JP5102028B2 - 抗ｃｄ１５４抗体 - Google Patents

抗ｃｄ１５４抗体 Download PDF

Info

Publication number
JP5102028B2
JP5102028B2 JP2007523693A JP2007523693A JP5102028B2 JP 5102028 B2 JP5102028 B2 JP 5102028B2 JP 2007523693 A JP2007523693 A JP 2007523693A JP 2007523693 A JP2007523693 A JP 2007523693A JP 5102028 B2 JP5102028 B2 JP 5102028B2
Authority
JP
Japan
Prior art keywords
amino acid
positions
antibody
amino acids
ser
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Fee Related
Application number
JP2007523693A
Other languages
English (en)
Other versions
JP2008511290A (ja
Inventor
フリーメン， ヘルマン ファン
アレクセイ アレクサンドロビッチ ルゴフスコイ，
カール ジェイ． エム． ハンフ，
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Biogen Inc
Biogen MA Inc
Original Assignee
Biogen Inc
Biogen Idec Inc
Biogen Idec MA Inc
Biogen MA Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Biogen Inc, Biogen Idec Inc, Biogen Idec MA Inc, Biogen MA Inc filed Critical Biogen Inc
Publication of JP2008511290A publication Critical patent/JP2008511290A/ja
Application granted granted Critical
Publication of JP5102028B2 publication Critical patent/JP5102028B2/ja
Expired - Fee Related legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2875—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the NGF/TNF superfamily, e.g. CD70, CD95L, CD153, CD154
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/06—Antiasthmatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/06—Antipsoriatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
    • A61P21/04—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system for myasthenia gravis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/20—Antivirals for DNA viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/04—Immunostimulants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/08—Antiallergic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P39/00—General protective or antinoxious agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/04—Antihaemorrhagics; Procoagulants; Haemostatic agents; Antifibrinolytic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/06—Antianaemics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2299/00—Coordinates from 3D structures of peptides, e.g. proteins or enzymes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
    • C07K2317/24—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin containing regions, domains or residues from different species, e.g. chimeric, humanized or veneered
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/55—Fab or Fab'
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/76—Antagonist effect on antigen, e.g. neutralization or inhibition of binding
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
    • C07K2317/92—Affinity (KD), association rate (Ka), dissociation rate (Kd) or EC50 value
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
    • Y10S435/81—Packaged device or kit

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)

Description

（関連出願の引用）
本出願は参考として全体が本明細書中で援用される２００４年７月２６日出願の米国暫定出願６０／５９１，３３７の優先権を主張する。
（技術分野）
本発明は部分的に軽鎖および重鎖のいずれかまたは両方の可変領域において置換されたアミノ酸少なくとも１つを含む抗ＣＤ１５４抗体およびそのフラグメント、および、そのような抗体またはそのフラグメントを含む組成物、および、抗体またはそのフラグメントを用いる方法に関する。
（発明の背景）
体液性および細胞媒介性の免疫の発生は抗原提示細胞（ＡＰＣ）およびエフェクターＴ細胞との活性化ヘルパーＴ細胞の相互作用により調節される。ヘルパーＴ細胞の活性化は抗原特異的Ｔ細胞レセプター（ＴＣＲ）のその同種ペプチドＭＨＣリガンドとの相互作用に依存するのみならず、多くの細胞接着分子および共起刺激分子による協調的結合および活性化を必要とする（非特許文献１）。
重要な共起刺激分子はＣＤ１５４（ＣＤ４０リガンド、ＣＤ４０Ｌ、ｇｐ３９、Ｔ−ＢＡＭ、Ｔ細胞活性化分子、ＴＲＡＰとしても知られている）、すなわち、ＣＤ４＋Ｔ細胞表面上に活性化依存性の一過的に制限された態様で発現されるＩＩ型膜貫通タンパク質である。ＣＤ１５４はまた活性化の後ＣＤ８＋Ｔ細胞のサブセット、好塩基球、肥満細胞、好酸球、ナチュラルキラー細胞、Ｂ細胞、マクロファージ、樹状細胞および血小板上でも発現される。ＣＤ１５４の反対レセプター、ＣＤ４０はＡＰＣを含む多くの細胞型の表面上で構成的および広範に発現されるＩ型膜タンパク質である（非特許文献２）。
ＣＤ１５４によるＣＤ４０を介したシグナリングはＣＤ４０レセプター担持細胞の活性化および至適ＣＤ４＋Ｔ細胞プライミングをもたらす事象のカスケードを開始させる。より詳細には、ＣＤ１５４とＣＤ４０との間の同種相互作用はＢ細胞から抗体分泌細胞およびメモリーＢ細胞への分化を促進する（非特許文献３，Ｄ．Ｍ．Ｍｏｎｒｏｅ，Ｕ．Ｈｅｄｎｅｒ，Ｍ．Ｒ．Ｈｏｆｆｍａｎ，Ｃ．Ｎｅｇｒｉｅｒ，Ｇ．Ｆ．Ｓａｖｉｄｇｅ ａｎｄ Ｇ．Ｃ．Ｉ． Ｗｈｉｔｅ， ｅｄｓ． Ｋｌｕｗｅｒ Ａｃａｄｅｍｉｃ／Ｐｌｅｎｕｍ Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ，２００１，ｐ．１３５）。さらにまた、ＣＤ１５４−ＣＤ４０相互作用はマクロファージおよび樹状細胞の活性化を介した細胞媒介免疫性およびナチュラルキラー細胞および細胞毒性Ｔリンパ球の発生を促進する（非特許文献３、上述）。
ＣＤ１５４−ＣＤ４０相互作用はコラーゲン誘導関節炎、実験的アレルギー性脳脊髄炎（ＥＡＥ）、卵巣炎、結腸炎、薬物誘発性ループス腎炎のような数種の実験的に誘導された自己免疫疾患において重要であることがわかっている。特に、これ等のモデルの全てにおける疾患の誘導は抗原投与時にＣＤ１５４アンタゴニストを用いてブロックできることが解っている（非特許文献３、上述）。
抗ＣＤ１５４アンタゴニストを用いた疾患のブロックはまたインスリン依存性糖尿病およびループス腎炎を含む自発的自己免疫疾患の動物モデルにおいて、並びに、移植片対宿主病、移植、肺線維症およびアテローム性動脈硬化症疾患のモデルにおいても観察されている（非特許文献３、上述）。
グリコシル化抗ＣＤ１５４抗体は数種の免疫応答関連の疾患の防止および処置のために有用であることがわかっているが、一部の被験体においては、これ等を用いた処置は場合により血栓塞栓活性による合併症を伴う。この副作用の機序は不明であるが、不適切な血小板活性化をもたらす血小板上のＦｃｇＲＩＩａおよびＣＤ１５４の抗ＣＤ１５４抗体またはその凝集物による結合が関与している可能性がある。他のＦｃγレセプターおよび補体への結合もまたこの作用を強化する可能性がある。すなわち、エフェクターレセプターに結合しない抗ＣＤ１５４抗体の型は処置用途のためにより安全および／またはより効果的であると考えられる。
抗ＣＤ１５４抗体が免疫機能を抑制する機序はＣＤ４０との相互作用をブロックするためのＣＤ１５４への単純な結合よりも複雑であり、そして実際にはエフェクター経路による寄与が含まれる場合がある。例えば、抗体抗原結合はＦｃγレセプターまたは補体成分へのＦｃドメインの結合を介した活性化Ｔ細胞の欠失を誘導する場合がある。あるいは、ＣＤ１５４への抗体の結合はＦｃγレセプター担持細胞上の抗体の細胞表面スカホールドの形成により増強される場合がある。さらにまた、抗体のその作用部位への接近はＦｃγレセプター結合相互作用により促進される場合がある。
体液性および細胞媒介性の免疫応答の両方の機能を調節する場合のＣＤ１５４の基軸的役割は処置上の免疫調節のためのこの経路の抑制剤の使用への多大な関心を惹起した（特許文献１）。それ自体、抗ＣＤ１５４抗体は他の処置用のタンパク質または遺伝子療法、アレルゲンへの免疫応答、自己免疫および移植のモデルの広範な種類において有利であることがわかっている。
従って、強力な免疫応答を惹起しないがその抗原に強力に結合する抗体、および、このような抗体、特に向上したＣＤ１５４抗体を発見するための方法がなお必要とされている。
米国特許第５，４７４，７７１号明細書 Ｓａｌａｚａｒ−Ｆｏｎｔａｎａ ｅｔ ａｌ．，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｈｅｍａｔ．，２００１，８，５ Ｆｏｙ ｅｔ ａｌ．，Ａｎｎ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１９９６，１４，５９１ Ｂｕｒｋｌｙ， Ａｄｖ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．Ｂｉｏ．，Ｖｏｌ．４８９．
本発明は、配列番号３と少なくとも８０％同一であるアミノ酸配列を含むペプチドまたはそのフラグメントを提供し、２４位、２６位、２７位、２８位、３０位、３１位、３２位、３３位、３４位、３５位、３６位、３８位、５４位、５７位、５８位、５９位、６０位、９３位、９５位、９６位、９７位、９８位、１００位および１０１位の各々におけるアミノ酸は、独立して、任意の天然に存在するアミノ酸または任意の天然に存在しないアミノ酸であり、該ペプチドは、配列番号１からなるものではなく、該フラグメントは、２４位、２６位、２７位、２８位、３０位、３１位、３２位、３３位、３４位、３５位、３６位、３８位、５４位、５７位、５８位、５９位、６０位、９３位、９５位、９６位、９７位、９８位、１００位および１０１位のうちの少なくとも１つを含み、野生型５ｃ８重鎖と複合体化した場合、該ペプチドまたはそのフラグメントは、ＣＤ１５４に結合し得る。
一部の実施形態においては、２４位のアミノ酸は、Ａｒｇ、Ａｓｎ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ａｌａ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｐｒｏ、Ｖａｌ、Ａｓｐ、ＧｌｕおよびＬｙｓからなる群より選択され；２６位のアミノ酸は、Ｓｅｒ、Ａｓｎ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ａｌａ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｐｒｏ、Ｖａｌ、ＡｓｐおよびＧｌｕからなる群より選択され；２７位のアミノ酸は、Ｇｌｎ、Ａｓｎ、Ｃｙｓ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、ＡｒｇおよびＬｙｓからなる群より選択され；２８位のアミノ酸は、Ａｒｇ、Ａｓｎ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ａｌａ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、ＰｒｏおよびＶａｌからなる群より選択され；３０位のアミノ酸は、Ｓｅｒ、Ａｓｎ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、ＡｒｇおよびＬｙｓからなる群より選択され；３１位のアミノ酸は、Ｓｅｒ、Ａｓｎ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ａｌａ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｐｒｏ、Ｖａｌ、ＡｒｇおよびＬｙｓからなる群より選択され；３２位のアミノ酸は、Ｓｅｒ、Ａｓｎ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ａｒｇ、Ａｌａ、Ｉｌｅ、ＬｅｕおよびＬｙｓからなる群より選択され；３３位のアミノ酸は、Ｔｈｒ、Ａｓｎ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｓｅｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ａｒｇ、Ａｌａ、ＶａｌおよびＬｙｓからなる群より選択され；３４位のアミノ酸は、Ｔｙｒ、Ａｓｎ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ａｌａ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｐｒｏ、Ｖａｌ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、ＡｒｇおよびＬｙｓからなる群より選択され；３５位のアミノ酸は、Ｓｅｒ、Ａｓｎ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｔｈｒ、ＴｒｐおよびＴｙｒからなる群より選択され；３６位のアミノ酸は、Ｔｙｒ、Ａｓｎ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ａｓｐ、Ａｌａ、ＬｅｕおよびＧｌｕからなる群より選択され；３８位のアミノ酸は、Ｈｉｓ、Ａｓｎ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｙ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ａｌａ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｐｒｏ、Ｖａｌ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、ＡｒｇおよびＬｙｓからなる群より選択され；５４位のアミノ酸は、Ｔｙｒ、Ａｓｎ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ａｌａ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｐｒｏ、Ｖａｌ、ＡｓｐおよびＧｌｕからなる群より選択され；５７位のアミノ酸は、Ａｓｎ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、ＡｓｐおよびＧｌｕからなる群より選択され；５８位のアミノ酸は、Ｌｅｕ、Ａｓｎ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、ＡｓｐおよびＧｌｕからなる群より選択され；５９位のアミノ酸は、Ｇｌｕ、Ａｓｎ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、ＴｙｒおよびＡｓｐからなる群より選択され；６０位のアミノ酸は、Ｓｅｒ、ＡｓｐおよびＧｌｕからなる群より選択され；９３位のアミノ酸は、Ｇｌｎ、Ａｓｎ、Ｃｙｓ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ａｌａ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｐｒｏ、Ｖａｌ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、ＡｒｇおよびＬｙｓからなる群より選択され；９５位のアミノ酸は、Ｓｅｒ、Ａｓｎ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、ＡｓｐおよびＧｌｕからなる群より選択され；９６位のアミノ酸は、Ｔｒｐ、Ａｓｎ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｙｒ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、ＡｒｇおよびＬｙｓからなる群より選択され；９７位のアミノ酸は、ＧｌｕおよびＡｓｐからなる群より選択され；９８位のアミノ酸は、Ｉｌｅ、Ａｓｎ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ａｓｐ、Ａｌａ、Ｌｅｕ、Ｐｒｏ、ＶａｌおよびＧｌｕからなる群より選択され；１００位のアミノ酸は、Ｐｒｏ、Ａｓｎ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、ＡｓｐおよびＧｌｕからなる群より選択され；そして１０１位のアミノ酸は、Ｔｈｒ、Ａｓｎ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｓｅｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ａｌａ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｐｒｏ、Ｖａｌ、ＡｓｐおよびＧｌｕからなる群より選択される。
一部の実施形態においては、２６位のアミノ酸は、ＳｅｒおよびＡｓｐからなる群より選択され；２７位のアミノ酸は、ＧｌｎおよびＧｌｕからなる群より選択され；２８位のアミノ酸は、ＡｒｇおよびＧｌｕからなる群より選択され；３１位のアミノ酸は、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｈｉｓ、Ａｓｎ、Ｔｈｒ、ＶａｌおよびＴｒｐからなる群より選択され；３２位のアミノ酸は、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｐｈｅ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、ＭｅｔおよびＴｒｐからなる群より選択され；３３位のアミノ酸は、Ｔｈｒ、Ａｌａ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、Ｖａｌ、Ｔｒｐ、Ａｓｐ、Ａｒｇ、ＴｙｒおよびＧｌｎからなる群より選択され；３４位のアミノ酸は、Ｔｙｒ、Ａｌａ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ｐｈｅ、Ｉｌｅ、Ｌｙｓ、Ｌｅｕ、Ｍｅｔ、Ａｒｇ、ＶａｌおよびＴｒｐからなる群より選択され；３６位のアミノ酸は、Ｔｙｒ、Ａｌａ、Ｐｈｅ、ＬｅｕおよびＴｒｐからなる群より選択され；５４位のアミノ酸は、ＴｙｒおよびＧｌｕからなる群より選択され；９６位のアミノ酸は、Ｔｒｐ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ｈｉｓ、Ａｒｇ、ＳｅｒおよびＴｈｒからなる群より選択され；そして９８位のアミノ酸は、Ｉｌｅ、Ａｌａ、Ｐｈｅ、Ｈｉｓ、Ｌｅｕ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｐｒｏ、Ｇｌｎ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｖａｌ、ＴｒｐおよびＴｙｒからなる群より選択される。
一部の実施形態においては、２６位のアミノ酸は、Ｓｅｒ、ＡｓｐおよびＧｌｕからなる群より選択され；２７位のアミノ酸は、Ｇｌｎ、ＡｓｐおよびＧｌｕからなる群より選択され；３１位のアミノ酸は、Ｓｅｒ、Ａｓｎ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｙ、ＴｈｒおよびＴｙｒからなる群より選択され；３２位のアミノ酸は、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、ＶａｌおよびＴｒｐからなる群より選択され；３３位のアミノ酸は、Ｔｈｒ、Ａｓｎ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｙ、ＳｅｒおよびＴｙｒからなる群より選択され；９８位のアミノ酸は、Ｉｌｅ、Ａｓｎ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、ＴｈｒおよびＴｙｒからなる群より選択され；２４位のアミノ酸および２８位のアミノ酸は、Ａｒｇであり；３０位、３５位、６０位および９５位のアミノ酸は、Ｓｅｒであり；３４位、３６位および５４位のアミノ酸は、Ｔｙｒであり；３８位のアミノ酸は、Ｈｉｓであり；５７位のアミノ酸は、Ａｓｎであり；５８位のアミノ酸は、Ｌｅｕであり；５９位および９７位のアミノ酸は、Ｇｌｕであり；９３位のアミノ酸は、Ｇｌｎであり；９６位のアミノ酸は、Ｔｒｐであり；１００位のアミノ酸は、Ｐｒｏであり；そして１０１位のアミノ酸は、Ｔｈｒである。
一部の実施形態においては、２６位のアミノ酸は、Ａｓｐであり；２７位のアミノ酸は、Ｇｌｕであり；２８位のアミノ酸は、Ｇｌｕであり；３１位のアミノ酸は、Ｖａｌであり；３３位のアミノ酸は、ＡｓｐおよびＡｒｇからなる群より選択され；そして５４位のアミノ酸は、Ｇｌｕである。
一部の実施形態においては、３１位のアミノ酸は、ＨｉｓおよびＡｓｎからなる群より選択され；３２位のアミノ酸は、ＴｒｐおよびＰｈｅからなる群より選択され；３３位のアミノ酸は、Ｔｒｐ、ＴｙｒおよびＧｌｎからなる群より選択され；３６位のアミノ酸は、ＬｅｕおよびＴｒｐからなる群より選択され；９６位のアミノ酸は、Ｈｉｓであり；そして９８位のアミノ酸は、ＰｈｅおよびＧｌｎからなる群より選択される。
一部の実施形態においては、２６位のアミノ酸は、ＳｅｒおよびＡｓｐからなる群より選択され；２７位のアミノ酸は、ＧｌｎおよびＧｌｕからなる群より選択され；３１位のアミノ酸は、ＳｅｒおよびＡｓｎからなる群より選択され；３２位のアミノ酸は、ＳｅｒおよびＰｈｅからなる群より選択され；３３位のアミノ酸は、Ｔｈｒ、ＧｌｎおよびＴｙｒからなる群より選択され；９８位のアミノ酸は、ＩｌｅおよびＧｌｎからなる群より選択され；２４位および２８位のアミノ酸は、Ａｒｇであり；３０位、３５位、６０位および９５位のアミノ酸は、Ｓｅｒであり；３４位、３６位および５４位のアミノ酸は、Ｔｙｒであり；３８位のアミノ酸は、Ｈｉｓであり；５７位のアミノ酸は、Ａｓｎであり；５８位のアミノ酸は、Ｌｅｕであり；５９位および９７位のアミノ酸は、Ｇｌｕであり；９３位のアミノ酸は、Ｇｌｎであり；９６位のアミノ酸は、Ｔｒｐであり；１００位のアミノ酸は、Ｐｒｏであり；そして１０１位のアミノ酸は、Ｔｈｒである。
一部の実施形態においては、該ペプチドは、配列番号３を含み、２６位のアミノ酸は、Ａｓｐであり；２７位のアミノ酸は、Ｇｌｎであり；３１位および３２位のアミノ酸は、Ｓｅｒであり；３３位のアミノ酸は、Ｔｈｒであり；９８位のアミノ酸は、Ｉｌｅであり；２４位および２８位のアミノ酸は、Ａｒｇであり；３０位、３５位、６０位および９５位のアミノ酸は、Ｓｅｒであり；３４位、３６位および５４位のアミノ酸は、Ｔｙｒであり；３８位のアミノ酸は、Ｈｉｓであり；５７位のアミノ酸は、Ａｓｎであり；５８位のアミノ酸は、Ｌｅｕであり；５９位および９７位のアミノ酸は、Ｇｌｕであり；９３位のアミノ酸は、Ｇｌｎであり；９６位のアミノ酸は、Ｔｒｐであり；１００位のアミノ酸は、Ｐｒｏであり；そして１０１位のアミノ酸は、Ｔｈｒである。
一部の実施形態においては、該ペプチドは、配列番号３を含み、２６位、３１位および３２位のアミノ酸は、Ｓｅｒであり；２７位のアミノ酸は、Ｇｌｕであり；３３位のアミノ酸は、Ｔｈｒであり；９８位のアミノ酸は、Ｉｌｅであり；２４位および２８位のアミノ酸は、Ａｒｇであり；３０位、３５位、６０位および９５位のアミノ酸は、Ｓｅｒであり；３４位、３６位および５４位のアミノ酸は、Ｔｙｒであり；３８位のアミノ酸は、Ｈｉｓであり；５７位のアミノ酸は、Ａｓｎであり；５８位のアミノ酸は、Ｌｅｕであり；５９位および９７位のアミノ酸は、Ｇｌｕであり；９３位のアミノ酸は、Ｇｌｎであり；９６位のアミノ酸は、Ｔｒｐであり；１００位のアミノ酸は、Ｐｒｏであり；そして１０１位のアミノ酸は、Ｔｈｒである。
一部の実施形態においては、該ペプチドは、配列番号３を含み、２６位および３２位のアミノ酸は、Ｓｅｒであり；２７位のアミノ酸は、Ｇｌｎであり；３１位のアミノ酸は、Ａｓｎであり；３３位のアミノ酸は、Ｔｈｒであり；９８位のアミノ酸は、Ｉｌｅであり；２４位および２８位のアミノ酸は、Ａｒｇであり；３０位、３５位、６０位および９５位のアミノ酸は、Ｓｅｒであり；３４位、３６位および５４位のアミノ酸は、Ｔｙｒであり；３８位のアミノ酸は、Ｈｉｓであり；５７位のアミノ酸は、Ａｓｎであり；５８位のアミノ酸は、Ｌｅｕであり；５９位および９７位のアミノ酸は、Ｇｌｕであり；９３位のアミノ酸は、Ｇｌｎであり；９６位のアミノ酸は、Ｔｒｐであり；１００位のアミノ酸は、Ｐｒｏであり；そして１０１位のアミノ酸は、Ｔｈｒである。
一部の実施形態においては、該ペプチドは、配列番号３を含み、２６位および３１位のアミノ酸は、Ｓｅｒであり；２７位のアミノ酸は、Ｇｌｎであり；３２位のアミノ酸は、Ｐｈｅであり；３３位のアミノ酸は、Ｔｈｒであり；９８位のアミノ酸は、Ｉｌｅであり；２４位および２８位のアミノ酸は、Ａｒｇであり；３０位、３５位、６０位および９５位のアミノ酸は、Ｓｅｒであり；３４位、３６位および５４位のアミノ酸は、Ｔｙｒであり；３８位のアミノ酸は、Ｈｉｓであり；５７位のアミノ酸は、Ａｓｎであり；５８位のアミノ酸は、Ｌｅｕであり；５９位および９７位のアミノ酸は、Ｇｌｕであり；９３位のアミノ酸は、Ｇｌｎであり；９６位のアミノ酸は、Ｔｒｐであり；１００位のアミノ酸は、Ｐｒｏであり；そして１０１位のアミノ酸は、Ｔｈｒである。
一部の実施形態においては、該ペプチドは、配列番号３を含み、２６位、３１位および３２位のアミノ酸は、Ｓｅｒであり；２７位および３３位のアミノ酸は、Ｇｌｎであり；９８位のアミノ酸は、Ｉｌｅであり；２４位および２８位のアミノ酸は、Ａｒｇであり；３０位、３５位、６０位および９５位のアミノ酸は、Ｓｅｒであり；３４位、３６位および５４位のアミノ酸は、Ｔｙｒであり；３８位のアミノ酸は、Ｈｉｓであり；５７位のアミノ酸は、Ａｓｎであり；５８位のアミノ酸は、Ｌｅｕであり；５９位および９７位のアミノ酸は、Ｇｌｕであり；９３位のアミノ酸は、Ｇｌｎであり；９６位のアミノ酸は、Ｔｒｐであり；１００位のアミノ酸は、Ｐｒｏであり；そして１０１位のアミノ酸は、Ｔｈｒである。
一部の実施形態においては、該ペプチドは、配列番号３を含み、２６位、３１位および３２位のアミノ酸は、Ｓｅｒであり；２７位のアミノ酸は、Ｇｌｎであり；３３位のアミノ酸は、Ｔｙｒであり；９８位のアミノ酸は、Ｉｌｅであり；２４位および２８位のアミノ酸は、Ａｒｇであり；３０位、３５位、６０位および９５位のアミノ酸は、Ｓｅｒであり；３４位、３６位および５４位のアミノ酸は、Ｔｙｒであり；３８位のアミノ酸は、Ｈｉｓであり；５７位のアミノ酸は、Ａｓｎであり；５８位のアミノ酸は、Ｌｅｕであり；５９位および９７位のアミノ酸は、Ｇｌｕであり；９３位のアミノ酸は、Ｇｌｎであり；９６位のアミノ酸は、Ｔｒｐであり；１００位のアミノ酸は、Ｐｒｏであり；そして１０１位のアミノ酸は、Ｔｈｒである。
一部の実施形態においては、該ペプチドは、配列番号３を含み、２６位、３１位および３２位のアミノ酸は、Ｓｅｒであり；２７位および９８位のアミノ酸は、Ｇｌｎであり；３３位のアミノ酸は、Ｔｈｒであり；２４位および２８位のアミノ酸は、Ａｒｇであり；３０位、３５位、６０位および９５位のアミノ酸は、Ｓｅｒであり；３４位、３６位および５４位のアミノ酸は、Ｔｙｒであり；３８位のアミノ酸は、Ｈｉｓであり；５７位のアミノ酸は、Ａｓｎであり；５８位のアミノ酸は、Ｌｅｕであり；５９位および９７位のアミノ酸は、Ｇｌｕであり；９３位のアミノ酸は、Ｇｌｎであり；９６位のアミノ酸は、Ｔｒｐであり；１００位のアミノ酸は、Ｐｒｏであり；そして１０１位のアミノ酸は、Ｔｈｒである。
一部の実施形態においては、該ペプチドは、配列番号３を含み、２６位のアミノ酸は、Ａｓｐであり；２７位のアミノ酸は、Ｇｌｕであり；３１位および３２位のアミノ酸は、Ｓｅｒであり；３３位のアミノ酸は、Ｔｈｒであり；９８位のアミノ酸は、Ｉｌｅであり；２４位および２８位のアミノ酸は、Ａｒｇであり；３０位、３５位、６０位および９５位のアミノ酸は、Ｓｅｒであり；３４位、３６位および５４位のアミノ酸は、Ｔｙｒであり；３８位のアミノ酸は、Ｈｉｓであり；５７位のアミノ酸は、Ａｓｎであり；５８位のアミノ酸は、Ｌｅｕであり；５９位および９７位のアミノ酸は、Ｇｌｕであり；９３位のアミノ酸は、Ｇｌｎであり；９６位のアミノ酸は、Ｔｒｐであり；１００位のアミノ酸は、Ｐｒｏであり；そして１０１位のアミノ酸は、Ｔｈｒである。
一部の実施形態においては、該ペプチドは、配列番号３を含み、２６位のアミノ酸は、Ａｓｐであり；２７位のアミノ酸は、Ｇｌｕであり；３１位のアミノ酸は、Ａｓｎであり；３２位のアミノ酸は、Ｓｅｒであり；３３位のアミノ酸は、Ｔｈｒであり；９８位のアミノ酸は、Ｉｌｅであり；２４位および２８位のアミノ酸は、Ａｒｇであり；３０位、３５位、６０位および９５位のアミノ酸は、Ｓｅｒであり；３４位、３６位および５４位のアミノ酸は、Ｔｙｒであり；３８位のアミノ酸は、Ｈｉｓであり；５７位のアミノ酸は、Ａｓｎであり；５８位のアミノ酸は、Ｌｅｕであり；５９位および９７位のアミノ酸は、Ｇｌｕであり；９３位のアミノ酸は、Ｇｌｎであり；９６位のアミノ酸は、Ｔｒｐであり；１００位のアミノ酸は、Ｐｒｏであり；そして１０１位のアミノ酸は、Ｔｈｒである。
一部の実施形態においては、該ペプチドは、配列番号３を含み、２６位のアミノ酸は、Ａｓｐであり；２７位のアミノ酸は、Ｇｌｕであり；３１位のアミノ酸は、Ｓｅｒであり；３２位のアミノ酸は、Ｐｈｅであり；３３位のアミノ酸は、Ｔｈｒであり；９８位のアミノ酸は、Ｉｌｅであり；２４位および２８位のアミノ酸は、Ａｒｇであり；３０位、３５位、６０位および９５位のアミノ酸は、Ｓｅｒであり；３４位、３６位および５４位のアミノ酸は、Ｔｙｒであり；３８位のアミノ酸は、Ｈｉｓであり；５７位のアミノ酸は、Ａｓｎであり；５８位のアミノ酸は、Ｌｅｕであり；５９位および９７位のアミノ酸は、Ｇｌｕであり；９３位のアミノ酸は、Ｇｌｎであり；９６位のアミノ酸は、Ｔｒｐであり；１００位のアミノ酸は、Ｐｒｏであり；そして１０１位のアミノ酸は、Ｔｈｒである。
一部の実施形態においては、該ペプチドは、配列番号３を含み、２６位のアミノ酸は、Ａｓｐであり；２７位のアミノ酸は、Ｇｌｕであり；３１位および３２位のアミノ酸は、Ｓｅｒであり；３３位のアミノ酸は、Ｇｌｎであり；９８位のアミノ酸は、Ｉｌｅであり；２４位および２８位のアミノ酸は、Ａｒｇであり；３０位、３５位、６０位および９５位のアミノ酸は、Ｓｅｒであり；３４位、３６位および５４位のアミノ酸は、Ｔｙｒであり；３８位のアミノ酸は、Ｈｉｓであり；５７位のアミノ酸は、Ａｓｎであり；５８位のアミノ酸は、Ｌｅｕであり；５９位および９７位のアミノ酸は、Ｇｌｕであり；９３位のアミノ酸は、Ｇｌｎであり；９６位のアミノ酸は、Ｔｒｐであり；１００位のアミノ酸は、Ｐｒｏであり；そして１０１位のアミノ酸は、Ｔｈｒである。
一部の実施形態においては、該ペプチドは、配列番号３を含み、２６位のアミノ酸は、Ａｓｐであり；２７位のアミノ酸は、Ｇｌｕであり；３１位および３２位のアミノ酸は、Ｓｅｒであり；３３位のアミノ酸は、Ｔｙｒであり；９８位のアミノ酸は、Ｉｌｅであり；２４位および２８位のアミノ酸は、Ａｒｇであり；３０位、３５位、６０位および９５位のアミノ酸は、Ｓｅｒであり；３４位、３６位および５４位のアミノ酸は、Ｔｙｒであり；３８位のアミノ酸は、Ｈｉｓであり；５７位のアミノ酸は、Ａｓｎであり；５８位のアミノ酸は、Ｌｅｕであり；５９位および９７位のアミノ酸は、Ｇｌｕであり；９３位のアミノ酸は、Ｇｌｎであり；９６位のアミノ酸は、Ｔｒｐであり；１００位のアミノ酸は、Ｐｒｏであり；そして１０１位のアミノ酸は、Ｔｈｒである。
一部の実施形態においては、該ペプチドは、配列番号３を含み、２６位のアミノ酸は、Ａｓｐであり；２７位のアミノ酸は、Ｇｌｕであり；３１位および３２位のアミノ酸は、Ｓｅｒであり；３３位のアミノ酸は、Ｔｈｒであり；９８位のアミノ酸は、Ｇｌｎであり；２４位および２８位のアミノ酸は、Ａｒｇであり；３０位、３５位、６０位および９５位のアミノ酸は、Ｓｅｒであり；３４位、３６位および５４位のアミノ酸は、Ｔｙｒであり；３８位のアミノ酸は、Ｈｉｓであり；５７位のアミノ酸は、Ａｓｎであり；５８位のアミノ酸は、Ｌｅｕであり；５９位および９７位のアミノ酸は、Ｇｌｕであり；９３位のアミノ酸は、Ｇｌｎであり；９６位のアミノ酸は、Ｔｒｐであり；１００位のアミノ酸は、Ｐｒｏであり；そして１０１位のアミノ酸は、Ｔｈｒである。
一部の実施形態においては、該ペプチドは、配列番号３を含み、２７位および９３位のアミノ酸は、Ｇｌｎであり；２６位、３１位、３２位、３０位、３５位、６０位および９５位のアミノ酸は、Ｓｅｒであり；３３位および１０１位のアミノ酸は、Ｔｈｒであり；９８位のアミノ酸は、Ｉｌｅであり；２４位および２８位のアミノ酸は、Ａｒｇであり；３４位および５４位のアミノ酸は、Ｔｙｒであり；３８位のアミノ酸は、Ｈｉｓであり；５７位のアミノ酸は、Ａｓｎであり；５８位のアミノ酸は、Ｌｅｕであり；５９位および９７位のアミノ酸は、Ｇｌｕであり；９６位および３６位のアミノ酸は、Ｔｒｐであり；そして１００位のアミノ酸は、Ｐｒｏである。
一部の実施形態においては、該ペプチドは、配列番号３を含み、２７位および９３位のアミノ酸は、Ｇｌｎであり；２６位、３１位、３２位、３０位、３５位、６０位および９５位のアミノ酸は、Ｓｅｒであり；１０１位のアミノ酸は、Ｔｈｒであり；９８位のアミノ酸は、Ｉｌｅであり；２４位および２８位のアミノ酸は、Ａｒｇであり；３４位、３６位および５４位のアミノ酸は、Ｔｙｒであり；３８位のアミノ酸は、Ｈｉｓであり；５７位のアミノ酸は、Ａｓｎであり；５８位のアミノ酸は、Ｌｅｕであり；５９位および９７位のアミノ酸は、Ｇｌｕであり；９６位および３３位のアミノ酸は、Ｔｒｐであり；そして１００位のアミノ酸は、Ｐｒｏである。
一部の実施形態においては、該ペプチドは、配列番号３を含み、２７位および９３位のアミノ酸は、Ｇｌｎであり；２６位、３２位、３０位、３５位、６０位および９５位のアミノ酸は、Ｓｅｒであり；３３位および１０１位のアミノ酸は、Ｔｈｒであり；９８位のアミノ酸は、Ｉｌｅであり；２４位および２８位のアミノ酸は、Ａｒｇであり；３４位、３６位および５４位のアミノ酸は、Ｔｙｒであり；３８位のアミノ酸は、Ｈｉｓであり；５７位のアミノ酸は、Ａｓｎであり；５８位のアミノ酸は、Ｌｅｕであり；５９位および９７位のアミノ酸は、Ｇｌｕであり；９６位のアミノ酸は、Ｔｒｐであり；３１位のアミノ酸は、Ｖａｌであり；そして１００位のアミノ酸は、Ｐｒｏである。
一部の実施形態においては、該ペプチドは、配列番号３を含み、２７位および９３位のアミノ酸は、Ｇｌｎであり；２６位、３１位、３２位、３０位、３５位、６０位および９５位のアミノ酸は、Ｓｅｒであり；１０１位のアミノ酸は、Ｔｈｒであり；９８位のアミノ酸は、Ｉｌｅであり；２４位および２８位のアミノ酸は、Ａｒｇであり；３４位、３６位および５４位のアミノ酸は、Ｔｙｒであり；３８位のアミノ酸は、Ｈｉｓであり；５７位のアミノ酸は、Ａｓｎであり；５８位のアミノ酸は、Ｌｅｕであり；５９位および９７位のアミノ酸は、Ｇｌｕであり；９６位のアミノ酸は、Ｔｒｐであり；３３位のアミノ酸は、Ａｓｐであり；そして１００位のアミノ酸は、Ｐｒｏである。
一部の実施形態においては、該ペプチドは、配列番号３を含み、２７位および９３位のアミノ酸は、Ｇｌｎであり；２６位、３１位、３２位、３０位、３５位、６０位および９５位のアミノ酸は、Ｓｅｒであり；３３位および１０１位のアミノ酸は、Ｔｈｒであり；９８位のアミノ酸は、Ｉｌｅであり；２４位および２８位のアミノ酸は、Ａｒｇであり；３４位および３６位のアミノ酸は、Ｔｙｒであり；３８位のアミノ酸は、Ｈｉｓであり；５７位のアミノ酸は、Ａｓｎであり；５８位のアミノ酸は、Ｌｅｕであり；５４位、５９位および９７位のアミノ酸は、Ｇｌｕであり；９６位のアミノ酸は、Ｔｒｐであり；そして１００位のアミノ酸は、Ｐｒｏである。
一部の実施形態においては、該ペプチドは、配列番号３を含み、２７位および９３位のアミノ酸は、Ｇｌｎであり；２６位、３１位、３２位、３０位、３５位、６０位および９５位のアミノ酸は、Ｓｅｒであり；３３位および１０１位のアミノ酸は、Ｔｈｒであり；９８位のアミノ酸は、Ｉｌｅであり；２４位および２８位のアミノ酸は、Ａｒｇであり；３４位、３６位および５４位のアミノ酸は、Ｔｙｒであり；３８位のアミノ酸は、Ｈｉｓであり；５７位のアミノ酸は、Ａｓｎであり；５８位のアミノ酸は、Ｌｅｕであり；５９位および９７位のアミノ酸は、Ｇｌｕであり；９６位のアミノ酸は、Ｔｒｐであり；そして１００位のアミノ酸は、Ｐｒｏである。
一部の実施形態においては、該ペプチドは、配列番号３を含み、２６位のアミノ酸は、Ａｓｐであり；２７位のアミノ酸は、Ｇｌｕであり；３１位および３２位のアミノ酸は、Ｓｅｒであり；９８位のアミノ酸は、Ｉｌｅであり；２４位および２８位のアミノ酸は、Ａｒｇであり；３０位、３５位、６０位および９５位のアミノ酸は、Ｓｅｒであり；３４位、３６位および５４位のアミノ酸は、Ｔｙｒであり；３８位のアミノ酸は、Ｈｉｓであり；５７位のアミノ酸は、Ａｓｎであり；５８位のアミノ酸は、Ｌｅｕであり；５９位および９７位のアミノ酸は、Ｇｌｕであり；９３位のアミノ酸は、Ｇｌｎであり；３３位および９６位のアミノ酸は、Ｔｒｐであり；１００位のアミノ酸は、Ｐｒｏであり；そして１０１位のアミノ酸は、Ｔｈｒである。
本発明はまた、配列番号６と少なくとも８０％同一であるアミノ酸配列を含むペプチドまたはそのフラグメントを提供し、２８位、３０位、３１位、３２位、３３位、３５位、５０位、５２位、５３位、５４位、５５位、５７位、５８位、５９位、６０位、６１位、６２位、６３位、６４位、６５位、６６位、９９位、１００位、１０１位、１０２位、１０３位、１０４位、１０５位、１０６位および１０７位の各々におけるアミノ酸は、独立して、任意の天然に存在するアミノ酸または任意の天然に存在しないアミノ酸であり、該ペプチドは、配列番号４からなるものではなく、該フラグメントは、２８位、３０位、３１位、３２位、３３位、３５位、５０位、５２位、５３位、５４位、５５位、５７位、５８位、５９位、６０位、６１位、６２位、６３位、６４位、６５位、６６位、９９位、１００位、１０１位、１０２位、１０３位、１０４位、１０５位、１０６位および１０７位のうちの少なくとも１つを含み、そして野生型５ｃ８軽鎖と複合体化された場合、該ペプチドまたはそのフラグメントは、ＣＤ１５４に結合し得る。
一部の実施形態においては、２８位のアミノ酸は、Ｉｌｅ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ａｓｎ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、ＴｒｐおよびＴｒｐからなる群より選択され；３０位のアミノ酸は、Ｔｈｒ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ａｓｎ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｓｅｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ａｌａ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、ＰｒｏおよびＶａｌからなる群より選択され；３１位のアミノ酸は、Ｓｅｒ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ｌｙｓ、ＧｌｎおよびＴｒｐからなる群より選択され；３２位のアミノ酸は、Ｔｙｒ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ａｓｎ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｓｅｒ、Ｔｒｐ、Ａｌａ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、ＰｒｏおよびＶａｌからなる群より選択され；３３位のアミノ酸は、Ｔｙｒ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ａｓｎ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ａｌａ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、ＰｒｏおよびＶａｌからなる群より選択され；３５位のアミノ酸は、Ｔｙｒ、Ａｓｎ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、ＡｓｐおよびＧｌｕからなる群より選択され；５０位のアミノ酸は、ＧｌｕおよびＡｓｐからなる群より選択され；５２位のアミノ酸は、Ａｓｎ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ａｒｇ、Ａｌａ、Ｌｅｕ、ＶａｌおよびＬｙｓからなる群より選択され；５３位のアミノ酸は、Ｐｒｏ、Ａｓｎ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、ＡｓｐおよびＧｌｕからなる群より選択され；５４位のアミノ酸は、Ｓｅｒ、Ａｓｎ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ａｒｇ、ＬｙｓおよびＧｌｕからなる群より選択され；５５位のアミノ酸は、Ａｓｎ、Ｇｌｕ、Ｌｙｓ、Ｇｌｎ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、ＭｅｔおよびＶａｌからなる群より選択され；５７位のアミノ酸は、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、ＰｈｅおよびＬｅｕからなる群より選択され；５８位のアミノ酸は、Ｔｈｒ、Ａｓｎ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｓｅｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ａｌａ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、ＰｒｏおよびＶａｌからなる群より選択され；５９位のアミノ酸は、Ａｓｎ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ａｌａ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｐｒｏ、Ｖａｌ、Ａｓｐ、およびＧｌｕからなる群より選択され；６０位のアミノ酸は、Ｐｈｅ、Ａｓｐ、Ａｓｎ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｍｅｔ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｇｌｕ、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ａｌａ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、ＰｒｏおよびＶａｌからなる群より選択され；６１位のアミノ酸は、Ａｓｎ、ＡｓｐおよびＧｌｕからなる群より選択され；６２位のアミノ酸は、ＧｌｕおよびＡｓｐからなる群より選択され；６３位のアミノ酸は、Ｌｙｓ、Ａｓｎ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ａｒｇ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ａｌａ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、ＰｒｏおよびＶａｌからなる群より選択され；６４位のアミノ酸は、Ｐｈｅ、Ａｓｎ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｍｅｔ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ａｌａ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、ＰｒｏおよびＶａｌからなる群より選択され；６５位のアミノ酸は、Ｌｙｓ、Ａｓｎ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ａｒｇ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ａｌａ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、ＰｒｏおよびＶａｌからなる群より選択され；６６位のアミノ酸は、Ｓｅｒ、ＡｓｐおよびＧｌｕからなる群より選択され；９９位のアミノ酸は、Ｓｅｒ、Ａｓｐ、ＧｌｕおよびＡｌａからなる群より選択され；１００位のアミノ酸は、ＡｓｐおよびＧｌｕからなる群より選択され；１０１位のアミノ酸は、Ｇｌｙ、ＰｈｅおよびＬｅｕからなる群より選択され；１０２位のアミノ酸は、Ａｒｇ、Ａｓｎ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、ＴｙｒおよびＬｙｓからなる群より選択され；１０３位のアミノ酸は、Ａｓｎ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ａｌａ、Ｉｌｅ、Ｌｙｓ、ＡｒｇおよびＶａｌからなる群より選択され；１０４位のアミノ酸は、ＡｓｐおよびＧｌｕからなる群より選択され；１０５位のアミノ酸は、Ｍｅｔ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ｌｙｓ、Ａｓｎ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｙ、Ｐｈｅ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、ＴｒｐおよびＴｙｒからなる群より選択され；１０６位のアミノ酸は、ＡｓｐおよびＧｌｕからなる群より選択され；そして１０７位のアミノ酸は、Ｓｅｒ、Ａｓｎ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ａｌａ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、ＰｒｏおよびＶａｌからなる群より選択される。
一部の実施形態においては、２８位のアミノ酸は、Ｉｌｅ、Ｈｉｓ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｓｅｒ、ＴｈｒおよびＧｌｕからなる群より選択され；３０位のアミノ酸は、Ｔｈｒ、Ｈｉｓ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｓｅｒ、ＴｙｒおよびＡｒｇからなる群より選択され；３１位のアミノ酸は、Ｓｅｒ、ＧｌｎおよびＴｒｐからなる群より選択され；３３位のアミノ酸は、Ｔｙｒ、Ａｌａ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、ＶａｌおよびＴｒｐからなる群より選択され；５２位のアミノ酸は、Ａｓｎ、Ａｌａ、Ｐｈｅ、Ｈｉｓ、Ｌｅｕ、Ｍｅｔ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、ＶａｌおよびＴｒｐからなる群より選択され；５４位のアミノ酸は、Ｓｅｒ、Ｇｌｕ、Ｈｉｓ、Ｌｙｓ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ａｒｇ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、ＴｙｒおよびＰｈｅからなる群より選択され；５５位のアミノ酸は、Ａｓｎ、Ｇｌｕ、Ｌｙｓ、Ｇｌｎ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、ＭｅｔおよびＶａｌからなる群より選択され；５７位のアミノ酸は、Ａｓｐ、ＰｈｅおよびＬｅｕからなる群より選択され；５９位のアミノ酸は、Ａｓｎ、Ａｌａ、Ｐｈｅ、Ｌｅｕ、Ｍｅｔ、Ｐｒｏ、Ｖａｌ、Ｔｒｐ、ＡｓｐおよびＴｙｒからなる群より選択され；９９位のアミノ酸は、ＳｅｒおよびＡｌａからなる群より選択され；１０１位のアミノ酸は、Ｇｌｙ、ＰｈｅおよびＬｅｕからなる群より選択され；そして１０３位のアミノ酸は、Ａｓｎ、Ａｌａ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ｐｈｅ、Ｈｉｓ、Ｉｌｅ、Ｌｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｒｇ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、ＶａｌおよびＴｙｒからなる群より選択される。
一部の実施形態においては、該ペプチドは、３１位および５４位のアミノ酸は、独立して、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｖａｌ、Ｔｒｐ、Ａｓｎ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、ＴｈｒおよびＴｙｒからなる群より選択され；５７位のアミノ酸は、Ａｓｐ、Ａｌａ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、ＶａｌおよびＴｒｐからなる群より選択され；１０１位のアミノ酸は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、ＶａｌおよびＴｒｐからなる群より選択され；１０３位のアミノ酸は、Ａｓｎ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、ＴｈｒおよびＴｙｒからなる群より選択され；２８位のアミノ酸は、Ｉｌｅであり；３０位および５８位のアミノ酸は、Ｔｈｒであり；３２位、３３位および３５位のアミノ酸は、Ｔｙｒであり；５０位および６２位のアミノ酸は、Ｇｌｕであり；５２位、５５位、５９位および６１位のアミノ酸は、Ａｓｎであり；５３位のアミノ酸は、Ｐｒｏであり；６０位および６４位のアミノ酸は、Ｐｈｅであり；６３位および６５位のアミノ酸は、Ｌｙｓであり；６６位、９９位および１０７位のアミノ酸は、Ｓｅｒであり；１００位、１０４位および１０６位のアミノ酸は、Ａｓｐであり；１０２位のアミノ酸は、Ａｒｇであり；そして１０５位のアミノ酸は、Ｍｅｔである。
一部の実施形態においては、３１位のアミノ酸は、Ｓｅｒ、ＴｒｐおよびＧｌｎからなる群より選択され；５４位のアミノ酸は、Ｓｅｒ、ＰｈｅおよびＧｌｎからなる群より選択され；５７位のアミノ酸は、Ａｓｐ、ＬｅｕおよびＰｈｅからなる群より選択され；１０１位のアミノ酸は、Ｇｌｙ、ＬｅｕおよびＰｈｅからなる群より選択され；１０３位のアミノ酸は、ＡｓｎおよびＴｙｒからなる群より選択され；２８位のアミノ酸は、Ｉｌｅであり；３０位および５８位のアミノ酸は、Ｔｈｒであり；３２位、３３位および３５位のアミノ酸は、Ｔｙｒであり；５０位および６２位のアミノ酸は、Ｇｌｕであり；５２位、５５位、５９位および６１位のアミノ酸は、Ａｓｎであり；５３位のアミノ酸は、Ｐｒｏであり；６０位および６４位のアミノ酸は、Ｐｈｅであり；６３位および６５位のアミノ酸は、Ｌｙｓであり；６６位、９９位および１０７位のアミノ酸は、Ｓｅｒであり；１００位、１０４位および１０６位のアミノ酸は、Ａｓｐであり；１０２位のアミノ酸は、Ａｒｇであり；そして１０５位のアミノ酸は、Ｍｅｔである。
一部の実施形態においては、２８位のアミノ酸は、Ｇｌｕであり；３３位のアミノ酸は、Ｐｈｅであり；５４位のアミノ酸は、Ｔｈｒであり；５９位のアミノ酸は、ＡｓｐおよびＬｅｕからなる群より選択される。
一部の実施形態においては、３０位のアミノ酸は、ＨｉｓおよびＡｒｇからなる群より選択され；３１位のアミノ酸は、ＧｌｎおよびＴｒｐからなる群より選択され；３３位のアミノ酸は、Ｔｒｐ、ＶａｌおよびＰｒｏからなる群より選択され；５２位のアミノ酸は、ＭｅｔおよびＴｒｐからなる群より選択され；５４位のアミノ酸は、Ａｓｎ、ＰｈｅおよびＧｌｎからなる群より選択され；５５位のアミノ酸は、Ｍｅｔ、ＬｙｓおよびＶａｌからなる群より選択され；５７位のアミノ酸は、ＰｈｅおよびＬｅｕからなる群より選択され；５９位のアミノ酸は、ＰｈｅおよびＴｙｒからなる群より選択され；１０１位のアミノ酸は、ＰｈｅおよびＬｅｕからなる群より選択され；そして１０３位のアミノ酸は、ＨｉｓおよびＴｙｒからなる群より選択される。
一部の実施形態においては、該ペプチドは、配列番号６を含み、３１位のアミノ酸は、Ｔｒｐであり；５４位のアミノ酸は、Ｓｅｒであり；５７位のアミノ酸は、Ａｓｐであり；１０１位のアミノ酸は、Ｇｌｙであり；１０３位のアミノ酸は、Ａｓｎであり；２８位のアミノ酸は、Ｉｌｅであり；３０位および５８位のアミノ酸は、Ｔｈｒであり；３２位、３３位および３５位のアミノ酸は、Ｔｙｒであり；５０位および６２位のアミノ酸は、Ｇｌｕであり；５２位、５５位、５９位および６１位のアミノ酸は、Ａｓｎであり；５３位のアミノ酸は、Ｐｒｏであり；６０位および６４位のアミノ酸は、Ｐｈｅであり；６３位および６５位のアミノ酸は、Ｌｙｓであり；６６位、９９位および１０７位のアミノ酸は、Ｓｅｒであり；１００位、１０４位および１０６位のアミノ酸は、Ａｓｐであり；１０２位のアミノ酸は、Ａｒｇであり；そして１０５位のアミノ酸は、Ｍｅｔである。
一部の実施形態においては、該ペプチドは、配列番号６を含み、３１位のアミノ酸は、Ｇｌｎであり；５４位のアミノ酸は、Ｓｅｒであり；５７位のアミノ酸は、Ａｓｐであり；１０１位のアミノ酸は、Ｇｌｙであり；１０３位のアミノ酸は、Ａｓｎであり；２８位のアミノ酸は、Ｉｌｅであり；３０位および５８位のアミノ酸は、Ｔｈｒであり；３２位、３３位および３５位のアミノ酸は、Ｔｙｒであり；５０位および６２位のアミノ酸は、Ｇｌｕであり；５２位、５５位、５９位および６１位のアミノ酸は、Ａｓｎであり；５３位のアミノ酸は、Ｐｒｏであり；６０位および６４位のアミノ酸は、Ｐｈｅであり；６３位および６５位のアミノ酸は、Ｌｙｓであり；６６位、９９位および１０７位のアミノ酸は、Ｓｅｒであり；１００位、１０４位および１０６位のアミノ酸は、Ａｓｐであり；１０２位のアミノ酸は、Ａｒｇであり；そして１０５位のアミノ酸は、Ｍｅｔである。
一部の実施形態においては、該ペプチドは、配列番号６を含み、３１位のアミノ酸は、Ｓｅｒであり；５４位のアミノ酸は、Ｐｈｅであり；５７位のアミノ酸は、Ａｓｐであり；１０１位のアミノ酸は、Ｇｌｙであり；１０３位のアミノ酸は、Ａｓｎであり；２８位のアミノ酸は、Ｉｌｅであり；３０位および５８位のアミノ酸は、Ｔｈｒであり；３２位、３３位および３５位のアミノ酸は、Ｔｙｒであり；５０位および６２位のアミノ酸は、Ｇｌｕであり；５２位、５５位、５９位および６１位のアミノ酸は、Ａｓｎであり；５３位のアミノ酸は、Ｐｒｏであり；６０位および６４位のアミノ酸は、Ｐｈｅであり；６３位および６５位のアミノ酸は、Ｌｙｓであり；６６位、９９位および１０７位のアミノ酸は、Ｓｅｒであり；１００位、１０４位および１０６位のアミノ酸は、Ａｓｐであり；１０２位のアミノ酸は、Ａｒｇであり；そして１０５位のアミノ酸は、Ｍｅｔである。
一部の実施形態においては、該ペプチドは、配列番号６を含み、３１位のアミノ酸は、Ｓｅｒであり；５４位のアミノ酸は、Ｇｌｎであり；５７位のアミノ酸は、Ａｓｐであり；１０１位のアミノ酸は、Ｇｌｙであり；１０３位のアミノ酸は、Ａｓｎであり；２８位のアミノ酸は、Ｉｌｅであり；３０位および５８位のアミノ酸は、Ｔｈｒであり；３２位、３３位および３５位のアミノ酸は、Ｔｙｒであり；５０位および６２位のアミノ酸は、Ｇｌｕであり；５２位、５５位、５９位および６１位のアミノ酸は、Ａｓｎであり；５３位のアミノ酸は、Ｐｒｏであり；６０位および６４位のアミノ酸は、Ｐｈｅであり；６３位および６５位のアミノ酸は、Ｌｙｓであり；６６位、９９位および１０７位のアミノ酸は、Ｓｅｒであり；１００位、１０４位および１０６位のアミノ酸は、Ａｓｐであり；１０２位のアミノ酸は、Ａｒｇであり；そして１０５位のアミノ酸は、Ｍｅｔである。
一部の実施形態においては、該ペプチドは、配列番号６を含み、３１位および５４位のアミノ酸は、Ｓｅｒであり；５７位のアミノ酸は、Ｐｈｅであり；１０１位のアミノ酸は、Ｇｌｙであり；１０３位のアミノ酸は、Ａｓｎであり；２８位のアミノ酸は、Ｉｌｅであり；３０位および５８位のアミノ酸は、Ｔｈｒであり；３２位、３３位および３５位のアミノ酸は、Ｔｙｒであり；５０位および６２位のアミノ酸は、Ｇｌｕであり；５２位、５５位、５９位および６１位のアミノ酸は、Ａｓｎであり；５３位のアミノ酸は、Ｐｒｏであり；６０位および６４位のアミノ酸は、Ｐｈｅであり；６３位および６５位のアミノ酸は、Ｌｙｓであり；６６位、９９位および１０７位のアミノ酸は、Ｓｅｒであり；１００位、１０４位および１０６位のアミノ酸は、Ａｓｐであり；１０２位のアミノ酸は、Ａｒｇであり；そして１０５位のアミノ酸は、Ｍｅｔである。
一部の実施形態においては、該ペプチドは、配列番号６を含み、３１位および５４位のアミノ酸は、Ｓｅｒであり；５７位のアミノ酸は、Ｌｅｕであり；１０１位のアミノ酸は、Ｇｌｙであり；１０３位のアミノ酸は、Ａｓｎであり；２８位のアミノ酸は、Ｉｌｅであり；３０位および５８位のアミノ酸は、Ｔｈｒであり；３２位、３３位および３５位のアミノ酸は、Ｔｙｒであり；５０位および６２位のアミノ酸は、Ｇｌｕであり；５２位、５５位、５９位および６１位のアミノ酸は、Ａｓｎであり；５３位のアミノ酸は、Ｐｒｏであり；６０位および６４位のアミノ酸は、Ｐｈｅであり；６３位および６５位のアミノ酸は、Ｌｙｓであり；６６位、９９位および１０７位のアミノ酸は、Ｓｅｒであり；１００位、１０４位および１０６位のアミノ酸は、Ａｓｐであり；１０２位のアミノ酸は、Ａｒｇであり；そして１０５位のアミノ酸は、Ｍｅｔである。
一部の実施形態においては、該ペプチドは、配列番号６を含み、３１位および５４位のアミノ酸は、Ｓｅｒであり；５７位のアミノ酸は、Ａｓｐであり；１０１位のアミノ酸は、Ｐｈｅであり；１０３位のアミノ酸は、Ａｓｎであり；２８位のアミノ酸は、Ｉｌｅであり；３０位および５８位のアミノ酸は、Ｔｈｒであり；３２位、３３位および３５位のアミノ酸は、Ｔｙｒであり；５０位および６２位のアミノ酸は、Ｇｌｕであり；５２位、５５位、５９位および６１位のアミノ酸は、Ａｓｎであり；５３位のアミノ酸は、Ｐｒｏであり；６０位および６４位のアミノ酸は、Ｐｈｅであり；６３位および６５位のアミノ酸は、Ｌｙｓであり；６６位、９９位および１０７位のアミノ酸は、Ｓｅｒであり；１００位、１０４位および１０６位のアミノ酸は、Ａｓｐであり；１０２位のアミノ酸は、Ａｒｇであり；そして１０５位のアミノ酸は、Ｍｅｔである。
一部の実施形態においては、該ペプチドは、配列番号６を含み、３１位および５４位のアミノ酸は、Ｓｅｒであり；５７位のアミノ酸は、Ａｓｐであり；１０１位のアミノ酸は、Ｌｅｕであり；１０３位のアミノ酸は、Ａｓｎであり；２８位のアミノ酸は、Ｉｌｅであり；３０位および５８位のアミノ酸は、Ｔｈｒであり；３２位、３３位および３５位のアミノ酸は、Ｔｙｒであり；５０位および６２位のアミノ酸は、Ｇｌｕであり；５２位、５５位、５９位および６１位のアミノ酸は、Ａｓｎであり；５３位のアミノ酸は、Ｐｒｏであり；６０位および６４位のアミノ酸は、Ｐｈｅであり；６３位および６５位のアミノ酸は、Ｌｙｓであり；６６位、９９位および１０７位のアミノ酸は、Ｓｅｒであり；１００位、１０４位および１０６位のアミノ酸は、Ａｓｐであり；１０２位のアミノ酸は、Ａｒｇであり；そして１０５位のアミノ酸は、Ｍｅｔである。
一部の実施形態においては、該ペプチドは、配列番号６を含み、３１位および５４位のアミノ酸は、Ｓｅｒであり；５７位のアミノ酸は、Ａｓｐであり；１０１位のアミノ酸は、Ｇｌｙであり；１０３位のアミノ酸は、Ｔｙｒであり；２８位のアミノ酸は、Ｉｌｅであり；３０位および５８位のアミノ酸は、Ｔｈｒであり；３２位、３３位および３５位のアミノ酸は、Ｔｙｒであり；５０位および６２位のアミノ酸は、Ｇｌｕであり；５２位、５５位、５９位および６１位のアミノ酸は、Ａｓｎであり；５３位のアミノ酸は、Ｐｒｏであり；６０位および６４位のアミノ酸は、Ｐｈｅであり；６３位および６５位のアミノ酸は、Ｌｙｓであり；６６位、９９位および１０７位のアミノ酸は、Ｓｅｒであり；１００位、１０４位および１０６位のアミノ酸は、Ａｓｐであり；１０２位のアミノ酸は、Ａｒｇであり；そして１０５位のアミノ酸は、Ｍｅｔである。
一部の実施形態においては、該ペプチドは、配列番号６を含み、３１位、５４位、６６位、９９位および１０７位のアミノ酸は、Ｓｅｒであり；５７位、１００位、１０４位および１０６位のアミノ酸は、Ａｓｐであり；１０１位のアミノ酸は、Ｇｌｙであり；１０３位、５２位、５５位、５９位および６１位のアミノ酸は、Ａｓｎであり；２８位のアミノ酸は、Ｉｌｅであり；５８位のアミノ酸は、Ｔｈｒであり；３２位、３３位および３５位のアミノ酸は、Ｔｙｒであり；５０位および６２位のアミノ酸は、Ｇｌｕであり；５３位のアミノ酸は、Ｐｒｏであり；６０位および６４位のアミノ酸は、Ｐｈｅであり；６３位および６５位のアミノ酸は、Ｌｙｓであり；１０２位のアミノ酸は、Ａｒｇであり；３０位のアミノ酸は、Ｈｉｓであり；そして１０５位のアミノ酸は、Ｍｅｔである。
一部の実施形態においては、該ペプチドは、配列番号６を含み、３１位、５４位、６６位、９９位および１０７位のアミノ酸は、Ｓｅｒであり；５７位、１００位、１０４位および１０６位のアミノ酸は、Ａｓｐであり；１０１位のアミノ酸は、Ｇｌｙであり；１０３位、５２位、５５位、５９位および６１位のアミノ酸は、Ａｓｎであり；２８位のアミノ酸は、Ｉｌｅであり；３０位および５８位のアミノ酸は、Ｔｈｒであり；３２位および３５位のアミノ酸は、Ｔｙｒであり；５０位および６２位のアミノ酸は、Ｇｌｕであり；５３位のアミノ酸は、Ｐｒｏであり；６０位および６４位のアミノ酸は、Ｐｈｅであり；６３位および６５位のアミノ酸は、Ｌｙｓであり；１０２位のアミノ酸は、Ａｒｇであり；３３位のアミノ酸は、Ｔｒｐであり；そして１０５位のアミノ酸は、Ｍｅｔである。
一部の実施形態においては、該ペプチドは、配列番号６を含み、３１位、６６位、９９位および１０７位のアミノ酸は、Ｓｅｒであり；５７位、１００位、１０４位および１０６位のアミノ酸は、Ａｓｐであり；１０１位のアミノ酸は、Ｇｌｙであり；１０３位、５２位、５４位、５５位、５９位および６１位のアミノ酸は、Ａｓｎであり；２８位のアミノ酸は、Ｉｌｅであり；３０位および５８位のアミノ酸は、Ｔｈｒであり；３２位、３３位および３５位のアミノ酸は、Ｔｙｒであり；５０位および６２位のアミノ酸は、Ｇｌｕであり；５３位のアミノ酸は、Ｐｒｏであり；６０位および６４位のアミノ酸は、Ｐｈｅであり；６３位および６５位のアミノ酸は、Ｌｙｓであり；１０２位のアミノ酸は、Ａｒｇであり；そして１０５位のアミノ酸は、Ｍｅｔである。
一部の実施形態においては、該ペプチドは、配列番号６を含み、３１位、５４位、６６位、９９位および１０７位のアミノ酸は、Ｓｅｒであり；５７位、１００位、１０４位および１０６位のアミノ酸は、Ａｓｐであり；１０１位のアミノ酸は、Ｇｌｙであり；１０３位、５２位、５５位、５９位および６１位のアミノ酸は、Ａｓｎであり；２８位のアミノ酸は、Ｉｌｅであり；３０位および５８位のアミノ酸は、Ｔｈｒであり；３２位および３５位のアミノ酸は、Ｔｙｒであり；５０位および６２位のアミノ酸は、Ｇｌｕであり；５３位のアミノ酸は、Ｐｒｏであり；３３位、６０位および６４位のアミノ酸は、Ｐｈｅであり；６３位および６５位のアミノ酸は、Ｌｙｓであり；１０２位のアミノ酸は、Ａｒｇであり；そして１０５位のアミノ酸は、Ｍｅｔである。
一部の実施形態においては、該ペプチドは、配列番号６を含み、３１位、５４位、６６位、９９位および１０７位のアミノ酸は、Ｓｅｒであり；５７位、５９位、１００位、１０４位および１０６位のアミノ酸は、Ａｓｐであり；１０１位のアミノ酸は、Ｇｌｙであり；１０３位、５２位、５５位および６１位のアミノ酸は、Ａｓｎであり；２８位のアミノ酸は、Ｉｌｅであり；３０位および５８位のアミノ酸は、Ｔｈｒであり；３２位、３３位および３５位のアミノ酸は、Ｔｙｒであり；５０位および６２位のアミノ酸は、Ｇｌｕであり；５３位のアミノ酸は、Ｐｒｏであり；６０位および６４位のアミノ酸は、Ｐｈｅであり；６３位および６５位のアミノ酸は、Ｌｙｓであり；１０２位のアミノ酸は、Ａｒｇであり；そして１０５位のアミノ酸は、Ｍｅｔである。
一部の実施形態においては、該ペプチドは、配列番号６を含み、３１位、５４位、６６位、９９位および１０７位のアミノ酸は、Ｓｅｒであり；５７位、１００位、１０４位および１０６位のアミノ酸は、Ａｓｐであり；１０１位のアミノ酸は、Ｇｌｙであり；１０３位、５２位、５５位および６１位のアミノ酸は、Ａｓｎであり；２８位のアミノ酸は、Ｉｌｅであり；３０位および５８位のアミノ酸は、Ｔｈｒであり；３２位、３３位および３５位のアミノ酸は、Ｔｙｒであり；５０位および６２位のアミノ酸は、Ｇｌｕであり；５３位のアミノ酸は、Ｐｒｏであり；６０位および６４位のアミノ酸は、Ｐｈｅであり；６３位および６５位のアミノ酸は、Ｌｙｓであり；１０２位のアミノ酸は、Ａｒｇであり；５９位のアミノ酸は、Ｌｅｕであり；そして１０５位のアミノ酸は、Ｍｅｔである。
本発明はまた、本明細書に開示したペプチドのいずれかを含む組成物を提供する。
本発明はまた、本明細書に開示したペプチドのいずれかをコードする核酸分子を提供する。
本発明はまた、本明細書に開示した核酸分子のいずれかを含むベクターを提供する。
本発明はまた、本明細書に開示した核酸分子またはベクターのいずれかを含む組成物を提供する。
本発明はまた、本明細書に開示した核酸分子またはベクターのいずれかを含む宿主細胞を提供する。
本発明はまた、本明細書に開示したペプチドのいずれかを含む抗体またはそのフラグメントを提供し、その抗体またはそのフラグメントは、ヒトＣＤ１５４に結合することができる。
一部の実施形態においては、抗体フラグメントは、単鎖抗体（ｓｃＦｖ）、Ｆ（ａｂ’）２フラグメント、ＦａｂフラグメントおよびＦｄフラグメントからなる群より選択される。
一部の実施形態においては、抗体またはそのフラグメントは、検出可能なマーカー（例えば、放射性同位体、酵素、蛍光色素、コロイド状金、染料およびビオチンからなる群より選択されるマーカー）により標識される。
一部の実施形態においては、抗体またはそのフラグメントは、治療剤（例えば、放射性同位体、毒素、トキソイドおよび化学療法剤からなる群より選択されるもの）に結合体化されるか；あるいはビーズに結合体化される。
一部の実施形態においては、抗体またはフラグメントは高分子量ポリマー、例えばポリエチレンイミンおよびポリリジンからなる群より選択されるもの少なくとも１つを含む。
一部の実施形態においては、抗体またはフラグメントはＰＥＧ化およびグリコシル化からなる群より選択されるアミノ酸少なくとも１つを含む。
本発明はまた本明細書に開示した抗体またはそのフラグメントのいずれかを含む組成物を提供する。
本発明はまた本明細書に開示した抗体またはそのフラグメントのいずれかを含むキットを提供する。
本発明はまた、ＣＤ１５４関連のヒトの疾患または障害を処置または防止するための方法を提供し、この方法は、該ＣＤ１５４関連のヒトの疾患または障害が軽減または防止されるように、請求項５５〜７７のうちのいずれか１項に記載の抗体またはそのフラグメント、あるいは請求項５３に記載の組成物の治療有効量または予防有効量をヒトに投与する工程；を包含する。
一部の実施形態においては、ヒトの疾患または障害は、炎症、例えば、関節炎に関係する炎症、接触性皮膚炎に関係する炎症、高ＩｇＥ症候群に関係する炎症、炎症性腸疾患に関係する炎症、アレルギー性喘息に関係する炎症、および特発性炎症疾患に関係する炎症からなる群より選択される。
一部の実施形態においては、関節炎は、慢性関節リウマチ、非リウマチ性炎症性関節炎（ｎｏｎ−ｒｈｅｕｍａｔｏｉｄ ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ａｒｔｈｒｉｔｉｓ）、ライム病関連関節炎および炎症性変形性関節症からなる群より選択されるる。
一部の実施形態においては、特発性炎症疾患は、乾癬および全身エリテマトーデスからなる群より選択される。
一部の実施形態においては、疾患または障害は、重症筋無力症、グレーブス病、特発性血小板減少性紫斑病、溶血性貧血、真性糖尿病、クローン病、多発性硬化症および薬物誘発性自己免疫疾患からなる群より選択される。
一部の実施形態においては、障害は、移植された器官（例えば、移植された心臓、移植された腎臓、移植された肝臓、移植された皮膚、移植された膵島細胞、および移植された骨髄からなる群より選択されるもの）の、被験体による拒絶である。
一部の実施形態においては、障害は、被験体における移植片対宿主病、アレルギー性応答、自己免疫応答および線維症、例えば肺線維症および線維性疾患からなる群より選択される。
一部の実施形態においては、肺線維症は、成人呼吸促進症候群に続発性の肺線維症、薬物誘発性肺線維症、特発性肺線維症または過敏性肺炎からなる群より選択され；そして、線維性疾患は。Ｃ型肝炎、Ｂ型肝炎、肝硬変、毒性傷害に続発性の肝硬変、薬物に続発性の肝硬変、ウイルス感染に続発性の肝硬変および自己免疫疾患に続発性の肝硬変からなる群より選択される。
一部の実施形態においては、自己免疫応答は、ライター症候群、脊椎関節炎、ライム病、ＨＩＶ感染、梅毒および結核から誘導されるものからなる群より選択される。
一部の実施形態においては、疾患または障害は、胃腸疾患、例えば食道運動障害（ｅｓｏｐｈａｇｅａｌ ｄｙｓｍｏｔｉｌｉｔｙ）、炎症性腸疾患および強皮症から選択されるものであり；または、脈管疾患であり、脈管疾患は、アテローム性動脈硬化症および再灌流傷害からなる群より選択される。
一部の実施形態においては、疾患または障害は、Ｔ細胞腫瘍癌、例えば、Ｔ細胞白血病およびリンパ腫からなる群より選択されるものである。
本発明はまたＣＤ１５４に関連するヒトの疾患または障害の処置において、および、ＣＤ１５４に関連するヒトの疾患または障害の処置のための医薬の製造において使用するためのペプチドまたはそのフラグメントを提供する。
本発明はペプチド、特に軽鎖および重鎖の可変領域をおよびそのフラグメント、およびそれらを含む抗体およびそのフラグメントを提供し、ペプチドは野生型５ｃ８抗体と比較してアミノ酸置換少なくとも１つを含む。
「抗体」という用語は本明細書においては、モノクローナル抗体（完全長モノクローナル抗体を包含する）、ポリクローナル抗体、多重特異性抗体（例えば二重特異的抗体）、キメラ抗体、ＣＤＲ移植抗体、ヒト化抗体、ヒト抗体等およびそのフラグメントを包含する。
「抗体フラグメント」等の表現は本明細書においては、例えば抗体軽鎖（ＶＬ）、抗体重鎖（ＶＨ）、単鎖抗体（ｓｃＦｖ）、Ｆ（ａｂ’）２フラグメント、Ｆａｂフラグメント、Ｆａｂ’フラグメント、Ｆｄフラグメント、Ｆｖフラグメントおよび単一ドメイン抗体フラグメント（ＤＡｂ）を包含する。
「ＣＤＲ」という用語は本明細書においては、例えばＫａｂａｔ，ＣｈｏｔｈｉａまたはＭａｃＣａｌｌｕｍ等により記載された相補性決定領域を包含する（例えばＫａｂａｔ ｅｔ ａｌ．，“Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ”， ＵＳ Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ ａｎｄ Ｈｕｍａｎ Ｓｅｒｖｉｃｅｓ， １９８３；Ｃｈｏｔｈｉａ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，１９８７，１９６，９０１−９１７；およびＭａｃＣａｌｌｕｍ ｅｔ ａｌ．，Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，１９９６，２６２，７３２−７４５参照）。
上記引用文献の各々により記載されているＣＤＲを典型的に包含するアミノ酸残基部分を比較のために以下に記載する。
Figure 0005102028
 「フレームワーク領域」という表現は本明細書においては、ＣＤＲの間にあってこれ等を分離している抗体配列を包含する。従って、可変領域フレームワークは約１００〜１２０アミノ酸長であるが、ＣＤＲ外のアミノ酸のみを指すことを意図している。重鎖可変領域の特定の例に関して、および、Ｋａｂａｔ等により定義されたＣＤＲに関しては、フレームワーク領域１はアミノ酸１〜３０を包含する可変領域のドメインに相当し；領域２はアミノ酸３６〜４９を包含する可変領域のドメインに相当し；領域３はアミノ酸６６〜９４を包含する可変領域のドメインに相当し；そして領域４はアミノ酸１０３から可変領域の最後までの可変領域のドメインに相当する。軽鎖のフレームワーク領域も同様に軽鎖可変領域のＣＤＲの各々により分離される。同様に、Ｃｈｏｔｈｉａ等またはＭｃＣａｌｌｕｍ等の定義を用いれば、フレームワーク領域の境界は上記した通りそれぞれのＣＤＲ末端により分離される。
「可変領域」という表現は本明細書においては、分子上への抗原結合を可能とし、そして定常領域ではない抗体のアミノ末端部分を包含する。用語は全体の可変領域の結合機能の一部または全てを保持している機能的フラグメント、例えば抗原結合フラグメントを包含することを意図している。
「５ｃ８抗体」という表現はＣＤ１５４に結合し、そして米国特許第５，４７４，７７１号に記載されている抗体を指す。ｈｕ５ｃ８ｍＡｂハイブリドーマはＡＴＣＣ（ＨＢ１０９１６）から入手可能である。５ｃ８抗体の軽鎖および重鎖の可変領域に関する野生型アミノ酸配列はそれぞれ配列番号１および配列番号４に示す。
１つの態様において、本発明は軽鎖の可変領域においてアミノ酸置換少なくとも１つを含む５ｃ８抗体誘導体を提供する。野生型５ｃ８軽鎖可変領域は配列番号１（アミノ酸配列）に示す。本発明はアミノ酸置換少なくとも１つが起こっている野生型５ｃ８軽鎖可変領域を含むペプチドを提供する（すなわち、配列番号１を含まないペプチド）。軽鎖ペプチドは定常領域および可変領域の両方を含む全軽鎖を含むことができ、または、可変領域のみを含んでもよい。軽鎖ペプチドはまた全可変領域、および、全定常領域マイナス１アミノ酸から定常領域の僅か１アミノ酸までの範囲またはその内部のいずれかの範囲であることができる定常領域の一部を含むこともできる。あるいは、軽鎖ペプチドは任意の無関係なペプチド配列に融合して融合タンパク質を形成している可変領域を含むこともできる。
一部の実施形態においては、軽鎖ペプチドは野生型５ｃ８抗体軽鎖可変領域（配列番号１参照）の以下の位置：すなわち、２４位、２６位、２７位、２８位、３０位、３１位、３２位、３３位、３４位、３５位、３６位、３８位、５４位、５７位、５８位、５９位、６０位、９３位、９５位、９６位、９７位、９８位、１００位および１０１位またはそのいずれかのサブセットからなる群より選択される位置のいずれかにおいてアミノ酸置換少なくとも１つを含む。アミノ酸置換を含有してよいこれ等の位置を含むこのようなペプチドは配列番号３（アミノ酸配列）に示す。これ等の軽鎖ペプチドはまた少なくとも２、少なくとも３、少なくとも４、少なくとも５、少なくとも６、少なくとも７、少なくとも８、少なくとも９、少なくとも１０、少なくとも１１、少なくとも１２、少なくとも１３、少なくとも１４、少なくとも１５、少なくとも１６、少なくとも１７、少なくとも１８、少なくとも１９、少なくとも２０、少なくとも２１、少なくとも２２または少なくとも２３アミノ酸の置換、または２４アミノ酸の各々における置換を含むこともできる。
一部の実施形態においては、軽鎖ペプチドは２６、２７、３１、３２、３３および９８位のいずれかまたはそのサブセットのいずれかにおいてアミノ酸置換少なくとも１つを含む。アミノ酸置換を含有してよいこれ等の位置を含むこのようなペプチドは配列番号３（アミノ酸配列）に記載されており、２４位、２８位、３０位、３４位、３５位、３６位、３８位、５４位、５７位、５８位、５９位、６０位、９３位、９５位、９６位、９７位、１００位および１０１位は野生型アミノ酸である。これ等のペプチドはまた少なくとも２、少なくとも３、少なくとも４または少なくとも５アミノ酸の置換、または６位置の各々における置換を含むこともできる。
上記した位置（すなわち、２４位、２６位、２７位、２８位、３０位、３１位、３２位、３３位、３４位、３５位、３６位、３８位、５４位、５７位、５８位、５９位、６０位、９３位、９５位、９６位、９７位、９８位、１００位および１０１位）の各々における置換されたアミノ酸はそれぞれ相互に独立して任意の天然に存在するアミノ酸または天然に存在しないアミノ酸であることができる。すなわち、特定の軽鎖ペプチドは天然に存在するアミノ酸であるアミノ酸置換１つ以上および／または天然に存在しないアミノ酸であるアミノ酸置換１つ以上を含んでよい。
個々のアミノ酸置換は以下、すなわち、：１）非極性側鎖を有するアミノ酸のセット、例えばＡｌａ、Ｃｙｓ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｖａｌ；２）負荷電側鎖を有するアミノ酸のセット、例えばＡｓｐ、Ｇｌｕ；３）正荷電側鎖を有するアミノ酸のセット、例えばＡｒｇ、Ｈｉｓ、Ｌｙｓ；および４）非荷電の極性側鎖を有するアミノ酸のセット、例えばＡｓｎ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、ＴｙｒにＣｙｓ、Ｇｌｙ、ＭｅｔおよびＰｈｅが付加されたもの、のいずれか１つから選択される。
天然に存在するアミノ酸には例えばアラニン（Ａｌａ）、アルギニン（Ａｒｇ）、アスパラギン（Ａｓｎ）、アスパラギン酸（Ａｓｐ）、システイン（Ｃｙｓ）、グルタミン（Ｇｌｎ）、グルタミン酸（Ｇｌｕ）、グリシン（Ｇｌｙ）、ヒスチジン（Ｈｉｓ）、イソロイシン（Ｉｌｅ）、ロイシン（Ｌｅｕ）、リジン（Ｌｙｓ）、メチオニン（Ｍｅｔ）、フェニルアラニン（Ｐｈｅ）、プロリン（Ｐｒｏ）、セリン（Ｓｅｒ）、スレオニン（Ｔｈｒ）、トリプトファン（Ｔｒｐ）、チロシン（Ｔｙｒ）およびバリン（Ｖａｌ）が包含される。
天然に存在しないアミノ酸には例えばノルロイシン、オルニチン、ノルバリン、ホモセリンおよび他のアミノ酸残基類縁体、例えばＥｌｌｍａｎ ｅｔ ａｌ．，Ｍｅｔｈ．Ｅｎｚｙｍ．，１９９１，２０２，３０１−３３６に記載のものが包含される。このような天然に存在しないアミノ酸残基を生成させるためにはＮｏｒｅｎ ｅｔ ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ，１９８９，２４４，１８２およびＥｌｌｍａｎ ｅｔ ａｌ．，ｓｕｐｒａの操作法を使用できる。慨すれば、これ等の操作法では天然に存在しないアミノ酸残基を用いてサプレッサーｔＲＮＡを化学的に活性化し、その後ＲＮＡのインビトロの転写および翻訳を行う。
一部の実施形態においては、軽鎖ペプチドは配列番号３の相当する領域に少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一である。すなわち、例えば、２６位および２７位にアミノ酸置換２つを含む軽鎖ペプチドは、ペプチドが少なくとも同一であることの上記パーセンテージ内に有る限り、なお別の置換をペプチド内の何処かに有することができる（すなわち、配列番号３において「Ｘａａ」と記載したもの以外の位置）。すなわち、別のアミノ酸置換またはアミノ酸挿入または欠失を有するペプチドも本明細書において意図される。軽鎖の定常領域の部分を含むペプチドのパーセント同一性を決定する際には、可変領域のみをパーセント同一性の目的のためには考慮するものとする（すなわち、定常領域の部分はパーセント同一性に包含されない）。
フラグメントは少なくとも８、少なくとも１０、少なくとも１５、少なくとも２０、少なくとも２５、少なくとも３０、少なくとも３５、少なくとも４０、少なくとも４５、少なくとも５０、少なくとも５５、少なくとも６０、少なくとも６５、少なくとも７０、少なくとも７５、少なくとも８０、少なくとも８５、少なくとも９０、少なくとも９５、少なくとも１００または少なくとも１０５アミノ酸、最大で１１０アミノ酸を含むことができる。一部の実施形態においては、フラグメントは配列番号３を参照すれば、２４位、２６位、２７位、２８位、３０位、３１位、３２位、３３位、３４位、３５位、３６位、３８位、５４位、５７位、５８位、５９位、６０位、９３位、９５位、９６位、９７位、９８位、１００位および１０１位またはそのサブセットのいずれかの少なくとも１つを含む。一部の実施形態においては、フラグメントは上記した軽鎖アミノ酸置換のいずれかの１つ以上を含む。
本明細書に記載した軽鎖ペプチドおよびそのフラグメントはＣＤ１５４に結合するその能力を保持している。すなわち、５ｃ８抗体の相当する野生型アミノ酸を本明細書に記載したペプチドまたはフラグメントで置き換えてもなお、得られる抗体はヒトＣＤ１５４に結合できるのである。例えば、野生型５ｃ８軽鎖可変領域のアミノ酸の全てまたは一部を本明細書に記載したペプチドまたはフラグメントの相当するアミノ酸で置き換えれば、ヒトＣＤ１５４に結合する能力を保持した抗体が得られる。
一部の実施形態においては、軽鎖は記載した位置において以下の型のアミノ酸、すなわち、：Ｒ２４（負、正、極性、非極性）；Ｓ２６（負、極性、非極性）；Ｑ２７（正、負、極性）；Ｒ２８（負、極性、非極性）；Ｓ３０（正、負、極性）；Ｓ３１（正、極性、非極性）；Ｓ３２（正、極性、非極性）；Ｔ３３（正、負、極性、非極性）；Ｙ３４（正、負、極性、非極性）；Ｓ３５（極性）；Ｙ３６（極性、非極性、負）；Ｈ３８（正、負、極性、非極性）；Ｙ５４（負、極性、非極性）；Ｎ５７（負、極性）；Ｌ５８（負、極性）；Ｅ５９（負、極性）；Ｓ６０（負）；Ｑ９３（正、負、極性、非極性）；Ｓ９５（負、極性）；Ｗ９６（負、正、極性）；Ｅ９７（負）；Ｉ９８（負、極性、非極性）；Ｐ１００（負、極性）；およびＴ１０１（負、極性、非極性）により置換されてよい。
一部の実施形態においては軽鎖ペプチドまたはそのフラグメントの２４位（配列番号３参照）のアミノ酸はＡｒｇ、Ａｓｎ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ａｌａ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｐｒｏ、Ｖａｌ、Ａｓｐ、ＧｌｕおよびＬｙｓまたはいずれかのそのサブセットからなる群より選択される。２４位のアミノ酸は好ましくはＡｒｇであることができる。
一部の実施形態においては、軽鎖ペプチドまたはそのフラグメントの２６位（配列番号３参照）のアミノ酸はＳｅｒ、Ａｓｎ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ａｌａ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｐｒｏ、Ｖａｌ、ＡｓｐおよびＧｌｕまたはいずれかのそのサブセットからなる群より選択される。あるいは、２６位のアミノ酸は好ましくはＳｅｒまたはＡｓｐであることができる。２６位のアミノ酸はまた好ましくはＳｅｒ、ＡｓｐまたはＧｌｕ；または好ましくはＳｅｒまたはＡｓｐであることもできる。
一部の実施形態においては、軽鎖ペプチドまたはそのフラグメントの２７位（配列番号３参照）のアミノ酸はＧｌｎ、Ａｓｎ、Ｃｙｓ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、ＡｒｇおよびＬｙｓまたはいずれかのそのサブセットからなる群より選択される。あるいは、２７位のアミノ酸は好ましくはＧｌｎまたはＧｌｕであることができる。２７位のアミノ酸はまた好ましくはＧｌｎ、ＡｓｐまたはＧｌｕ；または好ましくはＧｌｎまたはＧｌｕであることもできる。
一部の実施形態においては、軽鎖ペプチドまたはそのフラグメントの２８位（配列番号３参照）のアミノ酸はＡｒｇ、Ａｓｎ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ａｌａ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、ＰｒｏおよびＶａｌまたはいずれかのそのサブセットからなる群より選択される。あるいは、２８位のアミノ酸は好ましくはＡｒｇまたはＧｌｕであることができる。２８位のアミノ酸はまた好ましくはＡｒｇであることもできる。
一部の実施形態においては、軽鎖ペプチドまたはそのフラグメントの３０位（配列番号３参照）のアミノ酸はＳｅｒ、Ａｓｎ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、ＡｒｇおよびＬｙｓまたはいずれかのそのサブセットからなる群より選択される。３０位のアミノ酸は好ましくはＳｅｒであることができる。
一部の実施形態においては、軽鎖ペプチドまたはそのフラグメントの３１位（配列番号３参照）のアミノ酸はＳｅｒ、Ａｓｎ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ａｌａ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｐｒｏ、Ｖａｌ、ＡｒｇおよびＬｙｓまたはいずれかのそのサブセットからなる群より選択される。あるいは、３１位のアミノ酸はＳｅｒ、Ａｌａ、Ｈｉｓ、Ａｓｎ、Ｔｈｒ、ＶａｌおよびＴｒｐからなる群より選択される。３１位のアミノ酸はまたＳｅｒ、Ａｓｎ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｙ、ＴｈｒおよびＴｙｒからなる群より選択され；または好ましくはＳｅｒまたはＡｓｎである。
一部の実施形態においては、軽鎖ペプチドまたはそのフラグメントの３２位（配列番号３参照）のアミノ酸はＳｅｒ、Ａｓｎ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ａｒｇ、Ａｌａ、Ｉｌｅ、ＬｅｕおよびＬｙｓまたはいずれかのそのサブセットからなる群より選択される。あるいは、３２位のアミノ酸はＳｅｒ、Ａｌａ、Ｐｈｅ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、ＭｅｔおよびＴｒｐからなる群より選択される。３２位のアミノ酸はまたＳｅｒ、Ａｌａ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、ＶａｌおよびＴｒｐからなる群より選択され；または好ましくはＳｅｒまたはＰｈｅである。
一部の実施形態においては、軽鎖ペプチドまたはそのフラグメントの３３位（配列番号３参照）のアミノ酸はＴｈｒ、Ａｓｎ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｓｅｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ａｒｇ、Ａｌａ、ＶａｌおよびＬｙｓまたはいずれかのそのサブセットからなる群より選択される。あるいは、３３位のアミノ酸はＴｈｒ、Ａｌａ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、Ｖａｌ、Ｔｒｐ、Ａｓｐ、Ａｒｇ、ＴｙｒおよびＧｌｎからなる群より選択される。３３位のアミノ酸はまたＴｈｒ、Ａｓｎ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｙ、ＳｅｒおよびＴｙｒからなる群より選択され；または好ましくはＴｈｒ、ＧｌｎまたはＴｙｒである。
一部の実施形態においては、軽鎖ペプチドまたはそのフラグメントの３４位（配列番号３参照）のアミノ酸はＴｙｒ、Ａｓｎ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ａｌａ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｐｒｏ、Ｖａｌ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、ＡｒｇおよびＬｙｓまたはいずれかのそのサブセットからなる群より選択される。あるいは、３４位のアミノ酸はＴｙｒ、Ａｌａ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ｐｈｅ、Ｉｌｅ、Ｌｙｓ、Ｌｅｕ、Ｍｅｔ、Ａｒｇ、ＶａｌおよびＴｒｐからなる群より選択される。３４位のアミノ酸はまた好ましくはＴｙｒである。
一部の実施形態においては、軽鎖ペプチドまたはそのフラグメントの３５位（配列番号３参照）のアミノ酸はＳｅｒ、Ａｓｎ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｔｈｒ、ＴｒｐおよびＴｙｒまたはいずれかのそのサブセットからなる群より選択される。３５位のアミノ酸はまた好ましくはＳｅｒである。
一部の実施形態においては、軽鎖ペプチドまたはそのフラグメントの３６位（配列番号３参照）のアミノ酸はＴｙｒ、Ａｓｎ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ａｓｐ、Ａｌａ、ＬｅｕおよびＧｌｕまたはいずれかのそのサブセットからなる群より選択される。あるいは、３６位のアミノ酸はＴｙｒ、Ａｌａ、Ｐｈｅ、ＬｅｕおよびＴｒｐからなる群より選択される。３６位のアミノ酸はまた好ましくはＴｙｒである。
一部の実施形態においては、軽鎖ペプチドまたはそのフラグメントの３８位（配列番号３参照）のアミノ酸はＨｉｓ、Ａｓｎ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｙ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ａｌａ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｐｒｏ、Ｖａｌ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、ＡｒｇおよびＬｙｓまたはいずれかのそのサブセットからなる群より選択される。３８位のアミノ酸はまた好ましくはＨｉｓである。
一部の実施形態においては、軽鎖ペプチドまたはそのフラグメントの５４位（配列番号３参照）のアミノ酸はＴｙｒ、Ａｓｎ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ａｌａ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｐｒｏ、Ｖａｌ、ＡｓｐおよびＧｌｕまたはいずれかのそのサブセットからなる群より選択される。あるいは、５４位のアミノ酸は好ましくはＴｙｒまたはＧｌｕである。５４位のアミノ酸はまた好ましくはＴｙｒである。
一部の実施形態においては、軽鎖ペプチドまたはそのフラグメントの５７位（配列番号３参照）のアミノ酸はＡｓｎ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、ＡｓｐおよびＧｌｕまたはいずれかのそのサブセットからなる群より選択される。５７位のアミノ酸はまた好ましくはＡｓｎである。
一部の実施形態においては、軽鎖ペプチドまたはそのフラグメントの５８位（配列番号３参照）のアミノ酸はＬｅｕ、Ａｓｎ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、ＡｓｐおよびＧｌｕまたはいずれかのそのサブセットからなる群より選択される。５８位のアミノ酸はまた好ましくはＬｅｕである。
一部の実施形態においては、軽鎖ペプチドまたはそのフラグメントの５９位（配列番号３参照）のアミノ酸はＧｌｕ、Ａｓｎ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、ＴｙｒおよびＡｓｐまたはいずれかのそのサブセットからなる群より選択される。５９位のアミノ酸はまた好ましくはＧｌｕである。
一部の実施形態においては、軽鎖ペプチドまたはそのフラグメントの６０位（配列番号３参照）のアミノ酸はＳｅｒ、ＡｓｐおよびＧｌｕまたはいずれかのそのサブセットからなる群より選択される。６０位のアミノ酸はまた好ましくはＳｅｒである。
一部の実施形態においては、軽鎖ペプチドまたはそのフラグメントの９３位（配列番号３参照）のアミノ酸はＧｌｎ、Ａｓｎ、Ｃｙｓ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ａｌａ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｐｒｏ、Ｖａｌ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、ＡｒｇおよびＬｙｓまたはいずれかのそのサブセットからなる群より選択される。９３位のアミノ酸はまた好ましくはＧｌｎである。
一部の実施形態においては、軽鎖ペプチドまたはそのフラグメントの９５位（配列番号３参照）のアミノ酸はＳｅｒ、Ａｓｎ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、ＡｓｐおよびＧｌｕまたはいずれかのそのサブセットからなる群より選択される。９５位のアミノ酸はまた好ましくはＳｅｒである。
一部の実施形態においては、軽鎖ペプチドまたはそのフラグメントの９６位（配列番号３参照）のアミノ酸はＴｒｐ、Ａｓｎ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｙｒ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、ＡｒｇおよびＬｙｓまたはいずれかのそのサブセットからなる群より選択される。あるいは、９６位のアミノ酸はＴｒｐ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ｈｉｓ、Ａｒｇ、ＳｅｒおよびＴｈｒからなる群より選択される。９６位のアミノ酸はまた好ましくはＴｒｐである。
一部の実施形態においては、軽鎖ペプチドまたはそのフラグメントの９７位（配列番号３参照）のアミノ酸はＧｌｕまたはＡｓｐまたはいずれかのそのサブセットである。９７位のアミノ酸はまた好ましくはＧｌｕである。
一部の実施形態においては、軽鎖ペプチドまたはそのフラグメントの９８位（配列番号３参照）のアミノ酸はＩｌｅ、Ａｓｎ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ａｓｐ、Ａｌａ、Ｌｅｕ、Ｐｒｏ、ＶａｌおよびＧｌｕまたはいずれかのそのサブセットからなる群より選択される。あるいは、９８位のアミノ酸はＩｌｅ、Ａｌａ、Ｐｈｅ、Ｈｉｓ、Ｌｅｕ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｐｒｏ、Ｇｌｎ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｖａｌ、ＴｒｐおよびＴｙｒからなる群より選択される。９８位のアミノ酸はまたＩｌｅ、Ａｓｎ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、ＴｈｒおよびＴｙｒからなる群より選択され；または好ましくはＩｌｅまたはＧｌｎである。
一部の実施形態においては、軽鎖ペプチドまたはそのフラグメントの１００位（配列番号３参照）のアミノ酸はＰｒｏ、Ａｓｎ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、ＡｓｐおよびＧｌｕまたはいずれかのそのサブセットである。１００位のアミノ酸はまた好ましくはＰｒｏである。
一部の実施形態においては、軽鎖ペプチドまたはそのフラグメントの１０１位（配列番号３参照）のアミノ酸はＴｈｒ、Ａｓｎ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｓｅｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ａｌａ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｐｒｏ、Ｖａｌ、ＡｓｐおよびＧｌｕまたはいずれかのそのサブセットである。１０１位のアミノ酸はまた好ましくはＴｈｒである。
一部の実施形態においては２６位のアミノ酸は、Ａｓｐであり；２７位のアミノ酸は、Ｇｌｕであり；２８位のアミノ酸は、Ｇｌｕであり；３１位のアミノ酸は、Ｖａｌであり；３３位のアミノ酸は、ＡｓｐまたはＡｒｇであり；そして５４位のアミノ酸は、Ｇｌｕである。
一部の実施形態においては、３１位のアミノ酸は、ＨｉｓまたはＡｓｎであり；３２位のアミノ酸は、ＴｒｐまたはＰｈｅであり；３３位のアミノ酸は、Ｔｒｐ、ＴｙｒまたはＧｌｎであり；３６位のアミノ酸は、ＬｅｕまたはＴｒｐであり；９６位のアミノ酸は、Ｈｉｓであり；そして９８位のアミノ酸は、ＰｈｅまたはＧｌｎである。
一部の実施形態においては、ペプチドは配列番号３を含み、２６位のアミノ酸はＡｓｐであり；２７位のアミノ酸はＧｌｎであり；３１位および３２位のアミノ酸はＳｅｒであり；３３位のアミノ酸はＴｈｒであり；９８位のアミノ酸はＩｌｅであり；２４位および２８位のアミノ酸はＡｒｇであり；３０位、３５位、６０位および９５位のアミノ酸はＳｅｒであり；３４位、３６位および５４位のアミノ酸はＴｙｒであり；３８位のアミノ酸はＨｉｓであり；５７位のアミノ酸はＡｓｎであり；５８位のアミノ酸はＬｅｕであり；５９位および９７位のアミノ酸はＧｌｕであり；９３位のアミノ酸はＧｌｎであり；９６位のアミノ酸はＴｒｐであり；１００位のアミノ酸はＰｒｏであり；そして１０１位のアミノ酸はＴｈｒである。この変異体は本明細書においては変異体＃６と称する。
一部の実施形態においては、ペプチドは配列番号３を含み、２６位、３１位および３２位のアミノ酸はＳｅｒであり；２７位のアミノ酸はＧｌｕであり；３３位のアミノ酸はＴｈｒであり；９８位のアミノ酸はＩｌｅであり；２４位および２８位のアミノ酸はＡｒｇであり；３０位、３５位、６０位および９５位のアミノ酸はＳｅｒであり；３４位、３６位および５４位のアミノ酸はＴｙｒであり；３８位のアミノ酸はＨｉｓであり；５７位のアミノ酸はＡｓｎであり；５８位のアミノ酸はＬｅｕであり；５９位および９７位のアミノ酸はＧｌｕであり；９３位のアミノ酸はＧｌｎであり；９６位のアミノ酸はＴｒｐであり；１００位のアミノ酸はＰｒｏであり；そして１０１位のアミノ酸はＴｈｒである。この変異体は本明細書においては変異体＃７と称する。
一部の実施形態においては、ペプチドは配列番号３を含み、２６位のアミノ酸はＡｓｐであり；２７位のアミノ酸はＧｌｕであり；３１位および３２位のアミノ酸はＳｅｒであり；３３位のアミノ酸はＴｈｒであり；９８位のアミノ酸はＩｌｅであり；２４位および２８位のアミノ酸はＡｒｇであり；３０位、３５位、６０位および９５位のアミノ酸はＳｅｒであり；３４位、３６位および５４位のアミノ酸はＴｙｒであり；３８位のアミノ酸はＨｉｓであり；５７位のアミノ酸はＡｓｎであり；５８位のアミノ酸はＬｅｕであり；５９位および９７位のアミノ酸はＧｌｕであり；９３位のアミノ酸はＧｌｎであり；９６位のアミノ酸はＴｒｐであり；１００位のアミノ酸はＰｒｏであり；そして１０１位のアミノ酸はＴｈｒである。この変異体は本明細書においては変異体＃１４と称する。
一部の実施形態においては、ペプチドは配列番号３を含み、２７位および９３位のアミノ酸はＧｌｎであり；２６位、３１位、３２位、３０位、３５位、６０位および９５位のアミノ酸はＳｅｒであり；３３位および１０１位のアミノ酸はＴｈｒであり；９８位のアミノ酸はＩｌｅであり；２４位および２８位のアミノ酸はＡｒｇであり；３４位および５４位のアミノ酸はＴｙｒであり；３８位のアミノ酸はＨｉｓであり；５７位のアミノ酸はＡｓｎであり；５８位のアミノ酸はＬｅｕであり；５９位および９７位のアミノ酸はＧｌｕであり；９６位および３６位のアミノ酸はＴｒｐであり；そして１００位のアミノ酸はＰｒｏである。この変異体は本明細書においては変異体＃３と称する。
一部の実施形態においては、ペプチドは配列番号３を含み、２７位および９３位のアミノ酸はＧｌｎであり；２６位、３１位、３２位、３０位、３５位、６０位および９５位のアミノ酸はＳｅｒであり；１０１位のアミノ酸はＴｈｒであり；９８位のアミノ酸はＩｌｅであり；２４位および２８位のアミノ酸はＡｒｇであり；３４位、３６位および５４位のアミノ酸はＴｙｒであり；３８位のアミノ酸はＨｉｓであり；５７位のアミノ酸はＡｓｎであり；５８位のアミノ酸はＬｅｕであり；５９位および９７位のアミノ酸はＧｌｕであり；９６位および３３位のアミノ酸はＴｒｐであり；そして１００位のアミノ酸はＰｒｏである。この変異体は本明細書においては変異体＃５と称する。
一部の実施形態においては、ペプチドは配列番号３を含み、２７位および９３位のアミノ酸はＧｌｎであり；２６位、３２位、３０位、３５位、６０位および９５位のアミノ酸はＳｅｒであり；３３位および１０１位のアミノ酸はＴｈｒであり；９８位のアミノ酸はＩｌｅであり；２４位および２８位のアミノ酸はＡｒｇであり；３４位、３６位および５４位のアミノ酸はＴｙｒであり；３８位のアミノ酸はＨｉｓであり；５７位のアミノ酸はＡｓｎであり；５８位のアミノ酸はＬｅｕであり；５９位および９７位のアミノ酸はＧｌｕであり；９６位のアミノ酸はＴｒｐであり；３１位のアミノ酸はＶａｌであり；そして１００位のアミノ酸はＰｒｏである。この変異体は本明細書においては変異体＃８と称する。
一部の実施形態においては、ペプチドは配列番号３を含み、２７位および９３位のアミノ酸はＧｌｎであり；２６位、３１位、３２位、３０位、３５位、６０位および９５位のアミノ酸はＳｅｒであり；１０１位のアミノ酸はＴｈｒであり；９８位のアミノ酸はＩｌｅであり；２４位および２８位のアミノ酸はＡｒｇであり；３４位、３６位および５４位のアミノ酸はＴｙｒであり；３８位のアミノ酸はＨｉｓであり；５７位のアミノ酸はＡｓｎであり；５８位のアミノ酸はＬｅｕであり；５９位および９７位のアミノ酸はＧｌｕであり；９６位のアミノ酸はＴｒｐであり；３３位のアミノ酸はＡｓｐであり；そして１００位のアミノ酸はＰｒｏである。この変異体は本明細書においては変異体＃９と称する。
一部の実施形態においては、ペプチドは配列番号３を含み、２７位および９３位のアミノ酸はＧｌｎであり；２６位、３１位、３２位、３０位、３５位、６０位および９５位のアミノ酸はＳｅｒであり；３３位および１０１位のアミノ酸はＴｈｒであり；９８位のアミノ酸はＩｌｅであり；２４位および２８位のアミノ酸はＡｒｇであり；３４位および３６位のアミノ酸はＴｙｒであり；３８位のアミノ酸はＨｉｓであり；５７位のアミノ酸はＡｓｎであり；５８位のアミノ酸はＬｅｕであり；５４位、５９位および９７位のアミノ酸はＧｌｕであり；９６位のアミノ酸はＴｒｐであり；そして１００位のアミノ酸はＰｒｏである。この変異体は本明細書においては変異体＃１０と称する。
一部の実施形態においては、ペプチドは配列番号３を含み、２６位のアミノ酸はＡｓｐであり；２７位のアミノ酸はＧｌｕであり；３１位および３２位のアミノ酸はＳｅｒであり；９８位のアミノ酸はＩｌｅであり；２４位および２８位のアミノ酸はＡｒｇであり；３０位、３５位、６０位および９５位のアミノ酸はＳｅｒであり；３４位、３６位および５４位のアミノ酸はＴｙｒであり；３８位のアミノ酸はＨｉｓであり；５７位のアミノ酸はＡｓｎであり；５８位のアミノ酸はＬｅｕであり；５９位および９７位のアミノ酸はＧｌｕであり；９３位のアミノ酸はＧｌｎであり；３３位および９６位のアミノ酸はＴｒｐであり；１００位のアミノ酸はＰｒｏであり；そして１０１位のアミノ酸はＴｈｒである。この変異体は本明細書においては変異体＃１５と称する。
一部の実施形態においては、ペプチドは配列番号３を含み、２６位のアミノ酸はＡｓｐであり；２７位のアミノ酸はＧｌｎであり；３１位および３２位のアミノ酸はＳｅｒであり；３３位のアミノ酸はＴｈｒであり；９８位のアミノ酸はＩｌｅであり；２４位および２８位のアミノ酸はＡｒｇであり；３０位、３５位、６０位および９５位のアミノ酸はＳｅｒであり；３４位、３６位および５４位のアミノ酸はＴｙｒであり；３８位のアミノ酸はＨｉｓであり；５７位のアミノ酸はＡｓｎであり；５８位のアミノ酸はＬｅｕであり；５９位および９７位のアミノ酸はＧｌｕであり；９３位のアミノ酸はＧｌｎであり；９６位のアミノ酸はＴｒｐであり；１００位のアミノ酸はＰｒｏであり；そして１０１位のアミノ酸はＴｈｒである。
一部の実施形態においては、ペプチドは配列番号３を含み、２６位、３１位および３２位のアミノ酸はＳｅｒであり；２７位のアミノ酸はＧｌｕであり；３３位のアミノ酸はＴｈｒであり；９８位のアミノ酸はＩｌｅであり；２４位および２８位のアミノ酸はＡｒｇであり；３０位、３５位、６０位および９５位のアミノ酸はＳｅｒであり；３４位、３６位および５４位のアミノ酸はＴｙｒであり；３８位のアミノ酸はＨｉｓであり；５７位のアミノ酸はＡｓｎであり；５８位のアミノ酸はＬｅｕであり；５９位および９７位のアミノ酸はＧｌｕであり；９３位のアミノ酸はＧｌｎであり；９６位のアミノ酸はＴｒｐであり；１００位のアミノ酸はＰｒｏであり；そして１０１位のアミノ酸はＴｈｒである。
一部の実施形態においては、ペプチドは配列番号３を含み、２６位および３２位のアミノ酸はＳｅｒであり；２７位のアミノ酸はＧｌｎであり；３１位のアミノ酸はＡｓｎであり；３３位のアミノ酸はＴｈｒであり；９８位のアミノ酸はＩｌｅであり；２４位および２８位のアミノ酸はＡｒｇであり；３０位、３５位、６０位および９５位のアミノ酸はＳｅｒであり；３４位、３６位および５４位のアミノ酸はＴｙｒであり；３８位のアミノ酸はＨｉｓであり；５７位のアミノ酸はＡｓｎであり；５８位のアミノ酸はＬｅｕであり；５９位および９７位のアミノ酸はＧｌｕであり；９３位のアミノ酸はＧｌｎであり；９６位のアミノ酸はＴｒｐであり；１００位のアミノ酸はＰｒｏであり；そして１０１位のアミノ酸はＴｈｒである。
一部の実施形態においては、ペプチドは配列番号３を含み、２６位および３１位のアミノ酸はＳｅｒであり；２７位のアミノ酸はＧｌｎであり；３２位のアミノ酸はＰｈｅであり；３３位のアミノ酸はＴｈｒであり；９８位のアミノ酸はＩｌｅであり；２４位および２８位のアミノ酸はＡｒｇであり；３０位、３５位、６０位および９５位のアミノ酸はＳｅｒであり；３４位、３６位および５４位のアミノ酸はＴｙｒであり；３８位のアミノ酸はＨｉｓであり；５７位のアミノ酸はＡｓｎであり；５８位のアミノ酸はＬｅｕであり；５９位および９７位のアミノ酸はＧｌｕであり；９３位のアミノ酸はＧｌｎであり；９６位のアミノ酸はＴｒｐであり；１００位のアミノ酸はＰｒｏであり；そして１０１位のアミノ酸はＴｈｒである。
一部の実施形態においては、ペプチドは配列番号３を含み、２６位、３１位および３２位のアミノ酸はＳｅｒであり；２７位および３３位のアミノ酸はＧｌｎであり；９８位のアミノ酸はＩｌｅであり；２４位および２８位のアミノ酸はＡｒｇであり；３０位、３５位、６０位および９５位のアミノ酸はＳｅｒであり；３４位、３６位および５４位のアミノ酸はＴｙｒであり；３８位のアミノ酸はＨｉｓであり；５７位のアミノ酸はＡｓｎであり；５８位のアミノ酸はＬｅｕであり；５９位および９７位のアミノ酸はＧｌｕであり；９３位のアミノ酸はＧｌｎであり；９６位のアミノ酸はＴｒｐであり；１００位のアミノ酸はＰｒｏであり；そして１０１位のアミノ酸はＴｈｒである。
一部の実施形態においては、ペプチドは配列番号３を含み、２６位、３１位および３２位のアミノ酸はＳｅｒであり；２７位のアミノ酸はＧｌｎであり；３３位のアミノ酸はＴｙｒであり；９８位のアミノ酸はＩｌｅであり；２４位および２８位のアミノ酸はＡｒｇであり；３０位、３５位、６０位および９５位のアミノ酸はＳｅｒであり；３４位、３６位および５４位のアミノ酸はＴｙｒであり；３８位のアミノ酸はＨｉｓであり；５７位のアミノ酸はＡｓｎであり；５８位のアミノ酸はＬｅｕであり；５９位および９７位のアミノ酸はＧｌｕであり；９３位のアミノ酸はＧｌｎであり；９６位のアミノ酸はＴｒｐであり；１００位のアミノ酸はＰｒｏであり；そして１０１位のアミノ酸はＴｈｒである。
一部の実施形態においては、ペプチドは配列番号３を含み、２６位、３１位および３２位のアミノ酸はＳｅｒであり；２７位および９８位のアミノ酸はＧｌｎであり；３３位のアミノ酸はＴｈｒであり；２４位および２８位のアミノ酸はＡｒｇであり；３０位、３５位、６０位および９５位のアミノ酸はＳｅｒであり；３４位、３６位および５４位のアミノ酸はＴｙｒであり；３８位のアミノ酸はＨｉｓであり；５７位のアミノ酸はＡｓｎであり；５８位のアミノ酸はＬｅｕであり；５９位および９７位のアミノ酸はＧｌｕであり；９３位のアミノ酸はＧｌｎであり；９６位のアミノ酸はＴｒｐであり；１００位のアミノ酸はＰｒｏであり；そして１０１位のアミノ酸はＴｈｒである。
一部の実施形態においては、ペプチドは配列番号３を含み、２６位のアミノ酸はＡｓｐであり；２７位のアミノ酸はＧｌｕであり；３１位のアミノ酸はＡｓｐであり；３２位のアミノ酸はＳｅｒであり；３３位のアミノ酸はＴｈｒであり；９８位のアミノ酸はＩｌｅであり；２４位および２８位のアミノ酸はＡｒｇであり；３０位、３５位、６０位および９５位のアミノ酸はＳｅｒであり；３４位、３６位および５４位のアミノ酸はＴｙｒであり；３８位のアミノ酸はＨｉｓであり；５７位のアミノ酸はＡｓｎであり；５８位のアミノ酸はＬｅｕであり；５９位および９７位のアミノ酸はＧｌｕであり；９３位のアミノ酸はＧｌｎであり；９６位のアミノ酸はＴｒｐであり；１００位のアミノ酸はＰｒｏであり；そして１０１位のアミノ酸はＴｈｒである。このペプチドはまた本明細書においては「Ｓ２６Ｄ／Ｑ２７Ｅ／Ｓ３１Ｎ」ペプチドと称する。
一部の実施形態においては、ペプチドは配列番号３を含み、２６位のアミノ酸はＡｓｐであり；２７位のアミノ酸はＧｌｕであり；３１位のアミノ酸はＳｅｒであり；３２位のアミノ酸はＰｈｅであり；３３位のアミノ酸はＴｈｒであり；９８位のアミノ酸はＩｌｅであり；２４位および２８位のアミノ酸はＡｒｇであり；３０位、３５位、６０位および９５位のアミノ酸はＳｅｒであり；３４位、３６位および５４位のアミノ酸はＴｙｒであり；３８位のアミノ酸はＨｉｓであり；５７位のアミノ酸はＡｓｎであり；５８位のアミノ酸はＬｅｕであり；５９位および９７位のアミノ酸はＧｌｕであり；９３位のアミノ酸はＧｌｎであり；９６位のアミノ酸はＴｒｐであり；１００位のアミノ酸はＰｒｏであり；そして１０１位のアミノ酸はＴｈｒである。このペプチドはまた本明細書においては「Ｓ２６Ｄ／Ｑ２７Ｅ／Ｓ３２Ｆ」ペプチドと称する。
一部の実施形態においては、ペプチドは配列番号３を含み、２６位のアミノ酸はＡｓｐであり；２７位のアミノ酸はＧｌｕであり；３１位および３２位のアミノ酸はＳｅｒであり；３３位のアミノ酸はＧｌｎであり；９８位のアミノ酸はＩｌｅであり；２４位および２８位のアミノ酸はＡｒｇであり；３０位、３５位、６０位および９５位のアミノ酸はＳｅｒであり；３４位、３６位および５４位のアミノ酸はＴｙｒであり；３８位のアミノ酸はＨｉｓであり；５７位のアミノ酸はＡｓｎであり；５８位のアミノ酸はＬｅｕであり；５９位および９７位のアミノ酸はＧｌｕであり；９３位のアミノ酸はＧｌｎであり；９６位のアミノ酸はＴｒｐであり；１００位のアミノ酸はＰｒｏであり；そして１０１位のアミノ酸はＴｈｒである。このペプチドはまた本明細書においては「Ｓ２６Ｄ／Ｑ２７Ｅ／Ｔ３３Ｑ」ペプチドと称する。
一部の実施形態においては、ペプチドは配列番号３を含み、２６位のアミノ酸はＡｓｐであり；２７位のアミノ酸はＧｌｕであり；３１位および３２位のアミノ酸はＳｅｒであり；３３位のアミノ酸はＴｙｒであり；９８位のアミノ酸はＩｌｅであり；２４位および２８位のアミノ酸はＡｒｇであり；３０位、３５位、６０位および９５位のアミノ酸はＳｅｒであり；３４位、３６位および５４位のアミノ酸はＴｙｒであり；３８位のアミノ酸はＨｉｓであり；５７位のアミノ酸はＡｓｎであり；５８位のアミノ酸はＬｅｕであり；５９位および９７位のアミノ酸はＧｌｕであり；９３位のアミノ酸はＧｌｎであり；９６位のアミノ酸はＴｒｐであり；１００位のアミノ酸はＰｒｏであり；そして１０１位のアミノ酸はＴｈｒである。このペプチドはまた本明細書においては「Ｓ２６Ｄ／Ｑ２７Ｅ／Ｔ３３Ｙ」ペプチドと称する。
一部の実施形態においては、ペプチドは配列番号３を含み、２６位のアミノ酸はＡｓｐであり；２７位のアミノ酸はＧｌｕであり；３１位および３２位のアミノ酸はＳｅｒであり；３３位のアミノ酸はＴｈｒであり；９８位のアミノ酸はＧｌｎであり；２４位および２８位のアミノ酸はＡｒｇであり；３０位、３５位、６０位および９５位のアミノ酸はＳｅｒであり；３４位、３６位および５４位のアミノ酸はＴｙｒであり；３８位のアミノ酸はＨｉｓであり；５７位のアミノ酸はＡｓｎであり；５８位のアミノ酸はＬｅｕであり；５９位および９７位のアミノ酸はＧｌｕであり；９３位のアミノ酸はＧｌｎであり；９６位のアミノ酸はＴｒｐであり；１００位のアミノ酸はＰｒｏであり；そして１０１位のアミノ酸はＴｈｒである。このペプチドはまた本明細書においては「Ｓ２６Ｄ／Ｑ２７Ｅ／Ｉ９８Ｑ」ペプチドと称する。
別の態様において、本発明は重鎖の可変領域においてアミノ酸置換少なくとも１つを含む５ｃ８抗体誘導体を提供する。野生型５ｃ８重鎖可変領域は配列番号４（アミノ酸配列）に示す。本発明はアミノ酸置換少なくとも１つが起こっている野生型５ｃ８重鎖可変領域を含むペプチドを提供する（すなわち、配列番号４を含まないペプチド）。重鎖ペプチドは定常領域（ＣＨ１および／またはＣＨ２および／またはＣＨ３）および可変領域の両方を含む全重鎖を含むことができ、または、可変領域のみを含んでもよい。重鎖ペプチドはまた全可変領域、および、全定常領域マイナス１アミノ酸から定常領域の僅か１アミノ酸までの範囲またはその内部のいずれかの範囲であることができる定常領域の一部を含むこともできる。あるいは、重鎖ペプチドは任意の無関係なペプチド配列に融合して融合タンパク質を形成している可変領域を含むこともできる。
一部の実施形態においては、重鎖ペプチドは野生型５ｃ８抗体重鎖可変領域（配列番号４参照）の以下の位置：すなわち、２８位、３０位、３１位、３２位、３３位、３５位、５０位、５２位、５３位、５４位、５５位、５７位、５８位、５９位、６０位、６１位、６２位、６３位、６４位、６５位、６６位、９９位、１００位、１０１位、１０２位、１０３位、１０４位、１０５位、１０６位および１０７位またはそのいずれかのサブセットからなる群より選択される位置のいずれかにおいてアミノ酸置換少なくとも１つを含む。アミノ酸置換を含有してよいこれ等の位置を含むこのようなペプチドは配列番号６（アミノ酸配列）に示す。これ等の重鎖ペプチドはまた少なくとも２、少なくとも３、少なくとも４、少なくとも５、少なくとも６、少なくとも７、少なくとも８、少なくとも９、少なくとも１０、少なくとも１１、少なくとも１２、少なくとも１３、少なくとも１４、少なくとも１５、少なくとも１６、少なくとも１７、少なくとも１８、少なくとも１９、少なくとも２０、少なくとも２１、少なくとも２２、少なくとも２３、少なくとも２４、少なくとも２５、少なくとも２６、少なくとも２７、少なくとも２８または少なくとも２９アミノ酸の置換、または３０アミノ酸の各々における置換を含むこともできる。
一部の実施形態においては重鎖ペプチドは３１、５４、５７、１０１および１０３位のいずれかまたはそのサブセットのいずれかおいてアミノ酸置換少なくとも１つを含む。アミノ酸置換を含有してよいこれ等の位置を含むこのようなペプチドは配列番号６（アミノ酸配列）に記載されており、２８位、３０位、３２位、３３位、３５位、５０位、５２位、５３位、５５位、５８位、５９位、６０位、６１位、６２位、６３位、６４位、６５位、６６位、９９位、１００位、１０２位、１０４位、１０５位、１０６位および１０７位は野生型アミノ酸である。これ等のペプチドはまた少なくとも２、少なくとも３、少なくとも４、少なくとも５、少なくとも６、少なくとも７、少なくとも８、少なくとも９、少なくとも１０、少なくとも１１、少なくとも１２、少なくとも１３、少なくとも１４、少なくとも１５、少なくとも１６、少なくとも１７、少なくとも１８、少なくとも１９、少なくとも２０、少なくとも２１、少なくとも２２、少なくとも２３または少なくとも２４アミノ酸の置換、または２５位の各々におけるアミノ酸の置換を含むこともできる。
上記した位置（すなわち、２８位、３０位、３１位、３２位、３３位、３５位、５０位、５２位、５３位、５４位、５５位、５７位、５８位、５９位、６０位、６１位、６２位、６３位、６４位、６５位、６６位、９９位、１００位、１０１位、１０２位、１０３位、１０４位、１０５位、１０６位および１０７位）の各々における置換されたアミノ酸はそれぞれ相互に独立して任意の天然に存在するアミノ酸または天然に存在しないアミノ酸であることができる。すなわち、特定の重鎖ペプチドは天然に存在するアミノ酸であるアミノ酸置換１つ以上および／または天然に存在しないアミノ酸であるアミノ酸置換１つ以上を含んでよい。
一部の実施形態においては、重鎖ペプチドは配列番号６に少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一である。すなわち、例えば、３１位にアミノ酸置換を含む重鎖ペプチドは、ペプチドが少なくとも同一であることの上記パーセンテージ内に有る限り、なお別の置換をペプチド内の何処かに有することができる（すなわち、配列番号６において「Ｘａａ」と記載したもの以外の位置）。すなわち、別のアミノ酸置換またはアミノ酸挿入または欠失を有するペプチドも本明細書において意図される。重鎖の定常領域の部分を含むペプチドのパーセント同一性を決定する際には、可変領域のみをパーセント同一性の目的のためには考慮するものとする（すなわち、定常領域の部分はパーセント同一性に包含されない）。
一部の実施形態においては、配列番号６の相当する領域に少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含む重鎖ペプチドのフラグメントが提供される。
フラグメントは少なくとも８、少なくとも１０、少なくとも１５、少なくとも２０、少なくとも２５、少なくとも３０、少なくとも３５、少なくとも４０、少なくとも４５、少なくとも５０、少なくとも５５、少なくとも６０、少なくとも６５、少なくとも７０、少なくとも７５、少なくとも８０、少なくとも８５、少なくとも９０、少なくとも９５、少なくとも１００、少なくとも１０５、少なくとも１１０または少なくとも１１５アミノ酸、最大で１１７アミノ酸を含むことができる。一部の実施形態においては、フラグメントは配列番号６を参照すれば、２８位、３０位、３１位、３２位、３３位、３５位、５０位、５２位、５３位、５４位、５５位、５７位、５８位、５９位、６０位、６１位、６２位、６３位、６４位、６５位、６６位、９９位、１００位、１０１位、１０２位、１０３位、１０４位、１０５位、１０６位および１０７位またはそのサブセットのいずれかの少なくとも１つを含む。一部の実施形態においては、フラグメントは上記した重鎖アミノ酸置換のいずれかの１つ以上を含む。
本明細書に記載した重鎖ペプチドおよびそのフラグメントはＣＤ１５４に結合するその能力を保持している。すなわち、５ｃ８抗体の相当する野生型アミノ酸を本明細書に記載したペプチドまたはフラグメントで置き換えてもなお、得られる抗体はヒトＣＤ１５４に結合できるのである。例えば、野生型５ｃ８重鎖可変領域のアミノ酸の全てまたは一部を本明細書に記載したペプチドまたはフラグメントの相当するアミノ酸で置き換えれば、ヒトＣＤ１５４に結合する能力を保持した抗体が得られる。一部の実施形態においては、本明細書に記載した抗体は、野生型５ｃ８抗体よりも１残基以上少なく、ＣＤ１５４と接触してよい。
一部の実施形態においては、重鎖は記載した位置において以下の型のアミノ酸、すなわち、：Ｉ２８（正、負、極性）；Ｔ３０（正、負、極性、非極性）；Ｓ３１（正、極性）；Ｙ３２（正、負、極性、非極性）；Ｙ３３（正、負、極性、非極性）；Ｙ３５（極性）；Ｅ５０（負）；Ｎ５２（極性、非極性）；Ｐ５３（負、極性）；Ｓ５４（正、負、極性）；Ｎ５５（負、極性、非極性）；Ｄ５７（負、非極性）；Ｔ５８（極性、非極性）；Ｎ５９（負、極性、非極性）；Ｆ６０（負、正、極性、非極性）；Ｎ６１（負）；Ｅ６２（負）；Ｋ６３（負、正、極性、非極性）；Ｆ６４（負、極性、非極性）；Ｋ６５（負、正、極性、非極性）；Ｓ６６（負）；Ｓ９９（負、非極性）；Ｄ１００（負）；Ｇ１０１（非極性）；Ｒ１０２（正、極性）；Ｎ１０３（負、正、極性、非極性）；Ｄ１０４（負）；Ｍ１０５（負、極性、正）；Ｄ１０６（負）；およびＳ１０７（負、極性、非極性）により置換されてよい。
一部の実施形態においては、重鎖ペプチドまたはそのフラグメントの２８位（配列番号６参照）のアミノ酸はＩｌｅ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ａｓｎ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｓｅｒ、ＴｈｒおよびＴｒｐまたはそのいずれかのサブセットからなる群より選択される。あるいは、２８位のアミノ酸はＩｌｅ、Ｈｉｓ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｓｅｒ、ＴｈｒおよびＧｌｕからなる群より選択される。２８位のアミノ酸はまた好ましくはＩｌｅである。
一部の実施形態においては、重鎖ペプチドまたはそのフラグメントの３０位（配列番号６参照）のアミノ酸はＴｈｒ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ａｓｎ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｓｅｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ａｌａ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、ＰｒｏおよびＶａｌまたはそのいずれかのサブセットからなる群より選択される。あるいは、３０位のアミノ酸はＴｈｒ、Ｈｉｓ、Ａｓｎ、Ｇｌｕ、Ｓｅｒ、ＴｙｒおよびＡｒｇからなる群より選択される。３０位のアミノ酸はまた好ましくはＴｈｒである。
一部の実施形態においては、重鎖ペプチドまたはそのフラグメントの３１位（配列番号６参照）のアミノ酸はＳｅｒ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ｌｙｓ、ＧｌｎおよびＴｒｐまたはそのいずれかのサブセットからなる群より選択される。あるいは３１位のアミノ酸は好ましくはＳｅｒ、ＧｌｎまたはＴｒｐである、３１位のアミノ酸はＳｅｒ、Ａｌａ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｖａｌ、Ｔｒｐ、Ａｓｎ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、ＴｈｒおよびＴｙｒからなる群より選択され；または好ましくはＳｅｒ、ＴｒｐまたはＧｌｎである。
一部の実施形態においては、重鎖ペプチドまたはそのフラグメントの３２位（配列番号６参照）のアミノ酸はＴｙｒ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ａｓｎ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｓｅｒ、Ｔｒｐ、Ａｌａ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、ＰｒｏおよびＶａｌまたはそのいずれかのサブセットからなる群より選択される。３２位のアミノ酸は好ましくはＴｙｒである。
一部の実施形態においては、重鎖ペプチドまたはそのフラグメントの３３位（配列番号６参照）のアミノ酸はＴｙｒ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ａｓｎ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ａｌａ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、ＰｒｏおよびＶａｌまたはそのいずれかのサブセットからなる群より選択される。あるいは、３３位のアミノ酸はＴｙｒ、Ａｌａ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、ＶａｌおよびＴｒｐからなる群より選択される。３３位のアミノ酸はまた好ましくはＴｙｒである。
一部の実施形態においては、重鎖ペプチドまたはそのフラグメントの３５位（配列番号６参照）のアミノ酸はＴｙｒ、Ａｓｎ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、ＡｓｐおよびＧｌｕまたはそのいずれかのサブセットからなる群より選択される。３５位のアミノ酸はまた好ましくはＴｙｒである。
一部の実施形態においては、重鎖ペプチドまたはそのフラグメントの５０位（配列番号６参照）のアミノ酸はＧｌｕおよびＡｓｐまたはそのいずれかのサブセットからなる群より選択される。５０位のアミノ酸はまた好ましくはＧｌｕである。
一部の実施形態においては、重鎖ペプチドまたはそのフラグメントの５２位（配列番号６参照）のアミノ酸はＡｓｎ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ａｒｇ、Ａｌａ、Ｌｅｕ、ＶａｌおよびＬｙｓまたはそのいずれかのサブセットからなる群より選択される。あるいは、５２位のアミノ酸はＡｓｎ、Ａｌａ、Ｐｈｅ、Ｈｉｓ、Ｌｅｕ、Ｍｅｔ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、ＶａｌおよびＴｒｐからなる群より選択される。５２位のアミノ酸はまた好ましくはＡｓｎである。
一部の実施形態においては、重鎖ペプチドまたはそのフラグメントの５３位（配列番号６参照）のアミノ酸はＰｒｏ、Ａｓｎ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、ＡｓｐおよびＧｌｕまたはそのいずれかのサブセットからなる群より選択される。５３位のアミノ酸はまた好ましくはＰｒｏである。
一部の実施形態においては、重鎖ペプチドまたはそのフラグメントの５４位（配列番号６参照）のアミノ酸はＳｅｒ、Ａｓｎ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ａｒｇ、ＬｙｓおよびＧｌｕまたはそのいずれかのサブセットからなる群より選択される。あるいは、５４位のアミノ酸はＳｅｒ、Ｇｌｕ、Ｈｉｓ、Ｌｙｓ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ａｒｇ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、ＴｙｒおよびＰｈｅからなる群より選択される。５４位のアミノ酸はまたＳｅｒ、Ａｌａ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｖａｌ、Ｔｒｐ、Ａｓｎ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、ＴｈｒおよびＴｙｒからなる群より選択され；または好ましくはＳｅｒ、ＰｈｅまたはＧｌｎである。
一部の実施形態においては、重鎖ペプチドまたはそのフラグメントの５５位（配列番号６参照）のアミノ酸はＡｓｎ、Ｇｌｕ、Ｌｙｓ、Ｇｌｎ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、ＭｅｔおよびＶａｌまたはそのいずれかのサブセットからなる群より選択される。あるいは、５５位のアミノ酸はＡｓｎ、Ｇｌｕ、Ｌｙｓ、Ｇｌｎ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、ＭｅｔおよびＶａｌからなる群より選択される。５５位のアミノ酸はまた好ましくはＡｓｎである。
一部の実施形態においては、重鎖ペプチドまたはそのフラグメントの５７位（配列番号６参照）のアミノ酸はＡｓｐ、Ｇｌｕ、ＰｈｅおよびＬｅｕまたはそのいずれかのサブセットからなる群より選択される。あるいは、５７位のアミノ酸は好ましくはＡｓｐ、ＰｈｅまたはＬｅｕである。５７位のアミノ酸はＡｓｐ、Ａｌａ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、ＶａｌおよびＴｒｐからなる群より選択され；または好ましくはＡｓｐ、ＬｅｕまたはＰｈｅである。
一部の実施形態においては、重鎖ペプチドまたはそのフラグメントの５８位（配列番号６参照）のアミノ酸はＴｈｒ、Ａｓｎ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｓｅｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ａｌａ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、ＰｒｏおよびＶａｌまたはそのいずれかのサブセットからなる群より選択される。５８位のアミノ酸はまた好ましくはＴｈｒである。
一部の実施形態においては、重鎖ペプチドまたはそのフラグメントの５９位（配列番号６参照）のアミノ酸はＡｓｎ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ａｌａ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｐｒｏ、Ｖａｌ、Ａｓｐ、およびＧｌｕまたはそのいずれかのサブセットからなる群より選択される。あるいは、５９位のアミノ酸はＡｓｎ、Ａｌａ、Ｐｈｅ、Ｌｅｕ、Ｍｅｔ、Ｐｒｏ、Ｖａｌ、Ｔｒｐ、ＡｓｐおよびＴｙｒからなる群より選択される。５９位のアミノ酸はまた好ましくはＡｓｎである。
一部の実施形態においては、重鎖ペプチドまたはそのフラグメントの６０位（配列番号６参照）のアミノ酸はＰｈｅ、Ａｓｐ、Ａｓｎ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｍｅｔ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ａｌａ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、ＰｒｏおよびＶａｌまたはそのいずれかのサブセットからなる群より選択される。６０位のアミノ酸はまた好ましくはＰｈｅである。
一部の実施形態においては、重鎖ペプチドまたはそのフラグメントの６１位（配列番号６参照）のアミノ酸はＡｓｎ、ＡｓｐおよびＧｌｕまたはそのいずれかのサブセットからなる群より選択される。６１位のアミノ酸はまた好ましくはＡｓｎである。
一部の実施形態においては、重鎖ペプチドまたはそのフラグメントの６２位（配列番号６参照）のアミノ酸はＧｌｎおよびＡｓｐまたはそのいずれかのサブセットからなる群より選択される。６２位のアミノ酸はまた好ましくはＧｌｕである。
一部の実施形態においては、重鎖ペプチドまたはそのフラグメントの６３位（配列番号６参照）のアミノ酸はＬｙｓ、Ａｓｎ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ａｒｇ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ａｌａ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、ＰｒｏおよびＶａｌまたはそのいずれかのサブセットからなる群より選択される。６３位のアミノ酸はまた好ましくはＬｙｓである。
一部の実施形態においては、重鎖ペプチドまたはそのフラグメントの６４位（配列番号６参照）のアミノ酸はＰｈｅ、Ａｓｎ、Ｃｙｓ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｍｅｔ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ａｌａ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、ＰｒｏおよびＶａｌまたはそのいずれかのサブセットからなる群より選択される。６４位のアミノ酸はまた好ましくはＰｈｅである。
一部の実施形態においては、重鎖ペプチドまたはそのフラグメントの６５位（配列番号６参照）のアミノ酸はＬｙｓ、Ａｓｎ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ａｒｇ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ａｌａ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、ＰｒｏおよびＶａｌまたはそのいずれかのサブセットからなる群より選択される。６５位のアミノ酸はまた好ましくはＬｙｓである。
一部の実施形態においては、重鎖ペプチドまたはそのフラグメントの６６位（配列番号６参照）のアミノ酸はＳｅｒ、ＡｓｐおよびＧｌｕまたはそのいずれかのサブセットからなる群より選択される。６６位のアミノ酸はまた好ましくはＳｅｒである。
一部の実施形態においては、重鎖ペプチドまたはそのフラグメントの９９位（配列番号６参照）のアミノ酸はＳｅｒ、Ａｓｐ、ＧｌｕおよびＡｌａまたはそのいずれかのサブセットからなる群より選択される。あるいは、９９位のアミノ酸は好ましくはＳｅｒまたはＡｌａである。９９位のアミノ酸はまた好ましくはＳｅｒである。
一部の実施形態においては、重鎖ペプチドまたはそのフラグメントの１００位（配列番号６参照）のアミノ酸はＡｓｐおよびＧｌｕまたはそのいずれかのサブセットからなる群より選択される。１００位のアミノ酸はまた好ましくはＡｓｐである。
一部の実施形態においては、重鎖ペプチドまたはそのフラグメントの１０１位（配列番号６参照）のアミノ酸はＧｌｙ、ＰｈｅおよびＬｅｕまたはそのいずれかのサブセットからなる群より選択される。あるいは１０１位のアミノ酸は好ましくはＧｌｙ、ＰｈｅまたはＬｅｕである。１０１位のアミノ酸はＧｌｙ、Ａｌａ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、ＶａｌおよびＴｒｐからなる群より選択され；または好ましくはＧｌｙ、ＬｅｕまたはＰｈｅである。
一部の実施形態においては、重鎖ペプチドまたはそのフラグメントの１０２位（配列番号６参照）のアミノ酸はＡｒｇ、Ａｓｎ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、ＴｙｒおよびＬｙｓまたはそのいずれかのサブセットからなる群より選択される。１０２位のアミノ酸はまた好ましくはＡｒｇである。
一部の実施形態においては、重鎖ペプチドまたはそのフラグメントの１０３位（配列番号６参照）のアミノ酸はＡｓｎ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ａｌａ、Ｉｌｅ、Ｌｙｓ、ＡｒｇおよびＶａｌまたはそのいずれかのサブセットからなる群より選択される。あるいは、１０３位のアミノ酸はＡｓｎ、Ａｌａ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ｐｈｅ、Ｈｉｓ、Ｉｌｅ、Ｌｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｒｇ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、ＶａｌおよびＴｙｒからなる群より選択される。１０３位のアミノ酸はまたＡｓｎ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、ＴｈｒおよびＴｙｒ、または好ましくは、ＡｓｎもしくはＴｙｒからなる群より選択される。
一部の実施形態においては、重鎖ペプチドまたはそのフラグメントの１０４位（配列番号６参照）のアミノ酸はＡｓｐおよびＧｌｕまたはそのいずれかのサブセットからなる群より選択される。１０４位のアミノ酸はまた好ましくはＡｓｐである。
一部の実施形態においては、重鎖ペプチドまたはそのフラグメントの１０５位（配列番号６参照）のアミノ酸はＭｅｔ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ｌｙｓ、Ａｓｎ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｙ、Ｐｈｅ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、ＴｒｐおよびＴｙｒまたはそのいずれかのサブセットからなる群より選択される。１０５位のアミノ酸はまた好ましくはＭｅｔである。
一部の実施形態においては、重鎖ペプチドまたはそのフラグメントの１０６位（配列番号６参照）のアミノ酸はＡｓｐおよびＧｌｕまたはそのいずれかのサブセットからなる群より選択される。１０６位のアミノ酸はまた好ましくはＡｓｐである。
一部の実施形態においては、重鎖ペプチドまたはそのフラグメントの１０７位（配列番号６参照）のアミノ酸はＳｅｒ、Ａｓｎ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ａｌａ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、ＰｒｏおよびＶａｌまたはそのいずれかのサブセットからなる群より選択される。１０７位のアミノ酸はまた好ましくはＳｅｒである。
一部の実施形態においては、２８位のアミノ酸はＧｌｕであり；３３位のアミノ酸はＰｈｅであり；５４位のアミノ酸はＴｈｒであり；そして５９位のアミノ酸はＡｓｐまたはＬｅｕである。
一部の実施形態においては、３０位のアミノ酸はＨｉｓまたはＡｒｇであり；３１位のアミノ酸はＧｌｎまたはＴｒｐであり；３３位のアミノ酸はＴｒｐ、ＶａｌまたはＰｒｏであり；５２位のアミノ酸はＭｅｔまたはＴｒｐであり；５４位のアミノ酸はＡｓｎ、ＰｈｅまたはＧｌｎであり；５５位のアミノ酸はＭｅｔ、ＬｙｓまたはＶａｌであり；５７位のアミノ酸はＰｈｅまたはＬｅｕであり；５９位のアミノ酸はＰｈｅまたはＴｙｒであり；１０１位のアミノ酸はＰｈｅまたはＬｅｕであり；そして、１０３位のアミノ酸はＨｉｓまたはＴｙｒである。
一部の実施形態においては、ペプチドは配列番号６を含み、３１位、５４位、６６位、９９位および１０７位のアミノ酸はＳｅｒであり；５７位、１００位、１０４位および１０６位のアミノ酸はＡｓｐであり；１０１位のアミノ酸はＧｌｙであり；１０３位、５２位、５５位、５９位および６１位のアミノ酸はＡｓｎであり；２８位のアミノ酸はＩｌｅであり；５８位のアミノ酸はＴｈｒであり；３２位、３３位および３５位のアミノ酸はＴｙｒであり；５０位および６２位のアミノ酸はＧｌｕであり；５３位のアミノ酸はＰｒｏであり；６０位および６４位のアミノ酸はＰｈｅであり；６３位および６５位のアミノ酸はＬｙｓであり；１０２位のアミノ酸はＡｒｇであり；３０位のアミノ酸はＨｉｓであり；そして１０５位のアミノ酸はＭｅｔである。この変異体は本明細書においては変異体＃１と称する。
一部の実施形態においては、ペプチドは配列番号６を含み、３１位、５４位、６６位、９９位および１０７位のアミノ酸はＳｅｒであり；５７位、１００位、１０４位および１０６位のアミノ酸はＡｓｐであり；１０１位のアミノ酸はＧｌｙであり；１０３位、５２位、５５位、５９位および６１位のアミノ酸はＡｓｎであり；２８位のアミノ酸はＩｌｅであり；３０位および５８位のアミノ酸はＴｈｒであり；３２位および３５位のアミノ酸はＴｙｒであり；５０位および６２位のアミノ酸はＧｌｕであり；５３位のアミノ酸はＰｒｏであり；６０位および６４位のアミノ酸はＰｈｅであり；６３位および６５位のアミノ酸はＬｙｓであり；１０２位のアミノ酸はＡｒｇであり；３３位のアミノ酸はＴｒｐであり；そして１０５位のアミノ酸はＭｅｔである。この変異体は本明細書においては変異体＃２と称する。
一部の実施形態においては、ペプチドは配列番号６を含み、３１位、６６位、９９位および１０７位のアミノ酸はＳｅｒであり；５７位、１００位、１０４位および１０６位のアミノ酸はＡｓｐであり；１０１位のアミノ酸はＧｌｙであり；１０３位、５２位、５４位、５５位、５９位および６１位のアミノ酸はＡｓｎであり；２８位のアミノ酸はＩｌｅであり；３０位および５８位のアミノ酸はＴｈｒであり；３２位、３３位および３５位のアミノ酸はＴｙｒであり；５０位および６２位のアミノ酸はＧｌｕであり；５３位のアミノ酸はＰｒｏであり；６０位および６４位のアミノ酸はＰｈｅであり；６３位および６５位のアミノ酸はＬｙｓであり；１０２位のアミノ酸はＡｒｇであり；そして１０５位のアミノ酸はＭｅｔである。この変異体は本明細書においては変異体＃４と称する。
一部の実施形態においては、ペプチドは配列番号６を含み、３１位、５４位、６６位、９９位および１０７位のアミノ酸はＳｅｒであり；５７位、１００位、１０４位および１０６位のアミノ酸はＡｓｐであり；１０１位のアミノ酸はＧｌｙであり；１０３位、５２位、５５位、５９位および６１位のアミノ酸はＡｓｎであり；２８位のアミノ酸はＩｌｅであり；３０位および５８位のアミノ酸はＴｈｒであり；３２位および３５位のアミノ酸はＴｙｒであり；５０位および６２位のアミノ酸はＧｌｕであり；５３位のアミノ酸はＰｒｏであり；３３位、６０位および６４位のアミノ酸はＰｈｅであり；６３位および６５位のアミノ酸はＬｙｓであり；１０２位のアミノ酸はＡｒｇであり；そして１０５位のアミノ酸はＭｅｔである。この変異体は本明細書においては変異体＃１１と称する。
一部の実施形態においては、ペプチドは配列番号６を含み、３１位、５４位、６６位、９９位および１０７位のアミノ酸はＳｅｒであり；５７位、５９位、１００位、１０４位および１０６位のアミノ酸はＡｓｐであり；１０１位のアミノ酸はＧｌｙであり；１０３位、５２位、５５位および６１位のアミノ酸はＡｓｎであり；２８位のアミノ酸はＩｌｅであり；３０位および５８位のアミノ酸はＴｈｒであり；３２位、３３位および３５位のアミノ酸はＴｙｒであり；５０位および６２位のアミノ酸はＧｌｕであり；５３位のアミノ酸はＰｒｏであり；６０位および６４位のアミノ酸はＰｈｅであり；６３位および６５位のアミノ酸はＬｙｓであり；１０２位のアミノ酸はＡｒｇであり；そして１０５位のアミノ酸はＭｅｔである。この変異体は本明細書においては変異体＃１２と称する。
一部の実施形態においては、ペプチドは配列番号６を含み、３１位、５４位、６６位、９９位および１０７位のアミノ酸はＳｅｒであり；５７位、１００位、１０４位および１０６位のアミノ酸はＡｓｐであり；１０１位のアミノ酸はＧｌｙであり；１０３位、５２位、５５位および６１位のアミノ酸はＡｓｎであり；２８位のアミノ酸はＩｌｅであり；３０位および５８位のアミノ酸はＴｈｒであり；３２位、３３位および３５位のアミノ酸はＴｙｒであり；５０位および６２位のアミノ酸はＧｌｕであり；５３位のアミノ酸はＰｒｏであり；６０位および６４位のアミノ酸はＰｈｅであり；６３位および６５位のアミノ酸はＬｙｓであり；１０２位のアミノ酸はＡｒｇであり；５９位のアミノ酸はＬｅｕであり；そして１０５位のアミノ酸はＭｅｔである。この変異体は本明細書においては変異体＃１３と称する。
一部の実施形態においては、ペプチドは配列番号６を含み、３１位のアミノ酸はＴｒｐであり；５４位のアミノ酸はＳｅｒであり；５７位のアミノ酸はＡｓｐであり；１０１位のアミノ酸はＧｌｙであり；１０３位のアミノ酸はＡｓｎであり；２８位のアミノ酸はＩｌｅであり；３０位および５８位のアミノ酸はＴｈｒであり；３２位、３３位および３５位のアミノ酸はＴｙｒであり；５０位および６２位のアミノ酸はＧｌｕであり；５２位、５５位、５９位および６１位のアミノ酸はＡｓｎであり；５３位のアミノ酸はＰｒｏであり；６０位および６４位のアミノ酸はＰｈｅであり；６３位および６５位のアミノ酸はＬｙｓであり；６６位、９９位および１０７位のアミノ酸はＳｅｒであり；１００位、１０４位および１０６位のアミノ酸はＡｓｐであり；１０２位のアミノ酸はＡｒｇであり；そして１０５位のアミノ酸はＭｅｔである。
一部の実施形態においては、ペプチドは配列番号６を含み、３１位のアミノ酸はＧｌｎであり；５４位のアミノ酸はＳｅｒであり；５７位のアミノ酸はＡｓｐであり；１０１位のアミノ酸はＧｌｙであり；１０３位のアミノ酸はＡｓｎであり；２８位のアミノ酸はＩｌｅであり；３０位および５８位のアミノ酸はＴｈｒであり；３２位、３３位および３５位のアミノ酸はＴｙｒであり；５０位および６２位のアミノ酸はＧｌｕであり；５２位、５５位、５９位および６１位のアミノ酸はＡｓｎであり；５３位のアミノ酸はＰｒｏであり；６０位および６４位のアミノ酸はＰｈｅであり；６３位および６５位のアミノ酸はＬｙｓであり；６６位、９９位および１０７位のアミノ酸はＳｅｒであり；１００位、１０４位および１０６位のアミノ酸はＡｓｐであり；１０２位のアミノ酸はＡｒｇであり；そして１０５位のアミノ酸はＭｅｔである。
一部の実施形態においては、ペプチドは配列番号６を含み、３１位のアミノ酸はＳｅｒであり；５４位のアミノ酸はＰｈｅであり；５７位のアミノ酸はＡｓｐであり；１０１位のアミノ酸はＧｌｙであり；１０３位のアミノ酸はＡｓｎであり；２８位のアミノ酸はＩｌｅであり；３０位および５８位のアミノ酸はＴｈｒであり；３２位、３３位および３５位のアミノ酸はＴｙｒであり；５０位および６２位のアミノ酸はＧｌｕであり；５２位、５５位、５９位および６１位のアミノ酸はＡｓｎであり；５３位のアミノ酸はＰｒｏであり；６０位および６４位のアミノ酸はＰｈｅであり；６３位および６５位のアミノ酸はＬｙｓであり；６６位、９９位および１０７位のアミノ酸はＳｅｒであり；１００位、１０４位および１０６位のアミノ酸はＡｓｐであり；１０２位のアミノ酸はＡｒｇであり；そして１０５位のアミノ酸はＭｅｔである。
一部の実施形態においては、ペプチドは配列番号６を含み、３１位のアミノ酸はＳｅｒであり；５４位のアミノ酸はＧｌｎであり；５７位のアミノ酸はＡｓｐであり；１０１位のアミノ酸はＧｌｙであり；１０３位のアミノ酸はＡｓｎであり；２８位のアミノ酸はＩｌｅであり；３０位および５８位のアミノ酸はＴｈｒであり；３２位、３３位および３５位のアミノ酸はＴｙｒであり；５０位および６２位のアミノ酸はＧｌｕであり；５２位、５５位、５９位および６１位のアミノ酸はＡｓｎであり；５３位のアミノ酸はＰｒｏであり；６０位および６４位のアミノ酸はＰｈｅであり；６３位および６５位のアミノ酸はＬｙｓであり；６６位、９９位および１０７位のアミノ酸はＳｅｒであり；１００位、１０４位および１０６位のアミノ酸はＡｓｐであり；１０２位のアミノ酸はＡｒｇであり；そして１０５位のアミノ酸はＭｅｔである。
一部の実施形態においては、ペプチドは配列番号６を含み、３１位および５４位のアミノ酸はＳｅｒであり；５７位のアミノ酸はＰｈｅであり；１０１位のアミノ酸はＧｌｙであり；１０３位のアミノ酸はＡｓｎであり；２８位のアミノ酸はＩｌｅであり；３０位および５８位のアミノ酸はＴｈｒであり；３２位、３３位および３５位のアミノ酸はＴｙｒであり；５０位および６２位のアミノ酸はＧｌｕであり；５２位、５５位、５９位および６１位のアミノ酸はＡｓｎであり；５３位のアミノ酸はＰｒｏであり；６０位および６４位のアミノ酸はＰｈｅであり；６３位および６５位のアミノ酸はＬｙｓであり；６６位、９９位および１０７位のアミノ酸はＳｅｒであり；１００位、１０４位および１０６位のアミノ酸はＡｓｐであり；１０２位のアミノ酸はＡｒｇであり；そして１０５位のアミノ酸はＭｅｔである。
一部の実施形態においては、ペプチドは配列番号６を含み、３１位および５４位のアミノ酸はＳｅｒであり；５７位のアミノ酸はＬｅｕであり；１０１位のアミノ酸はＧｌｙであり；１０３位のアミノ酸はＡｓｎであり；２８位のアミノ酸はＩｌｅであり；３０位および５８位のアミノ酸はＴｈｒであり；３２位、３３位および３５位のアミノ酸はＴｙｒであり；５０位および６２位のアミノ酸はＧｌｕであり；５２位、５５位、５９位および６１位のアミノ酸はＡｓｎであり；５３位のアミノ酸はＰｒｏであり；６０位および６４位のアミノ酸はＰｈｅであり；６３位および６５位のアミノ酸はＬｙｓであり；６６位、９９位および１０７位のアミノ酸はＳｅｒであり；１００位、１０４位および１０６位のアミノ酸はＡｓｐであり；１０２位のアミノ酸はＡｒｇであり；そして１０５位のアミノ酸はＭｅｔである。
一部の実施形態においては、ペプチドは配列番号６を含み、３１位および５４位のアミノ酸はＳｅｒであり；５７位のアミノ酸はＡｓｐであり；１０１位のアミノ酸はＰｈｅであり；１０３位のアミノ酸はＡｓｎであり；２８位のアミノ酸はＩｌｅであり；３０位および５８位のアミノ酸はＴｈｒであり；３２位、３３位および３５位のアミノ酸はＴｙｒであり；５０位および６２位のアミノ酸はＧｌｕであり；５２位、５５位、５９位および６１位のアミノ酸はＡｓｎであり；５３位のアミノ酸はＰｒｏであり；６０位および６４位のアミノ酸はＰｈｅであり；６３位および６５位のアミノ酸はＬｙｓであり；６６位、９９位および１０７位のアミノ酸はＳｅｒであり；１００位、１０４位および１０６位のアミノ酸はＡｓｐであり；１０２位のアミノ酸はＡｒｇであり；そして１０５位のアミノ酸はＭｅｔである。
一部の実施形態においては、ペプチドは配列番号６を含み、３１位および５４位のアミノ酸はＳｅｒであり；５７位のアミノ酸はＡｓｐであり；１０１位のアミノ酸はＬｅｕであり；１０３位のアミノ酸はＡｓｎであり；２８位のアミノ酸はＩｌｅであり；３０位および５８位のアミノ酸はＴｈｒであり；３２位、３３位および３５位のアミノ酸はＴｙｒであり；５０位および６２位のアミノ酸はＧｌｕであり；５２位、５５位、５９位および６１位のアミノ酸はＡｓｎであり；５３位のアミノ酸はＰｒｏであり；６０位および６４位のアミノ酸はＰｈｅであり；６３位および６５位のアミノ酸はＬｙｓであり；６６位、９９位および１０７位のアミノ酸はＳｅｒであり；１００位、１０４位および１０６位のアミノ酸はＡｓｐであり；１０２位のアミノ酸はＡｒｇであり；そして１０５位のアミノ酸はＭｅｔである。
一部の実施形態においては、ペプチドは配列番号６を含み、３１位および５４位のアミノ酸はＳｅｒであり；５７位のアミノ酸はＡｓｐであり；１０１位のアミノ酸はＧｌｙであり；１０３位のアミノ酸はＴｙｒであり；２８位のアミノ酸はＩｌｅであり；３０位および５８位のアミノ酸はＴｈｒであり；３２位、３３位および３５位のアミノ酸はＴｙｒであり；５０位および６２位のアミノ酸はＧｌｕであり；５２位、５５位、５９位および６１位のアミノ酸はＡｓｎであり；５３位のアミノ酸はＰｒｏであり；６０位および６４位のアミノ酸はＰｈｅであり；６３位および６５位のアミノ酸はＬｙｓであり；６６位、９９位および１０７位のアミノ酸はＳｅｒであり；１００位、１０４位および１０６位のアミノ酸はＡｓｐであり；１０２位のアミノ酸はＡｒｇであり；そして１０５位のアミノ酸はＭｅｔである。
この配列に関する同一性または類似性は本明細書においては、配列をアラインし、そして必要に応じてギャップを導入して最大パーセント配列同一性を達成した後の野生型５ｃ８抗体残基と同一である修飾された配列におけるアミノ酸残基（すなわち、同じ残基）のパーセントとして定義する。典型的には、Ｎ末端、Ｃ末端または内部エクステンション、欠失または可変ドメイン外の抗体配列への挿入は配列の同一性または類似性に影響するものとは解釈しない。抗体はその超可変領域１つ以上の中またはこれに隣接してアミノ酸の改変１つ以上を含むことができる。パーセント配列同一性は例えばＳｍｉｔｈ ａｎｄ Ｗａｔｅｒｍａｎのアルゴリズムを使用するデフォルト設定を用いたギャッププログラム（Ｗｉｓｃｏｎｓｉｎ Ｓｅｑｕｅｎｃｅ Ａｎａｌｙｓｉｓ Ｐａｃｋａｇｅ，Ｖｅｒｓｉｏｎ ８ ｆｏｒ Ｕｎｉｘ（登録商標），Ｇｅｎｅｔｉｃｓ Ｃｏｍｐｕｔｅｒ Ｇｒｏｕｐ，Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｐａｒｋ，Ｍａｄｉｓｏｎ ＷＩ）により決定することができる（Ａｄｖ，Ａｐｐｌ．Ｍａｔｈ．，１９８１，２，４８２−４８９）。
本発明はまた本明細書に記載したペプチドまたはそのフラグメントのいずれかをコードする核酸分子を提供する。配列番号３のペプチドをコードする核酸分子は配列番号２に示す。配列番号６のペプチドをコードする核酸分子は配列番号５に記載する。本明細書に開示したペプチドのアミノ酸配列を有する当業者はペプチドをコードする核酸分子を設計して製造することができる。
本発明はまた本明細書に記載したペプチドまたはそのフラグメントのいずれかをコードするいずれかの核酸分子を含むベクターを提供する。当業者は多くのベクターを容易に熟知することができ、それらの大部分は市販されている。
本発明はまた本明細書に開示した核酸分子またはベクターのいずれかを含む宿主細胞を提供する。宿主細胞は例えばペプチドおよび抗体またはそれらのフラグメントを発現するために使用できる。ペプチドおよび抗体またはそれらのフラグメントはまたインビボにおいて細胞内で発現することができる。ペプチドおよび抗体またはそれらのフラグメントを製造するように形質転換（例えばトランスフェクト）された宿主細胞またはそのフラグメントは不朽化哺乳類細胞系統、例えばリンパ様起源のもの（例えばミエローマ、ハイブリドーマ、トリオーマまたはクアドローマ細胞系統）であることができる。宿主細胞はまた正常なリンパ様細胞、例えばウイルス（例えばエプスタイン・バーウイルス）による形質転換により不朽化されているＢ細胞を包含する。
一部の不朽化リンパ様細胞系統、例えばミエローマ細胞系統はその正常な状態において、単離されたＩｇ軽鎖または重鎖を分泌する。そのような細胞系統を本発明の方法の間に製造される変異抗体またはそのフラグメントを発現するベクターで形質転換する場合、正常に分泌された鎖が前に製造したベクターによりコードされるＩｇ鎖の可変ドメインに相補的であれば、方法の残余の工程を実施する必要はない。しかしながら、不朽化細胞系統が相補鎖を分泌しない場合は、適切な相補鎖またはそのフラグメントをコードするベクターを細胞内に導入することが必要になる。
不朽化細胞系統が相補の軽鎖または重鎖を分泌する場合は、形質転換された細胞系統は例えば適当な細菌細胞をベクターで形質転換し、そして次に不朽化細胞系統に細菌細胞を融合（例えばスフェロプラスト融合による）させることにより製造してよい。あるいは、エレクトロポレーションによりＤＮＡを不朽化細胞に直接導入してよい。
本発明の一部の実施形態においては、宿主細胞は例えば、細菌細胞、例えばＥ．ｃｏｌｉ，カウロバクター・クレセンタス、ストレプトマイセス種、およびサルモネラ・チフィムリウム；酵母細胞、例えばサッカロマイセス・セレビシアエ、スキゾサッカロマイセス・ポンベ、ピチア・パストリス、ピチア・メタノリカ；昆虫細胞系統、例えばスポドプレテラ・フルギペルダ（例えばＳｆ９およびＳｆ２１細胞系統、およびｅｘｐｒｅｓＳＦＴＭ細胞（Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ Ｃｏｒｐ．，Ｍｅｒｉｄｅｎ，ＣＴ，ＵＳＡ））、ショウジョウバエＳ２細胞およびＨｉｇｈ Ｆｉｖｅ（登録商標）細胞中のトリコプルシア（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ，Ｃａｒｌｓｂａｄ，ＣＡ，ＵＳＡ）；および哺乳類細胞、例えばＣＯＳ１およびＣＯＳ７細胞、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞、ＮＳ０ミエローマ細胞、ＮＩＨ３Ｔ３細胞、２９３細胞、ＨＥＰＧ２細胞、ＨｅＬａ細胞、Ｌ細胞、Ｈｅｌａ、ＭＤＣＫ、ＨＥＫ２９３、ＷＩ３８、ネズミＥＳ細胞系統（例えば系統１２９／ＳＶ、Ｃ５７／ＢＬ６、ＤＢＡ−１、１２９／ＳＶＪ）、Ｋ５６２、Ｊｕｒｋａｔ細胞およびＢＷ５１４７を包含する。他の有用な哺乳類細胞系統はよく知られており、Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ（ＡＴＣＣ）（Ｍａｎａｓｓａｓ，ＶＡ，ＵＳＡ）およびＮａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｇｅｎｅｒａｌ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ（ＮＩＧＭＳ）、Ｃｏｒｉｅｌｌ Ｃｅｌｌ Ｒｅｐｏｓｉｔｏｒｉｅｓ（Ｃａｍｄｅｎ、ＮＪ，ＵＳＡ）のＨｕｍａｎ Ｇｅｎｅｔｉｃ Ｃｅｌｌ Ｒｅｐｏｓｉｔｏｒｙより容易に入手できる。これ等の細胞型は代表例にすぎず、そして網羅的リストではない。
ペプチドまたは抗体およびそれらのフラグメントは原核細胞および真核細胞中で製造できる。すなわち、本発明はまた、ハイブリドーマ細胞、Ｂ細胞、プラズマ細胞並びに本発明の抗体を発現するように組み換え修飾された宿主細胞を含む本発明の抗体を発現する細胞を提供する。
一部上記した検討事項のうち、宿主細胞系統は所望の様式で発現されたペプチドまたは抗体またはそのフラグメントをプロセシングするその能力に基づいて選択してよい。ポリペプチドの翻訳後の修飾は、例えば、グリコシル化、アセチル化、カルボキシル化、リン酸化、脂質化およびアシル化を包含し、そしてこれらの翻訳後修飾の１つ以上を有する抗体またはそのフラグメントを提供することは本発明の特徴である。
本発明はまた本明細書に記載したいずれかのペプチドを含む抗体またはそのフラグメントを提供し、抗体またはそのフラグメントはヒトＣＤ１５４に結合することができる。一部の実施形態においては、抗体またはそのフラグメントは本明細書に記載した軽鎖ペプチドまたはそのフラグメントを含む。他の実施形態においては、抗体またはそのフラグメントは本明細書に記載した重鎖ペプチドまたはそのフラグメントを含む。さらに別の実施形態においては、抗体またはそのフラグメントは、本明細書に記載した重鎖ペプチドまたはそのフラグメントのいずれか、および、本明細書に記載した軽鎖ペプチドまたはそのフラグメントのいずれかを含む。
一部の実施形態において、抗体またはそのフラグメントは、変異体＃１４のペプチドである第１のペプチド、および、変異体＃１のペプチドである第２のペプチドを含む。このような複合変異体は本明細書においては変異体＃１６と称する。
一部の実施形態において、抗体またはそのフラグメントは、変異体＃１５のペプチドである第１のペプチド、および、変異体＃２のペプチドである第２のペプチドを含む。このような複合変異体は本明細書においては変異体＃１７と称する。
一部の実施形態において、抗体またはそのフラグメントは、変異体＃１５のペプチドである第１のペプチド、および、変異体＃１のペプチドである第２のペプチドを含む。このような複合変異体は本明細書においては変異体＃１８と称する。
一部の実施形態において、抗体またはそのフラグメントは、変異体＃１４のペプチドである第１のペプチド、および、変異体＃４のペプチドである第２のペプチドを含む。このような複合変異体は本明細書においては変異体＃１９と称する。
一部の実施形態において、抗体またはそのフラグメントは、変異体＃１５のペプチドである第１のペプチド、および、変異体＃４のペプチドである第２のペプチドを含む。このような複合変異体は本明細書においては変異体＃２０と称する。
一部の実施形態において、抗体またはそのフラグメントは、変異体＃１４のペプチドである第１のペプチド、および、変異体＃２のペプチドである第２のペプチドを含む。このような複合変異体は本明細書においては変異体＃２３と称する。
一部の実施形態においては、抗体またはそのフラグメントは、変異体＃１４である第１のペプチド、および、配列番号６を含む第２のペプチドを含み、３１位、６６位、９９位および１０７位のアミノ酸はＳｅｒであり；５７位、１００位、１０４位および１０６位のアミノ酸はＡｓｐであり；１０１位のアミノ酸はＧｌｙであり；１０３位、５２位、５４位、５５位、５９位および６１位のアミノ酸はＡｓｎであり；２８位のアミノ酸はＩｌｅであり；５８位のアミノ酸はＴｈｒであり；３２位および３５位のアミノ酸はＴｙｒであり；５０位および６２位のアミノ酸はＧｌｕであり；５３位のアミノ酸はＰｒｏであり；６０位および６４位のアミノ酸はＰｈｅであり；６３位および６５位のアミノ酸はＬｙｓであり；１０２位のアミノ酸はＡｒｇであり；３０位のアミノ酸はＨｉｓであり；３３位のアミノ酸はＴｒｐであり；そして１０５位のアミノ酸はＭｅｔである。このような複合変異体は本明細書においては、変異体＃２１と称する。
一部の実施形態においては、抗体またはそのフラグメントは、変異体＃１５である第１のペプチド、および、配列番号６を含む第２のペプチドを含み、３１位、６６位、９９位および１０７位のアミノ酸はＳｅｒであり；５７位、１００位、１０４位および１０６位のアミノ酸はＡｓｐであり；１０１位のアミノ酸はＧｌｙであり；１０３位、５２位、５４位、５５位、５９位および６１位のアミノ酸はＡｓｎであり；２８位のアミノ酸はＩｌｅであり；５８位のアミノ酸はＴｈｒであり；３２位および３５位のアミノ酸はＴｙｒであり；５０位および６２位のアミノ酸はＧｌｕであり；５３位のアミノ酸はＰｒｏであり；６０位および６４位のアミノ酸はＰｈｅであり；６３位および６５位のアミノ酸はＬｙｓであり；１０２位のアミノ酸はＡｒｇであり；３０位のアミノ酸はＨｉｓであり；３３位のアミノ酸はＴｒｐであり；そして１０５位のアミノ酸はＭｅｔである。このような複合変異体は本明細書においては、変異体＃２２と称する。
一部の実施形態においては、抗体またはそのフラグメントは、変異体＃１４である第１のペプチド、および、配列番号６を含む第２のペプチドを含み、３１位、５４位、６６位、９９位および１０７位のアミノ酸はＳｅｒであり；５７位、１００位、１０４位および１０６位のアミノ酸はＡｓｐであり；１０１位のアミノ酸はＧｌｙであり；１０３位、５２位、５５位、５９位および６１位のアミノ酸はＡｓｎであり；２８位のアミノ酸はＩｌｅであり；５８位のアミノ酸はＴｈｒであり；３２位および３５位のアミノ酸はＴｙｒであり；５０位および６２位のアミノ酸はＧｌｕであり；５３位のアミノ酸はＰｒｏであり；６０位および６４位のアミノ酸はＰｈｅであり；６３位および６５位のアミノ酸はＬｙｓであり；１０２位のアミノ酸はＡｒｇであり；３０位のアミノ酸はＨｉｓであり；３３位のアミノ酸はＴｒｐであり；そして１０５位のアミノ酸はＭｅｔである。このような複合変異体は本明細書においては、変異体＃２４と称する。
一部の実施形態においては、抗体またはそのフラグメントは、変異体＃１５である第１のペプチド、および、配列番号６を含む第２のペプチドを含み、３１位、５４位、６６位、９９位および１０７位のアミノ酸はＳｅｒであり；５７位、１００位、１０４位および１０６位のアミノ酸はＡｓｐであり；１０１位のアミノ酸はＧｌｙであり；１０３位、５２位、５５位、５９位および６１位のアミノ酸はＡｓｎであり；２８位のアミノ酸はＩｌｅであり；５８位のアミノ酸はＴｈｒであり；３２位および３５位のアミノ酸はＴｙｒであり；５０位および６２位のアミノ酸はＧｌｕであり；５３位のアミノ酸はＰｒｏであり；６０位および６４位のアミノ酸はＰｈｅであり；６３位および６５位のアミノ酸はＬｙｓであり；１０２位のアミノ酸はＡｒｇであり；３０位のアミノ酸はＨｉｓであり；３３位のアミノ酸はＴｒｐであり；そして１０５位のアミノ酸はＭｅｔである。このような複合変異体は本明細書においては、変異体＃２５と称する。
一部の実施形態においては、抗体またはそのフラグメントは、変異体＃１５である第１のペプチド、および、配列番号６を含む第２のペプチドを含み、３１位、６６位、９９位および１０７位のアミノ酸はＳｅｒであり；５７位、１００位、１０４位および１０６位のアミノ酸はＡｓｐであり；１０１位のアミノ酸はＧｌｙであり；１０３位、５２位、５４位、５５位、５９位および６１位のアミノ酸はＡｓｎであり；２８位のアミノ酸はＩｌｅであり；５８位のアミノ酸はＴｈｒであり；３２位、３３位および３５位のアミノ酸はＴｙｒであり；５０位および６２位のアミノ酸はＧｌｕであり；５３位のアミノ酸はＰｒｏであり；６０位および６４位のアミノ酸はＰｈｅであり；６３位および６５位のアミノ酸はＬｙｓであり；１０２位のアミノ酸はＡｒｇであり；３０位のアミノ酸はＨｉｓであり；そして１０５位のアミノ酸はＭｅｔである。このような複合変異体は本明細書においては、変異体＃２６と称する。
一部の実施形態においては、抗体またはそのフラグメントは、変異体＃１５である第１のペプチド、および、配列番号６を含む第２のペプチドを含み、３１位、６６位、９９位および１０７位のアミノ酸はＳｅｒであり；５７位、１００位、１０４位および１０６位のアミノ酸はＡｓｐであり；１０１位のアミノ酸はＧｌｙであり；１０３位、５２位、５４位、５５位、５９位および６１位のアミノ酸はＡｓｎであり；２８位のアミノ酸はＩｌｅであり；３０位および５８位のアミノ酸はＴｈｒであり；３２位および３５位のアミノ酸はＴｙｒであり；５０位および６２位のアミノ酸はＧｌｕであり；５３位のアミノ酸はＰｒｏであり；６０位および６４位のアミノ酸はＰｈｅであり；６３位および６５位のアミノ酸はＬｙｓであり；１０２位のアミノ酸はＡｒｇであり；３３位のアミノ酸はＴｒｐであり；そして１０５位のアミノ酸はＭｅｔである。このような複合変異体は本明細書においては、変異体＃２７と称する。
一部の実施形態においては、抗体またはそのフラグメントは、変異体＃１４である第１のペプチド、および、配列番号６を含む第２のペプチドを含み、３１位、６６位、９９位および１０７位のアミノ酸はＳｅｒであり；５７位、１００位、１０４位および１０６位のアミノ酸はＡｓｐであり；１０１位のアミノ酸はＧｌｙであり；１０３位、５２位、５４位、５５位、５９位および６１位のアミノ酸はＡｓｎであり；２８位のアミノ酸はＩｌｅであり；３０位および５８位のアミノ酸はＴｈｒであり；３２位および３５位のアミノ酸はＴｙｒであり；５０位および６２位のアミノ酸はＧｌｕであり；５３位のアミノ酸はＰｒｏであり；６０位および６４位のアミノ酸はＰｈｅであり；６３位および６５位のアミノ酸はＬｙｓであり；１０２位のアミノ酸はＡｒｇであり；３３位のアミノ酸はＴｒｐであり；そして１０５位のアミノ酸はＭｅｔである。このような複合変異体は本明細書においては、変異体＃２８と称する。
抗体は身体内の外来性分子の存在に応答した脊椎動物の免疫系の体液性のアームによりもたらされる概ね分子量１５０ｋＤの糖タンパク質である。機能的抗体または抗体誘導体はインビトロまたはインビボでその特定の抗原を認識して結合することが可能であり、そして、抗体結合に関連するその後の作用、例えば直接の細胞毒性、補体依存性の細胞毒性（ＣＤＣ）、抗体依存性の細胞毒性（ＡＤＣＣ）および抗体の生産を開始する場合がある。
抗原への結合により、抗体は感染性の微生物または他の抗原含有物体、例えば癌細胞の中和、破壊および排除に寄与する免疫系の多くのエフェクター系の１つ以上を活性化する。
本明細書に開示した抗体およびそのフラグメントは野生型５ｃ８抗体と比較して増強または低減された親和性、結合力および／または特異性を有する。一部の実施形態においては、本明細書に開示した抗体およびそのフラグメントは野生型５ｃ８抗体と比較して増強した親和性、結合力および／または特異性を有する。親和性、結合力および／または特異性は種々の方法で測定できる。一般的に、そして親和性を定義または測定する厳密な態様に関わらず、本発明の方法は、原料となる抗体よりもその臨床的適用のいずれかの態様において優れている抗体をそれらが生成する場合に抗体の親和性を向上させる（例えば修飾された抗体を低用量または低頻度で、または、原料となる抗体よりも簡便な投与経路で投与することができる場合に、本発明の用法は有効または成功であると見なされる）。
当業者の知る通り親和性の測定は単一の最終結果の数字を見るほど常時単純ではない。抗体は２つのアームを有しているため、その見かけの親和性は可変領域と抗原の間の内因性の親和性よりも通常は遥かに高値である。内因性親和性はｓｃＦｖおよびＦａｂフラグメントを用いて測定できる。
一部の実施形態においては、抗体フラグメントは単鎖抗体（ｓｃＦｖ）、Ｆ（ａｂ’）２フラグメント、Ｆａｂフラグメント、Ｆａｂ’フラグメントまたはＦｄフラグメントまたはその抗原結合フラグメントである。単鎖抗体は１本のタンパク質鎖内のタンパク質スペーサーにより連結された可変領域より構成される。他の実施形態においては、抗体フラグメントはヘテロマーの抗体複合体および抗体融合物、例えば２重特異性抗体、ヘミダイマー抗体および多価抗体（例えば４価抗体）を包含する。ヘミダイマー抗体はＦｃ部分および１つのＦａｂ部分から構成される。
一部の実施形態においては、抗体またはそのフラグメントはまた免疫グロブリンの軽鎖および／または重鎖の１つ以上を含有するタンパク質、例えばこれ等の鎖の単量体およびホモまたはヘテロ多量体（例えば２量体または３量体）を包含することができ、その場合、その鎖は場合によりジスルフィド結合または他の態様で交差結合している。これ等の抗体またはそのフラグメントは抗原１つ以上に結合できる。
本明細書に開示した抗体のフラグメントはＣＤ１５４に結合するその能力を保持している。例えばＣＤ１５４に結合できる５ｃ８のフラグメントに関しては、本明細書に開示したいずれかの変異を含む相当するフラグメントもまたＣＤ１５４に結合できる。５ｃ８により接触されるＣＤ１５４上に存在するアミノ酸はＶ１２６、Ｉ１２７、Ｓ１２８、Ｅ１２９、Ａ１３０、Ｓ１３１、Ｓ１３２、Ｋ１３３、Ｔ１３４、Ｑ１３９、Ｗ１４０、Ａ１４１、Ｅ１４２、Ｋ１４３、Ｇ１４４、Ｙ１４５、Ｙ１４６、Ｔ１４７、Ｍ１４８、Ｓ１４９、Ｎ１５０、Ｎ１５１、Ｖ１５３、Ｔ１５４、Ｌ１５５、Ｅ１５６、Ｎ１５７、Ｇ１５８、Ｋ１５９、Ｔ１７６、Ｆ１７７、Ｃ１７８、Ｓ１７９、Ｎ１８０、Ｅ１８２、Ａ１８３、Ｓ１８４、Ｒ２００、Ｆ２０１、Ｅ２０２、Ｒ２０３、Ｉ２０４、Ｌ２０５、Ａ２０９、Ａ２１５、Ｋ２１６、Ｐ２１７、Ｃ２１８、Ｇ２１９、Ｑ２２０、Ｑ２２１、Ｄ２４３、Ｐ２４４、Ｓ２４５、Ｑ２４６、Ｖ２４７、Ｓ２４８、Ｈ２４９、Ｇ２５０、Ｔ２５１、Ｇ２５２、Ｆ２５３およびＴ２５４を包含する。一部の実施形態においてはＣＤ１５４上のこれ等の残基の一部または全てが本明細書に記載した変異体と相互作用する。一部の実施形態においては、本明細書に記載した変異体は野生型抗体よりも１つ以上少ないＣＤ１５４残基と接触する場合がある。
一部の実施形態においては、抗体またはそのフラグメントは検出可能なマーカーで標識される。検出可能なマーカーは例えば放射性同位体（例えばＰ３２およびＳ３５）、酵素（例えばセイヨウワサビパーオキシダーゼ、クロラムフェニコールアセチルトランスフェラーゼ（ＣＡＴ）、β−ガラクトシダーゼ（β−ｇａｌ）等）、蛍光色素、発色団、コロイド状金、染料およびビオチンを包含する。標識された抗体またはそのフラグメントは種々の細胞または組織型において診断操作法を実施するために使用できる（多くの診断試験はタンパク質抗原（例えばＰＳＡ）の検出に依存している）。インビトロまたはインビボの画像化の操作法については、本明細書に記載した方法により製造された改変された抗体を別の薬剤、例えばＮＭＲ造影剤、Ｘ線造影剤または量子ドットにより標識することができる。ポリペプチド、例えば抗体またはそのフラグメントに検出可能な薬剤を結合するための方法は、当該分野で知られている。抗体はまた不溶性支持体（例えばビーズ、ガラスまたはプラスチックのスライド等）に結合することもできる。
一部の実施形態においては、抗体またはそのフラグメントは放射性同位体（例えば１１１Ｉｎまたは９０Ｙ）、毒素（例えば破傷風毒素またはリシン）、トキソイドおよび化学療法剤を包含する治療剤に結合体化される（米国特許第６，３０７，０２６号参照）。
一部の実施形態においては、抗体またはそのフラグメントは画像化剤に結合体化されることにより修飾される。画像化剤は、単離または検出を容易にするための、例えば標識部分（例えばビオチン、蛍光部分、放射性部分、ヒスチジンタグまたは他のペプチドタグ）を包含する。
投与されると、抗体はしばしば急速に循環から浄化され、そして従って比較的短い寿命の薬理学的活性を示す場合がある。その結果、抗体投与の処置効果を持続させるためには抗体の比較的大用量の頻繁な注射が必要となる場合がある。
一部の実施形態においては、抗体またはそのフラグメントはインビボの抗体の一体性と持続性を増大させるために修飾（他の部分への結合による等）することができる。例えば、抗体またはそのフラグメントは安定化を増強することにより抗体の血清中半減期を延長する部分を含むように修飾することができる。
一部の実施形態においては抗体またはそのフラグメントは少なくとも１つの高分子量ポリマー、例えばポリエチレンイミンおよびポリリシンを含む。一部の実施形態においては抗体またはそのフラグメントは水溶性ポリマー、例えばポリエチレングリコール、ポリエチレングリコールとポリプロピレングリコールの共ポリマー、カルボキシメチルセルロース、デキストラン、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドンまたはポリプロリンの共有結合により修飾され、これ等はすべて相当する未修飾タンパク質よりも静脈内注射後の血中の実質的により長い半減期を示すことがわかっている（Ａｂｕｃｈｏｗｓｋｉ ｅｔ ａｌ．，“Ｅｎｚｙｍｅｓ ａｓ Ｄｒｕｇｓ”， １９８１；Ｈｏｌｃｅｎｂｅｒｇ ｅｔ ａｌ．，Ｅｄ．，１９８１，Ｗｉｌｅｙ−Ｉｎｔｅｒｎｓｃｉｅｎｃｅ， Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ， ＮＹ，３６７−３８３；Ａｎｄｅｒｓｏｎ，Ｈｕｍａｎ Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒａｐｙ，Ｓｃｉｅｎｃｅ，１９９２，２５６，８０８−８１３；Ｎｅｗｍａｒｋ
ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ａｐｐｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，１９８２，４，１８５−１８９；およびＫａｔｒｅ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，１９８７，８４，１４７８−１４９１）。
一部の実施形態においては抗体またはそのフラグメントは少なくとも１つのアミノ酸位置においてＰＥＧ化またはグリコシル化されるか、または、他の適当な水溶性ポリマー、例えばＰＥＧ、エチレングリコール／プロピレングリコールの共ポリマー、カルボキシメチルセルロース、デキストラン、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、ポリ１，３ジオキソラン、ポリ１，３，６トリオキソラン、エチレン／無水マレイン酸共ポリマー、ポリアミノ酸（単独ポリマーまたはランダム共ポリマー）およびデキストランまたはポリ（ｎビニルピロリドン）ＰＥＧ、プロピレングリコール単独ポリマー、ポリプロピレンオキシド／エチレンオキシド共ポリマー、ポリオキシエチル化ポリオール（例えばグリセロール）、ポリビニルアルコールおよびこれ等の混合物で修飾される。
ポリマーはいずれかの適当な分子量のものであってよく、そして分枝鎖または未分枝鎖であってよい。
ＰＥＧについては、適当な平均分子量は約２ｋＤａ〜約１００ｋＤａである。これにより取り扱いと製造が容易になる。当業者の知る通り、ＰＥＧの製造においては、記載した分子量よりも一部の分子は高分子量であり、一部は低分子量となる。すなわち、分子量は典型的には「平均分子量」として特定される。他の分子量（サイズ）も所望の処置特性に応じて使用してよい（例えば所望の持続放出の持続時間；該当する場合は生物学的活性に対する作用；取り扱いの容易さ；抗原性の程度または非存在および処置タンパク質に対するＰＥＧの他の知られた作用）。種々の実施形態において、分子量は約２ｋＤａ、約５ｋＤａ、約１０ｋＤａ、約１５ｋＤａ、約２０ｋＤａ、約２５ｋＤａ、約３０ｋＤａ、約４０ｋＤａまたは約１００ｋＤａである。一部の実施形態においては、各ＰＥＧ鎖の平均分子量は約２０ｋＤａである。別の実施形態においては、平均分子量は約１０ｋＤａである。
このようにして結合したポリマー分子の数は変動してよく、そして機能に対する作用は当業者であれば確認することができる。モノ誘導体化を行ってよく、または、ジ誘導体化、トリ誘導体化、テトラ誘導体化または数種の誘導体化の組み合わせを同一もしくは異なる化学部分（例えば異なる分子量のＰＥＧのようなポリマー）に提供してもよい。タンパク質（またはポリペプチド）に対するポリマー分子の比率は、反応混合物中のその濃度と同様に変動する。一般的に、至適比（過剰な未反応のタンパク質またはポリマーが存在しないという点における反応効率に関する）は所望の誘導体化度（例えば、モノ、ジ、トリ等）、選択されたポリマーの分子量、ポリマーが分枝鎖であるかまたは未分枝鎖であるか、および、反応条件のような要因により決定される。
ＰＥＧ分子（または他の化学部分）はタンパク質の機能的または抗原性のドメインに対する作用を考慮しながらタンパク質に結合させなければならない。当業者の使用できる結合方法は多数存在する。例えばＥＰ０４０１３８４（ＰＥＧのＧＣＳＦへのカップリング）；Ｍａｌｉｋ ｅｔ ａｌ．，Ｅｘｐ．Ｈｅｍａｏｌ．，１９９２，２０，１０２８−１０３５（トレシルクロリドを使用したＧＭ ＣＳＦのＰＥＧ化を報告）を参照できる。
例えば、ＰＥＧは遊離のアミノまたはカルボキシル基のような反応性の基を介してアミノ酸残基に共有結合（ＰＥＧ化）してよい。遊離のアミノ基を有するアミノ酸残基はリジン残基およびアミノ末端アミノ酸残基を包含する。遊離のカルボキシル基を有するものはアスパラギン酸残基、グルタミン酸残基およびＣ末端アミノ酸残基を包含する。スルヒドリル基もまた、ＰＥＧ分子の結合のための反応性の基として使用してよい。処置目的のためには、結合は例えばＮ末端のアミノ基またはリジン基に有ることができる。アミノ末端の化学修飾されたタンパク質が特に望まれる場合もある。
本発明の組成物の説明として、ＰＥＧを用いる場合、種々のＰＥＧ分子（分子量、分枝等による）、反応混合物中のタンパク質（またはペプチド）分子に対するＰＥＧ分子の比率、実施すべきＰＥＧ化反応の型および選択されたアミノ末端ＰＥＧ化タンパク質を得る方法から選択してよい。アミノ末端ＰＥＧ化製造物を得るための方法（すなわちこの部分を他のモノＰＥＧ化物質から必要に応じて分離すること）はＰＥＧ化タンパク質分子からのアミノ末端ＰＥＧ化物質の精製により行ってよい。選択的アミノ末端化学修飾は、特定のタンパク質における誘導体化のために使用できる第１アミノ基の異なる型（リジンｖｓアミノ末端）の示差的な反応性を利用する還元的アルキル化により達成してよい。適切な反応条件下において、カルボニル基含有ポリマーによるアミノ末端におけるタンパク質の実質的に選択的な誘導体化が達成される。例えば、リジン残基のイプシロン（ε）アミノ基とタンパク質のアミノ末端のアルファ（α）アミノ基との間のｐＫａの差を利用できるｐＨにおいて反応を実施することによりタンパク質のアミノ末端を選択的にＰＥＧ化してよい。このような選択的誘導体化により、タンパク質への水溶性ポリマーの結合が制御され、ポリマーとの結合体化形成がタンパク質のアミノ末端において優先的に起こり、そして他の反応性の基、例えばリジン側鎖アミノ基の修飾はそれほど起こらない。
還元的アルキル化を用いる場合、水溶性ポリマーは上記した型のものであってよく、そして、タンパク質へのカップリングのための単一の反応性のアルデヒドを有さなければならない。単一の反応性のアルデヒドを有するＰＥＧプロピオンアルデヒドを使用してよい。
抗体の修飾はまた水溶液中のタンパク質の溶解度を上昇させ、凝集を排除し、タンパク質の物理的および化学的安定性を増強し、そしてタンパク質の免疫原性および抗原性を大きく低減することができる。その結果、未修飾タンパク質の場合よりも低頻度または低用量におけるこれ等のポリマータンパク質付加物の投与により、所望のインビボの生物学的活性を達成できる。
「キメラ抗体」という用語は異種タンパク質またはそのペプチドに、例えばペプチド結合またはペプチドリンカーにより結合された免疫グロブリン分子の少なくとも抗原結合部分を含むタンパク質を説明するために使用する。「異種」タンパク質とは非免疫グロブリンまたは異なる種、クラスまたはサブクラスの免疫グロブリンの部分であることができる。
このような抗体を作成できる多くの方法が存在する。例えば少なくともＶＨまたはＶＬをコードするＤＮＡ配列および異種タンパク質（またはそのペプチド（ペプチドは非免疫グロブリン分子としてそれが認識され得る十分な長さのもの（例えば免疫グロブリンに対して実質的な配列同一性を有さないペプチド）））をコードする配列に作動可能に連結したプロモーターを含む発現ベクターを製造することができる。必要に応じて、または所望の場合は、相補可変ドメインをコードするＤＮＡ配列に作動可能に連結したプロモーターを含む第２の発現ベクターを製造することができる（例えば親発現ベクターがＶＨをコードする場合は、第２の発現ベクターはＶＬをコードし、または、その逆も可能である）。次に細胞系統（例えば不朽化哺乳類細胞系統）を発現ベクターの一方または両方で形質転換し、キメラ可変ドメインまたはキメラ抗体の発現を可能にする条件下で培養することができる（例えば国際特許出願ＰＣＴ／ＧＢ８５／００３９２参照）。この方法は本発明の修飾された抗体、完全長の重鎖および軽鎖を含有する抗体またはそのフラグメント（例えば本明細書に記載したＦａｂ、Ｆ（ａｂ’）２またはｓｃＦｖフラグメント）を発現するために使用できる。方法はキメラ抗体の発現に限定されない。
天然に存在する抗体は単一の種から誘導されるが、操作された抗体および抗体フラグメントは１つ以上の種の動物から誘導される、例えばキメラ抗体であってよい。今日まで、マウス（ネズミ）／ヒトキメラおよびネズミ／非ヒト霊長類抗体が作成されているが、他の種の組み合わせも可能である。
一部の実施形態においては、抗体またはそのフラグメントはキメラ抗体である。典型的にはキメラ抗体は別の種（典型的にはヒト）の定常領域に融合した１つの種（典型的にはマウス）の相補性決定領域（ＣＤＲ）およびフレームワーク残基の両方を含む、重鎖および／または軽鎖の可変領域を包含する。これ等のキメラマウス／ヒト抗体は約７５％のヒトおよび２５％のマウスのアミノ酸配列をそれぞれ含有する。ヒト配列は抗体の定常領域を示し、マウス配列は抗体の可変領域（すなわち、抗原結合部位を含有）を示す。
このようなキメラを使用する根拠は、マウス抗体の抗原特異性を保持するがマウス抗体の免疫原性（マウス抗体はマウス以外の種においてそれに対する免疫応答を誘発する場合がある）を低減し、これにより、ヒトの処置においてキメラを使用できるようにすることである。
別の実施形態においては、抗体またはそのフラグメントは１つの抗体のフレームワーク領域および別の抗体のＣＤＲ領域を含むキメラ抗体を包含する。他の実施形態においては、抗体またはそのフラグメントは異なるヒト抗体由来のＣＤＲ領域を含むキメラ抗体を包含する。別の実施形態においては、抗体またはそのフラグメントは少なくとも２つの異なるヒト抗体由来のＣＤＲ領域を含むキメラ抗体を包含する。
上記したキメラ抗体の全てを作成する方法は当業者のよく知る通りである（米国特許第５，８０７，７１５号；Ｍｏｒｒｉｓｏｎ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，１９８４，８１，６８５１−５；Ｓｈａｒｏｎ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，１９８４，３０９，３６４−７；およびＴａｋｅｄａ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，１９８５，３１４，４５２−４）。
別の実施形態においては、抗体またはそのフラグメントはまた霊長類化、ヒト化および完全ヒト抗体を包含する。霊長類化およびヒト化抗体は典型的には、ヒト定常領域を通常はさらに含む非ヒト霊長類またはヒトの抗体Ｖ領域のフレームワークに移植されたネズミ抗体由来の重鎖および／または軽鎖ＣＤＲを含む（Ｒｉｅｃｈｍａｎｎ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，１９８８，３３２，３２３−７；Ｃｏ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，１９９１，３５１，５０１−２；および米国特許第６，０５４，２９７号、米国特許第５，８２１，３３７号、米国特許第５，７７０，１９６号、米国特許第５，７６６，８８６号、米国特許第５，８２１，１２３号、米国特許第５，８６９，６１９号、米国特許第６，１８０，３７７号、米国特許第６，０１３，２５６号、米国特許第５，６９３，７６１米国特許第および米国特許第６，１８０，３７０号）。
ヒト化抗体は、抗原結合のために必要でないヒト免疫グロブリン軽鎖または重鎖のアミノ酸の一部または全て（例えば定常領域および可変ドメインのフレームワーク領域）が同種の非ヒト抗体の軽鎖または重鎖由来の相当するアミノ酸を置換するために使用された組み換えＤＮＡ技術により作成された抗体である。例示すれば、ある抗原に対するネズミ抗体のヒト化バージョンはその重鎖および軽鎖の両方の上に、１）ヒト抗体の定常領域；２）ヒト抗体の可変ドメイン由来のフレームワーク領域；および３）ネズミ抗体由来のＣＤＲを有する。必要な場合は、ヒトフレームワーク領域内の１つ以上残基をネズミ抗体における相当する位置の残基に変更することにより抗原に対するヒト化抗体の結合親和性を温存することができる。この変更は場合により「復帰変異」と称される。ヒト化抗体は一般的にキメラヒト抗体と比較して前者はかなり少数の非ヒト成分しか含有しないため、ヒトにおける免疫応答を惹起する可能性は低い。ヒト化抗体を作成するための方法は抗体の当該分野でよく知られている（欧州特許第２３９４００号；Ｊｏｎｅｓ ｅｔ ａｌ．Ｎａｔｕｒｅ，１９８６，３２１，５２２−５２５；Ｒｉｅｃｈｍａｎｎ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，１９８８，３３２，３２３−３２７；Ｖｅｒｈｏｅｙｅｎ ｅｔ ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ，１９８８，２３９，１５３４−１５３６；Ｑｕｅｅｎ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，１９８９，８６，１００２９；Ｏｒｌａｎｄｉ ｅｔ ａｌ．， Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，１９８９，８６，３８３３；および米国特許第６，１８０，３７０号）。
一部の実施形態においては、ヒト化抗体はヒト抗体内へのネズミ（または他の非ヒト）ＣＤＲの移植により作成する。より詳細には、これは以下の通り、すなわち、１）重鎖および軽鎖可変ドメインをコードするｃＤＮＡをハイブリドーマから単離し；２）ＣＤＲを含む可変ドメインのＤＮＡ配列を配列決定により調べ；３）ＣＤＲをコードするＤＮＡを部位指向性変異誘発によりヒト抗体の重鎖または軽鎖可変ドメインコーディング配列の相当する領域に転移させ；そして４）所望のアイソタイプのヒト定常領域遺伝子セグメント（例えばＣＨは１、そしてＣＬはｋ）を付加することにより達成できる。最後に、ヒト化重鎖および軽鎖の遺伝子を哺乳類宿主細胞（例えばＣＨＯまたはＮＳ０細胞）中で同時発現することにより可溶性ヒト化抗体を製造する。
場合によりヒトフレームワークへのＣＤＲの直接の転移は得られる抗体の抗原結合親和性の損失をもたらす。その理由は、一部の同種の抗体においては、フレームワーク領域内の特定のアミノ酸は、ＣＤＲと相互作用し、これにより抗体の全体的な抗原結合親和性に影響するためである。このような場合、同種の抗体の抗原結合活性を保持するためにはアクセプター抗体のフレームワーク領域内に「復帰変異」を導入することが重要である。復帰変異を行う一般的な方法は当業者のよく知る通りである（Ｑｕｅｅｎ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，１９８９，８６，１００２９；およびＣｏ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，１９９１，８８，２８６９−２８７３；ＰＣＴ特許出願ＷＯ９０／０７８６１；およびＴｅｍｐｅｓｔ，Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，１９９１，９，２６６−２７１）。
一部の実施形態においては、抗体またはそのフラグメントは完全ヒト抗ＣＤ１５４抗体である。完全ヒト抗体はインビトロでプライミングされたヒト脾細胞（Ｂｏｅｒｎｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１９９１，１４７，８６−９５）またはファージディスプレイ抗体ライブラリ（米国特許第６，３００，０６４号）を用いて製造できる。あるいは、完全ヒト抗体はレパートリークローニングにより製造できる（Ｐｅｒｓｓｏｎ ｅｔ ａｌ．， Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，１９９１，８８，２４３２−２４３６；およびＨｕａｎｇ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ，１９９１，１４１，２２７−２３６）。さらにまた、米国特許第５，７９８，２３０号はヒトＢ細胞由来のヒトモノクローナル抗体の製造を記載しており、そこでは、ヒト抗体産生Ｂ細胞を免疫化に必要なタンパク質であるエプスタイン・バーウイルス核抗原２（ＥＢＮＡ２）を発現するエプスタイン・バーウイルスまたはその誘導体による感染により不朽化する。ＥＢＮＡ２の機能は後にシャットオフされ、抗体生産の増大がもたらされる。
完全ヒト抗体の製造のための他の方法では、不活性化された内因性Ｉｇ遺伝子座を有し、再配列されていないヒト抗体重鎖および軽鎖の遺伝子に関してトランスジェニックである非ヒト動物を使用する。このようなトランスジェニック動物は活性化Ｔ細胞またはＤ１．１タンパク質により免疫化（米国特許第５，４７４，７７１号；米国特許第６，３３１，４３３号；および米国特許第６，４５５，０４４号）することができ、そしてそれより誘導されたＢ細胞からハイブリドーマを作成することができる。これ等の方法の詳細は当該分野で知られている。例えばヒトＩｇミニ遺伝子座を含有するトランスジェニックマウスに関する種々のＧｅｎＰｈａｒｍ／Ｍｅｄａｒｅｘ（Ｐａｌｏ Ａｌｔｏ，ＣＡ）の公開物／特許、例えば米国特許第５，７８９，６５０号；ＸＥＮＯＭＯＵＳＥ（登録商標）マウスに関する種々のＡｂｇｅｎｉｘ（Ｆｒｅｍｏｎｔ，ＣＡ）の公開物／特許、例えば米国特許第６，０７５，１８１号、米国特許第６，１５０，５８４号および米国特許第６，１６２，９６３号；Ｇｒｅｅｎ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ Ｇｅｎｅｔｉｃｓ，１９９４，７，１３−２１；Ｍｅｎｄｅｚ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ Ｇｅｎｅｔｉｃｓ，１９９７，１５，１４６−５６；および「トランソミック」マウスに関する種々のＫｉｒｉｎ（Ｊａｐａｎ）の公開物／特許、例えば欧州特許第８４３９６１号およびＴｏｍｉｚｕｋａ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ Ｇｅｎｅｔｉｃｓ，１９９７，Ｊｕｎｅ；１６（２）：１３３−４３を参照できる。
抗体の配列（例えばＣＤＲグラフトまたは他の修飾されたまたは「ヒト化」抗体）を決定した後、その抗体は分子生物学の分野でよく知られた手法により作成できる。より詳細には、核酸配列（例えば所望のタンパク質をコードするＤＮＡ配列（例えば修飾された重鎖または軽鎖；その可変ドメイン、または他のその抗原結合フラグメント））で宿主細胞を形質転換することにより、広範なポリペプチドを組み換えＤＮＡ手法を用いて製造できる。
より詳細には、製造方法はキメラ抗体に関して上記したとおり実施できる。例えば改変された可変ドメインをコードするＤＮＡ配列はオリゴヌクレオチド合成により製造できる。可変ドメインはヒトアクセプター分子のＦＲおよびドナー、例えばネズミのＣＤＲを、残基１つ以上（例えばＣＤＲ内の残基）を修飾して抗原結合を促進するより前またはその後に含ませることができる。これはアクセプター抗体のフレームワーク領域の配列およびドナー抗体の少なくともＣＤＲ配列を決定することにより容易になる。あるいは、改変された可変ドメインをコードするＤＮＡ配列はプライマー指向オリゴヌクレオチド部位指向性変異誘発により製造してよい。この手法は変異点を含有するＤＮＡの１本鎖に所望の変異をコードしたオリゴヌクレオチドをハイブリダイズすること、および、変異を含有する鎖を作成するために１本鎖をオリゴヌクレオチドの伸長のための鋳型として使用することにより変異を含有する鎖を作成することを包含する。この手法は種々の形態において、例えばＺｏｌｌｅｒ ａｎｄ Ｓｍｉｔｈ （Ｎｕｃ．Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．，１９８２，１０，６４８７−６５００），Ｎｏｒｒｉｓ ｅｔ ａｌ．（Ｎｕｃ．Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．，１９８３，１１，５１０３−５１１２），Ｚｏｌｌｅｒ ａｎｄ Ｓｍｉｔｈ（ＤＮＡ，１９８４，３，４７９−４８８）およびＫｒａｍｅｒ ｅｔ ａｌ．，（Ｎｕｃ．Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．，１９８２，１０，６４７５−６４８５）に記載されている。
配列内に変異を導入する他の方法も同様に知られており、そして本明細書に記載した改変抗体を作成するために使用できる（例えばＣａｒｔｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ｎｕｃ．Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．，１９８５，１３，４４３１−４４４３参照）。部位指向性変異誘発に使用するオリゴヌクレオチドは、オリゴヌクレオチド合成により製造するか、または、適当な制限酵素を使用することによりドナー抗体の可変ドメインをコードするＤＮＡから単離することができる。
別の実施形態において、抗体またはそのフラグメントは無細胞翻訳によって製造することができる。あるいは抗体またはそのフラグメントは大規模生産を容易にするために抗体発現細胞を含有するバイオリアクター中で製造することができる。
一部の実施形態においては、抗体またはそのフラグメントは抗体の大規模生産を容易にするために乳汁中に抗体を発現するヤギ、ウシまたはヒツジのようなトランスジェニック哺乳類中で生産できる（米国特許第５，８２７，６９０号；およびＰｏｌｌｏｃｋ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈ．，１９９９，２３１，１４７−５７）。
本発明はまた本明細書に記載したペプチドまたはそのフラグメントいずれかの１つ以上、核酸分子またはベクターのいずれかの１つ以上、または、抗体またはそのフラグメントのいずれかの１つ以上を含む組成物を提供する。組成物は例えば医薬組成物を包含する。
予防的な用途において、医薬組成物または医薬は、障害の生化学的、組織学的および／または挙動上の症状、その合併症および障害の発症中に存在する中間的な病理学的表現型を含む障害の危険性を排除または低減するため、重症度を低下させるため、または、開始を遅延させるために十分な量で障害に罹患した被験体に投与される。処置用途においては、医薬組成物または医薬は、障害の症状（生化学的、組織学的および／または挙動上）、例えばその合併症および障害の発症における中間的な病理学的表現型を、治癒、または少なくとも部分的に停止するのに十分な量でそのような障害を疑われる、または既に罹患した被験体に投与される。
本発明の医薬組成物は薬学的に受容可能なキャリア中に本明細書に開示した抗体またはそのフラグメント少なくとも１つを含むことができる。「薬学的に受容可能なキャリア」とは、活性成分の投与のために通常使用される医薬品調製物の少なくとも１つの成分を指す。それ自体キャリアは当該分野で使用される薬学的賦形剤のいずれかおよびいずれかの形態の投与用ベヒクルを含有できる。キャリアは例えばリン酸塩緩衝食塩水、生理食塩水、水、クエン酸／スクロース／ツイーン処方およびエマルジョン、例えば油／水エマルジョンを包含する。
組成物は活性な治療剤および種々の他の薬学的に受容可能な成分を含むことができる。Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ（１５ｔｈ ｅｄ．，Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｅａｓｔｏｎ，Ｐｅｎｎｓｙｌｖａｎｉａ（１９８０））を参照できる。所望の形態は投与の意図される様式および処置用途により変動する。組成物はまた、所望の製剤に応じて、動物またはヒトへの投与のための医薬組成物を製剤するために一般的に使用されているベヒクルとして定義される、薬学的に受容可能な非毒性のキャリアまたは希釈剤を含むことができる。希釈剤は組み合わせの生物学的活性に影響しないように選択する。このような希釈剤の例は蒸留水、生理学的リン酸塩緩衝食塩水、リンゲル液、デキストロース溶液およびＨａｎｋ’ｓ溶液を包含する。さらにまた、医薬組成物または製剤はまた他のキャリア、アジュバント、または、非毒性、非処置性、非免疫原性の安定化剤等を含んでよい。経口投与用の組成物の固体製剤は適当なキャリアまたは賦形剤、例えばコーンスターチ、ゼラチン、乳糖、アカシア、スクロース、微結晶セルロース、カオリン、マンニトール、リン酸二カルシウム、炭酸カルシウム、塩化ナトリウムまたはアルギン酸を含有できる。使用できる錠剤崩壊剤は例えば微結晶セルロース、コーンスターチ、澱粉グリコール酸ナトリウムおよびアルギン酸を包含する。使用できる錠剤結着剤は、アカシア、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ポリビニルピロリドン（ＰｏｖｉｄｏｎｅＴＭ）、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、スクロース、澱粉およびエチルセルロースを包含する。使用できる潤滑剤はステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸、シリコーン液、タルク、ワックス、油脂およびコロイド状シリカを包含する。他の賦形剤は例えば、着色料、味マスキング剤、溶解促進剤、懸濁剤、圧縮剤、腸溶性コーティング、持続放出促進剤等を包含する。
抗体は活性成分の持続放出を可能にするような態様で製剤することができる蓄積注射またはインプラント製剤の形態で投与できる。例示される組成物はＨＣｌでｐＨ６．０に調節した５０ｍＭ Ｌ−ヒスチジンおよび１５０ｍＭ ＮａＣｌからなる水性の緩衝液中に製剤した５ｍｇ／ｍｌの抗体またはそのフラグメントを含む。モノクローナル抗体用の適当な製剤緩衝液の別の例は２０ｍＭクエン酸ナトリウム、ｐＨ６．０、１０％スクロースおよび０．１％ツイーン８０を含有する。
一部の実施形態においては、水または他の水性ベヒクル中に調製された経口投与用の医薬組成物の液体製剤は種々の懸濁剤、例えばメチルセルロース、アルギネート、トラガカント、ペクチン、ケルギン、カラギーナン、アカシア、ポリビニルピロリドンおよびポリビニルアルコールを含有できる。本発明の医薬組成物の液体製剤は活性化合物、水和剤、甘味料および着色料およびフレーバー剤を共に含有する溶液、エマルジョン、シロップおよびエリキシルも包含できる。投与すべき動物の肺内に吸入のための医薬組成物の種々の液体および粉末の製剤が従来の方法により製造できる。
一部の実施形態においては、注射用の医薬組成物の液体製剤は種々のキャリア、例えば植物油、ジメチルアセトアミド、ジメチルホルムアミド、エチルラクテート、エチルカーボネート、イソプロピルミリステート、エタノール、ポリオール、例えばグリセロール、プロピレングリコール、液体ポリエチレングリコール等を含むことができる。一部の実施形態においては、組成物はシトレート／スクロース／ツイーンのキャリアを含む。静脈内注射のためには、組成物の水溶解型を点滴法により投与することができ、これにより、抗カビ剤および生理学的に許容される賦形剤を含有する医薬品製剤を注入する。生理学的に許容される賦形剤は例えば５％デキストロース、０．９％食塩水、リンゲル液または他の適当な賦形剤を包含できる。組成物の適当な不溶性型は水性基剤または薬学的に受容可能な油脂基剤、例えば長鎖脂肪酸のエステル、例えばオレイン酸エチル中の懸濁液として調製して投与することができる。
組成物は例えば注射用の溶液、水性の懸濁液または溶液、非水性の懸濁液または溶液、固体および液体の経口用製剤、軟膏剤、ゲル、軟膏、皮内パッチ、クリーム、ローション、錠剤、カプセル、持続放出製剤等であることができる。一部の実施形態においては、局所適用のためには、医薬組成物は適当な軟膏中に製剤できる。一部の実施形態においては、局所用の半固体の軟膏製剤は典型的には医薬品用のクリーム基剤のようなキャリア中に約１〜２０％または５〜１０％の活性成分の濃度を含む。局所用組成物の製剤の一部の例は、活性成分および種々の支持体およびベヒクルを含有する滴下剤、チンキ、ローション、クリーム、溶液および軟膏を包含する。
典型的には、組成物は溶液または懸濁液のいずれかとしての注射剤であり；注射前に液体ベヒクル中の溶液または懸濁液とするのに適する固体形態も製造できる。調製物はまたリポソームまたは微粒子、例えばポリラクチド、ポリグリコリドまたは共ポリマー中に乳化またはカプセル化して増強されたアジュバント作用を得ることもできる（Ｌａｎｇｅｒ， Ｓｃｉｅｎｃｅ，１９９０，２４９，１５２７およびＨａｎｅｓ，Ａｄｖａｎｃｅｄ Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ Ｒｅｖｉｅｗｓ，１９９７，２８，９７を参照できる）。滅菌注射用調製物、例えば滅菌された注射用の水性または油性の懸濁液も製造できる。この懸濁液は適当な分散剤、水和剤および懸濁剤を用いながら当該分野で知られた手法に従って製剤してよい。一部の実施形態においては、医薬組成物はタンパク質に対する宿主の免疫応答を低減または防止するためにマイクロカプセル中で送達することができる。
症状を処置するための本発明の組成物の有効用量は、多種類の要因、例えば投与手段、標的部位、被験体の生理学的状況、被験体がヒトか動物か、他の医薬を投与するか、および、投与が予防的または処置的のいずれかであるかにより変動する。通常は被験体はヒトであるが、非ヒト動物、例えばトランスジェニック哺乳類も処置することができる。
抗体を用いた受動免疫のためには、用量範囲は約０．０００１〜１００ｍｇ／ｋｇ、約０．０１〜２００ｍｇ／ｋｇ、または約０．０１〜２０ｍｇ／ｋｇ宿主体重の範囲である。例えば用量は１ｍｇ／ｋｇ体重または１０ｍｇ／ｋｇ体重、または、１〜１０ｍｇ／ｋｇの範囲内、または少なくとも１ｍｇ／ｋｇであることができる。被験体にはこのような用量を毎日、または一日おき、週一回、または経験的に決定されたいずれかの他の日程に従って投与することができる。例示される処置は長期間、例えば少なくとも６ヶ月に渡って複数回の投薬における投与を意図する。別の例示される処置方法は２週に１回、または、一ヶ月１回、または３〜６ヶ月に１回の投与を意図する。例示される投薬日程は、毎日１〜１０ｍｇ／ｋｇまたは１５ｍｇ／ｋｇ、一日おきに３０ｍｇ／ｋｇ、または週当たり６０ｍｇ／ｋｇである。一部の実施形態においては、異なる結合特異性を有する２つ以上の抗体またはそのフラグメントを同時に投与し、その場合、投与される各抗体の用量は記載した範囲内に入るものとする。
抗体は通常は、複数回投与される。各投薬の時間間隔は週、月または年単位であることができる。一部の実施形態においては用量は１〜１０００ｍｇ／ｍｌ、そして一部の方法においては２５〜３００μｇ／ｍｌの血漿中抗体濃度を達成するように調節する。あるいは、抗体は持続放出製剤として投与することができ、その場合より低頻度の投与を要するのみとなる。用量および頻度は被験体における抗体の半減期により変動する。一般的に、ヒト抗体は最も長い半減期を示し、次いでヒト化抗体、キメラ抗体および非ヒト抗体の順に減少する。
用量および投与頻度は処置が予防的であるか処置的であるかにより変動する場合がある。予防的適用の場合、本発明の抗体またはそのカクテルを含有する組成物は被験体の抵抗性を増強するために既に疾患状況にあるわけではない被験体に対して投与される。このような量を「予防有効量」と定義する。この用途においては厳密な量はやはり被験体の健康の状況および全体的免疫性に依存するが、一般的に投薬当たり０．１〜２５ｍｇ、特に投薬当たり０．５〜２．５ｍｇの範囲である。長期間に渡り比較的低頻度の間隔で比較的低用量を投与する。一部の被験体は一生処置を受け続ける。
処置用途の場合は、比較的高用量（例えば投薬当たり約１〜２００ｍｇの抗体、ただし５〜２５ｍｇの用量がより一般的に使用されている）を比較的短い時間間隔で与えることが、疾患の進行を低減または停止させるまで、そして場合により被験体が疾患症状の部分的または完全な緩解を示すまで必要となる場合がある。その後、患者には予防的用法において投与することができる。
一部の実施形態においては、抗体またはそのフラグメント、またはそれを含む組成物は、被験体に対し、注射により、静脈内、皮下、腹腔内、筋肉内、骨髄内、脳室内、硬膜内、動脈内、血管内、関節内、滑膜内、胸骨内、鞘内、肝臓内、脊髄内、腫瘍内、頭蓋内、腸内、肺内、経粘膜、舌下または炎症または腫瘍生育の部位に局所的に、標準的な方法を用いて投与することができる。あるいは、抗体またはそのフラグメントまたはそれを含む組成物は経口、経鼻、眼内、直腸内または局所を包含する経路により被験体に投与できる。タンパク質薬剤の投与の最も典型的な経路は血管内、皮下または筋肉内であるが、他の経路も有効である場合がある。一部の実施形態においては、抗体は持続放出組成物またはＭｅｄｉｐａｄＴＭ装置のような装置として投与される。タンパク質薬剤はまた呼吸管を介して、例えば乾燥粉末吸入装置、ネブライザーまたは計量用量吸入器を用いて投与することもできる。
一部の実施形態においては、抗体またはそのフラグメントは、手術中に直接適用される腐食性のインプラントの蓄積注射のような手段により、または、被験体への注入ポンプまたは生体適合性の持続放出インプラントの移植により、持続放出投与により被験体に投与することができる。あるいは抗体またはそのフラグメントは１、３または６ヶ月の蓄積注射または生体分解性の材料および方法を用いることによる等の注射可能な蓄積投与経路によるか、または、抗体、抗体誘導体または医薬組成物を含有する経皮パッチを被験体の皮膚に適用し、一般的にはパッチ当たり１〜５時間、被験体の皮膚にパッチを接触させたままとすることにより、被験体に投与することができる。
組成物は場合により免疫障害の処置に少なくとも部分的に有効である他の薬剤と組み合わせて投与することができる。一部の実施形態においては、医薬組成物はさらに免疫抑制性または免疫調節性の化合物を含む。例えば、このような免疫抑制性または免疫調節性の化合物は以下のものの１つ、すなわち、ＣＤ２８を介したＴ細胞同時刺激シグナリングを中断させる薬剤；カルシニューリンシグナリングを中断させる薬剤、コルチコステロイド、抗増殖剤、および、例えばＣＤ４５、ＣＤ２、ＩＬ２Ｒ、ＣＤ４、ＣＤ８およびＲＡＮＫＦｃＲ、Ｂ７、ＣＴＬＡ４、ＴＮＦ、ＬＴβおよびＶＬＡ−４を包含する免疫細胞の表面上に発現されるタンパク質に特異的に結合する抗体であってよい。さらにまた、一部の実施形態においては、免疫抑制性または免疫調節性の化合物はタクロリムス、シロリムス、ミコフェノレートモフェチル、ミゾルビン、デオキシスペルグアリン、ブレキナールナトリウム、レフルノミド、ラパマイシンまたはアザスピランである。
本発明はまた本明細書に記載した抗体またはそのフラグメントのいずれかを含むキットを提供する。キットは例えば容器、パッケージまたはディスペンサーをラベルおよび投与または使用の説明書と共に包含することができる。
本発明はまたＣＤ１５４関連のヒトの疾患または障害を処置または防止する方法を提供する。一部の実施形態においては、方法は、ＣＤ１５４関連のヒトの疾患または障害が軽減または防止されるように、本明細書に記載した抗体またはそのフラグメントのいずれか、またはそれを含む組成物の処置または予防有効量をヒトに投与することを含む。本発明の目的のためには、「投与」とは当業者の知る抗体、抗体フラグメントまたは組成物を投与する標準的な方法のいずれかを意味し、本明細書に記載した例に限定されない。
一部の実施形態においては、処置されるべき被験体は本明細書に開示した処置に適する疾患または状態を有することが予め診断されている。このような被験体はすなわち、処置が必要であると診断されている。あるいは、処置は特定の疾患または状態を処置するが、同時に他の未診断の状態も同様に処置することを意図してよい。
疾患または障害に罹患している被験体の処置は標準的な方法を用いてモニタリングできる。一部の方法は例えば、薬剤の用量の投与の前に被験体の抗体のレベルまたはプロファイルのベースライン値を測定すること、および、これを処置後のプロファイルまたはレベルについての値と比較することを包含する。例えば、同じ試料の反復測定における実験誤差の典型的な限度より高値であるような有意な増大がレベルまたはプロファイルの値におけるこのような測定の平均からの１標準偏差として示されれば、正の処置結果（すなわち、薬剤の投与が所望の応答を達成した）の合図である。免疫応答の値が有意に変化しないか、低下した場合は、負の処置結果が示される。
他の実施形態においては、レベルまたはプロファイルの平均および標準偏差のような対照値を対照集団に関して求める。典型的には、対照集団の個体は以前の投与を受けていない。次に治療剤を投与された後の被験体におけるレベルまたはプロファイルの測定値を対照値と比較する。対照値と比較して有意な増大、例えば平均値から１標準偏差より高値であるものは、正または十分な処置結果の合図となる。有意な増大または低下が存在しないことは、負または不十分な処置結果の合図となる。治療剤の投与は一般的に対照値と比較してレベルが増大し続けている間は継続する。以前の通り、対照値と比較して定常状態が達成されれば治療剤投与は中断するか、または用量および／または頻度を低減することができることを示している。
他の実施形態においては、レベルまたはプロファイルの対照値、例えば平均および標準偏差は、治療剤の投与を受けており、そしてそのレベルまたはプロファイルが投与に応答して定常状態となった個体の対照集団から求める。被験体におけるレベルまたはプロファイルの測定された値を対照値と比較する。被験体における測定されたレベルが例えば対照値から有意に、例えば１標準偏差分、異なっていない場合は、処置は中断することができる。被験体におけるレベルが対照値より有意に低値であれば、薬剤の継続投与が補償される。被験体のレベルが対照値より低値に持続していれば、処置の変更が示される場合がある。
他の実施形態においては、現在処置を受けていないが処置過程の前歴のある被験体の抗体のレベルまたはプロファイルをモニタリングすることにより処置の再開が必要であるかどうかを決定する。被験体において測定されたレベルまたはプロファイルを前の処置過程の後に被験体において以前に達成された値と比較することができる。同じ試料の反復測定における誤差の典型的な限度より高値であるような、以前の測定と比較した場合の有意な低下は処置を再開できることを示す。あるいは、被験体において測定された値を処置過程の後の被験体集団において測定された対照値（平均＋標準偏差）と比較できる。あるいは、被験体において測定された値を、症状を有さないままでいる予防的投与被験体集団または疾患の特性の緩解を示している処置的投与被験体の集団における対照値と比較できる。これらの場合の全てにおいて、対照値と比較した場合の有意な低下、例えば標準偏差分を超えるものは、被験体において処置を再開するべきであることを示している。
投与後の抗体プロファイルは典型的には抗体濃度の急速なピーク値の出現とその後の指数的減衰を示す。さらに投薬を行わない場合は、減衰は投与された抗体の半減期に応じて数日〜数ヶ月の期間内に投与前のレベルに近づく。一部のヒト抗体の半減期の例は２０日のオーダーである。
一部の方法においては、被験体におけるある抗原に対する抗体のベースライン測定を投与前に行い、その後直ぐに第２の測定を行なうことによりピーク抗体レベルを測定し、そしてさらに１回以上の測定を間隔を置いて行うことにより抗体の減衰をモニタリングする。抗体のレベルがベースラインまたはベースラインを差し引いたピークの所定のパーセンテージ、例えば５０％、２５％または１０％にまで減少した時点で、抗体の追加投薬を行う。一部の実施形態においては、ピーク、およびその後に測定された、バックグラウンドを差し引いたレベルを前に測定された比較対照レベルと比較することにより他の被験体における有益な予防的または処置的な投与の様式を構成する。測定された抗体レベルが比較対照レベルより有意に低値、例えば処置から利益を得る被験体の集団における比較対照値の標準偏差を平均値から差し引いたものより低値であれば、抗体の追加投与が指示される。
別の実施形態は、障害の診断またはモニタリングのために研究者または医師が日常的に参考にしているいずれかの当該分野で認知された生理学的症状、例えば身体的または精神的な症状を処置の過程に渡ってモニタリングすることを包含する。
一部の実施形態においては、本明細書に開示した抗体またはそのフラグメントまたはそれを含む医薬組成物は被験体における免疫応答を抑制することができる。抗体、抗体誘導体または医薬組成物は有効抑制量において被験体に投与する。抗体、抗体誘導体、例えばＣＤ１５４結合フラグメントまたは医薬組成物の「有効抑制量」とは、それが投与される被験体においてＣＤ１５４−ＣＤ４０相互作用を抑制するために有効である任意の量である。「抑制量」を決定する方法は当該分野でよく知られており、例えば被験体が関与している型、被験体の体格および送達される治療剤を包含する要因により変動する。
特定の実施形態においては、抗ＣＤ１５４抗体、抗体誘導体または抗体または抗体誘導体を含む医薬組成物はＣＤ１５４分子に結合することができる。別の実施形態においては、抗ＣＤ１５４抗体、抗体誘導体または抗体または抗体誘導体を含む医薬組成物はＣＤ１５４−ＣＤ４０相互作用を抑制することにより免疫応答を抑制することができる。
一部の実施形態においては抗ＣＤ１５４抗体、抗体誘導体または抗体または抗体誘導体を含む医薬組成物は炎症を抑制することができる。本発明の目的のためには、炎症応答は、浮腫および貪食性白血球遊走を伴う毛細管拡張の結果としての赤熱、腫脹、灼熱感と疼痛を特徴とする。炎症応答の一部の例は関節炎、接触性皮膚炎、高ＩｇＥ症候群、炎症性腸疾患、アレルギー性喘息および特発性炎症疾患を包含する。関節炎の一部の例は慢性関節リウマチ、非リウマチ炎症性関節炎、ライム病に関連する関節炎および炎症性変形性関節症を包含する。特発性炎症性疾患の一部の例は乾癬および全身エリテマトーデスを包含する。本明細書に開示した化合物および／または組成物を用いて処置することができる別の疾患、障害および状態は例えばアテローム性動脈硬化症、重症筋無力症、グレーブス病、特発性血小板減少性紫斑病、溶血性貧血、真性糖尿病、クローン病、多発性硬化症および薬物誘発性自己免疫疾患、例えば薬物誘発性狼瘡を包含する。
一部の実施形態においては、化合物および組成物は移植された器官、例えば移植された心臓、腎臓、肝臓、皮膚、膵島細胞および骨髄の被験体による拒絶を抑制するために使用できる。別の実施形態においては、化合物および組成物は移植片対宿主病、アレルギー性応答、例えば枯草熱またはペニシリンまたは他の薬剤に対するアレルギー、感染性疾患から誘導される自己免疫応答に罹患した被験体における自己免疫応答を抑制するため、または被験体における線維症を抑制するために使用できる。線維症の例は肺線維症および線維性疾患を包含する。肺線維症の例は、成人呼吸促進症候群に続発性の肺線維症、薬物誘発性肺線維症、特発性肺線維症または過敏性肺炎を包含する。線維性疾患の例はＣ型肝炎、Ｂ型肝炎、肝硬変、毒性傷害に続発性の肝硬変、薬物に続発性の肝硬変、ウイルス感染に続発性の肝硬変および自己免疫疾患に続発性の肝硬変を包含する。
一部の実施形態においては、化合物および組成物は例えばライター症候群、脊椎関節炎、ライム病、ＨＩＶ感染、梅毒および結核から誘導される自己免疫応答に罹患した被験体における自己免疫応答を抑制することができる。
一部の実施形態においては、化合物および組成物は胃腸疾患、例えば食道運動障害、炎症性腸疾患および強皮症を抑制することができる。あるいは、化合物および組成物は脈管疾患、例えばアテローム性動脈硬化症および再灌流傷害を抑制できる。
一部の実施形態においては、化合物および組成物はＴ細胞癌、例えばＴ細胞白血病およびリンパ腫に罹患した被験体におけるＴ細胞の腫瘍細胞の増殖を抑制できる。あるいは化合物および組成物はＨＴＬＶＩウイルスによる被験体のＴ細胞のウイルス感染を抑制できる。
一部の実施形態においては化合物および組成物はｈｕ５ｃ８により特異的に認識されるタンパク質を発現する被験体における腫瘍細胞または新生物性の細胞を画像化するために使用できる。被験体における腫瘍細胞または新生物性の細胞を画像化するための１つの方法は、抗体または抗体フラグメントと腫瘍細胞または新生物性の細胞の表面上のタンパク質との間の複合体の形成を可能とする条件下に抗体またはそのフラグメントまたはそれを含む組成物の有効量を被験体に投与すること、および、形成したいずれかの抗体／タンパク質複合体または抗体フラグメント／複合体を画像化することにより被験体内のいずれかの腫瘍細胞または新生物性の細胞を画像化することを含む。
一部の実施形態においては、化合物および組成物はｈｕ５ｃ８により特異的に認識されるタンパク質を発現する被験体における腫瘍細胞または新生物性の存在を検出するために使用できる。被験体における腫瘍細胞または新生物性の存在を検出するための１つの方法は、抗体または抗体フラグメントとタンパク質との間の複合体の形成を可能にする条件下に抗体または抗体フラグメントまたはそれを含む組成物の有効量を被験体に投与すること、被験体から未結合の画像化剤を浄化すること、および、形成された抗体／タンパク質複合体または抗体フラグメント／複合体の存在を検出することを含み、このような複合体の存在は被験体内の腫瘍細胞または新生物性の細胞の存在を示す。
抗体またはそのフラグメントおよびそれを含む組成物は、処置の１日において投与される外来性抗原のような短時間に被験体が曝露される抗原に対する免疫応答を防止することのような特定の適応症のための単回用量として投与できる。このような処置の例は、治療剤、例えば抗原性医薬品、アレルゲンまたは血液製剤または遺伝子療法ベクターと共に本発明の抗体または抗体誘導体を同時投与することを包含する。移植された組織に対する、または、長期的に投与される抗原性医薬品に対する免疫反応を制御する場合のように抗原が長期的に存在する適応症においては、本発明の抗体、抗体誘導体または医薬組成物は、数日から数週間、乃至は被験体の生涯に渡る医療上指示される程度の長期間に渡って間隔を置いて投与される。
一部の実施形態においては上記した方法により処置できる被験体は動物、例えば哺乳類、例えばヒト、非ヒト霊長類、げっ歯類（ラット、マウス、ハムスターおよびモルモットを包含する）、ウシ、ウマ、ヒツジ、ヤギ、ブタ、イヌおよびネコである。大部分の例においては、哺乳類はヒトである。
本発明はまたＣＤ１５４に関連するヒトの疾患または障害を処置するために本明細書に記載したペプチドまたはそのフラグメント、または抗体またはそのフラグメントのいずれかの使用を提供する。
本発明はまたＣＤ１５４に関連するヒトの疾患または障害の処置のための医薬の製造における本明細書に記載したペプチドまたはそのフラグメント、または抗体またはそのフラグメントのいずれかの使用を提供する。
本明細書に開示した実施形態は以下の実施例に基づいてより良好に理解される。しかしながら、考察する特定の方法および結果は後に記載する本発明の実施形態においてより詳細に説明されている通り本発明を説明しているに過ぎないことは当業者の知る通りである。
出願を通じてカッコ内において種々の公開物および参考文献を参照している。これ等の公開物および参考文献の開示内容は、その全体において、本発明が関わる技術の現況をより詳細に説明するために本出願に参照により組み込まれる。材料、方法および実施例は説明的なものに過ぎず、限定する意図はない。
当業者の知る組み換えＤＮＡ技術の一般的原則を説明している標準的な参考研究は、Ａｕｓｕｂｅｌ ｅｔ ａｌ．，Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ Ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ， Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ＆ Ｓｏｎｓ， Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ （１９８８ ａｎｄ Ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔ ｔｏ ２００１）；Ｓａｍｂｒｏｏｋ ｅｔ ａｌ．，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ， ２ｄ Ｅｄ．， Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ， Ｐｌａｉｎｖｉｅｗ， Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ（１９８９）；Ｋａｕｆｍａｎ ｅｔ ａｌ．，Ｅｄｓ．，Ｈａｎｄｂｏｏｋ Ｏｆ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ａｎｄ Ｃｅｌｌｕｌａｒ Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｉｎ Ｂｉｏｌｏｇｙ Ａｎｄ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ， ＣＲＣ Ｐｒｅｓｓ， Ｂｏｃａ Ｒａｔｏｎ（１９９５）；ＭｃＰｈｅｒｓｏｎ， Ｅｄ．，Ｄｉｒｅｃｔｅｄ Ｍｕｔａｇｅｎｅｓｉｓ：Ａ Ｐｒａｃｔｉｃａｌ Ａｐｐｒｏａｃｈ， ＩＲＬ Ｐｒｅｓｓ， Ｏｘｆｏｒｄ（１９９１）を包含する。
当業者の知る免疫学の一般的原則を説明している標準的な参考研究は、Ｈａｒｌｏｗ ａｎｄ Ｌａｎｅ， Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ，２ｄ Ｅｄ．， Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ， Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ， Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ（１９９９）；およびＲｏｉｔｔ ｅｔ ａｌ．，Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ， ３ｄ Ｅｄ．， Ｍｏｓｂｙ−Ｙｅａｒ Ｂｏｏｋ Ｅｕｒｏｐｅ Ｌｉｍｉｔｅｄ， Ｌｏｎｄｏｎ（１９９３）を包含する。当業者の知る医学的生理学および薬理学の一般的原則を説明している標準的な参考研究は、Ｆａｕｃｉ ｅｔ ａｌ．，Ｅｄｓ／．Ｈａｒｒｉｓｏｎ’ｓ Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ Ｏｆ Ｉｎｔｅｒｎａｌ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ， １４ｔｈ Ｅｄ．，ＭｃＧｒａｗ−Ｈｉｌｌ Ｃｏｍｐａｎｉｅｓ， Ｉｎｃ．（１９９８）を包含する。
実施例を通して、特段の記載が無い限り、以下の材料および方法を用いた。以下の実施例は本発明の方法および生成物を説明するものである。当業者の知る分子生物学で通常遭遇する記載した条件およびパラメーターの適当な変更および適合は本発明の精神および範囲に包含される。
一般的に本発明の実施では特段の記載が無い限り、化学、分子生物学、組み換えＤＮＡ技術、免疫学（特に例えば抗体技術）および電気泳動における標準的な手法を用いる。例えばＳａｍｂｒｏｏｋ， Ｆｒｉｔｓｃｈ ａｎｄ Ｍａｎｉａｔｉｓ， Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ（１９８９）；Ａｎｔｉｂｏｄｙ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ （Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ），５１０，Ｐａｕｌ，Ｓ．，Ｈｕｍａｎａ Ｐｒ（１９９６）；Ａｎｔｉｂｏｄｙ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ：Ａ Ｐｒａｃｔｉｃａｌ Ａｐｐｒｏａｃｈ （Ｐｒａｃｔｉｃａｌ Ａｐｐｒｏａｃｈ Ｓｅｒｉｅｓ， １６９）， ＭｃＣａｆｆｅｒｔｙ， Ｅｄ．，Ｉｒｌ Ｐｒ（１９９６）；Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ，
Ｈａｒｌｏｗ ｅｔ ａｌ．，Ｃ．Ｓ．Ｈ．Ｌ．Ｐｒｅｓｓ， Ｐｕｂ．（１９９９）；およびＣｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，ｅｄｓ．Ａｕｓｕｂｅｌ ｅｔ ａｌ．，Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ（１９９２）を参照できる。
（実施例１：抗体設計）
本明細書に記載した方法を用いて至適化された抗体（またはその抗原結合フラグメント）を得たが、当業者の知る他の方法も制限無く使用できる。コンピューター分析に基づき、所定の抗体内において、至適化された抗体−抗原複合体内の電荷分布と元の抗体−抗原複合体内のそれとの間に差（差が大きいほど、有意性が高値である）が有る位置を発見することができる。このような電荷分布の差はまた溶媒中で抗原に結合した場合の抗体の結合自由エネルギーの変化にも関連する。次にそのような位置におけるアミノ酸残基を、元の抗体の静電気力が至適化抗体におけるものにより近似する（または別の実施形態においてはより発散した形態となる）ように変化させることにより、溶媒中で抗原に結合した場合の抗体の結合自由エネルギーを調節することができる。抗体に対する変化の導入は本明細書に記載した、そして、参照により本明細書に組み込まれる国際出願ＰＣＴ／ＵＳ０４／２４２００に記載された一連の個別の基準または規則に従う。
（１．向上した機能のために抗体を修飾する場合の規則）
抗体を修飾する場合の規則は以下の通り適用した。抗体の抗原結合親和性を、例えばその結合を向上または復活させるために調節するには、基本的な配列および／または構造のデータをまず獲得する。静電的電荷至適化の手法を次に適用することにより向上した親和性の変異体を示唆した。典型的には、静電的電荷至適化をまず用いて結合のためには至適未満であるＣＤＲ残基の位置を決定した（Ｌｅｅ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｃｈｅｍ．Ｐｈｙｓ．，１９９７，１０６，８６８１−８６９０；Ｋａｎｇａｓ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｃｈｅｍ．Ｐｈｙｓ．，１９９８，１０９，７５２２−７５４５）。次に１つ以上のＣＤＲ変異（すなわち、修飾）をさらにコンピューター分析に付す。これらの計算に基づいて、次に、本発明の規則にしたがって１つ以上の修飾を有する修飾された抗体のサブセットについて結合親和性を測定した。
連続体静電気モデルを用いて、静電的電荷至適化を抗体ＣＤＲのアミノ酸の各側鎖に対して実施した。電荷至適化は原子の中心における電荷を与えるが、実際の変異を常時もたらすわけではない。従って、電荷至適化の過程は目的の位置における天然の側鎖の特性を示すように強いる種々の制約事項と共に実施した。例えば至適化は、実質側鎖電荷−１、０および＋１について、原子の電荷が特定の値、例えば０．８５電子の電荷単位を超えないという追加の制約事項と共に実施した。次に、候補のアミノ酸側鎖位置およびそれらの位置における残基の修飾を、至適化において観察された静電的結合自由エネルギーの潜在的獲得に基づいて測定した。
ネイティブの残基から完全に非荷電の側鎖同配体、例えば同じ形状を有するが原子上に電荷を有さないか、または部分的に電荷を有するものへの移行における結合自由エネルギーの差（ｋｃａｌ／ｍｏｌ）を計算した。負の数は結合親和性の予測増大を示す。実質側鎖電荷が＋１、０および−１である至適電荷分布を用いて結合自由エネルギーの差を計算した。
結合自由エネルギーの差が望ましく（ΔＧ＜−０．２５ｋｃａｌ／ｍｏｌ）、そしてネイティブの残基から完全非荷電側鎖同配体、例えば同じ形状を有するが原子上に電荷を有さないか、または部分的に電荷を有する残基への変遷を伴っている場合、非極性側鎖を有するアミノ酸、例えばＡｌａ、Ｃｙｓ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｖａｌのセットからの修飾を選択した。
側鎖における至適電荷分布および−１の実質側鎖電荷から得ることができる結合自由エネルギーの差が良好である（ΔＧ＜−０．２５ｋｃａｌ／ｍｏｌ）場合には、負荷電の側鎖を有するアミノ酸、例えばＡｓｐ、Ｇｌｕのセットからの修飾を選択した。
同様に、側鎖における至適電荷分布および＋１の実質側鎖電荷から得ることができる結合自由エネルギーの差が良好である（ΔＧ＜−０．２５ｋｃａｌ／ｍｏｌ）場合には、正荷電の側鎖を有するアミノ酸、例えばＡｒｇ、Ｈｉｓ、Ｌｙｓのセットからの修飾を選択した。
最後に、側鎖における至適電荷分布および０の実質側鎖電荷から得ることができる結合自由エネルギーの差が良好である（ΔＧ＜−０．２５ｋｃａｌ／ｍｏｌ）場合は、非荷電の極性の側鎖を有するアミノ酸、例えばＡｓｎ、Ｃｙｓ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、ＴｙｒにＣｙｓ、Ｇｌｙ、ＭｅｔおよびＰｈｅが付加されたもののセットからの修飾を選択した。
本明細書に記載したとおり、設計された修飾抗体をインシリコで構築し、そして結合エネルギーを再計算した。修飾された側鎖は、各側鎖につき最も望ましい位置を決定するための６０度の二面角増分を用いてＣＨＡＲＭＭにおけるロータマー二面角スキャンを実施することにより構築した。次に結合エネルギーを野生型（親）および変異体（修飾）の複合体につき、ポアソン−ボルツマンの静電エネルギーおよびファンデルワールスエネルギーおよび埋没表面積に関する別の項を用いながら計算した。
次にこれ等のコンピューター変法による計算の結果を例えばインシリコまたは別の実験的構造／機能データに基づいた方法の次回反復の後に必要に応じて再評価した。
規則は以下の通り分類できる幾つかの予測を可能にする。
１）結合により部分的に埋没する抗体上の残基の関与する相互作用界面における修飾（相互作用は抗原との水素結合を作成することにより向上する）；
２）結合により埋没するため脱溶媒のペナルティーを支払うが抗原とは直接の静電的相互作用を示さない抗体上の極性残基の修飾（野生型残基と同様の形状を有する疎水性の残基を修飾することによるか、または、良好な静電的相互作用を示すことができる残基を負荷することにより、通常は向上がもたらされる）；および、
３）非相補性の電位の領域にある抗体上の表面残基の修飾。これ等の修飾は結合界面における充填相互作用を混乱させることなく抗体と抗原の間の長距離の静電的相互作用を向上させると考えられる。
第１の型の修飾は、これ等の残基が抗原の充足していない水素パートナーとの水素結合を本質的に作ることから、基本的な物理／化学の問題を精査することにより求められる。他の方法とは異なり、本発明の規則は脱溶媒のコストが有益な相互作用エネルギーを相殺できるようにする意外な残基修飾を可能にしている。
第２の型の修飾は、獲得エネルギーが主に良好ではない脱溶媒を排除しつつ非極性の相互作用を維持する結果であることから、さらに別のセットの修飾を示している。
第３の型の修飾は、親和性における有意な獲得の可能性を示す長距離の相互作用に関わる。これらの型の修飾は、それらが抗原との直接の接触を行わないため、抗体−抗原界面における繊細な相互作用における混乱を小さくするため、特に興味深いものである。
従って、所望の側鎖の化学的特徴を規則に従いながら候補アミノ酸位置について求められた場合には、残基の位置は例えば本明細書にさらに説明する通り、置換、挿入または欠失により修飾または改変した。
抗体修飾に関する上記規則のほかに、特定の決定事項、例えば溶媒の作用も、至適電荷分布の初回（およびその後の）計算の因数に組み入れることができる。
（２．抗体またはその抗原結合フラグメントの取得）
天然に存在しない抗体（またはその抗原結合フラグメント）を作成することを目標とした本発明の方法は、必須ではないが、抗体を取得することから始まる。その抗体は本明細書においては「親」抗体、または場合により「第１」抗体と称し、そして、それを用いることにより、その抗体内（例えば親抗体内）または親抗体の配列と同様であるかその一部を含有する配列を有する修飾または改変された抗体内のいずれかでアミノ酸残基１つ以上を修飾または改変することが可能となるような情報を得ることができる。本明細書に記載する通り、例えば親抗体のＣＤＲ（またはその部分）の１つ以上を標準的な遺伝子操作手法により修飾された抗体の相当するＣＤＲと置き換えることにより、いわゆるＣＤＲ移植または移植物を達成した。従って、哺乳類のモノクローナルまたはポリクローナル抗体（例えばネズミまたは霊長類）、キメラ、ＣＤＲ移植、ヒト化またはヒトの抗体を用いて方法を開始した。
親抗体は当該分野で認知されている入手元から得るか、または、当該分野で認知されている技術に従って作成した。例えば親抗体は別の原料または種、例えばネズミから誘導されたＣＤＲ領域を有するＣＤＲ移植またはヒト化抗体であった。
本発明の親抗体またはいずれかの修飾された抗体はまたモノクローナル抗体の様式であることができる。モノクローナル抗体を作成するための方法は当該分野で知られているもの（例えばＫｏｈｌｅｒ ａｎｄ Ｍｉｌｓｔｅｉｎ，Ｎａｔｕｒｅ， １９７５，２５６，４９５−４９７参照）並びにミエローマ細胞内に免疫グロブリンコードＤＮＡを安定に導入するための手法（例えばＯｉ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，１９８３，８０，８２５−８２９；Ｎｅｕｂｅｒｇｅｒ，ＥＭＢＯ Ｊ．，１９８３，２，１３７３−１３７８；およびＯｃｈｉ ｅｔ ａｌ．， Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，１９８３，８０，６３５１−６３５５参照）である。これ等の手法は、インビトロ変異誘発およびＤＮＡトランスフェクションを含んでおり、組み換え免疫グロブリンの構築を可能にし；これ等の手法を用いて本発明の方法において使用される親および修飾抗体を製造、またはこれ等の方法から得られる修飾抗体を製造することができる。あるいは、親抗体を市販品の供給元から入手することができる。抗体フラグメント（ｓｃＦｖおよびＦａｂ）はまたＥ．ｃｏｌｉから製造することもできる（製造方法および細胞の宿主はさらに後に記載する）。
親抗体はＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧまたはＩｇＭのクラスの抗体であることができる。
上記した通り、本発明の方法は４量体抗体のみ以外にも適用できる（例えばＧクラスの免疫グロブリン（ＩｇＧ）の構造を有する抗体）。例えば抗体を修飾する方法はいずれかの抗体の抗原結合フラグメントを用いても同様に実施できる。フラグメントは組み換え的に製造することができ、そして、タンパク質分解酵素で抗体を消化することにより、操作、合成または製造することができる。例えば、フラグメントはＦａｂフラグメントであることができ；パパインで消化することにより、２つの重鎖を連結している、鎖間（例えばＶＨ−ＶＨなど）ジスルフィド結合の前の領域において抗体を切断する。これにより軽鎖および重鎖のＶＨおよびＣＨ１のドメインを含有する２つの同一のフラグメントが形成される。あるいは、フラグメントはＦ（ａｂ’）２フラグメントであることができる。これ等のフラグメントは鎖間ジスルフィド結合の後の重鎖を切断し、両方の抗原結合部位を含有するフラグメントをもたらすペプシンで抗体を消化することにより作成できる。さらに代替法としては「１本鎖」抗体を使用することである。１本鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）フラグメントは種々の方法で構築できる。例えばＶＨ鎖のＣ末端をＶＬ鎖のＮ末端に連結することができる。典型的には、リンカー（例えば（ＧＧＧＧＳ）４）をＶＨとＶＬの間に入れる。しかしながら、鎖を連結できる順番は反転させることができ、そして検出または精製を容易にするタグ（例えばＭｙｃ−、Ｈｉｓ−、またはＦＬＡＧ−タグ）を含ませることができる（これ等のようなタグは本発明のいずれかの抗体または抗体フラグメントに付随させることができ；それらの使用はｓｃＦｖに限定されない）。従って、後述する通り、タグ付けされた抗体は本発明の範囲に包含される。別の実施形態においては、本明細書に記載した方法において使用される、またはそれらの方法により作成された抗体は、重鎖２量体または軽鎖２量体であることができる。さらにまた、抗体の軽鎖または重鎖またはその部分、例えば単一ドメイン抗体（ＤＡｂ）を使用することができる。
本発明の方法は反復可能であるため、親抗体は天然に存在する抗体でなくてもよい。抗体を修飾する方法は必要な限り多数回反復できるため、原料抗体（またはその抗原結合フラグメント）は完全に非ヒトであるか、または、ヒトＦＲおよび非ヒト（例えばネズミ）ＣＤＲを含有する抗体であることができる。すなわち、「親」抗体は親和性を向上させるために本発明の方法に付されるＣＤＲ移植抗体、例えば親和性成熟抗体であることができる。上記した通り、親和性は、単に、それが天然に存在するヒト抗体（ＦＲドナー）のその抗原に対する親和性と概ね同様となる（または有意に不良とはならない）程度まで向上させられ得る。すなわち、「親」抗体はむしろ、修飾の１回以上のより初期のラウンドにより作成された抗体、例えば１種より多い配列（例えばヒトのＦＲおよび非ヒトのＣＤＲ）を含有する抗体であってよい。本発明の方法は１つ以上の非ヒト（例えばネズミ）由来のＣＤＲおよびヒト抗体のＦＲを含む「親」抗体の使用を包含する。あるいは、親抗体は完全にヒトのものであることもできる。
構造が入手可能であれば、当然ながら、（それを再度作成するのではなく）その構造からコンピューター分析を開始してよい。
（３．抗体−抗原の構造データの情報に基づく本発明の方法）
タンパク質は、そのアミノ酸の配列により、そして所定のタンパク質（またはタンパク質含有複合体）が提供される溶媒により決定される３次元構造に折りたたまれることが解っている。タンパク質の３次元構造はその生物学的活性および安定性に影響し、その構造は多くの方法において決定または予測することができる。一般的に、経験的な方法は物理的生化学的分析を使用する。あるいは、３次構造は既知３次元構造を有する１つ以上の相同タンパク質（またはタンパク質複合体）の３次元構造のモデル構築を用いて予測することができる。Ｘ線結晶分析はおそらくはタンパク質構造を決定する最良の既知方法（従って、「結晶構造」という用語は「構造」という用語の代わりに用いてよい）であるが、推定はまた円偏光二色性、光散乱を用いて、または、放射エネルギーの吸収および発光を測定することにより行うこともできる。他の有用な手法は中性子回折および核磁気共鳴（ＮＭＲ）を包含する。これ等の方法の全ては当該分野でよく知られており、そして標準的なテキストブック（例えばＰｈｙｓｉｃａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ， ４ｔｈ Ｅｄ．，Ｗ．Ｊ．Ｍｏｏｒｅ，Ｐｒｅｎｔｉｓｓ−Ｈａｌｌ，Ｎ．Ｊ．，１９７２またはＰｈｙｓｉｃａｌ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，Ｋ．Ｅ．Ｖａｎ Ｈｏｌｄｅ，Ｐｒｅｎｔｉｓｓ−Ｈａｌｌ，Ｎ．Ｊ．，１９７１））および多くの公開物において十分説明されている。これ等の手法のいずれかを実施することにより抗体または抗体−抗原含有複合体の構造を決定することができ、次にこれを本発明の方法に従って分析し、そして例えば本発明の方法の１つ以上の工程に情報提供することができる。
同様にこれ等および類似の方法は例えば単鎖抗体、Ｆａｂフラグメント等からなるフラグメントを含む抗体フラグメントに結合した抗原の構造を得るために使用できる。抗体、抗体フラグメントまたはｓｃＦｖ−抗原複合体の結晶を形成するための方法は例えばｖａｎ ｄｅｎ Ｅｌｓｅｎ ｅｔ ａｌ．（参照により本明細書に組み込まれるＰｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，１９９９，９６，１３６７９−１３６８４）により報告されている。
（４．コンピューター分析）
本発明の方法を実施する際に使用される基本的なコンピューター方式は例えば参考として全体が本明細書中で援用される米国特許第６，２３０，１０２号に記載されている。
上記した通り、好ましくは本明細書に記載した個別の基準または規則に従って、抗体とそれが結合する抗原との間の静電気力のコンピューター分析の結果に応じて抗体を改変（または「修飾」）する。コンピューター分析は抗体内の至適電荷分布を予測可能とし、そして、コンピューターシステムにおいて電荷分布を示す１つの方法は多重極のセットとして示すことである。あるいは、電荷分布は抗体の原子の位置に存在する点電荷のセットにより表すことができる。電荷分布（好ましくは至適電荷分布）を求めた後、電荷分布に合致、またはより高度に合致するように抗体を調節することができる。
コンピューター分析は米国特許第６，２３０，１０２号に記載された計算を実施するコンピューター実行プロセスにより媒介してよい。コンピュータープログラムは本明細書においては抗原−抗体結合の現実の状況を考慮するように適合させる（そして他の方法とは異なり、本発明の方法は、溶媒中の抗体とその抗原の間の結合における例えば溶媒、長距離の静電気、および誘電効果を考慮する）。プロセスは、成熟した抗体とその抗原の間の結合自由エネルギーへの静電気の寄与を、未修飾の（「原料」または「親」）抗体のものと比較して最小限にする「成熟した」抗体上への電荷分布を達成する。典型通り、本明細書に記載したオペレーションを実施するコンピューターシステム（またはデバイス）（およびより詳細には米国特許第６，２３０，１０２号）はユーザーに情報をディスプレイするアウトプットデバイスを含む（例えばＣＲＴディスプレイ、ＬＣＤ、プリンター、通信デバイス、例えばモデム、オーディオアウトプット等）。さらにまた、部分的または全体的に方法を実施するための説明書を、説明書を実施するための電子デバイス内における使用に適する媒体に付与することができる。すなわち、本発明の方法はソフトウエア（例えばコンピューターリーダブルの説明書）およびハードウエア（例えばコンピューター、ロボットおよびチップ）を含む高スループットの方法に改良することができる。コンピューター実行プロセスは特定のコンピュータープラットホーム、特定のプロセッサ、または特定のハイレベルなプログラミング言語に限定されない。
有用なプロセスは例えば米国特許第６，２３０，１０２号に記載されており、そしてより詳細な解説は例えばＬｅｅ ａｎｄ Ｔｉｄｏｒ（Ｊ．Ｃｈｅｍ．Ｐｈｙｓ．，１９９７，１０６，８６８１−８６９０）に記載されており、これ等はともに参照により本明細書に組み込まれる。
（５．構造に基づくコンピューター設計方法）
抗体のその抗原への親和性を向上させるための例示される方法は構造に基づくコンピューター設計方法である。このような方法の１つはデッドエンド排除アルゴリズムを用いた側鎖リパッキングとして知られている（例えばＬａｓｔｅｒｓ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｅｎｇ．，８，８１５−２２；Ｌｏｏｇｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，３０７，４２９−４５；Ｄａｈｉｙａｔ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｓｃｉ．，５，８９５−９０３参照）。このような計算において、抗体残基は２０個の天然に存在するアミノ酸のいずれかにコンピューター処理により同時に変異され、そして、得られた変異体の親和性もコンピューター処理により評価する。コンピューター処理により作成された変異体のリストは変異体の計算された安定性により分類することができ、これにより、実験的に発現されることになる変異体のリストが作成される。計算においては、タンパク質骨格の可撓性は殆ど、または全く許されず、これにより設計された変異体が所定のＣＤＲコンフォメーションと共に安定であること予測されることを確保する。すなわち、コンピューター分析によりその抗原への親和性を増強する抗体の変異を予測することが可能となる。
（６．抗体およびその抗原結合フラグメントの作成）
抗体、例えばキメラ、ヒト化、モノクローナルおよび単鎖抗体の選択、クローニングおよび製造は当該分野でよく知られている。さらにまた、ｈｕ５ｃ８ｍＡｂのヒト化は以前に報告されている（Ｌｅｄｅｒｍａｎ Ｓ ｅｔ ａｌ．，Ｊ Ｅｘｐ Ｍｅｄ．１９９２，Ａｐｒ １；１７５（４）：１０９１−１０１およびＫａｒｐｕｓａｓ Ｍ ｅｔ ａｌ， Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ（Ｃａｍｂ）．２００１ Ａｐｒ ４；９（４）：３２１−９をそれぞれ参照できる）。この抗体はＡＴＣＣ（ＰＴＡ−４９３１）より入手可能である。５ｃ８抗体はＮＳ０ミエローマ細胞中で安定に発現され、そしてプロテインＡおよびゲル濾過クロマトグラフィーにより精製した。ＳＤＳ−ＰＡＧＥおよび分析用ゲル濾過クロマトグラフィーによればタンパク質は期待されたジスルフィド結合４量体を形成していたことが解った。本発明の単鎖抗体は典型的にはＥ．ｃｏｌｉ中で発現させ、標準的手法を用いて免疫精製した。
（７．５ｃ８Ｆａｂの製造）
二重シストロンプラスミドｐＢＥＦ０６４により５ｃ８Ｆａｂを発現させた。第１のシストロンは１１８アミノ酸重鎖可変領域をコードする５ｃ８重鎖の３５４ヌクレオチドとそれにインフレームで続くヒトＩｇＧ１定常ドメインの最初の１０２アミノ酸をコードする３０６ヌクレオチドおよび６ヒスチジンタグをコードする１８ヌクレオチドを含有している。第２のリボソーム進入部位は重鎖シストロンの末端の７ヌクレオチド後に位置している。第２のシストロンは１１１アミノ酸５ｃ８軽鎖可変領域をコードする３３３ヌクレオチドとそれにインフレームで続く１０７アミノ酸軽鎖定常ドメインをコードする３２１ヌクレオチドを含有している。発現はＥ．ｃｏｌｉ中で行い、ａｒａ−ＢＡＤプロモーターにより駆動し、そして重鎖および軽鎖はＯｍｐＡ（重鎖）およびＰｈｏＡ（軽鎖）ペリプラズム局在シグナルによりペリプラズム空間に指向させる。ペリプラズム局在シグナルはペリプラズム移出の間にタンパク質から切断された。
（８．結合試験）
結合試験は典型的にはＫｉｎＥｘＡＴＭキットを用いて実施した。試験はキット内に与えられたカラムに抗体（または抗原結合フラグメント）の希釈溶液を通過させることにより実施し、そして、抗体（またはその抗原結合フラグメント）の一部がビーズ上の抗原と相互作用する。次に抗体（またはそのフラグメント）を、蛍光染料Ｃｙ５と結合体化した二次抗ヒトＩｇＧ重鎖および軽鎖抗体によって検出した（Ｊａｃｋｓｏｎ ＩｍｍｕｎｏＲｅｓｅａｒｃｈ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｉｎｃ．，ＷｅｓｔＧｒｏｖｅ，ＰＡ）。蛍光染料からのシグナルがタンパク質濃度に比例するように抗体（またはそのフラグメント）の濃度を設定した。相互作用の溶液相の親和性を得るために、抗体（またはそのフラグメント）を可溶性抗原の連続希釈物と混合した。これ等のタンパク質（抗体および抗原）を室温における３時間インキュベーションまたは４℃における一夜インキュベーションの間に平衡に達するようにした。混合物を抗原含有カラム上に流し、そしてシグナルは溶液中に残存する未結合の抗体（または抗体フラグメント）の量に比例していた。得られたデータを直線−対数グラフ用紙にプロットし、そしてＫＤの値を与える非直線回帰による二次曲線にフィットさせた。
（９．５ｃ８−ＣＤ１５４結合試験）
ＥＬＩＳＡ系の競合的結合試験を実施した。抗ｃ−ｍｙｃｍＡｂを室温で２時間ＰＢＳ中１０μｇ／ｍｌでＮＵＮＣＭａｘｉｓｏｒｂプレート上にコーティングした。未標識の５ｃ８Ｆａｂ（変異体または野生型）の連続希釈物を作成し、等容量の固定濃度（３０ｎｇ／ｍｌ）のビオチン標識５ｃ８Ｆａｂ競合体と混合し、プレートに添加した。室温で２時間インキュベートした後、プレートを洗浄し、結合したビオチン標識５ｃ８Ｆａｂ競合体をストレプトアビジン−ＨＲＰで検出した。結合親和性は４パラメーター曲線フィットにより求めた。
（実施例２：抗体）
（１．抗体の作成）
ｈｕ５ｃ８ｍＡｂの選択、クローニングおよびヒト化は以前に報告されている。Ｌｅｄｅｒｍａ Ｓ ｅｔ ａｌ．，Ｊ Ｅｘｐ Ｍｅｄ．１９９２，Ａｐｒ １；１７５（４）：１０９１−１０１およびＫａｒｐｕｓａｓ Ｍ ｅｔ ａｌ， Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ（Ｃａｍｂ）．２００１ Ａｐｒ ４；９（４）：３２１−９をそれぞれ参照できる。ｈｕ５ｃ８ｍＡｂハイブリドーマはＡＴＣＣ（ＨＢ１０９１６）により入手可能である。
（２．ＣＤ１５４結合試験）
ＦＡＣＳ系の競合的結合試験をＡＴＣＣ（ＣＲＬ−１０９１５）より入手可能なｈｕＣＤ１５４＋Ｄ１．１細胞において実施した。細胞表面ＣＤ１５４への０．１ｍｇ／ｍｌのビオチン化ｈｕ５ｃ８ｍＡｂの結合をｈｕ５ｃ８ｍＡｂまたは他の抗体の滴定物に対して競合させた。細胞結合ビオチン化ｈｕ５ｃ８ｍＡｂをストレプトアビジン−フィコエリスリン（ＰＥ）を用いて検出した（ＢＤ−ＰｈａｒＭｉｎｇｅｎ Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ，ＵＳＡ）。相対的な結合親和性は４パラメーター曲線フィットのＩＣ５０値から推定した。
（３．ＣＤ１５４−ＦｃγＲ結合試験）
ＦｃγＲ結合親和性は、抗原とＦｃγＲ担持細胞（後述）の間の「架橋」を形成する抗体の能力に基づいた試験を用いて測定した。ＦｃγＲＩ（ＣＤ６４）架橋形成試験はＰＢＳ中１ｍｇ／ｍｌの組み換え可溶性ヒトＣＤ１５４（Ｂｉｏｇｅｎ，Ｋａｒｐｕｓａｓ Ｍ ｅｔ ａｌ．，Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ．１９９５ Ｄｅｃ １５；３（１２）：１４２６）で４℃一夜９６穴ＭａｘｉｓｏｒｂＥＬＩＳＡプレート（Ｎａｌｇｅ−Ｎｕｎｃ，Ｒｏｃｈｅｓｔｅｒ，ＮＹ，ＵＳＡ）をコーティングすること、および、次いで、ＰＢＳ中１％ＢＳＡでブロッキングすることにより実施した。次に抗体の滴定物を３７℃で３０分間ＣＤ１５４に結合させ、プレートを洗浄し、そして蛍光標識Ｕ９３７（ＣＤ６４＋）細胞の結合を測定した。Ｕ９３７細胞は１０％ＦＢＳ、１０ｍＭ ＨＥＰＥＳ、Ｌ−グルタミンおよびペニシリン／ストレプトマイシンを有するＲＰＭＩ培地中で成育させ、１：２にスプリットし、そして試験前の１日間１０００単位／ｍｌのＩＦＮγで活性化し、ＦｃγＲＩの発現を増大させた。
ＦｃγＲＩＩＩ（ＣＤ１６）架橋形成試験は、ＣＤ１６でトランスフェクトした蛍光標識Ｊｕｒｋａｔ細胞（寄贈元：Ｄａｎａ Ｆａｒｂｅｒ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ，Ｂｏｓｔｏｎ，ＭＡ，ＵＳＡ）のｍＡｂ依存性結合の測定と共に、９６穴組織培養プレート（Ｃｏｒｎｉｎｇ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ Ａｃｔｏｎ，ＭＡ，ＵＳＡ）中に生育させたＣＤ１５４発現チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞（Ｂｉｏｇｅｎ）の単層を用いて実施した。ＣＨＯ−ＣＤ１５４＋細胞を１ｘ１０５個／ｍｌで９６穴プレートに播種し、１０％透析ＦＢＳ、１００ｎＭメトトレキセート、Ｌ−グルタミンおよびペニシリン／ストレプトマイシンを添加したＭＥＭ中でコンフルエントとなるまで生育させた（全試薬の入手元：Ｇｉｂｃｏ−ＢＲＬ Ｒｏｃｋｖｉｌｌｅ，ＭＤ、ＵＳＡ）。１０％ＦＢＳ、４００ｍｇ／ｍｌゲネチシン、１０ｍＭ ＨＥＰＥＳ、ピルビン酸ナトリウム、Ｌ−グルタミンおよびペニシリン／ストレプトマイシンを添加したＲＰＭＩ中（全試薬の入手元：Ｇｉｂｃｏ−ＢＲＬ）で生育させたＣＤ１６＋Ｊｕｒｋａｔ細胞を試験実施前１日に１：２にスプリットした。
ＦｃγＲＩおよびＦｃγＲＩＩＩレセプターの両方の試験において、Ｆｃレセプター担持細胞は３７℃で２０分間、２’，７’−ビス−（２−カルボキシエチル）−５−（および−６）−カルボキシフルオレセインアセトキシメチルエステル（ＢＣＥＣＦ−ＡＭ）（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐｒｏｂｅｓ Ｅｕｇｅｎｅ，ＯＲ，ＵＳＡ）で標識した。過剰のＢＣＥＣＦ−ＡＭを除去するために洗浄した後、１ｘ１０５個の標識細胞を３７℃で３０分間試験中インキュベートした。未結合のＦｃγＲ＋細胞を数回洗浄して除去し、プレートを、励起波長４８５ｎｍおよび発光波長５３０ｎｍを用いてＣｙｔｏｆｌｕｏｒ２３５０蛍光マイクロプレートリーダー（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ Ｂｅｄｆｏｒｄ，ＭＡ，ＵＳＡ）上で読み取った。
（実施例３：抗ＣＤ１５４抗体の抗原結合親和性の向上）
本実施例においては処置上関連する抗原標的に対する抗体の結合親和性を向上させるための方法を記載する。
免疫学的応答の媒介に関与するタンパク質のＴＮＦファミリーのメンバーであるヒトＣＤ１５４に対する抗体（例えばＹａｍａｄａ ｅｔ ａｌ．，Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ，２００２，７３，Ｓ３６−９；Ｓｃｈｏｎｂｅｃｋ ｅｔ ａｌ．，Ｃｅｌｌ．Ｍｏｌ．Ｌｉｆｅ Ｓｃｉ．，２００１，５８，４−４３；Ｋｉｒｋ ｅｔ ａｌ．，Ｐｈｉｌｏｓ．Ｔｒａｎｓ．Ｒ．Ｓｏｃ．Ｌｏｎｄ．Ｂ．Ｓｃｉ．，２００１，３５６，６９１−７０２；Ｆｉｕｍａｒａ ｅｔ ａｌ．，Ｂｒ．Ｊ．Ｈａｅｍａｔｏｌ．，２００１，１１３，２６５−７４；およびＢｉａｎｃｏｎｅ ｅｔ ａｌ．，Ｉｎｔ．Ｊ．Ｍｏｌ．Ｍｅｄ．，１９９９，３，３４３−５３参照）をマウスの親和性成熟化により成育させた。５ｃ８モノクローナル抗体をこの試験から開発し、ＣＤ１５４により媒介される病理学的過程を抑制することを測定した。
親和性５ｃ８／ＣＤ１５４相互作用を増大させる試みにおいて、静電的電荷至適化の手法を、向上した親和性の変異体を示唆するための２レベル操作法において、抗体−抗原複合体の結晶構造に適用した。第１に、静電的電化至適化を用いて結合のためには至適未満であるＣＤＲ残基の位置を決定した（Ｌｅｅ ａｎｄ Ｔｉｄｏｒ，Ｊ．Ｃｈｅｍ．Ｐｈｙｓ．，１９９７，１０６，８６８１−８６９０；Ｋａｎｇａｓ ａｎｄ Ｔｉｄｏｒ，Ｊ．Ｃｈｅｍ．Ｐｈｙｓ．，１９９８，１０９，７５２２−７５４５）。第２にＣＤＲ変異のセットをさらにコンピューター分析するために求めた。これらの計算に基づいて、単一の変異を有する２３個の修飾抗体（すなわち、２３個の「単一変異体」）について結合親和性をコンピューター処理により調べた。単一変異体のうち８つが静電エネルギーの項目および完全なエネルギー機能の項目、例えばファンデルワールスエネルギーの項目および溶媒接触性表面積の項目の双方において野生型抗体より良好であることが予測された。これ等の項目は静電気力には無関係であるが、それらを計算することにより、設計された変異が他の残基に接触せず、そして埋没表面積の量を有意に低減しないことを確実なものとし；すなわち、複雑な形態の増大した埋没表面積は通常は有利である（下記の表の「全エネルギー」のコラムを参照）。
電荷至適化の結果に基づいて、変異をコンピューター分析のために測定した（至適電荷分布および現在の残基よりも至適状態により近い設計変異を調べ；このプロセスは検査により行った）。電荷至適化は原子中心の電荷を与えたが、実際の変異はもたらさなかった。電荷至適化の１ラウンドは天然の側鎖の特性を示すように強いる種々の制約事項と共に実施した。例えば至適化は、実質側鎖電荷−１、０および＋１について、原子の電荷が０．８５電子の電荷単位の絶対値を超えないという追加の制約事項と共に実施した。
ＣＤ１５４／５ｃ８複合体（ＰＤＢコード：１Ｉ９Ｒ）の結晶構造をプログラムＣＨＡＲＭＭ（Ａｃｃｅｌｒｙｓ，Ｉｎｃ．，Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ）と共に、水素を付加するための標準的操作法を用いて作成した。Ｎ−アセトアミドおよびＮ−メチルアミドのパッチをそれぞれＮ末端およびＣ末端に適用した。連続体静電気モデルを用いて、静電的電荷至適化をＡＣＱ２抗体ＣＤＲのアミノ酸の各側鎖に対して実施した。次に至適化において観察された静電結合エネルギーの潜在的獲得に基づいて適切な側鎖変異を決定した。側鎖は各側鎖につき最も望ましい位置を決定するための６０度の二面角増分を用いてＣＨＡＲＭＭにおけるロータマー二面角スキャンを実施することにより構築した。次に結合エネルギーを野生型および変異体の複合体につき、ポアソン−ボルツマンの静電エネルギーおよびファンデルワールスエネルギーおよび埋没表面積に関する別の項を用いながら計算した。
ヒト化中和抗体（５ｃ８）のＦａｂフラグメントと複合体化したＣＤ４０リガンドの結晶構造はｐＨ６．５０において３．１Åまで解った。ＣＤ１５４は天然では３量体であるため、複合体には３つの５ｃ８Ｆａｂ分子および５つのＣＤ１５４分子が存在する。これ等は３つの独立したＣＤ１５４／５ｃ８界面を複合体中に形成する。亜鉛（ＺＮ）原子は５ｃ８Ｆａｂの各々に結合しており、そしてそれは計算に使用した。計算は３つの界面に対して独立して実施し、全３部位に関して野生型より良好であることがわかったアミノ酸置換を利用した。
以下の表は３種全ての５ｃ８分子の軽鎖におけるＣＤＲ可変ループ１に関して得られた至適化の結果を示している。Ｍｕｔ（変異エネルギー）のコラムはネイティブの残基から完全に非荷電の側鎖同配体、例えば同じ形状を有するが原子上に電荷または部分的電荷を有さない残基への移行における結合自由エネルギーの差（ｋｃａｌ／ｍｏｌ表示）に相当する。負の数は結合親和性の予測増大を示す。Ｏｐｔ−１のコラムは側鎖における至適電荷分布および実質側鎖電荷−１を用いて得ることができる結合自由エネルギーの差に相当する。Ｏｐｔ０およびＯｐｔ１のコラムは実質電荷がそれぞれ０および＋１である至適電荷を用いた場合の結合自由エネルギーの差に相当する。これ等の結果および構造の目視による検査に基づき、これ等の結合自由エネルギーの向上を有効利用する変異を設計する。例えば、非荷電の側鎖同配体であるＶＡＬへのＳＥＲ３１の変異は変異エネルギーにおいて予測された−１．２３〜−０．９８ｋｃａｌ／ｍｏｌを使用する。ＧＬＮ２７からＧＬＵへの変異は実質電荷−１の側鎖への変異に関する−１．２１から−０．８８ｋｃａｌ／ｍｏｌの予測最大自由エネルギー獲得を使用する。
（表１−５ｃ８ＣＤＲ軽鎖可変ループ１について得られた至適化結果）
Figure 0005102028
Figure 0005102028
上記した通り、設計された変異体をインシリコで構築し、結合エネルギーを再計算した。これ等のコンピューター処理による変異の計算の結果を以下に示す。数字は野生型から変異体への結合親和性における変化を示す（負数は変異体がより良好であることを示す）。５ｃ８の全３鎖に関するエネルギーを示す。
（表２−５ｃ８ｃＤＲのコンピューター処理による変異の計算）
Figure 0005102028
Figure 0005102028
結果が示す通り、上記したコンピューター処理プロセスは親和性増強側鎖変異を予測するために良好に実施できた。
第１の型の変異は、これ等の残基が本質的に抗原の充足していない水素パートナーと水素結合を形成することから、検査により解明した。意外にも、脱溶媒のコストは大部分の場合において有利な相互作用エネルギーを相殺していると思われた。第２の型の変異は、エネルギー獲得が主に、望ましくない脱溶媒を排除しつつ非極性の相互作用を維持している結果であることから、直接性がより低い型またはセットの変異を示している。第３の変異型は親和性の有意な獲得の可能性を示す長距離の相互作用に関わる。これ等の型の変異は、それらが抗原との直接の接触を行わないため、抗体−抗原界面における繊細な相互作用における混乱を小さくするため、特に興味深いものである。
上記した通り得られたコンピューター処理によるデータに従って、５ｃ８（Ｆａｂフラグメント）の変異体を作成し、そしてＣＤ１５４に対するそれらの親和性を上記したＥＬＩＳＡ系の競合的結合試験およびＫｉｎＥｘＡＴＭ試験において野生型５ｃ８Ｆａｂの親和性と比較した。変異体の一部の選択された結果を以下の表に示す。親和性試験を実施した場合は、結果は元の５ｃ８（野生型）を超えた親和性倍加分として示した。１．０より大きい数字は増大した親和性を示し、１．０より小さい数字は低下した親和性を示す。
（表３−５ｃ８改変Ｆａｂ抗体フラグメントに関する観察された親和性の変化）
Figure 0005102028
Figure 0005102028
５ｃ８抗体のＣＤＲにおける５０アミノ酸上の理想的な電荷分布からの偏差の分析により、野生型と比較して高値のＣＤ１５４に対する親和性を有する５変異体：Ａｓｎ５９Ａｓｐ、Ａｓｎ５９Ｌｅｕ、Ｓｅｒ２６Ａｓｐ、Ｇｌｎ２７ＧｌｕおよびＴｙｒ５４Ｇｌｕの予測が可能となった。これ等の変異体を構築し、競合的ＥＬＩＳＡにより特性化した。進歩した親和性の変異体Ｓ２６ＤおよびＱ２７Ｅもまた野生型５ｃ８Ｆａｂと比較して９倍高値の親和性を有する二重変異体に組み合わせた。
側鎖リパッキングアルゴリズムを５ｃ８のＣＤＲに適用した。３０ＣＤＲ残基につき、１０４０個の配列をコンピューター分析し、１４の単一および二重変異体を実験的フォローアップ用に選択した。数種の変異体は野生型５ｃ８Ｆａｂと比較して高値の親和性を示した。側鎖リパッキング変異体をさらに高値の親和性の静電的変異体と組み合わせた。組み合わせた５つの点変異は野生型と比較して２５倍高値の親和性を有していた。さらにまた細胞内においてそれは完全長５ｃ８抗体により示されるブロッキングに匹敵するＩＣＡＭアップレギュレーション（ＣＤ４０−ＣＤ１５４相互作用の生物学的帰結）のより優れた抑制を示していた。変異体予測における４０％の全体的ヒット率が両方の方法において達成された。
Ｔ細胞依存性Ｂ細胞活性化試験を実施した。Ｔ細胞依存性Ｂ細胞活性化の抑制はＤ１．１：Ｒａｍｏｓの同時培養において測定した。ＣＤ１５４によるＢ細胞上のＣＤ４０の係留はＢ細胞の活性化およびＩＣＡＭ−１（ＣＤ５４）のアップレギュレーションをもたらす。抗ＣＤ１５４ｍＡｂおよびＦａｂはＣＤ４０−ＣＤ１５４相互作用を破壊することによりＢ細胞の活性化を抑制する。慨すれば、抗ＣＤ１５４Ｆａｂの滴定物を１：４比のＤ１．１：Ｒａｍｏｓ細胞に添加し、一夜インキュベートした。Ｒａｍｏｓ細胞上のＩＣＡＭ−１のアップレギュレーションを定量化する２色ＦＡＣＳ染色（ＣＤ２０ＦＩＴＣ／ＣＤ５４ＡＰＣ）を実施した。結果を表４に示す。
（表４−Ｔ細胞依存性Ｂ細胞活性化試験において観察された力価）
Figure 0005102028
 （同等物）
当業者にとっては日常的実験を超えるものを使用することなく本明細書に記載した本発明の特定の実施形態の多くの同等物が存在する。このような同等物は後に記載する請求項により包含されることを意図している。
本明細書に記載したもの以外の本発明の種々の変更が、上記から、当業者には明らかとなるであろう。このような変更もまた添付する請求項の範囲内に属することを意図している。本出願において引用した各参考文献（例えば学術誌類、米国特許または非米国特許、特許出願公開、国際特許出願公開、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号等）は参考として全体が本明細書中で援用される。

Claims (26)

  1. 抗体またはその抗原結合フラグメントであって、該抗体は、
    配列番号１のアミノ酸配列を含む軽鎖ペプチド、または、配列番号１のアミノ酸配列において、以下：
    ２６位のアミノ酸がＡｓｐで置換される、
    ２７位のアミノ酸がＧｌｕで置換される、そして
    ３３位のアミノ酸がＴｒｐで置換される、
    からなる群より選択されるアミノ酸置換のうちの少なくとも１つまたは組み合わせを含むアミノ酸配列を含む軽鎖ペプチド；と
    配列番号４のアミノ酸配列を含む重鎖ペプチド、または、配列番号４のアミノ酸配列において、以下：
    ３０位のアミノ酸がＨｉｓで置換される、
    ３３位のアミノ酸がＴｒｐで置換される、そして
    ５４位のアミノ酸がＡｓｎで置換される、
    からなる群より選択されるアミノ酸置換のうちの少なくとも１つまたは組み合わせを含むアミノ酸配列を含む重鎖ペプチド；
    を含み、該抗体またはその抗原結合フラグメントは、該軽鎖が配列番号１を含む場合には該重鎖ペプチド内に少なくとも１つのアミノ酸置換を含み、かつ、該抗体またはその抗原結合フラグメントは、該重鎖が配列番号４を含む場合には該軽鎖内に少なくとも１つのアミノ酸置換を含み、そして、
    該抗体またはその抗原結合フラグメントは、野生型５ｃ８抗体を上回る、ＣＤ１５４に対する増大した結合親和性を有する、抗体またはその抗原結合フラグメント。
  2. 単鎖抗体（ｓｃＦｖ）、Ｆ（ａｂ’）２フラグメント、ＦａｂフラグメントおよびＦｄフラグメントから選択される、請求項１に記載の抗原結合フラグメント。
  3. 検出可能なマーカーで標識された、請求項１〜２のうちのいずれか１項に記載の抗体またはその抗原結合フラグメント。
  4. 前記検出可能なマーカーは、放射性同位体、酵素、蛍光色素、コロイド状金、染料およびビオチンから選択される、請求項３に記載の抗体。
  5. 治療剤またはビーズに結合体化された、請求項１〜４のうちのいずれか１項に記載の抗体またはその抗原結合フラグメント。
  6. 前記治療剤は、放射性同位体、毒素、トキソイドおよび化学療法剤から選択される、請求項５に記載の抗体またはその抗原結合フラグメント。
  7. 少なくとも１つの高分子量ポリマーを含む、請求項１〜６のうちのいずれか１項に記載の抗体またはその抗原結合フラグメント。
  8. 前記ポリマーは、ポリエチレンイミンまたはポリリジンである、請求項７に記載の抗体またはその抗原結合フラグメント。
  9. 少なくとも１つのアミノ酸が、ＰＥＧ化またはグリコシル化されている、請求項１〜８のうちのいずれか１項に記載の抗体またはその抗原結合フラグメント。
  10. 請求項１〜９のうちのいずれか１項に記載の抗体またはその抗原結合フラグメントを含む、組成物。
  11. 請求項１〜９のうちのいずれか１項に記載の抗体またはその抗原結合フラグメントを含む、キット。
  12. 請求項１〜９のうちのいずれか１項に記載の抗体またはその抗原結合フラグメントを含む、組成物。
  13. 請求項１〜９のうちのいずれか１項に記載の抗体またはその抗原結合フラグメントをコードする、核酸分子。
  14. 請求項１３に記載の核酸分子を含む、ベクター。
  15. 請求項１３に記載の核酸分子または請求項１４に記載のベクターを含む、宿主細胞。
  16. ＣＤ１５４に関連するヒトの疾患または障害の処置のための組成物であって、
    請求項１〜９のうちのいずれか１項に記載の抗体またはその抗原結合フラグメント
    を含む、組成物。
  17. 前記ヒトの疾患または障害が、関節炎に関連する炎症、接触性皮膚炎に関連する炎症、高ＩｇＥ症候群に関連する炎症、炎症性腸疾患に関連する炎症、アレルギー性喘息に関連する炎症、および特発性炎症疾患に関連する炎症から選択される、炎症である、請求項１６に記載の組成物。
  18. 前記関節炎は、慢性関節リウマチ、非リウマチ性炎症性関節炎、ライム病に関連する関節炎および炎症性変形性関節症から選択され、前記特発性炎症疾患は、乾癬または全身エリテマトーデスである、請求項１７に記載の組成物。
  19. 前記疾患または障害は、重症筋無力症、グレーブス病、特発性血小板減少性紫斑病、溶血性貧血、真性糖尿病、クローン病、多発性硬化症および薬物誘発性自己免疫疾患から選択される、請求項１６に記載の組成物。
  20. 前記障害は、被験体による移植された器官の拒絶であり、該移植された器官は、移植された心臓、移植された腎臓、移植された肝臓、移植された皮膚、移植された膵島細胞、および移植された骨髄から選択される、請求項１６に記載の組成物。
  21. 前記障害は、被験体における移植片対宿主病、アレルギー性応答、自己免疫応答、および線維症から選択される、請求項１６に記載の組成物。
  22. 前記線維症は、肺線維症または線維性疾患であり、前記自己免疫応答は、ライター症候群、脊椎関節炎、ライム病、ＨＩＶ感染、梅毒および結核から選択されるものから誘導される、請求項２１に記載の組成物。
  23. 前記肺線維症は、成人呼吸促進症候群に続発性の肺線維症、薬物誘発性肺線維症、特発性肺線維症または過敏性肺炎から選択され、前記線維性疾患は、Ｃ型肝炎、Ｂ型肝炎、肝硬変、毒性傷害に続発性の肝硬変、薬物に続発性の肝硬変、ウイルス感染に続発性の肝硬変、および自己免疫疾患に続発性の肝硬変から選択される、請求項２２に記載の組成物。
  24. 前記疾患または障害は、胃腸疾患または脈管疾患である、請求項１６に記載の組成物。
  25. 前記胃腸疾患は、食道運動障害、炎症性腸疾患および強皮症から選択され；そして前記脈管疾患は、アテローム性動脈硬化症または再灌流傷害である、請求項２４に記載の組成物。
  26. 前記疾患または障害は、Ｔ細胞腫瘍癌であり、該Ｔ細胞腫瘍癌は、Ｔ細胞白血病およびＴ細胞リンパ腫から選択される、請求項１６に記載の組成物。
JP2007523693A 2004-07-26 2005-07-26 抗ｃｄ１５４抗体 Expired - Fee Related JP5102028B2 (ja)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US59133704P 2004-07-26 2004-07-26
US60/591,337 2004-07-26
PCT/US2005/026320 WO2006033702A2 (en) 2004-07-26 2005-07-26 Anti-cd154 antibodies

Related Child Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP2007224899A Division JP2008056676A (ja) 2004-07-26 2007-08-30 抗ｃｄ１５４抗体
JP2011262504A Division JP2012100660A (ja) 2004-07-26 2011-11-30 抗ｃｄ１５４抗体

Publications (2)

Publication Number Publication Date
JP2008511290A JP2008511290A (ja) 2008-04-17
JP5102028B2 true JP5102028B2 (ja) 2012-12-19

Family

ID=36090426

Family Applications (3)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP2007523693A Expired - Fee Related JP5102028B2 (ja) 2004-07-26 2005-07-26 抗ｃｄ１５４抗体
JP2007224899A Pending JP2008056676A (ja) 2004-07-26 2007-08-30 抗ｃｄ１５４抗体
JP2011262504A Withdrawn JP2012100660A (ja) 2004-07-26 2011-11-30 抗ｃｄ１５４抗体

Family Applications After (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP2007224899A Pending JP2008056676A (ja) 2004-07-26 2007-08-30 抗ｃｄ１５４抗体
JP2011262504A Withdrawn JP2012100660A (ja) 2004-07-26 2011-11-30 抗ｃｄ１５４抗体

Country Status (17)

Country Link
US (2) US8647625B2 (ja)
EP (2) EP1791563A4 (ja)
JP (3) JP5102028B2 (ja)
KR (1) KR20070047327A (ja)
CN (1) CN101072587B (ja)
AU (1) AU2005287406B2 (ja)
BR (1) BRPI0513798A (ja)
CA (1) CA2575838A1 (ja)
CZ (1) CZ200755A3 (ja)
EA (1) EA014226B1 (ja)
GE (1) GEP20105059B (ja)
IL (1) IL180852A (ja)
IS (1) IS8596A (ja)
MX (1) MX2007001015A (ja)
NO (1) NO20071069L (ja)
RS (1) RS20070027A (ja)
WO (1) WO2006033702A2 (ja)

Families Citing this family (39)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
AU2004253868B2 (en) * 2003-06-13 2011-06-16 Biogen Ma Inc. Aglycosyl anti-CD154 (CD40 ligand) antibodies and uses thereof
CN1871259A (zh) 2003-08-22 2006-11-29 比奥根艾迪克Ma公司 具有改变的效应物功能的经改进的抗体和制备它的方法
WO2006033702A2 (en) 2004-07-26 2006-03-30 Biogen Idec Ma Inc. Anti-cd154 antibodies
SI2125894T1 (sl) * 2007-03-22 2019-05-31 Biogen Ma Inc. Vezavne beljakovine, vključno s protitelesi, derivati protiteles in fragmenti protiteles, ki specifično vežejo CD154, ter njihove uporabe
EP2067785A1 (en) 2007-12-03 2009-06-10 Fresenius Medical Care Deutschland GmbH Human CD154-binding synthetic peptide and uses thereof
JP2012518001A (ja) * 2009-02-13 2012-08-09 インディアナ ユニバーシティ リサーチ アンド テクノロジー コーポレイション Ｍｍｐ２およびｍｍｐ９を阻害する化合物および方法
PL2993231T3 (pl) 2009-09-24 2019-01-31 Ucb Biopharma Sprl Szczep bakteryjny do ekspresji rekombinowanego białka mający degp pozbawione aktywności proteazowej przy zachowaniu aktywności białka opiekuńczego i nokauty genów tsp i ptr
JO3417B1 (ar) 2010-01-08 2019-10-20 Regeneron Pharma الصيغ المستقرة التي تحتوي على الأجسام المضادة لمضاد مستقبل( interleukin-6 (il-6r
GB201000590D0 (en) 2010-01-14 2010-03-03 Ucb Pharma Sa Bacterial host strain
GB201000591D0 (en) 2010-01-14 2010-03-03 Ucb Pharma Sa Bacterial hoist strain
GB201000587D0 (en) 2010-01-14 2010-03-03 Ucb Pharma Sa Bacterial hoist strain
GB201012599D0 (en) 2010-07-27 2010-09-08 Ucb Pharma Sa Process for purifying proteins
JP2012034668A (ja) * 2010-08-12 2012-02-23 Tohoku Univ ヒト型化抗ｅｇｆｒ抗体リジン置換可変領域断片及びその利用
PT2731973T (pt) 2011-07-13 2018-02-22 Ucb Biopharma Sprl Estirpe hospedeira bacteriana que expressa dsbc recombinante
AR087305A1 (es) 2011-07-28 2014-03-12 Regeneron Pharma Formulaciones estabilizadas que contienen anticuerpos anti-pcsk9, metodo de preparacion y kit
US9943594B2 (en) 2011-10-11 2018-04-17 Sanofi Biotechnology Methods for the treatment of rheumatoid arthritis
TWI589299B (zh) 2011-10-11 2017-07-01 再生元醫藥公司 用於治療類風濕性關節炎之組成物及其使用方法
JP6195171B2 (ja) 2012-04-27 2017-09-13 国立大学法人 東京大学 核酸デリバリー用ユニット構造型医薬組成物
GB201208367D0 (en) 2012-05-14 2012-06-27 Ucb Pharma Sa Biological product
TWI595007B (zh) * 2012-09-10 2017-08-11 Neotope Biosciences Ltd 抗ｍｃａｍ抗體及相關使用方法
TWI713453B (zh) 2014-06-23 2020-12-21 美商健生生物科技公司 干擾素α及ω抗體拮抗劑
MA41459A (fr) * 2015-02-03 2017-12-12 Als Therapy Development Inst Anticorps anti-cd40l et méthodes pour traiter des maladies ou des troubles liés aux cd40l
KR20160132694A (ko) * 2015-05-11 2016-11-21 주식회사 프로젠 Cd154에 특이적으로 결합하는 항체
KR101810778B1 (ko) * 2015-06-23 2017-12-20 서울대학교산학협력단 Cd154 결합 폴리펩타이드 및 그 용도
WO2016208948A1 (ko) * 2015-06-23 2016-12-29 서울대학교산학협력단 Cd154 결합 폴리펩타이드 및 그 용도
MY188405A (en) 2015-08-05 2021-12-08 Janssen Biotech Inc Anti-cd154 antibodies and methods of using them
CA2995645A1 (en) 2015-08-18 2017-02-23 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Anti-pcsk9 inhibitory antibodies for treating patients with hyperlipidemia undergoing lipoprotein apheresis
WO2018106959A1 (en) 2016-12-07 2018-06-14 Progenity Inc. Gastrointestinal tract detection methods, devices and systems
EP4108183A1 (en) 2017-03-30 2022-12-28 Biora Therapeutics, Inc. Treatment of a disease of the gastrointestinal tract with an immune modulatory agent released using an ingestible device
WO2018217918A2 (en) 2017-05-24 2018-11-29 Als Therapy Development Institute Therapeutic anti-cd40 ligand antibodies
WO2019044937A1 (ja) 2017-08-31 2019-03-07 国立大学法人 東京大学 核酸搭載ユニット型ポリイオンコンプレックス
WO2019246317A1 (en) 2018-06-20 2019-12-26 Progenity, Inc. Treatment of a disease or condition in a tissue originating from the endoderm
WO2019246312A1 (en) 2018-06-20 2019-12-26 Progenity, Inc. Treatment of a disease of the gastrointestinal tract with an immunomodulator
MA53481A (fr) 2018-08-29 2021-07-07 Regeneron Pharma Méthodes et compositions pour le traitement de sujets ayant une polyarthrite rhumatoïde
WO2020106757A1 (en) 2018-11-19 2020-05-28 Progenity, Inc. Ingestible device for delivery of therapeutic agent to the gastrointestinal tract
JP2022519828A (ja) 2019-01-31 2022-03-25 サノフィ・バイオテクノロジー 若年性特発性関節炎を治療するための抗ｉｌ－６受容体抗体
US11707610B2 (en) 2019-12-13 2023-07-25 Biora Therapeutics, Inc. Ingestible device for delivery of therapeutic agent to the gastrointestinal tract
KR20210095781A (ko) 2020-01-24 2021-08-03 주식회사 에이프릴바이오 항원결합 단편 및 생리활성 이펙터 모이어티로 구성된 융합 컨스트럭트를 포함하는 다중결합항체 및 이를 포함하는 약학조성물
IL311175A (en) 2021-09-01 2024-04-01 Biogen Ma Inc Anti-transferrin receptor antibodies and their uses

Family Cites Families (125)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE2745144C2 (de) 1977-10-07 1979-11-15 Ruetgerswerke Ag, 6000 Frankfurt Verfahren zur ortho-Alkylierung von Phenolen
US5807715A (en) 1984-08-27 1998-09-15 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Methods and transformed mammalian lymphocyte cells for producing functional antigen-binding protein including chimeric immunoglobulin
GB8607679D0 (en) 1986-03-27 1986-04-30 Winter G P Recombinant dna product
NO873164L (no) 1986-07-30 1988-02-01 Teijin Ltd Muse-humane kimaere antistoffer.
WO1988007089A1 (en) 1987-03-18 1988-09-22 Medical Research Council Altered antibodies
JP3095168B2 (ja) 1988-02-05 2000-10-03 エル． モリソン，シェリー ドメイン‐変性不変部を有する抗体
DE68928427T2 (de) * 1988-09-15 1998-06-04 Univ Columbia Antikörper mit modifiziertem Kohlenhydratgehalt und Verfahren zur Herstellung und Verwendung
US5530101A (en) 1988-12-28 1996-06-25 Protein Design Labs, Inc. Humanized immunoglobulins
IL162181A (en) 1988-12-28 2006-04-10 Pdl Biopharma Inc A method of producing humanized immunoglubulin, and polynucleotides encoding the same
US6673986B1 (en) 1990-01-12 2004-01-06 Abgenix, Inc. Generation of xenogeneic antibodies
US6150584A (en) 1990-01-12 2000-11-21 Abgenix, Inc. Human antibodies derived from immunized xenomice
US6075181A (en) 1990-01-12 2000-06-13 Abgenix, Inc. Human antibodies derived from immunized xenomice
US5789650A (en) 1990-08-29 1998-08-04 Genpharm International, Inc. Transgenic non-human animals for producing heterologous antibodies
WO1994004679A1 (en) 1991-06-14 1994-03-03 Genentech, Inc. Method for making humanized antibodies
JP4124480B2 (ja) 1991-06-14 2008-07-23 ジェネンテック・インコーポレーテッド 免疫グロブリン変異体
JP3308534B2 (ja) 1991-10-25 2002-07-29 イミュネックス・コーポレーション 新規なサイトカイン
US5474771A (en) 1991-11-15 1995-12-12 The Trustees Of Columbia University In The City Of New York Murine monoclonal antibody (5c8) recognizes a human glycoprotein on the surface of T-lymphocytes, compositions containing same
ES2202310T3 (es) 1991-12-13 2004-04-01 Xoma Corporation Metodos y materiales para la preparacion de dominios variables de anticuerpos modificados y sus usos terapeuticos.
US5869619A (en) 1991-12-13 1999-02-09 Xoma Corporation Modified antibody variable domains
CA2089229C (en) 1992-02-14 2010-04-13 Alejandro A. Aruffo Cd40cr receptor and ligands therefor
US5714350A (en) * 1992-03-09 1998-02-03 Protein Design Labs, Inc. Increasing antibody affinity by altering glycosylation in the immunoglobulin variable region
GB9206422D0 (en) 1992-03-24 1992-05-06 Bolt Sarah L Antibody preparation
WO1993022332A2 (en) 1992-04-24 1993-11-11 Board Of Regents, The University Of Texas System Recombinant production of immunoglobulin-like domains in prokaryotic cells
AU5098493A (en) 1992-08-21 1994-03-15 Schering Corporation Cd40 ligand, anti cd40 antibodies, and soluble cd40
US5540926A (en) 1992-09-04 1996-07-30 Bristol-Myers Squibb Company Soluble and its use in B cell stimulation
US6307026B1 (en) 1992-12-10 2001-10-23 Celltech Limited Humanized antibodies directed against A33 antigen
JPH06179814A (ja) 1992-12-15 1994-06-28 New Japan Chem Co Ltd ポリアミド樹脂組成物
US5885573A (en) 1993-06-01 1999-03-23 Arch Development Corporation Methods and materials for modulation of the immunosuppressive activity and toxicity of monoclonal antibodies
US6180377B1 (en) 1993-06-16 2001-01-30 Celltech Therapeutics Limited Humanized antibodies
EP0714409A1 (en) 1993-06-16 1996-06-05 Celltech Therapeutics Limited Antibodies
WO1995006481A1 (en) 1993-09-02 1995-03-09 Trustees Of Dartmouth College Methods for inducing antigen-specific t cell tolerance
US5827690A (en) 1993-12-20 1998-10-27 Genzyme Transgenics Corporatiion Transgenic production of antibodies in milk
WO1997008320A1 (en) 1995-08-18 1997-03-06 Morphosys Gesellschaft Für Proteinoptimierung Mbh Protein/(poly)peptide libraries
DK0843961T3 (da) 1995-08-29 2007-05-21 Kirin Brewery Kimærisk mus og fremgangsmåde til at producere samme
DE19541844C1 (de) 1995-11-09 1997-07-24 Gsf Forschungszentrum Umwelt Verfahren zur Herstellung von menschlichen Antikörpern und deren Verwendung
US6340459B1 (en) 1995-12-01 2002-01-22 The Trustees Of Columbia University In The City Of New York Therapeutic applications for the anti-T-BAM (CD40-L) monoclonal antibody 5C8 in the treatment of reperfusion injury in non-transplant recipients
WO1997034631A1 (en) 1996-03-18 1997-09-25 Board Of Regents, The University Of Texas System Immunoglobin-like domains with increased half lives
AU3968897A (en) 1996-08-02 1998-02-25 Bristol-Myers Squibb Company A method for inhibiting immunoglobulin-induced toxicity resulting from the use of immunoglobulins in therapy and in vivo diagnosis
US7247302B1 (en) * 1996-08-02 2007-07-24 Bristol-Myers Squibb Company Method for inhibiting immunoglobulin-induced toxicity resulting from the use of immunoglobulins in therapy and in vivo diagnosis
US6013256A (en) 1996-09-24 2000-01-11 Protein Design Labs, Inc. Method of preventing acute rejection following solid organ transplantation
WO1998023289A1 (en) 1996-11-27 1998-06-04 The General Hospital Corporation MODULATION OF IgG BINDING TO FcRn
US6277375B1 (en) * 1997-03-03 2001-08-21 Board Of Regents, The University Of Texas System Immunoglobulin-like domains with increased half-lives
US6230102B1 (en) * 1997-04-04 2001-05-08 Massachusetts Institute Of Technology Computer system and process for identifying a charge distribution which minimizes electrostatic contribution to binding at binding between a ligand and a molecule in a solvent and uses thereof
WO1998047531A2 (en) 1997-04-21 1998-10-29 Arch Development Corporation Fc receptor non-binding anti-cd3 monoclonal antibodies deliver a partial tcr signal and induce clonal anergy
BR9809641A (pt) 1997-05-17 2000-07-11 Biogen Inc Uso de um interruptor de ligação cd40:cd154 para evitar respostas imunes inadaptadas, particularmente rejeição a enxerto
WO1998058669A2 (en) 1997-06-20 1998-12-30 Biogen, Inc. Cd154 blockade therapy for pancreatic islet tissue transplantation
TR199903141T2 (xx) 1997-06-20 2000-09-21 Biogen, Inc. Terap�tik protein engelleyici sendrom i�in CD154 blokaj tedavisi.
AU759779B2 (en) 1997-10-31 2003-05-01 Genentech Inc. Methods and compositions comprising glycoprotein glycoforms
US6528624B1 (en) * 1998-04-02 2003-03-04 Genentech, Inc. Polypeptide variants
US6242195B1 (en) * 1998-04-02 2001-06-05 Genentech, Inc. Methods for determining binding of an analyte to a receptor
US6194551B1 (en) * 1998-04-02 2001-02-27 Genentech, Inc. Polypeptide variants
DK1068241T3 (da) 1998-04-02 2008-02-04 Genentech Inc Antistofvarianter og fragmenter deraf
AU3655899A (en) * 1998-04-20 1999-11-08 Regents Of The University Of California, The Modified immunoglobulin molecules and methods for use thereof
GB9809951D0 (en) 1998-05-08 1998-07-08 Univ Cambridge Tech Binding molecules
GB9815909D0 (en) * 1998-07-21 1998-09-16 Btg Int Ltd Antibody preparation
ES2694002T3 (es) 1999-01-15 2018-12-17 Genentech, Inc. Polipéptido que comprende una región Fc de IgG1 humana variante
US7183387B1 (en) * 1999-01-15 2007-02-27 Genentech, Inc. Polypeptide variants with altered effector function
US6737056B1 (en) * 1999-01-15 2004-05-18 Genentech, Inc. Polypeptide variants with altered effector function
WO2001027253A1 (en) * 1999-10-08 2001-04-19 Caliper Technologies Corp. Use of nernstein voltage sensitive dyes in measuring transmembrane voltage
US6849425B1 (en) * 1999-10-14 2005-02-01 Ixsys, Inc. Methods of optimizing antibody variable region binding affinity
GB0006398D0 (en) 2000-03-16 2000-05-03 Novartis Ag Organic compounds
WO2001079555A2 (en) 2000-04-14 2001-10-25 Millennium Pharmaceuticals, Inc. Roles of jak/stat family members in tolerance induction
CA2410786A1 (en) 2000-06-02 2001-12-13 Regents Of The University Of Minnesota Immunotherapeutic method to prevent islet cell rejection
US7449308B2 (en) 2000-06-28 2008-11-11 Glycofi, Inc. Combinatorial DNA library for producing modified N-glycans in lower eukaryotes
AU8867501A (en) * 2000-09-01 2002-03-13 Biogen Inc Co-crystal structure of monoclonal antibody 5c8 and cd154, and use thereof in drug design
AU2001287040A1 (en) 2000-09-01 2002-03-13 Biogen, Inc. Methods of designing and producing novel compounds having improved binding affinity for cd154 or other trimeric proteins
ES2649037T3 (es) * 2000-12-12 2018-01-09 Medimmune, Llc Moléculas con semividas prolongadas, composiciones y usos de las mismas
US6979556B2 (en) * 2000-12-14 2005-12-27 Genentech, Inc. Separate-cistron contructs for secretion of aglycosylated antibodies from prokaryotes
WO2002062850A2 (en) 2001-02-02 2002-08-15 Millennium Pharmaceuticals, Inc. Hybrid antibodies and uses thereof
BR0207267A (pt) 2001-02-19 2004-02-10 Merck Patent Gmbh Proteìnas artificiais com imunogenicidade reduzida
US6992174B2 (en) 2001-03-30 2006-01-31 Emd Lexigen Research Center Corp. Reducing the immunogenicity of fusion proteins
US7117096B2 (en) * 2001-04-17 2006-10-03 Abmaxis, Inc. Structure-based selection and affinity maturation of antibody library
US20040010376A1 (en) * 2001-04-17 2004-01-15 Peizhi Luo Generation and selection of protein library in silico
US20030054407A1 (en) * 2001-04-17 2003-03-20 Peizhi Luo Structure-based construction of human antibody library
ITTO20010506A1 (it) * 2001-05-25 2002-11-25 Iveco Motorenforschung Ag Turbina a geometria variabile.
US6720165B2 (en) 2001-06-14 2004-04-13 Zyomix, Inc. Methods for making antibody fragments and compositions resulting therefrom
WO2004003019A2 (en) 2002-06-28 2004-01-08 Domantis Limited Immunoglobin single variant antigen-binding domains and dual-specific constructs
GB2380127A (en) 2001-09-26 2003-04-02 Isis Innovation Treatment of chronic joint inflammation
GB0124317D0 (en) 2001-10-10 2001-11-28 Celltech R&D Ltd Biological products
EP1443961B1 (en) 2001-10-25 2009-05-06 Genentech, Inc. Glycoprotein compositions
EP2022799A2 (en) 2001-11-16 2009-02-11 Biogen Idec Inc. Polycistronic expression of antibodies
US7387776B2 (en) 2002-01-09 2008-06-17 Medarex, Inc. Human monoclonal antibodies against CD30
US20030224397A1 (en) * 2002-02-11 2003-12-04 Genentech, Inc. Antibody variants with faster antigen association rates
US20040002587A1 (en) 2002-02-20 2004-01-01 Watkins Jeffry D. Fc region variants
US8188231B2 (en) * 2002-09-27 2012-05-29 Xencor, Inc. Optimized FC variants
US7317091B2 (en) * 2002-03-01 2008-01-08 Xencor, Inc. Optimized Fc variants
WO2003074679A2 (en) 2002-03-01 2003-09-12 Xencor Antibody optimization
US20040132101A1 (en) * 2002-09-27 2004-07-08 Xencor Optimized Fc variants and methods for their generation
CA2485732A1 (en) 2002-05-20 2003-12-04 Abmaxis, Inc. Generation and selection of protein library in silico
DE60334453D1 (de) * 2002-05-30 2010-11-18 Macrogenics Inc Cd16a bindungsproteine und verwendung zur behandlung von immunkrankheiten
DK2345671T3 (en) 2002-09-27 2016-02-15 Xencor Inc Optimized Fc variants and methods for their formation
US7217797B2 (en) * 2002-10-15 2007-05-15 Pdl Biopharma, Inc. Alteration of FcRn binding affinities or serum half-lives of antibodies by mutagenesis
AU2003286467B2 (en) 2002-10-15 2009-10-01 Abbvie Biotherapeutics Inc. Alteration of FcRn binding affinities or serum half-lives of antibodies by mutagenesis
EP1570267B1 (en) 2002-12-03 2011-10-12 UCB Pharma, S.A. Assay for identifying antibody producing cells
AU2004204942A1 (en) 2003-01-08 2004-07-29 Xencor, Inc Novel proteins with altered immunogenicity
JP2006524039A (ja) 2003-01-09 2006-10-26 マクロジェニクス，インコーポレーテッド 変異型Ｆｃ領域を含む抗体の同定および作製ならびにその利用法
US7960512B2 (en) * 2003-01-09 2011-06-14 Macrogenics, Inc. Identification and engineering of antibodies with variant Fc regions and methods of using same
GB0303337D0 (en) 2003-02-13 2003-03-19 Celltech R&D Ltd Biological products
US8388955B2 (en) * 2003-03-03 2013-03-05 Xencor, Inc. Fc variants
US20090010920A1 (en) * 2003-03-03 2009-01-08 Xencor, Inc. Fc Variants Having Decreased Affinity for FcyRIIb
AU2004253868B2 (en) * 2003-06-13 2011-06-16 Biogen Ma Inc. Aglycosyl anti-CD154 (CD40 ligand) antibodies and uses thereof
PL1639011T3 (pl) 2003-06-30 2009-05-29 Domantis Ltd Pegilowane przeciwciała jednodomenowe (dAb)
AU2004261198A1 (en) * 2003-07-26 2005-02-10 Biogen Idec Ma Inc. Altered antibodies having improved antigen-binding affinity
CN1871259A (zh) * 2003-08-22 2006-11-29 比奥根艾迪克Ma公司 具有改变的效应物功能的经改进的抗体和制备它的方法
CA2545539A1 (en) * 2003-10-15 2005-04-28 Pdl Biopharma, Inc. Alteration of fc-fusion protein serum half-lives by mutagenesis of positions 250, 314 and/or 428 of the heavy chain constant region of ig
GB0324368D0 (en) 2003-10-17 2003-11-19 Univ Cambridge Tech Polypeptides including modified constant regions
WO2005063815A2 (en) * 2003-11-12 2005-07-14 Biogen Idec Ma Inc. Fcϝ receptor-binding polypeptide variants and methods related thereto
US20050142133A1 (en) 2003-12-03 2005-06-30 Xencor, Inc. Optimized proteins that target the epidermal growth factor receptor
EP1697741A4 (en) 2003-12-04 2008-02-13 Xencor Inc PROCESS FOR PRODUCING PROTEIN VARIANTS WITH INCREASED HOST STRUCTURE CONTENT AND COMPOSITIONS THEREOF
EP1697520A2 (en) 2003-12-22 2006-09-06 Xencor, Inc. Fc polypeptides with novel fc ligand binding sites
US20080089892A1 (en) 2004-01-12 2008-04-17 Eli Lilly And Co. Fc Region Variants
KR20050082389A (ko) 2004-02-18 2005-08-23 메덱스젠 주식회사 직렬 연쇄체를 갖는 면역접합체를 포함하는 장기이식합병증 치료용 약제학적 조성물
EP1737890A2 (en) * 2004-03-24 2007-01-03 Xencor, Inc. Immunoglobulin variants outside the fc region
KR20070038453A (ko) 2004-04-16 2007-04-10 마크로제닉스, 인크. ＦｃγＲＩＩＢ-특이적 항체 및 그의 사용 방법
EP2471813B1 (en) 2004-07-15 2014-12-31 Xencor, Inc. Optimized Fc variants
WO2006033702A2 (en) 2004-07-26 2006-03-30 Biogen Idec Ma Inc. Anti-cd154 antibodies
DK1776384T3 (da) 2004-08-04 2013-09-02 Mentrik Biotech Llc VARIANT-Fc-REGIONER
KR20070057839A (ko) 2004-08-19 2007-06-07 제넨테크, 인크. 변경된 이펙터 기능을 갖는 폴리펩티드 변이체
US7563443B2 (en) 2004-09-17 2009-07-21 Domantis Limited Monovalent anti-CD40L antibody polypeptides and compositions thereof
CN100369932C (zh) 2005-04-07 2008-02-20 苏州大学 抗人cd154单克隆抗体及其应用
RU2008110058A (ru) 2005-08-15 2009-09-27 Арана Терапьютикс Лимитед (Au) Химерные антитела с областями приматов нового света
EP1931709B1 (en) * 2005-10-03 2016-12-07 Xencor, Inc. Fc variants with optimized fc receptor binding properties
US8409810B2 (en) 2005-11-17 2013-04-02 Biogen Idec Ma Inc. Platelet aggregation assays using a CD40L-binding agent
TW200809660A (en) 2006-03-01 2008-02-16 Zi Decuma Ab A method for additive character recognition and an apparatus thereof
SI2125894T1 (sl) 2007-03-22 2019-05-31 Biogen Ma Inc. Vezavne beljakovine, vključno s protitelesi, derivati protiteles in fragmenti protiteles, ki specifično vežejo CD154, ter njihove uporabe

Also Published As

Publication number Publication date
US8647625B2 (en) 2014-02-11
JP2012100660A (ja) 2012-05-31
KR20070047327A (ko) 2007-05-04
BRPI0513798A (pt) 2008-05-13
CN101072587A (zh) 2007-11-14
WO2006033702A3 (en) 2007-01-04
US20140220031A1 (en) 2014-08-07
AU2005287406A1 (en) 2006-03-30
US8961976B2 (en) 2015-02-24
EA200700136A1 (ru) 2007-08-31
RS20070027A (en) 2008-11-28
US20080305116A1 (en) 2008-12-11
IS8596A (is) 2007-01-24
CN101072587B (zh) 2012-12-26
NO20071069L (no) 2007-02-26
JP2008511290A (ja) 2008-04-17
WO2006033702A2 (en) 2006-03-30
EP1791563A4 (en) 2009-07-08
CZ200755A3 (cs) 2007-04-11
MX2007001015A (es) 2007-04-12
EA014226B1 (ru) 2010-10-29
EP2399936A2 (en) 2011-12-28
EP2399936A3 (en) 2012-02-22
GEP20105059B (en) 2010-08-10
AU2005287406B2 (en) 2011-08-18
IL180852A0 (en) 2007-07-04
CA2575838A1 (en) 2006-03-30
IL180852A (en) 2011-04-28
JP2008056676A (ja) 2008-03-13
EP1791563A2 (en) 2007-06-06

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP5102028B2 (ja) 抗ｃｄ１５４抗体
AU2004253868B2 (en) Aglycosyl anti-CD154 (CD40 ligand) antibodies and uses thereof
KR101276596B1 (ko) 면역억제 특성을 가진 인간화 항-ｃｄ4 항체
US20140079697A1 (en) Humanized antibodies against monocyte chemotactic proteins
CN108135969B (zh) 具有改善的结合、功能和安全性特征的抗cd154抗体及其在人免疫治疗中的用途
AU2011224032B2 (en) Aglycosyl Anti-CD154 (CD40 Ligand) Antibodies and Uses Thereof
JP7432716B2 (ja) ヒト４－１ｂｂに結合可能な分子及びその応用

Legal Events

Date Code Title Description
A131 Notification of reasons for refusal

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131

Effective date: 20100714

A521 Request for written amendment filed

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523

Effective date: 20101014

A521 Request for written amendment filed

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A821

Effective date: 20101014

A131 Notification of reasons for refusal

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131

Effective date: 20110708

A601 Written request for extension of time

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601

Effective date: 20110922

A602 Written permission of extension of time

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602

Effective date: 20110930

A601 Written request for extension of time

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601

Effective date: 20111107

A602 Written permission of extension of time

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602

Effective date: 20111114

A521 Request for written amendment filed

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523

Effective date: 20111130

A02 Decision of refusal

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02

Effective date: 20120424

A521 Request for written amendment filed

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523

Effective date: 20120809

A521 Request for written amendment filed

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A821

Effective date: 20120809

A911 Transfer to examiner for re-examination before appeal (zenchi)

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A911

Effective date: 20120903

TRDD Decision of grant or rejection written
A01 Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model)

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01

Effective date: 20120918

A01 Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model)

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01

A61 First payment of annual fees (during grant procedure)

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61

Effective date: 20120927

FPAY Renewal fee payment (event date is renewal date of database)

Free format text: PAYMENT UNTIL: 20151005

Year of fee payment: 3

R150 Certificate of patent or registration of utility model

Ref document number: 5102028

Country of ref document: JP

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150

S531 Written request for registration of change of domicile

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R313531

S533 Written request for registration of change of name

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R313533

R350 Written notification of registration of transfer

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R350

R250 Receipt of annual fees

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250

R250 Receipt of annual fees

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250

R250 Receipt of annual fees

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250

R250 Receipt of annual fees

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250

LAPS Cancellation because of no payment of annual fees