
2.121 SW
Figure 02_image1213
2.122 TV
Figure 02_image1215
2.123 SZ
Figure 02_image1217
2.124 ZM
Figure 02_image1219
2.125 SV
Figure 02_image1221
2.126 SY
Figure 02_image1223
2.127 TK
Figure 02_image1225
2.128 TR
Figure 02_image1227
2.129 TY
Figure 02_image1229
2.130 TX
Figure 02_image1231
2.131 TZ
Figure 02_image1233
2.132 UA
Figure 02_image1235
2.133 UJ
Figure 02_image1237
2.134 UK
Figure 02_image1239
2.135 UU
Figure 02_image1241
2.136 UV
Figure 02_image1243
2.137 UZ
Figure 02_image1245
2.138 VB
Figure 02_image1247
2.139 VC
Figure 02_image1249
2.140 VS
Figure 02_image1251
2.141 VT
Figure 02_image1253
2.142 VY
Figure 02_image1255
2.143 WI
Figure 02_image1257
2.144 WK
Figure 02_image1259
2.145 WP
Figure 02_image1261
2.146 XD
Figure 02_image1263
2.147 XK
Figure 02_image1265
2.148 XL
Figure 02_image1267
2.149 YJ
Figure 02_image1269
2.150 YQ
Figure 02_image1271
2.151 YR
Figure 02_image1273
2.152 YS
Figure 02_image1275
2.153 YY
Figure 02_image1277
2.154 YT
Figure 02_image1279
2.155 YU
Figure 02_image1281
2.156 YV
Figure 02_image1283
2.157 YW
Figure 02_image1285
2.158 ZB
Figure 02_image1287
2.159 ZC
Figure 02_image1289
2.160 ZJ
Figure 02_image1291
2.161 ZE
Figure 02_image1293
2.162 ZS
Figure 02_image1295
2.163 ZW
Figure 02_image1297
2.164 ZX
Figure 02_image1299
2.166 AAA
Figure 02_image1301
2.167 AAD
Figure 02_image1303
2.168 AAE
Figure 02_image1305
2.169 ABG
Figure 02_image1307
2.170 ABL
Figure 02_image1309
2.171 ABN
Figure 02_image1311
2.172 AAF
Figure 02_image1313
2.173 ABO
Figure 02_image1315
2.174 ABM
Figure 02_image1317
2.175 ABU
Figure 02_image1319
2.176 ABV
Figure 02_image1321
2.177 (對照物) LB
Figure 02_image1323
2.178 (對照物) WD
Figure 02_image1325
2.179 (對照物) ZZ
Figure 02_image1327
2.180 (對照物) ZT
Figure 02_image1329
2.181 (對照物) XW
Figure 02_image1331
2.182 (對照物) SE
Figure 02_image1333
2.183 (對照物) SR
Figure 02_image1335
2.184 (對照物) YG
Figure 02_image1337
2.185 (對照物) KZ
Figure 02_image1339
在某些實施例中，合成子係選自由以下合成子實例組成之群：2.1、2.2、2.4、2.5、2.6、2.7、2.8、2.9、2.10、2.11、2.12、2.13、2.14、2.15、2.16、2.17、2.18、2.19、2.20、2.21、2.22、2.23、2.24、2.25、2.26、2.27、2.28、2.29、2.30、2.31、2.32、2.33、2.34、2.35、2.36、2.37、2.38、2.39、2.40、2.41、2.42、2.43、2.44、2.45、2.46、2.47、2.48、2.49、2.50、2.51、2.52、2.53、2.54、2.55、2.56、2.57、2.58、2.59、2.60、2.61、2.62、2.63、2.64、2.65、2.66、2.67、2.68、2.69、2.77、2.78、2.79、2.80、2.81、2.82、2.83、2.84、2.85、2.86、2.87、2.88、2.89、2.90、2.91、2.92、2.93、2.94、2.95、2.96、2.97、2.98、2.101、2.102、2.103、2.104、2.105、2.106、2.107、2.108、2.109、2.110、2.111、2.112、2.113、2.114、2.115、2.116、2.117、2.118、2.119、2.120、2.121、2.122、2.123、2.124、2.125、2.126、2.127、2.128、2.129、2.130、2.131、2.132、2.133、2.134、2.135、2.136、2.137、2.138、2.139、2.140、2.141、2.142、2.143、2.144、2.145、2.146、2.147、2.148、2.149、2.150、2.151、2.152、2.153、2.154、2.155、2.156、2.157、2.158、2.159、2.160、2.161、2.162、2.163、2.164、2.166、2.167、2.168、2.169、2.170、2.171、2.172、2.173、2.174、2.175及2.176，或其醫藥學上可接受之鹽。此等合成子之化合物名稱提供於下： N-[6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯基]-L-纈胺醯基-N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基](2-磺基乙基)胺甲醯基}氧基)甲基]苯基}-N 5-胺甲醯基-L-鳥胺醯胺； N-[6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯基]-L-纈胺醯基-N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基](3-磺基丙基)胺甲醯基}氧基)甲基]苯基}-N 5-胺甲醯基-L-鳥胺醯胺； N-[6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯基]-L-纈胺醯基-N-[4-({[{2-[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙氧基]乙基}(2-磺基乙基)胺甲醯基]氧基}甲基)苯基]-N 5-胺甲醯基-L-鳥胺醯胺； 甲基6-[4-(3-{[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基]({[4-({N-[6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯基]-L-纈胺醯基-N 5-胺甲醯基-L-鳥胺醯基}胺基)苯甲基]氧基}羰基)胺基}丙基)-1H-1,2,3-三唑-1-基]-6-脫氧-β-L-葡萄哌喃糖苷； N-[6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯基]-L-纈胺醯基-N-(4-{[([2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基]{3-[1-(β-D-葡萄哌喃糖醛醯基)-1H-1,2,3-三唑-4-基]丙基}胺甲醯基)氧基]甲基}苯基)-N 5-胺甲醯基-L-鳥胺醯胺； N-[6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯基]-L-纈胺醯基-N-{4-[({[(2R)-1-{[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基](甲基)胺基}-1-側氧基-3-磺基丙-2-基]胺甲醯基}氧基)甲基]苯基}-L-丙胺醯胺； N-[6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯基]-L-纈胺醯基-N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基][4-(β-D-葡萄哌喃糖基氧基)苯甲基]胺甲醯基}氧基)甲基]苯基}-N 5-胺甲醯基-L-鳥胺醯胺； N-[6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯基]-L-纈胺醯基-N-{4-[({[4-(β-D-阿洛哌喃糖基氧基)苯甲基][2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基]胺甲醯基}氧基)甲基]苯基}-N 5-胺甲醯基-L-鳥胺醯胺； N-[6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯基]-L-纈胺醯基-N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基](2-膦醯基乙基)胺甲醯基}氧基)甲基]苯基}-N 5-胺甲醯基-L-鳥胺醯胺； N-[6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯基]-L-纈胺醯基-N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基](2-膦醯基乙基)胺甲醯基}氧基)甲基]苯基}-L-丙胺醯胺； N-[6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯基]-L-纈胺醯基-N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基](3-膦醯基丙基)胺甲醯基}氧基)甲基]苯基}-N 5-胺甲醯基-L-鳥胺醯胺； N-[6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯基]-L-纈胺醯基-N-{4-[({[(2R)-1-{[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基]胺基}-1-側氧基-3-磺基丙-2-基]胺甲醯基}氧基)甲基]苯基}-L-丙胺醯胺； N-[6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯基]-L-纈胺醯基-N-[4-({[{2-[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙氧基]乙基}(3-膦醯基丙基)胺甲醯基]氧基}甲基)苯基]-N 5-胺甲醯基-L-鳥胺醯胺； N-[6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯基]-L-纈胺醯基-N-[4-({[{2-[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙氧基]乙基}(3-膦醯基丙基)胺甲醯基]氧基}甲基)苯基]-L-丙胺醯胺； N-[6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯基]-L-纈胺醯基-N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基](3-膦醯基丙基)胺甲醯基}氧基)甲基]苯基}-L-丙胺醯胺； 6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-3-(1-{[3-(2-{[(2S)-3-羧基-2-({[(4-{[(2S)-2-{[(2S)-2-{[6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯基]胺基}-3-甲基丁醯基]胺基}丙醯基]胺基}苯甲基)氧基]羰基}胺基)丙醯基](甲基)胺基}乙氧基)-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基]甲基}-5-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-甲酸； N-[6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯基]-L-纈胺醯基-N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基][4-(β-D-葡萄哌喃糖醛醯基氧基)苯甲基]胺甲醯基}氧基)甲基]苯基}-N 5-胺甲醯基-L-鳥胺醯胺； N-[6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯基]-L-纈胺醯基-N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[1-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-1,2,3,4-四氫喹啉-7-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基](2-膦醯基乙基)胺甲醯基}氧基)甲基]苯基}-N 5-胺甲醯基-L-鳥胺醯胺； N-[6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯基]-L-纈胺醯基-N 5-胺甲醯基-N-{4-[({[2-({3-[(4-{2-羧基-6-[8-([1,3]噻唑并[5,4-b]吡啶-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基](2-磺基乙基)胺甲醯基}氧基)甲基]苯基}-L-鳥胺醯胺； N-[6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯基]-L-纈胺醯基-N-{4-[({[(2R)-1-{[2-({3-[(4-{6-[1-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-1,2,3,4-四氫喹啉-7-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基](甲基)胺基}-1-側氧基-3-磺基丙-2-基]胺甲醯基}氧基)甲基]苯基}-N 5-胺甲醯基-L-鳥胺醯胺； N-[6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯基]-L-纈胺醯基-N-{4-[({[(2R)-1-{[2-({3-[(4-{6-[1-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-1,2,3,4-四氫喹啉-7-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基](甲基)胺基}-1-側氧基-3-磺基丙-2-基]胺甲醯基}氧基)甲基]苯基}-L-丙胺醯胺； N-[6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯基]-L-纈胺醯基-N 5-胺甲醯基-N-{4-[({[2-({3-[(4-{2-羧基-6-[8-([1,3]噻唑并[4,5-b]吡啶-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基](2-磺基乙基)胺甲醯基}氧基)甲基]苯基}-L-鳥胺醯胺； N-[6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯基]-L-纈胺醯基-N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[1-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-1,2,3,4-四氫喹啉-7-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基](2-磺基乙基)胺甲醯基}氧基)甲基]苯基}-N 5-胺甲醯基-L-鳥胺醯胺； N-[6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯基]-L-纈胺醯基-N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基](2-羧基乙基)胺甲醯基}氧基)甲基]苯基}-N 5-胺甲醯基-L-鳥胺醯胺； N-[6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯基]-L-纈胺醯基-N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基](2-羧基乙基)胺甲醯基}氧基)甲基]苯基}-L-丙胺醯胺； 6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-3-(1-{[3-(2-{[(2R)-3-羧基-2-({[(4-{[(2S)-2-{[(2S)-2-{[6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯基]胺基}-3-甲基丁醯基]胺基}丙醯基]胺基}苯甲基)氧基]羰基}胺基)丙醯基](甲基)胺基}乙氧基)-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基]甲基}-5-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-甲酸； N-[6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯基]-L-纈胺醯基-N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基][1-(羧基甲基)哌啶-4-基]胺甲醯基}氧基)甲基]苯基}-N 5-胺甲醯基-L-鳥胺醯胺； (S)-6-((2-((3-((4-(6-(8-(苯并[d]噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-2-羧基吡啶-3-基)-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基)-5,7-二甲基金剛烷-1-基)氧基)乙基)(甲基)胺基)-5-((((4-((S)-2-((S)-2-(6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯胺基)-3-甲基丁醯胺基)-5-脲基戊醯胺基)苯甲基)氧基)羰基)胺基)-N,N,N-三甲基-6-側氧基己-1-銨鹽； N-[6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯基]-L-纈胺醯基-N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基](2-磺基乙基)胺甲醯基}氧基)甲基]苯基}-L-丙胺醯胺； N-[6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯基]-L-纈胺醯基-N-[4-({[(4-{[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基](2-磺基乙基)胺基}哌啶-1-基)羰基]氧基}甲基)苯基]-N 5-胺甲醯基-L-鳥胺醯胺； N-[6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯基]-L-纈胺醯基-N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-5-(3-膦醯基丙氧基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基](甲基)胺甲醯基}氧基)甲基]苯基}-N 5-胺甲醯基-L-鳥胺醯胺； N-[6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯基]-L-纈胺醯基-N-[4-({[(4-{[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基](3-膦醯基丙基)胺基}哌啶-1-基)羰基]氧基}甲基)苯基]-N 5-胺甲醯基-L-鳥胺醯胺； N-[6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯基]-L-纈胺醯基-N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)萘-2-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基](3-膦醯基丙基)胺甲醯基}氧基)甲基]苯基}-N 5-胺甲醯基-L-鳥胺醯胺； N-[6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯基]-L-纈胺醯基-N-[4-({[(4-{[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基](2-羧基乙基)胺基}哌啶-1-基)羰基]氧基}甲基)苯基]-N 5-胺甲醯基-L-鳥胺醯胺； N-[6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯基]-L-纈胺醯基-N 5-胺甲醯基-N-{4-[({[2-({3-[(4-{2-羧基-6-[8-([1,3]噻唑并[4,5-b]吡啶-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基](3-膦醯基丙基)胺甲醯基}氧基)甲基]苯基}-L-鳥胺醯胺； N-[6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯基]-L-纈胺醯基-N 5-胺甲醯基-N-{4-[({[2-({3-[(4-{2-羧基-6-[8-([1,3]噻唑并[5,4-b]吡啶-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基](3-膦醯基丙基)胺甲醯基}氧基)甲基]苯基}-L-鳥胺醯胺； N-{6-[(氯乙醯基)胺基]己醯基}-L-纈胺醯基-N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基](2-磺基乙基)胺甲醯基}氧基)甲基]苯基}-L-丙胺醯胺； N-[6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯基]-L-纈胺醯基-N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-5-(羧基甲氧基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基](甲基)胺甲醯基}氧基)甲基]苯基}-N 5-胺甲醯基-L-鳥胺醯胺； N-[6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯基]-L-纈胺醯基-N-[4-({[(2-{[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基](2-磺基乙基)胺基}乙基)(2-羧基乙基)胺甲醯基]氧基}甲基)苯基]-N 5-胺甲醯基-L-鳥胺醯胺； 6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-3-[1-({3-[2-({(2S)-2-[{[(4-{[(2S)-5-(胺甲醯基胺基)-2-{[(2S)-2-{[6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基) 己醯基]胺基}-3-甲基丁醯基]胺基}戊醯基]胺基}苯甲基)氧基]羰基}(2-羧基乙基)胺基]-3-羧基丙醯基}胺基)乙氧基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}甲基)-5-甲基-1H-吡唑-4-基]吡啶-2-甲酸； 6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-3-(1-{[3-(2-{[(2S)-2-({[(4-{[(2S)-5-(胺甲醯基胺基)-2-{[(2S)-2-{[6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基) 己醯基]胺基}-3-甲基丁醯基]胺基}戊醯基]胺基}苯甲基)氧基]羰基}胺基)-3-羧基丙醯基](2-磺基乙基)胺基}乙氧基)-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基]甲基}-5-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-甲酸； N-[6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯基]-L-纈胺醯基-N-[4-({[(4-{[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基](3-羧基丙基)胺基}哌啶-1-基)羰基]氧基}甲基)苯基]-N 5-胺甲醯基-L-鳥胺醯胺； 4-[(1E)-3-({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-5-(羧基甲氧基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基](甲基)胺甲醯基}氧基)丙-1-烯-1-基]-2-({N-[6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯基]-β-丙胺醯基}胺基)苯基β-D-哌喃葡糖苷醛酸； N-[6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯基]-L-纈胺醯基-N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)萘-2-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基](2-磺基乙基)胺甲醯基}氧基)甲基]苯基}-N 5-胺甲醯基-L-鳥胺醯胺； N-[6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯基]-L-纈胺醯基-N-[4-({[(2-{[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-2-(6-羧基-5-{1-[(3,5-二甲基-7-{2-[甲基(2-磺基乙基)胺基]乙氧基}三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}吡啶-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基]氧基}乙基)胺甲醯基]氧基}甲基)苯基]-N 5-胺甲醯基-L-鳥胺醯胺； N-[6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯基]-L-纈胺醯基-N-[4-({[(2-{[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-2-(6-羧基-5-{1-[(3,5-二甲基-7-{2-[甲基(2-磺基乙基) 胺基]乙氧基}三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}吡啶-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基]氧基}乙基)(2-磺基乙基)胺甲醯基]氧基}甲基)苯基]-N 5-胺甲醯基-L-鳥胺醯胺； N-[6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯基]-L-纈胺醯基-N-[4-({[(2-{[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基](2-磺基乙基)胺基}乙基)(2-磺基乙基)胺甲醯基]氧基}甲基)苯基]-N 5-胺甲醯基-L-鳥胺醯胺； N-{6-[(氯乙醯基)胺基]己醯基}-L-纈胺醯基-N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基](2-磺基乙基)胺甲醯基}氧基)甲基]苯基}-N 5-胺甲醯基-L-鳥胺醯胺； N-[6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯基]-L-纈胺醯基-N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[4-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫-2H-1,4-苯并噁嗪-6-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基](2-磺基乙基)胺甲醯基}氧基)甲基]苯基}-N 5-胺甲醯基-L-鳥胺醯胺； N-[6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯基]-L-纈胺醯基-N-[4-({[(2-{[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-2-(6-羧基-5-{1-[(3,5-二甲基-7-{2-[甲基(2-磺基乙基)胺基]乙氧基}三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}吡啶-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基]氧基}乙基)(2-羧基乙基)胺甲醯基]氧基}甲基)苯基]-N 5-胺甲醯基-L-鳥胺醯胺； N-[6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯基]-L-纈胺醯基-N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-5-(3-磺基丙氧基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基](甲基)胺甲醯基}氧基)甲基]苯基}-N 5-胺甲醯基-L-鳥胺醯胺； N-[3-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)丙醯基]-L-纈胺醯基-N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基](2-磺基乙基)胺甲醯基}氧基)甲基]苯基}-N 5-胺甲醯基-L-鳥胺醯胺； N-[(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)乙醯基]-L-纈胺醯基-N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基](2-磺基乙基)胺甲醯基}氧基)甲基]苯基}-N 5-胺甲醯基-L-鳥胺醯胺； 6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-3-(1-{[3-(2-{[(2S)-2-({[(4-{[(2S,3R,4S,5S,6S)-6-羧基-3,4,5-三羥基四氫-2H-哌喃-2-基]氧基}-3-[(3-{[6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯基]胺基}丙醯基)胺基]苯甲基)氧基]羰基}胺基)-3-磺基丙醯基](甲基)胺基}乙氧基)-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基]甲基}-5-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-甲酸； 4-[(1E)-3-({[2-({3-[(4-{2-羧基-6-[8-([1,3]噻唑并[5,4-b]吡啶-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基](2-磺基乙基)胺甲醯基}氧基)丙-1-烯-1-基]-2-({N-[6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯基]-β-丙胺醯基}胺基)苯基β-D-哌喃葡糖苷醛酸； 4-[(1E)-3-({[2-({3-[(4-{2-羧基-6-[8-([1,3]噻唑并[4,5-b]吡啶-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基](2-磺基乙基)胺甲醯基}氧基)丙-1-烯-1-基]-2-({N-[6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯基]-β-丙胺醯基}胺基)苯基β-D-哌喃葡糖苷醛酸； 4-[(1E)-3-({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基](2-磺基乙基)胺甲醯基}氧基)丙-1-烯-1-基]-2-({N-[6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯基]-β-丙胺醯基}胺基)苯基β-D-哌喃葡糖苷醛酸； 4-[(1E)-3-({[2-({3-[(4-{2-羧基-6-[8-([1,3]噻唑并[5,4-b]吡啶-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基](3-膦醯基丙基)胺甲醯基}氧基)丙-1-烯-1-基]-2-({N-[6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯基]-β-丙胺醯基}胺基) 苯基β-D-哌喃葡糖苷醛酸； 4-[(1E)-3-({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-5-(3-膦醯基丙氧基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基](甲基)胺甲醯基}氧基)丙-1-烯-1-基]-2-({N-[6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯基]-β-丙胺醯基}胺基)苯基β-D-哌喃葡糖苷醛酸； 4-[(1E)-3-({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基](3-膦醯基丙基)胺甲醯基}氧基)丙-1-烯-1-基]-2-({N-[6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯基]-β-丙胺醯基}胺基)苯基β-D-哌喃葡糖苷醛酸； 4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基](2-磺基乙基)胺甲醯基}氧基)甲基]-3-[2-(2-{[3-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)丙醯基]胺基}乙氧基)乙氧基]苯基β-D-哌喃葡糖苷醛酸； 4-[(1E)-3-({[2-({3-[(4-{2-羧基-6-[8-([1,3]噻唑并[4,5-b]吡啶-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基](3-膦醯基丙基)胺甲醯基}氧基)丙-1-烯-1-基]-2-({N-[6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯基]-β-丙胺醯基}胺基) 苯基β-D-哌喃葡糖苷醛酸； 6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-3-{1-[(3-{2-[(2-羧基乙基)({[(2E)-3-(4-{[(2S,3R,4S,5S,6S)-6-羧基-3,4,5-三羥基四氫-2H-哌喃-2-基]氧基}-3-[(3-{[6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯基]胺基}丙醯基) 胺基]苯基)丙-2-烯-1-基]氧基}羰基)胺基]乙氧基}-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}吡啶-2-甲酸； 6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-3-{1-[(3-{2-[(2-羧基乙基){[(4-{[(2S,3R,4S,5S,6S)-6-羧基-3,4,5-三羥基四氫-2H-哌喃-2-基]氧基}-2-[2-(2-{[3-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)丙醯基]胺基}乙氧基)乙氧基]苯甲基)氧基]羰基}胺基]乙氧基}-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}吡啶-2-甲酸； N-[6-(乙烯基磺醯基)己醯基]-L-纈胺醯基-N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基](2-磺基乙基)胺甲醯基}氧基)甲基]苯基}-N 5-胺甲醯基-L-鳥胺醯胺； 4-[(1E)-3-{[(4-{[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基](3-膦醯基丙基)胺基}哌啶-1-基)羰基]氧基}丙-1-烯-1-基]-2-({N-[6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯基]-β-丙胺醯基}胺基)苯基β-D-哌喃葡糖苷醛酸； 4-[(1E)-3-{[(4-{[2-({3-[(4-{2-羧基-6-[8-([1,3]噻唑并[4,5-b]吡啶-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基](3-膦醯基丙基)胺基}哌啶-1-基)羰基]氧基}丙-1-烯-1-基]-2-({N-[6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯基]-β-丙胺醯基}胺基)苯基β-D-哌喃葡糖苷醛酸； 4-[(1E)-3-({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)萘-2-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基](2-磺基乙基)胺甲醯基}氧基)丙-1-烯-1-基]-2-({N-[6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯基]-β-丙胺醯基}胺基)苯基β-D-哌喃葡糖苷醛酸； 6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-3-[1-({3-[2-({N-[6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯基]-3-磺基-L-丙胺醯基}胺基)乙氧基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}甲基)-5-甲基-1H-吡唑-4-基]吡啶-2-甲酸； 6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-3-[1-({3-[2-(2-{[6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯基](2-磺基乙基)胺基}乙氧基)乙氧基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}甲基)-5-甲基-1H-吡唑-4-基]吡啶-2-甲酸； 6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-3-(1-{[3-(2-{[6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯基](2-磺基乙基)胺基}乙氧基)-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基]甲基}-5-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-甲酸； 6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-3-{1-[(3-{[1-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)-21-側氧基-22-(2-磺基乙基)-3,6,9,12,15,18-六氧雜-22-氮雜二十四烷-24-基]氧基}-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}吡啶-2-甲酸； 6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-3-{1-[(3-{[1-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)-21-側氧基-22-(2-磺基乙基)-3,6,9,12,15,18,25-七氧雜-22-氮雜二十七烷-27-基]氧基}-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}吡啶-2-甲酸； 6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-3-(1-{[3-(2-{[6-(乙烯基磺醯基)己醯基](2-磺基乙基)胺基}乙氧基)-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基]甲基}-5-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-甲酸； 6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-3-{1-[(3-{2-[{6-[(氯乙醯基)胺基]己醯基}(2-磺基乙基)胺基]乙氧基}-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}吡啶-2-甲酸； N-[6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯基]-L-纈胺醯基-N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基](3-羧基丙基)胺甲醯基}氧基)甲基]苯基}-N 5-胺甲醯基-L-鳥胺醯胺； N-{6-[(溴乙醯基)胺基]己醯基}-L-纈胺醯基-N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基](2-磺基乙基)胺甲醯基}氧基)甲基]苯基}-N 5-胺甲醯基-L-鳥胺醯胺； 4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基](3-羧基丙基)胺甲醯基}氧基)甲基]-3-[2-(2-{[3-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)丙醯基]胺基}乙氧基)乙氧基]苯基β-D-哌喃葡糖苷醛酸； 4-({[(4-{[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基](3-羧基丙基)胺基}哌啶-1-基)羰基]氧基}甲基)-3-[2-(2-{[3-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)丙醯基]胺基}乙氧基)乙氧基]苯基β-D-哌喃葡糖苷醛酸； 4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基](3-磺基丙基)胺甲醯基}氧基)甲基]-3-[2-(2-{[3-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)丙醯基]胺基}乙氧基)乙氧基]苯基β-D-哌喃葡糖苷醛酸； N-[6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯基]-L-纈胺醯基-N-[4-({[(3-{[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基](2-磺基乙基)胺基}氮雜環丁烷-1-基)羰基]氧基}甲基)苯基]-N 5-胺甲醯基-L-鳥胺醯胺； 6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-3-{1-[(3-{[26-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)-8,24-二側氧基-3-(2-磺基乙基)-11,14,17,20-四氧雜-3,7,23-三氮雜二十六烷-1-基]氧基}-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}吡啶-2-甲酸； N-[6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯基]-L-纈胺醯基-N-[4-({[(3-{[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基](2-磺基乙基)胺基}丙基)胺甲醯基]氧基}甲基)苯基]-N 5-胺甲醯基-L-鳥胺醯胺； N-{6-[(碘乙醯基)胺基]己醯基}-L-纈胺醯基-N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基](2-磺基乙基)胺甲醯基}氧基)甲基]苯基}-N 5-胺甲醯基-L-鳥胺醯胺； N-{6-[(乙烯基磺醯基)胺基]己醯基}-L-纈胺醯基-N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基](2-磺基乙基)胺甲醯基}氧基)甲基]苯基}-N 5-胺甲醯基-L-鳥胺醯胺； N-{6-[(乙烯基磺醯基)胺基]己醯基}-L-纈胺醯基-N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基](2-磺基乙基)胺甲醯基}氧基)甲基]苯基}-N 5-胺甲醯基-L-鳥胺醯胺； 6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-3-{1-[(3-{2-[(3-{[6-(乙烯基磺醯基)己醯基]胺基}丙基)(2-磺基乙基)胺基]乙氧基}-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}吡啶-2-甲酸； N-[3-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)丙醯基]-L-纈胺醯基-N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[1-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-1,2,3,4-四氫喹啉-7-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基](2-磺基乙基)胺甲醯基}氧基)甲基]苯基}-N 5-胺甲醯基-L-鳥胺醯胺； 6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-3-{1-[(3-{2-[(2-羧基乙基){[(2-{[(2S,3R,4S,5S,6S)-6-羧基-3,4,5-三羥基四氫-2H-哌喃-2-基]氧基}-4-[2-(2-{[3-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)丙醯基]胺基}乙氧基)乙氧基]苯甲基)氧基]羰基}胺基]乙氧基}-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}吡啶-2-甲酸； N-[6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯基]-3-磺基-L-丙胺醯基-L-纈胺醯基-N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基](2-羧基乙基)胺甲醯基}氧基)甲基]苯基}-N 5-胺甲醯基-L-鳥胺醯胺； 6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-3-{1-[(3-{[(43S,46S)-43-({[(4-{[(2S)-2-{[(2S)-2-{[6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯基]胺基}-3-甲基丁醯基]胺基}丙醯基]胺基}苯甲基)氧基]羰基}胺基)-46-甲基-37,44,47-三側氧基-2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32,35-十二氧雜-38,45,48-三氮雜五十烷-50-基]氧基}-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}吡啶-2-甲酸； N-[6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯基]-L-纈胺醯基-N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[1-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-1,2,3,4-四氫喹啉-7-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基](2-羧基乙基)胺甲醯基}氧基)甲基]苯基}-N 5-胺甲醯基-L-鳥胺醯胺； N-[6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯基]-L-纈胺醯基-N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)萘-2-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基](2-羧基乙基)胺甲醯基}氧基)甲基]苯基}-N 5-胺甲醯基-L-鳥胺醯胺； 6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)萘-2-基]-3-{1-[(3-{2-[(2-羧基乙基){[(2-{[(2R,3S,4R,5R,6R)-6-羧基-3,4,5-三羥基四氫-2H-哌喃-2-基]氧基}-4-[2-(2-{[6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯基]胺基}乙氧基)乙氧基]苯甲基)氧基]羰基}胺基]乙氧基}-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}吡啶-2-甲酸； N-[6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯基]-L-纈胺醯基-N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[5-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)喹啉-3-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基](2-磺基乙基)胺甲醯基}氧基) 甲基]苯基}-N 5-胺甲醯基-L-鳥胺醯胺； N-[6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯基]-L-纈胺醯基-N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[4-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)喹啉-6-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基](2-羧基乙基)胺甲醯基}氧基)甲基]苯基}-N 5-胺甲醯基-L-鳥胺醯胺； N-[6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯基]-L-纈胺醯基-N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[4-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)喹啉-6-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基](2-磺基乙基)胺甲醯基}氧基)甲基]苯基}-N 5-胺甲醯基-L-鳥胺醯胺； N-[6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯基]-L-纈胺醯基-N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[5-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)喹啉-3-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基](2-羧基乙基)胺甲醯基}氧基)甲基]苯基}-N 5-胺甲醯基-L-鳥胺醯胺； N-[6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯基]-L-纈胺醯基-N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[1-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-5,6-二氫咪唑并[1,5-a]吡嗪-7(8H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基](2-磺基乙基)胺甲醯基}氧基)甲基]苯基}-N 5-胺甲醯基-L-鳥胺醯胺； N-[6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯基]-L-纈胺醯基-N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[7-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-1H-吲哚-2-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基](2-磺基乙基)胺甲醯基}氧基)甲基]苯基}-N 5-胺甲醯基-L-鳥胺醯胺； N-[6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯基]-L-纈胺醯基-N-[4-({[{3-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-2-(6-羧基-5-{1-[(3,5-二甲基-7-{2-[(2-磺基乙基)胺基]乙氧基}三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}吡啶-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-6-基]丙基}(甲基)胺甲醯基]氧基}甲基)苯基]-N 5-胺甲醯基-L-鳥胺醯胺； N-(6-{[(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)乙醯基]胺基}己醯基)-L-纈胺醯基-N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基](2-磺基乙基)胺甲醯基}氧基)甲基]苯基}-N 5-胺甲醯基-L-鳥胺醯胺； N-[6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯基]-L-纈胺醯基-N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)萘-2-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基][3-(β-L-葡萄哌喃糖醛醯基氧基)丙基]胺甲醯基}氧基)甲基]苯基}-N 5-胺甲醯基-L-鳥胺醯胺； N-[6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯基]-L-纈胺醯基-N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[4-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)異喹啉-6-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基](2-磺基乙基)胺甲醯基}氧基)甲基]苯基}-N 5-胺甲醯基-L-鳥胺醯胺； N-[6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯基]-L-α-麩胺醯基-L-纈胺醯基-N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基](2-磺基乙基)胺甲醯基}氧基)甲基]苯基}-N 5-胺甲醯基-L-鳥胺醯胺； N-[(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)乙醯基]-L-α-麩胺醯基-L-纈胺醯基-N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基](2-磺基乙基)胺甲醯基}氧基)甲基]苯基}-N 5-胺甲醯基-L-鳥胺醯胺； 1-{[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基]({[4-({N-[6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯基]-D-纈胺醯基-N 5-胺甲醯基-D-鳥胺醯基}胺基)苯甲基]氧基}羰基)胺基}-1,2-二脫氧-D-阿拉伯-己糖醇； N-[6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯基]-L-纈胺醯基-N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[4-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-2-氧離子基異喹啉-6-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基](甲基)胺甲醯基}氧基)甲基]苯基}-N 5-胺甲醯基-L-鳥胺醯胺； N-({(3S,5S)-3-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)-2-側氧基-5-[(2-磺基乙氧基)甲基]吡咯啶-1-基}乙醯基)-L-纈胺醯基-N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)萘-2-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基](2-磺基乙基)胺甲醯基}氧基)甲基]苯基}-N 5-胺甲醯基-L-鳥胺醯胺； N-{(2S)-2-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)-3-[4-(2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32-十一氧雜三十四烷-34-基氧基)苯基]丙醯基}-L-纈胺醯基-N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)萘-2-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基](2-磺基乙基)胺甲醯基}氧基)甲基]苯基}-N 5-胺甲醯基-L-鳥胺醯胺； N-({(3S,5S)-3-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)-2-側氧基-5-[(2-磺基乙氧基)甲基]吡咯啶-1-基}乙醯基)-L-纈胺醯基-N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基](2-磺基乙基)胺甲醯基}氧基)甲基]苯基}-N 5-胺甲醯基-L-鳥胺醯胺； N-{(2S)-2-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)-3-[4-(2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32-十一氧雜三十四烷-34-基氧基)苯基]丙醯基}-L-纈胺醯基-N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基](2-磺基乙基)胺甲醯基}氧基)甲基]苯基}-N 5-胺甲醯基-L-鳥胺醯胺； (6S)-2,6-去水-6-(2-{2-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基](2-磺基乙基)胺甲醯基}氧基)甲基]-5-({N-[(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)乙醯基]-L-纈胺醯基-L-丙胺醯基}胺基)苯基}乙基)-L-古洛糖酸； 3-{[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)萘-2-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基]({[4-(4-{[6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯基]胺基}丁基)-2-(β-D-葡萄哌喃糖醛醯基氧基)苯甲基]氧基}羰基)胺基}丙基β-D-哌喃葡糖苷醛酸； N-{[(3S,5S)-3-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)-5-(甲氧基甲基)-2-側氧基吡咯啶-1-基]乙醯基}-L-纈胺醯基-N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基](2-磺基乙基)胺甲醯基}氧基)甲基]苯基}-N 5-胺甲醯基-L-鳥胺醯胺； (6S)-2,6-去水-6-(2-{2-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基](2-磺基乙基)胺甲醯基}氧基)甲基]-5-({N-[6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯基]-L-纈胺醯基-L-丙胺醯基}胺基)苯基}乙基)-L-古洛糖酸； 2-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基](2-磺基乙基)胺甲醯基}氧基)甲基]-5-(4-{[3-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)丙醯基]胺基}丁基)苯基β-D-哌喃葡糖苷醛酸； 2-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基](2-磺基乙基)胺甲醯基}氧基)甲基]-5-[4-({(2S)-2-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)-3-[4-(2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32-十一氧雜三十四烷-34-基氧基)苯基]丙醯基}胺基)丁基]苯基β-D-哌喃葡糖苷醛酸； (6S)-2,6-去水-6-(2-{2-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基](2-磺基乙基)胺甲醯基}氧基)甲基]-5-[(N-{(2S)-2-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)-3-[4-(2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32-十一氧雜三十四烷-34-基氧基)苯基]丙醯基}-L-纈胺醯基-L-丙胺醯基)胺基]苯基}乙基)-L-古洛糖酸； 6-(8-(苯并[d]噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-3-(1-((3-(2-((((2-(2-((2S,3R,4R,5S,6S)-6-羧基-3,4,5-三羥基四氫-2H-哌喃-2-基)乙基)-4-((S)-2-((S)-2-(2-((3S,5S)-3-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)-2-側氧基-5-((2-磺基乙氧基)甲基) 吡咯啶-1-基)乙醯胺基)-3-甲基丁醯胺基)丙醯胺基)苯甲基)氧基)羰基)(2-磺基乙基)胺基)乙氧基)-5,7-二甲基金剛烷-1-基)甲基)-5-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶甲酸； 6-(8-(苯并[d]噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-3-(1-((3-(2-((((2-(((2S,3R,4S,5S,6S)-6-羧基-3,4,5-三羥基四氫-2H-哌喃-2-基)氧基)-4-(4-(2-((3S,5S)-3-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)-2-側氧基-5-((2-磺基乙氧基)甲基)吡咯啶-1-基) 乙醯胺基)丁基)苯甲基)氧基)羰基)(2-磺基乙基)胺基)乙氧基)-5,7-二甲基金剛烷-1-基)甲基)-5-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶甲酸； 2-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基](2-磺基乙基)胺甲醯基}氧基)甲基]-5-(4-{[(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)乙醯基]胺基}丁基)苯基β-D-哌喃葡糖苷醛酸； 2-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)萘-2-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基](2-磺基乙基)胺甲醯基}氧基)甲基]-5-(4-{[(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)乙醯基]胺基}丁基)苯基β-D-哌喃葡糖苷醛酸； 2-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)萘-2-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基](2-磺基乙基)胺甲醯基}氧基)甲基]-5-[4-({(2S)-2-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)-3-[4-(2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32-十一氧雜三十四烷-34-基氧基)苯基]丙醯基}胺基)丁基]苯基β-D-哌喃葡糖苷醛酸； N-[(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)乙醯基]-L-纈胺醯基-N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基](2-磺基乙基)胺甲醯基}氧基)甲基]-3-(4-羧基丁基)苯基}-L-丙胺醯胺； 2-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基](2-磺基乙基)胺甲醯基}氧基)甲基]-5-(3-{[(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)乙醯基]胺基}丙基)苯基β-D-哌喃葡糖苷醛酸； 6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-3-{1-[(3-{2-[({[2-{[(2S,3R,4S,5S,6S)-6-羧基-3,4,5-三羥基四氫-2H-哌喃-2-基]氧基}-4-(4-{[(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)乙醯基]胺基}丁基)苯甲基]氧基}羰基)(3-{[1,3-二羥基-2-(羥基甲基)丙-2-基]胺基}-3-側氧基丙基)胺基]乙氧基}-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}吡啶-2-甲酸； 6-(8-(苯并[d]噻唑-2-基胺甲醯基)萘-2-基)-3-(1-((3-(2-((((2-(((2S,3R,4S,5S,6S)-6-羧基-3,4,5-三羥基四氫-2H-哌喃-2-基)氧基)-4-(4-(2-((3S,5S)-3-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)-2-側氧基-5-((2-磺基乙氧基)甲基)吡咯啶-1-基)乙醯胺基)丁基)苯甲基)氧基)羰基)(2-磺基乙基)胺基)乙氧基)-5,7-二甲基金剛烷-1-基)甲基)-5-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶甲酸； 2-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基][3-羥基-2-(羥基甲基)丙基]胺甲醯基}氧基)甲基]-5-(3-{[(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)乙醯基]胺基}丙基)苯基β-D-哌喃葡糖苷醛酸； N-({(3S,5S)-3-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)-2-側氧基-5-[(2-磺基乙氧基)甲基]吡咯啶-1-基}乙醯基)-L-纈胺醯基-N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基](2-磺基乙基)胺甲醯基}氧基)甲基]-3-(2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32,35,38,41,44,47,50-十七氧雜五十三碳-52-炔-53-基)苯基}-L-丙胺醯胺； N-({(3S,5S)-3-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)-2-側氧基-5-[(2-磺基乙氧基)甲基]吡咯啶-1-基}乙醯基)-L-纈胺醯基-N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基](2-磺基乙基)胺甲醯基}氧基)甲基]-3-(2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32,35,38,41,44,47,50-十七氧雜五十三烷-53-基)苯基}-L-丙胺醯胺； 2-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基][(3S)-3,4-二羥基丁基]胺甲醯基}氧基)甲基]-5-(3-{[(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)乙醯基]胺基}丙基)苯基β-D-哌喃葡糖苷醛酸； 1-{[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基]({[4-(4-{[(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)乙醯基]胺基}丁基)-2-(β-D-葡萄哌喃糖醛醯基氧基)苯甲基]氧基}羰基)胺基}-1,2-二脫氧-D-阿拉伯-己糖醇； 1-{[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基]({[4-(4-{[(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)乙醯基]胺基}丁基)-2-(β-D-葡萄哌喃糖醛醯基氧基)苯甲基]氧基}羰基)胺基}-1,2-二脫氧-D-赤式-戊糖醇； N-[(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)乙醯基]-L-纈胺醯基-N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)萘-2-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基](2-磺基乙基)胺甲醯基}氧基)甲基]-3-[27-(2,5,8,11,14,17,20,23-八氧雜二十六烷-26-基)-2,5,8,11,14,17,20,23-八氧雜-27-氮雜三十烷-30-基]苯基}-L-丙胺醯胺； (6S)-2,6-去水-6-(2-{2-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基](2-磺基乙基)胺甲醯基}氧基)甲基]-5-({N-[(2S)-3-[3,4-雙(2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32-十一氧雜三十四烷-34-基氧基)苯基]-2-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)丙醯基]-L-纈胺醯基-L-丙胺醯基}胺基)苯基}乙基)-L-古洛糖酸； N-[(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)乙醯基]-N-(2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32-十一氧雜三十四烷-34-基)-β-丙胺醯基-L-纈胺醯基-N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基](2-磺基乙基)胺甲醯基}氧基)甲基]-3-(2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32,35,38,41,44,47,50-十七氧雜五十三烷-53-基)苯基}-L-丙胺醯胺； N-[(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)乙醯基]-N-(2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32-十一氧雜三十四烷-34-基)-β-丙胺醯基-L-纈胺醯基-N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基](2-磺基乙基)胺甲醯基}氧基)甲基]苯基}-N 5-胺甲醯基-L-鳥胺醯胺； N-[(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)乙醯基]-L-纈胺醯基-N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基](2-磺基乙基)胺甲醯基}氧基)甲基]-3-[27-(2,5,8,11,14,17,20,23-八氧雜二十六烷-26-基)-2,5,8,11,14,17,20,23-八氧雜-27-氮雜三十烷-30-基]苯基}-L-丙胺醯胺； N-{(3S)-3-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)-3-[1-(2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32,35-十二氧雜三十七烷-37-基)-1H-1,2,3-三唑-4-基]丙醯基}-L-纈胺醯基-N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基](2-磺基乙基)胺甲醯基}氧基)甲基]苯基}-N 5-胺甲醯基-L-鳥胺醯胺； N-{(3R)-3-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)-3-[1-(2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32,35-十二氧雜三十七烷-37-基)-1H-1,2,3-三唑-4-基]丙醯基}-L-纈胺醯基-N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基](2-磺基乙基)胺甲醯基}氧基)甲基]苯基}-N 5-胺甲醯基-L-鳥胺醯胺； 6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-3-[1-({3-[2-({[(2-{2-[(2S,3R,4R,5S,6S)-6-羧基-3,4,5-三羥基四氫-2H-哌喃-2-基]乙基}-4-{[(2S)-2-{[(2S)-2-{[(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)乙醯基]胺基}-3-甲基丁醯基]胺基}丙醯基]胺基}苯甲基)氧基]羰基}[(3R,4S,5R)-3,4,5,6-四羥基己基]胺基)乙氧基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}甲基)-5-甲基-1H-吡唑-4-基]吡啶-2-甲酸； 6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-3-[1-({3-[2-({[(2-{2-[(2S,3R,4R,5S,6S)-6-羧基-3,4,5-三羥基四氫-2H-哌喃-2-基]乙基}-4-{[(2S)-2-({(2S)-2-[({(3S,5S)-3-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)-2-側氧基-5-[(2-磺基乙氧基)甲基]吡咯啶-1-基}乙醯基)胺基]-3-甲基丁醯基}胺基)丙醯基]胺基}苯甲基)氧基]羰基}[(3R,4S,5R)-3,4,5,6-四羥基己基]胺基)乙氧基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 37]癸-1-基}甲基)-5-甲基-1H-吡唑-4-基]吡啶-2-甲酸； (6S)-2,6-去水-6-(2-{2-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基](2-磺基乙基)胺甲醯基}氧基)甲基]-5-({N-[(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)乙醯基]-N-(2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32-十一氧雜三十四烷-34-基)-β-丙胺醯基-L-纈胺醯基-L-丙胺醯基}胺基)苯基}乙基)-L-古洛糖酸； (6S)-2,6-去水-6-(2-{2-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基](2-磺基乙基)胺甲醯基}氧基)甲基]-5-[(N-{2-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)-3-[1-(2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32,35-十二氧雜三十七烷-37-基)-1H-1,2,3-三唑-4-基]丙醯基}-L-纈胺醯基-L-丙胺醯基)胺基]苯基}乙基)-L-古洛糖酸； (6S)-2,6-去水-6-(2-{2-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基](2-磺基乙基)胺甲醯基}氧基)甲基]-5-[(N-{(3S)-3-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)-3-[1-(2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32,35-十二氧雜三十七烷-37-基)-1H-1,2,3-三唑-4-基]丙醯基}-L-纈胺醯基-L-丙胺醯基)胺基]苯基}乙基)-L-古洛糖酸； (6S)-2,6-去水-6-(2-{2-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基](2-磺基乙基)胺甲醯基}氧基)甲基]-5-[(N-{(3R)-3-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)-3-[1-(2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32,35-十二氧雜三十七烷-37-基)-1H-1,2,3-三唑-4-基]丙醯基}-L-纈胺醯基-L-丙胺醯基)胺基]苯基}乙基)-L-古洛糖酸； (6S)-2,6-去水-6-(2-{2-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基](2-磺基乙基)胺甲醯基}氧基)甲基]-5-[(N-{(3S)-3-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)-3-[1-(3-磺基丙基)-1H-1,2,3-三唑-4-基]丙醯基}-L-纈胺醯基-L-丙胺醯基)胺基]苯基}乙基)-L-古洛糖酸； (6S)-2,6-去水-6-(2-{2-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基](2-磺基乙基)胺甲醯基}氧基)甲基]-5-[(N-{(3R)-3-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)-3-[1-(3-磺基丙基)-1H-1,2,3-三唑-4-基]丙醯基}-L-纈胺醯基-L-丙胺醯基)胺基]苯基}乙基)-L-古洛糖酸； (6S)-2,6-去水-6-(2-{2-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基](2-磺基乙基)胺甲醯基}氧基)甲基]-5-({N-[(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)乙醯基]-N-[2-(2-磺基乙氧基)乙基]-β-丙胺醯基-L-纈胺醯基-L-丙胺醯基}胺基)苯基}乙基)-L-古洛糖酸； 6-{8-[(1,3-苯并噻唑-2-基)胺甲醯基]-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基}-3-[1-({3-[2-({[(2-{2-[(2S,3R,4R,5S,6S)-6-羧基-3,4,5-三羥基環氧乙烷-2-基]乙基}-4-{[(2S)-2-{[(2S)-2-{[(2S)-2-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)-3-{4-[(2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32-十一氧雜三十四烷-34-基)氧基]苯基}丙醯基]胺基}-3-甲基丁醯基]胺基}丙醯基]胺基}苯基)甲氧基]羰基}[(3R,4S,5R)-3,4,5,6-四羥基己基]胺基)乙氧基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}甲基)-5-甲基-1H-吡唑-4-基]吡啶-2-甲酸； 4-{[({2-[(3-{[4-(6-{8-[(1,3-苯并噻唑-2-基)胺甲醯基]-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基}-2-羧基吡啶-3-基)-5-甲基-1H-吡唑-1-基]甲基}-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)氧基]乙基}[(3S)-3,4-二羥基丁基]胺甲醯基)氧基]甲基}-3-(2-{2-[2-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)乙醯胺基]乙氧基}乙氧基)苯基β-D-哌喃葡糖苷醛酸； 2,6-去水-8-[2-({[{2-[(3-{[4-(6-{8-[(1,3-苯并噻唑-2-基)胺甲醯基]-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基}-2-羧基吡啶-3-基)-5-甲基-1H-吡唑-1-基]甲基}-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)氧基]乙基}(2-磺基乙基)胺甲醯基]氧基}甲基)-5-{[(79S,82S)-74-[(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)乙醯基]-82-甲基-77,80,83-三側氧基-79-(丙-2-基)-2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32,35,38,41,44,47,50,53,56,59,62,65,68,71-二十四氧雜-74,78,81-三氮雜八十三烷-83-基]胺基}苯基]-7,8-二脫氧-L-甘油-L-古洛糖辛酸； 6-{8-[(1,3-苯并噻唑-2-基)胺甲醯基]-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基}-3-{1-[(3-{2-[{[(4-{[(2S,5S)-2-[3-(胺甲醯基胺基)丙基]-10-[(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)乙醯基]-4,7-二側氧基-5-(丙-2-基)-15-磺基13-氧雜-3,6,10-三氮雜十五烷-1-醯基]胺基}苯基)甲氧基]羰基}(2-磺基乙基)胺基]乙氧基}-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基) 甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}吡啶-2-甲酸； 6-(8-(苯并[d]噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-3-(1-((3-(2-((((2-(2-((2S,3R,4R,5S,6S)-6-羧基-3,4,5-三羥基四氫-2H-哌喃-2-基)乙基)-4-((S)-2-((S)-2-(2-((3S,5S)-3-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)-2-側氧基-5-((2-磺基乙氧基)甲基)吡咯啶-1-基)乙醯胺基)-3-甲基丁醯胺基)丙醯胺基)苯甲基)氧基)羰基)((S)-3,4-二羥基丁基)胺基)乙氧基)-5,7-二甲基金剛烷-1-基)甲基)-5-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶甲酸； 2,6-去水-8-(2-{[({2-[(3-{[4-(6-{8-[(1,3-苯并噻唑-2-基)胺甲醯基]-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基}-2-羧基吡啶-3-基)-5-甲基-1H-吡唑-1-基]甲基}-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)氧基]乙基}[(3S)-3,4-二羥基丁基]胺甲醯基)氧基]甲基}-5-{[(2S)-2-({(2S)-2-[2-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)乙醯胺基]-3-甲基丁醯基}胺基)丙醯基]胺基}苯基)-7,8-二脫氧-L-甘油-L-古洛糖辛酸； 2-{[({2-[(3-{[4-(6-{8-[(1,3-苯并噻唑-2-基)胺甲醯基]-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基}-2-羧基吡啶-3-基)-5-甲基-1H-吡唑-1-基]甲基}-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)氧基]乙基}[(3S)-3,4-二羥基丁基]胺甲醯基)氧基]甲基}-5-{4-[2-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)乙醯胺基]丁基}苯基β-D-哌喃葡糖苷醛酸； 6-{8-[(1,3-苯并噻唑-2-基)胺甲醯基]-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基}-3-{1-[(3-{2-[{[(4-{[(2S)-5-(胺甲醯基胺基)-2-{[(2S)-2-{[6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯基]胺基}-3-甲基丁醯基]胺基}戊醯基]胺基}苯基)甲氧基]羰基}(2-磺基乙基)胺基]乙醯胺基}-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}吡啶-2-甲酸； N-[6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1 H-吡咯-1-基)己醯基]-L-纈胺醯基-A-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1 H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1 H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}硫基)乙基](2-磺基乙基)胺甲醯基}氧基)甲基]苯基}-N 5-胺甲醯基-L-鳥胺醯胺； N-[6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1 H-吡咯-1-基)己醯基]-L-纈胺醯基-N-[4-({[(3-{3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1 H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1 H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}丙基)(2-磺基乙基)胺甲醯基]氧基}甲基)苯基]-N 5-胺甲醯基-L-鳥胺醯胺； 2-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1 H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1 H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基][(3S)-3,4-二羥基丁基]胺甲醯基}氧基)甲基]-5-{4-[({(35,55)-3-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1 H-吡咯-1-基)-2-側氧基-5-[(2-磺基乙氧基)甲基]吡咯啶-1-基}乙醯基)胺基]丁基}苯基β-D-哌喃葡糖苷醛酸； 2,6-去水-8-[2-({[{2-[(3-{[4-(6-{8-[(1,3-苯并噻唑-2-基)胺甲醯基]-3,4-二氫異喹啉-2(1 H)-基}-2-羧基吡啶-3-基)-5-甲基-1 H-吡唑-1-基]甲基}-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)氧基]乙基}(2-磺基乙基)胺甲醯基]氧基}甲基)-5-{[N-({(3R,5S)-3-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1 H-吡咯-1-基)-2-側氧基-5-[(2-磺基乙氧基)甲基]吡咯啶-1-基}乙醯基)-L-纈胺醯基-L-丙胺醯基]胺基}苯基]-7,8-二脫氧-L-甘油 -L-古洛糖辛酸； 2,6-去水-8-{2-({[{2-[(3-{[4-(6-{8-[(1,3-苯并噻唑-2-基)胺甲醯基]-3,4-二氫異喹啉-2(1 H)-基}-2-羧基吡啶-3-基)-5-甲基-1 H-吡唑-1-基]甲基}-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)氧基]乙基}(2-磺基乙基)胺甲醯基]氧基}甲基)-5-[(N-{[(3R,5S)-3-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1 H-吡咯-1-基)-2-側氧基-5-(41-側氧基-2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32,35,38-十三氧雜-42-氮雜四十三烷-43-基)吡咯啶-1-基]乙醯基}-L-纈胺醯基-L-丙胺醯基)胺基]苯基}-7,8-二脫氧-L-甘油-L-古洛糖辛酸； (6S)-2,6-去水-6-(2-{2-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1 H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1 H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基][(3S)-3,4-二羥基丁基]胺甲醯基}氧基)甲基]-5-({N-[(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1 H-吡咯-1-基)乙醯基]-N-(2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32-十一氧雜三十四烷-34-基)-b-丙胺醯基-L-纈胺醯基-L-丙胺醯基}胺基)苯基}乙基)-L-古洛糖酸；及 (6S)-2,6-去水-6-(2-{2-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1 H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1 H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基][(3S)-3,4-二羥基丁基]胺甲醯基}氧基)甲基]-5-({N-[(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1 H-吡咯-1-基)乙醯基]-N-[2-(2-磺基乙氧基)乙基]-b-丙胺醯基-L-纈胺醯基-L-丙胺醯基}胺基)苯基}乙基)-L-古洛糖酸。 在某些實施例中，ADC或其醫藥學上可接受之鹽， D係選自由以下化合物組成之群之Bcl-xL抑制劑，該等化合物之改良之處在於對應於結構式(IIa)、(IIb)、(IIc)或(IId)之#位置的氫並不存在，從而形成單價基團： W2.01、W2.02、W2.03、W2.04、W2.05、W2.06、W2.07、W2.08、W2.09、W2.10、W2.11、W2.12、W2.13、W2.14、W2.15、W2.16、W2.17、W2.18、W2.19、W2.20、W2.21、W2.22、W2.23、W2.24、W2.25、W2.26、W2.27、W2.28、W2.29、W2.30、W2.31、W2.32、W2.33、W2.34、W2.35、W2.36、W2.37、W2.38、W2.39、W2.40、W2.41、W2.42、W2.43、W2.44、W2.45、W2.46、W2.47、W2.48、W2.49、W2.50、W2.51、W2.52、W2.53、W2.54、W2.55、W2.56、W2.57、W2.58、W2.59、W2.60、W2.61、W2.62、W2.63、W2.64、W2.65、W2.66、W2.67、W2.68、W2.69、W2.70、W2.71、W2.72、W2.73、W2.74、W2.75、W2.76、W2.77、W2.78、W2.79、W2.80、W2.81、W2.82、W2.83、W2.84、W2.85、W2.86、W2.87、W2.88、W2.89、W2.90及W2.91，及其醫藥學上可接受之鹽； L係選自由以下連接子組成之群：IVa.1-IVa.8、IVb.1-IVb.19、IVc.1-IVc.7、IVd.1-IVd.4、Va.1-Va.12、Vb.1-Vb.10、Vc.1-Vc.11、Vd.1-Vd.6、Ve.1-Ve.2、VIa.1、VIc.1-VIc.2、VId.1-VId.4、VIIa.1-VIIa.4、VIIb.1-VIIb.8、VIIc.1-VIIc.6，其中各連接子與該抗體Ab反應，形成共價連接； LK係硫醚；且 m係在1至8範圍內之整數。 在某些實施例中，ADC或其醫藥學上可接受之鹽， D係選自由以下化合物組成之群之Bcl-xL抑制劑，該等化合物之改良之處在於對應於結構式(IIa)、(IIb)、(IIc)或(IId)之#位置的氫並不存在，從而形成單價基團： 6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-3-{1-[(3,5-二甲基-7-{2-[(2-磺基乙基)胺基]乙氧基}三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}吡啶-2-甲酸； 6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-3-{1-[(3-{2-[(2-羧基乙基)胺基]乙氧基}-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}吡啶-2-甲酸； 6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)萘-2-基]-3-{1-[(3,5-二甲基-7-{2-[(2-磺基乙基)胺基]乙氧基}三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}吡啶-2-甲酸； 1-{[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基]胺基}-1,2-二脫氧-D-阿拉伯-己糖醇； 6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-3-(1-{[3-(2-{[3-羥基-2-(羥基甲基)丙基]胺基}乙氧基)-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基]甲基}-5-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-甲酸； 6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1 H)-基]-3-(1-{[3-(2-{[(3S)-3,4-二羥基丁基]胺基}乙氧基)-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基]甲基}-5-甲基-1 H-吡唑-4-基)吡啶-2-甲酸； 及其醫藥學上可接受之鹽； L係選自由呈封閉或開放形式之以下連接子組成之群：IVb.2、IVc.5、IVc.6、IVc.7、IVd.4、Vb.9、Vc.11、VIIa.1、VIIa.3、VIIc.1、VIIc.4及VIIc.5，及其醫藥學上可接受之鹽； LK係硫醚；且 m係在2至4範圍內之整數。 為了形成ADC，合成子(例如表5中所列之合成子)之順丁烯二醯亞胺環可以與抗體Ab反應，形成呈琥珀醯亞胺形式(封閉形式)或琥珀醯胺形式(開放形式)的共價連接。類似地，其他官能基，例如乙醯基鹵化物或乙烯基碸可以與抗體Ab反應，形成共價連接。 在某些實施例中，ADC或其醫藥學上可接受之鹽係選自由以下組成之群：AbA-CZ、AbA-TX、AbA-TV、AbA-YY、AbA-AAA、AbA-AAD、AbB-CZ、AbB-TX、AbB-TV、AbB-YY、AbB-AAD、AbG-CZ、AbG-TX、AbG-TV、AbG-YY、AbG-AAA、AbG-AAD、AbK-CZ、AbK-TX、AbK-TV、AbK-YY、AbK-AAA、AbK-AAD，其中CZ、TX、TV、YY、AAA及AAD係表5中所揭示之合成子，且其中該等合成子係呈開放或封閉形式。 在一個實施例中，ADC或其醫藥學上可接受之鹽係：
Figure 02_image1341
(i)， 其中m係2，Ab係hEGFR抗體，其中該hEGFR抗體包括含SEQ ID NO: 12中所述之胺基酸序列之重鏈CDR3結構域、含SEQ ID NO: 11中所述之胺基酸序列之重鏈CDR2結構域及含SEQ ID NO:10中所述之胺基酸序列之重鏈CDR1結構域；以及含SEQ ID NO: 8中所述之胺基酸序列之輕鏈CDR3結構域、含SEQ ID NO: 7中所述之胺基酸序列之輕鏈CDR2結構域及含SEQ ID NO: 6中所述之胺基酸序列之輕鏈CDR1結構域；視情況，其中該hEGFR抗體包括含SEQ ID NO: 9中所述之胺基酸序列之重鏈可變區及含SEQ ID NO: 5中所述之胺基酸序列之輕鏈可變區；視情況，其中該hEGFR抗體包括含SEQ ID NO:41中所述之胺基酸序列之重鏈恆定區及/或含SEQ ID NO:43中所述之胺基酸序列之輕鏈恆定區；視情況，其中該hEGFR抗體包括含SEQ ID NO: 15中所述之胺基酸序列之重鏈及SEQ ID NO: 13中所述之胺基酸序列之輕鏈；視情況，其中該hEGFR抗體包括含SEQ ID NO:102中所述之胺基酸序列之重鏈及含SEQ ID NO: 13中所述之胺基酸序列之輕鏈。 在一個實施例中，ADC或其醫藥學上可接受之鹽係：
Figure 02_image1343
(i)， 其中m係2，Ab係hEGFR抗體，其中該hEGFR抗體包括含SEQ ID NO: 18中所述之胺基酸序列之重鏈CDR3結構域、含SEQ ID NO: 17中所述之胺基酸序列之重鏈CDR2結構域及含SEQ ID NO:16中所述之胺基酸序列之重鏈CDR1結構域；以及含SEQ ID NO: 25中所述之胺基酸序列之輕鏈CDR3結構域、含SEQ ID NO: 24中所述之胺基酸序列之輕鏈CDR2結構域及含SEQ ID NO: 23中所述之胺基酸序列之輕鏈CDR1結構域；視情況，其中該hEGFR抗體包括含SEQ ID NO: 72中所述之胺基酸序列之重鏈可變區及含SEQ ID NO: 73中所述之胺基酸序列之輕鏈可變區；視情況，其中該hEGFR抗體包括含SEQ ID NO:41中所述之胺基酸序列之重鏈恆定區及/或含SEQ ID NO:43中所述之胺基酸序列之輕鏈恆定區；視情況，其中該hEGFR抗體包括含SEQ ID NO: 93中所述之胺基酸序列之重鏈及SEQ ID NO: 95中所述之胺基酸序列之輕鏈；視情況，其中該hEGFR抗體包括含SEQ ID NO:94中所述之胺基酸序列之重鏈及含SEQ ID NO: 95中所述之胺基酸序列之輕鏈。 在一個實施例中，ADC或其醫藥學上可接受之鹽係：
Figure 02_image1345
(ii)， 其中m係2，Ab係hEGFR抗體，其中該hEGFR抗體包括含SEQ ID NO: 12中所述之胺基酸序列之重鏈CDR3結構域、含SEQ ID NO: 11中所述之胺基酸序列之重鏈CDR2結構域及含SEQ ID NO:10中所述之胺基酸序列之重鏈CDR1結構域；以及含SEQ ID NO: 8中所述之胺基酸序列之輕鏈CDR3結構域、含SEQ ID NO: 7中所述之胺基酸序列之輕鏈CDR2結構域及含SEQ ID NO: 6中所述之胺基酸序列之輕鏈CDR1結構域；視情況，其中該hEGFR抗體包括含SEQ ID NO: 9中所述之胺基酸序列之重鏈可變區及含SEQ ID NO: 5中所述之胺基酸序列之輕鏈可變區；視情況，其中該hEGFR抗體包括含SEQ ID NO:41中所述之胺基酸序列之重鏈恆定區及/或含SEQ ID NO:43中所述之胺基酸序列之輕鏈恆定區；視情況，其中該hEGFR抗體包括含SEQ ID NO: 15中所述之胺基酸序列之重鏈及SEQ ID NO: 13中所述之胺基酸序列之輕鏈；視情況，其中該hEGFR抗體包括含SEQ ID NO:102中所述之胺基酸序列之重鏈及含SEQ ID NO: 13中所述之胺基酸序列之輕鏈。 在一個實施例中，ADC或其醫藥學上可接受之鹽係：
Figure 02_image1347
(ii)， 其中m係2，Ab係hEGFR抗體，其中該hEGFR抗體包括含SEQ ID NO: 18中所述之胺基酸序列之重鏈CDR3結構域、含SEQ ID NO: 17中所述之胺基酸序列之重鏈CDR2結構域及含SEQ ID NO:16中所述之胺基酸序列之重鏈CDR1結構域；以及含SEQ ID NO: 25中所述之胺基酸序列之輕鏈CDR3結構域、含SEQ ID NO: 24中所述之胺基酸序列之輕鏈CDR2結構域及含SEQ ID NO: 23中所述之胺基酸序列之輕鏈CDR1結構域；視情況，其中該hEGFR抗體包括含SEQ ID NO: 72中所述之胺基酸序列之重鏈可變區及含SEQ ID NO: 73中所述之胺基酸序列之輕鏈可變區；視情況，其中該hEGFR抗體包括含SEQ ID NO:41中所述之胺基酸序列之重鏈恆定區及/或含SEQ ID NO:43中所述之胺基酸序列之輕鏈恆定區；視情況，其中該hEGFR抗體包括含SEQ ID NO: 93中所述之胺基酸序列之重鏈及SEQ ID NO: 95中所述之胺基酸序列之輕鏈；視情況，其中該hEGFR抗體包括含SEQ ID NO:94中所述之胺基酸序列之重鏈及含SEQ ID NO: 95中所述之胺基酸序列之輕鏈。 在一個實施例中，ADC或其醫藥學上可接受之鹽係：
Figure 02_image1349
(iii)， 其中m係2，Ab係hEGFR抗體，其中該hEGFR抗體包括含SEQ ID NO: 12中所述之胺基酸序列之重鏈CDR3結構域、含SEQ ID NO: 11中所述之胺基酸序列之重鏈CDR2結構域及含SEQ ID NO:10中所述之胺基酸序列之重鏈CDR1結構域；以及含SEQ ID NO: 8中所述之胺基酸序列之輕鏈CDR3結構域、含SEQ ID NO: 7中所述之胺基酸序列之輕鏈CDR2結構域及含SEQ ID NO: 6中所述之胺基酸序列之輕鏈CDR1結構域；視情況，其中該hEGFR抗體包括含SEQ ID NO: 9中所述之胺基酸序列之重鏈可變區及含SEQ ID NO: 5中所述之胺基酸序列之輕鏈可變區；視情況，其中該hEGFR抗體包括含SEQ ID NO:41中所述之胺基酸序列之重鏈恆定區及/或含SEQ ID NO:43中所述之胺基酸序列之輕鏈恆定區；視情況，其中該hEGFR抗體包括含SEQ ID NO: 15中所述之胺基酸序列之重鏈及SEQ ID NO: 13中所述之胺基酸序列之輕鏈；視情況，其中該hEGFR抗體包括含SEQ ID NO:102中所述之胺基酸序列之重鏈及含SEQ ID NO: 13中所述之胺基酸序列之輕鏈。 在一個實施例中，ADC或其醫藥學上可接受之鹽係：
Figure 02_image1351
(iii)， 其中m係2，Ab係hEGFR抗體，其中該hEGFR抗體包括含SEQ ID NO: 18中所述之胺基酸序列之重鏈CDR3結構域、含SEQ ID NO: 17中所述之胺基酸序列之重鏈CDR2結構域及含SEQ ID NO:16中所述之胺基酸序列之重鏈CDR1結構域；以及含SEQ ID NO: 25中所述之胺基酸序列之輕鏈CDR3結構域、含SEQ ID NO: 24中所述之胺基酸序列之輕鏈CDR2結構域及含SEQ ID NO: 23中所述之胺基酸序列之輕鏈CDR1結構域；視情況，其中該hEGFR抗體包括含SEQ ID NO: 72中所述之胺基酸序列之重鏈可變區及含SEQ ID NO: 73中所述之胺基酸序列之輕鏈可變區；視情況，其中該hEGFR抗體包括含SEQ ID NO:41中所述之胺基酸序列之重鏈恆定區及/或含SEQ ID NO:43中所述之胺基酸序列之輕鏈恆定區；視情況，其中該hEGFR抗體包括含SEQ ID NO: 93中所述之胺基酸序列之重鏈及SEQ ID NO: 95中所述之胺基酸序列之輕鏈；視情況，其中該hEGFR抗體包括含SEQ ID NO:94中所述之胺基酸序列之重鏈及含SEQ ID NO: 95中所述之胺基酸序列之輕鏈。 在一個實施例中，ADC或其醫藥學上可接受之鹽係：
Figure 02_image1353
(iv)， 其中m係2，Ab係hEGFR抗體，其中該hEGFR抗體包括含SEQ ID NO: 12中所述之胺基酸序列之重鏈CDR3結構域、含SEQ ID NO: 11中所述之胺基酸序列之重鏈CDR2結構域及含SEQ ID NO:10中所述之胺基酸序列之重鏈CDR1結構域；以及含SEQ ID NO: 8中所述之胺基酸序列之輕鏈CDR3結構域、含SEQ ID NO: 7中所述之胺基酸序列之輕鏈CDR2結構域及含SEQ ID NO: 6中所述之胺基酸序列之輕鏈CDR1結構域；視情況，其中該hEGFR抗體包括含SEQ ID NO: 9中所述之胺基酸序列之重鏈可變區及含SEQ ID NO: 5中所述之胺基酸序列之輕鏈可變區；視情況，其中該hEGFR抗體包括含SEQ ID NO:41中所述之胺基酸序列之重鏈恆定區及/或含SEQ ID NO:43中所述之胺基酸序列之輕鏈恆定區；視情況，其中該hEGFR抗體包括含SEQ ID NO: 15中所述之胺基酸序列之重鏈及SEQ ID NO: 13中所述之胺基酸序列之輕鏈；視情況，其中該hEGFR抗體包括含SEQ ID NO:102中所述之胺基酸序列之重鏈及含SEQ ID NO: 13中所述之胺基酸序列之輕鏈。 在一個實施例中，ADC或其醫藥學上可接受之鹽係：
Figure 02_image1355
(iv) 其中m係2，Ab係hEGFR抗體，其中該hEGFR抗體包括含SEQ ID NO: 18中所述之胺基酸序列之重鏈CDR3結構域、含SEQ ID NO: 17中所述之胺基酸序列之重鏈CDR2結構域及含SEQ ID NO:16中所述之胺基酸序列之重鏈CDR1結構域；以及含SEQ ID NO: 25中所述之胺基酸序列之輕鏈CDR3結構域、含SEQ ID NO: 24中所述之胺基酸序列之輕鏈CDR2結構域及含SEQ ID NO: 23中所述之胺基酸序列之輕鏈CDR1結構域；視情況，其中該hEGFR抗體包括含SEQ ID NO: 72中所述之胺基酸序列之重鏈可變區及含SEQ ID NO: 73中所述之胺基酸序列之輕鏈可變區；視情況，其中該hEGFR抗體包括含SEQ ID NO:41中所述之胺基酸序列之重鏈恆定區及/或含SEQ ID NO:43中所述之胺基酸序列之輕鏈恆定區；視情況，其中該hEGFR抗體包括含SEQ ID NO: 93中所述之胺基酸序列之重鏈及SEQ ID NO: 95中所述之胺基酸序列之輕鏈；視情況，其中該hEGFR抗體包括含SEQ ID NO:94中所述之胺基酸序列之重鏈及含SEQ ID NO: 95中所述之胺基酸序列之輕鏈。 在一個實施例中，ADC或其醫藥學上可接受之鹽係：
Figure 02_image1357
(v)， 其中m係2，Ab係hEGFR抗體，其中該hEGFR抗體包括含SEQ ID NO: 12中所述之胺基酸序列之重鏈CDR3結構域、含SEQ ID NO: 11中所述之胺基酸序列之重鏈CDR2結構域及含SEQ ID NO:10中所述之胺基酸序列之重鏈CDR1結構域；以及含SEQ ID NO: 8中所述之胺基酸序列之輕鏈CDR3結構域、含SEQ ID NO: 7中所述之胺基酸序列之輕鏈CDR2結構域及含SEQ ID NO: 6中所述之胺基酸序列之輕鏈CDR1結構域；視情況，其中該hEGFR抗體包括含SEQ ID NO: 9中所述之胺基酸序列之重鏈可變區及含SEQ ID NO: 5中所述之胺基酸序列之輕鏈可變區；視情況，其中該hEGFR抗體包括含SEQ ID NO:41中所述之胺基酸序列之重鏈恆定區及/或含SEQ ID NO:43中所述之胺基酸序列之輕鏈恆定區；視情況，其中該hEGFR抗體包括含SEQ ID NO: 15中所述之胺基酸序列之重鏈及SEQ ID NO: 13中所述之胺基酸序列之輕鏈；視情況，其中該hEGFR抗體包括含SEQ ID NO:102中所述之胺基酸序列之重鏈及含SEQ ID NO: 13中所述之胺基酸序列之輕鏈。 在一個實施例中，ADC或其醫藥學上可接受之鹽係：
Figure 02_image1359
(v)， 其中m係2，Ab係hEGFR抗體，其中該hEGFR抗體包括含SEQ ID NO: 18中所述之胺基酸序列之重鏈CDR3結構域、含SEQ ID NO: 17中所述之胺基酸序列之重鏈CDR2結構域及含SEQ ID NO:16中所述之胺基酸序列之重鏈CDR1結構域；以及含SEQ ID NO: 25中所述之胺基酸序列之輕鏈CDR3結構域、含SEQ ID NO: 24中所述之胺基酸序列之輕鏈CDR2結構域及含SEQ ID NO: 23中所述之胺基酸序列之輕鏈CDR1結構域；視情況，其中該hEGFR抗體包括含SEQ ID NO: 72中所述之胺基酸序列之重鏈可變區及含SEQ ID NO: 73中所述之胺基酸序列之輕鏈可變區；視情況，其中該hEGFR抗體包括含SEQ ID NO:41中所述之胺基酸序列之重鏈恆定區及/或含SEQ ID NO:43中所述之胺基酸序列之輕鏈恆定區；視情況，其中該hEGFR抗體包括含SEQ ID NO: 93中所述之胺基酸序列之重鏈及SEQ ID NO: 95中所述之胺基酸序列之輕鏈；視情況，其中該hEGFR抗體包括含SEQ ID NO:94中所述之胺基酸序列之重鏈及含SEQ ID NO: 95中所述之胺基酸序列之輕鏈。 在一個實施例中，ADC或其醫藥學上可接受之鹽係：
Figure 02_image1361
(vi)， 其中m係2，Ab係hEGFR抗體，其中該hEGFR抗體包括含SEQ ID NO: 12中所述之胺基酸序列之重鏈CDR3結構域、含SEQ ID NO: 11中所述之胺基酸序列之重鏈CDR2結構域及含SEQ ID NO:10中所述之胺基酸序列之重鏈CDR1結構域；以及含SEQ ID NO: 8中所述之胺基酸序列之輕鏈CDR3結構域、含SEQ ID NO: 7中所述之胺基酸序列之輕鏈CDR2結構域及含SEQ ID NO: 6中所述之胺基酸序列之輕鏈CDR1結構域；視情況，其中該hEGFR抗體包括含SEQ ID NO: 9中所述之胺基酸序列之重鏈可變區及含SEQ ID NO: 5中所述之胺基酸序列之輕鏈可變區；視情況，其中該hEGFR抗體包括含SEQ ID NO:41中所述之胺基酸序列之重鏈恆定區及/或含SEQ ID NO:43中所述之胺基酸序列之輕鏈恆定區；視情況，其中該hEGFR抗體包括含SEQ ID NO: 15中所述之胺基酸序列之重鏈及SEQ ID NO: 13中所述之胺基酸序列之輕鏈；視情況，其中該hEGFR抗體包括含SEQ ID NO:102中所述之胺基酸序列之重鏈及含SEQ ID NO: 13中所述之胺基酸序列之輕鏈。 在一個實施例中，ADC或其醫藥學上可接受之鹽係：
Figure 02_image1363
(vi)， 其中m係2，Ab係hEGFR抗體，其中該hEGFR抗體包括含SEQ ID NO: 18中所述之胺基酸序列之重鏈CDR3結構域、含SEQ ID NO: 17中所述之胺基酸序列之重鏈CDR2結構域及含SEQ ID NO:16中所述之胺基酸序列之重鏈CDR1結構域；以及含SEQ ID NO: 25中所述之胺基酸序列之輕鏈CDR3結構域、含SEQ ID NO: 24中所述之胺基酸序列之輕鏈CDR2結構域及含SEQ ID NO: 23中所述之胺基酸序列之輕鏈CDR1結構域；視情況，其中該hEGFR抗體包括含SEQ ID NO: 72中所述之胺基酸序列之重鏈可變區及含SEQ ID NO: 73中所述之胺基酸序列之輕鏈可變區；視情況，其中該hEGFR抗體包括含SEQ ID NO:41中所述之胺基酸序列之重鏈恆定區及/或含SEQ ID NO:43中所述之胺基酸序列之輕鏈恆定區；視情況，其中該hEGFR抗體包括含SEQ ID NO: 93中所述之胺基酸序列之重鏈及SEQ ID NO: 95中所述之胺基酸序列之輕鏈；視情況，其中該hEGFR抗體包括含SEQ ID NO:94中所述之胺基酸序列之重鏈及含SEQ ID NO: 95中所述之胺基酸序列之輕鏈。 Bcl-xL抑制劑(包括彈頭)及合成子，以及其製備方法描述於US 2016-0339117 (AbbVie Inc.)中，該案以引用的方式併入本文中。 5. 合成 ADC 之方法本文所描述之Bcl-xL抑制劑及合成子可以使用已知的標準有機化學技術合成。用於合成Bcl-xL抑制劑及合成子之通用流程提供於下，該等Bcl-xL抑制劑及合成子可以原樣使用或經修飾以合成全範圍的本文所描述之Bcl-xL抑制劑及合成子。用於合成可用於指導之例示性Bcl-xL抑制劑及合成子的具體方法提供於 實例部分中。ADC同樣可以藉由標準方法製備，諸如與以下中所描述之方法類似的方法：Hamblett等人, 2004, 「Effects of Drug Loading on the Antitumor Activity of a Monoclonal Antibody Drug Conjugate」, Clin. Cancer Res.10:7063-7070；Doronina等人, 2003, 「Development of potent and highly efficacious monoclonal antibody auristatin conjugates for cancer therapy」, Nat. Biotechnol.21(7):778-784；及Francisco等人, 2003, Blood102:1458-1465。舉例而言，具有每份抗體四份藥物之ADC可以藉由以下方式製備：在37℃下，用過量還原劑，諸如DTT或TCEP部分還原抗體，保持30分鐘，接著藉由用含1 mM DTPA之DPBS經SEPHADEX ®G-25樹脂溶離來更換緩衝液。再用DPBS稀釋溶離液，且抗體之硫醇濃度可以使用5,5'-二硫代雙(2-硝基苯甲酸)[艾爾曼氏試劑(Ellman's reagent)]量測。在4℃下添加過量(例如5倍)之連接子-藥物合成子，保持1小時，且可以藉由添加大量過量(例如20倍)半胱胺酸來淬滅結合反應。所得ADC混合物可以在PBS中平衡之SEPHADEX G-25上純化以移除未反應之合成子，必要時脫鹽，且藉由尺寸排阻層析法純化。所得ADC接著可以例如經由0.2 μm過濾器無菌過濾，且必要時凍乾以便儲存。在某些實施例中，所有鏈間半胱胺酸二硫鍵均經連接子-藥物結合物置換。一個實施例係關於一種製備ADC之方法，其包含使本文所描述之合成子與抗體在使得合成子共價連接至抗體之條件下接觸。 前述Bcl-xL抑制劑、連接子及其合成子的實例，以及其製備方法可以見於美國專利公開案第US 2016/0339117號，其完整內容以引用的方式併入本文中。 用於合成可以用於合成全範圍本文所描述之ADC之例示性ADC的具體方法提供於 實例部分中。 5.1 用於合成 Bcl - xL 抑制劑之通用方法在以下流程中，各種取代基Ar 1、Ar 2、Z 1、R 4、R 10、R 11a及R 11b係如 實施方式部分中所定義。 5.1.1. 合成化合物 (6) 流程 1
Figure 02_image1365
流程1中描述中間物(6)之合成。化合物(1)可以用BH 3·THF處理以提供化合物(2)。該反應通常在環境溫度下於諸如(但不限於)四氫呋喃之溶劑中進行。化合物(3)可以藉由在氰基亞甲基三丁基磷烷存在下用
Figure 02_image1367
處理化合物(2)來製備。該反應通常在高溫下於諸如(但不限於)甲苯之溶劑中進行。化合物(3)可以在諸如(但不限於)三乙胺之鹼存在下用乙烷-1,2-二醇處理以提供化合物(4)。該反應通常在高溫下進行，且該反應可以在微波條件下進行。化合物(4)可以用諸如(但不限於)正丁基鋰之強鹼處理，隨後添加碘甲烷，以提供化合物(5)。該添加及反應通常係在低溫下於諸如(但不限於)四氫呋喃之溶劑中進行，之後升溫至環境溫度進行處理。化合物(5)可以用N-碘代琥珀醯亞胺處理以提供化合物(6)。該反應通常在環境溫度下於諸如(但不限於)N,N-二甲基甲醯胺之溶劑中進行。 5.1.2. 合成化合物 (12) 流程 2
Figure 02_image1369
流程2中描述中間物(12)之合成。化合物(3)可以在ZnCl 2·Et 2O或N,N'-偶氮異丁腈(AIBN)存在下用三正丁基烯丙基錫烷處理以提供化合物(10) (Yamamoto等人, 1998, Heterocycles 47:765-780)。該反應通常在-78℃下於諸如(但不限於)二氯甲烷之溶劑中進行。化合物(10)可以在此項技術中已知用於硼氫化/氧化之標準條件下處理以提供化合物(11)。舉例而言，在諸如(但不限於)四氫呋喃之溶劑中用諸如BH 3·THF之試劑處理化合物(10)，隨後在諸如(但不限於)氫氧化鈉之鹼存在下，用諸如(但不限於)過氧化氫之氧化劑處理中間物烷基硼烷加合物將提供化合物(11) (Brown等人, 1968, J. Am. Chem. Soc. 86:397)。通常，BH 3·THF之添加係在低溫下進行，隨後升溫至環境溫度，之後添加過氧化氫及氫氧化鈉以產生醇產物。化合物(12)可以根據流程1，如先前關於化合物(6)所描述產生。 5.1.3. 合成化合物 (15) 流程 3
Figure 02_image1371
流程3中描述中間物(15)之合成。化合物(3)可以在100℃下與硫脲於乙酸與48% HBr水溶液之溶劑混合物中反應，得到中間物，該中間物隨後可以在諸如(但不限於)含20% v/v乙醇之水之溶劑混合物中用氫氧化鈉處理以提供化合物(13)。化合物(13)可以在諸如(但不限於)乙醇鈉之鹼存在下與2-氯乙醇反應以提供化合物(14)。該反應通常在環境溫度或高溫下於諸如(但不限於)乙醇之溶劑中進行。化合物(15)可以根據流程1，如先前關於化合物(6)所描述產生。 5.1.4. 合成化合物 (22) 流程 4
Figure 02_image1373
流程4中描述化合物(22)之合成。化合物(16)可以在諸如(但不限於)碳酸鉀之鹼存在下與碘甲烷反應以提供化合物(17)。該反應通常在環境溫度或高溫下於諸如(但不限於)丙酮或N,N-二甲基甲醯胺之溶劑中進行。化合物(17)可以在光化學條件下在苯甲酮存在下與甲苯磺醯氰反應以提供化合物(18) (參見Kamijo等人, 2011, Org. Lett., 13:5928-5931)。該反應通常在環境溫度下於諸如(但不限於)乙腈或苯之溶劑中，使用Riko 100W中壓汞燈作為光源進行。化合物(18)可以與氫氧化鋰於諸如(但不限於)水及四氫呋喃或水及甲醇之混合物之溶劑系統中反應以提供化合物(19)。化合物(19)可以用BH 3·THF處理以提供化合物(20)。該反應通常在環境溫度下於諸如(但不限於)四氫呋喃之溶劑中進行。化合物(21)可以藉由在氰基亞甲基三丁基磷烷存在下用
Figure 02_image1375
處理化合物(20)來製備。該反應通常在高溫下於諸如(但不限於)甲苯之溶劑中進行。化合物(21)可以用N-碘代琥珀醯亞胺處理以提供化合物(22)。該反應通常在環境溫度下於諸如(但不限於)N,N-二甲基甲醯胺之溶劑中進行。 5.1.5. 合成化合物 (24) 流程 5
Figure 02_image1377
流程5中描述吡唑化合物(24)之合成。化合物(22)可以在諸如(但不限於)乙醚或四氫呋喃之溶劑中用諸如(但不限於)氫化鋰鋁之還原劑處理以提供化合物(23)。通常，該反應係在0℃下進行，隨後升溫至環境溫度或高溫。化合物(23)可以與二碳酸二第三丁酯在本文或文獻中所描述之標準條件下反應以提供化合物(24)。 5.1.6. 合成化合物 (24a) 流程 6
Figure 02_image1379
流程6中描述中間物(24a)之合成。化合物(22a)可以使用文獻中所描述之條件水解以提供化合物(23a)。通常，該反應係在高溫下在氫氧化鉀存在下於諸如(但不限於)乙二醇之溶劑中進行(參見Roberts等人, 1994, J. Org. Chem. 59:6464-6469；Yang等人, 2013, Org. Lett., 15:690-693)。化合物(24a)可以藉由庫爾提斯重排(Curtius rearrangement)，使用文獻中所描述之條件由化合物(23a)製備。舉例而言，化合物(23a)可以與疊氮化鈉在四丁基溴化銨、三氟甲磺酸鋅(II)及二碳酸二第三丁酯存在下反應以提供化合物(24a)(參見Lebel等人, Org. Lett., 2005, 7:4107-4110)。通常，該反應係在高溫下，較佳在40至50℃下於諸如(但不限於)四氫呋喃之溶劑中進行。 5.1.7. 合成化合物 (29) 流程 7
Figure 02_image1381
如流程7中所示，式(27)之化合物可以藉由使式(25)之化合物與3-溴-6-氟吡啶甲酸第三丁酯(26)在諸如(但不限於)N,N-二異丙基乙胺或三乙胺之鹼存在下反應來製備。該反應通常在惰性氛圍下在高溫下於諸如(但不限於)二甲亞碸之溶劑中進行。式(27)之化合物可以與4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼㖦(28)在本文或文獻中所描述之硼基化條件下反應，以提供式(29)之化合物。 5.1.8. 合成化合物 (38) 流程 8
Figure 02_image1383
流程8描述製備含有繫栓至金剛烷之-Nu(親核試劑)及以第三丁酯形式保護之吡啶甲酸酯之中間物的方法。化合物(30)可以與化合物(31)在本文或文獻中所描述之鈴木偶合(Suzuki Coupling)條件下反應以提供甲基化合物(32)。化合物(32)可以用諸如(但不限於)三乙胺之鹼處理，隨後用甲烷磺醯氯處理以提供化合物(33)。該添加通常在低溫下於諸如(但不限於)二氯甲烷之溶劑中進行，之後升溫至環境溫度。化合物(33)可以與式(34)之親核試劑(Nu)反應以提供化合物(35)。親核試劑之實例包括(但不限於)疊氮化鈉、甲胺、氨及亞胺基二碳酸二第三丁酯。化合物(17)可以與氫氧化鋰反應以提供化合物(36)。該反應通常在環境溫度下於諸如(但不限於)四氫呋喃、甲醇、水或其混合物之溶劑中進行。化合物(36)可以與式(37)之化合物在本文所描述或文獻中易於得到之醯胺化條件下反應以得到式(38)之化合物。 5.1.9. 合成化合物 (42) 及 (43) 流程 9
Figure 02_image1385
流程9顯示用於製備增溶之Bcl-xL抑制劑的代表性方法。Bcl-xL抑制劑可以使用如後續流程中所描述的以增溶基團修飾一級胺且接著將所得二級胺連接至連接子的通用方法合成。舉例而言，化合物(41)可以藉由使化合物(39)與化合物(40)反應來製備。該反應通常在環境溫度下於諸如(但不限於)N,N-二甲基甲醯胺之溶劑中進行。化合物(41)可以與三氟乙酸反應以提供化合物(43)。該反應通常在環境溫度下於諸如(但不限於)二氯甲烷之溶劑中進行。流程9中所示之另一實例係化合物(39)與乙烯基膦酸二乙酯反應，隨後與溴三甲基矽烷及烯丙基三甲基矽烷反應以提供化合物(42)。在本文所描述之Bcl-xL抑制劑上引入增溶基團的其他實例包括(但不限於)還原胺化反應、烷基化及醯胺化反應。 5.1.10. 合成化合物 (47) 流程 10
Figure 02_image1387
流程10顯示藉由醯胺化反應引入增溶基團。Bcl-xL抑制劑可以使用如後續流程中所描述的以增溶基團修飾一級胺或二級胺且接著將所得二級胺連接至連接子的通用方法合成。舉例而言，化合物(45)可以依序用HATU及化合物(44)處理，以提供化合物(46)。化合物(46)可以在諸如(但不限於)N, N-二甲基甲醯胺之溶劑中用二乙胺處理以得到化合物(47)。 5.1.11. 合成化合物 (51) 流程 11
Figure 02_image1389
流程11顯示用於製備增溶之Bcl-xL抑制劑的代表性方法。Bcl-xL抑制劑可以使用以間隔基修飾一級胺以得到以不同方式保護之二胺的通用方法合成。未保護之二級胺可以用增溶基團修飾。如後續流程中所描述，經保護胺脫除保護基揭露連接子連接之位點。舉例而言，化合物(39)可以在此項技術中已知之條件下用諸如(但不限於)4-側氧基哌啶-1-甲酸第三丁酯(48)之試劑還原烷基化以提供二級胺(49)。化合物(50)可以藉由使化合物(49)與乙烯磺酸4-((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)-2,2-二甲基丁酯(40)反應來製備。該反應通常在環境溫度下於諸如(但不限於)N,N-二甲基甲醯胺之溶劑中進行。化合物(40)可以與三氟乙酸反應以提供化合物(51)。該反應通常在環境溫度下於諸如(但不限於)二氯甲烷之溶劑中進行。 5.1.12. 合成化合物 (61) 流程 12
Figure 02_image1391
流程12描述合成增溶之Bcl-xL抑制劑的方法。化合物(52)可以與甲烷磺醯氯在諸如(但不限於)三乙胺之鹼存在下反應以提供化合物(53)。該反應通常在低溫下於諸如(但不限於)二氯甲烷之溶劑中進行。化合物(53)可以用氨之甲醇溶液處理以提供化合物(54)。該反應通常在高溫下進行，且該反應可以在微波條件下進行。化合物(56)可以藉由使化合物(55)在諸如(但不限於)N,N-二異丙基乙胺之鹼存在下反應來製備。該反應通常在環境溫度下於諸如(但不限於)N,N-二甲基甲醯胺之溶劑中進行。化合物(56)可以用二碳酸二第三丁酯及4-(二甲基胺基)吡啶處理以提供化合物(57)。該反應通常在環境溫度下於諸如(但不限於)四氫呋喃之溶劑中進行。化合物(59)可以藉由使化合物(57)與式(58)之
Figure 111128039-A0304-1
酸酯(或等效之
Figure 111128039-A0304-1
酸)在本文或文獻中所描述之鈴木偶合條件下反應來製備。雙(2,5-二側氧基吡咯啶-1-基)碳酸酯可以與化合物(37)反應，隨後與化合物(59)反應，以提供化合物(60)。該反應通常在環境溫度下於諸如(但不限於)乙腈之溶劑中進行。化合物(61)可以藉由用三氟乙酸處理化合物(60)製備。該反應通常在環境溫度下於諸如(但不限於)二氯甲烷之溶劑中進行。 5.1.13. 合成化合物 (70) 流程 13
Figure 02_image1393
流程13描述5-羥基四氫異喹啉中間物之合成。化合物(63)可以藉由用N-溴代琥珀醯亞胺處理化合物(62)來製備。該反應通常在環境溫度下於諸如(但不限於)N,N-二甲基甲醯胺之溶劑中進行。化合物(63)可以在諸如(但不限於)碳酸鉀之鹼存在下與苯甲基溴反應以提供化合物(64)。該反應通常在高溫下於諸如(但不限於)丙酮之溶劑中進行。化合物(64)可以在諸如(但不限於)三乙胺之鹼及諸如(但不限於)化合物(65)之催化劑存在下用一氧化碳及甲醇處理。該反應通常在高溫下在惰性氛圍下進行。化合物(65)可以用諸如(但不限於)鹽酸之二噁烷溶液之酸處理以提供化合物(66)。該反應通常在環境溫度下於諸如(但不限於)四氫呋喃之溶劑中進行。化合物(67)可以藉由使化合物(66)與3-溴-6-氟吡啶甲酸第三丁酯在諸如(但不限於)三乙胺之鹼存在下反應來製備。該反應通常在惰性氛圍下在高溫下於諸如(但不限於)二甲亞碸之溶劑中進行。化合物(67)可以與式(68)之
Figure 111128039-A0304-1
酸(其中Ad係本發明化合物(例如式(IIa)至(IId)之化合物)之甲基金剛烷部分)在本文或文獻中所描述之鈴木偶合條件下反應以提供化合物(69)。化合物(70)可以藉由使化合物(69)與氫氣在Pd(OH) 2存在下反應來製備。該反應通常在高溫下於諸如(但不限於)四氫呋喃之溶劑中進行。 5.1.14. 合成化合物 (75) 流程 14
Figure 02_image1395
流程14顯示用於製備增溶之Bcl-xL抑制劑的代表性方法。Bcl-xL抑制劑可以使用如後續流程中所描述的以增溶基團修飾Ar 2取代基且接著將胺連接至連接子之通用方法合成。舉例而言，化合物(71)可以與2-溴乙酸第三丁酯在諸如(但不限於)碳酸鉀之鹼存在下於諸如(但不限於)N, N-二甲基甲醯胺之溶劑中反應。化合物(72)可以在諸如(但不限於)甲醇、四氫呋喃或其混合物之溶劑中用氫氧化鋰水溶液處理以提供化合物(73)。化合物(74)可以藉由在先前所描述之條件下用化合物(37)使化合物(73)醯胺化獲得。化合物(74)可以用諸如(但不限於)三氟乙酸或HCl之酸處理，以提供式(75)之Bcl-xL抑制劑。該反應通常在環境溫度下於諸如(但不限於)二氯甲烷或1,4-二噁烷之溶劑中進行。 5.1.2. 用於合成合成子之通用方法在以下流程中，各種取代基Ar 1、Ar 2、Z 1、Y、G、R 11a及R 11b係如 實施方式部分中所定義。 5.2.1. 合成化合物 (89) 流程 15
Figure 02_image1397
如流程15中所示，式(77)之化合物(其中PG係適當的鹼不穩定保護基且AA(2)係Cit、Ala或Lys)可以與4-(胺基苯基)甲醇(78)在本文所描述或文獻中易於得到之醯胺化條件下反應以提供化合物(79)。化合物(80)可以藉由使化合物(79)與諸如(但不限於)二乙胺之鹼反應來製備。該反應通常在環境溫度下於諸如(但不限於)N,N-二甲基甲醯胺之溶劑中進行。化合物(81)(其中PG係適當的鹼或酸不穩定保護基且AA(1)係Val或Phe)可以與化合物(80)在本文所描述或文獻中易於得到之醯胺化條件下反應以提供化合物(82)。適當時，化合物(83)可以藉由用二乙胺或三氟乙酸處理化合物(82)製備。該反應通常在環境溫度下於諸如(但不限於)二氯甲烷之溶劑中進行。化合物(84)(其中Sp係間隔基)可以與化合物(83)反應以提供化合物(85)。該反應通常在環境溫度下於諸如(但不限於)N,N-二甲基甲醯胺之溶劑中進行。化合物(85)可以與雙(4-硝基苯基)碳酸酯(86)在諸如(但不限於)N,N-二異丙基乙胺之鹼存在下反應，以提供化合物(87)。該反應通常在環境溫度下於諸如(但不限於)N,N-二甲基甲醯胺之溶劑中進行。化合物(87)可以與化合物(88)在諸如(但不限於)N,N-二異丙基乙胺之鹼存在下反應，以提供化合物(89)。該反應通常在環境溫度下於諸如(但不限於)N,N-二甲基甲醯胺之溶劑中進行。 5.2.2. 合成化合物 (94) 及 (96) 流程 16
Figure 02_image1399
流程16描述將替代性mAb-連接子連接至二肽合成子。化合物(88)可以與化合物(90)在諸如(但不限於)N,N-二異丙胺之鹼存在下反應，以提供化合物(91)。該反應通常在環境溫度下於諸如(但不限於)N,N-二甲基甲醯胺之溶劑中進行。化合物(92)可以藉由使化合物(91)與二乙胺反應來製備。該反應通常在環境溫度下於諸如(但不限於)N,N-二甲基甲醯胺之溶劑中進行。化合物(93)(其中X 1係Cl、Br或I)可以與化合物(92)在本文所描述或文獻中易於得到之醯胺化條件下反應以提供化合物(94)。化合物(92)可以與式(95)之化合物在本文所描述或文獻中易於得到之醯胺化條件下反應以提供化合物(96)。 5.2.3. 合成化合物 (106) 流程 17
Figure 02_image1401
流程17描述乙烯基葡萄糖苷酸連接子中間物及合成子之合成。三乙酸(2R,3R,4S,5S,6S)-2-溴-6-(甲氧基羰基)四氫-2H-哌喃-3,4,5-三基酯(97)可以用氧化銀處理，隨後用4-溴-2-硝基苯酚(98)處理以提供三乙酸(2S,3R,4S,5S,6S)-2-(4-溴-2-硝基苯氧基)-6-(甲氧基羰基)四氫-2H-哌喃-3,4,5-三基酯(99)。該反應通常在環境溫度下於諸如(但不限於)乙腈之溶劑中進行。三乙酸(2S,3R,4S,5S,6S)-2-(4-溴-2-硝基苯氧基)-6-(甲氧基羰基)四氫-2H-哌喃-3,4,5-三基酯(99)可以與(E)-第三丁基二甲基((3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼㖦-2-基)烯丙基)氧基)矽烷(100)在諸如(但不限於)碳酸鈉之鹼及諸如(但不限於)參(二苯亞甲基丙酮)二鈀(Pd 2(dba) 3)之催化劑存在下反應，以提供三乙酸(2S,3R,4S,5S,6S)-2-(4-((E)-3-((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)丙-1-烯-1-基)-2-硝基苯氧基)-6-(甲氧基羰基)四氫-2H-哌喃-3,4,5-三基酯(101)。該反應通常在高溫下於諸如(但不限於)四氫呋喃之溶劑中進行。三乙酸(2S,3R,4S,5S,6S)-2-(2-胺基-4-((E)-3-羥基丙-1-烯-1-基)苯氧基)-6-(甲氧基羰基)四氫-2H-哌喃-3,4,5-三基酯(102)可以藉由使三乙酸(2S,3R,4S,5S,6S)-2-(4-((E)-3-((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)丙-1-烯-1-基)-2-硝基苯氧基)-6-(甲氧基羰基)四氫-2H-哌喃-3,4,5-三基酯(101)與鋅在諸如(但不限於)鹽酸之酸存在下反應來製備。該添加通常係在低溫下於諸如(但不限於)四氫呋喃、水或其混合物之溶劑中進行，之後升溫至環境溫度。三乙酸(2S,3R,4S,5S,6S)-2-(2-胺基-4-((E)-3-羥基丙-1-烯-1-基)苯氧基)-6-(甲氧基羰基)四氫-2H-哌喃-3,4,5-三基酯(102)可以與(3-氯-3-側氧基丙基)胺基甲酸(9H-茀-9-基)甲酯(103)在諸如(但不限於)N,N-二異丙基乙胺之鹼存在下反應，以提供三乙酸(2S,3R,4S,5S,6S)-2-(2-(3-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)丙醯胺基)-4-((E)-3-羥基丙-1-烯-1-基)苯氧基)-6-(甲氧基羰基)四氫-2H-哌喃-3,4,5-三基酯(104)。該添加通常在低溫下於諸如(但不限於)二氯甲烷之溶劑中進行，之後升溫至環境溫度。化合物(88)可以與三乙酸(2S,3R,4S,5S,6S)-2-(2-(3-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)丙醯胺基)-4-((E)-3-羥基丙-1-烯-1-基)苯氧基)-6-(甲氧基羰基)四氫-2H-哌喃-3,4,5-三基酯(104)在諸如(但不限於)N-乙基-N-異丙基丙-2-胺之鹼存在下反應，隨後處理且與化合物(105)在諸如(但不限於)N,N-二異丙基乙胺之鹼存在下反應以提供化合物(106)。該等反應通常在環境溫度下於諸如(但不限於)N,N-二甲基甲醯胺之溶劑中進行。 5.2.4. 合成化合物 (115) 流程 18
Figure 02_image1403
流程18描述代表性2-醚葡萄糖苷酸連接子中間物及合成子之合成。三乙酸(2S,3R,4S,5S,6S)-2-溴-6-(甲氧基羰基)四氫-2H-哌喃-2,4,5-三基酯(97)可以與2,4-二羥基苯甲醛(107)在碳酸銀存在下反應以提供三乙酸(2S,3R,4S,5S,6S)-2-(4-甲醯基-3-羥基苯氧基)-6-(甲氧基羰基)四氫-2H-哌喃-3,4,5-三基酯(108)。該反應通常在高溫下於諸如(但不限於)乙腈之溶劑中進行。三乙酸(2S,3R,4S,5S,6S)-2-(4-甲醯基-3-羥基苯氧基)-6-(甲氧基羰基)四氫-2H-哌喃-3,4,5-三基酯(108)可以用硼氫化鈉處理以提供三乙酸(2S,3R,4S,5S,6S)-2-(3-羥基-4-(羥基甲基)苯氧基)-6-(甲氧基羰基)四氫-2H-哌喃-3,4,5-三基酯(109)。該添加通常係在低溫下於諸如(但不限於)四氫呋喃、甲醇或其混合物之溶劑中進行，之後升溫至環境溫度。三乙酸(2S,3R,4S,5S,6S)-2-(4-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)-3-羥基苯氧基)-6-(甲氧基羰基)四氫-2H-哌喃-3,4,5-三基酯(110)可以藉由使三乙酸(2S,3R,4S,5S,6S)-2-(3-羥基-4-(羥基甲基)苯氧基)-6-(甲氧基羰基)四氫-2H-哌喃-3,4,5-三基酯(109)與第三丁基二甲基矽烷基氯在咪唑存在下反應來製備。該反應通常在低溫下於諸如(但不限於)二氯甲烷之溶劑中進行。三乙酸(2S,3R,4S,5S,6S)-2-(3-(2-(2-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)乙氧基)乙氧基)-4-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)苯氧基)-6-(甲氧基羰基)四氫-2H-哌喃-3,4,5-三基酯(111)可以藉由使三乙酸(2S,3R,4S,5S,6S)-2-(4-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)-3-羥基苯氧基)-6-(甲氧基羰基)四氫-2H-哌喃-3,4,5-三基酯(110)與(2-(2-羥基乙氧基)乙基)胺基甲酸(9H-茀-9-基)甲酯在三苯膦及諸如(但不限於)二氮烯-1,2-二甲酸二第三丁酯之偶氮二羧酸酯存在下反應來製備。該反應通常在環境溫度下於諸如(但不限於)甲苯之溶劑中進行。三乙酸(2S,3R,4S,5S,6S)-2-(3-(2-(2-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)乙氧基)乙氧基)-4-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)苯氧基)-6-(甲氧基羰基)四氫-2H-哌喃-3,4,5-三基酯(111)可以用乙酸處理以提供三乙酸(2S,3R,4S,5S,6S)-2-(3-(2-(2-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)乙氧基)乙氧基)-4-(羥基甲基)苯氧基)-6-(甲氧基羰基)四氫-2H-哌喃-3,4,5-三基酯(112)。該反應通常在環境溫度下於諸如(但不限於)水、四氫呋喃或其混合物之溶劑中進行。三乙酸(2S,3R,4S,5S,6S)-2-(3-(2-(2-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)乙氧基)乙氧基)-4-((((4-硝基苯氧基)羰基)氧基)甲基)苯氧基)-6-(甲氧基羰基)四氫-2H-哌喃-3,4,5-三基酯(113)可以藉由使三乙酸(2S,3R,4S,5S,6S)-2-(3-(2-(2-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)乙氧基)乙氧基)-4-(羥基甲基)苯氧基)-6-(甲氧基羰基)四氫-2H-哌喃-3,4,5-三基酯(112)與雙(4-硝基苯基)碳酸酯在諸如(但不限於)N-乙基-N-異丙基丙-2-胺之鹼存在下反應來製備。該反應通常在環境溫度下於諸如(但不限於)N,N-二甲基甲醯胺之溶劑中進行。三乙酸(2S,3R,4S,5S,6S)-2-(3-(2-(2-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)乙氧基)乙氧基)-4-((((4-硝基苯氧基)羰基)氧基)甲基)苯氧基)-6-(甲氧基羰基)四氫-2H-哌喃-3,4,5-三基酯(113)可以在諸如(但不限於)N-乙基-N-異丙基丙-2-胺之鹼存在下用化合物(88)處理，隨後用氫氧化鋰處理以提供化合物(114)。該反應通常係在環境溫度下於諸如(但不限於)N,N-二甲基甲醯胺、四氫呋喃、甲醇或其混合物之溶劑中進行。化合物(115)可以藉由使化合物(114)與化合物(84)在諸如(但不限於)N-乙基-N-異丙基丙-2-胺之鹼存在下反應來製備。該反應通常在環境溫度下於諸如(但不限於)N,N-二甲基甲醯胺之溶劑中進行。 5.2.5. 合成化合物 (119) 流程 19
Figure 02_image1405
流程19描述將第二增溶基團引入糖連接子中。化合物(116)可以與(R)-2-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-3-磺基丙酸(117)在本文所描述或文獻中易於得到之醯胺化條件下反應，隨後用諸如(但不限於)二乙胺之鹼處理，以提供化合物(118)。化合物(118)可以與化合物(84)(其中Sp係間隔基)在本文所描述或文獻中易於得到之醯胺化條件下反應，以提供化合物(119)。 5.2.6. 合成化合物 (129) 流程 20
Figure 02_image1407
流程20描述4-醚葡萄糖苷酸連接子中間物及合成子之合成。4-(2-(2-溴乙氧基)乙氧基)-2-羥基苯甲醛(122)可以藉由使2,4-二羥基苯甲醛(120)與1-溴-2-(2-溴乙氧基)乙烷(121)在諸如(但不限於)碳酸鉀之鹼存在下反應來製備。該反應通常在高溫下於諸如(但不限於)乙腈之溶劑中進行。4-(2-(2-溴乙氧基)乙氧基)-2-羥基苯甲醛(122)可以用疊氮化鈉處理以提供4-(2-(2-疊氮基乙氧基)乙氧基)-2-羥基苯甲醛(123)。該反應通常在環境溫度下於諸如(但不限於)N,N-二甲基甲醯胺之溶劑中進行。三乙酸(2S,3R,4S,5S,6S)-2-(5-(2-(2-疊氮基乙氧基)乙氧基)-2-甲醯基苯氧基)-6-(甲氧基羰基)四氫-2H-哌喃-3,4,5-三基酯(125)可以藉由使4-(2-(2-疊氮基乙氧基)乙氧基)-2-羥基苯甲醛(123)與三乙酸(3R,4S,5S,6S)-2-溴-6-(甲氧基羰基)四氫-2H-哌喃-3,4,5-三基酯(124)在氧化銀存在下反應來製備。該反應通常在環境溫度下於諸如(但不限於)乙腈之溶劑中進行。三乙酸(2S,3R,4S,5S,6S)-2-(5-(2-(2-疊氮基乙氧基)乙氧基)-2-甲醯基苯氧基)-6-(甲氧基羰基)四氫-2H-哌喃-3,4,5-三基酯(125)在Pd/C存在下氫化將提供三乙酸(2S,3R,4S,5S,6S)-2-(5-(2-(2-胺基乙氧基)乙氧基)-2-(羥基甲基)苯氧基)-6-(甲氧基羰基)四氫-2H-哌喃-3,4,5-三基酯(126)。該反應通常在環境溫度下於諸如(但不限於)四氫呋喃之溶劑中進行。三乙酸(2S,3R,4S,5S,6S)-2-(5-(2-(2-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)乙氧基)乙氧基)-2-(羥基甲基)苯氧基)-6-(甲氧基羰基)四氫-2H-哌喃-3,4,5-三基酯(127)可以藉由在諸如(但不限於)N-乙基-N-異丙基丙-2-胺之鹼存在下，用氯甲酸(9H-茀-9-基)甲酯處理三乙酸(2S,3R,4S,5S,6S)-2-(5-(2-(2-胺基乙氧基)乙氧基)-2-(羥基甲基)苯氧基)-6-(甲氧基羰基)四氫-2H-哌喃-3,4,5-三基酯(126)來製備。該反應通常在低溫下於諸如(但不限於)二氯甲烷之溶劑中進行。化合物(88)可以與三乙酸(2S,3R,4S,5S,6S)-2-(5-(2-(2-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)乙氧基)乙氧基)-2-(羥基甲基)苯氧基)-6-(甲氧基羰基)四氫-2H-哌喃-3,4,5-三基酯(127)在諸如(但不限於) N-乙基-N-異丙基丙-2-胺之鹼存在下反應，隨後用氫氧化鋰處理以提供化合物(128)。該反應通常在低溫下於諸如(但不限於)N,N-二甲基甲醯胺之溶劑中進行。化合物(129)可以藉由使化合物(128)與化合物(84)在諸如(但不限於) N-乙基-N-異丙基丙-2-胺之鹼存在下反應來製備。該反應通常在環境溫度下於諸如(但不限於)N,N-二甲基甲醯胺之溶劑中進行。 5.2.7. 合成化合物 (139) 流程 21
Figure 02_image1409
流程21描述胺基甲酸酯葡萄糖苷酸中間物及合成子之合成。2-胺基-5-(羥基甲基)苯酚(130)可以用氫化鈉處理且接著與4-甲基苯磺酸2-(2-疊氮基乙氧基)乙酯(131)反應以提供(4-胺基-3-(2-(2-疊氮基乙氧基)乙氧基)苯基)甲醇(132)。該反應通常在高溫下於諸如(但不限於)N,N-二甲基甲醯胺之溶劑中進行。2-(2-(2-疊氮基乙氧基)乙氧基)-4-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)苯胺(133)可以藉由使(4-胺基-3-(2-(2-疊氮基乙氧基)乙氧基)苯基)甲醇(132)與第三丁基二甲基氯矽烷在咪唑存在下反應來製備。該反應通常在環境溫度下於諸如(但不限於)四氫呋喃之溶劑中進行。2-(2-(2-疊氮基乙氧基)乙氧基)-4-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)苯胺(133)可以在諸如(但不限於)三乙胺之鹼存在下用光氣處理，隨後與三乙酸(3R,4S,5S,6S)-2-羥基-6-(甲氧基羰基)四氫-2H-哌喃-3,4,5-三基酯(134)在諸如(但不限於)三乙胺之鹼存在下反應，以提供三乙酸(2S,3R,4S,5S,6S)-2-(((2-(2-(2-疊氮基乙氧基)乙氧基)-4-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)苯基)胺甲醯基)氧基)-6-(甲氧基羰基)四氫-2H-哌喃-3,4,5-三基酯(135)。該反應通常在諸如(但不限於)甲苯之溶劑中進行，且該添加通常在低溫下進行，在添加光氣之後升溫至環境溫度且在添加三乙酸(3R,4S,5S,6S)-2-羥基-6-(甲氧基羰基)四氫-2H-哌喃-3,4,5-三基酯(134)之後在高溫下加熱。三乙酸(2S,3R,4S,5S,6S)-2-(((2-(2-(2-疊氮基乙氧基)乙氧基)-4-(羥基甲基)苯基)胺甲醯基)氧基)-6-(甲氧基羰基)四氫-2H-哌喃-3,4,5-三基酯(136)可以藉由使三乙酸(2S,3R,4S,5S,6S)-2-(((2-(2-(2-疊氮基乙氧基)乙氧基)-4-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)苯基)胺甲醯基)氧基)-6-(甲氧基羰基)四氫-2H-哌喃-3,4,5-三基酯(135)與對甲苯磺酸單水合物反應來製備。該反應通常在環境溫度下於諸如(但不限於)甲醇之溶劑中進行。三乙酸(2S,3R,4S,5S,6S)-2-(((2-(2-(2-疊氮基乙氧基)乙氧基)-4-(羥基甲基)苯基)胺甲醯基)氧基)-6-(甲氧基羰基)四氫-2H-哌喃-3,4,5-三基酯(136)可以與雙(4-硝基苯基)碳酸酯在諸如(但不限於)N,N-二異丙基乙胺之鹼存在下反應，以提供三乙酸(2S,3R,4S,5S,6S)-2-(((2-(2-(2-疊氮基乙氧基)乙氧基)-4-((((4-硝基苯氧基)羰基)氧基)甲基)苯基)胺甲醯基)氧基)-6-(甲氧基羰基)四氫-2H-哌喃-3,4,5-三基酯(137)。該反應通常在環境溫度下於諸如(但不限於)N,N-二甲基甲醯胺之溶劑中進行。三乙酸(2S,3R,4S,5S,6S)-2-(((2-(2-(2-疊氮基乙氧基)乙氧基)-4-((((4-硝基苯氧基)羰基)氧基)甲基)苯基)胺甲醯基)氧基)-6-(甲氧基羰基)四氫-2H-哌喃-3,4,5-三基酯(137)可以與化合物在諸如(但不限於)N,N-二異丙基乙胺之鹼存在下反應，隨後用氫氧化鋰水溶液處理，以提供化合物(138)。第一步驟通常在環境溫度下於諸如(但不限於)N,N-二甲基甲醯胺之溶劑中進行，且第二步驟通常在低溫下於諸如(但不限於)甲醇之溶劑中進行。化合物(138)可以用參(2-羧基乙基))膦鹽酸鹽處理，隨後與化合物(84)在諸如(但不限於)N,N-二異丙基乙胺之鹼存在下反應，以提供化合物(139)。與參(2-羧基乙基))膦鹽酸鹽之反應通常在環境溫度下於諸如(但不限於)四氫呋喃、水或其混合物之溶劑中進行，且與N-琥珀醯亞胺基6-順丁烯二醯亞胺己酸酯之反應通常在環境溫度下於諸如(但不限於)N,N-二甲基甲醯胺之溶劑中進行。 5.2.8. 合成化合物 (149) 流程 22
Figure 02_image1411
流程22描述半乳糖苷連接子中間物及合成子之合成。四乙酸(2S,3R,4S,5S,6R)-6-(乙醯氧基甲基)四氫-2H-哌喃-2,3,4,5-四基酯(140)可以在乙酸中用HBr處理以提供三乙酸(2R,3S,4S,5R,6S)-2-(乙醯氧基甲基)-6-溴四氫-2H-哌喃-3,4,5-三基酯(141)。該反應通常在氮氣氛圍下於環境溫度下進行。三乙酸(2R,3S,4S,5R,6S)-2-(乙醯氧基甲基)-6-(4-甲醯基-2-硝基苯氧基)四氫-2H-哌喃-3,4,5-三基酯(143)可以藉由在4-羥基-3-硝基苯甲醛(142)存在下，用氧化銀(I)處理三乙酸(2R,3S,4S,5R,6S)-2-(乙醯氧基甲基)-6-溴四氫-2H-哌喃-3,4,5-三基酯(141)來製備。該反應通常在環境溫度下於諸如(但不限於)乙腈之溶劑中進行。三乙酸(2R,3S,4S,5R,6S)-2-(乙醯氧基甲基)-6-(4-甲醯基-2-硝基苯氧基)四氫-2H-哌喃-3,4,5-三基酯(143)可以用硼氫化鈉處理以提供三乙酸(2R,3S,4S,5R,6S)-2-(乙醯氧基甲基)-6-(4-(羥基甲基)-2-硝基苯氧基)四氫-2H-哌喃-3,4,5-三基酯(144)。該反應通常在低溫下於諸如(但不限於)四氫呋喃、甲醇或其混合物之溶劑中進行。三乙酸(2R,3S,4S,5R,6S)-2-(乙醯氧基甲基)-6-(2-胺基-4-(羥基甲基)苯氧基)四氫-2H-哌喃-3,4,5-三基酯(145)可以藉由在鹽酸存在下，用鋅處理三乙酸(2R,3S,4S,5R,6S)-2-(乙醯氧基甲基)-6-(4-(羥基甲基)-2-硝基苯氧基)四氫-2H-哌喃-3,4,5-三基酯(144)來製備。該反應通常在氮氣氛圍下在低溫下於諸如(但不限於)四氫呋喃之溶劑中進行。三乙酸(2S,3R,4S,5S,6R)-2-(2-(3-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)丙醯胺基)-4-(羥基甲基)苯氧基)-6-(乙醯氧基甲基)四氫-2H-哌喃-3,4,5-三基酯(146)可以藉由使三乙酸(2R,3S,4S,5R,6S)-2-(乙醯氧基甲基)-6-(2-胺基-4-(羥基甲基)苯氧基)四氫-2H-哌喃-3,4,5-三基酯(145)與(3-氯-3-側氧基丙基)胺基甲酸(9H-茀-9-基)甲酯(103)在諸如(但不限於)N,N-二異丙基乙胺之鹼存在下反應來製備。該反應通常在低溫下於諸如(但不限於)二氯甲烷之溶劑中進行。三乙酸(2S,3R,4S,5S,6R)-2-(2-(3-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)丙醯胺基)-4-(羥基甲基)苯氧基)-6-(乙醯氧基甲基)四氫-2H-哌喃-3,4,5-三基酯(146)可以與雙(4-硝基苯基)碳酸酯在諸如(但不限於)N,N-二異丙基乙胺之鹼存在下反應，以提供三乙酸(2S,3R,4S,5S,6R)-2-(2-(3-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)丙醯胺基)-4-((((4-硝基苯氧基)羰基)氧基)甲基)苯氧基)-6-(乙醯氧基甲基)四氫-2H-哌喃-3,4,5-三基酯(147)。該反應通常在低溫下於諸如(但不限於)N,N-二甲基甲醯胺之溶劑中進行。三乙酸(2S,3R,4S,5S,6R)-2-(2-(3-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)丙醯胺基)-4-((((4-硝基苯氧基)羰基)氧基)甲基)苯氧基)-6-(乙醯氧基甲基)四氫-2H-哌喃-3,4,5-三基酯(147)可以與化合物(88)在諸如(但不限於)N,N-二異丙基乙胺之鹼存在下反應，隨後用氫氧化鋰處理，以提供化合物(148)。第一步驟通常在低溫下於諸如(但不限於)N,N-二甲基甲醯胺之溶劑中進行，且第二步驟通常在環境溫度下於諸如(但不限於)甲醇之溶劑中進行。化合物(148)可以在諸如(但不限於)N,N-二異丙基乙胺之鹼存在下用化合物(84)(其中Sp係間隔基)處理，以提供化合物(149)。該反應通常在環境溫度下於諸如(但不限於)N,N-二甲基甲醯胺之溶劑中進行。 5.3 用於合成抗 EGFR ADC 之 通用方法本發明亦揭示一種製備根據結構式(I)之抗EGFR ADC的方法：
Figure 02_image1413
其中D、L、LK、Ab及m係如 實施方式部分中所定義。該方法包含： 在30至40℃下，用有效量之二硫化物還原劑處理抗體水溶液至少15分鐘，且接著將該抗體溶液冷卻至20-27℃； 將包含選自2.1至2.176(表5)之群之合成子的水/二甲亞碸溶液添加至該還原之抗體溶液中； 將該溶液之pH值調至pH 7.5至8.5；以及 使該反應進行48至80小時以形成該ADC； 其中如藉由電噴霧質譜法所量測，對於各琥珀醯亞胺水解成琥珀醯胺，質量移位18±2 amu；且 其中該ADC視情況藉由疏水相互作用層析法純化。 在某些實施例中，抗體係hEGFR抗體，其中hEGFR抗體包含AbA、AbB、AbG及AbK之重鏈及輕鏈CDR。 本發明亦針對一種藉由上述方法製備之抗EGFR ADC。 在某些實施例中，本申請案中揭示之抗EGFR ADC係藉由使結合腫瘤細胞上表現之hEGFR細胞表面受體或腫瘤相關抗原的抗體與藥物-連接子合成子在使得藥物-連接子合成子如式(IIe)或(IIf)所示經由順丁烯二醯亞胺部分或如(IIg)中所示經由乙醯基鹵化物，或如(IIh)中所示經由乙烯基碸共價連接至該抗體的條件下接觸而形成，
Figure 02_image1415
其中D係根據如上文所描述之結構式(IIa)、(IIb)、(IIc)或(IId)之Bcl-xL抑制劑藥物且L 1係在合成子連接至抗體時並非由順丁烯二醯亞胺、乙醯基鹵化物或乙烯基碸形成之連接子部分；且其中藥物-連接子合成子係選自由合成子實例2.1至2.176(表5)或其醫藥學上可接受之鹽組成之群。 在某些實施例中，接觸步驟係在使得抗EGFR ADC具有2、3或4之DAR的條件下進行。 6. 抗 EGFR ADC 之純化ADC之純化可以使得收集到具有某些DAR之ADC的方式實現。舉例而言，可以使用HIC樹脂將高載藥量ADC與具有最佳藥物與抗體比率(DAR)，例如具有4或更小DAR之ADC分離。在一個實施例中，將疏水性樹脂添加至ADC混合物中以使非所需ADC，亦即較高載藥量之ADC，結合該樹脂且可以自該混合物選擇性移除。在某些實施例中，ADC之分離可以藉由使ADC混合物(例如包含4或更小之載藥物種ADC及6或更高之載藥物種ADC的混合物)與疏水性樹脂接觸來達成，其中樹脂量足以允許欲自ADC混合物移除之載藥物種結合。將樹脂與ADC混合物混合在一起，以使欲移除之ADC物種(例如6或更高之載藥物種)結合至樹脂且可以與ADC混合物中之其他ADC物種分離。用於該方法中之樹脂量係基於待移除物種與樹脂之間的重量比，其中所用樹脂量不允許所需載藥物種之大量結合。因此，可以使用方法將平均DAR減小至小於4。另外，亦可使用本文所描述之純化方法分離具有任何所需載藥物種範圍之ADC，例如4或更小之載藥物種、3或更小之載藥物種、2或更小之載藥物種、1或更小之載藥物種。 某種分子基於物種與疏水性樹脂之間之疏水相互作用結合至表面。在一個實施例中，本發明之方法涉及一種依賴疏水性樹脂與ADC混合物之互混的純化方法，其中添加至該混合物中之樹脂量決定將結合之物種(例如DAR為6或更高之ADC)。在自表現系統(例如哺乳動物表現系統)產生抗體及純化之後，抗體經還原並經由結合反應與藥物偶合。所得ADC混合物通常含有具有多種DAR(例如1至8)之ADC。在一個實施例中，ADC混合物包含4或更小之載藥物種及6或更高之載藥物種。根據本發明之方法，ADC混合物可以使用諸如(但不限於)分批法之方法純化，使得選擇具有4或更小之載藥物種之ADC並將其與具有更高載藥量之ADC(例如具有6或更高之載藥物種之ADC)分離。值得注意地，本文所描述之純化方法可以用於分離具有任何所需範圍之DAR，例如4或更小DAR、3或更小DAR，2或更小DAR之ADC。 因此，在一個實施例中，可以使包含4或更小之載藥物種及6或更高之載藥物種的ADC混合物與疏水性樹脂接觸以形成樹脂混合物，其中與該ADC混合物接觸之疏水性樹脂的量足以允許6或更高之載藥物種結合至樹脂，但不允許4或更小之載藥物種大量結合；以及自該ADC混合物移除疏水性樹脂，由此獲得包含ADC之組合物，其中該組合物包含小於15%的6或更高之載藥物種，且其中該ADC包含結合至Bcl-xL抑制劑之抗體。在一個獨立實施例中，本發明之方法包括使包含4或更小之載藥物種及6或更高之載藥物種的ADC混合物與疏水性樹脂接觸以形成樹脂混合物，其中與該ADC混合物接觸之疏水性樹脂的量足以允許6或更高之載藥物種結合至樹脂，但不允許4或更小之載藥物種大量結合；以及自該ADC混合物移除疏水性樹脂，由此獲得包含ADC之組合物，其中該組合物包含小於15%的6或更高之載藥物種，且其中該ADC包含結合至Bcl-xL抑制劑之抗體，其中該疏水性樹脂重量係ADC混合物中6或更高之載藥物種之重量的3至12倍。 本文所描述之ADC分離方法可以使用分批純化方法進行。分批純化方法一般包括將ADC混合物添加至容器中之疏水性樹脂中，混合，且隨後將樹脂自上清液分離。舉例而言，在分批純化之情況下，疏水性樹脂可以在所需平衡緩衝液中製備或平衡。由此可以獲得疏水性樹脂之漿液。接著，可以使ADC混合物與該漿液接觸以吸附欲藉由疏水性樹脂分離之特定ADC物種。接著，可以例如藉由過濾或藉由使漿液沈降並移出上清液，將包含不結合至疏水性樹脂材料之所需ADC的溶液自該漿液分離。所得漿液可以經一或多個洗步驟。為了溶離經結合之ADC，可以降低鹽濃度。在一個實施例中，本發明中使用之方法包括不超過50 g疏水性樹脂。 因此，可以使用分批方法，使包含4或更小之載藥物種及6或更高之載藥物種的ADC混合物與疏水性樹脂接觸以形成樹脂混合物，其中與該ADC混合物接觸之疏水性樹脂的量足以允許6或更高之載藥物種結合至樹脂，但不允許4或更小之載藥物種之大量結合；以及自該ADC混合物移除疏水性樹脂，由此獲得包含ADC之組合物，其中該組合物包含小於15%的6或更高之載藥物種，且其中該ADC包含結合至Bcl-xL抑制劑之抗體。在一個獨立實施例中，使用分批方法，使包含4或更小之載藥物種及6或更高之載藥物種的ADC混合物與疏水性樹脂接觸以形成樹脂混合物，其中與該ADC混合物接觸之疏水性樹脂的量足以允許6或更高之載藥物種結合至樹脂，但不允許4或更小之載藥物種之大量結合；以及自該ADC混合物移除疏水性樹脂，由此獲得包含ADC之組合物，其中該組合物包含小於15%的6或更高之載藥物種，且其中該ADC包含結合至Bcl-xL抑制劑之抗體，其中該疏水性樹脂重量係ADC混合物中6或更高之載藥物種之重量的3至12倍。 或者，在一個獨立實施例中，可以使用循環方法進行純化，藉此該樹脂填充於容器中且使ADC混合物通過疏水性樹脂床，直至移除待分離之特定ADC物種。接著自容器中抽吸出上清液(含有所需ADC物種)且樹脂床可以經歷洗滌步驟。 可以使用循環方法，使包含4或更小之載藥物種及6或更高之載藥物種的ADC混合物與疏水性樹脂接觸以形成樹脂混合物，其中與該ADC混合物接觸之疏水性樹脂的量足以允許6或更高之載藥物種結合至樹脂，但不允許4或更小之載藥物種之大量結合；以及自該ADC混合物移除疏水性樹脂，由此獲得包含ADC之組合物，其中該組合物包含小於15%的6或更高之載藥物種，且其中該ADC包含結合至Bcl-xL抑制劑之抗體。在一個獨立實施例中，使用循環方法，使包含4或更小之載藥物種及6或更高之載藥物種的ADC混合物與疏水性樹脂接觸以形成樹脂混合物，其中與該ADC混合物接觸之疏水性樹脂的量足以允許6或更高之載藥物種結合至樹脂，但不允許4或更小之載藥物種之大量結合；以及自該ADC混合物移除疏水性樹脂，由此獲得包含ADC之組合物，其中該組合物包含小於15%的6或更高之載藥物種，且其中該ADC包含結合至Bcl-xL抑制劑之抗體，其中該疏水性樹脂重量係ADC混合物中6或更高之載藥物種之重量的3至12倍。 或者，可以使用流過法(flow through process)純化ADC混合物以獲得包含具有某一所需DAR之大部分ADC的組合物。在流過法中，將樹脂填充於容器，例如管柱中，並使ADC混合物通過填充之樹脂，以使所需ADC物種基本上不結合至樹脂並流過該樹脂，且非所需ADC物種結合至該樹脂。流過法可以按單程模式(在此情況下，藉由單次通過容器中之樹脂而獲得所關注ADC物種)或按多程模式(在此情況下，藉由多次通過該容器中之樹脂而獲得所關注ADC物種)進行。流過法之進行使得所選重量之樹脂結合至非所需ADC群，且所需ADC(例如DAR 2-4)流過該樹脂且在一或多次通過之後收集於流過液中。 可以使用流過方法，使包含4或更小之載藥物種及6或更高之載藥物種的ADC混合物與疏水性樹脂接觸，其中與該ADC混合物接觸之疏水性樹脂的量足以允許6或更高之載藥物種結合至樹脂，但不允許4或更小之載藥物種之大量結合，其中4或更小之載藥物種穿過樹脂且隨後在一或多次通過後被收集起來，由此獲得包含ADC(例如DAR 2-4)之組合物，其中該組合物包含小於15%的6或更高之載藥物種，且其中該ADC包含結合至Bcl-xL抑制劑之抗體。在一個獨立實施例中，使用流過方法，藉由使ADC混合物穿過樹脂來使包含4或更小之載藥物種及6或更高之載藥物種的ADC混合物與疏水性樹脂接觸，其中與該ADC混合物接觸之疏水性樹脂的量足以允許6或更高之載藥物種結合至樹脂，但不允許4或更小之載藥物種之大量結合，其中4或更小之載藥物種穿過樹脂且隨後被收集起來，由此獲得包含ADC之組合物，其中該組合物包含小於15%的6或更高之載藥物種，且其中該ADC包含結合至Bcl-xL抑制劑之抗體，其中該疏水性樹脂重量係ADC混合物中6或更高之載藥物種之重量的3至12倍。 在流過法之後，樹脂可用一或多種洗滌液洗滌以便進一步回收具有所需DAR範圍之ADC(見於洗滌濾液中)。舉例而言，可以使用具有遞減之導電率的複數種洗滌液進一步回收具有所關注DAR之ADC。自洗滌樹脂獲得的溶離材料隨後可以與由流過法得到之濾液合併以提高具有所關注DAR之ADC的回收率。 前述分批法、循環法及流過法純化方法均係基於使用疏水性樹脂分離高與低ADC載藥量物種。疏水性樹脂包含與ADC之疏水特性相互作用之疏水性基團。ADC上之疏水性基團與疏水性樹脂內之疏水性基團相互作用。疏水性越強，則蛋白質與疏水性樹脂之相互作用越強。 疏水性樹脂通常包含與疏水性配位體(例如烷基或芳基)偶合之基底基質(例如交聯之瓊脂糖或合成共聚物材料)。許多疏水性樹脂係可商購的。實例包括(但不限於)具有低或高取代度之Phenyl Sepharose™ 6 Fast Flow (Pharmacia LKB Biotechnology, AB, Sweden)；Phenyl Sepharose™ High Performance (Pharmacia LKB Biotechnology, AB, Sweden)；Octyl Sepharose™ High Performance (Pharmacia LKB Biotechnology, AB, Sweden)；Fractogel TMEMD Propyl或Fractogel TMEMD Phenyl管柱(E. Merck, Germany)；Macro-Prep™ Methyl或Macro-Prep™ t-Butyl Supports (Bio-Rad, California)；WP HI-Propyl (C 3) TM(J. T. Baker, New Jersey)；及Toyopearl™醚、己基、苯基或丁基(TosoHaas, PA)。在一個實施例中，疏水性樹脂係丁基疏水性樹脂。在另一個實施例中，疏水性樹脂係苯基疏水性樹脂。在另一個實施例中，疏水性樹脂係己基疏水性樹脂、辛基疏水性樹脂或癸基疏水性樹脂。在一個實施例中，疏水性樹脂係具有正丁基配位體之甲基丙烯酸聚合物(例如TOYOPEARL Butyl-600M)。 用於純化ADC混合物以獲得具有所需DAR之組合物的其他方法描述於美國申請案第14/210,602號(美國專利申請公開案第US 2014/0286968號)中，以全文引用的方式併入本文中。 在本發明之某些實施例中，自具有更高或更低DAR之ADC中純化出具有DAR2之本文所描述之ADC。此類純化之DAR2 ADC在本文中稱為「E2」。用於獲得具有E2 抗EGFR ADC之組合物的純化方法。在一個實施例中，本發明提供一種包含ADC混合物之組合物，其中至少75%之ADC係具有DAR2之抗EGFR ADC(如本文所描述之該等ADC)。在另一個實施例中，本發明提供一種包含ADC混合物之組合物，其中至少80%之ADC係具有DAR2之抗EGFR ADC(如本文所描述之該等ADC)。在另一個實施例中，本發明提供一種包含ADC混合物之組合物，其中至少85%之ADC係具有DAR2之抗EGFR ADC(如本文所描述之該等ADC)。在另一個實施例中，本發明提供一種包含ADC混合物之組合物，其中至少90%之ADC係具有DAR2之抗EGFR ADC(如本文所描述之該等ADC)。 7. 抗 EGFR ADC 之用途包括在ADC中之Bcl-xL抑制劑以及藉由ADC遞送之合成子在表現Bcl-xL之細胞中抑制Bcl-xL活性且誘導細胞凋亡。因此，Bcl-xL抑制劑及/或ADC可以用於在細胞中抑制Bcl-xL活性及/或誘導細胞凋亡之方法中。 對於Bcl-xL抑制劑，該方法一般涉及使至少部分依賴於Bcl-xL表現而存活之細胞與足以抑制Bcl-xL活性及/或誘導細胞凋亡之量的Bcl-xL抑制劑接觸。對於ADC，該方法一般涉及使至少部分依賴於Bcl-xL表現而存活且表現ADC之抗體所針對之細胞表面抗原(亦即，EGFR)的細胞與ADC在使得ADC結合該抗原之條件下接觸。 在某些實施例中，ADC之抗體結合EGFR且促進ADC內化至細胞中，在此情況下，遞送Bcl-xL抑制性合成子。該方法可以在活體外於細胞分析中進行以抑制Bcl-xL活性及/或抑制細胞凋亡，或在活體內作為治療需要抑制細胞凋亡及/或誘導細胞凋亡之疾病的治療方法進行。 多種疾病牽涉到失調之細胞凋亡，包括例如自體免疫病症(例如，全身性紅斑性狼瘡症、類風濕性關節炎、移植物抗宿主病、重症肌無力或休格連氏症候群(Sjogren's syndrome))、慢性發炎性病況(例如銀屑病、哮喘或克隆氏病(Crohn's disease))、過度增生性病症(例如乳癌、肺癌)、病毒感染(例如疱疹、乳頭瘤或HIV)，及其他病況，諸如骨關節炎及動脈粥樣硬化。本文所描述之Bcl-xL抑制劑或ADC可以用於治療或改善此等疾病中之任一種。此等治療一般涉及向患有該疾病之個體投與足以提供治療益處之量的本文所描述之Bcl-xL抑制劑或ADC。對於ADC，投與之ADC中抗體之身分將取決於所治療之疾病，即該抗體應當結合將得益於Bcl-xL活性抑制之細胞類型中所表現之細胞表面抗原。所實現之治療益處亦將取決於所治療之具體疾病。在某些情況下，Bcl-xL抑制劑或ADC當作為單藥療法投與時，可以治療或改善疾病本身或該疾病之症狀。在其他情況下，Bcl-xL抑制劑或ADC可以作為包括其他藥劑之總體治療方案之一部分，該等其他試劑與該抑制劑或ADC一起治療或改善所治療之疾病或該疾病之症狀。熟習此項技術者將顯而易知可以作為本文所描述之Bcl-xL抑制劑及/或ADC之輔助或與之一起投與的可用於治療或改善特定疾病之藥劑。 儘管在任何治療方案中總是希望絕對治癒，但提供治療益處無需達成治癒。治療益處可以包括停止或減慢疾病之進展、使疾病消退而非治癒，及/或改善或減慢疾病症狀之進展。存活期相較於統計平均值延長及/或生活品質改善亦可視為治療益處。涉及細胞凋亡失調且在全世界造成顯著健康負擔的一類特定疾病係癌症。在一具體實施例中，本文所描述之Bcl-xL抑制劑及/或ADC可以用於治療癌症。該癌症可以例如為實體腫瘤或血液腫瘤。可以用本文所描述之ADC治療的癌症包括(但不限於)膀胱癌、腦癌、乳癌、骨髓癌症、子宮頸癌、慢性淋巴細胞性白血病、結腸直腸癌、食道癌、肝細胞癌、淋巴母細胞白血病、濾泡性淋巴瘤、T細胞或B細胞起源之淋巴惡性病、黑素瘤、骨髓性白血病、骨髓瘤、口腔癌、卵巢癌、非小細胞肺癌、慢性淋巴細胞性白血病、骨髓瘤、前列腺癌或脾臟癌。ADC尤其有益於治療癌症，因為可以使用抗體使Bcl-xL抑制性合成子特異性靶向腫瘤細胞，由此潛在地避免或改善可能與全身投與未結合之抑制劑有關的非所需副作用及/或毒性。一個實施例係關於一種治療涉及內在細胞凋亡失調之疾病的方法，該方法包含向患有涉及細胞凋亡失調之疾病的個體投與有效提供治療益處之量的本文所描述之ADC，其中該ADC之抗體結合內在細胞凋亡失調之細胞上的細胞表面受體。一個實施例係關於一種治療癌症之方法，其包含向患有癌症之個體投與有效提供治療益處之量的本文所描述之ADC，該ADC能夠結合癌細胞表面上表現的細胞表面受體或腫瘤相關抗原。 在致瘤性癌症之情況下，治療益處除包括上文所論述之作用外，亦可特定地包括停止或減慢腫瘤生長之進展、使腫瘤生長消退、根除一或多個腫瘤及/或使患者存活期相較於所治療癌症之類型及分期之統計平均值增加。在一個實施例中，所治療之癌症係致瘤性癌症。 本發明之ADC能夠同時在活體內及活體外中和人類EGFR活性。因此，該等本發明之ADC可以用於例如在含有hEGFR之細胞培養物中、在人類個體中或在具有與本發明抗體交叉反應之EGFR的其他哺乳動物個體中抑制hEGFR活性。在一個實施例中，本發明提供一種用於抑制hEGFR活性之方法，其包含使hEGFR與本發明之抗體或抗體部分接觸，由此抑制hEGFR活性。舉例而言，在含有或疑似含有hEGFR之細胞培養物中，可以向培養基中添加本發明之抗體或抗體部分以抑制培養物中之hEGFR活性。 在另一個實施例中，本發明之特徵在於一種用於降低個體，有利地患有EGFR活性有害之疾病或病症之個體體內之hEGFR活性的方法。本發明提供用於降低患有此類疾病或病症之個體體內之EGFR活性的方法，該方法包含向該個體投與本發明之ADC以降低個體體內之EGFR活性。較佳地，該EGFR係人類EGFR，且該個體係人類個體。或者，該個體可以為表現本發明之ADC能夠結合之EGFR的哺乳動物。又另外，該個體可以為已引入EGFR(例如藉由投與EGFR或藉由表現EGFR轉殖基因)之哺乳動物。本發明之ADC可以出於治療目的而投與人類個體。另外，本發明之ADC可以投與表現抗體能夠結合之EGFR的非人類哺乳動物以達成獸醫學目的或作為人類疾病之動物模型。就後者而言，此類動物模型可用於評價本發明抗體之治療功效(例如測試投藥劑量及時程)。 如本文所使用，術語「EGFR活性有害之病症」意欲包括在患有該病症之個體中EGFR之存在已顯示會引起或疑似會引起該病症之病理生理學或作為造成該病症惡化之因素的疾病及其他病症。因此，EGFR活性有害之病症係預期EGFR活性降低可緩解病症之症狀及/或進展的病症。該等病症可以例如由患有該病症之個體的生物流體中EGFR之濃度增加(例如，個體之腫瘤、血清、血漿、滑液等中之EGFR濃度增加)證明，該EGFR濃度可以例如使用如上所述之抗EGFR抗體偵測。可以用本發明之ADC，例如包含AbA之ADC治療的病症之非限制性實例包括下文論述之該等病症。舉例而言，適合病症包括(但不限於)多種癌症，包括(但不限於)乳癌、肺癌、神經膠質瘤、前列腺癌、胰臟癌、結腸癌、頭頸癌及腎癌。可以使用本文揭示之組合物及方法治療的癌症之其他實例包括鱗狀細胞癌(例如肺鱗狀細胞癌或頭頸鱗狀細胞癌)、三陰性乳癌、非小細胞肺癌、結腸直腸癌及間皮瘤。在一個實施例中，使用本文所揭示之ADC治療過度表現EGFR或呈EGFR陽性之實體腫瘤，例如抑制實體腫瘤生長或減小其大小。在一個實施例中，本發明係針對EGFR擴增性肺鱗狀細胞癌之治療。在一個實施例中，使用本文所揭示之ADC治療EGFR擴增性頭頸鱗狀細胞癌。在另一個實施例中，使用本文所揭示之ADC治療三陰性乳癌(TNBC)。本文所描述之疾病及病症可以藉由本發明之抗EGFR ADC以及包含此類抗EGFR ADC之醫藥組合物治療。 在某些實施例中，該癌症可以具有EGFR過度表現為特徵。 在其他實施例中，癌症係以具有活化EGFR突變，例如使EGFR信號傳導路徑活化之突變，及/或導致EGFR蛋白過度表現之突變為特徵。在特定例示性實施例中，該活化EGFR突變可以係EGFR基因中之突變。在特定實施例中，該活化EGFR突變係外顯子19缺失突變、外顯子21中之單點取代突變L858R、T790M點突變及/或其組合。 在某些實施例中，將本文所揭示之ADC投與有需要之個體以便治療可能展現表皮生長因子受體(EGFR)含量升高之晚期實體腫瘤類型。此類腫瘤之實例包括(但不限於)頭頸部鱗狀細胞癌、非小細胞肺癌、三陰性乳癌、結腸直腸癌及多形性膠質母細胞瘤。 在某些實施例中，本發明包括一種用於抑制或減少具有實體腫瘤之個體之實體腫瘤生長的方法，該方法包含向該具有實體腫瘤之個體投與本文所描述之抗EGFR ADC，由此抑制或減少該實體腫瘤生長。在某些實施例中，該實體腫瘤係非小細胞肺癌或神經膠母細胞瘤。在其他實施例中，該實體腫瘤係EGFRvIII陽性腫瘤或表現EGFR之實體腫瘤。在其他實施例中，該實體腫瘤係EGFR擴增性實體腫瘤或過度表現EGFR之實體腫瘤。在某些實施例中，本文所描述之抗EGFR ADC係單獨或與另外藥劑，例如放射及/或替莫唑胺組合投與具有多形性膠質母細胞瘤之個體。 在某些實施例中，本發明包括一種用於抑制或減少具有經鑑別為表現EGFR或過度表現EGFR之腫瘤(或表現EGFRvIII之腫瘤)之實體腫瘤的個體中之實體腫瘤生長的方法，該方法包含向具有該實體腫瘤之個體投與本文所描述之抗EGFR ADC，由此抑制或減少實體腫瘤生長。用於鑑別表現EGFR之腫瘤(例如過度表現EGFR之腫瘤)的方法係此項技術中已知的，且包括FDA批准之測試及驗證分析。舉例而言，EGFR pharmDx™分析(Dako North America, Inc.)係一種用於鑑別常規固定以用於組織學評價之正常組織及贅生性組織中之EGFR表現的定性免疫組織化學(IHC)套組系統。EGFR pharmDx特異性偵測表現EGFR之細胞中的EGFR(HER1)蛋白質。此外，亦可使用基於PCR之分析鑑別過度表現EGFR之腫瘤。舉例而言，此等分析可以使用變異EGFR基因(例如SEQ ID NO: 33)及/或cDNA特異性引子且使EGFR基因/cDNA或其一部分擴增。隨後，可以例如藉由凝膠電泳，使用此項技術中已知用於測定PCR產物大小之標準方法分析擴增之PCR產物。此類測試可以用於鑑別能用本文所描述之方法及組合物治療的腫瘤。 此項技術中可用的用於基因療法之任何方法均可根據本發明使用。有關基因療法方法之大體評述，參見Goldspiel等人, 1993, Clinical Pharmacy12:488-505；Wu及Wu, 1991, Biotherapy3:87-95；Tolstoshev, 1993, Ann. Rev. Pharmacol. Toxicol.32:573-596；Mulligan, Science260:926- 932 (1993)；以及Morgan及Anderson, 1993, Ann. Rev. Biochem.62:191-217；May, 1993, TIBTECH11(5):155-215。此項技術中通常已知的可以使用之重組DNA技術方法描述於Ausubel等人 (編), Current Protocols in Molecular Biology,John Wiley &Sons, NY (1993)；及Kriegler, Gene Transfer and Expression, A Laboratory Manual, Stockton Press, NY (1990)中。有關基因療法之各種方法的詳細說明提供於US20050042664 A1中，其以引用的方式併入本文中。 在另一態樣中，本申請案之特徵在於一種治療(例如治癒、抑制、改善、延遲或防止EGFR相關病症發作，或防止其再現或復發)或預防個體之EGFR相關病症的方法。該方法包括：向個體投與足以治療或預防EGFR相關病症之量的EGFR結合劑(尤其是拮抗劑)，例如本文中所描述之抗EGFR抗體或其片段。EGFR拮抗劑，例如抗EGFR抗體或其片段，可以單獨或與如本文所述之其他治療模式組合投與個體。 本發明之ADC可以單獨或組合使用以治療該等疾病。應理解，本發明之ADC可以單獨或與另外藥劑(例如治療劑)組合使用，該另外藥劑係由熟練技術人員根據其預定目的選擇。舉例而言，該另外藥劑可以為此項技術中公認可用於治療藉由本發明之ADC治療之疾病或病況的治療劑。該另外藥劑亦可為賦予治療組合物有益屬性之藥劑，例如影響組合物黏度之藥劑。 應進一步瞭解，意欲包括在本發明內之組合係可用於其預定目的之組合。以下闡述之藥劑係出於說明目的且不欲為限制性的。作為本發明之一部分的組合可以為本發明之抗體及至少一種選自以下清單之另外藥劑。若該組合使得所形成之組合物能執行其預定功能，則該組合亦可包括超過一種另外藥劑，例如兩種或三種另外藥劑。 組合療法可以包括與以下一或多種另外治療劑一起調配及/或共投與的本發明之抗EGFR拮抗劑ADC：例如一或多種細胞因子及生長因子抑制劑、免疫抑制劑、消炎劑(例如全身消炎劑)、抗纖維化藥劑、代謝抑制劑、酶抑制劑，及/或細胞毒性或細胞生長抑制劑、有絲分裂抑制劑、抗腫瘤抗生素、免疫調節劑、用於基因療法之載體、烷基化劑、抗血管生成劑、抗代謝物、含硼藥劑、化學保護劑、激素、抗激素劑、皮質類固醇、光活性治療劑、寡核苷酸、放射性核種藥劑、拓樸異構酶抑制劑、激酶抑制劑或放射增敏劑，如本文中進一步描述。 在一個特定實施例中，本文所描述之抗EGFR ADC係與抗癌劑或抗腫瘤劑組合使用。術語「抗癌劑」及「抗腫瘤劑」係指用於治療惡性病，諸如癌生長之藥物。藥物療法可以單獨或與其他治療(諸如手術或放射療法)組合使用。取決於所涉及器官之性質，可以使用若干類藥物進行癌症治療。舉例而言，乳癌通常用雌激素刺激，且可以用使性激素不活化之藥物治療。類似地，前列腺癌可以用使雄激素，即雄性性激素不活化之藥物治療。可以與本發明之抗EGFR ADC結合使用的抗癌劑包括尤其以下藥劑：
抗癌劑 評述 實例
抗體 (a)除抗EGFR抗體外之抗體；以及 (b)結合不同抗原決定基之抗EGFR抗體 結合在大部分人類癌症之細胞表面上表現之IGF-1R(類胰島素生長因子1型受體)的抗體                結合EGFR(表皮生長因子受體)之抗體；影響EGFR表現或活性之突變可能引起癌症          A12 (完全人類化之mAb) 19D12 (完全人類化之mAb) Cp751-871 (完全人類化之mAb) H7C10 (人類化mAb) αIR3 (小鼠) ScFV/FC (小鼠/人類嵌合體) EM/164 (小鼠)       馬妥珠單抗(Matuzumab)(EMD72000) Erbitux® / 西妥昔單抗 (Imclone) Vectibix® / 帕尼單抗(Panitumumab) (Amgen) mAb 806 尼妥珠單抗(Nimotuxumab)(TheraCIM)       AVEO (AV299) (AVEO) AMG102 (Amgen) 5D5 (OA-5d5) (Genentech) H244G11 (Pierre Fabre)       Ab #14 (MM 121-14) Herceptin® (曲妥珠單抗(Trastuzumab)；Genentech) 1B4C3；2D1D12 (U3 Pharma AG)
結合cMET(間質上皮轉化因子；MET家族受體酪胺酸激酶之成員)之抗體       結合不同抗原決定基之抗ErbB3抗體
靶向IGF1R之小分子 在許多人類癌症之細胞表面上表現的類胰島素生長因子1型受體 NVP-AEW 541-A BMS-536,924 (1H-苯并咪唑-2-基)-1H-吡啶-2-酮) BMS-554,417 賽克力格(Cycloligan) TAE226 PQ401
靶向EGFR之小分子 EGFR(表皮生長因子受體)；過度表現或影響EGFR表現或活性之突變可能引起癌症 Iressa® /吉非替尼(Gefitinib) (AstraZeneca) CI-1033 (PD 183805) (Pfizer) 拉帕替尼(Lapatinib)(GW-572016) (GlaxoSmithKline) Tykerb® /二甲苯磺酸拉帕替尼 (Smith Kline Beecham) Tarceva ® /鹽酸埃羅替尼(Erlotinib HCL)(OSI-774) (OSI Pharma) PKI-166 (Novartis) PD-158780 EKB-569 Tyrphostin AG 1478 (4-(3-氯苯胺基)-6,7-二甲氧基喹唑啉)
靶向cMET之小分子 cMET(間質上皮轉化因子；MET家族受體酪胺酸激酶之成員) PHA665752 ARQ 197
抗代謝物    氟尿嘧啶(5-FU) 卡培他濱(Capecitabine) / XELODA® (HLR Roche) 5-三氟甲基-2'-脫氧尿苷甲胺喋呤鈉 (Trexall) (Barr) 雷替曲塞(Raltitrexed)/Tomudex® (AstraZeneca) 培美曲塞(Pemetrexed) / Alimta® (Lilly) 替加氟(Tegafur) 胞嘧啶阿拉伯糖苷(阿糖胞苷(Cytarabine)，Ara-C) / Thioguanine® (GlaxoSmithKline) 5-氮雜胞苷 6-巰基嘌呤(巰基嘌呤，6-MP) 硫唑嘌呤/ Azasan® (AAIPHARMA LLC) 6-硫鳥嘌呤(6-TG) / Purinethol® (TEVA) 噴司他丁(Pentostatin)/ Nipent® (Hospira Inc.) 磷酸氟達拉濱(Fludarabine phosphate)/ Fludara® (Bayer Health Care) 克拉屈濱(Cladribine)(2-CdA，2-氯去氧腺苷) / Leustatin® (Ortho Biotech)
烷基化劑 烷基化抗腫瘤劑係將烷基連接至DNA的一種烷基化劑。由於癌細胞一般無限制地增殖超過健康細胞增殖，故其對DNA損傷較敏感，且烷基化劑在臨床上用於治療多種腫瘤。 核糖核苷酸還原酶抑制劑(RNR) 環磷醯胺/ 賽特杉(Cytoxan)(BMS) 尼歐薩(Neosar)(TEVA) 異環磷醯胺(Ifosfamide)/ Mitoxana® (ASTA Medica) 噻替派(Thiotepa)(Bedford, Abraxis, Teva) BCNU→1,3-雙(2-氯乙基)-1-亞硝基脲 CCNU→1, -(2-氯乙基)-3-環己基-1-亞硝基脲(甲基CCNU) 六甲基三聚氰胺(六甲蜜胺(Altretamine)，HMM) / Hexalen® (MGI Pharma Inc.) 白消安(Busulfan)/ 馬利蘭(Myleran)(GlaxoSmithKline) 鹽酸丙卡巴肼(Procarbazine HCL)/ 甲基苄肼(Matulane)(Sigma Tau Pharmaceuticals, Inc.) 達卡巴嗪(Dacarbazine)(DTIC) 苯丁酸氮芥(Chlorambucil)/ Leukara® (SmithKline Beecham) 美法侖(Melphalan)/ Alkeran® (GlaxoSmithKline) 順鉑(Cisplatin/Cisplatinum，CDDP) / 鉑替諾(Platinol)(Bristol Myers) 卡鉑(Carboplatin)/ 鉑爾定(Paraplatin)(BMS) 奧沙利鉑(Oxaliplatin)/Eloxitan® (Sanofi-Aventis US)
拓樸異構酶抑制劑 拓樸異構酶抑制劑係經設計以干擾拓樸異構酶(拓樸異構酶I及II)之作用的化學治療劑，拓樸異構酶係在正常細胞週期期間藉由催化DNA股之磷酸二酯主鏈斷裂及重新連接來控制DNA結構之變化的酶。 鹽酸多柔比星(Doxorubicin HCL)/ Doxil® (Alza) 檸檬酸道諾黴素(Daunorubicin citrate)/ Daunoxome® (Gilead) 鹽酸米托蒽醌(Mitoxantrone HCL)/ 諾凡特龍(Novantrone)(EMD Serono) 放線菌素D(Actinomycin D) 依託泊苷(Etoposide)/ Vepesid® (BMS)/ Etopophos® (Hospira, Bedford, Teva Parenteral, Etc.) 鹽酸拓朴替康(Topotecan HCL)/ Hycamtin® (GlaxoSmithKline) 替尼泊苷(Teniposide)(VM-26) / Vumon® (BMS) 鹽酸伊立替康(Irinotecan HCL)(CPT-ll)/ Camptosar® (Pharmacia & Upjohn)
微管靶向劑 微管係細胞骨架之組分之一。在神經細胞軸突中其直徑為約24 nm且長度在數微米至可能數毫米間變化。微管充當細胞內之結構組件且涉及許多細胞過程，包括有絲分裂、細胞質分裂及囊泡運輸。 長春新鹼(Vincristine)/ Oncovin® (Lilly) 硫酸長春花鹼(Vinblastine sulfate)/Velban®(中止) (Lilly) 酒石酸長春瑞賓(Vinorelbine tartrate)/ Navelbine® (PierreFabre) 硫酸長春地辛(Vindesine sulphate) / Eldisine® (Lilly) 太平洋紫杉醇(Paclitaxel)/ Taxol® (BMS) 多西他賽(Docetaxel)/ Taxotere® (Sanofi Aventis US) 奈米粒子太平洋紫杉醇(ABI-007) /Abraxane® (Abraxis BioScience, Inc.) 伊沙匹隆(Ixabepilone)/ IXEMPRA™ (BMS)
激酶抑制劑 激酶係催化磷酸酯基團自高能量磷酸供給分子轉移至特定受質之酶，且用於傳輸信號及調控複雜細胞過程。 甲磺酸伊馬替尼(Imatinib mesylate) / Gleevec (Novartis) 蘋果酸舒尼替尼(Sunitinib malate)/ Sutent® (Pfizer) 甲苯磺酸索拉非尼(Sorafenib tosylate)/ Nexavar® (Bayer) 鹽酸尼羅替尼單水合物(Nilotinib hydrochloride monohydrate)/Tasigna® (Novartis)、奧希替尼(Osimertinib)、考比替尼(Cobimetinib)、曲美替尼(Trametinib)、達拉菲尼(Dabrafenib)、戴那西里
蛋白質合成抑制劑 誘導細胞凋亡 L-天冬醯胺酶/ Elspar® (Merck & Co.)
免疫治療劑 誘導癌症患者展現免疫反應性             抗體/小分子免疫檢查點調節劑 α干擾素 血管生成抑制劑/ Avastin® (Genentech) IL-2→ 介白素2 (Aldesleukin) / Proleukin ® (Chiron) IL-12→介白素12    抗CTLA-4及PR-1療法 Yervoy® (伊派利單抗(ipilimumab)；Bristol-Myers Squibb) Opdivo® (納武單抗(nivolumab)；Bristol-Myers Squibb) Keytrada® (派立珠單抗(pembrolizumab)；Merck)
激素 與閉經及衰老有關的激素療法試圖增加體內某些激素之量以補償年齡或疾病相關之激素降低。激素療法作為癌症治療可降低特定激素之含量或改變癌症使用此等激素生長及擴散之能力。 檸檬酸托瑞米芬(Toremifene citrate)/ Fareston® (GTX, Inc.) 氟維司群(Fulvestrant)/ Faslodex® (AstraZeneca) 鹽酸雷諾昔酚(Raloxifene HCL)/ Evista® (Lilly) 阿那曲唑(Anastrazole)/ Arimidex® (AstraZeneca) 來曲唑(Letrozole)/ Femara® (Novartis) 法屈唑(Fadrozole)(CGS 16949A ) 依西美坦(Exemestane)/ Aromasin® (Pharmacia & Upjohn) 乙酸亮丙立德(Leuprolide acetate)/ Eligard® (QTL USA) Lupron® (TAP Pharm) 乙酸戈舍瑞林(Goserelin acetate)/ Zoladex® (AstraZeneca) 雙羥萘酸曲普瑞林(Triptorelin pamoate)/ Trelstar® (Watson Labs) 布舍瑞林(Buserelin)/ Suprefact® (Sanofi Aventis) 那法瑞林(Nafarelin)/ Synarel® (Pfizer) 西曲瑞克(Cetrorelix)/ Cetrotide® (EMD Serono) 比卡魯胺(Bicalutamide)/ Casodex® (AstraZeneca) 尼魯胺(Nilutamide)/ Nilandron® (Aventis Pharm.) 乙酸甲地孕酮(Megestrol acetate)/ Megace® (BMS) 生長抑素類似物(乙酸奧曲肽(Octreotide acetate)/ Sandostatin® (Novartis))
糖皮質激素 用於減少引起癌症疼痛之腫脹的消炎藥 潑尼龍(Prednisolone) 地塞米松(Dexamethasone)/ Decadron® (Wyeth)
芳香酶抑制劑 包括咪唑類 酮康唑(Ketoconazole)
mTOR抑制劑 mTOR信號傳導路徑最初係在研究免疫抑制劑雷帕黴素期間發現。此高度保守路徑響應於環境因素來調控細胞增殖及代謝，由此經由磷酸肌醇-3-激酶(PI-3K)將細胞生長因子受體信號傳導與細胞生長、增殖及血管生成相關聯。 西羅莫司(Sirolimus)(雷帕黴素(Rapamycin))/ Rapamune® (Wyeth) 坦羅莫司(Temsirolimus)(CCI-779) / Torisel® (Wyeth) 地磷莫司(Deforolimus)(AP23573) / (Ariad Pharm.) 依維莫司(Everolimus)(RAD00I) / Certican® (Novartis)
除以上抗癌劑外，本文所描述之抗EGFR ADC亦可以與第II部分中描述之藥劑組合投與。另外，前述抗癌劑亦可用於本發明之ADC中。 在特定實施例中，本發明之ADC可以單獨或與另一抗癌劑一起投與，該另一抗癌劑與該抗體聯合或協同作用以治療EGFR活性相關疾病。此類抗癌劑包括例如此項技術中熟知之藥劑(例如細胞毒素、化學治療劑、小分子及放射)。抗癌劑之實例包括(但不限於)帕諾雷(Panorex)(Glaxo-Welcome)、美羅華(Rituxan)(IDEC/Genentech/Hoffman la Roche)、麥羅塔(Mylotarg)(Wyeth)、坎帕斯(Campath)(Millennium)、澤娃靈(Zevalin)(IDEC and Schering AG)、百克沙(Bexxar)(Corixa/GSK)、艾必妥(Erbitux)(Imclone/BMS)、阿瓦斯汀(Avastin)(Genentech)及赫賽汀(Herceptin)(Genentech Hoffman la Roche)。其他抗癌劑包括(但不限於)美國專利第7,598,028號及國際公開案第WO2008/100624號中揭示之抗癌劑，其內容以引用的方式併入本文中。一或多種抗癌劑可以在投與本發明之抗體或其抗原結合部分之同時或之前或之後投與。 在本發明之特定實施例中，本文所描述之ADC可以與NAMPT抑制劑(參見US 2013/0303509中之抑制劑實例；AbbVie, Inc.，以引用的方式併入本文中)一起用於組合療法中以治療有需要之個體。NAMPT(又稱為前B細胞集落增強因子(PBEF)及內脂素)係催化菸鹼醯胺磷酸核糖基化(phosphoribosylation)的酶且為補救NAD之兩條路徑之一中的限速酶。在本發明之一個實施例中，本文所描述之抗EGFR抗體及ADC係與NAMPT抑制劑組合投與以治療個體之癌症。 在本發明之特定實施例中，本文所描述之ADC可以與SN-38一起用於組合療法中，SN-38係拓樸異構酶抑制劑伊立替康之活性代謝物。 在本發明之其他實施例中，本文所描述之ADC可以與PARP(聚ADP核糖聚合酶)抑制劑，例如維利帕尼(veliparib)一起用於組合療法中，以治療癌症，包括乳癌、卵巢癌及非小細胞肺癌。 可以與本文所描述之抗EGFR ADC共投與及/或一起調配的另外治療劑之其他實例包括(但不限於)以下一或多種：吸入性類固醇；β-促效劑，例如短效或長效β-促效劑；白三烯或白三烯受體之拮抗劑；組合藥物，諸如ADVAIR；IgE抑制劑，例如抗IgE抗體(例如XOLAIR、奧馬珠單抗(omalizumab))；磷酸二酯酶抑制劑(例如PDE4抑制劑)；黃嘌呤；抗膽鹼激導性劑藥物；肥大細胞穩定劑，諸如色甘酸；IL-4抑制劑；IL-5抑制劑；伊紅趨素(eotaxin)/CCR3抑制劑；組胺或其受體，包括H1、H2、H3及H4之拮抗劑；及前列腺素D或其受體(DP1及CRTH2)之拮抗劑。此等組合可以用於治療例如哮喘及其他呼吸病症。可以與本文所描述之抗EGFR ADC共投與及/或一起調配的另外治療劑之其他實例包括(但不限於)替莫唑胺、依魯替尼、杜維力絲及艾德斯布中之一或多種。 在某些實施例中，ADC係與另外藥劑或另外療法組合投與，其中該另外藥劑係選自由以下組成之群：抗PD1抗體(例如派立珠單抗)、抗PD-L1抗體((例如阿特珠單抗)、抗CTLA-4抗體(例如伊派利單抗)、MEK抑制劑(例如曲美替尼)、ERK抑制劑、BRAF抑制劑(例如達拉菲尼)、奧希替尼、埃羅替尼、吉非替尼、索拉非尼、CDK9抑制劑(例如戴那西里)、MCL-1抑制劑、替莫唑胺、Bcl-xL抑制劑、Bcl-2抑制劑(例如維奈托克)、依魯替尼、mTOR抑制劑(例如依維莫司)、PI3K抑制劑(例如布帕昔布)、杜維力絲、艾德斯布、AKT抑制劑、HER2抑制劑(例如，拉帕替尼)、紫杉烷(例如多西他賽、太平洋紫杉醇、奈米顆粒白蛋白結合型太平洋紫杉醇)、包含奧瑞他汀之ADC、包含PBD之ADC(例如，羅匹妥珠單抗特斯林)、包含類美登素之ADC(例如TDM1)、TRAIL促效劑、蛋白酶體抑制劑(例如硼替佐米)及菸鹼醯胺磷酸核糖轉移酶(NAMPT)抑制劑，或與奧瑞他汀ADC或PBD ADC組合投與。 可以與一或多種抗EGFR抗體或其片段共投與及/或一起調配的治療劑之另外實例包括以下一或多種：TNF拮抗劑(例如TNF受體之可溶性片段，例如p55或p75人類TNF受體或其衍生物，例如75 kD TNFR-IgG (75 kD TNF受體-IgG融合蛋白，ENBREL))；TNF酶拮抗劑，例如TNF轉化酶(TACE)抑制劑；蕈毒鹼受體拮抗劑；TGF-β拮抗劑；干擾素γ；吡非尼酮(perfenidone)；化學治療劑，例如甲胺喋呤、來氟米特(leflunomide)，或西羅莫司(雷帕黴素)或其類似物，例如CCI-779；COX2及cPLA2抑制劑；NSAID；免疫調節劑；p38抑制劑、TPL-2、MK-2及NFkB抑制劑等等。 其他較佳組合係抑制細胞因子之消炎藥(CSAID)；針對其他人類細胞因子或生長因子以及此等細胞因子及生長因子之受體的抗體或拮抗劑，該等細胞因子及生長因子例如IL-1、IL-2、IL-3、IL-4、IL-5、IL-6、IL-7、IL-8、IL-15、IL-16、IL-18、IL-21、IL-31、干擾素、EMAP-II、GM-CSF、FGF、EGF、PDGF及內皮素-1。本發明之抗體或其抗原結合部分可以與針對細胞表面分子，諸如CD2、CD3、CD4、CD8、CD25、CD28、CD30、CD40、CD45、CD69、CD80(B7.1)、CD86(B7.2)、CD90、CTLA、CTLA-4、PD-1，或其配位體，包括CD154(gp39或CD40L)之抗體組合。 較佳之治療劑組合可以干擾發炎級聯反應中之不同點；較佳實例包括TNF拮抗劑，如嵌合、人類化或人類TNF抗體、阿達木單抗(adalimumab)(HUMIRA ®；D2E7；PCT公開案第WO 97/29131號及美國專利第6,090,382號，以引用的方式併入本文中)、CA2(Remicade ®)、CDP 571，及可溶性p55或p75 TNF受體、其衍生物(p75TNFR1gG(Enbrel ®)或p55TNFR1gG(來那西普(Lenercept))，以及TNF轉化酶(TACE)抑制劑；類似地，IL-1抑制劑(介白素-1-轉化酶抑制劑、IL-1RA等)可能出於相同原因而有效。其他較佳組合包括介白素4。 在某些實施例中，ADC係與紫杉烷組合投與以治療非小細胞肺癌。 本發明之醫藥組合物可以包括「治療有效量」或「預防有效量」的本發明之抗體或抗體部分。「治療有效量」係指以必要的劑量且持續必要的時間段有效達成所需治療結果之量。抗體或抗體部分之治療有效量可以由熟習此項技術者確定且可以根據諸如個體之疾病狀態、年齡、性別及體重，以及該抗體或抗體部分在個體中引起所希望反應之能力之因素而變化。治療有效量亦為該抗體或抗體部分之治療有益作用超過任何有毒或有害作用的量。「預防有效量」係指以必要的劑量且持續必要的時間段有效達成所需預防結果之量。通常，由於預防劑量係在疾病之前或在疾病早期階段用於個體，故預防有效量將小於治療有效量。 ADC之投與量將取決於多種因素，包括(但不限於)所治療之特定疾病、投與模式、所需治療益處、疾病之分期或嚴重程度、患者之年齡、體重及其他特徵等。有效劑量之確定係在熟習此項技術者之能力範圍內。 劑量方案可以經過調整以提供最佳所需反應(例如治療或預防反應)。舉例而言，可以投與單次劑量，可以隨時間投與若干分次劑量，或可以依治療情況之緊急性指示按比例減少或增加劑量。就易於投藥及劑量均一性而言，將非經腸組合物調配成單位劑型尤其有利。如本文所使用，單位劑型係指適合作為單一劑量用於待治療之哺乳動物個體的物理個別單元；各單元含有經計算以產生所需治療效果的預定量之活性化合物與所需醫藥載劑之結合。本發明之單位劑型之規格係由下列情況指定且直接取決於下列情況：(a)活性化合物之獨特特徵及待達成之特定治療或預防作用，及(b)混配此類活性化合物以治療個體敏感性之技術中的固有限制。 ADC之治療或預防有效量的例示性、非限制性範圍為0.1-20 mg/kg，更佳為1-10 mg/kg。在一個實施例中，本文所描述之ADC的劑量係1至6 mg/kg，包括其中所述之個別劑量，例如1 mg/kg、2 mg/kg、3 mg/kg、4 mg/kg、5 mg/kg及6 mg/kg。在另一個實施例中，本文所描述之ADC的劑量係1至200 μg/kg，包括其中所述之個別劑量，例如1 μg/kg、2 μg/kg、3 μg/kg、4 μg/kg、5 μg/kg、10 μg/kg、20 μg/kg、30 μg/kg、40 μg/kg、50 μg/kg、60 μg/kg、80 μg/kg、100 μg/kg、120 μg/kg、140 μg/kg、160 μg/kg、180 μg/kg及200 μg/kg。應注意，劑量值可隨待緩解病狀之類型及嚴重程度而變化。亦應瞭解，對於任何特定個體，具體劑量方案應根據個體需要及投與組合物或監督組合物投與之人員的專業判斷隨時間進行調整，且本文所述之劑量範圍僅為例示性的，且不意欲限制所要求之組合物的範圍或實務。 在一個實施例中，向有需要之個體，例如患有癌症之個體投與0.1至30 mg/kg之ADC劑量的本文所描述之抗EGFR ADC，例如包含AbA之ADC。在另一個實施例中，向有需要之個體，例如患有癌症之個體投與1至15 mg/kg ADC劑量之抗EGFR ADC，例如包含AbA之ADC。在另一個實施例中，向有需要之個體，例如患有癌症之個體投與1至10 mg/kg ADC劑量之抗EGFR ADC，例如包含AbA之ADC。在另一個實施例中，向有需要之個體，例如患有癌症之個體投與2至3 mg/kg ADC劑量之抗EGFR ADC，例如包含AbA之ADC。在另一個實施例中，向有需要之個體，例如患有癌症之個體投與1至4 mg/kg ADC劑量之抗EGFR ADC，例如包含AbA之ADC。 在一個實施例中，向有需要之個體，例如患有癌症之個體投與1至200 μg/kg ADC劑量之抗EGFR ADC，例如包含AbA之ADC。在另一個實施例中，向有需要之個體，例如患有癌症之個體投與5至150 μg/kg ADC劑量之抗EGFR ADC，例如包含AbA之ADC。在另一個實施例中，向有需要之個體，例如患有癌症之個體投與5至100 μg/kg ADC劑量之抗EGFR ADC，例如包含AbA之ADC。在另一個實施例中，向有需要之個體，例如患有癌症之個體投與5至90 μg/kg ADC劑量之抗EGFR ADC，例如包含AbA之ADC。在另一個實施例中，向有需要之個體，例如患有癌症之個體投與5至80 μg/kg ADC劑量之抗EGFR ADC，例如包含AbA之ADC。在另一個實施例中，向有需要之個體，例如患有癌症之個體投與5至70 μg/kg ADC劑量之抗EGFR ADC，例如包含AbA之ADC。在另一個實施例中，向有需要之個體，例如患有癌症之個體投與5至60 μg/kg ADC劑量之抗EGFR ADC，例如包含AbA之ADC。在另一個實施例中，向有需要之個體，例如患有癌症之個體投與10至80 μg/kg ADC劑量之抗EGFR ADC，例如包含AbA之ADC。 在一個實施例中，向有需要之個體，例如患有癌症之個體投與0.1至6 mg/kg劑量的本文所描述之抗EGFR ADC。在另一個實施例中，向有需要之個體，例如患有癌症之個體投與0.5至4 mg/kg劑量的本文所描述之抗EGFR ADC。在另一個實施例中，向有需要之個體，例如患有癌症之個體投與1.8至2.4 mg/kg劑量的本文所描述之抗EGFR ADC。在另一個實施例中，向有需要之個體，例如患有癌症之個體投與1至4 mg/kg劑量的本文所描述之抗EGFR ADC。在另一個實施例中，向有需要之個體，例如患有癌症之個體投與約1 mg/kg劑量的本文所描述之抗EGFR ADC。在另一個實施例中，向有需要之個體，例如患有癌症之個體投與3至6 mg/kg劑量的本文所描述之抗EGFR ADC。在另一個實施例中，向有需要之個體，例如患有癌症之個體投與3 mg/kg劑量的本文所描述之抗EGFR ADC。在另一個實施例中，向有需要之個體，例如患有癌症之個體投與2至3 mg/kg劑量的本文所描述之抗EGFR ADC。在另一個實施例中，向有需要之個體，例如患有癌症之個體投與6 mg/kg劑量的本文所描述之抗EGFR ADC。 在另一個實施例中，向有需要之個體，例如患有癌症之個體投與1至200 μg/kg劑量的本文所描述之抗EGFR ADC。在另一個實施例中，向有需要之個體，例如患有癌症之個體投與5至100 μg/kg劑量的本文所描述之抗EGFR ADC。在另一個實施例中，向有需要之個體，例如患有癌症之個體投與5至90 μg/kg劑量的本文所描述之抗EGFR ADC。在另一個實施例中，向有需要之個體，例如患有癌症之個體投與5至80 μg/kg劑量的本文所描述之抗EGFR ADC。在另一個實施例中，向有需要之個體，例如患有癌症之個體投與5至70 μg/kg劑量的本文所描述之抗EGFR ADC。在另一個實施例中，向有需要之個體，例如患有癌症之個體投與5至60 μg/kg劑量的本文所描述之抗EGFR ADC。 在另一態樣中，本申請案提供一種用於偵測活體外樣品(例如生物樣品，諸如血清、血漿、組織或活檢體)中EGFR之存在的方法。該方法可以用於診斷病症，例如癌症。該方法包括：(i)使該樣品或對照樣品與如本文中所描述之抗EGFR ADC接觸；以及(ii)偵測抗EGFR ADC與樣品或對照樣品之間複合物之形成，其中樣品中複合物形成相對於對照樣品之統計顯著變化指示樣品中存在EGFR。 鑒於本發明之ADC能夠結合至人類EGFR，可以使用該等ADC，使用習知免疫分析，諸如酶聯免疫吸附劑分析(ELISA)、放射免疫分析(RIA)或組織免疫組織化學分析偵測人類EGFR(例如，生物樣品，諸如血清或血漿中)。在一個態樣中，本發明提供一種用於偵測生物樣品中之人類EGFR的方法，其包含使生物樣品與本發明之抗體或抗體部分接觸及偵測結合至人類EGFR之抗體(或抗體部分)或未結合抗體(或抗體部分)，由此偵測生物樣品中之人類EGFR。抗體用可偵測物質直接或間接標記以有助於偵測結合或未結合之抗體。適合的可偵測物質包括各種酶、輔基、螢光材料、發光材料及放射性材料。適合酶之實例包括辣根過氧化酶、鹼性磷酸酶、β-半乳糖苷酶或乙醯膽鹼酯酶；適合輔基複合物之實例包括抗生蛋白鏈菌素/生物素及抗生物素蛋白/生物素；適合螢光材料之實例包括傘酮、螢光素、異硫氰酸螢光素、若丹明、二氯三嗪基胺螢光素、丹磺醯氯或藻紅素；發光材料之實例包括魯米諾(luminol)；且適合放射性材料之實例包括 3H、 14C、 35S、 90Y、 99Tc、 111In、 125I、 131I、 177Lu、 166Ho或 153Sm。 作為標記抗體之替代，可以藉由競爭免疫分析，利用經可偵測物質標記之rhEGFR標準品及未標記之抗人類EGFR ADC，分析生物流體中之人類EGFR。在此分析中，將生物樣品、經標記之rhEGFR標準品及抗人類EGFR抗體組合且測定結合至未標記抗體之經標記rhEGFR標準品之量。生物樣品中人類EGFR之量與結合至抗EGFR抗體之經標記rhEGFR標準品之量成反比。類似地，亦可藉由競爭免疫分析，利用可偵測物質標記之rhEGFR標準品及未標記之抗人類EGFR ADC，分析生物流體中之人類EGFR。 8. 醫藥組合物本文所描述之Bcl-xL抑制劑及/或ADC可以呈包含該抑制劑或ADC及一或多種載劑、賦形劑及/或稀釋劑之形式。該等組合物可以調配用於特定用途，諸如用於獸醫學用途或人類醫藥用途。所用組合物(例如，乾燥粉末、液體調配物等)以及賦形劑、稀釋劑及/或載劑之形式將取決於該等抑制劑及/或ADC之預定用途及用於治療性用途之投與模式。 對於治療性用途，Bcl-xL抑制劑及/或ADC組合物可以作為包括醫藥學上可接受之載劑之無菌醫藥組合物之一部分供應。此組合物可以呈任何適合形式(取決於所期望的向患者投與組合物之方法)。該醫藥組合物可以藉由多種途徑，諸如經口、經皮、皮下、鼻內、靜脈內、肌肉內、鞘內、表面或局部投與患者。在任何給定情況下之最適合投與途徑將取決於特定Bcl-xL抑制劑或ADC、個體以及疾病之性質及嚴重程度，及個體之身體狀況。通常，Bcl-xL抑制劑將經口或非經腸投與，且ADC醫藥組合物將經靜脈內或皮下投與。 醫藥組合物可以便利地呈每劑含有預定量本文所描述之Bcl-xL抑制劑或ADC的單位劑型形式。單位劑量中所包括的抑制劑或ADC之量將取決於所治療之疾病以及此項技術中熟知之其他因素。對於Bcl-xL抑制劑，此類單位劑量可以呈含有適於單次投與之量之Bcl-xL抑制劑的錠劑、膠囊、口含錠等形式。對於ADC，此類單位劑量可以呈含有適於單次投與之量之ADC的凍乾之乾燥粉末形式，或呈液體形式。乾燥粉末單位劑型可以包裝於含注射器、適量稀釋劑及/或可用於投與之其他組分的套組中。呈液體形式之單位劑量可以便利地以預填充適於單次投與之量之ADC的注射器形式供應。 該等醫藥組合物亦可以含有適於多次投與之ADC之量的整體形式供應。 ADC之醫藥組合物可以藉由將具有所需純度之ADC與此項技術中常用的可選醫藥學上可接受之載劑、賦形劑或穩定劑(在本文中皆稱為「載劑」)，亦即緩衝劑、穩定劑、防腐劑、等張劑、非離子清潔劑、抗氧化劑及其他各種添加劑混合而製備成凍乾調配物或水溶液形式供儲存。參見Remington's Pharmaceutical Sciences, 第16版 (Osol編, 1980)。此類添加劑在所採用的劑量及濃度下應當對接受者無毒。 緩衝劑有助於將pH維持在接近生理條件的範圍內。其存在濃度可以在約2 mM至約50 mM範圍內。適用於本發明的緩衝劑包括有機酸及無機酸及其鹽，諸如檸檬酸鹽緩衝劑(例如，檸檬酸單鈉-檸檬酸二鈉混合物、檸檬酸-檸檬酸三鈉混合物、檸檬酸-檸檬酸單鈉混合物等)、琥珀酸鹽緩衝劑(例如，琥珀酸-琥珀酸單鈉混合物、琥珀酸-氫氧化鈉混合物、琥珀酸-琥珀酸二鈉混合物等)、酒石酸鹽緩衝劑(例如，酒石酸-酒石酸鈉混合物、酒石酸-酒石酸鉀混合物、酒石酸-氫氧化鈉混合物等)、反丁烯二酸鹽緩衝劑(例如，反丁烯二酸-反丁烯二酸單鈉混合物、反丁烯二酸-反丁烯二酸二鈉混合物、反丁烯二酸單鈉-反丁烯二酸二鈉混合物等)、葡糖酸鹽緩衝劑(例如，葡糖酸-葡糖酸鈉混合物、葡糖酸-氫氧化鈉混合物、葡糖酸-葡糖酸鉀混合物等)、草酸鹽緩衝劑(例如，草酸-草酸鈉混合物、草酸-氫氧化鈉混合物、草酸-草酸鉀混合物等)、乳酸鹽緩衝劑(例如，乳酸-乳酸鈉混合物、乳酸-氫氧化鈉混合物、乳酸-乳酸鉀混合物等)及乙酸鹽緩衝劑(例如，乙酸-乙酸鈉混合物、乙酸-氫氧化鈉混合物等)。另外，亦可以使用磷酸鹽緩衝劑、組胺酸緩衝劑，及三甲胺鹽，諸如Tris。 可以添加防腐劑以延緩微生物生長，且防腐劑之添加量可以在約0.2%至1% (w/v)範圍內。適用於本發明的防腐劑包括苯酚、苯甲醇、間甲酚、對羥基苯甲酸甲酯、對羥基苯甲酸丙酯、氯化十八烷基二甲基苯甲基銨、苯紮鹵銨(benzalconium halide)(例如苯紮氯銨、苯紮溴銨及苯紮碘銨)、氯化六羥季銨，及對羥苯甲酸烷基酯(諸如對羥基苯甲酸甲酯或對羥基苯甲酸丙酯)、兒茶酚、間苯二酚、環己醇及3-戊醇。等張劑有時稱為「穩定劑」，可以添加以確保本發明之液體組合物之等張性且包括多羥基糖醇，例如三羥基或更高級糖醇，諸如甘油、赤藻糖醇、阿拉伯糖醇、木糖醇、山梨糖醇及甘露糖醇。穩定劑係指一大類賦形劑，其功能範圍可以自增積劑至使治療劑溶解或有助於防止變性或黏附於容器壁上的添加劑。典型的穩定劑可以係多羥基糖醇(如以上所列舉)；胺基酸，諸如精胺酸、離胺酸、甘胺酸、麩醯胺酸、天冬醯胺、組胺酸、丙胺酸、鳥胺酸、L-白胺酸、2-苯丙胺酸、麩胺酸、蘇胺酸等；有機糖或糖醇，諸如乳糖、海藻糖、水蘇糖、甘露糖醇、山梨糖醇、木糖醇、核糖醇、肌醇、半乳糖醇、甘油及類似物，包括環醇，諸如肌醇；聚乙二醇；胺基酸聚合物；含硫還原劑，諸如尿素、麩胱甘肽、硫辛酸、巰基乙酸鈉、硫代甘油、α-單硫代甘油及硫代硫酸鈉；低分子量多肽(例如，具有10個殘基或更少殘基的肽)；蛋白質，諸如人血清白蛋白、牛血清白蛋白、明膠或免疫球蛋白；親水性聚合物，諸如聚乙烯吡咯啶酮單醣，諸如木糖、甘露糖、果糖、葡萄糖；雙醣，諸如乳糖、麥芽糖、蔗糖；及三醣，諸如棉子糖；以及多醣，諸如聚葡萄糖。 可以添加非離子界面活性劑或清潔劑(亦稱為「潤濕劑」)來幫助溶解糖蛋白以及避免攪拌誘導糖蛋白聚集，其亦使調配物暴露於有應力的剪切表面而不引起蛋白質變性。適合的非離子界面活性劑包括聚山梨醇酯(20、80等)、泊洛沙姆(poloxamer) (184、188等)、普洛尼克多元醇(Pluronic polyol)、聚氧乙烯脫水山梨糖醇單醚(TWEEN®-20、TWEEN®-80等)。非離子界面活性劑可以按約0.05 mg/ml至約1.0 mg/ml的範圍或約0.07 mg/ml至約0.2 mg/ml的範圍存在。 另外各種賦形劑包括增積劑(例如澱粉)、螯合劑(例如EDTA)、抗氧化劑(例如抗壞血酸、甲硫胺酸、維生素E)及共溶劑。 熟習此項技術者將易於瞭解，本文所描述的本發明之方法的其他適合修改及改編係顯而易見的且可在不脫離本發明之範疇或本文所揭示之實施例的情況下使用適合的等效物進行。現已詳細描述本發明，參考以下實例將更清楚地理解本發明，該等實例僅出於說明之目的包括在內且並不意欲為限制性的。 實例 實例1. 合成例示性Bcl-xL抑制劑 本實例提供例示性Bcl-xL抑制性化合物W2.01-W2.91之合成方法。Bcl-xL抑制劑(W2.01-W2.91)及合成子(實例2.1-2.176)係使用ACD/Name 2012版本(Build 56084, 2012年4月5日, Advanced Chemistry Development Inc., Toronto, Ontario)、ACD/Name 2014版本(Build 66687, 2013年10月25日, Advanced Chemistry Development Inc., Toronto, Ontario)、ChemDraw® 9.0.7版(CambridgeSoft, Cambridge, MA)、ChemDraw® 12.0超級版(CambridgeSoft, Cambridge, MA)或ChemDraw® 15.0.0.106專業版命名。Bcl-xL抑制劑及合成子係用ACD/Name 2012版本(Build 56084, 2012年4月5日, Advanced Chemistry Development Inc., Toronto, Ontario)、ACD/Name 2014版本(Build 66687, 2013年10月25日, Advanced Chemistry Development Inc., Toronto, Ontario)、ChemDraw® 9.0.7版(CambridgeSoft, Cambridge, MA)、ChemDraw® 12.0超級版(CambridgeSoft, Cambridge, MA)或ChemDraw® 15.0.0.106專業版命名。 1.1 合成 6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-3-[1-({3-[2-({2-[2-( 羧基甲氧基 ) 乙氧基 ] 乙基 } 胺基 ) 乙氧基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ] 吡啶 -2- 甲酸 ( 化合物 W2.01) 1.1.1  3- 溴 -5,7- 二甲基金剛烷甲酸在0℃下，向50 mL圓底燒瓶中添加溴(16 mL)。添加鐵粉(7 g)，並在0℃下攪拌反應30分鐘。添加3,5-二甲基金剛烷-1-甲酸(12 g)。使混合物升溫至室溫並攪拌3天。將冰與濃HCl之混合物倒入反應混合物中。所得懸浮液用Na 2SO 3(50 g於200 mL水中)處理兩次並用二氯甲烷萃取三次。合併之有機物用1N HCl水溶液洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮，得到標題化合物。 1.1.2     3- 溴 -5,7- 二甲基金剛烷甲醇向實例1.1.1 (15.4 g)於四氫呋喃(200 mL)中之溶液中添加BH 3(1M之四氫呋喃溶液，150 mL)，且在室溫下攪拌混合物隔夜。接著藉由逐滴添加甲醇小心地淬滅反應混合物。接著真空濃縮混合物，且使殘餘物乙酸乙酯(500 mL)與2N HCl水溶液(100 mL)之間平衡。水層進一步用乙酸乙酯萃取兩次，且合併之有機萃取液用水及鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥，並過濾。蒸發溶劑，得到標題化合物。 1.1.3   1-((3- 溴 -5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 )-1H- 吡唑向實例1.1.2 (8.0 g)於甲苯(60 mL)中之溶液中添加1H-吡唑(1.55 g)及氰基亞甲基三丁基磷烷(2.0 g)，且混合物在90℃下攪拌隔夜。濃縮反應混合物，且殘餘物藉由矽膠管柱層析法 (10:1庚烷:乙酸乙酯)純化，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 324.2 (M+H) +。 1.1.4   2-{[3,5- 二甲基 -7-(1H- 吡唑 -1- 基甲基 ) 三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ] 氧基 } 乙醇向實例1.1.3 (4.0 g)於乙-1,2-二醇(12 mL)中之溶液中添加三乙胺(3 mL)。在微波條件(Biotage Initiator)下，在150℃下攪拌混合物45分鐘。將混合物倒入水(100 mL)中並用乙酸乙酯萃取三次。合併之有機萃取液用水及鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥，並過濾。蒸發溶劑，得到殘餘物，藉由矽膠層析法，用20%乙酸乙酯/庚烷，隨後5%甲醇/二氯甲烷溶離來純化，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 305.2 (M+H) +。 1.1.5   2-({3,5- 二甲基 -7-[(5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ] 三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙醇向實例1.1.4 (6.05 g)於四氫呋喃(100 mL)中之冷(-78℃)溶液中添加n-BuLi (40 mL，2.5M之己烷溶液)，且在-78℃下攪拌混合物1.5小時。經由注射器添加碘甲烷(10 mL)，且在-78℃下攪拌混合物3小時。接著用NH 4Cl水溶液淬滅反應混合物並用乙酸乙酯萃取兩次，且合併之有機萃取液用水及鹽水洗滌。在經硫酸鈉乾燥後，過濾該溶液並濃縮，且殘餘物藉由矽膠管柱層析法，用5%甲醇/二氯甲烷溶離來純化，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 319.5 (M+H) +。 1.1.6   1-({3,5- 二甲基 -7-[2-( 羥基 ) 乙氧基 ] 三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 甲基 )-4- 碘 -5- 甲基 -1H- 吡唑向實例1.1.5 (3.5 g)於N,N-二甲基甲醯胺(30 mL)中之溶液中添加N-碘代琥珀醯亞胺(3.2 g)，且在室溫下攪拌混合物1.5小時。反應混合物用乙酸乙酯(600 mL)稀釋並用NaHSO 3水溶液、水及鹽水洗滌。有機層經硫酸鈉乾燥，過濾並減壓濃縮。殘餘物藉由矽膠層析法，用20%乙酸乙酯/二氯甲烷溶離來純化，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 445.3 (M+H) +。 1.1.7   1-((3-(2-(( 第三丁基二甲基矽烷基 ) 氧基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-4- 碘 -5- 甲基 -1H- 吡唑在-40℃下，將三氟甲烷磺酸第三丁基二甲基矽烷基酯(5.34 mL)添加至實例1.1.6 (8.6 g)及2,6-二甲基吡啶(3.16 mL)於二氯甲烷(125 mL)中之溶液中，並使反應物升溫至室溫隔夜。濃縮混合物，且殘餘物藉由矽膠層析法，用5-20%乙酸乙酯/庚烷溶離來純化，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 523.4 (M+H) +。 1.1.8   1-((3-(2-(( 第三丁基二甲基矽烷基 ) 氧基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -4-(4,4,5,5- 四甲基 -1,3,2- 二氧硼㖦 -2- 基 )-1H- 吡唑在-78℃下，將正丁基鋰(8.42 mL，2.5M之己烷溶液)添加至於120 mL四氫呋喃中之實例1.1.7 (9.8 g)中，並攪拌反應1分鐘。添加硼酸三甲酯(3.92 mL)，並攪拌反應5分鐘。添加頻哪醇(6.22 g)，並使反應物升溫至室溫且攪拌2小時。用pH 7緩衝液淬滅反應，且將混合物倒入乙醚中。分離各層，並減壓濃縮有機層。殘餘物藉由矽膠層析法，用1-25%乙酸乙酯/庚烷溶離來純化，得到標題化合物。 1.1.9   6- 氟 -3- 溴吡啶甲酸在5℃下，經1小時將6-胺基-3-溴吡啶甲酸(25 g)於400 mL 1:1二氯甲烷/氯仿中之漿液添加至於二氯甲烷(100 mL)中之四氟硼酸亞硝鎓鹽(18.2 g)中。所得混合物再攪拌30分鐘，接著升溫至35℃並攪拌隔夜。將反應物冷卻至室溫，且接著用NaH 2PO 4水溶液調至pH 4。所得溶液用二氯甲烷萃取三次，且合併之萃取液用鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮，得到標題化合物。 1.1.10  3- 溴 -6- 氟吡啶甲酸第三丁酯在0℃下，將對甲苯磺醯氯(27.6 g)添加至實例1.1.9 (14.5 g)及吡啶(26.7 mL)於二氯甲烷 (100 mL)及第三丁醇(80 mL)中之溶液中。攪拌反應15分鐘，且接著使其升溫至室溫，並攪拌隔夜。濃縮溶液並使其在乙酸乙酯與Na 2CO 3水溶液之間分配。分離各層，且水層用乙酸乙酯萃取。合併有機層，用Na 2CO 3水溶液及鹽水沖洗，經硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮，得到標題化合物。 1.1.11  2-(5- 溴 -6-( 第三丁氧基羰基 ) 吡啶 -2- 基 )-1,2,3,4- 四氫異喹啉 -8- 甲酸甲酯向1,2,3,4-四氫異喹啉-8-甲酸甲酯鹽酸鹽(12.37 g)及實例1.1.10 (15 g)於二甲亞碸(100 mL)中之溶液中添加N,N-二異丙基乙胺(12 mL)，且在50℃下攪拌混合物24小時。接著用乙酸乙酯(500 mL)稀釋混合物並用水及鹽水洗滌。有機層經硫酸鈉乾燥，過濾並減壓濃縮。殘餘物藉由矽膠層析法，用20%乙酸乙酯/己烷溶離來純化，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 448.4 (M+H) +。 1.1.12  2-(6-( 第三丁氧基羰基 )-5-(1-((3-(2-(( 第三丁基二甲基矽烷基 ) 氧基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶 -2- 基 )-1,2,3,4- 四氫異喹啉 -8- 甲酸甲酯將實例1.1.11 (3.08 g)、實例1.1.8 (5 g)、參(二亞苄基丙酮)二鈀(0) (126 mg)、1,3,5,7-四甲基-8-十四烷基-2,4,6-三氧雜-8-磷雜金剛烷(170 mg)及K 3PO 4(3.65 g)於1,4-二噁烷(25 mL)及水(25 mL)中之混合物加熱至90℃，保持2小時。冷卻混合物並將其倒入1:1乙醚:乙酸乙酯中。分離各層，且有機層用飽和NaH 2PO 4水溶液、水(2x)及鹽水洗滌。有機層經硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。殘餘物藉由矽膠層析法，用1-25%乙酸乙酯/庚烷溶離來純化，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 799.6 (M+H) +。 1.1.13  2-(6-( 第三丁氧基羰基 )-5-(1-((3-(2-(( 第三丁基二甲基矽烷基 ) 氧基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶 -2- 基 )-1,2,3,4- 四氫異喹啉 -8- 甲酸在70℃下，將實例1.1.12 (5 g)及氫氧化鋰單水合物(0.276 g)一起在四氫呋喃(50 mL)、甲醇(5 mL)及水(15 mL)之溶劑混合物中攪拌2天。冷卻反應物，用1M HCl水溶液酸化，並用乙酸乙酯萃取兩次。合併之有機層用鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。將殘餘物溶解於二氯甲烷(100 mL)中，在-40℃下冷卻，並添加2,6-二甲基吡啶(1.8 mL)及三氟甲烷磺酸第三丁基二甲基矽烷基酯(3.28 g)。使反應物升溫至室溫且攪拌2小時。用乙醚稀釋混合物，並分離各層。濃縮有機層。將殘餘物溶解於四氫呋喃中並用飽和K 2CO 3水溶液處理1小時。該混合物用濃HCl酸化並用乙酸乙酯萃取兩次。合併之有機層經硫酸鈉乾燥，過濾並減壓濃縮。殘餘物藉由矽膠層析法，用10-100%乙酸乙酯/庚烷，接著5%甲醇/乙酸乙酯溶離來純化，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 785.6 (M+H) +。 1.1.14 6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-3-(1-((3-(2- 羥基乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶甲酸第三丁酯在0℃下，將實例1.1.13 (970 mg)、N,N-二異丙基乙胺(208 mg)及六氟磷酸2-(3H-[1,2,3]三唑并[4,5-b]吡啶-3-基)-1,1,3,3-四甲基異
Figure 111128039-A0304-2
(HATU) (970 mg)在7 mL N,N-二甲基甲醯胺中攪拌10分鐘。添加苯并[d]噻唑-2-胺(278 mg)，且在50℃下攪拌混合物24小時。冷卻混合物並用乙酸乙酯稀釋。有機層用水及鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。獎殘餘物溶解於四氫呋喃(50 mL)中並添加氟化四丁基銨(10 mL，1M之四氫呋喃溶液)。攪拌反應1小時，將其倒入乙酸乙酯中並用pH 7緩衝液及鹽水洗滌。有機層經硫酸鈉乾燥，過濾並減壓濃縮。殘餘物藉由矽膠層析法，用10-100%乙酸乙酯/庚烷溶離來純化，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 803.7 (M+H) +。 1.1.15 6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-3-(1-((3,5- 二甲基 -7-(2- 側氧基乙氧基 ) 金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶甲酸第三丁酯向實例1.1.14 (100 mg)於二氯甲烷(1.3 mL)中之環境溫度溶液中一次性添加戴斯-馬丁高碘烷(Dess-Martin periodinane)(58.1 mg)。攪拌反應0.5小時，且再添加戴斯-馬丁高碘烷(8 mg)。攪拌反應1小時且藉由添加約10% NaOH水溶液及二氯甲烷淬滅反應。分離各層，且用約10% NaOH水溶液洗滌有機層。有機層用無水硫酸鈉乾燥，過濾並減壓濃縮，得到固體，不經進一步純化即用於後續反應中。MS (ESI) m/e 801.3 (M+H) +。 1.1.16  2-(2-(2-((2-((3-((4-(6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-2-( 第三丁氧基羰基 ) 吡啶 -3- 基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 氧基 ) 乙基 ) 胺基 ) 乙氧基 ) 乙氧基 ) 乙酸向2-(2-(2-胺基乙氧基)乙氧基)乙酸(22 mg)及實例1.1.15 (100 mg)於甲醇(1.3 mL)中之環境溫度溶液中添加MP-CNBH 3(65 mg，2.49 mmol/g裝載量)。輕柔振盪反應隔夜且經0.4微米過濾器過濾。粗物質使用Gilson系統，藉由逆相HPLC，用20-80%乙腈/含0.1% v/v三氟乙酸之水溶離來純化。合併所需溶離份並冷凍乾燥，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 948.3 (M+H) +。 1.1.17 6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-3-(1-((3-(2-((2-(2-( 羧基甲氧基 ) 乙氧基 ) 乙基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶甲酸向實例1.1.16(15 mg)於二氯甲烷(1 mL)中之環境溫度溶液中添加三氟乙酸(1 mL)。攪拌反應16小時且接著減壓濃縮。殘餘物使用Gilson系統，藉由逆相HPLC，用20-80%乙腈/含0.1% v/v三氟乙酸之水溶離來純化。合併所需溶離份並冷凍乾燥，得到標題化合物。 1H NMR (400MHz, 二甲亞碸 -d 6 ) δ ppm 12.70 (bs, 2H), 8.29 (s, 1H), 8.03 (d, 1H), 7.79 (d, 1H), 7.62 (d, 1H), 7.53-7.42 (m, 3H), 7.40-7.32 (m, 2H), 7.29 (s, 1H), 6.96 (d, 1H), 4.96 (bs, 2H), 4.03 (s, 2H), 3.90 (t, 2H), 3.84 (s, 2H), 3.68 (t, 2H), 3.63-3.54 (m, 6H), 3.17-3.04 (m, 4H), 3.00 (t, 2H), 2.10 (s, 3H), 1.45-1.40 (m, 2H), 1.36-1.20 (m, 4H), 1.21-0.96 (m, 7H), 0.91-0.81 (m, 6H)。MS (ESI) m/e 892.3 (M+H) +。 1.2 合成 6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-3-{1-[(3,5- 二甲基 -7-{2-[(2- 磺基乙基 ) 胺基 ] 乙氧基 } 三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 } 吡啶 -2- 甲酸 ( 化合物 W2.02) 1.2.1   2-(6-( 第三丁氧基羰基 )-5-(4,4,5,5- 四甲基 -1,3,2- 二氧硼㖦 -2- 基 ) 吡啶 -2- 基 )-1,2,3,4- 四氫異喹啉 -8- 甲酸甲酯向實例1.1.11 (2.25 g)及[1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯鈀(II) (205 mg)於乙腈(30 mL)中之溶液中添加三乙胺(3 mL)及頻哪醇硼烷(2 mL)，且在回流下攪拌混合物3小時。混合物用乙酸乙酯(200 mL)稀釋並用水及鹽水洗滌。有機層經硫酸鈉乾燥，過濾並減壓濃縮。藉由矽膠層析法，用20%乙酸乙酯/己烷溶離來純化殘餘物，得到標題化合物。 1.2.2 2-(6-( 第三丁氧基羰基 )-5-(1-((3-(2- 羥基乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶 -2- 基 )-1,2,3,4- 四氫異喹啉 -8- 甲酸甲酯向實例1.2.1 (2.25 g)於四氫呋喃(30 mL)及水(10 mL)中之溶液中添加實例1.1.6 (2.0 g)、1,3,5,7-四甲基-6-苯基-2,4,8-三氧雜-6-磷雜金剛烷(329 mg)、參(二亞苄基丙酮)二鈀(0) (206 mg)及磷酸三鉀(4.78 g)。使混合物回流隔夜，冷卻並用乙酸乙酯(500 mL)稀釋。所得混合物用水及鹽水洗滌，且有機層經硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。殘餘物藉由急驟層析法，用20%乙酸乙酯/庚烷，隨後5%甲醇/二氯甲烷溶離來純化，得到標題化合物。 1.2.3   2-(6-( 第三丁氧基羰基 )-5-(1-((3,5- 二甲基 -7-(2-(( 甲基磺醯基 ) 氧基 ) 乙氧基 ) 金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶 -2- 基 )-1,2,3,4- 四氫異喹啉 -8- 甲酸甲酯在冰浴中，向實例1.2.2 (3.32 g)於二氯甲烷(100 mL)中之冷溶液中依序添加三乙胺(3 mL)及甲烷磺醯氯(1.1 g)。在室溫下攪拌反應混合物1.5小時且用乙酸乙酯稀釋，並用水及鹽水洗滌。有機層經硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮，得到標題化合物。 1.2.4   2-(5-(1-((3-(2- 疊氮基乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-6-( 第三丁氧基羰基 ) 吡啶 -2- 基 )-1,2,3,4- 四氫異喹啉 -8- 甲酸甲酯向實例1.2.3 (16.5 g)於N,N-二甲基甲醯胺(120 mL)中之溶液中添加疊氮化鈉(4.22 g)。在80℃下加熱混合物3小時，冷卻，用乙酸乙酯稀釋並用水及鹽水洗滌。有機層經硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。殘餘物藉由急驟層析法，用20%乙酸乙酯/庚烷溶離來純化，得到標題化合物。 1.2.5     2-(5-(1-((3-(2- 疊氮基乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-6-( 第三丁氧基羰基 ) 吡啶 -2- 基 )-1,2,3,4- 四氫異喹啉 -8- 甲酸向實例1.2.4 (10 g)於四氫呋喃(60 mL)、甲醇(30 mL)及水(30 mL)之混合物中之溶液中添加氫氧化鋰單水合物(1.2 g)。在室溫下攪拌混合物隔夜並用2% HCl水溶液中和。濃縮所得混合物，且將殘餘物溶解於乙酸乙酯(800 mL)中，並用鹽水洗滌。有機層經硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮，得到標題化合物。 1.2.6     3-(1-((3-(2- 疊氮基乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ) 吡啶甲酸第三丁酯在60℃下，將實例1.2.5 (10 g)、苯并[d]噻唑-2-胺(3.24 g)、六氟磷酸氟-N,N,N',N'-四甲基甲脒鎓鹽(5.69 g)及N,N-二異丙基乙胺(5.57 g)於N,N-二甲基甲醯胺(20 mL)中之混合物加熱3小時，冷卻並用乙酸乙酯稀釋。用水及鹽水洗滌所得混合物。有機層經硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。殘餘物藉由急驟層析法，用20%乙酸乙酯/二氯甲烷溶離來純化，得到標題化合物。 1.2.7     3-(1-((3-(2- 胺基乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ) 吡啶甲酸第三丁酯向實例1.2.6 (2.0 g)於四氫呋喃(30 mL)中之溶液中添加Pd/C (10%, 200 mg)。在氫氣氛圍下攪拌混合物隔夜。濾出不溶性物質並濃縮濾液，得到標題化合物。 1.2.8     6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-3-[1-({3,5- 二甲基 -7-[(2,2,7,7- 四甲基 -10,10- 二氧離子基 -3,3- 二苯基 -4,9- 二氧雜 -10λ 6- 硫雜 -13- 氮雜 -3- 矽雜十五烷 -15- 基 ) 氧基 ] 三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ] 吡啶 -2- 甲酸第三丁 酯向實例1.2.7 (500 mg)於N,N-二甲基甲醯胺(8 mL)中之溶液中添加乙烯磺酸4-((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)-2,2-二甲基丁酯(334 mg)。在室溫下攪拌反應隔夜且添加甲基胺(0.3 mL)以淬滅反應。攪拌所得混合物20分鐘使用Analogix系統(C18管柱)，藉由逆相層析法，用50-100%乙腈/含0.1% v/v三氟乙酸之水溶離來純化，得到標題化合物。 1.2.9     6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-3-{1-[(3,5- 二甲基 -7-{2-[(2- 磺基乙基 ) 胺基 ] 乙氧基 } 三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 } 吡啶 -2- 甲酸用三氟乙酸(2.5 mL)處理於二氯甲烷(5 mL)中之實例1.2.8 (200 mg)隔夜。濃縮反應混合物且藉由逆相層析法(C18管柱)，用20-60%乙腈/含0.1% v/v三氟乙酸之水溶離來純化，得到標題化合物。 1H NMR (500 MHz, 二甲亞碸- d 6 ) δ ppm 12.86 (s, 1H), 8.32 (s, 2H), 8.02 (d, 1H), 7.78 (d, 1H), 7.60 (d, 1H), 7.51 (d, 1H), 7.40-7.49 (m, 2H), 7.31-7.39 (m, 2H), 7.27 (s, 1H), 6.95 (d, 1H), 4.94 (s, 2H), 3.87 (t, 2H), 3.81 (s, 2H), 3.15-3.25 (m, 2H), 3.03-3.13 (m, 2H), 3.00 (t, 2H), 2.79 (t, 2H), 2.09 (s, 3H), 1.39 (s, 2H), 1.22-1.34 (m, 4H), 0.94-1.18 (m, 6H), 0.85 (s, 6H)。MS (ESI) m/e 854.1 (M+H) +。 1.3 合成 2-{[(2-{[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ] 胺基 } 乙基 ) 磺醯基 ] 胺基 }-2- 脫氧 -D- 葡萄哌喃糖 ( 化合物 W2.03) 1.3.1     3-(1-((3-(2- 胺基乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ) 吡啶甲酸用三氟乙酸(2.5 mL)處理於二氯甲烷(2.5 mL)中之實例1.2.7 (200 mg)隔夜。濃縮反應混合物，且殘餘物藉由逆相層析法 (C18管柱)，用20-60%乙腈/含0.1% v/v三氟乙酸之水溶離來純化，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 746.2 (M+H) +。 1.3.2 三乙酸 (3R,4R,5S,6R)-6-( 乙醯氧基甲基 )-3-( 乙烯基磺醯胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -2,4,5- 三基酯在0℃下，向三乙酸(3R,4R,5S,6R)-6-(乙醯氧基甲基)-3-胺基四氫-2H-哌喃-2,4,5-三基酯(7.7 g)於二氯甲烷(100 mL)中之懸浮液中添加2-氯乙烷磺醯氯(4.34 g)。在0℃下攪拌混合物15分鐘，並添加三乙胺(12.1 mL)。在0℃下攪拌混合物1小時，升溫至室溫並攪拌2天。混合物用二氯甲烷稀釋並用水及鹽水洗滌。有機層經硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮，得到標題化合物。 1.3.3     N-((3R,4R,5S,6R)-2,4,5- 三羥基 -6-( 羥基甲基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -3- 基 ) 乙烯磺醯胺向實例1.3.2 (6.74 g)於甲醇(150 mL)中之溶液中添加三乙胺(10 mL)。攪拌混合物4天並濃縮。將殘餘物溶解於甲醇中並用Dowex HCR-5處理，直至溶液呈中性。過濾混合物，並濃縮濾液。殘餘物使用Sephadex LH-20管柱(100 g)，藉由層析法，用甲醇溶離來純化，得到標題化合物。 1.3.4     2-{[(2-{[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ] 胺基 } 乙基 ) 磺醯基 ] 胺基 }-2- 脫氧 -D- 葡萄哌喃糖將實例1.3.1 (23.5 mg)、實例1.3.3 (42.4 mg)及N,N-二異丙基乙胺(55 μL)於N,N-二甲基甲醯胺(1 mL)及水(0.3 mL)中之混合物攪拌5天。混合物藉由逆相層析法(C18管柱)，用20-60%乙腈/含0.1% v/v三氟乙酸之水溶離來純化，得到標題化合物。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 12.85 (s, 1H), 8.42 (s, 1H), 8.42 (s, 1H), 8.03 (d, 1H), 7.79 (d, 1H), 7.55-7.66 (m, 1H), 7.46-7.54 (m, 2H), 7.42-7.47 (m, 1H), 7.33-7.40 (m, 2H), 7.29 (s, 1H), 6.96 (d, 1H), 4.96 (s, 2H), 3.89 (t, 2H), 3.83 (s, 2H), 2.97-3.14 (m, 6H), 2.10 (s, 3H), 1.44 (s, 2H), 1.22-1.39 (m, 4H), 0.97-1.20 (m, 6H), 0.87 (s, 6H)。MS (ESI) m/e 1015.3 (M+H) +。 1.4 本段有意留白。 1.5 合成 6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-3-{1-[(3,5- 二甲基 -7-{2-[(4-{[(3R,4R,5S,6R)-3,4,5- 三羥基 -6-( 羥基甲基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 ] 甲基 } 苯甲基 ) 胺基 ] 乙氧基 } 三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 } 吡啶 -2- 甲酸 ( 化合物 W2.05) 1.5.1     [4-((3S,4R,5R,6R)-3,4,5- 三甲氧基甲氧基 -6- 甲氧基甲氧基甲基 - 四氫 - 哌喃 -2- 基甲基 )- 苯基 ]- 甲醇標題化合物係根據J. R. Walker等人, Bioorg. Med. Chem. 2006, 14, 3038-3048製備。MS (ESI) m/e 478 (M+NH 4) +。 1.5.2     4-((3S,4R,5R,6R)-3,4,5- 三甲氧基甲氧基 -6- 甲氧基甲氧基甲基 - 四氫 - 哌喃 -2- 基甲基 )- 苯甲醛將實例1.5.1 (1.000 g)溶解於二氯甲烷(25 mL)中，並添加戴斯-馬丁高碘烷(1.013 g)。在室溫下攪拌溶液16小時。用乙醚(25 mL)稀釋溶液並添加2 M碳酸鈉水溶液(25 mL)。混合物用乙醚萃取三次。合併有機萃取液，用鹽水洗滌，並經無水硫酸鈉乾燥。過濾後，減壓濃縮溶液且藉由矽膠層析法，用50-70%乙酸乙酯/庚烷溶離來純化。減壓蒸發溶劑，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 476 (M+NH 4) +。 1.5.3 乙酸 (2R,3R,4R,5S)-3,4,5- 三乙醯氧基 -6-(4- 甲醯基 - 苯甲基 )- 四氫 - 哌喃 -2- 基甲酯將實例1.5.2 (660 mg)溶解於甲醇(145 mL)中。添加6 M鹽酸(8 mL)，並在室溫下攪拌溶液兩天。減壓移除溶劑，與乙酸乙酯共沸三次。真空乾燥該物質四天。將該物質溶解於N,N-二甲基甲醯胺(50 mL)中。依序添加乙酸酐(12 mL)、吡啶(6 mL)及N,N-二甲基吡啶-4-胺(10 mg)，並在室溫下攪拌溶液16小時。溶液用水(150 mL)稀釋並用乙酸乙酯(50 mL)萃取三次。合併有機層，用水洗滌，用鹽水洗滌，並經無水硫酸鈉乾燥。過濾後，減壓濃縮溶液且在矽膠上藉由層析法，用40-50%乙酸乙酯/庚烷溶離來純化。減壓蒸發溶劑，得到標題化合物。 1.5.4 三乙酸 (2R,3R,4R,5S)-2-( 乙醯氧基甲基 )-6-(4-(((2-((3-((4-(6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-2-( 第三丁氧基羰基 ) 吡啶 -3- 基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 氧基 ) 乙基 ) 胺基 ) 甲基 ) 苯甲基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -3,4,5- 三基酯在室溫下，將實例1.5.7 (40 mg)及實例1.5.3 (22.5 mg)於二氯甲烷(1 mL)中攪拌10分鐘。添加三乙醯氧基硼氫化鈉(14 mg)，並在室溫下攪拌溶液16小時。該物質在矽膠上藉由層析法，用10%甲醇/二氯甲烷溶離來純化。減壓蒸發溶劑，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 1236 (M+H) +。 1.5.5 6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-3-{1-[(3,5- 二甲基 -7-{2-[(4-{[(3R,4R,5S,6R)-3,4,5- 三羥基 -6-( 羥基甲基 ) 四氫 -2 H- 哌喃 -2- 基 ] 甲基 } 苯甲基 ) 胺基 ] 乙氧基 } 三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 } 吡啶 -2- 甲酸將實例1.5.4 (68 mg)溶解於甲醇(0.5 mL)中。添加氫氧化鋰水溶液(2M，1 mL)，並在室溫下攪拌溶液4.5小時。添加乙酸(0.1 mL)，並在真空下移除溶劑。接著將該物質溶解於三氟乙酸(2 mL)中並在室溫下攪拌16小時。真空濃縮溶液。殘餘物使用配有150 × 30 mm C18管柱之Gilson PLC 2020，藉由逆相HPLC，用20-70%乙腈/含0.1% v/v三氟乙酸之水溶離來純化。合併所需溶離份並冷凍乾燥，得到標題化合物。 1H NMR (400MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 12.86 (bs, 1H), 8.68 (bs, 2H), 8.04 (d, 1H), 7.80 (d, 1H), 7.62 (d, 1H), 7.51-7.43 (m, 3H), 7.39-7.24 (m, 6H), 6.96 (d, 1H), 5.23 (t, 1H), 4.96 (s, 2H), 4.56 (d, 1H), 4.42 (dd, 1H), 4.11 (m, 2H), 3.89 (t, 2H), 3.83 (s, 2H), 3.61-3.56 (m, 3H), 3.39 (dd, 1H), 3.22 (t, 1H), 3.15 (t, 1H), 3.09 (d, 1H), 3.01 (m, 6H), 2.89 (t, 1H), 2.60 (m, 1H), 2.10 (s, 3H), 1.43 (s, 2H), 1.30 (q, 4H), 1.14 (m, 4H), 1.03 (q, 2H), 0.86 (s, 6H)。MS (ESI) m/e 1012 (M+H) +。 1.6 合成 6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-3-{1-[(3,5- 二甲基 -7-{2-[(3- 磺基丙基 ) 胺基 ] 乙氧基 } 三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 } 吡啶 -2- 甲酸 ( 化合物 W2.06) 1.6.1     3-((2-((3-((4-(6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-2-( 第三丁氧基羰基 ) 吡啶 -3- 基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 氧基 ) 乙基 ) 胺基 ) 丙烷 -1- 磺酸將實例1.2.7 (100 mg)、1,2-氧硫雜環戊烷2,2-二氧化物(13 mg)及N,N-二異丙基乙胺(19.07 μL)於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)中之混合物加熱至50℃隔夜。冷卻反應物且藉由逆相HPLC (C18管柱)，用20-60%乙腈/含0.1% v/v三氟乙酸之水溶離來純化，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 924.1 (M+H) +。 1.6.2     6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-3-{1-[(3,5- 二甲基 -7-{2-[(3- 磺基丙基 ) 胺基 ] 乙氧基 } 三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 } 吡啶 -2- 甲酸用三氟乙酸(2.5 mL)處理於二氯甲烷(2.5 mL)中之實例1.6.1 (40 mg)隔夜。濃縮反應混合物，且殘餘物藉由逆相層析法 (C18管柱)，用20-60%乙腈/含0.1% v/v三氟乙酸之水溶離來純化，得到標題化合物。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 12.86 (s, 1H), 8.52 (s, 2H), 8.04 (d, 1H), 7.79 (d, 1H), 7.61 (d, 1H), 7.41-7.55 (m, 3H), 7.32-7.39 (m, 2H), 7.29 (s, 1H), 6.96 (d, 1H), 4.96 (s, 2H), 3.89 (t, 2H), 3.49-3.58 (m, 2H), 2.94-3.12 (m, 6H), 2.56-2.64 (m, 2H), 1.88-1.99 (m, 2H), 1.41 (s, 2H), 1.22-1.36 (m, 4H), 0.96-1.20 (m, 6H), 0.86 (s, 6H)。MS (ESI) m/e 868.3 (M+H) +。 1.7 合成 6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-3-{1-[(3-{2-[(2,3- 二羥基丙基 ) 胺基 ] 乙氧基 }-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 } 吡啶 -2- 甲酸 ( 化合物 W2.07)向實例1.2.7 (30 mg)於二氯甲烷(3 mL)中之溶液中添加2,3-二羥基丙醛(3.6 mg)及NaCNBH 3/樹脂(200 mg)。攪拌混合物隔夜，過濾，並蒸發溶劑。將殘餘物溶解於二甲亞碸/甲醇(1:1，3 mL)中且使用Gilson系統，藉由逆相HPLC，用10-85%乙腈/含0.1%三氟乙酸之水溶離來純化，得到標題化合物。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 12.85 (s, 1H), 8.27 (s, 2H), 8.03 (d, 1H), 7.79 (d, 1H), 7.61 (t, 1H), 7.33-7.54 (m, 6H), 7.29 (s, 1H), 6.96 (d, 1H), 4.96 (s, 3H), 3.72-3.89 (m, 8H), 3.25-3.64 (m, 6H), 2.99-3.10 (m, 4H), 2.11 (s, 3H), 1.00-1.52 (m, 8H), 0.86 (s, 6H)。MS (ESI) m/e 820.3 (M+H) +。 1.8 合成 2-({[4-({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ] 胺基 } 甲基 ) 苯基 ] 磺醯基 } 胺基 )-2- 脫氧 - β -D- 葡萄哌喃糖 ( 化合物 W2.08) 1.8.1 三乙酸 (2R,3S,4S,5R,6S)-6-( 乙醯氧基甲基 )-3-(4- 甲醯基苯基磺醯胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -2,4,5- 三基酯將4-甲醯基苯-1-磺醯氯(100 mg)及三乙酸(2S,3R,4R,5S,6R)-6-(乙醯氧基甲基)-3-胺基四氫-2H-哌喃-2,4,5-三基酯鹽酸鹽(563 mg)添加至1,2-二氯乙烷(4 mL)中。添加N,N-二異丙基乙胺(0.51 mL)，且在55℃下加熱溶液三天。減壓濃縮溶液且在矽膠上藉由急驟管柱層析法，用70%乙酸乙酯/庚烷溶離來純化。減壓蒸發溶劑，並將該物質溶解於丙酮(4 mL)中。添加鹽酸(1M，4 mL)，並在室溫下攪拌溶液16小時。接著用70%乙酸乙酯/庚烷(20 mL)萃取該溶液。用鹽水洗滌有機層並經無水硫酸鈉乾燥。過濾後，減壓蒸發溶劑，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 514 (M+H) +。 1.8.2 三乙酸 (2R,3S,4S,5R,6S)-6-( 乙醯氧基甲基 )-3-(4-(((2-((3-((4-(6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-2-( 第三丁氧基羰基 ) 吡啶 -3- 基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 氧基 ) 乙基 ) 胺基 ) 甲基 ) 苯基磺醯胺基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -2,4,5- 三基酯標題化合物係藉由在實例1.5.4中用實例1.8.1替代實例1.5.3製備。MS (ESI) m/e 1301 (M+H) +。 1.8.3   2-({[4-({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ] 胺基 } 甲基 ) 苯基 ] 磺醯基 } 胺基 )-2- 脫氧 - β -D- 葡萄哌喃糖標題化合物係藉由在實例1.5.5中用實例1.8.2替代實例1.5.4製備。 1H NMR (400MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 12.86 (bs, 1H), 8.87 (bs, 2H), 8.04 (d, 1H), 7.91 (d, 2H), 7.79 (d, 1H), 7.70-7.55 (m, 3H), 7.52-7.42 (m, 3H), 7.39-7.33 (m, 2H), 7.29 (m, 1H), 6.96 (d, 1H), 4.96 (bs, 2H), 4.85 (dd, 1H), 4.62-4.52 (m, 2H), 4.32 (m, 2H), 3.89 (t, 2H), 3.83 (s, 2H), 3.70-3.35 (m, 10H), 3.02 (m, 4H), 2.91 (m, 1H), 2.10 (s, 3H), 1.44 (bs, 2H), 1.37-1.22 (m, 4H), 1.18-0.98 (m, 6H), 0.93-0.82 (m, 6H)。MS (ESI) m/e 1075 (M+H) +。 1.9 合成 8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-2-{6- 羧基 -5-[1-({3-[2-({2-[1-( β -D- 葡萄哌喃糖醛醯基 )-1H-1,2,3- 三唑 -4- 基 ] 乙基 } 胺基 ) 乙氧基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ] 吡啶 -2- 基 }-1,2,3,4- 四氫異喹啉 ( 化合物 W2.09) 1.9.1 三乙酸 (2R,3R,4S,5S,6S)-2-(4-(2- 羥基乙基 )-1H-1,2,3- 三唑 -1- 基 )-6-( 甲氧基羰基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -3,4,5- 三基酯向三乙酸(2R,3R,4S,5S,6S)-2-疊氮基-6-(甲氧基羰基)四氫-2H-哌喃-3,4,5-三基酯(720 mg)於第三丁醇(8 mL)及水(4 mL)中之溶液中添加丁-3-炔-1-醇(140 mg)、硫酸銅(II)五水合物(5.0 mg)及抗壞血酸鈉(40 mg)。在微波條件(Biotage Initiator)下，在100℃下攪拌混合物20分鐘。反應混合物用乙酸乙酯(300 mL)稀釋，用水及鹽水洗滌，且經硫酸鈉乾燥。過濾並蒸發溶劑，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 430.2 (M+H) +。 1.9.2 三乙酸 (2S,3S,4S,5R,6R)-2-( 甲氧基羰基 )-6-(4-(2- 側氧基乙基 )-1H-1,2,3- 三唑 -1- 基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -3,4,5- 三基酯在-78℃下，向二甲亞碸(0.5 mL)於二氯甲烷(10 mL)中之溶液中添加草醯氯(0.2 mL)。在-78℃下攪拌混合物20分鐘，經由注射器添加並三乙酸(2R,3R,4S,5S,6S)-2-(4-(2-羥基乙基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-6-(甲氧基羰基)四氫-2H-哌喃-3,4,5-三基酯(233 mg)於二氯甲烷(10 mL) 中之溶液。20分鐘後，將三乙胺(1 mL)添加至混合物中，且攪拌混合物30分鐘，同時使溫度升高至室溫。反應混合物用乙酸乙酯(300 mL)稀釋，用水及鹽水洗滌，且經硫酸鈉乾燥。過濾並蒸發溶劑，得到粗產物，不經進一步純化即用於下一反應中。MS (ESI) m/e 429.2 (M+H) +。 1.9.3   8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-2-{6- 羧基 -5-[1-({3-[2-({2-[1-( β -D- 葡萄哌喃糖醛醯基 )-1H-1,2,3- 三唑 -4- 基 ] 乙基 } 胺基 ) 乙氧基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ] 吡啶 -2- 基 }-1,2,3,4- 四氫異喹啉向實例1.3.1 (150 mg)於二氯甲烷(10 mL)中之溶液中添加實例1.9.2 (86 mg)及NaBH 3CN/樹脂(2.49 mmol/g，200 mg)，且攪拌混合物隔夜。接著過濾並濃縮反應混合物。將殘餘物溶解於四氫呋喃/甲醇/H 2O (2:1:1，12 mL)並添加氫氧化鋰單水合物(50 mg)。攪拌混合物隔夜。濃縮混合物，且殘餘物使用Gilson系統，藉由逆相HPLC，用10-85%乙腈/含0.1%三氟乙酸之水溶離來純化，得到標題化合物。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 12.84 (s, 1H), 8.48 (s, 2H), 8.20 (s, 1H), 8.03 (d, 1H), 7.79 (d, 1H), 7.62 (d, 1H), 7.32-7.53 (m, 5H), 7.29 (s, 1H), 6.96 (d, 1H), 5.66 (d, 1H), 4.96 (s, 2H), 4.00 (d, 1H), 3.76-3.92 (m, 6H), 3.22-3.26 (m, 2H), 2.96-3.15 (m, 8H), 2.10 (s, 3H), 0.99-1.52 (m, 14H), 0.87 (s, 6H)。MS (ESI) m/e 1028.3 (M+H) +。 1.10 合成 3-[1-({3-[2-(2-{[4-( β -D- 阿洛哌喃糖基氧基 ) 苯甲基 ] 胺基 } 乙氧基 ) 乙氧基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ]-6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ] 吡啶 -2- 甲酸 ( 化合物 W2.10) 1.10.1  2-(2-((3-((1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 氧基 ) 乙氧基 ) 乙醇標題化合物係如實例1.1.4中所述，藉由用2,2'-氧基二乙醇替代乙-1,2-二醇製備。MS (ESI) m/e 349.2 (M+H) +。 1.10.2  2-(2-((3,5- 二甲基 -7-((5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ) 金剛烷 -1- 基 ) 氧基 ) 乙氧基 ) 乙醇標題化合物係如實例1.1.5中所述，藉由用實例1.10.1替代實例1.1.4製備。MS (ESI) m/e 363.3 (M+H) +。 1.10.3  2-(2-((3-((4- 碘 -5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 氧基 ) 乙氧基 ) 乙醇標題化合物係如實例1.1.6中所述，藉由用實例1.10.2替代實例1.1.5製備。MS (ESI) m/e 489.2 (M+H) +。 1.10.4 甲烷磺酸 2-(2-((3-((4- 碘 -5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 氧基 ) 乙氧基 ) 乙酯向實例1.10.3 (6.16 g)於二氯甲烷(100 mL)中之冷卻溶液中添加三乙胺(4.21 g)，隨後添加甲烷磺醯氯(1.6 g)，且在室溫下攪拌混合物1.5小時。反應混合物接著用乙酸乙酯(600 mL)稀釋並用水及鹽水洗滌。在經硫酸鈉乾燥後，過濾該溶液並濃縮，且殘餘物不經進一步純化即用於下一反應中。MS (ESI) m/e 567.2 (M+H) +。 1.10.5  2-(2-((3-((4- 碘 -5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 氧基 ) 乙氧基 ) 乙胺在微波條件(Biotage Initiator)下，在100℃下將實例1.10.4 (2.5 g)於7N氨之甲醇溶液(15 mL)中之溶液攪拌20分鐘。真空濃縮反應混合物，且殘餘物用乙酸乙酯(400 mL)稀釋並用NaHCO 3水溶液、水及鹽水洗滌。在經硫酸鈉乾燥後，過濾該溶液並濃縮，且殘餘物不經進一步純化即用於下一反應中。MS (ESI) m/e 488.2 (M+H) +。 1.10.6  (2-(2-((3-((4- 碘 -5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 氧基 ) 乙氧基 ) 乙基 ) 胺基甲酸第三丁酯向實例1.10.5 (2.2 g)於四氫呋喃(30 mL)中之溶液中添加二碳酸二第三丁酯(1.26 g)及4-二甲基胺基吡啶(100 mg)。在室溫下攪拌混合物1.5小時並用乙酸乙酯(300 mL)稀釋。用飽和NaHCO 3水溶液、水(60 mL)及鹽水(60 mL)洗滌溶液。有機層用硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。殘餘物藉由矽膠層析法，用20%乙酸乙酯/二氯甲烷溶離來純化，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 588.2 (M+H) +。 1.10.7  2-(6-( 第三丁氧基羰基 )-5-(1-((3-(2-(2-(( 第三丁氧基羰基 ) 胺基 ) 乙氧基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶 -2- 基 )-1,2,3,4- 四氫異喹啉 -8- 甲酸甲酯標題化合物係如實例1.2.2中所述，藉由用實例1.10.6替代實例1.1.6製備。MS (ESI) m/e 828.5 (M+H) +。 1.10.8  2-(6-( 第三丁氧基羰基 )-5-(1-((3-(2-(2-(( 第三丁氧基羰基 ) 胺基 ) 乙氧基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶 -2- 基 )-1,2,3,4- 四氫異喹啉 -8- 甲酸標題化合物係如實例1.2.5中所述，藉由用實例1.10.7替代實例1.2.4製備。MS (ESI) m/e 814.5 (M+H) +。 1.10.10    6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-3-(1-((3-(2-(2-(( 第三丁氧基羰基 ) 胺基 ) 乙氧基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶甲酸第三丁酯標題化合物係如實例1.2.6中所述，藉由用實例1.10.8替代實例1.2.5製備。MS (ESI) m/e 946.2 (M+H) +。 1.10.11    3-(1-((3-(2-(2- 胺基乙氧基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ) 吡啶甲酸標題化合物係如實例1.1.17中所述，藉由用實例1.10.9替代實例1.1.16製備。 1.10.12   3-[1-({3-[2-(2-{[4-( β -D- 阿洛哌喃糖基氧基 ) 苯甲基 ] 胺基 } 乙氧基 ) 乙氧基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ]-6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ] 吡啶 -2- 甲酸向實例1.10.10 (88 mg)及三乙胺(0.04 mL)於二氯甲烷(1.5 mL)中之溶液中添加4-(((2S,3R,4R,5S,6R)-3,4,5-三羥基-6-(羥基甲基)四氫-2H-哌喃-2-基)氧基)苯甲醛(27.7 mg)、甲醇(1 mL)、MP-CNBH 3(2.49 mmol/g，117 mg)及乙酸(18 μL)。攪拌反應混合物隔夜。過濾反應物，並濃縮濾液。殘餘物藉由逆相層析法(C18管柱)，用20-60%乙腈/含0.1% v/v三氟乙酸之水溶離來純化，得到標題化合物。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 7.99 (d, 1H), 7.77 (d, 1H), 7.60 (d, 1H), 7.40-7.50 (m, 2H), 7.29-7.39 (m, 6H), 6.96 (d, 2H), 6.76 (d, 1H), 5.11 (d, 2H), 4.92 (s, 2H), 3.83-3.96 (m, 4H), 3.77 (s, 2H), 3.60-3.72 (m, 4H), 3.01 (d, 2H), 2.80 (t, 2H), 2.09 (s, 3H), 0.98-1.32 (m, 14H), 0.82 (s, 6H)。MS (ESI) m/e 1058.3 (M+H) +。 1.11 合成 6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-3-(1-{[3,5- 二甲基 -7-(2-{2-[(2- 磺基乙基 ) 胺基 ] 乙氧基 } 乙氧基 ) 三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ] 甲基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶 -2- 甲酸 ( 化合物 W2.11) 1.11.1  3-(1-((3-(2-(2- 胺基乙氧基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ) 吡啶甲酸第三丁酯將實例1.10.9 (6.8 g)溶解於含50%三氟乙酸之二氯甲烷(10 mL)中並攪拌20分鐘，且在真空下移除溶劑。殘餘物藉由逆相層析法，用20-80%乙腈/含0.1%三氟乙酸之水溶離來純化，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 790.2(M+H) +。 1.11.2   6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-3-(1-((3,5- 二甲基 -7-(2-(2-((2-( 苯氧基磺醯基 ) 乙基 ) 胺基 ) 乙氧基 ) 乙氧基 ) 金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶甲酸第三丁酯在0℃下，向實例1.11.1 (200 mg)及N,N-二異丙基乙胺(146 μL)於四氫呋喃(3 mL)中之溶液中添加乙烯磺酸苯酯(46 mg)。在0℃下攪拌反應混合物30分鐘，逐漸升溫至室溫，攪拌隔夜並濃縮，得到標題化合物。 1.11.3   6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-3-(1-((3,5- 二甲基 -7-(2-(2-((2-( 苯氧基磺醯基 ) 乙基 ) 胺基 ) 乙氧基 ) 乙氧基 ) 金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶甲酸用三氟乙酸(2.5 mL)處理實例1.11.2 (100 mg)於二氯甲烷(5 mL)中之溶液隔夜並濃縮，得到標題化合物。MS (APCI) m/e 974.9 (M+H) +。 1.11.4   6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-3-(1-{[3,5- 二甲基 -7-(2-{2-[(2- 磺基乙基 ) 胺基 ] 乙氧基 } 乙氧基 ) 三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ] 甲基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶 -2- 甲酸向實例1.11.3 (195 mg)於四氫呋喃(3 mL)及甲醇(2 mL)中之溶液中緩慢添加1M氫氧化鈉水溶液(2 mL)。攪拌混合物隔夜，並添加片狀NaOH (0.5 g)。在40℃下加熱所得混合物3小時，冷卻並濃縮。濃縮物藉由逆相層析法(C18管柱)，用10-70%乙腈/10 mM NH 4OAc水溶液溶離來純化，得到標題化合物。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 8.04 (d, 1H), 7.79 (d, 1H), 7.61 (d, 1H), 7.41-7.51 (m, 3H), 7.32-7.39 (m, 2H), 7.29 (s, 1H), 6.88 (d, 1H), 4.93 (s, 2H), 3.89 (t, 2H), 3.81 (s, 2H), 3.60-3.66 (m, 4H), 3.13-3.19 (m, 2H), 3.05-3.10 (m, 2H), 3.01 (t, 2H), 2.79 (t, 2H), 2.11 (s, 3H), 1.34 (s, 2H), 1.26 (s, 4H), 0.96-1.22 (m, 6H), 0.85 (s, 6H)。MS (ESI) m/e 898.2 (M+H) +。 1.12 合成 6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-3-{1-[(3,5- 二甲基 -7-{2-[(2- 膦醯基乙基 ) 胺基 ] 乙氧基 } 三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 } 吡啶 -2- 甲酸 ( 化合物 W2.12) 1.12.1   6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-3-(1-((3-(2-((2-( 二乙氧基磷醯基 ) 乙基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶甲酸第三丁酯向實例1.2.7 (307 mg)於四氫呋喃(5 mL)中之溶液中添加於水(2 mL)中之乙烯基膦酸二乙酯(176 mg)。在70℃下攪拌反應混合物3天，並添加數滴乙酸。混合物藉由逆相層析法(C18管柱)，用10-70%乙腈/含0.1% v/v三氟乙酸之水溶離來純化，得到標題化合物。MS (APCI) m/e 966.8 (M+H) +。 1.12.2   6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-3-{1-[(3,5- 二甲基 -7-{2-[(2- 膦醯基乙基 ) 胺基 ] 乙氧基 } 三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 } 吡啶 -2- 甲酸向實例1.12.1 (170 mg)於二氯甲烷(2.5 mL)中之溶液中添加溴三甲基矽烷(82 μL)及烯丙基三甲基矽烷(50.4 μL)。攪拌反應混合物隔夜並添加水(0.02 mL)。攪拌所得混合物隔夜並濃縮。殘餘物藉由逆相層析法(C18管柱)，用20-60%乙腈/含0.1%三氟乙酸之水溶離來純化，得到標題化合物。 1H NMR (500 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 8.35 (s, 2H), 8.03 (d, 1H), 7.79 (d, 1H), 7.62 (d, 1H), 7.41-7.53 (m, 3H), 7.33-7.40 (m, 2H), 7.29 (s, 1H), 6.96 (d, 1H), 4.96 (s, 2H), 3.89 (t, 2H), 3.83 (s, 2H), 3.09 (s, 4H), 3.01 (t, 2H), 2.10 (s, 3H), 1.85-2.00 (m, 2H), 1.43 (s, 2H), 1.19-1.37 (m, 4H), 1.14 (s, 6H), 0.87 (s, 6H)。MS (APCI) m/e 854.4 (M+H) +。 1.13 合成 6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-3-{1-[(3,5- 二甲基 -7-{2-[ 甲基 (3- 磺基 -L- 丙胺醯基 ) 胺基 ] 乙氧基 } 三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 } 吡啶 -2- 甲酸 ( 化合物 W2.13) 1.13.1 甲烷磺酸 2-({3-[(4- 碘 -5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙酯向實例1.1.6 (6.16 g)於二氯甲烷(100 mL)中之冷卻溶液中添加三乙胺(4.21 g)，隨後添加甲烷磺醯氯(1.6 g)，且在室溫下攪拌混合物1.5小時。反應混合物用乙酸乙酯(600 mL)稀釋並用水及鹽水洗滌。在經硫酸鈉乾燥後，過濾該溶液並濃縮，且殘餘物不經進一步純化即用於下一反應中。MS (ESI) m/e 523.4 (M+H) +。 1.13.2   1-({3,5- 二甲基 -7-[2-( 甲基胺基 ) 乙氧基 ] 三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 甲基 )-4- 碘 -5- 甲基 -1H- 吡唑在微波條件(Biotage Initiator)下，在100℃下將實例1.13.1 (2.5 g)於2M甲基胺之甲醇溶液(15 mL)中之溶液攪拌20分鐘。真空濃縮反應混合物，且殘餘物用乙酸乙酯(400 mL)稀釋並用NaHCO 3水溶液、水及鹽水洗滌。在經硫酸鈉乾燥後，過濾該溶液並濃縮，且殘餘物不經進一步純化即用於下一反應中。MS (ESI) m/e 458.4 (M+H) +。 1.13.3   [2-({3-[(4- 碘 -5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ] 甲基胺基甲酸第三丁酯向實例1.13.2 (2.2 g)於四氫呋喃(30 mL)中之溶液中添加二碳酸二第三丁酯(1.26 g)及催化量之4-二甲基胺基吡啶。在室溫下攪拌混合物1.5小時並用乙酸乙酯(300 mL)稀釋。用飽和NaHCO 3水溶液、水(60 mL)及鹽水(60 mL)洗滌溶液。有機層用硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。殘餘物藉由矽膠層析法，用20%乙酸乙酯/二氯甲烷溶離來純化，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 558.5 (M+H) +。 1.13.4   2-(6-( 第三丁氧基羰基 )-5-(1-((3-(2-(( 第三丁氧基羰基 )( 甲基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶 -2- 基 )-1,2,3,4- 四氫異喹啉 -8- 甲酸甲酯向實例1.2.1 (4.94 g)於四氫呋喃(60 mL)及水(20 mL)中之溶液中添加實例1.13.3 (5.57 g)、1,3,5,7-四甲基-8-十四烷基-2,4,6-三氧雜-8-磷雜金剛烷(412 mg)、參(二亞苄基丙酮)二鈀(0) (457 mg)及K 3PO 4(11 g)，且在回流下攪拌混合物24小時。冷卻反應混合物並用乙酸乙酯(500 mL)稀釋，用水及鹽水洗滌。有機層經硫酸鈉乾燥，過濾並減壓濃縮。殘餘物藉由矽膠層析法，用20%乙酸乙酯/庚烷溶離來純化，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 799.1 (M+H) +。 1.13.5   2-(6-( 第三丁氧基羰基 )-5-(1-((3-(2-(( 第三丁氧基羰基 )( 甲基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶 -2- 基 )-1,2,3,4- 四氫異喹啉 -8- 甲酸向實例1.13.4 (10 g)於四氫呋喃(60 mL)、甲醇(30 mL)及水(30 mL)中之溶液中添加氫氧化鋰單水合物(1.2 g)，且在室溫下攪拌混合物24小時。用2% HCl水溶液中和反應混合物並真空濃縮。殘餘物用乙酸乙酯(800 mL)稀釋並用水及鹽水洗滌，且經硫酸鈉乾燥。過濾並蒸發溶劑，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 785.1 (M+H) +。 1.13.6   6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-3-{1-[(3-{2-[( 第三丁氧基羰基 )( 甲基 ) 胺基 ] 乙氧基 }-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 37] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 } 吡啶 -2- 甲酸第三丁酯向實例1.13.5 (10 g)於N,N-二甲基甲醯胺(20 mL)中之溶液中添加苯并[d]噻唑-2-胺(3.24 g)、六氟磷酸氟-N,N,N',N'-四甲基甲脒鎓鹽(5.69 g)及N,N-二異丙基乙胺(5.57 g)，且在60℃下攪拌混合物3小時。反應混合物用乙酸乙酯(800 mL)稀釋並用水及鹽水洗滌，且經硫酸鈉乾燥。過濾並蒸發溶劑且藉由矽膠，用20%乙酸乙酯/二氯甲烷溶離來純化殘餘物，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 915.5 (M+H) +。 1.13.7   6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-3-[1-({3,5- 二甲基 -7-[2-( 甲基胺基 ) 乙氧基 ] 三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ] 吡啶 -2- 甲酸向實例1.13.6 (5 g)於二氯甲烷(20 mL)中之溶液中添加三氟乙酸(10 mL)，且攪拌混合物隔夜。在真空下蒸發溶劑，且將殘餘物溶解於二甲亞碸/甲醇(1:1，10 mL)中。混合物藉由逆相層析法，使用Analogix系統及C18管柱(300 g)，並用10-85%乙腈及含0.1%三氟乙酸之水溶離來純化，得到標題化合物。 1.13.8   6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-3-{1-[(3,5- 二甲基 -7-{2-[ 甲基 (3- 磺基 -L- 丙胺醯基 ) 胺基 ] 乙氧基 } 三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 } 吡啶 -2- 甲酸在室溫下，攪拌(R)-2-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-3-磺基丙酸(0.020 g)、N,N-二異丙基乙胺(0.045 mL)及六氟磷酸O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基
Figure 111128039-A0304-2
(HATU，0.020 g)一起於N,N-二甲基甲醯胺(0.75 mL)中之溶液。攪拌30分鐘後，添加實例1.13.7 (0.039 g)，並且再攪拌反應1小時。將二乙胺(0.027 mL)添加至反應物中並繼續攪拌3小時。用水(0.75 mL)及N,N-二甲基甲醯胺(1 mL)稀釋反應物，用三氟乙酸(0.039 mL)中和且使用Gilson系統，藉由逆相HPLC，用20-80%乙腈/含0.1% v/v三氟乙酸之水溶離來純化。合併所需溶離份並冷凍乾燥，得到標題化合物。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 12.89 (s, 1H), 8.11-8.02 (m, 4H), 7.84 (d, 1H), 7.66 (d, 1H), 7.60-7.45 (m, 3H), 7.45-7.36 (m, 2H), 7.34 (d, 1H), 7.00 (dd, 1H), 5.00 (s, 2H), 4.57-4.40 (m, 1H), 3.93 (t, 2H), 3.90-3.84 (m, 2H), 3.58-3.43 (m, 2H), 3.41-3.21 (m, 2H), 3.18-3.02 (m, 3H), 2.95-2.85 (m, 2H), 2.76 (td, 2H), 2.14 (d, 3H), 1.51-0.85 (m, 18H)。MS (ESI) m/e 911.2 (M+H) +。 1.14 合成 6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-3-{1-[(3,5- 二甲基 -7-{2-[(3- 膦醯基丙基 ) 胺基 ] 乙氧基 } 三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 } 吡啶 -2- 甲酸 ( 化合物 W2.14) 1.14.1   (3- 羥基丙基 ) 膦酸二第三丁酯將NaH (60%於礦物油中，400 mg)添加至於N,N-二甲基甲醯胺(30 mL)中之膦酸二第三丁酯(1.93 g)中，並在室溫下攪拌反應30分鐘。添加(3-溴丙氧基)(第三丁基)二甲基矽烷(2.1 g)，並攪拌反應隔夜。用乙醚(300 mL)稀釋混合物，且溶液用水及鹽水洗滌三次，接著經硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。將殘餘物溶解於20 mL四氫呋喃中，並添加氟化四丁基銨(TBAL，1M之四氫呋喃溶液，9 mL)。攪拌溶液20分鐘，且接著添加pH 7緩衝液(50 mL)。將混合物溶解於乙醚中，並分離，且用鹽水洗滌有機層，且接著濃縮。粗產物在矽膠上使用10-100%乙酸乙酯/庚烷，隨後5%甲醇/乙酸乙酯層析分離，得到標題化合物。 1.14.2   (3- 側氧基丙基 ) 膦酸二第三丁酯將實例1.14.1 (200 mg)及戴斯-馬丁高碘烷(370 mg)於二氯甲烷(5 mL)中攪拌2小時。將混合物溶解於乙酸乙酯中，並用1M NaOH水溶液及鹽水洗滌兩次，且接著濃縮。粗產物在矽膠上使用50-100%乙酸乙酯/庚烷，隨後10%甲醇/乙酸乙酯層析分離，得到標題化合物。 1.14.3   6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-3-(1-((3-(2-((3-( 二乙氧基磷醯基 ) 丙基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶甲酸第三丁酯標題化合物係如實例1.10.11中所描述，分別用實例1.2.7及實例1.14.2替代實例1.10.10及4-(((2S,3R,4R,5S,6R)-3,4,5-三羥基-6-(羥基甲基)四氫-2H-哌喃-2-基)氧基)苯甲醛製備。MS (APCI) m/e 980.9 (M+H) +。 1.14.5   6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-3-{1-[(3,5- 二甲基 -7-{2-[(3- 膦醯基丙基 ) 胺基 ] 乙氧基 } 三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 } 吡啶 -2- 甲酸標題化合物係如實例1.12.2中所描述，用實例1.14.3替代實例1.12.1製備。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 8.37 (s, 2H), 8.03 (d, 1H), 7.79 (d, 1H), 7.62 (d, 1H), 7.42-7.53 (m, 3H), 7.33-7.40 (m, 2H), 7.29 (s, 1H), 6.96 (d, 1H), 4.96 (s, 2H), 3.86-3.93 (m, 2H), 3.52-3.59 (m, 2H), 2.93-3.06 (m, 6H), 2.10 (s, 3H), 1.71-1.89 (m, 2H), 1.53-1.65 (m, 2H), 1.43 (s, 2H), 1.23-1.37 (m, 4H), 0.96-1.19 (m, 6H), 0.87 (s, 6H)。MS (APCI) m/e 868.3 (M+H) +。 1.15 合成 6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-3-{1-[(3,5- 二甲基 -7-{2-[(3- 磺基 -L- 丙胺醯基 ) 胺基 ] 乙氧基 } 三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 } 吡啶 -2- 甲酸 ( 化合物 W2.15)將(R)-2-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-3-磺基丙酸(0.050 g)及六氟磷酸O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基
Figure 111128039-A0304-2
(0.049 g)之溶液溶解於N,N-二甲基甲醯胺(1 mL)中並添加N,N-二異丙基乙胺(0.102 mL)。攪拌15分鐘後，添加實例1.3.1 (0.100 g)，並且再攪拌反應3小時。將二乙胺(0.061 mL)添加至反應物中並繼續攪拌隔夜。反應物用2,2,2-三氟乙酸(0.090 mL)中和並用N,N-二甲基甲醯胺(1 mL)及水(1 mL)稀釋。混合物使用Gilson系統，藉由逆相HPLC，用20-80%乙腈/含0.1% v/v三氟乙酸之水溶離來純化。合併所需溶離份並冷凍乾燥，得到標題化合物。 1H NMR (500 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 12.86 (s, 1H), 8.63 (t, 1H), 8.15-8.01 (m, 4H), 7.79 (d, 1H), 7.62 (d, 1H), 7.56-7.41 (m, 3H), 7.40-7.33 (m, 2H), 7.30 (s, 1H), 6.96 (d, 1H), 4.96 (s, 2H), 4.08-3.97 (m, 1H), 3.89 (t, 2H), 3.82 (s, 2H), 3.42-3.31 (m, 2H), 3.28-3.17 (m, 1H), 3.16-3.06 (m, 1H), 3.01 (t, 2H), 2.97 (dd, 1H), 2.76 (dd, 1H), 2.10 (s, 3H), 1.39 (s, 2H), 1.32-1.20 (m, 4H), 1.19-1.07 (m, 4H), 1.07-0.95 (m, 2H), 0.85 (s, 6H)。MS (ESI) m/e 897.2 (M+H) +。 1.16 合成 6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-3-(1-{[3,5- 二甲基 -7-(2-{2-[(3- 膦醯基丙基 ) 胺基 ] 乙氧基 } 乙氧基 ) 三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ] 甲基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶 -2- 甲酸 ( 化合物 W2.16) 1.16.1   6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-3-(1-((3-(2-(2-((3-( 二第三丁氧基磷醯基 ) 丙基 ) 胺基 ) 乙氧基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶甲酸第三丁酯將實例1.10.10 (338 mg)及實例1.14.2 (120 mg)溶解於乙醇(20 mL)中，並濃縮溶液。將殘餘物再溶解於乙醇(20 mL)中並濃縮。接著將殘餘物溶解於二氯甲烷(10 mL)中並向其中添加三乙醯氧基硼氫化鈉(119 mg)，並攪拌反應隔夜。粗混合物在矽膠上使用1%三乙胺/95:5乙酸乙酯/甲醇層析分離，得到標題化合物。MS (ESI) 1080.3 (M+H) +。 1.16.2   6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-3-(1-{[3,5- 二甲基 -7-(2-{2-[(3- 膦醯基丙基 ) 胺基 ] 乙氧基 } 乙氧基 ) 三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ] 甲基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶 -2- 甲酸將實例1.16.1 (22 mg)於二氯甲烷(3 mL)及三氟乙酸(3 mL)中攪拌2天。濃縮混合物且在Biotage Isolera One系統上，使用40 g C18管柱並用10-90%乙腈/ 0.1%三氟乙酸/水溶離進行逆相層析分離，得到呈三氟乙酸鹽形式之標題化合物。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 8.62 (bs, 1H), 8.10 (d, 1H), 7.86 (d, 1H), 7.68 (d, 1H), 7.57 (d, 1H), 7.54 (dd, 1H), 7.50 (d, 1H), 7.42 (m, 2H), 7.35 (s, 1H), 7.02 (d, 1H), 5.02 (s, 2H), 3.94 (m, 2H), 3.97 (m, 2H), 3.68 (m, 2H), 3.55 (m, 2H), 3.15 (m, 1H), 3.09 (m, 4H), 2.55 (m, 4H), 2.15 (s, 3H), 1.86 (m, 1H), 1.66 (m, 2H), 1.45 (m, 2H), 1.31 (m, 4H), 1.19 (m, 4H), 1.08 (m, 2H), 0.90 (s, 6H)。MS (ESI) 912.2 (M+H) +。 1.17 合成 3-{1-[(3-{2-[L-α- 天冬胺醯基 ( 甲基 ) 胺基 ] 乙氧基 }-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 }-6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ] 吡啶 -2- 甲酸 ( 化合物 W2.17) 1.17.1   6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-3-{1-[(3-{2-[{(2S)-4- 第三丁氧基 -2-[( 第三丁氧基羰基 ) 胺基 ]-4- 側氧基丁醯基 }( 甲基 ) 胺基 ] 乙氧基 }-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 37] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 } 吡啶 -2- 甲酸攪拌實例1.13.7 (0.060 g)、(S)- 1-(2,5-二側氧基吡咯啶-1-基) 2-((第三丁氧基羰基)胺基)琥珀酸4-第三丁酯(0.034 g)及N,N-二異丙基乙胺一起於二氯甲烷(1 mL)中之溶液。攪拌隔夜後，將反應物裝載至矽膠上並使用0.5-5% 甲醇/二氯甲烷梯度溶離，得到標題化合物。 1.17.2   3-{1-[(3-{2-[L- α - 天冬胺醯基 ( 甲基 ) 胺基 ] 乙氧基 }-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 }-6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ] 吡啶 -2- 甲酸用三氟乙酸(0.5 mL)處理實例1.17.1 (0.049 g)於二氯甲烷(1 mL)中之溶液，並攪拌反應隔夜。濃縮反應物，將其溶解於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)及水(0.5 mL)中，接著使用Gilson系統，藉由逆相HPLC，用20-80%乙腈/含0.1% v/v三氟乙酸之水溶離來純化。合併所需溶離份並冷凍乾燥，得到標題化合物。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 12.85 (s, 1H), 8.15 (d, 3H), 8.03 (d, 1H), 7.79 (d, 1H), 7.62 (d, 1H), 7.55-7.41 (m, 3H), 7.36 (td, 2H), 7.29 (d, 1H), 6.95 (d, 1H), 4.96 (s, 2H), 4.55 (s, 1H), 3.92-3.86 (m, 2H), 3.60-3.47 (m, 2H), 3.47-3.37 (m, 2H), 3.32-3.21 (m, 1H), 3.09-2.97 (m, 4H), 2.92-2.72 (m, 3H), 2.67-2.53 (m, 1H), 2.10 (s, 3H), 1.46-0.94 (m, 12H), 0.85 (s, 6H)。MS (ESI) m/e 875.2 (M+H) +。 1.18 合成 6-{4-[({2-[2-(2- 胺基乙氧基 ) 乙氧基 ] 乙基 }[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ] 胺基 ) 甲基 ] 苯甲基 }-2,6- 去水 -L- 古洛糖酸 ( 化合物 W2.18) 1.18.1   (2S,3S,4R,5S)-3,4,5- 三乙醯氧基 -6-(4- 溴甲基 - 苯甲基 )- 四氫 - 哌喃 -2- 甲酸甲酯標題化合物係如I. R. Walker等人, Bioorg. Med. Chem. 2006, 14, 3038-3048中所描述製備。MS (ESI) m/e 518, 520 (M+NH 4) +。 1.18.2   (2S,3S,4R,5S)-3,4,5- 三乙醯氧基 -6-(4- 甲醯基 - 苯甲基 )- 四氫 - 哌喃 -2- 甲酸甲酯將實例1.18.1 (75 mg)及吡啶N-氧化物(14 mg)添加至乙腈(0.75 mL)中。將氧化銀(I)(24 mg)添加至該溶液中，並在室溫下攪拌溶液16小時。添加無水硫酸鈉 (5 mg)，並攪拌溶液五分鐘。過濾該溶液並濃縮。粗物質在矽膠上藉由急驟管柱層析法，用50-70%乙酸乙酯/庚烷溶離來純化。減壓蒸發溶劑，得到標題化合物。 1.18.3 三乙酸 (3R,4S,5R,6R)-2-(4-(((2-((3-((4-(6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-2-( 第三丁氧基羰基 ) 吡啶 -3- 基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 氧基 ) 乙基 ) 胺基 ) 甲基 ) 苯甲基 )-6-( 甲氧基羰基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -3,4,5- 三基酯標題化合物係藉由在實例1.5.4中用實例1.18.2替代實例1.5.3製備。MS (ESI) m/e 1222 (M+H) +。 1.18.4   {2-[2-(2- 側氧基 - 乙氧基 )- 乙氧基 ]- 乙基 }- 胺基甲酸第三丁酯標題化合物係藉由在實例1.5.2中用{2-[2-(2-羥基-乙氧基)-乙氧基]-乙基}-胺基甲酸第三丁酯替代實例1.5.1製備。 1.18.5 三乙酸 (3R,4S,5R,6R)-2-(4-(2-(2-((3-((4-(6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-2-( 第三丁氧基羰基 ) 吡啶 -3- 基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 氧基 ) 乙基 )-14,14- 二甲基 -12- 側氧基 -5,8,13- 三氧雜 -2,11- 二氮雜十五烷基 ) 苯甲基 )-6-( 甲氧基羰基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -3,4,5- 三基酯標題化合物係藉由在實例1.5.4中用實例1.18.3替代實例1.2.7且用實例1.18.4替代實例1.5.3製備。MS (ESI) m/e 1453 (M+H) +。 1.18.6   6-{4-[({2-[2-(2- 胺基乙氧基 ) 乙氧基 ] 乙基 }[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ] 胺基 ) 甲基 ] 苯甲基 }-2,6- 去水 -L- 古洛糖酸標題化合物係藉由在實例1.5.5中用實例1.18.5替代實例1.5.4製備。 1H NMR (400MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 9.38 (bs, 1H), 8.05 (dd, 1H), 7.90-7.68 (m, 6H), 7.62 (m, 2H), 7.53-7.27 (m, 8H), 6.94 (d, 1H), 4.96 (bs, 1H), 4.38 (bs, 4H), 3.91-3.57 (m, 11H), 3.37-3.11 (m, 14H), 2.98 (m, 6H), 2.61 (m, 1H), 2.10 (s, 3H), 1.44 (bs, 2H), 1.26 (m, 4H), 1.18-0.90 (m, 6H), 0.87 (bs, 6H)。MS (ESI) m/e 1157 (M+H) +。 1.19 合成 4-({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ] 胺基 } 甲基 ) 苯基哌喃己糖苷醛酸 ( 化合物 W2.19) 1.19.1 三乙酸 (2R,3S,4R,5R,6R)-2-(4- 甲醯基苯氧基 )-6-( 甲氧基羰基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -3,4,5- 三基酯向三乙酸(2R,3R,4S,5S,6S)-2-溴-6-(甲氧基羰基)四氫-2H-哌喃-3,4,5-三基酯(2.42 g)於乙腈(30 mL)中之溶液中添加氧化銀(I)(1.4 g)及4-羥基苯甲醛(620 mg)。攪拌反應混合物4小時並過濾。濃縮濾液，且殘餘物藉由矽膠層析法，用5-50%乙酸乙酯/庚烷溶離來純化，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 439.2 (M+H) +。 1.19.2   4-({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ] 胺基 } 甲基 ) 苯基哌喃己糖苷醛酸向實例1.2.7 (36 mg)於四氫呋喃(2 mL)及乙酸(0.2 mL)中之溶液中添加實例1.19.1 (21 mg)，隨後添加MgSO 4(60 mg)。攪拌混合物1小時，隨後添加NaBH 3CN/樹脂(153 mg)。接著攪拌混合物3小時。過濾混合物並將氫氧化鋰單水合物(20 mg)添加至濾液中。攪拌混合物2小時且用三氟乙酸酸化，並藉由逆相HPLC (Gilson系統)，用10-85%乙腈/含0.1%三氟乙酸之水溶離來純化，得到標題化合物。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 12.86 (s, 1H), 8.57-8.72 (m, 2H), 8.03 (d, 1H), 7.79 (d, 1H), 7.62 (d, 1H), 7.34-7.53 (m, 6H), 7.08 (t, 2H), 6.95 (d, 1H), 5.10 (d,, 1H), 4.96 (s, 2H), 4.06-4.15 (m, 4H), 3.83-3.97 (m, 6H), 3.26-3.42 (m, 8H), 2.93-3.10 (m, 6H), 2.10 (s, 3H), 1.43 (s, 2H), 1.24-1.38 (m, 6H), 0.97-1.16 (m, 4H), 0.86 (s, 6H)。MS (ESI) m/e 1028.3 (M+H) +。 1.20 合成 6-[1-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-1,2,3,4- 四氫喹啉 -7- 基 ]-3-{1-[(3,5- 二甲基 -7-{2-[(2- 膦醯基乙基 ) 胺基 ] 乙氧基 } 三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 } 吡啶 -2- 甲酸 ( 化合物 W2.20) 1.20.1   2-((3,5- 二甲基 -7-((5- 甲基 -4-(4,4,5,5- 四甲基 -1,3,2- 二氧硼㖦 -2- 基 )-1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ) 金剛烷 -1- 基 ) 氧基 ) 乙醇向實例1.1.6 (9 g)及[1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯鈀(II)二氯甲烷(827 mg)於乙腈(60 mL)中之溶液中添加三乙胺(10 mL)及頻哪醇硼烷(6 mL)。在回流下攪拌混合物隔夜，冷卻並直接用於下一步驟中。MS (ESI) m/e 445.4 (M+H) +。 1.20.2   6- 氯 -3-(1-((3-(2- 羥基乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶甲酸第三丁酯向3-溴-6-氯吡啶甲酸第三丁酯(5.92 g)於四氫呋喃(60 mL)及水(30 mL)中之溶液中添加粗實例1.20.1 (4.44 g)、1,3,5,7-四甲基-6-苯基-2,4,8-三氧雜-6-磷雜金剛烷(1.5 g)、參(二亞苄基丙酮)二鈀(0) (927 mg)及K 3PO 4(22 g)。在回流下攪拌混合物隔夜，冷卻，用乙酸乙酯(800 mL)稀釋並用水及鹽水洗滌。有機層經硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。殘餘物藉由急驟層析法，用20%乙酸乙酯/庚烷，隨後5%甲醇/二氯甲烷溶離來純化，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 531.1 (M+H) +。 1.20.3   3-(1-((3-(2-(( 第三丁基二甲基矽烷基 ) 氧基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-6- 氯吡啶甲酸第三丁酯向實例1.20.2 (3.2 g)於N,N-二甲基甲醯胺(20 mL)中之溶液中添加咪唑(0.62 g)及氯代第三丁基二甲基矽烷(1.37 g)。攪拌混合物隔夜，用乙酸乙酯(300 mL)稀釋，並用水及鹽水洗滌。有機層經硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。殘餘物藉由急驟層析法，用20%乙酸乙酯/庚烷溶離來純化，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 645.4 (M+H) +。 1.20.4   3-(1-((3-(2-(( 第三丁基二甲基矽烷基 ) 氧基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-6-(1,2,3,4- 四氫喹啉 -7- 基 ) 吡啶甲酸第三丁酯向7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼㖦-2-基)-1,2,3,4-四氫喹啉(507 mg)於1,4-二噁烷(10 mL)及水(5 mL)中之溶液中添加實例1.20.3 (1.25 g)、二氯化雙(三苯基膦)鈀(II) (136 mg)及氟化銫(884 mg)。在微波合成儀(Biotage, Initiator)中，在120℃下加熱混合物20分鐘。混合物用乙酸乙酯(500 mL)稀釋，並用水及鹽水洗滌。有機層經硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮且藉由急驟層析法，用20%乙酸乙酯/庚烷且接著用5%甲醇/二氯甲烷溶離來純化，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 741.5 (M+H) +。 1.20.5   6-(1-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-1,2,3,4- 四氫喹啉 -7- 基 )-3-(1-(3-(2-(( 第三丁基二甲基矽烷基 ) 氧基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶甲酸第三丁酯向碳酸雙(2,5-二側氧基吡咯啶-1-基)酯(295 mg)於乙腈(10 mL)中之懸浮液中添加苯并[d]噻唑-2-胺(173 mg)，且攪拌混合物1小時。添加實例1.20.4 (710 mg)於乙腈(10 mL)中之溶液，並攪拌懸浮液隔夜。混合物用乙酸乙酯(300 mL)稀釋，用水及鹽水洗滌並經硫酸鈉乾燥。過濾後，濃縮有機層且藉由矽膠層析法，用20%乙酸乙酯/庚烷溶離來純化，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 917.2 (M+H) +。 1.20.6   6-(1-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-1,2,3,4- 四氫喹啉 -7- 基 )-3-(1-((3-(2- 羥基乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶甲酸第三丁酯向實例1.20.5 (1.4 g)於四氫呋喃(10 mL)中之溶液中添加氟化四丁基銨(1.0 M之四氫呋喃溶液，6 mL)。攪拌混合物3小時，用乙酸乙酯(300 mL)稀釋並用水及鹽水洗滌。有機層經硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 803.4 (M+H) +。 1.20.7   6-(1-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-1,2,3,4- 四氫喹啉 -7- 基 )-3-(1-((3,5- 二甲基 -7-(2-(( 甲基磺醯基 ) 氧基 ) 乙氧基 ) 金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶甲酸第三丁酯向實例1.20.6 (1.2 g)於二氯甲烷(20 mL)及三乙胺(2 mL)中之冷(0℃)溶液中添加甲烷磺醯氯(300 mg)。攪拌混合物4小時，用乙酸乙酯(200 mL)稀釋並用水及鹽水洗滌。有機層經硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 881.3 (M+H) +。 1.20.8   3-(1-((3-(2- 疊氮基乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-6-(1-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-1,2,3,4- 四氫喹啉 -7- 基 ) 吡啶甲酸第三丁酯向實例1.20.7 (1.5 g)於N,N-二甲基甲醯胺(20 mL)中之溶液中添加疊氮化鈉(331 mg)。攪拌混合物48小時，用乙酸乙酯(20.0 mL)稀釋並用水及鹽水洗滌。有機層經硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮且藉由矽膠層析法，用20%乙酸乙酯/二氯甲烷溶離來純化，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 828.4 (M+H) +。 1.20.9   3-(1-((3-(2- 胺基乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-6-(1-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-1,2,3,4- 四氫喹啉 -7- 基 ) 吡啶甲酸第三丁酯向實例1.20.8 (1.5 g)於四氫呋喃(30 mL)中之溶液中添加Pd/C (10%，200 mg)。在氫氣氛圍下攪拌混合物隔夜。過濾反應物，並濃縮濾液，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 802.4 (M+H) +。 1.20.10 6-(1-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-1,2,3,4- 四氫喹啉 -7- 基 )-3-(1-((3-(2-((2-( 二乙氧基磷醯基 ) 乙基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶甲酸第三丁酯標題化合物係如實例1.12.1中所描述，用實例1.20.9替代實例1.2.7製備。 1.20.11  6-[1-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-1,2,3,4- 四氫喹啉 -7- 基 ]-3-{1-[(3,5- 二甲基 -7-{2-[(2- 膦醯基乙基 ) 胺基 ] 乙氧基 } 三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 } 吡啶 -2- 甲酸標題化合物係如實例1.12.2中所描述，用實例1.20.10替代實例1.12.1製備。 1H NMR (500 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 8.40 (s, 2H), 8.02 (d, 1H), 7.74-7.89 (m, 3H), 7.47 (s, 2H), 7.38 (t, 1H), 7.30 (d, 1H), 7.23 (t, 1H), 3.96 (s, 2H), 3.90 (s, 2H), 3.53-3.64 (m, 2H), 3.03-3.18 (m, 2H), 2.84 (t, 2H), 2.23 (s, 3H), 1.87-2.02 (m, 4H), 1.46 (s, 2H), 1.26-1.38 (m, 4H), 1.12-1.23 (m, 4H), 0.99-1.11 (m, 2H), 0.89 (s, 6H)。MS (ESI) m/e 854.1 (M+H) +。 1.21 合成 6-[1-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-1,2,3,4- 四氫喹啉 -7- 基 ]-3-{1-[(3,5- 二甲基 -7-{2-[ 甲基 (3- 磺基 -L- 丙胺醯基 ) 胺基 ] 乙氧基 } 三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 } 吡啶 -2- 甲酸 ( 化合物 W2.21) 1.21.1   (2-((3,5- 二甲基 -7-((5- 甲基 -4-(4,4,5,5- 四甲基 -1,3,2- 二氧硼㖦 -2- 基 )-1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ) 金剛烷 -1- 基 ) 氧基 ) 乙基 )( 甲基 ) 胺基甲酸第三丁酯向實例1.13.3 (1.2 g)於1,4-二噁烷中之溶液中添加氯化雙(苯甲腈)鈀(II) (0.04 g)、4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼㖦(0.937 mL)及三乙胺(0.9 mL)。在回流下加熱混合物隔夜，用乙酸乙酯稀釋並用水(60 mL)及鹽水(60 mL)洗滌。有機層經硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮，得到標題化合物。 1.21.2   3-(1-((3-(2-(( 第三丁氧基羰基 )( 甲基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-6- 氯吡啶甲酸第三丁酯標題化合物係如實例1.1.12中所描述，分別用3-溴-6-氯吡啶甲酸第三丁酯及實例1.21.1替代實例1.1.11及實例1.1.8製備。MS (APCI) m/e 643.9 (M+H) +。 1.21.3   3-(1-((3-(2-(( 第三丁氧基羰基 )( 甲基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-6-(1,2,3,4- 四氫喹啉 -7- 基 ) 吡啶甲酸第三丁酯在100℃下，將實例1.21.2 (480 mg)、7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼㖦-2-基)-1,2,3,4-四氫喹啉(387 mg)、二氯雙(三苯基膦)-鈀(II) (78 mg)及氟化銫(340 mg)於1,4-二噁烷(12 mL)及水(5 mL)中之混合物加熱5小時。冷卻反應物並用乙酸乙酯稀釋。所得混合物用水及鹽水洗滌，且有機層經硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。殘餘物藉由急驟層析法，用50%乙酸乙酯/庚烷溶離來純化，得到標題化合物。MS (APCI) m/e 740.4 (M+H) +。 1.21.4   6-(1-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-1,2,3,4- 四氫喹啉 -7- 基 )-3-(1-((3-(2-(( 第三丁氧基羰基 )( 甲基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶甲酸第三丁酯向苯并[d]噻唑-2-胺(114 mg)於乙腈(5 mL)中之溶液中添加碳酸雙(2,5-二側氧基吡咯啶-1-基)酯(194 mg)。攪拌混合物1小時，並添加於乙腈(5 mL)中之實例1.21.3 (432 mg)。攪拌混合物隔夜，用乙酸乙酯稀釋，用水及鹽水洗滌。有機層經硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。殘餘物藉由矽膠層析法，用50%乙酸乙酯/庚烷溶離來純化，得到標題化合物。 1.21.5   6-(1-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-1,2,3,4- 四氫喹啉 -7- 基 )-3-(1-((3,5- 二甲基 -7-(2-( 甲基胺基 ) 乙氧基 ) 金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶甲酸用三氟乙酸(2.5 mL)處理於二氯甲烷(5 mL)中之實例1.2.4 (200 mg)隔夜。濃縮混合物，得到標題化合物。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 8.40 (s, 1H), 8.30 (s, 2H), 8.02 (d, 1H), 7.85 (d, 1H), 7.74-7.83 (m, 2H), 7.42-7.53 (m, 2H), 7.38 (t, 1H), 7.30 (d, 1H), 7.23 (t, 1H), 3.93-4.05 (m, 2H), 3.52-3.62 (m, 2H), 2.97-3.10 (m, 2H), 2.84 (t, 2H), 2.56 (t, 2H), 2.23 (s, 3H), 1.88-2.00 (m, 2H), 1.45 (s, 2H), 1.25-1.39 (m, 4H), 1.12-1.22 (m, 4H), 1.00-1.09 (m, 2H), 0.89 (s, 6H)。MS (ESI) m/e 760.1 (M+H) +。 1.21.6   6-(1-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-1,2,3,4- 四氫喹啉 -7- 基 )-3-(1-((3-(2-((R)-2-(( 第三丁氧基羰基 ) 胺基 )-N- 甲基 -3- 磺基丙醯胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶甲酸在冰浴中冷卻於N,N-二甲基甲醯胺(1.5 ml)中之(R)-2-((第三丁氧基羰基)胺基)-3-磺基丙酸(70.9 mg)及六氟磷酸O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基
Figure 111128039-A0304-2
(HATU，65 mg)，並添加N,N-二異丙基乙胺(68.9 μL)。在0℃下攪拌混合物15分鐘並在室溫下攪拌8小時。添加於N,N-二甲基甲醯胺(1 mL)及N,N-二異丙基乙胺(60 μL)中之實例1.21.5 (100 mg)。攪拌所得混合物隔夜，濃縮且藉由逆相層析法(C18管柱)，用20-60%乙腈/含0.1%三氟乙酸之水溶離來純化，得到標題化合物。 1.21.7   6-[1-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-1,2,3,4- 四氫喹啉 -7- 基 ]-3-{1-[(3,5- 二甲基 -7-{2-[ 甲基 (3- 磺基 -L- 丙胺醯基 ) 胺基 ] 乙氧基 } 三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 } 吡啶 -2- 甲酸用三氟乙酸(1.5 mL)處理於二氯甲烷(3 mL)中之實例1.21.6 (80 mg)達20分鐘。濃縮反應混合物且藉由逆相層析法(C18管柱)，用0-50%乙腈/ 4 mM乙酸銨水溶液溶離來純化，得到標題化合物。 1H NMR (500 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 8.57 (s, 1H), 7.59-7.67 (m, 3H), 7.54 (d, 1H), 7.46-7.51 (m, 1H), 7.30 (d, 1H), 7.08-7.17 (m, 2H), 6.90 (t, 1H), 3.91-4.10 (m, 3H), 3.84 (s, 2H), 3.04 (s, 2H), 2.75-2.83 (m, 4H), 2.59-2.70 (m, 2H), 2.27-2.39 (m, 2H), 2.26 (s, 3H), 1.81-1.93 (m, 2H), 1.74 (s, 9H), 1.42 (s, 2H), 0.96-1.33 (m, 10H), 0.86 (s, 3H)。MS (ESI) m/e 909.2 (M-H) -。 1.22 合成 3-{1-[(3,5- 二甲基 -7-{2-[(2- 磺基乙基 ) 胺基 ] 乙氧基 } 三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 }-6-[8-([1,3] 噻唑并 [5,4-b] 吡啶 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ] 吡啶 -2- 甲酸 ( 化合物 W2.22) 1.22.1   3-(1-((3-(2- 疊氮基乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-6-(8-( 噻唑并 [5,4-b] 吡啶 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ) 吡啶甲酸第三丁酯將實例1.2.5 (560 mg)及噻唑并[5,4-b]吡啶-2-胺(135 mg)溶解於二氯甲烷(12 mL)中。添加N,N-二甲基吡啶-4-胺(165 mg)及N-乙基-N'-(3-二甲基胺基丙基)碳化二亞胺鹽酸鹽(260 mg)，並在室溫下攪拌反應隔夜。濃縮反應混合物，且粗殘餘物藉由矽膠層析法，用65/35二氯甲烷/乙酸乙酯溶離來純化，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 829.1 (M+H) +。 1.22.2   3-(1-((3-(2- 胺基乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-6-(8-( 噻唑并 [5,4-b] 吡啶 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ) 吡啶甲酸第三丁酯標題化合物係藉由在實例1.2.7中用實例1.22.1替代實例1.2.6製備。MS (ESI) m/e 803.2 (M+H) +。 1.22.3   3-[1-({3,5- 二甲基 -7-[(2,2,7,7- 四甲基 -10,10- 二氧離子基 -3,3- 二苯基 -4,9- 二氧雜 -10λ 6- 硫雜 -13- 氮雜 -3- 矽雜十五烷 -15- 基 ) 氧基 ] 三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ]-6-[8-([1,3] 噻唑并 [5,4- b ] 吡啶 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ] 吡啶 -2- 甲酸第三丁酯向實例1.22.2 (70 mg)及乙烯磺酸4-((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)-2,2-二甲基丁酯(48 mg)於二氯甲烷(1 mL)中之溶液中添加N,N-二異丙基乙胺(0.06 mL)，並在室溫下攪拌反應隔夜。濃縮反應物，且粗殘餘物藉由矽膠層析法，用1-4%甲醇/二氯甲烷梯度溶離來純化，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 1249.2 (M+H) +。 1.22.4   2-((2-((3-((4-(2-( 第三丁氧基羰基 )-6-(8-( 噻唑并 [5,4-b] 吡啶 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ) 吡啶 -3- 基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 氧基 ) 乙基 ) 胺基 ) 乙烷磺酸向實例1.22.3 (70 mg)於四氫呋喃(0.25 mL)中之溶液中添加氟化四丁基銨(60 μL，1.0M四氫呋喃溶液)，並在室溫下攪拌反應兩天。濃縮反應物，且殘餘物藉由逆相層析法(C18管柱)，用10-90%乙腈/含0.1%三氟乙酸之水溶離來純化，得到呈三氟乙酸鹽形式之標題化合物。MS (ESI) m/e 911.1 (M+H) +。 1.22.5   3-{1-[(3,5- 二甲基 -7-{2-[(2- 磺基乙基 ) 胺基 ] 乙氧基 } 三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 }-6-[8-([1,3] 噻唑并 [5,4-b] 吡啶 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ] 吡啶 -2- 甲酸標題化合物係藉由在實例1.2.9中用實例1.22.4替代實例1.2.8製備。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 13.00 (s, 1H), 8.52 (dd, 2H), 8.33 (br s, 2H), 8.16 (dd, 1H), 7.62 (m, 1H), 7.53 (m, 2H), 7.45 (d, 1H), 7.38 (m, 1H), 7.29 (s, 1H), 6.98 (d, 1H), 4.96 (s, 2H), 3.88 (m, 2H), 3.83 (s, 2H), 3.54 (m, 2H), 3.22 (m, 2H), 3.10 (m, 2H), 3.02 (t, 2H), 2.80 (t, 2H), 2.11 (s, 3H), 1.41 (s, 2H), 1.28 (m, 4H), 1.14 (m, 4H), 1.02 (m, 2H), 0.86 (s, 6H)。MS (ESI) m/e 855.2 (M+H) +。 1.23 合成 3-{1-[(3,5- 二甲基 -7-{2-[(2- 磺基乙基 ) 胺基 ] 乙氧基 } 三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 }-6-[8-([1,3] 噻唑并 [4,5-b] 吡啶 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ] 吡啶 -2- 甲酸 ( 化合物 W2.23) 1.23.1   3-(1-((3-(2- 疊氮基乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-6-(8-( 噻唑并 [4,5-b] 吡啶 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ) 吡啶甲酸第三丁酯標題化合物係藉由在實例1.22.1中用噻唑并[4,5-b]吡啶-2-胺替代噻唑并[5,4-b]吡啶-2-胺製備。MS (ESI) m/e 855.2 (M+H) +。 1.23.2   3-(1-((3-(2- 胺基乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-6-(8-( 噻唑并 [4,5-b] 吡啶 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ) 吡啶甲酸第三丁酯標題化合物係藉由在實例1.2.7中用實例1.23.1替代實例1.2.6製備。MS (ESI) m/e 803.2 (M+H) +。 1.23.3   3-[1-({3,5- 二甲基 -7-[(2,2,7,7- 四甲基 -10,10- 二氧離子基 -3,3- 二苯基 -4,9- 二氧雜 -10λ 6- 硫雜 -13- 氮雜 -3- 矽雜十五烷 -15- 基 ) 氧基 ] 三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ]-6-[8-([1,3] 噻唑并 [4,5-b] 吡啶 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ] 吡啶 -2- 甲酸第三丁酯標題化合物係藉由在實例1.22.3中用實例1.23.2替代實例1.22.2製備。MS (ESI) m/e 1249.2 (M+H) +。 1.23.4   3-{1-[(3,5- 二甲基 -7-{2-[(2- 磺基乙基 ) 胺基 ] 乙氧基 } 三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 }-6-[8-([1,3] 噻唑并 [4,5-b] 吡啶 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ] 吡啶 -2- 甲酸標題化合物係藉由在實例1.2.9中用實例1.23.3替代實例1.2.8製備。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 13.20 (br s, 1H), 8.61 (dd, 1H), 8.56 (dd, 1H), 8.33 (br s, 2H), 7.56 (d, 1H) 7.52 (d, 1H), 7.46 (d, 1H), 7.39 (m, 2H), 7.29 (s, 1H), 6.98 (d, 1H), 4.98 (s, 2H), 3.88 (m, 2H), 3.83 (s, 2H), 3.54 (m, 2H), 3.22 (m, 2H), 3.10 (m, 2H), 3.02 (t, 2H), 2.80 (t, 2H), 2.10 (s, 3H), 1.41 (s, 2H), 1.30 (m, 4H), 1.12 (m, 4H), 1.02 (m, 2H), 0.86 (s, 6H)。MS (ESI) m/e 855.1 (M+H) +。 1.24 合成 6-[1-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-1,2,3,4- 四氫喹啉 -7- 基 ]-3-{1-[(3,5- 二甲基 -7-{2-[(2- 磺基乙基 ) 胺基 ] 乙氧基 } 三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 } 吡啶 -2- 甲酸 ( 化合物 W2.24) 1.24.1   6-[1-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-1,2,3,4- 四氫喹啉 -7- 基 ]-3-[1-({3,5- 二甲基 -7-[(2,2,7,7- 四甲基 -10,10- 二氧離子基 -3,3- 二苯基 -4,9- 二氧雜 -10λ 6- 硫雜 -13- 氮雜 -3- 矽雜十五烷 -15- 基 ) 氧基 ] 三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ] 吡啶 -2- 甲酸第三丁酯標題化合物係如實例1.2.8中所描述，用實例1.20.9替代實例1.2.7製備。 1.24.2   6-[1-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-1,2,3,4- 四氫喹啉 -7- 基 ]-3-{1-[(3,5- 二甲基 -7-{2-[(2- 磺基乙基 ) 胺基 ] 乙氧基 } 三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 } 吡啶 -2- 甲酸標題化合物係如實例1.2.9中所描述，用實例1.24.1替代實例1.2.8製備。 1H NMR (500 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 8.26-8.46 (m, 3H), 8.02 (d, 1H), 7.89 (d, 1H), 7.82 (d, 1H), 7.75-7.79 (m, 1H), 7.47 (s, 2H), 7.37 (t, 1H), 7.30 (d, 1H), 7.22 (t, 1H), 3.96 (s, 2H), 3.90 (s, 2H), 3.54-3.61 (m, 2H), 3.18-3.29 (m, 2H), 3.07-3.15 (m, 2H), 2.78-2.92 (m, 4H), 2.23 (s, 3H), 1.87-2.02 (m, 2H), 1.44 (s, 2H), 1.32 (q, 4H), 1.12-1.25 (m, 4H), 1.00-1.11 (m, 2H), 0.88 (s, 6H)。MS (ESI) m/e 854.0 (M+H) +。 1.25 合成 6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-3-{1-[(3-{2-[(2- 羧基乙基 ) 胺基 ] 乙氧基 }-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 } 吡啶 -2- 甲酸 (W2.25) 1.25.1   6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-3-(1-((3-(2-((3-( 第三丁氧基 )-3- 側氧基丙基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶甲酸第三丁酯標題化合物係如實例1.12.1中所描述，用丙烯酸第三丁酯替代乙烯基膦酸二乙酯製備。MS (APCI) m/e 930.6 (M+H) +。 1.25.2   6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-3-{1-[(3-{2-[(2- 羧基乙基 ) 胺基 ] 乙氧基 }-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 } 吡啶 -2- 甲酸標題化合物係如實例1.6.2中所描述，用實例1.25.1替代實例1.6.1製備。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 8.03 (d, 1H), 7.78 (d, 1H), 7.61 (d, 1H), 7.39-7.50 (m, 2H), 7.32-7.38 (m, 3H), 7.23 (s, 1H), 6.73 (d, 1H), 4.88 (s, 2H), 3.88 (t, 2H), 3.79 (s, 2H), 2.99 (t, 2H), 2.86-2.93 (m, 2H), 2.50-2.58 (m, 2H), 2.08 (s, 3H), 1.35 (d, 2H), 1.01-1.30 (m, 10H), 0.86 (s, 6H)。MS (APCI) m/e 819.0 (M+H) +。 1.26 合成 6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-3-{1-[(3,5- 二甲基 -7-{2-[(3- 膦醯基丙基 )( 哌啶 -4- 基 ) 胺基 ] 乙氧基 } 三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 } 吡啶 -2- 甲酸 ( 化合物 W2.26) 1.26.1   6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-3-(1-(((1r,3r)-3-(2-((1-( 第三丁氧基羰基 ) 哌啶 -4- 基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶甲酸第三丁酯在室溫下，攪拌實例1.2.7 (0.020 g)、4-側氧基哌啶-1-甲酸第三丁酯(4.79 mg)及三乙醯氧基硼氫化鈉(7 mg)於二氯甲烷(0.5 mL)中之溶液。攪拌反應隔夜且不經處理即藉由矽膠層析法，用0至10%甲醇/二氯甲烷溶離來純化，得到標題化合物。MS (ELSD) m/e 985.4 (M+H) +。 1.26.2   6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-3-{1-[(3,5- 二甲基 -7-{2-[(3- 膦醯基丙基 )( 哌啶 -4- 基 ) 胺基 ] 乙氧基 } 三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 } 吡啶 -2- 甲酸在室溫下，將實例1.26.1 (0.108 g)、實例1.14.2 (0.030 g)及三乙醯氧基硼氫化鈉(0.035 g)於二氯甲烷(1 mL)中之溶液攪拌1小時。將三氟乙酸(1 mL)添加至反應物中，並繼續攪拌隔夜。濃縮反應物，將其溶解於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)及水(0.5 mL)中且使用Gilson系統，藉由逆相HPLC，用10-75%乙腈/含0.1% v/v三氟乙酸之水溶離來純化。合併所需溶離份並冷凍乾燥，得到標題化合物。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 8.83 (s, 1H), 8.50 (s, 1H), 8.04 (d, 2H), 7.80 (d, 2H), 7.63 (d, 2H), 7.56-7.42 (m, 5H), 7.37 (tt, 3H), 7.30 (s, 1H), 6.96 (d, 1H), 4.96 (s, 2H), 3.89 (t, 2H), 3.44 (d, 6H), 3.31-3.16 (m, 6H), 3.09-2.98 (m, 2H), 2.98-2.85 (m, 1H), 2.18 (d, 2H), 2.10 (s, 3H), 2.00-1.74 (m, 4H), 1.71-1.57 (m, 2H), 1.51-0.97 (m, 12H), 0.87 (s, 6H)。MS (ESI) m/e 951.2 (M+H) +。 1.27 合成 3-{1-[(3-{2-[D-α- 天冬胺醯基 ( 甲基 ) 胺基 ] 乙氧基 }-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 }-6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ] 吡啶 -2- 甲酸 ( 化合物 W2.27) 1.27.1   6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-3-(1-((3,5- 二甲基 -7-(2-( 甲基胺基 ) 乙氧基 ) 金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶甲酸第三丁酯標題化合物係如實例1.11.1中所描述，藉由用實例1.13.6替代實例1.10.9製備。 1.27.2   3-{1-[(3-{2-[D- α - 天冬胺醯基 ( 甲基 ) 胺基 ] 乙氧基 }-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 }-6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ] 吡啶 -2- 甲酸將實例1.27.1 (0.074 g)、六氟磷酸(V) 2-(3H-[1,2,3]三唑并[4,5-b]吡啶-3-基)-1,1,3,3-四甲基異
Figure 111128039-A0304-2
(0.038 g)、N,N-二異丙基乙胺(0.048 mL)及(R)-4-(第三丁氧基)-2-((第三丁氧基羰基)胺基)-4-側氧基丁酸(0.029 g)於二氯甲烷(1 mL)中之溶液攪拌2小時。添加三氟乙酸(0.5 mL)，並繼續攪拌隔夜。濃縮反應物，將其溶解於N,N-二甲基甲醯胺(1.5 mL)及水(0.5 mL)中，且使用Gilson系統，藉由逆相HPLC，用10-75%乙腈/含0.1% v/v三氟乙酸之水溶離來純化。合併所需溶離份並冷凍乾燥，得到標題化合物。 1H NMR (500 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 12.88 (s, 1H), 8.16 (s, 3H), 8.04 (d, 1H), 7.80 (d, 1H), 7.62 (d, 1H), 7.55-7.42 (m, 3H), 7.41-7.33 (m, 2H), 7.33-7.27 (m, 1H), 6.96 (d, 1H), 4.96 (s, 2H), 4.63-4.49 (m, 1H), 3.89 (t, 2H), 3.82 (s, 2H), 3.61-3.37 (m, 4H), 3.10-2.97 (m, 4H), 2.89-2.73 (m, 2H), 2.67-2.52 (m, 1H), 2.10 (s, 3H), 1.45-0.95 (m, 12H), 0.85 (s, 6H)。MS (ESI) m/e 875.3 (M+H) +。 1.28 合成 6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-3-(1-{[3-(2-{[1-( 羧基甲基 ) 哌啶 -4- 基 ] 胺基 } 乙氧基 )-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ] 甲基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶 -2- 甲酸 ( 化合物 W2.28)在室溫下，攪拌實例1.2.7 (0.055 g)、2-(4-側氧基哌啶-1-基)乙酸第三丁酯(0.014 g)及三乙醯氧基硼氫化鈉(0.019 g)於二氯甲烷(0.5 mL)中之溶液。攪拌2小時後，將三氟乙酸(0.5 mL)添加至反應物中，並繼續攪拌隔夜。濃縮反應物，將其溶解於N,N-二甲基甲醯胺(1.5 mL)及水(0.5 mL)中且使用Gilson系統，藉由逆相HPLC，用10-80%乙腈/含0.1% v/v三氟乙酸之水溶離來純化。合併所需溶離份並冷凍乾燥，得到標題化合物。 1H NMR (501 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 12.85 (s, 1H), 8.80 (s, 2H), 8.03 (d, 1H), 7.80 (d, 1H), 7.62 (d, 1H), 7.55-7.41 (m, 3H), 7.36 (q, 2H), 7.29 (s, 1H), 6.96 (d, 1H), 4.96 (s, 2H), 4.07 (s, 2H), 3.89 (t, 2H), 3.83 (s, 2H), 3.66-3.55 (m, 4H), 3.30 (s, 1H), 3.08 (s, 4H), 3.02 (t, 2H), 2.22 (d, 2H), 2.10 (s, 3H), 1.97-1.78 (m, 2H), 1.44 (s, 2H), 1.31 (q, 4H), 1.20-0.96 (m, 6H), 0.87 (s, 6H)。MS (ESI) m/e 887.3 (M+H) +。 1.29 合成 N-[(5S)-5- 胺基 -6-{[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ]( 甲基 ) 胺基 }-6- 側氧基己基 ]-N,N- 二甲基甲銨 ( 化合物 W2.29)將Fmoc-N-ε-(三甲基)-L-離胺酸鹽酸鹽(0.032 g)、六氟磷酸(V) 2-(3H-[1,2,3]三唑并[4,5-b]吡啶-3-基)-1,1,3,3-四甲基異
Figure 111128039-A0304-2
(0.028 g)及N,N-二異丙基乙胺(0.034 mL)於N,N-二甲基甲醯胺(0.5 mL)中之溶液攪拌5分鐘。將反應物添加至實例1.13.7 (0.050 g)中，並在室溫下繼續攪拌隔夜。將二乙胺(0.069 mL)添加至反應物中，並且再繼續攪拌2小時。用N,N-二甲基甲醯胺(1 mL)、水(0.5 mL)及三氟乙酸(0.101 mL)稀釋反應物。混合物使用Gilson系統，藉由逆相HPLC，用10-90%乙腈/含0.1% v/v三氟乙酸之水溶離來純化。合併所需溶離份並冷凍乾燥，得到標題化合物。 1H NMR (500 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 12.87 (s, 1H), 8.13 (s, 3H), 8.04 (d, 1H), 7.80 (d, 1H), 7.62 (d, 1H), 7.54-7.42 (m, 3H), 7.42-7.34 (m, 2H), 7.29 (s, 1H), 6.96 (d, 1H), 4.96 (s, 2H), 4.42-4.24 (m, 1H), 3.89 (t, 2H), 3.82 (s, 2H), 3.29-3.16 (m, 2H), 3.08-3.00 (m, 15H), 2.87 (s, 2H), 2.10 (s, 3H), 1.84-1.60 (m, 4H), 1.42-0.97 (m, 15H), 0.85 (s, 6H)。MS (ESI) m/e 930.3 (M+H) +。 1.30 合成 6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-3-{1-[(3,5- 二甲基 -7-{2-[ 哌啶 -4- 基 (2- 磺基乙基 ) 胺基 ] 乙氧基 } 三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 } 吡啶 -2- 甲酸 ( 化合物 W2.30) 1.30.1   6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-3-(1-{[3-({13-[1-( 第三丁氧基羰基 ) 哌啶 -4- 基 ]-2,2,7,7- 四甲基 -10,10- 二氧離子基 -3,3- 二苯基 -4,9- 二氧雜 -10λ 6- 硫雜 -13- 氮雜 -3- 矽雜十五烷 -15- 基 } 氧基 )-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ] 甲基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶 -2- 甲酸第三丁酯在室溫下，將實例1.2.8 (0.111 g)、4-側氧基哌啶-1-甲酸第三丁酯(0.021 g)及三乙醯氧基硼氫化鈉(0.028 g)於二氯甲烷(1 mL)中之溶液攪拌1小時。添加乙酸(7.63 μL)，並繼續攪拌隔夜。再將4-側氧基哌啶-1-甲酸第三丁酯(0.021 g)、三乙醯氧基硼氫化鈉(0.028 g)及乙酸(8 μL)添加至反應物中，並且再繼續攪拌4小時。將反應物直接裝載至矽膠上且用0.5-4%甲醇/二氯甲烷梯度溶離，得到標題化合物。 1.30.26-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-3-{1-[(3,5-二甲基-7-{2-[哌啶-4-基(2-磺基乙基)胺基]乙氧基}三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基)甲基]-5-甲基-1H-吡唑-4-基}吡啶-2-甲酸 向實例1.30.1 (0.078 g)於二氯甲烷(1 mL)中之溶液中添加三氟乙酸(0.5 mL)，並在室溫下攪拌反應隔夜。濃縮反應物並將其溶解於N,N-二甲基甲醯胺(1.5 mL)及水(0.5 mL)中。混合物使用Gilson系統，藉由逆相HPLC，用10-75%乙腈/含0.1% v/v三氟乙酸之水溶離來純化。合併所需溶離份並冷凍乾燥，得到標題化合物。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 12.89 (s, 1H), 9.31 (s, 1H), 8.75 (d, 1H), 8.36-8.19 (m, 1H), 8.08 (d, 1H), 7.84 (d, 1H), 7.66 (d, 1H), 7.58 (d, 1H), 7.55-7.45 (m, 2H), 7.40 (td, 2H), 7.34 (s, 1H), 6.99 (d, 1H), 5.00 (s, 2H), 3.93 (t, 2H), 3.87 (s, 2H), 3.49 (d, 6H), 3.39-3.31 (m, 2H), 3.01 (m, 6H), 2.15 (s, 6H), 1.94 (s, 2H), 1.58-0.99 (m, 12H), 0.91 (s, 6H)。MS (ESI) m/e 937.3 (M+H) +。 1.31 合成 6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-5-(3- 膦醯基丙氧基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-3-[1-({3,5- 二甲基 -7-[2-( 甲基胺基 ) 乙氧基 ] 三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ] 吡啶 -2- 甲酸 ( 化合物 W2.31) 1.31.1   8- 溴 -5- 羥基 -3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 甲酸第三丁酯向5-羥基-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-甲酸第三丁酯(9 g)於N,N-二甲基甲醯胺(150 mL)中之溶液中添加N-溴代琥珀醯亞胺(6.43 g)。攪拌混合物隔夜並用水(200 mL)淬滅。混合物用乙酸乙酯(500 mL)稀釋，用水及鹽水洗滌，且經硫酸鈉乾燥。蒸發溶劑，得到標題化合物，不經進一步純化即用於下一反應中。MS(ESI) m/e 329.2 (M+H) +。 1.31.2   5-( 苯甲基氧基 )-8- 溴 -3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 甲酸第三丁酯向實例1.31.1 (11.8 g)於丙酮(200 mL)中之溶液中添加苯甲基溴(7.42 g)及K 2CO 3(5 g)，且在回流下攪拌混合物隔夜。濃縮混合物，且使殘餘物在乙酸乙酯(600 mL)與水(200 mL)之間分配。有機層用水及鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。殘餘物藉由矽膠層析法，用10%乙酸乙酯/庚烷溶離來純化，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 418.1 (M+H) +。 1.31.3   5-( 苯甲基氧基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2,8(1H)- 二甲酸 2- 第三丁酯 8- 甲酯在500 mL不鏽鋼壓力反應器中，將甲醇(100 mL)及三乙胺(9.15 mL)添加至實例1.31.2 (10.8 g)及[1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯鈀(II) (0.48 g)中。向容器充以氬氣若干次。反應器用一氧化碳加壓並在60 psi一氧化碳下，在100℃下攪拌2小時。冷卻後，真空濃縮粗反應混合物。將殘餘物添加至乙酸乙酯(500 mL)及水(200 mL)中。有機層進一步用水及鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。殘餘物藉由矽膠層析法，用10-20%乙酸乙酯/庚烷溶離來純化，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 398.1 (M+H) +。 1.31.4   5-( 苯甲基氧基 )-1,2,3,4- 四氫異喹啉 -8- 甲酸甲酯鹽酸鹽向實例1.31.3 (3.78 g)於四氫呋喃(20 mL)中之溶液中添加4N HCl之1,4-二噁烷溶液(20 mL)，且攪拌混合物隔夜。真空濃縮混合物，得到標題化合物，不經進一步純化即用於下一反應中。MS(ESI) m/e 298.1 (M+H) +。 1.31.5   5-( 苯甲基氧基 )-2-(5- 溴 -6-( 第三丁氧基羰基 ) 吡啶 -2- 基 )-1,2,3,4- 四氫異喹啉 -8- 甲酸甲酯向實例1.31.4 (3.03 g)於二甲亞碸(50 mL)中之溶液中添加實例1.1.10 (2.52 g)及三乙胺(3.8 mL)，且在氮氣下，在60℃下攪拌混合物隔夜。反應混合物用乙酸乙酯(500 mL)稀釋，用水及鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。殘餘物藉由矽膠層析法，用20%乙酸乙酯/庚烷溶離來純化，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 553.1 (M+H) +。 1.31.6   (2-((3,5- 二甲基 -7-((5- 甲基 -4-(4,4,5,5- 四甲基 -1,3,2- 二氧硼㖦 -2- 基 )-1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ) 金剛烷 -1- 基 ) 氧基 ) 乙基 )( 甲基 ) 胺基甲酸第三丁酯向實例1.13.3 (2.6 g)及[1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯鈀(II)二氯甲烷(190 mg)於乙腈(30 mL)中之溶液中添加三乙胺(2.0 mL)及頻哪醇硼烷(1.4 mL)，且在回流下攪拌混合物隔夜。混合物不經處理直接用於下一反應中。MS (ESI) m/e 558.4 (M+H) +。 1.31.7   5-( 苯甲基氧基 )-2-(6-( 第三丁氧基羰基 )-5-(1-((3-(2-(( 第三丁氧基羰基 )( 甲基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶 -2- 基 )-1,2,3,4- 四氫異喹啉 -8- 甲酸甲酯向實例1.31.5 (2.58 g)於四氫呋喃(40 mL)及水(20 mL)中之溶液中添加實例1.31.6 (2.66 g)、1,3,5,7-四甲基-6-苯基-2,4,8-三氧雜-6-磷雜金剛烷(341 mg)、參(二亞苄基丙酮)二鈀(0) (214 mg)及K 3PO 4(4.95 g)，且在回流下攪拌混合物4小時。混合物用乙酸乙酯(500 mL)稀釋，用水及鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。殘餘物藉由矽膠層析法，用20%乙酸乙酯/二氯甲烷溶離來純化，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 904.5 (M+H) +。 1.31.8   2-(6-( 第三丁氧基羰基 )-5-(1-((3-(2-(( 第三丁氧基羰基 )( 甲基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶 -2- 基 )-5- 羥基 -1,2,3,4- 四氫異喹啉 -8- 甲酸甲酯在250 mL不鏽鋼壓力瓶中，將四氫呋喃(60 mL)中之實例1.31.7 (3.0 g)添加至Pd(OH) 2(0.6 g，Degussa #E101NE/W，20%於碳上，49%水含量)中。在30 psi氫氣下，在50℃下將混合物振盪16小時。混合物經耐綸膜過濾，並在真空下蒸發溶劑，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 815.1(M+H) +。 1.31.9   2-(6-( 第三丁氧基羰基 )-5-(1-((3-(2-(( 第三丁氧基羰基 )( 甲基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶 -2- 基 )-5-(3-( 二第三丁氧基磷醯基 ) 丙氧基 )-1,2,3,4- 四氫異喹啉 -8- 甲酸甲酯向實例1.31.8 (163 mg)於四氫呋喃(10 mL)中之溶液中添加實例1.14.1 (50.5 mg)、三苯基膦 (52.5 mg)及偶氮二甲酸二第三丁酯(46.2 mg)，且攪拌混合物3小時。混合物用乙酸乙酯(200 mL)稀釋，用水及鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。殘餘物藉由矽膠層析法，用20%乙酸乙酯/庚烷，隨後5%甲醇/二氯甲烷溶離來純化，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 1049.2 (M+H) +。 1.31.10 2-(6-( 第三丁氧基羰基 )-5-(1-((3-(2-(( 第三丁氧基羰基 )( 甲基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶 -2- 基 )-5-(3-( 二第三丁氧基磷醯基 ) 丙氧基 )-1,2,3,4- 四氫異喹啉 -8- 甲酸向實例1.31.9 (3 g)於四氫呋喃(20 mL)、甲醇(10 mL)及水(10 mL)中之溶液中添加氫氧化鋰單水合物(30 mg)，且在室溫下攪拌混合物24小時。反應混合物用2% HCl水溶液中和並真空濃縮。殘餘物用乙酸乙酯(800 mL)稀釋，用水及鹽水洗滌，且經硫酸鈉乾燥。過濾並蒸發溶劑，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 1034.5 (M+H) +。 1.31.11  6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-5-(3- 膦醯基丙氧基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-3-[1-({3,5- 二甲基 -7-[2-( 甲基胺基 ) 乙氧基 ] 三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ] 吡啶 -2- 甲酸向實例1.31.10 (207 mg)於N,N-二甲基甲醯胺(4 mL)中之溶液中添加苯并[d]噻唑-2-胺(45.1 mg，0.3 mmol)、六氟磷酸氟-N,N,N',N'-四甲基甲脒鎓鹽(79 mg)及N,N-二丙基乙胺(150 mg)，且在60℃下攪拌混合物3小時。反應混合物用乙酸乙酯(200 mL)稀釋，用水及鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。殘餘物藉由矽膠層析法，用20%乙酸乙酯/庚烷，隨後5%甲醇/二氯甲烷溶離來純化。濃縮後，將該物質溶解於二氯甲烷與三氟乙酸(1:1，6 mL)之混合物中並使其在室溫下靜置隔夜。蒸發溶劑，且將殘餘物溶解於二甲亞碸/甲醇(1:1，9 mL)中。混合物使用Gilson系統，藉由逆相HPLC，用10-85%乙腈/含0.1% v/v三氟乙酸之水溶離來純化，得到標題化合物。 1H NMR (501 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 8.27 (s, 2H), 8.02 (d, 1H), 7.76 (dd, 2H), 7.43-7.56 (m, 2H), 7.32-7.37 (m, 1H), 7.29 (s, 1H), 7.00 (dd, 2H), 5.02 (s, 2H), 4.15 (t, 2H), 3.88-3.93 (m, 2H), 3.83 (s, 3FI), 3.50-3.59 (m, 4H), 2.95-3.08 (m, 2H), 2.78-2.87 (m, 2H), 2.51-2.55 (m, 3H), 2.11 (s, 3H), 1.90-2.01 (m, 2H), 1.65-1.75 (m, 2H), 1.41 (s, 2H), 1.22-1.36 (m, 6H), 0.98-1.18 (m, 6H), 0.87 (s, 6H)。MS (ESI) m/e 898.2 (M+H) +。 1.32 合成 6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-3-(1-{[3-(2-{[N-(2- 羧基乙基 )-L-α- 天冬胺醯基 ] 胺基 } 乙氧基 )-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ] 甲基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶 -2- 甲酸 ( 化合物 W2.32) 1.32.1   6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-3-(1-((3-(2-((S)-4-( 第三丁氧基 )-2-(( 第三丁氧基羰基 ) 胺基 )-4- 側氧基丁醯胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶甲酸第三丁酯向(S)-4-(第三丁氧基)-2-((第三丁氧基羰基)胺基)-4-側氧基丁酸(136 mg)及六氟磷酸O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基
Figure 111128039-A0304-2
(HATU，179 mg)於N,N-二甲基甲醯胺(3 mL)中之冷(0℃)溶液中添加N,N-二異丙基乙胺(165 μL)。攪拌反應混合物10分鐘，並添加於N,N-二甲基甲醯胺(1 mL)中之實例1.2.7 (252 mg)。在室溫下攪拌混合物1.5小時且藉由逆相層析法(C18管柱)，用50-100%乙腈/含0.1% v/v三氟乙酸之水溶離來純化，得到標題化合物。 1.32.2   3-(1-((3-(2-((S)-2- 胺基 -3- 羧基丙醯胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ) 吡啶甲酸用三氟乙酸(2.5 mL)處理於二氯甲烷(3 mL)中之實例1.32.1 (100 mg)隔夜。濃縮反應混合物，得到標題化合物。 1.32.3   6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-3-(1-((3-(2-((S)-2-((3-( 第三丁氧基 )-3- 側氧基丙基 ) 胺基 )-3- 羧基丙醯胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶甲酸向實例1.32.2 (102 mg)及N,N-二異丙基乙胺(0.21 mL)於N,N-二甲基甲醯胺(1.5 mL)中之混合物中添加丙烯酸第三丁酯(80 mg)及水(1.5 mL)。在50℃下加熱混合物24小時且藉由逆相層析法(C18管柱)，用20-60%乙腈/含0.1% v/v三氟乙酸之水溶離來純化，得到標題化合物。MS (APCI) m/e 989.1 (M+H) +。 1.32.4   6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-3-(1-{[3-(2-{[N-(2- 羧基乙基 )-L-α- 天冬胺醯基 ] 胺基 } 乙氧基 )-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ] 甲基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶 -2- 甲酸標題化合物係如實例1.6.2中所描述，用實例1.32.3替代實例1.6.1製備。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 12.86 (s, 3H), 8.62-9.21 (m, 2H), 8.52 (t, 1H), 8.03 (d, 1H), 7.79 (d, 1H), 7.62 (d, 1H), 7.42-7.53 (m, 3H), 7.33-7.41 (m, 2H), 7.29 (s, 1H), 6.95 (d, 1H), 4.96 (s, 2H), 4.04-4.19 (m, 1H), 3.89 (t, 2H), 3.81 (s, 2H), 3.32-3.41 (m, 2H), 3.16-3.27 (m, 2H), 3.10 (t, 2H), 3.01 (t, 2H), 2.83 (d, 2H), 2.66 (t, 2H), 2.10 (s, 3H), 1.39 (s, 2H), 1.20-1.32 (m, 4H), 0.94-1.16 (m, 6H), 0.85 (s, 6H)。MS (ESI) m/e 933.2 (M+H) +。 1.33 合成 3-{1-[(3-{2-[(2- 胺基乙基 )(2- 磺基乙基 ) 胺基 ] 乙氧基 }-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 }-6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ] 吡啶 -2- 甲酸 ( 化合物 W2.33) 1.33.1   6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-3-(1-((3-(2-((2-(( 第三丁氧基羰基 ) 胺基 ) 乙基 )(2- 磺基乙基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶甲酸向實例1.2.9 (188 mg)、(2-側氧基乙基)胺基甲酸第三丁酯(70.1 mg)及N,N-二異丙基乙胺(384 μL)中之溶液中添加三乙醯氧基硼氫化鈉(140 mg)，且攪拌混合物隔夜。添加NaCNBH 3(13.83 mg)。攪拌所得混合物1小時，並添加甲醇(1 mL)。攪拌混合物10分鐘，用乙酸乙酯稀釋，並用鹽水洗滌。有機層經硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。殘餘物藉由逆相層析法(C18管柱)，用20-80%乙腈/含0.1% v/v三氟乙酸之水溶離來純化，得到標題化合物。 1.33.2   3-{1-[(3-{2-[(2- 胺基乙基 )(2- 磺基乙基 ) 胺基 ] 乙氧基 }-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 }-6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ] 吡啶 -2- 甲酸標題化合物係如實例1.6.2中所描述，用實例1.33.1替代實例1.6.1製備。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 12.85 (s, 1H), 8.03 (d, 1H), 7.87 (s, 2H), 7.79 (d, 1H), 7.62 (d, 1H), 7.41-7.56 (m, 3H), 7.33-7.40 (m, 2H), 7.29 (s, 1H), 6.96 (d, 1H), 4.96 (s, 2H), 3.89 (t, 2H), 3.50 (s, 2H), 3.29-3.40 (m, 4H), 3.19 (s, 2H), 3.01 (t, 2H), 2.94 (t, 2H), 2.11 (s, 3H), 1.43 (s, 2H), 1.25-1.37 (m, 4H), 0.98-1.19 (m, 6H), 0.87 (s, 6H)。MS (ESI) m/e 897.2 (M+H) +。 1.34 合成 6-[5-(2- 胺基乙氧基 )-8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-3-[1-({3,5- 二甲基 -7-[2-( 甲基胺基 ) 乙氧基 ] 三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ] 吡啶 -2- 甲酸 ( 化合物 W2.34) 1.34.1   5-(2-((( 苯甲基氧基 ) 羰基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-2-(6-( 第三丁氧基羰基 )-5-(1-((3-(2-(( 第三丁氧基羰基 )( 甲基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶 -2- 基 )-1,2,3,4- 四氫異喹啉 -8- 甲酸甲酯向實例1.31.8 (500 mg)、 (2-羥基乙基)胺基甲酸苯甲酯(180 mg)及三苯基膦(242 mg)於四氫呋喃(9 mL)中之混合物中添加(E)-二氮烯-1,2-二甲酸二第三丁酯(212 mg)。攪拌混合物2小時，用乙酸乙酯稀釋並用水及鹽水洗滌。有機層經硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。殘餘物藉由矽膠層析法，用50-100%乙酸乙酯/庚烷溶離來純化，得到標題化合物。MS (APCI) m/e 991.1 (M+H) +。 1.34.2   5-(2-((( 苯甲基氧基 ) 羰基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-2-(6-( 第三丁氧基羰基 )-5-(1-((3-(2-(( 第三丁氧基羰基 )( 甲基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶 -2- 基 )-1,2,3,4- 四氫異喹啉 -8- 甲酸向實例1.34.1 (480 mg)於四氫呋喃(10 mL)及甲醇(5 mL)中之溶液中添加1 M氫氧化鋰(1.94 mL)。在50℃下加熱混合物隔夜，冷卻，用10% HCl水溶液酸化至pH 3並濃縮。殘餘物藉由逆相層析法(C18管柱)，用40-99%乙腈/含0.1% v/v三氟乙酸之水溶離來純化，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 977.4 (M+H) +。 1.34.3   6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-5-(2-((( 苯甲基氧基 ) 羰基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-3-(1-((3-(2-(( 第三丁氧基羰基 )( 甲基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶甲酸第三丁酯向實例1.34.2 (245 mg)、苯并[d]噻唑-2-胺(151 mg)及六氟磷酸氟-N,N,N',N'-四甲基甲脒鎓鹽 (TFFH) (132 mg)於N,N-二甲基甲醯胺(3 mL)中之混合物中添加N,N-二異丙基乙胺(876 μL)。在65℃下加熱反應混合物24小時，冷卻，用乙酸乙酯稀釋並用水及鹽水洗滌。有機層經硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮。殘餘物藉由矽膠層析法，用0-80%乙酸乙酯/庚烷溶離來純化，得到標題化合物。MS (APCI) m/e 1109.5 (M+H) +。 1.34.46-[5-(2-胺基乙氧基)-8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-3-[1-({3,5-二甲基-7-[2-(甲基胺基)乙氧基]三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}甲基)-5-甲基-1H-吡唑-4-基]吡啶-2-甲酸 用三氟乙酸(10 mL)處理於二氯甲烷(0.5 mL)中之實例1.34.3 (100 mg)隔夜。濃縮反應混合物且藉由逆相層析法(C18管柱)，用20-60%乙腈/含0.1% v/v三氟乙酸之水溶離來純化，得到標題化合物。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 12.75 (s, 2H), 8.27 (s, 2H), 7.89-8.09 (m, 4H), 7.77 (s, 2H), 7.44-7.53 (m, 2H), 7.35 (t, 1H), 7.29 (s, 1H), 7.02 (dd, 2H), 5.02 (s, 2H), 4.27 (t, 2H), 3.87-3.97 (m, 2H), 3.83 (s, 2H), 3.50-3.58 (m, 2H), 3.00 (s, 2H), 2.88-2.96 (m, 2H), 2.52-2.60 (m, 2H), 2.10 (s, 3H), 1.42 (s, 2H), 1.23-1.36 (m, 4H), 0.98-1.19 (m, 6H), 0.87 (s, 6H)。MS (ESI) m/e 819.3 (M+H) +。 1.35 合成 6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 ) 萘 -2- 基 ]-3-{1-[(3,5- 二甲基 -7-{2-[(3- 磺基丙基 ) 胺基 ] 乙氧基 } 三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 } 吡啶 -2- 甲酸 ( 化合物 W2.35) 1.35.1   6- 氯 -3-(1-((3,5- 二甲基 -7-(2- 側氧基乙氧基 ) 金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶甲酸第三丁酯在-78℃下，經20分鐘向草醯氯(8 mL，2.0 M之二氯甲烷溶液)於二氯甲烷(20 mL)中之溶液中逐滴添加含二甲亞碸(1 mL)之二氯甲烷(10 mL)。在氬氣下攪拌溶液30分鐘，且經10分鐘添加實例1.20.2 (3.8 g)於二氯甲烷(30 mL)中之溶液。在-78℃下再攪拌反應混合物60分鐘。在-78℃下添加三乙胺(2 mL)，且攪拌反應混合物60分鐘。移除冷卻浴，並使反應物升溫至室溫隔夜。添加水(60 mL)。水層用1% HCl水溶液酸化並用二氯甲烷萃取。合併之有機層用1% HCl水溶液、NaHCO 3水溶液及鹽水洗滌。有機層經硫酸鈉乾燥並濃縮，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 527.9 (M+H) +。 1.35.2   3- 碘丙烷 -1- 磺酸 2,2,2- 三氟 -1-( 對甲苯基 ) 乙酯標題化合物係根據J. Org. Chem., 2013, 78, 711-716中所報導之程序製備。 1.35.3   3- 胺基丙烷 -1- 磺酸 2,2,2- 三氟 -1-( 對甲苯基 ) 乙酯在微波條件(Biotage Initiator)下，將實例1.35.2 (2.0 g)於7 N氨之甲醇溶液(20 mL)中之溶液加熱至80℃，保持45分鐘。濃縮混合物，且將殘餘物溶解於乙酸乙酯(300 mL)中。有機層用水及鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 312.23 (M+H) +。 1.35.4   6- 氯 -3-(1-(((3,5- 二甲基 -7-(2-((3-((2,2,2- 三氟 -1-( 對甲苯基 ) 乙氧基 ) 磺醯基 ) 丙基 ) 胺基 ) 乙氧基 ) 金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶甲酸第三丁酯向實例1.35.3 (1.96 g)於二氯乙烷(30 mL)中之溶液中添加實例1.35.1 (3.33 g)。在室溫下攪拌反應混合物1小時，且添加NaBH 4(1.2 g)於甲醇(8 mL)中之懸浮液。在室溫下攪拌混合物3小時並用乙酸乙酯(300 mL)稀釋。有機層用2N NaOH水溶液、水及鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。將殘餘物溶解於四氫呋喃(30 mL)中，並添加二碳酸二第三丁酯(2 g)，隨後添加催化量之4-二甲基胺基吡啶。在室溫下攪拌混合物隔夜。混合物用乙酸乙酯(300 mL)稀釋並用水及鹽水洗滌。有機層經硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 924.42 (M+H) +。 1.35.5   7-(6-( 第三丁氧基羰基 )-5-(1-((3-(2-(( 第三丁氧基羰基 )(3-((2,2,2- 三氟 -1-( 對甲苯基 ) 乙氧基 ) 磺醯基 ) 丙基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶 -2- 基 )-1- 萘甲酸向7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼㖦-2-基)-1-萘甲酸甲酯(203 mg)於1,4-二噁烷(10 mL)及水(5 mL)之混合物中之溶液中添加實例1.35.4 (600 mg)、二氯化雙(三苯基膦)鈀(II) (45.6 mg)及氟化銫(296 mg)。在微波條件(Biotage Initiator)下，在120℃下加熱混合物30分鐘，用乙酸乙酯(200 mL)稀釋，並用水及鹽水洗滌。有機層經硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。殘餘物藉由矽膠層析法，用20%乙酸乙酯/庚烷溶離來純化，得到酯中間物。將殘餘物溶解於四氫呋喃(8 mL)、甲醇(4 mL)及水(4 mL)之混合物中，並用氫氧化鋰單水合物(200 mg)處理3小時。反應物用1N HCl水溶液酸化至pH 4並用乙酸乙酯(400 mL)稀釋。所得混合物用水及鹽水洗滌。有機層經硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 1060.24 (M+H) +。 1.35.6   6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 ) 萘 -2- 基 ]-3-{1-[(3,5- 二甲基 -7-{2-[(3- 磺基丙基 ) 胺基 ] 乙氧基 } 三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 } 吡啶 -2- 甲酸向實例1.35.5 (405 mg)於二氯甲烷(10 mL)中之溶液中添加苯并[d]噻唑-2-胺(57.4 mg)、1-乙基-3-[3-(二甲基胺基)丙基]-碳化二亞胺鹽酸鹽(146 mg)及4-(二甲基胺基)吡啶(93 mg)。在室溫下攪拌混合物隔夜，用乙酸乙酯(200 mL)稀釋，並用水及鹽水洗滌。有機層經硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。將殘餘物溶解於二氯甲烷(3 mL)中並用三氟乙酸(3 mL)處理隔夜。濃縮反應混合物，且殘餘物藉由逆相HPLC(Gilson系統)，用10-85%乙腈/含0.1% v/v三氟乙酸之水梯度溶離來純化，得到標題化合物。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 13.08 (s, 1H), 9.00 (s, 1H), 8.53 (s, 2H), 8.36 (dd, 1H), 8.26-8.13 (m, 3H), 8.06 (dd, 1H), 8.04-7.97 (m, 1H), 7.94 (d, 1H), 7.80 (d, 1H), 7.69 (dd, 1H), 7.51-7.43 (m, 2H), 7.40-7.31 (m, 1H), 7.19 (d, 0H), 3.88 (s, 2H), 3.54 (t, 2H), 3.16-2.91 (m, 4H), 2.68-2.55 (m, 2H), 2.29 (s, 0H), 2.22 (s, 3H), 1.93 (p, 2H), 1.43 (s, 2H), 1.38-1.23 (m, 4H), 1.10 (dq, 6H), 0.87 (s, 6H)。MS (ESI) m/e 863.2 (M+H) +。 1.36 合成 6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-3-{1-[(3-{2-[(2- 羧基乙基 )( 哌啶 -4- 基 ) 胺基 ] 乙氧基 }-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 } 吡啶 -2- 甲酸 ( 化合物 W2.36) 1.36.1   6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-3-(1-(((1r,3r)-3-(2-((3-( 第三丁氧基 )-3- 側氧基丙基 )(1-( 第三丁氧基羰基 ) 哌啶 -4- 基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶甲酸第三丁酯在室溫下攪拌實例1.25.1 (0.086 g)、4-側氧基哌啶-1-甲酸第三丁酯(0.037 g)、三乙醯氧基硼氫化鈉(0.039 g)及乙酸(11 μL)於二氯甲烷(1 mL)中之溶液。攪拌隔夜後，將反應物裝載至矽膠上且使用0.5至5%甲醇/二氯甲烷梯度溶離，得到標題化合物。MS (ELSD) m/e 1113.5 (M+H) +。 1.36.2   6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-3-{1-[(3-{2-[(2- 羧基乙基 )( 哌啶 -4- 基 ) 胺基 ] 乙氧基 }-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 } 吡啶 -2- 甲酸用三氟乙酸(0.5 mL)處理實例1.36.1 (0.050)於二氯甲烷(0.5 mL)中之溶液，並攪拌反應隔夜。濃縮反應物並將其溶解於二甲亞碸及甲醇(1:1)中。混合物使用Gilson系統，藉由逆相HPLC，用10-75%乙腈/含0.1% v/v三氟乙酸之水溶離來純化。合併所需溶離份並冷凍乾燥，得到標題化合物。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 12.84 (s, 1H), 9.38 (s, 1H), 8.78 (s, 1H), 8.42 (s, 1H), 8.03 (d, 1H), 7.80 (d, 1H), 7.63 (d, 1H), 7.55-7.42 (m, 3H), 7.41-7.33 (m, 2H), 7.30 (s, 1H), 6.96 (d, 1H), 4.96 (s, 2H), 3.89 (t, 2H), 3.83 (s, 2H), 3.73-3.54 (m, 3H), 3.53-3.34 (m, 4H), 3.34-3.25 (m, 2H), 3.02 (t, 2H), 2.99-2.85 (m, 2H), 2.78 (t, 2H), 2.23-2.04 (m, 5H), 1.92-1.76 (m, 2H), 1.43 (s, 2H), 1.39-1.23 (m, 4H), 1.23-0.96 (m, 6H), 0.87 (s, 6H)。MS (ESI) m/e 901.3 (M+H) +。 1.37 合成 6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-3-{1-[(3,5- 二甲基 -7-{2-[(3- 磺基 -L- 丙胺醯基 )(2- 磺基乙基 ) 胺基 ] 乙氧基 } 三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 } 吡啶 -2- 甲酸 ( 化合物 W2.37)將(R)-2-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-3-磺基丙酸(0.011 g)及六氟磷酸(V) 2-(3H-[1,2,3]三唑并[4,5-b]吡啶-3-基)-1,1,3,3-四甲基異
Figure 111128039-A0304-2
(10.80 mg)於N,N-二甲基甲醯胺(0.5 mL)中之溶液攪拌5分鐘。將該溶液添加至實例1.2.9 (0.025 g)及N,N-二異丙基乙胺(0.014 mL)中。攪拌2小時後，將二乙胺(0.013 mL)添加至反應物中，並且再繼續攪拌1小時。用N,N-二甲基甲醯胺及水稀釋反應物並用三氟乙酸淬滅。混合物使用Gilson系統，藉由逆相HPLC，用10-75%乙腈/含0.1% v/v三氟乙酸之水溶離來純化。合併所需溶離份並冷凍乾燥，得到標題化合物。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 12.84 (s, 1H), 8.03 (dd, 4H), 7.79 (d, 1H), 7.62 (d, 1H), 7.54 (dd, 1H), 7.51-7.41 (m, 2H), 7.36 (td, 2H), 7.33 (s, 1H), 6.98 (dd, 1H), 4.96 (s, 2H), 4.42 (dd, 2H), 3.89 (t, 2H), 3.83 (s, 2H), 3.73 (ddd, 2H), 3.57-3.38 (m, 2H), 3.31 (dt, 1H), 3.08 (dd, 1H), 3.02 (t, 2H), 2.87 (tt, 1H), 2.81-2.54 (m, 2H), 2.10 (d, 3H), 1.51-0.91 (m, 12H), 0.85 (s, 6H)。MS (ESI) m/e 1005.2 (M+H) +。 1.38 合成 6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-3-{1-[(3-{2-[{2-[(2- 羧基乙基 ) 胺基 ] 乙基 }(2- 磺基乙基 ) 胺基 ] 乙氧基 }-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 } 吡啶 -2- 甲酸 ( 化合物 W2.38) 1.38.1   6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-3-(1-((3-(2-((2-((3-( 第三丁氧基 )-3- 側氧基丙基 ) 胺基 ) 乙基 )(2- 磺基乙基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶甲酸標題化合物係如實例1.32.3中所描述，用實例1.33.2替代實例1.32.2製備。 1.38.2   6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-3-{1-[(3-{2-[{2-[(2- 羧基乙基 ) 胺基 ] 乙基 }(2- 磺基乙基 ) 胺基 ] 乙氧基 }-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 } 吡啶 -2- 甲酸標題化合物係如實例1.6.2中所描述，用實例1.38.1替代實例1.6.1製備。 1H NMR (501 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 12.87 (s, 1H), 8.68 (s, 2H), 8.04 (d, 1H), 7.79 (d, 1H), 7.62 (d, 1H), 7.53 (d, 1H), 7.42-7.50 (m, 2H), 7.33-7.40 (m, 2H), 7.29 (s, 1H), 6.96 (d, 1H), 4.96 (s, 3H), 3.89 (t, 2H), 3.83 (s, 2H), 3.66 (t, 2H), 3.31-3.53 (m, 8H), 3.18 (t, 2H), 3.02 (t, 2H), 2.95 (t, 2H), 2.67 (t, 2H), 2.11 (s, 3H), 1.43 (s, 2H), 1.22-1.37 (m, 6H), 0.98-1.19 (m, 6H), 0.87 (s, 6H)。MS (APCI) m/e 971.0 (M+H) +。 1.39 合成 3-{1-[(3,5- 二甲基 -7-{2-[(3- 膦醯基丙基 ) 胺基 ] 乙氧基 } 三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 }-6-[8-([1,3] 噻唑并 [4,5-b] 吡啶 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ] 吡啶 -2- 甲酸 ( 化合物 W2.39) 1.39.1   3-(1-((3-(2-((3-( 二第三丁氧基磷醯基 ) 丙基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-6-(8-( 噻唑并 [4,5-b] 吡啶 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ) 吡啶甲酸第三丁酯將實例1.23.2 (520 mg)及實例1.14.2 (175 mg)溶解於二氯甲烷(6 mL)中並在室溫下攪拌兩小時。添加硼氫化鈉(32 mg)於甲醇(1 mL)中之懸浮液，且攪拌混合物30分鐘。將反應物添加至飽和NaHCO 3水溶液中並用乙酸乙酯萃取。有機層用鹽水洗滌且經硫酸鈉乾燥。過濾並濃縮後，藉由矽膠層析法，用0.5-5.0%甲醇/二氯甲烷梯度溶離來純化，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 1037.3 (M+H) +。 1.39.2   3-{1-[(3,5- 二甲基 -7-{2-[(3- 膦醯基丙基 ) 胺基 ] 乙氧基 } 三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 }-6-[8-([1,3] 噻唑并 [4,5-b] 吡啶 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ] 吡啶 -2- 甲酸標題化合物係藉由在實例1.2.9中用實例1.39.1替代實例1.2.8製備。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 8.60 (dd, 1H), 8.52 (dd, 1H), 8.41 (br s, 2H), 7.65 (d, 1H) 7.48 (d, 1H), 7.46 (d, 1H), 7.38 (m, 2H), 7.29 (s, 1H), 6.97 (d, 1H), 4.97 (s, 2H), 3.89 (m, 2H), 3.83 (s, 2H), 3.56 (m, 2H), 3.02 (m, 6H), 2.11 (s, 3H), 1.81 (m, 2H), 1.61 (m, 2H), 2.11 (s, 3H), 1.43 (s, 2H), 1.30 (m, 4H), 1.14 (m, 4H), 1.04 (m, 2H), 0.87 (s, 6H)。MS (ESI) m/e 869.2 (M+H) +。 1.40 合成 3-{1-[(3,5- 二甲基 -7-{2-[(3- 膦醯基丙基 ) 胺基 ] 乙氧基 } 三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 }-6-[8-([1,3] 噻唑并 [5,4-b] 吡啶 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ] 吡啶 -2- 甲酸 ( 化合物 W2.40) 1.40.1   3-(1-((3-(2-((3-( 二第三丁氧基磷醯基 ) 丙基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-6-(8-( 噻唑并 [5,4-b] 吡啶 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ) 吡啶甲酸第三丁酯標題化合物係藉由在實例1.39.1中用實例1.22.2替代實例1.23.2製備。MS (ESI) m/e 1037.3 (M+H) +。 1.40.2   3-{1-[(3,5- 二甲基 -7-{2-[(3- 膦醯基丙基 ) 胺基 ] 乙氧基 } 三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 }-6-[8-([1,3] 噻唑并 [5,4-b] 吡啶 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ] 吡啶 -2- 甲酸標題化合物係藉由在實例1.2.9中用實例1.40.1替代實例1.2.8製備。 1H NMR (500 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 8.52 (dd, 2H), 8.41 (br s, 2H), 8.17 (dd, 1H), 7.63 (m, 1H), 7.53 (m, 2H), 7.46 (d, 1H), 7.38 (t, 1H), 7.30 (s, 1H), 6.98 (d, 1H), 4.96 (s, 2H), 3.88 (m, 2H), 3.83 (s, 2H), 3.56 (t, 2H), 3.00 (m, 6H), 2.11 (s, 3H), 1.81 (m, 2H), 1.60 (m, 2H), 1.43 (s, 2H), 1.31 (m, 4H), 1.14 (m, 4H), 1.04 (m, 2H), 0.87 (s, 6H)。MS (ESI) m/e 869.2 (M+H) +。 1.41 合成 6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-5-( 羧基甲氧基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-3-[1-({3,5- 二甲基 -7-[2-( 甲基胺基 ) 乙氧基 ] 三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ] 吡啶 -2- 甲酸 ( 化合物 W2.41) 1.41.1   5-(2-( 第三丁氧基 )-2- 側氧基乙氧基 )-2-(6-( 第三丁氧基羰基 )-5-(1-((3-(2-(( 第三丁氧基羰基 )( 甲基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶 -2- 基 )-1,2,3,4- 四氫異喹啉 -8- 甲酸甲酯向實例1.31.8 (163 mg)於N,N-二甲基甲醯胺(10 mL)中之溶液中添加2-溴乙酸第三丁酯(58.6 mg)及K 2CO 3(83 mg)，並攪拌反應隔夜。混合物用乙酸乙酯(200 mL)稀釋，用水及鹽水洗滌，且經硫酸鈉乾燥。過濾並蒸發溶劑，得到殘餘物，藉由矽膠層析法，用20%乙酸乙酯/庚烷溶離來純化，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 929.2 (M+H) +。 1.41.2   5-(2-( 第三丁氧基 )-2- 側氧基乙氧基 )-2-(6-( 第三丁氧基羰基 )-5-(1-((3-(2-(( 第三丁氧基羰基 )( 甲基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶 -2- 基 )-1,2,3,4- 四氫異喹啉 -8- 甲酸向實例1.41.1 (3 g)於四氫呋喃(20 mL)、甲醇(10 mL)及水(10 mL)中之溶液中添加氫氧化鋰單水合物(300 mg)。在室溫下攪拌混合物24小時。反應混合物用2% HCl水溶液中和並真空濃縮。殘餘物用乙酸乙酯(800 mL)稀釋，用水及鹽水洗滌，且經硫酸鈉乾燥。過濾並蒸發溶劑，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 914.5 (M+H) +。 1.41.3   6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-5-( 羧基甲氧基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-3-[1-({3,5- 二甲基 -7-[2-( 甲基胺基 ) 乙氧基 ] 三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ] 吡啶 -2- 甲酸向實例1.41.2 (183 mg)於N,N-二甲基甲醯胺(4 mL)中之溶液中添加苯并[d]噻唑-2-胺(45.1 mg)、六氟磷酸氟-N,N,N',N'-四甲基甲脒鎓鹽(79 mg)及N,N-二異丙基乙胺(0.203 mL)。在60℃下攪拌混合物隔夜。混合物用乙酸乙酯(300 mL)稀釋，用水及鹽水洗滌，且經硫酸鈉乾燥。過濾並蒸發溶劑，得到殘餘物，將其溶解於二氯甲烷/三氟乙酸(1:1，10 mL)中並攪拌隔夜。濃縮混合物，且殘餘物使用Gilson系統，藉由逆相HPLC，用10-85%乙腈/含0.1% v/v三氟乙酸之水溶離來純化，得到標題化合物。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 12.73 (s, 1H), 8.30 (s, 2H), 7.99-8.07 (m, 1H), 7.75-7.79 (m, 1H), 7.70 (d, 1H), 7.44-7.56 (m, 2H), 7.30-7.39 (m, 2H), 7.30 (s, 1H), 7.03 (t, 1H), 6.87-6.93 (m, 1H), 4.98-5.18 (m, 4H), 4.84 (s, 3H), 3.78-4.01 (m, 4H), 3.55 (t, 2H)。2.77-3.07 (m, 4H), 2.53-2.61 (m, 3H), 2.04-2.16 (m, 3H), 1.41 (s, 2H), 1.02-1.34 (m, 6H), 0.83-0.91 (m, 6H)。MS (ESI) m/e 834.2 (M+H) +。 1.42 合成 6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-3-{1-[(3-{2-[(3- 羧基丙基 )( 哌啶 -4- 基 ) 胺基 ] 乙氧基 }-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 } 吡啶 -2- 甲酸 ( 化合物 W2.42) 1.42.1   6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-3-(1-(((1r,3r)-3-(2-((1-( 第三丁氧基羰基 ) 哌啶 -4- 基 )(4- 甲氧基-4- 側氧基丁基)胺基)乙氧基)-5,7-二甲基金剛烷-1-基)甲基)-5-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶甲酸 第三丁酯 在室溫下，攪拌實例1.26.1 (0.169 g)、4-側氧基丁酸甲酯(0.024 g)及三乙醯氧基硼氫化鈉(0.055 g)於二氯甲烷(2 mL)中之溶液。2小時後反應物用二氯甲烷(50 mL)稀釋並用飽和碳酸氫鈉水溶液(10 mL)洗滌。分離有機層，經硫酸鎂乾燥，過濾並濃縮。矽膠層析，用0.5-5% 甲醇/含氨之二氯甲烷梯度溶離，得到標題化合物。MS (ELSD) m/e 1085.5 (M+H) +。 1.42.2   6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-3-{1-[(3-{2-[(3- 羧基丙基 )( 哌啶 -4- 基 ) 胺基 ] 乙氧基 }-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 } 吡啶 -2- 甲酸用三氟乙酸(0.5 mL)處理實例1.42.1 (0.161 g)於二氯甲烷(0.5 mL)中之溶液，並攪拌反應隔夜。濃縮反應物，將其溶解於甲醇(0.6 mL)中並用氫氧化鋰單水合物(0.124 g)於水(0.5 mL)中之溶液處理。攪拌1.5小時後，用三氟乙酸(0.229 mL)淬滅反應並用N,N-二甲基甲醯胺(0.5 mL)稀釋。混合物使用Gilson系統，藉由逆相HPLC，用10-60%乙腈/含0.1% v/v三氟乙酸之水溶離來純化。合併所需溶離份並冷凍乾燥，得到標題化合物。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 12.84 (s, 1H), 9.40 (s, 1H), 8.89-8.79 (m, 1H), 8.57-8.41 (m, 1H), 8.03 (d, 1H), 7.80 (d, 1H), 7.62 (d, 1H), 7.55-7.41 (m, 3H), 7.41-7.32 (m, 2H), 7.30 (s, 1H), 6.96 (d, 1H), 4.96 (s, 2H), 3.89 (t, 2H), 3.83 (s, 2H), 3.44 (d, 2H), 3.26 (s, 2H), 3.22-3.11 (m, 2H), 3.09-2.85 (m, 6H), 2.34 (t, 2H), 2.19 (d, 2H), 2.10 (s, 3H), 1.95-1.71 (m, 5H), 1.44 (s, 2H), 1.39-1.27 (m, 4H), 1.22-0.96 (m, 6H), 0.87 (s, 6H)。MS (ESI) m/e 915.3 (M+H) +。 1.43 合成 6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 ) 萘 -2- 基 ]-3-{1-[(3,5- 二甲基 -7-{2-[(2- 磺基乙基 ) 胺基 ] 乙氧基 } 三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 } 吡啶 -2- 甲酸 ( 化合物 W2.43) 1.43.1   3-(1-((3-(2- 羥基乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-6-(8-( 甲氧基羰基 ) 萘 -2- 基 ) 吡啶甲酸第三丁酯向7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼㖦-2-基)-1-萘甲酸甲酯(2.47 g)於1,4-二噁烷(40 mL)及水(20 mL)中之溶液中添加實例1.20.2 (4.2 g)、二氯化雙(三苯基膦)鈀(II) (556 mg)及氟化銫(3.61 g)，並在回流下攪拌反應隔夜。混合物用乙酸乙酯(400 mL)稀釋並用水及鹽水洗滌，且經硫酸鈉乾燥。過濾並蒸發溶劑，得到殘餘物，藉由矽膠層析法，用20%乙酸乙酯/庚烷，隨後5%甲醇/二氯甲烷溶離來純化，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 680.7 (M+H) +。 1.43.2   3-(1-((3,5- 二甲基 -7-(2-(( 甲基磺醯基 ) 氧基 ) 乙氧基 ) 金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-6-(8-( 甲氧基羰基 ) 萘 -2- 基 ) 吡啶甲酸第三丁酯向實例1.43.1 (725 mg)於二氯甲烷(10 mL)及三乙胺(0.5 mL)中之冷(0℃)溶液中添加甲烷磺醯氯(0.249 mL)，且攪拌混合物4小時。反應混合物用乙酸乙酯(200 mL)稀釋並用水及鹽水洗滌，且經硫酸鈉乾燥。過濾並蒸發溶劑，得到標題產物，不經進一步純化即用於下一反應中。MS (ESI) m/e 759.9 (M+H) +。 1.43.3   3-(1-(((3-(2- 疊氮基乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-6-(8-( 甲氧基羰基 ) 萘 -2- 基 ) 吡啶甲酸第三丁酯向實例1.43.2 (4.2 g)於N,N-二甲基甲醯胺(30 mL)中之溶液中添加疊氮化鈉(1.22 g)，且攪拌混合物96小時。反應混合物用乙酸乙酯(600 mL)稀釋，用水及鹽水洗滌，且經硫酸鈉乾燥。過濾並蒸發溶劑，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 705.8 (M+H) +。 1.43.4   7-(5-(1-((3-(2- 疊氮基乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-6-( 第三丁氧基羰基 ) 吡啶 -2- 基 )-1- 萘甲酸向實例1.43.3 (3.5 g)於四氫呋喃/甲醇/水(2:1:1，30 mL)中之溶液中添加氫氧化鋰單水合物(1.2 g)，且攪拌混合物隔夜。反應混合物用1N HCl水溶液酸化並用乙酸乙酯(600 mL)稀釋，用水及鹽水洗滌，且經硫酸鈉乾燥。過濾並蒸發溶劑，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 691.8 (M+H) +。 1.43.5   3-(1-((3-(2- 疊氮基乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 ) 萘 -2- 基 ) 吡啶甲酸第三丁酯向實例1.43.4 (870 mg)於N,N-二甲基甲醯胺(10 mL)中之溶液中添加苯并[d]噻唑-2-胺(284 mg)、六氟磷酸氟-N,N,N',N'-四甲基甲脒鎓鹽(499 mg)及N,N-二異丙基乙胺(488 mg)。在60℃下攪拌混合物3小時。反應混合物用乙酸乙酯(200 mL)稀釋並用水及鹽水洗滌，且經硫酸鈉乾燥。過濾並蒸發溶劑，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 824.1 (M+H) +。 1.43.6   3-(1-((3-(2- 胺基乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 ) 萘 -2- 基 ) 吡啶甲酸第三丁酯向實例1.43.5 (890 mg)於四氫呋喃(30 mL)中之溶液中添加Pd/C (90 mg)。在1個大氣壓之氫氣下攪拌混合物隔夜。過濾反應混合物，且催化劑用乙酸乙酯洗滌。蒸發溶劑，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 798.1 (M+H) +。 1.43.7   6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 ) 萘 -2- 基 ]-3-{1-[(3,5- 二甲基 -7-{2-[(2- 磺基乙基 ) 胺基 ] 乙氧基 } 三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 } 吡啶 -2- 甲酸向實例1.43.6 (189 mg)於N,N-二甲基甲醯胺(6 mL)中之溶液中添加乙烯磺酸4-((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)-2,2-二甲基丁酯(106 mg)。攪拌混合物4天。混合物用乙酸乙酯(300 mL)稀釋並用水及鹽水洗滌，且經硫酸鈉乾燥。過濾並蒸發溶劑之後，將殘餘物溶解於三氟乙酸(10 mL)中並靜置隔夜。在真空下蒸發三氟乙酸，且將殘餘物溶解於二甲亞碸/甲醇(1:1，6 mL)中。混合物藉由逆相HPLC (Gilson系統)，用10-85%乙腈/含0.1% v/v三氟乙酸之水溶離純化，得到標題化合物。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 13.09 (s, 1H), 9.02 (s, 1H), 8.31-8.43 (m, 3H), 8.16-8.26 (m, 3H), 7.93-8.08 (m, 3H), 7.82 (d, 1H), 7.66-7.75 (m, 1H), 7.46-7.55 (m, 2H), 7.37 (t, 1H), 3.90 (s, 3H), 3.17-3.28 (m, 2H), 3.07-3.16 (m, 2H), 2.82 (t, 2H), 2.24 (s, 3H), 1.44 (s, 2H), 0.99-1.37 (m, 12H), 0.87 (s, 6H)。MS (ESI) m/e 849.1 (M+H) +。 1.44 合成 3-{1-[(3-{2-[L-α- 天冬胺醯基 (2- 磺基乙基 ) 胺基 ] 乙氧基 }-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 }-6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ] 吡啶 -2- 甲酸 ( 化合物 W2.44) 1.44.1   6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-3-(1-((3-(2-((S)-4-( 第三丁氧基 )-2-(( 第三丁氧基羰基 ) 胺基 )-4- 側氧基 -N-(2- 磺基乙基 ) 丁醯胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶甲酸向(S)-4-(第三丁氧基)-2-((第三丁氧基羰基)胺基)-4-側氧基丁酸(40.7 mg)及六氟磷酸O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基
Figure 111128039-A0304-2
(HATU，40.1 mg)於N,N-二甲基甲醯胺(3 mL)中之冷(0℃)溶液中添加N,N-二異丙基乙胺(98 μL)。在室溫下攪拌反應混合物1小時，且添加於N,N-二甲基甲醯胺(1 mL)中之實例1.2.9 (60 mg)。攪拌混合物1.5小時並藉由逆相層析法(C18管柱)，用20-90%乙腈/含0.1% v/v三氟乙酸之水溶離來純化，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 1123.4 (M-H) -。 1.44.2   3-{1-[(3-{2-[L-α- 天冬胺醯基 (2- 磺基乙基 ) 胺基 ] 乙氧基 }-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 }-6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ] 吡啶 -2- 甲酸用三氟乙酸(1.5 mL)處理於二氯甲烷(5 mL)中之實例1.44.1 (100 mg)隔夜。濃縮反應混合物且藉由逆相層析法(C18管柱)，用20-60%乙腈/含0.1% v/v三氟乙酸之水溶離來純化，得到標題化合物。 1H NMR (500 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 12.85 (s, 2H), 8.11-8.22 (m, 3H), 8.04 (d, 1H), 7.79 (d, 1H), 7.62 (d, 1H), 7.41-7.54 (m, 3H), 7.32-7.39 (m, 2H), 7.29 (s, 1H), 6.95 (d, 1H), 4.95 (s, 2H), 4.80 (s, 1H), 3.89 (t, 2H), 3.81 (s, 2H), 3.55-3.71 (m, 2H), 3.01 (t, 4H), 2.74-2.86 (m, 1H), 2.57-2.73 (m, 2H), 2.09 (s, 3H), 0.91-1.46 (m, 13H), 0.84 (s, 6H)。MS (ESI) m/e 969.2 (M+H) +。 1.45 合成 6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-3-{1-[(3-{2-[(1,3- 二羥基丙 -2- 基 ) 胺基 ] 乙氧基 }-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 } 吡啶 -2- 甲酸 ( 化合物 W2.45) 1.45.1   6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-3-(1-((3,5- 二甲基 -7-(2-( 氧雜環丁烷 -3- 基胺基 ) 乙氧基 ) 金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶甲酸第三丁酯在室溫下，攪拌實例1.2.7 (0.095 g)、氧雜環丁-3-酮(10 mg)及三乙醯氧基硼氫化鈉(0.038 g)於二氯甲烷(1 mL)中之溶液。攪拌隔夜後，將反應混合物直接裝載至矽膠上並使用0.5-5%甲醇/含氨之二氯甲烷梯度溶離，得到標題化合物。MS (ELSD) m/e 858.4 (M+H) +。 1.45.2   6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-3-{1-[(3-{2-[(1,3- 二羥基丙 -2- 基 ) 胺基 ] 乙氧基 }-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 } 吡啶 -2- 甲酸將實例1.45.1溶解於二氯甲烷(0.5 mL)中並用三氟乙酸(0.5 mL)處理且攪拌隔夜。反應物使用Gilson系統，藉由逆相HPLC，用10-60%乙腈/含0.1% v/v三氟乙酸之水溶離來純化。合併所需溶離份並冷凍乾燥，得到標題化合物。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 12.84 (s, 1H), 8.19 (s, 2H), 8.02 (d, 1H), 7.78 (d, 1H), 7.61 (d, 1H), 7.53-7.40 (m, 3H), 7.40-7.31 (m, 2H), 7.28 (s, 1H), 6.94 (d, 1H), 4.95 (s, 2H), 3.87 (t, 2H), 3.82 (s, 2H), 3.67-3.62 (m, 4H), 3.22-3.14 (m, 1H), 3.14-3.06 (m, 2H), 3.00 (t, 4H), 2.09 (s, 3H), 1.41 (s, 2H), 1.37-1.20 (m, 4H), 1.20-0.95 (m, 6H), 0.85 (s, 6H)。MS (ESI) m/e 820.2 (M+H) +。 1.46 合成 6-[5-(2- 胺基乙氧基 )-8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-3-{1-[(3,5- 二甲基 -7-{2-[ 甲基 (2- 磺基乙基 ) 胺基 ] 乙氧基 } 三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 } 吡啶 -2- 甲酸 ( 化合物 W2.46) 1.46.1   6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-5-(2-{[( 苯甲基氧基 ) 羰基 ] 胺基 } 乙氧基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-3-[1-({3,5- 二甲基 -7-[(2,2,7,7,13- 五甲基 -10,10- 二氧離子基 -3,3- 二苯基 -4,9- 二氧雜 -10λ 6- 硫雜 -13- 氮雜 -3- 矽雜十五烷 -15- 基 ) 氧基 ] 三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ] 吡啶 -2- 甲酸標題化合物係如實例1.2.8中所描述，用實例1.35替代實例1.2.7製備。 1.46.2   6-[5-(2- 胺基乙氧基 )-8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-3-{1-[(3,5- 二甲基 -7-{2-[ 甲基 (2- 磺基乙基 ) 胺基 ] 乙氧基 } 三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 } 吡啶 -2- 甲酸標題化合物係如實例1.34.4中所描述，用1.46.1替代實例1.34.3製備。 1H NMR (500 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 12.74 (s, 2H), 8.96 (s, 1H), 8.03 (d, 1H), 7.94 (s, 3H), 7.72-7.81 (m, 2H), 7.53 (d, 1H), 7.47 (t, 1H), 7.35 (t, 1H), 7.28 (s, 1H), 7.02 (t, 2H), 5.03 (s, 2H), 4.26 (t, 2H), 3.92 (t, 2H), 3.83 (s, 2H), 3.23-3.38 (m, 4H), 3.13-3.25 (m, 1H), 2.82-3.00 (m, 4H), 2.78 (d, 3H), 2.11 (s, 3H), 1.23-1.50 (m, 6H), 0.95-1.21 (m, 6H), 0.86 (s, 6H)。MS (ESI) m/e 927.2 (M+H) +。 1.47 合成 6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-5-{2-[(2- 磺基乙基 ) 胺基 ] 乙氧基 }-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-3-{1-[(3,5- 二甲基 -7-{2-[ 甲基 (2- 磺基乙基 ) 胺基 ] 乙氧基 } 三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 } 吡啶 -2- 甲酸 ( 化合物 W2.47) 1.47.1   6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-5-[(2,2,7,7- 四甲基 -10,10- 二氧離子基 -3,3- 二苯基 -4,9- 二氧雜 -10λ 6- 硫雜 -13- 氮雜 -3- 矽雜十五烷 -15- 基 ) 氧基 ]-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-3-{1-[(3,5- 二甲基 -7-{2-[ 甲基 (2- 磺基乙基 ) 胺基 ] 乙氧基 } 三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 } 吡啶 -2- 甲酸標題化合物係如實例1.2.8中所描述，用實例1.46.2替代實例1.2.7製備。 1.47.2   6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-5-{2-[(2- 磺基乙基 ) 胺基 ] 乙氧基 }-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-3-{1-[(3,5- 二甲基 -7-{2-[ 甲基 (2- 磺基乙基 ) 胺基 ] 乙氧基 } 三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 } 吡啶 -2- 甲酸用三氟乙酸(5 mL)處理於二氯甲烷(5 mL)中之實例1.47.1 (100 mg)隔夜。濃縮反應混合物且藉由逆相層析法(C18管柱)，用20-60%乙腈/含0.1% v/v三氟乙酸之水溶離來純化，得到標題化合物。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm m 12.74 (s, 1H), 8.96 (d, 1H), 8.64 (s, 2H), 8.02 (d, 1H), 7.76 (dd, 2H), 7.41-7.57 (m, 2H), 7.24-7.40 (m, 2H), 7.02 (t, 2H), 5.03 (s, 2H), 4.23-4.42 (m, 2H), 3.90 (t, 2H), 3.83 (s, 2H), 3.25-3.40 (m, 6H), 3.12-3.24 (m, 2H), 2.81-3.01 (m, 6H), 2.78 (d, 3H), 2.10 (s, 3H), 1.22-1.47 (m, 6H), 0.97-1.21 (m, 6H), 0.86 (s, 6H)。MS (ESI) m/e 1035.3 (M+H) +。 1.48 合成 6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-3-{1-[(3,5- 二甲基 -7-{2-[(2- 磺基乙基 ){2-[(2- 磺基乙基 ) 胺基 ] 乙基 } 胺基 ] 乙氧基 } 三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 } 吡啶 -2- 甲酸 ( 化合物 W2.48) 1.48.1   6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-3-{1-[(3,5- 二甲基 -7-{[2,2,7,7- 四甲基 -10,10- 二氧離子基 -3,3- 二苯基 -16-(2- 磺基乙基 )-4,9- 二氧雜 -10λ 6- 硫雜 -13,16- 二氮雜 -3- 矽雜十八烷 -18- 基 ] 氧基 } 三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 } 吡啶 -2- 甲酸標題化合物係如實例1.2.8中所描述，用實例1.33.2替代實例1.2.7製備。 1.48.2   6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-3-{1-[(3,5- 二甲基 -7-{2-[(2- 磺基乙基 ){2-[(2- 磺基乙基 ) 胺基 ] 乙基 } 胺基 ] 乙氧基 } 三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 } 吡啶 -2- 甲酸標題化合物係如實例1.47.2中所描述，用實例1.48.1替代實例1.47.1製備。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 12.87 (s, 3H), 8.55 (s, 4H), 8.04 (d, 2H), 7.79 (d, 2H), 7.62 (d, 1H), 7.40-7.56 (m, 3H), 7.32-7.40 (m, 2H), 7.29 (s, 1H), 6.96 (d, 2H), 4.96 (s, 3H), 3.89 (t, 2H), 3.83 (s, 2H), 3.47 (d, 2H), 3.36 (s, 2H), 3.18-3.30 (m, 2H), 3.01 (t, 2H), 2.94 (t, 2H), 2.82 (t, 2H), 2.11 (s, 3H), 1.26-1.49 (m, 6H), 0.96-1.20 (m, 6H), 0.87 (s, 6H)。MS (ESI) m/e 1005.2 (M+H) +。 1.49 合成 6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-5-{2-[(2- 羧基乙基 ) 胺基 ] 乙氧基 }-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-3-{1-[(3,5- 二甲基 -7-{2-[ 甲基 (2- 磺基乙基 ) 胺基 ] 乙氧基 } 三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 } 吡啶 -2- 甲酸 ( 化合物 W2.49) 1.49.1   6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-5-(2-((3-( 第三丁氧基 )-3- 側氧基丙基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-3-(1-((3,5- 二甲基 -7-(2-( 甲基 (2- 磺基乙基 ) 胺基 ) 乙氧基 ) 金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶甲酸標題化合物係如實例1.32.3中所描述，用實例1.46.2替代實例1.32.2製備。 1.49.2   6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-5-{2-[(2- 羧基乙基 ) 胺基 ] 乙氧基 }-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-3-{1-[(3,5- 二甲基 -7-{2-[ 甲基 (2- 磺基乙基 ) 胺基 ] 乙氧基 } 三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 } 吡啶 -2- 甲酸標題化合物係如實例1.6.2中所描述，用實例1.49.1替代實例1.6.1製備。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 12.75 (s, 1H), 8.96 (s, 1H), 8.59 (s, 2H), 8.03 (d, 1H), 7.72-7.82 (m, 2H), 7.54 (d, 1H), 7.43-7.51 (m, 2H), 7.35 (t, 1H), 7.28 (s, 1H), 7.02 (dd, 2H), 5.02 (s, 2H), 4.34 (s, 2H), 3.93 (s, 2H), 3.83 (s, 2H), 3.62 (s, 2H), 2.84-3.01 (m, 4H), 2.78 (d, 3H), 2.65-2.75 (m, 2H), 2.11 (s, 3H), 1.20-1.45 (m, 7H), 0.95-1.21 (m, 6H), 0.86 (s, 6H)。MS (ESI) m/e 999.2 (M+H) +。 1.50 合成 3-{1-[(3,5- 二甲基 -7-{2-[(3- 膦醯基丙基 )( 哌啶 -4- 基 ) 胺基 ] 乙氧基 } 三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 }-6-[8-([1,3] 噻唑并 [4,5-b] 吡啶 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ] 吡啶 -2- 甲酸 ( 化合物 W2.50) 1.50.1   3-(1-((3-(2-((1-( 第三丁氧基羰基 ) 哌啶 -4- 基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-6-(8-( 噻唑并 [4,5-b] 吡啶 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ) 吡啶甲酸第三丁酯將實例1.23.2 (205 mg)溶解於二氯甲烷(2.4 mL)中，並添加4-側氧基哌啶-1-甲酸第三丁酯(51 mg)及三乙醯氧基硼氫化鈉(75 mg)。在室溫下攪拌反應兩小時。再添加二氯甲烷，並將反應物倒入飽和NaHCO 3水溶液中。有機層用鹽水洗滌且經硫酸鈉乾燥。過濾並濃縮後，殘餘物在Grace Reveleris®胺基濾筒上藉由矽膠層析法，用0.5至5.0%甲醇/二氯甲烷梯度溶離來純化，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 986.3(M+H) +。 1.50.2   3-{1-[(3,5- 二甲基 -7-{2-[(3- 膦醯基丙基 )( 哌啶 -4- 基 ) 胺基 ] 乙氧基 } 三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 }-6-[8-([1,3] 噻唑并 [4,5-b] 吡啶 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ] 吡啶 -2- 甲酸將實例1.50.1 (94 mg)溶解於二氯甲烷(1 mL)中，接著添加實例1.14.2 (25 mg)及三乙醯氧基硼氫化鈉(30 mg)。在室溫下攪拌反應四小時。添加三氟乙酸(1.5 mL)，並在室溫下攪拌反應隔夜。濃縮反應混合物且藉由逆相層析法(C18管柱)，用10-90%乙腈/含0.1% v/v三氟乙酸之水溶離來純化，得到呈三氟乙酸鹽形式之標題化合物。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 8.82 (br s, 1H) 8.60 (dd, 1H), 8.52 (dd, 1H), 8.50 (br s, 1H), 7.66 (d, 1H), 7.50 (d, 1H), 7.46 (d, 1H), 7.38 (m, 2H), 7.30 (s, 1H), 6.97 (d, 1H), 4.98 (s, 2H), 3.89 (t, 2H), 3.83 (s, 2H) 3.69 (m, 2H), 3.61 (m, 1H), 3.44 (m, 2H) 3.23 (m, 4H), 3.02 (t, 2H), 2.93 (m, 2H), 2.18 (m, 2H), 2.10 (s, 3H), 1.92 (m, 2H), 1.83 (m, 2H), 1.64 (m, 2H), 1.44 (s, 2H), 1.31 (m, 4H), 1.14 (m, 4H), 1.04 (m, 2H), 0.87 (s, 6H)。MS (ESI) m/e 952.3 (M+H) +。 1.51 合成 6-[4-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫 -2H-1,4- 苯并噁嗪 -6- 基 ]-3-{1-[(3,5- 二甲基 -7-{2-[(2- 磺基乙基 ) 胺基 ] 乙氧基 } 三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 } 吡啶 -2- 甲酸 ( 化合物 W2.51) 1.51.1   3-(1-((3-(2-(( 第三丁基二甲基矽烷基 ) 氧基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-6- 氯吡啶甲酸第三丁酯向實例1.20.2 (3.2 g)於N,N-二甲基甲醯胺(20 mL)中之溶液中添加咪唑(0.616 g)及氯第三丁基二甲基矽烷(1.37 g)。攪拌混合物隔夜。反應混合物用乙酸乙酯(300 mL)稀釋，用水及鹽水洗滌，且經硫酸鈉乾燥。過濾並蒸發溶劑，得到粗產物，藉由矽膠層析法，用20%乙酸乙酯/庚烷溶離來純化，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 645.4 (M+H) +。 1.51.2   3-(1-((3-(2-(( 第三丁基二甲基矽烷基 ) 氧基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-6-(3,4- 二氫 -2H- 苯并 [b][1,4] 噁嗪 -6- 基 ) 吡啶甲酸第三丁酯向6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼㖦-2-基)-3,4-二氫-2H-苯并[b][1,4]噁嗪(507 mg)於1,4-二噁烷(10 mL)及水(5 mL)中之溶液中添加實例1.51.1 (1.25 g)、二氯化雙(三苯基膦)鈀(II) (136 mg)及氟化銫(884 mg)。在微波條件(Biotage, Initiator)下，在120℃下攪拌混合物20分鐘。混合物用乙酸乙酯(500 mL)稀釋，用水及鹽水洗滌，且經硫酸鈉乾燥。過濾並蒸發溶劑，得到殘餘物，藉由矽膠層析法，用20%乙酸乙酯/庚烷，隨後5%甲醇/二氯甲烷溶離來純化，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 744.1 (M+H) +。 1.51.3   6-(4-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫 -2H- 苯并 [b][1,4] 噁嗪 -6- 基 )-3-(1-((3-(2-(( 第三丁基二甲基矽烷基 ) 氧基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶甲酸第三丁酯向碳酸雙(2,5-二側氧基吡咯啶-1-基)酯(295 mg)於乙腈(10 mL)中之環境溫度懸浮液中添加苯并[d]噻唑-2-胺(173 mg)，且攪拌混合物1小時。添加實例1.51.2 (710 mg)於乙腈(10 mL)中之溶液，且劇烈攪拌懸浮液隔夜。混合物用乙酸乙酯(300 mL)稀釋，用水及鹽水洗滌，且經硫酸鈉乾燥。過濾並蒸發溶劑，得到殘餘物，藉由矽膠層析法，用20%乙酸乙酯/庚烷溶離來純化，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 920.2 (M+H) +。 1.51.4   6-(4-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫 -2H- 苯并 [b][1,4] 噁嗪 -6- 基 )-3-(1-((3-(2- 羥基乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶甲酸第三丁酯向實例1.51.3 (1.4 g)於四氫呋喃(10 mL)中之溶液中添加氟化四丁基銨(1.0M之四氫呋喃溶液，6 mL)。攪拌混合物3小時。混合物用乙酸乙酯(300 mL)稀釋，用水及鹽水洗滌，且經硫酸鈉乾燥。過濾並蒸發溶劑，得到標題產物，不經進一步純化即用於下一反應中。MS (ESI) m/e 806.0 (M+H) +。 1.51.5   6-(4-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫 -2H- 苯并 [b][1,4] 噁嗪 -6- 基 )-3-(1-((3,5- 二甲基 -7-(2-(( 甲基磺醯基 ) 氧基 ) 乙氧基 ) 金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶甲酸第三丁酯向實例1.51.4 (1.2 g)於二氯甲烷(20 mL)及三乙胺(2 mL)中之冷(0℃)溶液中添加甲烷磺醯氯(300 mg)。攪拌混合物4小時。反應混合物用乙酸乙酯(200 mL)稀釋，用水及鹽水洗滌，且經硫酸鈉乾燥。過濾並蒸發溶劑，得到標題產物，不經進一步純化即用於下一反應中。MS (ESI) m/e 884.1 (M+H) +。 1.51.6   3-(1-((3-(2- 疊氮基乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-6-(4-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫 -2H- 苯并 [b][1,4] 噁嗪 -6- 基 ) 吡啶甲酸第三丁酯向實例1.51.5 (1.5 g)於N,N-二甲基甲醯胺(20 mL)中之溶液中添加疊氮化鈉(331mg)。攪拌混合物48小時。反應混合物用乙酸乙酯(200 mL)稀釋，用水及鹽水洗滌，且經硫酸鈉乾燥。過濾並蒸發溶劑，得到殘餘物，藉由矽膠層析法，用20%乙酸乙酯/二氯甲烷溶離來純化，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 831.1 (M+H) +。 1.51.7   3-(1-((3-(2- 胺基乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-6-(4-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫 -2H- 苯并 [b][1,4] 噁嗪 -6- 基 ) 吡啶甲酸第三丁酯向實例1.51.6 (1.5 g)於四氫呋喃(30 mL)中之溶液中添加Pd/C (10%，200 mg)。在1個大氣壓之氫氣下攪拌混合物隔夜。過濾反應混合物，並真空濃縮濾液，得到粗產物。MS (ESI) m/e 805.1 (M+H) +。 1.51.8   6-[4-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫 -2H-1,4- 苯并噁嗪 -6- 基 ]-3-{1-[(3,5- 二甲基 -7-{2-[(2- 磺基乙基 ) 胺基 ] 乙氧基 } 三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 } 吡啶 -2- 甲酸向實例1.51.7 (164 mg)於N,N-二甲基甲醯胺(10 mL)及N,N-二異丙基乙胺(0.5 mL)中之溶液中添加乙烯磺酸4-((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)-2,2-二甲基丁酯(91 mg)。攪拌混合物隔夜。反應混合物用乙酸乙酯(200 mL)稀釋，用水及鹽水洗滌，且經硫酸鈉乾燥。過濾並蒸發溶劑，得到殘餘物，將其溶解於四氫呋喃(2 mL)中。添加氟化四丁基銨(1 mL，1M之四氫呋喃溶液)，且攪拌混合物隔夜。真空濃縮混合物，且將殘餘物溶解於二氯甲烷/三氟乙酸(1:1，6 mL)中，使其靜置隔夜。蒸發溶劑後，殘餘物藉由逆相HPLC (Gilson系統)，用10-85%乙腈/含0.1% v/v三氟乙酸之水溶離來純化，得到標題化合物。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 8.74 (s, 1H), 8.35 (s, 2H), 7.94-8.00 (m, 1H), 7.86 (s, 1H) , 7.71-7.82 (m, 2H), 7.46 (s, 1H), 7.34-7.44 (m, 2H), 7.24 (t, 1H), 7.02 (d, 1H), 4.28-4.39 (m, 2H), 4.10-4.19 (m, 2H), 3.90 (s, 3H), 3.55-3.61 (m, 4H), 3.21-3.30 (m, 3H), 3.07-3.16 (m, 3H), 2.23 (s, 3H), 1.44 (s, 2H), 0.98-1.37 (m, 9H), 0.89 (s, 6H)。MS (ESI) m/e 856.1 (M+H) +。 1.52 合成 6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-5-(3- 磺基丙氧基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-3-[1-({3,5- 二甲基 -7-[2-( 甲基胺基 ) 乙氧基 ] 三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ] 吡啶 -2- 甲酸 ( 化合物 W2.52) 1.52.1   2-(6-( 第三丁氧基羰基 )-5-(1-((3-(2-(( 第三丁氧基羰基 )( 甲基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶 -2- 基 )-5-(3-((2,2,2- 三氟 -1-( 對甲苯基 ) 乙氧基 ) 磺醯基 ) 丙氧基 )-1,2,3,4- 四氫異喹啉 -8- 甲酸甲酯向實例1.31.8 (460 mg)於N,N-二甲基甲醯胺(10 mL)中之溶液中添加3-碘丙烷-1-磺酸2,2,2-三氟-1-(對甲苯基)乙酯(239 mg，根據J. Org. Chem., 2013, 78, 711-716製備)及K 2CO 3(234 mg)，且攪拌混合物隔夜。混合物用乙酸乙酯(200 mL)稀釋，用水及鹽水洗滌，且經硫酸鈉乾燥。過濾並蒸發溶劑，得到殘餘物，藉由矽膠層析法，用20%乙酸乙酯/庚烷溶離來純化，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 1018.5 (M+H) +。 1.52.2   2-(6-( 第三丁氧基羰基 )-5-(1-((3-(2-(( 第三丁氧基羰基 )( 甲基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶 -2- 基 )-5-(3-((2,2,2- 三氟 -1-( 對甲苯基 ) 乙氧基 ) 磺醯基 ) 丙氧基 )-1,2,3,4- 四氫異喹啉 -8- 甲酸向實例1.52.1 (176 mg)於四氫呋喃(4 mL)、甲醇(3 mL)及水(3 mL)中之溶液中添加氫氧化鋰單水合物(60 mg)，且攪拌混合物隔夜。混合物接著用乙酸乙酯(200 mL)稀釋，用1N HCl水溶液、水及鹽水洗滌，且經硫酸鈉乾燥。過濾並蒸發溶劑，得到標題產物，不經進一步純化即用於下一反應中。MS (ESI) m/e 1095.2 (M+H) +。 1.52.3   6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-5-(3-((2,2,2- 三氟 -1-( 對甲苯基 ) 乙氧基 ) 磺醯基 ) 丙氧基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-3-(1-((-(2-(( 第三丁氧基羰基 )( 甲基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶甲酸第三丁酯向實例1.52.2 (117 mg)於二氯甲烷(6 mL)中之溶液中添加苯并[d]噻唑-2-胺(19.27 mg)、1-乙基-3-[3-(二甲基胺基)丙基]-碳化二亞胺鹽酸鹽(37 mg)及4-(二甲基胺基)吡啶(23.5 mg)，且攪拌混合物隔夜。反應混合物用乙酸乙酯(200 mL)稀釋，用水及鹽水洗滌，且經硫酸鈉乾燥。過濾並蒸發溶劑，得到標題產物。MS (ESI) m/e 1226.1 (M+H) +。 1.52.4   6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-5-(3- 磺基丙氧基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-3-[1-({3,5- 二甲基 -7-[2-( 甲基胺基 ) 乙氧基 ] 三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ] 吡啶 -2- 甲酸將實例1.52.3 (130 mg)溶解於二氯甲烷/三氟乙酸(1:1，6 mL)中並攪拌隔夜。蒸發溶劑後，將殘餘物溶解於N,N-二甲基甲醯胺/水(1:1，12 mL)中且藉由逆相HPLC (Gilson)，用10至85%乙腈/含0.1% v/v三氟乙酸之水溶離來純化，得到標題化合物。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 12.68 (s, 1H), 8.13-8.32 (m, 2H), 8.01 (d, 1H), 7.75 (dd, 2H), 7.42-7.56 (m, 2H), 7.29 (s, 1H), 7.28-7.34 (m, 1H), 7.00 (dd, 2H), 5.03 (s, 2H), 4.19 (t, 2H), 3.83 (s, 3H), 3.50-3.57 (m, 4H), 2.95-3.05 (m, 2H), 2.81 (t, 2H), 2.52-2.65 (m, 4H), 1.39 (s, 2H), 0.96-1.32 (m, 12H), 0.87 (s, 6H)。MS (ESI) m/e 898.3 (M+H) +。 1.53 合成 3-{1-[(3,5- 二甲基 -7-{2-[(2- 磺基乙基 ) 胺基 ] 乙氧基 } 三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 }-6-[1-([1,3] 噻唑并 [4,5-b] 吡啶 -2- 基胺甲醯基 )-1,2,3,4- 四氫喹啉 -7- 基 ] 吡啶 -2- 甲酸 ( 化合物 W2.53) 1.53.1   6- 氯 -3-(1-((3-(2- 羥基乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶甲酸第三丁酯標題化合物係如實例1.51.4中所描述，用實例1.51.1替代實例1.51.3製備。 1.53.2   6- 氯 -3-(1-((3,5- 二甲基 -7-(2-(( 甲基磺醯基 ) 氧基 ) 乙氧基 ) 金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶甲酸第三丁酯向實例1.53.1 (1.89 g)於二氯甲烷(30 mL)及三乙胺(3 mL)中之冷(0℃)溶液中添加甲烷磺醯氯(1.03 g)，且攪拌混合物4小時。反應混合物用乙酸乙酯(200 mL)稀釋，用水及鹽水洗滌，且經硫酸鈉乾燥。過濾並蒸發溶劑，得到標題產物，不經進一步純化即用於下一反應中。 1.53.4   3-(1-((3-(2- 胺基乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-6- 氯吡啶甲酸第三丁酯將實例1.53.2 (2.2 g)溶解於7N氨之甲醇溶液(40 mL)中，且在微波條件(Biotage Initiator)下，在80℃下攪拌混合物2小時。真空濃縮混合物，且將殘餘物溶解於乙酸乙酯中，用水及鹽水洗，且經硫酸鈉乾燥。過濾並蒸發溶劑，得到標題化合物。 1.53.5   6- 氯 -3-[1-({3,5- 二甲基 -7-[(2,2,7,7- 四甲基 -10,10- 二氧離子基 -3,3- 二苯基 -4,9- 二氧雜 -10λ 6- 硫雜 -13- 氮雜 -3- 矽雜十五烷 -15- 基 ) 氧基 ] 三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ] 吡啶 -2- 甲酸第三丁酯向實例1.53.3 (1.59 g)於N,N-二甲基甲醯胺(30 mL)中之溶液中添加乙烯磺酸4-((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)-2,2-二甲基丁酯(1.6 g)及N,N-二異丙基乙胺(1 mL)，且攪拌混合物4天。將反應混合物溶解於乙酸乙酯(400 mL)中，用水及鹽水洗滌，且經硫酸鈉乾燥。過濾並蒸發溶劑，得到標題產物，不經進一步純化即用於下一反應中。MS (ESI) m/e 976.8 (M+H) +。 1.53.6   3-{1-[(3-{[13-( 第三丁氧基羰基 )-2,2,7,7- 四甲基 -10,10- 二氧離子基 -3,3- 二苯基 -4,9- 二氧雜 -10λ 6- 硫雜 -13- 氮雜 -3- 矽雜十五烷 -15- 基 ] 氧基 }-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 }-6- 氯吡啶 -2- 甲酸第三丁酯向實例1.53.4 (2.93 g)於四氫呋喃(50 mL)中之溶液中添加二碳酸二第三丁酯(0.786 g)及4-(二甲基胺基)吡啶(100 mg)，且攪拌混合物隔夜。真空濃縮混合物，且將殘餘物溶解於乙酸乙酯(300 mL)中，用1N HCl水溶液、水及鹽水洗滌，且經硫酸鈉乾燥。過濾並蒸發溶劑，得到殘餘物，藉由矽膠層析法，用20%乙酸乙酯/庚烷溶離來純化，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 1076.9 (M+H) +。 1.53.7   3-{1-[(3-{[13-( 第三丁氧基羰基 )-2,2,7,7- 四甲基 -10,10- 二氧離子基 -3,3- 二苯基 -4,9- 二氧雜 -10λ 6- 硫雜 -13- 氮雜 -3- 矽雜十五烷 -15- 基 ] 氧基 }-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 }-6-(1,2,3,4- 四氫喹啉 -7- 基 ) 吡啶 -2- 甲酸第三丁酯向7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼㖦-2-基)-1,2,3,4-四氫喹啉(65 mg)於1,4-二噁烷(10 mL)及水(5 mL)中之溶液中添加實例1.53.5 (220 mg)、二氯化雙(三苯基膦)鈀(II) (7 mg)及氟化銫(45.6 mg)。在微波條件(Biotage Initiator)下，在120℃下攪拌混合物30分鐘。混合物用乙酸乙酯(200 mL)稀釋，用水及鹽水洗滌，且經硫酸鈉乾燥。過濾並蒸發溶劑，得到殘餘物，藉由矽膠層析法，用20%乙酸乙酯/庚烷溶離來純化，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 1173.9 (M+H) +。 1.53.8   3-{1-[(3,5- 二甲基 -7-{2-[(2- 磺基乙基 ) 胺基 ] 乙氧基 } 三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 }-6-[1-([1,3] 噻唑并 [4,5-b] 吡啶 -2- 基胺甲醯基 )-1,2,3,4- 四氫喹啉 -7- 基 ] 吡啶 -2- 甲酸向碳酸雙(2,5-二側氧基吡咯啶-1-基)酯(48.2 mg)於乙腈(10 mL)中之環境溫度懸浮液中添加噻唑并[4,5-b]吡啶-2-胺(34 mg)，且攪拌混合物1小時。添加實例1.53.6 (220 mg)於乙腈(5 mL)中之溶液，且劇烈攪拌懸浮液隔夜。混合物用乙酸乙酯(200 mL)稀釋，用水及鹽水洗滌，且經硫酸鈉乾燥。過濾並蒸發溶劑，得到殘餘物，將其溶解於三氟乙酸(10 mL)中並攪拌隔夜。蒸發溶劑後，殘餘物藉由逆相HPLC (Gilson系統)，用10-85%乙腈/含0.1% v/v三氟乙酸之水溶離來純化，得到標題化合物。 1H NMR (500 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 8.42-8.48 (m, 1H), 8.31-8.40 (m, 4H), 8.03 (d, 1H), 7.89 (d, 1H), 7.80 (d, 1H), 7.47 (s, 1H), 7.26-7.37 (m, 2H), 3.93-4.02 (m, 3H), 3.90 (s, 3H), 3.52-3.60 (m, 3H), 3.17-3.26 (m, 2H), 3.05-3.14 (m, 2H), 2.76-2.89 (m, 5H), 2.23 (s, 3H), 1.90-2.01 (m, 2H), 1.44 (s, 2H), 1.27-1.37 (m, 4H), 0.99-1.22 (m, 5H), 0.88 (s, 6H)。MS (ESI) m/e 855.1 (M+H) +。 1.54 合成 3-{1-[(3,5- 二甲基 -7-{2-[(2- 磺基乙基 ) 胺基 ] 乙氧基 } 三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 }-6-[8-([1,3] 噻唑并 [4,5-b] 吡啶 -2- 基胺甲醯基 ) 萘 -2- 基 ] 吡啶 -2- 甲酸 ( 化合物 W2.54) 1.54.1   3-{1-[(3-{[13-( 第三丁氧基羰基 )-2,2,7,7- 四甲基 -10,10- 二氧離子基 -3,3- 二苯基 -4,9- 二氧雜 -10λ 6- 硫雜 -13- 氮雜 -3- 矽雜十五烷 -15- 基 ] 氧基 }-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 }-6-[8-( 甲氧基羰基 ) 萘 -2- 基 ] 吡啶 -2- 甲酸第三丁酯標題化合物係藉由在實例1.53.6中用7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼㖦-2-基)-1-萘甲酸甲酯替代7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼㖦-2-基)-1,2,3,4-四氫喹啉製備。MS (ESI) m/e 1226.6 (M+H) +。 1.54.2   7-[6-( 第三丁氧基羰基 )-5-{1-[(3-{[13-( 第三丁氧基羰基 )-2,2,7,7- 四甲基 -10,10- 二氧離子基 -3,3- 二苯基 -4,9- 二氧雜 -10λ 6- 硫雜 -13- 氮雜 -3- 矽雜十五烷 -15- 基 ] 氧基 }-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 } 吡啶 -2- 基 ] 萘 -1- 甲酸向實例1.54.1 (79 mg)於四氫呋喃(4 mL)、甲醇(3 mL)及水(3 mL)中之溶液中添加氫氧化鋰單水合物(60 mg)，且攪拌混合物隔夜。反應物用乙酸乙酯(200 mL)稀釋，用1N HCl水溶液、水及鹽水洗滌，且經硫酸鈉乾燥。過濾並蒸發溶劑，得到標題產物，不經進一步純化即用於下一步驟中。MS (ESI) m/e 1211.6 (M+H) +。 1.54.3   3-{1-[(3,5- 二甲基 -7-{2-[(2- 磺基乙基 ) 胺基 ] 乙氧基 } 三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 }-6-[8-([1,3] 噻唑并 [4,5-b] 吡啶 -2- 基胺甲醯基 ) 萘 -2- 基 ] 吡啶 -2- 甲酸向實例1.54.2 (60 mg)於二氯甲烷(4 mL)中之溶液中添加噻唑并[4,5-b]吡啶-2-胺(7.56 mg)、1-乙基-3-[3-(二甲基胺基)丙基]-碳化二亞胺鹽酸鹽(19 mg)及4-(二甲基胺基)吡啶(12.2 mg)，且攪拌混合物隔夜。反應混合物用乙酸乙酯(200 mL)稀釋，用水及鹽水洗滌，且經硫酸鈉乾燥。過濾並蒸發溶劑，得到標題產物，將其溶解於二氯甲烷/三氟乙酸(1:1，6 mL)中並攪拌隔夜。蒸發溶劑後，將殘餘物溶解於N,N-二甲基甲醯胺/水(1:1，12 mL)中且藉由逆相HPLC(Gilson系統)，用10-85%乙腈/含0.1%三氟乙酸之水溶離來純化，得到標題化合物。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 13.42 (s, 1H), 9.05 (s, 1H), 8.51-8.69 (m, 2H), 8.31-8.41 (m, 2H), 8.18-8.26 (m, 4H), 8.06 (d, 1H), 7.97 (d, 1H), 7.68-7.79 (m, 1H), 7.49 (s, 1H), 7.40 (dd, 1H), 3.90 (s, 3H), 3.18-3.29 (m, 3H), 3.07-3.15 (m, 2H), 2.82 (t, 3H), 2.24 (s, 3H), 1.44 (s, 2H), 0.97-1.37 (m, 10H), 0.88 (s, 6H)。MS (ESI) m/e 850.1 (M+H) +。 1.55 合成 (1ξ)-1-({2-[5-(1-{[3-(2- 胺基乙氧基 )-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ] 甲基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-6- 羧基吡啶 -2- 基 ]-8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-1,2,3,4- 四氫異喹啉 -5- 基 } 甲基 )-1,5- 去水 -D- 葡萄糖醇 ( 化合物 W2.55) 1.55.1   (2R,3R,4S,5R)-3,4,5- 參 ( 甲氧基甲氧基 )-2-(( 甲氧基甲氧基 ) 甲基 )-6- 亞甲基四氫 -2H- 哌喃標題化合物係根據J. R. Walker等人, Bioorg. Med. Chem. 2006, 14, 3038-3048製備。MS (ESI) m/e 370 (M+NH 4) +。 1.55.2   4- 溴 -3- 氰基甲基 - 苯甲酸甲酯經30分鐘向三甲基矽烷甲腈(3.59 mL)於四氫呋喃(6 mL)中之溶液中逐滴添加1M氟化四丁基銨(26.8 mL，1 M之四氫呋喃溶液)。在室溫下攪拌該溶液30分鐘。將4-溴-3-(溴甲基)苯甲酸甲酯(7.50 g)溶解於乙腈(30 mL)中且經30分鐘將其逐滴添加至前一溶液中。將溶液加熱至80℃，保持30分鐘，並冷卻。減壓濃縮溶液，且殘餘物藉由矽膠層析法，用20-30%乙酸乙酯/庚烷溶離來純化，得到標題化合物。 1.55.3   3-(2- 胺基乙基 )-4- 溴苯甲酸甲酯將實例1.55.2 (5.69 g)溶解於四氫呋喃(135 mL)中，並添加1 M硼烷(於四氫呋喃中，24.6 mL)。在室溫下攪拌該溶液16小時且緩慢用甲醇及1 M鹽酸水溶液淬滅。添加4 M鹽酸水溶液(150 mL)，並在室溫下攪拌溶液16小時。減壓濃縮混合物，且使用固體碳酸鉀將pH值調至11與12之間。接著用二氯甲烷(3 × 100 mL)萃取該溶液。合併有機萃取液且經無水硫酸鈉乾燥。過濾該溶液並減壓濃縮，且殘餘物藉由矽膠層析法，用10-20%甲醇/二氯甲烷溶離來純化，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 258, 260 (M+H) +。 1.55.4   4- 溴 -3-[2-(2,2,2- 三氟乙醯基胺基 )- 乙基 ]- 苯甲酸甲酯將實例1.55.2 (3.21 g)溶解於二氯甲烷(60 mL)中。將溶液冷卻至0℃，並添加三乙胺(2.1 mL)。逐滴添加三氟乙酸酐(2.6 mL)。在0℃下攪拌溶液十分鐘，並移除冷卻浴。1小時後，添加水(50 mL)，且溶液用乙酸乙酯(100 mL)稀釋。添加1 M鹽酸水溶液(50 mL)，且分離有機層，用1 M鹽酸水溶液洗滌，並用鹽水洗滌。溶液用無水硫酸鈉乾燥，過濾並減壓濃縮，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 371, 373 (M+H) +。 1.55.5   5- 溴 -2-(2,2,2- 三氟乙醯基 )-1,2,3,4- 四氫異喹啉 -8- 甲酸甲酯將實例1.55.4 (4.40 g)及三聚甲醛(1.865 g)放入燒瓶中並添加濃硫酸(32 mL)。在室溫下攪拌該溶液一小時。添加冷水(120 mL)，且用乙酸乙酯(3× 100 mL)萃取溶液。合併萃取液，用飽和碳酸氫鈉水溶液(100 mL)及水(100 mL)洗滌，並經無水硫酸鈉乾燥。過濾混合物並減壓濃縮。殘餘物藉由矽膠層析法，用20-30%乙酸乙酯/庚烷溶離來純化，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 366, 368 (M+H) +。 1.55.6   2-(2,2,2- 三氟乙醯基 )-5-(((3S,4R,5R,6R)-3,4,5- 參 ( 甲氧基甲氧基 )-6-(( 甲氧基甲氧基 ) 甲基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 ) 甲基 )-1,2,3,4- 四氫異喹啉 -8- 甲酸甲酯將實例1.55.1 (242 mg)溶解於四氫呋喃(7 mL)中並逐滴添加9-硼雜雙環[3.3.1]壬烷(3.0 mL)。使溶液回流4.5小時並使其冷卻至室溫。添加磷酸鉀(3M，0.6 mL)，且攪拌溶液10分鐘。接著使該溶液脫氣並用氮氣吹掃三次。單獨地將實例1.55.5 (239 mg)及二氯[1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]鈀(II)二氯甲烷加合物(39 mg)溶解於N,N-二甲基甲醯胺(7 mL)中，且使溶液脫氣並用氮氣吹掃三次。將N,N-二甲基甲醯胺溶液逐滴添加至四氫呋喃溶液中，且攪拌混合物18小時。添加HCl溶液(0.1 M水溶液，25 mL)，且溶液用乙酸乙酯(30 mL)萃取三次。合併有機萃取液，用鹽水洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。殘餘物藉由矽膠層析法，用30-50%乙酸乙酯/庚烷溶離來純化，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 710 (M+NH 4) +。 1.55.7   5-(((3S,4R,5R,6R)-3,4,5- 參 ( 甲氧基甲氧基 )-6-(( 甲氧基甲氧基 ) 甲基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 ) 甲基 )-1,2,3,4- 四氫異喹啉 -8- 甲酸甲酯將實例1.55.6 (247 mg)溶解於甲醇(1 mL)、四氫呋喃(1 mL)及水(0.5 mL)中。添加碳酸鉀(59 mg)，並在室溫下攪拌溶液16小時。溶液用乙酸乙酯(10 mL)稀釋並用飽和碳酸氫鈉水溶液(1 mL)洗滌。有機層經無水硫酸鈉乾燥，過濾並減壓濃縮，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 600 (M+H) +。 1.55.8   2-(5- 溴 -6-( 第三丁氧基羰基 ) 吡啶 -2- 基 )-5-(((3S,4R,5R,6R)-3,4,5- 參 ( 甲氧基甲氧基 )-6-(( 甲氧基甲氧基 ) 甲基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 ) 甲基 )-1,2,3,4- 四氫異喹啉 -8- 甲酸甲酯標題化合物係藉由在實例1.1.11中用實例1.55.7替代1,2,3,4-四氫異喹啉-8-甲酸甲酯製備。MS (ESI) m/e 799, 801 (M-第三丁基) +。 1.55.9   2-(6-( 第三丁氧基羰基 )-5-(4,4,5,5- 四甲基 -1,3,2- 二氧硼㖦 -2- 基 ) 吡啶 -2- 基 )-5-(((3S,4R,5R,6R)-3,4,5- 參 ( 甲氧基甲氧基 )-6-(( 甲氧基甲氧基 ) 甲基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 ) 甲基 )-1,2,3,4- 四氫異喹啉 -8- 甲酸甲酯標題化合物係藉由在實例1.2.1中用實例1.55.8替代實例1.1.11製備。MS (ESI) m/e 903 (M+H) +, 933 (M+MeOH-H) -。 1.55.10 2-((3-((4- 碘 -5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 氧基 ) 乙胺標題化合物係藉由在實例1.10.5中用實例1.13.1替代實例1.10.4製備。MS (ESI) m/e 444 (M+H) +。 1.55.11  (2-((3-((4- 碘 -5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 氧基 ) 乙基 ) 胺基甲酸第三丁酯標題化合物係藉由在實例1.10.6中用實例1.55.10替代實例1.10.5製備。MS (ESI) m/e 544 (M+H) +, 488 (M-第三丁基) +, 542 (M-H) -。 1.55.12 2-(6-( 第三丁氧基羰基 )-5-(1-((3-(2-(( 第三丁氧基羰基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶 -2- 基 )-5-(((3R,4S,5S,6S)-3,4,5- 參 ( 甲氧基甲氧基 )-6-(( 甲氧基甲氧基 ) 甲基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 ) 甲基 )-1,2,3,4- 四氫異喹啉 -8- 甲酸甲酯標題化合物係藉由在實例1.13.4中用實例1.55.9替代實例1.2.1並用實例1.55.11替代實例1.13.3製備。MS (ESI) m/e 1192 (M+H) +。 1.55.13 2-(6-( 第三丁氧基羰基 )-5-(1-((3-(2-(( 第三丁氧基羰基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶 -2- 基 )-5-(((3R,4S,5S,6S)-3,4,5- 參 ( 甲氧基甲氧基 )-6-(( 甲氧基甲氧基 ) 甲基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 ) 甲基 )-1,2,3,4- 四氫異喹啉 -8- 甲酸標題化合物係藉由在實例1.2.5中用實例1.55.12替代實例1.2.4製備。MS (ESI) m/e 1178 (M+H) +, 1176 (M-H) -。 1.55.14 6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-5-(((3R,4S,5S,6S)-3,4,5- 參 ( 甲氧基甲氧基 )-6-(( 甲氧基甲氧基 ) 甲基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 ) 甲基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-3-(1-((3-(2-(( 第三丁氧基羰基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶甲酸第三丁酯標題化合物係藉由在實例1.52.3中用實例1.55.13替代實例1.52.2製備。MS (ESI) m/e 1310 (M+H) +, 1308 (M-H) -。 1.55.15 (1 ξ )-1-({2-[5-(1-{[3-(2- 胺基乙氧基 )-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ] 甲基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-6- 羧基吡啶 -2- 基 ]-8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-1,2,3,4- 四氫異喹啉 -5- 基 } 甲基 )-1,5- 去水 -D- 葡萄糖醇標題化合物係藉由在實例1.52.4中用實例1.55.14替代實例1.52.3並用4M鹽酸水溶液替代三氟乙酸製備。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 7.96 (d, 1H), 7.73 (d, 1H), 7.58 (bs, 3H), 7.46 (d, 1H), 7.43-7.39 (m, 2H), 7.30 (d, 1H), 7.27-7.25 (m, 2H), 6.88 (d, 1H), 4.90 (q, 2H), 3.76 (m, 4H), 3.51 (m, 1H), 3.21 (d, 2H), 3.18 (d, 1H), 3.12 (m, 2H), 3.02 (m, 4H), 2.93 (m, 4H), 2.83 (m, 2H), 2.59 (m ,2H), 2.03 (s, 3H), 1.44 (s, 1H), 1.34 (s, 2H), 1.23 (q, 4H), 1.07 (m, 4H), 0.97 (q, 2 H), 0.80 (s, 6H)。MS (ESI) m/e 922 (M+H) +, 920 (M-H) -。 1.56 合成 6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-3-{1-[(3-{2-[(3- 羧基丙基 ) 胺基 ] 乙氧基 }-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 } 吡啶 -2- 甲酸 ( 化合物 W2.56) 1.56.1   6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-3-(1-((3-(2-((4-( 第三丁氧基 )-4- 側氧基丁基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶甲酸第三丁酯在密封之安瓿小瓶中，在50℃下向實例1.2.7 (0.103 g)及4-溴丁酸第三丁酯(0.032 g)於二氯甲烷(0.5 mL)中之溶液中添加N,N-二異丙基乙胺(0.034 mL)隔夜。濃縮反應物，將其溶解於二甲亞碸/甲醇(1:1，2 mL)中且使用Gilson系統，藉由逆相HPLC，用5-75%乙腈/含0.1% v/v三氟乙酸之水溶離來純化。合併所需溶離份並冷凍乾燥，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 944.6 (M+1)。 1.56.1   6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-3-{1-[(3-{2-[(3- 羧基丙基 ) 胺基 ] 乙氧基 }-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 } 吡啶 -2- 甲酸將實例1.56.1 (0.049 g)之溶液溶解於二氯甲烷(1 mL)中並用三氟乙酸(0.5 mL)處理，且攪拌混合物隔夜。濃縮反應物，將其溶解於(1:1) N,N-二甲基甲醯胺/水混合物(2 mL)中，且使用Gilson系統，藉由逆相HPLC，用5-75%乙腈/含0.1% v/v三氟乙酸之水溶離來純化。合併所需溶離份並冷凍乾燥，得到標題化合物。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 13.09-12.32 (m, 2H), 8.31 (s, 2H), 8.03 (d, 1H), 7.79 (d, 1H), 7.62 (d, 1H), 7.54-7.40 (m, 3H), 7.40-7.32 (m, 2H), 7.29 (s, 1H), 6.96 (d, 1H), 4.96 (s, 2H), 3.89 (t, 2H), 3.83 (s, 2H), 3.55 (d, 2H), 3.02 (q, 4H), 2.92 (q, 2H), 2.33 (t, 2H), 2.10 (s, 3H), 1.80 (p, 2H), 1.43 (s, 2H), 1.30 (q, 4H), 1.21-0.95 (m, 6H), 0.87 (s, 6H)。MS (ESI) m/e 832.3 (M+H) +。 1.57 合成 6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 ) 萘 -2- 基 ]-3-{1-[(3,5- 二甲基 -7-{2-[(3- 膦醯基丙基 ) 胺基 ] 乙氧基 } 三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 } 吡啶 -2- 甲酸 ( 化合物 W2.57) 1.57.1   3-(1-((3-(2- 羥基乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-6-(8-( 甲氧基羰基 ) 萘 -2- 基 ) 吡啶甲酸第三丁酯向7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼㖦-2-基)-1-萘甲酸甲酯(2.47 g)於1,4-二噁烷(40 mL)及水(20 mL)中之溶液中添加實例1.20.2 (4.2 g)、二氯化雙(三苯基膦)鈀(II) (556 mg)及氟化銫(3.61 g)。使混合物回流隔夜，用乙酸乙酯(400 mL)稀釋並用水及鹽水洗滌。有機層經硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。殘餘物藉由矽膠層析法，用20%乙酸乙酯/二氯甲烷且接著用5%甲醇/二氯甲烷溶離來純化，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 680.84 (M+H) +。 1.57.2   3-(1-((3,5- 二甲基 -7-(2-(( 甲基磺醯基 ) 氧基 ) 乙氧基 ) 金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-6-(8-( 甲氧基羰基 ) 萘 -2- 基 ) 吡啶甲酸第三丁酯向實例1.57.1 (725 mg)於二氯甲烷(10 mL)及三乙胺(0.5 mL)中之冷(0℃)溶液中添加甲烷磺醯氯(0.249 mL)。在室溫下攪拌混合物4小時，用乙酸乙酯稀釋，並用水及鹽水洗滌。有機層經硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 758.93 (M+H) +。 1.57.3   3-(1-((3-(2- 疊氮基乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-6-(8-( 甲氧基羰基 ) 萘 -2- 基 ) 吡啶甲酸第三丁酯向實例1.57.2 (4.2 g)於N,N-二甲基甲醯胺(30 mL)中之溶液中添加疊氮化鈉(1.22 g)。在室溫下攪拌混合物96小時，用乙酸乙酯(600 mL)稀釋並用水及鹽水洗滌。有機層經硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 704.86 (M+H) +。 1.57.4   7-(5-(1-((3-(2- 疊氮基乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-6-( 第三丁氧基羰基 ) 吡啶 -2- 基 )-1- 萘甲酸向實例1.57.3 (3.5 g)於四氫呋喃/甲醇/H 2O (2:1:1，30 mL)中之溶液中添加氫氧化鋰單水合物(1.2 g)，且在室溫下攪拌混合物隔夜。反應混合物用1N HCl水溶液酸化，用乙酸乙酯(600 mL)稀釋並用水及鹽水洗滌。有機層經硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 691.82 (M+H) +。 1.57.5   3-(1-((3-(2- 疊氮基乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 ) 萘 -2- 基 ) 吡啶甲酸第三丁酯向實例1.57.4 (870 mg)於N,N-二甲基甲醯胺(10 mL)中之溶液中添加苯并[d]噻唑-2-胺(284 mg)、六氟磷酸氟-N,N,N'N'-四甲基甲脒鎓鹽(499 mg)及N,N-二異丙基乙胺(488 mg)。在60℃下攪拌混合物3小時，用乙酸乙酯(200 mL)稀釋，並用水及鹽水洗滌。有機層經硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 824.02 (M+H) +。 1.57.6   3-(1-((3-(2- 胺基乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 ) 萘 -2- 基 ) 吡啶甲酸第三丁酯向實例1.57.5 (890 mg)於四氫呋喃(30 mL)中之溶液中添加Pd/C (90 mg，5%)。在氫氣氛圍下，在室溫下攪拌混合物隔夜，並過濾。濃縮濾液，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 798.2 (M+H) +。 1.57.7   6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 ) 萘 -2- 基 ]-3-{1-[(3,5- 二甲基 -7-{2-[(3- 膦醯基丙基 ) 胺基 ] 乙氧基 } 三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 } 吡啶 -2- 甲酸向實例1.57.6 (137 mg)於二氯甲烷(6 mL)中之溶液中添加實例1.14.2 (43 mg)。在室溫下攪拌混合物1.5小時，且添加NaBH 4(26 mg)於甲醇(2 mL)中之溶液。在室溫下攪拌混合物2小時，用乙酸乙酯(200 mL)稀釋並用2N NaOH水溶液、水及鹽水洗滌。有機層經硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。將殘餘物溶解於二氯甲烷(5 mL)中並用三氟乙酸(5 mL)處理隔夜。濃縮反應混合物。殘餘物藉由逆相HPLC (Gilson系統)，用10-85%乙腈/含0.1% v/v三氟乙酸溶液之水梯度溶離來純化，得到標題化合物。 1H NMR (500 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ 9.03 (s, 1H), 8.48-8.35 (m, 3H), 8.29-8.16 (m, 3H), 8.08 (dd, 1H), 8.03 (dd, 1H), 7.94 (d, 1H), 7.82 (d, 1H), 7.71 (dd, 1H), 7.53-7.47 (m, 2H), 7.38 (td, 1H), 4.81-0.53 (m, 89H)。MS (ESI) m/e 863.2 (M+H) +。 1.58 合成 6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-3-(1-{[3-(2-{[4-( β -D- 葡萄哌喃糖基氧基 ) 苯甲基 ] 胺基 } 乙氧基 )-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ] 甲基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶 -2- 甲酸 ( 化合物 W2.58)向實例1.3.1 (44.5 mg)於四氫呋喃(2 mL)及乙酸(0.2 mL)中之溶液中添加4-(((2S,3R,4R,5S,6R)-3,4,5-三羥基-6-(羥基甲基)四氫-2H-哌喃-2-基)氧基)苯甲醛(17 mg)及MgSO 4(300 mg)。在室溫下攪拌混合物1小時，隨後添加氰基硼氫化鈉/樹脂(300 mg)。在室溫下攪拌混合物隔夜並過濾。濃縮濾液，且殘餘物藉由逆相HPLC (Gilson系統)，用10-85%乙腈/含0.1% v/v三氟乙酸溶液之水梯度溶離來純化，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 1015.20 (M+H) +。 1.59 合成 3-(1-{[3-(2-{[4-( β -D- 阿洛哌喃糖基氧基 ) 苯甲基 ] 胺基 } 乙氧基 )-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ] 甲基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ] 吡啶 -2- 甲酸 ( 化合物 W2.59)向實例1.3.1 (44.5 mg)於四氫呋喃(2 mL)及乙酸(0.2 mL)中之溶液中添加4-(((2S,3R,4S,5S,6R)-3,4,5-三羥基-6-(羥基甲基)四氫-2H-哌喃-2-基)氧基)苯甲醛(17 mg)及MgSO 4(300 mg)，且在室溫下攪拌混合物1小時，隨後添加氰基硼氫化鈉/樹脂(300 mg)。在室溫下攪拌混合物隔夜並過濾。濃縮濾液，且殘餘物藉由逆相HPLC(Gilson系統)，用10-85%乙腈/含0.1% v/v三氟乙酸之水梯度溶離來純化，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 1015.20 (M+H) +。 1.60 合成 3-{1-[(3-{2-[ 氮雜環丁烷 -3- 基 (2- 磺基乙基 ) 胺基 ] 乙氧基 }-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 }-6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ] 吡啶 -2- 甲酸 ( 化合物 W2.60) 1.60.1   6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-3-(1-((3-(2-((1-( 第三丁氧基羰基 ) 氮雜環丁烷 -3- 基 )(2-((4-( 第三丁基二苯基矽烷基 ) 羥基 -2,2- 二甲基丁氧基 ) 磺醯基 ) 乙基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶甲酸第三丁酯在室溫下，將實例1.2.8 (0.075 g)、3-側氧基氮雜環丁烷-1-甲酸第三丁酯(0.021 g)及三乙醯氧基硼氫化鈉(0.025 g)於二氯甲烷(0.5 mL)中之溶液攪拌隔夜。將反應物裝載至矽膠上並用0-10%甲醇/二氯甲烷溶離，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 1403.9 (M+1)。 1.60.2   3-{1-[(3-{2-[ 氮雜環丁烷 -3- 基 (2- 磺基乙基 ) 胺基 ] 乙氧基 }-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 }-6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ] 吡啶 -2- 甲酸用三氟乙酸(1 mL)處理實例1.60.1 (0.029 g)於二氯甲烷(1 mL)中之溶液並攪拌隔夜。濃縮反應物，將其溶解於1:1二甲亞碸/甲醇(2 mL)中，且混合物使用Gilson系統，藉由逆相HPLC，用10-80%乙腈/含0.1% v/v三氟乙酸之水溶離來純化。合併所需溶離份並冷凍乾燥，得到標題化合物。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 12.86 (s, 1H), 8.81 (s, 2H), 8.04 (d, 1H), 7.79 (d, 1H), 7.62 (d, 1H), 7.52 (d, 1H), 7.50-7.46 (m, 1H), 7.44 (d, 1H), 7.40-7.33 (m, 2H), 7.30 (s, 1H), 6.96 (d, 1H), 4.96 (s, 2H), 4.37 (q, 1H), 4.27 (s, 2H), 4.11 (s, 2H), 3.89 (t, 2H), 3.83 (s, 2H), 3.58-3.54 (m, 2H), 3.32 (t, 2H), 3.24 (s, 2H), 3.01 (t, 2H), 2.85 (t, 2H), 2.10 (s, 3H), 1.48-0.97 (m, 12H), 0.87 (s, 6H)。MS (ESI) m/e 909.2 (M+H) +。 1.61 合成 3-{1-[(3-{2-[(3- 胺基丙基 )(2- 磺基乙基 ) 胺基 ] 乙氧基 }-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 }-6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ] 吡啶 -2- 甲酸 ( 化合物 W2.61) 1.61.1   6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-3-(1-((3-(2-((3-(( 第三丁氧基羰基 ) 胺基 ) 丙基 )(2- 磺基乙基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶甲酸標題化合物係使用有關實例1.33.1之程序，用(3-側氧基丙基)胺基甲酸第三丁酯替代(2-側氧基乙基)胺基甲酸第三丁酯製備。MS (ESI) m/e 1011.5 (M+H)。 1.61.2   3-{1-[(3-{2-[(3- 胺基丙基 )(2- 磺基乙基 ) 胺基 ] 乙氧基 }-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 }-6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ] 吡啶 -2- 甲酸標題化合物係如實例1.6.2中所描述，用實例1.61.1替代實例1.6.1製備。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 12.87 (s, 1H), 9.10 (s, 1H), 8.04 (d, 1H), 7.88-7.67 (m, 4H), 7.62 (d, 1H), 7.57-7.40 (m, 3H), 7.36 (td, 2H), 6.96 (d, 1H), 4.96 (s, 2H), 4.05-3.78 (m, 4H), 3.41-3.08 (m, 3H), 2.94 (tt, 6H), 2.11 (s, 3H), 1.92 (t, 2H), 1.53-0.95 (m, 11H), 0.87 (s, 6H)。MS (ESI) m/e 911.3 (M+H)。 1.62 合成 6-[1-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-1,2,3,4- 四氫喹啉 -7- 基 ]-3-{1-[(3-{2-[(2- 羧基乙基 ) 胺基 ] 乙氧基 }-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 } 吡啶 -2- 甲酸 ( 化合物 W2.62) 1.62.1   3-(1-((3-(2-((3-( 第三丁氧基 )-3- 側氧基丙基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-6- 氯吡啶甲酸第三丁酯向實例1.53.3 (521 mg)於乙醇(10 mL)中之環境溫度溶液中添加三乙胺(3 mL)，隨後添加丙烯酸第三丁酯(2 mL)。在室溫下攪拌混合物3小時且接著濃縮至乾。將殘餘物溶解於乙酸乙酯(200 mL)中，且用水及鹽水洗滌溶液。有機層經硫酸鈉乾燥，過濾並減壓濃縮，得到標題化合物，不經進一步純化即用於下一反應中。MS (ESI) m/e 657.21 (M+H) +。 1.62.2   3-(1-((3-(2-((3-( 第三丁氧基 )-3- 側氧基丙基 )( 第三丁氧基羰基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-6- 氯吡啶甲酸第三丁酯向實例1.62.1 (780 mg)於四氫呋喃(10 mL)中之溶液中添加二碳酸二第三丁酯(259 mg)，隨後添加催化量之4-二甲基胺基吡啶。在室溫下攪拌反應3小時且接著濃縮至乾。將殘餘物溶解於乙酸乙酯(200 mL)中，且用飽和NaHCO 3水溶液、水及鹽水洗滌溶液。有機層經硫酸鈉乾燥，過濾並減壓濃縮。殘餘物在矽膠上藉由層析法，用20%乙酸乙酯/庚烷溶離來純化，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 757.13 (M+H) +。 1.62.3   3-(1-((3-(2-((3-( 第三丁氧基 )-3- 側氧基丙基 )( 第三丁氧基羰基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-6-(1,2,3,4- 四氫喹啉 -7- 基 ) 吡啶甲酸第三丁酯向7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼㖦-2-基)-1,2,3,4-四氫喹啉(234 mg)於1,4-二噁烷(10 mL)及水(5 mL)中之溶液中添加實例1.62.2 (685 mg)、二氯化雙(三苯基膦)鈀(II)(63.2 mg)及氟化銫(410 mg)。藉由微波照射(Biotage Initiator)將混合物加熱至120℃，保持30分鐘。藉由添加乙酸乙酯及水淬滅反應。分離各層，且有機層用鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾並減壓濃縮。殘餘物在矽膠上藉由層析法，用20%乙酸乙酯/庚烷溶離來純化，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 854.82 (M+H) +。 1.62.4   6-(1-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-1,2,3,4- 四氫喹啉 -7- 基 )-3-(1-((3-(2-((3-( 第三丁氧基 )-3- 側氧基丙基 )( 第三丁氧基羰基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶甲酸第三丁酯向碳酸雙(2,5-二側氧基吡咯啶-1-基)酯(150 mg)於乙腈(10 mL)中之環境溫度懸浮液中添加苯并[d]噻唑-2-胺(88 mg)，且攪拌混合物1小時。添加實例1.62.3 (500 mg)於乙腈(2 mL)中之溶液，且劇烈攪拌懸浮液隔夜。藉由添加乙酸乙酯及水淬滅反應。分離各層，且有機層用鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾並減壓濃縮。殘餘物在矽膠上藉由層析法，用20%乙酸乙酯/二氯甲烷溶離來純化，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 1030.5 (M+H) +。 1.62.5   6-[1-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-1,2,3,4- 四氫喹啉 -7- 基 ]-3-{1-[(3-{2-[(2- 羧基乙基 ) 胺基 ] 乙氧基 }-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 } 吡啶 -2- 甲酸向實例1.62.4 (110 mg)於二氯甲烷(0.53 mL)中之環境溫度溶液中添加三氟乙酸(0.53 mL)。攪拌反應隔夜並濃縮成黏性油狀物。將殘餘物溶解於二甲亞碸/甲醇(1:1，2 mL)中且藉由逆相HPLC(Gilson系統)，用10-55%乙腈/含0.1%三氟乙酸之水溶離來純化，得到標題化合物。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 13.10 (s, 3H), 8.37 (s, 1H), 8.26 (s, 2H), 7.98 (d, 1H), 7.86-7.71 (m, 3H), 7.44 (s, 1H), 7.39-7.31 (m, 1H), 7.26 (d, 1H), 7.19 (t, 1H), 3.92 (d, 2H), 3.87 (s, 2H), 3.55 (t, 2H), 3.17-3.00 (m, 4H), 2.80 (t, 2H), 2.62 (t, 2H), 2.19 (s, 3H), 1.95-1.88 (m, 2H), 1.43 (s, 2H), 1.33-1.25 (m, 4H), 1.18-1.11 (m, 4H), 1.09-0.97 (m, 2H), 0.85 (s, 6H)。MS (ESI) m/e 818.0 (M+H) +。 1.63 合成 6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-3-{1-[(3-{2-[(N6,N6- 二甲基 -L- 離胺醯基 )( 甲基 ) 胺基 ] 乙氧基 }-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 } 吡啶 -2- 甲酸 (W2.63)攪拌(S)-2-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-6-(二甲基胺基)己酸(0.029 g)及六氟磷酸1-[雙(二甲基胺基)亞甲基]-1H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡錠3-氧化物(0.028 g)一起於含N,N-二異丙胺(0.035 mL)之N,N-二甲基甲醯胺(0.5 mL)中之溶液。攪拌5分鐘後，將該溶液添加至實例1.13.7 (0.051 g)中並在室溫下繼續攪拌隔夜。向反應物中添加二乙胺(0.070 mL)，並攪拌反應2小時。用N,N-二甲基甲醯胺(1 mL)、水(0.5 ml)及2,2,2-三氟乙酸(0.103 ml)稀釋反應物，接著經由逆相HPLC，使用10%至90%乙腈/水梯度來純化。收集含產物之溶離份並凍乾，得到標題化合物。 1H NMR (500 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ 9.59 (s, 1H), 8.41 (s, 1H), 8.12 (t, 3H), 8.01 (d, 1H), 7.85 (dd, 1H), 7.81 (d, 1H), 7.77 (dd, 1H), 7.47 (s, 1H), 7.38 (t, 1H), 7.30 (d, 1H), 7.22 (t, 1H), 3.97 (t, 2H), 3.89 (s, 2H), 3.49 (dt, 4H), 3.06 (s, 2H), 2.99 (q, 2H), 2.88 (s, 2H), 2.84 (t, 2H), 2.75 (d, 6H), 2.22 (s, 3H), 2.00-1.90 (m, 2H), 1.84-1.52 (m, 4H), 1.48-0.95 (m, 14H), 0.87 (d, 6H)。MS (ESI) m/e 916.2 (M+H) +。 1.64 合成 3-{1-[(3-{2-[(3- 胺基丙基 )( 甲基 ) 胺基 ] 乙氧基 }-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 }-6-[1-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-1,2,3,4- 四氫喹啉 -7- 基 ] 吡啶 -2- 甲酸 (W2.64) 1.64.1   6-(1-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-1,2,3,4- 四氫喹啉 -7- 基 )-3-(1-((3-(2-((3-(( 第三丁氧基羰基 ) 胺基 ) 丙基 )( 甲基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶甲酸在環境溫度下，將實例1.21.5 (100 mg)、N,N-二異丙基乙胺(68.9 μL)及(3-側氧基丙基)胺基甲酸第三丁酯(68.4 mg)於二氯甲烷(3 mL)中之溶液攪拌2小時，並添加NaCNBH 4(8.27 mg)。在環境溫度下攪拌反應隔夜。添加甲醇(1 mL)及水(0.2 mL)。攪拌所得混合物10分鐘並濃縮。將殘餘物溶解於二甲亞碸中在Gilson系統(C18管柱)上藉由逆相HPLC，用30-80%乙腈/ 0.1%三氟乙酸水溶液溶離來純化，得到呈三氟乙酸鹽形式之標題化合物。MS (ESI) m/e 459.4 (M+2H) 2+。 1.64.2   3-{1-[(3-{2-[(3- 胺基丙基 )( 甲基 ) 胺基 ] 乙氧基 }-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 }-6-[1-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-1,2,3,4-四氫喹啉-7-基]吡啶-2-甲酸 在0℃下，用三氟乙酸(1 mL)處理於二氯甲烷(4 mL)中之實例1.64.1 (100 mg)達1小時，且濃縮混合物。殘餘物藉由逆相HPLC (C18管柱)，用10-60%乙腈/ 0.1%三氟乙酸水溶液梯度溶離來純化，得到呈三氟乙酸鹽形式之標題化合物。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ 9.38 (s, 1H), 8.37 (s, 1H), 7.98 (d, 1H), 7.90-7.69 (m, 6H), 7.44 (s, 2H), 7.35 (td, 1H), 7.27 (d, 1H), 7.22-7.16 (m, 1H), 3.94 (d, 2H), 3.87 (s, 2H), 3.64 (t, 2H), 3.28-2.98 (m, 4H), 2.87-2.70 (m, 8H), 2.19 (s, 3H), 1.90 (dp, 4H), 1.43 (s, 2H), 1.36-1.22 (m, 4H), 1.15 (s, 4H), 1.08-0.95 (m, 2H), 0.86 (s, 6H)。MS (ESI) m/e 817.6 (M+H) +。 1.65 合成 3-{1-[(3-{2-[ 氮雜環丁烷 -3- 基 ( 甲基 ) 胺基 ] 乙氧基 }-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 }-6-[1-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-1,2,3,4- 四氫喹啉 -7- 基 ] 吡啶 -2- 甲酸 (W2.65) 1.65.1   6-(1-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-1,2,3,4- 四氫喹啉 -7- 基 )-3-(1-((3-(2-((1-( 第三丁氧基羰基 ) 氮雜環丁烷 -3- 基 )( 甲基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶甲酸標題化合物係使用實例1.64.1中所描述之程序，用3-側氧基氮雜環丁烷-1-甲酸第三丁酯替代(3-側氧基丙基)胺基甲酸第三丁酯製備。MS (ESI) m/e 915.3 (M+H) +。 1.65.2   3-{1-[(3-{2-[ 氮雜環丁烷 -3- 基 ( 甲基 ) 胺基 ] 乙氧基 }-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 }-6-[1-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-1,2,3,4- 四氫喹啉 -7- 基 ] 吡啶 -2- 甲酸標題化合物係使用實例1.64.2中之程序，用實例1.65.1替代實例1.64.1製備。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ 9.01 (s, 2H), 8.37 (s, 1H), 7.98 (d, 1H), 7.86-7.70 (m, 3H), 7.44 (s, 2H), 7.34 (td, 1H), 7.27 (d, 1H), 7.23-7.15 (m, 1H), 4.22 (s, 4H), 4.07 (s, 2H), 3.93 (t, 2H), 3.58 (t, 2H), 3.11 (s, 2H), 2.80 (t, 2H), 2.68 (s, 3H), 2.19 (s, 3H), 1.92 (p, 2H), 1.42 (s, 2H), 1.30 (s, 4H), 1.15 (s, 4H), 1.09-0.96 (m, 2H), 0.85 (s, 6H)。MS (ESI) m/e 815.5 (M+H) +。 1.66 合成 N6-(37- 側氧基 -2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32,35- 十二氧雜三十七烷 -37- 基 )-L- 離胺醯基 -N-[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ]-L- 丙胺醯胺 (W2.66) 1.66.1   (S)-6-((((9H- 茀 -9- 基 ) 甲氧基 ) 羰基 ) 胺基 )-2-(( 第三丁氧基羰基 ) 胺基 ) 己酸向在冰浴中冷卻的(S)-6-胺基-2-((第三丁氧基羰基)胺基)己酸(8.5 g)於5% NaHCO 3水溶液(300 mL)及二噁烷(40 mL)之混合物中之溶液中逐滴添加碳酸(9H-茀-9-基)甲基吡咯啶-1-基酯(11.7 g)於二噁烷(40 mL)中之溶液。使反應混合物升溫至室溫且攪拌24小時。如上文所描述設置三個另外的小瓶。反應完成後，合併全部四份反應混合物，且在真空下移除有機溶劑。用鹽酸水溶液(1N)將水性殘餘物酸化至pH 3且接著用乙酸乙酯(3 × 500 mL)萃取。合併之有機層用鹽水洗滌，經硫酸鎂乾燥，過濾並真空濃縮，得到粗化合物，由甲基第三丁基醚再結晶，得到標題化合物。 1H NMR (400MHz, 氯仿-d) δ 11.05 (br. s., 1H), 7.76 (d, 2H), 7.59 (d, 2H), 7.45-7.27 (m, 4H), 6.52-6.17 (m, 1H), 5.16-4.87 (m, 1H), 4.54-4.17 (m, 4H), 3.26-2.98 (m, 2H), 1.76-1.64 (m, 1H), 1.62-1.31 (m, 14H)。 1.66.2   17- 羥基 -3,6,9,12,15- 五氧雜十七烷 -1- 酸第三丁酯向3,6,9,12-四氧雜十四烷-1,14-二醇(40 g)於甲苯(800 mL)中之溶液中逐份添加第三丁醇鉀(20.7 g)。在室溫下攪拌混合物30分鐘。將2-溴乙酸第三丁酯(36 g)逐滴添加至混合物中。在室溫下攪拌反應16小時。如上文所描述設置兩個另外的小瓶。反應完成後，合併全部三份反應混合物。將水(500 mL)添加至合併之混合物中，且將混合物濃縮至1 L。混合物用二氯甲烷萃取並用1N第三丁醇鉀水溶液(1 L)洗滌。有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾並濃縮，得到粗產物，藉由矽膠管柱層析法，用二氯甲烷:甲醇50:1溶離來純化，得到標題化合物。 1H NMR (400MHz, 氯仿- d) δ 4.01 (s, 2H), 3.75-3.58 (m, 21H), 1.46 (s,9H)。 1.66.3   17-( 甲苯磺醯氧基 )-3,6,9,12,15- 五氧雜十七烷 -1- 酸第三丁酯在氮氣氛圍下，在0℃下向實例1.66.2 (30 g)於二氯甲烷(500 mL)中之溶液中逐滴添加4-甲基苯-1-磺醯氯(19.5 g)及三乙胺(10.3 g)於二氯甲烷(500 mL)中之溶液。在室溫下攪拌混合物18小時並將其倒入水(100 mL)中。溶液用二氯甲烷(3 × 150 mL)萃取，且有機層用鹽酸(6N，15 mL)，接著NaHCO 3(5%水溶液，15 mL)，隨後水(20 mL)洗滌。有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾並濃縮，得到殘餘物，藉由矽膠管柱層析法，用石油醚:乙酸乙酯10:1至二氯甲烷:甲醇5:1溶離來純化，得到標題化合物。 1H NMR (400MHz, 氯仿- d) δ 7.79 (d, 2H), 7.34 (d, 2H), 4.18-4.13 (m, 2H), 4.01 (s, 2H), 3.72-3.56 (m, 18H), 2.44 (s, 3H), 1.47 (s, 9H)。 1.66.4   2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32,35- 十二氧雜三十七烷 -37- 酸在0℃下，向2,5,8,11,14,17-六氧雜十九烷-19-醇(32.8 g)於四氫呋喃(300 mL)中之溶液中添加氫化鈉(1.6 g)。在室溫下攪拌混合物4小時。在室溫下，將實例1.66.3 (16 g)於四氫呋喃(300 mL)中之溶液逐滴添加至反應混合物中。在室溫下攪拌所得反應混合物16小時且接著添加水(20 mL)。在室溫下再攪拌混合物3小時以完成第三丁酯水解。真空濃縮最終反應混合物以移除有機溶劑。用二氯甲烷(2 × 150 mL)萃取水性殘餘物。將水層酸化至pH 3且接著用乙酸乙酯(2 × 150 mL)萃取。濃縮水層，得到粗產物，藉由矽膠管柱層析法，用石油醚:乙酸乙酯1:1至二氯甲烷:甲醇5:1梯度溶離來純化，得到標題化合物。 1H NMR (400MHz, 氯仿-d) δ 4.19 (s, 2H), 3.80-3.75 (m, 2H), 3.73-3.62 (m, 40H), 3.57 (dd, 2H), 3.40 (s, 3H)。 1.66.5   (43S,46S)-43-(( 第三丁氧基羰基 ) 胺基 )-46- 甲基 -37,44- 二側氧基 -2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32,35- 十二氧雜 -38,45- 二氮雜四十七烷 -47- 酸實例1.66.5係使用標準Fmoc固相肽合成程序及2-氯三苯甲基樹脂合成。在14℃下，將2-氯三苯甲基樹脂(12 g，100 mmol)、(S)-2-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)丙酸(10 g，32.1 mmol)及N,N-二異丙基乙胺(44.9 mL，257 mmol)於篩網乾燥的無水二氯甲烷(100 mL)中振盪24小時。過濾混合物且用二氯甲烷(3 × 500 mL)、二甲基甲醯胺(2 × 250 mL)及甲醇(2 × 250 mL)洗滌濾餅(每個步驟保持5分鐘)。向以上樹脂中添加20%哌啶/二甲基甲醯胺(100 mL)以移除Fmoc基團。混合物用氮氣鼓泡15分鐘且接著過濾。該樹脂用20%哌啶/二甲基甲醯胺(100 mL)再洗滌五次(每個步驟5分鐘)，並用二甲基甲醯胺(5 × 100 mL)洗滌，得到脫除保護基的裝載L-Ala之樹脂。 向實例1.66.1 (9.0 g)於N,N-二甲基甲醯胺(50 mL)中之溶液中添加羥基苯并三唑(3.5 g)、六氟磷酸2-(6-氯-1H-苯并三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基銨(9.3 g)及N,N-二異丙基乙胺(8.4 mL)。在20℃下攪拌混合物30分鐘。將以上混合物添加至裝載D-Ala之樹脂中且藉由在室溫下用氮氣鼓泡90分鐘進行混合。過濾混合物且樹脂用二甲基甲醯胺洗滌 (每個步驟5分鐘)。向以上樹脂中添加約20%哌啶/N,N-二甲基甲醯胺(100 mL)以移除Fmoc基團。混合物用氮氣鼓泡15分鐘並過濾。該樹脂用20%哌啶/二甲基甲醯胺(100 mL)再洗滌五次(每個步驟5分鐘)，且最後用二甲基甲醯胺(5 × 100 mL)洗滌。 向實例1.66.4 (11.0 g)於N,N-二甲基甲醯胺(50 mL)中之溶液中添加羥基苯并三唑(3.5 g)、六氟磷酸2-(6-氯-1H-苯并三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基銨(9.3g)及N,N-二異丙基乙胺(8.4 mL)，且將混合物添加至樹脂中且藉由在室溫下用氮氣鼓泡3小時進行混合。過濾混合物且殘餘物用二甲基甲醯胺(5 × 100 mL)、二氯甲烷(8 × 100 mL)洗滌(每個步驟5分鐘)。 向最終樹脂中添加1%三氟乙酸/二氯甲烷(100 mL)且使氮氣鼓泡通過，保持5分鐘。過濾混合物並收集濾液。重複裂解操作四次。利用NaHCO 3使合併之濾液達到pH 7並用水洗滌。有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾並濃縮，得到標題化合物。 1H NMR (400MHz, 甲醇-d 4) δ 4.44-4.33 (m, 1H), 4.08-4.00 (m, 1H), 3.98 (s, 2H), 3.77-3.57 (m, 42H), 3.57-3.51 (m, 2H), 3.36 (s, 3H), 3.25 (t, 2H), 1.77 (br. s.,1H), 1.70-1.51 (m, 4H), 1.44 (s, 9H), 1.42-1.39 (m, 3H)。 1.66.6   6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-3-(1-((3-(((43S,46S)-43-(( 第三丁氧基羰基 ) 胺基 )-46- 甲基 -37,44,47- 三側氧基-2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32,35-十二氧雜-38,45,48-三氮雜五十烷-50-基)氧基)-5,7-二甲基金剛烷-1-基)甲基)-5-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶甲酸 第三丁酯 將實例1.66.5 (123 mg，0.141 mmol)與六氟磷酸1-[雙(二甲基胺基)亞甲基]-1H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡錠3-氧化物(58.9 mg)及N,N-二異丙基乙胺(0.049 mL)混合於N-甲基-2-吡咯啶酮(1 mL)中，保持10分鐘且接著將其添加至實例1.2.7 (142 mg)及N,N-二異丙基乙胺(0.049 mL)於N-甲基-2-吡咯啶酮(1.5 mL)中之溶液中。在室溫下攪拌反應混合物兩小時。粗反應混合物使用Gilson系統及C18 25 × 100 mm管柱，藉由逆相HPLC，用5-85%乙腈/含0.1% v/v三氟乙酸之水溶離來純化。凍乾產物溶離份，得到標題化合物。MS (LC/MS) m/e 1695.5 (M+H) +。 1.66.7   3-(1-((3-(((43S,46S)-43- 胺基 -46- 甲基 -37,44,47- 三側氧基 -2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32,35-十二氧雜-38,45,48-三氮雜五十烷-50-基)氧基)-5,7-二甲基金剛烷-1-基)甲基)-5-甲基-1H-吡唑-4-基)-6-(8-(苯并[d]噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)吡啶甲酸 在室溫下，用1 mL三氟乙酸處理實例1.66.6 (82 mg)達30分鐘。在輕柔氮氣流下蒸發溶劑，且殘餘物使用Gilson系統及C18 25 × 100 mm管柱，藉由逆相HPLC，用5-85%乙腈/含0.1% v/v三氟乙酸之水溶離來純化。凍乾產物溶離份，得到呈三氟乙酸鹽形式之標題化合物。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 12.86 (s, 1H), 8.04 (dd, 4H), 7.64 (dt, 2H), 7.55-7.41 (m, 3H), 7.36 (q, 2H), 6.95 (d, 1H), 4.96 (s, 2H), 4.40-4.27 (m, 1H), 3.93-3.72 (m, 7H), 3.59-3.47 (m, 42H), 3.33-3.27 (m, 3H), 3.23 (s, 5H), 3.05 (dt, 5H), 2.10 (s, 3H), 1.72-1.64 (m, 2H), 1.48-1.36 (m, 4H), 1.35-1.16 (m, 10H), 1.16-0.94 (m,6H), 0.84 (d,6H)。MS (ESI) m/e 751.8 (2M+H) 2+。 1.67 合成甲基 6-[4-(3-{[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ] 胺基 } 丙基 )-1H-1,2,3- 三唑 -1- 基 ]-6- 脫氧 - β -L- 葡萄哌喃糖苷 (W2.67) 1.67.1   6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-3-(1-((3,5- 二甲基 -7-(2-( 戊 -4- 炔 -1- 基胺基 ) 乙氧基 ) 金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶甲酸向3-(1-((3-(2-胺基乙氧基)-5,7-二甲基金剛烷-1-基)甲基)-5-甲基-1H-吡唑-4-基)-6-(8-(苯并[d]噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)吡啶甲酸第三丁酯(85 mg)於四氫呋喃(2 mL)中之溶液中添加戊-4-炔醛(8.7 mg)、乙酸(20 mg，0.318)及無水硫酸鈉(300 mg)。在室溫下攪拌混合物1小時。將三乙醯氧基硼氫化鈉(45 mg)添加至反應混合物中。在室溫下攪拌混合物隔夜。反應混合物用乙酸乙酯(200 mL)稀釋，用水及鹽水洗滌，並經無水硫酸鈉乾燥。過濾並蒸發溶劑，得到粗產物，將其溶解於二氯甲烷(5 mL)及三氟乙酸(3 mL)中。在室溫下攪拌混合物隔夜。蒸發溶劑後，將殘餘物溶解於二甲亞碸/甲醇(1:1，3 mL)中，且在Gilson系統(C18管柱)上藉由逆相HPLC，用20-80%乙腈/含0.1%三氟乙酸之水溶離來純化，得到標題化合物。MS (APCI) m/e 812.2 (M+H) +。 1.67.2 甲基 6-[4-(3-{[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ] 胺基 } 丙基 )-1H-1,2,3- 三唑 -1- 基 ]-6- 脫氧 - β -L- 葡萄哌喃糖苷向三乙酸(2R,3R,4S,5S,6S)-2-疊氮基-6-(甲氧基羰基)四氫-2H-哌喃-3,4,5-三基酯(8.63 mg)於t-BuOH (2 mL)及水(1 mL)中之溶液中添加實例1.67.1 (20 mg)、硫酸銅(II)五水合物(2.0 mg)及抗壞血酸鈉(5 mg)。在微波條件(Biotage Initiator)下，在100℃下加熱混合物20分鐘。將LiOH H 2O (50 mg)添加至混合物中，在室溫下攪拌隔夜。用三氟乙酸中和混合物，且在Gilson系統(C18管柱)上藉由逆相HPLC，用20-80%乙腈/含0.1%三氟乙酸之水溶離來純化，得到標題化合物。MS (APCI) m/e 1032.2 (M+H) +。 1.68 合成 6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 ) 萘 -2- 基 ]-3-{1-[(3-{2-[(2- 羧基乙基 ) 胺基 ] 乙氧基 }-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 } 吡啶 -2- 甲酸 1.68.1   2-((3,5- 二甲基 -7-((5- 甲基 -4-(4,4,5,5- 四甲基 -1,3,2- 二氧硼㖦 -2- 基 )-1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ) 金剛烷 -1- 基 ) 氧基 ) 乙醇 (W2.68)向2-((3-((4-碘-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基)-5,7-二甲基金剛烷-1-基)氧基)乙醇(8.9 g)及PdCl 2(dppf)-CH 2Cl 2加合物(([1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯鈀(II) (1:1)，818 mg)於乙腈(120 mL)中之溶液中添加三甲基胺(10 mL)及4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼㖦(12.8 mL)。在回流下攪拌混合物隔夜。將混合物冷卻至室溫且不經進一步處理即用於下一反應中。MS (ESI) m/e 467.3 (M+Na) +。 1.68.2   6- 氯 -3-(1-((3-(2- 羥基乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶甲酸第三丁酯向3-溴-6-氯吡啶甲酸第三丁酯(6.52 g)於四氫呋喃(100 mL)及水(20 mL)中之溶液中添加實例1.68.1 (9.90 g)、(1S,3R,5R,7S)-1,3,5,7-四甲基-8-十四烷基-2,4,6-三氧雜-8-磷雜金剛烷(0.732 g)、參(二亞苄基丙酮)二鈀(0) (Pd 2(dba) 3，1.02 g)及K 3PO 4(23.64 g)。在回流下攪拌混合物隔夜。減壓濃縮混合物，將殘餘物溶解於乙酸乙酯(500 mL)中，用水及鹽水洗滌，並經無水硫酸鈉乾燥。過濾並蒸發溶劑，得到粗產物，藉由矽膠層析法，用20至40%乙酸乙酯/二氯甲烷溶離來純化，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 530.3 (M+H) +。 1.68.3   6- 氯 -3-(1-((3,5- 二甲基 -7-(2-(( 甲基磺醯基 ) 氧基 ) 乙氧基 ) 金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶甲酸第三丁酯向實例1.68.2 (3.88 g)於二氯甲烷(30 mL)及三乙胺(6 mL)中之冷(0℃)溶液中添加甲烷磺醯氯(2.52 g)。在室溫下攪拌混合物4小時。反應混合物用乙酸乙酯(400 mL)稀釋，用水及鹽水洗滌，並經無水硫酸鈉乾燥。過濾並蒸發溶劑，得到粗產物(4.6 g)，不經進一步純化即用於下一反應中。MS (ESI) m/e 608.1 (M+H) +。 1.68.4   3-{1-[(3-{2-[ 雙 ( 第三丁氧基羰基 ) 胺基 ] 乙氧基 }-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 }-6- 氯吡啶 -2- 甲酸第三丁酯向實例1.68.3 (151 mg)於N,N-二甲基甲醯胺(3 mL)中之溶液中添加亞胺基二甲酸二第三丁酯(54 mg)。在室溫下攪拌混合物隔夜。反應混合物用乙酸乙酯(200 mL)稀釋，用水及鹽水洗滌，並經無水硫酸鈉乾燥。過濾並蒸發溶劑，得到標題化合物，不經進一步純化即用於下一步驟中。MS (ESI) m/e 729.4 (M+H) +。 1.68.5   7-(6-( 第三丁氧基羰基 )-5-(1-((3-(2-(( 第三丁氧基羰基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶 -2- 基 )-1- 萘甲酸向7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼㖦-2-基)-1-萘甲酸甲酯(257 mg)於1,4-二噁烷(10 mL)及水(5 mL)中之溶液中添加實例1.68.4 (600 mg)、二氯化雙(三苯基膦)鈀(II) (57.8 mg)以及CsF (375 mg)。在微波條件(Biotage Initiator)下，在120℃下攪拌混合物30分鐘。混合物用乙酸乙酯(200 mL)稀釋，用水及鹽水洗滌，並經無水硫酸鈉乾燥。過濾並蒸發溶劑，得到粗產物，藉由矽膠層析法，用20%乙酸乙酯/庚烷溶離來純化，得到二酯中間物。將殘餘物溶解於四氫呋喃(10 mL)、甲醇(5 mL)及水(5 mL)中並添加LiOH H 2O (500 mg)，且在室溫下攪拌混合物隔夜。用2N HCl水溶液酸化混合物，將其溶解於400 mL乙酸乙酯中，用水及鹽水洗滌，並經無水硫酸鈉乾燥。過濾並蒸發溶劑，得到標題化合物。MS (APCI) m/e 765.3 (M+H) +。 1.68.6   3-(1-((3-(2- 胺基乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 ) 萘 -2- 基 ) 吡啶甲酸向實例1.68.5 (500 mg)於二氯甲烷(10 mL)中之溶液中添加苯并[d]噻唑-2-胺(98 mg)、1-乙基-3-(3-二甲基胺基丙基)碳化二亞胺(251 mg)及4-二甲基胺基吡啶(160 mg)。在室溫下攪拌混合物隔夜。反應混合物用乙酸乙酯(400 mL)稀釋，用水及鹽水洗滌，並經無水硫酸鈉乾燥。過濾並蒸發溶劑，得到殘餘物，將其溶解於二氯甲烷及三氟乙酸(10 mL，1:1)中。攪拌隔夜後，減壓濃縮溶液。將殘餘物溶解於N,N-二甲基甲醯胺(12 mL)中且藉由逆相HPLC (使用Gilson系統及C18管柱，用20-80%乙腈/含0.1%三氟乙酸之水溶離)純化，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 741.2 (M+H) +。 1.68.7   6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 ) 萘 -2- 基 ]-3-{1-[(3-{2-[(2- 羧基乙基 ) 胺基 ] 乙氧基 }-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 } 吡啶 -2- 甲酸向實例1.68.6 (35 mg)於N,N-二甲基甲醯胺(4 mL)中之溶液中添加丙烯酸第三丁酯(120 mg)及H 2O (138 mg)。在室溫下攪拌混合物隔夜。反應混合物用乙酸乙酯(400 mL)稀釋，用水及鹽水洗滌，並經無水硫酸鈉乾燥。過濾並蒸發溶劑，得到殘餘物，將其溶解於二氯甲烷及三氟乙酸(10 mL，1:1)中。16小時後，減壓濃縮混合物。將殘餘物溶解於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)中，且在Gilson系統(C18管柱)上藉由逆相HPLC，用20-80%乙腈/含0.1%三氟乙酸之水溶離來純化，得到標題化合物。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 13.08 (s, 1H), 8.99 (d, 1H), 8.43-8.24 (m, 4H), 8.24-8.11 (m, 3H), 8.04 (d, 1H), 7.99 (d, 1H), 7.90 (d, 1H), 7.78 (d, 1H), 7.74-7.62 (m, 1H), 7.53-7.43 (m, 2H), 7.35 (q, 1H), 3.87 (s, 2H), 3.08 (dp, 4H), 2.62 (t, 2H), 2.20 (s, 3H), 1.43 (s, 2H), 1.29 (q, 4H), 1.14 (s, 4H), 1.03 (q, 2H), 0.85 (s, 6H)。 1.69 合成 6-[5-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 ) 喹啉 -3- 基 ]-3-{1-[(3,5- 二甲基 -7-{2-[(2- 磺基乙基 ) 胺基 ] 乙氧基 } 三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 } 吡啶 -2- 甲酸 1.69.1   3- 溴喹啉 -5- 甲酸甲酯 (W2.69)向3-溴喹啉-5-甲酸(2 g)於甲醇(30 mL)中之溶液中添加濃H 2SO 4(5 mL)。在回流下攪拌該溶液隔夜。減壓濃縮混合物。將殘餘物溶解於乙酸乙酯(300 mL)中並用Na 2CO 3水溶液、水及鹽水洗滌。經無水硫酸鈉乾燥後，過濾並蒸發溶劑，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 266 (M+H) +。 1.69.2   3-(4,4,5,5- 四甲基 -1,3,2- 二氧硼㖦 -2- 基 ) 喹啉 -5- 甲酸甲酯向實例1.69.1 (356 mg)於N,N-二甲基甲醯胺(5 mL)中之溶液中添加PdCl 2(dppf)-CH 2Cl 2加合物([1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯鈀(II) (1:1)，55 mg)、乙酸鉀(197 mg)及雙(頻哪醇根基)二硼(510 mg)。在60℃下攪拌混合物隔夜。將混合物冷卻至室溫且不經進一步處理即用於下一反應中。MS (ESI) m/e 339.2 (M+Na) +。 1.69.3   3-[5-{1-[(3-{2-[ 雙 ( 第三丁氧基羰基 ) 胺基 ] 乙氧基 }-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 }-6-( 第三丁氧基羰基 ) 吡啶 -2- 基 ] 喹啉 -5- 甲酸甲酯向實例1.69.2 (626 mg)於1,4-二噁烷(10 mL)及水(5 mL)中之溶液中添加實例1.68.4 (1.46 g)、二氯化雙(三苯基膦)鈀(II) (140 mg)及CsF (911 mg)。在微波條件(Biotage Initiator)下，在120℃下攪拌混合物30分鐘。混合物用乙酸乙酯(200 mL)稀釋，用水及鹽水洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。殘餘物藉由矽膠層析法，用20%乙酸乙酯/庚烷(1 L)溶離來純化，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 880.3 (M+H) +。 1.69.4   3-(6-( 第三丁氧基羰基 )-5-(1-((3-(2-(( 第三丁氧基羰基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶 -2- 基 ) 喹啉 -5- 甲酸向實例1.69.3 (1.34 g)於四氫呋喃(10 mL)、甲醇(5 mL)及水(5 mL)中之溶液中添加LiOH H 2O (120 mg)，且在室溫下攪拌混合物隔夜。混合物用2N HCl水溶液酸化，用乙酸乙酯(400 mL)稀釋，用水及鹽水洗滌，並經無水硫酸鈉乾燥。過濾並蒸發溶劑，得到標題化合物。MS (APCI) m/e 766.3 (M+H) +。 1.69.5   3-(1-((3-(2- 胺基乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-6-(5-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 ) 喹啉 -3- 基 ) 吡啶甲酸向實例1.69.4 (200 mg)於二氯甲烷(10 mL)中之溶液中添加苯并[d]噻唑-2-胺(39.2 mg)、1-乙基-3-(3-二甲基胺基丙基)碳化二亞胺(50 mg)及4-二甲基胺基吡啶(32 mg)。在室溫下攪拌混合物隔夜。反應混合物用乙酸乙酯(200 mL)稀釋，用水及鹽水洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。將殘餘物溶解於二氯甲烷及三氟乙酸(10 mL，1:1)中，並攪拌反應隔夜。濃縮混合物，且將殘餘物溶解於N,N-二甲基甲醯胺(12 mL)中，並在Gilson系統(C18管柱)上藉由逆相HPLC，用20-80%乙腈/含0.1%三氟乙酸之水溶離來純化，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 742.1 (M+H) +。 1.69.6   6-[5-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 ) 喹啉 -3- 基 ]-3-{1-[(3,5- 二甲基 -7-{2-[(2- 磺基乙基 ) 胺基 ] 乙氧基 } 三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 } 吡啶 -2- 甲酸向實例1.69.5 (36 mg)於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)中之溶液中添加乙烯磺酸4-((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)-2,2-二甲基丁酯(22 mg)及H 2O (0.3 mL)。在室溫下攪拌混合物3小時。反應混合物用二氯甲烷及三氟乙酸(10 mL，1:1)稀釋並攪拌隔夜。濃縮混合物，且將殘餘物溶解於N,N-二甲基甲醯胺(4 mL)中，並在Gilson系統(C18管柱)上藉由逆相HPLC，用20-80%乙腈/含0.1%三氟乙酸之水溶離來純化，得到標題化合物。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 13.19 (s, 2H), 9.70 (d, 1H), 9.40 (s, 1H), 8.31 (d, 2H), 8.16 (d, 1H), 8.06 (d, 1H), 8.01 (d, 1H), 7.98-7.88 (m, 1H), 7.80 (d, 1H), 7.52-7.43 (m, 2H), 7.37 (q, 1H), 3.89 (s, 2H), 3.22 (p, 2H), 3.10 (q, 2H), 2.80 (t, 2H), 2.23 (s, 3H), 1.43 (s, 2H), 1.30 (q, 4H), 1.23-1.10 (m, 4H), 1.04 (q, 2H), 0.87 (s, 6H)。MS (ESI) m/e 850.2 (M+H) +。 1.70 合成 6-[4-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 ) 喹啉 -6- 基 ]-3-{1-[(3,5- 二甲基 -7-{2-[(2- 磺基乙基 ) 胺基 ] 乙氧基 } 三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 } 吡啶 -2- 甲酸 (W2.70) 1.70.1   6-(4,4,5,5- 四甲基 -1,3,2- 二氧硼㖦 -2- 基 ) 喹啉 -4- 甲酸乙酯向6-溴喹啉-4-甲酸乙酯(140 mg)於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)中之溶液中添加PdCl 2(dppf)-CH 2Cl 2加合物(([1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯鈀(II) (1:1)，20.42 mg)、乙酸鉀(147 mg)及雙(頻哪醇根基)二硼(190 mg)。在60℃下攪拌混合物隔夜。將混合物冷卻至室溫且不經進一步處理即用於下一反應中。MS (ESI) m/e 328.1(M+H) +。 1.70.2   6-[5-{1-[(3-{2-[ 雙 ( 第三丁氧基羰基 ) 胺基 ] 乙氧基 }-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 }-6-( 第三丁氧基羰基 ) 吡啶 -2- 基 ] 喹啉 -4- 甲酸乙酯向實例1.70.1 (164 mg)於1,4-二噁烷(10 mL)及水(5 mL)中之溶液中添加實例1.68.4 (365 mg)、二氯化雙(三苯基膦)鈀(II) (35 mg)及CsF (228 mg)。在微波條件(Biotage Initiator)下，在120℃下攪拌混合物30分鐘。混合物用乙酸乙酯(200 mL)稀釋，用水及鹽水洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。殘餘物藉由矽膠層析法，用20%乙酸乙酯/庚烷(1 L)溶離來純化，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 894.3 (M+H) +。 1.70.3   6-(6-( 第三丁氧基羰基 )-5-(1-((3-(2-(( 第三丁氧基羰基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶 -2- 基 ) 喹啉 -4- 甲酸向實例1.70.2 (3.1 g)於四氫呋喃(20 mL)、甲醇(10 mL)及水(10 mL)中之溶液中添加LiOH H 2O(240 mg)。在室溫下攪拌混合物隔夜。混合物用2N HCl水溶液酸化並用乙酸乙酯(400 mL)稀釋。有機層用水及鹽水洗滌且經無水硫酸鈉乾燥。過濾並蒸發溶劑，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 766.3 (M+H) +。 1.70.4   3-(1-((3-(2- 胺基乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-6-(4-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 ) 喹啉 -6- 基 ) 吡啶甲酸向實例1.70.3 (4.2 g)於二氯甲烷(30 mL)中之溶液中添加苯并[d]噻唑-2-胺(728 mg)、1-乙基-3-(3-二甲基胺基丙基)碳化二亞胺(1.40 g)及4-二甲基胺基吡啶(890 mg)，且在室溫下攪拌混合物隔夜。反應混合物用乙酸乙酯(500 mL)稀釋，用水及鹽水洗滌，並經無水硫酸鈉乾燥。過濾並蒸發溶劑，得到殘餘物，將其溶解於二氯甲烷及三氟乙酸(10 mL，1:1)中並攪拌隔夜。濃縮混合物，且將殘餘物溶解於N,N-二甲基甲醯胺(4 mL)中，並在Gilson系統(C18管柱)上藉由逆相HPLC，用20-80%乙腈/含0.1%三氟乙酸之水溶離來純化，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 742.2 (M+H) +。 1.70.5   6-[4-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 ) 喹啉 -6- 基 ]-3-{1-[(3,5- 二甲基 -7-{2-[(2- 磺基乙基 ) 胺基 ] 乙氧基 } 三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 } 吡啶 -2- 甲酸向實例1.70.4 (111 mg)於N,N-二甲基甲醯胺(4 mL)中之溶液中添加乙烯磺酸4-((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)-2,2-二甲基丁酯(67 mg)、N,N-二異丙基乙胺(0.2 mL)及H 2O (0.3 mL)。在室溫下攪拌混合物3小時。反應混合物用二氯甲烷及三氟乙酸(10 mL，1:1)稀釋並攪拌隔夜。濃縮混合物，且將殘餘物溶解於N,N-二甲基甲醯胺(4 mL)中，並在Gilson系統(C18管柱)上藉由逆相HPLC，用20-80%乙腈/含0.1%三氟乙酸之水溶離來純化，得到標題化合物。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 13.31 (s, 1H), 9.10 (d, 1H), 8.91 (s, 1H), 8.58 (dd, 1H), 8.47-8.16 (m, 4H), 8.06 (dd, 1H), 7.99-7.89 (m, 2H), 7.79 (d, 1H), 7.53-7.43 (m, 2H), 7.42-7.31 (m, 1H), 3.87 (s, 2H), 3.53 (d, 1H), 3.20 (p, 2H), 3.07 (p, 2H), 2.78 (t, 2H), 2.20 (s, 3H), 1.40 (s, 2H), 1.28 (q, 4H), 1.21-1.07 (m, 4H), 1.02 (q, 2H), 0.84 (s, 6H)。MS (ESI) m/e 850.1 (M+H) +。 1.71 合成 6-[5-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 ) 喹啉 -3- 基 ]-3-{1-[(3-{2-[(2- 羧基乙基 ) 胺基 ] 乙氧基 }-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 } 吡啶 -2- 甲酸 (W2.71)向實例1.69.5 (140 mg)於N,N-二甲基甲醯胺(10 mL)中之溶液中添加丙烯酸第三丁酯(242 mg)及H 2O (0.3 mL)，且在室溫下攪拌混合物過週末。反應混合物用二氯甲烷及三氟乙酸(10 mL，1:1)稀釋並攪拌隔夜。濃縮混合物，且將殘餘物溶解於N,N-二甲基甲醯胺(4 mL)中，並在Gilson系統(C18管柱)上藉由逆相HPLC，用20-80%乙腈/含0.1%三氟乙酸之水溶離來純化，得到標題化合物。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 13.17 (s, 2H), 9.69 (d, 1H), 9.37 (d, 1H), 8.30 (dd, 3H), 8.15 (dd, 1H), 8.04 (dd, 1H), 7.99-7.88 (m, 2H), 7.79 (d, 1H), 7.53-7.40 (m, 2H), 7.34 (td, 1H), 3.88 (s, 2H), 3.55 (t, 2H), 3.08 (dt, 4H), 2.62 (t, 2H), 2.21 (s, 3H), 1.43 (s, 2H), 1.29 (q, 4H), 1.14 (s, 4H), 1.03 (q, 2H), 0.85 (s, 6H)。MS (ESI) m/e 814.2 (M+H) +。 1.72 合成 6-[1-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-5,6- 二氫咪唑并 [1,5-a] 吡嗪 -7(8H)- 基 ]-3-{1-[(3,5- 二甲基 -7-{2-[(2- 磺基乙基 ) 胺基 ] 乙氧基 } 三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 } 吡啶 -2- 甲酸 (W2.72) 1.72.1   7-(5- 溴 -6-( 第三丁氧基羰基 ) 吡啶 -2- 基 )-5,6,7,8- 四氫咪唑并 [1,5-a] 吡嗪 -1- 甲酸乙酯標題化合物係藉由在實例1.1.11中用5,6,7,8-四氫咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-甲酸乙酯鹽酸鹽替代1,2,3,4-四氫異喹啉-8-甲酸酯鹽酸鹽製備。MS (ESI) m/e 451, 453 (M+H) +, 395, 397 (M-第三丁基) +。 1.72.2   7-(6-( 第三丁氧基羰基 )-5-(4,4,5,5- 四甲基 -1,3,2- 二氧硼㖦 -2- 基 ) 吡啶 -2- 基 )-5,6,7,8- 四氫咪唑并 [1,5-a] 吡嗪 -1- 甲酸乙酯標題化合物係藉由在實例1.2.1中用實例1.72.1替代實例1.1.11製備。MS (ESI) m/e 499 (M+H) +, 443 (M-第三丁基) +, 529 (M+CH 3OH-H) -。 1.72.3   7-(6-( 第三丁氧基羰基 )-5-(1-((3-(2-(( 第三丁氧基羰基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶 -2- 基 )-5,6,7,8- 四氫咪唑并 [1,5a] 吡嗪 -1- 甲酸乙酯標題化合物係藉由在實例1.13.4中用實例1.72.2替代實例1.2.1並用實例1.55.11替代實例1.13.3製備。MS (ESI) m/e 760 (M+H) +, 758 (M-H) -。 1.72.4   7-(6-( 第三丁氧基羰基 )-5-(1-((3-(2-(( 第三丁氧基羰基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶 -2- 基 )-5,6,7,8- 四氫咪唑并 [1,5 a] 吡嗪 -1- 甲酸標題化合物係藉由在實例1.1.13中用實例1.72.3替代實例1.1.12製備。MS (ESI) m/e 760 (M+H) +, 758 (M-H) -。 1.72.5   6-(1-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-5,6- 二氫咪唑并 [1,5-a] 吡嗪 -7(8H)- 基 )-3-(1-((3-(2-(( 第三丁氧基羰基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶甲酸第三丁酯標題化合物係藉由在實例1.52.3中用實例1.72.4替代實例1.52.2製備。MS (ESI) m/e 892 (M+H) +, 890 (M-H) -。 1.72.6   3-(1-{[3-(2- 胺基乙氧基 )-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ] 甲基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-6-[1-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-5,6- 二氫咪唑并 [1,5-a] 吡嗪 -7(8H)- 基 ] 吡啶 -2- 甲酸標題化合物係藉由在實例1.1.17中用實例1.72.5替代實例1.1.16製備。MS (ESI) m/e 736 (M+H) +, 734 (M-H) -。 1.72.7   6-(1-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-5,6- 二氫咪唑并 [1,5-a] 吡嗪 -7(8H)- 基 )-3-(1-((3-(2-((2-(((4-(( 第三丁基二苯基矽烷基 ) 氧基 )-2- 甲基丁 -2- 基 ) 氧基 ) 磺醯基 ) 乙基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶甲酸標題化合物係藉由在實例1.2.8中用實例1.72.6替代實例1.2.7製備。 1.72.8   6-[1-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-5,6- 二氫咪唑并 [1,5-a] 吡嗪 -7(8H)- 基 ]-3-{1-[(3,5- 二甲基 -7-{2-[(2- 磺基乙基 ) 胺基 ] 乙氧基 } 三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 } 吡啶 -2- 甲酸標題化合物係藉由在實例1.2.9中用實例1.72.7替代實例1.2.8製備。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 8.36 (bs, 2H), 8.03 (bs, 1H), 7.99 (d, 1H), 7.76 (d, 1H), 7.64 (d, 1H), 7.46 (t, 1H), 7.34 (s, 1H), 7.33 (t, 1H), 7.17 (d, 1H), 5.12 (s, 2H), 4.28 (t, 2H), 4.11 (t, 2H), 3.86 (s, 2H), 3.56 (t, 2H), 3.24 (m, 2H), 3.11 (m, 2H), 2.82 (t, 2H), 2.15 (s, 3H), 1.42 (s, 2H), 1.32 (q, 4H), 1.17 (q, 4, H), 1.03 (m, 2H), 0.88 (s, 6H)。MS (ESI) m/e 844 (M+H) +, 842 (M-H) -。 1.73 合成 8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-2-{6- 羧基 -5-[1-({3-[2-({3-[1-(β-D- 葡萄哌喃糖醛醯基 )-1H-1,2,3- 三唑 -4- 基 ] 丙基 } 胺基 ) 乙氧基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ] 吡啶 -2- 基 }-1,2,3,4- 四氫異喹啉 (W2.73)向三乙酸(2R,3R,4S,5S,6S)-2-疊氮基-6-(甲氧基羰基)四氫-2H-哌喃-3,4,5-三基酯(8.63 mg)於t-CH 3OH (2 mL)及水(1 mL)中之溶液中添加實例1.67.1 (20 mg)、硫酸銅(II)五水合物(2.0 mg)及抗壞血酸鈉(5 mg)。在微波條件(Biotage Initiator)下，在100℃下攪拌混合物20分鐘。將LiOH H 2O (50 mg)添加至混合物中，並繼續攪拌隔夜。混合物用三氟乙酸中和，並在Gilson系統(C18管柱)上藉由逆相HPLC，用20-80%乙腈/含0.1%三氟乙酸之水溶離來純化，得到標題化合物。MS (APCI) m/e 987.3 (M+H) +。 1.74 合成 6-[7-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-1H- 吲哚 -2- 基 ]-3-{1-[(3,5- 二甲基 -7-{2-[(2- 磺基乙基 ) 胺基 ] 乙氧基 } 三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 } 吡啶 -2- 甲酸 (W2.74) 1.74.1   2-[5-{1-[(3-{2-[ 雙 ( 第三丁氧基羰基 ) 胺基 ] 乙氧基 }-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 }-6-( 第三丁氧基羰基 ) 吡啶 -2- 基 ]-1H- 吲哚 -7- 甲酸甲酯實例1.74.1係藉由在實例1.1.12中用2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼㖦-2-基)-1H-吲哚-7-甲酸甲酯替代實例1.2.1並用實例1.68.4替代實例1.1.6製備。MS (ESI) m/e 866.3 (M-H) -。 1.74.2   2-(6-( 第三丁氧基羰基 )-5-(1-((3-(2-(( 第三丁氧基羰基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶 -2- 基 )-1H- 吲哚 -7- 甲酸實例1.74.2係藉由在實例1.1.13中用實例1.74.1替代實例1.1.12製備。MS (ESI) m/e 754.4 (M+H) +。 1.74.3   6-(7-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-1H- 吲哚 -2- 基 )-3-(1-((3-(2-(( 第三丁氧基羰基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶甲酸第三丁酯實例1.74.3係藉由在實例1.1.14中用實例1.74.2替代實例1.1.13製備。MS (ESI) m/e 886.5 (M+H) +。 1.74.4   3-(1-((3-(2- 胺基乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-6-(7-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-1H- 吲哚 -2- 基 ) 吡啶甲酸實例1.74.4係在實例1.1.17中藉由用實例1.74.3替代實例1.1.16製備。MS (ESI) m/e 730.2 (M+H) +。 1.74.5   6-[7-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-1H- 吲哚 -2- 基 ]-3-[1-({3,5- 二甲基 -7-[(2,2,7,7- 四甲基 -10,10- 二氧離子基 -3,3- 二苯基 -4,9- 二氧雜 -10λ 6- 硫雜 -13- 氮雜 -3- 矽雜十五烷 -15- 基 ) 氧基 ] 三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ] 吡啶 -2- 甲酸實例1.74.5係藉由在實例1.2.8中用實例1.74.4替代實例1.2.7製備。MS (ESI) m/e 1176.7 (M+H) +。 1.74.6   6-[7-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-1H- 吲哚 -2- 基 ]-3-{1-[(3,5- 二甲基 -7-{2-[(2- 磺基乙基 ) 胺基 ] 乙氧基 } 三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 } 吡啶 -2- 甲酸實例1.74.6係藉由在實例1.2.9中用實例1.74.5替代實例1.2.8製備。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 11.32 (d, 1H), 8.23 (dd, 1H), 8.18 (d, 1H), 7.93-7.82 (m, 3H), 7.71 (d, 1H), 7.62 (s, 3H), 7.57-7.51 (m, 1H), 7.47 (s, 1H), 7.40 (d, 1H), 7.35 (t, 1H), 7.22 (t, 1H), 4.86 (t, 2H), 3.85 (s, 2H), 3.47 (t, 2H), 3.08 (t, 2H), 2.88 (p, 2H), 2.21 (s, 3H), 1.37 (s, 2H), 1.32-1.20 (m, 4H), 1.14 (q, 4H), 1.07-0.94 (m, 2H), 0.84 (s, 6H)。MS (ESI) m/e 838.2 (M+H) +。 1.75 合成 6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-6-[3-( 甲基胺基 ) 丙基 ]-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-3-{1-[(3,5- 二甲基 -7-{2-[(2- 磺基乙基 ) 胺基 ] 乙氧基 } 三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 } 吡啶 -2- 甲酸 (W2.75) 1.75.13-溴-5-(溴甲基)苯甲酸甲酯 將偶氮二異丁腈(1.79 g)添加至於350 mL乙腈中之3-溴-5-甲基苯甲酸甲酯(50 g)及N-溴代琥珀醯亞胺(44.7 g)中，且使混合物回流隔夜。再添加11 g N-溴代琥珀醯亞胺及0.5 g偶氮二異丁腈，並繼續回流3小時。濃縮混合物，將其溶解於500 mL乙醚中，並攪拌30分鐘。過濾混合物，且濃縮所得溶液。粗產物在矽膠上使用10%乙酸乙酯/庚烷層析分離，得到標題化合物。 1.75.23-溴-5-(氰基甲基)苯甲酸甲酯 將氰化四丁基銨(50 g)添加至於300 mL乙腈中之實例1.75.1 (67.1 g)中，且將混合物加熱至70℃隔夜。冷卻混合物，將其倒入乙醚中並用水及鹽水沖洗。接著濃縮混合物並在矽膠上使用2-20%乙酸乙酯/庚烷層析分離，得到標題化合物。 1.75.3   3-(2- 胺基乙基 )-5- 溴苯甲酸甲酯將硼烷-THF複合物(126 mL，1M溶液)添加至實例1.75.2 (16 g)於200 mL四氫呋喃中之溶液中，且攪拌混合物隔夜。小心用甲醇(50 mL)淬滅反應，且接著濃縮至50 mL體積。將混合物溶解於120 mL甲醇/120 mL 4M HCl /120 mL二噁烷中並攪拌隔夜。減壓移除有機物，且殘餘物用乙醚萃取兩次。丟棄萃取液。有機層用固體K 2CO 3鹼化，且接著用乙酸乙酯及二氯甲烷(2×)萃取。合併萃取液，經Na 2SO 4乾燥，過濾並濃縮，得到標題化合物。 1.75.4   3- 溴 -5-(2-(2,2,2- 三氟乙醯胺基 ) 乙基 ) 苯甲酸甲酯在0℃下，將三氟乙酸酐(9.52 mL)逐滴添加至實例1.75.3 (14.5 g)及三甲基胺(11.74 mL)於200 mL二氯甲烷中之混合物中。添加後，使混合物升溫至室溫且攪拌三天。將混合物倒入乙醚中，並用NaHCO 3溶液及鹽水洗滌。濃縮混合物並在矽膠上使用5-30%乙酸乙酯/庚烷層析分離，得到標題化合物。 1.75.5   6- 溴 -2-(2,2,2- 三氟乙醯基 )-1,2,3,4- 四氫異喹啉 -8- 甲酸甲酯將硫酸添加至實例1.75.4 (10 g)中直至其成為溶液(40 mL)，此時添加三聚甲醛(4.24 g)並攪拌混合物2小時。接著將該溶液倒至400 mL冰上並攪拌10分鐘。混合物用乙酸乙酯(3×)萃取，且合併之萃取液用NaHCO 3溶液及鹽水洗滌，且接著濃縮。粗產物在矽膠上使用2-15%乙酸乙酯/庚烷層析分離，得到標題化合物。 1.75.6   6-(3-(( 第三丁氧基羰基 )( 甲基 ) 胺基 ) 丙 -1- 炔 -1- 基 )-2-(2,2,2- 三氟乙醯基 )-1,2,3,4- 四氫異喹啉 -8- 甲酸甲酯在50℃下，將實例1.75.5 (5.1 g)、甲基(丙-2-炔-1-基)胺基甲酸第三丁酯(2.71 g)、二氯化雙(三苯基膦)鈀(II) (PdCl 2(PPh 3) 2，0.49 g)、CuI (0.106 g)及三乙胺(5.82 mL)於50 mL二噁烷中之溶液攪拌隔夜。濃縮混合物並在矽膠上使用10-50%乙酸乙酯/庚烷層析分離，得到標題化合物。 1.75.7   6-(3-(( 第三丁氧基羰基 )( 甲基 ) 胺基 ) 丙基 )-2-(2,2,2- 三氟乙醯基 )-1,2,3,4- 四氫異喹啉 -8- 甲酸甲酯在250 mL壓力瓶中，將實例1.75.6 (4.2 g)、四氫呋喃(20 mL)及甲醇(20.00 mL)添加至潮濕的20% Pd(OH) 2/C (3 g)中並在50 psi壓力及50℃下振盪12小時。過濾該溶液並濃縮，得到標題化合物。 1.75.8   2-(5- 溴 -6-( 第三丁氧基羰基 ) 吡啶 -2- 基 )-6-(3-(( 第三丁氧基羰基 )( 甲基 ) 胺基 ) 丙基 )-1,2,3,4- 四氫異喹啉 -8- 甲酸甲酯將實例1.75.7 (4.22 g)及碳酸鉀(1.53 g)於在60 mL四氫呋喃、25 mL甲醇及10 mL水中攪拌隔夜。濃縮混合物且添加60 mL N,N-二甲基甲醯胺。接著向其中添加實例1.1.9 (3.05 g)及三乙胺(5 mL)，並在60℃下攪拌反應隔夜。將混合物冷卻至室溫，將其倒入乙酸乙酯(600 mL)中，用水(3×)及鹽水洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾並濃縮。殘餘物在矽膠上使用5-50%乙酸乙酯/庚烷層析分離，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 618.2 (M+H) +。 1.75.9   6-(3-(( 第三丁氧基羰基 )( 甲基 ) 胺基 ) 丙基 )-2-(6-( 第三丁氧基羰基 )-5-(4,4,5,5- 四甲基 -1,3,2- 二氧硼㖦 -2- 基 ) 吡啶 -2- 基 )-1,2,3,4- 四氫異喹啉 -8- 甲酸甲酯向實例1.75.8 (3.7 g)、三乙胺(2.50 mL)及PdCl 2(dppf) (([1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯鈀(II) (1:1)，0.29 g)於25 mL乙腈中之溶液中添加4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼㖦(1.74 mL)，且將反應混合物加熱至75℃，保持5小時，接著在60℃下攪拌隔夜。濃縮混合物並在矽膠上使用5-50%乙酸乙酯/庚烷層析分離，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 666.4 (M+H) +。 1.75.10 2-((2-((3-((4- 碘 -5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 氧基 ) 乙基 ) 胺基 ) 乙烷磺酸 4-(( 第三丁基二苯基矽烷基 ) 氧基 )-2,2- 二甲基丁酯在45℃下，將實例1.55.10 (2.39 g)、乙烯磺酸4-((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)-2,2-二甲基丁酯(2.41 g)及三乙胺(1.51 mL)於30 mL N,N-二甲基甲醯胺中攪拌3小時。冷卻混合物並將其倒入乙醚(400 mL)中，且該乙醚溶液用水(3×)及鹽水洗滌並濃縮。粗產物在矽膠上使用加有1%三乙胺的2-50%乙酸乙酯/庚烷層析分離，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 890.6 (M+H) +。 1.75.11  6-(6-(3-(( 第三丁氧基羰基 )( 甲基 ) 胺基 ) 丙基 )-8-( 甲氧基羰基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-3-(1-((3-(2-((2-((4-(( 第三丁基二苯基矽烷基 ) 氧基 )-2,2- 二甲基丁氧基 ) 磺醯基 ) 乙基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶甲酸將實例1.75.9 (1.777 g)、實例1.75.10 (1.98 g)、參(二亞苄基丙酮)二鈀(0) (0.102 g)、1,3,5,7-四甲基-8-十四烷基-2,4,6-三氧雜-8-磷雜金剛烷(0.918 g)及磷酸鉀(1.889 g)添加至25 mL二噁烷/10 mL水中，且溶液抽空/填充氮氣若干次。反應物澄清，且在70℃下攪拌隔夜。冷卻混合物並將其倒入乙酸乙酯(200 mL)中，並用水及鹽水洗滌。濃縮混合物並在矽膠上使用5-50%乙酸乙酯/庚烷，隨後10%甲醇/含1%三乙胺之乙酸乙酯層析分離，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 1301.4 (M+H) +。 1.75.12 6-(3-(( 第三丁氧基羰基 )( 甲基 ) 胺基 ) 丙基 )-2-(5-(1-((3-(2-((2-((4-(( 第三丁基二苯基矽烷基 ) 氧基 )-2,2- 二甲基丁氧基 ) 磺醯基 ) 乙基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-6- 羧基吡啶 -2- 基 )-1,2,3,4- 四氫異喹啉 -8- 甲酸在45℃下，將實例1.75.11 (1.5 g)及LiOH- H 2O (0.096 g)於15 mL四氫呋喃及3 mL水中攪拌10天。將混合物倒入200 mL乙酸乙酯/ 20 mL NaH 2PO 4溶液中，並添加濃HCl溶液，直至pH值達到3。分離各層，且水層用乙酸乙酯萃取兩次。合併之有機層用鹽水洗滌並濃縮。殘餘物在矽膠上使用0-5%甲醇/乙酸乙酯層析分離，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 1287.3 (M+H) +。 1.75.13 6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-6-(3-(( 第三丁氧基羰基 )( 甲基 ) 胺基 ) 丙基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-3-(1-((3-(2-((2-((4-(( 第三丁基二苯基矽烷基 ) 氧基 )-2,2- 二甲基丁氧基 ) 磺醯基 ) 乙基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶甲酸標題化合物係如實例1.2.6中所描述，用實例1.75.12替代實例1.2.5製備。MS (ESI) m/e 1419.5 (M+H) +。 1.75.14 6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-6-[3-( 甲基胺基 ) 丙基 ]-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-3-{1-[(3,5- 二甲基 -7-{2-[(2- 磺基乙基 ) 胺基 ] 乙氧基 } 三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 } 吡啶 -2- 甲酸標題化合物係如實例1.2.9中所描述，用實例1.75.13替代實例1.2.8製備。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 12.90 (bs, 1H), 8.33 (m, 2H), 8.02 (d, 1H), 7.78 (d, 1H), 7.66 (m, 1H), 7.47 (m, 3H), 7.35 (m, 3H), 7.25 (s, 2H), 6.95 (d, 1H), 4.95 (s, 2H), 4.28 (t, 2H), 4.11 (t, 2H), 3.95 (m, 2H), 3.20 (m, 2H), 3.08 (m, 2H), 2.96 (m, 2H), 2.89 (m, 2H), 2.78 (m, 2H), 2.65 (m, 2H), 2.55 (t, 2H), 2.12 (s, 3H), 1.95 (m, 2H), 1.39 (s, 2H), 1.25 (m, 6H), 1.12 (m, 6H), 0.93 (s, 3H), 0.85 (s, 6H)。MS (ESI) m/e 926.8 (M+H) +。 1.76 合成 5-{[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ] 胺基 }-5- 脫氧 -D- 阿拉伯糖醇 (W2.76) 1.76.1   6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-3-(1-((3,5- 二甲基 -7-(2-((((4R,4'R,5R)-2,2,2',2'- 四甲基 -[4,4'- 雙 (1,3- 二氧雜環戊烷 )]-5- 基 ) 甲基 ) 胺基 ) 乙氧基 ) 金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶甲酸第三丁酯將實例1.2.7 (75 mg)及(4R,4'R,5S)-2,2,2',2'-四甲基-[4,4'-雙(1,3-二氧雜環戊烷)]-5-甲醛(22 mg)溶解於二氯甲烷(1 mL)中。添加三乙醯氧基硼氫化鈉(40 mg)，並在室溫下攪拌溶液16小時。減壓濃縮溶液，且該物質在矽膠上藉由急驟管柱層析法，用5-10%甲醇/二氯甲烷溶離來純化。減壓蒸發溶劑，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 1016 (M+H) +, 1014 (M-H) -。 1.76.2   5-{[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ] 胺基 }-5- 脫氧 -D- 阿拉伯糖醇將實例1.76.1 (45 mg)溶解於三氟乙酸(1 mL)及水(0.2 mL)中。在室溫下混合溶液五天。減壓移除溶劑，並將該物質溶解於甲醇(2 mL)中。該物質在裝備有Luna管柱：C18(2)，100 A，250 × 30 mm之Grace Reveleris上，藉由逆相HPLC，使用25-75%乙腈/水(w/0.1% TFA)經30分鐘純化。彙集產物溶離份，冷凍並凍乾，得到呈雙三氟乙酸鹽形式之標題化合物。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 12.85 (bs, 2H), 8.31 (m, 1H), 8.16 (m, 1H), 8.04 (d, 1H), 7.80 (d, 1H), 7.62 (d, 1H), 7.51-7.43 (m, 3H), 7.37 (q, 2H), 7.29 (s, 1H), 6.69 (d, 1H), 4.96 (s, 2H), 4.04 (t, 2H), 3.89 (m, 2H), 3.59 (m, 3H), 3.49 (m, 4H), 3.42 (dd, 2H), 3.22 (dd, 2H), 3.06 (m, 2H), 3.02 (m, 4H), 2.10 (s, 3H), 1.43 (s, 2H), 1.30 (q, 4H), 1.14 (t, 4H), 1.04 (q, 2H), 0.87 (s, 6H)。MS (ESI) m/e 880 (M+H) +, 878 (M-H) -。 1.77 合成 1-{[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ] 胺基 }-1,2- 二脫氧 -D- 阿拉伯 - 己糖醇 (W2.77) 1.77.1   6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-3-(1-((3,5- 二甲基 -7-(2-(((3R,4S,5R)-3,4,5,6- 四羥基己基 ) 胺基 ) 乙氧基 ) 金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶甲酸第三丁酯將(4R,5S,6R)-6-(羥基甲基)四氫-2H-哌喃-2,4,5-三醇(15 mg)溶解於二甲亞碸(0.5 mL)中。添加實例1.2.7 (88 mg)，隨後添加氰基硼氫化鈉(27 mg)。逐滴添加乙酸(82 mg)，且在60℃下加熱溶液16小時。冷卻反應物，用1 mL甲醇稀釋，且在裝備有Luna管柱：C18(2)，100 A，150 × 30 mm之Grace Reveleris上，藉由逆相HPLC，使用20-75%乙腈/水(w/0.1% TFA)經60分鐘純化。彙集產物溶離份，冷凍並凍乾，得到呈雙三氟乙酸鹽形式之標題化合物。MS (ESI) m/e 950 (M+H) +, 948 (M-H) -。 1.77.2   1-{[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ] 胺基 }-1,2- 二脫氧 -D- 阿拉伯 - 己糖醇將實例1.77.1 (39 mg)溶解於二氯甲烷(0.5 mL)中。添加三氟乙酸(740 mg)，並在室溫下攪拌溶液16小時。減壓移除溶劑。將殘餘物溶解於N,N-二甲基甲醯胺(0.5 mL)中並添加1 M氫氧化鈉水溶液(0.5 mL)。在室溫下攪拌該溶液一小時。添加三氟乙酸(0.25 mL)，且該物質在裝備有Luna管柱：C18(2)，100 A，150 × 30 mm之Grace Reveleris上，藉由逆相HPLC，使用20-75%乙腈/水(w/0.1% TFA)經60分鐘純化。彙集產物溶離份，冷凍並凍乾，得到呈雙三氟乙酸鹽形式之標題化合物。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 12.86 (s, 1H), 12.74 (bs, 1H), 8.28 (bs, 1H), 8.20 (bs, 1H), 8.04 (d, 1H), 7.80 (d, 1H), 7.62 (d, 1H), 7.51-7.43 (m, 3H), 7.37 (q, 2H), 7.29 (s, 1H), 6.96 (d, 1H), 4.96 (s, 2H), 4.53 (bs, 3H), 3.89 (t, 2H), 3.83 (s, 2H), 3.77 (d, 1H), 3.60 (dd, 2H), 3.56 (t, 2H), 3.48 (m, 2H), 3.15 (d, 1H), 3.02 (m, 6H), 2.10 (s, 3H), 1.84 (m, 1H), 1.69 (m, 1H), 1.43 (s, 2H), 1.31 (q, 4H), 1.14 (t, 4H), 1.05 (q, 2H), 0.87 (s, 6H)。MS (ESI) m/e 894 (M+H) +, 892 (M-H) -。 1.78 合成 6-[4-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 ) 異喹啉 -6- 基 ]-3-{1-[(3,5- 二甲基 -7-{2-[(2- 磺基乙基 ) 胺基 ] 乙氧基 } 三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 } 吡啶 -2- 甲酸 (W2.78) 1.78.1   6-(4,4,5,5- 四甲基 -1,3,2- 二氧硼㖦 -2- 基 ) 異喹啉 -4- 甲酸甲酯向6-溴異喹啉-4-甲酸甲酯(1.33 g)於N,N-二甲基甲醯胺(30 mL)中之溶液中添加PdCl 2(dppf)-CH 2Cl 2加合物(([1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯鈀(II) (1:1)，204 mg)、乙酸鉀(1.48 g)及雙(頻哪醇根基)二硼(1.92 g)。在60℃下攪拌混合物隔夜。將混合物冷卻至室溫且不經進一步處理即用於下一反應中。MS (APCI) m/e 313.3 (M+H) +。 1.78.2   6-[5-{1-[(3-{2-[ 雙 ( 第三丁氧基羰基 ) 胺基 ] 乙氧基 }-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 }-6-( 第三丁氧基羰基 ) 吡啶 -2- 基 ] 異喹啉 -4- 甲酸甲酯向實例1.68.4 (1.2 g)於1,4-二噁烷(20 mL)及水(10 mL)中之溶液中添加實例1.78.1 (517 mg)、二氯化雙(三苯基膦)鈀(II) (58 mg)及CsF (752 mg)。在回流下攪拌混合物隔夜。LC/MS顯示預期產物為主要峰。混合物用乙酸乙酯(200 mL)稀釋，用水及鹽水洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。殘餘物藉由矽膠層析法，用20%乙酸乙酯/二氯甲烷溶離來純化，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 880.8 (M+H) +。 1.78.3   6-(6-( 第三丁氧基羰基 )-5-(1-((3-(2-(( 第三丁氧基羰基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶 -2- 基 ) 異喹啉 -4- 甲酸向實例1.78.2 (3.1 g)於四氫呋喃(20 mL)、甲醇(10 mL)及水(10 mL)中之溶液中添加LiOH H 2O (240 mg)。在室溫下攪拌混合物隔夜。混合物用2N HCl水溶液酸化且用乙酸乙酯(400 mL)稀釋。有機層用水及鹽水洗滌並經無水硫酸鈉乾燥。過濾並蒸發溶劑，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 766.4 (M+H) +。 1.78.4   3-(1-((3-(2- 胺基乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-6-(4-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 ) 異喹啉 -6- 基 ) 吡啶甲酸向實例1.78.3 (1.2 g)於二氯甲烷(20 mL)中之溶液中添加苯并[d]噻唑-2-胺(0.236 g)、1-乙基-3-(3-二甲基胺基丙基)碳化二亞胺(451 mg)及4-二甲基胺基吡啶(288 mg)，且在室溫下攪拌混合物隔夜。反應混合物用乙酸乙酯(500 mL)稀釋，用水及鹽水洗滌，並經無水硫酸鈉乾燥。過濾並蒸發溶劑，得到殘餘物，將其溶解於二氯甲烷及三氟乙酸(10 mL，1:1)中並攪拌隔夜。濃縮混合物，且將殘餘物溶解於N,N-二甲基甲醯胺(4 mL)中，並在Gilson系統(C18管柱)上藉由逆相HPLC，用20-80%乙腈/含0.1%三氟乙酸之水溶離來純化，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 742.1 (M+H) +。 1.78.5   6-[4-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 ) 異喹啉 -6- 基 ]-3-{1-[(3,5- 二甲基 -7-{2-[(2- 磺基乙基 ) 胺基 ] 乙氧基 } 三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 } 吡啶 -2- 甲酸向實例1.78.4 (55 mg)於N,N-二甲基甲醯胺(6 mL)中之溶液中添加乙烯磺酸4-((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)-2,2-二甲基丁酯(34 mg)、 N, N-二異丙基乙胺(0.6 mL)及H 2O (0.6 mL)。在室溫下攪拌混合物隔夜。反應混合物用二氯甲烷及三氟乙酸(10 mL，1:1)稀釋並攪拌隔夜。濃縮混合物，且將殘餘物溶解於N,N-二甲基甲醯胺(4 mL)中，並在Gilson系統(C18管柱)上藉由逆相HPLC，用20-80%乙腈/含0.1%三氟乙酸之水溶離來純化，得到標題化合物。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 13.25 (s, 2H), 9.58 (s, 1H), 9.06 (s, 1H), 9.00 (s, 1H), 8.52 (dd, 1H), 8.42 (d, 1H), 8.35 (d, 2H), 8.26 (d, 1H), 8.11-8.03 (m, 1H), 8.01 (d, 1H), 7.80 (d, 1H), 7.52-7.44 (m, 2H), 7.41-7.28 (m, 1H), 3.89 (s, 2H), 3.55 (t, 2H), 3.22 (t, 2H), 3.09 (s, 2H), 2.80 (t, 2H), 2.23 (s, 3H), 1.43 (s, 2H), 1.30 (q, 4H), 1.23-1.11 (m, 4H), 1.04 (q, 2H), 0.86 (s, 6H)。MS (ESI+) m/e 850.1 (M+H) +。 1.79 合成 6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-3-(1-{[3-(2-{[3- 羥基 -2-( 羥基甲基 ) 丙基 ] 胺基 } 乙氧基 )-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ] 甲基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶 -2- 甲酸 (W2.79) 1.79.1   2,2- 二甲基 -1,3- 二噁烷 -5- 甲醛向氯代鉻酸吡錠(1.1 g)及矽藻土(10 g)於二氯甲烷(10 mL)中之經攪拌懸浮液中逐滴添加(2,2-二甲基-1,3-二氧雜環戊烷-5-基)甲醇(0.5 g)於二氯甲烷(3 mL)中之溶液。在室溫下攪拌混合物2小時。懸浮液經矽藻土過濾並用乙酸乙酯洗滌。粗產物經矽膠過濾並濃縮，得到標題化合物。 1H NMR (501 MHz, 氯仿-d) δ 9.89 (s, 1H), 4.28-4.17 (m, 4H), 2.42-2.32 (m, 1H), 1.49 (s, 3H), 1.39 (s, 3H)。MS (ESI) m/e 305.9 (2M+NH4) +。 1.79.2   6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-3-(1-((3-(2-(((2,2- 二甲基 -1,3- 二氧雜環戊烷 -5- 基 ) 甲基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶甲酸第三丁酯向實例1.2.7 (100 mg)及實例1.79.1 (20 mg)於二氯甲烷(1 mL)中之溶液中添加三乙醯氧基硼氫化鈉(40 mg)，且在室溫下攪拌混合物2小時。反應物用二氯甲烷稀釋並用飽和碳酸氫鈉溶液洗滌。用二氯甲烷反萃取水層。合併之有機層經硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。殘餘物藉由矽膠層析法，用20%-100%乙酸乙酯/含乙醇(3:1)之庚烷溶離來純化，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 930.3 (M+H) +。 1.79.3   6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-3-(1-{[3-(2-{[3- 羥基 -2-( 羥基甲基 ) 丙基 ] 胺基 } 乙氧基 )-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ] 甲基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基)吡啶-2-甲酸 實例1.79.3係藉由在實例1.2.9中用實例1.79.2替代實例1.2.8製備。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 12.82 (s, 1H), 8.13 (s, 2H), 8.00 (dd, 1H), 7.76 (d, 1H), 7.59 (d, 1H), 7.49-7.38 (m, 3H), 7.37-7.29 (m, 2H), 7.25 (s, 1H), 6.92 (d, 1H), 4.92 (s, 4H), 3.85 (t, 2H), 3.79 (s, 2H), 3.53 (t, 2H), 3.47 (dd, 2H), 3.00 (dt, 7H), 2.07 (s, 3H), 1.93 (p, 1H), 1.38 (s, 2H), 1.32-1.19 (m, 4H), 1.16-0.91 (m, 6H), 0.83 (s, 7H)。MS (ESI) m/e 834.3 (M+H) +。 1.80 合成 1-{[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ] 胺基 }-1,2- 二脫氧 -D- 赤式 - 戊糖醇 (W2.80)標題化合物係藉由在實例1.77.1中用(4S,5R)-四氫-2H-哌喃-2,4,5-三醇替代(4R,5S,6R)-6-(羥基甲基)四氫-2H-哌喃-2,4,5-三醇並用實例1.3.1替代實例1.2.7製備。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 12.85 (bs, 1H), 12.72 (bs, 1H), 8.21 (bs, 2H), 8.04 (d, 1H), 7.79 (d, 1H), 7.62 (d, 1H), 7.52-7.42 (m, 3H), 7.37 (q, 2H), 7.29 (s, 1H), 6.95 (d, 1H), 4.96 (s, 2H), 3.89 (t, 2H), 3.83 (s, 2H), 3.65 (m, 2H), 3.56 (m, 2H), 3.38 (m, 2H), 3.32 (m, 2H), 3.24 (m, 2H), 3.03 (m, 5H), 2.10 (s, 3H), 1.89 (m, 1H), 1.67 (m, 1H), 1.44 (s, 2H), 1.31 (q, 4H), 1.14 (t, 4H), 1.05 (q, 2H), 0.86 (s, 6H)。MS (ESI) m/e 864 (M+H) +, 862 (M-H) -。 1.81 合成 6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-3-(1-{[3,5- 二甲基 -7-(2-{[(2S,3S)-2,3,4- 三羥基丁基 ] 胺基 } 乙氧基 ) 三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ] 甲基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶 -2- 甲酸 (W2.81) 1.81.1 碳酸第三丁酯 (4S,5S)-5- 羥基甲基 -2,2- 二甲基 -[1,3]二氧雜環戊烷-4-基甲酯 將((4S,5S)-2,2-二甲基-1,3-二氧雜環戊烷-4,5-二基)二甲醇(1000 mg)溶解於N,N-二甲基甲醯胺(50 mL)中。添加氫化鈉(60%於礦物油中，259 mg)。在室溫下混合溶液15分鐘。緩慢添加二碳酸二第三丁酯(1413 mg)。混合溶液30分鐘，並用飽和氯化銨水溶液淬滅反應。溶液用水(150 mL)稀釋並使用70%乙酸乙酯/庚烷萃取兩次。合併有機部分並用水(100 mL)萃取，用鹽水(50 mL)萃取，且在無水硫酸鈉上乾燥。減壓濃縮溶液，且該物質在矽膠上藉由急驟管柱層析法，用30%乙酸乙酯/庚烷溶離來純化。減壓蒸發溶劑，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 284 (M+Na) +。 1.81.2 碳酸第三丁酯 (4S,5R)-5- 甲醯基 -2,2- 二甲基 -[1,3] 二氧雜環戊烷 -4- 基甲酯將實例1.81.1 (528 mg)溶解於二氯甲烷(20 mL)中。添加戴斯-馬丁高碘烷(896 mg)，並在室溫下攪拌溶液四小時。減壓濃縮溶液，且該物質在矽膠上藉由急驟管柱層析法，用20%-50%乙酸乙酯/庚烷溶離來純化。減壓蒸發溶劑，得到標題化合物。 1.81.3   6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-3-(1-(((lS,3s,5R,7S)-3-(2-((((4S,5S)-5-((( 第三丁氧基羰基 ) 氧基 ) 甲基 )-2,2- 二甲基 -1,3- 二氧雜環戊烷 -4- 基 ) 甲基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶甲酸第三丁酯標題化合物係藉由在實例1.76.1中用實例1.81.2替代(4R,4'R,5S)-2,2,2',2'-四甲基-[4,4'-雙(1,3-二氧雜環戊烷)]-5-甲醛製備。 1.81.4   6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-3-(1-{[3,5- 二甲基 -7-(2-{[(2S,3S)-2,3,4- 三羥基丁基 ] 胺基 } 乙氧基 ) 三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ] 甲基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶 -2- 甲酸標題化合物係藉由在實例1.76.2中用實例1.81.3替代實例1.76.1製備。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 12.86 (bs, 2H), 8.28 (bs, 1H), 8.18 (bs, 1H), 8.04 (d, 1H), 7.80 (d, 1H), 7.63 (d, 1H), 7.51-7.43 (m, 3H), 7.36 (q, 2H), 7.29 (s, 1H), 6.96 (d, 1H), 4.96 (s, 2H), 3.89 (t, 2H), 3.83 (m, 3H), 3.46 (m, 4H), 3.40 (m, 4H), 3.08-2.96 (m, 6H), 2.10 (s, 3H), 1.43 (s, 2H), 1.30 (q, 4H), 1.14 (t, 4H), 1.04 (q, 2H), 0.87 (s, 6H)。MS (ESI) m/e 850 (M+H) +, 848 (M-H) -。 1.82 合成 6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-3-(1-{[3-(2-{[(2S,3S,4R,5R,6R)-2,3,4,5,6,7- 六羥基庚基 ] 胺基 } 乙氧基 )-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ] 甲基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶 -2- 甲酸 (W2.82)標題化合物係藉由在實例1.77.1中用(2R,3R,4S,5R,6R)-2,3,4,5,6,7-六羥基庚醛替代(4R,5S,6R)-6-(羥基甲基)四氫-2H-哌喃-2,4,5-三醇並用實例1.3.1替代實例1.2.7製備。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 12.86 (bs, 1H), 8.34-8.08 (m, 2H), 8.05 (d, 1H), 7.79 (d, 1H), 7.54-7.43 (m, 3H), 7.37 (m, 2H), 7.30 (s, 1H), 6.95 (d, 1H), 4.96 (s, 2H), 3.93 (m, 2H), 3.90 (m, 4H), 3.83 (s, 2H), 3.47 (m, 4H), 3.41 (m, 4H), 3.18-3.08 (m, 7H), 3.03 (t, 2H), 2.12 (s, 3H), 1.46 (s, 2H), 1.28 (q, 4H), 1.15 (t, 4H), 1.05 (q, 2H), 0.89 (s, 6H)。MS (ESI) m/e 940 (M+H) +。 1.83 合成 6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-3-{1-[(3-{2-[({3-[(1,3- 二羥基丙 -2- 基 ) 胺基 ] 丙基 } 磺醯基 ) 胺基 ] 乙氧基 }-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 } 吡啶 -2- 甲酸 (W2.83) 1.83.1   6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-3-(1-((3-(2-(3-((1,3- 二羥基丙 -2- 基 ) 胺基 ) 丙基磺醯胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶甲酸第三丁酯向實例1.2.7 (31 mg)及N,N-二異丙基乙胺(60 μL)於二氯甲烷(1 mL)中之冷卻(冰浴)溶液中添加3-氯丙烷-1-磺醯氯(5 μL)。在室溫下攪拌混合物2小時。濃縮反應物，將其溶解於N,N-二甲基甲醯胺(1 mL)中，轉移至2 mL微波管中並添加2-胺基丙烷-1,3-二醇(70 mg)。在微波條件(Biotage Initiator)下，在130℃下加熱混合物90分鐘。濃縮反應混合物，且殘餘物使用Gilson系統，藉由逆相HPLC，用20-100%乙腈/含0.1% v/v三氟乙酸之水溶離來純化。合併所需溶離份並冷凍乾燥，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 997.2 (M+H) +。 1.83.2   6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-3-{1-[(3-{2-[({3-[(1,3- 二羥基丙 -2- 基 ) 胺基 ] 丙基 } 磺醯基 ) 胺基 ] 乙氧基 }-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 } 吡啶 -2- 甲酸實例1.83.2係藉由在實例1.2.9中用實例1.83.1替代實例1.2.8製備。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 12.84 (s, 1H), 8.40 (s, 2H), 8.05-7.98 (m, 1H), 7.77 (d, 1H), 7.60 (d, 1H), 7.51-7.39 (m, 3H), 7.38-7.30 (m, 2H), 7.27 (s, 1H), 7.13 (t, 1H), 6.93 (d, 1H), 4.94 (s, 2H), 3.61 (qd, 4H), 3.36 (t, 2H), 3.16-2.93 (m, 10H), 2.08 (s, 3H), 2.00 (p, 2H), 1.38 (s, 2H), 1.25 (q, 4H), 1.15-0.92 (m, 6H), 0.84 (s, 6H)。MS (ESI) m/e 941.2 (M+H) +。 1.84 合成 6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-3-{1-[(3-{2-[(3-{[1,3- 二羥基 -2-( 羥基甲基 ) 丙 -2- 基 ] 胺基 }-3- 側氧基丙基 ) 胺基 ] 乙氧基 }-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 } 吡啶 -2- 甲酸 (W2.84)向3-(1-((3-(2-胺基乙氧基)-5,7-二甲基金剛烷-1-基)甲基)-5-甲基-1H-吡唑-4-基)-6-(8-(苯并[d]噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)吡啶甲酸第三丁酯(55 mg)於N,N-二甲基甲醯胺(6 mL)中之溶液中添加N-(1,3-二羥基-2-(羥基甲基)丙-2-基)丙烯醯胺(73.4 mg)、 N, N-二異丙基乙胺(0.2 mL)及H 2O (0.2 mL)。在室溫下攪拌混合物4天。LC/MS顯示預期產物為主要峰。反應混合物用乙酸乙酯(500 mL)稀釋，用水及鹽水洗滌，並經無水硫酸鈉乾燥。過濾並蒸發溶劑，得到殘餘物，將其溶解於二氯甲烷及三氟乙酸(10 mL，1:1)中並攪拌隔夜。濃縮混合物，且將殘餘物溶解於N,N-二甲基甲醯胺(8 mL)中，並在Gilson系統(C18管柱)上藉由逆相HPLC，用20-80%乙腈/含0.1%三氟乙酸之水溶離來純化，得到標題化合物。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 12.84 (s, 1H), 8.45 (s, 2H), 8.01 (d, 4H), 7.78 (d, 1H), 7.60 (d, 1H), 7.53-7.39 (m, 3H), 7.39-7.30 (m, 2H), 7.27 (s, 1H), 6.94 (d, 1H), 4.94 (s, 2H), 4.14 (s, 2H), 3.87 (t, 2H), 3.81 (s, 2H), 3.52 (d, 4H), 3.19 (s, 3H), 3.13-2.97 (m, 5H), 2.75 (t, 2H), 2.08 (s, 3H), 1.42 (s, 2H), 1.29 (q, 4H), 1.12 (s, 4H), 1.09-0.99 (m, 2H), 0.85 (s, 7H)。MS (ESI) m/e 921.2 (M+H) +。 1.85 合成 6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-3-(1-{[3-(2-{[(3S)-3,4- 二羥基丁基 ] 胺基 } 乙氧基 )-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ] 甲基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶 -2- 甲酸 (W2.85)向實例1.2.7 (213 mg)於二氯甲烷(2 mL)中之溶液中添加(S)-2-(2,2-二甲基-1,3-二氧雜環戊烷-4-基)乙醛(42 mg)。在室溫下攪拌30分鐘後，添加三乙醯氧基硼氫化鈉(144 mg)。在室溫下攪拌反應混合物隔夜。添加三氟乙酸(2 mL)並繼續攪拌隔夜。濃縮反應混合物，且殘餘物使用Gilson系統，藉由逆相HPLC，用5-85%乙腈/含0.1% v/v三氟乙酸之水溶離來純化。合併所需溶離份並冷凍乾燥，得到標題化合物。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 12.86 (s, 1H), 8.22 (d, 2H), 8.05-8.01 (m, 1H), 7.79 (d, 1H), 7.61 (d, 1H), 7.53-7.41 (m, 3H), 7.36 (td, 2H), 7.28 (s, 1H), 6.95 (d, 1H), 4.95 (s, 2H), 3.88 (t, 2H), 3.82 (s, 2H), 3.26-2.94 (m, 7H), 2.10 (s, 3H), 1.84-1.75 (m, 1H), 1.52-1.63 (m, 1H), 1.45-1.23 (m, 6H), 1.19-0.96 (m, 7H), 0.86 (s, 6H)。MS (ESI) m/e 834.3 (M+H) +。 1.86 合成 4-({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ] 胺基 } 甲基 ) 苯基 β -D- 葡萄哌喃糖苷醛酸 (W2.86)向3-(1-((3-(2-胺基乙氧基)-5,7-二甲基金剛烷-1-基)甲基)-5-甲基-1H-吡唑-4-基)-6-(8-(苯并[d]噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)吡啶甲酸(36 mg)於四氫呋喃(2 mL)及乙酸(0.2 mL)中之溶液中添加三乙酸(2S,3R,4S,5S,6S)-2-(4-甲醯基苯氧基)-6-(甲氧基羰基)四氫-2H-哌喃-3,4,5-三基酯(21 mg)，隨後添加MgSO 4(60 mg)。在室溫下攪拌混合物1小時，隨後添加MP-氰基硼氫化物(Biotage，53 mg，2.49 mmol/g)。接著在室溫下攪拌混合物3小時。過濾混合物，並將LiOH H 2O (20 mg)添加至濾液中。在室溫下攪拌混合物2小時且接著用三氟乙酸酸化。溶液在Gilson系統(C18管柱)上藉由逆相HPLC，用20-80%乙腈/含0.1%三氟乙酸之水溶離來純化，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 1028.3 (M+H) +。 1.87 合成 3-{[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 ) 萘 -2- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ] 胺基 } 丙基 β -D- 葡萄哌喃糖苷醛酸 (W2.87) 1.87.1 三乙酸 (2R,3R,5S,6S)-2-(3- 羥基丙氧基 )-6-( 甲氧基羰基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -3,4,5- 三基酯向三乙酸(2R,3R,5S,6S)-2-溴-6-(甲氧基羰基)四氫-2H-哌喃-3,4,5-三基酯(3.98 g)於甲苯(60 mL)中之經攪拌溶液中添加丙烷-1,3-二醇(15.22 g)。在75℃下攪拌混合物，且經3小時的時間分三份添加Ag 2CO 3(5.52 g)。在室溫下攪拌混合物隔夜，之後過濾懸浮液。濃縮濾液，且殘餘物藉由矽膠層析法，用50%乙酸乙酯/庚烷溶離來純化，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 409.9 (M+NH 4) +。 1.87.2 三乙酸 (2S,3S,5R,6R)-2-( 甲氧基羰基 )-6-(3- 側氧基丙氧基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -3,4,5- 三基酯在-78℃下，向二甲亞碸(0.5 mL)於二氯甲烷(10 mL)中之溶液中添加草醯氯(0.2 mL)。在-78℃下攪拌混合物20分鐘，並經由注射器添加實例1.87.1 (393 mg)於二氯甲烷(10 mL)中之溶液。20分鐘後，添加三乙胺(1 mL)。攪拌混合物30分鐘，並使溫度升溫至室溫。反應混合物用乙酸乙酯(300 mL)稀釋，用水及鹽水洗滌，並經無水硫酸鈉乾燥。過濾並蒸發溶劑，得到標題化合物，不經進一步純化即使用。MS (DCI) m/e 408.1 (M+NH 4) +。 1.87.33-{[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)萘-2-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基]胺基}丙基β-D-葡萄哌喃糖苷醛酸 向實例1.68.6 (171 mg)於二氯甲烷(10 mL)中之溶液中添加實例1.87.2 (90 mg)及NaBH(OAc) 3(147 mg)。在室溫下攪拌混合物隔夜。反應混合物用乙酸乙酯(200 mL)稀釋，用2% HCl水溶液、水及鹽水洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。將殘餘物溶解於四氫呋喃(6 mL)、甲醇(3 mL)及水(3 mL)中並添加LiOH H 2O (100 mg)。在室溫下攪拌混合物2小時，用三氟乙酸酸化並減壓濃縮。將殘餘物溶解於二甲亞碸/甲醇(1:1，12 mL)中，並在Gilson系統(C18管柱)上藉由逆相HPLC，用20-80%乙腈/含0.1%三氟乙酸之水溶離來純化，得到標題化合物。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 13.07 (s, 2H), 8.99 (s, 1H), 8.34 (dd, 1H), 8.29-8.11 (m, 5H), 8.06-8.02 (m, 1H), 7.99 (d, 1H), 7.90 (d, 1H), 7.78 (d, 1H), 7.68 (dd, 1H), 7.55-7.40 (m, 2H), 7.34 (td, 1H), 4.23 (d, 1H), 3.87 (s, 2H), 3.76 (dt, 1H), 3.60 (d, 1H), 3.53 (dt, 3H), 3.29 (t, 1H), 3.15 (t, 1H), 3.06-2.91 (m, 6H), 2.20 (s, 3H), 1.83 (p, 2H), 1.44 (s, 2H), 1.30 (q, 4H), 1.14 (s, 4H), 1.03 (q, 2H), 0.85 (s, 7H)。MS (ESI) m/e 975.2(M+H) +。 1.88 合成 6-[4-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-2- 氧離子基異喹啉 -6- 基 ]-3-[1-({3,5- 二甲基 -7-[2-( 甲基胺基 ) 乙氧基 ] 三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ] 吡啶 -2- 甲酸 (W2.88) 1.88.1   6-(6-( 第三丁氧基羰基 )-5-(1-((3-(2-(( 第三丁氧基羰基 )( 甲基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶 -2- 基 ) 異喹啉 -4- 甲酸甲酯向實例1.78.1 (0.73 g)於1,4-二噁烷(20 mL)及水(10 mL)中之溶液中添加3-(1-((3-(2-((第三丁氧基羰基)(甲基)胺基)乙氧基)-5,7-二甲基金剛烷-1-基)甲基)-5-甲基-1H-吡唑-4-基)-6-氯吡啶甲酸第三丁酯(1.5 g)、二氯化雙(三苯基膦)鈀(II) (82 mg)及CsF (1.06 g)，並在回流下攪拌反應隔夜。混合物用乙酸乙酯(200 mL)稀釋，用水及鹽水洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。殘餘物藉由矽膠層析法，用20%乙酸乙酯/庚烷(1 L)溶離來純化，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 794.8 (M+H) +。 1.88.2   6-(6-( 第三丁氧基羰基 )-5-(1-((3-(2-(( 第三丁氧基羰基 )( 甲基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶 -2- 基 ) 異喹啉 -4- 甲酸向實例1.88.1 (300 mg)於四氫呋喃(6 mL)、甲醇(3 mL)及水(3 mL)中之溶液中添加LiOH H 2O (100 mg)。在室溫下攪拌混合物2小時。混合物用2N HCl水溶液酸化，用乙酸乙酯(300 mL)稀釋，用水及鹽水洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮，得到標題化合物，不經進一步純化即使用。MS (ESI) m/e 781.2 (M+H) +。 1.88.3   6-(4-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 ) 異喹啉 -6- 基 )-3-(1-((3-(2-(( 第三丁氧基羰基 )( 甲基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶甲酸第三丁酯向實例1.88.2 (350 mg)於二氯甲烷(10 mL)中之溶液中添加苯并[d]噻唑-2-胺(67.5 mg)、1-乙基-3-(3-二甲基胺基丙基)碳化二亞胺(129 mg)及4-二甲基胺基吡啶(82 mg)。在室溫下攪拌混合物隔夜。混合物用乙酸乙酯(300 mL)稀釋，用水及鹽水洗滌，並經無水硫酸鈉乾燥。過濾並蒸發溶劑，得到殘餘物，藉由矽膠層析法，用5%甲醇/二氯甲烷溶離來純化，得到標題化合物。MS (APCI) m/e 912.3 (M+H) +。 1.88.4   4-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-6-(6- 羧基 -5-(1-((3,5- 二甲基 -7-(2-( 甲基胺基 ) 乙氧基 ) 金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶 -2- 基 ) 異喹啉 2- 氧化物向實例1.88.3 (100 mg)於二氯甲烷(6 mL)中之溶液中添加間氯過氧苯甲酸(19 mg)。在室溫下攪拌混合物4小時。混合物用乙酸乙酯(200 mL)稀釋，用飽和NaHCO 3水溶液、水及鹽水洗滌，並經無水硫酸鈉乾燥。過濾並蒸發溶劑，得到殘餘物，將其溶解於二氯甲烷/三氟乙酸(10 mL，1:1)中並攪拌在室溫下隔夜。蒸發溶劑，且殘餘物在Gilson系統(C18管柱)上藉由逆相HPLC，用20-80%乙腈/含0.1%三氟乙酸之水溶離來純化，得到標題化合物。 1H NMR (501 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 13.32 (s, 2H), 9.21 (d, 1H), 8.71 (d, 1H), 8.49 (dd, 1H), 8.36-8.19 (m, 4H), 8.12 (dd, 1H), 8.07 (d, 1H), 7.96 (dd, 1H), 7.82 (d, 1H), 7.56-7.46 (m, 3H), 7.42-7.35 (m, 1H), 3.90 (d, 3H), 3.56 (td, 3H), 3.02 (p, 3H), 2.55 (t, 4H), 2.29-2.19 (m, 4H), 1.45 (d, 3H), 1.37-1.26 (m, 5H), 1.16 (d, 6H), 1.10-1.01 (m, 3H), 0.88 (d, 8H)。MS (ESI) m/e 772.1 (M+H) +。 1.89 合成 6-{8-[(1,3- 苯并噻唑 -2- 基 ) 胺甲醯基 ]-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 }-3-{1-[(3,5- 二甲基 -7-{2-[(2- 磺基乙基 ) 胺基 ] 乙醯胺基 } 三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 } 吡啶 -2- 甲酸 (W2.89) 1.89.1   1-((3- 溴 -5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑向實例1.1.3 (500 mg)於四氫呋喃(30 mL)中之經冷卻(-30℃)溶液中添加正丁基鋰(9.67 mL)，且在-30℃下攪拌混合物2小時。在-30℃下逐滴添加碘甲烷(1.934 mL)。添加完成後，在-30℃下再攪拌混合物2小時。緩慢添加於冰水中之1N HCl水溶液，由此使溫度維持在0℃以下，直至pH值達到6。在室溫下攪拌混合物10分鐘，並用冰-水(10 mL)及乙酸乙酯(20 mL)稀釋。分離各層，且水層用乙酸乙酯萃取兩次。合併之有機相用鹽水洗滌，經MgSO 4乾燥，過濾並濃縮。殘餘物藉由急驟矽膠層析法，用15/1至10/1石油/乙酸乙酯溶離來純化，得到標題化合物。MS (LC-MS) m/e 337, 339 (M+H) +。 1.89.2   1-(3,5- 二甲基 -7-((5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ) 金剛烷 -1- 基 ) 脲將實例1.89.1 (2.7 g)與尿素 (4.81 g)混合並在140℃下攪拌16小時。將混合物冷卻至室溫並懸浮於甲醇(200 mL × 2)中。藉由過濾移除不溶性物質。濃縮濾液，得到標題化合物。MS (LC-MS) m/e 317.3 (M+H) +。 1.89.3   3,5- 二甲基 -7-((5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ) 金剛烷 -1- 胺向實例1.40.2 (2.53 g)於20%乙醇之水溶液(20 mL)中之溶液中添加氫氧化鈉(12.79 g)。在120℃下攪拌混合物16小時並在140℃下再攪拌16小時。添加6N HCl水溶液直至pH 6。濃縮混合物，且殘餘物懸浮於甲醇(200 mL)中。濾出不溶性物質。濃縮濾液，得到呈HCl鹽形式之標題化合物。MS (LC-MS) m/e 273.9 (M+H) +。 1.89.4   (2-((3,5- 二甲基 -7-((5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ) 金剛烷 -1- 基 ) 胺基 )-2- 側氧基乙基 ) 胺基甲酸第三丁酯向實例1.89.3 (2.16g)於N,N-二甲基甲醯胺(100 mL)中之溶液中添加三乙胺(3.30 mL)、2-((第三丁氧基羰基)胺基)乙酸(1.799 g)及六氟磷酸1-[雙(二甲基胺基)亞甲基]-1H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡錠3-氧化物(3.90 g)。在室溫下攪拌混合物2小時。添加水(40 mL)，且用乙酸乙酯(70 mL × 2)萃取混合物。合併之有機相用鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。殘餘物藉由矽膠層析法，用3/1至2/1石油/乙酸乙酯溶離來純化，得到標題化合物。MS (LC-MS) m/e 430.8 (M+H) +。 1.89.5   (2-((3-((4- 碘 -5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 胺基 )-2- 側氧基乙基 ) 胺基甲酸第三丁酯向實例1.89.4 (1.7 g)於N,N-二甲基甲醯胺(20 mL)中之環境溫度溶液中分數份添加NIS (N-碘代琥珀醯亞胺，1.066 g)，且在室溫下攪拌混合物16小時。添加冰-水(10 mL)及飽和Na 2S 2O 3水溶液(10 mL)。用乙酸乙酯(30 mL × 2)萃取混合物。合併之有機相用鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。殘餘物藉由矽膠層析法，用3/1至2/1石油/乙酸乙酯溶離來純化，得到標題化合物。MS (LC-MS) m/e 556.6 (M+H) +。 1.89.6   2-(5- 溴 -6-( 第三丁氧基羰基 ) 吡啶 -2- 基 )-1,2,3,4- 四氫異喹啉 -8- 甲酸甲酯向1,2,3,4-四氫異喹啉-8-甲酸甲酯鹽酸鹽(12.37 g)及實例1.1.10 (15 g)於二甲亞碸(100 mL)中之溶液中添加N,N-二異丙基乙胺(12 mL)，且在50℃下攪拌混合物24小時。接著用乙酸乙酯(500 mL)稀釋混合物並用水及鹽水洗滌。有機層經硫酸鈉乾燥，過濾並減壓濃縮。殘餘物藉由矽膠層析法，用20%乙酸乙酯/己烷溶離來純化，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 448.4 (M+H) +。 1.89.7   2-(6-( 第三丁氧基羰基 )-5-(4,4,5,5- 四甲基 -1,3,2- 二氧硼㖦 -2- 基 ) 吡啶 -2- 基 )-1,2,3,4- 四氫異喹啉 -8- 甲酸甲酯向實例1.89.6 (2.25 g)及[1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯鈀(II) (205 mg)於乙腈(30 mL)中之溶液中添加三乙胺(3 mL)及頻哪醇硼烷(2 mL)，且在回流下攪拌混合物3小時。混合物用乙酸乙酯(200 mL)稀釋並用水及鹽水洗滌。有機層經硫酸鈉乾燥，過濾並減壓濃縮。殘餘物藉由急驟層析法，用20%乙酸乙酯/己烷溶離來純化，得到標題化合物。 1.89.8   2-(6-( 第三丁氧基羰基 )-5-(1-((3-(2-(( 第三丁氧基羰基 ) 胺基 ) 乙醯胺基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶 -2- 基 )-1,2,3,4- 四氫異喹啉 -8- 甲酸甲酯標題化合物係使用實例1.2.2中之程序，用實例1.89.5替代實例1.1.6製備。MS (ESI) m/e 797.4 (M+H) +。 1.89.9   2-(6-( 第三丁氧基羰基 )-5-(1-((3-(2-(( 第三丁氧基羰基 ) 胺基 ) 乙醯胺基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶 -2- 基 )-1,2,3,4- 四氫異喹啉 -8- 甲酸標題化合物係使用實例1.2.5中之程序，用實例1.89.8替代實例1.2.4製備。MS (ESI) m/e 783.4 (M+H) +。 1.89.10 6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-3-(1-((3-(2-(( 第三丁氧基羰基 ) 胺基 ) 乙醯胺基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶甲酸第三丁酯標題化合物係使用實例1.2.6中之程序，用實例1.89.9替代實例1.2.5製備。MS (ESI) m/e 915.3 (M+H) +。 1.89.11  3-(1-{[3-(2- 胺基乙醯胺基 )-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ] 甲基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-6-{8-[(1,3- 苯并噻唑 -2- 基 ) 胺甲醯基 ]-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 } 吡啶 -2- 甲酸標題化合物係使用實例1.2.9中之程序，用實例1.89.10替代實例1.2.8製備。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ 12.82 (s, 1H), 8.00 (dd, 1H), 7.90-7.79 (m, 4H), 7.76 (d, 1H), 7.59 (dd, 1H), 7.49-7.38 (m, 3H), 7.37-7.29 (m, 2H), 7.25 (s, 1H), 6.92 (d, 1H), 4.92 (s, 2H), 3.85 (t, 2H), 3.77 (s, 2H), 3.40 (q, 2H), 2.98 (t, 2H), 2.07 (s, 3H), 1.63 (s, 2H), 1.57-1.38 (m, 4H), 1.15-0.93 (m, 6H), 0.80 (s, 6H)。MS (ESI) m/e 759.2 (M+H) +。 1.89.12 6-{8-[(1,3- 苯并噻唑 -2- 基 ) 胺甲醯基 ]-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 }-3-{1-[(3,5- 二甲基 -7-{2-[(2- 磺基乙基 ) 胺基 ] 乙醯胺基 } 三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 } 吡啶 -2- 甲酸向實例1.89.11 (102 mg)於N,N-二甲基甲醯胺(6 mL)中之溶液中添加乙烯磺酸4-((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)-2,2-二甲基丁酯(60 mg)，且在室溫下攪拌混合物過週末。混合物用乙酸乙酯(300 mL)稀釋，用水及鹽水洗滌，並經無水硫酸鈉乾燥。過濾並蒸發溶劑，得到殘餘物，將其溶解於二氯甲烷/三氟乙酸(10 mL，1:1)中並攪拌在室溫下隔夜。蒸發溶劑，且殘餘物在Gilson系統(C18管柱)上，藉由逆相HPLC，用20-80%乙腈/含0.1%三氟乙酸之水溶離來純化，得到標題化合物。 1H NMR (501 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ 12.83 (s, 1H), 8.57 (s, 2H), 8.02 (d, 1H), 7.95 (s, 1H), 7.77 (d, 1H), 7.60 (d, 1H), 7.52-7.37 (m, 3H), 7.39-7.29 (m, 2H), 7.26 (s, 1H), 6.94 (d, 1H), 4.94 (s, 2H), 3.87 (t, 2H), 3.79 (s, 2H), 3.16 (q, 2H), 2.99 (t, 2H), 2.77 (t, 2H), 2.08 (s, 3H), 1.64 (s, 2H), 1.55 (d, 2H), 1.45 (d, 2H), 1.21-0.95 (m, 6H), 0.82 (s, 6H)。MS (ESI) m/e 867.2 (M+H) +。 1.90 合成 6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-3-(1-{[3,5- 二甲基 -7-({2-[(2- 磺基乙基 ) 胺基 ] 乙基 } 硫基 ) 三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ] 甲基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶 -2- 甲酸 (W2.90) 1.90.1   3-((1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 硫醇在110℃下，將實例1.1.3 (2.8g)及硫脲(15.82 g)於33% (w/w) HBr之乙酸溶液(50 mL)中之混合物攪拌16小時並減壓濃縮，得到殘餘物。將殘餘物溶解於20%乙醇之水溶液(v/v：200 mL)，並添加氫氧化鈉(19.06 g)。在室溫下攪拌所得溶液16小時並濃縮。將殘餘物溶解於水(60 mL)中，並用6 N HCl水溶液酸化至pH 5-pH 6。用乙酸乙酯(200 mL × 2)萃取混合物。合併之有機層用鹽水洗滌，經MgSO 4乾燥，過濾並濃縮，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 319.1 (M+H) +。 1.90.2   2-((-3-((1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 硫基 ) 乙醇向實例1.90.1 (3.3g)於乙醇(120 mL)中之溶液中添加乙醇鈉(2.437 g)。攪拌混合物10分鐘，並逐滴添加2-氯乙醇(1.80 mL)。在室溫下攪拌混合物6小時並用1 N HCl水溶液中和至pH 7。濃縮混合物，且用乙酸乙酯(200 mL × 2)萃取殘餘物。合併之有機層用鹽水洗滌，經MgSO 4乾燥，過濾並濃縮。殘餘物在矽膠上藉由管柱層析法，用6/1至2/1石油醚/乙酸乙酯溶離來純化，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 321.2 (M+H) +。 1.90.3   2-((-3,5- 二甲基 -7-((5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ) 金剛烷 -1- 基 ) 硫基 ) 乙醇在氮氣下，在-20℃下向實例1.90.2 (2.3 g)於四氫呋喃(60 mL)中之溶液中逐滴添加正丁基鋰(14.35 mL，2M之己烷溶液)。在此溫度下攪拌混合物2小時。在-20℃下將碘甲烷(4.49 mL)添加至所得混合物中，且在-20℃下攪拌混合物2小時。在-20℃下，藉由逐滴添加飽和NH 4Cl水溶液淬滅反應。攪拌所得混合物10分鐘並用1 N HCl水溶液酸化至pH 5。用乙酸乙酯萃取混合物兩次。合併之有機層用鹽水洗滌，經MgSO 4乾燥，過濾並濃縮，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 335.3 (M+H) +。 1.90.4   2-((-3-((4- 碘 -5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 硫基 ) 乙醇向實例1.90.3 (3.65 g)於N,N-二甲基甲醯胺(90 mL)中之溶液中添加N-碘代琥珀醯亞胺(3.68 g)。在室溫下攪拌混合物16小時。藉由添加冰-水(8 mL)及飽和NaS 2O 3水溶液(8 mL)淬滅反應。再攪拌混合物10分鐘並用乙酸乙酯(30 mL × 2)萃取。合併之有機層用鹽水洗滌，經MgSO 4乾燥，過濾並減壓濃縮。殘餘物藉由矽膠層析法，用石油醚/乙酸乙酯(6/1至3/1)溶離來純化，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 461.2 (M+H) +。 1.90.5   [2-({3-[(4- 碘 -5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 硫基 ) 乙基 ]-2- 醯亞胺基二碳酸二第三丁酯向實例1.90.4 (3 g)於二氯甲烷(100 mL)中之冷溶液(0℃浴)中添加三乙胺(1.181 mL)及甲磺醯氯(0.559 mL)。在室溫下攪拌混合物4小時，且藉由添加冰-水(30 mL)淬滅反應。再攪拌混合物10分鐘並用二氯甲烷(50 mL × 2)萃取。合併之有機層用鹽水洗滌，經MgSO 4乾燥，過濾並減壓濃縮。將殘餘物溶解於乙腈(100 mL)中並添加NH(Boc) 2(1.695 g)及Cs 2CO 3(4.24 g)。在85℃下攪拌混合物16小時，且藉由添加水(20 mL)淬滅反應。攪拌混合物10分鐘並用乙酸乙酯(40 mL × 2)萃取。合併之有機層用鹽水洗滌，經MgSO 4乾燥，過濾並濃縮。殘餘物藉由矽膠層析法，用10/1至6/1石油醚/乙酸乙酯溶離來純化，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 660.1 (M+H) +。 1.90.6   2-[5-(1-{[3-({2-[ 雙 ( 第三丁氧基羰基 ) 胺基 ] 乙基 } 硫基 )-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ] 甲基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-6-( 第三丁氧基羰基 ) 吡啶 -2- 基 ]-1,2,3,4- 四氫異喹啉 -8- 甲酸甲酯標題化合物係使用實例1.2.2中之程序，用實例1.90.5替代實例1.1.6製備。MS (ESI) m/e 900.2 (M+H) +。 190.7A  2-(6-( 第三丁氧基羰基 )-5-(1-((3-((2-(( 第三丁氧基羰基 ) 胺基 ) 乙基 ) 硫基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶 -2- 基 )-1,2,3,4- 四氫異喹啉 -8- 甲酸標題化合物係如實例1.2.5中所描述，用實例1.90.6替代實例1.2.4製備。MS (ESI) m/e 786.2 (M+H) +。 190.7B  6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-3-(1-((3-((2-(( 第三丁氧基羰基 ) 胺基 ) 乙基 ) 硫基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶甲酸第三丁酯標題化合物係如實例1.2.6中所描述，用實例1.90.7A替代實例1.2.5製備。MS (ESI) m/e 918.8 (M+H) +。 1.90.8   3-(1-((3-((2- 胺基乙基 ) 硫基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ) 吡啶甲酸第三丁酯向實例1.90.7B (510 mg)於二氯甲烷(5 mL)中之溶液中添加三氟乙酸(5 mL)並在室溫下攪拌反應30分鐘。藉由添加飽和碳酸氫鈉水溶液淬滅反應並用二氯甲烷萃取三次。合併之有機物用無水硫酸鈉乾燥，過濾並減壓濃縮。殘餘物在Gilson系統(C18管柱)上藉由逆相HPLC，用20-80%乙腈/含0.1%三氟乙酸之水溶離來純化，得到標題產物。MS (ESI) m/e 818.1 (M+H) +。 1.90.9   3-(1-((3-((2- 胺基乙基 ) 硫基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ) 吡啶甲酸實例1.90.9係在實例1.90.8製備期間分離。MS (ESI) 762.2 (M+H) +。 1.90.10 6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-3-(1-((3-((2-((2-((4-(( 第三丁基二苯基矽烷基 ) 氧基 )-2,2- 二甲基丁氧基 ) 磺醯基 ) 乙基 ) 胺基 ) 乙基 ) 硫基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶甲酸第三丁酯將實例1.90.8 (235 mg)及乙烯磺酸4-((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)-2,2-二甲基丁酯(150 mg)溶解於二氯甲烷(1 mL)中，添加N,N-二異丙基乙胺(140 μL)，且在室溫下攪拌混合物六天。反應物直接藉由矽膠層析法，用0.5-3.0%甲醇/二氯甲烷梯度溶離來純化，得到標題化合物。 1.90.11  6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-3-(1-((3,5- 二甲基 -7-((2-((2- 磺基乙基 ) 胺基 ) 乙基 ) 硫基 ) 金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶甲酸標題化合物係藉由在實例1.2.9中用實例1.90.10替代實例1.2.8製備。 1H NMR (500 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 8.39 (br s, 2H), 8.03 (d, 1H), 7.79 (d, 1H), 7.62 (d, 1H), 7.51 (d, 1H),7.47 (ddd, 1H), 7.43 (d, 1H), 7.37 (d, 1H), 7.35 (ddd, 1H), 7.30 (s, 1H), 6.96 (d, 1H), 4.96 (s, 2H), 3.89 (t, 2H), 3.81 (s, 2H), 3.22 (m, 2H), 3.06 (br m, 2H), 3.01 (t, 2H), 2.79 (t, 2H), 2.74 (m, 2H), 2.10 (s, 3H), 1.51 (s, 2H), 1.37 (m, 4H), 1.15 (m, 4H), 1.05 (m, 2H), 0.83 (s, 6H)。MS (ESI) m/e 870.1 (M+H) +。 1.91 合成 6-{8-[(1,3- 苯并噻唑 -2- 基 ) 胺甲醯基 ]-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 }-3-{1-[(3,5- 二甲基 -7-{3-[(2- 磺基乙基 ) 胺基 ] 丙基 } 三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 } 吡啶 -2- 甲酸 (W2.91) 1.91.1   1-((3- 烯丙基 -5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-1H- 吡唑向實例1.1.3 (0.825 g，2.55 mmol)於甲苯(5 mL)中之溶液中添加N,N'-偶氮異丁腈(AIBN，0.419 g，2.55 mmol)及烯丙基三丁基錫烷(2.039 mL，6.38 mmol)。用N 2流淨化混合物15分鐘，在80℃下加熱8小時並濃縮。殘餘物藉由急驟層析法，用5%乙酸乙酯/石油醚溶離來純化，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 285.2 (M+H) +。 1.91.2   1-((3- 烯丙基 -5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑在N 2下，在-78℃下向實例1.91.1 (200 mg，0.703 mmol)於四氫呋喃(5 ml)中之溶液中添加正丁基鋰(2.81 mL，7.03 mmol)。攪拌混合物2小時，同時溫度增加至-20℃且接著在-20℃下攪拌1小時。添加碘甲烷(0.659 mL，10.55 mmol)並在-20℃下攪拌所得混合物0.5小時。用飽和NH 4Cl淬滅反應並用乙酸乙酯萃取兩次。合併之有機層用鹽水洗滌並濃縮，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 299.2 (M+H) +。 1.91.3   3-(3,5- 二甲基 -7-((5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ) 金剛烷 -1- 基 ) 丙 -1- 醇在氮氣氛圍下，將實例1.91.2 (2.175 g，7.29 mmol)於無水 四氫呋喃(42.5 mL)中之溶液冷卻至0℃。逐滴添加BH 3·THF (15.30 mL，15.30 mmol)。在室溫下攪拌反應混合物2小時並冷卻至0℃。向反應混合物中逐滴添加10N NaOH水溶液(5.03 mL，50.3 mmol)，隨後添加30% H 2O 2(16.52 mL，146 mmol)水溶液。使所得混合物升溫至室溫並攪拌90分鐘。用10%鹽酸(35 mL)淬滅反應。分離有機層且用乙酸乙酯(2 × 60 mL)萃取水層。合併之有機層用鹽水(3 × 60 mL)洗滌並在冰浴中冷卻。小心地添加飽和亞硫酸鈉水溶液(15 mL)並攪拌混合物數分鐘。有機層經硫酸鈉乾燥，過濾並在真空中濃縮。殘餘物藉由急驟層析法，用石油醚/乙酸乙酯(3:1至1:1)溶離來純化，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 317.3 (M+H) +。 1.91.4   3-(3-((4- 碘 -5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 丙 -1- 醇在室溫下，將實例1.91.3 (1.19 g，3.76 mmol)及1-碘吡咯啶-2, 5-二酮(1.015 g，4.51 mmol)於 N,N-二甲基甲醯胺(7.5 mL)中之混合物攪拌16小時。用飽和Na 2SO 3淬滅反應。混合物用乙酸乙酯稀釋並用飽和Na 2SO 3、飽和Na 2CO 3、水及鹽水洗滌。有機層經無水Na 2SO 4乾燥，過濾並濃縮。殘餘物藉由急驟層析法，用石油醚/乙酸乙酯(3:1至1:1) 溶離來純化，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 443.1 (M+H) +。 1.91.5 甲烷磺酸 3-(3-((4- 碘 -5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 丙酯在0℃下，向實例1.91.4 (1.55 g，3.50 mmol)於CH 2Cl 2(20 mL)中之溶液中緩慢添加(CH 3CH 2) 3N (0.693 mL，4.98 mmol)及甲磺醯氯(0.374 mL，4.80 mmol)。在20℃下攪拌混合物3.5小時並用CH 2Cl 2稀釋，用飽和NH 4Cl、NaHCO 3及鹽水洗滌。有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾並濃縮，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 521.1 (M+H) +。 1.91.6   (3-{3-[(4- 碘 -5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 丙基 )-2- 醯亞胺基二碳酸二第三丁酯在20℃下，向實例1.91.5 (1.92 g，3.69 mmol)於CH 3CN (40 ml)中之溶液中添加亞胺基二碳酸二第三丁酯(0.962 g，4.43 mmol)及Cs 2CO 3(2.404 g，7.38 mmol)。在80℃下攪拌混合物16小時並用乙酸乙酯稀釋，且用水及鹽水洗滌。有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾並濃縮。殘餘物藉由急驟層析法，用石油醚/乙酸乙酯(10:1)溶離來純化，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 642.3 (M+H) +。 1.91.7   2-[5-{1-[(3-{3-[ 雙 ( 第三丁氧基羰基 ) 胺基 ] 丙基 }-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 }-6-( 第三丁氧基羰基 ) 吡啶 -2- 基 ]-1,2,3,4- 四氫異喹啉 -8- 甲酸甲酯標題化合物係使用實例1.2.2中之程序，用實例1.91.6替代實例1.1.6製備。MS (ESI) m/e 882.2 (M+H) +。 1.91.8   2-[6-( 第三丁氧基羰基 )-5-{1-[(3-{3-[( 第三丁氧基羰基 ) 胺基 ] 丙基 }-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 } 吡啶 -2- 基 ]-1,2,3,4- 四氫異喹啉 -8- 甲酸標題化合物係使用實例1.2.5中之程序，用實例1.91.7替代實例1.2.4製備。MS (ESI) m/e 768.4 (M+H) +。 1.91.9   6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-3-(1-((3-(3-(( 第三丁氧基羰基 ) 胺基 ) 丙基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶甲酸第三丁酯標題化合物係使用實例1.2.6中之程序，用實例1.91.8替代實例1.2.5製備。MS (ESI) m/e 901.1 (M+H) +。 1.91.10 3-(1-((3-(3- 胺基丙基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ) 吡啶甲酸第三丁酯向實例1.91.9 (500 mg)於二氯甲烷(5 mL)中之溶液中添加三氟乙酸(5 mL)並在室溫下攪拌反應30分鐘。藉由添加飽和碳酸氫鈉水溶液淬滅反應並用二氯甲烷萃取三次。合併之有機物用無水硫酸鈉乾燥，過濾並減壓濃縮。殘餘物在Gilson系統(C18管柱)上藉由逆相HPLC，用20-80%乙腈/含0.1%三氟乙酸之水溶離來純化，得到標題產物。 1.91.11  3-(1-((3-(3- 胺基丙基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ) 吡啶甲酸向實例1.91.9 (350 mg)於二氯甲烷(5 mL)中之溶液中添加三氟乙酸(5 mL)。攪拌混合物隔夜。濃縮混合物且殘餘物使用Gilson系統，藉由逆相HPLC，用20-80%乙腈/含0.1% v/v三氟乙酸之水溶離來純化，得到標題化合物。 1H NMR (500 MHz, DMSO-d 6) δ ppm 12.86 (s, 1H), 8.03 (d, 1H), 7.79 (d, 1H), 7.62 (d, 4H), 7.47 (dt, 3H), 7.36 (q, 2H), 7.27 (s, 1H), 6.95 (d, 1H), 4.95 (s, 2H), 3.77 (s, 2H), 3.01 (t, 2H), 2.72 (q, 2H), 2.09 (s, 3H), 1.45 (t, 2H), 1.18-1.05 (m, 9H), 1.00 (d, 6H), 0.80 (s, 6H)。MS (ESI) m/e 744.2 ( M+H) +。 1.91.12 6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-3-(1-((3-(3-((2-((4-(( 第三丁基二苯基矽烷基 ) 氧基 )-2,2- 二甲基丁氧基 ) 磺醯基 ) 乙基 ) 胺基 ) 丙基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶甲酸第三丁酯標題化合物係使用實例1.2.8中之程序，用實例1.91.10替代實例1.2.7製備。 1.91.13 6-{8-[(1,3- 苯并噻唑 -2- 基 ) 胺甲醯基 ]-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 }-3-{1-[(3,5- 二甲基 -7-{3-[(2- 磺基乙基 ) 胺基 ] 丙基 } 三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 } 吡啶 -2- 甲酸標題化合物係使用實例1.2.9中之程序，用實例1.91.12替代實例1.2.8製備。 1H NMR (501 MHz, DMSO-d 6) δ 12.85 (s, 1H), 8.02 (dd, 1H), 7.77 (d, 1H), 7.60 (d, 1H), 7.54-7.39 (m, 3H), 7.38-7.31 (m, 2H), 7.26 (s, 1H), 6.94 (d, 1H), 4.94 (s, 2H), 3.87 (t, 2H), 3.15 (p, 2H), 3.00 (t, 2H), 2.86 (dq, 2H), 2.76 (t, 2H), 2.08 (s, 3H), 1.47 (td, 2H), 1.08 (d, 9H), 0.99 (d, 7H), 0.79 (s, 7H)。MS (ESI) m/e 852.2 (M+H) +。 實例 2. 合成例示性合成子本實例提供有關可用於製備ADC之例示性合成子的合成方法。 2.1 合成 N-[6-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 己醯基 ]-L- 纈胺醯基 -N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](2- 磺基乙基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ] 苯基 }-N 5- 胺甲醯基 -L- 鳥胺醯胺 ( 合成子 CZ)在水-冰浴中冷卻實例1.2.9 (100 mg)及碳酸4-((S)-2-((S)-2-(6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯胺基)-3-甲基丁醯胺基)-5-脲基戊醯胺基)苯甲酯(4-硝基苯基)酯(購自Synchem，114 mg)於N,N-二甲基甲醯胺(7 mL)，並添加N,N-二異丙基乙胺(0.15 mL)。在0℃下攪拌混合物30分鐘且接著在室溫下攪拌隔夜。反應物使用Gilson系統，藉由逆相HPLC，用20-60%乙腈/含0.1% v/v三氟乙酸之水溶離來純化，得到標題化合物。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 12.85 (s, 1H), 9.99 (s, 1H), 8.04 (t, 2H), 7.75-7.82 (m, 2H), 7.40-7.63 (m, 6H), 7.32-7.39 (m, 2H), 7.24-7.29 (m, 3H), 6.99 (s, 2H), 6.95 (d, 1H), 6.01 (s, 1H), 4.83-5.08 (m, 4H), 4.29-4.48 (m, 1H), 4.19 (t, 1H), 3.84-3.94 (m, 2H), 3.80 (d, 2H), 3.14-3.29 (m, 2H), 2.87-3.06 (m, 4H), 2.57-2.69 (m, 2H), 2.03-2.24 (m, 5H), 1.89-2.02 (m, 1H), 1.53-1.78 (m, 2H), 1.26-1.53 (m, 8H), 0.89-1.27 (m, 12H), 0.75-0.88 (m, 12H)。MS (ESI) m/e 1452.2 (M+H) +。 2.2 合成 N-[6-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 己醯基 ]-L- 纈胺醯基 -N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](3- 磺基丙基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ] 苯基 }-N 5- 胺甲醯基 -L- 鳥胺醯胺 ( 合成子 DH)標題化合物係如實例2.1中所描述，用實例1.6.2替代實例1.2.9製備。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 12.83 (s, 1H), 9.98 (s, 1H), 8.04 (t, 2H), 7.75-7.81 (m, 2H), 7.54-7.64 (m, 3H), 7.40-7.54 (m, 3H), 7.32-7.39 (m, 2H), 7.24-7.31 (m, 3H), 6.93-7.01 (m, 3H), 4.86-5.03 (m, 4H), 4.32-4.48 (m, 2H), 4.13-4.26 (m, 2H), 3.31-3.45 (m, 4H), 3.24 (d, 4H), 2.88-3.07 (m, 4H), 2.30-2.39 (m, 2H), 2.04-2.24 (m, 5H), 1.86-2.03 (m, 1H), 0.89-1.82 (m, 27H), 0.74-0.88 (m, 13H)。MS (ESI) m/e 1466.3 (M+H) +。 2.3 本段有意留白。 2.4 合成 N-[6-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 己醯基 ]-L- 纈胺醯基 -N-[4-({[{2-[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙氧基 ] 乙基 }(2- 磺基乙基 ) 胺甲醯基 ] 氧基 } 甲基 ) 苯基 ]-N 5- 胺甲醯基 -L- 鳥胺醯胺 ( 合成子 EP)標題化合物係如實例2.1中所描述，用實例1.11.4替代實例1.2.9製備。 1H NMR (500 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 12.85 (s, 1H), 10.00 (s, 1H), 8.01-8.10 (m, 2H), 7.79 (dd, 2H), 7.55-7.65 (m, 3H), 7.41-7.53 (m, 3H), 7.32-7.38 (m, 2H), 7.25-7.30 (m, 3H), 6.97-7.02 (m, 2H), 6.96 (d, 1H), 6.03 (s, 1H), 4.90-5.03 (m, 4H), 4.31-4.46 (m, 1H), 4.20 (s, 1H), 3.88 (t, 2H), 3.82 (s, 2H), 2.97-3.06 (m, 2H), 2.88-2.98 (m, 1H), 2.58-2.68 (m, 2H), 2.05-2.22 (m, 5H), 1.92-2.02 (m, 1H), 0.89-1.75 (m, 23H), 0.77-0.87 (m, 12H)。MS (ESI) m/e 1496.3 (M+H) +。 2.5 合成甲基 6-[4-(3-{[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ]({[4-({N-[6-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 己醯基 ]-L- 纈胺醯基 -N 5- 胺甲醯基 -L- 鳥胺醯基 } 胺基 ) 苯甲基 ] 氧基 } 羰基 ) 胺基 } 丙基 )-1H-1,2,3- 三唑 -1- 基 ]-6- 脫氧 -β-L- 葡萄哌喃糖苷 ( 合成子 EF) 2.5.1 戊 -4- 炔醛在-78℃下，經20分鐘向草醯氯(9.12 mL)溶解於二氯甲烷(200 mL)中之溶液中添加溶解於二氯甲烷(40 mL)中之二甲亞碸(14.8 mL)。再攪拌溶液30分鐘後，經10分鐘添加溶解於二氯甲烷(80 mL)中之4-戊炔醇(8.0 g)。在-78℃下再攪拌反應混合物60分鐘。在-78℃下添加三乙胺(66.2 mL)，且攪拌反應混合物60分鐘且接著使其再經一小時升溫至10℃。添加水(200 mL)，並分離兩層。水層用1% HCl水溶液酸化且接著用二氯甲烷(3× 100 mL)反萃取。合併之有機層用1% HCl水溶液及NaHCO 3水溶液洗滌。水性萃取液用二氯甲烷(2× 100 mL)反萃取，且合併之有機萃取液用鹽水洗滌並經硫酸鈉乾燥。過濾後，藉由旋轉蒸發(30℃水浴)移除溶劑，得到標題化合物。 2.5.2     6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-3-(1-((3,5- 二甲基 -7-(2-( 戊 -4- 炔 -1- 基胺基 ) 乙氧基 ) 金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶甲酸向實例1.2.7 (85 mg)於四氫呋喃(2 mL)中之溶液中添加戊-4-炔醛(8.7 mg)、乙酸(20 mg)及硫酸鈉(300 mg)。攪拌混合物1小時，並將三乙醯氧基硼氫化鈉(45 mg)添加至反應混合物。攪拌混合物隔夜，接著用乙酸乙酯(200 mL)稀釋，用水及鹽水洗滌，且經硫酸鈉乾燥。過濾並蒸發溶劑，得到殘餘物，將其溶解於二甲亞碸/甲醇(1:1，3 mL)中。混合物在Gilson系統上藉由逆相HPLC，用10-85%乙腈/含0.1%三氟乙酸之水溶離來純化，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 812.1 (M+H) +。 2.5.3     6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-3-(1-((3,5- 二甲基 -7-(2-((3-(1-(((2S,3R,4R,5S,6S)-3,4,5- 三羥基 -6- 甲氧基四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 ) 甲基 )-1H-1,2,3- 三唑 -4- 基 ) 丙基 ) 胺基 ) 乙氧基 ) 金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶甲酸向三乙酸(2S,3S,4R,5S,6S)-2-(疊氮基甲基)-6-甲氧基四氫-2H-哌喃-3,4,5-三基酯(8.63 mg)於第三丁醇(2 mL)及水(1 mL)中之溶液中添加實例2.5.2 (20 mg)、硫酸銅(II)五水合物(2.0 mg)及抗壞血酸鈉(5 mg)。在微波條件(Biotage Initiator)下，在100℃下攪拌混合物20分鐘。將氫氧化鋰單水合物(50 mg)添加至混合物中，並將其攪拌隔夜。用三氟乙酸中和混合物且藉由逆相HPLC (Gilson系統)，用10-85%乙腈/含0.1%三氟乙酸之水溶離來純化，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 1032.2 (M+H) +。 2.5.4 甲基 6-[4-(3-{[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ]({[4-({N-[6-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 己醯基 ]-L- 纈胺醯基 -N 5- 胺甲醯基 -L- 鳥胺醯基 } 胺基 ) 苯甲基 ] 氧基 } 羰基 ) 胺基 } 丙基 )-1H-1,2,3- 三唑 -1- 基 ]-6- 脫氧 -β-L- 葡萄哌喃糖苷向碳酸4-((S)-2-((S)-2-(6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯胺基)-3-甲基丁醯胺基)-5-脲基戊醯胺基)苯甲酯4-硝基苯酯(7.16 mg)及實例2.5.3 (10 mg)於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)中之溶液中添加N,N-二異丙基乙胺(0.1 mL)。攪拌混合物隔夜，接著用三氟乙酸酸化且藉由逆相HPLC (Gilson系統)，用10-85%乙腈/含0.1%三氟乙酸之水溶離來純化，得到標題化合物。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 9.65 (s, 1H), 7.97 (d, 1H), 7.76 (d, 1H), 7.64-7.72 (m, 2H), 7.53-7.63 (m, 3H), 7.38-7.51 (m, 4H), 7.30-7.37 (m, 2H), 7.22-7.27 (m, 3H), 6.84-6.98 (m, 3H), 4.97 (d, 4H), 4.65 (dd, 1H), 4.50 (d, 1H), 4.36-4.46 (m, 1H), 4.25-4.32 (m, 1H), 4.10-4.20 (m, 1H), 3.85-3.95 (m, 2H), 3.79 (s, 2H), 3.66-3.73 (m, 2H), 2.99-3.03 (m, 7H), 2.57 (t, 3H), 2.12-2.22 (m, 3H), 2.08 (s, 3H), 1.99-2.05 (m, 2H), 1.70-1.88 (m, 4H), 1.39-1.67 (m, 8H), 1.35 (s, 3H), 0.92-1.28 (m, 14H), 0.80-0.88 (m, 16H)。MS (ESI) m/e 1629.5 (M+H) +。 2.6 合成 N-[6-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 己醯基 ]-L- 纈胺醯基 -N-(4-{[([2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ]{3-[1-(β-D- 葡萄哌喃糖醛醯基 )-1H-1,2,3- 三唑 -4- 基 ] 丙基 } 胺甲醯基 ) 氧基 ] 甲基 } 苯基 )-N 5- 胺甲醯基 -L- 鳥胺醯胺 ( 合成子 EG) 2.6.1     6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-3-(1-((3-(2-((3-(1-((2R,3R,4S,5S,6S)-6- 羧基 -3,4,5- 三羥基四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 )-1H-1,2,3- 三唑 -4- 基 ) 丙基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶甲酸向三乙酸(2R,3R,4S,5S,6S)-2-疊氮基-6-(甲氧基羰基)四氫-2H-哌喃-3,4,5-三基酯(8.63 mg)於第三丁醇(2 mL)及水(1 mL)中之溶液中添加實例2.5.2 (20 mg)、硫酸銅(II)五水合物(2.0 mg)及抗壞血酸鈉(5 mg)。在微波條件(Biotage Initiator)下，在100℃下攪拌混合物20分鐘。將氫氧化鋰單水合物(50 mg)添加至混合物中，並將其隔夜。用三氟乙酸中和混合物且藉由逆相HPLC (Gilson系統)，用10-85%乙腈/含0.1%三氟乙酸之水溶離來純化，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 1032.1 (M+H) +。 2.6.2     N-[6-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 己醯基 ]-L- 纈胺醯基 -N-(4-{[([2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7 ]癸-1-基}氧基)乙基]{3-[1-(β-D-葡萄哌喃糖醛醯基)-1H-1,2,3-三唑-4-基]丙基}胺甲醯基)氧基]甲基}苯基)-N 5-胺甲醯基-L-鳥胺醯胺 標題化合物係藉由在實例2.5.4中用實例2.6.1替代實例2.5.3製備。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 9.64 (s, 1H), 7.98 (d, 1H), 7.90 (s, 1H), 7.76 (d, 1H), 7.68 (s, 1H), 7.52-7.62 (m, 3H), 7.20-7.50 (m, 9H), 6.84-6.98 (m, 3H), 5.56 (d, 1H), 4.98 (d, 4H), 4.36-4.49 (m, 2H), 4.11-4.23 (m, 2H), 3.96 (d, 2H), 3.74-3.91 (m, 7H), 3.51-3.58 (m, 5H), 3.35-3.49 (m, 10H), 2.97-3.02 (m, 6H), 2.57-2.66 (m, 3H), 2.12-2.24 (m, 2H), 2.08 (s, 3H), 1.69-2.01 (m, 3H), 1.35-1.65 (m, 9H), 0.93-1.28 (m, 10H), 0.81-0.89 (m, 10H)。MS (ESI) m/e 1629.4 (M+H) +。 2.7 合成 N-[6-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 己醯基 ]-L- 纈胺醯基 -N-{4-[({[(2R)-1-{[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ]( 甲基 ) 胺基 }-1- 側氧基 -3- 磺基丙 -2- 基 ] 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ] 苯基 }-L- 丙胺醯胺 ( 合成子 EH)向實例1.13.8 (0.018 g)及碳酸4-((S)-2-((S)-2-(6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯胺基)-3-甲基丁醯胺基)丙醯胺基)苯甲酯(4-硝基苯基)酯(0.015 g，0.023 mmol)於N,N-二甲基甲醯胺(0.75 mL)中之溶液中添加N,N-二異丙基乙胺(0.015 mL)。攪拌隔夜後，用N,N-二甲基甲醯胺(0.75 mL)及水(0.5 mL)稀釋反應物。混合物使用Gilson系統，藉由逆相HPLC，用10-70%乙腈/含0.1% v/v三氟乙酸之水溶離來純化。合併所需溶離份並冷凍乾燥，得到標題化合物。 1H NMR (500 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 12.86 (s, 1H), 9.93 (s, 1H), 8.14 (d, 1H), 8.04 (d, 1H), 7.84-7.76 (m, 2H), 7.61 (d, 1H), 7.57 (d, 2H), 7.53 (dd, 1H), 7.47 (t, 1H), 7.43 (d, 1H), 7.39-7.30 (m, 4H), 7.26 (d, 2H), 6.99 (s, 2H), 6.97 (dd, 1H), 4.96 (s, 2H), 4.90 (t, 2H), 4.75-4.65 (m, 1H), 4.46-4.33 (m, 2H), 4.17 (dd, 2H), 3.66-3.47 (m, 4H), 3.36 (t, 4H), 3.12 (s, 2H), 3.01 (t, 2H), 2.85-2.60 (m, 4H), 2.25-2.05 (m, 5H), 2.05-1.90 (m, 1H), 1.58-0.76 (m, 32H)。MS (ESI) m/e 1423.2 (M+H) +。 2.8 合成 N-[6-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 己醯基 ]-L- 纈胺醯基 -N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ][4-(β-D- 葡萄哌喃糖基氧基 ) 苯甲基 ] 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ] 苯基 }-N 5- 胺甲醯基 -L- 鳥胺醯胺 ( 合成子 ER) 2.8.1     6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-3-(1-((3,5- 二甲基 -7-(2-((4-(((2S,3R,4S,5S,6R)-3,4,5- 三羥基 -6-( 羥基甲基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 ) 氧基 ) 苯甲基 ) 胺基 ) 乙氧基 ) 金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶甲酸向實例1.2.7 (44.5 mg)於四氫呋喃(2 mL)及乙酸(0.2 mL)中之溶液中添加4-(((2S,3R,4S,5S,6R)-3,4,5-三羥基-6-(羥基甲基)四氫-2H-哌喃-2-基)氧基)苯甲醛(17 mg)及MgSO 4(300 mg)。攪拌混合物1小時，隨後添加氰基硼氫化鈉/樹脂(300 mg)。攪拌混合物隔夜。過濾混合物，並蒸發溶劑。將殘餘物溶解於二甲亞碸/甲醇(1:1，4 mL)中且藉由逆相HPLC (Gilson系統)，用10-85%乙腈/含0.1%三氟乙酸之水溶離來純化，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 1015.2 (M+H) +。 2.8.2     N-[6-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 己醯基 ]-L- 纈胺醯基 -N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ][4-(β-D- 葡萄哌喃糖基氧基 ) 苯甲基 ] 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ] 苯基 }-N 5- 胺甲醯基 -L- 鳥胺醯胺標題化合物係藉由在實例2.5.4中用實例2.8.1替代實例2.5.3製備。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 12.87 (s, 1H), 10.00 (s, 1H), 7.96-8.14 (m, 2H), 7.79 (d, 2H), 7.55-7.68 (m, 3H), 7.09-7.52 (m, 11H), 6.91-7.01 (m, 5H), 5.09 (d, 1H), 4.95 (dd, 4H), 4.35-4.47 (m, 4H), 4.14-4.23 (m, 3H), 3.86-3.94 (m, 6H), 3.31-3.46 (m, 8H), 3.16-3.25 (m, 3H), 2.90-3.04 (m, 4H), 2.59 (s, 1H), 1.88-2.24 (m, 6H), 0.88-1.75 (m, 24H), 0.76-0.90 (m, 12H)。MS (ESI) m/e 1613.7 (M+H) +。 2.9 合成 N-[6-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 己醯基 ]-L- 纈胺醯基 -N-{4-[({[4-(β-D- 阿洛哌喃糖基氧基 ) 苯甲基 ][2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ] 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ] 苯基 }-N 5- 胺甲醯基 -L- 鳥胺醯胺 ( 合成子 ES) 2.9.1     6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-3-(1-((3,5- 二甲基 -7-(2-((4-(((2S,3R,4R,5S,6R)-3,4,5- 三羥基 -6-( 羥基甲基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 ) 氧基 ) 苯甲基 ) 胺基 ) 乙氧基 ) 金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶甲酸向實例1.2.7 (44.5 mg)於四氫呋喃(2 mL)及乙酸(0.2 mL)中之溶液中添加4-(((2S,3R,4R,5S,6R)-3,4,5-三羥基-6-(羥基甲基)四氫-2H-哌喃-2-基)氧基)苯甲醛(17 mg)及MgSO 4(300 mg)。攪拌混合物1小時，隨後添加氰基硼氫化鈉/樹脂(300 mg)。攪拌混合物隔夜。過濾混合物，並蒸發溶劑。將殘餘物溶解於二甲亞碸/甲醇(1:1，4 mL)中且藉由逆相HPLC (Gilson系統)，用10-85%乙腈/含0.1%三氟乙酸之水溶離來純化，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 1015.2 (M+H) +。 2.9.2     N-[6-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 己醯基 ]-L- 纈胺醯基 -N-{4-[({[4-(β-D- 阿洛哌喃糖基氧基 ) 苯甲基 ][2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ] 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ] 苯基 }-N 5- 胺甲醯基 -L- 鳥胺醯胺標題化合物係藉由用在實例2.5.4中實例2.9.1替代實例2.5.3製備。 1H NMR (500 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 12.86 (s, 1H), 10.00 (s, 1H), 7.96-8.11 (m, 2H), 7.79 (d, 2H), 7.53-7.65 (m, 3H), 7.08-7.52 (m, 10H), 6.91-7.00 (m, 5H), 5.09 (d, 1H), 4.99 (d, 4H), 4.35-4.48 (m, 3H), 4.13-4.23 (m, 2H), 3.82-3.96 (m, 8H), 3.32-3.50 (m, 10H), 3.12-3.25 (m, 3H), 2.90-3.06 (m, 5H), 1.89-2.19 (m, 6H), 0.88-1.75 (m, 22H), 0.76-0.88 (m, 11H)。MS (ESI) m/e 1612.5 (M+H) +。 2.10 合成 N-[6-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 己醯基 ]-L- 纈胺醯基 -N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](2- 膦醯基乙基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ] 苯基 }-N 5- 胺甲醯基 -L- 鳥胺醯胺 ( 合成子 EQ)標題化合物係如實例2.1中所描述，用實例1.12.2替代實例1.2.9製備。 1H NMR (500 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 9.99 (s, 1H), 8.01-8.09 (m, 2H), 7.76-7.81 (m, 2H), 7.56-7.64 (m, 3H), 7.41-7.53 (m, 3H), 7.36 (q, 2H), 7.25-7.30 (m, 3H), 6.99 (s, 2H), 6.94 (d, 1H), 5.98 (s, 1H), 4.89-5.07 (m, 4H), 4.38 (s, 1H), 4.19 (t, 1H), 3.88 (t, 2H), 3.80 (d, 2H), 2.89-3.08 (m, 5H), 2.04-2.24 (m, 5H), 1.89-2.02 (m, 1H), 1.76-1.87 (m, 2H), 0.89-1.72 (m, 23H), 0.78-0.88 (m, 12H)。MS (ESI) m/e 1452.2 (M+H) +。 2.11 合成 N-[6-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 己醯基 ]-L- 纈胺醯基 -N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](2- 膦醯基乙基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ] 苯基 }-L- 丙胺醯胺 ( 合成子 EU)標題化合物係如實例2.1中所描述，分別用實例1.12.2及碳酸4-((S)-2-((S)-2-(6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯胺基)-3-甲基丁醯胺基)丙醯胺基)苯甲酯(4-硝基苯基)酯替代實例1.2.9及碳酸4-((S)-2-((S)-2-(6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯胺基)-3-甲基丁醯胺基)-5-脲基戊醯胺基)苯甲酯(4-硝基苯基)酯製備。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 9.93 (s, 1H), 8.12 (d, 1H), 8.03 (d, 1H), 7.72-7.83 (m, 2H), 7.54-7.65 (m, 3H), 7.41-7.54 (m, 3H), 7.31-7.40 (m, 2H), 7.24-7.30 (m, 3H), 6.99 (s, 2H), 6.94 (d, 1H), 4.87-5.11 (m, 3H), 4.11-4.45 (m, 1H), 3.88 (t, 2H), 3.79 (d, 2H), 2.97-3.05 (m, 2H), 2.63-2.70 (m, 1H), 2.29-2.37 (m, 1H), 2.03-2.20 (m, 5H), 1.73-2.00 (m, 5H), 1.39-1.55 (m, 4H), 0.88-1.38 (m, 19H), 0.72-0.89 (m, 12H)。MS (ESI) m/e 1364.5 (M-H) -。 2.12 合成 N-[6-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 己醯基 ]-L- 纈胺醯基 -N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](3- 膦醯基丙基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ] 苯基 }-N 5- 胺甲醯基 -L- 鳥胺醯胺 ( 合成子 EV)標題化合物係如實例2.1中所描述，用實例1.14.4替代實例1.2.9製備。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 9.98 (s, 1H), 8.04 (t, 2H), 7.78 (t, 2H), 7.61 (t, 3H), 7.39-7.54 (m, 3H), 7.32-7.39 (m, 2H), 7.25-7.30 (m, 3H), 6.99 (s, 2H), 6.95 (d, 1H), 6.01 (s, 1H), 4.97 (d, 4H), 4.29-4.47 (m, 2H), 4.14-4.23 (m, 2H), 3.85-3.93 (m, 2H), 3.32-3.42 (m, 2H), 3.24 (s, 2H), 2.88-3.09 (m, 3H), 1.87-2.23 (m, 6H), 0.91-1.74 (m, 27H), 0.72-0.89 (m, 12H)。MS (ESI) m/e 1466.3 (M+H) +。 2.13 合成 N-[6-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 己醯基 ]-L- 纈胺醯基 -N-{4-[({[(2R)-1-{[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ] 胺基 }-1- 側氧基 -3- 磺基丙 -2- 基 ] 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ] 苯基 }-L- 丙胺醯胺 ( 合成子 EW)向實例1.15 (0.020 g)及碳酸4-((S)-2-((S)-2-(6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯胺基)-3-甲基丁醯胺基)丙醯胺基)苯甲酯(4-硝基苯基)酯(0.017 g)於N,N-二甲基甲醯胺(0.5 mL)中之溶液中添加N,N-二異丙基乙胺(0.017 mL)。攪拌反應隔夜並用N,N-二甲基甲醯胺(1 mL)、水(0.5 mL) 稀釋。混合物使用Gilson系統，藉由逆相HPLC，用10-70%乙腈/含0.1% v/v三氟乙酸之水溶離來純化。合併所需溶離份並冷凍乾燥，得到標題化合物。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 12.85 (s, 1H), 9.93 (s, 1H), 8.12 (d, 1H), 8.04 (d, 1H), 7.86-7.76 (m, 3H), 7.63-7.41 (m, 7H), 7.39-7.32 (m, 2H), 7.30 (s, 1H), 7.30-7.21 (m, 2H), 6.99 (s, 2H), 6.97 (d, 1H), 4.96 (s, 2H), 4.93 (s, 2H), 4.49-4.33 (m, 2H), 4.18 (dd, 2H), 4.15-4.08 (m, 2H), 3.90-3.86 (m, 2H), 3.36 (t, 2H), 3.34-3.27 (m, 1H), 3.18-3.04 (m, 2H), 3.04-2.96 (m, 2H), 2.89-2.61 (m, 2H), 2.27-2.05 (m, 5H), 2.03-1.87 (m, 1H), 1.59-1.42 (m, 4H), 1.42-0.91 (m, 18H), 0.91-0.76 (m, 11H)。MS (-ESI) m/e 1407.5 (M-H) -。 2.14 合成 N-[6-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 己醯基 ]-L- 纈胺醯基 -N-[4-({[{2-[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙氧基 ] 乙基 }(3- 膦醯基丙基 ) 胺甲醯基 ] 氧基 } 甲基 ) 苯基 ]-N 5- 胺甲醯基 -L- 鳥胺醯胺 ( 合成子 EX)將實例1.16.2 (59 mg)、碳酸4-((S)-2-((S)-2-(6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯胺基)-3-甲基丁醯胺基)-5-脲基戊醯胺基)苯甲酯(4-硝基苯基)酯(48 mg)及N,N-二異丙基乙胺(0.056 mL)於2 mL N,N-二甲基甲醯胺中之混合物攪拌24小時。混合物在Biotage Isolera One系統上使用40 g C18管柱，經由逆相層析法，用10-90%乙腈/ 0.1%三氟乙酸/水溶離來純化。濃縮所需溶離份且產物自水及1,4-二噁烷凍乾，得到呈三氟乙酸鹽形式之標題化合物。 1H NMR (400MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 9.97 (bs, 1H), 8.04 (m, 2H), 7.79 (d, 2H), 7.59 (m, 3H), 7.46 (m, 3H), 7.36 (m, 2H), 7.27 (m, 2H), 6.99 (s, 2H), 6.94 (d, 1H), 4.97 (m, 4H), 4.40 (m, 2H), 4.17 (dd, 2H), 3.50-4.10 (m, 6H), 3.45 (m, 2H), 3.40 (m, 2H), 3.26 (m, 2H), 3.01 (m, 2H), 2.95 (s, 2H), 2.79 (s, 2H), 2.15 (m, 2H), 2.09 (s, 2H), 1.68 (m, 2H), 1.60 (m, 1-2H), 1.35-1.50 (m, 6H), 1.25 (m, 4H), 1.17 (m, 2H), 1.10 (m, 2H), 0.97 (m, 1-2H), 0.84 (m, 12H)。MS (ESI) m/e 1510.4 (M+H) +。 2.15 合成 N-[6-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 己醯基 ]-L- 纈胺醯基 -N-[4-({[{2-[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙氧基 ] 乙基 }(3- 膦醯基丙基 ) 胺甲醯基 ] 氧基 } 甲基 ) 苯基 ]-L- 丙胺醯胺 ( 合成子 EY)將實例1.16.2 (59 mg)、碳酸4-((S)-2-((S)-2-(6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯胺基)-3-甲基丁醯胺基)丙醯胺基)苯甲酯(4-硝基苯基)酯(42 mg)及N,N-二異丙基乙胺(0.042 mg)於2 mL N,N-二甲基甲醯胺中之混合物攪拌24小時。混合物在Biotage Isolera One系統上使用40 g C18管柱，經由逆相層析法，用10-90%乙腈/0.1%三氟乙酸/水溶離來純化。濃縮溶離份且產物自水及1,4-二噁烷凍乾，得到呈三氟乙酸鹽形式之標題化合物。MS (ESI) m/e 1422.6 (M-H) +。 2.16 合成 N-[6-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 己醯基 ]-L- 纈胺醯基 -N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](3- 膦醯基丙基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ] 苯基 }-L- 丙胺醯胺 ( 合成子 EZ)將實例1.14.4 (50 mg)、碳酸4-((S)-2-((S)-2-(6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯胺基)-3-甲基丁醯胺基)丙醯胺基)苯甲酯(4-硝基苯基)酯(38 mg)及N,N-二異丙基乙胺(0.050 mL)於2 mL N,N-二甲基甲醯胺中之混合物攪拌24小時。混合物在Biotage Isolera One系統上使用40 g C18管柱，經由逆相層析法，用10-90%乙腈/ 0.1%三氟乙酸/水溶離來純化。濃縮所需溶離份且產物自水及1,4-二噁烷凍乾，得到呈三氟乙酸鹽形式之標題化合物。 1H NMR (400MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 9.94 (bs, 1H), 8.12 (d, 1H), 8.04 (d, 1H), 7.80 (d, 2H), 7.61 (m, 3H), 7.47 (m, 3H), 7.36 (m, 2H), 7.29 (m, 2H), 6.99 (s, 2H), 6.95 (d, 1H), 4.97 (m, 4H), 4.40 (m, 2H), 4.16 (dd, 2H), 3.50-4.10 (m, 6H), 3.68 (m, 2H), 3.55 (m, 2H), 3.25 (m, 4H), 3.02 (m, 2H), 2.94 (s, 2H), 2.79 (s, 2H), 2.15 (m, 1H), 2.08 (s, 2H), 1.65 (m, 2H), 1.40-1.50 (m, 6H), 1.20-1.30 (m, 6H), 1.08-1.19 (m, 4H), 0.97 (m, 1-2H), 0.76-0.89 (m, 12H)。MS (ESI) m/e 1380.3 (M+H) +。 2.17 合成 6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-3-(1-{[3-(2-{[(2S)-3- 羧基 -2-({[(4-{[(2S)-2-{[(2S)-2-{[6-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 己醯基 ] 胺基 }-3- 甲基丁醯基 ] 胺基 } 丙醯基 ] 胺基 } 苯甲基 ) 氧基 ] 羰基 } 胺基 ) 丙醯基 ]( 甲基 ) 胺基 } 乙氧基 )-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ] 甲基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶 -2- 甲酸 ( 合成子 FD)向實例1.17 (0.040 g)及碳酸4-((S)-2-((S)-2-(6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯胺基)-3-甲基丁醯胺基)丙醯胺基)苯甲酯(4-硝基苯基)酯(0.034 g)於N,N-二甲基甲醯胺(1 mL)中之溶液中添加N,N-二異丙基乙胺(0.035 mL)。攪拌反應隔夜並用N,N-二甲基甲醯胺(1 mL)及水(0.5 mL)稀釋。混合物使用Gilson系統，藉由逆相HPLC，用10-70%乙腈/含0.1% v/v三氟乙酸之水溶離來純化。合併所需溶離份並冷凍乾燥，得到標題化合物。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 12.84 (s, 1H), 9.92 (s, 1H), 8.13 (d, 1H), 8.03 (d, 1H), 7.79 (d, 2H), 7.62 (d, 1H), 7.57 (d, 2H), 7.54-7.41 (m, 3H), 7.40-7.32 (m, 2H), 7.31-7.23 (m, 4H), 6.99 (s, 2H), 6.95 (dd, 1H), 5.01-4.89 (m, 4H), 4.78 (dq, 1H), 4.45-4.30 (m, 1H), 4.23-4.11 (m, 1H), 3.88 (t, 2H), 3.80 (s, 2H), 3.42-3.26 (m, 6H), 3.06 (s, 1H), 3.01 (t, 2H), 2.80 (s, 2H), 2.76-2.62 (m, 1H), 2.46-2.36 (m, 1H), 2.25-2.05 (m, 5H), 2.05-1.92 (m, 1H), 1.58-1.42 (m, 4H), 1.42-0.91 (m, 20H), 0.91-0.78 (m, 9H)。MS (ESI) m/e 1387.4 (M+H) +。 2.18 合成 N-[6-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 己醯基 ]-L- 纈胺醯基 -N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ][4-(β-D- 葡萄哌喃糖醛醯基氧基 ) 苯甲基 ] 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ] 苯基 }-N 5- 胺甲醯基 -L- 鳥胺醯胺 ( 合成子 FS)標題化合物係藉由在實例2.5.4中用實例1.19.2替代實例2.5.3製備。 1H NMR (500 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 12.86 (s, 1H), 10.00 (s, 1H), 7.97-8.14 (m, 2H), 7.79 (d, 2H), 7.07-7.65 (m, 13H), 6.87-7.01 (m, 4H), 5.92-6.08 (m, 1H), 4.87-5.07 (m, 4H), 4.33-4.48 (m, 3H), 4.13-4.26 (m, 1H), 3.74-3.94 (m, 6H), 3.14-3.34 (m, 8H), 2.84-3.05 (m, 6H), 1.87-2.25 (m, 6H), 0.89-1.73 (m, 21H), 0.76-0.87 (m, 12H)。MS (ESI) m/e 1626.4 (M+H) +。 2.19 合成 N-[6-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 己醯基 ]-L- 纈胺醯基 -N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[1-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-1,2,3,4- 四氫喹啉 -7- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](2- 膦醯基乙基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ] 苯基 }-N 5- 胺甲醯基 -L- 鳥胺醯胺 ( 合成子 FI)標題化合物係如實例2.1中所描述，用實例1.20.11替代實例1.2.9製備。 1H NMR (500 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 10.00 (s, 1H), 8.40 (s, 1H), 8.07 (d, 1H), 8.00 (d, 1H), 7.84-7.90 (m, 1H), 7.79 (dd, 3H), 7.55-7.66 (m, 2H), 7.46 (s, 2H), 7.37 (t, 1H), 7.29 (t, 3H), 7.18-7.25 (m, 1H), 6.99 (s, 2H), 5.99 (s, 1H), 5.00 (d, 1H), 4.38 (s, 1H), 4.13-4.24 (m, 1H), 3.96 (s, 2H), 3.87 (d, 2H), 2.88-3.08 (m, 4H), 2.84 (q, 2H), 2.04-2.26 (m, 5H), 1.89-2.01 (m, 3H), 1.75-1.88 (m, 2H), 1.63-1.74 (m, 1H), 0.91-1.63 (m, 21H), 0.76-0.89 (m, 12H)。MS (ESI) m/e 1450.5 (M-H) -。 2.20 合成 N-[6-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 己醯基 ]-L- 纈胺醯基 -N 5- 胺甲醯基 -N-{4-[({[2-({3-[(4-{2- 羧基 -6-[8-([1,3] 噻唑并 [5,4-b] 吡啶 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ] 吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](2- 磺基乙基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ] 苯基 }-L- 鳥胺醯胺 ( 合成子 FV)標題化合物係藉由在實例2.1中用實例1.22.5替代實例1.2.9製備。 1H NMR (500 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 13.00 (v br s, 1H), 10.00 (s, 1H), 8.52 (dd, 1H), 8.16 (dd, 1H), 8.06 (d, 1H), 7.78 (d, 1H), 7.62 (d, 1H), 7.59 (br m, 2H), 7.53 (m, 2H),7.45 (d, 1H), 7.37 (t, 1H), 7.30 (s, 1H) 7.27 (d, 2H), 6.99 (s, 2H), 6.97 (d, 1H), 4.98 (m, 4H), 4.39 (m, 1H), 4.19 (br m, 1H), 3.88 (t, 2H), 3.80 (br d, 2H), 3.44, 3.36 (br m, m, 總共6H), 3.24 (m, 2H), 2.94-3.01 (m, 4H), 2.63 (br m, 2H), 2.14 (m, 2H), 2.10 (s, 3H), 1.97 (br m, 1H), 1.68 (br m, 1H), 1.58 (br m, 1H), 1.34-1.47 (m, 8H), 1.08-1.23 (m 10H), 0.95 (br m, 2H), 0.85-0.80 (m, 12H)。MS (ESI) m/e 1451.4 (M-H) -。 2.21 合成 N-[6-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 己醯基 ]-L- 纈胺醯基 -N-{4-[({[(2R)-1-{[2-({3-[(4-{6-[1-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-1,2,3,4- 四氫喹啉 -7- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ]( 甲基 ) 胺基 }-1- 側氧基 -3- 磺基丙 -2- 基 ] 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ] 苯基 }-N 5- 胺甲醯基 -L- 鳥胺醯胺 ( 合成子 GC)標題化合物係如實例2.1中所描述，用實例1.21.7替代實例1.2.9製備。 1H NMR (500 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 9.98 (s, 1H), 8.40 (s, 1H), 8.07 (d, 1H), 8.01 (dd, 1H), 7.89 (t, 1H), 7.74-7.84 (m, 3H), 7.58 (d, 2H), 7.47 (s, 2H), 7.37 (t, 1H), 7.19-7.33 (m, 5H), 7.00 (s, 2H), 4.91 (q, 2H), 4.64-4.76 (m, 2H), 4.33-4.43 (m, 2H), 4.15-4.24 (m, 2H), 3.92-4.03 (m, 2H), 3.88 (s, 2H), 3.32-3.50 (m, 6H), 3.10-3.22 (m, 2H), 2.89-3.07 (m, 2H), 2.70-2.89 (m, 4H), 2.60-2.70 (m, 1H), 2.05-2.28 (m, 5H), 1.90-2.03 (m, 3H), 1.64-1.77 (m, 1H), 1.53-1.65 (m, 1H), 0.92-1.53 (m, 21H), 0.77-0.92 (m, 12H)。MS (ESI) m/e 1507.3 (M-H) -。 2.22 合成 N-[6-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 己醯基 ]-L- 纈胺醯基 -N-{4-[({[(2R)-1-{[2-({3-[(4-{6-[1-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-1,2,3,4- 四氫喹啉 -7- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ]( 甲基 ) 胺基 }-1- 側氧基 -3- 磺基丙 -2- 基 ] 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ] 苯基 }-L- 丙胺醯胺 ( 合成子 GB)標題化合物係如實例2.1中所描述，分別用實例1.21.7及碳酸4-((S)-2-((S)-2-(6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯胺基)-3-甲基丁醯胺基)丙醯胺基)苯甲酯(4-硝基苯基)酯替代實例1.2.9及碳酸4-((S)-2-((S)-2-(6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯胺基)-3-甲基丁醯胺基)-5-脲基戊醯胺基)苯甲酯(4-硝基苯基)酯製備。 1H NMR (500 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 9.93 (s, 1H), 8.39 (s, 1H), 8.13 (d, 1H), 8.01 (dd, 1H), 7.88 (t, 1H), 7.74-7.84 (m, 3H), 7.57 (d, 2H), 7.46 (s, 2H), 7.37 (t, 1H), 7.17-7.33 (m, 5H), 6.99 (s, 2H), 4.91 (d, 2H), 4.65-4.76 (m, 1H), 4.30-4.51 (m, 1H), 4.13-4.21 (m, 1H), 3.92-4.00 (m, 2H), 3.88 (s, 2H), 3.29-3.46 (m, 4H), 2.93-3.21 (m, 3H), 2.68-2.88 (m, 4H), 2.58-2.68 (m, 1H), 2.04-2.26 (m, 5H), 1.89-2.02 (m, 3H), 1.37-1.54 (m, 6H), 0.92-1.34 (m, 15H), 0.75-0.91 (m, 12H)。MS (ESI) m/e (M+H) +。 2.23 合成 N-[6-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 己醯基 ]-L- 纈胺醯基 -N 5- 胺甲醯基 -N-{4-[({[2-({3-[(4-{2- 羧基 -6-[8-([1,3] 噻唑并 [4,5-b] 吡啶 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ] 吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](2- 磺基乙基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ] 苯基 }-L- 鳥胺醯胺 ( 合成子 FW)標題化合物係藉由在實例2.1中用實例1.23.4替代實例1.2.9製備。 1H NMR (500 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 13.38 (v br s, 1H), 10.00 (s, 1H), 8.66 (m, 2H), 8.06 (d, 1H), 7.78 (d, 1H), 7.65 (d, 1H), 7.59 (br m, 2H), 7.53 (m, 1H), 7.47 (m 2H), 7.37 (t, 1H), 7.30 (s, 1H) 7.27 (d, 2H), 6.99 (s, 2H), 6.97 (d, 1H), 4.98 (m, 4H), 4.39 (m, 1H), 4.19 (br m, 1H), 3.88 (t, 2H), 3.80 (br d, 2H), 3.40 (br m, 6H), 3.24 (m, 2H), 2.98 (m, 4H), 2.63 (m, 2H), 2.16 (m, 2H), 2.10 (s, 3H), 1.97 (br m, 1H), 1.68 (br m, 1H), 1.58 (br m, 1H), 1.34-1.47(m, 8H), 1.08-1.23 (m, 10H), 0.95 (br m, 2H), 0.85-0.80 (m, 12H)。MS (ESI) m/e 1451.5 (M-H) -。 2.24 合成 N-[6-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 己醯基 ]-L- 纈胺醯基 -N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[1-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-1,2,3,4- 四氫喹啉 -7- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](2- 磺基乙基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ] 苯基 }-N 5- 胺甲醯基 -L- 鳥胺醯胺 ( 合成子 GD)標題化合物係如實例2.1中所描述，用實例1.24.2替代實例1.2.9製備。 1H NMR (500 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 10.00 (s, 1H), 8.38 (s, 1H), 8.07 (d, 1H), 8.00 (d, 1H), 7.85-7.92 (m, 1H), 7.73-7.85 (m, 3H), 7.55-7.65 (m, 2H), 7.46 (s, 2H), 7.37 (t, 1H), 7.28 (t, 3H), 7.22 (t, 1H), 6.99 (s, 2H), 6.00 (s, 1H), 4.99 (d, 1H), 4.28-4.50 (m, 1H), 4.19 (s, 1H), 3.77-4.03 (m, 4H), 3.31-3.41 (m, 2H), 3.20-3.29 (m, 2H), 2.87-3.08 (m, 3H), 2.83 (t, 2H), 2.63 (d, 2H), 2.05-2.25 (m, 5H), 1.88-2.01 (m, 3H), 1.69 (t, 1H), 1.53-1.63 (m, 1H), 1.31-1.53 (m, 8H), 1.04-1.29 (m, 11H), 0.89-1.02 (m, 2H), 0.77-0.88 (m, 12H)。MS (ESI) m/e 1450.4 (M-H) -。 2.25 合成 N-[6-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 己醯基 ]-L- 纈胺醯基 -N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](2- 羧基乙基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ] 苯基 }-N 5- 胺甲醯基 -L- 鳥胺醯胺 ( 合成子 GK)標題化合物係如實例2.1中所描述，用實例1.25.2替代實例1.2.9製備。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 12.85 (s, 1H), 9.98 (s, 1H), 8.04 (t, 2H), 7.75-7.82 (m, 2H), 7.60 (t, 3H), 7.41-7.53 (m, 3H), 7.32-7.39 (m, 2H), 7.24-7.29 (m, 3H), 6.99 (s, 2H), 6.94 (d, 3H), 5.97 (s, 1H), 4.88-5.04 (m, 4H), 4.38 (d, 1H), 4.12-4.24 (m, 1H), 3.88 (t, 2H), 3.75-3.84 (m, 2H), 3.32-3.40 (m, 2H), 3.28 (d, 2H), 2.90-3.05 (m, 4H), 2.42-2.49 (m, 2H), 2.05-2.22 (m, 5H), 1.87-2.01 (m, 1H), 0.90-1.76 (m, 22H), 0.74-0.88 (m, 12H)。MS (ESI) m/e 1414.5 (M-H) -。 2.26 合成 N-[6-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 己醯基 ]-L- 纈胺醯基 -N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](2- 羧基乙基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ] 苯基 }-L- 丙胺醯胺 ( 合成子 GJ)標題化合物係如實例2.1中所描述，分別用實例1.25.2及碳酸4-((S)-2-((S)-2-(6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯胺基)-3-甲基丁醯胺基)丙醯胺基)苯甲酯(4-硝基苯基)酯替代實例1.2.9及碳酸4-((S)-2-((S)-2-(6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯胺基)-3-甲基丁醯胺基)-5-脲基戊醯胺基)苯甲酯(4-硝基苯基)酯製備。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 12.78 (s, 1H), 9.93 (s, 1H), 8.12 (d, 1H), 8.03 (d, 1H), 7.75-7.83 (m, 2H), 7.54-7.65 (m, 3H), 7.41-7.52 (m, 3H), 7.32-7.40 (m, 2H), 7.24-7.29 (m, 3H), 6.98 (s, 2H), 6.94 (d, 1H), 4.90-5.04 (m, 4H), 4.32-4.45 (m, 2H), 4.12-4.21 (m, 2H), 3.88 (t, 2H), 3.79 (d, 2H), 3.31-3.46 (m, 4H), 3.23-3.31 (m, 2H), 3.01 (t, 2H), 2.46 (t, 2H), 2.04-2.22 (m, 5H), 1.87-2.02 (m, 1H), 1.40-1.60 (m, 4H), 0.91-1.37 (m, 17H), 0.76-0.88 (m, 12H)。MS (ESI) m/e 1328.4 (M-H) -。 2.27 合成 6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-3-(1-{[3-(2-{[(2R)-3- 羧基 -2-({[(4-{[(2S)-2-{[(2S)-2-{[6-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 己醯基 ] 胺基 }-3- 甲基丁醯基 ] 胺基 } 丙醯基 ] 胺基 } 苯甲基 ) 氧基 ] 羰基 } 胺基 ) 丙醯基 ]( 甲基 ) 胺基 } 乙氧基 )-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ] 甲基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶 -2- 甲酸 ( 合成子 GW)向實例1.27 (0.043 g)於N,N-二甲基甲醯胺(0.5 mL)中之溶液中添加碳酸4-((S)-2-((S)-2-(6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯胺基)-3-甲基丁醯胺基)丙醯胺基)苯甲酯(4-硝基苯基)酯(0.042 g)，隨後添加N,N-二異丙基乙胺(0.038 mL)，並在室溫下攪拌反應。攪拌16小時後，用水(0.5 mL)及N,N-二甲基甲醯胺(1 mL)稀釋反應物。混合物使用Gilson系統，藉由逆相HPLC，用10-70%乙腈/含0.1% v/v三氟乙酸之水溶離來純化。合併所需溶離份並冷凍乾燥，得到標題化合物。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 13.05 (s, 1H), 10.15 (s, 1H), 8.36 (d, 1H), 8.26 (d, 1H), 8.02 (d, 2H), 7.95-7.77 (m, 4H), 7.77-7.63 (m, 3H), 7.63-7.54 (m, 2H), 7.54-7.46 (m, 3H), 7.22 (s, 2H), 7.18 (dd, 1H), 5.17 (d, 4H), 5.01 (dq, 1H), 4.61 (p, 1H), 4.39 (t, 1H), 4.11 (t, 2H), 4.03 (s, 2H), 3.64-3.49 (m, 2H), 3.29 (s, 1H), 3.24 (t, 2H), 3.03 (s, 2H), 2.92 (dt, 1H), 2.73-2.61 (m, 4H), 2.35 (d, 4H), 2.18 (dt, 1H), 1.71 (h, 4H), 1.65-1.13 (m, 18H), 1.13-1.01 (m, 13H)。MS (ESI) m/e 1387.3 (M+H) +。 2.28 合成 N-[6-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 己醯基 ]-L- 纈胺醯基 -N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ][1-( 羧基甲基 ) 哌啶 -4- 基 ] 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ] 苯基 }-N 5- 胺甲醯基 -L- 鳥胺醯胺 ( 合成子 HF)在室溫下，攪拌實例1.28 (0.0449 g)、碳酸4-((S)-2-((S)-2-(6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯胺基)-3-甲基丁醯胺基)-5-脲基戊醯胺基)苯甲酯(4-硝基苯基)酯(0.049 g)及N,N-二異丙基乙胺(0.044 mL)一起於N,N-二甲基甲醯胺(0.5 mL)中之溶液。攪拌反應混合物隔夜並用N,N-二甲基甲醯胺(1 mL)及水(0.5 mL)稀釋。混合物使用Gilson系統，藉由逆相HPLC，用10-90%乙腈/含0.1% v/v三氟乙酸之水溶離來純化。合併所需溶離份並冷凍乾燥，得到標題化合物。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 12.85 (s, 1H), 9.99 (s, 1H), 8.04 (t, 2H), 7.78 (t, 2H), 7.65-7.58 (m, 3H), 7.54-7.41 (m, 3H), 7.38 (d, 1H), 7.34 (d, 1H), 7.32-7.24 (m, 3H), 6.99 (s, 2H), 6.95 (d, 1H), 5.97 (s, 1H), 5.01 (s, 2H), 4.96 (s, 2H), 4.38 (q, 1H), 4.23-4.14 (m, 1H), 4.05 (s, 2H), 3.88 (t, 2H), 3.80 (s, 2H), 3.36 (t, 2H), 3.26-2.86 (m, 8H), 2.27-2.02 (m, 6H), 2.02-1.86 (m, 2H), 1.86-1.75 (m, 2H), 1.75-1.54 (m, 2H), 1.54-0.90 (m, 24H), 0.89-0.72 (m, 14H)。MS (ESI) m/e 1485.2 (M+H) +。 2.29 合成 (S)-6-((2-((3-((4-(6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-2- 羧基吡啶 -3- 基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 氧基 ) 乙基 )( 甲基 ) 胺基 )-5-((((4-((S)-2-((S)-2-(6-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 己醯胺基 )-3- 甲基丁醯胺基 )-5- 脲基戊醯胺基 ) 苯甲基 ) 氧基 ) 羰基 ) 胺基 )-N,N,N- 三甲基 -6- 側氧基己 -1- 銨鹽 ( 合成子 HG)在室溫下攪拌實例1.29 (8 mg)、碳酸4-((S)-2-((S)-2-(6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯胺基)-3-甲基丁醯胺基)-5-脲基戊醯胺基)苯甲酯(4-硝基苯基)酯(8.24 mg)及N,N-二異丙基乙胺(7.50 μl，0.043 mmol)於N,N-二甲基甲醯胺(0.250 mL)中之溶液。3小時後，用N,N-二甲基甲醯胺(1.25 mL)及水(0.5 mL)稀釋反應物。混合物使用Gilson系統，藉由逆相HPLC，用10-90%乙腈/含0.1% v/v三氟乙酸之水溶離來純化。合併所需溶離份並冷凍乾燥，得到標題化合物。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 12.85 (s, 1H), 9.96 (s, 1H), 8.04 (t, 2H), 7.83-7.76 (m, 2H), 7.66-7.56 (m, 3H), 7.53-7.42 (m, 4H), 7.41-7.32 (m, 2H), 7.31-7.23 (m, 3H), 6.99 (s, 2H), 6.95 (d, 1H), 5.99 (s, 1H), 5.04-4.87 (m, 4H), 4.44-4.33 (m, 2H), 4.24-4.12 (m, 2H), 3.88 (t, 2H), 3.81 (s, 2H), 3.50-3.13 (m, 9H), 3.11-2.92 (m, 14H), 2.80 (s, 1H), 2.25-2.04 (m, 5H), 2.03-1.89 (m, 1H), 1.75-0.91 (m, 28H), 0.91-0.77 (m, 12H)。MS (ESI) m/e 1528.5 (M+H) +。 2.30 合成 N-[6-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 己醯基 ]-L- 纈胺醯基 -N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](2- 磺基乙基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ] 苯基 }-L- 丙胺醯胺 ( 合成子 HP)標題化合物係如實例2.1中所描述，用碳酸4-((S)-2-((S)-2-(6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯胺基)-3-甲基丁醯胺基)丙醯胺基)苯甲酯(4-硝基苯基)酯替代碳酸4-((S)-2-((S)-2-(6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯胺基)-3-甲基丁醯胺基)-5-脲基戊醯胺基)苯甲酯(4-硝基苯基)酯製備。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 12.83 (s, 1H), 9.94 (s, 1H), 8.12 (d, 1H), 8.04 (d, 1H), 7.79 (d, 2H), 7.40-7.63 (m, 6H), 7.32-7.39 (m, 2H), 7.24-7.30 (m, 3H), 6.99 (s, 2H), 6.95 (d, 1H), 4.90-5.03 (m, 4H), 4.31-4.47 (m, 1H), 4.09-4.24 (m, 1H), 3.84-3.93 (m, 2H), 3.81 (s, 2H), 3.30-3.39 (m, 2H), 3.20-3.28 (m, 2H), 3.01 (t, 2H), 2.57-2.65 (m, 2H), 2.05-2.22 (m, 5H), 1.87-2.02 (m, 2H), 1.41-1.58 (m, 4H), 1.22 (d, 18H), 0.74-0.89 (m, 12H)。MS (ESI) m/e 1364.5 (M-H) -。 2.31 合成 N-[6-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 己醯基 ]-L- 纈胺醯基 -N-[4-({[(4-{[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](2- 磺基乙基 ) 胺基 } 哌啶 -1- 基 ) 羰基 ] 氧基 } 甲基 ) 苯基 ]-N 5- 胺甲醯基 -L- 鳥胺醯胺 ( 合成子 HR)在室溫下攪拌實例1.30.2 (0.038 g)、碳酸4-((S)-2-((S)-2-(6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯胺基)-3-甲基丁醯胺基)-5-脲基戊醯胺基)苯甲酯(4-硝基苯基)酯(0.035 g)及N,N-二異丙基乙胺(0.032 mL)於N,N-二甲基甲醯胺(0.5 mL)中之溶液。攪拌3小時後，用N,N-二甲基甲醯胺(1.25 mL)及水(0.5 mL)稀釋反應物。混合物使用Gilson系統，藉由逆相HPLC，用10-90%乙腈/含0.1% v/v三氟乙酸之水溶離來純化。合併所需溶離份並冷凍乾燥，得到標題化合物。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 9.98 (s, 1H), 9.02 (s, 1H), 8.10-8.00 (m, 2H), 7.79 (d, 2H), 7.64-7.56 (m, 3H), 7.53 (d, 1H), 7.47 (t, 1H), 7.43 (d, 1H), 7.39-7.32 (m, 2H), 7.29 (d, 3H), 6.99 (s, 2H), 6.95 (d, 1H), 6.00 (s, 1H), 4.99 (s, 2H), 4.96 (s, 2H), 4.48-4.32 (m, 2H), 4.27-4.15 (m, 2H), 4.11 (d, 2H), 3.88 (t, 2H), 3.82 (s, 2H), 3.40-3.33 (m, 4H), 3.24-3.11 (m, 2H), 3.11-2.72 (m, 8H), 2.26-2.04 (m, 4H), 2.04-1.80 (m, 3H), 1.80-0.92 (m, 26H), 0.92-0.77 (m, 12H)。MS (ESI) m/e 1535.4 (M+H) +。 2.32 合成 N-[6-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 己醯基 ]-L- 纈胺醯基 -N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-5-(3- 膦醯基丙氧基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ]( 甲基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ] 苯基 }-N 5- 胺甲醯基 -L- 鳥胺醯胺 ( 合成子 HU)標題化合物係藉由在實例2.5.4中用實例1.31.11替代實例2.5.3製備。1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 9.98 (s, 1H), 8.03 (dd, 2H), 7.70-7.84 (m, 3H), 7.59 (d, 2H), 7.48 (dd, 2H), 7.23-7.37 (m, 4H), 6.93-7.02 (m, 4H), 4.99 (d, 4H), 4.12-4.21 (m, 8H), 3.88-3.96 (m, 4H), 3.75-3.84 (m, 4H), 3.23-3.49 (m, 7H), 2.73-3.07 (m, 8H), 1.89-2.21 (m, 9H), 0.91-1.77 (m, 25H), 0.77-0.91 (m, 12H)。MS (ESI) m/e 1496.3 (M+H) +。 2.33 合成 N-[6-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 己醯基 ]-L- 纈胺醯基 -N-[4-({[(4-{[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](3- 膦醯基丙基 ) 胺基 } 哌啶 -1- 基 ) 羰基 ] 氧基 } 甲基 ) 苯基 ]-N 5- 胺甲醯基 -L- 鳥胺醯胺 ( 合成子 HT)在室溫下攪拌實例1.26.2 (0.040 g)、碳酸4-((S)-2-((S)-2-(6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯胺基)-3-甲基丁醯胺基)-5-脲基戊醯胺基)苯甲酯(4-硝基苯基)酯(0.030 g)及N,N-二異丙基乙胺(0.020 mL)於N,N-二甲基甲醯胺(0.5 mL)中之溶液。攪拌3小時後，用N,N-二甲基甲醯胺(1.25 mL)及水(0.5 mL)稀釋反應物。混合物使用Gilson系統，藉由逆相HPLC，用10-90%乙腈/含0.1% v/v三氟乙酸之水溶離來純化。合併所需溶離份並冷凍乾燥，得到標題化合物。 1H NMR (500 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 9.98 (s, 1H), 9.26 (s, 1H), 8.06 (d, 1H), 8.05-8.01 (m, 1H), 7.79 (d, 2H), 7.62 (d, 1H), 7.61-7.57 (m, 2H), 7.52-7.42 (m, 3H), 7.38 (d, 1H), 7.35 (d, 1H), 7.32-7.26 (m, 3H), 6.99 (s, 2H), 6.95 (d, 1H), 6.01 (s, 1H), 4.99 (s, 2H), 4.96 (s, 3H), 4.44-4.33 (m, 2H), 4.18 (dd, 2H), 3.88 (t, 2H), 3.83 (s, 2H), 3.71-3.61 (m, 2H), 3.53 (t, 2H), 3.36 (t, 2H), 3.07-2.66 (m, 8H), 2.28-2.06 (m, 6H), 2.05-1.92 (m, 2H), 1.92-1.80 (m, 2H), 1.78-0.95 (m, 32H), 0.92-0.77 (m, 14H)。MS (ESI) m/e 1549.5 (M+H) +。 2.34 合成 N-[6-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 己醯基 ]-L- 纈胺醯基 -N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 ) 萘 -2- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](3- 膦醯基丙基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ] 苯基 }-N 5- 胺甲醯基 -L- 鳥胺醯胺 ( 合成子 HV)標題化合物係藉由在實例2.5.4中用實例1.14.4替代實例2.5.3製備。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 9.98 (s, 1H), 9.02 (s, 1H), 8.32-8.45 (m, 1H), 8.12-8.27 (m, 3H), 7.98-8.09 (m, 3H), 7.93 (d, 1H), 7.66-7.83 (m, 4H), 7.54-7.64 (m, 2H), 7.46-7.50 (m, 2H), 7.24-7.40 (m, 3H), 6.99 (s, 2H), 5.93-6.09 (m, 1H), 4.99 (s, 3H), 4.33-4.49 (m, 3H), 4.15-4.20 (m, 3H), 3.19-3.50 (m, 10H), 2.86-3.07 (m, 3H), 1.87-2.27 (m, 7H), 0.91-1.77 (m, 26H), 0.76-0.89 (m, 10H)。MS (ESI) m/e 1461.1 (M+H) +。 2.35 合成 N-[6-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 己醯基 ]-L- 纈胺醯基 -N-[4-({[(4-{[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](2- 羧基乙基 ) 胺基 } 哌啶 -1- 基 ) 羰基 ] 氧基 } 甲基 ) 苯基 ]-N 5- 胺甲醯基 -L- 鳥胺醯胺 ( 合成子 HZ)在室溫下攪拌實例1.36.2 (0.031 g)、碳酸4-((S)-2-((S)-2-(6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯胺基)-3-甲基丁醯胺基)-5-脲基戊醯胺基)苯甲酯(4-硝基苯基)酯(0.025 g)及N,N-二異丙基乙胺(0.016 mL)於N,N-二甲基甲醯胺(0.5 mL)中之溶液。攪拌3小時後，用N,N-二甲基甲醯胺(1.25 mL)及水(0.5 mL)稀釋反應物。混合物使用Gilson系統，藉由逆相HPLC，用10-90%乙腈/含0.1% v/v三氟乙酸之水溶離來純化。合併所需溶離份並冷凍乾燥，得到標題化合物。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 12.84 (s, 1H), 9.98 (s, 1H), 8.82 (s, 1H), 8.05 (dd, 2H), 7.79 (d, 2H), 7.70-7.53 (m, 2H), 7.53-7.24 (m, 6H), 6.99 (s, 2H), 6.95 (d, 1H), 6.00 (s, 1H), 4.99 (s, 2H), 4.96 (s, 2H), 4.37 (q, 2H), 4.25-4.15 (m, 2H), 3.88 (t, 2H), 3.83 (s, 2H), 3.69-3.61 (m, 2H), 3.44-3.30 (m, 4H), 3.08-2.90 (m, 4H), 2.90-2.72 (m, 4H), 2.27-2.04 (m, 5H), 2.04-1.89 (m, 2H), 1.77-0.94 (m, 28H), 0.91-0.78 (m, 14H)。MS (ESI) m/e 1499.5 (M+H) +。 2.36 合成 N-[6-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 己醯基 ]-L- 纈胺醯基 -N 5- 胺甲醯基 -N-{4-[({[2-({3-[(4-{2- 羧基 -6-[8-([1,3] 噻唑并 [4,5-b] 吡啶 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ] 吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](3- 膦醯基丙基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ] 苯基 }-L- 鳥胺醯胺 ( 合成子 IA)標題化合物係藉由在實例2.1中用實例1.39.2替代實例1.2.9製備。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 9.98 (s, 1H), 8.60 (dd, 1H), 8.52 (dd, 1H), 8.06 (d, 1H), 7.78 (d, 1H), 7.65 (d, 1H), 7.59 (br m, 2H), 7.50 (m, 1H), 7.45 (d, 1H), 7.38 (m, 2H), 7.28 (s, 1H), 7.27 (d, 2H), 6.99 (s, 2H), 6.97 (d, 1H), 5.98 (br s, 1H), 4.98 (s, 4H), 4.39 (m, 1H), 4.19 (br m, 1H), 3.88 (t, 2H), 3.80 (br d, 2H), 3.36 (br m, 3H), 3.24 br (m, 4H), 2.98 (m, 4H), 2.16 (m, 2H), 2.12 (s, 3H), 1.95 (br m, 1H), 1.67 (br m, 3H), 1.34-1.47 (m, 9H), 1.08-1.23 (m, 11H), 0.95 (br m, 2H), 0.85-0.80 (m, 12H)。MS (ESI) m/e 1465.5 (M-H) -。 2.37 合成 N-[6-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 己醯基 ]-L- 纈胺醯基 -N 5- 胺甲醯基 -N-{4-[({[2-({3-[(4-{2- 羧基 -6-[8-([1,3] 噻唑并 [5,4-b] 吡啶 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ] 吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](3- 膦醯基丙基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ] 苯基 }-L- 鳥胺醯胺 ( 合成子 IF)標題化合物係藉由在實例2.1中用實例1.40.2替代實例1.2.9製備。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 9.98 (s, 1H), 8.52 (dd, 1H), 8.16 (dd, 1H), 8.05 (br d, 1H), 7.78 (br d, 1H), 7.62 (m, 1H), 7.58 (br m, 2H), 7.52 (m, 2H), 7.44 (d, 1H), 7.38 (t, 1H), 7.29 (s, 1H) 7.27 (d, 2H), 6.99 (s, 2H), 6.97 (d, 1H), 4.98 (s, 2H), 4.96 (s, 2H), 4.39 (m, 1H), 4.19 (br m, 1H), 3.88 (t, 2H), 3.80 (br d, 2H), 3.36 (br m, 3H), 3.24 br (m, 4H), 2.98 (m, 4H), 2.16 (m, 2H), 2.12 (s, 3H), 1.95 (br m, 1H), 1.67 (br m, 3H), 1.47-1.34 (m, 9H), 1.08-1.23 (m, 11H), 0.95 (br m, 2H), 0.85-0.80 (m, 12H)。MS (ESI) m/e 1451.5 (M-H) -。 2.38 合成 N-{6-[( 氯乙醯基 ) 胺基 ] 己醯基 }-L- 纈胺醯基 -N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](2- 磺基乙基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ] 苯基 }-L- 丙胺醯胺 ( 合成子 IG) 2.38.1   3-(1-((3-(2-((((4-((S)-2-((S)-2- 胺基 -3- 甲基丁醯胺基 ) 丙醯胺基 ) 苯甲基 ) 氧基 ) 羰基 )(2- 磺基乙基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ) 吡啶甲酸在室溫下攪拌實例1.2.9 (0.050 g)、((S)-3-甲基-1-(((S)-1-((4-((((4-硝基苯氧基)羰基)氧基)甲基)苯基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基)-1-側氧基丁-2-基)胺基甲酸(9H-茀-9-基)甲酯(0.039 g)及N,N-二異丙基乙胺(0.027 mL)於N,N-二甲基甲醯胺(1 mL)中之溶液。攪拌隔夜後，將二乙胺(0.027 mL)添加至反應物中，並繼續攪拌2小時。用三氟乙酸淬滅反應，且混合物使用Gilson系統，藉由逆相HPLC，用5-75%乙腈/含0.1% v/v三氟乙酸之水溶離來純化。合併所需溶離份並冷凍乾燥，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 1499.5 (M+H) +。 2.38.2   N-{6-[( 氯乙醯基 ) 胺基 ] 己醯基 }-L- 纈胺醯基 -N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](2- 磺基乙基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ] 苯基 }-L- 丙胺醯胺向6-(2-氯乙醯胺基)己酸(6 mg)及六氟磷酸(V) 2-(3H-[1,2,3]三唑并[4,5-b]吡啶-3-基)-1,1,3,3-四甲基異
Figure 111128039-A0304-2
(0.011 g)於N,N-二甲基甲醯胺(1 mL)中之溶液中添加N,N-二異丙基乙胺(0.015 mL)，並攪拌反應5分鐘。將該溶液添加至實例2.38.1 (0.022 g)中且攪拌1小時。用N,N-二甲基甲醯胺(1 mL)及水(0.5 mL)稀釋反應物。混合物使用Gilson系統，藉由逆相HPLC，用10-90%乙腈/含0.1% v/v三氟乙酸之水溶離來純化。合併所需溶離份並冷凍乾燥，得到標題化合物。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 12.83 (s, 1H), 9.93 (s, 1H), 8.20-8.10 (m, 2H), 8.04 (d, 1H), 7.83-7.76 (m, 2H), 7.64-7.55 (m, 3H), 7.55-7.50 (m, 1H), 7.50-7.41 (m, 2H), 7.40-7.32 (m, 2H), 7.32-7.24 (m, 3H), 6.96 (d, 1H), 5.07-4.92 (m, 3H), 4.39 (p, 1H), 4.18 (dd, 2H), 4.01 (s, 2H), 3.92-3.76 (m, 6H), 3.54-3.32 (m, 4H), 3.25 (t, 2H), 3.13-2.93 (m, 4H), 2.72-2.58 (m, 2H), 2.29-2.12 (m, 2H), 2.09 (s, 3H), 2.05-1.92 (m, 1H), 1.58-0.89 (m, 18H), 0.89-0.77 (m, 12H)。MS (ESI) m/e 1362.2 (M+H) +。 2.39 合成 N-[6-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 己醯基 ]-L- 纈胺醯基 -N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-5-( 羧基甲氧基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ]( 甲基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ] 苯基 }-N 5- 胺甲醯基 -L- 鳥胺醯胺 ( 合成子 IJ)標題化合物係藉由在實例2.5.4中用實例1.41.3替代實例2.5.3製備。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 10.03 (s, 1H), 9.96 (s, 1H), 8.26-8.34 (m, 1H), 7.95-8.11 (m, 2H), 7.73-7.82 (m, 2H), 7.22-7.70 (m, 11H), 6.95-7.05 (m, 3H), 6.89 (d, 1H), 5.23 (s, 1H), 4.98 (d, 3H), 4.83 (s, 1H), 4.33-4.43 (m, 1H), 4.11-4.23 (m, 1H), 3.74-3.95 (m, 3H), 3.22-3.39 (m, 10H), 2.78-3.06 (m, 12H), 1.91-2.22 (m, 8H), 0.93-1.68 (m, 20H), 0.77-0.88 (m, 10H)。MS (ESI) m/e 1432.2 (M+H) +。 2.40 合成 N-[6-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 己醯基 ]-L- 纈胺醯基 -N-[4-({[(2-{[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](2- 磺基乙基 ) 胺基 } 乙基 )(2- 羧基乙基 ) 胺甲醯基 ] 氧基 } 甲基 ) 苯基 ]-N 5- 胺甲醯基 -L- 鳥胺醯胺 ( 合成子 IJ)標題化合物係如實例2.1中所描述，用實例1.38.2替代實例1.2.9製備。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 12.86 (s, 1H), 9.99 (s, 1H), 9.10 (s, 1H), 8.04 (t, 2H), 7.73-7.85 (m, 2H), 7.61 (t, 3H), 7.41-7.55 (m, 3H), 7.26-7.39 (m, 5H), 6.99 (s, 2H), 6.95 (d, 1H), 6.00 (s, 1H), 4.99 (d, 4H), 4.34-4.45 (m, 2H), 4.19 (dd, 2H), 3.88 (t, 2H), 3.82 (s, 2H), 3.36 (t, 4H), 2.85-3.09 (m, 5H), 2.06-2.22 (m, 4H), 1.89-2.02 (m, 1H), 0.94-1.77 (m, 20H), 0.77-0.90 (m, 11H)。MS (ESI) m/e 1567.4 (M+H) +。 2.41 合成 6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-3-[1-({3-[2-({(2S)-2-[{[(4-{[(2S)-5-( 胺甲醯基胺基 )-2-{[(2S)-2-{[6-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 己醯基 ] 胺基 }-3- 甲基丁醯基 ] 胺基 } 戊醯基 ] 胺基 } 苯甲基 ) 氧基 ] 羰基 }(2- 羧基乙基 ) 胺基 ]-3- 羧基丙醯基 } 胺基 ) 乙氧基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ] 吡啶 -2- 甲酸 ( 合成子 IK)標題化合物係如實例2.1中所描述，用實例1.32.4替代實例1.2.9製備。MS (ESI) m/e 1592.4 (M-H) -。 2.42 合成 6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-3-(1-{[3-(2-{[(2S)-2-({[(4-{[(2S)-5-( 胺甲醯基胺基 )-2-{[(2S)-2-{[6-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 己醯基 ] 胺基 }-3- 甲基丁醯基 ] 胺基 } 戊醯基 ] 胺基 } 苯甲基 ) 氧基 ] 羰基 } 胺基 )-3- 羧基丙醯基 ](2- 磺基乙基 ) 胺基 } 乙氧基 )-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ] 甲基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶 -2- 甲酸 ( 合成子 IL)標題化合物係如實例2.1中所描述，用實例1.44.2替代實例1.2.9製備。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 12.82 (s, 1H), 9.96 (s, 1H), 8.03 (t, 2H), 7.77 (d, 2H), 7.39-7.62 (m, 7H), 7.30-7.39 (m, 2H), 7.22-7.29 (m, 3H), 6.98 (s, 2H), 6.92-6.96 (m, 1H), 5.97 (s, 1H), 4.83-5.05 (m, 3H), 3.83-3.92 (m, 1H), 3.79 (s, 1H), 3.00 (s, 2H), 2.03-2.22 (m, 8H), 1.94 (s, 2H), 1.34 (d, 30H), 0.69-0.90 (m, 13H)。MS (ESI) m/e 1565.5 (M-H) -。 2.43 合成 N-[6-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 己醯基 ]-L- 纈胺醯基 -N-[4-({[(4-{[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](3- 羧基丙基 ) 胺基 } 哌啶 -1- 基 ) 羰基 ] 氧基 } 甲基 ) 苯基 ]-N 5- 胺甲醯基 -L- 鳥胺醯胺 ( 合成子 IM)在室溫下攪拌實例1.42.2 (0.045 g)、碳酸4-((S)-2-((S)-2-(6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯胺基)-3-甲基丁醯胺基)-5-脲基戊醯胺基)苯甲酯(4-硝基苯基)酯(0.035 g)及N,N-二異丙基乙胺(0.038 mL)於N,N-二甲基甲醯胺(0.5 mL)中之溶液。攪拌3小時後，用N,N-二甲基甲醯胺(1.25 mL)及水(0.5 mL)稀釋反應物。混合物使用Gilson系統，藉由逆相HPLC，用10-90%乙腈/含0.1% v/v三氟乙酸之水溶離來純化。合併所需溶離份並冷凍乾燥，得到標題化合物。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 12.76 (s, 1H), 9.91 (s, 1H), 8.79 (s, 1H), 7.98 (dd, 2H), 7.72 (d, 2H), 7.68-7.47 (m, 3H), 7.47-7.00 (m, 7H), 6.96-6.83 (m, 3H), 5.93 (s, 1H), 4.91 (d, 3H), 4.30 (q, 1H), 4.17-3.97 (m, 4H), 3.96-3.53 (m, 4H), 3.34-2.65 (m, 12H), 2.25 (t, 2H), 2.16-1.67 (m, 12H), 1.67-0.88 (m, 26H), 0.84-0.70 (m, 12H)。MS (ESI) m/e 1513.6 (M+H) +。 2.44 合成 4-[(1E)-3-({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-5-( 羧基甲氧基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ]( 甲基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 丙 -1- 烯 -1- 基 ]-2-({N-[6-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 己醯基 ]- β - 丙胺醯基 } 胺基 ) 苯基 β -D- 葡萄哌喃糖苷醛酸 ( 合成子 IO) 2.44.1   (E)- 第三丁基二甲基 ((3-(4,4,5,5- 四甲基 -1,3,2- 二氧硼㖦 -2- 基 ) 烯丙基 ) 氧基 ) 矽烷在氮氣氛圍下向燒瓶中裝入第三丁基二甲基(丙-2-炔-1-基氧基)矽烷(5 g)及二氯甲烷(14.7 mL)逐滴添加4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼㖦(3.94 g)。在室溫下攪拌混合物一分鐘，接著經由導管轉移至含有Cp 2ZrClH (氯代雙(η5-環戊二烯基)氫鋯，施瓦茨試劑(Schwartz's Reagent)) (379 mg)的充以氮氣之燒瓶中。所得反應混合物在室溫下攪拌16小時。小心地用水(15 mL)淬滅混合物，且接著用乙醚(3× 30 mL)萃取。合併之有機相用水(15 mL)洗滌，經MgSO 4乾燥，過濾，且藉由矽膠層析法，用0-8%乙酸乙酯/庚烷梯度溶離來純化，得到標題化合物。MS (ESI) m/z 316.0 (M+NH 4) +。 2.44.2 三乙酸 (2S,3R,4S,5S,6S)-2-(4- 溴 -2- 硝基苯氧基 )-6-( 甲氧基羰基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -3,4,5- 三基酯將三乙酸(2R,3R,4S,5S,6S)-2-溴-6-(甲氧基羰基)四氫-2H-哌喃-3,4,5-三基酯(5 g)溶解於乙腈(100 mL)中。將Ag 2O (2.92 g)添加至該溶液中，並在室溫下攪拌反應5分鐘。添加4-溴-2-硝基苯酚(2.74 g)，且在室溫下攪拌反應混合物4小時。銀鹽殘餘物經矽藻土過濾，且減壓濃縮濾液。殘餘物藉由矽膠層析法，用10-70%乙酸乙酯/庚烷梯度溶離來純化，得到標題化合物。MS (ESI+) m/z 550.9 (M+NH 4) +。 2.44.3 三乙酸 (2S,3R,4S,5S,6S)-2-(4-((E)-3-(( 第三丁基二甲基矽烷基 ) 氧基 ) 丙 -1- 烯 -1- 基 )-2- 硝基苯氧基 )-6-( 甲氧基羰基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -3,4,5- 三基酯將實例2.44.2 (1 g)、碳酸鈉(0.595 g)、參(二亞苄基丙酮)二鈀(Pd 2(dba) 3) (0.086 g)及1,3,5,7-四甲基-6-苯基-2,4,8-三氧雜-6-磷雜金剛烷(0.055 g)組合於配備有回流冷凝器之3頸50 mL圓底燒瓶中且用氮氣使該系統脫氣。單獨地用氮氣使實例2.44.1 (0.726 g)於四氫呋喃(15 mL)中之溶液脫氣30分鐘。後一溶液經由導管轉移至含有固體試劑之燒瓶中，隨後經由注射器添加脫氣之水(3 mL)。將反應物加熱至60℃，保持兩小時。使反應混合物在乙酸乙酯(3× 30 mL)與水(30 mL)之間分配。合併之有機相乾燥(Na 2SO 4)，過濾並濃縮。殘餘物藉由矽膠層析法，用0-35%乙酸乙酯/庚烷梯度溶離來純化，得到標題化合物。MS (ESI+) m/z 643.1 (M+NH 4) +。 2.44.4 三乙酸 (2S,3R,4S,5S,6S)-2-(2- 胺基 -4-((E)-3- 羥基丙 -1- 烯 -1- 基 ) 苯氧基 )-6-( 甲氧基羰基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -3,4,5- 三基酯向配備有壓力平衡之加料漏斗的500 mL充氮氣之三頸燒瓶裝入鋅粉(8.77 g)。經由導管添加實例2.44.3 (8.39 g)於四氫呋喃(67 mL)中之脫氣溶液。在冰浴中冷卻所得懸浮液，且經由加料漏斗以使得反應內溫不超過35℃之速率逐滴添加6N HCl (22.3 mL)。添加完成後，在室溫下攪拌反應兩小時，並經矽藻土墊過濾，用水及乙酸乙酯沖洗。用飽和NaHCO 3水溶液處理濾液，直至水層不再呈酸性，且過濾混合物以移除所得固體。將濾液轉移至分液漏斗中，並分離各層。水層用乙酸乙酯(3× 75 mL)萃取，且合併之有機層用水(100 mL)洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾並濃縮。用乙醚濕磨殘餘物且藉由過濾收集固體，得到標題化合物。MS (ESI+) m/z 482.0 (M+H) +。 2.44.5   (3- 氯 -3- 側氧基丙基 ) 胺基甲酸 (9H- 茀 -9- 基 ) 甲基酯向3-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)丙酸(5.0 g)於二氯甲烷(53.5 mL)中之溶液中添加氯化亞碸(0.703 mL)。在60℃下攪拌混合物一小時。冷卻混合物並濃縮，得到標題化合物，不經進一步純化即用於下一步驟中。 2.44.6 三乙酸 (2S,3R,4S,5S,6S)-2-(2-(3-((((9H- 茀 -9- 基 ) 甲氧基 ) 羰基 ) 胺基 ) 丙醯胺基 )-4-((E)-3- 羥基丙 -1- 烯 -1- 基 ) 苯氧基 )-6- ( 甲氧基羰基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -3,4,5- 三基酯將實例2.44.4 (6.78 g)溶解於二氯甲烷(50 mL)中，並在冰浴中將溶液冷卻至0℃。添加N,N-二異丙基乙胺(3.64 g)，隨後逐滴添加實例2.44.5 (4.88 g)於二氯甲烷(50 mL)中之溶液。攪拌反應16小時，使冰浴達到室溫。添加飽和NaHCO 3水溶液(100 mL)，並分離各層。水層進一步用二氯甲烷(2 × 50 mL)萃取。萃取液經Na 2SO 4乾燥，過濾，濃縮且藉由矽膠層析法，用5-95%乙酸乙酯/庚烷梯度溶離來純化，得到起始苯胺與所需產物的不可分離之混合物。使混合物在1N HCl水溶液 (40 mL)與乙醚及乙酸乙酯之1:1混合物(40 mL)之間分配，且接著水相進一步用乙酸乙酯(2× 25 mL)萃取。合併有機相，用水(2× 25 mL)洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾並濃縮，得到標題化合物。MS (ESI+) m/z 774.9 (M+H) +。 2.44.7 三乙酸 (2S,3R,4S,5S,6S)-2-(2-(3-((((9H- 茀 -9- 基 ) 甲氧基 ) 羰基 ) 胺基 ) 丙醯胺基 )-4-((E)-3-(((4- 硝基苯氧基 ) 羰基 ) 氧基 ) 丙 -1- 烯 -1- 基 ) 苯氧基 )-6-( 甲氧基羰基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -3,4,5- 三基酯將實例2.44.6 (3.57 g)溶解於二氯甲烷(45 mL)中並添加碳酸雙(4-硝基苯基)酯(2.80 g)，隨後逐滴添加N,N-二異丙基乙胺(0.896 g)。在室溫下攪拌反應混合物兩小時。矽膠(20 g)添加至反應溶液中，且混合物減壓濃縮至乾，浴溫保持在或低於25℃。將二氧化矽殘餘物裝載至管柱頂部，且產物藉由矽膠層析法，用0-100%乙酸乙酯-庚烷梯度溶離來純化，得到摻雜有硝基苯酚之部分純化之產物。用甲基第三丁基醚(250 mL)濕磨該物質，並使所得漿液靜置1小時。藉由過濾收集產物。以類似方式收集三個連續批次，得到標題化合物。MS (ESI+) m/z 939.8 (M+H) +。 2.44.8 3-(1-((3-(2-(((((E)-3-(3-(3- 胺基丙醯胺基 )-4-(((2S,3R,4S,5S,6S)- 6- 羧基 -3,4,5- 三羥基四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 ) 氧基 ) 苯基 ) 烯丙基 ) 氧基 ) 羰基 )( 甲基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-5-( 羧基甲氧基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ) 吡啶甲酸向實例2.44.7 (19.7 mg)及實例1.41.3 (18.5 mg)於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)中之冷(0℃)溶液中添加N,N-二異丙基乙胺(0.054 mL)。將反應物緩慢升溫至室溫並攪拌隔夜。向反應混合物中添加水(2 mL)及氫氧化鋰單水合物(50 mg)，且攪拌混合物隔夜。混合物用三氟乙酸酸化並過濾。混合物藉由逆相HPLC (Gilson系統)，用10-85%乙腈/含0.1%三氟乙酸之水溶離來純化，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 1273.2 (M+H) +。 2.44.9   4-[(1E)-3-({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-5-( 羧基甲氧基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ]( 甲基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 丙 -1- 烯 -1- 基 ]-2-({N-[6-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 己醯基 ]- β - 丙胺醯基 } 胺基 ) 苯基 β -D- 葡萄哌喃糖苷醛酸向實例2.44.8 (10 mg)及6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己酸2,5-二側氧基吡咯啶-1-基酯(2.3 mg)於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)中之溶液中添加N,N-二異丙基乙胺(0.054 mL)。攪拌反應隔夜。用甲醇(2 mL)稀釋反應混合物並用三氟乙酸酸化。混合物藉由逆相HPLC (Gilson系統)，用10-85%乙腈/含0.1%三氟乙酸之水溶離來純化，得到標題化合物。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 12.70 (s, 1H), 9.03 (s, 1H), 8.25 (s, 1H), 8.01 (d, 1H), 7.87 (t, 1H), 7.77 (d, 1H), 7.69 (d, 1H), 7.41-7.55 (m, 2H), 7.23-7.38 (m, 2H), 6.79-7.16 (m, 7H), 6.56 (d, 1H), 6.09-6.25 (m, 1H), 4.96-5.07 (m, 3H), 4.84 (s, 3H), 4.64 (d, 3H), 3.87-3.97 (m, 5H), 3.24-3.47 (m, 12H), 2.77-2.95 (m, 6H), 1.94-2.08 (m, 6H), 0.92-1.56 (m, 20H), 0.74-0.86 (m, 6H)。MS (ESI) m/e 1487.3 (M+Na) +。 2.45 合成 N-[6-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 己醯基 ]-L- 纈胺醯基 -N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 ) 萘 -2- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](2- 磺基乙基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ] 苯基 }-N 5- 胺甲醯基 -L- 鳥胺醯胺 ( 合成子 IP)標題化合物係藉由在實例2.5.4中用實例1.43.7替代實例2.5.3製備。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 13.09 (s, 1H), 9.99 (s, 1H), 9.02 (s, 1H), 8.30-8.40 (m, 3H), 7.93-8.25 (m, 6H), 7.23-7.86 (m, 10H), 6.92-7.05 (m, 2H), 4.99 (d, 2H), 4.36-4.44 (m, 2H), 4.14-4.23 (m, 2H), 2.87-3.35 (m, 12H) , 2.81 (t, 2H), 2.59-2.70 (m, 2H), 1.84-2.28 (m, 8H), 0.97-1.77 (m, 20H), 0.77-0.88 (m,10H)。MS (ESI) m/e 1448.3 (M+Na) +。 2.46 合成 N-[6-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 己醯基 ]-L- 纈胺醯基 -N-[4-({[(2-{[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-2-(6- 羧基 -5-{1-[(3,5- 二甲基 -7-{2-[ 甲基 (2- 磺基乙基 ) 胺基 ] 乙氧基 } 三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 } 吡啶 -2- 基 )-1,2,3,4- 四氫異喹啉 -5- 基 ] 氧基 } 乙基 ) 胺甲醯基 ] 氧基 } 甲基 ) 苯基 ]-N 5- 胺甲醯基 -L- 鳥胺醯胺 ( 合成子 IS)標題化合物係如實例2.1中所描述，用實例1.46.2替代實例1.2.9製備。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 12.69 (s, 1H), 9.97 (s, 1H), 8.97 (s, 1H), 8.04 (dd, 2H), 7.78 (d, 2H), 7.71 (d, 1H), 7.59 (d, 2H), 7.44-7.54 (m, 3H), 7.26-7.37 (m, 4H), 6.96-7.03 (m, 4H), 5.97 (s, 1H), 4.99 (d, 4H), 4.31-4.45 (m, 1H), 4.18 (dd, 1H), 4.09 (s, 2H), 3.85-3.93 (m, 2H), 3.83 (s, 2H), 3.39-3.47 (m, 2H), 3.24-3.39 (m, 4H), 3.12-3.24 (m, 2H), 2.75-3.07 (m, 9H), 2.06-2.23 (m, 5H), 1.90-2.01 (m, 1H), 1.54-1.75 (m, 2H), 1.24-1.52 (m, 12H), 0.91-1.24 (m, 8H), 0.77-0.88 (m, 12H)。MS (ESI) m/e 1525.4 (M+H) +。 2.47 合成 N-[6-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 己醯基 ]-L- 纈胺醯基 -N-[4-({[(2-{[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-2-(6- 羧基 -5-{1-[(3,5- 二甲基 -7-{2-[ 甲基 (2- 磺基乙基 ) 胺基 ] 乙氧基 } 三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 } 吡啶 -2- 基 )-1,2,3,4- 四氫異喹啉 -5- 基 ] 氧基 } 乙基 )(2- 磺基乙基 ) 胺甲醯基 ] 氧基 } 甲基 ) 苯基 ]-N 5- 胺甲醯基 -L- 鳥胺醯胺 ( 合成子 IU)標題化合物係如實例2.1中所描述，用實例1.47.2替代實例1.2.9製備。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 12.70 (s, 1H), 9.99 (s, 1H), 8.97 (s, 1H), 8.04 (dd, 2H), 7.78 (d, 2H), 7.71 (d, 1H), 7.59 (d, 2H), 7.43-7.55 (m, 2H), 7.28-7.37 (m, 4H), 6.94-7.07 (m, 4H), 6.05 (s, 1H), 4.93-5.11 (m, 4H), 4.31-4.46 (m, 2H), 4.12-4.26 (m, 4H), 3.80-3.95 (m, 4H), 3.40-3.50 (m, 2H), 3.24-3.40 (m, 6H), 3.13-3.24 (m, 2H), 2.74-3.08 (m, 9H), 2.63-2.73 (m, 2H), 2.05-2.23 (m, 5H), 1.96 (s, 1H), 1.52-1.77 (m, 2H), 1.23-1.53 (m, 12H), 0.97-1.22 (m, 8H), 0.77-0.89 (m, 12H)。MS (ESI) m/e 1631.5 (M-H) -。 2.48 合成 N-[6-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 己醯基 ]-L- 纈胺醯基 -N-[4-({[(2-{[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](2- 磺基乙基 ) 胺基 } 乙基 )(2- 磺基乙基 ) 胺甲醯基 ] 氧基 } 甲基 ) 苯基 ]-N 5- 胺甲醯基 -L- 鳥胺醯胺 ( 合成子 IV)標題化合物係如實例2.1中所描述，用實例1.48.2替代實例1.2.9製備。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 12.82 (s, 1H), 10.00 (s, 1H), 9.29-9.57 (m, 1H), 8.05 (t, 2H), 7.79 (d, 2H), 7.51-7.63 (m, 4H), 7.40-7.50 (m, 2H), 7.27-7.39 (m, 5H), 6.93-7.02 (m, 3H), 4.99 (d, 3H), 4.30-4.47 (m, 1H), 4.19 (t, 1H), 3.79-3.92 (m, 3H), 3.60-3.74 (m, 2H), 3.01 (s, 9H), 2.70 (d, 4H), 2.05-2.23 (m, 6H), 1.96 (d, 2H), 1.53-1.78 (m, 3H), 1.22-1.54 (m, 13H), 0.89-1.22 (m, 9H), 0.75-0.89 (m, 13H)。MS (ESI) m/e 1603.3 (M+H) +。 2.49 合成 N-{6-[( 氯乙醯基 ) 胺基 ] 己醯基 }-L- 纈胺醯基 -N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](2- 磺基乙基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ] 苯基 }-N 5- 胺甲醯基 -L- 鳥胺醯胺 ( 合成子 IZ) 2.49.1   3-(1-(((1r,3r)-3-(2-((((4-((S)-2-((S)-2- 胺基 -3- 甲基丁醯胺基 )-5- 脲基戊醯胺基 ) 苯甲基 ) 氧基 ) 羰基 )(2- 磺基乙基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ) 吡啶甲酸在室溫下，攪拌實例1.2.9 (0.045 g)、((S)-3-甲基-1-(((S)-1-((4-((((4-硝基苯氧基)羰基)氧基)甲基)苯基)胺基)-1-側氧基-5-脲基戊-2-基)胺基)-1-側氧基丁-2-基)胺基甲酸(9H-茀-9-基)甲酯(0.043 g)及N,N-二異丙基乙胺(0.041 mL)一起於N,N-二甲基甲醯胺(1 mL)中之溶液。攪拌隔夜後，將二乙胺(0.024 mL)添加至反應物中，並繼續攪拌2小時。用三氟乙酸淬滅反應，接著使用Gilson系統，藉由逆相HPLC，用10-75%乙腈/含0.1% v/v三氟乙酸之水溶離來純化。合併所需溶離份並冷凍乾燥，得到標題化合物。 2.49.2N-{6-[(氯乙醯基)胺基]己醯基}-L-纈胺醯基-N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基](2-磺基乙基)胺甲醯基}氧基)甲基]苯基}-N 5-胺甲醯基-L-鳥胺醯胺 向6-(2-氯乙醯胺基)己酸(6.43 mg)及六氟磷酸(V) 2-(3H-[1,2,3]三唑并[4,5-b]吡啶-3-基)-1,1,3,3-四甲基異
Figure 111128039-A0304-2
(0.012 g)於N,N-二甲基甲醯胺(0.5 mL)中之溶液中添加N,N-二異丙基乙胺(0.019 mL)，並攪拌反應5分鐘。將該溶液添加至實例2.49.1 (0.026 g)中且攪拌1小時。用N,N-二甲基甲醯胺(1 mL)及水(0.5 mL)稀釋反應物。混合物使用Gilson系統，藉由逆相HPLC，用10-60%乙腈/含0.1% v/v三氟乙酸之水溶離來純化。合併所需溶離份並冷凍乾燥，得到標題化合物。 1H NMR (500 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 12.85 (s, 1H), 9.99 (s, 1H), 8.18 (q, 1H), 8.08 (d, 1H), 8.04 (d, 1H), 7.84-7.76 (m, 2H), 7.64-7.56 (m, 3H), 7.56-7.50 (m, 1H), 7.47 (t, 1H), 7.43 (d, 1H), 7.37 (d, 1H), 7.35 (d, 1H), 7.29 (s, 1H), 7.27 (d, 2H), 6.95 (d, 1H), 6.05 (s, 1H), 5.05-4.91 (m, 4H), 4.48-4.33 (m, 1H), 4.26-4.14 (m, 1H), 4.02 (s, 2H), 3.88 (t, 2H), 3.81 (d, 2H), 3.25 (t, 2H), 3.14-2.98 (m, 6H), 2.98-2.87 (m, 2H), 2.74-2.59 (m, 2H), 2.27-2.05 (m, 6H), 2.04-1.92 (m, 1H), 1.78-1.65 (m, 1H), 1.65-1.53 (m, 1H), 1.53-0.90 (m, 22H), 0.90-0.73 (m, 12H)。MS (ESI) m/e 1448.2 (M+H) +。 2.50 合成 N-[6-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 己醯基 ]-L- 纈胺醯基 -N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[4-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫 -2H-1,4- 苯并噁嗪 -6- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](2- 磺基乙基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ] 苯基 }-N 5- 胺甲醯基 -L- 鳥胺醯胺 ( 合成子 JD)標題化合物係藉由在實例2.5.4中用實例1.51.8替代實例2.5.3製備。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 9.56 (s, 1H), 8.51-8.59 (m, 1H), 7.89 (d, 1H), 7.82 (d, 1H), 7.69-7.77 (m, 2H), 7.34-7.62 (m, 7H), 7.16-7.34 (m, 4H), 6.95 (dd, 1H), 5.95-6.05 (m, 1H), 4.95 (s, 2H), 4.06-4.44 (m, 6H), 3.85 (s, 3H), 3.39-3.59 (m, 7H), 2.61-2.74 (m, 3H), 2.19 (s, 3H), 1.88-2.16 (m, 3H), 0.96-1.75 (m, 22H), 0.71-0.89 (m, 13H)。MS (ESI) m/e 1454.2 (M+Na) +。 2.51 合成 N-[6-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 己醯基 ]-L- 纈胺醯基 -N-[4-({[(2-{[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-2-(6- 羧基 -5-{1-[(3,5- 二甲基 -7-{2-[ 甲基 (2- 磺基乙基 ) 胺基 ] 乙氧基 } 三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 } 吡啶 -2- 基 )-1,2,3,4- 四氫異喹啉 -5- 基 ] 氧基 } 乙基 )(2- 羧基乙基 ) 胺甲醯基 ] 氧基 } 甲基 ) 苯基 ]-N 5- 胺甲醯基 -L- 鳥胺醯胺 ( 合成子 JF)標題化合物係如實例2.1中所描述，用實例1.49.2替代實例1.2.9製備。 1H NMR (500 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 12.71 (s, 1H), 10.00 (s, 1H), 8.97 (s, 1H), 8.08 (d, 1H), 8.02 (d, 1H), 7.78 (d, 2H), 7.72 (d, 1H), 7.60 (d, 2H), 7.52 (d, 1H), 7.44-7.50 (m, 1H), 7.27-7.39 (m, 4H), 6.96-7.06 (m, 3H), 5.98 (s, 1H), 5.01 (d, 4H), 4.31-4.46 (m, 1H), 4.18 (s, 3H), 3.79-3.95 (m, 4H), 3.67-3.76 (m, 2H), 3.12-3.39 (m, 6H), 2.73-3.07 (m, 8H), 2.04-2.24 (m, 4H), 1.87-2.02 (m, 1H), 1.22-1.75 (m, 12H), 0.96-1.20 (m, 7H), 0.76-0.90 (m, 10H)。MS (ESI) m/e 1597.4 (M+H) +。 2.52 合成 N-[6-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 己醯基 ]-L- 纈胺醯基 -N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-5-(3- 磺基丙氧基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ]( 甲基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ] 苯基 }-N 5- 胺甲醯基 -L- 鳥胺醯胺 ( 合成子 JK)標題化合物係藉由在實例2.5.4中用實例1.52.4替代實例2.5.3製備。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 9.97 (s, 1H), 7.96-8.11 (m, 2H), 7.67-7.82 (m, 3H), 7.59 (d, 2H), 7.42-7.52 (m, 2H), 7.23-7.36 (m, 4H), 6.91-7.08 (m, 4H), 4.99 (d, 4H), 4.33-4.47 (m, 1H), 4.14-4.23 (m, 4H), 3.86-3.95 (m, 6H), 3.21-3.45 (m, 15H), 2.75-3.07 (m, 9H), 2.56-2.69 (m, 2H), 1.93-2.20 (m, 8H), 0.88-1.72 (m, 20H), 0.74-0.89 (m, 11H)。MS (ESI) m/e 1496.3 (M+Na) +。 2.53 合成 N-[3-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 丙醯基 ]-L- 纈胺醯基 -N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](2- 磺基乙基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ] 苯基 }-N 5- 胺甲醯基 -L- 鳥胺醯胺 ( 合成子 JJ)在室溫下攪拌實例2.49.1 (0.030 g)、3-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)丙酸2,5-二側氧基吡咯啶-1-基酯(6.34 mg)及N,N-二異丙基乙胺(0.012 mL)於N,N-二甲基甲醯胺(0.5 mL)中之溶液。1小時後，用N,N-二甲基甲醯胺:水之3:1混合物(1.5 mL)淬滅反應。混合物使用Gilson系統，藉由逆相HPLC，用10-85%乙腈/含0.1% v/v三氟乙酸之水溶離來純化。合併所需溶離份並冷凍乾燥，得到標題化合物。 1H NMR (500 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 12.85 (s, 1H), 9.99 (s, 1H), 8.18 (q, 1H), 8.12-8.00 (m, 2H), 7.86-7.75 (m, 2H), 7.65-7.55 (m, 3H), 7.53 (dd, 1H), 7.47 (t, 1H), 7.43 (d, 1H), 7.36 (q, 2H), 7.33-7.23 (m, 3H), 6.95 (d, 1H), 6.05 (s, 1H), 5.03-4.92 (m, 4H), 4.39 (q, 1H), 4.24-4.14 (m, 1H), 4.02 (s, 2H), 3.88 (t, 2H), 3.81 (d, 2H), 3.39-3.16 (m, 2H), 3.14-2.86 (m, 10H), 2.68-2.60 (m, 2H), 2.25-2.04 (m, 6H), 2.03-1.90 (m, 1H), 1.78-1.65 (m, 1H), 1.64-1.54 (m, 1H), 1.54-0.90 (m, 20H), 0.89-0.75 (m, 12H)。MS (ESI) m/e 1410.1 (M+H) +。 2.54 合成 N-[(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 乙醯基 ]-L- 纈胺醯基 -N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](2- 磺基乙基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ] 苯基 }-N 5- 胺甲醯基 -L- 鳥胺醯胺 ( 合成子 JL)在室溫下攪拌實例2.49.1 (0.039 g)、2-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)乙酸2,5-二側氧基吡咯啶-1-基酯(7.81 mg)及N,N-二異丙基乙胺(0.016 mL)於N,N-二甲基甲醯胺(0.5 mL)中之溶液。1小時後，用N,N-二甲基甲醯胺:水之3:1混合物(1.5 mL)淬滅反應。混合物使用Gilson系統，藉由逆相HPLC，用10-85%乙腈/含0.1% v/v三氟乙酸之水溶離來純化。合併所需溶離份並冷凍乾燥，得到標題化合物。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 12.85 (s, 1H), 10.00 (d, 1H), 8.24 (d, 2H), 8.04 (d, 1H), 7.79 (d, 1H), 7.59 (q, 3H), 7.53 (dd, 1H), 7.47 (t, 1H), 7.43 (d, 1H), 7.36 (td, 2H), 7.30 (s, 1H), 7.27 (d, 2H), 7.07 (s, 2H), 6.96 (d, 1H), 5.04-4.85 (m, 4H), 4.39 (q, 2H), 4.26 (dd, 2H), 4.13 (s, 2H), 3.86-3.17 (m, 8H), 3.07-2.81 (m, 4H), 2.63 (t, 2H), 2.09 (s, 3H), 2.03-1.79 (m, 1H), 1.75-1.51 (m, 2H), 1.51-1.03 (m, 12H), 1.01-0.76 (m, 16H)。MS (ESI) m/e 1394.4 (M-H) -。 2.55 合成 6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-3-(1-{[3-(2-{[(2S)-2-({[(4-{[(2S,3R,4S,5S,6S)-6- 羧基 -3,4,5- 三羥基四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 ] 氧基 }-3-[(3-{[6-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 己醯基 ] 胺基 } 丙醯基 ) 胺基 ] 苯甲基 ) 氧基 ] 羰基 } 胺基 )-3- 磺基丙醯基 ]( 甲基 ) 胺基 } 乙氧基 )-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ] 甲基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶 -2- 甲酸 ( 合成子 FE) 2.55.1 三乙酸 (2S,3R,4S,5S,6S)-2-(4- 甲醯基 -2- 硝基苯氧基 )-6-( 甲氧基羰基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -3,4,5- 三基酯向三乙酸(2R,3R,4S,5S,6S)-2-溴-6-(甲氧基羰基)四氫-2H-哌喃-3,4,5-三基酯(4 g)於乙腈(100 mL)中之溶液中添加氧化銀(I)(10.04 g)及4-羥基-3-硝基苯甲醛(1.683 g)。在室溫下攪拌反應混合物4小時並過濾。濃縮濾液，且殘餘物藉由矽膠層析法，用5-50%乙酸乙酯/庚烷溶離來純化，得到標題化合物。MS (ESI) m/e (M+18) +。 2.55.2 三乙酸 (2S,3R,4S,5S,6S)-2-(4-( 羥基甲基 )-2- 硝基苯氧基 )-6-( 甲氧基羰基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -3,4,5- 三基酯向實例2.55.1 (6 g)於氯仿 (75 mL)與異丙醇(18.75 mL)之混合物中之溶液中添加0.87 g矽膠。將所得混合物冷卻至0℃，添加NaBH 4(0.470 g)，且在0℃下攪拌所得懸浮液45分鐘。反應混合物用二氯甲烷(100 mL)稀釋且經矽藻土過濾。濾液用水及鹽水洗滌並濃縮，得到粗產物，不經進一步純化即使用。MS (ESI) m/e (M+NH 4) +。 2.55.3 三乙酸 (2S,3R,4S,5S,6S)-2-(2- 胺基 -4-( 羥基甲基 ) 苯氧基 )-6-( 甲氧基羰基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -3,4,5- 三基酯在1個大氣壓H 2下，在20℃下使用10% Pd/C (1.535 g)作為催化劑將實例2.55.2 (7 g)於乙酸乙酯(81 mL)中之攪拌溶液氫化12小時。反應混合物經矽藻土過濾，並減壓蒸發溶劑。殘餘物藉由矽膠層析法，用95/5二氯甲烷/甲醇溶離來純化，得到標題化合物。 2.55.4   3-((((9H- 茀 -9- 基 ) 甲氧基 ) 羰基 ) 胺基 ) 丙酸在500 mL燒瓶中，將3-胺基丙酸(4.99 g)溶解於10% Na 2CO 3水溶液(120 mL)中並用冰浴冷卻。向所得溶液中逐漸添加於1,4-二噁烷(100 mL)中之氯甲酸(9H-茀-9-基)甲酯(14.5 g)。在室溫下攪拌反應混合物4小時，且接著添加水(800 mL)。將水相層自反應混合物分離並用乙醚(3 × 750 mL)洗滌。水層用2N HCl水溶液酸化至pH 2並用乙酸乙酯(3 × 750 mL)萃取。合併有機層並濃縮，得到粗產物。粗產物於乙酸乙酯:己烷1:2之混合溶劑(300 mL)中再結晶，得到標題化合物。 2.55.5   (3- 氯 -3- 側氧基丙基 ) 胺基甲酸 (9H- 茀 -9- 基 ) 甲酯向實例2.55.4於二氯甲烷(160 mL)中之溶液中添加氯化亞碸(50 mL)。在60℃下攪拌混合物1小時。冷卻混合物並濃縮，得到標題化合物。 2.55.6 三乙酸 (2S,3R,4S,5S,6S)-2-(2-(3-((((9H- 茀 -9- 基 ) 甲氧基 ) 羰基 ) 胺基 ) 丙醯胺基 )-4-( 羥基甲基 ) 苯氧基 )-6-( 甲氧基羰基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -3,4,5- 三基酯向實例2.55.3 (6 g)於二氯甲烷(480 mL)中之溶液中添加N,N-二異丙基乙胺(4.60 mL)。添加實例2.55.5 (5.34 g)，且在室溫下攪拌混合物30分鐘。將混合物倒入飽和碳酸氫鈉水溶液中並用乙酸乙酯萃取。合併之萃取液用水及鹽水洗滌並經硫酸鈉乾燥。過濾並濃縮，得到殘餘物，經由徑向層析法，使用0-100%乙酸乙酯/石油醚作為移動相純化，得到標題化合物。 2.55.7 三乙酸 (2S,3R,4S,5S,6S)-2-(2-(3-((((9H- 茀 -9- 基 ) 甲氧基 ) 羰基 ) 胺基 ) 丙醯胺基 )-4-((((4- 硝基苯氧基 ) 羰基 ) 氧基 ) 甲基 ) 苯氧基 )-6-( 甲氧基羰基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -3,4,5- 三基酯向實例2.55.6 (5.1 g)於N,N-二甲基甲醯胺(200 mL)中之混合物中添加碳酸雙(4-硝基苯基)酯(4.14 g)及N,N-二異丙基乙胺(1.784 mL)。在室溫下攪拌混合物16小時並減壓濃縮。將粗物質溶解於二氯甲烷中且直接抽吸至1 mm徑向層析板上，並用50-100%乙酸乙酯/己烷溶離，得到標題化合物。MS (ESI) m/e (M+H) +。 2.55.8 3-(1-((3-(2-((R)-2-((((3-(3- 胺基丙醯胺基 )-4-(((2S,3R,4S,5S,6S) -6- 羧基 -3,4,5- 三羥基四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 ) 氧基 ) 苯甲基 ) 氧基 ) 羰基 ) 胺基 )-N- 甲基 -3- 磺基丙醯胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ) 吡啶甲酸攪拌實例1.13.7 (0.055 g)及實例2.55.7 (0.055 g)一起於N,N-二甲基甲醯胺(1.5 mL)中之溶液並添加N,N-二異丙基乙胺(0.053 mL)。攪拌3小時後，反應物用乙酸乙酯(75 mL)稀釋並用水 (20 mL)及鹽水(25 mL)洗滌，經硫酸鎂乾燥，過濾並濃縮。將殘餘物溶解於甲醇(1 mL)中並用於水(0.6 mL)中之氫氧化鋰水合物(0.025 g)處理。攪拌2小時後，用三氟乙酸(0.047 ml)淬滅反應並用N,N-二甲基甲醯胺(1 mL)稀釋。混合物使用Gilson系統，藉由逆相HPLC，用10-80%乙腈/含0.1% v/v三氟乙酸之水溶離來純化。合併所需溶離份並冷凍乾燥，得到呈三氟乙酸鹽形式之標題化合物。 2.55.9   6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-3-(1-{[3-(2-{[(2S)-2-({[(4-{[(2S,3R,4S,5S,6S)-6- 羧基 -3,4,5- 三羥基四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 ] 氧基 }-3-[(3-{[6-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 己醯基 ] 胺基 } 丙醯基 ) 胺基 ] 苯甲基 ) 氧基 ] 羰基 } 胺基 )-3- 磺基丙醯基 ]( 甲基 ) 胺基 } 乙氧基 )-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ] 甲基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶 -2- 甲酸攪拌實例2.55.8 (0.013 g)及6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己酸2,5-二側氧基吡咯啶-1-基酯(3.07 mg)於N,N-二甲基甲醯胺(1 mL)中之溶液並添加N,N-二異丙基乙胺(7.90 μL)。攪拌反應1小時並用N,N-二甲基甲醯胺及水稀釋。混合物使用Gilson系統，藉由逆相HPLC，用10-75%乙腈/含0.1% v/v三氟乙酸之水溶離來純化。合併所需溶離份並冷凍乾燥，得到標題化合物。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 12.84 (s, 1H), 9.07 (s, 1H), 8.15 (s, 1H), 8.04 (d, 1H), 7.89 (t, 1H), 7.79 (d, 1H), 7.61 (d, 1H), 7.56-7.50 (m, 1H), 7.47 (t, 1H), 7.43 (d, 1H), 7.39-7.32 (m, 2H), 7.31 (s, 1H), 7.28 (d, 1H), 7.06 (d, 1H), 7.04-6.92 (m, 4H), 5.00-4.79 (m, 5H), 4.73-4.64 (m, 1H), 3.94-3.78 (m, 4H), 3.57-2.84 (m, 12H), 2.84-2.56 (m, 6H), 2.14-1.73 (m, 5H), 1.57-0.89 (m, 22H), 0.84 (s, 6H)。MS (ESI) m/e 1516.2 (M-H) -。 2.56 合成 4-[(1E)-3-({[2-({3-[(4-{2- 羧基 -6-[8-([1,3] 噻唑并 [5,4-b] 吡啶 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ] 吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](2- 磺基乙基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 丙 -1- 烯 -1- 基 ]-2-({N-[6-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 己醯基 ]- β - 丙胺醯基 } 胺基 ) 苯基 β -D- 葡萄哌喃糖苷醛酸 ( 合成子GG) 2.56.1   3-(1-((3-(2-(((((E)-3-(3-(3- 胺基丙醯胺基 )-4-(((2S,3R,4S,5S,6S)-6- 羧基 -3,4,5- 三羥基四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 ) 氧基 ) 苯基 ) 烯丙基 ) 氧基 ) 羰基 )(2- 磺基乙基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-6-(8-( 噻唑并 [5,4-b] 吡啶 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ) 吡啶甲酸將實例1.22.5 (48 mg)溶解於二甲基甲醯胺(0.5 mL)中，並添加實例2.44.7 (55 mg)及N,N-二異丙基乙胺(90 μL)。在室溫下攪拌反應混合物隔夜。濃縮反應物，且將殘餘物溶解於甲醇(1 mL)中並添加1.94N LiOH水溶液(0.27 mL)。在室溫下攪拌混合物一小時。混合物藉由逆相層析法(C18管柱)，用10-90%乙腈/含0.1% v/v三氟乙酸之水溶離來純化，得到呈三氟乙酸鹽形式之標題化合物。MS (ESI-) m/e 1291.4 (M-H) -。 2.56.2   4-[(1E)-3-({[2-({3-[(4-{2- 羧基 -6-[8-([1,3] 噻唑并 [5,4-b] 吡啶 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ] 吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](2- 磺基乙基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 丙 -1- 烯 -1- 基 ]-2-({N-[6-(2,5- 二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯基]-β-丙胺醯基}胺基)苯基β-D-葡萄哌喃糖苷醛酸 標題化合物係藉由在實例2.1中用實例1.56.1替代實例1.2.9製備。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 13.00 (v br s, 1H), 9.03 (s, 1H), 8.53 (dd, 1H), 8.24 (s, 1H), 8.16 (dd, 1H), 7.90 (br s, 1H), 7.61 (d, 1H), 7.54 (d, 1H) 7.52 (d, 1H), 7.44 (d, 1H), 7.37 (t, 1H), 7.30 (s, 1H), 7.11 (br d, 1H), 7.03 (d, 1H), 6.98 (s, 2H), 6.97 (d, 1H), 6.58 (m, 1H), 6.15 (m,1H), 4.96 (s, 2H), 4.88 (br m, 1 H), 4.64 (br m, 2H), 3.88 (m, 3H), 3.79 (br m, 2H), 3.27-3.48 (m, 14H), 3.01 (m, 2H), 2.67 (br m, 2H), 2.54 (m, 2H), 2.09 (s, 3H), 2.03 (t, 2H), 1.45 (m, 6H), 1.37 (br m, 2H), 1.28-0.90 (m, 10H), 0.77-0.82 (m, 6H)。MS (ESI) m/e 1484.4 (M-H) -。 2.57 合成 4-[(1E)-3-({[2-({3-[(4-{2- 羧基 -6-[8-([1,3] 噻唑并 [4,5-b] 吡啶 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ] 吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](2- 磺基乙基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 丙 -1- 烯 -1- 基 ]-2-({N-[6-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 己醯基 ]- β - 丙胺醯基 } 胺基 ) 苯基 β -D- 葡萄哌喃糖苷醛酸 ( 合成子 GM) 2.57.1 3-(1-((3-(2-(((((E)-3-(3-(3- 胺基丙醯胺基 )-4-(((2S,3R,4S,5S,6S) -6- 羧基 -3,4,5- 三羥基四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 ) 氧基 ) 苯基 ) 烯丙基 ) 氧基 ) 羰基 )(2- 磺基乙基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-6-(8-( 噻唑并 [4,5-b] 吡啶 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ) 吡啶甲酸標題化合物係藉由在實例2.56.1中用實例1.23.4替代實例1.22.5製備。MS (ESI) m/e 1291.4 (M-H) -。 2.57.2   4-[(1E)-3-({[2-({3-[(4-{2- 羧基 -6-[8-([1,3] 噻唑并 [4,5-b] 吡啶 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ] 吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](2- 磺基乙基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 丙 -1- 烯 -1- 基 ]-2-({N-[6-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 己醯基 ]- β - 丙胺醯基 } 胺基 ) 苯基 β -D- 葡萄哌喃糖苷醛酸標題化合物係藉由在實例2.1中用實例1.57.1替代實例1.2.9製備。 1H NMR (500 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 9.03 (s, 1H), 8.72 (d, 1H), 8.66 (d, 1H), 8.25 (s, 1H), 7.89 (br m, 1H), 7.65 (d, 1H), 7.52 (br m, 2H), 7.46 (d, 1H), 7.39 (t, 1H), 7.30 (s, 1H), 7.11 (br d, 1H), 7.03 (d, 1H), 6.98 (s, 2H), 6.97 (d, 1H), 6.58 (m, 1H), 6.15 (m,1H), 4.96 (s, 2H), 4.88 (br m, 1 H), 4.64 (br m, 2H), 3.88 (m, 3H), 3.79 (br m, 2H), 3.27-3.48 (m, 14H), 3.01 (m, 2H), 2.67 (br m, 2H), 2.54 (m, 2H), 2.09 (s, 3H), 2.03 (t, 2H), 1.45 (m, 6H), 1.37 (br m, 2H), 1.28-0.90 (m, 10H), 0.77-0.82 (m, 6H)。MS (ESI) m/e 1484.4 (M-H) -。 2.58 合成 4-[(1E)-3-({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](2- 磺基乙基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 丙 -1- 烯 -1- 基 ]-2-({N-[6-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 己醯基 ]- β - 丙胺醯基 } 胺基 ) 苯基 β -D- 葡萄哌喃糖苷醛酸 ( 合成子 HD) 2.58.1 3-(1-((3-(2-(((((E)-3-(3-(3- 胺基丙醯胺基 )-4-(((2S,3R,4S,5S,6S) -6- 羧基 -3,4,5- 三羥基四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 ) 氧基 ) 苯基 ) 烯丙基 ) 氧基 ) 羰基 )(2- 磺基乙基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ) 吡啶甲酸標題化合物係藉由在實例2.56.1中用實例1.2.9替代實例1.22.5製備。MS (ESI-) m/e 1290.2 (M-H) -。 2.58.2   4-[(1E)-3-({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3 , 4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](2- 磺基乙基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 丙 -1- 烯 -1- 基 ]-2-({N-[6-(2,5- 二側氧基 -2 , 5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 己醯基 ]- β - 丙胺醯基 } 胺基 ) 苯基 β -D- 葡萄哌喃糖苷醛酸標題化合物係藉由在實例2.56.2中用實例1.58.1替代實例1.56.1製備。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 9.03 (s, 1H), 8.25 (s, 1H), 8.03 (d, 1H), 7.89 (br m, 1H), 7.79 (d, 1H), 7.61 (d, 1H), 7.53 (br m, 1H), 7.46 (m, 2H), 7.37 (m, 2H), 7.32 (s, 1H), 7.11 (br d, 1H), 7.03 (d, 1H), 6.98 (s, 2H), 6.97 (d, 1H), 6.58 (m, 1H), 6.15 (m,1H), 4.96 (s, 2H), 4.88 (br m, 1 H), 4.64 (br m, 2H), 3.88 (m, 3H), 3.79 (br m, 2H), 3.27-3.48 (m, 14H), 3.01 (m, 2H), 2.67 (br m, 2H), 2.54 (m, 2H), 2.09 (s, 3H), 2.03 (t, 2H), 1.45 (m, 6H), 1.37 (br m, 2H), 1.28-0.90 (m, 10H), 0.77-0.82 (m, 6H)。MS (ESI-) m/e 1483.3 (M-H) -。 2.59 合成 4-[(1E)-3-({[2-({3-[(4-{2- 羧基 -6-[8-([1,3] 噻唑并 [5,4-b] 吡啶 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ] 吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](3- 膦醯基丙基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 丙 -1- 烯 -1- 基 ]-2-({N-[6-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 己醯基 ]- β - 丙胺醯基 } 胺基 ) 苯基 β -D- 葡萄哌喃糖苷醛酸 ( 合成子 HS) 2.59.1 3-(1-((3-(2-(((((E)-3-(3-(3- 胺基丙醯胺基 )-4-(((2S,3R,4S,5S,6S)- 6- 羧基 -3,4,5- 三羥基四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 ) 氧基 ) 苯基 ) 烯丙基 ) 氧基 ) 羰基 )(3- 膦醯基丙基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-6-(8-( 噻唑并 [5,4-b] 吡啶 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ) 吡啶甲酸標題化合物係藉由在實例2.56.1中用實例1.40.2替代實例1.22.5製備。MS (ESI-) m/e 1305.4 (M-H) -。 2.59.2   4-[(1E)-3-({[2-({3-[(4-{2- 羧基 -6-[8-([1,3] 噻唑并 [5,4-b] 吡啶 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ] 吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](3- 膦醯基丙基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 丙 -1- 烯 -1- 基 ]-2-({N-[6-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 己醯基 ]- β - 丙胺醯基 } 胺基 ) 苯基 β -D- 葡萄哌喃糖苷醛酸標題化合物係藉由在實例2.56.2中用實例1.59.1替代實例1.56.1製備。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 9.03 (s, 1H), 8.53 (dd, 1H), 8.24 (s, 1H), 8.16 (dd, 1H), 7.90 (br s, 1H), 7.61 (d, 1H), 7.54 (d, 1H) 7.52 (d, 1H), 7.44 (d, 1H), 7.37 (t, 1H), 7.28 (s, 1H), 7.11 (br d, 1H), 7.03 (d, 1H), 6.98 (s, 2H), 6.97 (d, 1H), 6.56 (m, 1H), 6.16 (m,1H), 4.96 (s, 2H), 4.86 (br m, 1 H), 4.64 (br d, 2H), 3.88 (m, 3H), 3.79 (br m, 2H), 3.27-3.44 (m, 14H), 3.01 (m, 2H), 2.54 (m, 2H), 2.08 (s, 3H), 2.03 (t, 2H), 1.46 (m, 6H), 1.37 (br m, 2H), 1.28-0.90 (m, 10H), 0.77-0.82 (m, 6H)。MS (ESI) m/e 1498.4 (M-H) -。 2.60 合成 4-[(1E)-3-({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-5-(3- 膦醯基丙氧基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ]( 甲基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 丙 -1- 烯 -1- 基 ]-2-({N-[6-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 己醯基 ]-β- 丙胺醯基 } 胺基 ) 苯基 β-D- 葡萄哌喃糖苷醛酸 ( 合成子 HW) 2.60.1 3-(1-(((3-(2-(((((E)-3-(3-(3- 胺基丙醯胺基 )-4-(((2S,3R,4S,5S,6S) -6- 羧基 -3,4,5- 三羥基四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 ) 氧基 ) 苯基 ) 烯丙基 ) 氧基 ) 羰基 )( 甲基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-5-(3- 膦醯基丙氧基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ) 吡啶甲酸標題化合物係藉由在實例2.56.1中用實例1.31.11替代實例1.22.5製備。MS (ESI) m/e 1336.2 (M+Na) +。 2.60.2   4-[(1E)-3-({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-5- (3- 膦醯基丙氧基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ]( 甲基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 丙 -1- 烯 -1- 基 ]-2-({N-[6-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 己醯基 ]- β - 丙胺醯基 } 胺基 ) 苯基 β -D- 葡萄哌喃糖苷醛酸標題化合物係藉由在實例2.56.2中用實例1.60.1替代實例1.56.1製備。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 9.03 (s, 1H) 8.25 (s, 1H), 8.01 (d, 1H), 7.83-7.91 (m, 1H), 7.75 (dd, 2H), 7.42-7.58 (m, 2H), 7.34 (t, 1H), 7.28 (s, 1H), 6.93-7.15 (m, 6H), 6.56 (d, 1H), 6.09-6.24 (m, 1H), 5.01 (s, 3H), 4.80-4.92 (m, 2H), 4.57-4.69 (m, 3H), 4.12-4.21 (m, 6H), 3.86-3.94 (m, 7H), 3.28-3.47 (m, 12H), 2.77-2.96 (m, 6H), 2.52-2.58 (m, 2H), 2.09 (s, 3H), 1.90-2.05 (m, 4H), 1.65-1.78 (m, 2H), 0.90-1.53 (m, 16H), 0.80 (m, 6H)。MS (ESI) m/e 1529.5 (M+H) +。 2.61 合成 4-[(1E)-3-({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](3- 膦醯基丙基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 丙 -1- 烯 -1- 基 ]-2-({N-[6-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 己醯基 ]- β - 丙胺醯基 } 胺基 ) 苯基 β -D- 葡萄哌喃糖苷醛酸 ( 合成子 HX) 2.61.1 3-(1-((3-(2-(((((E)-3-(3-(3- 胺基丙醯胺基 )-4-(((2S,3R,4S,5S,6S) -6- 羧基 -3,4,5- 三羥基四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 ) 氧基 ) 苯基 ) 烯丙基 ) 氧基 ) 羰基 )(3- 膦醯基丙基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ) 吡啶甲酸標題化合物係藉由在實例2.56.1中用實例1.14.4替代實例1.22.5製備。MS (ESI) m/e 1304.3 (M-H) -。 2.61.2   4-[(1E)-3-({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](3- 膦醯基丙基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 丙 -1- 烯 -1- 基 ]-2-({N-[6-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 己醯基 ]- β - 丙胺醯基 } 胺基 ) 苯基 β -D- 葡萄哌喃糖苷醛酸標題化合物係藉由在實例2.56.2中用實例1.61.1替代實例1.56.1製備。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 9.03 (s, 1H), 8.25 (br s, 1H), 8.03 (d, 1H), 7.89 (br m, 1H), 7.79 (d, 1H), 7.61 (d, 1H), 7.53 (br m, 1H), 7.46 (m, 2H), 7.37 (m, 2H), 7.28 (s, 1H), 7.11 (br d, 1H), 7.03 (d, 1H), 6.98 (s, 2H), 6.97 (d, 1H), 6.56 (m, 1H), 6.17 (m,1H), 4.96 (s, 2H), 4.86 (br m, 1 H), 4.64 (br d, 2H), 3.88 (m, 3H), 3.79 (br m, 2H), 3.27-3.44 (m, 14H), 3.01 (m, 2H), 2.54 (m, 2H), 2.08 (s, 3H), 2.03 (t, 2H), 1.46 (m, 6H), 1.37 (br m, 2H), 1.28-0.90 (m, 10H), 0.77-0.82 (m, 6H)。MS (ESI-) m/e 1497.4 (M-H) -。 2.62 合成 4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](2- 磺基乙基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ]-3-[2-(2-{[3-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 丙醯基 ] 胺基 } 乙氧基 ) 乙氧基 ] 苯基 β -D- 葡萄哌喃糖苷醛酸 ( 合成子 HY) 2.62.1 三乙酸 (2S,3R,4S,5S,6S)-2-(4- 甲醯基 -3- 羥基苯氧基 )-6-( 甲氧基羰基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -3,4,5- 三基酯將2,4-二羥基苯甲醛(15 g)及三乙酸(2S,3R,4S,5S,6S)-2-溴-6-(甲氧基羰基)四氫-2H-哌喃-3,4,5-三基酯(10 g)溶解於乙腈中，隨後添加碳酸銀(10 g)並將反應物加熱至49℃。攪拌4小時後，冷卻反應物，過濾並濃縮。將粗標題化合物懸浮於二氯甲烷中且經矽藻土過濾並濃縮。殘餘物藉由矽膠層析法，用1-100%乙酸乙酯/庚烷溶離來純化，得到標題化合物。 2.62.2 三乙酸 (2S,3R,4S,5S,6S)-2-(3- 羥基 -4-( 羥基甲基 ) 苯氧基 )-6-( 甲氧基羰基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -3,4,5- 三基酯將實例2.62.1 (16.12 g)於四氫呋喃(200 mL)及甲醇(200 mL)中之溶液冷卻至0℃且逐份添加硼氫化鈉(1.476 g)。攪拌反應20分鐘並用水:飽和碳酸氫鈉水溶液之1:1混合物(400 mL)淬滅。濾出所得固體並用乙酸乙酯沖洗。分離各相且水層用乙酸乙酯萃取四次。合併之有機層經硫酸鎂乾燥，過濾並濃縮。粗標題化合物經由矽膠層析法，用1-100%乙酸乙酯/庚烷溶離來純化，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 473.9 (M+NH 4) +。 2.62.3 三乙酸 (2S,3R,4S,5S,6S)-2-(4-((( 第三丁基二甲基矽烷基 ) 氧基 ) 甲基 )-3- 羥基苯氧基 )-6-( 甲氧基羰基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -3,4,5- 三基酯在-5℃下，向於二氯甲烷(168 mL)中之實例2.62.2 (7.66 g)及第三丁基二甲基矽烷基氯(2.78 g)添加咪唑(2.63 g)並攪拌反應隔夜，使反應物內溫升溫至12℃。將反應混合物倒入飽和氯化銨水溶液中並用二氯甲烷萃取四次。合併之有機物用鹽水洗滌，經硫酸鎂乾燥，過濾並濃縮。粗標題化合物經由矽膠層析法，用1-50%乙酸乙酯/庚烷溶離來純化，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 593.0 (M+Na) +。 2.62.4 三乙酸 (2S,3R,4S,5S,6S)-2-(3-(2-(2-((((9H- 茀 -9- 基 ) 甲氧基 ) 羰基 ) 胺基 ) 乙氧基 ) 乙氧基 )-4-((( 第三丁基二甲基矽烷基 ) 氧基 ) 甲基 ) 苯氧基 )-6-( 甲氧基羰基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -3,4,5- 三基酯向於甲苯(88 mL)中之實例2.62.3 (5.03 g)及三苯基膦(4.62 g)中添加偶氮二甲酸二第三丁酯(4.06 g)並攪拌反應30分鐘。添加 (2-(2-羥基乙氧基)乙基)胺基甲酸(9H-茀-9-基)甲酯並且再攪拌反應1.5小時。將反應物直接裝載至矽膠上並用1-50%乙酸乙酯/庚烷溶離，得到標題化合物。 2.62.5 三乙酸 (2S,3R,4S,5S,6S)-2-(3-(2-(2-((((9H- 茀 -9- 基 ) 甲氧基 ) 羰基 ) 胺基 ) 乙氧基 ) 乙氧基 )-4-( 羥基甲基 ) 苯氧基 )-6-( 甲氧基羰基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -3,4,5- 三基酯在乙酸:水:四氫呋喃之3:1:1溶液(100 mL)中攪拌實例2.62.4 (4.29 g)隔夜。將反應物倒入飽和碳酸氫鈉水溶液中並用乙酸乙酯萃取。有機層經硫酸鎂乾燥，過濾並濃縮。粗標題化合物經由矽膠層析法，用1-50%乙酸乙酯/庚烷溶離來純化，得到標題化合物。 2.62.6 三乙酸 (2S,3R,4S,5S,6S)-2-(3-(2-(2-((((9H- 茀 -9- 基 ) 甲氧基 ) 羰基 ) 胺基 ) 乙氧基 ) 乙氧基 )-4-((((4- 硝基苯氧基 ) 羰基 ) 氧基 ) 甲基 ) 苯氧基 )-6-( 甲氧基羰基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -3,4,5- 三基酯向實例2.62.5 (0.595 g)及碳酸雙(4-硝基苯基)酯(0.492 g)於N,N-二甲基甲醯胺(4 mL)中之溶液中添加N-乙基-N-異丙基丙-2-胺(0.212 mL)。1.5小時後，在高真空下濃縮反應物。將反應物直接裝載至矽膠上並使用1-50%乙酸乙酯/庚烷溶離，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 922.9 (M+Na) +。 2.62.7 3-(1-((3-(2-((((2-(2-(2- 胺基乙氧基 ) 乙氧基 )-4-(((2S,3R,4S,5S,6S) -6- 羧基 -3,4,5- 三羥基四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 ) 氧基 ) 苯甲基 ) 氧基 ) 羰基 )(2- 磺基乙基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ) 吡啶甲酸向實例1.2.9 (0.073 g)及實例2.62.6 (0.077 g)於N,N-二甲基甲醯胺(0.5 mL)中之溶液中添加N,N-二異丙基乙胺(0.066 mL)，並攪拌反應隔夜。濃縮反應物，且將殘餘物溶解於四氫呋喃(0.5 mL)及甲醇(0.5 mL)並用氫氧化鋰單水合物(0.047 g)於水(0.5 mL)中之溶液處理。1小時後，用N,N-二甲基甲醯胺及水稀釋反應物且藉由添加三氟乙酸(0.116 mL)淬滅。混合物使用Gilson系統，藉由逆相HPLC，用10-75%乙腈/含0.1% v/v三氟乙酸之水溶離來純化。合併所需溶離份並冷凍乾燥，得到標題化合物。 2.62.8   4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](2- 磺基乙基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ]-3-[2-(2-{[3-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 丙醯基 ] 胺基 } 乙氧基 ) 乙氧基 ] 苯基 β -D- 葡萄哌喃糖苷醛酸在室溫下攪拌實例2.62.7 (0.053 g)、3-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)丙酸2,5-二側氧基吡咯啶-1-基酯(0.012 g)及N,N-二異丙基乙胺(0.033 mL)於N,N-二甲基甲醯胺(0.75 mL)中之溶液。攪拌1小時後，用N,N-二甲基甲醯胺及水稀釋反應物。混合物使用Gilson系統，藉由逆相HPLC，用10-75%乙腈/含0.1% v/v三氟乙酸之水溶離來純化。合併所需溶離份並冷凍乾燥，得到標題化合物。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 12.85 (s, 1H), 8.04 (d, 2H), 7.79 (d, 1H), 7.61 (d, 1H), 7.54 (d, 1H), 7.51-7.40 (m, 2H), 7.40-7.31 (m, 3H), 7.20 (d, 1H), 7.00-6.94 (m, 3H), 6.73-6.57 (m, 2H), 5.06 (t, 1H), 5.01-4.91 (m, 4H), 3.96-3.85 (m, 2H), 3.85-3.78 (m, 2H), 3.78-3.69 (m, 2H), 3.59 (t, 2H), 3.53-3.34 (m, 6H), 3.34-3.21 (m, 4H), 3.17 (q, 2H), 3.02 (t, 2H), 2.66 (t, 2H), 2.33 (t, 2H), 2.10 (s, 3H), 1.44-0.90 (m, 16H), 0.83 (d, 6H)。MS (-ESI) m/e 1432.4 (M-H) -。 2.63 合成 4-[(1E)-3-({[2-({3-[(4-{2- 羧基 -6-[8-([1,3] 噻唑并 [4,5-b] 吡啶 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ] 吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](3- 膦醯基丙基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 丙 -1- 烯 -1- 基 ]-2-({N-[6-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 己醯基 ]- β - 丙胺醯基 } 胺基 ) 苯基 β -D- 葡萄哌喃糖苷醛酸 ( 合成子 IB) 2.63.1 3-(1-((3-(2-(((((E)-3-(3-(3- 胺基丙醯胺基 )-4-(((2S,3R,4S,5S,6S) -6- 羧基 -3,4,5- 三羥基四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 ) 氧基 ) 苯基 ) 烯丙基 ) 氧基 ) 羰基 )(3- 膦醯基丙基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-6-(8-( 噻唑并 [4,5-b] 吡啶 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ) 吡啶甲酸標題化合物係藉由在實例2.56.1中用實例1.39.2替代實例1.22.5製備。 2.63.2   4-[(1E)-3-({[2-({3-[(4-{2- 羧基 -6-[8-([1,3] 噻唑并 [4,5-b] 吡啶 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ] 吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](3- 膦醯基丙基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 丙 -1- 烯 -1- 基 ]-2-({N-[6-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 己醯基 ]- β - 丙胺醯基 } 胺基 ) 苯基 β -D- 葡萄哌喃糖苷醛酸標題化合物係藉由在實例2.56.2中用實例2.63.1替代實例1.56.1製備。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 9.03 (s, 1H), 8.61 (d, 1H), 8.55 (d, 1H), 8.25 (br s, 1H), 7.89 (br m, 1H), 7.65 (d, 1H), 7.50 (br d, 1H), 7.46 (d, 1H), 7.39 (m, 2H), 7.28 (s, 1H), 7.11 (br d, 1H), 7.03 (d, 1H), 6.98 (s, 2H), 6.97 (d, 1H), 6.56 (m, 1H), 6.17 (m,1H), 4.97 (s, 2H), 4.86 (br m, 1 H), 4.64 (br d, 2H), 3.88 (m, 3H), 3.79 (br m, 2H), 3.27-3.44 (m, 14H), 3.01 (m, 2H), 2.54 (m, 2H), 2.08 (s, 3H), 2.03 (t, 2H), 1.46 (m, 6H), 1.37 (br m, 2H), 1.28-0.90 (m, 10H), 0.77-0.82 (m, 6H)。MS (ESI) m/e 1498.3 (M-H) -。 2.64 合成 6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-3-{1-[(3-{2-[(2- 羧基乙基 )({[(2E)-3-(4-{[(2S,3R,4S,5S,6S)-6- 羧基 -3,4,5- 三羥基四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 ] 氧基 }-3-[(3-{[6-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 己醯基 ] 胺基 } 丙醯基 ) 胺基 ] 苯基 ) 丙 -2- 烯 -1- 基 ] 氧基 } 羰基 ) 胺基 ] 乙氧基 }-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 } 吡啶 -2- 甲酸 ( 合成子 IE) 2.64.1 3-(1-((3-(2-(((((E)-3-(3-(3- 胺基丙醯胺基 )-4-(((2S,3R,4S,5S,6S) -6- 羧基 -3,4,5- 三羥基四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 ) 氧基 ) 苯基 ) 烯丙基 ) 氧基 ) 羰基 )(2- 羧基乙基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ) 吡啶甲酸三氟乙酸鹽向實例1.25.2 (0.050 g)及實例2.44.7 (0.061 g)於N,N-二甲基甲醯胺(1 mL)中之溶液中添加N,N-二異丙基乙胺(0.047 mL)，並在室溫下攪拌反應隔夜。濃縮反應物，且將殘餘物溶解於甲醇(0.5 mL)及四氫呋喃(0.5 mL)中並用氫氧化鋰水合物(0.034 g)於水(0.5 mL)中之溶液處理。在室溫下攪拌反應1小時。用三氟乙酸(0.083 mL)淬滅反應並用N,N-二甲基甲醯胺(1 mL) 稀釋。混合物使用Gilson系統，藉由逆相HPLC，用10-75%乙腈/含0.1% v/v三氟乙酸之水溶離來純化。合併所需溶離份並冷凍乾燥，得到標題化合物。 2.64.2   6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-3-{1-[(3-{2-[(2- 羧基乙基 )({[(2E)-3-(4-{[(2S,3R,4S,5S,6S)-6- 羧基 -3,4,5- 三羥基四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 ] 氧基 }-3-[(3-{[6-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 己醯基 ] 胺基 } 丙醯基 ) 胺基 ] 苯基 ) 丙 -2- 烯 -1- 基 ] 氧基 } 羰基 ) 胺基 ] 乙氧基 }-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 } 吡啶 -2- 甲酸向實例2.64.1 (0.042 g)及6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己酸2,5-二側氧基吡咯啶-1-基酯(10 mg)於N,N-二甲基甲醯胺(0.5 mL)中之溶液中添加N,N-二異丙基乙胺(0.027 mL)，並在室溫下攪拌反應2小時。用N,N-二甲基甲醯胺(1 mL)及水(0.5 mL)稀釋反應物。混合物使用Gilson系統，藉由逆相HPLC，用10-75%乙腈/含0.1% v/v三氟乙酸之水溶離來純化。合併所需溶離份並冷凍乾燥，得到標題化合物。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 12.85 (s, 1H), 9.04 (s, 1H), 8.25 (s, 1H), 8.03 (d, 1H), 7.87 (t, 1H), 7.79 (d, 1H), 7.61 (d, 1H), 7.54-7.40 (m, 3H), 7.40-7.31 (m, 2H), 7.28 (s, 1H), 7.10 (d, 1H), 7.04 (d, 1H), 6.98 (s, 2H), 6.95 (d, 1H), 6.57 (d, 1H), 6.24-6.11 (m, 1H), 4.96 (s, 2H), 4.86 (t, 1H), 4.65 (d, 2H), 3.95-3.84 (m, 2H), 3.84-3.75 (m, 4H), 3.44-3.24 (m, 10H), 3.01 (t, 2H), 2.62-2.52 (m, 4H), 2.09 (s, 3H), 2.03 (t, 2H), 1.46 (h, 4H), 1.40-1.31 (m, 2H), 1.30-0.88 (m, 14H), 0.87-0.75 (m, 6H)。MS (ESI) m/e 1447.5 (M-H) -。 2.65 合成 6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-3-{1-[(3-{2-[(2- 羧基乙基 ){[(4-{[(2S,3R,4S,5S,6S)-6- 羧基 -3,4,5- 三羥基四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 ] 氧基 }-2-[2-(2-{[3-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 丙醯基 ] 胺基 } 乙氧基 ) 乙氧基 ] 苯甲基 ) 氧基 ] 羰基 } 胺基 ] 乙氧基 }-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 } 吡啶 -2- 甲酸 ( 合成子 II) 2.65.1 3-(1-((3-(2-((((2-(2-(2- 胺基乙氧基 ) 乙氧基 )-4-(((2S,3R,4S,5S,6S) -6- 羧基 -3,4,5- 三羥基四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 ) 氧基 ) 苯甲基 ) 氧基 ) 羰基 )(2- 羧基乙基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ) 吡啶甲酸將實例1.25.2 (0.055 g)、實例2.62.6 (0.060 g)及N,N-二異丙基乙胺(0.052 mL)於N,N-二甲基甲醯胺(0.4 mL)中之溶液攪拌隔夜。濃縮反應物，且將殘餘物溶解於四氫呋喃(0.5 mL)、甲醇(0.5 mL)中，接著用氫氧化鋰水合物(0.037 g)於水(0.5 mL)中之溶液處理。攪拌1小時後，用三氟乙酸(0.091 mL)淬滅反應並用N,N-二甲基甲醯胺(1 mL)稀釋。混合物使用Gilson系統，藉由逆相HPLC，用10-75%乙腈/含0.1% v/v三氟乙酸之水溶離來純化。合併所需溶離份並冷凍乾燥，得到呈三氟乙酸鹽形式之標題化合物。 2.65.2   6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-3-{1-[(3-{2-[(2- 羧基乙基 ){[(4-{[(2S,3R,4S,5S,6S)-6- 羧基 -3,4,5- 三羥基四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 ] 氧基 }-2-[2-(2-{[3-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 丙醯基 ] 胺基 } 乙氧基 ) 乙氧基 ] 苯甲基 ) 氧基 ] 羰基 } 胺基 ] 乙氧基 }-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 } 吡啶 -2- 甲酸在室溫下攪拌實例2.65.1之三氟乙酸鹽(0.043)、3-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)丙酸2,5-二側氧基吡咯啶-1-基酯(10 mg)及N,N-二異丙基乙胺(0.028 mL)一起於N,N-二甲基甲醯胺(1 mL)中之溶液。攪拌1小時後，用N,N-二甲基甲醯胺(0.5 mL)及水(0.5 mL)稀釋反應物。混合物使用Gilson系統，藉由逆相HPLC，用5-75%乙腈/含0.1% v/v三氟乙酸之水溶離來純化。合併所需溶離份並冷凍乾燥，得到標題化合物。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 12.84 (s, 1H), 8.03 (d, 1H), 8.00 (t, 1H), 7.79 (d, 1H), 7.62 (d, 1H), 7.54-7.41 (m, 3H), 7.36 (td, 2H), 7.29 (s, 1H), 7.19 (d, 1H), 6.97 (s, 2H), 6.95 (d, 1H), 6.67 (d, 1H), 6.60 (dd, 1H), 5.14-5.03 (m, 1H), 4.96 (d, 4H), 4.08 (tt, 4H), 3.89 (q, 4H), 3.84-3.77 (m, 2H), 3.71 (t, 2H), 3.59 (t, 2H), 3.52-3.35 (m, 6H), 3.28 (dq, 4H), 3.17 (q, 2H), 3.01 (t, 2H), 2.46 (d, 1H), 2.33 (t, 2H), 2.09 (s, 3H), 1.45-0.90 (m, 12H), 0.82 (d, 6H)。MS (ESI) m/e 1396.4 (M-H) -。 2.66 合成 N-[6-( 乙烯基磺醯基 ) 己醯基 ]-L- 纈胺醯基 -N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](2- 磺基乙基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ] 苯基 }-N 5- 胺甲醯基 -L- 鳥胺醯胺 ( 合成子 KY) 2.66.1   3-(1-((3-(2-((((4-((S)-2-((S)-2- 胺基 -3- 甲基丁醯胺基 )-5-脲基戊醯胺基)苯甲基)氧基)羰基)(2-磺基乙基)胺基)乙氧基)-5,7-二甲基金剛烷-1-基)甲基)-5-甲基-1H-吡唑-4-基)-6-(8-(苯并[d]噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)吡啶甲酸 向實例1.2.9 (57 mg)及((S)-3-甲基-1-(((S)-1-((4-((((4-硝基苯氧基)羰基)氧基)甲基)苯基)胺基)-1-側氧基-5-脲基戊-2-基)胺基)-1-側氧基丁-2-基)胺基甲酸(9H-茀-9-基)甲酯(54 mg)於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)中之混合物中添加N,N-二異丙基乙胺(103 μL)。攪拌混合物隔夜，並添加二乙胺(61.5 μL)。攪拌所得混合物4小時且使用Gilson系統及C18管柱，藉由逆相HPLC，用10-70%乙腈/含0.1% v/v三氟乙酸之水溶離來純化，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 1257.4 (M-H)。 2.66.2   N-[6-( 乙烯基磺醯基 ) 己醯基 ]-L- 纈胺醯基 -N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](2- 磺基乙基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ] 苯基 }-N 5- 胺甲醯基 -L- 鳥胺醯胺標題化合物係使用實例2.83中之程序，分別用實例2.66.1及實例2.82.5替代實例1.2.9及6-(2-氯乙醯胺基)己酸2,5-二側氧基吡咯啶-1-基酯製備。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 12.88 (s, 0H), 9.99 (s, 1H), 8.05 (t, 2H), 7.80 (t, 2H), 7.60 (q, 3H), 7.36 (td, 2H), 7.28 (d, 3H), 7.01-6.89 (m, 2H), 6.29-6.15 (m, 2H), 6.02 (s, 1H), 4.97 (d, 4H), 4.40 (td, 1H), 4.20 (t, 1H), 4.00-3.77 (m, 4H), 3.55-3.33 (m, 4H), 3.25 (d, 2H), 3.14-2.88 (m, 6H), 2.62 (t, 2H), 2.09 (s, 4H), 1.82-0.90 (m, 10H), 0.84 (dd, 13H)。MS (ESI) m/e 1447.2 (M+H)。 2.67 合成 4-[(1E)-3-{[(4-{[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](3- 膦醯基丙基 ) 胺基 } 哌啶 -1- 基 ) 羰基 ] 氧基 } 丙 -1- 烯 -1- 基 ]-2-({N-[6-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 己醯基 ]- β - 丙胺醯基 } 胺基 ) 苯基 β -D- 葡萄哌喃糖苷醛酸 ( 合成子 IW) 2.67.1 3-(1-((3-(2-((1-((((E)-3-(3-(3- 胺基丙醯胺基 )-4-(((2S,3R,4S,5S,6S)-6-羧基-3,4,5-三羥基四氫-2H-哌喃-2-基)氧基)苯基)烯丙基)氧基)羰基)哌啶-4-基)(3-膦醯基丙基)胺基)乙氧基)-5,7-二甲基金剛烷-1-基)甲基)-5-甲基-1H-吡唑-4-基)-6-(8-(苯并[d]噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)吡啶甲酸 向實例1.26.2 (0.045 g)及實例2.44.7 (0.053 g)於N,N-二甲基甲醯胺(1 mL)中之溶液中添加N,N-二丙基乙胺(0.041 mL)，並在室溫下攪拌反應隔夜。濃縮反應物，且將殘餘物溶解於甲醇(0.5 mL)及四氫呋喃(0.5 mL)中並在室溫下，用氫氧化鋰單水合物(0.030 g)於水(0.5 mL)中之溶液處理。攪拌1小時後，用三氟乙酸(0.073 mL)淬滅反應並用N,N-二甲基甲醯胺(1 mL)稀釋。混合物使用Gilson系統，藉由逆相HPLC，用10-60%乙腈/含0.1% v/v三氟乙酸之水溶離來純化。合併所需溶離份並冷凍乾燥，得到標題化合物。 2.67.2   4-[(1E)-3-{[(4-{[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基](3-膦醯基丙基)胺基}哌啶-1-基)羰基]氧基}丙-1-烯-1-基]-2-({N-[6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯基]-β-丙胺醯基}胺基)苯基β-D-葡萄哌喃糖苷醛酸 向實例2.67.1 (0.040 g)及6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己酸2,5-二側氧基吡咯啶-1-基酯(9.84 mg)於N,N-二甲基甲醯胺(1 mL)中之溶液中添加N,N-二異丙基乙胺(0.023 mL)，並在室溫下攪拌反應2小時。用N,N-二甲基甲醯胺(1 mL)及水(1 mL)稀釋反應物。混合物使用Gilson系統，藉由逆相HPLC，用10-60%乙腈/含0.1% v/v三氟乙酸之水溶離來純化。合併所需溶離份並冷凍乾燥，得到標題化合物。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 9.28 (s, 1H), 9.04 (s, 1H), 8.25 (s, 1H), 8.03 (d, 1H), 7.87 (t, 1H), 7.79 (d, 1H), 7.62 (dd, 1H), 7.55-7.40 (m, 3H), 7.36 (td, 2H), 7.29 (s, 1H), 7.11 (dd, 1H), 7.05 (d, 1H), 6.98 (s, 2H), 6.95 (d, 1H), 6.59 (d, 1H), 6.20 (t, 1H), 6.16 (t, 0H), 4.96 (s, 2H), 4.88 (d, 1H), 4.66 (d, 2H), 4.14 (d, 2H), 3.96-3.86 (m, 2H), 3.83 (s, 2H), 3.54 (t, 7H), 3.48-3.28 (m, 12H), 3.01 (t, 2H), 2.84 (s, 2H), 2.55 (t, 2H), 2.10 (s, 3H), 2.07-1.95 (m, 4H), 1.88 (s, 2H), 1.73-1.54 (m, 4H), 1.54-1.38 (m, 6H), 1.39-1.26 (m, 4H), 1.26-0.93 (m, 8H), 0.86 (s, 6H)。MS (ESI) m/e 1582.4 (M+H) +。 2.68 合成 4-[(1E)-3-{[(4-{[2-({3-[(4-{2- 羧基 -6-[8-([1,3] 噻唑并 [4,5-b] 吡啶 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ] 吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](3- 膦醯基丙基 ) 胺基 } 哌啶 -1- 基 ) 羰基 ] 氧基 } 丙 -1- 烯 -1- 基 ]-2-({N-[6-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 己醯基 ]- β - 丙胺醯基 } 胺基 ) 苯基 β -D- 葡萄哌喃糖苷醛酸 ( 合成子 IY) 2.68.1 3-(1-((3-(2-((1-((((E)-3-(3-(3- 胺基丙醯胺基 )-4-(((2S,3R,4S,5S,6S) -6- 羧基 -3,4,5- 三羥基四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 ) 氧基 ) 苯基 ) 烯丙基 ) 氧基 ) 羰基 ) 哌啶 -4- 基 )(3- 膦醯基丙基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-6-(8-( 噻唑并 [4,5-b] 吡啶 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ) 吡啶甲酸標題化合物係藉由在實例2.56.1中用實例1.50.2替代實例1.44.7製備。MS (ESI) m/e 1388.5 (M-H) -。 2.68.2   4-[(1E)-3-{[(4-{[2-({3-[(4-{2- 羧基 -6-[8-([1,3] 噻唑并 [4,5-b] 吡啶 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ] 吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](3- 膦醯基丙基 ) 胺基 } 哌啶 -1- 基 ) 羰基 ] 氧基 } 丙 -1- 烯 -1- 基 ]-2-({N-[6-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 己醯基 ]- β - 丙胺醯基 } 胺基 ) 苯基 β -D- 葡萄哌喃糖苷醛酸標題化合物係藉由在實例2.56.2中用實例1.68.1替代實例1.56.1製備。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 9.03 (s, 1H), 8.61 (d, 1H), 8.50 (d, 1H), 8.25 (br s, 1H), 7.89 (t, 1H), 7.65 (d, 1H), 7.49 (d, 1H), 7.46 (d, 1H), 7.36 (m, 2H), 7.29 (s, 1H), 7.11 (br d, 1H), 7.03 (d, 1H), 6.98 (s, 2H), 6.97 (d, 1H), 6.58 (m, 1H), 6.17 (m,1H), 4.97 (s, 2H), 4.88 (d, 1 H), 4.65 (br d, 2H), 3.88 (m, 3H), 3.79 (br m, 2H), 3.66 (br m, 2H), 3.27-3.44, (m, 14H), 3.01 (m, 2H), 2.85 (br m, 2H), 2.54 (m, 2H), 2.10 (s, 3H), 2.03 (t, 2H), 1.98 (br m, 2H), 1.89 (m, 1H), 1.62 (m, 4H), 1.46 (m, 6H), 1.31 (m, 4H), 1.15 (m, 6H), 1.04 (m, 2H), 0.86 (s, 6H)。MS (ESI) m/e 1581.4 (M-H) -。 2.69 合成 4-[(1E)-3-({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 ) 萘 -2- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](2- 磺基乙基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 丙 -1- 烯 -1- 基 ]-2-({N-[6-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 己醯基 ]-β- 丙胺醯基 } 胺基 ) 苯基 β-D- 葡萄哌喃糖苷醛酸 ( 合成子JA) 2.69.1 3-(1-((3-(2-(((((E)-3-(3-(3- 胺基丙醯胺基 )-4-(((2S,3R,4S,5S,6S)-6 - 羧基 -3,4,5- 三羥基四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 ) 氧基 ) 苯基 ) 烯丙基 ) 氧基 ) 羰基 )(2- 磺基乙基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 ) 萘 -2- 基 ) 吡啶甲酸標題化合物係藉由在實例2.56.1中用實例1.43.7替代實例2.44.7製備。MS (ESI) m/e 1309.1 (M+Na) +。 2.69.2   4-[(1E)-3-({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 ) 萘 -2- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](2- 磺基乙基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 丙 -1- 烯 -1- 基 ]-2-({N-[6-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 己醯基 ]- β - 丙胺醯基 } 胺基 ) 苯基 β -D- 葡萄哌喃糖苷醛酸標題化合物係藉由在實例2.56.2中用實例2.69.1替代實例2.56.1製備。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 13.09 (s, 1H), 9.02 (s, 2H), 8.35 (d, 1H), 8.13-8.29 (m, 4H), 7.86-8.09 (m, 5H), 7.81 (d, 1H), 7.66-7.75 (m, 1H), 7.44-7.55 (m, 1H), 7.37 (t, 1H), 7.09-7.18 (m, 1H), 7.03 (d, 1H), 6.98 (s, 1H), 6.48-6.62 (m, 1H), 6.07-6.22 (m, 1H), 4.81-4.92 (m, 1H), 4.58-4.74 (m, 2H), 3.80-3.93 (m, 3H), 3.27-3.37 (m, 5H), 2.53-2.68 (m, 4H), 2.15-2.23 (m, 3H), 2.03 (t, 2H), 1.36-1.53 (m, 6H), 0.97-1.33 (m, 24H), 0.81 (d, 6H)。MS (ESI) m/e 1478.3(M-H) -。 2.70 本段有意留白。 2.71 本段有意留白。 2.72 本段有意留白。 2.73 本段有意留白。 2.74 本段有意留白。 2.75 本段有意留白。 2.76 本段有意留白。 2.77 合成 6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-3-[1-({3-[2-({N-[6-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 己醯基 ]-3- 磺基 -L- 丙胺醯基 } 胺基 ) 乙氧基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ] 吡啶 -2- 甲酸 ( 合成子 FA)向實例1.15 (0.023 g)及6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己酸2,5-二側氧基吡咯啶-1-基酯(9.12 mg)於N,N-二甲基甲醯胺(0.5 mL)中之溶液中添加N,N-二異丙基乙胺(0.012 mL)，並攪拌反應隔夜。用N,N-二甲基甲醯胺(1 mL)及水(0.5 mL)稀釋反應物。混合物使用Gilson系統，藉由逆相HPLC，用10-85%乙腈/含0.1% v/v三氟乙酸之水溶離來純化。合併所需溶離份並冷凍乾燥，得到標題化合物。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 12.84 (s, 1H), 8.04 (d, 1H), 7.90 (d, 1H), 7.79 (d, 1H), 7.65-7.57 (m, 2H), 7.54 (d, 1H), 7.51-7.41 (m, 2H), 7.40-7.31 (m, 3H), 7.01-6.96 (m, 3H), 4.96 (s, 2H), 4.34-4.28 (m, 3H), 3.89 (t, 2H), 3.83 (s, 2H), 3.37 (t, 2H), 3.29 (t, 2H), 3.16-2.95 (m, 4H), 2.80 (dd, 1H), 2.70 (dd, 1H), 2.11 (s, 3H), 2.06 (t, 2H), 1.47 (tt, 4H), 1.40-0.92 (m, 12H), 0.84 (s, 6H)。MS (ESI) m/e 1090.3 (M+H) +。 2.78 合成 6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-3-[1-({3-[2-(2-{[6-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 己醯基 ](2- 磺基乙基 ) 胺基 } 乙氧基 ) 乙氧基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ] 吡啶 -2- 甲酸 ( 合成子 FJ)標題化合物係如實例2.1中所描述，分別用實例1.11.4及6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己酸全氟苯酯替代實例1.2.9及碳酸4-((S)-2-((S)-2-(6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯胺基)-3-甲基丁醯胺基)-5-脲基戊醯胺基)苯甲酯(4-硝基苯基)酯製備。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸 -d 6 ) δ ppm 12.84 (s, 1H), 8.04 (d, 1H), 7.79 (d, 1H), 7.61 (d, 1H), 7.52 (dd, 1H), 7.42-7.49 (m, 2H), 7.33-7.39 (m, 2H), 7.30 (s, 1H), 6.98 (s, 2H), 6.96 (d, 1H), 4.95 (s, 2H), 3.89 (t, 2H), 3.82 (s, 2H), 3.46-3.56 (m, 4H), 3.31-3.46 (m, 10H), 3.01 (t, 2H), 2.61-2.68 (m, 1H), 2.55-2.60 (m, 1H), 2.21-2.32 (m, 2H), 2.10 (s, 3H), 1.40-1.51 (m, 4H), 1.37 (d, 2H), 0.91-1.30 (m, 12H), 0.83 (s, 6H)。MS (ESI) m/e 1091.2 (M+H) +。 2.79 合成 6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-3-(1-{[3-(2-{[6-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 己醯基 ](2- 磺基乙基 ) 胺基 } 乙氧基 )-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ] 甲基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶 -2- 甲酸 ( 合成子 FK)標題化合物係如實例2.1中所描述，用6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己酸全氟苯酯替代碳酸4-((S)-2-((S)-2-(6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯胺基)-3-甲基丁醯胺基)-5-脲基戊醯胺基)苯甲酯(4-硝基苯基)酯製備。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 12.85 (s, 1H), 8.04 (d, 1H), 7.79 (d, 1H), 7.61 (d, 1H), 7.52 (dd, 1H), 7.41-7.49 (m, 2H), 7.32-7.39 (m, 2H), 7.28 (s, 1H), 6.93-6.98 (m, 3H), 4.95 (s, 2H), 3.89 (t, 2H), 3.81 (s, 2H), 3.32-3.38 (m, 2H), 3.21-3.27 (m, 2H), 3.01 (t, 2H), 2.61-2.67 (m, 2H), 2.53-2.58 (m, 2H), 2.33-2.39 (m, 1H), 2.20-2.29 (m, 2H), 2.09 (s, 3H), 1.40-1.51 (m, 4H), 1.34 (s, 2H), 0.93-1.27 (m, 13H), 0.83 (s, 6H)。MS (ESI) m/e 1047.2 (M+H) +。 2.80 合成 6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-3-{1-[(3-{[1-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 )-21- 側氧基 -22-(2- 磺基乙基 )-3,6,9,12,15,18- 六氧雜 -22- 氮雜二十四烷 -24- 基 ] 氧基 }-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 } 吡啶 -2- 甲酸 ( 合成子 FQ)標題化合物係如實例2.1中所描述，用1-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)-3,9,12,15,18-五氧雜二十烷-21-酸全氟苯酯替代碳酸4-((S)-2-((S)-2-(6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯胺基)-3-甲基丁醯胺基)-5-脲基戊醯胺基)苯甲酯(4-硝基苯基)酯製備。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 12.84 (s, 1H), 8.04 (d, 1H), 7.79 (d, 1H), 7.61 (d, 1H), 7.42-7.54 (m, 3H), 7.33-7.38 (m, 2H), 7.28 (s, 1H), 6.95 (dd, 1H), 4.95 (s, 2H), 3.89 (t, 2H), 3.81 (s, 2H), 3.07-3.53 (m, 24H), 3.01 (t, 2H), 2.61-2.69 (m, 1H), 2.54-2.60 (m, 1H), 2.09 (s, 3H), 1.96 (d, 2H), 0.92-1.39 (m, 13H), 0.84 (s, 6H)。MS (ESI) m/e 1269.4 (M+H) +。 2.81 合成 6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-3-{1-[(3-{[1-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 )-21- 側氧基 -22-(2- 磺基乙基 )-3,6,9,12,15,18,25- 七氧雜 -22- 氮雜二十七烷 -27- 基 ] 氧基 }-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 } 吡啶 -2- 甲酸 ( 合成子 FR)標題化合物係如實例2.1中所描述，分別用實例1.11.4及1-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)-3,6,9,12,15,18-六氧雜二十烷-21-酸全氟苯酯替代實例1.2.9及碳酸4-((S)-2-((S)-2-(6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯胺基)-3-甲基丁醯胺基)-5-脲基戊醯胺基)苯甲酯(4-硝基苯基)酯製備。 1H NMR (500 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 12.84 (s, 1H), 8.04 (d, 1H), 7.79 (d, 1H), 7.61 (d, 1H), 7.52 (d, 1H), 7.41-7.50 (m, 2H), 7.33-7.39 (m, 2H), 7.31 (s, 1H), 7.01 (d, 2H), 6.97 (d, 1H), 4.96 (s, 2H), 3.89 (t, 2H), 3.83 (s, 2H), 3.31-3.60 (m, 30H), 3.01 (t, 2H), 2.64-2.71 (m, 1H), 2.53-2.61 (m, 3H), 2.10 (s, 3H), 1.38 (s, 2H), 1.20-1.31 (m, 4H), 1.12-1.18 (m, 2H), 0.91-1.12 (m, 4H), 0.84 (s, 6H)。 2.82 合成 6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-3-(1-{[3-(2-{[6-( 乙烯基磺醯基 ) 己醯基 ](2- 磺基乙基 ) 胺基 } 乙氧基 )-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ] 甲基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶 -2- 甲酸 ( 合成子 JE) 2.82.1   6-((2- 羥基乙基 ) 硫基 ) 己酸乙酯將6-溴己酸乙酯(3 g)、2-巰基乙醇(0.947 mL)及K 2CO 3(12 g)於乙醇(100 mL)中之混合物攪拌隔夜並過濾。濃縮濾液。將殘餘物溶解於二氯甲烷(100 mL)中並用水及鹽水洗滌。有機層經硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮，得到標題化合物。 2.82.2   6-((2- 羥基乙基 ) 硫基 ) 己酸將實例2.82.1 (12 g)及3 M NaOH水溶液(30 mL)於乙醇(30 mL)中之混合物攪拌隔夜。減壓移除有機物。殘留水相用乙酸乙酯洗滌，用HCl酸化至pH 5並用二氯甲烷萃取。合併萃取液，經硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮，得到標題化合物。 2.82.3   6-((2- 羥基乙基 ) 磺醯基 ) 己酸向實例2.82.2 (4 g)於水(40 mL)及1,4-二噁烷(160 mL)之混合物中之經攪拌溶液中添加Oxone® (38.4 g)，且攪拌混合物隔夜。過濾混合物，並濃縮濾液。殘留水層用二氯甲烷萃取。合併萃取液且經硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮，得到標題化合物。 2.82.4   6-( 乙烯基磺醯基 ) 己酸向實例2.82.3 (1 g)於二氯甲烷(10 mL)中之冷(0℃)溶液中添加三乙胺(2.8 mL)，隨後在氬氣下添加甲烷磺醯氯(1.1 mL)。攪拌混合物隔夜並用水及鹽水洗滌。有機層經硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮，得到標題化合物。 2.82.5   6-( 乙烯基磺醯基 ) 己酸 2,5- 二側氧基吡咯啶 -1- 基酯向實例2.82.4 (0.88 g)於二氯甲烷(10 ml)中之經攪拌溶液中添加1-羥基吡咯啶-2,5-二酮(0.54 g)及N,N'-二環己基碳化二亞胺(0.92 g)。攪拌混合物隔夜並過濾。濃縮濾液且藉由急驟層析法，用10-25%乙酸乙酯/石油溶離來純化，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 304.1 (M+1)。 2.82.6   6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-3-(1-{[3-(2-{[6-( 乙烯基磺醯基 ) 己醯基 ](2- 磺基乙基 ) 胺基 } 乙氧基 )-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ] 甲基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶 -2- 甲酸標題化合物係如實例2.83中所描述，用實例2.82.5替代6-(2-氯乙醯胺基)己酸2,5-二側氧基吡咯啶-1-基酯製備。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 12.86 (s, 1H), 8.04 (d, 1H), 7.79 (d, 1H), 7.61 (d, 1H), 7.53 (dd, 1H), 7.42-7.49 (m, 2H), 7.33-7.40 (m, 2H), 7.28 (s, 1H), 6.88-7.00 (m, 2H), 6.17-6.25 (m, 2H), 4.95 (s, 2H), 3.89 (t, 2H), 3.81 (s, 2H), 3.38 (dd, 2H), 3.25 (t, 2H), 3.04-3.12 (m, 2H), 3.01 (t, 2H), 2.62-2.69 (m, 1H), 2.56 (dd, 1H), 2.27 (q, 2H), 2.09 (s, 3H), 1.53-1.62 (m, 2H), 1.43-1.51 (m, 2H), 1.28-1.38 (m, 4H), 1.20-1.27 (m, 4H), 0.92-1.19 (m, 6H), 0.84 (s, 6H)。MS (ESI) m/e 1042.2 (M+H) +。 2.83 合成 6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-3-{1-[(3-{2-[{6-[( 氯乙醯基 ) 胺基 ] 己醯基 }(2- 磺基乙基 ) 胺基 ] 乙氧基 }-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 } 吡啶 -2- 甲酸 ( 合成子 JM)向實例1.2.9 (12.5 mg)及6-(2-氯乙醯胺基)己酸2,5-二側氧基吡咯啶-1-基酯(6.7 mg)於N,N-二甲基甲醯胺(1.5 mL)中之混合物中添加N,N-二異丙基乙胺(26 μL)。攪拌混合物10天且使用Gilson系統及C18管柱，藉由逆相HPLC，用20-60%乙腈/含0.1% v/v三氟乙酸之水溶離來純化，得到標題化合物。 1H NMR (500 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 12.83 (s, 1H), 8.15-8.21 (m, 1H), 8.04 (d, 1H), 7.79 (d, 1H), 7.61 (d, 1H), 7.52 (dd, 1H), 7.41-7.49 (m, 2H), 7.32-7.39 (m, 2H), 7.28 (s, 1H), 6.96 (dd, 1H), 4.95 (s, 2H), 4.01 (d, 2H), 3.89 (t, 2H), 3.81 (s, 2H), 3.39 (d, 2H), 3.25 (t, 2H), 2.98-3.10 (m, 5H), 2.62-2.70 (m, 1H), 2.56-2.61 (m, 1H), 2.23-2.30 (m, 2H), 2.09 (s, 3H), 1.33-1.52 (m, 5H), 1.19-1.30 (m, 6H), 0.91-1.18 (m, 6H), 0.84 (s, 6H)。MS (ESI) m/e 1043.2 (M+H) +。 2.84 合成 N-[6-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 己醯基 ]-L- 纈胺醯基 -N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](3- 羧基丙基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ] 苯基 }-N 5- 胺甲醯基 -L- 鳥胺醯胺 ( 合成子 LE)在室溫下，攪拌實例1.56 (0.020 g)、碳酸4-((S)-2-((S)-2-(6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯胺基)-3-甲基丁醯胺基)-5-脲基戊醯胺基)苯甲酯(4-硝基苯基)酯(0.022 g)及N,N-二異丙基乙胺(0.018 mL)一起於N,N-二甲基甲醯胺(0.4 mL)中之混合物。攪拌5小時後，用N,N-二甲基甲醯胺及水之1:1混合物(2 mL)稀釋反應物。混合物使用Gilson系統，藉由逆相HPLC，用10-85%乙腈/含0.1% v/v三氟乙酸之水溶離來純化。合併所需溶離份並冷凍乾燥，得到標題化合物。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 12.82 (s, 1H), 9.97 (s, 1H), STOTTS (m, 2H), 7.84-7.72 (m, 2H), 7.67-7.54 (m, 3H), 7.54-7.41 (m, 3H), 7.40-7.32 (m, 2H), 7.30-7.23 (m, 3H), 6.99 (s, 2H), 6.94 (d, 1H), 5.99 (s, 1H), 4.98 (s, 2H), 4.95 (s, 2H), 4.45-4.35 (m, 2H), 4.19 (dd, 2H), 3.88 (t, 2H), 3.82-3.76 (m, 2H), 3.47-3.31 (m, 4H), 3.28-3.19 (m, 4H), 3.07-2.89 (m, 4H), 2.21-2.11 (m, 4H), 2.09 (s, 2H), 2.02-1.89 (m, 1H), 1.77-1.63 (m, 2H), 1.62-1.27 (m, 10H), 1.27-0.90 (m, 13H), 0.88-0.78 (m, 12H)；MS (ESI) m/e 1430.3 (M+1) +。 2.85 合成 N-{6-[( 溴乙醯基 ) 胺基 ] 己醯基 }-L- 纈胺醯基 -N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](2- 磺基乙基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ] 苯基 }-N 5- 胺甲醯基 -L- 鳥胺醯胺 ( 合成子 LH) 2.85.1   6-(2- 溴乙醯胺基 ) 己酸 1H- 苯并 [d][1,2,3] 三唑 -1- 基酯向6-(2-溴乙醯胺基)己酸(105 mg)及六氟磷酸(苯并三唑-1-基氧基)三吡咯啶基鏻(PyBOP，325 mg)於N,N-二甲基甲醯胺(3 mL)中之溶液中添加三乙胺(87 μL)。攪拌混合物1小時且藉由Gilson HPLC系統(C18管柱)，用20-60%乙腈/0.1% TFA水溶離來純化，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 368.7 (M+H)。 2.85.2N-{6-[(溴乙醯基)胺基]己醯基}-L-纈胺醯基-N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基](2-磺基乙基)胺甲醯基}氧基)甲基]苯基}-N 5-胺甲醯基-L-鳥胺醯胺 向實例2.66.1 (6.6 mg)及實例2.85.2 (3.6 mg)於N,N-二甲基甲醯胺(0.3 mL)中之混合物中添加N,N-二異丙基乙胺(2.52 μL)。攪拌混合物5分鐘，用二甲亞碸稀釋且使用Gilson系統及C18管柱，藉由逆相HPLC，用20-60%乙腈/含0.1% v/v三氟乙酸之水溶離來純化，得到標題化合物。 1H NMR (500 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ 9.99 (s, 1H), 8.24 (s, 1H), 8.08 (d, 1H), 8.04 (d, 1H), 7.80 (dd, 2H), 7.60 (q, 3H), 7.56-7.50 (m, 1H), 7.50-7.41 (m, 2H), 7.36 (q, 2H), 7.32-7.25 (m, 3H), 6.96 (d, 1H), 4.98 (d, 4H), 4.39 (q, 1H), 4.20 (dd, 1H), 3.92-3.68 (m, 6H), 3.42 (dd, 1H), 3.25 (t, 2H), 3.09-2.87 (m, 6H), 2.64 (s, 2H), 2.25-1.87 (m, 5H), 1.79-0.89 (m, 17H), 0.88-0.67 (m, 12H)。MS (ESI) m/e 1492.5 (M-H)。 2.86 合成 4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](3- 羧基丙基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ]-3-[2-(2-{[3-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 丙醯基 ] 胺基 } 乙氧基 ) 乙氧基 ] 苯基 β -D- 葡萄哌喃糖苷醛酸 ( 合成子 LJ) 2.86.1 3-(1-((3-(2-((((2-(2-(2- 胺基乙氧基 ) 乙氧基 )-4-(((2S,3R,4S,5S,6S)-6-羧基-3,4,5-三羥基四氫-2H-哌喃-2-基)氧基)苯甲基)氧基)羰基)(3-羧基丙基)胺基)乙氧基)-5,7-二甲基金剛烷-1-基)甲基)-5-甲基-1H-吡唑-4-基)-6-(8-(苯并[d]噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)吡啶甲酸 向實例1.56 (0.024 g)及實例2.62.6 (0.030 g)於N,N-二甲基甲醯胺(0.4 mL)中之溶液中添加N,N-二異丙基乙胺(0.025 mL)，並攪拌反應隔夜。濃縮反應物，且將殘餘物溶解於四氫呋喃(0.5 mL)及甲醇(0.5 mL)中並用氫氧化鋰水合物(0.018 g)於水(0.5 mL)中之溶液處理。攪拌1小時後，用N,N-二甲基甲醯胺(1 mL)稀釋反應物且使用Gilson系統，藉由逆相HPLC，用10-75%乙腈/含0.1% v/v三氟乙酸之水溶離來純化。合併所需溶離份並冷凍乾燥，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 1262.7 (M+H) +。 2.86.2   4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基](3-羧基丙基)胺甲醯基}氧基)甲基]-3-[2-(2-{[3-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)丙醯基]胺基}乙氧基)乙氧基]苯基β-D-葡萄哌喃糖苷醛酸 向實例2.86.1 (0.0173 g)及3-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)丙酸2,5-二側氧基吡咯啶-1-基酯(4.38 mg)於N,N-二甲基甲醯胺(0.8 mL)中之溶液中添加3-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)丙酸2,5-二側氧基吡咯啶-1-基酯(4.38 mg)，並攪拌反應2小時。用N,N-二甲基甲醯胺:水之1:1混合物(1 mL)稀釋反應物，且混合物使用Gilson系統，藉由逆相HPLC，用10-80%乙腈/含0.1% v/v三氟乙酸之水溶離來純化。合併所需溶離份並冷凍乾燥，得到標題化合物。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 12.77 (s, 1H), 8.03 (d, 1H), 7.99 (t, 1H), 7.77 (d,1H), 7.62 (d, 1H), 7.55-7.41 (m, 3H), 7.40-7.32 (m, 2H), 8.28 (s, 1H), 7.23-7.17 (m, 1H), 6.97 (s, 2H), 6.94 (d, 1H), 6.66 (s, 1H), 6.60 (dd, 1H), 5.07 (m, 1H), 5.00-4.91 (m, 4H), 4.17-4.02 (m, 2H), 3.96-3.85 (m, 2H), 3.85-3.76 (m, 2H), 3.71 (t, 2H), 3.64-3.56 (m, 4H), 3.34-3.12 (m, 10H), 3.01 (, 2H), 2.33 (t, 2H), 2.24-2.12 (m, 2H), 2.09 (s, 3H), 1.70 (p, 2H), 1.45-0.88 (m, 12H), 0.88-0.77 (m, 6H)； MS (ESI) m/e 1434.2 (M+Na) +。 2.87 合成 4-({[(4-{[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](3- 羧基丙基 ) 胺基 } 哌啶 -1- 基 ) 羰基 ] 氧基 } 甲基 )-3-[2-(2-{[3-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 丙醯基 ] 胺基 } 乙氧基 ) 乙氧基 ] 苯基 β -D- 葡萄哌喃糖苷醛酸 ( 合成子MA) 2.87.1 3-(1-((3-(2-((1-(((2-(2-(2- 胺基乙氧基 ) 乙氧基 )-4-(((2S,3R,4S,5S,6S) -6- 羧基 -3,4,5- 三羥基四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 ) 氧基 ) 苯甲基 ) 氧基 ) 羰基 ) 哌啶 -4- 基 )(3- 羧基丙基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ) 吡啶甲酸用N,N-二異丙基乙胺(0.042 mL)處理實例1.42 (0.050 g)及實例2.62.6 (0.050 g)於N,N-二甲基甲醯胺(0.5 mL)中之溶液，並在室溫下攪拌反應2小時。濃縮反應物，且將殘餘物溶解於甲醇(0.5 mL)及四氫呋喃(0.5 mL)中並用氫氧化鋰水合物(0.031 g)於水(0.5 mL)中之溶液處理。攪拌反應1.5小時並用N,N-二甲基甲醯胺(1 mL)稀釋。混合物使用Gilson系統，藉由逆相HPLC，用10-80%乙腈/含0.1% v/v三氟乙酸之水溶離來純化。合併所需溶離份並冷凍乾燥，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 1345.7 (M+H) +。 2.87.2   4-({[(4-{[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基](3-羧基丙基)胺基}哌啶-1-基)羰基]氧基}甲基)-3-[2-(2-{[3-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)丙醯基]胺基}乙氧基)乙氧基]苯基 β-D-葡萄哌喃糖苷醛酸 用N,N-二異丙基乙胺(0.031 mL)處理實例2.87.1 (0.047 g)及3-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)丙酸2,5-二側氧基吡咯啶-1-基酯(0.011 g)於N,N-二甲基甲醯胺(0.5 mL)中之溶液，並在室溫下攪拌反應2小時。用N,N-二甲基甲醯胺:水之1:1混合物(2 mL)稀釋反應物。混合物使用Gilson系統，藉由逆相HPLC，用10-85%乙腈/含0.1% v/v三氟乙酸之水溶離來純化。合併所需溶離份並冷凍乾燥，得到標題化合物。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 12.87 (s, 1H), 8.96 (s, 1H), 8.15-8.07 (m, 2H), 7.88 (d, J= 8.1 Hz, 1H), 7.71 (d, J= 7.5 Hz, 1H), 7.62-7.50 (m, 3H), 7.50-7.45 (m, 1H), 7.45-7.42 (m, 1H), 7.37 (s, 1H), 7.33-7.27 (m, 1H), 7.07 (s, 2H), 7.07-7.02 (m, 1H), 6.80-6.74 (m, 1H), 6.72-6.66 (m, 1H), 5.23-5.14 (m, 1H), 5.13-5.00 (m, 4H), 4.27-4.12 (m, 4H), 4.06-3.95 (m, 4H), 3.92 (s, 2H), 3.83-3.78 (m, 2H), 3.57-3.32 (m, 10H), 3.32-3.14 (m, 4H), 3.14-3.06 (m, 2H), 2.90 (s, 2H), 2.49-2.37 (m, 4H), 2.19 (s, 3H), 2.12-2.01 (m, 2H), 2.02-1.88 (m, 2H), 1.74-1.57 (m, 2H), 1.52 (s, 2H), 1.45-1.30 (m, 4H), 1.30-1.05 (m, 6H), 0.95 (s, 6H)；MS (ESI) m/e 1495.4 (M+H) +。 2.88 合成 4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](3- 磺基丙基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ]-3-[2-(2-{[3-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 丙醯基 ] 胺基 } 乙氧基 ) 乙氧基 ] 苯基 β -D- 葡萄哌喃糖苷醛酸 ( 合成子 MD) 2.88.1 3-(1-((3-(2-((((2-(2-(2- 胺基乙氧基 ) 乙氧基 )-4-(((2S,3R,4S,5S,6S) -6- 羧基 -3,4,5- 三羥基四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 ) 氧基 ) 苯甲基 ) 氧基 ) 羰基 )(3- 磺基丙基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ) 吡啶甲酸用N,N-二異丙基乙胺(0.035 mL)處理實例1.6 (0.039 g)及實例2.62.6 (0.041 g)於N,N-二甲基甲醯胺(0.5 mL)中之溶液，並在室溫下攪拌反應2小時。濃縮反應物，且將殘餘物溶解於甲醇(0.5 mL)及四氫呋喃(0.5 mL)中並用氫氧化鋰水合物(0.025 g)於水(0.5 mL)中之溶液處理。攪拌反應1.5小時並用N,N-二甲基甲醯胺(1 mL)稀釋。混合物使用Gilson系統，藉由逆相HPLC，用10-80%乙腈/含0.1% v/v三氟乙酸之水溶離來純化。合併所需溶離份並冷凍乾燥，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 1297.8 (M+H) +。 2.88.2   4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基](3-磺基丙基)胺甲醯基}氧基)甲基]-3-[2-(2-{[3-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)丙醯基]胺基}乙氧基)乙氧基]苯基β-D-葡萄哌喃糖苷醛酸 向實例2.88.1 (0.024 g)及3-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)丙酸2,5-二側氧基吡咯啶-1-基酯(6.40 mg)於N,N-二甲基甲醯胺(0.5 mL)中之溶液中添加N,N-二異丙基乙胺(0.016 mL)，並在室溫下攪拌反應1小時。用N,N-二甲基甲醯胺:水之1:1混合物(2 mL)稀釋反應物。混合物使用Gilson系統，藉由逆相HPLC，用10-80%乙腈/含0.1% v/v三氟乙酸之水溶離來純化。合併所需溶離份並冷凍乾燥，得到標題化合物。 1H NMR (500 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 12.87 (s, 1H), 8.09-8.02 (m, 2H), 7.79 (d, 1H), 7.61 (d, 1H), 7.52 (dd, 1H), 7.50-7.42 (m, 2H), 7.40-7.33 (m, 2H), 7.31 (s, 1H), 7.20 (t, 1H), 6.98 (s, 3H), 6.66 (s, 1H), 6.60 (dd, 1H), 5.06 (t, 1H), 4.96 (s, 4H), 4.10 (dq, 4H), 3.81 (d, 4H), 3.71 (t, 2H), 3.59 (t, 2H), 3.51-3.35 (m, 4H), 3.26 (td, 6H), 3.17 (q, 2H), 3.01 (t, 2H), 2.35 (dt, 4H), 2.10 (d, 3H), 1.75 (d, 2H), 1.44-0.88 (m, 12H), 0.82 (d, 6H)；MS (ESI) m/e 1446.4 (M-H) -。 2.89 合成 N-[6-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 己醯基 ]-L- 纈胺醯基 -N-[4-({[(3-{[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](2- 磺基乙基 ) 胺基 } 氮雜環丁烷 -1- 基 ) 羰基 ] 氧基 } 甲基 ) 苯基 ]-N 5- 胺甲醯基 -L- 鳥胺醯胺 ( 合成子 MG)在室溫下，將實例1.60 (0.026 g)、碳酸4-((S)-2-((S)-2-(6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯胺基)-3-甲基丁醯胺基)-5-脲基戊醯胺基)苯甲酯(4-硝基苯基)酯(0.024 g)及N,N-二異丙基乙胺(0.022 mL)一起於N,N-二甲基甲醯胺(0.8 mL)中之溶液攪拌3小時。用N,N-二甲基甲醯胺:水之1:1混合物(2 mL)稀釋反應物。混合物使用Gilson系統，藉由逆相HPLC，用10-80%乙腈/含0.1% v/v三氟乙酸之水溶離來純化。合併所需溶離份並冷凍乾燥，得到標題化合物。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 12.85 (s, 1H), 9.99 (s, 1H), 8.06 (d, 1H), 8.03 (d, 1H), 7.79 (dd, 2H), 7.60 (dd, 3H), 7.55-7.41 (m, 3H), 7.36 (td, 2H), 7.29 (t, 3H), 6.99 (s, 2H), 6.95 (d, 1H), 5.99 (s, 1H), 5.04-4.92 (m, 4H), 4.37 (q, 1H), 4.34-4.24 (m, 1H), 4.24-4.10 (m, 4H), 3.88 (t, 2H), 3.82 (s, 2H), 3.40-3.29 (m, 4H), 3.01 (t, 2H), 2.99-2.91 (m, 1H), 2.87 (t, 2H), 2.25-2.06 (m, 5H), 1.95 (dt, 1H), 1.68 (s, 1H), 1.60 (s, 1H), 1.54-1.24 (m, 12H), 1.24-0.94 (m, 9H), 0.90-0.78 (m, 12H)； MS (ESI) m/e 1507.4 (M+H) +。 2.90 合成 6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-3-{1-[(3-{[26-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 )-8,24- 二側氧基 -3-(2- 磺基乙基 )-11,14,17,20- 四氧雜 -3,7,23- 三氮雜二十六烷 -1- 基 ] 氧基 }-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 } 吡啶 -2- 甲酸 ( 合成子 MS)在0℃下，向實例1.61.2 (15 mg)及1-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)-3-側氧基-7,10,13,16-四氧雜-4-氮雜十九烷-19-酸2,5-二側氧基吡咯啶-1-基酯(16.91 mg)於N,N-二甲基甲醯胺(0.8 mL)中之混合物中添加N,N-二異丙基乙胺(28.8 μL)。攪拌混合物3小時且使用Gilson系統及C18管柱，藉由逆相HPLC，用20-60%乙腈/含0.1%三氟乙酸之水溶離來純化，得到標題化合物。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 12.87 (s, 1H), 8.98 (s, 1H), 8.08-7.92 (m, 3H), 7.79 (d, 1H), 7.62 (d, 1H), 7.57-7.41 (m, 3H), 7.36 (td, 2H), 7.29 (s, 1H), 7.04-6.92 (m, 3H), 4.96 (s, 2H), 3.89 (t, 2H), 3.83 (s, 2H), 3.48 (d, 4H), 3.44-3.17 (m, 3H), 3.18-2.83 (m, 10H), 2.38-2.24 (m, 4H), 2.11 (s, 3H), 1.78 (m, 2H), 1.50-0.94 (m, 12H), 0.86 (s, 6H)。MS (ESI) m/e 1309.3 (M-H)。 2.91 合成 N-[6-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 己醯基 ]-L- 纈胺醯基 -N-[4-({[(3-{[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](2- 磺基乙基 ) 胺基 } 丙基 ) 胺甲醯基 ] 氧基 } 甲基 ) 苯基 ]-N 5- 胺甲醯基 -L- 鳥胺醯胺 ( 合成子 MR)在0℃下，向實例1.61.2 (12.8 mg)及碳酸4-((S)-2-((S)-2-(6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯胺基)-3-甲基丁醯胺基)-5-脲基戊醯胺基)苯甲酯(4-硝基苯基)酯(10.4 mg)於N,N-二甲基甲醯胺(0.5 mL)中之混合物中添加N,N-二異丙基乙胺(24.54 μL)。攪拌混合物3小時且使用Gilson系統及C18管柱，藉由逆相HPLC，用20-60%乙腈/含0.1%三氟乙酸之水溶離來純化，得到標題化合物。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 12.85 (s, 1H), 9.97 (s, 1H), 8.97 (s, 1H), 8.04 (t, 2H), 7.79 (dd, 2H), 7.65-7.40 (m, 7H), 7.36 (td, 3H), 7.28 (d, 3H), 6.99 (s, 2H), 6.95 (d, 1H), 5.98 (s, 1H), 4.95 (d, 4H), 4.49-4.30 (m, 1H), 4.24-4.11 (m, 1H), 3.88 (t, 2H), 3.82 (s, 2H), 3.36 (t, 3H), 3.18-2.84 (m, 9H), 2.25-1.88 (m, 5H), 1.85-0.90 (m, 14H), 0.91-0.75 (m, 13H)。MS (ESI) m/e (M+H)。 2.92 合成 N-{6-[( 碘乙醯基 ) 胺基 ] 己醯基 }-L- 纈胺醯基 -N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](2- 磺基乙基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ] 苯基 }-N 5- 胺甲醯基 -L- 鳥胺醯胺 ( 合成子 MQ)在冰浴中，向實例1.2.9 (8.2 mg)及6-(2-碘乙醯胺基)己酸2,5-二側氧基吡咯啶-1-基酯(4.7 mg)於N,N-二甲基甲醯胺(0.3 mL)中之混合物中添加N,N-二異丙基乙胺(3 μL)。在0℃下攪拌混合物1.5小時。用二甲亞碸稀釋反應物，且混合物使用Gilson系統及C18管柱，藉由逆相HPLC，用20-60%乙腈/含0.1%三氟乙酸之水溶離來純化，得到標題化合物。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 12.87 (s, 1H),10.00 (s, 1H), 8.21 (d, 1H), 8.06 (dd, 2H), 7.81 (dd, 2H), 7.60 (t, 3H), 7.48 (ddd, 3H), 7.36 (td, 2H), 7.28 (d, 3H), 6.95 (d, 1H), 4.97 (d, 4H), 4.39 (q, 1H), 4.19 (t, 1H), 3.88 (t, 2H), 3.80 (d, 2H), 3.25 (d, 2H), 2.97 (dq, 6H), 2.63 (s, 2H), 2.25-1.88 (m, 5H), 1.78-0.70 (m, 29H)。MS (ESI) m/e 1538.4 (M-H)。 2.93 合成 N-{6-[( 乙烯基磺醯基 ) 胺基 ] 己醯基 }-L- 纈胺醯基 -N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](2- 磺基乙基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ] 苯基 }-N 5- 胺甲醯基 -L- 鳥胺醯胺 ( 合成子 MZ) 2.93.16-(乙烯基磺醯胺基)己酸甲酯 在0℃下，向氯化6-甲氧基-6-側氧基己-1-銨(0.3 g)及三乙胺(1.15 mL)於二氯甲烷中之溶液中逐滴添加乙烯磺醯氯(0.209 g)。使反應混合物升溫至室溫並攪拌1小時。用二氯甲烷稀釋混合物並用鹽水洗滌。有機層經硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 471.0 (2M+H) +。 2.93.2   6-( 乙烯基磺醯胺基 ) 己酸將實例2.93.1 (80 mg)及氫氧化鋰單水合物(81 mg)於四氫呋喃(1 mL)及水(1 mL)之混合物中之溶液攪拌2小時，接著用水(20 mL)稀釋，並用乙醚(10 mL)洗滌。水層用1N HCl水溶液酸化至pH 4並用二氯甲烷(3×10 mL)萃取。有機層用鹽水(5 mL)洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮，得到標題化合物。 2.93.3   6-( 乙烯基磺醯胺基 ) 己酸 2,5- 二側氧基吡咯啶 -1- 基酯將實例2.93.2 (25 mg)、1-乙基-3-[3-(二甲基胺基)丙基]-碳化二亞胺鹽酸鹽(43.3 mg)及1-羥基吡咯啶-2,5-二酮(15.6 mg)於二氯甲烷(8 mL)之混合物攪拌隔夜，用飽和氯化銨水溶液及鹽水洗滌並濃縮，得到標題化合物。 2.93.4   N-{6-[( 乙烯基磺醯基 ) 胺基 ] 己醯基 }-L- 纈胺醯基 -N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](2- 磺基乙基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ] 苯基 }-N5- 胺甲醯基 -L- 鳥胺醯胺標題化合物係如實例2.83中所描述，分別用實例2.66.1及實例2.93.3替代實例1.2.9及6-(2-氯乙醯胺基)己酸2,5-二側氧基吡咯啶-1-基酯製備。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 12.85 (s, 1H), 9.98 (s, 1H), 8.05 (dd, 2H), 7.79 (d, 2H), 7.60 (t, 3H), 7.55-7.40 (m, 3H), 7.36 (td, 2H), 7.27 (d, 3H), 7.19 (t, 1H), 6.95 (d, 1H), 6.66 (dd, 1H), 6.09-5.90 (m, 2H), 4.97 (d, 4H), 4.39 (q, 1H), 4.20 (t, 1H), 3.88 (t, 2H), 3.80 (d, 2H), 3.25 (d, 2H), 2.97 (dt, 4H), 2.78 (q, 2H), 2.64 (q, 2H), 2.22-1.86 (m, 6H), 1.77-0.89 (m, 16H), 0.89-0.72 (m, 12H)。MS (ESI) m/e 1460.6 (M-H)。 2.94 合成 6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-3-(1-{[3-(2-{[3-({6-[( 碘乙醯基 ) 胺基 ] 己醯基 } 胺基 ) 丙基 ](2- 磺基乙基 ) 胺基 } 乙氧基 )-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ] 甲基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶 -2- 甲酸 ( 合成子 NA)標題化合物係使用實例2.83中之程序，分別用實例2.61.2及6-(2-碘乙醯胺基)己酸2,5-二側氧基吡咯啶-1-基酯替代實例1.2.9及6-(2-氯乙醯胺基)己酸2,5-二側氧基吡咯啶-1-基酯製備。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 12.87 (s, 1H), 8.98 (s, 1H), 8.20 (t, 1H), 8.04 (d, 1H), 7.91 (t, 1H), 7.79 (d, 1H), 7.62 (d, 1H), 7.53 (d, 1H), 7.50-7.41 (m, 2H), 7.36 (td, 2H), 7.29 (s, 1H), 6.96 (d, 1H), 4.96 (s, 2H), 3.89 (t, 2H), 3.83 (s, 2H), 3.06 (dt, 8H), 2.89 (t, 2H), 2.17-1.99 (m, 5H), 1.76 (s, 2H), 1.56-0.93 (m, 14H), 0.86 (s, 6H)。MS (ESI) m/e 1190.3 (M-H)。 2.95 合成 6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-3-{1-[(3-{2-[(3-{[6-( 乙烯基磺醯基 ) 己醯基 ] 胺基 } 丙基 )(2- 磺基乙基 ) 胺基 ] 乙氧基 }-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 } 吡啶 -2- 甲酸 ( 合成子 NB)標題化合物係使用實例2.83中之程序，分別用實例1.61.2及實例2.82.5替代實例1.2.9及6-(2-氯乙醯胺基)己酸2,5-二側氧基吡咯啶-1-基酯製備。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 12.87 (s, 1H), 8.98 (s, 1H), 8.04 (d, 1H), 7.92 (t, 1H), 7.79 (d, 1H), 7.62 (d, 1H), 7.53 (d, 1H), 7.51-7.41 (m, 2H), 7.36 (td, 2H), 7.29 (s, 1H), 7.01-6.90 (m, 2H), 6.29-6.16 (m, 2H), 4.96 (s, 2H), 3.89 (t, 2H), 3.83 (s, 2H), 3.45-3.19 (m, 2H), 3.19-2.95 (m, 8H), 2.89 (t, 2H), 2.16-1.98 (m, 5H), 1.84-1.66 (m, 2H), 1.64-1.21 (m, 13H), 1.08 (dq, 6H), 0.86 (s, 6H)。MS (ESI) m/e 1199.3 (M+H)。 2.96 合成 N-[3-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 丙醯基 ]-L- 纈胺醯基 -N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[1-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-1,2,3,4- 四氫喹啉 -7- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](2- 磺基乙基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ] 苯基 }-N 5- 胺甲醯基 -L- 鳥胺醯胺 ( 合成子 NP) 2.96.1   (S)-(1-((4-( 羥基甲基 ) 苯基 ) 胺基 )-1- 側氧基 -5- 脲基戊 -2- 基 ) 胺基甲酸 (9H- 茀 -9- 基 ) 甲酯將(S)-2-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-5-脲基戊酸(40 g)溶解於二氯甲烷(1.3L)中。將(4-胺基苯基)甲醇(13.01 g)、六氟磷酸(V) 2-(3H-[1,2,3]三唑并[4,5-b]吡啶-3-基)-1,1,3,3-四甲基異
Figure 111128039-A0304-2
(42.1 g)及N,N-二異丙基乙胺(0.035 L)添加至該溶液中，並在室溫下攪拌所得混合物16小時。藉由過濾收集產物並用二氯甲烷沖洗。真空乾燥合併之固體，得到標題化合物，不經進一步純化即用於下一步驟中。MS (ESI) m/e 503.3 (M+H) +。 2.96.2   (S)-2- 胺基 -N-(4-( 羥基甲基 ) 苯基 )-5- 脲基戊醯胺將實例2.96.1 (44 g)溶解於N,N-二甲基甲醯胺(300 mL)中。用二乙胺(37.2 mL)處理該溶液並在室溫下攪拌一小時。過濾反應混合物，且減壓濃縮溶劑。粗產物藉由鹼性氧化鋁層析法，用0-30%甲醇/乙酸乙酯梯度溶離來純化，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 281.2 (M+H) +。 2.96.3   ((S)-1-(((S)-1-((4-( 羥基甲基 ) 苯基 ) 胺基 )-1- 側氧基 -5- 脲基戊 -2- 基 ) 胺基 )-3- 甲基 -1- 側氧基丁 -2- 基 ) 胺基甲酸第三丁酯將(S)-2-(第三丁氧基羰基胺基)-3-甲基丁酸(9.69 g)溶解於N,N-二甲基甲醯胺(200 mL)中。向該溶液中添加六氟磷酸(V) 2-(3H-[1,2,3]三唑并[4,5-b]吡啶-3-基)-1,1,3,3-四甲基異
Figure 111128039-A0304-2
(18.65 g)，並在室溫下攪拌反應一小時。添加實例2.96.2 (12.5 g)及N,N-二異丙基乙胺(15.58 mL)且在室溫下攪拌反應混合物16小時。減壓濃縮溶劑且殘餘物藉由矽膠層析法，用10%甲醇/二氯甲烷溶離來純化，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 480.2 (M+H) +。 2.96.4   (S)-2-((S)-2- 胺基 -3- 甲基丁醯胺基 )-N-(4-( 羥基甲基 ) 苯基 )-5- 脲基戊醯胺將實例2.96.3 (31.8 g)溶解於二氯甲烷(650 mL)中並將三氟乙酸(4.85 mL)添加至該溶液中。在室溫下攪拌反應混合物三小時。減壓濃縮溶劑，得到粗標題化合物及2,2,2-三氟乙酸4-((S)-2-((S)-2-胺基-3-甲基丁醯胺基)-5-脲基戊醯胺基)苯甲酯之混合物。將粗物質溶解於1:1二噁烷/水溶液(300 mL)中並向該溶液中添加氫氧化鈉(5.55 g)。在室溫下攪拌混合物三小時。真空濃縮溶劑，且粗產物使用CombiFlash系統，藉由逆相HPLC，用5-60%乙腈/含0.05% v/v氫氧化銨之水梯度溶離來純化，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 380.2 (M+H) +。 2.96.5   (S)-2-((S)-2-(3-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 丙醯胺基 )-3- 甲基丁醯胺基 )-N-(4-( 羥基甲基 ) 苯基 )-5- 脲基戊醯胺向實例2.96.4 (38 mg)於N,N-二甲基甲醯胺(1 mL)中之溶液中添加3-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)丙酸2,5-二側氧基吡咯啶-1-基酯(26.7 mg)。在室溫下攪拌反應混合物隔夜且使用Gilson系統，藉由逆相HPLC，用10-85%乙腈/含0.1% v/v三氟乙酸之水梯度溶離來純化，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 531.06 (M+H) +。 2.96.6 碳酸 4-((S)-2-((S)-2-(3-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 丙醯胺基 )-3- 甲基丁醯胺基 )-5- 脲基戊醯胺基 ) 苯甲酯 (4- 硝基苯基 ) 酯向實例2.96.5 (53.1 mg)於N,N-二甲基甲醯胺(3 mL)中之溶液中添加碳酸雙(4-硝基苯基)酯(60.8 mg)。在室溫下攪拌反應混合物隔夜且使用Gilson系統，藉由逆相HPLC，用10-85%乙腈/含0.1% v/v三氟乙酸之水梯度溶離來純化，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 696.2 (M+H) +。 2.96.7   N-[3-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 丙醯基 ]-L- 纈胺醯基 -N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[1-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-1,2,3,4- 四氫喹啉 -7- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](2- 磺基乙基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ] 苯基 }-N5- 胺甲醯基 -L- 鳥胺醯胺標題化合物係如實例2.1中所描述，分別用實例1.24.2及實例2.96.6替代實例1.2.9及碳酸4-((S)-2-((S)-2-(6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯胺基)-3-甲基丁醯胺基)-5-脲基戊醯胺基)苯甲酯(4-硝基苯基)酯製備。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 9.91 (s, 1H), 9.80 (s, 2H), 8.33 (s, 2H), 7.96 (s, 2H), 7.81 (d, 4H), 7.61 (s, 2H), 7.43 (d, 10H), 7.34-7.02 (m, 14H), 5.92 (s, 8H), 4.94-4.70 (m, 6H), 4.18 (d, 11H), 3.85 (s, 8H), 3.05-2.66 (m, 8H), 2.30-2.13 (m, 14H), 2.03-1.49 (m, 2H), 0.92-0.63 (m, 40H)。MS (ESI) m/e 1408.3 (M-H) +。 2.97 合成 6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-3-{1-[(3-{2-[(2- 羧基乙基 ){[(2-{[(2S,3R,4S,5S,6S)-6- 羧基 -3,4,5- 三羥基四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 ] 氧基 }-4-[2-(2-{[3-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 丙醯基 ] 胺基 } 乙氧基 ) 乙氧基 ] 苯甲基 ) 氧基 ] 羰基 } 胺基 ] 乙氧基 }-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 } 吡啶 -2- 甲酸 ( 合成子 NN) 2.97.1   4-(2-(2- 溴乙氧基 ) 乙氧基 )-2- 羥基苯甲醛將2,4-二羥基苯甲醛(1.0 g)、1-溴-2-(2-溴乙氧基)乙烷(3.4 g)及碳酸鉀(1.0 g)於乙腈(30 mL)中之溶液加熱至75℃，保持2天。冷卻反應物，用乙酸乙酯(100 mL)稀釋，用水 (50 mL)及鹽水(50 mL)洗滌，經硫酸鎂乾燥，過濾並濃縮。殘餘物藉由矽膠層析法，用5-30%乙酸乙酯/庚烷梯度溶離來純化，得到標題化合物。MS (ELSD) m/e 290.4 (M+H) +。 2.97.2   4-(2-(2- 疊氮基乙氧基 ) 乙氧基 )-2- 羥基苯甲醛向實例2.97.1 (1.26 g)於N,N-二甲基甲醯胺(10 mL)中之溶液中添加疊氮化鈉(0.43 g)，並在室溫下攪拌反應隔夜。用乙醚(100 mL)稀釋反應物，用水 (50 mL)及鹽水(50 mL)洗滌，經硫酸鎂乾燥，過濾並濃縮。殘餘物藉由矽膠層析法，用5-30%乙酸乙酯/庚烷梯度溶離來純化，得到標題化合物。MS (ELSD) m/e 251.4 (M+H) +。 2.97.3 三乙酸 (2S,3R,4S,5S,6S)-2-(5-(2-(2- 疊氮基乙氧基 ) 乙氧基 )-2- 甲醯基苯氧基 )-6-( 甲氧基羰基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -3,4,5- 三基酯攪拌實例2.97.2 (0.84 g)、三乙酸(3R,4S,5S,6S)-2-溴-6-(甲氧基羰基)四氫-2H-哌喃-3,4,5-三基酯(1.99 g)及氧化銀(I)(1.16 g)一起於乙腈(15 mL)中之溶液。攪拌隔夜後，用二氯甲烷(20 mL)稀釋反應物。矽藻土添加，且過濾反應物並濃縮。殘餘物藉由矽膠層析法，用5-75%乙酸乙酯/庚烷梯度溶離來純化，得到標題化合物。 2.97.4 三乙酸 (2S,3R,4S,5S,6S)-2-(5-(2-(2- 疊氮基乙氧基 ) 乙氧基 )-2-( 羥基甲基 ) 苯氧基 )-6-( 甲氧基羰基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -3,4,5- 三基酯將實例2.97.3 (0.695 g)於甲醇(5 mL)及四氫呋喃(2 mL)中之溶液冷卻至0℃。添加硼氫化鈉(0.023 g)，且使反應物升溫至室溫。攪拌總計1小時後，將反應物倒入乙酸乙酯(75 mL)及水(25 mL)之混合物中，並添加飽和碳酸氫鈉水溶液(10 mL)。分離有機層，用鹽水(50 mL)洗滌，經硫酸鎂乾燥，過濾並濃縮。殘餘物藉由矽膠層析法，用5-85%乙酸乙酯/庚烷梯度溶離來純化，得到標題化合物。MS (ELSD) m/e 551.8 (M-H 2O) -。 2.97.5 三乙酸 (2S,3R,4S,5S,6S)-2-(5-(2-(2- 胺基乙氧基 ) 乙氧基 )-2-( 羥基甲基 ) 苯氧基 )-6-( 甲氧基羰基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -3,4,5- 三基酯在50 mL壓力瓶中，向於四氫呋喃(20 mL)中之實例2.97.4 (0.465 g)中添加5% Pd/C (0.1 g)，且在30 psi氫氣下振盪混合物16小時。過濾反應物並濃縮，得到標題化合物，不經進一步純化即使用。MS (ELSD) m/e 544.1 (M+H) +。 2.97.6 三乙酸 (2S,3R,4S,5S,6S)-2-(5-(2-(2-((((9H- 茀 -9- 基 ) 甲氧基 ) 羰基 ) 胺基 ) 乙氧基 ) 乙氧基 )-2-( 羥基甲基 ) 苯氧基 )-6-( 甲氧基羰基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -3,4,5- 三基酯將實例2.97.5 (0.443 g)於二氯甲烷(8 mL)中之溶液冷卻至0℃，接著添加N,N-二異丙基乙胺(0.214 mL)及氯甲酸(9H-茀-9-基)甲基酯(0.190 g)。1小時後，濃縮反應物。殘餘物藉由矽膠層析法，用5-95%乙酸乙酯/庚烷梯度溶離來純化，得到標題化合物。MS (ELSD) m/e 748.15 (M-OH) -。 2.97.7 三乙酸 (2S,3R,4S,5S,6S)-2-(5-(2-(2-((((9H- 茀 -9- 基 ) 甲氧基 ) 羰基 ) 胺基 ) 乙氧基 ) 乙氧基 )-2-((((4- 硝基苯氧基 ) 羰基 ) 氧基 ) 甲基 ) 苯氧基 )-6-( 甲氧基羰基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -3,4,5- 三基酯向實例2.97.6 (0.444 g)於N,N-二甲基甲醯胺(5 mL)中之溶液中添加N,N-二異丙基乙胺(0.152 mL)及碳酸雙(4-硝基苯基)酯(0.353 g)，並在室溫下攪拌反應。5小時後，濃縮反應物。殘餘物藉由矽膠層析法，用5-90%乙酸乙酯/庚烷梯度溶離來純化，得到標題化合物。 2.97.8 3-(1-((3-(2-((((4-(2-(2- 胺基乙氧基 ) 乙氧基 )-2-(((2S,3R,4S,5S,6S) -6- 羧基 -3,4,5- 三羥基四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 ) 氧基 ) 苯甲基 ) 氧基 ) 羰基 )(2- 羧基乙基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ) 吡啶甲酸三氟乙酸鹽向實例1.25 (0.070 g)及實例2.97.7 (0.070 g)於N,N-二甲基甲醯胺(0.4 mL)中之溶液中添加N,N-二異丙基乙胺(0.066 mL)。攪拌隔夜後，濃縮反應物。將殘餘物溶解於四氫呋喃(0.75 mL)及甲醇(0.75 mL)中，且添加氫氧化鋰單水合物(0.047 g)於水(0.75 mL)中之溶液。3小時後，用N,N-二甲基甲醯胺(1 mL)稀釋反應物並用三氟乙酸(0.116 mL)淬滅。混合物使用Gilson系統，藉由逆相HPLC，用10-75%乙腈/含0.1% v/v三氟乙酸之水溶離來純化。合併所需溶離份並冷凍乾燥，得到標題化合物。 2.97.9   6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-3-(1-((3-(2-((((2-(((2S,3R,4S,5S,6S)-6- 羧基 -3,4,5- 三羥基四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 ) 氧基 )-4-(2-(2-(3-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 丙醯胺基 ) 乙氧基 ) 乙氧基 ) 苯甲基 ) 氧基 ) 羰基 )(2- 羧基乙基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶甲酸將實例2.97.8 (0.027 g)、3-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)丙酸2,5-二側氧基吡咯啶-1-基酯(7.92 mg)及N,N-二異丙基乙胺(0.017 mL)一起於N,N-二甲基甲醯胺(0.4 mL)中之溶液攪拌1小時。用水及N,N-二甲基甲醯胺之1:1混合物(2 mL)淬滅反應。混合物使用Gilson系統，藉由逆相HPLC，用10-75%乙腈/含0.1% v/v三氟乙酸之水溶離來純化。合併所需溶離份並冷凍乾燥，得到標題化合物。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 12.81 (s, 1H), 8.03 (d, 2H), 7.79 (d, 1H), 7.62 (d, 1H), 7.54-7.40 (m, 3H), 7.36 (td, 2H), 7.28 (s, 1H), 7.18 (d, 1H), 6.98 (s, 2H), 6.95 (d, 1H), 6.69 (d, 1H), 6.60 (d, 1H), 5.03 (d, 3H), 4.96 (s, 2H), 4.05 (s, 2H), 3.93 (d, 2H), 3.88 (t, 2H), 3.80 (d, 2H), 3.75-3.67 (m, 2H), 3.59 (t, 6H), 3.29 (q, 6H), 3.17 (q, 2H), 3.01 (t, 2H), 2.47 (d, 2H), 2.33 (t, 2H), 2.09 (s, 3H), 1.44-0.88 (m, 12H), 0.82 (d, 6H)；MS (ESI) m/e 1396.5 (M-H) -。 2.98 合成 N-[6-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 己醯基 ]-3- 磺基 -L- 丙胺醯基 -L- 纈胺醯基 -N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](2- 羧基乙基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ] 苯基 }-N 5- 胺甲醯基 -L- 鳥胺醯胺 ( 合成子 NO) 2.98.1   3-(1-((3-(2-((((4-((S)-2-((S)-2- 胺基 -3- 甲基丁醯胺基 )-5- 脲基戊醯胺基 ) 苯甲基 ) 氧基 ) 羰基 )(2- 羧基乙基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ) 吡啶甲酸在室溫下，將實例1.25.2 (0.059 g)、((S)-3-甲基-1-(((S)-1-((4-((((4-硝基苯氧基)羰基)氧基)甲基)苯基)胺基)-1-側氧基-5-脲基戊-2-基)胺基)-1-側氧基丁-2-基)胺基甲酸(9H-茀-9-基)甲酯(0.053 g)及N,N-二異丙基乙胺(0.055 mL)於N,N-二甲基甲醯胺(0.5 mL)中之溶液攪拌隔夜。將二乙胺(0.066 mL)添加至反應物中，並繼續攪拌30分鐘。用N,N-二甲基甲醯胺及水之1:1混合物(2 mL)稀釋反應物且藉由添加三氟乙酸(0.073 mL)淬滅。混合物使用Gilson系統，藉由逆相HPLC，用10-75%乙腈/含0.1% v/v三氟乙酸之水溶離來純化。合併所需溶離份並冷凍乾燥，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 1223.8 (M+H) +。 2.98.2   3-(1-((3-(2-((((4-((S)-2-((S)-2-((R)-2- 胺基 -3- 磺基丙醯胺基 )-3- 甲基丁醯胺基 )-5- 脲基戊醯胺基 ) 苯甲基 ) 氧基 ) 羰基 )(2- 羧基乙基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ) 吡啶甲酸三氟乙酸鹽將(R)-2-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-3-磺基丙酸(0.021 g)、六氟磷酸O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基
Figure 111128039-A0304-2
(0.020 g)及N,N-二異丙基乙胺(0.031 mL)於N,N-二甲基甲醯胺(0.4 mL)中之溶液攪拌3分鐘。將該溶液添加至實例2.98.1 (0.043 g)於N,N-二甲基甲醯胺(0.4 mL)中之溶液中。攪拌30分鐘後，添加氫氧化鋰單水合物(0.022 g)於水(0.5 mL)中之溶液，並攪拌反應1小時。用a N,N-二甲基甲醯胺及水之1:1混合物(2 mL)稀釋反應物且藉由添加三氟乙酸(0.054 mL)淬滅。混合物使用Gilson系統，藉由逆相HPLC，用10-75%乙腈/含0.1% v/v三氟乙酸之水溶離來純化。合併所需溶離份並冷凍乾燥，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 1376.5 (M+1)。 2.98.3   6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-3-(1-((3-(2-((2- 羧基乙基 )(((4-((S)-2-((S)-2-((R)-2-(6-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 己醯胺基 )-3- 磺基丙醯胺基 )-3- 甲基丁醯胺基 )-5- 脲基戊醯胺基 ) 苯甲基 ) 氧基 ) 羰基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶甲酸將實例2.98.2 (0.025 g)、6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己酸2,5-二側氧基吡咯啶-1-基酯(7.77 mg)及N,N-二異丙基乙胺(0.015 mL)於N,N-二甲基甲醯胺(0.4 mL)中之溶液攪拌1小時。用水及N,N-二甲基甲醯胺之1:1混合物(2 mL)稀釋反應物。混合物使用Gilson系統，藉由逆相HPLC，用10-75%乙腈/含0.1% v/v三氟乙酸之水溶離來純化。合併所需溶離份並冷凍乾燥，得到標題化合物。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 12.85 (s, 1H), 9.46 (s, 1H), 8.20 (d, 1H), 8.07 (d, 1H), 8.03 (d, 1H), 8.00 (d, 1H), 7.79 (d, 1H), 7.69 (d, 2H), 7.61 (d, 1H), 7.51 (d, 1H), 7.49-7.45 (m, 1H), 7.43 (d, 1H), 7.36 (td, 2H), 7.29 (s, 1H), 7.25 (d, 2H), 6.97 (s, 2H), 6.95 (d, 1H), 4.98 (s, 2H), 4.96 (s, 2H), 4.73 (s, 2H), 4.16 (s, 2H), 4.03 (dd, 2H), 3.88 (t, 2H), 3.81 (s, 2H), 3.51-3.32 (m, 6H), 3.28 (t, 2H), 3.09 (dd, 1H), 3.06-2.94 (m, 4H), 2.89 (dd, 1H), 2.46 (d, 2H), 2.16 (dd, 1H), 2.09 (d, 4H), 1.74 (s, 2H), 1.62-1.29 (m, 8H), 1.29-0.92 (m, 12H), 0.92-0.78 (m, 12H)。MS (ESI) m/e 1566.6 (M-H) -。 2.99 合成對照合成子 4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ]( 甲基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ]-2-({N-[6-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 己醯基 ]- β - 丙胺醯基 } 胺基 ) 苯基 β -D- 葡萄哌喃糖苷醛酸 ( 合成子 H) 2.99.1 三乙酸 (2S,3R,4S,5S,6S)-2-(4- 甲醯基 -2- 硝基苯氧基 )-6-( 甲氧基羰基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -3,4,5- 三基酯向三乙酸(2R,3R,4S,5S,6S)-2-溴-6-(甲氧基羰基)四氫-2H-哌喃-3,4,5-三基酯(4 g)於乙腈(100 mL))中之溶液中添加氧化銀(I)(10.04 g)及4-羥基-3-硝基苯甲醛(1.683 g)。在室溫下攪拌反應混合物4小時並過濾。濃縮濾液，且殘餘物藉由矽膠層析法，用5-50%乙酸乙酯/庚烷溶離來純化，得到標題化合物。MS (ESI) m/e (M+18) +。 2.99.2 三乙酸 (2S,3R,4S,5S,6S)-2-(4-( 羥基甲基 )-2- 硝基苯氧基 )-6-( 甲氧基羰基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -3,4,5- 三基酯向實例2.99.1 (6 g)於氯仿(75 mL)及異丙醇(18.75 mL)之混合物中之溶液中添加0.87 g矽膠。將所得混合物冷卻至0℃，添加NaBH 4(0.470 g)，且在0℃下攪拌所得懸浮液45分鐘。用二氯甲烷(100 mL)稀釋反應混合物且經矽藻土過濾。用水及鹽水洗滌濾液並濃縮，得到粗產物，不經進一步純化即使用。MS (ESI) m/e (M+NH 4) +。 2.99.3 三乙酸 (2S,3R,4S,5S,6S)-2-(2- 胺基 -4-( 羥基甲基 ) 苯氧基 )-6-( 甲氧基羰基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -3,4,5- 三基酯在1個大氣壓H 2下，在20℃下使用10% Pd/C (1.535 g)作為催化劑將實例2.99.2 (7 g)於乙酸乙酯(81 mL) 中之攪拌溶液氫化12小時。經矽藻土過濾反應混合物，並減壓蒸發溶劑。殘餘物藉由矽膠層析法，用95/5二氯甲烷/甲醇溶離來純化，得到標題化合物。 2.99.4   3-((((9H- 茀 -9- 基 ) 甲氧基 ) 羰基 ) 胺基 ) 丙酸在500 mL燒瓶中，將3-胺基丙酸(4.99 g)溶解於10% Na 2CO 3水溶液(120 mL)中並用冰浴冷卻。向所得溶液中逐漸添加於1,4-二噁烷(100 mL)中之氯甲酸(9H-茀-9-基)甲酯(14.5 g)。在室溫下攪拌反應混合物4小時，且接著添加水(800 mL)。將水相層自反應混合物分離並用乙醚(3 × 750 mL)洗滌。水層用2N HCl水溶液酸化至pH 2並用乙酸乙酯(3 × 750 mL)萃取。合併有機層並濃縮，得到粗產物。使粗產物於乙酸乙酯:己烷1:2 (300 mL)之混合溶劑中再結晶，得到標題化合物。 2.99.5   (3- 氯 -3- 側氧基丙基 ) 胺基甲酸 (9H- 茀 -9- 基 ) 甲酯向實例2.99.4於二氯甲烷(160 mL)中之溶液中添加氯化亞碸(50 mL)。在60℃下攪拌混合物1小時。冷卻混合物並濃縮，得到標題化合物。 2.99.6 三乙酸 (2S,3R,4S,5S,6S)-2-(2-(3-((((9H- 茀 -9- 基 ) 甲氧基 ) 羰基 ) 胺基 ) 丙醯胺基 )-4-( 羥基甲基 ) 苯氧基 )-6-( 甲氧基羰基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -3,4,5- 三基酯向實例2.99.3 (6 g)於二氯甲烷(480 mL)中之溶液中添加N,N-二異丙基乙胺(4.60 mL)。添加實例2.99.5 (5.34 g)，且在室溫下攪拌混合物30分鐘。將混合物倒入飽和碳酸氫鈉水溶液中並用乙酸乙酯萃取。合併之萃取液用水及鹽水洗滌且經硫酸鈉乾燥。過濾並濃縮，得到殘餘物，經由徑向層析法，使用0-100%乙酸乙酯/石油醚作為移動相純化，得到標題化合物。 2.99.7 三乙酸 (2S,3R,4S,5S,6S)-2-(2-(3-((((9H- 茀 -9- 基 ) 甲氧基 ) 羰基 ) 胺基 ) 丙醯胺基 )-4-((((4- 硝基苯氧基 ) 羰基 ) 氧基 ) 甲基 ) 苯氧基 )-6-( 甲氧基羰基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -3,4,5- 三基酯向實例2.99.6 (5.1 g)於N,N-二甲基甲醯胺(200 mL)中之混合物中添加碳酸雙(4-硝基苯基)酯(4.14 g)及N,N-二異丙基乙胺(1.784 mL)。在室溫下攪拌混合物16小時並減壓濃縮。將粗物質溶解於二氯甲烷中且直接抽吸至1 mm徑向層析板上並用50-100%乙酸乙酯/己烷溶離，得到標題化合物。MS (ESI) m/e (M+H) +。 2.99.8      3-(1-((3-(2-((((3-(3- 胺基丙醯胺基 )-4-(((2S,3R,4S,5S,6S)-6- 羧基 -3,4,5- 三羥基四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 ) 氧基 ) 苯甲基 ) 氧基 ) 羰基 )( 甲基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ) 吡啶甲酸在0℃下，向實例1.13.7 (325 mg)及實例2.99.7 (382 mg)於N,N-二甲基甲醯胺(9 mL)中之溶液中添加N,N-二異丙胺(49.1 mg)。在0℃下攪拌反應混合物5小時，並添加乙酸(22.8 mg)。用乙酸乙酯稀釋所得混合物並用水及鹽水洗滌。有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾並濃縮。將殘餘物溶解於四氫呋喃(10 mL)及甲醇(5 mL)之混合物中。在0℃下向該溶液中添加1 M氫氧化鋰水溶液(3.8 mL)。在0℃下攪拌所得混合物1小時，用乙酸酸化並濃縮。凍乾濃縮物，得到粉末狀物。將該粉末狀物溶解於N,N-二甲基甲醯胺(10 mL)中，在冰浴中冷卻，且在0℃下添加哌啶(1 mL)。在0℃下攪拌混合物15分鐘並添加1.5 mL乙酸。溶液使用Gilson系統，藉由逆相HPLC，用30-80%乙腈/含0.1% v/v三氟乙酸之水溶離來純化，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 1172.2 (M+H) +。 2.99.9      4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7]癸-1-基}氧基)乙基](甲基)胺甲醯基}氧基)甲基]-2-({N-[6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯基]-β-丙胺醯基}胺基)苯基β-D-葡萄哌喃糖苷醛酸 在0℃下，向於N,N-二甲基甲醯胺(5 mL)中之實例2.99.8 (200 mg)中添加6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己酸2,5-二側氧基吡咯啶-1-基酯(105 mg)及N,N-二異丙基乙胺(0.12 mL)。在0℃下攪拌混合物15分鐘，升溫至室溫且在Gilson系統上，使用100 g C18管柱藉由逆相HPLC，用30-80%乙腈/含0.1% v/v三氟乙酸之水溶離來純化，得到標題化合物。 1H NMR (500 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 12.85 (s, 2H) 9.07 (s, 1H) 8.18 (s, 1H) 8.03 (d, 1H) 7.87 (t, 1H) 7.79 (d, 1H) 7.61 (d, 1H) 7.41-7.53 (m, 3H) 7.36 (q, 2H) 7.28 (s, 1H) 7.03-7.09 (m, 1H) 6.96-7.03 (m, 3H) 6.94 (d, 1H) 4.95 (s, 4H) 4.82 (t, 1H) 3.88 (t, 3H) 3.80 (d, 2H) 3.01 (t, 2H) 2.86 (d, 3H) 2.54 (t, 2H) 2.08 (s, 3H) 2.03 (t, 2H) 1.40-1.53 (m, 4H) 1.34 (d, 2H) 0.90-1.28 (m, 12H) 0.82 (d, 6H)。MS (ESI) m/e 1365.3 (M+H) +。 2.100 合成對照合成子 4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ]( 甲基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ]-2-({N-[19-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 )-17- 側氧基 -4,7,10,13- 四氧雜 -16- 氮雜十九烷 -1- 醯基 ]-β- 丙胺醯基 } 胺基 ) 苯基 β-D- 葡萄哌喃糖苷醛酸 ( 合成子 I)標題化合物係使用實例2.99.9中之程序，用1-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)-3-側氧基-7,10,13,16-四氧雜-4-氮雜十九烷-19-酸2,5-二側氧基吡咯啶-1-基酯替代6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己酸2,5-二側氧基吡咯啶-1-基酯製備。 1H NMR (500 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 8.95 (s, 1H) 8.16 (s, 1H) 7.99 (d, 1H) 7.57-7.81 (m, 4H) 7.38-7.50 (m, 3H) 7.34 (q, 2H) 7.27 (s, 1H) 7.10 (d, 1H) 7.00 (d, 1H) 6.88-6.95 (m, 2H) 4.97 (d, 4H) 4.76 (d, 2H) 3.89 (t, 2H) 3.84 (d, 2H) 3.80 (s, 2H) 3.57-3.63 (m, 4H) 3.44-3.50 (m, 4H) 3.32-3.43 (m, 6H) 3.29 (t, 2H) 3.16 (q, 2H) 3.02 (t, 2H) 2.87 (s, 3H) 2.52-2.60 (m, 2H) 2.29-2.39 (m, 3H) 2.09 (s, 3H) 1.37 (s, 2H) 1.20-1.29 (m, 4H) 1.06-1.18 (m, 4H) 0.92-1.05 (m, 2H) 0.83 (s, 6H)。MS (ESI) m/e 1568.6 (M-H) -。 2.101 合成 6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-3-{1-[(3-{[(43S,46S)-43-({[(4-{[(2S)-2-{[(2S)-2-{[6-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 己醯基 ] 胺基 }-3- 甲基丁醯基 ] 胺基 } 丙醯基 ] 胺基 } 苯甲基 ) 氧基 ] 羰基 j 胺基 )-46- 甲基 -37,44,47- 三側氧基 -2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32,35- 十二氧雜 -38,45,48- 三氮雜五十烷 -50- 基 ] 氧基 }-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 } 吡啶 -2- 甲酸 ( 合成子 OK)標題化合物係如實例2.7中所描述，用實例1.66.7替代實例1.13.8製備。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 12.85 (s, 1H), 8.21-7.97 (m, 4H), 7.79 (d, 4H), 7.71-7.32 (m, 15H), 7.28 (t, 4H), 7.02-6.91 (m, 3H), 4.95 (d, 5H), 4.33-4.12 (m, 3H), 3.98-3.76 (m, 11H), 3.41-3.21 (m, 22H), 3.21-2.90 (m, 12H), 2.24-2.05 (m, 7H), 1.81-0.90 (m, 46H), 0.90-0.78 (m, 17H)。MS (ESI) m/e 2014.0 (M+H) +, 1007.5 (M+2H) 2+, 672.0 (M+3H) 3+。 2.102 合成 N-[6-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 己醯基 ]-L- 纈胺醯基 -N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[1-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-1,2,3,4- 四氫喹啉 -7- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](2- 羧基乙基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ] 苯基 }-N 5- 胺甲醯基 -L- 鳥胺醯胺 ( 合成子 OW)標題化合物係如實例2.1中所描述，用實例1.62.5替代實例1.2.9製備。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 9.95 (s, 1H), 8.36 (s, 1H), 8.02 (d, 1H), 7.96 (d, 1H), 7.88-7.68 (m, 4H), 7.57 (d, 2H), 7.42 (s, 2H), 7.34 (t, 1H), 7.25 (dd, 3H), 7.19 (t, 1H), 6.95 (s, 2H), 5.96 (s, 1H), 4.96 (s, 2H), 4.35 (q, 1H), 4.15 (dd, 1H), 3.93 (t, 2H), 3.83 (d, 2H), 3.32 (t, 2H), 3.27 (d, 1H), 2.93 (dtd, 1H), 2.80 (t, 2H), 2.47 (p, 19H), 2.24-2.02 (m, 5H), 1.91 (p, 3H), 1.74-1.25 (m, 8H), 1.27-0.89 (m, 10H), 0.79 (dd, 13H)。MS (ESI) m/e 1414.4 (M+H) +。 2.103 合成 N-[6-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 己醯基 ]-L- 纈胺醯基 -N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 ) 萘 -2- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](2- 羧基乙基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ] 苯基 }-N 5- 胺甲醯基 -L- 鳥胺醯胺 ( 合成子 PC)標題化合物係如實例2.1中所描述，用實例1.68.7替代實例1.2.9製備。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 13.07 (s, 1H), 9.95 (s, 1H), 8.99 (s, 1H), 8.33 (dd, 1H), 8.25-8.09 (m, 3H), 8.12-7.95 (m, 3H), 7.90 (d, 1H), 7.76 (dd, 2H), 7.73-7.63 (m, 1H), 7.56 (s, 3H), 7.41-7.29 (m, 1H), 6.95 (s, 2H), 5.97 (s, 1H), 4.96 (s, 2H), 4.35 (d, 2H), 4.15 (dd, 1H), 3.50-3.22 (m, 10H), 2.92 (dtd, 3H), 2.29-2.00 (m, 6H), 1.92 (q, 1H), 1.75-0.88 (m, 24H), 0.79 (dd, 15H)。MS (ESI) m/e 1409.5 (M+H) +。 2.104 合成 6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 ) 萘 -2- 基 ]-3-{1-[(3-{2-[(2- 羧基乙基 ){[(2-{[(2R,3S,4R,5R,6R)-6- 羧基 -3,4,5- 三羥基四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 ] 氧基 }-4-[2-(2-{[6-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 己醯基 ] 胺基 } 乙氧基 ) 乙氧基 ] 苯甲基 ) 氧基 ] 羰基 j 胺基 ] 乙氧基 }-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 } 吡啶 -2- 甲酸 ( 合成子 PI) 2.104.1 3-(1-((3-(2-((((4-(2-(2- 胺基乙氧基 ) 乙氧基 )-2-(((2R,3S,4R,5R,6R )-6- 羧基 -3,4,5- 三羥基四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 ) 氧基 ) 苯甲基 ) 氧基 ) 羰基 )(2- 羧基乙基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 ) 萘 -2- 基 ) 吡啶甲酸向實例2.97.7 (26.9 mg)及實例1.68.7 (23.5 mg)於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)中之冷(0℃)混合物中添加N-乙基-N-異丙基丙-2-胺(0.043 mL)。使反應物緩慢升溫至室溫並攪拌隔夜。LC/MS顯示預期產物為主峰。向反應混合物中添加水(1 mL)及LiOH H 2O (20 mg)。在室溫下攪拌混合物3小時。用N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)稀釋混合物，過濾，並在Gilson系統(C18管柱)上藉由逆相HPLC，用20-80%乙腈/含0.1%三氟乙酸之水溶離來純化，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 1242.2 (M-H) -。 2.104.2    6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 ) 萘 -2- 基 ]-3-{1-[(3-{2-[(2- 羧基乙基 ){[(2-{[(2R,3S,4R,5R,6R)-6- 羧基 -3,4,5- 三羥基四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 ] 氧基 }-4-[2-(2-{[6-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 己醯基 ] 胺基 } 乙氧基 ) 乙氧基 ] 苯甲基 ) 氧基 ] 羰基 } 胺基 ] 乙氧基 }-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 } 吡啶 -2- 甲酸標題化合物係如實例2.97.9中所描述，藉由用實例2.104.1替代實例2.97.8且用6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己酸2,5-二側氧基吡咯啶-1-基酯替代3-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)丙酸2,5-二側氧基吡咯啶-1-基酯製備。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 13.06 (s, 2H), 8.99 (s, 1H), 8.34 (dd, 1H), 8.25-8.10 (m, 3H), 8.04 (d, 1H), 7.98 (d, 1H), 7.90 (d, 1H), 7.78 (d, 2H), 7.72-7.63 (m, 1H), 7.50-7.42 (m, 2H), 7.34 (t, 1H), 7.16 (d, 1H), 6.94 (s, 2H), 6.65 (d, 1H), 6.56 (dd, 1H), 4.02 (t, 2H), 3.90 (d, 1H), 3.83 (s, 2H), 3.66 (t, 3H), 3.28 (q, 4H), 3.15 (q, 2H), 2.19 (s, 3H), 1.99 (t, 2H), 1.51-1.30 (m, 6H), 1.28-0.88 (m, 11H), 0.81 (d, 6H)。MS (ESI) m/e 1433.4 (M+H) +。 2.105 合成 N-[6-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 己醯基 ]-L- 纈胺醯基 -N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[5-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 ) 喹啉 -3- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](2- 磺基乙基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ] 苯基 }-N 5- 胺甲醯基 -L- 鳥胺醯胺 ( 合成子 PJ)標題化合物係如實例2.1中所描述，用實例1.69.6替代實例1.2.9製備。 1H NMR (500 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 13.23 (s, 1H), 9.99 (s, 1H), 9.73 (d, 1H), 9.45 (s, 1H), 8.33 (t, 2H), 8.18 (d, 1H), 8.07 (dd, 2H), 8.02 (dd, 1H), 7.97 (dd, 1H), 7.80 (t, 2H), 7.65-7.55 (m, 2H), 7.53-7.44 (m, 2H), 7.37 (t, 1H), 7.27 (d, 2H), 6.98 (s, 2H), 4.98 (d, 2H), 4.38 (d, 1H), 4.18 (d, 1H), 3.56-3.31 (m, 3H), 3.26 (d, 2H), 3.08-2.89 (m, 2H), 2.64 (t, 2H), 2.23 (d, 3H), 2.12 (dp, 2H), 1.95 (s, 1H), 1.68 (s, 1H), 1.62-1.29 (m, 7H), 1.29-0.90 (m, 9H), 0.90-0.74 (m, 12H)。MS (ESI) m/e 1446.3 (M-H) -。 2.106 合成 N-[6-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 己醯基 ]-L- 纈胺醯基 -N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[4-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 ) 喹啉 -6- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](2- 羧基乙基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ] 苯基 }-N 5- 胺甲醯基 -L- 鳥胺醯胺 ( 合成子 PU)標題化合物係如實例2.1中所描述，用實例1.70替代實例1.2.9製備。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 9.97 (s, 1H), 9.12 (d, 1H), 8.93 (s, 1H), 8.60 (dd, 1H), 8.24 (dd, 2H), 8.05 (dd, 2H), 7.99-7.87 (m, 2H), 7.78 (dd, 2H), 7.67-7.51 (m, 3H), 7.43-7.31 (m, 1H), 7.26 (d, 2H), 6.97 (s, 2H), 5.98 (s, 1H), 4.97 (s, 2H), 4.37 (d, 2H), 4.17 (dd, 1H), 3.49-3.22 (m, 11H), 2.95 (ddd, 3H), 2.20 (s, 4H), 2.19-1.86 (m, 3H), 1.74-0.89 (m, 22H), 0.81 (dd, 15H)。MS (ESI) m/e 1410.4 (M-H) -。 2.107 合成 N-[6-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 己醯基 ]-L- 纈胺醯基 -N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[4-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 ) 喹啉 -6- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](2- 磺基乙基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ] 苯基 }-N 5- 胺甲醯基 -L- 鳥胺醯胺 ( 合成子 PV)標題化合物係如實例2.1中所描述，用實例1.70.5替代實例1.2.9製備。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 9.96 (s, 1H), 9.11 (d, 1H), 8.92 (s, 1H), 8.60 (dd, 1H), 8.23 (dd, 2H), 8.12-7.97 (m, 2H), 7.98-7.92 (m, 2H), 7.77 (dd, 2H), 7.56 (t, 2H), 7.51-7.42 (m, 2H), 7.42-7.31 (m, 1H), 7.24 (d, 2H), 6.95 (s, 2H), 4.95 (d, 2H), 4.36 (q, 1H), 3.90-3.80 (m, 3H), 3.52-3.27 (m, 3H), 3.23 (t, 2H), 3.06-2.83 (m, 2H), 2.67-2.58 (m, 2H), 2.19 (s, 3H), 2.09 (dp, 2H), 1.93 (d, 1H), 1.72-1.25 (m, 7H), 1.27-0.88 (m, 10H), 0.88-0.70 (m, 13H)。MS (ESI) m/e 1446.3 (M-H) -。 2.108 合成 N-[6-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 己醯基 ]-L- 纈胺醯基 -N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[5-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 ) 喹啉 -3- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](2- 羧基乙基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ] 苯基 }-N 5- 胺甲醯基 -L- 鳥胺醯胺 ( 合成子 PW)標題化合物係如實例2.1中所描述，用實例1.71替代實例1.2.9製備。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 9.97 (s, 1H), 9.70 (d, 1H), 9.40 (d, 1H), 8.31 (dd, 2H), 8.16 (d, 1H), 8.05 (t, 2H), 8.01-7.91 (m, 2H), 7.78 (dd, 2H), 7.59 (d, 3H), 7.52-7.44 (m, 2H), 7.36 (t, 1H), 7.26 (d, 2H), 6.96 (s, 2H), 5.99 (s, 1H), 4.97 (s, 2H), 4.37 (d, 2H), 4.16 (dd, 1H), 3.53-3.20 (m, 9H), 2.94 (dtd, 2H), 2.21 (s, 3H), 2.17-1.85 (m, 3H), 1.71-0.89 (m, 22H), 0.81 (dd, 14H)。MS (ESI) m/e 1410.4 (M-H) -。 2.109 合成 N-[6-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 己醯基 ]-L- 纈胺醯基 -N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[1-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-5,6- 二氫咪唑并 [1,5-a] 吡嗪 -7(8H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](2- 磺基乙基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ] 苯基 }-N 5- 胺甲醯基 -L- 鳥胺醯胺 ( 合成子 QW)標題化合物係藉由在實例2.1中用實例1.72.8替代實例1.2.9製備。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸d,) δ ppm 11.07 (bs, 1H), 10.00 (bs, 1H), 8.27 (bs, 1H), 8.12 (m, 2H), 8.07 (d, 1H), 7.99 (d, 1H), 7.84-7.74 (m, 2H), 7.65 (d, 1H), 7.59 (m, 2H), 7.54-7.44 (m, 1H), 7.42-7.31 (m, 2H), 7.28 (m, 2H), 7.21 (q, 1H), 7.00 (m, 1H) 6.94-6.92 (m, 2H), 6.04 (bs, 1H), 5.14 (s, 2H), 4.99 (m, 3H), 4.39 (m, 2H), 4.30 (bs, 2H), 4.20 (m, 2H), 4.12 (bs, 2H), 3.70-3.64 (m, 2H), 3.50 (m, 2H), 3.44-3.35 (m, 2H), 3.27 (m, 2H), 3.02 (m, 2H), 2.95 (m, 2H), 2.68 (t, 2H), 2.14 (m, 4H), 1.96 (m, 1H), 1.69 (m, 1H), 1.58 (m, 1H), 1.47 (m, 4H), 1.36 (m, 2H), 1.30-1.02 (m, 8H), 0.98 (m, 2H), 0.85-0.80 (m, 16 H)。 2.110 合成 N-[6-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 己醯基 ]-L- 纈胺醯基 -N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[7-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-1H- 吲哚 -2- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](2- 磺基乙基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ] 苯基 }-N 5- 胺甲醯基 -L- 鳥胺醯胺 ( 合成子 RM)實例2.110係藉由在實例2.1中用實例1.74.6替代實例1.2.9製備。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 11.30 (s, 1H), 9.93 (s, 1H), 8.26 (d, 1H), 8.17 (d, 1H), 8.02 (d, 1H), 7.92-7.84 (m, 3H), 7.76 (d, 1H), 7.69 (d, 1H), 7.54 (d, 3H), 7.47 (s, 1H), 7.35 (dd, 2H), 7.22 (t, 3H), 7.08 (t, 1H), 6.93 (s, 2H), 4.90 (s, 2H), 4.84 (t, 2H), 4.33 (q, 1H), 4.16-4.09 (m, 1H), 3.32 (t, 4H), 2.99 (m, 6H), 2.21 (s, 3H), 2.09 (m, 2H), 1.91 (m, 1H), 1.71-0.71 (m, 25H)。MS (ESI) m/e 1434.4 (M-H) -。 2.111 合成 N-[6-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 己醯基 ]-L- 纈胺醯基 -N-[4-({[{3-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-2-(6- 羧基 -5-{1-[(3,5- 二甲基 -7-{2-[(2- 磺基乙基 ) 胺基 ] 乙氧基 } 三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 } 吡啶 -2- 基 )-1,2,3,4- 四氫異喹啉 -6- 基 ] 丙基 }( 甲基 ) 胺甲醯基 ] 氧基 } 甲基 ) 苯基 ]-N 5- 胺甲醯基 -L- 鳥胺醯胺 ( 合成子 RR)標題化合物係如實例2.1中所描述，用實例1.75.14替代實例1.2.9製備。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 12.60 (bs, 1H), 9.98 (s, 1H), 8.33 (m, 2H), 8.02 (d, 2H), 7.75 (d, 2H), 7.55 (d, 2H), 7.49 (m, 3H), 7.29 (m, 1H), 7.25 (s, 4H), 6.99 (d, 2H), 6.95 (d, 1H), 5.90 (m, 1H), 5.42 (m, 2H), 4.95 (s, 2H), 4.90 (m, 2H), 4.35 (t, 1H), 4.18 (t, 1H), 3.85 (m, 2H), 3.80 (s, 3H), 3.55 (s, 3H), 3.52 (m, 2H), 3.35 (m, 4H), 3.22 (m, 4H), 3.08 (m, 2H), 2.99 (m, 2H), 2.92 (m, 2H), 2.85 (m, 2H), 2.79 (t, 2H), 2.52 (m, 1H), 2.15 (m, 1H), 2.09 (s, 3H), 1.94 (m, 1H), 1.88 (m, 1H), 1.68 (m, 1H), 1.54 (m, 1H), 1.42 (m, 4H), 1.38 (m, 4H), 1.27 (m, 4H), 1.13 (m, 4H), 1.02 (m, 2H), 0.85 (s, 6H), 0.78 (m, 6H)。MS (ESI) m/e 1523.3 (M+H) +, 1521.6 (M-H) -。 2.112 合成 N-(6-{[(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 乙醯基 ] 胺基 } 己醯基 )-L- 纈胺醯基 -N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](2- 磺基乙基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ] 苯基 }-N 5- 胺甲醯基 -L- 鳥胺醯胺 ( 合成子 SJ) 2.112.1    6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-3-(1-((3-(2-((((4-((S)-2-((S)-2-(( 第三丁氧基羰基 ) 胺基 )-3- 甲基丁醯胺基 )-5- 脲基戊醯胺基 ) 苯甲基 ) 氧基 ) 羰基 )(2- 磺基乙基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶甲酸在冰浴中冷卻於N,N-二甲基甲醯胺(5 mL)中之實例1.2.9三氟乙酸鹽(390 mg)、((S)-3-甲基-1-(((S)-1-((4-((((4-硝基苯氧基)羰基)氧基)甲基)苯基)胺基)-1-側氧基-5-脲基戊-2-基)胺基)-1-側氧基丁-2-基)胺基甲酸第三丁酯(286 mg)及1-羥基苯并三唑水合物(185 mg)並添加N,N-二異丙基乙胺(0.35 mL)。在0℃下攪拌混合物30分鐘且在室溫下攪拌隔夜。反應混合物用二甲亞碸稀釋至10 mL，並在Gilson系統(C18管柱)上藉由逆相HPLC，用20-80%乙腈/含0.1%三氟乙酸之水溶離來純化，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 680.1 (M+2H) 2+。 2.112.2    3-(1-((3-(2-((((4-((S)-2-((S)-2- 胺基 -3- 甲基丁醯胺基 )-5- 脲基戊醯胺基 ) 苯甲基 ) 氧基 ) 羰基 )(2- 磺基乙基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ) 吡啶甲酸在0℃下，用三氟乙酸(4 mL)處理於10 mL二氯甲烷中之實例2.112.1 (300 mg)達30分鐘並濃縮混合物。將殘餘物溶解於乙腈及水之混合物中，並凍乾，得到呈TF鹽形式之所需產物。MS (ESI) m/e 1257.4 (M-H) -。 2.112.3    6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-3-(1-((3-(2-((((4-((13S,16S)-13- 異丙基 -2,2- 二甲基 -4,11,14- 三側氧基 -16-(3- 脲基丙基 )-3- 氧雜 -5,12,15- 三氮雜十七烷醯胺基 ) 苯甲基 ) 氧基 ) 羰基 )(2- 磺基乙基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶甲酸在冰-水浴中冷卻於N,N-二甲基甲醯胺(3 mL)中之實例2.112.2 (三氟乙酸鹽，385 mg)及1-羥基苯并三唑水合物(140 mg)。逐滴添加N,N-二異丙基乙胺(226 μL)，隨後添加6-((第三丁氧基羰基)胺基)己酸2,5-二側氧基吡咯啶-1-基酯(127 mg)，且攪拌混合物隔夜。混合物藉由在Gilson系統(C18管柱)上進行逆相HPLC，用20-75%乙腈/含0.1%三氟乙酸之水溶離來純化，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 1470.2 (M-H) -。 2.112.4    3-(1-((3-(2-((((4-((S)-2-((S)-2-(6- 胺基己醯胺基 )-3- 甲基丁醯胺基 )-5- 脲基戊醯胺基 ) 苯甲基 ) 氧基 ) 羰基 )(2- 磺基乙基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ) 吡啶甲酸標題化合物係使用實例2.112.2中之程序，用實例2.112.3替代實例2.112.1製備。MS (ESI) m/e 1370.5 (M-H) -。 2.112.5    N-(6-{[(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 乙醯基 ] 胺基 } 己醯基 )-L- 纈胺醯基 -N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](2- 磺基乙基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ] 苯基 }-N5- 胺甲醯基 -L- 鳥胺醯胺在0℃下，用N,N-二異丙基乙胺(25.4 μL)處理於N,N-二甲基甲醯胺(0.3 mL)中之實例2.112.4 (25 mg)及2-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)乙酸2,5-二側氧基吡咯啶-1-基酯(9.19 mg)達30分鐘。反應混合物藉由在Gilson系統(C18管柱)上進行逆相HPLC，用35-65%乙腈/ 4 mM乙酸銨水混合物溶離來純化，得到呈銨鹽形式之標題化合物。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ 12.81 (s, 1H), 9.94 (s, 1H), 8.01 (dd, 2H), 7.75 (d, 2H), 7.56 (s, 3H), 7.51-7.45 (m, 1H), 7.45-7.37 (m, 2H), 7.36-7.28 (m, 2H), 7.24 (t, 3H), 7.17 (s, 2H), 7.05 (s, 3H), 7.04 (s, 2H), 6.92 (s, 3H), 5.93 (s, 1H), 5.36 (s, 2H), 5.05-4.85 (m, 4H), 4.36 (q, 1H), 4.16 (dd, 1H), 3.95 (s, 2H), 3.85 (t, 2H), 3.76 (d, 2H), 3.22 (d, 1H), 3.05-2.81 (m, 6H), 2.68-2.53 (m, 2H), 2.09 (d, 4H), 1.76-0.86 (m, 14H), 0.86-0.71 (m, 12H)。MS (ESI) m/e 1507.5 (M-H) -。 2.113 合成 N-[6-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 己醯基 ]-L- 纈胺醯基 -N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 ) 萘 -2- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ][3-(β-L- 葡萄哌喃糖醛醯基氧基 ) 丙基 ] 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ] 苯基 }-N 5- 胺甲醯基 -L- 鳥胺醯胺 ( 合成子 SM)標題化合物係如實例2.1中所描述，用實例1.87.3替代實例1.2.9製備。 1H NMR (501 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 13.08 (s, 1H), 9.96 (s, 1H), 9.00 (s, 1H), 8.35 (dd, 1H), 8.24-8.13 (m, 3H), 8.09-8.02 (m, 2H), 8.00 (d, 1H), 7.91 (d, 1H), 7.77 (dd, 2H), 7.71-7.64 (m, 1H), 7.58 (t, 2H), 7.49-7.44 (m, 2H), 7.39-7.32 (m, 1H), 7.26 (d, 2H), 6.96 (s, 2H), 5.97 (s, 1H), 4.96 (s, 2H), 4.37 (d, 1H), 4.22-4.12 (m, 2H), 3.84 (s, 1H), 3.37-3.20 (m, 6H), 3.15 (t, 1H), 3.04-2.81 (m, 2H), 2.20 (s, 3H), 2.11 (dp, 2H), 1.99-1.88 (m, 1H), 1.71 (q, 2H), 1.62-1.26 (m, 8H), 1.29-0.88 (m, 11H), 0.80 (dd, 14H)。MS (ESI) m/e 1571.4 (M-H) -。 2.114 合成 N-[6-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 己醯基 ]-L- 纈胺醯基 -N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[4-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 ) 異喹啉 -6- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](2- 磺基乙基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ] 苯基 }-N 5- 胺甲醯基 -L- 鳥胺醯胺 ( 合成子 SN)標題化合物係如實例2.1中所描述，用實例1.78.5替代實例1.2.9製備。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 9.95 (s, 1H), 9.61 (s, 1H), 9.08 (s, 1H), 9.00 (s, 1H), 8.54 (dd, 1H), 8.43 (d, 1H), 8.24 (d, 1H), 8.08-7.95 (m, 3H), 7.77 (dd, 2H), 7.63-7.51 (m, 2H), 7.50-7.42 (m, 2H), 7.40-7.31 (m, 1H), 7.24 (d, 2H), 6.95 (s, 2H), 6.00 (s, 1H), 4.95 (d, 2H), 4.36 (q, 1H), 4.15 (t, 1H), 3.27 (dt, 4H), 3.10-2.79 (m, 2H), 2.68-2.56 (m, 2H), 2.20 (s, 3H), 1.98-1.84 (m, 1H), 1.72-0.87 (m, 19H), 0.79 (dd, 13H)。MS (ESI) m/e 1446.4 (M-H) -。 2.115 合成 N-[6-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 己醯基 ]-L-α- 麩胺醯基 -L- 纈胺醯基 -N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](2- 磺基乙基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ] 苯基 }-N 5- 胺甲醯基 -L- 鳥胺醯胺 ( 合成子 SS) 2.115.16-(8-(苯并[d]噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-3-(1-((3-(2-((((4-((6S,9S,12S)-6-(3-(第三丁氧基)-3-側氧基丙基)-9-異丙基-2,2-二甲基-4,7,10-三側氧基-12-(3-脲基丙基)-3-氧雜-5,8,11-三氮雜十三烷醯胺基)苯甲基)氧基)羰基)(2-磺基乙基)胺基)乙氧基)-5,7-二甲基金剛烷-1-基)甲基)-5-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶甲酸 在0℃下，向實例2.112.2 (85 mg)、1-羥基苯并三唑水合物(41.3 mg)及(S)- 2-((第三丁氧基羰基)胺基)戊二酸5-第三丁酯1-(2,5-二側氧基吡咯啶-1-基)酯(54.0 mg)於N,N-二甲基甲醯胺(3 mL)中之混合物中逐滴添加N,N-二異丙基乙胺(118 μL)，且在0℃下攪拌混合物1小時。混合物藉由在Gilson系統(C18管柱)上進行逆相HPLC，用35-100%乙腈/含0.1%三氟乙酸之水溶離來純化，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 773.4 (M+2H) 2+。 2.115.2    3-(1-((3-(2-((((4-((S)-2-((S)-2-((S)-2- 胺基 -4- 羧基丁醯胺基 )-3- 甲基丁醯胺基 )-5- 脲基戊醯胺基 ) 苯甲基 ) 氧基 ) 羰基 )(2- 磺基乙基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ) 吡啶甲酸在0℃下，用三氟乙酸(4 mL)處理於二氯甲烷(11 mL)中之實例2.115.1 (100 mg)。在0℃下攪拌混合物3.5小時並濃縮。殘餘物藉由逆相HPLC，用5-60%乙腈/ 0.1%三氟乙酸水混合物溶離來純化，得到標題化合物。 2.115.3    N-[6-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 己醯基 ]-L-α- 麩胺醯基 -L- 纈胺醯基 -N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](2- 磺基乙基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ] 苯基 }-N5- 胺甲醯基 -L- 鳥胺醯胺在0℃下，向1-羥基苯并三唑水合物(2.87 mg)、6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己酸2,5-二側氧基吡咯啶-1-基酯(5.77 mg)及實例2.115.2 (13 mg)之混合物中添加N,N-二異丙基乙胺(13.08 μL)，且在0℃下攪拌混合物1小時。反應物藉由在Gilson系統(C18管柱)上進行逆相HPLC，用20-75%乙腈/含0.1%三氟乙酸之水溶離來純化，得到標題化合物。 1H NMR (501 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ 12.83 (s, 1H), 9.99 (s, 1H), 8.13 (d, 1H), 8.02 (dd, 1H), 7.97 (d, 1H), 7.80-7.74 (m, 1H), 7.64 (t, 1H), 7.61-7.48 (m, 4H), 7.47-7.38 (m, 2H), 7.38-7.30 (m, 2H), 7.29-7.23 (m, 3H), 6.96 (s, 2H), 6.93 (d, 1H), 5.99 (s, 1H), 5.06-4.88 (m, 5H), 4.37 (q, 1H), 4.28 (q, 1H), 4.18 (dd, 1H), 3.86 (t, 2H), 3.78 (d, 2H), 3.34 (t, 3H), 3.23 (d, 2H), 2.99 (t, 3H), 2.97-2.85 (m, 1H), 2.62 (dt, 1H), 2.26-2.15 (m, 2H), 2.16-2.00 (m, 5H), 2.01-1.79 (m, 1H), 1.75-1.50 (m, 3H), 1.50-0.87 (m, 17H), 0.81 (dd, 14H)。MS (ESI) m/e 1579.6 (M-H) -。 2.116 合成 N-[(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 乙醯基 ]-L-α- 麩胺醯基 -L- 纈胺醯基 -N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](2- 磺基乙基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ] 苯基 }-N 5- 胺甲醯基 -L- 鳥胺醯胺 ( 合成子 TA)標題化合物係使用實例2.115.3中之程序，用2-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)乙酸2,5-二側氧基吡咯啶-1-基酯替代6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己酸2,5-二側氧基吡咯啶-1-基酯製備。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ 10.02 (s, 1H), 8.38 (d, 1H), 8.14 (d, 1H), 8.03 (d, 1H), 7.82 (dd, 2H), 7.60 (t, 3H), 7.55-7.40 (m, 3H), 7.35 (td, 2H), 7.31-7.24 (m, 3H), 7.07 (s, 2H), 6.95 (d, 1H), 4.97 (d, 4H), 4.37 (ddd, 2H), 4.23-4.05 (m, 3H), 3.88 (t, 6H), 3.80 (d, 2H), 3.25 (d, 2H), 3.09-2.88 (m, 4H), 2.64 (s, 2H), 2.22 (dd, 2H), 2.09 (s, 3H), 2.02-1.49 (m, 5H), 1.47-0.89 (m, 12H), 0.83 (dd, 12H)。MS (ESI) m/e 1523.5 (M-H) -。 2.117 合成 1-{[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ]({[4-({N-[6-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 己醯基 ]-D- 纈胺醯基 -N 5- 胺甲醯基 -D- 鳥胺醯基 } 胺基 ) 苯甲基 ] 氧基 } 羰基 ) 胺基 }-1,2- 二脫氧 -D- 阿拉伯 - 己糖醇 ( 合成子 TW)標題化合物係藉由在實例2.1中用實例1.77.2替代實例1.2.9製備。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 12.85 (bs, 1H), 9.98 (s, 1H), 8.06 (d, 1H), 8.03 (d, 1H), 7.78 (t, 2H), 7.60 (m, 3H), 7.52-7.42 (m, 4H), 7.36 (q, 2H), 7.28 (s, 1H), 7.27 (d, 2H), 6.99 (s, 1H), 6.95 (d, 1H), 5.97 (bs, 1H), 5.00 (m, 2H), 4.95 (s, 2H), 4.39 (m, 1H), 4.19 (m, 2H), 3.88 (t, 2H), 3.79 (m, 4H), 3.58 (m, 4H), 3.46-3.33 (m, 10H), 3.26 (m, 4H), 3.01 (m, 2H), 2.94 (m, 1H), 2.14 (m, 2H), 2.09 (s, 3H), 1.96 (m, 1H), 1.69 (m, 2H), 1.59 (m, 1H), 1.47 (m, 4H), 1.35 (m, 4H), 1.28-1.03 (m, 10H), 0.95 (m, 2H), 0.82 (m, 12H)。MS (ESI) m/e 1493 (M+H) +, 1491 (M-H) -。 2.118 合成 N-[6-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 己醯基 ]-L- 纈胺醯基 -N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[4-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-2- 氧離子基異喹啉 -6- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ]( 甲基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ] 苯基 }-N 5- 胺甲醯基 -L- 鳥胺醯胺 ( 合成子 ST)標題化合物係如實例2.1中所描述，用實例1.88.4替代實例1.2.9製備。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 13.29 (s, 2H), 9.95 (s, 1H), 9.18 (s, 1H), 8.67 (s, 1H), 8.57-8.36 (m, 1H), 8.29-7.87 (m, 4H), 7.77 (dd, 2H), 7.56 (d, 2H), 7.53-7.41 (m, 2H), 7.24 (d, 2H), 6.95 (s, 2H), 5.95 (s, 1H), 4.94 (s, 2H), 4.35 (q, 1H), 4.15 (dd, 1H), 3.84 (s, 3H), 3.28 (dt, 4H), 3.06-2.77 (m, 3H), 2.19 (d, 3H), 2.17-1.80 (m, 3H), 1.74-0.88 (m, 22H), 0.79 (dd, 13H)。MS (ESI) m/e 1368.4 (M-H) -。 2.119 合成 N-({(3S,5S)-3-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 )-2- 側氧基 -5-[(2- 磺基乙氧基 ) 甲基 ] 吡咯啶 -1- 基 } 乙醯基 )-L- 纈胺醯基 -N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 ) 萘 -2- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](2- 磺基乙基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ] 苯基 }-N 5- 胺甲醯基 -L- 鳥胺醯胺 ( 合成子 ZL) 2.119.1    (3R,7aS)-3- 苯基四氫吡咯并 [1,2-c] 噁唑 -5(3H)- 酮在乾燥管下，使用迪恩-斯塔克分水器(Dean-Stark trap)將(S)-5-(羥基甲基)吡咯啶-2-酮(25g)、苯甲醛(25.5g)及對甲苯磺酸單水合物(0.50 g)於甲苯(300 mL)中之混合物加熱至回流，保持16小時。將反應物冷卻至室溫，並自不溶性材料傾析出溶劑。有機層用飽和碳酸氫鈉水溶液混合物(2x)及鹽水(1x)洗滌。有機層經硫酸鈉乾燥，過濾並減壓濃縮。殘餘物在矽膠上藉由急驟層析法，用35/65庚烷/乙酸乙酯溶離來純化，得到標題化合物。MS (DCI) m/e 204.0 (M+H) +。 2.119.2    (3R,6R,7aS)-6- 溴 -3- 苯基四氫吡咯并 [1,2-c] 噁唑 -5(3H)- 酮經40分鐘向實例2.119.1 (44.6 g)於四氫呋喃(670 mL)中之冷(-77℃)混合物中逐滴添加雙(三甲基矽烷基)胺基鋰(1.0M之己烷溶液，250 mL)，保持T rxn＜-73℃。在-77℃下攪拌反應2小時，並經20分鐘逐滴添加溴(12.5 mL)，保持T rxn＜-64℃。在-77℃下攪拌反應75分鐘並藉由將150 mL冷10%硫代硫酸鈉水溶液混合物添加至該-77℃反應物中來淬滅反應。使反應物升溫至室溫並使其在半飽和氯化銨水溶液混合物與乙酸乙酯之間分配。分離各層，且有機層用水及鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾並減壓濃縮。殘餘物藉由矽膠層析法，用80/20、75/25及70/30庚烷/乙酸乙酯梯度溶離來純化，得到標題化合物。MS (DCI) m/e 299.0及301.0 (M+NH 3+H) +。 2.119.3    (3R,6S,7aS)-6- 溴 -3- 苯基四氫吡咯并 [1,2-c] 噁唑 -5(3H)- 酮標題化合物係作為副產物自實例2.119.2分離。MS (DCI) m/e 299.0及301.0 (M+NH 3+H) +。 2.119.4    (3R,6S,7aS)-6- 疊氮基 -3- 苯基四氫吡咯并 [1,2-c] 噁唑 -5(3H)- 酮向實例2.119.2 (19.3 g)於N,N-二甲基甲醯胺(100 mL)中之混合物中添加疊氮化鈉(13.5 g)。將反應物加熱至60℃，保持2.5小時。將反應物冷卻至室溫且藉由添加水(500 mL)及乙酸乙酯(200 mL)淬滅。分離各層，且有機層用鹽水洗滌。用乙酸乙酯(50 mL)反萃取合併之水層。合併之有機層用硫酸鈉乾燥，過濾並減壓濃縮。殘餘物藉由矽膠層析法，用78/22庚烷/乙酸乙酯溶離來純化，得到標題化合物。MS (DCI) m/e 262.0 (M+NH 3+H) +。 2.119.5    (3R,6S,7aS)-6- 胺基 -3- 苯基四氫吡咯并 [1,2-c] 噁唑 -5(3H)- 酮向實例2.119.4 (13.5 g)於四氫呋喃(500 mL)及水(50 mL)中之混合物中添加聚合物支撐之三苯基膦(55 g)。在室溫下機械攪拌反應物隔夜。反應物經矽藻土過濾，用乙酸乙酯及甲苯溶離。減壓濃縮混合物，將其溶解於二氯甲烷(100 mL)中，用硫酸鈉乾燥，接著過濾並濃縮，得到標題化合物，不經進一步純化即用於後續步驟中。MS (DCI) m/e 219.0 (M+H) +。 2.119.6    (3R,6S,7aS)-6-( 二苯甲基胺基 )-3- 苯基四氫吡咯并 [1,2-c] 噁唑 -5(3H)- 酮向實例2.119.5 (11.3 g)於N,N-二甲基甲醯胺(100 mL)中之混合物中添加碳酸鉀(7.0 g)、碘化鉀(4.2 g)及苯甲基溴(14.5 mL)。在室溫下攪拌反應隔夜並藉由添加水及乙酸乙酯淬滅。分離各層，且有機層用鹽水洗滌。合併之水層用乙酸乙酯反萃取。合併之有機層用硫酸鈉乾燥，過濾並減壓濃縮。殘餘物藉由矽膠層析法，用10至15%乙酸乙酯/庚烷梯度溶離來純化，得到固體，用庚烷濕磨，得到標題化合物。MS (DCI) m/e 399.1 (M+H) +。 2.119.7    (3S,5S)-3-( 二苯甲基胺基 )-5-( 羥基甲基 ) 吡咯啶 -2- 酮向實例2.119.6 (13 g)於四氫呋喃(130 mL)中之混合物中添加對甲苯磺酸單水合物(12.4 g)及水(50 mL)，並將反應物加熱至65℃，保持6天。將反應物冷卻至室溫且藉由添加飽和碳酸氫鈉水溶液及乙酸乙酯淬滅。分離各層且用鹽水洗滌有機層。合併之水層用乙酸乙酯反萃取。合併之有機層用硫酸鈉乾燥，過濾並減壓濃縮。蠟狀固體用庚烷(150 mL)濕磨，得到標題化合物。MS (DCI) m/e 311.1 (M+H) +。 2.119.8    (3S,5S)-5-((( 第三丁基二甲基矽烷基 ) 氧基 ) 甲基 )-3-( 二苯甲基胺基 ) 吡咯啶 -2- 酮向實例2.119.7 (9.3 g)及1H-咪唑(2.2 g)於N,N-二甲基甲醯胺中之混合物中添加第三丁基氯二甲基矽烷(11.2 mL，50重量%於甲苯中)，並攪拌反應混合物隔夜。藉由添加水及乙醚淬滅反應混合物。分離各層且用鹽水洗滌有機層。用乙醚反萃取合併之水層。合併之有機層用硫酸鈉乾燥，過濾並減壓濃縮。殘餘物藉由矽膠層析法，用35%乙酸乙酯/庚烷溶離來純化，得到標題化合物。MS (DCI) m/e 425.1 (M+H) +。 2.119.9    2-((3S,5S)-5-((( 第三丁基二甲基矽烷基 ) 氧基 ) 甲基 )- 3-( 二苯甲基胺基 )-2- 側氧基吡咯啶 -1- 基 ) 乙酸第三丁酯向實例2.119.8 (4.5 g)於四氫呋喃(45 mL)中之冷(0℃)混合物中分兩份添加95%氫化鈉(320 mg)。攪拌冷混合物40分鐘，並添加2-溴乙酸第三丁酯(3.2 mL)。使反應物升溫至室溫且攪拌隔夜。藉由添加水及乙酸乙酯淬滅反應。分離各層且用鹽水洗滌有機層。用乙酸乙酯反萃取合併之水層。合併之有機層用硫酸鈉乾燥，過濾並減壓濃縮。殘餘物藉由矽膠層析法，用5-12%乙酸乙酯/庚烷梯度溶離來純化，得到標題化合物。MS (DCI) m/e 539.2 (M+H) +。 2.119.10   2-((3S,5S)-3-( 二苯甲基胺基 )-5-( 羥基甲基 )-2- 側氧基吡咯啶 -1- 基 ) 乙酸第三丁酯向實例2.119.9 (5.3 g)於四氫呋喃(25 mL)中之混合物中添加氟化四丁基銨(11 mL，1.0M於95/5四氫呋喃/水中)。在室溫下攪拌反應一小時且接著藉由添加飽和氯化銨水溶液混合物、水及乙酸乙酯淬滅反應。分離各層且用鹽水洗滌有機層。用乙酸乙酯反萃取合併之水層。合併之有機層用硫酸鈉乾燥，過濾並減壓濃縮。殘餘物藉由矽膠層析法，用35%乙酸乙酯/庚烷溶離來純化，得到標題化合物。MS (DCI) m/e 425.1 (M+H) +。 2.119.11   2-((3S,5S)-5-((2-((4-(( 第三丁基二甲基矽烷基 ) 氧基 )- 2,2- 二甲基丁氧基 ) 磺醯基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-3-( 二苯甲基胺基 )-2- 側氧基吡咯啶 -1- 基 ) 乙酸第三丁酯向實例2.119.10 (4.7 g)於二甲亞碸(14 mL)中之混合物中添加乙烯磺酸4-((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)-2,2-二甲基丁酯(14.5 g)於二甲亞碸(14 mL)中之混合物。添加碳酸鉀(2.6 g)及水(28 μL)，且在氮氣下，在60℃下加熱反應物一天。將反應物冷卻至室溫，且接著藉由添加鹽水混合物、水及乙醚淬滅。分離各層且用鹽水洗滌有機層。用乙醚反萃取合併之水層。合併之有機層用硫酸鈉乾燥，過濾並減壓濃縮。殘餘物藉由矽膠層析法，用15-25%乙酸乙酯/庚烷梯度溶離來純化，得到標題化合物。MS (ESI+) m/e 871.2 (M+H) +。 2.119.12   2-((3S,5S)-3- 胺基 -5-((2-((4-(( 第三丁基二甲基矽烷基 ) 氧基 )-2,2- 二甲基丁氧基 ) 磺醯基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-2- 側氧基吡咯啶 -1- 基 ) 乙酸第三丁酯將實例2.119.11 (873 mg)溶解於乙酸乙酯(5 mL)及甲醇(15 mL)中，並添加20 wt%氫氧化鈀/碳(180 mg)。在氫氣氛圍(30 psi)下，在室溫下攪拌反應混合物30小時，接著在50℃下攪拌一小時。將反應物冷卻至室溫，過濾並濃縮，得到所需產物。MS (ESI+) m/e 691.0 (M+H) +。 2.119.13   4-(((3S,5S)-1-(2-( 第三丁氧基 )-2- 側氧基乙基 )-5-((2-((4-(( 第三丁基二甲基矽烷基 ) 氧基 )-2,2- 二甲基丁氧基 ) 磺醯基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-2- 側氧基吡咯啶 -3- 基 ) 胺基 )-4- 側氧基丁 -2- 烯酸將順丁烯二酸酐(100 mg)溶解於二氯甲烷(0.90 mL)中，並逐滴添加實例2.119.12(650 mg)於二氯甲烷(0.90 mL)中之混合物，且接著在40℃下加熱2小時。反應混合物直接藉由矽膠層析法，用1.0-2.5%甲醇/含0.2%乙酸之二氯甲烷梯度溶離來純化。濃縮含產物溶離份之後，添加甲苯(10 mL)，且再次濃縮混合物，得到標題化合物。MS (ESI-) m/e 787.3 (M-H) -。 2.119.14   2-((3S,5S)-5-((2-((4-(( 第三丁基二甲基矽烷基 ) 氧基 )- 2,2- 二甲基丁氧基 ) 磺醯基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-3-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 )-2- 側氧基吡咯啶 -1- 基 ) 乙酸第三丁酯使實例2.119.13 (560 mg)在甲苯(7 mL)中形成漿液，並添加三乙胺(220 μL)及硫酸鈉(525 mg)。在氮氣氛圍下，在回流下加熱反應物6小時，且在室溫下攪拌反應混合物隔夜。過濾反應物，且用乙酸乙酯沖洗固體。減壓濃縮溶離劑，且殘餘物藉由矽膠層析法，用45/55庚烷/乙酸乙酯溶離來純化，得到標題化合物。 2.119.15   2-((3S,5S)-3-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 )-2- 側氧基 -5-((2- 磺基乙氧基 ) 甲基 ) 吡咯啶 -1- 基 ) 乙酸將實例2.119.14 (1.2 g)溶解於三氟乙酸(15 mL)中並在氮氣下加熱至65-70℃隔夜。在減壓下移除三氟乙酸。將殘餘物溶解於乙腈(2.5 mL)中且在Luna C18(2) AXIA管柱(250 × 50 mm，10μ粒度)上藉由製備型逆相液相層析法，經30分鐘使用5-75%含0.1%三氟乙酸之乙腈/水梯度來純化，得到標題化合物。MS (ESI-) m/e 375.2 (M-H) -。 2.119.16   3-(1-((3-(2-((((4-((S)-2-((S)-2- 胺基 -3- 甲基丁醯胺基 )-5- 脲基戊醯胺基 ) 苯甲基 ) 氧基 ) 羰基 )(2- 磺基乙基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 ) 萘 -2- 基 ) 吡啶甲酸標題化合物係藉由在實例2.49.1中用實例1.43.7替代實例1.2.9製備。MS (ESI-) m/e 1252.4 (M-H) -。 2.119.17   N-({(3S,5S)-3-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 )-2- 側氧基 -5-[(2- 磺基乙氧基 ) 甲基 ] 吡咯啶 -1- 基 } 乙醯基 )-L- 纈胺醯基 -N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 ) 萘 -2- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](2- 磺基乙基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ] 苯基 }-N5- 胺甲醯基 -L- 鳥胺醯胺將實例2.119.15 (7 mg)溶解於N,N-二甲基甲醯胺(0.15 mL)中，並添加六氟磷酸O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基
Figure 111128039-A0304-2
(9 mg)及N,N-二異丙基乙胺(7 μL)。在室溫下攪拌混合物3分鐘並將其添加至實例2.119.16 (28 mg)及N,N-二異丙基乙胺(15 μL)於N,N-二甲基甲醯胺(0.15 mL)中之混合物中。1小時後，用N,N-二甲基甲醯胺/水1/1(1.0 mL)稀釋反應物且藉由逆相層析法(C18管柱)，用5-75%乙腈/ 0.1% TFA水溶離來純化，得到標題化合物。 1H NMR (500 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 9.95 (s, 1H), 9.02 (s, 1H), 8.37 (d, 1H), 8.22 (m, 2H), 8.18 (m, 2H), 8.08 (m, 2H), 8.03 (m, 1H), 7.96 (br d, 1H), 7.81 (d, 1H), 7.70 (t, 1H), 7.61 (br m, 3H), 7.48 (m, 2H), 7.37 (t, 1H), 7.27 (br m, 2H), 7.08 (s, 2H), 4.99 (br d, 3H), 4.68 (t, 1H), 4.39 (m, 1H), 4.20 (m, 2H), 4.04 (m, 1H), 3.87 (br d, 2H), 3.74 (br m, 1H) 3.65 (br t, 2H), 3.48 (br m, 4H), 3.43 (br m, 2H), 3.26 (br m, 2H), 3.00 (br m, 2H), 2.80 (m, 1H), 2.76 (m, 1H), 2.66 (br m, 2H), 2.36 (br m, 1H), 2.22 (s, 3H), 2.00 (m, 1H), 1.87 (m, 1H), 1.69 (br m, 1H), 1.62 (br m, 1H), 1.40 (br m, 4H), 1.31-1.02 (m, 10 H), 0.96 (m, 2H), 0.85 (m, 12H)。MS (ESI-) m/e 1610.3 (M-H) -。 2.120 合成 N-{(2S)-2-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 )-3-[4-(2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32- 十一氧雜三十四烷 -34- 基氧基 ) 苯基 ] 丙醯基 }-L- 纈胺醯基 -N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-( 1 ,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 ) 萘 -2- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](2- 磺基乙基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ] 苯基 }-N 5- 胺甲醯基 -L- 鳥胺醯胺 ( 合成子 SX) 2.120.1    (S)-3-(4-(2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32- 十一氧雜三十四烷 -34- 基氧基 ) 苯基 )-2-(( 第三丁氧基羰基 ) 胺基 ) 丙酸甲酯向4-甲基苯磺酸2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32-十一氧雜三十四烷-34-基酯(82.48 g)及碳酸鉀(84.97 g)於乙腈(1.5 L)中之混合物中添加(S)-2-((第三丁氧基羰基)胺基)-3-(4-羥基苯基)丙酸甲酯(72.63 g)，且在30℃下攪拌反應混合物12小時。LC/MS指示起始物質消耗且主要產物係所需產物後，過濾反應物，並濃縮濾液，得到粗產物，藉由製備型HPLC純化，得到標題化合物。MS (ESI): m/e 811 (M+H 2O) +。 2.120.2 3-(4-(2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32- 十一氧雜三十四烷 -34- 基氧基 ) 苯基 )-2-(( 第三丁氧基羰基 ) 胺基 ) 丙酸向實例2.120.1 (90.00 g)於四氫呋喃(1.5 L)及水(500 mL)中之混合物中添加氫氧化鋰單水合物(14.27 g)。在30℃下攪拌反應混合物12小時，且LC/MS指示起始物質消耗且主要產物係所需產物。使用HCl水溶液將反應混合物調至pH=6，且濃縮混合物，得到粗標題化合物。MS (ESI): m/e 778.3 (M-H) -。 2.120.3 3-(4-(2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32- 十一氧雜三十四烷 -34- 基氧基 ) 苯基 )-2- 胺基丙酸在N 2下，在25℃下向實例2.120.2 (88.41 g)於二氯甲烷(1.5 L)中之混合物中添加三氟乙酸(100 mL)，且在40℃下攪拌反應混合物12小時。LC/MS指示起始物質消耗，且主要產物係所需產物。濃縮混合物，得到粗產物，藉由製備型HPLC純化，得到呈三氟乙酸鹽形式之標題化合物。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ ppm 7.20 (d, J=8.6 Hz, 2H), 6.93 (d, J=8.2 Hz, 2H), 4.22 (dd, J=5.5, 7.4 Hz, 1H), 4.14-4.06 (m, 2H), 3.84-3.79 (m, 2H), 3.68-3.50 (m, 40H), 3.33 (s,3H), 3.21 (d, J=5.5 Hz, 1H), 3.12-3.05 (m,1H)。MS (ESI) m/e 680.1 (M+H)+。 2.120.4    4-((2-(4-(2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32- 十一氧雜三十四烷 -34- 基氧基 ) 苯基 )-1- 羧基乙基 ) 胺基 )-4- 側氧基丁 -2- 烯酸向實例2.120.3 (80.00 g)於二噁烷(1 L)中之混合物中添加呋喃-2,5-二酮(35 g)，且在120℃下攪拌反應混合物4小時。LC/MS指示起始物質消耗，且主要產物係所需產物。濃縮混合物，得到粗標題化合物，不經純化即用於下一步驟中。MS (ESI) m/e 795.4 (M+H) +。 2.120.5    (S)-3-(4-(2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32- 十一氧雜三十四烷 -34- 基氧基 ) 苯基 )-2-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 丙酸向實例2.120.4 (96 g，粗品)於甲苯(1.5 L)中之混合物中添加三乙胺(35.13 g)，並在120℃攪拌反應混合物4小時。LC/MS指示起始物質消耗，且主要產物係所需產物。過濾反應物以分離有機相，且濃縮有機相，得到粗產物，藉由製備型HPLC (儀器：Shimadzu LC-20AP製備型HPLC，管柱：Phenomenex® Luna® (2) C18 250*50 mm，內徑10μm，移動相：A為H 2O (0.09%三氟乙酸)且B為CH 3CN，梯度：B在20分鐘內自15%至43%，流動速率：80 ml/min，波長：220 & 254 nm，注入量：每次注射1公克)，隨後SFC-HPLC純化，得到標題化合物。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ ppm 6.98 (d, 2H), 6.74 (d, 2H), 6.56 (s, 2H), 4.85 (dd, 1H), 4.03 (t, 2H), 3.84-3.76 (m, 2H), 3.71-3.66 (m, 2H), 3.65-3.58 (m, 39H), 3.55-3.50 (m, 2H), 3.41-3.30 (m, 4H)。MS (ESI) m/e 760.3 (M+H) +。 2.120.6 N-{(2S)-2-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 )-3-[4-(2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32- 十一氧雜三十四烷 -34- 基氧基 ) 苯基 ] 丙醯基 }-L- 纈胺醯基 -N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 ) 萘 -2- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](2- 磺基乙基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ] 苯基 }-N5- 胺甲醯基 -L- 鳥胺醯胺標題化合物係藉由在實例2.119.17中用實例2.120.5替代實例2.119.15製備。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 10.03 (s, 1H), 9.02 (s, 1H), 8.37 (d, 1H), 8.22 (m, 3H), 8.16 (d, 1H), 8.12 (br m, 1H), 8.07 (d, 1H), 8.01 (d, 1H), 7.96 (br d, 1H), 7.81 (d, 1H), 7.70 (t, 1H), 7.59 (br m, 2H), 7.48 (m, 2H), 7.37 (t, 1H), 7.28 (d, 2H), 7.02 (d, 2H), 6.89 (s, 2H), 6.77 (d, 2H), 4.98 (br d, 2H), 4.79 (dd, 1H), 4.39 (br m, 1H), 4.23 (br m, 2H), 3.99 (br m, 2H), 3.88 (br m, 2H), 3.69 (br m, 4H), 3.55 (m, 4H), 3.50 (s, 32H), 3.42 (m, 4H), 3.27 (m, 4H), 3.23 (s, 3H), 3.20 (m, 1H), 3.03 (br m, 1H), 2.98 (m, 1H), 2.65 (br t, 2H), 2.22 (s, 3H), 1.97 (br m, 1H), 1.69 (br m, 1H), 1.61 (br m, 1H), 1.39 (m, 4H), 1.31-0.91 (m, 12H), 0.85 (m, 9H), 0.77 (d, 3H)。MS (ESI) m/e 1993.7 (M-H) -。 2.121 合成 N-({(3S,5S)-3-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 )-2- 側氧基 -5-[(2- 磺基乙氧基 ) 甲基 ] 吡咯啶 -1- 基 } 乙醯基 )-L- 纈胺醯基 -N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](2- 磺基乙基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ] 苯基 }-N 5- 胺甲醯基 -L- 鳥胺醯胺 ( 合成子 SW)標題化合物係藉由在實例2.119.17中用實例2.49.1替代實例2.119.16製備。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 9.96 (s, 1H), 8.17 (br d, 1H), 8.03 (d, 2H), 7.79 (d, 1H), 7.61 (m, 3H), 7.55 (d, 1H), 7.45 (m, 2H), 7.37 (m, 3H), 7.27 (d, 2H), 7.08 (s, 2H), 6.98 (d, 1H), 4.97 (m, 4H), 4.68 (t, 1H), 4.37 (br m, 1H), 4.22 (br s, 1H), 4.17 (d, 1H), 4.03 (d, 1H), 3.89 (br t, 2H), 3.83 (br d, 2H), 3.74 (br m, 1H), 3.65 (t, 2H), 3.49 (m, 3H), 3.40 (br m, 4H), 3.25 (br m, 2H), 3.02 (br m, 4H), 2.80 (m, 2H), 2.67 (br m, 2H), 2.37 (br m, 1H), 2.10 (s, 3H), 1.99 (m, 1H), 1.86 (m, 1H), 1.69 (br m, 1H), 1.61 (br m, 1H), 1.52-0.91 (m, 16H), 0.85 (m, 12H)。MS (ESI) m/e 1615.4 (M-H) -。 2.122 合成 N-{(2S)-2-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 )-3-[4-(2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32- 十一氧雜三十四烷 -34- 基氧基 ) 苯基 ] 丙醯基 }-L- 纈胺醯基 -N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](2- 磺基乙基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ] 苯基 }-N 5- 胺甲醯基 -L- 鳥胺醯胺 ( 合成子 TV)向實例2.120.5 (19.61 mg)及六氟磷酸O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基
Figure 111128039-A0304-2
(9.81 mg)於N,N-二甲基甲醯胺(0.8 mL)中之混合物中添加N,N-二異丙基乙胺(27.7 μL)。攪拌混合物5分鐘並在0℃下，將其添加至實例2.112.2於N,N-二甲基甲醯胺(0.5 mL)中之冷混合物中。在0℃下攪拌反應混合物40分鐘，並在Gilson系統(C18管柱)上藉由逆相HPLC，用20-80%乙腈/含0.1%三氟乙酸之水溶離來純化，得到標題化合物。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ 9.99 (s, 1H), 8.19 (d, 1H), 8.14-8.04 (m, 1H), 8.00 (dd, 1H), 7.75 (d, 1H), 7.62-7.52 (m, 3H), 7.49 (d, 1H), 7.46-7.37 (m, 2H), 7.36-7.29 (m, 2H), 7.28-7.21 (m, 3H), 6.99 (d, 2H), 6.92 (d, 1H), 6.85 (s, 2H), 6.79-6.71 (m, 2H), 4.94 (d, 3H), 4.76 (dd, 1H), 4.35 (d, 1H), 4.20 (t, 1H), 3.96 (dd, 2H), 3.85 (t, 2H), 3.77 (d, 2H), 3.66 (dd, 2H), 3.52 (dd, 2H), 3.50-3.47 (m, 2H), 3.39 (dd, 2H), 3.20 (s, 4H), 2.97 (t, 3H), 2.60 (t, 2H), 2.13-2.01 (m, 3H), 1.93 (s, 1H), 1.61 (d, 2H), 1.49-0.88 (m, 10H), 0.87-0.59 (m, 12H)。MS (ESI) m/e 1998.7 (M-H) -。 2.123 合成 (6S)-2,6- 去水 -6-(2-{2-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](2- 磺基乙基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ]-5-({N-[(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 乙醯基 ]-L- 纈胺醯基 -L- 丙胺醯基 } 胺基 ) 苯基 } 乙基 )-L- 古洛糖酸 ( 合成子 SZ) 2.123.1 (3R,4S,5R,6R)-3,4,5- 參 ( 苯甲基氧基 )-6-( 苯甲基氧基甲基 )- 四氫哌喃 -2- 酮在0℃下，向(3R,4S,5R,6R)-3,4,5-參(苯甲基氧基)-6-((苯甲基氧基)甲基)四氫-2H-哌喃-2-醇(75 g)於二甲亞碸(400 mL)中之混合物中添加乙酸酐(225 mL)。在室溫下攪拌混合物16小時，隨後將其冷卻至0℃。添加大量水，並停止攪拌以使反應混合物沈降3小時(粗內酯移至燒瓶底部)。移除上清液，且粗混合物用乙酸乙酯稀釋並用水洗滌3次，用飽和NaHCO 3水溶液混合物中和，並用水再洗滌兩次。接著，有機層經硫酸鎂乾燥，過濾並濃縮，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 561 (M+Na) +。 2.123.2 (3R,4S,5R,6R)-3,4,5- 參 ( 苯甲基氧基 )-6-( 苯甲基氧基甲基 )-2- 乙炔基 - 四氫 -2H- 哌喃 -2- 醇在氮氣下並在乾冰/丙酮浴(內溫為-65℃)中冷卻下，向乙炔基三甲基矽烷(18.23 g)於四氫呋喃(400 mL)中之混合物中逐滴添加2.5M BuLi之己烷溶液(55.7 mL)，保持溫度低於-60℃。在冷浴中攪拌混合物40分鐘，隨後在冰-水浴(內溫升至0.4℃)中攪拌40分鐘，且最後再冷卻至-75℃。逐滴添加實例2.123.1 (50 g)於四氫呋喃(50 mL)中之混合物，保持內溫低於-70℃。在乾冰/丙酮浴中再攪拌混合物3小時。用飽和NaHCO 3水溶液混合物(250 mL)淬滅反應。使混合物升溫至室溫，用乙酸乙酯(3× 300 mL)萃取，經MgSO 4乾燥，過濾並真空濃縮，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 659 (M+Na) +。 2.123.3 三甲基 (((3S,4R,5R,6R)-3,4,5- 參 ( 苯甲基氧基 )-6-( 苯甲基氧基甲基 )- 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 ) 乙炔基 ) 矽烷在冰-鹽浴中，在-15℃下向實例2.123.2 (60 g)於乙腈(450 mL)及二氯甲烷(150 mL)中之混合之混合物中逐滴添加三乙基矽烷(81 mL)，隨後以使得內溫不超過-10℃之速率添加三氟化硼乙醚錯合物(40.6 mL)。接著在-15℃至-10℃下攪拌混合物2小時。用飽和NaHCO 3水溶液混合物(275 mL)淬滅反應並在室溫下攪拌1小時。接著用乙酸乙酯(3 × 550 mL)萃取混合物。萃取液經MgSO 4乾燥，過濾並濃縮。殘餘物藉由急驟層析法，用0%至7%乙酸乙酯/石油醚梯度溶離來純化，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 643 (M+Na) +。 2.123.4 (2R,3R,4R,5S)-3,4,5- 參 ( 苯甲基氧基 )-2-( 苯甲基氧基甲基 )-6- 乙炔基 - 四氫 -2H- 哌喃向實例2.123.3 (80 g)於二氯甲烷(200 mL)及甲醇(1000 mL)中之混合之混合物中添加1N NaOH水溶液混合物(258 mL)。在室溫下攪拌混合物2小時。移除溶劑。接著使殘餘物在水與二氯甲烷之間分配。用鹽水洗滌萃取液，經Na 2SO 4乾燥，過濾並濃縮，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 571 (M+Na) +。 2.123.5 三乙酸 (2R,3R,4R,5S)-2-( 乙醯氧基甲基 )-6- 乙炔基 - 四氫 -2H- 哌喃 -3,4,5- 三基酯向經冰/水浴冷卻的實例2.123.4 (66 g)於乙酸酐(500 mL)中之混合物中逐滴添加三氟化硼乙醚錯合物(152 mL)。在室溫下攪拌混合物16小時，用冰/水浴冷卻並用飽和NaHCO 3水溶液混合物中和。用乙酸乙酯(3×500 mL)萃取混合物，經Na 2SO 4乾燥，過濾並真空濃縮。殘餘物藉由急驟層析法，用0%至30%乙酸乙酯/石油醚梯度溶離來純化，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 357 (M+H) +。 2.123.6 (3R,4R,5S,6R)-2- 乙炔基 -6-( 羥基甲基 )- 四氫 -2H- 哌喃 -3,4,5- 三醇向實例2.123.5 (25 g)於甲醇(440 mL)中之混合物中添加甲醇鈉(2.1 g)。在室溫下攪拌混合物2小時，接著用4M HCl之二噁烷溶液中和。移除溶劑，且將殘餘物吸附至矽膠上且裝載至矽膠管柱。用0至100%乙酸乙酯/石油醚，接著0%至12%甲醇/乙酸乙酯梯度溶離管柱，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 211 (M+Na) +。 2.123.7 (2S,3S,4R,5R)-6- 乙炔基 -3,4,5- 三羥基 - 四氫 -2H- 哌喃 -2- 甲酸向三頸圓底燒瓶中裝入實例2.123.6 (6.00 g)、KBr (0.30 g)、溴化四丁基銨(0.41 g)及60 mL飽和NaHCO 3水溶液混合物。添加於60 mL二氯甲烷中之TEMPO ((2,2,6,6-四甲基哌啶-1-基)氧基，0.15 g)。劇烈攪拌混合物並在冰-鹽浴中冷卻至-2℃內溫。逐滴添加鹽水(12 mL)、NaHCO 3水溶液混合物(24 mL)及NaOCl (154 mL)之混合物，使得內溫維持在低於2℃。藉由添加固體Na 2CO 3將反應混合物之pH值維持在8.2-8.4範圍。總計6小時後，將反應混合物冷卻至3℃內溫並逐滴添加乙醇(-20 mL)。攪拌混合物約30分鐘。將混合物轉移至分液漏斗中，且丟棄二氯甲烷層。使用1 M HCl水溶液將水層之pH值調至2-3。接著濃縮水層至乾，得到固體。將甲醇(100 mL)添加至乾燥固體中，並攪拌漿液約30分鐘。混合物經矽藻土墊過濾，且用約100 mL甲醇洗滌漏斗中之殘餘物。減壓濃縮濾液，得到標題化合物。 2.123.8 (2S,3S,4R,5R)-6- 乙炔基 -3,4,5- 三羥基四氫 -2H- 哌喃 -2- 甲酸甲酯向500 mL三頸圓底燒瓶中裝入實例2.123.7 (6.45 g)於甲醇(96 mL)中之懸浮液並在內溫為-1℃之冰-鹽浴中冷卻。小心地添加純亞硫醯氯(2.79 mL)。在整個添加過程中內溫保持升高但不超過10℃。使反應物經2.5小時緩慢升溫至15-20℃。2.5小時後，濃縮反應物，得到標題化合物。 2.123.9 三乙酸 (3S,4R,5S,6S)-2- 乙炔基 -6-( 甲氧基羰基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -3,4,5- 三基酯向實例2.123.8 (6.9 g)於N,N-二甲基甲醯胺(75 mL)中之混合物中添加4-(二甲基胺基)吡啶(0.17 g)及乙酸酐(36.1 mL)。在冰浴中冷卻懸浮液且經由注射器經15分鐘添加吡啶(18.04 mL)。使反應物升溫至室溫隔夜。再添加乙酸酐(12 mL)及吡啶(6 mL)並且再繼續攪拌6小時。在冰浴中冷卻反應物且添加250 mL飽和NaHCO 3水溶液混合物並攪拌1小時。添加水(100 mL)，且用乙酸乙酯萃取混合物。有機萃取液用飽和CuSO 4混合物洗滌兩次，乾燥，過濾並濃縮。殘餘物藉由急驟層析法，用50%乙酸乙酯/石油醚溶離來純化，得到標題化合物。 1H NMR (500 MHz, 甲醇-d 4) δ ppm 5.29 (t, 1H), 5.08 (td, 2H), 4.48 (dd, 1H), 4.23 (d, 1H), 3.71 (s, 3H), 3.04 (d, 1H), 2.03 (s, 3H), 1.99 (s, 3H), 1.98 (s, 4H)。 2.123.10   2- 碘 -4- 硝基苯甲酸在氮氣氛圍下，向配備有機械攪拌器、溫度探針及加料漏斗的3L完全夾套包覆之燒瓶中裝入2-胺基-4-硝基苯甲酸(69.1 g，Combi-Blocks)及1.5 M硫酸水溶液(696 mL)。將所得懸浮液冷卻至0℃內溫，並經43分鐘逐滴添加亞硝酸鈉(28.8 g)於水(250 mL)中之混合物，同時溫度保持低於1℃。在約0℃下攪拌反應1小時。經44分鐘逐滴添加碘化鉀(107 g)於水(250 mL)中之混合物，同時保持內溫低於1℃。(最初添加係放熱的且有氣體放出)。在0℃下攪拌反應1小時。使溫度升高至20℃且接著在環境溫度下攪拌隔夜。反應混合物變為懸浮液。過濾反應混合物，且用水洗滌收集之固體。在10%亞硫酸鈉(350 mL，並使用約200 mL水洗滌固體)中攪拌潮濕固體(約108 g)達30分鐘。用濃鹽酸(35 mL)酸化懸浮液，且藉由過濾收集固體並用水洗滌。使該固體在水(1L)中形成漿液並且再過濾，且使固體在漏斗中乾燥隔夜。接著在真空烘箱中，在60℃下乾燥固體2小時。所得固體用二氯甲烷(500 mL)濕磨，且過濾懸浮液並再用二氯甲烷洗滌。空氣乾燥該固體，得到標題化合物。 2.123.11 (2- 碘 -4- 硝基苯基 ) 甲醇向火焰乾燥之3 L 3頸燒瓶中裝入實例2.123.10 (51.9 g)及四氫呋喃(700 mL)。在冰浴中將混合物冷卻至0.5℃，且經50分鐘逐滴添加硼烷-四氫呋喃錯合物(443 mL，1M之THF溶液) (氣體放出)，達到最終內溫1.3℃。攪拌反應混合物15分鐘，並移除冰浴。使反應物經30分鐘達到環境溫度。安放加熱套，且將反應物加熱至內溫65.5℃，保持3小時，且接著使其冷卻至室溫，同時攪拌隔夜。在冰浴中將反應混合物冷卻至0℃且藉由逐滴添加甲醇(400 mL)淬滅。短時間溫育後，溫度迅速升高至2.5℃，並有氣體放出。經約30分鐘添加前100 mL後，添加不再放熱，且停止氣體放出。移除冰浴，且在氮氣下，在環境溫度下攪拌混合物隔夜。濃縮混合物，得到固體，將其溶解於二氯甲烷/甲醇中且吸附至矽膠(約150 g)上。將殘餘物裝載至矽膠塞(3000 mL)上並用二氯甲烷溶離，得到標題化合物。 2.123.12   (4- 胺基 -2- 碘苯基 ) 甲醇向配備有機械攪拌器、由JKEM溫度探針控制之加熱套及冷凝器的5 L燒瓶中裝入實例2.123.11 (98.83 g)及乙醇(2 L)。迅速攪拌反應，並添加鐵(99 g)，隨後添加氯化銨(20.84 g)於水(500 mL)中之混合物。經20分鐘過程將反應物加熱至內溫80.3℃，此時其開始劇烈回流。降低加熱套，直至回流平息。隨後，將混合物加熱至80℃，保持1.5小時。反應物經膜過濾器趁熱過濾，且鐵殘餘物用熱50%乙酸乙酯/甲醇(800 mL)洗滌。使溶離劑通過矽藻土墊，並濃縮濾液。使殘餘物在50%鹽水(1500 mL)與乙酸乙酯(1500 mL)之間分配。分離各層，且用乙酸乙酯(400 mL × 3)萃取水層。合併之有機層經硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮，得到標題化合物，不經進一步純化即使用。 2.123.13   4-((( 第三丁基二甲基矽烷基 ) 氧基 ) 甲基 )-3- 碘苯胺向配有機械攪拌器之5 L燒瓶中裝入實例2.123.12 (88 g)及二氯甲烷(2 L)。在冰浴中將懸浮液冷卻至內溫2.5℃，並經8分鐘逐份添加第三丁基氯二甲基矽烷(53.3 g)。10分鐘後，將1H-咪唑(33.7 g)逐份添加至冷反應物中。攪拌反應90分鐘，同時內溫升至15℃。用水(3 L)及二氯甲烷(1 L)稀釋反應混合物。分離各層，且有機層經硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮，得到油狀物。殘餘物藉由矽膠層析法(1600 g矽膠)，用0-25%乙酸乙酯/庚烷梯度溶離來純化，得到呈油狀之標題化合物。 2.123.14   (S)-2-((S)-2-((((9H- 茀 -9- 基 ) 甲氧基 ) 羰基 ) 胺基 )-3- 甲基丁醯胺基 ) 丙酸向(S)-2-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-3-甲基丁酸(6.5 g)於二甲氧基乙烷(40 mL)中之混合物中添加於水(40 mL)中之(S)-2-胺基丙酸(1.393 g)及碳酸氫鈉(1.314 g)。添加四氫呋喃 (20 mL)以幫助溶解。在室溫下攪拌所得混合物16小時。添加檸檬酸水溶液(15%，75 mL)，且混合物用10% 2-丙醇之乙酸乙酯溶液(2 × 100 mL)萃取。在有機層中形成沈澱。用水(2 × 150 mL)洗滌合併之有機層。減壓濃縮有機層且接著用乙醚(80 mL)濕磨。短暫音波處理後，藉由過濾收集標題化合物。MS (ESI) m/e 411 (M+H) +。 2.123.15   ((S)-1-(((S)-1-((4-((( 第三丁基二甲基矽烷基 ) 氧基 ) 甲基 )-3- 碘苯基 ) 胺基 )-1- 側氧基丙 -2- 基 ) 胺基 )-3- 甲基 -1- 側氧基丁 -2- 基 ) 胺基甲酸 (9H- 茀 -9- 基 ) 甲酯向實例2.123.13 (5.44 g)及實例2.123.14 (6.15 g)於二氯甲烷(70 mL)及甲醇(35.0 mL)之混合物中之混合物中添加2-乙氧基喹啉-1(2H)-甲酸乙酯(4.08 g)，並攪拌反應隔夜。濃縮反應混合物並裝載至矽膠上，用10%至95%庚烷/乙酸乙酯，隨後5%甲醇/二氯甲烷梯度溶離。濃縮含產物溶離份，將其溶解於0.2%甲醇/二氯甲烷(50 mL)中，裝載至矽膠上且用0.2%至2%甲醇/二氯甲烷梯度溶離。收集含產物之溶離份，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 756.0 (M+H) +。 2.123.16 三乙酸 (2S,3S,4R,5S,6S)-2-((5-((S)-2-((S)-2-((((9H- 茀 -9- 基 ) 甲氧基 ) 羰基 ) 胺基 )-3- 甲基丁醯胺基 ) 丙醯胺基 )-2-((( 第三丁基二甲基矽烷基 ) 氧基 ) 甲基 ) 苯基 ) 乙炔基 )-6-( 甲氧基羰基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -3,4,5- 三基酯將實例2.123.9 (4.500 g)、實例2.123.15 (6.62 g)、碘化銅(I)(0.083 g)及二氯化雙(三苯基膦)鈀(II) (0.308 g)之混合物組合於小瓶中並脫氣。添加N,N-二甲基甲醯胺(45 mL)及N-乙基-N-異丙基丙-2-胺(4.55 mL)，並用氮氣吹掃反應容器且在室溫下攪拌隔夜。使反應物在水(100 mL)與乙酸乙酯(250 mL)之間分配。分離各層，且有機層經硫酸鎂乾燥，過濾並濃縮。殘餘物藉由矽膠層析法，用5%至95%乙酸乙酯/庚烷梯度溶離來純化。收集含產物之溶離份，濃縮且藉由矽膠層析法，用0.25%至2.5%甲醇/二氯甲烷梯度溶離來純化，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 970.4 (M+H) +。 2.123.17 三乙酸 (2S,3S,4R,5S,6S)-2-(5-((S)-2-((S)-2-((((9H- 茀 -9- 基 ) 甲氧基 ) 羰基 ) 胺基 )-3- 甲基丁醯胺基 ) 丙醯胺基 )-2-((( 第三丁基二甲基矽烷基 ) 氧基 ) 甲基 ) 苯乙基 )-6-( 甲氧基羰基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -3,4,5- 三基酯在50 mL壓力瓶中，將實例2.123.16 (4.7 g)及四氫呋喃(95 mL)添加至5% Pt/C (2.42 g，潮濕)中並在50 psi氫氣下，在室溫下振盪90分鐘。過濾反應物並濃縮，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 974.6 (M+H) +。 2.123.18 三乙酸 (2S,3S,4R,5S,6S)-2-(5-((S)-2-((S)-2-((((9H- 茀 -9- 基 ) 甲氧基 ) 羰基 ) 胺基 )-3- 甲基丁醯胺基 ) 丙醯胺基 )-2-( 羥基甲基 ) 苯乙基 )-6-( 甲氧基羰基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -3,4,5- 三基酯在室溫下，將實例2.123.17 (5.4 g)於四氫呋喃(7 mL)、水(7 mL)及冰乙酸(21 mL)中之混合物攪拌隔夜。反應物用乙酸乙酯(200 mL)稀釋並用水(100 mL)、飽和NaHCO 3水溶液混合物(100 mL)、鹽水(100 mL)洗滌，經硫酸鎂乾燥，過濾並濃縮。殘餘物藉由矽膠層析法，用0.5%至5%甲醇/二氯甲烷梯度溶離來純化，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 860.4 (M+H) +。 2.123.19 三乙酸 (2S,3S,4R,5S,6S)-2-(5-((S)-2-((S)-2-((((9H- 茀 -9- 基 ) 甲氧基 ) 羰基 ) 胺基 )-3- 甲基丁醯胺基 ) 丙醯胺基 )-2-((((4- 硝基苯氧基 ) 羰基 ) 氧基 ) 甲基 ) 苯乙基 )-6-( 甲氧基羰基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -3,4,5- 三基酯在室溫下，向實例2.123.18 (4.00 g)及碳酸雙(4-硝基苯基)酯(2.83 g)於乙腈(80 mL)中之混合物中添加N-乙基-N-異丙基丙-2-胺(1.22 mL)。攪拌隔夜後，濃縮反應物，將其溶解於二氯甲烷(250 mL)中並用飽和NaHCO 3水溶液混合物(4 × 150 mL)洗滌。有機層經硫酸鎂乾燥，過濾並濃縮。所得泡沫狀物藉由矽膠層析法，用5%至75%乙酸乙酯/己烷梯度溶離來純化，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 1025.5 (M+H) +。 2.123.20   3-(1-((3-(2-((((4-((R)-2-((R)-2- 胺基 -3- 甲基丁醯胺基 ) 丙醯胺基 )-2-(2-((2S,3R,4R,5S,6S)-6- 羧基 -3,4,5- 三羥基四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 ) 乙基 ) 苯甲基 ) 氧基 ) 羰基 )(2- 磺基乙基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ) 吡啶甲酸向實例2.123.19 (70 mg)及實例1.2.9 (58.1 mg)於N,N-二甲基甲醯胺(4 mL)中之冷(0℃)混合物中添加N-乙基-N-異丙基丙-2-胺(0.026 mL)。使反應物緩慢升溫至室溫並攪拌隔夜。向反應混合物中添加水(1 mL)及LiOH H 2O (20 mg)。在室溫下攪拌混合物3小時。用三氟乙酸酸化混合物，過濾，並在Gilson系統(C18管柱)上藉由逆相HPLC，用20-80%乙腈/含0.1%三氟乙酸之水溶離來純化，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 1564.4 (M-H) -。 2.123.21   (6S)-2,6- 去水 -6-(2-{2-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](2- 磺基乙基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ]-5-({N-[(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 乙醯基 ]-L- 纈胺醯基 -L- 丙胺醯基 } 胺基 ) 苯基 } 乙基 )-L- 古洛糖酸標題化合物係如實例2.54中所描述，用實例2.123.20替代實例2.49.1製備。 1H NMR (500 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 12.86 (s, 1H), 9.92 (d, 1H), 8.35-8.19 (m, 2H), 8.04 (d, 1H), 7.80 (d, 1H), 7.61 (d, 1H), 7.57-7.32 (m, 8H), 7.28 (s, 1H), 7.22 (d, 1H), 7.08 (s, 2H), 6.95 (d, 1H), 5.12-4.91 (m, 5H), 4.39 (t, 1H), 4.32-4.19 (m, 1H), 4.12 (s, 2H), 3.89 (t, 2H), 3.80 (d, 2H), 3.14 (t, 1H), 3.06-2.87 (m, 4H), 2.69-2.58 (m, 4H), 2.37 (p, 1H), 2.09 (d, 4H), 2.04-1.91 (m, 4H), 1.54 (d, 1H), 1.40-0.99 (m, 20H), 0.99-0.74 (m, 16H)。MS (ESI) m/e 1513.5 (M-H) -。 2.124 合成 3-{[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 ) 萘 -2- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ]({[4-(4-{[6-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 己醯基 ] 胺基 } 丁基 )-2-( β -D- 葡萄哌喃糖醛醯基氧基 ) 苯甲基 ] 氧基 } 羰基 ) 胺基 } 丙基 β -D- 葡萄哌喃糖苷醛酸 ( 合成子 ZM) 2.124.1A 丁 -3- 炔 -1- 基胺基甲酸 (9H- 茀 -9- 基 ) 甲酯在二氯甲烷(70 mL)中攪拌丁-3-炔-1-胺鹽酸鹽(9 g)及N,N-二異丙基乙胺(44.7 mL)之混合物並冷卻至0℃。添加氯甲酸(9H-茀-9-基)甲酯(22.06 g)於二氯甲烷(35 mL)中之混合物，並攪拌反應2小時。濃縮反應物，且殘餘物藉由矽膠層析法，用石油醚/乙酸乙酯(10%-25%)溶離來純化，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 314 (M+Na) +。 2.124.1B三乙酸 (3R,4S,5S,6S)-2-(2- 甲醯基 -5- 碘苯氧基 )-6-(甲氧基羰基)四氫-2H-哌喃-3,4,5-三基酯 向2-羥基-4-碘苯甲醛(0.95 g)於乙腈(10 ml)中之經攪拌溶液中添加三乙酸(3R,4S,5S,6S)-2-溴-6-(甲氧基羰基)四氫-2H-哌喃-3,4,5-三基酯(2.5 g)及氧化銀(2 g)。用鋁箔覆蓋混合物並在室溫下攪拌隔夜。經矽藻土過濾後，用乙酸乙酯洗滌濾液，濃縮溶液。反應混合物使用ISCO CombiFlash系統、SF40-80g管柱，藉由急驟層析法，用15-30%乙酸乙酯/庚烷(流動速率：60 ml/min)溶離來純化，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 586.9 (M+Na) +。 2.124.2 (2S,3S,4S,5R,6S)-6-(5-(4-(((9H- 茀 -9- 基 ) 甲氧基 ) 羰基胺基 ) 丁 -1- 炔基 )-2- 甲醯基苯氧基)-3,4,5-三乙醯氧基-四氫-2H-哌喃-2-甲酸 甲酯 稱取實例2.124.1B (2.7 g)、實例2.124.1A (2.091 g)、氯化雙(三苯基膦)鈀(II) (0.336 g)及碘化銅(I)(0.091 g)放至小瓶中且用氮氣流吹掃。添加三乙胺(2.001 mL)及四氫呋喃(45 mL)，並在室溫下攪拌反應。攪拌16小時後，用乙酸乙酯(200 mL)稀釋反應物並用水(100 mL)及鹽水(100 mL)洗滌。有機層經硫酸鎂乾燥，過濾並濃縮。殘餘物藉由矽膠層析法，用石油醚/乙酸乙酯(10%-50%)溶離來純化，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 750 (M+Na) +。 2.124.3 (2S,3S,4S,5R,6S)-6-(5-(4-(((9H- 茀 -9- 基 ) 甲氧基 ) 羰基胺基 ) 丁基 )-2- 甲醯基苯氧基 )-3,4,5- 三乙醯氧基 - 四氫 -2H- 哌喃 -2- 甲酸甲酯在100 mL壓力瓶中，在1 atm H 2下，在室溫下將實例2.124.2 (1.5 g)及四氫呋喃(45 mL)添加至10% Pd-C (0.483 g)中並攪拌16小時。過濾反應物並濃縮，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 754 (M+Na) +。 2.124.4 (2S,3S,4S,5R,6S)-6-(5-(4-(((9H- 茀 -9- 基 ) 甲氧基 ) 羰基胺基 ) 丁基 )-2-( 羥基甲基 ) 苯氧基 )-3,4,5- 三乙醯氧基 - 四氫 -2H- 哌喃 -2- 甲酸甲酯將實例2.124.3 (2.0 g)於四氫呋喃(7.00 mL)及甲醇(7 mL)中之混合物冷卻至0℃並整份添加NaBH 4(0.052 g)。30分鐘後，用乙酸乙酯 (150 mL)及水(100 mL)稀釋反應物。分離有機層，用鹽水(100 mL)洗滌，經硫酸鎂乾燥，過濾並濃縮。殘餘物藉由矽膠層析法，用石油醚/乙酸乙酯(10%-40%)溶離來純化，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 756 (M+Na) +。 2.124.5 (2S,3S,4S,5R,6S)-6-(5-(4-(((9H- 茀 -9- 基 ) 甲氧基 ) 羰基胺基 ) 丁基 )-2-(((4- 硝基苯氧基 ) 羰基氧基 ) 甲基 ) 苯氧基 )-3,4,5- 三乙醯氧基 - 四氫 -2H- 哌喃 -2- 甲酸甲酯在0℃下，向實例2.124.4 (3.0 g)及碳酸雙(4-硝基苯基)酯(2.488 g)於無水乙腈(70 mL)中之混合物中添加N,N-二異丙基乙胺(1.07 mL)。在室溫下攪拌16小時後，濃縮反應物，得到殘餘物，藉由矽膠層析法，用石油醚/乙酸乙酯(10%-50%)溶離來純化，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 921 (M+Na) +。 2.124.6 3-(1-((3-(2-((((4-(4- 胺基丁基 )-2-(((2R,3S,4R,5R,6R)-6- 羧基 -3,4,5- 三羥基四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 ) 氧基 ) 苯甲基 ) 氧基 ) 羰基 )(3-(((2S,3S,4R,5R,6R)-6- 羧基 -3,4,5- 三羥基四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 ) 氧基 ) 丙基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 ) 萘 -2- 基 ) 吡啶甲酸向實例2.124.5 (44 mg)及實例1.87.3 (47.4 mg)於N,N-二甲基甲醯胺(4 mL)中之冷(0℃)混合物中添加N-乙基-N-異丙基丙-2-胺(0.026 mL)。使反應物緩慢升溫至室溫並攪拌隔夜。向反應混合物中添加水(1 mL)及LiOH H 2O(20 mg)。在室溫下攪拌混合物3小時。用三氟乙酸酸化混合物，過濾，並在Gilson系統(C18管柱)上藉由逆相HPLC，用20-80%乙腈/含0.1%三氟乙酸之水溶離來純化，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 1564.4 (M-H) -。 2.124.7 3-{[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 ) 萘 -2- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ]({[4-(4-{[6-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 己醯基 ] 胺基 } 丁基 )-2-( β -D- 葡萄哌喃糖醛醯基氧基 ) 苯甲基 ] 氧基 } 羰基 ) 胺基 } 丙基 β -D- 葡萄哌喃糖苷醛酸標題化合物係如實例2.5.4中所描述，用實例2.124.6替代實例2.5.3製備。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 13.06 (s, 2H), 8.99 (s, 1H), 8.34 (dd, 1H), 8.25-8.09 (m, 3H), 8.08-8.02 (m, 1H), 7.98 (d, 1H), 7.89 (d, 1H), 7.78 (d, 1H), 7.66 (q, 2H), 7.50-7.41 (m, 2H), 7.37-7.31 (m, 1H), 7.14 (t, 1H), 6.94 (s, 2H), 6.90 (s, 1H), 6.82 (d, 1H), 5.14-5.02 (m, 2H), 4.97 (d, 1H), 4.19 (d, 1H), 3.85 (dd, 3H), 3.37-3.23 (m, 9H), 3.14 (t, 1H), 3.04-2.92 (m, 4H), 2.19 (s, 3H), 1.96 (t, 2H), 1.73 (s, 2H), 1.55-0.87 (m, 21H), 0.81 (d, 6H)。MS (ESI) m/e 1564.4 (M-H) -。 2.125 合成 N-{[(3S,5S)-3-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 )-5-( 甲氧基甲基 )-2- 側氧基吡咯啶 -1- 基 ] 乙醯基 }-L- 纈胺醯基 -N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](2- 磺基乙基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ] 苯基 }-N 5- 胺甲醯基 -L- 鳥胺醯胺 ( 合成子 SV) 2.125.1 2-((3S,5S)-3-( 二苯甲基胺基 )-5-( 甲氧基甲基 )-2- 側氧基吡咯啶 -1- 基 ) 乙酸第三丁酯向實例2.119.10 (1.4 g)於N,N-二甲基甲醯胺(5 mL)中之混合物中添加碘甲烷(0.8 mL)。將反應物冷卻至0℃，並添加95%氫化鈉(80 mg)。五分鐘後，移除冷卻浴，並在室溫下攪拌反應2.5小時。藉由添加水(20 mL)及乙酸乙酯(40 mL)淬滅反應。分離各層，且用鹽水洗滌有機層。用乙酸乙酯(10 mL)反萃取合併之水層。合併之有機層用硫酸鈉乾燥，過濾並減壓濃縮。殘餘物藉由矽膠層析法，用80/20庚烷/乙酸乙酯溶離來純化，得到標題化合物。MS (DCI) m/e 439.2 (M+H) +。 2.125.2 2-((3S,5S)-3- 胺基 -5-( 甲氧基甲基 )-2- 側氧基吡咯啶 -1- 基 ) 乙酸第三丁酯向實例2.125.1 (726 mg)於2,2,2-三氟乙醇(10 mL)中之混合物中添加氫氧化鈀/碳(20 wt%，150 mg)。在氫氣氛圍(50 psi)下，在室溫下攪拌反應物兩小時。過濾反應物並濃縮，得到標題化合物。MS (DCI) m/e 259.0 (M+H) +。 2.125.3 4-(((3S,5S)-1-(2-( 第三丁氧基 )-2- 側氧基乙基 )-5-( 甲氧基甲基 )-2- 側氧基吡咯啶 -3- 基 ) 胺基 )-4- 側氧基丁 -2- 烯酸標題化合物係藉由在實例2.119.13中用實例2.125.2替代實例2.119.12製備。MS (DCI) m/e 374.0 (M+NH 3+H) +。 2.125.4 2-((3S,5S)-3-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 )-5-( 甲氧基甲基 )-2- 側氧基吡咯啶 -1- 基 ) 乙酸第三丁酯標題化合物係藉由在實例2.119.14中用實例2.125.3替代實例2.119.13製備。MS (DCI) m/e 356.0 (M+NH 3+H) +。 2.125.5 2-((3S,5S)-3-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 )-5-( 甲氧基甲基 )-2- 側氧基吡咯啶 -1- 基 ) 乙酸向實例2.125.4 (120 mg)於二氯甲烷(8 mL)中之混合物中添加三氟乙酸(4 mL)。在室溫下攪拌反應90分鐘且接著減壓濃縮。將殘餘物溶解於乙腈(4 mL)且利用Luna C18(2) AXIA管柱，250 × 50 mm，10μ粒度，藉由製備型逆相HPLC，經30分鐘使用5-75%乙腈/含0.1%三氟乙酸之水梯度純化，得到標題化合物。MS (DCI) m/e 300.0 (M+NH 3+H) +。 2.125.6 N-{[(3S,5S)-3-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 )-5-( 甲氧基甲基 )-2- 側氧基吡咯啶 -1- 基 ] 乙醯基 }-L- 纈胺醯基 -N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](2- 磺基乙基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ] 苯基 }-N5- 胺甲醯基 -L- 鳥胺醯胺標題化合物係藉由在實例2.119.17中用實例2.125.5替代實例2.119.15且用實例2.49.1替代實例2.119.16製備。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 9.98 (s, 1H), 8.19 (br d, 1H), 8.03 (d, 1H), 7.96 (d, 1H), 7.79 (d, 1H), 7.61 (m, 3H), 7.55 (d, 1H), 7.45 (m, 2H), 7.37 (m, 2H), 7.32 (s, 1H), 7.27 (d, 2H), 7.08 (s, 2H), 6.96 (d, 1H), 5.00 (m, 2H), 4.96 (s, 2H), 4.69 (t, 1H), 4.39 (br m, 1H), 4.28 (m, 1H), 4.20 (d, 1H), 3.88 (t, 3H), 3.81 (br m, 3H), 3.46 (m, 3H), 3.40 (m, 2H), 3.26 (br m, 2H), 3.25 (s, 3H), 3.01 (m, 3H), 2.96 (m,1H), 2.65 (t, 2H), 2.36 (br m, 1H), 2.10 (s, 3H), 2.00 (m, 1H), 1.94 (m, 1H), 1.69 (br m, 1H), 1.59 (br m, 1H), 1.49-0.92 (m, 16H), 0.88 (d, 3H), 0.83 (m, 9H)。MS (ESI) m/e 1521.5 (M-H) -。 2.126 合成 (6S)-2,6- 去水 -6-(2-{2-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](2- 磺基乙基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ]-5-({N-[6-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 己醯基 ]-L- 纈胺醯基 -L- 丙胺醯基 } 胺基 ) 苯基 } 乙基 )-L- 古洛糖酸 ( 合成子 SY)標題化合物係如實例2.123.21中所描述，用6-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己酸2,5-二側氧基吡咯啶-1-基酯替代2-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)乙酸2,5-二側氧基吡咯啶-1-基酯製備。 1H NMR (501 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 12.83 (s, 1H), 9.87 (s, 1H), 8.09 (d, 1H), 8.05-7.95 (m, 1H), 7.77 (d, 2H), 7.59 (d, 1H), 7.55-7.31 (m, 7H), 7.28 (s, 1H), 7.20 (d, 1H), 6.97 (s, 2H), 6.94 (d, 1H), 5.08-4.84 (m, 5H), 4.36 (p, 1H), 3.78 (d, 2H), 3.54 (t, 1H), 3.48-3.28 (m, 9H), 3.21 (s, 2H), 3.12 (t, 2H), 3.02-2.84 (m, 4H), 2.81-2.54 (m, 6H), 2.19-1.84 (m, 9H), 1.63-1.39 (m, 6H), 1.35 (s, 1H), 1.29-0.86 (m, 18H), 0.80 (td, 15H)。MS (ESI) m/e 1568.4 (M-H) -。 2.127 合成 2-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](2- 磺基乙基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ]-5-(4-{[3-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 丙醯基 ] 胺基 } 丁基 ) 苯基 β -D- 葡萄哌喃糖苷醛酸 ( 合成子 TK) 2.127.1    3-(1-((3-(2-((((4-(4- 胺基丁基 )-2-(((2S,3R,4S,5S,6S)-6-羧基-3,4,5-三羥基四氫-2H-哌喃-2-基)氧基)苯甲基)氧基)羰基)(2-磺基乙基)胺基)乙氧基)-5,7-二甲基金剛烷-1-基)甲基)-5-甲基-1H-吡唑-4-基)-6-(8-(苯并[d]噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)吡啶甲酸 向實例1.2.9 (0.030 g)、實例2.124.5 (0.031 g)及1H-苯并[d][1,2,3]三唑-1-醇水合物(5 mg)於N,N-二甲基甲醯胺(0.5 mL)中之混合物中添加N-乙基-N-異丙基丙-2-胺(0.017 mL)，且攪拌反應混合物3小時。濃縮反應混合物，將其溶解於四氫呋喃(0.4 mL)及甲醇(0.4 mL)中並用氫氧化鋰水合物(0.020 g)於水(0.5 mL)中之混合物處理。1小時後，用2,2,2-三氟乙酸(0.072 mL)淬滅反應，用N,N-二甲基甲醯胺:水(1:1) (1 mL)稀釋且使用Gilson PLC 2020系統，藉由製備型逆相HPLC，用5%至75%乙腈/水梯度溶離來純化。合併含產物溶離份並凍乾，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 1251.7 (M+H) +。 2.127.2    2-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7 ]癸-1-基}氧基)乙基](2-磺基乙基)胺甲醯基}氧基)甲基]-5-(4-{[3-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)丙醯基]胺基}丁基)苯基β-D-葡萄哌喃糖苷醛酸 向實例2.127.1 (0.027 g)及3-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)丙酸2,5-二側氧基吡咯啶-1-基酯(6.32 mg)於N,N-二甲基甲醯胺(0.4 mL)中之混合物中添加N-乙基-N-異丙基丙-2-胺(0.017 mL)，並在室溫下攪拌反應1小時。用2,2,2-三氟乙酸(0.038 mL)、水(1.5 mL)及N,N-二甲基甲醯胺(0.5 mL)之混合物淬滅反應且在Gilson 2020系統上藉由製備型逆相HPLC，使用5%至75%乙腈/水梯度來純化。凍乾含產物溶離份，得到標題化合物。 1H NMR (501 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ 12.84 (s, 1H), 8.03 (dd, 1H), 7.91-7.85 (m, 1H), 7.78 (d, 1H), 7.61 (dd, 1H), 7.52 (dd, 1H), 7.50-7.40 (m, 2H), 7.39-7.31 (m, 2H), 7.31 (s, 1H), 7.17 (dd, 1H), 6.99-6.90 (m, 4H), 6.83 (d, 1H), 5.15-5.04 (m, 2H), 5.05-4.96 (m, 1H), 4.95 (s, 2H), 3.91-3.83 (m, 4H), 3.81 (d, 3H), 3.58 (t, 2H), 3.42 (td, 3H), 3.33-3.24 (m, 5H), 3.00 (q, 4H), 2.68 (dt, 2H), 2.29 (t, 2H), 2.09 (d, 3H), 1.49 (d, 3H), 1.34 (td, 5H), 1.21 (dd, 5H), 1.15-1.07 (m, 2H), 1.07 (s, 4H), 0.95 (q, 1H), 0.82 (d, 6H)。MS (ESI) m/e 1402.1 (M+H) +。 2.128 合成 2-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](2- 磺基乙基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ]-5-[4-({(2S)-2-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 )-3-[4-(2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32- 十一氧雜三十四烷 -34- 基氧基 ) 苯基 ] 丙醯基 } 胺基 ) 丁基 ] 苯基 β-D- 葡萄哌喃糖苷醛酸 ( 合成子 TR)在N,N-二甲基甲醯胺(0.4 mL)中將實例2.120.5 (0.035 g)、六氟磷酸O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基
Figure 111128039-A0304-2
(0.015 g)及N-乙基-N-異丙基丙-2-胺(0.015 mL)之混合物攪拌5分鐘。將混合物添加至實例2.127.1 (0.030 g)及N-乙基-N-異丙基丙-2-胺(0.015 mL)於N,N-二甲基甲醯胺(0.4 mL)中之混合物中並在室溫下攪拌3小時。用水(1.5 mL)、N,N-二甲基甲醯胺(0.5 mL)及2,2,2-三氟乙酸(0.034 mL)之混合物稀釋反應物且在Gilson 2020系統上藉由製備型逆相HPLC，使用5%至85%乙腈/水梯度純化。凍乾含產物溶離份，得到標題化合物。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ 12.83 (s, 1H), 8.04-7.93 (m, 2H), 7.76 (d, 1H), 7.58 (dd, 1H), 7.53-7.36 (m, 3H), 7.37-7.25 (m, 3H), 7.15 (d, 1H), 6.97-6.88 (m, 4H), 6.87 (d, 2H), 6.85-6.77 (m, 1H), 6.76-6.69 (m, 2H), 5.13-4.96 (m, 3H), 4.92 (s, 2H), 3.95 (dd, 2H), 3.84 (d, 2H), 3.78 (s, 8H), 3.69-3.60 (m, 2H), 3.47 (d, 38H), 3.48-3.35 (m, 6H), 3.20 (s, 8H), 3.10 (dd, 2H), 2.98 (t, 2H), 2.69-2.60 (m, 2H), 2.50 (d, 1H), 2.06 (s, 3H), 1.49 (t, 2H), 1.35 (s, 4H), 1.21 (d, 4H), 1.05 (s, 6H), 0.79 (d, 6H)。MS (ESI) m/e 1991.6 (M-H) -。 2.129 合成 (6S)-2,6- 去水 -6-(2-{2-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](2- 磺基乙基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ]-5-[(N-{(2S)-2-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 )-3-[4-(2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32- 十一氧雜三十四烷 -34- 基氧基 ) 苯基 ] 丙醯基 }-L- 纈胺醯基 -L- 丙胺醯基 ) 胺基 ] 苯基 } 乙基 )-L- 古洛糖酸 ( 合成子 TY)在N,N-二甲基甲醯胺(0.4 mL)中攪拌實例2.120.5 (0.033 g)、六氟磷酸O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基
Figure 111128039-A0304-2
(0.014 g)及N-乙基-N-異丙基丙-2-胺(0.015 mL)之混合物5分鐘。將該混合物添加至實例2.123.20 (0.032 g)及N-乙基-N-異丙基丙-2-胺(0.015 mL)於N,N-二甲基甲醯胺(0.4 mL)中之混合物中並在室溫下攪拌3小時。用水(1.5 mL)、N,N-二甲基甲醯胺(0.5 mL)及2,2,2-三氟乙酸(0.033 mL)之混合物稀釋反應物且在Gilson 2020系統上藉由製備型逆相HPLC，使用5%至85%乙腈/水梯度純化。凍乾含產物溶離份，得到標題化合物。 1H NMR (501 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ 9.90 (d, 1H), 8.25 (d, 1H), 8.12 (m, 1), 8.01 (m, 1H), 1.78 (m, 1H), 7.59 (d, 1H), 7.53-7.40 (m, 4H), 7.43-7.30 (m, 4H), 7.27 (s, 1H), 7.18 (d, 2H), 7.06 (s, 1H), 7.00 (d, 2H), 6.97-6.91 (m, 2H), 6.87 (s, 2H), 6.76 (d, 2H), 5.02-4.92 (m, 4H), 4.77 (dd, 1H), 4.20 (t, 1H), 3.98 (dd, 2H), 3.86 (t, 2H), 3.78 (d, 2H), 3.70-3.65 (m, 2H), 3.54 (s, 2H), 3.55-3.45 (m, 38H), 3.45-3.37 (m, 2H), 3.35-3.25 (m, 2H), 3.21 (s, 4H), 3.17-3.06 (m, 2H), 2.99 (t, 2H), 2.73 (s, 2H), 2.61 (s, 4H), 2.07 (d, 4H), 2.01 (s, 2H), 1.94 (s, 2H), 1.54 (s, 2H), 1.27 (d,4H), 1.22 (s,2H), 1.11 (s, 6H), 1.08-0.99 (m, 2H), 0.90-0.79 (m, 6H), 0.76 (d, 6H)。MS (ESI) m/e 705.6 (M-3H) 3-。 2.130 合成 6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-3-(1-((3-(2-((((2-(2-((2S,3R,4R,5S,6S)-6- 羧基 -3,4,5- 三羥基四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 ) 乙基 )-4-((S)-2-((S)-2-(2-((3S,5S)-3-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 )-2- 側氧基 -5-((2- 磺基乙氧基 ) 甲基 ) 吡咯啶 -1- 基 ) 乙醯胺基 )-3- 甲基丁醯胺基 ) 丙醯胺基 ) 苯甲基 ) 氧基 ) 羰基 )(2- 磺基乙基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶甲酸 ( 合成子 TX)標題化合物係藉由在實例2.119.17中用實例2.123.20替代實例2.119.16製備。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 9.85 (s, 1H), 8.17 (br d, 1H), 8.01 (d, 2H), 7.77 (d, 1H), 7.59 (d, 1H), 7.53 (d, 1H), 7.43 (m, 4H), 7.34 (m, 3H), 7.19 (d, 1H), 7.06 (s, 2H), 6.96 (d, 1H), 4.99 (m, 2H), 4.95 (s, 2H), 4.63 (t, 1H), 4.36 (t, 1H), 4.19 (br m, 1H), 4.16 (d, 1H), 3.98 (d, 1H), 3.87 (br t, 2H), 3.81 (br d, 2H), 3.73 (brm, 1H), 3.63 (t, 2H), 3.53 (m, 2H), 3.44 (m, 4H), 3.31 (t, 2H), 3.21 (br m, 2H), 3.17 (m, 2H), 3.00 (m, 2H), 2.92 (br m, 1H), 2.75 (m, 3H), 2.65 (br m, 3H), 2.35 (br m, 1H), 2.07 (s, 3H), 1.98 (br m, 2H), 1.85 (m, 1H), 1.55 (br m, 1H), 1.34 (br m, 1H), 1.26 (br m, 6H), 1.09 (br m, 7H), 0.93 (br m, 1H), 0.87, 0.83, 0.79 (皆為d, 總計12H)。MS (ESI) m/e 1733.4 (M-H) -。 2.131 合成 6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-3-(1-((3-(2-((((2-(((2S,3R,4S,5S,6S)-6- 羧基 -3,4,5- 三羥基四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 ) 氧基 )-4-(4-(2-((3S,5S)-3-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 )-2- 側氧基 -5-((2- 磺基乙氧基 ) 甲基 ) 吡咯啶 -1- 基 ) 乙醯胺基 ) 丁基 ) 苯甲基 ) 氧基 ) 羰基 )(2- 磺基乙基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶甲酸 ( 合成子 TZ)標題化合物係藉由在實例2.119.17中用實例2.127.1替代實例2.119.16製備。 1H NMR (500 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 8.02 (d, 1H), 7.82 (br t, 1H), 7.77 (d, 1H), 7.60 (d, 1H), 7.53 (br d, 1H), 7.45 (ddd, 1H), 7.42 (d, 1H), 7.36 (d, 1H), 7.35 (s, 1H), 7.33 (m, 1H), 7.15 (d, 1H), 7.05 (s, 2H), 6.97 (d, 1H), 6.94 (s, 1H), 6.83 (d, 1H), 5.07 (br m, 2H), 5.00 (d, 1H), 4.95 (s, 2H), 4.69 (t, 1H), 4.04 (d, 2H), 3.87 (m, 3H), 3.82 (m, 3H), 3.73 (br m, 1H), 3.61 (m, 2H), 3.47 (br m, 3H), 3.40 (m, 4H), 3.29 (m, 4H), 3.06 (br m, 2H), 3.00 (t, 2H), 2.73 (br m, 2H) 2.69 (br m, 2H), 2.52 (br t, 2H), 2.35 (br m, 1H), 2.08 (s, 3H), 1.81 (m, 1H), 1.53 (br m, 2H), 1.40 (m, 2H), 1.35 (br m, 2H), 1.29-0.88 (br m, 10H), 0.82, 0.80 (均為s, 總計6H)。MS (ESI-) m/e 1607.5 (M-H) -。 2.132 合成 2-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](2- 磺基乙基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ]-5-(4-{[(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 乙醯基 ] 胺基 } 丁基 ) 苯基 β -D- 葡萄哌喃糖苷醛酸 ( 合成子UA) 向實例2.127.1 (0.032 g)於N,N-二甲基甲醯胺(0.4 mL)中之混合物中添加N-乙基-N-異丙基丙-2-胺(0.025 mL)，且將混合物冷卻至0℃。整份添加2-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)乙酸2,5-二側氧基吡咯啶-1-基酯(8.86 mg)並在0℃下攪拌45分鐘。用水(1.5 mL)、N,N-二甲基甲醯胺(0.5 mL)及2,2,2-三氟乙酸(0.036 mL)之混合物稀釋反應物且在Gilson 2020系統上藉由製備型逆相HPLC，使用5%至75%乙腈/水梯度純化。凍乾含產物溶離份，得到標題化合物。 1H NMR (501 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ 12.86 (s, 1H), 8.06 (s, 1H), 8.02 (dd, 1H), 7.77 (d, 1H), 7.60 (dd, 1H), 7.51 (dd, 1H), 7.49-7.39 (m, 2H), 7.38-7.28 (m, 3H), 7.17 (dd, 1H), 7.06 (d, 2H), 6.98-6.89 (m, 2H), 6.83 (d, 1H), 5.13-5.03 (m, 2H), 5.04-4.96 (m, 1H), 4.94 (s, 2H), 3.97 (s, 2H), 3.90-3.77 (m, 6H), 3.50 (s, 1H), 3.50-3.41 (m, 2H), 3.41 (dt, 3H), 3.28 (dt, 4H), 3.06-2.96 (m, 4H), 2.66 (dt, 2H), 2.51 (s, 2H), 2.08 (d, 3H), 1.52 (s, 2H), 1.42-1.32 (m, 4H), 1.23 (d, 4H), 1.11 (q, 2H), 1.06 (s, 4H), 0.81 (d, 6H)。MS (ESI) m/e 1388.0 (M+H) +。 2.133 合成 2-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 ) 萘 -2- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](2- 磺基乙基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ]-5-(4-{[(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 乙醯基 ] 胺基 } 丁基 ) 苯基 β -D- 葡萄哌喃糖苷醛酸 ( 合成子 UZ) 2.133.1    3-(1-((3-(2-((((4-(4- 胺基丁基 )-2-(((2S,3R,4S,5S,6S)-6- 羧基 -3,4,5- 三羥基四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 ) 氧基 ) 苯甲基 ) 氧基 ) 羰基 )(2- 磺基乙基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 ) 萘 -2- 基 ) 吡啶甲酸向實例2.124.5 (0.060 g)、實例1.43.7 (0.056 g)及1H-苯并[d][1,2,3]三唑-1-醇(8 mg)於二甲亞碸(0.5 mL)中之混合物中添加N-乙基-N-異丙基丙-2-胺(0.056 mL)，並在室溫下攪拌反應3小時。用氫氧化鋰水合物(0.026 g)於水(1 mL)中之混合物處理反應物並攪拌30分鐘。將甲醇(0.5 mL)添加至反應物中並繼續攪拌30分鐘。將二乙胺(0.033 mL)添加至反應物中並繼續攪拌隔夜。用2,2,2-三氟乙酸(0.120 mL)淬滅反應且在Gilson 2020系統上藉由製備型逆相HPLC，使用5%至75%乙腈/水梯度純化。凍乾含產物溶離份，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 1247.7 (M+H) +。 2.133.2 2-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2-基胺甲醯基)萘-2-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[3.3.1.1 3,7 ]癸-1-基}氧基)乙基](2-磺基乙基)胺甲醯基}氧基)甲基]-5-(4-{[(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)乙醯基]胺基}丁基)苯基β-D-葡萄哌喃糖苷醛酸 向實例2.133.1 (0.030 g)於N,N-二甲基甲醯胺(0.400 mL)中之混合物中添加N-乙基-N-異丙基丙-2-胺(0.023 mL)並將混合物冷卻至0℃。整份添加2-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)乙酸2,5-二側氧基吡咯啶-1-基酯(8.34 mg)且在0℃下攪拌混合物30分鐘。用水(1.5 mL)、N,N-二甲基甲醯胺(0.5 mL)及2,2,2-三氟乙酸(0.034 mL)之混合物稀釋反應物且在Gilson 2020系統上藉由製備型逆相HPLC，使用5%至75%乙腈/水梯度純化。凍乾含產物溶離份，得到標題化合物。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ 13.08 (s, 1H), 9.01 (s, 1H), 8.39-8.31 (m, 1H), 8.25-8.11 (m, 3H), 8.06 (d, 2H), 7.99 (d, 1H), 7.94 (d, 1H), 7.79 (d, 1H), 7.68 (t, 1H), 7.51-7.42 (m, 1H), 7.46 (s, 1H), 7.35 (t, 1H), 7.22-7.13 (m, 1H), 7.06 (d, 2H), 6.93 (d, 1H), 6.83 (d, 1H), 5.15-5.00 (m, 2H), 4.99 (d, 1H), 3.97 (s, 2H), 3.86 (d, 3H), 3.42 (d, 4H), 3.29 (d, 5H), 3.03 (p, 2H), 2.72-2.62 (m, 2H), 2.51 (d, 3H), 2.21 (s, 3H), 1.51 (q, 2H), 1.37 (q, 4H), 1.24 (d, 4H), 1.10 (s, 5H), 0.83 (d, 6H), 0.61 (s, 2H)。MS (ESI) m/e 1383.0 (M+H) +。 2.134 合成 2-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 ) 萘 -2- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](2- 磺基乙基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ]-5-[4-({(2S)-2-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 )-3-[4-(2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32- 十一氧雜三十四烷 -34- 基氧基 ) 苯基 ] 丙醯基 } 胺基 ) 丁基 ] 苯基 β-D- 葡萄哌喃糖苷醛酸 ( 合成子 UK)在N,N-二甲基甲醯胺(0.4 mL)中攪拌實例2.120.5 (0.028 g)、六氟磷酸O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基
Figure 111128039-A0304-2
(0.013 g)及N-乙基-N-異丙基丙-2-胺(0.015 mL)之混合物5分鐘。將混合物添加至實例2.133.1 (0.030 g)及N-乙基-N-異丙基丙-2-胺(0.015 mL)於N,N-二甲基甲醯胺(0.4 mL)中之混合物中並在室溫下攪拌1小時。用水(1.5 mL)、N,N-二甲基甲醯胺(0.5 mL)及2,2,2-三氟乙酸(0.042 mL)之混合物稀釋反應物且在Gilson 2020系統上藉由製備型逆相HPLC，使用5%至75%乙腈/水梯度純化。凍乾含產物溶離份，得到標題化合物。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ 9.01 (s, 1H), 8.35 (dd, 1H), 8.27-8.13 (m, 3H), 8.06 (d, 1H), 8.00 (d, 1H), 7.94 (d, 1H), 7.79 (d, 1H), 7.73-7.64 (m, 1H), 7.53-7.43 (m, 2H), 7.42-7.32 (m, 1H), 7.17 (d, 1H), 7.06 (s, 1H), 7.04-6.91 (m, 3H), 6.89 (d, 2H), 6.83 (d, 1H), 6.74 (d, 1H), 5.16-4.93 (m, 4H), 4.63 (dd, 2H), 3.96 (t, 2H), 3.86 (d, 4H), 3.66 (s, 4H), 3.55-3.46 (m, 36H), 3.45-3.35 (m, 8H), 3.35-3.24 (m, 6H), 3.21 (s, 2H), 3.11 (s, 2H), 2.99 (d, 2H), 2.83-2.59 (m, 3H), 2.52 (d, 2H), 2.21 (s, 3H), 1.57-0.86 (m, 14H), 0.83 (d, 4H)。MS (ESI) m/e 1986.6 (M-H) -。 2.135 合成 N-[(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 乙醯基 ]-L- 纈胺醯基 -N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](2- 磺基乙基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ]-3-(4- 羧基丁基 ) 苯基 }-L- 丙胺醯胺 ( 合成子UU) 2.135.1    4-(( 第三丁氧基羰基 ) 胺基 )-2- 碘苯甲酸甲酯將3-碘-4-(甲氧基羰基)苯甲酸(9 g)溶解於第三丁醇(100 mL)中，並添加疊氮磷酸二苯酯(7.6 mL)及三乙胺(4.9 mL)。將混合物加熱至83℃ (內溫)隔夜。將混合物濃縮至乾且藉由急驟層析法，用0%至20%乙酸乙酯/庚烷梯度溶離來純化，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 377.9 (M+H) +。 2.135.2    4- 胺基 -2- 碘苯甲酸甲酯在室溫下，在二氯甲烷(30 mL)及三氟乙酸(10 mL)中攪拌實例2.135.1 (3 g)達1.5小時。將反應物濃縮至乾並使其在水(用鹽酸調至pH 1)與乙醚之間分配。分離各層，且水層用碳酸氫鈉水溶液混合物洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮至乾。所得固體用甲苯濕磨，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 278.0 (M+H) +。 2.135.3    4-((S)-2-((S)-2-((((9H- 茀 -9- 基 ) 甲氧基 ) 羰基 ) 胺基 )-3- 甲基丁醯胺基 ) 丙醯胺基 )-2- 碘苯甲酸甲酯向燒瓶中裝入實例2.135.2 (337 mg)及實例2.123.14 (500 mg)。添加乙酸乙酯(18 mL)，隨後添加吡啶(0.296 mL)。在冰浴中冷卻所得懸浮液，並逐滴添加2,4,6-三丙基-l,3,5,2,4,6-三氧雜三磷雜環己烷2,4,6-三氧化物(50%於乙酸乙酯中之混合物，1.4 mL)。在0℃下繼續攪拌45分鐘，並將反應物放入-20℃冷凍器中隔夜。使反應物升溫至室溫並用水淬滅。分離各層，且水層再用乙酸乙酯萃取兩次。合併之萃取液用無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。將殘餘物溶解於二氯甲烷中並用乙醚稀釋以使標題化合物沈澱，藉由過濾收集。MS (ESI) m/e 669.7 (M+H) +。 2.135.4    ((S)-1-(((S)-1-((4-( 羥基甲基 )-3- 碘苯基 ) 胺基 )-1- 側氧基丙 -2- 基 ) 胺基 )-3- 甲基 -1- 側氧基丁 -2- 基 ) 胺基甲酸 (9H- 茀 -9- 基 ) 甲酯將實例2.54.3 (1 g)溶解於四氫呋喃(15 mL)中，且在冰-丙酮浴中將混合物冷卻至-15℃。接著逐滴添加氫化鋰鋁(1N四氫呋喃溶液，3 mL)，保持溫度低於-10℃。攪拌反應1小時且小心地用10%檸檬酸(25 mL)淬滅。分離各層，且用乙酸乙酯萃取水層三次。合併之有機層用水及鹽水洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。將殘餘物吸附至矽膠上且藉由急驟層析法，用5%至6%甲醇/二氯甲烷梯度溶離來純化，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 664.1 (M+H) +。 2.135.5    5-(5-((S)-2-((S)-2-((((9H- 茀 -9- 基 ) 甲氧基 ) 羰基 ) 胺基 )-3- 甲基丁醯胺基 ) 丙醯胺基 )-2-( 羥基甲基 ) 苯基 ) 戊 -4- 炔酸甲酯向戊-4-炔酸甲酯(50 mg)、實例2.135.4 (180 mg)及N,N-二異丙基乙胺(0.15 mL)於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)中之經攪拌混合物中添加二氯化雙(三苯基膦)鈀(II) (20 mg)及碘化銅(5 mg)。用氮氣淨化混合物三次並在室溫下攪拌隔夜。反應物用乙酸乙酯稀釋並用水及鹽水洗滌。用乙酸乙酯反萃取水層。合併之有機層經硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。殘餘物在Gilson系統上藉由逆相HPLC，用20-90%乙腈/含0.1% v/v三氟乙酸之水溶離來純化。合併所需溶離份並冷凍乾燥，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 608.0 (M-H 2O) +。 2.135.6    5-(5-((S)-2-((S)-2-((((9H- 茀 -9- 基 ) 甲氧基 ) 羰基 ) 胺基 )-3- 甲基丁醯胺基 ) 丙醯胺基 )-2-( 羥基甲基 ) 苯基 ) 戊酸甲酯在50 psi H 2氛圍下，在20℃下攪拌實例2.135.5 (0.084 g)及10% Pd/C (0.02 g)於四氫呋喃(5 mL)中之混合物1小時。經矽藻土過濾反應混合物，並減壓蒸發溶劑，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 612.0 (M-H 2O) +。 2.135.7    5-(5-((S)-2-((S)-2-((((9H- 茀 -9- 基 ) 甲氧基 ) 羰基 ) 胺基 )-3- 甲基丁醯胺基 ) 丙醯胺基 )-2-((((4- 硝基苯氧基 ) 羰基 ) 氧基 ) 甲基 ) 苯基 ) 戊酸甲酯實例2.135.7係藉由在實例2.55.7中用實例2.135.7替代實例2.55.6製備。MS (ESI) m/e 795.4 (M+H) +。 2.135.8    3-(1-((3-(2-((((4-((S)-2-((S)-2- 胺基 -3- 甲基丁醯胺基 ) 丙醯胺基 )-2-(4- 羧基丁基 ) 苯甲基 ) 氧基 ) 羰基 )(2- 磺基乙基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ) 吡啶甲酸實例2.135.8係藉由在實例2.49.1中用2.135.7替代((S)-3-甲基-1-(((S)-1-((4-((((4-硝基苯氧基)羰基)氧基)甲基)苯基)胺基)-1-側氧基-5-脲基戊-2-基)胺基)-1-側氧基丁-2-基)胺基甲酸(9H-茀-9-基)甲酯製備。MS (ESI) m/e 1271.4 (M-H) -。 2.135.9    N-[(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 乙醯基 ]-L- 纈胺醯基 -N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](2- 磺基乙基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ]-3-(4- 羧基丁基 ) 苯基 }-L- 丙胺醯胺實例2.135.9係藉由在實例2.54中用2.135.8替代實例2.49.1製備。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm9.88 (d, 1H), 8.3-8.2 (m, 2H), 8.01 (dd, 1H), 7.77 (d, 1H), 7.59 (dd, 1H), 7.52 (dd, 1H), 7.47-7.29 (m, 8H), 7.23-7.18 (m, 1H), 7.05 (s, 2H), 6.95 (d, 1H), 5.00 (d, 2H), 4.94 (s, 2H), 4.37 (p, 1H), 3.51-3.28 (m, 5H), 3.26-3.14 (m, 2H), 2.99 (t, 2H), 2.65 (t, 2H), 2.57 (s, 2H), 2.26-2.17 (m, 3H), 2.07 (d, 3H), 1.94 (dd, 1H), 1.61-0.69 (m, 35H)。MS (ESI) m/e 1408.5 (M-H) +。 2.136 合成 2-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](2- 磺基乙基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ]-5-(3-{[(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 乙醯基 ] 胺基 } 丙基 ) 苯基 β -D- 葡萄哌喃糖苷醛酸 ( 合成子UV) 2.136.1 三乙酸 (3R,4S,5S,6S)-2-(5-(3-((((9H- 茀 -9- 基 ) 甲氧基 ) 羰基 ) 胺基 ) 丙 -1- 炔 -1- 基 )-2- 甲醯基苯氧基 )-6-( 甲氧基羰基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -3,4,5- 三基酯實例2.136.1係藉由在實例2.124.2中用丙-2-炔-1-基胺基甲酸(9H-茀-9-基)甲酯替代2.124.1A製備。MS (ESI) m/e 714.1 (M+H) +。 2.136.2 三乙酸 (2S,3R,4S,5S,6S)-2-(5-(3-((((9H- 茀 -9- 基 ) 甲氧基 ) 羰基 ) 胺基 ) 丙基 )-2- 甲醯基苯氧基 )-6-( 甲氧基羰基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -3,4,5- 三基酯實例2.136.2係藉由在實例2.124.3中用2.136.1替代2.124.2製備。MS (ESI) m/e 718.5 (M+H) +。 2.136.3 三乙酸 (2S,3R,4S,5S,6S)-2-(5-(3-((((9H- 茀 -9- 基 ) 甲氧基 ) 羰基 ) 胺基 ) 丙基 )-2-( 羥基甲基 ) 苯氧基 )-6-( 甲氧基羰基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -3,4,5- 三基酯實例2.136.3係藉由在實例2.124.4中用2.136.2替代2.124.3製備。MS (ESI) m/e 742.2 (M+Na) +。 2.136.4 三乙酸 (2S,3R,4S,5S,6S)-2-(5-(3-((((9H- 茀 -9- 基 ) 甲氧基 ) 羰基 ) 胺基 ) 丙基 )-2-((((4- 硝基苯氧基 ) 羰基 ) 氧基 ) 甲基 ) 苯氧基 )-6-( 甲氧基羰基 ) 四氫 -2H- 哌喃 -3,4,5- 三基酯實例2.136.4係藉由在實例2.124.5中用2.136.3替代2.124.4製備。MS (ESI) m/e 885.2 (M+Na) +。 2.136.5    3-(1-((3-(2-((((4-(3- 胺基丙基 )-2-(((3R,4S,5S,6S)-6- 羧基 -3,4,5- 三羥基四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 ) 氧基 ) 苯甲基 ) 氧基 ) 羰基 )(2- 磺基乙基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ) 吡啶甲酸實例2.136.5係藉由在實例2.49.1中用實例2.136.4替代 ((S)-3-甲基-1-(((S)-1-((4-((((4-硝基苯氧基)羰基)氧基)甲基)苯基)胺基)-1-側氧基-5-脲基戊-2-基)胺基)-1-側氧基丁-2-基)胺基甲酸(9H-茀-9-基)甲酯製備。MS (ESI) m/e 1237.7 (M+H) +。 2.136.6    2-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](2- 磺基乙基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ]-5-(3-{[(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 乙醯基 ] 胺基 } 丙基 ) 苯基 β -D- 葡萄哌喃糖苷醛酸實例2.136.6係藉由在實例2.54中用實例2.136.5替代實例2.49.1製備。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 8.14 (d, 1H), 8.01 (d, 1H), 7.59 (d, 1H), 7.53-7.39 (m, 4H), 7.38-7.28 (m, 3H), 7.22-7.15 (m, 2H), 7.13-6.91 (m, 5H), 6.84 (d, 1H), 5.17-4.91 (m, 5H), 3.35-3.2 (m, 4H), 3.10-2.90 (m, 4H), 2.75-2.65 (m, 2H), 2.08 (s, 3H), 1.65 (s, 2H), 1.39-0.71 (m, 21H)。MS (ESI) m/e 1372.3 (M-H) -。 2.137 合成 6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-3-{1-[(3-{2-[({[2-{[(2S,3R,4S,5S,6S)-6- 羧基 -3,4,5- 三羥基四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 ] 氧基 }-4-(4-{[(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 乙醯基 ] 胺基 } 丁基 ) 苯甲基 ] 氧基 } 羰基 )(3-{[1,3- 二羥基 -2-( 羥基甲基 ) 丙 -2- 基 ] 胺基 }-3- 側氧基丙基 ) 胺基 ] 乙氧基 }-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 } 吡啶 -2- 甲酸 ( 合成子 UZ) 2.137.1    3-(1-((3-(2-((((4-(4- 胺基丁基 )-2-(((2R,3S,4R,5R,6R)-6- 羧基 -3,4,5- 三羥基四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 ) 氧基 ) 苯甲基 ) 氧基 ) 羰基 )(3-((1,3- 二羥基 -2-( 羥基甲基 ) 丙 -2- 基 ) 胺基 )-3- 側氧基丙基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ) 吡啶甲酸標題化合物係如實例2.124.6中所描述，用實例1.84替代實例1.87.3製備。MS (ESI) m/e 1319.4 (M-H) -。 2.137.2    6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-3-{1-[(3-{2-[({[2-{[(2S,3R,4S,5S,6S)-6- 羧基 -3,4,5- 三羥基四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 ] 氧基 }-4-(4-{[(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 乙醯基 ] 胺基 } 丁基 ) 苯甲基 ] 氧基 } 羰基 )(3-{[1,3- 二羥基 -2-( 羥基甲基 ) 丙 -2- 基 ] 胺基 }-3- 側氧基丙基 ) 胺基 ] 乙氧基 }-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 } 吡啶 -2- 甲酸標題化合物係如實例2.54中所描述，用實例2.137.1替代實例2.49.1製備。 1H NMR (501 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 12.83 (s, 2H), 8.12 (s, 0H), 8.06 (s, 1H), 8.03-7.99 (m, 1H), 7.77 (d, 1H), 7.72 (s, 0H), 7.60 (d, 1H), 7.52-7.39 (m, 3H), 7.34 (td, 2H), 7.26 (s, 1H), 7.21-7.11 (m, 2H), 7.05 (s, 2H), 6.93 (d, 2H), 6.83 (d, 1H), 5.09 (d, 2H), 5.00 (d, 1H), 4.94 (s, 2H), 4.12 (t, 1H), 3.97 (s, 2H), 3.87 (q, 4H), 3.79 (d, 2H), 3.29 (q, 2H), 3.12-2.93 (m, 5H), 2.47-2.23 (m, 1H), 2.07 (d, 3H), 1.50 (d, 3H), 1.36 (d, 5H), 1.31-0.85 (m, 9H), 0.81 (d, 7H)。MS (ESI) m/e 1568.4 (M-H) -。 2.138 合成 6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 ) 萘 -2- 基 )-3-(1-((3-(2-((((2-(((2S,3R,4S,5S,6S)-6- 羧基 -3,4,5- 三羥基四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 ) 氧基 )-4-(4-(2-((3S,5S)-3-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 )-2- 側氧基 -5-((2- 磺基乙氧基 ) 甲基 ) 吡咯啶 -1- 基 ) 乙醯胺基 ) 丁基 ) 苯甲基 ) 氧基 ) 羰基 )(2- 磺基乙基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶甲酸 ( 合成子 VB)標題化合物係藉由在實例2.119.17中用實例2.133.1替代實例2.119.16製備。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 8.99 (s, 1H), 8.34 (dd, 1H), 8.19 (d, 1H), 8.17 (d, 1H), 8.13 (d, 1H), 8.04 (d, 1H), 7.97 (d, 1H), 7.93 (d, 1H), 7.80 (br t, 1H), 7.77 (d, 1H), 7.67 (dd, 1H), 7.45 (s, 1H), 7.45 (dd, 1H), 7.34 (dd, 1H), 7.14 (d, 1H), 7.03 (s, 2H), 6.93 (s, 1H), 6.82 (br d, 1H), 5.06 (br m, 2H), 4.98 (d, 1H), 4.67 (t, 1H), 4.02 (d, 2H), 3.85 (m, 3H), 3.71 (br m, 1H), 3.59 (t, 2H), 3.45 (br m, 3H), 3.41 (m, 4H), 3.27 (m, 4H), 3.03 (m, 2H), 2.70 (m, 2H) 2.65 (br m, 2H), 2.50 (br t, 2H), 2.31 (br m, 1H), 2.19 (s, 3H), 1.80 (m, 1H), 1.52 (br m, 2H), 1.38 (m, 2H), 1.35 (br m, 2H), 1.29-0.88 (br m, 10H), 0.82 (s, 3H), 0.80 (s, 3H)。MS (ESI) m/e 1602.4 (M-H) -。 2.139 合成 2-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ][3- 羥基 -2-( 羥基甲基 ) 丙基 ] 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ]-5-(3-{[(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 乙醯基 ] 胺基 } 丙基 ) 苯基 β -D- 葡萄哌喃糖苷醛酸 ( 合成子 VC) 2.139.1 3-(1-((3-(2-((((4-(3- 胺基丙基 )-2-(((2S,3R,4S,5S,6S)-6- 羧基 -3,4,5- 三羥基四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 ) 氧基 ) 苯甲基 ) 氧基 ) 羰基 )(3- 羥基 -2-( 羥基甲基 ) 丙基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ) 吡啶甲酸實例2.139.1係藉由在實例2.49.1中用實例2.136.4替代 ((S)-3-甲基-1-(((S)-1-((4-((((4-硝基苯氧基)羰基)氧基)甲基)苯基)胺基)-1-側氧基-5-脲基戊-2-基)胺基)-1-側氧基丁-2-基)胺基甲酸(9H-茀-9-基)甲酯並用實例1.79.3替代實例1.2.9製備。MS (ESI) m/e 1217.7 (M+H) + 。 2.139.2 2-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ][3- 羥基 -2-( 羥基甲基 ) 丙基 ] 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ]-5-(3-{[(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 乙醯基 ] 胺基 } 丙基 ) 苯基 β -D- 葡萄哌喃糖苷醛酸實例2.139.1係藉由在實例2.54中用實例2.139.1替代實例2.49.1製備。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 12.84 (s, 2H), 8.11 (t, 1H), 8.00 (dd, 1H), 7.76 (d, 1H), 7.62-7.56 (m, 1H), 7.50-7.37 (m, 3H), 7.37-7.29 (m, 2H), 7.25 (s, 1H), 7.16 (d, 1H), 7.04 (s, 2H), 6.96-6.88 (m, 2H), 6.82 (d, 1H), 5.06 (s, 2H), 4.98 (d, 1H), 4.92 (s, 2H), 3.97 (s, 2H), 3.44-3.18 (m, 11H), 3.07-2.90 (m, 4H), 2.05 (s, 3H), 1.80 (s, 1H), 1.64 (p, 2H), 1.38-0.67 (m, 19H)。(m, 21H)。MS (ESI) m/e 1352.5 (M-H) -。 2.140 合成 N-({(3S,5S)-3-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 )-2- 側氧基 -5-[(2- 磺基乙氧基 ) 甲基 ] 吡咯啶 -1- 基 } 乙醯基 )-L- 纈胺醯基 -N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](2- 磺基乙基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ]-3-(2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32,35,38,41,44,47,50- 十七氧雜五十三碳 -52- 炔 -53- 基 ) 苯基 }-L- 丙胺醯胺 ( 合成子 VS) 2.140.1 2- 碘 -4- 硝基苯甲酸在0℃下，將2-胺基-4-硝基苯甲酸(50 g)添加至濃H 2SO 4(75 mL)及水(750 mL)之混合物中，且攪拌混合物1小時。在0℃下，向混合物中逐滴添加亞硝酸鈉(24.62 g)於水(300 mL)中之混合物。在0℃下攪拌所得混合物3小時。將碘化鈉(65.8 g)於水(300 mL)中之混合物緩慢添加至以上混合物中。添加完成後，在0℃下攪拌所得混合物2小時，接著在室溫下攪拌16小時且在60℃下攪拌2小時。將所得混合物冷卻至室溫並用冰水(300 mL)稀釋。藉由過濾收集固體，用水(100 mL × 5)洗滌，且在空氣中乾燥16小時，得到標題化合物。MS (LC-MS) m/e 291.9 (M-H) -。 2.140.2 2- 碘 -4- 硝基苯甲酸甲酯在85℃下，將實例2.140.1 (130 g)於甲醇(1000 mL)及硫酸(23.65 mL)之混合物中之混合物攪拌16小時並濃縮至乾。用甲醇(100 mL)濕磨殘餘物且攪拌懸浮液10分鐘。藉由過濾收集固體，用水(200 mL × 3)及甲醇(20 mL)洗滌，且空氣乾燥16小時，得到標題化合物。MS (LC-MS) m/e 308.0 (M+H) +。 2.140.3 4- 胺基 -2- 碘苯甲酸甲酯在室溫下，向氯化銨(122 g)及鐵(38.2 g)於乙醇(1000 mL)及水(100 mL)中之混合物中添加實例2.140.2 (70 g)。在80℃下攪拌混合物4小時並過濾以移除不溶性物質。減壓濃縮濾液。將殘餘物溶解於乙酸乙酯(1000 mL)中並用水(500 mL)洗滌。用乙酸乙酯(1000 mL × 2)萃取水相。合併之有機相用鹽水洗滌，經MgSO 4乾燥，過濾並濃縮，得到標題化合物。MS (LC-MS) m/e 278.0 (M+H) +。 2.140.4 (4- 胺基 -2- 碘苯基 ) 甲醇在-50℃下，向實例2.140.3 (40 g)於四氫呋喃(800 mL)中之混合物中逐滴添加1M氫化二異丁基鋁(505 mL)。在-50℃下攪拌混合物3小時並冷卻至-20℃。將冰-水(180 mL)逐滴添加(保持溫度低於0℃)至混合物中。添加冰-水後，攪拌混合物10分鐘並過濾。濃縮濾液，且將殘餘物溶解於乙酸乙酯(800 mL)及水(200 mL)中。用乙酸乙酯(300 mL × 2)萃取水相。合併之有機相用鹽水洗滌，經MgSO 4乾燥，過濾並濃縮，得到標題化合物。MS (LC-MS) m/e 250.0 (M+H) +。 2.140.5 4-((( 第三丁基二甲基矽烷基 ) 氧基 ) 甲基 )-3- 碘苯胺向實例2.140.4 (40 g)及咪唑(21.87 g)於二氯甲烷(600 mL)及四氫呋喃(150 mL)中之混合物中添加第三丁基二甲基氯矽烷(29.0 g)。在室溫下攪拌混合物16小時並過濾以移除固體。向濾液中添加冰-水(50 mL)。攪拌混合物10分鐘並添加水(100 mL)。用二氯甲烷(500 mL × 2)萃取混合物。合併之有機相用鹽水洗滌，經MgSO 4乾燥，過濾並濃縮。殘餘物藉由矽膠層析法，用15/1至10/1石油醚/乙酸乙酯溶離來純化，得到標題化合物。MS (LC-MS) m/e 364.0 (M+H) +。 2.140.6 (S)-(1-((4-((( 第三丁基二甲基矽烷基 ) 氧基 ) 甲基 )-3- 碘苯基 ) 胺基 )-1- 側氧基丙 -2- 基 ) 胺基甲酸第三丁酯在0℃下，向(S)-2-((第三丁氧基羰基)胺基)丙酸(15.62 g)及實例2.140.5 (30 g)於二氯甲烷(600 mL)中之混合之混合物中逐滴添加POCl 3(15.39 mL)。在0℃下攪拌混合物2小時。將冰-水(60 mL)小心地逐滴添加至混合物中(保持溫度低於5℃)。攪拌混合物30分鐘並濃縮以移除二氯甲烷。將殘餘物懸浮於乙酸乙酯(500 mL)及水(100 mL)中。過濾懸浮液。有機相用水(200 mL × 2)及鹽水洗滌，經MgSO 4乾燥，過濾並濃縮，得到標題化合物。MS (LC-MS) m/e 533.0 (M-H) +。 2.140.7 (S)-(1-((4-( 羥基甲基 )-3- 碘苯基 ) 胺基 )-1- 側氧基丙 -2- 基 ) 胺基甲酸第三丁酯在0℃下，向實例2.140.6 (60 g)於四氫呋喃(600 mL)中之混合物中添加於四氫呋喃(120 mL)中之氟化四丁基銨(28.2 g)。在室溫下攪拌混合物16小時並過濾。向濾液中添加水(100 mL)。攪拌混合物10分鐘且接著濃縮。用乙酸乙酯(800 mL)及水(300 mL)稀釋殘餘物。用乙酸乙酯(200 mL × 3)萃取水相。合併之有機相用鹽水洗滌，經MgSO 4乾燥，過濾並濃縮。殘餘物藉由矽膠層析法，用3/1至1/1石油醚/乙酸乙酯溶離來純化，得到標題化合物。MS (LC-MS) m/e 443.0 (M+Na) +。 2.140.8 (S)-2- 胺基 -N-(4-( 羥基甲基 )-3- 碘苯基 ) 丙醯胺在室溫下，將實例2.140.7 (20 g)於二氯甲烷(80 mL)及三氟乙酸(40 mL)之混合物中之混合物攪拌2小時並濃縮。將殘餘物溶解於二氯甲烷(80 mL)中並添加三乙胺(16.95 mL)以將pH值調至8。在二氯甲烷中獲得呈游離鹼形式之標題化合物，不經進一步純化即用於下一步驟中。MS (LC-MS) m/e 321.1 (M+H) +。 2.140.9 ((S)-1-(((S)-1-((4-( 羥基甲基 )-3- 碘苯基 ) 胺基 )-1- 側氧基丙 -2- 基 ) 胺基 )-3- 甲基 -1- 側氧基丁 -2- 基 ) 胺基甲酸第三丁酯將(S)-2-((第三丁氧基羰基)胺基)-3-甲基丁酸(6.79 g)、三乙胺(9.58 mL)及1-羥基苯并三唑水合物(5.26 g)於二氯甲烷(250 mL)中之混合物攪拌20分鐘。在0℃下，將所得混合物逐滴添加至實例2.140.8 (10 g)及1-乙基-3-[3-(二甲基胺基)丙基]-碳化二亞胺鹽酸鹽(6.59 g)於二氯甲烷(100 mL)中之混合物中。完成添加後，在0℃下攪拌混合物2小時。添加冰-水(200 mL)，並攪拌所得混合物20分鐘。用飽和碳酸氫鈉水溶液混合物(100 mL × 2)、水(100 mL × 2)及鹽水(100 mL)洗滌有機相，經MgSO 4乾燥，過濾並濃縮。殘餘物藉由矽膠層析法，用3/1至1/1石油醚/乙酸乙酯溶離來純化，得到標題化合物。LC-MS m/e 542.1 (M+Na) +。 2.140.10 ((S)-1-(((S)-1-((4-( 羥基甲基 )-3-(2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32,35, 38,41,44,47,50- 十七氧雜五十三碳 -52- 炔 -53- 基 ) 苯基 ) 胺基 )-1- 側氧基丙 -2- 基 ) 胺基 )-3- 甲基 -1- 側氧基丁 -2- 基 ) 胺基甲酸第三丁酯向實例2.140.9 (50 mg)、2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32,35,38,41,44,47,50-十七氧雜五十三碳-52-炔(149 mg)、二氯化雙(三苯基膦)鈀(II) (27.0 mg)及N,N-二異丙基乙胺(0.05 mL)於N,N-二甲基甲醯胺(1 mL)中之混合物中添加碘化銅(I)(3.67 mg)。用氮氣流淨化反應物10分鐘並攪拌隔夜。用二甲亞碸稀釋反應物，並在Gilson系統上藉由逆相HPLC (C18管柱)，用20-70%乙腈/含0.1%三氟乙酸之水溶離來純化，得到標題化合物。MS (LC-MS) m/e 1164.2 (M-H) -。 2.140.11 ((S)-3- 甲基 -1-(((S)-1-((4-((((4- 硝基苯氧基 ) 羰基 ) 氧基 ) 甲基 )-3-(2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32,35,38,41,44,47,50- 十七氧雜五十三碳 -52- 炔 -53- 基 ) 苯基 ) 胺基 )-1- 側氧基丙 -2- 基 ) 胺基 )-1- 側氧基丁 -2- 基 ) 胺基甲酸第三丁酯向實例2.140.10 (80 mg)及碳酸雙(4-硝基苯基)酯(31.3 mg)於N,N-二甲基甲醯胺(0.2 mL)中之混合物中添加N,N-二異丙基乙胺(0.06 mL)。攪拌混合物3小時並藉由在Gilson系統(C18管柱)上進行逆相HPLC，用35-75%乙腈/含0.1%三氟乙酸之水溶離來純化，得到標題化合物。 2.140.12   6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-3-(1-((3-(2-((((4-((S)-2-((S)-2-(( 第三丁氧基羰基 ) 胺基 )-3- 甲基丁醯胺基 ) 丙醯胺基 )-2-(2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32,35,38,41,44,47,50- 十七氧雜五十三碳 -52- 炔 -53- 基 ) 苯甲基 ) 氧基 ) 羰基 )(2- 磺基乙基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶甲酸向實例1.2.9 (95 mg)、實例2.140.11 (148 mg)及1-羥基苯并三唑水合物(68.1 mg)於N,N-二甲基甲醯胺(2.5 mL)中之混合物中添加N,N-二異丙基乙胺(97 μL)。攪拌混合物3.5小時，並在Gilson系統(C18管柱)上藉由逆相HPLC，用35-80%乙腈/含0.1%三氟乙酸之水溶離來純化，得到標題化合物。 2.140.13 3-(1-((3-(2-((((4-((S)-2-((S)-2- 胺基 -3- 甲基丁醯胺基 ) 丙醯胺基 )-2-(2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32,35,38,41,44,47,50- 十七氧雜五十三碳 -52- 炔 -53- 基 ) 苯甲基 ) 氧基 ) 羰基 )(2- 磺基乙基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ) 吡啶甲酸用三氟乙酸(1 mL)處理實例2.140.12 (135 mg)於二氯甲烷(4 mL)中之冷(0℃)混合物5小時。濃縮混合物，並在Gilson系統(C18管柱)上藉由逆相HPLC，用20-60%乙腈/含0.1%三氟乙酸之水溶離來純化，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 973.4 (M+2H) 2+。 2.140.14 N-({(3S,5S)-3-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)-2-側氧基-5-[(2-磺基乙氧基)甲基]吡咯啶-1-基}乙醯基)-L-纈胺醯基-N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3-苯并噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基]-2-羧基吡啶-3-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]-5,7-二甲基三環[ 3.3.1.1 3,7 ]癸-1-基}氧基)乙基](2-磺基乙基)胺甲醯基}氧基)甲基]-3-(2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32,35,38,41,44,47,50-十七氧雜五十三碳-52-炔-53-基)苯基}-L-丙胺醯胺 用N,N-二異丙基乙胺(16.2 μL)處理實例2.119.15 (20.88 mg)及六氟磷酸O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基
Figure 111128039-A0304-2
(21.1 mg)於N,N-二甲基甲醯胺(0.4 mL)中之混合物7分鐘，並緩慢添加實例2.140.13 (60 mg)及N,N-二異丙基乙胺(32.3 μL)於N,N-二甲基甲醯胺(0.6 mL)中之混合物。攪拌反應混合物10分鐘且藉由在Gilson系統(C18管柱)上進行逆相HPLC，用20-70%乙腈/含0.1%三氟乙酸之水溶離來純化，得到標題化合物。 1H NMR (500 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ 10.01 (d, 1H), 8.22 (d, 1H), 8.02 (t, 2H), 7.90-7.75 (m, 2H), 7.66-7.50 (m, 3H), 7.50-7.39 (m, 3H), 7.35 (q, 3H), 7.05 (s, 2H), 7.00 (d, 1H), 5.08 (d, 2H), 4.97 (s, 2H), 4.65 (t, 1H), 4.47-4.31 (m, 4H), 4.23-4.14 (m, 2H), 3.90-3.69 (m, 5H), 3.68-3.58 (m, 4H), 3.57-3.53 (m, 2H), 3.52-3.43 (m, 57H), 3.42-3.33 (m, 4H), 3.22 (s, 5H), 3.01 (t, 2H), 2.49 (p, 3H), 2.09 (d, 3H), 2.04-1.77 (m, 1H), 1.40-1.17 (m, 6H), 1.06 (dd, 6H), 0.97-0.63 (m, 11H)。MS (ESI) m/e 1153.3 (M+2H) 2+。 2.141 合成 N-({(3S,5S)-3-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 )-2- 側氧基 -5-[(2- 磺基乙氧基 ) 甲基 ] 吡咯啶 -1- 基 } 乙醯基 )-L- 纈胺醯基 -N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](2- 磺基乙基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ]-3-(2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32,35,38,41,44,47,50- 十七氧雜五十三烷 -53- 基 ) 苯基 }-L- 丙胺醯胺 ( 合成子 VT) 2.141.1 ((S)-1-(((S)-1-((3-(2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32,35,38,41,44,47,50 - 十七氧雜五十二烷 -52- 基 )-4-( 羥基甲基 ) 苯基 ) 胺基 )-1- 側氧基丙 -2- 基 ) 胺基 )-3- 甲基 -1- 側氧基丁 -2- 基 ) 胺基甲酸第三丁酯在壓力瓶中，在50 psi氫氣下將實例2.140.10 (304 mg)及10% Pd/C (90 mg，無水)於四氫呋喃(20 mL)中之混合物振盪2小時。濾出不溶性物質，並濃縮濾液，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 1168.3 (M-H) -。 2.141.2  ((S)-1-(((S)-1-((3-(2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32,35,38,41,44,47,50- 十七氧雜五十二烷 -52- 基 )-4-((((4- 硝基苯氧基 ) 羰基 ) 氧基 ) 甲基 ) 苯基 ) 胺基 )-1- 側氧基丙 -2- 基 ) 胺基 )-3- 甲基 -1- 側氧基丁 -2- 基 ) 胺基甲酸第三丁酯標題化合物係使用實例2.140.11中之程序，用實例2.141.1替代實例2.140.10製備。 2.141.3 6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-3-(1-((3-(2-((((4-((S)-2-((S)-2-(( 第三丁氧基羰基 ) 胺基 )-3- 甲基丁醯胺基 ) 丙醯胺基 )-2-(2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32,35,38,41,44,47,50- 十七氧雜五十三烷 -53- 基 ) 苯甲基 ) 氧基 ) 羰基 )(2- 磺基乙基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶甲酸標題化合物係使用實例2.140.12中之程序，用實例2.141.2替代實例2.140.11製備。 2.141.4 3-(1-((3-(2-((((4-((S)-2-((S)-2- 胺基 -3- 甲基丁醯胺基 ) 丙醯胺基 )-2-(2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32,35,38,41,44,47,50- 十七氧雜五十三烷 -53- 基 ) 苯甲基 ) 氧基 ) 羰基 )(2- 磺基乙基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ) 吡啶甲酸標題化合物係使用實例2.140.13中之程序，用實例2.141.3替代實例2.140.12製備。MS (ESI) m/e 1948.8 (M-H) -。 2.141.5 N-({(3S,5S)-3-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 )-2- 側氧基 -5-[(2- 磺基乙氧基 ) 甲基 ] 吡咯啶 -1- 基 } 乙醯基 )-L- 纈胺醯基 -N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](2- 磺基乙基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ]-3-(2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32,35,38,41,44,47,50- 十七氧雜五十三烷 -53- 基 ) 苯基 }-L- 丙胺醯胺標題化合物係使用實例2.140.14中之程序，用實例2.141.4替代實例2.140.13製備。 1H NMR (501 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ 12.87 (s, 1H), 9.84 (s, 1H), 8.18 (d, 1H), 8.03 (dd, 2H), 7.78 (d, 1H), 7.61 (d, 1H), 7.52 (d, 1H), 7.45 (ddd, 4H), 7.40-7.32 (m, 2H), 7.30 (s, 1H), 7.22 (d, 1H), 7.07 (s, 2H), 6.96 (d, 1H), 5.01 (d, 2H), 4.95 (s, 2H), 4.64 (t, 1H), 4.38 (t, 1H), 4.24-4.12 (m, 2H), 4.00 (d, 1H), 3.88 (t, 2H), 3.78 (t, 3H), 3.64 (ddt, 2H), 3.49 (dd, 62H), 3.43-3.37 (m, 6H), 3.23 (s, 3H), 3.01 (t, 2H), 2.84-2.68 (m, 1.5H), 2.63 (dd, 4H), 2.36 (d, 0.5H), 2.08 (d, 3H), 1.74 (t, 2H), 1.25 (dt, 6H), 1.17-1.00 (m, 6H), 0.99-0.72 (m, 11H)。MS (ESI) m/e 1153.0 (M-2H) 2-。 2.142 合成 2-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ][(3S)-3,4- 二羥基丁基 ] 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ]-5-(3-{[(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 乙醯基 ] 胺基 } 丙基 ) 苯基 β-D- 葡萄哌喃糖苷醛酸 ( 合成子 VY) 2.142.1 3-(1-((3-(2-((((4-(3- 胺基丙基 )-2-(((2S,3R,4S,5S,6S)-6- 羧基 -3,4,5- 三羥基四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 ) 氧基 ) 苯甲基 ) 氧基 ) 羰基 )((S)-3,4- 二羥基丁基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ) 吡啶甲酸實例2.142.1係藉由在實例2.49.1中用實例2.136.4替代((S)-3-甲基-1-(((S)-1-((4-((((4-硝基苯氧基)羰基)氧基)甲基)苯基)胺基)-1-側氧基-5-脲基戊-2-基)胺基)-1-側氧基丁-2-基)胺基甲酸(9H-茀-9-基)甲酯且用實例1.85替代實例1.2.9製備。MS (ESI) m/e 1217.3 (M+H) +。 2.142.2 2-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ][(3S)-3,4- 二羥基丁基 ] 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ]-5-(3-{[(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 乙醯基 ] 胺基 } 丙基 ) 苯基 β-D- 葡萄哌喃糖苷醛酸實例2.142.2係藉由在實例2.54中用實例2.142.1替代實例2.49.1製備。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d6) δ ppm 8.14 (d, 1H), 8.03 (dt, 1H), 7.81-7.76 (m, 1H), 7.61 (dd, 1H), 7.53-7.41 (m, 3H), 7.38-7.32 (m, 2H), 7.28 (s, 1H), 7.18 (d, 1H), 7.06 (d, 2H), 6.97-6.92 (m, 2H), 6.85 (dd, 1H), 5.10 (q, 2H), 5.01 (d, 1H), 4.96 (s, 2H), 3.48-3.18 (m, 12H), 3.06 (q, 2H), 3.00 (t, 2H), 2.08 (s, 3H), E77-0.66 (m, 16H)。MS (ESI) m/e 1352.5 (M-H) -。 2.143 合成 1-{[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ]({[4-(4-{[(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 乙醯基 ] 胺基 } 丁基 )-2-( β -D- 葡萄哌喃糖醛醯基氧基 ) 苯甲基 ] 氧基 } 羰基 ) 胺基 }-1,2- 二脫氧 -D- 阿拉伯 - 己糖醇 ( 合成子 WI) 2.143.1 3-(1-((3-(2-((((4-(4- 胺基丁基 )-2-(((2S,3R,4S,5S,6S)-6- 羧基 -3,4,5- 三羥基四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 ) 氧基 ) 苯甲基 ) 氧基 ) 羰基 )((3R,4S,5R)-3,4,5,6- 四羥基己基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ) 吡啶甲酸標題化合物係藉由在實例2.97.8中用實例1.77.2替代實例1.25且用實例2.124.5替代實例2.97.7製備。MS (ESI) m/e 1291 (M+H) +, 1289 (M-H) -。 2.143.2 1-{[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ]({[4-(4-{[(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 乙醯基 ] 胺基 } 丁基 )-2-( β -D- 葡萄哌喃糖醛醯基氧基 ) 苯甲基 ] 氧基 } 羰基 ) 胺基 }-1,2- 二脫氧 -D- 阿拉伯 - 己糖醇標題化合物係藉由在實例2.54中用實例2.143.1替代實例2.49.1製備。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 8.04 (d, 1H), 7.81 (d, 1H), 7.61 (d, 1H), 7.54-7.43 (m, 3H), 7.41-7.35 (m, 2H), 7.29 (s, 1H), 7.18 (m, 1H), 7.03 (s, 2H), 6.97 (d, 1H), 6.93 (s, 1H), 6.86 (d, 1H), 5.18-5.05 (m, 3H), 5.03 (d, 1H), 4.97 (s, 2H), 4.01 (s, 2H), 3.91 (d, 1H), 3.87 (t, 2H), 3.83 (m, 2H), 3.72 (s, 2H), 3.67 (m, 2H), 3.59 (dd, 2H), 3.50-3.27 (m, 16H), 3.14 (d, 2H), 3.04 (m, 4H), 2.09 (s, 3H), 1.68 (m, 2H), 1.52 (m, 2H), 1.44-1.31 (m, 4H), 1.26-1.14 (m, 4H), 1.10 (m, 4H), 0.98 (q, 2H), 0.85 (m, 6H)。MS (ESI) m/e 1428 (M+H) +, 1426 (M-H) -。 2.144 合成 1-{[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ]({[4-(4-{[(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 乙醯基 ] 胺基 } 丁基 )-2-(β-D- 葡萄哌喃糖醛醯基氧基 ) 苯甲基 ] 氧基 } 羰基 ) 胺基 }-1,2- 二脫氧 -D- 赤式 - 戊糖醇 ( 合成子 WK) 2.144.1 3-(1-((3-(2-((((4-(4- 胺基丁基 )-2-(((2S,3R,4S,5S,6S)-6- 羧基 -3,4,5- 三羥基四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 ) 氧基 ) 苯甲基 ) 氧基 ) 羰基 )((3S,4R)-3,4,5- 三羥基戊基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ) 吡啶甲酸標題化合物係藉由在實例2.97.8中用實例1.80替代實例1.25且用實例2.124.5替代實例2.97.7製備。MS (ESI) m/e 1261 (M+H) +, 1259 (M-H) -。 2.144.2 1-{[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ]({[4-(4-{[(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 乙醯基 ] 胺基 } 丁基 )-2-( β -D- 葡萄哌喃糖醛醯基氧基 ) 苯甲基 ] 氧基 } 羰基 ) 胺基 }-1,2- 二脫氧 -D- 赤式 - 戊糖醇標題化合物係藉由在實例2.54中用實例2.144.1替代實例2.49.1製備。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 8.08 (t, 1H), 8.03 (d, 1H), 7.79 (d, 1H), 7.62 (d, 1H), 7.53-7.42 (m, 3H), 7.38-7.33 (m, 2H), 7.20 (s, 1H), 7.17 (m, 1H), 7.07 (s, 2H), 6.97-6.93 (m, 2H), 6.85 (d, 1H), 5.17-5.05 (m, 3H), 5.02 (d, 1H), 4.96 (s, 2H), 3.98 (s, 2H), 3.88 (m, 4H), 3.80 (m, 4H), 3.67 (m, 2H), 3.42 (m, 4H), 3.36-3.23 (m, 13H), 3.08-2.99 (m, 5H), 2.09 (s, 3H), 1.86 (m, 1H), 1.53 (m, 2H), 1.38 (m, 4H), 1.25 (m, 4H), 1.11 (m, 4H), 0.96 (m, 2H), 0.83 (m, 6H)。MS (ESI) m/e 1398 (M+H) +, 1396 (M-H) -。 2.145 合成 N-[(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 乙醯基 ]-L- 纈胺醯基 -N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 ) 萘 -2- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](2- 磺基乙基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ]-3-[27-(2,5,8,11,14,17,20,23- 八氧雜二十六烷 -26- 基 )-2,5,8,11,14,17,20,23- 八氧雜 -27- 氮雜三十烷 -30- 基 ] 苯基 }-L- 丙胺醯胺 ( 合成子 WP) 2.145.1 ((S)-1-(((S)-1-((3-(3-((( 苯甲基氧基 ) 羰基 ) 胺基 ) 丙 -1- 炔 -1- 基 )-4-( 羥基甲基 ) 苯基 ) 胺基 )-1- 側氧基丙 -2- 基 ) 胺基 )-3- 甲基 -1- 側氧基丁 -2- 基 ) 胺基甲酸第三丁酯向((S)-1-(((S)-1-((4-(羥基甲基)-3-碘苯基)胺基)-1-側氧基丙-2-基)胺基)-3-甲基-1-側氧基丁-2-基)胺基甲酸第三丁酯(0.5 g)於N,N-二甲基甲醯胺(6 mL)中之混合物中添加丙-2-炔-1-基胺基甲酸苯甲酯(0.182 g)、CuI (9.2 mg)、二氯化雙(三苯基膦)鈀(II) (35 mg)及N,N-二異丙基乙胺(1.0 mL)。在室溫下攪拌混合物隔夜。真空濃縮混合物。將殘餘物溶解於乙酸乙酯(300 mL)中，用水、鹽水洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。蒸發溶劑，且殘餘物藉由矽膠層析法，用30%乙酸乙酯/二氯甲烷溶離來純化，得到標題化合物。MS (APCI) m/e 581.2 (M-H) -。 2.145.2 ((S)-1-(((S)-1-((3-(3- 胺基丙基 )-4-( 羥基甲基 ) 苯基 ) 胺基 )-1- 側氧基丙 -2- 基 ) 胺基 )-3- 甲基 -1- 側氧基丁 -2- 基 ) 胺基甲酸第三丁酯向實例2.145.1 (1.7g)於乙醇(30 mL)中之混合物中添加5% Pd/C (0.3 g)及環己烯(大量過量)。在100℃下攪拌反應45分鐘。過濾反應物並減壓濃縮。將殘餘物溶解於N,N-二甲基甲醯胺中，並在Gilson系統(C18管柱)上藉由逆相HPLC，用20-80%乙腈/含0.1%三氟乙酸之水溶離來純化，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 451.1 (M-H) -。 2.145.3 ((S)-1-(((S)-1-((3-(27-(2,5,8,11,14,17,20,23- 八氧雜二十六烷 -26- 基 )-2,5,8,11,14,17,20,23- 八氧雜 -27- 氮雜三十烷 -30- 基 )-4-( 羥基甲基 ) 苯基 ) 胺基 )-1- 側氧基丙 -2- 基 ) 胺基 )-3- 甲基 -1- 側氧基丁 -2- 基 ) 胺基甲酸第三丁酯向實例2.145.2 (45 mg)於二氯甲烷(4 mL)中之混合物中添加2,5,8,11,14,17,20,23-八氧雜二十六烷-26-醛(79 mg)，隨後添加NaH(OAc) 3(63.5 mg)。在室溫下攪拌混合物3小時且接著減壓濃縮。將殘餘物溶解於N,N-二甲基甲醯胺中，並在Gilson系統(C18管柱)上藉由逆相HPLC，用20-80%乙腈/含0.1%三氟乙酸之水溶離來純化，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 1212.1 (M-H) -。 2.145.4 ((S)-1-(((S)-1-((3-(27-(2,5,8,11,14,17,20,23- 八氧雜二十六烷 -26- 基 )-2,5,8,11,14,17,20,23- 八氧雜 -27- 氮雜三十烷 -30- 基 )-4-((((4- 硝基苯氧基 ) 羰基 ) 氧基 ) 甲基 ) 苯基 ) 胺基 )-1- 側氧基丙 -2- 基 ) 胺基 )-3- 甲基 -1- 側氧基丁 -2- 基 ) 胺基甲酸第三丁酯向實例2.145.3 (80 mg)於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)中之混合物中添加碳酸雙(4-硝基苯基)酯(26 mg)，隨後添加N,N-二異丙胺(0.012 mL)。在室溫下攪拌混合物隔夜且在Gilson系統(C18管柱)上直接藉由逆相HPLC，用20-80%乙腈/含0.1%三氟乙酸之水溶離來純化，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 1376.97 (M-H) -。 2.145.5 3-(1-((3-(2-((((2-(27-(2,5,8,11,14,17,20,23- 八氧雜二十六烷 -26- 基 )-2,5,8,11,14,17,20,23- 八氧雜 -27- 氮雜三十烷 -30- 基 )-4-((S)-2-((S)-2- 胺基 -3- 甲基丁醯胺基 ) 丙醯胺基 ) 苯甲基 ) 氧基 ) 羰基 )(2- 磺基乙基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 ) 萘 -2- 基 ) 吡啶甲酸向實例2.145.4 (30 mg)於N,N-二甲基甲醯胺(4 mL)中之混合物中添加實例1.43 (18.68 mg)，隨後添加1-羥基苯并三唑水合物(3.4 mg)及N,N-二異丙胺(3.84 μL)。在室溫下攪拌混合物隔夜。將三氟乙酸(0.55 mL)添加至混合物並在室溫下攪拌3小時。混合物藉由在Gilson系統(C18管柱)上進行逆相HPLC，用20-80%乙腈/含0.1%三氟乙酸之水溶離來純化，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 1986.6 (M-H) -。 2.145.6 N-[(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 乙醯基 ]-L- 纈胺醯基 -N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 ) 萘 -2- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](2- 磺基乙基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ]-3-[27-(2,5,8,11,14,17,20,23- 八氧雜二十六烷 -26- 基 )-2,5,8,11,14,17,20,23- 八氧雜 -27- 氮雜三十烷 -30- 基 ] 苯基 }-L- 丙胺醯胺標題化合物係如實例2.123.21中所描述，用實例2.145.5替代實例2.123.20製備。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 13.10 (s, 1H), 9.92 (s, 1H), 9.43 (s, 1H), 9.02 (s, 1H), 8.37 (dd, 1H), 8.30-8.14 (m, 5H), 8.07 (d, 1H), 8.02 (d, 1H), 7.96 (d, 1H), 7.81 (d, 1H), 7.74-7.68 (m, 1H), 7.57 (s, 1H), 7.52-7.45 (m, 2H), 7.42-7.34 (m, 2H), 7.28 (d, 1H), 7.08 (s, 2H), 5.05 (d, 2H), 4.39 (t, 1H), 4.21 (dd, 1H), 4.12 (s, 2H), 3.88 (s, 2H), 3.49 (d, 55H), 3.34 (s, 200H), 3.23 (s, 5H), 3.13 (d, 4H), 2.79-2.65 (m, 5H), 2.23 (s, 3H), 1.94 (d, 8H), 1.47-0.94 (m, 15H), 0.92-0.76 (m, 12H)。 2.146 合成 (6S)-2,6- 去水 -6-(2-{2-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](2- 磺基乙基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ]-5-({N-[(2S)-3-[3,4- 雙 (2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32- 十一氧雜三十四烷 -34- 基氧基 ) 苯基 ]-2-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 丙醯基 ]-L- 纈胺醯基 -L- 丙胺醯基 } 胺基 ) 苯基 } 乙基 )-L- 古洛糖酸 ( 合成子 XD) 2.146.1 (S)-2-((( 苯甲基氧基 ) 羰基 ) 胺基 )-3-(3,4- 二羥基苯基 ) 丙酸向(S)-2-胺基-3-(3,4-二羥基苯基)丙酸(1.00 kg)及NaHCO 3(1.28 kg)於二噁烷(5.00 L)及水(5.00 L)中之混合物中逐滴添加氯甲酸苯甲酯(1.04 k)。在25℃下攪拌反應混合物12小時。藉由添加6 N HCl水溶液將反應混合物調至pH = 3.0 ~ 4.0並用乙酸乙酯(25 L)萃取。有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾並真空濃縮，得到標題化合物。 1H NMR (400MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 8.73 (s, 1H), 7.54-7.26 (m, 8H), 6.64-6.45 (m, 3H), 4.98 (s, 2H), 4.49 (s, 1H), 2.87 (d, J= 9.60 Hz, 1H), 2.68-2.62 (m, 1H)。 2.146.2 (S)-2-((( 苯甲基氧基 ) 羰基 ) 胺基 )-3-(3,4- 二羥基苯基 ) 丙酸苯甲酯在20℃下，向實例2.146.1 (800.00 g)及Cs 2CO 3(1.18 kg)中之混合物中添加溴甲基苯(259.67 g)。攪拌反應混合物1小時，且TLC顯示反應完成。用H 2O (5 L)稀釋殘餘物並用乙酸乙酯(三次，5 L)萃取。合併之有機層用鹽水(5 L)洗滌，經Na 2SO 4(150 g)乾燥，過濾並減壓濃縮。殘餘物藉由管柱層析法(SiO 2，石油醚/乙酸乙酯= 100:1至1:1)純化兩次，得到標題化合物。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ ppm 2.77-3.02 (m, 2 H), 4.47 (br. s., 1 H), 4.61 (d, J=7.94 Hz, 1 H), 5.01-5.17 (m, 4 H), 5.35-5.47 (m, 1 H), 6.32 (br. s., 1 H), 6.38 (d, J=7.94 Hz, 1 H), 6.51 (s, 1 H), 6.65 (d, J=7.94 Hz, 1 H), 7.17-7.42 (m, 9 H)。 2.146.3 (S)-2-((( 苯甲基氧基 ) 羰基 ) 胺基 )-3-(3,4- 雙 (2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32- 十一氧雜三十四烷 -34- 基氧基 ) 苯基 ) 丙酸苯甲酯向K 2CO 3(27.04 g)及KI (5.95 g)於N,N-二甲基甲醯胺(150 mL)中之混合物中添加於二甲基甲醯胺(150 mL)中之實例2.146.2 (8.12 g)及4-甲基苯磺酸2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32-十一氧雜三十四烷-34-基酯(27.00 g)。在N 2下，在75℃下攪拌混合物12小時。如上文所述再設置兩個小瓶。合併全部三份反應混合物進行純化。將混合物倒入NH 4Cl水溶液混合物(9 L)中，並用乙酸乙酯(五次，900 mL)萃取。合併之有機層用鹽水(1500 mL)洗滌，經Na 2SO 4(150 g)乾燥，過濾並減壓濃縮 ，得到粗殘餘物。殘餘物藉由管柱層析法(SiO 2，二氯甲烷/甲醇=100/1至20:1)純化，得到標題化合物。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ ppm 2.95-3.08 (m, 2 H), 3.38 (s, 6 H), 3.57-3.68 (m, 80 H), 3.78 (t, J=4.85 Hz, 2 H), 3.83 (t, J=5.29 Hz, 2 H), 4.01 (t, J=5.07 Hz, 2 H), 4.10 (t, J=5.07 Hz, 2 H), 4.58-4.70 (m, 1 H), 5.09 (s, 2 H), 5.14 (d, J=3.53 Hz, 2 H), 6.55 (d, J=8.38 Hz, 1 H), 6.62 (d, J=1.76 Hz, 1 H), 6.74 (d, J=7.94 Hz, 1 H), 7.27-7.49 (m, 10 H)。 2.146.4 (S)-2- 胺基 -3-(3,4- 雙 (2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32- 十一氧雜三十四烷 -34- 基氧基 ) 苯基 ) 丙酸向實例2.146.3 (16.50 g)於甲醇(200 mL)中之混合物中添加Pd/C (9.00 g)，且在H 2(50 psi)下，在50℃下攪拌混合物16小時。如上文所述再設置反應。LC/MS顯示反應完成，且合併兩份反應混合物進行純化。過濾混合物並濃縮。粗標題化合物不經進一步純化即用於下一步驟中。 2.146.5 (S)-3-(3,4- 雙 (2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32- 十一氧雜三十四烷 -34- 基氧基 ) 苯基 )-2-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 丙酸向實例2.146.4 (5.94 g)於H 2O (60.00 mL)中之混合物中添加Na 2CO 3(790.67 mg)及2,5-二側氧基吡咯-1-甲酸甲酯(1.19 g)。在25℃下攪拌混合物3小時。如上文所述再設置四份反應物。合併全部五份反應混合物進行純化。添加4M HCl水溶液以將pH值調至2。合併之混合物藉由製備型逆相HPLC(三氟乙酸條件)純化，得到標題化合物。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ ppm 3.35-3.40 (m, 6 H), 3.51-3.58 (m, 4 H), 3.58-3.75 (m, 78 H), 3.81 (q, J=4.70 Hz, 4 H), 4.11 (dt, J=10.14, 5.07 Hz, 4 H), 4.91 (dd, J=11.47, 5.29 Hz, 1 H), 6.53-6.69 (m, 3 H), 6.71-6.89 (m, 2 H)。MS (ESI) m/e 6 38.0 (M+H) +。 2.146.6 (6S)-2,6- 去水 -6-(2-{2-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](2- 磺基乙基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ]-5-({N-[(2S)-3-[3,4- 雙 (2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32- 十一氧雜三十四烷 -34- 基氧基 ) 苯基 ]-2-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 丙醯基 ]-L- 纈胺醯基 -L- 丙胺醯基 } 胺基 ) 苯基 } 乙基 )-L- 古洛糖酸在N,N-二甲基甲醯胺(0.4 mL)中攪拌實例2.146.5 (0.020 mL)、六氟磷酸O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基
Figure 111128039-A0304-2
(0.014 g)及N-乙基-N-異丙基丙-2-胺(0.020 mL)之混合物5分鐘。將混合物添加至實例2.123.20 (0.042 g)及N-乙基-N-異丙基丙-2-胺(0.020 mL)於N,N-二甲基甲醯胺(0.4 mL)中之混合物中並將其在室溫下攪拌3小時。用水(1.5 mL)、N,N-二甲基甲醯胺(0.5 mL)及2,2,2-三氟乙酸(0.054 mL)之混合物稀釋反應物且在Gilson 2020系統上藉由製備型逆相HPLC，使用5%至85%乙腈/水梯度純化。凍乾含產物溶離份，得到標題化合物。 1H NMR (501 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ 12.86 (s, 4H), 9.92 (s, 2H), 8.26 (d, 1H), 8.10 (s, 1H), 8.02 (dd, 1H), 7.77 (d, 1H), 7.64 (s, 1H), 7.54-7.49 (m, 1H), 7.49-7.39 (m, 2H), 7.39-7.31 (m, 2H), 7.28 (s, 1H), 7.20 (d, 1H), 6.94 (d, 1H), 6.87 (s, 2H), 6.77 (d, 1H), 6.60-6.53 (m, 1H), 5.05-4.91 (m, 5H), 4.80 (dd, 2H), 4.37 (t, 2H), 4.21 (t, 2H), 3.97 (dt, 3H), 3.86 (t, 3H), 3.78 (d, 3H), 3.68 (dt, 4H), 3.65-3.28 (m, 102H), 3.20-3.08 (m, 2H), 2.99 (t, 2H), 2.92 (d, 2H), 2.68 (dd, 2H), 2.07 (d, 4H), 1.54 (s, 2H), 1.37-0.71 (m, 16H)。MS (ESI) m/e 2631.2 (M-H) -。 2.147 合成 N-[(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 乙醯基 ]-N-(2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32- 十一氧雜三十四烷 -34- 基 )-β- 丙胺醯基 -L- 纈胺醯基 -N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](2- 磺基乙基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ]-3-(2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32,35,38,41,44,47,50- 十七氧雜五十三烷 -53- 基 ) 苯基 }-L- 丙胺醯胺 ( 合成子 XK) 2.147.1 2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32- 十一氧雜 -35- 氮雜三十八烷 -38- 酸苯甲酯向2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32-十一氧雜三十四烷-34-胺(1 g)於N,N-二甲基甲醯胺(4 mL)及水(3 mL)中之混合物中逐滴添加丙烯酸苯甲酯(0.377 g)。攪拌反應混合物隔夜，並在Gilson系統上藉由逆相HPLC (C18管柱)，用20-70%乙腈/含0.1%三氟乙酸之水溶離來純化，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 678.4 (M+H) +。 2.147.2 2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32- 十一氧雜 -35- 氮雜三十八烷 -38- 酸在壓力瓶中，在50 psi氫氣下將於四氫呋喃(10 mL)中之實例2.147.1 (220 mg)及10% Pd/C (44 mg，無水)振盪1小時。過濾反應物，並濃縮濾液。在高真空下乾燥殘餘物，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 588.3 (M+H) +。 2.147.3 35-(2-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 乙醯基 )-2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32- 十一氧雜 -35- 氮雜三十八烷 -38- 酸 2,5- 二側氧基吡咯啶 -1- 基酯用N,N-二異丙基乙胺(785 μL)處理2-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)乙酸2,5-二側氧基吡咯啶-1-基酯(566 mg)、1-羥基苯并三唑水合物(229 mg)、1-羥基吡咯啶-2,5-二酮(86 mg)及實例2.147.2 (440 mg)於N,N-二甲基甲醯胺(3mL)中之冷(0℃)混合物25分鐘。用二甲亞碸稀釋反應物，並在Gilson系統(C18管柱)上藉由逆相HPLC，用5-55%乙腈/含0.1%三氟乙酸之水溶離來純化，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 822.3 (M+H) +。 2.147.4 N-[(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 乙醯基 ]-N-(2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32- 十一氧雜三十四烷 -34- 基 )-β- 丙胺醯基 -L- 纈胺醯基 -N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](2- 磺基乙基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ]-3-(2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32,35,38,41,44,47,50- 十七氧雜五十三烷 -53- 基 ) 苯基 }-L- 丙胺醯胺向實例2.141.4 (28 mg)、實例2.147.3 (27.1 mg)及1-羥基苯并三唑水合物(6.6 mg)於N,N-二甲基甲醯胺(0.8 mL)中之冷(0℃)混合物中添加N,N-二丙基乙胺-2 (20.1 μL)。攪拌混合物10分鐘且藉由在Gilson系統(C18管柱)上進行逆相HPLC，用30-70%乙腈/含0.1%三氟乙酸之水溶離來純化，得到標題化合物。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ 12.81 (s, 1H), 9.84 (s, 1H), 8.21-7.86 (m, 2H), 7.75 (d, 1H), 7.57 (d, 1H), 7.52-7.28 (m, 7H), 7.27-7.15 (m, 2H), 7.04 (d, 2H), 6.91 (d, 1H), 4.94 (d, 4H), 4.36 (dt, 3H), 4.19 (dt, 1H), 3.84 (t, 2H), 3.75 (d, 2H), 3.63 (d, 1H), 3.46 (dd, 104H), 3.36 (s, 2H), 3.19 (s, 5H), 2.97 (t, 2H), 2.57 (t, 5H), 2.42-2.26 (m, 1H), 2.03 (s, 7H), 2.00-1.83 (m, 1H), 1.70 (t, 2H), 1.38-0.96 (m, 13H), 0.96-0.69 (m, 13H)。MS (ESI) m/e 1327.7 (M-2H) 2-。 2.148 合成 N-[(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 乙醯基 ]-N-(2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32- 十一氧雜三十四烷 -34- 基 )-β- 丙胺醯基 -L- 纈胺醯基 -N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](2- 磺基乙基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ] 苯基 }-N 5- 胺甲醯基 -L- 鳥胺醯胺 ( 合成子 XL)標題化合物係使用實例2.147.4中之程序，用實例2.112.2替代實例2.141.4製備。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ 12.83 (s, 1H), 9.96 (d, 1H), 8.18-7.85 (m, 3H), 7.75 (d, 1H), 7.64-7.37 (m, 7H), 7.32 (td, 2H), 7.28-7.20 (m, 3H), 7.04 (s, 2H), 6.92 (d, 1H), 5.17-4.79 (m, 4H), 4.59-4.31 (m, 3H), 4.21 (dt, 1H), 3.84 (t, 2H), 3.77 (d, 2H), 3.52 (s, 4H), 3.39 (d, 2H), 3.19 (s, 5H), 2.94 (dt, 4H), 2.60 (t, 3H), 2.43-2.27 (m, 1H), 2.05 (s, 4H), 1.60 (d, 2H), 1.44-0.57 (m, 22H)。MS (ESI) m/e 1964.8 (M-H) -。 2.149 合成 N-[(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 乙醯基 ]-L- 纈胺醯基 -N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](2- 磺基乙基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ]-3-[27-(2,5,8,11,14,17,20,23- 八氧雜二十六烷 -26- 基 )-2,5,8,11,14,17,20,23- 八氧雜 -27- 氮雜三十烷 -30- 基 ] 苯基 }-L- 丙胺醯胺 ( 合成子 YJ) 2.149.1 3-(1-((3-(2-((((2-(27-(2,5,8,11,14,17,20,23- 八氧雜二十六烷 -26- 基 )-2,5,8,11,14,17,20,23- 八氧雜 -27- 氮雜三十烷 -30- 基 )-4-((S)-2-((S)-2- 胺基 -3- 甲基丁醯胺基 ) 丙醯胺基 ) 苯甲基 ) 氧基 ) 羰基 )(2- 磺基乙基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ) 吡啶甲酸標題化合物係如實例2.145.5中所描述，用實例1.2.9替代實例1.43製備。MS (ESI) m/e 1991.4 (M-H) -。 2.149.2 N-[(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 乙醯基 ]-L- 纈胺醯基 -N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](2- 磺基乙基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ]-3-[27-(2,5,8,11,14,17,20,23- 八氧雜二十六烷 -26- 基 )-2,5,8,11,14,17,20,23- 八氧雜 -27- 氮雜三十烷 -30- 基 ] 苯基 }-L- 丙胺醯胺標題化合物係如實例2.145中所描述，用實例2.149.1替代實例2.145.5製備。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 12.83 (s, 1H), 9.90 (s, 1H), 9.41 (s, 1H), 8.24 (d, 2H), 8.01 (d, 1H), 7.77 (d, 1H), 7.67-7.29 (m, 8H), 7.26 (s, 2H), 7.06 (s, 2H), 6.93 (d, 1H), 5.03 (d, 2H), 4.93 (s, 2H), 4.37 (t, 1H), 4.19 (dd, 1H), 4.11 (s, 2H), 3.86 (t, 2H), 3.79 (s, 2H), 3.70-3.26 (m, 226H), 3.21 (s, 6H), 3.11 (s, 5H), 2.99 (t, 2H), 2.66 (d, 4H), 2.08 (s, 3H), 1.89 (s, 8H), 1.44-0.90 (m, 14H), 0.89-0.68 (m, 11H)。 2.150 合成 N-{(3S)-3-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 )-3-[1-(2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32,35- 十二氧雜三十七烷 -37- 基 )-1H-1,2,3- 三唑 -4- 基 ] 丙醯基 }-L- 纈胺醯基 -N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](2- 磺基乙基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ] 苯基 }-N 5- 胺甲醯基 -L- 鳥胺醯胺 ( 合成子 YQ) 2.150.1 3-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 戊 -4- 炔酸向3-胺基戊-4-炔酸三氟乙酸鹽(1.9 g)於四氫呋喃(30 mL)中之混合物中添加2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-甲酸甲酯(1.946 g)，隨後迅速添加N,N-二異丙基乙胺(8.04 mL)。在60℃下攪拌所得混合物16小時。將混合物濃縮至乾。殘餘物藉由在Gilson系統(C18管柱)上進行逆相HPLC，用20-80%乙腈/含0.1%三氟乙酸之水溶離來純化，得到標題化合物。MS (LC-MS) m/e 194 (M+H)。 1H-NMR (二甲亞碸-d 6, 400 MHz) δ 2.92-3.07 (m, 2H), 3.38 (d, 1H), 5.07-5.12 (m, 1H), 7.08 (s, 2H), 12.27 (bs, 0.6H)。 2.150.2 3-(1-(2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32,35- 十二氧雜三十七烷 -37- 基 )-1H-1,2,3- 三唑 -4- 基 )-3-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 丙酸向於第三丁醇/H 2O之混合物(2:1，15 mL)中之實例2.150.1 (700 mg)中添加37-疊氮基-2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32,35-十二氧雜三十七烷(2123 mg)。將(R)-2-((S)-1,2-二羥基乙基)-4-羥基-5-側氧基-2,5-二氫呋喃-3-酸鈉(71.8 mg)及硫酸銅(II) (28.9 mg)依序添加至混合物中。在室溫下攪拌所得混合物16小時並濃縮。殘餘物藉由在Gilson系統(C18管柱)上進行逆相HPLC，用20-80%乙腈/含0.1%三氟乙酸之水溶離來純化，得到標題化合物。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ 3.24 (s, 3H), 3.15-3.28 (m, 2H), 3.41-3.52 (m, 44H), 3.79 (t, 2H), 4.48 (t, 2H), 5.56-5.60 (m, 1H), 7.05 (s, 2H), 8.03 (s, 1H)。MS (LC-MS) m/e 779 (M+H) +。 2.150.3 N-{(3S)-3-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 )-3-[1-(2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32,35- 十二氧雜三十七烷 -37- 基 )-1H-1,2,3- 三唑 -4- 基 ] 丙醯基 }-L- 纈胺醯基 -N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](2- 磺基乙基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ] 苯基 }-N5- 胺甲醯基 -L- 鳥胺醯胺在0℃下，向六氟磷酸O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N,N,N\N'-四甲基
Figure 111128039-A0304-2
(8.45 mg)及實例2.150.2 (20 mg)於N,N-二甲基甲醯胺(0.3 mL)中之混合物中緩慢添加N,N-二異丙基乙胺(22.19 μL)，且攪拌反應混合物1分鐘。添加實例2.112.2 (20 mg)及N,N-二異丙基乙胺(22 μL)於N,N-二甲基甲醯胺(0.4 mL)中之冷(0℃)混合物。攪拌所得混合物10分鐘且藉由在Gilson系統(C18管柱)上進行逆相HPLC，用20-80%乙腈/含0.1%三氟乙酸之水溶離來純化，得到標題化合物。(3位之絕對構形係任意地指定。) 1H NMR (501 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ 9.95 (s, 1H), 8.07 (d, 3H), 8.04-7.96 (m, 2H), 7.77 (d, 1H), 7.64-7.53 (m, 3H), 7.50 (s, 1H), 7.48-7.39 (m, 2H), 7.34 (q, 2H), 7.30-7.23 (m, 3H), 6.98 (s, 2H), 6.93 (d, 1H), 5.61 (t, 1H), 4.96 (d, 4H), 4.54-4.27 (m, 3H), 4.14 (t, 1H), 3.86 (t, 2H), 3.77 (q, 4H), 3.43 (d, 71H), 3.21 (s, 6H), 3.00 (d, 5H), 2.61 (s, 2H), 2.07 (d, 3H), 1.92 (s, 1H), 1.60 (d, 2H), 1.47-0.86 (m, 10H), 0.85-0.67 (m, 12H)。MS (ESI) m/e 1010.6 (M-2H) 2-。 2.151 合成 N-{(3R)-3-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 )-3-[1-(2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32,35- 十二氧雜三十七烷 -37- 基 )-1H-1,2,3- 三唑 -4- 基 ] 丙醯基 }-L- 纈胺醯基 -N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](2- 磺基乙基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ] 苯基 }-N 5- 胺甲醯基 -L- 鳥胺醯胺 ( 合成子 YR)實例2.151係在製備2.150.3期間分離。(3位之絕對構形係任意地指定。) 1H NMR (501 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ 9.91 (s, 1H), 8.11 (dd, 2H), 8.04-7.99 (m, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.77 (d, 1H), 7.58 (t, 3H), 7.54-7.39 (m, 2H), 7.39-7.31 (m, 2H), 7.31-7.24 (m, 3H), 7.00 (s, 2H), 6.94 (d, 1H), 5.61 (dd, 1H), 5.08-4.79 (m, 4H), 4.40 (dt, 3H), 4.16 (s, 1H), 3.86 (t, 2H), 3.82-3.73 (m, 4H), 3.51-3.30 (m, 46H), 3.21 (s, 7H), 3.05-2.87 (m, 3H), 2.62 (t, 2H), 2.07 (d, 3H), 1.95 (s, 2H), 1.69 (s, 1H), 1.51-0.86 (m, 10H), 0.88-0.70 (m, 13H)。MS (ESI) m/e 1010.6 (M-2H) 2-。 2.152 合成 6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-3-[1-({3-[2-({[(2-{2-[(2S,3R,4R,5S,6S)-6- 羧基 -3,4,5- 三羥基四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 ] 乙基 }-4-{[(2S)-2-{[(2S)-2-{[(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 乙醯基 ] 胺基 }-3- 甲基丁醯基 ] 胺基 } 丙醯基 ] 胺基 } 苯甲基 ) 氧基 ] 羰基 }[(3R,4S,5 R)-3,4,5,6- 四羥基己基 ] 胺基 ) 乙氧基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ] 吡啶 -2- 甲酸 ( 合成子 YS) 2.152.1 3-(1-((3-(2-((((4-((S)-2-((S)-2- 胺基 -3- 甲基丁醯胺基 ) 丙醯胺基 )-2-(2-((2S,3R,4R,5S,6S)-6- 羧基 -3,4,5- 三羥基四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 ) 乙基 ) 苯甲基 ) 氧基 ) 羰基 )((3R,4S,5R)-3,4,5,6- 四羥基己基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ) 吡啶甲酸標題化合物係藉由在實例2.97.8中用實例1.77.2替代實例1.25且用實例2.123.19替代實例2.97.7製備。MS (ESI) m/e 1417 (M+H) +, 1415 (M-H) +。 2.152.2 6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-3-[1-({3-[2-({[(2-{2-[(2S,3R,4R,5S,6S)-6- 羧基 -3,4,5- 三羥基四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 ] 乙基 }-4-{[(2S)-2-{[(2S)-2-{[(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 乙醯基 ] 胺基 }-3- 甲基丁醯基 ] 胺基 } 丙醯基 ] 胺基 } 苯甲基 ) 氧基 ] 羰基 }[(3R,4S,5R)-3,4,5,6- 四羥基己基 ] 胺基 ) 乙氧基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ] 吡啶 -2- 甲酸標題化合物係藉由在實例2.54中用實例2.152.1替代實例2.49.1製備。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 9.85 (m, 1H), 8.18 (t, 2H), 7.96 (d, 1H), 7.73 (d, 1H), 7.55 (d, 1H), 7.46-7.25 (m, 8H), 7.21 (s, 1H), 7.15 (d, 1H), 7.00 (s, 1H), 6.99 (d, 1H), 6.88 (d, 1H), 4.95 (bs, 2H), 4.88 (s, 2H), 4.32 (m, 1H), 4.15 (t, 1H), 4.05 (s, 2H), 3.82 (t, 2H), 3.72 (m, 4H), 3.58-3.29 (m, 6H), 3.19 (m, 4H), 3.11-3.00 (m, 6H), 2.97 (t, 2H), 2.91 (t, 2H), 2.72 (m, 2H), 2.55 (m, 2H), 2.04 (s, 3H), 2.02-1.85 (m, 3H), 1.54 (m, 4H), 1.44 (s, 1H), 1.33 (bs, 1H), 1.22 (m, 6H), 1.04 (m, 6H), 0.86 (m, 2H), 0.77 (m, 12H)。MS (ESI) m/e 1554 (M+H) +, 1552 (M-H) -。 2.153 合成 6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-3-[1-({3-[2-({[(2-{2-[(2S,3R,4R,5S,6S)-6- 羧基 -3,4,5- 三羥基四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 ] 乙基 }-4-{[(2S)-2-({(2S)-2-[({(3S,5S)-3-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 )-2- 側氧基 -5-[(2- 磺基乙氧基 ) 甲基 ] 吡咯啶 -1- 基 } 乙醯基 ) 胺基 ]-3- 甲基丁醯基 } 胺基 ) 丙醯基 ] 胺基 } 苯甲基 ) 氧基 ] 羰基 }[(3R,4S,5R)-3,4,5,6- 四羥基己基 ] 胺基 ) 乙氧基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ] 吡啶 -2- 甲酸 ( 合成子 YY)將實例2.119.15 (11 mg)溶解於N,N-二甲基甲醯胺(0.1 mL)中。添加六氟磷酸(V) 2-(3H-[1,2,3]三唑并[4,5-b]吡啶-3-基)-1,1,3,3-四甲基異
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(11 mg)及N,N-二異丙基乙胺(7.4 mg)。在室溫下攪拌混合物五分鐘。接著將混合物再添加至實例2.152.1 (34 mg)及N,N-二異丙基乙胺(16.3 mg)於N,N-二甲基甲醯胺(0.2 mL)中之混合物中。在室溫下攪拌反應60分鐘並用三氟乙酸(36 mg)淬滅。用水(0.75 mL)及二甲亞碸(0.75 mL)稀釋混合物且在裝備有Luna管柱：C18(2)，100 A，150 × 30 mm之Grace Reveleris上，藉由逆相HPLC，使用10-75%乙腈/水(w/0.1% TFA)經30分鐘純化。彙集產物溶離份，冷凍並凍乾，得到呈三氟乙酸鹽形式之標題化合物。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 9.85 (m, 1H), 8.18 (d, 1H), 8.05 (d, 1H), 8.04 (d, 1H), 7.79 (d, 1H), 7.53-7.39 (m, 8H), 7.36 (q, 2H), 7.29 (s, 1H), 7.22 (d, 1H), 7.07 (s, 1H), 6.96 (d, 1H),5.18 (bs, 2H), 4.96 (s, 2H), 4.65 (t, 1H), 4.37 (t, 1H), 4.19 (t, 1H), 4.16 (s, 1H), 4.01 (d, 2H), 3.89 (t, 2H), 3.78 (m, 4H), 3.73 (m, 2H), 3.49-3.44 (m, 4H), 3.40-3.20 (m, 8H), 3.24 (m, 4H), 3.17-3.07 (m, 4H), 3.02 (t, 2H), 2.95 (t, 2H), 2.76 (m, 4H), 2.62 (m, 1H), 2.37 (m, 1H), 2.09 (s, 3H), 1.99 (m, 2H), 1.86 (q, 1H), 1.62 (m, 4H), 1.38 (bs, 2H), 1.28 (m, 6H), 1.18-1.02 (m, 6H), 0.96 (m, 2H), 0.91-0.79 (m, 12H)。MS (ESI) m/e 1773 (M-H) -。 2.154 合成 (6S)-2,6- 去水 -6-(2-{2-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](2- 磺基乙基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ]-5-({N-[(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 乙醯基 ]-N-(2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32- 十一氧雜三十四烷 -34- 基 )-β- 丙胺醯基 -L- 纈胺醯基 -L- 丙胺醯基 } 胺基 ) 苯基 } 乙基 )-L- 古洛糖酸 ( 合成子 YT) 2.154.1 3-(1-((3-(2-((((4-((S)-2-((S)-2- 胺基 -3-甲基丁醯胺基)丙醯胺基)-2-(2-((2S,3R,4R,5S,6S)-6-羧基-3,4,5-三羥基四氫-2H-哌喃-2-基)乙基)苯甲基)氧基)羰基)(2-磺基乙基)胺基)乙氧基)-5,7-二甲基金剛烷-1-基)甲基)-5-甲基-1H-吡唑-4-基)-6-(8-(苯并[d]噻唑-2-基胺甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)吡啶甲酸 在冰浴中冷卻實例1.2.9 (200 mg)、實例2.123.19 (288 mg)及1-羥基苯并三唑水合物(50.2 mg)於N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)中之混合物，並添加N,N-二異丙基乙胺(143 μL)。在室溫下攪拌反應混合物2.5小時並濃縮。將四氫呋喃(0.5 mL)及甲醇(0.5 mL)添加至殘餘物中。在冰浴中冷卻所得混合物並緩慢添加於水(2.5 mL)中之氫氧化鋰水合物(147 mg)。在室溫下攪拌混合物1.5小時，並在冰浴中冷卻。逐滴添加三氟乙酸(361 μL)，直至pH值達到6。混合物藉由在Gilson系統(C18管柱)上進行逆相HPLC，用35-45%乙腈/含0.1%三氟乙酸之水溶離來純化，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 1375.5 (M-H) -。 2.154.2 (6S)-2,6- 去水 -6-(2-{2-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](2- 磺基乙基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ]-5-({N-[(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 乙醯基 ]-N-(2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32- 十一氧雜三十四烷 -34- 基 )-β- 丙胺醯基 -L- 纈胺醯基 -L- 丙胺醯基 } 胺基 ) 苯基 } 乙基 )-L- 古洛糖酸在0℃下，向1-羥基苯并三唑水合物(5.22 mg)、實例2.154.1 (23.5 mg)及實例2.147.3 (24 mg)於N,N-二甲基甲醯胺(1 mL)中之混合物中緩慢添加N,N-二異丙基乙胺(23.84 μL)。在室溫下攪拌反應混合物15分鐘，並在Gilson系統(C18管柱)上藉由逆相HPLC，用35-50%乙腈/含0.1%三氟乙酸之水溶離來純化，得到標題化合物。 1H NMR (501 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ 12.83 (s, 1H), 9.88 (s, 1H), 8.23-8.04 (m, 2H), 8.02 (dd, 1H), 7.92 (s, 1H), 7.77 (d, 1H), 7.59 (d, 1H), 7.55-7.30 (m, 7H), 7.27 (s, 1H), 7.20 (d, 1H), 7.07 (d, 2H), 6.93 (d, 1H), 5.07-4.88 (m, 4H), 4.47-4.32 (m, 3H), 4.22 (dt, 1H), 3.97-3.73 (m, 4H), 3.62-3.45 (m, 35H), 3.31 (t, 3H), 3.21 (s, 3H), 3.06 (d, 2H), 2.83-2.54 (m, 5H), 2.47-2.29 (m, 1H), 2.13-1.84 (m, 5H), 1.52 (d, 1H), 1.43-0.69 (m, 26H)。MS (ESI) m/e 1043.0 (M-2H) 2-。 2.155 合成 (6S)-2,6- 去水 -6-(2-{2-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](2- 磺基乙基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ]-5-[(N-{2-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 )-3-[1-(2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32,35- 十二氧雜三十七烷 -37- 基 )-1H-1,2,3- 三唑 -4- 基 ] 丙醯基 }-L- 纈胺醯基 -L- 丙胺醯基 ) 胺基 ] 苯基 } 乙基 )-L- 古洛糖酸 ( 合成子 YU) 2.155.1 3-(1-(2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32,35- 十二氧雜三十七烷 -37- 基 )-1H-1,2,3- 三唑 -4- 基 )-2-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 丙酸標題化合物係使用實例2.150.2中之程序，用2-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)戊-4-炔酸替代實例2.150.1製備。 2.155.2 (6S)-2,6- 去水 -6-(2-{2-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](2- 磺基乙基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ]-5-[(N-{2-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 )-3-[1-(2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32,35- 十二氧雜三十七烷 -37- 基 )-1H-1,2,3- 三唑 -4- 基 ] 丙醯基 }-L- 纈胺醯基 -L- 丙胺醯基 ) 胺基 ] 苯基 } 乙基 )-L- 古洛糖酸標題化合物係使用實例2.150.3中之程序，分別用實例2.155.1及實例2.154.1替代實例2.150.2及實例2.112.2製備。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ 12.83 (s, 1H), 9.87 (d, 1H), 8.25-8.06 (m, 2H), 8.00 (d, 1H), 7.75 (d, 1H), 7.71 (s, 1H), 7.57 (d, 1H), 7.54-7.28 (m, 6H), 7.25 (s, 1H), 7.18 (d, 1H), 6.98-6.85 (m, 3H), 5.09-4.89 (m, 4H), 4.76 (ddd, 1H), 4.36 (ddd, 3H), 4.17 (q, 1H), 3.84 (t, 2H), 3.76 (d, 2H), 3.72-3.66 (m, 2H), 3.49-3.44 (m, 37H), 3.20 (s, 5H), 3.01-2.82 (m, 3H), 2.13-1.81 (m, 5H), 1.52 (s, 1H), 1.39-0.50 (m, 23H)。MS (ESI) m/e 1069.7 (M+2H) 2+。 2.156 合成 (6S)-2,6- 去水 -6-(2-{2-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](2- 磺基乙基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ]-5-[(N-{(3S)-3-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 )-3-[1-(2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32,35- 十二氧雜三十七烷 -37- 基 )-1H-1,2,3- 三唑 -4- 基 ] 丙醯基 }-L- 纈胺醯基 -L- 丙胺醯基 ) 胺基 ] 苯基 } 乙基 )-L- 古洛糖酸 ( 合成子 YV)實例2.156係在實例2.155.2製備期間以純非對映異構體形式分離。(3位之絕對構形係任意地指定。) 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ 12.82 (s, 1H), 9.85 (s, 1H), 8.08 (d, 2H), 8.03-7.95 (m, 2H), 7.75 (d, 1H), 7.57 (d, 1H), 7.51-7.29 (m, 6H), 7.24 (s, 1H), 7.18 (d, 1H), 6.95 (s, 2H), 6.91 (d, 1H), 5.59 (dd, 1H), 5.06-4.86 (m, 4H), 4.43 (dt, 2H), 4.32 (t, 1H), 4.11 (t, 1H), 3.84 (t, 2H), 3.75 (t, 3H), 3.55-3.41 (m, 43H), 3.41-3.36 (m, 2H), 3.19 (s, 5H), 3.10 (t, 1H), 3.03-2.86 (m, 3H), 2.59 (s, 3H), 2.13-1.82 (m, 6H), 1.52 (s, 1H), 1.37-0.65 (m, 26H)。MS (ESI) m/e 1067.8 (M-2H) 2-。 2.157 合成 (6S)-2,6- 去水 -6-(2-{2-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](2- 磺基乙基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ]-5-[(N-{(3R)-3-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 )-3-[1-(2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32,35- 十二氧雜三十七烷 -37- 基 )-1H-1,2,3- 三唑 -4- 基 ] 丙醯基 }-L- 纈胺醯基 -L- 丙胺醯基 ) 胺基 ] 苯基 } 乙基 )-L- 古洛糖酸 ( 合成子 YW)實例2.157係在實例2.155.2製備期間以純非對映異構體形式分離。(3位之絕對構形係任意地指定。) 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ 12.81 (s, 1H), 9.81 (s, 1H), 8.10 (d, 2H), 8.00 (d, 1H), 7.94 (s, 1H), 7.75 (d, 1H), 7.57 (d, 1H), 7.51-7.28 (m, 6H), 7.24 (s, 1H), 7.18 (d, 1H), 6.98 (s, 2H), 6.91 (d, 1H), 5.59 (t, 1H), 5.06-4.87 (m, 4H), 4.46-4.26 (m, 2H), 4.12 (d, 1H), 3.84 (t, 2H), 3.75 (d, 3H), 3.46 (d, 27H), 3.40-3.36 (m, 2H), 3.19 (s, 5H), 3.01-2.85 (m, 3H), 2.60 (s, 3H), 1.99 (d, 4H), 1.52 (s, 1H), 1.35-0.65 (m, 23H)。MS (ESI) m/e 1067.8 (M-2H) 2-。 2.158 合成 (6S)-2,6- 去水 -6-(2-{2-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](2- 磺基乙基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ]-5-[(N-{(3S)-3-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 )-3-[1-(3- 磺基丙基 )-1H-1,2,3- 三唑 -4- 基 ] 丙醯基 }-L- 纈胺醯基 -L- 丙胺醯基 ) 胺基 ] 苯基 } 乙基 )-L- 古洛糖酸 ( 合成子 ZB) 2.158.1 3- 疊氮基丙烷 -1- 磺酸鈉向疊氮化鈉(3.25 g)於水(25 mL)中之混合物中添加於丙酮(25 mL)中之1,2-氧硫雜環戊烷2,2-二氧化物(6.1 g)。在室溫下攪拌所得混合物24小時並濃縮至乾。將固體懸浮於乙醚(100 mL)中並在回流下攪拌1小時。將懸浮液冷卻至室溫，且藉由過濾收集固體，用丙酮及乙醚洗滌，並真空乾燥，得到標題化合物。MS (LC-MS) m/e 164 (M-H) -。 2.158.2 3- 疊氮基丙烷 -1- 磺酸異丙酯在室溫下將實例2.158.1 (6.8 g)於濃HCl (90 mL)中之混合物攪拌1小時。將混合物濃縮至乾。將殘餘物溶解於二氯甲烷(350 mL)中，並將三異丙氧基甲烷(42.0 mL)整份添加至混合物中。在50℃下攪拌所得混合物2小時並濃縮至乾。粗殘餘物藉由矽膠層析法，用10/1石油醚/乙酸乙酯溶離來純化，得到標題化合物。 1H-NMR (CDCl 3, 400 MHz): 1.42 (s, 3H), 1.44 (s, 3H), 2.08-2.15 (m, 2H), 3.17 (t, 2H), 3.51 (t, 2H), 4.95-5.01 (m, 1H)。 2.158.3 3-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 )-3-(1-(3- 磺基丙基 )-1H-1,2,3- 三唑 -4- 基 ) 丙酸向實例2.150.1 (450 mg)於第三丁醇/H 2O (2:1，9 mL)中之混合物中添加實例2.158.2 (483 mg)，隨後添加硫酸銅(II)(18.59 mg)及(R)-2-((S)-1,2-二羥基乙基)-4-羥基-5-側氧基-2,5-二氫呋喃-3-酸鈉(46.2 mg)。在室溫下攪拌所得混合物16小時，且將混合物濃縮至乾。殘餘物藉由在Gilson系統(C18管柱)上進行逆相HPLC，用20-80%乙腈/含0.1%三氟乙酸之水溶離來純化，得到標題化合物。 1H-NMR (二甲亞碸-d 6, 400 MHz): 2.06-2.10 (m, 2H), 2.45-2.48 (m, 2H), 3.21-3.23 (m, 2H), 4.40-4.44 (m, 2H), 5.55-5.59 (m, 1H), 7.05 (s, 2H), 8.10 (s, 1H)。MS (LCMS) m/e 359 (M+H) +。 2.158.4 (6S)-2,6- 去水 -6-(2-{2-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](2- 磺基乙基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ]-5-[(N-{(3S)-3-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 )-3-[1-(3- 磺基丙基 )-1H-1,2,3- 三唑 -4- 基 ] 丙醯基 }-L- 纈胺醯基 -L- 丙胺醯基 ) 胺基 ] 苯基 } 乙基 )-L- 古洛糖酸標題化合物係使用實例2.150.3中之程序，分別用實例2.158.3及實例2.154.1替代實例2.150.2及實例2.112.2製備。該化合物係以純非對映異構體形式分離。(3位之絕對構形係任意地指定。) 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ 10.14-9.66 (m, 1H), 8.07 (d, 2H), 8.04-7.96 (m, 2H), 7.75 (d, 1H), 7.57 (d, 1H), 7.52-7.29 (m, 7H), 7.26 (s, 1H), 7.18 (d, 1H), 6.92 (d, 3H), 5.58 (t, 1H), 5.09-4.84 (m, 4H), 4.35 (dt, 3H), 4.15-4.02 (m, 1H), 3.89-3.65 (m, 4H), 3.28 (d, 1H), 3.21 (dd, 2H), 3.14-3.02 (m, 2H), 3.01-2.86 (m, 4H), 2.62 (d, 3H), 2.37 (t, 2H), 2.29 (s, 0H), 2.02 (dt, 5H), 1.52 (s, 1H), 1.40-0.59 (m, 24H)。MS (ESI) m/e 1715.3 (M-H) -。 2.159 合成 (6S)-2,6- 去水 -6-(2-{2-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](2- 磺基乙基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ]-5-[(N-{(3R)-3-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 )-3-[1-(3- 磺基丙基 )-1H-1,2,3- 三唑 -4- 基 ] 丙醯基 }-L- 纈胺醯基 -L- 丙胺醯基 ) 胺基 ] 苯基 } 乙基 )-L- 古洛糖酸 ( 合成子 ZC)實例2.159係在實例2.158製備期間以純非對映異構體形式分離。(3位之絕對構形係任意地指定。) 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ 9.97 (d, 1H), 8.21 (d, 1H), 8.13 (d, 1H), 8.04-7.96 (m, 2H), 7.75 (d, 1H), 7.57 (d, 1H), 7.55-7.37 (m, 4H), 7.36-7.25 (m, 3H), 7.17 (d, 1H), 6.98 (s, 2H), 6.93 (d, 1H), 5.58 (t, 1H), 4.94 (d, 4H), 4.50-4.26 (m, 3H), 4.10 (s, 1H), 3.98-3.73 (m, 3H), 3.51 (d, 1H), 3.42 (s, 3H), 3.34-3.01 (m, 6H), 3.01-2.83 (m, 4H), 2.63 (d, 4H), 2.42 (d, 1H), 2.18-1.80 (m, 8H), 1.53 (s, 1H), 1.39-0.68 (m, 27H)。MS (ESI) m/e 1715.4 (M-H) -。 2.160 合成 (6S)-2,6- 去水 -6-(2-{2-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](2- 磺基乙基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ]-5-({N-[(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 乙醯基 ]-N-[2-(2- 磺基乙氧基 ) 乙基 ]-β- 丙胺醯基 -L- 纈胺醯基 -L- 丙胺醯基 } 胺基 ) 苯基 } 乙基 )-L- 古洛糖酸 ( 合成子 ZJ) 2.160.1 2-(2-(( 第三丁氧基羰基 ) 胺基 ) 乙氧基 ) 乙烷磺酸 4-(( 第三丁基二苯基矽烷基 ) 氧基 )-2,2- 二甲基丁酯在20℃下，向 (2-羥基乙基)胺基甲酸第三丁酯(433 mg)於二甲亞碸(0.9 mL)中之混合物中添加乙烯磺酸4-((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)-2,2-二甲基丁酯(500 mg)及K 2CO 3(210 mg)。在帶蓋瓶中，使混合物升溫至60℃並攪拌16小時。用乙酸乙酯稀釋混合物，用水及鹽水洗滌。有機層經無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。殘餘物藉由矽膠急驟層析法，用石油醚/乙酸乙酯(10:1-2:1)溶離來純化，得到標題化合物。MS (LC-MS) m/e 630.3 (M+Na) +。 2.160.2 2-(2- 胺基乙氧基 ) 乙烷磺酸 4-(( 第三丁基二苯基矽烷基 ) 氧基 )-2,2- 二甲基丁酯在20℃下，向實例2.160.1 (1.5 g)於無水二氯甲烷(100 mL)中之混合物中添加溴化鋅(II) (0.445 g)。在室溫下攪拌混合物16小時。再將溴化鋅(II) (278 mg)添加至以上混合物，並且再攪拌反應16小時。用1 M Na 2CO 3水溶液混合物(5 mL)淬滅反應，且用乙酸乙酯萃取水層三次。合併之有機層經硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。殘餘物藉由矽膠管柱層析法，用二氯甲烷/甲醇(10:1)溶離來純化，得到標題化合物。MS (LC-MS) m/e 508.2 (M+H) +。 2.160.3 3-((2-(2-((4-(( 第三丁基二苯基矽烷基 ) 氧基 )-2,2- 二甲基丁氧基 ) 磺醯基 ) 乙氧基 ) 乙基 ) 胺基 ) 丙酸第三丁酯向實例2.160.2 (0.365 g)於N,N-二甲基甲醯胺(5.5 mL)及水(0.55 mL)中之混合物中添加丙烯酸第三丁酯(0.105 mL)及三乙胺(10.02 μL)。在60℃下攪拌混合物30小時。濃縮混合物。將殘餘物與1 M Na 2CO 3水溶液混合物(5 mL)混合。用乙酸乙酯萃取水層三次。合併之有機層經硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。殘餘物藉由矽膠管柱層析法，用二氯甲烷/乙酸乙酯( 3:1)及二氯甲烷/甲醇(10:1)溶離來純化，得到標題化合物。MS (LC-MS) m/e 636.3 (M+H) +。 2.160.4 3-(N-(2-(2-((4-(( 第三丁基二苯基矽烷基 ) 氧基 )-2,2- 二甲基丁氧基 ) 磺醯基 ) 乙氧基 ) 乙基 )-2-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 乙醯胺基 ) 丙酸第三丁酯在0℃下，向實例2.160.3 (557.5 mg)、2-(2,5-二側氧基-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)乙酸(272 mg)及六氟磷酸O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基
Figure 111128039-A0304-2
(667 mg)於N,N-二甲基甲醯胺(1.75 mL)中之混合物中添加N,N-二異丙基乙胺(0.459 mL)。在0℃下攪拌所得混合物1小時。將反應混合物與飽和NH 4Cl水溶液混合物混合，用乙酸乙酯萃取並用鹽水洗滌。有機層經硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。殘餘物藉由矽膠管柱層析法，用石油醚/乙酸乙酯(2/1)溶離來純化，得到標題化合物。MS (LC-MS) m/e 795.3 (M+Na) +。 2.160.5 3-(2-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 )-N-(2-(2- 磺基乙氧基 ) 乙基 ) 乙醯胺基 ) 丙酸向實例2.160.4 (230 mg)於二氯甲烷(4 mL)中之混合物中添加三氟乙酸(3 mL)。在20℃下攪拌混合物16小時並濃縮。殘餘物藉由在Gilson系統(C18管柱)上進行逆相HPLC，用20-80%乙腈/含0.1%三氟乙酸之水溶離來純化，得到標題化合物。MS (LC-MS) m/e 379.0 (M+Na) +。 2.160.6 2-(2-(2-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 )-N-(3-((2,5- 二側氧基吡咯啶 -1- 基 ) 氧基 )-3- 側氧基丙基 ) 乙醯胺基 ) 乙氧基 ) 乙烷 -1- 磺酸將1-羥基吡咯啶-2,5-二酮(16.43 mg)、實例2.160.5 (30 mg)、1-乙基-3-[3-(二甲基胺基)丙基]-碳化二亞胺鹽酸鹽(45.6 mg)於N,N-二甲基甲醯胺中之混合物攪拌隔夜。反應混合物藉由在Gilson系統(C18管柱)上進行逆相HPLC，用2-30%乙腈/含0.1%三氟乙酸之水溶離來純化，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 475.9(M+H) +。 2.160.7 (6S)-2,6- 去水 -6-(2-{2-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ](2- 磺基乙基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ]-5-({N-[(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 乙醯基 ]-N-[2-(2- 磺基乙氧基 ) 乙基 ]-β- 丙胺醯基 -L- 纈胺醯基 -L- 丙胺醯基 } 胺基 ) 苯基 } 乙基 )-L- 古洛糖酸在0℃下，向1-羥基苯并三唑水合物(4.45 mg)、實例2.160.6 (8.97 mg)及實例2.154.1 (20 mg)於N,N-二甲基甲醯胺(0.8 mL)中之混合物中添加N,N-二異丙基乙胺(20 μL，逐滴)。在室溫下攪拌反應混合物1小時，並在Gilson系統(C18管柱)上藉由逆相HPLC，用30-55%乙腈/含0.1%三氟乙酸之水溶離來純化，得到標題化合物。 1H NMR (500 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ 12.87 (s, 1H), 9.88 (d, 1H), 8.28-8.10 (m, 1H), 8.03 (d, 1H), 7.95 (d, 1H), 7.78 (d, 1H), 7.60 (d, 1H), 7.56-7.31 (m, 7H), 7.28 (s, 1H), 7.21 (d, 1H), 7.06 (d, 2H), 6.95 (d, 1H), 5.06-4.90 (m, 4H), 4.38 (q, 3H), 4.28-4.11 (m, 1H), 3.87 (t, 2H), 3.79 (d, 2H), 3.71-3.49 (m, 5H), 3.21 (d, 2H), 3.12 (q, 2H), 2.97 (dt, 3H), 2.84-2.57 (m, 6H), 2.38 (dd, 1H), 2.13-1.86 (m, 5H), 1.55 (s, 1H), 1.39-0.64 (m, 25H)。MS (ESI) m/e 867.6 (M-2H) 2-。 2.161 合成 6-{8-[(1,3- 苯并噻唑 -2- 基 ) 胺甲醯基 ]-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 }-3-[1-({3-[2-({[(2-{2-[(2S,3R,4R,5S,6S)-6- 羧基 -3,4,5- 三羥基環氧乙烷 -2- 基 ] 乙基 }-4-{[(2S)-2-{[(2S)-2-{[(2S)-2-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 )-3-{4-[(2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32- 十一氧雜三十四烷 -34- 基 ) 氧基 ] 苯基 } 丙醯基 ] 胺基 }-3- 甲基丁醯基 ] 胺基 } 丙醯基 ] 胺基 } 苯基 ) 甲氧基 ] 羰基 }[(3R,4S,5R)-3,4,5,6- 四羥基己基 ] 胺基 ) 乙氧基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ] 吡啶 -2- 甲酸 ( 合成子 ZE)標題化合物係藉由在實例2.153中用實例2.120.5替代實例2.119.15製備。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 12.84 (bs, 2H), 9.92 (m, 1H), 8.26 (d, 1H), 8.13 (d, 1H), 8.03 (d, 1H), 7.79 (d, 1H), 7.61 (d, 1H), 7.52-7.41 (m, 4H), 7.36 (m, 3H), 7.27 (s, 1H), 7.21 (d, 1H), 7.02 (d, 2H), 6.95 (d, 1H), 6.89 (s, 2H), 6.78 (d, 2H), 5.02 (bs, 4H), 4.96 (s, 2H), 4.59 (dd, 1H), 4.38 (m, 2H), 4.21 (t, 1H), 3.99 (t, 2H), 3.88 (t, 2H), 3.79 (m, 2H), 3.69 (t, 2H), 3.64 (m, 1H), 3.57 (m, 4H), 3.53 (m, 4H), 3.50 (s, 40H), 3.42 (m, 2H), 3.38 (m, 1H), 3.30 (m, 2H), 3.23 (s, 6H), 3.20-3.08 (m, 6H), 3.01 (t, 2H), 2.94 (t, 1H), 2.76 (m, 1H), 2.61 (m, 1H), 2.08 (s, 3H), 2.06-1.92 (m, 2H), 1.67-1.52 (m, 3H), 1.38 (m, 1H), 1.32-1.22 (m, 6H), 1.18-1.01 (m, 6H), 0.92 (m, 2H), 0.84 (m, 6H), 0.78 (m, 6H)。MS (ESI) m/e 1078 (M-2H) -。 2.162 合成 4-{[({2-[(3-{[4-(6-{8-[(1,3- 苯并噻唑 -2- 基 ) 胺甲醯基 ]-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 }-2- 羧基吡啶 -3- 基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ] 甲基 }-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 氧基 ] 乙基 }[(3S)-3,4- 二羥基丁基 ] 胺甲醯基 ) 氧基 ] 甲基 }-3-(2-{2-[2-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 乙醯胺基 ] 乙氧基 } 乙氧基 ) 苯基 β-D- 葡萄哌喃糖苷醛酸 ( 合成子 ZS) 2.162.1 3-(1-((3-(2-((((2-(2-(2- 胺基乙氧基 ) 乙氧基 )-4-(((2S,3R,4S,5S,6S) -6- 羧基 -3,4,5- 三羥基四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 ) 氧基 ) 苯甲基 ) 氧基 ) 羰基 )((S)-3,4- 二羥基丁基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ) 吡啶甲酸實例2.162.1係藉由在實例2.49.1中用實例2.62.6替代((S)-3-甲基-1-(((S)-1-((4-((((4-硝基苯氧基)羰基)氧基)甲基)苯基)胺基)-1-側氧基-5-脲基戊-2-基)胺基)-1-側氧基丁-2-基)胺基甲酸(9H-茀-9-基)甲酯並用實例1.85替代實例1.2.9製備。MS (ESI) m/e 1261.4 (M-H) -。 2.162.2 4-{[({2-[(3-{[4-(6-{8-[(1,3- 苯并噻唑 -2- 基 ) 胺甲醯基 ]-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 }-2- 羧基吡啶 -3- 基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ] 甲基 }-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 氧基 ] 乙基 }[(3S)-3,4- 二羥基丁基 ] 胺甲醯基 ) 氧基 ] 甲基 }-3-(2-{2-[2-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 乙醯胺基 ] 乙氧基 } 乙氧基 ) 苯基 β-D- 葡萄哌喃糖苷醛酸實例2.162.2係藉由在實例2.54中用實例2.162.1替代實例2.49.1製備。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ 8.18 (t, 1H), 8.00 (dd, 1H), 7.76 (d, 1H), 7.58 (dd, 1H), 7.50-7.29 (m, 6H), 7.26 (s, 1H), 7.17 (d, 1H), 7.03 (s, 2H), 6.92 (d, 1H), 6.64 (d, 1H), 6.57 (dd, 1H), 4.94 (d, 4H), 4.08 (hept, 2H), 4.00 (s, 2H), 3.92-3.68 (m, 8H), 3.51-3.13 (m, 12H), 2.98 (t, 2H), 2.06 (s, 3H), 1.65 (s, 1H), 1.43-0.66 (m, 18H)。MS (ESI) m/e 1398.5 (M-H) -。 2.163 合成 2,6- 去水 -8-[2-({[{2-[(3-{[4-(6-{8-[(1,3- 苯并噻唑 -2- 基 ) 胺甲醯基 ]-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 }-2- 羧基吡啶 -3- 基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ] 甲基 }-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 氧基 ] 乙基 }(2- 磺基乙基 ) 胺甲醯基 ] 氧基 } 甲基 )-5-{[(79S,82S)-74-[(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 乙醯基 ]-82- 甲基 -77,80,83- 三側氧基 -79-( 丙 -2- 基 )-2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32,35,38,41,44,47,50,53,56,59,62,65,68,71- 二十四氧雜 -74,78,81- 三氮雜八十三烷 -83- 基 ] 胺基 } 苯基 ]-7,8- 二脫氧 -L- 甘油 -L- 古洛糖 - 辛酸 ( 合成子 ZW) 2.163.1 2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32,35,38,41,44,47,50,53,56,59,62,65 ,68,71- 二十四氧雜 -74- 氮雜七十七烷 -77- 酸苯甲酯標題化合物係使用實例2.147.1中之程序，用2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32,35,38,41,44,47,50,53,56,59,62,65,68,71-二十四氧雜七十三烷-73-胺替代2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32-十一氧雜三十四烷-34-胺製備。MS (ESI) m/e 625.9 (M+2H) 2+。 2.163.2        2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32,35,38,41,44,47,50,53,56,59, 62,65,68,71- 二十四氧雜 -74- 氮雜七十七烷 -77- 酸標題化合物係使用實例2.147.2中之程序，用實例2.163.1替代實例2.147.1製備。MS (ESI) m/e 1160.7 (M+H) +。 2.163.3 74-(2-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 乙醯基 )-2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32,35,38,41,44,47,50,53,56,59,62,65,68,71- 二十四氧雜 -74- 氮雜七十七烷 -77- 酸 2,5- 二側氧基吡咯啶 -1- 基酯標題化合物係使用實例2.147.3中之程序，用實例2.163.2替代實例2.147.2製備。MS (ESI) m/e 698.1(M+2H) 2+。 2.163.4 2,6- 去水 -8-[2-({[{2-[(3-{[4-(6-{8-[(1,3- 苯并噻唑 -2- 基 ) 胺甲醯基 ]-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 }-2- 羧基吡啶 -3- 基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ] 甲基 }-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 氧基 ] 乙基 }(2- 磺基乙基 ) 胺甲醯基 ] 氧基 } 甲基 )-5-{[(79S,82S)-74-[(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 乙醯基 ]-82- 甲基 -77,80,83- 三側氧基 -79-( 丙 -2- 基 )-2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32,35,38,41,44,47,50,53,56,59,62,65,68,71- 二十四氧雜 -74,78,81- 三氮雜八十三烷 -83- 基 ] 胺基 } 苯基 ]-7,8- 二脫氧 -L- 甘油 -L- 古洛糖 - 辛酸標題化合物係使用實例2.147.4中之程序，分別用實例2.163.3及實例2.154.1替代實例2.147.3及實例2.141.4製備。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ 9.86 (s, 1H), 8.23-7.87 (m, 3H), 7.76 (d, 1H), 7.58 (dd, 1H), 7.53-7.25 (m, 7H), 7.19 (d, 1H), 7.05 (d, 2H), 6.92 (d, 1H), 5.07-4.85 (m, 4H), 4.49-4.30 (m, 3H), 4.20 (dt, 1H), 3.52 (d, 8H), 3.46-3.26 (m, 7H), 3.20 (s, 4H), 3.15-2.82 (m, 4H), 2.61 (s, 3H), 2.38 (dq, 1H), 2.11-1.82 (m, 5H), 1.53 (s, 1H), 1.39-0.66 (m, 24H)。MS (ESI) m/e 1326.9 (M-2H) 2-。 2.164 合成 6-{8-[(1,3- 苯并噻唑 -2- 基 ) 胺甲醯基 ]-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 }-3-{1-[(3-{2-[{[(4-{[(2S,5S)-2-[3-( 胺甲醯基胺基 ) 丙基 ]-10-[(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 乙醯基 ]-4,7- 二側氧基 -5-( 丙 -2- 基 )-15- 磺基 13- 氧雜 -3,6,10- 三氮雜十五烷 -1- 醯基 ] 胺基 } 苯基 ) 甲氧基 ] 羰基 }(2- 磺基乙基 ) 胺基 ] 乙氧基 }-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 } 吡啶 -2- 甲酸 ( 合成子 ZX)在室溫下，將1-羥基吡咯啶-2,5-二酮(2.74 mg)、1-乙基-3-[3-(二甲基胺基)丙基]-碳化二亞胺鹽酸鹽(4.26 mg)及實例2.160.5 (9.01 mg)於N,N-二甲基甲醯胺(0.3 mL)中之混合物攪拌隔夜。在冰浴中冷卻混合物。添加1-羥基苯并三唑水合物(3.65 mg)以及實例2.112.2 (20 mg)與N,N-二異丙基乙胺(22.19 μL)之混合物。在0℃下攪拌所得混合物10分鐘且藉由逆相HPLC，用30%-55%乙腈/ 0.1%三氟乙酸水溶離來純化，得到標題化合物。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ 9.95 (d, 1H), 8.18-7.89 (m, 3H), 7.76 (d, 1H), 7.57 (d, 3H), 7.52-7.21 (m, 8H), 7.04 (d, 2H), 6.92 (d, 1H), 4.94 (d, 4H), 4.37 (d, 2H), 4.19 (d, 1H), 3.85 (t, 2H), 3.77 (d, 2H), 3.22 (d, 2H), 2.96 (dt, 4H), 2.73 (dt, 2H), 2.66-2.55 (m, 2H), 2.36 (s, 1H), 2.06 (s, 3H), 1.91 (s, 1H), 1.61 (d, 3H), 1.47-0.86 (m, 11H), 0.80 (ddd, 12H)。MS (ESI) m/e 1617.5 (M-H) -。 2.165 本段有意留白。 2.166 合成 6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-3-(1-((3-(2-((((2-(2-((2S,3R,4R,5S,6S)-6- 羧基 -3,4,5- 三羥基四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 ) 乙基 )-4-((S)-2-((S)-2-(2-((3S,5S)-3-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 )-2- 側氧基 -5-((2- 磺基乙氧基 ) 甲基 ) 吡咯啶 -1- 基 ) 乙醯胺基 )-3- 甲基丁醯胺基 ) 丙醯胺基 ) 苯甲基 ) 氧基 ) 羰基 )((S)-3,4- 二羥基丁基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶甲酸 ( 合成子 AAA)標題化合物係藉由在實例2.119.17中用實例2.167.1替代實例2.119.16製備。 1H NMR (500 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 9.86 (br d, 1H), 8.17 (br d, 1H), 8.04 (m, 2H), 7.78 (d, 1H), 7.61 (d, 1H), 7.51 (br d, 1H), 7.49-7.39 (m, 4H), 7.36 (m, 2H), 7.29 (s, 1H), 7.21 (d, 1H), 7.07 (s, 2H), 6.95 (d, 1H), 5.00 (s, 2H), 4.96 (s, 2H), 4.64 (t, 1H), 4.36 (m, 1H), 4.19 (m, 1H), 4.16 (d, 1H), 4.01 (d, 1H), 3.88 (br t, 2H), 3.82 (br m, 3H), 3.75 (br m, 1H), 3.64 (t, 2H), 3.54 (d, 2H), 3.47 (m, 4H), 3.43 (br m, 4H), 3.23 (br m, 5H), 3.13 (t, 1H), 3.10 (br m, 1H), 3.01 (br m, 2H), 2.93 (t, 1H), 2.83-2.68 (m, 3H), 2.37 (m, 1H), 2.08 (s, 3H), 1.99 (br m, 2H), 1.85 (m, 1H), 1.55 (br m, 1H), 1.37 (br m, 1H), 1.28 (br m, 6H), 1.10 (br m, 7H), 0.93 (br m, 1H), 0.88-0.69 (m, 12H)。MS (ESI) m/e 1713.6 (M-H) -。 替代性合成 6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-3-(1-((3-(2-((((2-(2-((2S,3R,4R,5S,6S)-6- 羧基 -3,4,5- 三羥基四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 ) 乙基 )-4-((S)-2-((S)-2-(2-((3S,5S)-3-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 )-2- 側氧基 -5-((2- 磺基乙氧基 ) 甲基 ) 吡咯啶 -1- 基 ) 乙醯胺基 )-3- 甲基丁醯胺基 ) 丙醯胺基 ) 苯甲基 ) 氧基 ) 羰基 )((S)-3,4- 二羥基丁基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶甲酸 ( 合成子 AAA) 2.166.1 3-(1-((3-(2-((((4-((S)-2-((S)-2- 胺基 -3- 甲基丁醯胺基 ) 丙醯胺基 )-2-(2-((2S,3R,4R,5S,6S)-6- 羧基 -3,4,5- 三羥基四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 ) 乙基 ) 苯甲基 ) 氧基 ) 羰基 )((S)-3,4- 二羥基丁基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ) 吡啶甲酸向實例1.85 (0.065 g)、1-羥基苯并三唑(0.013 g)及N,N-二異丙基乙胺(0.06 mL)於N,N-二甲基甲醯胺(0.5 mL)中之經攪拌溶液中添加實例2.123.19 (0.085 g)，且在室溫下攪拌混合物2小時。減壓濃縮反應物。將殘餘物溶解於甲醇(0.5 mL)及四氫呋喃(0.5 mL)之溶劑混合物中，且添加氫氧化鋰單水合物(30 mg)。在環境溫度下攪拌反應1小時，之後減壓濃縮反應物。將殘餘物溶解於含0.1 mL三氟乙酸之甲醇/水(1:1，1 mL)中。樣品藉由逆相HPLC (Phenomenex® Luna® C18 250 × 50 mm管柱，100 mL/min)，用20-100%乙腈/含0.01%三氟乙酸之水經40分鐘溶離來純化。將含產物之溶離份凍乾，得到標題化合物。MS (ESI) m/z 1357.5 (M+H) +。 2.166.2 6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-3-(1-((3-(2-((((2-(2-((2S,3R,4R,5S,6S)-6- 羧基 -3,4,5- 三羥基四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 ) 乙基 )-4-((S)-2-((S)-2-(2-((3S,5S)-3-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 )-2- 側氧基 -5-((2- 磺基乙氧基 ) 甲基 ) 吡咯啶 -1- 基 ) 乙醯胺基 )-3- 甲基丁醯胺基 ) 丙醯胺基 ) 苯甲基 ) 氧基 ) 羰基 )((S)-3,4- 二羥基丁基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 吡啶甲酸 ( 合成子 AAA)向實例2.119.15 (16 mg)於N,N-二甲基甲醯胺(200 μL)中之溶液中添加六氟磷酸1-[雙(二甲基胺基)亞甲基]-1H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡錠3-氧化物(16 mg，HATU)及N,N-二異丙基乙胺(17 μL)。攪拌反應5分鐘，並添加實例2.166.1 (48 mg)及N,N-二異丙基乙胺(20 μL)於N,N-二甲基甲醯胺(200 μL)中之溶液。攪拌反應一小時並用N,N-二甲基甲醯胺/水之混合物(1/1，1.5 mL)稀釋。樣品藉由逆相HPLC (Phenomenex® Luna® C18 250 × 50 mm管柱, 100 mL/min)，用20-70%乙腈/含0.01%三氟乙酸之水經40分鐘溶離來純化。將含產物之溶離份凍乾，得到標題化合物。 1H NMR (500 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 9.86 (br d, 1H), 8.17 (br d, 1H), 8.04 (m, 2H), 7.78 (d, 1H), 7.61 (d, 1H), 7.51 (br d, 1H), 7.49-7.39 (m, 4H), 7.36 (m, 2H), 7.29 (s, 1H), 7.21 (d, 1H), 7.07 (s, 2H), 6.95 (d, 1H), 5.00 (s, 2H), 4.96 (s, 2H), 4.64 (t, 1H), 4.36 (m, 1H), 4.19 (m, 1H), 4.16 (d, 1H), 4.01 (d, 1H), 3.88 (br t, 2H), 3.82 (br m, 3H), 3.75 (br m, 1H), 3.64 (t, 2H), 3.54 (d, 2H), 3.47 (m, 4H), 3.43 (br m, 4H), 3.23 (br m, 5H), 3.13 (t, 1H), 3.10 (br m, 1H), 3.01 (br m, 2H), 2.93 (t, 1H), 2.83-2.68 (m, 3H), 2.37 (m, 1H), 2.08 (s, 3H), 1.99 (br m, 2H), 1.85 (m, 1H), 1.55 (br m, 1H), 1.37 (br m, 1H), 1.28 (br m, 6H), 1.10 (br m, 7H), 0.93 (br m, 1H), 0.88-0.69 (m, 12H)。MS (ESI) m/z 1713.6 (M-H) -。 2.167 合成 2,6- 去水 -8-(2-{[({2-[(3-{[4-(6-{8-[(1,3- 苯并噻唑 -2- 基 ) 胺甲醯基 ]-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 }-2- 羧基吡啶 -3- 基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ] 甲基 }-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 氧基 ] 乙基 }[(3S)-3,4- 二羥基丁基 ] 胺甲醯基 ) 氧基 ] 甲基 }-5-{[(2S)-2-({(2S)-2-[2-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 乙醯胺基 ]-3- 甲基丁醯基 } 胺基 ) 丙醯基 ] 胺基 } 苯基 )-7,8- 二脫氧 -L- 甘油 -L- 古洛糖 - 辛酸 ( 合成子 AAD) 2.167.1 3-(1-((3-(2-((((4-((S)-2-((S)-2- 胺基 -3- 甲基丁醯胺基 ) 丙醯胺基 )-2-(2-((2S,3R,4R,5S,6S)-6- 羧基 -3,4,5- 三羥基四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 ) 乙基 ) 苯甲基 ) 氧基 ) 羰基 )((S)-3,4- 二羥基丁基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ) 吡啶甲酸實例2.167.1係藉由在實例2.49.1中用實例2.123.19替代 ((S)-3-甲基-1-(((S)-1-((4-((((4-硝基苯氧基)羰基)氧基)甲基)苯基)胺基)-1-側氧基-5-脲基戊-2-基)胺基)-1-側氧基丁-2-基)胺基甲酸(9H-茀-9-基)甲酯且用實例1.85替代實例1.2.9製備。MS (ESI) m/e 1355.5 (M-H) -。 2.167.2 2,6- 去水 -8-(2-{[({2-[(3-{[4-(6-{8-[(1,3- 苯并噻唑 -2- 基 ) 胺甲醯基 ]-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 }-2- 羧基吡啶 -3- 基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ] 甲基 }-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 氧基 ] 乙基 }[(3S)-3,4- 二羥基丁基 ] 胺甲醯基 ) 氧基 ] 甲基 }-5-{[(2S)-2-({(2S)-2-[2-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 乙醯胺基 ]-3- 甲基丁醯基 } 胺基 ) 丙醯基 ] 胺基 } 苯基 )-7,8- 二脫氧 -L- 甘油 -L- 古洛糖 - 辛酸實例2.167.2係藉由在實例2.54中用實例2.167.1替代實例2.49.1製備。 1H NMR (501 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ 9.90 (d, 1H), 8.25 (m, 2H), 8.01 (d, 1H), 7.77 (d, 1H), 7.59 (d, 1H), 7.51-7.40 (m, 4H), 7.40-7.31 (m, 3H), 7.26 (s, 1H), 7.20 (d, 1H), 7.05 (s, 2H), 6.93 (d, 1H), 4.96 (d, 4H), 4.36 (t, 1H), 4.22-4.06 (m, 3H), 3.85 (t, 2H), 3.26-3.17 (m, 4H), 3.14-2.88 (m, 5H), 2.78-2.55 (m, 2H), 2.10-1.88 (m, 5H), 1.69-1.49 (m, 2H), 1.39-0.73 (m, 28H)。MS (ESI) m/e 1492.5 (M-H) -。 2.168 合成 2-{[({2-[(3-{[4-(6-{8-[(1,3- 苯并噻唑 -2- 基 ) 胺甲醯基 ]-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 }-2- 羧基吡啶 -3- 基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ] 甲基 }-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 氧基 ] 乙基 }[(3S)-3,4- 二羥基丁基 ] 胺甲醯基 ) 氧基 ] 甲基 }-5-{4-[2-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 乙醯胺基 ] 丁基 } 苯基 β-D- 葡萄哌喃糖苷醛酸 ( 合成子AAE) 2.168.1 3-(1-((3-(2-((((4-(4- 胺基丁基 )-2-(((2S,3R,4S,5S,6S)-6- 羧基 -3,4,5- 三羥基四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 ) 氧基 ) 苯甲基 ) 氧基 ) 羰基 )((S)-3,4- 二羥基丁基 ) 胺基 ) 乙氧基 )-5,7- 二甲基金剛烷 -1- 基 ) 甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-6-(8-( 苯并 [d] 噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ) 吡啶甲酸實例2.168.1係藉由在實例2.49.1中用實例2.124.5替代((S)-3-甲基-1-(((S)-1-((4-((((4-硝基苯氧基)羰基)氧基)甲基)苯基)胺基)-1-側氧基-5-脲基戊-2-基)胺基)-1-側氧基丁-2-基)胺基甲酸(9H-茀-9-基)甲酯且用實例1.85替代實例1.2.9製備。MS (ESI) m/e 1229.5 (M-H) -。 2.168.2 2-{[({2-[(3-{[4-(6-{8-[(1,3- 苯并噻唑 -2- 基 ) 胺甲醯基 ]-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 }-2- 羧基吡啶 -3- 基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ] 甲基 }-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 氧基 ] 乙基 }[(3S)-3,4- 二羥基丁基 ] 胺甲醯基 ) 氧基 ] 甲基 }-5-{4-[2-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 乙醯胺基 ] 丁基 } 苯基 β-D- 葡萄哌喃糖苷醛酸實例2.168.2係藉由在實例2.54中用實例2.168.1替代實例2.49.1製備。 1H NMR (501 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ 8.07 (s, 1H), 8.01 (dt, 1H), 7.77 (dt, 1H), 7.63-7.57 (m, 1H), 7.51-7.39 (m, 3H), 7.38-7.31 (m, 2H), 7.26 (s, 1H), 7.16 (d, 1H), 7.05 (s, 2H), 6.93 (d, 2H), 6.84-6.80 (m, 1H), 5.14-4.98 (m, 3H), 4.94 (s, 2H), 3.79 (d, 2H), 3.48-3.19 (m, 10H), 3.08-2.96 (m, 4H), 2.52 (s, 4H), 2.07 (s, 2H), 1.77-0.72 (m, 14H)。MS (ESI) m/e 1366.5 (M-H) -。 2.169 合成 6-{8-[(1,3- 苯并噻唑 -2- 基 ) 胺甲醯基 ]-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 }-3-{1-[(3-{2-[{[(4-{[(2S)-5-( 胺甲醯基胺基 )-2-{[(2S)-2-{[6-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 己醯基 ] 胺基 }-3- 甲基丁醯基 ] 胺基 } 戊醯基 ] 胺基 } 苯基 ) 甲氧基 ] 羰基 }(2- 磺基乙基 ) 胺基 ] 乙醯胺基 }-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 } 吡啶 -2- 甲酸 ( 合成子 ABG)標題化合物係如實例2.54中所描述，用實例1.89.12替代實例2.49.1製備。 1H NMR (501 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 9.95 (d, 1H), 8.10-7.96 (m, 1H), 7.75 (t, 2H), 7.57 (dd, 3H), 7.51-7.18 (m, 8H), 6.95 (d, 3H), 6.92 (s, 0H), 5.03-4.86 (m, 4H), 4.36 (d, 1H), 3.85 (t, 2H), 3.78-3.67 (m, 4H), 3.42 (s, 2H), 3.33 (t, 2H), 3.04-2.86 (m, 4H), 2.63 (d, 2H), 2.13 (dd, 1H), 2.07 (s, 3H), 1.98-1.87 (m, 0H), 1.71-1.23 (m, 10H), 1.24-0.85 (m, 6H), 0.78 (t, 11H)。MS (ESI) m/e 1463.5 (M-H) -。 2.170 合成 N-[6-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 己醯基 ]-L- 纈胺醯基 -N-{4-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 硫基 ) 乙基 ](2- 磺基乙基 ) 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ] 苯基 }-N5- 胺甲醯基 -L- 鳥胺醯胺 ( 合成子 ABL)標題化合物係藉由在實例2.1中用實例1.90.11替代實例1.2.9製備。 1H NMR (500 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 10.0 (s, 1H), 8.08 (br s, 1H), 8.03 (d, 1H), 7.81 (br s, 1H) 7.78 (d, 1H), 7.60 (m, 3H) 7.52 (t, 1H), 7.47 (t, 1H), 7.43 (d, 1H), 7.37 (d, 1H), 7.34 (d, 1H) 7.32 (s, 1H), 7.28 (d, 2H), 6.99 (s, 1H), 6.96 (d, 2H), 5.00 (s, 2H), 4.96 (s, 2H), 4.39 (m, 1H), 4.18 (m, 2H), 3.88 (m, 2H), 3.82 (s, 1H), 3.77 (s, 1H), 3.46 (br m, 2H), 3.58 (t, 2H), 3.29 (v br m, 2H), 3.01 (br m, 3H), 2.95 (br m, 1H), 2.47 (m, 2H), 2.61 (br m, 2H) 2.16 (m, 1H), 2.10 (m, 4H), 1.96 (br m, 1H), 1.69 (v br m, 1H), 1.59 (v br m, 1H), 1.53-1.40 (m, 7H), 1.39-1.22 (m, 5H), 1.17 (m, 3H), 1.13-0.88 (m, 6H), 0.87-0.77 (m, 9H), 0.75 (s, 3H)。MS (ESI) m/e 1466.5 (M-H) -。 2.171 合成 N-[6-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 己醯基 ]-L- 纈胺醯基 -N-[4-({[(3-{3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 丙基 )(2- 磺基乙基 ) 胺甲醯基 ] 氧基 } 甲基 ) 苯基 ]-N5- 胺甲醯基 -L- 鳥胺醯胺 ( 合成子 ABN)標題化合物係如實例2.1中所描述，用實例1.91.13替代實例1.2.9製備。 1H NMR (501 MHz, DMSO-d 6) δ ppm 12.83 (s, 1H), 9.96 (s, 1H), 8.03 (t, 2H), 7.77 (d, 2H), 7.64-7.52 (m, 3H), 7.45 (ddd, 3H), 7.34 (td, 2H), 7.29-7.21 (m, 3H), 7.03-6.91 (m, 3H), 4.95 (d, 4H), 4.37 (q, 1H), 4.17 (s, 1H), 3.86 (t, 2H), 3.45-3.29 (m, 4H), 3.10 (t, 2H), 2.95 (dt, 4H), 2.61 (q, 2H), 2.15 (td, 2H), 2.07 (s, 3H), 2.00-1.89 (m, 1H), 1.74-1.24 (m, 10H), 1.25-0.87 (m, 13H), 0.88-0.70 (m, 12H)。MS (ESI) m/e 1450.2 (M+H) +。 2.172 合成 2-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ][(3S)-3,4- 二羥基丁基 ] 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ]-5-{4-[({(3S,5S)-3-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 )-2- 側氧基 -5-[(2- 磺基乙氧基 ) 甲基 ] 吡咯啶 -1- 基 } 乙醯基 ) 胺基 ] 丁基 } 苯基 β-D- 葡萄哌喃糖苷醛酸 ( 合成子 AAF)標題化合物係如實例2.119.17中所描述，用實例2.168.1替代實例2.119.16製備。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 8.03 (d, 1H), 7.84 (br t, 1H), 7.78 (d, 1H), 7.61 (d, 1H), 7.50 (br d, 1H), 7.45 (dd, 1H), 7.43 (d, 1H), 7.36 (m, 2H), 7.29 (s, 1H), 7.17 (br m, 1H), 7.06 (s, 2H), 6.95 (m, 2H), 6.85 (d, 1H), 5.08 (s, 2H), 5.02 (d, 1H), 4.96 (s, 2H), 4.70 (t, 1H), 4.06 (d, 2H), 3.88 (m, 4H), 3.81 (m, 2H), 3.73 (br m, 1H), 3.62 (m, 2H), 3.47 (br m, 4H), 3.40 (m, 4H), 3.35 (m, 2H), 3.29 (m, 4H), 3.07 (m, 2H), 3.00 (t, 2H), 2.73 (m, 2H), 2.54 (m, 2H), 2.36 (br m, 1H), 2.09 (s, 3H), 1.83 (m, 1H), 1.71 (br m, 1H), 1.55 (br m, 2H), 1.40 (br m, 5H), 1.24 (br m, 4H), 1.10 (br m, 5H), 0.94 (br m, 1H), 0.83, 0.81 (均為s, 總計6H)。MS (ESI) m/e 1587.5 (M-H) -。 2.173 合成 2,6- 去水 -8-[2-({[{2-[(3-{[4-(6-{8-[(1,3- 苯并噻唑 -2- 基 ) 胺甲醯基 ]-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 }-2- 羧基吡啶 -3- 基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ] 甲基 }-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 氧基 ] 乙基 }(2- 磺基乙基 ) 胺甲醯基 ] 氧基 } 甲基 )-5-{[N-({(3R,5S)-3-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 )-2- 側氧基 -5-[(2- 磺基乙氧基 ) 甲基 ] 吡咯啶 -1- 基 } 乙醯基 )-L- 纈胺醯基 -L- 丙胺醯基 ] 胺基 } 苯基 ]-7,8- 二脫氧 -L- 甘油 -L- 古洛糖 - 辛酸 ( 合成子 ABO) 2.173.1 (3R,6R,7aS)-6- 疊氮基 -3- 苯基四氫吡咯并 [1,2-c] 噁唑 -5(3H)- 酮標題化合物係藉由在實例2.119.4中用實例2.119.3替代實例2.119.2製備。MS (DCI) m/e 262.0 (M+NH 4) +。 2.173.2 (3R,6R,7aS)-6- 胺基 -3- 苯基四氫吡咯并 [1,2-c] 噁唑 -5(3H)- 酮標題化合物係藉由在實例2.119.5中用實例2.173.1替代實例2.119.4製備。MS (DCI) m/e 219.0 (M+H) +。 2173.3  (3R,6R,7aS)-6-( 二苯甲基胺基 )-3- 苯基四氫吡咯并 [1,2-c] 噁唑 -5(3H)- 酮標題化合物係藉由在實例2.119.6中用實例2.173.2替代實例2.119.5製備。MS (DCI) m/e 399.1 (M+H) +。 2.173.4 (3R,5S)-3-( 二苯甲基胺基 )-5-( 羥基甲基 ) 吡咯啶 -2- 酮標題化合物係藉由在實例2.119.7中用實例2.173.3替代實例2.119.6製備，不過將反應物加熱至65℃，保持1天而非6天。MS (DCI) m/e 311.1 (M+H) +。 2.173.5 (3R,5S)-5-((( 第三丁基二甲基矽烷基 ) 氧基 ) 甲基 )-3-( 二苯甲基胺基 ) 吡咯啶 -2- 酮標題化合物係藉由在實例2.119.8中用實例2.173.4替代實例2.119.7製備。標題化合物不經純化即用於下一步驟。MS (DCI) m/e 425.2 (M+H) +。 2.173.6 2-((3R,5S)-5-((( 第三丁基二甲基矽烷基 ) 氧基 ) 甲基 )-3-( 二苯甲基胺基 )-2- 側氧基吡咯啶 -1- 基 ) 乙酸第三丁酯標題化合物係藉由在實例2.119.9中用實例2.173.5替代實例2.119.8製備。標題化合物不經純化即用於下一步驟。MS (DCI) m/e 539.3 (M+H) +。 2.173.7 2-((3R,5S)-3-( 二苯甲基胺基 )-5-( 羥基甲基 )-2- 側氧基吡咯啶 -1- 基 ) 乙酸第三丁酯標題化合物係藉由在實例2.119.10中用實例2.173.6替代實例2.119.9製備。MS (DCI) m/e 425.2 (M+H) +。 2.173.8 2-((3R,5S)-5-((2-((4-(( 第三丁基二苯基矽烷基 ) 氧基 )-2,2- 二甲基丁氧基 ) 磺醯基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-3-( 二苯甲基胺基 )-2- 側氧基吡咯啶 -1- 基 ) 乙酸第三丁酯標題化合物係藉由在實例2.119.11中用實例2.173.7替代實例2.119.10製備。 2.173.9 (S)-2-(2-((2-((4-(( 第三丁基二苯基矽烷基 ) 氧基 )-2,2- 二甲基丁氧基 ) 磺醯基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-5- 側氧基吡咯啶 -1- 基 ) 乙酸第三丁酯標題化合物係藉由在實例2.119.12中用實例2.173.8替代實例2.119.11製備。MS (ESI) m/e 691.1 (M+H) +。 2.173.10   4-(((3R,5S)-1-(2-( 第三丁氧基 )-2- 側氧基乙基 )-5-((2-((4-(( 第三丁基二苯基矽烷基 ) 氧基 )-2,2- 二甲基丁氧基 ) 磺醯基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-2- 側氧基吡咯啶 -3- 基 ) 胺基 )-4- 側氧基丁 -2- 烯酸標題化合物係藉由在實例2.119.13中用實例2.173.9替代實例2.119.12製備。MS (ESI) m/e 789.0 (M+H) +。 2.173.11 2-((3R,5S)-5-((2-((4-(( 第三丁基二苯基矽烷基 ) 氧基 )-2,2- 二甲基丁氧基 ) 磺醯基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-3-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 )-2- 側氧基吡咯啶 -1- 基 ) 乙酸第三丁酯標題化合物係藉由在實例2.119.14中用實例2173.10替代實例2.119.13製備。 2.173.12   2-((3R,5S)-3-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 )-2- 側氧基 -5-((2- 磺基乙氧基 ) 甲基 ) 吡咯啶 -1- 基 ) 乙酸標題化合物係藉由在實例2.119.15中用實例2.173.11替代實例2.119.14製備。MS (ESI) m/e 377.0 (M+H) +。 2.173.13   2,6- 去水 -8-[2-({[{2-[(3-{[4-(6-{8-[(1,3- 苯并噻唑 -2- 基 ) 胺甲醯基 ]-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 }-2- 羧基吡啶 -3- 基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ] 甲基 }-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 氧基 ] 乙基 }(2- 磺基乙基 ) 胺甲醯基 ] 氧基 } 甲基 )-5-{[N-({(3R,5S)-3-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 )-2- 側氧基 -5-[(2- 磺基乙氧基 ) 甲基 ] 吡咯啶 -1- 基 } 乙醯基 )-L- 纈胺醯基 -L- 丙胺醯基 ] 胺基 } 苯基 ]-7,8- 二脫氧 -L- 甘油 -L- 古洛糖 - 辛酸標題化合物係藉由在實例2.119.17中用實例2.123.20替代實例2.119.16並用實例2.173.12替代實例2.119.15製備。 1H NMR (400 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 9.94 (d, 1H), 8.28 (br d, 1H), 8.01 (d, 2H), 7.77 (d, 1H), 7.59 (d, 1H), 7.53 (d, 1H), 7.43 (m, 4H), 7.34 (m, 3H), 7.19 (d, 1H), 7.06 (s, 2H), 6.96 (d, 1H), 4.99 (m, 2H), 4.95 (s, 2H), 4.78 (t, 1H), 4.36 (t, 1H), 4.19 (br m, 1H),4.16(d, 1H), 3.98 (d, 1H), 3.87 (br t, 2H),3.81 (brd, 2H), 3.73 (brm, 1H), 3.63 (t, 2H), 3.53 (m, 2H), 3.44 (m, 4H), 3.31 (t, 2H), 3.21 (br m, 2H), 3.17 (m, 2H), 3.00 (m, 2H), 2.92 (br m, 1H), 2.75 (m, 3H), 2.65 (br m, 3H), 2.35 (br m, 1H), 2.16 (m, 1H), 2.07 (s, 3H), 1.98 (br m, 2H), 1.55 (br m, 1H), 1.34 (br m, 1H), 1.26 (br m, 6H), 1.09 (br m, 7H), 0.93 (br m, 1H), 0.87, 0.83, 0.79 (皆為d, 總計12H)。MS (ESI) m/e 1733.3 (M-H) -。 2.174 合成 2,6- 去水 -8-{2-({[{2-[(3-{[4-(6-{8-[(1,3- 苯并噻唑 -2- 基 ) 胺甲醯基 ]-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 }-2- 羧基吡啶 -3- 基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ] 甲基 }-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 氧基 ] 乙基 }(2- 磺基乙基 ) 胺甲醯基 ] 氧基 } 甲基 )-5-[(N-{[(3R,5S)-3-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 )-2- 側氧基 -5-(41- 側氧基 -2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32,35,38- 十三氧雜 -42- 氮雜四十三烷 -43- 基 ) 吡咯啶 -1- 基 ] 乙醯基 }-L- 纈胺醯基 -L- 丙胺醯基 ) 胺基 ] 苯基 }-7,8- 二脫氧 -L- 甘油 -L- 古洛糖 - 辛酸 ( 合成子 ABM) 2.174.1 [(3R,5S)-5-{[ 雙 ( 第三丁氧基羰基 ) 胺基 ] 甲基 }-3-( 二苯甲基胺基 )-2- 側氧基吡咯啶 -1- 基 ] 乙酸第三丁酯向實例2.173.7 (1.6 g)於二氯甲烷(15 mL)中之冷(0℃)溶液中逐滴添加三乙胺(0.70 mL)及甲烷磺醯氯(0.39 mL)。移除冰浴，並在室溫下攪拌反應兩小時。藉由添加飽和碳酸氫鈉水溶液淬滅反應。分離各層，且用鹽水洗滌有機層。合併之水層用二氯甲烷反萃取。合併之有機層用無水硫酸鈉乾燥，過濾並減壓濃縮，得到中間物甲磺酸酯(1.9 g)。將殘餘物溶解於乙腈(15 mL)中，並添加亞胺基二甲酸二第三丁酯(1.0 g)及碳酸銫(2.4 g)。在氮氣下，將反應物加熱至回流，保持一天。冷卻反應物並藉由添加水及乙醚淬滅。分離各層，且用鹽水洗滌有機層。用乙醚反萃取合併之水層。合併之有機層用無水硫酸鈉乾燥，過濾並減壓濃縮。殘餘物藉由矽膠層析法，用20%乙酸乙酯/庚烷溶離來純化，得到標題化合物。MS (DCI) m/e 624.3 (M+H) +。 2.174.2 [(3R,5S)-3- 胺基 -5-{[ 雙 ( 第三丁氧基羰基 ) 胺基 ] 甲基 }-2- 側氧基吡咯啶 -1- 基 ] 乙酸第三丁酯向實例2.174.1 (1.0 g)於乙酸乙酯(6 mL)及甲醇(18 mL)中之溶液中添加氫氧化鈀/ (100 mg，20 wt%)。在氫氣球下，在室溫下攪拌反應一天。反應物經矽藻土過濾，用乙酸乙酯溶離。減壓濃縮濾液，溶解於二氯甲烷(10 mL)中並經由注射器尖Teflon 40微米過濾器過濾。減壓濃縮濾液，得到標題化合物。MS (DCI) m/e 444.1 (M+H) +。 2.174.3 4-{[(3R,5S)-5-{[ 雙 ( 第三丁氧基羰基 ) 胺基 ] 甲基 }-1-(2- 第三丁氧基 -2- 側氧基乙基 )-2- 側氧基吡咯啶 -3- 基 ] 胺基 }-4- 側氧基丁 - 2- 烯酸標題化合物係藉由在實例2.119.13中用實例2.174.2替代實例2.119.12製備。MS (ESI) m/e 540.2 (M-H) -。 2.174.4 [(3R,5S)-5-{[ 雙 ( 第三丁氧基羰基 ) 胺基 ] 甲基 }-3-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 )-2- 側氧基吡咯啶 -1- 基 ] 乙酸第三丁酯標題化合物係藉由在實例2.119.14中用實例2.174.3替代實例2.119.13製備。MS (DCI) m/e 541.1 (M+NH 4) +。 2.174.5 2-((3R,5S)-5-( 胺基甲基 )-3-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 )-2- 側氧基吡咯啶 -1- 基 ) 乙酸向實例2.174.4 (284 mg)於二氯甲烷(10 mL)中之溶液中添加三氟乙酸(5 mL)。在室溫下攪拌反應兩小時並減壓濃縮。將殘餘物溶解於水/乙腈7/3 (5 mL)中，冷凍並凍乾，得到標題化合物，不經進一步純化即用於後續步驟中。MS (ESI) m/e 266.1 (M-H) -。 2.174.6 2-((3R,5S)-3-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 )-2- 側氧基 -5-(41- 側氧基 -2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32,35,38- 十三氧雜 -42- 氮雜四十三烷 -43- 基 ) 吡咯啶 -1- 基 ) 乙酸向2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32,35,38-十三氧雜四十一烷-41-酸(160 mg)於N,N-二甲基甲醯胺(1.0 mL)中之溶液中六氟磷酸添加O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基
Figure 111128039-A0304-2
(85 mg)及N,N-二異丙基乙胺(130 μL)。在室溫下攪拌反應混合物三分鐘，並添加實例2.174.5 (70 mg)及N,N-二異丙基乙胺(130 pT)於N,N-二甲基甲醯胺(1.0 mL)中之溶液。在室溫下攪拌反應一小時並用N,N-二甲基甲醯胺/水1/1 (3.5 mL)稀釋。溶液在Gilson系統(C18管柱)上藉由逆相HPLC，用20-70%乙腈/ 0.1% TFA水溶離來純化，得到標題化合物。MS (ESI) m/e 880.4 (M-H) -。 2.174.7 2,6- 去水 -8-{2-({[{2-[(3-{[4-(6-{8-[(1,3- 苯并噻唑 -2- 基 ) 胺甲醯基 ]-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 }-2- 羧基吡啶 -3- 基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ] 甲基 }-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 ) 氧基 ] 乙基 }(2- 磺基乙基 ) 胺甲醯基 ] 氧基 } 甲基 )-5-[(N-{[(3R,5S)-3-(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 )-2- 側氧基 -5-(41- 側氧基 -2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32,35,38- 十三氧雜 -42- 氮雜四十三烷 -43- 基 ) 吡咯啶 -1- 基 ] 乙醯基 }-L- 纈胺醯基 -L- 丙胺醯基 ) 胺基 ] 苯基 }-7,8- 二脫氧 -L- 甘油 -L- 古洛糖 - 辛酸標題化合物係藉由在實例2.119.17中用實例2.174.6替代實例2.119.15並用實例2.123.20替代實例2.119.16製備。 1H NMR (500 MHz, 二甲亞碸-d 6) δ ppm 9.93 (br d, 1H), 8.28 (d, 1H), 8.03 (d, 1H), 8.02 (br s, 1H), 7.91 (br d, 1H), 7.79 (d, 1H), 7.61 (d, 1H), 7.51 (br d, 1H), 7.49-7.42 (m, 3H), 7.40 (br d, 1H), 7.36 (m, 2H), 7.28 (s, 1H), 7.22 (d, 1H), 7.06 (s, 2H), 6.95 (d, 1H), 5.00 (br d, 2H), 4.95 (s, 2H), 4.70 (t, 1H), 4.39 (m, 1H), 4.28 (m, 1H), 4.00 (dd, 2H), 3.88 (br m, 2H), 3.85 (br m, 1H), 3.80 (br m, 2H), 3.62 (t, 2H), 3.50 (s, 44H), 3.48 (d, 4H), 3.43 (br m, 2H), 3.34 (br m, 2H), 3.23 (s, 3H), 3.21 (v br m, 2H), 3.14 (t, 2H), 3.10 (v br m, 1H), 3.00 (t, 2H), 2.94 (br m, 1H), 2.76 (v br m, 1H), 2.64 (v br m, 3H), 2.34 (br t, 2H), 2.32 (m, 1H), 2.17 (m, 1H), 2.09 (br d, 3H), 2.00 (br m, 1H), 1.56 (br m, 1H), 1.39-1.19 (br m, 8H), 1.19-0.92 (br m, 8H), 0.88 (br d, 3H), 0.87 (br m, 1H), 0.82 (br d, 6H), 0.79 (br s, 3H)。MS (ESI) m/e 1119.2 [(M-2H)/2] -。 2.175 合成 (6S)-2,6- 去水 -6-(2-{2-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ][(3S)-3,4- 二羥基丁基 ] 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ]-5-({N-[(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 乙醯基 ]-N-(2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32- 十一氧雜三十四烷 -34- 基 )-b- 丙胺醯基 -L- 纈胺醯基 -L- 丙胺醯基 } 胺基 ) 苯基 } 乙基 )-L- 古洛糖酸 ( 合成子 ABU)標題化合物係使用實例2.147.4中之程序，用實例2.167.1替代實例2.141.4製備。MS (ESI) m/e 1033.4 (M+2H) 2+。 2.176 合成 (6S)-2,6- 去水 -6-(2-{2-[({[2-({3-[(4-{6-[8-(1,3- 苯并噻唑 -2- 基胺甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ]-2- 羧基吡啶 -3- 基 }-5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ]-5,7- 二甲基三環 [3.3.1.1 3,7] 癸 -1- 基 } 氧基 ) 乙基 ][(3S)-3,4- 二羥基丁基 ] 胺甲醯基 } 氧基 ) 甲基 ]-5-({N-[(2,5- 二側氧基 -2,5- 二氫 -1H- 吡咯 -1- 基 ) 乙醯基 ]-N-[2-(2- 磺基乙氧基 ) 乙基 ]-b- 丙胺醯基 -L- 纈胺醯基 -L- 丙胺醯基 } 胺基 ) 苯基 } 乙基 )-L- 古洛糖酸 ( 合成子 ABV)標題化合物係使用實例2.160.7中之程序，用實例2.167.1替代實例2.154.1製備。MS (ESI) m/e 859.4 (M+2H) 2+。 實例 3 . 合成例示性 Bcl - xL 抑制性 ADC例示性ADC係使用以下描述之九種例示性方法之一合成。表6關於用於合成各例示性ADC之方法。 方法 A .將Bond-Breaker™參(2-羧基乙基)膦(TCEP)溶液(10 mM，0.017 mL)添加至經預加熱至37℃之抗體溶液(10 mg/mL，1mL)中。反應混合物在37℃保持1小時。將經還原抗體之溶液添加至合成子溶液(3.3 mM，0.160 mL二甲亞碸(DMSO)溶液)中並輕緩地混合30分鐘。將反應溶液裝載至脫鹽管柱(PD10，在使用之前用DPBS洗滌3次)上，隨後裝載達爾伯克磷酸鹽緩衝生理食鹽水(Dulbecco' phosphate-buffered saline，DPBS)(1.6 mL)並用另外DPBS(3 mL)溶離。純化之ADC溶液經由0.2微米低蛋白質結合之13 mm注射器式過濾器過濾並在4℃下儲存。 方法 B. 將Bond-Breaker™參(2-羧基乙基)膦(TCEP)溶液(10 mM，0.017 mL)添加至經預加熱至37℃之抗體溶液(10 mg/mL，1 mL)中。反應混合物在37℃保持1小時。藉由添加硼酸緩衝液(0.05 mL，0.5 M，pH8)將經還原抗體之溶液調至pH=8，將其添加至合成子溶液(3.3 mM，0.160 mL DMSO溶液)中並輕緩地混合4小時。將反應溶液裝載至脫鹽管柱(PD10，在使用之前用DPBS洗滌3次)上，隨後裝載DPBS(1.6 mL)並用另外DPBS(3 mL)溶離。純化之ADC溶液經由0.2微米低蛋白質結合之13 mm注射器式過濾器過濾並在4℃下儲存。 方法 C. 使用在一展開板上裝備有I235/96尖端模組化施配技術(Dispense Technology，MDT)、含有夾持臂(部件號7400358)之拋棄式頭部(部件號70243540)及8尖端Varispan吸液臂(部件號7002357)的PerkinElmer Janus(部件號AJL8M01)自動液體處理系統進行結合。該PerkinElmer Janus系統係使用4.8.3.315版WinPREP軟體控制。 使用MDT，用100 μL 1×DPBS預先潤濕帕爾過濾板(Pall Filter plate) 5052。對該過濾板施加真空10秒且隨後通氣5秒以移除過濾板中之DPBS。將蛋白質A樹脂(GE MabSelect Sure)於DPBS中之50%漿液倒入裝備有磁性球之8孔儲集器中，並藉由使行進之磁體在儲集器盤下部通過來混合樹脂。使用裝備有1 mL導電尖端之8尖端Varispan臂抽出樹脂(250 μL)並轉移至96孔過濾板中。施加真空2個循環以移除大部分緩衝液。使用MDT，抽吸出150 μL 1×PBS並將其施配至保持該樹脂之96孔過濾板中。施加真空，自樹脂移除緩衝液。重複該沖洗/真空循環3次。將2 mL之96孔收集板安放在Janus板上，且MDT轉移450 μL之5×DPBS至該收集板上待用。如上文關於條件A所描述來製備經還原抗體(2 mg)之DPBS溶液(200 μL)並將其預裝載至96孔板中。將經還原抗體之溶液轉移至含有樹脂之過濾板孔中，並藉由在孔內反覆抽吸/施配100 μL體積，每個循環持續45秒，用MDT混合混合物。在5分鐘過程內重複抽吸/施配循環總計5次。對過濾板施加真空2個循環，由此移除過量抗體。用水沖洗MDT尖端5個循環(200 μL，1 mL總體積)。MDT抽吸且施配150 μL DPBS至含有樹脂結合之抗體的過濾板孔中，並施加真空兩個循環。再重複洗滌及真空程序兩次。在最後一個真空循環之後，將100 μL之1×DPBS施配至含有樹脂結合之抗體的孔中。MDT接著收集以96孔形式塗鋪的30 μL各3.3 mM合成子之二甲亞碸溶液並將其施配至在DPBS中含有樹脂結合之抗體的過濾板中。藉由在孔內反覆抽吸/施配100 μL體積，每個循環持續45秒，用MDT混合含有結合混合物之孔。經5分鐘過程重複抽吸/施配程序總計5次。施加真空2個循環以將過量合成子移除至廢物中。用水沖洗MDT尖端5個循環(200 μL，1 mL總體積)。MDT抽吸並施配DPBS(150 μL)至結合混合物中，並施加真空兩個循環。再重複洗滌及真空程序兩次。接著MDT夾鉗將過濾板及套環移動至保持台上。MDT將含有450 μL 10×DPBS之2 mL收集板置放於真空歧管內部。MDT藉由置放該過濾板及套環重新組裝真空歧管。用水沖洗MDT尖端5個循環(200 μL，1 mL總體積)。MDT抽吸及施配100 μL IgG溶離緩衝液3.75(Pierce)至結合混合物中。一分鐘之後，施加真空2個循環，並將溶離液捕捉於含有450 μL 5×DPBS之接收板中。再重複抽吸/施配程序3次以遞送在pH 7.4 DPBS中濃度範圍為1.5至2.5 mg/mL之ADC樣品。 方法 D. 使用在一展開板上裝備有I235/96尖端模組化施配技術(MDT)、含有夾持臂(部件號7400358)之拋棄式頭部(部件號70243540)及8尖端Varispan吸液臂(部件號7002357)的PerkinElmer Janus(部件號AJL8M01)自動液體處理系統進行結合。該PerkinElmer Janus系統係使用4.8.3.315版WinPREP軟體控制。 使用MDT，用100 μL 1×DPBS預先潤濕帕爾過濾板5052。對該過濾板施加真空10秒且隨後通氣5秒以移除過濾板中之DPBS。將蛋白質A樹脂(GE MabSelect Sure)於DPBS中之50%漿液倒入裝備有磁性球之8孔儲集器中，並藉由使行進之磁體在儲集器盤下部通過來混合樹脂。使用裝備有1 mL導電尖端之8尖端Varispan臂抽出樹脂(250 μL)並轉移至96孔過濾板中。對過濾板施加真空2個循環以移除大部分緩衝液。MDT抽吸並施配150 μL DPBS至含有樹脂之過濾板孔中。再重複洗滌及真空程序兩次。將2 mL之96孔收集板安放在Janus板上，且MDT轉移450 μL之5×DPBS至該收集板上待用。如上文關於方法A所描述來製備經還原抗體(2 mg)之DPBS溶液(200 μL)並將其施配至96孔板中。MDT接著收集以96孔形式塗鋪的30 μL各3.3 mM合成子之二甲亞碸溶液並將其施配至裝載有含還原抗體之DPBS的板中。藉由在該孔內反覆抽吸/施配100 μL體積兩次，用MDT混合該混合物。五分鐘之後，將結合反應混合物(230 μL)轉移至含有樹脂之96孔過濾板中。藉由在孔內反覆抽吸/施配100 μL體積，每個循環持續45秒，用MDT混合含有結合混合物及樹脂之孔。經5分鐘過程重複抽吸/施配程序總計5次。施加真空2個循環以移除過量合成子及蛋白質至廢物中。用水沖洗MDT尖端5個循環(200 μL，1 mL總體積)。MDT抽吸並施配DPBS(150 μL)至結合混合物中，並施加真空兩個循環。再重複洗滌及真空程序兩次。接著MDT夾鉗將過濾板及套環移動至保持台上。MDT將含有450 μL 10×DPBS之2 mL收集板置放於真空歧管內部。MDT藉由置放該過濾板及套環重新組裝真空歧管。用水沖洗MDT尖端5個循環(200 μL，1 mL總體積)。MDT抽吸及施配100 μL IgG溶離緩衝液3.75(P)至結合混合物中。一分鐘之後，施加真空2個循環，並將溶離液捕捉於含有450 μL 5×DPBS之接收板中。再重複抽吸/施配程序3次以遞送在pH 7.4 DPBS中濃度範圍為1.5至2.5 mg/mL之ADC樣品。 方法 E. 在室溫下，將Bond-Breaker™參(2-羧基乙基)膦(TCEP)溶液(10 mM，0.017 mL)添加至抗體溶液(10 mg/mL，1 mL)中。將反應混合物加熱至37℃，保持75分鐘。將經還原抗體之溶液冷卻至室溫並添加至合成子溶液(10 mM，0.040 mL之DMSO溶液)中，隨後添加硼酸緩衝液(0.1 mL，1M，pH 8)。使反應溶液在室溫下靜置3天，將其裝載至脫鹽管柱(PD10，在使用之前用DPBS洗滌3次，每次5 mL)上，隨後裝載DPBS(1.6 mL)並用另外DPBS(3 mL)溶離。純化之ADC溶液經由0.2微米低蛋白質結合之13 mm注射器式過濾器過濾並在4℃下儲存。 方法 F. 使用Tecan Freedom Evo自動液體處理系統進行結合。將抗體(10 mg/mL)之溶液預加熱至37℃且以每孔3 mg(0.3 mL)之量等分至加熱之96深孔盤中並保持在37℃。將Bond-Breaker™參(2-羧基乙基)膦(TCEP)溶液(1 mM，每孔0.051 mL)添加至抗體中，且反應混合物在37℃保持75分鐘。將經還原抗體之溶液轉移至未加熱的96深孔盤中。將相應合成子溶液(5 mM，0.024 mL DMSO溶液)添加至含經還原抗體之孔中並處理15分鐘。將反應溶液裝載至具有脫鹽管柱(NAP5，在使用之前用DPBS洗滌4次)之平台(8×12)上，隨後裝載DPBS(0.3 mL)並用另外DPBS(0.8 mL)溶離。純化之ADC溶液進一步等分以供分析並在4℃下儲存。 方法 G. 使用Tecan Freedom Evo自動液體處理系統進行結合。將抗體(10 mg/mL)之溶液預加熱至37℃並以每孔3 mg(0.3mL)之量等分至加熱之96深孔盤上且保持在37℃。將Bond-Breaker™參(2-羧基乙基)膦(TCEP)溶液(1 mM，每孔0.051 mL)添加至抗體中，且反應混合物在37℃保持75分鐘。將經還原抗體之溶液轉移至未加熱的96深孔盤中。將相應合成子溶液(5 mM，每孔0.024 mL DMSO溶液)添加至含經還原抗體之孔中，隨後添加硼酸緩衝液(pH=8，每孔0.03 mL)並處理15分鐘。將反應溶液裝載至具有脫鹽管柱(NAP5，在使用之前用DPBS洗滌4次)之平台(8×12)上，隨後裝載DPBS(0.3 mL)並用另外DPBS(0.8 mL)溶離。純化之ADC溶液進一步等分以供分析並在4℃下儲存。 方法 H. 在室溫下，將Bond-Breaker™參(2-羧基乙基)膦(TCEP)溶液(10 mM，0.17 mL)添加至抗體溶液(10 mg/mL，10 mL)中。將反應混合物加熱至37℃，保持75分鐘。將合成子溶液(10 mM，0.40 mL DMSO溶液)添加到冷卻至室溫的經還原抗體之溶液中。在室溫下，使反應溶液靜置30分鐘。用飽和硫酸銨溶液(約2至2.5 mL)處理ADC溶液，直至形成略微混濁之溶液。將此溶液裝載至用30%相B/相A(相A：1.5 M硫酸銨、25 mM磷酸鹽；相B：25 mM磷酸鹽、25%異丙醇v/v)平衡之丁基瓊脂糖凝膠管柱(5 mL丁基瓊脂糖凝膠)上。在施加之梯度A/B達到75%相B時溶離出含DAR2(又稱「E2」)及DAR4(又稱「E4」)之個別溶離份。對於較大規模，使用離心濃縮器或TFF濃縮各ADC溶液並交換緩衝液。純化之ADC溶液經由0.2微米低蛋白質結合之13 mm注射器式過濾器過濾並在4℃下儲存。 方法 I. 在室溫下，將Bond-Breaker™參(2-羧基乙基)膦(TCEP)溶液(10 mM，0.17 mL)添加至抗體溶液(10 mg/mL，10 mL)中。將反應混合物加熱至37℃，保持75分鐘。將合成子溶液(10 mM，0.40 mL DMSO溶液)添加到冷卻至室溫的經還原抗體之溶液中。在室溫下，使反應溶液靜置30分鐘。用飽和硫酸銨溶液(約2至2.5 mL)處理ADC溶液，直至形成略微混濁之溶液。將此溶液裝載至用30%相B/相A(相A：1.5 M硫酸銨、25 mM磷酸鹽；相B：25 mM磷酸鹽、25%異丙醇v/v)平衡之丁基瓊脂糖凝膠管柱(5 mL丁基瓊脂糖凝膠)上。在施加之梯度A/B達到75%相B時溶離出含DAR2(又稱「E2」)及DAR4(又稱「E4」)之個別溶離份。對於較大規模，使用離心濃縮器或TFF濃縮各ADC溶液並交換緩衝液。用硼酸緩衝液(0.1 mL，1M，pH8)處理ADC溶液。使反應溶液在室溫下靜置3天，接著將其裝載至脫鹽管柱(PD10，在使用之前用DPBS洗滌3次，每次5 mL)上，隨後裝載DPBS(1.6 mL)並用另外DPBS(3 mL)溶離。純化之ADC溶液經由0.2微米低蛋白質結合之13 mm注射器式過濾器過濾並在4℃下儲存。 下表6指示經由例示性方法合成的例示性ADC。AbB、AbG、AbK、AbA1係表2中描述的Ab1之親和力成熟變異體。針對CMV糖蛋白H之單株抗體(MSL109)係同型相配之非靶向性對照物。 表 6 ：用於合成例示性 ADC 之合成方法
實例編號 ADC 方法
3.1 AbA-CZ G
3.2 AbA-TX G
3.3 AbA-TV G
3.4 AbA-YY G
3.5 AbA-AAA G
3.6 AbA-AAD G
3.7 AbB-CZ G
3.8 AbB-TX G
3.9 AbB-TV G
3.10 AbB-YY G
3.11 AbB-AAD G
3.12 AbG-CZ G
3.13 AbG-TX G
3.14 AbG-TV G
3.15 AbG-YY G
3.16 AbG-AAA G
3.17 AbG-AAD G
3.18 AbK-CZ G
3.19 AbK-TX G
3.20 AbK-TV G
3.21 AbK-YY G
3.22 AbK-AAA G
3.23 AbK-AAD G
3.24 MSL109-CZ G
3.25 MSL109-TX G
3.26 MSL109-TV G
3.27 MSL109-YY G
3.28 MSL109-AAA G
3.29 MSL109-AAD G
3.30 AbA-WD E
3.31 AbA-LB A
3.32 AbB-WD E
3.33 AbB-LB A
3.34 AbG-WD E
3.35 AbG-LB A
3.36 AbK-WD E
3.37 AbK-LB A
3.38 MSL109-WD E
3.39 MSL109-LB A
3.40 AbA-ZT G
3.41 AbA-ZZ G
3.42 AbA-XW G
3.43 AbA-SE A
3.44 AbA-SR A
3.45 AbA-YG E
3.46 AbA-KZ A
3.47 AbB-ZT G
3.48 AbB-ZZ G
3.49 AbB-XW G
3.50 AbB-SE A
3.51 AbB-SR A
3.52 AbB-YG E
3.53 AbB-KZ A
3.54 AbG-ZT G
3.55 AbG-ZZ G
3.56 AbG-XW G
3.57 AbG-SE A
3.58 AbG-SR A
3.59 AbG-YG E
3.60 AbG-KZ A
3.61 AbK-ZT G
3.62 AbK-ZZ G
3.63 AbK-XW G
3.64 AbK-SE A
3.65 AbK-SR A
3.66 AbK-YG E
3.67 AbK-KZ A
3.68 MSL109-ZT G
3.69 MSL109-ZZ G
3.70 MSL109-XW G
3.71 MSL109-SE A
3.72 MSL109-SR A
3.73 MSL109-YG E
3.74 MSL109-KZ A
實例 4 . 例示性 ADC 之藥物與抗體比率 ( DAR ) 及聚集如以上實例3中所描述合成的例示性ADC之DAR及聚集百分比分別係藉由LC-MS及尺寸排阻層析法(SEC)測定。 4.1 LC - MS 通用方法LC-MS分析係使用接合至Agilent LC/MSD TOF 6220 ESI質譜儀之Agilent 1100 HPLC系統進行。用5 mM(最終濃度)BOND BREAKER TCEP溶液(Thermo Scientific, Rockford, IL)還原ADC，將其裝載至上Protein Microtrap(Michrom Bioresorces, Auburn, CA)脫鹽濾筒上並在環境溫度下用10% B至75% B之梯度經0.2分鐘溶離。移動相A係含0.1%甲酸(FA)之H 2O，移動相B係含0.1% FA之乙腈，且流動速率係0.2 ml/min。使用Agilent MassHunter(TM)採集軟體採集共溶離之輕鏈及重鏈之電噴霧-電離飛行時間質譜。使用MassHunter軟體之最大熵特徵對提取的強度-m/z譜圖進行解卷積以測定各經還原之抗體片段的質量。自解卷積之譜圖，藉由對輕鏈及重鏈之裸峰及改良峰之強度求和，用強度乘以所連接藥物之數量進行正規化，由此計算DAR。用經加和、正規化之強度除以強度總和，且兩條輕鏈及兩條重鏈之求和結果得到完整ADC之最終平均DAR值。 生物結合物之硫代琥珀醯亞胺水解可以藉由電噴霧質譜監測，因為添加水至該結合物中使該結合物之可觀測分子量增加18道爾頓。當藉由完全還原人類IgG1抗體之鏈間二硫鍵並使順丁烯二醯亞胺衍生物結合至各所得半胱胺酸來製備結合物時，該抗體之每條輕鏈將含有單一順丁烯二醯亞胺修飾且每條重鏈將含有三個順丁烯二醯亞胺修飾，如圖4中所描述。在所得硫代琥珀醯亞胺完全水解之後，輕鏈之質量將因此增加18道爾頓，同時每條重鏈之質量將增加54道爾頓。此繪示於圖5中，其中例示性順丁烯二醯亞胺藥物-連接子(合成子TX，分子量1736 Da)結合至完全還原之AbA抗體且隨後水解。重鏈上單一N連接之糖基化位點的存在引起未結合抗體中所觀測到的質量不均勻性。 圖5顯示1)在結合之前、2)在與順丁烯二醯亞胺衍生物結合得到硫代琥珀醯亞胺中間物之後及3)pH8介導之硫代琥珀醯亞胺環水解後的例示性抗體Aba之輕鏈及重鏈之質譜(MS)特徵。 4.2 尺寸排阻層析通用方法尺寸排阻層析(SEC)係使用Shodex KW802.5管柱，在含0.25 mM氯化鉀及15%異丙醇之0.2M磷酸鉀(pH 6.2)中以0.75 ml/min流動速率進行。藉由曲線下面積積分測定高分子量溶離物及單體溶離物各自在280 nm下之峰面積吸光度。藉由用高分子量溶離液在280 nM下之峰面積吸光度除以高分子量及單體溶離物在280 nM下之峰面積吸光度總和，乘以100%來測定結合物樣品之聚集物溶離份百分比。 4.3. 結果使用以上LC-MS方法測定平均DAR值。ADC之聚集物溶離份百分比亦係使用實例4.2中描述的SEC方法測定。DAR及%聚集均報導於下表7中。 表 7 ： ADC 分析特徵
應用實例編號 ADC 代碼 DAR (藉由MS測定) %Agg (藉由SEC測定)
3.1 AbA-CZ 3.2 4.7
3.2 AbA-TX 2.8 0.7
3.3 AbA-TV 3.7 2.4
3.4 AbA-YY 2.2 18.8
3.5 AbA-AAA 2 19
3.6 AbA-AAD 3.3 3.6
3.7 AbB-CZ 3.5 0
3.8 AbB-TX 2.2 0
3.9 AbB-TV 2.3 0.7
3.10 AbB-YY 2.2 0
3.11 AbB-AAD 2.7 0
3.12 AbG-CZ 3.4 4
3.13 AbG-TX 3.3 1.6
3.14 AbG-TV 3.7 1.4
3.15 AbG-YY 2.2 16.5
3.16 AbG-AAA 1.9 17.5
3.17 AbG-AAD 3.4 2.5
3.18 AbK-CZ 3.4 3.3
3.19 AbK-TX 2.2 1.6
3.20 AbK-TV 2.4 2.6
3.21 AbK-YY 1.7 20
3.22 AbK-AAA 1.6 20.4
3.23 AbK-AAD 2.8 3.6
3.24 MSL109-CZ 3.4 4.1
3.25 MSL109-TX 3.5 0.7
3.26 MSL109-TV 4.2 0.7
3.27 MSL109-YY 2.3 17.5
3.28 MSL109-AAA 2.2 17.7
3.29 MSL109-AAD 3.6 2.9
3.30 AbA-WD 1.8 0
3.31 AbA-LB 2.4 14.5
3.32 AbB-WD 1.6 0
3.33 AbB-LB 1.8 0
3.34 AbG-WD 3.4 3.2
3.35 AbG-LB 2.5 15.3
3.36 AbK-WD 1.7 4.9
3.37 AbK-LB 1.8 13.6
3.38 MSL109-WD 2.9 0
3.39 MSL109-LB 1.8 0
3.40 AbA-ZT 2 17.1
3.41 AbA-ZZ 1.3 19.2
3.42 AbA-XW 3.7 6.6
3.43 AbA-SE 2.8 0
3.44 AbA-SR 2.3 37.1
3.45 AbA-YG 1.9 0
3.46 AbA-KZ 2 4.4
3.47 AbB -ZT 1.4 0
3.48 AbB -ZZ 1.1 0
3.49 AbB -XW 3.2 0
3.50 AbB -SE 2.2 0
3.51 AbB -SR 2.1 0
3.52 AbB -YG 1.1 0
3.53 AbB -KZ 1.9 0
3.54 AbG-ZT 1.6 12.4
3.55 AbG-ZZ 1.4 16.8
3.56 AbG-XW 3.7 5.9
3.57 AbG-SE 3.8 2.1
3.58 AbG-SR 2.8 36.7
3.59 AbG-YG 3.7 2.4
3.60 AbG-KZ 2.7 11.6
3.61 AbK-ZT 1.3 13.4
3.62 AbK-ZZ 1.9 4.5
3.63 AbK-XW 2.8 6.2
3.64 AbK-SE 2.7 2.5
3.65 AbK-SR 2.3 30.1
3.66 AbK-YG 0.9 0
3.67 AbK-KZ 2.3 10.2
3.68 MSL109-ZT 2.3 7.5
3.69 MSL109-ZZ 1.4 15
3.70 MSL109-XW 3.3 3.7
3.71 MSL109-SE 3.6 33.4
3.72 MSL109-SR 1.8 2.3
3.73 MSL109-YG 3.1 13.2
3.74 MSL109-KZ 2.5 18
實例 5 . 靶向 EGFR 之 ADC 在 活體外抑制癌細胞生長將呈Bcl-xL ADC形式之抗EGFR抗體AbB、AbG、AbK及AbL針對EGFR陽性非小細胞肺癌細胞(NCI-H1650)之細胞毒性與非靶向性MSL109同型相配的例示性ADC相比較。為了進一步評價此等例示性EGFR靶向性Bcl-xL-ADC之活體外功效，在 mcl - 1 -/- 小鼠胚胎纖維母細胞(MEF)中過度表現人類EGFR。Mcl-1係指基因骨髓細胞白血病1。 Mcl - 1 -/- MEF的存活依賴於Bcl-xL(Lessene等人, 2013, Nature Chemical Biology9:390-397)。 5.1 方法經由用含有huEGFR序列之反轉錄病毒構築體pLVC-IRES-Hygro(Clontech)或空載體，利用FuGENE 6轉染試劑(Roche Molecular Biochemicals, Mannheim, Germany)轉染GP2-293包裝細胞株(Clontech)來產生反轉錄病毒上清液。培養48小時之後，收集含病毒上清液並在凝聚胺(8 μg/ml；Sigma)存在下，施加至75 cm 2培養瓶中之 mcl - 1 -/ - MEF(每瓶0.5×10 6個)中，再保持48小時。3天之後，用含250 μg/mL潮黴素B(Invitrogen)之培養基完全補充物洗滌並選擇 Mcl - 1 -/- MEF。藉由流式細胞測量術確定huEGFR之表現且與親本細胞株或用空載體轉染之細胞株相比較。 在含有10% FBS之DMEM中，用AB033靶向性Bcl-xL-ADC、單獨AB033或MSL109靶向性Bcl-xL-ADC處理表現huEGFR之 Mcl - 1 -/- MEF或pLVX空載體(載體對照)96小時。對於該分析，將細胞以250個細胞/孔塗鋪於384孔組織培養盤(Corning, Corning, NY)中總體積為25 μL之分析培養基(DMEM及10% HI FBS)中。藉由Echo 550聲波液體處理器(Acoustic Liquid Handler；Labcyte)施配1 μm至1 pM，分別用1 μm或0.5 μm至150 pM或25 pM的4倍連續稀釋之所關注抗體藥物結合物處理塗鋪之細胞。對於 Mcl - 1 -/- MEF huEGFR細胞株及對於 Mcl - 1 -/- MEF載體細胞株，每種濃度至少一式三份進行測試。根據製造商之推薦，使用CellTiter-Glo發光細胞活力分析(Promega Corp., Madison, WI)測定在37℃及5% CO 2下抗體藥物結合物處理96小時之後之活細胞分數。在Perkin Elmer Envision中使用發光方案以0.1秒積分時間讀取盤。對每一稀釋點之重複測試值求平均值且藉由使用線性回歸，用GraphPad Prism 5(GraphPad Software, Inc.)將數據擬合成S形曲線模型來生成抗體藥物結合物之EC 50值，Y=((底部-頂部)/(1+((x/K) n)))+頂部，其中Y係量測之反應，x係化合物濃度，n係希爾斜率(Hill Slope)且K係EC 50，且底部及頂部分別為較低及較高漸近線。使用目測檢查曲線驗證曲線擬合結果。 Mcl - 1 -/- MEF係自沃爾特及伊麗莎醫學研究所(Walter and Eliza Hall Institute of Medical Research)之David C.S.Huang獲得。 將穩定過度表現eGFP之NCI-H1650細胞維持於含有10%胎牛血清(Invitrogen目錄號10082)之RPMI培養基(Invitrogen目錄號22400)中。用胰蛋白酶自盤移出細胞且以300個細胞/孔塗鋪於Corning 384孔球形盤(目錄號3830)中之25 μL相同培養基中。以500 × g離心該等盤5分鐘並將其置放於37℃及5% CO 2及95%濕度的Essen INCUCYTE Zoom活細胞分析系統中。使細胞形成球狀體，保持3天，隨後給予相等體積的2×指定濃度之抗體藥物結合物。將該等球狀體再培育6天，同時在Incucyte Zoom中監測生長及GFP螢光，隨後添加40 μL Promega CELLTITER-GLO 3D(目錄號G968B)且接著讀取發光。由Incucyte Zoom監測之最終GFP螢光(在表8中稱為「H1650 GFP螢光EC 50(μg/mL)」)及由CellTiter-Glo試劑得到之化學發光讀數(在表8中稱為「H1650 CTG-3D EC 50(μg/mL)」)測定 IC 50 。 5.2 結果代表性ADC之細胞活力分析結果(EC 50，以奈莫耳濃度或μg/mL表示)提供於下表8中。 表 8 ： 例示性 EGFR 靶向性 ADC 之 活體外細胞活力功效
ADC代碼. DAR huEGFR + mcl- l -/- MEF EC 50(μM) mcl-l -/- MEF載體對照 EC 50(μM) H1650 GFP螢光EC 50(μg/mL) H1650 CTG-3D EC 50(μg/mL)
AbA-CZ 3.2 0.0003 ＞0.5 1.24 0.88
AbA-TX 2.8 0.016 ＞0.5 13.88 ＞40
AbA-TV 3.7 0.003 0.364 0.69 0.34
AbA-YY 2.2 0.46 ＞0.5 7.85 ＞40
AbA-AAA 2 0.22 0.306 0.98 0.65
AbA-AAD 3.3 0.065 ＞0.5 0.36 0.79
AbB-CZ 3.5 0.0059 0.104 0.88 1.27
AbB-TX 2.2 0.011 0.491 3.72 2.39
AbB-TV 2.3 0.0024 0.31 0.74 0.86
AbB-YY 2.2 0.051 0.4 7.73 8.6
AbB-A AD 2.7 0.0046 ＞10 0.59 0.16
AbG-CZ 3.4 0.0034 0.194 0.25 0.07
AbG-TX 3.3 0.0053 0.368 0.51 0.15
AbG-TV 3.7 0.0026 0.196 0.04 0.03
AbG-YY 2.2 ＞0.5 ＞0.5 1.1 0.4
AbG-AAA 1.9 0.22 ＞0.5 0.17 0.12
AbG-AAD 3.4 0.108 ＞0.5 0.03 0.02
AbK-CZ 3.4 0.0001 ＞0.5 0.21 0.08
AbK-TX 2.2 0.00079 ＞1.0 1.47 1.07
AbK-TV 2.4 0.00015 0.455 0.16 0.05
AbK-YY 1.7 0.047 ＞1.0 1.09 0.49
AbK-AAA 1.6 0.0034 ＞1.0 0.16 0.11
AbK-AAD 2.8 0.0004 ＞0.5 0.06 0.01
MSL109-CZ 3.4 0.087 0.154 ＞40 ＞40
MSL109-TX 3.5 0.191 ＞0.5 24 22
MSL109-TV 4.2 0.143 0.411 ＞40 ＞40
MSL109-YY 2.3 ＞0.5 ＞0.5 ＞40 ＞40
MSL109-AAA 2.2 ＞0.5 ＞0.5 ＞40 ＞40
MSL109-AAD 3.6 ＞0.5 ＞0.5 ＞40 ＞40
AbA-WD 1.8 0.304 NT 7.62 23.59
AbA-LB 2.4 0.027 NT 2.48 4.05
AbB-WD 1.6 0.023 NT 1.01 2.69
AbB-LB 1.8 0.031 NT 2.38 1.07
AbG-WD 3.4 0.0058 NT 0.36 2.03
AbG-LB 2.5 0.024 NT 1.62 1.68
AbK-WD 1.7 0.035 NT 2.57 4.36
AbK-LB 1.8 0.017 NT 1.33 1.23
MSL109-WD 2.9 0.22 NT 1.791 7.668
MSL109-LB 1.8 0.025 NT 0.5744 0.6426
AbA-ZT 2 0.104 ＞0.5 1.13 0.35
AbA-ZZ 1.3 0.186 ＞0.5 1.18 1.86
AbA-XW 3.7 0.032 0.229 ＞40 ＞40
AbA-SE 2.8 0.105 NT 4.23 4.00
AbA-SR 2.3 0.0059 NT 2.22 2.12
AbA-YG 1.9 0.0064 NT 2.84 3.80
AbA-KZ 2 0.152 NT 29.31 ＞40
AbB-ZT 1.4 0.0089 0.404 0.64 0.26
AbB-ZZ 1.1 0.0074 0.311 0.61 0.52
AbB-XW 3.2 0.00065 ＞0.5 12.14 6.92
AbB-SE 2.2 0.039 NT 2.18 0.59
AbB-SR 2.1 0.007 NT 2.10 0.62
AbB-YG 1.1 0.0033 NT 1.55 3.28
AbB-KZ 1.9 0.055 NT 37.73 16.47
AbG-ZT 1.6 0.033 ＞0.5 0.08 0.1
AbG-ZZ 1.4 0.068 ＞0.5 0.44 0.47
AbG-XW 3.7 0.019 0.246 ＞40 ＞40
AbG-SE 3.8 0.024 NT 0.99 0.96
AbG-SR 2.8 0.007 NT 1.38 1.31
AbG-YG 3.7 0.001 NT 0.63 1.24
AbG-KZ 2.7 0.096 NT 38.19 38.34
AbK-ZT 1.3 0.0002 ＞0.5 0.12 0.05
AbK-ZZ 1.9 0.045 ＞0.5 0.16 0.03
AbK-XW 2.8 0.0006 ＞0.5 8.53 ＞40
AbK-SE 2.7 0.161 NT 1.68 2.67
AbK-SR 2.3 0.0089 NT 1.36 1.74
AbK-YG 0.9 0.037 NT 10.40 12.32
AbK-KZ 2.3 0.224 NT ＞40 ＞40
MSL109-ZT 2.3 ＞0.5 ＞0.5 ＞40 ＞40
MSL109-ZZ 1.4 ＞0.5 ＞0.5 ＞40 ＞40
MSL109-XW 3.3 0.297 0.494 ＞40 ＞40
MSL109-SE 3.6 ＞0.5 NT 3.692 6.079
MSL109-SR 1.8 0.142 NT 2.046 9.138
MSL109-YG 3.1 0.057 NT 3.895 5.852
MSL109-KZ 2.5 0.255 NT ＞40 ＞40
NT =未測試 如上表8中所描述，包含抗EGFR抗體及Bcl-xL抑制劑之抗EGFR ADC以多種效力有效降低人類EGFR表現性 mcl1 -/- 纖維母細胞之細胞活力。如藉由剩餘細胞螢光及降低之活力所量測，抗EGFR Bcl-xL ADC亦抑制NSCLC球狀體(H1650 GFP)之生長。相比之下，非靶向性(MSL109)對照Bcl-xL ADC以Bcl-xL ADC形式展示降低之效力。 實例 6 . 抗 EGFR - Bcl - xL ADC 之活體內功效使用鼠類異種移植物非小細胞肺癌(NSCLC)模型評價呈Bcl-xL抑制性ADC形式的抗EGFR抗體AbB、AbG、AbK、AbA之活體內抗腫瘤活性。詳言之，使EGFR陽性NSCLC NCI-H1650細胞(ATCC寄存號CRL-5883)作為側腹異種移植物在小鼠中生長。將ADC之活性與用作陰性對照的非靶向性IgG同型相配之抗體(AB095)(識別破傷風類毒素之人類IgG1抗體；參見Larrick等人, 1992, Immunological Reviews69-85)相比較。結果呈現於下表9、10及11中。 6 . 1 評價在異種移植物模型方法中之功效細胞株NCI-H1650係自美國典型培養物保藏中心(American Type Culture Collection；ATCC寄存號CRL-5883，Manassas, VA)獲得。在補充有10%胎牛血清(FBS, Hyclone, Logan, UT)之RPMI-1640中以單層培養細胞。為產生異種移植物，將5×10 6個活細胞分別皮下接種至免疫缺陷型雌性SCID/bg小鼠(Charles River Laboratories, Wilmington, MA)之右側腹中。注射體積係0.2 ml且由S MEM與基質膠(BD, Franklin Lakes, NJ)之1:1混合物構成。腫瘤在約200 mm 3大小相配。 在0.9%氯化鈉中調配對照抗體及ADC用於注射且經腹膜內注射。注射體積不超過200 μl。療法在腫瘤大小相配之後24小時內開始。在療法開始時，稱得小鼠為約22 g。腹膜內(IP)投與單次劑量(QD×1)或每週IP投與總計六劑(Q7D×6)之抗EGFR ADC及AB095。 每週估計腫瘤體積兩至三次。經由電子卡尺量測腫瘤之長度(L)及寬度(W)且根據以下等式計算體積：V=L×W 2/2。每籠圈養八隻小鼠。食物及水可隨意獲得。在實驗開始之前，使小鼠適應動物設施至少一周時間。以12小時亮:12小時暗時程(在06:00小時開燈)之亮階段測試動物。當腫瘤體積達到3,000 mm 3或出現皮膚潰瘍時，對小鼠實施安樂死。 為瞭解治療劑之功效，使用治療反應之幅值(TGI max)、耐久性(TGD)參數。TGI max係在實驗期間之最大腫瘤生長抑制作用。腫瘤生長抑制作用係藉由100*(1-T v/C v)計算，其中T v及C v分別係治療組及對照組之平均腫瘤體積。TGD或腫瘤生長延遲係經治療腫瘤達到1 cm 3體積所需之時間相對於對照組(AB095)延長。TGD係藉由100*(T t/C t-1)計算，其中T t及C t分別係治療組及對照組達到1 cm 3之中值時間段。 根據表9、10及11中所述(及以上實例中描述)之合成方法，某些抗Bcl-xL抑制性合成子結合至EGFR靶向性抗體AbA、AbB、AbG及AbK。 表 9 . 抗 EGFR - Bcl - xL ADC 在 NCI - H1650 NSCLC 模型中的活體內功效
藥物 合成方法 DAR 劑量 (毫克/公斤/天) 方案/途徑 N TGI max(%) TGD (%)
AB095** - - 10 QD×1 / IP 8 0 0
AbA-CZ A 3.7 3 QD×1 / IP 8 81 100
AbA-CZ A 3.7 10 QD×1 / IP 8 99 144
** IgG1 mAb      
表 10 . 抗 EGFR - Bcl - xL ADC 在 NCI - H1650 NSCLC 模型中的活體內功效
藥物 結合方法 DAR 劑量(毫克/公斤/天) 方案/途徑 N TGI max(%)
AB095** - - 10 QD×1 / IP 8 0
AbG-TX E 3.4 10 QD×1 / IP 8 88
AbG-AAA E 3.6 10 QD×1 / IP 8 76
AbG-XW E 4.2 10 QD×1 / IP 8 76
AbK-CZ A 3.5 10 QD×1 / IP 8 77
AbK-AAA E 3.1 10 QD×1 / IP 8 84
AbB-CZ A 3.5 10 QD×1 / IP 8 82
** IgG1 mAb
表9及10中提供的結果指示，呈Bcl-xL抑制劑ADC形式的抗EGFR抗體AbB、AbG、AbK、AbA在H1650異種移植物非小細胞肺癌(NSCLC)模型之腫瘤生長抑制方面具有類似效用。 比較呈DAR2(E2)與DAR4(E4)Bcl-xL抑制劑結合物形式的抗EGFR抗體AbA及AbG針對在小鼠中作為側腹異種移植物生長的EGFR陽性非小細胞肺癌模型NCI-H1650之活體內抗腫瘤活性。將此等ADC之活性與作為對照的非靶向性IgG同型相配之抗體(AB095)相比較。結果呈現於表11中。表11中顯示之結果指示，呈Bcl-xL ADC形式之抗EGFR抗體AbA及AbG作為純化之DAR2或DAR4結合物針對H1650異種移植物模型有效，其中TGI及TGD與投加之Bcl-xL彈頭之總量成比例。另外，比較表11中所列結合物之功效揭示，生長抑制作用與投與之Bcl-xL之量成比例。 表 11 . 抗 EGFR - Bcl - xL ADC 在 NCI - H1650 NSCLC 模型中的活體內功效
藥物 結合方法 DAR 劑量 (毫克/公斤/天) 方案/途徑 N TGI max(%) TGD (%)
AB095** - - 8 Q7D×6 / IP 8 0 0
AbA-CZ E2 H 2 2 Q7D×6 / IP 8 67 93
AbA-CZ E2 H 2 4 Q7D×6 / IP 8 67 93
AbA-CZ E2 H 2 8 Q7D×6 / IP 8 83 193
AbA-CZ E4 H 4 1 Q7D×6 / IP 8 62 75
AbA-CZ E4 H 4 2 Q7D×6 / IP 8 73 100
AbA-CZ E4 H 4 4 Q7D×6 / IP 8 77 114
AbG-CZ E2 H 2 2 Q7D×6 / IP 8 64 93
AbG-CZ E2 H 2 4 Q7D×6 / IP 8 80 143
AbG-CZ E2 H 2 8 Q7D×6 / IP 8 75 143
AbG-CZ E4 H 4 1 Q7D×6 / IP 8 61 64
AbG-CZ E4 H 4 2 Q7D×6 / IP 8 80 114
AbG-CZ E4 H 4 4 Q7D×6 / IP 8 74 114
** IgG1 mAb
作為對照，評價包含結合至Bcl-xL抑制劑之非靶向性抗體MSL109(MSL109係針對CMV糖蛋白H之單株抗體)的ADC針對在小鼠中作為側腹異種移植物生長的EGFR陽性非小細胞肺癌模型NCI-H1650之活體內抗腫瘤活性。將此等ADC之活性與作為對照的非靶向性IgG同型相配之抗體(AB095)相比較，顯示極普通的腫瘤生長抑制作用及較低或無腫瘤生長延遲作用。結果呈現於表12中，且顯示使用非靶向性抗體作為載體之Bcl-xL ADC僅引起普通腫瘤生長抑制作用及較低或無腫瘤生長延遲作用。此較低的抗腫瘤活性與用EGFR靶向性Bcl-xL ADC所觀測到的大得多的TGI及TGD形成對比(表9及10)，且反映了此等ADC在EGFR表現性模型中之抗原依賴性遞送。 表 12 . 非靶向性 ( MSL109 ) Bcl - xL 抑制性 ADC 在 NCI - H1650 NSCLC 模型中的活體內功效
生長抑制
治療 劑量 [a]/途徑/方案 TGI max(%) TGD (%)
MSL109 †-H 3/IP/Q4D×6 18* 0
MSL109 †-H 10/IP/Q4D×6 43* 20*
MSL109 †-H 30/IP/Q4D×6 8 0
MSL109 †-CZ 3/IP/Q4D×6 29* 0
MSL109 †-CZ 3/IP/Q7D×6 18* 0
MSL109 †-CZ 10/IP/Q4D×6 32* 16
MSL109 †-CZ 30/IP/Q4D×6 32* 12
†非靶向性抗體 [a]劑量係以毫克/公斤/天給出 * = p ＜ 0.05，相較於對照治療(AB095) Q4Dx6指示每4天一劑，總計6劑
雖然已說明且描述各種具體實施例，但應瞭解可在不偏離本發明之精神及範疇的情況下做出各種改變。 序列表
SEQ ID NO: 說明
1 Ab1 VH胺基酸序列
2 Ab1、AbC、AbD及AbE VH CDR1胺基酸序列
3 Ab1、AbC、AbD、AbE、AbF、AbJ及AbN VH CDR2胺基酸序列
4 Ab1、AbC、AbD及AbE VH CDR3胺基酸序列
5 Ab1及AbA VL胺基酸序列
6 Ab1、AbA、AbB、AbC及AbF VL CDR1胺基酸序列
7 Ab1、AbA、AbB及AbC及AbF VL CDR2胺基酸序列
8 Ab1、AbA、AbB及AbF VL CDR3胺基酸序列
9 AbA VH胺基酸序列
10 AbA、AbF及AbK VH CDR1胺基酸序列
11 AbA、AbH、AbK、AbL、AbM、AbO及AbQ VH CDR2胺基酸序列
12 AbA、AbF、AbM、AbN及AbO VH CDR3胺基酸序列
13 Ab1及AbA輕鏈胺基酸序列
14 Ab1重鏈胺基酸序列
15 AbA重鏈胺基酸序列
16 AbB及AbG VH CDR1胺基酸序列
17 AbB及AbG VH CDR2胺基酸序列
18 AbG、AbH、AbJ及AbL VH CDR3胺基酸序列
19 AbB及AbK VH CDR3胺基酸序列
20 AbM及AbN VH CDR1胺基酸序列
21 AbP VH CDR1胺基酸序列
22 AbP及AbQ VH CDR3胺基酸序列
23 AbG、AbH及AbJ VL CDR1胺基酸序列
24 AbG、AbH及AbJ VL CDR2胺基酸序列
25 AbG、AbH及AbJ VL CDR3胺基酸序列
26 AbK、AbL、AbM、AbN及AbO VL CDR1胺基酸序列
27 AbE、AbK、AbL、AbM、AbN及AbO VL CDR2胺基酸序列
28 AbK、AbL、AbM、AbN及AbO VL CDR3胺基酸序列
29 AbP及AbQ VL CDR1胺基酸序列
30 AbP及AbQ VL CDR2胺基酸序列
31 AbD、AbP及AbQ VL CDR3胺基酸序列
32 人類EGFR胺基酸序列(含信號序列)
33 人類表皮生長因子受體變異體III(hEGFRvIII)胺基酸
34 人類EGFR細胞外結構域(ECD)胺基酸序列
35 AbA、AbG、AbK、AbM及AbP之VH CDR1共同序列
36 AbA、AbG、AbK、AbM及AbP之VH CDR2共同序列
37 AbA、AbG、AbK、AbM及AbP之VH CDR3共同序列
38 AbA、AbG、AbK、AbM及AbP之VL CDR1共同序列
39 AbA、AbG、AbK、AbM及AbP之VL CDR2共同序列
40 AbA、AbG、AbK、AbM及AbP之VL CDR3共同序列
41 Ig γ-1恆定區
42 Igγ-1恆定區突變體
43 Ig κ恆定區
44 Ig λ恆定區
45 EGFR之抗原決定基
46 EGFRvIII ECD之胺基酸序列
47 EGFR 1-525胺基酸序列
48 重鏈胺基酸序列Ab2
49 輕鏈胺基酸序列Ab2
50 VH胺基酸序列AbE
51 VL胺基酸序列AbE
52 VH胺基酸序列AbF
53 VL胺基酸序列AbF
54 VH胺基酸序列AbH
55 VL胺基酸序列AbH
56 VH胺基酸序列AbJ
57 VL胺基酸序列AbJ
58 VH胺基酸序列AbL
59 VL胺基酸序列AbL
60 VH胺基酸序列AbN
61 VL胺基酸序列AbN
62 VH胺基酸序列AbO
63 VL胺基酸序列AbO
64 VH胺基酸序列AbB
65 VL胺基酸序列AbB
66 VH胺基酸序列AbC
67 VL胺基酸序列AbC
68 VH胺基酸序列AbD
69 VL胺基酸序列AbD
70 VH胺基酸序列AbQ
71 VL胺基酸序列AbQ
72 VH胺基酸序列AbG
73 VL胺基酸序列AbG
74 VH胺基酸序列AbK
75 VL胺基酸序列AbK
76 VH胺基酸序列AbM
77 VL胺基酸序列AbM
78 VH胺基酸序列AbP
79 VL胺基酸序列AbP
80 AbH、AbJ、AbL及AbO VH CDR1胺基酸序列
81 AbQ VH CDR1胺基酸序列
82 AbD及AbE VL CDR1胺基酸序列
83 AbD VL CDR2胺基酸序列
84 AbC VL CDR3胺基酸序列
85 AbE VL CDR3胺基酸序列
86 AbA重鏈核酸序列
87 AbA輕鏈核酸序列
88 重鏈胺基酸前導序列
89 輕鏈胺基酸前導序列
90 AbB重鏈胺基酸序列
91 AbB重鏈胺基酸序列、LALA突變
92 AbB輕鏈胺基酸序列
93 AbG重鏈胺基酸序列
94 AbG重鏈胺基酸序列、LALA突變
95 AbG輕鏈胺基酸序列
96 AbK重鏈胺基酸序列
97 AbK重鏈胺基酸序列、LALA突變
98 AbK輕鏈胺基酸序列
圖 1顯示EGFR以及Ab1及Ab2所結合之區域的示意圖。 圖 2提供Ab1(SEQ ID NO: 1及5)及AbA(SEQ ID NO: 9及5)之可變重鏈(VH)及可變輕鏈(VL)區胺基酸序列。在VH及VL區內之CDR序列加框，且Ab1 VH序列與AbA VH序列之間的差異加陰影。 圖 3描述Ab1(SEQ ID NO:13及14)及AbA(SEQ ID NO:13及15)之全長輕鏈及重鏈。Ab1序列與AbA序列之間在重鏈中之差異係突出顯示。 圖 4顯示抗體還原、用順丁烯二醯亞胺衍生物修飾得到硫代琥珀醯亞胺中間物且隨後水解硫代琥珀醯亞胺部分之圖示。 圖 5顯示1)在結合之前、2)在與順丁烯二醯亞胺衍生物結合得到硫代琥珀醯亞胺中間物之後及3)pH8介導之硫代琥珀醯亞胺環水解後的例示性抗體之輕鏈及重鏈之質譜(MS)特徵。 
<![CDATA[<110> 美商艾伯維有限公司(ABBVIE INC.)]]>
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          <![CDATA[<150> US62/347,416]]>
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          Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln 
          1               5                   10                  15      
          Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Tyr Ser Ile Ser Ser Asp 
                      20                  25                  30          
          Phe Ala Trp Asn Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp 
                  35                  40                  45              
          Met Gly Tyr Ile Ser Tyr Ser Gly Asn Thr Arg Tyr Gln Pro Ser Leu 
              50                  55                  60                  
          Lys Ser Arg Ile Thr Ile Ser Arg Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Phe 
          65                  70                  75                  80  
          Leu Lys Leu Asn Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys 
                          85                  90                  95      
          Val Thr Ala Gly Arg Gly Phe Pro Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val 
                      100                 105                 110         
          Thr Val Ser Ser 
                  115     
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          Gly Tyr Ser Ile Ser Ser Asp Phe Ala Trp Asn 
          1               5                   10      
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          Tyr Ile Ser Tyr Ser Gly Asn Thr Arg Tyr Gln Pro Ser Leu Lys Ser 
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          Ala Gly Arg Gly Phe Pro Tyr 
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          Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Met Ser Val Ser Val Gly 
          1               5                   10                  15      
          Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys His Ser Ser Gln Asp Ile Asn Ser Asn 
                      20                  25                  30          
          Ile Gly Trp Leu Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ser Phe Lys Gly Leu Ile 
                  35                  40                  45              
          Tyr His Gly Thr Asn Leu Asp Asp Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 
              50                  55                  60                  
          Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 
          65                  70                  75                  80  
          Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Val Gln Tyr Ala Gln Phe Pro Trp 
                          85                  90                  95      
          Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 
                      100                 105         
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          His Ser Ser Gln Asp Ile Asn Ser Asn Ile Gly 
          1               5                   10      
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          Val Gln Tyr Ala Gln Phe Pro Trp Thr 
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          Glu Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln 
          1               5                   10                  15      
          Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Tyr Ser Ile Ser Arg Asp 
                      20                  25                  30          
          Phe Ala Trp Asn Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp 
                  35                  40                  45              
          Met Gly Tyr Ile Ser Tyr Asn Gly Asn Thr Arg Tyr Gln Pro Ser Leu 
              50                  55                  60                  
          Lys Ser Arg Ile Thr Ile Ser Arg Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Phe 
          65                  70                  75                  80  
          Leu Lys Leu Asn Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys 
                          85                  90                  95      
          Val Thr Ala Ser Arg Gly Phe Pro Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val 
                      100                 105                 110         
          Thr Val Ser Ser 
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          Gly Tyr Ser Ile Ser Arg Asp Phe Ala Trp Asn 
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          Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Met Ser Val Ser Val Gly 
          1               5                   10                  15      
          Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys His Ser Ser Gln Asp Ile Asn Ser Asn 
                      20                  25                  30          
          Ile Gly Trp Leu Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ser Phe Lys Gly Leu Ile 
                  35                  40                  45              
          Tyr His Gly Thr Asn Leu Asp Asp Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 
              50                  55                  60                  
          Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 
          65                  70                  75                  80  
          Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Val Gln Tyr Ala Gln Phe Pro Trp 
                          85                  90                  95      
          Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala 
                      100                 105                 110         
          Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly 
                  115                 120                 125             
          Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala 
              130                 135                 140                 
          Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln 
          145                 150                 155                 160 
          Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser 
                          165                 170                 175     
          Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr 
                      180                 185                 190         
          Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser 
                  195                 200                 205             
          Phe Asn Arg Gly Glu Cys 
              210                 
          <![CDATA[<210> 14]]>
          <![CDATA[<211> 445]]>
          <![CDATA[<212> PRT]]>
          <![CDATA[<213> 人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<221> 來源]]>
          <![CDATA[<223> /註釋=「人工序列之描述：合成多肽」]]>
          <![CDATA[<400> 14]]>
          Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln 
          1               5                   10                  15      
          Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Tyr Ser Ile Ser Ser Asp 
                      20                  25                  30          
          Phe Ala Trp Asn Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp 
                  35                  40                  45              
          Met Gly Tyr Ile Ser Tyr Ser Gly Asn Thr Arg Tyr Gln Pro Ser Leu 
              50                  55                  60                  
          Lys Ser Arg Ile Thr Ile Ser Arg Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Phe 
          65                  70                  75                  80  
          Leu Lys Leu Asn Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys 
                          85                  90                  95      
          Val Thr Ala Gly Arg Gly Phe Pro Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val 
                      100                 105                 110         
          Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala 
                  115                 120                 125             
          Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu 
              130                 135                 140                 
          Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly 
          145                 150                 155                 160 
          Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser 
                          165                 170                 175     
          Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu 
                      180                 185                 190         
          Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr 
                  195                 200                 205             
          Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr 
              210                 215                 220                 
          Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe 
          225                 230                 235                 240 
          Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro 
                          245                 250                 255     
          Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val 
                      260                 265                 270         
          Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr 
                  275                 280                 285             
          Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val 
              290                 295                 300                 
          Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys 
          305                 310                 315                 320 
          Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser 
                          325                 330                 335     
          Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro 
                      340                 345                 350         
          Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val 
                  355                 360                 365             
          Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly 
              370                 375                 380                 
          Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp 
          385                 390                 395                 400 
          Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp 
                          405                 410                 415     
          Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His 
                      420                 425                 430         
          Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly 
                  435                 440                 445 
          <![CDATA[<210> 15]]>
          <![CDATA[<211> 445]]>
          <![CDATA[<212> PRT]]>
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          <![CDATA[<221> 來源]]>
          <![CDATA[<223> /註釋=「人工序列之描述：合成多肽」]]>
          <![CDATA[<400> 15]]>
          Glu Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln 
          1               5                   10                  15      
          Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Tyr Ser Ile Ser Arg Asp 
                      20                  25                  30          
          Phe Ala Trp Asn Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp 
                  35                  40                  45              
          Met Gly Tyr Ile Ser Tyr Asn Gly Asn Thr Arg Tyr Gln Pro Ser Leu 
              50                  55                  60                  
          Lys Ser Arg Ile Thr Ile Ser Arg Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Phe 
          65                  70                  75                  80  
          Leu Lys Leu Asn Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys 
                          85                  90                  95      
          Val Thr Ala Ser Arg Gly Phe Pro Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val 
                      100                 105                 110         
          Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala 
                  115                 120                 125             
          Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu 
              130                 135                 140                 
          Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly 
          145                 150                 155                 160 
          Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser 
                          165                 170                 175     
          Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu 
                      180                 185                 190         
          Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr 
                  195                 200                 205             
          Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr 
              210                 215                 220                 
          Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe 
          225                 230                 235                 240 
          Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro 
                          245                 250                 255     
          Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val 
                      260                 265                 270         
          Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr 
                  275                 280                 285             
          Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val 
              290                 295                 300                 
          Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys 
          305                 310                 315                 320 
          Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser 
                          325                 330                 335     
          Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro 
                      340                 345                 350         
          Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val 
                  355                 360                 365             
          Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly 
              370                 375                 380                 
          Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp 
          385                 390                 395                 400 
          Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp 
                          405                 410                 415     
          Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His 
                      420                 425                 430         
          Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly 
                  435                 440                 445 
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          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<221> 來源]]>
          <![CDATA[<223> /註釋=「人工序列之描述：合成肽」]]>
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          Gly Tyr Ser Ile Ser Asn Asp Phe Ala Trp Asn 
          1               5                   10      
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          <![CDATA[<213> 人工序列]]>
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          <![CDATA[<221> 來源]]>
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          <![CDATA[<400> 17]]>
          Tyr Ile Ser Tyr Lys Gly Asn Thr Arg Tyr Gln Pro Ser Leu Lys Ser 
          1               5                   10                  15      
          <![CDATA[<210> 18]]>
          <![CDATA[<211> 7]]>
          <![CDATA[<212> PRT]]>
          <![CDATA[<213> 人工序列]]>
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          <![CDATA[<400> 18]]>
          Ala Ser Arg Gly Leu Pro Tyr 
          1               5           
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          <![CDATA[<211> 7]]>
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          <![CDATA[<400> 19]]>
          Ala Ser Arg Gly Phe Pro Trp 
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          Gly Tyr Ser Ile Gly Arg Asp Phe Ala Trp Asn 
          1               5                   10      
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          <![CDATA[<223> /註釋=「人工序列之描述：合成肽」]]>
          <![CDATA[<400> 21]]>
          Gly Tyr Ser Ile His Ser Asp Phe Ala Trp Asn 
          1               5                   10      
          <![CDATA[<210> 22]]>
          <![CDATA[<211> 7]]>
          <![CDATA[<212> PRT]]>
          <![CDATA[<213> 人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<221> 來源]]>
          <![CDATA[<223> /註釋=「人工序列之描述：合成肽」]]>
          <![CDATA[<400> 22]]>
          Ala Ser Trp Gly Leu Pro Trp 
          1               5           
          <![CDATA[<210> 23]]>
          <![CDATA[<211> 11]]>
          <![CDATA[<212> PRT]]>
          <![CDATA[<213> 人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<221> 來源]]>
          <![CDATA[<223> /註釋=「人工序列之描述：合成肽」]]>
          <![CDATA[<400> 23]]>
          His Ser Ser Gln Asp Ile Thr Tyr Asn Ile Gly 
          1               5                   10      
          <![CDATA[<210> 24]]>
          <![CDATA[<211> 7]]>
          <![CDATA[<212> PRT]]>
          <![CDATA[<213> 人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<221> 來源]]>
          <![CDATA[<223> /註釋=「人工序列之描述：合成肽」]]>
          <![CDATA[<400> 24]]>
          His Gly Ala Asn Leu Asp Asp 
          1               5           
          <![CDATA[<210> 25]]>
          <![CDATA[<211> 9]]>
          <![CDATA[<212> PRT]]>
          <![CDATA[<213> 人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<221> 來源]]>
          <![CDATA[<223> /]]>註釋=「人工序列之描述：合成肽」
          <![CDATA[<400> 25]]>
          Val Gln Tyr Asp Glu Phe Pro Trp Thr 
          1               5                   
          <![CDATA[<210> 26]]>
          <![CDATA[<211> 11]]>
          <![CDATA[<212> PRT]]>
          <![CDATA[<213> 人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<221> 來源]]>
          <![CDATA[<223> /註釋=「人工序列之描述：合成肽」]]>
          <![CDATA[<400> 26]]>
          His Ser Ser Gln Asp Ile Thr Tyr Asn Val Gly 
          1               5                   10      
          <![CDATA[<210> 27]]>
          <![CDATA[<211> 7]]>
          <![CDATA[<212> PRT]]>
          <![CDATA[<213> 人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<221> 來源]]>
          <![CDATA[<223> /註釋=「人工序列之描述：合成肽」]]>
          <![CDATA[<400> 27]]>
          His Gly Ser Asn Leu Asp His 
          1               5           
          <![CDATA[<210> 28]]>
          <![CDATA[<211> 9]]>
          <![CDATA[<212> PRT]]>
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          <![CDATA[<223> /註釋=「人工序列之描述：合成肽」]]>
          <![CDATA[<400> 28]]>
          Val Gln Tyr Asp Asp Phe Pro Trp Thr 
          1               5                   
          <![CDATA[<210> 29]]>
          <![CDATA[<211> 11]]>
          <![CDATA[<212> PRT]]>
          <![CDATA[<213> 人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
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          <![CDATA[<400> 29]]>
          His Ser Ser Gln Asp Ile Asn Met Asn Val Gly 
          1               5                   10      
          <![CDATA[<210> 30]]>
          <![CDATA[<211> 7]]>
          <![CDATA[<212> PRT]]>
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          His Gly Ala Ile Leu Asp Asp 
          1               5           
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          <![CDATA[<211> 9]]>
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          <![CDATA[<400> 31]]>
          Val Gln Tyr Ala Glu Phe Pro Trp Thr 
          1               5                   
          <![CDATA[<210> 32]]>
          <![CDATA[<211> 1210]]>
          <![CDATA[<212> PRT]]>
          <![CDATA[<213> 智人]]>
          <![CDATA[<400> 32]]>
          Met Arg Pro Ser Gly Thr Ala Gly Ala Ala Leu Leu Ala Leu Leu Ala 
          1               5                   10                  15      
          Ala Leu Cys Pro Ala Ser Arg Ala Leu Glu Glu Lys Lys Val Cys Gln 
                      20                  25                  30          
          Gly Thr Ser Asn Lys Leu Thr Gln Leu Gly Thr Phe Glu Asp His Phe 
                  35                  40                  45              
          Leu Ser Leu Gln Arg Met Phe Asn Asn Cys Glu Val Val Leu Gly Asn 
              50                  55                  60                  
          Leu Glu Ile Thr Tyr Val Gln Arg Asn Tyr Asp Leu Ser Phe Leu Lys 
          65                  70                  75                  80  
          Thr Ile Gln Glu Val Ala Gly Tyr Val Leu Ile Ala Leu Asn Thr Val 
                          85                  90                  95      
          Glu Arg Ile Pro Leu Glu Asn Leu Gln Ile Ile Arg Gly Asn Met Tyr 
                      100                 105                 110         
          Tyr Glu Asn Ser Tyr Ala Leu Ala Val Leu Ser Asn Tyr Asp Ala Asn 
                  115                 120                 125             
          Lys Thr Gly Leu Lys Glu Leu Pro Met Arg Asn Leu Gln Glu Ile Leu 
              130                 135                 140                 
          His Gly Ala Val Arg Phe Ser Asn Asn Pro Ala Leu Cys Asn Val Glu 
          145                 150                 155                 160 
          Ser Ile Gln Trp Arg Asp Ile Val Ser Ser Asp Phe Leu Ser Asn Met 
                          165                 170                 175     
          Ser Met Asp Phe Gln Asn His Leu Gly Ser Cys Gln Lys Cys Asp Pro 
                      180                 185                 190         
          Ser Cys Pro Asn Gly Ser Cys Trp Gly Ala Gly Glu Glu Asn Cys Gln 
                  195                 200                 205             
          Lys Leu Thr Lys Ile Ile Cys Ala Gln Gln Cys Ser Gly Arg Cys Arg 
              210                 215                 220                 
          Gly Lys Ser Pro Ser Asp Cys Cys His Asn Gln Cys Ala Ala Gly Cys 
          225                 230                 235                 240 
          Thr Gly Pro Arg Glu Ser Asp Cys Leu Val Cys Arg Lys Phe Arg Asp 
                          245                 250                 255     
          Glu Ala Thr Cys Lys Asp Thr Cys Pro Pro Leu Met Leu Tyr Asn Pro 
                      260                 265                 270         
          Thr Thr Tyr Gln Met Asp Val Asn Pro Glu Gly Lys Tyr Ser Phe Gly 
                  275                 280                 285             
          Ala Thr Cys Val Lys Lys Cys Pro Arg Asn Tyr Val Val Thr Asp His 
              290                 295                 300                 
          Gly Ser Cys Val Arg Ala Cys Gly Ala Asp Ser Tyr Glu Met Glu Glu 
          305                 310                 315                 320 
          Asp Gly Val Arg Lys Cys Lys Lys Cys Glu Gly Pro Cys Arg Lys Val 
                          325                 330                 335     
          Cys Asn Gly Ile Gly Ile Gly Glu Phe Lys Asp Ser Leu Ser Ile Asn 
                      340                 345                 350         
          Ala Thr Asn Ile Lys His Phe Lys Asn Cys Thr Ser Ile Ser Gly Asp 
                  355                 360                 365             
          Leu His Ile Leu Pro Val Ala Phe Arg Gly Asp Ser Phe Thr His Thr 
              370                 375                 380                 
          Pro Pro Leu Asp Pro Gln Glu Leu Asp Ile Leu Lys Thr Val Lys Glu 
          385                 390                 395                 400 
          Ile Thr Gly Phe Leu Leu Ile Gln Ala Trp Pro Glu Asn Arg Thr Asp 
                          405                 410                 415     
          Leu His Ala Phe Glu Asn Leu Glu Ile Ile Arg Gly Arg Thr Lys Gln 
                      420                 425                 430         
          His Gly Gln Phe Ser Leu Ala Val Val Ser Leu Asn Ile Thr Ser Leu 
                  435                 440                 445             
          Gly Leu Arg Ser Leu Lys Glu Ile Ser Asp Gly Asp Val Ile Ile Ser 
              450                 455                 460                 
          Gly Asn Lys Asn Leu Cys Tyr Ala Asn Thr Ile Asn Trp Lys Lys Leu 
          465                 470                 475                 480 
          Phe Gly Thr Ser Gly Gln Lys Thr Lys Ile Ile Ser Asn Arg Gly Glu 
                          485                 490                 495     
          Asn Ser Cys Lys Ala Thr Gly Gln Val Cys His Ala Leu Cys Ser Pro 
                      500                 505                 510         
          Glu Gly Cys Trp Gly Pro Glu Pro Arg Asp Cys Val Ser Cys Arg Asn 
                  515                 520                 525             
          Val Ser Arg Gly Arg Glu Cys Val Asp Lys Cys Asn Leu Leu Glu Gly 
              530                 535                 540                 
          Glu Pro Arg Glu Phe Val Glu Asn Ser Glu Cys Ile Gln Cys His Pro 
          545                 550                 555                 560 
          Glu Cys Leu Pro Gln Ala Met Asn Ile Thr Cys Thr Gly Arg Gly Pro 
                          565                 570                 575     
          Asp Asn Cys Ile Gln Cys Ala His Tyr Ile Asp Gly Pro His Cys Val 
                      580                 585                 590         
          Lys Thr Cys Pro Ala Gly Val Met Gly Glu Asn Asn Thr Leu Val Trp 
                  595                 600                 605             
          Lys Tyr Ala Asp Ala Gly His Val Cys His Leu Cys His Pro Asn Cys 
              610                 615                 620                 
          Thr Tyr Gly Cys Thr Gly Pro Gly Leu Glu Gly Cys Pro Thr Asn Gly 
          625                 630                 635                 640 
          Pro Lys Ile Pro Ser Ile Ala Thr Gly Met Val Gly Ala Leu Leu Leu 
                          645                 650                 655     
          Leu Leu Val Val Ala Leu Gly Ile Gly Leu Phe Met Arg Arg Arg His 
                      660                 665                 670         
          Ile Val Arg Lys Arg Thr Leu Arg Arg Leu Leu Gln Glu Arg Glu Leu 
                  675                 680                 685             
          Val Glu Pro Leu Thr Pro Ser Gly Glu Ala Pro Asn Gln Ala Leu Leu 
              690                 695                 700                 
          Arg Ile Leu Lys Glu Thr Glu Phe Lys Lys Ile Lys Val Leu Gly Ser 
          705                 710                 715                 720 
          Gly Ala Phe Gly Thr Val Tyr Lys Gly Leu Trp Ile Pro Glu Gly Glu 
                          725                 730                 735     
          Lys Val Lys Ile Pro Val Ala Ile Lys Glu Leu Arg Glu Ala Thr Ser 
                      740                 745                 750         
          Pro Lys Ala Asn Lys Glu Ile Leu Asp Glu Ala Tyr Val Met Ala Ser 
                  755                 760                 765             
          Val Asp Asn Pro His Val Cys Arg Leu Leu Gly Ile Cys Leu Thr Ser 
              770                 775                 780                 
          Thr Val Gln Leu Ile Thr Gln Leu Met Pro Phe Gly Cys Leu Leu Asp 
          785                 790                 795                 800 
          Tyr Val Arg Glu His Lys Asp Asn Ile Gly Ser Gln Tyr Leu Leu Asn 
                          805                 810                 815     
          Trp Cys Val Gln Ile Ala Lys Gly Met Asn Tyr Leu Glu Asp Arg Arg 
                      820                 825                 830         
          Leu Val His Arg Asp Leu Ala Ala Arg Asn Val Leu Val Lys Thr Pro 
                  835                 840                 845             
          Gln His Val Lys Ile Thr Asp Phe Gly Leu Ala Lys Leu Leu Gly Ala 
              850                 855                 860                 
          Glu Glu Lys Glu Tyr His Ala Glu Gly Gly Lys Val Pro Ile Lys Trp 
          865                 870                 875                 880 
          Met Ala Leu Glu Ser Ile Leu His Arg Ile Tyr Thr His Gln Ser Asp 
                          885                 890                 895     
          Val Trp Ser Tyr Gly Val Thr Val Trp Glu Leu Met Thr Phe Gly Ser 
                      900                 905                 910         
          Lys Pro Tyr Asp Gly Ile Pro Ala Ser Glu Ile Ser Ser Ile Leu Glu 
                  915                 920                 925             
          Lys Gly Glu Arg Leu Pro Gln Pro Pro Ile Cys Thr Ile Asp Val Tyr 
              930                 935                 940                 
          Met Ile Met Val Lys Cys Trp Met Ile Asp Ala Asp Ser Arg Pro Lys 
          945                 950                 955                 960 
          Phe Arg Glu Leu Ile Ile Glu Phe Ser Lys Met Ala Arg Asp Pro Gln 
                          965                 970                 975     
          Arg Tyr Leu Val Ile Gln Gly Asp Glu Arg Met His Leu Pro Ser Pro 
                      980                 985                 990         
          Thr Asp Ser Asn Phe Tyr Arg Ala  Leu Met Asp Glu Glu  Asp Met Asp 
                  995                 1000                 1005             
          Asp Val  Val Asp Ala Asp Glu  Tyr Leu Ile Pro Gln  Gln Gly Phe 
              1010                 1015                 1020             
          Phe Ser  Ser Pro Ser Thr Ser  Arg Thr Pro Leu Leu  Ser Ser Leu 
              1025                 1030                 1035             
          Ser Ala  Thr Ser Asn Asn Ser  Thr Val Ala Cys Ile  Asp Arg Asn 
              1040                 1045                 1050             
          Gly Leu  Gln Ser Cys Pro Ile  Lys Glu Asp Ser Phe  Leu Gln Arg 
              1055                 1060                 1065             
          Tyr Ser  Ser Asp Pro Thr Gly  Ala Leu Thr Glu Asp  Ser Ile Asp 
              1070                 1075                 1080             
          Asp Thr  Phe Leu Pro Val Pro  Glu Tyr Ile Asn Gln  Ser Val Pro 
              1085                 1090                 1095             
          Lys Arg  Pro Ala Gly Ser Val  Gln Asn Pro Val Tyr  His Asn Gln 
              1100                 1105                 1110             
          Pro Leu  Asn Pro Ala Pro Ser  Arg Asp Pro His Tyr  Gln Asp Pro 
              1115                 1120                 1125             
          His Ser  Thr Ala Val Gly Asn  Pro Glu Tyr Leu Asn  Thr Val Gln 
              1130                 1135                 1140             
          Pro Thr  Cys Val Asn Ser Thr  Phe Asp Ser Pro Ala  His Trp Ala 
              1145                 1150                 1155             
          Gln Lys  Gly Ser His Gln Ile  Ser Leu Asp Asn Pro  Asp Tyr Gln 
              1160                 1165                 1170             
          Gln Asp  Phe Phe Pro Lys Glu  Ala Lys Pro Asn Gly  Ile Phe Lys 
              1175                 1180                 1185             
          Gly Ser  Thr Ala Glu Asn Ala  Glu Tyr Leu Arg Val  Ala Pro Gln 
              1190                 1195                 1200             
          Ser Ser  Glu Phe Ile Gly Ala  
              1205                 1210 
          <![CDATA[<210> 33]]>
          <![CDATA[<211> 943]]>
          <![CDATA[<212> PRT]]>
          <![CDATA[<213> 智人]]>
          <![CDATA[<400> 33]]>
          Met Arg Pro Ser Gly Thr Ala Gly Ala Ala Leu Leu Ala Leu Leu Ala 
          1               5                   10                  15      
          Ala Leu Cys Pro Ala Ser Arg Ala Leu Glu Glu Lys Lys Gly Asn Tyr 
                      20                  25                  30          
          Val Val Thr Asp His Gly Ser Cys Val Arg Ala Cys Gly Ala Asp Ser 
                  35                  40                  45              
          Tyr Glu Met Glu Glu Asp Gly Val Arg Lys Cys Lys Lys Cys Glu Gly 
              50                  55                  60                  
          Pro Cys Arg Lys Val Cys Asn Gly Ile Gly Ile Gly Glu Phe Lys Asp 
          65                  70                  75                  80  
          Ser Leu Ser Ile Asn Ala Thr Asn Ile Lys His Phe Lys Asn Cys Thr 
                          85                  90                  95      
          Ser Ile Ser Gly Asp Leu His Ile Leu Pro Val Ala Phe Arg Gly Asp 
                      100                 105                 110         
          Ser Phe Thr His Thr Pro Pro Leu Asp Pro Gln Glu Leu Asp Ile Leu 
                  115                 120                 125             
          Lys Thr Val Lys Glu Ile Thr Gly Phe Leu Leu Ile Gln Ala Trp Pro 
              130                 135                 140                 
          Glu Asn Arg Thr Asp Leu His Ala Phe Glu Asn Leu Glu Ile Ile Arg 
          145                 150                 155                 160 
          Gly Arg Thr Lys Gln His Gly Gln Phe Ser Leu Ala Val Val Ser Leu 
                          165                 170                 175     
          Asn Ile Thr Ser Leu Gly Leu Arg Ser Leu Lys Glu Ile Ser Asp Gly 
                      180                 185                 190         
          Asp Val Ile Ile Ser Gly Asn Lys Asn Leu Cys Tyr Ala Asn Thr Ile 
                  195                 200                 205             
          Asn Trp Lys Lys Leu Phe Gly Thr Ser Gly Gln Lys Thr Lys Ile Ile 
              210                 215                 220                 
          Ser Asn Arg Gly Glu Asn Ser Cys Lys Ala Thr Gly Gln Val Cys His 
          225                 230                 235                 240 
          Ala Leu Cys Ser Pro Glu Gly Cys Trp Gly Pro Glu Pro Arg Asp Cys 
                          245                 250                 255     
          Val Ser Cys Arg Asn Val Ser Arg Gly Arg Glu Cys Val Asp Lys Cys 
                      260                 265                 270         
          Asn Leu Leu Glu Gly Glu Pro Arg Glu Phe Val Glu Asn Ser Glu Cys 
                  275                 280                 285             
          Ile Gln Cys His Pro Glu Cys Leu Pro Gln Ala Met Asn Ile Thr Cys 
              290                 295                 300                 
          Thr Gly Arg Gly Pro Asp Asn Cys Ile Gln Cys Ala His Tyr Ile Asp 
          305                 310                 315                 320 
          Gly Pro His Cys Val Lys Thr Cys Pro Ala Gly Val Met Gly Glu Asn 
                          325                 330                 335     
          Asn Thr Leu Val Trp Lys Tyr Ala Asp Ala Gly His Val Cys His Leu 
                      340                 345                 350         
          Cys His Pro Asn Cys Thr Tyr Gly Cys Thr Gly Pro Gly Leu Glu Gly 
                  355                 360                 365             
          Cys Pro Thr Asn Gly Pro Lys Ile Pro Ser Ile Ala Thr Gly Met Val 
              370                 375                 380                 
          Gly Ala Leu Leu Leu Leu Leu Val Val Ala Leu Gly Ile Gly Leu Phe 
          385                 390                 395                 400 
          Met Arg Arg Arg His Ile Val Arg Lys Arg Thr Leu Arg Arg Leu Leu 
                          405                 410                 415     
          Gln Glu Arg Glu Leu Val Glu Pro Leu Thr Pro Ser Gly Glu Ala Pro 
                      420                 425                 430         
          Asn Gln Ala Leu Leu Arg Ile Leu Lys Glu Thr Glu Phe Lys Lys Ile 
                  435                 440                 445             
          Lys Val Leu Gly Ser Gly Ala Phe Gly Thr Val Tyr Lys Gly Leu Trp 
              450                 455                 460                 
          Ile Pro Glu Gly Glu Lys Val Lys Ile Pro Val Ala Ile Lys Glu Leu 
          465                 470                 475                 480 
          Arg Glu Ala Thr Ser Pro Lys Ala Asn Lys Glu Ile Leu Asp Glu Ala 
                          485                 490                 495     
          Tyr Val Met Ala Ser Val Asp Asn Pro His Val Cys Arg Leu Leu Gly 
                      500                 505                 510         
          Ile Cys Leu Thr Ser Thr Val Gln Leu Ile Thr Gln Leu Met Pro Phe 
                  515                 520                 525             
          Gly Cys Leu Leu Asp Tyr Val Arg Glu His Lys Asp Asn Ile Gly Ser 
              530                 535                 540                 
          Gln Tyr Leu Leu Asn Trp Cys Val Gln Ile Ala Lys Gly Met Asn Tyr 
          545                 550                 555                 560 
          Leu Glu Asp Arg Arg Leu Val His Arg Asp Leu Ala Ala Arg Asn Val 
                          565                 570                 575     
          Leu Val Lys Thr Pro Gln His Val Lys Ile Thr Asp Phe Gly Leu Ala 
                      580                 585                 590         
          Lys Leu Leu Gly Ala Glu Glu Lys Glu Tyr His Ala Glu Gly Gly Lys 
                  595                 600                 605             
          Val Pro Ile Lys Trp Met Ala Leu Glu Ser Ile Leu His Arg Ile Tyr 
              610                 615                 620                 
          Thr His Gln Ser Asp Val Trp Ser Tyr Gly Val Thr Val Trp Glu Leu 
          625                 630                 635                 640 
          Met Thr Phe Gly Ser Lys Pro Tyr Asp Gly Ile Pro Ala Ser Glu Ile 
                          645                 650                 655     
          Ser Ser Ile Leu Glu Lys Gly Glu Arg Leu Pro Gln Pro Pro Ile Cys 
                      660                 665                 670         
          Thr Ile Asp Val Tyr Met Ile Met Val Lys Cys Trp Met Ile Asp Ala 
                  675                 680                 685             
          Asp Ser Arg Pro Lys Phe Arg Glu Leu Ile Ile Glu Phe Ser Lys Met 
              690                 695                 700                 
          Ala Arg Asp Pro Gln Arg Tyr Leu Val Ile Gln Gly Asp Glu Arg Met 
          705                 710                 715                 720 
          His Leu Pro Ser Pro Thr Asp Ser Asn Phe Tyr Arg Ala Leu Met Asp 
                          725                 730                 735     
          Glu Glu Asp Met Asp Asp Val Val Asp Ala Asp Glu Tyr Leu Ile Pro 
                      740                 745                 750         
          Gln Gln Gly Phe Phe Ser Ser Pro Ser Thr Ser Arg Thr Pro Leu Leu 
                  755                 760                 765             
          Ser Ser Leu Ser Ala Thr Ser Asn Asn Ser Thr Val Ala Cys Ile Asp 
              770                 775                 780                 
          Arg Asn Gly Leu Gln Ser Cys Pro Ile Lys Glu Asp Ser Phe Leu Gln 
          785                 790                 795                 800 
          Arg Tyr Ser Ser Asp Pro Thr Gly Ala Leu Thr Glu Asp Ser Ile Asp 
                          805                 810                 815     
          Asp Thr Phe Leu Pro Val Pro Glu Tyr Ile Asn Gln Ser Val Pro Lys 
                      820                 825                 830         
          Arg Pro Ala Gly Ser Val Gln Asn Pro Val Tyr His Asn Gln Pro Leu 
                  835                 840                 845             
          Asn Pro Ala Pro Ser Arg Asp Pro His Tyr Gln Asp Pro His Ser Thr 
              850                 855                 860                 
          Ala Val Gly Asn Pro Glu Tyr Leu Asn Thr Val Gln Pro Thr Cys Val 
          865                 870                 875                 880 
          Asn Ser Thr Phe Asp Ser Pro Ala His Trp Ala Gln Lys Gly Ser His 
                          885                 890                 895     
          Gln Ile Ser Leu Asp Asn Pro Asp Tyr Gln Gln Asp Phe Phe Pro Lys 
                      900                 905                 910         
          Glu Ala Lys Pro Asn Gly Ile Phe Lys Gly Ser Thr Ala Glu Asn Ala 
                  915                 920                 925             
          Glu Tyr Leu Arg Val Ala Pro Gln Ser Ser Glu Phe Ile Gly Ala 
              930                 935                 940             
          <![CDATA[<210> 34]]>
          <![CDATA[<211> 645]]>
          <![CDATA[<212> PRT]]>
          <![CDATA[<213> 智人]]>
          <![CDATA[<400> 34]]>
          Met Arg Pro Ser Gly Thr Ala Gly Ala Ala Leu Leu Ala Leu Leu Ala 
          1               5                   10                  15      
          Ala Leu Cys Pro Ala Ser Arg Ala Leu Glu Glu Lys Lys Val Cys Gln 
                      20                  25                  30          
          Gly Thr Ser Asn Lys Leu Thr Gln Leu Gly Thr Phe Glu Asp His Phe 
                  35                  40                  45              
          Leu Ser Leu Gln Arg Met Phe Asn Asn Cys Glu Val Val Leu Gly Asn 
              50                  55                  60                  
          Leu Glu Ile Thr Tyr Val Gln Arg Asn Tyr Asp Leu Ser Phe Leu Lys 
          65                  70                  75                  80  
          Thr Ile Gln Glu Val Ala Gly Tyr Val Leu Ile Ala Leu Asn Thr Val 
                          85                  90                  95      
          Glu Arg Ile Pro Leu Glu Asn Leu Gln Ile Ile Arg Gly Asn Met Tyr 
                      100                 105                 110         
          Tyr Glu Asn Ser Tyr Ala Leu Ala Val Leu Ser Asn Tyr Asp Ala Asn 
                  115                 120                 125             
          Lys Thr Gly Leu Lys Glu Leu Pro Met Arg Asn Leu Gln Glu Ile Leu 
              130                 135                 140                 
          His Gly Ala Val Arg Phe Ser Asn Asn Pro Ala Leu Cys Asn Val Glu 
          145                 150                 155                 160 
          Ser Ile Gln Trp Arg Asp Ile Val Ser Ser Asp Phe Leu Ser Asn Met 
                          165                 170                 175     
          Ser Met Asp Phe Gln Asn His Leu Gly Ser Cys Gln Lys Cys Asp Pro 
                      180                 185                 190         
          Ser Cys Pro Asn Gly Ser Cys Trp Gly Ala Gly Glu Glu Asn Cys Gln 
                  195                 200                 205             
          Lys Leu Thr Lys Ile Ile Cys Ala Gln Gln Cys Ser Gly Arg Cys Arg 
              210                 215                 220                 
          Gly Lys Ser Pro Ser Asp Cys Cys His Asn Gln Cys Ala Ala Gly Cys 
          225                 230                 235                 240 
          Thr Gly Pro Arg Glu Ser Asp Cys Leu Val Cys Arg Lys Phe Arg Asp 
                          245                 250                 255     
          Glu Ala Thr Cys Lys Asp Thr Cys Pro Pro Leu Met Leu Tyr Asn Pro 
                      260                 265                 270         
          Thr Thr Tyr Gln Met Asp Val Asn Pro Glu Gly Lys Tyr Ser Phe Gly 
                  275                 280                 285             
          Ala Thr Cys Val Lys Lys Cys Pro Arg Asn Tyr Val Val Thr Asp His 
              290                 295                 300                 
          Gly Ser Cys Val Arg Ala Cys Gly Ala Asp Ser Tyr Glu Met Glu Glu 
          305                 310                 315                 320 
          Asp Gly Val Arg Lys Cys Lys Lys Cys Glu Gly Pro Cys Arg Lys Val 
                          325                 330                 335     
          Cys Asn Gly Ile Gly Ile Gly Glu Phe Lys Asp Ser Leu Ser Ile Asn 
                      340                 345                 350         
          Ala Thr Asn Ile Lys His Phe Lys Asn Cys Thr Ser Ile Ser Gly Asp 
                  355                 360                 365             
          Leu His Ile Leu Pro Val Ala Phe Arg Gly Asp Ser Phe Thr His Thr 
              370                 375                 380                 
          Pro Pro Leu Asp Pro Gln Glu Leu Asp Ile Leu Lys Thr Val Lys Glu 
          385                 390                 395                 400 
          Ile Thr Gly Phe Leu Leu Ile Gln Ala Trp Pro Glu Asn Arg Thr Asp 
                          405                 410                 415     
          Leu His Ala Phe Glu Asn Leu Glu Ile Ile Arg Gly Arg Thr Lys Gln 
                      420                 425                 430         
          His Gly Gln Phe Ser Leu Ala Val Val Ser Leu Asn Ile Thr Ser Leu 
                  435                 440                 445             
          Gly Leu Arg Ser Leu Lys Glu Ile Ser Asp Gly Asp Val Ile Ile Ser 
              450                 455                 460                 
          Gly Asn Lys Asn Leu Cys Tyr Ala Asn Thr Ile Asn Trp Lys Lys Leu 
          465                 470                 475                 480 
          Phe Gly Thr Ser Gly Gln Lys Thr Lys Ile Ile Ser Asn Arg Gly Glu 
                          485                 490                 495     
          Asn Ser Cys Lys Ala Thr Gly Gln Val Cys His Ala Leu Cys Ser Pro 
                      500                 505                 510         
          Glu Gly Cys Trp Gly Pro Glu Pro Arg Asp Cys Val Ser Cys Arg Asn 
                  515                 520                 525             
          Val Ser Arg Gly Arg Glu Cys Val Asp Lys Cys Asn Leu Leu Glu Gly 
              530                 535                 540                 
          Glu Pro Arg Glu Phe Val Glu Asn Ser Glu Cys Ile Gln Cys His Pro 
          545                 550                 555                 560 
          Glu Cys Leu Pro Gln Ala Met Asn Ile Thr Cys Thr Gly Arg Gly Pro 
                          565                 570                 575     
          Asp Asn Cys Ile Gln Cys Ala His Tyr Ile Asp Gly Pro His Cys Val 
                      580                 585                 590         
          Lys Thr Cys Pro Ala Gly Val Met Gly Glu Asn Asn Thr Leu Val Trp 
                  595                 600                 605             
          Lys Tyr Ala Asp Ala Gly His Val Cys His Leu Cys His Pro Asn Cys 
              610                 615                 620                 
          Thr Tyr Gly Cys Thr Gly Pro Gly Leu Glu Gly Cys Pro Thr Asn Gly 
          625                 630                 635                 640 
          Pro Lys Ile Pro Ser 
                          645 
          <![CDATA[<210> 35]]>
          <![CDATA[<211> 11]]>
          <![CDATA[<212> PRT]]>
          <![CDATA[<213> 人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<221> 來源]]>
          <![CDATA[<223> /註釋=「人工序列之描述：合成肽」]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<221> VARIANT]]>
          <![CDATA[<222> (5)..(5)]]>
          <![CDATA[<223> /替代=「Gly」或「His」]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<221> VARIANT]]>
          <![CDATA[<222> (6)..(6)]]>
          <![CDATA[<223> /替代=「Arg」或「Asn」]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<221> MISC_FEATURE]]>
          <![CDATA[<222> (1)..(11)]]>
          <![CDATA[<223> /註釋=「序列中給出之變異體殘基對於關於變異]]>位置之
                     註釋中的該等殘基沒有偏好」
          <![CDATA[<400> 35]]>
          Gly Tyr Ser Ile Ser Ser Asp Phe Ala Trp Asn 
          1               5                   10      
          <![CDATA[<210> 36]]>
          <![CDATA[<211> 16]]>
          <![CDATA[<212> PRT]]>
          <![CDATA[<213> 人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<221> 來源]]>
          <![CDATA[<223> /註釋=「人工序列之描述：合成肽」]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<221> VARIANT]]>
          <![CDATA[<222> (5)..(5)]]>
          <![CDATA[<223> /替代=「Asn」或「Lys」]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<221> MISC_FEATURE]]>
          <![CDATA[<222> (1)..(16)]]>
          <![CDATA[<223> /註釋=「序列中給出之變異體殘基對於關於變異位置之註釋中的該等殘]]>
                     基沒有偏好」
          <![CDATA[<400> 36]]>
          Tyr Ile Ser Tyr Ser Gly Asn Thr Arg Tyr Gln Pro Ser Leu Lys Ser 
          1               5                   10                  15      
          <![CDATA[<210> 37]]>
          <![CDATA[<211> 7]]>
          <![CDATA[<212> PRT]]>
          <![CDATA[<213> 人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<221> 來源]]>
          <![CDATA[<223> /註釋=「人工序列之描述：合成肽」]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<221> VARIANT ]]>
          <![CDATA[<222> (3)..(3)]]>
          <![CDATA[<223> /替代=「Trp」]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<221> VARIANT ]]>
          <![CDATA[<222> (5)..(5)]]>
          <![CDATA[<223> /替代=「Leu」]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<221> VARIANT ]]>
          <![CDATA[<222> (7)..(7)]]>
          <![CDATA[<223> /替代=「Trp」]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<221> MISC_FEATURE]]>
          <![CDATA[<222> (1)..(7)]]>
          <![CDATA[<223> /註釋=「序列中給出之變異體殘基對於關於變異位置之註釋中的該等殘]]>
                     基沒有偏好」
          <![CDATA[<400> 37]]>
          Ala Ser Arg Gly Phe Pro Tyr 
          1               5           
          <![CDATA[<210> 38]]>
          <![CDATA[<211> 11]]>
          <![CDATA[<212> PRT]]>
          <![CDATA[<213> 人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<221> 來源]]>
          <![CDATA[<223> /註釋=「人工序列之描述：合成肽」]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<221> VARIANT]]>
          <![CDATA[<222> (7)..(7)]]>
          <![CDATA[<223> /替代=「Thr」]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<221> VARIANT ]]>
          <![CDATA[<222> (8)..(8)]]>
          <![CDATA[<223> /替代=「Met」或「Ser」]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<221> VARIANT ]]>
          <![CDATA[<222> (10)..(10)]]>
          <![CDATA[<223> /替代=「Val」]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<221> MISC_FEATURE]]>
          <![CDATA[<222> (1)..(11)]]>
          <![CDATA[<223> /註釋=「序列中給出之變異體殘基對於關於變異位置之註釋中的該等殘]]>
                     基沒有偏好」
          <![CDATA[<400> 38]]>
          His Ser Ser Gln Asp Ile Asn Tyr Asn Ile Gly 
          1               5                   10      
          <![CDATA[<210> 39]]>
          <![CDATA[<211> 7]]>
          <![CDATA[<212> PRT]]>
          <![CDATA[<213> 人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<221> 來源]]>
          <![CDATA[<223> /註釋=「人工序列之描述：合成肽」]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<221> VARIANT]]>
          <![CDATA[<222> (3)..(3)]]>
          <![CDATA[<223> /替代=「Ala」或「Ser」]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<221> VARIANT ]]>
          <![CDATA[<222> (4)..(4)]]>
          <![CDATA[<223> /替代=「Ile」]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<221> VARIANT ]]>
          <![CDATA[<222> (7)..(7)]]>
          <![CDATA[<223> /替代=「His」]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<221> MISC_FEATURE]]>
          <![CDATA[<222> (1)..(7)]]>
          <![CDATA[<223> /註釋=「序列中給出之變異體殘基對於關於變異位置之註釋中的該等殘]]>
                     基沒有偏好」
          <![CDATA[<400> 39]]>
          His Gly Thr Asn Leu Asp Asp 
          1               5           
          <![CDATA[<210> 40]]>
          <![CDATA[<211> 9]]>
          <![CDATA[<212> PRT]]>
          <![CDATA[<213> 人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<221> 來源]]>
          <![CDATA[<223> /註釋=「人工序列之描述：合成肽」]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<221> VARIANT]]>
          <![CDATA[<222> (4)..(4)]]>
          <![CDATA[<223> /替代=「Asp」]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<221> VARIANT]]>
          <![CDATA[<222> (5)..(5)]]>
          <![CDATA[<223> /替代=「Glu」或「Asp」]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<221> MISC_FEATURE]]>
          <![CDATA[<222> (1)..(9)]]>
          <![CDATA[<223> /註釋=「序列中給出之變異體殘基對於關於變異位置之註釋中的該等殘]]>
                     基沒有偏好」
          <![CDATA[<400> 40]]>
          Val Gln Tyr Ala Gln Phe Pro Trp Thr 
          1               5                   
          <![CDATA[<210> 41]]>
          <![CDATA[<211> 330]]>
          <![CDATA[<212> PRT]]>
          <![CDATA[<213> 智人]]>
          <![CDATA[<400>]]> 41
          Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys 
          1               5                   10                  15      
          Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr 
                      20                  25                  30          
          Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser 
                  35                  40                  45              
          Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser 
              50                  55                  60                  
          Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr 
          65                  70                  75                  80  
          Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys 
                          85                  90                  95      
          Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys 
                      100                 105                 110         
          Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro 
                  115                 120                 125             
          Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys 
              130                 135                 140                 
          Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp 
          145                 150                 155                 160 
          Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu 
                          165                 170                 175     
          Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu 
                      180                 185                 190         
          His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn 
                  195                 200                 205             
          Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly 
              210                 215                 220                 
          Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu 
          225                 230                 235                 240 
          Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr 
                          245                 250                 255     
          Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn 
                      260                 265                 270         
          Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe 
                  275                 280                 285             
          Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn 
              290                 295                 300                 
          Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr 
          305                 310                 315                 320 
          Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 
                          325                 330 
          <![CDATA[<210> 42]]>
          <![CDATA[<211> 330]]>
          <![CDATA[<212> PRT]]>
          <![CDATA[<213> 智人]]>
          <![CDATA[<400> 42]]>
          Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys 
          1               5                   10                  15      
          Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr 
                      20                  25                  30          
          Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser 
                  35                  40                  45              
          Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser 
              50                  55                  60                  
          Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr 
          65                  70                  75                  80  
          Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys 
                          85                  90                  95      
          Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys 
                      100                 105                 110         
          Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro 
                  115                 120                 125             
          Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys 
              130                 135                 140                 
          Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp 
          145                 150                 155                 160 
          Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu 
                          165                 170                 175     
          Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu 
                      180                 185                 190         
          His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn 
                  195                 200                 205             
          Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly 
              210                 215                 220                 
          Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu 
          225                 230                 235                 240 
          Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr 
                          245                 250                 255     
          Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn 
                      260                 265                 270         
          Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe 
                  275                 280                 285             
          Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn 
              290                 295                 300                 
          Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr 
          305                 310                 315                 320 
          Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 
                          325                 330 
          <![CDATA[<210> 43]]>
          <![CDATA[<211> 107]]>
          <![CDATA[<212> PRT]]>
          <![CDATA[<213> 智人]]>
          <![CDATA[<400> 43]]>
          Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu 
          1               5                   10                  15      
          Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe 
                      20                  25                  30          
          Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln 
                  35                  40                  45              
          Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser 
              50                  55                  60                  
          Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu 
          65                  70                  75                  80  
          Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser 
                          85                  90                  95      
          Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 
                      100                 105         
          <![CDATA[<210> 44]]>
          <![CDATA[<211> 105]]>
          <![CDATA[<212> PRT]]>
          <![CDATA[<213> 智人]]>
          <![CDATA[<400> 44]]>
          Gln Pro Lys Ala Ala Pro Ser Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser Glu 
          1               5                   10                  15      
          Glu Leu Gln Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp Phe 
                      20                  25                  30          
          Tyr Pro Gly Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Ser Ser Pro Val 
                  35                  40                  45              
          Lys Ala Gly Val Glu Thr Thr Thr Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn Lys 
              50                  55                  60                  
          Tyr Ala Ala Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys Ser 
          65                  70                  75                  80  
          His Arg Ser Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val Glu 
                          85                  90                  95      
          Lys Thr Val Ala Pro Thr Glu Cys Ser 
                      100                 105 
          <![CDATA[<210> 45]]>
          <![CDATA[<211> 16]]>
          <![CDATA[<212> PRT]]>
          <![CDATA[<213> 智人]]>
          <![CDATA[<400> 45]]>
          Cys Gly Ala Asp Ser Tyr Glu Met Glu Glu Asp Gly Val Arg Lys Cys 
          1               5                   10                  15      
          <![CDATA[<210> 46]]>
          <![CDATA[<211> 350]]>
          <![CDATA[<212> PRT]]>
          <![CDATA[<213> 智人]]>
          <![CDATA[<400> 46]]>
          Leu Glu Glu Lys Lys Gly Asn Tyr Val Val Thr Asp His Gly Ser Cys 
          1               5                   10                  15      
          Val Arg Ala Cys Gly Ala Asp Ser Tyr Glu Met Glu Glu Asp Gly Val 
                      20                  25                  30          
          Arg Lys Cys Lys Lys Cys Glu Gly Pro Cys Arg Lys Val Cys Asn Gly 
                  35                  40                  45              
          Ile Gly Ile Gly Glu Phe Lys Asp Ser Leu Ser Ile Asn Ala Thr Asn 
              50                  55                  60                  
          Ile Lys His Phe Lys Asn Cys Thr Ser Ile Ser Gly Asp Leu His Ile 
          65                  70                  75                  80  
          Leu Pro Val Ala Phe Arg Gly Asp Ser Phe Thr His Thr Pro Pro Leu 
                          85                  90                  95      
          Asp Pro Gln Glu Leu Asp Ile Leu Lys Thr Val Lys Glu Ile Thr Gly 
                      100                 105                 110         
          Phe Leu Leu Ile Gln Ala Trp Pro Glu Asn Arg Thr Asp Leu His Ala 
                  115                 120                 125             
          Phe Glu Asn Leu Glu Ile Ile Arg Gly Arg Thr Lys Gln His Gly Gln 
              130                 135                 140                 
          Phe Ser Leu Ala Val Val Ser Leu Asn Ile Thr Ser Leu Gly Leu Arg 
          145                 150                 155                 160 
          Ser Leu Lys Glu Ile Ser Asp Gly Asp Val Ile Ile Ser Gly Asn Lys 
                          165                 170                 175     
          Asn Leu Cys Tyr Ala Asn Thr Ile Asn Trp Lys Lys Leu Phe Gly Thr 
                      180                 185                 190         
          Ser Gly Gln Lys Thr Lys Ile Ile Ser Asn Arg Gly Glu Asn Ser Cys 
                  195                 200                 205             
          Lys Ala Thr Gly Gln Val Cys His Ala Leu Cys Ser Pro Glu Gly Cys 
              210                 215                 220                 
          Trp Gly Pro Glu Pro Arg Asp Cys Val Ser Cys Arg Asn Val Ser Arg 
          225                 230                 235                 240 
          Gly Arg Glu Cys Val Asp Lys Cys Asn Leu Leu Glu Gly Glu Pro Arg 
                          245                 250                 255     
          Glu Phe Val Glu Asn Ser Glu Cys Ile Gln Cys His Pro Glu Cys Leu 
                      260                 265                 270         
          Pro Gln Ala Met Asn Ile Thr Cys Thr Gly Arg Gly Pro Asp Asn Cys 
                  275                 280                 285             
          Ile Gln Cys Ala His Tyr Ile Asp Gly Pro His Cys Val Lys Thr Cys 
              290                 295                 300                 
          Pro Ala Gly Val Met Gly Glu Asn Asn Thr Leu Val Trp Lys Tyr Ala 
          305                 310                 315                 320 
          Asp Ala Gly His Val Cys His Leu Cys His Pro Asn Cys Thr Tyr Gly 
                          325                 330                 335     
          Cys Thr Gly Pro Gly Leu Glu Gly Cys Pro Thr Asn Gly Pro 
                      340                 345                 350 
          <![CDATA[<210> 47]]>
          <![CDATA[<211> 525]]>
          <![CDATA[<212> PRT]]>
          <![CDATA[<213> 智人]]>
          <![CDATA[<400> 47]]>
          Met Arg Pro Ser Gly Thr Ala Gly Ala Ala Leu Leu Ala Leu Leu Ala 
          1               5                   10                  15      
          Ala Leu Cys Pro Ala Ser Arg Ala Leu Glu Glu Lys Lys Val Cys Gln 
                      20                  25                  30          
          Gly Thr Ser Asn Lys Leu Thr Gln Leu Gly Thr Phe Glu Asp His Phe 
                  35                  40                  45              
          Leu Ser Leu Gln Arg Met Phe Asn Asn Cys Glu Val Val Leu Gly Asn 
              50                  55                  60                  
          Leu Glu Ile Thr Tyr Val Gln Arg Asn Tyr Asp Leu Ser Phe Leu Lys 
          65                  70                  75                  80  
          Thr Ile Gln Glu Val Ala Gly Tyr Val Leu Ile Ala Leu Asn Thr Val 
                          85                  90                  95      
          Glu Arg Ile Pro Leu Glu Asn Leu Gln Ile Ile Arg Gly Asn Met Tyr 
                      100                 105                 110         
          Tyr Glu Asn Ser Tyr Ala Leu Ala Val Leu Ser Asn Tyr Asp Ala Asn 
                  115                 120                 125             
          Lys Thr Gly Leu Lys Glu Leu Pro Met Arg Asn Leu Gln Glu Ile Leu 
              130                 135                 140                 
          His Gly Ala Val Arg Phe Ser Asn Asn Pro Ala Leu Cys Asn Val Glu 
          145                 150                 155                 160 
          Ser Ile Gln Trp Arg Asp Ile Val Ser Ser Asp Phe Leu Ser Asn Met 
                          165                 170                 175     
          Ser Met Asp Phe Gln Asn His Leu Gly Ser Cys Gln Lys Cys Asp Pro 
                      180                 185                 190         
          Ser Cys Pro Asn Gly Ser Cys Trp Gly Ala Gly Glu Glu Asn Cys Gln 
                  195                 200                 205             
          Lys Leu Thr Lys Ile Ile Cys Ala Gln Gln Cys Ser Gly Arg Cys Arg 
              210                 215                 220                 
          Gly Lys Ser Pro Ser Asp Cys Cys His Asn Gln Cys Ala Ala Gly Cys 
          225                 230                 235                 240 
          Thr Gly Pro Arg Glu Ser Asp Cys Leu Val Cys Arg Lys Phe Arg Asp 
                          245                 250                 255     
          Glu Ala Thr Cys Lys Asp Thr Cys Pro Pro Leu Met Leu Tyr Asn Pro 
                      260                 265                 270         
          Thr Thr Tyr Gln Met Asp Val Asn Pro Glu Gly Lys Tyr Ser Phe Gly 
                  275                 280                 285             
          Ala Thr Cys Val Lys Lys Cys Pro Arg Asn Tyr Val Val Thr Asp His 
              290                 295                 300                 
          Gly Ser Cys Val Arg Ala Cys Gly Ala Asp Ser Tyr Glu Met Glu Glu 
          305                 310                 315                 320 
          Asp Gly Val Arg Lys Cys Lys Lys Cys Glu Gly Pro Cys Arg Lys Val 
                          325                 330                 335     
          Cys Asn Gly Ile Gly Ile Gly Glu Phe Lys Asp Ser Leu Ser Ile Asn 
                      340                 345                 350         
          Ala Thr Asn Ile Lys His Phe Lys Asn Cys Thr Ser Ile Ser Gly Asp 
                  355                 360                 365             
          Leu His Ile Leu Pro Val Ala Phe Arg Gly Asp Ser Phe Thr His Thr 
              370                 375                 380                 
          Pro Pro Leu Asp Pro Gln Glu Leu Asp Ile Leu Lys Thr Val Lys Glu 
          385                 390                 395                 400 
          Ile Thr Gly Phe Leu Leu Ile Gln Ala Trp Pro Glu Asn Arg Thr Asp 
                          405                 410                 415     
          Leu His Ala Phe Glu Asn Leu Glu Ile Ile Arg Gly Arg Thr Lys Gln 
                      420                 425                 430         
          His Gly Gln Phe Ser Leu Ala Val Val Ser Leu Asn Ile Thr Ser Leu 
                  435                 440                 445             
          Gly Leu Arg Ser Leu Lys Glu Ile Ser Asp Gly Asp Val Ile Ile Ser 
              450                 455                 460                 
          Gly Asn Lys Asn Leu Cys Tyr Ala Asn Thr Ile Asn Trp Lys Lys Leu 
          465                 470                 475                 480 
          Phe Gly Thr Ser Gly Gln Lys Thr Lys Ile Ile Ser Asn Arg Gly Glu 
                          485                 490                 495     
          Asn Ser Cys Lys Ala Thr Gly Gln Val Cys His Ala Leu Cys Ser Pro 
                      500                 505                 510         
          Glu Gly Cys Trp Gly Pro Glu Pro Arg Asp Cys Val Ser 
                  515                 520                 525 
          <![CDATA[<210> 48]]>
          <![CDATA[<211> 452]]>
          <![CDATA[<212> PRT]]>
          <![CDATA[<213> 人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<221> 來源]]>
          <![CDATA[<223> /註釋=「人工序列之描述：合成多肽」]]>
          <![CDATA[<400> 48]]>
          Gln Val Gln Leu Lys Gln Ser Gly Pro Gly Leu Val Gln Pro Ser Gln 
          1               5                   10                  15      
          Ser Leu Ser Ile Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe Ser Leu Thr Asn Tyr 
                      20                  25                  30          
          Gly Val His Trp Val Arg Gln Ser Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Leu 
                  35                  40                  45              
          Gly Val Ile Trp Ser Gly Gly Asn Thr Asp Tyr Asn Thr Pro Phe Thr 
              50                  55                  60                  
          Ser Arg Leu Ser Ile Asn Lys Asp Asn Ser Lys Ser Gln Val Phe Phe 
          65                  70                  75                  80  
          Lys Met Asn Ser Leu Gln Ser Asn Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys Ala 
                          85                  90                  95      
          Arg Ala Leu Thr Tyr Tyr Asp Tyr Glu Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly 
                      100                 105                 110         
          Thr Leu Val Thr Val Ser Ala Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe 
                  115                 120                 125             
          Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu 
              130                 135                 140                 
          Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp 
          145                 150                 155                 160 
          Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu 
                          165                 170                 175     
          Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser 
                      180                 185                 190         
          Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro 
                  195                 200                 205             
          Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Pro Lys Ser Pro Lys Ser 
              210                 215                 220                 
          Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu 
          225                 230                 235                 240 
          Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu 
                          245                 250                 255     
          Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser 
                      260                 265                 270         
          His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu 
                  275                 280                 285             
          Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr 
              290                 295                 300                 
          Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn 
          305                 310                 315                 320 
          Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro 
                          325                 330                 335     
          Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln 
                      340                 345                 350         
          Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val 
                  355                 360                 365             
          Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val 
              370                 375                 380                 
          Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro 
          385                 390                 395                 400 
          Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr 
                          405                 410                 415     
          Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val 
                      420                 425                 430         
          Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu 
                  435                 440                 445             
          Ser Pro Gly Lys 
              450         
          <![CDATA[<210> 49]]>
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          <![CDATA[<212> PRT]]>
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          <![CDATA[<400> 49]]>
          Asp Ile Leu Leu Thr Gln Ser Pro Val Ile Leu Ser Val Ser Pro Gly 
          1               5                   10                  15      
          Glu Arg Val Ser Phe Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Gly Thr Asn 
                      20                  25                  30          
          Ile His Trp Tyr Gln Gln Arg Thr Asn Gly Ser Pro Arg Leu Leu Ile 
                  35                  40                  45              
          Lys Tyr Ala Ser Glu Ser Ile Ser Gly Ile Pro Ser Arg Phe Ser Gly 
              50                  55                  60                  
          Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Ser Ile Asn Ser Val Glu Ser 
          65                  70                  75                  80  
          Glu Asp Ile Ala Asp Tyr Tyr Cys Gln Gln Asn Asn Asn Trp Pro Thr 
                          85                  90                  95      
          Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys Arg Thr Val Ala Ala 
                      100                 105                 110         
          Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly 
                  115                 120                 125             
          Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala 
              130                 135                 140                 
          Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln 
          145                 150                 155                 160 
          Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser 
                          165                 170                 175     
          Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr 
                      180                 185                 190         
          Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser 
                  195                 200                 205             
          Phe Asn Arg Gly Ala 
              210             
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          <![CDATA[<221> 來源]]>
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          <![CDATA[<400> 50]]>
          Glu Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln 
          1               5                   10                  15      
          Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Tyr Ser Ile Ser Ser Asp 
                      20                  25                  30          
          Phe Ala Trp Asn Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp 
                  35                  40                  45              
          Met Gly Tyr Ile Ser Tyr Ser Gly Asn Thr Arg Tyr Gln Pro Ser Leu 
              50                  55                  60                  
          Lys Ser Arg Ile Thr Ile Ser Arg Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Phe 
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                      100                 105                 110         
          Thr Val Ser Ser 
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          Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Met Ser Val Ser Val Gly 
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          Leu Gly Trp Leu Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ser Phe Lys Gly Leu Ile 
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          Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 
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          Lys Ser Arg Ile Thr Ile Ser Arg Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Phe 
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          1               5                   10                  15      
          Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Tyr Ser Ile Gly Lys Asp 
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          Thr Val Ser Ser 
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          Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 
          65                  70                  75                  80  
          Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Val Gln Tyr Asp Glu Phe Pro Trp 
                          85                  90                  95      
          Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 
                      100                 105         
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          Glu Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln 
          1               5                   10                  15      
          Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Tyr Ser Ile Ser Arg Asp 
                      20                  25                  30          
          Phe Ala Trp Asn Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp 
                  35                  40                  45              
          Met Gly Tyr Ile Ser Tyr Asn Gly Asn Thr Arg Tyr Gln Pro Ser Leu 
              50                  55                  60                  
          Lys Ser Arg Ile Thr Ile Ser Arg Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Phe 
          65                  70                  75                  80  
          Leu Lys Leu Asn Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys 
                          85                  90                  95      
          Val Thr Ala Ser Arg Gly Phe Pro Trp Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val 
                      100                 105                 110         
          Thr Val Ser Ser 
                  115     
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          <![CDATA[<400> 75]]>
          Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Met Ser Val Ser Val Gly 
          1               5                   10                  15      
          Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys His Ser Ser Gln Asp Ile Thr Tyr Asn 
                      20                  25                  30          
          Val Gly Trp Leu Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ser Phe Lys Gly Leu Ile 
                  35                  40                  45              
          Tyr His Gly Ser Asn Leu Asp His Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 
              50                  55                  60                  
          Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 
          65                  70                  75                  80  
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                          85                  90                  95      
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                      100                 105         
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          Glu Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln 
          1               5                   10                  15      
          Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Tyr Ser Ile Gly Arg Asp 
                      20                  25                  30          
          Phe Ala Trp Asn Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp 
                  35                  40                  45              
          Met Gly Tyr Ile Ser Tyr Asn Gly Asn Thr Arg Tyr Gln Pro Ser Leu 
              50                  55                  60                  
          Lys Ser Arg Ile Thr Ile Ser Arg Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Phe 
          65                  70                  75                  80  
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                          85                  90                  95      
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                      100                 105                 110         
          Thr Val Ser Ser 
                  115     
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          Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Met Ser Val Ser Val Gly 
          1               5                   10                  15      
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              50                  55                  60                  
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              50                  55                  60                  
          Lys Ser Arg Ile Thr Ile Ser Arg Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Phe 
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                          85                  90                  95      
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          1               5                   10                  15      
          Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys His Ser Ser Gln Asp Ile Asn Met Asn 
                      20                  25                  30          
          Val Gly Trp Leu Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ser Phe Lys Gly Leu Ile 
                  35                  40                  45              
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              50                  55                  60                  
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          65                  70                  75                  80  
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                          85                  90                  95      
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          Gly Tyr Ser Ile Ser His Asp Phe Ala Trp Asn 
          1               5                   10      
          <![CDATA[<210> 82]]>
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          His Ser Ser Gln Asp Ile Asn Ser Asn Leu Gly 
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          His Gly Ala Asn Leu His Asp 
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          <![CDATA[<221> 來源]]>
          <![CDATA[<223> /註釋=「人工序列之描述：合成肽」]]>
          <![CDATA[<400> 84]]>
          Val Gln Tyr Glu Gln Phe Pro Trp Thr 
          1               5                   
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          <![CDATA[<211> 9]]>
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          <![CDATA[<213> 人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<221> 來源]]>
          <![CDATA[<223> /註釋=「人工序列之描述：合成肽」]]>
          <![CDATA[<400> 85]]>
          Val Gln Tyr Asp Gln Phe Pro Trp Thr 
          1               5                   
          <![CDATA[<210> 86]]>
          <![CDATA[<211> 1338]]>
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          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<221> 來源]]>
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          <![CDATA[<400> 86]]>
          gaggtgcaac tccaagagag cgggcccggc ctcgtgaagc cctctcagac tctgtccctg       60
          acttgcactg tgagcgggta ttccatcagc agagacttcg catggaactg gatccgccag      120
          cctcccggta agggactgga gtggatgggg tacatcagct acaacggtaa tacacgctat      180
          cagccctccc tgaagtctcg cattaccatt agtcgcgata cctccaagaa ccagttcttt      240
          ctgaaactca acagcgtgac agccgctgac accgccacct actactgcgt gaccgccagc      300
          agggggttcc cttactgggg ccagggcact ctggtcaccg tttcttctgc gtcgaccaag      360
          ggcccatcgg tcttccccct ggcaccctcc tccaagagca cctctggggg cacagcggcc      420
          ctgggctgcc tggtcaagga ctacttcccc gaaccggtga cggtgtcgtg gaactcaggc      480
          gccctgacca gcggcgtgca caccttcccg gctgtcctac agtcctcagg actctactcc      540
          ctcagcagcg tggtgaccgt gccctccagc agcttgggca cccagaccta catctgcaac      600
          gtgaatcaca agcccagcaa caccaaggtg gacaagaaag ttgagcccaa atcttgtgac      660
          aaaactcaca catgcccacc gtgcccagca cctgaactcc tggggggacc gtcagtcttc      720
          ctcttccccc caaaacccaa ggacaccctc atgatctccc ggacccctga ggtcacatgc      780
          gtggtggtgg acgtgagcca cgaagaccct gaggtcaagt tcaactggta cgtggacggc      840
          gtggaggtgc ataatgccaa gacaaagccg cgggaggagc agtacaacag cacgtaccgt      900
          gtggtcagcg tcctcaccgt cctgcaccag gactggctga atggcaagga gtacaagtgc      960
          aaggtctcca acaaagccct cccagccccc atcgagaaaa ccatctccaa agccaaaggg     1020
          cagccccgag aaccacaggt gtacaccctg cccccatccc gcgaggagat gaccaagaac     1080
          caggtcagcc tgacctgcct ggtcaaaggc ttctatccca gcgacatcgc cgtggagtgg     1140
          gagagcaatg ggcagccgga gaacaactac aagaccacgc ctcccgtgct ggactccgac     1200
          ggctccttct tcctctacag caagctcacc gtggacaaga gcaggtggca gcaggggaac     1260
          gtcttctcat gctccgtgat gcatgaggct ctgcacaacc actacacgca gaagagcctc     1320
          tccctgtctc cgggtaaa                                                   1338
          <![CDATA[<210> 87]]>
          <![CDATA[<211> 642]]>
          <![CDATA[<212> DNA]]>
          <![CDATA[<213> 人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<221> 來源]]>
          <![CDATA[<223> /註釋=「人工序列之描述：合成聚核苷酸」]]>
          <![CDATA[<400> 87]]>
          gacatccaga tgacccagtc cccctccagt atgtctgtgt ctgtgggcga ccgtgtgacc       60
          attacctgcc actcctccca ggacatcaat agcaatatcg gttggttgca acagaagcca      120
          ggcaagtcct tcaaagggct gatttaccat ggtaccaacc tggacgacgg ggttcctagt      180
          cgtttcagcg gctccgggtc cggaaccgat tacactctga ccatcagcag tttgcagcct      240
          gaggactttg ctacctatta ttgtgtgcag tacgctcagt tcccatggac tttcggcggg      300
          ggcaccaaac tggagatcaa acgtacggtg gctgcaccat ctgtcttcat cttcccgcca      360
          tctgatgagc agttgaaatc tggaactgcc tctgttgtgt gcctgctgaa taacttctat      420
          cccagagagg ccaaagtaca gtggaaggtg gataacgccc tccaatcggg taactcccag      480
          gagagtgtca cagagcagga cagcaaggac agcacctaca gcctcagcag caccctgacg      540
          ctgagcaaag cagactacga gaaacacaaa gtctacgcct gcgaagtcac ccatcagggc      600
          ctgagctcgc ccgtcacaaa gagcttcaac aggggagagt gt                         642
          <![CDATA[<210> 88]]>
          <![CDATA[<211> 19]]>
          <![CDATA[<212> PRT]]>
          <![CDATA[<213> 人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<221> 來源]]>
          <![CDATA[<223> /註釋=「人工序列之描述：合成肽」]]>
          <![CDATA[<400> 88]]>
          Met Glu Phe Gly Leu Ser Trp Leu Phe Leu Val Ala Ile Leu Lys Gly 
          1               5                   10                  15      
          Val Gln Cys 
          <![CDATA[<210> 89]]>
          <![CDATA[<211> 20]]>
          <![CDATA[<212> PRT]]>
          <![CDATA[<213> 人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<221> 來源]]>
          <![CDATA[<223> /註釋=「人工序列之描述：合成肽」]]>
          <![CDATA[<400> 89]]>
          Met Arg Val Pro Ala Gln Leu Leu Gly Leu Leu Leu Leu Trp Phe Pro 
          1               5                   10                  15      
          Gly Ser Arg Cys 
                      20  
          <![CDATA[<210> 90]]>
          <![CDATA[<211> 446]]>
          <![CDATA[<212> PRT]]>
          <![CDATA[<213> 人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<221> 來源]]>
          <![CDATA[<223> /註釋=「人工序列之描述：合成多肽」]]>
          <![CDATA[<400> 90]]>
          Glu Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln 
          1               5                   10                  15      
          Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Tyr Ser Ile Ser Asn Asp 
                      20                  25                  30          
          Phe Ala Trp Asn Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp 
                  35                  40                  45              
          Met Gly Tyr Ile Ser Tyr Lys Gly Asn Thr Arg Tyr Gln Pro Ser Leu 
              50                  55                  60                  
          Lys Ser Arg Ile Thr Ile Ser Arg Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Phe 
          65                  70                  75                  80  
          Leu Lys Leu Asn Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys 
                          85                  90                  95      
          Val Thr Ala Ser Arg Gly Phe Pro Trp Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val 
                      100                 105                 110         
          Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala 
                  115                 120                 125             
          Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu 
              130                 135                 140                 
          Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly 
          145                 150                 155                 160 
          Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser 
                          165                 170                 175     
          Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu 
                      180                 185                 190         
          Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr 
                  195                 200                 205             
          Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr 
              210                 215                 220                 
          Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe 
          225                 230                 235                 240 
          Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro 
                          245                 250                 255     
          Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val 
                      260                 265                 270         
          Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr 
                  275                 280                 285             
          Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val 
              290                 295                 300                 
          Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys 
          305                 310                 315                 320 
          Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser 
                          325                 330                 335     
          Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro 
                      340                 345                 350         
          Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val 
                  355                 360                 365             
          Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly 
              370                 375                 380                 
          Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp 
          385                 390                 395                 400 
          Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp 
                          405                 410                 415     
          Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His 
                      420                 425                 430         
          Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 
                  435                 440                 445     
          <![CDATA[<210]]>> 91]]&gt;
          <br/>&lt;![CDATA[&lt;211&gt; 446]]&gt;
          <br/>&lt;![CDATA[&lt;212&gt; PRT]]&gt;
          <br/>&lt;![CDATA[&lt;213&gt; 人工序列]]&gt;
          <br/>
          <br/>&lt;![CDATA[&lt;220&gt;]]&gt;
          <br/>&lt;![CDATA[&lt;221&gt; 來源]]&gt;
          <br/>&lt;![CDATA[&lt;223&gt; /註釋=「人工序列之描述：合成多肽」]]&gt;
          <br/>
          <br/>&lt;![CDATA[&lt;400&gt; 91]]&gt;
          <br/><![CDATA[Glu Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln 
          1               5                   10                  15      
          Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Tyr Ser Ile Ser Asn Asp 
                      20                  25                  30          
          Phe Ala Trp Asn Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp 
                  35                  40                  45              
          Met Gly Tyr Ile Ser Tyr Lys Gly Asn Thr Arg Tyr Gln Pro Ser Leu 
              50                  55                  60                  
          Lys Ser Arg Ile Thr Ile Ser Arg Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Phe 
          65                  70                  75                  80  
          Leu Lys Leu Asn Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys 
                          85                  90                  95      
          Val Thr Ala Ser Arg Gly Phe Pro Trp Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val 
                      100                 105                 110         
          Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala 
                  115                 120                 125             
          Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu 
              130                 135                 140                 
          Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly 
          145                 150                 155                 160 
          Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser 
                          165                 170                 175     
          Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu 
                      180                 185                 190         
          Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr 
                  195                 200                 205             
          Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr 
              210                 215                 220                 
          Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly Gly Pro Ser Val Phe 
          225                 230                 235                 240 
          Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro 
                          245                 250                 255     
          Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val 
                      260                 265                 270         
          Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr 
                  275                 280                 285             
          Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val 
              290                 295                 300                 
          Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys 
          305                 310                 315                 320 
          Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser 
                          325                 330                 335     
          Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro 
                      340                 345                 350         
          Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val 
                  355                 360                 365             
          Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly 
              370                 375                 380                 
          Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp 
          385                 390                 395                 400 
          Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp 
                          405                 410                 415     
          Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His 
                      420                 425                 430         
          Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 
                  435                 440                 445     
          <![CDATA[<210> 92]]>
          <![CDATA[<211> 214]]>
          <![CDATA[<212> PRT]]>
          <![CDATA[<213> 人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<221> 來源]]>
          <![CDATA[<223> /註釋=「人工序列之描述：合成多肽」]]>
          <![CDATA[<400> 92]]>
          Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Met Ser Val Ser Val Gly 
          1               5                   10                  15      
          Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys His Ser Ser Gln Asp Ile Asn Ser Asn 
                      20                  25                  30          
          Ile Gly Trp Leu Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ser Phe Lys Gly Leu Ile 
                  35                  40                  45              
          Tyr His Gly Thr Asn Leu Asp Asp Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 
              50                  55                  60                  
          Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 
          65                  70                  75                  80  
          Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Val Gln Tyr Ala Gln Phe Pro Trp 
                          85                  90                  95      
          Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala 
                      100                 105                 110         
          Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly 
                  115                 120                 125             
          Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala 
              130                 135                 140                 
          Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln 
          145                 150                 155                 160 
          Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser 
                          165                 170                 175     
          Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr 
                      180                 185                 190         
          Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser 
                  195                 200                 205             
          Phe Asn Arg Gly Glu Cys 
              210                 
          <![CDATA[<210> 93]]>
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          <![CDATA[<400> 93]]>
          Glu Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln 
          1               5                   10                  15      
          Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Tyr Ser Ile Ser Asn Asp 
                      20                  25                  30          
          Phe Ala Trp Asn Trp Ile Arg Gln Leu Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp 
                  35                  40                  45              
          Met Gly Tyr Ile Ser Tyr Lys Gly Asn Thr Arg Tyr Gln Pro Ser Leu 
              50                  55                  60                  
          Lys Ser Arg Ile Thr Ile Ser Arg Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Phe 
          65                  70                  75                  80  
          Leu Lys Leu Asn Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys 
                          85                  90                  95      
          Val Thr Ala Ser Arg Gly Leu Pro Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val 
                      100                 105                 110         
          Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala 
                  115                 120                 125             
          Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu 
              130                 135                 140                 
          Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly 
          145                 150                 155                 160 
          Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser 
                          165                 170                 175     
          Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu 
                      180                 185                 190         
          Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr 
                  195                 200                 205             
          Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr 
              210                 215                 220                 
          Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe 
          225                 230                 235                 240 
          Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro 
                          245                 250                 255     
          Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val 
                      260                 265                 270         
          Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr 
                  275                 280                 285             
          Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val 
              290                 295                 300                 
          Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys 
          305                 310                 315                 320 
          Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser 
                          325                 330                 335     
          Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro 
                      340                 345                 350         
          Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val 
                  355                 360                 365             
          Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly 
              370                 375                 380                 
          Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp 
          385                 390                 395                 400 
          Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp 
                          405                 410                 415     
          Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His 
                      420                 425                 430         
          Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 
                  435                 440                 445     
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          Glu Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln 
          1               5                   10                  15      
          Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Tyr Ser Ile Ser Asn Asp 
                      20                  25                  30          
          Phe Ala Trp Asn Trp Ile Arg Gln Leu Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp 
                  35                  40                  45              
          Met Gly Tyr Ile Ser Tyr Lys Gly Asn Thr Arg Tyr Gln Pro Ser Leu 
              50                  55                  60                  
          Lys Ser Arg Ile Thr Ile Ser Arg Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Phe 
          65                  70                  75                  80  
          Leu Lys Leu Asn Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys 
                          85                  90                  95      
          Val Thr Ala Ser Arg Gly Leu Pro Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val 
                      100                 105                 110         
          Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala 
                  115                 120                 125             
          Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu 
              130                 135                 140                 
          Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly 
          145                 150                 155                 160 
          Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser 
                          165                 170                 175     
          Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu 
                      180                 185                 190         
          Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr 
                  195                 200                 205             
          Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr 
              210                 215                 220                 
          Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly Gly Pro Ser Val Phe 
          225                 230                 235                 240 
          Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro 
                          245                 250                 255     
          Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val 
                      260                 265                 270         
          Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr 
                  275                 280                 285             
          Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val 
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          Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys 
          305                 310                 315                 320 
          Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser 
                          325                 330                 335     
          Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro 
                      340                 345                 350         
          Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val 
                  355                 360                 365             
          Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly 
              370                 375                 380                 
          Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp 
          385                 390                 395                 400 
          Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp 
                          405                 410                 415     
          Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His 
                      420                 425                 430         
          Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 
                  435                 440                 445     
          <![CDATA[<210> 95]]>
          <![CDATA[<211> 214]]>
          <![CDATA[<212> PRT]]>
          <![CDATA[<213> 人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<221> 來源]]>
          <![CDATA[<223> /註釋=「人工序列之描述：合成多肽」]]>
          <![CDATA[<400> 95]]>
          Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Met Ser Val Ser Val Gly 
          1               5                   10                  15      
          Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys His Ser Ser Gln Asp Ile Thr Tyr Asn 
                      20                  25                  30          
          Ile Gly Trp Leu Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ser Phe Lys Gly Leu Ile 
                  35                  40                  45              
          Tyr His Gly Ala Asn Leu Asp Asp Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 
              50                  55                  60                  
          Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 
          65                  70                  75                  80  
          Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Val Gln Tyr Asp Glu Phe Pro Trp 
                          85                  90                  95      
          Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala 
                      100                 105                 110         
          Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly 
                  115                 120                 125             
          Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala 
              130                 135                 140                 
          Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln 
          145                 150                 155                 160 
          Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser 
                          165                 170                 175     
          Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr 
                      180                 185                 190         
          Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser 
                  195                 200                 205             
          Phe Asn Arg Gly Glu Cys 
              210                 
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          <![CDATA[<400> 96]]>
          Glu Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln 
          1               5                   10                  15      
          Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Tyr Ser Ile Ser Arg Asp 
                      20                  25                  30          
          Phe Ala Trp Asn Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp 
                  35                  40                  45              
          Met Gly Tyr Ile Ser Tyr Asn Gly Asn Thr Arg Tyr Gln Pro Ser Leu 
              50                  55                  60                  
          Lys Ser Arg Ile Thr Ile Ser Arg Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Phe 
          65                  70                  75                  80  
          Leu Lys Leu Asn Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys 
                          85                  90                  95      
          Val Thr Ala Ser Arg Gly Phe Pro Trp Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val 
                      100                 105                 110         
          Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala 
                  115                 120                 125             
          Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu 
              130                 135                 140                 
          Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly 
          145                 150                 155                 160 
          Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser 
                          165                 170                 175     
          Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu 
                      180                 185                 190         
          Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr 
                  195                 200                 205             
          Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr 
              210                 215                 220                 
          Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe 
          225                 230                 235                 240 
          Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro 
                          245                 250                 255     
          Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val 
                      260                 265                 270         
          Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr 
                  275                 280                 285             
          Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val 
              290                 295                 300                 
          Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys 
          305                 310                 315                 320 
          Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser 
                          325                 330                 335     
          Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro 
                      340                 345                 350         
          Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val 
                  355                 360                 365             
          Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly 
              370                 375                 380                 
          Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp 
          385                 390                 395                 400 
          Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp 
                          405                 410                 415     
          Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His 
                      420                 425                 430         
          Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 
                  435                 440                 445     
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          Glu Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln 
          1               5                   10                  15      
          Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Tyr Ser Ile Ser Arg Asp 
                      20                  25                  30          
          Phe Ala Trp Asn Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp 
                  35                  40                  45              
          Met Gly Tyr Ile Ser Tyr Asn Gly Asn Thr Arg Tyr Gln Pro Ser Leu 
              50                  55                  60                  
          Lys Ser Arg Ile Thr Ile Ser Arg Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Phe 
          65                  70                  75                  80  
          Leu Lys Leu Asn Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys 
                          85                  90                  95      
          Val Thr Ala Ser Arg Gly Phe Pro Trp Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val 
                      100                 105                 110         
          Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala 
                  115                 120                 125             
          Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu 
              130                 135                 140                 
          Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly 
          145                 150                 155                 160 
          Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser 
                          165                 170                 175     
          Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu 
                      180                 185                 190         
          Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr 
                  195                 200                 205             
          Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr 
              210                 215                 220                 
          Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly Gly Pro Ser Val Phe 
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          Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr 
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          Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val 
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          Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys 
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          Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro 
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          Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val 
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          Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly 
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          Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp 
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          Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp 
                          405                 410                 415     
          Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His 
                      420                 425                 430         
          Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 
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          <![CDATA[<212> PRT]]>
          <![CDATA[<213> 人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<221> 來源]]>
          <![CDATA[<223> /註釋=「人工序列之描述：合成多肽」]]>
          <![CDATA[<400> 98]]>
          Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Met Ser Val Ser Val Gly 
          1               5                   10                  15      
          Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys His Ser Ser Gln Asp Ile Thr Tyr Asn 
                      20                  25                  30          
          Val Gly Trp Leu Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ser Phe Lys Gly Leu Ile 
                  35                  40                  45              
          Tyr His Gly Ser Asn Leu Asp His Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 
              50                  55                  60                  
          Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 
          65                  70                  75                  80  
          Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Val Gln Tyr Asp Asp Phe Pro Trp 
                          85                  90                  95      
          Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala 
                      100                 105                 110         
          Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly 
                  115                 120                 125             
          Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala 
              130                 135                 140                 
          Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln 
          145                 150                 155                 160 
          Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser 
                          165                 170                 175     
          Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr 
                      180                 185                 190         
          Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser 
                  195                 200                 205             
          Phe Asn Arg Gly Glu Cys 
              210                 
          <![CDATA[<210> 99]]>
          <![CDATA[<211> 4]]>
          <![CDATA[<212> PRT]]>
          <![CDATA[<213> 人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<221> 來源]]>
          <![CDATA[<223> /註釋=「人工序列之描述：合成肽」]]>
          <![CDATA[<400> 99]]>
          Gly Phe Leu Gly 
          1               
          <![CDATA[<210> 100]]>
          <![CDATA[<211> 4]]>
          <![CDATA[<212> PRT]]>
          <![CDATA[<213> 人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<221> 來源]]>
          <![CDATA[<223> /註釋=「人工序列之描述：合成肽」]]>
          <![CDATA[<400> 100]]>
          Ala Leu Ala Leu 
          1               
          <![CDATA[<210> 101]]>
          <![CDATA[<211> 5]]>
          <![CDATA[<212> PRT]]>
          <![CDATA[<213> 人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<221> 來源]]>
          <![CDATA[<223> /註釋=「人工序列之描述：合成肽」]]>
          <![CDATA[<400> 101]]>
          Tyr Tyr Tyr Tyr Tyr 
          1               5   
          <![CDATA[<210> 102]]>
          <![CDATA[<211> 446]]>
          <![CDATA[<212> PRT]]>
          <![CDATA[<213> 人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<221> 來源]]>
          <![CDATA[<223> /註釋=「人工序列之描述：合成多肽」]]>
          <![CDATA[<400> 102]]>
          Glu Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln 
          1               5                   10                  15      
          Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Tyr Ser Ile Ser Arg Asp 
                      20                  25                  30          
          Phe Ala Trp Asn Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp 
                  35                  40                  45              
          Met Gly Tyr Ile Ser Tyr Asn Gly Asn Thr Arg Tyr Gln Pro Ser Leu 
              50                  55                  60                  
          Lys Ser Arg Ile Thr Ile Ser Arg Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Phe 
          65                  70                  75                  80  
          Leu Lys Leu Asn Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys 
                          85                  90                  95      
          Val Thr Ala Ser Arg Gly Phe Pro Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val 
                      100                 105                 110         
          Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala 
                  115                 120                 125             
          Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu 
              130                 135                 140                 
          Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly 
          145                 150                 155                 160 
          Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser 
                          165                 170                 175     
          Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu 
                      180                 185                 190         
          Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr 
                  195                 200                 205             
          Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr 
              210                 215                 220                 
          Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe 
          225                 230                 235                 240 
          Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro 
                          245                 250                 255     
          Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val 
                      260                 265                 270         
          Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr 
                  275                 280                 285             
          Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val 
              290                 295                 300                 
          Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys 
          305                 310                 315                 320 
          Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser 
                          325                 330                 335     
          Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro 
                      340                 345                 350         
          Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val 
                  355                 360                 365             
          Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly 
              370                 375                 380                 
          Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp 
          385                 390                 395                 400 
          Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp 
                          405                 410                 415     
          Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His 
                      420                 425                 430         
          Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 
                  435                 440                 445
Figure 12_A0101_SEQ_0001
Figure 12_A0101_SEQ_0002
Figure 12_A0101_SEQ_0003
Figure 12_A0101_SEQ_0004
Figure 12_A0101_SEQ_0005
Figure 12_A0101_SEQ_0006
Figure 12_A0101_SEQ_0007
Figure 12_A0101_SEQ_0008
Figure 12_A0101_SEQ_0009
Figure 12_A0101_SEQ_0010
Figure 12_A0101_SEQ_0011
Figure 12_A0101_SEQ_0012
Figure 12_A0101_SEQ_0013
Figure 12_A0101_SEQ_0014
Figure 12_A0101_SEQ_0015
Figure 12_A0101_SEQ_0016
Figure 12_A0101_SEQ_0017
Figure 12_A0101_SEQ_0018
Figure 12_A0101_SEQ_0019
Figure 12_A0101_SEQ_0020
Figure 12_A0101_SEQ_0021
Figure 12_A0101_SEQ_0022
Figure 12_A0101_SEQ_0023
Figure 12_A0101_SEQ_0024
Figure 12_A0101_SEQ_0025
Figure 12_A0101_SEQ_0026
Figure 12_A0101_SEQ_0027
Figure 12_A0101_SEQ_0028
Figure 12_A0101_SEQ_0029
Figure 12_A0101_SEQ_0030
Figure 12_A0101_SEQ_0031
Figure 12_A0101_SEQ_0032
Figure 12_A0101_SEQ_0033
Figure 12_A0101_SEQ_0034
Figure 12_A0101_SEQ_0035
Figure 12_A0101_SEQ_0036
Figure 12_A0101_SEQ_0037
Figure 12_A0101_SEQ_0038
Figure 12_A0101_SEQ_0039
Figure 12_A0101_SEQ_0040
Figure 12_A0101_SEQ_0041
Figure 12_A0101_SEQ_0042
Figure 12_A0101_SEQ_0043
Figure 12_A0101_SEQ_0044
Figure 12_A0101_SEQ_0045
Figure 12_A0101_SEQ_0046
Figure 12_A0101_SEQ_0047
Figure 12_A0101_SEQ_0048
Figure 12_A0101_SEQ_0049
Figure 12_A0101_SEQ_0050
Figure 12_A0101_SEQ_0051
Figure 12_A0101_SEQ_0052
Figure 12_A0101_SEQ_0053
Figure 12_A0101_SEQ_0054
Figure 12_A0101_SEQ_0055
Figure 12_A0101_SEQ_0056
Figure 12_A0101_SEQ_0057
Figure 12_A0101_SEQ_0058
Figure 12_A0101_SEQ_0059
Figure 12_A0101_SEQ_0060
Figure 12_A0101_SEQ_0061
Figure 12_A0101_SEQ_0062
Figure 12_A0101_SEQ_0063
Figure 12_A0101_SEQ_0064
Figure 12_A0101_SEQ_0065
Figure 12_A0101_SEQ_0066
Figure 12_A0101_SEQ_0067
Figure 12_A0101_SEQ_0068
Figure 12_A0101_SEQ_0069
Figure 12_A0101_SEQ_0070
Figure 12_A0101_SEQ_0071
Figure 12_A0101_SEQ_0072
Figure 12_A0101_SEQ_0073
Figure 12_A0101_SEQ_0074
Figure 12_A0101_SEQ_0075
Figure 12_A0101_SEQ_0076
Figure 12_A0101_SEQ_0077
Figure 12_A0101_SEQ_0078
Figure 12_A0101_SEQ_0079
Figure 12_A0101_SEQ_0080
Figure 12_A0101_SEQ_0081
Figure 12_A0101_SEQ_0082
Figure 12_A0101_SEQ_0083
Figure 12_A0101_SEQ_0084
Figure 12_A0101_SEQ_0085
Figure 12_A0101_SEQ_0086
Figure 12_A0101_SEQ_0087
Figure 12_A0101_SEQ_0088
Figure 12_A0101_SEQ_0089
Figure 12_A0101_SEQ_0090
Figure 12_A0101_SEQ_0091
Figure 12_A0101_SEQ_0092
Figure 12_A0101_SEQ_0093
Figure 12_A0101_SEQ_0094
Figure 12_A0101_SEQ_0095
Figure 12_A0101_SEQ_0096
Figure 12_A0101_SEQ_0097
Figure 12_A0101_SEQ_0098
Figure 12_A0101_SEQ_0099
Figure 111128039-A0101-11-0001-1

Claims (3)

  1. 一種抗人類表皮生長因子受體(hEGFR)抗體藥物結合物，其包含以下結構：
    Figure 03_image1417
    ， 其中Ab係IgG1抗EGFR抗體，其包含 重鏈可變區，其包含：包含SEQ ID NO: 19所述之胺基酸序列之重鏈CDR3結構域、包含SEQ ID NO: 17所述之胺基酸序列之重鏈CDR2結構域及包含SEQ ID NO:16所述之胺基酸序列之重鏈CDR1結構域；及 輕鏈可變區，其包含：包含SEQ ID NO: 8所述之胺基酸序列之輕鏈CDR3結構域、包含SEQ ID NO: 7所述之胺基酸序列之輕鏈CDR2結構域及包含SEQ ID NO: 6所述之胺基酸序列之輕鏈CDR1結構域；且 其中m為2。
  2. 如請求項1之抗體藥物結合物，其中該抗EGFR抗體包括：包含SEQ ID NO: 64所述之胺基酸序列之重鏈可變區及包含SEQ ID NO: 65所述之胺基酸序列之輕鏈可變區。
  3. 如請求項1之抗體藥物結合物，其中該抗體包含：包含SEQ ID NO: 90所述之胺基酸序列之重鏈及包含SEQ ID NO: 92所述之胺基酸序列之輕鏈。
TW111128039A 2016-06-08 2017-06-07 抗egfr抗體藥物結合物 TW202320860A (zh)

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Families Citing this family (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
AU2017277534A1 (en) * 2016-06-08 2019-01-03 Abbvie Inc. Anti-EGFR antibody drug conjugates
EP3835322A3 (en) 2016-06-08 2021-10-06 AbbVie Inc. Anti-b7-h3 antibodies and antibody drug conjugates
CN111065623A (zh) * 2017-05-24 2020-04-24 德克萨斯州大学系统董事会 用于抗体药物缀合物的接头
WO2020236825A2 (en) 2019-05-20 2020-11-26 Novartis Ag Mcl-1 inhibitor antibody-drug conjugates and methods of use
RU2745738C1 (ru) * 2019-05-20 2021-03-31 МэбПлекс Интернэшнл Ко., Лтд. Однореакторный способ получения промежуточного продукта конъюгата антитело-лекарственное средство
KR20210097627A (ko) 2020-01-30 2021-08-09 성균관대학교산학협력단 면역관문 억제제 및 엑소좀 분비 억제제를 포함하는 항체-약물 접합체 및 이를 포함하는 약학적 조성물
EP4153242B1 (en) 2020-05-19 2024-05-15 Les Laboratoires Servier Para-amino-benzyl linkers, process for their preparation and their use in conjugates
WO2022115477A1 (en) 2020-11-24 2022-06-02 Novartis Ag Bcl-xl inhibitor antibody-drug conjugates and methods of use thereof
AR124681A1 (es) 2021-01-20 2023-04-26 Abbvie Inc Conjugados anticuerpo-fármaco anti-egfr
EP4359440A1 (en) * 2021-06-22 2024-05-01 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Anti-egfrviii antibody drug conjugates and uses thereof
WO2023208106A1 (zh) * 2022-04-29 2023-11-02 石药集团中奇制药技术（石家庄）有限公司 具有肝靶向递送效应的化合物及其寡聚核苷酸缀合物
WO2023223097A1 (en) 2022-05-20 2023-11-23 Novartis Ag Antibody drug conjugates
WO2023225359A1 (en) 2022-05-20 2023-11-23 Novartis Ag Antibody-drug conjugates of antineoplastic compounds and methods of use thereof

Family Cites Families (40)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US1726514A (en) 1926-11-01 1929-08-27 Firm Ferd Liebschner & Sohn Picker for looms
WO1988007089A1 (en) 1987-03-18 1988-09-22 Medical Research Council Altered antibodies
AU631802B2 (en) 1988-06-14 1992-12-10 Cetus Oncology Corporation Coupling agents and sterically hindered disulfide linked conjugates prepared therefrom
AU634186B2 (en) 1988-11-11 1993-02-18 Medical Research Council Single domain ligands, receptors comprising said ligands, methods for their production, and use of said ligands and receptors
US5124471A (en) 1990-03-26 1992-06-23 The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services Bifunctional dtpa-type ligand
US5714350A (en) 1992-03-09 1998-02-03 Protein Design Labs, Inc. Increasing antibody affinity by altering glycosylation in the immunoglobulin variable region
PT1071700E (pt) 1998-04-20 2010-04-23 Glycart Biotechnology Ag Modificação por glicosilação de anticorpos para melhorar a citotoxicidade celular dependente de anticorpos
PT1914244E (pt) 1999-04-09 2013-07-26 Kyowa Hakko Kirin Co Ltd Processo para regular a actividade de moléculas funcionais sob o ponto de vista imunológico
US7449308B2 (en) 2000-06-28 2008-11-11 Glycofi, Inc. Combinatorial DNA library for producing modified N-glycans in lower eukaryotes
DE60139720D1 (de) 2000-06-28 2009-10-08 Glycofi Inc Verfahren für die Herstellung modifizierter Glykoproteine
EP1243276A1 (en) 2001-03-23 2002-09-25 Franciscus Marinus Hendrikus De Groot Elongated and multiple spacers containing activatible prodrugs
US20100056762A1 (en) 2001-05-11 2010-03-04 Old Lloyd J Specific binding proteins and uses thereof
WO2003016466A2 (en) 2001-08-17 2003-02-27 Eli Lilly And Company ANTI-Aβ ANTIBODIES
EP1443961B1 (en) 2001-10-25 2009-05-06 Genentech, Inc. Glycoprotein compositions
EP2357006B1 (en) 2002-07-31 2015-09-16 Seattle Genetics, Inc. Drug conjugates and their use for treating cancer, an autoimmune disease or an infectious disease
AU2003256038A1 (en) 2002-08-30 2004-03-19 Ramot At Tel Aviv University Ltd. Self-immolative dendrimers releasing many active moieties upon a single activating event
AU2003282624A1 (en) 2002-11-14 2004-06-03 Syntarga B.V. Prodrugs built as multiple self-elimination-release spacers
US7662387B2 (en) 2003-02-20 2010-02-16 Seattle Genetics Anti-cd70 antibody-drug conjugates and their use for the treatment of cancer and immune disorders
EP1718667B1 (en) 2004-02-23 2013-01-09 Genentech, Inc. Heterocyclic self-immolative linkers and conjugates
CA2562772A1 (en) 2004-04-15 2005-10-27 Glycofi, Inc. Production of galactosylated glycoproteins in lower eukaryotes
EP4026840A1 (en) 2005-07-18 2022-07-13 Seagen Inc. Beta-glucuronide-linker drug conjugates
RU2489423C2 (ru) 2006-02-02 2013-08-10 Синтарга Б.В. Водорастворимые аналоги сс-1065 и их конъюгаты
MX2010005857A (es) 2007-11-28 2010-11-22 Mersana Therapeutics Inc Conjugados de analogos de fumagillina biodegradables biocompatibles.
US20100152725A1 (en) 2008-12-12 2010-06-17 Angiodynamics, Inc. Method and system for tissue treatment utilizing irreversible electroporation and thermal track coagulation
CA2762877A1 (en) 2009-05-28 2010-12-02 Mersana Therapeutics, Inc. Polyal drug conjugates comprising variable rate-releasing linkers
EP2553019A1 (en) 2010-03-26 2013-02-06 Mersana Therapeutics, Inc. Modified polymers for delivery of polynucleotides, method of manufacture, and methods of use thereof
US8889675B2 (en) * 2011-10-14 2014-11-18 Abbvie Inc. Apoptosis-inducing agents for the treatment of cancer and immune and autoimmune diseases
TWI571466B (zh) * 2011-10-14 2017-02-21 艾伯維有限公司 用於治療癌症及免疫與自體免疫疾病之細胞凋亡誘發劑
AU2012348017A1 (en) 2011-12-05 2014-07-03 Igenica Biotherapeutics, Inc. Antibody-drug conjugates and related compounds, compositions, and methods
JP2015503635A (ja) 2011-12-23 2015-02-02 マーサナ・セラピューティクス・インコーポレイテッド フマギリン誘導体ｐｈｆ複合体の医薬品配合物
BR112014028222A2 (pt) 2012-05-15 2017-06-27 Seattle Genetics Inc conjugados vinculadores auto-estabilizantes.
US9504756B2 (en) 2012-05-15 2016-11-29 Seattle Genetics, Inc. Self-stabilizing linker conjugates
US20140017265A1 (en) 2012-07-05 2014-01-16 Mersana Therapeutics, Inc. Terminally Modified Polymers and Conjugates Thereof
US10226535B2 (en) 2012-12-10 2019-03-12 Mersana Therapeutics, Inc. Auristatin compounds and conjugates thereof
AU2013359506B2 (en) 2012-12-10 2018-05-24 Mersana Therapeutics, Inc. Protein-polymer-drug conjugates
WO2014093640A1 (en) 2012-12-12 2014-06-19 Mersana Therapeutics,Inc. Hydroxy-polmer-drug-protein conjugates
AR099812A1 (es) * 2014-03-21 2016-08-17 Abbvie Inc Anticuerpos y conjugados de anticuerpo y fármaco anti-egfr
RU2017123942A (ru) 2014-12-09 2019-01-11 Эббви Инк. Ингибирующие bcl-xl соединения, обладающие низкой клеточной проницаемостью, и коньюгаты антитело-лекарственное средство, включающие их
CN113209306A (zh) * 2014-12-09 2021-08-06 艾伯维公司 具有细胞渗透性的bcl-xl抑制剂的抗体药物缀合物
US20160158377A1 (en) * 2014-12-09 2016-06-09 Abbvie Inc. BCL-XL Inhibitory Compounds and Antibody Drug Conjugates Including the Same

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Publication number Publication date
CN116059394A (zh) 2023-05-05
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SG11201810970WA (en) 2019-01-30
EP4104865A1 (en) 2022-12-21
US20230077680A1 (en) 2023-03-16
KR20190015526A (ko) 2019-02-13
US20190343961A1 (en) 2019-11-14
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EP3468996B1 (en) 2022-05-04
JP2023166395A (ja) 2023-11-21
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WO2017214282A1 (en) 2017-12-14
CN109563168A (zh) 2019-04-02

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