TWI558399B - 癌症之組合療法 - Google Patents

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Description

癌症之組合療法
本發明係關於[5-(4-乙基-哌嗪-1-基甲基)-吡啶-2-基]-[5-氟-4-(7-氟-3-異丙基-2-甲基-3H-苯并咪唑-5-基)-嘧啶-2-基]-胺與抗人類VEGFR2抗體、較佳雷莫蘆單抗(ramucirumab)之組合，及使用該組合治療某些病症(諸如非小細胞肺癌(NSCLC))之方法。
本發明屬於NSCLC治療領域。肺癌被列為全世界男性及女性中由癌症所致之死亡之最常見病因之一。肺癌之兩種主要類型為小細胞肺癌及NSCLC。非小細胞肺癌佔肺癌病例之大約80%或80%以上。治療可涉及手術、化學療法或輻射療法以及此等治療之組合。
令人遺憾的是，NSCLC之治癒仍然難以實現且存在對可證明可有效治療NSCLC之更多及不同療法之需要。
[5-(4-乙基-哌嗪-1-基甲基)-吡啶-2-基]-[5-氟-4-(7-氟-3-異丙基-2-甲基-3H-苯并咪唑-5-基)-嘧啶-2-基]-胺(阿貝馬奇(abemaciclib))為週期素依賴性激酶4及6(CDK4/6)之抑制劑。阿貝馬奇及此化合物之製造及使用方法(包括用於治療癌症且更特定言之用於治療NSCLC)揭示於WO2010/075074中。此外，已在患有NSCLC之患者中觀察到該化合物之臨床活性。
雷莫蘆單抗為針對血管內皮生長因子受體2(VEGFR2)之全人類單株抗體。雷莫蘆單抗及此化合物之製造及使用方法(包括用於治療贅生性疾病，諸如實體及非實體腫瘤)揭示於WO2003/075840中。此 外，亦已報導雷莫蘆單抗在患有NSCLC之患者中之臨床活性(美通社(PRNewswire)「Ramucirumab Improved Survival in Second-Line Study of Patients with Non-Small Cell Lung Cancer」(INDIANAPOLIS,2014年2月19日))。於2014年12月16日，雷莫蘆單抗(Cyramza®)經U.S.F.D.A.批准用於治療NSCLC。
本文中提出[5-(4-乙基-哌嗪-1-基甲基)-吡啶-2-基]-[5-氟-4-(7-氟-3-異丙基-2-甲基-3H-苯并咪唑-5-基)-嘧啶-2-基]-胺與雷莫蘆單抗之新穎組合。儘管此項技術中已涵蓋CDK4/6抑制劑及VEGFR2抑制劑之組合，但本發明者在本文中揭示藉由使用[5-(4-乙基-哌嗪-1-基甲基)-吡啶-2-基]-[5-氟-4-(7-氟-3-異丙基-2-甲基-3H-苯并咪唑-5-基)-嘧啶-2-基]-胺及抗VEGFR2 Ab之新穎組合作為特定治療方案之一部分來治療NSCLC之方法，與僅由任一藥劑提供之治療效果相比，該治療方案在一些NSCLC患者中提供來自此等治療劑之組合活性之增強及/或出人意料之有利治療效果。本發明者亦在本文中揭示藉由使用[5-(4-乙基-哌嗪-1-基甲基)-吡啶-2-基]-[5-氟-4-(7-氟-3-異丙基-2-甲基-3H-苯并咪唑-5-基)-嘧啶-2-基]-胺及雷莫蘆單抗之新穎組合作為特定治療方案之一部分來治療NSCLC之方法，與僅由任一藥劑提供之治療效果相比，該治療方案在一些NSCLC患者中提供來自此等治療劑之組合活性之增強及/或出人意料之有利治療效果。
因此，本發明提供一種治療患者之NSCLC之方法，其包含向需要此治療之NSCLC患者投與有效量之[5-(4-乙基-哌嗪-1-基甲基)-吡啶-2-基]-[5-氟-4-(7-氟-3-異丙基-2-甲基-3H-苯并咪唑-5-基)-嘧啶-2-基]-胺或其醫藥學上可接受之鹽以及有效量之抗VEGFR2 Ab。本發明亦提供一種治療患者之NSCLC之方法，其包含向需要此治療之NSCLC患者投與有效量之[5-(4-乙基-哌嗪-1-基甲基)-吡啶-2-基]-[5-氟-4-(7-氟-3-異丙基-2-甲基-3H-苯并咪唑-5-基)-嘧啶-2-基]-胺或其醫藥學上可接 受之鹽以及雷莫蘆單抗。此等方法視情況進一步包含投與有效量之一或多種選自由以下組成之群之抗腫瘤劑：培美曲塞(pemetrexed)、吉西他濱(gemcitabine)、多西他賽(docetaxel)、貝伐單抗(bevacizumab)、卡鉑(carboplatin)及順鉑(cisplatin)。此等抗腫瘤劑之有效量通常為該等藥劑標籤上規定之劑量。
本發明進一步提供一種醫藥組合物，其包含[5-(4-乙基-哌嗪-1-基甲基)-吡啶-2-基]-[5-氟-4-(7-氟-3-異丙基-2-甲基-3H-苯并咪唑-5-基)-嘧啶-2-基]-胺或其醫藥學上可接受之鹽及一或多種醫藥學上可接受之載劑、稀釋劑或賦形劑；以及抗VEGFR2 Ab與一或多種醫藥學上可接受之載劑、稀釋劑或賦形劑之醫藥組合物。本發明亦提供一種醫藥組合物，其包含[5-(4-乙基-哌嗪-1-基甲基)-吡啶-2-基]-[5-氟-4-(7-氟-3-異丙基-2-甲基-3H-苯并咪唑-5-基)-嘧啶-2-基]-胺或其醫藥學上可接受之鹽及一或多種醫藥學上可接受之載劑、稀釋劑或賦形劑；以及雷莫蘆單抗與一或多種醫藥學上可接受之載劑、稀釋劑或賦形劑之醫藥組合物。
此外，本發明提供一種套組，其包含[5-(4-乙基-哌嗪-1-基甲基)-吡啶-2-基]-[5-氟-4-(7-氟-3-異丙基-2-甲基-3H-苯并咪唑-5-基)-嘧啶-2-基]-胺或其醫藥學上可接受之鹽及抗VEGFR2 Ab。本發明亦提供一種套組，其包含[5-(4-乙基-哌嗪-1-基甲基)-吡啶-2-基]-[5-氟-4-(7-氟-3-異丙基-2-甲基-3H-苯并咪唑-5-基)-嘧啶-2-基]-胺或其醫藥學上可接受之鹽及雷莫蘆單抗。本發明進一步提供一種套組，其包含：包含[5-(4-乙基-哌嗪-1-基甲基)-吡啶-2-基]-[5-氟-4-(7-氟-3-異丙基-2-甲基-3H-苯并咪唑-5-基)-嘧啶-2-基]-胺或其醫藥學上可接受之鹽及一或多種醫藥學上可接受之載劑、稀釋劑或賦形劑之醫藥組合物；及包含抗VEGFR2 Ab及一或多種醫藥學上可接受之載劑、稀釋劑或賦形劑之醫藥組合物。本發明亦提供一種套組，其包含：包含[5-(4-乙基-哌嗪-1- 基甲基)-吡啶-2-基]-[5-氟-4-(7-氟-3-異丙基-2-甲基-3H-苯并咪唑-5-基)-嘧啶-2-基]-胺或其醫藥學上可接受之鹽及一或多種醫藥學上可接受之載劑、稀釋劑或賦形劑之醫藥組合物；及包含雷莫蘆單抗及一或多種醫藥學上可接受之載劑、稀釋劑或賦形劑之醫藥組合物。
本發明進一步提供一種組合，其包含[5-(4-乙基-哌嗪-1-基甲基)-吡啶-2-基]-[5-氟-4-(7-氟-3-異丙基-2-甲基-3H-苯并咪唑-5-基)-嘧啶-2-基]-胺或其醫藥學上可接受之鹽及抗VEGFR2 Ab以同時、單獨或依序用於治療NSCLC。
本發明進一步提供一種組合，其包含[5-(4-乙基-哌嗪-1-基甲基)-吡啶-2-基]-[5-氟-4-(7-氟-3-異丙基-2-甲基-3H-苯并咪唑-5-基)-嘧啶-2-基]-胺或其醫藥學上可接受之鹽及雷莫蘆單抗以同時、單獨或依序用於治療NSCLC。
本發明進一步提供[5-(4-乙基-哌嗪-1-基甲基)-吡啶-2-基]-[5-氟-4-(7-氟-3-異丙基-2-甲基-3H-苯并咪唑-5-基)-嘧啶-2-基]-胺或其醫藥學上可接受之鹽及抗VEGFR2 Ab之組合在療法中之用途。本發明進一步提供[5-(4-乙基-哌嗪-1-基甲基)-吡啶-2-基]-[5-氟-4-(7-氟-3-異丙基-2-甲基-3H-苯并咪唑-5-基)-嘧啶-2-基]-胺或其醫藥學上可接受之鹽及抗VEGFR2 Ab之組合用於製造治療NSCLC之藥物之用途。
本發明進一步提供[5-(4-乙基-哌嗪-1-基甲基)-吡啶-2-基]-[5-氟-4-(7-氟-3-異丙基-2-甲基-3H-苯并咪唑-5-基)-嘧啶-2-基]-胺或其醫藥學上可接受之鹽及雷莫蘆單抗之組合在療法中之用途。本發明進一步提供[5-(4-乙基-哌嗪-1-基甲基)-吡啶-2-基]-[5-氟-4-(7-氟-3-異丙基-2-甲基-3H-苯并咪唑-5-基)-嘧啶-2-基]-胺或其醫藥學上可接受之鹽及雷莫蘆單抗之組合用於製造治療NSCLC之藥物之用途。
本發明之另一態樣為一種治療患者之非小細胞肺癌之方法，其包含對需要治療之非小細胞肺癌患者進行以下： a)在21天週期之第1天以10mg/kg投與雷莫蘆單抗；及b)在21天週期之第1-21天，每12小時以50-200mg經口投與[5-(4-乙基-哌嗪-1-基甲基)-吡啶-2-基]-[5-氟-4-(7-氟-3-異丙基-2-甲基-3H-苯并咪唑-5-基)-嘧啶-2-基]-胺或其醫藥學上可接受之鹽。
本發明之另一態樣提供：a)[5-(4-乙基-哌嗪-1-基甲基)-吡啶-2-基]-[5-氟-4-(7-氟-3-異丙基-2-甲基-3H-苯并咪唑-5-基)-嘧啶-2-基]-胺或其醫藥學上可接受之鹽用於製造治療NSCLC之藥物之用途；b)雷莫蘆單抗用於製造治療NSCLC之藥物之用途；其中雷莫蘆單抗在21天週期之第1天以10mg/kg靜脈內投與，且[5-(4-乙基-哌嗪-1-基甲基)-吡啶-2-基]-[5-氟-4-(7-氟-3-異丙基-2-甲基-3H-苯并咪唑-5-基)-嘧啶-2-基]-胺或其醫藥學上可接受之鹽在21天週期之第1-21天每12小時以50-200mg經口投與。
如本文所用，化合物之名稱「[5-(4-乙基-哌嗪-1-基甲基)-吡啶-2-基]-[5-氟-4-(7-氟-3-異丙基-2-甲基-3H-苯并咪唑-5-基)-嘧啶-2-基]-胺」揭示於WO2010/075074中且係指具有以下結構之化合物：
此化合物之CAS登記號為1231929-97-7。該化合物之通用名稱為阿貝馬奇。替代化合物名稱包括N-[5-[(4-乙基-1-哌嗪基)甲基]-2-吡啶基]-5-氟-4[4-氟-2-甲基-1-(1-甲基乙基)-1H-苯并咪唑-6-基]-2-嘧啶胺、1-[5-(4-乙基-哌嗪-1-基甲基)-吡啶-2-基]-[5-氟-4-(7-氟-3-異丙基-2-甲基-3H-苯并咪唑-5-基)-嘧啶-2-基]-胺及N-(5-((4-乙基哌嗪-1-基)甲 基)吡啶-2-基)-5-氟-4-(4-氟-1-異丙基-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)嘧啶-2-胺。
如本文所用，術語「VEGFR2」係指如SEQ ID NO：9中所示之胺基酸序列的多肽。VEGFR2亦稱為KDR。
如本文所用，術語「抗VEGFR2 Ab」係指包含以下各者之抗體：如SEQ ID NO：2中所示之胺基酸序列的輕鏈可變區(LCVR)，及如SEQ ID NO：4中所示之胺基酸序列的重鏈可變區(HCVR)，其中抗VEGFR2 Ab以足夠親和力及特異性結合至VEGFR2。在一些實施例中，抗VEGFR2 Ab為包含以下各者且以足夠親和力及特異性結合至VEGFR2之抗體：如SEQ ID NO：6中所示之胺基酸序列的輕鏈，及如SEQ ID NO：8中所示之胺基酸序列的重鏈。在本發明之其他實施例中，抗VEGFR2 Ab為雷莫蘆單抗。所選抗體對VEGFR2將具有足夠強之結合親和力。舉例而言，該抗體一般將以在約100nM至約1pM之間的Kd值結合VEGFR2。可例如藉由基於表面電漿子共振之分析(諸如描述於PCT申請公開案第WO2005/012359號中之BIAcore分析法)、酶聯免疫吸附分析(ELISA)及競爭分析(例如放射性標記抗原結合分析(RIA))測定抗體親和力。在一個實施例中，藉由用抗VEGFR2 Ab、較佳雷莫蘆單抗執行之RIA量測Kd。
如本文所用，術語「雷莫蘆單抗」亦稱為Cyramza®，IMC-1121b，CAS登記號為947687-13-0，係指包含以下各者之抗VEGFR2 Ab：各如SEQ ID NO：6中所示之胺基酸序列的兩條輕鏈，及各如SEQ ID NO：8中所示之胺基酸序列的兩條重鏈。
除非另外指示，否則術語「抗體」係指包含藉由雙硫鍵互連之兩條重鏈(HC)及兩條輕鏈(LC)之免疫球蛋白分子。各鏈之胺基端部分包括主要負責經由其中所含之互補決定區(CDR)來識別抗原的約100個至約110個胺基酸之可變區。各鏈之羧基端部分界定主要負責效應 功能之恆定區。
如本文所用，術語「抗原結合片段」係指保留結合至其抗原之能力之任何抗體片段。該等「抗原結合片段」可選自由Fv、scFv、Fab、F(ab')2、Fab'、scFv-Fc片段及雙功能抗體組成之群。抗體之抗原結合片段通常將包含至少一個可變區。抗原結合片段較佳包含重鏈可變區(HCVR)及輕鏈可變區(LCVR)。如本文所用之抗原結合片段更佳包含賦予對VEGFR2之抗原結合特異性之HCVR及LCVR(亦即「VEGFR2結合片段」)。
如本文所用，術語「輕鏈可變區(LCVR)」係指抗體分子之輕鏈中包括互補決定區(CDR；亦即CDR1、CDR2及CDR3)及構架區(FR)之胺基酸序列的部分。
如本文所用，術語「重鏈可變區(HCVR)」係指抗體分子之重鏈中包括互補決定區(CDR；亦即CDR1、CDR2及CDR3)及構架區(FR)之胺基酸序列的部分。
如本文所用，術語「互補決定區」及「CDR」係指在抗體或其抗原結合片段之LC及HC多肽之可變區內發現的非鄰近抗原組合位點。此等特定區域已由他人描述，包括Kabat等人，Ann.NY Acad.Sci.190：382-93(1971)；Kabat等人，J.Biol.Chem.252：6609-6616(1977)；Kabat等人，Sequences of Proteins of Immunological Interest，第五版，U.S.Department of Health and Human Services,NIH出版物第91-3242(1991)號；Chothia等人，J.Mol.Biol.196：901-917(1987)；MacCallum等人，J.Mol.Biol.,262：732-745(1996)；及North等人，J.Mol.Biol.,406,228-256(2011)，其中當相互比較時，定義包括胺基酸殘基之重疊或子集。
CDR穿插在稱為構架區(「FR」)之較保守區中。各LCVR及HCVR由三個CDR及四個FR組成，自胺基端至羧基端按以下順序排 列：FR1、CDR1、FR2、CDR2、FR3、CDR3、FR4。輕鏈之三個CDR稱為「LCDR1、LCDR2及LCDR3」，且重鏈之三個CDR稱為「HCDR1、HCDR2及HCDR3」。CDR含有與抗原形成特異性相互作用之大部分殘基。LCVR區及HCVR區內之CDR胺基酸殘基之編號及定位係根據已知慣例(例如Kabat(1991)、Chothia(1987)及/或North(2011))。在本發明之不同實施例中，抗體之FR可與人類生殖系序列一致或可經天然或人工修飾。
如本文所用，術語「DC101」係指針對小鼠VEGFR2之大鼠單株抗體，其可在實驗中在小鼠中用作抗VEGFR2 Ab、較佳雷莫蘆單抗之替代物。參見例如Witte L.等人Monoclonal antibodies targeting the receptor-2(Flk1/KDR)as an anti-angiogenic therapeutic strategy.Cancer Metastasis Rev.,17：155-161,1998；及/或Prewett M.等人，Antivascular endothelial growth factor receptor(fetal liver kinase 1)monoclonal antibody inhibits tumor angiogenesis and growth of several mouse and human tumors.Cancer Res.,59：5209-5218,1999。
在某些實施例中，改變本文中經提供用於本發明方法之抗VEGFR2 Ab以增加或減少抗體之糖基化程度。向抗體添加糖基化位點或使抗體缺失糖基化位點可藉由改變胺基酸序列以便產生或移除一或多個糖基化位點來便利地實現。
在抗VEGFR2 Ab包含Fc區之情況下，可改變連接於其上之碳水化合物。由哺乳動物細胞產生之天然抗體通常包含分支鏈雙天線寡醣，其一般藉由N鍵連接至Fc區之CH2域的Asn297。參見例如Wright等人TIBTECH 15：26-32(1997)。該寡醣可包括各種碳水化合物，例如甘露糖、N-乙醯基葡糖胺(GlcNAc)、半乳糖及唾液酸，以及連接至雙天線寡醣結構之「主幹」中之GlcNAc的海藻糖。在一些實施例中，可對本發明抗體中之寡醣進行修飾以便形成具有某些改良特性之 抗體變異體。
在一個實施例中，提供具有缺乏連接(直接或間接)至Fc區之海藻糖的碳水化合物結構之抗VEGFR2 Ab變異體。舉例而言，此類抗體中海藻糖之量可為1%至80%、1%至65%、5%至65%或20%至40%。海藻糖之量藉由相對於如藉由MALDI-TOF質譜分析量測之附接至Asn 297之所有醣結構(例如複合、雜交及高甘露糖結構)的總和，計算糖鏈內Asn297處之海藻糖之平均量來測定，如例如WO 2008/077546中所描述。Asn297係指位於Fc區中約位置297(Fc區殘基之Eu編號)處之天冬醯胺殘基；然而，由於抗體之較小序列變化，Asn297亦可位於位置297之上游或下游約±3個胺基酸處，亦即位置294與300之間。該等海藻糖基化變異體可具有改良之ADCC功能。參見例如美國專利公開案第US 2003/0157108號(Presta,L.)；第US 2004/0093621號(Kyowa Hakko Kogyo Co.,Ltd)。與「去海藻糖基化」或「缺乏海藻糖」抗體變異體相關之公開案之實例包括：US 2003/0157108、WO 2000/61739、WO 2001/29246、US 2003/0115614、US 2002/0164328及Yamane-Ohnuki等人Biotech.Bioeng.87：614(2004)。能夠產生去海藻糖基化抗體之細胞株之實例包括缺乏蛋白質海藻糖基化之Lec13 CHO細胞(Ripka等人Arch.Biochem.Biophys.249：533-545(1986)；美國專利申請案第US 2003/0157108 A1號，Presta,L；及WO 2004/056312 A1,Adams等人)，及基因剔除細胞株，諸如α-1,6-海藻糖基轉移酶基因、FUT8、基因剔除CHO細胞(參見例如Yamane-Ohnuki等人Biotech.Bioeng.87：614(2004)；Kanda,Y.等人，Biotechnol.Bioeng.,94(4)：680-688(2006)；及WO2003/085107)。
如本文所用，術語「套組」係指包含至少兩個單獨容器之封裝，其中第一容器含有[5-(4-乙基-哌嗪-1-基甲基)-吡啶-2-基]-[5-氟-4-(7-氟-3-異丙基-2-甲基-3H-苯并咪唑-5-基)-嘧啶-2-基]-胺或其醫藥學 上可接受之鹽，且第二容器含有抗VEGFR2 Ab。如本文所用，術語「套組」亦指包含至少兩個單獨容器之封裝，其中第一容器含有[5-(4-乙基-哌嗪-1-基甲基)-吡啶-2-基]-[5-氟-4-(7-氟-3-異丙基-2-甲基-3H-苯并咪唑-5-基)-嘧啶-2-基]-胺或其醫藥學上可接受之鹽，且第二容器含有雷莫蘆單抗。「套組」亦可包括向癌症患者、較佳NSCLC患者投與此第一及第二容器之內容物中之所有或一部分的說明。
如本文所用，術語「治療(treating/to treat/treatment)」係指抑制、減緩、阻止、減輕或逆轉現有症狀、病症、病狀或疾病之進展或嚴重程度。
如本文所用，術語「患者」係指哺乳動物，較佳人類。
如本文所用，術語「癌症」及「癌性」係指或描述患者之通常以不受調控之細胞增殖為特徵之生理病狀。在此定義中包括良性及惡性癌症。「早期癌症」或「早期腫瘤」意謂非晚期或轉移性的或經分類為0、I、或II期癌症之癌症。癌症之實例包括(但不限於)NSCLC。
本發明之組合治療之主要優勢為在患者中產生顯著抗癌效果而不引起顯著毒性或不良作用，以使得患者總體上得益於組合治療方法之能力。本發明之組合治療之功效可藉由通常用於評估癌症治療之各種端點量測，該等端點包括(但不限於)腫瘤消退、腫瘤重量或尺寸收縮、進展時間、總體存活、無進展存活、總體反應率、反應持續時間及生命品質。本發明中所使用之治療劑可致使抑制轉移性擴散而不使原發腫瘤收縮，可誘導原發腫瘤收縮或可僅發揮腫瘤穩定效果。因為本發明係關於獨特抗腫瘤劑之組合之用途，所以可視情況使用新穎方法來測定本發明之任何特定組合療法之功效，所述新穎方法包括例如量測血管生成之血漿或泌尿標記及經由放射學成像量測反應。
如本文所用，術語「完全反應」(CR)係指所有目標病變消失。任何病理學淋巴結(無論目標或非目標)之短軸必須減少至<10mm。
如本文所用，術語「部分反應」(PR)係指以基線直徑總和作為參照，目標病變之直徑總和減少至少30%。
如本文所用，術語「進行性疾病」(PD)係指以研究之最小總和(若基線總和為研究之最小總和，則此包括基線總和)作為參照，目標病變之直徑總和增加至少20%。除20%之相對增加以外，該總和亦必須展現至少5mm之絕對增加。(註釋：一或多種新穎病變之出現亦視為進展)。
如本文所用，術語「穩定疾病」(SD)係指以同時處於研究之最小總和直徑作為參照，既不充分收縮以使PR合格亦不充分增加以使PD合格。
如本文所用，術語「客觀反應」(OR)係指CR加PR之總和。
對應於根據RECIST v1.1,Eisenhauer等人，European Journal of Cancer,2009,45,228-247之定義，熟習此項技術者將瞭解術語CR、PR、PD、SD及OR。
如本文所用，術語「疾病進展時間」或「TTP」係指自初始治療之時間直至癌症進展或惡化之時間，一般以週或月量測。此類進展可由熟練臨床醫師評估。
如本文所用，術語「延長TTP」係指相對於i)未經治療患者或相對於ii)用特定組合療法中之少於全部抗腫瘤劑治療之患者，增加經治療患者之疾病進展時間。
如本文所用，術語「存活」係指患者保持活著，且包括總體存活以及無進展存活。
如本文所用，術語「總體存活」係指自診斷或治療時間起，患者保持活著持續限定時間，諸如1年、5年等。
如本文所用，術語「無進展存活」係指患者在癌症不進展或不變糟之情況下保持活著。
如本文所用，術語「延長存活」意謂相對於i)未經治療患者，ii)用特定組合療法中之少於全部抗腫瘤劑治療之患者，或iii)對照治療方案，增加經治療患者之總體或無進展存活。在治療起始之後或在癌症之初始診斷之後，持續至少約一個月、至少約兩個月、至少約四個月、至少約六個月、至少約九個月或至少約1年、或至少約2年、或至少約3年、或至少約4年、或至少約5年、或至少約10年等監測存活情況。
如本文所用，術語「原發腫瘤」或「原發癌」意謂原始癌症且不意謂位於個體體內另一組織、器官或位置之轉移性病變。
如本文所用，術語「有效量」係指在向患者進行單劑量或多劑量投與之後，在處於診斷或治療之患者中獲得有效反應之[5-(4-乙基-哌嗪-1-基甲基)-吡啶-2-基]-[5-氟-4-(7-氟-3-異丙基-2-甲基-3H-苯并咪唑-5-基)-嘧啶-2-基]-胺或其醫藥學上可接受之鹽之量或劑量，及抗VEGFR2 Ab之量或劑量。如本文所用，術語「有效量」亦指在向患者進行單劑量或多劑量投與之後，在處於診斷或治療之患者中獲得有效反應之[5-(4-乙基-哌嗪-1-基甲基)-吡啶-2-基]-[5-氟-4-(7-氟-3-異丙基-2-甲基-3H-苯并咪唑-5-基)-嘧啶-2-基]-胺或其醫藥學上可接受之鹽之量或劑量，及雷莫蘆單抗之量或劑量。應瞭解，本發明之組合療法藉由以在體內提供有效含量之[5-(4-乙基-哌嗪-1-基甲基)-吡啶-2-基]-[5-氟-4-(7-氟-3-異丙基-2-甲基-3H-苯并咪唑-5-基)-嘧啶-2-基]-胺或其醫藥學上可接受之鹽及抗VEGFR2 Ab的任何方式投與[5-(4-乙基-哌嗪-1-基甲基)-吡啶-2-基]-[5-氟-4-(7-氟-3-異丙基-2-甲基-3H-苯并咪唑-5-基)-嘧啶-2-基]-胺或其醫藥學上可接受之鹽以及抗VEGFR2 Ab來執行。亦應瞭解，本發明之組合療法藉由以在體內提供有效含量之[5-(4-乙基-哌嗪-1-基甲基)-吡啶-2-基]-[5-氟-4-(7-氟-3-異丙基-2-甲基-3H-苯并咪唑-5-基)-嘧啶-2-基]-胺或其醫藥學上可接受之鹽及雷莫蘆 單抗的任何方式投與[5-(4-乙基-哌嗪-1-基甲基)-吡啶-2-基]-[5-氟-4-(7-氟-3-異丙基-2-甲基-3H-苯并咪唑-5-基)-嘧啶-2-基]-胺或其醫藥學上可接受之鹽以及雷莫蘆單抗來執行。
如本文所用，術語患者之「有效反應」或患者對用藥劑組合治療之「反應性」及類似措辭係指在共同投與[5-(4-乙基-哌嗪-1-基甲基)-吡啶-2-基]-[5-氟-4-(7-氟-3-異丙基-2-甲基-3H-苯并咪唑-5-基)-嘧啶-2-基]-胺或其醫藥學上可接受之鹽及抗VEGFR2 Ab之後賦予患者之臨床或治療效益。如本文所用，術語患者之「有效反應」或患者對用藥劑組合治療之「反應性」及類似措辭亦指在共同投與[5-(4-乙基-哌嗪-1-基甲基)-吡啶-2-基]-[5-氟-4-(7-氟-3-異丙基-2-甲基-3H-苯并咪唑-5-基)-嘧啶-2-基]-胺或其醫藥學上可接受之鹽及雷莫蘆單抗之後賦予患者之臨床或治療效益。此類效益包括以下中之任何一或多種：延長存活(包括總體存活及無進展存活)；產生客觀反應(包括完全反應或部分反應)；或改良癌症之病徵或症狀等。
有效量可容易由作為熟習此項技術者之主治診斷醫師藉由使用已知技術且藉由觀察在類似情況下得到之結果來確定。在確定用於患者之有效量中，主治診斷醫師考慮多個因素，包括(但不限於)：患者之物種；其體型、年齡及一般健康狀況；所涉及之特定疾病或病症；涉及程度或該疾病或病症之嚴重程度；個別患者之反應；所投與之特定化合物；投與模式；所投與製劑之生物可用性特徵；所選擇之劑量方案；伴隨藥療之使用；及其他相關情況。
本發明之組合中之[5-(4-乙基-哌嗪-1-基甲基)-吡啶-2-基]-[5-氟-4-(7-氟-3-異丙基-2-甲基-3H-苯并咪唑-5-基)-嘧啶-2-基]-胺或其醫藥學上可接受之鹽一般可在廣泛劑量範圍內有效。舉例而言，每日劑量通常處於約100毫克/天至約400毫克/天，較佳約200毫克/天至約400毫克/天，且最佳約300毫克/天至約400毫克/天之範圍內。此外，本發明 之組合中之抗VEGFR2 Ab、較佳雷莫蘆單抗一般可在廣泛劑量範圍內有效。舉例而言，每三週週期之劑量通常處於約6mg/kg至10mg/kg，較佳約8mg/kg至約10mg/kg之範圍內，且最佳約10mg/kg。在一些情況下，在[5-(4-乙基-哌嗪-1-基甲基)-吡啶-2-基]-[5-氟-4-(7-氟-3-異丙基-2-甲基-3H-苯并咪唑-5-基)-嘧啶-2-基]-胺或其醫藥學上可接受之鹽及抗VEGFR2 Ab、較佳雷莫蘆單抗之前述範圍之下限以下的劑量濃度可為超足量的，而在其他情況下，可以可接受之副作用採用較小或仍較大劑量，且因此以上劑量範圍不意欲以任何方式限制本發明之範疇。當例如在21天週期內與抗VEGFR2 Ab組合給予時，[5-(4-乙基-哌嗪-1-基甲基)-吡啶-2-基]-[5-氟-4-(7-氟-3-異丙基-2-甲基-3H-苯并咪唑-5-基)-嘧啶-2-基]-胺或其醫藥學上可接受之鹽每天係以在約100毫克/天至約400毫克/天之範圍內投與，且抗VEGFR2 Ab、較佳雷莫蘆單抗在第一天以在約6mg/kg至10mg/kg之範圍內投與。當例如在21天週期內組合給予時，[5-(4-乙基-哌嗪-1-基甲基)-吡啶-2-基]-[5-氟-4-(7-氟-3-異丙基-2-甲基-3H-苯并咪唑-5-基)-嘧啶-2-基]-胺或其醫藥學上可接受之鹽每天以在約200毫克/天至約400毫克/天之範圍內投與，且抗VEGFR2 Ab、較佳雷莫蘆單抗在第一天以在約8mg/kg至10mg/kg之範圍內投與。當例如在21天週期內組合給予時，[5-(4-乙基-哌嗪-1-基甲基)-吡啶-2-基]-[5-氟-4-(7-氟-3-異丙基-2-甲基-3H-苯并咪唑-5-基)-嘧啶-2-基]-胺或其醫藥學上可接受之鹽每天以在約300毫克/天至約400毫克/天之範圍內投與，且抗VEGFR2 Ab、較佳雷莫蘆單抗在第一天以約10mg/kg投與。
游離鹼5-(4-乙基-哌嗪-1-基甲基)-吡啶-2-基]-[5-氟-4-(7-氟-3-異丙基-2-甲基-3H-苯并咪唑-5-基)-嘧啶-2-基]-胺較佳。然而，熟習讀者應瞭解，5-(4-乙基-哌嗪-1-基甲基)-吡啶-2-基]-[5-氟-4-(7-氟-3-異丙基-2-甲基-3H-苯并咪唑-5-基)-嘧啶-2-基]-胺能夠形成鹽。5-(4-乙基-哌 嗪-1-基甲基)-吡啶-2-基]-[5-氟-4-(7-氟-3-異丙基-2-甲基-3H-苯并咪唑-5-基)-嘧啶-2-基]-胺可與多種無機酸及有機酸中之任一者反應形成醫藥學上可接受之酸加成鹽。該等醫藥學上可接受之酸加成鹽及其常見製備方法在此項技術中眾所周知。參見例如P.Stahl等人，HANDBOOK OF PHARMACEUTICAL SALTS：PROPERTIES,SELECTION AND USE,(VCHA/Wiley-VCH,2002)；L.D.Bighley,S.M.Berge,D.C.Monkhouse,「Encyclopedia of Pharmaceutical Technology」.J.Swarbrick及J.C.Boylan編，第13卷，Marcel Dekker,Inc.,New York,Basel,Hong Kong 1995，第453-499頁；S.M.Berge等人，「Pharmaceutical Salts」,Journal of Pharmaceutical Sciences，第66卷，第1期，1977年1月。鹽酸鹽及甲磺酸鹽為較佳鹽。甲磺酸鹽為尤其較佳鹽。
較佳將[5-(4-乙基-哌嗪-1-基甲基)-吡啶-2-基]-[5-氟-4-(7-氟-3-異丙基-2-甲基-3H-苯并咪唑-5-基)-嘧啶-2-基]-胺或其醫藥學上可接受之鹽及抗VEGFR2 Ab、較佳雷莫蘆單抗調配成藉由使化合物具有生物可用性之任何途徑投與之醫藥組合物。投與途徑可以任何方式變化，其受藥物之物理特性及患者及照護者之便利性限制。[5-(4-乙基-哌嗪-1-基甲基)-吡啶-2-基]-[5-氟-4-(7-氟-3-異丙基-2-甲基-3H-苯并咪唑-5-基)-嘧啶-2-基]-胺或其醫藥學上可接受之鹽較佳經口投與。較佳地，抗VEGFR2 Ab、較佳雷莫蘆單抗組合物經調配用於非經腸投與，諸如靜脈內或皮下投與。此外，[5-(4-乙基-哌嗪-1-基甲基)-吡啶-2-基]-[5-氟-4-(7-氟-3-異丙基-2-甲基-3H-苯并咪唑-5-基)-嘧啶-2-基]-胺或其醫藥學上可接受之鹽經調配用於經口或非經腸投與，包括靜脈內或皮下投與。該等醫藥組合物及其製備方法在此項技術中眾所周知。(參見例如，Remington：The Science and Practice of Pharmacy(D.B.Troy編，第21版，Lippincott,Williams & Wilkins,2006)。
如本文所用，片語「與……組合」係指[5-(4-乙基-哌嗪-1-基甲基)-吡啶-2-基]-[5-氟-4-(7-氟-3-異丙基-2-甲基-3H-苯并咪唑-5-基)-嘧啶-2-基]-胺或其醫藥學上可接受之鹽與抗VEGFR2 Ab同時投與。如本文所用，片語「與……組合」亦指[5-(4-乙基-哌嗪-1-基甲基)-吡啶-2-基]-[5-氟-4-(7-氟-3-異丙基-2-甲基-3H-苯并咪唑-5-基)-嘧啶-2-基]-胺或其醫藥學上可接受之鹽與抗VEGFR2 Ab以任何順序依序投與。如本文所用，片語「與……組合」亦指[5-(4-乙基-哌嗪-1-基甲基)-吡啶-2-基]-[5-氟-4-(7-氟-3-異丙基-2-甲基-3H-苯并咪唑-5-基)-嘧啶-2-基]-胺或其醫藥學上可接受之鹽與抗VEGFR2 Ab以其任何組合形式投與。如本文所用，片語「與……組合」亦指[5-(4-乙基-哌嗪-1-基甲基)-吡啶-2-基]-[5-氟-4-(7-氟-3-異丙基-2-甲基-3H-苯并咪唑-5-基)-嘧啶-2-基]-胺或其醫藥學上可接受之鹽與雷莫蘆單抗同時投與。如本文所用，片語「與……組合」亦指[5-(4-乙基-哌嗪-1-基甲基)-吡啶-2-基]-[5-氟-4-(7-氟-3-異丙基-2-甲基-3H-苯并咪唑-5-基)-嘧啶-2-基]-胺或其醫藥學上可接受之鹽與雷莫蘆單抗以任何順序依序投與。如本文所用，片語「與……組合」亦指[5-(4-乙基-哌嗪-1-基甲基)-吡啶-2-基]-[5-氟-4-(7-氟-3-異丙基-2-甲基-3H-苯并咪唑-5-基)-嘧啶-2-基]-胺或其醫藥學上可接受之鹽與雷莫蘆單抗以其任何組合形式投與。[5-(4-乙基-哌嗪-1-基甲基)-吡啶-2-基]-[5-氟-4-(7-氟-3-異丙基-2-甲基-3H-苯并咪唑-5-基)-嘧啶-2-基]-胺及抗VEGFR2 Ab可以同一醫藥組合物之部分之形式或以單獨醫藥組合物之形式投與。[5-(4-乙基-哌嗪-1-基甲基)-吡啶-2-基]-[5-氟-4-(7-氟-3-異丙基-2-甲基-3H-苯并咪唑-5-基)-嘧啶-2-基]-胺及雷莫蘆單抗可以同一醫藥組合物之部分之形式或以單獨醫藥組合物之形式投與。[5-(4-乙基-哌嗪-1-基甲基)-吡啶-2-基]-[5-氟-4-(7-氟-3-異丙基-2-甲基-3H-苯并咪唑-5-基)-嘧啶-2-基]-胺可在投與抗VEGFR2 Ab之前投與。[5-(4-乙基-哌嗪-1-基甲基)-吡啶-2-基]-[5-氟-4-(7-氟-3- 異丙基-2-甲基-3H-苯并咪唑-5-基)-嘧啶-2-基]-胺可在投與抗VEGFR2 Ab同時投與。[5-(4-乙基-哌嗪-1-基甲基)-吡啶-2-基]-[5-氟-4-(7-氟-3-異丙基-2-甲基-3H-苯并咪唑-5-基)-嘧啶-2-基]-胺可在投與抗VEGFR2 Ab之後投與。[5-(4-乙基-哌嗪-1-基甲基)-吡啶-2-基]-[5-氟-4-(7-氟-3-異丙基-2-甲基-3H-苯并咪唑-5-基)-嘧啶-2-基]-胺可在投與抗VEGFR2 Ab之前、在投與抗VEGFR2 Ab同時或在投與抗VEGFR2 Ab之後或以其某一組合形式投與。[5-(4-乙基-哌嗪-1-基甲基)-吡啶-2-基]-[5-氟-4-(7-氟-3-異丙基-2-甲基-3H-苯并咪唑-5-基)-嘧啶-2-基]-胺可在投與雷莫蘆單抗之前投與。[5-(4-乙基-哌嗪-1-基甲基)-吡啶-2-基]-[5-氟-4-(7-氟-3-異丙基-2-甲基-3H-苯并咪唑-5-基)-嘧啶-2-基]-胺可在投與雷莫蘆單抗同時投與。[5-(4-乙基-哌嗪-1-基甲基)-吡啶-2-基]-[5-氟-4-(7-氟-3-異丙基-2-甲基-3H-苯并咪唑-5-基)-嘧啶-2-基]-胺可在投與雷莫蘆單抗之後投與。[5-(4-乙基-哌嗪-1-基甲基)-吡啶-2-基]-[5-氟-4-(7-氟-3-異丙基-2-甲基-3H-苯并咪唑-5-基)-嘧啶-2-基]-胺可在投與雷莫蘆單抗之前、在投與雷莫蘆單抗同時或在投與雷莫蘆單抗之後或以其某一組合形式投與。在抗VEGFR2 Ab以重複時間間隔投與之情況下(例如在標準療程期間)，[5-(4-乙基-哌嗪-1-基甲基)-吡啶-2-基]-[5-氟-4-(7-氟-3-異丙基-2-甲基-3H-苯并咪唑-5-基)-嘧啶-2-基]-胺可在抗VEGFR2 Ab之各投與之前投與。在抗VEGFR2 Ab以重複時間間隔投與之情況下(例如在標準療程期間)，[5-(4-乙基-哌嗪-1-基甲基)-吡啶-2-基]-[5-氟-4-(7-氟-3-異丙基-2-甲基-3H-苯并咪唑-5-基)-嘧啶-2-基]-胺可在抗VEGFR2 Ab之各投與同時投與。在抗VEGFR2 Ab以重複時間間隔投與之情況下(例如在標準療程期間)，[5-(4-乙基-哌嗪-1-基甲基)-吡啶-2-基]-[5-氟-4-(7-氟-3-異丙基-2-甲基-3H-苯并咪唑-5-基)-嘧啶-2-基]-胺可在抗VEGFR2 Ab之各投與之後投與。在抗VEGFR2 Ab以重複時間間隔投與之情況下(例如在標準療程期間)，[5-(4-乙基-哌 嗪-1-基甲基)-吡啶-2-基]-[5-氟-4-(7-氟-3-異丙基-2-甲基-3H-苯并咪唑-5-基)-嘧啶-2-基]-胺可在抗VEGFR2 Ab之各投與之前、在抗VEGFR2 Ab之各投與同時或在抗VEGFR2 Ab之各投與之後或以其某一組合形式投與。在抗VEGFR2 Ab以重複時間間隔投與之情況下(例如在標準療程期間)，[5-(4-乙基-哌嗪-1-基甲基)-吡啶-2-基]-[5-氟-4-(7-氟-3-異丙基-2-甲基-3H-苯并咪唑-5-基)-嘧啶-2-基]-胺可相對於用抗VEGFR2 Ab之療法，以不同時間間隔投與。在抗VEGFR2 Ab以重複時間間隔投與之情況下(例如在標準療程期間)，[5-(4-乙基-哌嗪-1-基甲基)-吡啶-2-基]-[5-氟-4-(7-氟-3-異丙基-2-甲基-3H-苯并咪唑-5-基)-嘧啶-2-基]-胺可在用抗VEGFR2 Ab之療程之前、在該療程期間之任何時間或在該療程之後以單一或一系列劑量投與。在抗VEGFR2 Ab以重複時間間隔投與之情況下(例如在標準療程期間)，[5-(4-乙基-哌嗪-1-基甲基)-吡啶-2-基]-[5-氟-4-(7-氟-3-異丙基-2-甲基-3H-苯并咪唑-5-基)-嘧啶-2-基]-胺可在用抗VEGFR2 Ab之療程之前、在該療程期間之任何時間或在該療程之後以單一劑量投與。在抗VEGFR2 Ab以重複時間間隔投與之情況下(例如在標準療程期間)，[5-(4-乙基-哌嗪-1-基甲基)-吡啶-2-基]-[5-氟-4-(7-氟-3-異丙基-2-甲基-3H-苯并咪唑-5-基)-嘧啶-2-基]-胺可在用抗VEGFR2 Ab之療程之前以單一劑量投與。在抗VEGFR2 Ab以重複時間間隔投與之情況下(例如在標準療程期間)，[5-(4-乙基-哌嗪-1-基甲基)-吡啶-2-基]-[5-氟-4-(7-氟-3-異丙基-2-甲基-3H-苯并咪唑-5-基)-嘧啶-2-基]-胺可在用抗VEGFR2 Ab之療程期間的任何時間以單一劑量投與。在抗VEGFR2 Ab以重複時間間隔投與之情況下(例如在標準療程期間)，[5-(4-乙基-哌嗪-1-基甲基)-吡啶-2-基]-[5-氟-4-(7-氟-3-異丙基-2-甲基-3H-苯并咪唑-5-基)-嘧啶-2-基]-胺可在用抗VEGFR2 Ab之療程之後以單一劑量投與。在抗VEGFR2 Ab以重複時間間隔投與之情況下(例如在標準療程期間)，[5-(4-乙基-哌嗪-1- 基甲基)-吡啶-2-基]-[5-氟-4-(7-氟-3-異丙基-2-甲基-3H-苯并咪唑-5-基)-嘧啶-2-基]-胺可在用抗VEGFR2 Ab之療程之前以一系列劑量投與。在抗VEGFR2 Ab以重複時間間隔投與之情況下(例如在標準療程期間)，[5-(4-乙基-哌嗪-1-基甲基)-吡啶-2-基]-[5-氟-4-(7-氟-3-異丙基-2-甲基-3H-苯并咪唑-5-基)-嘧啶-2-基]-胺可在用抗VEGFR2 Ab之療程之後以一系列劑量投與。
在雷莫蘆單抗以重複時間間隔投與之情況下(例如在標準療程期間)，[5-(4-乙基-哌嗪-1-基甲基)-吡啶-2-基]-[5-氟-4-(7-氟-3-異丙基-2-甲基-3H-苯并咪唑-5-基)-嘧啶-2-基]-胺可在雷莫蘆單抗之各投與之前投與。在雷莫蘆單抗以重複時間間隔投與之情況下(例如在標準療程期間)，[5-(4-乙基-哌嗪-1-基甲基)-吡啶-2-基]-[5-氟-4-(7-氟-3-異丙基-2-甲基-3H-苯并咪唑-5-基)-嘧啶-2-基]-胺可在雷莫蘆單抗之各投與同時投與。在雷莫蘆單抗以重複時間間隔投與之情況下(例如在標準療程期間)，[5-(4-乙基-哌嗪-1-基甲基)-吡啶-2-基]-[5-氟-4-(7-氟-3-異丙基-2-甲基-3H-苯并咪唑-5-基)-嘧啶-2-基]-胺可在雷莫蘆單抗之各投與之後投與。在雷莫蘆單抗以重複時間間隔投與之情況下(例如在標準療程期間)，[5-(4-乙基-哌嗪-1-基甲基)-吡啶-2-基]-[5-氟-4-(7-氟-3-異丙基-2-甲基-3H-苯并咪唑-5-基)-嘧啶-2-基]-胺可在雷莫蘆單抗之各投與之前、在雷莫蘆單抗之各投與同時或在雷莫蘆單抗之各投與之後或以其某一組合形式投與。在雷莫蘆單抗以重複時間間隔投與之情況下(例如在標準療程期間)，[5-(4-乙基-哌嗪-1-基甲基)-吡啶-2-基]-[5-氟-4-(7-氟-3-異丙基-2-甲基-3H-苯并咪唑-5-基)-嘧啶-2-基]-胺可相對於用雷莫蘆單抗之療法，以不同時間間隔投與。在雷莫蘆單抗以重複時間間隔投與之情況下(例如在標準療程期間)，[5-(4-乙基-哌嗪-1-基甲基)-吡啶-2-基]-[5-氟-4-(7-氟-3-異丙基-2-甲基-3H-苯并咪唑-5-基)-嘧啶-2-基]-胺可在用雷莫蘆單抗之療程之前、在該療程期間之任何時間 或在該療程之後以單一或一系列劑量投與。在雷莫蘆單抗以重複時間間隔投與之情況下(例如在標準療程期間)，[5-(4-乙基-哌嗪-1-基甲基)-吡啶-2-基]-[5-氟-4-(7-氟-3-異丙基-2-甲基-3H-苯并咪唑-5-基)-嘧啶-2-基]-胺可在用雷莫蘆單抗之療程之前、在該療程期間之任何時間或在該療程之後以單一劑量投與。在雷莫蘆單抗以重複時間間隔投與之情況下(例如在標準療程期間)，[5-(4-乙基-哌嗪-1-基甲基)-吡啶-2-基]-[5-氟-4-(7-氟-3-異丙基-2-甲基-3H-苯并咪唑-5-基)-嘧啶-2-基]-胺可在用雷莫蘆單抗之療程之前以單一劑量投與。在雷莫蘆單抗以重複時間間隔投與之情況下(例如在標準療程期間)，[5-(4-乙基-哌嗪-1-基甲基)-吡啶-2-基]-[5-氟-4-(7-氟-3-異丙基-2-甲基-3H-苯并咪唑-5-基)-嘧啶-2-基]-胺可在用雷莫蘆單抗之療程期間的任何時間以單一劑量投與。在雷莫蘆單抗以重複時間間隔投與之情況下(例如在標準療程期間)，[5-(4-乙基-哌嗪-1-基甲基)-吡啶-2-基]-[5-氟-4-(7-氟-3-異丙基-2-甲基-3H-苯并咪唑-5-基)-嘧啶-2-基]-胺可在用雷莫蘆單抗之療程之後以單一劑量投與。在雷莫蘆單抗以重複時間間隔投與之情況下(例如在標準療程期間)，[5-(4-乙基-哌嗪-1-基甲基)-吡啶-2-基]-[5-氟-4-(7-氟-3-異丙基-2-甲基-3H-苯并咪唑-5-基)-嘧啶-2-基]-胺可在用雷莫蘆單抗之療程之前以一系列劑量投與。在雷莫蘆單抗以重複時間間隔投與之情況下(例如在標準療程期間)，[5-(4-乙基-哌嗪-1-基甲基)-吡啶-2-基]-[5-氟-4-(7-氟-3-異丙基-2-甲基-3H-苯并咪唑-5-基)-嘧啶-2-基]-胺可在用雷莫蘆單抗之療程之後以一系列劑量投與。
[5-(4-乙基-哌嗪-1-基甲基)-吡啶-2-基]-[5-氟-4-(7-氟-3-異丙基-2-甲基-3H-苯并咪唑-5-基)-嘧啶-2-基]-胺或其醫藥學上可接受之鹽可藉由此項技術中已知之多種程序製備。
以下製備及實例進一步說明本發明。除非相反地指出，否則本文中所說明之化合物使用ChemDraw® Ultra 5.0命名及編號。
製備1 1-(6-溴-吡啶-3-基甲基)-4-乙基-哌嗪
向6-溴-吡啶-3-甲醛(8.3kg)及二氯甲烷(186kg)之混合物中添加純1-乙基哌嗪(5.6kg)。隨後，逐份添加三乙醯氧基硼氫化鈉(10.9kg)且在20-30℃下攪拌12小時。將反應物淬滅於二氯甲烷(36kg)及氫氧化鈉水溶液2N(46kg)之混合物中。分離各層且用二氯甲烷(24×2kg)將水層萃取兩次。合併有機層，用鹽水(50×2kg)洗滌且在真空下移除溶劑，得到11.5kg標題化合物。MS(ES+)：m/z=285(M+H)+。
製備2 5-(4-乙基-哌嗪-1-基甲基)-吡啶-2-基胺
在T40℃下向1-(6-溴-吡啶-3-基甲基)-4-乙基-哌嗪(14.2kg)、氧化亞銅(200g)及MeOH(57kg)之脫氣混合物中添加液氨(50.0kg)。在65-75℃下加熱混合物隔夜。冷卻至20-30℃且經CELITE®填料過濾。濃縮濾液且添加二氯甲烷(113kg)且用氫氧化鈉2N(23kg)將pH調整至12-14，分離各相且用二氯甲烷(58×2kg)洗滌有機相且合併有機層。經由CELITE®過濾混合物且濃縮。將殘餘物溶解於甲苯(9.7kg)中且藉由添加甲基第三丁基醚(8.3kg)結晶，得到6.0kg標題化合物。經由甲苯再結晶達到進一步純化。MS(ES+)：m/z=221(M+H)+。
製備3 N-(4-溴-2,6-二氟-苯基)-N'-異丙基-乙脒
向4-溴-2,6-二氟-苯胺(10.0g)、N-異丙基乙醯胺(9.73g)、磷醯氯(6.70mL)於甲苯(150mL)中之混合物中添加三乙胺(10.05mL)。將混合物加熱至回流，持續3小時。冷卻混合物且在真空下移除溶劑。將粗產物溶解於二氯甲烷中，用碳酸氫鈉飽和水溶液洗滌若干次以移除所有痕量酸。經硫酸鈉乾燥且在真空下移除溶劑，得到14g標題化合物。MS(ES+)：m/z=292(M+H)+。
製備4 6-溴-4-氟-1-異丙基-2-甲基-1H-苯并咪唑
向N-(4-溴-2,6-二氟-苯基)-N'-異丙基-乙脒(16.2kg)於N-甲基甲醯胺(76kg)中之溶液中逐份添加第三丁醇鉀(6.9kg)，同時將溫度維持在T<30℃下。在70-75℃下加熱混合物直至根據HPLC反應完成。冷卻至20-30℃且藉由添加至水(227kg)中淬滅，隨後用甲基第三丁基醚(37×4kg)萃取。用鹽水(49×2kg)洗滌經合併之有機相且濃縮至25至30L，添加正己烷(64kg)且過濾漿料，得到11kg標題化合物。MS(ES+)：m/z=272(M+H)+。
藉由將粗化合物溶解於二氯甲烷中且經由矽膠及CELITE®填料過濾，隨後自甲基第三丁基醚/己烷混合物分離進一步純化。
製備5 4-氟-1-異丙基-2-甲基-6-(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧硼-2-基)-1H-苯并咪唑
將氮氣鼓泡至6-溴-4-氟-1-異丙基-2-甲基-1H-苯并咪唑(30.0g)、雙(頻哪醇根基)二硼(42.15g)、三環己基膦(5.43g)、乙酸鉀(32.58g)及二甲亞碸(200mL)之混合物中。添加乙酸鈀(2.8g)且在90℃下於預加熱油浴中加熱1小時。用乙酸乙酯(200mL)稀釋且經CELITE®填料過濾。用鹽水(100mL)洗滌混合物，經硫酸鈉乾燥且在真空下移除溶劑。用己烷濕磨且過濾固體，得到27g標題化合物。MS(ES+)：m/z=319(M+H)+。
製備6 6-(2-氯-5-氟-嘧啶-4-基)-4-氟-1-異丙基-2-甲基-1H-苯并咪唑
將氮氣鼓泡至2,4-二氯-5-氟-嘧啶(12.7g)、氯化雙(三苯膦)鈀(II)(4.9g)、碳酸鈉之2M水溶液(103.7mL)及1,2-二甲氧乙烷(120mL)中之混合物中。在80℃之預加熱油浴中加熱且逐滴添加4-氟-1-異丙基- 2-甲基-6-(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧硼-2-基)-1H-苯并咪唑(22g)於1,2-二甲氧乙烷(200mL)中之溶液。將混合物在84℃下攪拌1小時。冷卻至室溫，添加乙酸乙酯(800mL)且用鹽水(100mL)洗滌兩次。經硫酸鎂乾燥且在真空下移除溶劑。用乙腈濕磨，得到14.4g標題化合物。MS(ES+)：m/z=323(M+H)+。
參考實例1 [5-(4-乙基-哌嗪-1-基甲基)-吡啶-2-基]-[5-氟-4-(7-氟-3-異丙基-2-甲基-3H-苯并咪唑-5-基)-嘧啶-2-基]-胺
將氮氣鼓泡至6-(2-氯-5-氟-嘧啶-4-基)-4-氟-1-異丙基-2-甲基-1H-苯并咪唑(15.9g)、5-(4-乙基-哌嗪-1-基甲基)-吡啶-2-基胺(10.85g)、碳酸銫(32.10g)、參(二亞苄基丙酮)二鈀(1.82g)、4,5-雙(二苯膦基)-9,9-二甲基二苯并哌喃(2.35g)於1,4-二噁烷(197.06mL)中之混合物中。在110℃下於預加熱油浴中加熱混合物2小時。冷卻至室溫，用二氯甲烷稀釋且經CELITE®填料過濾。在真空下移除溶劑且藉由矽膠管柱層析，用二氯甲烷/甲醇(2%)且隨後二氯甲烷/甲醇-NH3 2M 2%溶離來純化，得到22.11g標題化合物。MS(ES+)：m/z=507(M+H)+。
參考實例1A [5-(4-乙基-哌嗪-1-基甲基)-吡啶-2-基]-[5-氟-4-(7-氟-3-異丙基-2-甲基-3H-苯并咪唑-5-基)-嘧啶-2-基]-胺甲磺酸鹽
向[5-(4-乙基-哌嗪-1-基甲基)-吡啶-2-基]-[5-氟-4-(7-氟-3-異丙基-2-甲基-3H-苯并咪唑-5-基)嘧啶-2-基]-胺(17.3g)於二氯甲烷(100mL)及甲醇(100mL)之混合物中之溶液中添加甲磺酸(63.59mL)。攪拌溶 液1小時且在真空下移除溶劑。用甲基第三丁基醚濕磨且過濾固體，得到20.4g標題化合物。MS 35(ES+)：m/z=507(M+H)+。
參考實例2 [5-(4-乙基-哌嗪-1-基甲基)-吡啶-2-基]-[5-氟-4-(7-氟-3-異丙基-2-甲基-3H-苯并咪唑-5-基)-嘧啶-2-基]-胺 結晶形態I
混合102.1mg非晶形[5-(4-乙基-哌嗪-1-基甲基)-吡啶-2-基]-[5-氟-4-(7-氟-3-異丙基-2-甲基-3H-苯并咪唑-5-基)-嘧啶-2-基]-胺與2mL丙酮。藉由真空過濾分離沈澱固體，產生淡黃色濾餅且原地於過濾設備上乾燥30分鐘，得到72.1mg固體。將固體置放於100℃真空烘箱中3小時。形態I之代表性XRD峰顯示於表1中。
參考實例3 [5-(4-乙基-哌嗪-1-基甲基)-吡啶-2-基]-[5-氟-4-(7-氟-3-異丙基-2-甲基-3H-苯并咪唑-5-基)-嘧啶-2-基]-胺 結晶形態III
混合208mg非晶形[5-(4-乙基-哌嗪-1-基甲基)-吡啶-2-基]-[5-氟-4-(7-氟-3-異丙基-2-甲基-3H-苯并咪唑-5-基)-嘧啶-2-基]-胺與4mL丙酮。在60℃下使懸浮液漿化2小時同時在1000rpm下攪拌，且隨後藉由真空過濾分離固體，產生淡黃色濾餅。原地於過濾設備上乾燥30分鐘，得到112mg固體(54%產率)。置放於80℃真空烘箱中3小時。形態III之代表性XRD峰顯示於表2中。使用外標驗證峰位置。
X射線粉末繞射
晶體之XRD圖係用在50kV及40mA下操作之裝備有CuKα源(λ=1.54056Å)及Vantec偵測器之Bruker D8 Advance X射線粉末繞射儀獲得。各樣品在4°與40° 2θ之間掃描，其中2θ之步長為0.02°且掃描速率為9.0秒/步，且發散及接收狹縫為1mm且偵測器狹縫為0.1mm。將乾 粉裝填至凹入式頂部裝載樣品固持器中且使用玻璃載片獲得光滑表面。在環境溫度及相對濕度下收集結晶形態繞射圖。在挑選峰之前移除形態III晶體之背景，而不移除形態I之背景。
結晶學技術中熟知對於任何既定結晶形態，由於由諸如晶體形態及習性之因素所產生之較佳定向，繞射峰之相對強度可能變化。在存在較佳定向之影響之情況下，峰強度改變，但多晶型物之特徵峰位置不變。參見例如美國藥典(The United States Pharmacopeia)第23版，國家處方集(National Formulary)第18版，第1843-1844頁，1995。此外，結晶學技術中亦熟知，對於任何既定結晶形態，角度峰位置可略微變化。舉例而言，峰位置可能由於分析樣品時之溫度或濕度變化、樣品移位或內標之存在或不存在而有位移。在本發明之情況下，2θ±0.1之峰位置變化率將考慮此等潛在變化而不妨礙明確鑑別指定結晶形態。
結晶形態之確認可基於特徵峰、通常為較顯著之峰(以°2θ為單位)之任何獨特組合來進行。因此，[5-(4-乙基-哌嗪-1-基甲基)-吡啶-2-基]-[5-氟-4-(7-氟-3-異丙基-2-甲基-3H-苯并咪唑-5-基)-嘧啶-2-基]-胺結晶形態I之製備樣品藉由XRD圖，使用CuKα輻射來表徵，其具有如下表1中所描述之繞射峰(2θ值)，且尤其具有在4.51處之峰以及一或多個選自由13.09、16.31及18.82組成之群的峰；其中繞射角之公差為0.1度。
[5-(4-乙基-哌嗪-1-基甲基)-吡啶-2-基]-[5-氟-4-(7-氟-3-異丙基-2-甲基-3H-苯并咪唑-5-基)-嘧啶-2-基]-胺結晶形態III之製備樣品藉由XRD圖，使用CuKα輻射來表徵，其具有如下表2中所描述之繞射峰(2θ值)，且尤其具有在21.29處之峰以及一或多個選自由11.54、10.91及12.13組成之群的峰；其中繞射角之公差為0.1度。
固態13C NMR
用在1H及13C頻率分別為400.131MHz及100.623MHz下操作且使用Bruker 4mm雙共振探針之Bruker Avance III 400寬孔NMR光譜儀獲得交叉極化/變角度旋轉(CP/MAS)NMR(固態NMR或SSNMR)光譜。使用Bruker MAS-II控制器將MAS速率設定成5kHz或10kHz；將旋轉速度維持在設定點之2Hz內。使用在100kHz之質子章動頻率下之SPINAL64去耦進行異核去耦。藉由五個脈衝總旁頻帶抑制(TOSS)序列消除旋轉旁頻帶。將磁化自質子轉移至碳之CP接觸時間設定成4ms且在1H通道上使用93.5kHz至46.9kHz之線性功率斜坡以增強CP效率。擷取時間設定成34ms且在30kHz之光譜寬度上以5s之循環延遲獲取光譜。樣品溫度調整為297±1K以使由樣品旋轉所引起之摩擦生熱最小化。經由金剛烷之高場共振(δ=29.5ppm)，13C化學位移外部參照(±0.05ppm)純(液態)四甲基矽烷之質子去耦13C峰。
[5-(4-乙基-哌嗪-1-基甲基)-吡啶-2-基]-[5-氟-4-(7-氟-3-異丙基-2-甲基-3H-苯并咪唑-5-基)-嘧啶-2-基]-胺結晶形態III之化學位移之峰清單如下：13C-NMR：ν(F1)(ppm)11.7,12.9,20.5,48.6,52.5,59.4,108.9,110.0,112.7,127.3,129.4,135.5,136.4,148.8,150.1,152.2,154.5,156.3。
參考實例4 [5-(4-乙基-哌嗪-1-基甲基)-吡啶-2-基]-[5-氟-4-(7-氟-3-異丙基-2-甲基-3H-苯并咪唑-5-基)-嘧啶-2-基]-胺 結晶形態III-途徑B
a. 1-(6-溴-吡啶-3-基甲基)-4-乙基-哌嗪
向6-溴-吡啶-3-甲醛(8.3kg)及二氯甲烷(186kg)之混合物中添加純1-乙基哌嗪(5.6kg)。隨後，逐份添加三乙醯氧基硼氫化鈉(10.9kg)且在20-30℃下攪拌12小時。將反應物淬滅於二氯甲烷(36kg)及氫氧化鈉水溶液2N(46kg)之混合物中。分離各層且用二氯甲烷(24×2kg)將水層萃取兩次。合併有機層，用鹽水(50×2kg)洗滌且在真空下移除溶劑，得到11.5kg標題化合物。MS(ES+)：m/z=285(M+H)+。
b. 5-(4-乙基-哌嗪-1-基甲基)-吡啶-2-基胺
在T40℃下向1-(6-溴-吡啶-3-基甲基)-4-乙基-哌嗪(14.2kg)、氧化亞銅(200g)及甲醇(57kg)之脫氣混合物中添加液氨(50.0kg)。在65-75℃下加熱混合物隔夜。冷卻至20-30℃且經CELITE®填料過濾。濃縮濾液且添加二氯甲烷(113kg)且用氫氧化鈉2N(23kg)將pH調整至12-14，分離各相且用二氯甲烷(58×2kg)洗滌有機相且合併有機層。經由CELITE®過濾混合物且濃縮。將殘餘物溶解於甲苯(9.7kg)中且藉由添加甲基第三丁基醚(8.3kg)結晶，得到6.0kg標題化合物。經由甲苯再結晶達到進一步純化。MS(ES+)：m/z=221(M+H)+。
c. N-異丙基-乙醯胺
在<20℃下向2-丙胺(12kg)於乙酸乙酯(108kg)中之溶液中添加碳酸鉀(28kg)。將混合物冷卻至5℃至0℃且以約2-3千克/小時添加乙醯氯(16.7kg)。攪拌直至根據氣相層析反應完成。用水(0.8kg)淬滅反應物且過濾反應混合物且濃縮，得到13.4kg標題化合物。NMR(CDCl3)4.06(m,1H),1.94(s,3H),1.14(d,6H)。
d. N-(4-溴-2,6-二氟-苯基)-N'-異丙基-乙脒
在<20℃下向4-溴-2,6-二氟-苯胺(14.5kg)、N-異丙基乙醯胺(8.5kg)、三乙胺(10.6kg)於甲苯(115kg)中之混合物中添加磷醯氯(16.0kg)。在10-20℃下攪拌直至根據高效液相層析反應完成。在真空下移 除溶劑且添加甲基第三丁基醚(64kg)。用10%碳酸鈉水溶液(250kg)調整混合物之pH。過濾混合物且用甲基第三丁基醚(11×2kg)沖洗濾餅。分離各相且用甲基第三丁基醚(22×2kg)洗滌水層。合併有機層且濃縮，過濾且用環己烷(0.6kg)洗滌且乾燥，得到17.2kg標題化合物。MS(ES+)：m/z=292(M+H)+。
e. 6-溴-4-氟-1-異丙基-2-甲基-1H-苯并咪唑
向N-(4-溴-2,6-二氟-苯基)-N'-異丙基-乙脒(16.2kg)於N-甲基甲醯胺(76kg)中之溶液中逐份添加第三丁醇鉀(6.9kg)，同時將溫度維持在T<30℃下。在70-75℃下加熱混合物直至根據高效液相層析反應完成。冷卻至20-30℃且藉由添加至水(227kg)中淬滅，隨後用甲基第三丁基醚(37×4kg)萃取。用鹽水(49×2kg)洗滌經合併之有機相且濃縮至25-30L，添加正己烷(64kg)且過濾漿料，得到11kg標題化合物。MS(ES+)：m/z=272(M+H)+。
藉由將粗化合物溶解於二氯甲烷中且經由矽膠及CELITE®填料過濾，隨後自甲基第三丁基醚/己烷混合物分離進一步純化。
f. 4-氟-1-異丙基-2-甲基-6-(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧硼-2-基)-1H-苯并咪唑
將氮氣鼓泡至6-溴-4-氟-1-異丙基-2-甲基-1H-苯并咪唑(600g)、雙(頻哪醇根基)二硼(843g)、三環己基膦(106g)、乙酸鉀(652g)及二甲亞碸(3.6L)之混合物中。添加乙酸鈀(49g)且在100℃下加熱直至根據高效液相層析反應完成。冷卻反應混合物且用水(18L)稀釋，隨後過濾以分離固體。將粗物質溶解於1,2-二甲氧乙烷(450mL)中且經由CELITE®過濾。濾液直接用於部分g。
g. 6-(2-氯-5-氟-嘧啶-4-基)-4-氟-1-異丙基-2-甲基-1H-苯并咪唑
將氮氣鼓泡至2,4-二氯-5-氟-嘧啶(517g)、碳酸鈉(586g)於水(1.7L)及1,2-二甲氧乙烷(3.4L)中之混合物中。添加氯化雙(三苯膦)鈀(II) (4.9g)且在80±3℃下加熱反應物且逐滴添加來自部分f之4-氟-1-異丙基-2-甲基-6-(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧硼-2-基)-1H-苯并咪唑於1,2-二甲氧乙烷中之溶液(5.1L)。在80±3℃下攪拌混合物直至根據高效液相層析反應完成。冷卻至室溫且用冷水(2.1L，5℃)稀釋。攪拌1小時，隨後藉由過濾分離粗固體。藉由用異丙醇濕磨實現固體之進一步純化，得到472g標題化合物。MS(ES+)：m/z=323(M+H)+。
h.[5-(4-乙基-哌嗪-1-基甲基)-吡啶-2-基]-[5-氟-4-(7-氟-3-異丙基-2-甲基-3H-苯并咪唑-5-基)-嘧啶-2-基]-胺結晶形態III
將氮氣鼓泡至6-(2-氯-5-氟-嘧啶-4-基)-4-氟-1-異丙基-2-甲基-1H-苯并咪唑(465g)、5-(4-乙基-哌嗪-1-基甲基)-吡啶-2-基胺(321g)、碳酸鉀(403g)、4,5-雙(二苯膦基)-9,9-二甲基二苯并哌喃(17g)於第三戊醇(2.3L)中之混合物中。在100±5℃下加熱參(二亞苄基丙酮)二鈀(13.2g)及混合物直至根據高效液相層析反應完成。冷卻至室溫，用二氯甲烷(1.2L)稀釋且經CELITE®填料過濾。用4M HCl(2.3L×2)萃取濾液。合併水層且與木炭(32g)一起攪拌。經由CELITE®過濾，添加二氯甲烷(1.7L)且用NaOH(28%水溶液，1.5L)調整pH。收集有機層且用二氯甲烷(1.7L)洗滌水層。合併有機層，用鹽水(1L)洗滌，且經硫酸鎂乾燥。使用以固體為載體之Si-硫醇處理以移除殘餘鈀且將溶劑換為丙酮。過濾漿料且乾燥，得到605g呈形態I之粗產物。混合605g形態I與4.3L無水丙酮。使懸浮液在56-57℃(回流)下漿化至少18小時且隨後在環境溫度下漿化4小時。藉由真空過濾分離固體，產生淡黃色濾餅。在35℃下於真空烘箱中乾燥固體直至獲得570g之恆 重。藉由XRPD確認物質為標題化合物之形態III。MS(ES+)：m/z=507(M+H)+。
以下實例說明抗VEGFR2 Ab(包括(但不限於)雷莫蘆單抗)(藉助於針對小鼠VEGFR2之大鼠單株抗體DC101，其可在實驗中在小鼠中用作雷莫蘆單抗之替代物)與[5-(4-乙基-哌嗪-1-基甲基)-吡啶-2-基]-[5-氟-4-(7-氟-3-異丙基-2-甲基-3H-苯并咪唑-5-基)-嘧啶-2-基]-胺之組合之出人意料的改良。[5-(4-乙基-哌嗪-1-基甲基)-吡啶-2-基]-[5-氟-4-(7-氟-3-異丙基-2-甲基-3H-苯并咪唑-5-基)-嘧啶-2-基]-胺之甲磺酸鹽形式用於某些以下分析中且表示為化合物A。
實例1 化合物A以及DC101於小鼠異種移植模型(H441及NCI-H2122)中關於非小細胞肺癌之抗腫瘤作用 總體資訊： 腫瘤植入及處理：
使人類NSCLC細胞株NCI-H441或NCI-H2122生長於RPMI 1640培養基+10%胎牛血清中。收集具有胰蛋白酶之亞匯合細胞且用無血清之生長培養基沖洗兩次。對於皮下腫瘤，藉由在各個體動物之背側皮下注射含5×106個細胞之漢克氏平衡鹽溶液(Hank's balanced salt solution，HBSS)與基質膠(BD Bioscience,Franklin Lakes,NJ)之1：1混合物起始生長。當平均腫瘤體積在尺寸上達至大約150-200mm3時，藉由此項技術中熟知之隨機化分組技術按腫瘤尺寸及體重將動物隨機化分組且使用每組所指定之動物數目將所述動物置放至其各別處理組中。
資料擷取：
使用Web Director擷取腫瘤尺寸及體重。藉由使用下式估計腫瘤體積(V)：V=0.536L×W2，其中L=所量測之直徑中之較大者且W= 垂直直徑中之較小者。將腫瘤體積資料轉化成對數標度以使時間及處理組之間之變異數等化。藉由隨時間及處理之雙向重複量測之變異數分析，使用SAS軟體(版本9.3)之MIXED程序分析對數體積資料。用於重複量測之相關模型為Spatial Power。比較各時間點之處理組與對照組。MIXED程序亦單獨用於各處理組以計算在各時間點之經調整之平均值及標準誤差。兩個分析均解釋各動物內之自相關及在早期自研究移除具有較大腫瘤之動物時出現之資料丟失。繪製各處理組之經調整之平均值及標準誤差對比時間之圖。使用最接近用化合物A給藥之最後一天獲取的腫瘤體積量測值來計算腫瘤體積之相對變化(T/C%)，而基線腫瘤體積為在給藥第一天或在給藥第一天之前不久記錄之體積。使用式T/C%=100×△T/△C計算T/C%值，其中T=化合物處理組之平均腫瘤體積，△T=化合物處理組之平均腫瘤體積減基線日之平均腫瘤體積，C=對照(媒劑)組之平均腫瘤體積，且△C=對照組之平均腫瘤體積減基線日之平均腫瘤體積。在彼等情況下觀察腫瘤生長抑制：T/C%之計算值小於100%，其中較大抑制產生較小T/C%值。若△T<0，則計算腫瘤消退值而非T/C%，其中消退%=100×△T/T初始以使得T初始=所有處理組之腫瘤體積之總平均值。所列出之T/C%之任何負值為消退%值。
藉由在研究過程期間一週兩次進行之三維測徑規量測法量測腫瘤體積來評估DC101與化合物A之組合之抗腫瘤功效。在研究過程期間每週兩次量測體重作為耐受性之一般指示。
化合物A及DC101之調配：每週於1%羥乙基纖維素(HEC)中於pH 2之25mM磷酸鹽緩衝液(PB)中調配化合物A且將其儲存在4℃下。將DC101溶解於磷酸鹽緩衝鹽水中且儲存在4℃下。
對照組：向對照組之動物投與根據各化合物之相同時程分別用於化合物A及DC101之兩種媒劑。
對於單一療法組，用如所指示之所需化合物及不遵循非給藥化合物之時程來給藥之化合物之媒劑處理動物。
NCI-H441異種移植腫瘤 研究1： 單一療法化合物A
使用0.2毫升/劑量以50mg/kg或100mg/kg之劑量每日一次持續28天藉由經口管飼用化合物A處理帶有NCI-H441異種移植腫瘤之雌性Hsd無胸腺裸小鼠(n=8)。在平均腫瘤體積在尺寸上達至大約150-200mm3之後(腫瘤植入之後的第15天)開始投與化合物A且28天後(第42天)結束處理。在處理期期間，一週兩次量測腫瘤體積及體重。
結果：用50mg/kg或100mg/kg化合物A處理引起腫瘤生長之顯著抑制。在研究第42天觀察之50mg/kg劑量之平均消退百分比為-8.1%且100mg/kg劑量之平均消退百分比為-22.8%。與對照相比，此等值經測定為統計顯著的(p<0.001)。在處理期結束時之相對腫瘤體積指示，用50mg/kg化合物A單一療法處理引起8隻動物中6隻動物之部分反應及8隻動物中2隻動物之穩定疾病。在用100mg/kg化合物A單一療法處理之所有(8/8)小鼠中觀察到部分反應。用單一試劑化合物A處理未顯示顯著耐受性問題：對於100mg/kg劑量最大相對體重損失為4.7%且對於50mg/kg劑量為2.7%。體重損失經量測為於基線(第14天)上記錄之平均體重相較於處理之最後一天(第42天)之變化百分比。
單一療法DC101
以10mg/kg、20mg/kg或40mg/kg之劑量每週兩次持續四週藉由腹膜內注射用DC101處理帶有NCI-H441異種移植腫瘤之雌性Hsd無胸腺裸小鼠(n=8)。在平均腫瘤體積在尺寸上達至大約150-200mm3之後(腫瘤植入之後的第15天)開始投與DC101且在第39天結束處理。在處理期期間，一週兩次量測腫瘤體積及體重。
結果：用10mg/kg、20mg/kg或40mg/kg DC101處理引起腫瘤生長之顯著抑制。在給藥期結束時(第42天)觀察到的腫瘤體積之變化(T/C%)就10mg/kg劑量、20mg/kg劑量及40mg/kg劑量而言分別為25.6%、10.4%及9.0%。關於用DC101處理之所有組，觀察到與媒劑對照組(p<0.001%)相比，NCI-H441異種移植腫瘤之統計顯著(p<0.001)生長抑制。用DC101之單一試劑處理產生關於穩定疾病及部分反應之頻率之劑量依賴性趨勢，使得在用10mg/kg、20mg/kg及40mg/kg處理之組中穩定疾病及部分反應之組合頻率分別為2/8、5/8及6/8。用DC101之單一試劑處理中之任一者不存在顯著耐受性問題：對於10mg/kg劑量最大相對體重損失為1.3%，對於20mg/kg劑量為1.5%且對於40mg/kg劑量為0.5%。體重損失經量測為於基線(第14天)上記錄之平均體重相較於處理之最後一天(第42天)之變化百分比。
化合物A及DC101之組合
使用0.2毫升/劑量以50mg/kg之劑量每日一次持續28天藉由經口管飼化合物A且以20mg/kg之劑量每週兩次腹膜內注射DC101來處理帶有NCI-H441異種移植腫瘤之雌性Hsd無胸腺裸小鼠(n=8)。投與均開始於腫瘤植入之後的第15天，在第42天結束化合物A處理且在第39天結束DC101處理。在處理期期間，一週兩次量測腫瘤體積且量測體重。
結果：與單一療法組中之每一者相比，用50mg/kg化合物A及20mg/kg DC101組合處理引起抗腫瘤功效改良。與僅用50mg/kg化合物A處理之組中之8.1%消退及僅用20mg/kg DC101處理之組中之觀察到的10.4%的T/C%相比，組合組在給藥期結束時(第42天)之腫瘤體積顯示42.9%消退(亦即T/C%=-42.9%)。各單一療法組相比於組合組之間的抗腫瘤功效差異為統計顯著的(p<0.001)。組合處理引起8/8處理動物之部分反應。相比之下，8隻動物中僅2隻顯示對DC101單一療法之 部分反應，三隻動物顯示穩定疾病(3/8)且三隻動物顯示進行性疾病(3/8)。8隻動物中6隻顯示對化合物A單一療法之部分反應且2隻動物顯示穩定疾病(2/8)。就組合療法而言，部分反應者之頻率(8/8)增加，以及消退之量值統計顯著增加(p<0.001)(接收組合療法之8隻動物中的5隻具有優於在單一試劑化合物A(50mg/kg)組中觀察到的最佳反應之消退率)。未觀察到組合處理相對於單一療法或對照之耐受性統計顯著變化。特定言之，與單一療法化合物A處理之2.7%及單一療法DC101處理之1.5%相比，組合組之最大相對體重損失為3.0%。體重損失經量測為於基線(第14天)上記錄之平均體重相較於處理之最後一天(第42天)之變化百分比。
研究2： 單一療法化合物A
使用0.2毫升/劑量以50mg/kg或75mg/kg之劑量每日一次持續28天藉由經口管飼(經口(PO))用化合物A處理帶有NCI-H441異種移植腫瘤之雌性Hsd無胸腺裸小鼠(n=7)。在平均腫瘤體積在尺寸上達至大約150-200mm3之後(腫瘤植入之後的第36天)開始投與化合物A且28天後(第63天)結束處理。在處理期期間，一週兩次量測腫瘤體積及體重。
結果：在給藥期結束時(第67天)，用50mg/kg或75mg/kg化合物A處理NCI-H441異種移植物引起腫瘤生長之顯著抑制。當與媒劑對照相比時，50mg/kg處理顯示7.0%之T/C%，而75mg/kg處理產生-4.8%之消退。與對照相比，此等值經測定為統計顯著的(p<0.001)。在處理期結束時之相對腫瘤體積指示，用50mg/kg或75mg/kg化合物A之單一療法產生關於穩定疾病及部分反應之頻率的劑量依賴性趨勢，使得穩定疾病及部分反應之組合頻率分別為4/7及6/7。關於50mg/kg及75mg/kg化合物A單一療法，7隻小鼠中的2隻及7隻小鼠中的3隻實現 完全消退。關於50mg/kg及75mg/kg化合物A單一療法，最大相對體重損失為5.5%及5.1%，其與對照動物無統計不同。
單一療法DC101
以20mg/kg之劑量每週兩次持續四週藉由腹膜內注射用DC101處理帶有NCI-H441異種移植腫瘤之雌性Hsd無胸腺裸小鼠(n=7)。在平均腫瘤體積在尺寸上達至大約150-200mm3之後(腫瘤植入之後的第36天)開始投與DC101。在處理期期間，一週兩次量測腫瘤體積及體重。
結果：當與媒劑對照相比時，用20mg/kg DC101處理亦引起腫瘤生長之顯著抑制，其中T/C%為5.6%。與對照相比，此等值經測定為統計顯著的(p<0.001)。在處理期結束時之相對腫瘤體積指示，用DC101之單一療法使得6隻小鼠中的2隻具有進行性疾病，6隻小鼠中的2隻具有穩定疾病且6隻小鼠中的2隻實現部分反應。對於DC101單一療法，最大相對體重損失為3.9%，其與對照動物無統計不同。
化合物A與DC101之組合
使用0.2毫升/劑量以50mg/kg或75mg/kg之劑量每日一次持續28天藉由經口管飼化合物A且以20mg/kg之劑量每週兩次腹膜內注射DC101來處理帶有NCI-H441異種移植腫瘤之雌性Hsd無胸腺裸小鼠(n=7)。投與均開始於平均腫瘤體積在尺寸上達至大約150-200mm3之後(腫瘤植入之後的第36天)且在第63天結束處理。在處理期期間，一週兩次量測腫瘤體積及體重。
用20mg/kg DC101及化合物A之組合處理顯示出顯著優於單一療法組中之任一者之抗腫瘤功效，其中包括50mg/kg或75mg/kg化合物A之組合處理分別產生-48.6%及-38.9%之腫瘤消退。當與媒劑對照組(p<0.001)以及其各別單一療法組相比時，對腫瘤生長之此等影響為統計顯著的。特定言之，當與DC101單一療法相比時，50mg/kg或75 mg/kg之組合均為統計顯著的，其中分別地，p<0.001及p=0.033；當與其各別化合物A單一療法組相比時，50mg/kg及75mg/kg之組合處理亦為統計顯著的，其中分別地，p<0.001及p=0.006。
在處理期結束時之相對腫瘤體積量測值指示，DC101與50mg/kg或75mg/kg化合物A之組合療法產生100%之疾病控制率，其中各組中之7/7小鼠有穩定疾病或實現部分反應。此顯示與用DC101或化合物A之單一療法相比，反應顯著改良，其中對於用50mg/kg化合物A、75mg/kg化合物A及20mg/kg DC101之單一療法，所觀察到之疾病控制率(穩定疾病+部分反應)分別為4/7、6/7及4/6。
組合組之相對體重變化與對照或單一療法組無統計不同。
NCI-H2122異種移植腫瘤 單一療法化合物A
使用0.2毫升/劑量以50mg/kg或75mg/kg之劑量每日一次持續28天藉由經口管飼(經口)用化合物A處理帶有NCI-H2122異種移植腫瘤之雌性Hsd無胸腺裸小鼠(n=8)。在平均腫瘤體積在尺寸上達至大約150-200mm3之後(腫瘤植入之後的第16天)投與化合物A且在第43天結束處理。在處理期期間，一週兩次量測腫瘤體積及體重。
結果：在給藥期結束時(第45天)，當與媒劑對照相比時，用50mg/kg或75mg/kg化合物A處理之NCI-H2122異種移植物引起腫瘤生長之顯著抑制，其中T/C%分別為64.3%及37.3%。與對照相比，此等值經測定為統計顯著的(p<0.001)。接受化合物A之組之相對體重變化與對照組無統計不同。
單一療法DC101
以20mg/kg之劑量藉由腹膜內注射用DC101處理帶有NCI-H2122異種移植腫瘤之雌性Hsd無胸腺裸小鼠(n=8)。在平均腫瘤體積在尺寸上達至大約150-200mm3之後(腫瘤植入之後第16天)開始投與 DC101，且每週兩次繼續四週。在處理期期間，一週兩次量測腫瘤體積及體重。
結果：當與媒劑對照相比時，用20mg/kg DC101處理亦引起腫瘤生長之顯著抑制，其中T/C%為45.7%。與對照相比，此值經測定為統計顯著的(p<0.001)。接受DC101之組之相對體重變化與對照組無統計不同。
化合物A及DC101之組合
使用0.2毫升/劑量以50mg/kg或75mg/kg之劑量每日一次持續28天藉由經口管飼(經口)化合物A且以20mg/kg之劑量每週兩次腹膜內注射DC101來處理帶有NCI-H2122異種移植腫瘤之雌性Hsd無胸腺裸小鼠(n=8)。投與均開始於平均腫瘤體積在尺寸上達至大約150-200mm3之後(腫瘤植入之後的第16天)且在第43天結束處理。在處理期期間，一週兩次量測腫瘤體積及體重。
結果：用20mg/kg DC101及化合物A之組合處理顯示顯著優於單一療法組中之任一者之抗腫瘤功效，其中包括50mg/kg或75mg/kg化合物A之組合處理分別產生20.7%及9.3%之T/C%。當與媒劑對照組(p<0.001)相比時以及當與其各別化合物A單一療法組(p<0.001)相比時，對腫瘤生長之此等影響為統計顯著的。當與DC101單一療法相比時，用50mg/kg或75mg/kg之組合均為統計顯著的，其中分別地，p=0.002及p<0.001。在處理期結束時之相對腫瘤體積指示，用DC101及50mg/kg或75mg/kg化合物A之組合療法產生關於穩定疾病及部分反應之頻率的劑量依賴性趨勢，使得穩定疾病及部分反應之組合頻率分別為4/8及7/8。組合組之相對體重變化與對照或單一療法組無統計不同。
總體而言在3個不同研究中，在用DC101及化合物A之單一療法之後觀察到顯著抗腫瘤功效，其中組合療法產生功效之統計顯著改 良。在3個研究之整個過程中獲取之體重量測值指示，該等處理(包括組合處理)對耐受性皆無顯著負面影響。
實例2 雷莫蘆單抗與抗CDK4/6處理之組合減少內皮細胞芽生
藉由活體外基於細胞之分析量測內皮細胞芽生之活體外減少。使用該分析量測化合物A及雷莫蘆單抗對內皮細胞芽生之影響。
在補充有SINGLEQUOTSTM(Lonza CC-4176)及2%胎牛血清(FBS)之Lonza EBM2(Lonza CC-3156)培養基中培養HUVEC細胞(Lonza C2519A)。在補充有SINGLEQUOTSTM(Lonza CC-4126)及10% FBS(Hyclone SH30611.02)之Lonza纖維母細胞基礎培養基(FBM)(Lonza CC-3131)中培養肺癌相關之纖維母細胞(CAF)。
在室溫下在50mL PBS(HyClone SH30264.02)中將1公克聚葡萄糖塗佈之Cytodex 3微珠(Sigma C3275)水合至少3小時且置放於震盪器上15分鐘。丟棄上清液，用PBS洗滌珠粒3次且再懸浮於50mL PBS中。置放於矽化玻璃瓶及在120℃下高壓釜處理15分鐘且儲存在4℃下。
在分析當天，輕輕地混合珠粒且將1.2mL珠粒轉移至50mL管(Falcon，352098)中且使其自然沈降。抽吸PBS，且用20mL預升溫完全內皮細胞基礎培養基-2(EBM2)洗滌珠粒。使珠粒沈降，輕輕抽吸培養基且添加15mL完全EBM2。
自培養燒瓶收集HUVEC細胞，用PBS沖洗，且細胞一集攏即添加TrypLE(Gibco 126051-010)且抽吸。將HUVEC細胞輕輕地再懸浮於20mL完全培養基中，測定活細胞數且將2.5×107細胞懸浮液添加至珠粒中至24mL之最終體積。將平放之管置放於37℃下5% CO2中4小時，且每20分鐘輕輕地顛倒若干次。以2毫升/燒瓶將珠粒及細胞懸浮液轉移至12個T75燒瓶(Nunc 156499)中。用20mL培養基沖洗管且12 個燒瓶等分。使培養基達至10mL且在37℃下於5% CO2中培育燒瓶隔夜。
自2個T75燒瓶來回若干次吸取含有HUVEC/珠粒之培養基以自燒瓶釋放HUVEC/珠粒。將溶液轉移至50mL管中且用5mL培養基洗滌燒瓶且轉移至同一管中。使珠粒沈降且使用1mL吸液管與新鮮EBM2進一步混合2次以視需要分離珠粒。將珠粒再懸浮於2×15mL血纖維蛋白原溶液中，其由補充有1875μL 4U/mL抑肽酶(0.15單位/毫升最終濃度)(Sigma A3428)的50mL 2mg/mL血纖維蛋白原(Sigma F4883)組成。用0.22微米過濾器無菌過濾。
自T150燒瓶收集CAF細胞，用PBS沖洗，且細胞一集攏即添加TrypLE(Gibco 126051-010)且抽吸。添加2mL完全培養基(補充有SINGLEQUOTSTM及2% FBS之EBM2)且測定活細胞數且以4×104個細胞/毫升將細胞添加至血纖維蛋白原溶液中。
將12μL凝血酶(Sigma T4393-100單位)添加至24孔玻璃底培養板(In Vitro Scientific P24-1.5H-N)中至0.6單位/0.5毫升凝結溶液之最終濃度。將0.5mL血纖維蛋白原-珠粒/CAF懸浮液快速添加至各孔以允許混合且防止形成氣泡。將培養板置放於罩中20分鐘以在無干擾之情況下凝結，且隨後將培養板移至培育箱(37℃，5% CO2)持續20分鐘。將0.5mL完全培養基逐滴添加至各孔以避免妨礙凝結。以10μg/mL之濃度將雷莫蘆單抗添加至各孔。以3nM、10nM、30nM、100nM及500nM之濃度將化合物A添加至含有雷莫蘆單抗之孔。在二甲亞碸中連續稀釋化合物且隨後轉移至分析培養板以使得分析中二甲亞碸之最終濃度為0.05%。在37℃下於2% CO2中培育培養板。在處理之後的第4天，用新鮮培養基及處理替換培養基。
在處理之後的第7天，在4℃下於4%多聚甲醛(PFA)(Electron Microscopy Sciences 15710)中固定孔隔夜。用0.5mL杜爾貝科氏磷酸 鹽緩衝鹽水(Dulbecco's Phosphate-Buffered Saline，DPBS)(HyClone SH30264.01，批號AVJ79791)洗滌培養板且在4℃下用0.5% TRITONTM X-100/PBS(Sigma T9284)滲透10分鐘。各用1mL甘胺酸/DPBS(Bio-Rad 161-0718)沖洗培養板3次歷時10-15分鐘且用每孔0.5mL之IF緩衝液阻斷隔夜，該緩衝液由含0.1% BSA、0.2% TRITONTM X-100、0.05% Tween-20之DPBS+10%山羊血清(Invitrogen 16210)組成。移除緩衝液且在4℃下用初級抗體，綿羊抗人類CD31(1：100)(R&D Systems BAF806)及Cy3標記之抗α平滑肌肌動蛋白(1：200)(Sigma C6198)於以上緩衝液中培育培養板隔夜。在室溫下伴隨輕輕震盪各用IF緩衝液沖洗孔3次歷時20分鐘。添加含Alexa Fluor 488驢抗綿羊IgG(H+L)(1：200)(Molecular Probes A-11015)之培育緩衝液且在室溫下培育1小時。如上所述沖洗孔，且在室溫下於含4',6-二甲脒基-2-苯基吲哚(DAPI)(1：10000)(Invitrogen D1306)之DPBS中培育1至2小時。用DPBS沖洗孔5分鐘。添加0.5mL之DPBS且使用2X物鏡於CELLINSIGHTTM(Thermal Science)上掃描培養板。使用CELLINSIGHTTM神經突偵測分析進行內皮細胞芽生之成像及定量。使用JMP 9(SAS，9.0.3)統計分析資料。
各實驗表示三次重複實驗之平均值，其表示為幾何平均值且可計算95%信賴區間。用式((雷莫蘆單抗對照-處理)/(雷莫蘆單抗對照))×100計算減少百分比。
結果表明將化合物A添加至雷莫蘆單抗以劑量依賴性方式增加了雷莫蘆單抗之抗血管效果。當與僅雷莫蘆單抗處理相比時，在300nM及500nM下化合物A與雷莫蘆單抗組合使內皮細胞芽生長度分別減少了42.5%(p<0.0034)及50%(p<0.0007)。
實例3 [5-(4-乙基-哌嗪-1-基甲基)-吡啶-2-基]-[5-氟-4-(7-氟-3-異丙基-2- 甲基-3H-苯并咪唑-5-基)-嘧啶-2-基]-胺與雷莫蘆單抗組合用於IV期NSCLC患者之研究 研究設計
此研究為在21天週期之第1至21天每12(±3)小時以100mg、150mg或200mg經口給予[5-(4-乙基-哌嗪-1-基甲基)-吡啶-2-基]-[5-氟-4-(7-氟-3-異丙基-2-甲基-3H-苯并咪唑-5-基)-嘧啶-2-基]-胺以及以10mg/kg經60分鐘靜脈內輸注投與雷莫蘆單抗，隨後在21天週期之第1天觀察患有IV期NSCLC之患者1小時的多中心、非隨機化、開放標籤、劑量遞增階段1b研究。
研究目標
此研究之主要目標為使用不良事件之常用術語準則(Common Terminology Criteria for Adverse Events，CTCAE 4.0版，NCI 2009)評估[5-(4-乙基-哌嗪-1-基甲基)-吡啶-2-基]-[5-氟-4-(7-氟-3-異丙基-2-甲基-3H-苯并咪唑-5-基)-嘧啶-2-基]-胺當與雷莫蘆單抗組合經口投與患有IV期NSCLC之患者時之安全性及耐受性。
該研究之次要目標為記錄[5-(4-乙基-哌嗪-1-基甲基)-吡啶-2-基]-[5-氟-4-(7-氟-3-異丙基-2-甲基-3H-苯并咪唑-5-基)-嘧啶-2-基]-胺當與雷莫蘆單抗組合給予時之抗腫瘤活性；測定[5-(4-乙基-哌嗪-1-基甲基)-吡啶-2-基]-[5-氟-4-(7-氟-3-異丙基-2-甲基-3H-苯并咪唑-5-基)-嘧啶-2-基]-胺當與雷莫蘆單抗組合給予時之藥物動力學(PK)；及藉助於MD安德森症狀評估量表-肺癌(MD Anderson Symptom Inventory-Lung Cancer，MDASI-LC)判別所收集之患者所提出疼痛及疾病相關症狀的變化特徵。
試驗藥物
提供100mg、150mg或200mg之膠囊用於經口投與[5-(4-乙基-哌嗪-1-基甲基)-吡啶-2-基]-[5-氟-4-(7-氟-3-異丙基-2-甲基-3H-苯并咪唑 -5-基)-嘧啶-2-基]-胺。
[5-(4-乙基-哌嗪-1-基甲基)-吡啶-2-基]-[5-氟-4-(7-氟-3-異丙基-2-甲基-3H-苯并咪唑-5-基)-嘧啶-2-基]-胺可視情況在21天週期之第1天至第21天期間遞減至每12小時經口投與100mg。
雷莫蘆單抗可調配成濃度為10mg/kg之水溶液(500mg/50mL瓶)，呈無菌、無防腐劑溶液形式提供用於輸注之雷莫蘆單抗。緩衝液含有10mM組胺酸、75mM氯化鈉、133mM甘胺酸及0.01%聚山梨醇酯80，pH 6.0。雷莫蘆單抗係提供於一次性之50mL標稱體積玻璃瓶中。
雷莫蘆單抗之第一劑量視患者之以千克為單位之基線體重而定。若自上次劑量計算，體重變化(增加或減少)10%，則必須重新計算雷莫蘆單抗之隨後劑量；若自上次劑量計算，體重變化(增加或減少)<10%，則可重新計算隨後劑量。
來自進行中之臨床試驗的可評估患者之初步資料呈現於表3中。
PR為部分反應；SD為穩定疾病；PD為進行性疾病；NDR為無資料報導。
儘管可評估患者之以上初步資料揭露患有進行性疾病之兩名患 者，但其進一步揭露患有穩定疾病之四名患者及有部分反應之兩名患者。
序列表
<SEQ ID NO：1；DNA；人類>
<SEQ ID NO：2；PRT1；人類>
<SEQ ID NO：3；DNA；人類>
<SEQ ID NO：4；PRT1；人類>
<SEQ ID NO：5；DNA；人類>
<SEQ ID NO：6；PRT1；人類>
<SEQ ID NO：7；DNA；人類>
<SEQ ID NO：8；PRT1；人類>
<SEQ ID NO：9；PRT1；人類>
<110> 美國禮來大藥廠
<120> 癌症之組合療法
<130> X20246
<150> 61/944811
<151> 2014-02-26
<160> 9
<170> PatentIn version 3.5
<210> 1
<211> 321
<212> DNA
<213> 智人
<400> 1
<210> 2
<211> 107
<212> PRT
<213> 智人
<400> 2
<210> 3
<211> 348
<212> DNA
<213> 智人
<400> 3
<210> 4
<211> 116
<212> PRT
<213> 智人
<400> 4
<210> 5
<211> 642
<212> DNA
<213> 智人
<400> 5
<210> 6
<211> 214
<212> PRT
<213> 智人
<400> 6
<210> 7
<211> 1338
<212> DNA
<213> 智人
<400> 7
<210> 8
<211> 446
<212> PRT
<213> 智人
<400> 8
<210> 9
<211> 1337
<212> PRT
<213> 智人
<400> 9

Claims (17)

  1. 一種醫藥組合物，其包含有效量之化合物，與有效量之抗體，該抗體包含如SEQ ID NO：2中所示胺基酸序列的輕鏈可變區(LCVR)及如SEQ ID NO：4中所示胺基酸序列的重鏈可變區 (HCVR)，其中該化合物係或其醫藥學上可接受之鹽，且其中該抗體結合至VEGFR2。
  2. 如請求項1之醫藥組合物，其中該化合物為
  3. 如請求項2之醫藥組合物，其中該抗體包含如SEQ ID NO：6中所示胺基酸序列的輕鏈及如SEQ ID NO：8中所示胺基酸序列的重鏈，且該抗體結合至VEGFR2。
  4. 如請求項3之醫藥組合物，其中該抗體為雷莫蘆單抗(ramucirumab)。
  5. 一種套組，其包含化合物及抗體，該抗體包含如SEQ ID NO：2所示胺基酸序列的輕鏈可變區(LCVR)及如SEQ ID NO：4所示胺基酸序列的重鏈可變區(HCVR)，其中該化合物係 或其醫藥學上可接受之鹽，且其中該抗體結合至VEGFR2。
  6. 如請求項5之套組，其中該抗體包含如SEQ ID NO：6中所示之胺基酸序列的輕鏈及如SEQ ID NO：8中所示之胺基酸序列的重鏈，且該抗體結合至VEGFR2。
  7. 如請求項6之套組，其中該抗體為雷莫蘆單抗(ramucirumab)。
  8. 如請求項7之套組，其中該化合物為
  9. 一種套組，其包含：包含下式化合物： 或其醫藥學上可接受之鹽及一或多種醫藥學上可接受之載劑、稀釋劑或賦形劑之醫藥組合物；及包含雷莫蘆單抗(ramucirumab)及一或多種醫藥學上可接受之載劑、稀釋劑或賦形劑之醫藥組合物。
  10. 如請求項5至9中任一項之套組，其中該化合物或其鹽之投藥劑量為約100毫克/天至約400毫克/天之間，且雷莫蘆單抗之投藥劑 量為每三週投與一次約6mg/kg至約10mg/kg之間的劑量。
  11. 如請求項10之套組，其中該化合物或其鹽用於經口投與且雷莫蘆單抗用於靜脈內投與。
  12. 一種組合，其包含[5-(4-乙基-哌嗪-1-基甲基)-吡啶-2-基]-[5-氟-4-(7-氟-3-異丙基-2-甲基-3H-苯并咪唑-5-基)-嘧啶-2-基]-胺或其醫藥學上可接受之鹽及抗VEGFR2 Ab，供同時、單獨或依序用於治療NSCLC，其中該抗VEGFR2 Ab包含如SEQ ID NO：2中所示胺基酸序列的輕鏈可變區(LCVR)及如SEQ ID NO：4中所示胺基酸序列的重鏈可變區(HCVR)。
  13. 如請求項12之組合，其中該抗VEGFR2 Ab為雷莫蘆單抗(ramucirumab)。
  14. 一種如請求項1至4中任一項之醫藥組合物之用途，其係用於製造治療非小細胞肺癌之藥物。
  15. 一種[5-(4-乙基-哌嗪-1-基甲基)-吡啶-2-基]-[5-氟-4-(7-氟-3-異丙基-2-甲基-3H-苯并咪唑-5-基)-嘧啶-2-基]-胺或其醫藥學上可接受之鹽之用途，其係用於製造與抗VEGFR2 Ab併用以治療非小細胞肺癌之藥物，其中該抗VEGFR2 Ab包含如SEQ ID NO：2中所示胺基酸序列的輕鏈可變區(LCVR)及如SEQ ID NO：4中所示胺基酸序列的重鏈可變區(HCVR)。
  16. 一種抗VEGFR2 Ab之用途，其係用於製造與[5-(4-乙基-哌嗪-1-基甲基)-吡啶-2-基]-[5-氟-4-(7-氟-3-異丙基-2-甲基-3H-苯并咪唑-5-基)-嘧啶-2-基]-胺或其醫藥學上可接受之鹽併用以治療非小細胞肺癌之藥物，其中該抗VEGFR2 Ab包含如SEQ ID NO：2中所示胺基酸序列的輕鏈可變區(LCVR)及如SEQ ID NO：4中所示胺基酸序列的重鏈可變區(HCVR)。
  17. 如請求項15或16之用途，其中該抗VEGFR2 Ab為雷莫蘆單抗(ramucirumab)。
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