TR201808537T4 - Sistein değiştirilmiş antikorlar ve konjugatlar. - Google Patents

Sistein değiştirilmiş antikorlar ve konjugatlar. Download PDF

Info

Publication number
TR201808537T4
TR201808537T4 TR2018/08537T TR201808537T TR201808537T4 TR 201808537 T4 TR201808537 T4 TR 201808537T4 TR 2018/08537 T TR2018/08537 T TR 2018/08537T TR 201808537 T TR201808537 T TR 201808537T TR 201808537 T4 TR201808537 T4 TR 201808537T4
Authority
TR
Turkey
Prior art keywords
antibody
frac
cysteine
seq
ace
Prior art date
Application number
TR2018/08537T
Other languages
English (en)
Inventor
W Eigenbrot Charles
Reddy Junutula Jagath
Lowman Henry
E Raab Helga
Vandlen Richard
Original Assignee
Genentech Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Genentech Inc filed Critical Genentech Inc
Publication of TR201808537T4 publication Critical patent/TR201808537T4/tr

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6801—Drug-antibody or immunoglobulin conjugates defined by the pharmacologically or therapeutically active agent
    • A61K47/6803—Drugs conjugated to an antibody or immunoglobulin, e.g. cisplatin-antibody conjugates
    • A61K47/68031—Drugs conjugated to an antibody or immunoglobulin, e.g. cisplatin-antibody conjugates the drug being an auristatin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6801—Drug-antibody or immunoglobulin conjugates defined by the pharmacologically or therapeutically active agent
    • A61K47/6803—Drugs conjugated to an antibody or immunoglobulin, e.g. cisplatin-antibody conjugates
    • A61K47/68033—Drugs conjugated to an antibody or immunoglobulin, e.g. cisplatin-antibody conjugates the drug being a maytansine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6801—Drug-antibody or immunoglobulin conjugates defined by the pharmacologically or therapeutically active agent
    • A61K47/6803—Drugs conjugated to an antibody or immunoglobulin, e.g. cisplatin-antibody conjugates
    • A61K47/6811—Drugs conjugated to an antibody or immunoglobulin, e.g. cisplatin-antibody conjugates the drug being a protein or peptide, e.g. transferrin or bleomycin
    • A61K47/6817—Toxins
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6835—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site
    • A61K47/6851—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site the antibody targeting a determinant of a tumour cell
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6889—Conjugates wherein the antibody being the modifying agent and wherein the linker, binder or spacer confers particular properties to the conjugates, e.g. peptidic enzyme-labile linkers or acid-labile linkers, providing for an acid-labile immuno conjugate wherein the drug may be released from its antibody conjugated part in an acidic, e.g. tumoural or environment
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/32—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against translation products of oncogenes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
    • A01K2267/00—Animals characterised by purpose
    • A01K2267/03—Animal model, e.g. for test or diseases
    • A01K2267/0331—Animal model for proliferative diseases
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
    • C07K2317/21—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin from primates, e.g. man
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/51—Complete heavy chain or Fd fragment, i.e. VH + CH1
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/52—Constant or Fc region; Isotype
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/55—Fab or Fab'
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/60—Immunoglobulins specific features characterized by non-natural combinations of immunoglobulin fragments
    • C07K2317/62—Immunoglobulins specific features characterized by non-natural combinations of immunoglobulin fragments comprising only variable region components
    • C07K2317/624—Disulfide-stabilized antibody (dsFv)

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
  • Investigating Or Analysing Materials By The Use Of Chemical Reactions (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

Antikorlar, bir ana antikorun bir veya daha fazla sayıda amino asidinin çapraz bağlı olmayan, yüksek düzeyde reaktif sistein amino asitleriyle ikame edilmesi suretiyle değiştirilir. Antikor fragmanları da bir veya daha fazla sayıda sistein amino asidiyle değiştirilerek sistein değiştirilmiş antikor fragmanları (ThioFab) oluşturulabilir. Sistein değiştirilmiş antikorları tasarlama, hazırlama, tarama ve seçme yöntemleri, bu buluşta sunulmaktadır. İsteğe göre bir albümin bağlanma peptidi (ABP) sekansı içeren sistein değiştirilmiş antikorlar (Ab), bir bağlayıcı (L) aracılığıyla bir veya daha fazla sayıda ilaç moiyetesiyle (D) konjuge edilerek Formül I ile temsil edilen sistein değiştirilmiş antikor-ilaç konjugatları oluşturulur: Ab-(L-D)p I; bu formülde, p simgesi 1 ilâ 4'tür. Sistein değiştirilmiş antikor ilaç bileşiklerinin ve bileşimlerinin diyagnostik ve terapötik kullanımları da bu buluşta açıklanmaktadır.

Description

TARIFNAMESISTEIN DEGISTIRILMIS ANTIKORLAR VE MBULUSUN ALANIBu bulus, sistein degistirilmis antikorlarla, bir sistein degistirilmis antikor ile bir ilaç moiyetesi arasinda olusturulan antikor-ilaç konjugatlariyla, antikor-ilaç konjugatlarmin farmasötik bilesimleri vetibbi kullaniin alanlariyla ilgilidir.BULUS HAKKINDA ON BILGIAntikor tedavisi, kanser, immünolojik bozukluklar ve anjiyogenik bozukluklar görülen hastalarin hedefli tedavi için bilinen ve kullanilan bir tedavi yöntemidir. Arastirmacilar, antikorlarla kanser tanisi ve tedavisi için etkin ve etkili selüler hedefleri kesfetmek amaciyla, kanseröz olmayan normal hücre(ler)e kiyasla kanser hücrelerinin yüzeyinde spesifik eksprese edilen transmembran ya da tümör-iliskili polieptidleri tanimlamaya çalismislardir. Bu tümör-iliskili hücre yüzeyi anti jen polipeptidlerinin, yani tümör iliskili anti jenlerin (TAA) tanimlanmasi, antikor-bazli tedaviler araciligiyla yikim için kanserhücrelerini spesifik hedefleme kabiliyetine yol açmistir.Kanser tedavisinde sitotoksik ya da sitostatik ajanlari, yani tümör hücrelerini Öldüren ya da hücrelerin çogalmasini inhibe eden ilaçlari lokal olarak uygulamak için kullanilan antikor-ilaç konjugatlari (ADC), Yani immünokonjugatlar (Lambert, J. (2005) Curr. Opinion in Pharmacology 5:543-549; Wu ve ark. (2005) Nature Biotechnology 23(9):1137-1146; Payne, G. (2003) Cancer Cell 3:207-212; Syrigos and Epenetos (1999) Anticancer Research 19:605-614;Niculescu- Duvaz and Springer (1997) AdV. Drug Deliv. ReV. 26:151- 172; 4.975.278 sayili ABD Patenti), teorik olarak, bir ilaç moietesinin spesifik olarak bir tümöre tasinmasina ve orada intraselüler olarak akümüle olmasina olanak saglarlar, konjuge edilmemis ilaçlarla yapilan sistemik uygulama ise, ortadan kaldirilinalari hedeflenen tümör hücrelerinin yani sira normal hücrelerin de kabul edilemez düzeyde toksisiteye inaruz kalinalarina sebep olabilir (Baldwin ve ark., Lancet (Mar. 15, 1986) sayfa 603-05; Thorpe (1985) "Antibody Carriers Of Cytotoxic Agents 111 Cancer Therapy: A Review," in Monoclonal Antibodies '84: Biological And Clinical Applications A.
Pinchera ve ark., (eds) sayfa 475-506). Minimum toksisiteyle maksimum etkinlik elde edilmeye çalisilmaktadir. ADC tasarlamak ve gelistirmek için gösterilen çabalarin odak noktasi, monoklonal antikorlarin (mAb11er) selektivitesi ve ilaç-baglama ve ilaç-salma özellikleridir (Lambert, J. (2005) Curr. Opinion in Pharmacology :543-549. Bu stratejiler kapsaminda hem poliklonal hem de monoklonal antikorlarla iyi sonuçlara erisildigi rapor edilmistir (Rowland ve ark., (1986) Cancer Iinmunol. Immunother., 21:183-87).
Bu yöntemler kapsaminda kullanilan ilaçlar arasinda, daunomisin, doksorubisin, metotreksat ve Vindesin bulunur (bkz: yukarida atifyapilan Rowland ve ark., (1986)). Antikor-toksin konjugatlarindakullanilan toksinler arasinda, difteri toksini gibi bakteriyel toksinler, risin gibi bitkisel toksinler ve geldanamisin (Mandler ve ark (2000) J .
Nat. Cancer Inst. 92(l9):1573-1581;Mandler ve ark (2000) Bioorganic & Med. Chem. Letters 10:1025-1028;Mand1er ve ark (2002) Bioconjugate Chein. 13:786-791), maytansinoidler (EP 1391213;Liu ve ark., (1996) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 93:8618- 8623) ve kalikainisin (Lode ve ark (1998) Cancer Res. 58:2928;Hinman ve ark (1993) Cancer Res. 53:3336-3342) gibi küçük inoleküllü toksinler sayilabilir. Toksinler, sitotoksik ve sitostatik etkilerini, tübülin baglanimi, DNA baglanimi veya topoizomeraz inhibisyonu dahil olmak üzere muhtelif mekanizmalar araciligiyla ortaya koyabilirler. Bazi sitotoksik ilaçlar, büyük antikorlara veya protein reseptörü ligandlarina konjuge edildiklerindeinaktif olina veya daha az aktif olina egiliini gösterirler.Bir antikor-radyoizotop konjugati onaylanmistir. ZEVALIN® (ibritumomab tiuksetan, Biogen/Idec), normal ve malign B leiifositlerinin yüzeylerinde bulunan CD20 antijenine karsi yönlendirilmis bir fare IgGl kappa nionoklonal antikoru ve yani sira, bir tiyoüre baglayici-selatörle bagli li'In veya g'OY radyoizotopundan olusan bir antikor-radyoizotop konjugatidir (Wiseman ve ark (2000) Eur. Jour. Nucl. Med. 27(7):766-77; Wiseman ve ark (2002) Blood 99(12):4336-42; Witzig ve ark (2002) J. Clin. Oncol. 20(lO):2453- 63;Witzig ve ark (2002) J. Clin. Oncol. 20(15):3262-69). Her ne kadar ZEVALIN®, B-hücreli non-Hodgkin Lenfomasina (NHL) karsi etkinlige sahip olsa da, uygulamasi hastalarin çogunda siddetli ve uzun süreli sitopenilere yol açar. Kalikainisine bagli bir hu CD33antikorundan olusan bir antikor-ilaç konjugati olan MYLOTARGTM(gemtuzumab ozogamisin, Wyeth Pharmaceuticals), enjeksiyonla akut miyeloid lösemi tedavisi için 2000 senesinde onay alinistir (Drugs of the Future (2000) 25(7):686; 4970198; 5079233; 5585089; 5606040; 5693762; 5739116; 5767285 ve 5773001 sayili ABD Patentleri).
Cantuzuinab mertansin (Immunogen, Inc), CanAg eksprese eden kolon, pankreas, gastrik ve benzeri kanser tiplerinin tedavisi için Faz II deney asainasina dogru giden ve disülfur baglayicisi SPP araciligiyla maytansinoid ilaç moietesi DMl ”e (Xie ve ark (2004) J. of Pharm. and Exp. Ther. 308(3)21073-1082) baglanmis huC242 antikorundan olusan bir antikor-ilaç konjugatidir. MLN-2704 (Millennium Pharm., BZL Biologics, Immunogen 1110.), prostat tümörlerinin potansiyel tedavisi olarak gelistirilmekte olan ve maytansinoid ilaç inoietesi DMl”e baglanmis anti-prostat spesifik membran antijeni (PSMA) monoklonal antikorundan olusan birantikor-ilaç konjugatidir.Dolastatinin sentetik analoglari olan auristatin peptidleri auristatin E (AB) ve monometilauristatin (MMAE) ise (WO 02/088172), (i) kimerik monoklonal antikorlar cBR96°ya (karsinomlarda eksprese olan Lewis Y”yi hedef alir) ve (ii) (hematolojik malignitelerde eksprese olan CD30'u hedef alan cAClO”a (Klussman, ve ark (2004), Bioconjugate Chemistry 15(4):765-773;Doronina ve ark (2003) Nature Biotechnology 21(7):778-784; Francisco ve ark (2003) Blood 102(4):1458-1465;US 2004/0018194; (iii) CD20-eksprese eden kanserler ve immün bozukluklarin tedavisi için rituksan (WO 04/032828) gibi anti-CD20 antikorlarina; (iv) kolorektal kanserin tedavisi için anti-EphB2R antikorlari 2H9 ve anti-IL-8°e (Mao ve ark (2004) Cancer Research 64(3):781-788); (v) E-selektin antikoruna(Bhaskar ve ark (2003) Cancer Res. 63:6387-6394) ve (vi) baska anti- CD30 aiitikorlarina (WO 03/043583) konjuge edilmislerdir. Auristatin E varyantlari, US 5767237 ve US 6124431 numarali dokünianlarda açiklanmaktadir. Monoklonal antikorlara konjuge edilmis monometil auristatiii E, “Senter ve ark, Proceedings of the American Association for Cancer Research, Cilt 45, Abstrakt No 623, presented Mart 28, 2004” referansinda açiklanmaktadir. Auristatin analoglari MMAE ve MMAF, çesitli farkli antikorlara konjuge edilmistir (WO 2005/081711).Bir ilaç moiyetesinin bir antikora baglanmasi, yani kovalent baglarla baglanmasi için geleneksel araçlar, genelde, ilaç moiyetelerinin aiitikorun bir dizi bölgesinde baglandigi bir heterojen molekül karisimina yol açar. Ornegin, sitotoksik ilaçlar tipik olarak bir antikoruii siklikla çok sayida lizin artiklari vasitasiyla aiitikorlara konjuge edilerek bir heterojen antikor-ilaç konjugati karisimi olusturulmustur. Reaksiyon kosullarina bagli olarak, heterojen karisim tipik olarak 0'dan yaklasik 8°e kadar veya daha fazla bagli ilaç moiyetesine sahip bir antikor dagiliini içerir. Ilave olarak, belirli bir tamsayida ilaç moiyetesi/antikor oranina sahip her bir konjugat alt- grubu içinde, ilaç inoiyetesinin antikor üzerinde çesitli bölgelere baglandigi bir potansiyel heterojen karisim bulunur. Analitik ve preparatif yöntemler heterojen karisim içinde bir konjugat reaksiyonundaii kaynaklanan antikor-ilaç konjugati türü moleküllerini ayirmak ve karakterize etmek için yetersiz olabilir. Antikorlar büyük, karmasik ve yapisal olarak çesitli biyomoleküllerdir ve siklikla pek çok reaktif fonksiyonel gruba sahiptir. Bunlarin baglayici ajanlarla Veilaç baglayici ara ürünlerle reaktiviteleri pH, konsantrasyon, tuzkonsantrasyonu ve es çözücüler gibi faktörlere baglidir. Ayrica, çok kademeli konjugasyon prosesi, reaksiyon kosullarinin kontrolündeki ve reaktanlar ile ara ürünlerin karakterizasyonundaki güçlüklerdendolayi tekrarlanamayabilir.Sistein tiyoller, protonlanmis çogu aminin aksine nötr pH°ta reaktiftir ve pH 7 yakininda daha az nükleofiliktir. Serbest tiyol (RSH, sülfhidril) gruplari nispeten reaktif oldugundan, sistein artiklarina sahip proteinler genelde bunlarin oksidize formunda disülfûr bagli oligomerler olarak bulunur veya dahili köprülü disülfür gruplarina sahiptir. Ekstraselüler proteinler genelde serbest tiyollere sahip degildir (Garman, 1997, Non-Radioactive Labelling: A Practical Approach, Academic Press, London, sayfa 55). Bir proteindeki serbest tiyol miktari standart Ellman testiyle tahmin edilebilir.
Immünoglobülin M bir disüliür-bagli pentamerine örnektir; immünoglobülin G ise alt-birimleri birbirine baglayan dahili disülfür köprülerine sahip bir proteine ömektir. Bu gibi proteinlerde, reaktif serbest tiyolü üretmek için disülfûr baglarinin ditiyotreitol (DTT) veya selenol gibi bir reaktifle indirgenmesi gerekir (Singh ve ark (2002) Anal. Biochem. 304:147-156). Bu yaklasim antikor tersiyer yapisindave anti jen baglama spesifisitesinde kayba yol açabilir.Antikor sistein tiyol gruplari genelde elektrofilik konjugasyon reaktiflerine dogru antikor amin veya hidroksil gruplarindan daha reaktiftir, yani daha nükleofiliktir. Sistein artiklari, ligandlara kovalent baglar olusturmak veya yeni intramoleküler disültür baglari olusturmak için genetik mühendislik teknikleriyle proteinlere dahil edilmistir (Better ve ark (1994) J. Biol. Chem. 13:9644-9650; Bemhard ve ark (1994) Bioconjugate Chem. 5:›126- 132; Greenwood ve ark (1994) Therapeutic Immunology 12247- 255; Tu ve ark (1999) Proc. Natl. Acad. Sci USA 96:4862- 4867; Karino ve ark (2000) J. of Biotechnology, 76:207-214; Chmura ve ark (2001) Proc. Nat. Acad. Sci. USA 98(15):8480-8484; US 6248564). Bununla birlikte, sistein tiyol gruplarinda, bir proteinin çesitli amino asit artiklarinin sistein amino asitlerine mutasyonuyla uygulanan mühendislik, özellikle eslestirilmemis (serbest Cys) artiklar veya reaksiyon ya da oksidasyon için nispeten erisilebilir olan artiklar durumunda olmak üzere potansiyel olarak problematiktir. E. coli periplazmasi, kültür süpernatanlari veya kismen ya da tamamen saflastirilmis olan protein olmak üzere proteinin konsantre çözeltilerinde, proteinin yüzeyindeki eslestirilmemis Cys artiklari, moleküller arasi disülfürleri ve dolayisiyla da protein dimerlerini veya multimerlerini olusturmak için eslestirilebilir ve oksidize olabilir.
Disülfür dimer olusumu, bir ilaca, liganda veya baska bir etikete konjugasyon için yeni Cys”yi reaktif durumdan çikarir. Ayrica, protein, yeni tasarlanan Cys artigi ile mevcut Cys artigi arasinda oksidatif olarak bir intramoleküler disülfür bagi olusturursa, Cys gruplarinin ikisi de aktif bölge katilimi ve etkilesimi için kullanilamaz.
Ayrica, protein, yanlis katlanma veya tersiyer yapi kaybiyla inaktif ya da non-spesifik hale getirilebilir (Zhang ve ark (2002) Anal. Biochem. 3ll:l-9).WO 2004/050849 numarali doküman, immünotoksinlerle ve onlarintümör tedavisinde kullanilmasiyla ilgilidir.WO 03/049704 numarali doküman, kanser tedavisi için kullanilacakantikorlarla ilgilidir.WO 03/060080 numarali doküman, kanin immünoglobulin degisken domainleri, kaninize antikorlar ve bunlari hazirlama ve kullanmaaaincina yönelik yöntemlerle ilgilidir.WO 94/06474 numarali doküman, Helicobacter pylori antikor tedavisiyle ilgilidir.“Shopes B., 1993, Molecular Immunology, Elmsford, NY, US, 30(6): 603-609” referansi, tamamlayici araciligiyla sitolizi tamamen baslatan sinirli fleksibiliteye sahip bir genetigi degistirilmis insan lgG”siyleilgilidir.“Hafner F. T. ve ark., 2000, Analytical Chemistry, 72(23): 5779- 5786” referansi, afinite probu kapiler elektroforeziyle feintomolar seviyede küçük analitlerin non-kompetitif immünoeseyiyle ve onun bir üniform-etiketli SCFV immünoreaktifi kullanilan digoksin dogrudananalizinde kullanimiyla ilgilidir.“Renard M. ve ark., 2003, Journal of Molecular Biology, London, GB, 326(1): 167-175” referansi, reaktifsiz floresaii immünosens'orlerin tasariini için fonksiyonel verilerden topolojik kisitlamalarintüretilmesiyle ilgilidir.“Corneillie T. M. ve ark., 2004, Bioconjugate Chemistry, 15(6): 1389- 1391” referansi, zayif elektrofilik metal kompleksler için artanafiniteye sahip monoklonal antikor 2D12.5”in bir G54C mutantiylailgilidir.“Trail P. A. ve ark., 2003, Cancer Immunology, Immunotherapy: CII, 52(5): 328-337” referansi, kanserin hedefli tedavisi için monoklonalantikor ilaç immünokonjugatlariyla ilgilidir.“Schelte P. ve ark., 2000, Bioconjugate Chemistry, ACS, Washington, DC, US, 11(1): 118-123” referansi, inaleiinid ve broinoasetil fonksiyonlarinin tiyollerle diferansiyel reaktivitesi ve onlarin lipozomal diepitop yapilari hazirlamak amaciyla uygulanmasiylailgilidir.“Lyons A. ve ark., 1990, Proteiii Engineering, Oxford University Press, Surrey, GB, 3(8): 703-709” referansi, zincire sokulan yüzey sistein artiklari araciligiyla rekoinbinan antikorlara yere-özgübaglanmayla ilgilidir.“Wright S.K. ve ark., 1998, Analytical Biochemsitry, 265(1): 8-14” referansi, proteinlerde sisteinlerin iniktar tayini için yöntemlerindegerlendirmesiyle ilgilidir.ÖZETBu dogrultuda, bir özellikte, bu bulus, 0,6 ile 1,0 araliginda bir tiyol reaktivitesi degerine ve SEKANS KOD NO.: 10, 11, 13, 14, 31, 34, 37, 38 ve 42 arasindan seçilen agir zincirde bir sekansa ve asagidaki sekanslara sahip bir veya daha fazla sayida serbest sistein amino asidiiçeren bir sistein degistirilmis antikora yönelik bir proses sunar:10NSLRCEDTAV (SEKANS KOD NO.: 10) LVTVCSASTKGPS (SEKANS KOD NO.: 11) LVTVSSCSTKGPS (SEKANS KOD NO.: 13) LVTVSSACTKGPS (SEKANS KOD NO.: 14) HEDPEVKFNWYVDGCEVHNAKTKPR (SEKANS KOD NO.: 31)YKCKVCNKALP (SEKANS KOD NO.: 34)KGFYPCDIAVE (SEKANS KOD NO.: 37)PPVLDCDGSFF (SEKANS KOD NO.: 38) GQGTLVTVSACSTKGPSVFPL (SEKANS KOD NO.: 42);burada, SEKANS KOD NO.: 10, 11, 13, 14, 31, 34, 37, 38 ve 42”de gösterilen sistein, serbest sistein amino asididir, ya da SEKANS KOD NO.: 17, 19, 20, 21, 22, 24, 25 ve 27 arasindan seçilen hafif zincirdebir sekans:SLSASCGDRVT (SEKANS KOD NO.: 17) EIKRTCAAPSV (SEKANS KOD NO.: 19) TCAAPCVFIFPP (SEKANS KOD NO.: 20) FIFPPCDEQLK (SEKANS KOD NO.: 21) DEQLKCGTASV (SEKANS KOD NO.: 22) WKVDNCLQSGN (SEKANS KOD NO.: 24) ALQSGCSQESV (SEKANS KOD NO.: 25) GLSSPCTKSFN (SEKANS KOD NO.: 27)burada, SEKANS KOD NO.: 17, 19, 20, 21, 22, 24, 25 ve 27”de gösterilen sistein, serbest sistein amino asididir; burada, sisteindegistirilmis antikor, bir insan antikoru, kimerik antikor ya da11hümanize antikordur.Baska bir yönde mevcut bulus, bir ilaç kisma baglanan mevcut bulusun bir sistein ile yapilandirilmis antikorunu (Ab) içeren birantikor-ilaç konjugat bilesigini saglar.Ilaç inoiyeteleri arasinda bir maytansinoit, bir auristatin, bir dolastatin, bir trikoteken, CC1065, bir kalikeainisin ve diger enedin antibiyotikleri, bir taksan, bir antrasiklin ve bunlarin stereoizomerleri, izosterleri, analoglari ya da türevleri bunlarla sinirli olmaksizin yeralir. Ornek ilaç moiyeteleri arasinda DMl , MMAE ve MMAF vardir.Formül 1 ile temsil edilen antikor-ilaç konjugati, bir albümin- baglanma peptidi (ABF) sekansi da içerebilir ve bilesim, Formül Ia iletemsil edilen bilesiine sahiptir:ABP-Ab-(L-D)p IaBu bulusun baska bir özelligi, bir sistein degistirilmis antikor ya da bir sistein degistirilmis antikor-ilaç kon jugati ve fizyolojik ya da farmakolojik açidan kabul edilebilir tasiyici ya da seyreltici içeren bir bilesimle ilgilidir. Terapötik kullanima yönelik bu bilesim sterildir veliyofilize edilebilir.Bu bulusun baska bir özelligi, burada açiklanan antikor-ilaç konjugatlarinin ve bilesimlerinin tibbi kullanimlarini kapsar.
Farmasötik bilesimler, Formül 1 bilesikleri ile bir veya daha fazlasayida kemoterapötik a janin kombinasyonlarini kapsar.12Bazi özelliklerinde, bu bulus, Örnegin kanserin bir ErbB reseptörünün asiri-ekspresyonuyla karakterize edildigi durumlarda kanseri bir anti- ErbB antikorunun bir antikor-ilaç kon jugatini kullanarak tedavi etmekamaciyla antikor-ilaç kon jugatlarmin tibbi kullanimlarini kapsar.Alternatif ya da ek olarak, bu bulus, bulus konusu konjugatlarin, HER2 reseptörü ve EGF reseptöründen olusan gruptan seçilen bir büyüme faktörü reseptörünü asiri eksprese eden tümör hücrelerinin çogalmasini inhibe ederek kanseri tedavi etme amacina yönelik olan ve bir hastaya atif yapilan büyüme faktörü reseptörüne spesifik baglanan bir antikor-ilaç konjugati bilesigi ve bir kemoterapötik ajanuygulama basamagindan olusan tibbi kullanimlarini kapsar.Alternatif ya da ek olarak, bu bulus, bulus konusu konjugatlarin, bir insan kanser hastasini, örnegin ErbB2 reseptörü asiri-ekspresyonuyla karakterize edilen bir bozukluk oldugundan süphelenilen ya da böyle bir tani konulmus olan bir insan hastayi tedavi etme amacina yönelik olan ve bir antikor-ilaç koiijugati bilesigi ile bir kemoterapötik ajanin kombinasyonun etkin ve etkili miktarini uygulama basamagindanolusan tibbi kullanimlari kapsar.SEKILLERIN KISA TANIMISekil 1A, X-isini kristal koordinatlariyla türetilen hu4D5Fabv7 antikor fragmani üç boyutlu temsilini göstermektedir. Agir ve hafif zincirlerin degistirilmis Cys artiklarinin örneklerinin yapi pozisyonlari numaralandirilir (bir sirali numaralandirmasistemine göre).13Sekil 18, 4D5V7fabH için Kabat nuinaralandirma semasina (alt sira) kiyasla N-terminusundan baslayarak bir sirali numaralandirma semasini (üst sira) göstermektedir. Kabat numaralandirmasi insersiyonlari, a, b, c ile gösterilir.Sekil 2A ve Sekil 2B, BSA (içi bos çubuk), HER2 (çizgili çubuk) ya da streptavidinle (içi dolu çubuk) etkilesimler için PHESELECTOR eseyiyle hu4D5FabV8 ve hu4D5FabV8 Cys mutanti (ThioFab) faj varyantlari olan (A) biyotinlenmemis faj- hu4D5FabV8 ve (B) biyotinlenmis faj-hu4D5FabV8 (B),nin 450 nm°de absorbans belirlemesiyle birlikte baglanma ölçümlerini göstermektedir.Sekil 3A ve Sekil 33, BSA (içi bos çubuk), HER2 (çizgili çubuk) ya da streptavidirile (içi dolu çubuk) etkilesimler için PHESELECTOR eseyiyle hu4D5FabV8 (sol) ve hu4D5FabV8 Cys mutanti (ThioFab) varyantlari olan (A) biyotinlenmemis faj-hu4D5Fabv8 ve (B) biyotinleninis faj-hu4D5FabV8”in 450 nm”de absorbans belirlemesiyle birlikte baglanma ölçümlerini göstermektedir. Hafif zincir varyantlari sol tarafta gösterilmektedir ve agir zincir varyantlari sag tarafta gösterilmektedir. Tiyol reaktivitesi = streptavidin baglanmasi için OD450 nm + HER2 (antikor) baglanmasi için OD450 nmSekil 4A, yabani tip hu4D5FabV8”de bulunan artiklarin Fraksiyonel Yüzey Erisilebilirlik degerlerini göstermektedir.
Hafif zincir yerleri sol tarafta gösterilmektedir ve agir zincir yerleri sag tarafta gösterilmektedir.Sekil 4B, HER2 (gün 2), streptavidin (SA) (gün 2), HER2 (gün 4) ve SAiyla (gün 4) etkilesimler için biyotinlenmis hu4D5FabV8 (sol) ve hu4D5Fabv8 Cys mutanti (ThioFab)14varyantlarinin 450 nm”de absorbans belirlemesiyle birlikte baglanma ölçümlerini göstermektedir. Faj-hu4D5FabV8 Cys varyantlari izole edildi ve 4°C sicaklikta saklandi. Biyotin konjugasyonu 2. günde ya da 4. günde gerçeklestirildi ve ardindan, Ornek 2”de tarif edildigi gibi Her2 ve streptavidinle etkilesimlerini izlemek ve degistirilmis ThioFab varyantlarinda reaktif tiyol gruplarinin stabilitesini derinlemesine incelemek için PHESELECTOR analizleri yapildi.Sekil 5, streptavidin ve HER2”ye baglanma için, biyotin- maleiinid konjuge-hu4D5FabV8 (A'121C) ve biyotinlenmemis yabani tip hu4D5FabV83in 450 nm”de absorbans belirleinesiyle birlikte baglanma ölçümlerini göstermektedir. Her bir Fab, 2 ng ve 20 ng°de test edildi.Sekil 6, tavsan albümini, streptavidin (SA) ve HER2°yle baglanma için, biyotinlenmis ABP-hu4DSFabV8 yabani tip (wt) ve ABP-hu4D5FabV8 sistein inutantlari V1 lOC ve A121C7nin 450 nm'de absorbans belirlemesiyle birlikte ELISA analizi sonuçlarini göstermektedir.Sekil 7, tavsan albümini, HER2 ve streptavidinle (SA) baglanma ve Fab-HRP or SA-HRP'yle inceleme için, biyotinlenmis ABP-hu4D5FabV8 sistein mutantlari (ThioFab varyantlari) olan (soldan saga) tekli Cys varyantlari ABP- VllOC, ABP-AlZlC ve ikili Cys varyantlari ABP-VllOC- A88C ve ABP-VllOC-A121C°nin 450 nm”de absorbans belirlemesiyle birlikte ELISA analizi sonuçlarini göstermektedir.Sekil 8, biyotinlenmis ThioFab fajinm ve bir anti-faj HRPantikorunun HERTye (üst) ve Streptavidine (alt) baglanmasini15göstermektedir.
Sekil 9, bir HER2 reseptörü antijenine baglanan bir ABP- ThioFab füzyon proteini ilaç konjugatinin bir örnek temsilinigöstermektedir. ABP : albümin baglanma proteini.
Sekil 10, -°-trastuzumab;-A-trastuzumab-SMCC-DMI ve -O-hu4D5FabV8 sistein mutanti-(Al21C)-BMPEO-DM1 ile tedavi edilen SK-BR-3 hücrelerinin bir in-Vitro hücre proliferasyonu eseyini göstermektedir.Sekil 11, -o- trastuzuinab; -O-trastuzumab-SMCC-DMI; ve -D- hu4D5FabV8 sistein mutanti (V110C) -BMPEO-DM] ile tedavi edilen SK-BR-3 hücrelerinin bir in-Vitro hücre proliferasyonu eseyini göstermektedir.Sekil 12, 0. Günde î? Vehül (Tampon); -I- ABP-hu4D5FabV8 sistein mutanti (V1 IOC hafif zinciri)-DM1 ve -o- ABP- hu4D5FabV8 sistein mutanti (A121C agir zinciri)-DM1 dozu uygulanan MMTV-HER2 F05 memeli tümör allograftli atimik tüysüz farelerde zaman içerisinde ortalama tümör hacmi degisikligini göstermektedir.Sekil 13A, absorbans belirlemesi için HRP etiketli sekonder antikor baglanmasiyla birlikte iinmobilize HER2”ye biyotinlenmis antikor baglanmasinin bir resimli görüntüsünü sunmaktadir.Sekil 13B, immobilize HER2°ye baglanma için, biyotin- nialeimid kon juge tiyo-trastuzumab varyantlari ve biyotinlenmemis yabani tip trastuzumabin 450 nm”de absorbans belirlemesiyle birlikte baglanma ölçümlerini göstermektedir.Soldan saga: VllOC (tekli cys), A121C (tekli cys).16V110C1A121C (ikili cys) ve trastuzumab. Her bir tiyo IgG varyanti ve trastuzuinab, 1,10 ve 100 ng”de test edildi.Sekil 14A, absorbans belirlemesi için biyotinin anti-IgG- HRP,ye baglaninasiyla birlikte biyotinlenmis antikorun iminobilize HER2°ye baglaninasinin bir resimli görüntüsünü sunmaktadir.Sekil 14B, immobilize streptavidine baglanma için, biyotin- maleiinid kon juge-tiyo trastuzumab varyantlari ve biyotinlenmemis yabani tip trastuzumabin 450 nm”de absorbaiis belirlemesiyle birlikte baglanma ölçümlerini göstermektedir.
Soldan saga VllOC (tekli cys), A121C (tekli cys), V1 lOC/A121C (ikili cys) ve trastuzumab. Her bir tiyo IgG varyanti ve trastuzumab, 1,10 ve 100 ng”de test edildi.Sekil 15, konjugasyon için hücre kültüründen eksprese edilen bir sistein degistirilmis antikor (ThioMab) hazirlamak amacina yönelik genel prosesi göstermektedir.Sekil 16, iminobilize Protein A”da saflastirma isleminden sonra 2H9 ThioMab Fc varyantlari (soldan saga, serit 1-9) A339C; S337C; S324C; A287C; V284C; V282C; V279C; V273C°nin ve 2H9 yabani tipinin indirgeyici olinayan (üst) ve indirgeyici (alt) denatüran poliakrilamid jel elektroforezi analizini göstermektedir. Sagdaki serit, intakt proteinlerin yaklasik 150 kDa, agir zincir fragmanlarinin yaklasik 50 kDa ve hafif zincir fragmanlarinin yaklasik 25 kDa oldugunu gösteren bir boyut inarkeri merdivenidir.Sekil 17A, immobilize Protein A'da saflastirma isleminden sonra 2H9 ThioMab varyantlari (soldan saga, serit 1-4) L- V15C; Sl79C; S375C; S400C A°nin indirgeyici olmayan (sol)17ve indirgeyici (+DTT) (sag) denatüran poliakrilamid jel elektroforezi analizini göstermektedir.Sekil 17B, immobilize Protein A”da saflastirma isleminden sonra 2H9 ve 3A5 ThioMab varyantlarinin indirgeyiei olmayan (sol) ve indirgeyici (+DTT) (sag) denatüran poliakrilainid jel elektroforezi analizini göstermektedir.Sekil 18, biyotinlenmis Thio-IgG varyantlarinin western blot analizini göstermektedir. 2H9 ve 3A5 ThioMab varyantlari, indirgenmis denatüran poliakrilamid jel elektroforezinde analiz edildi; proteinler, nitroselüloz membrana aktarildi. Antikorun ve konjuge biyotinin varligi, sirasiyla anti-IgG-HRP”yle (üst) ve streptavidin-HRP”yle incelendi (alt). Serit l: 3A5 H-A121C.
Serit 2: 3A5 L-VllOC. Serit 3: 2H9H-A121C. Serit 4: 2H9 L- V110C. Serit 5: 2H9 yabani tip.Sekil 19, anti-IgG-HRP”yle inceleme ve 450 nin'de absorbans ölçümü (üst çubuk grafigi) yoluyla, biyotinlenmis 2H9 varyantlarinin streptavidine baglanmasi için ELISA analizini göstermektedir. Alt seinatik diyagram, ELISA analizinde kullanilan deney tasariinini göstermektedir.Sekil 20, -o- trastuzuinab; -A- ilaç yükü 3,4 DMl/Ab olan trastuzumab-SMCC-DMl ve -0- ilaç yükü 1,6 DMI/Ab olan tiyo-trastuzumab (A121C)-BMPEO-DM1 ile tedavi edilen SK- BR-3-hücrelerinin bir in-vitro hücre proliferasyonu eseyinigöstermektedir.Sekil 21A, -O- ana 2H9 anti-EphBZR ve -D- tiyo 2H9 (A121C) BMPEO-DM] ile tedavi edilen HT lOSOEphBZ hücrelerinin birin-vitro hücre proliferasyonu eseyini göstermektedir.18Sekil 21 B, -O- ana 2H9 anti-EphB2R ve -El- tiyo 2H9 (A121 C) BMPEO-DMI ile tedavi edilen BT 474 hücrelerinin bir in-vitro hücre proliferasyonu eseyini göstermektedir.Sekil 22, -9- 3A5 anti MUC16-SMCC-DM1 ve -I- tiyo 3A5 (A121C) BMPEO-DM] ile tedavi edilen PC3/ne0 hücrelerinin bir in-vitro hücre proliferasyonu eseyini göstermektedir.Sekil 23, -9- 3A5 anti MUClö-SMCC-DMI ve -I- tiyo 3A5 (A121C) BMPEO-DM] ile tedavi edilen PC3/MUC16 hücrelerinin bir in-vitro hücre proliferasyonu eseyini göstermektedir.Sekil 24, -0- 3A5 anti MUC16-SMCC-DM1 ve -I- tiyo 3A5 (A121C) BMPEO-DMl ile tedavi edilen OVCAR-3 hücrelerinin bir in-vitro hücre proliferasyonu eseyini göstermektedir.Sekil 25, i? Vehikül (Tampon); _o_ ilaç yükü 3,4 DMl/Ab olan trastuzumab-SMCC-DMI 10 mg/kg; -i- ilaç yükü 1,6 DMl/Ab olan tiyo trastuzumab (A121C)-SMCC-DM1 21 mg/kg ve -i:i- ilaç yükü 1,6 DM l/Ab olan tiyo trastuzumab (A121C)-SMCC- DMl 10 ing/kg ile 0. Günde bir tekli doz uygulamasindan sonra, MMTV-HER2 F05 memeli tümör allograftli atimik tüysüz farelerde 21 gün boyunca ortalama tümör hacmidegisikligini göstermektedir.ÖRNEK YAPILARIN DETAYLI TANIMIBu bölümde, bulusun belirli yapilarina detayli olarak atif yapilacaktirve bu bulus yapilarinin örnekleri, ekli kimyasal yapilarda ve19formüllerde gösterilmektedir. Bu bulus, siralanan yapilarla baglantili olarak açiklanirken, bulusun kapsaminin bu yapilarlasinirlandirilmasiiiin düsünülmedigi anlasilacaktir.Aksi belirtilmedikçe, burada kullanilan teknik ve bilimsel terimler, bu bulusun ait oldugu sektörde olagan bilgi ve beceri sahibi kisilerin yaygin olarak anlayacaklari anlamdadir ve asagida atif yapilan referanslarda kullanilanlara uygundur: Singleton ve ark (1994) Dictionary of Microbiology and Molecular Biology, 2. Ed., J. Wiley & Sons, New York, NY; and Janeway, C., Travers, P., Walport, M., Shlomchik (2001) Immunobiology, 5. Ed., Garland Publishing, New YorkTANIMLARAksi belirtilmedikçe, bu dokümanda kullanilan asagidaki terimler veibareler, asagida açiklandiklari anlamda kullanilmislardir.Bu dokümanda ticari adlar kullanildiginda, basvuru sahipleri, birbirinden bagimsiz olarak ticari adin verildigi ürününün formülasyonunu, jenerik ilaci ve ticari adin verildigi ürününün etkinfarmasötik bilesen(ler)ini kasteder.Burada kullanilan "antikor" terimi, en genis anlamiyla kullanilir ve spesifik olarak monoklonal antikorlar, poliklonal antikorlar, dimerler, multimerler, multispesifik antikorlar (örnegin, bispesifik antikorlar) ve istenen biyolojik aktiviteyi gösterdikleri sürece, antikor fragmanlarinikapsar (Miller ve ark (2003) Jour. of lminunology 170:4854-4861).20Antikorlar, murin antikorlari, insan antikorlari, hümanize antikorlar, kimerik antikorlar ya da baska türlerden türetilen antikorlar olabilir.
Bir antikor, immün sistem tarafindan olusturulan ve bir spesifik antijeni taniyabilen ve ona baglanabilen bir proteindir (Janeway, C., Travers, P., Walport, M., Shloinchik (2001) Immuno Biology, 5. Ed., Garland Publishing, New York). Bir hedef antijen genellikle çoklu antikorlar üzerinde CDR°ler tarafindan taninan ve epitoplar da denilen birçok baglanma yeri içerir. Farkli bir epitopa Spesifik baglanan her bir antikor farkli bir yapiya sahiptir. Bundan dolayi, bir anti jen, birden fazla tekabül eden antikor içerebilir. Bir antikor, bir tam-boy immünoglobulin molekülünü ya da bir tam-boy immünoglobulin molekülünün immünolojik açidan aktif kismini, yani ilgili bir hedefin ya da onun parçasinin bir anti jenini immünospesifik olarak baglayan bir antijen baglanina yeri içeren bir molekülü kapsar; atif yapilan hedefler arasinda, bunlarla sinirli kalmaksizin, kanser hücresi ya da bir otoimmün hastalikla iliskili otoimmün antikorlar üreten hücreler vardir. Burada açiklanna immünoglobulin, herhangi bir inimüiioglobulin molekülü tipinde (örnegin IgG, IgE, IgM, lgD ve IgA), sinifinda (örnegin IgGl, IgGZ, lgG3, lgG4, lgA] ve lgAZ) ya da alt-sinifinda olabilir. Immünoglobulinler, herhangi bir türeden türetilebilir. Bununla birlikte, bu bulusun bir özelliginde,immünoglobulin insan, inurin ya da tavsan kaynaklidir."Antikor fragmanlari", bir tam-boy antikorun bir kismini, genellikle antijen baglanma ya da degisken bölgesini kapsar. Antikor fragmanlarina örnek olarak Fab, Fab', F(ab')2 ve FV fragmanlari; diabody”ler; lineer antikorlar; minibodysler (Olafsen ve ark (2004) Protein Eng. Design & Sel. l7(4):315-323); bir Fab ekspresyon21kütüphanesi tarafindan üretilen fragmanlar; anti-idiyotipik (anti-1d) antikorlar; CDR (tamainlayicilik belirleme bölgesi) ve kanser hücresi antijenleri, Viral antijenler ya da mikrobiyal antijenlere immünospesifik olarak baglanan yukaridakilerin herhangi birisinin epitop-baglayici fragmanlari; tek-Zincirli antikor molekülleri ve ayrica, antikor fragmanlarindan olusturulan inultispesifik antikorlargösterilebilir.Bu dokümanda kullanilan "monoklonal antikor" terimi, büyük ölçüde homojen antikorlardan olusan, yani popülasyonu olusturan münferit antikorlarin çok küçük miktarlarda bulunabilecek olasi dogada mevcut mutasyonlar hariç özdes oldugu bir popülasyondan elde edilen bir antikora atif yapar. Monoklonal antikorlar yüksek düzeyde spesifiktir ve tek bir anti jenik yere yönlendirilirler. Ek olarak, normalde farkli determinantlara (epitoplar) karsi yönlendirilen farkli antikorlari kapsayan poliklonal antikor preparatlarinin aksine, her bir monoklonal antikor, antijen üzerindeki tek bir determinanta karsi yönlendirilir.
Monoklonal antikorlar, spesifisitelerinin yani sira, diger antikorlar tarafindan kontamine edilmeden sentezlenebilmeleri açisindan da avantajlidirlar. Niteleyici "monoklonal" sözcügü, antikorun büyük ölçüde homojen bir antikor popülasyonundan elde edilmis oldugunu gösteren bir terimdir ve antikor üretiminin belirli bir yöntemle gerçeklestirilmesini zorunlu kilacak sekilde anlasilmainali ve yorumlanmamalidir. Örnegin, bu bulusa göre kullanilacak monoklonal antikorlar, ilk olarak “Kohler ve ark., Nature 2562495 (1975)” referansinda tanimlanan hibridom yöntemiyle hazirlanabilecegi gibi, rekombinan DNA yöntemleriyle de (bakiniz örnegin, ABD Patent No.: 4816567 ve 5807715) hazirlanabilir. Monoklonal antikorlar,22örnegin “Clackson ve ark (1991) Nature, 3522624-628” ve “Marks ve ark (1991) J. Mol. Biol., 222:581-597” referanslarinda açiklanan teknikler kullanilarak faj antikor kütüphanelerinden de izoleedilebilirler.Burada inonoklonal antikorlar spesifik olarak agir ve/veya hafif zincirin bir kismi belirli bir türden türetilmis olan ya da belirli bir antikor sinifi ya da alt-sinifina ait olan antikorlarda kendilerine tekabül eden sekanslara özdes ya da homolog olan, zincir(ler)in geri kalan kismi ise baska bir türden türetilmis olan ya da baska bir antikor sinifi ya da alt-sinifina ait olan antikorlarda kendilerine tekabül eden sekanslara özdes ya da homolog olan “kimerik” antikorlari ve ayni zamanda, istenen biyolojik aktiviteyi gösterdikleri sürece bu antikorlarin fragmanlarini kapsar (US 4816567 ve Morrison ve ark (1984) Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 81:6851-6855). Ilgili kimerik antikorlar arasinda, insan sabit bölge sekanslarindan ve yani sira, insan-disi bir primattan (örnegin, Eski Dünya Maymunu ya da Insansilar) türetilen degisken domain anti jen-baglanma sekanslarindanolusan “primatize” antikorlar da bulunur.Bu dokümanda kullanilan bir “intakt antikor” terimi, VL ve VH domainlerinin yam sira, bir hafif zincir sabit domaini (CL) ve agir zincir sabit domainleri CHl, CH2 ve CH3°ten olusan bir antikordur.
Sabit domainler, nativ sekans sabit domainleri (örnegin, insan nativ sekans sabit domainleri) ya da onlarin amino asit sekansi varyantlari olabilirler. Intakt antikorda, bir antikorun Fc sabit bölgesine (bir nativ sekans FC bölgesi ya da amino asit sekans varyanti Fc bölgesi)atfedilebilecek biyolojik aktivitelere atif yapan bir ya da daha fazla23sayida “efektör fonksiyon” bulunabilir. Antikor efektör fonksiyonlarina 'Örnek olarak asagida sayilanlar gösterilebilir: C lq baglama; tainamlayici bagimli sitotoksisite; Fc reseptörü baglanmasi; antikor-bagimli hücre-aracili sitotoksisite (ADCC); fagositoz; B hücresi reseptörü gibi hücre yüzeyi reseptörlerinin asagi regülasyonu ve BCR.Agir zincirlerinin sabit domaininin amino asit sekansina bagli olarak, intakt antikorlar, farkli "siniflara" atanabilir. Bes ana intakt immünoglobulin antikoru sinifi vardir: IgA, IgD, IgE, lgG ve lgM ve bunlarin birkaçi, `Örnegin IgGl, IgG2, IgG3, IgG4, IgA ve IgA2 gibi "alt-siniflara" da (izotipler) bölünebilir. Antikorlarin farkli siniflarina tekabül eden agir-Zincir sabit domainleri, sirasiyla (1., 5, 8, y ve p olarak adlandirilir. Immünoglobulinlerin farkli siniflarinin alt-birim yapilari ve üç-boyutlu konfigürasyonlari iyi bilinmektedir. lg formlari arasinda mentese modifikasyonlari ya da mentesesiz formlar vardir (Roux ve ark (1998) J. Immunol. 161:4083-4090; Lund ve ark (2000) Eur. J. Biochem. 267:7246-7256; US 2005/0048572; US 2004/0229310).Bir "ErbB reseptörü", hücre çogalmasi, diferasyasyonu ve sürvisinin önemli aracilari olan ErbB reseptör ailesine ait bir reseptör protein tirozin kinazdir. ErbB reseptör ailesinin epidermal büyüme faktörü reseptörü (EGFR, ErbBl, HERl), HER2 (ErbB2 or p185neu), HER3 (ErbB3) ve HER4 de (ErbB4 ya da tyr02) dahil dört ayri üyesi vardir.
Bir anti-ErbB2 antikorlari grubu, insan meme tümörü hücre hatti SKBR3 kullanilarak karakterize edilmistir (Hudziak ve ark (1989) Mol. Cell. BioL 9(3):1165-1172). Hücre proliferasyonunu %5624oraninda inhibe eden 4D5 isimli antikorla maksimum inhibisyon elde edildi. Gruptaki diger antikorlar, bu eseyde hücre proliferasyonunu daha düsük bir seviyeye kadar azaltti. 4D5 antikorunun ErbB2-asiri eksprese eden meme tümörü hücre hatlarini TNF-(x sitotoksik etkilerine karsi sensitize ettigi de tespit edildi (US 5677171). Hudziak ve arkadaslarinin referansinda açiklanan anti-ErbB2 antikorlari asagida atif yapilan referanslarda ilaveten karakterize edilir: Fendly ve ark (1990) Cancer Research 50:1550-1558; Kotts ve ark. (1990) In Vitro 26(3)59A; Sarup ve ark (1991) Growth Regulatioii 1:72- 82; Shepard ve ark. .1. (1991) Clin. lmmunol. ll(3):117-127; Kumar ve ark. (1991) Mol. Cell. Biol. 11(2):979-986; Lewis ve ark. (1993) Cancer ImmunoL Immunother. 37:255-263; Pietras ve ark. (1994) Oncogene 9:1829-1838; Vitetta ve ark. (1994) Cancer Research 545301-5309; SliWkowski ve ark (1994) J. Biol. Chem. 269(20):14661-14665; Scott ve ark. (1991) J. BioL Chein. 266:]4300- ; D'souza ve ark. Proc. Natl. Acad. Sci. (1994) 91:7202-7206; Lewis ve ark. (1996) Cancer Research 56:1457-1465 ve Schaefer ve ark. (1997) Oncogene 15:1385-1394.ErbB reseptörü genellikle bir ErbB ligandini baglayabilen bir ekstraselüler domain; bir lipofilik transmembran domain; bir korunan intraselüler tirozin kinaz domaini ve fosforile edilebilecek birkaç tirozin artigi bulunan bir karboksil-terminal sinyalleme domaini içerir.
ErbB reseptörü, bir "natiV sekans" ErbB reseptörü ya da onun bir "amino asit sekansi varyanti" olabilir. Tercihen, ErbB reseptörü, native sekans insan ErbB reseptörüdür. Bu dogrultuda, bir "ErbB reseptör ailesi üyesi", EGFR (ErbBl), ErbB2, ErbB3, ErbB4 ya dagünümüzde bilinen ya da gelecekte tanimlanacak olan baska herhangi25bir ErbB reseptörüdür."ErbBl", "epidermal büyüme faktörü reseptörü", "EGFR" ve "HERl" terimleri bu dokümanda dönüsümlü kullanilir ve dogal ortamda kendiliginden olusan mutant formlari da (örnegin “Humphrey ve ark (1990) Proc. Nat. Acad. Sci. (USA) 87:4207-4211” referansinda açiklandigi gibi olan bir EGFR delesyon inutanti) dahil olmak üzere, örnegin “Carpenter ve ark (1987) Ann. ReV. Biochem, 56:881-914” eserinde açiklandigi gibi olan EGFRsye atif yaparlar. erbBl terimi, EGFR protein ürününü kodlayan gene atif yapar. HERl”e karsi antikorlar örnegin “Murthy ve ark (1987) Arch. Biochem. Biophys., 252z549-560” referansmda ve WO 9525167 sayili patentteaçiklanmaktadir."ERRP", "EGF-Reseptörü Iliskili Protein", "EGFR Iliskili Protein" ve "epidermal büyüine faktörü reseptörü iliskili protein" ibareleri bu dokümanda dönüsümlü kullanilir ve örnegin US 6399743 sayili patentte ve ABD Yayin No. 2003/0096373 olan dokümanda açiklandigi gibi ERRP°yc atif yapar."ErbBZ" ve "HER2" terimleri bu dokümanda dönüsümlü kullanilir ve örnegin “Seniba ve ark (1985) Proc. Nat. Acad. Sci. (USA) 82:6497- 6501” ve “Yamamoto ve ark (1986) Nature, 319:230-234” referanslarinda açiklanan insan HERZ proteinine (GenBank erisim numarasi X03363) atif yapar. "erbB2" terimi, insan HERZssini kodlayan gene atif yapar ve "neu" terimi, sican p185neu”sunu kodlayan gene atif yapar. Tercih edilen ErbB2, natiV sekans insan ErbB2”sidir.26"ErbB3" ve "HER3", ömegin ABD Patent No. 5183884 ve 5480968sde ve “Kraus ve ark (1989) Proc. Nat Acad. Sci. (USA) 86:9193-9197” referansinda açiklandigi gibi reseptör polipeptidine atif yapmaktadir. ErbB3”e karsi antikorlar sektörde bilinmektedir ve örnegin ABD Patent No. 5183884 ve 5480968°de ve WO 97/35885sayili patentte tarif edilmektedir.Burada kullanilan "ErbB4" ve "HER4" teriinleri, örnegin 599.274 numarali EP Patent Basvurusunda ve “P10Wman ve ark (1993) Proc.
Natl. Acad. Sci. USA 90:1746-1750” ve “Plowman ve ark (1993) Nature 366:473-475” referanslarinda açiklandigi gibi olan reseptör polipeptidine ve bu reseptör polipeptidinin WO 99/ 19488 numarali patentte açiklandigi gibi olan izoformlarina atif yapar. HER4”e karsi antikorlar, örnegin WO 02/ 18444 sayili patentte açiklanmaktadir.ErbB reseptörlerine karsi antikorlar, örnegin Santa Cruz Biotechnology, Inc., California, ABD dahil birçok kaynaktan ticariolarak temin edilebilir."Amino asit sekansi varyanti" terimi, bir nativ sekans polipeptidden bir ölçüde farklilasan amino asit sekanslarina sahip polipeptidlere atif yapar. Normalde, amino asit sekansi varyantlari, bir nativ ErbB ligandinin en az bir reseptör baglanma domainiyle ya da bir nativ ErbB reseptörünün en az bir ligand baglanma domainiyle en az yaklasik %70 oraninda sekans özdesligine sahip olacaktir ve bu reseptör ya da ligand baglanma domainleriyle sekans açisindan tercihen en az yaklasik %80, daha çok tercihen en az yaklasik %90oraninda homolog olacaktir. Amino asit sekansi varyantlarinda nativ27amino asit sekansinin amino asit sekansi içinde belirli pozisyonlarda sübstitüsyonlar, delesyonlar ve/Veya insersiyonlar bulunur. Aminoasitler geleneksel adlarla, tek harfli ve üç harfli kodlarla adlandirilir."Sekans özdesligi" ibaresi, sekanslar hizalandiktan ve gerekirse maksimuin yüzde sekans özdesligi elde etmek için bosluklar eklendikten sonra özdes olan bir ainino asit sekansi varyantindaki artik yüzdesi olarak taniinlanir. Hizalama için kullanilan yöntemler ve bilgisayar programlari sektörde iyi bilinmektedir. Bu bilgisayar programlarindan birisi, Genentech, Inc sirketinin yazdigi ve patent koruinasi için 10 Aralik 1991 tarihinde Ainerika Birlesik Devletleri Telif Haklari Ofisi, Washington, DC 20559'a gerekli kullanici dokümantasyonuyla birlikte basvuru yapmis oldugu “Align 2”programidir.“Antikor-bagimli hücre-aracili sitotoksisite” ya da “ADCC” terimi, Fc reseptörlerini (FcR'ler) ekSprese eden Spesifik olmayan sitotoksik hücrelerin (örnegin Dogal Katil (NK) hücreler, nötrofiller ve makrofajlar) bir hedef hücreye bagli bulunan antikoru tanidigi ve akabinde hedef hücrenin lize olmasina yol açtigi bir hücre-aracili reaksiyona atif yapar. ADCC”ye aracilik eden primer hücreler olarak NK hücreleri yalnizca FcyRIII eksprese ederken, monositler FcyRI, FcyRII and FcyRIII”yi eksprese ederler. Heinatopoetik hücrelerdeki FCR ekspresyonu, Ravetch ve Kinet°e ait eserde ““Annu. Rev.
Iinmunol 9:457-92, 1991” sayfa 464”te yer alan Tablo 3”te özetlenmektedir. Ilgi konusu bir molekülün ADCC aktivitesini degerlendirmek için, örnegin 5500362 veya 5821337 sayili ABDPatentlerinde tarif edilen bir in vitro ADCC eseyi gerçeklestirilebilir.28Bu gibi eseyler için faydali ve uygun efektör hücreler arasinda, periferal kan mononükleer hücreleri (PBMC) ve Dogal Katil (NK) hücreler bulunur. Alternatif ya da ek olarak, ilgi konusu molekülün ADCC aktivitesi, bir örnegi “Clynes ve ark (1998) PROC. NAT.
ACAD. SCL (USA) (USA) 95:652-656” referansinda aktarilan birhayvan modeli kullanilarak in vivo ortamda degerlendirilebilir.“Insan efektör hücreleri”, bir ya da daha fazla sabit bölge reseptörü (FcR) eksprese eden ve efektör fonksiyonlar ortaya koyan lökositlerdir. Hücreler, tercihen, en azindan FcyRIIl°yi eksprese ederler ve ADCC efektör fonksiyonunu gerçeklestirirler. ADCC fonksiyonuna aracilik eden insan lökositlerine verilebilecek örnekler arasinda, periferal kan mononükleer hücreleri (PBMC), dogal katil (NK) hücreler, monositler, sitotoksik T hücreleri ve nötrofiller de bulunmakla beraber, PBMC°ler ve NK hücreler tercih edilmektedir.
Efektör hücreler, bir nativ kaynaktan, örnegin kandan ya da buradaaçiklandigi gibi PBMC”lerden izole edilebilirler.“Fc reseptörü” ve “FcR” terimleri, bir antikorun Fc bölgesine baglanan bir reseptörü. tanimlamak için kullanilmaktadir. Tercih edilen FcR, bir nativ sekans insan FcR”sidir. Öte yandan, tercih edilen bir FcR, bir IgG antikoruna (bir gama reseptörü) baglanan ve FcyRI, FcyRII ve FcyRIII alt-sinifi reseptörlerinden ve bunlara bagli olarak, bu reseptörlerin allelik varyantlari ve alternatif splicing islemine ugratilmis formlarindan biri olan bir reseptördür. FcyRII reseptörleri arasinda, temelde sitoplazmik domainleri açisindan farklilik gösteren benzer amino asit sekanslarina sahip FcyRIIA (bir “aktive edicireseptör”) ve FclelB (bir inhibe edici reseptör) bulunur. Aktive edici29reseptör FclelA, sitoplazmik domaininde bir immünoreseptör tirozin-bazli aktivasyon motifi (ITAM) içerir. Inhibe edici reseptör FcyRIIB, sitoplazmik domaininde bir immünoreseptör tirozin-bazli inhibisyon motifi (ITIM) içerir. (“Da'eron, Annu. Rev. Iinmunol. :203-234 (1997)” referansinda derlenmistir). FcR°ler; “Ravetch and Kinet, Annu. Rev. Immunol 9:457-92 (1991)”, “Capel ve ark., Iinmunomethods 4225-34 (1994)” ve de “Haas ve ark (1995) J. Lab.
Clin. Med. 126:330-41” referanslarinda derleninektedir. Gelecekte tanimlanacaklar da dahil olmak üzere diger FCR”ler, burada kullanilan “FcR” teriminin kapsamina girmektedir. Bu terim, ayrica inatemal IgG”lerin fetusa transferinden sorumlu olan neonatal reseptör FcRnsyi de kapsamaktadir (Guyer ve ark (1976) J. lmmunoL. l 17:587 ve Kim ve ark (1994) J. ImmunoL 24:249).“Tamamlayici-bagimli sitotoksisite” veya “CDC” terimi, bir molekülün tamamlayici varliginda bir hedefini lize etme kabiliyetine atif yapar. Tamamlayici aktivasyon yolagi, tamamlayici sisteminin (Clq) ilk bileseninin bir kognat antijenle kompleks halinde bulunan bir moleküle (örnegin, bir antikora) baglanimi neticesinde baslar.
Tamamlayici aktivasyonunu degerlendirmek maksadiyla, örnegin Gazzano-Santoro ve arkadaslarinin (J. Immunol. Methods 202:]63,1996) aktardiklari gibi, bir CDC eseyi gerçeklestirilebilir.“Nativ antikorlar”, genellikle, iki özdes hafif (L) zincir ve iki özdes agir (H) zincirden olusan, yaklasik 150.000 Dalton agirligindaki heterotetramerik glikoproteinlerdir. Hafif zincirlerden her biri, bir kovalent disülfûr bagiyla agir zincirlerden birine baglidir; disülfûrbagi sayisi, farkli immünoglobulin izotiplerinin agir zincirleri arasinda30farklilik gösterir. Agir ve hafif zincirlerin her birinde, ayrica düzenli araliklarla ayrilmis zincir-içi disülfur köprüleri bulunur. Her agir zincirin bir ucunda bir degisken domain (VH) ve bunu takip eden bir dizi sabit domain bulunur. Her hafif zincirin bir ucunda bir degisken domain (VL) ve diger ucunda bir sabit domain bulunur. Hafif zincirin sabit domaini, agir zincirin ilk sirada bulunan sabit domainiyle hizalanir; hafif zincir degisken domaini ise, agir zincir degisken domainiyle hizalanir. Hafif ve agir zincir degisken domaiiileri arasinda belirli ainino asit artiklarinin bir arayüz olusturduklaridüsünülmektedir.“Degisken” terimi, degisken domainlerin belirli kisimlarinin antikorlar genelinde sekans açisindan genis ölçüde farkli olduklari ve belirli her bir antikorun kendisine iliskin aiitijene yönelik baglanimi ve spesifisitesini saglamak için kullanildiklari olgusuna atif yapar. Ancak degiskenlik, antikorlara ait degisken domainler arasinda esit ölçüde dagilim gösterinez. Hem hafif zincir hem de agir zincir degisken domainlerinde hiperdegisken bölgeler olarak adlandirilan üç segmentte yogunlasir. Degisken domainlerin en fazla korunan kisimlari, çerçeve bölgeleri (FR) olarak adlandirilirlar. Nativ agir ve hafif ziiicirlerin degisken domainlerinin her biri, büyük oranda bir ß- yaprak konfigürasyonu kullanilan ve ayrica, ß-yaprak yapisini baglayan ve bazen de bu yapinin bir parçasi olan luplar olusturan üç hiperdegisken bölgeyle birbirlerine baglanan dört FR°den olusur.
Zincirlerin her birindeki hiperdegisken bölgeler, FR,1erle yakin proksimitede bir arada tutulur ve diger zincirin hiperdegisken bölgeleriyle birlikte, antikorlarin antijen baglanma yeri olusumunakatkida bulunurlar (bakiniz: Kabat ve ark (1991), Sequences of31Proteins of Iminunological Interest, 5. Ed. Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, MD.). Sabit domainler, bir antikorun bir anti jene baglanma islevine dogrudan katilmazlar, ancak antikorun antikor-bagimli selüler sitotoksisiteye (ADCC) katilimi gibiçesitli farkli efektör fonksiyonlar gösterirler.Bu dokümanda kullanilan "hiperdegisken bölge" terimi, antijen baglanmasindan sorumlu bir antikorun amino asit artiklarina atif yapar. Hiperdegisken bölge genellikle bir "tamamlayicilik belirleme bölgesi" ya da "CDR"den elde edilen ainino asit artiklarindan (yani, hafif zincir degisken domaininde 24-34 (Ll), 50-56 (L2) ve 89-97 (L3) artiklari ve agir zincir degisken domaininde 31-35 (Hl), 50-65 (H2) ve 95-102 (H3) artiklari; Kabat ve ark., yukarida atif yapilmaktadir) ve/Veya bir "hiperdegisken lup"tan elde edilen artiklardan (yani, hafif zincir degisken doinaininde 26-32 (Ll), 50-52 (L2) ve 91-96 (L3) artiklari ve agir zincir degisken domaininde 26-32 (Hl), 53-55 (H2) ve 96-101 (H3) artiklari; Chothia and Lesk (1987) I.
Mol. Biol., l96:901-9l7) olusur. “Çerçeve” veya “FR” artiklari, burada tanimlanan hiperdegisken bölge artiklari disindaki degiskendomain artiklaridir.Antikorlariii papain sindirimi, her birinde tek bir anti jen-baglanma yeri bulunan ve “Fab” fragmanlari olarak adlandirilan iki özdes antijen-baglanma fragmanini ve ismi kolayca kristalize olma kabiliyetini yansitan bir artik “FC” fragmanini üretir. Pepsin uygulamasi, iki anti jen-baglanma yeri bulunan ve buna ragmen hâlâaiitijeni çapraz baglayabilen bir F(ab,)2 fraginani ortaya çikarir.32"FV", bir tam antijen-tanima ve -baglanma yeri içeren en küçük antikor fragmanidir. Bu bölge, kovalent olmayan siki bir bagla birbirine bagli bir agir zincir ve bir hafif zincir degisken domaininin bir diinerinden olusur. Bu konfigürasyonda, degisken doinainlerin her birinin üç adet hiperdegisken bölgesi etkilesime girerek, VH-VL dimerinin yüzeyi üzerinde bir antijen-baglanma yeri olusturur. Bir bütün olarak bu alti hiperdegisken bölge, antikora, anti jene baglanma Spesifisitesi kazandirirlar. Bununla birlikte, her ne kadar baglanma yerinin tamamindan daha düsük bir afinitede olsa da, tek bir degisken domain (ya da bir anti jene özgü olarak yalnizca üç hiperdegisken bölge içeren bir Fv°nin yarisi) dahi antijeni tanima ve baglamakabiliyetine sahiptir.Fab fragmani da hafif zincirin sabit domainini ve agir zincirin ilk sabit domainini (CHl) içerir. Fab” fragmanlari, antikor mentese bölgesi kaynakli bir veya daha fazla sayida sistein de dahil, agir zincir CH 1 domaini karboksil terminal ucunda birkaç artik ilavesiyle Fab fragmanlarindan ayrilir. Fab°-SH, sabit domainlere ait sistein artik(lar)1n1n en az bir serbest tiyol grubu tasidigi Fab, için burada kullanilan adlandirmadir. F(ab”)2 antikoru fragmanlari, aslen, aralarinda mentese sisteinleri bulunan Fab” fragmanlari çiftleri olarak üretilmislerdir. Antikor fragmanlarina iliskin baska kimyasaleslesmeler de bilinmektedir.Herhangi bir omurgali türünden elde edilen antikorlarin “hafif zincirleri”, sabit domainlerinin amino asit sekanslarina bagli olarak kappa (K) ve lambda (l) olarak adlandirilan açikça ayri iki tiptenbirine atanabilirler.33“Tek-Zincirli FV” ya da “scFV” antikor fragmanlari, antikorun VH ve VL domainlerini kapsarlar; bu domainler, tek bir polipeptid zincirinde bulunurlar. FV polipeptidi, tercihen, ayrica VH ve VL domainleri arasinda scFv1nin istenen antijen baglanma yapisini olusturmasini mümkün kilan bir polipeptid baglayicisi da içerir. scFV hakkinda yapilmis bir gözden geçirme ve derleme çalismasi için “Pluckthun in The Pharmacology of Monoclonal Antibodies, cilt 113, Rosenburg and Moore eds., Springer-Verlag, New York, sayfa 269-315 (1994)” referansina bakiniz. ScFV fragmanlarinin anti-ErbB2 antikoru, WO93/16185 dokümaninda ve 5.571.894 ve 5.587.458 sayili ABDPatentlerinde anlatilmaktadir.“Diabody°ler” terimi, iki anti jen baglanma yeri bulunan ve her biri ayni polipeptid zincirinde (VH-VL) bir hafif zincir degisken domainine (VL) bagli halde bir agir zincir degisken domaini (VH) içeren küçük antikor fragmanlarina atif yapar. Ayni zincirde yer alan iki domain arasinda eslesme olmasini saglamak için çok kisa olan bir baglayici kullanilarak, domainler, baska bir zincirin tamamlayici domainleriyle eslesmeye ve iki adet anti jen baglanma yeri olusturmaya zorlanirlar.
Diabody”ler, 'örnegin EP 404.097, WO 93/ l 1 161 ve “Hollinger ve ark. (1993) Proc. Natl. Acad. Sci. ABD 90:6444-6448” referanslarindadaha ayrintili anlatilmaktadir.Insan-disi (örnegin, kemirgen) antikorlarin "hümanize" formlari, insan-disi immünoglobulinden türetilmis minimum sekans içeren kimerik antikorlardir. Hümanizasyon, murin antijen baglama bilgilerini bir immünojik olmayan insan antikoru alicisina aktarmayöntemidir ve terapötik açidan faydali ve kullanisli birçok ilaç34üretilmesini saglamistir. Hümanizasyon yöntemi genellikle alti inurin tamamlayicilik belirleme bölgesinin (CDR) hepsinin bir insan antikoru çerçevesine transferiyle baslar (Jones ve ark, (1986) Nature 3212522-525). Bu CDR-graftli antikorlar genellikle antijen baglama için orijinal afinitesini koruinaz ve esasinda, afinite çogunlukla oldukça bozulur. CDRSIere ek olarak, seçili insan-disi antikor çerçeve artiklari da uygun CDR konformasyonunu korumak için dahil edilebilir (Chothia ve ark (1989) Nature 3422877). Graftlanan CDR”lerin yapisal konforinasyonunu destekleinek için kilit fare çerçeve artklarinin insan aliciya transferinin antijen baglamasini ve afinitesini gelistirdigi gösterilmistir (Riechmann ve ark (1992) J. Mol.
Biol. 224, 487-499; Foote and Winter, (1992) J. Mol. Biol. 224z487- 499; Presta ve ark (1993) J. Iinmunol. 151,2623-2632; Werther ve ark (1996) J. Iminunol. Methods 157:4986-4995 ve Presta ve ark (2001) Thromb. Haemost 85:379-3 89). Çogu durumda ve çogunlukla, hümanize antikorlar, insan immüiioglobulinleridir (alici antikoru); bu immünoglobulinlerde, alicinin hiperdegisken bölge artiklari, istenen spesifisite, afinite ve kapasiteye sahip, fare, siçan, tavsan ya da insan- disi primat gibi bir insan-disi türden elde edilen hiperdegisken bölge artiklariyla (donör antikoru) ikame edilirler. Bazi durumlarda, insan immünoglobulininin çerçeve bölge (FR) artiklari, bunlara tekabül eden insan-disi artiklarla ikame edilirler. Ek olarak, hümanize antikorlar, ne alici antikorunda ne de donör antikorunda bulunan artiklari içerebilirler. Bu modifikasyonlar, antikor performansini daha da arttirmak ve düzeltmek için yapilirlar. Hümanize antikor, genelde, hiperdegisken bölgelerin hepsinin ya da hemen hemen hepsinin bir insan-disi immünoglobulininkine tekabül ettigi ve FR bölgelerininhepsinin ya da hemen hemen hepsinin bir insan immünoglobulin35sekansinin bölgeleri oldugu en az bir ve normalde iki degisken doinainin hemen hemen hepsini kapsar. Hümanize antikor, istege göre, bir immünoglobulinin, normalde bir insan immünoglobulininin sabit bölgesinin (FC) en azindan bir kismini da içerebilir. Ilave detayli bilgi için bakiniz: US 6407213; Jones ve ark. (1986) Nature 321 :522- 525; Riechmann ve ark (1988) Nature 332z323-329 ve Presta, (1992) Curr. Op. Struct. Biol., 2:593-596.Bir "serbest sistein amino asidi", degistirilerek bir ana antikora dönüsürülmüs olan, bir tiyol fonksiyonel grubuna (-SH) sahip olan ve bir intramoleküler ya da intermoleküler disülfûr köprüsü olarakeslestirilmeyen sistein amino asit artigina atif yapar."Tiyol reaktivite degeri", serbest sistein amino asitlerinin reaktivitesinin bir kantitatif karakterizasyonudur. Tiyol reaktivite degeri, bir sistein degistirilmis antikorda, bir tiyol-reaktif nitelikte reaktif maddeyle reaksiyona giren bir serbest sistein amino asidi yüzdesidir ve maksimum 1 degerine dönüstürülür. Örnegin, bir sistein degistirilmis antikorda, bir biyotin-maleimid reaktifi gibi bir tiyol- reaktif nitelikte reaktif maddeyle %100”1'uk bir verimle reaksiyona giren bir serbest sistein amino asidi, tiyol reaktivite degeri 1,0 olan biyotin etiketli bir antikor olusturur. Ayni veya farkli ana antikor halinde tasarlanmis olan ve bir tiyol-reaktif nitelikte reaktif maddeyle %80°lik bir verimle reaksiyona giren bir baska sistein amino asidinin tiyol reaktivite degeri 0,8”dir. Ayni veya farkli ana antikor halinde tasarlanmis olan ve bir tiyol-reaktif nitelikte reaktif maddeyle hiç reaksiyona girmeyen bir baska sistein amino asidinin tiyol reaktivitedegeri 0°d1r. Belirli bir sisteinin tiyo] reaktivite degeri ELISA testiyle,36kütle spektroskopisiyle, sivi kromatografisiyle, otoradyografiyle veyabaska kantitatif analitik testlerle belirlenebilir.Bir "ana antikor", bir veya daha fazla sayida ainino asit artiginin bir veya daha fazla sayida sisteiii artigiyla ikame ediligi bir amino asit sekansi içeren bir antikordur. Ana antikor, bir nativ veya yabani tip sekans içerebilir. Ana antikor, bir antikorun baska nativ, yabani tip ya da modifiye formlarina kiyasla önceden-mevcut amino asit sekans modifikasyonlari (örnegin eklemeler, delesyoiilar ve/Veya sübstitüyonlar) içerebilir. Bir ana antikor, ilgili hedef anti jene, önregin biyolojik açidan önemli polipeptide karsi yönlendirilebilir. Polipeptid- disi antijenlere (ömegin tümör-iliskili glikolipid antijenleri; bakinizUS 5091178) karsi yönlendirilen antikorlar da Öngörülmektedir.Ornek ana antikorlar arasinda hücre yüzeyi ve transmembran reseptörler ve tümör-iliskili antijenler (TAA) için afiniteye veselektiviteye sahip antikorlar vardir.Ornek baska ana antikorlar arasinda, bunlarla sinirli kalmaksizin, asagida sayilanlar arasiiidan seçilenler vardir: anti-'Östrojen reseptör antikoru, anti-progesteron reseptör antikoru, anti-p53 antikoru, anti- HER-2/neu antikoru, anti-EGFR antikoru, anti-katepsin D antikoru, anti-Bcl-Z antikoru, anti-l3-kadheriii antikoru, aiiti-CA125 antikoru, and-CA15-3 antikoru, anti-CAI9-9 antikoru, anti-c-erbB-2 antikoru, anti-P-glikoprotein antikoru, anti-CEA antikoru, anti-retinoblastom protein antikoru, anti-ras onkoprotein antikoru, anti-Lewis X antikoru, anti-Ki-67 antikoru, anti-PCNA antikoru, anti-CD3 antikoru, anti- CD4 antikoru, anti-CD5 antikoru, anti-CD7 antikoru, anti-CBS37antikoru, anti-CD9/p24 antikoru, anti-CDIO antikoru, anti-CDllc antikoru, anti-CD13 antikoru, anti-CD14 aiitikoru, anti-CD15 antikoru, anti-CD19 antikoru, anti-CDZO antikoru, anti-CD22 antikoru, anti-CD23 antikoru, anti-CD30 antikoru, anti-CD3l antikoru, anti-CD33 antikoru, anti-CD34 antikoru, anti-CD35 antikoru, anti-CD38 antikoru, anti-CD41 antikoru, anti-LCA/CD45 antikoru, anti-CD45RO antikoru, anti-CD45RA antikoru, anti-CD39 antikoru, anti-CDIOO antikoru, anti-CD95/Fas antikoru, anti-CD99 antikoru, anti-CD106 antikoru, anti-ubikutin antikoru, anti-CD7l antikoru, anti-c-myc antikoru, anti-sitokeratin antikoru, anti-vimentin antikoru, anti-HPV protein antikoru, anti-kappa hafif zincir antikoru, anti-lambda hafif zincir antikoru, anti-melanozom antikoru, anti- prostat spesifik anti jeii antikoru, anti-S-lOO antikoru, anti-tau antijen antikoru, anti-fibrin antikoru, anti-keratin antikoru ve anti-Tn-antijenantikoru.Bir "izole” antikor, kendi dogal ortainina ait bir bilesen çerçevesinde taiiimlaninis ve ondan ayrilmis ve/veya geri kazanilmis bir antikordur.
Dogal ortaminin kontaminant bilesenleri, antikorun diyagnostik veya terap'otik kullanim olanaklarina müdahale edebilecek nitelikte olan materyallerdir ve bunlar arasinda, enzimler, hormonlar ve diger proteinli veya proteinsiz solütler sayilabilir. Bulusun tercih edilen yapilarinda, antikor, (l) Lowry yöntemi çerçevesiiide belirlenen degerlere göre, antikor agirliginin %95”inden daha fazla ve en çok tercihen %99”undan daha fazla bir noktaya kadar, (2) bir döner kap tipi sekanslayici kullanilarak, N-terminal ya da internal amino asit sekansina ait en az 15 artigi elde etmek için yeterli bir düzeye kadarya da (3) Coomassie mavi veya tercihen gümüs boya kullanilarak38indirgen kosullar ya da indirgen olmayan kosullar altinda SUS-PAGE yoluyla yapilan ölçüme göre hoinojenlik kaydedilene dek saflastirilir.
Izole antikorlar arasinda, rekombinan hücreler içerisinde in situ bulunan antikorlar bulunur, zira bu durumda antikorun dogal ortaininda mevcut bulunan bilesenlerden en az biri mevcut olmayacaktir. Bununla birlikte, bu izole antikorlar hazirlanirkengenelde en az bir adet saflastirma basamagi gerçeklestirilecektir.Bir moleküler hedefi ya da ilgili antijeni, örnegin ErbB2 antijenini "baglayan" bir antikor, anti jen eksprese eden bir hücreyi hedef alma konusunda faydali olacak sekilde yeterli afiniteyle 0 antijeni baglayabilen bir antikordur. Antikor ErbBZ”yi baglayan bir antikor oldugunda, genellikle tercihen baska ErbB reseptörlerinin aksine ErbB2”yi baglar ve EGFR, ErbB3 ya da ErbB4 gibi baska proteinlerle anlamli ve önemli çapraz reaksiyona girmeyen bir antikor olabilir.
Bulusun böyle yapilarinda, antikorun bu non-ErbB2 proteinlerine baglanma düzeyi (örnegin, endojen reseptöre hücre yüzeyi baglanmasi), floresan aktive hücre ayirma (FACS) analiziyle ya da radyoiinmünopresipitasyonla (RIA) tayin edildigi gibi %10”dan azdir.
Zaman zaman, örnegin, “Schecter ve ark. (1984) Nature 312:513” ve “Drebin ve ark (1984) Nature 312:545-548” referanslarinda tarif edildigi gibi, anti-ErbB2 antikoru siçan neu proteiniyle anlamli ve önemli çapraz reaksiyona girmezBu bulus kapsaminda yer alan antikorlar için moleküler hedefler arasinda 'Örnegin bunlarla siiiirli kalmaksizin asagida sayilanlar da dahil CD proteinleri ve oiilarin ligandlari vardir: (i) CD3, CD4, CD8, CDl9, CD20, CD22, CD34, CD40, CD7901 (CD79a) ve CD79ß (CD79b); (ii) ErbB reseptör ailesinin üyeleri, örnegin EGF reseptörü,39HERZ, HER3 ya da HER4 reseptörü; (iii) hücre adezyon molekülleri, örnegin LFA-l, Macl, p150,95, VLA-4, ICAM-l, VCAM ve 0tV/ß3 integrin ve bunlarin alfa ya da beta alt-birimleri (örnegin, anti-CDI la, anti-CD18 ya da anti-CDI lb antikorlari); (iv) büyüme faktörleri, örnegin VEGF; IgE; kan grubu anti jenleri; flk2/flt3 reseptörü; obezite (OB) reseptörü; mp1 reseptörü, CTLA-4; protein C, BR3, c-met, doku faktörü, B7 ve benzeri ve (V) hücre yüzeyi ve transmembran tümör-iliskili anti jenler (TAA).Aksi belirtilmedikçe, "monoklonal antikor 4D5" terimi, murin 4D5 antikorunun (ATCC CRL 10463) ya da ondan türetilen anti jen baglanma artiklarina sahip bir antikora atif yapar. Örnegin, nionoklonal antikor 4D5, murin monoklonal antikora 4D5 ya da onun bir varyanti, örnegin bir hümanize 4D5 olabilir. Hümanize 4D5 antikorlarina öniek olarak, ABD Patent No. 5821337°de açiklandigi gibi, huMAb4D5-l, huMAb4D5-2, huMAb4D5-3, huMAb4D5-4, huMAb4D5-5, huMAb4D5-6, huMAb4D5-7 ve huMAb4D5-8 (trastuzumab, HERCEPTIN®) gösterilebilir."Tedavi etme" ya da "tedavi" terimleri, hem terap'otik tedaviye hem de amaci örnegin kanserin gelismesi ya da yayilmasi gibi bir istenmeyen fizyolojik degisikligi ya da bozuklugu önlemek ya da yavaslatmak (azaltmak) olan profilaktik veya önleyici tedbirlere atif yapar. Bu bulusun amaçlari dogrultusunda, faydali ya da istenen klinik sonuçlar arasinda, bunlarla sinirli kalmaksizin, belirlenebilir düzeyde olsun ya da olmasin, semptomlarin hafifletilmesi, hastaligin boyutunun azaltilmasi, stabil (yani, kötülesmeyen) hastalik durumu, hastalikprogresyonunun gecikmesi ya da yavaslamasi, hastalik durumunun40iyilesmesi ya da palyasyonu ve (kismen ya da tamamen) reinisyon vardir. "Tedavi", tedavi alinmadiginda beklenen sürviye kiyasla sürvinin uzamasi anlamina da gelebilir. Tedaviye ihtiyaci olanlar arasinda, rahatsizligin ya da bozuklugun zaten mevcut oldugu hastalar ve rahatsizliga ya da bozukluga egilimli olanlar ya da rahatsizligin yada bozuklugun önlenecegi hastalar vardir."Terapötik açidan etkin ve etkili miktar" ibaresi, bir memelide bir hastaligi ya da bozuklugu tedavi etmek için etkin ve etkili bir ilaç miktarina atif yapar. Kanser söz konusu oldugunda, terapötik açidan etkin ve etkili ilaç miktari, kaiiser hücrelerinin sayisini azaltabilir; tümörün boyutunu küçültebilir; periferal organlara kanser hücresi infiltrasyonunu inhibe edebilir (yani bir ölçüye kadar yavaslatabilir ve tercihen durdurabilir); tümör inetastaziiii inhibe edebilir (yani, bir ölçüye kadar yavaslatabilir ve tercihen durdurabilir); tümör büyümesini bir ölçüye kadar inhibe edebilir ve/veya kanserle iliskili bir veya daha fazla sayida semptomu bir ölçüye kadar hafifletebilir.
Ilaç kanser hücrelerinin çogalmasini önleyebildigi ve/veya mevcut kanser hücrelerini öldürebildigi düzeyde sitostatik ve/veya sitotoksik olabilir. Kanser tedavisi için, etkinlik, örnegin hastalik progresyonuna kadar geçen zaman (TTP) degerlendirilerek ve/veya cevap orani (RR)tayin edilerek ölçülebilir."Biyoyararlanim" terimi, bir hastaya uygulanan belirli bir ilaç miktarinin sistemik yararlanimina (yani, kan/plazma seviyeleri) atif yapar. Biyoyararlanim, uygulanan dozaj formundan genel dolasima ulasan ilaç için hem zaman (hiz) ölçütünü hem de toplam miktar(düzey) ölçüiiü gösteren bir mutlak terimdir.41"Kanser" ve "kanseröz" terimleri, memelilerde görülen ve tipik olarak regüle edilmemis hücre çogalmasiyla karakterize olan fizyolojik duruma atif yapar ve onu tanimlar. Bir "tümör", bir veya daha fazla sayida kanseröz hücre içerir. Kansere 'Örnek olarak, bunlarla sinirli kalmaksizin, karsinom, lenfoma, blastom, sarkoina ve lösemi ya da lenfoid malignensiler gösterilebilir. Bu kanserlerin daha somut 'Örnekleri arasinda skuamöz hücreli kanser (örnegin, epitelyal skuamöz hücreli kanser), küçük-hücreli akciger kanseri, küçük hücreli-disi akciger kanseri ("NSCLC"), akciger adenokarsinomu ve skuain'oz akciger karsinomu da dahil akciger kanseri, peritoneum kanseri, hepatoselüler kanser, gastrointestinal kanser de dahil gastrik kanser ya da mide kanseri, pankreas kanseri, glioblastom, serviks kanseri, yumurtalik kanseri, karaciger kanseri, mesane kanseri, hepatom, meme kanseri, kolon kanseri, rektal kanser, colorektal kanser, endometrium ya da uterin karsinomu, tükürük bezi karsinomu, böbrek kanseri ya da renal kanser, prostat kanseri, vulva kanseri, tiroid kanseri, hepatik karsinom, anal karsinom, penil karsinom ve bas veboyun kanseri sayilabilir.Bir "ErbB-eksprese eden kanser", hücre yüzeyinde ErbB proteini bulunan hücreler içeren bir kanserdir. Bir "ErbBZ-eksprese eden kanser", bir anti-ErbB2 antikoru baglanabilecek ve kanser açisindan terapötik bir etki yapabilecek sekilde, hücrelerinin yüzeyi üzerindeyeterli düzeyde ErbB2 üreten bir kanserdir.Bir antijenik reseptörü “asiri-eksprese eden” bir kanser, ayni doku tipinden kanseröz olmayan bir hücreye kiyasla, hücre yüzeyi üzerindeanlamli ve önemli düzeyde daha yüksek seviyelerde reseptör, örnegin42ErbB2 içeren bir kanserdir. Bu asiri-ekspresyona, gen amplifikasyonu ya da transkripsiyonda veya translasyonda artis neden olabilir.
Reseptör asiri-ekspresyonu, bir hücrenin yüzeyi üzerinde bulunan reseptör proteininin seviyelerinde artis (örnegin, bir iminünohistokimya eseyiyle; IHC) degerlendirilerek bir diyagnostik ya da prognostik eseyde tayin edilebilir. Alternatif ya da ek olarak, örnegin, floresan in-situ hibridizasyon (FISH; bakiniz WO 98/45479), southern blotlaina ya da polimeraz zincir reaksiyonu (PCR) teknikleriyle, örnegin gerçek-zamanli kantitatif PCR (RT-PCR) teknigiyle hücrede reseptör-kodlayici nükleik asit seviyeleriölçülebilir.ErbB2 (HER2) asiri eksprese eden tümörler, beher hücrede eksprese edilen HER2 moleküllerinin birçok kopyasina tekabül eden imniünohistokimyasal skorlarla siniflandirilir ve biyokimyasal olarak tayin edilebilir: 0 = 0-10.000 kopya/hücre, l+ = en az yaklasik 200.000 k0pya/hücre, 2+ = en az yaklasik 500.000 k0pya/hücre, 3+ = yaklasik 1-2 X 106 kopya/hücre. Tirozin kinazin ligand-bagimsiz aktivasyonuna yol açan 3+ seviyesinde HERZ asiri ekspresyonu (Hudziak ve ark (1987) Proc. Natl Acad Sci. USA, 84:7159-7163), meme kanserlerinin yaklasik %30”unda meydana gelir ve bu hastalarda, relaps görülmeyen sürvi ve genel sürvi azalir (Slamon ve ark (1989) Science, 244:707-712; Slamon ve ark (1987) Science, 2352177-182).Bu dokümanda kullanilan "sitotoksik ajan" terimi, hücrelerin fonksiyonunu inhibe eden ya da önleyen ve/veya hücre yikiminaneden olan bir maddeye atif yapar. Bu teriinin isaret ettigi maddeler43arasinda, radyoaktif izotoplar (örnegin ”At, 1311, '251,90Y, '86Re, 188Re, 15'7'Sm, mBi, 32P, 60C ve Lu radyoaktif izotoplari), kemoterapötik ajanlar ve toksinler, örnegin, küçük molekül toksinleri ya da enzimatik açidan aktif bakteriyel, fungal, bitkisel ya da hayvansal toksinler ve bunlarin sentetik analoglari vetürevleri bulunur.Bu dokümanda kullanilan bir "otoimmün hastalik" terimi, kisinin kendi dokularindan ya da organlarindan kaynaklanan ya da kendi dokularina ya da organlarina karsi yönlendirilen bir hastaliga ya da bozukluga ya da bu gibi hastaliklarin ya da bozukluklarin kosegregasyonu veya birlikte tezahürüne ya da bu gibi hastaliklardan dolayi meydana gelen rahatsizliklara atif yapar. Bu otoimmün ve inflamatuar hastaliklarin birçogunda, bir dizi klinik marker ve laboratuvar markeri bulunabilir, bu markerler arasinda, sadece bunlarla sinirli kalmaksizin, hipergamaglobulinemi, yüksek otoantikor seviyeleri, dokularda antijen-antikor kompleksi birikiinleri, kortikosteroid tedavileri veya iinmünosüpresif tedavilerden saglanan fayda ve etkilenen dokulardaki lenfoid hücre agregatlari bulunur. B hücresi aracili otoimmün hastaliklarla ilgili teorilerin çizdigi çerçeve göz ardi edildiginde, B hücrelerinin insan otoimmün hastaliklarinda çok sayida mekanik yolak araciligiyla patojenik etki gösterdiklerine inanilmaktadir, bu yolaklar arasinda, otoantikor üretimi, immün kompleks olusumu, dendritik ve T hücresi aktivasyonu, sitokin sentezi, direkt kemokin salimi ve ektopik neo-lenfogenez için bir nidus temini bulunur. Otoimmün hastaliklarin patolojisinde bu yolaklarin her biri farkli düzeylerde rol oynayabilir. Bir otoimmünhastalik, bir organ-spesifik hastalik (yani, endokrin sistemi,44hematopoetik sistem, cilt, kardiyopulinoner sistem, gastrointestinal ve karaciger sistemleri, renal sistem, tiroid, kulaklar, nöromüsküler sistem, merkezi sinir sistemi, Vb. gibi bir organ sistemini spesifik olarak hedef alan immün cevap) olabilecegi gibi, birden çok organ sistemini etkileme potansiyeli bulunan bir sistemik hastalik da (örnegin sistemik lupus eritematozus (SLE), romatoid artrit,polimiyozitis, Vb.) olabilir."Sitostatik" terimi, hücrelerin fonksiyonunu sinirlandirma, 'Örnegin selüler büyümeyi veya hücre proliferasyonunu sinirlandirma etkisineatif yapar.Bir "kemoterapötik ajan", kanser tedavisinde kullanilabilecek bir kimyasal bilesiktir. Kemoterap'otik ajanlara 'Örnek olarak asagida sayilanlar gösterilebilir: Erlotinib (TARCEVA®, Genentech/OSI Pharin.), Bortezomib (VELCADE®, Milleniuin Pharm.), Fulvestrant (FASLODEX®, Astrazeneca), Sutent (SU11248, Pfizer), Letrozol (FEMARA®, Novartis), Imatinib mesilat (GLEEVECC'D, Novartis), PTK787/ZK 222584 (Novartis), Oksaliplatin (Eloxatin®, Sanofi), 5- FU (5-florourasil), Lökovorin, Rapamisin (Sirolimus, RAPAMUNE®, Wyeth), Lapatinib (GSK572016, GlaxoSmithKline). Lonafarnib (SCH 66336), Sorafenib (BAY43-9006, Bayer Labs.) ve Gefitinib (IRESSA®, Astrazeneca), AG1478, AG1571 (SU 5271; Sugen), tiyotepa ve CYTOXAN® siklosfosfamid gibi alkilleme ajanlari; busülfan, improsülfan ve piposülfan gibi alkil sülfonatlar; benzodopa, karbokuon, meturedopa ve üredopa gibi aziridinler; altretamin, trietilenmelamin, trietilenfosforamid, trietilentiyofosforamid vetrimetiloloinelaimin de dahil etileniminler ve metilainelaininler;45asetogeninler (özellikle de bullatakin ve bul]atakin0n); kamptotesin (sentetik analog topotekan dahil); bryostatin; kallistatin; CC-1065 (onun adozelesin, karzelesin ve bizelesin sentetik analoglari da dahil); kriptofisinler (özellikle kriptofisin 1 ve kriptofisin 8); dolastatin; duokarmisin (sentetik analoglar KW-2189 ve CBl-TMl dahil); eleuterobin; pankratistatin; bir sarkodiktyin; spongistatin; klorambusil, klomafazin, kolofosfamid, estramustin, ifosfainid, mekloretamin, mekloretamin oksit hidroklor'ür, melfalan, noveinbisin, fenesterin, prednimustin, trofosfamid, urasil mustard gibi nitrojen mustardlar; karmustin, klorozotokin, fotemustin, lomustin, nimustin ve raniinnustin gibi nitrozüreler: enediyne antibiyotikler (örnegin kalikeamisin, 'Özellikle de kalikeamisin gama 11 ve kalikeamisin omegall (örnegin bkz: AgneW, Chem Intl. Ed. Engl., 33: 183-186 (1994)) gibi antibiyotikler; dinemisin A da dahil dinemisin; klodronat gibi bisfosfonatlar; bir esperamisin; bunlarin yani sira, neokarzinostatin kromofor ve iliskili kromoprotein enediyne antibiyotik kromoforlari; aklasinomisinler, aktinomisin, antramisin, azaserin, bleomisinler, kaktinomisin, karabisin, karminomisin, karzinofilin, kromomisinler, daktinomisin, daunorubisin, detorubisin, 6-diazo-5-okso-L-norlösin, ADRIAMYCIN® doksorubisini (morfolino-doksorubisin, siyanomorfolino-doksorubisin, Z-pirrolino- doksorubisin ve deoksidoksorubisin dahil), epirubisin, esorubisin, idarubisin, marsellomisin, mitomisinler, örnegin mitomirin C, mikofenolik asit, nogalamisin, olivomisinler, peplomisin, potfiromisin, puromisin, kuelamisin, rodorubisin, streptonigrin, streptozosin, tubersidin, ubenimeks, zinostatin, zombisin; metotreksat ve 5-f10r0urasil (5-FU) gibi anti-inetabolitler; denopterin, metotreksat,pteropterin, trimetreksat gibi folik asit analoglari; fludarabin, 6-46merkaptopurin, tiyamiprin, tiyoguanin gibi purin analoglari; ansitabin, azasitidin, 6-azauridin, karmofur, sitarabin, dideoksi'ûridin, doksifluridin, enositabin, floksuridin gibi pirimidin analoglari; kalusteron, dromostanolon propionat, epitiostanol, mepitiostan, testolakton gibi androjenler; aminoglutetimid, mitotan, trilostan gibi anti-adrenaller; frolinik asit gibi folik asit canlandiricilar; aseglaton; aldofosfamid glikozit; aminolevulinik asit; enilurasil; amsakrin; bestrabusil; bisantren; edatraksat; defofamin; demekolsin; diazikuon; elfornitin; elliptinyuin asetat; bir epotilon; etoglusid; galyuin nitrat; hidroksiüre; lentinan; lonidainin; maytansin ve ansamitokinler gibi maytansinoidler; mitoguazon; mitoksantron; mopidanmol; nitraerin; pentostatin; fenamet; pirambisin; losoksantron; podofillinik asit; 2- etilhidrazit; prokarbazin; PSK® polisakkarit kompleksi (JHS Natural Products, Eugene, OR); razoksan; rizoksin; sizofiran; spirogermanyum; tenuazonik asit; triazikuon; 2,2',2"- triklorotrietilamin; trikotesenler (Özellikle de T-2 toksini, verrak'ürin A, roridin A ve anguidin); üretan; vindesin; dakarbazin; mannomüstin; mitobronitol; mitolaktol; pipobroman; gasitozin; arabinozit ("Ara-C"); siklofosfamid; tiyotepa; taksoidler, örnegin paklitaksel TAXOL®; (Bristol- Myers Squibb Oncology, Princeton, N.J.), paklitakselin albümin-islenmis nanopartikül formülasyonu olan Cremophor- içermeyen ABRAXANETM (American Pharmaceutical Partners, Schaumberg, Illinois) ve doksetaksel TAXOTERE®; (Rhöne- Poulenc Rorer, Antony, France); kloranbusil; GEMZAR® gemsitabin; 6- tiyoguanin; merkaptopurin; metotreksat; platin analoglari, örnegin cisplatin ve karboplatin; Vinblastin; platin; etopozit (VP-16); ifosfamid; mitoksantron; Vinkristin; NAVELBINE® Vinorelbin;novantron; tenipozit; edatreksat; daunomisin; aminopterin; kseloda;47ibandronat; CPT-ll; topoizomeraz inhibitörü RFS 2000; diflorometilornithine (DMFO); retinoidler, örnegin retinoik asit; kapesitabin ve yukarida sayilanlarin herhangi birisinin farmasötikaçidan kabul edilebilir tuzlari, asitleri ya da türevleri.Asagida siralananlar da burada verilen "kemoterapötik ajan" tanimina dahildirler: (i) hormonlarin tümörler üzerindeki etkinligini regüle ya da inhibe etme islevini gören anti-hormonal ajanlar, örnegin tamoksifen (NOLVADEX® tamoksifen dahil), raloksifen, droloksifen, 4-hidroksitamoksifen, trioksifen, keoksifen, LYl 17018, onapriston ve FARESTON® toremifen de dahil anti-östrojenler ve selektif östrojen reseptör modülatörleri (SERM°ler); (ii) adrenal bezlerdeki östrojen üretimini regüle eden aromataz enzimini inhibe eden aromataz inhibitörleri, örnegin 4(5)-imidazoller, aminoglutetimid, MEGASE® megestrol asetat, AROMASIN® eksemestan, formestan, fadrozol, RIVISOR® vorozol, FEMARA® letrozol ve ARIMIDEX® anastrozol; (iii) flutamid, nilutamid, bikalutamid, löprolid ve goserelin gibi anti- androjenler ve yani sira troksasitabin (bir 1,3-dioksolan nükleozit sitozin analogu); (iv) aroinataz inhibitörleri; (V) protein kinaz inhibitörleri; (vi) lipid kinaz inhibitörleri; (vii) antisens oligonükleotidleri, özellikle de anormal hücre proliferasyonunda rol oynayan sinyal yolaklarindaki genlerin ekspresyonunu inhibe edenler, örnegin PKC-alfa, Ralf ve H-Ras; (viii) ribozimler, örnegin VEGF ekspresyon inhibitörleri (örnegin ANGIOZYME® ribozim) ve HER2 ekspresyon inhibitörleri; (iX) gen tedavisi asilari gibi asilar, örnegin ALLOVECTIN® asisi, LEUVECTIN® asisi ve VAXID® asisi; PROLEUKIN®, rIL-2; bir topoizomeraz 1 inhibitörü olan LURTOTECAN®; ABARELIX® rmRH; (x) anti-anjiyogenik ajanlar,48örnegin bevasizumab (AVASTIN®, Genentech) ve (xi) yukarida sayilanlarin herhangi birisinin farinasötik açidan kabul edilebilirtuzlari, asitleri ve türevleri.Burada geçen “EGFR-hedefli ilaç” terimi, EGFR'ye baglanan ve istege bagli olarak EGFR aktivasyonunu inhibe eden bir terapötik ajana atif yapar. Bu gibi ajanlara verilebilecek örnekler arasinda, EGFR'ye baglanan antikorlar ve küçük moleküller sayilabilir.
EGFR”ye baglanan antikorlara verilebilecek 'Örnekler arasinda, MAb 579 (ATCC CRL HB 8506), MAb 455 (ATCC CRL HB8507), MAb 225 (ATCC CRL 8508), MAb 528 (ATCC CRL 8509) (bkz: 4.943.533 sayili ABD Patenti, Mendelsohn ve ark.) ve örnegin bunlarin kiinerize 225 (C225 veya Setuksimab; ERBUTIX®) ve yeniden sekillendirilmis insan 225 (H225) gibi varyantlari (bkz: WO 96/40210, Imclone Systems Inc.); tip II mutant EGFR”ye baglanan antikorlar (5.212.290 sayili ABD Patenti); EGFR”ye baglanan hümanize ve kimerik antikorlar (5.891.996 sayili ABD Patenti) ve EGFR°ye baglanan 'Örnegin ABX-EGF gibi insan antikorlari (bkz: WO98/50433, Abgenix/Amgen) vardir. Anti-EGFR antikoru, bir sitotoksik ajanla konjuge edilebilir ve bu yolla, bir immünokonjigat olusturulabilir (bakiniz örnegin, EP 659,439A2, Merck Patent GmbH).
EGFR,ye baglanan küçük moleküllere örnek olarak ZD1839 ya da Gefitinib (IRESSATM; Astra Zeneca), Erlotinib HCl (CP-358774, TARCEVATM; Genentech/OSI) ve AG1478, AG1571 (SU 5271;Sugen) gösterilebilir.Protein kinaz inhibitörleri, ErbB reseptörü gibi bir tirozin kinazintirozin kinaz aktivitesini belirli bir dereceye kadar inhibe eden tirozin49kinaz inhibitörlerini kapsar. Bu gibi inhibitörlere verilebilecek örnekler asagida sayilmaktadir: bir 'Önceki paragrafta geçen EGFR- hedefli ilaçlar ve bunlarin yani sira, PD l53035.4-(3-kloroanilino) kuinazolin gibi kuinazolinler; piridopirimidinler; piriinidopirimidinler; CGP 59326, CGP 60261 ve CGP 62706 gibi pirolopirimidinler ve pirazolopirimidinler, 4-(fenilaniino)-7H-pirr010[2,3-d] pirimidinler; kürküinin (diferuloil metan, 4,5-bis (4-f10roanilin0)ftalimid); nitrotiofen moieteleri içeren tirfostinler; PD-0183805 (Warner- Lambert); antisens molekülleri (örnegin ErbB-kodlayici nükleik aside baglananlar); kinoksalinler (5.804.396 sayili ABD Patenti); trifostinler (5.804.396 sayili ABD Patenti); ZD6474 (Astra Zeneca); PTK-787 (Novartis/Schering AG); CI-1033 (Pfizer) gibi pan-ErbB inhibitörleri; Affinitac (1818 3521; Isis/Lilly); Imatinib mesilat (Gleevac; Novartis); PKI 166 (Novartis); GW2016 (Glaxo SinithKline); CI-1033 (Pfizer); EKB-569 (Wyeth); Semaksinib (Sugen); ZD6474 (AstraZeneca); PTK-787 (Novartis/Schering AG); INC-lCll (Imclone) ya da asagidaki patent yayinlarinin herhangi birinde isaret edilenler: WO 99/09016 (American Cyanamid); WO 98/43960 (American Cyanamid); WO 97/38983 (Warner Lambert); WO 99/06378 (Warner Lainbert); WO 99/06396 (Warner Lambert); WO 96/30347 (Pfizer, Inc); WO 96/33978 (Zeneca); WO 96/3397 (Zeneca) ve WO 96/33980 (Zeneca).Bir “anti-anjiyogenik ajan”, kan damarlarinin gelisimini belirli bir dereceye kadar bloke eden veya engelleyen bir bilesige atif yapar.
Anti-anjiyogenik faktör, örnegin, an jiyogenez kolaylastirilmasinda rol oynayan bir büyüme faktörüne veya büyüme faktörü reseptörüne baglanan bir küçük molekül ya da antikordur. Burada tercih edilenanti-anjiyogenik faktör, Vasküler Endotelyal Büyüme Faktörüne50(VEGF) baglanan bir antikordur.“Sitokin” terimi, baska bir hücre üzerinde etki gösteren bir hücre popülasyonunca interselüler aracilar olarak serbest birakilan proteinlere isaret eden bir jenerik terimdir. Bu gibi sitokinlere verilebilecek örnekler arasinda, lenfokinler, monokinler ve geleneksel polipeptid hormonlari bulunur. Sitokinlere örnek olarak asagida sayilanlar da verilebilir: insan büyüine hormonu, N-metionil insan büyüme faktörü ve bovin büyüme hormonu gibi büyüme hormonlari; tiroksin; paratiroid hormonu; tiroksin; insülin; proinsülin; relaksin; prorelaksin; folikül stimüle edici horinon (FSH), tiroid stimüle edici hormon (TSH) ve lüteinleyici horinon (LH) gibi glikoprotein hormonlari; hepatik büyüme faktörü; fibroblast büyüme faktörü; prolaktin; plasental laktojen; tümör nekroz faktörü-Ot ve [3; inüllerian inhibe edici madde; fare gonadotropini baglantili peptid; inhibin; aktivin; vasküler endotelyal büyüme faktörü; integrin; trombopoietin (TPO); NGF-ß gibi sinir büyüme faktörleri; trombosit büyüine faktörü; TGF-a ve TGF-ß gibi transforme edici büyüme faktörleri (TGF°ler); insülin-benzeri büyüine faktörü-l ve _11; eritropoietin (EPO); osteoindüktif faktörler; interferon-oi, -B ve -y gibi interferonlar; makrofaj-CSF (M-CSF), granülosit-makrofaj-CSF (GM-CSF) ve granülosit-CSF (G-CSF) gibi koloni stimüle edici faktörler (CSF'ler); IL-l, IL-la, IL-2, IL-3, IL-4, IL-5, IL-6, IL-7, IL-8, IL-9, IL-lO, IL- 11 ve IL-12 gibi interlökinler (IL°ler); TNF-oi veya TNF-ß gibi bir tümör nekroz faktörü ve LIF ve kit ligandi (KL) dahil diger polipeptid faktörleri. Burada geçen sitokin teriminin kapsamina, dogal kaynagindan veya rekombiiian hücre kültüründen elde edilenproteinler ve nativ sekans sitokinlerinin biyolojik olarak aktif51esdegerleri de girer.Bu patent basvurusunda kullanilan "ön-ilaç" terimi, bir farmas'otik açidan kabul edilebilir etkin maddenin ana ilaca kiyasla tümör hücrelerine karsi daha düsük bir sitotoksisiteye sahip olan ve enzimatik veya hidrolitik olarak aktive edilebilecek ya da daha aktif ana forma dönüstürülebilecek olan bir prek'ûrsor veya türev formuna atif yapar. Bakiniz örnegin, Wilman, "Prodrugs in Cancer Chemotherapy" Biochemical Society Transactions, 14, sayfa 375-382, 615. Meeting Belfast (1986) ve Stella ve ark., "Prodrugs: A Chemical Approach to Targeted Drug Delivery," Directed Drug Delivery, Borchardt ve ark., (ed), sayfa 247-267, Humana Press (1985). Bu bulusa konu olan 'Ön-ilaçlar arasinda, bunlarla sinirli kalmaksizin, fosfat-içeren 'Ön-ilaçlar, tiofosfat-içeren 'Ön-ilaçlar, sülfat-içeren `Ön- ilaçlar, peptid-içeren 'Ön-ilaçlar, D-amino asit-modifiye edilmis ön- ilaçlar, glikosile 'Ön-ilaçlar, ß-laktam-içeren 'Ön-ilaçlar, istege göre substit'üe edilen fenoksiasetamid-içeren 'Ön-ilaçlar, istege göre substitüe edilen fenilasetamid-içeren `Ön-ilaçlar, 5-f10r0sitozin ve daha aktif sitotoksik serbest ilaç formuna dönüstürülebilecek baska 5- floroüridin Ön-ilaçlari sayilabilir. Bu bulusta kullanmak üzere bir ön- ilaç formuna derivatize edilebilecek sitotoksik ilaçlara örnek olarak, bunlarla sinirli kalmaksizin, yukarida açiklananlar gibi kemoterapötikajanlar gösterilebilir.Bir "lipozom", bir ilaci (örnegin burada açiklanan anti-ErbBZ antikorlari ve istege göre, bir kemoterap'otik ajan) bir memeliye tasimak ainaciyla kullanilan, çesitli farkli tiplerde lipid, fosfolipidve/veya yüzey-aktif maddeden olusan küçük bir veziküldür. Lipozom52bilesenleri, genellikle, biyolojik ineinbranlarin lipid düzenlemesinebenzer sekilde, bir çift-katmanli olusum halinde dizilirler."Kullanma talimati" ibaresi, geleneksel olarak terapötik ürünlerin ticari paketlerine dahil edilen ve endikasyonlar, kullanim, dozaj, uygulama ve kontrendikasyonlar konusunda bilgiler ve/veya bu terapötik ürünlerin kullanimina iliskin uyarilar içeren talimatlara atfenkullanilir."Faj görüntüleme", varyant polipeptidlerin faj partiküllerinin, örnegin filamentöz faj partiküllerinin yüzeyi üzerinde bulunan bir kilif proteinine füzyon proteinleri olarak görüntülenmesine dayanan bir tekniktir. Randomize protein varyantlarindan olusan büyük kütüphanelerin bir hedef moleküle yüksek afiniteyle baglanan sekanslar bakimindan hizli ve verimli bir siralama ve siniflandirmaya tâbi tutulabilecek olmasi, faj görüntüleme tekniginin sagladigi avantajlardan biridir. Fajda peptid ve protein kütüphanelerini görüntüleme yöntemi, spesifik baglanma özellikleri sergileyen polipeptidleri bulmak ainaciyla milyonlarca polipeptid arasinda tarama yapmak için kullanilmaktadir. Polivalent faj görüntüleme yöntemleri, filamentöz fajin plll veya pVlll ürünüyle kurulan füzyonlar araciligiyla küçük random peptidleri ve küçük proteinleri görüntülemek için kullanilinaktadirlar (bkz: "Wells and Lowman (1992) Curr. Opin. Struct. Biol. 3:355-362" eseri ve orada atif yapilan diger eserler). Bir movolanet faj görüntülemede, bir protein veya peptid kütüphanesi bir faj kilif proteinine veya onun bir kismina füzyonlanir ve yabani tip proteinin varliginda düsük seviyelerdeeksprese edilir. Polivalent faj görüntüleineye kiyasla avidite etkileri53daha düsüktür, dolayisiyla siralama ve siniflandirma intrinsik ligand afinitesine dayanir ve DNA manipülasyonlarini kolaylastiran ve basitlestiren fajmid vektörleri kullanilir. Bkz: Lowman and Wells, Methods: A companion to Methods in Enzmology, 3:205-0216 (1991). Faj görüntüleme, antikor-benzeri inoleküller üretme tekniklerini kapsar (Janeway, C., Travers, P., Walport, M., Shlomchik (2001) Immunobiology, 5. Ed., Garland Publishing, NeW York, p627- 628; Lee ve ark).Bir “fajmid”, ColEl gibi bir bakteriyel replikasyon orijini ve bir bakteriyofa j intergenik bölgesinin bir kopyasini barindiran bir plazmid vektörüdür. Fajmid, filamentöz bakteriyofaj ve lambdoid bakteriyofaj dahil olmak üzere bilinen herhangi bir bakteriyofajda kullanilabilir.
Plazmid, bunlarin yani sira, bir seçilebilir antibiyotik direnç inarkeri de içerecektir. Bu vektörlere klonlanan DNA segmentleri, plazmid olarak çogaltilabilirler. Faj partikülllerinin üretimi için gereken tüm genlerle birlikte bu vektörleri tasiyan hücreler temin edildiginde, plazinidin replikasyon modu degiserek döner daire replikasyonu olur ve bu sayede, plazmid DNA'nin iplikçiklerinden birinin kopyalari olusur ve faj partikülleri paketlenir. Fajmid, enfeksiyöz olan veya olmayan faj partikülleri olusabilir. Bu terim, bir heterolog polipeptid genine bagli olan ve onunla birlikte bir gen füzyonu olusturarak heterolog polipeptidin faj partikülünün yüzeyi üzerinde görüntülenmesini saglayan bir faj kilif protein geni veya genfragmaninin yer aldigi fajmidleri kapsar."Baglayici", "Baglayici Birimi" ya da "bag", bir kovalent bag ya da birantikoru bir ilaç moiyetesine kovalent baglayan bir atom zinciri içeren54bir kimyasal moiyete anlamina gelir. Bu bulusun çesitli farkli yapilarinda, bir baglayici L olarak belirtilir. Baglayicilar, bir alkildiil, bir arilen, bir heteroarilen gibi bir divalent radikali; -(CR2)nO(CR2)n-, alkiloksi tekrarlama biriinleri (örnegin polietilenoksi, PEG, polimetilenoksi) ve alkilainino (örnegin polietilenamino, J effamineTM) gibi moiyeteleri ve süksinat, süksinamid, diglikolat, malonat vekaproainid dahil diasit ester and amidleri kapsar."Etiket" terimi, bir antikora kovalent baglanabilen ve asagida açiklanan islevleri gören herhangi bir moiyete anlamina gelir: (i) belirlenebilir bir sinyal verme; (ii) bir ikinci etiketle etkilesiine girerek birinci ya da ikinci etiketin sagladigi belirlenebilir sinyali (örnegin, FRET, yani floresans rezonans enerji transferi) modifiye etme; (iii) antijenle ya da ligandla etkilesimleri stabilize etme ya da baglanma afinitesini arttirma; (iv) yük, hidrofobisite, sekil ya da baska fiziksel parametrelerle mobiliteyi, 'örnegin elektroforetik mobiliteyi ya da hücre geçirgenligini etkileme ya da (v) ligand afinitesi, antikor/antijen baglanmasi ya da iyonik kompleks olusturmayi module etmek için biryakalama moiyetesi sunma.Burada kullanilan stereokimyasal tanimlar ve teamüller genellikle “8.
P. Parker, Ed., McGraW-Hill Dictionary of Chemical Terins (1984) McGraW-Hill Book Company, NeW York” ve “Eliel, E. and Wilen, S., "Stereochemistry of Organic Compounds", John Wiley & Sons, Inc., New York, 1994” referanslarina uygundur. Birçok organik bilesik, optik açidan aktif formda bulunur, yani düzlem-polarize isigin düzlemini döndürme kabiliyetine sahiptir. Optik açidan aktif bilesikaçiklanirken, molekülün kiral merkez(ler)i etrafindaki mutlak55konfigürasyonunu tanimlamak için D ve L ya da R ve S Önekleri kullanilir. Bilesik tarafindan düzlem-polarize isigin rotasyon yönünü tanimlamak için (1 ve 1 ya da (+) ve (-) önekleri kullanilir; (-) ya da 1 önekleri, bilesigin sola çeviren oldugu anlainina gelir. (+) ya da (1 önekli bir bilesik, saga çevirendir. Belirli bir kimyasal yapi için, bu stereoizomerler birbirlerinin ayna görüntüleri olmalari hariç özdestir.
Bir spesifik stereoizomer, bir enantiomer olarak da anilabilir ve bu izomelerin bir karisimi çogunlukla bir eiiantiomerik karisimi olarak adlandirilir. Enantiomerlerin 50:50 oraninda bir karisimi, bir rasemik karisim ya da bir rasemat olarak anilir ve bu karisim, bir kimyasal reaksiyonda ya da proseste herhangi bir stereoseleksiyon ya da stereospesifisitenin olmadigi durumlarda elde edilebilir. "Rasemik karisim" ve "rasemat" terimleri, optik aktivitesi olmayan ve ikienaiitomerik türden olusan bir esmolar karisima atif yapar.Bu dokümanda kullanilan "farmas'otik açidan kabul edilebilir tuz" ibaresi, bir ADC”nin farmas'otik açidan kabul edilebilir organik ya da inorganik tuzlarina atif yapar. Tuzlara 'Örnek olarak, bunlarla sinirli kalmaksizin, sülfat, sitrat, asetat, oksalat, klorür, bromür, iyodür, nitrat, bisülfat, fosfat, asit fosfat, izonikotinat, laktat, salisilat, asit sitrat, tartrat, oleat, tannat, pantotenat, bitartrat, askorbat, süksinat, maleat, gentisinat, fumarat, glukonat, glukuronat, sakkarat, format, benzoat, glutamat, metansülfonat, etansülfonat, benzensülfonat, p- tolüensülfonat ve pamoat (yani, 1,1'-metilen-bis-(2-hidroksi-3- naftoat)) tuzlari gösterilebilir. Farmasötik açidan kabul edilebilir bir tuz, bir asetat iyonu, bir süksinat iyonu ya da baska karsit-iyon gibi baska bir molekülün dahil edilmesini kapsayabilir. Karsit-iyon, anabilesik üzerindeki yükü stabilize eden herhangi bir organik ya da56inorganik moiyete olabilir. Ek olarak, farmasötik açidan kabul edilebilir bir tuzun yapisinda birden fazla yüklü atom bulunabilir. Çoklu yüklü atomlarin farmasötik açidan kabul edilebilir tuzun parçasi oldugu durumlarda, tuz, çoklu karsit iyonlar içerebilir. Sonuç olarak, farmas'Ötik açidan kabul edilebilir bir tuz, bir veya daha fazla sayidayüklü atom ve/Veya bir veya daha fazla sayida karsit-iyon içerebilir."Farmasötik açidan kabul edilebilir solvat", bir veya daha fazla sayida çözücü molekülü ve bir ADC”nin birlesmesine atif yapar. Farmasötik açidan kabul edilebilir solvatlar olusturan çözücülere örnek olarak, bunlarla sinirli kalmaksizin, su, izopropanol, etanol, metanol, DMSO,etil asetat, asetik asit ve etanolamin gösterilebilir.Asagida verilen kisaltmalar, bu dokümanda kullanilmaktadir ve belirtilen anlama sahiptirler: BME, beta-merkaptoetanoldür; Boc, N- (t-bütoksikarbonil) bilesigidir; çit, sitrullindir (2-amin0-5-üreid0 pentanoik asit); dap, dolaproindir; DCC, 1,3-disikloheksilkarbodiimid bilesigidir; DCM, diklorometan bilesigidir; DEA, dietilamin bilesigidir; DEAD, dietilazodikarboksilat bilesigidir; DEPC, dietilfosforilsiyanidat bilesigidir; DIAD, diizopropilazodikarboksilat bilesigidir; DlEA, N,N-diizopropi1etilamin bilesigidir; dil, dolaizolösindir; DMA, dimetilasetamid bilesigidir; DMAP, 4- dimetilaminopiridin bilesigidir; DME, etilenglikol dimetil eter (ya da 1,2-dimetoksietan) bilesigidir; DMF, N,N-dimetilformamid bilesigidir; DMSO, dimetilsülfoksit bilesigidir; doe, dolafenindir; dov, N,N- dimetilvalindir; DTNB, 5,5'-ditiyobis(2-nitrobenzoik asit) bilesigidir; DTPA, dietilentriaminpentaasetik asit bilesigidir; DTT, ditiyotreitoldür; EDCI, 1-(3-diinetilaminopropi1)-3-etilkarbodiimid57hidroklorür bilesigidir; EEDQ, 2-etoksi-1-etoksikarboriil-l ,2- dihidrokinolin bilesigidir; ES-MS, elektrosprey kütle spektrometrisidir; EtOAc, etil asetattir; Fmoc, N-(9- florenilmetoksikarbonil) bilesigidir; gly, glisindir, HATU, O-(7- azabenzotriazol-l -il)-N,N,N',N'-tetrametiluronyum heksaflorofosf at bilesigidir; HOBt, 1-hidr0ksibenzotriazol bilesigidir; HPLC, yüksek basinçli SlVl kromatografisidir; ile, izolösindir; lys, lizindir; MeCN (CH3CN), asetonitrildir; MeOH, metanoldi'ir; Mtr, 4-anisildifenilmetil (ya da 4-met0ksitritil) bilesigidir; nor, (lS, 2R)-(+)-n0refedrin bilesigidir; PAB, p-amiriobenzilkarbamoil bilesigidir; PBS, fosfat- tamponlu salindir (pH 7); PEG, polietilen glikoldür; Ph, fenildir; Pnp, p-nitrofenildir; MC, 6-maleimid0kapr0ildir; phe, L-fenilalanin bilesigidir; PyBrop, bromo tris-pirrolidino fosfonyum heksaflorofosfat bilesigidir; SEC, boyut dislama kromatografisidir; Su, süksinimiddir; TFA, trifloroasetik asittir; TLC, ince tabaka kromatografisidir; UV,ultraviyoledir ve val, valindir.SISTEIN DEGISTIRILMIS ANTIKORLARBu bulus açiklamasina konu olan bilesikler, bir yabani-tip ya da ana antikorun bir veya daha fazla sayida amino asidinin bir sistein amino asidiyle ikame edildigi sistein degistirilmis antikorlari kapsar.
Antikorun herhangi bir formu bu sekilde degistirilebilir, yani mutasyona ugratilabilir. Örnegin, bir ana Fab antikoru fragmani, burada “ThioFab” olarak anilan bir sistein degistirilmis Fab olusturacak sekilde degistirilebilir. Benzer sekilde, bir ana monoklonal antikor, bir “ThioMab” olusturacak sekilde degistirilebilir. Tekbölgedeki mutasyonun bir ThioFab'da tek bir degistirilmis sistein58artigi olusturdugu, buna karsilik IgG antikorunun dimerik yapisindan dolayi bir ThioMabsda iki adet degistirilmis sistein artigi olusturdugu vurgulanmalidir. Ikame edilmis (“degistirilmis”) sistein (Cys) artiklari bulunan mutantlar, yeni sokulan, degistirilmis sistein tiyol gruplarinin reaktivitesi açisiiidan degerlendirilir. Tiyol reaktivitesi degeri, 0 ile 1,0 araliginda bagil sayisal birimdir ve herhangi bir sistein degistirilmis antikor için ölçülebilir. Bu bulus açiklamasina konu olan sistein degistirilmis antikorlarin tiyol reaktivitesi degerleri 0,6 ile 1,0araliginda; 0,7 ile 1,0 araliginda ya da 0,8 ile 1,0 araligindadir.Bu bulusa konu olan tasarlama, seçme ve hazirlama yöntemleri, elektrofilik fonksiyonellikle reaktif olan sistein degistirilmis antikorlara olanak saglar. Bu yöntemler, ayrica, belirtilen, tasarlanan, selektif bölgelerde ilaç moleküllerine sahip antikor-ilaç konjugati (ADC) bilesikleri gibi antikor konjugat bilesiklerine de olanak saglar.
Bir antikor yüzeyindeki reaktif sistein artiklari bir ilaç moiyetesinin maleiinid veya haloasetil gibi bir tiyol reaktif grubu vasitasiyla spesifik olarak konjuge edilmesine izin verir. Bir Cys artiginin tiyol fonksiyoiielliginin bir inaleimid grubuna nükleofilik reaktivitesi, lizin artiklarinin ainino grubu veya N-terminal amino grubu gibi bir proteindeki baska herhangi bir amino asit fonksiyonelligine kiyasla yaklasik 1000 kat daha yüksektir. Iyodoasetil ve maleimid reaktiflerindeki tiyol spesifik fonksiyonellik ainin gruplariyla reaksiyona girebilir, fakat daha yüksek pH (> 9,0) ve daha uzun reaksiyon süreleri gerekir (Garman, 1997, Non-Radioactive Labelling:A Practical Approach, Academic Press, London).Bu bulus açiklamasina konu olan sistein degistirilmis antikorlar59tercihen yabani tip, ana antikor inuadillerinin antijen baglama kapasitesini korur ve sürdürürler. Bundan dolayi, sistein degistirilinis antikorlar, antijenlere tercihen spesifik olarak baglanabilirler. Bu antijenler arasinda, örnegin tümör-iliskili antijenler (TAA), hücre yüzeyi reseptör proteinleri ve diger hücre yüzeyi molekülleri, transmembran proteinleri, sinyal proteinleri, hücre sürvisi regülatör faktörleri, hücre çogalmasi regülatör faktörleri, doku gelisimi ve diferansiyasyonuyla baglantili (örnegin, fonksiyonel olarak ona katkida bulundugu bilinen veya süphelenilen) moleküller, lenfokinler, sitokinler, hücre siklusu regülasyonunda rol oynayan moleküller, vaskülojenezde rol oynayan moleküller ve anjiyojenezle baglantili (örnegin, fonksiyonel olarak ona katkida bulundugu bilinen veya süphelenilen) moleküller bulunur. Tümör iliskili antijen bir küme diferansiyasyon faktörü (yani, bir CD protein) olabilir. Sistein degistirilmis antikorun baglanabildigi bir anti jen, yukarida atif yapilan kategorilerden birinin bir alt-setinin bir üyesi olabilir; burada, atif yapilan kategorinin diger alt-set(ler)i, (ilgili antijene göre) ayri birözellige sahip baska moleküller/antijenler içerir.Ana antikor; US 5821337 numarali patentte Tablo 3°de gösterildigi gibi huMAb4D5-1, huMAb4D5-2, huMAb4D5-3, huMAb4D5-4, huMAb4D5-5, huMAb4D5-6, huMAb4D5-7 ve huMAb4D5-8 (Trastuzumab, HERCEPTIN®); hümanize 520C9 (WO 93/21319) ve burada açiklandigi gibi hümanize 2C4 antikorlari arasindan seçilen bir hümanize antikor da olabilir. Bu bulus açiklamasina konu olan sistein degistirilmis antikorlar, bir tiyol-reaktif nitelikte reaktif maddeyle yere özgü biçimde ve etkili olarak kuplajlanabilir. Tiyol-reaktif niteliktereaktif madde, bir inultifonksiyonel baglayici reaktifi, bir yakalama,60yani afinite, etiket reaktifi (örnegin, bir biyotin-baglayici reaktifi), bir belirleme etiketi (örnegin, bir florofor reaktifi), bir kati faz immobilizasyon reaktifi (örnegin, SEPHAROSETM, polistiren veya cam) veya bir ilaç-baglayici ara ürünü olabilir. Bir tiyol-reaktif nitelikte reaktif maddenin bir 'Örnegi N-etil maleimid (NEM) bilesigidir. Bir örnek yapida, bir ThioFabün bir biyotin-baglayici reaktifiyle reaksiyonu bir biyotinlenmis ThioFab ortaya çikarir ve bununla, sistein degistirilmis artigin varligi ve reaktivitesi teSpit edilebilir ve 'Ölçülebilir, Bir ThioFaan bir multifonksiyonel baglayici reaktifiyle reaksiyonu, bir ilaç moiyetesi reakifiyle veya baska bir etiketle reaksiyona sokulabilecek bir fonksiyonalize baglayicili bir ThioFab temin eder. Bir ThioFaan bir ilaç-baglayici ara ürünüylereaksiyonu bir ThioFab ilaç kon jugati temin eder.Burada tarif edilen örnek yöntemler, genel olarak antikorlarin tanimlanmasina ve üretimine ve daha genel olarak da burada tarif edilen tasarlama ve tarama basamaklarinin uygulanmasi yoluyla digerproteinlere uygulanabilir.Böyle bir yaklasim, reaktif grubunun Örnegin bir maleimid, bir iyodoasetamid, bir piridil disülfur veya baska tiyol-reaktif konjugasyon partneri oldugu baska tiyol-reaktif nitelikte reaktif maddelerin konjugasyonuna uygulanabilir (Haugland, 2003, Molecular Probes Handbook of Fluorescent Probes and Research Chemicals, Molecular Probes, Inc.;Brinkley, 1992, Bioconjugate Chem. 3:2; Garman, 1997, Non-Radioactive Labelling: A Practical Approach, Academic Press, London; Means (1990) Bioconjugate Chem. 1:2;Hermans0n, G. in Bioconjugate Techniques (1996)61Academic Press, San Diego, sayfa 40-55, 643-671). Partner, bir sitotoksik ajan (örnegin, doksorubisin ya da bogmaca toksini gibi bir toksin), bir floresan boya, örnegin floresein ya da rodamin gibi bir florofor, bir görüntüleme ya da radyoterapötik metal için bir selatlama ajani, bir peptidil ya da peptidil-disi etiket ya da belirleme tagi ya da polietilen glikolün çesitli farkli izomerleri gibi klirens-modifiye edici ajan, bir üçüncü komponente baglanan bir peptid ya da baska birkarbonhidrat ya da lipofilik ajan olabilir.Burada örnek antikor fragmani hu4D5 Fabv8°de tanimlanan yerler esas olarak tüm antikor türelerinde iyi korunan bir sabit antikor domaininde bulunur. Bu yerler, ilave yapisal tasarim ya da spesifik antikor yapisi bilgisine ihtiyaç olmadan ve antikorun degisken domainlerinde dogasi geregi bulunan antijen baglama özelliklerine müdahale etmeden baska antikorlara da kapsamli bir biçimdeuygulanabilir olmalidir.Kanser tedavisinde kullanilabilecek ve faydali olabilecek sistein degistirilmis antikorlar arasinda, bunlarla sinirli kalmaksizin, hücre yüzeyi reseptörlerine ve tümör-iliskili antijenlere (TAA) karsi antikorlar vardir. Bu antikorlar, çiplak antikorlar (bir ilaç veya etiket moiyetesine konjuge edilmemis) olarak veya Formül 1 antikor-ilaç konjugatlari (ADC) olarak kullanilabilir. Tümör-iliskili antijenler sektörde bilinmektedir ve sektörde iyi bilinen yöntemler ve bilgiler kullanilarak antikorlar üretme prosesinde kullanmak amaciyla hazirlanabilir. Arastirmacilar, kanser tanisi ve tedavisi için etkin ve etkili selüler hedefler kesfetmek amaciyla, bir veya daha fazla sayidakanseröz olmayan normal hücreye(hücrelere) kiyasla bir veya daha62fazla sayida belirli tipte(tiplerde) kanser hücresinin yüzeyinde spesifik eksprese edilen transmenibran ya da tümör-iliskili polieptidleri tanimlamaya çalismislardir. Çogunlukla, bu tümör-iliskili polipeptidler, kanseröz olmayan hücrelerin yüzeyine kiyasla kanser hücrelerinin yüzeyinde daha fazla eksprese edilirler. Bu tümör-iliskili hücre yüzeyi anti jen polipeptidlerinin tanimlanmasi, antikor-bazli tedaviler araciligiyla yikim için kanser hücreleriiii spesifik hedeflemekabiliyetine yol açmistir.TAA°ya örnek olarak, bunlarla sinirli kalmaksizin, asagida listelenen TAA (1)-(36) gösterilebilir. Kolaylik olmasi ainaciyla, tümü sektörde bilinen bu antijenlere iliskin bilgiler, Ulusal Biyoteknoloji Bilgi Merkezi”nin (NCBI) nükleik asit ve protein sekansi tanimlama teamülleri izlenerek asagida listelenmekte ve adlar, alternatif adlar, Genbank erisim numaralari ve primer referans(lar)1 kapsamaktadir.
TAA (1)-(36)”ya tekabül eden nükleik asit ve protein sekanslari, GenBank gibi herkese açik veritabanlarinda mevcuttur. Antikorlarin hedef aldigi tümör-iliskili antijenler, atif yapilan referanslarda tanimlanan sekanslara en az yaklasik %70, %80, %85, %90 ya da %95 sekaiis Özdesligine sahip olan ya da atif yapilaii referanslarda bulunan bir sekansa sahip bir TAA°yla hemen hemen ayni biyolojik özellikler ya da karakteristikler gösteren tüm amino asit sekaiis varyantlariiii ve izoformlarini kapsar. Örnegin, bir varyant sekansa sahip bir TAA genellikle listede ona tekabül eden sekansa sahip TAA”ya spesifikbaglanan bir antikora spesifik baglanabilir.63TUMOR-ILISKILI ANTIJENLER (1)-(36):(1) BMPRIB (kemik morfogenetik protein reseptörü-tip IB, Genbank erisim no.: NM_001203); ten Di jke, P., ve ark Science 264 (5155):101-104 (1994), Oncogene 14 (11):1377-1382 (1997)): WO2004063362 (Istem 2); W02003042661 (Istem 12); US2003134790-A1 (Sayfa 38-39); W02002102235 (Istem 13; Sayfa 296); WO2003055443 (Sayfa 91-92); W0200299122 (Ornek 2; Sayfa 528-530); W02003029421 (Istem 6); W02003024392 (Istem 2; Sekil 112); WO200298358 (Istem 1; Sayfa 183); WO20025494O (Sayfa 100-101); W0200259377 (Sayfa 349-350); W0200230268 (Istem 27; Sayfa 376); W0200148204 (Ornek; Sekil 4); NP_001 194 kemik morfogenetik protein reseptörü, tip IB /pid=NP_001194.1; Çapraz-referanslar: MIM:603248; NP_001 194.1; AY065 994(2) E16 (LATl, SLC7A5, Genbank erisim no.: NM_003486); Biochem. Biophys. Res. Commun. 255 (2), 283-288 (1999), Nature 395 (6699):288-291 (1998), Gaugitsch, H.W., ve ark (1992) J. Biol. Chem. 267 (16):1 1267- 11273);WO2004048938 (Örnek 2); W02004032842 (Ornek IV); W02003042661 (Istem 12); W02003016475 (Istem 1); W0200278524 (Örnek 2); WO200299074 (Istem 19; Sayfa 127-129); W0200286443 (Istem 27; Sayfa 222, 393); W02003003906 (Istem 10; Sayfa 293); W0200264798 (istem 33; Sayfa 93-95); W0200014228(Istem 5; Sayfa 133-136); USZOO3224454 (Sekil 3); W02003025138 (Istem '12; Sayfa64150); NP_003477 çözünen madde tasiyici ailesi 7 (katyonik amino asit transporteri, y+sistein), üye 5 /pid=NP_003477.3 - Homo sapiens; Çapraz-referanslar: MIM2600182; NP_003477.3; NM_015923; NM_003486_1(3) STEAP] (alti transmembranli prostat epitelyal antijeni, Genbank erisim no.: NM_012449); Cancer Res. 61 (15), 5857- 5860 (2001), Hubert, R.S., ve ark (1999) Proc. Natl. Acad. Sci.
USA. 96 (25):14523-14528); W02004065577 (Istem 6); W02004027049 (Sekil 1L); EP1394274 (Ornek 11); W02004016225 (Istem 2); W02003042661 (Istem 12); USZOO3157089 (Örnek 5); USZOO3185830 (Ornek 5); U82003064397 (Sekil 2); W0200289747 (Ornek 5; Sayfa 618- 619); W02003022995 (Örnek 9; Sekil 13A, Ornek 53; Sayfa 173, Örnek 2; Sekil 2A); NP_036581 alti transmembranli prostat epitelyal antijeni; Çapraz-referanslar: MIM2604415; NP_036581.1; NM_012449_1(4) 0772P (CA125, MUC16, Genbank erisim no.: AF361486); J. Biol. Chem. 276 (29):27371-27375 (2001)); W02004045553 (Istem 14); W0200292836 (istem 6; Sekil 12); W0200283866 (Istem 15; Sayfa 116-121); U82003124140 (Ornek 16); Çapraz-referanslar: GI:34501467; AAK74120.3; AF361486_1(5) MPF (MPF, MSLN, SMR, megakaryosit güçlendirici faktör, mezotelin, Genbank erisim no.: NM_005823); Yamaguchi, N., ve ark Biol. Chem. 269 (2), 805-808 (1994), Proc. Natl. Acad.
Sci. USA. 96 (20):1 1531-] 1536 (1999), Proc. Natl. Acad. Sci.65USA. 93 (1):]36-140 (1996), J. Biol. Chem. 270 (37):21984- 21990 (1995)); WO2003101283 (Istem 14); (W02002102235 (Istem 13; Sayfa 287-288); WO2002101075 (Istem 4; Sayfa 308-309); WO200271928 (Sayfa 320-321); WO9410312 (Sayfa 52-57); Çapraz- referanslar: MIM:601051; NP_005814.2; NM_005823_1(6) Napi3b (NAPI-3B, NPTIIb, SLC34A2, çözünen madde tasiyici ailesi 34 (sodyum fosfat), üye 2, tip II sodyum-bagimli fosfat transporteri 3b, Genbank erisim no.: NM_006424);J.
Biol. Chem. 277 (22):19665-19672 (2002), Genoinics 62 (2):281-284 (1999), Feild, J.A., ve ark (1999) Biochem.
Biophys. Res. Commun. 258 (3):578- 582); W02004022778 (Istem 2); EP1394274 (Ornek 11); W02002102235 (Istem 13; Sayfa 326); EP875569 (Istem 1; Sayfa 17-19);W0200157188 (Istem 20; Sayfa 329); W02004032842 (Ornek IV); WO200175177 (Istem 24; Sayfa 139-140_); Çapraz-referanslar: MIM:604217; NP_006415.1; NM_006424_1(7) Sema 5b (FLJ10372, KIAA1445, Mm.42015, SEMASB, SEMAG, Seiriaforin 5b Hlog, seina domain, yedi trombospondin tekrari (tip 1 ve tip l-benzeri), transmembran domaini (TM) ve kisa sitoplazmik domain, (semaforin) 5B, Genbank erisim no.: AB040878);Nagase T., ve ark (2000) DNA Res. 7 (2):143-150); W02004000997 (istem 1); W02003003984 (Istem 1); W0200206339 (Istem 1; Sayfa 50); W0200188133 (Istem 1; Sayfa 41-43, 48-58);66W02003054152(Istem 20); W02003101400(Istem 11); Erisim No.: Q9P283; EMBL; AB040878; BAA95969.1.
Genew; HGNC: 10737;(8) PSCA hlg (2700050C12Rik, C530008016Rik, RIKEN cDNA 2700050C12, RIKEN cDNA 2700050C12 geni, Genbank erisim no.: AY358628); Ross ve ark (2002) Cancer Res. 62:2546-2553; US2003129192 (Istem 2); US2004044180 (Istem 12); USZOO4044179 (Istem 1 1); U82003096961 (Istem 11); U82003232056 (Örnek 5); W02003105758 (Istem 12); US2003206918 (Ornek 5); EP1347046 (Istem 1); W02003025148 (Istem 20); Çapraz-referanslar: GII37182378; AAQ88991.1; AY358628_1(9) ETBR (Endotelin tip B reseptörü, Genbank erisim no.: AY275463); Nakamuta M., ve ark Biochem. Biophys. Res.
Cominun. 177, 34-39, 1991;Ogawa Y., ve ark Biochem.
Biophys. Res. C0mmun. 178,248-255, 1991;Arai H., ve ark Jpn. Circ. J. 56, 1303-1307, 1992;Arai H., ve ark J. 8101.
Chem. 268, 3463-3470, 1993; Sakamoto A., Yanagisawa M., ve ark Biochem. Biophys. Res. C0mmun.178, 656- 663,1991; Elshourbagy N.A., ve ark J. Biol. Chem. 268, 3873- 3879,1993;Haend1er B., ve ark J. Cardiovasc. Pharmacol. 20, 51-84, 1992; Tsutsumi M., ve ark Gene 228, 43-49, 1999; Strausberg R.L., ve ark Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 99, 16899-16903, 2002; Bourgeois C., ve ark J. Clin. Endocrinol.
Metab. 82, 3116-3123, 1997; Okamoto Y., ve ark Biol. Chem. 272, 21589-21596, 1997;Verheij JB., ve ark Am. J. Med.67Genet. 108, 223-225, 2002; Hofstra R.M.W., ve ark Eur. J.
Hum. Genet. 5180-1235, 1997; Puffenberger EG., ve ark Cell 79,1257-1266,l994;Attie T., ve ark, Hum. Mol. Genet. 4, 2407-2409, 1995; Auricchio A., ve ark Hum. Mol. Genet. :351-354,l996; Amiel J., ve ark Hum. Mol. Genet 5, 355-357, 1996; Hofstra R.M.W., ve ark Nat. Genet. 12, 445- 447,1996; Svensson PJ., ve ark Hum. Genet. 103,145- 148,1998;Fuchs S., ve ark Mol. Med. 7,115-124, 2001; Pingault V., ve ark (2002) Hum. Genet. 111,198- 206; W0004045516 (Istem 1); W02004048938 (Ornek 2);W02004040000 (Istem 151); W02003087768 (Istem 1); W0200301647 (Istem 1); WO2003016475 (Istem 1); W0200261087 (Sekil 1); W0200301649 (Sekil 6); WO2003025138 (Istem 12; Sayfa 144); W0200198351 (lstem 1; Sayfa 124-125);EP522868 (Istem 8; Sekil 2); W0200177172 (Istem 1; Sayfa 297-299); U82003109676; US6518404 (Sekil 3); USS773223 (Istem la; Kolon 31-34); WOOO4001004;(10) MSG783 (RNF124, hipotetik protein FLJ20315, Genbank erisim no.: NM_017763); W02003104275 (Istem 1); W02004046342 (Ornek 2); W02003042661 (Istem 12); W02003083074 (Istein 14; Sayfa 61); W02003018621 (Istem 1); W02003024392 (Istem 2; Sekil 93); W0200166689 (Örnek 6); Cross-references: LocusID: 54894; NP_060233.2; NM_017763_168(11) STEAP2 (HGNC_8639, IPCA-l, PCANAPI, STAMPI, STEAP2, STMP, prostat kanseri iliskili gen 1, prostat kanseri iliskili protein l, alti transmembranli prostat epitelyal anti jeni 2, alti transmembranli prostat proteini, Genbank erisim no.: AF455138); Lab. Invest. 82 (l 1): 1573-1582 (2002)); W02003087306; U82003064397 (Istem 1; Sekil 1); W0200272596 (Istem 13; Sayfa 54-55); WO200172962 (Istem 1; Sekil 4B);WO2003104270 (istem 11); W02003104270 (Istein 16); USZOO4005598 (Istem 22); W02003042661 (Istem 12); US2003060612 (Istem 12; Sekil ); W0200226822 (Istem 23; Sekil 2); W0200216429 (Istem 12; Sekil 10); Çapraz referanslar: G1222655488; AAN04080.1; AF455138_1(12) TrpM4 (BR22450, FL120041, TRPM4, TRPM4B, geçici reseptör potansiyel katyon kanali, alt-aile M, üye 4, Genbank erisim no.: NM_017636);Xu, X.Z, ve ark Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 98 (19)310692- 10697 (2001), Cell 109 (3):397-407 (2002), J. 8101. Chem. 278(33):30813-30820 (2003)); U82003143557 (Istein 4); W0200040614 (Istem 14; Sayfa 100-103); WO200210382 (Istem 1; Sekil 9A); W02003042661 (istem 12); W0200230268 (Istem 27; Sayfa 391);U82003219806 (Istem 4); W0200162794 (Istem 14; Sekil 1A- D); Çapraz referanslar: MIM:606936; NP_060106.2; NM_017636_169(13) CRIPTO (CR, CRI, CRGF, CRIPTO, TDGFi, teratokarsinom-kaynakli büyüme faktörü, Genbank erisim no.: NP_OO3203 ya da NM_OO3212); Ciccodicola, A., ve ark EMBO J. 8 (7):1987-l99l (1989), Am. J. Hum. Genet. 4943):555-565 (1991)): USZOO3224411 (Istem 1); W02003083041 (Örnek 1); WO2003034984 (Istem 12);W020028817O (Istem 2; Sayfa 52-53); W02003024392 (Istem 2; Sekil 58); W02002164l3 (Istem 1; Sayfa 94-95, 105); W0200222808 (Istem 2; Sekil 1);USS854399 (Örnek 2; Col 17-'18); USS792616 (Sekil 2); Çapraz referanslar: MIM: 187395; NP_003203.1; NM_()O3212_1(14) CD21 (CR2 (Tamamlayici reseptörü 2) ya da C3DR (C3d/Epstein Barr Virüs reseptörü) ya da Hs. 73792, Genbank erisim no.: M26004); Fu jisaku ve ark (1989) J. Biol. Chem. 264 (4):2118-2125);Weis J.J., ve ark J. Exp. Med. 167,1047- 1066,l988; Moore M., ve ark Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 84,9194-9198,1987; Barel M., ve ark Mol. lmmunol. 35,1025- 1031,1998;Weis JJ., ve ark Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 83, 5639-5643, 1986; Sinha SK., ve ark (1993) J. Immun01.150, 5311-5320; W02004045520 (Örnek 4); U82004005538 (Örnek 1); W02003062401 (Istem 9); W02004045520 (Ornek 4); WO9102536 (Sekil 9.1.-9.9); W02004020595 (Istem 1); Erisim No.: P20023; Ql3866; Q14212; EMBL; M26004; AAA35786.1.70(15) CD79b (CD79B, CD79ß, le (immünoglobulin-iliskili beta), B29, Genbank erisim no.: NM_000626 ya da 11038674); Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. (2003) 100 (7):4l26-413l, Blood (2002) 100 (9):3068-3076, Muller ve ark (1992) Eur.J.
Immunol. 22 (6):1621-1625); W02004016225 (istein 2, Sekil 140);W02003087768. U82004101874 (istem 1. sayfa 102); W02003062401 (istem 9); W0200278524 (Örnek 2); US 2002150573 (istem 5, sayfa 15); USS644033; W02003048202 (istem 1, sayfa 306 ve 309); WO 99/558658, U86534482 (istem 13, Sekil 17A/B); WO200055351 (istem 11, sayfa 1145-1146); Çapraz referanslar: MIM: 147245; NP_000617. 1; NM_000626_1(16) FCRH2 (1FGP4, IRTA4, SPAPlA (fosfataz ankor proteini la içeren SH2 domaini), SPAPlB, SPAPlC, Genbank erisim no.: NM_030764, AY358130); Genome Res. 13 (10):2265- 2270 (2003),Immunogenetics 54 (2):87-95 (2002), Blood 99 (8):2662-2669 (2002), Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 98 (17):9772-9777 (2001), Xu, MJ., ve ark (2001) Biochem.
Biophys. Res. Commun. 280 (3):768-775; W02004016225 (Istem 2); W02003077836; WO 200138490 (Istem 5; Sekil 18D-1-18D-2); WO 2003097803 (Istem 12); W02003089624 (Istem 25); Çapraz referanslar: MIM2606509; NP_1103912; NM_030764_1 (17) HER2 (ErbB2, Genbank erisim no.: Ml730); Coussens L., ve ark Science (1985) 230(4730):1132-1139); Yamamoto T., ve ark Nature 319, 230-234,1986; Semba K., ve ark Proc. Natl.
Acad. Sci. USA. 82, 6497-6501, 1985; SWiercz LM., ve ark 1.71Cell Biol. 165, 869-880, 2004; Kuhns JJ., ve ark J. Biol. Chem. 274, 36422-36427, 1999; Cho H.-S., ve ark Nature 421, 756- 760, 2003; Ehsani A., ve ark (1993) Genomics 15, 426-429; W02004048938 (Örnek 2); W02004027049 (Sekil 11); W02004009622; W02003081210; W02003089904 (Istem 9); W02003016475 (istem 1); US2003118592; W02003008537 (Istem 1); W02003055439 (Istem 29; Sekil 1A-B); WO2003025228 (Istein 37; Sekil 5C);W0200222636 (Ornek 13; Sayfa 95-107); W0200212341 (Istem 68; Sekil 7); W0200213847 (Sayfa 71-74); W0200214503 (Sayfa 114- 117); W0200153463 (Istem 2; Sayfa 41-46); WO 200141787 (Sayfa 15); W0200044899 (Istem 52; Sekil 7);W0200020579 (Istem 3; Sekil 2); U85869445 (Istem 3; Kolon 31-38); WO9630514 (Istem 2; Sayfa 56-61); EP1439393 (istem 7); W02004043361 (istem 7); WO 2004022709; W0200100244 (Örnek 3; Sekil 4); Erisim No.: P04626; EMBL; M11767; AAA35808.1. EMBL; M11761; AAA35808.1.(18) NCA (CEACAM6, Genbank erisim no.: M18728);Bamett T., ve ark Genomics 3,59-66,l988; Tawaragi Y., ve ark Biochem. Biophys. Res. Commun. 150, 89-96, 1988; Strausberg RL., ve ark Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 99:16899-16903, 2002; WO2004063709; EP1439393 (Istem 7); WO2004044178 (Ornek 4); WO2004031238; W02003042661 (Istem 12); W0200278524 (Ornek 2); W0200286443 (Istem 27; Sayfa 427); W0200260317 (Istem722); Erisim NO.: P40199; Ql4920; EMBL; M29541; AAA59915.1. EMBL; M18728;(19) MDP (DPEPl, Genbank erisim no. BC017023) Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 99 (26):16899-16903 (2002));W02003016475 (Istem 1); W0200264798(Istem 33; Sayfa 85-87);JP05003790 (Sekil 6-8);WO9946284 (Sekil 9); Çapraz referanslar: MIM2179780; AAH17023.1; BC017023_1(20) 1L20Ru (1L20Ra, ZCYTOR7, Genbank erisim no.
AF184971); Clark H.F., ve ark Genome Res. 13, 2265-2270, 2003; Mungall AJ., ve ark Nature 425, 805-811, 2003; Blumberg H., ve ark Cell 104, 9-19, 2001; Dumoutier L., Ve ark J. Immunol. 167, 3545-3549. 2001; Parrish-Novak J., ve ark J. Biol. Chem. 277, 47517-47523, 2002; Pletnev S., ve ark (2003) Biochemistry 42: 12617-12624; Sheikh F., ve ark (2004) J. Immunol. 172, 2006-2010; EP1394274 (Ornek 11); US2004005320 (Omek 5); W02003029262 (Sayfa 74-75); W02003002717 (Istem 2; Sayfa 63); W0200222153 (Sayfa 45- 47); U82002042366 (Sayfa 20-21); WO200146261 (Sayfa 57- 59); WO200146232 (Sayfa 63-65); WO9837193 (Istem 1; Sayfa 55-59); Erisim No.: Q9UHF4; Q6UWA9; Q96SH8; EMBL; AF184971; AAF01320.1.(21) Brevican (BCAN, BEHAB, Genbank erisim no.
AF229053) Gary 8.0. ve ark Gene 256, 139-147, 2000; Clark HP., ve ark Genome Res. 13, 2265-2270, 2003; Strausberg RL., ve ark Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 99, 16899-7316903, 2002; U82003186372(Istem 11); USZOO3186373 (Istem 11); USZOO3119131(Istem 1; Sekil 52); USZOO3119122 (Istem 1; Sekil 52); USZOO3119126 (Istem 1); USZOO3119121(Istem 1; Sekil 52);U82003119129(Istem 1); US2003ll9l30 (Istem 1); US2003119128 (Istem 1; Sekil 52); USZOO3119125 (Istem 1); W02003016475 (Istem 1); W0200202634 (Istem 1);(22) EphBZR (DRT, ERK, Hek5, EPHT3, Ty105. Genbank erisim no. NM_O4442) Chan, J. and Watt, V.M., Oncogene 6 (6), 1057-1061 (1991) Oncogene 10 (5):897-905 (1995), Annu.
Rev. Neurosci. 21:309-345 (1998), Int. Rev. Cytol. 196:177- 244 (2000)); WO 2003042661 (Istem 12); WO 200053216 (Isteln 1; Sayfa 41); W02004065576 (Isteln 1); W02004020583 (Istem 9); W02003004529 (Sayfa 128-132); W0200053216 (Istem 1; Sayfa 42);Çapraz referanslar: MIMz600997; NP_004433.2; N0_004442_1(23) ASLG659 (B7h, Genbank erisim no. AX092328) US 20040101899 (Isteln 2); WO 2003104399 (Istem 11); WO 2004000221 (Sekil 3); USZOO3165504(Istem 1); US 2003124140 (Ornek 2); US2003065143 (Sekil 60); WO 2002102235 (Isteln 13; Sayfa 299); US 2003091580 (Ornek 2);W0200210187(Istem 6; Sekil 10);W0200194641(Istem 12; Sekil 7b);W0 200202624 (Istem 13; Sekil 1A-lB); US 2002034749 (Istem 54; Sayfa 45-46); WO 200206317 (Ornek 2;Sayfa 320-321, Isteln 34; Sayfa 321-322);W0 200271928 (Sayfa 468-469); W0200202587 (Örnek 1; Sekil 1);74wo 200140269 (Ornek 3; Sayfa 190-192);wo 200036107 (Ornek 2; Sayfa 205-207); W02004053079 (Istem 12); W02003004989 (Istem 1); W0200271928 (Sayfa 233- 234, 452-453); wo 0116318;(24) PSCA (Prostat kök hücre antijen prekürsörü, Genbank erisim no.: A1297436); Reiter RE., ve ark Proc. Natl. Acad. Sci.
USA. 95,1735-1740,l998; Gu Z, ve ark Oncogene 19; 1288- 1296,2000;Biochem. Biophys. Res. Commun. (2000) 275(3):783-788; W02004022709, EP1394274 (Ornek 11); USZOO4018553 (Istem 17); W02003008537 (Istem 1); W0200281646 (Istem 1; Sayfa 164); WO2003003906 (Istem ; Sayfa 288); WO200140309 (Örnek 1; Sekil 17); U82001055751 (Ornek 1; Sekil 1b); W0200032752 (Istem 18; Sekil 1);WO9851805 (Istem 17; Sayfa 97); WO9851824 (Istem 10; Sayfa 94); WO9840403 (Istem 2; Sekil lB); Erisim No.: 043653; EMBL; AF043498; AAC39607.1.(25) GEDA (Genbank erisim no.: AY260763); AAP14954 lipoma HMGIC füzyon-partneri-benzeri protein /pid=AAP14954.1 Homo sapiens (insan); WO2003054152 (Istem 20); WO2003000842 (Istem 1); W02003023013 (Örnek 3, Istem 20); U82003194704 (Istem 45);Çapraz referanslar: GI:30102449; AAP14954.1; AY260763_1(26) BAFF-R (B hücresi - aktive edici faktör reseptörü, BLyS reseptörü 3, BR3, Genbank erisim no.: AF 116456); BAFF75reseptörü/pid=NP_443l77.1 - Homo sapiens; Thompson, JS., ve ark Science 293 (5537), 2108-21] 1 (2001); W02004058309; W02004011611; W02003045422 (Ornek; Sayfa 32-33); W02003014294 (Istem 35; Sekil 6B); W02003035846 (Istem 70; Sayfa 615-616); W0200294852 (Kolon 136-137); W0200238766 (Istem 3; Sayfa 133); W0200224909 (Örnek 3; Sekil 3); Çapraz referanslar: MIMz606269; NP_443 177. 1; NM_052945_1; AF132600(27) CD22 (B-hücresi reseptör'ü CD22-B izoformu, BL-CAM, Lyb-8, Lyb8, SlGLEC-Z, FLJ22814, Genbank erisim no.: AK026467); Wilson ve ark (1991) .1. Exp. Med. 173:137- 146; W02003072036 (Istem 1; Sekil 1); Çapraz referanslar: MIM: 107266; NP_001762. 1; NM_001771_1(28) CD79a (CD79A, CD790t, immünoglobulin-iliskili alfa, Ig betayla (CD79B) kovalent etkilesime giren ve yüzey üzerinde lg M molekülleriyle bir kompleks olusturan, B-h'ûcresi diferansiyasyonundan rol oynayan bir sinyali transd'ûse eden bir B hücresi-spesifik protein); pI: 4,84, MW: 25028 TM: 2 [P] Gen Kromozomu: 19q13.2, Genbank erisim no.: NP_001774.10); W02003088808, U820030228319; W020030 62401 (istem 9); US2002150573 (istem 4, sayfa 13-14); WO9958658 (istem 13, Sekil 16); WO9207574 (Sekil 1); U85644033; Ha ve ark (1992) J. Immunol. 148(5):1526- 1531; Mueller ve ark (1992) Eur. J. Biochem. 22:1621-761625; Hashimoto ve ark (1994) Immunogenetics 40(4):287- 295;Preud'h0mme ve ark (1992) Clin. Exp. Immunol. 90(l):l4l-146; Yu ve ark (1992) J. Immunol. 148(2) 633- 637; Sakaguchi ve ark (1988) EMBO J. 7(l 1):3457-3464;(29) CXCRS (Burkitt'in lenfoma reseptörü 1, CXCL 13 kemokiniyle aktive edilen, lenfosit migrasyonunda ve humoral savunmada islev gören, HIV-2 enfeksiyonunda ve muhtemelen AIDS, lenfoma, miyelom ve lösemi gelisiminde rol oynayan bir G protein-kuplajli reseptör); 372 aa), pl: 8,54 MW: 41959 TM: 7 [P] Gen Kromozomu: llq23.3, Genbank erisim no.: NP_001707. 1);W02004040000; W02004015426; U82003105292 (Örnek 2); U86555339 (Ornek 2); W0200261087 (Sekil 1); WC 200157188 (Istein 20, sayfa 269); WO 200172830 (sayfa 12- 13); W0200022l29 (Örnek 1, sayfa 152-153, Örnek 2, sayfa 254-256); WO9928468 (istem 1, sayfa 38); USS440021 (Ornek 2, kolon 49-52); WO9428931 (sayfa 56- 58); WO9217497 (istem 7, Sekil 5); Dobner ve ark (1992) Eur.
J. Immunol. 22:2795-2799; Barella ve ark (1995) Biochem. J. 309:773-779;(30) HLA-DOB (peptidleri baglayan ve onlari CD4+ T lenfositlerine sunan MHC sinif 11 molekül (la anti jen) beta alt- birimi); 273 aa, pl: 6,56 MW: 30820 TM: 1 [P] Gen Kromozomu: 6p21.3, Genbank erisim no.: NP_002111.1); Tonnelle ve ark (1985) EMBOJ. 4(l l):2839-2847; Jonsson ve ark (1989) lmmunogenetics 29(6):4l 1-413; Beck ve ark (1992)77J. Mol. Biol. 228:433-441; Strausberg ve ark (2002) Proc. Natl.
Acad. Sci USA 99:16899-16903; Servenius ve ark (1987') J.
Biol. Chem. 26218759-8766; Beck ve ark (1996) J. Mol. Biol. 25521-13; Naruse ve ark (2002) Tissue Antigens 592512- 519; WO9958658 (istem 13, Sekil 15); US6153408 (Col 35- 38); U85976551 (c01 168-170);US6011146 (col 145- 146); Kasahara ve ark (1989) Immunogenetics 30(1):66- 68; Larhammar ve ark (1985) J. Biol. Chem. 260(26):14111- 14119;(31) P2X5 (Purinerjik reseptör P2X ligand-kapili iyon kanali 5, ekstraselüler ATP kapili bir iyon kanali; sinaptik transmisyon ve nörogenezde rol oyiiayabilir; yoksunluk, idiyopatik detrusor instabilitesinin patofizyolojisine katkida bulunabilir); 422 aa), pl: 7,63, MW: 47206 TM: 1 [P] Gen Kromozomu: 17p13.3), Genbank erisim no.: NP_002552.2); Le ve ark (1997) FEBS Lett. 418(1-2):195-1995; WO 2004047749; WO 2003072035 (istem 10); Touchman ve ark (2000) Genome Res. :165-173; WO200222660 (istem 20); W02003093444 (istem 1);W02003087768 (istem 1); W02003029277 (sayfa 82);(32) CD72 (B-hücresi diferansiyasyori antijeni CD72, Lyb-2); PROTEIN SEKANSI Full maeaity... tafrfpd (i..359; 359 aa), pI: 8,66, MW: 40225 TM: 1 [P] Gen Kromozomu: 9p13.3, Genbank erisim 110.: NP_001773.1); WO2004042346 (istem 65); WO2003026493 (sayfa 51-52, 57-58), WO 200075655 (sayfa IOS-106); Von Hoegen ve ark (1990) J.78Immunol. 144(12):4870-4877; Strausberg ve ark (2002) Proc.
Natl. Acad. Sci USA 99:16899-16903;(33) LY64 (Lenfosit anti jeni 64 (RP105), lösince zengin tekrar (LRR) ailesinin tip I membran proteini, B-hücresi aktivasyonunu ve apoptozu regüle eder; fonksiyon kaybi, sistemik lupus eritematozus görülen hastalarda hastalik aktivitesinde artisla iliskilidir); 661 aa, pl: 6,20, MW: 74147 TM: 1 [P] Gen Kromozomu: 5q12, Genbank erisim no.: NP_005573.1); US2002193567; WO9707198 (istem l 1, sayfa 39-42); Miura ve ark (1996) Genomics 38(3):299-304; Miura ve ark (1998) Blood 9222815-2822; WO2003083047; WO9744452 (istem 8, sayfa 57-61);W0200012130 (sayfa 24- 26);(34) FCRHl (Fc reseptörü-benzeri protein 1, C2 tip Ig-benzeri ve ITAM domainleri içeren immünoglobulin Fc domaini için bir putatif reseptör; B-lenfosit diferansiyasyonunda rol oynayabilir), 429 aa, pl: 5,28, MW: 46925 TM: 1 [P] Gen Kromozomu: lq21-1q22, Genbank erisim no.: NP_443170.1); W02003077836; W0200138490 (istem 6, Sekil 18E-1-18-E- 2); Davis ve ark (2001) Proc. Natl. Acad. Sci USA 98(l7):9772-9777; WO 2003089624 (istem 8); EP 1347046 (istem 1); W02003089624 (istem 7);(35) IRTA2 (FCRHS, lmmünoglobulin üst-aile reseptör translokasyonu iliskili 2, B hücresi gelisimi ve lenfomagenezdeolasi rolleri olan bir putatif immünoreseptör; bazi B hücresi79malignensilerinde translokasyon yoluyla genin deregülasyonu meydana gelir); 977 aa, pl: 6,88, MW: 106468, TM: 1 [P] Gen Kromozomu: lq21, (Genbank erisim no.: Human:AF343662, AF343663, AF343664, AF343665, AF369794, AF397453, AKO90423, AKO90475, AL834187, AY358085; Fare: AK089756, AY158090, AY506558; NP_112571.1); NP_112571.1 W02003024392 (istem 2, Sekil 97); Nakayaina ve ark (2000) Biochem. Bi0phys. Res. Commun. 277(l):124- 127;W02003077836; WO200138490 (istem 3, Sekil l8B-1- 188-2);(36) TENBZ (TMEFFZ, tomoregulin, TPEF, HPPl, TR, büyüme faktörlerinin EGF/heregulin ailesiyle iliski putatif transmembran proteoglikan ve follistatin), 374 aa, NCBI Erisim No.: AAD55776, AAF91397, AAG49451, NCBI RefSeq: NP_057276; NCBI Geni: 23671; OMIM: 605734; SwissProt Q9UIK5; (Genbank erisim no.: AF179274; AY358907, CAF85723, CQ782436); W02004074320 (SEKANS KOD NO. 810);JP2004113151(SEKANS KOD NO.: 2,4, 8); WO2003042661 (SEKANS KOD NO. 580); W02003009814 (SEKANS KOD NO. 411); EP1295944 (sayfa 69-70); W0200230268 (sayfa 329);WO200190304(SEKANS KOD NO. 2706); U82004249l30; USZOO4022727; W02004063355; US2004197325; U82003232350; U82004005563; US2003124579;H0rie ve ark (2000) Genomics 67:146-152;Uchida ve ark (1999) Biochem.
Biophys. Res. Commun. 266:593-602;Liang ve ark (2000)80Cancer Res. 60:4907-12;G1ynne-Jones ve ark (2001) Int .l Cancer. Oct 15;94(2):l78-84.Ana antikor, bir albümin-baglanma peptidi (ABP) sekansi içeren bir füzyon proteini de olabilir (Dennis ve ark. (2002) "Albumin Binding As A General Strategy For lmproving The Pharmacokinetics Of Proteins" J Biol Chem. 277:35035-35043; WO 01/45746). Bu bulusa konu olan antikorlar, asagida atif yapilan referanslarda açiklanan ABP sekanslarina sahip füzyon proteinlerini kapsar: (i) “Dennis ve ark (2002) .1 Biol Chem. 277z35035-35043” dokümaninda sayfa 35038°de Tablo III ve IV; (ii) US 2004/0001827 numarali dokümanda [0076] nuinarali paragrafta SEKANS KOD NO.: 9-22 ve (iii) WO 01/45746 numarali dokümanda sayfa 12-l3°te SEKANS KOD NO.: zl-zl4.MUTAJENEZBaslangiç polipeptidinin bir amino asit sekansi varyantini kodlayan DNA, sektörde bilinen çesitli farkli yöntemlerle hazirlanir. Bu yöntemler arasinda, bunlarla sinirli kalmaksizin, yere-yönlendirilmis (ya da oligonükleotid-aracili) mutajenez, PCR mutajenezi ve polipeptidi kodlayan daha önce hazirlanmis bir DNA”n1n kaset mutajenezi yoluyla hazirlama yöntemleri vardir. Rekombinant antikorlarin varyantlari, ayni zamanda, restriksiyon fragmaiii manipülasyonuyla veya sentetik oligonükleotidle üst üste bindirme uzatina PCR”siyle de olusturulabilir. Mutajenik primerler sistein kodon ikame(ler)ini kodlar. Bu mutant sistein degistirilmis antikorlari kodlayan DNA,yi üretmek için standart mutajenez tekniklerikullanilabilir. Genel kilavuzlar, “Sambrook ve ark Molecular Cloning,81A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, N.Y., 1989” ve “Ausubel ve ark Current Protocols in Molecular Biology, Greene Publishing and Wiley-Interscience. NewYork, N.Y., 1993” referanslarinda bulunabilir.Yere-yönlendirilmis mutajenez, sübstitüsyon varyantlari, yani mutant proteinler hazirlainak için kullanilan bir yöntemdir. Bu teknik sektörde iyi bilinmektedir (bakiniz örnegin, Carter (1985) ve ark Nucleic Acids Res. 13:4431-4443; Ho ve ark (1989) Gene (Ainst.) 77:51-59 ve Kunkel ve ark (1987) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 822488). Kisaca açiklamak gerekirse, DNA›nin yere-yönlendirilmis mutagenezi gerçeklestirilirken, baslangiç DNA°si, ilk önce istenen niutasyonu kodlayan bir oligonükleotid bu baslangiç DNA”sinin bir tekli iplikçigine hibridize edilerek degistirilir. Hibridizasyondan sonra, bir DNA polimeraz, hibridize edilmis oligonükleotidi bir primer olarak ve baslangiç DNA7sinm tekli iplikçigini bir sablon olarak kullanarak bir tani ikinci iplikçigi sentezlemek ainaciyla kullanilir.
Sonuçta, istenen mutasyonu kodlayan oligonükleotid, elde edilen çift iplikçikli cDNA”ya dahil edilir. Yere-yönlendirilmis mutajenez, bir ekspresyon plazmidinde mutajeneze tâbi tutulacak proteini eksprese eden gen içinde gerçeklestirilebilir ve elde edilen plazmid, istenen sistein ikame mutasyonlarinin sokulmasini teyit etmek ainaciyla sekanslanabilir (Liu ve ark (1998) J. Biol. Chem. 273:20252-20260). Örnegin QuikChange® Multi Yere-Yönlendirilmis Mutajenez Kiti (Stratagene, La Jolla, CA) gibi ticari piyasada mevcut olanlar dahil yere-yönlendirilmis mutajenez protokolleri ve formatlari kullanilir.PCR mutajenezi, baslangiç polipeptidiiiin ainino asit seknasivaryantlarini hazirlamak için de uygundur. Bakiniz: Higuchi, (1990)82in PCR Protocols, sayfa 177-183, Academic Press; lto ve ark (1991) Gene 102:67-70; Bemhard ve ark (1994) Bioconjugate Chein. 52126- 132; ve Vallette ve ark (1989) Nuc. Acids Res. 17:723-733. Kisaca açiklamak gerekirse, küçük miktarlarda sablon DNA bir PCR”de baslangiç malzemesi olarak kullanildiginda, yalnizca priinerlerin sablondan farklilastigi pozisyonlarda sablon sekanstaii farklilik gösteren bir spesifik DNA fragmaninin nispeten büyük miktarlarini olusturmak için, bir sablon DNA°da tekabül eden bölgeden sekansaçisindan hafif farklilik gösteren priinerler kullanilabilir.Varyantlar hazirlamak için kullanilan baska bir yöntem olan kaset mutajenezi, “Wells ve ark (1985) Gene 34:315-323” referansinda tarif edilen teknige dayanir. Baslangiç malzemesi, niutasyona ugratilacak baslangiç polipeptid DNA”sini içeren plaziniddir (ya da baska vektördür). Mutasyona ugratilacak baslangiç DNA'sinda kodon(lar) taniinlanir. Tanimlaninis mutasyoii yer(ler)inin her bir tarafinda bir özgün restriksiyon endonükleaz yeri bulunmalidir. Böyle restriksiyon yerleri inevcut degilse, bunlar yukarida tarif edilen oligon'ûkleotid- aracili mutajenez yöntemi kullanilarak olusturularak baslangiç polipeptid DNAssinda uygun lokasyonlara sokulabilirler. Plazmid DNA°si, bu yerlerde kesilerek linearize edilir. Restriksiyon yerleri arasinda DNA sekansini kodlayan, fakat istenen mutasyon(lar)i içeren bir çift-iplikçikli oligonükleotid, standart prosedürler kullanilararak sentezlenir; bu prosedürlerde, iki oligonükleotid iplikçigi ayri ayri sentezlenir ve ardindan, standart teknikler kullanilarak birlikte hibiridize edilir. Bu çift-iplikçikli oligoni'ikleotid, kaset olarak anilir.
Bu kaset, linearize plazinidin uçlariyla uyumlu 5' ve 3' uçlarina sahipolacak sekilde tasarlanir ve böylece, plazinide dogrudan dogruya83ligate edilebilir. Bu durumda, bu plazinid, mutasyonlu DNA sekansi içerir. Kodlanan sistein ikamelerini içeren mutant DNA, DNAsekanslaina yoluyla teyit edilebilir.PCR esasli mutajenezle sablon olarak çift iplikçikli plazmid DNA kullanilarak oligonükleotid yönlendinneli mutajenezle tekli mutasyonlar da 'üretilir (Sambrook and Russel, (2001) Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 3rd edition; Zoller ve ark (1983) Methods Enzyinol. 100:468-500;Zoller, MJ. and Smith, M. (1982) Nucl. Acids Res. 10:6487-6500).Bu bulusta, Ml3 faji üzerinde gösterilen hu4D5FabV8 (Gerstner ve ark (2002) "Sequence Plasticity In The Antigen-Binding Site Of A Therapeutic Anti-HER2 Antibody", J Mol Biol. 321:851-62), deneylerde bir model sistem olarak kullanildi. hu4D5FabV8-faj, hu4D5FabV8 ve ABP-hu4D5Fabv8 yapilarina, sistein inutasyonlari sokuldu. hu4D5-ThioFab-Faj hazirlama prosedürleri, daha önce tarif edilen polietilen glikol (PEG) çökeltme yöntemi kullanilarak gerçeklestirildi (Lowman, Henry B. (1998) Methods in Molecular Biology (Totowa, New Jersey) 87 (Coinbinatorial Peptide Library Protocols) 249-264).Oligonükleotidler, fosforamidit sentez yöntemiyle (US 4415732; US 4458066; Beaucage, S. and Iyer, R. (1992) "Advances in the synthesis of oligonucleotides by the phosphorainidite approach", Tetrahedron 48:2223-2311) hazirlanir. Fosforamidit yöntemi, reaktif 3' fosforamidit moiyeteli nükleotid inonomer birimlerinin kontrollügözenekli cam ya da yüksek düzeyde çapraz-bagli polistirenden84olusan bir kati destek üzerinde ve çogunlukla sentezin basinda kati destege 3' terminusu nükleozitinin eklendigi 3' ilâ 5' yönünde bir oligonükleotid zincirine siklik ilavesine yol açar (US 5047524; US 5262530). Yöntem genellikle ticari piyasada inevcut otomatik sentezleyici kullanilarak gerçeklestirilir (Applied Biosystems, Foster City, CA). Oligonükleotidler, belirleme, yakalama, stabilizasyon ya da baska amaçlarla non-izotopik moiyetelerle kiinyasal olarak etiketleiiebilir (Andrus, A. "Chemical methods for 5' non-isotOpic labelling of PCR probes and primers" (1995) in PCR 2: A Practical Approach, Oxford University Press, Oxford, sayfa 39- 54; Hermanson, G. in Bioconjugate Techniques (1996) Academic Press, San Diego, sayfa 40-55, 643-671; Keller, G. and Manak, M. in DNA Probes Second Edition (1993), Stockton Press, New York, sayfa 121-23).PHESELECTOR ESEYI PHESELECTOR (Faj ELISA for Selection of Reactive Thiols) eseyi bir ELISA faj forinatinda antikorlardaki reaktif sistein gruplarinin tespitine izin verir. Ornek 2°de detayli tarif edildigi gibi, ilgili protein (örnegin, antikor) kuyucuk yüzeyleri üzerine kaplanir ve ardindan, faj partikülleriyle inkübasyon yapilir ve daha sonra, HRP etiketli sekonder antikor eklenir ve absorbans belirlemesi yapilir. Fa j üzerinde görüntülenen inutant proteinler hizli, istikrarli ve yüksek verimli bir sekilde taranabilir. Antikorlarin ve diger proteinlerin rastgele protein faj kütüphanelerinden serbest Cys”nin uygun reaktif bölgelerinin alimini tanimlamak için, sistein degistirilmis antikor kütüphaneleriayni yaklasiin kullanilarak üretilebilir ve baglaina seçimine tâbi85tutulabilir. Bu teknik, faj üzerinde görüntülenen sistein mutant proteinlerinin bir afinite reaktifiyle veya ayni zamanda tiyol-reaktif olan raporlama grubuyla reaksiyona sokulmasini içerir. Sekil 8, Fab ya da ThioFabsin HER2°ye (üst) ve biyotinlenmis ThioFab°1n Streptavidine (alt) baglanmasini gösteren bir sematik temsillePHESELECTOR Eseyini göstermektedir.PROTEIN EKSPRESYONU VE SAFLASTIRMASI Sistein degistirilmis antikrolari kodlayan DNA, geleneksel prosedürler kullanilarak (örnegin, murin antikorlarinin agir ve hafif Zincirlerini kodlayan genlere spesifik baglananbilen oligonükleotid problari kullanilarak) kolaylikla izole edilir ve sekanslanir. Hibridom hücreleri, bu gibi DNA için bir kaynak islevini görür. DNA izole edildikten sonra, ekspresyon vektörleri içine konulabilir ve bu ekspresyon vektörleri de, daha sonra, aksi halde antikor proteinini üretmesi mümkün olmayan E. coli hücreleri, simian COS hücreleri, Çin hamsteri yumurtalik (CHO) hücreleri ya da baska memeli konakçi hücreleri, örnegin, niiyelom hücreleri gibi konakçi hücrelere transfekte edilerek (US 5807715; US 2005/0048572; US 2004/0229310) rekombinan konakçi hücrelerde monoklonal antikorlarin sentezini saglarlar. hu4D5FabV8 sistein degistirilmis antikorlarinin verimleri, yabani tip hu4D5FabV8,e benzerdi. Antikoru kodlayan DNA bakterilerinde rekombinan ekspresyona iliskin inceleme makaleleri arasinda “Skerra ve ark (1993) Curr. Opinion in Immunol. 5:256-262” ve “Pluckthun (1992) Immunol. Revs. 130:151- 188” vardir.86Tasarim ve seçim islemlerinden sonra, yüksek düzeyde reaktif eslesmemis Cys artiklari içeren sistein degistirilmis antikorlar, örnegin ThioFab”lar asagida tarif edilen islemlerle üretilebilir: (i) `Örnegin E. coli sistemi gibi bir bakteriyel sistemde ya da 'Örnegin Çin Hamsteri Yumurtalik hücreleri (CHO) gibi bir memeli hücre kültürü sisteminde (WO 01/00245) ekspresyon ve (ii) yaygin protein saflastirma teknikleri kullanilaral saflastirma (Lowman ve ark (1991)J. Biol.Chem. 266(17): 10982-10988).ThioFab°lar, bir non-supresör E. Coli susu olan 34B8°de indüksiyondan sonra eksprese edilmislerdir (Baca ve ark (1997) Journal Biological Chemistry 272(16)210678-84). Ornek 3a”ya bakiniz. Hasat edilen hücre peleti, PBS (fosfat tampoiilu salin) içinde yeniden süspanse edilmis; bir mikro-akiskanlistirici içinden geçirilerek toplam hücre lizisi gerçeklestirilmis ve ThioFablar, afinite kromatografisi yoluyla protein G SEPHAROSETM (Amersham) ile saflastirilmislardir. ThioFab°lar, yukarida açiklandigi gibi biyotin- PEO-maleimid ile konjuge edilmislerdir ve Biyotinlenmis- ThioFab°lar, Superdex-ZOOW (Amershain) jel filtrasyon kromatografisiyle ek olarak saflastirilmislardir ve bu islem, serbest biyotin-PEO-maleimidi ve ThioFab”larin oligomerik fraksiyonunuelimine etmistir.KUTLE SPEKTROSKOPISI ANALIZIBiyotiii konuge edilmis Fabîn hassas molekül agirligi tayini için, sivi kromatografisi elektrosprey iyonizasyon kütle spektrometrik (LC-ESI- MS) analizi yapildi (Cole, R.B. Electro Spray lonization Mass87Spectrometry: Fundamentals, Instruinentation And Applications. (1997) Wiley, New York). Biyotinlenmis hu4D5FabV8 (A121C) peptidinin amino asit sekansi, triptik sindirim ve ardindan, LC-ESI-Tandem MS analiziyle (Tablo 4, Örnek 3b).Antikor Fab fragmani hu4D5FabV8, 10 Cys artigi (hafifi zincirde bes, agir zincirde bes) dahil yaklasik 445 amino asit artigi içerir. Hümanize 4D5 degisken fragmaninin (FV4D5) yüksek rezolüsyonlu yapisi belirlenmistir; bakiniz: Eigenbrot ve ark "X-Ray Structures Of The Anti gen-Binding Domains Froin Three Variants Of Humanized Anti- P185her2 Antibody 4D5 And Comparison With Molecular Modeling" (1993) .1 M0] Biol. 229:969-995). Cys artiklarinin hepsi disülfûr baglari forinunda mevcuttur; bundan dolayi, bu artiklar, (bir indirgeyici ajanla isleme tâbi tutulmadigi sürece) ilaç-maleimidle konjuge olacak herhangi bir reaktif tiyol grubu içermez. Bu sebeple, yeni tasarlanan Cys artigi eslestirilmemis olarak kalabilir ve bir ilaç- maleimid gibi bir elektrofilik baglayici reaktifiyle veya ilaç-baglayici ara ürünüyle reaksiyona girebilir, yani ona konjuge olabilir. Sekil 1A, X-isini kristal koordinatlariyla türetilen hu4D5 F abv7 antikor fragmani üç boyutlu temsilini göstermektedir. Agir ve hafif zincirlerin degistirilmis Cys artiklarinin yapi pozisyonlari bir sirali numaralandirma sistemine göre numaralandirilir. Bu sirali numaralandirma sistemi, Kabat numaralandirma sisteminden (üst sira) a, b, c olarak belirtilen insersiyonlarla farklilasan ve N-terminalinden baslayan sirali numaralandirma semasini (üst sira) gösteren Sekil lB'ye göre, trastuzumabin 4d5v7fabH varyanti için Kabat nuinaralandirma sistemiyle baglantilidir (Kabat ve ark., (1991)Sequences of Proteins of lmmunological Interest, 5th Ed. Public88Health Service, National lnstitutes of Health, Bethesda, MD). Kabat numaralandirma sisteminin kullanimiyla, gerçek lineer amino asit sekansi, degisken domainin bir FR veya CDR”sinin kisaltmasina veya ona yapilan insersiyona karsilik gelen daha az ve ilave amino asit içerebilir. Sistein degistirilmis, asagida gösterilen agir zincir varyantbölgeleri sirali numaralandirma ve Kabat numaralandirma semalariyla tanimlanir. 4D5Fab Agir zincir Sirali Kabat varyantlari Numaralandirma Numaralandirmasi A40C Ala-40 Ala-40 A88C Ala-88 Ala-84 Sll9C Ser-119 Ser-112 SlZOC Ser-120 Ser-1 13 A121C Ala-121 Ala-114 S 1 22C Ser-122 Ser-115 A175C Ala-175 Ala-168 Ml3 fajinid-Cys mutant Fab°lari (Sekil 3A ve Sekil 3B), Fab proteinlerine kiyasla hizla taranabilir. Antijene ve streptavidine fajmid-ThioFab baglanmasi, Ornek 2°de tarif edildigi ve Sekil 8°de gösterildigi gibi, sirasiyla HER2 ve streptavidin ELISA plakalari üzerine kaplanarak ve ardindan, anti-Fab-HRP°yle (bayirturbu peroksidazi) problanarak test edilebilir. Bu yöntem, degistirilmis Cys artigi/konjuge edilmis biyotin molekülünün antijen baglanmasi ve tiyol grubu reaktivitesi üzerindeki etkisinin eszainanli izlenmesineolanak saglamistir. Bu yöntem ayrica reaktif tiyol gruplarini M13 faj89üzerinde görüntülenen herhangi bir protein açisindan taramak için de uygulanabilir. Konjuge edilmis ya da edilmemis fajinid-ThioFab”lar, basit PEG çökeltme yöntemiyle saflastirilir.Hümanize 4D5°in (hu4D5Fab) antijen-baglanma fragmani, E. Coli°de iyi eksprese edilir ve bakteriyofaj üzerinde görüntülenmistir (Garrard ve ark (1993) Gene 128:103-109). Antikor Fab fragmani hu4D5FabV8, tiyol reaktivitesini problamak için ELISA bazli eseyde bir model sistem olarak Ml3 faj üzerinde görüntülendi. Sekil 8, biyotinleninis ThioFab fajinin ve bir anti-faj HRP antikorunun HER2”ye (üst) ve Streptavidine (alt) baglanmasini gösteren bir PHESELECTOR Eseyi grafiksel temsilini göstermektedir. Kristal yapisi bilgilerinden, baslangiçta, antijen baglanma yüzeyinden uzak bes amino asitli artiklar (L-Ala43, H-A1a40, H-Serl 19, H-AlalZl ve H-Ser122) seçildi (Eigenbrot ve ark (1993) J Mol Biol. 2291969-995).
Protein Veritabani X-isini kristal yapisi, lFVC olarak atandi. Cys artiklari, bu pozisyonlarda yere yönlendirilmis mutajenezle degistirildi. ThioFab-faj preparatlari izoel edildi ve biyotinilasyonreaktifiyle reaksiyona sokuldu.Biyotin kon juge edilmis ve edilmemis varyantlar, bir HRP (bayirturbu peroksidazi)-k0njuge anti-faj antikoruyla bir ELISA bazli PHESELECTOR eseyi (Sekil 8, Örnek 2) yapilarak HERZ ve streptavidin baglanmasi açisindan test edildi. Biyotinlenmemis faj- hu4D5FabV8 (Sekil 2A) ve biyotinlenmis faj-hu4D5Fabv85in (Sekil 2B) BSA°yla (içi bos kutu), HER2”yle (gri kutu) ya da streptavidinle (içi dolu kutu) etkilesimi, bir standart HRP reaksiyonu gelistirilerek ve 450 nm'de absorbans ölçülerek anti-Ml3-bayirturbu peroksidaz90(HRP) antikoru yoluyla izlendi. Bir koloriinetrik sübstrat döngüsüyle üretilen absorbans 450 nm°de ölçüldü. ThioFab°in HER2”yle reaktivitesi, antijen baglanmasini ölçer. ThioFab7m streptavidinle reaktivitesi, biyotinilasyon düzeyini ölçer. ThioFab°in BSA”yla reaktivitesi, spesifik olmayan etkilesim için bir negatif kontroldür.
Sekil 2A'da görüldügü gibi, ThioFab-faj varyantlarinin hepsinin HERTye baglanma özellikleri, yabani tip hu4D5Fabv8-faj1nkine benzerdir. Ek olarak, biyotinle konjugasyon, ThioFab°in HER2'ye baglanmasina müdahale etmemistir (Sekil 2B).Sasirtici ve beklenmedik bir biçimde, ThioFab-faj numuneleri, degisen seviyelerde streptavidin baglama aktivitesi gösterdiler. Test edilen faj-ThioFab°larin hepsi arasindan, A121C sistein degistirilmis antikor maksimum tiyol reaktivitesi gösterdi. Yabani tip hu4D5Fabv8- faj ayni miktarlarda biyotin-maleimidle inkübe edilmesine ragmen, bu fajin streptavidin baglama aktivitesi düsüktü; bu bulgu, hu4D5Fabv8 ve M13 faj kilif proteinlerinden elde edilen öiiceden mevcut sistein artiklarinin (disülfür bagi olusumunda rol oynar), biyotin-maleimidin yere-özgü konjugasyonuna müdahale etinedigine isaret eder. Bu sonuçlar, Fab yüzeyi reaktif tiyol gruplarini taraiiiak için faj ELISAeseyinin basarili bir biçimde kullanilabilecegini gösterir.PHESELECTOR eseyi, antikorlarda reaktif tiyol gruplarinin tespitine izin verir. Bu yöntemle A121C varyantinin tanimlanmasi, buna örnek olarak gösterilebilir. Reaktif tiyol gruplarina sahip daha fazla ThioFab varyanti tanimlamak için tam Fab molekülü etkin olarak taranabilir. Çözücünün bir polipeptiddeki amino asit artiklarina erisebilirligini tanimlamak ve miktarini tayin etmek için fraksiyonel yüzeyerisilebilirligi parametresi kullanilmistir. Yüzey erisilebilirligi, bir91çözücü molekülüyle (örnegin, su) temas ettirilebilecek yüzey alani (ÄZ) olarak ifade edilebilir. Isgal edilen su alani yaklasik 1,4 IA yariçapli bir küre olarak bulunur. Yazilim bir proteinin her bir amino asidinin yüzey erisilebilirligini bilinen x isini kristalografisi türeVli koordinatlarla hesaplainak için algoritinalar kullanan CCP4 Suite kristalografi programlari ("The CCP4 Suite: Programs for Protein Crystallography" (1994) Acta. Cryst. D50r760-763) olarak ücretsiz olarak temin edilebilir veya lisanslanabilir (“Secretary to CCP4, Daresbury Laboratory, Warrington, WA4 4AD, United Kingdom, Fax: (+44) 1925 603 825 ” veya “intemetz WWW.ccp4.ac.uk/dist/html/INDEX.html”). Yüzey erisilebilirlik hesaplamalarini gerçeklestiren iki örnek yazilim modülü, “B.Lee and F.M.Richards (1971) J.Mol.Biol. 55:379-400” referaiisinda açiklanan algoritinalari esas alan “AREAIMOL” ve “SURFACE”dir.
AREAIMOL, bir prob küresinin (bir çözücü molekülünü temsil eder) merkezinin yeri olarak bir proteinin çözücü erisebilir yüzeyini, proteinin Van der Waals yüzeyi üzerinde yuvarlanirken tanimlar.
AREAIMOL, her bir atom çevresinde (atomun merkezinden, atoin ve prob yariçaplarinin toplamina esit belirli bir mesafede) uzatilmis bir küre üzerinde yüzey noktalari olusturarak ve komsu atomlarla baglantili esdeger küreler içinde bulunanlari elimine ederek çözücü erisebilir yüzeyi alanini hesaplar. AREAIMOL bir PDB koordinat dosyasindaki atoinlarin solvent erisebilir alaniiii bulur ve erisim alanini artiga göre, zincire göre ve tam molekül için özetler. Münferit atomlar için erisilebilir alanlar (veya alan farklari) bir sözde PDB çikti dosyasina yazilabilir. AREAIMOL her bir eleman için tek bir yariçap kabul eder ve sadece sinirli sayida farkli eleman tanimlar. Bilinmeyenatoin tipleri (yani, AREAIMOL'ün dahili veritabaninda olmayanlar)92için 1,8 A varsayilan yariçap atanacaktir. Tanimlanan atomlarin listesiasagida verilmektedir:Atom Atomik no. Van der Waals yariçapi (Ã) C 6 1,80 N 7 1,65 0 8 1,60 Mg 12 1,60 s 16 1,85 P 15 1,90 C1 17 1,80 C0 27 1,80AREAIMOL ve SURFACE, mutlak erisilebilirlikleri, yani kare Angstroms (A) sayisini rapor eder. Fraksiyonel yüzey erisilebilirligi, bir polipeptid içindeki bir amino asit için ilgili bir standart duruma atifta bulunularak hesaplanir. Referans durum, Gly-X-Gly tripeptididir; burada, X simgesi, ilgili amino asittir ve referans durum, beta iplikçiklerindekiler gibi bir “uzatilmis” konformasyon olmalidir.
Uzatilmis konformasyon X”in erisilebilirligini azami düzeye çikarir.
Bir hesaplanmis erisilebilir alan bir Gly-X-Gly tripeptid referans durumundaki erisilebilir alanla bölünür ve fraksiyonel erisilebilirlik olan bölümü rapor eder. Yüzde erisilebilirlik, fraksiyonel erisilebilirlikçarpi `100Sdür.Yüzey erisilebilirligini hesaplamak için bir baska 'Örnek algoritma,polipeptidin X isini koordinatlari temelinde bir amino asit artiginin bir 93su küresine fraksiyonel erisebilirligini hesaplayan xsae programininSOLV modülüne dayanir (Broger, C., F. Hoffman-LaRoche. Basel).hu4D5FabV7”deki her amino asit için fraksiyonel yüzey erisilebilirligi, kristal yapisi bilgisi kullanilarak hesaplanabilir (Eigenbrot ve ark. (1993) J Mol Biol. 2292969-995). hu4D5FabV7 hafif zincir ve agirzincir amino asitleri için fraksiyonel yüzey erisilebilirlik degerleri, Tablo 1”de azalan sirayla gösterilmektedir.Tablo 1 .hu4D5FabV7-hafif zinciriSER A 202 frac acc= 101,236 ASP A 151 frac ace: 41,586 GLY A 41 frac ace: 90,775 SER A 12 frac ace: 40,633 GLY A 157 frac ace: 88,186 ASN A 210 frac ace: 40,158 ASP A1 frac ace: 87,743 SER A 63 frac ace: 39,872 SER A 156 frac ace: 83,742 ARG A 66 frac ace: 39,669 GLY A 57 frac ace: 81,611 PRO A 8 frac ace: 39,297 SER A 168 f rac ace: 79,680 SER A 65 frac acc= 39,219 SER A 56 frac ace: 79,181 SER A77 frac ace: 38,820 LYS A 169 frac ace: 77,591 THR A 180 frac acc= 38,296 SER A 60 frac ace: 75,291 ASP A 185 frac ace: 38,234 THR A 109 frac ace: 74,603 THR A 31 frac ace: 38,106 CYS A 214 frac ace: 72,021 THR A 94 frac ace: 37,452 LYS A 126 frac ace: 71,002 THR A 93 frac acc= 37,213 SER A 67 frac ace: 66,694 THR A 197 frac ace: 36,709 hu4D5FabV7-hafif zinciriARG A 18 frac ace: 66,126ASN SER LYS LYS GLN GLU GLN LYSARG A 24PHB SER GLN ALA SER LYS GLY LYS PRO GLU ALAVALA 152 frac A 127 frac A 190 frac A 145 frac A 199 frac A 143 frac A 3 frac A 188 frac frac A 53 frac A 9 frac A 27 frac A 153 frac A 203 frac A 42 frac A 16 frac A 45 frac A 204 frac A 213 frac A 184 fracA 15 fracacc= 65,415 ace: 65,345 2100: 65,189 acc= 63,342 acc= 62,470 ace: 61,681 ace: 59,976 acc= 59,680 ace: 59,458 acc= 58,705 acc= 58,446 ace: 57,247 ace: 56,538 ace: 55,864 ace: 54,730 ace: 54,612 ace: 54,464 ace: 53,172 ace: 53,084 ace: 52,556ace: 52,460SER A 182 f rac ace:GLY A 128 fracLYS A 207 fracASPA 17 fracGLY A 200 fracGLU A 165 fracALA A 112 fracGLN A 79 fracVAL A 191 fracSER A 208 fracLYS A 39 fracGLU A 123 fracTHR A 69 fracSER A 76 fracHISA 189 fracARG A 108 fracASN A 158 fracVAL A 205 fracSER A 14 fracGLN A 155 fracGLU A 187 fracARG A 211 fracacc=acc=::ICC=acc=ace:ace:ace:acc=ace:acc=ace:acc:ace:acc=acc=acc:acc=ace:ace:acc:acc=36,424 ,779 ,638 ,413 ,274 ,067 34,912 34,601 33,935 33,525 33,446 32,486 32,276 32,108 31,984 31,915 31,447 31,305 31,094 ,630 ,328 ,027 hu4D5FabV7-hafif zinciriSER LEU GLN SER THR THR ASP GLY THR ASP PRO SER SER TYR LYS GLU VAL GLU PRO ASN GLN SERA 7 frac A 154 frac A 100 frac A 10 frac A 5 frac A 206 frac A 28 frac A 68 frac A 20 frac A 122 frac A 80 frac A 52 frac A 26 frac A 92 frac A 107 frac A 161 frac A 110 frac A 81 frac A 59 frac A 30 frac A 160 fracA 114 fracace: 51,936 acc= 51,525 ace: 51,195 2100: 49,907 acc= 48,879 acc= 48,853 ace: 48,758 ace: 48,690 acc= 48,675 ace: 47,359 acc= 46,984 acc= 46,917 ace: 46,712 ace: 46,218 ace: 45,912 ace: 45,100 ace: 44,844 ace: 44,578 ace: 44,290 ace: 42,721 ace: 42,692ace: 42,374LYSASN ASPSERGLN THR ALA ARG LEU ASPTHR ALA VAL PRO ALA LYSLEU THR GLU THR THRASPA 183 frac A 138 frac A 170 frac A 159 frac A 147 frac A 22 frac A43 frac A 142 frac A 54 frac A 167 frac A 129 frac A 144 frac A 163 frac A 95 frac A 111 frac A 103 frac A 181 frac A 72 frac A 195 frac A 178 frac A 85 fracA 70 fracace: 29,751acc= 29,306acc= 29,041acc= 27,70527,485acc= ace: 27,121 ace: 26,801 ace: 26,447 acc= 25,882 ace: 25,785 2100: 23,880 ace: 23,652 acc: 22,261 ace: 20,607ace: 19,942acc= 18,647ace: 18,312acc= 18,226ace: 18,006ace: 17,499 300: 17,343acc= 17,194 hu4D5FabV7-hafif zinciriPRO PHE THRARG A 61TYR SER LYS GLU LEU GLY GLY PHE THR SER PRO PHE THR ALA HISVAL SERALAA 40 frac A 116 frac A 97 frac frac A 49 frac A 50 frac A 149 frac A 55 frac A 201 frac A 64 frac A 212 frac A 98 frac A 74 frac A 171 frac A 141 frac A 83 frac A 164 frac A 32 frac A 198 frac A 146 frac A 121 fracA 13 fracace: 41,928acc= 16,406ace: 16,2042100: 16,19216,076acc= acc= 15,74615,510ace: ace: 14,927 acc= 14,012 ace: 13,735 acc= 13,396 acc= 12,852ace: 12,169 ace: 11,536 acc= 11,073 ace: 10,871 ace: 10,325 ace: 9,971 ace: 9,958 ace: 9,861 ace: 9,833ace: 9,61596LEU LEU PRO LEU ALA PHEPHEALA VAL ASPLEU GLNMETA4SER S ER LEU PHE TRP PHE TYR LEUVALA 11 frac A 125 frac A 96 frac A 47 frac A 51 frac A 118 frac A 62 frac A 25 frac A 133 frac A 82 frac A 179 frac A 124 frac frac A 177 frac A 131 frac A 135 frac A 71 frac A 35 frac A 209 frac A 186 frac A 78 fracA 196 fracace:acc=acc=::ICC=acc=ace:ace:ace:acc=ace:acc=ace:acc:ace:acc=acc=acc:acc=ace:ace:acc:acc=16,568 2,398 2,387 2,180 1,837 1,779 1,581 1,538 1,315 1,141 0,872 0,787 0,778 0,693 0,693 0,654 0,593 0,448 0,395 0,259 0,157 0,000 hu4D5FabV7-hafif zinciriGLU A 105 frac ace: 9,416SER ILE HIS ALA GLN VAL PRO GLN PRO GLY TYR VAL TYR SER ILE ASN TRP GLY PRO LEUVALA 162 frac A 117 frac A 91 frac A 193 frac A 37 frac A 58 frac A 120 frac A 38 frac A 113 frac A 101 frac A 140 frac A 115 frac A 87 frac A 5176 frac A 2 frac A 137 frac A 148 frac A 99 frac A 44 frac A 175 fracA 19 fracacc= 9,304 ace: 8,780 2100: 8,557 acc= 8,547 acc= 8,442 ace: 8,281 ace: 8,095 acc= 6,643 ace: 6,594 acc= 6,558 acc= 5,894 ace: 5,712 ace: 4,539 acc= 4,106 ace: 4,080 ace: 3,906 ace: 3,676 ace: 3,550 ace: 3,543 ace: 3,488ace: 3,420VAL VAL VAL VAL TYR TYR TYR THR SER PHE LEU LEU ILE ILE ILE GLN GLN CYS CYS CYS CYS ALAA 132 frac A 104 frac A 33 frac A 29 frac A 192 frac A 86 frac A 36 frac A 102 frac A 174 frac A 139 frac A 136 frac A 73 frac A 75 frac A 48 frac A 21 frac A 90 frac A 89 frac A 194 frac A 134 frac A 88 frac A 23 fracA 130 fracace:acc=acc=::ICC=acc=ace:ace:ace:acc=ace:acc=ace:acc:ace:acc=acc=acc:acc=acc=ace:acc:acc=0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 hu4D5FabV7-hafif zinciriILE A 106 frac PRO A 119 frac LEU A 46 frac GLN A 6 frac TYR A 173 frac VAL A 150 frac GLN A 166 fracTHR A 172 fracace: 3,337 acc= 2,953 ace: 2,887 2100: 2,860 acc= 2,825 acc= 2,525 ace: 2,525ace: 2,436hu4D5Fabv7-agir zinciriSER B 179 frac GLY B 42 frac GLUB 1 fracGLY B 66 frac ASP B 102 frac SER B 75 frac GLY B 140 frac ASN B 211 frac GLY B 197 frac ASP B 62 frac GLY B 103 frac SER B 163 fracSER B 139 fracacc= 99,479acc= 95,850 3.00: 87,276ace: 84,541ace: 83,794acc= 80,567ace: 80,344acc: 79,588ace: 78,676ace: 77,716ace: 77,176ace: 76,664ace: 74,94698ALA A 84 frac ace:ALA A 34 frac acc=PRO THR THR LEU GLY S ER THR PRO LYS LYS ALA GLU SERB 14 frac B 54 frac B 200 frac B `177 frac B 8 frac B 7 frac B 69 frac B 220 frac B 208 frac B 30 frac B 23 frac B 46 fracB 25 fracace:acc=ace:acc:acc=acc=acc=acc:acc=ace:ace:acc:ace:0,0000,00045,729 45,503 45,369 45,337 44,898 43,530 43,503 43,378 43,138 42,380 41,952 41,43041,323 hu4D5FabV7-agir zinciriLYS B 213 frac ace:ALA THR SER SER PRO THR SER LYS GLY THR ASP GLY SER SER LYS GLY SER TYR GLU SERLYSB 165 frac B 167 frac B 122 frac B 194 frac B 41 frac B 198 frac B 222 frac B 43 frac B 26 frac B 138 frac B 31 frac B '15 frac B 168 frac B '120 frac B 76 frac B 141 frac B 137 frac B 57 frac B 89 frac B 180 fracB 65 fracace:ace:.'CICC=acc=ace:ace:ace:ace:acc=acc='clCC=ace:acc=acc=ace:acc:acc=acc:ace:ace:ace:74,442 74,339 73,934 72,870 71,959 71,540 68,668 68,128 67,782 67,782 65,826 64,222 64,172 62,100 61,332 61,092 59,419 59,179 58,916 58,483 56,289 55,04499ARG LYSASN GLN THR SERGLY GLY THR PRO GLY TYR LYSGLY GLY THR GLY VAL ALA SERGLY SERB 87 frac B 124 fracB 28 fracB 3 fracB 123 fracB 63 frac B 56 frac B 169 fracB 172 fracB 209 fracB 101 fracB 109 fracB 221 fracB 44 fracB `181 fracB 58 fracB 9 fraCB 5 fracB 121 fracB 127 fracB 10 fracB 71 fracace:acc=ace:acc=acc=ace:ace:ace:acc=ace:acc=ace:acc:acc=acc=acc=acc:acc=ace:ace:acc:ace:41,282 40,888 40,529 39,824 39,306 38,867 38,582 38,469 38,421 38,309 38,040 36,829 36,520 ,147 34,735 34,457 34,254 34,198 33,049 32,390 32,230 -659 100hu4D5FabV7-agir zinciriASP B 215 frac ace: 54,656 ASP B 73 frac ace: 30,245 GLN B 13 frac acc= 53,719 LEU B 115 frac acc= 29,867 GLN B 112 frac ace: 53,215 LEU B 11 frac ace: 29,825 TYR B 105 frac acc= 51,940 ASN B 84 frac acc= 29,765 ALA B 88 frac 2100: 51,602 SER B 210 frac acc= 28,656 GLY B 164 frac ace: 50,259 GLU B 155 frac ace: 28,162 PRO B 192 frac ace: 49,826 SER B 160 frac ace: 26,526 THR B 158 frac ace: 49,694 CYS B 223 frac ace: 26,270 THR B 142 frac acc= 48,896 GLY B 16 frac acc= 26,158 ASN B 55 frac acc= 48,344 ILE B 202 frac ace: 26,068 LYS B 136 frac acc= 48,312 GLN B 82 frac acc= 25,836 ARG B 19 frac 3.00: 48,082 SER B 193 frac ace: 25 ,550 PRO B '156 frac ace: 47,366 ASN B 77 frac acc: 25,418 PRO B 174 frac ace: 47,157 ARG B 59 frac acc= 25,301 LYS B 217 frac acc= 47,102 VAL B 93 frac ace: 25,254 GLN B 199 frac ace: 46,650 THR B 74 frac ace: 24,902 SER B 17 frac acc: 45,980 GLU B 219 frac acc: 24,778 SER B 85 frac ace: 45,824 ASN B 206 frac acc= 24,647 VAL B 170 frac ace: 24,549 PRO B 154 frac acc: 6,767TYR B 52 frac ace: 24,298 PRO B 133 frac ace: 6,767ALA B 175 frac ace: 23,804 TRP B 99 frac acc: 6,502LYS B 216 frac ace: 23,277 THR B 32 frac ace: 6,291 hu4D5FabV7-agir zinciriVAL B 214 frac ace: 23,150GLY ASN ALA ALA LEU THR LEU TYR THR VAL SERSERTHR AS PTHR SERLEU TYR TYR VAL PROB 125 frac B 162 frac B 72 frac B 40 frac B 18 frac B 212 frac B 182 frac B 33 frac B 190 frac B 176 frac B 21 frac B '119 frac B 91 frac B '151 frac B 114 frac B 134 frac B 196 frac B 60 frac B 183 frac B 2 fracB 130 fracace:ace:.'CICC=acc=ace:ace:ace:ace:acc=acc='clCC=ace:acc=acc=ace:acc:acc=acc:ace:ace:ace:22,802 22,245 22,166 21,974 ,273 ,170 19,619 19,398 19,365 18,941 18,929 18,877 18,237 17,849 17,601 17,571 17,090 16,575 ,968 ,90115,342101LEU VAL ILE SER PHE ARG TRP VAL ALA TYR GLU ALA ILE GLY LEU TYR LEU PHE VAL CYS TRP LEUB45 B 128 B 51 B 186 B 173 B 38 847 B 118 B 24 B 95 B 6B 144 B 70 B 111 B4B 201 B 148 B 68 B 188 B 22 B 161B 131frac frac frac frac frac frac frac frac frac frac frac frac frac frac frac frac fraC frac frac frac fracfracace:acc=ace:acc=acc=ace:ace:ace:acc=ace:acc=ace:acc:acc=acc=acc=acc:acc=ace:ace:acc:ace:4,649 4,515 4,307 4,084 3,969 3,734 3,561 3,409 3,376 3,242 3,216 3,167 1,958 1,868 1,808 1,758 1,744 1,708 1,315 0,935 0,876 0,654 102hu4D5FabV7-agir zinciriLEU B 166 frac ace: 15,268 VAL B 205 frac acc= 0,495 GLY B 100 frac acc= 15,003 ALA B 92 frac acc= 0,356 PHE B 27 frac ace: 14,383 ALA B 79 frac ace: 0,356 ASN B 204 frac acc= 13,873 VAL B 64 frac acc= 0,263 PHE B 104 frac 2100: 13,836 ILE B 29 frac acc= 0,227TYR B 80 frac ace: 13,490 VAL B 218 frac ace: 0,000 VAL B 159 frac ace: 12,782 VAL B 189 frac ace: 0,000 ARG B 67 frac ace: 12,362 VAL B 149 frac ace: 0,000 GLN B 178 frac acc= 12,131 VAL B 116 frac acc= 0,000 HIS B 171 frac acc= 11,412 VAL B 48 frac ace: 0,000 SER B 184 frac acc= 11,255 VAL B 37 frac acc= 0,000 ARG B 98 frac 3.00: 11,115 TYR B 152 frac ace: 0,000 PRO B 53 frac ace: `11,071 TYR B 94 frac acc: 0,000 GLN B 39 frac ace: 11,037 TRP B 36 frac acc= 0,000 SER B '195 frac acc= `10,909 SER B `187 frac acc= 0,000 ASP B 108 frac ace: 10,525 SER B 97 frac ace: 0,000 LEU B 185 frac acc: 10,464 MET B 107 frac acc: 0,000 GLY B 113 frac ace: 10,406 MET B 83 frac ace: 0,000 THR B 78 frac ace: 10,213 LEU B 145 frac acc: 0,000 THR B 117 frac ace: 9,990 LEU B 86 frac ace: 0,000 LYS B 150 frac ace: 9,447 LEU B 81 frac acc: 0,000 VAL B 157 frac ace: 9,323 LEU B 20 frac ace: 0,000103hu4D5FabV7-agir zinciriVAL TRP ALA SER PHE ARG ALA ALA VAL PRO PHEB 12 frac ace: 9,207 ILE B 34 frac acc= 0,000 B 110 frac acc= 9,069 HIS B 207 frac acc= 0,000 B 143 frac acc= 8,903 HIS B 35 frac acc= 0,000 B 135 frac acc= 8,897 GLY B 146 frac acc= 0,000 B 129 frac acc= 8,895 CYS B 203 frac ace: 0,000 B 50 frac acc= 8,639 CYS B 147 frac ace: 0,000 B 61 frac ace: 8,547 CYS B 96 frac ace: 0,000 B 132 frac ace: 7,882 ASP B 90 frac ace: 0,000 B 191 frac acc= 7,366 ALA B 106 frac ace: 0,000 B 126 frac acc= 7,258 ALA B 49 frac ace: 0,0000 B 153 frac acc= 6,918Cys artiklariyla ikame etmek için degistirilebilecek hu4D5FabV8artiklarini tanimlamak amaciyla asagida açiklanan iki kriteruygulandi:1. Tamamen yakilan, yani fraksiyonel yüzey erisilebilirligi %10”dan az olan amino asit artiklari elimine edildi. Tablo 1, erisilebilirligi (fraksiyonel yüzey erisilebilirligi) %10”un üzerinde olan 134 (hafif zincir) ve 151 (agir zincir) hu4D5FabV8 artigi oldugunu gösterir. En erisilebilir ilk 011 Ser, Ala ve Val artigi, yeni degistirilmis Cys tarafindan antikorda yalnizca minimal yapisal kisitlamalar ortaya çikarak, baskaamino asitlere kiyasla Cys°ye yakin yapisal benzerligi sayesinde104seçildi. Baska sistein ikamesi yerleri de taranabilir ve konjugasyon için kullanisli olabilir.2. Artiklar, fonksiyonel ve yapisal Fab etkilesiinleri oynadiklari rol baz alinarak ayrilirlar. Anti jen etkilesimlerinde rol oynainayan ve mevcut disülfur baglarindan uzak olan artiklar da seçildi. Yeiii degisitirilen Cys artiklari, antijen baglanmasindan uzak olmali ve ona müdahale etineinelidir ve dis'ulfur bagiolusumunda rol oynayan sisteinle eslesmemelidir.Asagida sayilan hu4D5FabV8 artiklari, yukarida açiklanan kriterleri karsiladi ve Cyssyle ikame edilmek üzere seçildi: L-V15,LA43, L- V110, L-Al44, L-SlöS, H-A88, H-AlZl, H-Sl22, H-Al75 ve H- 8179 (Sekil l”de gösterilmektedir).Tiyol reaktivitesi, herhangi bir antikora genellenebilir; burada, ainino asitlerin reaktif sistein ainino asitleriyle sübstitüsyonu, L-10 ilâ L-20; L-38 ilâ L-48; L-105 ilâ L-115; L-l39 ilâ L-l49; L-163 ilâ L-l73 arasiiidan seçilen hafif zincir araliklari dahilinde ve H-35 ilâ H-45; H- 83 ilâ H-93; H-l 14 ilâ l-I-127 ve H-l70 ilâ H-184 arasindan seçilen agir zincir araliklari dahilinde ve H-268 ilâ H-291; H-319 ilâ H-344; H-370 ilâ H-380 ve H-395 ilâ H-405 arasindan seçilen araliklarda Fc bölgesinde yapilabilir.Tiyol reaktivitesi, bir antikorun örnegin hafif zincir sabit domaini (CL) ve agir zincir sabit domaiiileri CHl, CH2 ve CH3 gibi belirli domaiiileriiie genellenebilir. 0,6 ya da daha yüksek tiyol reaktivitesi degerlerine yol açan sistein ikameleri, lgG alt-siniflari IgGl, IgGZ, lgG3, lgG4, lgA ve lgAZ de dahil lgA, lgD, IgE, lgG ve lgM intakt105antikorlarinin sirasiyla a, 5, 8, y ve u agir zincir sabit domainlerindeyapilabilir.Kristal yapisi verileri temelinde, seçilen 10 Cys mutantinin antijen birlesme yerinden, 'Örnegin bu durumda HER2°yle arayüzeyden uzak oldugu açiktir. Bu mutantlar, fonksiyonel etkilesimler üzerinde dolayli etkileri açisindan deneysel olarak test edilebilirler. Cys Fab varyantlarimn hepsinin tiyol reaktiviteleri, Ornek 1 ve 23de tarif edildigi gibi ve Tablo 2°de sunuldugu gibi ölçüldü ve hesaplandi. L- V15C, L-Vl 10C, H-A88C ve H-A121C artiklari, reaktif ve stabil tiyol gruplari (Sekil 3A ve 3B) içerir. V`15C, VllOC, Al44C, 5168C mutantlari, hafif zincir Cys varyantlaridir. A88C, A121C, Al75C, Sl79C mutantlari, agir zincir Cys varyantlaridir. Yüksek fraksiyonel yüzey erisilebilirligine sahip yerlerin, PHESELECTOR eseyiyle (Tablo 2) hesaplama yapildiginda, en yüksek tiyol reaktivitesine sahip olmamasi sasirtici ve beklenmedik bir durumdur. Baska bir deyisle, fraksiyonel yüzey erisilebilirligi (Tablo 1, 2), tiyol reaktivitesiyle (Tablo 2) bagintili degildi. Esasinda, %20 ile %80 araliginda orta yüzey erisilebilirligine sahip olan yerlerde (Sekil 4A, Tablo 1) ya da Ala ya da Val artiklari gibi kismen korumasiz yerlerde degistirilmis Cys artiklari, Ser artiklarinda sokulan Cys”ye kiyasla daha iyi tiyol reaktivitesi (yani, >0,6) (Sekil 3B, Tablo 2) gösterdi ve bunun sonucunda, tek basina kristal yapisi bilgileri bu yerleri seçmek için yeterli olmadigindan dolayi, tiyol reaktif yerlerin taramasindaPHESELECTOR eseyi kullanilmasi gerekti (Sekil ?B ve 4A).4D5 ThioFab Cys mutantlarinin amino asit artiklari için tiyol106reaktivitesi verileri Sekil 3A ve 3B°de gösterilmektedir: (3A) biyotinleninemis (kontrol) ve (3B) biyotinleninis faj-ThioFab°lar.
Antikor/Fab yüzeyi üzerindeki reaktif tiyol gruplari, PHESELECTOR esey analizleriyle, biyotinlenmemis faj-hu4D5Fabv8iin (3A) ve biyotinleninis faj-hu4D5Fabv8”in (3B) BSA°yla (içi bos kutu), HER2”yle (gri kutu) ya da streptavidinle (içi dolu kutu) etkilesimi açisindan tanimlandi. Esey, Ornek 2”de tarif edildigi gibi gerçeklestirildi. Hafif zincir varyantlari sol tarafta, agir zincir varyantlari ise sag taraftadir. Biyotinlenmeinis 4D5 ThioFab Cys mutantlarinin baglanmasi, beklendigi gibi düsüktür, fakat HER2°ye kuvvetli baglanma sürdürülür. Biyotinlenmis 4D5 ThioFab Cys mutantlarinin streptavidine ve HERTye baglanma orani, Tablo 2”de gösterilen tiyol reaktivitesi degerlerini vermektedir. 450 nm°de arkaplan absorbansi ya da biyotinleninis 4D5 ThioFab Cys mutantlarinin BSA°ya küçük miktarlarda spesifik olmayan protein baglanmasi da Sekil 3B7de açikça görülmektedir. Bir Cys artigiyla ikame edilen seçili amino asit artiklarinin Fraksiyonel Yüzey Erisilebilirligi degerleri Sekil 4A7da gösterilmektedir. Fraksiyonel yüzey erisilebilirligi, mevcut hu4D5Fabv7 yapisindan hesaplanmistir ve Tablo 1”de gösterilmektedir (Eigenbrot ve ark. (1993) J Mol Biol. 229z969-995). hu4D5Fabv7 ve hu4D5Fabv8 yapilarinin konforinasyonel parametreleri yüksek düzeyde tutarlidir ve hu4D5Fabv7”nin fraksiyonel yüzey erisilebilirligi ile hu4D5FabV8 sistein mutantlarinin tiyol reaktivitesi arasindaki bagintinin tayinine olanak saglar. Kismen korumasiz artiklarda (Ala ya da Val) sokulan faj ThioFab Cys artiklarinin ölçülen tiyol reaktivitesi, Ser artiklarinda sokulanlara kiyasla daha iyidir (Tablo 2). Tablo 2,de gösterilenThioFab Cys mutantlarindan, tiyo reaktivitesi degerleri ile fraksiyonel107yüzey erisilebilirligi arasinda herhangi bir baginti olmadigi ya da çokaz baginti oldugu görülebilir.Bir antikorun L-15, L-43, L-110, L-144, L-168, H-40, H-88, H-119, H-121, H-122, H-l75 ve H-l79 pozisyonlarindaki amino asitler genellikle serbest sistein amino asitleriyle mutasyona ugratilabilir (ikame edilebilir). Bu pozisyonlarin her bir tarafindan yaklasik 5 amino asit artigi dahilindeki araliklar, yani L-lO ilâ L-ZO; L-38 ilâ L- 48; L-105 ilâ L-115;L-139 ilâ L-l49; L-163 ilâ L-l73; H-35 ilâ H-45; H-83 ilâ H-93; H-114 ilâ H-127 ve H-170 ilâ H-184 ve yani sira, H- 268 ilâ H-291; H-319 ilâ H-344; H-370 ilâ H-38O ve H-395 ilâ H-405 arasindan seçilen FC bölgesindeki araliklar da serbest sistein asitleriyle ikame edilerek bu bulusa konu olan sistein degistirilmis antikorlarelde edilebilir.Tablo 2. Fa j-ThioFab”1ar1n tiyol reaktivitesi Faj-ThioFab Tiyol Fraksiyonel Yüzey yapisi Reaktivitesi Erisilebilirligi (%) (Tablo 1”den) hu4D5FabV8 -Wt 0,125 - L-V15C 0934 52,46 L-A43C 0,385 26,80 L-vi lOC 0,850 44,84 L-A144C 0,373 23,65 L-si68C 0,514 79,68 H-A4OC 0,450 21,97 H-A88C 0914 51,60 108 Faj-ThioFab Tiyol Fraksiyonel Yüzey yapisi Reaktivitesi Erisilebilirligi (%) (Tablo lsden) H-Sl 19C 0,680 18,88 H-A121C 0,925 33,05 H-SlZZC 0,720 72,87 H-Al75C 0,19 23,80 H-S 1 79C 0,446 99,48 L = hafif zincir, [-1 = agir zincir, A = alanin, S = serin, V = valin, C = sisteinTiyol reaktivitesi, streptavidin baglanmasi için OD450 nm degerinin HER2 (antikor) baglanmasi için OD450 nm degerine orani olarakölçülür (Ornek 2). 1 tiyol reaktivitesi degeri, sistein tiyolün tam biyotinilasyonunu gösterir. Hafif zincirden iki Cys varyanti (L-V15C ve L-VllOC) ve agir zincirden iki Cys varyanti (H-A88C ve H-A121C) seçilerek ilave analize tâbi tutuldu, çünkü bu varyantlar, en yüksek tiyol reaktivitesidegerini gösterdi (Tablo 2).Faj saflastirmadan farkli olarak, F ab hazirlama islemi, üretim ölçegine bagli olarak 2-3 gün gerektirebilir. Bu süre esnasinda, tiyol gruplari, oksidasyondan dolayi reaktivite kaybedebilir. hu4D5FabV8-faj üzerinde tiyol gruplarinin stabilitesini problamak için, j-thioFab”larin tiyol reaktivitesinin stabilitesi ölçüldü (Sekil 4B). ThioFab-faj saflastirma isleminden sonra, 1. günde, 2. günde ve 4. günde, numunelerin hepsi, biyotin-PEO-maleimidle konjuge edildi ve faj ELISA eseyiyle (PHESELECTOR) problanarak HER2 ve streptavidin baglanmasi test edildi. L-V15C, L-VllOC, H-A88C ve H-A121C,109baska ThioFab varyantlarina kiyasla anlamli ve Önemli miktarlardatiyol reaktivitesini koru ve sürdürûr (Sekil 4B).ETIKETLI SISTEIN DEGISTIRILMIS ANTIKORLARBu bulusa konu olan sistein degistirilmis antikorlar, bir reaktif sistein tiyol grubu yoluyla antikora kovalent olarak baglanabilen herhangi bir etiket moiyetesiyle konjuge edilebilir (Singh ve ark (2002) Anal.
Biochein. 304:147-15;Har10W E. and Lane, D. (1999) Using Antibodies: A Laboratory Manual, Cold Springs Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY; Lundblad R.L. (1991) Chemical Reagents for Protein Modification, 2. ed. CRC Press, Boca Raton, FL). Bagli etiket asagidaki fonksiyonlari yerine getirebilir: (i) belirlenebilir bir sinyal verme; (ii) bir ikinci etiketle etkilesime girerek birinci ya da ikinci etiketin sagladigi belirlenebilir sinyali modifiye etme, 'örnegin F RET (floresans rezonans enerji transferi) saglama; (iii) antijenle ya da ligandla etkilesimleri stabilize etme ya da baglanma afinitesini arttirma; (iv) yük, hidrofobisite, sekil ya da baska fiziksel parainetrelerle mobiliteyi, örnegin elektroforetik inobiliteyi ya da hücre geçirgenligini etkileme ya da (v) ligand afinitesi, antikor/antijen baglanmasi ya da iyonik kompleks olusturmayi modüle etmek için biryakalama inoiyetesi sunma.Etiketli sistein degistirilmis antikorlar diyagnostik eseylerde, örnegin söz konusu bir anti jenin spesifik hücreler, dokular veya serum içinde ekspresyonunun tespiti için yararli olabilir. Diyagnostik uygulamalar için, antikor tipik olarak bir tespit edilebilir inoiyeteyle etiketlenir.Genel olarak asagidaki kategorilerde gruplandirilabilen çok sayida110etiket mevcuttur:(a) 3H, ”C, ”C, 181:, 32P, 358, 64Cu, 68Ga, 86Y, 99Tc, '”In, 1231, [241, '251, 13'I, 133Xe, 177Lu, 2"At veya 2i3Bi gibi radyoizotoplar (radyonüklidler). Radyoizotop etiketli antikorlar, reseptör hedefli görüntüleme deneylerinde yararlidir. Antikor, bir radyoizotop metali baglayan, selatlayan veya baska herhangi bir sekilde kompleks yapan ve “Current Protocols in Immunology, Ciltler 1 and 2, Coligen ve ark, Ed. Wiley-Interscience, NeW York, NY, Pubs. (1991)”de tarif edilen teknikler kullanilarak antikorun degistirilmis sistein tiyoliyle reaktif olan ligand reaktifleriyle etiketlenebilir. Bir metal iyonunu kompleks yapabilecek selatlaina ligandlari arasinda DOTA, DOTP, DOTMA, DTPA ve TETA bulunur (Macrocyclics, Dallas, TX).
Radyonüklidler, bu bulusa konu olan antikor-ilaç kon jugatlariyla kompleksasyon vasitasiyla hedef alinabilir (Wu ve ark (2005) Nature Biotechnology 23(9): 1137-1146).
Deneylerde görüntüleme yapmak için antikor etiketleri olarak kullanmaya uygun metal-selat kompleksleri asagida atif yapilan referanslarda açiklanmaktadir: US 5342606; US 5428155;US 5316757; US 5480990; US 5462725; US 5428139; US 5385893;US 5739294; US 5750660; US 5834456; Hnatowich ve ark (1983) J. Immunol. Methods 65:147-157; Meares ve ark (1984) Anal. Biochem. 142:68-78;Mirzadeh ve ark (1990) Bioconjugate Chem.l:59-65;Meares ve ark (1990) J.
Cancerl990, Suppl. 10:21-26; Izard ve ark (1992) Bioconjugate Chein. 3:346-350;Nikula ve ark (1995) Nucl. Med. Biol. 22:387-90; Camera ve ark (1993) Nucl. Med. Biol. 202955-11162; Kukis ve ark (1998) J. NucL Med. 39:2105-2110; Verel ve ark (2003) J. Nucl. Med. 44:1663-1670; Camera ve ark (1994) J. Nucl. Med. 21:640-646; Ruegg ve ark (1990) Cancer Res. 50:4221-4226;Vere1 ve ark (2003) J. Nucl. Med. 4421663- 1670; Lee ve ark (2001) Cancer Res. 61:4474-4482; Mitchell, ve ark (2003) J. Nucl. Med. 44:1105-1112; Kobayashi ve ark (1999) Bioconjugate Chem. 10:103-111; Miederer ve ark (2004) J. Nucl. Med. 45:129-137; DeNardo ve ark(l998) Clinical Cancer Research 4:2483-90; Blend ve ark (2003) Cancer Biotherapy & Radiopharmaceuticals 18:355-363; Nikula ve ark (1999) J. Nucl. Med. 40:166-76;K0bayashi ve ark (1998) J. NucL Med. 39:829-36; Mardirossian ve ark (1993) Nucl. Med. Biol. 20:65-74;Rose11i ve ark (1999) Cancer Biotherapy & Radiopharmaceuticals, 14:209-20.(b) Nadir toprak selatlari (evropyum selatlari) gibi floresan etiketler, FITC, 5-karboksifloresein, 6-karboksi floresein dahil floresein tipleri; TAMRA dahil rodamin tipleri; dansil; Lizamin; siyaninler; fikoeritrinler; Texas Kirmizisi ve buiilariii analoglari.
Floresan etiketler örnegin yukaridaki Güncel Immünoloji Protokollerinde açiklanan teknikler kullanilarak antikorlara kon juge edilebilir. Floresan boyalar ve floresan etiket reaktifleri arasinda Invitrogen/Molecular Probes (Eugene, OR) ve Pierce Biotechnology, Inc. (Rockford, IL),den temin edilebilenler yer alir.(0) Çesitli enzim-substrat etiketleri mevcuttur ve açiklanmaktadir (US 4275149). Enzim, genelde, bir kromojenik sübstratin çesitli teknikler kullanilarak ölçülebilen kimyasaldegisimini katalize eder. Örnegin, enzim, bir sübstratin112spektrofotometrik olarak ölçülebilen renk degisimini katalize edebilir. Alternatif olarak, enzim, sübstratin floresansini veya kemiluminesansini degistirebilir. Floresanstaki bir degisimin miktarini tayin etmek için teknikler yukarida tarif edilmistir.
Kemiluminesans sübstrati bir kimyasal reaksiyonla elektronik olarak uyarilir ve daha sonra, ölçülebilen (ömegin bir kemiluminometre kullanilarak) isik yayabilir veya bir floresan aliciya enerji verebilir. Enzimatik etiketlerin 'örnekleri arasinda lusiferazlar (örnegin, ates böcegi lusiferazi ve bakteriyel lusiferaz; US 4737456), lusiferin, 2,3-dihidrofitalazindionlar, malat dehidrojenaz, üreaz, peroksidaz, örnegin, bayirturbu peroksidazi (HRP), alkaliii fosfataz (AP), ß-galaktosidaz, glukoamilaz, lizozim, sakkarid oksidazlar (örnegin, glukoz oksidaz, galaktoz oksidaz ve glukoz-Ö-fosfat dehidrojenaz), heterosiklik oksidazlar (örnegin, ürikaz ve ksaiitin oksidaz), laktoperoksidaz, mikroperoksidaz ve benzeri bulunur. Enzimleri antikorlara konjuge etme teknikleri “O”Sullivan ve ark (1981) “Methods for the Preparation of Enzyme-Antibody Con jugates for use in Enzyme Immunoassay”, in Methods in Enzym. (ed J.
Langone & H. Van Vunakis), Academic Press, New York, 73:147-166” referajinda tarif edilmistir.Enzim-sübstrat kombinasyonlarinin örnekleri arasinda `Örnegin sunlarbulunur:(i) Bir sübstrat olarak hidrojen peroksidazli bayirturbuperoksidazi (HRP); burada, hidrojen peroksidaz bir boya113prekursorunu (örnegin, ortofenilen diamin (OPD) veya 3,3,,5,5s-tetrametilbenzidin hidroklor'ûr (TMB)) okside eder.(ii) Kromojenik sübstrat olarak para-nitrofenil fosfatli alkalin fosfataz (AP) ve(iii) bir kromojenik sübstratli (ömegin, p-nitrofenil-ß-D- galaktosidaz) veya florojenik sübstratli (4-metilumbeliferil-B-D-galaktosidaz) ß-D-galaktosidaz (ß-D-Gal).Sektördeki uzmanlarca çok sayida baska enzim-sübstrat kombinasyonu bilinmektedir. Genel bir inceleine olarak, bkz. US4275149 ve US 4318980.Bir etiket bir sistein degistirilmis antikorla dolayli olarak konjuge edilebilir. Örnegin, antikor, biyotinle konjuge edilebilir ve yukarida sözü edilen üç genis etiket kategorisinden herhangi biri avidinle veya streptavidinle veya tersine konjuge edilebilir. Biyotin selektif olarak streptavidine baglanir ve dolayisiyla, etiket, bu dolayli yöntemle antikorla konjuge edilebilir. Alternatif olarak, etiketin polipeptid varyantiyla dolayli konjugasyonunu elde etmek için, polipeptid varyanti küçük bir haptenle (örnegin, digoksin) konjuge edilir ve yukarida sözü edilen farkli tipte etiketlerden biri bir anti-hapten polipeptid varyantiyla (Örnegin, anti-digoksin antikoru) konjuge edilebilir. Dolayisiyla, etiketin polipeptid varyantiyla dolayli konjugasyonu elde edilebilir (Hermanson, G. (1996) in BioconjugateTechniques Academic Press, San Diego).Bu bulusa konu olan polipeptid varyanti, ELISA, kompetitif baglanma114eseyleri, dogrudan ve dolayli sandviç eseyleri, iinmünopresipitasyon eseyleri gibi herhangi bir bilinen esey yönteminde kullanilabilir (Zola, (1987) Monoclonal Antibodies: A Manual of Techniques, sayfa 147- 158, CRC Press, Inc.).Bir baglama veya tanimlama olayini lokalize etmek, görüntülemek ve miktarini tayin etmek için bir belirleme etiketi yararli olabilir. Bu bulusa konu olan etiketli antikorlar hücre yüzeyi reseptörünü teSpit edebilir. Belirlenebilir sekilde etiketlenmis antikorlar için bir diger kullanim alani da, bir boncugun bir floresan etiketli antikorla kon juge edilmesini ve bir ligandin baglanmasiyla bir floresans sinyalin tespitini içeren boncuk esasli bir immüno-yakalama yöntemidir.
Benzer baglanma belirleme metodolojileri, antikor-antijen etkilesimlerini Ölçmek ve tespit etmek için yüzey plazinon rezonansi(SPR) etkisinden yararlanir.Floresan boyalar ve keiniluminesan boyalar gibi belirleme etiketleri (Briggs ve ark (1997) “Synthesis of Functionalised Fluorescent Dyes and Their Coupling to Amines and Amino Acids,, J. Chem. Soc..
Perkin-Trans. 1:1051-1058) belirlenebilir bir sinyal temin eder ve genelde antikorlari etiketlemek için kullanilir ve tercihen asagidaki özelliklere sahiptir: (i) küçük miktarlarda antikorlarin hem hücresiz, hem de hücre esasli testlerde hassas sekilde tespit edilebilmesi için, etiketli antikor düsük arkaplanla çok yüksek bir sinyal üretmelidir ve (ii) floresan sinyalin 'Önemli bir foto beyazlatma olmadan gözlenebilmesi, izlenebilmesi ve kaydedilebilmesi için etiketli antikor fosfatlanabilir olmalidir. Etiketli antikorun inembranlara veya hücreyüzeylerine, 'ozellikle canli hücrelerin hücre yüzeyi baglaninasini115içeren uygulamalar için, etiketler tercihen (iii) etkin konjugat konsantrasyonu ve belirleine hassasiyeti elde etmek için iyi suda çözünürlüge sahiptir ve (iv) hücrelerin normal metabolik proseslerini bozmamasi veya prematüre hücre ölümüne sebep olmamasi için canlihücreler için non-toksiktir.Selüler floresans yogunlugunun dogrudan tayini ve floresan etiketli olaylarin, `Örnegin, peptid-boya konjugatlarinin hücre yüzeyine baglanmasinin sayimi, canli hücrelerle veya boncuklarla yapilan non- radyoaktif karistir-oku eseylerinin otoinasyonunu saglayan bir sistem (FMAT® 8100 HTS Sistemi, Applied Biosystems, Foster City, Calif.) üzerinde yürütülebilir (Miraglia, “Homogeneous cell- and head-based assays for high throughput screening using fluorometric microvolume assay technology”, (1999) J. of Bioinolecular Screening 4:193-204).
Etiketli antikorlarin kullanim alanlari arasinda, hücre yüzeyi reseptörü baglama eseyleri, immüno-yakalama eseyleri, floresans bagli immünosorbent eseyleri (FLISA), kaSpaz-klevaji (Zheng, “CaSpase-3 controls both cytoplasmic and nuclear events associated With Fas- mediated apoptosis in ViV0°, (1998) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 95:618-23; US 6372907), apoptoz (Vermes, “A novel assay for apoptosis. Flow cytometric detection of phosphatidylserine expression on early apoptotic cells using fluorescein labelled Annexin V" (1995) J. Immunol. Methods 184r39-51) ve sitotoksisite eseyleri bulunur.
Hücre yüzeyine hedeflenen bir molekülle yukari veya asagi regülasyonu tanimlamak için florometrik mikro-hacim eseyi teknolojisi kullanilabilir (Swartzman, 'A homogeneous and multiplexed immunoassay for high-throughput screening usingfluorometric microvolume assay technology', (1999) Anal. Biochem.116271:]43-51).Bu bulusa konusu etiketli sistein degistirilmis antikorlar, asagida sayilanlar gibi çesitli farkli biyomedikal ve moleküler görüntüleme yöntemleri ve tekniklerinde görüntüleme biyomarkerleri ve problari olarak yararlidir: (i) MRI (manyetik rezonans görüntüleme); (ii) MicroCT (bilgisayarli tomografi); (iii) SPECT (tek foton emisyonlu bilgisayarli tomografi); (iv) PET (pozitron emisyon tomografisi) (Chen ve ark (2004) Bioconjugate Chem. 15:41-49); (v) biyoluminesans; (vi) floresans ve (vii) ultrason. Immünosintigrafi, radyoaktif maddelerle etiketlenmis antikorlarin bir hayvan veya insan hastaya uygulandigi bir görüntüleme prosedürüdür ve vücutta antikorun lokalize oldugu bölgelerin bir resmi çekilir (US 6528624).
Görüntüleme biyomarkerleri objektif olarak ölçülebilir ve normal biyolojik proseslerin, patojenik proseslerin veya bir terapötik müdahaleye farmakolojik cevaplarin bir göstergesi olarak degerlendirilebilir. Biyoniarkerler çesitli tipte olabilir: Tip 0 inarkerler bir hastaligin dogal hikaye markerleridir ve bilinen klinik indekslerle, örnegin, romatoid artritte sinovyal enflamasyonun MR] görüntülemesiyle boylamasina bagintilidir; Tip I markerler bir etki mekanizmasina göre, mekanizma klinik sonuçla baglantili olamayabilmesine ragmen bir müdahalenin etkisini yakalar; Tip II markerler, örnegin, romatoid artritte bilgisayarli tomografiyle (CT) ölçülen kemik erozyonu gibi, biyomarkerdeki degisimin veya biyomarkerden alinan sinyalin hedeflenen cevabi “valide etinek” için bir klinik fayda öngördügü temsilci sonlaiiini noktalari olarak görev yapar. Bu sebeple, görüntüleme biyomarkerleri, (i) bir hedef proteininekspresyonu, (ii) bir terapötigin hedef proteine baglanmasi, yani117selektivite ve (iii) klirens ve yari Ömür farmakokinetik verileri hakkinda farmakodinamik (PD) terap'Ötik bilgi temin edebilir. In vivo görüntüleme biyomarkerlerinin laboratuvar esasli biyomarkerlere göre avantajlari sunlardir: non-invazif tedavi, tayin edilebilirlik, tam vücut degerlendirmesi, tekrarlainali doz uygulainasi ve degerlendirme, yani çoklu zaman noktalari ve preklinik (küçük hayvan) sonuçlardan klinik (insan) sonuçlara kadar potansiyel olarak transfer edilebilir etkiler.
Bazi uygulainalar için, biyo-görüntüleme preklinik çalismalardahayvan deneylerinin yerine alir veya sayilarini en aza indirir.Radyonüklid görüntüleme etiketleri arasinda 3H311C, MC, 181:, 321), 358, 64Cu, 68Ga, say, QQTC, mln, 1231, 241, 1 251,13'I,l33Xe, 177Lu,2']At ya da 213Bi gibi radyoni'iklidler vardir.
Radyonüklid metal iyonu, DOTA gibi bir selatlaina baglayiciyla kompleks hale getirilebilir. DOTA-maleimid (4- maleimidobi'itiramidobenzil-DOTA) gibi baglayici reaktifler, “Axworthy ve ark (2000) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 97(4):1802- 1807)” referansinda tarif edilen prosedürler uygulanarak aminobenzil- DOTA”nin izopropilkloroformatla (Aldrich) aktive edilmis 4- maleimidobütirik asitle (Fluka) reaksiyonu. yoluyla hazirlanabilir.
DOTA-maleimid reaktifleri, sistein degistirilmis antikorlarin serbest sistein amino asitleriyle reaksiyona girer ve antikor üzerinde bir inetal kompleksleine ligaiidi sunar (Lewis ve ark (1998) Bioconj. Chem. 9:72-86). DOTA-NHS (1 ,4,7,10-tetraazasiklododekan-l ,4,7,10- tetraasetik asit mono (N-hidroksisüksinimid ester) gibi selatlama baglayicisi etiketleme reaktifleri ticari piyasada mevcuttur (Macrosiklics, Dallas, TX). Radyonüklid etiketli antikorlarla reseptörhedefi görüntülemesi, tümör dokusunda antikorlarin progresif118akümülasyonunun belirlenmesi ve miktar tayini yoluyla yolak aktivasyonunun bir markerini sunabilir (Albert ve ark (1998) Bioorg.
Med. Chem. Lett. 8:1207-1210). Konjuge edilmis radyo-metaller,lizozomal bozunmanin ardindan intraselüler ortamda kalabilir.Peptid etiketleme yöntemleri iyi bilinmektedir. Bakiniz: Haugland, 2003, Molecular Probes Handbook of Fluorescent Probes and Research Chemicals, Molecular Probes, Inc.; Brinkley, 1992, Bioconjugate Chem. 3:2; Garman, (1997) Non-Radioactive Labelling: A Practical Approach, Academic Press, London; Means (1990) Bioconjugate Chem. 1:2; Glazer ve ark (1975) Chemical Modification of Proteins Laboratory Techniques in Biocheinistry and Molecular Biology (T. S. Work and E. Work, Eds.) American Elsevier Publishing Co., New York; Lundblad, R. L. and Noyes, C. M. (1984) Chemical Reagents for Protein Modification, Ciltler 1 and it, CRC Press, New York; Pfleiderer, G. (1985) "Chemical Modification of Proteins", Modern Methods in Protein Chemistry, H. Tschesche, Ed., Walter DeGryter, Berlin and New York ve Wong (1991) Chemistry of Protein Conjugation and Cross-linking, CRC Press, Boca Raton, Fla.); De Leon-Rodriguez ve ark (2004) Chem.Eur. J. 10:1149- 1 155; Lewis ve ark (2001) Bioconjugate Chem. 12:320-324; Li ve ark (2002) Bioconjugate Chem. 13:110-115; Mier ve ark (2005) Bioconjugate Chem. 16:240-237.Yeterli yakinlik iki moiyeteyle, yani bir floresan raporlayici ve söndürücüyle etiketlenen peptidler ve proteinler, floresans rezonans enerji transferine (FRET) tâbi olur. Raporlayici gruplar, tipik olarak,belirli bir dalga boyunda isikla uyarilan floresan boyalardir ve119maksimum parlaklikta emisyon için enerjiyi uygun Stokes kayinasiyla bir alici veya söndürücü gruba transfer eder. Floresan boyalar arasinda, floresiii ve rodainin ve bunlarin türevleri gibi genisletilmis aromatiklige sahip moleküller bulunur. Floresan raporlayici, bir intakt peptid içinde söndürücü inoiyeteyle kismen veya önemli bir ölçüde söndürülebilir. Peptidin bir peptidaz veya proteazla klevajindan sonra, floresansta belirlenebilir bir artis ölçülebilir (Knight, C. (1995) “Fluorimetric Assays of Proteolytic Eiizymes,, Methods inEnzyinology, Acadeinic Press, 248: 18-34).Bu bulusa konu olan etiketli antikorlar bir afinite saflastirma ajani olarak da kullanilabilir. Bu proseste, etiketli antikor, sektörde iyi bilinen yöntemler kullanilarak bir Sephadex reçinesi veya filtre kagidi gibi bir kati faz üzerinde iininobilize edilir. Immobilize antikor, saflastirilacak antijeni içeren bir numuiieyle temas ettirilir ve daha sonra, destek, numunede bulunan ve iminobilize polipeptid varyantina bagli olan, saflastirilacak antijen haricindeki hemen hemen tüm maddeyi çikaracak uygun bir çözücüyle yikanir. Son olarak, destek, polipeptid varyantindan aiitijeiii çözecek olan, pH 5,0 glisin tainponugibi baska bir uygun çözücüyle yikanir.Etiketlenie reaktifleri, tipik olarak, (i) etiketli antikoru olusturniak için dogrudan bir sistein degistirilmis antikorun bir sistein tiyolüyle, (ii) bir baglayici-etiket ara ürünü olusturmak için bir baglayici reaktifiyle veya (iii) etiketli antikoru olusturmak için bir baglayici antikorla reaksiyona girebilecek reaktif fonksiyonelligine sahiptir. Baska fonksiyonel gruplar kullanilabilmesine ragmen, etiketlemereaktiflerinin reaktif fonksiyonelligi sunlari içerir: inaleiinid,120haloasetil, iyodoasetamid suksinimidil ester (ömegin, NHS, N- hidroksisüksinimid), izotiyosiyanat, sülfonil klor'ûr, 2,6-diklorotriazinil, pentaflorofenil ester ve fosforamidit.Bir örnek reaktif fonksiyonel grup, 'Örnegin, biyotin veya floresan boya gibi belirlenebilir bir etiketin bir karboksil grubu sübstitüentinin N-hidroksisuksinimidil esteri (NHS). Etiketin NHS esteri 'onceden olusturulabilir, izole edilebilir, saflastirilabilir ve/Veya karakterize edilebilir ya da yerinde olusturulabilir ve bir antikorun bir nükleofilik grubuyla reaksiyona sokulabilir. Tipik olarak, etiketin karboksil formu, bir karbodiimid reaktifi (örnegin, disiklohekzilkarbodiimid, diizopropilkarbodiimid) veya bir uronyum reaktifi, ömegin, TSTU (O- (N-Suksinimidil)-N,N,N°,N”-tetran1etilur0nyurn tetrafloroborat, HBTU (O-benzotriazol-l -il)-N,N,N°,N”-tetra1neti1uronyu1n heksafloro fosfat), veya HATU (O-(7-azabenzotriazol-l-il)-N,N,N”,Ni-tetrametil uronyuin heksaflorofosfat), bir aktivatör, Örnegin, l-hidroksi benzotriazol (HOBt) ve N-hidroksisuksinimid'in bazi kombinasyonlariyla reaksiyona sokularak aktive edilebilir ve böylece, etiketin NHS esteri elde edilebilir. Bazi durumlarda, etiket ve antikor, etiketin yerinde aktivasyonu. ve antikorun reaksiyonu yoluyla kuplajlanarak etiket-antikor konjugati tek basamakta olusturulabilir.
Baska aktivasyon ve kuplajlaina reaktifleri arasinda TBTU (2-(1H- benzotriazo- l -il)- l - 1 ,3,3 -tetrametiluronyum heksaflorof osf at), TFFH (N,N°,N", N'”-tetrametiluronyum 2-floro-heksaflorofosfat), PyBOP (benzotriazol- l -il-oksi-tris-pirolidino-fosfonyum heksaflorofosfat, EEDQ (2-etoksi- 1 -etoksikarbonil-l ,2-dihidr0-kuinolin), DCC (disikloheksil karbodiimid); DIPCDI (diizopropilkarbodiimid), MSNT(l-(mesitilen-2-sülfonil)-3-nitro-lH-l,2,4-triazol ve aril sülfonil121halo jenürler, örnegin triizopropilbenzensülfonil klorür bulunur.BIYOTIN-MALEIMIDIN THIOFAB9LARA KONJUGASYONUYukarida tanimlanan ThioFab özellikleri, fajin varliginda tespit edilmistir, çünkü Fab”in faj kaplama proteinine füzyonu, Cys tiyol erisebilirligiiii veya reaktivitesini degistirme potansiyeline sahip olabilir. Bu nedenle, ThioFab yapilari, alkalen fosfataz baslatici altinda bir ekspresyon vektörüne klonlanmis (Chang ve ark (1987) Gene 55:189-196) ve ThioFab ekspresyonu, fosfat içermeyen vasatta E. coli hücreleri büyütülerek indüklenmistir. ThioFab”lar bir Protein G SEPHAROSETM kolonunda saflastirilmis ve indirgen olan ve olmayan SDS-PAGE jellerinde analiz edilmislerdir. Bu analizler, ThioFab”1arin reaktif tiyol gruplarini koruduklarinin mi, yoksa intrainoleküler veya moleküller arasi disülfür baglari olusturarak inaktive mi edildiklerinin tespit edilmesine olanak vermektedir. ThioFab”lar L-V15C, L-Vl lOC, H-A88C ve H-A121C, Protein-G SEPHAROSETM kolon kromatografisiyle eksprese edilmis ve saflastirilmislardir (detayli bilgi için yöntemler bölümlerine bakiniz). Saflastirilmis proteinler, indirgen kosullar (DTT ile) ve indirgen olmayan kosullar (DTT”siz) altinda SDS-PAGE jelde analiz edilmislerdir. BME (beta-merkaptoetanol) gibi diger indirgen ajanlar, jelde, zincirler arasi disülfür gruplarini ayirmak amaciyla kullanilabilirler. ThioFabiin büyük bir kisminin (- %90) monomerik formda oldugu, yabani tip hu4D5Fabv8°nin temelde ve esas olarak inonomerik formda (47 kDa) oldugu SDS-PAGE jel analizinden anlasilmaktadir.ThioFab (A121C) ve yabani tip hu4D5FabV8, oda sicakliginda 3 saatsüreyle 100 kati fazla biyotin-maleimid ile inkibü edilinislerdir ve122biyotinlenmis Fablar bir SuperdeX-200l`M jel filtrasyon kolonuna yüklenmislerdir. Bu saflastirma basamagi, monomerik Fab”in oligomerik Fab°dan ve ayni zamanda fazla serbest biyotin- maleimidden (veya serbest sitotoksik ilaçtan) ayrilmasi için faydaliolmustur.Sekil 5, faj kontekstinin yoklugunda ThioFab varyantlarinin özelliklerinin validasyonunu göstermektedir. Faj füzyonu olinayan proteinler, hu4D5FabV8 ve hu4D5FabV8-A121C (ThioFab-AlZlC), önce protein-G agaroz boncuklari kullanilarak eksprese edilmis ve saflastirilmis ve ardindan, 100 kati molar biyotin-maleimid fazlasiyla inkibü edilmislerdir. Bir biyotinlenmis sistein degistirilmis ThioFab”m ve bir biyotinlenmemis yabani tip Fab”in Streptavidin ve HER2 baglanmasi karsilastirilmistir. Biyotin konjugasyonunun (streptavidin ile etkilesim) kapsami ve bunlarin HER2°ye baglanma kabiliyeti, ELISA analizleriyle gözlemlenmis ve izlenmistir. Her Fab, 2 ng ve 20 ng”de test edilmistir.Biyotinlenmis A`121C ThioFab, yabani tip hu4D5FabV8°e kiyaslanabilir ve denk HER2 baglanmasini muhafaza etmistir (Sekil ). Yabani tip Fab ve AlZlC-ThioFab, jel filtrasyon kolon kromatografisiyle saflastirilmislardir. Iki numune, ana antikor olarak keçi anti-Fab-HRP kullanilmak suretiyle ve ELISA yöntemiyle HER2 ve streptavidin baglanmasi açisindan test edilmislerdir. Hem yabani tip (açik kutu) hem de ThioFab”1n (noktali kutu) HERTye baglanmalari benzerdir, fakat sadece ThioFab, streptavidin baglanmasini muhafaza etmistir. Biyotinlenmemis yabani tiphu4D5FabV8 ile, streptavidin ile sadece temel düzeyde bir etkilesim123gözlemlenmistir (Sekil 5). Biyotinleninis-ThioFab°in (Al2lC) kütle spektral (LC-ESI-MS) analizi, yabani tip hu4D5FabV8°e (47737 dalton) kiyasla 48294.5 daltonluk bir majör pikle sonuçlaninistir. Bu iki molekül arasindaki 537.5 dalton fark, tam olarak, ThioFab,a konjuge olmus tek bir biyotin-maleimid°e tekabül etmektedir. Kütle spektral protein sekanslama (LC-ESI-Tandein kütle spektrum analizi) sonuçlari, ayrica, konjuge biyotin molekülünün yeni degistirilmissistein artigmda oldugunu da teyit etmislerdir (Tablo 4, Örnek 3).BIYOTIN-MALEIMIDIN ALBUMIN BAGLANMA PEPTIDI (ABP)-THIOFABLARA YERE OZGU KONJUGASYONU Plazma-protein baglanmasi, kisa ömürlü moleküllerin farmakokinetik özelliklerini gelistirmenin etkili ve etkin bir yoludur. Albümin, plazmada en fazla miktarda bulunan proteindir. Serum albümin baglanma peptidleri (ABP), doku alimi, penetrasyon ve difüzyon özelliklerinin degistirilmesi de dahil olinak üzere, kaynasmis aktif domain proteinlerin farmakodinamigini degistirebilirler. Bu farmakodinamik parametreler, uygun serum albümin baglanma peptidi sekansinin spesifik seleksiyonu yoluyla modüle edilebilir (US 20040001827). Faj görüntüleme yoluyla bir dizi albümin baglanma peptidi belirleninistir (Dennis ve ark. (2002) "Albumin Binding As A General Strategy For Improving The Pharmacokinetics Of Proteins" J Biol Chem 277:35035-35043;WO 01/45746). Bulusa konu olan bilesikler, (i) Dennis ve ark (2002) J Biol Chem. 277:35035- 35043 Tablolar III ve IV, sayfa 35038; (ii) US 20040001827 at [0076] SEKANS KOD NO.: 9-22 ve (iii) WO 01/45746 sayfalar 12-13, SEKANS KOD NO.: zl-z14 tarafindan ögretilen ABP sekanslarini124kapsamaktadir.Albümin Baglanma (ABP)-Fablari, bir albümin baglanma peptidi Fab agir zincirinin C-terminusuna l:l stoikiometrik oranda (1 ABP / 1 Fab) baglaninak ve kaynastirilmak suretiyle degistirilmistir. Bu ABP- Fablarinin albüminle baglanmasinin onlarin tavsanlar ve farelerdeki yari ömürlerini 25 katindan daha fazla artirdigi gösterilmistir. Bu nedenle, yukarida tanimlanan reaktif sistein artiklari, bu ABP-Fablara dahil edilebilir ve sitotoksik ilaçlarla yere özgü konjugasyon için ve ardindan in vivo hayvan çalismalarinda kullanilabilirler. Sekil 9, bir grafiksel albümin baglanma peptidi-Fab füzyonu (ABP-Fab) baglayiciilaç kon jugatini göstermektedir.Ornek albümin baglanma peptidi sekanslari, bunlarla sinirlikalmaksizin, SEKANS KOD NO. l-5°de sayilan amino asitsekanslarini kapsar: CDKTHTGGGSQRLMEDICLPRWGCLWEDDF SEKANS KOD NO. :1 QRLMEDICLPRWGCLWEDDF SEKANS KOD NO.:2 QRLIEDICLPRWGCLWEDDF SEKANS KOD NO.:3 RLIEDICLPRWGCLWEDD SEKANS KOD NO.:4 DICLPRWGCLW SEKANS KOD NO.:5Albümin baglanma peptidi (ABP) sekanslari, birden fazla hayvan cinsinden (fare, siçan, tavsan, büyükbas hayvanlar, alyanakli maymun, habes maymunu ve insan) elde edilen albimünü Kd (tavsan) = 0.3 uM ile baglarlar. Albümin baglanma peptidi, albümini bagladigi bilinenligandlarla rekabet etmez ve tavsanda 2,3 saatlik bir yari ömrü (TI/2)125vardir. ABP-ThioFab proteinleri, yukaridaki bölümlerde açiklandigi gibi, önce BSA-SEPHAROSETM'de saflastirilmis ve ardindan, Superdex-SZOO kolon kromatografisinde biyotin-maleimid konjugasyonu ve saflastirmasindan geçirilmislerdir. Saflastirilmis biyotinlenmis proteinler hoinojendi ve herhangi bir oligomerikformdan yoksundu (Ornek 4).Sekil 6, Albümin Baglanma Peptidi (ABP)-ThioFab varyantlarinin özelliklerini göstermektedir. ABP-hu4D5Fabv8-wt, ABP- hu4D5FabV8-V110C ve ABP-hu4D5FabV8-A121C°nin tavsan albümini, streptavidin ve HER2 ile baglanma kabiliyetini test etmek amaciyla ELISA analizleri yapilmistir. ELISA (Sekil 6) ve BIAcore baglanma kinetigi analiziyle (Tablo 3) tevsik edildigi gibi, biyotinlenmis ABP-ThioFab°lar, albümine ve HER2”ye yabani tip ABP-hu4D5Fabv8sninkine benzer bir afiniteyle baglanma kabiliyetine sahiptirler. Tanimlandigi gibi, bir ELISA plakasi albümin, HER2 ve SA ile kaplanmistir. Biyotinlenmis ABP-ThioFab°larin albümin, HER2 ve SA°ya baglanmalari, anti-Fab HRP ile test edilmistir.
Biyotinlenmis ABP-ThioFab”larin, biyotinlenmemis kontrol ABP- hu4D5Fabv8-wt°ye kiyasla streptavidine baglanina kabiliyeti vardi; bu da, her iki varyant için de ayni sistein mutantlar kullanildigi için, ABP-ThioFab'larin biyotin maleimid ile ThioFab°lar gibi yere özgü bir tarzda ve sekilde konjuge olduklarini göstermektedir (Sekil 6).Tablo 3. Biyotinlenmis ABP-hu4D5Fabv8 yabani tipe ve ThioFab”1araHER2 ve tavsan albümin baglanmasi için BIAcore kinetik analizi126 Antikor kon(M`ls`l) 16,551) (nM) HER2baglanmasiYabani tip 4,57xio5 4,19xi05 0,0917 VllOC 4,18X105 4,05xi05 0,097 A121C 3,91xio5 4,15x10'5 0,106 Tavsan albümin baglanmasiYabani tip 1,66x105 0,0206 124 V110C 2,43x165 0,0331 136 A121C 1,70x105 0,0238 140 ABP = albümin baglanma peptidi Alternatif olarak, bir albümin-baglanma peptidi, antikora, bir baglayicimoiyete yoluyla kovalent baglanma yöntemiyle de baglanabilir.ABP-THIOFAB9LARIN BEHER FAB BASINA IKI SERBEST TIYOL GRUBUYLA DEGISTIRILMESIYukaridaki sonuçlar, mevcut dört (L-V15C, L-Vl lOC, H-A88C ve H- A121C) thioFab (sistein degistirilmis Fab antikorlari) varyantinin hepsinin, bir etiket reaktifi, baglayici reaktifi veya ilaç-baglayici ara ürünüyle yere özgü konjugasyon için kullanilabilecek reaktif tiyol gruplarina sahip olduklarini göstermektedir. L-VISC, ekspreseedilebilir ve saflastirilabilir, fakat bunlar nispeten düsük verim127oranlariyla yapilabilir. Bununla birlikte, L-Vl lOC, H-A88C ve H- A121C varyantlarinin ekspresyon ve saflastirma verimleri, hu4D5FabV8sinkine benzerdi. Bu nedenle, bu mutantlar daha detayli analiz için kullanilabilir ve beher Fab basina birden fazla tiyol grubu elde edecek sekilde rekombine edilebilirler. Bu hedefe yönelik olarak, beher Fab molekülü basina iki tiyol grubu elde edecek sekilde hafif zincirde bir tiyol grubu ve agir zincirde bir tiyol grubu olusturulmustur (L-Vl 10C/HA88C ve L-Vl lOC/H-A121C). Bu iki çift sistein varyanti, bir E. coli ekspresyon sisteminde eksprese edilinis ve saflastirilmislardir. Saflastirilinis biyotinlenmis ABP-ThioFab”lar1n homojenitesinin tek sistein varyantlarinin homojenitesine benzeroldugu tespit edilmistir.Beher Fab için iki reaktif sistein artigini degistirmenin etkileri arastirilmistir (Sekil 7). Biyotinlenmis ABP-ThioFab”in SA7ya baglanmasi streptavidin-HRP kullanilarak incelenmis ve bu yolla ikinci bir biyotinin varligi test edilmistir (Sekil 7). HER2/Fab analizi için, bir ELISA plakasi HER2 ile kaplanmis ve anti-Fab HRP ile denenmistir. SA/Fab analizi için, bir ELISA plakasi SA ile kaplanmis ve anti-Fab HRP ile denenmistir. SA/SA analizi için, bir ELISA plakasi SA ile kaplanmis ve SA-HRP ile denenmistir. Sekil 7.
Biyotinlenmis ABP-hu4D5FabV8 sistein varyantlarinin HER2, streptavidin (SA), HER2/Fab, 10 SA/Fab ve SA/SA ile etkilesimine dair ELISA analizleri, bunlarin etkilesimlerinin sirasiyla anti-Fab- HRP ve SA-HRP izlendigini göstermektedir. SA/Fab, Fab basina tek bir biyotinin varligini gözlemlemistir; SA/SA analizi ile ise Fab basina birden fazla biyotin gözlemlenmistir. HER2snin çift sisteinmutantlarina baglanmasi, tek sistein varyantlarinin baglanmasina 128benzemektedir (Sekil 7). Bununla birlikte, Fab molekülü basina birden fazla serbest tiyol grubu bulunmasindan ötürü, çift sistein mutanti üzerinde biyotinlenme düzeyi, tek sistein varyantlarina kiyasla dahayüksekti (Sekil 7).TRASTUZUMABHN THlO lgG VARYANTLARININ DEGISTIRILMESIBelirli artiklarda tam-boy monoklonal antikor trastuzumab°in (HERCEPTIN®, Genentech Inc.) içine sistein sokuldu.
Trastuzumab°1n tek sistein inutantlari l-l-A88C, H-Al2lC ve L- VllOC ile trastuzumabsin çift sistein inutantlari VllOC-A121C ve V1 lOC-AlZlC, CHO (Çin Hamster Yumurtalik) hücrelerinde, lmM sistein içeren vasat içinde geçici fermentasyon yoluyla eksprese edildiler. A88C niutant agir 20 zincir sekansi (450 aa), SEKANS KOD NO.:6”dir. Al2lC mutant agir zincir sekansi (450 aa), SEKANS KOD NO.:7”dir. VllOC mutant hafif zincir sekansi (214 aa) ise SEKANS KOD NO.:8”dir.EVQLVESGGGLVQPGGSLRLS mscrm WIWKGLMRI YPTNGYTRY ADSVKG RH! SMS MAMWSMCWIAWYCSRwOGDGWWWGQGTLWVSB ÂSTKGPS VFPWSSKSTSGCTAWVKDYFPSMVSWN SGAL'ISGVBTPPAVIQSS GLYSISSVW'VPSSSIGTQTY I CNVNHKPSNTKVUKKVEPKSQKTBTCPPCPRVM PSW'LFPPKPWI SRTPMCVVWVSHBDPEVWWWWXPRBMW STY'RWSVLTVLHWKEYKCKVSWPAP I EK'I'I SWGQPREPOVYTLPPSRBB MTKNQVSLTGNKGPYPSDIAVEWESNGQPWPWLDSDGSPFLYSEMKBRU WSCSMWKSISEPGKSEKANS KOD NO:6wowzsooawopccsmiscmscmimimmimr Answc mi sammimmsmmnmcsnmmmmmms csmpswpmssxs'rsocrmmyrpxrmswnmrscvmmvims uymmssswmimnsmmmipmmmmum psmpppxpmmismpmcwvnvsaznpmwwvmmumm smwsnmommmsmpui mismpumvmppsm mvnmmmwnmsmpmwwemsmvsmmmnu wsammxswismSEKANS KOD NO:7129DI QMTQS PSSLSASVC DRVTI TCRASODVNTRVAWYQOKPGKÄPKLLI YSAS FLYSGVPS.RFSGSRSGTDFTLTX SSLQPBDFATYYCQQHYTTFPTFWGTKVBIKRTCMPSVFIFPP5DEQLKSGTASWCLLNNFYPREAKVQHKVDNADQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSET LSICADYEIO'IKVYACWQGLSSPVTKSFNRGECBu bulusun bir yapisina göre, sistein degistirilmis tiyo-trastuzuniab antikorlari, bir serbest sistein amino asidiyle birlikte asagidakidegisken bölge agir zincir sekanslarindan birini veya birden fazlasiniSEKANS KOD N0:8olusturmaktadirlar (SEKANS KOD NO.: 9-16). Mutant Sekans SEKANS KOD NO.: A40C WVRQCPGKGL SEKANS KOD NO.:9 A88C NSLRCEDTAV SEKANS KOD NO.: 10 Sl 19C LVTVCSASTKGPS SEQ ED NO:1 1SlZOC LVTVSCASTKGPS SEKANS KOD NO.: 12 A121C LVTVSSCSTKGPS SEKANS KOD NO.: 13 S122C LVTVSSACTKGPS SEKANS KOD NO.: 14 A175C HTFPCVLQSSGLYS SEKANS KOD NO.:15 Sl79C HTFPAVLQCSGLYS SEKANS KOD NO:16 Bu bulusun baska bir yapisina göre, sistein degistirilmis tiyo- trastuzumab antikorlari, bir serbest sistein amino asitle birlikteasagidaki degisken bölge hafif zincir sekanslarindan birini veya birdenfazlasini olusturmaktadirlar (SEKANS KOD NO.: 17-27). 130 MutantSekansSEKANS KOD NO.: V15CSLSASCGDRVTSEKANS KOD NO.:17 A43CQKPGKCPKLLISEKANS KOD NO.:18 VllOCEIKRTCAAPSVSEKANS KOD NO.:19 Sll4CTCAAPCVFIFPPSEKANS KOD NO.:20 Sl21CFIFPPCDEQLKSEKANS KOD NO.:21 $127CDEQLKCGTASVSEKANS KOD NO.:22 A144CFYPRECKVQWKSEKANS KOD NO.:23 A153CWKVDNCLQSGNSEKANS KOD NO.:24 N158CALQSGCSQESVSEKANS KOD NO.:25 8168CVTEQDCKDSTYSEKANS KOD NO.:26 V205C GLSSPCTKSFN SEKANS KOD NO.:27 Sonuçta elde edilen tam-boy tiyo-trastuzumab lgG varyantlarinda, tiyol reaktivite ve HER2 baglanma aktivitesi eseyleri yapilmistir.
Sekil 13A, absorbans belirlemesi için immobilize HER2 and HERP etiketli sekonder antikora biyotinlenmis antikor baglanmasinin bir resimli görüntüsünü sunmaktadir. Sekil 13B, 450 nm”de absorbans belirlemesiyle birlikte immobilize HER2°ye baglanma ölçümlerini göstermektedir (soldan saga): biyotinlenmemis yabani tip trastuzumab (Wt), biyotin-maleimid konjuge tiyo-trastuzumab varyantlari V110C (tekli cys), A121C (tekli cys) va V110C-A121C (ikili cys). Her bir tiyo lgG varyanti ve trastuzumab, 1, 10 ve 100 ng”de test edildi.
Olçümler, biyotinlenmis anti-HER2 ThioMablarin HER2 baglanmaaktivitelerini koruduklarini göstermektedir. 131Sekil 14A, absorbans belirlemesi için biyotinin anti-IgG-HRP”ye baglanmasiyla birlikte biyotinlenmis antikorun iinmobilize HER2”ye baglanmasinin bir resimli görüntüsünü sunmaktadir. Sekil l4B, streptavidine baglanma konusunda, biyotin-maleimid konjuge tiyo- trastuzumab varyantlari ve biyotinlenmemis yabani tip trastuzumabin 450 nm”de absorbans belirlemesiyle birlikte baglanma ölçümlerini göstermektedir. Soldan saga: VllOC (tekli cys), A121C (tekli cys), Vl lOC/AlZlC (ikili cys) ve trastuzumab. Her bir tiyo IgG varyanti ve trastuzumab, l, 10 ve 100 ng°de test edildi. Olçümler, HER2 ThiolVlablarin yüksek bir tiyol reaktivitesine sahip olduklarinigöstermektedir.Belirli artiklarda tam-boy 2H9 anti-EphBZR antikorunun içine sistein sokuldu. 2H9°un tek sistein mutanti H-AlZlC, CHO (Çin Hamster Yumurtalik) hücrelerinde, lmM sistein içeren vasat içinde geçici fermentasyon yoluyla eksprese edildi. A121C 2H9 mutant agir zincirsekansi (450 aa), SEKANS KOD NO.:28,dir.EVQLVESGGGLVQ PGGSLRLSCMSGYTFTSYWMHWRQAPGKGLEHVGPINPSTGYTDY NOWRFTI SADTSKNTÂMMNSLRAEDTAVYYCTRRPKI PWTLWVSS CSTKGP SVFP LAPSSKSTSGGTMMCLVIGDYFPBPVTVSWSGALTSGVBTF PAVIOSS GLYSLSSVVTVPSS SLGTQ'I'YI CNVNHKPSNTKVDKJCVBPKSCDKTH'ICPPCPAPELDGG PSVPLFPPKPKDMI SRTPEVTCWVDVSHBDPEWVEVHNAXTKPREBOYN STYRWSVLTVIMQDULNGKEYKCKVSNKÂLGAPI EKTI SWGQPRBWPPSRBB MTKNQVSL'PCLVKGPYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSNSFPLYSKLWDKSRÜ QQGWFSCSWWKSLSWPGKSEKANS KOD NO:28Sistein degistirilmis tiy0-2H9 antikorlari, bir serbest sistein amino asitle birlikte asagidaki Fc sabit bölge agir zinzir sekanslariniolusturmaktadirlar (SEKANS KOD NO.: 29-38).132 MutantSekansSEKANS KOD NO.: V273CHEDPECKFNWYVDGVEVHNAKTKPRSEKANS KOD NO.:29 V279CHEDPEVKFNWYCDGVEVHNAKTKPRSEKANS KOD NO.:30 V282CHEDPEVKFNWYVDGCEVHNAKTKPRSEKANS KOD NO.:31 V284CHEDPEVKFNWYVDGVECHNAKTKPRSEKANS KOD NO.:32 A287CHEDPEVKFNWYVDGVEVHNCKTKPRSEKANS KOD NO.:33 8324CYKCKVCNKALPSEKANS KOD NO.:34 S337CIEKTICKAKGQPRSEKANS KOD NO.:35 A339CIEKTISKCKGQPRSEKANS KOD NO.:36 S375CKGFYPCDIAVESEKANS KOD NO.:37 S4OOC PPVLDCDGSFF SEKANS KOD NO.:38 Sekil 16, immobilize Protein A°da saflastirma isleminden sonra, 2H9 ThioMab FC varyantlari (soldan saga, serit 1-9) A339C; S337C; S324C; A287C; V284C; V282C; V279C ve V273C”nin ve 21-19 yabani tipinin indirgeyici olmayan (üst) ve indirgeyici (alt) denatüran SDS-PAGE (poliakrilamid jel elektroforezi) analizini göstermektedir.
Sagdaki serit, intakt proteinlerin yaklasik 150 kDa, agir zincir fragmanlarinin yaklasik 50 kDa ve hafif zincir fragmanlarinin yaklasik kDa oldugunu gösteren bir boyut markeri merdivenidir. Sekil 17A, immobilize Protein A,da saflastirma isleminden sonra, 2H9 ThioMab varyantlari (soldan saga, serit 1-4) L-V15C; S'179C; S375C ve S400C”nin indirgeyici olmayan (sol) ve indirgeyici (sag) denatüran poliakrilamid jel elektroforezi analizini göstermektedir. Sekil l7B, iminobilize Protein A°da saflastirma isleminden sonra, ilave 2H9 ve 3A5 ThioMab varyantlarinin indirgeyici olmayan (sol) ve indirgeyici(+DTT) (sag) denatüran poliakrilamid jel elektroforezi analizini 133göstermektedir. 2H9 ThioMab varyantlari (hem Fab°da hem de Fc bölgesinde) tanimlandigi gibi eksprese edildiler ve saflastirildilar.
Sekil 16, 17A ve l7B7de görüldügü gibi, proteinlerin hepsi, reaktif ThioMablari konjugasyon için hazirlamak amaciyla SDS-PAGE isleminde ve ardindan, Ornek ll°in indirgeme ve oksidasyonprosedüründe homojendirler (Ornek 12).Belirli artiklarda tam-boy 3A5 anti-MUC16 antikorunun içine sistein sokuldu. 3A57in tekli cys mutanti H-AlZlC, CHO (Çin Hamster Yumurtalik) hücrelerinde, 1 mM sistein içeren vasatlar içinde geçici fermentasyon yoluyla eksprese edildi. A121C 3A5 mutant agir Zincirsekansi (446 aa), SEKANS KOD NO.:39°dan olusmaktadir.SVQLQESGPG Lv:: FSQSLSLTCTVTGYS I mvaawi normmcyxmscvm NPSLKSRI s i msmornmswrsmammmnmoocnmmu G PSVFPIAPS SKSTSGGTAALGCLVKDY F PE: ?VTVSHRSGRLTSGVBTF ?RMS SELYS LSSVVTVPSSSLGTQTY I mvsmmmpmmppcpunmm LPPPKDKDTLH: snrpmmvenmpmmmnemmm WSVLMRQDNLNGKBY KCKVSNKALPAPI Em smoo PRBPQVYTLPPSREEMTKN QVSLTCLVXGFY PSDIAVEHSSNGQPENNYKTTP Pvwsmsrnvs icm'voxs RWVPS CSVPOIBALHNHYTQKSLSISPGKSEKANS KOD NO:39Sistein degistirilmis tiy0-3A5 anti-MUC16 antikorlari, bir serbest sistein amino asitle birlikte asagidaki degisken bölge agir zincirsekanslarindan olusmaktadirlar (SEKANS KOD NO.: 40-44).134 Mutant Sekans SEKANS KOD NO.: F45C NWIRQCPGNK SEKANS KOD NO:40 A90C LNSCTTEDTAT SEKANS KOD NO:41 A121C GQGTLVTVSACSTKGPSVFPL SEKANS KOD NO:42 A175C HTFPCVLQSSGLYS SEKANS KOD NO:43 V176C HTFPACLQSSGLYS SEKANS KOD NO.:44 Sistein degistirilmis tiy0-3A5 anti-MUC16 antikorlari, bir serbest sistein ainino asitle birlikte asagidaki degisken bölge hafif zincirsekanslarindan olusmaktadirlar (SEKANS KOD NO.: 45-49). Mutant Sekans SEKANS KOD NO.: L15C FLSVSCGGRVT SEKANS KOD NO:45 A43C QKPGNCPRLLI SEKANS KOD NO.:46 V1 10C ElKRTCAAPSV SEKANS KOD NO:47 A144C FYPRECKVQWK SEKANS KOD NO:48 8168C VTEQDCKDSTY SEKANS KOD NO.:49 THIOMABLARIN TIYOL REAKTIVITESITam-boy IgG sistein degistirilmis antikorlarin (ThioMablar) tiyol reaktivitesi, biyotinlenmeyle ve streptavidin baglanmasiyla ölçülmüstür. Biyotin-maleimid ile spesifik olarak baglanan ThioMab°1 incelemek amaciyla bir western blot eseyi gerçeklestirildi. Bu eseyde, antikorlar, indirgen SDS-PAGEyde analiz edildiler ve Biyotinin varligi Spesifik olarak streptavidin-HRP ile inkübasyon yöntemiyle arastirildi.Sekil 18”de görüldügü gibi, streptavidin-HRP etkilesimi, hangi135degistirilmis sistein varyantinin kullanildigina bagli olarak agir zincirde ya da hafif zincirde gözlemlendi ve yabani tipte herhangi bir etkilesim görülmedi; bu da, ThioMab varyantlarinin biyotini degistirilmis sistein artiginda spesifik olarak konjuge ettiklerini göstermektedir. Sekil 18, iminobilize anti-IgG-HRP”de (üst jel) ve streptavidin-HRP”de (alt jel) yakalandiktan sonra indirgenmis ve biyotinlenmis Thio-IgG varyantlarinin denatüran jel analizini göstermektedir. Serit l: 3A5 H-AlZlC. Serit 2: 3A5 L-Vl 10C. Serit 3: 2H9 H-AlZlC. Serit 4: ZH9 L-Vl 10C. Serit 5: anti-EphBZR 2H9 ana, yabani tip. Her bir mutant (serit l-4), HRP belirlemesiyle (üst) anti-IgG tarafindan yakalaninistir ve bu da, seçiciligin ve afinitenin muhafaza edildigini göstermektedir. Immobilize streptavidinin HRP belirlemesiyle (alt) yakalanmasi, biyotinin agir ve hafif zincirler üstündeki lokasyonunu teyit etti. Serit 1 ve 3°de sistein degistirilinis antikorlarda sistein mutasyonunun lokasyonu agir zincirdir. Serit 2 ve 4”de sistein degistirilmis antikorlarda sistein mutasyonunun lokasyonu hafif zincirdir. Sistein mutasyon yeri, biyotin-maleimid reaktifiylekon jugasyona girer.
Sekil 18”in ThioMab sistein degistirilmis antikorlarinin ve bir 2H9V15C varyantinin LC/MS yöntemiyle analizi, tiyol reaktivitesini kantitatif olarak gösterdi (Tablo 5).Tablo 5 ThioMablarin biyotinlenmesinin LC/MS yöntemiyle miktar tayini 7 Tiyol reaktivitesi136 ThioMab varyanti Beher ThioMab basina biyotin adedi 2H9 wt 0,0 2H9 L-V15C 0,6 2H9 L-Vl 10C 0,5 2H9 H-AlZlC 2,0 3A5 L-Vl lOC 1,0 3A5 H-AlZlC 2,0 Sistein degistirme islemi, lgG antikorlarinin sabit domaini olan Fe bölgesinde yapildi. Çesitli farkli amino asit yerleri sistein yerlerine dönüstürüldüler ve eksprese edilen mutantlar olan sistein degistirilmis antikorlarin tiyol reaktivitesi incelendi ve degerlendirildi.
Biyotinlenmis 2H9 ThioMab FC varyantlarinin tiyol reaktiVitesi ise, bir ELISA eseyinde immobilize streptavidinde yakalama yoluyla ve HRP miktar tayini yöntemiyle incelendi ve degerlendirildi (Sekil 19).
Reaktif Tiyol gruplarini içeren sistein artiklarini hizla tespit etmek ve elemek amaciyla bir ELISA eseyi gerçeklestirildi. Sekil 19”un sematik diyagraminda gösterildigi gibi, streptavidin-biyotin etkilesimi, anti- IgG-HRP ile inceleme ve ardindan 450 nm°de absorbansi `Ölçme yoluyla izlendi. Bu sonuçlar, 2H9-ThioFc varyantlari V282C, A287C, A339C. S375C ve S400C,nin orta ile en yüksek arasi düzeyde Tiyol reaktivitesine sahip olduklarini teyit etti. Tablo 6°da açiklandigi gibi, 2H9 ThioMab FC varyantlarinin biyotik konjugasyonunun düzeyi ve miktari LS/MS analiziyle tespit edildi. LS/MS analizi, A282C, S375C ve S400C varyantlarinin %100 biyotin konjugasyonuna ve V284C ve A339C varyantlarinin %50 konjugasyona sahip olduklarini teyit etti 137ve bu da, reaktif bir sistein tiyol grubunun varligini gösterdi. Diger ThioFc varyantlari ve ana, yabani tip 2H9”un ya çok az biyotinlenmesivardi ya da hiç yoktu.Tablo 6 2H9 Fc ThioMablarm biyotinlenmesinin LC/MS yöntemiylemiktar tayini 2H9 ThioMab Fc varyantlari Biyotinlenme % V273C 0 V279C 31 V282C 100 V284C 50 A287C 0 8324C 71 S337C 0 A339C 54 S375C 100 S400C 100 (yabani tip 2H9) 0 THIO-4D5 FAB HAFIF ZINCIR VARYANTLARININ TIYOL REAKTIVITESISekil 8”de gösterilen PHESELECTOR eseyiyle Ölçüldügü gibi, antiErbBZ antikoru 4D5°un çesitli farkli sistein degistirilmis hafifzincir varyant Fablari üzerinde yapilan bir inceleme, tiyol reaktivitesi138degeri 0,6 ve daha fazla olan bir dizi varyantin bulundugunu ortaya koydu (Tablo 7). Tablo 7°de gösterilen tiyol reaktiVitesi degerleri, HC-AlZlC varyantinin komple biyotinlendigi varsayimiyla, %100 olarak belirlenen agir zincir 4D5 ThioFob varyantina (HC-AlZlC)norinallestirilmis degerlerdir ve yüzde biriiniyle gösterilinektedirler.Tablo 7 4D5 ThioFab hafif zincir varyantlarinin tiyol reaktivitesi degerleri4D5 ThioFab varyantlari Tiyol reaktivitesi degerleri (%) V15C 100 V] lOC 95Sl 14C 78 SlZlC 75 8127C 75 A153C 82 N158C 77 V205C 78 (HC-AlZlC) 100 (4D5 yabani tip) 25 ANTIKOR-ILAC KONJUGATLARIBu bulusa konu olan sistein degistirilmis antikorlar, herhangi bir terapötik ajanla, yani bir reaktif sistein tiyol grubu araciligiylaantikora kovalent baglanabilecek ilaç moiyetesiyle kon juge edilebilir.139Bir antikor-ilaç konjugati (ADC) bilesiginin bir örnek yapisi, bir sistein degistirilmis antikor (Ab) ve bir ilaç inoiyetesi (D) içerir; burada, antikor, 0,6 ile 1,0 araliginda bir tiyol reaktivitesi degerine sahip bir veya daha fazla sayida serbest sistein amino asidi içerir ve antikor, bir baglayici moiyetesi (L) yoluyla bir veya daha fazla sayida serbest sistein amino asidi araciligiyla D°ye baglanir ve bilesimFormül 1 ile temsil edilir:Ab-(L-D)p Iburada, p simgesi l, 2, 3 ya da 4”t`ur. Bir tiyol reaktif baglayici moiyetesi araciligiyla bir antikor molekülüne kon juge edilebilecek ilaç moiyetesi sayisi, burada tarif edilen yöntemlerle sokulan sistein artiklari sayisiyla sinirlidir. Sonuç olarak, Formül 1 ile temsil edilen örnek ADC, l, 2, 3 ya da 4 adet degistirilmis sistein amino asidiiiesahip antikorlar içerir.Bir antikor-ilaç konjugati bilesiginin (ADC) baska bir örnek yapisi, bir sistein degistirilmis antikor (Ab), bir albümin-baglanma peptidi (ABF) ve bir ilaç moiyetesi (D) içerir; burada, antikor, bir baglayici moiyetesi (L) araciligiyla ilaç moiyetesine baglanir ve antikor, bir amid bagi ya da bir ikinci baglayici inoiyetesi yoluyla albümin-baglama peptidine baglanir ve bilesim Formül Ia ile temsil edilir:ABP-Ab-(L-D)p Iaburada, p simgesi l, 2, 3 ya da 4it`ûr.140Bu bulusa konu olan ADC bilesikleri, antikanser aktivitesi açisindan faydali olanlari kapsar. Daha somut ifade etmek gerekirse, bilesikler, bir ilaç moiyetesine, yani toksine konjuge edilen, yani bir baglayici araciligiyla kovalent baglanan bir sistem-degistirilmis antikoru kapsar.
Ilaç bir antikora konjuge edilmediginde, bir sitotoksik ya da sitostatik etkiye sahip olur. Sonuç olarak, ilaç moiyetesinin biyolojik aktivitesi, bir antikora kon jugasyon yoluyla modüle edilir. Bu bulusa konu olan antikor-ilaç konjugatlari (ADC) bir sitotoksik ajanin etkin ve etkili dozunu tümör dokusuna selektif tasir ve bu yolla, selektivitenin dahayüksek olmasi, yani etkin dozun daha düsük olmasi saglanabilir.Bu bulusun bir yapisinda, bir memelide bulus konusu ADC”nin biyoyararlaniini ya da ADC°nin bir intraselüler metaboliti, ADC'nin ilaç moiyetesini içeren bir ilaç bilesigine kiyasla artar. Bir ineinelide ADCanin biyoyararlanimi ya da ADC°nin bir intraselüler metaboliti,ilaç moiyetesi içerineyen ADC analoguna kiyasla da artar.ILAC MOIYETELERIAntikor-ilaç konjugatlarinin (ADC) ilaç moiyetesi (D), bir sitotoksik ya da sitostatik etkiye sahip bir bilesigi, moiyeteyi ya da grubu kapsar.
Ilaç moiyeteleri arasinda (i) mikrot'ûbülin inhibitörleri, mitoz inhibitörleri, topoizomeraz inhibitörleri ya da DNA interkalatörleri islevini görebilen kemoterapötik ajanlar; (ii) enzimatik olarak islevgörebilen protein toksinleri ve (iii) radyoizotoplar vardir.Ornek ilaç inoiyeteleri arasinda, bunlarla sinirli kalmaksizin, birmaytansinoid, bir auristatin, bir dolastatin, bir trikotesen, CC1065, bir141kalikeainisin ve baska enediyne antibiyotikleri, bir taksan, bir antrasiklin ve bunlarin stereoizomerleri, izosterleri, analoglari ya datürevleri vardir.Maytansinoid ilaç moiyeteleri olarak kullaniina uygun inaytansin bilesikleri sektörde iyi bilinmektedir ve bilinen yöntemlerle dogal kaynaklardan izole edilebilir veya genetik mühendisligi teknikleri kullanilarak üretilebilir (bakiniz Yu ve ark (2002) PROC. NAT.
ACAD. SCL (USA) 99:7968-7973) ya da maytansinol ve inaytansinolanaloglari bilinen yöntemlerle sentetik olarak da hazirlanabilir.Ornek maytansinoid ilaç moiyeteleri arasinda C-l9-dekloro (ABD Patent No. 4256746) (ansainitosin P2”nin lityum alüminyum hidrid indirgeinesiyle hazirlanir); C-20-hidr0ksi (veya C-20-deineti1) +/-C- 19-dekloro (ABD Patent No. 4361650 ve 4307016) (Streptoniyces veya Actinomyces kullanilarak deinetilasyonla ya da LAH kullanilarak deklorinasyonla hazirlanir) ve C-20-demetoksi, C-20-asiloksi (-OCOR), +/-dekloro (ABD Patent No. 4.294.757) (asil klorürler kullanilarak asilasyonla hazirlanir) gibi modifiye aroniatik halkaya sahip olanlar ve baska pozisyonlarda modifikasyonlara sahip olanlarbulunur.Ornek maytansinoid ilaç inoiyeteleri arasinda ayrica C-9-SH (ABD Patent No. 4424219) (maytansinolün HZS veya P255°1e reaksiyonuyla hazirlanir); C-14-alkoksimetil(demetoksi/CH2 OR) (US 4331598); C- 14-hidroksimeti1 veya asiloksimetil (CH20H veya CH2OAC) (ABD Patent No. 4450254) (Nocardia'dan hazirlanir); C-lS-hidroksi/asiloksi (US 4364866) (maytansinolün Streptomycesqe dönüsümüyle 142hazirlanir); C-lS-metoksi (ABD Patent No. 4313946 ve 4315929) (TreWia nudl flora°dan izole edilir); C-lS-N-demetil (ABD Patent No. 4362663 ve 4322348) (maytansinolün Streptomyces°le demetilasyonuyla hazirlanir) ve 4,5-deoksi (US 4371533) (inaytansinolün titanyum triklorür/LAH indirgemesiyle) gibi modifikasyonlara sahip olanlar da bulunur. Maytansin bilesikleri üzerindeki pek çok pozisyonun, baglanti tipine bagli olarak baglanti pozisyonu olarak yararli oldugu bilinmektedir. Örnegin, bir ester baglantisi olusturmak için, bir hidroksil grubuna sahip C-3 pozisyonu, hidroksimetille modifiye edilmis C-14 pozisyonu, hidroksil grubuyla modifiye edilmis C-15 pozisyonu ve bir hidroksil grubuna sahip C-20 pozisyonunun tümü uygundur.Formül 1 ile temsil edilen antikor-ilaç konjugatlariinin (ADC) ilaçmoiyetesi (D), asagidaki yapiya sahip maytansinoidleri kapsar:Hac` tcnam-S-ê burada, dalgali çizgi, D°nin sülfür atomunun bir antikor-ilaç konjugati (ADC) baglayicisina (L) kovalent bagini gösterir. R simgesi birbirinden bagimsiz olarak H olabilecegi gibi, metil, etil, l-propil, 2- propil, l-bütil, 2-metil-l-pr0pil, 2-bütil, 2-metil-2-pr0pil, l-pentil, 2- pentil, 3-pentil, 2-metil-2-bütil, 3-metil-2-bütil, 3-metil-l-büti1, 2-143metil-l-bütil, I-heksil, 2-heksi1, 3-heksil, 2-meti1-2-pentil, 3-meti1-2- pentil, 4-metil-2-penti1, 3-meti1-3-pentil, 2-meti1-3-pentil, 2,3-dimetil- 2-bütil ve 3,3-dimeti1-2-bütil arasindan seçilen bir Ci-C6 alkil de olabilir. Amid grubunu sülfür atoinuna baglayan alkilen zincirimetanil, etanil ya da propel olabilir, yani m simgesi 1, 2 ya da 3”tür.Maytansin bilesikleri, mikrotübülin proteini tübülinin polimerizasyonunun inhibisyonu yoluyla mitoz esnasinda mikrotübüllerin olusiriasini inhibe ederek hücre proliferasyonunu inhibe eder (Remillard ve ark (1975) Science 189:]002-1005).
Maytansin ve maytansinoidler yüksek düzeyde sitotoksiktir, fakat kanser tedavisinde klinik kullanimlari, esas olarak tümörler için selektivitelerinin zayif olmasina atfedilebilecek siddetli sistemik yan etkilerle büyük ölçüde sinirlandirilmistir. Maytansinle yapilan klinik deneyler, merkezi sinir sistemi ve gastrointestinal sistem üzerinde siddetli advers etkilerden dolayi kesilmistir (Issel ve ark (1978) Can.
Treatment Rev. 5: 1 99-207).Maytansinoid ilaç moiyeteleri, antikor-ilaç konjugatlarinda çekici ilaç moiyeteleridir, çünkü bunlar: (i) fermentasyonla veya fermentasyon ürünlerinin kimyasal modifikasyonuyla veya türevlendirilmesiyle hazirlamak için kolay erisilebilirdir; (ii) disültür ve non-disültür baglayicilarla antikorlara konjugasyon için uygun fonksiyonel gruplarla türevlendirmeye tâbidir; (iii) plazmada stabildir ve (iv) çesitli tümör hücresi hatlarina karsi etkilidir (US 2005/0169933, WO 2005/037992, US 5208020).Baska ilaç moiyeteleriyle ilgili olarak, maytansinoid ilaç moiyetesinin 144bütün stereoizomerleri, bulus konusu bilesikler, yani D°nin kira] karbonlarinda R ve S7nin herhangi bir kombinasyonu için tasarlanir.
Bu bulusun bir yapisinda, maytansinoid ilaç moiyetesi (D) asagidaki stereokimyaya sahip olur:Hac` (cazin-s--g 5 Maytansinoid ilaç moieitilerinin `Örnek yapilari arasinda sunlar bulunur: asagidaki yapilara sahip DMl, (CR2)m = CH2CH2; DM3, (CR2)m = CH2CH2CH(CH3) ve DM4. (CR2)m : CHZCH2C(CH3)2I DM1 145on,CH20Hzc-S_êDMS CH: â êHO CH30HBaglayici, baglayici tipine bagli olarak çesitli farkli pozisyonlarda maytansinoid molekülüne baglanabilir. Örnegin, geleneksel kuplajlama teknikleri kullanilarak bir hidroksil grubuyla reaksiyon yoluyla bir ester bagi olusturulabilir. Reaksiyon, bir hidroksil grubuna sahip C-3 pozisyonunda, hidroksimetille modifiye edilmis C-14 pozisyonunda, bir hidroksil grubuyla modifiye edilmis C-15 pozisyonunda ve bir hidroksil grubuyla modifiye edilmis C-20 pozisyonunda gerçeklesebilir. Bu bulusun tercih edilen bir yapisinda,maytansinol ya da bir maytansinol analogunun C-3 pozisyonunda bagolusur.Formül 1 ile temsil edilen antikor-ilaç konjugatlarinin (ADC) ilaç146moiyetesi (D) ayrica dolastatinleri ve onlarin peptidik analoglari ve türevlerini ve auristatinleri de (ABD Patent No. 5635483; 5780588) kapsar. Dolastatinler ve auristatinlerin mikrotübül dinamigine, GTP hidrolizine ve nükleer ve hücresel bölünmeye müdahale ettikleri (Woyke ve ark (2001) Anlimicrob. Agents and Chemother. 45(12):3580-3584) ve anti-kanser akivitesine (ABD Patent No. 5663149) ve atifungal aktiviteye (Pettit ve ark (1998) Antimicrob.
Agents Chemother. 42:2961-2965) sahip olduklari gösterilmistir.
Dolastatin veya auristatin ilaç moiyetesinin çesitli farkli formlari, peptidik ilaç moiyetesinin N (amino) terminali veya C (karboksil) terminali vasitasiyla antikora kovalent baglanabilir (WO 02/088172; Doronina ve ark (2003) Nature Biotechnology 21(7):778- 784; Francisco ve ark (2003) Blood 102(4): 1458-1465).Ilaç moiyeteleri arasinda dolastatiiiler, auristatinler (US 5635483; US 5780588; US 5767237; US 6124431) ve bunlarin analoglari ve türevleri bulunur. Dolastatinler ve auristatinlerin mikrotübül dinamigine, GTP hidrolizine ve nükleer ve hücresel bölünmeye müdahale ettikleri (Woyke ve ark (2001) Anlimicrob. Agents and Chemother. 45(12):3580-3584) ve anti-kanser akivitesine (ABD Patent No. 5663149) ve atifungal aktiviteye (Pettit ve ark (1998) Antimicrob. Agents Chemother. 42:2961-2965) sahip olduklari gösterilmistir. Dolastatin veya auristatin ilaç moiyetesi, peptidik ilaç moiyetesinin N (ainino) terminali veya C (karboksil) terminalivasitasiyla antikora baglanabilir (WO 02/088172).Ornek auristatin yapilari arasinda N-terminal baglimonometilauristatin ilaç inoiyeteleri DE ve DF bulunur (WO 1472005/0817] 1 numarali dokümanda ve “Senter ve ark, Proceedings of the American Association for Cancer Research, Cilt 45, Abstrakt No 623, presented March 28, 2004” referansinda açiklanir; bu açiklamalarbu dokümana referans olarak açikça ve tümüyle dahil edilmistir).Formül 1 ile temsil edilen antikor-ilaç konjugatlarinin (ADC) ilaç moiyetesi (D), N-terminusu araciligiyla antikora baglananmonometilauristatin ilaç moiyeteleri MMAE ve MMAF5yi kapsar:wrêiûiârwîo / 3% yaww°\ ° MMAF Normalde, peptid-bazli ilaç moiyeteleri, iki veya daha fazla amino asit ve/Veya peptid fragmani arasinda bir peptid bagi olusturularak hazirlanabilir. Bu peptid baglari örnegin peptid kimyasi alaninda iyi bilinen siVi faz sentez yöntemine göre hazirlanabilir (bakiniz: E.Schröder and K. Lübke, "The Peptides", Cilt 1, sayfa 76-136,1965,Academic Press).Ilaç moiyetesi, kalikeamisin ve onun analoglari ve türevlerini kapsar.
Kalikeamisin ailesi antibiyotikler, pikomolar alti konsantrasyonlarda çift iplikçikli DNA kopmalari üretebilir. Kalikeamisin ailesi konjugatlarin hazirlanmasi için bkz. US 5712374; US 5714586; US 5739116; US 5767285; US 5770701, US 5770710; US 5773001; US1485877296. Kullanilabilecek kalikeamisin yapisal analoglari arasinda, bunlarla sinirli kalmaksizin, Yil, 09', 0(3', N-asetil-yH, PSAG ve 911 bulunur (Hinman ve ark Cancer Research 53:3336-3342 (1993), Lode ve ark Cancer Research 58:2925-2928 (1998)).Protein toksinleri arasinda asagida sayilanlar vardir: difteri A zinciri, baglayici olmayan aktif difteri toksini fragmanlari, ekzotoksin A zinciri (Pseudomonas aeruginosa'dan), risin A zinciri (Vitetta ve ark (1987) Science, 23821098), abrin A zinciri, inodesin A zinciri, alfa- sarkin, Aleurites fordii proteinleri, diantin proteinleri, Phytolaca americana proteinleri (PAPI, PAPI] ve PAP-S), momordica charantia inhibitör'û, kursin, krotin, sapaonaria officinalis inhibitör'u, gelonin, mitojelin, restriktosin, fenoinisin, enomisin ve trikotesenler (WO93/21232).Terap'otik radyoizotoplar arasinda 32P, 33P, 90Y, 1251, 1311, 131In, 153Sm,186Re, 188Re, 21'At, 212Bi, 2 12 Pb ve Lu radyoaktif izotoplari bulunur.Radyoizotop ya da baska etiketler, konjugata bilinen yollarla dahil edilebilir (Fraker ve ark (1978) Biochem. Biophys. Res. Commun. 80:49-57; "Monoclonal Antibodies in Immunoscintigraphy" Chatal, CRC Press 1989). Karbon-l4-etiketli 1-izotiyosiyanatobenzi1-3- nietildietilen trianiinpentaasetik asit (MX-DTPA), bir radyonüklidin antikora konjugasyonu için bir örnek selatlama ajanidir (WO94/11026).149BAGLAYICILARBir "Baglayici" (L), bir veya daha fazla sayida ilaç moiyetesini (D) ve bir antikor birimini (Ab) baglayarak Formül 1 ile temsil edilen antikor- ilaç konjugatlarini (ADC) olusturinak için kullanilabilecek bir bifonksiyonel ya da multifonksiyonel moiyetedir. Antikor-ilaç konjugatlari (ADC), Ilaca ve Antikora baglanma için reaktif fonksiyonelligine sahip bir Baglayici kullanilarak uygun sekilde hazirlanabilir. Bir sistein degistirilmis antikorun (Ab) bir sistein tiyolü, bir baglayici reaktifinin, bir ilaç moiyetesinin veya bir ilaç-baglayici ara ürününün bir fonksiyonel grubuyla bir bag olusturabilir.Bu bulusun bir 'Özelligine, bir Baglayici, bir antikorda mevcut bir nükleofilik sisteine reaktif olan bir elektrofilik gruba sahip bir reaktif yer içerir. Antikorun sistein tiyolü bir Baglayici üzerindeki bir elektrofilik grupla reaktiftir ve bir Baglayiciyla bir kovalent bag olusturur. Yararli elektrofilik gruplar arasinda, bunlarla sinirli kalmamak üzere, maleimid ve haloasetainid gruplari bulunur.20 adet sistein degistirilmis antikor, “Klussman, ve ark (2004), Bioconjugate Cheinistry 15(4):765-773” referansinda sayfa 766”da tarif edilen kon jugasyon yöntemine ve Ornek 4”te açiklanan protokole göre baglayici reaktifleriyle ya da ilaç-baglayici ara ürünleriyle, maleiinid ya da a-halo karbonil gibi elektrofilik fonksiyonel gruplarlareaksiyona girer.Bu bulusun bir yapisinda, bir ADC baglayicisi L asagida gösterilen forinülle temsil edilir:-Aa-WWYy-150burada: -A- simgesi antikorun (Ab) bir sistein tiyoli'ine kovaleiit baglanan bir Gerdirici birimdir; a simgesi 0 ya da l”dir; her bir -W- simgesi birbirinden bagimsiz olarak bir Amino Asit birimidir; W simgesi birbirinden bagimsiz olarak 0 ile 12 araliginda bir taiiisayidir; -Y- simgesi ilaç moiyetesine kovalent baglanan bir Aralayici birimdir vey simgesi O, 1 ya da 2°dir.GERDIRICI BIRIMGerdirici birim (-A-), eger varsa, bir antikor birimini bir aniiiio asit birimine (-W-) baglayabilir. Bu baglamda, bir antikor (Ab), bir Gerdirici Birimin bir elektrofilik fonksiyonel grubuyla bir bag olusturabilen bir serbest sisteiii tiyol grubuna sahiptir. Bu yapinin temsilci Gerdirici birimleri, Formül llla ve lllb°de köseli parantezler içinde gösterilmektedir; burada, Ab-, -W-, -Y-, -D, W ve y simgeleri yukarida açiklandigi gibidir ve R'7 simgesi (CH2)r, C3-Cg karbosiklil, O-(CH2)n arilen, (CH2)r-arilen, -arileii-(CH2)r-, (CH2)r-(C3- C8 karbosiklil), (C3-Cg karbosiklil)-(CH2)r, C3-C8 heterosiklil, (CH2)r- (C3-Cgheterosik1il), -(C3-C8 heterosiklil)-(CH2)r-, -(CH2)rC(O)NRb- (CH2)r-, -(CH2CH20).`-, -(CH2CH20)r-CH2-, -(CH2)rC(O)NRb (CH2CH2O)r-, -(CH2)I.C-(O)NRb(CH2CH20)r-CH2-, -(CH2CH20)r C(O)NRb(CH2CHZO)T-, -(CH2CHZO)rC(O)NRb(CH2 CHZO)r -CH2- ve - (CHZCHZO)rC(O)NRb(CH2)r- arasiiidan seçilen bir divaleiit radikaldir;151burada, Rb simgesi H, C1-C6 alkil, fenil ya da benzildir ve r simgesibirbirinden bagimsiz olarak 0 ile 10 araliginda bir tamsayidir.Arilen, ana aroinatik halka sisteminden iki hidrojen atomunun çikarilmasiyla türetilen 6-20 karbon atoinlu divalan aromatik hidrokarbon radikalleri içerir. Tipik arilen gruplari arasinda, bunlarla sinirli kalmaksizin, benzen, sübstit'ue benzen, naftalen, antrasen,bifenil ve benzerinden türetilmis radikaller bulunur.Heterosiklil gruplari arasinda, bir veya daha fazla sayida halka atomunun nitro jen, oksijen ve sülfür gibi bir heteroatom oldugu bir halka sistemi bulunur. Heterosikl radikal 1 ila 20 karbon atomu ve N, O, P ve S'den seçilen l ilâ 3 hetero atom içerir. Bir heterosikl, 3 ilâ 7 halka elemanina sahip bir monosikl (2 ilâ 6 karbon atoinu ve N, O, P ve S7den seçilen 1 ilâ 3 hetero atom) veya 7 ilâ 10 halka eleinanina sahip bir bisikl (4 ilâ 9 karbon atomu ve N, O, P ve S”den seçilen 1 ilâ 3 hetero atom) olabilir; örnek olarak bir bisiklo [4,5], [5,5], [5,6] veya [6,6] sistemi gösterilebilir. Heterosikller “Paquette, Leo A., “Principles of Modem Heterosiklic Chemistry” (W.A. Benjamin, New York, 1968)” referansinda, özellikle Bölüm 1, 3, 4, 6, 7 ve 9”da; “The Chemistry of Heterosiklic Coinpounds, A series of Monographs (John Wiley & Sons, New York, 1950 to present)” referansinda, 'Özellikle Cilt 13, 14, 16, 19 ve 28”de; “1. Am. Chem. Soc. (1960) 82;5566”datarif edilmistir.Heterosikl 'Örnekleri arasinda, bunlarla sinirli kalmaksizin, piridil, dihidropiridil, tetrahidropiridil (piperidil), tiyazolil, tetrahidrotiyofenil,sülfür oksidize tetrahidrotiyofenil, pirimidinil, furanil, tienil, pirrolil,152pirazolil, imidazolil, tetrazolil, benzofuranil, tiyanaftalenil, indolil, indolenil, kinolinil, izokinolinil, benzimidazolil, piperidinil, 4- piperidonil, pirrolidinil, 2-pirr01idonil, pirrolinil, tetrahidrofuranil, bis- tetrahidrofuranil, tetrahidropiranil, bis-tetrahidropiranil, tetrahidrokinolinil, tetrahidroizokinolinil, dekahidrokinolinil, oktahidroizokinolinil, azosinil, triazinil, 6H-l,2,5-tiyadiazinil, 2H,6H- 1,5,2-ditiyazinil, tienil, tiyantrenil, piranil, izobenzofuranil, kromenil, ksaiitenil, fenoksatinil, 2H-pirrolil, izotiyazolil, izoksazolil, pirazinil, piridazinil, indolizinil, izoindolil, 3H-indoli1, lH-indazolil, purinil, 4H-kinolizinil, ftalazinil, naftiridinil, kinoksalinil, kinazolinil, sinnolinil, pteridinil, 4Ah-karbazoli1, karbazolil, ß-karbolinil, fenantridinil, akridinil, pirimidinil, fenantrolinil, fenazinil, fenotiyazinil, furazanil, fenoksazinil, izokromanil, kromanil, imidazolidinil, imidazolinil, pirazolidinil, pirazolinil, piperazinil, indolinil, izoindolinil, kuinûklidinil, morfolinil, oksazolidinil, benzotriazolil, benzizoksazolil, oksindolil, benzoksazolinil ve izatinoil sayilabilir.Karbosiklil gruplari, monosikl olarak 3 ilâ 7 karbon atomuna ve bisikl olarak 7 ilâ 12 karbon atoinuna sahip bir doymus veya doymamis halka içerir. Monosiklik karbosikller 3 ilâ 6 halka atomuna, daha tipik olarak 5 veya 6 halka atomuna sahiptir. Bisiklik karbosikller örnegin, bir bisiklo [4,5], [5,5], [5,6] veya [6,6] sistemi olarak ayarlanmis olarak 7 ilâ 12 halka atomuna 'Örnegin, bir bisiklo [5,6] veya [6,6] sistemi olarak ayarlanmis olarak veya 9 ya da 10 halka atomuna sahiptir. Monosiklik karbosikl örnekleri arasinda siklopropil, siklobütil, siklopentil, l-siklopent-l-enil, l-siklopent-Z-enil, l- siklopent-3-enil, sikloheksil, l-sikloheks-l-enil, l-siklohekS-Z-enil, 1-sikloheks-3-enil, sikloheptil ve siklooktil vardir.153Formül 1 ADC°nIn bütün örnek yapilarindan, örnegin, lll-Vl°dan, açikça gösterilmediginde bile 1 ilâ 4 ilaç moiyetesinin, degistirilmissistein artiklari sayisina bagli olarak bir antikora (p=l-4) bagli olduguanlasilacaktir.
Ab-S Ri7c(or__ww_Yy_D O p mi Ab-S* 9 mbGerdirici Birimin bir örnegi Formül IIIa ile gösterilmektedir ve maleimido-kaproilden (MC) türetilir; burada, R17 simgesi -(CH2)5- bilesigidir:*gGerdirici Birimin bir `Örnegi Formül IIIa ile gösterilmektedir ve maleiinido-propanoilden (MP) türetilir; burada, R” simgesi -(CH2)2- bilesigidir: 154Gerdirici Birimin baska bir örnegi Formül Illa ile gösterilmektedir;burada, R” simgesi -(CH2CHZO)I.-CH2- bilesigidir ve I' simgesi 2”dir:g NME"O 0Gerdirici Birimin baska bir örnegi Formül 11121 ile gösterilmektedir; burada, R” simgesi -(CH2)1.C(O)NRb(CH2CH20)i.-CH2- bilesigidir;burada, Rb simgesi H'dir ve her bir r simgesi 2,dir:gigN/JSNOwO/Ni/EMPEGGerdirici Birimin baska bir örnegi Formül IIIb ile gösterilmektedir;burada, R'7 simgesi -(CH2)5- bilesigidir:;QîSA/Vm/H.Bu bulusun baska bir yapisinda, Gerdirici birim, Antikor biriminin bir sülfür atomu ile Gerdirici biriminin bir sülfür atomu arasinda bir disülfi'ir bagiyla Antikor birimine baglanir. Bu yapinin temsilci Gerdirici birimi, Formül IV,te köseli parantezler içinde gösterilmektedir; burada, R”, Ab-, -W-, -Y-, -D, W ve y simgeleriyukarida açiklandigi gibidir. 155Ab-Seâs-RW-CXOk-Ww-Yy-D ) P IVBu bulusun yine baska bir yapisinda, Gerdiricinin reaktif grubu, bir antikorun bir serbest sistein tiyoli'iyle bir bag olusturabilen bir tiyol- reaktif fonksiyonel grup içerir. Tiyol-reaktif fonksiyonel gruplarin 'Örnekleri arasinda, bunlarla sinirli kalmamak üzere, maleimid, 0(- haloasetil, aktive esterler, örnegin, süksinimid esterler, 4-nitrofenil esterler, pentaflorofenil esterler, tetraflorofenil esterler, anhidritler, asit klor'i'irler, sülfonil klor'i'irler, izosiyanatlar ve izotiyosiyanatlar bulunur. Bu yapinin temsilci Gerdirici birimleri Formül Va ve Vb°de köseli parantezler içinde gösterilir; burada -Rl7-, Ab-, -W-, -Y-, -D, W ve y yukarida tanimlandigi gibidir.AbAgs-qomH-RW-qor-wr-Yy- D ) p VaÃb-és-CßmH-W7-0(0)-w.,-Y,- D ) P vi›Bu bulusun baska bir yapisinda, baglayici, birden fazla ilaç moiyetesinin bir dallanan, multifonksiyonel baglayici moiyetesi vasitasiyla bir antikora kovalent baglanmasi için dendritik tipte bir baglayici olabilir (Sun ve ark (2002) Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters 12:2213-2215; Sun ve ark (2003) Bioorganic & Medicinal Chemistry 11:1761-1768; King (2002) Tetrahedron Letters43:1987-1990). Dendritik baglayicilar ilacin antikora molar oranini,156yani ADC”nin potansiyla ilgili olan yükü artirabilir. Bu sebeple, bir sistein degistirilmis antikorun sadece bir reaktif sistein tiyol grubu tasidigi durumda, bir dendritik baglayici vasitasiyla çok sayida ilaçmoiyetesi baglanabilir.AMINO ASIT BIRIMI Baglayici, amino asit artiklari içerebilir. Amino asit birimi (-WW-), mevcut oldugunda, antikoru (Ab) bulus konusu sistein degistirilmisantikor-ilaç konjugatmin (ADC) ilaç moiyetesine (D) baglar.-WW- simgesi bir dipeptid, tripeptid, tetrapeptid, pentapeptid, hekzapeptid, heptapeptid, oktapeptid, nonapeptid, dekapeptid, undekapeptid veya dodekapeptid biriinidir. Amino asit biriini içeren amino asit artiklari arasinda, dogal olusumlu olanlar ve yani sira küçük ainino asitler ve dogal olusuinlu olmayan amino asit analoglari, örnegin, sitrulin bulunur. Her bir -W- birimi bagimsiz olarak asagidaköseli parantez içinde gösterilen formüle sahiptir ve W simgesi O ile 12g 1%burada, R19 simgesi hidrojen, inetil, izopropil, izobütil, sec-bütil, benzil, p-hidroksibenzil, -CHZOH, -CH(OH)CH3, -CHZCHZSCH3, - CHZCONHZ, -CHZCOOH, -CHZCHZCONHZ, -CH2CH2COOH,-araliginda bir tamsayidir: 5157(CH2)3NHC(=NH)NH2, -(CH2)3NH2, -(CH2)3NHCOCH3, - (CH2)3NHCHO, -(CH2)4NHC(=NH)NH2,-(CH2)4NH2, - (CH2)4NHCOCH3, -(CH2)4NHCHO, -(CH2)3NHCONH2, - (CH2)4NHCONH2,-CH2CH2CH(OH)CH2NH2, 2-piridilmetil-, 3- piridilmetil-, 4-piridilmetil-, fenil, sikloheksil ya da asagidagösterilenleren biridir.“kö/O.“(Vûßi *ah/ÜÇ.)VC:) ; ?bo› H .NAmino Asit birimi, bir tümör-iliskili proteaz dahil bir veya daha fazla sayida enzim tarafindan enzimatik olarak klevaja ugratilarak Ilaç moiyetesi (-D) serbest birakilir; bu bulusun bir yapisinda, bir Ilaç (D)temin etmek için salimin ardindan in ViV0 olarak protonlanir.Kullanilabilecek -WW- birimleri tasarlanabilir ve örnegin bir tümör-iliskili proteaz gibi belirli bir enzim tarafindan enzimatik klevaj için158selektivitesi açisindan optimize edilebilir. Bu bulusun bir yapisinda, bir -WW- birimi, klevaji katepsin B, C ve D ya da bir plazmin proteaztarafindan katalize edilen bir birimdir.Ornek -WW- Ainino Asit biriinleri arasinda bir dipeptid, bir tripeptid, bir tetrapeptid veya bir pentapeptid bulunur. Oniek dipeptidler arasiiida valin-sitrulin (ve veya val-Cit), alanin-fenilalanin (af veya ala-phe) bulunur. Ornek tripeptidler arasinda glisin-valine-sitrulin(gly-val-cit) ve glisin-glisin-glisin (gly-gly-gly) bulunur.R19 simgesi hidrojen haricinde bir bilesik oldugunda, R19”un baglandigi karbon atomu kiraldir. R19”un baglandigi her bir karbon atomu birbirinden bagimsiz olarak (S) veya (R) konfigürasyonlarina sahiptir veya bir raseinik karisimdir. Amino asit biriinleri bu sebeple enantiyomerik olarak saf, rasemik veya diastareomerik olabilir.ARALAYICI BIRIM Aralayici birim (-Yy-), mevcut oldugunda (y : 1 veya 2), bir Amino Asit birimi varsa (W : 1-12) Ainino Asit birimini (-WW-) ilaç moiyetesine (D) baglar. Alternatif olarak, Aralayici birim, bir Amino Asit biriini mevcut olmadiginda Gerdirici birimi ilaç inoiyetesine baglar. Aralayici birim, ayni zamanda, hem Ainino Asit birimi, hem de Gerdirici birimi bulunmadiginda (W, y : 0) ilaç inoiyetesini antikora baglar. Aralayici birimleri iki genel tiptedir: self-immolatif ve non-self-immolatif. Bir non-self-immolatif Aralayici birim, bir Amiiio Asit biriminin antikor-ilaç konjugatindan veya Ilaç moiyetisi baglayicisindan klevajindan, `Özellikle enzimatik sonra Aralayicibirimin bir kisminin veya tainaminin Ilaç moiyetesine bagli kaldigi bir159Aralayici birimdir. Bir glisin-glisin Aralayici biriini veya bir glisin Aralayici birimi içeren bir ADC, bir tümör hücresi iliskili proteaz, bir kanser hücresi iliskili proteaz veya bir lenfosit iliskili proteaz vasitasiyla enzimatik klevaja tâbi tutuldugunda, bir glisin-glisin-ilaç inoiyetesi veya bir glisin-ilaç moiyetesi Ab-Aa-WW-”den klevaja ugrar. Bu bulusun bir yapisinda, hedef hücre içinde bir bagimsiz hidroliz reaksiyonu gerçeklesir ve glisin-ilaç moiyetesi bagini klevajaugratir ve ilaci serbest birakir.Bu bulusun baska bir yapisinda, -Yy- simgesi fenilen kisnii Qm ile sübstitüe edilen bir p-aminobenzilkarbamoil (PAB) birimidir (bakiniz Sema 2 ve Sema 3); burada, Q simgesi -Ci-Cg alkil, -O-(Ci-Cg alkil), - halojen,- nitro ya da -siyanudur ve ni simgesi 0-4 araliginda birtaiiisayidir.Non-self-immolatif Aralayici birimin (-Y-) örnek yapilari söyledir: -Gly-Gly- ; -Gly- ; -Ala-Phe- ; -Val-Cit-.Bu bulusun bir yapisinda, Aralayici birimin bulunmadigi (y:0) bir Ilaç moiyetesi-baglayici veya bir ADC ya da onuii farinasötik olarak kabuledilebilir tuzu ya da solvati temin edilir.Alternatif olarak, bir self-immolatif Aralayici birim içeren bir ADC, - D salimi yapabilir. Bu bulusun bir yapisinda, -Y- simgesi, PAB grubunun amino nitro jen atomu vasitasiyla -WW-,ye baglanan ve bir karbonat, karbamat veya eter grubu vasitasiyla dogrudan -D”ye dogrudan baglanan bir PAB grubu olup, ADC asagidaki 'Örnek yapiya sahiptir:160Cm _1_ Ab Aa-ww-NH-<_:/>-10 cburada, Q simgesi -C i-Cg alkil, -O-(C 1'Cg alkil), -halojen, -nitro ya da -siyanodur; m simgesi 0-4 araliginda bir tamsayidir ve 1:› simgesi 1 ile4 araligindadir.Self-immolatif aralayicilarin baska 'Örnekleri arasinda, bunlarla sinirli kalmaksizin, 2-aminoimidazol-S-metanol türevleri gibi PAB grubuna elektronik olarak benzer olan aromatik bilesikler (Hay ve ark. (1999) Bioorg. Med. Chem. Lett. 922237) ve orto ya da para- aminobenzilasetaller bulunur. S'ûbstiti'ie edilmis veya edilmemis 4- aminobütirik asit ainidler (Rodrigues ve ark (1995) Cheinistry Biology 22223), uygun sekilde sübstit'ûe edilmis bisiklo[2.2.l] ve bisiklo[2.2.2] halka sistemleri (Storm ve ark (1972) J. Amer. Chem. Soc. 94:5815) ve 2-amin0fenilpr0piy0nik asit amidler (Amsberry, ve ark (1990) I.
Org. Chem. 5525867) gibi amid baginin hidrolizinin ardindan siklizasyona tâbi tutulan aralayicilar kullanilabilir. Glisinde sübstiti'ie edilmis amin içeren ilaçlarin eliminasyonu da (Kingsbury ve ark (1984) J. Med. Chem. 27:1447) ADC'lerde yararli self-immolatifdolgularin örnekleridir.Bu bulusun bir yapisinda, Aralayici birim, çoklu ilaçlari dahil etmek ve salinak için kullanilabilecek olan ve asagida gösterilen yapiya sahipolan bir dallanmis bis(hidr0ksimetil)stiren (BHMS) bilesigidir:161CH2(OC)n_Ahh _W "s MCHüocln-Dbir 2-(4-aminobenziliden)propan-l,3-diol dendrimer birimi içerir (WO 2004/043493; de Groot ve ark (2003) Angew. Chem. Int. Ed. 42:4490- 4494); burada, Q simgesi -Ci-Cg alkil, -O-(Ci-Cg alkil), -halojen, - nitro veya -siyanodur; m simgesi 0 ile 4 araliginda bir tamsayidir; nsimgesi 0 veya lSdir; p simgesi ise 1 ile 4 araliginda degisir.
DENDRITIK BAGLAYICILARBu bulusun baska bir yapisinda, baglayici L, bir dallanan, multifonksiyonel baglayici moiyetesi yoluyla birden fazla ilaç moiyetesinin bir antikora kovalant baglanmasi için bir dendritik tipte baglayici olabilir (Sun ve ark (2002) Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters 12:2213-2215; Sun ve ark (2003) Bioorganic & Medicinal Chemistry 11:1761-1768). Dendritik baglayicilar, ADC potansiyla iliskili olarak, ilacin antikora molar oranini, yani yükü arttirabilir. Sonuç olarak, bir sistein degistirilmis antikorun yalnizca bir reaktif sistein tiyo] grubu içerdigi durumlarda, çok sayida ilaçmoiyetesi, bir dendritik baglayici yoluyla baglanabilir.Dendritik baglayici reaktiflerin asagida gösterilen `Örnek yapilari, dokuz adede kadar nükleofilik ilaç moiyetesi reaktifinin kloroetil nitrojen inustard fonksiyonel gruplariyla reaksiyon yoluyla konjugeedilmesine olanak saglar: 162C N/\/[/x3N H\ 0x.. cilzocu;crizciizwi-iccHacMacar<3~Nicmzcuzci)2&da ,sv,Y= CH200H2cH lNHcrgcmCHßHzcHwozH)NuîcuzcHzch-Mcnzcrmo,0 N ,cz, (ll)\ z , cnzocuprgcuncwcx,veyaCHZOGHQCHQÄNHCHZCYg Bir Aralayici birimin baska bir yapisinda, bulus konusu bilesiklerde baglayicilar olarak self-immolatif 2,6-bis(hidr0ksimetil)-p-kresol ve 2,4,6-tris(hidr0ksimetil)-fenol dendrimer birimleriyle dallanmis, dendritik baglayicilar (WO 2004/01993; Szalai ve ark (2003) J . Amer.
Chem. Soc. 125215688-15689; Shamis ve ark (2004) J. Amer. Chem.
Soc. 12621726-1731; Amir ve ark (2003) Angew. Chem. Int. Ed. 42:4494-4499) kullanilabilir.
Bu bulusun baska bir yapisinda, D moiyeteleri aynidir.Bu bulusun yine baska bir yapisinda, D moiyeteleri farklidir. 163Bu bulusun bir özelliginde, Aralayici birimler (-Yy-), Formül (X)- (XII) ile temsil edilir:0 X burada, Q simgesi -C i-Cg alkil, -O-(Ci-Cg alkil), -halojen, -nitro ya da -siyanodur ve m simgesi 0-4 araliginda bir tamsayidir; g-HN-CHZ-co-g xi %-NHCHacwyNncnzqm- XI] Formül 1 antikor-ilaç konjugati bilesiklerinin yapilari arasinda XIIIa (val-cit), Xlllb (MC-val-cit), Xlllc (MC-val-cit-PAB) vardir: '1 N Yyo P0di..I~2H0%“Hz xmi 1645 Formül Ia antikor-ilaç konjugati bilesiklerinin baska örnek yapilariarasinda XIVa-e vardir:XL0 IIAb-S CHQC_Y_C"_D Ah s-cnzc-o 165Ab-o cm-O-ê-o pXIVdms-éwg-H HR):5 burada, X simgesi asagida gösterildigi gibidir:_GHz-O- . -rcnan- , _(CH2CH2°)n_ 0 -wOê--iw ÜRXIVe o "- (CHûii- -Q veya _(CHQn-g-rîl-(CHQn-- I R ;Y simgesi asagida gösterildigi gibidir: R __ _g / 'î' . \ / veya _N_(CH2)n'15 ve R simgesi birbirinden bagimsiz olarak H ya da C l-CÖ alkildir ve nsimgesi 1 ilâ 12”dir.Bu bulusun baska bir yapisinda, bir Baglayici, bir antikor üzerinde bulunan bir elektrofilik grupla reaktif olan bir nükleofilik grup içeren20 bir reaktif fonksiyonel gruba sahiptir. Bir antikor üzerinde bulunan166kullanisli elektrofilik gruplar arasinda, bunlarla sinirli kalmaksizin, aldehid ve keton karbonil gruplari vardir. Bir baglayicinin bir nükleofilik grubunun heteroatomu, bir antikor üzerindeki bir elektrofilik grupla reaksiyona girebilir ve bir antikor birimine bir kovalent bag olusturabilir. Bir Baglayici üzerinde bulunan kullanisli nükleofilik gruplar arasinda, bunlarla sinirli kalmaksizin, hidrazit, oksim, amino, hidrazin, tiyosemikarbazon, hidrazin karboksilat ve arilhidrazit vardir. Bir antikor 'üzerindeki elektrofilik grup, birBaglayiciya baglanina için uygun yer saglar.Normalde, iki veya daha fazla amino asit ve/Veya peptid fragmani arasinda bir peptid bagi olusturularak peptid-tipi Baglayicilar hazirlanabilir. Bu peptid baglari, `Örnegin peptid kiinyasi alaninda iyi bilinen sivi faz sentez yöntemine (E. Schroder and K. Lübke (1965) "The Peptides", Cilt 1, sayfa 76-136, Academic Press) görehzirlanabilir.Baglayici ara ürünleri, Aralayici, Gerdirici ve Amino Asit birimleri dahil reaksiyonlarin herhangi bir koinbinasyonuyla ya da sekansiyla monte edilebilir. Aralayici, Gerdirici ve Amino Asit birimleri, dogasi geregi elektrofilik, nükleofilik ve serbest radikal olan reaktif fonksiyonel gruplari kullanabilir. Reaktif fonksiyonel gruplar arasinda, bunlarla sinirli kalmaksizin, asagida gösterilenler vardir:-COOH-coon oi-i ,167H N\-0j`o-<_I>-No2 . X/îii:burada, X simgesi bir ayrilma grrubu, örnegin O-mesil, O-tosil, -Cl, -Br, -1 ya da maleimiddir.Bu bulusun baska bir yapisinda, Baglayici, çözünürlügü ya da reaktiviteyi modüle eden gruplarla sübstitüe edilebilir. Örnegin, sülfonat (-SO3`) ya da amonyum gibi bir yüklü sübstitüent, reaktifin suda çözünürlügünü artirabilir ve baglayici reaktifinin antikorla veya ilaç moiyetesiyle kuplajlanma reaksiyonunu kolaylastirabilir ya da ADC°yi hazirlamak için kullanilan sentez yoluna bagli olarak Ab- L”nin (antikor-baglayici ara ürünü) D7yle ya da D-L'nin (ilaç- baglayici ara ürünü) Ab,yle kuplajlanma reaksiyonunukolaylastirabilir.Bu bulusa konu olan bilesikler, bunlarla sinirli kalmaksizin, Pierce Biotechnology, Inc., Customer Service Department, P.O. Box 117, Rockford, IL. 61105 U.S.A, U.S.A 1-800-874-3723, International +815-968-0747 firmasindan ticari olarak temin edilebilecek baglayici reaktifleriyle (BMPEO, BMPS, EMCS, GMBS, HBVS, LC-SMCC, MBS, MPBH, SBAP, SIA, SIAB, SMCC, SMPB, SMPH, sulfo- EMCS, sülfo-GMBS, sülfo-KMUS, sülfo-MBS, sülfo-SIAB, sülfo- SMCC ve sülfo-SMPB ve SVSB (süksiniinidil-(4- Vinilsülfon)benzoat)) ve yani sira, bis-maleimide reaktifleriyle (DTME, BMB, BMDB, BMH, BMOE, BM(PEO)3 ve BM(PEO)4) hazirlanan ADC°yi açikça kapsamaktadir. Bakiniz: sayfalar 467-498,1682003-2004 Applications Handbook and Catalog. Bis-maleimid reaktifleri, bir sistein degistirilmis antikorun tiyol grubunun bir tiyol içeren ilaç moiyetesine, etikete veya baglayici ara ürününe sirali veya eszamanli olarak baglanmasina izin verir. Maleimidin yani sira bir sistein degistirilmis antikor, ilaç moiyetesi, etiket veya baglayici ara ürününün bir tiyol grubuyla reaktif olan baska fonksiyonel gruplar arasinda iyodoasetamid, bromoasetamid, Vinil piridin, disülfur, piridildisülfûr, izosiyanat ve izotiyosiyanat bulunur.00 \ o 0NNowO/VN NNOwONowN\ \ /o o o iaiviuaiaoi3 BM(PEO)4Kullanilabilecek baglayici reaktileri, Molecular Biosciences lnc.
(Boulder, CO) gibi baska ticari kaynaklardan elde edilebilecegi, asagida atif yapilan referanslarda tarif edilen prosedürlere göre sentezlenebilir de: Toki ve ark (2002) J. Org. Chem. 6721866- 1872; Walker, M.A. (1995) J. Org. Chem. 60:5352-5355; Frisch ve ark (1996) Bioconjugate Chem. 7:180-186; US 6214345; WO 02/088172; US 2003130189; U82003096743; WO 03/026577; WO 03/043583 ve WO 04/032828.Formül (11121) ile temsil edilen gerdiriciler, asagidaki baglayici reaktifleri bir Amino Asit biriminin N-terminaliyle reaksiyonasokularak bir Baglayiciya dahil edilebilir: 1690 O *T &Hamam-&g o . o burada, n simgesi 1-10 araliginda bir tamsayidir ve T siingesi -H ya da -SOgNa bilesigidir; o ' _ gn-@qci-iân-cbyo- o o burada, 11 simgesi 0-3 araliginda bir tamsayidir; ' O woio_ ; \ 7 0 0 \ 0 0 W .
N . ve 5170Gerdirici birimler, asagidaki bifonksiyonel reaktifler bir amino bir Amino Asit biriminin N-terminaliyle reaksiyona sokularak birbaglayiciya dahil edilebilir:wie& &mg; 09;:BKÂNHVîo 'WMOburada, X simgesi Br ya da I°d1r. Formülün gerdirme birimleri, asagidaki bifonksiyonel reaktifler bir Amino Asit biriminin N-terminaliyle reaksiyona sokularak bir baglayiciya dahil edilebilir.veFormül (Va) ile temsil edilen gerdirici birimler, asagidaki ara ürünler bir Amino Asit biriminin N-terminaliyle reaksiyona sokularak birBaglayiciya dahil edilebilir: 171o BohNH-NHg-.Äoý _ . ' ove o Bor-NH-NHz/YO`Ç _ 0 o5 Asagida gösterilen Formülün Izotiyosiyanat Gerdiricileri, ““Aiigew.
Chem., (1975) 87(l4), 517” referansinda tarif edildigi gibi,izotiosiyanatkarboksilik asit klorürlerinden hazirlanabilir.S=C=N-R”-C(O)-g 1 0burada, -R17- simgesi burada açiklandigi gibidir.Bir maleiinid Gerdirici ve bir para-aminobenzilkarbamoil (PAB) self- immolatif Gerdirici içeren bir örnek valin-sitrulin (val-cit ya da VC)15 dipeptid baglayici reaktifi asagida gösterilen yapiya sahiptir:0 QMX 0% “30 CH; 0 \ &O &WR/“w \ "02 F -N H ITIOC H o \ NH HgNburada, Q simgesi -C i-Cg alkil, -O-(Ci-Cg alkil), -halojen, -nitro ya da -siyanodur ve m simgesi 0-4 araliginda bir tamsayidir.20172Bir maleimid Aralayici birimine ve bir p-aminobenzil self-immolatif Aralayici birimine sahip bir 'Örnek phe-lys(Mtr) dipeptid baglayici reaktifi “Dubowchik, ve ark. (1997) Tetrahedron Letters, 38:5257-60”referansina göre hazirlanabilir ve asagida gösterilen yapiya sahiptir:Qm\< OH Ph H 0 '\\ LWN» Fmoc-N 3 H H 0HN-Mtr burada, Mtr simgesi m0n0-4-metoksitritildir; Q simgesi 'Cl-C3 alkil, -O-(Cl-Cg alkil), -halojen, -nitro ya da -siyanodur ve m simgesi 0-4araliginda bir tamsayidir.Bu bulusa konu olan antikor-ilaç konjugati bilesiklerinin 'Örnekleriarasinda asagida gösterilenler vardir:fm m ;%5 "312795151 ;gpAb-MC-vc- ?AB MMAFWSSMWGNM )pAb-Mch-PAB-MMAE 173Ab- _.O 0 H on NWNIHINEWH p Ab-MC-MMAE Ab' 0 0 H 0 H NWN Ne» N N 0 l 0 ' ° om CH 9 Ab-MC-WAF5 burada, Val simgesi valindir; Cit simgesi sitrulindir; p simgesi 1, 2, 3, ya da 4°tî1r ve Ab siingesi bir sistein degistirilmis antikordur.
Maytansinoid ilaç moiyetesi DMl°in bir BMPEO baglayici araciligiyla trastuzumabin bir tiyol grubuna baglandigi baska `Örnek antikor ilaç kon jugatlari asagida gösterilen yapiya sahiptir: burada, Ab simgesi bir sistein degistirilmis antikordur; n siingesi O, 115 ya da 2°dir ve p simgesi 1, 2, 3 ya da 4”tür.174AN TIKOR-ILAC KONJUGATLARININ HAZIRLANMASIFormül 1 ile temsil edilen ADC, asagida açiklananlar da dahil, sektörde bilgi ve beceri sahibi kisilerin bildikleri organik kimya reaksiyonlari, kosullari ve reakifleri kullanilarak birkaç yolla hazirlanabilir: (1) bir sistein degistirilmis antikorun bir sistein grubunun bir baglayici reaktifiyle reaksiyona girerek bir kovalent bag yoluyla antikor-baglayici ara ürünü Ab-L olusturmasi ve ardindan, bir aktive edilmis ilaç moiyetesi Diyle reaksiyona girinesi ve (2) bir ilaç moiyetesinin bir nükleofilik grubunun bir baglayici reaktifiyle reaksiyona girerek bir kovalent bag yoluyla ilaç-baglayici ara ürünü D-L olusturmasi ve ardindan, sistein degistirilmis antikorun bir sistein grubuyla reaksiyona girmesi. Konjugasyon yöntemleri (1) ve (2), Formül (1) ile temsil edilen antikor-ilaç konjugatlarini hazirlamak için çesitli farkli sistein degistirilmis antikorlar, ilaç moiyeteleri vebaglayicilarla uygulanabilir.Antikor sistein tiyol gruplari nükleofiliktir ve ve reaksiyona girerek baglayici reaktifleri ve ilaç-baglayici ara ürünleri üzerindeki elektrofilik gruplarla kovalent baglar olusturabilir: (i) NHS esterler, HOBt esterler, haloformatlar ve asit halojenürler gibi aktif esterler; (ii) haloasetamidler gibi alkil ve benzil halojenürler; (iii) aldehitler, ketonlar, karboksil ve maleimid gruplari ve (iv) sülfür degisimi yoluyla piridil disûlfurleri de içine alan disülfurler. Bir ilaç moiyetesi üzerindeki nükleofilik gruplar arasinda, bunlarla sinirli kalmamak 'uzere asagida sayilanlar bulunur: amin, tiyol, hidroksil, hidrazit, oksim, hidrazin, tiyosemikarbazon, hidrazin karboksilat ve baglayicimoiyeteleri ve baglayici reaktifleri üzerindeki elektrofilik gruplarla175kovalent bag olusturmak için reaksiyona girebilen arilhidrazit gruplari.Maytansin örnegin May-SSCH3 bilesigine dönüstürülebilir ve bu bilesik de serbest tiyol May-SHsye indirgenebilir ve bir modifiye antikorla reaksiyona sokularak (Chari ve ark (1992) Cancer Research 52:127-131) bir disülfur baglayicili bir maytansinoid-antikor immünokonjugati olusturabilir. Disülfur baglayicili antikor- maytansinoid konjugatlari rapor edilmistir (WO O4/O]6801;US 6884874; US 2004/039176 A1;WO 03/068144; US 2004/001838 AlgUS Patent Nos. 6441163,5208020,5416064;WO 01/024763).
Disi'ilfur baglayici SPP, baglayici reaktifi N-süksinimidil 4-(2-piridiltiyo) pentanoatla olusturulur.Belirli kosullar altinda, sistein degistirilmis antikorlar, DTT (Cleland reaktifi, ditiyotreitol) veya TCEP (tris(2-karboksietil)fosfin hidroklorür; Getz ve ark (1999) Anal. Biochem. cilt 273:73-80; Soltec Ventures, Beverly, MA) gibi bir indirgeme ajaniyla tedavi yoluyla baglayici reaktifleriyle kon jugasyon için reaktif hale getirilebilir. CHO hücrelerinde eksprese edilen tam-boy sistein degistirilmis monoklonal antikorlar (ThioMabdar) 37°C sicaklikta 3 saat süreyle yaklasik 50 kat TCEP fazlasiyla indirgenerek yeni dahil edilen sistein artiklari ile kültür vasatinda mevcut sistein arasinda olusabilecek disülfid baglari indirgendi. Indirgenen ThioMab seyreltildi ve 10 mM sodyum asetat, pH 5 içinde HiTrap S kolona yüklendi ve 0,3M sodyum klorür içeren PBS°yle elüe edildi. Ana Mab°da bulunan sistein artiklari arasinda oda sicakliginda gece boyunca seyreltik (200 nM) aköz bakir sülfatla (CuSO4) disi'ilfûr baglari yeniden olusturuldu. Sektörde bilinen baskaoksidanlar, yani oksidize edici ajanlar ve oksidizasyon kosullari da176kullanilabilir. Ortam havasi oksidasyonu da etkin ve etkilidir. Bu hafif, kismi reoksidasyon basamagi, zincir-içi disülfürleri yüksek fideliteleyle ve etkin ve etkili biçimde olusturur. Ilaç-baglayici ara ürününün, örnegin BM(PEO)4-DMl”in yaklasik 10 kati fazlaligi ilave edildi, karistirildi ve oda sicakliginda yaklasik bir saat süreyle beklemeye birakilarak konjugasyon gerçeklestirildi ve ThioMab antikor-ilaç konjugati olusturuldu. Konjugasyon karisimi jelle filtrelendi ve bir HiTrap S kolona yüklendi ve bu kolonla elüe edildi Ve böylece, fazlalik ilaç-baglayic ara ürünü ve baska safsizliklarçikartildi.Sekil 15, konjugasyon için hücre kültüründen eksprese edilen bir sistein degistirilmis antikor hazirlamak amacina yönelik genel prosesi göstermektedir. Muhtemelen zincirler-arasi çesitli farkli disülfur baglariyla birlikte olusan disülfûr ekleme ürünleri indirgenerek klevaha ugratildi ve böylece, antikorun indirgenmis formu elde edildi.
Eslestirilmis sistein artiklari arasindaki zincirler arasi disülfür baglari kismi oksidasyon kosullari altinda, örnegin ortam oksijenine maruz birakilarak yeniden olusturulur. Yeni dahil edilen, degistirilmis ve eslestirilineinis sistein artiklari, bulus konusu antikor konjugatlariiii olusturmak için baglayici reaktifleriyle veya ilaç-baglayici ara ürünleriyle reaksiyon için kullanilabilir. Memeli hücre hatlarinda eksprese edilen ThioMab°lar, -S-S- bagi olusuinu yoluyla bir degistirilmis Cys°ye harici olarak konjuge edilmis Cys ekleme ürününe sebep olur. Bu nedenle, reaktif ThioMab”1ar üretmek için saflastirilmis ThioMab'lar Ornek ll”de tarif edildigi gibi indirgeme ve oksidasyon prosedürleriyle islenmelidir. Bu ThioMab”lar inaleimidiçeren sitotoksik ilaçlar, floroforlar ve baska etiketlerle konjuge177etmede kullanilir.Çesitli farkli ThioFab ve ThioMab antikor-ilaç kon jugatlari hazirlandi (Örnek 4-8). Sistein mutant hu4D5FabV8 (V1 lOC), bir bis-maleimido baglayici reaktifi BMPEOIu maytansinoid ilaç moiyetesi DM1”le konjuge edilerek hu4D5Fabv8 (V1 lOC) -BMPEO-DMl (Ornek 8) olusturuldu.IN VITRO HUCRE PROLIFERASYON ESEYLERIGenelde, bir antikor-ilaç konjugasinin (ADC) sitotoksik veya sitostatik aktivitesi, reseptör proteinlerine, örnegin HER2°ye sahip olan memeli hücreleri bir hücre kültürü vasatinda ADCîiin antikoruna maruz birakilarak; hücreler yaklasik 6 saatten yaklasik 5 güne kadar degisen bir süreyle kültürlenerek ve hücre canliligi ölçülerek ölçülür.
Bu bulusa konu olan ADC,nin canliligini (proliferasyon), sitotoksisitesini ve ap0ptoz indüksiyonunu (kaSpaz aktivasyonu)ölçmek amaciyla hücre-bazli in vitro eseyler kullanilmistir.Antikor-ilaç konjugalarinin in vitro potensi, bir hücre proliferasyon eseyiyle ölçülmüstür (Sekil 10 ve 11, Ornek 9). CellTiter- G10®Luminesan Hücre Canliligi Eseyi, Coleoptera lusiferazin rekombinan ekspresyoiiuna dayanan ve ticari piyasada bulunan (Promega Corp., Madison, WI) bir homojen esey yöntemidir (A.B.D.
Patent No. 5583024; 5674713 ve 5700670). Bu hücre proliferasyon eseyi, metabolik olarak aktif hücrelerin bir göstergesi olan mevcut ATP miktar tayini temelinde, kültür içinde mevcut canli hücrelerinsayisini tespit eder (Crouch ve ark (1993) 1. lmmunol. Meth. 160:8'l-17888; US 6602677). CellTiter-Glo® Eseyi, 96 kuyucuklu formatta yapilmistir; bu da, bu eseyi, yüksek çiktili taramaya (HTS) mecbur birakmaktadir (HTS) (Cree ve ark (1995) AntiCancer Drugs 6:398- 404). Hoinojen esey prosedürü, tek reaktifin (CellTiter-Glo® Reagent) dogrudan dogruya serum-takviyeli vasat içinde kültürlenen hücrelere ilave edilmesini kapsamaktadir. Hücre yikama, vasatin kaldirilmasi ve multipl pipetleme basamaklarini uygulamak gerekmemektedir.
Sistem, reaktifin eklenmesinden ve karistirilniasindan sonra 10 dakika içinde bir 384-kuyucuk formatinda kuyucuk basina 15 kadar düsük bir sayida hücreyi belirler ve yakalar. Hücreler ADC ile kesintisiz olarak muamele edilebilirler ya da ADC ile muamele edilebilir ve ADC°den ayrilabilirler. Genelde, kisa bir süreyle, ömegin 3 saat muamele edilen hücreler, kesintisiz muamele edilen hücrelerle ayni potens etkilerinigöstermislerdir.Hoinojen "ekle-karistir-Ölç" formati, hücre lizisiyle ve mevcut ATP miktarina orantili bir luminesans sinyalin üretilinesiyle sonuçlanir.
ATP miktari, dogrudan dogruya, kültürde mevcut hücrelerin sayisina orantilidir. CellTiter-Glo® Eseyi, kullanilan hücre tipine ve vasata bagli olarak genelde bes saatten daha uzun bir yari ömre sahip bulunan ve lusiferaz reaksiyonunun ürettigi bir “akkor tipi” luminesans sinyal yaratir. Canli hücreler, bagil luminesans/isima biriniiyle (RLU) yansitilir. Sübstrat, Beetle Luciferin, eszamanli olarak ATP°nin AMP°ye dönüsmesi ve fotonlarin üretilmesiyle birlikte, rekombinan atesb'ocegi lusiferaziyla oksidatif olarak dekarboksile edilir. Uzatilmis yari-ömür, reaktif enjekt'orleri kullanma geregini ortadan kaldirir ve inultipl plakalarin kesintisiz veya yiginmodunda proseslenmesi için gerekli esnekligi saglar. Bu hücre179proliferasyon eseyi, çesitli farkli çoklu kuyucuk formatiyla, örnegin, 96 ya da 384 kuyucuk formatiyla kullanilabilir. Elde edilen veriler, luminometreyle ya da CCD kamera görüntüleme cihaziyla kaydedilebilir. Luminesans çiktisi, zamana göre ölçülen bagil isima birimiyle (RLU) sunulur. Alternatif olarak, luminesans fotonlari, bir sintilantin varliginda bir sintilasyon sayaciyla da sayilabilir. Isimabirimleri, bu durumda CPS -beher saniyede adet- birimiylesunulabilir: Lusiferaz ATP +Lusiferin+ Oz--Poksilusiferin+ AMP + PP! + 002 + isima Mg.?Antikor-ilaç konjugalarimn anti-proliferatif etkileri, SK-BR-3 meme tümörü hücre hattina karsi yukarida belirtilen in vitro hücre öldürme eseyiiide hücre proliferasyonuyla ölçüldü (Sekil 10 ve 11). ADC'nin IC50 degerleri, HER2 reseptör proteinini asiri eksprese ettikleri bilinen SK-BR-3 hücrelerine karsi tespit edildiler.Sekil 10, trastuzumab-SMCC-DMlün (IC50=0,008-O,015 tig/ml) agir zincir sistein mutant konjugasi hu4D5Fabv8 -(A121C)-BMPEO- DMl ”den (IC50 = 0,04 tig/ml) daha kuvvetli oldugunu göstermektedir.
Her iki kon juga da, hücre öldürme konusunda çiplak trastuzumab°dan önemli oranda daha kuvvetliydiler (1C50 = 0,1 tig/ml). Trastuzumab- SMCC-DMl için ilaç yükleinesi 2,8 DMl/Ab; hu4D5Fabv8 (A121C)-BMPEO-DM1 için ilaç yüklemesi ise 0,6 DMl/Ab idi.Sekil 11, trastuzumab-SMCC-DMPin (IC50= 0,008-0,015 tig/ml) hafif zincir sistein mutant hu4D5Fabv8 (Vl 10C)-BMPEO-DM1,den (IC50= 0,07 tig/ml) daha kuvvetli oldugunu göstermektedir. Her iki180konjuga da, hücre Öldürme konusunda çiplak trastuzumab'dan önemli oranda daha kuvvetliydiler (IC50 = 0,1 tig/ml). Trastuzumab-SMCC- DMl için ilaç yüklemesi 2,8 DMl/Ab; hu4D5Fabv8 (V1 10C)- BMPEO-DMl için ilaç yüklemesi ise 0,9 DMl/Ab idi.Tam-boy IgG ThioMab konjugalari, in vitro ortamda hücre proliferasyonu etkinligi açisindan test edildiler ve ana aiitikorlarla kiyaslandilar. Sekil 20, ana antikor trastuzuinab (HERCEPTIN®, Genentech, Inc._); yaklasik 3,4 DMl/Ab ilaç yüklemeli trastuzumab- SMCC-DM] ve yaklasik 1,6 DMl /Ab ilaç yüklemeli tiyo-trastuzumab (A121C)-BMPEO-DM ile muamele edilen SK-BR-3 hücrelerinde yapilan bir eseyin sonuçlarini göstermektedir. Trastuzumab-SMCC- DMl koiijugasi, antikora ainino reaktif NHS ester SMCC baglayici reaktif araciligiyla baglanir; tiyo-trastuzumab (A121C) -BMPEO- DMl kon jugalari ise tiyol reaktif nialeimid BMPEO baglayici reaktifi araciigiyla baglanirlar. Her iki konjuga da SK-BR-3 hücrelerine karsi kuvvetliydiler ve denk bir aktivite gösterdiler; trastuzumab ise bir sitotoksik etki göstermedi. Sekil 21A, ana 2H9 anti-EphBZR ve tiyo 2H9 (A121C) BMPEO-DM] konjugalariyla muamele edilmis HT 1080EphB2 hücrelerinde yapilan bir eseyin sonuçlariiii göstermektedir. Sekil 21B, ana 2H9 anti-EphBZR ve tiyo 2H9 (A121C) BMPEO-DMI konjugalariyla muamele edilmis BT 474 hücreleri üzerinde yapilan bir eseyin sonuçlarini göstermektedir. Hem HT 1080EphB2 hem de BT 474 hücrelerine karsi, 2H9 ThioMab konjugasi, ana 2H9 antikoru konjugasindan daha kuvvetliydi. Thio- 2H9-BMPEO-DM1 konjugasi, sadece marjinal bir aktivitenin gözlemlendigi bir EphB2-harici hücre hattina, BT474 kiyasla EphBZ spesifik hücre hattinda (HTlOSOEphHZ) fonksiyonel hücre öldürme181aktivitesi gösterdi.Antikor ilaç kon jugalari, antikorun bir ana antikor oldugu ve antikorun bir sistein degistirilmis antikor oldugu deneylerde karsilastirildilar.
Sekil 22, 3A5 anti MUC16-SMCC-DM1 ve tiyo 3A5 (A121C) BMPEO-DMl ile muamele edilen PC3/neo hücreleri üzerinde yapilan bir eseyin sonuçlarini göstermektedir. Sekil 23, 3A5 anti MUC16- SMCC-DMl ve tiyo 3A5 (A121C) BMPEO-DMl ile muamele edilen PC3/MUC16 hücreleri üzerinde yapilan bir eseyin sonuçlarini göstermektedir. Sekil 24 ise, 3A5 anti MUC lÖ-SMCC-DM 1 ve tiyo 3A5 (A121C) BMPEO-DMl ile muamele edilen OVCAR-3 hücreleri üzerinde yapilan bir eseyiii sonuçlarini göstermektedir. Tiyo-3A5- BMPEO-DMl, kontrol PC3/neo hücre hatti üzerinde öneinli bir hücre öldürme aktivitesi göstermemis; PC3/MUC16 hücre hatti üzerinde ise 3A5-SMCC-DMl°e denk bir aktivite göstermistir. Tiyo-3A5-DM1 konjugasi da, endojen MUC16 antijenini eksprese eden OVCAR-3hücreleri üzerinde aktivite göstermistir.IN VIVO ETKINLIKBu bulusa konu olan iki albümin baglanma peptidi-DMI (maytansinoid)-antikor-ilaç konjugasinin (ADC) in Vivo etkinligi, ekspresyonu yüksek bir HER2 transgenik eksplaiit fare modeliyle ölçüldü (Sekil 12, Örnek 10). HERCEPTIN® tedavisine cevap vermeyen ya da zayif bir cevap veren F05 inmtv transgenik fareden aliiian bir allogreft yayildi. Deneklere ABP-rhuFab4D5-cys (hafif Zincir)-DMl; ABP-rhuFab4D5-cys (agir zincir)-DM1 ve plasebo PBStampon kontrol (Vehikül) bir kere uygulandi ve ardindan, tümörün iki 182katina çikmasi, log hücre ölümü ve tümörün küçülmesine kadar geçenzainani ölçmek amaciyla, denekler 3 hafta süreyle izlendiler. Numune Doz Ti PR CR TDV (gün) Vehikül(PBStamp0nu) 7/7 0/7 0/7 3 ABP-rhuFab4D5-V110C (hafif Beher kgsda 25 mg 7/7 7/7 0/7 14 zincir)-DM1 (0,9 DMl/Ab) (1012 tig/m2 DMI) ABP-rhuFab4D5-A121C (agir Beher kg“de 37,5 mg 7/7 4/7 0/7 16 ziiicir)-DM1 (0,6 DMl/Ab) (1012 tig/m2 DMI) Ti terimi, T = 0 seviyesinde çalisma grubunda bulunan tümörlühayvan sayisi + gruptaki toplam hayvan sayisini temsil etmektedir.PR terimi, tümörde kismi remisyon gösteren hayvanlarin sayisi + grup içinde T = 0 seviyesinde tümörlü hayvanlarin sayisini temsil etmektedir. CR terimi ise, tümörde tam remisyon gösteren hayvanlarin sayisi + grup içinde T = 0 seviyesinde tümörlü hayvanlarin sayisini temsil etmektedir. TDV terimi, tümörün iki katina çikma süresi, yani, kontrol tümörü hacminin iki katina çikmasi için geçen zaman günolarak anlamina gelmektedir.Beher kg°a 25 mg (1012 ug/m2 DMl) ABP-rhuFab4D5-cys (hafif zincir)-DM1 ile tedavi edilen yedi farenin hepsi tümör-pozitifti ve sadece bir hayvanda 20 gün sonra kismi remisyon gözlemlendi. Beher kg°a 37,5 mg (1012 ug/m2 DMI) ABP-rhuFab4D5-cys (agir zincir)- DMl ile tedavi edilen yedi farenin hepsi tümör-pozitifti ve dörthayvanda 20 gün sonra kismi remisyon gözlemlendi.183BMPEO baglayici ve DM] ilaç moiyetesine konjuge edilen ve A121C sistein mutasyonu bulunan tam-boy IgG ThioMab antikoru, MMTV- HER2 F05 tümör-tasiyan farelerde ana trastuzumab-SMCC-DMI konjugasina karsi test edildi. Gün 0 enjeksiyonda tümör büyüklügü, yaklasik 100-200 mm idi. Sekil 25, Gün 0,da Vehikül (Tampon); trastuzumab-SMCC-DMl 10 mg/kg; tiyo trastuzumab (A121C)- SMCC-DMI 21 mg/kg ve tiyo trastuzumab (A121C)-SMCC-DM1 10 mg/kg ile birlikte tek bir doz uygulamasindan sonra, MMTV-HER2 F05 memeli tümör allogreftli atimik çiplak farelerde 21 gün içindetümör hacminde meydana gelen ortalama degisimi göstermektedir. Numune Doz Ti PR CR Vehikül (PBS tampon) - 10/ 10 0/10 0/ 10 trastuzumab-SMCC-DMI Beher kg fare basina 10 10/ 10 7/10 0/10 3.4 DMl/Ab mg Ab (490 tig/m2 DMl) tiyo-trastuzumab (Al2lC)- Beher kg fare basina 21 8/10 6/10 4/10 BMPEO-DMI 1.6 mg Ab (496 lig/m2DMl/Ab DMl)tiyo-trastuzumab (A121C)- Beher kg fare basina 10 10/ 10 0/ 10 0/ 10 BMPEO-DMI 1.6 mg Ab (236 ug/m2DMl/Ab DMl) Sekil 25”den, konjugalarin her birinin tümör büyümesini geciktirme konusunda plaseboya (Vehikül) kiyasla 'önemli bir etki yaptigi anlasilabilmektedir. Yukarida belirtilen dört grup içindeki on farenin her birine, gün 1°de tek bir enjeksiyon yapildi. Ana trastuzumab- SMCC-DMI konjugasi, sistein degistirilmis tiyo-trastuzumab (A121C)-BMPEO-DM1 konjugasindan (1,6 DMl/Ab) iki katindan184daha fazla (3,4 DMl/Ab) sayida ilaç moiyetesiyle yüklendi.
Dolayisiyla, DMl”in etkin miktari, ana trastuzuinab-SMCC-DMI ile daha yüksek doz (21 mg Ab) tiyo-trastuzuinab (A121C)-BMPEO- DMl arasinda yaklasik olarak esitti. Bu iki numune, en yüksek kuvveti gösterdiler. Enjeksiyondan 14 gün sonra, bu konjugalari alan hayvanlarin çogunda kismi veya tam remisyon gözlemlendi. Daha düsük doz tiyo-trastuzumab (A121C)-BMPEO-DM1 numunesinin daha düsük etkinligi, tedaviye bir DMl doz-baglantili cevap alindigini teyit etti. Tiyo-Trastuzuinab-DMI, kontrol trastuzumab-SMCC-DMI konjugasina esdeger antikor (10 mg/kg) ya da DM] ilaç (21 mg/kg) miktarinda dozlandi. Sekil 25”den görülebildigi gibi, Tiyo-BMPEO- DM] (21 mg/kg), tedaviye trastuzumab-SMCC-DM] grubundan biraz daha iyi bir cevap verdi, çünkü Thiomab-DMI tedavisinde hayvanlarin bazilari tedaviye tam cevap verirken, trastuzumab- SMCC-DMI tedavisinde sadece tek bir hayvandan kismi bir cevapalinabildi.ANTIKOR-ILAC KONJUGATLARININ UYGULANMASIBu bulusa konu olan antikor-ilaç kon jugatlari (ADC), tedavi edilecek duruma uygun herhangi bir yolla uygulanabilir. ADC normalde parenteral olarak, yani infûzyon yoluyla, subkutan yolla,intramüsküler yolla, intravenöz yolla, intradermal yolla, intratekalyolla ve epidural yolla uygulanacaktir.FARMAOTIK FORMULASYONLARBu bulusa konu olan terapötik antikor-ilaç konjugatlarinin (ADC)185farmasötik formülasyonlari normalde farmasötik açidan kabul edilebilir bir parenteral vehikülle ve bir enjeksiyonluk birim dozaj formu halinde parenteral uygulama, yani bolus, intravenöz, intratümör enjeksiyon için hazirlanir. Istenen saflik derecesine sahip bir antikor- ilaç konjugati (ADC) istege göre bir liyofilize formülasyon ya da bir aköz çözelti formunda, farmasötik açidan kabul edilebilir seyrelticiler, tasiyicilar, yardimci maddeler ya da stabilizörlerle karistirilir (Remington's Pharmaceutical Sciences (1980) 16. edisyon, 0501, A.Ed.).Kabul edilebilir seyrelticiler, tasiyicilar, yardimci maddeler ve stabilizörler, uygulandiklari dozajlarda ve konsantrasyonlarda alicilar için toksik degillerdir ve asagida sayilaiilari kapsarlar: fosfat, sitrat ve baska organik asitler gibi tamponlar; askorbik asit ve metionin de dahil antioksidanlar; koruyucular (örnegin oktadesildimetilbenzil amonyum klorür; heksametonyuin klorür; benzalkonyum klorür, benzetonyum klorür; fenol, bütil ya da benzil alkol; alkil parabenler, örnegin metil ya da propil paraben; katekol; resorkinol; sikloheksanol; 3-pentanol ve m-kresol); düsük molekül agirlikli (yaklasik 10 artiktan az) polipeptidler; proteinler, örnegin serum albumini, jelatin ya da immünoglobulinler; hidrofilik polimerler, örnegin polivinilpirrolidon; amino asitler, örnegin glisin, glutamin, asparajin, histidin, arginin ya da lizin; monosakkaritler, disakkaritler ve glukoz, mannoz ya da dekstrinler de dahil baska karbonhidratlar; EDTA gibi selatlama ajanlari; sukroz, mannitol, trehaloz ya da sorbitol gibi sekerler; tuz- olusturucu karsit-iyonlar, örnegin sodyum; metal kompleksleri (örnegin, Zn-protein kompleksleri) ve/Veya non-iyonik yüzey-aktifmaddeler, örnegin TWEENTM, PLURONICS"M ya da polietilen glikol186(PEG). Örnegin, liyofilize anti-ErbBZ antikor formülasyonlari, WO 97/04801 numarali dokümanda tarif edilmektedir.Etkin farmasötik bilesenler, örnegin koaservasyon teknikleriyle ya da arayüzey polimerizasyonu yoluyla hazirlanaii mikrokapsüller içine, örnegin sirasiyla hidroksimetilselüloz ya da jelatin-mikrokapsüller ve poli(meti1metasilat) mikrokaps'ûller içinde ya da kolloidal ilaç tasima sistemleri (örnegin lipozomlar, albümin mikrosferleri, mikroemülsiyonlar, nanopartiküller ve nanokapsüller) içinde ya da makroemülsiyonlar içine de hapsedilebilir. Bu teknikler “Remington's Pharmaceutical Sciences 16. edisyon, Osol, A. Ed. (1980)”referansinda tarif edilmektedir.Sürekli-salimli preparatlar hazirlanabilir. Sürekli-salimli preparatlara verilebilecek uygun örnekler arasinda, ADC içeren kati hidrofobik polimerlerin yari-geçirgen matrisleri sayilabilir; bu matrisler, sekillendirilmis maddeler formunda, 'Örnegin film ya da mikrokapsül formunda bulunurlar. Sürekli-salimli matrislere Örnek olarak polyesterler, hidrojeller [örnegin poli(2-hidroksietil-metakrilat) ya da poli(vinilalk01)], polilaktidler (3773919 sayili ABD Patenti), L- glutamik asit ve gamma-etil-L-glutamat kopolimerleri, bozuiidurulamayan etilen-Vinil asetat, bozuiidurulabilir laktik asit- glikolik asit kopolimerleri [örnegin, LUPRON DEPOTTM (laktik asit- glikolik asit kopolimeri ve löprolid asetattan olusan enjekte edilebilirmikrosferler)] ve poli-D-(-)-3-hidroksibütirik asit gösterilebilir.In-Vivo uygulama için kullanilacak formülasyonlar steril olmalidir;sterilizasyon islemi, steril filtrasyon ineinbranlariyla filtrasyon yoluyla187kolaylikla gerçeklestirilir.Formülasyonlar, daha önce atif yapilan uygulama yollarina uygun formülasyonlardir. Formülasyonlar, birim dozaj formunda uygun sekilde sunulabilir ve eczacilik sektöründe iyi bilinen yöntemlerin herhangi birisiyle hazirlanabilir. Teknikler ve formülasyonlar genellikle “Remington's Pharmaceutical Sciences (Mack Publishing Co., Easton, PA)” referansinda bulunmaktadir. Bu yöntemler, etkin maddeyi bir veya daha fazla sayida yardimci madde içeren tasiyiciyla birlestirme basamagini kapsar. Genelde, formülasyonlar, etkin maddenin s1V1 tasiyicilarla ya da ince bölünmüs kati tasiyicilarla ya da her ikisiyle üniform biçimde ve iyice birlestirilmesi ve ardindan, gerekirse, ürünün sekillendirilmesi suretiyle hazirlanir.Bu bulusa konu olan aköz süspansiyonlar, aköz süspansiyonlarin üretimi için uygun yardimci maddelerle karisim halinde etkin maddeler içerir. Bu yardimci maddeler arasinda örnegin sodyum karboksimetilselüloz, kroskarmelloz, povidon, metilselüloz, hidroksipropil metilselüloz, sodyum aljinat, polivinilpirrolidon, tragakant gami ve akasya gami gibi bir süspansiyon ajani ve örnegin dogada mevcut bir fosfatid (örnegin, lesitin), bir alkilen oksidin bir yag asidiyle bir kondensasyon ürünü (örnegin, polioksietilen stearat), etilen oksidin bir uzun Zincirli alifatik alkolle bir kondensasyon ürünü (örnegin, heptadekaetilenoksisetanol), etilen oksidin bir yag asidi ve bir heksitol anhidridden türetilen bir kismi esterle bir kondeiisasyon ürünü (örnegin, polioksietilen sorbitan monooleat) gibi dispersiyon ya da islatma ajanlari vardir. Aköz süspansiyon ayrica etil veya n-propil p-hidroksi-benzoat gibi bir veya daha fazla sayida koruyucu, bir veyadaha fazla sayida renklendirici ajan, bir veya daha fazla sayida aroma188ajani ve sukroz veya sakkarin gibi bir veya daha fazla sayidatatlandirici ajan da içerebilir.ADC farmasötik bilesimleri, steril en jeksiyonluk aköz ya da oleajinöz süspansiyon gibi bir steril enjeksiyonluk preparat formunda olabilir.
Bu süspansiyon, uygun dispersiyon ya da islatma ajanlari ve yukarida atif yapilan süspansiyon ajanlari kullanilarak sektörde bilinen yönteinlere göre formüle edilebilir. Steril enjeksiyonluk preparat ayrica toksik olmayan parenteral açidan kabul edilebilir seyreltici ya da çözücü içinde bir steril enjeksiyonluk çözelti ya da süspansiyon, örnegin 1,3-bütan-diol içinde bir çözelti olabilecegi gibi, bir liyofilize toz olarak da hazirlanabilir. Kullanilabilecek kabul edilebilir vehiküller ve çözücüler arasinda su, Ringer çözeltisi ve izotonik sodyum klorür çözeltisi vardir. Ek olarak, bir çözücü ya da süspansiyon vasati olarak steril sabit yaglarin kullanilmasi da uygun olabilir. Bu amaçla, sentetik mono- ya da digliseridler de dahil tadi olmayan herhangi bir sabit yag kullanilabilir. Ek olarak, benzer sekilde, enjeksiyonluk preparatlar hazirlarken oleik asit gibi yagasitleri de kullanilabilir.Bir tekli dozaj formu üretmek için tasiyici malzemeyle kombine edilebilecek etkin madde miktari, tedavi edilen konakçiya ve belirli uygulama moduna bagli olarak degisecektir. Örnegin, intravenöz infüzyon için kullanilmasi hedeflenen bir aköz çözelti, yaklasik 30 mL/saat hizda uygun bir hacimde infüzyon yapilabilmesi için çözeltinin beher mililitresinde yaklasik 3 ilâ 500 ug etkin maddeiçerebilir.189Parenteral uygulaina için uygun formülasyonlar arasinda anti- oksidanlar, tamponlar, bakteriyostatlar ve formülasyonu hedeflenen alicinin kaniyla izotonik hale getiren çözünmüs maddeler içerebilecek aköz ve aköz-olmayan steril enjeksiyon çözeltileri ve süspansiyon ajanlari ve koyulastirici ajanlar içerebilecek aköz ve aköz-olmayansteril süspansiyonlar vardir.Bagirsakta hidroliz veya denatürasyon nedeniyle protein terapötiklerinin oral uygulamasi genellikle istenmemesine ragmen, oral uygulama için uygun ADC formülasyonlari kapsül, hap veya tablet gibi, her biri önceden belirlenmis miktarda ADC içeren ayribirimler halinde hazirlanabilir.Formülasyonlar, örnegin sizdirmaz kapatilmis ampuller ve flakonlar gibi birim-doz ya da çoklu-doz kaplarinda ambalajlanabilir ve sadece kullanmadan hemen önce örnegin enjeksiyonluk su gibi steril sivi tasiyicinin ilave edilmesini gerektiren dondurularak-kurutulmus (liyofilize) kosullarda saklanabilir. Ekstamporane enjeksiyon çözeltileri ve süspansiyonlari, daha önce tarif edilen tipte steril tozlardan, granûllerden ve tabletlerden hazirlanir. Tercih edilen birim dozaj formülasyonlari, yukarida atif yapildigi gibi etkin maddenin günlük dozunu ya da birim günlük alt-dozunu ya da uygun birfraksiyonunu içerir.Bu bulus, bir veterinerlik tasiyicisiyla birlikte yukarida tanimlandigi gibi olan en az bir adet etkin bilesen içeren veterinerlik bilesimleri temin edilmesini de saglar. Veterinerlik tasiyicilari, bilesimiuygulamak amaciyla kullanilabilecek malzeinelerdir ve kullanilan190etkin bilesenle uyumlu olan ve veterinerlik sektörü genelinde kabul gören veya inert nitelikte olan kati, sivi veya gaz halindeki inaddeler olabilir. Bu veterinerlik bilesinileri parenteral veya oral yolla ya datercih edilen baska herhangi bir uygun yolla uygulanabilirler.ANTIKOR-ILAC KONJUGATI TEDAVI YÖNTEMLERI Bu bulusa konu olan antikor-ilaç konjugatlarinin (ADC) ömegin bir tümör aiitijeninin asiri-eksresyonuyla karakterize edilen Çesitli farkli hastaliklari ya da bozukluklari tedavi etmek için kullanilabilmesi tasarlanmaktadir. Bu duruinlara ya da hiperproliferatif bozukluklara örnek olarak benign ya da malign tümörler; lösemi ve lenfoid nialignensiler gösterilebilir. Digerleri arasinda da, nöronal, gliyal, astrosital, hipotalamik, glandular, inakrofajal, epitelyal, stromal, blastokoelik, enflamatuvar, anjiyojenik ve otoimmün dahilimmünolojik bozukluklar bulunur.Hayvan modellerinde ve hücre bazli eseylerde tanimlanan ADC bilesikleri tüinörlü yüksek primatlar ve insan klinik deneylerinde de tanimlanabilir. Insan klinik deneyleri, “Baselga ve ark. (1996) J. Clin.
Oncol. 142737-744” referansinda rapor edildigi gibi, daha önce yogun anti-kanser tedavisi almis olan HERZ asiri-eksprese eden metastatik meme kanseri hastalarinda anti-HER2 moiioklonal antikoru HERCEPTIN® ürününün etkinligini test eden klinik deneylere benzer sekilde tasarlanabilir. Klinik deney, bilinen kemoterapötik ve/veya sitotoksik ajanlari kapsayan radyasyon ve/veya kemoterapi gibi bilinen terapötik rejimlerle kombinasyonlar haliiide bir ADCsninetkinligini degerlendirmek için tasarlanabilir.191Genelde, tedavi edilecek hastalik ya da bozukluk, kanser gibi bir hiperproliferatif hastaliktir. Tedavi edilecek kansere örnek olarak, bunlarla sinirli kalmaksizin, karsinom, lenfoma, blastom, sarkoina ve lösemi ya da lenfoid malignensiler gösterilebilir. Bu kanserlerin daha somut örnekleri arasinda skuam'oz hücreli kanser (örnegin, epitelyal skuamöz hücreli kanser), küçük-hücreli akciger kanseri, küçük hücreli-disi akciger kanseri, akciger adenokarsinomu ve skuamöz akciger karsinomu da dahil akciger kanseri, peritoneum kanseri, hepatoselüler kanser, gastrointestinal kanser de dahil gastrik kanser ya da mide kanseri, pankreas kanseri, glioblastom, serviks kanseri, yumurtalik kanseri, karaciger kanseri, mesane kanseri, hepatom, meme kanseri, kolon kanseri, rektal kanser, colorektal kanser, endometrium ya da uterin karsinomu, tükürük bezi karsinomu, böbrek kanseri ya da renal kanser, prostat kanseri, vulva kanseri, tiroid kanseri, hepatik karsinom, anal karsinom, penil karsinom ve bas veboyun kanseri sayilabilir.Kanser, HER2-eksprese eden hücreler içerebilir ve böylece, bu bulusa konu olan ADC, kaiiser hücrelerine baglanabilir. Kanserde ERbBZ ekspresyonunu tayin etmek için çesitli farkli diyagnostik/prognostik eseyler mevcuttur. Bu bulusun bir yapisinda, ErbBZ asiri-ekspresyonu, örnegin HERCEPTEST (Dako) kullanilarak IHCsyle analiz edilebilir.
Bir tümör biyopsisinden alman parafine gömülü doku kesitleri, IHC eseyine tâbi tutulabilir ve asagida gösterilen ErbB2 proteini boyama yogunlugu kriterleri esasinda puanlandirilabilirler: Skor 0: Herhangi bir boyaiima gözlemlenmez ya da sadece tümör hücrelerinin %10”undan azinda membranlarda boyanma gözlemlenir; Skor l+:Tümör hücrelerinin %10°undan fazlasinda membranlarda soluk/zor192algilanabilir boyanina tespit edilir, hücre meinbranlari sadece kismen boyanmis haldedirler; Skor 2+: Tümör hücrelerinin %10”undan fazlasinda zayif ilâ orta seviyede tam membran boyanmasi gözlemlenir; Skor 3+: Tümör hücrelerinin %losundan fazlasinda orta ilâ kuvvetli seviyede tam membran boyanmasi gözlemlenir. ErbBZ asiri ekspresyon degerlendirmesi bakimindan 0 veya l+ skorlarina atanan tümörler, ErbB2”yi asiri eksprese etmeyen tümörler olarak karakterize edilirken, 2+ veya 3+ skorlarina atanan tümörler, ErbB2°yiasiri eksprese eden tümörler olarak karakterize edilebilirler.Alternatif veya ek olarak, tümördeki ErbB2 asiri ekspresyonunun boyutlarini (varsa) belirlemek için, formalinde fikse edilip parafine gömülmüs tümör dokusunda, INF ORM® (Ventana Co., Arizona) veyaPATHVISION® (Vysis, III.) gibi FISH eseyleri gerçeklestirilebilir.ADC bilesiklerinin tedavide kullanilabilecegi otoimmün hastaliklar arasinda asagida sayilanlar vardir: romatolojik bozukluklar (örnegin, romatoid artrit, S jögren sendromu, skleroderma, SLE ve lupus nefritis gibi lupus, polimiyozit/dermatomiyozit, kriyoglobulinemi, anti- fosfolipid antikor sendromu ve psöriatik artrit), osteoartrit, otoimmün gastrointestinal bozukluklar ve karaciger bozukluklari (örnegin, iiiflamatuar bagirsak hastaliklari (örnegin ülseratif kolit ve Crohn hastaligi), otoimmün gastrit ve pernisiyöz anemi, otoimmün hepatit, primer biliyer siroz, primer sklerozan kolanjit ve çölyak hastaligi), vaskülit (örnegin Churg-Strauss vasküliti, Wegener granülomatözü ve poliarterit dahil ANCA-iliskili vaskülit gibi), otoimmün nörolojik bozukluklar (örnegin multipl skleroz, opsoklonus myoklonussendromu, myastenia gravis, nöroiniyelitis optika, Parkinson hastaligi,193Alzheimer hastaligi ve otoimmün polinöropatiler), renal bozukluklar (Örnegin glomerülonefrit, Goodpasture sendromu ve Berger hastaligi), otoimmün dermatolojik bozukluklar (örnegin psöriyazis, ürtiker, kurdesen, pemfigus vulgaris, büllöz pemfigoid ve kutanöz lupus eritematozus), hematolojik bozukluklar (örnegin trombositopenik purpura, trombotik trombositopenik purpura, post-transfüzyon purpurasi ve otoimmün hemolitik anemi gibi), ateroskleroz, üveit, otoimmün isitme hastaliklari (örnegin iç kulak hastaligi ve isitme kaybi gibi), Behçet hastaligi, Raynaud sendromu, organ transplanti ve otoimmün endokrin bozukluklari (örnegin insülin-bagimli diabetes mellitus (IDDM), Addison hastaligi ve otoimmün tiroid hastaligi (örnegin Graves hastaligi ve tiroidit) dahil diyabet baglantili otoimmün hastaliklari). Daha çok tercih edilen hastaliklar arasinda, örnegin roinatoid artrit, ülseratif kolit, ANCA-iliskili vaskülit, lupus, multipl skleroz, Sjögren sendromu, Graves hastaligi, IDDM,pernisiyöz anemi, tiroidit ve glomerülonefrit sayilabilir.Hastaligin önlenmesi ya da tedavisi için, bir ADC°nin uygun dozaji, yukarida açiklanan tedavi edilecek hastaligin tipine, hastaligin siddetine ve seyrine, molekülün önleyici amaçlarla mi, yoksa terapötik amaçlarla mi uygulandiginda, 'önceden uygulanan tedaviye, hastanin klinik hikayesine ve antikora cevaba ve tedaviyi yapan doktorun kararina bagli olacaktir. Molekülün hastaya bir defada ya da bir dizi tedavi boyunca uygulanmasi uygundur. Hastaligin tipine ve siddetine bagli olarak, yaklasik 1 tig/kg ilâ 15 mg/kg (örnegin 0,1 - 20 mg/kg) molekül, örnegin bir veya daha fazla sayida ayri uygulama yoluyla ya da kesintisiz infüzyon yoluyla hastaya uygulamak için ilk adaydozajdir. Bir tipik dozaj rejimi, wkarida atif yapilan faktörlere bagli194olarak yaklasik l ug/kg ilâ 100 mg/kg ya da daha fazla olabilir. Bir hastaya uygulanacak bir 'Örnek ADC dozaji, yaklasik 0,1 ile yaklasik mg/kg hasta agirligi araligindadir.Tedavi edilen duruma bagli olarak birkaç gün ya da daha uzun bir süre boyunca yinelenen uygulamalar için, tedavi, hastalik semptomlarinin istenen supresyonu saglanana kadar sürdürülür. Bir örnek dozaj rejimi, anti-ErbB2 antikorunun yaklasik 4 mg/kg baslangiç yükleme dozunu ve ardindan, haftada bir yaklasik 2 mg/kg idame dozunu uygulamayi kapsar. Baska dozaj rejimleri de kullanilabilir. Bu tedavinin seyrigeleneksel tekniklerle ve eseylerle kolaklikla izlenir.KOMBINASYON TEDAVISIBu bulusa konu olan bir antikor-ilaç konjugati (ADC), bir farmasötik kombinasyon formülasyonunda ya da kombinasyon tedavisi olarak dozlaina rejiminde anti-kanser özelliklerine sahip bir ikinci bilesikle kombine edilebilir. Farmasötik kombinasyon formülasyonu ya da dozlaina rejiminin ikinci bilesigi tercihen birbirlerini advers etkileineyecek sekilde koinbinasyonun ADC°sini tamamlayiciaktivitelere sahiptir.Ikinci bilesik, bir kemoterapötik ajan, sitotoksik ajan, sitokin, büyüme inhibitörü ajani, anti-hormonal ajan ve/veya kardiyoprotektan olabilir.
Bu moleküllerin hedeflenen amaç için etkin ve etkili miktarlarda kombinasyon halinde mevcut olmasi uygundur. Bu bulusa konu olan bir ADC içeren bir farmas'otik bilesim, bir tubulin-olusturucu inhibitör, bir topoizomeraz inhibitörü ya da bir DNA baglayici gibi bir195kemoterapötik ajani da terapötik açidan etkin ve ekili miktarda daiçerebilir.Bu bulusa göre tanimlanan bir antikanser ajaniyla kombinasyon halinde baska terap'otik rejiinler de uygulanabilir. Kombinasyon tedavisi bir eszamanli ya da sirali rejim olarak uygulanabilir. Sirayla uygulandiginda, kombinasyon, iki veya daha fazla uygulama haliiide uygulanabilir. Kombine uygulama, ayri formülasyonlar ya da tekli farmasötik formülasyon kullanilarak yapilan es-uygulamayi ve tercihen etkin maddelerin her ikisinin (ya da hepsinin) biyolojik etkinliklerini eszamanli gösterecekleri bir sürenin mevcut oldugu herhangi bir sirasiyla yapilan ardisik uygulamayi kapsar.Bu bulusun bir yapisinda, bir ADC°yle tedavi, farkli kemoterapötik ajanlarin kokteyllerinin es zainanli uygulainasi da dahil, burada tanimlanan bir antikanser ajaiii ile bir veya daha fazla sayida kemoterapötik ajanin ya da büyüme inhibitörü ajaninin kombine uygulamasini kapsar. Kemoterapötik ajanlar arasinda taksanlar (örnegin, paklitaksel ve dosetaksel) ve/veya antrasiklin antibiyotikleri vardir. Bu kemoterapötik ajanlarin hazirlama prosedürü ve dozlaiiia programlari, üretici talimatlarina göre ya da bilgi ve beceri sahibi doktorlar tarafindan ampirik olarak tayin edildigi gibi kullanilabilir.
Bu kemoterapi için hazirlama prosedürleri ve dozlama programlari ayrica “Cheinotherapy Service Ed., M.C. Perry, Williams & Wilkins, Baltimore, Md. (1992)” referansinda da tarif edilmektedir.ADC, bir anti-hormonal bilesikle; örnegin tamoksifeii gibi bir anti- östrojen bilesigiyle; onapristoii gibi bir anti-progesteronla (EP616812) ya da flutaniid gibi bir anti-androjenle, bu moleküller için196bilinen dozajlarda kombine edilebilir. Tedavi edilecek kanserin horinondan bagimsiz kanser oldugu duruinlarda, hasta önceden anti- hormonal tedaviye tâbi tutulmus olabilir ve kanser hormondan bagimsiz olmaya basladiktan sonra, hastaya ADC (ve istege göre, burada açiklanan baska ajanlar) uygulanabilir. Hastaya, (tedaviyle iliskili miyokardial disfonksiyonu `Önleme ya da azaltmak için) bir kardiyoprotektan ya da bir veya daha fazla sayida sitokini es- uygulama da faydali olabilir. Yukarida açiklanan terap'otik rejimlere ek olarak, hasta, kanser hücrelerinin cerrahi prosedürle çikartilmasiislemine ve/veya radyasyon tedavisine de tâbi tutulabilir.Yukarida es-uygulanan ajanlarin herhangi birisi için uygun dozajlar, günümüzde halihazirda kullanilmakta olan dozajlardir ve yeiii tanimlanan ajan ve baska kemoterapötik ajanlar ya da tedavilerinkombine etkinliginden (Sinerji) dolayi düsürülebilir.Koinbinasyon tedavisi “Sinerji” saglayabilir ve “sinerjistik” etkinin, yani etkin maddeler birlikte kullanildiginda elde edilen etkinin bilesiklerin ayri olarak kullanilmasindan kaynaklanan etkilerin toplamindan büyük oldugunu kanitlayabilir. Etkin maddeler (1) bir kombine, birim dozaj formülasyonunda birlikte formüle edildiginde ve eszamanli olarak uygulandiginda ya da verildiginde; (2) ayri formülasyonlar halinde dönüsümlü veya paralel olarak uygulandiginda veya (3) baska herhangi bir re jimle uygulandiginda bir sinerjistik etki elde edilebilir. Dönüsümlü tedavi olarak uygulandiginda, bilesikler sirayla, 'Örnegin ayri siringalarda farkli enjeksiyonlar halinde uygulandiginda ya da verildiginde bir sinerjistik etki elde edilebilir.Genelde, dönüsümlü tedavi sirasinda, her bir etkin maddenin etkin ve197etkili bir dozaji sirayla, yani seri olarak uygulanir; kombinasyon tedavisinde ise iki veya daha fazla etkin maddenin etkin ve etkilidozajlari birlikte uygulanir.ANTIKOR-ILAC KONJUGALARININ METABOLITLERIBu ürünler teknigin bilinen durumuna göre apaçik olmadiklari ve yeni ürünler olduklari sürece, burada tanimlanan ADC bilesiklerinin in vivo metabolik ürünleri de bu bulusun kapsami içine girmektedir. Bu ürünler örnegin verilen bilesigin oksidasyonu, redüksiyonu, hidrolizi, amidasyonu, esterifikasyonu, enzimatik klevaji ve benzeri proseslerden kaynaklanabilir. Dolayisiyla, bu bulus, bu bulusa konu olan bir bilesigin bir metabolik ürün vermek için yeterli bir süre boyunca bir memeli ile temas ettirilinesinden olusan bir prosesleüretilen ve apaçik olinayan yeni bilesikleri de kapsar.Metabolit ürünleri, normalde, bir radyoaktif isaretli (örnegin, ”C veya 3 H) ADC”nin hazirlanmasi ve bunun metabolizasyonun gerçeklesmesi için yeterli bir süre (normalde yaklasik 30 saniye ile 30 saat arasinda bir süre) birakilmak suretiyle siçan, fare, hint domuzu, maymun veya insan gibi bir hayvana algilanabilir bir dozda (ömegin, yaklasik 0,5 mg/kg°dan fazla) parenteral yoldan verilmesi ve onun dönüsüm ürünlerinin idrar, kan veya diger biyolojik örneklerden izole edilmesi yoluyla hazirlanmak suretiyle tanimlanirlar. Bu ürünler, isaretli olduklari için kolaylikla izole edilirler (digerleri, metabolitin içinde varligini sürdüren epitoplari baglama kabiliyetine sahip antikorlar kullanilmak suretiyle izole edilirler). Metabolit yapilari,geleneksel tarzda, örnegin MS, LC/MS veya NMR analiziyle198belirlenirler. Genelde, inetabolitlerin analizi, teknikte uzman kisilerin iyi bildikleri geleneksel ilaç metabolizma çalismalariyla ayni sekilde ve tarzda yapilir. Baska bir yolla ve in vivo ortamda bulunmadiklari sürece dönüsüm ürünleri, bu bulusa konu olan ADC bilesiklerininterap'otik dozlamasi için yapilan diyagnostik eseylerde faydali olurlar.ISARETLI ANTIKOR GORUNTULEME YÖNTEMLERI Bu bulusun baska bir yapisinda, sistein degistirilinis antikorlar, sistein tiyol kullanilarak, radyonüklidlerle, flüoresan boyalariyla, biyoluminesans-tetikleyici sübstrat moieyeteleriyle, kimyasal luminesans-tetikleyici sübstrat moiyeteleriyle, enzimlerle ve diyagnostik, farniakodinamik ve terapötik uygulamalarla yapilan görünteleine deneyleri için baska belirleme etiketleriyle isaretlenebilirler. Genelde, isaretlenmis sistein degistirilmis antikor, yani “biyomarker” veya “prob”, Örnegin insan, kemirgen veya baska küçük hayvanlar gibi bir canli organizmaya, bir disinlanmis organa veya doku numunesine enjeksiyon, perfüzyon ya da oral injestiyon yoluyla verilir. Probun dagilimi belirli bir zaman süreci içerisindetespit edilir ve bir görüntüyle gösterilir.ARAÇ VE GERECLERBu bulusun baska bir yapisinda, yukarida tanimlanan hastaliklarin tedavisi için faydali olan malzemeler içeren bir araç gereç veya “kit” tanitilmaktadir. Araç gereç, bir kaptan ve kabin üzerinde veya kapla baglantili bir etiketten veya bir prospektüsten olusur. Uygun kaplararasinda Örnegin siseler, flakonlar, siringalar, blister plakasi, Vb.°nden199söz edilebilir. Kaplar, cam veya plastik gibi çesitli farkli malzemelerden üretilebilir. Kabin içinde, hastaligin tedavisi için etkili bir antikor-ilaç konjugasi (ADC) bilesimi vardir ve kabin bir steril erisim portu bulunabilir (örnegin, kap, bir hipoderinik enjeksiyon ignesiyle delinebilen bir tipasi bulunan bir intravenöz çözelti torbasi veya bir flakon olabilir). Bilesikteki etken maddelerden en az bir tanesi bir ADC”dir. Etikette veya prospektüste, bilesimin kanser gibi seçilecek belirli bir hastaligin tedavisi için kullanildigi belirtilir.
Alternatif olarak ya da ek olarak, araç gereç, ayrica, bakteriyostatik en jeksiyonluk su (BWFI), fosfat-tamponlu salin, Ringer's çözeltisi ve dekstroz çözeltisi gibi farmasötik olarak kabul edilebilir bir tampon içeren ikinci (veya üçüncü) bir kabi da içerebilir. Baska tamponlar, seyrelticiler, filtreler, igneler ve siringalar da dahil olmak üzere ticari açidan ve kullanici açisindan arzu edilebilecek baska malzemelere deiçerebilir.ÖRNEKLERÖrnek 1 - Biyotinlenmis ThioFab Faiin HazirlanmasiThioFab-faji (5 x 1012 faj partikülleri), 150 kati fazla biyotin-PEO- maleiinid ((+)-biotinil-3-maleimidopropiyonamidil-3,6- dioksaoktainediamin (Oda ve ark (2001) Nature Biotechnology 192379-382, Pierce Biotechnology, Inc.) ile oda sicakliginda 3 saat süreyle reaksiyona sokulmustur. Fazla biyotin-PEO-maleimid, biyotin-konjuge fajdan tekrarlainali PEG çökeltmeleriyle (3-4 kere) çikartilmistir. Biyotin-BMCC, PEO-Iodoacetyl Biotin, Iyodoasetil- LC-Biyotin ve Biyotin-HPDP (Pierce Biotechnology, Inc.) ve Na-(3- ina]simidilpropiyonil)biositin (MFB, Molecular Probes, Eugene, OR) 200de dahil olmak üzere, sistein tiyol gruplariyla reaktif olan elektrofilik gruplar içeren ve ticari piyasada bulunan baska biyotinlestirme reaktifleri de kullanilabilir. Biyotinlestirme, bifonksiyonel ve multifonksiyonel baglayici reaktifleri için kullanilabilecek diger ticari kaynaklar arasinda Molecular Probes, Eugene, OR ve Sigma, St.Louis, MO'dan söz edilebilir. 0mk.."Biyotin-PEO-maleîmidOrnek 2 - PHESELECTOR EseviBOVin seruin albümin (BSA), erbBZ ekstraselüler domain (HER2) ve streptavidin (100 pl 2 ug/ml), Maxisorp 96 kuyucuklu plakalara ayri ayri kaplanmislardir. %O,5 Tween-20 (PBS içinde) ile bloke edildikten sonra, biyotinlenmis ve biyotinlenmemis hu4D5Fabv8-ThioFab-Faji (2x10'0 faj partikülleri), önce oda sicakliginda 1 saat süreyle inki'ibe edilmisler ve ardindan, bayirturbu peroksidazi (HRP) etiketli sekonder antikorla (anti-M 13 faj kaplama proteini, pVIII protein antikoru) inkübasyona tâbi tutulmuslardir. Sekil 8, Fab”in veya ThioFab”in HERZ'ye (üst) ve biyotinlenmis ThioFab°in streptavidina (alt) baglanmasini tanimlayan sematik bir gösterimle PHESELECTOREseyini göstermektedir.Standart HRP reaksiyonu gerçeklestirilmis ve 450 nm”de absorbansölçülmüstür. Tiyol reaktivitesi, streptavidin için OD450 ile HER2 için201OD450 arasindaki oran hesaplanmak suretiyle ölçülmüstûr. Tiyol reaktivitesi degerinin 1 olmasi, sistein tiyolun tam ve eksiksiz biyotinlendigini gösterir. Fab protein baglanma ölçümlerinde, hu4D5FabV8 (2-20 ng) kullanilmis ve ardindan, HRP etiketli keçipoliklonal anti-Fab antikorlariyla inkübasyon gerçeklestirilmistir,Ornek 3a - Thi0Fab°larin Ekspresvonu ve SaflastirilmasiThioFab”lar, bir non-supresör E. Coli susu olan 34B8°de indüksiyondan sonra eksprese edilmislerdir (Baca ve ark (1997) Journal Biological Chemistry 272(16)210678-84). Kültür hücresi peleti, PBS (fosfat tamponlu salin) içinde yeniden süspanse edilmis; bir mikro-akiskanlistirici içinden geçirilerek toplam hücre lizisi gerçeklestirilmis ve ThioFabdar, afinite kromatografisi yoluyla protein G SEPHAROSETM (Amershain) ile saflastirilmislardir.ThioFab°lar L-VlSC, L-VllOC, H-A88C ve H-A121C, Protein-G SEPHAROSETM kolon kromatografisiyle eksprese edilmis ve saflastirilmislardir. Oligomerik-Fab, 26 ilâ 30 fraksiyonlarin içinde mevcuttu ve monomerik formun çogunlugu 3 1-34 fraksiyonlarindaydi. Monomerik formu olusturan fraksiyonlar, yabani tip hu4D5FabV8 ile birlikte SDS-PAGE ile havuzlanmis ve analiz edilmislerdir ve indirgen olan (DTT veya BME ile) ve indirgen olmayan (DTT veya BME°siz) kosullar altinda SDS-PAGE jelinde analiz edilmislerdir. AlZlC-ThioFab jel filtraspon fraksiyonlari, indirgen olmayan SDS-PAGE'de analiz edilmislerdir.202ThioFab°lar, yukarida açiklandigi gibi biyotin-PEO-maleimid ile konjuge edilmislerdir ve Biyotinlenmis-ThioFab“lar, SuperdeX-200TM (Amersham) jel filtrasyon kromatografisiyle ek olarak saflastirilmislardir ve bu islem, serbest biyotin-PEO-maleimidi ve ThioFab”larin oligoinerik fraksiyonunu elimine etmistir. Yabani tip hu4D5FabV8 ve hu4D5Fabv8 AlZlC-ThioFabsin (miktar olarak 0,5) her biri, oda sicakliginda 3 saat süreyle 100 kati molar fazla biyotin- PEO-maleimid ile ayrica inkübe edilmis ve hem serbest biyotini hem de oligomerik Fablari monomerik formdan ayirmak için bir Superdex-200 jel filtrasyon kolonuna yüklenmistir.Ornek 3b - ThioFabHarin AnaliziBiyotinlenmis hu4D5FabV8 (AlZlC) ThioFab ve Yabani tip hu4D5FabV8”in enzimatik dijest fragmanlari, sivi kromatografi elektrosprey iyonizasyon kütle spektroskopisiyle (LS-ESI-MS) analiz edildiler. Biyotinlenmis hu4D5FabV8 (AlZlC)°1n 482945 primer kütlesi ile yabani tip hu4D5Fabv8sin 47737,0 primer kütlesi arasindaki fark 557,5 kütle birimiydi. Bu fragman, bir tek biyotin- PEO-maleimid moieyetesinin (C23H36N5O782) mevcudiyetini göstermektedir. Tablo 4, fragmantasyon degerlerinin dagiliminigöstermekte ve bu da sekansi teyit etmektedir.Tablo 4. Triptik siiidiriinden sonra biyotinlenmis hu4D5Fabv8 ThioFab A121C”nin LC-ESI-Kütle spektruin analizi 203 Amino asitb Fragmaniy Fragmani A (Alanin) 72M (Metiyonin) 203 2505 D (Aspartik asiü) 318 2374 Y (Tirosin) 481 2259 W (Triptofan) 667 2096 G (Glisin) 724 1910 Q (glutamin) 852 1853 G (Glisin) 909 1725 T (Treonin) 1010 1668 L (Lösin) 1 123 1567 V (Valin) 1222 1454 T (Treonin) 1323 1355 V (Valin) 1422 1254 S (Serin) 1509 1155 S (Serin) 1596 1068 C (Sistein) + 2242 981 biyotinS (Serin) 2329 335 T (Treonin) 2430 248 K (Lisin) 175 204Superdex-ZOO jel filtrasyonundan önce ve sonra, biyotinlenmis ABP- hu4D5FabV8-Al2lC, biyotinlenmis ABP- hu4D5FabV8-V110C, biyotinlenmis çift Cys ABP-hu4D5FabV8-(VllOC-A88C) ve biyotinlenmis çift Cys ABP-hu4D5FabV8-(VllOC-AlZlCYnin DTT veya BME,le ya da DTT veya BME°siz SDS-PAGE jel analizleri yapildi.hu4D5FabV8-(V 1 10C)-BMPEO-DMl ”nin (Superdex-ZOO jel filtrasyon saflastirmasindan sonra) kütle spektroskopisi analizi (MS/MS): Fab+l 516075, Fab 505155. Bu veriler, %91,2 oraninda konjugasyon oldugunu göstermektedir. hu4D5FabV8-(V110C)- BMPEO-DM]°nin (indirgenmis) MS/MS analizi: LC 234472, LC+1 245373, HC (Fab) 270725. Bu veriler, tüm DMI konjugasyonununFab hafif zinciri üzerinde gerçeklestigini göstermektedir.Ornek 4 - ABP-hu4D5Fabv8-(V110C) ve MC-MMAE Koniugasvonu Yoluyla ABP-hu4D5FabV8-(V110C)-MC- MMAE9nin HazirlanmasiIlaç baglayici reaktifi, maleimidokaproil-monometil auristatin E (MMAE), yani MC-MMAE, DMSO içinde çözündürülür; asetonitril ve su içinde bilinen bir konsantrasyonda seyreltilir ve fosfat tamponlu salin (PBS) içinde sogutulmus ABP-hu4D5FabV8-(Vl lOC) ThioFab”a ilave edilir. Yaklasik bir saat sonra, reaksiyonu sönümlendirmek ve reaksiyona girmemis antikor tiyol gruplarini örtmek ve saklamak için bir maleimid fazlasi ilave edilir. Reaksiyon karisimi santrifüjal ultrafiltrasyon yoluyla konsantre edilir ve ABP-hu4D5FabV8- (V1 10C)-MC-MMAE, PBS içinde G25 reçineden geçirilerek elüsyon205yoluyla saflastirilir ve tuzdan arindirilir; steril kosullar altinda 0,2 um filtrelerden geçirilerek filtrelenir ve depolama ve saklama içindondurulur.Ornek 5 - ABP-hu4D5FabV8-(V110C) ve MC-MMAF` Kon jugasvonu yoluyla ABP-hu4D5FabV8-(V110C)-MC- MMAF”nin Hazirlanmasi ABP-hu4D5FabV8-(VllOC)-MC-MMAF, Ornek 4”de tanimlanan prosedür izlenerek ABP-hu4D5FabV8-(V110C) ThioFab ve MC- MMAF kon ju gasyonu yoluyla hazirlanir.Örnek 6 - ABP-AlZlC-ThioFab ve MC-val-cit-PAB-MMAE Koniugasvonu voluvla ABP-A121C-ThioFab-MC-val-cit-PAB- MMAE9nin Hazirlanmasi ABP-hu4D5FabV8-(A121C)-MC-val-cit-PAB-MMAE, Ornek 4”de tanimlanan prosedür izlenerek ABP-hu4D5FabV8-(A121C) ve MC- val-cit-PAB-MMAE konjugasyonu yoluyla hazirlanir.Örnek 7 - ABP-AlZlC-ThioFab ve MC-val-cit-PAB-MMAF Koniugasvonu yoluyla ABP-A121C-ThioFab-MC-val-cit-PAB- MMAF5nin Hazirlanmasi ABP-hu4D5FabV8-(A121C)-MC-val-cit-PAB-MMAF, Ornek 4”de tanimlanan prosedür izlenerek ABP-hu4D5Fabv8-(A121C) ve MC- Val-cit-PAB-MMAF kon jugasyonu yoluyla hazirlanir. 206MCwaI-cil-PAB vMMAFÖrnek 8 - hu4D5Fabv8-(V110C) ThioFab-BMPEO-DMPnin Hazirlanmasihu4D5FabV8-(V110C) ThioFab°da serbest sistein, bis-maleimido reaktifi BM(PEO)4 (Pierce Chemical) ile modifiye edilmis ve antikorun yüzeyinde reaksiyona ugramamis bir maleimido grubu birakmisti. Bu, bir %50 etanol/su karisimi içerisinde BM(PEO)4, 10 mM konsantrasyonuna kadar çözündürülmek ve yaklasik olarak 1,6 mg/ml (10 mikromolar) konsantrasyonda fosfat tamponlu salin içinde hu4D5FabV8-(V110C) ThioFab içeren bir çözeltiye on kati molar fazla BM(PEO)4 ilave edilmek ve 1 saat süreyle reaksiyona birakilmak suretiyle gerçeklestirilmistir, Fazla BM(PEO)4, 150 mM NaCl tampon ile 30 mM sitrat, pH 6 içinde jel filtrasyonuyla (HiTrap kolon, Pharmacia) çikartilmistir. hu4D5FabV8-(V110C) ThioFab- BMPEO ara ürününe, dimetil asetamid (DMA) içinde çözündürülmüs yaklasik 10 kati molar fazla DMl ilave edilmistir. Ilaç moieyete reaktifini çözündürmek için dimetilformamid (DMF) de kullanilabilir.
Reaksiyona ugramamis ilaci çikartmak için, reaksiyon karisimi, jel filtrasyonundan veya PBS'ye diyalizden önce gece boyunca reaksiyona birakilmistir. Yüksek molekül agirligina sahip agregalari çikartmak ve saflastirilmis hu4D5FabV8-(V110C) ThioFab-BMPEO- DMl elde etmek amaciyla, PBS içinde 8200 kolonlari üzerinde jel207filtrasyonu yöntemi kullanilmistir.Ayni protokolle, hu4D5FabV8 (AlZlC) ThioFab-BMPEO-DMI dehazirlanmistir.Ornek 9 -In vitro hücre proliferasvon eseyi ADC°nin etkinligi, asagidaki protokol uygulanarak bir hücre proliferasyon eseyiyle ölçülmüstür (CellTiter Glo Luininiscent Cell Viability Assay, Promega Corp. Technical Bulletin T8288; Mendoza ve ark (2002) Cancer Res. 62:5485-5488):1. 96 kuyucuklu ve opak duvarli bir plakanin her kuyucuguna, vasat içinde yaklasik 104 hücre (SKBR-3, BT474, MCF7 veya MDA-MB-468) içeren bir 100 hücre kültürü alikotu konulmustur.2. Vasat içeren ve hücre içermeyen kontrol kuyucuklari da hazirlanmistir.3. Deney kuyucuklarina ADC ilave edilmis ve 3-5 gün süreyle inkübe edilmistir.4. Plakalar, yaklasik 30 dakika süreyle oda sicakligina gelene kadar dengelenmeye birakilmistir.5. Her kuyucukta mevcut hücre kültürü vasatinin hacmine esithacimde CellTiter-Glo Reaktifi ilave edilmistir.içinde 2 dakika süreyle karistirilmistir. 7. Luminesans sinyalini stabilize etmek için, plaka, Odasicakliginda 10 dakika süreyle inkübe edilmistir.2088. Luminesans kaydedilmis ve grafiklerde RLU = bagi]luminesans birimi birimiyle rapor edilmistir.Belirli bazi hücreler, kuyucuk basina 50 uL alan 96 kuyucuklu bir plaka içinde 1000-2000/kuyucuk (PC3 hatlari) ya da 2000- 3000/kuyucuk (OVCAR-3) oraninda tohumlanmislardir. Bir (PC3) ya da iki (OVCAR-3) gün sonra, “hiçbir ADC” kontrol kuyucugu tek basina vasati almayacak sekilde, 9000, 3000, 1000, 333, 111, 37, 12.4, 4.1 veya 1.4 nglmL nihai konsantrasyonlara kadar 50 uL hacimlerde ADC ilave edilmistir. Kosullar düplikat veya triplikattir. 3 (PC3) ya da 4-5 (OVCAR-3) gün sonra, 100 uL/kuyucuk oraninda Cell TiterGlo II ilave edilmis (lusiferaz-bazli esey; ATP seviyeleriyle ölçülen proliferasyon) ve hücre adedi bir luminoinetre kullanilarak tespit edilmistir. Veriler, standart sapma hata çubuklariyla, her replika seti için bir luminesans araci olarak çizilmislerdir. Protokol, CellTiter GloLuminisan Hücre Canliligi Eseyinin (Promega) bir modifikasyonudur:1. 1000 hücre/kuyucuk PC3/Mu016, PC3/neo (50 uL/kuyucuk) vasat kaplayiniz. Ovcar3 hücreleri, 2000 hücre/kuyucuk (50 uL) vasatlari içinde kaplanmalidirlar (tarifleri asagidadir). Hücreleri gece boyunca baglanmaya birakimz.2. ABC, 18 tig/ml çalisma konsantrasyonundan baslanmak suretiyle vasat içerisinde 1:3 oraninda seri olarak seyreltilir (bu da, 9 ug/ml nihai konsantrasyonla sonuçlanir). Kuyucugun içinde bulunan 50 uL hücrelere ve vasatlara 50 uL seyreltilinis ADC ilave edilir.3. 72-96 saat boyunca inkübe ediniz (standardi 72 saattir, fakathücreler %85-95 konflüent olduklarinda eseyi durdurmak için 0209ug/mL konsantrasyonu izleyiniz).4. 100 uL/kuyucuk Promega Cell Titer Glo reaktifi ilave ediniz; 3 dakika boyunca çalkalayiniz ve luminometrede okuyunuz.
Vasatlar: %50/50/10FBS/glutamin içinde büyütülen PC3/ne0 ve PC3/MUC16 ve RFMI/20%FBS/glutamin içinde büyütüleii 250 ug/mL G-4180VCAR-3.Ornek 10 - Ekspresvonu yüksek HERZ transgenik eksplant faremodelinde tümör büvümesinin inhibisvonu, in vivo etkinlikTransgenik deneyler için uygun hayvanlar, Taconic (Germantown, N.Y.) gibi standart ticari kaynaklardan temin edilebilirler. Uygun olan pek çok sus vardir, fakat tümör olusumuna daha yüksek duyarliliklari sebebiyle FVB disi fareler tercih edilmektedir. Çiftlestirme için FVB erkekleri kullanilmis ve yalanci gebeligi stimüle etmek amaciyla vazektomize edilmis CD.1 damizliklari kullanilmistir. Vazektomize edilmis fareler herhangi bir ticari tedarikçiden temin edilebilirler.
Kurucular, FVB farelerle ya da l29/BL6 X FVB p53 heterozigos farelerle çiftlestirilmislerdir. Tümör olusumunu potansiyel olarak artirmak amaciyla, P53 alelinde heterozigositesi bulunan fareler kullanilmistir. Ancak bunun gereksiz oldugu anlasilmistir. Bu nedenle, bazi Fl tümörleri karisik suslardir. Kurucu tümörler sadece FVB”dir.
Yavrulari olmaksizin bir takim gelismekte olan tümörleri bulunan altikurucu elde edilmistir.Tümörleri bulunan hayvanlar (F05 mmtv transgenik farelerden yayilan allogreft), tek veya çoklu doz ADC”nin intravenöz (IV)enjeksiyonuyla tedavi edilmislerdir. Tümör hacmi, enjeksiyondan210sonra çesitli farkli zaman noktalarinda ölçülmüs vedegerlendirilmistir.Tümörler, HER2”nin siçan homologu olan neu”nun mutasyonal olarak aktive edilmis bir forinunu eksprese eden transgenik farelerde kolaylikla çikmaktadirlar, fakat insan meme kanserlerinde asiri eksprese edilen HER2 mutasyona ugramaz ve inutasyona ugrainamis HER2'yi asiri ekSprese eden transgenik farelerde tümör olusumu çok daha az saglamdir (Webster ve ark (1994) Semin. Cancer BioL 5:69- 76).Mutasyona ugramamis HER2 ile tümör olusumunu gelistirmek amaciyla, HER2”nin downstream özgün baslatma kodonundan translasyon baslatma sikligini aksi halde azaltacak olan bu upstream ATG kodonlarinda translasyonun baslatilmasini engellemek için bir upstream ATG°nin silindigi bir HER2 CDNA plazmidi kullanilarak transgenik fareler üretilmistir (Örnegin, Child ve ark (1999) J. Biol.
Chem. 274: 24335-24341 referansina bakiniz). Ek olarak, 5' ucuna bir kimerik intron ilave edilmistir ve bu da, daha önce de rapor edildigi gibi ekspresyon seviyesini artirmalidir (Neuberger and Williams (1988) Nucleic Acids Res. 1626713; Buchman and Berg (1988) Mol.
Cell. Biol. 8:4395; Brinster ve ark (1988) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 852836). Kimerik intron, bir Promega vektörü, Pci-neo memeli ekspresyon vektöründen türetilmistir (bp 890-1022). cDNA 3'-ucu, insan büyüme hormonu eksonlari 4 ve 5 ile ve poliadenilasyon sekanslariyla yandan desteklenmistir. Ayrica, bu sus tümör olusumu ve gelisimine karsi daha duyarli oldugu için FVB fareler kullanilmistir. Meme bezinde dokuya-özgü HER2 ekspresyonunusaglamak için MMTV-LTR'den alinan promoter kullanilmistir.211Tümör olusumuna karsi duyarliligi artirmak amaciyla hayvanlar AlN 76A diyetiyle beslenmislerdir (Rao ve ark (1997) Breast Cancer Res. and Treatment 45: 149- l 58).Ornek 1 1 - Koniugasvon için ThioMablarinRedi'i ksivonu/Oksidasvonu CHO hücreleri içinde ekSprese edilmis tam-boy sistein degistirilmis monoklonal antikorlar (ThioMablar), yaklasik 50 kati fazla TCEP (tris(2-karboksietil)fosfin hidroklorûr ile 37°C sicaklikta 3 saat süreyle indirgeninislerdir; Getz ve ark (1999) Anal. Biochem Cilt 273:73-80; Soltec Ventures, Beverly, MA). Indirgenmis ThioMab (Sekil 15), 10 HM sodyum asetat, pH 5 içinde seyreltilmis ve bir HiTrap S kolonuna yüklenmistir ve 0.3M sodyum klorür içeren PBS ile ayristirilmistir.
Ayristirilmis indirgenmis ThioMab, oda sicakliginda gece boyunca 200 nM aköz bakir sülfatla (CuSO4) muamele edilmistir. Çevre havasioksidasyonu da etkiliydi.Ornek 12 - ThioMablarin KoniugasvonuTiyo-trastuzumab (A121C)-BMPEO-DM1, tiyo-21-l9 (A121C)- BMPEO-DMl ve tiy0-3A5 (A121C)-BMPEO-DM1 de dahil ThioMab antikor-ilaç konjugalarini olusturmak ve konjugasyonu gerçeklestirmek amaciyla, tiyo-trastuzumab (A121C), tiyo-2H9 (A121C) ve tiy0-3A5 (A121C) de dahil, Ornek l l”in yeniden oksidize edilmis ThioMablari, bir 10 kati fazla ilaç-baglayici ara ürünü BM(PEO)4-DM1 ile kombine edilmis; karistirilmis ve Oda sicakliginda yaklasik bir saat bekletilmislerdir. Asiri ilaç-baglayici ara212ürününü ve diger safsizliklari çikartmak amaciyla, konjugasyon karisimi jel filtreleninis ya da yükleninis ve bir HiTrap S kolonundangeçirilerek ayristirilmistir.Bu bulusuii kapsami, sadece bulusun birkaç özelligini göstermeyi amaçlayan örneklerde açiklanan spesifik yapilarla sinirli degildir ve fonksiyonel olarak esdeger nitelikte olan baska yapilar da bu bulusunkapsami içindedir. 213TARIFNAME IÇERISINDE ATIF YAPILAN REFERANSLARBasvuru sahibi tarafindan atif yapilan referanslara iliskin bu liste,yalnizca okuyucunun yardimi içindir ve Avrupa Patent Belgesinin birkismini olusturmaz. Her ne kadar referanslarin derlenmesine büyükönem verilmis olsa da, hatalar veya eksiklikler engellenememektedirve EPO bu baglamda hiçbir sorumluluk kabul etmemektedir.Tarifname içerisinde atifta bulunulan patent dökümanlari:. US 4975278 A [0003] . EP 1391213 A [0003]. US 4970198 A [0004]- US 5079233 A [0004]- us 5585089 A [0004]. US 5606040 A [0004]. US 5693762 A [0004]. US 5739116 A [0004] [0207]. US 5767285 A [0004] [0207]- us 5773001 A [0004] [0207]. WO 02088172 A [0005] [0202] [0203] [0255] . US 20040018194 A [0005]. WO 04032828 A [0005] [0255]. WO 03043583 A [0005] [0255]- us 5767237 A [0005] [0203]. US 6124431 A [0005] [0203]. wo 2005081711 A [0005] [0204] . US 6248564 B [0008]. WO 2004050849 A [0009]. wo 03049704 A [0010]. wo 03060080 A [0011]. WO 9406474 A [0012]. US 4816567 A [0037] [0038]. US 5807715 A [0037]- us 20050048572 A [0040] [0119] . US 20040229310 A [0040] [0119] . US 5677171 A [0041]. wo 9525167 A [0043]. US 6399743 B [0044]- us 20030096373 A [0044]. US 5183884 A [0046]. US 5480968 A [0046]. US 480968 A [0046]. WO 9735885 A [0046]9 US 5212290 A [0086]° US 5891996 A [0086]0 WC 9850433 A [0086]o EP 659439 A2 [0086]o US 5804396 A [0087]o WO 9909016 A [0087]0 WC 9843960 A [0087]° WO 9738983 A, Wamer Lambert [0087] ° WO 9906378 A, Warner Lambert [0087] 9 WC 9906396 A, Warner Lambert [0087] 0 WC 9630347 A [0087]0 WC 9633978 A, Zeneca [0087] 0 WC 963397 A, Zeneca [0087] 0 WC 9633980 A, Zeneca [0087] 0 WC 9321319 A [0103]° WO 2004063362 A [0109]- WO 2003042661 A [0109]° US 2003134790 A1 [0109]o WO 2002102235 A [0109]° WO 2003055443 A [0109]o WO 200299122 A [0109]0 WO 2003029421 A [0109]0 WC 2003024392 A [0109]0 WC 200298358 A [0109]° WO 200254940 A [0109]o WO 200259377 A [0109]. WO 200230268 A [0109]- WO 200148204 A [0109]- WO 2004048938 A [0109]0 WC 2004032842 A [0109]0 WC 2003016475 A [0109]o WO 200278524 A [0109]0 WC 200299074 A [0109]o WO 200286443 A [0109] 214. EP 599274 A [0047] . WO 9919488 A [0047]. wo 0218444 A [0047]. US 5500362 A [0051]. us 5821337 A [0051] [0073] [0103] . wo 9316185 A [0062]. US 5571894 A [0062]- us 5587458 A [0062]. EP 404097 A [0063]. wo 9311161 A [0063]. US 6407213 B [0064]. US 5091178 A [0067]. wo 9845479 A [0079]. US 4943533 A, Mendelsohn [0086] . WO 9640210 A [0086]. WO 200292836 A [0109] . WO 200283866 A [0109] . US 2003124140 A [0109] - WO 2003101283 A [0109] . wo 2002101075 A [0109] . WO 200271928 A [0109] . WO 9410312 A [0109]. WO 2004022778 A [0109] . EP 875569 A [0109]- wo 200157188 A [0109] . WO 200175177 A [0109] . WO 2004000997 A [0109] . WO 2003003984 A [0109] . WO 200206339 A [0109] - wo 200188133 A [0109] . WO 2003054152 A [0109] . WO 2003101400 A [0109] . US 2003129192 A [0109] . US 2004044180 A [0109] - us 2004044179 A [0109] . US 2003096961 A [0109] . US 2003232056 A [0109] . WO 2003105758 A [0109] . US 2003206918 A [0109] - EP 1347046 A [0109]. WO 2003025148 A [0109] . WO 2004045516 A [0109] . WO 2004040000 A [0109] . wo 2003087768 A [0109] - wo 200261087 A [0109] . WO 2003016494 A [0109] . WO 200198351 A [0109] . EP 522868 A [0109]. WO 2003003906 A [0109] 0 wo 200264798 A [0109] . wo 200014228 A [0109] . US 2003224454 A [0109] . wo 2003025138 A10109] . wo 2004065577 A [0109] . WO 2004027049 A [0109] . EP 1394274 A [0109]. WO 2004016225 A [0109] 0 us 2003157089 A [0109] . US 2003185830 A [0109] . US 2003064397 A [0109] . wo 200289747 A [0109] . wo 2003022995 A [0109] . wo 2004045553 A [0109] . WO 2003034984 A [0109] . WO 200288170 A [0109] - wo 200216413 A [0109] . WO 200222808 A [0109] . us 5854399 A [0109]. US 5792616 A [0109]. WO 2004045520 A [0109] . us 2004005538 A [0109] - WO 2003062401 A [0109] ~ wo 9102536 A [0109]. WO 2004020595 A [0109] . US 2004101874 A [0109] . us 2002150573 A [0109] . US 5644033 A [0109]. wo 2003048202 A [0109] . wo 99558658 A [0109]. US 6534482 13 [0109]. wo 200055351 A [0109] 0 WC 2003077836 A [0109] ~ wo 200138490 A [0109] . WO 2003097803 A [0109] . WO 2003089624 A [0109] . wo 2004009622 A [0109] - WO 2003081210 A [0109] . wo 2003089904 A [0109] . US 2003118592 A [0109] . WO 2003008537 A [0109] . wo 2003055439 A [0109] . wo 2003025228 A [0109] . wo 200222636 A [0109] . wo 200212341 A [0109] . WO 200213847 A [0109] . wo 200214503 A [0109] . WO 200177172 A [0109] . US 2003109676 A [0109] - US 6518404 B [0109]. US 5773223 A [0109]. wo 2004001004 A [0109] . wo 2003104275 A [0109] . wo 2004046342 A [0109] - wo 2003083074 A [0109] . WO 2003018621 A [0109] . wo 200166689 A [0109] . WO 2003087306 A [0109] . WO 200272596 A [0109] . wo 200172962 A [0109] . WO 2003104270 A [0109] . us 2004005598 A [0109] . US 2003060612 A [0109] . WO 200226822 A [0109] - wo 200216429 A [0109] . US 2003143557 A [0109] . wo 200040614 A [0109] . wo 200210382 A [0109] . US 2003219806 A [0109] - wo 200162794 A [0109] . US 2003224411 A [0109] . WO 2003083041 A [0109]. US 2003186373 A [0109] . US 2003119131 A [0109] . US 2003119122 A [0109] . us 2003119126 A [0109] . US 2003119121 A [0109] . US 2003119129 A [0109] . US 2003119130 A [0109] . US 2003119128 A [0109] - us 2003119125 A [0109] . WO 200202634 A [0109] . WO 200053216 A [0109] . wo 2004065576 A [0109] . WO 2004020583 A [0109] - wo 2003004529 A [0109] . US 20040101899 A [0109] . WO 2003104399 A [0109] . WO 2004000221 A [0109] . US 2003165504 A [0109] - us 2003065143 A [0109] . US 2003091580 A [0109] . WO 200210187 A [0109] . WO 200194641 A [0109] . WO 200202624 A [0109]215. wo 200153463 A [0109] 0 WO 200141787 A [0109] . wo 200044899 A [0109] . wo 200020579 A [0109] . us 5869445 A [0109]. WO 9630514 A [0109]. EP 1439393 A [0109]. wo 2004043361 A [0109] . WO 2004022709 A [0109] 0 wo 200100244 A [0109] . WO 2004063709 A [0109] . WO 2004044178 A [0109] . wo 2004031238 A [0109] . wo 200260317 A [0109] 0113 05003790 B [0109]. WO 9946284 A [0109]. US 2004005320 A [0109] - wo 2003029262 A [0109] . WO 2003002717 A [0109] . wo 200222153 A [0109] . US 2002042366 A [0109] . WO 200146261 A [0109] . wo 200146232 A [0109] . WO 9837193 A [0109]. US 2003186372 A [0109]0 WO 200172830 A [0109] . WO 200022129 A [0109] . WO 9928468 A [0109]. us 5440021 A [0109]. WO 9428931 A [0109]. WO 9217497 A [0109]. US 6153408 A [0109]. Us 5976551 A [0109]. us 6011146 A [0109]. WO 2004047749 A [0109] . WO 2003072035 A [0109] . wo 200222660 A [0109] . WO 2003093444 A [0109] . wo 2003029277 A [0109] . WO 2004042346 A [0109] . WO 2003026493 A [0109] . WO 200075655 A [0109] . US 2002193567 A [0109] . wo 9707198 A [0109]. WO 2003083047 A [0109] . WO 9744452 A [0109]. WO 200012130 A [0109] . WO 2004074320 A [0109] 216. US 2002034749 A [0109] . WO 200206317 A [0109] . wo 200202587 A [0109] . WO 200140269 A [0109] . wo 200036107 A [0109] . wo 2004053079 A [0109] . wo 2003004989 A [0109] - wo 0116318 A [0109]. US 2004018553 A [0109] . wo 200281646 A [0109] . wo 200140309 A [0109] . US 2001055751 A [0109] . wo 200032752 A [0109] . WO 9851805 A [0109]. wo 9851824 A [0109]. WO 9840403 A [0109]. WO 2003000842 A [0109] - wo 2003023013 A [0109] . US 2003194704 A [0109] . wo 2004058309 A [0109] . wo 200401161 A [0109] . wo 2003045422 A [0109] - wo 2003014294 A [0109] . wo 2003035846 A [0109] . wo 200294852 A [0109] . WO 200238766 A [0109] . WO 200224909 A [0109] . wo 2003072036 A [0109] . WO 2003088808 A [0109] . us 20030228319 A [0109] . WO 9958658 A [0109]. wo 9207574 A [0109]- wo 2004015426 A [0109] . US 2003105292 A [0109] . us 6555339 B [0109]. US 4361650 A [0193]. US 4307016 A [0193]. us 4294757 A [0193]. US 4424219 A [0194]. us 4331598 A [0195]. US 4450254 A [0195]. US 4364866 A [0195]. us 4313946 A [0195]. US 4315929 A [0195]. us 4362663 A [0195]. US 4322348 A [0195]. US 4371533 A [0195]- us 20050169933 A [0198]. JP 2004113151 B [0109] 0 wo 2003009814 A [0109] . EP 1295944 A [0109]. wo 200190304 A [0109] . us 2004249130 A [0109] . US 2004022727 A [0109] . WO 2004063355 A [0109] . us 2004197325 A [0109] . us 2003232350 A [0109] « us 2004005563 A [0109] . US 2003124579 A [0109] . WO 0145746 A [0110] [0161] . us 20040001827 A [0110] [0161] . US 4415732 A [0117]. us 4458066 A [0117]. US 5047524 A [0117]. US 5262530 A [0117]- us 58017715 B [0119]. WO 0100245 A [0120]. us 5342606 A [0142]. US 5428155 A [0142]. US 5316757 A [0142]. us 5480990 A [0142]i US 5462725 A [0142]. us 5428139 A [0142]. US 5385893 A [0142]. US 5739294 A [0142]. us 5750660 A [0142]. US 5834456 A [0142]. us 4275149 A [0142] [0144] . US 4737456 A [0142]. US 4318980 A [0144]. us 6372907 B [0149]. US 6528624 B [0150]- us 4256746 A [0193]. WO 2004043493 A [0241] . WO 200401993 A [0244] . us 6214345 B [0255]i US 2003130189 A [0255] . us 2003096743 A [0255] . WO 03026577 A [0255]0 WO 04016801 A [0265]. us 6884874 B [0265]. US 2004039176 A1 [0265] . wo 03068144 A [0265]. US 2004001838 A1 [0265] . US 6441163 B [0265]. us 5416064 A [0265] 217. WO 2005037992 A [0198]. US 5208020 A [0198] [0265] . US 5635483 A [0202] [02031 . US 5780588 A [0202] [0203] . us 5663149 A [0202] [0203] . US 5712374 A [0207]. US 5714586 A [0207]- us 5770701 A [0207]. US 5770710 A [0207]. US 5877296 A [0207]. wo 9321232 A [0208]. wo 9411026 A [0210]. wo 01024763 A [0265] . US 5583024 A [0270]. us 5674713 A [0270i. US 5700670 A [0270]. us 6602677 B [0270]. wo 9704801 A [0284]. US 3773919 A [0286]. EP 616812 A [0308]. us 2005034353 W [0339] 0 us 60696353 8 [03391. US 60612468 B [0339]Tarifnamede belirtilen patentlestirilmemis literatür:° LAMBERT, J. Curr. Opinion in Pharmacology, 2005, vol. 5, 543-549
[0003]° WU et al. Nature Biotechnology, 2005, vol. 23 (9), 1137-1146 [0003] [0142]0 PAYNE, G. Cancer Cell, 2003, vol. 3, 207-212 [0003]° SYRIGOS ; EPENETOS. Anticancer Research, 1999, vol. 19, 605-614[0003]° NICULESCU-DUVAZ ; SPRINGER.Adv. Drug Del. Rev., 1997, vol. 26, 151- 172 [0003]o BALDWIN et al. Lancet, 15 March 1986, 603-05 [0003]° Antibody Carriers Of Cytotoxic Agentsln Cancer Therapy: A Review. THORPEet al. Monoclonal Antibodies 84: Biological And Clinical Applications. 1985, vol. 84, 475-506 [0003]0 ROWLAND et al. Cancer Immunol.- WISEMAN et al. Eur. J. Nucl. Med., 2000, vol. 27 (7), 766-77 [0004]~ WISEMAN et al. Blood, 2002, vol. 99 (12), 4336-42 [0004]° WITZIG et al. J. Clin. 011001., 2002, vol. 20 (10), 2453-63 [0004]o WITZIG et al. J. Clin. Oncol., 2002, vol. 20 (15), 3262-69 [0004]' XIE et al. J. of Pharin. and Exp.
Ther., 2004, vol. 308 (3), 1073-1082
[0004]o KLUSSMAN et al. Bioconjugate Chemistry, 2004, vol. 15 (4), 765-773
[0005] [0213]- DORONINA et al. Nature Biotechnology, 2003, vol. 21 (7), 778- 784 [0005] [0202]o FRANCISCO et al. Blood, 2003, vol. 102 (4), 1458-1465 [0005]- MAO et al. Cancer Research, 2004, vol. 64 (3), 781-788 [0005]lmmunother., 1986, vol. 21, 183-87 [0003] ° MANDLER et al. J. of the Nat. Cancer Inst., 2000, vol. 92 (19), 1573-1581 [0003]- BHASKAR et al. Cancer Res., 2003, v01. 63, 6387-6394 [0005] ° SENTER et al. Proceedings of the- MANDLER et al. Bioorganic & Med.
Chein. Letters, 2000, vol. 10, 1025-1028
[0003]° MANDLER et al. Bioconjugate Chem.,2002, vol. 13, 786-791 [0003] - LIU et al. Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1996, vol. 93, 8618-8623 [0003]0 LODE et al. Cancer Res., 1998, vol. 58,2928 [0003]American Association for Cancer Research, 28 March 2004, vol. 45
[0005] [0204]° GARMAN. Non-Radioactive Labelling: A Practical Approach.
Academic Press, 1997, 55 [0007]o SINGH et al. Anal. Biochem., 2002, vol. 304, 147-156 [0007]. BETTER et al. J. Biol. Chem., 1994, 218o HINMAN et al. Cancer Res., 1993, vol.53, 3336-3342 [0003]- BERNHARD et al. Bioconjugate Chem., 1994, vol. 5, 126-132 [0008]
[0113]° GREENWOOD et al. TherapeuticImmunology, 1994, vol. 1, 247-255 [0008]- TU et al. Proc. Natl. Acad. Sci USA, 1999, vol. 96, 4862-4867 [0008]o KAN N O et al. .1 . of Biotechnology, 2000, vol. 76, 207-214 [0008]o CHMURA et al. Proc. Nat. Acad. Sci.
USA, 2001, vol. 98 (15), 8480-8484
[0008]° ZHANG et al. Anal. Biochem., 2002, vol. 311, 1-9 [0008]° SHOPES B. Molecular Iminunology, 1993, vol. 30 (6), 603-609 [0013]0 HAFNER F. T. et al. AnalyticalChemistry, 2000, vol. 72 (23), 5779-5786[0014]° RENARD M. et al. Journal of Molecular Biology, 2003, vol. 326 (1), 167-175 [0015]o CORNEILLIE T. M. et al.Bioconjugate Chemistry, 2004, vol. 15 (6),1389-1391 [0016]- TRAIL P. A. et al. Cancer Immunology,Iminunotherapy: CII, 2003, vol. 52 (5), 328-337 [0017]° SCHELTE P. et al. Bioconjugate Chemistry. ACS, 2000, vol. 11, 118-123
[0018]0 LYONS A. et al. Protein Engineering.
Oxford University Press, 1990, vol. 3, 703-709 [0019]° WRIGHT S.K. et al. Analytical Biochemsitry, 1998, vol. 265 (1), 8-14
[0020]° SINGLETON et al. Dictionary of Microbiology and Molecular Biology. J.
Wiley & Sons, 1994 [0032]° JANEWAY, C. ; TRAVERS, P. ; WALPORT, M. ; SHLOMCHIK. lmmunobiology. Garland Publishing, 2001 [0032]° MILLER et al. J our. of Immunology, 2003, vol. 170, 4854-4861 [0035]vol. 13, 9644-9650 [0008]' SHEPARD et al. J. (1991) Clin. lmmunol., 1991, vol. 11 (3), 117-127
[0041]o KUMAR et al. Mol. Cell. Biol., 1991, vol. 11 (2), 979-986 [0041]' LEWIS et al. Cancer Iininunol. lmmunother., 1993, vol. 37, 255-263
[0041]o PIETRAS et al. Oncogene, 1994, vol. 9, 1829-1838 [0041]o VITETTA et al. Cancer Research, 1994, vol. 54, 5301-5309 [0041]- SLIWKOWSKI et al. J . Biol. Chem., 1994, vol. 269 (20), 14661 -14665
[0041]° SCOTT et al. J. Biol. Chem., 1991, vol. 266, 14300-5 [0041]° D,SOUZA et al. Proc. Natl. Acad.
Sci., 1994, vol. 91, 7202-7206 [0041]- LEWIS et al. Cancer Research, 1996, vol. 56, 14457-1465 [0041]o SCHAEFER et al. Oncogene, 1997, vol. 15, 1385-1394 [0041]° CARPENTER et al. Ann. Rev.
Biochem., 1987, vol. 56, 881-914
[0043]o HUMPHREY et al. Proc. Nat. Acad.
Sci. (USA), 1990, vol. 87, 4207-4211
[0043]. MURTHY et al. Arch. Biochern.
Biophys., 1987, vol. 252, 549-560
[0043]° SEMBA et al. Proc. Nat. Acad. Sci.
(USA), 1985, vol. 82, 6497-6501 [0045] o YAMAMOTO et al. Nature, 1986, vol. 319, 230-234 [0045]- KRAUS et al. Proc. Nat. Acad. Sci.
(USA), 1989, vol. 86, 9193-9197 [0046] o PLOWMAN et al. Proc. Natl. Acad.
Sci. USA, 1993, vol. 90, 1746-1750
[0047]o PLOWMAN et al. Nature, 1993, vol. 366, 473-475 [0047]o RAVETCH ; KIN ET. Annu. Rev.
Immunol., 1991, vol. 9, 457-92 [0051]o CLYNES et al. PROC. NAT. ACAD.
SCI. (USA) (USA), 1998, vol. 95, 652- 219° JANEWAY, C. ; TRAVERS, P. ; WALPORT, M. ; SHLOMCHIK. lmmuno Biology. 2001 [0035]0 OLAFSEN et al. Protein Eng. Design & Sel., 2004, vol. 17 (4), 315-323 [0036]° KOHLER et al. Nature, 1975, vol. 256, 495 [0037]- CLACKSON et al. Nature, 1991, vol. 352, 624-628 [0037]o MARKS et al. J. Mol. Biol., 1991, vol. 222, 581-597 [0037]o MORRISON et al. Proc. Natl. Acad.
Sci. USA, 1984, vol. 81, 6851-6855 [0038] ° ROUX et al. J. Immnnol., 1998, vol. 161, 4083-4090 [0040]o LUND et al. Eur. J. Biochem., 2000, vol. 267, 7246-7256 [0040]- HUDZIAK et al. Mol. Cell. Biol., 1989, vol. 9 (3), 1165-1172 [0041]0 FEN DLY et al. Cancer Research, 1990, vol. 50, 1550-1558 [0041]o KOTTS et al. In Vitro, 1990, vol. 26 (3), 59A [0041]° SARUP et al. Growth Regulation, 1991, vol. 1, 72-82 [0041]° PLUCKTHUN. Pharmacology of Monoclonal Antibodies. Springer-Verlag, 1994, vol. 113, 269-315 [0062]° HOLLINGER et al. Proc. Natl. Acad.
Sci. USA, 1993, vol. 90, 6444-6448 [0063] ° JONES et al. Nature, 1986, vol. 321, 522-525 [0064]- CHOTHIA et al. Nature, 1989, vol. 342, 877 [0064]° RIECHMANN et al. J. Mol. Biol., 1992, vol. 224, 487-499 [0064]0 FOOTE ; WINTER. J. Mol. Biol., 1992, vol. 224, 487-499 [0064]° PRESTA et al. J. lmmunol., 1993, vol. 151, 2623-2632 [0064]° WERTHER et al. J. Immunol. Methods, 1996, vol. 157, 4986-4995 [0064]- PRESTA et al. Thromb. Haemost., 2001, vol. 85,379-389 [0064]o RIECHMA NN et al. Nature, 1988, vol. 332, 323-329 [0064]° PRESTA. Curr. Op. Struct. Biol., 1992, vol. 2, 593-596 [0064]656 [0051]' DAERON. Annu. Rev. Iinmunol., 1997, vol. 15, 203-234 [0053]° RAVETCH ; KINET. Annu. Rev. lininunol, 1991, vol. 9, 457-92 [0053]- CAPEL et al. Immunomethods, 1994, vol. 4, 25-34 [0053]o HAAS et al. J. Lab. Clin. Med., 1995, vol. 126, 330-41 [0053]' GUYER et al. J. lmmunol., 1976, vol. 117, 587 [0053]° KIM et al. J. lmmunol., 1994, vol. 24, 249 [0053]- GAZZANO-SANTORO et al. J. linmunol. Methods, 1996, vol. 202, 163
[0054]o KABAT et al. Sequences of Proteins of lmmunological Interest. Public Health Service, National Institutesof Health, 1991 [0056] [0123]- CHOTHIA ; LESK. J. Mol. Biol., 1987, vol. 196, 901-917 [0057]o MEANS. Bioconjugate Chem., 1990, vol. 1, 2 [0105] [0152]o HERMANSON, G. Bioconjugate Techniques. Academic Press, 1996, 40- 55, 643-671 [0105]- DIJKE,P. et al. Science, 1994, vol. 264 (5155), 101-104 [0109]° Oncogene, 1997, vol. 14 (1 1), 1377- 1382 [0109]° Biochem. Biophys. Res. Commun., 1999, vol. 255 (2), 283-288 [0109]- Nature, 1998, vol. 395 (6699), 288- 291 [0109]o GAUGITSCH, H.W. et al. J. Biol.
Chem., 1992, vol. 267 (16), 11267- 11273 [0109]- Cancer Res., 2001, vol. 61 (15), 5857- 5860 [0109]° HUBERT, R.S. et al. Proc. Natl.
Acad. Sci. U.S.A., 1999, vol. 96 (25), 14523-14528 [0109]0 J. Biol. Chem., 2001, vol. 276 (29), 27371-27375 [0109]- YAMAGUCHI, N. et al. Biol.
Chem., 1994, vol. 269 (2), 805-808
[0109] 220o SCHECTER et al. Nature, 1984, vol. 312, 513 [0071]- DREBIN et al. Nature, 1984, vol. 312, 545-548 [0071]o HUDZIAK et al. Proc. Natl. Acad. Sci.USA, 1987, vol. 84, 7159-7163 [0080]° SLAMON et al. Science, 1989, vol. 244,707-7 1 2 [0080]° SLAMON et al. Science, 1987, vol. 235,177-182 [0080]° AngeW Chem Intl. Ed. Engl., 1994, vol. 33, 183-186 [0084]- WILMAN. Prodrugs in Cancer Chemotherapy. Biocheinical Society Transactions, 1986, vol. 14, 375-382
[0090]o prodrugs: A Chemical Approach to Targeted Drug Delivery. STELLA et al.
Directed Drug Delivery. HumanaPress, 247-267 [0090]° WELLS ; LOWMAN. Curr. Opin.Struct. Biol., 1992, vol. 3, 355-362 [0093]- LOWMAN; WELLS. Methods: A companion to Methods in Enzymology, 1991, vol. 3, 205-0216 [0093]° JANEWAY, C. ; TRAVERS, P. ; WALPORT, M. ; SHLOMCHIK. 1mmun0bio10gy. Garland Publishing, 2001, 627-628 [0093]° McGraW-Hill Dictionary of Chemical Terms. Mc- GraW-Hill Book Company, 1984 [0097]° ELIEL, E. ; WILEN, S.
Stereochemistry of Organic Compounds.
John Wiley & Sons, Inc, 1994 [0097]° GARMAN. Non-Radioactive Labelling:A Practical Approach. Academic Press, 1997 [0102]° HAUGLAND. Molecular Probes Handbook of Fluorescent Probes and Research Chemicals. Molecular Probes, Inc, 2003 [0105]- BRINKLEY. Bioconjugate Chem., 1992, vol. 3, 2 [0105]o GARMAN. Non-Radioactive Labelling:A Practical Approach. Academic Press, 1997 [0105] [0152]' VERHEIJ J.B. et al. Am. J. Med. Genet,- Proc.Natl.Acad. Sci. U.S.A., 1999, vol. 96 (20), 11531-11536 [0109]- Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A., 1996, vol. 93 (1), 136-140 [0109]° .1. Biol. Chem., 1995, vol. 270 (37), 21984-21990 [0109]° J. Biol. Chem., 2002, vol. 277 (22), 19665-19672 [0109]' Genomics, 1999, vol. 62 (2), 281-284
[0109]° FEILD, J .A. et al. Biochem. Biophys.
Res. Coinmun., 1999, vol. 258 (3), 578- 582 [0109]- NAGASE T. et al. DNA Res., 2000, vol. 7 (2), 143-150 [0109]o ROSS et al. Cancer Res., 2002, vol. 62, 2546-2553 [0109]° NAKAMUTA M. et al. Biochem.
Biophys. Res. Coinmun., 1991, vol. 177, 34-39 [0109]- OGAWA Y. et al. Biochem. Biophys.
Res. Commun., 1991, vol. 178, 248-255
[0109]- ARAI H. et al. Jpn. Circ. J., 1992, vol. 56, 1303-1307 [0109]° ARAI H. et al. J. Biol. Chem., 1993, vol. 268, 3463-3470 [0109]- SAKAMOTO A. ; YANAGISAWA M. et al. Biochem. Biophys. Res.
Commun., 1991, vol. 178, 656-663
[0109]- ELSHOURBAGY N-A. et al. J. Biol.
Chem., 1993, vol. 268, 3873-3879
[0109]- HAENDLER B. et al. 1. Cardiovasc.
Pharmacol., 1992, vol. 20, sl-S4
[0109]- TSUTSUMI M. et al. Gene, 1999, vol. 228, 43-49 [0109]° STRAUSBERG R.L. et al. Proc.
Natl. Acad. Sci. U.S.A., 2002, vol. 99, 16899-16903 [0109]o BOURGEOIS C. et al. .1. Clin.
Endocrinol. Metab., 1997, vol. 82, 3116-3123 [0109]- OKAMOTO Y. et al. Biol. Chem., 1997, vol. 272, 21589-21596 [0109]° SEMBA K. et al. Proc. Natl. Acad. 2212002, vol. 108, 223-225 [0109]0 HOFSTRA R.M.W. et al. Eur. J. Hum.
Genet., 1997, vol. 5, 180-185 [0109]o PUFFENBERGER E.G. et al. Cell, 1994, vol. 79, 1257-1266 [0109]° ATTIE T. et al. Hum. Mol. Genet., 1995, vol. 4, 2407-2409 [0109]' AURICCHIO A. et al. Hum. MOI.
Genet., 1996, vol. 5, 351-354 [0109]o AMIEL J. et al. Hum. Mol. Genet, 1996,vol. 5, 355-357 [0109]o HOFSTRA R.M.W. et al. Nat. Genet., 1996, vol. 12, 445-447 [0109]° SVENSSON P.J. et al. Hum. Genet., 1998, vol. 103, 145-148 [0109]o FUCHS S. et al. Mol. Med., 2001, vol. 7,115-124 [0109]- PINGAULT V. et al. Hurn. Genet., 2002, vol. 111, 198-206 [0109]° Lab. Invest., 2002, vol. 82 (1 1), 1573- 1582 [0109]° XU, X,Z. et al. Proc. Natl. Acad. Sci.
U.S.A., 2001, vol. 98 (19), 10692-10697
[0109]° Cell, 2002, vol. 109 (3), 397-407 [0109] 0 J. Biol. Chem., 2003, vol. 278 (33), 30813-30820 [0109]- CICCODICOLA, A. et al. EMBO J., 1989, vol. 8 (7), 1987-1991 [0109]0 Am. J. Hum. Genet., 1991, vol. 49 (3), 555-565 [0109]o FUJISAKU et al. J. Biol. Chem., 1989, vol. 264 (4), 21 18-2125 [0109]0 WEIS J.J. et al. J. Exp. Med., 1988, vol.167, 1047-1066 [0109]° MOORE M. et al. Proc. Natl. Acad. Sci.U.S.A., 1987, vol. 84, 9194-9198 [0109] - BAREL M. et al. Mol. lmmunol., 1998, vol. 35, 1025-1031 [0109]° WEIS J.J. et al. Proc. Natl. Acad. Sci.
U.S.A., 1986, vol. 83, 5639-5643 [0109] ° SINHA S.K. et al. J. lmmunol., 1993, vol. 150, 5311-5320 [0109]° Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A., 2003, vol. 100 (7), 4126-4131 [0109]0 Blood, 2002, vol. 100 (9), 3068-3076
[0109]- MULLER et al. Eur. .1. lmmunol., 1992,Sci. U.S.A., 1985, vol. 82, 6497-6501
[0109]° SWIERCZ J.M. et al. J. Cell Biol., 2004, vol. 165, 869-880 [0109]° KUHNS JJ. et al. J. Biol. Chem., 1999, vol. 274, 36422-36427 [0109]' CI-IO H.-S. et al. Nature, 2003, vol. 421, 756-760 [0109]- EHSANI A et al. Genomics, 1993, vol. 15, 426-429 [0109]° BARNETT T. et al. Genomics, 1988, vol. 3, 59-66 [0109]- TAWARAGI Y. et al. Biochem.
Bi0phys. Res. Coinmun., 1988, vol. 150, 89-96 [0109]o Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A., 2002, vol. 99 (26), 16899-16903 [0109]° CLARK H.F. et al. Genome Res., 2003, vol. 13, 2265-2270 [0109]o MUNGALL A.J. et al. Nature, 2003, vol. 425, 805-811 [0109]- BLUMBERG H. et al. Cell, 2001, vol. 104, 9-19 [0109]- DUMOUTIER L. et al. J. lmmunol., 2001, vol. 167, 3545-3549 [0109]° PARRISH-NOVAK J. et al. J. Biol.
Chem., 2002, vol. 277, 47517-47523
[0109]- PLETNEV S. et al. Biochemistry, 2003, vol. 42, 12617-12624 [0109]- SHEIKH F. et al. J. lmmunol., 2004, vol. 172, 2006-2010 [0109]° GARY S.C. et al. Gene, 2000, vol. 256, 139-147 [0109]o CLARK H-F. et al. Genome Res., 2003, vol. 13, 2265-2270 [0109]o CHAN,J. ; WATT, V.M. Oncogene, 1991, vol. 6 (6), 1057-1061 [0109]- Oncogene, 1995, vol. 10 (5), 897-905
[0109]° Annu. Rev. Neurosci., 1998, vol. 21, 309-345 [0109]. Int. Rev. Cytol., 2000, vol. 196, 177- 244 [0109]o REITER R.E. et al. Proc. Natl.
Acad. Sci. U.S.A., 1998, vol. 95, 1735- 1740 [0109]° GU Z. et al. Oncogene, 2000, vol. 19, 222vol. 22 (6), 1621-1625 [0109] ' Genome Res., 2003, V01. 13 (10), 2265- 2270 [0109]0 Immunogenetics, 2002, vol. 54 (2), 87-95[0109] . Blood, 2002, vol. 99 (8), 2662-2669
[0109]- Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A., 2001, vol.98 (17), 9772-9777 [0109]o XU, MJ. et al. Biochem. Biophys. Res.
Commun., 2001, vol. 280 (3), 768-775
[0109]° COUSSENS L. et al. Science, 1985, vol.230 (4730), 1132-1139 [0109]0 YAMAMOTO T. et al. Nature, 1986, vol. 319, 230-234 [0109]0 YU et al. J. llnnlunol., 1992, vol. 148(2), 633-637 [0109]° SAKAGUCHI et al. EMBO J., 1988,vol. 7 (11), 3457-3464 [0109]° DOBNER et al. Eur. J, Immunol., 1992,vol. 22, 2795-2799 [0109]- BARELLA et al. Biochem. J., 1995, vol.309, 773-779 [0109]° TONNELLE et al. EMBO J., 1985, vol.4 (11), 2839-2847 [0109]° JONSSON et al. Immunogenetics, 1989,vol. 29 (6), 41 1-413 [0109] ° BECK et al. J. Mol. Biol., 1992,v01. 228, 433-441 [0109]° STRAUSBERG et al. Proc. Natl. Acad.Sci USA, 2002, vol. 99, 16899-16903
[0109]° SERVENIUS. J. Biol. Chem., 1987, vol.262, 8759-8766 [0109]° BECK. J.M01.Bi01., 1996, vol. 255, 1-13 [0109]- NARUSE et al. Tissue Antigens, 2002, vol. 59, 512-519 [0109]0 KASAHARA et al. lmmunogenetics, 1989, vol. 30 (1), 66-68 [0109]0 LARHAMMAR et al. J. Biol. Chem., 1985, vol. 260 (26), 141 1 1-141 19 [0109] o LE et al. FEBS Lett., 1997, vol. 418 (1-2), 1995-199 [0109]° TOUCHMAN et al. Genome. Res., 2000, vol. 10, 165-173 [0109]' VON HOEGEN et al. J. lmmunol.,1288-1296 [0109]' Biochein. Biophys. Res. Commun., 2000, vol. 275 (3), 783-788 [0109]° THOMPSON, J.S. et al. Science, 2001, vol. 293 (5537), 2108-2111
[0109]. WILSON et al. J. Exp. Med., 1991, vol. 173, 137-146 [0109]- HA et al. J. Immunol., 1992, vol. 148 (5), 1526-1531 [0109]° MUELLER et al. Eur. J. Biochem., 1992, vol. 22, 1621-1625 [0109]- HASHIMOTO et al.
Iminunogenetics, 1994, vol. 40(4), 287-295 [0109]o PREUD”HOMME et al. Clin. Exp.
Immunol., 1992, vol. 90 (1), 141-146
[0109]- CARTER et al. Nucleic Acids Res., 1985, v01. 13, 4431-4443 [0112]- HO et al. Gene (Amst.), 1989, vol. 77, 51-59 [0112]o KUNKEL et al. Proc. Natl. Acad.
Sci. USA, 1987, vol. 82, 488 [0112]o LIU et al. J. Biol. Chem., 1998, vol. 273, 20252-20260 [0112]' HIGUCHI. PCR Protocols.
Academic Press, 1990, 177-183 [0113] - ITO et al. Gene, 1991, vol. 102, 67- 70 [0113]- VALLETTE et al. Nuc. Acids Res., 1989, vol. 17, 723-733 [0113]- WELLS et al. Gene, 1985, Vol. 34, 315-323 [0114]- SAMBROOK ; RUSSEL. Molecular Cloning: A Laboratory Manual. 2001
[0115]- ZOLLER et al. Methods Enzymol., 1983, vol. 100, 468-500 [0115]' ZOLLER, M.J.;SM1TH, M. Nucl.
Acids Res., 1982, vol. 10, 6487-6500
[0115]° GERSTNER et al. Sequence Plasticity In The Anti gen-Binding Site Of A Therapeutic Anti-HERZ Antibody.J Mol Biol., 2002, vol. 321, 851-62 [0116]- LOWMAN; HENRY B. 2231990, vol. 144 (12), 4870-4877[0109]- MIURA et al. Genomics, 1996, vol. 38 (3), 299-304 [0109]o MIURA et al. Blood, 1998, vol. 92, 2815-2822 [0109]o DAVIS et al. Proc. Natl. Acad. Sci USA, 2001, vol. 98 (17), 9772-9777 [0109]° NAKAYAMA et al. Biochem. Biophys.
Res. Coinmun., 2000, vol. 277 (l), 124-Combinatorial Peptide Library Protocols. Methods in Molecular Biology, 1998, vol. 87, 249-264 [0116] - BEAUCAGE, S. ; LAYER, R.
Advances in the synthesis of oligonucleotides by the phosphoramidite approach.
Tetrahedron, 1992, vol. 48, 2223-23] 1
[0117]° Chemical methods for 5, non-isotopic127 [0109] labelling of PCR probes and primers.
° HORIE et al. Genomics, 2000, vol. 67, ANDRUS, A. PCR 2: A Practical 146-152 [0109] Approach. Oxford University Press,° UCHIDA et al. Biochem. Biophys. Res.
Coininun., 1999, vol. 266, 593-602 [0109] o LIANG et al. Cancer Res., 2000, vol. 60, 4907-12 [0109]° GLYNNE-JONES et al. lntJ Cancer., October 2001, vol. 94 (2), 178-84
[0109]° DENNIS et al. Albumin Binding As A General Strategy For Improving The Pharmacokinetics Of Proteins. J Biol Chein., 2002, vol. 277, 35035-35043
[0110] [0161]° DENNIS et al. J Biol Chem., 2002, vol. 277, 35035-35043 [0110] [0161]- SAMBROOK et al. Molecular Cloning, A Laboratory Manual. Cold Spring Harbor Laboratory Press, 1989 [0111]o AUSUBEL et al. Current Protocols in Molecular Biology. Greene Publishing and Wiley-lnterscience, 1993 [0111]0 The CCP4 Suite: Programs for Protein Crystallography. Acta. Cryst., 1994, vol.
DSO, 760-763 [0128]- B.LEE; F.M.RICHARDS. J .Ma1.Biol., 1971, vol. 55, 379-400 [0128]° SINGH et al. Anal. Biochem., 2002, vol. 304,147-15 [0141]° HARLOW E. ; LANE, D. Using1995, 39-54 [0117]- HERMANSON, G. Bioconjugate Techniques. Academic Press, 1996, vol. 40-55, 643-671 [0117]0 KELLER, G.; MANAK, M. DNA Probes Second Edition. Stockton Press, 1993,121-23[0117]- SKERRA et al. Curr. Opinion in lmmunol., 1993, vol. 5, 256-262 [0119] o PLUCKTHUN. lmmunol. Revs., 1992, vol. 130, 151-188 [0119]- LOWMAN et al. J. Biol. Chem., 1991, vol. 266 (17), 10982-10988
[0120]° BACA et al. Journal Biological Chemistry, vol. 272 (16), 10678-84
[0121]. Electro Spray Ionization Mass Spectrometry: Fundamentals.COLE, R.B. lnstrumentation And Applications. Wiley, 1997 [0122]o EIGENBROT et al. X-Ray Structures Of The Antigen-Binding Doinains From Three Variants Of Humanized Anti-P185her2 Antibody 4D5 And Comparison With Molecular Modeling. J Mol Biol., 1993, vol.229, 969-995 [0123]Antibodies: A Laboratory Manual. Cold Springs Harbor Laboratory Press, 1999
[0141]o LUNDBLAD R.L. Chemical Reagentsfor Protein Modification. CRC Press, 1991[0141] - Current Protocols in lmmunology.' GARRARD et al. Gene, 1993, vol. 128, 103-109 [0125]° EIGENBROT et al. J Mol Biol., 1993, vol. 229, 969-995 [0125] [0131]
[0137]° HERMANSON, G. Bioconjugate Techniques. Academic Press, 1996 224Wiley-Interscience, 1991, vol. 1 and 2
[0142]- HNATOWICH et al. J. lmmunol.
Methods, 1983, vol. 65, 147-157 [0142] o MEARES et al. Anal. Biochem., 1984, vol. 142, 68-78 [0142]o MIRZADEH et al. Bioconjugate Chem.,1990, vol. 1, 59-65 [0142]o MEARES et al. J. Cancer, 1990, 21-26
[0142]° IZARD et al. Bioconjugate Chem., 1992, vol. 3, 346-350 [0142]- NIKULA et al. Nucl. Med. Biol., 1995, vol. 22, 387-90 [0142]0 CAMERA et al. Nucl. Med. Biol., 1993,vol. 20, 955-62 [0142]o KUKIS et al. J. Nucl. Med., 1998, vol. 39, 2105-2110 [0142]0 VEREL et al. J. Nucl. Med., 2003, vol. 44, 1663-1670 [0142]° CAMERA et al. J. Nucl. Med., 1994, vol. 21, 640-646 [0142]- RUEGG et al. Cancer Res., 1990, vol. 50, 4221-4226 [0142]o LEE et al. Cancer Res., 2001, vol. 61, 4474-4482 [0142]o MITCHELL et al. J. Nucl. Med., 2003, vol. 44, 1 105-1112 [0142]° KOBAYASHI et al. Bioconjugate Chem., 1999, vol. 10, 103-111 [0142]- MIEDERER et al. J. Nucl. Med., 2004, vol. 45, 129-137 [0142]- DENARDO et al. Clinical Cancer Research, 1998, vol. 4, 2483-90[0142]° BLEND et al. Cancer Biotherapy &Radiopharmaceuticals, 2003, vol. 18, 355-363 [014210 NIKULA et al. J. Nucl. Med., 1999, vol.40, 166-76 [0142]° KOBAYASHI et al. J. Nucl. Med., 1998, vol. 39, 829-36 [0142]0 MARDIROSSIAN et al. Nucl. Med.
Biol., 1993, vol. 20, 65-74 [0142]o ROSELLI et al. Cancer Biotherapy &Radiopharmaceuticals, 1999, vol. 14, 209-20 [0142] - Methods for the Preparation of Enzyme-[0145]0 ZOLA. Monoclonal Antibodies: A Manual of Techniques. C RC Press, Inc, 1987, 147-158 [0146]- BRIGGS et al. Synthesis of Functionalised Fluorescent Dyes and Their Coupling to Amines and Amino Acids. J. Chein. Soc., Perkin-Trans., 1997, vol. 1, 1051-1058 [0148]o MIRAGLIA. Homogeneous ce11- and bead-based assays for high throughput screening using Iluorometric microvolume assay technology. J. of Biomolecular Screening, 1999, vol. 4, 193-204 [0149]o ZHENG. Caspase-3 controls both cytoplasmic and nuclear events associated With Fas-mediated apoptosis in vivo. Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1998, vol. 95, 6123-23 [0149]- VERMES. A novel assay for apoptosis. Flow cytometric detection of phosphatidylserine expression onearly apoptotic cells using fluorescein labelled Annexin V. J. lmmunol.
Methods, 1995, vol. 184, 39-51 [0149] ' SWARTZMAN. A homogeneous and multiplexed immunoassay for high- throughput screening using fluorometric microvolume assay technology. Anal. Biochem., 1999, vol. 271, 143-51 [0149]- CHEN et al. Bioconjugate Chein., 2004, vol. 15, 41-49 [0150]- AXWORTHY et al. Proc. Natl.
Acad. Sci. USA, 2000, vol. 97 (4), 1802-1807 [0151]- LEWIS et al. Bioconj. Chein., 1998, vol. 9, 72-86 [0151]' ALBERT et al. Bioorg. Med. Chem.
Lett., 1998, vol. 8, 1207-1210 [0151]' HAUGLAND. Molecular Probes Handbook of Fluorescent Prabes and Research Chemicals. Molecular Probes, lnc, 2003 [0152]- BRINKLEY. Bioconjugate Chem, 1992, vol. 3, 2 [0152]° GLAZER et al. Chemical 225Antibody Conjugates for use in Enzyme Immunoassay. O'SULLIVAN et al.
Methods in Enzym. AcademicPress, 1981, vol. 73, 147-166 [0142]o Fluorimetric Assays of Proteolytic Enzymes.KNIGHT, C. Methods in Enzyrnology.
Academic Press, 1995, vol. 248, 18-34
[0153]° CHANG et al. Gene, 1987, vol. 55, 189-196 [0157] 0 YN et al. PROC. NAT. ACAD. SCI.
(USA), 2002, vol. 99, 7968-7973 [0192]° REMILLARD et al. Science, 1975, vol.189, 1002-1005 [0197]o ISSEL et al. Can. Treatment Rev., 1978,vol.5,199-207[0197]- WOYKE et al. Antimicrob. Agents and Chemother., 2001, vol. 45 (12), 3580-3584[0202] [0203]° PETTIT et al. Antimicrob. Agents Chemother., 1998, vol. 42, 2961-2965
[0202] [0203]° FRANCISCO et al. Blood, 2003, vol. 102 (4), 1438-1465 [0202]° E. SCHRODER ; K. LUBKE. The Peptides. Academic Press, 1965, vol. 1, 76-136 [0206] [0251]° HINMAN et al. Cancer Research, 1993,vol. 53, 3336-3342 [0207] - LODE et al. Cancer Research, 1998, vol. 58, 2925-2928 [0207]- VITETTA et al. Science, 1987, vol. 238,1098[0208]o FRAKER et al. Biochem. Biophys. Res.Commun., 1978, vol. 80, 49-57 [0210] ° Monoclonal Antibodies in Immunoscintigraphy. CRC Press, 1989
[0210]° PAQUETTE, LEO A. Principles of Modern Heterocyclic Chemistry. W.A.
Benjamin, 1968 [0217]- The Chemistry of Heterocyclic Compounds, A series of Monographs.
John Wiley & Sons, 1950, vol. 13,14,16,19,28 [0217]0 J. Am. Chem. Soc., 1960, vol. 82, 5566
[0217]Modification of Proteins. Laboratory Techniques in Biochemistry and Molecular Biology. American Elsevier Publishing Co, 1975 [0152]o LUNDBLAD, R. L. ; NOYES, C. M.
Chemical Reagents for Protein Modification. CRC Press, 1984, vol. land 11 [0152]- Chemical Modification of Proteins.
PFLEIDERER, G. Modem Methods in Protein Chemistry. Walter De- Gryter, 1985 [0152]° WON G. Chemistry of ProteinCon jugation and Cross-linking. CRC Press, 1991 [0152]0 DE LEON-RODRIGUEZ et al.
ChemEur. J., 2004, vol. 10, 1149-1155
[0152]- LEWIS et al. Bioconjugate Chein., 2001, vol. 12, 320-324 [0152]- LI et al. Bioconjugate Chem., 2002, vol. 13, 110-115 [0152]o MIER et al. Bioconjugate Chem., 2005, vol. 16, 240-237 [0152]' SZALAI et al. J. Amer. Chem. 806., 2003, vol. 125, 15688-15689 [0244]' SHAMIS et al. J. Amer. Chem. 800., 2004, vol. 126, 1726-1731 [0244]° AMIR et al. Angew. Chem. Int. Ed., 2003, vol. 42, 4494-4499 [0244]- Applications Handbook and Catalog. 2003, 467-498 [0254]- TOKI et al. 1. Org. Chem., 2002, vol. 67, 1866-1872 [0255]- WALKER, M.A. J. Org. Chem., 1995, vol. 60, 5352-5355 [0255]o FRISCH et al. Bioconjugate Chem., 1996, vol. 7, 180-186 [0255]- Angew. Chem., 1975, vol. 87 (14), 517 [0259]o DUBOWCHIK et al. Tetrahedron Letters, 1997, vol. 38, 5257-60 [0261] ° CHARI et al. Cancer Research, 1992, vol. 52, 127-131 [0265]. GETZ et al. Anal. Biochem., 1999, vol. 273, 73-80 [0266] [0336]° CROUCH et al. .1. Immunol. Meth., 1993, vol. 160, 81-88 [0270] 226o SUN et al. Bioorganic & Medicinal Cheinistry Letters, 2002, vol. 12, 2213- 2215 [0228] [0242]0 SUN et al. Bioorganic & Medicinal Chemistry, 2003, vol. 1 1, 1761-1768
[0228] [0242]o KING. Tetrahedron Letters, 2002, vol. 43, 1987-1990 [0228]° HAY et al. Bioorg. Med. Chem. Lett., 1999, vol. 9, 2237 [0240]° RODRIGUES et al. Chemistry Biology,1995, vol. 2, 223 [0240] - STORM et al. .1. Amer. Chem. Soc., 1972, vol. 94, 5815 [0240]° AMSBERRY et al. J. Org. Chem., 1990,vol. 55, 5867 [0240]0 KINGSBURY et al. J. Med. Chem., 1984, vol. 27, 1447 [0240]0 GROOT et al. Angew. Chem. Int. Ed., 2003, vol. 42, 4490-4494 [0241]- CREE et al. AntiCancer Drugs, 1995, vol. 6, 398-404 [0270]- Remington°s Pharmaceutical Sciences. 1980 [0283] [0285]- Remingtonas Pharmaceutical Sciences. Mack Publishing Co, [0288] o BASELGA et al. J. Clin. Oncol., 1996, vol. 14, 737-744 [0297]- Chemotherapy Service. Williams & Wilkins, 1992 [0307]0 ODA et al. Nature Biotechnology.
Pierce Biotechnology, Inc, 2001, vol. 19, 379-382 [0315]- BACA et al. Journal Biological Chemistry, 1997, vol. 272 (16), 10678- 84 [0318]o MENDOZA et al. Cancer Res., 2002, vol. 62, 5485-5488 [0330]- WEBSTER et al. Semin. Cancer Biol., 1994, vol. 5, 69-76 [0334]- CHILD et al. J. Biol. Chem., 1999, vol. 274, 24335-24341 [0335]o NEUBERGER ; WILLIAMS.
Nucleic Acids Res., 1988, vol. 16, 6713
[0335]o BUCHMAN ; BERG. Mol. Cell.
Biol., 1988, vol. 8, 4395 [0335]o BRINSTER et al. Proc. Natl. Acad.
Sci. USA, 1988, vol. 85, 836 [0335]- RAO et al. Breast Cancer Res. and Treatment, 1997, vol. 45, 149-158
[0335]

Claims (1)

  1. ISTEMLER 1. 0,6 ile 1,0 araliginda bir tiyol reaktivitesi degerine ve SEKANS agir zincirde bir sekansa: NSLRCEDTAV (SEKANS KOD NO.: 10) LVTVCSASTKGPS (SEKANS KOD NO.: 1 l) LVTVSSCSTKGPS (SEKANS KOD NO.: 13) LVTVSSACTKGPS (SEKANS KOD NO.: 14) HEDPEVKFNWYVDGCEVHNAKTKPR (SEKANS KOD NO.: 31) YKCKVCNKALP (SEKANS KOD NO.: 34) KGFYPCDIAVE (SEKANS KOD NO.: 37) PPVLDCDGSFF (SEKANS KOD NO.: 38) GQGTLVTVSACSTKGPSVFPL (SEKANS KOD NO.: 42) 429de gösterilen sistein, serbest sistein ainino asididir, seçilen hafif zincirde bir sekansa: SLSASCGDRVT (SEKANS KOD NO.: 17) ElKRTCAAPSV (SEKANS KOD NO.: 19) TCAAPCVFIFPP (SEKANS KOD NO.: 20) FIFPPCDEQLK (SEKANS KOD NO.: 21) DEQLKCGTASV (SEKANS KOD NO.: 22) WKVDNCLQSGN (SEKANS KOD NO.: 24) ALQSGCSQESV (SEKANS KOD NO.: 25) GLSSPCTKSFN (SEKANS KOD NO.: 27) sahip bir veya daha fazla sayida serbest sistein amino asidi içeren bir sistein degistirilmis antikor, burada, SEKANS KOD NO.: 17, amino asididir; burada, sistein degistirilmis antikor, bir insan antikoru, kiinerik antikor ya da hümanize antikordur. Istem l”e göre bir sistein degistirilmis antikor olup ve asagidaki basamaklari içeren bir proses ile hazirlanir: (i) sistein degistirilmis antikoru kodlayan bir nükleik asit sekansinin mutajenizasyonu; (1`i) sistein degistirilmis antikorun ekspresyonu ve (iii) sistein degistirilmis antikorun izolasyonu ve saflastirilmasi. Istem 1”e ya da Istem 2°ye göre sistein degistirilmis antikor olup, antikor bir monoklonal antikor, bir bispesifik antikor ve bir antikor fragmani arasindan seçilir. Istem 3°e göre bir sistein degistirilmis antikor olup, burada ana antikor trastuzumab, bir anti-EphBZR antikoru ve bir anti-MUC16 antikoru arasindan seçilir. Onceki isteinlerdeii herhangi birisine göre, asagida sayilanlar arasindan seçilen bir amino asit sekansi içeren bir sistein degistirilmis antikor: SEKANS KOD NO.: 6: F\-'QI.\"IES(K KiLVQPGLISLRLSFAAS( iFNIKDIYIHWVROAPGKGLEWVARIYF'TNOY TRY ADSVKGRFIISADTSKNTAYLQMNSL R('I-ZDTA\"Y`1'(`SRW(KîRiI-'YAMDYVN iQGI LVTVSS ASTKGPSVF mapssicsrsrimmi muvxmrPL-Px-Tx-'swxsc;ALTsoviirFpAvross GI.YSLSSWWPSSSLGTOTY ICNVNHKvsmxx-DKKWPK SCDKTHT(`PP(`PAPl-ZI.LGG PSVI LFPPKPKDTLMISRTPEVl ÇVVVDVSHEDPLVKFNWYVD(iVtVIlNAK'I'KPRL-L-'QYN STYRVVSVI.TVLHQDWLN(EKEYKCKVSNKAI.PAP[EKTISK AKGQPREPQVYTLPPSREE MTKNOVSLTCLVKG FYPSDUVFWF SNCQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKII vnxsn w (xxiNVFSt'SVMHEALH NHY'I'QKSLSLSPGK, veya SEKANS KOD NO.: 7: EVQLVESÜ(i(;LVQPGGSLRLSCAASUI-'NlKDTYIHWVKQAPUKGLL'W\-'i\RIYVTN(iY'I`RY Ansv KGRI'TISADTSKNTAYLQMNSLRAILD'I'A\-'\i'YL'SRW(}(;`I)(if-`YAMDYWGQG'I LV'I'VSS (ISTK(`iPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSS GLYSLSSVV`I'\-°PSSSL(ETQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGG PSVFLF PPKPKDTLMISRTPEVTC\-'\"VI)\"SHE[)PEVKFN WYVIXWEVHNAKTKI'REEQYN STYR\-'\-'S\*'L'l`\~'l.HODWLMSKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAK(iQPREPQVY'l'LPPSREE MTKNQVSLTCLVKG'FYPSDIAVEWESN(iQPIîNNYKTTPPVLDSDÜSFFLYSKIIVDKSRW QQGNVFSCSVMHEAI.HNHYTQKSLSLSPGK, veya SEKANS KOD NO.: 8: DIQMTQSPSSLSASV( iDRVTIT(IRASQD\*'.\"I`.i\\".›\\r\"\'QQKP(iKAPKLLlYSASF LYSGV PS RFSLISRSGTDFH (T1551.OPFDFA'T\*'\'(`QQH\'"I"IAPIVTF(_ÃQ( iTK VFJKRTCA APSVFI FPP SDL-QLKSU'I'ASV W.` LLNNI YPR FA K VOWKVDNA l ,SK DST YSI SSTI 'T SEKANS KOD NO.: 28: E\-'QL\"ES(Ki(iL\"QP(i(&SLRLS(`AAS(iYlT'TSY\\";\1H\v\“VRQAP(iK( iLEWVG!INPS'I'GYTDY NOKFKDRFTISADTSKNTAYIQMNSI.RAF.DTAVYYFTRRPKIPRHANVFWGQGTLVTVSS CSTKÜPSVFPI.APSSKSTSUGTAAIÜCIN'KDYFPIÄPVI'VSW'NSGAI.'TSGVHTFPAVLQSS (SLAYSLSSV\~"I`\"PSSSL(1'IQlYIL'NVNHKPSNTKVIJKKVIIPKSCDK'I HTCPI'CI'APFI [GG PSVI'II-'PPKPKDTLMISRT PEVFCVVVDVSHEIM'L'VKI NWYVIKIVEVHNAK'I'KPRLLQY i\' STYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAK(?QPREPQVYTLPPSRIEE M T K NQVSIIC LVKGFYPSDIAVEWT:SNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYS KLTVDKSRW QQGNVFSCSVMHEAI iNHYTOKSl SISPCiK. ve SEKANS KOD NO.: 39: DVQLQESGP( 'iL\".\'PSQSL SLT(.I'I`\~'TG`1'SITN DYA WNWlKQI'PGNKLEWMGYIN Y 50`!' I` l'Y NPSLKSRISITRDTSKNQFFLHLNSVITEDTATYYCARWD(i(iLTYWGQ(?TLVTVSACSTK GPSVFPLAPSSKSTSGGTAA LGCLVK DYFPEPVYVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYS LSSVV'IVPSSSLUTQ'I'Y ICN\*'NH KPSN'I KV DKKVE PKSCDKTHTCPPCPAPEL LGGPSVF LH'PKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKP NWYVDUVILVHNAKI KPRI: EQY NS I'Y R VVSVI TVI.HQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAK( iQPR [î PQVYTLPPSRE EMTKN QVSLTCLVKG FYPSDIAVFWF.SNGQPFNNW'KT'TPPVI .DSDGSFFLY SKI.T\-'DKSRWQQGN VFSCSV MH EM 4 HNHYTQK SI Sl .SPO K. 6. Istemler 1-3”ten herhangi birisine göre bir sistein degistirilmis antikor üretme amacina yönelik olan ve ana antikorun IgA, IgD, . Istem 6°ya göre bir sistein degistirilmis antikor olup, burada . Istemler 1- 3,ten ya da istemler 6-7°den herhangi birisine göre bir sistein degistirilmis antikor olup, burada sistein degistirilmis antikor ya da ana antikor asagida sayilan reseptörler (1)-(36),nin birine veya daha fazlasina baglanir: (1) BMPRlB (kemik morfogenetik protein reseptör'û-tip IB); (2) E16 (LATl, SLC7A5); (3) STEAPl (alti transmembranli prostat epitelyal anti jeni); (4) O; (5) MPF (MPF, MSLN, SMR, megakaryosit güçlendirici faktör, mezotelin); (6) Napi3b (NAPI-3B, NPTIIb, SLC34A2, çözünen madde tasiyici ailesi 34 (sodyum fosfat), üye 2, tip II sodyum- bagimli fosfat transporteri 3b); SEMAG, Semaforin 5b Hlog, sema domain, yedi trombospondin tekrari (tip 1 ve tip l-benzeri), transmembran domaini (TM) ve kisa sitoplazinik domain, (semaforin) 5B); (9) ETBR (Endotelin tip B reseptörü); (10) MSG; (l 1) STEAP2 (HGNC_8639, IPCA-l, PCANAPI, STAMPI, STEAPZ, STM P, prostat kanseri iliskili gen 1, prostat kanseri iliskili protein l, alti transmeinbranli prostat epitelyal anti jeni 2, alti transmembranli prostat proteini); reseptör potansiyel katyon kanali, alt-aile M, üye 4); (13) CRIPTO (CR, CRl, CRGF, CRIPTO, TDGFl, teratokarsinom-kaynakli büyüme faktörû); (14) CD21 (CR2 (Tamamlayici reseptör'û 2) ya da C3DR (C3d/Epstein Barr Virüs reseptörü) ya da Hs. 73792); (15) CD79b (CD79B, CD79B, [Gb (immünoglobulin-iliskili (16) FCRH2 (IFGP4, lRTA4, SPAPIA (fosfataz ankor proteini la içeren SH2 domaini), SPAPlB, SPAPlC); (17) HERZ; (18) NCA; (19) MDP; (20) ILZOROL; (21) Brevican; (22) EphBZR; (23) ASLG659; (24) PSCA; (25) GEDA; (26) BAFF-R (B hücresi - aktive edici faktör reseptörü, BLyS reseptörü 3, BR3); (27) CD22 (B-hücresi reseptör'û CD22-B izoformu); (28) CD79a (CD79A, CD79a, immünoglobulin-iliskili alfa, lg betayla (CD79B) kovalent etkilesime giren ve yüzey üzerinde lgM molekülleriyle bir kompleks olusturan, B- hücresi diferansiyasyonundan rol oynayan bir sinyali transdüse eden bir B hücresi-spesifik protein); (29) CXCR5 (Burkitt'in lenfoma reseptörü l, CXCL 13 kemokiniyle aktive edilen, lenfosit migrasyonunda ve humoral savunmada islev gören, HIV-2 enfeksiyonunda ve muhtemelen AIDS, lenfoma, miyelom ve lösemi gelisiminde rol oynayan bir G protein-kuplajli reseptör); (30) HLA-DOB (peptidleri baglayan ve onlari CD4+ T lenfositlerine sunan MHC sinif II molekül (Ia antijen) beta alt-birimi); (31) P2X5 (Purinerjik reseptör P2X ligand-kapili iyon kanali 5, ekstraselüler ATP kapili bir iyon kanali; sinaptik transmisyon ve nörogenezde rol oynayabilir; yoksunluk, idiyopatik detrusor instabilitesinin patofizyolojisine katkida bulunabilir); (32) CD72 (B-hücresi diferansiyasyon antijeni CD72, Lyb- (33) LY64 (Lenfosit antijeni 64 (RP105), lösince zengin tekrar (LRR) ailesinin tip 1 membran proteini, B-hücresi aktivasyonunu ve apoptozu regüle eder; fonksiyon kaybi, sistemik lupus eritematozus görülen hastalarda hastalik aktivitesinde artisla iliskilidir); (34) FcRHl (FC reseptörü-benzeri protein 1, C2 tip Ig- benzeri ve ITAM domainleri içeren immünoglobulin Fc domaini için bir putatif reseptör; B-lenfosit diferansiyasyonunda rol oynayabilir); (35) IRTA2 (Immünoglobulin üst-aile reseptör translokasyonu iliskili 2, B hücresi gelisimi ve lenfomagenezde olasi rolleri olan bir putatif immünoreseptör; bazi B hücresi malignensilerinde translokasyon yoluyla genin deregülasyonu meydana gelir) ve (36) TENB2 (büyüme faktörlerinin EGF/heregulin ailesiyle iliski putatif transmembran proteoglikan ve follistatin). Onceki istemlerden herhangi birisine göre bir sistein degistirilmis antikor olup, burada antikor bir yakalama etiketine, bir belirleme etiketine ya da bir kati destege kovalent olarak baglanir. Istem 9”a göre bir sistein degistirilmis antikor olup, burada antikor bir floresein tipi, bir rodamin tipi, dansil, Lizamin, bir siyanin, bir fikoeritrin, Texas Kirmizi ve bunlarin bir analogu arasindan seçilen bir floresan boya belirleme etiketine kovalent olarak baglanir. Istem 9”a göre bir sistem degistirilmis antikor olup, burada antikor belirleme etiketine kovalent olarak baglanir. Istem 9,a göre bir sisteiii degistirilmis antikor olup, burada antikor DOTA, DOTP, DOTMA, DTPA ve TETA arasindan seçilen bir selatlama ligandiyla bir belirleme etiketine kovalent olarak baglanir. 1 ila 12 arasindaki isteinlerden herhangi birine göre bir sistem degistirilmis antikor (Ab) içeren bir bilesimdir. 14. 1 ila 12 arasindaki istemlerden herhangi birine göre bir sistein degistirilmis antikor (Ab) içerenbir antikor-ilaç konjugati bilesigidir. 5 15. Istem l4°e göre bir antikor-ilaç konjugati içeren bir fannasötik bilesimdir. 16. Istem 14'e göre terapide kullanilmak üzere bir antikor-ilaç kon jugati bilesigidir.
TR2018/08537T 2004-09-23 2005-09-22 Sistein değiştirilmiş antikorlar ve konjugatlar. TR201808537T4 (tr)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US61246804P 2004-09-23 2004-09-23
US69635305P 2005-06-30 2005-06-30

Publications (1)

Publication Number Publication Date
TR201808537T4 true TR201808537T4 (tr) 2018-07-23

Family

ID=36090710

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
TR2018/08537T TR201808537T4 (tr) 2004-09-23 2005-09-22 Sistein değiştirilmiş antikorlar ve konjugatlar.

Country Status (19)

Country Link
US (6) US7521541B2 (tr)
EP (2) EP3088004B1 (tr)
JP (2) JP4948413B2 (tr)
KR (1) KR101270829B1 (tr)
CN (2) CN104447992A (tr)
AU (1) AU2005286607B2 (tr)
BR (1) BRPI0516284A (tr)
CA (1) CA2580141C (tr)
DK (1) DK1791565T3 (tr)
ES (2) ES2579805T3 (tr)
HK (1) HK1100423A1 (tr)
HU (1) HUE030079T2 (tr)
IL (1) IL181584A (tr)
NZ (2) NZ553500A (tr)
PL (1) PL1791565T3 (tr)
RU (1) RU2412947C2 (tr)
SI (1) SI1791565T1 (tr)
TR (1) TR201808537T4 (tr)
WO (1) WO2006034488A2 (tr)

Families Citing this family (1133)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6136311A (en) 1996-05-06 2000-10-24 Cornell Research Foundation, Inc. Treatment and diagnosis of cancer
US6833438B1 (en) 1999-06-01 2004-12-21 Agensys, Inc. Serpentine transmembrane antigens expressed in human cancers and uses thereof
US20040141975A1 (en) 1998-06-01 2004-07-22 Raitano Arthur B. Nucleic acid and corresponding protein entitled 98P4B6 useful in treatment and detection of cancer
US20060052321A1 (en) 2002-04-05 2006-03-09 Raitano Arthur B Nucleic acid and corresponding protein entitled 98P4B6 useful in treatment and detection of cancer
EP1086223B1 (en) 1998-06-01 2009-07-29 Agensys, Inc. Novel serpentine transmembrane antigens expressed in human cancers and uses thereof
US20030149531A1 (en) 2000-12-06 2003-08-07 Hubert Rene S. Serpentine transmembrane antigens expressed in human cancers and uses thereof
AU775373B2 (en) 1999-10-01 2004-07-29 Immunogen, Inc. Compositions and methods for treating cancer using immunoconjugates and chemotherapeutic agents
US7097840B2 (en) * 2000-03-16 2006-08-29 Genentech, Inc. Methods of treatment using anti-ErbB antibody-maytansinoid conjugates
US7589180B2 (en) 2001-05-11 2009-09-15 Abbott Laboratories Inc. Specific binding proteins and uses thereof
US20100056762A1 (en) 2001-05-11 2010-03-04 Old Lloyd J Specific binding proteins and uses thereof
US7494646B2 (en) 2001-09-06 2009-02-24 Agensys, Inc. Antibodies and molecules derived therefrom that bind to STEAP-1 proteins
ES2537074T3 (es) 2001-09-06 2015-06-02 Agensys, Inc. Ácido nucleico y proteína correspondiente denominados STEAP-1 útiles en el tratamiento y la detección de cáncer
US20110045005A1 (en) 2001-10-19 2011-02-24 Craig Crowley Compositions and methods for the treatment of tumor of hematopoietic origin
US20090068178A1 (en) * 2002-05-08 2009-03-12 Genentech, Inc. Compositions and Methods for the Treatment of Tumor of Hematopoietic Origin
US20070207142A1 (en) * 2002-05-08 2007-09-06 Genentech, Inc. Compositions and methods for the treatment of tumor of hematopoietic origin
AU2003263964C1 (en) 2002-07-31 2010-08-19 Seagen Inc. Drug conjugates and their use for treating cancer, an autoimmune disease or an infectious disease
US9701754B1 (en) 2002-10-23 2017-07-11 City Of Hope Covalent disulfide-linked diabodies and uses thereof
US20110042260A1 (en) * 2003-04-10 2011-02-24 Craig Crowley Compositions and methods for the treatment of tumor of hematopoietic origin
US8088387B2 (en) 2003-10-10 2012-01-03 Immunogen Inc. Method of targeting specific cell populations using cell-binding agent maytansinoid conjugates linked via a non-cleavable linker, said conjugates, and methods of making said conjugates
SI1725249T1 (sl) 2003-11-06 2014-04-30 Seattle Genetics, Inc. Spojine monometilvalina, sposobne konjugacije na ligande
WO2005082023A2 (en) * 2004-02-23 2005-09-09 Genentech, Inc. Heterocyclic self-immolative linkers and conjugates
EP1725586B1 (en) 2004-03-02 2015-01-14 Seattle Genetics, Inc. Partially loaded antibodies and methods of their conjugation
NZ550816A (en) 2004-04-22 2009-12-24 Agensys Inc Antibodies and molecules derived therefrom that bind to STEAP-1 proteins
US20100111856A1 (en) * 2004-09-23 2010-05-06 Herman Gill Zirconium-radiolabeled, cysteine engineered antibody conjugates
EP2845865A1 (en) * 2004-11-12 2015-03-11 Xencor Inc. Fc variants with altered binding to FcRn
CA2586909A1 (en) 2004-11-12 2006-12-14 Seattle Genetics, Inc. Auristatins having an aminobenzoic acid unit at the n terminus
US8367805B2 (en) 2004-11-12 2013-02-05 Xencor, Inc. Fc variants with altered binding to FcRn
US20110123440A1 (en) * 2005-03-29 2011-05-26 Genevieve Hansen Altered Antibody FC Regions and Uses Thereof
USRE47223E1 (en) 2005-06-20 2019-02-05 Genentech, Inc. Compositions and methods for the diagnosis and treatment of tumor
EP3498289A1 (en) 2005-07-07 2019-06-19 Seattle Genetics, Inc. Monomethylvaline compounds having phenylalanine side-chain modifications at the c-terminus
WO2007008848A2 (en) 2005-07-07 2007-01-18 Seattle Genetics, Inc. Monomethylvaline compounds having phenylalanine carboxy modifications at the c-terminus
GB0514779D0 (en) 2005-07-19 2005-08-24 Celltech R&D Ltd Biological products
WO2008020827A2 (en) * 2005-08-01 2008-02-21 Biogen Idec Ma Inc. Altered polypeptides, immunoconjugates thereof, and methods related thereto
US8008453B2 (en) 2005-08-12 2011-08-30 Amgen Inc. Modified Fc molecules
US7750116B1 (en) 2006-02-18 2010-07-06 Seattle Genetics, Inc. Antibody drug conjugate metabolites
US8940871B2 (en) 2006-03-20 2015-01-27 The Regents Of The University Of California Engineered anti-prostate stem cell antigen (PSCA) antibodies for cancer targeting
MX2008015132A (es) * 2006-05-30 2008-12-10 Genentech Inc Anticuerpos e inmunoconjugados y sus usos.
GB0619291D0 (en) 2006-09-29 2006-11-08 Ucb Sa Altered antibodies
ZA200902161B (en) * 2006-10-27 2010-06-30 Genentech Inc Antiobodies and immunoconjugates and uses therefor
AU2013202022B2 (en) * 2006-10-27 2015-06-11 Genentech, Inc. Antibodies and immunoconjugates and uses therefor
EP2061814B1 (en) * 2006-10-27 2012-06-06 Genentech, Inc. Antibodies and immunoconjugates and uses therefor
PL2099823T5 (pl) 2006-12-01 2023-02-20 Seagen Inc. Wariant środków wiążących cel i jego zastosowania
US9090693B2 (en) 2007-01-25 2015-07-28 Dana-Farber Cancer Institute Use of anti-EGFR antibodies in treatment of EGFR mutant mediated disease
CA2676766A1 (en) 2007-02-09 2008-08-21 Genentech, Inc. Anti-robo4 antibodies and uses therefor
JP5618549B2 (ja) 2007-03-15 2014-11-05 ルードヴィッヒ インスティテュート フォー キャンサーリサーチ リミテッド Ｅｇｆｒ抗体及びｓｒｃ阻害剤を用いる治療方法及び関連製剤
JP5394246B2 (ja) * 2007-03-30 2014-01-22 ジェネンテック， インコーポレイテッド 抗体及びイムノコンジュゲートとこれらの使用方法
PE20090245A1 (es) * 2007-05-08 2009-03-17 Genentech Inc Anticuerpos anti-muc16 disenados con cisteina y conjugados de anticuerpos y farmacos
KR20190140090A (ko) 2007-07-09 2019-12-18 제넨테크, 인크. 폴리펩티드의 재조합 생산 동안의 디술피드 결합 환원의 방지
CN101801188A (zh) 2007-07-12 2010-08-11 特拉加拉医药品公司 治疗癌症、肿瘤和肿瘤相关性疾病的方法和组合物
DK2474557T3 (da) * 2007-07-16 2014-11-10 Genentech Inc Anti-CD79b-antistoffer og immunkonjugater og fremgangsmåder til anvendelse
WO2009012256A1 (en) 2007-07-16 2009-01-22 Genentech, Inc. Humanized anti-cd79b antibodies and immunoconjugates and methods of use
CN101952312A (zh) 2007-07-31 2011-01-19 米迪缪尼有限公司 多特异性表位结合蛋白及其应用
US9901567B2 (en) 2007-08-01 2018-02-27 Syntarga B.V. Substituted CC-1065 analogs and their conjugates
WO2009019314A1 (en) * 2007-08-08 2009-02-12 Novozymes A/S Transferrin variants and conjugates
JP5532486B2 (ja) 2007-08-14 2014-06-25 ルードヴィッヒ インスティテュート フォー キャンサー リサーチ Ｅｇｆ受容体を標的とするモノクローナル抗体１７５ならびにその誘導体および用途
EP2185188B1 (en) 2007-08-22 2014-08-06 Medarex, L.L.C. Site-specific attachment of drugs or other agents to engineered antibodies with c-terminal extensions
JP6126773B2 (ja) 2007-09-04 2017-05-10 ザ リージェンツ オブ ザ ユニバーシティ オブ カリフォルニア 癌のターゲッティングおよび検出のための高親和性抗前立腺幹細胞抗原（ｐｓｃａ）抗体
EP2195028A2 (en) * 2007-09-18 2010-06-16 The Jackson Laboratory Antibodies and fc fusion protein modifications with enhanced persistence or pharmacokinetic stability in vivo and methods of use thereof
US7959861B2 (en) * 2007-09-19 2011-06-14 Stc.Unm Integrated affinity microcolumns and affinity capillary electrophoresis
CA2700673A1 (en) * 2007-09-24 2009-04-02 Tragara Pharmaceuticals, Inc. Therapies for treating cancer using combinations of cox-2 inhibitors and anti-her2(erbb2) antibodies or combinations of cox-2 inhibitors and her2(erbb2) receptor tyrosine kinase inhibitors
ES2566957T3 (es) 2007-09-26 2016-04-18 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Región constante de anticuerpo modificado
EP2740490A1 (en) * 2007-10-03 2014-06-11 Cornell University Treatment of proliferative disorders using antibodies to PSMA
WO2009052249A1 (en) * 2007-10-19 2009-04-23 Genentech, Inc. Cysteine engineered anti-tenb2 antibodies and antibody drug conjugates
KR101658083B1 (ko) 2007-10-19 2016-09-30 시애틀 지네틱스, 인크. 씨디19 결합제 및 그의 용도
US20090162359A1 (en) 2007-12-21 2009-06-25 Christian Klein Bivalent, bispecific antibodies
US9266967B2 (en) 2007-12-21 2016-02-23 Hoffmann-La Roche, Inc. Bivalent, bispecific antibodies
EP3575317A1 (en) 2007-12-26 2019-12-04 Xencor, Inc. Fc variants with altered binding to fcrn
MX2010007767A (es) * 2008-01-18 2010-08-09 Medimmune Llc Anticuerpos manipulados con cisteina para conjugacion especifica de sitio.
DK2657253T3 (en) * 2008-01-31 2017-10-09 Genentech Inc Anti-CD79b antibodies and immune conjugates and methods of use
WO2009099741A1 (en) * 2008-02-01 2009-08-13 Genentech, Inc. Nemorubicin metabolite and analog reagents, antibody-drug conjugates and methods
EP2644204B1 (en) 2008-03-18 2017-04-19 Genentech, Inc. Combinations of an Anti-HER2 antibody-drug conjugate and pertuzumab
US8609105B2 (en) 2008-03-18 2013-12-17 Seattle Genetics, Inc. Auristatin drug linker conjugates
KR20100137585A (ko) * 2008-04-30 2010-12-30 이뮤노젠 아이엔씨 강력한 복합체 및 친수성 링커
KR20220035504A (ko) 2008-04-30 2022-03-22 이뮤노젠 아이엔씨 가교제 및 그 용도
AU2015202204A1 (en) * 2008-04-30 2015-05-14 Immunogen, Inc. Cross-linkers and their uses
MX2010014079A (es) 2008-06-20 2011-02-22 Novartis Ag Inmunoglobulinas con agregacion reducida.
PT2310970E (pt) 2008-06-20 2013-07-26 Massachusetts Inst Technology Métodos de identificação de regiões de ligação macromolecular e de regiões predispostas à agregação nas proteínas e suas utilizações
JP5438922B2 (ja) * 2008-06-25 2014-03-12 日東電工株式会社 核酸の製造方法
DE102008033871A1 (de) * 2008-06-26 2009-12-31 InBio Prof.Jürgen Büddefeld Dr.Peter Klauth Prof.Manfred Rietz GbR (vertretungsberechtigter Gesellschafter: Dr.Peter Klauth, 41189 Mönchengladbach) Abstandsgesteuerte Energietransfer-Farbstoffkomplexe
CN102089431A (zh) 2008-06-30 2011-06-08 艾斯巴技术,爱尔康生物医药研究装置有限责任公司 官能化的多肽
EP2769711A1 (en) * 2008-07-10 2014-08-27 ESBATech, an Alcon Biomedical Research Unit LLC Methods and Compositions for Enhanced Delivery of Macromolecules
ES2532635T3 (es) 2008-07-15 2015-03-30 Genentech, Inc. Conjugados de antraciclina, proceso para su preparación y su uso como compuestos antitumorales
US20100069616A1 (en) * 2008-08-06 2010-03-18 The Regents Of The University Of California Engineered antibody-nanoparticle conjugates
US20120027772A1 (en) * 2008-11-20 2012-02-02 Genentech, Inc. Therapeutic protein formulations
CA3150199A1 (en) 2009-01-09 2010-07-15 Seagen Inc. Weekly dosing regimens for anti-cd30 vc-pab-mmae antibody drug-conjugates
EP3543256A1 (en) 2009-01-12 2019-09-25 Cytomx Therapeutics Inc. Modified antibody compositions, methods of making and using thereof
US9493545B2 (en) * 2009-02-11 2016-11-15 Albumedix A/S Albumin variants and conjugates
ES2712732T3 (es) * 2009-02-17 2019-05-14 Cornell Res Foundation Inc Métodos y kits para el diagnóstico de cáncer y la predicción de valor terapéutico
US9238878B2 (en) * 2009-02-17 2016-01-19 Redwood Bioscience, Inc. Aldehyde-tagged protein-based drug carriers and methods of use
EP2400992B1 (en) 2009-02-27 2015-07-22 Genentech, Inc. Methods and compositions for protein labelling
KR101769160B1 (ko) 2009-03-05 2017-08-17 옥스포드 바이오테라퓨틱스 리미티드 Ｃａｄｍ１에 특이적인 완전 인간 항체
CN104447995A (zh) * 2009-03-20 2015-03-25 霍夫曼-拉罗奇有限公司 双特异性抗-her抗体
PE20120770A1 (es) 2009-03-25 2012-07-10 Genentech Inc ANTICUERPOS ANTI alfa5ß1 CON ACTIVIDAD SOBRE GLIOBLASTOMAS
WO2010111686A2 (en) 2009-03-27 2010-09-30 Life Technologies Corp Labeled enzyme compositions, methods & systems
MX2011010265A (es) 2009-04-01 2011-10-11 Genentech Inc Anticuerpos anti-fcrh5 e inmunoconjugados y metodos de uso.
US8466260B2 (en) 2009-04-01 2013-06-18 Genentech, Inc. Anti-FcRH5 antibodies and immunoconjugates and methods of use
MX2011010159A (es) 2009-04-02 2011-10-17 Roche Glycart Ag Anticuerpos multiespecificos que comprenden anticuerpos de longitud completa y fragmentos fab de cadena sencilla.
JP5616428B2 (ja) 2009-04-07 2014-10-29 ロシュ グリクアート アクチェンゲゼルシャフト 三価の二重特異性抗体
SG10201810743WA (en) 2009-06-03 2018-12-28 Immunogen Inc Conjugation methods
CN102458479B (zh) * 2009-06-04 2016-07-13 诺华公司 识别IgG结合位点的方法
US9676845B2 (en) 2009-06-16 2017-06-13 Hoffmann-La Roche, Inc. Bispecific antigen binding proteins
EP2711018A1 (en) 2009-06-22 2014-03-26 MedImmune, LLC Engineered Fc regions for site-specific conjugation
EP2448966B1 (en) 2009-07-03 2018-11-14 Avipep Pty Ltd Immuno-conjugates and methods for producing them
CN105440133A (zh) * 2009-07-15 2016-03-30 Aimm医疗股份公司 革兰氏阳性细菌特异性结合化合物
US8394922B2 (en) 2009-08-03 2013-03-12 Medarex, Inc. Antiproliferative compounds, conjugates thereof, methods therefor, and uses thereof
US9493578B2 (en) 2009-09-02 2016-11-15 Xencor, Inc. Compositions and methods for simultaneous bivalent and monovalent co-engagement of antigens
ES2667258T3 (es) 2009-09-10 2018-05-10 Ucb Biopharma Sprl Anticuerpos multivalentes
WO2011034605A2 (en) 2009-09-16 2011-03-24 Genentech, Inc. Coiled coil and/or tether containing protein complexes and uses thereof
EP2486023A4 (en) * 2009-10-06 2014-05-07 Immunogen Inc EFFICIENT CONJUGATES AND HYDROPHILIC BINDER
GB0922434D0 (en) 2009-12-22 2010-02-03 Ucb Pharma Sa antibodies and fragments thereof
GB0922435D0 (en) 2009-12-22 2010-02-03 Ucb Pharma Sa Method
CA2778673A1 (en) * 2009-10-27 2011-05-05 Karen Margrete Miller Function modifying nav 1.7 antibodies
US9234037B2 (en) 2009-10-27 2016-01-12 Ucb Biopharma Sprl Method to generate antibodies to ion channels
US8748380B2 (en) 2009-10-30 2014-06-10 Novozymes Biopharma Dk A/S Albumin variants
GB0920127D0 (en) 2009-11-17 2009-12-30 Ucb Pharma Sa Antibodies
GB0920324D0 (en) 2009-11-19 2010-01-06 Ucb Pharma Sa Antibodies
EP2506876B1 (en) 2009-12-02 2016-10-12 Imaginab, Inc. J591 minibodies and cys-diabodies for targeting human prostate specific membrane antigen (psma) and methods for their use
TW201129380A (en) * 2009-12-04 2011-09-01 Genentech Inc Methods of treating metastatic breast cancer with trastuzumab-MCC-DM1
BR112012012983A2 (pt) * 2009-12-04 2020-09-15 Genentech Inc método para sintetizar um anticorpo multiespecífico, método para sintetizar um painel de anticorpos multiespecíficos, método para sintetizar um análogo de anticorpo, método para sintetizar um painel de análogos de anticorpo e composições
WO2011084496A1 (en) * 2009-12-16 2011-07-14 Abbott Biotherapeutics Corp. Anti-her2 antibodies and their uses
US8765432B2 (en) 2009-12-18 2014-07-01 Oligasis, Llc Targeted drug phosphorylcholine polymer conjugates
AU2010336029B2 (en) * 2009-12-23 2011-10-13 Avipep Pty Ltd Immuno-conjugates and methods for producing them 2
US20110159588A1 (en) 2009-12-30 2011-06-30 Kui Lin Methods for Modulating a PDGF-AA Mediated Biological Response
TWI504410B (zh) 2010-02-08 2015-10-21 Agensys Inc 結合至１６１ｐ２ｆ１０ｂ蛋白之抗體藥物結合物（ａｄｃ）
CN102892779B (zh) 2010-02-18 2016-12-21 基因泰克公司 神经调节蛋白拮抗剂及其在治疗癌症中的用途
MA34057B1 (fr) 2010-02-23 2013-03-05 Genentech Inc Compositions et methodes pour le diagnostic et le traitement d'une tumeur
AU2011232514A1 (en) 2010-03-24 2012-08-30 Genentech, Inc. Anti-LRP6 antibodies
GB201005064D0 (en) 2010-03-25 2010-05-12 Ucb Pharma Sa Biological products
EP2554669B1 (en) * 2010-03-26 2018-09-19 Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd. Novel antibody having modification site introduced therein, and antibody fragment
AR080793A1 (es) 2010-03-26 2012-05-09 Roche Glycart Ag Anticuerpos biespecificos
ME02670B (me) 2010-03-26 2017-06-20 Memorial Sloan Kettering Cancer Center Antitela za MUC16 i metode za njihovu primenu
US8927695B2 (en) 2010-03-30 2015-01-06 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Protein-based assays for screening of the IgE-receptor interaction
US10233228B2 (en) 2010-04-09 2019-03-19 Albumedix Ltd Albumin derivatives and variants
AU2011239525B2 (en) 2010-04-15 2015-04-09 Medimmune Limited Pyrrolobenzodiazepines used to treat proliferative diseases
AU2011239522B2 (en) 2010-04-15 2014-10-23 Medimmune Limited Targeted pyrrolobenzodiazapine conjugates
PE20130342A1 (es) 2010-04-15 2013-04-20 Spirogen Sarl Pirrolobenzodiacepinas y conjugados de las mismas
HUE030846T2 (en) 2010-04-21 2017-06-28 Syntarga Bv Conjugates of CC-1065 analogues and bifunctional linkers
ES2636908T3 (es) * 2010-04-27 2017-10-10 Ventana Medical Systems, Inc. Conjugados de nanopartícula-anticuerpo y procedimientos para producir y usar dichos conjugados
BR112012028326A2 (pt) 2010-05-06 2017-03-21 Novartis Ag anticorpo multivalente isolado, anticorpos biparatópicos isolados, ácido nucleico, vetor, composição farmacêutica, método de obtenção dos referidos anticorpos, bem como uso do dos mesmos
US9428583B2 (en) 2010-05-06 2016-08-30 Novartis Ag Compositions and methods of use for therapeutic low density lipoprotein-related protein 6 (LRP6) multivalent antibodies
WO2011146568A1 (en) 2010-05-19 2011-11-24 Genentech, Inc. Predicting response to a her inhibitor
SI2575847T2 (sl) 2010-05-25 2022-08-31 F. Hoffmann-La Roche Ag Tehnike čiščenja polipeptidov
WO2011147834A1 (en) 2010-05-26 2011-12-01 Roche Glycart Ag Antibodies against cd19 and uses thereof
EP2575897A4 (en) * 2010-06-01 2016-06-01 Advanced Proteome Therapeutics Inc CROSSLINKING OF PROTEINS AND OTHER ENTITIES THROUGH ALPHA-HALO-ACETOPHENONES CONJUGATES, BENZYL HALIDES, QUINONES
MX336109B (es) 2010-06-03 2016-01-08 Genentech Inc Formacion de imagenes inmuno-tep de anticuerpos e inmunoconjugados y usos de lo mismo.
EP2579897A1 (en) * 2010-06-08 2013-04-17 Genentech, Inc. Cysteine engineered antibodies and conjugates
MX336001B (es) 2010-06-18 2016-01-07 Genentech Inc Anticuerpos anti-axl y metodos de uso.
WO2011161119A1 (en) 2010-06-22 2011-12-29 F. Hoffmann-La Roche Ag Antibodies against insulin-like growth factor i receptor and uses thereof
WO2011161189A1 (en) 2010-06-24 2011-12-29 F. Hoffmann-La Roche Ag Anti-hepsin antibodies and methods of use
CA2803792A1 (en) 2010-07-09 2012-01-12 Genentech, Inc. Anti-neuropilin antibodies and methods of use
WO2012010582A1 (en) 2010-07-21 2012-01-26 Roche Glycart Ag Anti-cxcr5 antibodies and methods of use
CN103052649B (zh) 2010-07-29 2015-12-16 Xencor公司 具有修改的等电点的抗体
CN103153341B (zh) 2010-08-03 2015-05-27 霍夫曼-拉罗奇有限公司 慢性淋巴细胞性白血病(cll)生物标志物
RU2584597C2 (ru) 2010-08-13 2016-05-20 Рош Гликарт Аг Антитела против а2 тенасцина с и способы их применения
UA113712C2 (xx) 2010-08-13 2017-02-27 Антитіло до fap і способи його застосування
CN103068846B9 (zh) 2010-08-24 2016-09-28 弗·哈夫曼-拉罗切有限公司 包含二硫键稳定性Fv片段的双特异性抗体
CN103080132B (zh) 2010-08-25 2016-06-08 弗·哈夫曼-拉罗切有限公司 抗il-18r1的抗体及其用途
AU2011295919A1 (en) 2010-08-31 2013-03-07 Genentech, Inc. Biomarkers and methods of treatment
TW201302793A (zh) 2010-09-03 2013-01-16 Glaxo Group Ltd 新穎之抗原結合蛋白
TWI814373B (zh) 2010-09-29 2023-09-01 美商艾澤西公司 與191p4d12蛋白結合之抗體藥物共軛物(adc)
EP3828205A1 (en) 2010-10-01 2021-06-02 Oxford BioTherapeutics Ltd Anti-ror1 antibodies
EP3708586A1 (en) 2010-10-29 2020-09-16 Perseus Proteomics Inc. Anti-cdh3 antibody having high internalization capacity
MX2013005046A (es) 2010-11-03 2013-12-12 Immunogen Inc Agentes citotoxicos que comprenden nuevos derivados de ansamitocina.
US9676871B2 (en) 2010-11-05 2017-06-13 Pfizer Inc. Engineered polypeptide conjugates and methods for making thereof using transglutaminase
JP6296536B2 (ja) 2010-11-05 2018-03-20 メドベット サイエンス ピーティーワイエルティーディーＭｅｄｖｅｔ Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｐｔｙ Ｌｔｄ 内皮前駆細胞のマーカーおよびその使用
WO2012064733A2 (en) * 2010-11-09 2012-05-18 Medimmune, Llc Antibody scaffold for homogenous conjugation
US8772457B2 (en) 2010-11-10 2014-07-08 Genentech, Inc. BACE1 antibodies
ES2544608T3 (es) 2010-11-17 2015-09-02 Genentech, Inc. Conjugados de anticuerpo y de alaninil-maitansinol
CA2820630A1 (en) * 2010-12-09 2012-06-14 Bayer Healthcare Llc Dimeric molecular complexes with free cysteine residues and conjugates thereof
CN105175542B (zh) 2010-12-16 2018-12-18 弗·哈夫曼-拉罗切有限公司 与th2抑制相关的诊断和治疗
PE20141114A1 (es) 2010-12-20 2014-09-15 Genentech Inc Anticuerpos anti-mesotelina e inmunoconjugados
MX2013007168A (es) 2010-12-22 2013-11-04 Genentech Inc Anticuerpo anti-pcsk9 y metodos de uso.
WO2012085111A1 (en) 2010-12-23 2012-06-28 F. Hoffmann-La Roche Ag Polypeptide-polynucleotide-complex and its use in targeted effector moiety delivery
JOP20210044A1 (ar) 2010-12-30 2017-06-16 Takeda Pharmaceuticals Co الأجسام المضادة لـ cd38
CN103415621A (zh) 2011-01-14 2013-11-27 雷德伍德生物科技股份有限公司 醛标记免疫球蛋白多肽及其使用方法
JP2014506883A (ja) * 2011-02-03 2014-03-20 インディ モレキュラー，インコーポレイテッド Ｐｓａ捕捉剤、組成物、方法及びその製造
CN103402546B (zh) 2011-02-10 2018-04-13 海德堡鲁普雷希特卡尔斯大学 用于肝特异性诊断的疏水性修饰肽
US9534000B2 (en) 2011-02-15 2017-01-03 Immunogen, Inc. Cytotoxic benzodiazepine derivatives and methods of preparation
WO2012116926A1 (en) 2011-02-28 2012-09-07 F. Hoffmann-La Roche Ag Antigen binding proteins
AR085403A1 (es) 2011-02-28 2013-09-25 Hoffmann La Roche Proteinas monovalentes que se unen a antigenos
KR20160044598A (ko) 2011-03-29 2016-04-25 로슈 글리카트 아게 항체 Fc 변이체
JP2014516511A (ja) 2011-04-07 2014-07-17 ジェネンテック， インコーポレイテッド 抗ｆｇｆｒ４抗体及び使用方法
US9598496B2 (en) 2011-05-09 2017-03-21 Perseus Proteomics Inc. Antibody capable of specifically recognizing transferrin receptor
CA2833212C (en) 2011-05-12 2020-06-09 Genentech, Inc. Multiple reaction monitoring lc-ms/ms method to detect therapeutic antibodies in animal samples using framework signature peptides
RS56090B1 (sr) 2011-05-16 2017-10-31 Hoffmann La Roche Fgfr1 agonisti i načini primene
CN106432506A (zh) 2011-05-24 2017-02-22 泽恩格尼亚股份有限公司 多价和单价多特异性复合物及其用途
CA2836927A1 (en) 2011-06-21 2012-12-27 Immunogen, Inc. Novel maytansinoid derivatives with peptide linker and conjugates thereof
US20130004484A1 (en) 2011-06-30 2013-01-03 Genentech, Inc. Anti-c-met antibody formulations
WO2013022855A1 (en) 2011-08-05 2013-02-14 Xencor, Inc. Antibodies with modified isoelectric points and immunofiltering
BR112014003431A2 (pt) 2011-08-17 2017-06-13 Genentech Inc anticorpo, ácido nucleico, célula hospedeira, método de produção de um anticorpo, imunoconjugado, formulação farmacêutica, agente farmacêutico, uso do anticorpo, método de tratamento de um indivíduo que tem câncer e método de aumento de tempo para recorrência de tumor
CN103890006A (zh) 2011-08-23 2014-06-25 罗切格利卡特公司 抗mcsp抗体
BR112014004166A2 (pt) 2011-08-23 2018-05-29 Roche Glycart Ag anticorpo biespecífico compreendendo pelo menos dois fragmentos fab, célula hospedeira procariótica ou eucariótica, metodo de produção de um anticorpo, imunoconjugado e invenção
CN107586340B (zh) 2011-08-23 2022-01-21 罗切格利卡特公司 对t细胞活化性抗原和肿瘤抗原特异性的双特异性抗体及使用方法
UY34317A (es) 2011-09-12 2013-02-28 Genzyme Corp Anticuerpo antireceptor de célula T (alfa)/ß
JP2014533927A (ja) 2011-09-15 2014-12-18 ジェネンテック， インコーポレイテッド 分化を促進する方法
WO2013040188A1 (en) * 2011-09-15 2013-03-21 Cytodyn, Inc. Anti-cd11a antibodies and uses thereof
AR087918A1 (es) 2011-09-19 2014-04-23 Genentech Inc Tratamientos combinados que comprenden antagonistas de c-met y antagonistas de b-raf
CA2849039C (en) 2011-09-20 2018-09-18 Spirogen Sarl Pyrrolobenzodiazepines as unsymmetrical dimeric pbd compounds for inclusion in targeted conjugates
AU2012319150B2 (en) 2011-10-05 2017-08-17 Genentech, Inc. Methods of treating liver conditions using Notch2 antagonists
EP2766392B1 (en) 2011-10-10 2019-07-17 Xencor, Inc. A method for purifying antibodies
US10851178B2 (en) 2011-10-10 2020-12-01 Xencor, Inc. Heterodimeric human IgG1 polypeptides with isoelectric point modifications
JP6532678B2 (ja) 2011-10-14 2019-06-19 ジェネンテック， インコーポレイテッド 抗ＨｔｒＡ１抗体及び使用方法
US9388187B2 (en) 2011-10-14 2016-07-12 Medimmune Limited Pyrrolobenzodiazepines
EA036202B1 (ru) 2011-10-14 2020-10-14 Сиэтл Дженетикс, Инк. Пирролбензодиазепины и конъюгаты направленного действия
HUE025661T2 (en) * 2011-10-14 2016-04-28 Medimmune Ltd Pyrrolobenzodiazepines and their conjugates
BR112014008888A2 (pt) 2011-10-14 2017-04-18 Seattle Genetics Inc pirrolobenzodiazepinas
EP3388435B1 (en) 2011-10-14 2023-05-03 Seagen Inc. Pyrrolobenzodiazepines and targeted conjugates
EP2766000A2 (en) 2011-10-15 2014-08-20 F.Hoffmann-La Roche Ag Scd1 antagonists for treating cancer
WO2013059531A1 (en) 2011-10-20 2013-04-25 Genentech, Inc. Anti-gcgr antibodies and uses thereof
MX2014004991A (es) 2011-10-28 2014-05-22 Genentech Inc Combinaciones terapeuticas y metodos para tratar el melanoma.
KR20140091721A (ko) 2011-11-02 2014-07-22 제넨테크, 인크. 오버로드 및 용리 크로마토그래피
WO2013070565A1 (en) 2011-11-07 2013-05-16 Medimmune, Llc Multispecific and multivalent binding proteins and uses thereof
US20140315817A1 (en) 2011-11-18 2014-10-23 Eleven Biotherapeutics, Inc. Variant serum albumin with improved half-life and other properties
JP2014533700A (ja) 2011-11-21 2014-12-15 ジェネンテック， インコーポレイテッド 抗ｃ−ＭＥＴ抗体の精製
JP2015501639A (ja) 2011-11-23 2015-01-19 アイジェニカ バイオセラピューティクス インコーポレイテッド 抗ｃｄ９８抗体およびその使用方法
AU2012348017A1 (en) * 2011-12-05 2014-07-03 Igenica Biotherapeutics, Inc. Antibody-drug conjugates and related compounds, compositions, and methods
EP2788024A1 (en) 2011-12-06 2014-10-15 F.Hoffmann-La Roche Ag Antibody formulation
WO2013096791A1 (en) 2011-12-23 2013-06-27 Genentech, Inc. Process for making high concentration protein formulations
CA2859755C (en) * 2011-12-23 2021-04-20 Pfizer Inc. Engineered antibody constant regions for site-specific conjugation and methods and uses therefor
JP2015506944A (ja) 2012-01-18 2015-03-05 ジェネンテック， インコーポレイテッド Ｆｇｆ１９修飾薬を使用する方法
EP2804629A1 (en) 2012-01-18 2014-11-26 Genentech, Inc. Anti-lrp5 antibodies and methods of use
CA2862292C (en) 2012-01-20 2019-10-08 Sea Lane Biotechnologies, Llc Binding molecule conjugates
RU2644341C2 (ru) 2012-02-10 2018-02-08 Дженентек, Инк. Одноцепочечные антитела и другие гетеромультимеры
RU2014133069A (ru) 2012-02-11 2016-04-10 Дженентек, Инк. Транслокации r-спондина и способы с их использованием
AR089972A1 (es) 2012-02-13 2014-10-01 Bristol Myers Squibb Co Compuestos de enediino, conjugados de estos y sus usos y metodos
MX360352B (es) 2012-02-15 2018-10-30 Hoffmann La Roche Cromatografia de afinidad basada en receptores fc.
SG10201801444WA (en) 2012-02-24 2018-04-27 Abbvie Stemcentrx Llc Anti sez6 antibodies and methods of use
WO2013126746A2 (en) 2012-02-24 2013-08-29 Stem Centrx, Inc. Novel modulators and methods of use
BR112014020697B1 (pt) * 2012-02-24 2024-01-09 Alteogen Inc Anticorpo modificado compreendendo um motivo contendo cisteína na terminação do anticorpo, conjugado anticorpo-droga modificado compreendendo uma droga ligada ao anticorpo modificado e método de produção do mesmo
AU2013234299B2 (en) 2012-03-16 2017-06-22 Albumedix Ltd. Albumin variants
JP2015514710A (ja) 2012-03-27 2015-05-21 ジェネンテック， インコーポレイテッド Ｈｅｒ３阻害剤に関する診断及び治療
AR090549A1 (es) 2012-03-30 2014-11-19 Genentech Inc Anticuerpos anti-lgr5 e inmunoconjugados
CN104220595A (zh) 2012-04-04 2014-12-17 株式会社英仙蛋白质科学 抗cdh3(p-钙粘着蛋白）抗体的药剂偶联物
US10385395B2 (en) 2012-04-11 2019-08-20 The Regents Of The University Of California Diagnostic tools for response to 6-thiopurine therapy
CA2867824A1 (en) 2012-05-01 2013-11-07 Genentech, Inc. Anti-pmel17 antibodies and immunoconjugates
WO2013170191A1 (en) 2012-05-11 2013-11-14 Genentech, Inc. Methods of using antagonists of nad biosynthesis from nicotinamide
EP2849790B1 (en) 2012-05-15 2019-04-10 Concortis Biosystems, Corp Drug-conjugates, conjugation methods, and uses thereof
US20130309223A1 (en) 2012-05-18 2013-11-21 Seattle Genetics, Inc. CD33 Antibodies And Use Of Same To Treat Cancer
JP6192022B2 (ja) 2012-05-21 2017-09-06 ジェネンテック， インコーポレイテッド 抗Ｌｙ６Ｅ抗体及びイムノコンジュゲート並びに使用方法
CN104335047B (zh) 2012-05-23 2017-08-15 弗·哈夫曼-拉罗切有限公司 治疗剂的选择方法
WO2013177481A1 (en) 2012-05-25 2013-11-28 Immunogen, Inc. Benzodiazepines and conjugates thereof
BR112014031310A2 (pt) 2012-06-15 2017-07-25 Genentech Inc anticorpos anti-pcsk9, formulações, dosagem e métodos de uso
EP2867253B1 (en) 2012-06-27 2016-09-14 F. Hoffmann-La Roche AG Method for selection and production of tailor-made highly selective and multi-specific targeting entities containing at least two different binding entities and uses thereof
CA2871882A1 (en) 2012-06-27 2014-01-03 F. Hoffmann-La Roche Ag Method for making antibody fc-region conjugates comprising at least one binding entity that specifically binds to a target and uses thereof
HUE029435T2 (en) 2012-07-04 2017-02-28 Hoffmann La Roche Anti-theophylline antibodies and methods of their application
CN107973856B (zh) 2012-07-04 2021-11-23 弗·哈夫曼-拉罗切有限公司 共价连接的抗原-抗体缀合物
EP3339328A1 (en) 2012-07-04 2018-06-27 F. Hoffmann-La Roche AG Anti-biotin antibodies and methods of use
RU2670491C2 (ru) 2012-07-05 2018-10-23 Дженентек, Инк. Система экспрессии и секреции
CN104411337A (zh) 2012-07-09 2015-03-11 基因泰克公司 包含抗cd79b抗体的免疫偶联物
MA37840B1 (fr) 2012-07-09 2020-05-29 Genentech Inc Immunoconjugués comprenant des anticorps anti-cd79b
CA2873889A1 (en) 2012-07-09 2014-01-16 Genentech, Inc. Anti-cd22 antibodies and immunoconjugates
AR091701A1 (es) 2012-07-09 2015-02-25 Genentech Inc Anticuerpos anti-cd22 e inmunoconjugados
HRP20211641T1 (hr) 2012-07-13 2022-02-04 Roche Glycart Ag Bispecifična protutijela anti-vegf/anti-ang-2 i njihova primjena u liječenju vaskularnih očnih bolesti
US9181343B2 (en) 2012-07-19 2015-11-10 Redwood Bioscience Inc. Antibody specific for CD22 and methods of use thereof
BR112015002193A2 (pt) 2012-08-02 2017-07-04 Genentech Inc anticorpos anti-etbr e imunoconjugados
MX2015001407A (es) 2012-08-02 2015-05-08 Genentech Inc Inmunoconjugados y anticuerpos anti-etbr.
US10431325B2 (en) 2012-08-03 2019-10-01 Novartis Ag Methods to identify amino acid residues involved in macromolecular binding and uses therefor
WO2014031566A1 (en) 2012-08-22 2014-02-27 Immunogen, Inc. Cytotoxic benzodiazepine derivatives
AU2013305534B2 (en) * 2012-08-23 2018-05-31 Agensys, Inc. Antibody drug conjugates (ADC) that bind to 158P1D7 proteins
US9790268B2 (en) 2012-09-12 2017-10-17 Genzyme Corporation Fc containing polypeptides with altered glycosylation and reduced effector function
US20150218220A1 (en) * 2012-09-12 2015-08-06 Brian Alan MENDELSOHN Amatoxin derivatives and cell-permeable conjugates thereof as inhibitors of rna polymerase
HUE055443T2 (hu) 2012-09-26 2021-11-29 Immunogen Inc Javított eljárások maytansinol acilezéséhez
US9777067B2 (en) 2012-09-27 2017-10-03 Massachusetts Institute Of Technology HER2- and VEGF-A-binding proteins with enhanced stability
KR20150064068A (ko) 2012-10-08 2015-06-10 로슈 글리카트 아게 2개의 Fab 단편을 포함하는 FC-부재 항체 및 이용 방법
SG11201502757QA (en) 2012-10-09 2015-05-28 Igenica Biotherapeutics Inc Anti-c16orf54 antibodies and methods of use thereof
PL2766048T3 (pl) 2012-10-12 2015-05-29 Medimmune Ltd Pirolobenzodiazepiny i ich koniugaty
MX364328B (es) 2012-10-12 2019-04-23 Medimmune Ltd Conjugados del anticuerpo pirrolobenzodiazepina.
DK2906251T3 (da) 2012-10-12 2017-11-20 Adc Therapeutics Sa Pyrrolobenzodiazepin-anti-CD22-antistofkonjugater
EP2906297B1 (en) 2012-10-12 2017-12-06 ADC Therapeutics SA Pyrrolobenzodiazepine-antibody conjugates
CA3060520C (en) 2012-10-12 2022-05-17 Medimmune Limited Pyrrolobenzodiazepines and conjugates thereof
NZ707486A (en) 2012-10-12 2018-09-28 Adc Therapeutics Sa Pyrrolobenzodiazepine - anti-psma antibody conjugates
WO2014057114A1 (en) 2012-10-12 2014-04-17 Adc Therapeutics Sàrl Pyrrolobenzodiazepine-anti-psma antibody conjugates
AU2013328673B2 (en) 2012-10-12 2017-07-13 Medimmune Limited Synthesis and intermediates of pyrrolobenzodiazepine derivatives for conjugation
NZ707534A (en) 2012-10-12 2018-08-31 Adc Therapeutics Sa Pyrrolobenzodiazepine-antibody conjugates
AU2013337277B2 (en) 2012-11-05 2018-03-08 Foundation Medicine, Inc. Novel NTRK1 fusion molecules and uses thereof
HUE039920T2 (hu) 2012-11-08 2019-02-28 Univ Miyazaki Transzferrin receptor specifikusan felismerni képes antitest
MX2015005363A (es) 2012-11-08 2015-11-06 Novozymes Biopharma Dk As Variantes de albumina.
EP2917243B1 (en) 2012-11-08 2018-03-14 F.Hoffmann-La Roche Ag Her3 antigen binding proteins binding to the beta-hairpin of her3
MX2015005860A (es) 2012-11-13 2015-08-10 Genentech Inc Anticuerpos de antihemaglutinina y metodo de uso.
WO2014078729A1 (en) 2012-11-15 2014-05-22 Genentech, Inc. IONIC STRENGTH-MEDIATED pH GRADIENT ION EXCHANGE CHROMATOGRAPHY
ES2649991T3 (es) * 2012-11-19 2018-01-16 Baliopharm Ag Anticuerpo biespecífico recombinante que se une a CD20 y CD95
US9474803B2 (en) 2012-11-27 2016-10-25 Alteogen Inc. Composition for stabilizing fusion protein in which protein and FC domain are fused
US9353150B2 (en) 2012-12-04 2016-05-31 Massachusetts Institute Of Technology Substituted pyrazino[1′,2′:1 ,5]pyrrolo[2,3-b]-indole-1,4-diones for cancer treatment
PL2900277T3 (pl) 2012-12-13 2022-05-16 Immunomedics, Inc. Dawkowanie immunokoniugatów przeciwciał i sn-38 dla poprawy skuteczności i zmniejszenia toksyczności
CN104994885B (zh) * 2012-12-19 2017-09-29 基因泰克公司 用于放射性卤素蛋白质标记的方法和组合物
AU2013364065B2 (en) 2012-12-21 2018-10-04 Altrubio Inc. Hydrophilic self-immolative linkers and conjugates thereof
CA2894959C (en) 2012-12-21 2022-01-11 Spirogen Sarl Unsymmetrical pyrrolobenzodiazepines-dimers for use in the treatment of proliferative and autoimmune diseases
CN110452242A (zh) 2012-12-21 2019-11-15 麦迪穆有限责任公司 吡咯并苯并二氮杂卓及其结合物
WO2014107024A1 (ko) * 2013-01-03 2014-07-10 셀트리온 항체-링커-약물 결합체, 그의 제조방법 및 그를 포함하는 항암제 조성물
US11053316B2 (en) 2013-01-14 2021-07-06 Xencor, Inc. Optimized antibody variable regions
US9605084B2 (en) 2013-03-15 2017-03-28 Xencor, Inc. Heterodimeric proteins
US10487155B2 (en) 2013-01-14 2019-11-26 Xencor, Inc. Heterodimeric proteins
US10968276B2 (en) 2013-03-12 2021-04-06 Xencor, Inc. Optimized anti-CD3 variable regions
US9701759B2 (en) 2013-01-14 2017-07-11 Xencor, Inc. Heterodimeric proteins
WO2014110601A1 (en) 2013-01-14 2014-07-17 Xencor, Inc. Novel heterodimeric proteins
US10131710B2 (en) 2013-01-14 2018-11-20 Xencor, Inc. Optimized antibody variable regions
WO2014113510A1 (en) 2013-01-15 2014-07-24 Xencor, Inc. Rapid clearance of antigen complexes using novel antibodies
WO2014113729A2 (en) 2013-01-18 2014-07-24 Foundation Mecicine, Inc. Methods of treating cholangiocarcinoma
CN103933575B (zh) 2013-01-23 2017-09-29 上海新理念生物医药科技有限公司 一种三齿型连接子及其应用
WO2014116749A1 (en) 2013-01-23 2014-07-31 Genentech, Inc. Anti-hcv antibodies and methods of using thereof
MX2015010146A (es) * 2013-02-08 2016-05-31 Novartis Ag Sitios especificos para modificar anticuerpos para hacer inmunoconjugados.
SG11201506243XA (en) 2013-02-14 2015-09-29 Bristol Myers Squibb Co Tubulysin compounds, methods of making and use
SG11201506358PA (en) 2013-02-15 2015-09-29 Perseus Proteomics Inc Anti-cdh3 humanized antibody, drug conjugate thereof, and use thereof
BR112015018418A2 (pt) 2013-02-22 2017-07-18 Hoffmann La Roche métodos para tratar câncer, para aumentar a eficácia de um tratamento, para adiar e/ou prevenir o desenvolvimento de câncer, para aumentar a sensibilidade a um terapêutico direcionado, para estender o período de sensibilidade, para estender a duração de resposta a um terapêutico direcionado e produto farmacêutico
CN105164159A (zh) 2013-02-22 2015-12-16 施特姆森特克斯股份有限公司 新的抗体缀合物及其用途
WO2014131715A1 (en) 2013-02-26 2014-09-04 Roche Glycart Ag Anti-mcsp antibodies
US9901647B2 (en) 2013-02-28 2018-02-27 Immunogen, Inc. Conjugates comprising cell-binding agents and cytotoxic agents
EP2961434A2 (en) 2013-02-28 2016-01-06 ImmunoGen, Inc. Conjugates comprising cell-binding agents and cytotoxic agents
CN105246511A (zh) 2013-03-06 2016-01-13 豪夫迈·罗氏有限公司 治疗和预防癌症药物抗性的方法
CN110256560A (zh) 2013-03-11 2019-09-20 建新公司 通过糖工程的位点特异性抗体-药物偶联
CN105142674B (zh) 2013-03-13 2018-11-13 麦迪穆有限责任公司 吡咯并苯并二氮杂卓和其结合物
AU2014244245C1 (en) 2013-03-13 2018-04-19 Genentech, Inc. Pyrrolobenzodiazepines and conjugates thereof
US20160031887A1 (en) 2013-03-13 2016-02-04 Medimmune Limited Pyrrolobenzodiazepines and conjugates thereof
EP2968540A2 (en) 2013-03-14 2016-01-20 Genentech, Inc. Combinations of a mek inhibitor compound with an her3/egfr inhibitor compound and methods of use
MX2015010777A (es) 2013-03-14 2016-04-25 Genentech Inc Anticuerpos e inmunoconjugados anti-b7-h4.
US9546203B2 (en) * 2013-03-14 2017-01-17 Amgen Inc. Aglycosylated Fc-containing polypeptides with cysteine substitutions
US9562099B2 (en) 2013-03-14 2017-02-07 Genentech, Inc. Anti-B7-H4 antibodies and immunoconjugates
JP2016516046A (ja) 2013-03-14 2016-06-02 ジェネンテック， インコーポレイテッド がんの治療方法及びがん薬物耐性を阻止する方法
SG11201507430RA (en) * 2013-03-15 2015-10-29 Abbvie Deutschland Anti-egfr antibody drug conjugate formulations
US10519242B2 (en) 2013-03-15 2019-12-31 Xencor, Inc. Targeting regulatory T cells with heterodimeric proteins
DK2970486T3 (en) 2013-03-15 2018-08-06 Xencor Inc MODULATION OF T-CELLS WITH BISPECIFIC ANTIBODIES AND FC-FUSIONS
US10106624B2 (en) 2013-03-15 2018-10-23 Xencor, Inc. Heterodimeric proteins
US20140377253A1 (en) * 2013-03-15 2014-12-25 Abbvie Biotherapeutics Inc. Fc variants
EA201890895A1 (ru) 2013-03-15 2019-02-28 Зинджения, Инк. Мультивалентные и моновалентные мультиспецифические комплексы и их применение
PL3587448T3 (pl) 2013-03-15 2021-11-29 Xencor, Inc. Białka heterodimeryczne
BR112015023084A2 (pt) * 2013-03-15 2017-11-21 Abbvie Biotechnology Ltd anticorpo anti-cd25 monoclonal ou um fragmento ligante anti-cd25 de um anticorpo monoclonal, conjugado de anticorpo-droga, composição farmacêutica, ácido nucleico, vetor, célula hospedeira procariota e eucariota, método para a produção de um anticorpo anti-cd25 ou fragmento ligante anti-cd25, e, uso de um anticorpo anti-cd25 monoclonal de um conjugado anticorpo-droga ou de uma composição farmacêutica
CN105378075B (zh) 2013-03-15 2022-04-05 Atyr 医药公司 组氨酰-trna合成酶-fc缀合物
MX2015012326A (es) 2013-03-15 2016-03-08 Genentech Inc Anticuerpos anti-crth2 y su uso.
KR20150130451A (ko) 2013-03-15 2015-11-23 제넨테크, 인크. 암 치료 방법 및 항암제 내성 예방을 위한 방법
EP3385277A1 (en) 2013-03-15 2018-10-10 F. Hoffmann-La Roche AG Il-22 polypeptides and il-22 fc fusion proteins and methods of use
US10858417B2 (en) 2013-03-15 2020-12-08 Xencor, Inc. Heterodimeric proteins
KR20230070054A (ko) 2013-03-15 2023-05-19 제넨테크, 인크. Pd-1 및 pd-l1 관련 상태를 치료하기 위한 바이오마커 및 방법
EP2970476A1 (en) 2013-03-15 2016-01-20 F. Hoffmann-La Roche AG Compositions and methods for diagnosis and treatment of hepatic cancers
US9260527B2 (en) 2013-03-15 2016-02-16 Sdix, Llc Anti-human CXCR4 antibodies and methods of making same
RU2661111C2 (ru) 2013-03-15 2018-07-11 Ац Иммуне С.А. Антитела к тау и способы применения
UA118028C2 (uk) 2013-04-03 2018-11-12 Рош Глікарт Аг Біспецифічне антитіло, специфічне щодо fap і dr5, антитіло, специфічне щодо dr5, і спосіб їх застосування
EP3327034A1 (en) 2013-04-29 2018-05-30 F. Hoffmann-La Roche AG Fcrn-binding abolished anti-igf-1r antibodies and their use in the treatment of vascular eye diseases
KR20210094669A (ko) 2013-04-29 2021-07-29 에프. 호프만-라 로슈 아게 인간 fcrn-결합 변형된 항체 및 사용 방법
CA2904805A1 (en) 2013-04-29 2014-11-06 F. Hoffmann-La Roche Ag Fc-receptor binding modified asymmetric antibodies and methods of use
US9708406B2 (en) 2013-05-20 2017-07-18 Genentech, Inc. Anti-transferrin receptor antibodies and methods of use
US9803002B2 (en) 2013-05-31 2017-10-31 Genentench, Inc. Anti-wall teichoic antibodies and conjugates
US9884126B2 (en) 2013-05-31 2018-02-06 Genentech, Inc. Anti-wall teichoic antibodies and conjugates
WO2014194030A2 (en) 2013-05-31 2014-12-04 Immunogen, Inc. Conjugates comprising cell-binding agents and cytotoxic agents
LT3004162T (lt) 2013-05-31 2020-06-10 Genentech, Inc. Antikūnai prieš ląstelės sienelės teicho rūgštį ir konjugatai
US10781259B2 (en) 2013-06-06 2020-09-22 Magenta Therapeutics, Inc. Modified antibodies and related compounds, compositions, and methods of use
AR096687A1 (es) 2013-06-24 2016-01-27 Genentech Inc Anticuerpos anti-fcrh5
CN105452293B (zh) * 2013-07-03 2021-03-16 首尔大学校产学协力团 转化为半胱氨酸的鸡抗体和使用其的位点特异性缀合
BR112016000231A8 (pt) 2013-07-12 2019-12-31 Genentech Inc métodos para identificações de condições de separação com cromatografia de troca de íons e para análises de composições de polipeptídeos
WO2015015448A2 (en) 2013-07-31 2015-02-05 Rinat Neuroscience Corp. Engineered polypeptide conjugates
TWI646108B (zh) 2013-08-01 2019-01-01 艾澤西公司 結合至ｃｄ３７蛋白質之抗體藥物結合物（ａｄｃ）
KR20180021234A (ko) 2013-08-12 2018-02-28 제넨테크, 인크. 보체-연관 상태의 치료를 위한 조성물 및 방법
EA201690195A1 (ru) 2013-08-12 2016-05-31 Дженентек, Инк. Конъюгатные соединения антитело-лекарство на основе димера 1-(хлорметил)-2,3-дигидро-1h-бензо[e]индола и способы применения и лечения
KR20160054501A (ko) 2013-08-26 2016-05-16 맵백스 테라퓨틱스, 인코포레이티드 시알릴-루이스 ａ에 대한 사람 항체 코드화 핵산
CN105848671B (zh) * 2013-08-28 2019-12-13 艾伯维施特姆森特克斯有限责任公司 位点特异性抗体缀合方法和组合物
KR20160046914A (ko) 2013-08-28 2016-04-29 스템센트알엑스 인코포레이티드 신규한 ｓｅｚ6 조절물질 및 사용방법
WO2015031693A1 (en) * 2013-08-28 2015-03-05 Stem Centrx, Inc. Engineered anti-dll3 conjugates and methods of use
JP6602765B2 (ja) 2013-09-05 2019-11-06 ジェネンテック， インコーポレイテッド クロマトグラフィー再使用のための方法
WO2015035342A2 (en) 2013-09-08 2015-03-12 Oligasis Llc Factor viii zwitterionic polymer conjugates
KR102332302B1 (ko) 2013-09-13 2021-12-01 제넨테크, 인크. 세포주에서 숙주 세포 단백질 및 재조합 폴리펩티드 생성물을 검출 및 정량화하기 위한 조성물 및 방법
KR20160055252A (ko) 2013-09-17 2016-05-17 제넨테크, 인크. 항-lgr5 항체의 사용 방법
EP3049437A1 (en) 2013-09-27 2016-08-03 F. Hoffmann-La Roche AG Thermus thermophilus slyd fkbp domain specific antibodies
CA2922912A1 (en) 2013-10-11 2015-04-16 F. Hoffmann-La Roche Ag Multispecific domain exchanged common variable light chain antibodies
GB201317981D0 (en) 2013-10-11 2013-11-27 Spirogen Sarl Pyrrolobenzodiazepines and conjugates thereof
US10010624B2 (en) 2013-10-11 2018-07-03 Medimmune Limited Pyrrolobenzodiazepine-antibody conjugates
WO2015052534A1 (en) 2013-10-11 2015-04-16 Spirogen Sàrl Pyrrolobenzodiazepine-antibody conjugates
AU2014333563B9 (en) 2013-10-11 2020-04-02 Oxford Biotherapeutics Ltd Conjugated antibodies against LY75 for the treatment of cancer
GB201317982D0 (en) 2013-10-11 2013-11-27 Spirogen Sarl Pyrrolobenzodiazepines and conjugates thereof
RU2016117978A (ru) 2013-10-11 2017-11-17 Дженентек, Инк. Ингибиторы nsp4 и способы их применения
EP3054986B1 (en) 2013-10-11 2019-03-20 Medimmune Limited Pyrrolobenzodiazepine-antibody conjugates
BR112016008477A2 (pt) 2013-10-18 2017-10-03 Genentech Inc Corpos, ácido nucleico, célula hospedeira, método de produção de um anticorpo, imunoconjugado, formulação farmacêutica e usos do anticorpo
AR098126A1 (es) 2013-10-21 2016-05-04 Genentech Inc Anticuerpos anti-ly6e (locus e del complejo del antígeno 6 linfocítico), inmunoconjugados y métodos para usarlos
CA2924873A1 (en) 2013-10-23 2015-04-30 Genentech, Inc. Methods of diagnosing and treating eosinophilic disorders
PE20160870A1 (es) 2013-11-06 2016-09-09 Abbvie Stemcentrx Llc Anticuerpos anti-claudina novedosos y metodos de uso
EP2873680A1 (en) * 2013-11-13 2015-05-20 F.Hoffmann-La Roche Ag Oligopeptide and methods for producing conjugates thereof
EP3783020A1 (en) 2013-11-21 2021-02-24 F. Hoffmann-La Roche AG Anti-alpha-synuclein antibodies and methods of use
CN106104273A (zh) 2013-12-12 2016-11-09 施特姆森特克斯股份有限公司 新型抗dpep3抗体和使用方法
EA201691214A1 (ru) 2013-12-13 2016-12-30 Дженентек, Инк. Антитела к cd33 и иммуноконъюгаты
CN105873614B (zh) 2013-12-16 2020-10-30 基因泰克公司 肽模拟化合物及其抗体-药物缀合物
MX2016007578A (es) 2013-12-16 2016-10-03 Genentech Inc Compuestos de conjugado anticuerpo-farmaco dimerico de 1-(clorometil)-2,3-dihidro-1h-benzo [e] indol, y metodos de uso y tratamiento.
EP3082875B1 (en) 2013-12-16 2020-11-25 Genentech, Inc. Peptidomimetic compounds and antibody-drug conjugates thereof
BR112016014126B1 (pt) 2013-12-16 2023-02-14 Medimmune Limited Composto não-peptídico, conjugados de anticorpo-fármaco do mesmo, uso dos ditos conjugados para o tratamento de câncer e composição farmacêutica que compreende os mesmos
US9067998B1 (en) 2014-07-15 2015-06-30 Kymab Limited Targeting PD-1 variants for treatment of cancer
US8992927B1 (en) 2014-07-15 2015-03-31 Kymab Limited Targeting human NAV1.7 variants for treatment of pain
ES2811923T3 (es) 2013-12-17 2021-03-15 Genentech Inc Anticuerpos anti-CD3 y métodos de uso
US8986694B1 (en) 2014-07-15 2015-03-24 Kymab Limited Targeting human nav1.7 variants for treatment of pain
US9045545B1 (en) 2014-07-15 2015-06-02 Kymab Limited Precision medicine by targeting PD-L1 variants for treatment of cancer
US9914769B2 (en) 2014-07-15 2018-03-13 Kymab Limited Precision medicine for cholesterol treatment
CA2932958A1 (en) 2013-12-20 2015-06-25 F. Hoffmann-La Roche Ag Humanized anti-tau(ps422) antibodies and methods of use
TWI670283B (zh) 2013-12-23 2019-09-01 美商建南德克公司 抗體及使用方法
PL3089996T3 (pl) 2014-01-03 2021-12-13 F. Hoffmann-La Roche Ag Dwuswoiste przeciwciała przeciw haptenowi/przeciw receptorowi występującemu w barierze krew-mózg, ich kompleksy i ich zastosowanie jako przenośniki wahadłowe występujące w barierze krew-mózg
MX2016008189A (es) 2014-01-03 2016-09-29 Hoffmann La Roche Conjugados helicoidales-anticuerpo anti-helicoidal unidos covalentemente y usos de los mismos.
CA2930046A1 (en) 2014-01-03 2015-07-09 F. Hoffmann-La Roche Ag Covalently linked polypeptide toxin-antibody conjugates
KR102381685B1 (ko) 2014-01-06 2022-04-01 에프. 호프만-라 로슈 아게 1가 혈액 뇌 장벽 셔틀 모듈
EP2891664A1 (en) * 2014-01-07 2015-07-08 Technische Universität München Novel methods for the stabilisation of immunoglobulin constant domains
CN104861063A (zh) * 2014-01-10 2015-08-26 博笛生物科技有限公司 靶向her2阳性肿瘤的化合物和组合物
CN104861067A (zh) * 2014-01-10 2015-08-26 博笛生物科技有限公司 用于免疫疗法的化合物和组合物
US10548985B2 (en) * 2014-01-10 2020-02-04 Birdie Biopharmaceuticals, Inc. Compounds and compositions for treating EGFR expressing tumors
CA2935433C (en) 2014-01-10 2019-04-02 Synthon Biopharmaceuticals B.V. Duocarmycin anti-her2 antibody drug conjucates with activity against her2 expressing malignancies
CA2935430C (en) 2014-01-10 2018-09-18 Synthon Biopharmaceuticals B.V. Duocarmycin adcs for use in treatment of endometrial cancer
CN104861064A (zh) * 2014-01-10 2015-08-26 博笛生物科技有限公司 靶向表达egfr的肿瘤的化合物和组合物
CN110903398B (zh) 2014-01-15 2023-08-15 豪夫迈·罗氏有限公司 具有修饰的FCRN和保持的蛋白A结合性质的Fc区变体
WO2015112597A1 (en) * 2014-01-21 2015-07-30 Belmont Biosciences, Inc. Variants of igg fc with limited amine groups that retain functional properties
RU2016130349A (ru) 2014-01-24 2018-03-01 Дженентек, Инк. Способы применения антител против steap1 и иммуноконъюгатов
KR20160111039A (ko) 2014-02-08 2016-09-23 제넨테크, 인크. 알츠하이머 질환을 치료하는 방법
MX2016010237A (es) 2014-02-08 2017-04-27 Genentech Inc Metodos de tratamiento de enfermedad de alzheimer.
CA2938450C (en) 2014-02-11 2023-10-17 Seattle Genetics, Inc. Selective reduction of proteins
CA2936565C (en) 2014-02-12 2020-08-11 Genentech, Inc. Anti-jagged1 antibodies and methods of use
CA2937556A1 (en) 2014-02-21 2015-08-27 Genentech, Inc. Anti-il-13/il-17 bispecific antibodies and uses thereof
MX2016010677A (es) 2014-02-21 2017-04-10 Abbvie Stemcentrx Llc Conjugados de anticuerpos anti-drosophila similar a delta 3 (anti-dll3) y medicamentos para usarse en el tratamiento contra melanoma.
GB201403775D0 (en) 2014-03-04 2014-04-16 Kymab Ltd Antibodies, uses & methods
CN104788566A (zh) * 2014-03-11 2015-07-22 南京任诺药业有限公司 用于构建放射性同位素偶联标记的ADC药物的改造抗体IgG1-CH-V280C
CN104672330A (zh) * 2014-03-11 2015-06-03 南京任诺药业有限公司 用于构建放射性同位素偶联标记的ADC药物的改造抗体IgG1-CH-N267C
US20170021033A1 (en) * 2014-03-12 2017-01-26 Novartis Ag Specific sites for modifying antibodies to make immunoconjugates
CA2941687A1 (en) 2014-03-14 2015-09-17 Genentech, Inc. Methods and compositions for secretion of heterologous polypeptides
EP3116486B1 (en) 2014-03-14 2019-12-04 Daniel J. Capon Hybrid immunoglobulin containing non-peptidyl linkage
PL3129067T3 (pl) * 2014-03-19 2023-05-08 Genzyme Corporation Specyficzne dla miejsca glikomodyfikowanie ugrupowań celujących
RU2016141385A (ru) 2014-03-24 2018-04-28 Дженентек, Инк. Лечение рака антагонистами с-мет и их корреляция с экспрессией hgf
ME03666B (me) 2014-03-28 2020-10-20 Xencor Inc Bispecifična antitela koja se vezuju za cd38 i cd3
CA2943262A1 (en) 2014-03-31 2015-10-08 Genentech, Inc. Anti-ox40 antibodies and methods of use
BR112016022345A2 (pt) 2014-03-31 2017-10-10 Genentech Inc terapia de combinação compreendendo agentes antiangiogênese e agonistas de ligação de ox40
US11135182B2 (en) 2014-04-10 2021-10-05 Af Chemicals, Llc Affinity medicant conjugates
KR20160142885A (ko) 2014-04-10 2016-12-13 에이에프 케미칼스, 엘엘씨 친화성 약제 컨쥬게이트
US10285955B2 (en) 2014-04-10 2019-05-14 Af Chemicals, Llc Affinity medicant conjugate
JP2017512765A (ja) 2014-04-11 2017-05-25 メディミューン，エルエルシー 二重特異性ｈｅｒ２抗体
GB201406767D0 (en) 2014-04-15 2014-05-28 Cancer Rec Tech Ltd Humanized anti-Tn-MUC1 antibodies anf their conjugates
MX2016013635A (es) 2014-04-18 2017-02-02 Acceleron Pharma Inc Métodos para aumentar los niveles de eritrocitos y tratar de la enfermedad de células falciformes.
LT3134125T (lt) 2014-04-25 2020-01-10 Pierre Fabre Médicament Antikūno ir vaisto konjugatas bei jo panaudojimas vėžio gydymui
US11602525B2 (en) 2014-04-25 2023-03-14 Rinat Neuroscience Corp. Antibody-drug conjugates with high drug loading
ES2841249T3 (es) 2014-04-25 2021-07-07 Pf Medicament Anticuerpo IGF-1R y su utilización como un vehículo de direccionamiento para el tratamiento del cáncer
MA39909B1 (fr) 2014-04-25 2019-05-31 Pf Medicament Conjugué anticorps de l'igf-1r-médicament et son utilisation pour le traitement du cancer
WO2015168468A1 (en) 2014-05-01 2015-11-05 Genentech, Inc. Anti-factor d antibody variants and uses thereof
WO2015177360A1 (en) * 2014-05-22 2015-11-26 Synthon Biopharmaceuticals B.V. Site-specific conjugation of linker drugs to antibodies and resulting adcs
CN106414499A (zh) 2014-05-22 2017-02-15 基因泰克公司 抗gpc3抗体和免疫偶联物
JP2017524371A (ja) 2014-05-23 2017-08-31 ジェネンテック， インコーポレイテッド Ｍｉｔバイオマーカーとその使用方法
WO2015187811A2 (en) 2014-06-04 2015-12-10 MabVax Therapeutics, Inc. Human monoclonal antibodies to ganglioside gd2
EP3151830A4 (en) * 2014-06-06 2018-02-07 Redwood Bioscience, Inc. Anti-her2 antibody-maytansine conjugates and methods of use thereof
CN106459202A (zh) 2014-06-11 2017-02-22 豪夫迈·罗氏有限公司 抗LgR5抗体及其用途
CN107073121A (zh) 2014-06-13 2017-08-18 基因泰克公司 治疗及预防癌症药物抗性的方法
BR122023023170A2 (pt) 2014-06-13 2024-02-20 Acceleron Pharma Inc. Uso de um antagonista de actrii no tratamento ou prevenção de úlcera cutânea associada com beta-talassemia
BR112016029860A2 (pt) 2014-06-20 2017-10-24 Abgenomics Int Inc conjugados de anticorpo antirreceptor alfa de folato (fra)-fármaco e métodos de uso dos mesmos
AR100978A1 (es) 2014-06-26 2016-11-16 Hoffmann La Roche LANZADERAS CEREBRALES DE ANTICUERPO HUMANIZADO ANTI-Tau(pS422) Y USOS DE LAS MISMAS
WO2015197736A1 (en) 2014-06-26 2015-12-30 F. Hoffmann-La Roche Ag Anti-brdu antibodies and methods of use
US9840553B2 (en) 2014-06-28 2017-12-12 Kodiak Sciences Inc. Dual PDGF/VEGF antagonists
JP2017526641A (ja) 2014-07-11 2017-09-14 ジェネンテック， インコーポレイテッド Ｎｏｔｃｈ経路阻害
US20160009805A1 (en) 2014-07-11 2016-01-14 Genentech, Inc. Anti-pd-l1 antibodies and diagnostic uses thereof
US9139648B1 (en) 2014-07-15 2015-09-22 Kymab Limited Precision medicine by targeting human NAV1.9 variants for treatment of pain
US20160060360A1 (en) 2014-07-24 2016-03-03 Xencor, Inc. Rapid clearance of antigen complexes using novel antibodies
EP3473271B1 (en) 2014-07-31 2022-07-20 The Government of the United States of America as represented by the Secretary of the Department of Health and Human Services Human monoclonal antibodies against epha4 and their use
US20170260261A1 (en) 2014-08-28 2017-09-14 Bioatla, Llc Conditionally Active Chimeric Antigen Receptors for Modified T-Cells
TWI751102B (zh) 2014-08-28 2022-01-01 美商奇諾治療有限公司 對ｃｄ１９具專一性之抗體及嵌合抗原受體
CN112546238A (zh) * 2014-09-01 2021-03-26 博笛生物科技有限公司 用于治疗肿瘤的抗-pd-l1结合物
JP2017527562A (ja) 2014-09-03 2017-09-21 イミュノジェン・インコーポレーテッド 細胞毒性ベンゾジアゼピン誘導体
PL3189056T3 (pl) 2014-09-03 2020-11-02 Immunogen, Inc. Cytotoksyczne pochodne benzodiazepinowe
TW201617368A (zh) 2014-09-05 2016-05-16 史坦森特瑞斯公司 新穎抗ｍｆｉ２抗體及使用方法
EP3193940A1 (en) 2014-09-10 2017-07-26 Medimmune Limited Pyrrolobenzodiazepines and conjugates thereof
US10059768B2 (en) 2014-09-12 2018-08-28 Genentech, Inc. Anti-B7-H4 antibodies and immunoconjugates
GB201416112D0 (en) 2014-09-12 2014-10-29 Medimmune Ltd Pyrrolobenzodiazepines and conjugates thereof
TWI758784B (zh) 2014-09-12 2022-03-21 美商建南德克公司 抗her2抗體及免疫結合物
WO2016040825A1 (en) 2014-09-12 2016-03-17 Genentech, Inc. Anthracycline disulfide intermediates, antibody-drug conjugates and methods
CA2958479A1 (en) 2014-09-12 2016-03-17 Genentech, Inc. Anti-cll-1 antibodies and immunoconjugates
AR101844A1 (es) 2014-09-12 2017-01-18 Genentech Inc Anticuerpos y conjugados modificados genéticamente con cisteína
JP2017533887A (ja) 2014-09-17 2017-11-16 ジェネンテック， インコーポレイテッド ピロロベンゾジアゼピン類及びその抗体ジスルフィドコンジュゲート
CN107124870A (zh) 2014-09-17 2017-09-01 基因泰克公司 包含抗her2抗体和吡咯并苯并二氮杂*的免疫缀合物
PT3262071T (pt) 2014-09-23 2020-06-16 H Hoffnabb La Roche Ag Métodos de utilização de imunoconjugados anti-cd79b
MX2017004664A (es) 2014-10-09 2017-06-30 Genzyme Corp Conjugados de farmacos de anticuerpos modificados mediante glicoingenieria.
EP3207027B1 (en) * 2014-10-16 2019-06-19 The University of Melbourne Novel imaging composition and uses thereof
CN107074938A (zh) 2014-10-16 2017-08-18 豪夫迈·罗氏有限公司 抗‑α‑突触核蛋白抗体和使用方法
US9821059B2 (en) 2014-10-17 2017-11-21 Alteogen Inc. Composition for stabilizing protein and pharmaceutical formulation comprising the same
EP3207128B1 (en) 2014-10-17 2022-07-27 Kodiak Sciences Inc. Butyrylcholinesterase zwitterionic polymer conjugates
GB201419108D0 (en) 2014-10-27 2014-12-10 Glythera Ltd Materials and methods relating to linkers for use in antibody drug conjugates
GB201419185D0 (en) * 2014-10-28 2014-12-10 Adc Biotechnology Ltd Method of synthesising ADCs using affinity resin
KR101969121B1 (ko) * 2014-10-28 2019-04-15 에스케이텔레콤 주식회사 시스테인 조작된 항체
CA2966005C (en) 2014-10-31 2021-04-27 Abbvie Biotherapeutics Inc. Anti-cs1 antibodies and antibody drug conjugates
MX2017005751A (es) 2014-11-03 2018-04-10 Genentech Inc Métodos y biomarcadores para predecir la eficacia y evaluación de un tratamiento con agonista de ox40.
EP3215850B1 (en) 2014-11-03 2019-07-03 F. Hoffmann-La Roche AG Assays for detecting t cell immune subsets and methods of use thereof
PL3215528T3 (pl) 2014-11-06 2020-01-31 F.Hoffmann-La Roche Ag Warianty regionu Fc ze zmodyfikowanym wiązaniem FcRn i sposoby stosowania
WO2016073157A1 (en) 2014-11-06 2016-05-12 Genentech, Inc. Anti-ang2 antibodies and methods of use thereof
JP6576456B2 (ja) 2014-11-06 2019-09-18 エフ．ホフマン−ラ ロシュ アーゲーＦ． Ｈｏｆｆｍａｎｎ−Ｌａ Ｒｏｃｈｅ Ａｋｔｉｅｎｇｅｓｅｌｌｓｃｈａｆｔ 修飾されたＦｃＲｎ結合特性およびプロテインＡ結合特性を有するＦｃ領域変種
CN107105632A (zh) 2014-11-10 2017-08-29 豪夫迈·罗氏有限公司 肾病动物模型及其治疗剂
CR20170240A (es) 2014-11-10 2018-04-03 Genentech Inc Anticuerpos anti-interleucina-33 y sus usos
US10077287B2 (en) 2014-11-10 2018-09-18 Bristol-Myers Squibb Company Tubulysin analogs and methods of making and use
HUE049982T2 (hu) 2014-11-14 2020-11-30 Hoffmann La Roche TNF-családba tartozó ligandum-trimert tartalmazó antigénkötõ molekulák
RU2730668C2 (ru) 2014-11-19 2020-08-24 Аксон Ньюросайенс Се Гуманизированные тау-антитела при болезни альцгеймера
CN107001473B (zh) 2014-11-19 2021-07-09 豪夫迈·罗氏有限公司 抗-运铁蛋白受体抗体及使用方法
JP6859259B2 (ja) 2014-11-19 2021-04-14 ジェネンテック， インコーポレイテッド ＢＡＣＥｌに対する抗体及び神経疾患免疫療法のためのその使用
JP6993228B2 (ja) 2014-11-19 2022-03-03 ジェネンテック， インコーポレイテッド 抗トランスフェリン受容体／抗ｂａｃｅ１多重特異性抗体および使用方法
PL3221355T3 (pl) 2014-11-20 2021-03-08 F. Hoffmann-La Roche Ag Terapia skojarzona składająca się z dwuswoistych aktywujących limfocyty T cząsteczek wiążących antygen CD3 i receptor folianowy 1 (FolR1) oraz antagonistów wiązania osi PD-1
KR20170101895A (ko) 2014-11-25 2017-09-06 에이디씨 테라퓨틱스 에스에이 피롤로벤조디아제핀-항체 접합체
KR20170084326A (ko) 2014-11-26 2017-07-19 젠코어 인코포레이티드 Ｃｄ3 및 종양 항원과 결합하는 이종이량체 항체
US10259887B2 (en) 2014-11-26 2019-04-16 Xencor, Inc. Heterodimeric antibodies that bind CD3 and tumor antigens
EP3223907A2 (en) 2014-11-26 2017-10-04 Xencor, Inc. Heterodimeric antibodies that bind cd3 and cd38
KR20170086121A (ko) * 2014-12-03 2017-07-25 제넨테크, 인크. 4급 아민 화합물 및 그의 항체-약물 접합체
WO2016090040A1 (en) 2014-12-03 2016-06-09 Genentech, Inc. Anti-staphylococcus aureus antibody rifamycin conjugates and uses thereof
MA41119A (fr) 2014-12-03 2017-10-10 Acceleron Pharma Inc Méthodes de traitement de syndromes myélodysplasiques et d'anémie sidéroblastique
BR112017011325A2 (pt) 2014-12-03 2020-07-21 Genentech, Inc. ?composto de conjugado anticorpo?antibiótico, composição, método de tratamento de uma infecção, método para matar staph aureus, processo para produzir o conjugado, kit para o tratamento de uma infecção, intermediários antibiótico-ligante e ligante-droga?
CN107001482B (zh) 2014-12-03 2021-06-15 豪夫迈·罗氏有限公司 多特异性抗体
BR112017011326A2 (pt) 2014-12-05 2018-07-31 Genentech, Inc. anticorpo, ácido nucleico, vetor, célula hospedeira, método para produzir o anticorpo, imunoconjugado, composição farmacêutica, usos do anticorpo, métodos para tratar ou retardar a progressão de distúrbio proliferativo celular e para intensificar a função imune
MY192062A (en) 2014-12-05 2022-07-25 Memorial Sloan Kettering Cancer Center Chimeric antigen receptors targeting fc receptor-like 5 and uses thereof
BR112017011234A2 (pt) 2014-12-10 2018-03-27 Genentech Inc anticorpos contra receptor da barreira hematoencefálica e métodos de uso
CN113045650A (zh) 2014-12-19 2021-06-29 中外制药株式会社 抗-c5抗体及使用方法
US10428155B2 (en) 2014-12-22 2019-10-01 Xencor, Inc. Trispecific antibodies
WO2016115201A1 (en) 2015-01-14 2016-07-21 Bristol-Myers Squibb Company Heteroarylene-bridged benzodiazepine dimers, conjugates thereof, and methods of making and using
TWI718118B (zh) 2015-01-16 2021-02-11 美商奇諾治療有限公司 針對ｒｏｒ１之特異性抗體及嵌合抗原受體
CN107428823B (zh) 2015-01-22 2021-10-26 中外制药株式会社 两种以上抗-c5抗体的组合与使用方法
EA201791754A1 (ru) 2015-02-05 2019-01-31 Чугаи Сейяку Кабусики Кайся АНТИТЕЛА, СОДЕРЖАЩИЕ ЗАВИСЯЩИЙ ОТ КОНЦЕНТРАЦИИ ИОНОВ АНТИГЕНСВЯЗЫВАЮЩИЙ ДОМЕН, ВАРИАНТЫ Fc-ОБЛАСТИ, IL-8-СВЯЗЫВАЮЩИЕ АНТИТЕЛА И ИХ ПРИМЕНЕНИЯ
SG10202006863YA (en) * 2015-02-16 2020-08-28 Lonza Ag Cl and/or ch1 mutated antibodies for drug conjugation
MA41645A (fr) * 2015-03-04 2018-01-09 Abbvie Stemcentrx Llc Anticorps issus de génie génétique spécifiques au site et méthodes d'utilisation
WO2016141387A1 (en) 2015-03-05 2016-09-09 Xencor, Inc. Modulation of t cells with bispecific antibodies and fc fusions
US10073098B2 (en) 2015-03-06 2018-09-11 Genentech, Inc. Ultrapurified DsbA and DsbC and methods of making and using the same
LT3268047T (lt) 2015-03-09 2023-11-10 Heidelberg Pharma Research Gmbh Amatoksino-antikūno konjugatai
SG11201707195SA (en) 2015-03-09 2017-10-30 Agensys Inc Antibody drug conjugates (adc) that bind to flt3 proteins
CA2977285A1 (en) 2015-03-16 2016-09-22 F. Hoffmann-La Roche Ag Methods of detecting and quantifying il-13 and uses in diagnosing and treating th2-associated diseases
CN107667120B (zh) * 2015-03-17 2022-03-08 纪念斯隆-凯特林癌症中心 抗muc16抗体及其应用
WO2016146833A1 (en) 2015-03-19 2016-09-22 F. Hoffmann-La Roche Ag Biomarkers for nad(+)-diphthamide adp ribosyltransferase resistance
MX2017012352A (es) 2015-04-03 2018-01-26 Eureka Therapeutics Inc Construccion dirigida a complejos de peptido de alfa-fetoproteina/complejo principal de histocompatibilidad (afp/cph) y usos de los mismos.
MA41919A (fr) 2015-04-06 2018-02-13 Acceleron Pharma Inc Hétéromultimères alk4:actriib et leurs utilisations
EP3889171A1 (en) 2015-04-06 2021-10-06 Acceleron Pharma Inc. Tgf-beta superfamily type i and type ii receptor heteromultimers and uses thereof
IL283764B2 (en) 2015-04-10 2024-01-01 Amgen Inc Interleukin for the expansion of myotonic control T-2 cells
GB201506411D0 (en) 2015-04-15 2015-05-27 Bergenbio As Humanized anti-axl antibodies
GB201506389D0 (en) 2015-04-15 2015-05-27 Berkel Patricius H C Van And Howard Philip W Site-specific antibody-drug conjugates
GB201506402D0 (en) 2015-04-15 2015-05-27 Berkel Patricius H C Van And Howard Philip W Site-specific antibody-drug conjugates
KR20170138494A (ko) 2015-04-17 2017-12-15 엘살리스 비오떼끄 항-ｔｙｒ０３ 항체 및 이의 용도
EP3286565A1 (en) * 2015-04-21 2018-02-28 Genentech, Inc. Compositions and methods for prostate cancer analysis
JP7044553B2 (ja) 2015-04-24 2022-03-30 ジェネンテック， インコーポレイテッド 結合ポリペプチドを含む細菌を特定する方法
KR102462811B1 (ko) 2015-04-27 2022-11-04 에이비온 주식회사 항체에 덴드론이 접합된 면역접합체 및 이의 용도
JP2018520642A (ja) 2015-05-01 2018-08-02 ジェネンテック， インコーポレイテッド マスク抗ｃｄ３抗体及びその使用方法
EP3294771A1 (en) 2015-05-11 2018-03-21 H. Hoffnabb-La Roche Ag Compositions and methods of treating lupus nephritis
HRP20201900T4 (hr) 2015-05-12 2024-06-07 F. Hoffmann - La Roche Ag Terapeutski i dijagnostički postupci kod raka
EP3795679A1 (en) 2015-05-28 2021-03-24 Genentech, Inc. Cell-based assay for detecting anti-cd3 homodimers
WO2016196343A1 (en) 2015-05-29 2016-12-08 Genentech, Inc. Humanized anti-ebola virus glycoprotein antibodies and methods of use
CN106267225B (zh) 2015-05-29 2020-03-06 上海新理念生物医药科技有限公司 三马来酰亚胺型连接子及其应用
WO2016196298A1 (en) 2015-05-29 2016-12-08 Genentech, Inc. Therapeutic and diagnolstic methods for cancer
CN107810012A (zh) 2015-06-02 2018-03-16 豪夫迈·罗氏有限公司 使用抗il‑34抗体治疗神经疾病的组合物和方法
MX2017015700A (es) 2015-06-04 2018-11-09 Ospedale San Raffaele Srl Igfbp3 y sus usos.
MX367312B (es) 2015-06-04 2019-08-14 Ospedale San Raffaele Srl Inhibidor del eje igrbp3/tmem219 y diabetes.
AU2016270858B2 (en) 2015-06-05 2022-04-28 Ac Immune Sa Anti-Tau antibodies and methods of use
WO2016200835A1 (en) 2015-06-08 2016-12-15 Genentech, Inc. Methods of treating cancer using anti-ox40 antibodies and pd-1 axis binding antagonists
WO2016200836A1 (en) 2015-06-08 2016-12-15 Genentech, Inc. Methods of treating cancer using anti-ox40 antibodies
WO2016205176A1 (en) 2015-06-15 2016-12-22 Genentech, Inc. Antibodies and immunoconjugates
RU2748943C2 (ru) 2015-06-16 2021-06-02 Дженентек, Инк. ГУМАНИЗИРОВАННЫЕ АНТИТЕЛА И АНТИТЕЛА С СОЗРЕВШЕЙ АФФИННОСТЬЮ ПРОТИВ FcRH5 И СПОСОБЫ ИХ ПРИМЕНЕНИЯ
EP3310811B1 (en) 2015-06-16 2021-06-16 Genentech, Inc. Anti-cd3 antibodies and methods of use
TW201718647A (zh) 2015-06-16 2017-06-01 建南德克公司 抗-cll-1抗體及使用方法
JP2018524312A (ja) 2015-06-17 2018-08-30 ジェネンテック， インコーポレイテッド 抗ｈｅｒ２抗体及び使用方法
PE20180498A1 (es) 2015-06-19 2018-03-09 Eisai Randd Man Co Ltd Inmunoglobulinas conjugadas en cys80
PL3313877T3 (pl) 2015-06-24 2020-11-02 F. Hoffmann-La Roche Ag Humanizowane przeciwciała przeciwko białku tau(pS422) i sposoby stosowania
CR20170562A (es) 2015-06-24 2018-02-01 Hoffmann La Roche Anticuerpos anti-receptor de transferrina con afinidad diseñada.
SI3313845T1 (sl) 2015-06-29 2021-01-29 Immunogen, Inc. Konjugati spremenjenih protiteles cisteina
CN108473573A (zh) 2015-06-29 2018-08-31 豪夫迈·罗氏有限公司 Ii型抗cd20抗体用于器官移植中
CA3162586A1 (en) 2015-06-29 2017-01-05 Ventana Medical Systems, Inc. Materials and methods for performing histochemical assays for human pro-epiregulin and amphiregulin
NZ739830A (en) 2015-07-12 2021-12-24 Hangzhou Dac Biotech Co Ltd Bridge linkers for conjugation of cell-binding molecules
US9839687B2 (en) 2015-07-15 2017-12-12 Suzhou M-Conj Biotech Co., Ltd. Acetylenedicarboxyl linkers and their uses in specific conjugation of a cell-binding molecule
WO2017024171A1 (en) 2015-08-04 2017-02-09 Acceleron Pharma Inc. Methods for treating myeloproliferative disorders
EP4137158A1 (en) 2015-08-07 2023-02-22 Imaginab, Inc. Antigen binding constructs to target molecules
CN105384825B (zh) 2015-08-11 2018-06-01 南京传奇生物科技有限公司 一种基于单域抗体的双特异性嵌合抗原受体及其应用
CN106467575B (zh) * 2015-08-18 2020-07-31 四川百利药业有限责任公司 半胱氨酸改造的抗体-毒素偶联物
JP6967221B2 (ja) 2015-08-19 2021-11-17 国立研究開発法人理化学研究所 非天然アミノ酸導入抗体
CA2989966C (en) 2015-08-20 2024-04-30 Albumedix A/S Albumin variants and conjugates
GB201514928D0 (en) 2015-08-21 2015-10-07 King S College London PDD compounds
CN108026180B (zh) 2015-08-28 2022-06-07 豪夫迈·罗氏有限公司 抗羟腐胺赖氨酸抗体及其用途
JP6904947B2 (ja) 2015-09-22 2021-07-21 スプリング バイオサイエンス コーポレーション 抗ｏｘ４０抗体及びその診断用途
CN116987187A (zh) 2015-09-23 2023-11-03 豪夫迈·罗氏有限公司 抗-vegf抗体的优化的变体
EP3662930A1 (en) 2015-09-24 2020-06-10 AbVitro LLC Hiv antibody compositions and methods of use
CA2994858C (en) 2015-09-25 2024-01-23 Genentech, Inc. Anti-tigit antibodies and methods of use
AR106188A1 (es) 2015-10-01 2017-12-20 Hoffmann La Roche Anticuerpos anti-cd19 humano humanizados y métodos de utilización
MX2018003820A (es) 2015-10-02 2018-12-10 F Hoffmann ­La Roche Ag Anticuerpos biespecificos especificos para un receptor de tnf coestimulador.
EP3356406A1 (en) 2015-10-02 2018-08-08 H. Hoffnabb-La Roche Ag Bispecific anti-human cd20/human transferrin receptor antibodies and methods of use
AR106189A1 (es) 2015-10-02 2017-12-20 Hoffmann La Roche ANTICUERPOS BIESPECÍFICOS CONTRA EL A-b HUMANO Y EL RECEPTOR DE TRANSFERRINA HUMANO Y MÉTODOS DE USO
MX2018003629A (es) 2015-10-02 2018-08-01 Hoffmann La Roche Anticuerpos anti-pd1 y metodos de uso.
MY192202A (en) 2015-10-02 2022-08-06 Hoffmann La Roche Bispecific antibodies specific for pd1 and tim3
MA43345A (fr) 2015-10-02 2018-08-08 Hoffmann La Roche Conjugués anticorps-médicaments de pyrrolobenzodiazépine et méthodes d'utilisation
JP7074665B2 (ja) 2015-10-07 2022-05-24 エフ・ホフマン－ラ・ロシュ・アクチェンゲゼルシャフト 共刺激ｔｎｆ受容体に対する四価の二重特異性抗体発明の分野
MA43354A (fr) 2015-10-16 2018-08-22 Genentech Inc Conjugués médicamenteux à pont disulfure encombré
MA45326A (fr) 2015-10-20 2018-08-29 Genentech Inc Conjugués calichéamicine-anticorps-médicament et procédés d'utilisation
US9669106B2 (en) 2015-10-26 2017-06-06 Pierre Fabre Medicament Conjugate of monomethyl auristatin F and trastuzumab and its use for the treatment of cancer
US10858423B2 (en) 2015-10-26 2020-12-08 Pierre Fabre Medicament Composition for the treatment of IGF-1R expressing cancer
MA44334A (fr) 2015-10-29 2018-09-05 Novartis Ag Conjugués d'anticorps comprenant un agoniste du récepteur de type toll
IL295756A (en) 2015-10-29 2022-10-01 Hoffmann La Roche Antibodies against fc-variable region and methods of use
EP3184547A1 (en) 2015-10-29 2017-06-28 F. Hoffmann-La Roche AG Anti-tpbg antibodies and methods of use
JP2018531980A (ja) 2015-10-30 2018-11-01 ジェネンテック， インコーポレイテッド 抗ｄ因子抗体製剤
ES2870141T3 (es) 2015-10-30 2021-10-26 Hoffmann La Roche Anticuerpos anti-HtrA1 y procedimientos de uso de los mismos
JP2018534930A (ja) 2015-10-30 2018-11-29 ジェネンテック， インコーポレイテッド 抗ｄ因子抗体及びコンジュゲート
JP6911026B2 (ja) 2015-10-30 2021-07-28 ジェネンテック， インコーポレイテッド Ｄ因子活性及びｄ因子阻害剤の力価を測定する方法
EP3368090A1 (en) 2015-10-30 2018-09-05 H. Hoffnabb-La Roche Ag Anti-factor d antibody variant conjugates and uses thereof
CN108602884B (zh) 2015-11-08 2024-06-25 豪夫迈·罗氏有限公司 筛选多特异性抗体的方法
EP3380121B1 (en) 2015-11-23 2023-12-20 Acceleron Pharma Inc. Actrii antagonist for use in treating eye disorders
EP3380122B1 (en) 2015-11-24 2021-06-02 Byondis B.V. Anti-5t4 antibodies and antibody-drug conjugates
EP3383910A1 (en) 2015-11-30 2018-10-10 AbbVie Inc. ANTI-huLRRC15 ANTIBODY DRUG CONJUGATES AND METHODS FOR THEIR USE
US10188660B2 (en) 2015-11-30 2019-01-29 Abbvie Inc. Anti-huLRRC15 antibody drug conjugates and methods for their use
TWI726942B (zh) 2015-11-30 2021-05-11 美商輝瑞股份有限公司 位點專一性ｈｅｒ２抗體藥物共軛體
AU2016362402A1 (en) 2015-12-04 2018-06-28 Eureka Therapeutics, Inc. Antibodies targeting Fc receptor-like 5 and methods of use
CN108699136B (zh) 2015-12-07 2022-03-18 Xencor股份有限公司 结合cd3和psma的异二聚抗体
CR20180364A (es) 2015-12-18 2018-08-22 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Anticuerpos anti-c5 y métodos de uso
US20180362619A1 (en) 2015-12-21 2018-12-20 Bristol-Myers Squibb Company Variant antibodies for site-specific conjugation
AU2016381964B2 (en) 2015-12-30 2024-02-15 Kodiak Sciences Inc. Antibodies and conjugates thereof
CA3010601A1 (en) 2016-01-08 2017-07-13 Bioalliance C.V. Tetravalent anti-psgl-1 antibodies and uses thereof
EP3405489A1 (en) 2016-01-20 2018-11-28 Genentech, Inc. High dose treatments for alzheimer's disease
JP7438662B2 (ja) 2016-01-25 2024-02-27 ジェネンテック， インコーポレイテッド Ｔ細胞依存性二重特異的抗体をアッセイするための方法
GB201601431D0 (en) 2016-01-26 2016-03-09 Medimmune Ltd Pyrrolobenzodiazepines
WO2017132627A2 (en) 2016-01-29 2017-08-03 Achaogen, Inc. Screening methods for identifying antibodies that bind cell surface epitopes
GB201602359D0 (en) 2016-02-10 2016-03-23 Medimmune Ltd Pyrrolobenzodiazepine Conjugates
GB201602356D0 (en) 2016-02-10 2016-03-23 Medimmune Ltd Pyrrolobenzodiazepine Conjugates
WO2017137628A1 (en) 2016-02-12 2017-08-17 Synthon Biopharmaceuticals B.V. Selective reduction of cysteine-engineered antibodies
SG11201806261XA (en) 2016-02-17 2018-09-27 Seattle Genetics Inc Bcma antibodies and use of same to treat cancer and immunological disorders
MX2018010128A (es) * 2016-02-26 2019-01-21 Jiangsu Hengrui Medicine Co Toxina nueva y metodo de preparacion de un intermediario de la misma.
MX2018010361A (es) 2016-02-29 2019-07-08 Genentech Inc Métodos terapéuticos y de diagnóstico para el cáncer.
WO2017151947A1 (en) * 2016-03-02 2017-09-08 George Robert Pettit 4-azapodophylotoxins compounds
SG10202007520WA (en) 2016-03-02 2020-09-29 Eisai R&D Man Co Ltd Eribulin-based antibody-drug conjugates and methods of use
KR102204805B1 (ko) 2016-03-04 2021-01-20 제넨테크, 인크. 항체-리파마이신 접합체의 제조 방법
EP3433281A1 (en) 2016-03-21 2019-01-30 Elstar Therapeutics, Inc. Multispecific and multifunctional molecules and uses thereof
JP6943872B2 (ja) 2016-03-25 2021-10-06 ジェネンテック， インコーポレイテッド 多重全抗体及び抗体複合体化薬物定量化アッセイ
WO2017176007A1 (ko) * 2016-04-06 2017-10-12 (주)알테오젠 변형항체를 포함하는 항체-약물 접합체
ES2929010T3 (es) 2016-04-06 2022-11-24 Alteogen Inc Conjugado de anticuerpo-fármaco que comprende anticuerpo modificado
EP3443004A1 (en) 2016-04-14 2019-02-20 H. Hoffnabb-La Roche Ag Anti-rspo3 antibodies and methods of use
JP2019515670A (ja) 2016-04-15 2019-06-13 ジェネンテック， インコーポレイテッド がんをモニタリングし治療するための方法
EP3443350B1 (en) 2016-04-15 2020-12-09 H. Hoffnabb-La Roche Ag Methods for monitoring and treating cancer
US11208527B2 (en) 2016-04-15 2021-12-28 Beckman Coulter, Inc. Photoactive macromolecules and uses thereof
AU2017254674A1 (en) 2016-04-21 2018-11-01 Abbvie Stemcentrx Llc Novel anti-BMPR1B antibodies and methods of use
JP2019515677A (ja) 2016-04-26 2019-06-13 アール．ピー．シェーラー テクノロジーズ エルエルシー 抗体複合体ならびにそれを作製および使用する方法
GB201607478D0 (en) 2016-04-29 2016-06-15 Medimmune Ltd Pyrrolobenzodiazepine Conjugates
KR102523682B1 (ko) 2016-05-02 2023-04-19 에프. 호프만-라 로슈 아게 콘톨스바디 - 단쇄 표적 결합제
EP3243836A1 (en) 2016-05-11 2017-11-15 F. Hoffmann-La Roche AG C-terminally fused tnf family ligand trimer-containing antigen binding molecules
US10918627B2 (en) 2016-05-11 2021-02-16 Massachusetts Institute Of Technology Convergent and enantioselective total synthesis of Communesin analogs
EP3455252B1 (en) 2016-05-11 2022-02-23 F. Hoffmann-La Roche AG Modified anti-tenascin antibodies and methods of use
JP7285076B2 (ja) 2016-05-11 2023-06-01 エフ・ホフマン－ラ・ロシュ・アクチェンゲゼルシャフト Ｔｎｆファミリーリガンドトリマーとテネイシン結合部分とを含む抗原結合分子
HRP20221298T1 (hr) 2016-05-13 2022-12-23 Bioatla, Inc. Anti-ror2 protutijela, fragmenti protutijela, njihovi imunokonjugati i njihove uporabe
EP3243832A1 (en) 2016-05-13 2017-11-15 F. Hoffmann-La Roche AG Antigen binding molecules comprising a tnf family ligand trimer and pd1 binding moiety
PT3458102T (pt) 2016-05-17 2020-08-17 Abbvie Inc Conjugados de fármacos com anticorpo anti-cmet e métodos para o seu uso
PL3458101T3 (pl) 2016-05-20 2021-05-31 F. Hoffmann-La Roche Ag Koniugaty PROTAC-przeciwciało i sposoby ich stosowania
JP7022080B2 (ja) 2016-05-27 2022-02-17 ジェネンテック， インコーポレイテッド 部位特異的抗体－薬物複合体の特徴付けのための生化学分析的方法
US10639378B2 (en) 2016-06-06 2020-05-05 Genentech, Inc. Silvestrol antibody-drug conjugates and methods of use
EP4257613A3 (en) 2016-06-14 2023-12-13 Xencor, Inc. Bispecific checkpoint inhibitor antibodies
MX2018015173A (es) 2016-06-17 2019-07-04 Genentech Inc Purificacion de anticuerpos multiespecificos.
CN116143918A (zh) 2016-06-24 2023-05-23 豪夫迈·罗氏有限公司 抗聚泛素多特异性抗体
EP3475304B1 (en) 2016-06-28 2022-03-23 Xencor, Inc. Heterodimeric antibodies that bind somatostatin receptor 2
KR20230149857A (ko) 2016-07-07 2023-10-27 더 보드 어브 트러스티스 어브 더 리랜드 스탠포드 주니어 유니버시티 항체-애쥬번트 접합체
EP3482205A1 (en) 2016-07-08 2019-05-15 H. Hoffnabb-La Roche Ag Use of human epididymis protein 4 (he4) for assessing responsiveness of muc 16-positive cancer treatment
PT3496739T (pt) 2016-07-15 2021-06-21 Acceleron Pharma Inc Composições compreendendo polipéptidos actriia para uso no tratamento de hipertensão pulmonar
WO2018014260A1 (en) 2016-07-20 2018-01-25 Nanjing Legend Biotech Co., Ltd. Multispecific antigen binding proteins and methods of use thereof
AU2017302282A1 (en) 2016-07-27 2019-02-07 Acceleron Pharma Inc. Methods and compositions for treating myelofibrosis
KR20230107408A (ko) 2016-07-29 2023-07-14 주노 쎄러퓨티크스 인코퍼레이티드 항-cd19 항체에 대한 항-이디오타입 항체
CA3026050A1 (en) 2016-08-05 2018-02-08 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Composition for prophylaxis or treatment of il-8 related diseases
WO2018027204A1 (en) 2016-08-05 2018-02-08 Genentech, Inc. Multivalent and multiepitopic anitibodies having agonistic activity and methods of use
EP3496763A1 (en) 2016-08-11 2019-06-19 Genentech, Inc. Pyrrolobenzodiazepine prodrugs and antibody conjugates thereof
CA3033737A1 (en) 2016-08-15 2018-02-22 Genentech, Inc. Chromatography method for quantifying a non-ionic surfactant in a composition comprising the non-ionic surfactant and a polypeptide
CN109641911B (zh) 2016-08-19 2023-02-21 百时美施贵宝公司 seco-环丙吡咯并吲哚化合物和其抗体-药物缀合物以及制备和使用方法
WO2018037060A1 (en) 2016-08-25 2018-03-01 Roche Diagnostics Gmbh Multifunctionalized silicon nanoparticles, processes for their preparation and uses thereof in electrochemiluminescence based detection methods
UY37376A (es) 2016-08-26 2018-03-23 Amgen Inc Construcciones de arni para inhibir expresión de asgr1 y métodos para su uso
US10793632B2 (en) 2016-08-30 2020-10-06 Xencor, Inc. Bispecific immunomodulatory antibodies that bind costimulatory and checkpoint receptors
SG10201607778XA (en) 2016-09-16 2018-04-27 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Anti-Dengue Virus Antibodies, Polypeptides Containing Variant Fc Regions, And Methods Of Use
CN116731197A (zh) 2016-09-19 2023-09-12 豪夫迈·罗氏有限公司 基于补体因子的亲和层析
WO2018057849A1 (en) 2016-09-23 2018-03-29 Genentech, Inc. Uses of il-13 antagonists for treating atopic dermatitis
CN110139873A (zh) 2016-10-03 2019-08-16 朱诺治疗学股份有限公司 Hpv特异性结合分子
WO2018065501A1 (en) 2016-10-05 2018-04-12 F. Hoffmann-La Roche Ag Methods for preparing antibody drug conjugates
AU2017340504A1 (en) 2016-10-05 2019-04-11 Acceleron Pharma, Inc. Compositions and method for treating kidney disease
AU2017339517B2 (en) 2016-10-06 2024-03-14 Foundation Medicine, Inc. Therapeutic and diagnostic methods for cancer
CN117398475A (zh) * 2016-10-08 2024-01-16 四川百利药业有限责任公司 半胱氨酸改造的抗体-毒素偶联物及其制备方法
WO2018068201A1 (en) 2016-10-11 2018-04-19 Nanjing Legend Biotech Co., Ltd. Single-domain antibodies and variants thereof against ctla-4
GB201617466D0 (en) 2016-10-14 2016-11-30 Medimmune Ltd Pyrrolobenzodiazepine conjugates
PE20191034A1 (es) 2016-10-14 2019-08-05 Xencor Inc Proteinas de fusion heterodimericas biespecificas que contienen proteinas de fusion fc il-15/il-15r y fragmentos de anticuerpo pd-1
US10398783B2 (en) 2016-10-20 2019-09-03 Bristol-Myers Squibb Company Antiproliferative compounds and conjugates made therefrom
EP3532091A2 (en) 2016-10-29 2019-09-04 H. Hoffnabb-La Roche Ag Anti-mic antibidies and methods of use
EP3534947A1 (en) 2016-11-03 2019-09-11 Kymab Limited Antibodies, combinations comprising antibodies, biomarkers, uses & methods
TWI763732B (zh) * 2016-11-07 2022-05-11 美商西雅圖遺傳學公司 工程化半胱胺酸帽之分佈
US20210308277A1 (en) 2016-11-14 2021-10-07 Hangzhou Dac Biotech Co., Ltd. Conjugation linkers, cell binding molecule-drug conjugates containing the linkers, methods of making and uses such conjugates with the linkers
CN109923128A (zh) 2016-11-15 2019-06-21 基因泰克公司 用于用抗cd20/抗cd3双特异性抗体进行治疗的给药
TW201829463A (zh) 2016-11-18 2018-08-16 瑞士商赫孚孟拉羅股份公司 抗hla-g抗體及其用途
JOP20190100A1 (ar) 2016-11-19 2019-05-01 Potenza Therapeutics Inc بروتينات ربط مولد ضد مضاد لـ gitr وطرق استخدامها
KR102221364B1 (ko) 2016-11-21 2021-03-04 쿠레아브 게엠베하 항-gp73　항체　및　면역접합체
US10287256B2 (en) 2016-11-23 2019-05-14 Immunogen, Inc. Selective sulfonation of benzodiazepine derivatives
MY191926A (en) 2016-12-01 2022-07-18 Regeneron Pharma Radiolabeled anti-pd-l1 antibodies for immuno-pet imaging
TW202328181A (zh) 2016-12-07 2023-07-16 美商建南德克公司 抗-tau抗體及使用方法
KR20240035636A (ko) 2016-12-07 2024-03-15 제넨테크, 인크. 항-타우 항체 및 이의 이용 방법
TW201827076A (zh) 2016-12-12 2018-08-01 美商建南德克公司 使用抗pd-l1抗體及抗雄激素治療癌症之方法
WO2018112108A1 (en) 2016-12-13 2018-06-21 Bolt Biotherapeutics, Inc. Antibody adjuvant conjugates
JP7125400B2 (ja) 2016-12-19 2022-08-24 エフ・ホフマン－ラ・ロシュ・アクチェンゲゼルシャフト 標的化４－１ｂｂ（ｃｄ１３７）アゴニストとの併用療法
PL3559034T3 (pl) 2016-12-20 2021-04-19 F. Hoffmann-La Roche Ag Terapia skojarzona dwuswoistymi przeciwciałami anty-CD20/anty-CD3 i agonistami 4-1BB (CD137)
JOP20190134A1 (ar) 2016-12-23 2019-06-02 Potenza Therapeutics Inc بروتينات رابطة لمولد ضد مضادة لنيوروبيلين وطرق استخدامها
MX2019007795A (es) 2017-01-03 2019-08-16 Hoffmann La Roche Moleculas de union a antigeno biespecificas que comprenden el clon 20h4.9 anti-4-1bb.
WO2018132597A1 (en) 2017-01-12 2018-07-19 Eureka Therapeutics, Inc. Constructs targeting histone h3 peptide/mhc complexes and uses thereof
DK3579883T3 (da) 2017-02-08 2021-09-06 Adc Therapeutics Sa Pyrrolobenzodiazepin-antistofkonjugater
AU2018217926B2 (en) 2017-02-08 2019-10-03 Adc Therapeutics Sa Pyrrolobenzodiazepine-antibody conjugates
GB201702031D0 (en) 2017-02-08 2017-03-22 Medlmmune Ltd Pyrrolobenzodiazepine-antibody conjugates
WO2018147960A1 (en) 2017-02-08 2018-08-16 Imaginab, Inc. Extension sequences for diabodies
WO2018148585A1 (en) 2017-02-10 2018-08-16 Genentech, Inc. Anti-tryptase antibodies, compositions thereof, and uses thereof
US20200291089A1 (en) 2017-02-16 2020-09-17 Elstar Therapeutics, Inc. Multifunctional molecules comprising a trimeric ligand and uses thereof
KR20190122739A (ko) 2017-02-28 2019-10-30 시애틀 지네틱스, 인크. 컨쥬게이션을 위한 시스테인 변이된 항체
KR20190134631A (ko) 2017-03-01 2019-12-04 제넨테크, 인크. 암의 진단 및 치료 방법
GB201703876D0 (en) 2017-03-10 2017-04-26 Berlin-Chemie Ag Pharmaceutical combinations
CN110612124B (zh) 2017-03-22 2024-04-16 豪夫迈·罗氏有限公司 用于治疗眼部病症的优化的抗体组合物
TW202400231A (zh) 2017-03-28 2024-01-01 美商建南德克公司 治療神經退化性疾病之方法
EP3601346A1 (en) 2017-03-29 2020-02-05 H. Hoffnabb-La Roche Ag Bispecific antigen binding molecule for a costimulatory tnf receptor
CN110573528B (zh) 2017-03-29 2023-06-09 豪夫迈·罗氏有限公司 针对共刺激性tnf受体的双特异性抗原结合分子
JOP20190203A1 (ar) 2017-03-30 2019-09-03 Potenza Therapeutics Inc بروتينات رابطة لمولد ضد مضادة لـ tigit وطرق استخدامها
SG11201909218RA (en) 2017-04-03 2019-11-28 Hoffmann La Roche Antibodies binding to steap-1
BR112019017329A2 (pt) 2017-04-03 2020-04-14 Hoffmann La Roche imunoconjugados, um ou mais polinucleotídeos e vetores, métodos para a produção de um imunoconjugado, tratamento de uma doença e para a estimulação do sistema imunológico, composição, uso do imunoconjugado, invenção e usos da composição
CA3053358A1 (en) 2017-04-04 2018-10-11 F. Hoffmann-La Roche Ag Novel bispecific antigen binding molecules capable of specific binding to cd40 and to fap
US11285207B2 (en) 2017-04-05 2022-03-29 Hoffmann-La Roche Inc. Bispecific antibodies specifically binding to PD1 and LAG3
TW201836647A (zh) 2017-04-06 2018-10-16 美商艾伯維有限公司 抗－ｐｒｌｒ抗體藥物軛合物（ａｄｃ）及其用途
PT3609540T (pt) 2017-04-14 2023-03-01 Bolt Biotherapeutics Inc Método de síntese de imunoconjugado
WO2018191548A2 (en) 2017-04-14 2018-10-18 Kodiak Sciences Inc. Complement factor d antagonist antibodies and conjugates thereof
TW201839400A (zh) 2017-04-14 2018-11-01 美商建南德克公司 用於癌症之診斷及治療方法
EP3612537B1 (en) 2017-04-18 2022-07-13 Medimmune Limited Pyrrolobenzodiazepine conjugates
US20200129637A1 (en) 2017-04-20 2020-04-30 Adc Therapeutics Sa Combination therapy with an anti-axl antibody-drug conjugate
JP2020517638A (ja) 2017-04-20 2020-06-18 エータイアー ファーマ， インコーポレイテッド 肺の炎症を治療するための組成物および方法
TW201839001A (zh) 2017-04-20 2018-11-01 美商伊繆諾金公司 細胞毒性苯并二氮平衍生物及其綴合物
JP7248588B2 (ja) 2017-04-21 2023-03-29 ジェネンテック， インコーポレイテッド 疾患の治療のためのｋｌｋ５アンタゴニストの使用
AU2018258049A1 (en) 2017-04-26 2019-12-12 Eureka Therapeutics, Inc. Constructs specifically recognizing glypican 3 and uses thereof
AU2018256934B2 (en) 2017-04-27 2021-10-14 Anaptysbio, Inc. Antibody agents directed against Lymphocyte Activation Gene-3 (LAG-3) and uses thereof
RU2019139434A (ru) 2017-05-05 2021-06-07 Сентр фор Проуб Девелопмент энд Коммерсиализэйшн Моноклональные антитела против igf-1r и их применение
CN117603148A (zh) 2017-05-05 2024-02-27 探针技术开发及商业化中心 双官能螯合物的药代动力学增强及其用途
US10093741B1 (en) 2017-05-05 2018-10-09 Fusion Pharmaceuticals Inc. IGF-1R monoclonal antibodies and uses thereof
JP7265788B2 (ja) * 2017-05-09 2023-04-27 シアノ バイオテック ゲーエムベーハー 修飾ミクロシスチンおよびノジュラリン
EP3529364B1 (en) 2017-05-09 2020-01-01 Cyano Biotech GmbH Method of producing a non-ribosomal peptide from cyanobacteria
US11116835B2 (en) 2017-05-10 2021-09-14 Fred Hutchinson Cancer Research Center Epstein Barr virus antibodies, vaccines, and uses of the same
US11932650B2 (en) 2017-05-11 2024-03-19 Massachusetts Institute Of Technology Potent agelastatin derivatives as modulators for cancer invasion and metastasis
JP2020522254A (ja) 2017-05-31 2020-07-30 エルスター セラピューティクス， インコーポレイテッド 骨髄増殖性白血病（ｍｐｌ）タンパク質に結合する多特異性分子およびその使用
CN110891605A (zh) * 2017-06-07 2020-03-17 希沃尔拜克治疗公司 免疫调节化合物的抗体缀合物及其用途
KR102442736B1 (ko) 2017-06-14 2022-09-16 에이디씨 테라퓨틱스 에스에이 항-cd19 adc의 투여를 위한 투약량 체제
CN110869394A (zh) * 2017-06-16 2020-03-06 伊莱利利公司 工程改造的抗体化合物及其缀合物
EP3645122A1 (en) 2017-06-30 2020-05-06 Xencor, Inc. Targeted heterodimeric fc fusion proteins containing il-15/il-15ra and antigen binding domains
AU2018304458B2 (en) 2017-07-21 2021-12-09 Foundation Medicine, Inc. Therapeutic and diagnostic methods for cancer
US10494370B2 (en) 2017-08-16 2019-12-03 Bristol-Myers Squibb Company Toll-like receptor 7 (TLR7) agonists having a pyridine or pyrazine moiety, conjugates thereof, and methods and uses therefor
US10457681B2 (en) 2017-08-16 2019-10-29 Bristol_Myers Squibb Company Toll-like receptor 7 (TLR7) agonists having a tricyclic moiety, conjugates thereof, and methods and uses therefor
CN111278461A (zh) * 2017-08-16 2020-06-12 百时美施贵宝公司 可前药化抗体、其前药以及使用和制备方法
US10472361B2 (en) 2017-08-16 2019-11-12 Bristol-Myers Squibb Company Toll-like receptor 7 (TLR7) agonists having a benzotriazole moiety, conjugates thereof, and methods and uses therefor
WO2019035938A1 (en) 2017-08-16 2019-02-21 Elstar Therapeutics, Inc. MULTISPECIFIC MOLECULES BINDING TO BCMA AND USES THEREOF
US10508115B2 (en) 2017-08-16 2019-12-17 Bristol-Myers Squibb Company Toll-like receptor 7 (TLR7) agonists having heteroatom-linked aromatic moieties, conjugates thereof, and methods and uses therefor
US10487084B2 (en) 2017-08-16 2019-11-26 Bristol-Myers Squibb Company Toll-like receptor 7 (TLR7) agonists having a heterobiaryl moiety, conjugates thereof, and methods and uses therefor
JP7220203B2 (ja) 2017-08-18 2023-02-09 メドイミューン・リミテッド ピロロベンゾジアゼピン複合体
IL273387B2 (en) 2017-09-20 2023-10-01 Ph Pharma Co Ltd Thylanstatin analogs
JP2020534332A (ja) 2017-09-22 2020-11-26 イミュノジェン， インコーポレイテッド カチオン交換クロマトグラフィーを使用した三重軽鎖抗体の分離
MX2020002710A (es) 2017-09-29 2020-07-20 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Molecula de union al antigeno multiespecifica que tiene actividad de sustitucion de la funcion de cofactor del factor viii de coagulacion de sangre (fviii) y formulacion farmaceutica que contiene tal molecula como ingrediente activo.
US11364303B2 (en) 2017-09-29 2022-06-21 Pfizer Inc. Cysteine engineered antibody drug conjugates
CN111683963B (zh) 2017-10-03 2024-03-29 默克专利有限公司 半胱氨酸工程化的抗原结合分子
WO2019070541A1 (en) 2017-10-03 2019-04-11 Juno Therapeutics, Inc. HPV-SPECIFIC BINDING MOLECULES
EP3694890A4 (en) 2017-10-12 2021-11-03 Immunowake Inc. LIGHT CHAIN ANTIBODY FUSION PROTEIN WITH VEGFR
US10640508B2 (en) 2017-10-13 2020-05-05 Massachusetts Institute Of Technology Diazene directed modular synthesis of compounds with quaternary carbon centers
WO2019073069A1 (en) 2017-10-13 2019-04-18 Boehringer Ingelheim International Gmbh HUMAN ANTIBODIES AGAINST THOMSEN-NEW ANTIGEN (TN)
BR112020008323A2 (pt) 2017-11-01 2020-11-03 Juno Therapeutics Inc anticorpos e receptores de antígenos quiméricos específicos para antígeno de maturação de células b
KR20200079492A (ko) 2017-11-01 2020-07-03 에프. 호프만-라 로슈 아게 이중특이성 2+1 컨터체
BR112020007630A2 (pt) 2017-11-01 2020-11-17 F. Hoffmann-La Roche Ag anticorpo biespecífico ox40, produto farmacêutico, composição farmacêutica e anticorpos biespecíficos anti-fap/ anti-ox40
JP2021500902A (ja) 2017-11-01 2021-01-14 エフ・ホフマン−ラ・ロシュ・アクチェンゲゼルシャフト 新規ｔｎｆファミリーリガンド三量体含有抗原結合分子
AU2018361819A1 (en) 2017-11-02 2020-04-16 Oxford Biotherapeutics Ltd Antibodies and methods of use
CN107789631B (zh) * 2017-11-03 2021-03-16 合肥瀚科迈博生物技术有限公司 抗人ErbB2双表位抗体-药物偶联物及其应用
EP3707510B1 (en) 2017-11-06 2024-06-26 F. Hoffmann-La Roche AG Diagnostic and therapeutic methods for cancer
JP2021502100A (ja) 2017-11-08 2021-01-28 ゼンコア インコーポレイテッド 新規抗ｐｄ−１配列を用いた二重特異性および単一特異性抗体
US10981992B2 (en) 2017-11-08 2021-04-20 Xencor, Inc. Bispecific immunomodulatory antibodies that bind costimulatory and checkpoint receptors
ES2920123T3 (es) 2017-11-14 2022-08-01 Medimmune Ltd Conjugados de pirrolobenzodiazepina
WO2019118937A1 (en) 2017-12-15 2019-06-20 Juno Therapeutics, Inc. Anti-cct5 binding molecules and methods of use thereof
AU2018390418B2 (en) 2017-12-19 2023-12-21 Xencor, Inc. Engineered IL-2 Fc fusion proteins
EP3502140A1 (en) 2017-12-21 2019-06-26 F. Hoffmann-La Roche AG Combination therapy of tumor targeted icos agonists with t-cell bispecific molecules
BR112020011469A2 (pt) 2017-12-21 2020-11-24 F. Hoffmann-La Roche Ag anticorpos, molécula de ligação ao antígeno biespecífica, um ou mais polinucleotídeos isolados, um ou mais vetores, célula hospedeira, método para produzir um anticorpo, composição farmacêutica, uso do anticorpo, método de tratamento de uma doença e invenção
WO2019126472A1 (en) 2017-12-22 2019-06-27 Genentech, Inc. Use of pilra binding agents for treatment of a disease
TWI827575B (zh) 2017-12-28 2024-01-01 美商伊繆諾金公司 苯二氮平衍生物
EP3732202A4 (en) 2017-12-28 2022-06-15 Nanjing Legend Biotech Co., Ltd. SINGLE DOMAIN ANTIBODIES AND VARIANTS THEREOF AGAINST TIGIT
WO2019129211A1 (en) 2017-12-28 2019-07-04 Nanjing Legend Biotech Co., Ltd. Antibodies and variants thereof against pd-l1
JP2021508471A (ja) 2017-12-29 2021-03-11 エフ．ホフマン−ラ ロシュ アーゲーＦ． Ｈｏｆｆｍａｎｎ−Ｌａ Ｒｏｃｈｅ Ａｋｔｉｅｎｇｅｓｅｌｌｓｃｈａｆｔ 抗ｖｅｇｆ抗体のｖｅｇｆ受容体遮断選択性を改善する方法
AU2019205090A1 (en) 2018-01-05 2020-08-06 Ac Immune Sa Misfolded TDP-43 binding molecules
KR20200120641A (ko) 2018-01-15 2020-10-21 난징 레전드 바이오테크 씨오., 엘티디. Pd-1에 대한 단일-도메인 항체 및 이의 변이체
CN111655717A (zh) 2018-01-26 2020-09-11 豪夫迈·罗氏有限公司 IL-22 Fc融合蛋白及使用方法
TWI835773B (zh) 2018-01-26 2024-03-21 美商建南德克公司 組合物及使用方法
US11866498B2 (en) 2018-02-08 2024-01-09 Genentech, Inc. Bispecific antigen-binding molecules and methods of use
TWI829667B (zh) 2018-02-09 2024-01-21 瑞士商赫孚孟拉羅股份公司 結合gprc5d之抗體
JP7418337B2 (ja) 2018-02-09 2024-01-19 ジェネンテック， インコーポレイテッド マスト細胞媒介性炎症性疾患の治療法及び診断法
WO2019158645A1 (en) 2018-02-14 2019-08-22 Abba Therapeutics Ag Anti-human pd-l2 antibodies
MA51907A (fr) 2018-02-21 2021-05-26 Hoffmann La Roche Posologie pour un traitement avec des protéines de fusion il-22 fc
CA3092108A1 (en) 2018-02-26 2019-08-29 Genentech, Inc. Dosing for treatment with anti-tigit and anti-pd-l1 antagonist antibodies
GB201803342D0 (en) 2018-03-01 2018-04-18 Medimmune Ltd Methods
EP3533460A1 (en) 2018-03-02 2019-09-04 Diaccurate Therapeutic anti-spla2-gib antibodies and the uses thereof
CN111683961A (zh) 2018-03-13 2020-09-18 豪夫迈·罗氏有限公司 4-1bb激动剂与抗cd20抗体的治疗剂组合
EP3765501A1 (en) 2018-03-13 2021-01-20 F. Hoffmann-La Roche AG Combination therapy with targeted 4-1bb (cd137) agonists
AU2019235634A1 (en) 2018-03-13 2020-10-22 Zymeworks Bc Inc. Anti-HER2 biparatopic antibody-drug conjugates and methods of use
US20210238280A1 (en) 2018-03-14 2021-08-05 Elstar Therapeutics, Inc. Multifunctional molecules that bind to calreticulin and uses thereof
SG11202006217YA (en) 2018-03-14 2020-07-29 Beijing Xuanyi Pharmasciences Co Ltd Anti-claudin 18.2 antibodies
US20200040103A1 (en) 2018-03-14 2020-02-06 Genentech, Inc. Anti-klk5 antibodies and methods of use
US20210009711A1 (en) 2018-03-14 2021-01-14 Elstar Therapeutics, Inc. Multifunctional molecules and uses thereof
EP3765494A4 (en) 2018-03-15 2022-03-23 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha ANTI-DENGUE VIRUS ANTIBODIES WITH CROSS-REACTIVITY AGAINST ZIKA VIRUS AND METHODS OF USE
JP7438180B2 (ja) 2018-03-20 2024-02-26 ウーシー バイオロジクス アイルランド リミテッド 新規抗ｌａｇ－３抗体ポリペプチド
BR112020018868A2 (pt) 2018-03-28 2021-01-26 Axon Neuroscience Se métodos baseados em anticorpo para detectar e tratar doença de alzheimer
EP3774880A1 (en) 2018-03-29 2021-02-17 AbbVie Inc. Selective reduction of antibodies
KR20200135510A (ko) 2018-03-29 2020-12-02 제넨테크, 인크. 포유류 세포들에서 젖분비자극 활성의 조절
CA3093034A1 (en) 2018-03-30 2019-10-03 Nanjing Legend Biotech Co., Ltd. Single-domain antibodies against lag-3 and uses thereof
EP3773911A2 (en) 2018-04-04 2021-02-17 Xencor, Inc. Heterodimeric antibodies that bind fibroblast activation protein
TW202011029A (zh) 2018-04-04 2020-03-16 美商建南德克公司 偵測及定量fgf21之方法
US11471489B2 (en) 2018-04-05 2022-10-18 Juno Therapeutics, Inc. T cell receptors and engineered cells expressing same
GB201806022D0 (en) 2018-04-12 2018-05-30 Medimmune Ltd Pyrrolobenzodiazepines and conjugates thereof
TW202012440A (zh) 2018-04-13 2020-04-01 瑞士商赫孚孟拉羅股份公司 包含4-1bbl之靶向her2的抗原結合分子
AR114789A1 (es) 2018-04-18 2020-10-14 Hoffmann La Roche Anticuerpos anti-hla-g y uso de los mismos
AU2019256539A1 (en) 2018-04-18 2020-11-26 Xencor, Inc. PD-1 targeted heterodimeric fusion proteins containing IL-15/IL-15Ra Fc-fusion proteins and PD-1 antigen binding domains and uses thereof
EP3781598A1 (en) 2018-04-18 2021-02-24 Xencor, Inc. Tim-3 targeted heterodimeric fusion proteins containing il-15/il-15ra fc-fusion proteins and tim-3 antigen binding domains
AR115052A1 (es) 2018-04-18 2020-11-25 Hoffmann La Roche Anticuerpos multiespecíficos y utilización de los mismos
US11485741B2 (en) 2018-04-24 2022-11-01 Bristol-Myers Squibb Company Macrocyclic toll-like receptor 7 (TLR7) agonists
CN110464842B (zh) 2018-05-11 2022-10-14 信达生物制药(苏州)有限公司 包含抗pcsk9抗体的制剂及其用途
US11987629B2 (en) 2018-06-01 2024-05-21 Tayu Huaxia Biotech Medical Group Co., Ltd. Compositions and uses thereof for treating disease or condition
AU2019277700A1 (en) 2018-06-01 2020-11-19 Eisai R&D Management Co., Ltd. Splicing modulator antibody-drug conjugates and methods of use
JP7398396B2 (ja) 2018-06-01 2023-12-14 ノバルティス アーゲー Ｂｃｍａに対する結合分子及びその使用
JP7372237B2 (ja) 2018-06-04 2023-10-31 中外製薬株式会社 細胞質内での半減期が変化した抗原結合分子
GB201809746D0 (en) 2018-06-14 2018-08-01 Berlin Chemie Ag Pharmaceutical combinations
US11912763B2 (en) 2018-06-17 2024-02-27 L & L Biopharma Co., Ltd. Antibody targeting CLDN18.2, bispecific antibody, ADC, and CAR, and applications thereof
US11993661B2 (en) 2018-06-18 2024-05-28 Eureka Therapeutics, Inc. Constructs targeting prostate-specific membrane antigen (PSMA) and uses thereof
WO2019243825A1 (en) 2018-06-21 2019-12-26 Curadev Pharma Limited Small molecule modulators of human sting, conjugates and therapeutic applications
BR112020026724A2 (pt) 2018-07-02 2021-03-30 Amgen Inc. Proteína de ligação ao antígeno anti-steap1
US11845797B2 (en) 2018-07-03 2023-12-19 Marengo Therapeutics, Inc. Anti-TCR antibody molecules and uses thereof
TW202035447A (zh) 2018-07-04 2020-10-01 瑞士商赫孚孟拉羅股份公司 新穎雙特異性促效性4-1bb抗原結合分子
MX2021000745A (es) 2018-07-20 2021-03-26 Surface Oncology Inc Composiciones anti-cd112r y metodos.
CA3107383A1 (en) 2018-07-23 2020-01-30 Magenta Therapeutics, Inc. Use of anti-cd5 antibody drug conjugate (adc) in allogeneic cell therapy
EP3829648A1 (en) 2018-07-27 2021-06-09 Promega Corporation Quinone-containing conjugates
US20220195045A1 (en) 2018-08-03 2022-06-23 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Antigen-binding molecule containing two antigen-binding domains that are linked to each other
US11554120B2 (en) 2018-08-03 2023-01-17 Bristol-Myers Squibb Company 1H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidine compounds as toll-like receptor 7 (TLR7) agonists and methods and uses therefor
SG11202003531WA (en) 2018-08-10 2020-05-28 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Anti-cd137 antigen-binding molecule and utilization thereof
TW202021618A (zh) 2018-08-17 2020-06-16 美商２３與我有限公司 抗ｉｌ１ｒａｐ抗體及其使用方法
GB201814281D0 (en) 2018-09-03 2018-10-17 Femtogenix Ltd Cytotoxic agents
KR102353086B1 (ko) * 2018-09-07 2022-01-20 아주대학교산학협력단 신규 면역독소 제조방법
MX2021003214A (es) 2018-09-19 2021-05-12 Genentech Inc Metodos terapeuticos y de diagnostico para el cancer de vejiga.
EP3861025A1 (en) 2018-10-01 2021-08-11 F. Hoffmann-La Roche AG Bispecific antigen binding molecules with trivalent binding to cd40
KR20210069675A (ko) 2018-10-01 2021-06-11 에프. 호프만-라 로슈 아게 항-fap 클론 212를 포함하는 이중특이적 항원 결합 분자
EP3632929A1 (en) 2018-10-02 2020-04-08 Ospedale San Raffaele S.r.l. Antibodies and uses thereof
AU2019355971A1 (en) 2018-10-03 2021-05-06 Xencor, Inc. IL-12 heterodimeric Fc-fusion proteins
WO2020081493A1 (en) 2018-10-16 2020-04-23 Molecular Templates, Inc. Pd-l1 binding proteins
CN113196061A (zh) 2018-10-18 2021-07-30 豪夫迈·罗氏有限公司 肉瘤样肾癌的诊断和治疗方法
JP2022512716A (ja) 2018-10-19 2022-02-07 メドイミューン・リミテッド ピロロベンゾジアゼピン複合体
CA3112977A1 (en) 2018-10-19 2020-04-23 Medimmune Limited Pyrrolobenzodiazepine conjugates
JP2022513400A (ja) 2018-10-29 2022-02-07 メルサナ セラピューティクス インコーポレイテッド ペプチド含有リンカーを有するシステイン操作抗体－薬物コンジュゲート
CA3117493A1 (en) 2018-10-30 2020-05-07 Immunogen, Inc. Methods of treatment using anti-cd123 immunoconjugates
BR112021009373A2 (pt) 2018-11-16 2021-08-17 Memorial Sloan Kettering Cancer Center anticorpos para mucina-16 e métodos de uso dos mesmos
AU2019386021B2 (en) 2018-11-27 2024-02-15 Innovent Biologics (Suzhou) Co., Ltd. Anti-il-23p19 antibody and uses thereof
CA3121265A1 (en) 2018-12-05 2020-06-11 Genentech, Inc. Diagnostic methods and compositions for cancer immunotherapy
AU2018451747A1 (en) 2018-12-06 2021-06-17 F. Hoffmann-La Roche Ag Combination therapy of diffuse large B-cell lymphoma comprising an anti-CD79b immunoconjugates, an alkylating agent and an anti-CD20 antibody
CN113227119A (zh) 2018-12-10 2021-08-06 基因泰克公司 用于与含Fc的蛋白质进行位点特异性缀合的光交联肽
EP3667323A1 (en) 2018-12-11 2020-06-17 Kelner, Michael Methods, compositions and devices for treating cancer with illudofulvenes
JP2022512401A (ja) 2018-12-13 2022-02-03 エーザイ・アール・アンド・ディー・マネジメント株式会社 ハーボキシジエンスプライシング調節薬抗体－薬物コンジュゲート及びその使用方法
BR102019025989A2 (pt) 2018-12-14 2020-06-23 Beckman Coulter, Inc. Modificação de corantes poliméricos e aplicações
EP3898667A2 (en) 2018-12-20 2021-10-27 F. Hoffmann-La Roche AG Modified antibody fcs and methods of use
AR117327A1 (es) 2018-12-20 2021-07-28 23Andme Inc Anticuerpos anti-cd96 y métodos de uso de estos
CN113286822A (zh) 2018-12-21 2021-08-20 豪夫迈·罗氏有限公司 靶向肿瘤的超激动性cd28抗原结合分子
SG11202106198YA (en) 2018-12-21 2021-07-29 Hoffmann La Roche Antibody that binds to vegf and il-1beta and methods of use
EP3898682A1 (en) 2018-12-21 2021-10-27 F. Hoffmann-La Roche AG Tumor-targeted agonistic cd28 antigen binding molecules
EA202191656A1 (ru) 2018-12-21 2021-10-26 23Эндми, Инк. Анти-il-36 антитела и способы их применения
MY194642A (en) 2018-12-21 2022-12-09 Hoffmann La Roche Antibodies binding to cd3
US11666658B2 (en) 2018-12-21 2023-06-06 Regeneran Pharmaceuticals, Inc. Rifamycin analogs and antibody-drug conjugates thereof
CN113272327A (zh) 2018-12-30 2021-08-17 豪夫迈·罗氏有限公司 抗兔cd19抗体及其使用方法
JP2022522985A (ja) 2019-01-22 2022-04-21 ジェネンテック， インコーポレイテッド 免疫グロブリンａ抗体、並びに産生及び使用の方法
US20220089770A1 (en) 2019-01-24 2022-03-24 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Novel cancer antigens and antibodies of said antigens
US20220096651A1 (en) 2019-01-29 2022-03-31 Juno Therapeutics, Inc. Antibodies and chimeric antigen receptors specific for receptor tyrosine kinase like orphan receptor 1 (ror1)
GB201901197D0 (en) 2019-01-29 2019-03-20 Femtogenix Ltd G-A Crosslinking cytotoxic agents
EP3693063A1 (en) 2019-02-06 2020-08-12 Diaccurate Methods and compositions for treating cancer
US11478553B2 (en) 2019-02-15 2022-10-25 Wuxi Biologies Ireland Limited Process for preparing antibody-drug conjugates with improved homogeneity
GB2599229B (en) 2019-02-21 2024-04-24 Marengo Therapeutics Inc Multifunctional molecules that bind to calreticulin and uses thereof
AU2020226904A1 (en) 2019-02-21 2021-09-16 Marengo Therapeutics, Inc. Anti-TCR antibody molecules and uses thereof
CN114127112A (zh) 2019-02-21 2022-03-01 马伦戈治疗公司 与t细胞结合的多功能分子及其治疗自身免疫性病症的用途
SG11202108955QA (en) 2019-02-21 2021-09-29 Marengo Therapeutics Inc Antibody molecules that bind to nkp30 and uses thereof
EP3927744A1 (en) 2019-02-21 2021-12-29 Marengo Therapeutics, Inc. Multifunctional molecules that bind to t cell related cancer cells and uses thereof
KR20210133237A (ko) 2019-02-27 2021-11-05 제넨테크, 인크. 항-tigit 및 항-cd20 또는 항-cd38 항체로 치료를 위한 투약
CA3132185A1 (en) 2019-03-01 2020-09-10 Xencor, Inc. Heterodimeric antibodies that bind enpp3 and cd3
EP3935385A1 (en) 2019-03-08 2022-01-12 F. Hoffmann-La Roche AG Methods for detecting and quantifying membrane-associated proteins on extracellular vesicles
WO2020181846A1 (zh) * 2019-03-11 2020-09-17 凯惠科技发展(上海)有限公司 一种含半胱氨酸的抗体、药物偶联物及其应用
AU2020236015A1 (en) 2019-03-14 2021-09-09 Genentech, Inc. Treatment of cancer with HER2XCD3 bispecific antibodies in combination with anti-HER2 MAB
US20220160881A1 (en) 2019-03-15 2022-05-26 Medimmune Limited Azetidobenzodiazepine dimers and conjugates comprising them for use in the treatment of cancer
KR20220022112A (ko) 2019-03-21 2022-02-24 이뮤노젠 아이엔씨 세포-결합 제제-약물 콘쥬게이트를 준비하는 방법
CN118240003A (zh) 2019-03-29 2024-06-25 免疫医疗有限公司 化合物及其缀合物
US20220324988A1 (en) 2019-04-10 2022-10-13 Nankai University Anti-CD40 antibodies and uses thereof
JP7301155B2 (ja) 2019-04-12 2023-06-30 エフ・ホフマン－ラ・ロシュ・アクチェンゲゼルシャフト リポカリンムテインを含む二重特異性抗原結合分子
CA3134522A1 (en) 2019-04-19 2020-10-22 Genentech, Inc. Anti-mertk antibodies and their methods of use
SG11202110287QA (en) 2019-04-24 2021-10-28 Heidelberg Pharma Res Gmbh Amatoxin antibody-drug conjugates and uses thereof
BR112021022815A2 (pt) 2019-05-14 2021-12-28 Genentech Inc Métodos para tratar linfoma folicular, kits, imunoconjugados e polatuzumabe vedotina
US20230081720A1 (en) 2019-05-20 2023-03-16 Novartis Ag Mcl-1 inhibitor antibody-drug conjugates and methods of use
WO2020234473A1 (en) 2019-05-23 2020-11-26 Ac Immune Sa Anti-tdp-43 binding molecules and uses thereof
AR119264A1 (es) 2019-06-05 2021-12-09 Genentech Inc Método para reutilización de cromatografía
WO2020247054A1 (en) 2019-06-05 2020-12-10 Massachusetts Institute Of Technology Compounds, conjugates, and compositions of epipolythiodiketopiperazines and polythiodiketopiperazines and uses thereof
GB201908128D0 (en) 2019-06-07 2019-07-24 Adc Therapeutics Sa Pyrrolobenzodiazepine-antibody conjugates
MX2021015221A (es) 2019-06-13 2022-03-17 Bolt Biotherapeutics Inc Compuestos de aminobenzazepina, inmunoconjugados y usos de estos.
BR112021026293A2 (pt) 2019-06-26 2022-03-03 Hoffmann La Roche Moléculas de ligação, anticorpos humanizados, ácido nucleico isolado, célula hospedeira, métodos para produzir a molécula de ligação ao antígeno, para tratar um indivíduo e suprarregular ou prolongar a atividade de células t citotóxicas, composição farmacêutica e uso da molécula
WO2020260326A1 (en) 2019-06-27 2020-12-30 F. Hoffmann-La Roche Ag Novel icos antibodies and tumor-targeted antigen binding molecules comprising them
KR20220029725A (ko) 2019-06-29 2022-03-08 항저우 디에이씨 바이오테크 씨오, 엘티디 세포-결합 분자-튜불리신 유도체 접합체 및 이의 제조 방법
AU2020298833A1 (en) 2019-07-03 2022-01-20 Oxford Biotherapeutics Ltd Antibodies and methods of use
US20220273810A1 (en) 2019-07-08 2022-09-01 Imcare Biotech, Llc Anti-serine protease inhibitor kazal (spik) antibodies, immunoconjugates, and methods of use
AR119393A1 (es) 2019-07-15 2021-12-15 Hoffmann La Roche Anticuerpos que se unen a nkg2d
TW202116358A (zh) * 2019-07-19 2021-05-01 美商免疫感應治療公司 抗體-干擾素基因刺激蛋白(sting)促效劑結合物及其於免疫療法之用途
US20220298115A1 (en) 2019-07-25 2022-09-22 Curadev Pharma Pvt. Ltd. Small molecule inhibitors of acetyl coenzyme a synthetase short chain 2 (acss2)
JP2022543551A (ja) 2019-07-31 2022-10-13 エフ・ホフマン－ラ・ロシュ・アクチェンゲゼルシャフト Ｇｐｒｃ５ｄに結合する抗体
PE20220394A1 (es) 2019-07-31 2022-03-18 Hoffmann La Roche Anticuerpos que se fijan a gprc5d
EP4007773A1 (en) 2019-08-06 2022-06-08 Aprinoia Therapeutics Limited Antibodies that bind to pathological tau species and uses thereof
US20210040174A1 (en) * 2019-08-08 2021-02-11 Navrogen, Inc. Composition and Use of Humoral Immune Suppressor Antagonists for the Treatment of Humoral Immune Suppressed Diseases
EP4019544A4 (en) * 2019-08-19 2023-10-18 Shenyang Pharmaceutical University ANTIBODY MUTANT AND APPLICATION THEREOF
EP3786180A1 (en) 2019-08-27 2021-03-03 Diaccurate Antibodies and the uses thereof
US20220313835A1 (en) 2019-09-03 2022-10-06 Bolt Biotherapeutics, Inc. Aminoquinoline compounds, immunoconjugates, and uses thereof
EP4028132A1 (en) 2019-09-11 2022-07-20 Imcare Biotech, LLC Epitopes of anti-serine protease inhibitor kazal (spik) antibodies
EP4028054A1 (en) 2019-09-12 2022-07-20 Genentech, Inc. Compositions and methods of treating lupus nephritis
AU2020349509A1 (en) 2019-09-18 2022-03-31 Genentech, Inc. Anti-KLK7 antibodies, anti-KLK5 antibodies, multispecific anti-KLK5/KLK7 antibodies, and methods of use
AU2020348393A1 (en) 2019-09-20 2022-02-24 Genentech, Inc. Dosing for anti-tryptase antibodies
CN114746119A (zh) 2019-09-27 2022-07-12 詹森生物科技公司 抗-ceacam抗体及其用途
WO2021062085A1 (en) 2019-09-27 2021-04-01 Genentech, Inc. Dosing for treatment with anti-tigit and anti-pd-l1 antagonist antibodies
CN114746404A (zh) 2019-09-30 2022-07-12 博尔特生物治疗药物有限公司 酰胺连接的氨基苯并氮杂䓬免疫缀合物及其用途
US20230165967A1 (en) 2019-10-04 2023-06-01 TAE Life Sciences Antibody Compositions Comprising Fc Mutations and Site-Specific Conjugation Properties for use in Treating Cancer, Immunological Disorders, and Methods Thereof
JP2022553640A (ja) 2019-10-10 2022-12-26 コディアック サイエンシーズ インコーポレイテッド 眼障害を処置する方法
EP4045090A1 (en) 2019-10-18 2022-08-24 Genentech, Inc. Methods of using anti-cd79b immunoconjugates to treat diffuse large b-cell lymphoma
KR102235549B1 (ko) * 2019-10-22 2021-04-02 주식회사 바이오맥스 항체-약물 복합체 형성을 위한 이관능성 링커와 시스테인이 태그된 스파이태그/캐쳐를 이용한 고효율 접합 키트
WO2021080608A1 (en) 2019-10-25 2021-04-29 Medimmune, Llc Branched moiety for use in conjugates
WO2021081407A1 (en) 2019-10-25 2021-04-29 Bolt Biotherapeutics, Inc. Thienoazepine immunoconjugates, and uses thereof
CN115066613A (zh) 2019-11-06 2022-09-16 基因泰克公司 用于治疗血液癌症的诊断和治疗方法
AU2020381495A1 (en) 2019-11-15 2022-05-19 Seagen Inc. Methods of treating HER2 positive breast cancer with tucatinib in combination with an anti-HER2 antibody-drug conjugate
BR112022008629A2 (pt) 2019-11-15 2022-07-19 Enthera S R L Anticorpo isolado ou fragmento de ligação de antígeno do mesmo, polinucleotídeo isolado, vetor, célula isolada, composição farmacêutica, uso dos mesmos e método para inibir a ligação de igfbp3 ao receptor tmem219
US20230039165A1 (en) 2019-11-21 2023-02-09 Enthera S.R.L. Igfbp3 antibodies and therapeutic uses thereof
US11591295B2 (en) 2019-11-25 2023-02-28 Af Chemicals Llc Affinity illudofulvene conjugates
CN112898414B (zh) 2019-12-04 2024-05-10 珠海泰诺麦博制药股份有限公司 抗人巨细胞病毒抗体及其用途
KR20220110539A (ko) 2019-12-04 2022-08-08 에이씨 이뮨 에스에이 치료 및 진단용 신규 분자
CN115916817A (zh) 2019-12-06 2023-04-04 朱诺治疗学股份有限公司 针对bcma靶向结合结构域的抗独特型抗体及相关组合物和方法
KR20220122656A (ko) 2019-12-06 2022-09-02 주노 쎄러퓨티크스 인코퍼레이티드 Ｇｐｒｃ5ｄ-표적화 결합 도메인에 대한 항-이디오타입 항체 및 관련 조성물 및 방법
AU2020403145A1 (en) 2019-12-13 2022-07-07 Genentech, Inc. Anti-Ly6G6D antibodies and methods of use
CN110922476A (zh) * 2019-12-16 2020-03-27 蓝怡科技集团股份有限公司 一种生物素偶联抗体及其制备方法和应用
KR20220114559A (ko) 2019-12-18 2022-08-17 테네오포, 인코포레이티드 Cd38에 결합하는 중쇄 항체
BR112022011854A2 (pt) 2019-12-18 2022-09-06 Hoffmann La Roche Anticorpos, polinucleotídeo isolado, célula hospedeira, métodos para produzir um anticorpo e para tratar uma doença, composição farmacêutica, usos do anticorpo e invenção
KR20220120586A (ko) 2019-12-23 2022-08-30 에자이 알앤드디 매니지먼트 가부시키가이샤 에리불린 기반의 항체-약물 컨쥬게이트의 생성 방법
JP7373588B2 (ja) 2019-12-27 2023-11-02 中外製薬株式会社 抗ｃｔｌａ－４抗体およびその使用
CN113045655A (zh) 2019-12-27 2021-06-29 高诚生物医药(香港)有限公司 抗ox40抗体及其用途
CN113597434B (zh) 2019-12-31 2022-07-01 北京质肽生物医药科技有限公司 Glp-1和gdf15的融合蛋白以及其缀合物
EP4084821A4 (en) 2020-01-03 2024-04-24 Marengo Therapeutics, Inc. CD33-BINDING MULTIFUNCTIONAL MOLECULES AND THEIR USES
EP4087657A1 (en) 2020-01-08 2022-11-16 Synthis Therapeutics, Inc. Alk5 inhibitor conjugates and uses thereof
WO2021140130A1 (en) 2020-01-09 2021-07-15 F. Hoffmann-La Roche Ag New 4-1bbl trimer-containing antigen binding molecules
CN110818795B (zh) 2020-01-10 2020-04-24 上海复宏汉霖生物技术股份有限公司 抗tigit抗体和使用方法
CN113728013B (zh) 2020-01-11 2022-06-14 北京质肽生物医药科技有限公司 Glp-1和fgf21的融合蛋白的缀合物
BR112022014391A2 (pt) 2020-01-22 2022-09-13 Medimmune Ltd Compostos e conjugados dos mesmos
TW202140076A (zh) 2020-01-22 2021-11-01 英商梅迪繆思有限公司 化合物及其軛合物
MX2022009101A (es) * 2020-01-23 2022-10-07 Adagene Ag Proteinas heterodimericas con mutaciones fc.
WO2021194481A1 (en) 2020-03-24 2021-09-30 Genentech, Inc. Dosing for treatment with anti-tigit and anti-pd-l1 antagonist antibodies
WO2022050954A1 (en) 2020-09-04 2022-03-10 Genentech, Inc. Dosing for treatment with anti-tigit and anti-pd-l1 antagonist antibodies
TW202144395A (zh) 2020-02-12 2021-12-01 日商中外製藥股份有限公司 用於癌症之治療的抗cd137抗原結合分子
EP3868396A1 (en) 2020-02-20 2021-08-25 Enthera S.R.L. Inhibitors and uses thereof
EP4106819A1 (en) 2020-02-21 2022-12-28 Silverback Therapeutics, Inc. Nectin-4 antibody conjugates and uses thereof
WO2021170071A1 (en) 2020-02-28 2021-09-02 Shanghai Henlius Biotech, Inc. Anti-cd137 constructs, multispecific antibody and uses thereof
EP4112642A4 (en) 2020-02-28 2024-06-26 Shanghai Henlius Biotech, Inc. ANTI-CD137 CONSTRUCTION AND ITS USE
EP4110404A1 (en) 2020-02-28 2023-01-04 Genzyme Corporation Modified binding polypeptides for optimized drug conjugation
US20230126689A1 (en) 2020-03-06 2023-04-27 Go Therapeutics, Inc. Anti-glyco-cd44 antibodies and their uses
WO2021183849A1 (en) 2020-03-13 2021-09-16 Genentech, Inc. Anti-interleukin-33 antibodies and uses thereof
MX2022011455A (es) 2020-03-19 2022-10-03 Genentech Inc Anticuerpos anti-tgf-beta con selectividad de isoforma y metodos de uso.
US11365239B2 (en) 2020-03-20 2022-06-21 Tsb Therapeutics (Beijing) Co., Ltd. Anti-SARS-COV-2 antibodies and uses thereof
WO2021194913A1 (en) 2020-03-24 2021-09-30 Genentech, Inc. Tie2-binding agents and methods of use
CN115315512A (zh) 2020-03-26 2022-11-08 基因泰克公司 具有降低的宿主细胞蛋白质的经修饰的哺乳动物细胞
EP4126940A1 (en) 2020-03-30 2023-02-08 F. Hoffmann-La Roche AG Antibody that binds to vegf and pdgf-b and methods of use
AR121706A1 (es) 2020-04-01 2022-06-29 Hoffmann La Roche Moléculas de unión a antígeno biespecíficas dirigidas a ox40 y fap
WO2021202959A1 (en) 2020-04-03 2021-10-07 Genentech, Inc. Therapeutic and diagnostic methods for cancer
WO2021207662A1 (en) 2020-04-10 2021-10-14 Genentech, Inc. Use of il-22fc for the treatment or prevention of pneumonia, acute respiratory distress syndrome, or cytokine release syndrome
CA3175530A1 (en) 2020-04-24 2021-10-28 Genentech, Inc. Methods of using anti-cd79b immunoconjugates
JP2023523011A (ja) 2020-04-24 2023-06-01 マレンゴ・セラピューティクス，インコーポレーテッド Ｔ細胞関連のがん細胞に結合する多機能性分子およびその使用
WO2021222167A1 (en) 2020-04-28 2021-11-04 Genentech, Inc. Methods and compositions for non-small cell lung cancer immunotherapy
CN115996756A (zh) 2020-05-08 2023-04-21 博尔特生物治疗药物有限公司 弹性蛋白酶底物肽连接子免疫缀合物及其用途
WO2021231976A1 (en) 2020-05-14 2021-11-18 Xencor, Inc. Heterodimeric antibodies that bind prostate specific membrane antigen (psma) and cd3
WO2021239666A1 (en) 2020-05-26 2021-12-02 Diaccurate Therapeutic methods
US20230220057A1 (en) 2020-05-27 2023-07-13 Staidson (Beijing) Biopharmaceuticals Co., Ltd. Antibodies specifically recognizing nerve growth factor and uses thereof
EP4157461A1 (en) 2020-05-29 2023-04-05 23Andme, Inc. Anti-cd200r1 antibodies and methods of use thereof
CN116529260A (zh) 2020-06-02 2023-08-01 当康生物技术有限责任公司 抗cd93构建体及其用途
EP4157462A1 (en) 2020-06-02 2023-04-05 Dynamicure Biotechnology LLC Anti-cd93 constructs and uses thereof
CN116096752A (zh) 2020-06-05 2023-05-09 卫材R&D管理有限公司 抗bcma抗体-药物缀合物及其使用方法
PE20240080A1 (es) 2020-06-08 2024-01-16 Hoffmann La Roche Anticuerpos anti-hbv y metodos de uso
CN115698719A (zh) 2020-06-12 2023-02-03 基因泰克公司 用于癌症免疫疗法的方法和组合物
WO2021257124A1 (en) 2020-06-18 2021-12-23 Genentech, Inc. Treatment with anti-tigit antibodies and pd-1 axis binding antagonists
WO2021255142A1 (en) 2020-06-19 2021-12-23 F. Hoffmann-La Roche Ag Antibodies binding to cd3
AU2021291011A1 (en) 2020-06-19 2023-01-05 F. Hoffmann-La Roche Ag Antibodies binding to CD3 and CD19
JP2023531625A (ja) 2020-06-19 2023-07-25 エフ・ホフマン－ラ・ロシュ・アクチェンゲゼルシャフト ＣＤ３及びＦｏｌＲ１に結合する抗体
WO2021255146A1 (en) 2020-06-19 2021-12-23 F. Hoffmann-La Roche Ag Antibodies binding to cd3 and cea
JP2023531222A (ja) 2020-06-22 2023-07-21 アルミラル・ソシエダッド・アノニマ 抗ｉｌ－３６抗体およびその使用方法
WO2021259199A1 (zh) 2020-06-22 2021-12-30 信达生物制药(苏州)有限公司 抗cd73抗体及其用途
KR20230016206A (ko) 2020-06-23 2023-02-01 에프. 호프만-라 로슈 아게 Her2를 표적으로 하는 작용성 CD28 항원 결합 분자
US20220041672A1 (en) 2020-06-24 2022-02-10 Genentech, Inc. Apoptosis resistant cell lines
WO2021260064A1 (en) 2020-06-25 2021-12-30 F. Hoffmann-La Roche Ag Anti-cd3/anti-cd28 bispecific antigen binding molecules
CA3183993A1 (en) 2020-07-01 2022-01-06 Peter R. Baum Anti-asgr1 antibody conjugates and uses thereof
EP4179332A1 (en) 2020-07-13 2023-05-17 Genentech, Inc. Cell-based methods for predicting polypeptide immunogenicity
PE20231300A1 (es) 2020-07-17 2023-08-24 Genentech Inc Anticuerpos anti-notch2 y metodos de uso
GB2597532A (en) 2020-07-28 2022-02-02 Femtogenix Ltd Cytotoxic compounds
AU2021315665A1 (en) 2020-07-29 2023-03-16 Dynamicure Biotechnology Llc Anti-CD93 constructs and uses thereof
GB202011993D0 (en) 2020-07-31 2020-09-16 Adc Therapeutics Sa ANTI-IL 13Ra2 antibodies
EP4189121A1 (en) 2020-08-03 2023-06-07 Genentech, Inc. Diagnostic and therapeutic methods for lymphoma
WO2022029660A1 (en) 2020-08-05 2022-02-10 Juno Therapeutics, Inc. Anti-idiotypic antibodies to ror1-targeted binding domains and related compositions and methods
EP4192942A1 (en) 2020-08-07 2023-06-14 Genentech, Inc. T cell-based methods for predicting polypeptide immunogenicity
EP4196168A1 (en) 2020-08-13 2023-06-21 Bolt Biotherapeutics, Inc. Pyrazoloazepine immunoconjugates, and uses thereof
US20230322908A1 (en) 2020-08-14 2023-10-12 Ac Immune Sa Humanized Anti-TDP-43 Binding Molecules and Uses Thereof
KR102607909B1 (ko) 2020-08-19 2023-12-01 젠코어 인코포레이티드 항-cd28 조성물
AU2021333779A1 (en) 2020-08-26 2023-04-13 Marengo Therapeutics, Inc. Methods of detecting TRBC1 or TRBC2
AU2021331076A1 (en) 2020-08-26 2023-04-06 Marengo Therapeutics, Inc. Antibody molecules that bind to NKp30 and uses thereof
JP2023542080A (ja) 2020-08-26 2023-10-05 マレンゴ・セラピューティクス，インコーポレーテッド カルレティキュリンに結合する多機能性分子およびその使用
WO2022043517A2 (en) 2020-08-27 2022-03-03 Cureab Gmbh Anti-golph2 antibodies for macrophage and dendritic cell differentiation
TW202227625A (zh) 2020-08-28 2022-07-16 美商建南德克公司 宿主細胞蛋白質之ＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓ９多重剔除
KR20230061458A (ko) 2020-09-04 2023-05-08 에프. 호프만-라 로슈 아게 Vegf-a 및 ang2에 결합하는 항체 및 사용 방법
US11795225B2 (en) 2020-09-11 2023-10-24 Medimmune Limited Therapeutic binding molecules
PE20231575A1 (es) 2020-09-14 2023-10-04 Ichnos Sciences SA Anticuerpos que se unen a il1rap y usos de estos
CA3191328A1 (en) 2020-09-21 2022-03-24 Genentech, Inc. Purification of multispecific antibodies
CN115925995A (zh) 2020-09-30 2023-04-07 北京质肽生物医药科技有限公司 多肽缀合物和使用方法
CA3193952A1 (en) 2020-10-05 2022-04-14 Bernard Martin Fine Dosing for treatment with anti-fcrh5/anti-cd3 bispecific antibodies
EP4229082A1 (en) 2020-10-16 2023-08-23 AC Immune SA Antibodies binding to alpha-synuclein for therapy and diagnosis
AR123855A1 (es) 2020-10-20 2023-01-18 Genentech Inc Anticuerpos anti-mertk conjugados con peg y métodos de uso
WO2022084210A1 (en) 2020-10-20 2022-04-28 F. Hoffmann-La Roche Ag Combination therapy of pd-1 axis binding antagonists and lrrk2 inhitibors
WO2022084400A1 (en) 2020-10-20 2022-04-28 Kantonsspital St. Gallen Antibodies or antigen-binding fragments specifically binding to gremlin-1 and uses thereof
US20230390426A1 (en) 2020-10-22 2023-12-07 Nihon Medi-Physics Co., Ltd. Method for producing radioactive zirconium complex
US20220153842A1 (en) 2020-11-04 2022-05-19 Genentech, Inc. Dosing for treatment with anti-cd20/anti-cd3 bispecific antibodies and anti-cd79b antibody drug conjugates
WO2022098638A2 (en) 2020-11-04 2022-05-12 Genentech, Inc. Dosing for treatment with anti-cd20/anti-cd3 bispecific antibodies
TW202225191A (zh) 2020-11-04 2022-07-01 美商建南德克公司 抗ｃｄ２０／抗ｃｄ３雙特異性抗體之皮下給藥
EP4244254A1 (en) 2020-11-16 2023-09-20 F. Hoffmann-La Roche AG Combination therapy with fap-targeted cd40 agonists
CN117136076A (zh) 2020-11-24 2023-11-28 诺华股份有限公司 Mcl-1抑制剂抗体药物缀合物和使用方法
CN116744978A (zh) 2020-12-11 2023-09-12 博尔特生物治疗药物有限公司 抗her2免疫缀合物及其用途
US20220195066A1 (en) 2020-12-11 2022-06-23 Bolt Biotherapeutics, Inc. Anti-cea immunoconjugates, and uses thereof
EP4259211A1 (en) 2020-12-11 2023-10-18 Bolt Biotherapeutics, Inc. Anti-her2 immunoconjugates, and uses thereof
CN116635084A (zh) 2020-12-11 2023-08-22 博尔特生物治疗药物有限公司 抗cea免疫缀合物和其用途
WO2022125908A1 (en) 2020-12-11 2022-06-16 Bolt Biotherapeutics, Inc. Anti-pd-l1 immunoconjugates, and uses thereof
EP4263609A1 (en) 2020-12-17 2023-10-25 F. Hoffmann-La Roche AG Anti-hla-g antibodies and use thereof
CA3203257A1 (en) 2020-12-23 2022-06-30 Li Li Anti-b7-h3 antibody and uses thereof
WO2022140797A1 (en) 2020-12-23 2022-06-30 Immunowake Inc. Immunocytokines and uses thereof
MX2023007846A (es) 2021-01-06 2023-07-07 Hoffmann La Roche Tratamiento conjunto que usa un anticuerpo biespecifico contra pd1-lag3 y un anticuerpo biespecifico de linfocitos t cd20.
AR124681A1 (es) 2021-01-20 2023-04-26 Abbvie Inc Conjugados anticuerpo-fármaco anti-egfr
WO2022162203A1 (en) 2021-01-28 2022-08-04 Vaccinvent Gmbh Method and means for modulating b-cell mediated immune responses
WO2022162201A1 (en) 2021-01-28 2022-08-04 Vaccinvent Gmbh Method and means for modulating b-cell mediated immune responses
CN117120084A (zh) 2021-01-28 2023-11-24 维肯芬特有限责任公司 用于调节b细胞介导的免疫应答的方法和手段
EP4288458A1 (en) 2021-02-03 2023-12-13 Genentech, Inc. Multispecific binding protein degrader platform and methods of use
WO2022175595A1 (en) 2021-02-16 2022-08-25 Glykos Finland Oy Linker-payloads and conjugates thereof
GB202102396D0 (en) 2021-02-19 2021-04-07 Adc Therapeutics Sa Molecular adjuvant
EP4046996A1 (en) 2021-02-19 2022-08-24 Universität Bielefeld Cryptophycin compounds and conjugates thereof
WO2022187591A1 (en) 2021-03-05 2022-09-09 Go Therapeutics, Inc. Anti-glyco-cd44 antibodies and their uses
TW202302646A (zh) 2021-03-05 2023-01-16 美商當康生物科技有限公司 抗vista構築體及其用途
IL305736A (en) 2021-03-09 2023-11-01 Xencor Inc Heterodimeric antibodies that bind CD3 and CLDN6
WO2022192898A2 (en) 2021-03-10 2022-09-15 Immunowake Inc. Immunomodulatory molecules and uses thereof
EP4305065A1 (en) 2021-03-10 2024-01-17 Xencor, Inc. Heterodimeric antibodies that bind cd3 and gpc3
WO2022192647A1 (en) 2021-03-12 2022-09-15 Genentech, Inc. Anti-klk7 antibodies, anti-klk5 antibodies, multispecific anti-klk5/klk7 antibodies, and methods of use
CA3213599A1 (en) 2021-03-15 2022-09-22 Genentech, Inc. Compositions and methods of treating lupus nephritis
WO2022197877A1 (en) 2021-03-19 2022-09-22 Genentech, Inc. Methods and compositions for time delayed bio-orthogonal release of cytotoxic agents
US20240150466A1 (en) 2021-03-25 2024-05-09 Dynamicure Biotechnology Llc Anti-igfbp7 constructs and uses thereof
TW202300175A (zh) 2021-03-26 2023-01-01 美商博特生物治療公司 ２－胺基－４－羧醯胺－苯并氮呯免疫結合物及其用途
EP4313162A1 (en) 2021-03-26 2024-02-07 Bolt Biotherapeutics, Inc. 2-amino-4-carboxamide-benzazepine immunoconjugates, and uses thereof
BR112023020832A2 (pt) 2021-04-08 2023-12-19 Marengo Therapeutics Inc Moléculas multifuncionais ligadas a tcr e seus usos
US20240209080A1 (en) 2021-04-10 2024-06-27 Profoundbio Us Co. Folr1 binding agents, conjugates thereof and methods of using the same
GB202105187D0 (en) 2021-04-12 2021-05-26 Medimmune Ltd Pyrrolobenzodiazepine conjugates
AR125344A1 (es) 2021-04-15 2023-07-05 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Anticuerpo anti-c1s
CA3215965A1 (en) 2021-04-19 2022-10-27 Amy Shen Modified mammalian cells
CN117203238A (zh) 2021-04-23 2023-12-08 普方生物制药美国公司 Cd70结合剂、其偶联物及其使用方法
CN117321086A (zh) 2021-04-26 2023-12-29 轩竹生物科技股份有限公司 一种双特异抗体偶联物
WO2022241446A1 (en) 2021-05-12 2022-11-17 Genentech, Inc. Methods of using anti-cd79b immunoconjugates to treat diffuse large b-cell lymphoma
TW202306993A (zh) 2021-05-14 2023-02-16 美商建南德克公司 Ｔｒｅｍ２之促效劑
WO2022243261A1 (en) 2021-05-19 2022-11-24 F. Hoffmann-La Roche Ag Agonistic cd40 antigen binding molecules targeting cea
JP2024521107A (ja) 2021-05-21 2024-05-28 ジェネンテック， インコーポレイテッド 目的の組換え産物を産生するための修飾細胞
EP4346882A1 (en) 2021-05-26 2024-04-10 Oxford BioTherapeutics Ltd Pharmaceutical combination comprising an anti-cd205 antibody and an immune checkpoint inhibitor
WO2022255778A1 (ko) * 2021-06-01 2022-12-08 주식회사 에즈큐리스 Ｉｌ-33 단백질 저해용 화합물의 스크리닝 방법 및 상기 화합물을 포함하는 알러지성 질환 치료용 약학조성물
AR126009A1 (es) 2021-06-02 2023-08-30 Hoffmann La Roche Moléculas agonistas de unión al antígeno cd28 que se dirigen a epcam
WO2022255440A1 (en) 2021-06-04 2022-12-08 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Anti-ddr2 antibodies and uses thereof
WO2022258600A1 (en) 2021-06-09 2022-12-15 F. Hoffmann-La Roche Ag Combination of a particular braf inhibitor (paradox breaker) and a pd-1 axis binding antagonist for use in the treatment of cancer
EP4355785A1 (en) 2021-06-17 2024-04-24 Amberstone Biosciences, Inc. Anti-cd3 constructs and uses thereof
WO2022271987A1 (en) 2021-06-23 2022-12-29 TeneoFour, Inc. Anti-cd38 antibodies and epitopes of same
CN117616123A (zh) 2021-06-25 2024-02-27 中外制药株式会社 抗ctla-4抗体
CA3220353A1 (en) 2021-06-25 2022-12-29 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Use of anti-ctla-4 antibody
WO2023275025A1 (en) 2021-06-28 2023-01-05 Byondis B.V. Conjugates comprising phosphoantigens and their use in therapy
WO2023283611A1 (en) 2021-07-08 2023-01-12 Staidson Biopharma Inc. Antibodies specifically recognizing tnfr2 and uses thereof
EP4370545A1 (en) 2021-07-12 2024-05-22 Genentech, Inc. Structures for reducing antibody-lipase binding
JP2024524613A (ja) 2021-07-14 2024-07-05 ライシア セラピューティクス， インコーポレイテッド Ｍ６ｐｒ細胞表面受容体結合化合物及びコンジュゲート
TW202309097A (zh) 2021-07-14 2023-03-01 美商建南德克公司 抗ｃ－ｃ模體趨化因子受體８（ｃｃｒ８）抗體及其使用方法
CA3226269A1 (en) 2021-07-14 2023-01-19 Lycia Therapeutics, Inc. Asgpr cell surface receptor binding compounds and conjugates
CN115812082A (zh) 2021-07-14 2023-03-17 舒泰神（北京）生物制药股份有限公司 特异性识别cd40的抗体及其应用
EP4373576A1 (en) 2021-07-22 2024-05-29 Genentech, Inc. Brain targeting compositions and methods of use thereof
EP4373859A1 (en) 2021-07-22 2024-05-29 F. Hoffmann-La Roche AG Heterodimeric fc domain antibodies
EP4382538A1 (en) 2021-08-02 2024-06-12 Innovent Biologics (Suzhou) Co., Ltd. Anti-cd79b×cd3 bispecific antibody and use thereof
WO2023012147A1 (en) 2021-08-03 2023-02-09 F. Hoffmann-La Roche Ag Bispecific antibodies and methods of use
CA3228178A1 (en) 2021-08-05 2023-02-09 Go Therapeutics, Inc. Anti-glyco-muc4 antibodies and their uses
TW202337499A (zh) 2021-08-07 2023-10-01 美商建南德克公司 使用抗ｃｄ７９ｂ免疫結合物治療瀰漫性大ｂ細胞淋巴瘤之方法
WO2023019239A1 (en) 2021-08-13 2023-02-16 Genentech, Inc. Dosing for anti-tryptase antibodies
CN117858905A (zh) 2021-08-19 2024-04-09 豪夫迈·罗氏有限公司 多价抗变体fc区抗体及使用方法
KR20240049296A (ko) 2021-08-27 2024-04-16 제넨테크, 인크. 타우 병증을 치료하는 방법
TW202325727A (zh) 2021-08-30 2023-07-01 美商建南德克公司 抗聚泛素多特異性抗體
AU2022339819A1 (en) 2021-09-03 2024-04-11 Go Therapeutics, Inc. Anti-glyco-lamp1 antibodies and their uses
TW202328188A (zh) 2021-09-03 2023-07-16 美商Ｇｏ治療公司 抗醣化-cmet抗體及其用途
WO2023056403A1 (en) 2021-09-30 2023-04-06 Genentech, Inc. Methods for treatment of hematologic cancers using anti-tigit antibodies, anti-cd38 antibodies, and pd-1 axis binding antagonists
CN115975030B (zh) * 2021-09-30 2023-09-26 杭州邦顺制药有限公司 抗cd39抗体-药物偶联物及其用途
JPWO2023058723A1 (tr) 2021-10-08 2023-04-13
WO2023076599A1 (en) 2021-10-29 2023-05-04 Bolt Biotherapeutics, Inc. Tlr agonist immunoconjugates with cysteine-mutant antibodies, and uses thereof
AU2022379952A1 (en) 2021-11-05 2024-05-16 American Diagnostics & Therapy, Llc (Adxrx) Monoclonal antibodies against carcinoembryonic antigens, and their uses
EP4180061A1 (en) 2021-11-10 2023-05-17 Nerviano Medical Sciences S.r.l. Anthracycline derivative linker reagents, antibody-drug conjugates and methods
WO2023086807A1 (en) 2021-11-10 2023-05-19 Genentech, Inc. Anti-interleukin-33 antibodies and uses thereof
KR20240099430A (ko) 2021-11-10 2024-06-28 아스트라제네카 아베 항체 분자 및 접합체
WO2023091887A1 (en) 2021-11-16 2023-05-25 Genentech, Inc. Methods and compositions for treating systemic lupus erythematosus (sle) with mosunetuzumab
WO2023088959A1 (en) 2021-11-16 2023-05-25 Ac Immune Sa Novel molecules for therapy and diagnosis
WO2023089314A1 (en) 2021-11-18 2023-05-25 Oxford Biotherapeutics Limited Pharmaceutical combinations
US20230201366A1 (en) 2021-11-19 2023-06-29 Adc Therapeutics Sa Anti-psma conjugates
CA3238167A1 (en) 2021-11-19 2023-05-25 Maria Leia Smith Gpc3 binding agents, conjugates thereof and methods of using the same
US20230285580A1 (en) 2021-11-19 2023-09-14 Adc Therapeutics Sa Anti-il-13ralpha2 conjugates
AR127887A1 (es) 2021-12-10 2024-03-06 Hoffmann La Roche Anticuerpos que se unen a cd3 y plap
CA3240585A1 (en) 2021-12-17 2023-06-22 Wenfeng Xu Anti-ox40 antibodies, multispecific antibodies and methods of use
AU2022411573A1 (en) 2021-12-17 2024-06-27 Shanghai Henlius Biologics Co., Ltd. Anti-ox40 antibodies and methods of use
AR128031A1 (es) 2021-12-20 2024-03-20 Hoffmann La Roche Anticuerpos agonistas anti-ltbr y anticuerpos biespecíficos que los comprenden
WO2023131219A1 (en) 2022-01-06 2023-07-13 Virtuoso Binco, Inc. Conjugates, compositions and methods of use
US20230322958A1 (en) 2022-01-19 2023-10-12 Genentech, Inc. Anti-Notch2 Antibodies and Conjugates and Methods of Use
WO2023156549A1 (en) 2022-02-16 2023-08-24 Ac Immune Sa Humanized anti-tdp-43 binding molecules and uses thereof
TW202348252A (zh) 2022-02-16 2023-12-16 英商梅迪繆思有限公司 用治療性結合分子治療癌症的組合療法
EP4230222A1 (en) 2022-02-17 2023-08-23 Oxsonics Limited Combination therapy with an anti-axl antibody-pbd conjugate and nanocups
TW202342520A (zh) 2022-02-18 2023-11-01 美商樂天醫藥生技股份有限公司 抗計畫性死亡配體１（ｐｄ—ｌ１）抗體分子、編碼多核苷酸及使用方法
WO2023160982A1 (en) 2022-02-28 2023-08-31 Adc Therapeutics Sa Dosage regimen
WO2023169896A1 (en) 2022-03-09 2023-09-14 Astrazeneca Ab BINDING MOLECULES AGAINST FRα
WO2023170216A1 (en) 2022-03-11 2023-09-14 Astrazeneca Ab A SCORING METHOD FOR AN ANTI-FRα ANTIBODY-DRUG CONJUGATE THERAPY
WO2023186756A1 (en) 2022-03-28 2023-10-05 F. Hoffmann-La Roche Ag Interferon gamma variants and antigen binding molecules comprising these
AU2023241735A1 (en) 2022-04-01 2024-07-11 Genentech, Inc. Hydroxypropyl methyl cellulose derivatives to stabilize polypeptides
WO2023191816A1 (en) 2022-04-01 2023-10-05 Genentech, Inc. Dosing for treatment with anti-fcrh5/anti-cd3 bispecific antibodies
US20230355792A1 (en) 2022-04-07 2023-11-09 Heidelberg Pharma Research Gmbh Methods of improving the therapeutic index
WO2023194565A1 (en) 2022-04-08 2023-10-12 Ac Immune Sa Anti-tdp-43 binding molecules
TW202408562A (zh) 2022-04-13 2024-03-01 美商建南德克公司 治療性蛋白質之醫藥組成物及使用方法
WO2023203177A1 (en) 2022-04-20 2023-10-26 Kantonsspital St. Gallen Antibodies or antigen-binding fragments pan-specifically binding to gremlin-1 and gremlin-2 and uses thereof
TW202406934A (zh) 2022-05-03 2024-02-16 美商建南德克公司 抗Ｌｙ６Ｅ抗體、免疫結合物及其用途
WO2023217933A1 (en) 2022-05-11 2023-11-16 F. Hoffmann-La Roche Ag Antibody that binds to vegf-a and il6 and methods of use
WO2023219613A1 (en) 2022-05-11 2023-11-16 Genentech, Inc. Dosing for treatment with anti-fcrh5/anti-cd3 bispecific antibodies
WO2023222580A1 (en) 2022-05-16 2023-11-23 Byondis B.V. Novel masked antibodies
TW202404645A (zh) 2022-05-20 2024-02-01 瑞士商諾華公司 Met bcl-xl抑制劑抗體-藥物結合物及其使用方法
WO2023225320A1 (en) 2022-05-20 2023-11-23 Novartis Ag Epha2 bcl-xl inhibitor antibody-drug conjugates and methods of use thereof
WO2023240058A2 (en) 2022-06-07 2023-12-14 Genentech, Inc. Prognostic and therapeutic methods for cancer
WO2023237706A2 (en) 2022-06-08 2023-12-14 Institute For Research In Biomedicine (Irb) Cross-specific antibodies, uses and methods for discovery thereof
WO2024002938A1 (en) 2022-06-27 2024-01-04 Astrazeneca Ab Combinations involving epidermal growth factor receptor tyrosine kinase inhibitors for the treatment of cancer
WO2024015897A1 (en) 2022-07-13 2024-01-18 Genentech, Inc. Dosing for treatment with anti-fcrh5/anti-cd3 bispecific antibodies
WO2024020432A1 (en) 2022-07-19 2024-01-25 Genentech, Inc. Dosing for treatment with anti-fcrh5/anti-cd3 bispecific antibodies
WO2024020407A1 (en) 2022-07-19 2024-01-25 Staidson Biopharma Inc. Antibodies specifically recognizing b- and t-lymphocyte attenuator (btla) and uses thereof
WO2024020564A1 (en) 2022-07-22 2024-01-25 Genentech, Inc. Anti-steap1 antigen-binding molecules and uses thereof
WO2024020429A1 (en) 2022-07-22 2024-01-25 Lyell Immunopharma, Inc. Immune cell therapy
WO2024037633A2 (en) 2022-08-19 2024-02-22 Evive Biotechnology (Shanghai) Ltd Formulations comprising g-csf and uses thereof
WO2024044779A2 (en) 2022-08-26 2024-02-29 Juno Therapeutics, Inc. Antibodies and chimeric antigen receptors specific for delta-like ligand 3 (dll3)
WO2024049949A1 (en) 2022-09-01 2024-03-07 Genentech, Inc. Therapeutic and diagnostic methods for bladder cancer
WO2024054929A1 (en) 2022-09-07 2024-03-14 Dynamicure Biotechnology Llc Anti-vista constructs and uses thereof
WO2024052684A1 (en) 2022-09-09 2024-03-14 MyricX Pharma Limited Antibody drug conjugate comprising nmt inhibitor and its use
WO2024077239A1 (en) 2022-10-07 2024-04-11 Genentech, Inc. Methods of treating cancer with anti-c-c motif chemokine receptor 8 (ccr8) antibodies
WO2024091991A1 (en) 2022-10-25 2024-05-02 Genentech, Inc. Therapeutic and diagnostic methods for multiple myeloma
WO2024094688A1 (en) 2022-11-01 2024-05-10 Heidelberg Pharma Research Gmbh Anti-gucy2c antibody and uses thereof
WO2024102734A1 (en) 2022-11-08 2024-05-16 Genentech, Inc. Compositions and methods of treating childhood onset idiopathic nephrotic syndrome
WO2024102948A1 (en) 2022-11-11 2024-05-16 Celgene Corporation Fc receptor-homolog 5 (fcrh5) specific binding molecules and bispecific t-cell engaging antibodies including same and related methods
WO2024100170A1 (en) 2022-11-11 2024-05-16 F. Hoffmann-La Roche Ag Antibodies binding to hla-a*02/foxp3
US20240190978A1 (en) 2022-11-15 2024-06-13 CSBioAsset LLC Compositions and methods for immunomodulatory bifunctional fusion molecules
WO2024108053A1 (en) 2022-11-17 2024-05-23 Sanofi Ceacam5 antibody-drug conjugates and methods of use thereof
WO2024108178A1 (en) 2022-11-18 2024-05-23 Genentech, Inc. Signal amplification and multiplexing using mass tags for ia-lc-ms/ms based assays
WO2024121632A1 (en) 2022-12-09 2024-06-13 Crispr Therapeutics Ag Use of anti-cd117 antibody drug conjugate (adc)
WO2024129756A1 (en) 2022-12-13 2024-06-20 Seagen Inc. Site-specific engineered cysteine antibody drug conjugates
WO2024127332A1 (en) 2022-12-14 2024-06-20 Pheon Therapeutics Ltd Cytotoxic compounds
WO2024137619A1 (en) 2022-12-20 2024-06-27 Bolt Biotherapeutics, Inc. Anti-claudin, bis-benzimid azole sting agonist immunoconjugates, and uses thereof
WO2024133374A1 (en) 2022-12-22 2024-06-27 Byondis B.V. Novel linker drugs comprising phosphoantigens, novel conjugates and their use in therapy
WO2024138128A2 (en) 2022-12-23 2024-06-27 Genentech, Inc. Cereblon degrader conjugates, and uses thereof

Family Cites Families (350)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3773919A (en) 1969-10-23 1973-11-20 Du Pont Polylactide-drug mixtures
CU22545A1 (es) 1994-11-18 1999-03-31 Centro Inmunologia Molecular Obtención de un anticuerpo quimérico y humanizado contra el receptor del factor de crecimiento epidérmico para uso diagnóstico y terapéutico
US4307016A (en) 1978-03-24 1981-12-22 Takeda Chemical Industries, Ltd. Demethyl maytansinoids
US4275149A (en) 1978-11-24 1981-06-23 Syva Company Macromolecular environment control in specific receptor assays
US4318980A (en) 1978-04-10 1982-03-09 Miles Laboratories, Inc. Heterogenous specific binding assay employing a cycling reactant as label
US4256746A (en) 1978-11-14 1981-03-17 Takeda Chemical Industries Dechloromaytansinoids, their pharmaceutical compositions and method of use
JPS55102583A (en) 1979-01-31 1980-08-05 Takeda Chem Ind Ltd 20-acyloxy-20-demethylmaytansinoid compound
JPS55162791A (en) 1979-06-05 1980-12-18 Takeda Chem Ind Ltd Antibiotic c-15003pnd and its preparation
JPS5645483A (en) 1979-09-19 1981-04-25 Takeda Chem Ind Ltd C-15003phm and its preparation
JPS5645485A (en) 1979-09-21 1981-04-25 Takeda Chem Ind Ltd Production of c-15003pnd
EP0028683A1 (en) 1979-09-21 1981-05-20 Takeda Chemical Industries, Ltd. Antibiotic C-15003 PHO and production thereof
US4458066A (en) 1980-02-29 1984-07-03 University Patents, Inc. Process for preparing polynucleotides
WO1982001188A1 (en) 1980-10-08 1982-04-15 Takeda Chemical Industries Ltd 4,5-deoxymaytansinoide compounds and process for preparing same
US4450254A (en) 1980-11-03 1984-05-22 Standard Oil Company Impact improvement of high nitrile resins
US4315929A (en) 1981-01-27 1982-02-16 The United States Of America As Represented By The Secretary Of Agriculture Method of controlling the European corn borer with trewiasine
US4313946A (en) 1981-01-27 1982-02-02 The United States Of America As Represented By The Secretary Of Agriculture Chemotherapeutically active maytansinoids from Trewia nudiflora
US4415732A (en) 1981-03-27 1983-11-15 University Patents, Inc. Phosphoramidite compounds and processes
JPS57192389A (en) 1981-05-20 1982-11-26 Takeda Chem Ind Ltd Novel maytansinoid
US4816567A (en) 1983-04-08 1989-03-28 Genentech, Inc. Recombinant immunoglobin preparations
US4943533A (en) 1984-03-01 1990-07-24 The Regents Of The University Of California Hybrid cell lines that produce monoclonal antibodies to epidermal growth factor receptor
US5807715A (en) 1984-08-27 1998-09-15 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Methods and transformed mammalian lymphocyte cells for producing functional antigen-binding protein including chimeric immunoglobulin
US5342606A (en) 1984-10-18 1994-08-30 Board Of Regents, The University Of Texas System Polyazamacrocyclic compounds for complexation of metal ions
US5316757A (en) 1984-10-18 1994-05-31 Board Of Regents, The University Of Texas System Synthesis of polyazamacrocycles with more than one type of side-chain chelating groups
US4970198A (en) 1985-10-17 1990-11-13 American Cyanamid Company Antitumor antibiotics (LL-E33288 complex)
US4737456A (en) 1985-05-09 1988-04-12 Syntex (U.S.A.) Inc. Reducing interference in ligand-receptor binding assays
US5583024A (en) 1985-12-02 1996-12-10 The Regents Of The University Of California Recombinant expression of Coleoptera luciferase
US5091178A (en) 1986-02-21 1992-02-25 Oncogen Tumor therapy with biologically active anti-tumor antibodies
IL85035A0 (en) 1987-01-08 1988-06-30 Int Genetic Eng Polynucleotide molecule,a chimeric antibody with specificity for human b cell surface antigen,a process for the preparation and methods utilizing the same
US5079233A (en) 1987-01-30 1992-01-07 American Cyanamid Company N-acyl derivatives of the LL-E33288 antitumor antibiotics, composition and methods for using the same
US4975278A (en) 1988-02-26 1990-12-04 Bristol-Myers Company Antibody-enzyme conjugates in combination with prodrugs for the delivery of cytotoxic agents to tumor cells
US5677425A (en) * 1987-09-04 1997-10-14 Celltech Therapeutics Limited Recombinant antibody
GB8720833D0 (en) * 1987-09-04 1987-10-14 Celltech Ltd Recombinant dna product
US5606040A (en) 1987-10-30 1997-02-25 American Cyanamid Company Antitumor and antibacterial substituted disulfide derivatives prepared from compounds possessing a methyl-trithio group
US5770701A (en) 1987-10-30 1998-06-23 American Cyanamid Company Process for preparing targeted forms of methyltrithio antitumor agents
JP3040121B2 (ja) 1988-01-12 2000-05-08 ジェネンテク，インコーポレイテッド 増殖因子レセプターの機能を阻害することにより腫瘍細胞を処置する方法
US5262530A (en) 1988-12-21 1993-11-16 Applied Biosystems, Inc. Automated system for polynucleotide synthesis and purification
US5047524A (en) 1988-12-21 1991-09-10 Applied Biosystems, Inc. Automated system for polynucleotide synthesis and purification
US5530101A (en) 1988-12-28 1996-06-25 Protein Design Labs, Inc. Humanized immunoglobulins
DE3920358A1 (de) 1989-06-22 1991-01-17 Behringwerke Ag Bispezifische und oligospezifische, mono- und oligovalente antikoerperkonstrukte, ihre herstellung und verwendung
CA2023779A1 (en) 1989-08-23 1991-02-24 Margaret D. Moore Compositions and methods for detection and treatment of epstein-barr virus infection and immune disorders
WO1991003489A1 (en) 1989-09-08 1991-03-21 The Johns Hopkins University Structural alterations of the egf receptor gene in human gliomas
US5208020A (en) 1989-10-25 1993-05-04 Immunogen Inc. Cytotoxic agents comprising maytansinoids and their therapeutic use
US5183884A (en) 1989-12-01 1993-02-02 United States Of America Dna segment encoding a gene for a receptor related to the epidermal growth factor receptor
JPH053790A (ja) 1990-04-19 1993-01-14 Fujisawa Pharmaceut Co Ltd デヒドロペプチダーゼ−ｉ
US5256643A (en) 1990-05-29 1993-10-26 The Government Of The United States Human cripto protein
WO1992007574A1 (en) 1990-10-25 1992-05-14 Tanox Biosystems, Inc. Glycoproteins associated with membrane-bound immunoglobulins as antibody targets on b cells
US5571894A (en) 1991-02-05 1996-11-05 Ciba-Geigy Corporation Recombinant antibodies specific for a growth factor receptor
WO1992017497A1 (en) 1991-03-29 1992-10-15 Genentech, Inc. Human pf4a receptors and their use
US5440021A (en) 1991-03-29 1995-08-08 Chuntharapai; Anan Antibodies to human IL-8 type B receptor
CA2103059C (en) 1991-06-14 2005-03-22 Paul J. Carter Method for making humanized antibodies
JP3050424B2 (ja) 1991-07-12 2000-06-12 塩野義製薬株式会社 ヒトエンドセリンリセプター
US5264557A (en) 1991-08-23 1993-11-23 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services Polypeptide of a human cripto-related gene, CR-3
US5587458A (en) 1991-10-07 1996-12-24 Aronex Pharmaceuticals, Inc. Anti-erbB-2 antibodies, combinations thereof, and therapeutic and diagnostic uses thereof
US6011146A (en) 1991-11-15 2000-01-04 Institut Pasteur Altered major histocompatibility complex (MHC) determinant and methods of using the determinant
US6153408A (en) 1991-11-15 2000-11-28 Institut Pasteur And Institut National De La Sante Et De La Recherche Medicale Altered major histocompatibility complex (MHC) determinant and methods of using the determinant
DK1136556T3 (da) 1991-11-25 2005-10-03 Enzon Inc Fremgangsmåde til fremstilling af multivalente antigen-bindende proteiner
US5480990A (en) 1991-12-10 1996-01-02 The Dow Chemical Company Bicyclopolyazamacrocyclocarboxylic acid complexes for use as contrast agents
US5739294A (en) 1991-12-10 1998-04-14 The Dow Chemical Company Bicyclopol yazamacrocyclophosphonic acid complexes for use as contrast agents
US5428139A (en) 1991-12-10 1995-06-27 The Dow Chemical Company Bicyclopolyazamacrocyclophosphonic acid complexes for use as radiopharmaceuticals
CA2129663C (en) 1992-02-06 2005-07-05 James S. Huston Biosynthetic binding protein for cancer marker
WO1993021319A1 (en) 1992-04-08 1993-10-28 Cetus Oncology Corporation HUMANIZED C-erbB-2 SPECIFIC ANTIBODIES
ZA932522B (en) 1992-04-10 1993-12-20 Res Dev Foundation Immunotoxins directed against c-erbB-2(HER/neu) related surface antigens
WO1994002893A1 (en) 1992-07-17 1994-02-03 Kabushiki Kaisha Komatsu Seisakusho Intelligent graphic operation panel and highlighting control method
WO1994006474A1 (en) * 1992-09-16 1994-03-31 Galagen Inc. ANTIBODY TREATMENT OF $i(HELICOBACTER PYLORI)
IL107366A (en) 1992-10-23 2003-03-12 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Genes coding for megakaryocyte potentiator
NZ258392A (en) 1992-11-13 1997-09-22 Idec Pharma Corp Chimeric and radiolabelled antibodies to the b lymphocyte cellsurface antigen bp35 (cd-20) and their use in the treatment of b cell lymphona
CA2103323A1 (en) 1992-11-24 1994-05-25 Gregory D. Plowman Her4 human receptor tyrosine kinase
US5635483A (en) 1992-12-03 1997-06-03 Arizona Board Of Regents Acting On Behalf Of Arizona State University Tumor inhibiting tetrapeptide bearing modified phenethyl amides
US5644033A (en) 1992-12-22 1997-07-01 Health Research, Inc. Monoclonal antibodies that define a unique antigen of human B cell antigen receptor complex and methods of using same for diagnosis and treatment
US5780588A (en) 1993-01-26 1998-07-14 Arizona Board Of Regents Elucidation and synthesis of selected pentapeptides
US5801005A (en) 1993-03-17 1998-09-01 University Of Washington Immune reactivity to HER-2/neu protein for diagnosis of malignancies in which the HER-2/neu oncogene is associated
US5869445A (en) 1993-03-17 1999-02-09 University Of Washington Methods for eliciting or enhancing reactivity to HER-2/neu protein
ATE186219T1 (de) 1993-03-24 1999-11-15 Berlex Biosciences Kombination von antihormonale und bindende moleküle zur krebsbehandlung
US5462725A (en) 1993-05-06 1995-10-31 The Dow Chemical Company 2-pyridylmethylenepolyazamacrocyclophosphonic acids, complexes and derivatives thereof, for use as contrast agents
US5385893A (en) 1993-05-06 1995-01-31 The Dow Chemical Company Tricyclopolyazamacrocyclophosphonic acids, complexes and derivatives thereof, for use as contrast agents
US6214345B1 (en) 1993-05-14 2001-04-10 Bristol-Myers Squibb Co. Lysosomal enzyme-cleavable antitumor drug conjugates
US5773223A (en) 1993-09-02 1998-06-30 Chiron Corporation Endothelin B1, (ETB1) receptor polypeptide and its encoding nucleic acid methods, and uses thereof
EP0731106B1 (en) 1993-10-01 2004-11-17 Teikoku Hormone Mfg. Co., Ltd. Dolastatin derivatives
ATE207366T1 (de) 1993-12-24 2001-11-15 Merck Patent Gmbh Immunokonjugate
HU221001B1 (hu) 1994-03-17 2002-07-29 Merck Patent Gmbh. Egyláncú anti-EGFR Fv-k és anti-EGFR ellenanyagok
US5773001A (en) 1994-06-03 1998-06-30 American Cyanamid Company Conjugates of methyltrithio antitumor agents and intermediates for their synthesis
MX9700535A (es) 1994-07-21 1997-04-30 Akzo Nobel Nv Formulaciones de peroxido de cetona ciclico.
US5804396A (en) 1994-10-12 1998-09-08 Sugen, Inc. Assay for agents active in proliferative disorders
US5750370A (en) 1995-06-06 1998-05-12 Human Genome Sciences, Inc. Nucleic acid encoding human endothlein-bombesin receptor and method of producing the receptor
US7166470B2 (en) 1994-10-18 2007-01-23 Symyx Technologies, Inc. Formation of combinatorial arrays of materials using solution-based methodologies
US5663149A (en) 1994-12-13 1997-09-02 Arizona Board Of Regents Acting On Behalf Of Arizona State University Human cancer inhibitory pentapeptide heterocyclic and halophenyl amides
WO1996030347A1 (en) 1995-03-30 1996-10-03 Pfizer Inc. Quinazoline derivatives
JPH08336393A (ja) 1995-04-13 1996-12-24 Mitsubishi Chem Corp 光学活性なγ−置換−β−ヒドロキシ酪酸エステルの製造法
GB9508565D0 (en) 1995-04-27 1995-06-14 Zeneca Ltd Quiazoline derivative
GB9508538D0 (en) 1995-04-27 1995-06-14 Zeneca Ltd Quinazoline derivatives
EP0831880A4 (en) 1995-06-07 2004-12-01 Imclone Systems Inc ANTIBODIES AND FRAGMENTS OF ANTIBODIES INHIBITING TUMOR GROWTH
US5714586A (en) 1995-06-07 1998-02-03 American Cyanamid Company Methods for the preparation of monomeric calicheamicin derivative/carrier conjugates
US5712374A (en) 1995-06-07 1998-01-27 American Cyanamid Company Method for the preparation of substantiallly monomeric calicheamicin derivative/carrier conjugates
US5707829A (en) 1995-08-11 1998-01-13 Genetics Institute, Inc. DNA sequences and secreted proteins encoded thereby
PT1516628E (pt) 1995-07-27 2013-09-24 Genentech Inc Formulação de proteína liofilizada isotónica estável
US20020193567A1 (en) 1995-08-11 2002-12-19 Genetics Institute, Inc. Secreted proteins and polynucleotides encoding them
WO1997010846A1 (en) * 1995-09-18 1997-03-27 Intracel Corporation Neutralizing monoclonal antibodies to respiratory syncytial virus
US5834456A (en) 1996-02-23 1998-11-10 The Dow Chemical Company Polyazamacrocyclofluoromonoalkylphosphonic acids, and their complexes, for use as contrast agents
JP3646191B2 (ja) 1996-03-19 2005-05-11 大塚製薬株式会社 ヒト遺伝子
AU727082B2 (en) 1996-03-27 2000-11-30 Genentech Inc. ErbB3 antibodies
EP0892789B2 (en) 1996-04-12 2009-11-18 Warner-Lambert Company LLC Irreversible inhibitors of tyrosine kinases
CA2254843A1 (en) 1996-05-17 1997-11-27 Schering Corporation Human b-cell antigens, related reagents
US5945511A (en) 1997-02-20 1999-08-31 Zymogenetics, Inc. Class II cytokine receptor
US7033827B2 (en) 1997-02-25 2006-04-25 Corixa Corporation Prostate-specific polynucleotide compositions
US20030185830A1 (en) 1997-02-25 2003-10-02 Corixa Corporation Compositions and methods for the therapy and diagnosis of prostate cancer
US6261791B1 (en) 1997-03-10 2001-07-17 The Regents Of The University Of California Method for diagnosing cancer using specific PSCA antibodies
US6541212B2 (en) 1997-03-10 2003-04-01 The Regents Of The University Of California Methods for detecting prostate stem cell antigen protein
EP2343085B1 (en) 1997-03-10 2014-12-10 The Regents of The University of California Antibody against prostate stem cell antigen (PSCA)
UA73073C2 (uk) 1997-04-03 2005-06-15 Уайт Холдінгз Корпорейшн Заміщені 3-ціанохіноліни, спосіб їх одержання та фармацевтична композиція
US5994071A (en) 1997-04-04 1999-11-30 Albany Medical College Assessment of prostate cancer
US6555339B1 (en) 1997-04-14 2003-04-29 Arena Pharmaceuticals, Inc. Non-endogenous, constitutively activated human protein-coupled receptors
US6319688B1 (en) 1997-04-28 2001-11-20 Smithkline Beecham Corporation Polynucleotide encoding human sodium dependent phosphate transporter (IPT-1)
US6235883B1 (en) 1997-05-05 2001-05-22 Abgenix, Inc. Human monoclonal antibodies to epidermal growth factor receptor
WO1998051824A1 (en) 1997-05-15 1998-11-19 Abbott Laboratories Reagents and methods useful for detecting disease of the urinary tract
US6890749B2 (en) 1997-05-15 2005-05-10 Abbott Laboratories Reagents and methods useful for detecting diseases of the prostate
US6753165B1 (en) 1999-01-14 2004-06-22 Bolder Biotechnology, Inc. Methods for making proteins containing free cysteine residues
ZA986732B (en) 1997-07-29 1999-02-02 Warner Lambert Co Irreversible inhibitiors of tyrosine kinases
ZA986729B (en) 1997-07-29 1999-02-02 Warner Lambert Co Irreversible inhibitors of tyrosine kinases
TW436485B (en) 1997-08-01 2001-05-28 American Cyanamid Co Substituted quinazoline derivatives
US6248564B1 (en) 1997-08-29 2001-06-19 Harvard University Mutant MHC class I molecules
US6602677B1 (en) 1997-09-19 2003-08-05 Promega Corporation Thermostable luciferases and methods of production
AU9805398A (en) 1997-10-15 1999-05-03 Children's Medical Center Corporation Novel human egf receptors and use thereof
US20030060612A1 (en) 1997-10-28 2003-03-27 Genentech, Inc. Compositions and methods for the diagnosis and treatment of tumor
US20020034749A1 (en) 1997-11-18 2002-03-21 Billing-Medel Patricia A. Reagents and methods useful for detecting diseases of the breast
US6110695A (en) 1997-12-02 2000-08-29 The Regents Of The University Of California Modulating the interaction of the chemokine, B Lymphocyte Hemoattractant, and its Receptor, BLR1
US7005504B2 (en) * 1998-01-22 2006-02-28 Genentech, Inc. Antibody fragment-peg conjugates
WO2004031238A2 (en) 2002-10-03 2004-04-15 Mcgill Univeristy Antibodies and cyclic peptides which bind cea (carcinoembryonic antigen) and their use as cancer therapeutics
DE69939527D1 (de) 1998-03-13 2008-10-23 Burnham Inst Zielsuchende verbindungen für verschiedene organe und gewebe
US6528624B1 (en) 1998-04-02 2003-03-04 Genentech, Inc. Polypeptide variants
DE19820190A1 (de) 1998-04-28 1999-11-04 Metagen Gesellschaft Fuer Genomforschung Mbh Menschliche Nukleinsäuresequenzen aus Pankreas-Tumor
AU4078599A (en) 1998-05-13 1999-11-29 Epimmune, Inc. Expression vectors for stimulating an immune response and methods of using the same
US20020187472A1 (en) 2001-03-09 2002-12-12 Preeti Lal Steap-related protein
US20030064397A1 (en) 1998-05-22 2003-04-03 Incyte Genomics, Inc. Transmembrane protein differentially expressed in prostate and lung tumors
WO2000012130A1 (en) 1998-08-27 2000-03-09 Smithkline Beecham Corporation Rp105 agonists and antagonists
JP4689781B2 (ja) 1998-09-03 2011-05-25 独立行政法人科学技術振興機構 アミノ酸輸送蛋白及びその遺伝子
AU5963699A (en) 1998-10-02 2000-04-26 Mcmaster University Spliced form of (erb)b-2/neu oncogene
WO2001057188A2 (en) 2000-02-03 2001-08-09 Hyseq, Inc. Novel nucleic acids and polypeptides
US6468546B1 (en) 1998-12-17 2002-10-22 Corixa Corporation Compositions and methods for therapy and diagnosis of ovarian cancer
US20020119158A1 (en) 1998-12-17 2002-08-29 Corixa Corporation Compositions and methods for the therapy and diagnosis of ovarian cancer
US6858710B2 (en) 1998-12-17 2005-02-22 Corixa Corporation Compositions and methods for the therapy and diagnosis of ovarian cancer
US6962980B2 (en) 1999-09-24 2005-11-08 Corixa Corporation Compositions and methods for the therapy and diagnosis of ovarian cancer
US20030091580A1 (en) 2001-06-18 2003-05-15 Mitcham Jennifer L. Compositions and methods for the therapy and diagnosis of ovarian cancer
US20030190669A1 (en) 1998-12-30 2003-10-09 Genentech, Inc. Secreted and transmembrane polypeptides and nucleic acids encoding the same
WO2000040614A2 (en) 1998-12-30 2000-07-13 Beth Israel Deaconess Medical Center, Inc. Characterization of the soc/crac calcium channel protein family
WO2000044899A1 (en) 1999-01-29 2000-08-03 Corixa Corporation Her-2/neu fusion proteins
GB9905124D0 (en) 1999-03-05 1999-04-28 Smithkline Beecham Biolog Novel compounds
AU3395900A (en) 1999-03-12 2000-10-04 Human Genome Sciences, Inc. Human lung cancer associated gene sequences and polypeptides
US7304126B2 (en) 1999-05-11 2007-12-04 Genentech, Inc. Secreted and transmembrane polypeptides and nucleic acids encoding the same
AU5003200A (en) 1999-05-14 2000-12-05 United States Of America As Represented By The Department Of Veterans Affairs, The Isolation and characterization of epidermal growth factor related protein
US7049410B2 (en) 1999-05-14 2006-05-23 Majumdar Adhip P N Antibodies to a novel EGF-receptor related protein (ERRP)
AU4952600A (en) 1999-06-03 2000-12-28 Takeda Chemical Industries Ltd. Screening method with the use of cd100
SI1189641T1 (sl) 1999-06-25 2009-12-31 Genentech Inc Humanizirana protitelesa proti ErbB2 in zdravljenje s protitelesi proti ErbB2
MXPA01013240A (es) 1999-06-25 2002-06-21 Genentech Inc Metodo de tratamiento utilizando conjugados de anticuerpo contra erbb-maytansionoide.
US7589172B2 (en) 1999-07-20 2009-09-15 Genentech, Inc. PRO256 polypeptides
US7297770B2 (en) 1999-08-10 2007-11-20 Genentech, Inc. PRO6496 polypeptides
US7294696B2 (en) 1999-08-17 2007-11-13 Genentech Inc. PRO7168 polypeptides
CA2380355A1 (en) 1999-09-01 2001-03-08 Genentech, Inc. Secreted and transmembrane polypeptides and nucleic acids encoding the same
US20030232056A1 (en) 1999-09-10 2003-12-18 Corixa Corporation Compositions and methods for the therapy and diagnosis of ovarian cancer
US20030129192A1 (en) 1999-09-10 2003-07-10 Corixa Corporation Compositions and methods for the therapy and diagnosis of ovarian cancer
US20030206918A1 (en) 1999-09-10 2003-11-06 Corixa Corporation Compositions and methods for the therapy and diagnosis of ovarian cancer
AU775373B2 (en) 1999-10-01 2004-07-29 Immunogen, Inc. Compositions and methods for treating cancer using immunoconjugates and chemotherapeutic agents
US6750054B2 (en) 2000-05-18 2004-06-15 Lexicon Genetics Incorporated Human semaphorin homologs and polynucleotides encoding the same
DE60039448D1 (de) 1999-10-29 2008-08-21 Genentech Inc Gegen das prostata-stammzellantigen (psca) gerichtete antikörper und deren verwendung
US6372907B1 (en) 1999-11-03 2002-04-16 Apptera Corporation Water-soluble rhodamine dye peptide conjugates
EP2363403B1 (en) 1999-11-29 2016-04-20 The Trustees of Columbia University in the City of New York Isolation of five novel genes coding for new fc receptors-type melanoma involved in the pathogenesis of lymphoma/melanoma
EP1248800A2 (en) 1999-11-30 2002-10-16 Corixa Corporation Compositions and methods for therapy and diagnosis of breast cancer
EP1239866A4 (en) 1999-12-10 2005-02-09 Epimmune Inc INDUCTION OF HER2 / NEU CELLULAR IMMUNE RESPONSES USING PEPTIDE AND NUCLEIC ACID-CONTAINING COMPOSITIONS
US6610286B2 (en) 1999-12-23 2003-08-26 Zymogenetics, Inc. Method for treating inflammation using soluble receptors to interleukin-20
EP1616575B1 (en) 1999-12-23 2012-06-06 ZymoGenetics, Inc. Method for treating inflammation
JP4741139B2 (ja) 1999-12-23 2011-08-03 ザイモジェネティクス， インコーポレイテッド 可溶性インターロイキン−２０レセプター
NZ502058A (en) 1999-12-23 2003-11-28 Ovita Ltd Isolated mutated nucleic acid molecule for regulation of ovulation rate
JP2003518075A (ja) 1999-12-24 2003-06-03 ジェネンテック・インコーポレーテッド 生理活性化合物の消失半減期延長のための方法及び組成物
US20040001827A1 (en) 2002-06-28 2004-01-01 Dennis Mark S. Serum albumin binding peptides for tumor targeting
US7297333B2 (en) 2000-01-20 2007-11-20 Genentech, Inc. Anti-PRO10268 antibodies
US20020039573A1 (en) 2000-01-21 2002-04-04 Cheever Martin A. Compounds and methods for prevention and treatment of HER-2/neu associated malignancies
US20030224379A1 (en) 2000-01-21 2003-12-04 Tang Y. Tom Novel nucleic acids and polypeptides
US20030104562A1 (en) 2000-02-11 2003-06-05 Genentech, Inc. Secreted and transmembrane polypeptides and nucleic acids encoding the same
AU2001238596A1 (en) 2000-02-22 2001-09-03 Millennium Pharmaceuticals, Inc. 18607, a novel human calcium channel
US20040005561A1 (en) 2000-03-01 2004-01-08 Corixa Corporation Compositions and methods for the detection, diagnosis and therapy of hematological malignancies
US20040002068A1 (en) 2000-03-01 2004-01-01 Corixa Corporation Compositions and methods for the detection, diagnosis and therapy of hematological malignancies
WO2001066689A2 (en) 2000-03-07 2001-09-13 Hyseq, Inc. Novel nucleic acids and polypeptides
US7097840B2 (en) * 2000-03-16 2006-08-29 Genentech, Inc. Methods of treatment using anti-ErbB antibody-maytansinoid conjugates
CA2403637A1 (en) 2000-03-24 2001-10-04 Fahri Saatcioglu Novel prostate-specific or testis-specific nucleic acid molecules, polypeptides, and diagnostic and therapeutic methods
WO2001072830A2 (de) 2000-03-31 2001-10-04 Ipf Pharmaceuticals Gmbh Diagnostik- und arzneimittel zur untersuchung des zelloberflächenproteoms von tumor- und entzündungszellen sowie zur behandlung von tumorerkrankungen und entzündlichen erkrankungen vorzugsweise mit hilfe einer spezifischen chemokinrezeptor-analyse und der chemokinrezeptor-ligand-interaktion
AU2001253140A1 (en) 2000-04-03 2001-10-15 The Government Of The United States Of America, As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services Tumor markers in ovarian cancer
NZ521158A (en) 2000-04-07 2004-08-27 Arena Pharm Inc Non-endogenous, constitutively activated known G protein-coupled receptors
WO2001090304A2 (en) 2000-05-19 2001-11-29 Human Genome Sciences, Inc. Nucleic acids, proteins, and antibodies
WO2001094641A2 (en) 2000-06-09 2001-12-13 Idec Pharmaceuticals Corporation Gene targets and ligands that bind thereto for treatment and diagnosis of ovarian carcinomas
JP2004523203A (ja) 2000-06-16 2004-08-05 インサイト・ゲノミックス・インコーポレイテッド Ｇタンパク質結合受容体
WO2002002634A2 (en) 2000-06-30 2002-01-10 Incyte Genomics, Inc. Human extracellular matrix and cell adhesion polypeptides
EP1294885A2 (en) 2000-06-30 2003-03-26 Amgen, Inc. B7-like molecules and uses thereof
EP1301524A1 (en) 2000-06-30 2003-04-16 Human Genome Sciences, Inc. B7-like polynucleotides, polypeptides, and antibodies
WO2002006339A2 (en) 2000-07-03 2002-01-24 Curagen Corporation Proteins and nucleic acids encoding same
US20040044179A1 (en) 2000-07-25 2004-03-04 Genentech, Inc. Secreted and transmembrane polypeptides and nucleic acids encoding the same
WO2002010187A1 (en) 2000-07-27 2002-02-07 Mayo Foundation For Medical Education And Research B7-h3 and b7-h4, novel immunoregulatory molecules
JP2004505617A (ja) 2000-07-28 2004-02-26 ヴィッセンバッハ，ウルリヒ Ｔｒｐ８、Ｔｒｐ９およびＴｒｐ１０、癌の新規マーカー
US7229623B1 (en) 2000-08-03 2007-06-12 Corixa Corporation Her-2/neu fusion proteins
CA2419533A1 (en) 2000-08-14 2002-02-21 Corixa Corporation Compositions and methods for the therapy and diagnosis of her-2/neu-associated malignancies
AU2001283360A1 (en) 2000-08-14 2002-02-25 Corixa Corporation Methods for diagnosis and therapy of hematological and virus-associated malignancies
GB0020953D0 (en) 2000-08-24 2000-10-11 Smithkline Beecham Biolog Vaccine
CA2420140A1 (en) 2000-08-24 2002-02-28 Genentech, Inc. Compositions and methods for the diagnosis and treatment of tumor
US20020119148A1 (en) 2000-09-01 2002-08-29 Gerritsen Mary E. ErbB4 antagonists
WO2002022660A2 (en) 2000-09-11 2002-03-21 Hyseq, Inc. Novel nucleic acids and polypeptides
AR030612A1 (es) 2000-09-12 2003-08-27 Smithkline Beecham Corp Procedimiento e intermedios
EP1803733B1 (en) 2000-09-15 2010-03-10 ZymoGenetics, Inc. Polypeptides comprising the extracellular domains of IL-20RA and/or IL-20RB
US7491797B2 (en) 2000-09-15 2009-02-17 Genentech, Inc. PRO6308 polypeptide
US6613567B1 (en) 2000-09-15 2003-09-02 Isis Pharmaceuticals, Inc. Antisense inhibition of Her-2 expression
CA2422814A1 (en) 2000-09-18 2002-03-21 Biogen, Inc. Cripto mutant and uses thereof
UA83458C2 (uk) 2000-09-18 2008-07-25 Байоджен Айдек Ма Інк. Виділений поліпептид baff-r (рецептор фактора активації в-клітин сімейства tnf)
EP1474528A4 (en) 2000-10-13 2006-06-14 Protein Design Labs Inc METHODS FOR DIAGNOSING PROSTATE CANCER, COMPOSITIONS AND METHODS FOR SCREENING PROSTATE CANCER MODULATORS
ATE432986T1 (de) 2000-11-07 2009-06-15 Zymogenetics Inc Menschlicher rezeptor für tumor necrosis factor
US20020150573A1 (en) 2000-11-10 2002-10-17 The Rockefeller University Anti-Igalpha-Igbeta antibody for lymphoma therapy
US20040018194A1 (en) 2000-11-28 2004-01-29 Francisco Joseph A. Recombinant anti-CD30 antibodies and uses thereof
WO2002061087A2 (en) 2000-12-19 2002-08-08 Lifespan Biosciences, Inc. Antigenic peptides, such as for g protein-coupled receptors (gpcrs), antibodies thereto, and systems for identifying such antigenic peptides
WO2002054940A2 (en) 2001-01-12 2002-07-18 University Of Medicine & Dentistry Of New Jersey Bone morphogenetic protein-2 in the treatment and diagnosis of cancer
US20030119125A1 (en) 2001-01-16 2003-06-26 Genentech, Inc. Secreted and transmembrane polypeptides and nucleic acids encoding the same
US20030119133A1 (en) 2001-01-16 2003-06-26 Genentech, Inc. Secreted and transmembrane polypeptides and nucleic acids encoding the same
US7754208B2 (en) 2001-01-17 2010-07-13 Trubion Pharmaceuticals, Inc. Binding domain-immunoglobulin fusion proteins
MXPA03006617A (es) 2001-01-24 2004-12-02 Protein Design Labs Inc Metodos de diagnostico de cancer de pecho, composiciones y metodos de rastreo de moduladores de cancer de pecho.
US20030073144A1 (en) 2001-01-30 2003-04-17 Corixa Corporation Compositions and methods for the therapy and diagnosis of pancreatic cancer
WO2002064780A1 (en) 2001-02-12 2002-08-22 Bionomics Limited Dna sequences for human tumour suppressor genes
AU2002258518A1 (en) 2001-03-14 2002-09-24 Millennium Pharmaceuticals, Inc. Nucleic acid molecules and proteins for the identification, assessment, prevention, and therapy of ovarian cancer
AU2002311787A1 (en) 2001-03-28 2002-10-15 Zycos Inc. Translational profiling
WO2003008537A2 (en) 2001-04-06 2003-01-30 Mannkind Corporation Epitope sequences
US6820011B2 (en) 2001-04-11 2004-11-16 The Regents Of The University Of Colorado Three-dimensional structure of complement receptor type 2 and uses thereof
JP5232350B2 (ja) 2001-04-17 2013-07-10 ザ ボード オブ トラスティーズ オブ ザ ユニバーシティ オブ アーカンソー Ｃａ１２５遺伝子のリピート配列並びに診断および治療的介入のためのその使用
AU2002309583A1 (en) 2001-04-18 2002-11-05 Protein Desing Labs, Inc. Methods of diagnosis of lung cancer, compositions and methods of screening for modulators of lung cancer
CN100352501C (zh) 2001-04-26 2007-12-05 比奥根艾迪克Ma公司 Cripto阻断抗体及其用途
US6884869B2 (en) 2001-04-30 2005-04-26 Seattle Genetics, Inc. Pentapeptide compounds and uses related thereto
JP2005504513A (ja) 2001-05-09 2005-02-17 コリクサ コーポレイション 前立腺癌の治療及び診断のための組成物及び方法
AU2002344326A1 (en) 2001-05-11 2002-11-25 Sloan-Kettering Institute For Cancer Research Nucleic acid sequence encoding ovarian antigen, ca125, and uses thereof
KR20040030628A (ko) 2001-05-24 2004-04-09 지모제넥틱스, 인코포레이티드 Ｔａｃｉ-면역글로불린 융합 단백질
US6441163B1 (en) 2001-05-31 2002-08-27 Immunogen, Inc. Methods for preparation of cytotoxic conjugates of maytansinoids and cell binding agents
US7157558B2 (en) 2001-06-01 2007-01-02 Genentech, Inc. Polypeptide encoded by a polynucleotide overexpresses in tumors
WO2002098358A2 (en) 2001-06-04 2002-12-12 Eos Biotechnology, Inc. Methods of diagnosis and treatment of androgen-dependent prostate cancer, prostate cancer undergoing androgen-withdrawal, and androgen-independent prostate cancer
JP2005518185A (ja) 2001-06-04 2005-06-23 キュラジェン コーポレイション 新規タンパク質およびそれをコード化する核酸
WO2002099040A2 (en) 2001-06-05 2002-12-12 Exelixis, Inc. Igs as modifiers of the p53 pathway and methods of use
CA2449289A1 (en) 2001-06-05 2002-12-12 Exelixis, Inc. Gfats as modifiers of the p53 pathway and methods of use
US7235358B2 (en) 2001-06-08 2007-06-26 Expression Diagnostics, Inc. Methods and compositions for diagnosing and monitoring transplant rejection
US7125663B2 (en) 2001-06-13 2006-10-24 Millenium Pharmaceuticals, Inc. Genes, compositions, kits and methods for identification, assessment, prevention, and therapy of cervical cancer
WO2002102235A2 (en) 2001-06-18 2002-12-27 Eos Biotechnology Inc. Methods of diagnosis of ovarian cancer, compositions and methods of screening for modulators of ovarian cancer
US7189507B2 (en) 2001-06-18 2007-03-13 Pdl Biopharma, Inc. Methods of diagnosis of ovarian cancer, compositions and methods of screening for modulators of ovarian cancer
AU2002322280A1 (en) 2001-06-21 2003-01-21 Millennium Pharmaceuticals, Inc. Compositions, kits, and methods for identification, assessment, prevention, and therapy of breast cancer
WO2003002717A2 (en) 2001-06-28 2003-01-09 Schering Corporation Biological activity of ak155
WO2003004529A2 (en) 2001-07-02 2003-01-16 Licentia Ltd. Ephrin-tie receptor materials and methods
US20040076955A1 (en) 2001-07-03 2004-04-22 Eos Biotechnology, Inc. Methods of diagnosis of bladder cancer, compositions and methods of screening for modulators of bladder cancer
WO2003003984A2 (en) 2001-07-05 2003-01-16 Curagen Corporation Novel proteins and nucleic acids encoding same
US7446185B2 (en) 2001-07-18 2008-11-04 The Regents Of The University Of California Her2/neu target antigen and use of same to stimulate an immune response
WO2003009814A2 (en) 2001-07-25 2003-02-06 Millennium Pharmaceuticals, Inc. Novel genes, compositions, kits, and methods for identification, assessment, prevention, and therapy of prostate cancer
PL377119A1 (pl) 2001-08-03 2006-01-23 Genentech, Inc. Peptydy TACIs i BR3 i ich zastosowanie
US20070015145A1 (en) 2001-08-14 2007-01-18 Clifford Woolf Nucleic acid and amino acid sequences involved in pain
US20030092013A1 (en) 2001-08-16 2003-05-15 Vitivity, Inc. Diagnosis and treatment of vascular disease
AU2002313559A1 (en) 2001-08-23 2003-03-10 Oxford Biomedica (Uk) Limited Genes
AU2002357643A1 (en) 2001-08-29 2003-04-14 Vanderbilt University The human mob-5 (il-24) receptors and uses thereof
US20040235068A1 (en) * 2001-09-05 2004-11-25 Levinson Arthur D. Methods for the identification of polypeptide antigens associated with disorders involving aberrant cell proliferation and compositions useful for the treatment of such disorders
US20030124579A1 (en) 2001-09-05 2003-07-03 Eos Biotechnology, Inc. Methods of diagnosis of ovarian cancer, compositions and methods of screening for modulators of ovarian cancer
ES2537074T3 (es) 2001-09-06 2015-06-02 Agensys, Inc. Ácido nucleico y proteína correspondiente denominados STEAP-1 útiles en el tratamiento y la detección de cáncer
AU2002330039A1 (en) 2001-09-17 2003-04-01 Eos Biotechnology, Inc. Methods of diagnosis of cancer compositions and methods of screening for modulators of cancer
NZ531674A (en) 2001-09-18 2009-03-31 Genentech Inc Compositions and methods for the diagnosis and treatment of tumor
WO2003025228A1 (en) 2001-09-18 2003-03-27 Proteologics, Inc. Methods and compositions for treating hcap associated diseases
WO2003025148A2 (en) 2001-09-19 2003-03-27 Nuvelo, Inc. Novel nucleic acids and polypeptides
US7091186B2 (en) 2001-09-24 2006-08-15 Seattle Genetics, Inc. p-Amidobenzylethers in drug delivery agents
WO2003026577A2 (en) 2001-09-24 2003-04-03 Seattle Genetics, Inc. P-amidobenzylethers in drug delivery agents
US20030077644A1 (en) 2001-09-28 2003-04-24 Bing Yang Diagnosis and treatment of diseases caused by mutations in CD72
AU2002362454A1 (en) 2001-10-03 2003-04-14 Origene Technologies, Inc. Regulated breast cancer genes
AU2002362436A1 (en) 2001-10-03 2003-04-14 Rigel Pharmaceuticals, Inc. Modulators of lymphocyte activation and migration
US20050123925A1 (en) 2002-11-15 2005-06-09 Genentech, Inc. Compositions and methods for the diagnosis and treatment of tumor
AU2002351505B2 (en) 2001-10-19 2008-04-03 Genentech, Inc. Compositions and methods for the diagnosis and treatment of inflammatory bowel disorders
WO2003035846A2 (en) 2001-10-24 2003-05-01 National Jewish Medical And Research Center Structure of tall-1 and its cognate receptor
BR0213738A (pt) 2001-10-31 2006-11-21 Alcon Inc proteìnas morfogênicas ósseas (bmp), receptores de bmp e proteìnas de ligação de bmp e seu uso no diagnóstico e no tratamento de glaucoma
WO2003042661A2 (en) 2001-11-13 2003-05-22 Protein Design Labs, Inc. Methods of diagnosis of cancer, compositions and methods of screening for modulators of cancer
US20030232350A1 (en) 2001-11-13 2003-12-18 Eos Biotechnology, Inc. Methods of diagnosis of cancer, compositions and methods of screening for modulators of cancer
EP1482972A4 (en) 2001-11-20 2005-11-23 Seattle Genetics Inc TREATMENT OF IMMUNOLOGICAL DISORDERS USING ANTI-CD30 ANTIBODIES
WO2003045422A1 (en) 2001-11-29 2003-06-05 Genset S.A. Agonists and antagonists of prolixin for the treatment of metabolic disorders
WO2003048202A2 (en) 2001-12-03 2003-06-12 Asahi Kasei Pharma Corporation Nf-kappab activating genes
AU2002366951A1 (en) 2001-12-10 2003-07-09 Nuvelo,Inc. Novel nucleic acids and polypeptides
WO2003049704A2 (en) 2001-12-11 2003-06-19 University Of Massachusetts Antibodies to treat cancer
EP1485126A4 (en) * 2001-12-21 2007-03-21 Idexx Lab Inc DOG IMMUNOGLOBULIN VARIABLE DOMAINS, DOG ANTIBODIES, AND METHOD FOR THEIR PRODUCTION AND USE
US6716821B2 (en) 2001-12-21 2004-04-06 Immunogen Inc. Cytotoxic agents bearing a reactive polyethylene glycol moiety, cytotoxic conjugates comprising polyethylene glycol linking groups, and methods of making and using the same
US20030134790A1 (en) 2002-01-11 2003-07-17 University Of Medicine And Dentistry Of New Jersey Bone Morphogenetic Protein-2 And Bone Morphogenetic Protein-4 In The Treatment And Diagnosis Of Cancer
US7452675B2 (en) 2002-01-25 2008-11-18 The Queen's Medical Center Methods of screening for TRPM4b modulators
WO2003072736A2 (en) 2002-02-21 2003-09-04 Duke University Reagents and treatment methods for autoimmune diseases
WO2003072035A2 (en) 2002-02-22 2003-09-04 Genentech, Inc. Compositions and methods for the treatment of immune related diseases
WO2003083047A2 (en) 2002-03-01 2003-10-09 Exelixis, Inc. MP53s AS MODIFIERS OF THE p53 PATHWAY AND METHODS OF USE
WO2003104399A2 (en) 2002-06-07 2003-12-18 Avalon Pharmaceuticals, Inc Cancer-linked gene as target for chemotherapy
WO2003101400A2 (en) 2002-06-04 2003-12-11 Avalon Pharmaceuticals, Inc. Cancer-linked gene as target for chemotherapy
EP2258712A3 (en) 2002-03-15 2011-05-04 Multicell Immunotherapeutics, Inc. Compositions and Methods to Initiate or Enhance Antibody and Major-histocompatibility Class I or Class II-restricted T Cell Responses by Using Immunomodulatory, Non-coding RNA Motifs
WO2004000997A2 (en) 2002-03-19 2003-12-31 Curagen Corporation Therapeutic polypeptides, nucleic acids encoding same, and methods of use
CA2478981A1 (en) 2002-03-21 2003-10-02 Sunesis Pharmaceuticals, Inc. Identification of kinase inhibitors
US7193069B2 (en) 2002-03-22 2007-03-20 Research Association For Biotechnology Full-length cDNA
EP1494693B1 (en) 2002-03-22 2010-12-08 Biogen Idec MA Inc. Cripto-specific antibodies
JP2005521429A (ja) 2002-03-25 2005-07-21 ユーエービー リサーチ ファウンデーション Ｆｃレセプターホモログ、試薬およびこれらの使用
WO2003083074A2 (en) 2002-03-28 2003-10-09 Idec Pharmaceuticals Corporation Novel gene targets and ligands that bind thereto for treatment and diagnosis of colon carcinomas
US20030194704A1 (en) 2002-04-03 2003-10-16 Penn Sharron Gaynor Human genome-derived single exon nucleic acid probes useful for gene expression analysis two
CA2481503A1 (en) 2002-04-05 2003-10-23 Agensys, Inc. Nucleic acid and corresponding protein entitled 98p4b6 useful in treatment and detection of cancer
WO2003087768A2 (en) 2002-04-12 2003-10-23 Mitokor Targets for therapeutic intervention identified in the mitochondrial proteome
CA2481507A1 (en) 2002-04-16 2003-10-30 Genentech, Inc. Compositions and methods for the diagnosis and treatment of tumor
US20030224467A1 (en) 2002-04-17 2003-12-04 Osborne C. Kent AIB1 as a prognostic marker and predictor of resistance to endocrine therapy
AU2003228869A1 (en) 2002-05-03 2003-11-17 Incyte Corporation Transporters and ion channels
AU2003229294A1 (en) 2002-05-15 2003-12-02 Avalon Pharmaceuticals Cancer-linked gene as target for chemotherapy
WO2003101388A2 (en) 2002-05-30 2003-12-11 Bristol-Myers Squibb Company Human solute carrier family 7 member 11 (hslc7a11)
WO2003101283A2 (en) 2002-06-04 2003-12-11 Incyte Corporation Diagnostics markers for lung cancer
AU2003242633A1 (en) 2002-06-06 2003-12-22 Molecular Engines Laboratories Dudulin genes, non-human animal model: uses in human hematological disease
CN100532549C (zh) 2002-06-06 2009-08-26 肿瘤疗法科学股份有限公司 与人结肠癌相关的基因和多肽
AU2003245441A1 (en) 2002-06-12 2003-12-31 Avalon Pharmaceuticals, Inc. Cancer-linked gene as target for chemotherapy
US20040022727A1 (en) 2002-06-18 2004-02-05 Martin Stanton Aptamer-toxin molecules and methods for using same
US20040249130A1 (en) 2002-06-18 2004-12-09 Martin Stanton Aptamer-toxin molecules and methods for using same
CA2489792C (en) 2002-06-20 2012-05-15 Snaptrack Incorporated Reducing cross-interference in a combined gps receiver and communication system
AU2003245615A1 (en) 2002-06-20 2004-01-06 The Regents Of The University Of California Compositions and methods for modulating lymphocyte activity
EP2365004B1 (en) 2002-06-21 2016-01-06 Johns Hopkins University School of Medicine Membrane associated tumor endothelium markers
GB0216081D0 (en) * 2002-07-11 2002-08-21 Imp College Innovations Ltd Methods of making biological materials and uses thereof
WO2004009622A2 (en) 2002-07-19 2004-01-29 Cellzome Ag Protein complexes of cellular networks underlying the development of cancer and other diseases
AU2003256836A1 (en) 2002-07-25 2004-02-16 Genentech, Inc. Taci antibodies and uses thereof
CA2494104A1 (en) 2002-07-31 2004-04-22 Seattle Genetics, Inc. Anti-cd20 antibody-drug conjugates for the treatment of cancer and immune disorders
AU2003251471A1 (en) 2002-08-06 2004-02-25 Bayer Healthcare Ag Diagnostics and therapeutics for diseases associated with human cxc chemokine receptor 5(cxcr5)
JP2004121218A (ja) 2002-08-06 2004-04-22 Jenokkusu Soyaku Kenkyusho:Kk 気管支喘息または慢性閉塞性肺疾患の検査方法
AU2003259163B2 (en) 2002-08-16 2008-07-03 Immunogen, Inc. Cross-linkers with high reactivity and solubility and their use in the preparation of conjugates for targeted delivery of small molecule drugs
CA2495389A1 (en) 2002-08-19 2004-02-26 Genentech, Inc. Compositions and methods for the diagnosis and treatment of tumor
EP1391213A1 (en) 2002-08-21 2004-02-25 Boehringer Ingelheim International GmbH Compositions and methods for treating cancer using maytansinoid CD44 antibody immunoconjugates and chemotherapeutic agents
AU2003278725A1 (en) 2002-08-27 2004-03-19 Bristol-Myers Squibb Company Polynucleotide predictor set for identifying protein tyrosine kinase modulators
WO2004020595A2 (en) 2002-08-29 2004-03-11 Five Prime Therapeutics, Inc. Novel human polypeptides encoded by polynucleotides
AU2002951346A0 (en) 2002-09-05 2002-09-26 Garvan Institute Of Medical Research Diagnosis of ovarian cancer
JP2005537800A (ja) 2002-09-06 2005-12-15 マンカインド コーポレイション エピトープ配列
AU2003300776A1 (en) 2002-09-09 2004-05-25 Omeros Corporation G protein coupled receptors and uses thereof
JP2004113151A (ja) 2002-09-27 2004-04-15 Sankyo Co Ltd 癌遺伝子及びその用途
AU2003288918A1 (en) 2002-10-04 2004-05-04 Van Andel Research Institute Molecular sub-classification of kidney tumors and the discovery of new diagnostic markers
AU2003287345A1 (en) 2002-10-31 2004-06-07 Genentech, Inc. Methods and compositions for increasing antibody production
EP1581169A4 (en) 2002-11-08 2008-09-17 Genentech Inc COMPOSITIONS AND METHODS FOR TREATING DISEASES RELATED TO NATURAL K CELLS
CA2503621A1 (en) 2002-11-13 2004-05-27 Genentech, Inc. Methods and compositions for diagnosing dysplasia
AU2003282624A1 (en) 2002-11-14 2004-06-03 Syntarga B.V. Prodrugs built as multiple self-elimination-release spacers
WO2004045553A2 (en) 2002-11-15 2004-06-03 The Board Of Trustees Of The University Of Arkansas Ca125 gene and its use for diagnostic and therapeutic interventions
AU2003298650B2 (en) 2002-11-15 2010-03-11 Musc Foundation For Research Development Complement receptor 2 targeted complement modulators
AU2003297300A1 (en) 2002-11-20 2004-06-15 Biogen Idec Inc. Novel gene targets and ligands that bind thereto for treatment and diagnosis of carcinomas
EP2410332A1 (en) 2002-11-21 2012-01-25 The University Of Utah Method for identifying purinergic modulators of the olfactory system
US20040253606A1 (en) 2002-11-26 2004-12-16 Protein Design Labs, Inc. Methods of detecting soft tissue sarcoma, compositions and methods of screening for soft tissue sarcoma modulators
EP1567556A4 (en) * 2002-12-02 2006-03-22 Us Gov Health & Human Serv RECOMBINANT IMMUNOTOXIN AND USE IN THE TREATMENT OF TUMORS
AU2003302774A1 (en) 2002-12-06 2004-06-30 Diadexus, Inc. Compositions, splice variants and methods relating to ovarian specific genes and proteins
US20040157278A1 (en) 2002-12-13 2004-08-12 Bayer Corporation Detection methods using TIMP 1
CA2510315C (en) 2002-12-20 2014-01-28 Protein Design Labs, Inc. Antibodies against gpr64 and uses thereof
AU2003299819A1 (en) 2002-12-23 2004-07-22 Human Genome Sciences, Inc. Neutrokine-alpha conjugate, neutrokine-alpha complex, and uses thereof
WO2004063709A2 (en) 2003-01-08 2004-07-29 Bristol-Myers Squibb Company Biomarkers and methods for determining sensitivity to epidermal growth factor receptor modulators
US20050227301A1 (en) 2003-01-10 2005-10-13 Polgen Cell cycle progression proteins
WO2004063355A2 (en) 2003-01-10 2004-07-29 Protein Design Labs, Inc. Novel methods of diagnosis of metastatic cancer, compositions and methods of screening for modulators of matastatic cancer
US20040171823A1 (en) 2003-01-14 2004-09-02 Nadler Steven G. Polynucleotides and polypeptides associated with the NF-kappaB pathway
JP2007520996A (ja) 2003-01-15 2007-08-02 ミレニアム・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッド ４４３９０、５４１８１、２１１、５６８７、８８４、１４０５、６３６、４４２１、５４１０、３０９０５、２０４５、１６４０５、１８５６０、２０４７、３３７５１、５２８７２、１４０６３、２０７３９、３２５４４、４３２３９、４４３７３、５１１６４、５３０１０、１６８５２、１５８７、２２０７、２２２４５、２３８７、５２９０８、６９１１２、１４９９０、１８５４７、１１５、５７９、１５９８５、１５６２５、７６０、１８６０３、２３９５、２５５４、８６７５、３２７２０、４８０９、１４３０３、１６８１６、１７８２７、３２６２０、５７７、６１９、１４２３、２１５８、８２６３、１５４０２、１６２０９、１６３８６、２１１６５、３０９１１、４１８９７、１６４３、２５４３、９６２６、１３２３１、３２４０９、８４２６０、２８８２、８２０３、３２６７８または５５０５３を用いて泌尿器科障害を処置するための方法および組成物
WO2004065417A2 (en) 2003-01-23 2004-08-05 Genentech, Inc. Methods for producing humanized antibodies and improving yield of antibodies or antigen binding fragments in cell culture
CA2516128A1 (en) 2003-02-14 2004-09-02 Sagres Discovery, Inc. Therapeutic targets in cancer
US20030224411A1 (en) 2003-03-13 2003-12-04 Stanton Lawrence W. Genes that are up- or down-regulated during differentiation of human embryonic stem cells
US8088387B2 (en) 2003-10-10 2012-01-03 Immunogen Inc. Method of targeting specific cell populations using cell-binding agent maytansinoid conjugates linked via a non-cleavable linker, said conjugates, and methods of making said conjugates
SI1725249T1 (sl) 2003-11-06 2014-04-30 Seattle Genetics, Inc. Spojine monometilvalina, sposobne konjugacije na ligande

Also Published As

Publication number Publication date
US20090175865A1 (en) 2009-07-09
ES2669510T3 (es) 2018-05-28
IL181584A0 (en) 2007-07-04
AU2005286607A1 (en) 2006-03-30
PL1791565T3 (pl) 2016-10-31
CN101065151B (zh) 2014-12-10
BRPI0516284A (pt) 2008-09-02
JP4948413B2 (ja) 2012-06-06
HUE030079T2 (en) 2017-04-28
US20150017188A1 (en) 2015-01-15
WO2006034488A3 (en) 2006-09-28
AU2005286607B2 (en) 2011-01-27
US20100003766A1 (en) 2010-01-07
IL181584A (en) 2013-08-29
EP3088004B1 (en) 2018-03-28
JP2011162565A (ja) 2011-08-25
NZ580115A (en) 2010-10-29
CA2580141A1 (en) 2006-03-30
EP1791565A2 (en) 2007-06-06
KR20070054682A (ko) 2007-05-29
NZ553500A (en) 2009-11-27
EP3088004A1 (en) 2016-11-02
CA2580141C (en) 2013-12-10
KR101270829B1 (ko) 2013-06-07
CN101065151A (zh) 2007-10-31
WO2006034488A2 (en) 2006-03-30
US8309300B2 (en) 2012-11-13
US7855275B2 (en) 2010-12-21
US20110137017A1 (en) 2011-06-09
RU2412947C2 (ru) 2011-02-27
RU2007115040A (ru) 2008-10-27
ES2579805T3 (es) 2016-08-16
SI1791565T1 (sl) 2016-08-31
JP2008516896A (ja) 2008-05-22
US7521541B2 (en) 2009-04-21
US20070092940A1 (en) 2007-04-26
EP1791565B1 (en) 2016-04-20
HK1100423A1 (zh) 2007-09-21
US20180000962A1 (en) 2018-01-04
CN104447992A (zh) 2015-03-25
DK1791565T3 (en) 2016-08-01

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US20180000962A1 (en) Cysteine engineered antibodies and conjugates
US20230130874A1 (en) Cysteine Engineered Antibodies and Conjugates
KR101839163B1 (ko) 시스테인 조작된 항체 및 접합체
MX2007003404A (es) Anticuerpos y conjugados diseñados de cisteina