EA036202B1 - Пирролбензодиазепины и конъюгаты направленного действия - Google Patents

Пирролбензодиазепины и конъюгаты направленного действия Download PDF

Info

Publication number
EA036202B1
EA036202B1 EA201692215A EA201692215A EA036202B1 EA 036202 B1 EA036202 B1 EA 036202B1 EA 201692215 A EA201692215 A EA 201692215A EA 201692215 A EA201692215 A EA 201692215A EA 036202 B1 EA036202 B1 EA 036202B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
group
attachment
unit
groups
formula
Prior art date
Application number
EA201692215A
Other languages
English (en)
Other versions
EA201692215A1 (ru
Inventor
Скотт Джеффри
Патрик Бёрк
Филип Уилсон Ховард
Original Assignee
Сиэтл Дженетикс, Инк.
Медимьюн Лимитед
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Сиэтл Дженетикс, Инк., Медимьюн Лимитед filed Critical Сиэтл Дженетикс, Инк.
Publication of EA201692215A1 publication Critical patent/EA201692215A1/ru
Publication of EA036202B1 publication Critical patent/EA036202B1/ru

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D519/00—Heterocyclic compounds containing more than one system of two or more relevant hetero rings condensed among themselves or condensed with a common carbocyclic ring system not provided for in groups C07D453/00 or C07D455/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2875—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the NGF/TNF superfamily, e.g. CD70, CD95L, CD153, CD154
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D487/04—Ortho-condensed systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/55—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having seven-membered rings, e.g. azelastine, pentylenetetrazole
    • A61K31/551—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having seven-membered rings, e.g. azelastine, pentylenetetrazole having two nitrogen atoms, e.g. dilazep
    • A61K31/5513—1,4-Benzodiazepines, e.g. diazepam or clozapine
    • A61K31/5517—1,4-Benzodiazepines, e.g. diazepam or clozapine condensed with five-membered rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. imidazobenzodiazepines, triazolam
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/62—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being a protein, peptide or polyamino acid
    • A61K47/66—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being a protein, peptide or polyamino acid the modifying agent being a pre-targeting system involving a peptide or protein for targeting specific cells
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6801—Drug-antibody or immunoglobulin conjugates defined by the pharmacologically or therapeutically active agent
    • A61K47/6803—Drugs conjugated to an antibody or immunoglobulin, e.g. cisplatin-antibody conjugates
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6835—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site
    • A61K47/6849—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site the antibody targeting a receptor, a cell surface antigen or a cell surface determinant
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Abstract

Соединение формулы Iили его фармацевтически приемлемая соль или сольват или его конъюгат,где R2 имеет формулу IIIгде A представляет собой C5-7арильную группу, X представляет собой или NHRN, где RN выбран из группы, включающей H и C1-4алкил, и либо (i) Q1 представляет собой одинарную связь, и Q2 выбран из одинарной связи и -Z-(CH2)n-, где Z выбран из одинарной связи, O, S и NH, и n составляет от 1 до 3; или (ii) Q1 представляет собой -CH=CH-, и Q2 представляет собой одинарную связь; R12 представляет собой C5-10арильную группу; замещенную группой, выбранной из OH, CO2H, CO2RO, где RO выбран из C1-4алкила; R6 и R9 независимо выбраны из H, R, OH, OR, SH, SR, NH2, NHR, NRR', нитро, Me3Sn и галогена; где R и R' независимо выбраны из необязательно замещенной C1-12алкильной, C3-20 гетероциклильной и C5-20арильной групп; R7 выбран из H, R, OH, OR, SH, SR, NH2, NHR, NHRR', нитро, Me3Sn и галогена; либо (a) R10 представляет собой H, и R11 представляет собой OH, ORA, где RA представляет собой C1-4алкил; (b) R10 и R11 образуют двойную связь азот-углерод между атомами азота и углерода, к которым они присоединены; или (c) R10 представляет собой H, и R11 представляет собой SOzM, где z представляет собой 2 или 3, и M представляет собой одновалентный фармацевтически приемлемый катион; R" представляет собой C3-12алкиленовую группу, цепь которой может прерываться одним или более гетероатомами, например O, S, NRN2, где RN2 представляет собой H или C1-4 алкил, и/или ароматическими кольцами, например бензолом или пиридином; Y и Y' выбраны из O, S или NH; R6', R7', R9' выбраны из тех же групп, как R6, R7 и R9 соответственно, и R10' и R11' представляют собой такие же группы, как R10 и R11, где если R11 и R11' представляют собой SOzM, M может представлять собой двухвалентный фармацевтически приемлемый катион.

Description

Настоящее изобретение относится к пирролбензодиазепинам (PBD), в частности к димерам пирролбензодиазепина, содержащим C2-C3 двойную связь и арильную группу в положении C2 в каждом мономерном звене, и их включению в конъюгаты направленного действия.
Уровень техники
Некоторые пирролбензодиазепины (PBD) способны распознавать и связываться со специфическими последовательностями ДНК; предпочтительной последовательностью является PuGPu. Первый противоопухолевый антибиотик на основе PBD, антрамицин, был открыт в 1965 году (Leimgruber, et al., J. Am. Chem. Soc, 87, 5793-5795 (1965); Leimgruber, et al., J. Am. Chem. Soc, 87, 5791-5793 (1965)). После этого сообщалось о ряде природных PBD, и были разработаны многочисленные способы синтеза их различных аналогов (Thurston, et al., Chem. Rev. 1994, 433-465 (1994); Antonow, D. и Thurston, D.E., Chem. Rev. 2011 111 (4), 2815-2864). Члены данного семейства включают эббимицин (abbeymycin) (Hochlowski, et al., J. Antibiotics, 40, 145-148 (1987)), чикамицин (chicamycin) (Konishi, et al., J. Antibiotics, 37, 200-206 (1984)), DC-81 (патент Японии 58-180487; Thurston, et al., Chem. Brit., 26, 767-772 (1990); Bose, et al., Tempahedron, 48, 751-758 (1992)), мазетрамицин (mazethramycin) (Kuminoto, et al., J. Antibiotics, 33, 665667 (1980)), неотрамицины A и B (neothramycin) (Takeuchi, et al., J. Antibiotics, 29, 93-96 (1976)), поротрамицин (porothramycin) (Tsunakawa, et al.), J. Antibiotics, 41, 1366-1373 (1988)), протракарцин (prothracarcin) (Shimizu, et al., J. Antibiotics, 29, 2492-2503 (1982); Langley и Thurston, J. Org. Chem., 52, 91-97 (1987)), сибаномицин (DC-102) (Hara, et al., J. Antibiotics, 41, 702-704 (1988); Itoh, et al., J. Antibiotics, 41, 1281-1284 (1988)), сибиромицин (sibiromycin) (Leber, et al., J. Am. Chem. Soc, 110, 2992-2993 (1988)) и томамицин (tomamycin) (Arima, et al., J. Antibiotics, 25, 437-444 (1972)). PBD имеют следующую общую структуру:
о
Они различаются числом, типом и положением заместителей как в ароматических кольцах A, так и пиррольных кольцах C, а также степенью насыщения кольца C. В кольце B присутствуют имин (N=C), карбиноламин (NH-CH(OH)) или метиловый эфир карбиноламина (NH-CH(OMe)) в положении N10-C11, которое представляет собой электрофильный центр, ответственный за алкилирование ДНК. Все известные природные продукты имеют ^-конфигурацию хирального центра C11a, что обеспечивает правозакрученную форму, если смотреть от кольца C в направлении кольца A. Такая форма придает им подходящую трехмерную конфигурацию для изоспиральности с малой бороздкой B-формы ДНК, что приводит к плотному соединению в месте связывания (Kohn, In Antibiotics III. Springer-Verlag, New York, pp. 3-11 (1975); Hurley и Needham-VanDevanter, Acc. Chem. Res., 19, 230-237 (1986)). Их способность образовывать аддукты в малой бороздке позволяет указанным соединениям влиять на процессинг ДНК, а, следовательно, и применять их в качестве противоопухолевых агентов.
Ранее было обнаружено, что биологическую активность указанных молекул можно усиливать путем объединения двух звеньев PBD посредством их C8/C'-гuдроксильных функциональных групп через гибкий алкиленовый линкер (Bose, D.S., et al., J. Am. Chem. Soc., 114, 4939-4941 (1992); Thurston, D.E., et al., J. Org. Chem., 61, 8141-8147 (1996)). Полагают, что димеры PBD вызывают селективные повреждения последовательностей ДНК, такие как поперечные сшивки палиндромных участков 5'-Pu-GATC-Py-3' цепей ДНК (Smellie, M., et al., Biochemistry, 42, 8232-8239 (2003); Martin, С, et al., Biochemistry, 44, 41354147), что считается основной причиной, определяющей их биологическую активность. Одним из примеров димера PBD, SG2000 (SJG-136)
недавно вошел в фазу II клинических испытаний в области онкологии (Gregson, S., et al., J. Med. Chem., 44, 737-748 (2001); Alley, M.C., et al., Cancer Research, 64, 6700-6706 (2004); Hartley, J.A., et al., Cancer Research, 64, 6693-6699 (2004)).
Позднее авторы настоящего изобретения предложили в WO 2005/085251 димерные соединения PBD, содержащие C2 арильные заместители, такие как SG2202 (ZC-207)
- 1 036202
Было показано, что указанные соединения являются очень подходящими цитотоксическими агентами (Howard, P.W., et al., Bioorg. Med. Chem. (2009), 19 (22), 6463-6466, doi: 10.1016/j.bmcl.2009.09.012).
Благодаря особенности действия указанных высокоактивных соединений при поперечной сшивке ДНК указанные молекулы были получены в симметричной форме. Это обеспечивалось прямым синтезом за счет либо получения фрагментов PBD, уже содержащих линкерную группу димера, либо путем взаимодействия синтезированных фрагментов PBD с линкерной группой димера.
В WO 2010/043880 описаны несимметричные димерные соединения PBD, содержащие арильные группы в положении C2 каждого мономера, где одна из трех указанных арильных групп содержит заместитель, способный обеспечить якорь для связывания указанного соединения и другого фрагмента. В находящейся одновременно на рассмотрении международной заявке PCT/US2011/032664, поданной 15 апреля 2011 г., описано включение указанных соединений димера PBD в конъюгаты направленного действия.
Описание изобретения
Авторы настоящего изобретения разработали дополнительные несимметричные димерные соединения PBD для включения в конъюгаты направленного действия, в которых заместители на C2 арильной группе, не содержащие якорь для связывания указанного соединения и другого фрагмента, отличаются от ранее описанных. Указанные отличающиеся замещающие группы обладают преимуществами при получении применении указанных соединений, особенно в биологических свойствах, и при синтезе конъюгатов, а также биологических свойствах указанных конъюгатов.
Настоящее изобретение включает соединение, имеющее формулу I
или его фармацевтически приемлемую соль или сольват, где
R2 имеет формулу III
-4q1.A^q2.X ш
....... . ...... „ „ ... . ...... *-N<R4 . „N .... . .. ..
где A представляет собой фенил, X представляет собой - где R выбран из группы, состоящей из H и ^^алкила;
и либо:
(i) Q1 представляет собой одинарную связь, и Q2 представляет собой одинарную связь; или (ii) Q1 представляет собой -CH=CH-, и Q2 представляет собой одинарную связь;
R12 представляет собой фенил, замещенный группой, выбранной из OH, CO2H, CO2RO, где
RO выбран из ^^алкила;
R6 и R9 представляют собой H; R7 представляет собой ^^алкокси;
R10 и R11 образуют двойную связь азот-углерод между атомами азота и углерода, к которым они присоединены;
R представляет собой ^^алкиленовую группу;
Y и Y' представляют собой O;
R6, R7, R9 выбраны из тех же групп, как R6, R7 и R9 соответственно, и R10 и R11 представляют собой такие же группы, как R10 и R11.
Согласно второму аспекту настоящего изобретения предложено применение соединения по первому аспекту изобретения для получения лекарственного средства для лечения пролиферативного заболевания. Согласно второму аспекту также предложено соединение по первому аспекту изобретения для применения для лечения пролиферативного заболевания.
Специалисты в данной области техники могут легко определить, подходит ли исследуемый кандидат конъюгата для лечения пролиферативного состояния для любого конкретного типа клеток. Например, исследования, которые можно без труда применять для определения активности, обеспечиваемой конкретным соединением, описаны ниже в примерах.
Согласно третьему аспекту изобретение включает соединение формулы II
или его фармацевтически приемлемую соль или сольват, где
R2 имеет формулу III \q1.AXq2.X ш
- 2 036202 где A представляет собой фенил, X представляет собой . где RN выбран из группы, состоящей из H и С1.4алкила;
и либо:
(i) Q1 представляет собой одинарную связь, и Q2 представляет собой одинарную связь; или (ii) Q1 представляет собой -CH=CH-, и Q2 представляет собой одинарную связь;
R12 представляет собой фенил, замещенный группой, выбранной из OH, CO2H, CO2Ro, где RO выбран из C1-4алкила;
R6 и R9 представляют собой H;
R7 представляет собой С1.4алкокси;
R10 представляет собой карбаматную защитную группу азота, и R11 представляет собой O-ProtO, где ProtO представляет собой защитную группу кислорода;
R представляет собой С3.7алкиленовую группу;
Y и Y' представляют собой O;
R6, R7, R9 выбраны из тех же групп, как R6, R7 и R9 соответственно, и R10 и R11 представляют собой такие же группы, как R10 и R11.
Согласно четвертому аспекту настоящее изобретение включает способ получения соединения формулы I или его фармацевтически приемлемой соли или сольвата из соединения формулы II или его фармацевтически приемлемой соли или сольвата путем снятия защиты иминной связи.
Несимметричные димеры PBD согласно настоящему изобретению получают при помощи способов, отличающихся от применявшихся ранее для получения симметричных димеров PBD. В частности, авторами настоящего изобретения разработан способ, заключающийся в добавлении каждого заместителя C2 в ядро симметричного димера PBD на разных стадиях способа. Соответственно согласно пятому аспекту настоящего изобретения предложен способ получения соединения по первому и третьему аспектам изобретения, включающий по меньшей мере одну стадию способа, описанную ниже.
Согласно шестому аспекту настоящее изобретение относится к конъюгатам, содержащим димеры PBD, связанные с нацеливающим агентом, где указанный димер PBD представляет собой димер PBD формулы I или его фармацевтически приемлемую соль или сольват (см. выше).
Согласно некоторым вариантам реализации конъюгаты имеют следующую формулу IV
L - (LU-D)p (IV) или его фармацевтически приемлемую соль или сольват, где L представляет собой звено лиганда (т.е. нацеливающий агент), LU представляет собой звено линкера, a D представляет собой звено лекарственного соединения, представляющее собой димер PBD (см. ниже). Индекс p составляет от 1 до 20. Соответственно конъюгаты содержат звено лиганда, ковалентно связанное по меньшей мере с одним звеном лекарственного соединения при помощи звена линкера. Звено лиганда, более подробно описанное ниже, представляет собой нацеливающий агент, который связывается с фрагментом-мишенью. Звено лиганда может, например, специфично связываться с компонентом клетки (агент, связывающийся с клеткой) или с другими целевыми молекулами-мишенями. Соответственно в настоящем изобретении также предложены способы лечения, например, различных типов рака и аутоиммунных заболеваний. Указанные способы включают применение конъюгатов, где звено лиганда представляет собой нацеливающий агент, который специфично связывается с молекулой-мишенью. Звено лиганда может представлять собой, например, белок, полипептид или пептид, такой как антитело, антигенсвязывающий фрагмент антитела или другой связывающий агент, такой как гибридный белок Fc.
В конъюгатах согласно настоящему изобретению димер PBD D представляет собой димер формулы I или его фармацевтически приемлемую соль или сольват.
Содержание лекарственного соединения обозначается p, значение количества молекул лекарственного соединения на звено лиганда (например, антитела). Содержание лекарственного соединения может варьироваться от 1 до 20 звеньев лекарственного соединения (D) на звено лиганда (например, Ab или mAb). Для композиций p представляет собой среднее содержание лекарственного соединения в конъюгатах в композиции, и p составляет от 1 до 20.
Согласно некоторым вариантам реализации p составляет от примерно 1 до примерно 8 звеньев лекарственного соединения на звено лиганда. Согласно некоторым вариантам реализации p принимает значение 1. Согласно некоторым вариантам реализации p принимает значение 2. Согласно некоторым вариантам реализации p составляет от примерно 2 до примерно 8 звеньев лекарственного соединения на звено лиганда. Согласно некоторым вариантам реализации p составляет от примерно 2 до примерно 6, от 2 до примерно 5 или от 2 до примерно 4 звеньев лекарственного соединения на звено лиганда. Согласно некоторым вариантам реализации p составляет примерно 2, примерно 4, примерно 6 или примерно 8 звеньев лекарственного соединения на звено лиганда.
Среднее количество звеньев лекарственного соединения на звено лиганда в препаратах после реакции конъюгации может быть охарактеризовано с помощью традиционных средств, например массспектроскопии, анализа ИФА и ВЭЖХ. Может быть также определено количественное распределение конъюгатов через p. В некоторых случаях отделение, очистку и характеризацию гомогенных конъюгатов,
- 3 036202 в которых p имеет конкретное значение, от конъюгатов с другим содержанием лекарственного соединения можно выполнить с помощью средств, таких как обращенно-фазовая ВЭЖХ или электрофорез.
В седьмом аспекте настоящее изобретение относится к соединениям линкер-лекарственное соединение (т.е. лекарственные соединения-линкеры), содержащим димеры PBD (см. выше), связанные со звеном линкера. Указанные лекарственные соединения-линкеры можно использовать в качестве промежуточных веществ для синтеза конъюгатов, содержащих димеры PBD, связанные с нацеливающим агентом.
Указанные лекарственные соединения-линкеры могут иметь следующую формулу V:
LU-D (V) его фармацевтически приемлемую соль или сольват, где LU является звеном линкера, и D является звеном лекарственного соединения, представляющим собой димер PBD.
Фигуры
На фиг. 1 показано действие на объем опухоли конъюгата согласно настоящему изобретению в двух различных дозировках;
на фиг. 2 показано действие на объем опухоли того же конъюгата, как на фиг. 1, на различные опухоли.
Определения.
Фармацевтически приемлемые катионы.
Примеры фармацевтически приемлемых одновалентных и двухвалентных катионов описаны в публикации Berge, et al., J. Pharm. Sci., 66, 1-19 (1977), содержание которой включено в настоящий документ посредством ссылки полностью и для всех целей.
Фармацевтически приемлемый катион может быть неорганическим или органическим.
Примеры фармацевтически приемлемых одновалентных неорганических катионов включают, но не ограничиваются ими, ионы щелочных металлов, такие как Na+ и K+. Примеры фармацевтически приемлемых двухвалентных неорганических катионов включают, но не ограничиваются ими, катионы щелочноземельных металлов, такие как Ca2+ и Mg2+. Примеры фармацевтически приемлемых органических катионов включают, но не ограничиваются ими, ион аммония (т.е. NH4+) и замещенные ионы аммония (например, NH3R+, NH2R2+, NHR3+, NR4+). Примерами некоторых подходящих замещенных ионов аммония являются ионы, полученные из этиламина, диэтиламина, дициклогексиламина, триэтиламина, бутиламина, этилендиамина, этаноламина, диэтаноламина, пиперазина, бензиламина, фенилбензиламина, холина, меглумина и трометамина, а также из аминокислот, таких как лизин и аргинин. Примером распространенного четвертичного иона аммония является N(CH3)4 +.
Заместители.
В настоящем описании выражение возможно замещенный относится к исходной группе, которая может быть незамещенной или замещенной.
Если не указано иное, в настоящем описании термин замещенный относится к исходной группе, которая содержит один или более заместителей. В настоящем описании термин заместитель используется в традиционном значении и относится к химическому фрагменту, который ковалентно присоединен или, если это возможно, конденсирован с исходной группой. Хорошо известен широкий ряд заместителей, и способы их получения и введения в разнообразные исходные группы также хорошо известны.
Примеры заместителей более подробно описаны ниже.
С1-12алкил: в настоящем описании термин С1-12алкил относится к одновалентному фрагменту, полученному в результате удаления атома водорода от атома углерода в углеводороде, содержащем от 1 до 12 атомов углерода, который может быть алифатическим или алициклическим и который может быть насыщенным или ненасыщенным (например, частично ненасыщенным, полностью ненасыщенным). В настоящем описании термин С1-4алкил относится к одновалентному фрагменту, полученному путем удаления атома водорода от атома углерода углеводородного соединения, имеющего от 1 до 4 атомов углерода, которое может быть алифатическим или алициклическим и которое может быть насыщенным или ненасыщенным (например, частично ненасыщенным, полностью ненасыщенным). Аналогично, в настоящем описании термин С1-2алкил относится к одновалентному фрагменту, полученному путем удаления атома водорода от атома углерода углеводородного соединения, имеющего от 1 до 2 атомов углерода, то есть метилу или этилу.
Таким образом, термин алкил включает подклассы алкенил, алкинил, циклоалкил и т.д., описанные ниже.
Примеры насыщенных алкильных групп включают, но не ограничиваются ими, метил (C1), этил (C2), пропил (C3), бутил (C4), пентил (C5), гексил (C6) и гептил (C7).
Примеры насыщенных линейных алкильных групп включают, но не ограничиваются ими, метил (C1), этил (C2), н-пропил (C3), н-бутил (C4), н-пентил (амил) (C5), н-гексил (C6) и н-гептил (C7).
Примеры насыщенных разветвленных алкильных групп включают изопропил (C3), изобутил (C4), втор-бутил (C4), трет-бутил (C4), изопентил (C5) и неопентил (C5).
С2-12алкенил: в настоящем описании термин С2-12алкенил относится к алкильной группе, содержащей одну или более двойных углерод-углеродных связей.
Примеры ненасыщенных алкенильных групп включают, но не ограничиваются ими, этенил (винил,
- 4 036202
-CH=CH2), 1-пропенил (-CH=CH-CH3), 2-пропенил (аллил, -CH-CH=CH2), изопропенил (1-метилвинил,
-C(CH3)=CH2), бутенил (C4), пентенил (C5) и гексенил (C6).
С2-12алкинил: в настоящем описании термин С2-12алкинил относится к алкильной группе, содержащей одну или более тройных углерод-углеродных связей.
Примеры ненасыщенных алкинильных групп включают, но не ограничиваются ими, этинил (-CbCH) и 2-пропинил (пропаргил, -CH2-C^CH).
С3-12циклоалкил: в настоящем описании термин С3-12циклоалкил относится к алкильной группе, которая также является циклической группой; то есть представляет собой одновалентный фрагмент, полученный в результате удаления атома водорода из атома алициклического кольца циклического углеводородного соединения (карбоциклического соединения), содержащий от 3 до 7 атомов углерода, включая от 3 до 7 атомов в кольце.
Примеры циклоалкильных групп включают, но не ограничиваются ими, группы, полученные из насыщенных моноциклических углеводородных соединений:
циклопропана (C3), циклобутана (C4), циклопентана (C5), циклогексана (C6), циклогептана (C7), метилциклопропана (C4), диметилциклопропана (C5), метилциклобутана (C5), диметилциклобутана (C6), метилциклопентана (C6), диметилциклопентана (C7) и метилциклогексана (C7);
ненасыщенных моноциклических углеводородных соединений:
циклопропена (C3), циклобутена (C4), циклопентена (C5), циклогексена (C6), метилциклопропена (C4), диметилциклопропена (C5), метилциклобутена (C5), диметилциклобутена (C6), метилциклопентена (C6), диметилциклопентена (C7) и метилциклогексена (C7); и насыщенных полициклических углеводородных соединений:
норкарана (C7), норпинана (C7), норборнана (C7).
В указанном контексте префиксы (например, C3-20, C3-7, C5-6 и т.д.) обозначают количество атомов в кольце или диапазон количества атомов в кольце, включая атомы углерода и гетероатомы.
Приведенные выше группы, по отдельности или как часть другого заместителя, могут быть замещены одной или более группами, выбранными из таких же групп и дополнительных заместителей, перечисленных ниже.
Галогены: -F, -Cl, -Br и -I.
Гидрокси: -OH.
Простой эфир: -OR, где R представляет собой заместитель простого эфира, например С1-7алкильную группу (которую также называют С1-7алкоксигруппой, ка описано ниже), C3-20 гетероциклильную группу (которую также называют С3-20гетероциклилоксигруппой) или С5-20арильную группу (которую также называют С5-20арилоксигруппой), предпочтительно С1-7алкильную группу.
Алкокси: -OR, где R представляет собой алкильную группу, например С1-7алкильную группу. Примеры С1-7алкоксигрупп включают, но не ограничиваются ими, -OMe (метокси), -OEt (этокси), -O(nPr) (нпропокси), -O(iPr) (изопропокси), -O(nBu) (н-бутокси), -O(sBu) (втор-бутокси), -O(iBu) (изобутокси) и -O(tBu) (трет-бутокси).
Ацеталь: -CH(OR1)(OR2), где R1 и R2 независимо представляют собой заместители ацеталя, например С1-7алкильную группу, С3-20гетероциклильную группу или С5-20арильную группу, предпочтительно С1-7алкильную группу, или в случае циклической ацетальной группы R1 и R2, взятые совместно с двумя атомами кислорода, к которым они присоединены, и атомами углерода, к которым они присоединены, образуют гетероциклическое кольцо, содержащее от 4 до 8 атомов в кольце. Примеры ацетальных групп включают, но не ограничиваются ими, -CH(OMe)2, -CH(OEt)2 и -CH(OMe)(OEt).
Гемиацеталь: -CH(OH)(OR1), где R1 представляет собой заместитель гемиацеталя, например С1-7алкильную группу, С3-20гетероциклильную группу или С5-20арильную группу, предпочтительно С1-7алкильную группу. Примеры гемиацетальных групп включают, но не ограничиваются ими, -CH(OH)(OMe) и -CH(OH)(OEt).
Кеталь: -CR(OR1)(OR2), где R1 и R2 такие же, как определены для ацеталей, и R представляет собой заместитель кеталя, отличный от водорода, например С1-7алкильную группу, С3-20гетероциклильную группу или С5-20арильную группу, предпочтительно С1-7алкильную группу. Примеры кеталей включают, но не ограничиваются ими, -C(Me)(OMe)2, -C(Me)(OEt)2, -C(Me)(OMe)(OEt), -C(Et)(OMe)2, -C(Et)(OEt)2 и -C(Et)(OMe)(OEt).
Гемикеталь: -CR(OH)(OR1), где R1 такой же, как определен для гемиацеталей, и R представляет собой заместитель гемикеталя, отличный от водорода, например С1-7алкильную группу, С3-20гетероциклильную группу или С5-20арильную группу, предпочтительно С1-7алкильную группу. Примеры гемикеталей включают, но не ограничиваются ими, -C(Me)(OH)(OMe), -C(Et)(OH)(OMe), -C(Me)(OH)(OEt) и -C(Et)(OH)(OEt).
Оксогруппа (кето-, -он): =O.
Тион (тиокетон): =S.
Имино (иминная группа): =NR, где R представляет собой заместитель имина, например водород, С1-7алкильную группу, С3-20гетероциклильную группу или С5-20арильную группу, предпочтительно водород или С1-7алкильную группу. Примеры иминов включают, но не ограничиваются ими, =NH, =NMe,
- 5 036202 =NEt и =NPh.
Формил (карбальдегид, карбоксальдегид): -C(=O)H.
Ацил (кето-): -C(=O)R, где R представляет собой заместитель ацила, например С1-7алкильную группу (которую также называют C1-7алкилацилом или C1-7алканоилом), C3-20 гетероциклильную группу (которую также называют С3-20гетероциклилацилом) или С5-20арильную группу (которую также называют С5-20арилацилом), предпочтительно С1-7алкильную группу. Примеры ацильных групп включают, но не ограничиваются ими, -C(=O)CH3 (ацетил), -C(=O)CH2CH3 (пропионил), -C(=O)C(CH3)3 (т-бутирил) и -C(=O)Ph (бензоил, фенон).
Карбокси (карбоновая кислота): -C(=O)OH.
Тиокарбокси (тиокарбоновая кислота): -C(=S)SH.
Тиолокарбокси (тиолокарбоновая кислота): -C(=O)SH.
Тионокарбокси (тионокарбоновая кислота): -C(=S)OH.
Имидокислота: -C(=NH)OH.
Гидроксамовая кислота: -C(=NOH)OH.
Сложный эфир (карбоксилат, сложный эфир карбоновой кислоты, оксикарбонил): -C(=O)OR, где R представляет собой заместитель сложноэфирной группы, например С1-7алкильную группу, С3-20гетероциклильную группу или С5-20арильную группу, предпочтительно С1-7алкильную группу. Примеры сложноэфирных групп включают, но не ограничиваются ими, -C(=O)OCH3, -C(=O)OCH2CH3, -С(=О)ОС(СНз)з и -C(=O)OPh.
Ацилокси (обращенный сложный эфир): -OC(=O)R, где R представляет собой заместитель ацилокси, например С1-7алкильную группу, С3-20гетероциклильную группу или С5-20арильную группу, предпочтительно С1-7алкильную группу. Примеры ацилоксигрупп включают, но не ограничиваются ими, -ОС(=О)СНз (ацетокси), -ОС(=О)СН2СНз, -ОС(=О)С(СНз)з, -OC(=O)Ph и -OC(=O)CH2Ph.
Оксикарбонилокси: -OC(=O)OR, где R представляет собой заместитель сложноэфирной группы, например С1-7алкильную группу, С3-20гетероциклильную группу или С5-20арильную группу, предпочтительно С1-7алкильную группу. Примеры сложноэфирных групп включают, но не ограничиваются ими, -ОС(=О)ОСНз, -ОС(=О)ОСН2СНз, -ОС(=О)ОС(СНз)з и -OC(=O)OPh.
Амино: -NR1R2, где R1 и R2 независимо представляют собой заместители аминогруппы, например водород, С1-7алкильную группу (которую также называют С1-7алкиламино или ди-С1-7алкиламино), С3-20гетероциклильную группу или С5-20арильную группу, предпочтительно H или С1-7алкильную группу, или в случае циклической аминогруппы R1 и R2 совместно с атомом азота, к которому они присоединены, образуют гетероциклическое кольцо, содержащее от 4 до 8 атомов в кольце. Аминогруппы могут быть первичными (-NH2), вторичными (-NHR1) или третичными (-NHR1R2), а также в случае катионной формы могут быть четвертичными (-+NR1R2R3). Примеры аминогрупп включают, но не ограничиваются ими, -NH2, -NHCH3, -NHC(CH3)2, -N(CH3)2, -N(CH2CH3)2 и -NHPh. Примеры циклических аминогрупп включают, но не ограничиваются ими, азиридино, азетидино, пирролидино, пиперидино, пиперазино, морфолино и тиоморфолино.
Амидная группа (карбамоил, карбамил, аминокарбонил, карбоксамид): -C(=O)NR1R2, где R1 и R2 независимо представляют собой заместители аминогруппы, определенные для аминогрупп. Примеры амидогрупп включают, но не ограничиваются ими, -C(=O)NH2, -C(=O)NHCH3, -C(=O)N(CH3)2, -C(=O)NHCH2CH3 и -C(=O)N(CH2CH3)2, a также амидогруппы, в которых R1 и R2 совместно с атомом азота, к которому они присоединены, образуют гетероциклическую структуру, как, например, в случае пиперидинокарбонила, морфолинокарбонила, тиоморфолинокарбонила и пиперазинокарбонила.
Тиоамид (тиокарбамил): -C(=S)NR1R2, где R1 и R2 независимо представляют собой заместители аминогруппы, определенные для аминогрупп. Примеры амидных групп включают, но не ограничиваются ими, -C(=S)NH2, -C(=S)NHCH3, -C(=S)N(CH3)2U -C(=S)NHCH2CH3.
Ациламидо (ациламино): -NR1C(=O)R2, где R1 представляет собой заместитель амидной группы, например водород, С1-7алкильную группу, С3-20гетероциклильную группу или C5-20 арильную группу, предпочтительно водород или С1-7алкильную группу, и R2 представляет собой заместитель ацильной группы, например С1-7алкильную группу, Сз-20 гетероциклильную группу или С5-20арильную группу, предпочтительно водород или С1-7алкильную группу. Примеры ациламидогрупп включают, но не ограничиваются ими, -NHC(=O)CH3, -NHC(=O)CH2CH3 и -NHC(=O)Ph. R1 и R2, взятые вместе, могут образовывать циклическую структуру, например, как в сукцинимидиле, малеимидиле и фталимидиле
сукцинимидил малеимидил фталимидил
Аминокарбонилокси: -OC(=O)NR1R2, где R1 и R2 независимо представляют собой заместители аминогруппы, определенные для аминогрупп. Примеры аминокарбонилоксигрупп включают, но не ограничиваются ими, -OC(=O)NH2, -OC(=O)NHMe, -OC(=O)NMe2 и -OC(=O)NEt2.
Уреидогруппа: -N(R1)CONR2R3, где R2 и R3 независимо представляют собой заместители амино- 6 036202 группы, определенные для аминогрупп, a R1 представляет собой заместитель уреидогруппы, например водород, С1-7алкильную группу, С3-20гетероциклильную группу или С5-20арильную группу, предпочтительно водород или C1-7алкильную группу. Примеры уреидогрупп включают, но не ограничиваются ими,
-NHCONH2, -NHCONHMe, -NHCONHEt, -NHCONMe2, -NHCONEt2, -NMeCONH2, -NMeCONHMe,
-NMeCONHEt, -NMeCONMe2n -NMeCONEt2.
Гуанидин: -NH-C(=NH)NH2.
Тетразолил: пятичленное ароматическое кольцо, содержащее четыре атома азота и один атом углерода
Иминогруппа: =NR, где R представляет собой заместитель иминогруппы, например водород, С1-7алкильную группу, С3-20гетероциклильную группу или С5-20арильную группу, предпочтительно H или С1-7алкильную группу. Примеры иминогрупп включают, но не ограничиваются ими, =NH, =NMe и =NEt.
Амидин (амидино): -C(=NR)NR2, где каждый R представляет собой заместитель амидиногруппы, например водород, С1-7алкильную группу, С3-20гетероциклильную группу или С6-20арильную группу, предпочтительно H или С1-7алкильную группу. Примеры амидиногрупп включают, но не ограничиваются ими, -C(=NH)NH2, -C^NHNMe^ -C(=NMe)NMe2.
Нитро: -NO2.
Нитрозо: -NO.
Азидо: -N3.
Циано (нитрил, карбонитрил): -CN.
Изоциано: -NC.
Цианато: -OCN.
Изоцианато: -NCO.
Тиоциано (тиоцианато): -SCN.
Изотиоциано (изотиоцианато): -NCS.
Сульфгидрил (тиол, меркапто): -SH.
Простой тиоэфир (сульфид): -SR, где R представляет собой заместитель простого тиоэфира, например С1-7алкильную группу (которую также называют С1-7алкилтиогруппой), С3-20гетероциклильную группу или С5-20арильную группу, предпочтительно С1-7алкильную группу. Примеры С1-7алкилтиогрупп включают, но не ограничиваются ими, -SCH3 и -SCH2CH3.
Дисульфид: -SS-R, где R представляет собой заместитель дисульфида, например С1-7алкильную группу, С3-20гетероциклильную группу или С5-20арильную группу, предпочтительно С1-7алкильную группу (которую также называют С1-7алкилдисульфидом). Примеры С1-7алкилдисульфидных групп включают, но не ограничиваются ими, -SSCH3 и -SSCH2CH3.
Сульфин (сульфинил, сульфоксид): -S(=O)R, где R представляет собой заместитель сульфиногруппы, например С1-7алкильную группу, С3-20гетероциклильную группу или С5-20арильную группу, предпочтительно С1-7алкильную группу. Примеры сульфиновых групп включают, но не ограничиваются ими, -S(=O)CH3 и -S(=O)CH2CH3.
Сульфон (сульфонил): -S(=O)2R, где R представляет собой заместитель сульфоновой группы, например С1-7алкильную группу, С3-20гетероциклильную группу или С5-20арильную группу, предпочтительно С1-7алкильную группу, включая, например, фторированную или перфторированную С1-7алкильную группу. Примеры сульфоновых групп включают, но не ограничиваются ими, -S(=O)2CH3 (метансульфонил, мезил), -S(=O)2CF3 (трифлил), -S(=O)2CH2CH3 (эзил), -S(=O)2C4F9 (нонафлил), -S(=O)2CH2CF3 (трезил), -S(=O)2CH2CH2NH2 (таурил), -S(=O)2Ph (фенилсульфонил, безил), 4-метилфенилсульфонил (тозил), 4-хлорфенилсульфонил (хлозил), 4-бромфенилсульфонил (брозил), 4-нитрофенил (нозил), 2-нафталинсульфонат (напсил) и 5-диметиламинонафталин-1-илсульфонат (дансил).
Сернистая кислота (сульфино): -S(=O)OH, -SO2H.
Сульфокислота (сульфо): -S(=O)2OH, -SO3H.
Сульфинат (сложный эфир сернистой кислоты): -S(=O)OR; где R представляет собой заместитель сульфинатной группы, например С1-7алкильную группу, С3-20гетероциклильную группу или С5-20арильную группу, предпочтительно С1-7алкильную группу. Примеры сульфинатных групп включают, но не ограничиваются ими, -S(=O)OCH3 (метоксисульфинил; метилсульфинат) и -S(=O)OCH2CH3 (этоксисульфинил; этилсульфинат).
Сульфонат (сложный эфир сульфокислоты): -S(=O)2OR, где R представляет собой заместитель сульфонатной группы, например С1-7алкильную группу, С3-20гетероциклильную группу или С5-20арильную группу, предпочтительно С1-7алкильную группу. Примеры сульфонатных групп включают, но не ограничиваются ими, -S(=O)2OCH3 (метоксисульфонил; метилсульфонат) и -S(=O)2OCH2CH3 (этоксисульфонил; этилсульфонат).
Сульфинилокси: -OS(=O)R, где R представляет собой заместитель сульфинилоксигруппы, например С1-7алкильную группу, С3-20гетероциклильную группу или С5-20арильную группу, предпочтительно
- 7 036202
С1-7алкильную группу. Примеры сульфинилоксигрупп включают, но не ограничиваются ими,
-OS(=O)CH3 и -OS(=O)CH2CH3.
Сульфонилокси: -OS(=O)2R, где R представляет собой заместитель сульфонилоксигруппы, например ^-щлкильную группу, ^-^гетероциклильную группу или ^-^арильную группу, предпочтительно C1-7алкильную группу. Примеры сульфонилоксигрупп включают, но не ограничиваются ими, -OS(=O)2CH3 (мезилат) и -OS(=O)2CH2Ch3 (эзилат).
Сульфат: -OS(=O)2OR; где R представляет собой заместитель сульфатной группы, например C1—7алкильную группу, ^-^гетероциклильную группу или ^-^арильную группу, предпочтительно СпЩлкильную группу. Примеры сульфатных групп включают, но не ограничиваются ими, -OS(=O)2OCH3 и -SO(=O)2OCH2CH3.
Сульфамил (сульфамоил; амид сернистой кислоты; сульфинамид): -S(=O)NR1R2, где R1 и R2 независимо представляют собой заместители аминогруппы, определенные для аминогрупп. Примеры сульфамильных групп включают, но не ограничиваются ими, -S(=O)NH2, -S(=O)NH(CH3), -S(=O)N(CH3)2, -S(=O)NH(CH2CH3), -S(=O)N(CH2CH3)2 и -S(=O)NHPh.
Сульфонамидо (сульфинамоил, амид сульфокислоты, сульфонамид): -S(=O)2NR1R2, где R1 и R2 независимо представляют собой заместители аминогруппы, определенные для аминогрупп. Примеры сульфонамидных групп включают, но не ограничиваются ими, -S(=O)2NH2, -S(=O)2NH(CH3), -S(=O)2N(CH3)2, -S(=O)2NH(CH2CH3), -S(=O)2N(CH2CH3)2u -S(=O)2NHPh.
Сульфамино: -NR1S(=O)2OH, где R1 представляет собой заместитель аминогруппы, определенный для аминогрупп. Примеры сульфаминогрупп включают, но не ограничиваются ими, -NHS(=O)2OH и -N(CH3)S(=O)2OH.
Сульфонамино: -NR1S(=O)2R, где R1 представляет собой заместитель аминогруппы, определенный для аминогрупп, и R представляет собой заместитель сульфонаминогруппы, например СпЩлкильную группу, ^-^гетероциклильную группу или ^-^арильную группу, предпочтительно ^-щлкильную группу. Примеры сульфонаминогрупп включают, но не ограничиваются ими, -NHS(=O)2CH3 и -N(CH3)S(=O)2C6H5.
Сульфинамино: -NR1S(=O)R, где R1 представляет собой заместитель аминогруппы, определенный для аминогрупп, и R представляет собой заместитель сульфинаминогруппы, например ^-щлкильную группу, ^-.^гетероциклильную группу или ^-^арильную группу, предпочтительно ^-щлкильную группу. Примеры сульфинаминогрупп включают, но не ограничиваются ими, -NHS(=O)CH3 и -N(CH3)S(=O)C6H5.
Фосфино (фосфин): -PR2, где R представляет собой заместитель фосфиногруппы, например -H, СпЩлкильную группу, ^-^гетероциклильную группу или ^-^арильную группу, предпочтительно -H, СпЩлкильную группу или ^-^арильную группу. Примеры фосфиновых групп включают, но не ограничиваются ими, -PH2, -P(CH3)2, -P(CH2CH3)2, -P(t-Bu)2 и -P(Ph)2.
Фосфо: -P(=O)2.
Фосфинил (фосфиноксид): -P(=O)R2, где R представляет собой заместитель фосфинила, например C1—7алкильную группу, ^-^гетероциклильную группу или ^-^арильную группу, предпочтительно C1-7алкильную группу или ^-^арильную группу. Примеры фосфинильных групп включают, но не ограничиваются ими, -P(=O)(CH3)2, -P(=O)(CH2CH3)2, -P(=O)(t-Bu)2 и -P(=O)(Ph)2.
Фосфоновая кислота (фосфоно): -P(=O)(OH)2.
Фосфонат (сложный эфир фосфоновой кислоты): -P(=O)(OR)2, где R представляет собой заместитель фосфонатной группы, например -H, ^-щлкильную группу, ^-^гетероциклильную группу или ^-^арильную группу, предпочтительно -H, СпЩлкильную группу или ^-^арильную группу. Примеры фосфонатных групп включают, но не ограничиваются ими, -P(=O)(OCH3)2, -P(=O)(OCH2CH3)2, -P(=O)(Ot-Bu)2 и -P(=O)(OPh)2.
Фосфорная кислота (фосфоноокси): -ОР(=О)(ОН)2.
Фосфат (сложный эфир фосфоноокси): -OP(=O)(OR)2, где R представляет собой заместитель фосфатной группы, например -H, ^-щлкильную группу, ^-^гетероциклильную группу или ^-^арильную группу, предпочтительно -H, C1-7алкильную группу или ^-^арильную группу. Примеры фосфатных групп включают, но не ограничиваются ими, -ОР(=О)(ОСН3)2, -ОР(=О)(ОСН2СН3)2, -OP(=O)(O-t-Bu)2 и -OP(=O)(OPh)2.
Фосфористая кислота: -ОР(ОН)2.
Фосфит: -OP(OR)2, где R представляет собой заместитель фосфитной группы, например - H, СпЩлкильную группу, ^-^гетероциклильную группу или ^-^арильную группу, предпочтительно -H, СпЩлкильную группу или ^-^арильную группу. Примеры фосфитных групп включают, но не ограничиваются ими, -ОР(ОСНз)2, -ОР(ОСН2СНз)2, -OP(O-t-Bu)2 и -OP(OPh)2.
Фосфорамидит: -OP(OR1)-NR22, где R1 и R2 представляют собой заместители фосфорамидитной группы, например -H, (возможно замещенную) СпЩлкильную группу, ^-^гетероциклильную группу или ^-^арильную группу, предпочтительно -H, СпЩлкильную группу или ^-^арильную группу. Примеры фосфорамидитных групп включают, но не ограничиваются ими, -OP(OCH2CH3)-N(CH3)2, -OP(OCH2CH3)-N(i-Pr)2 и -OP(OCH2CH2CN)-N(i-Pr)2.
- 8 036202
Фосфорамидат: -OP(=O)(OR1)-NR2 2, где R1 и R2 представляют собой заместители фосфорамидатной группы, например -H, (возможно замещенную) СгЩлкильную группу, C3-20гетероцuклильную группу или ^-^арильную группу, предпочтительно -H, C1-7алкильную группу или ^-^арильную группу. Примеры фосфорамидатных групп включают, но не ограничиваются ими, -OP(=O)(OCH2CH3)-N(CH3)2,
-OP(=O)(OCH2CH3)-N(i-Pr)2 и -OP(=O)(OCH2CH2CN)-N(i-Pr)2.
Алкилен.
^^алкилен: в настоящем описании термин ^^алкилен относится к бидентатному фрагменту, полученному в результате удаления двух атомов водорода, обоих от одного атома углерода или по одному от каждого из двух разных атомов углерода, в углеводороде, содержащем от 3 до 7 атомов углерода (если не указано иное), который может быть алифатическим или апициклическим и который может быть насыщенным, частично ненасыщенным или полностью ненасыщенным. Таким образом, термин алкилен включает такие подклассы, как алкенилен, алкинилен, циклоалкилен и т.д., описанные ниже.
Примеры линейных насыщенных ^^алкиленовых групп включают, но не ограничиваются ими, -(CH2)n-, где n представляет собой целое число от 3 до 7, например -CH2CH2CH2-(пропилен), -CH2CH2CH2CH2- (бутилен), -CH2CH2CH2CH2CH2- (пентилен) и -CH2CH2CH2CH-2CH2CH2CH2- (гептилен).
Примеры разветвленных насыщенных ^^алкиленовых групп включают, но не ограничиваются ими, -CH(CH3)CH2-, -CH(CH3)CH2CH2-, -CH(CH3)CH2CH2CH2-, -CH2CH(CH3)CH2-, -CH2CH(CH3)CH2CH2-CH(CH2CH3)-, -CH(CH2CH3)CH2- и -CH2CH(CH2CH3)CH2-.
Примеры линейных частично ненасыщенных ^^алкиленовых групп (^^алкениленовых и алкиниленовых групп) включают, но не ограничиваются ими, -CH=CH-CH2-, -CH2-CH=CH2-, -CH=CH-CH2-CH2-CH=CH-CH2-CH2-CH2-, -CH=CH-CH=CH-, -CH=CH-CH=CH-CH2-, -CH=CH-CH=CH-CH2-CH2-, -CH=CH-CH2-CH=CH-, -CH=CH-CH2-CH2-CH=CH- и -CH2-C C-CH2-.
Примеры разветвленных частично ненасыщенных ^^алкиленовых групп (^-щлкениленовых и алкиниленовых групп) включают, но не ограничиваются ими, -C(CH3)=CH-, -C(CH3)=CH-CH2-, -CH=CHCH(CH3)- и -C C-CH(CH3)-.
Примеры алициклических насыщенных ^^алкиленовых групп (C3-7циклоалкиленов) включают, но не ограничиваются ими, циклопентилен (например, циклопент-1,3-илен) и циклогексилен (например, циклогекс-1,4-илен).
Примеры алициклических частично ненасыщенных ^^алкиленовых групп (C3-7циклоалкиленов) включают, но не ограничиваются ими, циклопентенилен (например, 4-циклопентен-1,3-илен), циклогексенилен (например, 2-циклогексен-1,4-илен; 3-циклогексен-1,2-илен; 2,5-циклогексадиен-1,4-илен).
Защитные группы атома кислорода: термин защитные группы атома кислорода относится к фрагменту, который защищает гидроксигруппу, и такие группы хорошо известны в данной области техники. Большое число подходящих групп описано в Greene, T.W. и Wuts, G.M., Protective Groups in Organic Synthesis, 3rd Edition, John Wiley & Sons, Inc., 1999 на с. 23-100, содержание которого включено в настоящий документ посредством ссылки во всей полноте и для любых целей. Классы групп, представляющие наибольший интерес, включают простые силильные эфирные группы (например, триметилсилильную группу (TMS), трет-бутилдиметилсилильную группу (TBDMS)), замещенные простые метиловые эфирные группы (например, тетрагидропиранильную группу (ТНР)) и сложноэфирные группы (например, ацетатную).
Карбаматные защитные группы атома азота: термин карбаматные защитные группы атома азота относится к фрагменту, который защищает атом азота иминной связи, и такие группы хорошо известны в данной области техники. Указанные группы имеют следующую структуру:
где R'10 представляет собой R, определенный выше. Большое число подходящих групп описано в Greene, T.W. и Wuts, G.M., Protective Groups in Organic Synthesis, 3rd Edition, John Wiley & Sons, Inc., 1999, на с. 503-549, содержание которого включено в настоящий документ посредством ссылки во всей полноте и для любых целей.
Гемиаминальные защитные группы атома азот: термин гемиаминальные защитные группы атома азота относится к группе, имеющей следующую структуру:
где R'10 представляет собой R, определенный выше. Большое число подходящих групп описано в Greene, T.W. и Wuts, G.M., Protective Groups in Organic Synthesis, 3rd Edition, John Wiley & Sons, Inc., 1999, на с. 633-647, содержание которого включено в настоящий документ посредством ссылки во всей полноте и для любых целей.
Конъюгаты.
В настоящем изобретении предложены конъюгаты, содержащие димер PBD, связанный со звеном
- 9 036202 лиганда через звено линкера. Согласно одному из вариантов реализации звено линкера включает удлиняющее звено (A), специфичное звено (L1) и звено-спейсер (L2). Звено линкера связано одним концом со звеном лиганда (L) и другим концом - с димерным соединением PBD (D).
Согласно одному аспекту такой конъюгат представлен ниже формулой IVa
L- (A1a-L1s-L2y-D)p (IVa) или его фармацевтически приемлемой солью или сольватом, где
L представляет собой звено лиганда; и
- A1a-L1s-L2y- представляет собой звено линкера (LU), где
- A1 представляет собой удлиняющее звено, a представляет собой 1 или 2,
- L1 представляет собой специфичное звено, s представляет собой целое число в диапазоне от 0 до 12,
- L2 представляет собой звено-спейсер, y представляет собой 0, 1 или 2;
- D представляет собой димер PBD; и p принимает значения от 1 до 20.
Согласно другому аспекту такой конъюгат представлен ниже формулой IVb
L1s
I
L - (A1 a- L2 y-D)p (IVb)
Также его можно представить в виде
L - (А1а- L2y (- L1 S) -D)p (IVb) или его фармацевтически приемлемой солью или сольватом где
L представляет собой звено лиганда; и
- A1a-L1s(L2 y)- представляет собой звено линкера (LU), где
- A1 представляет собой удлиняющее звено, связанное с удлиняющим звеном (L2), a представляет собой 1 или 2,
- L1 представляет собой специфичное звено, связанное с удлиняющим звеном (L2), s представляет собой целое число в диапазоне от 0 до 12,
- L2 представляет собой звено-спейсер, y представляет собой 0, 1 или 2;
- D представляет собой димер PBD; и p принимает значения от 1 до 20.
Предпочтительные варианты реализации изобретения.
Представленные ниже предпочтительные варианты реализации можно применять для всех аспектов настоящего изобретения, как описано выше, или они могут относиться к одному аспекту. Предпочтительные варианты реализации можно объединять в любых комбинациях.
Согласно одному из вариантов реализации указанный конъюгат имеет формулу
L- (A1a-L1s-L2y-D)p,
L- (A1 a-Ls1-D)p,
L- (A1-L1-D)p или
L- (A1-D)p или его фармацевтически приемлемая соль или сольват, где L, A1, a, L1, s, L2, D, y и p такие, как описано выше.
Согласно одному из вариантов реализации звено лиганда (L) представляет собой связывающийся с клетками агент (CBA), который специфично связывается с молекулой-мишенью на поверхности клеткимишени. Ниже приведена формула соединения в качестве примера
где звездочка означает место присоединения к звену лекарственного соединения (D), CBA представляет собой связывающийся с клетками агент, L1 представляет собой специфичное звено, A1 представляет собой удлиняющее звено, соединяющее L1 и связывающийся с клетками агент, L2 представляет собой звено-спейсер, которое представляет собой ковалентную связь, саморасщепляющуюся группу, или совместно с -OC(=O) образует саморасщепляющуюся группу, при атом L2 является необязательным. -OC(=O)- может рассматриваться как часть L1 или L2 при необходимости.
- 10 036202
Согласно другому варианту реализации звено лиганда (L) представляет собой связывающийся с клетками агент (CBA), который специфично связывается с молекулой-мишенью на поверхности клеткимишени. Ниже представлена формула соединения в качестве примера
СВА - А1а- L1S - L2 y где звездочка означает место присоединения к звену лекарственного соединения (D), CBA представляет собой связывающийся с клетками агент, L1 представляет собой специфичное звено, A1 представляет собой удлиняющее звено, соединяющее L1 и связывающийся с клетками агент, L2 представляет собой звено-спейсер, которое представляет собой ковалентную связь или саморасщепляющуюся группу, а представляет собой 1 или 2, s представляет собой 0, 1 или 2, и y представляет собой 0, 1 или 2.
Согласно вариантам реализации, проиллюстрированным выше, L1 может представлять собой способное к расщеплению специфичное звено и может называться триггер, который при расщеплении активирует саморасщепляющуюся группу (или саморасщепляющиеся группы) в L2, в случае если саморасщепляющаяся(иеся) группа(ы) присутствует(ют). Когда специфичное звено L1 расщепляется или линкер (т.е. ковалентная связь) между L1 и L2 расщепляется, то саморасщепляющаяся группа высвобождает звено лекарственного соединения (D).
Согласно другому варианту реализации звено лиганда (L) представляет собой связывающийся с клетками агент (CBA), который специфично связывается с молекулой-мишенью на поверхности клеткимишени. Ниже приведена формула соединения в качестве примера
L1 S
I
СВА-А1а-L2 y-* где звездочка означает место присоединения к звену лекарственного соединения (D), CBA представляет собой связывающийся с клетками агент, L1 представляет собой специфичное звено, связанное с L2, A1 представляет собой удлиняющее звено, соединяющее L2 и связывающийся с клетками агент, L2 представляет собой саморасщепляющуюся группу, а представляет собой 1 или 2, s представляет собой 1 или 2, и y представляет собой 1 или 2.
Согласно различным вариантам реализации, описанным в настоящем документе, природа L1 и L2 может изменяться в широких пределах. Указанные группы выбирают с учетом их характеристик, которые могут частично определяться условиями в том месте, в которое доставляется конъюгат. Если специфичное звено L1 способно к расщеплению, то структуру и/или последовательность L1 выбирают таким образом, чтобы оно расщеплялось под действием ферментов, присутствующих в целевом участке (например, в клетке-мишени). Также можно применять звенья L1, которые способны расщепляться в результате изменений pH (например, фрагменты, лабильные к действию кислоты или основания), температуры или под действием облучения (например, фотолабильные фрагменты). Звенья L1, способные расщепляться в восстановительных или окислительных условиях, также можно использовать в указанных конъюгатах.
Согласно некоторым вариантам реализации L1 может содержать одну аминокислоту или непрерывную последовательность аминокислот. Последовательность аминокислот может представлять собой субстрат-мишень для фермента.
Согласно одному из вариантов реализации L1 способен расщепляться под действием ферментов. Согласно одному из вариантов реализации фермент представляет собой астеразу или пептидазу. Например, L1 может расщепляться лизосомной протеазой, такой как катепсин.
Согласно одному из вариантов реализации L2 присутствует и совместно с -C( О)О-образует саморасщепляющуюся группу или саморасщепляющиеся группы. Согласно некоторым вариантам реализации -C(=O)O- также представляет собой саморасщепляющуюся группу.
Согласно одному из вариантов реализации, где L1 способен расщепляться под действием фермента, и L2 присутствует, фермент расщепляет связь между L1 и L2, в результате чего саморасщепляющаяся(иеся) группа(ы) высвобождает(ют) звено лекарственного соединения.
L1 и L2, в случае если присутствуют, могут быть связаны с помощью связывающей группы, выбранной из
-Ο(=Ο)ΝΗ-,
-С(=О)О-,
-NHC(=O)-,
-00(=0)-,
-00(=0)0-,
-ΝΗΟ(=Ο)Ο-,
-ΟΟ(=Ο)ΝΗ-,
-ΝΗΟ(=Ο)ΝΗ и
-О- (гликозидная связь).
Аминогруппа в L1, которая связана с L2, может представлять собой N-конец аминокислоты или может быть получена из аминогруппы боковой цепи аминокислоты, например боковой цепи аминокислоты лизин.
- 11 036202
Карбоксильная группа в L1, которая связана с L2, может представлять собой C-конец аминокислоты или может быть получена из карбоксильной группы боковой цепи аминокислоты, например боковой цепи аминокислоты глутаминовая кислота.
Гидроксигруппа в L1, которая связана с L2, может быть получена из гидроксигруппы боковой цепи аминокислоты, например боковой цепи аминокислоты серин.
Согласно одному из вариантов реализации -C(=O)Q- и L2 вместе образуют группу
где звездочка означает место присоединения к звену лекарственного соединения, волнистая линия означает место присоединения к L1, Y представляет собой -N(H)-, -Q-, -C(=O)N(H)- или -C(=O)Q-, и n принимает значения от 0 до 3. Фениленовое кольцо возможно замещено одним, двумя или тремя заместителями, описанными в настоящем документе.
Согласно одному из вариантов реализации Y представляет собой NH.
Согласно одному из вариантов реализации n принимает значение 0 или 1. Предпочтительно n принимает значение 0.
Если Y представляет собой NH, и n принимает значение 0, то саморасщепляющуюся группу можно назвать п-аминобензилкарбонильным линкером (PABC).
Саморасщепляющаяся группа обеспечивает высвобождение звена лекарственного соединения (т.е. несимметричного PBD), если активируется удаленный участок линкера, при этом разложение происходит согласно представленному ниже уравнению (при n=0)
где звездочка означает место присоединения к звену лекарственного соединения, L* представляет собой активированную форму остатка линкера, высвобожденное звено лекарственного соединения не показано. Указанные группы обладают преимуществом, заключающимся в отделении места активации от лекарственного соединения.
Согласно другому варианту реализации -C(=O)Q- и L2 вместе образуют группу, выбранную из
где звездочка, волнистая линия, Y и n такие, как определено выше. Каждое фениленовое кольцо возможно замещено одним, двумя или тремя заместителями, описанными в настоящем документе. Согласно одному из вариантов реализации фениленовое кольцо, содержащее заместитель Y, является возможно замещенным, и фениленовое кольцо, не содержащее заместитель Y, является незамещенным.
Согласно другому варианту реализации -C(=O)Q- и L2 вместе образуют группу, выбранную из
где звездочка, волнистая линия, Y и n такие, как определено выше, E представляет собой O, S или NR, D представляет собой N, CH или CR, a F представляет собой N, CH или CR.
Согласно одному из вариантов реализации D представляет собой N.
Согласно одному из вариантов реализации D представляет собой CH.
Согласно одному из вариантов реализации E представляет собой O или S.
Согласно одному из вариантов реализации F представляет собой CH.
Согласно предпочтительному варианту реализации ковалентная связь между L1 и L2 представляет собой связь, лабильную к действию катепсина (например, способную к расщеплению).
Согласно одному из вариантов реализации L1 включает дипептид. Аминокислоты в дипептиде могут представлять собой любую комбинацию природных аминокислот и неприродных аминокислот. Согласно некоторым вариантам реализации дипептид содержит природные аминокислоты. Если линкер представляет собой линкер, лабильный к действию катепсина, то дипептид представляет собой участок расщепления, опосредованного катепсином. Дипептид, таким образом, является участком распознавания
- 12 036202 для катепсина.
Согласно одному из вариантов реализации группа -X1-X2- в дипептиде, -NH-X1-X2-CO-, выбрана из
-Phe-Lys-,
-Val-Ala-,
-Val-Lys-,
-A la-Lys-,
-Val-Cit-,
-Phe-Cit-,
-Leu-Cit-,
-lle-Cit-,
-Phe-Arg- и
-Trp-Cit-;
где Cit представляет собой цитруллин. В указанном дипептиде -NH- представляет собой аминогруппу в X1, а CO представляет собой карбонильную группу в X2.
Предпочтительно группа -X1-X2- в дипептиде, -NH-X1-X2-CO-, выбрана из
-Phe-Lys-,
-Val-Ala-,
-Val-Lys-,
-Ala-Lys- и
-Val-Cit-.
Более предпочтительно группа -X1-X2- в дипептиде, -NH-X1-X2-CO-, представляет собой -Phe-Lys-, Val-Cit или -Val-Ala-.
Другие требуемые комбинации аминокислот в дипептиде включают
-Gly-Gly-,
-Pro-Pro- и
-Val-Glu-.
Можно применять другие комбинации аминокислот в дипептиде, включая комбинации, описанные в публикации Dubowchik et al., содержание которой включено в настоящий документ посредством ссылки во всей полноте и для всех целей.
Согласно одному из вариантов реализации боковая цепь аминокислоты является химически защищенной, если это необходимо. Защитная группа боковой цепи может представлять собой группу, описанную ниже. Последовательности защищенных аминокислот способны расщепляться под действием ферментов. Например, последовательность аминокислот в дипептиде, содержащем остаток Lys с Bocзащищенной боковой цепью, способна расщепляться под действием катепсина.
Защитные группы боковых цепей аминокислот хорошо известны в данной области техники и описаны в каталоге Novabiochem (Novabiochem Catalog). Дополнительные способы введения защитных групп представлены в Protective groups in Organic Synthesis, Greene и Wuts.
Ниже приведены возможные защитные группы боковых цепей аминокислот, имеющих реакционноспособные функциональные группы в боковых цепях
Arg: Z, Mtr, Tos;
Asn: Trt, Xan;
Asp: Bzl, t-Bu;
Cys: Acm, Bzl, Bzl-ОМе, Bzl-Me, Trt;
Glu: Bzl, t-Bu;
Gin: Trt, Xan;
His: Boc, Dnp, Tos, Trt;
Lys: Boc, Z-CI, Fmoc, Z;
Ser: Bzl, TBDMS, TBDPS;
Thr: Bz;
Trp: Boc;
Tyr: Bzl, Z, Z-Br.
Согласно одному из вариантов реализации -X2- опосредованно связан со звеном лекарственного соединения. Согласно указанному варианту реализации звено-спейсер L2 присутствует.
Согласно одному из вариантов реализации -X2- непосредственно связан со звеном лекарственного соединения. Согласно указанному варианту реализации звено-спейсер L2 отсутствует.
Согласно одному из вариантов реализации дипептид применяют в комбинации с саморасщепляющейся(имися) группой(ами) (звено-спейсер). Саморасщепляющаяся(иеся) группа(ы) может быть соединена с -X2-.
Если саморасщепляющаяся группа присутствует, то -X2- связан непосредственно с саморасщепляющейся группой. Согласно одному из вариантов реализации -X2- связан с группой Y саморасщепляющейся группы. Предпочтительно группа -X2-CO- связана с Y, где Y представляет собой NH.
Согласно одному из вариантов реализации -X1- связан непосредственно с A1. Предпочтительно группа -NH-X1- (N-конец X1) связана с A1. A1 может содержать функциональную группу -CO- и, тем са- 13 036202 мым, образовывать амидную связь с -X1-.
Согласно одному из вариантов реализации L1 и L2, взятые совместно с -OC(=O)-, содержат группу
-X1-X2-PABC-. Группа PABC связана непосредственно со звеном лекарственного соединения. В одном из примеров саморасщепляющаяся группа и дипептид вместе образуют группу -Phe-Lys-PABC-, которая показана ниже
где звездочка означает место присоединения к звену лекарственного соединения, и волнистая линия означает место присоединения к остальной части L1 или место присоединения к A1. Предпочтительно волнистая линия означает место присоединения к A1.
Альтернативно саморасщепляющаяся группа и дипептид вместе образуют группу -Val-Ala-PABC-, которая показана ниже
где звездочка и волнистая линия такие, как определено выше.
Согласно другому варианту реализации L1 и L2 совместно с -OC(=O)- представляют собой
где звездочка означает место присоединения к звену лекарственного соединения, волнистая линия означает место присоединения к A1, Y представляет собой ковалентную связь или функциональную группу, и E представляет собой группу, которая способна к расщеплению и, тем самым, активировать саморасщепляющуюся группу.
E выбирают таким образом, чтобы группа была способной к расщеплению, например, под действием света или фермента. E может представлять собой -NO2 или глюкуроновую кислоту (например, βглюкуроновую кислоту). Первая из указанных групп может быть чувствительна к действию нитроредуктазы, а последняя к действию β-глюкуронидазы.
Группа Y может представлять собой ковалентную связь.
Группа Y может представлять собой функциональную группу, выбранную из
-С(=О)-,
-NH-,
-0-,
-C(=O)NH-,
-0(=0)0-,
-NHC(=O)-,
-00(=0)-,
-00(=0)0-,
-ΝΗΟ(=Ο)Ο-,
-OC(=O)NH-,
-NHC(=O)NH-,
-NHC(=O)NH,
-C(=O)NHC(=O)-,
SO2 и
-S-.
Группа Y предпочтительно представляет собой -NH-, -CH2-, -О- и -S-.
Согласно некоторым вариантам реализации L1 и L2, взятые совместно с -OC(=O)-, представляют собой
где звездочка означает место присоединения в звену лекарственного соединения, волнистая линия означает место присоединения к A, Y представляет собой ковалентную связь или функциональную группу, и E представляет собой глюкуроновую кислоту (например, β-глюкуроновую кислоту). Y предпочтительно представляет собой функциональную группу, выбранную из -NH-.
- 14 036202
Согласно некоторым вариантам реализации L1 и L2, взятые вместе, представляют собой
где звездочка означает место присоединения к остатку L2 или звену лекарственного соединения, волнистая линия означает место присоединения kA1, Y представляет собой ковалентную связь или функциональную группу, и E представляет собой глюкуроновую кислоту (например, β-глюкуроновую кислоту). Y предпочтительно представляет собой функциональную группу, выбранную из -NH-, -CH2-, -О- и -S-.
Согласно некоторым дополнительным вариантам реализации Y представляет собой функциональную группу, предложенную выше, где функциональная группа связана с аминокислотой, и аминокислота связана с удлиняющим звеном A1. Согласно некоторым вариантам реализации аминокислота представляет собой β-аланин. Согласно указанному варианту реализации аминокислоту можно рассматривать в качестве эквивалента удлиняющего звена.
Специфичное звено L1 и лиганд опосредованно связаны через удлиняющее звено. L1 и A1 могут быть связаны посредством связывающей группы, выбранной из
-Ο(=Ο)ΝΗ-,
-С(=О)О-,
-NHC(=O)-,
-ОС(=О)-,
-00(=0)0-,
-ΝΗΟ(=Ο)Ο-,
-OC(=O)NH- и
-NHC(=O)NH-.
Согласно одному из вариантов реализации группа A1 представляет собой
где звездочка означает место присоединения к L1, L2 или D, волнистая линия означает место присоединения к звену лиганда, и n принимает значения от 0 до 6. Согласно одному из вариантов реализации n принимает значение 5.
Согласно одному из вариантов реализации группа A1 представляет собой
где звездочка означает место присоединения к L1, L2 или D, волнистая линия означает место присоединения к звену лиганда, и n принимает значения от 0 до 6. Согласно одному из вариантов реализации n принимает значение 5.
Согласно одному из вариантов реализации группа A1 представляет собой
где звездочка означает место присоединения соединения к звену лиганда, n принимает значение к L1, L2 или D, волнистая линия означает место при0 или 1, и m принимает значения от 0 до 30. Согласно предпочтительному варианту реализации n принимает значение 1, и m принимает значения от 0 до 10, от 1 до 8, предпочтительно от 4 до 8, более предпочтительно 4 или 8.
Согласно одному из вариантов реализации группа A1 представляет собой
где звездочка означает место присоединения к L1, L2 или D, волнистая линия означает место присоединения к звену лиганда, n принимает значение 0 или 1, и m принимает значения от 0 до 30. Согласно предпочтительному варианту реализации n принимает значение 1, и m принимает значения от 0 до 10, от 1 до 8, предпочтительно от 4 до 8, более предпочтительно 4 или 8.
Согласно одному из вариантов реализации группа A1 представляет собой
- 15 036202 где звездочка означает место присоединения к L1, L2 или D, волнистая линия означает место присоединения к звену лиганда, и n принимает значения от 0 до 6. Согласно одному из вариантов реализации n принимает значение 5.
Согласно одному из вариантов реализации группа A1 представляет собой
где звездочка означает место присоединения к L1, L2 или D, волнистая линия означает место присоединения к звену лиганда, и n принимает значения от 0 до 6. Согласно одному из вариантов реализации n принимает значение 5.
Согласно одному из вариантов реализации группа A1 представляет собой
где звездочка означает место присоединения к L1, L2 или D, волнистая линия означает место присоединения к звену лиганда, n принимает значение 0 или 1, и m принимает значения от 0 до 30. Согласно предпочтительному варианту реализации n принимает значение 1, и m принимает значения от 0 до 10, от 1 до 8, предпочтительно от 4 до 8, более предпочтительно 4 или 8.
Согласно одному из вариантов реализации группа A1 представляет собой
где звездочка означает место присоединения к L1, L2 или D, волнистая линия означает место присоединения к звену лиганда, n принимает значение 0 или 1, и m принимает значения от 0 до 30. Согласно предпочтительному варианту реализации n принимает значение 1, и m принимает значения от 0 до 10, от 1 до 8, предпочтительно от 4 до 8, более предпочтительно 4 или 8.
Согласно одному из вариантов реализации звено лиганда и A1 связаны посредством тиольного остатка лиганда и малеимидной группы в A1.
Согласно одному из вариантов реализации звено лиганда и A1 связаны посредством
где звездочка означает место присоединения к остатку A1, L1, L2 или D, а волнистая линия означает место присоединения к остатку звена лиганда. Согласно указанному варианту реализации атом S, как правило, получен от звена лиганда.
Согласно каждому из вариантов реализации, предложенных выше, можно применять альтернативную функциональную группу вместо группы, полученной из малеимида, показанной ниже
где волнистая линия означает место присоединения к звену лиганда, как указано выше, и звездочка означает связь с остатком группы A1 или с L1, L2 или D.
Согласно одному из вариантов реализации группа, полученная из малеимида, замещена на группу
где волнистая линия означает место присоединения к звену лиганда, и звездочка означает связь с остатком группы A1 или с L1, L2 или D.
Согласно одному из вариантов реализации группа, полученная из малеимида, замещена на группу, которая, возможно взятая совместно со звеном лиганда (например, связывающегося с клетками агента), выбрана из
- 16 036202
-Ο(=Ο)ΝΗ-,
-C(=O)O-,
-NHC(=O)-,
-00(=0)-,
-00(=0)0-,
-ΝΗ0(=0)0-,
-00(=0)ΝΗ-,
-ΝΗ0(=0)ΝΗ-,
-NHC(=0)NH, -C(=0)NHC(=0)-, -S-, -S-S-, -СН2С(=0)-, -0(=0)0Η2-, = Ν-ΝΗ- и -ΝΗ-Ν=.
Из которых -C(=O)CH2- может быть предпочтительной, особенно когда указанная карбонильная группа связана с -NH-.
Согласно одному из вариантов реализации группа, полученная из малеимида, замещена на группу, которая, возможно взятая совместно с лигандом, выбрана из
где волнистая линия означает место присоединения к звену лиганда или связь с остатком группы A1, и звездочка означает другое место присоединения к звену лиганда или связь с остатком группы A1.
Другие группы, подходящие для связывания L1 со связывающимся с клетками агентом, описаны в WO 2005/082023.
Согласно одному из вариантов реализации удлиняющее звено A1 присутствует, специфичное звено L1 присутствует, и звено-спейсер L2 отсутствует. Таким образом, L1 и звено лекарственного соединения напрямую соединены посредством связи, что эквивалентно тому, что согласно указанному варианту реализации L2 представляет собой связь.
L1 и D могут быть связаны при помощи связывающей группы, выбранной из
-C(=O)N<,
-OC(=O)N<, и
-NHC(=O)N<, где N< является частью D.
Согласно одному из вариантов реализации L1 и D предпочтительно соединены при помощи связи
-C(=O)N<.
Согласно одному из вариантов реализации L1 содержит дипептид, и один из концов дипептида связан с D. Как описано выше, аминокислоты, входящие в состав дипептида, могут представлять собой любую комбинацию природных аминокислот и неприродных аминокислот. Согласно некоторым вариантам реализации дипептид содержит природные аминокислоты. Если линкер представляет собой линкер, лабильный к действию катепсина, то дипептид представляет собой участок расщепления, опосредованный катепсином. Дипептид, таким образом, является участком распознавания для катепсина.
Согласно одному из вариантов реализации группа -X1-X2- в дипептиде, -NH-X1-X2-CO-, выбрана из
-Phe-Lys-,
-Val-Ala-,
-Val-Lys-,
-Ala-Lys-,
-Val-Cit-,
-Phe-Cit-,
-Leu-Git-,
-lle-Cit-,
-Phe-Arg- и
-Trp-Cit-;
где Cit представляет собой цитруллин. В указанном дипептиде -NH- представляет собой аминогруппу в X1, а CO представляет собой карбонильную группу в X2.
Предпочтительно группа -X1-X2- в дипептиде, -NH-X1-X2-CO-, выбрана из
-Phe-Lys-,
-Val-Ala-,
-Val-Lys-,
-Ala-Lys- и
-Val-Cit-.
- 17 036202
Более предпочтительно группа -X1-X2- в дипептиде, -NH-X1-X2-CO-, представляет собой -Phe-Lysили -Val-Ala-.
Другие важные комбинации аминокислот в дипептиде включают
-Gly-Gly-,
-Pro-Pro- и
-Val-Glu-.
Можно применять другие комбинации аминокислот в дипептиде, включая описанные выше. Согласно одному из вариантов реализации L1-D представляет собой где -NH-X1-X2-CO представляет собой дипептид, N< является частью звена лекарственного соединения, звездочка означает места присоединения к остатку звена лекарственного соединения, и волнистая линия означает место присоединения к остатку L1 или место присоединения к A1. Предпочтительно волнистая линия означает место присоединения к A1.
Согласно одному из вариантов реализации дипептид представляет собой валин-аланин, а L1-D представляет собой
где звездочки, -N< и волнистая линия такие, как определено выше.
Согласно одному из вариантов реализации дипептид представляет собой фенилаланин-лизин, и L1D представляет собой
где звездочки, -N< и волнистая линия такие, как определено выше.
Согласно одному из вариантов реализации дипептид представляет собой валин-цитруллин.
Согласно одному из вариантов реализации группы A1-L1 представляют собой
где звездочка означает место присоединения к L2 или D, волнистая линия означает место присоединения к звену лиганда, и n принимает значения от 0 до 6. Согласно одному из вариантов реализации n принимает значение 5.
Согласно одному из вариантов реализации группы A1-L1 представляют собой
где звездочка означает место присоединения к L2 или D, волнистая линия означает место присоединения к звену лиганда, и n принимает значения от 0 до 6. Согласно одному из вариантов реализации n принимает значение 5.
Согласно одному из вариантов реализации группы A1-L1 представляют собой
где звездочка означает место присоединения к L2 или D, волнистая линия означает место присоединения к звену лиганда, n принимает значение 0 или 1, и m принимает значения от 0 до 30. Согласно предпочтительному варианту реализации n принимает значение 1, и m принимает значения от 0 до 10, от 1 до 8, предпочтительно от 4 до 8, более предпочтительно 4 или 8.
Согласно одному из вариантов реализации группы A1-L1 представляют собой
где звездочка означает место присоединения к L2 или D, волнистая линия означает место присоединения к звену лиганда, n принимает значение 0 или 1, и m принимает значения от 0 до 30. Согласно предпочтительному варианту реализации n принимает значение 1, и m принимает значения от 0 до 10, от 1 до 7, предпочтительно от 3 до 7, более предпочтительно 3 или 7.
- 18 036202
Согласно одному из вариантов реализации группы A1-L1 представляют собой
где звездочка означает место присоединения к L2 или D, волнистая линия означает место присоединения к звену лиганда, и n принимает значения от 0 до 6. Согласно одному из вариантов реализации n принимает значение 5.
Согласно одному из вариантов реализации группы A1-L1 представляют собой
где звездочка означает место присоединения к L2 или D, волнистая линия означает место присоединения к звену лиганда, и n принимает значения от 0 до 6. Согласно одному из вариантов реализации n принимает значение 5.
Согласно одному из вариантов реализации группы A1-L1 представляют собой
о где звездочка означает место присоединения к L2 или D, волнистая линия означает место присоединения к звену лиганда, n принимает значение 0 или 1, и m принимает значения от 0 до 30. Согласно предпочтительному варианту реализации n принимает значение 1, и m принимает значение от 0 до 10, от 1 до 8, предпочтительно от 4 до 8, более предпочтительно 4 или 8.
Согласно одному из вариантов реализации группы A1-L1 представляют собой
о где звездочка означает место присоединения к L2 или D, волнистая линия означает место присоединения к звену лиганда, n принимает значение 0 или 1, и m принимает значение от 0 до 30. Согласно предпочтительному варианту реализации n принимает значение 1, и m принимает значение от 0 до 10, от 1 до 8, предпочтительно от 4 до 8, более предпочтительно 4 или 8.
Согласно одному из вариантов реализации группы L-A1-L1 представляют собой
где звездочка означает место присоединения к L2 или D, S представляет собой серосодержащую группу звена лиганда, волнистая линия означает место присоединения к остальной части звена лиганда, и n принимает значения от 0 до 6. Согласно одному из вариантов реализации n принимает значение 5.
Согласно одному из вариантов реализации группы L-A1-L1 представляют собой
где звездочка означает место присоединения к L2 или D, S представляет собой серосодержащую группу звена лиганда, волнистая линия означает место присоединения к остальной части звена лиганда, и n принимает значения от 0 до 6. Согласно одному из вариантов реализации n принимает значение 5.
Согласно одному из вариантов реализации группы L-A1-L1 представляют собой
где звездочка означает место присоединения к L2 или D, S представляет собой серосодержащую группу звена лиганда, волнистая линия означает место присоединения к остальной части звена лиганда, n принимает значение 0 или 1, и m принимает значения от 0 до 30. Согласно предпочтительному варианту реализации n принимает значение 1, и m принимает значения от 0 до 10, от 1 до 8, предпочтительно от 4 до 8, более предпочтительно 4 или 8.
Согласно одному из вариантов реализации группы L-A1-L1 представляют собой
- 19 036202 где звездочка означает место присоединения к L2 или D, волнистая линия означает место присоединения к звену лиганда, n принимает значение 0 или 1, и m принимает значения от 0 до 30. Согласно предпочтительному варианту реализации n принимает значение 1, и m принимает значения от 0 до 10, от до 7, предпочтительно от 4 до 8, более предпочтительно 4 или 8.
Согласно одному из вариантов реализации группы L-A1-L1 представляют собой
где звездочка означает место присоединения к L2 или D, волнистая линия означает место присоединения к остатку звена лиганда, и n принимает значения от 0 до 6. Согласно одному из вариантов реализации n принимает значение 5.
Согласно одному из вариантов реализации группы L-A1-L1 представляют собой
где звездочка означает место присоединения к L2 или D, волнистая линия означает место присоединения к остатку лиганда, и n принимает значения от 0 до 6. Согласно одному из вариантов реализации n принимает значение 5.
Согласно одному из вариантов реализации группы L-A1-L1 представляют собой
где звездочка означает место присоединения к L2 или D, волнистая линия означает место присоединения к остатку звена лиганда, n принимает значение 0 или 1, и m принимает значения от 0 до 30. Согласно предпочтительному варианту реализации n принимает значение 1, и m принимает значение от 0 до 10, от 1 до 8, предпочтительно от 4 до 8, более предпочтительно 4 или 8.
Согласно одному из вариантов реализации группы L-A1-L1 представляют собой
где звездочка означает место присоединения к L2 нения к остатку звена лиганда, n принимает значение или D, волнистая линия означает место присоеди0 или 1, и m принимает значения от 0 до 30. Согласно предпочтительному варианту реализации n принимает значение 1, и m принимает значения от 0 до 10, от 1 до 8, предпочтительно от 4 до 8, более предпочтительно 4 или 8.
Согласно одному из вариантов реализации удлиняющее звено представляет собой ацетамидное звено, имеющее формулу
Z-CH2-CO-N-*, где звездочка означает место присоединения к остатку удлиняющего звена, L1 или D, а волнистая линия означает место присоединения к звену лиганда.
Линкер-лекарственное соединение.
Согласно другим вариантам реализации предложены лекарственные соединения, связанные с линкером, для конъюгации с лигандом. Согласно одному из вариантов реализации лекарственные соединения, связанные с линкером, предназначены для соединения со связывающимся с клетками агентом.
Согласно одному из вариантов реализации лекарственное соединение, связанное с линкером, имеет формулу
где звездочка означает место присоединения к звену лекарственного соединения, G1 представляет собой удлиняющее звено (А1) для образования связи со звеном лиганда, L1 представляет собой специфичное звено, L2 (звено-спейсер) представляет собой ковалентную связь или совместно с -OC(=O)- обра- 20 036202 зует саморасщепляющуюся(иеся) группу(ы).
Согласно другому варианту реализации лекарственное соединение, связанное с линкером, имеет формулу
G1-L1-L2- *, где звездочка означает место присоединения к звену лекарственного соединения, G1 представляет собой удлиняющее звено (А1) для образования связи со звеном лиганда, L1 представляет собой специфичное звено, L2 (звено-спейсер) представляет собой ковалентную связь или саморасщепляющуюся(иеся) группу(ы).
L1 и L2 являются такими, как определено выше. Выражение связывание с A1 можно рассматривать в данном случае как связывание с G1.
Согласно одному из вариантов реализации, когда L1 содержит аминокислоту, боковая цепь этой аминокислоты может быть защищена. Можно использовать любые подходящие защитные группы. Согласно одному из вариантов реализации защитные группы боковой цепи способны удаляться совместно с другими защитными группами, присутствующими в соединении. Согласно другим вариантам реализации защитные группы могут быть расположены ортогонально по отношению к другим защитным группам, присутствующим в молекуле.
Подходящие защитные группы боковых цепей аминокислот включают группы, описанные в каталоге Novabiochem 2006/2007 (Novabiochem Catalog 2006/2007). Защитные группы для линкера, лабильного к действию катепсина, также описаны в источнике Dubowchik et al.
Согласно конкретным вариантам реализации группа L1 включает остаток аминокислоты Lys. Боковая цепь этой аминокислоты может быть защищена при помощи Boc- или Alloc-защитных групп. Bocзащитная группа является более предпочтительной.
Функциональная группа G1 образует связывающую группу в результате взаимодействия со звеном лиганда (например, со связывающимся с клетками агентом).
Согласно одному из вариантов реализации функциональная группа G1 представляет собой или содержит аминокислоту, карбоновую кислоту, гидроксигруппу, тиольную или малеимидную группу для взаимодействия с соответствующей группой звена лиганда. Согласно предпочтительному варианту реализации G1 содержит малеимидную группу.
Согласно одному из вариантов реализации группа G1 представляет собой алкилмалеимидную группу. Указанная группа подходит для взаимодействия с тиольными группами, в частности с тиольными группами цистеина, присутствующими в связывающемся с клетками агенте, например присутствующими в антителе.
Согласно одному из вариантов реализации группа G1 представляет собой
где звездочка означает место присоединения к L1, L2 или D, и n принимает значения от 0 до 6. Согласно одному из вариантов реализации n принимает значение 5.
Согласно одному из вариантов реализации группа G1 представляет собой
где звездочка означает место присоединения к L1, L2 или D, и n принимает значения от 0 до 6. Согласно одному из вариантов реализации n принимает значение 5.
Согласно одному из вариантов реализации группа G1 представляет собой
где звездочка означает место присоединения к L1, L2 или D, n принимает значение 0 или 1, и m принимает значения от 0 до 30. Согласно предпочтительному варианту реализации n принимает значение 1, и m принимает значения от 0 до 10, от 1 до 2, предпочтительно от 4 до 8 и более предпочтительно 4 или 8.
Согласно одному из вариантов реализации группа G1 представляет собой
где звездочка означает место присоединения к L1, L2 или D, n принимает значение 0 или 1, и m принимает значения от 0 до 30. Согласно предпочтительному варианту реализации n принимает значение 1, и m принимает значения от 0 до 10, от 1 до 8, предпочтительно от 4 до 8 и более предпочтительно 4 или 8.
- 21 036202
Согласно одному из вариантов реализации группа G1 представляет собой
где звездочка означает место присоединения к L1, L2 или D, и n принимает значения от 0 до 6. Согласно одному из вариантов реализации n принимает значение 5.
Согласно одному из вариантов реализации группа G1 представляет собой
где звездочка означает место присоединения к L1, L2 или D, и n принимает значения от 0 до 6. Согласно одному из вариантов реализации n принимает значение 5.
Согласно одному из вариантов реализации группа G1 представляет собой
где звездочка означает место присоединения к L1, L2 или D, n принимает значение 0 или 1, и m принимает значения от 0 до 30. Согласно предпочтительному варианту реализации n принимает значение 1, и m принимает значения от 0 до 10, от 1 до 2, предпочтительно от 4 до 8 и более предпочтительно 4 или 8.
Согласно одному из вариантов реализации группа G1 представляет собой
где звездочка означает место присоединения к L1, L2 или D, n принимает значение 0 или 1, и m принимает значения от 0 до 30. Согласно предпочтительному варианту реализации n принимает значение 1, и m принимает значения от 0 до 10, от 1 до 8, предпочтительно от 4 до 8 и более предпочтительно 4 или 8.
В каждом из указанных выше вариантов реализации можно использовать альтернативную функциональную группу вместо малеимидной группы, показанной ниже
где звездочка означает связь с остатком группы G.
Согласно одному из вариантов реализации группа, полученная из малеимида, замещена на группу
где звездочка означает связь с остатком группы G.
Согласно одному из вариантов реализации малеимидная группа замещена на группу, выбранную из
-С(=О)ОН,
-он,
-nh2,
-sh,
- С(=О)СН2Х, где X представляет собой CI, Вг или I,
-ОНО,
-NHNH2,
- С=СН и
- N3 (азид).
Из которых -C(=O)CH2X может быть предпочтительной, особенно когда указанная карбонильная группа связана с -NH-.
Согласно одному из вариантов реализации L1 присутствует, и G1 представляет собой -NH2, -NHMe, -COOH, -OH или -SH.
Согласно одному из вариантов реализации, когда L1 присутствует, G1 представляет собой -NH2 или NHMe. Каждая из групп может представлять собой N-конец последовательности аминокислот в L1.
Согласно одному из вариантов реализации L1 присутствует, G1 представляет собой -NH2, и L1 представляет собой последовательность аминокислот -X1-X2-, как определено выше.
Согласно одному из вариантов реализации L1 присутствует, и G1 представляет собой COOH. Эта группа может представлять собой C-конец последовательности аминокислот в L1.
- 22 036202
Согласно одному из вариантов реализации L1 присутствует, и G1 представляет собой OH.
Согласно одному из вариантов реализации L1 присутствует, и G1 представляет собой SH.
Группа G1 способна превращаться из одной функциональной группы в другую. Согласно одному из вариантов реализации L1 присутствует, и G1 представляет собой -NH2. Указанная группа способна превращаться в другую группу G1, содержащую малеимидную группу. Например, группу -NH2 можно подвергать взаимодействию с кислотами или активированной кислотой (например, с N-сукцинимидными формами кислот) тех групп G1, содержащих малеимидную группу, показанных выше.
Группу G1, таким образом, можно превращать в функциональную группу, которая больше подходит для взаимодействия со звеном лиганда.
Как отмечалось выше, согласно одному из вариантов реализации L1 присутствует, a G1 представляет собой -NH2, -NHMe, -COOH, -OH или -SH. В дополнительном варианте реализации указанные группы предложены в химически защищенной форме. Химически защищенная форма, таким образом, является предшественником линкера, который содержит функциональную группу.
Согласно одному из вариантов реализации G1 представляет собой -NH2 в химически защищенной форме. Указанная группа может быть защищена карбаматной защитной группой. Карбаматная защитная группа может быть выбрана из группы, состоящей из Alloc, Fmoc, Boc, Troc, Teoc, Cbz и PNZ.
Предпочтительно, если G1 представляет собой -NH2, то она защищена Alloc- или Fmoc-группой.
Согласно одному из вариантов реализации, если G1 представляет собой -NH2, то она защищена Fmoc-группой.
Согласно одному из вариантов реализации защитная группа является такой же, как и карбаматная защитная группа блокирующей (кэппирующей) группы.
Согласно одному из вариантов реализации защитная группа отличается от карбаматной защитной группы блокирующей группы. Согласно указанному варианту реализации предпочтительно, чтобы защитная группа была способна удаляться в условиях, при которых не происходит удаление карбаматной защитной группы блокирующей группы.
Химическую защитную группу можно удалять для получения функциональной группы, связывающейся со звеном лиганда. Указанная функциональная группа затем необязательно может быть превращена в другую функциональную группу, описанную выше.
Согласно одному из вариантов реализации активная группа представляет собой амин. Указанный амин предпочтительно представляет собой N-терминальный амин, входящий в состав пептида, а также может представлять собой N-терминальный амин, входящий в состав предпочтительных дипептидов согласно настоящему изобретению.
Активную группу можно подвергать взаимодействию с образованием функциональной группы, предназначенной для образования связи со звеном лиганда.
Согласно другим вариантам реализации линкер представляет собой предшественник линкера, содержащего активную группу. Согласно указанному варианту реализации линкер содержит активную группу, которая защищена с помощью защитной группы. Защитную группу можно удалить для получения линкера, содержащего активную группу.
Если активная группа представляет собой амин, то защитная группа может представлять собой защитную группу аминогруппы, например, описанную в источнике Green и Wuts.
Защитная группа предпочтительно расположена ортогонально по отношению к другим защитным группам, присутствующим в звене линкера.
Согласно одному из вариантов реализации защитная группа расположена ортогонально к блокирующей группе. Таким образом, защитная группа активной группы способна удаляться с сохранением блокирующей группы. Согласно другим вариантам реализации защитная группа и блокирующая группа способна удаляться в тех же условиях, что и, например, условия для удаления блокирующей группы.
Согласно одному из вариантов реализации звено линкера представляет собой
NHBoc где звездочка означает место присоединения к звену лекарственного соединения, и волнистая линия означает место присоединения к остатку звена линкера, если он присутствует, или место присоединения к G1. Предпочтительно волнистая линия означает место присоединения к G1.
Согласно одному из вариантов реализации звено линкера представляет собой
- 23 036202 где звездочка и волнистая линия являются такими, как определено выше.
Другие функциональные группы, подходящие для применения для образования связи между L1 и связывающимся с клетками агентом, описаны в WO 2005/082023.
Звено лиганда.
Звено лиганда может быть любым и включает белок, полипептид, пептид и непептидный агент, который специфично связывается с молекулой-мишенью. Согласно некоторым вариантам реализации звено лиганда может представлять собой белок, полипептид или пептид. Согласно некоторым вариантам реализации звено лиганда может представлять собой циклический полипептид. Указанные звенья лигандов могут включать антитела или фрагмент антитела, который содержит по меньшей мере один участок связывания с молекулой-мишенью, лимфокины, гормоны, факторы роста или любые другие связывающиеся с клетками молекулы или вещества, которые могут специфично связываться с мишенью. В настоящем документе звено лиганда также называют связывающим агентом или нацеливающим агентом.
Термины специфично связывается и специфичное связывание относятся к связыванию антитела или другого белка, полипептида или пептида с целевой молекулой (например, с антигеном). Как правило, антитело или другая молекула связывается с аффинностью, составляющей по меньшей мере примерно 1 х 107 М-1, при этом аффинность связывания с целевой молекулой по меньшей мере в два раза выше аффинности связывания с другими молекулами (например, БСА, казеина), отличными от целевой молекулы или родственной ей молекулы.
Примеры звеньев лигандов включают агенты, описанные для применения в документе WO 2007/085930, содержание которого включено в настоящий документ посредством ссылки во все полноте и для всех целей.
Согласно некоторым вариантам реализации звено лиганда представляет собой связывающийся с клетками агент, который связывается с внеклеточной мишенью на поверхности клетки. Указанный связывающийся с клетками агент может представлять собой белок, полипептид, пептид или непептидный агент. Согласно некоторым вариантам реализации связывающийся с клетками агент может представлять собой белок, полипептид или пептид. Согласно некоторым вариантам реализации связывающийся с клетками агент может представлять собой циклический полипептид. Связывающийся с клетками агент также может представлять собой антитело или антигенсвязывающий фрагмент антитела. Таким образом, согласно одному из вариантов реализации в настоящем изобретении предложен конъюгат антителолекарственное средство (ADC).
Согласно одному из вариантов реализации антитело представляет собой моноклональное антитело, химерное антитело, гуманизированное антитело, полностью человеческое антитело или одноцепочечное антитело. Один из вариантов реализации антитела представляет собой фрагмент одного из представленных антител, имеющих биологическую активность. Примеры указанных фрагментов включают фрагменты Fab, Fab', F(ab')2 и Fv.
Антитело может представлять собой диатело, доменное антитело (DAB) или одноцепочечное антитело.
Согласно одному из вариантов реализации антитело представляет собой моноклональное антитело.
Антитела для применения в настоящем изобретении включают антитела, описанные в документе WO 2005/082023, содержание которого включено в настоящее описание посредством ссылки во все полноте и для всех целей. Особенно предпочтительными являются антитела к опухолеассоциированным антигенам. Примеры указанных антигенов, известных в данной области техники, включают, но не ограничиваются ими, опухолеассоциированные антигены, представленные в WO 2005/082023 (см., например, с. 41-55).
Согласно некоторым вариантам реализации указанные конъюгаты предназначены для направленного действия на опухолевые клетки через антигены, расположенные на поверхности клетки. Антигены могут представлять собой антигены, расположенные на поверхности клетки, которые сверхэкспрессируются или экспрессируются с отклонениями по времени или атипичными клетками. Предпочтительно антиген-мишень экспрессируется только пролиферирующими клетками (предпочтительно опухолевыми клетками); тем не менее, это явление редко наблюдают на практике. В результате, антигены-мишени, как правило, выбирают на основании дифференциальной экспрессии между пролиферирующими и здоровыми тканями.
Были разработаны антитела для направленного действия на определенные опухолеассоциированные антигены, включая Cripto, CD19, CD20, CD22, CD30, CD33, гликопротеин NMB, CanAg, Her2 (ErbB2/Neu), CD56 (NCAM), CD70, CD79, CD138, PSCA, ПСМА (простатспецифический мембранный антиген) (PSMA), BCMA, E-селектин, EphB2, меланотрансферин (Melanotransferin), Muc16 и TMEFF2. Согласно любому из предложенных вариантов реализации в настоящем изобретении звено лиганда может представлять собой моноклональное антитело, которое специфически связывается с антигеном Crypto, антигеном CD19, антигеном CD20, антигеном CD22, антигеном CD30, антигеном CD33, гликопротеином NMB, антигеном CanAg, антигеном Her2 (ErbB2/Neu), антигеном CD56 (NCAM), CD70 антигеном, антигеном CD79, антигеном CD138, PSCA, PSMA (простатический специфический мембранный анти- 24 036202 ген), BCMA, E-селектином, EphB2, меланотрансферином, антигеном Muc16 или антигеном TMEFF2.
Звено лиганда связано с линкером. Согласно одному из вариантов реализации звено лиганда связано с A, входящим в состав звена линкера, если A присутствует.
Согласно одному из вариантов реализации звено лиганда связано со звеном линкера посредством простой тиоэфирной связи.
Согласно одному из вариантов реализации звено лиганда связано со звеном линкера посредством дисульфидной связи.
Согласно одному из вариантов реализации звено лиганда связано со звеном линкера посредством амидной связи.
Согласно одному из вариантов реализации звено лиганда связано со звеном линкера посредством сложноэфирной связи.
Согласно одному из вариантов реализации связывание звена лиганда и звена линкера осуществля ется посредством связывания тиольной группы остатка цистеина в звене лиганда и малеимидной группы в звене линкера.
Остатки цистеина в звене лиганда могут быть доступны для взаимодействия с функциональными группами звена линкера для образования связи. Согласно другим вариантам реализации, например, когда звено лиганда представляет собой антитело, тиольные группы антитела могут участвовать в образовании межцепочечных дисульфидных связей. Указанные межцепочечные связи можно превращать в свободные тиольные группы, например, путем обработки антитела DTT до взаимодействия с функциональной группой звена линкера.
Согласно некоторым вариантам реализации остаток цистеина вводят в тяжелую или легкую цепь антитела. Положения ввода цистеина в результате реакции замещения в тяжелых или легких цепях антитела включают положения, описанные в публикации заявки US 2007/0092940 и публикации международной заявки WO 2008/070593, содержание которых включено в настоящее описание во всей полноте и для всех целей.
Способы лечения.
Соединения или конъюгаты согласно настоящему изобретению можно применять в способе терапии. Также предложен способ лечения, включающий введение субъекту, нуждающемуся в лечении, терапевтически эффективного количества соединения формулы I или его конъюгата. Термин терапевтически эффективное количество означает количество, достаточное для достижения благоприятного действия для пациента. Указанное благоприятное действие может представлять собой, по меньшей мере, облегчение по меньшей мере одного симптома. Фактическое количество вводимого соединения, а также скорость и длительность введения будут зависеть от характера и степени тяжести состояния, подвергаемого лечению. Назначения для лечения, например выбор дозировки, входят в компетенцию врачей общей практики и других лечащих врачей.
Соединение или конъюгат можно вводить индивидуально или в комбинации с другими способами лечения, например одновременно или последовательно, в зависимости от состояния, подвергаемого лечению. Примеры способов лечения и терапий включают, но не ограничиваются ими, химиотерапию (введение активных агентов, включая, например, лекарственные средства), оперативное вмешательство и лучевую терапию.
Фармацевтические композиции согласно настоящему изобретению и для применения согласно настоящему изобретению могут включать в дополнение к активному ингредиенту, т.е. к соединению формулы I или его конъюгату, фармацевтически приемлемый наполнитель, носитель, буфер, стабилизатор или другие вещества, хорошо известные специалистам в данной области техники. Указанные вещества должны быть нетоксичными и не должны снижать эффективность активного ингредиента. Конкретная природа носителя или другого вещества будет зависеть от способа введения, который может быть пероральным или представлять собой инъекцию, например, кожную, подкожную или внутривенную.
Фармацевтические композиции для перорального введения могут быть в форме таблеток, капсул, порошка или в жидкой форме. Таблетка может содержать твердый носитель или вспомогательное средство. Жидкие фармацевтические композиции, как правило, содержат жидкий носитель, такой как вода, минеральные, животные или растительные масла, минеральные или синтетические масла. В такую композицию может быть включен физиологический солевой раствор, раствор декстрозы или раствор другого сахарида, или гликоли, такие как этиленгликоль, пропиленгликоль или полиэтиленгликоль. Капсула может включать твердый носитель, такой как желатин.
В случае внутривенной, кожной или подкожной инъекции или инъекции в место поражения активный ингредиент должен находиться в форме водного раствора, подходящего для парентерального введения, который является апирогенным и имеет подходящие pH, изотоничность и стабильность. Специалисты в данной области техники смогут приготовить подходящие растворы с применением, например, изотонических разбавителей, таких как хлорид натрия для инъекций, раствор Рингера для инъекций, лактированный раствор Рингера для инъекций. Консерванты, стабилизаторы, буферы, антиоксиданты и/или другие добавки можно вводить при необходимости.
Соединения и конъюгаты можно применять для лечения пролиферативного заболевания и аутоим- 25 036202 мунного заболевания. Термин пролиферативное заболевание относится к нежелательной или неконтролируемой клеточной пролиферации с избыточным содержанием клеток в организме или атипичных клеток, что представляет собой нежелательный процесс, например неопластический или гиперпластический рост in vitro или in vivo.
Примеры пролиферативных состояний включают, но не ограничиваются ими, доброкачественную, предопухолевую и злокачественную пролиферацию клеток, включая, но не ограничиваясь ими, неоплазмы и опухоли (например, гистиоцитому, глиому, астроцитому, остеому), раковые заболевания (например, рак легких, мелкоклеточный рак легких, рак желудочно-кишечного тракта, колоректальный рак, рак толстой кишки, карциному молочной железы, карциному яичников, рак простаты, рак яичек, рак печени, рак почек, рак мочевого пузыря, рак поджелудочной железы, рак мозга, саркому, остеосаркому, саркому Капоши, меланому), лейкозы, псориаз, заболевания костей, фибропролиферативные нарушения (например, соединительных тканей) и атеросклероз. Другие раковые заболевания, представляющие интерес, включают, но не ограничиваются ими, гематологические злокачественные опухоли, такие как лейкозы и лимфомы, например неходжкинскую лимфому и ее подтипы, такие как ДКВКЛ (диффузная крупноклеточная B-клеточная лимфома), лимфому маргинальной зоны, мантийной зоны и фолликулярную лимфому, лимфому Ходжкина, ОМЛ (острый миелобластный лейкоз) и другие раковые заболевания B- или Tклеток.
Примеры аутоиммунных заболеваний включают следующие: ревматоидный артрит, аутоиммунные демиелинизирующие нарушения (например, рассеянный склероз, аллергический энцефаломиелит), псориатический артрит, эндокринную офтальмопатию, увеоретинит, системную красную волчанку, тяжелую миастению, болезнь Грейвса, гломерулонефрит, аутоиммунные нарушения печени, воспалительное заболевание кишечника (например, болезнь Крона), анафилаксию, аллергические реакции, синдром Шегрена, сахарный диабет I типа, первичный билиарный цирроз, гранулематоз Вегенера, фибромиалгию, полимиозит, дерматомиозит, множественную эндокринную недостаточность, синдром Шмидта, аутоиммунный увеит, болезнь Аддисона, адреналит, тироидит, тироидит Хашимото, аутоиммунный тироидит, пернициозную анемию, атрофию желудка, хронический гепатит, волчаночный гепатит, атеросклероз, подострую кожную красную волчанку, гипопаратиреоз, синдром Дресслера, аутоиммунную тромбоцитопению, идиопатическую тромбоцитопеническую пурпуру, гемолитическую анемию, вульгарную пузырчатку, пузырчатку, герпетиформный дерматит, алопецию Ареата, пемфигоид, склеродермию, прогрессирующий системный склероз, CREST-синдром (кальциноз, синдром Рейно, нарушение моторики пищевода, склеродактилия и телеангиэктазия), мужское и женское аутоиммунное бесплодие, анкилозирующий спондилит, язвенный колит, смешанное заболевание соединительной ткани, нодозный полиартериит, системный некротизирующий васкулит, атопический дерматит, атопический ринит, синдром Гудпасчера, болезнь Шагаса, саркоидоз, ревматическую лихорадку, астму, привычный выкидыш, антифосфолипидный синдром, легкое фермера, мультиформную эритему, посткардиотомный синдром, синдром Кушинга, аутоиммунный хронический активный гепатит, легкое птицевода, токсический эпидермальный некролиз, синдром Альпорта, альвеолит, аллергический альвеолит, фиброзный альвеолит, интерстициальное заболевание легких, нодозную эритему, гангренозную пиодермию, трансфузионную реакцию, артериит Такаясу, ревматоидную полимиалгию, темпоральный артериит, шистосомоз, гигантоклеточный артериит, аскариаз, аспергиллез, синдром Самптера, экзему, лимфоматоидный гранулематоз, болезнь Бехчета, синдром Каплана, болезнь Кавасаки, лихорадку денге, энцефаломиелит, эндокардит, фиброз эндомиокарда, эндофтальмит, стойкую возвышающуюся эритему, псориаз, эритробластоз плода, эозинофильный фасциит, синдром Шульмана, синдром Фелти, филариоз, циклит, хронический циклит, гетерохромный циклит, циклит Фукса, нефропатию IgA, пурпуру Геноха-Шенлейна, реакцию трансплантат против хозяина, отторжение трансплантата, кардиомиопатию, синдром Итона-Ламберта, рецидивирующий полихондрит, криоглобулинемию, макроглобулинемию Вальденстрема, синдром Эванса и аутоиммунную гонадную недостаточность.
Согласно некоторым вариантам реализации аутоиммунное заболевание представляет собой нарушение, связанное с B лимфоцитами (например, системную красную волчанку, синдром Гудпасчера, ревматоидный артрит и диабет I типа), Th1-лимфоцитами (например, ревматоидный артрит, рассеянный склероз, псориаз, синдром Шегрена, тироидит Хашимото, болезнь Грейвса, первичный билиарный цирроз, гранулематоз Вегенера, туберкулез или заболевание трансплантат против хозяина) или Th2лимфоцитами (например, атопический дерматит, системную красную волчанку, атопическую астму, риноконъюнктивит, аллергический ринит, синдром Оменна, системный склероз или хроническое заболевание трансплантат против хозяина). В целом, нарушения, связанные с дендритными клетками, включают нарушения, связанные с Th1-лимфоцитами и Th2-лимфоциmами. Согласно некоторым вариантам реализации аутоиммунное нарушение представляет собой нарушение иммунной системы, опосредованное T-клетками.
Согласно некоторым вариантам реализации количество вводимого конъюгата находится в диапазоне от примерно 0,01 до примерно 10 мг/кг на дозу. Согласно некоторым вариантам реализации количество вводимого конъюгата находится в диапазоне от примерно 0,01 до примерно 5 мг/кг на дозу. Согласно некоторым вариантам реализации количество вводимого конъюгата находится в диапазоне от примерно
- 26 036202
0,05 до примерно 5 мг/кг на дозу. Согласно некоторым вариантам реализации количество вводимого конъюгата находится в диапазоне от примерно 0,1 до примерно 5 мг/кг на дозу. Согласно некоторым вариантам реализации количество вводимого конъюгата находится в диапазоне от примерно 0,1 до примерно 4 мг/кг на дозу. Согласно некоторым вариантам реализации количество вводимого конъюгата находится в диапазоне от примерно 0,05 до примерно 3 мг/кг на дозу. Согласно некоторым вариантам реализации количество вводимого конъюгата находится в диапазоне от примерно 0,1 до примерно 3 мг/кг на дозу. Согласно некоторым вариантам реализации количество вводимого конъюгата находится в диапазоне от примерно 0,1 до примерно 2 мг/кг на дозу.
Другие формы.
Если не указано иное, предложенные выше заместители включают хорошо известные ионные формы, соли, сольваты и защищенные формы указанных заместителей. Например, ссылка на карбоновую кислоту (-COOH) также включает анионную (карбоксилатную) форму (-COO-), соль или сольват кислоты, а также традиционные защищенные формы. Аналогично, ссылка на аминогруппу включает протонированную форму (-N+HR1R2), соль или сольват аминогруппы, например гидрохлоридную соль, а также традиционные защищенные формы аминогруппы. Аналогично, ссылка на гидроксильную группу также включает анионную форму (-O-), соль или сольват указанной группы, а также традиционные защищенные формы.
Соли.
Могут быть удобными или желательными получение, очистка и/или обращение с соответствующей солью активного соединения (конъюгата), например фармацевтически приемлемой солью. Примеры фармацевтически приемлемых солей описаны в Berge, et al., J. Pharm. Sci., 66, 1-19 (1977).
Например, если соединение является анионным или содержит функциональную группу, которая может быть анионной (например, -COOH может представлять собой -COO-), в данном случае возможно образование соли с подходящим катионом. Примеры подходящих неорганических катионов включают, но не ограничиваются ими, ионы щелочных металлов, такие как Na+ и K+, катионы щелочноземельных металлов, такие как Ca2+ и Mg2+, и другие катионы, такие как Al3+. Примеры подходящих органических катионов включают, но не ограничиваются ими, ион аммония (NH4+) и замещенные ионы аммония (например, NH3R+, NH2R2+, NHR3+, NR/). Примерами некоторых подходящих замещенных ионов аммония являются ионы, полученные из этиламина, диэтиламина, дициклогексиламина, триэтиламина, бутиламина, этилендиамина, этаноламина, диэтаноламина, пиперазина, бензиламина, фенилбензиламина, холина, меглумина и трометамина, а также из аминокислот, таких как лизин и аргинин. Примером распространенного четвертичного иона аммония является N(CH3)4+.
Если соединение является катионным или содержит функциональную группу, которая может быть катионной (например, -NH2 может представлять собой -NH3 +), тогда возможно образование соли с подходящим анионом. Примеры подходящих неорганических анионов включают, но не ограничиваются ими, анионы, полученные из следующих неорганических кислот: хлороводородной, бромоводородной, йодоводородной, серной, сернистой, азотной, азотистой, фосфорной и фосфористой.
Примеры подходящих органических анионов включают, но не ограничиваются ими, анионы, полученные из следующих органических кислот: 2-ацетилоксибензойной, уксусной, аскорбиновой, аспарагиновой, бензойной, камфорсульфокислоты, коричной, лимонной, этилендиаминтетрауксусной, этандисульфокислоты, этансульфокислоты, фумаровой, глюкогептоновой, глюконовой, глутаминовой, гликолевой, гидроксималеиновой, гидроксинафталинкарбоновой, изетионовой, молочной, лактобионовой, лауриновой, малеиновой, яблочной, метансульфокислоты, муциновой, олеиновой, щавелевой, пальмитиновой, памовой, пантотеновой, фенилуксусной, фенилсульфокислоты, пропионовой, виноградной, салициловой, стеариновой, янтарной, сульфаниловой, винной, толуолсульфокислоты и валериановой. Примеры подходящих полимерных органических анионов включают, но не ограничиваются ими, анионы, полученные из следующих полимерных кислот: дубильной кислоты, карбоксиметилцеллюлозы.
Сольваты.
Могут быть удобными или желательными получение, очистка и/или обращение с соответствующим сольватом активного соединения. Термин сольват используют в настоящем изобретении в общепринятом значении для обозначения комплекса растворенного вещества (например, активного соединения, соли активного соединения) и растворителя. Если растворитель представляет собой воду, то сольват обычно называют гидратом, например моногидратом, дигидратом, тригидратом и т.д.
Карбиноламины.
Изобретение включает соединения, в которых присоединение растворителя проходит по иминной связи фрагмента PBD, что показано ниже, где растворитель представляет собой воду или спирт (RAOH, где RA представляет собой ^^алкил)
Указанные формы можно назвать карбиноламинной и простой эфирной карбиноламинной формой
- 27 036202
PBD. Равновесие в указанных реакциях зависит от условий, в которых находятся соединения, а также от природы самого фрагмента.
Указанные конкретные соединения можно выделить в твердом виде, например, путем лиофилизации.
Изомеры.
Конкретные соединения могут существовать в одной или более конкретных геометрических, оптических, энантиомерных, диастереомерных, эпимерных, атропоизмерных, стереоизомерных, таутомерных, конформационных или аномерных формах, включая, но не ограничиваясь ими, цис- и трансформы; E- и Z-формы; c-, t- и r-формы; эндо- и экзо-формы; R-, S- и мезоформы; D- и L-формы; d- и l-формы; (+)- и (-)-формы; кето-, -енольные и -енолятные формы; син- и антиформы; синклинальные и антиклинальные формы; а- и β-формы; аксиальные и экваториальные формы; конформации ванна, кресло, твист, конверт и полукресло; а также их комбинации, которые далее в целом называют изомерами (или изомерными формами).
Необходимо отметить, что за исключением описанного ниже для таутомерных форм, из термина изомеры, используемого в настоящем документе, специально исключены структурные (или конституционные) изомеры (т.е. изомеры, имеющие различные связи между атомами, а не только различное положение атомов в пространстве). Например, ссылку на метоксигруппу -OCH3 не следует рассматривать как ссылку на ее структурный изомер, гидроксиметильную группу -CH2OH. Аналогично, ссылку на ортохлорфенил не следует рассматривать как ссылку на его структурный изомер, метахлорфенил. Тем не менее, ссылка на класс структур вполне может включать структурные изомерные формы, входящие в указанный класс (например, C1-7αлкил включает н-пропил и изопропил; бутил включает н-, изо-, втор- и трет-бутил; метоксифенил включает орто-, мета- и параметоксифенил).
Указанное выше исключение не относится к таутомерным формам, например кето-, -енольным и -енолятным формам, как, например, в случае следующих таутомерных пар: кето/енол (показано ниже), имин/енамин, амид/иминоспирт, амидин/амидин, нитрозо/оксим, тиокетон/ентиол, Nнитрозо/гидроксиазо и нитро/ацинитро
Кето енол енолят
Следует отметить, что в термин изомер специально включены соединения с замещением одного или более атомов изотопами. Например, H может представлять собой любой изотоп, включая 1H, 2H (D) и 3H (T); C может представлять собой любой изотоп, включая 12C, 13C и 14C; O может представлять собой любой изотоп, включая 16O и 18O; и т.п.
Если не указано иное, ссылка на конкретное соединение включает все указанные изомерные формы, включая (полностью или частично) рацемические и другие смеси. Способы получения (например, асимметрический синтез) и разделения (например, фракционная кристаллизация и хроматографические методы) указанных изомерных форм или известны из уровня техники, или легкодоступны за счет известной адаптации известным образом способов, описанных в настоящем документе, или известных способов.
Общие способы синтеза.
Синтез соединений PBD широко представлен в следующих источниках, содержание которых включено в настоящее описание посредством ссылки во всей полноте и для всех целей:
a) WO 00/12508 (с.14-30);
b) WO 2005/023814 (с.3-10);
c) WO 2004/043963 (с.28 и 29) и
d) WO 2005/085251 (с.30-39).
Способ синтеза.
Конъюгаты согласно настоящему изобретению, где R10 и R11 образуют двойную азотуглеродную связь между атомами азота и углерода, к которым они присоединены, можно синтезировать из соединения формулы 2
где R2, R6, R7, R9, R6, R7, R9, R12, X, X' и R являются такими, как определено для соединений формулы I, ProtN представляет собой защитную группу атома азота для проведения синтеза, и ProtO представляет собой защищенную кислородсодержащую группу для проведения синтеза или оксогруппу, путем снятия защиты иминной связи при помощи стандартных методов.
Получаемое соединение может быть в карбиноламинной форме или простой эфирной карбиноламинной форме в зависимости от используемых растворителей. Например, если ProtN представляет собой Troc, a ProtO представляет собой защитную группу атома кислорода для проведения синтеза, то снятие
- 28 036202 защиты проводят с применением пары Cd/Pb с получением соединения формулы (I). Если ProtN представляет собой SEM или аналогичную группу, и ProtO представляет собой оксогруппу, тогда оксогруппу можно удалить путем восстановления, которое приводит к образованию промежуточного защищенного карбиноламина, который затем можно обработать для удаления SEM-защитной группы, с последующим удалением воды. Восстановление соединения формулы 2 можно проводить, например, при помощи супергидрида или тетраборгидрида лития, в то же время подходящим способом удаления SEM-защитной группы является обработка силикагелем.
Соединения формулы 2 можно синтезировать из соединения формулы 3 a
где R2, R6, R7, R9, R6, R7, R9, X, X' и R являются такими, как определено для соединений формулы 2, путем сочетания с металлорганическим производным, содержащим R12, например с борорганическим производным. Борорганическое производное может представлять собой боронат или бороновую кислоту.
Соединения формулы 2 можно синтезировать из соединения формулы 3b
где R12, R6, R7, R9, R6, R7, R9, X, X' и R являются такими, как определено для соединений формулы 2, путем сочетания с металлорганическим производным, содержащим R2, например с борорганическим производным. Борорганическое производное может представлять собой боронат или бороновую кислоту. Соединения формул 3a и 3b можно синтезировать из соединения формулы 4
где R2, R6, R7, R9, R6, R7, R9, X, X' и R являются такими, как определено для соединений формулы 2, путем сочетания примерно с одним эквивалентом (например, от 0,9 или 1 до 1,1 или 1,2) металлорганического производного, например борорганического производного, содержащего R2 или R12.
Сочетание, описанное выше, как правило, проводят в присутствии палладиевого катализатора, например Pd(PPh3)4, Pd(OCOCH3)2, PdCl2 или Pd2(dba)3. Реакцию сочетания можно проводить в обычных условиях, но также можно проводить в условиях микроволнового излучения.
Две стадии реакции сочетания, как правило, проводят последовательно. Их можно проводить с проведением или без проведения очистки между двумя стадиями. Если очистку не проводят, то две стадии можно проводить в одном реакционном сосуде. Проведение очистки обычно требуется после второй стадии реакции сочетания. Очистку соединения от нежелательных побочных продуктов можно проводить путем колоночной хроматографии или ион-обменного разделения.
Синтез соединений формулы 4, где ProtO представляет собой оксогруппу, a ProtN представляет собой SEM, подробно описан в документе WO 00/12508, содержание которого включено в настоящее описание посредством ссылки во всей полноте и для всех целей. В частности, в настоящем описании приведена ссылка на схему 7 на с.24, где предложенное выше соединение обозначено как промежуточное вещество P. Этот способ синтеза также описан в WO 2004/043963, содержание которого включено в настоящее описание посредством ссылки во всей полноте и для всех целей. Дополнительную ссылку можно делать на синтез соединений 8a и 8b в WO 2010/043880 (с.36-45), содержание которого включено в настоящее описание посредством ссылки во всей полноте и для всех целей.
Синтез соединений формулы 4, где ProtO представляет собой защищенную кислородсодержащую группу, описан в документе WO 2005/085251, в котором описан синтез, включенный в настоящее описание посредством ссылки.
Соединения формулы I, где R10 и R10 представляют собой H, и R11 и R11 представляют собой SOzM, можно синтезировать из соединений формулы I, где R10 и R11 образуют двойную азот-углеродную связь между атомами азота и углерода, к которым они присоединены, путем присоединения подходящей бисульфитной соли или сульфинатной соли и последующей стадии соответствующей очистки. Дополнительные способы описаны в документе GB 2053894, содержание которого включено в настоящее описание посредством ссылки.
Согласно некоторым вариантам реализации изобретения, в частности, R12 содержит заместитель, представляющий собой OH или CO2H, в указанных выше способах может понадобиться добавление металлорганического производного R12, в котором замещающая группа защищена. Например, если R12 содержит CO2H, может быть предпочтительным присоединение соединения, в котором карбоксигруппа защищена в виде сложной эфирной группы (например, С1-4алкиловый сложный эфир) и затем снятие за- 29 036202 щиты с указанной карбоксигруппы на поздней стадии синтеза. Защита может быть снята с помощью добавленной части линкерной группы для получения линкера лекарственного соединения. Заместитель OH можно защитить с помощью фенольных защитных групп, известных в данной области техники.
Защитные группы атома азота для проведения синтеза.
Защитные группы азота для проведения синтеза хорошо известны в данной области техники. В настоящем изобретении особенно важны карбаматные защитные группы азота и гемиаминальные защитные группы азота.
Карбаматные защитные группы азота имеют следующую структуру:
где R'10 представляет собой R, определенный выше. Большое число подходящих групп описано в Greene, T.W. и Wuts, G.M., Protective Groups in Organic Synthesis, 3rd Edition, John Wiley & Sons, Inc., 1999, с. 503-549, содержание которого включено в настоящее описание посредством ссылки.
Особенно предпочтительные защитные группы включают Troc, Teoc, Fmoc, BOC, Doc, Hoc, TcBOC, 1-Adoc и 2-Adoc.
Другими возможными группами являются нитробензилоксикарбонил (например, 4нитробензилоксикарбонил) и 2-(фенилсульфонил)этоксикарбонил.
Защитные группы, которые можно удалить с помощью палладиевого катализа, например Alloc, не являются предпочтительными.
Гемиаминальные защитные группы азота имеют следующую структуру:
где R'10 представляет собой R, определенный выше. Большое число подходящих групп описано в качестве защитных групп амидной группы в Greene, T.W. и Wuts, G.M., Protective Groups in Organic Synthesis, 3rd Edition, John Wiley & Sons, Inc., 1999, на с. 633-647, содержание которого включено в настоящее описание посредством ссылки. Группы, описанные в настоящем документе, можно применять для соединений для применения согласно настоящему изобретению. Указанные группы включают, но не ограничиваются ими, SEM, MOM, MTM, MEM, BOM, нитро- или метоксизамещенный BOM и С1зССН2ОСН2-.
Защищенные группы кислорода для проведения синтеза.
Защищенные группы кислорода для проведения синтеза хорошо известны в данной области техники. Большое число подходящих защитных групп кислорода описано в Greene, T.W. и Wuts, G.M., Protective Groups in Organic Synthesis, 3rd Edition, John Wiley & Sons, Inc., 1999, на с. 23-200, содержание которого включено в настоящее описание посредством ссылки во всей полноте и для всех целей.
Особенно важные классы таких групп включают простые силильные эфиры, простые метиловые эфиры, простые алкильные эфиры, простые бензиловые эфиры, сложные эфиры, ацетаты, бензоаты, карбонаты и сульфонаты.
Предпочтительные защитные группы атома кислорода включают ацетаты, TBS и THP.
Синтез конъюгатов лекарственного вещества.
Конъюгаты, содержащие димеры PBD, описанные в настоящем документе, могут быть получены с использованием знаний специалиста в данной области техники в комбинации с приведенным в настоящем документе описанием. Например, линкеры описаны в патентах США №№ 6214345 и 7498298, а также WO 2009/0117531, содержание которых включено в настоящий документ посредством ссылки во всей полноте и для всех целей. Другие линкеры могут быть получены согласно ссылкам, приведенным в настоящем документе, или методам, известным специалисту в данной области техники.
Лекарственные соединения, связанные с линкером, могут быть получены согласно способам, известным в данной области техники, в комбинации с приведенным в настоящем документе описанием. Например, связывание заместителей X на основе аминов (звено лекарственного соединения димера PDB) с активными группами звеньев линкера можно осуществить согласно способам, в целом, описанным в патентах США №№ 6214345 и 7498298 и WO 2009-0117531, а также известны специалисту в данной области техники. Некоторые примеры приведены ниже.
Антитела могут быть конъюгированы с лекарственными соединениями, связанными с линкером, как описано в Doronina et al., Nature Biotechnology, 2003, 21, 778-784. Вкратце, антитела (4-5 мг/мл) в PBS, содержащем 50 нМ бората натрия при pH 7,4 восстанавливают гидрохлоридом трис(карбоксиэтил)фосфина (TCEP) при 37°C. Протекание реакции, в результате которой восстанавливаются межцепочечные дисульфиды, контролируют путем взаимодействия с 5,5'-дитиобис-(2нитробензойной кислотой) и оставляют до достижения требуемого уровня тиолов/mAb. Затем восстановленное антитело охлаждают до 0°C и алкилируют 1,5 экв. малеимидного лекарственного соединения, связанного с линкером, на тиол антитела. Через 1 ч реакцию гасят путем добавления 5 экв. Nацетилцистеина. Гашеное лекарственное соединение, связанное с линкером, удаляют с помощью фильтрации в геле через колонку PD-10. Затем ADC стерильно фильтровали через 0,22 мкм шприцевой
- 30 036202 фильтр. Концентрация белка может быть определена с помощью спектрального анализа при 280 и 329 нм соответственно с поправкой на поглощение лекарственного соединения при 280 нм. Эксклюзионную хроматографию можно использовать для определения чрезмерной агрегации антител, и RP-ВЭЖХ (обращенно-фазовая высокоэффективная жидкостная хроматография) можно использовать для определения содержания оставшегося NAC-гашеного лекарственного соединения, связанного с линкером.
Антитела с введенными остатками цистеина можно конъюгировать с соединениями линкерлекарственное соединение как описано в международной публикации на патент WO 2008/070593, содержание которой включено в настоящее описание посредством ссылки во всей полноте и для всех целей. Антитела, содержащие введенный остаток цистеина в основной цепи, постностью восстанавливают путем добавления 10 экв. TCEP и 1 мМ ЭДТА и доводя pH до 7,4 с помощью 1 М Трис-буфера (pH 9,0). После 1 ч инкубации при 37°C реакционную смесь охлаждают до 22°C и добавляют 30 экв. дегидроаскорбиновой кислоты для селективного повторного окисления исходных дисульфидов, сохраняя введенный цистеин в восстановленном состоянии. pH доводят до 6,5 с помощью 1 М Трис буфера (pH 3,7) и реакцию оставляют протекать в течение 1 ч при 22°C. Затем pH раствора опять повышают до 7,4 путем добавления 1 М Трис буфера (pH 9,0). 3,5 экв. линкера лекарственного соединения PBD в ДМСО помещают в подходящий контейнер для разбавления пропиленгликолем до добавления к реакционной смеси. Для сохранения растворимости линкера лекарственного соединения PBD само антитело сначала разбавляют пропиленгликолем до конечной концентрации 33% (например, если раствор антитела имел реакционный объем 60 мл, добавляют 30 мл пропиленгликоля). Такой же объем пропиленгликоля (30 мл в данном примере) добавляют к линкеру лекарственного соединения PBD в качестве разбавителя. После перемешивания раствор линкера лекарственного соединения PBD в пропиленгликоле добавляют к раствору антитела для проведения конъюгации; конечная концентрация пропиленгликоля составляла 50%. Реакцию оставляют протекать в течение 30 мин и затем гасят путем добавления 5 экв. N-ацетилцистеина. ADC очищают с помощью ультрафильтрации через 30 kD мембрану (следует отметить, что концентрацию пропиленгликоля, используемого в реакции, можно уменьшить для любого конкретного PBD, поскольку он только решает проблему сохранения растворимости линкера лекарственного соединения в водной среде).
Для соединений линкер-лекарственное соединение на основе галогенацетамида конъюгацию можно проводить в целом следующим образом. К раствору восстановленных и повторно окисленных антител (содержащих введенные цистеины в основную цепь) в 10 мМ Трис (pH 7,4), 50 мМ NaCl и 2 мМ DTPA добавляют 0,5 объемов пропиленгликоля. 10 мМ раствор соединения линкер-лекарственное соединение на основе галогенацетамида в диметилацетамиде получают непосредственно перед конъюгацией. Эквивалентное количество пропиленгликоля, добавленного к раствору антитела, добавляют к 6-кратному молярному избытку соединения линкер-лекарственное соединение. Разбавленный раствор линкерлекарственное соединение добавляют к раствору антитела и pH доводят до 8-8,5 с использованием 1 М Трис (pH 9). Реакцию конъюгации проводят в течение 45 мин при 37°C. Конъюгацию контролируют по восстановлению и денатурированию обращенно-фазовой PLRP-S хроматографии. Избыток соединения линкер-лекарственное соединение удаляют с помощью смолы Quadrasil MP и буфер заменяют на 10 мМ Трис (pH 7,4), 50 мМ NaCl и 5% пропиленгликоля с использованием колонки для обессоливания PD-10.
Примеры схем синтеза линкеров лекарственного соединения.
Следующие схемы являются иллюстративными способами синтеза линкеров лекарственного соединения - димер PBD показан с конкретными заместителями и димерными связями, однако они могут варьироваться с рамках объема настоящего изобретения.
- 31 036202
где Prot Sub относится либо к OH, либо CO2H фенильным замещающим группам или их защищенным версиям. Защиту можно установить посредством реакций, проводимых для введения связывающего звена, и можно снимать в ходе синтеза, когда это необходимо. Согласно некоторым вариантам реализации защиту устанавливают на стадии (i), но удаляют либо до, либо после стадии (ii). Согласно другим вариантам реализации устанавливают на стадии (i), но удаляют после стадии (iii).
Промежуточное вещество глюкоронидного линкера S1 (ссылка: Jeffrey et al., Bioconjugate Chemistry, 2006, 17, 831-840) можно обработать дифосгеном в дихлорметане при -78°C с получением хлорформиата глюкоронида, который затем подвергают взаимодействию с димером PBD S2, растворенным в CH2Cl2 путем добавления по каплям. Нагревание реакционной смеси до 0°C в течение 2 ч с последующей экстракцией приводит к получению соединения S3. Обработка раствора S3 в соответствующей смеси растворителей MeOH, тетрагидрофурана и воды (охлажденной до 0°C) моногидратом гидроксида лития в течение 4 ч с последующим взаимодействием с ледяной уксусной кислотой приводит к получению соединения S4. Добавление сложного эфира малеимидокапроила и NHS к раствору S4 в ДМФА с последующим добавлением диизопропилэтиламина и перемешиваем при комнатной температуре в атмосфере азота в течение 2 ч приводит к получению требуемого линкера лекарственного соединения S5.
Данный подход можно также использовать с димерами PBD, содержащими алифатические амины, такие как бензиламин, например S6 h2n^T ° ° I>-co2H 2 S6
Способы по примерам 2 и 3 можно использовать для большого количества димеров PBD согласно настоящему изобретению для введения пептидных линкеров.
Дополнительные предпочтительные варианты реализации.
Предложенные ниже предпочтительные варианты реализации можно применять ко всем аспектам изобретения, описанным выше, или они могут относиться к одному аспекту. Предпочтительные варианты реализации можно объединять в любой комбинации.
Согласно некоторым вариантам реализации R6, R7, R9, R10, R11 и Y' предпочтительно являются такими же, как R6, R7, R9, R10, R11 и Y соответственно.
Линкер в димере.
Y и Y' предпочтительно представляют собой O.
R предпочтительно представляет собой ^^алкиленовую группу, не содержащую заместителей. Более предпочтительно R представляет собой C3, C5 или C7 алкилен. Более предпочтительно R представляет собой C3 или C5 алкилен.
R6-R9.
R9 предпочтительно представляет собой H.
R6 предпочтительно выбран из H, OH, OR, SH, NH2, нитрогруппы и галогена, более предпочтительно из H или галогена и более предпочтительно представляет собой H.
R7 предпочтительно выбран из H, OH, OR, SH, SR, NH2, NHR, NRR' и галогена и более предпочтительно независимо выбран из H, OH и OR, где R предпочтительно выбран из необязательно замещенных C1-7алкильной, ^-^гетероциклильной и C5-10арильной групп. Более предпочтительно R может представлять собой C1-4алкильную группу, которая может быть замещенной или незамещенной. Заместитель,
- 32 036202 представляющий интерес, представляет собой С5-6арильную группу (например, фенил). Особенно предпочтительными заместителями в положении 7 являются OMe и OCH2Ph. Другие важные заместители представляют собой диметиламино (т.е.- NMe2); -(OC2H4)qOMe, где q составляет от 0 до 2; азотсодержащие C6 гетероциклилы, в том числе морфолино, пиперидинил и N-метилпиперазинил.
Указанные предпочтительные варианты реализации относятся к R9, R6 и R7 соответственно.
R2.
А в R2 может представлять собой фенильную группу или С5-7гетероарильную группу, например фуранил, тиофенил и пиридил. Согласно некоторым вариантам реализации A предпочтительно представляет собой фенил. Согласно другим вариантам реализации A предпочтительно представляет собой тиофенил, например тиофен-2-ил и тиофен-3-ил.
X представляет собой группу, выбранную из NHRN, где RN выбран из группы, включающей Н и *—NH NH
С^алкил, и . Согласно некоторым вариантам реализации X может предпочтительно представлять собой NHRn. X может предпочтительно представлять собой NHMe, NHEt и NH2 и может более предпочтительно представлять собой NH2.
Q2-X может быть на любом из доступных атомов в кольце С5-7арильной группы, но предпочтительно на атоме в кольце, который не расположен рядом со связью с остатком соединения, т.е. предпочтительно находится в β- или γ-положении относительно связи с остатком соединения. Следовательно, когда С5-7арильная группа (A) представляет собой фенил, заместитель (Q2-X), то заместитель предпочтительно находится в мета- или пара-положении и более предпочтительно в пара-положении.
Согласно некоторым вариантам реализации Q1 представляет собой одинарную связь. Согласно указанным вариантам реализации Q2 выбран из одинарной связи и -Z-(CH2)n-, где Z выбран из одинарной связи, O, S и NH и составляет от 1 до 3. Согласно некоторым вариантам реализации Q2 представляет собой одинарную связь. Согласно другим вариантам реализации Q2 представляет собой -Z-(CH2)n-. Согласно указанным вариантам реализации Z может представлять собой О или S и n может представлять собой 1 или n может представлять собой 2. Согласно другим указанным вариантам реализации Z может представлять собой одинарную связь и n может представлять собой 1.
Согласно другим вариантам реализации Q1 представляет собой -CH=CH-.
Согласно некоторым вариантам реализации R2 может представлять собой -A-CH2-X и -A-X.
Согласно указанным вариантам реализации X может предпочтительно представлять собой NH2.
R12.
R12 может представлять собой С5-7арильную группу. С5-7арильная группа может представлять собой фенильную группу или С5-7гетероарильную группу, например фуранил, тиофенил и пиридил. Согласно некоторым вариантам реализации R12 предпочтительно представляет собой фенил. Согласно другим вариантам реализации R12 предпочтительно представляет собой тиофенил, например тиофен-2-ил и тиофен-3-ил.
R12 может представлять собой С8,10арил, например хинолинильную или изохинолинильную группу. Хинолинильная или изохинолинильная группа может быть связана с ядром PBD через любой доступный атом кольца. Например, хинолинил может представлять собой хинолин-2-ил, хинолин-3-ил, хинолин-4ил, хинолин-5-ил, хинолин-6-ил, хинолин-7-ил и хинолин-8-ил. Среди указанных групп хинолин-3-ил и хинолин-6-ил могут быть предпочтительными. Изохинолинил может представлять собой изохинолин-1ил, изохинолин-3-ил, изохинолин-4-ил, изохинолин-5-ил, изохинолин-6-ил, изохинолин-7-ил и изохинолин-8-ил. Среди указанных групп изохинолин-3-ил и изохинолин-6-ил могут быть предпочтительными.
R12 содержит заместитель, выбранный из OH, CO2H, CO2RO, где R0 выбран из С1-4алкила. Указанный заместитель может быть в любом положении.
Когда R12 представляет собой С5-7арильную группу, то единственный заместитель предпочтительно расположен у атома кольца, который не расположен рядом со связью с остатком соединения, т.е. предпочтительно находится в β- или γ-положении относительно связи с остатком соединения. Таким образом, если С5-7арильная группа представляет собой фенил, то заместитель предпочтительно находится в метаили пара-положении и более предпочтительно в пара-положении.
Когда R12 представляет собой С8-10арильную группу, например хинолинил или изохинолинил, он может содержать любое число заместителей в любом положении хинолинового или изохинолинового колец. R0 предпочтительно выбран из С1-2алкила, т.е. метила и этила.
Группы R12.
Особенно предпочтительные замещенные группы R12 включают, но не ограничиваются ими, 4гидроксифенил, 3- гидроксифенил, 4-карбоксифенил, 3-карбоксифенил, 4-метилоксикарбонилфенил, 3метилоксикарбонилфенил, 4-этилоксикарбонилфенил и 4-этилоксикарбонилфенил.
M и z.
Предпочтительно М и М' представляют собой одновалентные фармацевтически приемлемые катионы и более предпочтительно Na+.
z предпочтительно представляет собой 3.
- 33 036202
Соответственно соединения согласно настоящему изобретению включают, например, соединения формулы I или их фармацевтически приемлемые соли или сольваты, где (i) R2 имеет формулу III
Q Q ш где A представляет собой фенильную группу, X представляет собой NHRN, где RN выбран из группы, включающей H и C1-4насыщенный алкил, Q1 представляет собой одинарную связь, и остальные заместители такие, как описано в настоящем документе.
Соединения согласно настоящему изобретению включают, например, соединения формулы I или их фармацевтически приемлемые соли или сольваты, где (ii) R2 имеет формулу III ^q1'Aq2'X ш где A представляет собой фенильную группу, X представляет собой NHRN, где RN выбран из группы, включающей H и C1-4насыщенный алкил, Q1 представляет собой одинарную связь, Q2 выбран из одинарной связи и -Z-(CH2)n-, где Z выбран из одинарной связи и n составляет от 1 до 3; и остальные заместители такие, как описано в настоящем документе.
(iii) Соединения согласно настоящему изобретению включают, например, соединения формулы I или их фармацевтически приемлемые соли или сольваты, где R12 представляет собой фенильную группу, замещенную группой, выбранной из CO2H, CO2Ro, где RO выбран из насыщенного C1-4алкила; и остальные заместители такие, как описано в настоящем документе.
(iv) Соединения согласно настоящему изобретению включают, например, соединения формулы I или их фармацевтически приемлемые соли или сольваты, где R12 представляет собой фенильную группу, замещенную группой, выбранной из CO2H, CO2RO, где RO выбран из метила или этила; и остальные заместители такие, как описано в настоящем документе.
(v) Соединения согласно настоящему изобретению включают, например, соединения формулы I или их фармацевтически приемлемые соли или сольваты, где
R2 имеет формулу III
2'Х ПТ
Q Q Ш где A представляет собой фенильную группу, X представляет собой NHRN, где RN выбран из группы, включающей H и C1_4насыщенный алкил, Q1 представляет собой одинарную связь, Q2 выбран из одинарной связи и -Z-(CH2)n-, где Z выбран из одинарной связи и n составляет от 1 до 3; R12 представляет собой фенильную группу, замещенную группой, выбранной из OH, CO2H, CO2Ro, где RO выбран из ^^насыщенного алкила; и остальные заместители такие, как описано в настоящем документе.
(vi) Соединения согласно настоящему изобретению включают, например, соединения формулы I или их фармацевтически приемлемые соли или сольваты, где
R2 имеет формулу III 4α'·%2·χ ш где A представляет собой фенильную группу, X представляет собой NHRN, где RN выбран из группы, включающей H и C1_4насыщенный алкил, Q1 представляет собой одинарную связь, Q2 выбран из одинарной связи и -Z-(CH2)n-, где Z выбран из одинарной связи и n составляет от 1 до 3; R12 представляет собой фенильную группу, замещенную группой, выбранной из CO2H, CO2RO, где RO выбран из метила или этила; и остальные заместители такие, как описано в настоящем документе.
Предпочтительные соединения согласно настоящему изобретению включают любое их описанных соединений (i)-(vi), где:
(a) замещающая группа на R12 находится в мета- или пара- положении и более предпочтительно в пара- положении, (b) Y и Y' представляют собой O, (c) R представляет собой -(CH2)- (CH2)-(CH2)- или -(CH2)- (CH2)-(CH2)-(CH2)-(CH2)-, (d) R10 и R11 образуют связь азот-углерод между атомами азота и углерода, к которым они присоединены, и R10 и R11 образуют связь азот-углерод между атомами азота и углерода, к которым они присоединены, (e) R7 представляют собой метокси или этокси и R7 представляют собой метокси или этокси, или (f) R6, R9, R6 и R9 представляют собой водород, или любая комбинация (a)-(f).
Особенно предпочтительными соединениями согласно настоящему изобретению являются соединения формулы 1 a
или его фармацевтически приемлемые соли или сольваты, где n принимает значение 1 или 3;
R1a представляет собой метил или фенил;
R2a представляет собой
- 34 036202 где Rn выбран из H и метила; R12a выбран из
или их фармацевтически приемлемые соли или сольваты. 3-й аспект.
Особенно предпочтительные соединения включают
- 35 036202
Предпочтительные варианты, указанные выше для первого аспекта, можно применять по отношению к соединениям данного аспекта в соответствующих случаях.
Когда R10 представляет собой карбаматную защитную группу азота, он может предпочтительно представлять собой Teoc, Fmoc и Troc и более предпочтительно представлять собой Troc.
Когда R11 представляет собой O-ProtO, где ProtO представляет собой защитную группу кислорода, ProtO может предпочтительно представлять собой TBS или ТНР и более предпочтительно представлять собой TBS.
Когда R10 представляет собой гемиаминальную защитную группу азота, он может предпочтительно представлять собой MOM, BOM или SEM и более предпочтительно представлять собой SEM.
Предпочтительные варианты для соединения формулы I применимы в соответствующих случаях к D в шестом аспекте изобретения. Например, в шестом аспекте димер PBD представляет собой любое из соединений формулы I или его фармацевтически приемлемой соли или сольвата, описанное в настоящем *-|/ ΝΗ )ν-£- *—*—* mljdN документе, за исключением того, что заменен заменен \ / ί.. —nhrin заменен *—N(Rn)-£5 , где волнистая линия означает место присоединения к звену линкера.
Соответственно конъюгаты согласно настоящему изобретению включают конъюгаты, имеющие следующую формулу (IV)
L - (LU-D)p (IV) или его фармацевтически приемлемую соль или сольват, где L представляет собой звено лиганда (т.е. нацеливающий агент), LU представляет собой звено линкера и димер PBD D представляет собой любое соединение формулы I или его фармацевтически приемлемую соль или сольват, описанные в на‘-N^NH *-\ /N-£- * mudN стоящем документе, за исключением того, что заменен ^а заменен ? и *—nhrin *—N(Rn)-^- заменен , , где волнистая линия означает место присоединения к звену линкера.
(а) Конъюгаты согласно настоящему изобретению включают, например, конъюгаты формулы
СВА-А1-1_1-* где звездочка означает место присоединения к димеру PBD (D) или звену-спейсеру, CBA представляет собой связывающийся с клетками агент, L1 представляет собой специфичное звено, расщепляемое под действием фермента, и A1 представляет собой удлиняющее звено, соединяющее L1 и связывающийся с клетками агент.
(b) Конъюгаты согласно настоящему изобретению включают, например, конъюгаты формулы
СВА-А1-* где звездочка означает место присоединения к димеру PBD (D), CBA представляет собой связывающийся с клетками агент, L1 и A1 представляют собой удлиняющее звено, соединяющее лекарственное соединение и связывающийся с клетками агент.
(c) Конъюгаты согласно настоящему изобретению включают, например, конъюгаты формулы
СВА-А1-1_1-* где звездочка означает место присоединения к димеру PBD (D), CBA представляет собой связывающийся с клетками агент, A1 представляет собой удлиняющее звено, соединяющее L1 и связывающийся с клетками агент, и L1 представляет собой специфичное звено, расщепляемое под действием катепсина, L1 представляет собой дипептид, L1 представляет собой дипептид, расщепляемый под действием катепсина, или L1 представляет собой дипептид, выбранный из -Phe-Lys-, -Val-Ala-, -Val-Lys-, -Ala-Lys- и -Val-Cit-.
Предпочтительные конъюгаты согласно настоящему изобретению включают любые из описанных в (a)-(c), где A1 представляет собой
где звездочка означает место присоединения к L1 или D, волнистая линия означает место присоеди нения к CBA, и n принимает значения от 0 до 6 (предпочтительно n принимает значение 5).
Особенно предпочтительными конъюгатами согласно настоящему изобретению являются конъюгаты формулы Ib, Ic, Id и Ie
- 36 036202
или его фармацевтически приемлемая соль или сольват, где n принимает значение от 1 до 3;
R1a представляют собой метил;
Rn представляют собой H;
R12a выбран из
А1 представляет собой удлиняющее звено;
L1 представляет собой дипептид, расщепляемый под действием катепсина;
Ab представляет собой антитело; и p составляет от 1 до 20.
В особенно предпочтительном варианте реализации формул Ib, Ic, Id и Ie или их фармацевтически приемлемой соли или сольвата связь между антителом и звеном линкера формируется между тиольной группой остатка цистеина антитела и малеимидной группой звена линкера.
Особенно предпочтительные конъюгаты включают
- 37 036202
- 38 036202
или его фармацевтически приемлемая соль или сольват, где n принимает значение 1 или 3.
А1 представляет собой удлиняющее звено;
L1 представляет собой дипептид, расщепляемый под действием катепсина;
Ab представляет собой антитело; и p составляет от 1 до 20.
В особенно предпочтительном варианте реализации во всех предпочтительных конъюгатах связь между антителом и звеном линкера формируется между тиольной группой остатка цистеина антитела и малеимидной группой звена линкера.
В особенно предпочтительном варианте реализации во всех предпочтительных конъюгатах антитело представляет собой моноклональное антитело, которое специфически связывается с антигеном Crypto, антигеном CD19, антигеном CD20, антигеном CD22, антигеном CD30, антигеном CD33, гликопротеином NMB, антигеном CanAg, антигеном Her2 (ErbB2/Neu), антигеном CD56 (NCAM), антигеном CD70, антигеном CD79, антигеном CD138, PSCA, PSMA (простатический специфический мембранный антиген), ВСМА, E-селектином, EphB2, меланотрансферином, антигеном Muc16 или антигеном TMEFF2.
Предпочтительные варианты для соединения формулы I применимы в соответствующих случаях к D в седьмом аспекте изобретения. Например, в седьмом аспекте димер PBD представляет собой любое из соединений формулы I или его фармацевтически приемлемую соль или сольват, описанное в настоящем *—Ν NH документе, за исключением того, что \—/ заменен
NH ' заменен r—nhrn заменен
- где волнистая линия означает место присоединения к звену линкера.
Особенно предпочтительные лекарственные соединения-линкеры согласно настоящему изобретению представляют собой лекарственные соединения-линкеры формулы If, Ig, Ih и Ii
или его фармацевтически приемлемая соль или сольват, где n принимает значение 1 или 3;
R1a представляет собой метил или фенил;
Rn представляет собой Н;
R12a выбран из
- 39 036202
А1 представляет собой удлиняющее звено
L1 представляет собой дипептид, расщепляемый под действием катепсина.
Особенно предпочтительные лекарственные соединения-линкеры включают
или его фармацевтически приемлемая соль или сольват, где n принимает значение 1 или 3;
- 40 036202
А1 представляет собой удлиняющее звено;
L1 представляет собой дипептид, расщепляемый под действием катепсина.
Примеры
Общие методы проведения экспериментов для примера 1.
Оптическое вращение измеряли на поляриметре ADP 220 (Bellingham Stanley Ltd.), концентрации (c) представлены в виде г/100 мл. Температуру плавления измеряли при помощи цифрового измерителя температуры плавления (Electrothermal). ИК-спектры записывали на ИК-спектрометре Perkin-Elmer Spectrum 1000 FT. Спектры 1H и 13C ЯМР получали при 300 K на ЯМР-спектрометре Bruker Advance при 400 и 100 МГц соответственно. Химические сдвиги представлены относительно TMS (δ=0,0 ppm), сигналы обозначены как s (синглет), d (дублет), t (триплет), dt (двойной триплет), dd (дублет дублетов), ddd (двойной дублет дублетов) или m (мультиплет), константы спин-спинового взаимодействия даны в герцах (Гц). Данные масс-спектрометрического анализа (МС) получали на оборудовании Waters Micromass ZQ, соединенного с ВЭЖХ хроматографом Waters 2695 и детектором Waters 2996 PDA. Использовались следующие параметры системы Waters Micromass ZQ: капилляр (кВ), 3,38; конус (B), 35; экстрактор (B), 3,0; температура источника (°C), 100; температура десольватации (°C), 200; скорость потока подвижной фазы (л/ч), 50; расход десольватированного потока (л/ч), 250. Масс-спектрометрию высокого разрешения (HRMS) проводили в системе Waters Micromass QTOF Global в положительном W-режиме с использованием наконечников из борсиликатного стекла с металлическим покрытием для введения образцов в прибор. Тонкослойную хроматографию (TCX) проводили на алюминиевых пластинах с силикагелем (Merck 60, F254), а для флэш-хроматографии использовали силикагель (Merck 60, 230-400 меш ASTM). За исключением HOBt (NovaBiochem) и реагентов на твердой подложке (Argonaut), все остальные химические реактивы и растворители приобретали в Sigma-Aldrich и их применяли в поставляемом виде без дополнительной очистки. Безводные растворители получали путем перегонки в атмосфере сухого азота в присутствии соответствующего осушителя и хранили над молекулярными ситами 4Л или над натриевой проволокой. Петролейный эфир представляет собой фракцию, кипящую при 40-60°C.
Общие условия ЖХ/МС: ВЭЖХ (Waters Alliance 2695) проводили с применением подвижных фаз: воды (A) (муравьиная кислота 0,1%) и ацетонитрила (B) (муравьиная кислота 0,1%). Градиент: начальный состав - 5% В, через 1,0 мин, затем 5% В до 95% В, в течение 3 мин. Состав подвижной фазы сохраняли в течение 0,5 мин на уровне 95% В, а затем возвращали к уровню 5% В за 0,3 мин. Общее время градиентного анализа составляет 5 мин. Скорость потока: 3,0 мл/мин, 400 мкл вводили при помощи тройника с нулевым мертвым объемом в масс-спектрометр. Диапазон длин волн детектирования: 220-400 нм. Режим: диодная матрица (535 сканов). Колонка: Phenomenex® Onyx Monolithic C18 50x4,60 мм.
Пример 1.
о (a) ^)-2-(4-аминофенил)-7-метокси-8-(3-(^)-7-метокси-2-(трифторметилсульфонил)-5,11-диоксо-
10-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-5,10,11,11 a-тетрагидро-1 H-пирроло [2,1-c][1,4]бензодиазепин-8илокси)пентокси)-10-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1 H-пирроло [2,1-c][1,4]бензодиазепин-5,11(10H,^^дион (2).
1,Г-[[(Пентан-1,5-диил)диокси]бис-(1^)-7-метокси-2-[[(трифторметил)сульфонил]окси]-10-((2(триметилсилил)этокси)метил)-1,10,11,11 а-тетрагидро^^пирроло [2,1-c][1,4]-бензодиазепин-5,11 -дион] (/(соединение 8b в WO 2010/043880) (2,8 г, 2,4 ммоль, 1 экв.) добавляли к смеси карбоната натрия (388
- 41 036202 мг, 3,66 ммоль, 1,52 экв.) и 4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)анилина (509 мг, 2,32 ммоль, 0,95 экв.) в толуоле/воде/этаноле (20/10/10 мл). Реакционную колбу продували аргоном и добавляли твердый Pd(0)тетракис трифенилфосфин(84 мг, 0,072 ммоль, 0,03 экв.). Реакцию оставляли протекать в течение 2 ч при 26°C с интенсивным перемешиванием в атмосфере аргона. Смесь разделяли между этилацетатом (200 мл) и водой (100 мл). Органическую фазу промывали водой (100 мл) с последующим солевым раствором (50 мл). Органическую фазу сушили над сульфатом магния и летучие вещества удаляли с помощью ротационного испарения с последующим применением высокого вакуума. Остаток очищали с помощью флеш-хроматографии (градиент этилацетат/гексан от 30/70 до 100/0 об./об.). Несимметричный аминотрифлат (2) изолировали с 46% выходом (1,23 г). ЖХ/МС кт 3,80 мин m/z (1087,6) M+H. Получали 932 мг (33%) исходного материала и 400 мг (16%) симметричного 4-аминофенильного продукта.
(b) (S)-8-((5-(((S)-2-(4-αминофенил)-7-метокси-5-оксо-11-гидрокси-5,11a-дигидро-1H-пирроло[2,1c][1,4]бензодиазепин-8-ил)окси)пентил)окси)-7-метокси-5-оксо-11-гидрокси-5,11а-дигидро-1H-пирроло[2,1-c][1,4]диазепин-2-илтрифторметансульфонат(3).
Аминотрифлат (2) растворяли в сухом ТГФ (15 мл) и охлаждали при -78°C (1,2 г, 1,1 ммоль, 1 экв.). Раствор супергидрида в ТГФ (1М, 3,3 мл, 3,3 ммоль, 3 экв.) медленно вводили в перемешиваемую реакционную смесь. Через 15 мин наблюдали завершение реакции. Реакционную смесь гасили водой (10 мл) и позже экстрагировали ДХМ (50 мл). Органические вещества промывали водой (100 мл), затем солевым раствором (50 мл). Органическую фазу сушили над сульфатом магния и летучие вещества удаляли с помощью ротационного испарения с последующим применением высокого вакуума. Неочищенный карбиноламин (3)(1,10 г) не очищали и использовали непосредственно на следующей стадии. ЖХ/МС кт 2,68 мин m/z (796) M+H для имина без защиты SEM (саморасщепление в кислых условиях ЖХ/МС).
(c) (8)-2-(4-аминофенил)-7-метокси-8-(5-((8)-7-метокси-2-(4-метилоксикарбонилфенил)-5-оксо5,11a-дигидро-1H-пирроло[2,1-c][1,4]бензодиазепин-8-илокси)пентилокси)-1H-пирроло[2,1-c] [1,4]бензодиазепин-5(11aH)-он (4).
Неочищенный карбиноламинтрифлат, защищенный SEM (3), полученный на предыдущей стадии (1,10 г, 1 ммоль, 1 экв.), добавляли к смеси карбоната натрия (341 мг, 3,2 ммоль, 3,2 экв.) и 4метоксикарбонилбороновой кислоты (286 мг, 1,6 ммоль, 1,6 экв.) в толуоле/воде/метаноле/ТГФ (10/5/5/5 мл). Реакционную колбу продували аргоном и добавляли твердый Pd(0)тетракис трифенилфосфин (35 мг, 0,030 ммоль, 0,03 экв.). Реакцию оставляли протекать в течение ночи с интенсивным перемешиванием в атмосфере аргона. Смесь разделяли между этилацетатом (200 мл) и водой (100 мл). Органическую фазу промывали водой (100 мл) с последующим промыванием солевым раствором (50 мл). Органическую фазу сушили над сульфатом магния и летучие вещества удаляли с помощью ротационного испарения с последующим применением высокого вакуума. Остаток обрабатывали ДХМ (50 мл), этанолом (140 мл), водой (70 мл) и силикагелем (100 г). Вязкую смесь оставляли перемешиваться при комнатной температуре в течение 3 дней. Смесь медленно фильтровали через воронку Бюхнера и остаток силикагеля промывали смесью 90/10 об./об. хлороформ/метанол (500 мл). Органическую фазу промывали водой (300 мл), солевым раствором (100 мл), сушили (сульфат магния), фильтровали и выпаривали в вакууме с получением неочищенного вещества, которое очищали с помощью флеш-хроматографии (градиент метанол/хлороформ от 0/100 до 4/96 об./об.) с выходом 200 мг (25%) димера PBD ЖХ/МС кт 2,68 мин m/z (782) M+H.
Общие методы проведения экспериментов для примеров 2-3.
Все коммерчески доступные безводные растворители применяли без дополнительной очистки. Аналитическую тонкослойную хроматографию проводили на алюминиевых пластинах с силикагелем 60 F254 (EMD Chemicals, Gibbstown, Нью-Джерси). Радиальную хроматографию проводили на приборе Chromatotron (Harris Research, Palo Alto, Калифорния). Аналитическую ВЭЖХ проводили с помощью системы подачи растворителя Varian ProStar 210, оборудованной детектором Varian ProStar 330 PDA. Образцы элюировали через колонку с обращенной фазой C12 Phenomenex Synergi 2,0 х 150 мм, 4 мкм, 80 А. Кислая мобильная фаза состояла из ацетонитрила и воды, которые содержали 0,1% муравьиной кислоты. Соединения элюировали в линейном градиенте кислым ацетонитрилом в концентрации, составляющей от 5% через 1 мин после ввода до 95% через 11 мин, затем в изократическом режиме при концентрации ацетонитрила 95% до 15 мин (скорость потока=1,0 мл/мин). ЖХ/МС проводили на массспектрометре ZMD Micromass, соединенном с хроматографом ВЭЖХ HP Agilent 1100, оборудованным колонкой с обращенной фазой C12 Phenomenex Synergi 2,0x150 мм, 4 мкм, 80 А. Кислый элюент состоял из линейного градиента концентрации ацетонитрила в 0,1%-ной водной муравьиной кислоте, составляющей от 5 до 95% в течение 10 мин, затем в изократическом режиме при концентрации ацетонитрила 95% в течение 5 мин (скорость потока=0,4 мл/мин). Препаративную ВЭЖХ проводили с помощью системы подачи растворителя Varian ProStar 210, оборудованной детектором Varian ProStar 330 PDA. Продукты очищали на колонке с обращенной фазой C12 Phenomenex Synergi 10,0x250 мм, 4 мкм, 80 А, элюируя 0,1%-ной муравьиной кислотой в воде (растворитель A) и 0,1%-ной муравьиной кислотой в ацетонитриле (растворитель B). Способ очистки включал следующий градиент растворителя A и растворителя B: 90:10 от 0 до 5 мин; 90:10-10:90 с 5 до 80 мин; затем в изократическом режиме 10:90 в течение 5 мин.
- 42 036202
Скорость потока составляла 4,6 мл/мин, детектирование проводили при 254 нм. Пример 2.
(8)-2-((8)-2-(6-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1Н-пиррол-1-ил)гексанамидо)-3-метилбутанамидо)- (a) пропановая кислота (5).
К-(Малеимидокаприлокси)сукцинамид (1,619 г, 5,25 ммоль, 1,05 экв.) и H-Val-Ala-OH (0,941 г, 5 ммоль, 1 экв.) помещали в 25 мл приемную колбу с мешалкой и колбу продували азотом. Добавляли ДМФА (4,7 мл) и полученную белую суспензию перемешивали. Добавляли DIPEA (0,87 мл, 5 ммоль, 1 экв.) и смесь оставляли перемешиваться при комнатной температуре в течение ночи. Смесь охлаждали на бане лед/вода и по каплям добавляли 2М HCl (3 мл, 6 ммоль). Вязкую смесь переносили в делительную воронку и реакционный сосуд промывали насыщ. NaCl (7 мл), EtOAc (10 мл), насыщ NaCl (10 мл) и EtOAc (5 мл). После отделения водной фазы ее экстрагировали дополнительным количеством EtOAc (2x15 мл). Объединенные органические экстракты промывали насыщ. NaCl (4x15 мл) до достижения в промывке pH ~3,5. Органические экстракты сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного 5 в виде белого твердого вещества (2,172 г, 114% выход неочищенного продукта). Неочищенное 5 суспендировали в теплом CH2Cl2 (35 мл) и фильтровали с удалением мелкого белого твердого вещества. Твердые вещества промывали дополнительным CH2Cl2 (3 мл). Добавляли толуол (5 мл) и смесь охлаждали на бане лед/вода с получением густой суспензии. Твердые вещества собирали фильтрованием, промывали холодной смесью CH2Cl2 (12 мл) и толуола (2 мл) и сушили путем продувания воздуха через образец в течение ночи с получением 5 в виде белого твердого вещества (1,327 г, 70% выход). TCX: Rf=0,26, 10% MeOH в CH2Cl2- 1H ЯМР (CDC^) (ppm) 0,95 (d, J=17 Гц, 3H), 0,98 (d, J=17 Гц, 3H), 1,30 (m, 2H), 1,40 (d, J=17 Гц, 3H), 1,61 (m, 4H), 2,06 (m, 1H), 2,25 (dt, J=4, 19 Гц, 2H), 3,35 (s, 1H), 3,49 (t, J=17 Гц,2Н), 4,20 (d, J=18 Гц, 1H), 4,38 (m, 1H), 6,80 (s, 2H). Аналитическая ВЭЖХ (0,1% муравьиной кислоты): tR 9,05 мин. ЖХ-МС: tR 11,17 мин, m/z (ES+) обнаружено 381,9 (М+Н)+, m/z (ES-) обнаружено 379,9 (М-Н)-.
(b) Метил-4-(^)-8-((5-((^)-2-(4-(^)-2-(^)-2-(6-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1Н-пиррол-1-ил)гексан- амидо)-3-метилбутанамидо)пропанамидо)фенил)-7-метокси-5-оксо-5,11а-дигидро-1Н-бензо[е]пирроло[ 1,2-a] [ 1,4]диазепин-8-ил)окси)пентил)окси)-7-метокси-5-оксо-5,11 a-дигидро-1 Н-бензо[е]пирроло[1,2a] [ 1,4]диазепин-2-ил)бензоат (6).
°Ύ>° ν
В 10-мл колбу помещали 5 (11 мг, 29 мкмоль), EEDQ(k'?#'k^ )(8,9 мг, 36 мкмоль) и 0,46 мл безводного CH2Cl2. Метанол (24 мкл) добавляли для ускорения растворения и смесь перемешивали в атмосфере азот в течение 15 мин. Затем добавляли анилин 4 (18 мг, 24 мкмоль) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 4 ч, после чего анализ ЖХ-МС показал конверсию в продукт. Реакционную смесь концентрировали, растворяли в CH2Cl2 (1 мл) и очищали радиальной хроматографией на 1 мм пластине хроматрона, элюируя смесями CH2Cl2/CH3OH (от 100:0 до 90:10 CH2cl2/CH3OH) с получением 6 (9,9 мг, 36%). Аналитическая ВЭЖХ: tR 12,10 мин. ЖХ-МС: tR 12,91 мин,
- 43 036202 m/z (ES+) обнаружено 1145,6 (М+Н)+.
Пример 3.
), R2 = Η
11: R1 = МС (
9: ri = Н, R2 =
10: R1 = Н, R2 = Н о
Соединение 7 получали таким же образом, как и соединение 5 в примере 2(a) с использованием аллилхлороформиата вместо №(малеимидокаприлокси)сукцинамида и дихлорметана в качестве реакцион ного растворителя.
(a) Метил-4-(^)-8-(3-((^)-2-(4-(^)-2-(^)-2-(((аллилокси)карбонил)амино)-3-метилбутанамидо)- пропанамидо)фенил)-7-метокси-5-оксо-5,11а-дигидро-1Н-бензо[е]пирроло[1,2-а][1,4]диазепин-8-ил)окси)пропокси)-7-метокси-5-оксо-5,11a-дигuдро-1H-бензо[e]пирроло[1,2-a][1,4]диазепин-2-ил)бензоат (8)
К 7 (52 мг, 0,192 ммоль) в 5%-ной смеси метанол/дихлорметан (3 мл) при 0°C добавляли EEDQ (кЖЭ ) (47 мг, 0,193 ммоль) и смесь перемешивали в течение 15 мин до добавления 4 (50 мг, 0,064 ммоль). Реакционную смесь оставляли нагреваться до комнатной температуры и контролировали ЖХМС. Смесь аспирировали на 1 мм пластине хроматрона и элюировали смесью от 1 до 3% метанол/дихлорметан. Фракции, содержащие продукт, объединяли и концентрировали с получением 43 мг (65%) 8 в виде желтого твердого вещества: МС (ES+) m/z 1036,87 [M+H]+.
(b) Метил-4-(^)-8-(3-((^)-2-(4-(^)-2-(^)-2-амино-3-метилбутанамидо)пропанамидо)фенил)-7- метокси-5-оксо-5,11а-дигидро-1Н-бензо[е]пирроло[1,2-а][1,4]диазепин-8-ил)окси)пропокси)-7-метокси5-оксо-5,11а-дигидро-1Н-бензо[е]пирроло[1,2-а][1,4]диазепин-2-ил)бензоат (9).
К раствору 8 (43 мг) в безводном дихлорметане (3 мл) добавляли Ph3P (0,5 мг, 0,002 ммоль), пирролидин (7 мкл, 0,082 ммоль) и тетракис палладий (1,1 мг, 0,001 ммоль). Через приблизительно 30 мин реакционную смесь аспирировали на 1 мм пластине хроматрона и элюировали 5% и затем 10% метанолом в дихлорметане. Основную фракцию собирали и концентрировали при пониженном давлении с получением 22 мг (56%) 9: МС (ES+) m/z 952,5 [M+H]+.
(c) 4-(^)-8-(3-((^)-2-(4-(^)-2-(^)-2-амино-3-метилбутанамидо)пропанамидо)фенил)-7-метокси-5оксо-5,11а-дигидро-1Н-бензо[е]пирроло[1,2-а][1,4]диазепин-8-ил)окси)пропокси)-7-метокси-5-оксо5,11а-дигидро-1Н-бензо[е]пирроло[1,2-а][1,4]диазепин-2-ил)бензойная кислота (10).
К 9 (20 мг) в ТГФ/СН3ОН (2 мл) добавляли раствор гидроксида лития (1 мл 0,1 М раствора). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре. Через 5 ч ЖХ-МС выявила 30% конверсию в требуемый продукт со значительным разложением. Реакционную смесь охлаждали до -80°C в течение 16 ч. ЖХ-МС показала смесь -1:1 10 и 9. Реакционную смесь нейтрализовали 0,1 N HCl (~1 мл) и концентрировали до приблизительно 1 мл. Добавляли ДМСО (1 мл) и CH3CN (1 мл) и смесь очищали с помощью препаративной обращенно-фазовой ВЭЖХ. Фракции, содержащие продукт, объединяли, замораживали и лиофилизировали. В результате получали 1,7 мг (9%) 10 в виде желтой пленки: МС (ES+) m/z 938 [M+H]+.
- 44 036202 (d) 4-(^)-8-(3-((^)-2-(4-(^)-2-(^)-2-(6-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1Н-пиррол-1-ил)гексанамидо)-3метилбутанамидо)пропанамидо)фенил)-7-метокси-5-оксо-5,11 а-дигидро-1Н-бензо[е]пирроло[1,2а][1,4]диазепин-8-ил)окси)пропокси)-7-метокси-5-оксо-5,11а-дигидро-1Н-бензо[е]пирроло[1,2-а][1,4]диазепин-2-ил)бензойная кислота (11).
К смеси 10 (1,7 мг, 1,8 мкмоль) в ДМФА (100 мкл) добавляли DIPEA (1 мкл, 5,75 мкмоль) и N(малеимидокаприлокси)сукцинамид (4,6 мг, 15 мкмоль). Реакцию контролировали с помощью ЖХ-МС. Через 1 ч реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении, растворяли в 0,5 мл ДМСО, 0,5 мл ацетонитрила и 0,5 мл воды и очищали с помощью препаративной обращенно-фазовой ВЭЖХ. Фракции, содержащие продукт, замораживали и лиофилизировали с получением 0,2 мг (10%) 11: МС (ES+) m/z 1131,6 [M+H]+.
Пример 4.
(a) ^)-2-(4-аминофенил)-8-(3-((^)-2-(4-гидроксифенил)-7-метокси-5,11-диоксо-10-((2-(триметил- силил)этокси)метил)-5,10,11,11 a-тетрагидро-1H-бензо[e]пирроло[1,2-a] [ 1,4]диазепин-8-ил)окси)пропокси)-7-метокси-10-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1 Н-бензо^пирроло^ ,2-a] [ 1,4]диазепин5,11(10Н,11зН)-дион (13).
В колбу помещали анилинтрифлат 12 (соединение 9, WO 2011/130613 A1) (520 мг, 490 мкмоль, 1 экв.), растворенный в толуоле (5,4 мл), этаноле (2,7 мл) и воде (2,7 мл). К перемешанному раствору добавляли 4-гидроксифенилбороновую кислоту (88 мг, 640 мкмоль, 1,3 экв.), карбонат натрия (83 мг, 780 мкмоль, 1,6 экв.) и тетракис(трифенилфосфин)палладий(0) (23 мг, 20 мкмоль, 0,04 экв.), реакционную смесь энергично перемешивали течение ночи при комнатной температуре в атмосфере азота. Через 22 ч реакция остановилась. Добавляли дополнительное количество тетракис(трифенилфосфин)палладия (0) (100 мг, 87 мкмоль, 0,18 экв.) и 4-гидроксифенилбороновой кислоты (88 мг, 640 мкмоль, 1,3 экв.) и реакционную смесь перемешивали при 35°C в течение дополнительных 24 ч, после чего анализ ЖХ-МС показал конверсию в продукт. Реакционную смесь концентрировали и затем разделяли между этилацетатом (100 мл) и водой (100 мл). Водный слой экстрагировали дважды этилацетатом (100 мл). Затем органический слой промывали водой (100 мл), солевым раствором (100 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали досуха с получением неочищенного SEM дилактама 13. Неочищенный продукт очищали с помощью флеш-хроматографии, элюируя смесями гексанов:этилацетата (от 75:25 до 0:100), с получением чистого продукта 13 (218 мг, 44%). ЖХ-МС: tR 11,54 мин, m/z (ES+) обнаружено 1004,3 (М+Н)+. 1H ЯМР (CDCl3) δ (ppm) 0,02 (s, 18H), 0,98 (m, 4H), 2,44 (m, 2H), 3,12 (m, 2H), 3,67 (m, 3H), 3,77 (m, 4H), 3,91 (m, 8H), 4,29 (t, J=5,9 Гц, 4H), 4,59 (dt, J=3,1, 10,2 Гц, 2H), 4,76 (dd, J=3,1, 10,2 Гц, 2H), 5,52 (d, J=10,2 Гц, 2H), 6,34 (bs, 1H), 6,66 (d, J=8,2 Гц, 2H), 6,83 (d, J=8,6 Гц, 2H), 7,22 (m, 4H), 7,27 (m, 6H), 7,39 (s, 2H).
(b) (S)-2-(4-аминофенил)-8-(3-(((S)-2-(4-гидроксифенил)-7-метокси-5-оксо-5,11a-дигидро-1Hбензо[e]пирроло[1,2-a][1,4]диазепин-8-ил)окси)пропокси)-7-метокси-1H-бензо[e]пирроло[1,2-a][1,4]диазепин-5(11aH)-он (14).
В колбу, высушенную пламенем, помещали SEM дилактам 13 (109 мг, 109 мкмоль, 1 экв.), растворенный в безводном тетрагидрофуране (2,2 мл), и охлаждали до -78°C. Триэтилборгидрид лития (0,33 мл 1 М раствора в ТГФ, 330 мкмоль, 3 экв.) добавляли по каплям и реакционную смесь перемешивали в атмосфере аргона в течение 2,5 ч, после чего ЖХ показала неполную конверсию в продукт. Добавляли дополнительные 0,66 мл восстановителя и реакционную смесь перемешивали в течение еще одного часа. Реакцию гасили посредством добавления воды (1 мл) и оставляли нагреваться до комнатной температуры, затем разбавляли солевым раствором (25 мл) и экстрагировали трижды дихлорметаном (25 мл). Объединенные органические вещества промывали солевым раствором (25 мл), сушили над сульфатом натрия и выпаривали досуха. Остаток растворяли в смеси дихлорметана (2,8 мл), этанола (7,4 мл) и воды (1,0 мл), и добавляли силикагель (2,7 г). Полученную суспензию перемешивали при комнатной температуре в течение 4 дней. Анализ TCX показал конверсию иминного димера 14, после чего суспензию фильтровали на воронке из пористого стекла и силикагелевый фильтрационный остаток промывали 10%-ным метанолом в хлороформе до прекращения проявления поглощения PBD в фильтрате. В результате концентри- 45 036202 рования фильтрата получали неочищенный иминный димер 14. Вещество растворяли в минимальном количестве дихлорметана и очищали радиальной хроматографией на 1 мм пластине хроматрона, элюируя смесями CH2Cl2/MeOH (от 100:0 до 80:20) с получением 14 (31 мг, 40%). ЖХ-МС: tR 8,48 мин, m/z (ES+) обнаружено 712,2 (М+Н)+.
Пример 5.
6-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-Ш-пиррол-1-ил)-М-(^)-1-((^)-1-((4-(^)-8-(3-((^)-2-(4-гидроксифенил)7 -метокси-5 -оксо-5,11 a-дигидро-1 H-бензо Ипирроло [1,2-a][1,4]диазепин-8-ил)окси)пропокси)-7 -метокси-5 -оксо-5,11 a-дигидро-1 H-бензо Ипирроло [1,2-a][1,4]диазепин-2-ил)фенил)амино)-1 -оксопропан-2ил)амино)-3-метил-1 -оксобутан-2-ил)гексанамид (15).
В высушенную пламенем колбу помещали малеимидокапроил-валин-аланиновый линкер (соединение 36 примера 13 в WO 2011/130613 A1) (11 мг, 29 мкмоль, 1,5 экв.), растворенного в 0,8 мл 5%-го метанола в безводном дихлорметане. Кислоту предварительно активировали путем добавления Nэтоксикарбонил-2-этокси-1,2-дигидрохинолина (9 мг, 34 мкмоль, 1,8 экв.) с последующим перемешиванием при комнатной температуре в атмосфере азота в течение 15 мин. Затем активированную кислоту добавляли в высушенную пламенем колбу, содержащую димер PBD 14 (13 мг, 19 мкмоль, 1 экв.). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в атмосфере азота в течение 4 ч, после чего анализ ЖХ/МС показал конверсию в продукт. Вещество разбавляли в дихлорметане и очищали радиальной хроматографией на 1 мм пластине хроматрона, элюируя смесями CH2Cl2/MeOH (от 100:0 до 80:20) с получением 15 (7,7 мг, 38%). ЖХ-МС: m/z (ES+) обнаружено 1075,5 (М+Н)+.
Пример 6. Получение конъюгатов димеров PBD.
Антитела с введенными цистеинами: антитела CD70, содержащие остаток цистеина в положении 239 тяжелой цепи полностью восстанавливали путем добавления 10 экв. TCEP и 1 мМ ЭДТА и доведения pH до 7,4 при помощи 1 М буфера Tris (pH 9,0). После инкубирования в течение 1 ч при 37°C реакционную смесь охлаждали до 22°C и добавляли 30 экв. дегидроаскорбиновой кислоты для селективного окисления исходных дисульфидов при сохранении цистеина 239 в восстановленном состоянии. pH доводили до 6,5 при помощи 1 М буфера Tris (pH 3,7) и реакцию проводили в течение 1 ч при 22°C. pH раствора затем снова повышали до 7,4 путем добавления 1 М буфера Tris (pH 9,0). 3,5 экв. PBD лекарственного соединения, связанного с линкером, в ДМСО помещали в подходящий контейнер для разбавления пропиленгликолем перед добавлением в реакционную смесь. Для сохранения растворимости лекарственного соединения PBD, связанного с линкером, антитело сначала разбавляли пропиленгликолем до конечной концентрации 33% (например, если раствор антитела имел объем 60 мл, то добавляли 30 мл пропиленгликоля). Тот же объем пропиленгликоля (в данном случае примерно 30 мл) затем добавляли к лекарственному соединению PBD, связанному с линкером, в качестве разбавителя. После перемешивания раствор лекарственного соединения PBD, связанного с линкером, в пропиленгликоле добавляли в раствор антитела для проведения конъюгации; конечная концентрация пропиленгликоля составляла 50%. Реакцию проводили в течение 30 мин, а затем гасили путем добавления 5 экв. N-ацетилцистеина. ADC затем очищали путем ультрафильтрации через мембрану 30 кДа (необходимо отметить, что концентрацию пропиленгликоля, применяемого в реакции, можно снижать в случае любого конкретного PBD, так как единственным назначением пропиленгликоля является сохранение лекарственного соединения, связанного с линкером, в растворенном состоянии в водной среде).
Пример 7. Определение цитотоксичности свободного лекарственного соединения in vitro.
Клетки, как подробно описано ниже, собирали и помещали в 96-луночные планшеты с черными стенками при плотности 10,000 клеток/лунка в 150 мкл среды. Добавляли последовательные разведения исследуемого образца (50 мкл) и инкубацию проводили в течение 92 ч при 37°C. После добавления исследуемого соединения культуры инкубировали в течение 96 ч при 37°C. В среду добавляли ресазурин (0,25 мМ, 50 мкл, Sigma, St. Louis, MO) и инкубацию продолжали в течение 4 ч. Планшеты считывали на планшет-ридере Fusion HT (Packard, Meriden, CT) с использованием длины волны возбуждения 525 нм и длины волны излучения 590 нм. Данные со всех анализов сократили с использованием GraphPad Prism Version 4 для Windows (GraphPad Software, San Diego, CA). Концентрации IC50 по сравнению с необработанными контрольными клетками определяли с использованием нормирования с помощью 4параметрической кривой.
Значения IC50 (pM) для соединений 4 и 14.
- 46 036202
Таблица 1
IC50 в pM после 48-часовой обработки
соединение 786-0 Caki-1 HL60 HEL9217
4 50 20 8 8
14 200 400 30 50
Пример 8. Определение активности выбранных конъюгатов in vitro.
Цитотоксическую активность выбранных конъюгатов антитело-лекарственное средство in vitro определяли при помощи исследования восстановления резазурина (Sigma, St. Louis, Миссури, США) (ссылка: Doronina et al., Nature Biotechnology, 2003, 21, 778-784). Конъюгаты антитело-лекарственное соединение получали согласно описанному выше в примере 6.
Для 96-часового исследования культивируемые клетки в логарифмической фазе роста помещали на 24 ч в 96-луночные планшеты, содержащие 150 мкл RPMI 1640, содержащей 20% FBS. Проводили последовательные разбавления ADC в питательной среде до рабочей концентрации 4х; 50 мкл каждого разбавленного раствора добавляли в 96-луночные планшеты. После добавления ADC клетки инкубировали с исследуемыми конъюгатами в течение 4 дней при 37°C. Затем в каждую лунку добавляли резазурин до достижения конечной концентрации 50 мкМ, и планшеты дополнительно инкубировали в течение 4 ч при 37°C. Планшеты затем анализировали, определяя степень снижения содержания красителя на планшетном анализаторе Fusion HT (Packard Instruments, Meridien, Коннектикут, США), длины волн возбуждения и испускания составляли 530 и 590 нм соответственно. Значение IC50, измеренное в трех повторностях, определяют в настоящем описании как концентрацию, которая приводит к 50% снижению роста клеток по сравнению с контрольными опытами без добавления лекарственного средства.
На таблице ниже показана цитотоксичность ADC в 96-часовом in vitro исследовании. ADC исследовали в отношении антиген положительных и антиген отрицательных клеточных линий.
Таблица 2
IC50 в pM после 96-часовой обработки
ADC Лекарственные соединения/Ab 786-0 Caki-1 антиген- отрицательная клеточная линия
h1F6ec-6 1,8 30 0,1 90,000
h1F6ec-11 1,8 50 30 Эффект отсутствует
h1F6ec-15 2,0 30 13 10,000
Пример 9. Определение цитотоксичности выбранных конъюгатов in vivo.
Все исследования проводили в соответствии с протоколом комитета по содержанию и использованию лабораторных животных в условиях, полностью одобренных ассоциацией оценки и аккредитации лабораторных исследований на животных. Сначала определяли переносимость ADC для подтверждения переносимости конъюгатов в клинически значимых дозах для ксенотрансплантатных экспериментов. Мышам BALB/c вводили возрастающие дозы ADC в PBS, содержащем 0,5 М аргинина и 0,01% Tween 20. Контролировали потерю массы и внешние признаки заболевания у мышей после обработки; мышей, у которых наблюдали потерю 20% массы тела или другие признаки заболевания, подвергали эвтаназии. Применяемое антитело CD70 представляло собой гуманизированное h1F6 (WO 2006/113909), с точечной мутацией замены серина на цистеин в положении 239. Конъюгацию к звену лекарственного соединения проводили через введенный цистеин в положении 239. В среднем 2 лекарственных соединения помещали на антитело.
Эксперименты in vivo терапии проводили на моделях ксенотрансплантатов у мышей, имеющих CD70+ почечно-клеточную карциному или неходжкинскую лимфому. Фрагменты опухолей имплантировали бестимусным мышам. Мышей случайно разбивали в исследуемые группы, средний размер опухоли в каждой группе составлял примерно 100 мм3. ADC вводили согласно указанной схеме. Определяли зависимость объема опухоли от времени, используя формулу объема (LxW2)/2. Животных подвергали эвтаназии, если объем опухоли достигал 1000 мм3. Исследование мышей, у которых наблюдали продолжительную регрессию опухоли, прекращали примерно на 100 день после введения импланта.
На фиг. 1 показаны результаты исследования лечения h1F6ec-соединение 6 в CD70+ почечноклеточной карциноме (786-O) с однократной дозировкой, введенной IP (внутрибрюшинно). На этой фигуре, ^означает необработанные, · означает обработанные h1F6ec-6 при 0,03 мг/кг и о означает обработанные h1F6ec-6 при 0,1 мг/кг.
На фиг. 2 показаны результаты исследования с использованием h1F6ec-соединения 6 в неходжкинской лимфоме (MHHPreB1) с дозированием q7dx2. На этой фигуре К означает необработанные и · означает обработанные h1F6ec-6 при 0,1 мг/кг.
Результаты исследования переносимости у мышей при номинальной загрузке h1F6ec-6 2 лекарственных соединения/mAb продемонстрировали, что однократная доза 1 мг/кг хорошо переносилась, при
- 47 036202 этом отсутствовала потеря массы или внешние признаки заболевания в течение 30 дней. Введение большей дозы (2,5 мг/кг) приводило к потере массы.
Значения IC50 (nM) для ADC с соединением 6
ADCs 786-0 раковая клеточная линия Caki-1 раковая клеточная линия CD70 neg раковая клеточная линия CD70 neg раковая клеточная линия CD70 neg раковая клеточная линия
h1F6ec-6 (1,8dr/Ab) 1 0,5 7491 2074 5327
Значения IC50 (nM) для ADC с соединением 6 и соединением 11
ADCs 786-0 Caki-1 CD70 neg CD70 neg CD70 neg
раковая раковая раковая раковая раковая
клеточная клеточная клеточная клеточная клеточная
линия линия линия линия линия
h1F6ec-11 (1,8dr/Ab) 4 2 Отсутствие эффекта 7725 Макс lnh=50%
h1F6ec-6 (1,8dr/Ab) 2 0,01 7215 1415 Макс lnh=45%

Claims (9)

  1. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
    1. Конъюгат, имеющий формулу IV
    L - (LU-D)p (IV) или его фармацевтически приемлемая соль;
    где L представляет собой звено лиганда, выбранное из группы, состоящей из полноразмерного антитела и антигенсвязывающего фрагмента полноразмерного антитела, причем указанное антитело является антителом к опухолеассоциированным антигенам;
    LU представляет собой звено линкера, имеющее формулу X о
    где E представляет собой остаток глюкуроновой кислоты, звездочка у углерода карбонила означает место присоединения этого атома углерода к звену лекарственного соединения, и волнистая линия означает место присоединения к звену лиганда, и
    А1 представляет собой
    где звездочка означает место присоединения к атому азота формулы X, волнистая линия означает место присоединения к звену лиганда;
    p принимает значения от 1 до 20; и
    D представляет собой звено лекарственного соединения, где звено лекарственного соединения представляет собой димер пирролбензодиазепина (PBD) формулы I
    где *—N(Rn)-%А представляет собой фенил, где X представляет собой > где RN выбран из группы, состоящей из H и С1-4алкила, звездочка означает место присоединения к Q2, и волнистая линия означает место присоединения к звену линкера; и
    R2 имеет формулу III \q1'A-q2'X ш (i) Q1 представляет собой одинарную связь, и Q2 представляет собой одинарную связь, или (ii) Q1 представляет собой -CH=CH-, и Q2 представляет собой одинарную связь; и
    R12 представляет собой фенил, имеющий заместитель, выбранный из группы, состоящей из OH, CO2H и CO2RO, где RO представляет собой С1-4алкил;
    R6, R6', R9 и R9 представляют собой H; R7 представляет собой группу C1-4алкокси;
    R10 и R11 образуют азот-углеродную двойную связь между атомами азота и углерода, с которыми они связаны;
    и
    R представляет собой Cз-7алкиленовую группу;
    Y и Y' представляют собой O;
    R7 выбран из той же группы, что и R7, и R10 и R11 такие же, как R10 и R11; и где LU присоединен к D через X заместитель R2.
  2. 2. Конъюгат по п.1, отличающийся тем, что звено лекарственного соединения выбрано из группы, состоящей из
    - 49 036202
    L.
    и их фармацевтически приемлемых солей, где волнистая линия у атома азота означает место присоединения этого атома к LU.
  3. 3. Конъюгат по п.1, отличающийся тем, что LU-D представляет собой
    где Prot Sub представляет собой -OH или CO2H, и волнистая линия означает место присоединения к
  4. 4. Конъюгат по п.1, отличающийся тем, что LU-D представляет собой
    - 50 036202
    где Prot Sub представляет собой -OH или CO2H, и волнистая линия означает место присоединения к L.
  5. 5. Соединение имеющее формулу
    G1-L1-L2-D, или его фармацевтическая соль или сольват, где -L1-L2- имеет структуру формулы X'
    где E представляет собой остаток глюкуроновой кислоты, звездочка означает место присоединения к звену лекарственного соединения, и волнистая линия означает место присоединения к G1, где
    G1 представляет собой
    где звездочка означает место присоединения к атому азота формулы X, и волнистая линия означает место присоединения к звену лиганда;
    и
    D представляет собой звено лекарственного соединения, где звено лекарственного соединения представляет собой димер пирролбензодиазепина (PBD) формулы I
    где
    А представляет собой фенил, где X представляет собой ( , где RN выбран из группы, состоящей из H и С1-4алкила, звездочка означает место присоединения к Q2, и волнистая линия означает место присоединения к звену линкера; и
    R2 имеет формулу III (i) Q1 представляет собой одинарную связь, и Q2 представляет собой одинарную связь, или (ii) Q1 представляет собой -CH=CH-, и Q2 представляет собой одинарную связь; и
    R12 представляет собой фенил, имеющий заместитель, выбранный из группы, состоящей из OH, CO2H и CO2Ro, где R0 представляет собой С1_4алкил;
    R6, R6, R9 и R9 представляют собой H; R7 представляет собой группу C1_4алкокси;
    R10 и R11 образуют азот-углеродную двойную связь между атомами азота и углерода, с которыми они связаны;
    и
    R представляет собой группу Cз_7алкилен;
    Y и Y' представляют собой O;
    R7 выбран из той же группы, что и R7, и R10 и R11 такие же, как R10 и R11; и где LU присоединен к D через X заместитель R2.
  6. 6. Соединение по п.5, отличающееся тем, что звено лекарственного соединения выбрано из группы, состоящей из
    - 51 036202
    и их фармацевтически приемлемых солей, где волнистая линия у атома азота означает место присоединения указанного атома к LU.
  7. 7. Соединение по п.5, отличающееся тем, что LU-D представляет собой
    где Prot Sub представляет собой -OH или CO2H, предпочтительно защищенный.
  8. 8. Соединение по п.5, отличающееся тем, что LU-D представляет собой
    - 52 036202
    где Prot Sub представляет собой -OH или CO2H, предпочтительно защищенный, и волнистая линия означает место присоединения указанного атома к L.
  9. 9. Способ лечения пролиферативного заболевания, включающий введение субъекту, нуждающемуся в лечении, терапевтически эффективного количества конъюгата по п.1.
EA201692215A 2011-10-14 2012-10-12 Пирролбензодиазепины и конъюгаты направленного действия EA036202B1 (ru)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201161547195P 2011-10-14 2011-10-14

Publications (2)

Publication Number Publication Date
EA201692215A1 EA201692215A1 (ru) 2017-07-31
EA036202B1 true EA036202B1 (ru) 2020-10-14

Family

ID=48082466

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA201490582A EA026643B1 (ru) 2011-10-14 2012-10-12 Пирролбензодиазепины и конъюгаты направленного действия
EA201692215A EA036202B1 (ru) 2011-10-14 2012-10-12 Пирролбензодиазепины и конъюгаты направленного действия

Family Applications Before (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA201490582A EA026643B1 (ru) 2011-10-14 2012-10-12 Пирролбензодиазепины и конъюгаты направленного действия

Country Status (14)

Country Link
US (3) US9387259B2 (ru)
EP (2) EP2753178B1 (ru)
JP (2) JP6399930B2 (ru)
KR (1) KR101961976B1 (ru)
CN (1) CN103997893B (ru)
AU (1) AU2012322613B2 (ru)
CA (1) CA2850375C (ru)
EA (2) EA026643B1 (ru)
ES (1) ES2660233T3 (ru)
HK (1) HK1253715A1 (ru)
IL (1) IL231797A (ru)
MX (2) MX358757B (ru)
WO (1) WO2013055993A1 (ru)
ZA (1) ZA201402404B (ru)

Families Citing this family (119)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB0819095D0 (en) 2008-10-17 2008-11-26 Spirogen Ltd Pyrrolobenzodiazepines
CA2795353C (en) 2010-04-15 2018-01-09 Spirogen Developments Sarl Pyrrolobenzodiazepines used to treat proliferative diseases
AU2011239522B2 (en) 2010-04-15 2014-10-23 Medimmune Limited Targeted pyrrolobenzodiazapine conjugates
BR112014006703A8 (pt) 2011-09-20 2018-01-09 Spirogen Sarl "pirrolobenzodiazepinas
EA027386B1 (ru) * 2011-10-14 2017-07-31 Медимьюн Лимитед Пирролобензодиазепины
KR101961976B1 (ko) 2011-10-14 2019-03-25 시애틀 지네틱스, 인크. 피롤로벤조디아제핀 및 표적 접합체
EP2755642B1 (en) 2011-10-14 2018-07-18 Seattle Genetics, Inc. Pyrrolobenzodiazepines and targeted conjugates
MX341523B (es) 2011-10-14 2016-08-24 Medimmune Ltd Pirrolobenzodiazepinas.
DK2906248T3 (en) 2012-10-12 2019-03-04 Medimmune Ltd Pyrrolobenzodiazepines and their conjugates
MX364328B (es) 2012-10-12 2019-04-23 Medimmune Ltd Conjugados del anticuerpo pirrolobenzodiazepina.
RS58921B1 (sr) 2012-10-12 2019-08-30 Medimmune Ltd Pirolobenzodiazepini i njihovi konjugati
EP2906250B1 (en) 2012-10-12 2018-05-30 ADC Therapeutics SA Pyrrolobenzodiazepine-anti-psma antibody conjugates
EP2906297B1 (en) 2012-10-12 2017-12-06 ADC Therapeutics SA Pyrrolobenzodiazepine-antibody conjugates
PT2906253T (pt) 2012-10-12 2018-11-05 Medimmune Ltd Conjugados de anticorpo anti-psma de pirrolobenzodiazepina
EP2906249B1 (en) 2012-10-12 2018-06-27 MedImmune Limited Synthesis and intermediates of pyrrolobenzodiazepine derivatives for conjugation
LT2906251T (lt) 2012-10-12 2017-12-11 Adc Therapeutics Sa Pirolobenzodiazepino-anti-cd22 antikūno konjugatai
EP2906298B1 (en) 2012-10-12 2018-10-03 ADC Therapeutics SA Pyrrolobenzodiazepine-antibody conjugates
WO2014089177A2 (en) 2012-12-04 2014-06-12 Massachusetts Institute Of Technology Compounds, conjugates and compositions of epipolythiodiketopiperazines and polythiodiketopiperazines
AU2013366490B9 (en) 2012-12-21 2018-02-01 Medimmune Limited Unsymmetrical pyrrolobenzodiazepines-dimers for use in the treatment of proliferative and autoimmune diseases
JP6307519B2 (ja) 2012-12-21 2018-04-04 メドイミューン・リミテッドＭｅｄＩｍｍｕｎｅ Ｌｉｍｉｔｅｄ ピロロベンゾジアゼピンおよびその結合体
NZ710746A (en) 2013-03-13 2018-11-30 Medimmune Ltd Pyrrolobenzodiazepines and conjugates thereof
WO2014143622A1 (en) 2013-03-13 2014-09-18 Seattle Genetics, Inc. ACTIVATED CARBON FILTRATION FOR PURIFICATION OF BENZODIAZEPINE ADCs
MX2015011367A (es) 2013-03-13 2015-12-16 Seattle Genetics Inc Ciclodextrina y formulaciones de conjugados anticuerpo-farmaco.
SG11201507214SA (en) 2013-03-13 2015-10-29 Medimmune Ltd Pyrrolobenzodiazepines and conjugates thereof
CA2902872A1 (en) 2013-03-15 2014-09-18 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Biologically active molecules, conjugates thereof, and therapeutic uses
US10208125B2 (en) 2013-07-15 2019-02-19 University of Pittsburgh—of the Commonwealth System of Higher Education Anti-mucin 1 binding agents and uses thereof
JP6608823B2 (ja) 2013-08-26 2019-11-20 レゲネロン ファーマシューティカルス，インコーポレーテッド マクロライドジアステレオマーを含む医薬組成物、その合成方法、及び治療上の使用
EP3054986B1 (en) 2013-10-11 2019-03-20 Medimmune Limited Pyrrolobenzodiazepine-antibody conjugates
US9950078B2 (en) 2013-10-11 2018-04-24 Medimmune Limited Pyrrolobenzodiazepine-antibody conjugates
GB201317981D0 (en) 2013-10-11 2013-11-27 Spirogen Sarl Pyrrolobenzodiazepines and conjugates thereof
EP3054983B1 (en) 2013-10-11 2019-03-20 Medimmune Limited Pyrrolobenzodiazepine-antibody conjugates
GB201317982D0 (en) 2013-10-11 2013-11-27 Spirogen Sarl Pyrrolobenzodiazepines and conjugates thereof
EA201690780A1 (ru) 2013-10-15 2016-08-31 Сиэтл Дженетикс, Инк. Пегилированные лекарственные средства-линкеры для улучшенной фармакокинетики конъюгатов лиганд-лекарственное средство
KR102442906B1 (ko) 2013-12-19 2022-09-14 씨젠 인크. 표적화된-약물 컨쥬게이트와 함께 사용되는 메틸렌 카바메이트 링커
WO2015138460A1 (en) 2014-03-11 2015-09-17 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Anti-egfrviii antibodies and uses thereof
GB201409653D0 (en) * 2014-05-30 2014-07-16 Stell Dr Anneliese Pyrrolobenzodiazepine therapeutic agents
CN106687141A (zh) 2014-09-10 2017-05-17 麦迪穆有限责任公司 吡咯并苯并二氮杂卓及其缀合物
SG10201809668TA (en) 2014-09-12 2018-11-29 Genentech Inc Anti-her2 antibodies and immunoconjugates
GB201416112D0 (en) 2014-09-12 2014-10-29 Medimmune Ltd Pyrrolobenzodiazepines and conjugates thereof
MX2017006770A (es) 2014-11-25 2018-02-09 Adc Therapeutics Sa Conjugados de pirrolobenzodiazepina y anticuerpo.
US9526801B2 (en) 2015-01-14 2016-12-27 Bristol-Myers Squibb Company Heteroarylene-bridged benzodiazepine dimers, conjugates thereof, and methods of making and using
CA2973354A1 (en) 2015-01-14 2016-07-21 Bristol-Myers Squibb Company Benzodiazepine dimers, conjugates thereof, and methods of making and using
US10472408B2 (en) * 2015-03-05 2019-11-12 Peter Und Traudl Engelhorn-Stiftung Zur Förderung Der Lebenswissenschaften Fusion proteins comprising partial tetraspanin sequences and a system thereof for presenting peptides on the cell surface
WO2016160615A1 (en) 2015-03-27 2016-10-06 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Maytansinoid derivatives, conjugates thereof, and methods of use
GB201506411D0 (en) 2015-04-15 2015-05-27 Bergenbio As Humanized anti-axl antibodies
GB201506402D0 (en) 2015-04-15 2015-05-27 Berkel Patricius H C Van And Howard Philip W Site-specific antibody-drug conjugates
EP3313854A1 (en) 2015-06-23 2018-05-02 Bristol-Myers Squibb Company Macrocyclic benzodiazepine dimers, conjugates thereof, preparation and uses
US11191844B2 (en) 2015-07-06 2021-12-07 Regeneran Pharmaceuticals, Inc. Multispecific antigen-binding molecules and uses thereof
MA43345A (fr) 2015-10-02 2018-08-08 Hoffmann La Roche Conjugués anticorps-médicaments de pyrrolobenzodiazépine et méthodes d'utilisation
US11793880B2 (en) 2015-12-04 2023-10-24 Seagen Inc. Conjugates of quaternized tubulysin compounds
TWI814699B (zh) 2015-12-04 2023-09-11 美商思進公司 四級胺化妥布賴森(tubulysin)化合物之結合物
WO2017100642A1 (en) 2015-12-11 2017-06-15 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods for reducing or preventing growth of tumors resistant to egfr and/or erbb3 blockade
MY198605A (en) 2016-01-25 2023-09-08 Regeneron Pharma Maytansinoid derivatives conjugates thereof, and methods of use
GB201601431D0 (en) 2016-01-26 2016-03-09 Medimmune Ltd Pyrrolobenzodiazepines
GB201602359D0 (en) 2016-02-10 2016-03-23 Medimmune Ltd Pyrrolobenzodiazepine Conjugates
GB201602356D0 (en) 2016-02-10 2016-03-23 Medimmune Ltd Pyrrolobenzodiazepine Conjugates
WO2017165851A1 (en) 2016-03-25 2017-09-28 Seattle Genetics, Inc. Process for the preparation of pegylated drug-linkers and intermediates thereof
US11352446B2 (en) 2016-04-28 2022-06-07 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods of making multispecific antigen-binding molecules
GB201607478D0 (en) 2016-04-29 2016-06-15 Medimmune Ltd Pyrrolobenzodiazepine Conjugates
US10918627B2 (en) 2016-05-11 2021-02-16 Massachusetts Institute Of Technology Convergent and enantioselective total synthesis of Communesin analogs
US10143695B2 (en) 2016-05-18 2018-12-04 Mersana Therapeutics, Inc. Pyrrolobenzodiazepines and conjugates thereof
BR112018076263A2 (pt) 2016-06-17 2019-03-26 Magenta Therapeutics, Inc. composições e métodos para a depleção de células
TWI760344B (zh) 2016-06-24 2022-04-11 美商梅爾莎納醫療公司 吡咯並苯並二氮呯類和彼等之共軛物類
JP2019524687A (ja) 2016-07-01 2019-09-05 グラクソスミスクライン、インテレクチュアル、プロパティー、ディベロップメント、リミテッドＧｌａｘｏｓｍｉｔｈｋｌｉｎｅ Ｉｎｔｅｌｌｅｃｔｕａｌ Ｐｒｏｐｅｒｔｙ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ Ｌｉｍｉｔｅｄ 抗体薬物複合体およびこれを用いた治療方法
US10772972B2 (en) 2016-09-23 2020-09-15 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Anti-STEAP2 antibody drug conjugates, and compositions and uses thereof
PL3515946T3 (pl) 2016-09-23 2022-11-07 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Przeciwciała anty-muc16 (mucyna 16)
WO2018071455A1 (en) 2016-10-10 2018-04-19 Cellerant Therapeutics, Inc. Isoquinolidinobenzodiazepine (iqb)-1(chloromethyl)-2,3-dihydro-1h-benzo[e]indole (cbi) dimers
GB201617466D0 (en) 2016-10-14 2016-11-30 Medimmune Ltd Pyrrolobenzodiazepine conjugates
SG10202104259RA (en) 2016-11-08 2021-06-29 Regeneron Pharma Steroids and protein-conjugates thereof
TWI782930B (zh) 2016-11-16 2022-11-11 美商再生元醫藥公司 抗ｍｅｔ抗體，結合ｍｅｔ之雙特異性抗原結合分子及其使用方法
GB201619490D0 (en) * 2016-11-17 2017-01-04 Medimmune Ltd Pyrrolobenzodiazepine conjugates
BR112019014991A2 (pt) 2017-01-20 2020-04-07 Magenta Therapeutics Inc composições e métodos para a supressão de células cd137+
ES2871001T3 (es) 2017-02-08 2021-10-28 Adc Therapeutics Sa Conjugados de pirrolobenzodiazepinas y anticuerpos
GB201702031D0 (en) 2017-02-08 2017-03-22 Medlmmune Ltd Pyrrolobenzodiazepine-antibody conjugates
JP7181181B2 (ja) 2017-02-28 2022-11-30 第一三共株式会社 抗ｈｅｒ３抗体－薬物コンジュゲート投与によるｅｇｆｒ－ｔｋｉ抵抗性の非小細胞肺癌の治療方法
IL269398B1 (en) 2017-03-24 2024-01-01 Seagen Inc A process for the preparation of glucuronide-drug binders and their intermediates
PT3612537T (pt) 2017-04-18 2022-08-29 Medimmune Ltd Conjugados de pirrolobenzodiazepina
JP7408396B2 (ja) 2017-04-20 2024-01-05 アーデーセー セラピューティクス ソシエテ アノニム 併用療法
US11932650B2 (en) 2017-05-11 2024-03-19 Massachusetts Institute Of Technology Potent agelastatin derivatives as modulators for cancer invasion and metastasis
JP2020520926A (ja) 2017-05-18 2020-07-16 レゲネロン ファーマシューティカルス，インコーポレーテッド ビス−オクタヒドロフェナントレンカルボキサミド及びそのタンパク質コンジュゲート
US11491237B2 (en) 2017-05-18 2022-11-08 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Cyclodextrin protein drug conjugates
WO2018229222A1 (en) 2017-06-14 2018-12-20 Adc Therapeutics Sa Dosage regimes for the administration of an anti-cd19 adc
MY194477A (en) 2017-08-18 2022-11-30 Medimmune Ltd Pyrrolobenzodiazepine conjugates
IL301638A (en) 2017-09-29 2023-05-01 Daiichi Sankyo Co Ltd Conjugation of an antibody with a pyrrolobenzodiazepine derivative
US10640508B2 (en) 2017-10-13 2020-05-05 Massachusetts Institute Of Technology Diazene directed modular synthesis of compounds with quaternary carbon centers
AU2018365946A1 (en) 2017-11-07 2020-05-14 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Hydrophilic linkers for antibody drug conjugates
EP3710066B1 (en) * 2017-11-14 2022-06-08 Medimmune Limited Pyrrolobenzodiazepine conjugates
US11638760B2 (en) 2017-11-27 2023-05-02 Mersana Therapeutics, Inc. Pyrrolobenzodiazepine antibody conjugates
TW201929908A (zh) 2017-12-21 2019-08-01 美商梅爾莎納醫療公司 吡咯并苯并二氮呯抗體共軛物
JP7366028B2 (ja) 2018-01-08 2023-10-20 レゲネロン ファーマシューティカルス，インコーポレーテッド ステロイド及びその抗体コンジュゲート
GB201803342D0 (en) 2018-03-01 2018-04-18 Medimmune Ltd Methods
GB201806022D0 (en) 2018-04-12 2018-05-30 Medimmune Ltd Pyrrolobenzodiazepines and conjugates thereof
KR20210016528A (ko) 2018-04-30 2021-02-16 리제너론 파마슈티칼스 인코포레이티드 Her2 및/또는 aplp2에 결합하는 항체 및 이중특이적 항원-결합 분자 및 접합체 그리고 이들의 용도
EP3790899A1 (en) 2018-05-09 2021-03-17 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Anti-msr1 antibodies and methods of use thereof
BR112020023145A2 (pt) 2018-05-17 2021-02-02 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. anticorpo anti-cd63 ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, molécula de ligação ao antígeno biespecífica, proteína terapêutica de múltiplos domínios, polinucleotídeo composição farmacêutica, e, composto
CA3100141A1 (en) * 2018-05-29 2019-12-05 Intocell, Inc. Novel benzodiazepine derivatives and uses thereof
CN112912109A (zh) 2018-09-20 2021-06-04 第一三共株式会社 通过施用抗her3抗体-药物缀合物治疗her3-突变的癌症
AU2019384136A1 (en) 2018-11-20 2021-06-10 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Bis-octahydrophenanthrene carboxamide derivatives and protein conjugates thereof for use as LXR agonists
KR20210106467A (ko) 2018-12-21 2021-08-30 리제너론 파마슈티칼스 인코포레이티드 튜불리신 및 단백질-튜불리신 접합체
CN113226470A (zh) 2018-12-21 2021-08-06 瑞泽恩制药公司 利福霉素类似物及其抗体-药物缀合物
MA53772B1 (fr) 2019-01-08 2023-08-31 Regeneron Pharma Lieurs sans trace et conjugués protéiques associés
CN113727757A (zh) 2019-02-21 2021-11-30 瑞泽恩制药公司 使用结合met的抗-met抗体和双特异性抗原结合分子治疗眼癌的方法
WO2020247054A1 (en) 2019-06-05 2020-12-10 Massachusetts Institute Of Technology Compounds, conjugates, and compositions of epipolythiodiketopiperazines and polythiodiketopiperazines and uses thereof
EP4031574A1 (en) 2019-09-16 2022-07-27 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Radiolabeled met binding proteins for immuno-pet imaging
US11814428B2 (en) 2019-09-19 2023-11-14 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Anti-PTCRA antibody-drug conjugates and uses thereof
WO2021080608A1 (en) 2019-10-25 2021-04-29 Medimmune, Llc Branched moiety for use in conjugates
EP4093440A1 (en) 2020-01-24 2022-11-30 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Protein-antiviral compound conjugates
AU2021228225A1 (en) 2020-02-28 2022-09-01 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Bispecific antigen binding molecules that bind HER2, and methods of use thereof
US11701427B2 (en) 2020-04-16 2023-07-18 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Diels-alder conjugation methods
US20230069722A1 (en) 2020-06-24 2023-03-02 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Tubulysins and protein-tubulysin conjugates
JPWO2022014698A1 (ru) 2020-07-17 2022-01-20
CN116615251A (zh) 2020-09-14 2023-08-18 瑞泽恩制药公司 包含glp1肽模拟物的抗体-药物缀合物及其用途
EP4232481A1 (en) 2020-10-22 2023-08-30 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Anti-fgfr2 antibodies and methods of use thereof
CA3220081A1 (en) 2021-07-28 2023-02-02 Thomas Nittoli Protein-antiviral compound conjugates
US20230414775A1 (en) 2021-12-29 2023-12-28 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Tubulysins and protein-tubulysin conjugates
WO2023137026A1 (en) 2022-01-12 2023-07-20 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Camptothecin analogs conjugated to a glutamine residue in a protein, and their use
WO2023137443A1 (en) 2022-01-14 2023-07-20 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Verrucarin a derivatives and antibody drug conjugates thereof
US20230330254A1 (en) 2022-03-11 2023-10-19 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Anti-glp1r antibody-tethered drug conjugates comprising glp1 peptidomimetics and uses thereof
WO2024020164A2 (en) 2022-07-21 2024-01-25 Firefly Bio, Inc. Glucocorticoid receptor agonists and conjugates thereof

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2006111759A1 (en) * 2005-04-21 2006-10-26 Spirogen Limited Pyrrolobenzodiazepines
US20110196148A1 (en) * 2008-10-17 2011-08-11 Spirogen Limited Unsymmetrical pyrrolobenzodiazepine-dimers for treatment of proliferative diseases

Family Cites Families (119)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3361742A (en) 1964-12-07 1968-01-02 Hoffmann La Roche 5-oxo-1h-pyrrolo-[2, 1-c][1, 4]-benzodiazepin-2-crylamides
US3523941A (en) 1967-03-06 1970-08-11 Hoffmann La Roche Benzodiazepine compounds and process for their preparation
US3524849A (en) 1967-10-27 1970-08-18 Hoffmann La Roche Process for the preparation of pyrrolo-benzodiazepine acrylamides and intermediates useful therein
IL33558A (en) 1968-12-30 1973-10-25 Fujisawa Pharmaceutical Co Antibiotic pyrrolo-benzodiazepine compound,its derivatives and processes for their production
JPS4843755B1 (ru) 1969-06-26 1973-12-20
FR2027356A1 (en) 1968-12-30 1970-09-25 Fujisawa Pharmaceutical Co Benzodiazepinone antibiotics
JPS5382792U (ru) 1976-12-10 1978-07-08
JPS6053033B2 (ja) 1976-12-28 1985-11-22 財団法人微生物化学研究会 新制癌抗生物質マゼスラマイシン及びその製造方法
JPS585916B2 (ja) 1977-12-27 1983-02-02 株式会社ミドリ十字 新規ベンゾジアゼピン系化合物
JPS5615289A (en) 1979-07-17 1981-02-14 Green Cross Corp:The Novel benzodiazepinnbased compound 3
JPS57131791A (en) 1980-12-31 1982-08-14 Fujisawa Pharmaceut Co Ltd Benzodiazepine derivative and its preparation
JPH0353356Y2 (ru) 1981-02-06 1991-11-21
CA1185602A (en) 1981-02-27 1985-04-16 Emilio Kyburz Imidazodiazepines
CA1173441A (en) 1981-02-27 1984-08-28 Hoffmann-La Roche Limited Imidazodiazepines
CA1184175A (en) 1981-02-27 1985-03-19 Walter Hunkeler Imidazodiazepines
JPS58180487A (ja) 1982-04-16 1983-10-21 Kyowa Hakko Kogyo Co Ltd 抗生物質ｄｃ−８１およびその製造法
JPS58180487U (ja) 1982-05-28 1983-12-02 松下電工株式会社 光線式報知器の組立体
US4427588A (en) 1982-11-08 1984-01-24 Bristol-Myers Company Process for conversion of oxotomaymycin to tomaymycin
US4427587A (en) 1982-11-10 1984-01-24 Bristol-Myers Company Total synthesis of antitumor antibiotics BBM-2040A and BBM-2040B
JPS59152329A (ja) 1983-02-17 1984-08-31 Green Cross Corp:The 局所障害抑制剤
FR2586683B1 (fr) 1985-08-29 1988-07-01 Centre Nat Rech Scient Nouveaux derives de neothramycine, leur procede de preparation et leur application en tant que medicaments
JP2660201B2 (ja) 1988-08-05 1997-10-08 塩野義製薬株式会社 新規ピロロ［１，４］ベンゾジアゼピン誘導体および老人性痴呆薬
FR2676230B1 (fr) 1991-05-07 1993-08-27 Centre Nat Rech Scient Nouveaux derives de pyrrolo [1,4]-benzodiazepines, leur procede de preparation et medicaments les contenant.
GB9205051D0 (en) 1992-03-09 1992-04-22 Cancer Res Campaign Tech Pyrrolobenzodiazepine derivatives,their preparation,and compositions containing them
FR2696176B1 (fr) 1992-09-28 1994-11-10 Synthelabo Dérivés de pipéridine, leur préparation et leur application en thérapeutique.
US6214345B1 (en) 1993-05-14 2001-04-10 Bristol-Myers Squibb Co. Lysosomal enzyme-cleavable antitumor drug conjugates
GB9316162D0 (en) 1993-08-04 1993-09-22 Zeneca Ltd Fungicides
AU5094699A (en) 1998-07-08 2000-02-01 E-Ink Corporation Methods for achieving improved color in microencapsulated electrophoretic devices
ATE240334T1 (de) 1998-08-27 2003-05-15 Spirogen Ltd Pyrrolobenzodiazepine
GB9818730D0 (en) 1998-08-27 1998-10-21 Univ Portsmouth Collections of compounds
GB9818731D0 (en) 1998-08-27 1998-10-21 Univ Portsmouth Compounds
GB9818732D0 (en) 1998-08-27 1998-10-21 Univ Portsmouth Collection of compounds
US6909006B1 (en) 1999-08-27 2005-06-21 Spirogen Limited Cyclopropylindole derivatives
DK1320522T3 (da) 2000-09-19 2006-04-03 Moses Lee Achirale analoger af CC-1065 og af duocarmyciner samt præparater og metoder til anvendelse deraf
US6362331B1 (en) 2001-03-30 2002-03-26 Council Of Scientific And Industrial Research Process for the preparation of antitumor agents
US6660856B2 (en) 2002-03-08 2003-12-09 Kaohsiung Medical University Synthesis of pyrrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepine analogues
JP4741838B2 (ja) 2002-07-31 2011-08-10 シアトル ジェネティクス，インコーポレーテッド 癌、自己免疫疾患または感染症を治療するための薬物結合体およびその使用
US20040138269A1 (en) 2002-10-11 2004-07-15 Sugen, Inc. Substituted pyrroles as kinase inhibitors
FR2846966A1 (fr) 2002-11-07 2004-05-14 Fournier Lab Sa Derive du 4-methyl-2-oxo-2h-1-benzopyran-7-yl 5-thio-beta-d- xylopyranoside, son procede de preparation et composition pharmaceutique le contenant
GB0226593D0 (en) 2002-11-14 2002-12-24 Consultants Ltd Compounds
DE60326060D1 (de) 2003-03-31 2009-03-19 Council Scient Ind Res Nichtvernetzende pyrroloä2,1-cüä1,4übenzodiazepine als potentielle antitumor-agentien und ihre herstellung
GB0321295D0 (en) 2003-09-11 2003-10-15 Spirogen Ltd Synthesis of protected pyrrolobenzodiazepines
GB0416511D0 (en) 2003-10-22 2004-08-25 Spirogen Ltd Pyrrolobenzodiazepines
AU2004284075A1 (en) 2003-10-22 2005-05-06 Government Of The United States Of America, Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Pyrrolobenzodiazepine derivatives, compositions comprising the same and methods related thereto
PT2489364E (pt) 2003-11-06 2015-04-16 Seattle Genetics Inc Compostos de monometilvalina conjugados com anticorpos
US7375078B2 (en) 2004-02-23 2008-05-20 Genentech, Inc. Heterocyclic self-immolative linkers and conjugates
GB0404578D0 (en) 2004-03-01 2004-04-07 Spirogen Ltd Pyrrolobenzodiazepines
GB0404577D0 (en) 2004-03-01 2004-04-07 Spirogen Ltd Pyrrolobenzodiazepines
AU2005219626B2 (en) * 2004-03-01 2010-11-18 Medimmune Limited 11-hydroxy-5H-pyrrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-one derivatives as key intermediates for the preparation of C2 substituted pyrrolobenzodiazepines
GB0404574D0 (en) 2004-03-01 2004-04-07 Spirogen Ltd Amino acids
DE102004010943A1 (de) 2004-03-03 2005-09-29 Degussa Ag Verfahren zur Herstellung von N-geschützten 4-Ketprolinderivaten
JP5166861B2 (ja) 2004-03-09 2013-03-21 スピロゲン リミティッド ピロロベンゾジアゼピン
FR2869231B1 (fr) 2004-04-27 2008-03-14 Sod Conseils Rech Applic Composition therapeutique contenant au moins un derive de la pyrrolobenzodiazepine et la fludarabine
GB0410725D0 (en) * 2004-05-13 2004-06-16 Spirogen Ltd Pyrrolobenzodiazepine therapeutic agents
DK1791565T3 (en) 2004-09-23 2016-08-01 Genentech Inc Cysteingensplejsede antibodies and conjugates
WO2006068325A2 (en) 2004-12-24 2006-06-29 Showa Denko K. K. Production method of thermoelectric semiconductor alloy, thermoelectric conversion module and thermoelectric power generating device
EP1871418B1 (en) 2005-04-19 2014-03-19 Seattle Genetics, Inc. Humanized anti-cd70 binding agents and uses thereof
ATE427949T1 (de) 2005-10-05 2009-04-15 Spirogen Ltd 4-a4-(5-oxo-2,3,5,11a-tetrahydro-5h-pyrrolo a2, 1-cua1,4ubenzodiazepin-8-yloxy)-butyrylaminou-1 - pyrrol-2-carbonsaurealkylesterderivate und verwandte verbindung zur behandlung einer proliferativen erkrankung
US20070154906A1 (en) 2005-10-05 2007-07-05 Spirogen Ltd. Methods to identify therapeutic candidates
EP1813614B1 (en) 2006-01-25 2011-10-05 Sanofi Cytotoxic agents comprising new tomaymycin derivatives
ZA200900545B (en) 2006-07-18 2010-03-31 Sanofi Aventis Antagonist antibody against EPHA2 for the treatment of cancer
EP1914242A1 (en) 2006-10-19 2008-04-23 Sanofi-Aventis Novel anti-CD38 antibodies for the treatment of cancer
WO2008050140A2 (en) 2006-10-27 2008-05-02 Spirogen Limited Compounds for treatment of parasitic infection
DK2099823T4 (da) 2006-12-01 2022-05-09 Seagen Inc Målbindingsmiddelvarianter og anvendelser deraf
DK2019104T3 (da) 2007-07-19 2013-12-16 Sanofi Sa Cytotoksiske midler, der omfatter nye tomaymycinderivater, og terapeutisk anvendelse deraf
KR101641345B1 (ko) * 2007-10-12 2016-07-20 시애틀 지네틱스, 인크. 항체-약물 접합체를 이용한 병용 요법
GB0722087D0 (en) 2007-11-09 2007-12-19 Spirogen Ltd Polyamides
GB0722088D0 (en) 2007-11-09 2007-12-19 Spirogen Ltd Pyrrolobenzodiazepines
CA2718942A1 (en) 2008-03-18 2009-09-24 Seattle Genetics, Inc. Auristatin drug linker conjugates
WO2009117631A2 (en) 2008-03-21 2009-09-24 Kingsdown, Inc. Methods and apparatuses for providing a sleep system having customized zoned support and zoned comfort
GB0813432D0 (en) 2008-07-22 2008-08-27 Spirogen Ltd Pyrrolobenzodiazepines
GB0819097D0 (en) 2008-10-17 2008-11-26 Spirogen Ltd Pyrrolobenzodiazepines
NZ594177A (en) 2009-02-05 2014-02-28 Immunogen Inc Novel benzodiazepine derivatives
FR2949469A1 (fr) 2009-08-25 2011-03-04 Sanofi Aventis Derives anticancereux, leur preparation et leur application en therapeutique
CA2775350A1 (en) * 2009-09-24 2011-03-31 Seattle Genetics, Inc. Dr5 ligand drug conjugates
ES2449379T3 (es) 2010-02-09 2014-03-19 Bristol-Myers Squibb Company Derivados de bencilpirrolidinona como moduladores de la actividad de receptores de quimiocinas
SI2528625T1 (sl) 2010-04-15 2013-11-29 Spirogen Sarl Pirolobenzodiazepini in njihovi konjugati
CA2795353C (en) 2010-04-15 2018-01-09 Spirogen Developments Sarl Pyrrolobenzodiazepines used to treat proliferative diseases
AU2011239522B2 (en) 2010-04-15 2014-10-23 Medimmune Limited Targeted pyrrolobenzodiazapine conjugates
GB201006340D0 (en) 2010-04-15 2010-06-02 Spirogen Ltd Synthesis method and intermediates
US9353127B2 (en) 2011-02-15 2016-05-31 Immunogen, Inc. Methods of preparation of conjugates
BR112014006703A8 (pt) 2011-09-20 2018-01-09 Spirogen Sarl "pirrolobenzodiazepinas
MX341523B (es) 2011-10-14 2016-08-24 Medimmune Ltd Pirrolobenzodiazepinas.
KR101961976B1 (ko) 2011-10-14 2019-03-25 시애틀 지네틱스, 인크. 피롤로벤조디아제핀 및 표적 접합체
EA027386B1 (ru) 2011-10-14 2017-07-31 Медимьюн Лимитед Пирролобензодиазепины
EP2755642B1 (en) 2011-10-14 2018-07-18 Seattle Genetics, Inc. Pyrrolobenzodiazepines and targeted conjugates
JP6166728B2 (ja) 2011-10-14 2017-07-19 メドイミューン・リミテッドＭｅｄＩｍｍｕｎｅ Ｌｉｍｉｔｅｄ ピロロベンゾジアゼピンの製造に有用な合成方法及び中間体
KR101877598B1 (ko) 2011-10-14 2018-07-11 메디뮨 리미티드 피롤로벤조디아제핀 및 그의 컨주게이트
EP2855482B1 (en) 2012-04-30 2017-03-01 MedImmune Limited Pyrrolobenzodiazepines
AU2013255612B2 (en) 2012-04-30 2017-06-22 Medimmune Limited Pyrrolobenzodiazepines
MX2015000357A (es) 2012-07-09 2015-05-12 Genentech Inc Anticuerpos e inmunoconjugados anti-cd22.
MA37840B1 (fr) 2012-07-09 2020-05-29 Genentech Inc Immunoconjugués comprenant des anticorps anti-cd79b
JP2015528818A (ja) 2012-08-02 2015-10-01 ジェネンテック， インコーポレイテッド 抗ｅｔｂｒ抗体およびイムノコンジュゲート
EP2906297B1 (en) 2012-10-12 2017-12-06 ADC Therapeutics SA Pyrrolobenzodiazepine-antibody conjugates
RS58921B1 (sr) 2012-10-12 2019-08-30 Medimmune Ltd Pirolobenzodiazepini i njihovi konjugati
WO2014057118A1 (en) 2012-10-12 2014-04-17 Adc Therapeutics Sarl Pyrrolobenzodiazepine-anti-cd22 antibody conjugates
HUE034505T2 (en) 2012-10-12 2018-02-28 Adc Therapeutics Sa Pirrolobenzodiazepine anti-her2 antibody conjugates
EP2906298B1 (en) 2012-10-12 2018-10-03 ADC Therapeutics SA Pyrrolobenzodiazepine-antibody conjugates
PT2906253T (pt) 2012-10-12 2018-11-05 Medimmune Ltd Conjugados de anticorpo anti-psma de pirrolobenzodiazepina
EP2906249B1 (en) 2012-10-12 2018-06-27 MedImmune Limited Synthesis and intermediates of pyrrolobenzodiazepine derivatives for conjugation
DK2906248T3 (en) 2012-10-12 2019-03-04 Medimmune Ltd Pyrrolobenzodiazepines and their conjugates
EP2906250B1 (en) 2012-10-12 2018-05-30 ADC Therapeutics SA Pyrrolobenzodiazepine-anti-psma antibody conjugates
LT2906251T (lt) 2012-10-12 2017-12-11 Adc Therapeutics Sa Pirolobenzodiazepino-anti-cd22 antikūno konjugatai
MX364328B (es) 2012-10-12 2019-04-23 Medimmune Ltd Conjugados del anticuerpo pirrolobenzodiazepina.
AU2013366490B9 (en) 2012-12-21 2018-02-01 Medimmune Limited Unsymmetrical pyrrolobenzodiazepines-dimers for use in the treatment of proliferative and autoimmune diseases
JP6307519B2 (ja) 2012-12-21 2018-04-04 メドイミューン・リミテッドＭｅｄＩｍｍｕｎｅ Ｌｉｍｉｔｅｄ ピロロベンゾジアゼピンおよびその結合体
US9968687B2 (en) 2013-02-22 2018-05-15 Abbvie Stemcentrx Llc Anti-DLL3 antibody drug conjugates
US20160031887A1 (en) 2013-03-13 2016-02-04 Medimmune Limited Pyrrolobenzodiazepines and conjugates thereof
NZ710746A (en) 2013-03-13 2018-11-30 Medimmune Ltd Pyrrolobenzodiazepines and conjugates thereof
SG11201507214SA (en) 2013-03-13 2015-10-29 Medimmune Ltd Pyrrolobenzodiazepines and conjugates thereof
US20160106861A1 (en) 2013-04-26 2016-04-21 Spirogen Sarl Axl antibody-drug conjugate and its use for the treatment of cancer
GB201317981D0 (en) 2013-10-11 2013-11-27 Spirogen Sarl Pyrrolobenzodiazepines and conjugates thereof
EP3054983B1 (en) 2013-10-11 2019-03-20 Medimmune Limited Pyrrolobenzodiazepine-antibody conjugates
US20160256561A1 (en) 2013-10-11 2016-09-08 Medimmune Limited Pyrrolobenzodiazepine-antibody conjugates
EP3054986B1 (en) 2013-10-11 2019-03-20 Medimmune Limited Pyrrolobenzodiazepine-antibody conjugates
GB201317982D0 (en) 2013-10-11 2013-11-27 Spirogen Sarl Pyrrolobenzodiazepines and conjugates thereof
US9950078B2 (en) 2013-10-11 2018-04-24 Medimmune Limited Pyrrolobenzodiazepine-antibody conjugates
EA033456B1 (ru) 2013-12-16 2019-10-31 Genentech Inc Конъюгаты антитело-лекарственное средство, содержащие пептидомиметические линкеры
GB201406767D0 (en) 2014-04-15 2014-05-28 Cancer Rec Tech Ltd Humanized anti-Tn-MUC1 antibodies anf their conjugates

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2006111759A1 (en) * 2005-04-21 2006-10-26 Spirogen Limited Pyrrolobenzodiazepines
US20110196148A1 (en) * 2008-10-17 2011-08-11 Spirogen Limited Unsymmetrical pyrrolobenzodiazepine-dimers for treatment of proliferative diseases

Also Published As

Publication number Publication date
US9387259B2 (en) 2016-07-12
KR101961976B1 (ko) 2019-03-25
US20160287721A1 (en) 2016-10-06
US10329352B2 (en) 2019-06-25
IL231797A0 (en) 2014-05-28
MX358757B (es) 2018-09-03
CN103997893B (zh) 2019-04-12
EA026643B1 (ru) 2017-04-28
BR112014009055A2 (pt) 2017-04-18
ES2660233T3 (es) 2018-03-21
EA201692215A1 (ru) 2017-07-31
HK1253715A1 (zh) 2019-06-28
US20170298137A1 (en) 2017-10-19
MX2014004555A (es) 2015-02-05
JP6599509B2 (ja) 2019-10-30
NZ623216A (en) 2016-05-27
MX2020010616A (es) 2020-10-20
EP3309162A1 (en) 2018-04-18
EP2753178A1 (en) 2014-07-16
US9707301B2 (en) 2017-07-18
JP2018138611A (ja) 2018-09-06
CA2850375A1 (en) 2013-04-18
CN103997893A (zh) 2014-08-20
AU2012322613B2 (en) 2016-04-21
EP2753178B1 (en) 2017-12-06
EP2753178A4 (en) 2015-04-15
EA201490582A1 (ru) 2014-11-28
ZA201402404B (en) 2017-04-26
IL231797A (en) 2017-04-30
JP2014534200A (ja) 2014-12-18
CA2850375C (en) 2019-07-02
WO2013055993A1 (en) 2013-04-18
KR20140079811A (ko) 2014-06-27
AU2012322613A1 (en) 2014-05-29
JP6399930B2 (ja) 2018-10-03
US20140302066A1 (en) 2014-10-09

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP6599509B2 (ja) ピロロベンゾジアゼピンおよび標的コンジュゲート
JP7123635B2 (ja) ピロロベンゾジアゼピンおよび標的コンジュゲート
KR101687054B1 (ko) 증식성 질환 치료용 피롤로벤조디아제핀
KR101772354B1 (ko) 표적화된 피롤로벤조디아제핀 접합체
AU2012322932B2 (en) Pyrrolobenzodiazepines
AU2012311505B2 (en) Pyrrolobenzodiazepines as unsymmetrical dimeric PBD compounds for inclusion in targeted conjugates
KR101891859B1 (ko) 피롤로벤조디아제핀
BR112014009055B1 (pt) Compostos pirrolobenzodiazepinas, conjugados alvos, ligante de fármaco e uso dos ditos conjugados para tratar uma doença proliferativa
BR122021017842B1 (pt) Compostos pirrolobenzodiazepinas e conjugados alvos
NZ623216B2 (en) Pyrrolobenzodiazepines and targeted conjugates

Legal Events

Date Code Title Description
TC4A Change in name of a patent proprietor in a eurasian patent