KR20210106467A - 튜불리신 및 단백질-튜불리신 접합체 - Google Patents

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KR20210106467A
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에이미 한
마커스 켈리
윌리엄 올슨
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리제너론 파마슈티칼스 인코포레이티드
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Abstract

본원은 튜불리신 및 그의 단백질(예를 들어 항체) 약물 접합체를 포함하여, 암과 연관된 질병 및 질환의 치료를 위한 화합물, 조성물 및 방법을 제공한다.

Description

튜불리신 및 단백질-튜불리신 접합체
본원은 신규의 튜불리신(tubulysin) 및 그의 단백질 접합체, 및 튜불리신 및 그의 단백질 접합체를 투여함을 포함하는 다양한 질병, 질환 및 상태의 치료 방법을 제공한다.
항체-약물 접합체(antibody-drug conjugate; ADC)가 암 치료 섭생(regimen)에서 적용이 점점 증가하고 있지만, 드노보(de novo) 또는 치료-발생 내성 기전은 임상적 이점을 손상시킬 수 있다. 시험관내에서 연속적인 ADC 노출하에 발생하는 2가지 내성 기전은 다중약물 내성(multidrug resistance; MDR)을 부여하는 수송체의 상향조절(upregulation) 및 동족항원(cognate antigen) 발현의 상실을 포함한다. 이러한 내성 기전을 피하는 신규 기술이 차세대 ADC의 유용성의 확장을 제공할 수 있다.
점액세균(myxobacterial) 배양 브로쓰(broth)로부터 최초로 단리된 튜불리신은 분열하는 세포의 세포골격을 빠르게 붕해시키고 세포사멸을 유도하는 대단히 효능있는 튜불린 중합 억제제의 한 그룹이다. 튜불리신은 N-메틸-D-피페콜린산(Mep), L-이소류신(Ile), 및 특이한 N,O-아세탈 및 2차 알콜 또는 아세톡시기를 함유하는 튜부발린(Tuv)으로 구성된다. 튜불리신 A, B, C, G 및 I는 C-말단 튜부티로신(Tut) γ-아미노산을 함유하는 반면, D, E, F 및 H는 대신에 상기 위치에 튜부페닐알라닌(Tup)을 갖는다(Angew. Chem.Int. Ed. Engl. 43, 4888-4892).
튜불리신은 검증된 작용 기전을 통한 약물-내성 세포에서의 그의 강력한 활성으로 인해 유망한 항암 리더로서 부상하였다. 평균적인 세포성장 억제 활성은 다중약물 내성 암종에 대한 활성을 포함하여, 주지된 에포틸론, 빈블라스틴 및 탁솔의 상기 활성을 10-배 내지 1000-배까지 능가한다(Biochem. J. 2006, 396, 235-242; Nat. Prod. Rep. 2015, 32, 654-662). 튜불리신은 다중약물 내성 KB-V1 자궁경부암종 세포를 포함한 암 세포에 대해 대단히 효능있는 증식방지 활성을 갖는다(Angew. Chem. Int. Ed. 2004, 43, 4888-4892; 및 Biochemical Journal 2006, 396, 235-242).
본원은 예를 들어 항암 및 항혈관형성 치료에 유용한 화합물을 제공한다.
하나의 구현예에서, 하기 화학식 I의 구조를 갖는 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염을 제공한다:
[화학식 I]
Figure pct00001
상기 식에서
R1은 C1-C10 알킬이고;
R3은 -C(O)C1-C5 알킬, -C(O)N(H)C1-C10 알킬, 또는 -(C1-C10 알킬렌)-NR3aR3b이고, 여기에서
R3a 및 R3b는 각각의 경우에 독립적으로, 수소, 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 및 아실이고, 여기에서 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 및 아실은 임의로 치환되며;
R4 및 R5는 각각의 경우에 독립적으로, 수소 또는 C1-C5 알킬이고;
R6은 -OH 또는 -NHNH2이고;
R7은 각각의 경우에 독립적으로, 수소, -OH, 할로겐, 또는 -NR7aR7b이고, 여기에서
R7a 및 R7b는 각각의 경우에 독립적으로, 수소, 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 아실, 및 아미노산 잔기이고, 여기에서 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 및 아실은 임의로 치환되며;
R8은 각각의 경우에 독립적으로, 수소, 중수소, -NHR9, 또는 할로겐이고, 여기에서
R9는 수소, -C1-C5 알킬, 또는 -C(O)C1-C5 알킬이고;
m은 1 또는 2이고;
Q는 -CH2- 또는 -O-이고 여기에서
Q가 -O-일 때, R2는 C1-C10 알킬, C1-C10 알키닐, -C1-C10 알킬렌-(5원 헤테로아릴), -C1-C3 알킬렌-Q1-(CH2)n아릴, 또는 C1-C3 하이드록시알킬이거나; 또는
Q가 -CH2-일 때, R2는 C5-C10 알킬, C1-C10 알키닐, -C1-C10 알킬렌-(5원 헤테로아릴), -C1-C3 알킬렌-Q1-(CH2)n아릴, 또는 C1-C3 하이드록시알킬이고;
Q1은 -CH2- 또는 -O-이고;
상기 헤테로아릴은 비치환되거나 또는 알킬, 아미노알킬, 하이드록시알킬, 카복시알킬, 벤질 또는 페닐로 치환되고;
상기 아릴은 비치환되거나 니트로 또는 아미노로 치환되고;
n은 1 내지 5의 정수이다.
하나의 구현예에서, 하기 화학식 I의 구조를 갖는 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염을 제공한다:
[화학식 I]
Figure pct00002
상기 식에서,
R1은 C1-C10 알킬이고;
R3은 -C(O)C1-C5 알킬, -C(O)N(H)C1-C10 알킬, 또는 -(C1-C10 알킬렌)-NR3aR3b이고, 여기에서
R3a 및 R3b는 각각의 경우에 독립적으로, 수소, 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 및 아실이고, 여기에서 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 및 아실은 임의로 치환되며;
R4 및 R5는 각각의 경우에 독립적으로, 수소 또는 C1-C5 알킬이거나; 또는 몇몇 구현예에서, R4 및 R5는 이들이 부착된 탄소와 함께 3-8원 사이클로알킬, 치환된 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 또는 치환된 헤테로사이클로알킬을 형성하고;
R6은 -OH 또는 -NHNH2이거나; 또는 몇몇 구현예에서, R6은 -NHSO2R60이고, 여기에서 R60은 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 치환된 아릴, 또는 치환된 헤테로아릴이고;
R7은 각각의 경우에 독립적으로, 수소, -OH, 할로겐, 또는 -NR7aR7b이고, 여기에서
R7a 및 R7b는 각각의 경우에 독립적으로, 수소, 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 및 아실이고, 여기에서 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 및 아실은 임의로 치환되며;
R8은 각각의 경우에 독립적으로, 수소, 중수소, -NHR9, 또는 할로겐이고, 여기에서
R9는 수소, -C1-C5 알킬, 또는 -C(O)C1-C5 알킬이고;
m은 1 또는 2이고;
Q는 -CH2- 또는 -O-이고 여기에서
Q가 -O-일 때, R2는 C1-C10 알킬, C1-C10 알키닐, -C1-C10 알킬렌-(5원 헤테로아릴), -C1-C3 알킬렌-Q1-(CH2)n아릴, 또는 C1-C3 하이드록시알킬이거나; 또는
Q가 -CH2-일 때, R2는 C5-C10 알킬, C1-C10 알키닐, -C1-C10 알킬렌-(5원 헤테로아릴), -C1-C3 알킬렌-Q1-(CH2)n아릴, 또는 C1-C3 하이드록시알킬이고;
Q1은 -CH2- 또는 -O-이고;
상기 헤테로아릴은 비치환되거나 또는 알킬, 아미노알킬, 하이드록시알킬, 카복시알킬, 벤질 또는 페닐로 치환되고;
상기 아릴은 비치환되거나 니트로 또는 아미노로 치환되고;
n은 1 내지 5의 정수이다.
또 다른 구현예에서, 하기 화학식 A, B, C 또는 D의 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염을 제공한다:
[화학식 A]
Figure pct00003
[화학식 B]
Figure pct00004
[화학식 C]
Figure pct00005
[화학식 D]
Figure pct00006
상기 식들에서,
L은 링커이고;
BA는 결합제이고;
k는 1 내지 30의 정수이고;
R1은 C1-C10 알킬이고;
R3은 -C(O)C1-C5 알킬, -C(O)N(H)C1-C10 알킬, 또는 -(C1-C10 알킬렌)-NR3aR3b이고, 여기에서
R3a 및 R3b는 각각의 경우에 독립적으로, 수소, 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 및 아실이고, 여기에서 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 및 아실은 임의로 치환되며;
R4 및 R5는 각각의 경우에 독립적으로, 수소 또는 C1-C5 알킬이고;
R6은 -OH, -O-, -NHNH2 또는 -NHNH-이고;
R7은 각각의 경우에 독립적으로, 수소, -OH, 할로겐, -O-, 또는 -NR7aR7b이고, 여기에서
R7a 및 R7b는 각각의 경우에 독립적으로, 결합, 수소, 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 아실, 및 아미노산 잔기이고, 여기에서 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 및 아실은 임의로 치환되며;
R8은 각각의 경우에 독립적으로, 수소, 중수소, -NHR9, 또는 할로겐이고, 여기에서
R9는 수소, -C1-C5 알킬, 또는 -C(O)C1-C5 알킬이고;
m은 1 또는 2이고;
Q는 -CH2- 또는 -O-이고 여기에서
Q가 -O-일 때, R2는 C1-C10 알킬, C1-C10 알키닐, 위치이성질체성 C1-C10 트리아졸릴렌, -C1-C10 알킬렌-(5원 헤테로아릴), 위치이성질체성 -C1-C10 알킬렌-(5원 헤테로아릴렌), -C1-C3 알킬렌-Q1-(CH2)n아릴, C1-C3 하이드록시알킬, 또는 C1-C10 알킬에테르이거나; 또는
Q가 -CH2-일 때, R2는 C5-C10 알킬, C1-C10 알키닐, 위치이성질체성 C1-C10 트리아졸릴렌, -C1-C10 알킬렌-(5원 헤테로아릴), 위치이성질체성 -C1-C10 알킬렌-(5원 헤테로아릴렌), -C1-C3 알킬렌-Q1-(CH2)n아릴, C1-C3 하이드록시알킬, 또는 C1-C10 알킬에테르이고;
Q1은 -CH2- 또는 -O-이고;
상기 위치이성질체성 트리아졸릴렌은 비치환되거나 또는 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 및 아실로 치환되고;
상기 헤테로아릴 또는 위치이성질체성 헤테로아릴렌은 비치환되거나 또는 알킬, 아미노알킬, -알킬렌-NH-, 하이드록시알킬, -알킬렌-O-, 카복시알킬, -알킬렌-COO-, 벤질 또는 페닐로 치환되고;
상기 아릴은 비치환되거나 니트로, 아미노, 또는 -NH-로 치환되고;
n은 1 내지 5의 정수이다.
또 다른 구현예에서, 하기 화학식 A, B, C 또는 D의 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염을 제공한다:
[화학식 A]
Figure pct00007
[화학식 B]
Figure pct00008
[화학식 C]
Figure pct00009
[화학식 D]
Figure pct00010
상기 식들에서,
L은 링커이고;
BA는 결합제이고;
k는 1 내지 30의 정수이고;
R1은 C1-C10 알킬이고;
R3은 -C(O)C1-C5 알킬, -C(O)N(H)C1-C10 알킬, 또는 -(C1-C10 알킬렌)-NR3aR3b이고, 여기에서
R3a 및 R3b는 각각의 경우에 독립적으로, 수소, 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 및 아실이고, 여기에서 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 및 아실은 임의로 치환되며;
R4 및 R5는 각각의 경우에 독립적으로, 수소 또는 C1-C5 알킬이고;
R6은 -OH, -O-, -NHNH2 또는 -NHNH-이거나; 또는 몇몇 구현예에서, R6은 -NHSO2R60이고, 여기에서 R60은 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 치환된 아릴, 치환된 헤테로아릴, 또는 -L-에 결합시 2가 -알킬렌-, -알케닐렌-, -알키닐렌-, -사이클로알킬렌-, -헤테로사이클로알킬렌-, -아릴렌-, -헤테로아릴렌-, 치환된 -아릴렌-, 또는 치환된 -헤테로아릴렌-이고;
R7은 각각의 경우에 독립적으로, 수소, -OH, -O-, 할로겐, 또는 -NR7aR7b이고, 여기에서
R7a 및 R7b는 각각의 경우에 독립적으로, 결합, 수소, 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 및 아실(여기에서 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 및 아실은 임의로 치환된다), 또는 -L-에 결합시 2가 -알킬렌-, -알케닐렌-, -알키닐렌-, -사이클로알킬렌-, -아릴렌-, -헤테로아릴렌-, 또는 -아실렌-(여기에서 -알킬렌-, -알케닐렌-, -알키닐렌-, -사이클로알킬렌-, -아릴렌-, -헤테로아릴렌-, 또는 -아실렌-은 임의로 치환된다)이고;
R8은 각각의 경우에 독립적으로, 수소, 중수소, -NHR9, 또는 할로겐이고, 여기에서
R9는 수소, -C1-C5 알킬, 또는 -C(O)C1-C5 알킬이고;
m은 1 또는 2이고;
Q는 -CH2- 또는 -O-이고 여기에서
Q가 -O-일 때, R2는 C1-C10 알킬, 2가 -C1-C10 알킬렌-, C1-C10 알키닐, 2가 -C1-C10 알키닐렌-, 위치이성질체성 C1-C10 알킬 트리아졸릴, 위치이성질체성 2가 -C1-C10 알킬 트리아졸릴렌-, -C1-C10 알킬렌-(5원 헤테로아릴), 위치이성질체성 2가 -C1-C10 알킬렌-(5원 헤테로아릴렌)-, -C1-C3 알킬렌-Q1-(CH2)n아릴, 2가 -C1-C3 알킬렌-Q1-(CH2)n아릴렌-, C1-C3 하이드록시알킬, 2가 -C1-C3 하이드록시알킬렌-, C1-C10 알킬에테르, 또는 2가 -C1-C10 알킬에테르-이거나; 또는
Q가 -CH2-일 때, R2는 C5-C10 알킬, 2가 -C5-C10 알킬렌-, C1-C10 알키닐, 2가 -C1-C10 알키닐렌-, 위치이성질체성 C1-C10 알킬 트리아졸릴, 위치이성질체성 2가 -C1-C10 알킬 트리아졸릴렌-, -C1-C10 알킬렌-(5원 헤테로아릴), 위치이성질체성 2가 -C1-C10 알킬렌-(5원 헤테로아릴렌)-, -C1-C3 알킬렌-Q1-(CH2)n아릴, 2가 -C1-C3 알킬렌-Q1-(CH2)n아릴렌-, C1-C3 하이드록시알킬, 2가 -C1-C3 하이드록시알킬렌-, C1-C10 알킬에테르, 또는 2가 -C1-C10 알킬에테르-이고;
Q1은 -CH2- 또는 -O-이고;
상기 위치이성질체성 트리아졸릴렌은 비치환되거나 또는 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 및 아실로 치환되고;
상기 헤테로아릴 또는 위치이성질체성 헤테로아릴렌은 비치환되거나 또는 알킬, 아미노알킬, -알킬렌-NH-, 하이드록시알킬, -알킬렌-O-, 카복시알킬, -알킬렌-COO-, 벤질 또는 페닐로 치환되고;
상기 아릴은 비치환되거나 니트로, 아미노, 또는 -NH-로 치환되고;
n은 1 내지 5의 정수이다.
하나의 구현예에서, 하기 화학식 LPa, LPb, LPc 또는 LPd의 링커-페이로드 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염을 제공한다:
[화학식 LPa]
Figure pct00011
[화학식 LPb]
Figure pct00012
[화학식 LPc]
Figure pct00013
또는
[화학식 LPd]
Figure pct00014
상기 식들에서,
L은 링커이고;
R1은 C1-C10 알킬이고;
R3은 -C(O)C1-C5 알킬, -C(O)N(H)C1-C10 알킬, 또는 -(C1-C10 알킬렌)-NR3aR3b이고, 여기에서
R3a 및 R3b는 각각의 경우에 독립적으로, 수소, 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 및 아실이고, 여기에서 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 및 아실은 임의로 치환되며;
R4 및 R5는 각각의 경우에 독립적으로, 수소 또는 C1-C5 알킬이고;
R6은 -OH, -O-, -NHNH2 또는 -NHNH-이고;
R7은 각각의 경우에 독립적으로, 수소, -OH, -O-, 할로겐, 또는 -NR7aR7b이고, 여기에서
R7a 및 R7b는 각각의 경우에 독립적으로, 결합, 수소, 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 아실, 및 아미노산 잔기이고, 여기에서 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 및 아실은 임의로 치환되며;
R8은 각각의 경우에 독립적으로, 수소, 중수소, -NHR9, 또는 할로겐이고, 여기에서
R9는 수소, -C1-C5 알킬, 또는 -C(O)C1-C5 알킬이고;
m은 1 또는 2이고;
Q는 -CH2- 또는 -O-이고 여기에서
Q가 -O-일 때, R2는 C1-C10 알킬, C1-C10 알키닐, 위치이성질체성 C1-C10 트리아졸릴렌, -C1-C10 알킬렌-(5원 헤테로아릴), 위치이성질체성 -C1-C10 알킬렌-(5원 헤테로아릴렌), -C1-C3 알킬렌-Q1-(CH2)n아릴, C1-C3 하이드록시알킬, 또는 C1-C10 알킬에테르이거나; 또는
Q가 -CH2-일 때, R2는 C5-C10 알킬, C1-C10 알키닐, 위치이성질체성 C1-C10 트리아졸릴렌, -C1-C10 알킬렌-(5원 헤테로아릴), 위치이성질체성 -C1-C10 알킬렌-(5원 헤테로아릴렌), -C1-C3 알킬렌-Q1-(CH2)n아릴, C1-C3 하이드록시알킬, 또는 C1-C10 알킬에테르이고;
Q1은 -CH2- 또는 -O-이고;
상기 위치이성질체성 트리아졸릴렌은 비치환되거나 또는 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 및 아실로 치환되고;
상기 헤테로아릴 또는 위치이성질체성 헤테로아릴렌은 비치환되거나 또는 알킬, 아미노알킬, -알킬렌-NH-, 하이드록시알킬, -알킬렌-O-, 카복시알킬, -알킬렌-COO-, 벤질 또는 페닐로 치환되고;
상기 아릴은 비치환되거나 니트로, 아미노, 또는 -NH-로 치환되고;
n은 1 내지 5의 정수이다.
하나의 구현예에서, 하기 화학식 LPa, LPb, LPc 또는 LPd의 링커-페이로드 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염을 제공한다:
[화학식 LPa]
Figure pct00015
[화학식 LPb]
Figure pct00016
또는
[화학식 LPc]
Figure pct00017
[화학식 LPd]
Figure pct00018
상기 식들에서,
L은 링커이고;
R1은 C1-C10 알킬이고;
R3은 -C(O)C1-C5 알킬, -C(O)N(H)C1-C10 알킬, 또는 -(C1-C10 알킬렌)-NR3aR3b이고, 여기에서
R3a 및 R3b는 각각의 경우에 독립적으로, 수소, 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 및 아실이고, 여기에서 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 및 아실은 임의로 치환되며;
R4 및 R5는 각각의 경우에 독립적으로, 수소 또는 C1-C5 알킬이고;
R6은 -OH, -O-, -NHNH2 또는 -NHNH-이거나; 또는 몇몇 구현예에서, R6은 -NHSO2R60이고, 여기에서 R60은 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 치환된 아릴, 치환된 헤테로아릴, 또는 -L-에 결합시 2가 -알킬렌-, -알케닐렌-, -알키닐렌-, -사이클로알킬렌-, -헤테로사이클로알킬렌-, -아릴렌-, -헤테로아릴렌-, 치환된 -아릴렌-, 또는 치환된 -헤테로아릴렌-이고;
R7은 각각의 경우에 독립적으로, 수소, -OH, -O-, 할로겐, 또는 -NR7aR7b이고, 여기에서
R7a 및 R7b는 각각의 경우에 독립적으로, 결합, 수소, 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 및 아실(여기에서 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 및 아실은 임의로 치환된다), 또는 -L-에 결합시 2가 -알킬렌-, -알케닐렌-, -알키닐렌-, -사이클로알킬렌-, -아릴렌-, -헤테로아릴렌-, 또는 -아실렌-(여기에서 -알킬렌-, -알케닐렌-, -알키닐렌-, -사이클로알킬렌-, -아릴렌-, -헤테로아릴렌-, 또는 -아실렌-은 임의로 치환된다)이고;
R8은 각각의 경우에 독립적으로, 수소, 중수소, -NHR9, 또는 할로겐이고, 여기에서
R9는 수소, -C1-C5 알킬, 또는 -C(O)C1-C5 알킬이고;
m은 1 또는 2이고;
Q는 -CH2- 또는 -O-이고 여기에서
Q가 -O-일 때, R2는 C1-C10 알킬, 2가 -C1-C10 알킬렌-, C1-C10 알키닐, 2가 -C1-C10 알키닐렌-, 위치이성질체성 C1-C10 알킬 트리아졸릴, 위치이성질체성 2가 -C1-C10 알킬 트리아졸릴렌-, -C1-C10 알킬렌-(5원 헤테로아릴), 위치이성질체성 2가 -C1-C10 알킬렌-(5원 헤테로아릴렌)-, -C1-C3 알킬렌-Q1-(CH2)n아릴, 2가 -C1-C3 알킬렌-Q1-(CH2)n아릴렌-, C1-C3 하이드록시알킬, 2가 -C1-C3 하이드록시알킬렌-, C1-C10 알킬에테르, 또는 2가 -C1-C10 알킬에테르-이거나; 또는
Q가 -CH2-일 때, R2는 C5-C10 알킬, 2가 -C5-C10 알킬렌-, C1-C10 알키닐, 2가 -C1-C10 알키닐렌-, 위치이성질체성 C1-C10 알킬 트리아졸릴, 위치이성질체성 2가 -C1-C10 알킬 트리아졸릴렌-, -C1-C10 알킬렌-(5원 헤테로아릴), 위치이성질체성 2가 -C1-C10 알킬렌-(5원 헤테로아릴렌)-, -C1-C3 알킬렌-Q1-(CH2)n아릴, 2가 -C1-C3 알킬렌-Q1-(CH2)n아릴렌-, C1-C3 하이드록시알킬, 2가 -C1-C3 하이드록시알킬렌-, C1-C10 알킬에테르, 또는 2가 -C1-C10 알킬에테르-이고;
Q1은 -CH2- 또는 -O-이고;
상기 위치이성질체성 트리아졸릴렌은 비치환되거나 또는 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 및 아실로 치환되고;
상기 헤테로아릴 또는 위치이성질체성 헤테로아릴렌은 비치환되거나 또는 알킬, 아미노알킬, -알킬렌-NH-, 하이드록시알킬, -알킬렌-O-, 카복시알킬, -알킬렌-COO-, 벤질 또는 페닐로 치환되고;
상기 아릴은 비치환되거나 니트로, 아미노, 또는 -NH-로 치환되고;
n은 1 내지 5의 정수이다.
또 다른 구현예에서, 본원은 항체, 또는 그의 항원 결합 단편을 포함하는 항체-약물 접합체를 제시하며, 여기에서 상기 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 본원에 기재된 바와 같은 화합물에 접합된다.
또 다른 구현예에서, 본원은 본원에 기재된 화합물, 링커-페이로드, 또는 항체-약물 접합체, 및 조성물의 제조 방법을 제시한다.
도 1-14는 튜불리신 페이로드, 튜불리신 링커-페이로드, 및 그의 단백질 접합체에 대한 합성 화학 반응식을 도시한다.
도 15는 항-STEAP2 Ab-LP3, 항-STEAP2 Ab-LP4, 대조용 Ab-LP3, 및 대조용 Ab-LP4의 크기 배제 크로마토그래피를 도시한다.
도 16은 항-STEAP2 튜불리신 ADC가 CTG-2440 전립선암 PDX 함유 NOG 마우스에 대해 현저한 항-종양 효능을 나타냄을 도시한다.
도 17은 항-STEAP2 튜불리신 ADC가 CTG-2441 전립선암 PDX 함유 NOG 마우스에 대해 현저한 항-종양 효능을 나타냄을 도시한다.
본원은 대상체(subject)에서, 예를 들어 암의 치료에 유용한 화합물, 조성물, 및 방법을 제공한다.
정의
본원에 제공된 화합물을 언급할 때, 하기의 용어들은 달리 정의되지 않는 한 하기의 의미를 갖는다. 달리 정의되지 않는 한, 본원에 사용된 모든 기술과학 용어는 당업자에 의해 통상적으로 이해되는 바와 동일한 의미를 갖는다. 본원에 제공된 용어에 대해 다수의 정의가 존재하는 경우에, 달리 서술되지 않는 한 본 정의가 우세하다.
본원에 사용되는 바와 같이, "알킬"은 1가 및 포화된 탄화수소 라디칼 모이어티(moiety)를 지칭한다. 알킬은 임의로 치환되며 선형, 분지된, 또는 환상, 즉 사이클로알킬일 수 있다. 알킬은 비제한적으로 1-20 탄소원자, 즉 C1-20 알킬; 1-12 탄소원자, 즉 C1-12 알킬; 1-8 탄소원자, 즉 C1-8 알킬; 1-6 탄소원자, 즉 C1-6 알킬; 및 1-3 탄소원자, 즉 C1-3 알킬을 갖는 라디칼들을 포함한다. 알킬 모이어티의 예는 비제한적으로 메틸, 에틸, n-프로필, i-프로필, n-부틸, s-부틸, t-부틸, i-부틸, 펜틸 모이어티, 헥실 모이어티, 사이클로프로필, 사이클로부틸, 사이클로펜틸, 및 사이클로헥실을 포함한다. 펜틸 모이어티는 비제한적으로, n-펜틸 및 i-펜틸을 포함한다. 헥실 모이어티는 비제한적으로, n-헥실을 포함한다.
본원에 사용되는 바와 같이, "알킬렌"은 2가 알킬기를 지칭한다. 달리 명시되지 않는 한, 알킬렌은 비제한적으로 1-20 탄소원자를 포함한다. 알킬렌기는 알킬에 대해 본원에 기재된 바와 같이 임의로 치환된다. 일부 구현예에서, 알킬렌은 치환되지 않는다.
입체화학의 명시 없는 아미노산 또는 아미노산 잔기의 표시는 상기 아미노산의 L-형태, 상기 아미노산의 D-형태, 또는 이들의 라세미 혼합물을 포함함을 의미한다.
본원에 사용되는 바와 같이, "할로알킬"은 알킬이 할로겐, 예를 들어 불소(F), 염소(Cl), 브롬(Br) 또는 요오드(I) 중에서 선택된 적어도 하나의 치환체를 포함하는 상기 정의된 바와 같은 알킬을 지칭한다. 할로알킬의 예는 비제한적으로 -CF3, -CH2CF3, -CCl2F, 및 -CCl3을 포함한다.
본원에 사용되는 바와 같이, "알케닐"은 적어도 2개의 탄소원자 및 하나 이상의 비-방향족 탄소-탄소 이중 결합을 함유하는 1가 탄화수소 라디칼 모이어티를 지칭한다. 알케닐은 임의로 치환되며 선형, 분지된, 또는 환상일 수 있다. 알케닐은 비제한적으로 2-20 탄소원자, 즉 C2-20 알케닐; 2-12 탄소원자, 즉 C2-12 알케닐; 2-8 탄소원자, 즉 C2-8 알케닐; 2-6 탄소원자, 즉 C2-6 알케닐; 및 2-4 탄소원자, 즉 C2-4 알케닐을 갖는 라디칼들을 포함한다. 알케닐 모이어티의 예는 비제한적으로 비닐, 프로페닐, 부테닐 및 사이클로헥세닐을 포함한다.
본원에 사용되는 바와 같이, "알키닐"은 적어도 2개의 탄소원자 및 하나 이상의 탄소-탄소 삼중 결합을 함유하는 1가 탄화수소 라디칼 모이어티를 지칭한다. 알키닐은 임의로 치환되며 선형, 분지된, 또는 환상일 수 있다. 알키닐은 비제한적으로 2-20 탄소원자, 즉 C2-20 알키닐; 2-12 탄소원자, 즉 C2-12 알키닐; 2-8 탄소원자, 즉 C2-8 알키닐; 2-6 탄소원자, 즉 C2-6 알키닐; 및 2-4 탄소원자, 즉 C2-4 알키닐을 갖는 라디칼들을 포함한다. 알키닐 모이어티의 예는 비제한적으로 에티닐, 프로피닐 및 부티닐을 포함한다.
본원에 사용되는 바와 같이, "알콕시"는 1가 및 포화된 탄화수소 라디칼 모이어티를 지칭하며 여기에서 상기 탄화수소는 산소 원자에 대한 단일 결합을 포함하고 상기 라디칼은 산소 원자상에 국소화된다, 예를 들어 에톡시의 경우 CH3CH2-O이다. 알콕시 치환체는 상기 알콕시 치환체의 산소 원자를 통해, 치환하는 화합물에 결합한다. 알콕시는 임의로 치환되며 선형, 분지된, 또는 환상, 즉 사이클로알콕시일 수 있다. 알콕시는 비제한적으로 1-20 탄소원자, 즉 C1-20 알콕시; 1-12 탄소원자, 즉 C1-12 알콕시; 1-8 탄소원자, 즉 C1-8 알콕시; 1-6 탄소원자, 즉 C1-6 알콕시; 및 1-3 탄소원자, 즉 C1-3 알콕시를 갖는 것들을 포함한다. 알콕시 모이어티의 예는 비제한적으로 메톡시, 에톡시, n-프로폭시, i-프로폭시, n-부톡시, s-부톡시, t-부톡시, i-부톡시, 펜톡시 모이어티, 헥속시 모이어티, 사이클로프로폭시, 사이클로부톡시, 사이클로펜톡시, 및 사이클로헥속시를 포함한다.
본원에 사용되는 바와 같이, "할로알콕시"는 알콕시가 할로겐, 예를 들어 F, Cl, Br 또는 I 중에서 선택된 적어도 하나의 치환체를 포함하는 상기 정의된 바와 같은 알콕시를 지칭한다.
본원에 사용되는 바와 같이, "아릴"은 고리 원자가 탄소 원자인 방향족 화합물의 라디칼인 1가 모이어티를 지칭한다. 아릴은 임의로 치환되며 모노사이클릭 또는 폴리사이클릭, 예를 들어 비사이클릭 또는 트리사이클릭일 수 있다. 아릴 모이어티의 예는 비제한적으로 6 내지 20 고리 탄소원자, 즉 C6-20 아릴; 6 내지 15 고리 탄소원자, 즉 C6-15 아릴 및 6 내지 10 고리 탄소원자, 즉 C6-10 아릴을 갖는 것들을 포함한다. 아릴 모이어티의 예는 비제한적으로 페닐, 나프틸, 플루오레닐, 아줄레닐, 안트릴, 펜안트릴, 및 피레닐을 포함한다.
본원에 사용되는 바와 같이, "아릴알킬"은 알킬 화합물이 방향족 치환체로 치환된 알킬 화합물의 라디칼인 1가 모이어티를 지칭한다, 즉 상기 방향족 화합물은 알킬기에 대한 단일 결합을 포함하고, 여기에서 상기 라디칼은 상기 알킬기상에 국소화된다. 아릴알킬기는 알킬기를 통해, 예시된 화학 구조에 결합한다. 아릴알킬을 구조, 예를 들어
Figure pct00019
또는
Figure pct00020
에 의해 나타낼 수 있으며, 여기에서 B는 방향족 모이어티, 예를 들어 아릴 또는 페닐이다. 아릴알킬은 임의로 치환된다, 즉 아릴기 및/또는 알킬기는 본원에 개시된 바와 같이 치환될 수 있다. 아릴알킬의 예는 비제한적으로 벤질을 포함한다.
본원에 사용되는 바와 같이, "알킬아릴"은 아릴 화합물이 알킬 치환체로 치환된 아릴 화합물의 라디칼인 1가 모이어티를 지칭한다, 즉 상기 아릴 화합물은 알킬기에 대한 단일 결합을 포함하고, 여기에서 상기 라디칼은 상기 아릴기상에 국소화된다. 알킬아릴기는 아릴기를 통해, 예시된 화학 구조에 결합한다. 알킬아릴을 구조, 예를 들어
Figure pct00021
또는
Figure pct00022
에 의해 나타낼 수 있으며, 여기에서 B는 방향족 모이어티, 예를 들어 페닐이다. 알킬아릴은 임의로 치환된다, 즉 아릴기 및/또는 알킬기는 본원에 개시된 바와 같이 치환될 수 있다. 알킬아릴의 예는 비제한적으로 톨루일을 포함한다.
본원에 사용되는 바와 같이, "아릴옥시"는 고리 원자가 탄소 원자이고 상기 고리가 산소 라디칼로 치환된 방향족 화합물의 라디칼인 1가 모이어티를 지칭한다, 즉 상기 방향족 화합물은 산소 원자에 대한 단일 결합을 포함하고, 여기에서 상기 라디칼은 상기 산소 원자상에 국소화된다, 예를 들어 페녹시의 경우
Figure pct00023
이다. 아릴옥시 치환체는 상기 산소 원자를 통해, 치환하는 화합물에 결합한다. 아릴옥시는 임의로 치환된다. 아릴옥시는 비제한적으로 6 내지 20 고리 탄소원자, 즉 C6-20 아릴옥시; 6 내지 15 고리 탄소원자, 즉 C6-15 아릴옥시, 및 6 내지 10 고리 탄소원자, 즉 C6-10 아릴옥시를 갖는 라디칼들을 포함한다. 아릴옥시 모이어티의 예는 비제한적으로 페녹시, 나프톡시, 및 안트록시를 포함한다.
본원에 사용되는 바와 같이, "아릴렌"은 고리 원자가 오직 탄소원자뿐인 방향족 화합물의 2가 모이어티를 지칭한다. 아릴렌은 임의로 치환되며 모노사이클릭 또는 폴리사이클릭, 예를 들어 비사이클릭 또는 트리사이클릭일 수 있다. 아릴렌 모이어티의 예는 비제한적으로 6 내지 20 고리 탄소원자, 즉 C6-20 아릴렌; 6 내지 15 고리 탄소원자, 즉 C6-15 아릴렌 및 6 내지 10 고리 탄소원자, 즉 C6-10 아릴렌을 갖는 것들을 포함한다.
본원에 사용되는 바와 같이, "헤테로알킬"은 하나 이상의 탄소원자가 헤테로원자에 의해 교체된 알킬을 지칭한다. 본원에 사용되는 바와 같이, "헤테로알케닐"은 하나 이상의 탄소원자가 헤테로원자에 의해 교체된 알케닐을 지칭한다. 본원에 사용되는 바와 같이, "헤테로알키닐"은 하나 이상의 탄소원자가 헤테로원자에 의해 교체된 알키닐을 지칭한다. 적합한 헤테로원자는 비제한적으로 질소, 산소 및 황원자를 포함한다. 헤테로알킬, 헤테로알케닐, 및 헤테로알키닐은 임의로 치환된다. 헤테로알킬 모이어티의 예는 비제한적으로 아미노알킬, 설포닐알킬, 및 설피닐알킬을 포함한다. 헤테로알킬 모이어티의 예는 또한 비제한적으로 메틸아미노, 메틸설포닐, 및 메틸설피닐을 포함한다.
본원에 사용되는 바와 같이, "헤테로아릴"은 고리 원자가 탄소 원자 및 적어도 하나의 산소, 황, 질소 또는 인 원자를 함유하는 방향족 화합물의 라디칼인 1가 모이어티를 지칭한다. 헤테로아릴 모이어티의 예는 5 내지 20 고리 원자; 5 내지 15 고리 원자; 및 5 내지 10 고리 원자를 갖는 것들을 포함한다. 헤테로아릴은 임의로 치환된다.
본원에 사용되는 바와 같이, "헤테로아릴렌"은 방향족 고리의 하나 이상의 고리 원자가 산소, 황, 질소, 또는 인 원자로 교체된 2가 헤테로아릴을 지칭한다. 헤테로아릴렌은 임의로 치환된다.
본원에 사용되는 바와 같이, "헤테로사이클로알킬"은 하나 이상의 탄소 원자가 헤테로원자에 의해 교체된 사이클로알킬을 지칭한다. 적합한 헤테로원자는 비제한적으로 질소, 산소 및 황 원자를 포함한다. 헤테로사이클로알킬은 임의로 치환된다. 헤테로사이클로알킬 모이어티의 예는 비제한적으로 모르폴리닐, 피페리디닐, 테트라하이드로피라닐, 피롤리디닐, 이미다졸리디닐, 옥사졸리디닐, 티아졸리디닐, 디옥솔라닐, 디티올라닐, 옥사닐 또는 티아닐을 포함한다.
본원에 사용되는 바와 같이, "루이스산"은 고립 전자쌍을 허용하는 분자 또는 이온을 지칭한다. 본원에 기재된 방법에 사용되는 루이스산은 양성자 이외의 것이다. 루이스산은 비제한적으로 비-금속산, 금속산, 경질 루이스산, 및 연질 루이스산을 포함한다. 루이스산은 비제한적으로 알루미늄, 붕소, 철, 주석, 티타늄, 마그네슘, 구리, 안티몬, 인, 은, 이터븀, 스칸듐, 니켈 및 아연의 루이스산을 포함한다. 예시적인 루이스산은 비제한적으로 AlBr3, AlCl3, BCl3, 붕소 트리클로라이드 메틸 설파이드, BF3, 붕소 트리플루오라이드 메틸 에테레이트, 붕소 트리플루오라이드 메틸 설파이드, 붕소 트리플루오라이드 테트라하이드로푸란, 디사이클로헥실보론 트리플루오로메탄설포네이트, 철(III) 브로마이드, 철(III) 클로라이드, 주석(IV) 클로라이드, 티타늄(IV) 클로라이드, 티타늄(IV) 이소프로폭사이드, Cu(OTf)2, CuCl2, CuBr2, 아연 클로라이드, 알킬알루미늄 할라이드(RnAlX3-n, 여기에서 R은 하이드로카빌이다),　 Zn(OTf)2, ZnCl2, Yb(OTf)3, Sc(OTf)3, MgBr2, NiCl2, Sn(OTf)2, Ni(OTf)2, 및 Mg(OTf)2를 포함한다.
본원에 사용되는 바와 같이, "N-함유 헤테로사이클로알킬"은 하나 이상의 탄소원자가 헤테로원자에 의해 교체되고 적어도 하나의 교체 헤테로원자가 질소원자인 사이클로알킬을 지칭한다. 질소외에 적합한 헤테로원자는 비제한적으로 산소 및 황원자를 포함한다. N-함유 헤테로사이클로알킬은 임의로 치환된다. N-함유 헤테로사이클로알킬 모이어티의 예는 비제한적으로 모르폴리닐, 피페리디닐, 피롤리디닐, 이미다졸리디닐, 옥사졸리디닐, 또는 티아졸리디닐을 포함한다.
본원에 사용되는 바와 같이, "임의로 치환된"은 라디칼 모이어티, 예를 들어 임의로 치환된 알킬을 기재하는데 사용되는 경우, 상기와 같은 모이어티가 하나 이상의 치환체에 임의로 결합됨을 의미한다. 상기와 같은 치환체의 예는 비제한적으로 할로, 시아노, 니트로, 아미노, 하이드록실, 임의로 치환된 할로알킬, 아미노알킬, 하이드록시알킬, 아지도, 에폭시, 임의로 치환된 헤테로아릴, 임의로 치환된 헤테로사이클로알킬,
Figure pct00024
Figure pct00025
Figure pct00026
Figure pct00027
또는
Figure pct00028
를 포함하며, 여기에서 RA, RB, 및 RC는 각각의 경우에 독립적으로 수소원자, 알킬, 알케닐, 알키닐, 아릴, 알킬아릴, 아릴알킬, 헤테로알킬, 헤테로아릴, 또는 헤테로사이클로알킬이거나, 또는 RA 및 RB가 이들이 결합된 원자와 함께 포화되거나 또는 불포화된 카보사이클릭 고리를 형성하고, 여기에서 상기 고리는 임의로 치환되며, 하나 이상의 고리 원자는 헤테로원자로 임의로 교체된다. 몇몇 구현예에서, 라디칼 모이어티가 임의로 치환된 헤테로아릴, 임의로 치환된 헤테로사이클로알킬, 또는 임의로 치환된 포화되거나 불포화된 카보사이클릭 고리인 경우, 상기 임의로 치환된 헤테로아릴, 임의로 치환된 헤테로사이클로알킬, 또는 임의로 치환된 포화되거나 불포화된 카보사이클릭 고리상의 치환체는, 이들이 치환되는 경우, 추가적인 치환체로 추가로 임의로 치환된 치환체로는 치환되지 않는다. 일부 구현예에서, 본원에 기재된 기가 임의로 치환될 때, 상기 기에 결합된 치환체는 달리 명시되지 않는 한 치환되지 않는다.
본원에 사용되는 바와 같이, "결합제"는 주어진 결합 상대, 예를 들어 항원에 특이적으로 결합할 수 있는 임의의 분자, 예를 들어 단백질, 항체 또는 그의 단편을 지칭한다.
본원에 사용되는 바와 같이, "링커"는 본원에 기재된 하나 이상의 화합물, 예를 들어 페이로드 화합물 및 강화제에 상기 결합제를 공유적으로 연결하거나, 또는 공유적으로 연결할 수 있는(예를 들어 반응성기를 통해) 2가, 3가 또는 다가 모이어티를 지칭한다.
본원에 사용되는 바와 같이, "아미드 합성 조건"은 예를 들어 카복실산, 활성화된 카복실산, 또는 아실 할라이드와 아민과의 반응에 의해 아미드 형성을 수행하기에 적합한 반응 조건을 지칭한다. 일부 예에서, 아미드 합성 조건은 카복실산과 아민간의 아미드 결합 형성을 수행하기에 적합한 반응 조건을 지칭한다. 상기 예 중 일부에서, 카복실산을 먼저 활성화된 카복실산으로 전환시킨 후에 상기 활성화된 카복실산을 아민과 반응시켜 아미드를 형성시킨다. 아미드 형성을 수행하기에 적합한 조건은 비제한적으로 카복실산과 아민간의 반응을 수행하기 위해 시약, 예를 들어 비제한적으로 디사이클로헥실카보디이미드(DCC), 디이소프로필카보디이미드(DIC), (벤조트리아졸-1-일옥시)트리스(디메틸아미노)포스포늄 헥사플루오로포스페이트(BOP), (벤조트리아졸-1-일옥시)트리피롤리디노포스포늄 헥사플루오로포스페이트(PyBOP), (7-아자벤조트리아졸-1-일옥시)트리피롤리디노포스포늄 헥사플루오로포스페이트(PyAOP), 브로모트리피롤리디노포스포늄 헥사플루오로포스페이트(PyBrOP), O-(벤조트리아졸-1-일)-N,N,N',N'-테트라메틸유로늄 헥사플루오로포스페이트(HBTU), O-(벤조트리아졸-1-일)-N,N,N',N'-테트라메틸유로늄 테트라플루오로보레이트(TBTU), 1-[비스(디메틸아미노)메틸렌]-1H-1,2,3-트리아졸로[4,5-b]피리디늄 3-옥시드 헥사플루오로포스페이트(HATU), N-에톡시카보닐-2-에톡시-1,2-디하이드로퀴놀린(EEDQ), N-에틸-N'-(3-디메틸아미노프로필)카보디이미드(EDC), 2-클로로-1,3-디메틸이미다졸리디늄 헥사플루오로포스페이트(CIP), 2-클로로-4,6-디메톡시-1,3,5-트리아진(CDMT) 및 카보닐디이미다졸(CDI)을 사용하는 조건을 포함한다. 일부 예에서, 카복실산을 먼저 활성화된 카복실산 에스테르로 전환시킨 후에 상기 활성화된 카복실산 에스테르를 아민으로 처리하여 아미드 결합을 형성시킨다. 몇몇 구현예에서, 상기 카복실산을 시약으로 처리한다. 상기 시약은 상기 카복실산을 탈양성자화시키고 이어서, 양성자화된 시약상에 상기 탈양성자화된 카복실산에 의한 친핵성 공격의 결과로서 상기 탈양성자화된 카복실산과의 생성물 복합체를 형성시킴으로써 상기 카복실산을 활성화시킨다. 몇몇 카복실산에 대한 상기 활성화된 카복실 에스테르는 후속적으로 상기 카복실산이 활성화되기 전보다 아민에 의한 친핵성 공격에 더 민감하다. 이는 아미드 결합 형성을 생성시킨다. 이와 같이, 상기 카복실산은 활성화된 것으로서 기재된다. 예시적인 시약은 DCC 및 DIC를 포함한다.
본원에 사용되는 바와 같이, "위치이성질체", "위치이성질체들", 또는 "위치이성질체들의 혼합물"은 적합한 알킨으로 처리된 적합한 아지드(예를 들어 -N3, 또는 PEG-N3 유도체화된 항체)로부터 유래하는 1,3-가환 또는 변형-촉진된 알킨-아지드 가환(SPAAC)-달리 클릭 반응(click reaction)으로서 공지됨-의 생성물(들)을 지칭한다. 몇몇 구현예에서, 예를 들어 위치이성질체 및 위치이성질체들의 혼합물은 하기에 나타낸 클릭 반응 생성물을 특징으로 한다:
Figure pct00029
몇몇 구현예에서, 하나 초과의 적합한 아지드 및 하나 초과의 적합한 알킨을 생성물로 가는 도중에 합성 반응식 내에 사용할 수 있으며, 여기에서 각각의 아지드-알킨 쌍은 하나 이상의 독립적인 클릭 반응에 참여하여 위치이성질체성 클릭 반응 생성물들의 혼합물을 생성시킬 수 있다. 예를 들어, 당업자는 생성물로 가는 도중에, 적합한 제1 아지드를 독립적으로 적합한 제1 알킨과 반응시키고, 적합한 제2 아지드를 독립적으로 적합한 제2 알킨과 반응시켜, 본원에 기재된 ADC의 샘플 중에 4개의 가능한 클릭 반응 위치이성질체 또는 상기 4개의 가능한 클릭 반응 위치이성질체들의 혼합물을 생성시킬 수 있음을 알 것이다.
본원에 사용되는 바와 같이, "잔기"란 용어는 화학 반응 후에 남은 화합물 내의 화학적 모이어티를 지칭한다. 예를 들어, "아미노산 잔기" 또는 "N-알킬 아미노산 잔기"란 용어는 아미노산 또는 N-알킬 아미노산의, 적합한 커플링 상대에의 아미드 커플링 또는 펩티드 커플링의 생성물을 지칭하며; 여기에서 예를 들어 상기 아미노산 또는 N-알킬아미노산의 아미드 또는 펩티드 커플링 후에 수 분자가 방출되어, 상기 중에 아미노산 잔기 또는 N-알킬 아미노산 잔기가 통합된 생성물이 생성된다. "아미노산"이란 용어는 천연 및 합성 α, β, γ, 또는 δ 아미노산을 지칭하며, 비제한적으로 단백질에서 발견되는 아미노산, 즉 글리신, 알라닌, 발린, 류신, 이소류신, 메티오닌, 페닐알라닌, 트립토판, 프롤린, 세린, 쓰레오닌, 시스테인, 티로신, 아스파라진, 글루타민, 아스파테이트, 글루타메이트, 리신, 아르기닌 및 히스티딘을 포함한다. 몇몇 구현에에서, 아미노산은 L-배열이다. 한편으로, 아미노산은 알라닐, 발리닐, 류시닐, 이소류시닐, 프롤리닐, 페닐알라니닐, 트립토파닐, 메티오니닐, 글리시닐, 세리닐, 쓰레오니닐, 시스테이닐, 티로시닐, 아스파라지닐, 글루타미닐, 아스파토일, 글루타로일, 리시닐, 아르기니닐, 히스티디닐, β-알라닐, β-발리닐, β-류시닐, β-이소류시닐, β-프롤리닐, β-페닐알라니닐, β-트립토파닐, β-메티오니닐, β-글리시닐, β-세리닐, β-쓰레오니닐, β-시스테이닐, β-티로시닐, β-아스파라지닐, β-글루타미닐, β-아스파토일, β-글루타로일, β-리시닐, β-아르기니닐 또는 β-히스티디닐의 유도체일 수 있다. "아미노산 유도체"란 용어는 본원에 기재되고 예시된 바와 같은 천연 또는 비-천연 아미노산으로부터 유도될 수 있는 그룹을 지칭한다. 아미노산 유도체는 당업자에게 자명하며, 비제한적으로 천연 및 비-천연 아미노산의 에스테르, 아미노 알콜, 아미노 알데히드, 아미노 락톤, 및 N-메틸 유도체를 포함한다. 몇몇 구현예에서, 아미노산 잔기는
Figure pct00030
또는
Figure pct00031
이고, 여기에서 SC는 천연 또는 비-천연 아미노산의 측쇄 또는 결합(예를 들어 글리신에서와 같이, 수소; 세린에서와 같이 -CH2OH; 시스테인에서와 같이 -CH2SH; 리신에서와 같이 -CH2CH2CH2CH2NH2; 글루탐산에서와 같이 -CH2CH2COOH; 글루타민에서와 같이 -CH2CH2C(O)NH2; 또는 티로신에서와 같이 -CH2C6H5OH 등)이며;
Figure pct00032
는 또 다른 화학적 개체에 대한 결합을 나타낸다. 몇몇 구현예에서, SC는 수소, 알킬, 헤테로알킬, 아릴알킬 및 헤테로아릴알킬로 이루어지는 그룹 중에서 선택된다.
본원에 사용되는 바와 같이, "치료 유효량"은 질병 또는 질환의 치료 또는 관리에서 환자에게 치료학적 이득을 제공하거나, 또는 상기 질병 또는 질환과 연관된 하나 이상의 증상을 지연시키거나 최소화하기에 충분한 양(예를 들어 화합물의)을 지칭한다.
본원에 사용되는 바와 같이, "구조 이성질체"는 동일한 분자식을 갖지만, 원자 배열 방식이 상이한 화학 구조를 갖는 화합물을 지칭한다. 예시적인 구조 이성질체는 n-프로필 및 이소프로필; n-부틸, 2급-부틸, 및 3급-부틸; 및 n-펜틸, 이소펜틸 및 네오펜틸 등을 포함한다.
몇몇 기, 모이어티, 치환체, 및 원자를, 상기 기, 모이어티, 치환체, 원자가 결합하는 원자를 가리키기 위해서 결합 또는 결합들을 교차하는 물결선으로 묘사한다. 예를 들어,
Figure pct00033
또는
Figure pct00034
로서 묘사된 프로필기로 치환되는 페닐기는 하기의 구조를 갖는다:
Figure pct00035
. 본원에 사용되는 바와 같이, 고리원자간의 결합을 통해 환상기(예를 들어 방향족, 헤테로방향족, 축합된 고리, 및 포화되거나 불포화된 사이클로알킬 또는 헤테로사이클로알킬)에 결합된 치환체를 도시하는 삽화는 달리 명시되지 않는 한, 본원에 제시되거나 또는 본 개시내용이 속하는 분야에 공지된 기법에 따라, 상기 환상기가 상기 환상기 중의 임의의 고리 위치에서 또는 축합된 고리 기 중의 임의의 고리상에서 상기 치환체로 치환될 수 있음을 나타내고자 한다. 예를 들어, 기
Figure pct00036
또는
Figure pct00037
(여기에서, 아래첨자 q는 0 내지 4의 정수이고 치환체 R1의 위치들은 일반적으로, 즉 결합선 구조, 즉 특정한 고리 탄소원자의 어떠한 꼭짓점에도 직접 부착되지 않게 기재된다)은 하기의 비제한적인 기들의 예(여기에서 치환체 R1은 특정한 고리 탄소원자에 결합된다)를 포함한다:
Figure pct00038
Figure pct00039
Figure pct00040
Figure pct00041
Figure pct00042
Figure pct00043
,
Figure pct00044
Figure pct00045
Figure pct00046
Figure pct00047
및
Figure pct00048
본원에 사용되는 바와 같이, "반응성 링커"란 어구 또는 약어 "RL"은 예를 들어
Figure pct00049
(여기에서 RG는 반응성기이고 SP는 이격기이다)로서 묘사된 반응성기("RG") 및 이격기("SP")를 포함하는 1가 기를 지칭한다. 본원에 기재된 바와 같이, 반응성 링커는 하나 초과의 반응성기 및 하나 초과의 이격기를 포함할 수 있다. 상기 이격기는 상기 반응성기를 또 다른 기, 예를 들어 페이로드에 가교하는 임의의 2가 모이어티이다. 상기 반응성 링커(RL)는 상기 링커가 결합되는 페이로드와 함께, 본원에 기재된 항체 접합체의 제조에 합성 전구체로서 유용한 중간체("링커-페이로드" 또는 LP)를 제공한다. 상기 반응성 링커는, 또 다른 기, 예를 들어 항체, 변형된 항체, 또는 그의 항원 결합 단편, 또는 강화기의 반응성 부분과 반응할 수 있는 작용기 또는 모이어티인 반응성기를 포함한다. 상기 반응기와 항체, 변형된 항체, 또는 그의 항원 결합 단편과의 반응으로부터 생성되는 모이어티는 상기 연결기와 함께, 본원에 기재된 접합체의 "결합제 링커"("BL") 부분을 포함한다. 몇몇 구현예에서, "반응성기"는 항체 또는 그의 항원-결합 단편의 시스테인 또는 리신 잔기와 반응하는 작용기 또는 모이어티(예를 들어 말레이미드 또는 N-하이드록시숙신이미드(NHS) 에스테르)이다. 몇몇 구현예에서, "반응성기"는 클릭 화학 반응을 겪을 수 있는 작용기 또는 모이어티이다(예를 들어 하기 문헌들을 참조하시오: click chemistry, Huisgen Proc. Chem. Soc. 1961, Wang et al. J. Am. Chem. Soc. 2003, 및 Agard et al. J. Am. Chem. Soc. 2004). 상기 클릭 화학 반응의 일부 구현예에서, 상기 반응성기는 아지드와 1,3-가환 반응을 겪을 수 있는 알킨이다. 상기와 같은 적합한 반응성기는 비제한적으로, 변형된 알킨, 예를 들어 변형-촉진된 알킨-아지드 가환(SPAAC)에 적합한 것들, 사이클로알킨, 예를 들어 사이클로옥틴, 벤젠고리화된 알킨, 및 구리 촉매의 존재하에서 알킨과 1,3-가환 반응을 겪을 수 있는 알킨을 포함한다. 적합한 알킨은 또한 비제한적으로 디벤조아자사이클로옥틴 또는
Figure pct00050
(DIBAC), 디벤조사이클로옥틴 또는
Figure pct00051
(DIBO), 비아릴아자사이클로옥티논 또는
Figure pct00052
(BARAC), 디플루오르화된 사이클로옥틴 또는
Figure pct00053
, 또는
Figure pct00054
또는
Figure pct00055
(DIFO), 치환된, 예를 들어 플루오르화된 알킨, 아자-사이클로알킨, 비사이클[6.1.0]노닌 또는
Figure pct00056
(BCN, 여기에서 R은 알킬, 알콕시 또는 아실이다) 및 그의 유도체를 포함한다. 특히 유용한 알킨은
Figure pct00057
및
Figure pct00058
을 포함한다. 상기와 같은 반응성기를 포함하는 링커-페이로드는 아지도기로 기능화된 항체 접합에 유용하다. 상기와 같은 기능화된 항체는 아지도-폴리에틸렌 글리콜기로 기능화된 항체를 포함한다. 몇몇 구현예에서, 상기와 같은 기능화된 항체는 효소 트랜스글루타미나제의 존재하에서 적어도 하나의 글루타민 잔기, 예를 들어 중쇄 Gln295를 갖는 항체를 아미노기 및 아지드기를 갖는 화합물로 처리함으로써 유도된다.
일부 예에서, 상기 반응성기는 알킨, 예를 들어
Figure pct00059
이며, 이는 클릭 화학을 통해 아지드, 예를 들어
Figure pct00060
와 반응하여 클릭 화학 생성물, 예를 들어
Figure pct00061
또는
Figure pct00062
을 형성할 수 있다. 일부 예에서, 상기 기는 변형된 항체 또는 그의 항원 결합 단편상의 아지드와 반응한다. 일부 예에서, 상기 반응성기는 알킨, 예를 들어
Figure pct00063
이며, 이는 클릭 화학을 통해 아지드, 예를 들어
Figure pct00064
와 반응하여 클릭 화학 생성물, 예를 들어
Figure pct00065
을 형성할 수 있다. 일부 예에서, 상기 반응성기는 알킨, 예를 들어
Figure pct00066
이며, 이는 클릭 화학을 통해 아지드, 예를 들어
Figure pct00067
와 반응하여 클릭 화학 생성물, 예를 들어
Figure pct00068
또는
Figure pct00069
을 형성할 수 있다. 일부 예에서, 상기 반응성기는 작용기, 예를 들어
Figure pct00070
이며, 이는 항체 또는 그의 항원-결합 단편상의 시스테인 잔기와 반응하여 상기에 대한 탄소-황 결합, 예를 들어
Figure pct00071
을 형성하며, 여기에서 Ab는 항체 또는 그의 항원-결합 단편을 지칭하고 S는 시스테인 잔기상의 S 원자를 지칭하며 이를 통해 작용기가 상기 Ab에 결합한다. 일부 예에서, 상기 반응성기는 작용기, 예를 들어
Figure pct00072
이며, 이는 항체 또는 또는 그의 항원-결합 단편상의 리신 잔기와 반응하여 상기에 대한 아미드 결합, 예를 들어
Figure pct00073
을 형성하며, 여기에서 Ab는 항체 또는 그의 항원-결합 단편을 지칭하고 NH는 리신 측쇄 잔기상의 NH 원자를 지칭하며 이를 통해 작용기가 상기 Ab에 결합한다.
본원에 사용되는 바와 같이, "생분해성 모이어티"란 어구는 생체내에서, 통상적인 생물학적 과정에 의해 신체로부터 제거될 수 있는 무독성의 생체적합성 성분으로 분해되는 모이어티를 지칭한다. 일부 구현예에서, 생분해성 모이어티는 약 90일 이하, 약 60일 이하, 또는 약 30일 이하의 과정에 걸쳐 생체내에서 완전히 또는 실질적으로 분해되며, 여기에서 분해 정도는 상기 생분해성 모이어티의 질량 손실 퍼센트에 기초하며, 완전한 분해는 100% 질량 손실에 상응한다. 예시적인 생분해성 모이어티는 비제한적으로 지방족 폴리에스테르, 예를 들어 폴리(ε-카프로락톤)(PCL), 폴리(3-하이드록시부티레이트)(PHB), 폴리(글리콜산)(PGA), 폴리(락트산)(PLA), 및 글리콜산과 그의 공중합체(즉 폴리(D,L-락티드-코글리콜리드)(PLGA)를 포함한다(Vert M, Schwach G, Engel R and Coudane J (1998) J Control Release 53(1-3):85-92; Jain R A (2000) Biomaterials 21(23):2475-2490; Uhrich K E, Cannizzaro S M, Langer R S and Shakesheff K M (1999) Chemical Reviews 99(11):3181-3198; 및 Park T G (1995) Biomaterials 16(15):1123-1130, 이들은 각각 내용 전체가 본원에 참고로 인용된다).
본원에 사용되는 바와 같이, "결합제 링커" 또는 "BL"이란 어구는 결합제(예를 들어 항체 또는 그의 항원-결합 단편)를 본원에 제시된 페이로드 화합물(예를 들어 튜불리신) 및 임의로, 하나 이상의 측쇄 화합물과 연결하거나, 접속시키거나 또는 결합시키는 임의의 2가, 3가 또는 다가 기 또는 모이어티를 지칭한다. 일반적으로, 본원에 기재된 항체 접합체에 적합한 결합제 링커는 상기 항체 접합체의 순환 반감기를 이용하기에 충분히 안정하고, 동시에 상기 접합체의 항원-매개된 내면화 후에 그의 페이로드를 방출할 수 있는 것들이다. 링커는 절단성이거나 비-절단성일 수 있다. 절단성 링커는 내면화에 이어서 세포내 대사에 의해 절단되는, 예를 들어 가수분해, 환원, 또는 효소 반응을 통해 절단되는 링커이다. 비-절단성 링커는 내면화에 이어서 항체의 리소솜 분해를 통해, 부착된 페이로드를 방출하는 링커이다. 적합한 링커는 비제한적으로 산-불안정성 링커, 가수분해-불안정성 링커, 효소 절단성 링커, 환원 불안정성 링커, 자기-희생 링커, 및 비-절단성 링커를 포함한다. 적합한 링커는 또한 비제한적으로 펩티드, 글루쿠로니드, 숙신이미드-티오에테르, 폴리에틸렌 글리콜(PEG) 단위, 히드라존, mal-카프로일 단위, 디펩티드 단위, 발린-시트룰린 단위, 및 파라-아미노벤질옥시카보닐(PABC), 파라-아미노벤질(PAB) 단위를 포함한다. 일부 구현예에서, 상기 결합제 링커(BL)는 반응성 링커(RL)의 반응성 기(RG) 및 결합제, 예를 들어 항체, 변형된 항체 또는 그의 항원 결합 단편의 반응성 부분의 반응에 의해 형성되는 모이어티를 포함한다.
일부 예에서, 상기 BL은 하기의 모이어티:
Figure pct00074
또는
Figure pct00075
를 포함하며, 여기에서
Figure pct00076
는 상기 결합제에 대한 결합이다. 일부 예에서, 상기 BL은 하기의 모이어티:
Figure pct00077
을 포함하며, 여기에서
Figure pct00078
는 상기 결합제에 대한 결합이다. 일부 예에서, 상기 BL은 하기의 모이어티:
Figure pct00079
또는
Figure pct00080
를 포함하며, 여기에서
Figure pct00081
는 상기 결합제에 대한 결합이다. 일부 예에서, 상기 BL은 하기의 모이어티:
Figure pct00082
을 포함하며, 여기에서
Figure pct00083
는 상기 항체 또는 그의 항원-결합 단편의 시스테인에 대한 결합이다. 일부 예에서, 상기 BL은 하기의 모이어티:
Figure pct00084
을 포함하며, 여기에서
Figure pct00085
는 상기 항체 또는 그의 항원-결합 단편의 리신에 대한 결합이다.
폴리펩티드에 적용시, "실질적인 유사성" 또는 "실질적으로 유사한"이란 어구는 2개의 펩티드 서열이, 예를 들어 디폴트 갭 가중치를 사용하여 GAP 또는 BESTFIT 프로그램에 의해 최적으로 정렬될 때, 적어도 95% 서열 일치성, 훨씬 더 바람직하게는 적어도 98% 또는 99% 서열 일치성을 공유함을 의미한다. 서열 유사성을 또한 문헌[Altschul et al. J. Mol. Biol. 215: 403-10]에 기재되거나 blast.ncbi.nlm.nih.gov/Blast.cgi에서 입수할 수 있는 BLAST 알고리즘(공개된 디폴트 설정 사용)을 사용하여 측정할 수 있다. 바람직하게, 동일하지 않은 잔기 위치는 보존적 아미노산 치환에 의해 상이하다. "보존적 아미노산 치환"은 아미노산 잔기가 유사한 화학적 성질(예를 들어 전하 또는 소수성)을 갖는 측쇄(R 기)를 갖는 또 다른 아미노산 잔기에 의해 치환되는 것이다. 일반적으로, 보존적 아미노산 치환은 단백질의 기능적 성질을 실질적으로 변화시키지 않을 것이다. 2개 이상의 아미노산 서열이 보존적 치환에 의해 서로 상이한 경우에, 서열 일치성 퍼센트 또는 유사성 정도를 상기 치환의 보존적 성질을 보정하도록 상향 조절할 수 있다. 이러한 조절을 수행하는 방법은 당업자에게 주지되어 있다. 예를 들어 문헌[Pearson (1994) Methods Mol. Biol. 24: 307-331]을 참조하시오. 유사한 화학적 성질을 갖는 측쇄를 갖는 아미노산 그룹의 예는 (1) 지방족 측쇄: 글리신, 알라닌, 발린, 류신 및 이소류신; (2) 지방족-하이드록실 측쇄: 세린 및 쓰레오닌; (3) 아미드-함유 측쇄: 아스파라진 및 글루타민; (4) 방향족 측쇄: 페닐알라닌, 티로신 및 트립토판; (5) 염기성 측쇄: 리신, 아르기닌 및 히스티딘; (6) 산성 측쇄: 아스파테이트 및 글루타메이트; 및 (7) 황-함유 측쇄: 시스테인 및 메티오닌을 포함한다. 바람직한 보존적 아미노산 치환 그룹은 발린-류신-이소류신, 페닐알라닌-티로신, 리신-아르기닌, 알라닌-발린, 글루타메이트-아스파테이트, 및 아스파라진-글루타민이다. 한편으로, 보존적 교체는 문헌[Gonnet et al. (1992) Science 256: 1443-1445]에 개시된 PAM250 로그-우도 행렬에서 양성값을 갖는 임의의 변화이다. "보통으로 보존적인" 교체는 PAM250 로그-우도 행렬에서 비음성값을 갖는 임의의 변화이다.
화합물 또는 페이로드 - Q는 탄소이다.
본원은 화합물 또는 페이로드를 제공한다. 임의의 특정한 실시 이론에 얽매이고자 하는 것은 아니지만, 화합물은 튜불리신 또는 튜불리신 유도체를 포함한다. 몇몇 구현예에서, 화합물은 접합체의 부분으로서 세포로 전달될 수 있다. 몇몇 구현예에서, 화합물은 튜불리신 또는 튜불리신 유도체의 임의의 활성을, 표적, 예를 들어 표적 세포에서 또는 상기 중에서 수행할 수 있다. 몇몇 화합물은 하나 이상의 추가적인 활성을 가질 수 있다. 몇몇 구현예에서, 화합물은 폴레이트 수용체, 소마토스타틴 수용체, 및/또는 봄베신 수용체의 활성을 조절할 수 있다.
몇몇 구현예에서, 본원은 하기 화학식 I의 구조를 갖는 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염 또는 전구약물(prodrug)을 제시한다:
화학식 I
Figure pct00086
상기 식에서, Q는 -CH2-이고; R2는 C5-C10 알킬이고; R3은 -C(O)C1-C5 알킬이고; R4는 수소이고; R5는 C1-C5 알킬이고; R7은 할로겐이다. 화학식 I에서, 몇몇 구현예에서, 유용한 R1 기는 메틸 및 에틸을 포함한다. 몇몇 구현에에서, 유용한 R1 기는 프로필, 부틸, 펜틸, 헥실, 헵틸, 옥틸, 노닐, 데실 및 이들의 구조 이성질체를 포함한다. 하나의 구현예에서, R1은 메틸이다. 하나의 구현예에서, R1은 에틸이다. 하나의 구현예에서, R1은 프로필, 및 그의 구조 이성질체이다. 하나의 구현예에서, R1은 부틸, 및 그의 구조 이성질체이다. 하나의 구현예에서, R1은 펜틸, 및 그의 구조 이성질체이다. 하나의 구현예에서, R1은 헥실 및 그의 구조 이성질체이다. 하나의 구현예에서, R1은 헵틸 및 그의 구조 이성질체이다. 하나의 구현예에서, R1은 옥틸 및 그의 구조 이성질체이다. 하나의 구현예에서, R1은 노닐 및 그의 구조 이성질체이다. 하나의 구현예에서, R1은 데실 및 그의 구조 이성질체이다. 화학식 I에서, 상기 몇몇 구현예에서, 유용한 R2 기는 n-펜틸, n-헥실, n-헵틸, n-옥틸, n-노닐 및 n-데실을 포함한다. 하나의 구현예에서, R2는 n-펜틸, 또는 그의 구조 이성질체이다. 또 다른 구현예에서, R2는 n-헥실, 또는 그의 구조 이성질체이다. 또 다른 구현예에서, R2는 n-헵틸, 또는 그의 구조 이성질체이다. 또 다른 구현예에서, R2는 n-옥틸, 또는 그의 구조 이성질체이다. 또 다른 구현예에서, R2는 n-노닐, 또는 그의 구조 이성질체이다. 또 다른 구현예에서, R2는 n-데실, 또는 그의 구조 이성질체이다. 하나의 구현예에서, Q-R2는 n-헥실이다. 상기 화학식 I의 몇몇 구현예에서, 유용한 R3 기는 -C(O)Me, -C(O)Et, -C(O)프로필, -C(O)부틸, 및 -C(O)펜틸을 포함한다. 하나의 구현예에서, R3은 -C(O)Me이다. 또 다른 구현예에서, R3은 -C(O)Et이다. 또 다른 구현예에서, R3은 -C(O)프로필 및 그의 구조 이성질체이다. 또 다른 구현예에서, R3은 -C(O)부틸 및 그의 구조 이성질체이다. 또 다른 구현예에서, R3은 -C(O)펜틸 및 그의 구조 이성질체이다. 상기 화학식 I의 몇몇 구현예에서, 유용한 R5 기는 메틸, 에틸, 프로필, 부틸 및 펜틸을 포함한다. 하나의 구현예에서, R5는 메틸이다. 또 다른 구현예에서, R5는 에틸이다. 또 다른 구현예에서, R5는 프로필, 및 그의 구조 이성질체이다. 또 다른 구현예에서, R5는 부틸, 및 그의 구조 이성질체이다. 또 다른 구현예에서, R5는 펜틸, 및 그의 구조 이성질체이다. 상기 화학식 I의 몇몇 구현예에서, R6은 -OH 또는 -NHNH2를 포함한다. 하나의 구현예에서, R6은 -OH이다. 또 다른 구현예에서, R6은 -NHNH2이다. 화학식 I에서, 상기 몇몇 구현예에서, 각각의 R7은 독립적으로, 불소, 염소, 브롬 및 요오드를 포함한다. 하나의 구현예에서, R7은 불소이다. 또 다른 구현예에서, R7은 염소이다. 또 다른 구현예에서, R7은 브롬이다. 또 다른 구현예에서, R7은 요오드이다. 화학식 I에서, 상기 몇몇 구현예에서, R8은 수소, 중수소, -NHR9, 또는 할로겐을 포함한다. 상기 화학식 I의 몇몇 구현예에서, R9는 수소, -C1-C5 알킬, 또는 -C(O)C1-C5 알킬이다. 상기 화학식 I의 몇몇 구현예에서, m은 1 또는 2이다. 하나의 구현예에서, R8은 수소이다. 하나의 구현예에서, R8은 중수소이다. 몇몇 구현예에서, R8은 독립적으로 불소, 염소, 브롬 및 요오드를 포함한다. 하나의 구현예에서, R8은 불소이다. 또 다른 구현예에서, R8은 염소이다. 또 다른 구현예에서, R8은 브롬이다. 또 다른 구현예에서, R8은 요오드이다. 하나의 구현예에서, -NHR9는 -NH2이다. 하나의 구현예에서, -NHR9는 -NHMe, -NHEt, -NHCH2CH2CH3, -NHCH2CH2CH2CH3, 및 -NHCH2CH2CH2CH2CH3을 포함한다. 하나의 구현예에서, -NHR9는 -NHMe이다. 하나의 구현예에서, -NHR9는 -NHEt이다. 하나의 구현예에서, -NHR9는 -NHCH2CH2CH3이다. 하나의 구현예에서, -NHR9는 -NHCH2CH2CH2CH3이다. 하나의 구현예에서, -NHR9는 -NHCH2CH2CH2CH2CH3이다. 하나의 구현예에서, -NHR9는 -NHC(O)Me, -NHC(O)Et, -NHC(O)CH2CH2CH3, -NHC(O)CH2CH2CH2CH3, 및 -NHC(O)CH2CH2CH2CH2CH3을 포함한다. 하나의 구현예에서, -NHR9는 -NHC(O)Me이다. 하나의 구현예에서, -NHR9는 -NHC(O)Et이다. 하나의 구현예에서, -NHR9는 -NHC(O)CH2CH2CH3이다. 하나의 구현예에서, -NHR9는 -NHC(O)CH2CH2CH2CH3이다. 하나의 구현예에서, -NHR9는 -NHC(O)CH2CH2CH2CH2CH3이다. 하나의 구현예에서, m은 1이다. 하나의 구현예에서, m은 2이다.
몇몇 구현예에서, 본원은 하기 화학식 II의 구조를 갖는 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염 또는 전구약물을 제시한다:
[화학식 II]
Figure pct00087
.
몇몇 구현예에서, R2, R3, R6, 및 R7은 선행 단락에 기재된 바와 같다.
몇몇 구현예에서, 본원은 Q가 -CH2-이고; R2가 C5-C10 알킬이고; R3이 -C(O)C1-C5 알킬이고; R4 및 R5가 메틸이고; R7이 -OH, 할로겐, 또는 -NH2이고; R8이 각각의 경우에 독립적으로 수소, 중수소, -NHR9, 또는 할로겐이고, 여기에서 R9가 수소 또는 -C1-C5 알킬이고; m이 1 또는 2인 화학식 I의 구조를 갖는 화합물, 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염 또는 전구약물을 제시한다. 몇몇 구현예에서, R1, R2, R3, 및 Q-R2는 상기 화학식 I에서 기재한 바와 같다. 상기 화학식 I의 몇몇 구현예에서, R7은 불소, 염소, 브롬 및 요오드를 포함한다. 하나의 구현예에서, R7은 불소이다. 또 다른 구현예에서, R7은 염소이다. 또 다른 구현예에서, R7은 브롬이다. 또 다른 구현예에서, R7은 요오드이다. 하나의 구현예에서, R7은 -OH이다. 하나의 구현예에서, R7은 -NH2이다. 하나의 구현예에서, R8은 수소이다. 하나의 구현예에서, R8은 중수소이다. 몇몇 구현예에서, R8은 독립적으로, 불소, 염소, 브롬 및 요오드를 포함한다. 하나의 구현예에서, R8은 불소이다. 또 다른 구현예에서, R8은 염소이다. 또 다른 구현예에서, R8은 브롬이다. 또 다른 구현예에서, R8은 요오드이다. 하나의 구현예에서, R8은 -NHR9이다. 하나의 구현예에서, -NHR9는 -NH2이다. 하나의 구현예에서, -NHR9는 -NHMe, -NHEt, -NHCH2CH2CH3, -NHCH2CH2CH2CH3, 및 -NHCH2CH2CH2CH2CH3을 포함한다. 하나의 구현예에서, -NHR9는 -NHMe이다. 하나의 구현예에서, -NHR9는 -NHEt이다. 하나의 구현예에서, -NHR9는 -NHCH2CH2CH3이다. 하나의 구현예에서, -NHR9는 -NHCH2CH2CH2CH3이다. 하나의 구현예에서, -NHR9는 -NHCH2CH2CH2CH2CH3이다. 하나의 구현예에서, m은 1이다. 하나의 구현예에서, m은 2이다.
몇몇 구현예에서, 본원은 하기 화학식 III의 구조를 갖는 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염을 제시한다:
[화학식 III]
Figure pct00088
.
몇몇 구현예에서, Q, R2, R3, R7, R8, R9 및 Q-R2는 선행 단락에 기재된 바와 같다.
몇몇 구현예에서, 본원은 Q가 -CH2-이고; R2가 C1-C10 알키닐이고; R6이 -OH인 화학식 I의 구조를 갖는 화합물, 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염 또는 전구약물을 제시한다. 몇몇 구현예에서, R1, R3, R4, R5, R7, 및 R8은 상술한 바와 같다. 화학식 I의 하나의 구현예에서, R2는 -CH2CCH이다. 화학식 I의 하나의 구현예에서, R2는 -CH2CH2CCH이다. 화학식 I의 하나의 구현예에서, R2는 -CH2CH2CH2CCH이다. 화학식 I의 하나의 구현예에서, R2는 -CH2CH2CH2CH2CCH이다. 화학식 I의 하나의 구현예에서, R2는 -CH2CH2CH2CH2CH2CCH이다. 화학식 I의 하나의 구현예에서, R2는 -CH2CH2CH2CH2CH2CH2CCH이다. 화학식 I의 하나의 구현예에서, R2는 -CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CCH이다. 화학식 I의 하나의 구현예에서, R2는 -CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CCH이다. 화학식 I의 하나의 구현예에서, R2는 -CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CCH이다. 화학식 I의 하나의 구현예에서, R2는 -CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CCH이다.
몇몇 구현예에서, 본원은 하기 화학식 IV의 구조를 갖는 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염을 제시한다:
[화학식 IV]
Figure pct00089
.
몇몇 구현예에서, R2, R3, R4, R5, R7 및 R8은 선행 단락에 기재된 바와 같다.
몇몇 구현예에서, 본원은 Q가 -CH2-이고; R2가 위치이성질체성 -C1-C10 알킬렌-(5-원 헤테로아릴이고), 여기에서 상기 헤테로아릴이 비치환되거나 또는 알킬, 아미노알킬, 하이드록실알킬, 카복시알킬, 벤질 또는 페닐로 치환되며; R3이 -C(O)C1-C5 알킬이고; R4 및 R5가 C1-C5 알킬이고; R6이 -OH이고; R7이 -NH2인 화학식 I의 구조를 갖는 화합물, 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염 또는 전구약물을 제시한다. 몇몇 구현예에서, R1, R8 및 R9는 상술한 바와 같다. 상기 화학식 I의 몇몇 구현예에서, 유용한 R2 기는 위치이성질체성 -C1-C10 알킬렌-(1,2,3-트리아졸)을 포함하고, 여기에서 상기 위치이성질체성 1,2,3-트리아졸은 비치환되거나 또는 알킬, 아미노알킬, 하이드록실알킬, 카복시알킬, 벤질 또는 페닐로 치환된다. 하기의 구현예에서, 1,2,3-트리아졸은 본원의 어딘가에 기재된 바와 같이, 말단 알킨과 아지드간의 클릭-화학 반응으로부터 유도되어 위치이성질체성 생성물을 생성시킨다. 하나의 구현예에서, R2는
Figure pct00090
이다. 하나의 구현예에서, R2는
Figure pct00091
이다. 하나의 구현예에서, R2는
Figure pct00092
이다. 하나의 구현예에서, R2는
Figure pct00093
이다. 하나의 구현예에서, R2는
Figure pct00094
이다. 하나의 구현예에서, R2는
Figure pct00095
이다. 하나의 구현예에서, R2는
Figure pct00096
이다. 하나의 구현예에서, R2는
Figure pct00097
이다. 하나의 구현예에서, R2는
Figure pct00098
이다. 하나의 구현예에서, R2는
Figure pct00099
이다. 본 단락의 구현예들 중 임의의 하나 이상에서, Y는 수소, 알킬, 아미노알킬, 하이드록실알킬, 카복시알킬, 벤질 또는 페닐이다. 하나의 구현예에서, Y는 수소이다. 하나의 구현예에서, Y는 알킬이다. 하나의 구현예에서, Y는 아미노알킬이다. 하나의 구현예에서, Y는 하이드록실알킬이다. 하나의 구현예에서, Y는 카복시알킬이다. 하나의 구현예에서, Y는 페닐이다. 상기 화학식 I의 몇몇 구현예에서, 유용한 R3 기는 -C(O)Me, -C(O)Et, -C(O)프로필, -C(O)부틸, 및 -C(O)펜틸을 포함한다. 하나의 구현예에서, R3은 -C(O)Me이다. 또 다른 구현예에서, R3은 -C(O)Et이다. 또 다른 구현예에서, R3은 -C(O)프로필 및 그의 구조 이성질체이다. 또 다른 구현예에서, R3은 -C(O)부틸 및 그의 구조 이성질체이다. 또 다른 구현예에서, R3은 -C(O)펜틸 및 그의 구조 이성질체이다. 상기 화학식 I의 몇몇 구현예에서, 유용한 R4 및 R5 기는 독립적으로, 메틸, 에틸, 프로필 및 그의 구조 이성질체, 부틸 및 그의 구조 이성질체, 및 펜틸 및 그의 구조 이성질체, 및 이들의 조합을 포함한다. 예를 들어, 하나의 구현예에서, R4 및 R5는 Me이다. 또 다른 예로서, 하나의 구현예에서, R4 및 R5는 에틸이다. 또 다른 예로서, R4는 메틸이고 R5는 에틸이다. 본 단락내 구현예로서 R4 및 R5에 대한 다른 예시적인 조합 또는 변화가 본 명세서에서 고려된다.
몇몇 구현예에서, 본원은 하기 화학식 V의 구조를 갖는 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염을 제시한다:
[화학식 V]
Figure pct00100
.
몇몇 구현예에서, R2, R3, R4 및 R5는 선행 단락에 기재된 바와 같다.
몇몇 구현예에서, 본원은 하기 화학식 VI 또는 화학식 VII의 구조를 갖는 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염을 제시한다:
[화학식 VI]
Figure pct00101
[화학식 VII]
Figure pct00102
상기 식들에서,
R10은 수소, 메틸, -CH2CH2NH2, -CH2CH2OH, -CH2COOH, -CH2CH2CH2COOH, 벤질 또는 페닐이다. 하나의 구현예에서, R10은 수소이다. 하나의 구현예에서, R10은 메틸이다. 하나의 구현예에서, R10은 -CH2CH2NH2이다. 하나의 구현예에서, R10은 -CH2CH2OH이다. 하나의 구현예에서, R10은 -CH2COOH이다. 하나의 구현예에서, R10은 -CH2CH2CH2COOH이다. 하나의 구현예에서, R10은 벤질이다. 하나의 구현예에서, R10은 페닐이다.
몇몇 구현예에서, 본원은 하기로 이루어지는 그룹 중에서 선택될 수 있는 화학식 I, II, III, IV, V, VI 또는 VII 중 어느 하나에 따른 화합물; 또는 그의 위치이성질체, 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염을 제공한다:
Figure pct00103
Figure pct00104
Figure pct00105
Figure pct00106
;
Figure pct00107
Figure pct00108
;
Figure pct00109
Figure pct00110
;
Figure pct00111
Figure pct00112
Figure pct00113
; 및
Figure pct00114
.
몇몇 구현예에서, 본원은 하기 화학식 XIII의 구조를 갖는 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염 또는 전구약물을 제시한다:
[화학식 XIII]
Figure pct00115
상기 식에서, Q는 -CH2-이고; R2는 C5-C10 알킬이고; R3은 -C(O)C1-C5 알킬이고; R4는 수소 또는 C1-C5 알킬이고; R5는 C1-C5 알킬이거나; 또는 R4 및 R5는 이들이 부착된 탄소와 함께 3-8원 사이클로알킬, 치환된 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 또는 치환된 헤테로사이클로알킬이고; R7은 할로겐이다. 화학식 XIII에서, 몇몇 구현예에서, 유용한 R1 기는 메틸 및 에틸을 포함한다. 몇몇 구현에에서, 유용한 R1 기는 프로필, 부틸, 펜틸, 헥실, 헵틸, 옥틸, 노닐, 데실 및 이들의 구조 이성질체를 포함한다. 하나의 구현예에서, R1은 메틸이다. 하나의 구현예에서, R1은 에틸이다. 하나의 구현예에서, R1은 프로필, 및 그의 구조 이성질체이다. 하나의 구현예에서, R1은 부틸, 및 그의 구조 이성질체이다. 하나의 구현예에서, R1은 펜틸, 및 그의 구조 이성질체이다. 하나의 구현예에서, R1은 헥실 및 그의 구조 이성질체이다. 하나의 구현예에서, R1은 헵틸 및 그의 구조 이성질체이다. 하나의 구현예에서, R1은 옥틸 및 그의 구조 이성질체이다. 하나의 구현예에서, R1은 노닐 및 그의 구조 이성질체이다. 하나의 구현예에서, R1은 데실 및 그의 구조 이성질체이다. 화학식 XIII에서, 상기 몇몇 구현예에서, 유용한 R2 기는 n-펜틸, n-헥실, n-헵틸, n-옥틸, n-노닐 및 n-데실을 포함한다. 하나의 구현예에서, R2는 n-펜틸, 또는 그의 구조 이성질체이다. 또 다른 구현예에서, R2는 n-헥실, 또는 그의 구조 이성질체이다. 또 다른 구현예에서, R2는 n-헵틸, 또는 그의 구조 이성질체이다. 또 다른 구현예에서, R2는 n-옥틸, 또는 그의 구조 이성질체이다. 또 다른 구현예에서, R2는 n-노닐, 또는 그의 구조 이성질체이다. 또 다른 구현예에서, R2는 n-데실, 또는 그의 구조 이성질체이다. 하나의 구현예에서, Q-R2는 n-헥실이다. 상기 화학식 XIII의 몇몇 구현예에서, 유용한 R3 기는 -C(O)Me, -C(O)Et, -C(O)프로필, -C(O)부틸, 및 -C(O)펜틸을 포함한다. 하나의 구현예에서, R3은 -C(O)Me이다. 또 다른 구현예에서, R3은 -C(O)Et이다. 또 다른 구현예에서, R3은 -C(O)프로필 및 그의 구조 이성질체이다. 또 다른 구현예에서, R3은 -C(O)부틸 및 그의 구조 이성질체이다. 또 다른 구현예에서, R3은 -C(O)펜틸 및 그의 구조 이성질체이다. 하나의 구현예에서, R4는 수소이다. 상기 화학식 XIII의 몇몇 구현예에서, 유용한 R4 기는 메틸, 에틸, 프로필, 부틸 및 펜틸을 포함한다. 하나의 구현예에서, R4는 메틸이다. 또 다른 구현예에서, R4는 에틸이다. 또 다른 구현예에서, R4는 프로필, 및 그의 구조 이성질체이다. 또 다른 구현예에서, R4는 부틸, 및 그의 구조 이성질체이다. 또 다른 구현예에서, R4는 펜틸, 및 그의 구조 이성질체이다. 상기 화학식 XIII의 몇몇 구현예에서, 유용한 R5 기는 메틸, 에틸, 프로필, 부틸 및 펜틸을 포함한다. 하나의 구현예에서, R5는 메틸이다. 또 다른 구현예에서, R5는 에틸이다. 또 다른 구현예에서, R5는 프로필, 및 그의 구조 이성질체이다. 또 다른 구현예에서, R5는 부틸, 및 그의 구조 이성질체이다. 또 다른 구현예에서, R5는 펜틸, 및 그의 구조 이성질체이다. 하나의 구현예에서, R4 및 R5는 메틸이다. 하나의 구현예에서, R4 및 R5는 이들이 부착된 탄소와 함께 사이클로프로필 또는 치환된 사이클로프로필이다. 하나의 구현예에서, R4 및 R5는 이들이 부착된 탄소와 함께 사이클로부틸 또는 치환된 사이클로부틸이다. 하나의 구현예에서, R4 및 R5는 이들이 부착된 탄소와 함께 사이클로펜틸 또는 치환된 사이클로펜틸이다. 하나의 구현예에서, R4 및 R5는 이들이 부착된 탄소와 함께 사이클로헥실 또는 치환된 사이클로헥실이다. 하나의 구현예에서, R4 및 R5는 이들이 부착된 탄소와 함께 사이클로헵틸 또는 치환된 사이클로헵틸이다. 하나의 구현예에서, R4 및 R5는 이들이 부착된 탄소와 함께 사이클로옥틸 또는 치환된 사이클로옥틸이다. 하나의 구현예에서, R4 및 R5는 이들이 부착된 탄소와 함께 사이클로프로필이며, 이때 상기 사이클로프로필 중 하나의 메틸렌 탄소는 Z로 교체되고, 이때 Z는 산소, 질소 또는 황이다. 하나의 구현예에서, R4 및 R5는 이들이 부착된 탄소와 함께 사이클로부틸이며, 이때 상기 사이클로부틸 중 하나의 메틸렌 탄소는 Z로 교체되고, 이때 Z는 산소, 질소 또는 황이다. 하나의 구현예에서, R4 및 R5는 이들이 부착된 탄소와 함께 사이클로펜틸이며, 이때 상기 사이클로펜틸 중 하나 이상의 메틸렌 탄소는 Z로 교체되고, 이때 Z는 산소, 질소 또는 황이다. 하나의 구현예에서, R4 및 R5는 이들이 부착된 탄소와 함께 사이클로헥실이며, 이때 상기 사이클로헥실 중 하나 이상의 메틸렌 탄소는 Z로 교체되고, 이때 Z는 산소, 질소 또는 황이다. 하나의 구현예에서, R4 및 R5는 이들이 부착된 탄소와 함께 사이클로헵틸이며, 이때 상기 사이클로헵틸 중 하나 이상의 메틸렌 탄소는 Z로 교체되고, 이때 Z는 산소, 질소 또는 황이다. 하나의 구현예에서, R4 및 R5는 이들이 부착된 탄소와 함께 사이클로옥틸이며, 이때 상기 사이클로옥틸 중 하나 이상의 메틸렌 탄소는 Z로 교체되고, 이때 Z는 산소, 질소 또는 황이다. 상기 화학식 XIII의 몇몇 구현예에서, R60은 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 치환된 아릴, 또는 치환된 헤테로아릴이다. 적합한 R60 알킬기는 R1에 대해 본 단락에 기재된 것들, 예를 들어 메틸, 에틸 등을 포함한다. 적합한 R60 알케닐, 알키닐, 아릴 및 헤테로아릴은 본원의 다른 어딘가에 기재되어 있다. 적합한 R60 사이클로알킬 및 헤테로사이클로알킬은 본 단락에 기재된 바와 같은, 부착된 탄소와 함께 R4 및 R5에 대해 기재된 것들을 포함한다. 화학식 XIII에서, 상기 몇몇 구현예에서, 각각의 R7은 독립적으로, 불소, 염소, 브롬 및 요오드를 포함한다. 하나의 구현예에서, R7은 불소이다. 또 다른 구현예에서, R7은 염소이다. 또 다른 구현예에서, R7은 브롬이다. 또 다른 구현예에서, R7은 요오드이다. 화학식 XIII에서, 상기 몇몇 구현예에서, R8은 수소, 중수소, -NHR9, 또는 할로겐을 포함한다. 상기 화학식 XIII의 몇몇 구현예에서, R9는 수소, -C1-C5 알킬, 또는 -C(O)C1-C5 알킬이다. 상기 화학식 XIII의 몇몇 구현예에서, m은 1 또는 2이다. 하나의 구현예에서, R8은 수소이다. 하나의 구현예에서, R8은 중수소이다. 몇몇 구현예에서, R8은 독립적으로 불소, 염소, 브롬 및 요오드를 포함한다. 하나의 구현예에서, R8은 불소이다. 또 다른 구현예에서, R8은 염소이다. 또 다른 구현예에서, R8은 브롬이다. 또 다른 구현예에서, R8은 요오드이다. 하나의 구현예에서, -NHR9는 -NH2이다. 하나의 구현예에서, -NHR9는 -NHMe, -NHEt, -NHCH2CH2CH3, -NHCH2CH2CH2CH3, 및 -NHCH2CH2CH2CH2CH3을 포함한다. 하나의 구현예에서, -NHR9는 -NHMe이다. 하나의 구현예에서, -NHR9는 -NHEt이다. 하나의 구현예에서, -NHR9는 -NHCH2CH2CH3이다. 하나의 구현예에서, -NHR9는 -NHCH2CH2CH2CH3이다. 하나의 구현예에서, -NHR9는 -NHCH2CH2CH2CH2CH3이다. 하나의 구현예에서, -NHR9는 -NHC(O)Me, -NHC(O)Et, -NHC(O)CH2CH2CH3, -NHC(O)CH2CH2CH2CH3, 및 -NHC(O)CH2CH2CH2CH2CH3을 포함한다. 하나의 구현예에서, -NHR9는 -NHC(O)Me이다. 하나의 구현예에서, -NHR9는 -NHC(O)Et이다. 하나의 구현예에서, -NHR9는 -NHC(O)CH2CH2CH3이다. 하나의 구현예에서, -NHR9는 -NHC(O)CH2CH2CH2CH3이다. 하나의 구현예에서, -NHR9는 -NHC(O)CH2CH2CH2CH2CH3이다. 하나의 구현예에서, m은 1이다. 하나의 구현예에서, m은 2이다.
몇몇 구현예에서, 본원은 하기 화학식 XIV의 구조를 갖는 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염 또는 전구약물을 제시한다:
[화학식 XIV]
Figure pct00116
.
몇몇 구현예에서, R2, R3, R7, 및 R60은 선행 단락에 기재된 바와 같다.
몇몇 구현예에서, 본원은 Q가 -CH2-이고; R2가 C5-C10 알킬이고; R3이 -C(O)C1-C5 알킬이고; R4 및 R5가 메틸이고; R7이 -OH, 할로겐, 또는 -NH2이고; R8이 각각의 경우에 독립적으로 수소, 중수소, -NHR9, 또는 할로겐이고, 여기에서 R9가 수소 또는 -C1-C5 알킬이고; m이 1 또는 2인 화학식 XIII의 구조를 갖는 화합물, 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염 또는 전구약물을 제시한다. 몇몇 구현예에서, R1, R2, R3, 및 Q-R2는 상기 화학식 XIII에서 기재한 바와 같다. 상기 화학식 XIII의 몇몇 구현예에서, R7은 불소, 염소, 브롬 및 요오드를 포함한다. 하나의 구현예에서, R7은 불소이다. 또 다른 구현예에서, R7은 염소이다. 또 다른 구현예에서, R7은 브롬이다. 또 다른 구현예에서, R7은 요오드이다. 하나의 구현예에서, R7은 -OH이다. 하나의 구현예에서, R7은 -NH2이다. 하나의 구현예에서, R8은 수소이다. 하나의 구현예에서, R8은 중수소이다. 몇몇 구현예에서, R8은 독립적으로, 불소, 염소, 브롬 및 요오드를 포함한다. 하나의 구현예에서, R8은 불소이다. 또 다른 구현예에서, R8은 염소이다. 또 다른 구현예에서, R8은 브롬이다. 또 다른 구현예에서, R8은 요오드이다. 하나의 구현예에서, R8은 -NHR9이다. 하나의 구현예에서, -NHR9는 -NH2이다. 하나의 구현예에서, -NHR9는 -NHMe, -NHEt, -NHCH2CH2CH3, -NHCH2CH2CH2CH3, 및 -NHCH2CH2CH2CH2CH3을 포함한다. 하나의 구현예에서, -NHR9는 -NHMe이다. 하나의 구현예에서, -NHR9는 -NHEt이다. 하나의 구현예에서, -NHR9는 -NHCH2CH2CH3이다. 하나의 구현예에서, -NHR9는 -NHCH2CH2CH2CH3이다. 하나의 구현예에서, -NHR9는 -NHCH2CH2CH2CH2CH3이다. 상기 화학식 XIII의 몇몇 구현예에서, R60은 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 치환된 아릴, 또는 치환된 헤테로아릴이다. 적합한 R60 알킬기는 R1에 대해 화학식 XIII의 상황에 기재된 것들, 예를 들어 메틸, 에틸 등을 포함한다. 적합한 R60 알케닐, 알키닐, 아릴 및 헤테로아릴은 본원의 다른 어딘가에 기재되어 있다. 적합한 R60 사이클로알킬 및 헤테로사이클로알킬은 화학식 XIII의 상황에 기재된 바와 같은, 부착된 탄소와 함께 R4 및 R5에 대해 기재된 것들을 포함한다. 하나의 구현예에서, m은 1이다. 하나의 구현예에서, m은 2이다.
몇몇 구현예에서, 본원은 하기 화학식 XV의 구조를 갖는 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염을 제시한다:
[화학식 XV]
Figure pct00117
몇몇 구현예에서, Q, R2, R3, R7, R8, R9, Q-R2 및 R60은 선행 단락에 기재된 바와 같다.
몇몇 구현예에서, 본원은 Q가 -CH2-이고; R2가 C1-C10 알키닐이고; R60이 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 치환된 아릴, 또는 치환된 헤테로아릴인 화학식 XIII의 구조를 갖는 화합물, 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염 또는 전구약물을 제시한다. 적합한 R60 알킬기는 R1에 대해 화학식 XIII의 상황에 기재된 것들, 예를 들어 메틸, 에틸 등을 포함한다. 적합한 R60 알케닐, 알키닐, 아릴 및 헤테로아릴은 본원의 다른 어딘가에 기재되어 있다. 적합한 R60 사이클로알킬 및 헤테로사이클로알킬은 화학식 XIII의 상황에 기재된 바와 같은, 부착된 탄소와 함께 R4 및 R5에 대해 기재된 것들을 포함한다. 몇몇 구현예에서, R1, R3, R4, R5, R7, 및 R8은 상술한 바와 같다. 화학식 XIII의 하나의 구현예에서, R2는 -CH2CCH이다. 화학식 XIII의 하나의 구현예에서, R2는 -CH2CH2CCH이다. 화학식 XIII의 하나의 구현예에서, R2는 -CH2CH2CH2CCH이다. 화학식 XIII의 하나의 구현예에서, R2는 -CH2CH2CH2CH2CCH이다. 화학식 XIII의 하나의 구현예에서, R2는 -CH2CH2CH2CH2CH2CCH이다. 화학식 XIII의 하나의 구현예에서, R2는 -CH2CH2CH2CH2CH2CH2CCH이다. 화학식 XIII의 하나의 구현예에서, R2는 -CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CCH이다. 화학식 XIII의 하나의 구현예에서, R2는 -CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CCH이다. 화학식 XIII의 하나의 구현예에서, R2는 -CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CCH이다. 화학식 XIII의 하나의 구현예에서, R2는 -CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CCH이다.
몇몇 구현예에서, 본원은 하기 화학식 XVI의 구조를 갖는 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염을 제시한다:
[화학식 XVI]
Figure pct00118
몇몇 구현예에서, R2, R3, R4, R5, R7, R8 및 R60은 선행 단락에 기재된 바와 같다.
몇몇 구현예에서, 본원은 Q가 -CH2-이고; R2가 위치이성질체성 C1-C10 알킬렌-(5-원 헤테로아릴이고), 여기에서 상기 헤테로아릴이 비치환되거나 또는 알킬, 아미노알킬, 하이드록실알킬, 카복시알킬, 벤질 또는 페닐로 치환되며; R3이 -C(O)C1-C5 알킬이고; R4 및 R5가 C1-C5 알킬이고; R7이 -NH이고; R60이 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 치환된 아릴, 또는 치환된 헤테로아릴인 화학식 XIII의 구조를 갖는 화합물, 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염 또는 전구약물을 제시한다. 적합한 R60 알킬기는 R1에 대해 화학식 XIII의 상황에 기재된 것들, 예를 들어 메틸, 에틸 등을 포함한다. 적합한 R60 알케닐, 알키닐, 아릴 및 헤테로아릴은 본원의 다른 어딘가에 기재되어 있다. 적합한 R60 사이클로알킬 및 헤테로사이클로알킬은 화학식 XIII의 상황에 기재된 바와 같은, 부착된 탄소와 함께 R4 및 R5에 대해 기재된 것들을 포함한다. 몇몇 구현예에서, R1, R8 및 R9는 상술한 바와 같다. 상기 화학식 XIII의 몇몇 구현예에서, 유용한 R2 기는 위치이성질체성 -C1-C10 알킬렌-(1,2,3-트리아졸)을 포함하고, 여기에서 상기 위치이성질체성 1,2,3-트리아졸은 비치환되거나 또는 알킬, 아미노알킬, 하이드록실알킬, 카복시알킬, 벤질 또는 페닐로 치환된다. 하기의 구현예에서, 1,2,3-트리아졸은 본원의 어딘가에 기재된 바와 같이, 말단 알킨과 아지드간의 클릭-화학 반응으로부터 유도되어 위치이성질체성 생성물을 생성시킨다. 하나의 구현예에서, R2는
Figure pct00119
이다. 하나의 구현예에서, R2는
Figure pct00120
이다. 하나의 구현예에서, R2는
Figure pct00121
이다. 하나의 구현예에서, R2는
Figure pct00122
이다. 하나의 구현예에서, R2는
Figure pct00123
이다. 하나의 구현예에서, R2는
Figure pct00124
이다. 하나의 구현예에서, R2는
Figure pct00125
이다. 하나의 구현예에서, R2는
Figure pct00126
이다. 하나의 구현예에서, R2는
Figure pct00127
이다. 하나의 구현예에서, R2는
Figure pct00128
이다. 본 단락의 구현예들 중 임의의 하나 이상에서, Y는 수소, 알킬, 아미노알킬, 하이드록실알킬, 카복시알킬, 벤질 또는 페닐이다. 하나의 구현예에서, Y는 수소이다. 하나의 구현예에서, Y는 알킬이다. 하나의 구현예에서, Y는 아미노알킬이다. 하나의 구현예에서, Y는 하이드록실알킬이다. 하나의 구현예에서, Y는 카복시알킬이다. 하나의 구현예에서, Y는 페닐이다. 상기 화학식 XIII의 몇몇 구현예에서, 유용한 R3 기는 -C(O)Me, -C(O)Et, -C(O)프로필, -C(O)부틸, 및 -C(O)펜틸을 포함한다. 하나의 구현예에서, R3은 -C(O)Me이다. 또 다른 구현예에서, R3은 -C(O)Et이다. 또 다른 구현예에서, R3은 -C(O)프로필 및 그의 구조 이성질체이다. 또 다른 구현예에서, R3은 -C(O)부틸 및 그의 구조 이성질체이다. 또 다른 구현예에서, R3은 -C(O)펜틸 및 그의 구조 이성질체이다. 상기 화학식 XIII의 몇몇 구현예에서, 유용한 R4 및 R5 기는 독립적으로, 메틸, 에틸, 프로필 및 그의 구조 이성질체, 부틸 및 그의 구조 이성질체, 및 펜틸 및 그의 구조 이성질체, 및 이들의 조합을 포함한다. 예를 들어, 하나의 구현예에서, R4 및 R5는 메틸이다. 또 다른 예로서, 하나의 구현예에서, R4 및 R5는 에틸이다. 또 다른 예로서, R4는 메틸이고 R5는 에틸이다. 본 단락내 구현예로서 R4 및 R5에 대한 다른 예시적인 조합 또는 변화가 본 명세서에서 고려된다.
몇몇 구현예에서, 본원은 하기 화학식 XVII의 구조를 갖는 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염을 제시한다:
[화학식 XVII]
Figure pct00129
몇몇 구현예에서, R2, R3, R4, R5 및 R60은 선행 단락에 기재된 바와 같다.
몇몇 구현예에서, 본원은 하기 화학식 XVIII 또는 화학식 XIX의 구조를 갖는 화합물을 제시한다:
[화학식 XVIII]
Figure pct00130
[화학식 XIX]
Figure pct00131
상기 식들에서,
R60은 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 치환된 아릴, 또는 치환된 헤테로아릴이다. 적합한 R60 알킬기는 R1에 대해 화학식 XIII의 상황에 기재된 것들, 예를 들어 메틸, 에틸 등을 포함한다. 적합한 R60 알케닐, 알키닐, 아릴 및 헤테로아릴은 본원의 다른 어딘가에 기재되어 있다. 적합한 R60 사이클로알킬 및 헤테로사이클로알킬은 화학식 XIII의 상황에 기재된 바와 같은, 부착된 탄소와 함께 R4 및 R5에 대해 기재된 것들을 포함한다. 몇몇 구현예에서, R10은 수소, 메틸, -CH2CH2NH2, -CH2CH2OH, -CH2COOH, -CH2CH2CH2COOH, 벤질 또는 페닐; 또는 그의 약학적으로 허용 가능한 염이다. 하나의 구현예에서, R10은 수소이다. 하나의 구현예에서, R10은 메틸이다. 하나의 구현예에서, R10은 -CH2CH2NH2이다. 하나의 구현예에서, R10은 -CH2CH2OH이다. 하나의 구현예에서, R10은 -CH2COOH이다. 하나의 구현예에서, R10은 -CH2CH2CH2COOH이다. 하나의 구현예에서, R10은 벤질이다. 하나의 구현예에서, R10은 페닐이다.
본 섹션의 임의의 선행 구현예에서, R7은 -NR7aR7b이고, 여기에서 R7a 및 R7b는 각각의 경우에 독립적으로, 수소, 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 아실 및 아미노산 잔기이고, 여기에서 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 및 아실은 임의로 치환된다. 몇몇 구현예에서, R7a는 수소이고 R7b는 아미노산 잔기이다.
화합물 또는 페이로드 - Q는 산소이다
몇몇 구현예에서, 본원은 하기 화학식 I의 구조를 갖는 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염 또는 전구약물을 제시한다:
화학식 I
Figure pct00132
상기 식에서, Q는 -O-이고; R2는 C1-C10 알킬이고; R7은 -OH 또는 NH2이다. 화학식 I에서, 몇몇 구현예에서, 유용한 R1 기는 메틸 및 에틸을 포함한다. 몇몇 구현에에서, 유용한 R1 기는 프로필, 부틸, 펜틸, 헥실, 헵틸, 옥틸, 노닐, 데실 및 이들의 구조 이성질체를 포함한다. 하나의 구현예에서, R1은 메틸이다. 하나의 구현예에서, R1은 에틸이다. 하나의 구현예에서, R1은 프로필, 및 그의 구조 이성질체이다. 하나의 구현예에서, R1은 부틸, 및 그의 구조 이성질체이다. 하나의 구현예에서, R1은 펜틸, 및 그의 구조 이성질체이다. 하나의 구현예에서, R1은 헥실 및 그의 구조 이성질체이다. 하나의 구현예에서, R1은 헵틸 및 그의 구조 이성질체이다. 하나의 구현예에서, R1은 옥틸 및 그의 구조 이성질체이다. 하나의 구현예에서, R1은 노닐 및 그의 구조 이성질체이다. 하나의 구현예에서, R1은 데실 및 그의 구조 이성질체이다. 화학식 I에서, 몇몇 구현예에서, 유용한 R2 기는 메틸, 에틸, n-프로필, n-부틸, n-펜틸, n-헥실, n-헵틸, n-옥틸, n-노닐 및 n-데실을 포함한다. 하나의 구현예에서, R2는 메틸이다. 하나의 구현예에서, R2는 에틸이다. 하나의 구현예에서, R2는 n-프로필, 또는 그의 구조 이성질체이다. 하나의 구현예에서, R2는 n-부틸, 또는 그의 구조 이성질체이다. 하나의 구현예에서, R2는 n-펜틸, 또는 그의 구조 이성질체이다. 또 다른 구현예에서, R2는 n-헥실, 또는 그의 구조 이성질체이다. 또 다른 구현예에서, R2는 n-헵틸, 또는 그의 구조 이성질체이다. 또 다른 구현예에서, R2는 n-옥틸, 또는 그의 구조 이성질체이다. 또 다른 구현예에서, R2는 n-노닐, 또는 그의 구조 이성질체이다. 또 다른 구현예에서, R2는 n-데실, 또는 그의 구조 이성질체이다. 몇몇 구현예에서, R3은 -C(O)C1-C5 알킬, -C(O)N(H)C1-C10 알킬, 또는 -(C1-C10 알킬렌)-NR3aR3b이고, 여기에서 R3a 및 R3b는 각각의 경우에 독립적으로, 수소, 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 및 아실이고, 여기에서 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴 및 아실은 임의로 치환된다. 상기 화학식 I의 몇몇 구현예에서, 유용한 R3 기는 -C(O)Me, -C(O)Et, -C(O)프로필, -C(O)부틸, 및 -C(O)펜틸, 및 이들의 구조 이성질체를 포함한다. 하나의 구현예에서, R3은 -C(O)Me이다. 또 다른 구현예에서, R3은 -C(O)Et이다. 또 다른 구현예에서, R3은 -C(O)프로필 및 그의 구조 이성질체이다. 또 다른 구현예에서, R3은 -C(O)부틸 및 그의 구조 이성질체이다. 또 다른 구현예에서, R3은 -C(O)펜틸 및 그의 구조 이성질체이다. 상기 화학식 I의 몇몇 구현예에서, 유용한 R3 기는 -C(O)N(H)Me, -C(O)N(H)Et, -C(O)N(H)프로필 및 그의 구조 이성질체, -C(O)N(H)부틸 및 그의 구조 이성질체, -C(O)N(H)펜틸 및 그의 구조 이성질체, -C(O)N(H)헥실 및 그의 구조 이성질체, -C(O)N(H)헵틸 및 그의 구조 이성질체, -C(O)N(H)옥틸 및 그의 구조 이성질체, -C(O)N(H)노닐 및 그의 구조 이성질체, -C(O)N(H)데실 및 그의 구조 이성질체를 포함한다. 상기 화학식 I의 하나의 구현예에서, R3은 -C(O)N(H)Me이다. 상기 화학식 I의 하나의 구현예에서, R3은 -C(O)N(H)Et이다. 상기 화학식 I의 하나의 구현예에서, R3은 -C(O)N(H)프로필, 및 그의 구조 이성질체이다. 상기 화학식 I의 하나의 구현예에서, R3은 -C(O)N(H)부틸, 및 그의 구조 이성질체이다. 상기 화학식 I의 하나의 구현예에서, R3은 -C(O)N(H)펜틸, 및 그의 구조 이성질체이다. 상기 화학식 I의 하나의 구현예에서, R3은 -C(O)N(H)헥실, 및 그의 구조 이성질체이다. 상기 화학식 I의 하나의 구현예에서, R3은 -C(O)N(H)헵틸, 및 그의 구조 이성질체이다. 상기 화학식 I의 하나의 구현예에서, R3은 -C(O)N(H)옥틸, 및 그의 구조 이성질체이다. 상기 화학식 I의 하나의 구현예에서, R3은 -C(O)N(H)노닐, 및 그의 구조 이성질체이다. 상기 화학식 I의 하나의 구현예에서, R3은 -C(O)N(H)데실, 및 그의 구조 이성질체이다. 상기 화학식 I의 몇몇 구현예에서, 유용한 R3 기는 -CH2-NR3aR3b, -CH2CH2-NR3aR3b, -CH2CH2CH2-NR3aR3b, -CH2CH2CH2CH2-NR3aR3b, -CH2CH2CH2CH2CH2-NR3aR3b, -CH2CH2CH2CH2CH2CH2-NR3aR3b, -CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2-NR3aR3b, -CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2-NR3aR3b, -CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2-NR3aR3b, 및 -CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2-NR3aR3b를 포함하고, 여기에서 R3a 및 R3b는 각각의 경우에 독립적으로, 수소, 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 및 아실이고, 여기에서 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴 및 아실은 임의로 치환된다. 상기 화학식 I의 하나의 구현예에서, R3은 -CH2-NR3aR3b이고, 여기에서 R3a 및 R3b는 각각의 경우에 독립적으로, 수소, 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 및 아실이고, 여기에서 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴 및 아실은 임의로 치환된다. 상기 화학식 I의 하나의 구현예에서, R3은 -CH2CH2-NR3aR3b이고, 여기에서 R3a 및 R3b는 각각의 경우에 독립적으로, 수소, 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 및 아실이고, 여기에서 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴 및 아실은 임의로 치환된다. 상기 화학식 I의 하나의 구현예에서, R3은 -CH2CH2CH2-NR3aR3b이고, 여기에서 R3a 및 R3b는 각각의 경우에 독립적으로, 수소, 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 및 아실이고, 여기에서 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴 및 아실은 임의로 치환된다. 상기 화학식 I의 하나의 구현예에서, R3은 -CH2CH2CH2CH2-NR3aR3b이고, 여기에서 R3a 및 R3b는 각각의 경우에 독립적으로, 수소, 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 및 아실이고, 여기에서 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴 및 아실은 임의로 치환된다. 상기 화학식 I의 하나의 구현예에서, R3은 -CH2CH2CH2CH2CH2-NR3aR3b이고, 여기에서 R3a 및 R3b는 각각의 경우에 독립적으로, 수소, 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 및 아실이고, 여기에서 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴 및 아실은 임의로 치환된다. 상기 화학식 I의 하나의 구현예에서, R3은 -CH2CH2CH2CH2CH2CH2-NR3aR3b이고, 여기에서 R3a 및 R3b는 각각의 경우에 독립적으로, 수소, 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 및 아실이고, 여기에서 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴 및 아실은 임의로 치환된다. 상기 화학식 I의 하나의 구현예에서, R3은 -CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2-NR3aR3b이고, 여기에서 R3a 및 R3b는 각각의 경우에 독립적으로, 수소, 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 및 아실이고, 여기에서 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴 및 아실은 임의로 치환된다. 상기 화학식 I의 하나의 구현예에서, R3은 -CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2-NR3aR3b이고, 여기에서 R3a 및 R3b는 각각의 경우에 독립적으로, 수소, 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 및 아실이고, 여기에서 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴 및 아실은 임의로 치환된다. 상기 화학식 I의 하나의 구현예에서, R3은 -CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2-NR3aR3b이고, 여기에서 R3a 및 R3b는 각각의 경우에 독립적으로, 수소, 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 및 아실이고, 여기에서 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴 및 아실은 임의로 치환된다. 상기 화학식 I의 하나의 구현예에서, R3은 -CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2-NR3aR3b이고, 여기에서 R3a 및 R3b는 각각의 경우에 독립적으로, 수소, 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 및 아실이고, 여기에서 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴 및 아실은 임의로 치환된다. 상기 화학식 I의 몇몇 구현예에서, 유용한 R4 기는 수소, 메틸, 에틸, 프로필, 부틸 및 펜틸, 및 이들의 구조 이성질체를 포함한다. 하나의 구현예에서, R4는 메틸이다. 또 다른 구현예에서, R4는 에틸이다. 또 다른 구현예에서, R4는 프로필, 및 그의 구조 이성질체이다. 또 다른 구현예에서, R4는 부틸, 및 그의 구조 이성질체이다. 또 다른 구현예에서, R4는 펜틸, 및 그의 구조 이성질체이다. 상기 화학식 I의 몇몇 구현예에서, 유용한 R5 기는 수소, 메틸, 에틸, 프로필, 부틸 및 펜틸, 및 이들의 구조 이성질체를 포함한다. 하나의 구현예에서, R5는 수소이다. 하나의 구현예에서, R5는 메틸이다. 또 다른 구현예에서, R5는 에틸이다. 또 다른 구현예에서, R5는 프로필, 및 그의 구조 이성질체이다. 또 다른 구현예에서, R5는 부틸, 및 그의 구조 이성질체이다. 또 다른 구현예에서, R5는 펜틸, 및 그의 구조 이성질체이다. 몇몇 구현예에서, R4 및 R5는 이들이 부착된 탄소와 함께 3-8원 사이클로알킬, 치환된 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 또는 치환된 헤테로사이클로알킬을 형성한다. 본 단락내 구현예로서 R4 및 R5에 대한 다른 예시적인 조합 또는 변화가 본 명세서에서 고려된다. 상기 화학식 I의 몇몇 구현예에서, R6은 -OH 또는 -NHNH2를 포함한다. 하나의 구현예에서, R6은 -OH이다. 또 다른 구현예에서, R6은 -NHNH2이다. 몇몇 구현예에서, R6은 -NHSO2R60이고, 여기에서 R60은 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 치환된 아릴, 또는 치환된 헤테로아릴이다. 상기 화학식 I에서, 하나의 구현예에서, R7은 -OH이다. 상기 화학식 I에서, 하나의 구현예에서, R7은 -NH2이다. 화학식 I에서, 상기 몇몇 구현예에서, R8은 수소, 중수소, -NHR9, 또는 할로겐을 포함한다. 상기 화학식 I의 몇몇 구현예에서, R9는 수소, -C1-C5 알킬, 또는 -C(O)C1-C5 알킬이다. 상기 화학식 I의 몇몇 구현예에서, m은 1 또는 2이다. 하나의 구현예에서, R8은 수소이다. 하나의 구현예에서, R8은 중수소이다. 몇몇 구현예에서, R8은 독립적으로 불소, 염소, 브롬 및 요오드를 포함한다. 하나의 구현예에서, R8은 불소이다. 또 다른 구현예에서, R8은 염소이다. 또 다른 구현예에서, R8은 브롬이다. 또 다른 구현예에서, R8은 요오드이다. 하나의 구현예에서, -NHR9는 -NH2이다. 하나의 구현예에서, -NHR9는 -NHMe, -NHEt, -NHCH2CH2CH3, -NHCH2CH2CH2CH3, 및 -NHCH2CH2CH2CH2CH3을 포함한다. 하나의 구현예에서, -NHR9는 -NHMe이다. 하나의 구현예에서, -NHR9는 -NHEt이다. 하나의 구현예에서, -NHR9는 -NHCH2CH2CH3이다. 하나의 구현예에서, -NHR9는 -NHCH2CH2CH2CH3이다. 하나의 구현예에서, -NHR9는 -NHCH2CH2CH2CH2CH3이다. 하나의 구현예에서, -NHR9는 -NHC(O)Me, -NHC(O)Et, -NHC(O)CH2CH2CH3, -NHC(O)CH2CH2CH2CH3, 및 -NHC(O)CH2CH2CH2CH2CH3을 포함한다. 하나의 구현예에서, -NHR9는 -NHC(O)Me이다. 하나의 구현예에서, -NHR9는 -NHC(O)Et이다. 하나의 구현예에서, -NHR9는 -NHC(O)CH2CH2CH3이다. 하나의 구현예에서, -NHR9는 -NHC(O)CH2CH2CH2CH3이다. 하나의 구현예에서, -NHR9는 -NHC(O)CH2CH2CH2CH2CH3이다. 하나의 구현예에서, m은 1이다. 하나의 구현예에서, m은 2이다.
몇몇 구현예에서, 본원은 하기 화학식 VIII의 구조를 갖는 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염을 제시한다:
[화학식 VIII]
Figure pct00133
몇몇 구현예에서, R2, R3, R4, R5, R6, 및 R7은 선행 단락에 기재된 바와 같다. 화학식 VIII의 하나의 구현예에서, R3은 -C(O)Me이고, R2, R4, R5, R6, 및 R7은 선행 단락에 기재된 바와 같다. 화학식 VIII의 하나의 구현예에서, R3은 -C(O)N(H)C1-C10 알킬이고, R2, R4, R5, R6, 및 R7은 선행 단락에 기재된 바와 같다.
몇몇 구현예에서, 본원은 R3이 -C(O)N(H)C1-C10 알킬이고; R4가 수소이고; R5가 C1-C5 알킬이고; R6 및 R7이 -OH인 화학식 I의 구조를 갖는 화합물, 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염 또는 전구약물을 제시한다. 몇몇 구현예에서, R2는 상기 화학식 I에 기재된 바와 같다. 상기 화학식 I의 몇몇 구현예에서, 유용한 R3 기는 -C(O)N(H)Me, -C(O)N(H)Et, -C(O)N(H)프로필 및 그의 구조 이성질체, -C(O)N(H)부틸 및 그의 구조 이성질체, -C(O)N(H)펜틸 및 그의 구조 이성질체, -C(O)N(H)헥실 및 그의 구조 이성질체, -C(O)N(H)헵틸 및 그의 구조 이성질체, -C(O)N(H)옥틸 및 그의 구조 이성질체, -C(O)N(H)노닐 및 그의 구조 이성질체, -C(O)N(H)데실 및 그의 구조 이성질체를 포함한다. 상기 화학식 I의 하나의 구현예에서, R3은 -C(O)N(H)Me이다. 상기 화학식 I의 하나의 구현예에서, R3은 -C(O)N(H)Et이다. 상기 화학식 I의 하나의 구현예에서, R3은 -C(O)N(H)프로필, 및 그의 구조 이성질체이다. 상기 화학식 I의 하나의 구현예에서, R3은 -C(O)N(H)부틸, 및 그의 구조 이성질체이다. 상기 화학식 I의 하나의 구현예에서, R3은 -C(O)N(H)펜틸, 및 그의 구조 이성질체이다. 상기 화학식 I의 하나의 구현예에서, R3은 -C(O)N(H)헥실, 및 그의 구조 이성질체이다. 상기 화학식 I의 하나의 구현예에서, R3은 -C(O)N(H)헵틸, 및 그의 구조 이성질체이다. 상기 화학식 I의 하나의 구현예에서, R3은 -C(O)N(H)옥틸, 및 그의 구조 이성질체이다. 상기 화학식 I의 하나의 구현예에서, R3은 -C(O)N(H)노닐, 및 그의 구조 이성질체이다. 상기 화학식 I의 하나의 구현예에서, R3은 -C(O)N(H)데실, 및 그의 구조 이성질체이다. 하나의 구현예에서, R5는 메틸이다. 또 다른 구현예에서, R5는 에틸이다. 또 다른 구현예에서, R5는 프로필, 및 그의 구조 이성질체이다. 또 다른 구현예에서, R5는 부틸, 및 그의 구조 이성질체이다. 또 다른 구현예에서, R5는 펜틸, 및 그의 구조 이성질체이다.
몇몇 구현예에서, 본원은 하기 화학식 IX의 구조를 갖는 화합물, 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염을 제시한다:
[화학식 IX]
Figure pct00134
상기 식에서, R11은 C1-C10 알킬이다. 하나의 구현예에서, R11은 메틸이다. 하나의 구현예에서, R11은 에틸이다. 하나의 구현예에서, R11은 프로필, 및 그의 구조 이성질체이다. 하나의 구현예에서, R11은 부틸, 및 그의 구조 이성질체이다. 하나의 구현예에서, R11은 펜틸, 및 그의 구조 이성질체이다. 하나의 구현예에서, R11은 헥실, 및 그의 구조 이성질체이다. 하나의 구현예에서, R11은 헵틸, 및 그의 구조 이성질체이다. 하나의 구현예에서, R11은 옥틸, 및 그의 구조 이성질체이다. 하나의 구현예에서, R11은 노닐, 및 그의 구조 이성질체이다. 하나의 구현예에서, R11은 데실, 및 그의 구조 이성질체이다.
몇몇 구현예에서, 본원은 Q가 -O-이고; R2가 C1-C10 알키닐이고; R3이 -C(O)C1-C5 알킬이고; R6이 -OH인 화학식 I의 구조를 갖는 화합물, 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염 또는 전구약물을 제시한다. 몇몇 구현예에서, R1, R4, R5, R7, 및 R8은 상기 화학식 I에서 기재한 바와 같다. 화학식 I의 하나의 구현예에서, R2는 -CH2CCH이다. 화학식 I의 하나의 구현예에서, R2는 -CH2CH2CCH이다. 화학식 I의 하나의 구현예에서, R2는 -CH2CH2CH2CCH이다. 화학식 I의 하나의 구현예에서, R2는 -CH2CH2CH2CH2CCH이다. 화학식 I의 하나의 구현예에서, R2는 -CH2CH2CH2CH2CH2CCH이다. 화학식 I의 하나의 구현예에서, R2는 -CH2CH2CH2CH2CH2CH2CCH이다. 화학식 I의 하나의 구현예에서, R2는 -CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CCH이다. 화학식 I의 하나의 구현예에서, R2는 -CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CCH이다. 화학식 I의 하나의 구현예에서, R2는 -CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CCH이다. 화학식 I의 하나의 구현예에서, R2는 -CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CCH이다. 하나의 구현예에서, R3은 -C(O)Me이다. 또 다른 구현예에서, R3은 -C(O)Et이다. 또 다른 구현예에서, R3은 -C(O)프로필, 및 그의 구조 이성질체이다. 또 다른 구현예에서, R3은 -C(O)부틸, 및 그의 구조 이성질체이다. 또 다른 구현예에서, R3은 -C(O)펜틸, 및 그의 구조 이성질체이다.
몇몇 구현예에서, 본원은 하기 화학식 X의 구조를 갖는 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염을 제시한다:
[화학식 X]
Figure pct00135
몇몇 구현예에서, R2, R3, R4, R5 및 R7은 선행 단락에 기재된 바와 같다.
몇몇 구현예에서, 본원은 Q가 -O-이고; R2가 C1-C10 알키닐이고; R3이 -C(O)N(H)C1-C10 알킬이고; R6이 -OH인 화학식 I의 구조를 갖는 화합물, 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염 또는 전구약물을 제시한다. 몇몇 구현예에서, R1, R4, R5, R7, 및 R8은 상기 화학식 I에서 기재한 바와 같다. 화학식 I의 하나의 구현예에서, R2는 -CH2CCH이다. 화학식 I의 하나의 구현예에서, R2는 -CH2CH2CCH이다. 화학식 I의 하나의 구현예에서, R2는 -CH2CH2CH2CCH이다. 화학식 I의 하나의 구현예에서, R2는 -CH2CH2CH2CH2CCH이다. 화학식 I의 하나의 구현예에서, R2는 -CH2CH2CH2CH2CH2CCH이다. 화학식 I의 하나의 구현예에서, R2는 -CH2CH2CH2CH2CH2CH2CCH이다. 화학식 I의 하나의 구현예에서, R2는 -CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CCH이다. 화학식 I의 하나의 구현예에서, R2는 -CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CCH이다. 화학식 I의 하나의 구현예에서, R2는 -CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CCH이다. 화학식 I의 하나의 구현예에서, R2는 -CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CCH이다. 상기 화학식 I의 하나의 구현예에서, R3은 -C(O)N(H)Me이다. 상기 화학식 I의 하나의 구현예에서, R3은 -C(O)N(H)Et이다. 상기 화학식 I의 하나의 구현예에서, R3은 -C(O)N(H)프로필, 및 그의 구조 이성질체이다. 상기 화학식 I의 하나의 구현예에서, R3은 -C(O)N(H)부틸, 및 그의 구조 이성질체이다. 상기 화학식 I의 하나의 구현예에서, R3은 -C(O)N(H)펜틸, 및 그의 구조 이성질체이다. 상기 화학식 I의 하나의 구현예에서, R3은 -C(O)N(H)헥실, 및 그의 구조 이성질체이다. 상기 화학식 I의 하나의 구현예에서, R3은 -C(O)N(H)헵틸, 및 그의 구조 이성질체이다. 상기 화학식 I의 하나의 구현예에서, R3은 -C(O)N(H)옥틸, 및 그의 구조 이성질체이다. 상기 화학식 I의 하나의 구현예에서, R3은 -C(O)N(H)노닐, 및 그의 구조 이성질체이다. 상기 화학식 I의 하나의 구현예에서, R3은 -C(O)N(H)데실, 및 그의 구조 이성질체이다.
몇몇 구현예에서, 본원은 하기 화학식 XI의 구조를 갖는 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염을 제시한다:
[화학식 XI]
Figure pct00136
몇몇 구현예에서, R2, R4, R5 및 R8은 선행 단락에 기재된 바와 같다.
몇몇 구현예에서, 본원은 Q가 -O-이고; R2가 C1-C3 알킬렌-Q1-(CH2)n아릴; 또는 C1-C3 하이드록시알킬이고; R3이 -C(O)C1-C5 알킬이고; R4가 수소이고; R5가 C1-C5 알킬이고; R6 및 R7이 -OH인 화학식 I의 구조를 갖는 화합물, 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염 또는 전구약물을 제시한다. 몇몇 구현예에서, R1 및 R8은 상기 화학식 I에서 기재한 바와 같다. 몇몇 구현예에서, R2는 C1-C3 알킬렌-Q1-(CH2)n아릴이고, Q1은 -CH2-이다. 상응하게, 하나의 구현예에서, R2는 -CH2CH2(CH2)n아릴이고, 여기에서 아릴은 비치환되거나 또는 니트로 또는 아미노로 치환되고, n은 1 내지 5의 정수이다. 하나의 구현예에서, R2는 -CH2CH2(CH2)n페닐이고, n은 1, 2, 3, 4, 또는 5이다. 하나의 구현예에서, R2는 -CH2CH2(CH2)n p-니트로페닐이고, n은 1, 2, 3, 4, 또는 5이다. 하나의 구현예에서, R2는 -CH2CH2(CH2)n p-아미노페닐이고, n은 1, 2, 3, 4, 또는 5이다. R2는 -CH2CH2CH2(CH2)n아릴이고, 여기에서 아릴은 비치환되거나 또는 니트로 또는 아미노로 치환되고, n은 1 내지 5의 정수이다. 하나의 구현예에서, R2는 -CH2CH2CH2(CH2)n페닐이고, n은 1, 2, 3, 4, 또는 5이다. 하나의 구현예에서, R2는 -CH2CH2CH2(CH2)n p-니트로페닐이고, n은 1, 2, 3, 4, 또는 5이다. 하나의 구현예에서, R2는 -CH2CH2CH2(CH2)n p-아미노페닐이고, n은 1, 2, 3, 4, 또는 5이다. 하나의 구현예에서, R2는 -CH2CH2CH2CH2(CH2)n아릴이고, 여기에서 아릴은 비치환되거나 또는 니트로 또는 아미노로 치환되고, n은 1 내지 5의 정수이다. 하나의 구현예에서, R2는
-CH2CH2CH2CH2(CH2)n페닐이고, n은 1, 2, 3, 4, 또는 5이다. 하나의 구현예에서, R2는
-CH2CH2CH2CH2(CH2)n p-니트로페닐이고, n은 1, 2, 3, 4, 또는 5이다. 하나의 구현예에서, R2는 -CH2CH2CH2CH2(CH2)n p-아미노페닐이고, n은 1, 2, 3, 4, 또는 5이다. 몇몇 구현예에서, R2는 C1-C3 알킬렌-Q1-(CH2)n아릴이고, Q1은 -O-이다. 상응하게, 하나의 구현예에서, R2는 -CH2O-(CH2)n아릴이고, 여기에서 아릴은 비치환되거나 또는 니트로 또는 아미노로 치환되고, n은 1 내지 5의 정수이다. 하나의 구현예에서, R2는 -CH2O-(CH2)n페닐이고, n은 1, 2, 3, 4, 또는 5이다. 하나의 구현예에서, R2는 -CH2O-(CH2)n p-니트로페닐이고, n은 1, 2, 3, 4, 또는 5이다. 하나의 구현예에서, R2는 -CH2O-(CH2)n p-아미노페닐이고, n은 1, 2, 3, 4, 또는 5이다. 하나의 구현예에서, R2는 -CH2CH2O-(CH2)n아릴이고, 여기에서 아릴은 비치환되거나 또는 니트로 또는 아미노로 치환되고, n은 1 내지 5의 정수이다. 하나의 구현예에서, R2는 -CH2CH2O-(CH2)n페닐이고, n은 1, 2, 3, 4, 또는 5이다. 하나의 구현예에서, R2는 -CH2CH2O-(CH2)n p-니트로페닐이고, n은 1, 2, 3, 4, 또는 5이다. 하나의 구현예에서, R2는 -CH2CH2O-(CH2)n p-아미노페닐이고, n은 1, 2, 3, 4, 또는 5이다. 하나의 구현예에서, R2는 -CH2CH2CH2O-(CH2)n아릴이고, 여기에서 아릴은 비치환되거나 또는 니트로 또는 아미노로 치환되고, n은 1 내지 5의 정수이다. 하나의 구현예에서, R2는 -CH2CH2CH2O-(CH2)n페닐이고, n은 1, 2, 3, 4, 또는 5이다. 하나의 구현예에서, R2는
-CH2CH2CH2O-(CH2)n p-니트로페닐이고, n은 1, 2, 3, 4, 또는 5이다. 하나의 구현예에서, R2는 -CH2CH2CH2O-(CH2)n p-아미노페닐이고, n은 1, 2, 3, 4, 또는 5이다. 하나의 구현예에서, R2는 -CH2OH이다. 하나의 구현예에서, R2는 -CH2CH2OH이다. 하나의 구현예에서, R2는 -CH2CH2CH2OH이다. 상기 화학식 I의 몇몇 구현예에서, 유용한 R3 기는 -C(O)Me, -C(O)Et, -C(O)프로필, -C(O)부틸, 및 -C(O)펜틸, 및 이들의 구조 이성질체를 포함한다. 하나의 구현예에서, R3은 -C(O)Me이다. 또 다른 구현예에서, R3은 -C(O)Et이다. 또 다른 구현예에서, R3은 -C(O)프로필 및 그의 구조 이성질체이다. 또 다른 구현예에서, R3은 -C(O)부틸 및 그의 구조 이성질체이다. 또 다른 구현예에서, R3은 -C(O)펜틸 및 그의 구조 이성질체이다. 상기 화학식 I의 몇몇 구현예에서, 유용한 R5 기는 메틸, 에틸, 프로필, 부틸 및 펜틸, 및 이들의 구조 이성질체를 포함한다. 하나의 구현예에서, R5는 메틸이다. 또 다른 구현예에서, R5는 에틸이다. 또 다른 구현예에서, R5는 프로필, 및 그의 구조 이성질체이다. 또 다른 구현예에서, R5는 부틸, 및 그의 구조 이성질체이다. 또 다른 구현예에서, R5는 펜틸, 및 그의 구조 이성질체이다.
몇몇 구현예에서, 본원은 하기 화학식 XII의 구조를 갖는 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염을 제시한다:
[화학식 XII]
Figure pct00137
몇몇 구현예에서, R2 및 R3은 선행 단락에 기재된 바와 같다. 화학식 II의 하나의 구현예에서, R2는 선행 단락에 기재된 바와 같은 C1-C3 알킬렌-O-(CH2)n아릴이다. 화학식 XII의 하나의 구현예에서, R2는 선행 단락에 기재된 바와 같은 C1-C3 하이드록시알킬이다.
몇몇 구현예에서, 본원은 하기로 이루어지는 그룹 중에서 선택될 수 있는 화학식 I, VIII, IX, X, XI 또는 XII 중 어느 하나에 따른 화합물; 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염을 제공한다:
Figure pct00138
Figure pct00139
Figure pct00140
;
Figure pct00141
Figure pct00142
Figure pct00143
Figure pct00144
Figure pct00145
몇몇 구현예에서, 본원은 하기 화학식 XIII의 구조를 갖는 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염 또는 전구약물을 제시한다:
화학식 XIII
Figure pct00146
상기 식에서, Q는 -O-이고; R2는 C1-C10 알킬이고; R7은 -OH 또는 -NH2이다. 화학식 XIII에서, 몇몇 구현예에서, 유용한 R1 기는 메틸 및 에틸을 포함한다. 몇몇 구현에에서, 유용한 R1 기는 프로필, 부틸, 펜틸, 헥실, 헵틸, 옥틸, 노닐, 데실 및 이들의 구조 이성질체를 포함한다. 하나의 구현예에서, R1은 메틸이다. 하나의 구현예에서, R1은 에틸이다. 하나의 구현예에서, R1은 프로필, 및 그의 구조 이성질체이다. 하나의 구현예에서, R1은 부틸, 및 그의 구조 이성질체이다. 하나의 구현예에서, R1은 펜틸, 및 그의 구조 이성질체이다. 하나의 구현예에서, R1은 헥실 및 그의 구조 이성질체이다. 하나의 구현예에서, R1은 헵틸 및 그의 구조 이성질체이다. 하나의 구현예에서, R1은 옥틸 및 그의 구조 이성질체이다. 하나의 구현예에서, R1은 노닐 및 그의 구조 이성질체이다. 하나의 구현예에서, R1은 데실 및 그의 구조 이성질체이다. 화학식 XIII에서, 상기 몇몇 구현예에서, 유용한 R2 기는 메틸, 에틸, n-프로필, n-부틸, n-펜틸, n-헥실, n-헵틸, n-옥틸, n-노닐 및 n-데실을 포함한다. 하나의 구현예에서, R2는 메틸이다. 또 다른 구현예에서, R2는 에틸이다. 또 다른 구현예에서, R2는 n-프로필, 또는 그의 구조 이성질체이다. 또 다른 구현예에서, R2는 n-부틸, 또는 그의 구조 이성질체이다. 또 다른 구현예에서, R2는 n-펜틸, 또는 그의 구조 이성질체이다. 또 다른 구현예에서, R2는 n-헥실, 또는 그의 구조 이성질체이다. 또 다른 구현예에서, R2는 n-헵틸, 또는 그의 구조 이성질체이다. 또 다른 구현예에서, R2는 n-옥틸, 또는 그의 구조 이성질체이다. 또 다른 구현예에서, R2는 n-노닐, 또는 그의 구조 이성질체이다. 또 다른 구현예에서, R2는 n-데실, 또는 그의 구조 이성질체이다. 몇몇 구현예에서, R3은 -C(O)C1-C5 알킬, -C(O)N(H)C1-C10 알킬, 또는 -(C1-C10 알킬렌)-NR3aR3b이고, 여기에서 R3a 및 R3b는 각각의 경우에 독립적으로, 수소, 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 및 아실이고, 여기에서 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴 및 아실은 임의로 치환된다. 상기 화학식 XIII의 몇몇 구현예에서, 유용한 R3 기는 -C(O)Me, -C(O)Et, -C(O)프로필, -C(O)부틸, 및 -C(O)펜틸, 및 이들의 구조 이성질체를 포함한다. 하나의 구현예에서, R3은 -C(O)Me이다. 또 다른 구현예에서, R3은 -C(O)Et이다. 또 다른 구현예에서, R3은 -C(O)프로필 및 그의 구조 이성질체이다. 또 다른 구현예에서, R3은 -C(O)부틸 및 그의 구조 이성질체이다. 또 다른 구현예에서, R3은 -C(O)펜틸 및 그의 구조 이성질체이다. 상기 화학식 I의 몇몇 구현예에서, 유용한 R3 기는 -C(O)N(H)Me, -C(O)N(H)Et, -C(O)N(H)프로필 및 그의 구조 이성질체, -C(O)N(H)부틸 및 그의 구조 이성질체, -C(O)N(H)펜틸 및 그의 구조 이성질체, -C(O)N(H)헥실 및 그의 구조 이성질체, -C(O)N(H)헵틸 및 그의 구조 이성질체, -C(O)N(H)옥틸 및 그의 구조 이성질체, -C(O)N(H)노닐 및 그의 구조 이성질체, -C(O)N(H)데실 및 그의 구조 이성질체를 포함한다. 상기 화학식 XIII의 하나의 구현예에서, R3은 -C(O)N(H)Me이다. 상기 화학식 XIII의 하나의 구현예에서, R3은 -C(O)N(H)Et이다. 상기 화학식 XIII의 하나의 구현예에서, R3은 -C(O)N(H)프로필, 및 그의 구조 이성질체이다. 상기 화학식 XIII의 하나의 구현예에서, R3은 -C(O)N(H)부틸, 및 그의 구조 이성질체이다. 상기 화학식 XIII의 하나의 구현예에서, R3은 -C(O)N(H)펜틸, 및 그의 구조 이성질체이다. 상기 화학식 XIII의 하나의 구현예에서, R3은 -C(O)N(H)헥실, 및 그의 구조 이성질체이다. 상기 화학식 XIII의 하나의 구현예에서, R3은 -C(O)N(H)헵틸, 및 그의 구조 이성질체이다. 상기 화학식 XIII의 하나의 구현예에서, R3은 -C(O)N(H)옥틸, 및 그의 구조 이성질체이다. 상기 화학식 XIII의 하나의 구현예에서, R3은 -C(O)N(H)노닐, 및 그의 구조 이성질체이다. 상기 화학식 XIII의 하나의 구현예에서, R3은 -C(O)N(H)데실, 및 그의 구조 이성질체이다. 상기 화학식 XIII의 몇몇 구현예에서, 유용한 R3 기는 -CH2-NR3aR3b, -CH2CH2-NR3aR3b, -CH2CH2CH2-NR3aR3b, -CH2CH2CH2CH2-NR3aR3b, -CH2CH2CH2CH2CH2-NR3aR3b, -CH2CH2CH2CH2CH2CH2-NR3aR3b, -CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2-NR3aR3b, -CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2-NR3aR3b, -CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2-NR3aR3b, 및 -CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2-NR3aR3b를 포함하고, 여기에서 R3a 및 R3b는 각각의 경우에 독립적으로, 수소, 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 및 아실이고, 여기에서 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴 및 아실은 임의로 치환된다. 상기 화학식 XIII의 하나의 구현예에서, R3은 -CH2-NR3aR3b이고, 여기에서 R3a 및 R3b는 각각의 경우에 독립적으로, 수소, 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 및 아실이고, 여기에서 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴 및 아실은 임의로 치환된다. 상기 화학식 XIII의 하나의 구현예에서, R3은 -CH2CH2-NR3aR3b이고, 여기에서 R3a 및 R3b는 각각의 경우에 독립적으로, 수소, 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 및 아실이고, 여기에서 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴 및 아실은 임의로 치환된다. 상기 화학식 XIII의 하나의 구현예에서, R3은 -CH2CH2CH2-NR3aR3b이고, 여기에서 R3a 및 R3b는 각각의 경우에 독립적으로, 수소, 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 및 아실이고, 여기에서 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴 및 아실은 임의로 치환된다. 상기 화학식 XIII의 하나의 구현예에서, R3은 -CH2CH2CH2CH2-NR3aR3b이고, 여기에서 R3a 및 R3b는 각각의 경우에 독립적으로, 수소, 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 및 아실이고, 여기에서 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴 및 아실은 임의로 치환된다. 상기 화학식 XIII의 하나의 구현예에서, R3은 -CH2CH2CH2CH2CH2-NR3aR3b이고, 여기에서 R3a 및 R3b는 각각의 경우에 독립적으로, 수소, 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 및 아실이고, 여기에서 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴 및 아실은 임의로 치환된다. 상기 화학식 XIII의 하나의 구현예에서, R3은 -CH2CH2CH2CH2CH2CH2-NR3aR3b이고, 여기에서 R3a 및 R3b는 각각의 경우에 독립적으로, 수소, 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 및 아실이고, 여기에서 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴 및 아실은 임의로 치환된다. 상기 화학식 XIII의 하나의 구현예에서, R3은 -CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2-NR3aR3b이고, 여기에서 R3a 및 R3b는 각각의 경우에 독립적으로, 수소, 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 및 아실이고, 여기에서 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴 및 아실은 임의로 치환된다. 상기 화학식 XIII의 하나의 구현예에서, R3은 -CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2-NR3aR3b이고, 여기에서 R3a 및 R3b는 각각의 경우에 독립적으로, 수소, 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 및 아실이고, 여기에서 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴 및 아실은 임의로 치환된다. 상기 화학식 XIII의 하나의 구현예에서, R3은 -CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2-NR3aR3b이고, 여기에서 R3a 및 R3b는 각각의 경우에 독립적으로, 수소, 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 및 아실이고, 여기에서 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴 및 아실은 임의로 치환된다. 상기 화학식 XIII의 하나의 구현예에서, R3은 및 -CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2-NR3aR3b이고, 여기에서 R3a 및 R3b는 각각의 경우에 독립적으로, 수소, 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 및 아실이고, 여기에서 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴 및 아실은 임의로 치환된다. 상기 화학식 XIII의 몇몇 구현예에서, 유용한 R4 기는 수소, 메틸, 에틸, 프로필, 부틸 및 펜틸, 및 이들의 구조 이성질체를 포함한다. 하나의 구현예에서, R4는 수소이다. 하나의 구현예에서, R4는 메틸이다. 또 다른 구현예에서, R4는 에틸이다. 또 다른 구현예에서, R4는 프로필, 및 그의 구조 이성질체이다. 또 다른 구현예에서, R4는 부틸, 및 그의 구조 이성질체이다. 또 다른 구현예에서, R4는 펜틸, 및 그의 구조 이성질체이다. 상기 화학식 XIII의 몇몇 구현예에서, 유용한 R5 기는 수소, 메틸, 에틸, 프로필, 부틸 및 펜틸, 및 이들의 구조 이성질체를 포함한다. 하나의 구현예에서, R5는 수소이다. 하나의 구현예에서, R5는 메틸이다. 또 다른 구현예에서, R5는 에틸이다. 또 다른 구현예에서, R5는 프로필, 및 그의 구조 이성질체이다. 또 다른 구현예에서, R5는 부틸, 및 그의 구조 이성질체이다. 또 다른 구현예에서, R5는 펜틸, 및 그의 구조 이성질체이다. 하나의 구현예에서, R4 및 R5는 메틸이다. 몇몇 구현예에서, R4 및 R5는 이들이 부착된 탄소와 함께 3-8원 사이클로알킬, 치환된 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 또는 치환된 헤테로사이클로알킬을 형성한다. 본 단락내 구현예로서 R4 및 R5에 대한 다른 예시적인 조합 또는 변화가 본 명세서에서 고려된다. 하나의 구현예에서, R4 및 R5는 이들이 부착된 탄소와 함께 사이클로프로필 또는 치환된 사이클로프로필이다. 하나의 구현예에서, R4 및 R5는 이들이 부착된 탄소와 함께 사이클로부틸 또는 치환된 사이클로부틸이다. 하나의 구현예에서, R4 및 R5는 이들이 부착된 탄소와 함께 사이클로펜틸 또는 치환된 사이클로펜틸이다. 하나의 구현예에서, R4 및 R5는 이들이 부착된 탄소와 함께 사이클로헥실 또는 치환된 사이클로헥실이다. 하나의 구현예에서, R4 및 R5는 이들이 부착된 탄소와 함께 사이클로헵틸 또는 치환된 사이클로헵틸이다. 하나의 구현예에서, R4 및 R5는 이들이 부착된 탄소와 함께 사이클로옥틸 또는 치환된 사이클로옥틸이다. 하나의 구현예에서, R4 및 R5는 이들이 부착된 탄소와 함께 사이클로프로필이며, 이때 상기 사이클로프로필 중 하나의 메틸렌 탄소는 Z로 교체되고, 이때 Z는 산소, 질소 또는 황이다. 하나의 구현예에서, R4 및 R5는 이들이 부착된 탄소와 함께 사이클로부틸이며, 이때 상기 사이클로부틸 중 하나의 메틸렌 탄소는 Z로 교체되고, 이때 Z는 산소, 질소 또는 황이다. 하나의 구현예에서, R4 및 R5는 이들이 부착된 탄소와 함께 사이클로펜틸이며, 이때 상기 사이클로펜틸 중 하나 이상의 메틸렌 탄소는 Z로 교체되고, 이때 Z는 산소, 질소 또는 황이다. 하나의 구현예에서, R4 및 R5는 이들이 부착된 탄소와 함께 사이클로헥실이며, 이때 상기 사이클로헥실 중 하나 이상의 메틸렌 탄소는 Z로 교체되고, 이때 Z는 산소, 질소 또는 황이다. 하나의 구현예에서, R4 및 R5는 이들이 부착된 탄소와 함께 사이클로헵틸이며, 이때 상기 사이클로헵틸 중 하나 이상의 메틸렌 탄소는 Z로 교체되고, 이때 Z는 산소, 질소 또는 황이다. 하나의 구현예에서, R4 및 R5는 이들이 부착된 탄소와 함께 사이클로옥틸이며, 이때 상기 사이클로옥틸 중 하나 이상의 메틸렌 탄소는 Z로 교체되고, 이때 Z는 산소, 질소 또는 황이다. 상기 화학식 XIII의 몇몇 구현예에서, R60은 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 치환된 아릴, 또는 치환된 헤테로아릴이다. 적합한 R60 알킬기는 R1에 대해 본 단락에 기재된 것들, 예를 들어 메틸, 에틸 등을 포함한다. 적합한 R60 알케닐, 알키닐, 아릴 및 헤테로아릴은 본원의 다른 어딘가에 기재되어 있다. 적합한 R60 사이클로알킬 및 헤테로사이클로알킬은 본 단락에 기재된 바와 같은, 부착된 탄소와 함께 R4 및 R5에 대해 기재된 것들을 포함한다. 상기 화학식 XIII에서, 하나의 구현예에서, R7은 -OH이다. 상기 화학식 XIII에서, 하나의 구현예에서, R7은 -NH2이다. 화학식 XIII에서, 상기 몇몇 구현예에서, R8은 수소, 중수소, -NHR9, 또는 할로겐을 포함한다. 상기 화학식 XIII의 몇몇 구현예에서, R9는 수소, -C1-C5 알킬, 또는 -C(O)C1-C5 알킬이다. 상기 화학식 XIII의 몇몇 구현예에서, m은 1 또는 2이다. 하나의 구현예에서, R8은 수소이다. 하나의 구현예에서, R8은 중수소이다. 몇몇 구현예에서, R8은 독립적으로 불소, 염소, 브롬 및 요오드를 포함한다. 하나의 구현예에서, R8은 불소이다. 또 다른 구현예에서, R8은 염소이다. 또 다른 구현예에서, R8은 브롬이다. 또 다른 구현예에서, R8은 요오드이다. 하나의 구현예에서, -NHR9는 -NH2이다. 하나의 구현예에서, -NHR9는 -NHMe, -NHEt, -NHCH2CH2CH3, -NHCH2CH2CH2CH3, 및 -NHCH2CH2CH2CH2CH3을 포함한다. 하나의 구현예에서, -NHR9는 -NHMe이다. 하나의 구현예에서, -NHR9는 -NHEt이다. 하나의 구현예에서, -NHR9는 -NHCH2CH2CH3이다. 하나의 구현예에서, -NHR9는 -NHCH2CH2CH2CH3이다. 하나의 구현예에서, -NHR9는 -NHCH2CH2CH2CH2CH3이다. 하나의 구현예에서, -NHR9는 -NHC(O)Me, -NHC(O)Et, -NHC(O)CH2CH2CH3, -NHC(O)CH2CH2CH2CH3, 및 -NHC(O)CH2CH2CH2CH2CH3을 포함한다. 하나의 구현예에서, -NHR9는 -NHC(O)Me이다. 하나의 구현예에서, -NHR9는 -NHC(O)Et이다. 하나의 구현예에서, -NHR9는 -NHC(O)CH2CH2CH3이다. 하나의 구현예에서, -NHR9는 -NHC(O)CH2CH2CH2CH3이다. 하나의 구현예에서, -NHR9는 -NHC(O)CH2CH2CH2CH2CH3이다. 하나의 구현예에서, m은 1이다. 하나의 구현예에서, m은 2이다.
몇몇 구현예에서, 본원은 하기 화학식 XX의 구조를 갖는 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염을 제시한다:
[화학식 XX]
Figure pct00147
몇몇 구현예에서, R2, R3, R4, R5, R7, 및 R60은 선행 단락에 기재된 바와 같다. 화학식 VIII의 하나의 구현예에서, R3은 -C(O)Me이고, R2, R4, R5, R7, 및 R60은 선행 단락에 기재된 바와 같다. 화학식 VIII의 하나의 구현예에서, R3은 -C(O)N(H)C1-C10 알킬이고, R2, R4, R5, R7, 및 R60은 선행 단락에 기재된 바와 같다.
몇몇 구현예에서, 본원은 R3이 -C(O)N(H)C1-C10 알킬이고; R4가 수소 또는 C1-C5 알킬이고; R5가 C1-C5 알킬이고; R7이 -OH이고; R60이 화학식 XIII의 상황에서 기재된 바와 같은 화학식 XIII의 구조를 갖는 화합물, 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염 또는 전구약물을 제시한다. 몇몇 구현예에서, R2는 상기 화학식 XIII에 기재된 바와 같다. 상기 화학식 XIII의 몇몇 구현예에서, 유용한 R3 기는 -C(O)N(H)Me, -C(O)N(H)Et, -C(O)N(H)프로필 및 그의 구조 이성질체, -C(O)N(H)부틸 및 그의 구조 이성질체, -C(O)N(H)펜틸 및 그의 구조 이성질체, -C(O)N(H)헥실 및 그의 구조 이성질체, -C(O)N(H)헵틸 및 그의 구조 이성질체, -C(O)N(H)옥틸 및 그의 구조 이성질체, -C(O)N(H)노닐 및 그의 구조 이성질체, -C(O)N(H)데실 및 그의 구조 이성질체를 포함한다. 상기 화학식 XIII의 하나의 구현예에서, R3은 -C(O)N(H)Me이다. 상기 화학식 XIII의 하나의 구현예에서, R3은 -C(O)N(H)Et이다. 상기 화학식 XIII의 하나의 구현예에서, R3은 -C(O)N(H)프로필, 및 그의 구조 이성질체이다. 상기 화학식 XIII의 하나의 구현예에서, R3은 -C(O)N(H)부틸, 및 그의 구조 이성질체이다. 상기 화학식 XIII의 하나의 구현예에서, R3은 -C(O)N(H)펜틸, 및 그의 구조 이성질체이다. 상기 화학식 XIII의 하나의 구현예에서, R3은 -C(O)N(H)헥실, 및 그의 구조 이성질체이다. 상기 화학식 XIII의 하나의 구현예에서, R3은 -C(O)N(H)헵틸, 및 그의 구조 이성질체이다. 상기 화학식 XIII의 하나의 구현예에서, R3은 -C(O)N(H)옥틸, 및 그의 구조 이성질체이다. 상기 화학식 XIII의 하나의 구현예에서, R3은 -C(O)N(H)노닐, 및 그의 구조 이성질체이다. 상기 화학식 XIII의 하나의 구현예에서, R3은 -C(O)N(H)데실, 및 그의 구조 이성질체이다. 하나의 구현예에서, R4는 수소이다. 하나의 구현예에서, R4는 메틸이다. 또 다른 구현예에서, R4는 에틸이다. 또 다른 구현예에서, R4는 프로필, 및 그의 구조 이성질체이다. 또 다른 구현예에서, R4는 부틸, 및 그의 구조 이성질체이다. 또 다른 구현예에서, R4는 펜틸, 및 그의 구조 이성질체이다. 또 다른 구현예에서, R5는 메틸이다. 또 다른 구현예에서, R5는 에틸이다. 또 다른 구현예에서, R5는 프로필, 및 그의 구조 이성질체이다. 또 다른 구현예에서, R5는 부틸, 및 그의 구조 이성질체이다. 또 다른 구현예에서, R5는 펜틸, 및 그의 구조 이성질체이다. 하나의 구현예에서, R4 및 R5는 메틸이다.
몇몇 구현예에서, 본원은 하기 화학식 XXI의 구조를 갖는 화합물; 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염을 제시한다:
[화학식 XXI]
Figure pct00148
상기 식에서, R60은 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 치환된 아릴, 또는 치환된 헤테로아릴이다. 적합한 R60 알킬기는 R1에 대해 화학식 XIII의 상황에서 기재된 것들, 예를 들어 메틸, 에틸 등을 포함한다. 적합한 R60 알케닐, 알키닐, 아릴 및 헤테로아릴은 본원의 다른 어딘가에 기재되어 있다. 적합한 R60 사이클로알킬 및 헤테로사이클로알킬은 화학식 XIII의 상황에서 기재된 바와 같은, 부착된 탄소와 함께 R4 및 R5에 대해 기재된 것들을 포함한다. 몇몇 구현예에서, R11은 C1-C10 알킬이다. 하나의 구현예에서, R11은 메틸이다. 하나의 구현예에서, R11은 에틸이다. 하나의 구현예에서, R11은 프로필, 및 그의 구조 이성질체이다. 하나의 구현예에서, R11은 부틸, 및 그의 구조 이성질체이다. 하나의 구현예에서, R11은 펜틸, 및 그의 구조 이성질체이다. 하나의 구현예에서, R11은 헥실, 및 그의 구조 이성질체이다. 하나의 구현예에서, R11은 헵틸, 및 그의 구조 이성질체이다. 하나의 구현예에서, R11은 옥틸, 및 그의 구조 이성질체이다. 하나의 구현예에서, R11은 노닐, 및 그의 구조 이성질체이다. 하나의 구현예에서, R11은 데실, 및 그의 구조 이성질체이다.
몇몇 구현예에서, 본원은 Q가 -O-이고; R2가 C1-C10 알키닐이고; R3이 -C(O)C1-C5 알킬이고; R60이 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 치환된 아릴, 또는 치환된 헤테로아릴인 화학식 XIII의 구조를 갖는 화합물, 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염 또는 전구약물을 제시한다. 적합한 R60 알킬기는 R1에 대해 화학식 III의 상황에서 기재된 것들, 예를 들어 메틸, 에틸 등을 포함한다. 적합한 R60 알케닐, 알키닐, 아릴 및 헤테로아릴은 본원의 다른 어딘가에 기재되어 있다. 적합한 R60 사이클로알킬 및 헤테로사이클로알킬은 화학식 XIII의 상황에서 기재된 바와 같은, 부착된 탄소와 함께 R4 및 R5에 대해 기재된 것들을 포함한다. 몇몇 구현예에서, R1, R4, R5, R7, 및 R8은 상기 화학식 XIII에서 기재한 바와 같다. 화학식 XIII의 하나의 구현예에서, R2는 -CH2CCH이다. 화학식 XIII의 하나의 구현예에서, R2는 -CH2CH2CCH이다. 화학식 XIII의 하나의 구현예에서, R2는 -CH2CH2CH2CCH이다. 화학식 XIII의 하나의 구현예에서, R2는 -CH2CH2CH2CH2CCH이다. 화학식 XIII의 하나의 구현예에서, R2는 -CH2CH2CH2CH2CH2CCH이다. 화학식 XIII의 하나의 구현예에서, R2는 -CH2CH2CH2CH2CH2CH2CCH이다. 화학식 XIII의 하나의 구현예에서, R2는 -CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CCH이다. 화학식 XIII의 하나의 구현예에서, R2는 -CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CCH이다. 화학식 XIII의 하나의 구현예에서, R2는 -CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CCH이다. 화학식 XIII의 하나의 구현예에서, R2는 -CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CCH이다. 하나의 구현예에서, R3은 -C(O)Me이다. 또 다른 구현예에서, R3은 -C(O)Et이다. 또 다른 구현예에서, R3은 -C(O)프로필, 및 그의 구조 이성질체이다. 또 다른 구현예에서, R3은 -C(O)부틸, 및 그의 구조 이성질체이다. 또 다른 구현예에서, R3은 -C(O)펜틸, 및 그의 구조 이성질체이다.
몇몇 구현예에서, 본원은 하기 화학식 XXII의 구조를 갖는 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염을 제시한다:
[화학식 XXII]
Figure pct00149
몇몇 구현예에서, R2, R3, R4, R5, R7 및 R60은 선행 단락에 기재된 바와 같다.
몇몇 구현예에서, 본원은 Q가 -O-이고; R2가 C1-C10 알키닐이고; R3이 -C(O)N(H)C1-C10 알킬이고; R60이 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 치환된 아릴, 또는 치환된 헤테로아릴인 화학식 XIII의 구조를 갖는 화합물, 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염 또는 전구약물을 제시한다. 적합한 R60 알킬기는 R1에 대해 화학식 XIII의 상황에서 기재된 것들, 예를 들어 메틸, 에틸 등을 포함한다. 적합한 R60 알케닐, 알키닐, 아릴 및 헤테로아릴은 본원의 다른 어딘가에 기재되어 있다. 적합한 R60 사이클로알킬 및 헤테로사이클로알킬은 화학식 XIII의 상황에서 기재된 바와 같은, 부착된 탄소와 함께 R4 및 R5에 대해 기재된 것들을 포함한다. 몇몇 구현예에서, R1, R4, R5, R7, 및 R8은 상기 화학식 XIII에서 기재한 바와 같다. 화학식 XIII의 하나의 구현예에서, R2는 -CH2CCH이다. 화학식 XIII의 하나의 구현예에서, R2는 -CH2CH2CCH이다. 화학식 XIII의 하나의 구현예에서, R2는 -CH2CH2CH2CCH이다. 화학식 XIII의 하나의 구현예에서, R2는 -CH2CH2CH2CH2CCH이다. 화학식 XIII의 하나의 구현예에서, R2는 -CH2CH2CH2CH2CH2CCH이다. 화학식 XIII의 하나의 구현예에서, R2는 -CH2CH2CH2CH2CH2CH2CCH이다. 화학식 XIII의 하나의 구현예에서, R2는 -CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CCH이다. 화학식 XIII의 하나의 구현예에서, R2는 -CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CCH이다. 화학식 XIII의 하나의 구현예에서, R2는 -CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CCH이다. 화학식 XIII의 하나의 구현예에서, R2는 -CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CCH이다. 상기 화학식 XIII의 하나의 구현예에서, R3은 -C(O)N(H)Me이다. 상기 화학식 XIII의 하나의 구현예에서, R3은 -C(O)N(H)Et이다. 상기 화학식 XIII의 하나의 구현예에서, R3은 -C(O)N(H)프로필, 및 그의 구조 이성질체이다. 상기 화학식 XIII의 하나의 구현예에서, R3은 -C(O)N(H)부틸, 및 그의 구조 이성질체이다. 상기 화학식 XIII의 하나의 구현예에서, R3은 -C(O)N(H)펜틸, 및 그의 구조 이성질체이다. 상기 화학식 XIII의 하나의 구현예에서, R3은 -C(O)N(H)헥실, 및 그의 구조 이성질체이다. 상기 화학식 XIII의 하나의 구현예에서, R3은 -C(O)N(H)헵틸, 및 그의 구조 이성질체이다. 상기 화학식 XIII의 하나의 구현예에서, R3은 -C(O)N(H)옥틸, 및 그의 구조 이성질체이다. 상기 화학식 XIII의 하나의 구현예에서, R3은 -C(O)N(H)노닐, 및 그의 구조 이성질체이다. 상기 화학식 XIII의 하나의 구현예에서, R3은 -C(O)N(H)데실, 및 그의 구조 이성질체이다.
몇몇 구현예에서, 본원은 하기 화학식 XXIII의 구조를 갖는 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염을 제시한다:
[화학식 XXIII]
Figure pct00150
몇몇 구현예에서, R2, R3, R5, R8 및 R60은 선행 단락에 기재된 바와 같다.
몇몇 구현예에서, 본원은 Q가 -O-이고; R2가 C1-C3 알킬렌-Q1-(CH2)n아릴; 또는 C1-C3 하이드록시알킬이고; R3이 -C(O)C1-C5 알킬이고; R4가 수소 또는 C1-C5 알킬이고; R5가 C1-C5 알킬이고; R7이 -OH이고; R60이 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 치환된 아릴, 또는 치환된 헤테로아릴인 화학식 XIII의 구조를 갖는 화합물, 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염 또는 전구약물을 제시한다. 적합한 R60 알킬기는 R1에 대해 화학식 XIII의 상황에서 기재된 것들, 예를 들어 메틸, 에틸 등을 포함한다. 적합한 R60 알케닐, 알키닐, 아릴 및 헤테로아릴은 본원의 다른 어딘가에 기재되어 있다. 적합한 R60 사이클로알킬 및 헤테로사이클로알킬은 화학식 XIII의 상황에서 기재된 바와 같은, 부착된 탄소와 함께 R4 및 R5에 대해 기재된 것들을 포함한다. 몇몇 구현예에서, R1 및 R8은 상기 화학식 XIII에서 기재한 바와 같다. 몇몇 구현예에서, R2는 C1-C3 알킬렌-Q1-(CH2)n아릴이고, Q1은 -CH2-이다. 상응하게, 하나의 구현예에서, R2는 -CH2CH2(CH2)n아릴이고, 여기에서 아릴은 비치환되거나 또는 니트로 또는 아미노로 치환되고, n은 1 내지 5의 정수이다. 하나의 구현예에서, R2는 -CH2CH2(CH2)n페닐이고, n은 1, 2, 3, 4, 또는 5이다. 하나의 구현예에서, R2는 -CH2CH2(CH2)n p-니트로페닐이고, n은 1, 2, 3, 4, 또는 5이다. 하나의 구현예에서, R2는 -CH2CH2(CH2)n p-아미노페닐이고, n은 1, 2, 3, 4, 또는 5이다. R2는 -CH2CH2CH2(CH2)n아릴이고, 여기에서 아릴은 비치환되거나 또는 니트로 또는 아미노로 치환되고, n은 1 내지 5의 정수이다. 하나의 구현예에서, R2는 -CH2CH2CH2(CH2)n페닐이고, n은 1, 2, 3, 4, 또는 5이다. 하나의 구현예에서, R2는 -CH2CH2CH2(CH2)n p-니트로페닐이고, n은 1, 2, 3, 4, 또는 5이다. 하나의 구현예에서, R2는 -CH2CH2CH2(CH2)n p-아미노페닐이고, n은 1, 2, 3, 4, 또는 5이다. 하나의 구현예에서, R2는 -CH2CH2CH2CH2(CH2)n아릴이고, 여기에서 아릴은 비치환되거나 또는 니트로 또는 아미노로 치환되고, n은 1 내지 5의 정수이다. 하나의 구현예에서, R2는 -CH2CH2CH2CH2(CH2)n페닐이고, n은 1, 2, 3, 4, 또는 5이다. 하나의 구현예에서, R2는 -CH2CH2CH2CH2(CH2)n p-니트로페닐이고, n은 1, 2, 3, 4, 또는 5이다. 하나의 구현예에서, R2는 -CH2CH2CH2CH2(CH2)n p-아미노페닐이고, n은 1, 2, 3, 4, 또는 5이다. 몇몇 구현예에서, R2는 C1-C3 알킬렌-Q1-(CH2)n아릴이고, Q1은 -O-이다. 상응하게, 하나의 구현예에서, R2는 -CH2O-(CH2)n아릴이고, 여기에서 아릴은 비치환되거나 또는 니트로 또는 아미노로 치환되고, n은 1 내지 5의 정수이다. 하나의 구현예에서, R2는 -CH2O-(CH2)n페닐이고, n은 1, 2, 3, 4, 또는 5이다. 하나의 구현예에서, R2는 -CH2O-(CH2)n p-니트로페닐이고, n은 1, 2, 3, 4, 또는 5이다. 하나의 구현예에서, R2는 -CH2O-(CH2)n p-아미노페닐이고, n은 1, 2, 3, 4, 또는 5이다. 하나의 구현예에서, R2는 -CH2CH2O-(CH2)n아릴이고, 여기에서 아릴은 비치환되거나 또는 니트로 또는 아미노로 치환되고, n은 1 내지 5의 정수이다. 하나의 구현예에서, R2는 -CH2CH2O-(CH2)n페닐이고, n은 1, 2, 3, 4, 또는 5이다. 하나의 구현예에서, R2는 -CH2CH2O-(CH2)n p-니트로페닐이고, n은 1, 2, 3, 4, 또는 5이다. 하나의 구현예에서, R2는 -CH2CH2O-(CH2)n p-아미노페닐이고, n은 1, 2, 3, 4, 또는 5이다. 하나의 구현예에서, R2는 -CH2CH2CH2O-(CH2)n아릴이고, 여기에서 아릴은 비치환되거나 또는 니트로 또는 아미노로 치환되고, n은 1 내지 5의 정수이다. 하나의 구현예에서, R2는 -CH2CH2CH2O-(CH2)n페닐이고, n은 1, 2, 3, 4, 또는 5이다. 하나의 구현예에서, R2는
-CH2CH2CH2O-(CH2)n p-니트로페닐이고, n은 1, 2, 3, 4, 또는 5이다. 하나의 구현예에서, R2는 -CH2CH2CH2O-(CH2)n p-아미노페닐이고, n은 1, 2, 3, 4, 또는 5이다. 하나의 구현예에서, R2는 -CH2OH이다. 하나의 구현예에서, R2는 -CH2CH2OH이다. 하나의 구현예에서, R2는 -CH2CH2CH2OH이다. 상기 화학식 XIII의 몇몇 구현예에서, 유용한 R3 기는 -C(O)Me, -C(O)Et, -C(O)프로필, -C(O)부틸, 및 -C(O)펜틸, 및 이들의 구조 이성질체를 포함한다. 하나의 구현예에서, R3은 -C(O)Me이다. 또 다른 구현예에서, R3은 -C(O)Et이다. 또 다른 구현예에서, R3은 -C(O)프로필 및 그의 구조 이성질체이다. 또 다른 구현예에서, R3은 -C(O)부틸 및 그의 구조 이성질체이다. 또 다른 구현예에서, R3은 -C(O)펜틸 및 그의 구조 이성질체이다. 하나의 구현예에서, R4는 수소이다. 상기 화학식 I의 몇몇 구현예에서, 유용한 R4 기는 메틸, 에틸, 프로필, 부틸 및 펜틸, 및 이들의 구조 이성질체를 포함한다. 하나의 구현예에서, R4는 메틸이다. 또 다른 구현예에서, R4는 에틸이다. 또 다른 구현예에서, R4는 프로필, 및 그의 구조 이성질체이다. 또 다른 구현예에서, R4는 부틸, 및 그의 구조 이성질체이다. 또 다른 구현예에서, R4는 펜틸, 및 그의 구조 이성질체이다. 상기 화학식 I의 몇몇 구현예에서, 유용한 R5 기는 메틸, 에틸, 프로필, 부틸 및 펜틸, 및 이들의 구조 이성질체를 포함한다. 하나의 구현예에서, R5는 메틸이다. 또 다른 구현예에서, R5는 에틸이다. 또 다른 구현예에서, R5는 프로필, 및 그의 구조 이성질체이다. 또 다른 구현예에서, R5는 부틸, 및 그의 구조 이성질체이다. 또 다른 구현예에서, R5는 펜틸, 및 그의 구조 이성질체이다. 하나의 구현예에서, R4 및 R5는 메틸이다.
몇몇 구현예에서, 본원은 하기 화학식 XXIV의 구조를 갖는 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염을 제시한다:
[화학식 XXIV]
Figure pct00151
몇몇 구현예에서, R2, R3 및 R60은 선행 단락에 기재된 바와 같다. 화학식 XXIV의 하나의 구현예에서, R2는 선행 단락에 기재된 바와 같은 C1-C3 알킬렌-O-(CH2)n아릴이다. 화학식 XXIV의 하나의 구현예에서, R2는 선행 단락에 기재된 바와 같은 C1-C3 하이드록시알킬이다.
본 섹션의 임의의 선행 구현예에서, R7은 -NR7aR7b이고, 여기에서 R7a 및 R7b는 각각의 경우에 독립적으로, 수소, 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 아실 및 아미노산 잔기이고, 여기에서 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 및 아실은 임의로 치환된다. 몇몇 구현예에서, R7a는 수소이고 R7b는 아미노산 잔기이다.
결합제
본 개시내용에 제공된 접합체 중 어느 하나에 적합한 결합제는 비제한적으로 항체, 림포카인(예를 들어 IL-2 또는 IL-3), 호르몬(예를 들어 인슐린 및 글루코코르티코이드), 성장인자(예를 들어 EGF, 트랜스페린, 및 피브로넥틴 III 유형), 바이러스 수용체, 인터류킨, 또는 임의의 다른 세포 결합 또는 펩티드 결합 분자 또는 물질을 포함한다. 결합제는 또한 비제한적으로 안키린 반복 단백질 및 인터페론을 포함한다.
일부 구현예에서, 결합제는 항체 또는 그의 항원-결합 단편이다. 상기 항체는 당업자에게 공지된 임의의 형태일 수 있다. 본원에 사용되는 바와 같은 "항체"란 용어는 특정 항원에 특이적으로 결합하거나 상호작용하는 적어도 하나의 상보성 결정 영역(CDR)을 포함하는 임의의 항원-결합 분자 또는 분자 복합체를 지칭한다. "항체"란 용어는 디설파이드 결합에 의해 상호-연결된 4개의 폴리펩티드쇄, 2개의 중(H)쇄 및 2개의 경(L)쇄를 포함하는 면역글로불린 분자뿐만 아니라 그의 다량체(예를 들어 IgM)을 포함한다. 각각의 중쇄는 중쇄 가변 영역(본원에서 HCVR 또는 VH로서 약기함) 및 중쇄 불변 영역을 포함한다. 상기 중쇄 불변 영역은 3개의 도메인, CH1, CH2 and CH3을 포함한다. 각각의 경쇄는 경쇄 가변 영역(본원에서 LCVR 또는 VL로서 약기함) 및 경쇄 불변 영역을 포함한다. 상기 경쇄 불변 영역은 하나의 도메인(CL1)을 포함한다. 상기 VH 및 VL 영역은 보다 보존된, 프레임워크 영역(FR)이라 칭하는 영역들과 산재된, 상보성 결정 영역(CDR)이라 칭하는 고가변성 영역들로 추가로 세분될 수 있다. 각각의 VH 및 VL은 하기의 순서로 아미노-말단에서 카복시-말단으로 배열된 3개의 CDR 및 4개의 FR로 구성된다: FR1, CDR1, FR2, CDR2, FR3, CDR3, FR4. 본원에 개시된 상이한 구현예에서, 본원의 화합물에 적합한 항체(또는 그의 항원-결합 부분)의 FR은 인간 생식계열 서열과 일치하거나 또는 천연적으로 또는 인공적으로 변형될 수 있다. 아미노산 공통 서열을 2개 이상의 CDR의 병행 분석에 기초하여 정의할 수 있다. 본원에 사용되는 바와 같은 "항체"란 용어는 또한 완전 항체 분자의 항원-결합 단편을 포함한다. 본원에 사용되는 바와 같은 항체의 "항원-결합 부분", 항체의 "항원-결합 단편" 등의 용어는 항원과 특이적으로 결합하여 복합체를 형성하는 임의의 천연의, 효소적으로 수득할 수 있는, 합성의 또는 유전자 조작된 폴리펩티드 또는 당단백질을 포함한다. 항체의 항원-결합 단편은 예를 들어 임의의 적합한 표준 기법(들), 예를 들어 항체 가변 및 임의로 불변 도메인을 암호화하는 DNA의 조작 및 발현을 수반하는 단백질 분해적 절단 또는 재조합 유전 공학 기법(들)을 사용하여 완전 항체 분자로부터 유도될 수 있다. 상기와 같은 DNA는 공지되고/되거나, 예를 들어 상업적인 출처, DNA 라이브러리(예를 들어 파지-항체 라이브러리 포함)로부터 쉽게 입수되거나, 또는 합성될 수 있다. 상기 DNA를 서열분석하고 화학적으로 또는 분자 생물학 기법을 사용함으로써 조작하여, 예를 들어 하나 이상의 가변 및/또는 불변 도메인을 적합한 배열로 배열하거나, 또는 코돈을 도입시키거나, 시스테인 잔기를 생성시키거나, 아미노산을 변형, 부가 또는 결실시키는 등을 할 수 있다. 항원-결합 단편의 비제한적인 예는 (i) Fab 단편; (ii) F(ab')2 단편; (iii) F 단편; (iv) Fv 단편; (v) 단쇄 Fv(scFv) 분자; (vi) dAb 단편; 및 (vii) 항체(예를 들어 단리된 CDR, 예를 들어 CDR3 펩티드) 또는 구속된 FR3-CDR3-FR4 펩티드의 고가변 영역을 모방하는 아미노산 잔기로 이루어지는 최소 인식 단위를 포함한다. 다른 조작된 분자, 예를 들어 도메인-특이성 항체, 단일 도메인 항체, 도메인-결실된 항체, 키메라 항체, CDR-접목된 항체, 디아바디, 트리아바디, 테트라바디, 미니바디, 나노바디(예를 들어 1가 나노바디, 2가 나노바디 등), 작은 모듈형 면역약제(SMIP), 및 샤크 가변 IgNAR 도메인이 또한 본원에 사용되는 바와 같은 "항원-결합 단편"이란 표현내에 포함된다. 항체의 항원-결합 단편은 전형적으로 적어도 하나의 가변 도메인을 포함할 것이다. 상기 가변 도메인은 임의의 크기 또는 아미노산 조성을 가질 수 있으며 일반적으로는 하나 이상의 프레임워크 서열에 인접하거나 또는 상기와 인프레임인 적어도 하나의 CDR을 포함할 것이다. VL 도메인과 연관된 VH 도메인을 갖는 항원-결합 단편에서, 상기 VH 및 VL 도메인은 임의의 적합한 배열로 서로에 대해 위치할 수 있다. 예를 들어 상기 가변 영역은 이량체성일 수 있으며 VH-VH, VH-VL 또는 VL-VL 이량체를 함유할 수 있다. 대안으로, 항체의 항원-결합 단편은 단량체성 VH 또는 VL 도메인을 함유할 수 있다. 몇몇 구현예에서, 항체의 항원-결합 단편은 적어도 하나의 불변 도메인에 공유적으로 연결된 적어도 하나의 가변 도메인을 함유할 수 있다. 본 발명의 항체의 항원-결합 단편내에서 발견될 수 있는 가변 및 불변 도메인의 비제한적인, 예시적인 배열은 하기를 포함한다: (i) VH-CH1; (ii) VH-CH2; (iii) VH-CH3; (iv) VH-CH1-CH2; (v) VH-CH1-CH2-CH3; (vi) VH-CH2-CH3; (vii) VH-CL; (viii) VL-CH1; (ix) VL-CH2; (x) VL-CH3; (xi) VL-CH1-CH2; (xii) VL-CH1-CH2-CH3; (xiii) VL-CH2-CH3; 및 (xiv) VL-CL. 상기에 나열된 예시적인 배열 중 어느 하나를 포함한, 가변 및 불변 도메인의 임의의 배열에서, 가변 및 불변 도메인은 서로 직접 연결되거나 또는 완전한 또는 부분적인 힌지 또는 링커 영역에 의해 연결될 수 있다. 힌지 영역은 단일 폴리펩티드 분자에서 인접한 가변 및/또는 불변 도메인 사이에 가요성 또는 반-가요성 연결을 생성시키는 적어도 2(예를 들어, 5, 10, 15, 20, 40, 60, 또는 그 이상)개의 아미노산으로 이루어질 수 있다. 완전 항체 분자의 경우와 같이, 항원-결합 단편은 단일특이성 도는 다중특이성(예를 들어 이중특이성)일 수 있다. 항체의 다중특이성 항원-결합 단편은 전형적으로 적어도 2개의 상이한 가변 도메인을 포함하며, 여기에서 각각의 가변 도메인은 별도의 항원에 또는 동일한 항원상의 상이한 에피토프에 특이적으로 결합할 수 있다. 본원에 개시된 예시적인 이중특이성 항체 포맷을 포함한 임의의 다중특이성 항체 포맷을 당해 분야에서 이용가능한 통상적인 기법을 사용하여 본 개시내용의 항체의 항원-결합 단편의 상황에서의 용도에 적합화할 수 있다. 본원에 기재된 몇몇 구현예에서, 본원에 기재된 항체는 인간 항체이다. 본원에 사용된 바와 같은 "인간 항체"란 용어는 인간 생식계열 면역글로불린 서열로부터 유래된 가변 및 불변 영역을 갖는 항체를 포함함을 의미한다. 본 발명의 인간 항체는 예를 들어 CDR 및 특히 CDR3 중에, 인간 생식계열 면역글로불린 서열에 의해 암호화되지 않는 아미노산 잔기(예를 들어 시험관내에서 무작위 또는 부위-특이적인 돌연변이유발에 의해 또는 생체내에서 체세포 돌연변이에 의해 도입된 돌연변이)를 포함할 수 있다. 그러나, 본원에 사용되는 바와 같은 "인간 항체"란 용어는 또 다른 포유동물 종, 예를 들어 마우스의 생식계열로부터 유래된 CDR 서열이 인간 프레임워크 서열상에 접목된 항체를 포함함을 의미하는 것은 아니다. 상기 "인간 항체"란 용어는 변형 또는 인간 중재/조작 없이, 천연의 변형되지 않은 살아있는 유기체 중에 통상적으로 존재하는 천연 분자를 포함하지 않는다. 본원에 개시된 항체는 일부 구현예에서 재조합 인간 항체일 수 있다. 본원에 사용되는 바와 같은 "재조합 인간 항체"란 용어는 재조합 수단에 의해 제조되거나, 발현되거나, 생성되거나 단리된 모든 인간 항체, 예를 들어 숙주 세포내에 형질감염된 재조합 발현 벡터를 사용하여 발현된 항체(하기에 추가로 개시됨), 재조합의 조합적 인간 항체 라이브러리로부터 단리된 항체(하기에 추가로 기재됨), 인간 면역글로불린 유전자에 대해 트랜스제닉인 동물(예를 들어 마우스)로부터 단리된 항체(예를 들어 문헌[Taylor et al. (1992) Nucl. Acids Res. 20:6287-6295]을 참조하시오), 또는 인간 면역글로불린 유전자 서열의, 다른 DNA 서열에의 이어맞추기를 수반하는 임의의 다른 수단에 의해 제조되거나, 발현되거나, 생성되거나 단리된 항체를 포함함을 의미한다. 상기와 같은 재조합 인간 항체는 인간 생식계열 면역글로불린 서열로부터 유래된 가변 및 불변 영역을 갖는다. 그러나, 몇몇 구현예에서, 상기와 같은 재조합 인간 항체에 시험관내 돌연변이유발(또는 인간 Ig 서열에 트랜스제닉인 동물이 사용되는 경우, 생체내 체세포 돌연변이유발)을 가하며, 따라서 상기 재조합 항체의 VH 및 VL 영역의 아미노산 서열은, 인간 생식계열 VH 및 VL 서열로부터 유래되고 이와 관련되지만, 생체내에서 인간 항체 생식계열 레퍼토리내에 자연적으로 존재하지 않을 수도 있는 서열이다. 하나의 형태에서, 면역글로불린 분자는 대략 150-160 kDa의 안정한 4 쇄 구조물을 포함하며, 여기에서 상기 이량체들을 쇄간 중쇄 디설파이드 결합에 의해 함께 유지된다. 두 번째 형태에서, 상기 이량체는 쇄간 디설파이드 결합을 통해 연결되지 않으며 공유 커플링된 경쇄 및 중쇄(반-항체)로 구성된 약 75-80 kDa의 분자가 형성된다. 이들 형태는 친화성 정제후에 조차도 분리하기가 대단히 어려웠다. 다양한 온전한 IgG 아이소타입에서 상기 두 번째 형태의 출현 빈도는 비제한적으로, 항체의 힌지 영역 아이소타입과 연관된 구조적 차이에 기인한다. 인간 IgG4 힌지의 힌지 영역 중 단일 아미노산 치환이 상기 두 번째 형태의 출현(Angal et al. (1993) Molecular Immunology 30:105)을 전형적으로 인간 IgG1 힌지를 사용하여 관찰되는 수준으로 현저하게 감소시킬 수 있다. 본 개시내용은 상기 힌지, CH2, 또는 CH3 영역에, 예를 들어 생산시 목적하는 항체 형태의 수율을 개선시키는 것이 바람직할 수 있는 하나 이상의 돌연변이를 갖는 항체를 포함한다. 본원에 기재된 항체는 단리된 항체일 수 있다. 본원에 사용되는 바와 같은 "단리된 항체"는 그의 천연 환경 중 적어도 하나의 성분으로부터 식별되고 분리 및/또는 회수된 항체를 지칭한다. 예를 들어, 유기체의 적어도 하나의 성분으로부터, 또는 항체가 자연적으로 존재하거나 자연적으로 생성되는 조직 또는 세포로부터 분리되거나 제거된 항체가 본 개시내용의 목적을 위해 "단리된 항체"이다. 단리된 항체는 또한 재조합 세포내의 원위치 항체를 포함한다. 단리된 항체는 적어도 하나의 정제 또는 단리 단계가 가해진 항체이다. 몇몇 구현예에 따라, 단리된 항체는 다른 세포 물질 및/또는 화학물질이 실질적으로 없을 수 있다. 본원에 사용된 항체는 상기 항체가 유래된 상응하는 생식계열 서열에 비해 중쇄 및 경쇄 가변 도메인의 프레임워크 및/또는 CDR 영역 중에 하나 이상의 아미노산 치환, 삽입, 및/또는 결실을 포함할 수 있다. 상기와 같은 돌연변이는 본원에 개시된 아미노산 서열을, 예를 들어 공개적인 항체 서열 데이터베이스로부터 입수할 수 있는 생식계열 서열에 비교함으로써 쉽게 확인될 수 있다. 본 개시내용은 본원에 개시된 아미노산 서열 중 어느 하나로부터 유래된 항체 및 그의 항원-결합 단편을 포함하며, 여기에서 하나 이상의 프레임워크 및/또는 CDR 영역내 하나 이상의 아미노산은 상기 항체가 유래된 생식계열 서열의 상응하는 잔기(들), 또는 또 다른 인간 생식계열 서열의 상응하는 잔기(들) 또는 상응하는 생식계열 잔기(들)의 보존적 아미노산 치환으로 돌연변이된다(상기와 같은 서열 변화를 본원에서 집합적으로 "생식계열 돌연변이"라 칭한다). 당업자는 본원에 개시된 중쇄 및 경쇄 가변 영역으로 시작하여, 하나 이상의 개별적인 생식계열 돌연변이 또는 그의 조합을 포함하는 다수의 항체 및 항원-결합 단편을 쉽게 생성시킬 수 있다. 몇몇 구현예에서, VH 및/또는 VL 도메인 내 프레임워크 및/또는 CDR 잔기는 모두 상기 항체가 유래된 원래 생식계열 서열에서 발견되는 잔기로 역 돌연변이된다. 다른 구현예에서, 단지 몇몇 잔기만이, 예를 들어 FR1의 처음 8개 아미노산내에서 또는 FR4의 마지막 8개 아미노산내에서 발견되는 돌연변이된 잔기만이, 또는 CDR1, CDR2 또는 CDR3내에서 발견되는 돌연변이된 잔기만이 원래의 생식계열 서열로 역 돌연변이된다. 다른 구현예에서, 상기 프레임워크 및/또는 CDR 잔기(들) 중 하나 이상은 상이한 생식계열 서열(즉 상기 항체가 원래 유래된 생식계열 서열과 상이한 생식계열 서열)의 상응하는 잔기(들)로 돌연변이된다. 더욱 또한, 본 개시내용의 항체는 상기 프레임워크 및/또는 CDR 영역내 2개 이상의 생식계열 돌연변이의 임의의 조합을 함유할 수 있다, 예를 들어 몇몇 개별적인 잔기는 특정 생식계열 서열의 상응하는 잔기로 돌연변이되는 반면 상기 원래 생식계열 서열과 상이한 몇몇 다른 잔기는 유지되거나 또는 상이한 생식계열 서열의 상응하는 잔기로 돌연변이된다. 하나 이상의 생식계열 돌연변이를 함유하는 항체 및 항원-결합 단편이 일단 수득되었으면, 이를 하나 이상의 목적하는 성질, 예를 들어 개선된 결합 특이성, 증가된 결합 친화성, 개선되거나 향상된 길항작용성 또는 작용성 생물학적 성질(경우에 따라), 감소된 면역원성 등에 대해 쉽게 시험할 수 있다. 이러한 일반적인 방식으로 수득된 항체 및 항원-결합 단편은 본 개시내용에 포함된다. 또한 본원의 화합물에 유용한 항체는 하나 이상의 보존적 치환을 갖는 본원에 개시된 HCVR, LCVR 및/또는 CDR 아미노산 서열 중 어느 하나의 변체를 포함하는 항체를 포함한다. "에피토프"란 용어는 파라토프로서 공지된 항체 분자의 가변 영역 중의 특정한 항원-결합 부위와 상호작용하는 항원 결정인자를 지칭한다. 단일 항원은 하나 초과의 에피토프를 가질 수 있다. 따라서, 상이한 항체는 항원상의 상이한 구역에 결합할 수 있으며 상이한 생물학적 효과를 가질 수 있다. 에피토프는 입체형태이거나 선형일 수 있다. 입체형태적 에피토프는 선형 폴리펩티드 쇄의 상이한 분절로부터 공간적으로 나란한 아미노산에 의해 생성된다. 선형 에피토프는 폴리펩티드 쇄 중의 인접한 아미노산 잔기들에 의해 생성된 것이다. 몇몇 상황에서, 에피토프는 항원상의 사카라이드, 포스포릴기, 또는 설포닐기의 모이어티를 포함할 수 있다.
몇몇 구현예에서, 항체는 경쇄를 포함한다. 몇몇 구현예에서, 경쇄는 카파 경쇄이다. 몇몇 구현예에서, 경쇄는 람다 경쇄이다. 몇몇 구현예에서, 항체는 중쇄를 포함한다. 일부 구현예에서, 중쇄는 IgA이다. 일부 구현예에서, 중쇄는 IgD이다. 일부 구현예에서, 중쇄는 IgE이다. 일부 구현예에서, 중쇄는 IgG이다. 일부 구현예에서, 중쇄는 IgM이다. 일부 구현예에서, 중쇄는 IgG1이다. 일부 구현예에서, 중쇄는 IgG2이다. 일부 구현예에서, 중쇄는 IgG3이다. 일부 구현예에서, 중쇄는 IgG4이다. 일부 구현예에서, 중쇄는 IgA1이다. 일부 구현예에서, 중쇄는 IgA2이다.
일부 구현예에서, 항체는 항체 단편이다. 일부 구현예에서, 항체 단편은 Fv 단편이다. 일부 구현예에서, 항체 단편은 Fab 단편이다. 일부 구현예에서, 항체 단편은 F(ab')2 단편이다. 일부 구현예에서, 항체 단편은 Fab' 단편이다. 일부 구현예에서, 항체 단편은 scFv(sFv) 단편이다. 일부 구현예에서, 항체 단편은 scFv-Fc 단편이다.
일부 구현예에서, 항체는 단클론 항체이다. 일부 구현예에서, 항체는 다클론 항체이다. 일부 구현예에서, 항체는 제1 항원-결합 도메인(또한 본원에서 "D1"으로서 지칭된다) 및 제2 항원-결합 도메인(또한 본원에서 "D2"로서 지칭된다)을 포함하는 이중특이성 항체이다.
본원에 사용되는 바와 같이, "항원-결합 도메인"이란 표현은 특정 관심 항원(예를 들어 PRLR 또는 STEAP2)에 특이적으로 결합할 수 있는 임의의 펩티드, 폴리펩티드, 핵산 분자, 스캐폴드-유형 분자, 펩티드 디스플레이 분자, 또는 폴리펩티드-함유 구조물을 의미한다. 본원에 사용되는 바와 같은 "특이적으로 결합하다"란 용어 등은 항원-결합 도메인이 1 μM 이하의 해리 상수(KD)를 특징으로 하는 특정 항원과의 복합체를 형성하고 통상적인 시험 조건하에서 다른 관련되지 않은 항원과는 결합하지 않음을 의미한다. "관련되지 않은 항원"은 서로 95% 미만의 아미노산 일치성을 갖는 단백질, 펩티드 또는 폴리펩티드이다.
본 개시내용의 상황에 사용될 수 있는 항원-결합 도메인의 예시적인 범주는 항체, 항체의 항원-결합 부분, 특정 항원(예를 들어 펩티바디)과 특이적으로 상호작용하는 펩티드, 특정 항원과 특이적으로 상호작용하는 수용체 분자, 특정 항원과 특이적으로 결합하는 수용체의 리간드-결합 부분을 포함하는 단백질, 항원-결합 스캐폴드(예를 들어 DARPin, HEAT 반복 단백질, ARM 반복 단백질, 테트라트리코펩티드 반복 단백질, 및 천연 반복 단백질을 기본으로 하는 다른 스캐폴드 등(예를 들어 문헌[Boersma and Pluckthun, 2011, Curr. Opin. Biotechnol. 22:849-857], 및 상기 중에 인용된 참고문헌을 참조하시오), 및 앱타머 및 그의 부분을 포함한다
2개의 분자가 서로 특이적으로 결합하는지의 여부를 결정하는 방법은 당해 분야에 주지되어 있으며, 예를 들어 평형 투석, 표면 플라스몬 공명 등을 포함한다. 예를 들어, 본 개시내용의 상황에 사용되는 바와 같은 항원-결합 도메인은 표면 플라스몬 공명 분석에서 측정시, 특정 항원(예를 들어 표적 분자[T] 또는 내면화 효과기 단백질[E]) 또는 그의 일부와, 약 1 μM 미만, 약 500 nM 미만, 약 250 nM 미만, 약 125 nM 미만, 약 60 nM 미만, 약 30 nM 미만, 약 10 nM 미만, 약 5 nM 미만, 약 2 nM 미만, 약 1 nM 미만, 약 500 pM 미만, 약 400 pM 미만, 약 300 pM 미만, 약 200 pM 미만, 약 100 pM 미만, 약 90 pM 미만, 약 80 pM 미만, 약 70 pM 미만, 약 60 pM 미만, 약 50 pM 미만, 약 40 pM 미만, 약 30 pM 미만, 약 20 pM 미만, 약 10 pM 미만, 약 5 pM 미만, 약 4 pM 미만, 약 2 pM 미만, 약 1 pM 미만, 약 0.5 pM 미만, 약 0.2 pM 미만, 약 0.1 pM 미만, 또는 약 0.05 pM 미만의 KD로 결합하는 폴리펩티드를 포함한다.
일부 구현예에서, 항체는 키메라 항체이다. 일부 구현예에서, 항체는 인간화된 항체이다. 일부 구현예에서, 항체는 인간 항체이다.
일부 구현예에서, 항체는 항-PSMA, 항-PRLR, 항-MUC16, 항-HER2, 또는 항-EGFRvIII, 또는 항-STEAP2 항체이다. 일부 구현예에서, 항체는 항-PRLR 또는 항 HER2 항체이다. 일부 구현예에서, 항체 또는 그의 항원-결합 단편은 항-STEAP2이다. 일부 구현예에서, 항체 또는 그의 항원-결합 단편은 항-PRLR이다.
항체는 당업자에게 적합한 것으로 여겨지는 임의의 항원에 대해 결합 특이성을 가질 수 있다. 몇몇 구현예에서, 항원은 막관통 분자(예를 들어 수용체)이다. 하나의 구현예에서, 항원은 종양상에서 발현된다. 일부 구현예에서, 결합제는, 공유되거나, 과발현되거나, 또는 특정 유형의 종양상에서 변형되는 종양 또는 항원의 한 유형에 특이적인 항원을 포함하여, 종양 항원과 상호작용하거나 상기 항원에 결합한다. 하나의 구현예에서, 항원은 고형 종양상에서 발현된다. 예시적인 항원은 비제한적으로 지단백질; 알파1-안티트립신; 세포독성 T-림프구 관련 항원(CTLA), 예를 들어 CTLA-4; 혈관 내피성장 인자(VEGF); 호르몬 또는 성장 인자에 대한 수용체; 단백질 A 또는 D; 섬유아세포 성장인자 수용체 2(FGFR2), EpCAM, GD3, FLT3, PSMA, PSCA, MUC1, MUC16, STEAP, STEAP2, CEA, TENB2, EphA 수용체, EphB 수용체, 폴레이트 수용체, FOLRI, 메소텔린, 크립토, 알파v베타6, 인테그린, VEGF, VEGFR, EGFR, 트랜스페린 수용체, IRTA1, IRTA2, IRTA3, IRTA4, IRTA5; CD 단백질, 예를 들어 CD2, CD3, CD4, CD5, CD6, CD8, CD11, CD14, CD19, CD20, CD21, CD22, CD25, CD26, CD28, CD30, CD33, CD36, CD37, CD38, CD40, CD44, CD52, CD55, CD56, CD59, CD70, CD79, CD80. CD81, CD103, CD105, CD134, CD137, CD138, CD152, 또는 미국특허 공보 제 2008/0171040 호 또는 미국특허 공보 제 2008/0305044 호(각각 내용 전체가 참고로 인용된다)에 개시된 하나 이상의 종양-관련 항원 또는 세포-표면 수용체에 결합하는 항체; 에리쓰로포이에틴; 골유도 인자; 면역독소; 골 형태발생 단백질(BMP); T-세포 수용체; 표면 막 단백질; 인테그린, 예를 들어 CD11a, CD11b, CD11c, CD18, ICAM, VLA-4 및 VCAM; 종양 관련 항원, 예를 들어 AFP, ALK, B7H4, BAGE 단백질, β-카테닌, brc-abl, BRCA1, BORIS, CA9(카보닉 안하이드라제 IX), 카스파제-8, CD20, CD40, CD123, CDK4, CEA, CLEC12A, c-키트, cMET, CTLA4, 사이클린-B1, CYP1B1, EGFR, EGFRvIII, 엔도글린, Epcam, EphA2, ErbB2/Her2, ErbB3/Her3, ErbB4/Her4, ETV6-AML, Fra-1, FOLR1, GAGE 단백질, GD2, GD3, GloboH, 글리피칸-3, GM3, gp100, Her2, HLA/B-raf, HLA/EBNA1, HLA/k-ras, HLA/MAGE-A3, hTERT, IGF1R, LGR5, LMP2, MAGE 단백질, MART-1, 메소텔린, ML-IAP, Muc1, Muc16, CA-125, MUM1, NA17, NGEP, NY-BR1, NY-BR62, NY-BR85, NY-ESO1, OX40, p15, p53, PAP, PAX3, PAX5, PCTA-1, PDGFR-α, PDGFR-β, PDGF-A, PDGF-B, PDGF-C, PDGF-D, PLAC1, PRLR, PRAME, PSCA, PSGR, PSMA (FOLH1), RAGE 단백질, Ras, RGS5, Rho, SART-1, SART-3, Steap-1, Steap-2, STn, 설비빈, TAG-72, TGF-β, TMPRSS2, Tn, TNFRSF17, TRP-1, TRP-2, 티로시나제, 및 유로플라킨-3, 및 상기 나열된 폴리펩티드 중 어느 하나의 단편; 세포-표면 발현된 항원; MUC16; c-MET; 스캐빈저 수용체 A(SR-A)를 포함한 A 부류 스캐빈저 수용체와 같은 분자, 및 다른 막 단백질, 예를 들어 V-세트 및 Ig 도메인-함유 4(VSIG4)를 포함한 B7 패밀리-관련된 구성원, 콜로니 자극 인자 1 수용체(CSF1R), 아시알로당단백질 수용체(ASGPR), 및 아밀로이드 베타 전구체-유사 단백질 2(APLP-2)를 포함한다. 일부 구현예에서, 항원은 PRLR 또는 HER2이다. 일부 구현예에서, 항원은 STEAP2이다. 일부 구현예에서, 항원은 인간 STEAP2이다. 일부 예에서, MAGE 단백질은 MAGE-1, -2, -3, -4, -6 및 -12 중에서 선택된다. 일부 예에서, GAGE 단백질은 GAGE-1 및 GAGE-2 중에서 선택된다.
예시적인 항원은 또한 비제한적으로 BCMA, SLAMF7, GPNMB, 및 UPK3A를 포함한다. 예시적인 항원은 또한 비제한적으로 MUC16, STEAP2, 및 HER2를 포함한다.
일부 구현예에서, 항원은 MUC16을 포함한다. 일부 구현예에서, 항원은 STEAP2를 포함한다. 일부 구현예에서, 항원은 PSMA를 포함한다. 일부 구현예에서, 항원은 HER2를 포함한다. 일부 구현예에서, 항원은 프로락틴 수용체(PRLR) 또는 전립선-특이성 막 항원(PSMA)을 포함한다. 일부 구현예에서, 항원은 MUC16을 포함한다. 일부 구현예에서, 항원은 PSMA를 포함한다. 일부 구현예에서, 항원은 HER2를 포함한다. 일부 구현예에서, 항원은 STEAP2를 포함한다.
몇몇 구현예에서, 항체는 EU 넘버링 시스템에서 295번 위치의 하나 이상의 중쇄에 글루타민 잔기를 포함한다. 본 개시내용에서, 상기 위치를 글루타민 295로서, 또는 Gln295로서, 또는 Q295로서 지칭한다. 당업자는 상기가 다수의 항체의 야생형 서열 중의 보존된 글루타민 잔기임을 알 것이다. 다른 유용한 구현예에서, 항체를 글루타민 잔기를 포함하도록 조작할 수 있다. 몇몇 구현예에서, 항체는 하나 이상의 N297Q 돌연변이를 포함한다. 글루타민 잔기를 포함하도록 항체 서열을 변형시키는 기법은 당업자의 기술내에 있다(예를 들어 하기를 참조하시오, Ausubel et al. Current Protoc. Mol. Biol.).
일부 구현예에서, 링커-페이로드 또는 페이로드에 접합된 항체 또는 그의 항원-결합 단편은 STEAP2를 표적화하는 항체일 수 있다. 적합한 항-STEAP2 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 예를 들어 국제 공보 제 WO 2018/058001 호의 75페이지 표 1에 개시된 아미노산 서열을 포함하는 것들을 포함하여, 상기 공보에 기재된 것들을 포함한다. 일부 구현예에서, 항-STEAP2 항체는 WO 2018/058001 A1의 H1M7814N의 CDR을 포함한 상기 간행물의 H1H7814N이다. 일부 구현예에서, 항-STEAP2 항체는 서열번호 2를 포함하는 중쇄 상보성 결정 영역(HCDR)-1; 서열번호 3을 포함하는 HCDR2; 서열번호 4를 포함하는 HCDR3; 서열번호 6을 포함하는 경쇄 상보성 결정 영역(LCDR)-1; 서열번호 7을 포함하는 LCDR2; 및 서열번호 8을 포함하는 LCDR3을 포함한다. 일부 구현예에서, 항-STEAP2 항체는 서열번호 1을 포함하는 중쇄 가변 영역(HCVR) 및 서열번호 5를 포함하는 경쇄 가변 영역(LCVR)을 포함한다. 상기 구현예 중 어느 하나에서, 항-STEAP2 항체는 항체 기능 또는 결합의 장애를 생성시키지 않으면서 하나의 부위에 글루타민 잔기를 삽입시키는 부위-지향된 돌연변이유발에 의해 제조될 수 있다. 예를 들어, 상기 구현예 중 어느 하나에서, 항-STEAP2 항체는 Asn297Gln(N297Q) 돌연변이를 포함할 수 있다. N297Q 돌연변이를 갖는 상기와 같은 항체는 또한, 트랜스글루타미나제에 접근할 수 있고 따라서 페이로드 또는 링커-페이로드(표 A)에 접합할 수 있는, 그의 가변 영역에 하나 이상의 추가적인 천연 글루타민 잔기를 함유할 수 있다. 몇몇 구현예에서, 항체 또는 그의 항원-결합 단편은 서열번호 1의 중쇄 가변 영역(HCVR) 아미노산 서열내에 3개의 중쇄 상보성 결정 영역(HCDR1, HCDR2 및 HCDR3); 및 서열번호 5의 경쇄 가변 영역(LCVR) 아미노산 서열내에 3개의 경쇄 상보성 결정 영역(LCDR1, LCDR2 및 LCDR3)을 포함한다. 몇몇 구현예에서, 항체 또는 그의 항원-결합 단편은 서열번호 1의 HCVR 아미노산 서열; 및 서열번호 5의 LCVR 아미노산 서열을 포함한다. 국제 공보 제 WO 2018/058001 A1은 내용 전체가 본원에 참고로 인용된다.
일부 구현예에서, 링커-페이로드 또는 페이로드에 접합된 항체 또는 그의 항원-결합 단편은 인간 프로락틴 수용체(PRLR)를 표적화하는 항체일 수 있다. 적합한 항-PRLR 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 예를 들어 국제 공보 제 WO 2015/026907 A1 호의 36페이지 표 1에 개시된 아미노산 서열을 포함하는 것들을 포함하여, 상기 공보에 기재된 것들을 포함한다. 일부 구현예에서, 항-PRLR 항체는 WO 2015/026907 A1의 H2M6958N2의 CDR을 포함한 상기 간행물의 H1H6958N2이다. 일부 구현예에서, 항-PRLR 항체는 서열번호 10을 포함하는 중쇄 상보성 결정 영역(HCDR)-1; 서열번호 11을 포함하는 HCDR2; 서열번호 12를 포함하는 HCDR3; 서열번호 14을 포함하는 경쇄 상보성 결정 영역(LCDR)-1; 서열번호 15를 포함하는 LCDR2; 및 서열번호 16을 포함하는 LCDR3을 포함한다. 일부 구현예에서, 항-PRLR 항체는 서열번호 9를 포함하는 중쇄 가변 영역(HCVR) 및 서열번호 13을 포함하는 경쇄 가변 영역(LCVR)을 포함한다. 상기 구현예 중 어느 하나에서, 항-PRLR 항체는 항체 기능 또는 결합의 장애를 생성시키지 않으면서 하나의 부위에 글루타민 잔기를 삽입시키는 부위-지향된 돌연변이유발에 의해 제조될 수 있다. 예를 들어, 상기 구현예 중 어느 하나에서, 항-PRLR 항체는 Asn297Gln(N297Q) 돌연변이를 포함할 수 있다. N297Q 돌연변이를 갖는 상기와 같은 항체는 또한, 트랜스글루타미나제에 접근할 수 있고 따라서 페이로드 또는 링커-페이로드(표 A)에 접합할 수 있는, 그의 가변 영역에 하나 이상의 추가적인 천연 글루타민 잔기를 함유할 수 있다. 몇몇 구현예에서, 항체 또는 그의 항원-결합 단편은 서열번호 9의 중쇄 가변 영역(HCVR) 아미노산 서열내에 3개의 중쇄 상보성 결정 영역(HCDR1, HCDR2 및 HCDR3); 및 서열번호 13의 경쇄 가변 영역(LCVR) 아미노산 서열내에 3개의 경쇄 상보성 결정 영역(LCDR1, LCDR2 및 LCDR3)을 포함한다. 몇몇 구현예에서, 항체 또는 그의 항원-결합 단편은 서열번호 9의 HCVR 아미노산 서열; 및 서열번호 13의 LCVR 아미노산 서열을 포함한다. 국제 공보 제 WO 2015/026907 A1은 내용 전체가 본원에 참고로 인용된다.
[표 A]
예시적인 항체 H1H7814N(항-STEAP2) 및 H1H6958N2(항-PRLR)의 서열
Figure pct00152
본 개시내용은 표 A에 나열된 HCVR 아미노산 서열 중 어느 하나 중에서 선택된 아미노산 서열, 또는 상기에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98%, 또는 적어도 99% 서열 일치성을 갖는 그의 실질적으로 유사한 서열을 포함하는 HCVR을 포함하는, STEAP2에 특이적으로 결합하는 항체 또는 그의 항원-결합 단편을 제공한다.
본 개시내용은 표 A에 나열된 LCVR 아미노산 서열 중 어느 하나 중에서 선택된 아미노산 서열, 또는 상기에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98%, 또는 적어도 99% 서열 일치성을 갖는 그의 실질적으로 유사한 서열을 포함하는 LCVR을 포함하는, STEAP2에 특이적으로 결합하는 항체 또는 그의 항원-결합 단편을 제공한다.
본 개시내용은 또한 표 A에 나열된 LCVR 아미노산 서열 중 어느 하나와 짝을 이룬 표 A에 나열된 HCVR 아미노산 서열 중 어느 하나를 포함하는 HCVR 및 LCVR 아미노산 서열 쌍(HCVR/LCVR)을 포함하는, STEAP2에 특이적으로 결합하는 항체 또는 그의 항원-결합 단편을 제공한다. 몇몇 구현예에 따라, 본 개시내용은 표 A에 나열된 예시적인 항-STEAP2 항체 중 어느 하나내에 함유된 HCVR/LCVR 아미노산 서열 쌍을 포함하는 항체 또는 그의 항원-결합 단편을 제공한다. 몇몇 구현예에서, HCVR/LCVR 아미노산 서열 쌍은 국제 공보 제 WO 2018/058001 A1 호(내용 전체가 본원에 참고로 인용된다)에 기재된 바와 같이; 250/258로 이루어지는 그룹 중에서 선택된다.
본 개시내용은 또한 표 A에 나열된 중쇄 CDR1(HCDR1) 아미노산 서열 중 어느 하나 중에서 선택된 아미노산 서열, 또는 상기에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98%, 또는 적어도 99% 서열 일치성을 갖는 그의 실질적으로 유사한 서열을 포함하는 HCDR1을 포함하는, STEAP2에 특이적으로 결합하는 항체 또는 그의 항원-결합 단편을 제공한다.
본 개시내용은 표 A에 나열된 중쇄 CDR2(HCDR2) 아미노산 서열 중 어느 하나 중에서 선택된 아미노산 서열, 또는 상기에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98%, 또는 적어도 99% 서열 일치성을 갖는 그의 실질적으로 유사한 서열을 포함하는 HCDR2를 포함하는, STEAP2에 특이적으로 결합하는 항체 또는 그의 항원-결합 단편을 제공한다.
본 개시내용은 표 A에 나열된 중쇄 CDR3(HCDR3) 아미노산 서열 중 어느 하나 중에서 선택된 아미노산 서열, 또는 상기에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98%, 또는 적어도 99% 서열 일치성을 갖는 그의 실질적으로 유사한 서열을 포함하는 HCDR3을 포함하는, STEAP2에 특이적으로 결합하는 항체 또는 그의 항원-결합 단편을 제공한다.
본 개시내용은 표 A에 나열된 경쇄 CDR1(LCDR1) 아미노산 서열 중 어느 하나 중에서 선택된 아미노산 서열, 또는 상기에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98%, 또는 적어도 99% 서열 일치성을 갖는 그의 실질적으로 유사한 서열을 포함하는 LCDR1을 포함하는, STEAP2에 특이적으로 결합하는 항체 또는 그의 항원-결합 단편을 제공한다.
본 개시내용은 표 A에 나열된 경쇄 CDR2(LCDR2) 아미노산 서열 중 어느 하나 중에서 선택된 아미노산 서열, 또는 상기에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98%, 또는 적어도 99% 서열 일치성을 갖는 그의 실질적으로 유사한 서열을 포함하는 LCDR2를 포함하는, STEAP2에 특이적으로 결합하는 항체 또는 그의 항원-결합 단편을 제공한다.
본 개시내용은 표 A에 나열된 경쇄 CDR3(LCDR3) 아미노산 서열 중 어느 하나 중에서 선택된 아미노산 서열, 또는 상기에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98%, 또는 적어도 99% 서열 일치성을 갖는 그의 실질적으로 유사한 서열을 포함하는 LCDR3을 포함하는, STEAP2에 특이적으로 결합하는 항체 또는 그의 항원-결합 단편을 제공한다.
본 개시내용은 또한 표 A에 나열된 LCDR3 아미노산 서열 중 어느 하나와 짝을 이룬 표 A에 나열된 HCDR3 아미노산 서열 중 어느 하나를 포함하는 HCDR3 및 LCDR3 아미노산 서열 쌍(HCDR3/LCDR3)을 포함하는, STEAP2에 특이적으로 결합하는 항체 또는 그의 항원-결합 단편을 제공한다. 몇몇 구현예에 따라, 본 개시내용은 표 A에 나열된 예시적인 항-STEAP2 항체 중 어느 하나내에 함유된 HCDR3/LCDR3 아미노산 서열 쌍을 포함하는 항체 또는 그의 항원-결합 단편을 제공한다. 몇몇 구현예에서, HCDR3/LCDR3 아미노산 서열 쌍은 국제 공보 제 WO 2018/058001 A1 호(내용 전체가 본원에 참고로 인용된다)에 기재된 바와 같이; 256/254로 이루어지는 그룹 중에서 선택된다.
본 개시내용은 또한 표 A에 나열된 예시적인 항-STEAP2 항체 중 어느 하나내에 함유된 6개 CDR의 세트(즉 HCDR1-HCDR2-HCDR3-LCDR1-LCDR2-LCDR3)를 포함하는, STEAP2에 특이적으로 결합하는 항체 또는 그의 항원-결합 단편을 제공한다. 몇몇 구현예에서, HCDR1-HCDR2-HCDR3-LCDR1-LCDR2-LCDR3 아미노산 서열 세트는 국제 공보 제 WO 2018/058001 A1 호(내용 전체가 본원에 참고로 인용된다)에 기재된 바와 같이; 252-254-256-260-262-264로 이루어지는 그룹 중에서 선택된다.
관련된 구현예에서, 본 개시내용은 표 A에 나열된 예시적인 항-STEAP2 항체 중 어느 하나에 의해 한정된 바와 같은 HCVR/LCVR 아미노산 서열 쌍내에 함유된 6개 CDR의 세트(즉 HCDR1-HCDR2-HCDR3-LCDR1-LCDR2-LCDR3)를 포함하는, STEAP2에 특이적으로 결합하는 항체 또는 그의 항원-결합 단편을 제공한다. 예를 들어, 본 개시내용은 국제 공보 제 WO 2018/058001 A1 호(내용 전체가 본원에 참고로 인용된다)에 기재된 바와 같이; 250/258로 이루어지는 그룹 중에서 선택된 HCVR/LCVR 아미노산 서열 쌍내에 함유된 HCDR1-HCDR2-HCDR3-LCDR1-LCDR2-LCDR3 아미노산 서열 세트를 포함하는, STEAP2에 특이적으로 결합하는 항체 또는 그의 항원-결합 단편을 포함한다. HCVR 및 LCVR 아미노산 서열내에서 CDR을 식별하는 방법 및 기법은 당해 분야에 주지되어 있으며 본원에 개시된 명시된 HCVR 및/또는 LCVR 아미노산 서열내에서 CDR을 식별하는데 사용할 수 있다. CDR의 경계를 식별하는데 사용될 수 있는 예시적인 규약은 예를 들어 Kabat 정의, Chothia 정의, 및 AbM 정의를 포함한다. 일반적으로, Kabat 정의는 서열 가변성에 기초하고, Chothia 정의는 구조적 루프 영역의 위치에 기초하며, AbM 정의는 Kabat과 Chothia 접근법의 절충이다. 예를 들어 하기의 문헌을 참조하시오: Kabat, "Sequences of Proteins of Immunological Interest," National Institutes of Health, Bethesda, Md. (1991); Al-Lazikani et al., J. Mol. Biol. 273:927-948 (1997); 및 Martin et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 86:9268-9272 (1989). 공개 데이터베이스를 또한 항체내 CDR 서열의 식별에 이용할 수 있다.
본 개시내용은 표 A에 나열된 HCVR 아미노산 서열 중 어느 하나 중에서 선택된 아미노산 서열, 또는 상기에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98%, 또는 적어도 99% 서열 일치성을 갖는 그의 실질적으로 유사한 서열을 포함하는 HCVR을 포함하는, PRLR에 특이적으로 결합하는 항체 또는 그의 항원-결합 단편을 제공한다.
본 개시내용은 표 A에 나열된 LCVR 아미노산 서열 중 어느 하나 중에서 선택된 아미노산 서열, 또는 상기에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98%, 또는 적어도 99% 서열 일치성을 갖는 그의 실질적으로 유사한 서열을 포함하는 LCVR을 포함하는, PRLR에 특이적으로 결합하는 항체 또는 그의 항원-결합 단편을 제공한다.
본 개시내용은 또한 표 A에 나열된 LCVR 아미노산 서열 중 어느 하나와 짝을 이룬 표 A에 나열된 HCVR 아미노산 서열 중 어느 하나를 포함하는 HCVR 및 LCVR 아미노산 서열 쌍(HCVR/LCVR)을 포함하는, PRLR에 특이적으로 결합하는 항체 또는 그의 항원-결합 단편을 제공한다. 몇몇 구현예에 따라, 본 개시내용은 표 A에 나열된 예시적인 항-PRLR 항체 중 어느 하나내에 함유된 HCVR/LCVR 아미노산 서열 쌍을 포함하는 항체 또는 그의 항원-결합 단편을 제공한다. 몇몇 구현예에서, HCVR/LCVR 아미노산 서열 쌍은 국제 공보 제 WO 2015/026907 A1 호(내용 전체가 본원에 참고로 인용된다)에 기재된 바와 같이; 18/26; 66/74; 274/282; 290/298; 및 370/378로 이루어지는 그룹 중에서 선택된다.
본 개시내용은 표 A에 나열된 중쇄 CDR1(HCDR1) 아미노산 서열 중 어느 하나 중에서 선택된 아미노산 서열, 또는 상기에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98%, 또는 적어도 99% 서열 일치성을 갖는 그의 실질적으로 유사한 서열을 포함하는 HCDR1을 포함하는, PRLR에 특이적으로 결합하는 항체 또는 그의 항원-결합 단편을 제공한다.
본 개시내용은 표 A에 나열된 중쇄 CDR2(HCDR2) 아미노산 서열 중 어느 하나 중에서 선택된 아미노산 서열, 또는 상기에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98%, 또는 적어도 99% 서열 일치성을 갖는 그의 실질적으로 유사한 서열을 포함하는 HCDR2를 포함하는, PRLR에 특이적으로 결합하는 항체 또는 그의 항원-결합 단편을 제공한다.
본 개시내용은 표 A에 나열된 중쇄 CDR3(HCDR3) 아미노산 서열 중 어느 하나 중에서 선택된 아미노산 서열, 또는 상기에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98%, 또는 적어도 99% 서열 일치성을 갖는 그의 실질적으로 유사한 서열을 포함하는 HCDR3을 포함하는, PRLR에 특이적으로 결합하는 항체 또는 그의 항원-결합 단편을 제공한다.
본 개시내용은 표 A에 나열된 경쇄 CDR1(LCDR1) 아미노산 서열 중 어느 하나 중에서 선택된 아미노산 서열, 또는 상기에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98%, 또는 적어도 99% 서열 일치성을 갖는 그의 실질적으로 유사한 서열을 포함하는 LCDR1을 포함하는, PRLR에 특이적으로 결합하는 항체 또는 그의 항원-결합 단편을 제공한다.
본 개시내용은 표 A에 나열된 경쇄 CDR2(LCDR2) 아미노산 서열 중 어느 하나 중에서 선택된 아미노산 서열, 또는 상기에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98%, 또는 적어도 99% 서열 일치성을 갖는 그의 실질적으로 유사한 서열을 포함하는 LCDR2를 포함하는, PRLR에 특이적으로 결합하는 항체 또는 그의 항원-결합 단편을 제공한다.
본 개시내용은 표 A에 나열된 경쇄 CDR3(LCDR3) 아미노산 서열 중 어느 하나 중에서 선택된 아미노산 서열, 또는 상기에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98%, 또는 적어도 99% 서열 일치성을 갖는 그의 실질적으로 유사한 서열을 포함하는 LCDR3을 포함하는, PRLR에 특이적으로 결합하는 항체 또는 그의 항원-결합 단편을 제공한다.
본 개시내용은 또한 표 A에 나열된 LCDR3 아미노산 서열 중 어느 하나와 짝을 이룬 표 A에 나열된 HCDR3 아미노산 서열 중 어느 하나를 포함하는 HCDR3 및 LCDR3 아미노산 서열 쌍(HCDR3/LCDR3)을 포함하는, PRLR에 특이적으로 결합하는 항체 또는 그의 항원-결합 단편을 제공한다. 몇몇 구현예에 따라, 본 개시내용은 표 A에 나열된 예시적인 항-PRLR 항체 중 어느 하나내에 함유된 HCDR3/LCDR3 아미노산 서열 쌍을 포함하는 항체 또는 그의 항원-결합 단편을 제공한다. 몇몇 구현예에서, HCDR3/LCDR3 아미노산 서열 쌍은 국제 공보 제 WO 2015/026907 A1 호(내용 전체가 본원에 참고로 인용된다)에 기재된 바와 같이; 24/32; 72/80; 280/288; 296/304; 및 376/384로 이루어지는 그룹 중에서 선택된다.
본 개시내용은 또한 표 A에 나열된 예시적인 항-PRLR 항체 중 어느 하나내에 함유된 6개 CDR의 세트(즉 HCDR1-HCDR2-HCDR3-LCDR1-LCDR2-LCDR3)를 포함하는, PRLR에 특이적으로 결합하는 항체 또는 그의 항원-결합 단편을 제공한다. 몇몇 구현예에서, HCDR1-HCDR2-HCDR3-LCDR1-LCDR2-LCDR3 아미노산 서열 세트는 국제 공보 제 WO 2015/026907 A1 호(내용 전체가 본원에 참고로 인용된다)에 기재된 바와 같이; 20-22-24-28-30-32; 68-70-72-76- 78-80; 276-278-280-284-286-288; 292-294-296-300-302-304; 및 372-374-376-380-382-384로 이루어지는 그룹 중에서 선택된다.
관련된 구현예에서, 본 개시내용은 표 A에 나열된 예시적인 항-PRLR 항체 중 어느 하나에 의해 한정된 바와 같은 HCVR/LCVR 아미노산 서열 쌍내에 함유된 6개 CDR의 세트(즉 HCDR1-HCDR2-HCDR3-LCDR1-LCDR2-LCDR3)를 포함하는, PRLR에 특이적으로 결합하는 항체 또는 그의 항원-결합 단편을 제공한다. 예를 들어, 본 개시내용은 국제 공보 제 WO 2015/026907 A1 호(내용 전체가 본원에 참고로 인용된다)에 기재된 바와 같이; 18/26; 66/74; 274/282; 290/298; 및 370/378로 이루어지는 그룹 중에서 선택된 HCVR/LCVR 아미노산 서열 쌍내에 함유된 HCDR1-HCDR2-HCDR3-LCDR1-LCDR2-LCDR3 아미노산 서열 세트를 포함하는, PRLR에 특이적으로 결합하는 항체 또는 그의 항원-결합 단편을 제공한다. HCVR 및 LCVR 아미노산 서열내에서 CDR을 식별하는 방법 및 기법은 당해 분야에 주지되어 있으며 본원에 개시된 명시된 HCVR 및/또는 LCVR 아미노산 서열내에서 CDR을 식별하는데 사용할 수 있다. CDR의 경계를 식별하는데 사용될 수 있는 예시적인 규약은 예를 들어 Kabat 정의, Chothia 정의, 및 AbM 정의를 포함한다. 일반적으로, Kabat 정의는 서열 가변성에 기초하고, Chothia 정의는 구조적 루프 영역의 위치에 기초하며, AbM 정의는 Kabat과 Chothia 접근법의 절충이다. 예를 들어 하기의 문헌을 참조하시오: Kabat, "Sequences of Proteins of Immunological Interest," National Institutes of Health, Bethesda, Md. (1991); Al-Lazikani et al., J. Mol. Biol. 273:927-948 (1997); 및 Martin et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 86:9268-9272 (1989). 공개 데이터베이스를 또한 항체내 CDR 서열의 식별에 이용할 수 있다.
결합제 링커를 항체 또는 항원-결합 분자내의 특정 아미노산에서의 부착을 통해 결합제, 예를 들어 상기 항체 또는 항원-결합 분자에 결합시킬 수 있다. 본 개시내용의 상기 구현예의 상황에서 사용될 수 있는 예시적인 아미노산 부착은 예를 들어 리신(예를 들어 하기를 참조하시오, US 5,208,020; US 2010/0129314; Hollander et al., Bioconjugate Chem., 2008, 19:358-361; WO 2005/089808; US 5,714,586; US 2013/0101546; 및 US 2012/0585592), 시스테인(예를 들어 하기를 참조하시오, US 2007/0258987; WO 2013/055993; WO 2013/055990; WO 2013/053873; WO 2013/053872; WO 2011/130598; US 2013/0101546; 및 US 7,750,116), 셀레노시스테인(예를 들어 하기를 참조하시오, WO 2008/122039; 및 Hofer et al., Proc. Natl. Acad. Sci., USA, 2008, 105:12451-12456), 포르밀 글리신(예를 들어 하기를 참조하시오, Carrico et al., Nat. Chem. Biol., 2007, 3:321-322; Agarwal et al., Proc. Natl. Acad. Sci., USA, 2013, 110:46-51, 및 Rabuka et al., Nat. Protocols, 2012, 10:1052-1067), 비천연 아미노산(예를 들어 하기를 참조하시오, WO 2013/068874, 및 WO 2012/166559), 및 산성 아미노산(예를 들어 하기를 참조하시오, WO 2012/05982)을 포함한다. 링커를 또한 탄수화물에의 부착을 통해 항원-결합 단백질에 접합시킬 수 있다(예를 들어 하기를 참조하시오, US 2008/0305497, WO 2014/065661, 및 Ryan et al., Food & Agriculture Immunol., 2001, 13:127-130).
일부 예에서, 결합제는 항체 또는 항원 결합 분자이며, 상기 항체를 리신 잔기를 통해 링커에 결합시킨다. 일부 구현예에서, 상기 항체 또는 항원 결합 분자를 시스테인 잔기를 통해 링커에 결합시킨다.
링커를 또한 트랜스글루타미나제-기반 화학-효소 접합을 통해 하나 이상의 글루타민 잔기에 접합시킬 수 있다(예를 들어 문헌[Dennler et al., Bioconjugate Chem. 2014, 25, 569-578]을 참조하시오). 예를 들어, 트랜스글루타미나제의 존재하에서, 항체의 하나 이상의 글루타민 잔기를 1차 아민 화합물에 결합시킬 수 있다. 1차 아민 화합물은 예를 들어 트랜스글루타미나제-매개된 결합을 통해 항체 약물 접합체를 직접 제공하는 페이로드, 또는 링커-페이로드를 포함한다. 1차 아민 화합물은 또한 항체 약물 접합체의 합성을 향해 추가의 화합물과 후속적으로 반응할 수 있는 반응성기로 기능화된 링커 및 이격기를 포함한다. 글루타민 잔기를 포함하는 항체를 천연 공급원으로부터 단리하거나 또는 하나 이상의 글루타민 잔기를 포함하도록 조작할 수 있다. 글루타민 잔기를 항체 폴리펩티드 쇄로 조작하기 위한 기법(글루타미닐-변형된 항체 또는 항원 결합 분자)은 당업자의 기술내에 있다. 몇몇 구현예에서, 항체는 아글리코실화된다.
몇몇 구현예에서, 항체 또는 글루타미닐-변형된 항체 또는 항원 결합 분자는 적어도 하나의 폴리펩티드 쇄 서열 중에 적어도 하나의 글루타민 잔기를 포함한다. 몇몇 구현예에서, 상기 항체 또는 글루타미닐-변형된 항체 또는 항원 결합 분자는 각각 하나의 Gln295 또는 Q295 잔기를 갖는 2개의 중쇄 폴리펩티드를 포함한다. 추가의 구현예에서, 상기 항체 또는 글루타미닐-변형된 항체 또는 항원 결합 분자는 중쇄 295 외의 부위에 하나 이상의 글루타민 잔기를 포함한다. 본원은 본원에 기재된 N297Q 돌연변이(들)를 갖는 본 섹션의 항체를 포함한다.
1차 아민 화합물
몇몇 구현예에서, 글루타민을 포함하는 항체(또는 항원 결합 화합물)의 트랜스글루타미나제 매개된 커플링에 유용한 1차 아민 화합물은 당업자에 의해 유용한 것으로 여겨지는 임의의 1차 아민 화합물일 수 있다. 일반적으로, 상기 1차 아민 화합물은 화학식 H2N-R을 가지며, 여기에서 R은 항체 및 반응 조건과 양립성인 임의의 기일 수 있다. 몇몇 구현예에서, R은 알킬, 치환된 알킬, 헤테로알킬, 또는 치환된 헤테로알킬이다.
일부 구현예에서, 상기 1차 아민 화합물은 반응성기 또는 보호된 반응성기를 포함한다. 유용한 반응성기는 아지드, 알킨, 사이클로알킨, 티올, 알콜, 케톤, 알데히드, 카복실산, 에스테르, 아미드, 하이드라지드, 아닐린 및 아민을 포함한다. 몇몇 구현예에서, 상기 반응성기는 아지드, 알킨, 설프히드릴, 사이클로알킨, 알데히드, 및 카복실로 이루어지는 그룹 중에서 선택된다.
몇몇 구현예에서, 상기 1차 아민 화합물은 화학식 H2N-LL-X에 따르며, 여기에서 LL은 2가 이격기이고 X는 반응성기 또는 보호된 반응성기이다. 특정 구현예에서, LL은 2가 폴리에틸렌 글리콜(PEG)기이다. 몇몇 구현예에서, X는 -SH, -N3, 알킨, 알데히드, 및 테트라졸로 이루어지는 그룹 중에서 선택된다. 특정 구현예에서, X는 -N3이다.
몇몇 구현예에서, 상기 1차 아민 화합물은 하기 화학식 중 하나에 따른다:
H2N-(CH2) n -X;
H2N-(CH2CH2O) n -(CH2) p -X;
H2N-(CH2) n -N(H)C(O)-(CH2) m -X;
H2N-(CH2CH2O) n -N(H)C(O)-(CH2CH2O) m -(CH2) p -X;
H2N-(CH2) n -C(O)N(H)-(CH2) m -X;
H2N-(CH2CH2O) n -C(O)N(H)-(CH2CH2O) m -(CH2)p-X;
H2N-(CH2) n -N(H)C(O)-(CH2CH2O) m -(CH2)p-X;
H2N-(CH2CH2O) n -N(H)C(O)-(CH2) m -X;
H2N-(CH2) n -C(O)N(H)-(CH2CH2O) m -(CH2) p -X; 및
H2N-(CH2CH2O) n -C(O)N(H)-(CH2) m -X;
상기에서, n은 1 내지 12 중에서 선택된 정수이고;
m은 0 내지 12 중에서 선택된 정수이고;
p는 0 내지 2 중에서 선택된 정수이고;
X는 -SH, -N3, -C≡CH, -C(O)H, 테트라졸, 및 하기 중 어느 하나로 이루어지는 그룹 중에서 선택된다:
Figure pct00153
상기에서, 알킬 또는 알킬렌(즉 -CH2-) 기 중 어느 하나를, 예를 들어 C1-8알킬, 메틸포르밀, 또는 -SO3H로 임의로 치환시킬 수 있다. 몇몇 구현예에서, 상기 알킬기는 치환되지 않는다.
몇몇 구현예에서, 상기 1차 아민 화합물은 하기로 이루어지는 그룹 중에서 선택된다:
Figure pct00154
및
Figure pct00155
특정 구현예에서, 상기 1차 아민 화합물은
Figure pct00156
이다.
상기 반응에 대한 예시적인 조건은 하기 실시예에서 제공된다.
링커
몇몇 구현예에서, 본원에 기재된 접합체의 링커 L 부분은 결합제를 본원에 기재된 페이로드 화합물에 공유적으로 연결하는 모이어티, 예를 들어 2가 모이어티이다. 다른 경우에, 상기 링커 L은 결합제를 본원에 기재된 페이로드 화합물에 공유적으로 연결하는 3가 또는 다가 모이어티이다. 적합한 링커를 예를 들어 하기의 문헌에서 찾을 수 있으며: Antibody-Drug Conjugates and Immunotoxins; Phillips, G. L., Ed.; Springer Verlag: New York, 2013; Antibody-Drug Conjugates; Ducry, L., Ed.; Humana Press, 2013; Antibody-Drug Conjugates; Wang, J., Shen, W.-C., 및 Zaro, J. L., Eds.; Springer International Publishing, 2015, 각각의 내용은 전체가 본원에 참고로 인용된다. 몇몇 구현예에서, 본원에 기재된 링커-페이로드의 링커 L 부분은 결합제를 본원에 기재된 페이로드 화합물에 2가로 공유 결합시킬 수 있는, 본원에 기재된 페이로드 화합물에 공유 결합된 모이어티이다. 다른 경우에, 본원에 기재된 링커-페이로드의 링커 L 부분은 3가 또는 다가 모이어티로서, 결합제를 본원에 기재된 페이로드 화합물에 공유 결합시킬 수 있는, 본원에 기재된 페이로드 화합물에 공유 결합된 모이어티이다. 페이로드 화합물은 상기 화학식 I, II, III, IV, V, VI, VII, VIII IX, X, XI, 및 XII의 화합물을 포함하며, 링커 L과의 결합 또는 통합에 따른 그의 잔기가 링커-페이로드이다. 링커-페이로드를 결합제, 예를 들어 항체 또는 그의 항원 결합 단편에 추가로 결합시켜 항체-약물 접합체를 형성시킬 수 있다. 당업자는 페이로드 모이어티의 몇몇 작용기가 링커 및/또는 결합제에의 연결에 편리함을 알 것이다. 예를 들어, 몇몇 구현예에서, 링커는 존재하지 않고 페이로드가 결합제에 직접 결합된다. 하나의 구현예에서, 페이로드는 말단 알킨을 포함하고, 결합제는 아지드를 포함하며, 여기에서 각각의 알킨 및 아지드는 페이로드 잔기를 결합제 잔기에 직접 결합시키는 위치이성질체성 클릭 화학에 관여한다. 또 다른 구현예에서, 페이로드는 카복실산을 포함하고 결합제는 리신을 포함하며, 여기에서 각각의 카복실산 및 리신은 페이로드 잔기를 결합제 잔기에 직접 결합시키는 아미드 결합 형성에 관여한다. 페이로드 작용기는 아민(예를 들어, 화학식 C, D, LPc, 및 LPd), 4급 암모늄 이온(예를 들어, 화학식 A 및 LPa), 하이드록실(예를 들어, 화학식 C, D, LPc, 및 LPd), 포스페이트, 카복실산(예를 들어, 화학식 B, D, LPb, 및 LPd에서와 같이, L에 결합시 에스테르의 형태로), 히드라지드(예를 들어, 화학식 B 및 LPb), 아미드(예를 들어, 화학식 C 및 LPc의 아닐린, 또는 화학식 D 및 LPd의 아민으로부터 유래됨), 및 당을 추가로 포함한다.
몇몇 구현예에서, 상기 링커는 생리학적 조건하에서 안정하다. 몇몇 구현예에서, 상기 링커는 절단가능하다, 예를 들어 효소의 존재하에서 또는 특정 pH 범위 또는 값에서 적어도 페이로드 부분을 방출할 수 있다. 일부 구현예에서, 링커는 효소-절단성 모이어티를 포함한다. 예시적인 효소-절단성 모이어티는 비제한적으로 펩티드 결합, 에스테르 결합, 히드라존, β-글루쿠로니드 결합, 및 디설파이드 결합을 포함한다. 일부 구현예에서, 상기 링커는 카뎁신-절단성 링커를 포함한다. 일부 구현예에서, 링커는 β-글루쿠로니다제(GUSB)-절단성 링커를 포함한다(예를 들어 Creative Biolabs, creative-biolabs.com/adc/beta-glucuronide-linker.htm, 또는 문헌[ACS Med. Chem. Lett.　2010, 1: 277-280]으로부터의 GUSB 링커를 참조하시오).
일부 구현예에서, 상기 링커는 비-절단성 모이어티를 포함한다. 일부 구현예에서, 상기 비-절단성 링커는
Figure pct00157
또는 그의 잔기로부터 유래된다. 일부 구현예에서, 상기 비-절단성 링커-페이로드 잔기는
Figure pct00158
또는 그의 위치이성질체이다. 일부 구현예에서, 상기 비-절단성 링커는
Figure pct00159
또는 그의 잔기로부터 유래된다. 일부 구현예에서, 상기 비-절단성 링커-페이로드 잔기는
Figure pct00160
또는 그의 위치이성질체이다. 일부 구현예에서, 상기 링커는 말레이미드 사이클로헥산 카복실레이트 또는 4-(N-말레이미도메틸)사이클로헥산카복실산(MCC)이다. 상기 구조들에서,
Figure pct00161
는 결합제에 대한 결합을 가리킨다. 상기 구조들에서, 일부 예에서,
Figure pct00162
는 예를 들어 아지드 또는 알킨 작용기를 갖는 결합제와 상보성 알킨 또는 아지드 작용기를 갖는 링커 페이로드의 반응으로부터 생성되는 클릭 화학 잔기를 가리킨다. 하나의 구현예에서,
Figure pct00163
는 예를 들어, 마이클 부가 반응을 통해 하나 이상의 결합제 시스테인과 말레이미드 작용기를 갖는 하나 이상의 링커 또는 링커-페이로드와의 반응으로부터 생성되는 2가 설파이드를 가리킨다. 상기 구조들에서, 다른 예에서,
Figure pct00164
는 예를 들어, 당업자에 의해 인식되는 바와 같이, 하나 이상의 결합제 리신과 활성화되거나 활성화되지 않은 카복실 작용기를 갖는 하나 이상의 링커 또는 링커-페이로드와의 반응으로부터 생성되는 아미드 결합을 가리킨다. 상기 구조들에서, 다른 예에서,
Figure pct00165
는 예를 들어, 당업자에 의해 인식되는 바와 같이 하나 이상의 결합제 리신과 활성화된 카복실 작용기를 갖는 하나 이상의 링커 또는 링커-페이로드와의 반응으로부터 생성되는 아미드 결합을 가리킨다.
일부 구현예에서, 적합한 링커는 비제한적으로, 단일 결합제, 예를 들어 항체의 2개의 시스테인 잔기에 화학적으로 결합되는 것들을 포함한다. 상기와 같은 링커는 접합 과정의 결과로서 붕괴되는 항체의 디설파이드 결합을 모방하는 작용을 할 수 있다.
일부 구현예에서, 상기 링커는 하나 이상의 아미노산을 포함한다. 적합한 아미노산은 천연, 비-천연, 표준, 비-표준, 단백질생성, 비-단백질생성, 및 L- 또는 D-α-아미노산을 포함한다. 일부 구현예에서, 상기 링커는 알라닌, 발린, 글리신, 류신, 이소류신, 메티오닌, 트립토판, 페닐알라닌, 프롤린, 세린, 쓰레오닌, 시스테인, 티로신, 아스파라진, 글루타민, 아스파트산, 글루탐산, 리신, 아르기닌, 히스티딘 또는 시트룰린, 이들의 유도체, 또는 이들의 임의의 조합(예를 들어 디펩티드, 트리펩티드, 올리고펩티드, 폴리펩티드 등)을 포함한다. 몇몇 구현예에서, 상기 아미노산의 하나 이상의 측쇄는 하기에 기재된 측쇄기에 연결된다. 일부 구현예에서, 상기 링커는 아미노산 발린 및 시트룰린을 포함하거나 또는 이들로 이루어지는 펩티드(예를 들어 2가-Val-Cit- 또는 2가-VCit-)이다. 일부 구현예에서, 상기 링커는 아미노산 알라닌 및 알라닌, 또는 2가-AA-를 포함하거나 또는 이들로 이루어지는 펩티드이다. 일부 구현예에서, 상기 링커는 아미노산 글루탐산 및 알라닌, 또는 -EA-를 포함하거나 또는 이들로 이루어지는 펩티드이다. 일부 구현예에서, 상기 링커는 아미노산 글루탐산 및 글리신, 또는 -EG-를 포함하거나 또는 이들로 이루어지는 펩티드이다. 일부 구현예에서, 상기 링커는 아미노산 글리신 및 글리신, 또는 -GG-를 포함하거나 또는 이들로 이루어지는 펩티드이다. 일부 구현예에서, 상기 링커는 아미노산 글루타민, 발린, 및 시트룰린, 또는 -Q-V-Cit- 또는 -QVCit-를 포함하거나 또는 이들로 이루어지는 펩티드이다. 일부 구현예에서, 상기 링커는 아미노산 글루탐산, 발린 및 시트룰린, 또는 -E-V-Cit- 또는 -EVCit-를 포함하거나 또는 이들로 이루어지는 펩티드이다. 일부 구현예에서, 상기 링커는 아미노산 -GGGGS-를 포함하거나 또는 이들로 이루어지는 펩티드이다. 일부 구현예에서, 상기 링커는 아미노산 -GGGGG-를 포함하거나 또는 이들로 이루어지는 펩티드이다. 일부 구현예에서, 상기 링커는 아미노산 -GGGGK-를 포함하거나 또는 이들로 이루어지는 펩티드이다. 일부 구현예에서, 상기 링커는 아미노산 -GFGG-를 포함하거나 또는 이들로 이루어지는 펩티드이다. 일부 구현예에서, 상기 링커는 아미노산 리신, 발린, 및 시트룰린, 또는 -KVCit-를 포함하거나 또는 이들로 이루어지는 펩티드이다. 일부 구현예에서, 상기 링커는 아미노산 -KVA-를 포함하거나 또는 이들로 이루어지는 펩티드이다. 일부 구현예에서, 상기 링커는 아미노산 -VA-를 포함하거나 또는 이들로 이루어지는 펩티드이다. 본 단락, 및 본 명세서 전체를 통한 구현예 중 어느 하나에서, 당업자에 의해 인식되는 바와 같이, 표준 3문자 또는 1문자 아미노산 표시가 사용된다. 예시적인 1문자 아미노산 표시는 글리신의 경우 G, 리신의 경우 K, 세린의 경우 S, 발린의 경우 V, 알라닌의 경우 A, 및 페닐알라닌의 경우 F를 포함한다.
일부 구현예에서, 상기 링커는 자기-희생기를 포함한다. 상기 자기-희생기는 당업자에 공지된 임의의 상기와 같은 기일 수 있다. 특정 구현예에서, 상기 자기-희생기는 p-아미노벤질(PAB) 또는 그의 유도체이다. 유용한 유도체는 p-아미노벤질옥시카보닐(PABC)이다. 당업자는 자기-희생기가 페이로드로부터 링커의 나머지 원자를 방출시키는 화학 반응을 수행할 수 있음을 알 것이다.
일부 구현예에서, 상기 링커는 하기와 같다:
Figure pct00166
상기에서, SP1은 이격기이고;
SP2는 이격기이고;
Figure pct00167
는 결합제에 대한 하나 이상의 결합이고;
Figure pct00168
는 페이로드에 대한 하나 이상의 결합이고;
각각의 AA는 아미노산 잔기이고;
n은 1 내지 10의 정수이다.
상기 SP1 이격기는 (AA)n 모이어티 또는 잔기를, 결합제(BA) 또는 BA에 결합하는 반응성기 잔기에 연결시키는 모이어티이다. 적합한 SP1 이격기는 비제한적으로 알킬렌 또는 폴리에테르, 또는 이 둘 모두를 포함하는 것들을 포함한다. 상기 이격기의 단부, 예를 들어 BA 또는 AA에 결합되는 이격기의 부분은 접합체의 화학 합성 동안 항체 또는 AA를 상기 이격기에 커플링시키기 위해 사용되는 반응성 모이어티로부터 유래된 모이어티일 수 있다. 몇몇 구현예에서, n은 1, 2, 3 또는 4이다. 특정 구현예에서, n은 2이다. 특정 구현예에서, n은 3이다. 특정 구현예에서, n은 4이다.
일부 구현예에서, 상기 SP1 이격기는 알킬렌을 포함한다. 일부 구현예에서, 상기 SP1 이격기는 C5-7 알킬렌을 포함한다. 일부 구현예에서, 상기 SP1 이격기는 폴리에테르를 포함한다. 일부 구현예에서, 상기 SP1 이격기는 에틸렌 옥사이드의 중합체, 예를 들어 폴리에틸렌 글리콜을 포함한다.
일부 구현예에서, 상기 SP1 이격기는 하기와 같다:
Figure pct00169
또는
Figure pct00170
상기에서, RG'는 반응성기 RG와 결합제와의 반응에 따른 반응성기 잔기이고;
Figure pct00171
는 결합제에 대한 결합이고;
Figure pct00172
는 (AA)n에 대한 결합이고, 여기에서 n은 1 내지 10의 정수이며;
b는 2 내지 8의 정수이다.
상기 반응성기 RG는 결합제에 대해 하나 이상의 결합을 형성시킬 수 있는 것으로 당업자에게 공지된 임의의 반응성기일 수 있다. 상기 반응성기 RG는 그의 구조 중에 결합제와 반응하여(예를 들어 그의 시스테인 또는 리신 잔기에서 또는 아지드 모이어티에서 항체와, 예를 들어 하나 이상의 글루타민 잔기에서 PEG-N3 기능화된 항체와 반응하여) 화학식 A, A', B, B', C, C', D 또는 D'의 화합물을 형성할 수 있는 부분을 포함하는 모이어티이다. 상기 반응성기는 결합제에의 접합에 이어서, 반응성기 잔기(RG')로 된다. 예시적인 반응성기는 비제한적으로, 결합제와 반응할 수 있는 할로아세틸, 이소티오시아네이트, 숙신이미드, N-하이드록시숙신이미드, 또는 말레이미드 부분을 포함하는 것들을 포함한다.
몇몇 구현예에서, 반응성기는 비제한적으로 알킨을 포함한다. 몇몇 구현예에서, 상기 알킨은 변형된 알킨과 같이 구리 촉매의 부재하에서 아지드와 1,3-가환 반응을 겪을 수 있는 알킨이다. 변형된 알킨은 변형-촉진된 알킨-아지드 가환(SPAAC)에 적합하며, 사이클로알킨, 예를 들어 사이클로옥틴 및 벤젠고리화된 알킨을 포함한다. 적합한 알킨은 비제한적으로 디벤조아자사이클로옥틴 또는
Figure pct00173
(DIBAC), 디벤조사이클로옥틴 또는
Figure pct00174
(DIBO), 비아릴아자사이클로옥티논 또는
Figure pct00175
(BARAC), 디플루오르화된 사이클로옥틴 또는
Figure pct00176
, 또는
Figure pct00177
또는
Figure pct00178
(DIFO), 치환된, 예를 들어 플루오르화된 알킨, 아자-사이클로알킨, 비사이클[6.1.0]노닌 또는
Figure pct00179
(BCN) 및 그의 유도체를 포함한다. 특히 유용한 알킨은
Figure pct00180
,
Figure pct00181
및
Figure pct00182
을 포함한다.
몇몇 구현예에서, 상기 결합제는 RG'에 직접 결합된다. 몇몇 구현예에서, 상기 결합제는 이격기, 예를 들어
Figure pct00183
와 RG' 사이에 위치한 SP4를 통해 RG'에 결합된다. 특정 구현예에서, 상기 결합제는 SP4, 예를 들어 PEG 이격기를 통해 RG'에 간접적으로 결합된다. 하기에 상세히 논의되는 바와 같이, 몇몇 구현예에서, 상기 결합제는 하나 이상의 아지도기로 기능화시킴으로써 제조된다. 각각의 아지도기는 RG와 반응하여 RG'를 형성시킬 수 있다. 특정 구현예에서, 상기 결합제는 글루타민 잔기에 연결된 -PEG-N3으로 유도체화된다. 예시적인 -N3 유도체화된 결합제, 그의 제조 방법, 및 RG와의 반응에 사용하기 위한 방법을 본원에 제공한다. 몇몇 구현예에서, RG는 1,3-가환에 참여하기에 적합한 알킨이고, RG'는 RG와 아지도-기능화된 결합제와의 반응으로부터 형성된 위치이성질체성 1,2,3-트리아졸릴 모이어티이다. 추가의 예로서, 몇몇 구현예에서, RG'는
Figure pct00184
또는
Figure pct00185
, 또는 각각의 위치이성질체의 혼합물에 도시된 바와 같이 결합제에 연결된다. 각각의 R 및 R'는 본원에 기재되거나 예시된 바와 같다.
상기 SP2 이격기(존재하는 경우)는 (AA)n 모이어티를 페이로드에 연결시키는 모이어티이다. 적합한 이격기는 비제한적으로 SP1 이격기로서 상술한 것들을 포함한다. 추가의 적합한 SP2 이격기는 비제한적으로 알킬렌 또는 폴리에테르, 또는 이 둘 모두를 포함하는 것들을 포함한다. 상기 SP2 이격기의 단부, 예를 들어 페이로드 또는 AA에 직접 결합되는 이격기의 부분은 접합체의 화학 합성 동안 상기 페이로드 또는 AA를 상기 SP2 이격기에 커플링시키기 위해 사용되는 반응성 모이어티로부터 유래된 모이어티일 수 있다. 일부 예에서, 상기 SP2 이격기의 단부, 예를 들어 페이로드 또는 AA에 직접 결합된 SP2 이격기의 부분은 접합체의 화학 합성 동안 상기 페이로드 또는 AA를 상기 이격기에 커플링시키기 위해 사용되는 반응성 모이어티의 잔기일 수 있다.
일부 구현에에서, 상기 SP2 이격기(존재하는 경우)는 -NH-(p-C6H4)-CH2-, -NH-(p-C6H4)-CH2OC(O)-, 아미노산, 디펩티드, 트리펩티드, 올리고펩티드, -O-, -N(H)-,
Figure pct00186
,
Figure pct00187
,
Figure pct00188
,
Figure pct00189
,
Figure pct00190
,
Figure pct00191
,
Figure pct00192
,
Figure pct00193
,
Figure pct00194
,
Figure pct00195
,
Figure pct00196
,
Figure pct00197
,
Figure pct00198
,
Figure pct00199
, 및 이들의 임의의 조합으로 이루어지는 그룹 중에서 선택된다. 몇몇 구현에에서, 각각의
Figure pct00200
는 페이로드에 대한 결합이고, 각각의
Figure pct00201
는 (AA)n에 대한 결합이다.
상기 화학식에서, 각각의 (AA)n은 아미노산, 또는 임의로 p-아미노벤질옥시카보닐 잔기(PABC),
Figure pct00202
, 또는
Figure pct00203
이다. PABC가 존재하는 경우, 바람직하게는 단지 하나의 PABC만이 존재한다. 바람직하게, 상기 PABC는, 존재하는 경우, 페이로드에 가까운 (AA)n 기 중의 말단 AA에 결합된다.
Figure pct00204
또는
Figure pct00205
가 존재하는 경우, 오직
Figure pct00206
또는
Figure pct00207
만이 존재한다. 바람직하게,
Figure pct00208
또는
Figure pct00209
잔기는, 존재하는 경우, 벤질옥시카보닐 모이어티를 통해 페이로드에 결합되며, AA는 존재하지 않는다. 각각의 AA에 적합한 아미노산은 천연, 비-천연, 표준, 단백질생성, 비-단백질생성, 및 L- 또는 D-α-아미노산을 포함한다. 일부 구현예에서, AA는 알라닌, 발린, 류신, 이소류신, 메티오닌, 트립토판, 페닐알라닌, 프롤린, 세린, 쓰레오닌, 시스테인, 티로신, 아스파라진, 글루타민, 아스파트산, 글루탐산, 리신, 아르기닌, 히스티딘 또는 시트룰린, 이들의 유도체, 또는 이들의 임의의 조합(예를 들어 디펩티드, 트리펩티드, 및 올리고펩티드 등)을 포함한다. 몇몇 구현예에서, 상기 아미노산의 하나 이상의 측쇄는 하기에 기재된 측쇄기에 연결된다. 일부 구현예에서, n은 2이다. 일부 구현예에서, (AA)n은 발린-시트룰린이다. 일부 구현예에서, (AA)n은 시트룰린-발린이다. 일부 구현예에서, (AA)n은 발린-알라닌이다. 일부 구현예에서, (AA)n은 알라닌-발린이다. 일부 구현예에서, (AA)n은 발린-글리신이다. 일부 구현예에서, (AA)n은 글리신-발린이다. 일부 구현예에서, n은 3이다. 일부 구현예에서, (AA)n은 발린-시트룰린-PABC이다. 일부 구현예에서, (AA)n은 시트룰린-발린-PABC이다. 일부 구현예에서, (AA)n은 글루타메이트-발린-시트룰린이다. 일부 구현예에서, (AA)n은 글루타민-발린-시트룰린이다. 일부 구현예에서, (AA)n은 리신-발린-알라닌이다. 일부 구현예에서, (AA)n은 리신-발린-시트룰린이다. 일부 구현예에서, n은 4이다. 일부 구현예에서, (AA)n은 글루타메이트-발린-시트룰린-PAB이다. 일부 구현예에서, (AA)n은 글루타민-발린-시트룰린-PABC이다. 당업자는 PABC를 하기의 구조를 갖는 p-아미노벤질옥시카보닐의 잔기로서 인식할 것이다:
Figure pct00210
또는
Figure pct00211
상기 PABC 잔기는 시험관내 및 생체내에서 몇몇 링커의 절단을 촉진하는 것으로 나타났다. 당업자는 PAB를 p-아미노벤질 또는 -NH-(p-C6H4)-CH2-의 2가 잔기로서 인식할 것이다.
일부 구현예에서, 상기 링커는 하기와 같다:
Figure pct00212
또는
Figure pct00213
;
Figure pct00214
또는
Figure pct00215
; 또는
Figure pct00216
또는
Figure pct00217
상기에서:
각각의
Figure pct00218
는 결합제에 대한 결합이고;
각각의
Figure pct00219
는 페이로드에 대한 결합이고;
각각의 R9는 -CH3 또는 -(CH2)3N(H)C(O)NH2이고;
각각의 A는 -O-, -N(H)-,
Figure pct00220
또는
Figure pct00221
이고, 여기에서 ZZ는 수소, 또는 본원의 어딘가에 논의된 바와 같은 아미노산에 대한 측쇄이다. 추가의 예로서, 하나의 구현예에서, ZZ는 C1-6 알킬이다. 추가의 예로서, 하나의 구현예에서, ZZ는 C1-6 헤테로알킬이다. 본 단락의 특정 구현예에서, A는 본원의 어딘가에 기재된 바와 같이, X가 -N3인 1차 아민 화합물 또는 그의 잔기로부터 유래될 수 있다. 상기 구현예에서, 1,2,3-트리아졸 잔기는 본원의 어딘가에 기재된 바와 같이, 본원에 기재된 화합물 또는 페이로드의 알킨 또는 말단 아세틸렌과의 클릭 화학 반응에 참여한 이후의 아지드로부터 유래된다. 상응하게, 하나의 비제한적인 예에서, A는
Figure pct00222
또는
Figure pct00223
, 또는 이들의 혼합물이다. 한편으로, 또 다른 구현예에서, A는
Figure pct00224
또는
Figure pct00225
, 또는 이들의 혼합물이다. 또 다른 구현예에서, A는
Figure pct00226
또는
Figure pct00227
, 또는 이들의 혼합물이다. 또 다른 구현예에서, A는
Figure pct00228
또는
Figure pct00229
, 또는 이들의 혼합물이다. 상기에 논의된 바와 같이, 결합제에 대한 결합은 직접적이거나, 또는 이격기를 통해서일 수 있다. 몇몇 구현예에서, 상기 결합제에 대한 결합은 PEG 이격기를 통해 상기 결합제의 글루타민 잔기에 대한 것이다.
일부 구현예에서, 상기 링커는 하기와 같다:
Figure pct00230
Figure pct00231
또는
Figure pct00232
상기에서:
각각의
Figure pct00233
는 결합제에 대한 결합이고;
각각의
Figure pct00234
는 페이로드에 대한 결합이고;
각각의 R9는 -CH3 또는 -(CH2)3N(H)C(O)NH2이고;
각각의 A는 -O-, -N(H)-,
Figure pct00235
또는
Figure pct00236
이고, 여기에서 ZZ는 수소, 또는 본원의 어딘가에 논의된 바와 같은 아미노산에 대한 측쇄이다. 예를 들어, 하나의 구현예에서, ZZ는 C1-6 알킬이다. 추가의 예로서, 하나의 구현예에서, ZZ는 C1-6 헤테로알킬이다. 본 단락의 특정 구현예에서, A는 본원의 어딘가에 기재된 바와 같이, X가 -N3인 1차 아민 화합물 또는 그의 잔기로부터 유래될 수 있다. 상기 구현예에서, 1,2,3-트리아졸 잔기는 본원의 어딘가에 기재된 바와 같이, 본원에 기재된 화합물 또는 페이로드의 알킨 또는 말단 아세틸렌과의 클릭 화학 반응에 참여한 이후의 아지드로부터 유래된다. 상응하게, 하나의 비제한적인 예에서, A는
Figure pct00237
또는
Figure pct00238
, 또는 이들의 혼합물이다. 한편으로, 또 다른 구현예에서, A는
Figure pct00239
또는
Figure pct00240
, 또는 이들의 혼합물이다. 또 다른 구현예에서, A는
Figure pct00241
또는
Figure pct00242
, 또는 이들의 혼합물이다. 또 다른 구현예에서, A는
Figure pct00243
또는
Figure pct00244
, 또는 이들의 혼합물이다. 상기에 논의된 바와 같이, 결합제에 대한 결합은 직접적이거나, 또는 이격기를 통해서일 수 있다. 몇몇 구현예에서, 상기 결합제에 대한 결합은 PEG 이격기를 통해 상기 결합제의 글루타민 잔기에 대한 것이다.
상기 구현예 중 어느 하나에서, (AA)n 기는 하나 이상의 강화기로 변형될 수 있다. 유리하게, 강화기를 (AA)n 중의 임의의 아미노산의 측쇄에 연결할 수 있다. 강화기 연결에 유용한 아미노산은 리신, 아스파라진, 아스파테이트, 글루타민, 글루타메이트, 및 시트룰린을 포함한다. 상기 강화기에의 연결은 아미노산 측쇄에 대한 직접 결합일 수 있거나, 또는 상기 연결은 이격기 및/또는 반응성기를 통해 간접적일 수 있다. 유용한 이격기 및 반응성기는 상술한 임의의 것을 포함한다. 상기 강화기는 당업자에 의해 유용한 것으로 여겨지는 임의의 기일 수 있다. 예를 들어, 상기 강화기는 상기 화합물, 페이로드, 링커 페이로드, 또는 항체 접합체에, 비제한적으로 생물학적, 생화학적, 합성, 용해, 영상화, 검출 및 반응성 효과 등을 포함한 이로운 효과를 부여하는 임의의 기일 수 있다. 몇몇 구현예에서, 상기 강화기는 친수성기이다. 몇몇 구현예에서, 상기 강화기는 사이클로덱스트린이다. 몇몇 구현예에서, 상기 강화기는 알킬, 헤테로알킬, 알킬레닐, 헤테로알킬레닐 설폰산, 헤테로알킬레닐 타우린, 헤테로알킬레닐 인산 또는 포스페이트, 헤테로알킬레닐 아민(예를 들어 4급 아민), 또는 헤테로알킬레닐 당이다. 몇몇 구현예에서, 당은 비제한적으로 모노사카라이드, 디사카라이드, 및 폴리사카라이드를 포함한다. 예시적인 모노사카라이드는 글루코스, 리보스, 데옥시리보스, 자일로스, 아라비노스, 만노스, 갈락토스, 프럭토스 등을 포함한다. 몇몇 구현예에서, 당은 당 산, 예를 들어 글루쿠론산을 포함하며, 글루쿠로니드와 같은 접합된 형태(즉 글루쿠론화를 통해)를 추가로 포함한다. 예시적인 디사카라이드는 말토스, 슈크로스, 락토스, 락툴로스, 트레할로스 등을 포함한다. 예시적인 폴리사카라이드는 아밀로스, 아밀로펙틴, 글리코겐, 이눌린, 셀룰로스 등을 포함한다. 상기 사이클로덱스트린은 당업자에게 공지된 임의의 사이클로덱스트린일 수 있다. 몇몇 구현예에서, 상기 사이클로덱스트린은 알파 사이클로덱스트린, 베타 사이클로덱스트린, 또는 감마 사이클로덱스트린, 또는 이들의 혼합물이다. 몇몇 구현예에서, 상기 사이클로덱스트린은 알파 사이클로덱스트린이다. 몇몇 구현예에서, 상기 사이클로덱스트린은 베타 사이클로덱스트린이다. 몇몇 구현예에서, 상기 사이클로덱스트린은 감마 사이클로덱스트린이다. 몇몇 구현예에서, 상기 강화기는 접합체의 나머지의 용해도를 개선시킬 수 있다. 몇몇 구현예에서, 상기 알킬, 헤테로알킬, 알킬레닐, 또는 헤테로알킬레닐 설폰산은 치환되거나 치환되지 않는다. 몇몇 구현예에서, 상기 알킬, 헤테로알킬, 알킬레닐, 또는 헤테로알킬레닐 설폰산은 -(CH2)1-5SO3H, -(CH2) n -NH-(CH2)1-5SO3H, -(CH2) n -C(O)NH-(CH2)1-5SO3H, -(CH2CH2O) m -C(O)NH-(CH2)1-5SO3H, -(CH2) n -N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2, -(CH2) n -C(O)N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2, 또는 -(CH2CH2O) m -C(O)N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2이고, 여기에서 n은 1, 2, 3, 4, 또는 5이고, m은 1, 2, 3, 4, 또는 5이다. 하나의 구현예에서, 상기 알킬 또는 알킬레닐 설폰산은 -(CH2)1-5SO3H이다. 또 다른 구현예에서, 상기 헤테로알킬 또는 헤테로알킬레닐 설폰산은-(CH2) n -NH-(CH2)1-5SO3H이고, 여기에서 n은 1, 2, 3, 4, 또는 5이다. 또 다른 구현예에서, 상기 알킬, 헤테로알킬, 알킬레닐, 또는 헤테로알킬레닐 설폰산은 -(CH2) n -C(O)NH-(CH2)1-5SO3H이고, 여기에서 n은 1, 2, 3, 4, 또는 5이다. 또 다른 구현예에서, 상기 알킬, 헤테로알킬, 알킬레닐, 또는 헤테로알킬레닐 설폰산은 -(CH2CH2O) m -C(O)NH-(CH2)1-5SO3H이고, 여기에서 m은 1, 2, 3, 4, 또는 5이다. 또 다른 구현예에서, 상기 알킬, 헤테로알킬, 알킬레닐, 또는 헤테로알킬레닐 설폰산은 -(CH2) n -N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2이고, 여기에서 n은 1, 2, 3, 4, 또는 5이다. 또 다른 구현예에서, 상기 알킬, 헤테로알킬, 알킬레닐, 또는 헤테로알킬레닐 설폰산은 -(CH2) n -C(O)N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2이고, 여기에서 n은 1, 2, 3, 4, 또는 5이다. 또 다른 구현예에서, 상기 알킬, 헤테로알킬, 알킬레닐, 또는 헤테로알킬레닐 설폰산은 -(CH2CH2O) m -C(O)N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2이고, 여기에서 m은 1, 2, 3, 4, 또는 5이다. 일부 구현예에서, 링커는 하기와 같다:
Figure pct00245
상기에서:
SP1은 이격기이고;
SP2는 이격기이고;
SP3은 (AA)n 중 하나의 AA에 연결된 이격기이고;
Figure pct00246
은 결합제에 대한 하나 이상의 결합이고;
Figure pct00247
은 페이로드에 대한 하나 이상의 결합이고;
Figure pct00248
은 강화기 EG에 대한 하나 이상의 결합이고;
각각의 AA는 아미노산이고;
n은 1 내지 10의 정수이다.
상기에 논의된 바와 같이, 결합제에 대한 결합은 직접적이거나, 또는 이격기를 통해서일 수 있다. 몇몇 구현예에서, 상기 결합제에 대한 결합은 PEG 이격기를 통해 상기 결합제의 글루타민 잔기에 대한 것이다.
상기 SP1 이격기는 상술한 바와 같다. 상기 SP2 이격기는 상술한 바와 같다. 각각의 (AA)n 기는 상술한 바와 같다.
상기 SP3 이격기는 (AA)n 모이어티를 강화기(EG)에 연결시키는 모이어티이다. 적합한 SP3 이격기는 비제한적으로 알킬렌 또는 폴리에테르, 또는 이 둘 모두를 포함하는 것들을 포함한다. 상기 SP3 이격기의 단부, 예를 들어 강화기 또는 AA에 직접 결합되는 SP3 이격기의 부분은 접합체의 화학 합성 동안 상기 강화기 또는 AA를 상기 SP3 이격기에 커플링시키기 위해 사용되는 반응성 모이어티로부터 유래된 모이어티일 수 있다. 일부 예에서, 상기 SP3 이격기의 단부, 즉 강화기 또는 AA에 직접 결합되는 이격기의 부분은 접합체의 화학 합성 동안 상기 강화기 또는 AA를 상기 이격기에 커플링시키기 위해 사용되는 반응성 모이어티의 잔기일 수 있다. 몇몇 구현예에서, 상기 SP3은 (AA)n 중 하나 및 단지 하나의 AA에 연결된 이격기이다. 몇몇 구현예에서, 상기 SP3 이격기는 (AA)n의 리신 잔기의 측쇄에 연결된다.
일부 구현예에서, 상기 SP3 이격기는 하기와 같다:
Figure pct00249
,
Figure pct00250
, 또는
Figure pct00251
상기에서:
RG'는 반응성기 RG와 강화제 EG와의 반응에 따른 반응성기 잔기이고;
Figure pct00252
는 강화기에 대한 결합이고;
Figure pct00253
는 (AA)n에 대한 결합이고;
a는 2 내지 8의 정수이고;
n은 1 내지 4의 정수이다.
상기 반응성기 RG는 강화제에 대해 하나 이상의 결합을 형성할 수 있는 것으로 당업자에게 공지된 임의의 반응성기일 수 있다. 상기 반응성기 RG는 그의 구조 중에 강화기와 반응하여 화학식 LPa, LPb, LPc, LPd, LPa', LPb', LPc', LPd', A, B, C, D, A', B', C', D', 또는 A"의 화합물을 형성할 수 있는 부분을 포함하는 모이어티이다. 상기 강화기에의 접합에 이어서, 상기 반응성기는 반응성기 잔기(RG')로 된다. 상기 반응성기 RG는 상술한 임의의 반응성기일 수 있다. 예시적인 반응성기는 비제한적으로, 결합제와 반응할 수 있는 할로아세틸, 이소티오시아네이트, 숙신이미드, N-하이드록시숙신이미드, 또는 말레이미드 부분을 포함하는 것들을 포함한다.
몇몇 구현예에서, 반응성기는 비제한적으로 알킨을 포함한다. 몇몇 구현예에서, 상기 알킨은 변형된 알킨과 같이 구리 촉매의 부재하에서 아지드와의 1,3-가환 반응을 겪을 수 있는 알킨이다. 변형된 알킨은 변형-촉진된 알킨-아지드 가환(SPAAC)에 적합하며, 사이클로알킨, 예를 들어 사이클로옥틴 및 벤젠고리화된 알킨이다. 적합한 알킨은 비제한적으로 디벤조아자사이클로옥틴 또는
Figure pct00254
(DIBAC), 디벤조사이클로옥틴 또는
Figure pct00255
(DIBO), 비아릴아자사이클로옥티논 또는
Figure pct00256
(BARAC), 디플루오르화된 사이클로옥틴 또는
Figure pct00257
, 또는
Figure pct00258
또는
Figure pct00259
(DIFO), 치환된, 예를 들어 플루오르화된 알킨, 아자-사이클로알킨, 비사이클[6.1.0]노닌 또는
Figure pct00260
(BCN) 및 그의 유도체를 포함한다. 특히 유용한 알킨은
Figure pct00261
,
Figure pct00262
및
Figure pct00263
을 포함한다.
일부 구현예에서, 링커는 하기와 같다:
Figure pct00264
상기에서:
RG'는 반응성기 RG와 결합제와의 반응에 따른 반응성기 잔기이고;
PEG는 -NH-PEG4-C(O)-이고;
SP2는 이격기이고;
SP3은 (AA)n 중 하나의 AA 잔기에 연결된 이격기이고;
Figure pct00265
은 결합제에 대한 하나 이상의 결합이고;
Figure pct00266
은 페이로드에 대한 하나 이상의 결합이고;
Figure pct00267
은 강화기 EG에 대한 하나 이상의 결합이고;
각각의 AA는 아미노산이고;
n은 1 내지 10의 정수이다.
상기에 논의된 바와 같이, 결합제에 대한 결합은 직접적이거나, 또는 이격기를 통해서일 수 있다. 몇몇 구현예에서, 상기 결합제에 대한 결합은 PEG 이격기를 통해 상기 결합제의 글루타민 잔기에 대한 것이다.
일부 구현예에서, 상기 링커는
Figure pct00268
또는 그의 약학적으로 허용 가능한 염, 용매화물, 또는 그의 입체이성질체 형태, 또는 그의 위치이성질체, 또는 그의 위치이성질체들의 혼합물이며,
상기에서:
각각의
Figure pct00269
는 결합제에 대한 결합이고;
각각의
Figure pct00270
는 페이로드에 대한 결합이고;
각각의
Figure pct00271
은 강화제에 대한 결합이고;
각각의 R9는 -CH3 또는 -(CH2)3N(H)C(O)NH2이고;
각각의 A는 -O-, -N(H)-,
Figure pct00272
또는
Figure pct00273
이고, 여기에서 ZZ는 수소, 또는 본원의 어딘가에 논의된 바와 같은 아미노산에 대한 측쇄이다. 예를 들어, 하나의 구현예에서, ZZ는 C1-6 알킬이다. 추가의 예로서, 하나의 구현예에서, ZZ는 C1-6 헤테로알킬이다. 본 단락의 특정 구현예에서, A는 본원의 어딘가에 기재된 바와 같이, X가 -N3인 1차 아민 화합물 또는 그의 잔기로부터 유래될 수 있다. 상기 구현예에서, 1,2,3-트리아졸 잔기는 본원의 어딘가에 기재된 바와 같이, 본원에 기재된 화합물 또는 페이로드의 알킨 또는 말단 아세틸렌과의 클릭 화학 반응에 참여한 이후의 아지드로부터 유래된다. 상응하게, 하나의 비제한적인 예에서, A는
Figure pct00274
또는
Figure pct00275
, 또는 이들의 혼합물이다. 한편으로, 또 다른 구현예에서, A는
Figure pct00276
또는
Figure pct00277
, 또는 이들의 혼합물이다. 또 다른 구현예에서, A는
Figure pct00278
또는
Figure pct00279
, 또는 이들의 혼합물이다. 또 다른 구현예에서, A는
Figure pct00280
또는
Figure pct00281
, 또는 이들의 혼합물이다. 몇몇 구현예에서, 1,3-가환 또는 SPAAC 위치이성질체, 또는 위치이성질체들의 혼합물은 적합한 알킨으로 처리된 PEG-N3 유도체화된 항체로부터 유래된다. 예를 들어 하나의 구현예에서, 상기 링커는
Figure pct00282
또는 그의 약학적으로 허용 가능한 염, 용매화물, 또는 그의 입체이성질체 형태, 또는 그의 위치이성질체, 또는 그의 위치이성질체들의 혼합물이다. 추가의 예로서, 하나의 구현예에서, 상기 링커는
Figure pct00283
또는 그의 약학적으로 허용 가능한 염, 용매화물, 또는 그의 입체이성질체 형태, 또는 그의 위치이성질체, 또는 그의 위치이성질체들의 혼합물이다. 추가의 예로서, 상기 링커는
Figure pct00284
또는 그의 약학적으로 허용 가능한 염, 용매화물, 또는 그의 입체이성질체 형태, 또는 그의 위치이성질체, 또는 그의 위치이성질체들의 혼합물이다. 추가의 예로서, 하나의 구현예에서, 상기 링커는
Figure pct00285
또는 그의 약학적으로 허용 가능한 염, 용매화물, 또는 그의 입체이성질체 형태, 또는 그의 위치이성질체, 또는 그의 위치이성질체들의 혼합물이다. 상기에 논의된 바와 같이, 결합제에 대한 결합은 직접적이거나, 또는 이격기를 통해서일 수 있다. 몇몇 구현예에서, 상기 결합제에 대한 결합은 PEG 이격기를 통해 상기 결합제의 글루타민 잔기에 대한 것이다. 몇몇 구현예에서, 상기 강화제는 친수성기이다. 몇몇 구현예에서, 상기 강화제는 사이클로덱스트린이다. 몇몇 구현예에서, 상기 강화기는 알킬, 헤테로알킬, 알킬레닐, 헤테로알킬레닐 설폰산, 헤테로알킬레닐 타우린, 헤테로알킬레닐 인산 또는 포스페이트, 헤테로알킬레닐 아민(예를 들어 4급 아민), 또는 헤테로알킬레닐 당이다. 몇몇 구현예에서, 당은 비제한적으로 모노사카라이드, 디사카라이드, 및 폴리사카라이드를 포함한다. 예시적인 모노사카라이드는 글루코스, 리보스, 데옥시리보스, 자일로스, 아라비노스, 만노스, 갈락토스, 프럭토스 등을 포함한다. 몇몇 구현예에서, 당은 당 산, 예를 들어 글루쿠론산을 포함하며, 글루쿠로니드와 같은 접합된 형태(즉 글루쿠론화를 통해)를 추가로 포함한다. 예시적인 디사카라이드는 말토스, 슈크로스, 락토스, 락툴로스, 트레할로스 등을 포함한다. 예시적인 폴리사카라이드는 아밀로스, 아밀로펙틴, 글리코겐, 이눌린, 셀룰로스 등을 포함한다. 상기 사이클로덱스트린은 당업자에게 공지된 임의의 사이클로덱스트린일 수 있다. 몇몇 구현예에서, 상기 사이클로덱스트린은 알파 사이클로덱스트린, 베타 사이클로덱스트린, 또는 감마 사이클로덱스트린, 또는 이들의 혼합물이다. 몇몇 구현예에서, 상기 사이클로덱스트린은 알파 사이클로덱스트린이다. 몇몇 구현예에서, 상기 사이클로덱스트린은 베타 사이클로덱스트린이다. 몇몇 구현예에서, 상기 사이클로덱스트린은 감마 사이클로덱스트린이다. 몇몇 구현예에서, 상기 알킬, 헤테로알킬, 알킬레닐, 또는 헤테로알킬레닐 설폰산은 -(CH2)1-5SO3H, -(CH2) n -NH-(CH2)1-5SO3H, -(CH2) n -C(O)NH-(CH2)1-5SO3H, -(CH2CH2O) m -C(O)NH-(CH2)1-5SO3H, -(CH2) n -N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2, -(CH2) n -C(O)N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2, 또는 -(CH2CH2O) m -C(O)N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2이고, 여기에서 n은 1, 2, 3, 4, 또는 5이고, m은 1, 2, 3, 4, 또는 5이다. 하나의 구현예에서, 상기 알킬 또는 알킬레닐 설폰산은 -(CH2)1-5SO3H이다. 또 다른 구현예에서, 상기 헤테로알킬 또는 헤테로알킬레닐 설폰산은-(CH2) n -NH-(CH2)1-5SO3H이고, 여기에서 n은 1, 2, 3, 4, 또는 5이다. 또 다른 구현예에서, 상기 알킬, 헤테로알킬, 알킬레닐, 또는 헤테로알킬레닐 설폰산은 -(CH2) n -C(O)NH-(CH2)1-5SO3H이고, 여기에서 n은 1, 2, 3, 4, 또는 5이다. 또 다른 구현예에서, 상기 알킬, 헤테로알킬, 알킬레닐, 또는 헤테로알킬레닐 설폰산은 -(CH2CH2O) m -C(O)NH-(CH2)1-5SO3H이고, 여기에서 m은 1, 2, 3, 4, 또는 5이다. 또 다른 구현예에서, 상기 알킬, 헤테로알킬, 알킬레닐, 또는 헤테로알킬레닐 설폰산은 -(CH2) n -N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2이고, 여기에서 n은 1, 2, 3, 4, 또는 5이다. 또 다른 구현예에서, 상기 알킬, 헤테로알킬, 알킬레닐, 또는 헤테로알킬레닐 설폰산은 -(CH2) n -C(O)N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2이고, 여기에서 n은 1, 2, 3, 4, 또는 5이다. 또 다른 구현예에서, 상기 알킬, 헤테로알킬, 알킬레닐, 또는 헤테로알킬레닐 설폰산은 -(CH2CH2O) m -C(O)N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2이고, 여기에서 m은 1, 2, 3, 4, 또는 5이다.
일부 구현예에서, 상기 링커는
Figure pct00286
또는 그의 약학적으로 허용 가능한 염, 용매화물, 또는 그의 입체이성질체 형태, 또는 그의 위치이성질체, 또는 그의 위치이성질체들의 혼합물이고, 상기에서:
각각의
Figure pct00287
는 결합제에 대한 결합이고;
각각의
Figure pct00288
은 강화제에 대한 결합이고;
각각의
Figure pct00289
는 페이로드에 대한 결합이고;
각각의 R9는 -CH3 또는 -(CH2)3N(H)C(O)NH2이고;
각각의 A는 -O-, -N(H)-,
Figure pct00290
또는
Figure pct00291
이고, 여기에서 ZZ는 수소, 또는 본원의 어딘가에 논의된 바와 같은 아미노산에 대한 측쇄이다. 예를 들어, 하나의 구현예에서, ZZ는 C1-6 알킬이다. 추가의 예로서, 하나의 구현예에서, ZZ는 C1-6 헤테로알킬이다. 본 단락의 특정 구현예에서, A는 본원의 어딘가에 기재된 바와 같이, X가 -N3인 1차 아민 화합물 또는 그의 잔기로부터 유래될 수 있다. 상기 구현예에서, 1,2,3-트리아졸 잔기는 본원의 어딘가에 기재된 바와 같이, 본원에 기재된 화합물 또는 페이로드의 알킨 또는 말단 아세틸렌과의 클릭 화학 반응에 참여한 이후의 아지드로부터 유래된다. 상응하게, 하나의 비제한적인 예에서, A는
Figure pct00292
또는
Figure pct00293
, 또는 이들의 혼합물이다. 한편으로, 또 다른 구현예에서, A는
Figure pct00294
또는
Figure pct00295
, 또는 이들의 혼합물이다. 또 다른 구현예에서, A는
Figure pct00296
또는
Figure pct00297
, 또는 이들의 혼합물이다. 또 다른 구현예에서, A는
Figure pct00298
또는
Figure pct00299
, 또는 이들의 혼합물이다. 상기에 논의된 바와 같이, 결합제에 대한 결합은 직접적이거나, 또는 이격기를 통해서일 수 있다. 몇몇 구현예에서, 상기 결합제에 대한 결합은 PEG 이격기를 통해 상기 결합제의 글루타민 잔기에 대한 것이다. 몇몇 구현예에서, 상기 강화제는 친수성기이다. 몇몇 구현예에서, 상기 강화제는 사이클로덱스트린이다. 몇몇 구현예에서, 상기 강화기는 알킬, 헤테로알킬, 알킬레닐, 헤테로알킬레닐 설폰산, 헤테로알킬레닐 타우린, 헤테로알킬레닐 인산 또는 포스페이트, 헤테로알킬레닐 아민(예를 들어 4급 아민), 또는 헤테로알킬레닐 당이다. 몇몇 구현예에서, 당은 비제한적으로 모노사카라이드, 디사카라이드, 및 폴리사카라이드를 포함한다. 예시적인 모노사카라이드는 글루코스, 리보스, 데옥시리보스, 자일로스, 아라비노스, 만노스, 갈락토스, 프럭토스 등을 포함한다. 몇몇 구현예에서, 당은 당 산, 예를 들어 글루쿠론산을 포함하며, 글루쿠로니드와 같은 접합된 형태(즉 글루쿠론화를 통해)를 추가로 포함한다. 예시적인 디사카라이드는 말토스, 슈크로스, 락토스, 락툴로스, 트레할로스 등을 포함한다. 예시적인 폴리사카라이드는 아밀로스, 아밀로펙틴, 글리코겐, 이눌린, 셀룰로스 등을 포함한다. 상기 사이클로덱스트린은 당업자에게 공지된 임의의 사이클로덱스트린일 수 있다. 몇몇 구현예에서, 상기 사이클로덱스트린은 알파 사이클로덱스트린, 베타 사이클로덱스트린, 또는 감마 사이클로덱스트린, 또는 이들의 혼합물이다. 몇몇 구현예에서, 상기 사이클로덱스트린은 알파 사이클로덱스트린이다. 몇몇 구현예에서, 상기 사이클로덱스트린은 베타 사이클로덱스트린이다. 몇몇 구현예에서, 상기 사이클로덱스트린은 감마 사이클로덱스트린이다. 몇몇 구현예에서, 상기 알킬, 헤테로알킬, 알킬레닐, 또는 헤테로알킬레닐 설폰산은 -(CH2)1-5SO3H, -(CH2) n -NH-(CH2)1-5SO3H, -(CH2) n -C(O)NH-(CH2)1-5SO3H, -(CH2CH2O) m -C(O)NH-(CH2)1-5SO3H, -(CH2) n -N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2, -(CH2) n -C(O)N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2, 또는 -(CH2CH2O) m -C(O)N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2이고, 여기에서 n은 1, 2, 3, 4, 또는 5이고, m은 1, 2, 3, 4, 또는 5이다. 하나의 구현예에서, 상기 알킬 또는 알킬레닐 설폰산은 -(CH2)1-5SO3H이다. 또 다른 구현예에서, 상기 헤테로알킬 또는 헤테로알킬레닐 설폰산은-(CH2) n -NH-(CH2)1-5SO3H이고, 여기에서 n은 1, 2, 3, 4, 또는 5이다. 또 다른 구현예에서, 상기 알킬, 헤테로알킬, 알킬레닐, 또는 헤테로알킬레닐 설폰산은 -(CH2) n -C(O)NH-(CH2)1-5SO3H이고, 여기에서 n은 1, 2, 3, 4, 또는 5이다. 또 다른 구현예에서, 상기 알킬, 헤테로알킬, 알킬레닐, 또는 헤테로알킬레닐 설폰산은 -(CH2CH2O) m -C(O)NH-(CH2)1-5SO3H이고, 여기에서 m은 1, 2, 3, 4, 또는 5이다. 또 다른 구현예에서, 상기 알킬, 헤테로알킬, 알킬레닐, 또는 헤테로알킬레닐 설폰산은 -(CH2) n -N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2이고, 여기에서 n은 1, 2, 3, 4, 또는 5이다. 또 다른 구현예에서, 상기 알킬, 헤테로알킬, 알킬레닐, 또는 헤테로알킬레닐 설폰산은 -(CH2) n -C(O)N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2이고, 여기에서 n은 1, 2, 3, 4, 또는 5이다. 또 다른 구현예에서, 상기 알킬, 헤테로알킬, 알킬레닐, 또는 헤테로알킬레닐 설폰산은 -(CH2CH2O) m -C(O)N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2이고, 여기에서 m은 1, 2, 3, 4, 또는 5이다.
일부 구현예에서, 상기 링커는
Figure pct00300
,
Figure pct00301
,
Figure pct00302
,
Figure pct00303
또는 그의 약학적으로 허용 가능한 염, 용매화물, 또는 그의 입체이성질체 형태, 또는 그의 위치이성질체, 또는 그의 위치이성질체들의 혼합물이고, 상기에서:
각각의
Figure pct00304
는 결합제에 대한 결합이고;
각각의
Figure pct00305
는 페이로드에 대한 결합이고;
R9는 -CH3 또는 -(CH2)3N(H)C(O)NH2이고;
A는 -O-, -N(H)-,
Figure pct00306
또는
Figure pct00307
이고, 여기에서 ZZ는 수소, 또는 본원의 어딘가에 논의된 바와 같은 아미노산에 대한 측쇄이다. 예를 들어, 하나의 구현예에서, ZZ는 C1-6 알킬이다. 추가의 예로서, 하나의 구현예에서, ZZ는 C1-6 헤테로알킬이다. 본 단락의 특정 구현예에서, A는 본원의 어딘가에 기재된 바와 같이, X가 -N3인 1차 아민 화합물 또는 그의 잔기로부터 유래될 수 있다. 상기 구현예에서, 1,2,3-트리아졸 잔기는 본원의 어딘가에 기재된 바와 같이, 본원에 기재된 화합물 또는 페이로드의 알킨 또는 말단 아세틸렌과의 클릭 화학 반응에 참여한 이후의 아지드로부터 유래된다. 상응하게, 하나의 비제한적인 예에서, A는
Figure pct00308
또는
Figure pct00309
, 또는 이들의 혼합물이다. 한편으로, 또 다른 구현예에서, A는
Figure pct00310
또는
Figure pct00311
, 또는 이들의 혼합물이다. 또 다른 구현예에서, A는
Figure pct00312
또는
Figure pct00313
, 또는 이들의 혼합물이다. 또 다른 구현예에서, A는
Figure pct00314
또는
Figure pct00315
, 또는 이들의 혼합물이다. 상기에 논의된 바와 같이, 결합제에 대한 결합은 직접적이거나, 또는 이격기를 통해서일 수 있다. 몇몇 구현예에서, 상기 결합제에 대한 결합은 PEG 이격기를 통해 상기 결합제의 글루타민 잔기에 대한 것이다.
일부 구현예에서, 상기 링커는
Figure pct00316
,
Figure pct00317
,
Figure pct00318
,
Figure pct00319
또는 그의 약학적으로 허용 가능한 염, 용매화물, 또는 그의 입체이성질체 형태, 또는 그의 위치이성질체, 또는 그의 위치이성질체들의 혼합물이고, 상기에서:
각각의
Figure pct00320
는 결합제에 대한 결합이고;
각각의
Figure pct00321
는 페이로드에 대한 결합이고;
R9는 -CH3 또는 -(CH2)3N(H)C(O)NH2이고;
A는 -O-, -N(H)-,
Figure pct00322
또는
Figure pct00323
이고, 여기에서 ZZ는 수소, 또는 본원의 어딘가에 논의된 바와 같은 아미노산에 대한 측쇄이다. 예를 들어, 하나의 구현예에서, ZZ는 C1-6 알킬이다. 추가의 예로서, 하나의 구현예에서, ZZ는 C1-6 헤테로알킬이다. 본 단락의 특정 구현예에서, A는 본원의 어딘가에 기재된 바와 같이, X가 -N3인 1차 아민 화합물 또는 그의 잔기로부터 유래될 수 있다. 상기 구현예에서, 1,2,3-트리아졸 잔기는 본원의 어딘가에 기재된 바와 같이, 본원에 기재된 화합물 또는 페이로드의 알킨 또는 말단 아세틸렌과의 클릭 화학 반응에 참여한 이후의 아지드로부터 유래된다. 상응하게, 하나의 비제한적인 예에서, A는
Figure pct00324
또는
Figure pct00325
, 또는 이들의 혼합물이다. 한편으로, 또 다른 구현예에서, A는
Figure pct00326
또는
Figure pct00327
, 또는 이들의 혼합물이다. 또 다른 구현예에서, A는
Figure pct00328
또는
Figure pct00329
, 또는 이들의 혼합물이다. 또 다른 구현예에서, A는
Figure pct00330
또는
Figure pct00331
, 또는 이들의 혼합물이다. 상기에 논의된 바와 같이, 결합제에 대한 결합은 직접적이거나, 또는 이격기를 통해서일 수 있다. 몇몇 구현예에서, 상기 결합제에 대한 결합은 PEG 이격기를 통해 상기 결합제의 글루타민 잔기에 대한 것이다.
일부 구현예에서, 상기 링커는
Figure pct00332
또는 그의 약학적으로 허용 가능한 염, 용매화물, 또는 그의 입체이성질체 형태, 또는 그의 위치이성질체, 또는 그의 위치이성질체들의 혼합물이고, 상기에서:
각각의
Figure pct00333
는 결합제에 대한 결합이고;
각각의
Figure pct00334
는 페이로드에 대한 결합이고;
각각의
Figure pct00335
은 강화기에 대한 결합이고;
각각의 R9는 -CH3 또는 -(CH2)3N(H)C(O)NH2이고;
각각의 A는 -O-, -N(H)-,
Figure pct00336
또는
Figure pct00337
이고, 여기에서 ZZ는 수소, 또는 본원의 어딘가에 논의된 바와 같은 아미노산에 대한 측쇄이다. 예를 들어, 하나의 구현예에서, ZZ는 C1-6 알킬이다. 추가의 예로서, 하나의 구현예에서, ZZ는 C1-6 헤테로알킬이다. 본 단락의 특정 구현예에서, A는 본원의 어딘가에 기재된 바와 같이, X가 -N3인 1차 아민 화합물 또는 그의 잔기로부터 유래될 수 있다. 상기 구현예에서, 1,2,3-트리아졸 잔기는 본원의 어딘가에 기재된 바와 같이, 본원에 기재된 화합물 또는 페이로드의 알킨 또는 말단 아세틸렌과의 클릭 화학 반응에 참여한 이후의 아지드로부터 유래된다. 상응하게, 하나의 비제한적인 예에서, A는
Figure pct00338
또는
Figure pct00339
, 또는 이들의 혼합물이다. 한편으로, 또 다른 구현예에서, A는
Figure pct00340
또는
Figure pct00341
, 또는 이들의 혼합물이다. 또 다른 구현예에서, A는
Figure pct00342
또는
Figure pct00343
, 또는 이들의 혼합물이다. 또 다른 구현예에서, A는
Figure pct00344
또는
Figure pct00345
, 또는 이들의 혼합물이다. 상기에 논의된 바와 같이, 결합제에 대한 결합은 직접적이거나, 또는 이격기를 통해서일 수 있다. 몇몇 구현예에서, 상기 결합제에 대한 결합은 PEG 이격기를 통해 상기 결합제의 글루타민 잔기에 대한 것이다. 몇몇 구현예에서, 상기 강화제는 친수성기이다. 몇몇 구현예에서, 상기 강화제는 사이클로덱스트린이다. 몇몇 구현예에서, 상기 강화기는 알킬, 헤테로알킬, 알킬레닐, 헤테로알킬레닐 설폰산, 헤테로알킬레닐 타우린, 헤테로알킬레닐 인산 또는 포스페이트, 헤테로알킬레닐 아민(예를 들어 4급 아민), 또는 헤테로알킬레닐 당이다. 몇몇 구현예에서, 당은 비제한적으로 모노사카라이드, 디사카라이드, 및 폴리사카라이드를 포함한다. 예시적인 모노사카라이드는 글루코스, 리보스, 데옥시리보스, 자일로스, 아라비노스, 만노스, 갈락토스, 프럭토스 등을 포함한다. 몇몇 구현예에서, 당은 당 산, 예를 들어 글루쿠론산을 포함하며, 글루쿠로니드와 같은 접합된 형태(즉 글루쿠론화를 통해)를 추가로 포함한다. 예시적인 디사카라이드는 말토스, 슈크로스, 락토스, 락툴로스, 트레할로스 등을 포함한다. 예시적인 폴리사카라이드는 아밀로스, 아밀로펙틴, 글리코겐, 이눌린, 셀룰로스 등을 포함한다. 상기 사이클로덱스트린은 당업자에게 공지된 임의의 사이클로덱스트린일 수 있다. 몇몇 구현예에서, 상기 사이클로덱스트린은 알파 사이클로덱스트린, 베타 사이클로덱스트린, 또는 감마 사이클로덱스트린, 또는 이들의 혼합물이다. 몇몇 구현예에서, 상기 사이클로덱스트린은 알파 사이클로덱스트린이다. 몇몇 구현예에서, 상기 사이클로덱스트린은 베타 사이클로덱스트린이다. 몇몇 구현예에서, 상기 사이클로덱스트린은 감마 사이클로덱스트린이다. 몇몇 구현예에서, 상기 알킬, 헤테로알킬, 알킬레닐, 또는 헤테로알킬레닐 설폰산은 -(CH2)1-5SO3H, -(CH2) n -NH-(CH2)1-5SO3H, -(CH2) n -C(O)NH-(CH2)1-5SO3H, -(CH2CH2O) m -C(O)NH-(CH2)1-5SO3H, -(CH2) n -N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2, -(CH2) n -C(O)N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2, 또는 -(CH2CH2O) m -C(O)N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2이고, 여기에서 n은 1, 2, 3, 4, 또는 5이고, m은 1, 2, 3, 4, 또는 5이다. 하나의 구현예에서, 상기 알킬 또는 알킬레닐 설폰산은 -(CH2)1-5SO3H이다. 또 다른 구현예에서, 상기 헤테로알킬 또는 헤테로알킬레닐 설폰산은-(CH2) n -NH-(CH2)1-5SO3H이고, 여기에서 n은 1, 2, 3, 4, 또는 5이다. 또 다른 구현예에서, 상기 알킬, 헤테로알킬, 알킬레닐, 또는 헤테로알킬레닐 설폰산은 -(CH2) n -C(O)NH-(CH2)1-5SO3H이고, 여기에서 n은 1, 2, 3, 4, 또는 5이다. 또 다른 구현예에서, 상기 알킬, 헤테로알킬, 알킬레닐, 또는 헤테로알킬레닐 설폰산은 -(CH2CH2O) m -C(O)NH-(CH2)1-5SO3H이고, 여기에서 m은 1, 2, 3, 4, 또는 5이다. 또 다른 구현예에서, 상기 알킬, 헤테로알킬, 알킬레닐, 또는 헤테로알킬레닐 설폰산은 -(CH2) n -N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2이고, 여기에서 n은 1, 2, 3, 4, 또는 5이다. 또 다른 구현예에서, 상기 알킬, 헤테로알킬, 알킬레닐, 또는 헤테로알킬레닐 설폰산은 -(CH2) n -C(O)N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2이고, 여기에서 n은 1, 2, 3, 4, 또는 5이다. 또 다른 구현예에서, 상기 알킬, 헤테로알킬, 알킬레닐, 또는 헤테로알킬레닐 설폰산은 -(CH2CH2O) m -C(O)N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2이고, 여기에서 m은 1, 2, 3, 4, 또는 5이다.
일부 구현예에서, 상기 링커는
Figure pct00346
또는 그의 약학적으로 허용 가능한 염, 용매화물, 또는 그의 입체이성질체 형태, 또는 그의 위치이성질체, 또는 그의 위치이성질체들의 혼합물이고, 상기에서:
각각의
Figure pct00347
는 결합제에 대한 결합이고;
각각의
Figure pct00348
는 페이로드에 대한 결합이고;
각각의 R9는 -CH3 또는 -(CH2)3N(H)C(O)NH2이고;
각각의 A는 -O-, -N(H)-,
Figure pct00349
또는
Figure pct00350
이고, 여기에서 ZZ는 수소, 또는 본원의 어딘가에 논의된 바와 같은 아미노산에 대한 측쇄이다. 예를 들어, 하나의 구현예에서, ZZ는 C1-6 알킬이다. 추가의 예로서, 하나의 구현예에서, ZZ는 C1-6 헤테로알킬이다. 본 단락의 특정 구현예에서, A는 본원의 어딘가에 기재된 바와 같이, X가 -N3인 1차 아민 화합물 또는 그의 잔기로부터 유래될 수 있다. 상기 구현예에서, 1,2,3-트리아졸 잔기는 본원의 어딘가에 기재된 바와 같이, 본원에 기재된 화합물 또는 페이로드의 알킨 또는 말단 아세틸렌과의 클릭 화학 반응에 참여한 이후의 아지드로부터 유래된다. 상응하게, 하나의 비제한적인 예에서, A는
Figure pct00351
또는
Figure pct00352
, 또는 이들의 혼합물이다. 한편으로, 또 다른 구현예에서, A는
Figure pct00353
또는
Figure pct00354
, 또는 이들의 혼합물이다. 또 다른 구현예에서, A는
Figure pct00355
또는
Figure pct00356
, 또는 이들의 혼합물이다. 또 다른 구현예에서, A는
Figure pct00357
또는
Figure pct00358
, 또는 이들의 혼합물이다. 상기에 논의된 바와 같이, 결합제에 대한 결합은 직접적이거나, 또는 이격기를 통해서일 수 있다. 몇몇 구현예에서, 상기 결합제에 대한 결합은 PEG 이격기를 통해 상기 결합제의 글루타민 잔기에 대한 것이다. 몇몇 구현예에서, 상기 강화제는 친수성기이다. 몇몇 구현예에서, 상기 강화제는 사이클로덱스트린이다. 몇몇 구현예에서, 상기 강화기는 알킬, 헤테로알킬, 알킬레닐, 헤테로알킬레닐 설폰산, 헤테로알킬레닐 타우린, 헤테로알킬레닐 인산 또는 포스페이트, 헤테로알킬레닐 아민(예를 들어 4급 아민), 또는 헤테로알킬레닐 당이다. 몇몇 구현예에서, 당은 비제한적으로 모노사카라이드, 디사카라이드, 및 폴리사카라이드를 포함한다. 예시적인 모노사카라이드는 글루코스, 리보스, 데옥시리보스, 자일로스, 아라비노스, 만노스, 갈락토스, 프럭토스 등을 포함한다. 몇몇 구현예에서, 당은 당 산, 예를 들어 글루쿠론산을 포함하며, 글루쿠로니드와 같은 접합된 형태(즉 글루쿠론화를 통해)를 추가로 포함한다. 예시적인 디사카라이드는 말토스, 슈크로스, 락토스, 락툴로스, 트레할로스 등을 포함한다. 예시적인 폴리사카라이드는 아밀로스, 아밀로펙틴, 글리코겐, 이눌린, 셀룰로스 등을 포함한다. 상기 사이클로덱스트린은 당업자에게 공지된 임의의 사이클로덱스트린일 수 있다. 몇몇 구현예에서, 상기 사이클로덱스트린은 알파 사이클로덱스트린, 베타 사이클로덱스트린, 또는 감마 사이클로덱스트린, 또는 이들의 혼합물이다. 몇몇 구현예에서, 상기 사이클로덱스트린은 알파 사이클로덱스트린이다. 몇몇 구현예에서, 상기 사이클로덱스트린은 베타 사이클로덱스트린이다. 몇몇 구현예에서, 상기 사이클로덱스트린은 감마 사이클로덱스트린이다. 몇몇 구현예에서, 상기 알킬, 헤테로알킬, 알킬레닐, 또는 헤테로알킬레닐 설폰산은 -(CH2)1-5SO3H, -(CH2) n -NH-(CH2)1-5SO3H, -(CH2) n -C(O)NH-(CH2)1-5SO3H, -(CH2CH2O) m -C(O)NH-(CH2)1-5SO3H, -(CH2) n -N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2, -(CH2) n -C(O)N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2, 또는 -(CH2CH2O) m -C(O)N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2이고, 여기에서 n은 1, 2, 3, 4, 또는 5이고, m은 1, 2, 3, 4, 또는 5이다. 하나의 구현예에서, 상기 알킬 또는 알킬레닐 설폰산은 -(CH2)1-5SO3H이다. 또 다른 구현예에서, 상기 헤테로알킬 또는 헤테로알킬레닐 설폰산은-(CH2) n -NH-(CH2)1-5SO3H이고, 여기에서 n은 1, 2, 3, 4, 또는 5이다. 또 다른 구현예에서, 상기 알킬, 헤테로알킬, 알킬레닐, 또는 헤테로알킬레닐 설폰산은 -(CH2) n -C(O)NH-(CH2)1-5SO3H이고, 여기에서 n은 1, 2, 3, 4, 또는 5이다. 또 다른 구현예에서, 상기 알킬, 헤테로알킬, 알킬레닐, 또는 헤테로알킬레닐 설폰산은 -(CH2CH2O) m -C(O)NH-(CH2)1-5SO3H이고, 여기에서 m은 1, 2, 3, 4, 또는 5이다. 또 다른 구현예에서, 상기 알킬, 헤테로알킬, 알킬레닐, 또는 헤테로알킬레닐 설폰산은 -(CH2) n -N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2이고, 여기에서 n은 1, 2, 3, 4, 또는 5이다. 또 다른 구현예에서, 상기 알킬, 헤테로알킬, 알킬레닐, 또는 헤테로알킬레닐 설폰산은 -(CH2) n -C(O)N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2이고, 여기에서 n은 1, 2, 3, 4, 또는 5이다. 또 다른 구현예에서, 상기 알킬, 헤테로알킬, 알킬레닐, 또는 헤테로알킬레닐 설폰산은 -(CH2CH2O) m -C(O)N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2이고, 여기에서 m은 1, 2, 3, 4, 또는 5이다.
일부 구현예에서, 상기 링커는
Figure pct00359
,
Figure pct00360
,
Figure pct00361
; 또는 그의 약학적으로 허용 가능한 염, 용매화물, 또는 그의 입체이성질체 형태, 또는 그의 위치이성질체, 또는 그의 위치이성질체들의 혼합물이고, 상기에서:
각각의
Figure pct00362
는 결합제에 대한 결합이고;
각각의
Figure pct00363
는 페이로드에 대한 결합이고;
R9는 -CH3 또는 -(CH2)3N(H)C(O)NH2이고;
A는 -O-, -N(H)-,
Figure pct00364
또는
Figure pct00365
이고, 여기에서 ZZ는 수소, 또는 본원의 어딘가에 논의된 바와 같은 아미노산에 대한 측쇄이다. 예를 들어, 하나의 구현예에서, ZZ는 C1-6 알킬이다. 추가의 예로서, 하나의 구현예에서, ZZ는 C1-6 헤테로알킬이다. 본 단락의 특정 구현예에서, A는 본원의 어딘가에 기재된 바와 같이, X가 -N3인 1차 아민 화합물 또는 그의 잔기로부터 유래될 수 있다. 상기 구현예에서, 1,2,3-트리아졸 잔기는 본원의 어딘가에 기재된 바와 같이, 본원에 기재된 화합물 또는 페이로드의 알킨 또는 말단 아세틸렌과의 클릭 화학 반응에 참여한 이후의 아지드로부터 유래된다. 상응하게, 하나의 비제한적인 예에서, A는
Figure pct00366
또는
Figure pct00367
, 또는 이들의 혼합물이다. 한편으로, 또 다른 구현예에서, A는
Figure pct00368
또는
Figure pct00369
, 또는 이들의 혼합물이다. 또 다른 구현예에서, A는
Figure pct00370
또는
Figure pct00371
, 또는 이들의 혼합물이다. 또 다른 구현예에서, A는
Figure pct00372
또는
Figure pct00373
, 또는 이들의 혼합물이다. 상기에 논의된 바와 같이, 결합제에 대한 결합은 직접적이거나, 또는 이격기를 통해서일 수 있다. 몇몇 구현예에서, 상기 결합제에 대한 결합은 PEG 이격기를 통해 상기 결합제의 글루타민 잔기에 대한 것이다.
일부 구현예에서, 상기 링커는 하기와 같다:
Figure pct00374
,
Figure pct00375
,
Figure pct00376
상기에서:
각각의
Figure pct00377
는 결합제에 대한 결합이고;
각각의
Figure pct00378
는 페이로드에 대한 결합이고;
R9는 -CH3 또는 -(CH2)3N(H)C(O)NH2이고;
A는 -O-, -N(H)-,
Figure pct00379
또는
Figure pct00380
이고, 여기에서 ZZ는 수소, 또는 본원의 어딘가에 논의된 바와 같은 아미노산에 대한 측쇄이다. 예를 들어, 하나의 구현예에서, ZZ는 C1-6 알킬이다. 추가의 예로서, 하나의 구현예에서, ZZ는 C1-6 헤테로알킬이다. 본 단락의 특정 구현예에서, A는 본원의 어딘가에 기재된 바와 같이, X가 -N3인 1차 아민 화합물 또는 그의 잔기로부터 유래될 수 있다. 상기 구현예에서, 1,2,3-트리아졸 잔기는 본원의 어딘가에 기재된 바와 같이, 본원에 기재된 화합물 또는 페이로드의 알킨 또는 말단 아세틸렌과의 클릭 화학 반응에 참여한 이후의 아지드로부터 유래된다. 상응하게, 하나의 비제한적인 예에서, A는
Figure pct00381
또는
Figure pct00382
, 또는 이들의 혼합물이다. 한편으로, 또 다른 구현예에서, A는
Figure pct00383
또는
Figure pct00384
, 또는 이들의 혼합물이다. 또 다른 구현예에서, A는
Figure pct00385
또는
Figure pct00386
, 또는 이들의 혼합물이다. 또 다른 구현예에서, A는
Figure pct00387
또는
Figure pct00388
, 또는 이들의 혼합물이다. 상기에 논의된 바와 같이, 결합제에 대한 결합은 직접적이거나, 또는 이격기를 통해서일 수 있다. 몇몇 구현예에서, 상기 결합제에 대한 결합은 PEG 이격기를 통해 상기 결합제의 글루타민 잔기에 대한 것이다.
특정 구현예에서, 알킨 또는 말단 아세틸렌을 갖는 개시된 화합물 또는 페이로드를 글루타민 잔기에 결합된 -PEG-N3으로 유도체화된 결합제에 결합시킬 수 있다. 예시적인 -N3 유도체화된 결합제, 그의 제조 방법, 및 그의 사용 방법을 본원에 제공한다. 몇몇 구현예에서, -PEG-N3으로 유도체화된 결합제와의 1,3-가환에 참여하기에 적합한 본원에 기재된 알킨을 갖는 화합물 또는 페이로드는 위치이성질체성 1,2,3-트리아졸릴 결합된 모이어티를 제공한다. 예를 들어, 몇몇 구현예에서, 결합제에 결합된 화합물 또는 페이로드는
Figure pct00389
, 또는 이들의 혼합물일 수 있으며, 이때 각각의
Figure pct00390
는 결합제에의 결합이다.
링커-페이로드
몇몇 구현예에서, 링커-페이로드는 링커에 결합된, 상기 화학식 I, II, III, IV, V, VI, VII, VIII, IX, X, XI, 또는 XII 중 임의의 하나 이상에 의해 포함되는 임의의 특정 화합물을 포함하며, 여기에서 본원에 기재된 링커(들)는 본원에 기재된 항체 또는 그의 항원 결합 단편과 반응성인 모이어티를 포함한다. 특정 구현예에서, 상기 링커는 상기 화학식 I, II, III, IV, V, VI, VII, VIII, IX, X, XI, 또는 XII 중 임의의 하나 이상에서 피페리딘 질소, R2, R6 또는 R7에 결합된다. 하나의 구현예에서, 상기 링커-페이로드는 하기 화학식 LPa'의 구조를 갖는다:
[화학식 LPa']
Figure pct00391
상기 식에서 SP1, (AA)p, SP2, R1, Q, Q1, R2, R3, R4, R5, R6, R7, 및 R8은 본원에 개시된 구현예 중 어느 하나에 기재된 바와 같다. 하나의 구현예에서, 링커-페이로드는 하기 화학식 LPb'의 구조를 갖는다:
[화학식 LPb']
Figure pct00392
상기 식에서 SP1, (AA)p, SP2, R1, Q, Q1, R2, R3, R4, R5, R6, R7, 및 R8은 본원에 개시된 구현예 중 어느 하나에 기재된 바와 같다. 하나의 구현예에서, 링커-페이로드는 하기 화학식 LPc'의 구조를 갖는다:
[화학식 LPc']
Figure pct00393
상기 식에서 SP1, (AA)p, SP2, R1, Q, Q1, R2, R3, R4, R5, R6, R7, 및 R8은 본원에 개시된 구현예 중 어느 하나에 기재된 바와 같다. 하나의 구현예에서, 링커-페이로드는 하기 화학식 LPb'의 구조를 갖는다:
[화학식 LPd']
Figure pct00394
상기 식에서 SP1, (AA)p, SP2, R1, Q, Q1, R2, R3, R4, R5, R6, R7, 및 R8은 본원에 개시된 구현예 중 어느 하나에 기재된 바와 같다. 본 단락의 구현예 중 어느 하나에서, 화학식 LPa', LPb', LPc' 또는 LPd'는 그의 약학적으로 허용가능한 염일 수 있다. 본 단락의 구현예 중 어느 하나에서, p는 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 또는 10이다.
상기 구현예 중 어느 하나에서, 아릴은 페닐, 나프틸, 플루오레닐, 아줄레닐, 안트릴, 펜안트릴, 및 피레닐을 포함하고; 헤테로아릴은 푸라닐, 티오페닐, 피롤릴, 옥사졸릴, 티아졸릴, 이미다졸릴, 피라졸릴, 이속사졸릴, 이소티아졸릴, 피리딜, 피라지닐, 피리미디닐, 피리다지닐, 퀴놀리닐, 이소퀴놀리닐, 신놀리닐, 퀴나졸리닐, 퀴녹살리닐, 프탈라지닐, 프테리디닐, 벤조푸라닐, 디벤조푸라닐, 벤조티오페닐, 벤즈옥사졸릴, 벤즈티아졸릴, 디벤조티오페닐, 인돌릴, 인돌리닐, 벤즈이미다졸릴, 인다졸릴, 및 벤즈트리아졸릴을 포함하고; 아실은 -C(O)R3c를 포함하고, 여기에서 R3c는 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 아릴, 및 헤테로아릴을 포함한다. 하나의 구현예에서, 아릴은 페닐이다. 하나의 구현예에서, 아릴은 나프틸이다. 하나의 구현예에서, 아릴은 플루오레닐이다. 하나의 구현예에서, 아릴은 아줄레닐이다. 하나의 구현예에서, 아릴은 안트릴이다. 하나의 구현예에서, 아릴은 펜안트릴이다. 하나의 구현예에서, 아릴은 피레닐이다. 하나의 구현예에서, 헤테로아릴은 푸라닐이다. 하나의 구현예에서, 헤테로아릴은 티오페닐이다. 하나의 구현예에서, 헤테로아릴은 피롤릴이다. 하나의 구현예에서, 헤테로아릴은 옥사졸릴이다. 하나의 구현예에서, 헤테로아릴은 티아졸릴이다. 하나의 구현예에서, 헤테로아릴은 이미다졸릴이다. 하나의 구현예에서, 헤테로아릴은 피라졸릴이다. 하나의 구현예에서, 헤테로아릴은 이속사졸릴이다. 하나의 구현예에서, 헤테로아릴은 이소티아졸릴이다. 하나의 구현예에서, 헤테로아릴은 피리딜이다. 하나의 구현예에서, 헤테로아릴은 피라지닐이다. 하나의 구현예에서, 헤테로아릴은 피리미디닐이다. 하나의 구현예에서, 헤테로아릴은 피리다지닐이다. 하나의 구현예에서, 헤테로아릴은 퀴놀리닐이다. 하나의 구현예에서, 헤테로아릴은 이소퀴놀리닐이다. 하나의 구현예에서, 헤테로아릴은 신놀리닐이다. 하나의 구현예에서, 헤테로아릴은 퀴나졸리닐이다. 하나의 구현예에서, 헤테로아릴은 퀴녹살리닐이다. 하나의 구현예에서, 헤테로아릴은 프탈라지닐이다. 하나의 구현예에서, 헤테로아릴은 프테리디닐이다. 하나의 구현예에서, 헤테로아릴은 벤조푸라닐이다. 하나의 구현예에서, 헤테로아릴은 디벤조푸라닐이다. 하나의 구현예에서, 헤테로아릴은 벤조티오페닐이다. 하나의 구현예에서, 헤테로아릴은 벤족사졸릴이다. 하나의 구현예에서, 헤테로아릴은 벤즈티아조일이다. 하나의 구현예에서, 헤테로아릴은 디벤조티오페닐이다. 하나의 구현예에서, 헤테로아릴은 인돌릴이다. 하나의 구현예에서, 헤테로아릴은 인돌리닐이다. 하나의 구현예에서, 헤테로아릴은 벤즈이미다졸릴이다. 하나의 구현예에서, 헤테로아릴은 인다졸릴이다. 하나의 구현예에서, 헤테로아릴은 벤즈트리아졸릴이다. 하나의 구현예에서, 아실은 -C(O)R3c이고, R3c는 알킬이다. 하나의 구현예에서, 아실은 -C(O)R3c이고, R3c는 알케닐이다. 하나의 구현예에서, 아실은 -C(O)R3c이고, R3c는 알키닐이다. 하나의 구현예에서, 아실은 -C(O)R3c이고, R3c는 사이클로알킬이다. 하나의 구현예에서, 아실은 -C(O)R3c이고, R3c는 아릴이다. 하나의 구현예에서, 아실은 -C(O)R3c이고, R3c는 헤테로아릴이다.
본 섹션의 임의의 선행 구현예에서, R7은 -NR7aR7b이고, 여기에서 R7a 및 R7b는 각각의 경우에 독립적으로 수소, 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 아실, 및 아미노산 잔기이고, 여기에서 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 및 아실은 임의로 치환된다. 몇몇 구현예에서, R7a는 수소이고, R7b는 아미노산 잔기이다.
접합체/항체 약물 접합체(ADC)
본원은 항체, 또는 그의 항원 결합 단편을 제공하며, 여기에서 상기 항체는 본원에 기재된 바와 같은 화학식 I, II, III, IV, V, VI, VII, VIII, IX, X, XI, 또는 XII의 하나 이상의 화합물에 접합된다.
본원은 하기 화학식 A의 접합체 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 위치이성질체, 또는 입체이성질체 형태를 제공한다:
[화학식 A]
Figure pct00395
상기 식에서, R1, Q, Q1, R2, R3, R4, R5, R6, R7, R8, R9, 및 m은 화학식 I의 상황에서 상술한 바와 같고, BA는 결합제이고, L은 링커이고, k는 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 또는 10이다. 몇몇 구현예에서, k는 1-2, 1-3, 2-3, 2-4, 3-4, 또는 1-4의 범위이다. 몇몇 구현예에서, 화학식 A에서 -L-BA에 접합된 화합물은 상술한 바와 같은 화학식 II, III, IV, V, VI, VII, VIII, IX, X, XI, 및/또는 XII의 하나 이상의 화합물을 포함하고, 여기에서 BA는 결합제이고, L은 링커이고, k는 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 또는 10이다. 몇몇 구현예에서, k는 1-2, 1-3, 2-3, 2-4, 3-4, 또는 1-4의 범위이다. 본 단락의 임의의 구현예에서, BA는 항체 또는 그의 항원 결합 단편이고, 여기에서 항체는 상술한 바와 같은 화학식 I의 화합물에 접합된다. 본 단락의 임의의 구현예에서, BA는 항체 또는 그의 항원 결합 단편이고, 여기에서 항체는 상술한 바와 같은 화학식 II의 화합물에 접합된다. 본 단락의 임의의 구현예에서, BA는 항체 또는 그의 항원 결합 단편이고, 여기에서 항체는 상술한 바와 같은 화학식 III의 화합물에 접합된다. 본 단락의 임의의 구현예에서, BA는 항체 또는 그의 항원 결합 단편이고, 여기에서 항체는 상술한 바와 같은 화학식 IV의 화합물에 접합된다. 본 단락의 임의의 구현예에서, BA는 항체 또는 그의 항원 결합 단편이고, 여기에서 항체는 상술한 바와 같은 화학식 V의 화합물에 접합된다. 본 단락의 임의의 구현예에서, BA는 항체 또는 그의 항원 결합 단편이고, 여기에서 항체는 상술한 바와 같은 화학식 VI의 화합물에 접합된다. 본 단락의 임의의 구현예에서, BA는 항체 또는 그의 항원 결합 단편이고, 여기에서 항체는 상술한 바와 같은 화학식 VII의 화합물에 접합된다. 본 단락의 임의의 구현예에서, BA는 항체 또는 그의 항원 결합 단편이고, 여기에서 항체는 상술한 바와 같은 화학식 VIII의 화합물에 접합된다. 본 단락의 임의의 구현예에서, BA는 항체 또는 그의 항원 결합 단편이고, 여기에서 항체는 상술한 바와 같은 화학식 IX의 화합물에 접합된다. 본 단락의 임의의 구현예에서, BA는 항체 또는 그의 항원 결합 단편이고, 여기에서 항체는 상술한 바와 같은 화학식 X의 화합물에 접합된다. 본 단락의 임의의 구현예에서, BA는 항체 또는 그의 항원 결합 단편이고, 여기에서 항체는 상술한 바와 같은 화학식 XI의 화합물에 접합된다. 본 단락의 임의의 구현예에서, BA는 항체 또는 그의 항원 결합 단편이고, 여기에서 항체는 상술한 바와 같은 화학식 XII의 화합물에 접합된다. 본 단락의 구현예 중 어느 하나에서, 화학식 A에서 -L-BA에 접합된 화학식 II, III, IV, V, VI, VII, VIII, IX, X, XI, 및/또는 XII의 임의의 하나 이상의 화합물은 피페리딘 질소를 통해 접합된다.
본원은 하기 화학식 B의 접합체 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 위치이성질체, 또는 입체이성질체 형태를 제공한다:
[화학식 B]
Figure pct00396
상기 식에서, R1, Q, Q1, R2, R3, R4, R5, R6, R7, R8, R9, 및 m은 화학식 I의 상황에서 상술한 바와 같고, BA는 결합제이고, L은 링커이고, k는 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 또는 10이다. 몇몇 구현예에서, k는 1-2, 1-3, 2-3, 2-4, 3-4, 또는 1-4의 범위이다. 몇몇 구현예에서, 화학식 B에서 -L-BA에 접합된 화합물은 상술한 바와 같은 화학식 II, III, IV, V, VI, VII, VIII, IX, X, XI, 및/또는 XII의 하나 이상의 화합물을 포함하고, 여기에서 BA는 결합제이고, L은 링커이고, k는 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 또는 10이다. 몇몇 구현예에서, k는 1-2, 1-3, 2-3, 2-4, 3-4, 또는 1-4의 범위이다. 본 단락의 임의의 구현예에서, BA는 항체 또는 그의 항원 결합 단편이고, 여기에서 항체는 상술한 바와 같은 화학식 I의 화합물에 접합된다. 본 단락의 임의의 구현예에서, BA는 항체 또는 그의 항원 결합 단편이고, 여기에서 항체는 상술한 바와 같은 화학식 II의 화합물에 접합된다. 본 단락의 임의의 구현예에서, BA는 항체 또는 그의 항원 결합 단편이고, 여기에서 항체는 상술한 바와 같은 화학식 III의 화합물에 접합된다. 본 단락의 임의의 구현예에서, BA는 항체 또는 그의 항원 결합 단편이고, 여기에서 항체는 상술한 바와 같은 화학식 IV의 화합물에 접합된다. 본 단락의 임의의 구현예에서, BA는 항체 또는 그의 항원 결합 단편이고, 여기에서 항체는 상술한 바와 같은 화학식 V의 화합물에 접합된다. 본 단락의 임의의 구현예에서, BA는 항체 또는 그의 항원 결합 단편이고, 여기에서 항체는 상술한 바와 같은 화학식 VI의 화합물에 접합된다. 본 단락의 임의의 구현예에서, BA는 항체 또는 그의 항원 결합 단편이고, 여기에서 항체는 상술한 바와 같은 화학식 VII의 화합물에 접합된다. 본 단락의 임의의 구현예에서, BA는 항체 또는 그의 항원 결합 단편이고, 여기에서 항체는 상술한 바와 같은 화학식 VIII의 화합물에 접합된다. 본 단락의 임의의 구현예에서, BA는 항체 또는 그의 항원 결합 단편이고, 여기에서 항체는 상술한 바와 같은 화학식 IX의 화합물에 접합된다. 본 단락의 임의의 구현예에서, BA는 항체 또는 그의 항원 결합 단편이고, 여기에서 항체는 상술한 바와 같은 화학식 X의 화합물에 접합된다. 본 단락의 임의의 구현예에서, BA는 항체 또는 그의 항원 결합 단편이고, 여기에서 항체는 상술한 바와 같은 화학식 XI의 화합물에 접합된다. 본 단락의 임의의 구현예에서, BA는 항체 또는 그의 항원 결합 단편이고, 여기에서 항체는 상술한 바와 같은 화학식 XII의 화합물에 접합된다. 본 단락의 구현예 중 어느 하나에서, 화학식 B에서 -L-BA에 접합된 화학식 II, III, IV, V, VI, VII, VIII, IX, X, XI, 및/또는 XII의 임의의 하나 이상의 화합물은 2가 R6을 통해 접합된다.
본원은 하기 화학식 C의 접합체 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 위치이성질체, 또는 입체이성질체 형태를 제공한다:
[화학식 C]
Figure pct00397
상기 식에서, R1, Q, Q1, R2, R3, R4, R5, R6, R7, R8, R9, 및 m은 화학식 I의 상황에서 상술한 바와 같고, BA는 결합제이고, L은 링커이고, k는 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 또는 10이다. 몇몇 구현예에서, k는 1-2, 1-3, 2-3, 2-4, 3-4, 또는 1-4의 범위이다. 몇몇 구현예에서, 화학식 C에서 -L-BA에 접합된 화합물은 상술한 바와 같은 화학식 II, III, IV, V, VI, VII, VIII, IX, X, XI, 및/또는 XII의 하나 이상의 화합물을 포함하고, 여기에서 BA는 결합제이고, L은 링커이고, k는 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 또는 10이다. 몇몇 구현예에서, k는 1-2, 1-3, 2-3, 2-4, 3-4, 또는 1-4의 범위이다. 본 단락의 임의의 구현예에서, BA는 항체 또는 그의 항원 결합 단편이고, 여기에서 항체는 상술한 바와 같은 화학식 I의 화합물에 접합된다. 본 단락의 임의의 구현예에서, BA는 항체 또는 그의 항원 결합 단편이고, 여기에서 항체는 상술한 바와 같은 화학식 II의 화합물에 접합된다. 본 단락의 임의의 구현예에서, BA는 항체 또는 그의 항원 결합 단편이고, 여기에서 항체는 상술한 바와 같은 화학식 III의 화합물에 접합된다. 본 단락의 임의의 구현예에서, BA는 항체 또는 그의 항원 결합 단편이고, 여기에서 항체는 상술한 바와 같은 화학식 IV의 화합물에 접합된다. 본 단락의 임의의 구현예에서, BA는 항체 또는 그의 항원 결합 단편이고, 여기에서 항체는 상술한 바와 같은 화학식 V의 화합물에 접합된다. 본 단락의 임의의 구현예에서, BA는 항체 또는 그의 항원 결합 단편이고, 여기에서 항체는 상술한 바와 같은 화학식 VI의 화합물에 접합된다. 본 단락의 임의의 구현예에서, BA는 항체 또는 그의 항원 결합 단편이고, 여기에서 항체는 상술한 바와 같은 화학식 VII의 화합물에 접합된다. 본 단락의 임의의 구현예에서, BA는 항체 또는 그의 항원 결합 단편이고, 여기에서 항체는 상술한 바와 같은 화학식 VIII의 화합물에 접합된다. 본 단락의 임의의 구현예에서, BA는 항체 또는 그의 항원 결합 단편이고, 여기에서 항체는 상술한 바와 같은 화학식 IX의 화합물에 접합된다. 본 단락의 임의의 구현예에서, BA는 항체 또는 그의 항원 결합 단편이고, 여기에서 항체는 상술한 바와 같은 화학식 X의 화합물에 접합된다. 본 단락의 임의의 구현예에서, BA는 항체 또는 그의 항원 결합 단편이고, 여기에서 항체는 상술한 바와 같은 화학식 XI의 화합물에 접합된다. 본 단락의 임의의 구현예에서, BA는 항체 또는 그의 항원 결합 단편이고, 여기에서 항체는 상술한 바와 같은 화학식 XII의 화합물에 접합된다. 본 단락의 구현예 중 어느 하나에서, 화학식 C에서 -L-BA에 접합된 화학식 II, III, IV, V, VI, VII, VIII, IX, X, XI, 및/또는 XII의 임의의 하나 이상의 화합물은 2가 R7을 통해 접합된다.
본원은 하기 화학식 D의 접합체 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 위치이성질체, 또는 입체이성질체 형태를 제공한다:
[화학식 D]
Figure pct00398
상기 식에서, R1, Q, Q1, R2, R3, R4, R5, R6, R7, R8, R9, 및 m은 화학식 I의 상황에서 상술한 바와 같고, BA는 결합제이고, L은 링커이고, k는 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 또는 10이다. 몇몇 구현예에서, k는 1-2, 1-3, 2-3, 2-4, 3-4, 또는 1-4의 범위이다. 몇몇 구현예에서, 화학식 D에서 -L-BA에 접합된 화합물은 상술한 바와 같은 화학식 II, III, IV, V, VI, VII, VIII, IX, X, XI, 및/또는 XII의 하나 이상의 화합물을 포함하고, 여기에서 BA는 결합제이고, L은 링커이고, k는 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 또는 10이다. 몇몇 구현예에서, k는 1-2, 1-3, 2-3, 2-4, 3-4, 또는 1-4의 범위이다. 본 단락의 임의의 구현예에서, BA는 항체 또는 그의 항원 결합 단편이고, 여기에서 항체는 상술한 바와 같은 화학식 I의 화합물에 접합된다. 본 단락의 임의의 구현예에서, BA는 항체 또는 그의 항원 결합 단편이고, 여기에서 항체는 상술한 바와 같은 화학식 II의 화합물에 접합된다. 본 단락의 임의의 구현예에서, BA는 항체 또는 그의 항원 결합 단편이고, 여기에서 항체는 상술한 바와 같은 화학식 III의 화합물에 접합된다. 본 단락의 임의의 구현예에서, BA는 항체 또는 그의 항원 결합 단편이고, 여기에서 항체는 상술한 바와 같은 화학식 IV의 화합물에 접합된다. 본 단락의 임의의 구현예에서, BA는 항체 또는 그의 항원 결합 단편이고, 여기에서 항체는 상술한 바와 같은 화학식 V의 화합물에 접합된다. 본 단락의 임의의 구현예에서, BA는 항체 또는 그의 항원 결합 단편이고, 여기에서 항체는 상술한 바와 같은 화학식 VI의 화합물에 접합된다. 본 단락의 임의의 구현예에서, BA는 항체 또는 그의 항원 결합 단편이고, 여기에서 항체는 상술한 바와 같은 화학식 VII의 화합물에 접합된다. 본 단락의 임의의 구현예에서, BA는 항체 또는 그의 항원 결합 단편이고, 여기에서 항체는 상술한 바와 같은 화학식 VIII의 화합물에 접합된다. 본 단락의 임의의 구현예에서, BA는 항체 또는 그의 항원 결합 단편이고, 여기에서 항체는 상술한 바와 같은 화학식 IX의 화합물에 접합된다. 본 단락의 임의의 구현예에서, BA는 항체 또는 그의 항원 결합 단편이고, 여기에서 항체는 상술한 바와 같은 화학식 X의 화합물에 접합된다. 본 단락의 임의의 구현예에서, BA는 항체 또는 그의 항원 결합 단편이고, 여기에서 항체는 상술한 바와 같은 화학식 XI의 화합물에 접합된다. 본 단락의 임의의 구현예에서, BA는 항체 또는 그의 항원 결합 단편이고, 여기에서 항체는 상술한 바와 같은 화학식 XII의 화합물에 접합된다. 본 단락의 구현예 중 어느 하나에서, 화학식 D에서 -L-BA에 접합된 화학식 II, III, IV, V, VI, VII, VIII, IX, X, XI, 및/또는 XII의 임의의 하나 이상의 화합물은 2가 R2를 통해 접합된다.
화학식 B의 하나의 구현예에서, BA는 결합제이고; L은 링커이고; Q는 -CH2-이고; R1은 C1-C10 알킬이고; R2는 C5-C10 알킬이고; R3은 -C(O)C1-C5 알킬이고; R4는 수소이고; R5는 C1-C5 알킬이고; R6은 -NHNH-이고; R7은 할로겐이고; R8은 수소이고; m은 1이고; k는 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 또는 10이다. 화학식 B의 하나의 구현예에서, BA는 결합제이고; L은 링커이고; Q는 -CH2-이고; R1은 메틸, 에틸, 프로필, 부틸, 펜틸, 헥실, 헵틸, 옥틸, 노닐, 또는 데실, 및 그의 구조 이성질체이고; R2는 펜틸, 헥실, 헵틸, 옥틸, 노닐, 또는 데실, 및 그의 구조 이성질체이고; R3은 -C(O)CH3, -C(O)CH2CH3, -C(O)CH2CH2CH3, -C(O)CH2CH2CH2CH3, 또는 -C(O)CH2CH2CH2CH2CH3이고; R4는 수소이고; R5는 메틸, 에틸, 프로필, 부틸 또는 펜틸, 및 그의 구조 이성질체이고; R6은 -NHNH-이고; R7은 플루오로, 클로로, 브로모 또는 요오도이고; R8은 수소이고; m은 1이고; k는 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 또는 10이다. 하나의 구현예에서, 화학식 B의 접합체는 하기 화학식 Bi를 포함한다:
[화학식 Bi]
Figure pct00399
상기 식에서, BA는 결합제이고; L은 링커이고; R1은 메틸, 에틸, 프로필, 부틸, 펜틸, 헥실, 헵틸, 옥틸, 노닐, 또는 데실, 및 그의 구조 이성질체이고; R2는 펜틸, 헥실, 헵틸, 옥틸, 노닐, 또는 데실, 및 그의 구조 이성질체이고; R3은 -C(O)CH3, -C(O)CH2CH3, -C(O)CH2CH2CH3, -C(O)CH2CH2CH2CH3, 또는 -C(O)CH2CH2CH2CH2CH3이고; R5는 메틸, 에틸, 프로필, 부틸 또는 펜틸, 및 그의 구조 이성질체이고; R7은 플루오로, 클로로, 브로모 또는 요오도이고; k는 1, 2, 3 또는 4이다. 화학식 Bi의 하나의 구현예에서, BA는 결합제이고; L은 링커이고; R1은 메틸이고; R2는 펜틸, 및 그의 구조 이성질체이고; R3은 -C(O)CH3이고; R5는 메틸이고; R7은 플루오로, 클로로, 브로모 또는 요오도이고; k는 1, 2, 3 또는 4이다. 하나의 구현예에서, 화학식 B의 접합체는 하기의 접합체를 포함한다:
Figure pct00400
상기 식에서 BA는 결합제이고; k는 1, 2, 3 또는 4이다. 본 단락의 구현예 중 어느 하나에서, BA는 항체 또는 그의 항원 결합 단편이다. 본 단락의 구현예 중 어느 하나에서, k는 1-2, 1-3, 2-3, 2-4, 3-4 또는 1-4의 범위이다. 본 단락의 구현예 중 어느 하나에서, k는 1이다. 본 단락의 구현예 중 어느 하나에서, k는 2이다. 본 단락의 구현예 중 어느 하나에서, k는 3이다. 본 단락의 구현예 중 어느 하나에서, k는 4이다.
화학식 B의 하나의 구현예에서, BA는 결합제이고; L은 링커이고; Q는 -O-이고; R1은 C1-C10 알킬이고; R2는 C5-C10 알킬이고; R3은 -C(O)C1-C5 알킬이고; R4는 수소이고; R5는 C1-C5 알킬이고; R6은 -NHNH-이고; R7은 -OH이고; R8은 수소이고; m은 1이고; k는 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 또는 10이다. 화학식 B의 하나의 구현예에서, BA는 결합제이고; L은 링커이고; Q는 -O-이고; R1은 메틸, 에틸, 프로필, 부틸, 펜틸, 헥실, 헵틸, 옥틸, 노닐, 또는 데실, 및 그의 구조 이성질체이고; R2는 펜틸, 헥실, 헵틸, 옥틸, 노닐, 또는 데실, 및 그의 구조 이성질체이고; R3은 -C(O)CH3, -C(O)CH2CH3, -C(O)CH2CH2CH3, -C(O)CH2CH2CH2CH3, 또는 -C(O)CH2CH2CH2CH2CH3이고; R4는 수소이고; R5는 메틸, 에틸, 프로필, 부틸 또는 펜틸, 및 그의 구조 이성질체이고; R6은 -NHNH-이고; R7은 -OH이고; R8은 수소이고; m은 1이고; k는 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 또는 10이다. 하나의 구현예에서, 화학식 B의 접합체는 하기 화학식 Bii를 포함한다:
[화학식 Bii]
Figure pct00401
상기 식에서, BA는 결합제이고; L은 링커이고; R1은 메틸, 에틸, 프로필, 부틸, 펜틸, 헥실, 헵틸, 옥틸, 노닐, 또는 데실, 및 그의 구조 이성질체이고; R2는 펜틸, 헥실, 헵틸, 옥틸, 노닐, 또는 데실, 및 그의 구조 이성질체이고; R3은 -C(O)CH3, -C(O)CH2CH3, -C(O)CH2CH2CH3, -C(O)CH2CH2CH2CH3, 또는 -C(O)CH2CH2CH2CH2CH3이고; R5는 메틸, 에틸, 프로필, 부틸 또는 펜틸, 및 그의 구조 이성질체이고; R7은 -OH이고; k는 1, 2, 3 또는 4이다. 화학식 Bii의 하나의 구현예에서, BA는 결합제이고; L은 링커이고; R1은 메틸이고; R2는 펜틸, 및 그의 구조 이성질체이고; R3은 -C(O)CH3이고; R5는 메틸이고; R7은 -OH이고; k는 1, 2, 3 또는 4이다. 하나의 구현예에서, 화학식 B의 접합체는 하기로 이루어지는 그룹 중에서 선택된 화합물을 포함한다:
Figure pct00402
및
Figure pct00403
상기 식에서 BA는 결합제이고; k는 1, 2, 3 또는 4이다. 본 단락의 구현예 중 어느 하나에서, BA는 항체 또는 그의 항원 결합 단편이다. 본 단락의 구현예 중 어느 하나에서, k는 1-2, 1-3, 2-3, 2-4, 3-4 또는 1-4의 범위이다. 본 단락의 구현예 중 어느 하나에서, k는 1이다. 본 단락의 구현예 중 어느 하나에서, k는 2이다. 본 단락의 구현예 중 어느 하나에서, k는 3이다. 본 단락의 구현예 중 어느 하나에서, k는 4이다.
화학식 C의 하나의 구현예에서, BA는 결합제이고; L은 링커이고; Q는 -CH2-이고; R1은 C1-C10 알킬이고; R2는 C5-C10 알키닐이고; R3은 -C(O)C1-C5 알킬이고; R4 및 R5는 독립적으로, C1-C5 알킬이고; R6은 -OH이고; R7은 -NH-이고; R8은 수소이고; m은 1이고; k는 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 또는 10이다. 화학식 C의 하나의 구현예에서, BA는 결합제이고; L은 링커이고; Q는 -CH2-이고; R1은 메틸, 에틸, 프로필, 부틸, 펜틸, 헥실, 헵틸, 옥틸, 노닐, 또는 데실, 및 그의 구조 이성질체이고; R2는 펜티닐, 헥시닐, 헵티닐, 옥티닐, 노니닐, 또는 데시닐이고; R3은 -C(O)CH3, -C(O)CH2CH3, -C(O)CH2CH2CH3, -C(O)CH2CH2CH2CH3, 또는 -C(O)CH2CH2CH2CH2CH3이고; R4 및 R5는 독립적으로, 메틸, 에틸, 프로필, 부틸 또는 펜틸, 및 그의 구조 이성질체이고; R6은 -OH이고; R7은 -NH-이고; R8은 수소이고; m은 1이고; k는 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 또는 10이다. 하나의 구현예에서, 화학식 C의 접합체는 하기 화학식 Ci를 포함한다:
[화학식 Ci]
Figure pct00404
상기 식에서, BA는 결합제이고; L은 링커이고; R1은 메틸, 에틸, 프로필, 부틸, 펜틸, 헥실, 헵틸, 옥틸, 노닐, 또는 데실, 및 그의 구조 이성질체이고; R2는 펜티닐, 헥시닐, 헵티닐, 옥티닐, 노니닐, 또는 데시닐이고; R3은 -C(O)CH3, -C(O)CH2CH3, -C(O)CH2CH2CH3, -C(O)CH2CH2CH2CH3, 또는 -C(O)CH2CH2CH2CH2CH3이고; R4 및 R5는 독립적으로, 메틸, 에틸, 프로필, 부틸 또는 펜틸, 및 그의 구조 이성질체이고; R7은 -NH-이고; k는 1, 2, 3 또는 4이다. 화학식 Ci의 하나의 구현예에서, BA는 결합제이고; L은 링커이고; R1은 메틸이고; R2는 펜티닐이고; R3은 -C(O)CH3이고; R4 및 R5는 메틸이고; R7은 -NH-이고; k는 1, 2, 3 또는 4이다. 하나의 구현예에서, 화학식 C의 접합체는 하기로 이루어지는 그룹 중에서 선택된 화합물을 포함한다:
Figure pct00405
및
Figure pct00406
상기 식에서 BA는 결합제이고; k는 1, 2, 3 또는 4이다. 본 단락의 구현예 중 어느 하나에서, BA는 항체 또는 그의 항원 결합 단편이다. 본 단락의 구현예 중 어느 하나에서, k는 1-2, 1-3, 2-3, 2-4, 3-4 또는 1-4의 범위이다. 본 단락의 구현예 중 어느 하나에서, k는 1이다. 본 단락의 구현예 중 어느 하나에서, k는 2이다. 본 단락의 구현예 중 어느 하나에서, k는 3이다. 본 단락의 구현예 중 어느 하나에서, k는 4이다.
화학식 C의 하나의 구현예에서, BA는 결합제이고; L은 링커이고; Q는 -O-이고; R1은 C1-C10 알킬이고; R2는 C5-C10 알키닐이고; R3은 -C(O)C1-C5 알킬이고; R4 및 R5는 독립적으로, C1-C5 알킬이고; R6은 -OH이고; R7은 -NH-이고; R8은 수소이고; m은 1이고; k는 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 또는 10이다. 화학식 C의 하나의 구현예에서, BA는 결합제이고; L은 링커이고; Q는 -O-이고; R1은 메틸, 에틸, 프로필, 부틸, 펜틸, 헥실, 헵틸, 옥틸, 노닐, 또는 데실, 및 그의 구조 이성질체이고; R2는 펜티닐, 헥시닐, 헵티닐, 옥티닐, 노니닐, 또는 데시닐이고; R3은 -C(O)CH3, -C(O)CH2CH3, -C(O)CH2CH2CH3, -C(O)CH2CH2CH2CH3, 또는 -C(O)CH2CH2CH2CH2CH3이고; R4 및 R5는 독립적으로, 메틸, 에틸, 프로필, 부틸 또는 펜틸, 및 그의 구조 이성질체이고; R6은 -OH이고; R7은 -NH-이고; R8은 수소이고; m은 1이고; k는 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 또는 10이다. 하나의 구현예에서, 화학식 C의 접합체는 하기 화학식 Cii를 포함한다:
[화학식 Cii]
Figure pct00407
상기 식에서, BA는 결합제이고; L은 링커이고; R1은 메틸, 에틸, 프로필, 부틸, 펜틸, 헥실, 헵틸, 옥틸, 노닐, 또는 데실, 및 그의 구조 이성질체이고; R2는 펜티닐, 헥시닐, 헵티닐, 옥티닐, 노니닐, 또는 데시닐이고; R3은 -C(O)CH3, -C(O)CH2CH3, -C(O)CH2CH2CH3, -C(O)CH2CH2CH2CH3, 또는 -C(O)CH2CH2CH2CH2CH3이고; R4 및 R5는 독립적으로, 메틸, 에틸, 프로필, 부틸 또는 펜틸, 및 그의 구조 이성질체이고; R7은 -NH-이고; k는 1, 2, 3 또는 4이다. 화학식 Cii의 하나의 구현예에서, BA는 결합제이고; L은 링커이고; R1은 메틸이고; R2는 펜티닐이고; R3은 -C(O)CH3이고; R4 및 R5는 메틸이고; R7은 -NH-이고; k는 1, 2, 3 또는 4이다. 하나의 구현예에서, 화학식 C의 접합체는 하기로 이루어지는 그룹 중에서 선택된 화합물을 포함한다:
Figure pct00408
및
Figure pct00409
상기 식에서 BA는 결합제이고; k는 1, 2, 3 또는 4이다. 하나의 구현예에서, 화학식 C의 접합체는 하기로 이루어지는 그룹 중에서 선택된 화합물을 포함한다:
Figure pct00410
및
Figure pct00411
상기 식에서 BA는 결합제이고; k는 1, 2, 3 또는 4이다. 하나의 구현예에서, 화학식 C의 접합체는 하기로 이루어지는 그룹 중에서 선택된 화합물을 포함한다:
Figure pct00412
및
Figure pct00413
상기 식에서 BA는 결합제이고; k는 1, 2, 3 또는 4이다. 하나의 구현예에서, 화학식 C의 접합체는 하기로 이루어지는 그룹 중에서 선택된 화합물을 포함한다:
Figure pct00414
및
Figure pct00415
상기 식에서 BA는 결합제이고; k는 1, 2, 3 또는 4이다. 하나의 구현예에서, 화학식 C의 접합체는 하기로 이루어지는 그룹 중에서 선택된 화합물을 포함한다:
Figure pct00416
및
Figure pct00417
상기 식에서 BA는 결합제이고; k는 1, 2, 3 또는 4이다. 하나의 구현예에서, 화학식 C의 접합체는 하기로 이루어지는 그룹 중에서 선택된 화합물을 포함한다:
Figure pct00418
및
Figure pct00419
상기 식에서 BA는 결합제이고; k는 1, 2, 3 또는 4이다. 하나의 구현예에서, 화학식 C의 접합체는 하기로 이루어지는 그룹 중에서 선택된 화합물을 포함한다:
Figure pct00420
및
Figure pct00421
상기 식에서 BA는 결합제이고; k는 1, 2, 3 또는 4이다. 하나의 구현예에서, 화학식 C의 접합체는 하기로 이루어지는 그룹 중에서 선택된 화합물을 포함한다:
Figure pct00422
및
Figure pct00423
상기 식에서 BA는 결합제이고; k는 1, 2, 3 또는 4이다. 하나의 구현예에서, 화학식 C의 접합체는 하기로 이루어지는 그룹 중에서 선택된 화합물을 포함한다:
Figure pct00424
및
Figure pct00425
상기 식에서 BA는 결합제이고; k는 1, 2, 3 또는 4이다. 하나의 구현예에서, 화학식 C의 접합체는 하기로 이루어지는 그룹 중에서 선택된 화합물을 포함한다:
Figure pct00426
및
Figure pct00427
상기 식에서 BA는 결합제이고; k는 1, 2, 3 또는 4이다. 하나의 구현예에서, 화학식 C의 접합체는 하기로 이루어지는 그룹 중에서 선택된 화합물을 포함한다:
Figure pct00428
및
Figure pct00429
상기 식에서 BA는 결합제이고; k는 1, 2, 3 또는 4이다. 하나의 구현예에서, 화학식 C의 접합체는 하기로 이루어지는 그룹 중에서 선택된 화합물을 포함한다:
Figure pct00430
및
Figure pct00431
상기 식에서 BA는 결합제이고; k는 1, 2, 3 또는 4이다. 본 단락의 구현예 중 어느 하나에서, BA는 항체 또는 그의 항원 결합 단편이다. 본 단락의 구현예 중 어느 하나에서, k는 1-2, 1-3, 2-3, 2-4, 3-4 또는 1-4의 범위이다. 본 단락의 구현예 중 어느 하나에서, k는 1이다. 본 단락의 구현예 중 어느 하나에서, k는 2이다. 본 단락의 구현예 중 어느 하나에서, k는 3이다. 본 단락의 구현예 중 어느 하나에서, k는 4이다.
화학식 C의 하나의 구현예에서, BA는 결합제이고; L은 링커이고; Q는 -CH2-이고; R1은 C1-C10 알킬이고; R2는 C5-C10 알키닐이고; R3은 -C(O)C1-C5 알킬이고; R4 및 R5는 독립적으로, C1-C5 알킬이고; R6은 -OH이고; R7은 -NH-이고; R8은 수소이고; m은 1이고; k는 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 또는 10이다. 화학식 C의 하나의 구현예에서, BA는 결합제이고; L은 링커이고; Q는 -CH2-이고; R1은 메틸, 에틸, 프로필, 부틸, 펜틸, 헥실, 헵틸, 옥틸, 노닐, 또는 데실, 및 그의 구조 이성질체이고; R2는 펜티닐, 헥시닐, 헵티닐, 옥티닐, 노니닐, 또는 데시닐이고; R3은 -C(O)CH3, -C(O)CH2CH3, -C(O)CH2CH2CH3, -C(O)CH2CH2CH2CH3, 또는 -C(O)CH2CH2CH2CH2CH3이고; R4 및 R5는 독립적으로, 메틸, 에틸, 프로필, 부틸 또는 펜틸, 및 그의 구조 이성질체이고; R6은 -OH이고; R7은 -NH-이고; R8은 수소이고; m은 1이고; k는 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 또는 10이다. 하나의 구현예에서, 화학식 C의 접합체는 하기 화학식 Ci를 포함한다:
화학식 Ci
Figure pct00432
상기 식에서, BA는 결합제이고; L은 링커이고; R1은 메틸, 에틸, 프로필, 부틸, 펜틸, 헥실, 헵틸, 옥틸, 노닐, 또는 데실, 및 그의 구조 이성질체이고; R2는 펜티닐, 헥시닐, 헵티닐, 옥티닐, 노니닐, 또는 데시닐이고; R3은 -C(O)CH3, -C(O)CH2CH3, -C(O)CH2CH2CH3, -C(O)CH2CH2CH2CH3, 또는 -C(O)CH2CH2CH2CH2CH3이고; R4 및 R5는 독립적으로, 메틸, 에틸, 프로필, 부틸 또는 펜틸, 및 그의 구조 이성질체이고; R7은 -NH-이고; k는 1, 2, 3 또는 4이다. 화학식 Ci의 하나의 구현예에서, BA는 결합제이고; L은 링커이고; R1은 메틸이고; R2는 펜티닐이고; R3은 -C(O)CH3이고; R5는 메틸이고; R7은 -NH-이고; k는 1, 2, 3 또는 4이다. 하나의 구현예에서, 화학식 C의 접합체는 하기로 이루어지는 그룹 중에서 선택된 화합물을 포함한다:
Figure pct00433
및
Figure pct00434
상기 식에서 BA는 결합제이고; k는 1, 2, 3 또는 4이다. 본 단락의 구현예 중 어느 하나에서, BA는 항체 또는 그의 항원 결합 단편이다. 본 단락의 구현예 중 어느 하나에서, k는 1-2, 1-3, 2-3, 2-4, 3-4 또는 1-4의 범위이다. 본 단락의 구현예 중 어느 하나에서, k는 1이다. 본 단락의 구현예 중 어느 하나에서, k는 2이다. 본 단락의 구현예 중 어느 하나에서, k는 3이다. 본 단락의 구현예 중 어느 하나에서, k는 4이다.
화학식 C의 하나의 구현예에서, BA는 결합제이고; L은 링커이고; Q는 -O-이고; R1은 C1-C10 알킬이고; R2는 C5-C10 알키닐이고; R3은 -C(O)C1-C5 알킬이고; R4 및 R5는 독립적으로, C1-C5 알킬이고; R6은 -OH이고; R7은 -NH-이고; R8은 수소이고; m은 1이고; k는 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 또는 10이다. 화학식 C의 하나의 구현예에서, BA는 결합제이고; L은 링커이고; Q는 -O-이고; R1은 메틸, 에틸, 프로필, 부틸, 펜틸, 헥실, 헵틸, 옥틸, 노닐, 또는 데실, 및 그의 구조 이성질체이고; R2는 펜틸, 헥실, 헵틸, 옥틸, 노닐 또는 데실, 및 그의 구조 이성질체이고; R3은 -C(O)CH3, -C(O)CH2CH3, -C(O)CH2CH2CH3, -C(O)CH2CH2CH2CH3, 또는 -C(O)CH2CH2CH2CH2CH3이고; R4 및 R5는 독립적으로, 메틸, 에틸, 프로필, 부틸 또는 펜틸, 및 그의 구조 이성질체이고; R6은 -OH이고; R7은 -NH-이고; R8은 수소이고; m은 1이고; k는 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 또는 10이다. 하나의 구현예에서, 화학식 C의 접합체는 하기 화학식 Cii를 포함한다:
화학식 Cii
Figure pct00435
상기 식에서, BA는 결합제이고; L은 링커이고; R1은 메틸, 에틸, 프로필, 부틸, 펜틸, 헥실, 헵틸, 옥틸, 노닐, 또는 데실, 및 그의 구조 이성질체이고; R2는 펜틸, 헥실, 헵틸, 옥틸, 노닐, 또는 데실, 및 그의 구조 이성질체이고; R3은 -C(O)CH3, -C(O)CH2CH3, -C(O)CH2CH2CH3, -C(O)CH2CH2CH2CH3, 또는 -C(O)CH2CH2CH2CH2CH3이고; R4 및 R5는 독립적으로, 메틸, 에틸, 프로필, 부틸 또는 펜틸, 및 그의 구조 이성질체이고; R7은 -NH-이고; k는 1, 2, 3 또는 4이다. 화학식 Cii의 하나의 구현예에서, BA는 결합제이고; L은 링커이고; R1은 메틸이고; R2는 펜틸이고; R3은 -C(O)CH3이고; R4 및 R5는 메틸이고; R7은 -NH-이고; k는 1, 2, 3 또는 4이다. 하나의 구현예에서, 화학식 C의 접합체는 하기로 이루어지는 그룹 중에서 선택된 화합물을 포함한다:
Figure pct00436
및
Figure pct00437
상기 식에서 BA는 결합제이고; k는 1, 2, 3 또는 4이다. 하나의 구현예에서, 화학식 C의 접합체는 하기로 이루어지는 그룹 중에서 선택된 화합물을 포함한다:
Figure pct00438
및
Figure pct00439
상기 식에서 BA는 결합제이고; k는 1, 2, 3 또는 4이다. 하나의 구현예에서, 화학식 C의 접합체는 하기로 이루어지는 그룹 중에서 선택된 화합물을 포함한다:
Figure pct00440
및
Figure pct00441
상기 식에서 BA는 결합제이고; k는 1, 2, 3 또는 4이다. 본 단락의 구현예 중 어느 하나에서, BA는 항체 또는 그의 항원 결합 단편이다. 본 단락의 구현예 중 어느 하나에서, k는 1-2, 1-3, 2-3, 2-4, 3-4 또는 1-4의 범위이다. 본 단락의 구현예 중 어느 하나에서, k는 1이다. 본 단락의 구현예 중 어느 하나에서, k는 2이다. 본 단락의 구현예 중 어느 하나에서, k는 3이다. 본 단락의 구현예 중 어느 하나에서, k는 4이다.
화학식 C의 하나의 구현예에서, BA는 결합제이고; L은 링커이고; Q는 -CH2-이고; R1은 C1-C10 알킬이고; R2는 C5-C10 알키닐이고; R3은 -C(O)C1-C5 알킬이고; R4 및 R5는 독립적으로, C1-C5 알킬이고; R6은 -OH이고; R7은 -NH-이고; R8은 수소이고; m은 1이고; k는 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 또는 10이다. 화학식 C의 하나의 구현예에서, BA는 결합제이고; L은 링커이고; Q는 -CH2-이고; R1은 메틸, 에틸, 프로필, 부틸, 펜틸, 헥실, 헵틸, 옥틸, 노닐, 또는 데실, 및 그의 구조 이성질체이고; R2는 펜티닐, 헥시닐, 헵티닐, 옥티닐, 노니닐, 또는 데시닐이고; R3은 -C(O)CH3, -C(O)CH2CH3, -C(O)CH2CH2CH3, -C(O)CH2CH2CH2CH3, 또는 -C(O)CH2CH2CH2CH2CH3이고; R4 및 R5는 독립적으로, 메틸, 에틸, 프로필, 부틸 또는 펜틸, 및 그의 구조 이성질체이고; R6은 -OH이고; R7은 -NH-이고; R8은 수소이고; m은 1이고; k는 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 또는 10이다. 하나의 구현예에서, 화학식 C의 접합체는 하기 화학식 Ci를 포함한다:
화학식 Ci
Figure pct00442
상기 식에서, BA는 결합제이고; L은 링커이고; R1은 메틸, 에틸, 프로필, 부틸, 펜틸, 헥실, 헵틸, 옥틸, 노닐, 또는 데실, 및 그의 구조 이성질체이고; R2는 펜티닐, 헥시닐, 헵티닐, 옥티닐, 노니닐, 또는 데시닐이고; R3은 -C(O)CH3, -C(O)CH2CH3, -C(O)CH2CH2CH3, -C(O)CH2CH2CH2CH3, 또는 -C(O)CH2CH2CH2CH2CH3이고; R4 및 R5는 독립적으로, 메틸, 에틸, 프로필, 부틸 또는 펜틸, 및 그의 구조 이성질체이고; R7은 -NH-이고; k는 1, 2, 3 또는 4이다. 화학식 Ci의 하나의 구현예에서, BA는 결합제이고; L은 링커이고; R1은 메틸이고; R2는 펜티닐이고; R3은 -C(O)CH3이고; R4 및 R5는 메틸이고; R7은 -NH-이고; k는 1, 2, 3 또는 4이다. 하나의 구현예에서, 화학식 C의 접합체는 하기로 이루어지는 그룹 중에서 선택된 화합물을 포함한다:
Figure pct00443
및
Figure pct00444
상기 식에서 BA는 결합제이고; k는 1, 2, 3 또는 4이다. 본 단락의 구현예 중 어느 하나에서, BA는 항체 또는 그의 항원 결합 단편이다. 본 단락의 구현예 중 어느 하나에서, k는 1-2, 1-3, 2-3, 2-4, 3-4 또는 1-4의 범위이다. 본 단락의 구현예 중 어느 하나에서, k는 1이다. 본 단락의 구현예 중 어느 하나에서, k는 2이다. 본 단락의 구현예 중 어느 하나에서, k는 3이다. 본 단락의 구현예 중 어느 하나에서, k는 4이다.
화학식 C의 하나의 구현예에서, BA는 결합제이고; L은 링커이고; Q는 -CH2-이고; R1은 C1-C10 알킬이고; R2는 C5-C10 알킬이고; R3은 -C(O)C1-C5 알킬이고; R4 및 R5는 독립적으로, C1-C5 알킬이고; R6은 -OH이고; R7은 -NH-이고; R8은 할로겐이고; m은 1이고; k는 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 또는 10이다. 화학식 C의 하나의 구현예에서, BA는 결합제이고; L은 링커이고; Q는 -CH2-이고; R1은 메틸, 에틸, 프로필, 부틸, 펜틸, 헥실, 헵틸, 옥틸, 노닐, 또는 데실, 및 그의 구조 이성질체이고; R2는 펜틸, 헥실, 헵틸, 옥틸, 노닐 또는 데실이고; R3은 -C(O)CH3, -C(O)CH2CH3, -C(O)CH2CH2CH3, -C(O)CH2CH2CH2CH3, 또는 -C(O)CH2CH2CH2CH2CH3이고; R4 및 R5는 독립적으로, 메틸, 에틸, 프로필, 부틸 또는 펜틸, 및 그의 구조 이성질체이고; R6은 -OH이고; R7은 -NH-이고; R8은 할로겐이고; m은 1이고; k는 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 또는 10이다. 하나의 구현예에서, 화학식 C의 접합체는 하기 화학식 Ciii를 포함한다:
[화학식 Ciii]
Figure pct00445
상기 식에서, BA는 결합제이고; L은 링커이고; R1은 메틸, 에틸, 프로필, 부틸, 펜틸, 헥실, 헵틸, 옥틸, 노닐, 또는 데실, 및 그의 구조 이성질체이고; R2는 펜틸, 헥실, 헵틸, 옥틸, 노닐, 또는 데실이고; R3은 -C(O)CH3, -C(O)CH2CH3, -C(O)CH2CH2CH3, -C(O)CH2CH2CH2CH3, 또는 -C(O)CH2CH2CH2CH2CH3이고; R4 및 R5는 독립적으로, 메틸, 에틸, 프로필, 부틸 또는 펜틸, 및 그의 구조 이성질체이고; R7은 -NH-이고; R8은 할로겐이고; m은 1이고; k는 1, 2, 3 또는 4이다. 화학식 Ciii의 하나의 구현예에서, BA는 결합제이고; L은 링커이고; R1은 메틸이고; R2는 펜틸이고; R3은 -C(O)CH3이고; R4 및 R5는 메틸이고; R7은 -NH-이고; R8은 할로겐이고; m은 1이고; k는 1, 2, 3 또는 4이다. 하나의 구현예에서, 화학식 C의 접합체는 하기로 이루어지는 그룹 중에서 선택된 화합물을 포함한다:
Figure pct00446
및
Figure pct00447
상기 식에서 BA는 결합제이고; k는 1, 2, 3 또는 4이다. 하나의 구현예에서, 화학식 C의 접합체는 하기를 포함한다:
Figure pct00448
상기 식에서 BA는 결합제이고; k는 1, 2, 3 또는 4이다. 본 단락의 구현예 중 어느 하나에서, BA는 항체 또는 그의 항원 결합 단편이다. 본 단락의 구현예 중 어느 하나에서, k는 1-2, 1-3, 2-3, 2-4, 3-4 또는 1-4의 범위이다. 본 단락의 구현예 중 어느 하나에서, k는 1이다. 본 단락의 구현예 중 어느 하나에서, k는 2이다. 본 단락의 구현예 중 어느 하나에서, k는 3이다. 본 단락의 구현예 중 어느 하나에서, k는 4이다.
화학식 C의 하나의 구현예에서, BA는 결합제이고; L은 링커이고; Q는 -O-이고; R1은 C1-C10 알킬이고; R2는 C5-C10 알킬이고; R3은 -C(O)N(H)C1-C10 알킬이고; R4 및 R5는 독립적으로, C1-C5 알킬이고; R6은 -OH이고; R7은 -NH-이고; R8은 수소이고; m은 1이고; k는 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 또는 10이다. 화학식 C의 하나의 구현예에서, BA는 결합제이고; L은 링커이고; Q는 -O-이고; R1은 메틸, 에틸, 프로필, 부틸, 펜틸, 헥실, 헵틸, 옥틸, 노닐, 또는 데실, 및 그의 구조 이성질체이고; R2는 펜틸, 헥실, 헵틸, 옥틸, 노닐, 또는 데실, 및 그의 구조 이성질체이고; R3은 -C(O)N(H)CH3, -C(O)N(H)CH2CH3, -C(O)N(H)CH2CH2CH3, -C(O)N(H)CH2CH2CH2CH3, 또는 -C(O)N(H)CH2CH2CH2CH2CH3이고; R4 및 R5는 독립적으로, 메틸, 에틸, 프로필, 부틸 또는 펜틸, 및 그의 구조 이성질체이고; R6은 -OH이고; R7은 -NH-이고; R8은 수소이고; m은 1이고; k는 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 또는 10이다. 하나의 구현예에서, 화학식 C의 접합체는 하기 화학식 Cii를 포함한다:
화학식 Cii
Figure pct00449
상기 식에서, BA는 결합제이고; L은 링커이고; R1은 메틸, 에틸, 프로필, 부틸, 펜틸, 헥실, 헵틸, 옥틸, 노닐, 또는 데실, 및 그의 구조 이성질체이고; R2는 펜틸, 헥실, 헵틸, 옥틸, 노닐, 또는 데실, 및 그의 구조 이성질체이고; R3은 -C(O)N(H)CH3, -C(O)N(H)CH2CH3, -C(O)N(H)CH2CH2CH3, -C(O)N(H)CH2CH2CH2CH3, 또는 -C(O)N(H)CH2CH2CH2CH2CH3이고; R4 및 R5는 독립적으로, 메틸, 에틸, 프로필, 부틸 또는 펜틸, 및 그의 구조 이성질체이고; R7은 -NH-이고; k는 1, 2, 3 또는 4이다. 화학식 Cii의 하나의 구현예에서, BA는 결합제이고; L은 링커이고; R1은 메틸이고; R2는 펜틸이고; R3은 -C(O)N(H)CH3이고; R4 및 R5는 메틸이고; R7은 -NH-이고; k는 1, 2, 3 또는 4이다. 하나의 구현예에서, 화학식 C의 접합체는 하기로 이루어지는 그룹 중에서 선택된 화합물을 포함한다:
Figure pct00450
및
Figure pct00451
상기 식에서 BA는 결합제이고; k는 1, 2, 3 또는 4이다. 하나의 구현예에서, 화학식 C의 접합체는 하기로 이루어지는 그룹 중에서 선택된 화합물을 포함한다:
Figure pct00452
및
Figure pct00453
상기 식에서 BA는 결합제이고; k는 1, 2, 3 또는 4이다. 본 단락의 구현예 중 어느 하나에서, BA는 항체 또는 그의 항원 결합 단편이다. 본 단락의 구현예 중 어느 하나에서, k는 1-2, 1-3, 2-3, 2-4, 3-4 또는 1-4의 범위이다. 본 단락의 구현예 중 어느 하나에서, k는 1이다. 본 단락의 구현예 중 어느 하나에서, k는 2이다. 본 단락의 구현예 중 어느 하나에서, k는 3이다. 본 단락의 구현예 중 어느 하나에서, k는 4이다.
화학식 C의 하나의 구현예에서, BA는 결합제이고; L은 링커이고; Q는 -CH2-이고; R1은 C1-C10 알킬이고; R2는 C5-C10 알킬이고; R3은 -C(O)N(H)C1-C5 알킬이고; R4 및 R5는 독립적으로, C1-C5 알킬이고; R6은 -OH이고; R7은 -NH-이고; R8은 할로겐이고; m은 1이고; k는 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 또는 10이다. 화학식 C의 하나의 구현예에서, BA는 결합제이고; L은 링커이고; Q는 -CH2-이고; R1은 메틸, 에틸, 프로필, 부틸, 펜틸, 헥실, 헵틸, 옥틸, 노닐, 또는 데실, 및 그의 구조 이성질체이고; R2는 펜틸, 헥실, 헵틸, 옥틸, 노닐 또는 데실이고; R3은 -C(O)N(H)CH3, -C(O)N(H)CH2CH3, -C(O)N(H)CH2CH2CH3, -C(O)N(H)CH2CH2CH2CH3, 또는 -C(O)N(H)CH2CH2CH2CH2CH3이고; R4 및 R5는 독립적으로, 메틸, 에틸, 프로필, 부틸 또는 펜틸, 및 그의 구조 이성질체이고; R6은 -OH이고; R7은 -NH-이고; R8은 할로겐이고; m은 1이고; k는 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 또는 10이다. 하나의 구현예에서, 화학식 C의 접합체는 하기 화학식 Ciii를 포함한다:
화학식 Ciii
Figure pct00454
상기 식에서, BA는 결합제이고; L은 링커이고; R1은 메틸, 에틸, 프로필, 부틸, 펜틸, 헥실, 헵틸, 옥틸, 노닐, 또는 데실, 및 그의 구조 이성질체이고; R2는 펜틸, 헥실, 헵틸, 옥틸, 노닐, 또는 데실이고; R3은 -C(O)N(H)CH3, -C(O)N(H)CH2CH3, -C(O)N(H)CH2CH2CH3, -C(O)N(H)CH2CH2CH2CH3, 또는 -C(O)N(H)CH2CH2CH2CH2CH3이고; R4 및 R5는 독립적으로, 메틸, 에틸, 프로필, 부틸 또는 펜틸, 및 그의 구조 이성질체이고; R7은 -NH-이고; R8은 할로겐이고; m은 1이고; k는 1, 2, 3 또는 4이다. 화학식 Ciii의 하나의 구현예에서, BA는 결합제이고; L은 링커이고; R1은 메틸이고; R2는 펜틸이고; R3은 -C(O)N(H)CH3이고; R4 및 R5는 메틸이고; R7은 -NH-이고; R8은 할로겐이고; m은 1이고; k는 1, 2, 3 또는 4이다. 하나의 구현예에서, 화학식 C의 접합체는 하기로 이루어지는 그룹 중에서 선택된 화합물을 포함한다:
Figure pct00455
및
Figure pct00456
상기 식에서 BA는 결합제이고; k는 1, 2, 3 또는 4이다. 본 단락의 구현예 중 어느 하나에서, BA는 항체 또는 그의 항원 결합 단편이다. 본 단락의 구현예 중 어느 하나에서, k는 1-2, 1-3, 2-3, 2-4, 3-4 또는 1-4의 범위이다. 본 단락의 구현예 중 어느 하나에서, k는 1이다. 본 단락의 구현예 중 어느 하나에서, k는 2이다. 본 단락의 구현예 중 어느 하나에서, k는 3이다. 본 단락의 구현예 중 어느 하나에서, k는 4이다.
몇몇 구현예에서, 항체 또는 그의 항원-결합 단편을 본원에 기재된 바와 같은 화학식 I, II, III, IV, V, VI, VII, VIII, IX, X, XI, 및/또는 XII의 임의의 하나 이상에 직접 접합시킬 수 있다. 하나의 구현예에서, 항체-약물 접합체는 하기로 이루어지는 그룹 중에서 선택된, 본원에 기재된 바와 같은 화학식 I, II, III, IV, V, VI, VII, VIII, IX, X, XI, 및/또는 XII의 임의의 하나 이상에 접합된 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 포함한다
Figure pct00457
Figure pct00458
Figure pct00459
Figure pct00460
Figure pct00461
Figure pct00462
Figure pct00463
및
Figure pct00464
.
하나의 구현예에서, 항체-약물 접합체는
Figure pct00465
에 접합된 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 포함한다. 하나의 구현예에서, 항체-약물 접합체는
Figure pct00466
에 접합된 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 포함한다. 하나의 구현예에서, 항체-약물 접합체는
Figure pct00467
에 접합된 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 포함한다. 하나의 구현예에서, 항체-약물 접합체는
Figure pct00468
에 접합된 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 포함한다. 하나의 구현예에서, 항체-약물 접합체는
Figure pct00469
에 접합된 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 포함한다. 하나의 구현예에서, 항체-약물 접합체는
Figure pct00470
에 접합된 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 포함한다. 하나의 구현예에서, 항체-약물 접합체는
Figure pct00471
에 접합된 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 포함한다.
제공된 화합물 또는 접합체 구현예 중 어느 하나에서, BA는 PRLR에 결합하는 항체 또는 그의 항원 결합 단편이다. 제공된 화합물 또는 접합체 구현예 중 어느 하나에서, BA는 STEAP2에 결합하는 항체 또는 그의 항원 결합 단편이다. 제공된 화합물 또는 접합체 구현예 중 어느 하나에서, BA는 항체 또는 그의 항원-결합 단편이며, 접합은 적어도 하나의 Q295 잔기를 통한다. 제공된 화합물 또는 접합체 구현예 중 어느 하나에서, BA는 항체 또는 그의 항원-결합 단편이며, 접합은 2개의 Q295 잔기를 통한다. 제공된 화합물 또는 접합체 구현예 중 어느 하나에서, BA는 N297Q 항체 또는 그의 항원-결합 단편이다. 제공된 화합물 또는 접합체 구현예 중 어느 하나에서, BA는 N297Q 항체 또는 그의 항원-결합 단편이며, 접합은 적어도 하나의 Q295 및 적어도 하나의 Q297 잔기를 통한다. 제공된 화합물 또는 접합체 구현예 중 어느 하나에서, BA는 N297Q 항체 또는 그의 항원-결합 단편이며, 접합은 2개의 Q295 잔기 및 2개의 Q297 잔기를 통한다. 특정 구현예에서, 넘버링은 EU 넘버링 시스템에 따른다.
상기 구현예 중 어느 하나에서, BA는 항-STEAP2 항체이다. 몇몇 구현예에서, BA는 하기 실시예에 기재된 항-STEAP2 항체 H1H7814N이다. 몇몇 구현예에서, BA는 하기 실시예에 기재된 항-STEAP2 항체 H1H7814N N297Q이다. 몇몇 구현예에서, BA는 서열번호 1에 따른 HCVR 및 서열번호 5에 따른 LCVR을 포함하는 항-STEAP2 항체이다. 몇몇 구현예에서, BA는 서열번호 1에 따른 HCVR 및 서열번호 5에 따른 LCVR을 포함하는 N297Q 항체이다. 몇몇 구현예에서, BA는 각각 서열번호 2, 3, 4, 6, 7 및 8에 따른 HCDR1, HCDR2, HCDR3, LCDR1, LCDR2, 및 LCDR3 중 1, 2, 3, 4, 5 또는 6개를 포함하는 항-STEAP2 항체이다. 몇몇 구현예에서, BA는 각각 서열번호 2, 3, 4, 6, 7 및 8에 따른 HCDR1, HCDR2, HCDR3, LCDR1, LCDR2, 및 LCDR3 중 1, 2, 3, 4, 5 또는 6개를 포함하는 N297Q 항체이다. N297Q는 하나 이상의 잔기 297이 아스파라진(N)에서 글루타민(Q)으로 돌연변이됨을 가리킨다. 바람직하게, 각각의 잔기 297은 Q로 돌연변이된다. 바람직한 구현예에서, 넘버링은 EU 넘버링 시스템에 따른다. 본 단락의 몇몇 구현예에서, k는 1 내지 4이다. 몇몇 구현예에서, k는 1, 2, 3, 또는 4이다. 몇몇 구현예에서, k는 4이다.
상기 구현예 중 어느 하나에서, BA는 항-PRLR 항체이다. 몇몇 구현예에서, BA는 하기 실시예에 기재된 항-PRLR 항체 H1H6958N2이다. 몇몇 구현예에서, BA는 하기 실시예에 기재된 항-PRLR 항체 H1H6958N2 N297Q이다. 몇몇 구현예에서, BA는 서열번호 9에 따른 HCVR 및 서열번호 13에 따른 LCVR을 포함하는 항-PRLR 항체이다. 몇몇 구현예에서, BA는 서열번호 9에 따른 HCVR 및 서열번호 13에 따른 LCVR을 포함하는 N297Q 항체이다. 몇몇 구현예에서, BA는 각각 서열번호 10, 11, 12, 14, 15 및 16에 따른 HCDR1, HCDR2, HCDR3, LCDR1, LCDR2, 및 LCDR3 중 1, 2, 3, 4, 5 또는 6개를 포함하는 항-PRLR 항체이다. 몇몇 구현예에서, BA는 각각 서열번호 10, 11, 12, 14, 15 및 16에 따른 HCDR1, HCDR2, HCDR3, LCDR1, LCDR2, 및 LCDR3 중 1, 2, 3, 4, 5 또는 6개를 포함하는 N297Q 항체이다. N297Q는 하나 이상의 잔기 297이 아스파라진(N)에서 글루타민(Q)으로 돌연변이됨을 가리킨다. 바람직하게, 각각의 잔기 297은 Q로 돌연변이된다. 바람직한 구현예에서, 넘버링은 EU 넘버링 시스템에 따른다. 본 단락의 몇몇 구현예에서, k는 1 내지 4이다. 몇몇 구현예에서, k는 1, 2, 3, 또는 4이다. 몇몇 구현예에서, k는 4이다.
본 섹션의 임의의 선행 구현예에서, R7은 -NR7aR7b이고, 여기에서 R7a 및 R7b는 각각의 경우에 독립적으로, 수소, 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 아실 및 아미노산 잔기이고, 여기에서 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 및 아실은 임의로 치환된다. 몇몇 구현예에서, R7a는 수소이고 R7b는 아미노산 잔기이다.
화합물 또는 페이로드, 및 링커-페이로드의 제조 방법
본원에 제공된 화합물을 당업자에게 자명한 임의의 방법에 의해 제조하거나, 단리하거나, 수득할 수 있다. 예시적인 제조 방법을 하기 실시예에 상세히 기재한다. 몇몇 구현예에서, 본원에 제공된 화합물을 반응식 A-D에 따라 일반적으로 제조할 수 있다:
[반응식 A]
예시적인 제조 반응식
Figure pct00472
[반응식 B]
예시적인 제조 반응식
Figure pct00473
[반응식 C]
예시적인 제조 반응식
Figure pct00474
[반응식 D]
예시적인 제조 반응식
Figure pct00475
상기 예시적인 제조 반응식에서, R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7, R8은 화학식 I의 상황에 기재되어 있다. 반응식 A에서, 아미노산을 호몰로게이션하고(homologated), 이어서 α-탄소에서 젬-디메틸화하였다. N-설포닐카복스아미드를 당업자에 의해 인식되는 바와 같이, 표준 조건하에서 H2NSO2R60을 사용하여 제조할 수 있다. 반응식 B에서, 시스테인은 티아졸 형성으로 가는 도중에 환화에 참여한 다음, Boc-보호된 N-알콕시아민의 알돌 축합 및 마이클 부가되었다. 이어서 Boc-보호된 N-알콕시아민은 Boc-보호된 아민 유도체로 환원되었다. 반응식 C에서, Boc-보호된 N-알콕시아민은 탈보호되고 아실화되었다. 아지드의 스타우딩거 환원에 이어서 아미드화되었다. 알콜의 탈보호, 에스테르의 비누화, 및 알콜의 아실화는 끝에서 두번째 중간체를 제공하였다. 카복실레이트의 활성화에 이어서 아미드화는 화학식 I의 화합물을 제공하였다. 반응식 D의 반응은 유사하였으며, 여기에서 환원적 아민화가 합성의 초기에 수행된 다음 반응식 C에서와 유사한 단계가 수행되어, 화학식 I의 화합물을 또한 제공하였다. 예시적인 제조 방법을 하기 실시예에서 상세히 기재한다.
본원에 기재된 링커-페이로드를 반응식 E-H, J, K, M 및 N에 나타낸 바와 같은 일련의 커플링 단계에 의해 일반적으로 합성할 수 있다:
[반응식 E]
예시적인 제조 반응식
Figure pct00476
Figure pct00477
Figure pct00478
[반응식 F]
예시적인 제조 반응식
Figure pct00479
[반응식 G]
예시적인 제조 반응식
Figure pct00480
[반응식 H]
예시적인 제조 반응식
Figure pct00481
Figure pct00482
[반응식 J]
예시적인 제조 반응식
Figure pct00483
Figure pct00484
[반응식 K]
예시적인 제조 반응식
Figure pct00485
Figure pct00486
[반응식 M]
예시적인 제조 반응식
Figure pct00487
Figure pct00488
[반응식 N]
예시적인 제조 반응식
Figure pct00489
Figure pct00490
상기 예시적인 제조 반응식에서, R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7, R8은 화학식 I의 상황에 기재되어 있다. 반응식 E에서, 페이로드는 벤질 할라이드로 처리되어 4급 암모늄 링커-페이로드를 형성한다. 반응식 F, G, J, M 및 N에서 페이로드는 카보네이트로 처리되어 링커-페이로드를 형성한다. 반응식 H에서, 페이로드는 벤질 아지드로 처리되어 트리아졸릴 링커-페이로드를 형성한다. 반응식 K에서, 페이로드는 벤질 알콜로 에스테르화되어 링커-페이로드를 형성한다.
몇몇 구현예에서, 본원은 하기로 이루어지는 그룹 중에서 선택된 화합물(예를 들어 링커-페이로드)을 제공한다:
Figure pct00491
;
Figure pct00492
;
Figure pct00493
;
Figure pct00494
;
Figure pct00495
;
Figure pct00496
;
Figure pct00497
;
Figure pct00498
Figure pct00499
;
Figure pct00500
;
Figure pct00501
;
Figure pct00502
Figure pct00503
Figure pct00504
;
Figure pct00505
; 및
Figure pct00506
.
본 단락내 몇몇 구현예에서, 모든 부분입체이성질체가 고려된다. 예를 들어, 하나의 구현예에서,
Figure pct00507
내의 입체화학은 한정되지 않거나 라세미이다. 추가의 예로서 하나의 구현예에서,
Figure pct00508
내의 입체 화학은 (R)-이다. 추가의 예로서, 하나의 구현예에서,
Figure pct00509
내의 입체화학은 (S)-이다. 추가의 예로서, 하나의 구현예에서,
Figure pct00510
내의 입체화학은 (S)- 과잉 (R)-이다. 추가의 예로서, 하나의 구현예에서,
Figure pct00511
내의 입체화학은 (R)-과잉 (S)-이다.
본원에 기재된 접합체를, 본원에 기재된 링커-페이로드를 표준 접합 조건하에서 결합제, 예를 들어 항체와 커플링시킴으로써 합성할 수 있다(예를 들어 문헌[Doronina et al. Nature Biotechnology 2003, 21, 7, 778](내용 전체가 본원에 참고로 인용된다)을 참조하시오). 상기 결합제가 항체인 경우, 상기 항체를 상기 항체의 하나 이상의 시스테인 또는 리신 잔기를 통해 링커-페이로드에 커플링시킬 수 있다. 링커-페이로드를, 예를 들어 항체에 환원제, 예를 들어 디티오쓰레이톨을 가하여 상기 항체의 디설파이드 결합을 절단하고, 상기 환원된 항체를, 예를 들어 젤 여과에 의해 정제하고, 후속적으로 상기 항체를 적합한 반응성 모이어티, 예를 들어 말레이미도기를 함유하는 링커-페이로드로 처리함으로써 시스테인 잔기에 커플링시킬 수 있다. 적합한 용매는 비제한적으로 수, DMA, DMF 및 DMSO를 포함한다. 반응성기, 예를 들어 활성화된 에스테르 또는 산 할라이드기를 함유하는 링커-페이로드를 항체의 리신 잔기에 커플링시킬 수 있다. 적합한 용매는 비제한적으로 수, DMA, DMF 및 DMSO를 포함한다. 적합체를 공지된 단백질 기법, 예를 들어 크기 배제 크로마토그래피, 투석 및 한외여과/정용여과를 사용하여 정제할 수 있다.
결합제, 예를 들어 항체를 또한 클릭 화학 반응을 통해 접합시킬 수 있다. 상기 클릭 화학 반응의 일부 구현예에서, 상기 링커-페이로드는 아지드와 위치이성질체성 1,3-가환 반응을 겪을 수 있는 반응성기, 예를 들어 알킨을 포함한다. 상기와 같은 적합한 반응성기는 상기에 기재되어 있다. 상기 항체는 하나 이상의 아지드기를 포함한다. 상기와 같은 항체는 예를 들어 아지도-폴리에틸렌 글리콜기로 기능화된 항체를 포함한다. 몇몇 구현예에서, 상기와 같은 기능화된 항체는 적어도 하나의 글루타민 잔기, 예를 들어 중쇄 Gln295를 갖는 항체를 효소 트랜스글루타미나제의 존재하에서 1차 아민 화합물로 처리함으로써 유도된다. 몇몇 구현예에서, 상기와 같은 기능화된 항체는 적어도 하나의 글루타민 잔기, 예를 들어 중쇄 Gln297을 갖는 항체를 효소 트랜스글루타미나제의 존재하에서 1차 아민 화합물로 처리함으로써 유도된다. 상기와 같은 항체는 Asn297Gln(N297Q) 돌연변이체를 포함한다. 몇몇 구현예에서, 상기와 같은 기능화된 항체는 적어도 2개의 글루타민 잔기, 예를 들어 중쇄 Gln295 및 중쇄 Gln297을 갖는 항체를 효소 트랜스글루타미나제의 존재하에서 1차 아민 화합물로 처리함으로써 유도된다. 상기와 같은 항체는 Asn297Gln(N297Q) 돌연변이체를 포함한다. 몇몇 구현예에서, 상기 항체는 총 2개 또는 총 4개의 글루타민 잔기에 대해 본 단락에 기재된 바와 같은 2개의 중쇄를 갖는다.
몇몇 구현예에서, 상기 항체는 2개의 글루타민 잔기(각각의 중쇄에 하나씩)를 포함한다. 특정 구현예에서, 상기 항체는 각각의 중쇄에 Q295 잔기를 포함한다. 추가의 구현예에서, 상기 항체는 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 또는 그 이상의 글루타민 잔기를 포함한다. 상기 글루타민 잔기는 중쇄, 경쇄, 또는 중쇄와 경쇄 모두 중에 있을 수 있다. 이들 글루타민 잔기는 야생형 잔기, 또는 조작된 잔기일 수 있다. 상기 항체를 표준 기법에 따라 제조할 수 있다.
당업자는 항체가 종종 중쇄 서열 중 잔기 Q295에 가까운 잔기 N297에서 글리코실화됨을 알 것이다. 잔기 N297에서의 글리코실화는 잔기 Q295에서 트랜스글루타미나제를 방해할 수 있다(상기 Dennler et al.). 상응하게, 유리한 구현예에서, 상기 항체는 글리코실화되지 않는다. 몇몇 구현예에서, 상기 항체는 탈글리코실화되거나 아글리코실화된다. 특정 구현예에서, 항체 중쇄는 N297 돌연변이를 갖는다. 달리 서술하자면, 상기 항체는 297번 위치에서 더 이상 아스파라진 잔기를 갖지 않도록 돌연변이된다. 특정 구현예에서, 항체 중쇄는 N297Q 돌연변이를 갖는다. 상기와 같은 항체는, 글리코실화 서열을 제거하거나 불활성화하는 부위-지향된 돌연변이유발에 의해, 또는 글루타민 잔기를 임의의 간섭 글리코실화 부위 또는 임의의 다른 간섭 구조로부터 떨어진 부위에 삽입하는 부위-지향된 돌연변이유발에 의해 제조될 수 있다. 상기와 같은 항체를 천연 또는 인공적인 공급원으로부터 단리할 수 있다.
이어서 상기 항체를 글리코실화의 간섭 없이 1차 아민 화합물과 반응시키거나 상기 화합물로 처리한다. 몇몇 구현예에서, 아글리코실화된 항체를 1차 아민 화합물과 반응시키거나 상기 화합물로 처리하여 글루타미닐-변형된 항체를 생성시킨다. 몇몇 구현예에서, 탈글리코실화된 항체를 1차 아민 화합물과 반응시키거나 상기 화합물로 처리하여 글루타미닐-변형된 항체를 생성시킨다.
상기 1차 아민은 트랜스글루타미나제의 존재하에서 글루타민 잔기와 공유 결합을 형성할 수 있는 임의의 1차 아민일 수 있다. 유용한 1차 아민은 상기에 기재되어 있다. 상기 트랜스글루타미나제는 당업자에 의해 적합한 것으로 여겨지는 임의의 트랜스글루타미나제일 수 있다. 몇몇 구현예에서, 상기 트랜스글루타미나제는 상기 1차 아민 화합물상의 유리 아민기와 글루타민 잔기의 측쇄상의 아실기간의 이소펩티드 결합의 형성을 촉매화하는 효소이다. 트랜스글루타미나제는 또한 단백질-글루타민-γ-글루타밀트랜스퍼라제로서 공지되어 있다. 특정 구현예에서, 상기 트랜스글루타미나제는 EC 2.3.2.13으로서 분류된다. 상기 트랜스글루타미나제는 적합한 것으로 여겨지는 임의의 공급원으로부터 유래할 수 있다. 몇몇 구현예에서, 상기 트랜스글루타미나제는 미생물성이다. 유용한 트랜스글루타미나제가 스트렙토마이세스 모바라엔세(Streptomyces mobaraense), 스트렙토마이세스 신나모네움(Streptomyces cinnamoneum), 스트렙토마이세스 그리세오-카르네움(Streptomyces griseo-carneum), 스트렙토마이세스 라벤둘라에(Streptomyces lavendulae) 및 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis)로부터 단리되었다. 포유동물 트랜스글루타미나제를 포함한 비-미생물성 트랜스글루타미나제가 또한 사용될 수 있다. 몇몇 구현예에서, 상기 트랜스글루타미나제는 임의의 기법에 의해 생성되거나 또는 당업자에 의해 적합한 것으로 여겨지는 임의의 공급원으로부터 수득될 수 있다. 특정 구현예에서, 상기 트랜스글루타미나제는 상업적인 공급원로부터 수득된다.
특정 구현예에서, 상기 1차 아민 화합물은 트랜스글루타민화 후에 추가로 반응할 수 있는 반응성기를 포함한다. 이러한 구현예에서, 상기 글루타미닐-변형된 항체를 반응성 페이로드 화합물 또는 반응성 링커-페이로드 화합물과 반응시키거나 이들로 처리하여 항체-페이로드 접합체 또는 항체-링커-페이로드 접합체를 형성시킬 수 있다. 몇몇 구현예에서, 상기 1차 아민 화합물은 아지드를 포함한다.
몇몇 구현예에서, 상기 글루타미닐-변형된 항체를 반응성 링커-페이로드와 반응시키거나 이들로 처리하여 항체-링커-페이로드 접합체를 형성시킨다. 상기 반응은 당업자에 의해 적합한 것으로 여겨지는 조건하에서 진행될 수 있다. 몇몇 구현예에서, 상기 글루타미닐-변형된 항체를, 상기 글루타미닐-변형된 항체와 링커-페이로드 화합물간에 결합을 형성시키기에 적합한 조건하에서 상기 반응성 링커-페이로드 화합물과 접촉시킨다. 적합한 반응 조건은 당업자에게 주지되어 있다. 예시적인 반응을 하기 실시예에 제공한다.
약학 조성물 및 치료 방법
본원은 치료 또는 예방 유효량의 본원에 개시된 화합물 중 하나 이상, 예를 들어 본원에 제공된 화학식의 화합물 중 하나 이상을 투여함을 포함하는, 질병, 상태 또는 질환의 치료 및 예방 방법을 제공한다. 질병, 질환 및/또는 상태는 비제한적으로 본원에 나열된 항원과 연관된 것들을 포함한다.
본원에 기재된 화합물을 단독으로 또는 하나 이상의 추가적인 치료제와 함께 투여할 수 있다. 상기 하나 이상의 추가적인 치료제를 본원에 기재된 화합물의 투여 직전에, 상기 투여와 동시에, 또는 상기 투여 직후에 투여할 수 있다. 본 개시내용은 또한 본원에 기재된 화합물 중 어느 하나를 하나 이상의 추가적인 치료제와 함께 포함하는 약학 조성물, 및 치료가 필요한 대상체에게 상기와 같은 조합을 투여함을 포함하는 치료 방법을 포함한다.
적합한 추가적인 치료제는 비제한적으로 제2 튜불리신, 자가면역 치료제, 호르몬, 생물제, 또는 단클론 항체를 포함한다. 적합한 치료제는 또한 비제한적으로 본원에 제시된 화합물의 임의의 약학적으로 허용 가능한 염, 산, 또는 유도체를 포함한다.
본원에 기재된 방법의 일부 구현예에서, 본원에 기재된 화합물(또는 본원에 기재된 화합물 및 본원에서 언급된 추가적인 치료제 중 어느 하나의 조합을 포함하는 약학 조성물)의 수회 용량을 한정된 시간 과정에 걸쳐 대상체에게 투여할 수 있다. 상기 개시내용의 태양에 따른 방법은 대상체에게 수회 용량의 본원에 기재된 화합물을 순차적으로 투여함을 포함한다. 본원에 사용되는 바와 같이, "순차적으로 투여함"은 상기 화합물의 각각의 용량을 대상체에게 상이한 시점에서, 예를 들어 미리결정된 간격(예를 들어 시간, 일, 주, 또는 개월)으로 분리된 상이한 날에 투여함을 의미한다. 본 개시내용은 환자에게 단일 초기 용량의 본원에 기재된 화합물에 이어서, 하나 이상의 2차 용량의 상기 화합물, 및 임의로 하나 이상의 3차 용량의 상기 화합물을 순차적으로 투여함을 포함하는 방법을 포함한다.
"초기 용량", "2차 용량" 및 "3차 용량"이란 용어는 본원에 기재된 화합물의 시간적인 투여 순서를 지칭한다. 따라서, 상기 "초기 용량"은 치료 섭생의 시작시에 투여되는 용량(또한 "기준선 용량"으로서 지칭됨)이고; 상기 "2차 용량"은 상기 초기 용량 후에 투여되는 용량이고; 상기 "3차 용량"은 상기 2차 용량 후에 투여되는 용량이다. 상기 초기, 2차 및 3차 용량은 모두 동일한 양의 본원에 기재된 화합물을 포함할 수 있으나, 일반적으로는 투여 빈도의 면에서 서로 상이할 수 있다. 몇몇 구현예에서, 상기 초기, 2차 및/또는 3차 용량 중에 포함되는 화합물의 양은 치료 과정 동안 서로 변한다(예를 들어 적합한 대로 상향 또는 하향 조절된다). 몇몇 구현예에서, 2회 이상(예를 들어 2, 3, 4, 또는 5회)의 용량을 "로딩 용량"으로서 치료 섭생의 시작시에 투여한 다음, 후속적인 용량을 덜 빈번한 기준(예를 들어 "유지 용량")으로 투여한다.
본 개시내용의 몇몇 예시적인 구현예에서, 각각의 2차 및/또는 3차 용량을 바로 선행의 용량 후 1 내지 26주(예를 들어 1, 1½, 2, 2½, 3, 3½, 4, 4½, 5, 5½, 6, 6½, 7, 7½, 8, 8½, 9, 9½, 10, 10½, 11, 11½, 12, 12½, 13, 13½, 14, 14½, 15, 15½, 16, 16½, 17, 17½, 18, 18½, 19, 19½, 20, 20½, 21, 21½, 22, 22½, 23, 23½, 24, 24½, 25, 25½, 26, 26½주, 또는 그 이상)째에 투여한다. 본원에 사용되는 바와 같은 "바로 선행의 용량"이란 어구는 수회 투여의 순서에서, 개입 용량 없이 순서가 바로 다음 용량의 투여 전에 환자에게 투여되는 화합물의 용량을 의미한다.
본 개시내용의 상기 태양에 따른 방법은 환자에게 상기 화합물의 임의의 수의 2차 및/또는 3차 용량을 투여함을 포함할 수 있다. 예를 들어, 몇몇 구현예에서, 단지 단일의 2차 용량만을 상기 환자에게 투여한다. 다른 구현예에서, 2회 이상(예를 들어 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8 또는 그 이상)의 2차 용량을 상기 환자에게 투여한다. 마찬가지로, 몇몇 구현예에서, 단지 단일의 3차 용량만을 상기 환자에게 투여한다. 다른 구현예에서, 2회 이상(예를 들어 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8 또는 그 이상)의 3차 용량을 상기 환자에게 투여한다. 상기 투여 섭생을 특정 환자의 수명에 걸쳐 무한정으로, 또는 상기와 같은 치료가 더 이상 치료학적으로 필요하거나 유리하지 않을 때까지 수행할 수 있다.
다수의 2차 용량을 수반하는 구현예에서, 각각의 2차 용량을 다른 2차 용량과 동일한 빈도로 투여할 수 있다. 예를 들어, 각각의 2차 용량을 바로 선행의 용량 후 1 내지 2주째 또는 1 내지 2개월째에 환자에게 투여할 수 있다. 유사하게, 다수의 3차 용량을 수반하는 구현예에서, 각각의 3차 용량을 다른 3차 용량과 동일한 빈도로 투여할 수 있다. 예를 들어, 각각의 3차 용량을 바로 선행의 용량 후 2 내지 12주째에 환자에게 투여할 수 있다. 상기 개시내용의 몇몇 구현예에서, 상기 2차 및/또는 3차 용량이 환자에게 투여되는 빈도는 치료 섭생의 과정에 걸쳐 변할 수 있다. 상기 투여 빈도를 또한 임상 검사에 이어서 개인 환자의 필요에 따라 의사가 치료 과정 동안 조절할 수 있다.
본 개시내용은 2 내지 6개의 로딩 용량을 환자에게 1차 빈도(예를 들어 1주일에 1회, 2주마다 1회, 3주마다 1회, 1개월에 1회, 2개월마다 1회 등)로 투여한 다음, 덜 빈번한 기준으로 상기 환자에게 2개 이상의 유지 용량을 투여하는 투여 섭생을 포함한다. 예를 들어 상기 개시내용의 상기 태양에 따라, 상기 로딩 용량을 1개월에 1회의 빈도로 투여하는 경우, 유지 용량을 상기 환자에게 6주마다 1회, 2개월마다 1회, 3개월마다 1회 등으로 투여할 수 있다.
본 개시내용은 본원에 기재된 화합물 및/또는 접합체, 예를 들어 화학식 I, II, III, IV, V, VI, VII, VIII IX, X, XI, 및 XII의 화합물의 약학 조성물, 예를 들어 본원에 기재된 화합물, 그의 염, 입체이성질체, 위치이성질체, 다형체, 및 약학적으로 허용 가능한 담체, 희석제, 및/또는 부형제를 포함하는 조성물을 포함한다. 적합한 담체, 희석제 및 부형제의 예는 비제한적으로 적합한 조성물 pH의 유지를 위한 완충제(예를 들어 시트레이트 완충제, 숙시네이트 완충제, 아세테이트 완충제, 포스페이트 완충제, 락테이트 완충제, 옥살레이트 완충제 등), 담체 단백질(예를 들어 인간 혈청 알부민), 염수, 폴리올(예를 들어 트레할로스, 슈크로스, 자일리톨, 솔비톨 등), 계면활성제(예를 들어 폴리소르베이트 20, 폴리소르베이트 80, 폴리옥솔레이트 등), 항균제, 및 산화방지제를 포함한다.
일부 예에서, 본원은 암이 있는 환자에게 치료 유효량의 화학식 I, II, III, IV, V, VI, VII, VIII IX, X, XI, 및 XII의 화합물 또는 그의 약학 조성물을 투여함을 포함하는 상기 암의 치료 방법을 제시한다. 일부 구현예에서, 본원은 암이 있는 환자에게 치료 유효량의 본원에 기재된 항체-튜불리신 접합체 또는 그의 약학 조성물을 투여함을 포함하는 상기 암의 치료 방법을 제공한다. 일부 구현예에서, 접합체, 예를 들어 본원에 기재된 항체-약물 접합체 중의 결합제, 예를 들어 항체는, 공유되거나, 과발현되거나, 또는 특정 유형의 종양상에서 변형되는 종양 또는 항원의 한 유형에 특이적인 항원을 포함하여, 종양 항원과 상호작용하거나 상기 항원에 결합한다. 예로는 비제한적으로 폐암의 경우 알파-액티닌-4, 흑색종의 경우 ARTC1, 만성 골수성 백혈병의 경우 BCR-ABL 융합 단백질, 흑색종의 경우 B-RAF, CLPP 또는 Cdc27, 편평세포 암종의 경우 CASP-8, 및 신세포 암종의 경우 hsp70-2뿐만 아니라 하기의 공유된 종양-특이 항원, 예를 들어 BAGE-1, GAGE, GnTV, KK-LC-1, MAGE-A2, NA88-A, TRP2-INT2를 포함한다. 종양 항원의 추가적인 예는 비제한적으로 PSMA, PRLR, MUC16, HER2, EGFRvIII, 및 항-STEAP2, 및 MET를 포함한다.
본원에 개시된 화합물을 뇌 및 뇌막, 구강인두, 폐 및 기관지, 위장관, 남성 및 여성 생식관, 근육, 뼈, 피부 및 부속기, 결합 조직, 비장, 면역계, 혈액 형성 세포 및 골수, 간 및 요로, 및 특수 감각 기관, 예를 들어 눈에서 발생하는 원발성 및/또는 전이성 종양의 치료에 사용할 수 있다. 몇몇 구현예에서, 본원에 제공된 화합물은 하기의 암 중 하나 이상의 치료에 사용된다: 신세포 암종, 췌장암종, 두경부암(예를 들어 두경부 편평세포 암종[HNSCC]), 전립선암, 거세-저항성(castrate-resistant) 전립선암, 악성 신경교종, 골육종(osteosarcoma), 결장직장암, 위암(예를 들어 MET 증폭을 갖는 위암), 중피종(mesothelioma), 악성 중피종, 다발성 골수종, 난소암, 폐암, 소세포 폐암, 비-소세포 폐암, 활막 육종(synovial sarcoma), 갑상선암, 유방암, PRLR 양성(PRLR+) 유방암, 흑색종, 급성 골수성 백혈병, 성인 T-세포 백혈병, 성상세포종(astrocytomas), 방광암, 자궁경부암, 담관암종(cholangiocarcinoma), 자궁내막암, 식도암, 교모세포종(glioblastomata), 카포시육종(Kaposi's sarcoma), 신장암, 평활근육종(leiomyosarcomas), 간암, 림프종, MFH/섬유육종, 비인두암(nasopharyngeal cancer), 횡문근육종(rhabdomyosarcoma), 결장암, 위암, 자궁암, 잔류암(residual cancer)(여기에서 "잔류암"은 항암 요법 치료후 대상체에서 하나 이상의 암성 세포의 존재 또는 지속을 의미한다), 및 윌름 종양(Wilms' tumor). 일부 구현예에서, 암은 유방암이다. 일부 구현예에서, 암은 전립선암이다.
일부 예에서, 본원은 전립선암이 있는 환자에게 예방학적 유효량의 화학식 I, II, III, IV, V, VI, VII, VIII IX, X, XI, 및 XII의 화합물, 또는 그의 약학 조성물을 투여함을 포함하는, 상기 질환의 예방 방법을 제시한다.
실시예
본원은 신규의 튜불리신, 그의 단백질 접합체, 및 상기 튜불리신 및 접합체를 투여함을 포함하는, 질병, 질환 및 상태의 치료 방법을 제공한다.
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본 발명의 몇몇 구현예를 하기의 비제한적인 실시예에 의해 예시한다. 본원에 사용되는 바와 같이, 이들 과정, 반응식 및 실시예에 사용되는 규약들은, 특정 약어가 특별히 정의되는지의 여부에 관계 없이, 현대 과학 문헌, 예를 들어 [the Journal of the American Chemical Society] 또는 [the Journal of Biological Chemistry]에 사용되는 것들과 일치한다. 구체적으로, 비제한적으로, 하기의 약어들이 실시예, 및 명세서 전체를 통해 사용될 수 있다:
Figure pct00545
Figure pct00546
Figure pct00547
시약 및 용매는 달리 명백히 서술되지 않는 한, 상업적인 출처, 예를 들어 Sinopharm Chemical Reagent Co. (SCRC), Sigma-Aldrich, Alfa 또는 다른 판매인으로부터 수득되었다. 1H NMR 및 다른 NMR 스펙트럼은 Bruker AVIII 400 또는 Bruker AVIII 500상에 기록되었다. 상기 데이터는 내부 표준 테트라메틸실란(TMS)으로부터 다운필드 백만당 부(ppm)의 양성자 이동을 측정하는 Nuts 소프트웨어 또는 MestReNova 소프트웨어로 처리되었다.
HPLC-MS 측정을 하기의 조건을 사용하여 Agilent 1200 HPLC/6100 SQ 시스템 상에서 실행하였다: HPLC-MS 측정을 위한 방법 A는, 이동상으로서: A: 수(0.01% 트리플루오로아세트산(TFA)), B: 아세토니트릴(0.01% TFA); 구배상: 15분에 걸쳐 5%의 B에서 95%의 B로 증가; 유량: 1.0 ㎖/분; 컬럼: SunFire C18, 4.6 x 50 ㎜, 3.5 ㎛; 컬럼 온도: 50℃; 검출기: 아날로그 디지털 컨버터(ADC) 휘발성 광-산란 검출기(ELSD), 다이오드 배열 검출기(DAD)(214 ㎚ 및 254 ㎚), 전기분무 이온화-대기압 이온화(ES-API)를 포함하였다. HPLC-MS 측정을 위한 방법 B는, 이동상으로서: A: 수(10 mM NH4HCO3), B: 아세토니트릴; 구배상: 15분 이내에 5%의 B에서 95%의 B로 증가; 유량: 1.0 ㎖/분; 컬럼: XBridge C18, 4.6 x 50 ㎜, 3.5 ㎛; 컬럼 온도: 50℃. 검출기: ADC ELSD, DAD(214 ㎚ 및 254 ㎚), 질량 선택성 검출기(MSD ES-API)를 포함하였다.
LC-MS 측정을 하기의 조건을 사용하여 Agilent 1200 HPLC/6100 SQ 시스템상에서 실행하였다: LC-MS 측정을 위한 방법 A는 장치로서: WATERS 2767; 컬럼: Shimadzu Shim-Pack, PRC-ODS, 20 x 250 ㎜, 15 ㎛, 2개가 일렬로 연결되어 있다; 이동상: A: 수(0.01% TFA), B: 아세토니트릴(0.01% TFA); 구배상: 3분 이내에 5%의 B에서 95%의 B로 증가; 유량: 1.8-2.3 ㎖/분; 컬럼: SunFire C18, 4.6 x 50 ㎜, 3.5 ㎛; 컬럼 온도: 50℃. 검출기: ADC ELSD, DAD(214 ㎚ 및 254 ㎚), ES-API를 포함하였다. LC-MS 측정을 위한 방법 B는 장치로서, Gilson GX-281; 컬럼: Xbridge Prep C18 10 ㎛ OBD, 19 x 250 ㎜; 이동상: A: 수(10 mM NH4HCO3), B: 아세토니트릴; 구배상: 3분 이내에 5%에서 95%의 B로; 유량: 1.8-2.3 ㎖/분; 컬럼: XBridge C18, 4.6 x 50 ㎜, 3.5 ㎛; 컬럼 온도: 50℃. 검출기: ADC ELSD, DAD(214 ㎚ 및 254 ㎚), MSD ES-API를 포함하였다.
산성 또는 염기성 용매 시스템 중의 예비 고압 액체 크로마토그래피(Prep-HPLC)를 Gilson GX-281 장치상에서 사용하였다. 산성 용매 시스템은 Waters Sunfire 10 ㎛ C18 컬럼(100 Å, 250 x 19 ㎜)을 사용하였고, prep-HPLC에 대한 용매 A는 수/0.05% TFA이고 용매 B는 아세토니트릴이었다. 용출 조건은 30 ㎖/분의 유량으로 20분에 걸쳐 용매 B가 5%에서 100%로 증가하는 선형 구배였다. 염기성 용매 시스템은 Waters Xbridge 10 ㎛ C18 컬럼(100 Å, 250 x 19 ㎜)을 포함하였고, prep-HPLC에 대해 사용된 용매 A는 수/10 mM 암모늄 비카보네이트(NH4HCO3)이고 용매 B는 아세토니트릴이었다. 용출 조건은 30 ㎖/분의 유량으로 20분에 걸쳐 용매 B가 5%에서 100%로 증가하는 선형 구배였다.
플래시 크로마토그래피를 Agela Flash 컬럼 실리카-CS 카트리지와 함께, Biotage 장치상에서 수행하였으며; 역상 플래시 크로마토그래피를 Boston ODS 또는 Agela C18 카트리지와 함께, Biotage 장치상에서 수행하였다.
분석학적 키랄 HPLC 방법 - SFC 조건
a) 장치: SFC 방법 스테이션(Thar, Waters)
b) 컬럼: 키랄PAK AD-H/AS-H/OJ-H/OD-H 4.6 x 100 ㎜, 5 ㎛(Daicel)
c) 컬럼 온도: 40℃
d) 이동상: CO2/IPA(0.1% DEA) = 55/45
e) 유량: 4.0 ㎖/분
f) 배압: 120 바
g) 주입 부피: 2 ㎕
예비 키랄 HPLC 방법 - SFC 조건
a) 장치: SFC-80(Thar, Waters)
b) 컬럼: 키랄PAK AD-H/AS-H/OJ-H/OD-H 20 x 250 ㎜, 10 ㎛(Daicel)
c) 컬럼 온도: 35℃
d) 이동상: CO2/IPA(0.2% 메탄올 암모니아) = 30/70
e) 유량: 80 g/분
f) 배압: 100 바
g) 검출 파장: 214 ㎚
h) 주기 시간: 6.0 min
i) 샘플 용액: 70 ㎖ 메탄올 중에 용해된 1500 ㎎
j) 주입 부피: 2 ㎖(로딩: 42.86 ㎎/주입)
제조 방법
표 1의 튜불리신 페이로드(IV, V, VI)를 중간체 I(도 1), II 및 III(도 4-6)으로부터 합성하였다. 표 2의 튜불리신-링커-페이로드를, 상업적으로 입수할 수 있거나 또는 문헌에 따라 합성된(예를 들어 US 2014/227295; 및 WO2014/191578 A1을 참조하시오) 공지된 링커 L-1(도 8), L-2, L-3(도 9) 및 L-4(도 10A)와 함께 튜불리신 페이로드로부터 합성하였다.
중간체 Ia-c 및 Ig-l의 합성을 도 1에 도시한다. Boc-아미노산 1을 2,2-디메틸-1,3-디옥산-4,6-디온 2와 축합시킨 다음, NaBH4로 케톤 3을 환원시켜 화합물 4를 제공하였다. 화합물 4를 하나의 단계로 개환 및 후속적인 개폐를 위한 가열된 조건하에서 4의 데-카복실화를 통해 락탐 5로 전환시켰다. 5의 α-위치에서의 메틸화에 이어서, 염기성 가수분해로 락탐 5를 산 7로 전환시키고, 최종적으로 Boc 탈보호시켜 중간체 Ia-c 및 Ig-l을 제공하였다.
중간체 Id-f의 합성은 Id(R4 = F)의 경우 WO2016/138288 A1; Ie(R4 = OH)의 경우 문헌[Org. Lett. 2009, 11(24), 5567-5569]; 및 If(R4 = NH2)의 경우 US 9,382,289 B2에 기재된 과정을 따랐다.
중간체 17a-c의 합성을 도 2에 도시한다. 티아졸 11을 2-옥소-프로판알 9에 의한 환화에 이어서 MnO2 산화를 통해 시스테인 에틸 에스테르 8로부터 수득하였다. α,β-불포화된 케톤 13을 11과 2-메틸 프로판알 12와의 알돌 축합으로부터 수득하였다. 하이드록실아민 유도체 15의 α,β-불포화된 케톤 13으로의 마이클 부가에 이어서, CBS 촉매화된 환원으로 시스-17 및 트랜스-17의 혼합물을 제공하였으며, 이를 컬럼 크로마토그래피에 의해 분리시키고 키랄 HPLC 또는 SFC에 의해 추가로 정제시켜 목적하는 키랄 17a-c를 제공하였다.
코리 박시 시바타(Corey-Bakshi-Shibata) 환원(aka CBS 환원) 또는 이츠노 코리(Itsuno-Corey) 환원이 주지되어 있으며 이는 고도로 거울상이성질체선택성 케톤-환원 반응이다. 옥스아자보로리딘 시약이 케톤 16A의 환원을 매개하여 알콜 17A를 높은 ee로 제공함이 보고되었으며, 여기에서 17A 및 입체이성질체 17B는 충분히 특성화되었다(Angew. Chem. Int. Ed. 2007, 46, 3526-3529; 도 3을 참조하시오). 우리는 CBS-BH3·SMe를 사용하여 16a 및 16b를 환원시키고 반응 조물질로부터 시스-17a 또는 시스-17b(de>90%) 및 트랜스-17a 또는 트랜스-17b(de ∼80%)를 별도로 수득하였다. 상기 혼합된 거울상이성질체를 키랄 SFC에 의해 추가로 정제시켜 순수한 거울상이성질체(de>95%)를 제공하였다. 우리는 또한 대안의 환원 조건을 시도하였으며 나트륨 보로하이드라이드를 사용하여 16c를 환원시켜 실리카젤 컬럼 크로마토그래피 후에 시스-17c 및 트랜스-17c를 수득하였다. 각 쌍의 분리된 이성질체를 각각 키랄 HPLC에 의해 추가로 단리시켜, 17c-P1, 17c-P2, 17c-P3, 및 17c-P4(모두 ee>99%)를 제공하였다. 모두 4개의 이성질체에 대한 키랄 중심을 결정하기 위해서, 각 화합물의 N-O 결합을 Mo(CO)6를 사용하여 절단시켜 각각 17A 또는 17B, 및 그의 부분입체이성질체 17A' 또는 17B'를 제공하였다. 화합물 17a-c의 키랄 중심을, 17A 및 17B 모두에 대한 1H NMR 데이터 및 광학 회전 데이터를 동일 화합물에 대한 공개된 데이터와 비교함으로써 결정하였다.
O-중간체 및 C-중간체(II 및 III)의 합성을 도 4에 도시한다. 화합물 19a-c를 17a-c의 O-TBS 보호로부터 수득한 다음, 18a-c를 Boc 탈보호하였다. 화합물 19d-e를, 각각 공지된 화합물 21(Eur. Pat. Appl., 2409983, 25 Jan 2012)에 의한 카프로알데히드 또는 5-헥신알데히드 20의 환원적 아민화로부터 수득하였다. 19c 중의 삼중 결합을 팔라듐-탄소로 환원시켜 19f를 제공할 수 있다. 화합물 19a-e를 (2S,3S)-2-아지도-3-메틸펜타노일 클로라이드 22로 처리하여 아미드 23a-e를 제공하고, 이어서 트리페닐 포스핀의 존재하에서 스타우딩거 환원을 수행한 다음 N-메틸-2R-피페리딘카복실산 25로 아미드화시켜 아미드 26a-e를 제공하였다. 화합물 26a-e를 세슘 플루오라이드에 의한 TBS 탈보호 및 후속적인 염기성 가수분해를 통해 중간체 IIa-e로 전환시켰다. IIc 중의 삼중 결합을 팔라듐-탄소로 환원시켜 IIf를 제공하였다. 중간체 IIIa-f를 중간체 IIa-f의 아세틸화로부터 수득하였다. 중간체 IIIg를 TMS-CH2N3에 의한 [3+2] 환화에 이어서 세슘 플루오라이드에 의한 TBS 탈보호를 통해 IIIe로부터 수득하였다.
C-튜불리신 유도체(IV) 및 O-튜불리신 유도체(V)의 제조를 위한 합성을 도 5에 도시한다. C-튜불리신 유도체(IV)를 문헌[J. Org. Chem. 2008, 73 (12), 4362-4369]에 보고된 과정에 따라 합성하였다. 도 5에 도시된 바와 같이, N,N'-디이소프로필카보디이미드(DIC)의 존재하에서 중간체 IIId-e의 펜타플루오로페놀(PFP)에 의한 에스테르화는 펜타플루오로페닐 에스테르 28a-e를 제공하였으며, 이를 아미드화에서 아민 Ia-l로 처리하고, Fmoc 또는 TMS(TMS 탈보호에 대해서, 도 6A를 참조하시오)의 추가적인 탈보호 후에 각각 C-튜불리신 페이로드 IVa-g 및 IVq-x를 제공하였다. O-튜불리신 유도체(V)를, DIC의 존재하에 PFP에 의한 에스테르화에 이어서 Ia-l에 의한 아미드화를 통해, IIIa-c 및 f로부터 상술한 방법을 사용하여 합성하였다. Fmoc의 추가적인 탈보호 후에 O-튜불리신 유도체 Vb, Ve 및 Vh를 수득하였다. O-튜불리신 유도체 Vi의 팔라듐-탄소에 의한 수소화는 아닐린 유도체 Vj를 제공하였으며, 이를 열로 추가로 수소화시켜 Vk를 제공하였다.
C-트리아졸 튜불리신 유사체(IVh 및 j-p)를 도 6A에 도시된 2개의 접근법을 통해 제조하였다. 첫 번째 접근법에서, 중간체 IIIe를 [3+2] 클릭 반응에서 TMS-메틸 아지드로 처리하여 IIIg1을 형성시킨 다음, 세슘 플루오라이드로 TMS 탈보호시켜 IIIg2를 제공하였다. IIIg2를 펜타플루오로페닐 에스테르 31로 전환시키고 Fmoc 탈보호 후에 후속적으로 아미드 커플링시켜 IVh를 제공하였다. 두 번째 접근법에서, 트리아졸 튜불리신 유사체 IVj-p를, 중간체 Fmoc-IVd 및 상이한 아지도 시약(R5-N3)과의 [3+2] 클릭 반응에 이어서 Fmoc 탈보호를 통해 제조하였다.
O-튜불리신 유도체 VIa-f,h의 제조를 위한 합성을 도 7A 및 7B에 도시한다. 화합물 27a를 비스(4-니트로페닐) 카보네이트(NPC)로 처리하여 활성화된 카보네이트 33을 형성시키고, 이어서 이를 1차 아민으로 처리하여 각각 화합물 34a-e, F, H를 제공하였다. 카바메이트 VIa-f,h를 각각, 예를 들어 중간체 Ie에 의한 화합물 34a-e, F, H의 아미드화로부터 수득하였다.
링커-튜불리신-페이로드(LP)의 제조를 위한 합성을 LP1의 경우 도 8에, LP2의 경우 도 9에, LP3 및 LP4의 경우 도 10A, LP5의 경우 도 10B에 도시한다. 링커-페이로드의 제조를 위한 2개의 접근법이 존재한다. 한 가지 방법은 LP1의 합성에서 예시된, 링커와 페이로드와의 접합이고(도 8); 또 다른 방법은 LP2의 합성에서 예시된, 링커와 페이로드의 단편을 연결한 다음, 아미드 커플링시켜 링커-페이로드를 제조하는 것이다.
도 8에 도시된 바와 같이, LP1을, IVa와 히드라진 수화물을 반응시켜 IVa'를 제공한 다음 MC-VC-PAB-PNP(L-1)로 처리하여 합성하였다.
도 9에 도시된 바와 같이, LP2를, 먼저 VC-PAB를 중간체 Ie의 히드라지드와 커플링시킴으로써 합성하였다. 즉, 중간체 Ie를 히드라진 수화물로 처리하여 히드라지드 35를 형성시키고, 이를 N-Fmoc-VC-PAB-PNP(L-2)로 처리하고 TFA를 사용하여 Boc 탈보호후에 화합물 37을 제공하였다. 중간체 IIIa에 의한 37의 아미드화는 Fmoc의 탈보호 후에 화합물 39를 제공하였으며; DIBAC-suc-PEG4-COOH(L-3)에 의한 39의 아미드화는 LP2를 제공하였다.
핵심 중간체를 상이한 컬럼 조건하에서 키랄 SFC상에서 분석하였으며 여기에서 상기는 모두 >99% ee를 나타내었고 상세한 체류 시간(Rt)을 하기와 같이 표 3에 요약한다.
중간체의 ee를 결정하기 위한 키랄 SFC Rt
화합물 키랄 SFC Rt (min)
AD-H AS-H OJ-H OD-H
37 2.14 3.89 1.99 4.97
38 2.19 3.99 2.06 6.24
39 2.37 2.11 5.73 　
도 10A에 도시된 바와 같이, 링커 L-2를 중간체 7e로 처리하고 Boc 탈보호 후에 화합물 41을 제공하였다. 화합물 41과 28e 또는 28c와의 아미드 커플링 반응은 Fmoc 탈보호 후에, 각각 43a 또는 43b를 제공하였다. 화합물 43a 또는 43b를 DIBAC-suc-PEG4-NHS(L-4)와 커플링시켜 각각 LP3 또는 LP4를 제공하였다.
실험 과정
도 1의 중간체 1의 합성
화합물 3에 대한 일반적인 과정
DCM(20 ㎖) 중의 화합물 1(5 g, 1.0 당량)의 혼합물에 0℃에서 화합물 2(1.1 당량) 및 DMAP(1.5 당량)를 가하고, 혼합물을 0℃에서 30분간 교반한 후에 EDCI(1.1 당량)를 반응 혼합물에 가하였다. 생성 혼합물을 rt에서 밤새 교반하였다. LCMS는 반응이 완료되었음을 보였다. 혼합물을 수성 칼륨 비설페이트(5%, 4x) 및 염수로 세척하였다. 유기층을 분리하고 황산 나트륨상에서 건조시키고 진공하에서 농축시켰다. 잔사를 메탄올로 습성화시켜 백색 고체로서 화합물 3(50-60% 수율)을 제공하였다.
Figure pct00548
3급-부틸 N-[(2S)-1-(2,2-디메틸-4,6-디옥소-1,3-디옥산-5-일)-1-옥소-3-페닐프로판-2-일] 카바메이트 (3a)
화합물 3에 대한 일반적인 과정에 따라, 화합물 3a(4.2 g, 57% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. [0001] ESI m/z: 805 (2M + Na)+. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 15.57 (s, 1H), 7.34-7.27 (m, 4H), 7.26-7.23 (m, 1H), 5.89 (s, 1H), 5.09-4.79 (m, 1H), 3.25-3.05 (m, 1H), 2.94-2.79 (m, 1H), 1.75 (s, 3H), 1.65 (s, 3H), 1.36 (s, 9H) ppm.
Figure pct00549
3급-부틸 N-[(2S)-1-(2,2-디메틸-4,6-디옥소-1,3-디옥산-5-일)-3-(4-플루오로페닐)-1-옥소프로판-2-일]카바메이트 (3b)
화합물 3에 대한 일반적인 과정에 따라, 화합물 3b(4.2 g, 58% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. ESI m/z: 841 (2M + Na)+. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.30-7.24 (m, 2H), 7.03-6.97 (m, 2H), 5.93-5.78 (m, 1H), 5.08-4.96 (m, 1H), 3.23-3.09 (m, 1H), 2.86-2.74 (m, 1H), 2.06-1.82 (m, 1H), 1.76 (s, 3H), 1.68 (s, 3H), 1.36 (s, 9H) ppm.
Figure pct00550
(S)-3급-부틸 1-(2,2-디메틸-4,6-디옥소-1,3-디옥산-5-일)-3-(4-니트로페닐)-1-옥소프로판-2-일카바메이트 (3d)
화합물 3에 대한 일반적인 과정에 따라, 화합물 3c(3.3 g, 47% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. ESI m/z: 459 (M + Na)+. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 15.7 (s, 1H), 8.19 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 7.53 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 5.87 (s, 1H), 5.09-5.08 (m, 1H), 3.33-3.31 (m, 1H), 2.90-2.86 (m, 1H), 1.73 (s, 6H), 1.33 (s, 9H) ppm.
Figure pct00551
3급-부틸 1-(2,2-디메틸-4,6-디옥소-1,3-디옥산-5-일)-3-(4-플루오로-3-니트로페닐)-1-옥소프로판-2-일카바메이트 (3f)
화합물 3에 대한 일반적인 과정에 따라, 화합물 3f(62 g, 조 물질)를 백색 고체로서 수득하였으며, 이를 추가의 정제 없이 다음 단계에 사용하였다. ESI m/z: 477(M+Na)+.(주: 화합물 1f를 참고 문헌[J. Am. Chem. Soc., 2010, 132(22), 7776-7783)]에 따라 합성하였다).
Figure pct00552
3급-부틸 1-(2,2-디메틸-4,6-디옥소-1,3-디옥산-5-일)-3-(3-플루오로-4-니트로페닐)-1-옥소프로판-2-일카바메이트 (3j)
디옥산(140 ㎖) 및 수(70 ㎖) 중의 2-아미노-3-(3-플루오로-4-니트로페닐)프로판산(3.5 g, 15 mmol; 문헌[Medicinal Chemistry Letters 2016, 7(3), 250-255]에 따라 합성됨)의 용액에 0℃에서 나트륨 카보네이트(4.8 g, 46 mmol) 및 Boc2O(3.6 g, 17 mmol)를 가하였다. 혼합물을 반응이 완료될 때까지(이는 LCMS에 의해 모니터되었다) RT에서 4시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 수로 희석하고 농 HCl로 pH 2-3으로 산성화하였다. 수성 혼합물을 에틸 아세테이트로 추출하고 합한 유기 용액을 염수로 세척하였다. 휘발성 물질을 진공하에서 제거하고 잔류 조 생성물을 석유 에테르 중의 25% 에틸 아세테이트로부터 재결정화하여 담황색 고체로서 화합물 1j(4.7 g, 87% 수율)를 제공하였다. ESI m/z: 351.1(M+Na)+. 화합물 1j를 사용하여 화합물 3에 대한 일반적인 과정에 따라, 화합물 3j(4.0 g, 96% 조 수율)를 갈색 고체로서 수득하고, 이를 추가의 정제 없이 다음 단계에 사용하였다. ESI m/z: 477.1(M+Na)+.
Figure pct00553
3급-부틸 (S)-(3-(4-(벤질옥시)-3-니트로페닐)-1-(2,2-디메틸-4,6-디옥소-1,3-디옥산-5-일)-1-옥소프로판-2-일)카바메이트 (3k)
화합물 1k(문헌[J. Am. Chem. Soc. 1980, 102, 7156-7157]에 따라 합성됨)를 사용하여 화합물 3에 대한 일반적인 과정에 따라, 화합물 3k(4.8 g, 97% 조 수율)를 담-녹색 고체로서 수득하고, 이를 추가의 정제 없이 다음 단계에 사용하였다. ESI m/z: 565.1(M+Na)+.
Figure pct00554
3급-부틸 (3-(3-(벤질옥시)-4-니트로페닐)-1-(2,2-디메틸-4,6-디옥소-1,3-디옥산-5-일)-1-옥소프로판-2-일)카바메이트 (3l)
화합물 1l(문헌[J. Med. Chem. 1997, 40, 3182-3191]에 따라 합성된 2-아미노-3-(3-하이드록시-4-니트로페닐)프로판산으로부터 출발함을 제외하고, 1k에서와 유사한 과정을 사용하여 합성됨)을 사용하여 화합물 3에 대한 일반적인 과정에 따라, 화합물 3l(4.6 g, 95% 조 수율)을 옅은색 고체로서 수득하고, 이를 추가의 정제 없이 다음 단계에 사용하였다. ESI m/z: 565.1(M+Na)+.
화합물 4에 대한 일반적인 과정
DCM(20 ㎖) 중의 화합물 3(1.0 당량)의 용액에 0℃에서 주사기로 아세트산(11 당량)을 가하고, 나트륨 보로하이드라이드(2.5 당량)를 여러번 나누어 연속적으로 가하였다. 반응 혼합물을 화합물 3이 완전히 소모될 때까지(이는 LCMS에 의해 모니터되었다) 0℃에서 2시간 동안 교반하였다. 이어서 혼합물을 0℃에서 염수로 급냉시키고 DCM으로 추출하였다(3회). 합한 유기층을 황산 나트륨상에서 건조시키고 진공하에서 농축시켰다. 잔사를 실리카젤 컬럼 크로마토그래피(에틸 아세테이트/DCM에 의해 용출됨)에 의해 정제시켜 화합물 4(83-96% 수율)를 제공하였다.
Figure pct00555
3급-부틸 N-[(2R)-1-(2,2-디메틸-4,6-디옥소-1,3-디옥산-5-일)-3-페닐프로판-2-일]카바메이트 (4a)
화합물 4에 대한 일반적인 과정에 따라, 화합물 4a(3.8 g, 95% 수율)를, 실리카젤 컬럼 크로마토그래피(에틸 아세테이트/DCM, v/v = 1/10에 의해 용출됨)에 의해 정제시킨 후에 무색 오일로서 수득하였다. ESI m/z: 777 (2M + Na)+. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.33-7.28 (m, 2H), 7.25-7.28 (m, 3H), 4.55-4.40 (m, 1H), 4.28-4.18 (m, 1H), 3.98-3.84 (s, 1H), 2.86 (d, J = 6.3 Hz, 2H), 2.36-2.12 (m, 2H), 1.78 (s, 3H), 1.74 (s, 3H), 1.36 (s, 9H) ppm.
Figure pct00556
3급-부틸 N-[(2R)-1-(2,2-디메틸-4,6-디옥소-1,3-디옥산-5-일)-3-(4-플루오로페닐)프로판-2-일] 카바메이트 (4b)
화합물 4에 대한 일반적인 과정에 따라, 화합물 4b(3.8 g, 95% 수율)를, 실리카젤 컬럼 크로마토그래피(에틸 아세테이트/DCM, v/v = 1/1에 의해 용출됨)에 의해 정제시킨 후에 무색 오일로서 수득하였다. ESI m/z: 813 (2M + Na)+. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.20-7.12 (m, 2H), 7.03-6.94 (m, 2H), 4.50-4.40 (m, 1H), 4.25-4.13 (m, 1H), 3.92-3.84 (m, 1H), 2.87-2.74 (m, 2H), 2.34-2.06 (m, 2H), 1.78 (s, 3H), 1.73 (s, 3H), 1.35 (s, 9H) ppm.
Figure pct00557
3급-부틸 N-[(2R)-1-(2,2-디메틸-4,6-디옥소-1,3-디옥산-5-일)-3-(4-니트로페닐)프로판-2-일] 카바메이트 (4d)
화합물 4에 대한 일반적인 과정에 따라, 화합물 4d(11 g, 83% 수율)를, 실리카젤 컬럼 크로마토그래피(에틸 아세테이트/DCM, v/v = 3/2에 의해 용출됨)에 의해 정제시킨 후에 무색 오일로서 수득하였다. ESI m/z: 867 (2M + Na)+. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.18 (d, J = 8.6 Hz, 2H), 7.40 (d, J = 8.6 Hz, 2H), 4.52 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.39-4.18 (m, 1H), 3.84 (s, 1H), 3.05-2.87 (m, 2H), 2.39-2.14 (m, 2H), 1.80 (s, 3H), 1.75 (s, 3H), 1.35 (s, 9H) ppm.
Figure pct00558
3급-부틸 1-(2,2-디메틸-4,6-디옥소-1,3-디옥산-5-일)-3-(4-플루오로-3-니트로페닐)프로판-2-일카바메이트 (4f)
화합물 4에 대한 일반적인 과정에 따라, 화합물 4f(35 g, 2 단계로 79% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. ESI m/z: 463(M+Na)+.
Figure pct00559
3급-부틸 1-(2,2-디메틸-4,6-디옥소-1,3-디옥산-5-일)-3-(3-플루오로-4-니트로페닐)프로판-2-일카바메이트 (4j)
화합물 3j를 사용하여 화합물 4에 대한 일반적인 과정에 따라, 화합물 4j(3.4g, 2 단계로 77% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. ESI m/z: 463.1(M+Na)+.
Figure pct00560
3급-부틸 (S)-(1-(4-(벤질옥시)-3-니트로페닐)-3-(2,2-디메틸-4,6-디옥소-1,3-디옥산-5-일)프로판-2-일)카바메이트 (4k)
화합물 4에 대한 일반적인 과정에 따라, 화합물 4k(2.0 g, 46% 수율)를, 실리카젤 컬럼 크로마토그래피(에틸 아세테이트/석유 에테르, v/v = 1/1에 의해 용출됨)에 의해 정제시킨 후에 백색 고체로서 수득하였다. ESI m/z: 552.1(M+Na)+.
Figure pct00561
3급-부틸 (1-(3-(벤질옥시)-4-니트로페닐)-3-(2,2-디메틸-4,6-디옥소-1,3-디옥산-5-일)프로판-2-일)카바메이트 (4l)
화합물 4에 대한 일반적인 과정에 따라, 화합물 4l(2.0 g, 48% 수율)를, 실리카젤 컬럼 크로마토그래피(에틸 아세테이트/석유 에테르, v/v = 1/에 의해 용출됨)에 의해 정제시킨 후에 백색 고체로서 수득하였다. ESI m/z: 552.1(M+Na)+.
화합물 5에 대한 일반적인 과정
톨루엔(0.2-0.5 g/㎖) 중의 화합물 4의 용액을 90℃에서 3시간 동안 교반하였으며, 이때 화합물 4에서 화합물 5로의 전환이 LCMS에 의해 모니터되었다. 이어서 휘발성 물질을 진공하에서 제거하였다. 잔사를 실리카젤 컬럼 크로마토그래피(에틸 아세테이트/석유 에테르에 의해 용출됨)에 의해 정제시켜 오일로서 화합물 5(82-91% 수율)를 제공하였다.
Figure pct00562
3급-부틸 (2R)-2-벤질-5-옥소피롤리딘-1-카복실레이트 (5a)
화합물 5에 대한 일반적인 과정에 따라, 화합물 5a(2.3 g, 82% 수율)를, 실리카젤 컬럼 크로마토그래피(에틸 아세테이트/석유 에테르, v/v = 1/9에 의해 용출됨)에 의해 정제시킨 후에 무색 오일로서 수득하였다. ESI m/z: 220 (M - 55)+. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.35-7.29 (m, 2H), 7.28-7.24 (m, 1H), 7.21-7.17 (m, 2H), 4.40-4.34 (m, 1H), 3.18-3.10 (m, 1H), 2.77-2.70 (m, 1H), 2.35-2.29 (m, 2H), 2.01-1.91 (m, 1H), 1.85-1.77 (m, 1H), 1.59 (s, 9H) ppm.
Figure pct00563
3급-부틸 (2R)-2-[(4-플루오로페닐)메틸]-5-옥소피롤리딘-1-카복실레이트 (5b)
화합물 5에 대한 일반적인 과정에 따라, 화합물 5b(5.1 g, 91% 수율)를, 실리카젤 컬럼 크로마토그래피(에틸 아세테이트/석유 에테르, v/v = 1/5에 의해 용출됨)에 의해 정제시킨 후에 황색 오일로서 수득하였다. ESI m/z: 609 (2M + Na)+. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.18-7.13 (m, 2H), 7.04-6.99 (m, 2H), 4.37-4.31 (m, 1H), 3.13-3.07 (m, 1H), 2.76-2.69 (m, 1H), 2.40-2.26 (m, 2H), 2.04-1.91 (m, 1H), 1.81-1.75 (m, 1H), 1.58 (s, 9H) ppm.
Figure pct00564
3급-부틸 (2R)-2-[(4-니트로페닐)메틸]-5-옥소피롤리딘-1-카복실레이트 (5d)
화합물 5에 대한 일반적인 과정에 따라, 화합물 5d(7.9 g, 90% 수율)를, 실리카젤 컬럼 크로마토그래피(에틸 아세테이트/석유 에테르, v/v = 1/9에 의해 용출됨)에 의해 정제시킨 후에 황색 오일로서 수득하였다. ESI m/z: 663 (2M + Na)+. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.20 (d, J = 8.6 Hz, 2H), 7.39 (d, J = 8.6 Hz, 2H), 4.46-4.36 (m, 1H), 3.32-3.24 (m, 1H), 2.88-2.80 (m, 1H), 2.48-2.37 (m, 2H), 2.08-1.97 (m, 1H), 1.80-1.71 (m, 1H), 1.58 (s, 9H) ppm.
Figure pct00565
3급-부틸 2-(4-플루오로-3-니트로벤질)-5-옥소피롤리딘-1-카복실레이트 (5f)
화합물 5에 대한 일반적인 과정에 따라, 화합물 5f(15 g, 78% 수율)를, 실리카젤 컬럼 크로마토그래피(DCM에 의해 용출됨)에 의해 정제시킨 후에 황색 오일로서 수득하였다. ESI m/z: 361(M+Na)+.
Figure pct00566
3급-부틸 2-(3-아미노-4-플루오로벤질)-5-옥소피롤리딘-1-카복실레이트 (5g)
에틸 아세테이트(100 ㎖) 중의 화합물 5f(15 g, 44 mmol)의 용액에 습성 10% Pd/C(1.5 g)를 가하였다. 혼합물을 탈기시키고 수소로 3회 교환하고, 생성 혼합물을, 반응이 LCMS에 따라 완료될 때까지 실온에서 수소 벌룬하에 3시간 동안 교반하였다. 생성 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고, 여액을 진공하에서 농축시켜 황색 고체로서 조 화합물 5g(14 g, 조 물질)을 제공하고, 이를 다음 단계에 바로 사용하였다. ESI m/z: 209.1(M-Boc+H)+.
Figure pct00567
3급-부틸 2-(3-(벤질옥시카보닐아미노)-4-플루오로벤질)-5-옥소피롤리딘-1-카복실레이트 (5h1)
THF(10 ㎖) 중의 화합물 5g(0.74 g, 2.4 mmol)의 용액에 0℃에서 나트륨 비카보네이트(0.30 g, 3.6 mmol) 및 CbzCl(0.38 ㎖, 2.64 mmol)을 가하였다. 혼합물을 4시간 동안 rt에서 교반하였으며, 이는 LCMS에 의해 모니터되었다. 생성 혼합물을 농축시키고 잔사를 실리카젤 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르 중의 0-35% 에틸 아세테이트)에 의해 정제시켜 담황색 오일로서 화합물 5h1(0.85 g, 80% 수율)을 제공하였다. ESI m/z: 343.1(M-Boc+H)+.
Figure pct00568
3급-부틸 2-(3-(디벤질아미노)-4-플루오로벤질)-5-옥소피롤리딘-1-카복실레이트 (5i)
DMF(200 ㎖) 중의 화합물 5g(14 g, 44 mmol)의 용액에 실온에서 칼륨 카보네이트(18 g, 0.13 mol) 및 벤질브로마이드(13 ㎖, 0.11 mol)를 가하였다. 생성 혼합물을, 5i가 LCMS에 따라 더 이상 형성되지 않을 때까지 80℃에서 교반하였다. 실온에서 냉각 후에, 생성 혼합물을 수(500 ㎖)에 붓고 DCM(200 ㎖ x 2)으로 추출하였다. 합한 유기 용액을 수(100 ㎖ x 2) 및 염수(200 ㎖ x 1)로 세척하고, 황산 나트륨상에서 건조시키고, 진공하에서 농축시켜 황색 오일로서 화합물 5i(24 g, 조 물질)를 제공하였다. ESI m/z: 489.2(M+H)+.
Figure pct00569
3급-부틸 2-(3-플루오로-4-니트로벤질)-5-옥소피롤리딘-1-카복실레이트 (5j1)
화합물 4j를 사용하여 화합물 5에 대한 일반적인 과정에 따라, 화합물 5j1(1.7 g, 63% 수율)을, 실리카젤 컬럼 크로마토그래피(DCM에 의해 용출됨)에 의해 정제시킨 후에 황색 오일로서 수득하였다. ESI m/z: 361.1 (M + Na)+. 1H NMR (500 MHz, DMSO d6 ) δ 8.15 (t, J = 8.2 Hz, 1H), 7.48 (dd, J = 12.3, 1.4 Hz, 1H), 7.30 (dd, J = 8.5, 1.2 Hz, 1H), 4.38-4.31 (m, 1H), 3.13 (dd, J = 13.1, 4.4 Hz, 1H), 2.97 (dd, J = 13.1, 8.8 Hz, 1H), 2.59-2.52 (m, 1H), 2.29-2.21 (m, 1H), 1.99 (m, 1H), 1.71-1.62 (m, 1H), 1.44 (s, 9H) ppm.
Figure pct00570
3급-부틸 2-(4-아미노-3-플루오로벤질)-5-옥소피롤리딘-1-카복실레이트 (5j2)
에틸 아세테이트(30 ㎖) 중의 화합물 5j1(1.5 g, 4.4 mmol)의 용액에 습성 10% Pd/C(0.30 g)를 가하였다. 혼합물을 탈기시키고 수소로 3회 교환하고, 생성 혼합물을, 반응이 LCMS에 따라 완료될 때까지 실온에서 수소 벌룬하에 3시간 동안 교반하였다. 생성 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고, 여액을 진공하에서 농축시켜 황색 고체로서 조 화합물 5j2(1.4 g, 조 물질)을 제공하고, 이를 다음 단계에 바로 사용하였다. ESI m/z: 209.1(M-Boc+H)+.
Figure pct00571
3급-부틸 2-(4-(디벤질아미노)-3-플루오로벤질)-5-옥소피롤리딘-1-카복실레이트 (5j)
DMF(3 ㎖) 중의 화합물 5j2(0.22 g, 0.71 mmol)의 용액에 실온에서 칼륨 카보네이트(0.35 g, 2.5 mmol) 및 벤질브로마이드(0.25 ㎖, 2.1 mmol)를 가하였다. 생성 혼합물을, 5i가 LCMS에 따라 더 이상 형성되지 않을 때까지 80℃에서 밤새 교반하였다. 실온으로 냉각 후에, 생성 혼합물을 수(50 ㎖)에 붓고 DCM(25 ㎖ x 2)으로 추출하였다. 합한 유기 용액을 수(25 ㎖ x 2) 및 염수(50 ㎖ x 1)로 세척하고, 황산 나트륨상에서 건조시키고, 진공하에서 농축시켜 황색 오일로서 화합물 5j(0.33 g, 95% 조 수율)를 제공하였다. ESI m/z: 489.3(M+H)+.
Figure pct00572
3급-부틸 (R)-2-(4-(벤질옥시)-3-니트로벤질)-5-옥소피롤리딘-1-카복실레이트 (5k)
화합물 5에 대한 일반적인 과정에 따라, 화합물 5k(0.5 g, 62% 수율)을, 실리카젤 컬럼 크로마토그래피(에틸 아세테이트/석유 에테르, v/v = 1/1에 의해 용출됨)에 의해 정제시킨 후에 백색 고체로서 수득하였다. ESI m/z: 327.1(M-Boc+H)+.
Figure pct00573
3급-부틸 2-(3-(벤질옥시)-4-니트로벤질)-5-옥소피롤리딘-1-카복실레이트 (5l)
화합물 5에 대한 일반적인 과정에 따라, 화합물 5l(0.6 g, 74% 수율)을, 실리카젤 컬럼 크로마토그래피(에틸 아세테이트/석유 에테르, v/v = 1/1에 의해 용출됨)에 의해 정제시킨 후에 백색 고체로서 수득하였다. ESI m/z: 327.1(M-Boc+H)+.
화합물 7(a,b,d,h-j)에 대한 일반적인 과정
THF(0.1 g/㎖) 중의 화합물 5(1.0 당량)의 용액에 -78℃에서 헥산(1 M, 2.5 당량) 중의 리튬 비스(트리메틸실릴)아미드를 가하고, 혼합물을 -78℃에서 30분간 교반한 후에 요오도메탄(4 당량)을 -78℃에서 한 번에 가하였다. 생성 혼합물을, 화합물 5가 완전히 소모될 때까지(LCMS에 의해 모니터됨) -78℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 rt로 가온되게 하고 혼합물에 수성 수산화 나트륨(2 M, 2-3 당량)을 가하였다. 생성 혼합물을 rt에서 2시간 동안 교반하고, 이를 LCMS에 의해 모니터하였다. 반응이 완료된 후에, 반응물을 0℃로 냉각시키고 수성 하이드로클로라이드(1 M)에 의해 pH 3으로 산성화하였다. 혼합물을, 상기가 2개의 층으로 분리될 때까지 염수로 희석하였다. 수성층을 에틸 아세테이트로 추출하고(3회), 합한 유기 용액을 황산 나트륨상에서 건조시키고, 진공하에서 농축시켰다. 잔사를 역상 플래시 크로마토그래피(수 중 5-95% 아세토니트릴)에 의해 정제시켜 밝은 황색 고체로서 화합물 7(15-46% 수율)을 제공하였다.
Figure pct00574
(4S)-4-{[(3급-부톡시)카보닐]아미노}-2,2-디메틸-5-페닐펜탄산 (7a)
화합물 7에 대한 일반적인 과정에 따라, 화합물 7a(0.31 g, 46% 수율)를 밝은 황색 오일로서 수득하였다. ESI m/z: 665(2M+Na)+.
Figure pct00575
(4S)-4-{[(3급-부톡시)카보닐]아미노}-5-(4-플루오로페닐)-2,2-디메틸펜탄산 (7b)
화합물 7에 대한 일반적인 과정에 따라, 화합물 7b(0.44 g, 15% 수율)를 밝은 황색 오일로서 수득하였다. ESI m/z: 701(2M+Na)+.
Figure pct00576
(4S)-4-{[(3급-부톡시)카보닐]아미노}-2,2-디메틸-5-(4-니트로페닐)펜탄산 (7d)
화합물 7에 대한 일반적인 과정에 따라, 화합물 7d(1.2 g, 26% 수율)를 밝은 황색 오일로서 수득하였다. ESI m/z: 311 (M - 55)+. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.18-8.13 (m, 2H), 7.38-7.31 (m, 2H), 6.98-6.91 (m, 1H), 4.00-3.88 (m, 1H), 2.87-2.68 (m, 2H), 2.26-2.14 (m, 1H), 1.46-1.39 (m, 1H), 1.35 (s, 1H), 1.25-1.13 (m, 15H) ppm.
Figure pct00577
(4S)-5-(4-아미노페닐)-4-{[(3급-부톡시)카보닐]아미노}-2,2-디메틸펜탄산 (7e)
메탄올(10 ㎖) 및 에틸 아세테이트(3 ㎖) 중의 화합물 7d(0.50 g, 1.4 mmol)의 용액에 rt에서 질소 분위기하에 Pd/C(10% Pd, 0.10 g)를 가하였다. 혼합물을 rt에서 수소 분위기하에 2시간 동안 교반하고, 이를 LCMS에 의해 모니터하였다. 반응 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고 셀라이트를 메탄올로 세척하였다(3회), 합한 여액을 진공하에서 농축시켜 밝은 황색 고체로서 화합물 7e(0.46 g, 99% 수율)를 제공하고, 이를 정제 없이 다음 단계에 사용하였다. ESI m/z: 281(M-tBu+H)+.
Figure pct00578
(4S)-4-아미노-5-(4-아미노-3-클로로페닐)-2,2-디메틸펜탄산, TFA 염 (A-2b)(도 5A)
DMF(10 ㎖) 중의 중간체 Boc-A-2d(또는 7e)(0.55 g, 1.6 mmol)의 용액에 N-클로로숙신이미드(NCS)(0.24 g, 1.8 mmol)를 가하고, 혼합물을 RT에서 밤새 교반하고, 이를 LCMS에 의해 모니터하였다. 생성 혼합물을 에틸 아세테이트(150 ㎖)로 희석하고, 수 및 염수로 세척하고, 황산 나트륨상에서 건조시키고 농축시켰다. 잔사를 실리카젤 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르 중의 50% 에틸 아세테이트)에 의해 정제시켜 밝은 황색 고체로서 Boc-A-2b(0.48 g, ESI m/z 315.0(M-tBu+H)+)를 제공하고, 이를 TFA(2 ㎖)에 용해시켰다. 혼합물을, Boc가 LCMS에 따라 완전히 제거될 때까지 RT에서 15분간 교반하였다. 휘발성 물질을 진공하에서 제거하여 밝은 황색 고체로서 조 화합물 A-2b(0.64 g, TFA 염, Boc-A-2d로부터 80% 수율)를 제공하고, 이를 추가의 정제 없이 바로 사용하였다. ESI m/z 271.1(M+H)+.
Figure pct00579
(4S)-4-{[(3급-부톡시)카보닐]아미노}-5-(4-{[(9H-플루오렌-9-일메톡시)카보닐]아미노}페닐)-2,2-디메틸펜탄산 (7c)
DCM(10 ㎖) 중의 화합물 7e(0.46 g, 1.4 mmol)의 혼합물에 rt에서 피리딘(0.22 g, 2.7 mmol)을 가하고 혼합물을 3분간 교반한 후에 9-플루오레닐메틸 클로로포르메이트(Fmoc-Cl, 0.53 g, 2.1 mmol)를 가하였다. 이어서 혼합물을 rt에서 2시간 동안 교반하고, LCMS에 의해 모니터하였다. 혼합물을 Prep-HPLC(트리플루오로아세트산 시스템)에 의해 정제시켜 백색 고체로서 화합물 7c(0.20 g, 26% 수율)를 제공하였다. ESI m/z: 581 (M + Na)+. 1H NMR (500 MHz, 메탄올- d4 ) δ 7.83 (d, J = 7.5 Hz, 2H), 7.72 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 7.50-7.28 (m, 6H), 7.20-7.05 (m, 2H), 4.55-4.38 (m, 2H), 4.30 (t, J = 6.7 Hz, 1H), 3.90-3.80 (m, 1H), 2.75-2.50 (m, 2H), 1.90-1.80 (m, 1H), 1.70-1.60 (m, 1H), 1.38-1.10 (m, 15H) ppm.
Figure pct00580
Figure pct00581
(S)-4-((3급-부톡시카보닐)아미노)-5-(4-((3급-부톡시카보닐)아미노)페닐-3,5-d2)-2,2-디메틸펜탄산 (7g)
D2O(1 ㎖) 중의 화합물 7e(0.10 g, 0.30 mmol)의 혼합물에 농 DCl(0.05 ㎖)을 가하고, 여기에서 화합물 7e를 용해시켰다. 용액을 밀봉하고 140℃에서 2.5시간 동안 극초단파를 조사하였다. rt로 냉각시킨 후에, 혼합물에 주사기로 농 DCl(2 ㎖)을 가하였다. 이어서 밀봉된 튜브를 오일 욕에 의해 120℃까지 가열하였다. 반응 혼합물을 상기 온도에서 밤새 교반하고, 이를 LCMS에 의해 모니터하였다. rt로 냉각시킨 후에, 혼합물을 포화된 나트륨 비카보네이트로 pH 8로 중화시켰다. 수성 용액을 진공하에서 농축시키고 잔사를 에틸 아세테이트 및 수로 분리시켰다. 수성층을 동결건조시키고 잔사(무기 염과 함께 50 ㎎)를 디옥산-수의 혼합물(3 ㎖, v/v = 2/1)에 용해시켰다. 상기 용액에 나트륨 카보네이트(66 ㎎, 0.63 mmol) 및 Boc2O(50 ㎎, 0.23 mmol)를 rt에서 가하였다. 혼합물을 rt에서 밤새 교반하고 이를 LCMS에 의해 모니터하였다. 휘발성 물질을 진공하에서 건조시키고 잔사를 역상 플래시 크로마토그래피(수 중 5-95% 아세토니트릴(10 mM 암모늄 비카보네이트와 함께))에 의해 정제시켜 백색 고체로서 화합물 7g(15 ㎎, 11% 수율)을 제공하였다. ESI m/z: 461(M+Na)+.
Figure pct00582
5-(3-((벤질옥시카보닐)(메틸)아미노)-4-플루오로페닐)-4-(3급-부톡시카보닐아미노)-2,2-디메틸펜탄산 (7h)
화합물 7에 대한 일반적인 과정에 따라, 화합물 7h(0.23 g, 21% 수율)를 무색 오일로서 수득하였다. ESI m/z: 403.2(M-55)+.
Figure pct00583
4-{[(3급-부톡시)카보닐]아미노}-5-[3-(디벤질아미노)-4-플루오로페닐]-2,2-디메틸펜탄산 (7i)
화합물 5i를 사용하여 화합물 7에 대한 일반적인 과정에 따라, 화합물 7i(2.1 g, 24% 수율)를 황색 오일로서 수득하였다. ESI m/z: 535.2(M+H)+.
Figure pct00584
4-{[(3급-부톡시)카보닐]아미노}-5-[4-(디벤질아미노)-3-플루오로페닐]-2,2-디메틸펜탄산 (7j)
화합물 5j를 사용하여 화합물 7에 대한 일반적인 과정에 따라, 화합물 7j(60 ㎎, 17% 수율)를 황색 오일로서 수득하였다. ESI m/z: 535.2(M+H)+.
Figure pct00585
(S)-5-(4-(벤질옥시)-3-니트로페닐)-4-((3급-부톡시카보닐)아미노)-2,2-디메틸펜탄산 (7k)
화합물 7에 대한 일반적인 과정에 따라, 화합물 7k(0.1 g, 24% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. ESI m/z: 373.1(M-Boc+H)+.
Figure pct00586
5-(3-(벤질옥시)-4-니트로페닐)-4-((3급-부톡시카보닐)아미노)-2,2-디메틸펜탄산 (7l)
화합물 7에 대한 일반적인 과정에 따라, 화합물 7k(0.2 g, 36% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. ESI m/z: 373.1(M-Boc+H)+.
중간체 I에 대한 일반적인 과정
DCM(50 ㎎/㎖) 중의 화합물 7의 용액에 트리플루오로아세트산(VTFA/VDCM = 1/3)을 rt에서 주사기로 가하였다. 혼합물을, Boc가 LCMS에 따라 완전히 제거될 때까지 rt에서 2시간 동안 교반하였다. 휘발성 물질을 진공하에서 제거하고 잔사를 Prep-HPLC(트리플루오로아세트산 시스템)에 의해 정제시켜 백색 고체로서 중간체 Ia-c(80-94% 수율)를 제공하였다.
Figure pct00587
(S)-4-아미노-2,2-디메틸-5-페닐펜탄산 (Ia)
중간체 I에 대한 일반적인 과정에 따라, Ia(0.20 g, 94% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. ESI m/z: 222 (M + H)+. 1H NMR (500 MHz, DMSO d6 ) δ 12.64 (s, 1H), 7.77 (s, 2H), 7.38-7.33 (m, 2H), 7.30-7.23 (m, 3H), 3.45-3.37 (m, 1H), 2.90-2.74 (m, 2H), 1.83-1.68 (m, 2H), 1.07 (s, 3H), 1.03 (s, 3H) ppm.
Figure pct00588
(4S)-4-아미노-5-(4-플루오로페닐)-2,2-디메틸펜탄산 (Ib)
중간체 I에 대한 일반적인 과정에 따라, Ib(85 ㎎, 80% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. ESI m/z: 240 (M + H)+. 1H NMR (400 MHz, 메탄올- d4 ) δ 7.36-7.25 (m, 2H), 7.12 (t, J = 8.7 Hz, 2H), 3.56-3.44 (m, 1H), 3.03-2.81 (m, 2H), 1.97-1.89 (m, 1H), 1.78-1.70 (m, 1H), 1.23 (s, 3H), 1.07 (s, 3H) ppm.
Figure pct00589
(4S)-4-아미노-5-(4-{[(9H-플루오렌-9-일메톡시)카보닐]아미노}페닐)-2,2-디메틸펜탄산 (Ic)
중간체 I에 대한 일반적인 과정에 따라, Ic(60 ㎎, 92% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. ESI m/z: 459 (M + H)+. 1H NMR (500 MHz, 메탄올- d4 ) δ 7.84 (d, J = 7.5 Hz, 2H), 7.72 (d, J = 7.5 Hz, 2H), 7.52-7.40 (m, 4H), 7.35 (t, J = 7.4 Hz, 2H), 7.20 (d, J = 7.8 Hz, 2H), 4.52 (d, J = 5.6 Hz, 2H), 4.30 (t, J = 6.6 Hz, 1H), 3.51-3.44 (m, 1H), 2.94-2.84 (m, 2H), 1.96-1.87 (m, 1H), 1.78-1.72 (m, 1H), 1.23 (s, 3H), 1.09 (s, 3H) ppm.
Figure pct00590
(S)-4-아미노-5-(4-아미노페닐-3,5-d2)-2,2-디메틸펜탄산 (Ig)
중간체 I에 대한 일반적인 과정에 따라, 중간체 Ig(10 ㎎, 80% 수율)를 갈색 오일로서 수득하였다. ESI m/z: 239(M+H)+.
Figure pct00591
4-아미노-5-(3-(((벤질옥시)카보닐)(메틸)아미노)-4-플루오로페닐)-2,2-디메틸펜탄산 (Ih)
중간체 I에 대한 일반적인 과정에 따라, 중간체 Ih(0.18 g, 97% 수율)를 갈색 오일로서 수득하였다. ESI m/z: 403(M+H)+.
Figure pct00592
4-아미노-5-[3-(디벤질아미노)-4-플루오로페닐]-2,2-디메틸펜탄산 (Ii)
중간체 I에 대한 일반적인 과정에 따라, 중간체 Ii(50 ㎎, 99% 수율)를 갈색 오일로서 수득하였다. ESI m/z: 435(M+H)+.
Figure pct00593
4-아미노-5-[4-(디벤질아미노)-3-플루오로페닐]-2,2-디메틸펜탄산 (Ij)
중간체 I에 대한 일반적인 과정에 따라, 중간체 Ij(40 ㎎, 99% 수율)를 갈색 오일로서 수득하였다. ESI m/z: 435(M+H)+.
Figure pct00594
(S)-4-아미노-5-(4-(벤질옥시)-3-니트로페닐)-2,2-디메틸펜탄산 (Ik)
중간체 I에 대한 일반적인 과정에 따라, 중간체 Ik(78 ㎎, 99% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. ESI m/z: 373.1(M+H)+.
Figure pct00595
4-아미노-5-(3-(벤질옥시)-4-니트로페닐)-2,2-디메틸펜탄산 (Il)
중간체 I에 대한 일반적인 과정에 따라, 중간체 Il(0.1 g, 99% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. ESI m/z: 373.1(M+H)+.
도 4에서 중간체 II 및 III의 합성
중간체 IIa-c의 합성
Figure pct00596
에틸 2-아세틸티아졸-4-카복실레이트(11)(도 2)
에탄올 및 수의 혼합물(1.5 L, v/v = 1) 중의 시스테인 하이드로클로라이드 에틸 에스테르 8(15 g, 81 mmol)의 용액에 나트륨 비카보네이트(6.8 g, 81 mmol) 및 수성 피루빅 알데히드 9(35%, 18 ㎖, 0.11 mol)를 연속적으로 가하였다. 반응 혼합물을 RT에서 18시간 동안 교반하고 이어서 그의 원래 부피의 절반까지 <25℃ 수욕으로 농축시켰다. 잔류 수성 용액에 포화시까지 고체 염화 나트륨을 가하고 수성 용액을 DCM으로 추출하였다(2회). 합한 유기 용액을 황산 나트륨상에서 건조시키고 진공하에서 농축시켜 조 화합물 10을 제공하고, 이를 임의의 추가의 정제 없이 바로 사용하였다.
DCM(0.50 L) 중의 화합물 10(16 g, 81 mmol)의 용액에 활성화된 이산화 망간(0.14 ㎏, 1.6 mol)을 가하였다. 반응 혼합물을 65℃에서 밤새 교반하고, 이를 LCMS에 의해 모니터하였다. 반응물을 rt로 냉각시킨 후에, 현탁액을 셀라이트 패드를 통해 여과하고 셀라이트/잔사를 에틸 아세테이트(2 x 200 ㎖)로 세척하였다. 합한 여액을 진공하에서 농축시켰다. 조 생성물을 플래시 크로마토그래피(에틸 아세테이트/헥산, v/v = 1:3에 의해 용출됨)에 의해 정제시켜 황색 고체로서 화합물 11(5.9 g, 2 단계로 37% 수율)을 제공하였다. ESI m/z: 199.9 (M + H)+. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.44 (s, 1H), 4.49 (q, J = 7.1 Hz, 2H), 2.79 (s, 3H), 1.43 (t, J = 7.1 Hz, 3H) ppm.
Figure pct00597
에틸 2-(4-메틸펜트-2-에노일)티아졸-4-카복실레이트 (13)(도 2)
무수 THF(50 ㎖) 중의 11(2.9 g, 15 mmol)의 용액을 질소 분위기하에 0℃로 냉각시켰다. 상기 용액에 톨루엔 중의 티타늄 테트라클로라이드의 용액(1 M, 32 ㎖, 32 mmol)을 주사기를 통해 가하였다. 생성 혼합물을 0℃에서 30분간 교반하고 이어서 -78℃로 냉각시켰다. -78℃에서, TEA(4.5 ㎖, 32 mmol)를 혼합물에 가하였다. 반응 혼합물을 -78℃에서 10분간 교반하고 이어서 순수한 이소부티르알데히드(1.6 ㎖, 17 mmol)를 적가하였다. 반응물을, 반응이 LCMS에 따라 완료될 때까지 -78℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응물을 rt로 가온시킨 후에, 반응물을 포화된 수성 염화 암모늄(50 ㎖)으로 급냉시키고 에틸 아세테이트로 추출하였다. 합한 유기 용액을 무수 황산 나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고 진공하에서 농축시켰다. 잔사를 플래시 크로마토그래피(헥산 중의 10% 에틸 아세테이트에 의해 용출됨)에 의해 정제시켜 무색 오일로서 화합물 13(1.5 g, 41% 수율)을 제공하였다. ESI m/z: 253.9 (M + H)+. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.44 (s, 1H), 7.34-7.34 (m, 2H), 4.49 (q, J = 7.0 Hz, 2H), 2.64 (m, 1H), 1.45 (t, J = 7.0 Hz, 3H), 1.18 (d, J = 7.0 Hz, 6H) ppm.
Figure pct00598
3급-부틸 N-(헥실옥시)카바메이트 (15a)(도 2)
아세토니트릴(50 ㎖) 중의 3급-부틸 하이드록시카바메이트(2.1 g, 16 mmol)의 용액에 DCM 또는 MeCN 중의 1-브로모헥산(2.7 g, 18 mmol) 및 DBU(2.5 g, 17 mmol)를 연속적으로 가하였다. 반응물을 rt에서 12시간 동안 교반하고, TLC 및 LCMS에 의해 모니터하였다. 반응 혼합물을 수성 HCl(0.1 N)로 급냉시키고 에틸 아세테이트로 추출하였다. 합한 유기층을 황산 나트륨상에서 건조시키고 진공하에서 농축시켰다. 잔사를 플래시 크로마토그래피(석유 에테르 중의 0-100% 에틸 아세테이트에 의해 용출됨)에 의해 정제시켜 무색 오일로서 화합물 15a(1.7 g, 50% 수율)를 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.17 (br s, 1H), 3.84 (t, J = 6.7 Hz, 2H), 1.65-1.58 (m, 2H), 1.49 (s, 9H), 1.40-1.26 (m, 6H), 0.89 (t, J = 6.8 Hz, 3H) ppm.
Figure pct00599
3급-부틸 3-(4-니트로벤질옥시)프로폭시카바메이트 (15b)(도 2)
1-(브로모메틸)-4-니트로벤젠(0.10 ㎏, 0.46 mol), 1,3-프로판디올(0.39 L, 5.1 mol) 및 수산화 칼륨(27 g, 0.49 mol)의 혼합물을 80℃에서 밤새 교반하였다. 반응물을 냉각시킨 후에, 혼합물을 수(500 ㎖)에 붓고 여과하였다. 여액을 DCM(2 x 400 ㎖)으로 추출하였다. 합한 유기층을 수로 세척하고 황산 나트륨상에서 건조시키고 진공하에서 농축시켜 갈색 오일로서 3-[(4-니트로페닐)메톡시]프로판-1-올(95 g, 97%)을 제공하였으며 [ESI m/z: 212 (M + H)+. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.23 (d, J = 8 Hz, 2H), 7.52 (d, J = 8 Hz, 2H), 4.65 (s, 2H), 3.83 (t, J = 6 Hz, 2H), 3.73 (t, J = 6 Hz, 2H), 2.04 (br s, 1H), 1.96-1.91 (m, 2H) ppm], 이때 순도를 LCMS에 의해 확인하고 상기 물질을 추가의 정제 없이 다음 단계에 사용하였다. 조 3-[(4-니트로페닐)메톡시]프로판-1-올(89 g, 0.42 mol)을 DCM(0.90 L)에 용해시키고 상기 용액에 TEA(85 g, 0.84 mol)를 가하였다. 용액을 0℃로 냉각시킨 후에 염화 메탄설포닐(72 g, 0.63 mol)을 적가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 30분간 교반하고, LCMS에 의해 모니터하고, 이어서 포화된 수성 염화 암모늄으로 세척하였다(3회). 유기층을 황산 나트륨상에서 건조시키고 여과하였다. 여액에 DCM 또는 MeCN 중의 3급-부틸 하이드록시카바메이트(90 g, 0.68 mol) 및 DBU(90 g, 0.59 mol)를 연속적으로 가하였다. 생성 혼합물을 rt에서 밤새 교반하고, 이어서 DCM 또는 MeCN 중의 3급-부틸 하이드록시카바메이트(30 g, 0.23 mol) 및 DBU(50 g, 0.33 mol)를 다시 가하였다. 혼합물을 rt에서 추가로 2일간 교반하였다. LCMS는 출발 물질의 대부분이 소모되었음을 보였다. 반응 혼합물을 포화된 수성 염화 암모늄으로 세척하고(3회), 황산 나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에서 농축시켰다. 잔사를 플래시 크로마토그래피(석유 에테르 중의 0-15% 에틸 아세테이트에 의해 용출됨)에 의해 정제시켜 황색 오일로서 화합물 15b(90 g, 65% 수율)를 제공하였다. ESI m/z: 349 (M + Na)+. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.23 (d, J = 8.7 Hz, 2H), 7.53 (d, J = 8.6 Hz, 2H), 7.18 (s, 1H), 4.64 (s, 2H), 4.01 (t, J = 6.2 Hz, 2H), 3.68 (t, J = 6.2 Hz, 2H), 2.00 (q, J = 6.2 Hz, 2H), 1.50 (s, 9H) ppm.
Figure pct00600
3급-부틸 N-(펜트-4-인-1-일옥시)카바메이트 (15c)(도 2)
DMSO(0.50 L) 중의 3급-부틸 하이드록시카바메이트(20 g, 15 mmol)의 용액에 칼륨 3급-부톡사이드(13 g, 12 mmol) 및 5-클로로-1-펜틴(10 g, 10 mmol)을 연속적으로 가하였다. 반응 혼합물을 rt에서 질소하에 16시간 동안 교반하고, 이를 LCMS에 의해 모니터하였다. 이어서 혼합물을 포화된 수성 염화 암모늄으로 급냉시켰다. 수성 용액을 에틸 아세테이트로 추출하였다(2회). 합한 유기 용액을 수로 세척하고(3회), 황산 나트륨상에서 건조시키고 농축시켰다. 조 생성물을 실리카젤 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르 중의 5-20% 에틸 아세테이트에 의해 용출됨)에 의해 정제시켜 무색 오일로서 화합물 15c(7.2 g, 36% 수율)를 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.18 (s, 1H), 3.95 (t, J = 6.2 Hz, 2H), 2.33 (d, J = 2.6 Hz, 2H), 1.96 (s, 1H), 1.89-1.81 (m, 2H), 1.49 (s, 9H) ppm.
Figure pct00601
에틸 2-(3-{[(3급-부톡시)카보닐](헥실옥시)아미노}-4-메틸펜타노일)-1,3-티아졸-4-카복실레이트 (16a)(도 2)
THF(45 ㎖) 중의 화합물 15a(2.6 g, 12 mmol)의 용액에 수소화 나트륨(무기 오일 중 60%, 0.60 g, 12 mmol)을 질소하에 0℃에서 여러번으로 나누어 가하였다. 혼합물을 rt에서 20분간 교반한 후에 THF(15 ㎖) 중의 화합물 13(1.5 g, 4.0 mmol)의 용액을 적가하였다. 생성 혼합물을, 13이 TLC(헥산 중 10% 에틸 아세테이트)에 따라 소모될 때까지 rt에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트 및 염수로 희석하였다. 수성층을 에틸 아세테이트로 추출하고 합한 유기 용액을 황산 나트륨 상에서 건조시키고 진공하에서 농축시켰다. 잔사를 실리카젤 컬럼 크로마토그래피(헥산 중 10% 에틸 아세테이트에 의해 용출됨)에 의해 정제시켜 황색 오일로서 화합물 16a(0.25 g, 60% 수율)를 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.42 (s, 1H), 4.45 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 4.38-4.30 (m, 1H), 3.87-3.76 (m, 2H), 3.61-3.53 (m, 1H), 3.43-3.37 (m, 1H), 2.09-1.99 (m, 1H), 1.56-1.43 (m, 2H), 1.46 (s, 9H), 1.43 (t, J = 7.2 Hz, 3H), 1.33-1.21 (m, 6H), 1.02 (t, J = 6.7 Hz, 6H), 0.86 (t, J = 7.1 Hz, 3H) ppm.
Figure pct00602
에틸 2-{3-[10,10-디메틸-1-(4-니트로페닐)-8-옥소-2,6,9-트리옥사-7-아자운데칸-7-일]-4-메틸펜타노일}-1,3-티아졸-4-카복실레이트 (16b)(도 2)
톨루엔(50 ㎖) 중의 화합물 15b(5.2 g, 16 mmol) 및 화합물 13(2.7 g, 11 mmol)의 혼합물을 빙-수욕으로 5℃로 냉각시키고, 상기 용액에 테트라부틸암모늄 브로마이드(0.34 g, 1.1 mmol) 및 수성 수산화 칼륨(50%, 1.4 g, 13 mmol)을 연속적으로 가하였다. 혼합물을 rt에서 16h 동안 교반하였다. 혼합물을 포화된 수성 염화 암모늄(200 ㎖)에 붓고 현탁액을 에틸 아세테이트로 추출하였다(3회). 합한 유기층을 염수로 세척하고, 황산 나트륨상에서 건조시키고, 진공하에서 농축시켰다. 잔사를 플래시 크로마토그래피(석유 에테르 중의 0-30% 에틸 아세테이트에 의해 용출됨)에 의해 정제시켜 조 물질 16b를 제공하고, 이를 역상 플래시 크로마토그래피(ODS 컬럼, 수 중 50-100% 아세토니트릴(10 mM 암모늄 비카보네이트와 함께))에 의해 다시 정제시켜 황색 오일로서 화합물 16b(3.2 g, 52% 수율)를 제공하였다. ESI m/z: 602 (M + Na)+. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.42 (s, 1H), 8.21 (d, J = 8.6 Hz, 2H), 7.53 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 4.63 (s, 2H), 4.44 (q, J = 6.8 Hz, 2H), 4.38-4.33 (m, 1H), 4.04-3.96 (m, 2H), 3.64-3.55 (m, 4H), 3.50-3.30 (m, 1H), 2.05-1.90 (m, 2H), 1.47-1.41 (m, 12H), 1.01 (d, J = 6.7 Hz, 6H) ppm.
Figure pct00603
에틸 2-(3-{[(3급-부톡시)카보닐](펜트-4-인-1-일옥시)아미노}-4-메틸펜타노일)-1,3-티아졸-4-카복실레이트 (16c)(도 2)
16b의 제조에 대한 과정에 따라, 16c(38 g, 84% 수율)를 오일로서 수득하였다. ESI m/z: 475 (M + Na)+. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.42 (s, 1H), 4.44 (q, J = 6.9 Hz, 2H), 4.36 (td, J = 9.5, 3.8 Hz, 1H), 3.99-3.87 (m, 3H), 3.65-3.67 (m, 1H), 3.45-3.30 (m, 1H), 2.43-2.15 (m, 3H), 1.83-1.70 (m, 2H), 1.46 (s, 9H), 1.43 (t, J = 7.1 Hz, 3H), 1.01 (d, J = 6.5 Hz, 6H) ppm.
Figure pct00604
에틸 2- ((1R,3R)-3-(3급-부톡시카보닐(헥실옥시)아미노)-1-하이드록시-4-메틸펜틸) 티아졸-4-카복실레이트 (17a); 및 에틸 2-((1R,3S)-3-(3급-부톡시카보닐(헥실옥시)아미노)-1-하이드록시-4-메틸펜틸) 티아졸-4-카복실레이트 (17a2)(도 3)
톨루엔 중의 (S)-2-메틸-CBS-옥스아자보로리딘의 상업적인 용액(1 M, 64 ㎕, 64 μmol)을 무수 THF(3 ㎖)로 희석하고 0℃로 냉각시켰다. 상기 용액에 THF 중의 BH3·Me2S의 용액(2 M, 0.38 ㎖, 0.38 mmol)을 0℃에서 주사기로 가하였다. 상기 용액을 0℃에서 10분간 교반한 후에 무수 THF(2 ㎖) 중의 16a(0.15 g, 0.32 mmol)의 용액을 적가하였다. 반응물을 rt로 가온시키고 밤새 교반하였다. 반응물을 메탄올(1 ㎖)로 급냉시키고 휘발성 물질을 진공하에서 제거하였다. 잔사를 플래시 크로마토그래피(헥산 중의 20% 에틸 아세테이트에 의해 용출됨)에 의해 정제시켜 17a(70 ㎎, Rf = 0.3, 헥산 중 20% 에틸 아세테이트) 및 부분입체이성질체 17a2(61 ㎎, Rf = 0.25, 헥산 중 20% 에틸 아세테이트)(86% 총 수율)를 제공하였다.
17a: [a]D 23 = +7.296 (c = 1.82, CHCl3, 키랄 분리 후). ESI m/z: 473 (M + H)+. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.14 (s, 1H), 4.99 (d, J = 10.2 Hz, 1H), 4.42 (q, J = 7.1 Hz, 2H), 4.00 (dd, J = 14.2, 6.8 Hz, 1H), 3.92 (dd, J = 13.7, 7.0 Hz, 2H), 2.41 (m, 1H), 2.00 (m, 1H), 1.92 (t, J = 11.2 Hz, 1H), 1.62 (m, 2H), 1.53 (s, 9H), 1.41 (m, 5H), 1.32 (m, 5H), 1.03 (d, J = 6.6 Hz, 3H), 0.97 (d, J = 6.7 Hz, 3H), 0.91 (t, J = 6.8 Hz, 3H) ppm.
17a2: [a]D 23 = +28.81 (c = 1.24, CHCl3). ESI m/z: 473 (M + H)+. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.12 (s, 1H), 5.12 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 4.42 (q, J = 7.1 Hz, 2H), 4.09 (s, 1H), 3.99 (dd, J = 14.3, 6.9 Hz, 1H), 3.88-3.78 (m, 2H), 2.42 (dt, J = 14.8, 3.3 Hz, 1H), 2.12-2.06 (m, 1H), 1.91 (tt, J = 13.3, 6.6 Hz, 1H), 1.63-1.57 (m, 2H), 1.49 (s, 9H), 1.42-1.33 (m, 5H), 1.31-1.25 (m, 5H), 0.98 (dd, J = 6.6, 4.3 Hz, 6H), 0.88 (t, J = 6.8 Hz, 3H) ppm.
도 3 및 4에서 O-튜불리신의 키랄 중심의 결정
Figure pct00605
에틸 2-((1R,3R)-3-(3급-부톡시카보닐아미노)-1-하이드록시-4-메틸펜틸)티아졸-4-카복실레이트 (17A)
화합물 17a(500 ㎎, 1.06 mmol), Mo(CO)6(1 g, 3.79 mmol), CH3CN(15 ㎖) 및 H2O(5 ㎖)의 혼합물을 120℃에서 극초단파 반응기에서 8h 동안 교반하였다. 이어서 혼합물을 냉각시키고, 여과하고, 농축시켰다. 조 혼합물에 MeOH(10 ㎖) 및 Boc2O(500 ㎎, 2.29 mmol)를 가하고, 생성 혼합물을 rt에서 3h 동안 교반하였다. 혼합물을 농축시키고, CH2Cl2(10 ㎖)에 현탁시키고 여과하였다. 여액을 농축시키고 플래시 크로마토그래피(실리카젤, PE에서 PE/EA = 60/40)에 의해 정제시키고, 이어서 prep-HPLC(NH4HCO3/H2O/CH3CN)에 의해 정제시켜 백색 고체(25 ㎎, 6.3%)로서 17A를 제공하였다. [a]D 23 = +13.571 (c = 0.56, CHCl3). ESI m/z: 373 (M+H)+. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.14 (s, 1H), 5.22 (d, J = 3.8 Hz, 1H), 5.02 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 4.58 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 4.42 (q, J = 7.1 Hz, 2H), 3.77-3.69 (m, 1H), 2.13-2.03 (m, 1H), 1.85-1.68 (m, 2H), 1.44-1.41 (s, 9H), 1.40 (t, J = 7.1 Hz, 3H), 0.96 (d, J = 6.8, 3.0 Hz, 3H), 0.95 (d, J = 6.8 Hz, 3H) ppm.
에틸 2-((1R,3S)-3-(3급-부톡시카보닐아미노)-1-하이드록시-4-메틸펜틸)티아졸-4-카복실레이트 (17B)
화합물 17a2(600 ㎎, 1.27 mmol), Mo(CO)6(1.2 g, 4.55 mmol), CH3CN(12 ㎖) 및 H2O(4 ㎖)의 혼합물을 100℃에서 극초단파 반응기에서 2h 및 120℃에서 6h 동안 교반하였다. 이어서 혼합물을 여과하고, 농축시켰다. 혼합물을 MeOH(10 ㎖)에 용해시키고 Boc2O(600 ㎎, 2.75 mmol)를 가하였다. 혼합물을 rt에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 농축시키고, CH2Cl2에 현탁시키고 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하였다. 여액을 농축시키고 플래시 크로마토그래피(실리카젤, PE에서 PE/EA = 50/50)에 의해 정제시키고, 이어서 prep-HPLC(NH4HCO3/H2O/CH3CN)에 의해 정제시켰다. 생성된 모든 분획을 농축시키고 동결건조시켜 백색 고체(85 ㎎, 18%)로서 17B를 제공하였다. [a]D 23 = +82.957 (c = 1.6, CHCl3). ESI m/z: 373 (M+H)+. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.04 (s, 1H), 4.90 (s, 1H), 5.07 (s, 1H), 4.53 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 4.35 (q, J = 7.1 Hz, 2H), 3.58 (m, 1H), 2.30 (d, J = 14.8 Hz, 1H), 2.00-1.85 (m, 2H), 1.34 (s, 9H), 1.32 (t, J = Hz, 3H), 0.9 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 0.86 (d, J = 6.8 Hz, 3H).
클로로포름-d 중의 17a로부터 17A 및 17a2로부터 17B의 1H NMR 화학 이동을, (1R,3R)-17A 및 (1R,3S)-17B에 대한 공개된 1H NMR 데이터(Organic 및 Biomolecular Chemistry 2013, 11(14), 2273-2287)와 함께 표 4에 요약한다. 모든 분석학적 데이터 리뷰시, 결론은 17a가, (1R,3R)-17A로 전환될 수 있는 (1R,3R)-17a이고, 17a2는 (1R,3S)-17B로 전환될 수 있는 (1R,3S)-17a라는 것이었다.
(1R,3R)-17A, (1R,3R)-17A, (1R,3S)-17B, 및 (1R,3S)-17B의 NMR 데이터
(1R,3R)-17A (참조 데이터) (1R,3R)-17A (17a로부터)
1 8.08 (s, 1H) 8.14 (s, 1H)
(NH) 5.14 (br s, 1H) 5.22 (d, J = 3.8 Hz, 1H)
3 4.98 (br d, J = 11 Hz, 1H) 5.02 (d, J = 11 Hz, 1H)
4 4.58 (d, J = 9.4 Hz, 1H) 4.58 (d, J = 9.6 Hz, 1H)
5 4.36 (q, J = 7.3 Hz, 2H) 4.42 (q, J = 7.1 Hz, 2H)
6 3.75-3.64 (m, 1H), 3.77-3.69 (m, 1H)
7 2.04 (dt, J =12, 2.2 Hz, 1H) 2.13-2.03 (m, 1H)
8 1.81-1.63 (m, 2H) 1.85-1.68 (m, 2H)
9 1.40 (s, 9H), 1.44 (s, 9H)
10 1.37 (t, J =7.3 Hz, 3H) 1.40 (t, J-7.1 Hz, 3H)
11 0.93 (d, J = 7.0 Hz, 3H) 0.96 (d, J = 6.8, 3.0 Hz, 3H).
12 0.91 (d, J = 6.8 Hz, 3H) 0.95, (d, J = 6.8 Hz, 3H)
[a]D 23 = +4.5
(c = CHCl3 중의 1.74 g/100 ㎖)		 [a]D 23 = +13.571
(c = CHCl3 중의 0.56 g/100 ㎖)
Rf = 0.51 (n-Hex/AcOEt = 6:4) on TLC
(1R,3S)-17B (참조 데이터) (1R,3S)-17B (17a2로부터)
1 8.07 (s, 1H) 8.04 (s, 1H)
(NH) 4.82 (br s, 1H), 4.90 (s, 1H)
3 5.18-5.04 (m, 1H) 5.07 (s, 1H)
4 4.56 (br d, J = 8.6 Hz, 1H) 4.53 (d, J = 8.9 Hz, 1H)
5 4.38 (q, J = 6.9 Hz, 2H) 4.35 (q, J = 7.1 Hz, 2H)
6 3.68-3.56 (m, 1H) 3.584 (m, 1H)
7 2.39-2.26 (m, 1H) 2.30 (d, J = 14.8 Hz, 1H)
8 1.98-1.77 (m, 2H) 2.00-1.85 (m, 2H)
9 1.39 (s, 9H), 1.34 (s, 9H)
10 1.37 (t, J = 6.9 Hz, 3H) 1.32, (t, J = 7 Hz, 3H)
11 0.94 (d, J = 6.8 Hz, 3H) 0.90 (d, J = 6.8 Hz, 3H)
12 0.90 (d, J = 6.7 Hz, 3H) 0.86 (d, J = 6.8 Hz, 3H)
[a]D 23 = +57.7
(c = CHCl3 중의 1.2 g/100 ㎖)		 [a]D 23 = +82.957
(c = CHCl3 중의 1.6 g / 100 ㎖)
Rf = 0.27 (n-Hex/AcOEt = 6:4) on TLC
에틸 2-((1R,3R)-3-(3급-부톡시카보닐(3-(4-니트로벤질옥시)프로폭시)아미노)-1-하이드록시-4 -메틸펜틸)티아졸-4-카복실레이트 (17b)
Figure pct00606
(1R,3R)-17a의 제조에 대해 상술한 바와 유사한 반응 조건을 사용하여, 조 (1R,3R)-17b(2.7 g, 80% ee, 43% 수율) 및 부분입체이성질체 (1R,3S)-17b(2.5 g, 39% 수율)를 별도로 수득하였다. 화합물 17b(조 물질)를 키랄 SFC에 의해 추가로 정제시켜 황색 오일로서 거울상이성질체 순수한 (1R,3R)-17b(1.7 g, 63% 수율)를 제공하였다. (1R,3R)-17b의 키랄성을 17a에 대해 기재된 바와 동일한 방법을 사용하여 확인하였다.
(1R,3R)-17b에 대해서: ESI m/z: 604 (M + Na)+. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.20 (d, J = 8.7 Hz, 2H), 8.13 (s, 1H), 7.52 (d, J = 8.7 Hz, 2H), 4.97 (d, J = 10.0 Hz, 1H), 4.64 (s, 2H), 4.42 (q, J = 7.1 Hz, 2H), 4.15-4.03 (m, 3H), 3.91 (t, J = 9.7 Hz, 1H), 3.69 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 2.43-2.36 (m, 1H), 2.03-1.86 (m, 4H), 1.52 (s, 9H), 1.41 (t, J = 7.1 Hz, 3H), 1.02 (d, J = 6.6 Hz, 3H), 0.94 (d, J = 6.7 Hz, 3H) ppm. 키랄 SFC 컬럼 OD-H, CO2/MeOH(0.2% 메탄올 암모니아). 체류 시간: 5.58 min, 면적%: >99%.
(1S,3S)-17b에 대해서: ESI m/z: 604 (M + Na)+. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.21 (d, J = 8.7 Hz, 2H), 8.13 (s, J = 4.0 Hz, 1H), 7.51 (d, J = 8.6 Hz, 2H), 5.15-5.12 (m, 1H), 4.62 (s, 2H), 4.45-4.41 (m, 2H), 4.15 (dd, J = 14.4, 6.3 Hz, 1H), 4.05 (dd, J = 14.2, 6.1 Hz, 1H), 3.95 (s, 1H), 3.80 (t, J = 8.1 Hz, 1H), 3.66 (t, J = 6.3 Hz, 2H), 2.43 (dt, J = 14.8, 3.5 Hz, 1H), 2.13-1.89 (m, 4H), 1.50 (s, 9H), 1.42 (t, J = 7.1 Hz, 3H), 1.00-0.98 (m, 6H) ppm. 키랄 SFC 컬럼 OD-H, CO2/MeOH(0.2% 메탄올 암모니아). 체류 시간: 4.37 min, 면적%: >99%.
에틸 2-((1R, 3R)-3-(3급-부톡시카보닐 (펜트-4-인일옥시) 아미노)-1-하이드록시-4-메틸펜틸) 티아졸-4-카복실레이트 (17c-P2); 및 에틸 2-((1S, 3S)-3-(3급-부톡시카보닐 (펜트-4-인일옥시) 아미노)-1-하이드록시-4-메틸펜틸)티아졸-4-카복실레이트 (17c-P1); 에틸 2-((1R,3S)-3-(3급-부톡시카보닐(펜트-4-인일옥시)아미노)-1-하이드록시-4-메틸펜틸)티아졸-4-카복실레이트 (17c-P3); 및 에틸 2-((1S,3R)-3-(3급-부톡시카보닐(펜트-4-인일옥시)아미노)-1-하이드록시-4-메틸펜틸)티아졸-4-카복실레이트 (17c-P4)
에탄올(0.30 L) 중의 화합물 16c(93 g, 0.21 mol)의 용액에 나트륨 보로하이드라이드(7.8 g, 0.21 mol)를 0℃에서 조금씩 가하였다. 상기 용액을, 반응이 LCMS에 따라 완료될 때까지 0℃에서 3시간 동안 교반하였다. 반응물을 0℃에서 수(1 L)로 급냉시키고 수성 용액을 DCM(1.5 L)으로 추출하였다. 합한 유기층을 진공하에서 농축시켰다. 조 생성물을 실리카젤 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르 중의 5-20% 에틸 아세테이트로 용출됨)에 의해 정제시켜 시스-17c(조 물질)(29 g, 31% 수율) 및 트랜스-17c(26 g, 27% 수율)를 제공하였다. 시스 이성질체를 키랄 SFC에 의해 추가로 정제시켜 (1S,3S)-17c(피크 1)(6 g, 21% 수율), 및 순수한 (1R,3R)-17c(피크 2)(8.2 g, 28% 수율, 99% ee)를 제공하였다. 트랜스-17c(2 g)를 SFC에 의해 분리시켜 (1RS,3S)-17c-P3(0.52 g, 26% 수율), 및 (1S,3R)-17c-P4(0.55 g, 27% 수율)를 제공하였다.
Figure pct00607
(1S,3S)-17c(피크 1)에 대해서: ESI m/z: 477 (M + Na)+. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.13 (s, 1H), 4.98 (d, J = 9.5 Hz, 1H), 4.41 (q, J = 7.1 Hz, 2H), 4.10 (dd, J = 14.0, 6.2 Hz, 1H), 4.03 (dd, J = 13.6, 6.3 Hz, 1H), 3.92 (t, J = 9.8 Hz, 1H), 2.48-2.39 (m, 1H), 2.36 (td, J = 6.9, 2.5 Hz, 2H), 2.08 (t, J = 2.4 Hz, 1H), 2.06-1.95 (m, 1H), 1.87 (dt, J = 13.0, 8.9 Hz, 3H), 1.52 (s, 9H), 1.40 (t, J = 7.1 Hz, 3H), 1.02 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 0.95 (d, J = 6.7 Hz, 3H) ppm.
Figure pct00608
(1R,3R)-17c(피크 2)에 대해서: ESI m/z: 477 (M + Na)+. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.13 (s, 1H), 4.98 (d, J = 9.5 Hz, 1H), 4.41 (q, J = 7.1 Hz, 2H), 4.10 (dd, J = 14.0, 6.2 Hz, 1H), 4.03 (dd, J = 13.6, 6.3 Hz, 1H), 3.92 (t, J = 9.8 Hz, 1H), 2.48-2.39 (m, 1H), 2.36 (td, J = 6.9, 2.5 Hz, 2H), 2.08 (t, J = 2.4 Hz, 1H), 2.06-1.95 (m, 1H), 1.87 (dt, J = 13.0, 8.9 Hz, 3H), 1.52 (s, 9H), 1.40 (t, J = 7.1 Hz, 3H), 1.02 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 0.95 (d, J = 6.7 Hz, 3H). 키랄 SFC 컬럼 EnantioPak OZ-H, CO2/EtOH(0.2% 메탄올 암모니아). 체류 시간: 0.71 min, 면적%: 100%.
(1R,3S)-17c-P3에 대해서: ESI m/z: 477 (M + Na)+. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.12 (s, 1H), 5.19-5.06 (m, 1H), 4.42 (q, J = 7.1 Hz, 2H), 4.09 (dd, J = 14.3, 6.1 Hz, 1H), 3.98 (dd, J = 14.3, 6.1 Hz, 1H), 3.91 (s, 1H), 3.80 (t, J = 8.4 Hz, 1H), 2.42 (dt, J = 14.9,3.4 Hz, 1H), 2.32 (td, J = 7.0, 2.6 Hz, 2H), 2.12 (ddd, J = 14.9, 10.4, 8.9 Hz, 1H), 1.94 (dt, J = 16.4, 4.7Hz, 2H), 1.83 (p, J = 6.7 Hz, 2H), 1.50 (s, 9H), 1.40 (t, J = 7.1 Hz, 3H), 0.99 (s, 3H), 0.98 (d, J = 0.8 Hz, 3H).
(1S,3R)-17c-P4에 대해서: ESI m/z: 477 (M + Na)+. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.12 (s, 1H), 5.16-5.10 (m, 1H), 4.44-4.39 (m, 2H), 4.13-4.05 (m, 1H), 3.98 (dd, J = 14.2, 6.2 Hz, 1H), 3.91 (s, 1H), 3.80 (t, J = 8.2 Hz, 1H), 2.42 (dt, J = 14.9, 3.4 Hz, 1H), 2.32 (td, J = 7.0, 2.6 Hz, 2H), 2.18-2.07 (m, 1H), 1.94 (dt, J = 16.5, 4.6 Hz, 2H), 1.83 (p, J = 6.6 Hz, 2H), 1.50 (s, 9H), 1.40 (t, J = 7.1 Hz, 3H), 0.99 (s, 3H), 0.98 (s, 3H).
17c 이성질체의 키랄성을 17a와 동일한 방법을 사용하여 확인하였다. 2개의 17c 시스 이성질체에 대해서: 17c-P2는 (1R,3R)-17A로 전환되었고, 17c-P1은 (1S,3S)-17A로 전환되었다. 2개의 17c 트랜스 이성질체에 대해서: 17c-P3은 (1R,3S)-17B로 전환되었고, 17c-P4는 (1S,3R)-17B로 전환되었다. 클로로포름-d 중의 17c(P1, P2, P3, P4)로부터 17A 및 17B 이성질체의 1H NMR 화학 이동을 하기 표 5에 요약한다. 모든 분석학적 데이터 리뷰시, 결론은 17c-P2가, (1R,3R)-17A로 전환될 수 있는 (1R,3R)-17c이고(보고됨), 17c-P4는 (1S,3R)-17B로 전환될 수 있는 (1S,3R)-17c라는 것(보고됨)이었다.
(1R,3R)-17A, (1R,3R)-17A, (1S,3S)-17A, (1R,3S)-17B, (1S,3R)-17B 및 (1R,3S)-17B의 NMR 데이터
(1R,3R)-17A (참조) (1R,3R)-17A (1S,3S)-17A
　 (1R,3R)-17c; 시스-P2로부터 (1S,3S)-17c; 시스-P1로부터
1 8.08 (s, 1H) 8.13 (s, 1H) 8.12 (s, 1H)
2 (NH) 5.14 (br s, 1H) 3.84 (br s, 1H) NA
3 4.98 (br d, J = 11 Hz, 1H) 5.02 (d, J = 11 Hz, 1H) 5.02 (d, J = 11 Hz, 1H)
4 4.58 (d, J = 9.4 Hz, 1H) 4.59 (d, J = 9.6 Hz, 1H) 4.56 (d, J = 9.6 Hz, 1H)
5 4.36 (q, J = 7.3 Hz, 2H) 4.42 (q, J = 7.1 Hz, 2H) 4.42 (q, J = 7.1 Hz, 2H)
6 3.75-3.64 (m, 1H), 3.77-3.69 (m, 1H) 3.77-3.67 (m, 1H)
7 2.04 (dt, J =12, 2.2 Hz, 1H) 2.12-2.03 (m, 1H) 2.13-2.04 (m, 1H)
8 1.81-1.63 (m, 2H) 1.85-1.68 (m, 2H) 1.82-1.70 (m, 2H)
9 1.40 (s, 9H), 1.44 (s, 9H) 1.45 (s, 9H)
10 1.37 (t, J =7.3 Hz, 3H) 1.40 (t, J = 7.1 Hz, 3H) 1.40 (t, J = 7.1 Hz, 3H)
11 0.93 (d, J = 7.0 Hz, 3H) 0.96 (d, J = 6.8 Hz, 3H) 0.97 (d, J = 6.8 Hz, 3H)
12 0.91 (d, J = 6.8 Hz, 3H) 0.95 (d, J = 6.8 Hz, 3H) 0.95 (d, J = 6.8 Hz, 3H)
[a]D 23 = +4.5
(c = CHCl3 중의 1.74 g/100 ㎖) 		[a]D 23 = +10.244
(c = CHCl3 중의 2.46 g/100 ㎖)		 [a]D 23 = -12.045
(c = CHCl3 중의 0.88 g/100 ㎖)
　 (1R,3S)-17B (참조) (1S,3R)-17B (1R,3S)-17B
　 (1S,3R)-17c; 트랜스-P4로부터 (1R,3S)-17c; 트랜스-P3으로부터
1 8.07 (s, 1H) 8.11 (s, 1H) 8.11 (s, 1H)
2 (NH) 4.82 (br s, 1H), NA 1.86 (br s, 1H)
3 5.18-5.04 (m, 1H) 5.13 (d, J = 4.4 Hz, 1H) 5.13 (d, J = 4.5 Hz, 1H)
4 4.56 (br d, J = 8.6 Hz, 1H) 4.59 (d, J = 8.5 Hz, 1H) 4.58 (d, J = 8.2 Hz, 1H)
5 4.38 (q, J = 6.9 Hz, 2H) 4.41 (q, J = 7.1 Hz, 2H) 4.41 (q, J = 7.1 Hz, 2H)
6 3.68-3.56 (m, 1H) 3.67-3.63 (m, 1H) 3.71-3.58 (m, 1H)
7 2.39-2.26 (m, 1H) 2.40-2.33 (m, 1H) 2.41-2.31 (m, 1H)
8 1.98-1.77 (m, 2H) 1.99-1.91 (m, 2H) 1.98-1.89 (m, 2H)
9 1.39 (s, 9H), 1.41 (s, 9H) 1.42 (s, 9H)
10 1.37 (t, J = 6.9 Hz, 3H) 1.40 (t, J = 7.0 Hz, 3H) 1.40 (t, J = 6.7 Hz, 3H)
11 0.94 (d, J = 6.8 Hz, 3H) 0.97 (d, J = 6.8 Hz, 3H) 0.97 (d, J = 6.7 Hz, 3H)
12 0.90 (d, J = 6.7 Hz, 3H) 0.93 (d, J = 6.8 Hz, 3H) 0.93 (d, J = 6.8 Hz, 3H)
　 [a]D 23 = +57.7
(c = CHCl3 중의 1.2 g/100 ㎖) 		[a]D 23 = -73.140
(c = CHCl3 중의 0.86 g/100 ㎖)		 [a]D 23 = +61.579
(c = CHCl3 중의 1.52 g/100 ㎖)　
시스-17c 및 트랜스-17c에 대한 키랄 SFC 분리 조건을 하기 표 6에 요약하였다.
화합물 시스 17c 트랜스 17c
장치 SFC-200 (Thar, Waters) SFC-200 (Thar, Waters)
컬럼 OZ　30*250 ㎜, 5um (Decial) AD 20*250 ㎜, 5um (Dacel)
컬럼 온도 35℃ 35℃
이동상 CO2/ 메탄올(0.1% NH4OH) = 90/10 CO2/ MeOH 0.2% NH4OH (7M 메탄올) = 85/15
유량 70 g/min 120 g/min
배압 100 bar 100 bar
검출 파장 214 ㎚ 214 ㎚
주기 시간 2.0 min 3.6 min
샘플 용액 20 ㎖ 메탄올에 용해된 1.8 g 35 ㎖ 메탄올에 용해된 1.8 g
주입 부피 0.35 ㎖ 1.0 ㎖
Figure pct00609
에틸 2-[(1R,3R)-3-{[(3급-부톡시)카보닐](헥실옥시)아미노}-1-[(3급-부틸디메틸실릴)옥시]-4-메틸펜틸]-1,3-티아졸-4-카복실레이트 (18a)
DCM(16 ㎖) 중의 화합물 17a(3.2 mmol)의 용액에 2,6-루티딘(1.8 ㎖, 38.4 mmol) 및 3급-부틸디메틸실릴 클로라이드(TBSCl, 1.7 ㎖, 19.2 mmol)를 4℃에서 연속적으로 가하였다. 혼합물을 4℃에서 30분간 교반하였다. 생성 혼합물을 rt로 가온시키고 반응이 LCMS에 따라 완료될 때까지 2시간 동안 교반하였다. 이어서 반응 혼합물을 염수에 부었다. 수성층을 에틸 아세테이트로 추출하였다. 합한 유기층을 염수로 세척하고, 황산 나트륨상에서 건조시키고, 진공하에서 농축시켰다. 잔사를 플래시 크로마토그래피(헥산 중 25% 에틸 아세테이트에 의해 용출됨)에 의해 정제시켜 무색 오일로서 화합물 18a(1.8 g, 95% 수율)를 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 9.92 (s, 1H), 5.24 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 4.43-4.36 (m, 2H), 4.13-4.10 (m, 1H), 4.02-3.99 (m, 1H), 3.86 (m, 1H), 2.15-2.09 (m, 1H), 1.89-1.83 (m, 2H), 1.67-1.56 (m, 2H), 1.40 (s, 9H), 1.41-1.25 (m, 9H), 0.95-0.83 (m, 18H), 0.15 (s, 3H), 0.0 (s, 3H) ppm.
Figure pct00610
에틸 2-[(1R,3R)-1-[(3급-부틸디메틸실릴)옥시]-3-[10,10-디메틸-1-(4-니트로페닐)-8-옥소-2,6,9-트리옥사-7-아자운데칸-7-일]-4-메틸펜틸]-1,3-티아졸-4-카복실레이트 (18b)
DMF(50 ㎖) 중의 화합물 17b(1.7 g, 2.9 mmol)의 혼합물에 이미다졸(2.37 g, 34.8 mmol) 및 TBSCl(2.69 g, 17.4 mmol)을 가하고 혼합물을 rt에서 3일간 교반하였다. 혼합물을 수(140 ㎖)에 붓고 에틸 아세테이트로 추출하였다(2회). 합한 유기층을 염수로 세척하고, 황산 나트륨상에서 건조시키고, 진공하에서 농축시켰다. 잔사를 플래시 크로마토그래피(석유 에테르 중의 0-15% 에틸 아세테이트에 의해 용출됨)에 의해 정제시켜 무색 오일로서 화합물 18b(1.8 g, 88% 수율)를 제공하였다. ESI m/z: 696 (M+H)+. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.17 (d, J = 8.6 Hz, 2H), 8.09 (s, 1H), 7.47 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 5.24 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 4.60 (s, 2H), 4.39 (m, 2H), 4.19 (m, 2H), 3.90 (s, 1H), 3.70 (m, 2H), 2.14 (m, 1H), 2.01 (m, 2H), 1.84 (m, 2H), 1.52 (s, 9H), 1.39 (t, J = 7.1 Hz, 3H), 0.92 (m, 15H), 0.16 (s, 3H), -0.08 (s, 3H) ppm
Figure pct00611
에틸 2-[(1R,3R)-3-{[(3급-부톡시)카보닐](펜트-4-인-1-일옥시)아미노}-1-[(3급-부틸디메틸실릴)옥시]-4-메틸펜틸]-1,3-티아졸-4-카복실레이트 (18c)
18b의 제조와 동일한 과정을 사용하여, 화합물 18c(4.4 g, 70% 수율)를 오일로서 수득하였다. ESI m/z: 569 (M + H)+. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.96 (s, 1H), 5.08 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 4.33-4.18 (m, 2H), 4.02 (dd, J = 12.8, 7.1 Hz, 1H), 3.99-3.92 (m, 1H), 3.74 (br s, 1H), 2.23-2.17 (m, 2H), 2.04-1.95 (m, 1H), 1.78-1.65(m, 5H), 1.36 (s, 9H), 1.25 (s, 3H), 0.80-0.76 (m, 15H), 0.00 (s, 3H), -0.25 (s, 3H) ppm.
Figure pct00612
에틸 2-[(5R,7R)-2,2,3,3-테트라메틸-7-(프로판-2-일)-4,9-디옥사-8-아자-3-실라펜타데칸-5-일]-1,3-티아졸-4-카복실레이트 (19a)
DCM(10 ㎖) 중의 10% TFA 중의 18a(1.8 g, 3.1 mmol)의 혼합물을 rt에서 24시간 동안 교반하고, 이어서 진공하에서 농축시켜 조 화합물 19a(1.7 g, 80% 수율)를 제공하고, 이를 추가의 정제 없이 다음 단계에 사용하였다.
Figure pct00613
에틸 2-[(8R,10R)-12,12,13,13-테트라메틸-1-(4-니트로페닐)-8-(프로판-2-일)-2,6,11-트리옥사-7-아자-12-실라테트라데칸-10-일]-1,3-티아졸-4-카복실레이트 (19b)
DCM(50 ㎖) 중의 화합물 18b(1.4 g, 2.0 mmol)의 혼합물에 TFA(5.0 ㎖)를 가하고, 반응 혼합물을, Boc 보호기가 LCMS에 따라 완전히 제거될 때까지 rt에서 4시간 동안 교반하였다. 이어서 혼합물을 포화된 수성 나트륨 비카보네이트(100 ㎖)에 붓고 DCM으로 추출하였다(3회). 합한 유기층을 황산 나트륨상에서 건조시키고 진공하에서 농축시켜 밝은 황색 오일로서 화합물 19b(1.2 g 조 물질, TFA 염으로서)를 제공하였다. ESI m/z: 596 (M+H)+. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.22 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 8.11 (s, 1H), 7.52 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 5.33 (dd, J = 6.8, 3.8 Hz, 1H), 4.62 (s, 2H), 4.50-4.35 (m, 2H), 3.81 (t, J = 6.3 Hz, 2H), 3.62 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 2.89-2.85 (m, 1H), 2.04-1.98 (m, 1H), 1.97-1.84 (m, 3H), 1.73-1.66 (m, 1H), 1.42 (t, J = 7.2 Hz, 3H), 0.96 (s, 9H), 0.83 (d, J = 6.9 Hz, 6H), 0.17 (s, 3H), 0.00 (s, 3H) ppm.
Figure pct00614
에틸 2-[(5R,7R)-2,2,3,3-테트라메틸-7-(프로판-2-일)-4,9-디옥사-8-아자-3-실라테트라데크-13-인-5-일]-1,3-티아졸-4-카복실레이트 (19c)
19b의 제조와 동일한 과정을 사용하여, 화합물 19c(3.4 g, 94% 조 수율, TFA 염으로서)를 수득하였다. ESI m/z: 469 (M + H)+. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.11 (s, 1H), 5.80 (s, 1H), 5.33 (dd, J = 7.1, 3.5 Hz, 1H), 4.49-4.36 (m, 2H), 3.75 (t, J = 6.2 Hz, 2H), 2.84 (ddd, J = 10.0, 4.0, 1.7 Hz, 1H), 2.27 (td, J = 7.2, 2.6 Hz, 2H), 2.05-1.98 (m, 1H), 1.96 (t, J = 2.6 Hz, 1H), 1.86 (ddd, J = 14.6, 7.1, 1.8 Hz, 1H), 1.82-1.76 (m, 2H), 1.72-1.65 (m, 1H), 1.41 (t, J = 7.1 Hz, 3H), 0.97 (s, 9H), 0.82 (dd, J = 6.9, 2.3 Hz, 6H), 0.16 (s, 3H), 0.00 (s, 3H) ppm.
19e의 합성을 도 11에 도시하였다.
메틸 2-(디메톡시메틸)티아졸-4-카복실레이트 (T2)(도 11)
아세토니트릴(15 L) 중의 화합물 T1(0.57 ㎏, 2.7 mol, Rf = 0.5 및 0.6, PE:EA = 2:1, 20% PMA)의 용액에 실온에서 이산화 망간(2.5 ㎏)을 가하고, 혼합물을 60℃로 가온하고, 6시간 동안 교반하였다. 이어서 혼합물을 셀라이트 패드를 통해 여과하고 농축시켰다. 화합물 T2(0.65 ㎏, Rf = 0.55 및 0.65, PE:EA = 2:1, UV)를 황색 고체로서 수득하고 추가의 정제 없이 사용하였다.
메틸 2-포름일티아졸-4-카복실레이트 (T3)
아세톤(15 L) 중의 화합물 T2(0.65 ㎏, 3.0 mol, Rf = 0.55 및 0.65, PE:EA = 2:1, UV)의 용액에 실온에서 농 하이드로클로라이드(2.0 L, 6 N)를 가하고, 혼합물을 가온 환류시키고 1h 동안 교반하였다. 이어서 혼합물을 rt로 냉각시키고 감압하에서 농축시켰다. 조 물질을 에틸 아세테이트에 용해시키고 유기상을 포화된 수성 나트륨 비카보네이트 및 염수로 세척하고, 황산 마그네슘상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔사를 석유 에테르 중의 50% 에틸 아세테이트로부터 재결정시켜 화합물 T3(66 g, 3 단계에 걸쳐 총 14% 수율, Rf = 0.7, PE:EA = 2:1, UV)를 황색 고체로서 제공하였다.
메틸 2-((R)-3-((S)-3급-부틸설피닐이미노)-1-하이드록시-4-메틸펜틸)티아졸-4-카복실레이트 (T6)
(S)-2-메틸프로판-2-설핀아미드 T4(7.3 ㎖, 68 mmol)를 100 ㎖ 테트라하이드로피란(THF)에 용해시키고, 여기에 Ti(OEt)4(27 ㎖, 130 mmol) 및 3-메틸-2-부탄온(8 g, 41 mmol)을 rt에서 가하였다. 반응 혼합물을 밤새 환류시키고, 이어서 냉각시키고 염수 용액에 가하였다. 생성 혼합물을 여과하고 케이크를 EtOAc로 세척하였다. 유기상을 농축시켜 잔사를 제공하고 실리카젤 컬럼 크로마토그래피(DCM:EtOAc, 4:1)를 수행하여 오일로서 설핀이민 T5(9.5 g, 37 mmol, 75%)를 제공하였다(참고문헌 US9226974, 2016)
에틸 에테르(0.63 L) 중의 디이소프로필아민(27 ㎖, 0.27 mol)의 0.5 M 용액을 0℃로 냉각시키고 상기 용액에 n-부틸리튬(0.12 L, 0.29 mol, 헥산 중 2.5 M 용액)을 가하였다. 용액을 0℃에서 20분간 교반하고 이어서 -78℃로 냉각시켰다. 에틸 에테르(0.55 L) 중의 설핀아미드 T5(50 g, 0.27 mol)의 용액을 서서히 가하고, 반응 혼합물을 -78℃에서 추가로 30분간 교반하고, 여기에 에틸 에테르(150 ㎖) 중의 클로로티타늄 트리이소프로폭시드(0.14 ㎏, 0.53 mol)의 용액을 가하고, 반응 혼합물을 추가로 20분간 -78℃에서 교반하였다. 이어서 혼합물에 T3(29 g, 0.17 mol)을 한 번에 가하고, 혼합된 용액을 -78℃에서 12h 동안 교반하였다. 이어서 용액을 -78℃에서 THF/AcOH(150 ㎖, v/v = 4:1)의 용액으로 중화시키고, 이어서 rt로 가온시켰다. 수(250 ㎖)로 희석 후에, 생성 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고, 필터 케이크를 에틸 아세테이트로 철저히 세척하였다. 합한 여액을 염수로 세척하고, 황산 마그네슘상에서 건조시키고, 여과하고, 감압하에서 농축시켰다. 잔사를 실리카젤 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제시켜 황색 오일로서 화합물 T6(50 g, 79%; Rf = 0.6, PE:EA = 1:1, UV)를 제공하였다.
메틸 2-((1R,3R)-3-((S)-1,1-디메틸에틸설핀아미도)-1-하이드록시-4-메틸펜틸)티아졸-4-카복실레이트 (T7)
-78℃에서 THF(0.52 L) 중의 이민 T6(62 g, 0.17 mol)의 0.4 M 용액에 티타늄 에톡사이드(76 ㎖, 0.33 mol)를 가한 다음 나트륨 보로하이드라이드(26 g, 0.69 mol)를 가하고, 용액을 30분에 걸쳐 -45℃로 서서히 가온시켰다. 반응 혼합물을 -45℃에서 12h 동안 교반하고, 이어서 반응의 내부 온도를 기체 발포가 멈출 때까지 -30℃아래에서 유지시키면서 메탄올(125 ㎖)로 서서히 희석하였다. 용액을 rt로 가온시키고 수(1.4 L)로 더욱 급냉시켰다. 생성 현탁액을 셀라이트 패드를 통해 여과하고, 필터 케이크를 에틸 아세테이트로 철저히 세척하였다. 합한 여액을 염수로 1회 세척하고, 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔사를 실리카젤 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제시켜 황색 오일로서 T7(31 g, 50% 수율, Rf = 0.4, PE:EA = 1:1, UV)을 제공하였다.
메틸 2-((1R,3R)-3-아미노-1-하이드록시-4-메틸펜틸)티아졸-4-카복실레이트 하이드로클로라이드 (T8)
메탄올(0.50 L) 중의 화합물 T7(31 g, 86 mmol)의 용액에 디옥산(1.0 L, 4.0 N) 중의 하이드로클로라이드를 가하였다. 반응 혼합물을 rt에서 3시간 동안 교반하고 이어서 휘발성 물질을 진공하에서 제거하여 황색 고체로서 조 생성물 T8을 제공하고, 이를 정제 없이 다음 단계에 사용하였다(문헌[J. Am. Chem. Soc. 2006, 128, 16018-16019]을 참조하시오).
메틸 2-((1R,3R)-3-(3급-부톡시카보닐아미노)-1-하이드록시-4-메틸펜틸)티아졸-4-카복실레이트 (T9)
0℃에서 THF(1.5 L) 중의 아미노 알콜 T8(39 g, 86 mmol)의 용액에 트리에틸아민(21 g, 0.21 mol) 및 디-3급-부틸 디카보네이트(21 g, 98 mmol)를 가하였다. 반응 혼합물을 rt로 가온시키고 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고 여액을 농축시켜 백색 고체로서 화합물 T9(34 g, Rf = 0.6, PE:EA = 2:1, UV)를 제공하고, 이를 정제 없이 다음 단계에 사용하였다.
메틸 2-((5R,7R)-7-이소프로필-2,2,3,3,11,11-헥사메틸-9-옥소-4,10-디옥사-8-아자-3-실라도데칸-5-일)티아졸-4-카복실레이트 (T10)
DMF(450 ㎖) 중의 T9(34 g, 86 mmol, Rf = 0.3, PE:EA = 3:1, UV)의 용액을 0℃로 냉각시키고, 여기에 이미다졸(15 g, 0.22 mol) 및 3급-부틸디메틸실릴 클로라이드(32 g, 0.22 mol)를 가하였다. 이어서 반응 혼합물을 rt로 가온시키고, 밤새 교반하였다. 생성 혼합물을 염수(1.0 L)로 급냉시키고 수성층을 에틸 아세테이트로 추출하였다. 합한 유기 용액을 염수로 세척하고, 황산 마그네슘상에서 건조시키고, 여과하고 감압하에서 농축시켰다. 잔사를 실리카젤 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제시켜 무색 오일로서 화합물 T10(32 g, 3 단계에 걸쳐 78% 수율, Rf = 0.7, PE:EA = 3:1, UV)을 제공하였다.
메틸 2-((1R,3R)-3-아미노-1-(3급-부틸디메틸실릴옥시)-4-메틸펜틸)티아졸-4-카복실레이트 (T11)
DCM(800 ㎖) 중의 T10(32 g, 68 mmol)의 용액에 0℃에서 TFA(160 ㎖)를 적가하였다. 생성 혼합물을 0℃에서 5시간 동안 교반하고, 이어서 휘발성 물질을 감압하에서 제거하였다. 잔사를 DCM에 용해시키고 나트륨 비카보네이트로 세척하였다. 유기 용액을 황산 나트륨상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔사 T11(26 g, Rf = 0.3, PE:EA = 3:1, UV)를 정제 없이 다음 단계에 사용하였다.
Figure pct00615
메틸 2-((1R,3R)-1-(3급-부틸디메틸실릴옥시)-3-(헥실아미노)-4-메틸펜틸)티아졸-4-카복실레이트 (19d)
하기 19e와 유사한 과정에 따라, 화합물 T11a(4.2 g, 9.9 mmol) 및 카프로알데히드를 사용하여 황색 오일로서 화합물 19d(3.0 g, 66% 수율)를 제공하였다.
메틸 2-((1R,3R)-1-(3급-부틸디메틸실릴옥시)-3-(헥스-5-이닐아미노)-4-메틸펜틸)티아졸-4-카복실레이트 (19e)
DCM(0.75 L) 중의 헥스-5-인-1-올 30(23 g, 0.23 mol)의 용액에 피리디늄 클로로크로메이트(PCC, 0.10 ㎏, 0.47 mol)를 조금씩 나누어 가하고 반응 혼합물을 rt에서 밤새 교반하였다. 이어서 반응 혼합물을 디에틸 에테르로 희석하고 셀라이트를 통해 여과하였다. 여액을 농축시키고 증류시켜 목적하는 헥스-5-인알 31(12 g, 52% 수율)을 제공하였다. DEM(0.30 L) 중의 화합물 T11(26 g, 67 mmol, Rf = 0.3-0.5, PE:EA = 1:1, UV)의 용액에 0℃에서 헥스-5-인알(6.5 g, 67 mmol) 및 나트륨 트리아세톡시보로하이드라이드(43 g, 0.20 mol)를 가하였다. 반응 혼합물을 rt에서 6시간 동안 교반하고, 이어서 나트륨 비카보네이트로 급냉시켰다. 혼합물을 DCM으로 추출하고 유기 용액을 황산 나트륨상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에서 농축시켰다. 조 생성물을 실리카젤 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제시켜 황색 오일로서 화합물 19e(24 g, 3 단계에 걸쳐 78% 수율, Rf = 0.3-0.5, PE:EA = 1:1, UV)를 제공하였다.
(2S,3S)-2-아지도-3-메틸펜탄산 (21)(도 12)
증류 H2O(4.5 ㎖) 및 CH2Cl2(7.5 ㎖) 중의 나트륨 아지드(1.78 g, 27.45 mmol)의 용액을 빙욕에서 냉각시켰다. 트리플산 무수물(0.93 ㎖, 5.55 mmol)을 교반하면서 5분에 걸쳐 서서히 가하고 생성 용액을 2h 동안 교반하였다. CH2Cl2 상을 분리시키고 수성 부분을 CH2Cl2(2 x 3.75 ㎖)로 추출하였다. 트리플릴 아지드를 함유하는 유기 분획들을 모으고, 포화된 Na2CO3로 1회 세척하고 추가의 정제 없이 다음 단계에 사용하였다. (2S,3S)-2-클로로-3-메틸-N-발레르산(20, 366 ㎎, 2.79 mmol)을 증류 H2O(9 ㎖) 및 CH3OH(18 ㎖) 중의 K2CO3(577.5 ㎎, 4.19 mmol) 및 CuSO4 오수화물(6.98 ㎎, 27.9 μmol)과 혼합하였다. 혼합물에 CH2Cl2(15 ㎖) 중의 트리플산 아지드를 가하고 생성 혼합물을 주변 온도에서 밤새 교반하였다. 유기 용매를 진공하에서 제거하고 수성 슬러리를 H2O(50 ㎖)로 희석하고, 후속적으로 농 HCl로 pH 6으로 산성화시키고, 이어서 pH 6.2 포스페이트 완충제(0.25 M, 50 ㎖)로 희석하고, EtOAc로 추출하여(4회) 설폰아미드 부산물을 제거하였다. 이어서 수성상을 농 HCl로 pH 2로 산성화하고 이어서 EtOAc로 추출하였다(3회). EtOAc 추출물을 합하고, MgSO4로 건조시키고, 이어서 증발 건조시켜 옅은 오일로서 조 화합물 21(390 ㎎, 89% 수율)을 제공하였다. 21을 추가의 정제 없이 사용하였다. 21에 대해서: 1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 3.84 (d, J = 5.8 Hz, 1H), 2.15-1.95 (m, 2H), 1.70-1.55 (m, 1H), 1.45-1.25 (m, 1H), 1.04 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 0.94 (t, J = 7.4 Hz, 3H) ppm.
(2S,3S)-2-아지도-3-메틸펜타노일 클로라이드 (22)(도 12)
염화 옥살릴(2.44 ㎖, 28.0 mmol) 및 DMF(0.464 ㎖, 5.97 mmol)를 헥산 중의 아지도 이소류신 21(0.938 g, 5.97 mmol)의 0.024 M 용액에 가하였다. 반응 혼합물을 rt에서 1h 동안 교반하고, 여과하고 진공하에서 농축시켰다. 산 클로라이드 22를 단리하고 추가의 정제 없이 바로 사용하였다.
Figure pct00616
에틸 2-[(1R,3R)-3-[(2S,3S)-2-아지도-N-(헥실옥시)-3-메틸펜탄아미도]-1-[(3급-부틸디메틸실릴)옥시]-4-메틸펜틸]-1,3-티아졸-4-카복실레이트 (23a)
CH2Cl2(37.3 ㎖) 중의 19a(1.46 g, 3.0 mmol, 1.0 당량)의 0.10 M 용액을 0℃로 냉각시켰다. 용액에 디이소프로필에틸아민(3.25 ㎖, 5.0 당량) 및 산 클로라이드 22(1.6 당량)를 가하였다. 반응 혼합물을 rt로 가온시키고 18h 동안 교반하였다. 이어서 염수(50 ㎖)를 반응 혼합물에 가하고, 수성층을 EtOAc(2 x 75 ㎖)로 추출하였다. 합한 유기 부분을 건조시키고, 여과하고 진공하에서 농축시켰다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(1:1 헥산/EtOAc)에 의해 정제시켜 무색 오일로서 23a(1.31 g, 70%)를 제공하였다. ESI m/z: 626 (M + H)+. 1H NMR(400 MHz, CDCl3): 8.08 (s, 1H), 4.35 (q, 2H, J = 7.2 Hz), 4.23 (t, 2H, J = 7.2 Hz), 3.83 (q, 1H, J = 6.4 Hz), 3.68 (d, 1H, J = 9 Hz), 2.24 (m, 1H), 2.09 (m, 1H), 1.89 (m, 2H), 1.75 (m, 1H), 1.58 (m, 2H), 1.35 (m, 5H), 1.26 (m, 6H), 0.95 (m, 24H), 0.09 (s, 3H), -0.15 (s 3H) ppm.
Figure pct00617
에틸 2-((8R,10R)-7-((2S,3S)-2-아지도-3-메틸펜타노일)-8-이소프로필-12,12,13,13-테트라메틸-1-(4-니트로페닐)-2,6,11-트리옥사-7-아자-12-실라테트라데칸-10-일)티아졸-4-카복실레이트 (23b)
23a의 제조와 유사한 반응 조건을 사용하여, 화합물 23b(310 ㎎, 63%)를 400 ㎎의 화합물 19b로부터 수득하였다. ESI m/z: 735(M+H)+.
Figure pct00618
에틸 2-[(1R,3R)-3-[(2S,3S)-2-아지도-3-메틸-N-(펜트-4-인-1-일옥시)펜탄아미도]-1-[(3급-부틸 디메틸실릴)옥시]-4-메틸펜틸]-1,3-티아졸-4-카복실레이트 (23c)
23b의 제조와 유사한 반응 조건을 사용하여, 화합물 23c(2.3 g, 60%)를 3 g의 19c로부터 수득하였다. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.04 (s, 1H), 5.05 (dd, J = 25.8, 7.8 Hz, 1H), 4.40-4.22 (m, 4H), 4.09-4.03 (m, 1H), 3.69 (t, J = 10.0 Hz, 1H), 2.33-2.28 (m, 2H), 2.27-2.20 (m, 1H), 2.10-2.01 (m, 1H), 1.97-1.86 (m, 3H), 1.81 (dd, J = 12.1, 6.2 Hz, 2H), 1.76-1.64 (m, 1H), 1.33 (t, J = 7.1 Hz, 3H), 1.27-1.23 (m, 1H), 0.93-0.86 (m, 21H), 0.00 (s, 3H), -0.07 (s, 3H) ppm.
Figure pct00619
메틸 2-((1R,3R)-3-((2S,3S)-2-아지도-N-헥실-3-메틸펜탄아미도)-1-(3급-부틸디메틸실릴옥시)-4-메틸펜틸)티아졸-4-카복실레이트 (23d)
23a의 제조와 유사한 반응 조건을 사용하여, 화합물 23d(4.1 g, 수율 92%)를 3.3 g의 화합물 19d로부터 수득하였다.
Figure pct00620
메틸 2-((1R,3R)-3-((2S,3S)-2-아지도-N-(헥스-5-이닐)-3-메틸펜탄아미도)-1-(3급-부틸디메틸실릴옥시)-4-메틸펜틸)티아졸-4-카복실레이트 (23e)
23a의 제조와 유사한 반응 조건을 사용하여, 화합물 23e(33 g, 수율 92%, Rf = 0.95, PE:EA = 3:1, UV)를 27 g의 화합물 19e로부터 무색 오일로서 수득하였다.
Figure pct00621
에틸 2-((5R,7R)-7-이소프로필-2,2,3,3-테트라메틸-8-((2R,3S)-3-메틸-2-((S)-1-메틸피페리딘-2-일)펜타노일)-4,9-디옥사-8-아자-3-실라펜타데칸-5-일)티아졸-4-카복실레이트 (24a)
EtOAc(50 ㎖) 중의 아지드 23a(2.50 g, 3.99 mmol)의 용액에 10% Pd/C(1.38 ㎎)를 가하였다. 이어서 반응 혼합물을 수소 분위기하에서 27h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라이트 플러그를 통해 여과하고, 필터 패드를 EtOAc로 세척하였다. 합한 여액을 정제 없이 다음 단계에 바로 사용하였다. ESI m/z 600.4(M+H)+.
Figure pct00622
에틸 2-((8R,10R)-7-((2S,3S)-2-아지도-3-메틸펜타노일)-8-이소프로필-12,12,13,13-테트라메틸-1-(4-니트로페닐)-2,6,11-트리옥사-7-아자-12-실라테트라데칸-10-일)티아졸-4-카복실레이트 (24b)
THF(10 ㎖) 및 수(5 ㎖) 중의 화합물 23b(300 ㎎, 0.41 mmol) 및 Ph3P(300 ㎎, 1.15 mmol)의 혼합물을 rt에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 DCM(100 ㎖)으로 희석하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하였다. 여액을 진공하에서 농축시키고 플래시 컬럼 크로마토그래피(실리카젤 20 g, DCM 내지 DCM/MeOH = 95/5)에 의해 정제시켜 무색 오일로서 화합물 24b(210 ㎎, 72%)를 제공하였다. ESI m/z: 709 (M+H)+. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.17 (d, J = 8.6 Hz, 2H), 8.09 (s, 1H), 7.46 (d, J = 8.6 Hz, 2H), 5.11-5.09 (m, 1H), 4.60 (s, 2H), 4.35 (m, 4H), 4.11 (dd, J = 14.6, 6.3 Hz, 1H), 3.68 (t, J = 6.2 Hz, 2H), 3.53 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 2.35-2.29 (m, 1H), 2.06-1.94 (m, 4H), 1.77-1.71 (m, 2H), 1.39 (t, J = 7.1 Hz, 3H), 1.16-1.07 (m, 1H), 0.93 (m, 23H), 0.13 (s, 3H), -0.10 (s, 3H) ppm.
Figure pct00623
에틸 2-[(1R,3R)-3-[(2S,3S)-2-아미노-3-메틸-N-(펜트-4-인-1-일옥시)펜탄아미도]-1-[(3급-부틸 디메틸실릴)옥시]-4-메틸펜틸]-1,3-티아졸-4-카복실레이트 (24c)
24b의 제조와 유사한 반응 조건을 사용하여, 화합물 24c(1.2 g, 57%)를 2.2 g의 화합물 23c로부터 수득하였다. ESI m/z: 582 (M + H)+. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.11 (s, 1H), 5.10 (d, J = 7.1 Hz, 1H), 4.50-4.00 (m, 5H), 3.54 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 2.35-2.20 (m, 3H), 2.05-1.90 (m, 5H), 1.90-1.83 (m, 2H), 1.80-1.70 (m, 2H), 1.40 (t, J = 7.1 Hz, 3H), 1.40-0.91 (m, 23H), 0.13 (s, 3H), -0.10 (s, 3H) ppm.
Figure pct00624
메틸 2-((1R,3R)-3-((2S,3S)-2-아미노-N-헥실-3-메틸펜탄아미도)-1-(3급-부틸디메틸실릴옥시)-4-메틸펜틸)티아졸-4-카복실레이트 (24d)
화합물 24a의 제조와 유사한 반응 조건을 사용하여, 조 화합물 24d를 1.6 g의 화합물 23d로부터 수득하였다. 조 생성물 24d를 정제 없이 다음 단계에 사용하였다.
Figure pct00625
에틸 2-((1R,3R)-3-((2S,3S)-2-아미노-N-(헥스-5-이닐)-3-메틸펜탄아미도)-1-(3급-부틸디메틸실릴옥시)-4-메틸펜틸)티아졸-4-카복실레이트 (24e)
화합물 24a의 제조와 유사한 반응 조건을 사용하여, 조 화합물 24e를 24 g의 화합물 23e로부터 수득하였다. 조 생성물 24e를 정제 없이 다음 단계에 사용하였다.
Figure pct00626
에틸 2-[(1R,3R)-1-[(3급-부틸디메틸실릴)옥시]-3-[(2S,3S)-N-(헥실옥시)-3-메틸-2-{[(2R)-1-메틸피페리딘-2-일]포름아미도}펜탄아미도]-4-메틸펜틸]-1,3-티아졸-4-카복실레이트 (26a)
EtOAc(30 ㎖, 활성화된 알루미나의 플러그를 통해 여과됨) 중의 화합물 25(1.72 g, 12 mmol)의 0.4 M 용액에 펜타플루오로페놀(2.43 g, 13.2 mmol, 1.1 당량) 및 DCC(2.72 g, 13.2 mmol, 1.1 당량)를 가하였다. 반응 혼합물을 rt에서 21h 동안 교반하고 이어서 여과하고, 잔사를 EtOAc(10 ㎖)로 세척하였다. 활성화된 에스테르를 정제 또는 농축 없이 바로 사용하였다. 활성화된 에스테르(0.3 M, 40 ㎖)의 용액을 상기에서 수득된 EtOAc(50 ㎖, 4.0 mmol) 중의 24a의 용액에 가하였다. 생성 혼합물을 rt에서 밤새 교반하였다. 휘발성 물질을 진공하에서 제거하고 잔사를 플래시 크로마토그래피(EtOAc 중의 0-10% 메탄올)에 의해 정제시켜 무색 오일로서 화합물 26a(2.0 g, 69% 수율)를 제공하였다. ESI m/z: 725(M+H)+.
Figure pct00627
에틸 2-((8R,10R)-8-이소프로필-12,12,13,13-테트라메틸-7-((2S,3S)-3-메틸-2-((R)-1-메틸 피페리딘-2-카복스아미도)펜타노일)-1-(4-니트로페닐)-2,6,11-트리옥사-7-아자-12-실라테트라데칸-10-일)티아졸-4-카복실레이트 (26b)
무수 염화 메틸렌(25 ㎖) 중의 화합물 25(185 ㎎, 1.3 mmol) 및 펜타플루오로페놀(357 ㎎, 1.9 mmol)의 용액에 0℃에서 염화 메틸렌(1.0 ㎖) 중의 DIC(245 ㎎, 1.9 mmol)의 용액을 주사기로 적가하였다. 생성 용액을 추가로 1시간 동안 교반하였다. 이어서 용액을 여과하고 여액을 농축시켜 조 펜타플루오로페닐 에스테르(400 ㎎)를 제공하였다. ESI m/z: 310.0(M+H)+. 조 펜타플루오로페닐 에스테르를 무수 DCM(11 ㎖)에 용해시켰다. 용액에 24b(400 ㎎, 565 μmol) 및 DIPEA(275 ㎎, 889 μmol)를 가하였다. 생성 용액을 rt에서 밤새 교반하였다. 반응 용액을 농축 건조시키고 잔사를 플래시 컬럼 크로마토그래피(EtOAc/PE = 1/2 이어서 2/1로 용출)에 의해 정제시켜 담황색 고체로서 26b(320 ㎎, 2 단계로 68%)를 제공하였다. ESI m/z: 834.4 (M + H)+. 1H NMR (DMSOd6, 500 MHz) δ 8.99 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 8.48 (s, 1H), 8.17(d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.51 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 4.90 (d, J = 9.5 Hz, 1H), 4.75 (t, J = 9.0 Hz, 1H), 4.58 (s, 2H), 4.38-4.34 (m, 1H), 4.28 (q, J = 7.5 Hz, 2H), 4.16-4.06 (m, 3H), 3.82-3.77 (m, 1H), 3.72-3.67 (m, 1H), 3.64-3.60 (m, 1H), 3.36-3.34 (m, 1H), 3.13-3.06 (m, 1H), 2.66 (d, J = 4.0 Hz, 3H), 2.29-2.23 (m, 1H), 2.07-1.96 (m, 3H), 1.94-1.87 (m, 3H), 1.81-1.78 (m, 2H), 1.68-1.57 (m, 2H), 1.47-1.39 (m, 2H), 1.29(t, J = 7.0 Hz, 3H), 1.10-1.05 (m, 1H), 0.93-0.89 (m, 14H), 0.85 (d, J = 6.0 Hz, 3H), 0.81 (t, J = 7.5 Hz, 3H), 0.08 (s, 3H), -0.16 (s, 3H) ppm.
Figure pct00628
에틸 2-[(1R,3R)-1-[(3급-부틸디메틸실릴)옥시]-4-메틸-3-[(2S,3S)-3-메틸-2-{[(2R)-1-메틸 피페리딘-2-일]포름아미도}-N-(펜트-4-인-1-일옥시)펜탄아미도]펜틸]-1,3-티아졸-4-카복실레이트 (26c)
26b의 제조와 유사한 반응 조건을 사용하여, 화합물 26c(1.7 g, 78%)를 1.8 g의 화합물 24c로부터 수득하였다. ESI m/z: 707 (M + H)+. 1H NMR (500 MHz, 메탄올 d4 ) δ 8.38 (s, 1H), 5.03 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 4.85 (t, J = 6.3 Hz, 1H), 4.40 (q, J = 7.5 Hz, 3H), 4.13-4.07 (m, 1H), 4.03-3.86 (m, 2H), 3.52-3.45 (m, 1H), 3.35-3.29 (m, 1H), 2.87 (s, 3H), 2.51-2.35 (m, 3H), 2.25 (t, J = 2.4 Hz, 1H), 2.23-2.15 (m, 1H), 2.10-1.53 (m, 11H), 1.40 (t, J = 7.1 Hz, 3H), 1.27-1.19 (m, 1H), 1.08-0.94 (m, 12H), 0.94 (s, 9H), 0.13 (s, 3H), -0.16 (s, 3H) ppm.
Figure pct00629
에틸 2-((5R,7R)-7-이소프로필-2,2,3,3-테트라메틸-8-((2S,3S)-3-메틸-2-((R)-1-메틸피페리딘-2-카복스아미도)펜타노일)-4,9-디옥사-8-아자-3-실라테트라데칸-5-일)티아졸-4-카복실레이트 (26f)
메탄올(5 ㎖) 중의 화합물 26c(20 ㎎, 28 μmol)의 용액에 목탄상 5% 팔라듐(5 ㎎)을 가하고 혼합물을 탈기시키고 수소로 3회 역충전하였다. 생성 혼합물을, 삼중 결합이 완전히 환원될 때까지(LCMS에 의해 모니터됨) 수소 분위기하에 rt에서 6시간 동안 교반하였다. 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고 셀라이트를 메탄올로 세척하였다(3회). 합한 여액을 진공하에서 농축시켜 백색 고체로서 화합물 26f(18 ㎎, 90% 조 수율)를 제공하고, 이를 정제 없이 다음 단계에 사용하였다. ESI m/z: 712(M+H)+.
Figure pct00630
메틸 2-((3S,6R,8R)-3-2급-부틸-5-헥실-6-이소프로필-10,10,11,11-테트라메틸-1-((R)-1-메틸피페리딘-2-일)-1,4-디옥소-9-옥사-2,5-디아자-10-실라도데칸-8-일)티아졸-4-카복실레이트 (26d)
상기 수득된 조 물질 24d를 DCM(27 ㎖)에 용해시켰다. 용액에 HOBt(0.40 g, 3.0 mmol) 및 화합물 25(0.42 g, 2.34 mmol)를 가하였다. 반응 혼합물을 0℃로 냉각시킨 후에, EDCI(0.56 g, 2.92 mmol) 및 DIPEA(0.49 ㎖, 2.813 mmol)를 연속적으로 가하였다. 생성 혼합물을 rt에서 밤새 교반하였다. 휘발성 물질을 제거하고 잔사를 에틸 아세테이트 및 수성 나트륨 비카보네이트에 의해 분리시켰다. 수성 용액을 에틸 아세테이트로 추출하고 합한 유기 용액을 황산 나트륨상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켜 조 물질 26d(1.7 g, 23d로부터 89% 수율)를 제공하고, 이를 정제 없이 다음 단계에 사용하였다.
Figure pct00631
메틸 2-((3S,6R,8R)-3-2급-부틸-5-(헥스-5-이닐)-6-이소프로필-10,10,11,11-테트라메틸-1-((R)-1-메틸피페리딘-2-일)-1,4-디옥소-9-옥사-2,5-디아자-10-실라도데칸-8-일)티아졸-4-카복실레이트 (26e)
화합물 26d의 제조와 유사한 반응 조건을 사용하여, 화합물 26e(39 g, 수율, Rf = 0.6, DCM:메탄올 = 10:1, UV)를 53 g의 화합물 24e로부터 수득하였다.
Figure pct00632
에틸 2-[(1R,3R)-3-[(2S,3S)-N-(헥실옥시)-3-메틸-2-{[(2R)-1-메틸피페리딘-2-일]포름아미도} 펜탄아미도]-1-하이드록시-4-메틸펜틸]-1,3-티아졸-4-카복실레이트 (27a)
THF(40 ㎖) 중의 26a(2.0)의 용액에 TBAF(10 ㎖, THF 중의 1 M)를 가하고 생성 용액을 rt에서 16h 동안 교반하고, 이어서 농축시켰다. 잔사를 HPFC 정제(에틸 아세테이트 중의 0-5% 메탄올)에 의해 정제시켜 27a(1.5 g, 75% 수율)를 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, 메탄올 d4 ) δ 8.33 (s, 1H), 4.88 (m, 2H), 4.40 (q, J = 7Hz, 2H), 4.33 (t, J = 7.6Hz, 1H), 4.20 (m, 1H), 4.02 (m, 1H), 3.0 (m, 2H), 2.65 (m, 1H), 2.36 (s, 3H), 2.32 (m, 1H), 2.12, (m, 1H), 2.0 (m, 2H), 1.90 (m, 2H), 1.62-1.70 (m, 6H), 1.5 (m, 2H), 1.40 (t, J = 7 Hz, 3H), 1.30-1.38 (m, 8H), 1.0 (m, 9H), 0.95 (m, 6H) ppm.
Figure pct00633
에틸 2-((1R,3R)-1-하이드록시-4-메틸-3-((2S,3S)-3-메틸-2-((R)-1-메틸피페리딘-2-카복스아미도)-N-(3-(4-니트로벤질옥시)프로폭시)펜탄아미도)펜틸)티아졸-4-카복실레이트 (27b)
DMSO(2.5 ㎖) 중의 화합물 26b(130 ㎎, 240 μmol) 및 세슘 플루오라이드(109 ㎎, 720 mmol)의 혼합물을 rt에서 2시간 동안 교반하였다. 이어서 용액을 RP 컬럼 크로마토그래피(수 중 0-100% 아세토니트릴)에 의해 정제시켜 담황색 고체로서 화합물 27b(140 ㎎, 수율 81%)를 제공하였다. ESI m/z: 720.3 (M + H)+. 1H NMR (500 MHz, DMSO d6 ) δ 8.42 (s, 1H), 8.16 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.59 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.52 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 6.37 (br s, 1H), 4.74 (t, J = 9.0 Hz, 1H), 4.66 (s, 2H), 4.63 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 4.31-4.26 (m, 3H), 4.20-4.15 (m, 1H), 4.01 (br s, 1H), 3.74-3.62 (m, 2H), 2.83-2.80 (m, 1H), 2.47-2.44 (m, 2H), 2.07 (s, 3H), 1.98-1.92 (m, 4H), 1.82-1.77 (m, 2H), 1.59-1.33 (m, 6H), 1.29 (t, J = 7.0 Hz, 3H), 1.14-1.04 (m, 2H), 0.86 (d, J = 6.5 Hz, 9H), 0.79 (t, J = 7.5 Hz, 3H) ppm. 키랄 SFC > 99% (AD-H, AS-H, OJ-H, 및 OD-H), Rt: 2.04 min (AD-H), 4.39 min (AS-H), 3.56 min (OD-H), 및 3.72 min (OJ-H).
Figure pct00634
에틸 2-((1R,3R)-1-하이드록시-4-메틸-3-((2S,3S)-3-메틸-2-((R)-1-메틸피페리딘-2-카복스아미도)-N-(펜트-4-인일옥시)펜탄아미도)펜틸)티아졸-4-카복실레이트 (27c)
27b의 제조와 유사한 과정을 사용하여, 화합물 27c(43 ㎎, 86% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. ESI m/z: 593(M+H)+.
Figure pct00635
에틸 2-((1R,3R)-1-하이드록시-4-메틸-3-((2S,3S)-3-메틸-2-((R)-1-메틸피페리딘-2-카복스아미도)-N-(펜틸옥시)펜탄아미도)펜틸)티아졸-4-카복실레이트 (27f)
27a의 제조와 유사한 과정을 사용하여, 화합물 27f(13 ㎎, 86% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. ESI m/z: 597(M+H)+.
Figure pct00636
메틸 2-((1R,3R)-3-((2S,3S)-N-헥실-3-메틸-2-((R)-1-메틸피페리딘-2-카복스아미도)펜탄아미도)-1-하이드록시-4-메틸펜틸)티아졸-4-카복실레이트 (27d)
27a의 제조와 유사한 과정을 사용하여, 조 물질 27d(1.8 g)를 점성 황색 오일로서 수득하고, 이를 정제 없이 다음 단계에 사용하였다.
Figure pct00637
메틸 2-((1R,3R)-3-((2S,3S)-N-(헥스-5-이닐)-3-메틸-2-((R)-1-메틸피페리딘-2-카복스아미도)펜탄아미도)-1-하이드록시-4-메틸펜틸)티아졸-4-카복실레이트 (27e)
27a의 제조와 유사한 과정을 사용하여, 조 화합물 27e(44 g, Rf = 0.55 및 0.5, DCM:메탄올 = 10:1, UV)를 수득하고, 이를 정제 없이 사용하였다.
중간체 II에 대한 일반적인 과정
THF(15-20 ㎎/㎖) 중의 27(1.0 당량)의 용액에 수성 수산화 리튬(0.5 M, VH2O/VTHF = 1)을 가하고 혼합물을, 가수분해가 LCMS에 의해 모니터되는 바와 같이 완료될 때까지 rt에서 10시간 동안 교반하였다. 이어서 반응 혼합물을 아세트산으로 pH 3으로 산성화하고 1/3 부피로 농축시켰다. 잔류 수성 용액을 Prep-HPLC(암모늄 비카보네이트 시스템)에 의해 직접 정제시켜 백색 고체로서 중간체 IIa, b, c, e(66-90% 수율)를 제공하였다.
Figure pct00638
2-((1R,3R)-3-((2S,3S)-N-(헥실옥시)-3-메틸-2-((R)-1-메틸피페리딘-2-카복스아미도)펜탄아미도)-1-하이드록시-4-메틸펜틸)티아졸-4-카복실산 (IIa)
중간체 II에 대한 일반적인 과정에 따라, IIa(0.25 g, 66% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. ESI m/z: 583 (M + H)+. 1H NMR (400 MHz, 메탄올 d4 ) δ 8.05 (s, 1H), 4.77 (d, J = 6.9 Hz, 1H), 4.34-4.11 (m, 2H), 3.88 (d, J = 10.1 Hz, 1H), 3.73 (t, J = 9.8 Hz, 1H), 3.46 (d, J = 12.9 Hz, 1H), 2.99 (t, J = 11.9 Hz, 1H), 2.74 (s, 3H), 2.74-2.62 (m, 1H), 2.24-2.15 (m, 2H), 2.02-1.86 (m, 4H), 1.83-1.71 (m, 6H), 1.40-1.50 (m, 2H), 1.23-1.4 (m, 6H), 1.06-0.90 (m, 17H) ppm.
Figure pct00639
2-((1R,3R)-1-하이드록시-4-메틸-3-((2S,3S)-3-메틸-2-((R)-1-메틸피페리딘-2-카복스아미도)-N-(3-(4-니트로벤질옥시)프로폭시)펜탄아미도)펜틸)티아졸-4-카복실산 (IIb)
중간체 II에 대한 일반적인 과정에 따라, IIb(0.10 g, 81% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. ESI m/z: 692 (M + H)+. 1H NMR (500 MHz, DMSO d6 ) δ 8.26 (s, 1H), 8.17 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.60 (d, J = 8.5 Hz, 3H), 6.27 (brs, 1H), 4.74 (t, J = 8.5 Hz, 1H), 4.66 (s, 2H), 4.63(d, J = 8.0 Hz, 1H), 4.32-4.28 (m, 1H), 4.20-4.15 (m, 1H), 4.02 (brs, 1H), 3.73-3.62 (m, 3H), 2.86-2.83 (m, 1H), 2.55-2.53 (m, 1H), 2.47-2.41 (m, 1H), 2.10 (s, 3H), 2.01-1.94 (m, 4H), 1.83-1.78 (m, 2H), 1.61-1.52 (m, 3H), 1.47-1.35 (m, 3H), 1.16-1.04 (m, 2H), 0.86 (d, J = 6.5 Hz, 9H), 0.79 (t, J = 7.5 Hz, 3H) ppm. 키랄 SFC >95% (AD-H, AS-H, 및 OJ-H), Rt: 2.05 min (AD-H), 2.66 min (AS-H), 및 1.77 min (OJ-H).
Figure pct00640
2-((1R,3R)-1-하이드록시-4-메틸-3-((2S,3S)-3-메틸-2-((R)-1-메틸피페리딘-2-카복스아미도)-N-(펜트-4-인일옥시)펜탄아미도)펜틸)티아졸-4-카복실산 (IIc)
중간체 II에 대한 일반적인 과정에 따라, IIc(37 ㎎, 90% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. ESI m/z: 565(M+H)+.
Figure pct00641
2-((1R,3R)-1-하이드록시-4-메틸-3-((2S,3S)-3-메틸-2-((R)-1-메틸피페리딘-2-카복스아미도)-N-(펜틸옥시)펜탄아미도)펜틸)티아졸-4-카복실산 (IIf)
중간체 II에 대한 일반적인 과정에 따라, IIf(20 ㎎, 88% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. ESI m/z: 569(M+H)+.
Figure pct00642
2-((1R,3R)-3-((2S,3S)-N-헥실-3-메틸-2-((R)-1-메틸피페리딘-2-카복스아미도)펜탄아미도)-1-하이드록시-4-메틸펜틸)티아졸-4-카복실산 (IId)
중간체 II에 대한 일반적인 과정에 따라, 조 화합물 IId를 수득하고 정제 없이 다음 단계에 사용하였다.
Figure pct00643
2-((1R,3R)-3-((2S,3S)-N-(헥스-5-이닐)-3-메틸-2-((R)-1-메틸피페리딘-2-카복스아미도)펜탄아미도)-1-하이드록시-4-메틸펜틸)티아졸-4-카복실산 (IIe)
중간체 II에 대한 일반적인 과정에 따라, 조 화합물 IIe(R = 0.05, DCM:메탄올 = 10:1, UV)를 수득하고 정제 없이 다음 단계에 사용하였다.
중간체 III에 대한 일반적인 과정
피리딘(15 ㎎/㎖) 중의 화합물 II(1.0 당량)의 용액에 0℃에서 아세트산 무수물(3.0 당량)을 주사기로 가하였다. 반응 혼합물을 rt에서 10시간 동안 교반하고, 이를 LCMS에 의해 모니터하였다. 반응 혼합물을 rt에서 메탄올(20 ㎖)로 급냉시키고 이어서 상기 온도에서 밤새 교반하였다. 휘발성 물질을 진공하에서 제거하고 잔사를 prep-HPLC에 의해 정제시켜 백색 고체로서 중간체 III(88-99% 수율)을 제공하였다.
Figure pct00644
2-((1R,3R)-1-아세톡시-3-((2S,3S)-N-(헥실옥시)-3-메틸-2-((R)-1-메틸피페리딘-2-카복스아미도)펜탄아미도)-4-메틸펜틸)티아졸-4-카복실산 (IIIa)
중간체 III에 대한 일반적인 과정에 따라, 조 IIIa(40 ㎎, >99% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, 메탄올 d4 ) δ 8.38 (s, 1H), 7.60 (m, 1H), 4.81 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 4.01-3.95 (m, 2H), 3.67-3.63 (m, 1H), 3.49-3.46 (m, 1H), 3.33-3.25 (m, 1H), 3.21-3.12 (m, 1H), 2.91 (s, 3H), 2.66-2.60 (m, 1H), 2.38-2.19 (m, 3H), 2.15 (s, 3H), 1.99-1.19 (m, 15H), 1.06-0.92 (m, 17H) ppm.
Figure pct00645
2-((8R,10R)-8-이소프로필-7-((2S,3S)-3-메틸-2-((R)-1-메틸피페리딘-2-카복스아미도)펜타노일)-1-(4-니트로페닐)-12-옥소-2,6,11-트리옥사-7-아자트리데칸-10-일)티아졸-4-카복실산 (IIIb)
중간체 III에 대한 일반적인 과정에 따라, IIIb(94 ㎎, 88% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. ESI m/z: 734 (M + H)+. 1H NMR (DMSO d6 , 500 MHz) δ 8.34 (s, 1H), 8.18 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.67-7.66 (m, 1H), 7.59 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 5.74 (d, J = 11.5 Hz, 1H), 4.76 (t, J = 8.5 Hz, 1H), 4.64 (s, 2H), 4.28-4.24 (m, 1H), 4.09-4.05 (m, 1H), 3.99 (brs, 1H), 3.68-3.58 (m, 3H), 2.88-2.85 (m, 1H), 2.63-2.59 (m, 1H), 2.40-2.36 (m, 1H), 2.29-2.25 (m, 1H), 2.14-2.08 (m, 7H), 1.98-1.94 (m, 3H), 1.78-1.76 (m, 1H), 1.67-1.55 (m, 3H), 1.46-1.37 (m, 3H), 1.24-1.15 (m, 1H), 1.05-0.98 (m, 1H), 0.91 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 0.86-0.84 (m, 6H), 0.80 (t, J = 7.0 Hz ,3H) ppm. 키랄 SFC > 95% (AD-H, AS-H, OJ-H, 및 OD-H), Rt: 1.92 min (AD-H), 2.06 min (AS-H), 2.33 min(OD-H), 및 1.60 min (OJ-H).
Figure pct00646
2-((1R,3R)-1-아세톡시-4-메틸-3-((2S,3S)-3-메틸-2-((R)-1-메틸피페리딘-2-카복스아미도)-N-(펜트-4-인일옥시)펜탄아미도)펜틸)티아졸-4-카복실산 (IIIc)
중간체 III에 대한 일반적인 과정에 따라, IIIc(18 ㎎, 93% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. ESI m/z: 607(M+H)+.
Figure pct00647
2-((1R,3R)-1-아세톡시-4-메틸-3-((2S,3S)-3-메틸-2-((R)-1-메틸피페리딘-2-카복스아미도)-N-(펜틸옥시)펜탄아미도)펜틸)티아졸-4-카복실산 (IIIf)
중간체 III에 대한 일반적인 과정에 따라, IIIf(20 ㎎, 89% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. ESI m/z: 611(M+H)+.
Figure pct00648
2-((1R,3R)-1-아세톡시-3-((2S,3S)-N-헥실-3-메틸-2-((R)-1-메틸피페리딘-2-카복스아미도)펜탄아미도)-4-메틸펜틸)티아졸-4-카복실산 (IIId)
중간체 III에 대한 일반적인 과정에 따라, IIId(0.81 g, 19d로부터 5 단계로 49% 수율)를 수득하였다.
Figure pct00649
2-((1R,3R)-1-아세톡시-3-((2S,3S)-N-(헥스-5-인-1-일)-3-메틸-2-((R)-1-메틸피페리딘-2-카복스아미도)펜탄아미도)-4-메틸펜틸)티아졸-4-카복실산 (IIIe)
중간체 III에 대한 일반적인 과정에 따라, 조 화합물 IIIe(12 g, 5 단계로 50% 수율, Rf = 0.1, DCM:메탄올 = 10:1, UV)를 수득하였다. ESI m/z: 603 (M - H)-. 1H NMR (400 MHz, DMSO d6 ) δ 8.11 (s, 1H), 7.75 (br s, 1H), 5.61 (d, 1H), 4.45 (t, 1H), 3.71 (t, 1H), 3.68-2.50 (m, 5H), 2.40-1.90 (m, 11H), 1.90-1.30 (m, 12H), 1.27-0.60 (m, 14H) ppm.
C-튜불리신 IV의 합성(도 5)
IV에 대한 일반적인 과정
무수 DCM(10-15 ㎎/㎖) 중의 중간체 III(1.0 당량) 및 PFP(1.5 당량)의 혼합물에 DCM(7 ㎎/㎖) 중의 N,N'-디이소프로필카보디이미드(DIC, 1.5 당량)의 용액을 0℃에서 주사기로 적가하였다. 생성 혼합물을 rt로 가온시키고 16시간 동안 교반하고, 이를 LCMS에 의해 모니터하였다. 휘발성 물질을 진공하에서 제거하고 잔사를 에틸 아세테이트(III/에틸 아세테이트: 1 ㎎/㎖)에 현탁시켰다. 현탁액을 20분간 교반하고 고체를 여과하였다. 여액을 진공하에서 농축시켜 담황색 오일로서 조 펜타플루오로페닐 에스테르 28을 제공하고, 이를 무수 DMF(20 ㎎/㎖)에 용해시켰다. 용액에 DIPEA(2.5 당량) 및 중간체 I(0.9-1.2 당량)를 rt에서 후속적으로 가하였다. 반응 혼합물을 rt에서 밤새 교반하였으며 LCMS에 따라 완료된 것으로 여겨졌다. R4 = NHFmoc의 경우, 이어서 반응 혼합물에 피페리딘(0.5-1.0 ㎖)을 주사기로 가하고 반응 혼합물을, Fmoc가 LCMS에 따라 제거될 때까지 rt에서 2시간 동안 교반하였다. 이어서 혼합물을 Prep-HPLC(암모늄 비카보네이트 시스템)에 의해 직접 정제시켜 백색 고체로서 IV(10-60% 수율)를 제공하였다.
(IVa)
Figure pct00650
(2S,4R)-4-(2-((1R,3R)-1-아세톡시-3-((2S,3S)-N-헥실-3-메틸-2-((R)-1-메틸피페리딘-2-카복스아미도)펜탄아미도)-4-메틸펜틸)티아졸-4-카복스아미도)-5-(4-플루오로페닐)-2-메틸펜탄산 (IVa)
IV에 대한 일반적인 과정에 따라, IVa(17 ㎎, 3% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. ESI m/z 816.5 (M + H)+. 1H NMR (400 MHz, DMSO d6 ) δ 8.18 (s, 1H), 7.90-7.80 (m, 1H), 7.72-7.61 (m, 1H), 7.25-7.17 (m, 2H), 7.10-7.00 (m, 2H), 5.64 (d, J = 13.2 Hz, 1H), 4.48 (t, J = 9.2 Hz, 1H), 4.22-4.10 (m, 1H), 3.75-3.60 (m, 1H), 3.11-2.73 (m, 4H), 2.45-2.24 (m, 3H), 2.11 (s, 3H), 2.06 (s, 3H), 2.00-1.78 (m, 5H), 1.65-1.43 (m, 7H), 1.41-1.20 (m, 9H), 1.10-0.91 (m, 8H), 0.90-0.76 (m, 10H), 0.72-0.62 (m, 3H) ppm. Anal. HPLC: >99%, Rt: 8.51 min (방법 A).
(IVb)
(4S)-4-({2-[(1R,3R)-1-(아세틸옥시)-3-[(2S,3S)-N-(헥스-5-인-1-일)-3-메틸-2-{[(2R)-1-메틸피페리딘-2-일]포름아미도}펜탄아미도]-4-메틸펜틸]-1,3-티아졸-4-일}포름아미도)-2,2-디메틸-5-페닐펜탄산 (IVb)
IV에 대한 일반적인 과정에 따라, IVb(2.0 ㎎, 10% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. ESI m/z 808.3 (M + H)+. 1H NMR (500 MHz, DMSO d6 ) δ 8.15 (s, 1H), 7.72 (s, 2H), 7.28-7.21 (m, 2H), 7.19-7.16 (d, J = 5.9 Hz, 2H), 5.65 (d, J = 13.2 Hz, 1H), 4.46 (t, J = 9.4 Hz, 1H), 4.34-4.24 (m, 1H), 3.76-3.70 (m, 1H), 3.03-2.97 (m, 1H), 2.85-2.81 (m, 2H), 2.76-2.72 (m, 2H), 2.29-2.17 (m, 4H), 2.13 (s, 3H), 2.07 (s, 3H), 1.97-1.84 (m, 4H), 1.84-1.80 (m, 3H), 1.61 (d, J = 10.3 Hz, 2H), 1.54-1.32 (m, 7H), 1.19-1.06 (m, 10H), 0.95 (d, J = 6.0 Hz, 3H), 0.86-0.80 (m, 6H), 0.69 (d, J = 6.0 Hz, 3H) ppm. Anal. HPLC: >99%, Rt: 8.51 min (방법 A).
(IVc)
(4S)-4-({2-[(1R,3R)-1-(아세틸옥시)-3-[(2S,3S)-N-(헥스-5-인-1-일)-3-메틸-2-{[(2R)-1-메틸피페리딘-2-일]포름아미도}펜탄아미도]-4-메틸펜틸]-1,3-티아졸-4-일}포름아미도)-5-(4-플루오로페닐)-2,2-디메틸펜탄산 (IVc)
IV에 대한 일반적인 과정에 따라, IVc(3.1 ㎎, 16% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. ESI m/z 826.2 (M + H)+. 1H NMR (500 MHz, DMSO d6 ) δ 8.14 (s, 1H), 7.72-7.68 (m, 2H), 7.21-7.18 (m, 2H), 7.07-7.03 (m, 2H), 5.65 (d, J = 13.0 Hz, 1H), 4.46 (t, J = 9.5 Hz, 1H), 4.26-4.23 (m, 1H), 3.75-3.69 (m, 1H), 3.03-2.97 (m, 1H), 2.87-2.79 (m, 2H), 2.76-2.72 (m, 2H), 2.29-2.18 (m, 4H), 2.13 (s, 3H), 2.09 (s, 3H), 1.97-1.84 (m, 4H), 1.77-1.68 (m, 3H), 1.62-1.61 (m, 2H), 1.54-1.37 (m, 6H), 1.27-1.21 (m, 1H), 1.19-1.11 (m, 2H), 1.08-1.06 (m, 6H), 0.96-0.94 (m, 4H), 0.84-0.80 (m, 6H), 0.70-0.68 (m, 3H) ppm. Anal. HPLC: >99%, Rt: 8.44 min (방법 B).
Figure pct00651
(IVd)
(4S)-4-({2-[(1R,3R)-1-(아세틸옥시)-3-[(2S,3S)-N-(헥스-5-인-1-일)-3-메틸-2-{[(2R)-1-메틸피페리딘-2-일]포름아미도}펜탄아미도]-4-메틸펜틸]-1,3-티아졸-4-일}포름아미도)-5-(4-아미노페닐)-2,2-디메틸펜탄산 (IVd)
IV에 대한 일반적인 과정에 따라, IVd(5.8 ㎎, 14% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. ESI m/z 412.3 (M/2 + H)+, 823.3 (M + H)+ (10%). 1H NMR (500 MHz, DMSO d6 ) δ 8.16 (s, 1H), 7.77-7.61 (m, 2H), 6.82 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 6.45 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 5.66 (d, J = 13.5 Hz, 1H), 4.84 (s, 2H), 4.47 (t, J = 9.5 Hz, 1H), 4.19-4.16 (m, 1H), 3.76-3.71 (m, 1H), 3.05-2.99 (m, 1H), 2.85-2.82 (m, 1H), 2.74 (t, J = 2.5 Hz, 1H), 2.64 (dd, J = 13.5, 6.0 Hz, 1H), 2.58-2.53 (m, 1H), 2.31-2.14 (m, 7H), 2.07 (s, 3H), 1.87-1.72 (m, 7H), 1.69-1.52 (m, 10H), 1.19-1.08 (m, 2H), 1.05 (d, J = 7.5 Hz, 6H), 0.96 (d, J = 7.5 Hz, 3H), 0.85-0.81 (m, 6H), 0.69 (d, J = 6.0 Hz, 3H) ppm. Anal. HPLC: >99%, Rt: 6.92 min (방법 A).
(IVe)
(2S,4R)-4-({2-[(1R,3R)-1-(아세틸옥시)-3-[(2S,3S)-N-(헥스-5-인-1-일)-3-메틸-2-{[(2R)-1-메틸피페리딘-2-일]포름아미도}펜탄아미도]-4-메틸펜틸]-1,3-티아졸-4-일}포름아미도)-5-(4-플루오로페닐)-2-메틸펜탄산 (IVe)
IV에 대한 일반적인 과정에 따라, IVe(9.0 ㎎, 45% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. ESI m/z 812.4 (M + H)+. 1H NMR (500 MHz, 메탄올 d4 ) δ 8.11 (s, 1H), 7.26 (dd, J = 8.4, 5.5 Hz, 2H), 6.98 (s, 2H), 5.80 (d, J = 13.0 Hz, 1H), 4.93 (m, 1H), 4.88-4.84 (m, 1H), 4.66 (d, J = 9.3 Hz, 1H), 4.36 (s, 1H), 3.86 (s, 1H), 3.19-3.01 (m, 2H), 2.92 (d, J = 6.8 Hz, 2H), 2.55 (s, 1H), 2.44-2.30 (m, 6H), 2.27-2.22(m, 2H), 2.19 (s, 3H), 2.05-1.96 (m, 3H), 1.95-1.86 (m, 3H), 1.82-1.58 (m, 9H), 1.45-1.36 (m, 1H), 1.27-1.20 (m, 1H), 1.19 (d, J = 7.1 Hz, 3H), 1.07 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 1.01 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 0.95 (m, 3H), 0.85 (d, J = 6.1 Hz, 3H) ppm. Anal. HPLC: >99%, Rt: 8.14 min (방법 A). 키랄HPLC: >99%, Rt: 1.05 min (AD); >99%, 1.42 min (AS); >99%, 0.92 min (OD); >99%, 2.92 min (OJ).
(IVf)
(2S,4R)-4-({2-[(1R,3R)-1-(아세틸옥시)-3-[(2S,3S)-N-(헥스-5-인-1-일)-3-메틸-2-{[(2R)-1-메틸피페리딘-2-일]포름아미도}펜탄아미도]-4-메틸펜틸]-1,3-티아졸-4-일}포름아미도)-5-(4-하이드록시페닐)-2-메틸펜탄산 (IVf)
IV에 대한 일반적인 과정에 따라, IVf(8.5 ㎎, 43% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. ESI m/z 810.3 (M + H)+. 1H NMR (400 MHz, DMSO d6 ) δ 9.19 (s, 1H), 8.18 (s, 1H), 7.71 (d, J = 10.0 Hz, 1H), 6.96 (d, J = 10.0 Hz, 2H), 6.63 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 5.64 (d, J = 12.9 Hz, 1H), 4.46 (t, J = 9.5 Hz, 1H), 4.14 (s, 1H), 3.74 (s, 1H), 3.01 (s, 1H), 2.82 (d, J = 11.4 Hz, 1H), 2.75-2.70 (m, 2H), 2.68-2.62 (m, 1H), 2.47-2.45 (m, 1H), 2.39-2.15 (m, 6H), 2.13-2.08 (m, 4H), 2.06 (s, 3H), 1.95-1.72 (m, 6H), 1.62-1.60 (m, 2H), 1.54-1.32 (m, 7H), 1.20-1.08 (m, 2H), 1.05 (d, J = 7.1 Hz, 3H), 0.96 (d, J = 6.4 Hz, 3H), 0.85-0.80 (m, 6H), 0.68 (d, J = 6.1 Hz, 3H) ppm. Anal. HPLC: >99%, Rt: 6.83 min (방법 B).
(IVg)
(2S,4R)-4-({2-[(1R,3R)-1-(아세틸옥시)-3-[(2S,3S)-N-(헥스-5-인-1-일)-3-메틸-2-{[(2R)-1-메틸피페리딘-2-일]포름아미도}펜탄아미도]-4-메틸펜틸]-1,3-티아졸-4-일}포름아미도)-5-(4-아미노페닐)-2-메틸펜탄산 (IVg)
IV에 대한 일반적인 과정에 따라, IVg(6.0 ㎎, 30% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. ESI m/z 809.2 (M + H)+. 1H NMR (500 MHz, DMSO d6 ) δ 8.18 (s, 1H), 7.89 (s, 1H), 7.70 (d, J = 9.3 Hz, 1H), 6.82 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 6.45 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 5.65 (d, J = 13.0 Hz, 1H), 4.84 (s, 2H), 4.46 (t, J = 9.5 Hz, 1H), 4.09 (s, 1H), 3.74 (s, 1H), 3.05-2.97 (m, 1H), 2.83-2.80 (m, 1H), 2.74 (t, J = 8.3 Hz , 1H), 2.71-2.63 (m, 3H), 2.60-2.56 (m, 1H), 2.37-2.33 (m, 1H), 2.28-2.24 (m, 2H), 2.19-2.16 (m, 1H), 2.12 (s, 3H), 2.06 (s, 3H), 1.98-1.73 (m, 7H), 1.62-1.60 (m, 2H), 1.49-1.44 (m, 5H), 1.39-1.34 (m, 1H), 1.23 (s, 3H), 1.03 (d, J = 7.5 Hz, 3H), 0.96 (d, J = 6.0 Hz, 3H), 0.85-0.80 (m, 6H), 0.68 (d, J = 6.0 Hz, 3H) ppm. Anal. HPLC: >99%, Rt: 6.87 min (방법 B). 키랄 HPLC: >99%, Rt: 0.8 min (AD); >99%, 1.24 min (AS); >99%, 3.1 min (OD); >99%, 1.47 min (OJ).
C-튜불리신 VII 및 VIII의 합성(도 5A)
VII 및 VIII에 대한 일반적인 과정
DCM(50 mM) 중의 화합물 A-1(1.0 당량)의 용액에 화합물 A-2(1.5 당량) 및 DIPEA(4.0 당량)를 가하고, 반응 혼합물을 RT에서 4시간 동안 교반하고, 이를 LCMS에 의해 모니터하였다. 생성 혼합물을 역상 플래시 크로마토그래피(수성 TFA(0.01%) 중의 0-30% 아세토니트릴)에 의해 직접 정제시켜 회색 고체로서 VII 또는 VIII(7-57% 수율)를 제공하였다.
Figure pct00652
(4S)-4-({2-[(1R,3R)-1-(아세틸옥시)-3-[(2S,3S)-N-헥실-3-메틸-2-{[(2R)-1-메틸피페리딘-2-일]포름아미도}펜탄아미도]-4-메틸펜틸]-1,3-티아졸-4-일}포름아미도)-5-(4-아미노-3-클로로페닐)-2,2-디메틸펜탄산 (VII)
화합물 A-2b로 처리된 화합물 A-1a로부터 VII 및 VIII에 대한 일반적인 과정에 따라, 페이로드 VII(5.0 ㎎, 14% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. ESI m/z: 861.3 (M + H)+. 1H NMR (400 MHz, DMSO d6 ) δ 8.16 (s, 1H), 7.67 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 7.56 (br s, 1H), 7.21 (br s, 1H), 6.94 (d, J = 0.8 Hz, 1H), 6.82 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.65 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 5.65 (d, J = 13.2 Hz, 1H), 5.32 (t, J = 5.2 Hz, 1H), 5.15 (s, 2H), 4.48 (t, J = 9.6 Hz, 1H), 4.22-4.18 (m, 1H), 3.74-3.70 (m, 1H), 3.03-2.96 (m, 1H), 2.83 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 2.60 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 2.33-2.16 (m, 3H), 2.14 (s, 3H), 2.07 (s, 3H), 2.03-1.90 (m, 3H), 1.76-1.55 (m, 3H), 1.33-1.20 (m, 10H), 1.16-1.13 (m, 2H), 1.07-1.04 (m, 7H), 0.95 (d, J = 6.4 Hz, 3H), 0.86-0.80 (m, 11H), 0.68 (d, J = 5.6 Hz, 3H) ppm.
Figure pct00653
(4S)-4-({2-[(1R,3R)-1-(아세틸옥시)-3-[(2S,3S)-N-헥실-3-메틸-2-{[(2R)-1-메틸피페리딘-2-일]포름아미도}펜탄아미도]-4-메틸펜틸]-1,3-티아졸-4-일}포름아미도)-5-(4-플루오로페닐)-2,2-디메틸펜탄산 (VIII)
화합물 A-2c로 처리된 화합물 A-1a로부터 VII 및 VIII에 대한 일반적인 과정에 따라, 페이로드 VIII(7.0 ㎎, 26% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. ESI m/z: 830.5 (M + H)+. 1H NMR (400 MHz, DMSO d6 ) δ 8.16 (s, 1H), 7.67 (d, J = 9.6Hz, 1H), 7.19 (dd, J = 8.0 및 6.0 Hz, 2H), 7.06 (t, J = 8.8 Hz, 2H), 5.64 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 4.48 (t, J = 9.2 Hz, 1H), 4.27-4.23 (m, 1H), 3.73-3.65 (m, 1H), 3.02-2.93 (m, 1H), 2.84-2.75 (m, 3H), 2.33-1.83 (m, 12H), 1.90-1.40 (m, 8H), 1.28-1.23 (m, 11H), 1.17-1.13 (m, 1H), 1.06 (d, J = 4.0 Hz, 6H), 0.96 (d, J = 6.4 Hz, 3H), 0.87-0.79 (m, 9H), 0.68 (d, J = 6.0 Hz, 3H) ppm.
C-트리아졸 튜불리신 페이로드 IV의 합성(도 6A)
(IVh)
Figure pct00654
2-((1R,3R)-1-아세톡시-4-메틸-3-((2S,3S)-3-메틸-2-((R)-1-메틸피페리딘-2-카복스아미도)-N-(4-(1-((트리메틸실릴)메틸)-1H-1,2,3-트리아졸-4-일)부틸)펜탄아미도)펜틸)티아졸-4-카복실산 (IIIg1)
THF(3 ㎖) 및 수(1 ㎖) 중의 IIIe(80 ㎎, 132 μmol), 트리메틸실릴메틸 아지드(34 ㎎, 264 μmol), 및 나트륨 아스코르베이트(80 ㎎, 132 μmol)의 혼합물에 1 방울의 수성 황산 구리(2.1 ㎎, 13 μmol)를 가하였다. 생성 혼합물을 rt에서 1시간 동안 교반하고, 이어서 여과하고 농축시켜 백색 고체로서 IIIg1(87 ㎎, 89.6% 수율)을 제공하였다. ESI m/z: 734.1(M+H)+.
Figure pct00655
2-((1R,3R)-1-아세톡시-4-메틸-3-((2S,3S)-3-메틸-N-(4-(1-메틸-1H-1,2,3-트리아졸-4-일)부틸)-2-((R)-1-메틸피페리딘-2-카복스아미도)펜탄아미도)펜틸)티아졸-4-카복실산 (IIIg2)
DMF(1 ㎖) 중의 IIIg1(87 ㎎, 118 μmol) 및 CsF(72 ㎎, 474 μmol)의 혼합물을 60℃에서 1h 동안 교반하였다. 반응 용액을 실리카젤 컬럼 크로마토그래피(DCM/MeOH 15:1)에 의해 정제시켜 백색 고체로서 IIIg2(59 ㎎, 75% 수율)를 제공하였다. ESI m/z: 663.3(M+H)+.
Figure pct00656
퍼플루오로페닐 2-((1R,3R)-1-아세톡시-4-메틸-3-((2S,3S)-3-메틸-N-(4-(1-메틸-1H-1,2,3-트리아졸-4-일)부틸)-2-((R)-1-메틸피페리딘-2-카복스아미도)펜탄아미도)펜틸)티아졸-4-카복실레이트 (31)
THF(2 ㎖) 중의 IIIg2(59 ㎎, 89 μmol), PFP(33 ㎎, 178 μmol) 및 DIC(23 ㎎, 178 μmol)의 혼합물을 25℃에서 18시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 실리카젤 컬럼 크로마토그래피(DCM/MeOH 15:1)에 의해 정제시켜 백색 고체로서 31(59 ㎎, 75% 수율)를 제공하였다. ESI m/z: 828.3(M+H)+.
Figure pct00657
(4S)-4-({2-[(1R,3R)-1-(아세틸옥시)-4-메틸-3-[(2S,3S)-3-메틸-N-[4-(1-메틸-1H-1,2,3-트리아졸-4-일)부틸]-2-{[(2R)-1-메틸피페리딘-2-일]포름아미도}펜탄아미도]펜틸]-1,3-티아졸-4-일}포름아미도)-5-(4-{[(9H-플루오렌-9-일메톡시)카보닐]아미노}페닐)-2,2-디메틸펜탄산 (32)
DMF(3 ㎖) 중의 화합물 31(40 ㎎, 40 μmol), DIPEA(15 ㎎, 119 μmol) 및 중간체 Ic(22 ㎎, 119 umol)의 혼합물을 25℃에서 16시간 동안 교반하고 반응 용액을 RP 크로마토그래피(CH3CN/H2O, 0-100% CH3CN)에 의해 정제시켜 백색 고체로서 32(23 ㎎, 53% 수율)를 제공하였다. ESI m/z: 1102.1(M+H)+.
Figure pct00658
(S)-4-(2-((1R,3R)-1-아세톡시-4-메틸-3-((2S,3S)-3-메틸-N-(4-(1-메틸-1H-1,2,3-트리아졸-4-일)부틸)-2-((R)-1-메틸피페리딘-2-카복스아미도)펜탄아미도)펜틸)티아졸-4-카복스아미도)-5-(4-아미노페닐)-2,2-디메틸펜탄산 (IVh)
DMF(1 ㎖) 중의 화합물 32(23 ㎎, 21 umol) 및 피페리딘(5 ㎎, 63 μmol)의 혼합물을 23℃에서 16시간 동안 교반하고 반응 용액을 RP 크로마토그래피(H2O 중의 0-100% CH3CN)에 의해 직접 정제시켜 백색 고체로서 IVh(5 ㎎, 27% 수율)를 제공하였다. EIS m/z: 880.4 (M+H)+. 1H NMR (500 MHz, 메탄올 d4 ) δ 8.10 (s, 1H), 7.75 (s, 1H), 6.96 (d, J = 8.2 Hz, 2H), 6.64 (d, J = 8.2 Hz, 2H), 5.76 (d, J = 12.5 Hz, 1H), 4.57 (d, J = 9.3 Hz, 1H), 4.36-4.30 (m, 1H), 4.04 (s, 3H), 3.89-3.78 (m, 1H), 3.19-3.08 (m, 2H), 3.00-2.93 (m, 1H), 2.81-2.63 (m, 5H), 2.38-2.33 (m, 1H), 2.23 (s, 3H), 2.20-2.15 (m, 4H), 2.09-1.86 (m, 4H), 1.84-1.63 (m, 9H), 1.61-1.48 (m, 3H), 1.36-1.27 (m, 1H), 1.13 (s, 3H), 1.10 (s, 3H), 1.05 (d, J = 6.4 Hz, 3H), 0.92-0.87 (m, 6H), 0.86-0.80 (m, 3H) ppm.
IVj-p에 대한 일반적인 과정
THF(Fmoc-IVd의 ㎎당 0.3 ㎖) 및 수(Fmoc-IVd의 ㎎당 0.1 ㎖) 중의 Fmoc-IVd(1 당량), R5-아지드(2 당량) 및 나트륨 아스코르베이트(2 당량)의 혼합물에 수성 황산 구리(0.1 당량, 1 M)를 가하였다. 생성 혼합물을 rt에서 16h 동안 교반하였다. 혼합물을 RP 크로마토그래피에 의해 직접 정제시켜 백색 고체로서 32(64%-76% 수율)를 제공하였다. 이어서 32를 DMF에 용해시키고 피페리딘(0.1-1.0 ㎖, 과잉)을 주사기로 가하였다. 반응 혼합물을, Fmoc가 LCMS에 따라 제거될 때까지 rt에서 2시간 동안 교반하였다. 이어서 혼합물을 Prep-HPLC에 의해 직접 정제시켜(방법 B) 백색 고체로서 IVj-p를 제공하였다.
(IVj)
(S)-4-(2-((1R,3R)-3-((2S,3S)-N-(4-(1H-1,2,3-트리아졸-5-일)부틸)-3-메틸-2-((R)-1-메틸피페리딘-2-카복스아미도)펜탄아미도)-1-아세톡시-4-메틸펜틸)티아졸-4-카복스아미도)-5-(4-아미노페닐)-2,2-디메틸펜탄산 (IVj)
IVj-p에 대한 일반적인 과정에 따라, IVj(2 ㎎, 35% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. ESI m/z: 866.5 (M + H)+. 1H NMR (400 MHz, DMSO d6 ) δ 8.15 (s, 1H), 7.70-7.62 (m, 1H), 7.48 (s, 1H), 6.82 (d, J = 8.2 Hz, 2H), 6.45 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 5.61-5.55 (m, 1H), 5.32 (s, 1H), 4.85 (s, 2H), 4.38 (s, 1H), 4.12-4.03 (m, 1H), 3.77-3.63 (m, 1H), 3.11-2.96 (m, 1H), 2.87-2.79 (m, 1H), 2.74 (s, 2H), 2.69 (s, 1H), 2.67 (s, 1H), 2.33 (s, 1H), 2.25-2.19 (m, 1H), 2.11 (s, 3H), 2.06 (s, 3H), 2.00 (d, J = 7.4 Hz, 2H), 1.97-1.89 (m, 3H), 1.83-1.73 (m, 3H), 1.63 (s, 3H), 1.47 (s, 4H), 1.45-1.44 (m, 1H), 1.27 (s, 2H), 1.18-1.10 (m, 2H), 0.96 (t, J = 9.0 Hz, 9H), 0.85 (s, 3H), 0.79 (s, 3H), 0.66 (s, 3H) ppm.
(IVk)
(S)-4-(2-((1R,3R)-1-아세톡시-3-((2S,3S)-N-(4-(1-(2-아미노에틸)-1H-1,2,3-트리아졸-5-일)부틸)-3-메틸-2-((R)-1-메틸피페리딘-2-카복스아미도)펜탄아미도)-4-메틸펜틸)티아졸-4-카복스아미도)-5-(4-아미노페닐)-2,2-디메틸펜탄산 (IVk)
IVj-p에 대한 일반적인 과정에 따라, IVk(2 ㎎, 36% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. ESI m/z: 910.5 (M + H)+. 1H NMR (400 MHz, DMSO d6 ) δ 8.17 (s, 1H), 7.83 (d, J = 10.6 Hz, 1H), 7.67 (s, 1H), 6.79 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 6.44 (d, J = 8.2 Hz, 2H), 5.64 (s, 1H), 5.32 (s, 1H), 4.85 (s, 2H), 4.43 (s, 1H), 4.28 (s, 2H), 4.15 (s, 1H), 3.06-3.02 (m, 1H), 2.94 (s, 2H), 2.79 (s, 4H), 2.67 (s, 3H), 2.33 (s, 1H), 2.12 (t, J = 11.7 Hz, 4H), 2.06 (s, 3H), 1.99 (s, 4H), 1.86-1.77 (m, 3H), 1.59 (s, 6H), 1.50 (s, 4H), 1.45-1.35 (m, 3H), 0.97 (dd, J = 14.6, 5.2 Hz, 8H), 0.85 (s, 1H), 0.78 (dd, J = 16.6, 7.2 Hz, 6H), 0.66 (s, 3H) ppm.
(IVl)
(S)-4-(2-((1R,3R)-1-아세톡시-3-((2S,3S)-N-(4-(1-(2-하이드록시에틸)-1H-1,2,3-트리아졸-5-일)부틸)-3-메틸-2-((R)-1-메틸피페리딘-2-카복스아미도)펜탄아미도)-4-메틸펜틸)티아졸-4-카복스아미도)-5-(4-아미노페닐)-2,2-디메틸펜탄산 (IVl)
IVj-p에 대한 일반적인 과정에 따라, IVl(2 ㎎, 36% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. ESI m/z: 910.4 (M + H)+. 1H NMR (400 MHz, DMSO d6 ) δ 8.18 (s, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.84 (s, 1H), 7.66 (s, 1H), 6.80 (d, J = 8.2 Hz, 2H), 6.43 (d, J = 8.2 Hz, 2H), 5.62 (d, J = 12.5 Hz, 1H), 4.84 (s, 2H), 4.44 (s, 1H), 4.31 (t, J = 5.4 Hz, 2H), 4.12 (s, 1H), 3.74 (d, J = 5.5 Hz, 2H), 3.04 (s, 2H), 2.82 (d, J = 11.7 Hz, 1H), 2.69 (d, J = 20.5 Hz, 5H), 2.29 (d, J = 28.0 Hz, 2H), 2.12 (s, 3H), 2.06 (s, 3H), 2.00 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 1.92 (d, J = 11.8 Hz, 2H), 1.82 (s, 4H), 1.62 (s, 4H), 1.53-1.50 (m, 1H), 1.46 (s, 3H), 1.38-1.34 (m, 1H), 1.23 (s, 3H), 1.17-1.12 (m, 1H), 0.98 (d, J = 6.7 Hz, 5H), 0.95 (d, J = 6.4 Hz, 3H), 0.78 (dd, J = 13.5, 6.8 Hz, 6H), 0.67 (s, 3H) ppm.
(IVm)
(S)-4-(2-((1R,3R)-1-아세톡시-3-((2S,3S)-N-(4-(1-(카복시메틸)-1H-1,2,3-트리아졸-4-일)부틸)-3-메틸-2-((R)-1-메틸피페리딘-2-카복스아미도)펜탄아미도)-4-메틸펜틸)티아졸-4-카복스아미도)-5-(4-아미노페닐)-2,2-디메틸펜탄산 (IVm)
Figure pct00659
IVj-p에 대한 일반적인 과정에 따라, IVm(2 ㎎, 2 단계로 16% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. ESI m/z: 924.2 (M + H)+. 1H NMR (400 MHz, DMSO d6 ) δ 9.86 (s, 1H), 8.37-8.23 (m, 1H), 8.15 (s, 1H), 8.13-7.81 (m, 1H), 7.75 (s, 1H), 7.62 (s, 1H), 6.79 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 6.42 (d, J = 8.2 Hz, 2H), 5.61 (d, J = 13.2 Hz, 1H), 5.31 (s, 1H), 4.93 (s, 2H), 4.48 (s, 1H), 4.17 (s, 3H), 3.66 (s, 2H), 3.00 (s, 3H), 2.66 (s, 2H), 2.32 (s, 1H), 2.22 (s, 3H), 2.12 (s, 3H), 1.99 (d, J = 7.5 Hz, 2H), 1.91-1.79 (m, 4H), 1.62 (d, J = 5.3 Hz, 4H), 1.54 (d, J = 5.2 Hz, 4H), 1.44 (s, 4H), 1.01 (d, J = 2.3 Hz, 6H), 0.95 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 0.80 (t, J = 5.6 Hz, 6H), 0.69 (s, 3H) ppm.
(IVn)
(S)-4-(2-((1R,3R)-1-아세톡시-3-((2S,3S)-N-(4-(1-(3-카복시프로필)-1H-1,2,3-트리아졸-4-일)부틸)-3-메틸-2-((R)-1-메틸피페리딘-2-카복스아미도)펜탄아미도)-4-메틸펜틸)티아졸-4-카복스아미도)-5-(4-아미노페닐)-2,2-디메틸펜탄산 (IVn)
Figure pct00660
IVj-p에 대한 일반적인 과정에 따라, IVn(1 ㎎, 2 단계로 11% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. ESI m/z: 952.1 (M + H)+. 1H NMR (400 MHz, DMSO d6 ) δ 8.17 (s, 1H), 7.81 (s, 1H), 7.80-7.72 (m, 1H), 7.67 (d, J = 9.1 Hz, 1H), 6.79 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 6.44 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 5.62 (d, J = 12.9 Hz, 1H), 4.42 (t, J = 9.5 Hz, 1H), 4.27 (t, J = 6.7 Hz, 2H), 4.14 (s, 2H), 3.76 (s, 1H), 3.03-3.00 (m, 1H), 2.82 (d, J = 5.5 Hz, 5H), 2.66 (s, 3H), 2.22 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 2.12 (s, 3H), 2.06 (s, 3H), 1.93 (s, 3H), 1.81 (d, J = 7.0 Hz, 2H), 1.74 (s, 1H), 1.65 (s, 2H), 1.59 (s, 2H), 1.51 (s, 6H), 1.48-1.30 (m, 4H), 1.15 (d, J = 11.9 Hz, 1H), 1.07-1.00 (m, 1H), 0.96 (dd, J = 11.2, 5.0 Hz, 9H), 0.81-0.72 (m, 6H), 0.66 (d, J = 5.8 Hz, 3H) ppm.
Figure pct00661
(IVo)
(S)-4-(2-((1R,3R)-1-아세톡시-3-((2S,3S)-N-(4-(1-벤질-1H-1,2,3-트리아졸-4-일)부틸)-3-메틸-2-((R)-1-메틸피페리딘-2-카복스아미도)펜탄아미도)-4-메틸펜틸)티아졸-4-카복스아미도)-5-(4-아미노페닐)-2,2-디메틸펜탄산 (IVo)
IVj-p에 대한 일반적인 과정에 따라, IVo(2.5 ㎎, 50% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. ESI m/z: 956.5 (M + H)+. 1H NMR (500 MHz, DMSO d6 ) δ 8.19 (s, 1H), 7.91 (s, 1H), 7.66 (s, 1H), 7.35-7.26 (m, 5H), 6.78 (d, J = 8.2 Hz, 2H), 6.43 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 5.62 (d, J = 13.2 Hz, 1H), 5.51 (s, 2H), 4.84 (s, 2H), 4.43 (t, J = 9.1 Hz, 1H), 4.07 (s, 1H), 3.77-3.67 (m, 1H), 3.07-2.96 (s, 1H), 2.82 (d, J = 11.5 Hz, 1H), 2.66 (s, 3H), 2.48-2.42 (m, 2H), 2.24 (t, J = 12.7 Hz, 1H), 2.12 (s, 3H), 2.05 (s, 3H), 2.01-1.88 (m, 2H), 1.89-1.72 (m, 4H), 1.72-1.32 (m, 10H), 1.23 (s, 2H), 1.20-1.10 (m, 1H), 1.06-0.97 (m, 1H), 0.97-0.83 (m, 9H), 0.76 (dd, J = 17.4, 7.0 Hz, 6H), 0.65 (s, 3H) ppm.
Figure pct00662
(IVp)
(S)-4-(2-((1R,3R)-1-아세톡시-4-메틸-3-((2S,3S)-3-메틸-2-((R)-1-메틸피페리딘-2-카복스아미도)-N-(4-(1-페닐-1H-1,2,3-트리아졸-4-일)부틸)펜탄아미도)펜틸)티아졸-4-카복스아미도)-5-(4-아미노페닐)-2,2-디메틸펜탄산 (IVp)
IVj-p에 대한 일반적인 과정에 따라, IVp(3.5 ㎎, 40% 수율)를 무색 고체로서 수득하였다. ESI m/z: 942.5 (M + H)+. 1H NMR (500 MHz, DMSO d6 ) δ 8.64 (s, 1H), 8.17 (s, 1H), 7.85 (d, J = 7.8 Hz, 2H), 7.73-7.61 (m, 1H), 7.56 (t, J = 7.9 Hz, 2H), 7.45 (t, J = 7.4 Hz, 1H), 6.80 (d, J = 8.2 Hz, 2H), 6.43 (d, J = 8.2 Hz, 2H), 5.64 (d, J = 13.0 Hz, 1H), 4.84 (s, 2H), 4.38 (t, J = 9.1 Hz, 1H), 4.09 (s, 1H), 3.84-3.70 (s, 1H), 3.10-3.01 (s, 1H), 2.85-2.62 (m, 4H), 2.48-2.44 (m, 2H), 2.29-2.19 (m, 1H), 2.12 (s, 3H), 2.05 (s, 3H), 2.01-1.90 (m, 2H), 1.88-1.75 (m, 4H), 1.69-1.29 (m, 10H), 1.23 (s, 2H), 1.19-1.10 (m, 1H), 1.02-0.89 (m, 10H), 0.72-0.62 (m, 9H) ppm.
Figure pct00663
(IVq)
(S)-4-(2-((1R,3R)-1-아세톡시-3-((2S,3S)-N-헥실-3-메틸-2-((R)-1-메틸피페리딘-2-카복스아미도)펜탄아미도)-4-메틸펜틸)티아졸-4-카복스아미도)-5-(4-아미노페닐)-2,2-디메틸펜탄산 (IVq)
IV에 대한 일반적인 과정에 따라, IVg(4.0 ㎎, 72% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. ESI m/z 828.3 (M + H)+. 1H NMR (400 MHz, DMSO d6 ) δ 8.19 (s, 1H), 8.04 (s, 1H), 7.65 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 6.81 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 6.44 (d, J = 8.2 Hz, 2H), 5.64 (d, J = 13.0 Hz, 1H), 4.84 (s, 2H), 4.49 (t, J = 9.3 Hz, 1H), 4.43-4.20 (m, 1H), 4.11 (s, 1H), 3.67 (d, J = 14.8 Hz, 2H), 3.01 (d, J = 11.0 Hz, 2H), 2.83 (d, J = 11.4 Hz, 1H), 2.68 (d, J = 4.7 Hz, 2H), 2.28 (dd, J = 24.7, 12.1 Hz, 2H), 2.13 (s, 3H), 2.07 (s, 3H), 1.98-1.88 (m, 2H), 1.87-1.81 (m, 2H), 1.73 (s, 1H), 1.59 (s, 2H), 1.54 (s, 2H), 1.45 (s, 2H), 1.29 (s, 6H), 1.19-1.06 (m, 2H), 1.00 (d, J = 9.8 Hz, 6H), 0.95 (d, J = 6.4 Hz, 3H), 0.83 (dd, J = 16.5, 9.4 Hz, 10H), 0.68 (d, J = 5.8 Hz, 3H) ppm.
Figure pct00664
(IVr)
(S)-4-(2-((1R,3R)-1-아세톡시-3-((2S,3S)-N-(헥스-5-인-1-일)-3-메틸-2-((R)-1-메틸피페리딘-2-카복스아미도)펜탄아미도)-4-메틸펜틸)티아졸-4-카복스아미도)-5-(4-아미노페닐-3,5-d2)-2,2-디메틸펜탄산 (IVr)
IV에 대한 일반적인 과정에 따라, IVr(2.0 ㎎, 34% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. ESI m/z 825.5 (M + H)+. 1H NMR (500 MHz, DMSO d6 ) δ 8.15 (s, 1H), 7.71 (s, 1H), 7.59 (s, 1H), 6.81 (s, 2H), 5.65 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 4.84 (s, 2H), 4.46 (t, J = 9.3 Hz, 1H), 4.18 (s, 1H), 3.73 (s, 1H), 3.01 (s, 1H), 2.83 (d, J = 10.7 Hz, 1H), 2.74 (s, 1H), 2.63 (dd, J = 13.2, 6.2 Hz, 1H), 2.57-2.53 (m, 1H), 2.40-2.10 (m, 7H), 2.07 (s, 3H), 2.03-1.69 (m, 7H), 1.69-1.29 (m, 10H), 1.23 (s, 2H), 1.04 (d, J = 6.7 Hz, 6H), 0.95 (d, J = 6.1 Hz, 3H), 0.88-0.76 (m, 6H), 0.67 (s, 3H) ppm.
Figure pct00665
(IVs)
(S)-4-(2-((1R,3R)-1-아세톡시-3-((2S,3S)-N-헥실-3-메틸-2-((R)-1-메틸피페리딘-2-카복스아미도)펜탄아미도)-4-메틸펜틸)티아졸-4-카복스아미도)-5-(4-아미노페닐-3,5-d2)-2,2-디메틸펜탄산 (IVs)
IV에 대한 일반적인 과정에 따라, IVs(0.80 ㎎, 6% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. ESI m/z 829.5 (M + H)+. 1H NMR (500 MHz, DMSO d6 ) δ 8.16 (s, 1H), 7.67 (s, 1H), 7.53 (s, 1H), 6.80 (s, 2H), 5.65 (d, J = 13.0 Hz, 1H), 4.80 (s, 2H), 4.48 (t, J = 9.4 Hz, 1H), 4.19 (s, 1H), 3.70 (s, 1H), 2.99 (s, 1H), 2.81 (d, J = 15.3 Hz, 1H), 2.68-2.52 (m, 2H), 2.43-2.10 (m, 7H), 2.07 (s, 3H), 2.02-1.73 (m, 7H), 1.73-1.33 (m, 10H), 1.33-1.28 (m, 2H), 1.23 (s, 2H), 1.05 (d, J = 5.1 Hz, 6H), 0.95 (d, J = 6.4 Hz, 3H), 0.89-0.78 (m, 9H), 0.68 (s, 3H) ppm.
(IVt)
2-4-(2-((1R,3R)-1-아세톡시-3-((2S,3S)-N-(헥스-5-이닐)-3-메틸-2-((R)-1-메틸피페리딘-2-카복스아미도)펜탄아미도)-4-메틸펜틸)티아졸-4-카복스아미도)-5-(3-((벤질옥시카보닐)(메틸)아미노)-4-플루오로페닐)-2,2-디메틸펜탄산 (IVt1)(도 6B)
Figure pct00666
IV에 대한 일반적인 과정에 따라, IVt1(6.0 ㎎, 47% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. ESI m/z 989.1(M+H)+.
4-(2-((1R,3R)-1-아세톡시-3-((2S,3S)-N-헥실-3-메틸-2-((R)-1-메틸피페리딘-2-카복스아미도)펜탄아미도)-4-메틸펜틸)티아졸-4-카복스아미도)-5-(4-플루오로-3-(메틸아미노)페닐)-2,2-디메틸펜탄산 (IVt)(도 6B)
Figure pct00667
화합물 IVt1(6 ㎎, 6.1 μmol)의 용액에 질소하에 습성 Pd/C(10% Pd, 2 ㎎)를 가하였다. 현탁액을 탈기시키고 분위기를 수소로 3회 교환하고 이어서 수소 벌룬하에 rt에서 30분간 교반하고, LCMS에 의해 모니터하였다. 반응 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고 여액을 진공하에서 농축시켰다. 잔사를 prep-HPLC에 의해 정제시켜(방법 B) 백색 고체로서 화합물 IVt(2 ㎎, 38% 수율)를 제공하였다. ESI m/z 859.1 (M + H)+. 1H NMR (400 MHz, DMSO d6 ) δ 8.19 (d, J = 6.2 Hz, 1H), 7.66 (d, J = 9.7 Hz, 1H), 6.90-6.77 (m, 1H), 6.38 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 6.32 (s, 1H), 5.63 (d, J = 12.6 Hz, 1H), 5.36 (s, 1H), 4.48 (d, J = 6.9 Hz, 1H), 4.21 (s, 1H), 3.70 (s, 1H), 2.97 (s, 1H), 2.81 (s, 1H), 2.70 (d, J = 21.9 Hz, 2H), 2.55 (d, J = 4.9 Hz, 3H), 2.22 (s, 2H), 2.12 (d, J = 3.5 Hz, 3H), 2.06 (s, 3H), 1.97-1.83 (m, 4H), 1.68-1.34 (m, 9H), 1.29 (s, 8H), 1.18-1.13 (m, 1H), 1.04 (s, 7H), 0.95 (d, J = 6.4 Hz, 3H), 0.88-0.79 (m, 10H), 0.68 (d, J = 5.9 Hz, 3H) ppm.
(IVuA/B)
4-({2-[(1R,3R)-1-(아세틸옥시)-3-[(2S,3S)-N-(헥스-5-인-1-일)-3-메틸-2-{[(2R)-1-메틸피페리딘-2-일]포름아미도}펜탄아미도]-4-메틸펜틸]-1,3-티아졸-4-일}포름아미도)-5-[3-(디벤질아미노)-4-플루오로페닐]-2,2-디메틸펜탄산 (IVu1)
Figure pct00668
IV에 대한 일반적인 과정에 따라, IVu1(10 ㎎, 40% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다. ESI m/z 511.3(M/2+H)+.
4-({2-[(1R,3R)-1-(아세틸옥시)-3-[(2S,3S)-N-헥실-3-메틸-2-{[(2R)-1-메틸피페리딘-2-일]포름아미도}펜탄아미도]-4-메틸펜틸]-1,3-티아졸-4-일}포름아미도)-5-(3-아미노-4-플루오로페닐)-2,2-디메틸펜탄산 (IVu)
Figure pct00669
화합물 IVu1(10 ㎎, 9.8 μmol)의 용액에 질소하에 습성 Pd/C(10% Pd, 3 ㎎)를 가하였다. 현탁액을 탈기시키고 분위기를 수소로 3회 교환하고 이어서 수소 벌룬하에 rt에서 24시간 동안 교반하고, LCMS에 의해 모니터하였다. 반응 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고 여액을 진공하에서 농축시켰다. 조 생성물 혼합물을 prep-HPLC에 의해 정제시켜(방법 A) 백색 고체로서 화합물 IVu를 제공하였다.
IVuA (2 mg, 23% 수율): ESI m/z 845.5 (M + H)+, LCMS 체류 시간: 1.41 min; 1H NMR (400 MHz, DMSO d6 ) δ 8.21 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.64 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 6.83 (dd, J = 11.4, 8.2 Hz, 1H), 6.60 (t, J = 10.0 Hz, 1H), 6.30 (s, 1H), 5.64 (d, J = 13.2 Hz, 1H), 5.01 (s, 2H), 4.48 (t, J = 9.4 Hz, 1H), 4.13 (s, 1H), 3.68 (s, 1H), 3.00 (s, 2H), 2.87-2.65 (m, 3H), 2.25 (d, J = 11.9 Hz, 2H), 2.12 (d, J = 4.7 Hz, 3H), 2.06 (s, 3H), 2.00-1.81 (m, 4H), 1.72 (br s, 1H), 1.65-1.25 (m, 15H), 1.18-1.04 (m, 2H), 0.98-0.59 (m, 22H) ppm.
IVuB (2 mg, 23% 수율): ESI m/z 845.5 (M + H)+, LCMS 체류 시간: 1.42 min; 1H NMR (400 MHz, DMSO d6 ) δ 8.18 (s, 1H), 7.56 (s, 1H), 6.82 (dd, J = 11.5, 8.2 Hz, 1H), 6.67-6.52 (m, 1H), 6.29 (s, 1H), 5.66 (s, 1H), 5.01 (s, 2H), 4.48 (t, J = 9.1 Hz, 1H), 4.26 (s, 1H), 3.68 (s, 1H), 3.02 (s, 2H), 2.77-2.54 (m, 3H), 2.25 (s, 2H), 2.13 (d, J = 9.8 Hz, 6H), 1.95-1.50 (m, 12H), 1.35-1.03 (m, 15H), 0.98-0.59 (m, 17H) ppm.
(IVvA/B)
4-({2-[(1R,3R)-1-(아세틸옥시)-3-[(2S,3S)-N-헥실-3-메틸-2-{[(2R)-1-메틸피페리딘-2-일]포름아미도}펜탄아미도]-4-메틸펜틸]-1,3-티아졸-4-일}포름아미도)-5-(4-아미노-3-플루오로페닐)-2,2-디메틸펜탄산 (IVv, 2개의 부분입체이성질체 A 및 B)
Figure pct00670
Ii 대신에 Ij를 사용함을 제외하고, Ii 및 IIIe로부터 IVu로의 유사한 과정에 따라, 부분입체이성질체로서 화합물 IVv를 수득하고 이어서 prep-HPLC에 의해 분리시켜(방법 A) 백색 고체로서 부분입체이성질체 A 및 부분입체이성질체 B를 제공하였다.
IVvA(5 ㎎, 10% 수율): ESI m/z 845(M+H)+, LCMS 체류시간: 1.40 min
IVvB(5 ㎎, 10% 수율): ESI m/z 845(M+H)+, LCMS 체류시간: 1.41 min. 부분입체이성질체 IVvB는 도 5A에 도시된 바와 같다.
(IVw)
(S)-4-(2-((1R,3R)-1-아세톡시-3-((2S,3S)-N-(헥스-5-이닐)-3-메틸-2-((R)-1-메틸피페리딘-2-카복스아미도)펜탄아미도)-4-메틸펜틸)티아졸-4-카복스아미도)-5-(4-(벤질옥시)-3-니트로페닐)-2,2-디메틸펜탄산 (IVw1)
Figure pct00671
화합물 IV에 대한 일반적인 과정에 따라, 화합물 IVw1(10 ㎎, 40% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다. ESI m/z: 959.5(M+H)+.
(S)-4-(2-((1R,3R)-1-아세톡시-3-((2S,3S)-N-헥실-3-메틸-2-((R)-1-메틸피페리딘-2-카복스아미도)펜탄아미도)-4-메틸펜틸)티아졸-4-카복스아미도)-5-(3-아미노-4-하이드록시페닐)-2,2-디메틸펜탄산 (IVw)
Figure pct00672
에탄올(5 ㎖) 중의 화합물 IVw1(10 ㎎, 0.10 mmol)의 용액에 질소하에 농 HCl(0.1 ㎖) 및 습성 Pd/C(10% Pd, 3 ㎎)를 가하였다. 현탁액을 탈기시키고 분위기를 수소로 3회 교환하고 이어서 수소 벌룬하에 rt에서 30분 동안 교반하고, LCMS에 의해 모니터하였다. 반응 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고 여액을 진공하에서 농축시켰다. 조 생성물 혼합물을 prep-HPLC에 의해 정제시켜(방법 A) 백색 고체로서 화합물 IVw(1 ㎎, 12% 수율)를 제공하였다. ESI m/z: 843.5(M+H)+.
(IVx)
4-(2-((1R,3R)-1-아세톡시-3-((2S,3S)-N-헥실-3-메틸-2-((R)-1-메틸피페리딘-2-카복스아미도)펜탄아미도)-4-메틸펜틸)티아졸-4-카복스아미도)-5-(4-아미노-3-하이드록시페닐)-2,2-디메틸펜탄산 (IVx)
Figure pct00673
Ik 대신에 Il을 사용함을 제외하고, IVw와 유사한 과정에 따라, 화합물 IVx를 백색 고체로서 수득하였다. ESI m/z: 843.5(M+H)+.
(IVy)
(1R,3R)-1-(4-((S)-1-(4-아미노페닐)-5-히드라지닐-4,4-디메틸-5-옥소펜탄-2-일카바모일)티아졸-2-일)-3-((2S,3S)-N-헥실-3-메틸-2-((R)-1-메틸피페리딘-2-카복스아미도)펜탄아미도)-4-메틸펜틸 아세테이트 (IVy)
Figure pct00674
무수 DMF(2 ㎖) 중의 Fmoc-IVq(60 ㎎, 60 μmol, 화합물 IVq의 과정을 참조하시오)의 용액에 HATU(24 ㎎, 66 μmol) 및 DIPEA(24 ㎎, 0.18 mmol)를 가하였다. 혼합물을 rt에서 10분간 교반한 다음 Boc-히드라진(8.0 ㎎, 60 μmol)을 가하였다. 생성 용액을 rt에서 1시간 동안 교반하고, 이를 LCMS에 의해 모니터하였다. 혼합물을 역상 플래시 크로마토그래피(수 중 5-95% 아세토니트릴(0.03% TFA와 함께))에 의해 직접 분리시켜 백색 고체로서 Boc-히드라진 중간체(70 ㎎, ESI m/z: 1163.6(M+H)+)를 제공하였다. 중간체(10 ㎎, 10 μmol)를 DMF(2 ㎖)에 용해시키고 용액에 1 방울의 피페리딘(약 0.02 ㎖)을 가하였다. 용액을 Fmoc가 LCMS에 따라 제거될 때까지 rt에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 역상 플래시 크로마토그래피(수 중 5-95% 아세토니트릴(0.03% TFA와 함께))에 의해 직접 분리시켜 백색 고체로서 조 de-Fmoc 중간체(5 ㎎, ESI m/z: 421.3((M-Boc)/2+H)+)를 제공하고 이를 DCM(2 ㎖)에 용해시켰다. 용액에 TFA(0.4 ㎖)를 가하고 혼합물을 Boc가 LCMS에 따라 제거될 때까지 rt에서 2시간 동안 교반하였다. 휘발성 물질을 진공하에서 제거하고 잔사를 prep-HPLC에 의해 정제시켜(방법 B) 백색 고체로서 화합물 IVy(1 ㎎, Fmoc-IVq로부터 11% 수율)를 제공하였다. ESI m/z: 841.5 (M + H)+. 1H NMR (500 MHz, DMSO d6 ) δ 8.75 (s, 1H), 8.17 (s, 1H), 7.64 (d, J = 9.1 Hz, 1H), 7.50 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 6.80 (d, J = 8.2 Hz, 2H), 6.44 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 5.60 (d, J = 12.7 Hz, 1H), 4.85 (s, 2H), 4.49 (t, J = 9.4 Hz, 1H), 4.07 (s, 1H), 3.91 (s, 2H), 3.68 (br s, 1H), 2.99 (s, 1H), 2.82 (d, J = 11.5 Hz, 1H), 2.63 (dd, J = 13.0, 6.2 Hz, 1H), 2.47-2.27 (m, 4H), 2.12 (s, 3H), 2.06 (s, 3H), 2.03-1.79 (m, 5H), 1.77-1.39 (m, 8H), 1.32 (s, 7H), 1.23 (s, 2H), 1.00 (d, J = 8.5 Hz, 6H), 0.96 (d, J = 6.4 Hz, 3H), 0.90-0.77 (m, 9H), 0.68 (d, J = 5.5 Hz, 3H) ppm.
O-튜불리신 에스테르 V의 합성(도 5)
(Va)
Figure pct00675
(2S,4R)-4-(2-((1R,3R)-1-아세톡시-3-((2S,3S)-N-(헥실옥시)-3-메틸-2-((R)-1-메틸피페리딘-2-카복스아미도)펜탄아미도)-4-메틸펜틸)티아졸-4-카복스아미도)-5-(4-하이드록시페닐)-2-메틸펜탄산 (Va)
VI에 대한 일반적인 과정에 따라(하기), Va(8.5 ㎎, 28% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. ESI m/z: 830.1 (M + H)+. 1H NMR (500 MHz, DMSO d6 ) δ 9.19 (s, 1H), 8.19 (s, 1H), 7.83 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 7.48 (d, J = 9.5 Hz, 1H), 6.97 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 6.63 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 5.77 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 4.81-4.78 (m, 1H), 4.16-4.06 (m, 3H), 3.97-3.95 (m, 1H), 2.85-2.83 (m, 1H), 2.75-2.71 (m, 1H), 2.68-2.64 (m, 1H), 2.47-2.36 (m, 4H), 2.11 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 2.07-1.94 (m, 2H), 1.80-1.79 (m, 2H), 1.63-1.61 (m, 4H), 1.54-1.44 (m, 3H), 1.42-1.37 (m, 4H), 1.33-1.26 (m, 5H), 1.18-1.09 (m, 2H), 1.06 (d, J = 7.5 Hz, 3H), 0.98 (d, J = 7.0 Hz, 3H), 0.89-0.82 (m, 12H) ppm.
(Vb)
Figure pct00676
(4S)-4-({2-[(1R,3R)-1-(아세틸옥시)-4-메틸-3-[(2S,3S)-3-메틸-2-{[(2R)-1-메틸피페리딘-2-일]포름아미도}-N-(펜틸옥시)펜탄아미도]펜틸]-1,3-티아졸-4-일}포름아미도)-5-(4-아미노페닐)-2,2-디메틸펜탄산 (Vb)
VI에 대한 일반적인 과정에 따라, Vb(6.0 ㎎, 30% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. ESI m/z 829.4 (M + H)+. 1H NMR (400 MHz, DMSO d6 ) δ 8.17 (s, 1H), 7.74 (br s, 1H), 7.51 (d, J = 9.5 Hz, 1H), 6.81 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 6.43 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 5.80 (d, J = 11.5 Hz, 1H), 4.91-4.78 (m, 3H), 4.19-4.11 (m, 2H), 4.10-4.02 (m, 1H), 3.98-3.93 (m, 1H), 2.87-2.81 (m, 1H), 2.65-2.61 (m, 1H), 2.44-2.32 (m, 2H), 2.11 (d, J = 14 Hz, 6H), 2.02-1.92 (m, 2H), 1.88-1.78 (m, 2H), 1.66-1.5 (m, 5H), 1.55-1.23 (m, 11H), 1.18-1.14 (m, 1H), 1.03 (d, J = 11 Hz, 6H), 0.96 (d, J = 7.0 Hz, 3H), 0.88-0.81 (m, 12H) ppm. Anal. HPLC: 95%, Rt: 8.55 min (방법 B).
(Vc)
Figure pct00677
(4S)-4-({2-[(1R,3R)-1-(아세틸옥시)-4-메틸-3-[(2S,3S)-3-메틸-2-{[(2R)-1-메틸피페리딘-2-일]포름아미도}-N-(펜트-4-인-1-일옥시)펜탄아미도]펜틸]-1,3-티아졸-4-일}포름아미도)-2,2-디메틸-5-페닐펜탄산 (Vc)
VI에 대한 일반적인 과정에 따라, Vc(7.0 ㎎, 35% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. ESI m/z 810.0 (M + H)+. 1H NMR (500 MHz, DMSO d6 ) δ 8.15 (s, 1H), 7.74 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.55 (d, J = 10.0 Hz, 1H) , 7.25-7.22 (m, 2H), 7.18-7.16 (m, 3H), 5.81 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 4.77-4.74 (m, 1H), 4.31-4.22 (m, 2H), 4.08-4.04 (m, 2H), 2.83-2.81 (m, 3H), 2.76-2.71 (m, 1H), 2.34-2.33 (m, 3H), 2.13 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 1.99-1.91 (m, 3H), 1.81-1.80 (m, 3H), 1.69-1.60 (m, 3H), 1.52-1.37 (m, 4H), 1.09-1.08 (m, 1H), 1.06-1.04 (m, 6H), 0.97-0.95 (m, 6H), 0.87-0.81 (m, 9H) ppm. Anal. HPLC: >99%, Rt: 8.63 min (방법 B).
(Vd)
Figure pct00678
(4S)-4-({2-[(1R,3R)-1-(아세틸옥시)-4-메틸-3-[(2S,3S)-3-메틸-2-{[(2R)-1-메틸피페리딘-2-일]포름아미도}-N-(펜트-4-인-1-일옥시)펜탄아미도]펜틸]-1,3-티아졸-4-일}포름아미도)-5-(4-플루오로페닐)-2,2-디메틸펜탄산 (Vd)
VI에 대한 일반적인 과정에 따라, Vd(8.0 ㎎, 40% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. ESI m/z 828.4 (M + H)+. 1H NMR (400 MHz, DMSO d6 ) δ 8.08 (s, 1H), 7.71 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 7.51 (d, J = 10.0 Hz, 1H), 7.14-7.11 (m, 2H), 7.00-6.95 (m, 2H), 5.74 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 4.68 (t, J = 9.6 Hz, 1H), 4.18-4.12 (m, 2H), 4.00-3.95 (m, 2H), 2.77-2.64 (m, 4H), 2.29-2.20 (m, 3H), 2.06 (s, 3H), 2.02 (s, 3H), 1.93-1.81 (m, 3H), 1.67-1.62 (m, 3H), 1.57-1.28 (m, 9H), 1.13-1.10 (m, 2H), 1.01 (s, 3H), 0.97 (s,3H), 0.90-0.88 (m, 3H), 0.81-0.76 (m, 9H) ppm. Anal. HPLC: >99%, Rt: 8.40 min (방법 B).
(Ve)
Figure pct00679
(4S)-4-({2-[(1R,3R)-1-(아세틸옥시)-4-메틸-3-[(2S,3S)-3-메틸-2-{[(2R)-1-메틸피페리딘-2-일]포름아미도}-N-(펜트-4-인-1-일옥시)펜탄아미도]펜틸]-1,3-티아졸-4-일}포름아미도)-5-(4-아미노페닐)-2,2-디메틸펜탄산 (Ve)
VI에 대한 일반적인 과정에 따라, Ve(5.3 ㎎, 27% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. ESI m/z 413.3 (M/2 + H)+, 825.3 (M + H)+ (30%). 1H NMR (500 MHz, DMSO d6 ) δ 8.16 (s, 1H), 7.78 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.56 (d, J = 10.0 Hz, 1H) , 6.81 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 6.44 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 5.81 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 4.90-4.74 (m, 3H), 4.26-4.23 (m, 1H), 4.15-4.05 (m, 3H), 2.85-2.82 (m, 2H), 2.77 (br s, 1H), 2.68-2.64 (m, 1H), 2.36-2.31 (m, 3H), 2.13 (s, 3H), 2.09 (s, 3H), 2.03-1.96 (m, 2H), 1.89-1.78 (m, 4H), 1.62-1.35 (m, 9H), 1.19-1.05 (m, 2H), 1.04 (s, 3H), 1.00 (s, 3H), 0.96 (d, J = 5.5 Hz, 3H), 0.89-0.82 (m, 9H) ppm. Anal. HPLC: 95%, Rt: 6.98 min (방법 B).
(Vf)
Figure pct00680
(2S,4R)-4-({2-[(1R,3R)-1-(아세틸옥시)-4-메틸-3-[(2S,3S)-3-메틸-2-{[(2R)-1-메틸피페리딘-2-일]포름아미도}-N-(펜트-4-인-1-일옥시)펜탄아미도]펜틸]-1,3-티아졸-4-일}포름아미도)-5-(4-플루오로페닐)-2-메틸펜탄산 (Vf)
VI에 대한 일반적인 과정에 따라, Vf(4.0 ㎎, 20% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. ESI m/z 814.3 (M + H)+. 1H NMR (500 MHz, 메탄올 d4 ) δ 8.11 (s, 1H), 7.25 (dd, J = 8.5, 5.5 Hz, 2H), 6.96 (t, J = 9.0 Hz, 2H), 5.92-5.90 (m, 1H), 4.91-4.87 (m, 1H), 4.42-4.38 (m, 1H), 4.36-4.30 (m, 1H), 4.20 (dd, J = 13.9, 6.5 Hz, 1H), 4.09-4.03 (m, 1H), 3.15-3.02 (m, 2H), 2.97-2.90 (m, 2H), 2.75-2.65 (m, 1H), 2.56-2.48 (m, 1H), 2.45-2.34 (m, 8H), 2.20-2.10 (m, 4H), 2.04-1.90 (m, 5H), 1.80-1.57 (m, 6H), 1.46-1.36 (m, 1H), 1.27-1.21 (m, 1H), 1.18 (d, J = 7.0 Hz, 3H), 1.07 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 1.03-1.01 (m, 6H), 0.95 (t, J = 7.5 Hz, 3H) ppm. Anal. HPLC: 98%, Rt: 7.63 min (방법 B).
(Vg)
Figure pct00681
(2S,4R)-4-({2-[(1R,3R)-1-(아세틸옥시)-4-메틸-3-[(2S,3S)-3-메틸-2-{[(2R)-1-메틸피페리딘-2-일]포름아미도}-N-(펜트-4-인-1-일옥시)펜탄아미도]펜틸]-1,3-티아졸-4-일}포름아미도)-5-(4-하이드록시페닐)-2-메틸펜탄산 (Vg)
VI에 대한 일반적인 과정에 따라, Vg(7.8 ㎎, 39% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. ESI m/z 812.3 (M + H)+. 1H NMR (500 MHz, 메탄올 d4 ) δ 8.11 (s, 1H), 7.06 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 6.69 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 5.90 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 4.89-4.85 (m, 1H), 4.64 (br s, 1H), 4.41-4.39 (m, 1H), 4.31-4.26(m, 1H), 4.20-4.16 (m, 1H), 4.05-3.98 (s, 1H), 3.12-3.30 (m, 1H), 2.86-2.84 (m, 2H), 2.74-2.66 (m, 1H), 2.54-2.49 (m, 1H), 2.43-2.30 (m, 8H), 2.18 (s, 4H), 2.04-1.90 (m, 5H), 1.79-1.56 (m, 6H), 1.46-1.38 (m, 1H), 1.25-1.20 (m, 1H), 1.19 (d, J = 7.0 Hz, 3H), 1.07 (d, J = 7.0 Hz, 3H), 1.02 (d, J = 7.0 Hz, 6H), 0.95 (t, J = 7.0 Hz, 3H) ppm. Anal. HPLC: >99%, Rt: 7.68 min (방법 A).
(Vh)
Figure pct00682
(2S,4R)-4-({2-[(1R,3R)-1-(아세틸옥시)-4-메틸-3-[(2S,3S)-3-메틸-2-{[(2R)-1-메틸피페리딘-2-일]포름아미도}-N-(펜트-4-인-1-일옥시)펜탄아미도]펜틸]-1,3-티아졸-4-일}포름아미도)-5-(4-아미노페닐)-2-메틸펜탄산 (Vh)
VI에 대한 일반적인 과정에 따라, Vh(12 ㎎, 60% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. ESI m/z 406.2 (M/2 + H)+, 811.2 (M + H)+ (10%). 1H NMR (500 MHz, DMSO d6 ) δ 8.18 (s, 1H), 7.82 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 7.53 (d, J = 9.5 Hz, 1H), 6.83 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 6.44 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 5.78 (d, J = 12 Hz, 1H), 4.76 (t, J = 9.6 Hz, 1H), 4.26-4.12 (m, 1H), 4.10-4.03 (m, 3H), 2.83-2.80 (m, 2H), 2.70-2.65 (m, 1H), 2.60-2.56 (m, 1H), 2.47-2.46 (m, 1H), 2.39-2.28 (m, 4H), 2.12 (s, 3H), 2.09 (s, 3H), 2.03-1.91 (m, 2H), 1.84-1.78 (m, 4H), 1.62-1.35 (m, 8H), 1.18-1.07 (m, 2H), 1.04 (d, J = 10.5 Hz, 3H), 0.97 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 0.89-0.81 (m, 9H) ppm. Anal. HPLC: >99%, Rt: 6.84 min (방법 A).
(Vi)
Figure pct00683
(2S,4R)-5-(4-하이드록시페닐)-4-(2-((8R,10R)-8-이소프로필-7-((2S,3S)-3-메틸-2-((R)-1-메틸피페리딘-2-카복스아미도)펜타노일)-1-(4-니트로페닐)-12-옥소-2,6,11-트리옥사-7-아자트리데칸-10-일)티아졸-4-카복스아미도)-2-메틸펜탄산 (Vi)
VI에 대한 일반적인 과정에 따라, Vi(30 ㎎, 47% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. ESI m/z 939.5 (M + H)+. 1H NMR (500 MHz, DMSO d6 ) δ 12.08 (s, 1H), 9.15 (s, 1H), 8.19 (s, 1H), 8.17 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.86 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.56 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.51 (d, J = 10.0 Hz, 1H), 6.96 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 6.62 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 5.77 (d, J = 12.5 Hz, 1H), 5.77 (t, J = 8.5 Hz, 1H), 4.59 (s, 2H), 4.31-4.27 (m, 1H), 4.15-4.04 (m, 3H), 3.68-3.58 (m, 2H), 2.85-2.82 (m, 1H), 2.75-2.70 (m, 1H), 2.67-2.62 (m, 1H), 2.42-2.28 (m, 4H), 2.10 (s, 3H), 2.09 (s, 3H), 1.98-1.91 (m, 4H), 1.85-1.74 (m, 2H), 1.63-1.32 (m, 7H), 1.20-1.11 (m, 1H), 1.05-0.99 (m, 4H), 0.93 (d, J = 6.0 Hz, 3H), 0.84 (d, J = 7.0 Hz, 6H), 0.79 (t, J = 7.5 Hz, 3H) ppm.
(Vj)
Figure pct00684
(2S,4R)-4-(2-((8R,10R)-1-(4-아미노페닐)-8-이소프로필-7-((2S,3S)-3-메틸-2-((R)-1-메틸피페리딘-2-카복스아미도)펜타노일)-12-옥소-2,6,11-트리옥사-7-아자트리데칸-10-일)티아졸-4-카복스아미도)-5-(4-하이드록시페닐)-2-메틸펜탄산 (Vj)
에탄올(2.0 ㎖) 중의 화합물 Vi(4.0 ㎎, 4.2 μmol)의 용액에 목탄상 팔라듐(5% Pd, 0.6 ㎎)을 가하고 혼합물을 탈기시키고 수소로 3회 역충전하였다. 생성 혼합물을, 질소기가 LCMS에 의해 모니터된 바와 같이 완전히 환원될 때까지 rt에서 2시간 동안 수소 분위기하에서 교반하였다. 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고 셀라이트를 에탄올로 세척하였다(3x). 합한 여액을 진공하에서 농축시켰다. 잔사를 prep-HPLC(암모늄 비카보네이트 시스템)에 의해 정제시켜 백색 고체로서 화합물 Vj(2.0 ㎎, 53% 수율)를 제공하였다. ESI m/z: 909 (M + H)+. 1H NMR (500 MHz, DMSO d6 ) δ 9.16 (s, 1H), 8.18 (s, 1H), 7.84 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 7.48 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 6.96 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 6.90 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 6.62 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 6.46 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 5.76 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 4.75 (t, J = 8.4 Hz, 1H), 4.23-4.16 (m, 3H), 4.11 (br s, 1H), 4.04-3.98 (m, 2H), 3.50-3.43 (m, 2H), 2.84-2.81 (m, 1H), 2.75-2.60 (m, 2H), 2.37-2.30 (m, 3H), 2.09-2.07 (m, 9H), 1.97-1.74 (m, 6H), 1.63-1.60 (m, 2H), 1.51-1.33 (m, 5H), 1.23-1.05 (m, 2H), 1.02 (d, J = 7.6 Hz, 3H), 0.93 (d, J = 6.4 Hz, 3H), 0.87-0.80 (m, 9H) ppm. 키랄 SFC > 99% (AD-H, AS-H, OJ-H, 및 OD-H), Rt: 1.61 min (AD-H), 2.71 min (AS-H), 4.32 min (OD-H), 및 1.97 min (OJ-H).
(Vk)
Figure pct00685
(2S,4R)-4-(2-((1R,3R)-1-아세톡시-3-((2S,3S)-N-(3-하이드록시프로폭시)-3-메틸-2-((R)-1-메틸피페리딘-2-카복스아미도)펜탄아미도)-4-메틸펜틸)티아졸-4-카복스아미도)-5-(4-하이드록시페닐)-2-메틸펜탄산 (Vk)
메탄올(4.0 ㎖) 중의 화합물 Vi(17 ㎎, 18 μmol)의 용액에 목탄상 팔라듐(5% Pd, 1.7 ㎎)을 가하고 혼합물을 탈기시키고 수소로 3회 역충전하였다. 생성 혼합물을 rt에서 밤새, 및 이어서 50℃에서 추가로 6시간 동안 수소 분위기하에서 교반하였다. LCMS는 Vi도 Vj도 남아있지 않음을 나타내었다. 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고 셀라이트를 에탄올로 세척하였다(3회). 합한 여액을 진공하에서 농축시켰다. 잔사를 Prep-HPLC(암모늄 비카보네이트 시스템)에 의해 정제시켜 백색 고체로서 화합물 Vk(6.0 ㎎, 41% 수율)를 제공하였다. ESI m/z: 804.2 (M + H)+. 1H NMR (500 MHz, DMSO d6 ) δ 9.16 (s, 1H), 8.18 (s, 1H), 7.95 (br s, 1H), 7.51 (d, J = 10.0 Hz, 1H), 6.98 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 6.63 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 6.80 (d, J = 11.5 Hz, 1H), 4.79 (t, J = 8.5 Hz, 1H), 4.26-4.22 (m, 1H), 4.14-4.06 (m, 3H), 3.58-3.56 (m, 2H), 2.85-2.82 (m, 1H), 2.77-2.72 (m, 1H), 2.67-2.63 (m, 1H), 2.48-2.46 (m, 1H), 2.40-2.30 (m, 2H), 2.13 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 2.04-1.91 (m, 2H), 1.85-1.79 (m, 4H), 1.64-1.62 (m, 2H), 1.55-1.32 (m, 6H), 1.20-1.09 (m, 2H), 1.05 (d, J = 7.0 Hz, 3H), 0.96 (d, J = 7.0 Hz, 3H), 0.89-0.82 (m, 10H) ppm.
O-튜불리신의 합성(도 5A)
IX 및 X에 대한 일반적인 과정
DCM(50 mM) 중의 화합물 A-1(1.0 당량)의 용액에 화합물 A-2(1.5 당량) 및 DIPEA(4.0 당량)을 가하고, 반응 혼합물을 RT에서 4시간 동안 교반하고, 이를 LCMS에 의해 모니터하였다. 생성 혼합물을 역상 플래시 크로마토그래피(수성 TFA(0.01%) 중의 0-30% 아세토니트릴)에 의해 직접 정제시켜 회색 고체로서 IX 또는 X(7-57% 수율)를 제공하였다.
Figure pct00686
(4S)-4-({2-[(1R,3R)-1-(아세틸옥시)-4-메틸-3-[(2S,3S)-3-메틸-2-{[(2R)-1-메틸피페리딘-2-일]포름아미도}-N-(펜트-4-인-1-일옥시)펜탄아미도]펜틸]-1,3-티아졸-4-일}포름아미도)-5-(4-하이드록시페닐)-2,2-디메틸펜탄산 (IX)
화합물 A-2e로 처리된 화합물 A-1b로부터 IX 및 X에 대한 일반적인 과정에 따라, 페이로드 IX(15 ㎎, 12% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. ESI m/z 826.5 (M + H)+. 1H NMR (400 MHz, DMSO d6 ) δ 9.16 (s, 1H), 8.16 (s, 1H), 7.65 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.59 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 6.95 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 6.62 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 5.82 (d, J = 10.0 Hz, 1H), 4.76 (t, J = 8.4 Hz, 1H), 4.23-4.20 (m, 2H), 4.09-4.01 (m, 2H), 2.90-2.80 (m, 2H), 2.73-2.68 (m, 1H), 2.63-2.58 (m, 1H), 2.39-2.31 (m, 3H), 2.14-2.06 (m, 6H), 2.01-1.87 (m, 3H), 1.84-1.80 (m, 3H), 1.66-1.61 (m, 3H), 1.56-1.53 (m, 1H), 1.46-1.36 (m, 3H), 1.22-1.11 (m, 2H), 1.05-1.03 (m, 7H), 0.96 (d, J = 6.4 Hz, 3H), 0.88-0.81 (m, 10H) ppm.
Figure pct00687
(4S)-4-({2-[(1R,3R)-1-(아세틸옥시)-4-메틸-3-[(2S,3S)-3-메틸-2-{[(2R)-1-메틸피페리딘-2-일]포름아미도}-N-(펜틸옥시)펜탄아미도]펜틸]-1,3-티아졸-4-일}포름아미도)-5-(4-하이드록시페닐)-2,2-디메틸펜탄산 (X)
화합물 A-2e로 처리된 화합물 A-1c로부터 IX 및 X에 대한 일반적인 과정에 따라, 페이로드 X(20 ㎎, 57% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. ESI m/z 830.1 (M + H)+. 1H NMR (400 MHz, DMSO d6 ) δ 9.15 (s, 1H), 8.16 (s, 1H), 7.67 (br s, 1H), 7.47 (d, J = 10.0 Hz, 1H), 6.94 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 6.61 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 5.80 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 4.79 (t, J = 9.2 Hz, 1H), 4.19-4.04 (m, 3H), 3.95-3.93 (m, 1H), 2.85-2.81 (m, 1H), 2.71-2.62 (m, 2H), 2.43-2.30 (m, 3H), 2.11 (d, J = 9.6 Hz, 6H), 2.10-1.76 (m, 4H), 1.66-1.10 (m, 15H), 1.04 (d, J = 6.0 Hz, 6H), 0.96 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 0.88-0.81 (m, 12H) ppm.
O-튜불리신 카보네이트(VI)의 합성
화합물 33A, F, H에 대한 일반적인 과정(도 7A)
무수 DMF(27의 그램당 10 ㎖) 중의 화합물 27a, c, f(1.0 당량) 및 비스(4-니트로페닐)카보네이트(NPC)(5.0 당량)의 혼합물에 DIPEA(3 당량)를 가하고 혼합물을, 화합물 27a, c, f가 LCMS에 의해 모니터된 바와 같이 완전히 소모될 때까지 rt에서 16시간 동안 교반하였다. 생성 혼합물을 포화된 수성 나트륨 비카보네이트에 붓고 수성 용액을 에틸 아세테이트로 추출하였다(4회). 합한 유기 용액을 염수로 세척하고, 황산 나트륨상에서 건조시키고, 여과하고 농축 건조시켜 황색 오일로서 조 화합물 33A, F, H를 제공하고, 이를 정제 없이 다음 단계에 사용하였다.
Figure pct00688
에틸 2-((1R,3R)-3-((2S,3S)-N-(헥실옥시)-3-메틸-2-((R)-1-메틸피페리딘-2-카복스아미도)펜탄아미도)-4-메틸-1-((4-니트로페녹시)카보닐옥시)펜틸)티아졸-4-카복실레이트 (33A)
무수 DMF(1 ㎖) 중의 화합물 27a(0.10 g, 0.16 mmol) 및 비스(4-니트로페닐)카보네이트(NPC)(0.25 g, 0.82 mmol)의 혼합물에 DIPEA(63 ㎎, 0.49 mmol)를 가하고 혼합물을, 화합물 27a가 LCMS에 의해 모니터된 바와 같이 완전히 소모될 때까지 rt에서 16시간 동안 교반하였다. 생성 혼합물을 포화된 수성 나트륨 비카보네이트(10.0 ㎖)에 붓고 수성 용액을 에틸 아세테이트로 추출하였다(4회). 합한 유기 용액을 염수로 세척하고, 황산 나트륨상에서 건조시키고, 여과하고 농축 건조시켜 황색 오일로서 조 화합물 33A(430 ㎎)를 제공하고, 이를 정제 없이 다음 단계에 사용하였다. ESI m/z: 775.8(M+H)+.
화합물 34a-e, F, H에 대한 일반적인 과정(도 7A)
DCM(5.0 ㎖) 중의 상기에서 수득된 조 물질 33A, F, H(1.0 당량, 화합물 27a, c, f로부터 산정됨)의 용액을 R2NH2(THF 중의 2 M 용액, 4.0 당량)로 주사기로 처리하였다. 생성 용액을 rt에서 16시간 동안 교반하였다. 이어서 반응 혼합물을 DCM(5.0 ㎖)으로 희석하고 포화된 수성 나트륨 비카보네이트(10 ㎖)로 세척하였다. 수성층을 DCM으로 추출하였다(2회). 합한 유기 용액을 황산 나트륨상에서 건조시키고, 여과하고 진공하에서 농축시켜 조 카바메이트를 제공하고, 이를 수 및 THF에 용해시켰다. 용액에 수산화 리튬 수화물(7-8 당량)을 가하였다. 생성 혼합물을 rt에서 밤새 교반하였다. 휘발성 물질을 진공하에서 제거하고 잔류 수성 혼합물을 수성 시트르산 용액(1 M)으로 pH 6.0으로 산성화시켰다. 혼합물을 DCM으로 추출하였다(3회). 합한 유기층을 농축시키고 잔사를 RP 크로마토그래피(수 중 0-80% 아세토니트릴(0.01% TFA의 존재 또는 부재하에서))에 의해 정제시켜 백색 고체로서 화합물 34a-e, F, H를 제공하였다.
화합물 VIa-f, h에 대한 일반적인 과정(도 7A)
무수 DCM(10-15 ㎎/㎖) 중의 화합물 34(1.0 당량) 및 PFP(1.5 당량)의 혼합물에 0℃에서 DCM(5-10 ㎎/㎖) 중의 DIC(1.1 당량)의 용액을 주사기로 적가하였다. 생성 용액을 rt로 가온시키고 16시간 동안 교반하고, LCMS에 의해 모니터하였다. 휘발성 물질을 진공하에서 제거하고 잔사를 에틸 아세테이트에 현탁시켰다. 고체를 여과하고 여액을 농축시켰다. 잔사를 무수 DMF(15-20 ㎎/㎖)에 용해시키고 용액에 DIPEA(3.0 당량) 및 중간체 Ie 또는 Ic(1.0 당량)를 연속적으로 가하였다. 반응 혼합물을 rt에서 밤새 교반하고, LCMS에 의해 모니터하였다. 반응 혼합물을 Prep-HPLC(암모늄 비카보네이트 시스템)에 의해 직접 정제시켜 백색 고체로서 VIa-e 또는 Fmoc-VIf, h를 제공하였다. 화합물 Fmoc-VIf, h(1 당량)를 DMF(Fmoc-VIf, h의 ㎎당 0.15 ㎖)에 용해시켰다. 용액에 피페리딘(Vpip/VDMF = 1/20, 과잉)을 가하고 반응 혼합물을, Fmoc가 LCMS에 의해 모니터된 바와 같이 완전히 제거될 때까지 rt에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 prep-HPLC에 의해 직접 정제시켜(방법 B) 백색 고체로서 VIf, h를 제공하였다.
Figure pct00689
2-((5R,7R)-7-이소프로필-8-((2S,3S)-3-메틸-2-((R)-1-메틸피페리딘-2-카복스아미도)펜타노일)-3-옥소-4,9-디옥사-2,8-디아자펜타데칸-5-일)티아졸-4-카복실산 트리플루오로아세트산 염 (34a)
34a-e, F, H에 대한 일반적인 과정에 따라, 화합물 34a(43 ㎎, 27a로부터 40% 수율)를 트리플루오로아세트산 염으로서 수득하였다. ESI m/z: 640.0 (M + H)+. 1H NMR (400 MHz, DMSO d6 ) δ 9.70 (br s, 1H), 8.98-8.96 (m, 1H), 8.42 (s, 1H), 7.46 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 5.62 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 4.78-4.73 (m, 1H), 4.08-4.05 (m, 1H), 3.92-3.82 (m, 2H), 3.63-3.61 (m, 1H), 3.06-2.99 (m, 1H), 2.71 (s, 3H), 2.54-2.51 (m, 3H), 2.17-2.05 (m, 3H), 1.87-1.75 (m, 1H), 1.67-1.66 (m, 2H), 1.58-1.54 (m, 4H), 1.46-1.36 (m, 4H), 1.28-1.27 (m, 4H), 1.16-1.12 (m, 1H), 0.96-0.82 (m, 17H) ppm.
Figure pct00690
2-((6R,8R)-8-이소프로필-9-((2S,3S)-3-메틸-2-((R)-1-메틸피페리딘-2-카복스아미도)펜타노일)-4-옥소-5,10-디옥사-3,9-디아자헥사데칸-6-일)티아졸-4-카복실산 (34b)
34a-e, F, H에 대한 일반적인 과정에 따라, 화합물 34b(10 ㎎, 27a로부터 10% 수율)를 트리플루오로아세트산 염으로서 수득하였다. ESI m/z: 654.3 (M + H)+. 1H NMR (500 MHz, DMSO d6 ) δ 8.31 (s, 1H), 7.59 (br s, 1H), 7.51-7.48 (m, 1H), 5.60 (d, J = 7.0 Hz, 1H), 4.79-4.76 (m, 1H), 4.10-4.06 (m, 1H), 3.95-3.90 (m, 1H), 3.84-3.83 (m, 1H), 3.00-2.94 (m, 2H), 2.89-2.86 (m, 1H), 2.18-2.16 (m, 4H), 2.05-2.03 (m, 2H), 1.82-1.80 (m, 1H), 1.69-1.54 (m, 6H), 1.47-1.37 (m, 6H), 1.29-1.27 (m, 5H), 1.19-1.16 (m, 1H), 1.10-1.06 (m, 1H), 0.99 (t, J = 7.5 Hz, 3H), 0.94 (d, J = 6.0 Hz, 3H), 0.91-0.84 (m, 12H) ppm.
Figure pct00691
2-((7R,9R)-9-이소프로필-10-((2S,3S)-3-메틸-2-((R)-1-메틸피페리딘-2-카복스아미도)펜타노일)-5-옥소-6,11-디옥사-4,10-디아자헵타데칸-7-일)티아졸-4-카복실산 트리플루오로아세트산 염 (34c)
34a-e, F, H에 대한 일반적인 과정에 따라, 화합물 34c(45 ㎎, 27a로부터 36% 수율)를 트리플루오로아세트산 염으로서 수득하였다. ESI m/z: 667.9 (M + H)+. 1H NMR (400 MHz, DMSO d6 ) δ 13.17 (br s, 1H), 9.67 (br s, 1H), 8.99 (s, 1H), 8.42 (s, 1H), 7.59 (t, J = 5.6 Hz, 1H), 5.62 (d, J = 11.8 Hz, 1H), 4.77 (t, J = 8.6 Hz, 1H), 4.16-4.01 (m, 1H), 3.94-3.87 (m, 1H), 3.83 (br s, 1H), 3.63 (br s, 1H), 3.11-2.95 (m, 1H), 2.89 (q, J = 6.8 Hz, 2H), 2.70 (s, 3H), 2.62-2.53 (m, 1H), 2.26-1.96 (m, 3H), 1.93-1.82 (m, 1H), 1.82-1.52 (m, 6H), 1.51-1.33 (m, 6H), 1.33-1.21 (m, 4H), 1.20-1.08 (m, 1H), 1.00-0.88 (m, 9H), 0.88-0.75 (m, 9H) ppm.
Figure pct00692
2-((8R,10R)-10-이소프로필-11-((2S,3S)-3-메틸-2-((R)-1-메틸피페리딘-2-카복스아미도)펜타노일)-6-옥소-7,12-디옥사-5,11-디아자옥타데칸-8-일)티아졸-4-카복실산 트리플루오로아세트산 염 (34d)
34a-e, F, H에 대한 일반적인 과정에 따라, 화합물 34d(50 ㎎, 27a로부터 44% 수율)를 트리플루오로아세트산 염으로서 수득하였다. ESI m/z: 682.0 (M + H)+. 1H NMR (500 MHz, DMSO d6 ) δ 13.16 (br s, 1H), 9.69 (s, 1H), 9.01 (d, J = 9.1 Hz, 1H), 8.42 (s, 1H), 7.57 (t, J = 5.6 Hz, 1H), 5.62 (d, J = 11.9 Hz, 1H), 4.76 (t, J = 8.7 Hz, 1H), 4.11-4.02 (m, 1H), 3.94-3.80 (m, 2H), 3.62 (s, 1H), 3.34 (d, J = 12.1 Hz, 1H), 3.09-3.00 (m, 1H), 2.97-2.88 (m, 2H), 2.74-2.67 (m, 3H), 2.62-2.54 (m, 1H), 2.18-2.04 (m, 3H), 1.92-1.83 (m, 1H), 1.83-1.54 (m, 6H), 1.49-1.20 (m, 12H), 1.20-1.10 (m, 1H), 0.98-0.88 (m, 9H), 0.88-0.80 (m, 9H) ppm.
Figure pct00693
2-((9R,11R)-9-이소프로필-8-((2S,3S)-3-메틸-2-((R)-1-메틸피페리딘-2-카복스아미도)펜타노일)-13-옥소-7,12-디옥사-8,14-디아자아이코산-11-일)티아졸-4-카복실산 트리플루오로아세트산 염 (34e)
34a-e, F, H에 대한 일반적인 과정에 따라, 화합물 34e(40 ㎎, 27a로부터 46% 수율)를 트리플루오로아세트산 염으로서 수득하였다. ESI m/z: 709.9(M+H)+.
(VIa)
(2S,4R)-5-(4-하이드록시페닐)-4-(2-((5R,7R)-7-이소프로필-8-((2S,3S)-3-메틸-2-((R)-1-메틸피페리딘-2-카복스아미도)펜타노일)-3-옥소-4,9-디옥사-2,8-디아자펜타데칸-5-일)티아졸-4-카복스아미도)-2-메틸펜탄산 (VIa)
VIa-f,h에 대한 일반적인 과정에 따라, VIa(16 ㎎, 36% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. ESI m/z: 845.0 (M + H)+. 1H NMR (500 MHz, DMSO d6 ) δ 9.70 (s, 1H), 9.22 (br s, 1H), 8.96 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 8.17 (s, 1H), 7.82 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.44 (d, J = 4.5 Hz, 1H), 6.98 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 6.63 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 5.65 (d, J = 11.5 Hz, 1H), 4.80-4.76 (m, 1H), 4.13-4.11 (m, 2H), 3.98-3.96 (m, 1H), 3.85-3.81 (m, 2H), 3.32 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 3.08-3.01 (m, 1H), 2.74-2.66 (m, 5H), 2.55-2.53 (d, J = 8.5 Hz, 3H), 2.42-2.38 (m, 1H), 2.25-2.20 (m, 1H), 2.09-2.07 (m, 2H), 1.88-1.82 (m, 4H), 1.78-1.66 (m, 4H), 1.62-1.23 (m, 10H), 1.16-1.11 (m, 1H), 1.07 (d, J = 7.0 Hz, 3H), 0.98 (d, J = 7.0 Hz, 3H), 0.92-0.90 (m, 6H), 0.86-0.83 (m, 6H) ppm. 키랄 SFC: > 99% (AD-H 및 AS-H).
(VIb)
(2S,4R)-5-(4-하이드록시페닐)-4-(2-((6R,8R)-8-이소프로필-9-((2S,3S)-3-메틸-2-((R)-1-메틸피페리딘-2-카복스아미도)펜타노일)-4-옥소-5,10-디옥사-3,9-디아자헥사데칸-6-일)티아졸-4-카복스아미도)-2-메틸펜탄산 (VIb)
VIa-f,h에 대한 일반적인 과정에 따라, VIb(2.0 ㎎, 15% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. ESI m/z: 859.5 (M + H)+. 1H NMR (500 MHz, DMSO d6 ) δ 9.17 (s, 1H), 8.15 (s, 1H), 7.76 (br s, 1H), 7.49 (t, J = 5.5 Hz, 1H), 7.44 (d, J = 9.5 Hz, 1H), 6.97 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 6.64 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 5.65 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 4.81-4.77 (m, 1H), 4.16-4.11 (m, 2H), 3.97-3.94 (m, 2H), 3.02-2.96 (m, 1H), 2.85-2.82 (m, 1H), 2.75-2.64 (m, 4H), 2.37-2.36 (m, 1H), 2.25-2.19 (m, 1H), 2.10 (s, 3H), 2.04-1.92 (m, 3H), 1.87-1.81 (m, 2H), 1.65-1.48 (m, 7H), 1.41-1.35 (m, 4H), 1.28-1.25 (m, 5H), 1.18-1.15 (m, 2H), 1.05 (d, J = 7.0 Hz, 3H), 1.02-0.97 (m, 6H), 0.89 (d, J = 7.0 Hz, 6H), 0.86-0.82 (m, 6H ) ppm.
(VIc)
(2S,4R)-5-(4-하이드록시페닐)-4-(2-((7R,9R)-9-이소프로필-10-((2S,3S)-3-메틸-2-((R)-1-메틸피페리딘-2-카복스아미도)펜타노일)-5-옥소-6,11-디옥사-4,10-디아자헵타데칸-7-일)티아졸-4-카복스아미도)-2-메틸펜탄산 (VIc)
VIa-f,h에 대한 일반적인 과정에 따라, VIc(20 ㎎, 40% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. ESI m/z: 873.5 (M + H)+. 1H NMR (500 MHz, DMSO d6 ) δ 9.16 (s, 1H), 8.15 (s, 1H), 7.70 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.51 (t, J = 5.6 Hz, 1H), 7.45 (d, J = 9.4 Hz, 1H), 6.97 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 6.63 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 5.65 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 4.79 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 4.20-4.07 (m, 2H), 4.07-3.90 (m, 2H), 2.91 (q, J = 6.5 Hz, 2H), 2.87-2.79 (m, 1H), 2.76-2.61 (m, 2H), 2.47-2.34 (m, 3H), 2.27-2.17 (m, 1H), 2.10 (s, 3H), 2.07-1.90 (m, 2H), 1.88-1.76 (m, 2H), 1.67-1.56 (m, 4H), 1.56-1.44 (m, 3H), 1.44-1.31 (m, 6H), 1.29-1.22 (m, 4H), 1.21-1.08 (m, 2H), 1.05 (d, J = 7.1 Hz, 3H), 0.97 (d, J = 6.6 Hz, 3H), 0.91-0.78 (m, 16H) ppm. 키랄 SFC: > 99% (AD-H 및 AS-H).
(VId)
(2S,4R)-5-(4-하이드록시페닐)-4-(2-((8R,10R)-10-이소프로필-11-((2S,3S)-3-메틸-2-((R)-1-메틸피페리딘-2-카복스아미도)펜타노일)-6-옥소-7,12-디옥사-5,11-디아자옥타데칸-8-일)티아졸-4-카복스아미도)-2-메틸펜탄산 (VId)
VIa-f,h에 대한 일반적인 과정에 따라, VId(33 ㎎, 50% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. ESI m/z: 887.3 (M + H)+. 1H NMR (500 MHz, DMSO d6 ) δ 9.16 (s, 1H), 8.14 (s, 1H), 7.70 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.49 (t, J = 5.7 Hz, 1H), 7.45 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 6.97 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 6.63 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 5.65 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 4.93-4.62 (m, 1H), 4.20-4.05 (m, 2H), 4.05-3.86 (m, 2H), 2.95 (q, J = 6.5 Hz, 2H), 2.87-2.78 (m, 1H), 2.78-2.60 (m, 2H), 2.48-2.34 (m, 3H), 2.21 (t, J = 11.5 Hz, 1H), 2.10 (s, 3H), 2.07-1.90 (m, 2H), 1.89-1.75 (m, 2H), 1.68-1.56 (m, 4H), 1.56-1.44 (m, 3H), 1.42-1.31 (m, 6H), 1.31-1.21 (m, 6H), 1.21-1.07 (m, 2H), 1.05 (d, J = 7.1 Hz, 3H), 0.97 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 0.93-0.72 (m, 16H) ppm. 키랄 SFC: > 96% (AD-H 및 AS-H).
(VIe)
(2S,4R)-5-(4-하이드록시페닐)-4-(2-((9R,11R)-9-이소프로필-8-((2S,3S)-3-메틸-2-((R)-1-메틸피페리딘-2-카복스아미도)펜타노일)-13-옥소-7,12-디옥사-8,14-디아자아이코산-11-일)티아졸-4-카복스아미도)-2-메틸펜탄산 (VIe)
VIa-f,h에 대한 일반적인 과정에 따라, VIe(21 ㎎, 40% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. ESI m/z: 915.5 (M + H)+. 1H NMR (400 MHz, DMSO d6 ) δ 9.17 (s, 1H), 8.15 (s, 1H), 7.71 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 7.58-7.35 (m, 2H), 6.97 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 6.63 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 5.65 (d, J = 10.0 Hz, 1H), 4.78 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.21-4.04 (m, 2H), 4.04-3.86 (m, 2H), 3.01-2.89 (m, 2H), 2.89-2.77 (m, 1H), 2.77-2.59 (m, 2H), 2.48-2.31 (m, 3H), 2.30-2.16 (m, 1H), 2.11 (s, 3H), 2.07-1.90 (m, 2H), 1.90-1.74 (m, 2H), 1.66-1.55 (m, 4H), 1.54-1.44 (m, 3H), 1.43-1.31 (m, 6H), 1.29-1.16 (m, 12H), 1.05 (d, J = 7.0 Hz, 3H), 0.96 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 0.92-0.77 (m, 16H) ppm.
(VIf)
에틸 2-[(1R,3R)-4-메틸-3-[(2S,3S)-3-메틸-2-{[(2R)-1-메틸피페리딘-2-일]포름아미도}-N-(펜트-4-인-1-일옥시)펜탄아미도]-1-[(4-니트로페녹시카보닐)옥시]펜틸]-1,3-티아졸-4-카복실레이트 (33F)(도 7B)
Figure pct00694
27a 대신에 27c를 사용함을 제외하고, 33A와 유사한 과정에 따라, 화합물 33F(120 ㎎, 조 물질)를 황색 오일로서 수득하고, 이를 추가의 정제 없이 다음 단계에 사용하였다. ESI m/z: 758.3(M+H)+.
2-[(1R,3R)-1-[(에틸카바모일)옥시]-4-메틸-3-[(2S,3S)-3-메틸-2-{[(2R)-1-메틸피페리딘-2-일]포름아미도}-N-(펜트-4-인-1-일옥시)펜탄아미도]펜틸]-1,3-티아졸-4-카복실산 (34F)(도 7B)
Figure pct00695
33A 대신에 33F를 사용함을 제외하고, 34b와 유사한 과정에 따라, 화합물 34F(25 ㎎, 3 단계로 52% 수율)를, 역상 플래시 크로마토그래피(수성 TFA(0.01%) 중의 45-55% 아세토니트릴)에 의해 정제 후에 무색 오일로서 수득하였다. ESI m/z: 636.2(M+H)+.
(4S)-5-(4-아미노페닐)-4-({2-[(1R,3R)-1-[(에틸카바모일)옥시]-4-메틸-3-[(2S,3S)-3-메틸-2-{[(2R)-1-메틸피페리딘-2-일]포름아미도}-N-(펜트-4-인-1-일옥시)펜탄아미도]펜틸]-1,3-티아졸-4-일}포름아미도)-2,2-디메틸펜탄산 (VIf)(도 7B)
Figure pct00696
34 대신에 34F를 사용하고 Ie 대신에 Ic를 사용함을 제외하고, VI에 대한 일반적인 과정에 따라, Fmoc-VIf(15 ㎎)를 밝은 갈색 고체로서 수득하였다. ESI m/z: 1076.3(M+H)+. 화합물 Fmoc-VIf(15 ㎎)를 DMF(2.0 ㎖)에 용해시켰다. 용액에 피페리딘(0.10 ㎖)을 가하고 반응 혼합물을, Fmoc가 LCMS에 의해 모니터된 바와 같이 완전히 제거될 때까지 rt에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 prep-HPLC에 의해 직접 정제시켜(방법 B) 백색 고체로서 VIf(8 ㎎, 3 단계로 27% 수율)를 제공하였다. ESI m/z: 854.5 (M + H)+. 1H NMR (메탄올 d4 , 500 MHz) δ 8.07 (s, 1H), 6.99 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 6.66 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 5.78 (dd, J = 11.2, 1.2 Hz, 1H), 4.90-4.88 (m, 1H), 4.38-4.27 (m, 2H), 4.20-4.15 (m, 1H), 4.00-3.91 (m, 1H), 3.16-3.09 (m, 3H), 3.04-3.01 (m, 1H), 2.94-2.91 (m, 1H), 2.85-2.66 (m, 3H), 2.49-2.12 (m, 9H), 2.06-1.55 (m, 12H), 1.43-1.31 (m, 1H), 1.24-1.00 (m, 17H), 0.94 (t, J = 7.2 Hz, 3H) ppm. Anal. HPLC: > 99%, 체류 시간: 7.85 min (방법 B).
(VIg)
(4S)-5-(4-아세트아미도페닐)-4-({2-[(1R,3R)-1-[(에틸카바모일)옥시]-4-메틸-3-[(2S,3S)-3-메틸-2-{[(2R)-1-메틸피페리딘-2-일]포름아미도}-N-(펜트-4-인-1-일옥시)펜탄아미도]펜틸]-1,3-티아졸-4-일}포름아미도)-2,2-디메틸펜탄산 (VIg)(도 7B)
Figure pct00697
화합물 VIf(1.0 ㎎, 1.2 μmol)를 DCM(1.0 ㎖)에 용해시키고 용액을 빙욕에서 0℃로 냉각시켰다. 용액에 DCM(50 ㎕) 중의 Ac2O(0.24 ㎎, 2.4 μmol)의 용액 및 DCM(50 ㎕) 중의 DIPEA(0.30 ㎎, 2.4 μmol)의 용액을 가하였다. 반응 혼합물을 rt에서 2시간 동안 교반하였다. LCMS는 출발 물질의 완전한 소모를 나타내었으며, 목적하는 생성물이 검출되었다. 휘발성 물질을 진공하에서 제거하고 조 생성물을 pre-HPLC에 의해 직접 정제시켜(방법 B) 백색 고체로서 VIg(0.3 ㎎, 수율 28%)를 제공하였다. ESI m/z: 896.5(M+H)+. Anal. HPLC: 100%, 체류시간: 7.49 min(방법 B).
(VIh)
(S)-5-(4-아미노페닐)-4-(2-((5R,7R)-7-이소프로필-8-((2S,3S)-3-메틸-2-((R)-1-메틸피페리딘-2-카복스아미도)펜타노일)-3-옥소-4,9-디옥사-2,8-디아자테트라데칸-5-일)티아졸-4-카복스아미도)-2,2-디메틸펜탄산 (VIh)(도 7B)
Figure pct00698
27c 대신에 27f를 사용함을 제외하고, 27c에서 화합물 VIf로의 과정과 유사한 과정에 따라, 화합물 VIh(2 ㎎, 27f로부터 4.5%)를 백색 고체로서 수득하였다. ESI m/z: 844.2 (M + H)+. 1H NMR (DMSO d6 , 400 MHz) δ 8.10 (d, J = 21.6 Hz, 1H), 7.45 (dd, J = 30.2, 7.1 Hz, 2H), 6.81 (d, J = 8.2 Hz, 2H), 6.44 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 5.79-5.56 (m, 1H), 4.94-4.63 (m, 3H), 4.14 (s, 2H), 3.95 (d, J = 7.1 Hz, 1H), 2.85 (d, J = 11.4 Hz, 2H), 2.70-2.60 (m, 2H), 2.56 (d, J = 4.6 Hz, 2H), 2.45-2.41 (m, 1H), 2.20 (d, J = 11.4 Hz, 1H), 2.09 (d, J = 12.0 Hz, 3H), 2.05-1.90 (m, 3H), 1.81 (s, 3H), 1.61 (s, 6H), 1.50 (d, J = 20.7 Hz, 2H), 1.35 (d, J = 4.8 Hz, 6H), 1.14 (d, J = 28.2 Hz, 2H), 1.08 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 1.03 (d, J = 7.9 Hz, 6H), 0.96 (d, J = 6.6 Hz, 2H), 0.90-0.79 (m, 12H) ppm.
예시적인 제조 반응식 E, H, J, K, M 및 N
반응식 E(102 및 102a)
DMF 중의 Fmoc-vc-PAB-X(X = Br, Cl, 또는 -OTf)의 용액에 피페리딘을 가하고 용액을 LCMS에 의해 Fmoc-vc-PAB-X의 소모가 완료될 때까지 rt에서 교반하였다. 수율이 촉매 NaI의 존재하에서 개선된다. 표준 후처리 조건에 이어서, 조 vc-PAB-X를 DMF 및 6-말레이미도헥산산(과잉)에 용해시키고, HATU 및 DIPEA를 가한다. 반응물을, vc-PAB-X 소모가 LCMS를 통해 완료될 때까지 rt에서 교반한다. 표준 후처리 조건에 따라, 조 물질을 HPLC에 의해 정제시켜 102를 제공한다. 6-말레이미도헥산산(과잉)을 L-3(과잉)으로 대체함을 제외하고, 동일한 과정에 따라, 102a를 제공한다. 한편으로, 조 vc-PAB-X를 DMF에 용해시키고 L-4(과잉) 및 DIPEA를 가한다. 반응물을, vc-PAB-X 소모가 LCMS를 통해 완료될 때까지 rt에서 교반한다. 표준 후처리 조건에 따라, 조 물질을 HPLC에 의해 정제시켜 102a를 또한 제공한다.
반응식 E(104 및 104a)
DMF 중의 100의 용액에 102 또는 102a(과잉)를 가한다. 개별적인 반응을, 100의 소모가 LCMS에 의해 완료될 때까지 rt에서 교반한다. 표준 후처리 조건에 따라, 개별적인 조 물질을 HPLC를 통해 정제시켜 각각 104 또는 104a를 제공한다. 한편으로, 공지된 102aa를 THF(또는 또 다른 극성 비양성자성 용매)에 용해시키고 DIBAL로 환원시켜, LCMS에 의해 모니터된 바와 같이 102aa의 소모 후에, 102b를 제공한다. 표준 후처리 및 단리 조건에 따라, 102b를 DMF(또는 또 다른 극성 비양성자성 용매)에 용해시키고 PyBoc 및 DIPEA의 존재하에 실온에서 102c와 커플링시켜, 또한 표준 후처리 및 단리 조건 후에 102dd를 제공한다(주: 공지된 102d는 하기의 단계에서 균등하게 경쟁한다). Fmoc-vc-PAB-X(X = Br, Cl 또는 -OTf)를 DMF(또는 또 다른 극성 비양성자성 용매)에 용해시키고 촉매적 NaI, DMAP 및 피리딘의 존재하에서 102d 또는 102dd로 처리하여 조 102f를 제공한다. DMF(또는 또 다른 극성 비양성자성 용매) 중의 피페리딘에 의한 후속 처리는 표준 후처리 및 단리 조건 후에, 102f를 제공한다. 102f를 DMF(또는 또 다른 극성 비양성자성 용매)에 용해시키고 L-4 및 DIPEA로 처리하여, 표준 후처리 및 단리 조건에 따라 102h를 제공한다. 102h를 104에로 가는 중에(cf. 도 5, 예를 들어 A=Q) 도 4 및 5에 기재된 바와 유사하게(cf. 도 4, 25에 대한 24a-e 커플링) 추가로 조작할 수 있다.
반응식 H(108 및 108a)
DMF(또는 또 다른 비-양성자화 유기 용매) 중의 Fmoc-vc-PAB-Br의 용액에 NaN3을 가하고 용액을, Fmoc-vc-PAB-Br의 소모가 LCMS에 의해 완료될 때까지 rt에서 교반한다. 이어서 피페리딘을 가하고 Fmoc의 탈보호가 LCMS에 의해 완료될 때까지 교반한다. 표준 후처리 조건에 따라, 조 vc-PAB-N3을 DMF(또는 또 다른 비-양성자화 유기 용매)에 용해시키고, 6-말레이미도헥산산(과잉), HATU 및 DIPEA를 가한다. 반응을 vc-PAB-Br 소모가 LCMS를 통해 완료될 때까지 rt에서 교반한다. 표준 후처리 조건에 따라, 조 물질을 HPLC에 의해 정제시켜 108을 제공한다. 6-말레이미도헥산산(과잉)을 L-3(과잉)으로 대체함을 제외하고, 동일한 과정에 따라 108a를 제공한다. 한편으로, 조 vc-PAB-N3을 DMF(또는 또 다른 비-양성자화 유기 용매)에 용해시키고 L-4(과잉) 및 DIPEA를 가한다. 반응물을, vc-PAB-N3 소모가 LCMS를 통해 완료될 때까지 rt에서 교반한다. 표준 후처리 조건에 따라, 조 물질을 HPLC에 의해 정제시켜 108a를 또한 제공한다.
반응식 H(110 및 110a)
THF:수(3:1) 중의 108 또는 108a(과잉) 및 나트륨 아스코르베이트의 용액에 106을 가한다. 이어서 1 방울의 수성 황산 구리를 가한다. 개별적인 혼합물을, 106이 LCMS에 의해 소모될 때까지 rt에서 교반한다. 표준 후처리 및 HPLC에 의한 정제는 각각 110 및 110a를 제공한다.
반응식 J(116, 116a, 116b 및 116c)
DMF(또는 또 다른 비-양성자화 유기 용매) 중의 112, L-1(과잉) 및 HOBt의 용액에 DIPEA를 가하고 반응을 LCMS에 의해 112의 소모시까지 교반한다. 표준 후처리 조건에 따라, 조 물질을 HPLC에 의해 정제시켜 116을 제공한다. 한편으로, DMF(또는 또 다른 비-양성자화 유기 용매) 중의 112, L-2(과잉) 및 HOBt의 용액에 DIPEA를 가하고 반응을 LCMS에 의해 112의 소모시까지 교반한다. 표준 후처리 조건에 따라, 조 물질을 HPLC에 의해 정제시켜 116a를 제공한다. DMF(또는 또 다른 비-양성자화 유기 용매) 중의 116a의 용액에 피페리딘을 가하고 반응을 Fmoc 탈보호가 완료될 때까지 LCMS에 의해 모니터한다. 표준 후처리 조건에 따라, 조 물질을 HPLC에 의해 정제시켜 116b를 제공한다. DMF(또는 또 다른 비-양성자화 유기 용매) 중의 116b의 용액에 L-3(과잉), HATU 및 DIPEA를 가한다. 반응을, 116b 소모가 LCMS를 통해 완료될 때까지 rt에서 교반한다. 표준 후처리 조건에 따라, 조 물질을 HPLC에 의해 정제시켜 116c를 제공한다. 또는, DMF(또는 또 다른 비-양성자화 유기 용매) 중의 116b의 용액에 L-4(과잉) 및 DIPEA를 가하고, 반응을 LCMS에 의해 116b의 소모가 완료될 때까지 rt에서 교반한다. 표준 후처리 조건에 따라, 조 물질을 HPLC에 의해 정제시켜 또한 116c를 제공한다.
반응식 K(120 및 120a)
DCM(또는 또 다른 비-양성자화 유기 용매) 중의 Fmoc-vc-PAB-OH의 용액에 TBSCl 및 NEt3을 가한다. 반응물을, LCMS에 의해 Fmoc-vc-PAB-OH가 소모될 때까지 교반한다. 표준 후처리 조건에 따라, 조 Fmoc-vc-PAB-OTBS를 DMF(또는 또 다른 비-양성자화 유기 용매)에 용해시키고 피페리딘을 가한다. 표준 후처리에 따라, 조 vc-PAB-OTBS를 DMF(또는 또 다른 비-양성자화 유기 용매)에 용해시키고 6-말레이미도헥산산(과잉), HATU 및 DIPEA를 가한다. 반응물을, LCMS를 통해 vc-PAB-OTBS 소모시까지 rt에서 교반한다. 이어서 THF 중의 과잉의 TBAF를 가하고, LCMS에 의해 완전한 탈보호 후에 조 물질을 HPLC에 의해 정제시켜 120을 제공한다. 6-말레이미도헥산산(과잉)을 L-3(과잉)으로 대체시킴을 제외하고, 동일한 과정에 따라 120a를 제공한다. 한편으로, 조 vc-PAB-OTBS를 DMF(또는 또 다른 비-양성자화 유기 용매)에 용해시키고 L-4(과잉) 및 DIPEA를 가한다. 반응물을, LCMS를 통해 vc-PAB-OTBS 소모가 완료될 때까지 rt에서 교반한다. 이어서 THF 중의 TBAF를 가하고, LCMS에 의해 완전한 탈보호 후에, 조 물질을 HPLC에 의해 정제시켜 또한 120a를 제공한다.
반응식 K(122 및 122a)
DCM(또는 또 다른 비-양성자화 유기 용매) 중의 118 및 PFP의 용액에 0℃에서 DCM(또는 또 다른 비-양성자화 유기 용매) 중의 DIC 용액을 주사기로 적가한다. 생성 용액을 LCMS에 의해 118의 소모시까지 교반한다. 이어서 휘발성 물질을 진공하에서 제거하고 잔사를 에틸 아세테이트에 용해시킨다. 고체를 여과하고 여액을 농축시켜 중간체 펜타플루오로페닐 에스테르를 제공한다. 중간체 에스테르를 DMF에 용해시키고 DIPEA를 가한 다음 120 또는 120a를 가한다. 개별적인 용액을 밤새 교반하고 HPLC에 의해 정제시켜 에스테르 122 또는 122a를 제공한다.
반응식 M(128, 128a, 128b 및 128c)
DMF(또는 또 다른 비-양성자화 유기 용매) 중의 124, L-1(과잉) 및 HOBt의 용액에 DIPEA를 가하고 반응물을 LCMS에 의해 124의 소모시까지 교반한다. 표준 후처리 조건에 따라, 조 물질을 HPLC에 의해 정제시켜 128을 제공한다. 한편으로, DMF(또는 또 다른 비-양성자화 유기 용매) 중의 124, L-2(과잉) 및 HOBt의 용액에 DIPEA를 가하고 반응물을 LCMS에 의해 124의 소모시까지 교반한다. 표준 후처리 조건에 따라, 조 물질을 HPLC에 의해 정제시켜 128a를 제공한다. DMF 중의 128a의 용액에 피페리딘을 가하고 반응을 Fmoc 탈보호가 완료될 때까지 LCMS에 의해 모니터한다. 표준 후처리 조건에 따라, 조 물질을 HPLC에 의해 정제시켜 128b를 제공한다. DMF(또는 또 다른 비-양성자화 유기 용매) 중의 128b의 용액에 L-3(과잉), HATU 및 DIPEA를 가한다. 반응물을, 128b 소모가 LCMS를 통해 완료될 때까지 rt에서 교반한다. 표준 후처리 조건에 따라, 조 물질을 HPLC에 의해 정제시켜 128c를 제공한다. 또는, DMF(또는 또 다른 비-양성자화 유기 용매) 중의 128b의 용액에 L-4(과잉) 및 DIPEA를 가하고, 반응물을 LCMS에 의해 128b의 소모가 완료될 때까지 rt에서 교반한다. 표준 후처리 조건에 따라, 조 물질을 HPLC에 의해 정제시켜 또한 128c를 제공한다.
반응식 N(134, 134a, 134b 및 134c)
DMF(또는 또 다른 비-양성자화 유기 용매) 중의 130, L-1(과잉) 및 HOBt의 용액에 DIPEA를 가하고 반응물을 LCMS에 의해 130의 소모시까지 교반한다. 표준 후처리 조건에 따라, 조 물질을 HPLC에 의해 정제시켜 134를 제공한다. 한편으로, DMF(또는 또 다른 비-양성자화 유기 용매) 중의 130, L-2(과잉) 및 HOBt의 용액에 DIPEA를 가하고 반응을 LCMS에 의해 130의 소모시까지 교반한다. 표준 후처리 조건에 따라, 조 물질을 HPLC에 의해 정제시켜 134a를 제공한다. DMF(또는 또 다른 비-양성자화 유기 용매) 중의 134a의 용액에 피페리딘을 가하고 반응을 Fmoc 탈보호가 완료될 때까지 LCMS에 의해 모니터한다. 표준 후처리 조건에 따라, 조 물질을 HPLC에 의해 정제시켜 134b를 제공한다. DMF(또는 또 다른 비-양성자화 유기 용매) 중의 134b의 용액에 L-3(과잉), HATU 및 DIPEA를 가한다. 반응물을, 134b 소모가 LCMS를 통해 완료될 때까지 rt에서 교반한다. 표준 후처리 조건에 따라, 조 물질을 HPLC에 의해 정제시켜 134c를 제공한다. 또는, DMF(또는 또 다른 비-양성자화 유기 용매) 중의 134b의 용액에 L-4(과잉) 및 DIPEA를 가하고, 반응물을 LCMS에 의해 134b의 소모가 완료될 때까지 rt에서 교반한다. 표준 후처리 조건에 따라, 조 물질을 HPLC에 의해 정제시켜 또한 134c를 제공한다.
MC-링커-페이로드의 합성(도 8)
Figure pct00699
(1R,3R)-1-(4-((2R,4S)-1-(4-플루오로페닐)-5-히드라지닐-4-메틸-5-옥소펜탄-2-일카바모일)티아졸-2-일)-3-((2S,3R)-N-헥실-3-메틸-2-((R)-1-메틸피페리딘-2-카복스아미도)펜탄아미도)-4-메틸펜틸 아세테이트 (IVa')
무수 에틸 아세테이트(1 ㎖) 중의 IVa(9 ㎎, 0.011 mmol)의 용액에 -15℃에서 질소하에 디이소프로필에틸아민(14 ㎎, 0.11 mmol) 및 이소부틸 클로로포르메이트(15 ㎎, 0.11 mmol)의 혼합물을 가하였다. 용액을 질소하에 -15℃에서 추가로 2시간 동안 교반 후에, DMF(0.5 ㎖) 중의 NH2NH2·H2O(8 ㎎, 0.17 mmol)의 용액을 상기에 가하였다. 반응 혼합물을 -15℃에서 밤새 교반하고 이어서 추가로 45분간 20℃로 가온시켰다. 조 생성물을 염기성 prep-HPLC에 의해 정제시켜 백색 고체로서 IVa'(4 ㎎, 수율 44%)를 제공하였다. ESI m/z: 830[M+H]+.
(1R,3R)-3-[(2S,3S)-N-(헥실옥시)-3-메틸-2-{[(2R)-1-메틸피페리딘-2-일]포름아미도}펜탄아미도]-1-(4-{[(2R,4S)-4-(히드라진카보닐)-1-(4-하이드록시페닐)-4-메틸부탄-2-일]카바모일}-1,3-티아졸-2-일)-4-메틸펜틸 아세테이트 (Va')　
무수 DMF(5.0 ㎖) 중의 화합물 Va(50 ㎎, 60.2 μmol), HATU(34 ㎎, 90.3 μmol) 및 DIPEA(16 ㎎, 120.4 μmol)의 혼합물을 rt에서 10분간 교반하고, 이어서 혼합물에 히드라진 수화물(95%, 9 ㎎, 180.7 μmol)을 가하였다. 생성 용액을 추가로 1h 동안 교반하고 반응물은 LC-MS에 의해 완료된 것으로 보였다. 반응 혼합물을 prep-HPLC에 의해 직접 정제시켜(방법 B) 백색 고체로서 Va'(34 ㎎, 수율 68%)를 제공하였다. ESI m/z: 844.3 (M + H)+.　1H NMR (500 MHz DMSO d6 )　δ　9.15 (s, 1H), 8.94 (s, 1H), 8.21 (s, 1H), 7.79 (d,　J　= 9.0 Hz, 1H), 7.46 (d,　J　= 10.0 Hz, 1H), 6.96 (d,　J　= 8.5 Hz, 2H), 6.62 (d,　J　= 8.5 Hz, 2H), 5.76 (d,　J　= 10.5 Hz, 1H), 4.81-4.78 (m, 1H), 4.18-3.94 (m, 6H), 2.85-2.82 (m, 1H), 2.73-2.62 (m, 2H), 2.47-2.28 (m, 4H), 2.12 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 2.03-1.93 (m, 2H), 1.84-1.77 (m, 2H), 1.64-1.61 (m, 4H), 1.56-1.53 (m, 1H), 1.47-1.45 (m, 2H), 1.39-1.35 (m, 4H), 1.27-1.26 (m, 4H), 1.18-1.05 (m, 2H), 0.97 (d,　J　= 6.5 Hz, 6H), 0.89-0.82 (m, 12H) ppm.
Figure pct00700
4-((S)-2-((S)-2-(6-(2,5-디옥소-2,5-디하이드로-1H-피롤-1-일)헥산아미도)-3-메틸부탄아미도)-5-우레이도펜탄아미도)벤질-((2S,4R)-4-(2-((1R,3R)-1-아세톡시-3-((2S,3R)-N-헥실-3-메틸-2-((R)-1-메틸피페리딘-2-카복스아미도)펜탄아미도)-4-메틸펜틸)티아졸-4-카복스아미도)-5-(4-플루오로페닐)-2-메틸펜타노일)히드라진카복실레이트 (LP1)
DMF(1 ㎖) 중의 IVa'(3.0 ㎎, 0.036 mmol), mc-vc-PAB-PNP(L-1)(8.1 ㎎, 0.108 mmol) 및 HOBt(9 ㎎, 0.07 mmol)의 용액에 DIPEA(0.9 ㎎, 0.007 mmol)를 가하였다. 반응 혼합물을 N2 하에 rt에서 밤새 교반하였다. 조 생성물을 산성 prep-HPLC에 의해 정제시켜 백색 고체로서 LP1(3.4 ㎎, 66%)을 수득하였다. ESI-MS(EI+, m/z): 1428.7 [M+H]+, 715.0 [M/2+H]+.
DIBAC-링커-페이로드의 합성(도 9)
Figure pct00701
3급-부틸 (2R,4S)-5-히드라지닐-1-(4-하이드록시페닐)-4-메틸-5-옥소펜탄-2-일카바메이트 (35)
무수 DMF(7.5 ㎖) 중의 중간체 Ie(500 ㎎, 1.5 mmol), HATU(706 ㎎, 1.9 mmol) 및 DIPEA(399 ㎎, 3.1 mmol)의 용액을 rt에서 30분간 교반하고, 이어서 히드라진 수화물(95%, 712 ㎎, 15.5 mmol)을 가하였다. 생성 용액을 LCMS에 의해 모니터된 바와 같이 완료시까지 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 RP 크로마토그래피(10 mM NH4HCO3와 함께 수 중 0-100% 아세토니트릴)에 의해 직접 정제시켜 백색 고체로서 화합물 35(450 ㎎, 72%)를 제공하였다. ESI m/z: 338.0 (M + H)+. 1H NMR (500 MHz, DMSO d6 ) δ 9.10 (s, 1H), 8.84 (s, 1H), 6.91 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 6.64-6.60 (m, 3H), 4.11-4.07 (m, 2H), 3.40-3.37 (m, 1H), 2.49-2.46 (m, 2H), 2.29-2.25 (m, 1H), 1.68-1.62 (m, 1H), 1.34-1.21 (m, 10H), 0.96 (d, J = 6.5 Hz, 3H) ppm.
Figure pct00702
4-((S)-2-((S)-2-(((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카보닐아미노)-3-메틸부탄아미도)-7-아미노-7-옥소헵탄아미도)벤질 2-((2S,4R)-4-(3급-부톡시카보닐아미노)-5-(4-하이드록시페닐)-2-메틸펜타노일)히드라진카복실레이트 (36)
무수 DMF(7.0 ㎖) 중의 화합물 35(430 ㎎, 1275.9 μmol), DIPEA(317 ㎎, 2551.8 μmol) 및 HOBt(258 ㎎, 1913.9 μmol)의 용액을 Fmoc-vc-PAB-PNP(L-2)(1075 ㎎, 1403.5 μmol)로 처리하고, 이어서 반응물을 LCMS에 의해 모니터된 바와 같이 완료시까지 rt에서 3h 동안 교반하였다. 완료된 용액을 RP 크로마토그래피(0.1% TFA와 함께 수 중 0-80% 아세토니트릴)에 의해 정제시켜 백색 고체로서 화합물 36(800 ㎎, 수율 65%)을 제공하였다. ESI m/z: 965.4(M+H)+.
Figure pct00703
4-((S)-2-((S)-2-(((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카보닐아미노)-3-메틸부탄아미도)-5-우레이도펜탄아미도)벤질 2-((2S,4R)-4-아미노-5-(4-하이드록시페닐)-2-메틸펜타노일) 히드라진카복실레이트 (37)
DCM(9.5 ㎖) 중의 화합물 36(500 ㎎, 518.7 μmol)의 용액을 TFA(0.5 ㎖)로 처리하고, rt에서 1h 동안 교반하여 완료하였다. 이어서 용액을 0℃로 냉각시키고 N-메틸모르폴린(NMM)으로 중화시켜 pH 7.0을 성취하였다. 이어서 용액을 농축시키고 잔사를 RP 크로마토그래피(탈이온수 중 0-100% 아세토니트릴)에 의해 정제시켜 백색 고체로서 화합물 37(167 ㎎, 수율 37%)을 제공하였다. ESI m/z: 865.4 (M + H)+. 1H NMR (400 MHz, DMSO d6 ) δ 10.09 (s, 1H), 9.72 (s, 1H), 9.34 (s, 1H), 9.24 (s, 1H), 8.13-8.10 (m, 1H), 7.90-7.86 (m, 2H), 7.75-7.71 (m, 2H), 7.68-7.67 (m, 2H), 7.61-7.58 (m, 2H), 7.44-7.38 (m, 3H), 7.33-7.29 (m, 4H), 7.04-7.69 (m, 2H), 6.71 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 5.99-5.96 (m, 1H), 5.41 (s, 2H), 5.02 (s, 2H), 4.41-4.37 (m, 1H), 4.31-4.19 (m, 3H), 3.94-3.90 (m, 1H), 3.29-3.28 (m, 1H), 3.04-2.90 (m, 2H), 2.71-2.66 (m, 2H), 2.00-1.95 (m, 1H), 1.78-1.33 (m, 6H), 1.00 (d, J = 6.4 Hz, 3H), 0.88-0.83 (m, 6H) ppm. 키랄 SFC: > 99% (AD-H, AS-H, OJ-H, 및 OD-H), Rt: 2.14 min (AD-H), 3.89 min (AS-H), 1.99 min (OJ-H), 및 4.97 min (OD-H).
Figure pct00704
4-((S)-2-((S)-2-(((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카보닐아미노)-3-메틸부탄아미도)-5-우레이도펜탄아미도)벤질 2-((2S,4R)-4-(2-((1R,3R)-1-아세톡시-3-((2S,3S)-N-(헥실옥시)-3-메틸-2-((R)-1-메틸피페리딘-2-카복스아미도)펜탄아미도)-4-메틸펜틸)티아졸-4-카복스아미도)-5-(4-하이드록시페닐)-2-메틸펜타노일)히드라진카복실레이트 (38)
무수 염화 메틸렌(4.0 ㎖) 중의 화합물 IIIa(125 ㎎, 200 μmol) 및 PFP(55 ㎎, 300 μmol)의 용액에 염화 메틸렌(1.0 ㎖) 중의 DIC(38 ㎎, 300 μmol)의 용액을 0℃에서 주사기로 적가하였다. 생성 용액을 추가로 1시간 동안 교반하였다. 이어서 휘발성 물질을 진공하에서 제거하고 잔사를 에틸 아세테이트(4.0 ㎖)에 용해시켰다. 고체를 여과하고 여액을 농축시켜 담황색 오일로서 펜타플루오로페닐 에스테르(200 ㎎ 조 물질)를 제공하고, 이를 무수 DMF(3.0 ㎖)에 용해시켰다. 이어서 용액에 디이소프로필에틸아민(DIPEA, 62 ㎎, 480 μmol)을 가한 다음 화합물 37(138 ㎎, 160 μmol)을 가하였다. 용액을 밤새 교반하고 이어서 RP 크로마토그래피(탈이온수 중의 0-100% 아세토니트릴)에 의해 정제시켜 백색 고체로서 화합물 38(70 ㎎, 2단계에 걸쳐 수율 30%)을 제공하였다. ESI m/z: 1471.4 (M + H)+, 736.3 (M/2 + H)+. 1H NMR (500 MHz, DMSO d6 ) δ 10.10 (s, 1H), 9.68 (s, 1H), 9.15 (br s, 2H), 8.22 (s, 1H), 8.14-8.13 (m, 1H), 7.91-7.88 (m, 3H), 7.77-7.73 (m, 2H), 7.62-7.57 (m, 2H), 7.46-7.40 (m, 3H), 7.35-7.23 (m, 4H), 7.00-6.90 (m, 2H), 6.61 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 5.99-5.98 (m, 1H), 5.78-5.74 (m, 1H), 5.42 (s, 2H), 5.02-5.01 (m, 2H), 4.81-4.78 (m, 1H), 4.44-4.40 (m, 1H), 4.32-4.23 (m, 3H), 4.17-4.05 (m, 3H), 3.97-3.92 (m, 2H), 3.04-2.84 (m, 3H), 2.74-2.71 (m, 2H), 2.48-2.34 (m, 3H), 2.11 (s, 6H), 2.03-1.98 (m, 3H), 1.82-1.79 (m, 2H), 1.69-1.32 (m, 16H), 1.27-1.24 (m, 5H), 1.18-1.07 (m, 2H), 1.06-1.03 (m, 2H), 1.00 (d, J = 7.0 Hz, 3H), 0.90-0.82 (m, 19H) ppm. 키랄 SFC: > 99% (AS-H, OJ-H, 및 OD-H), Rt: 2.19 min (AD-H), 3.99 min (AS-H), 2.06 min (OJ-H), 및 6.24 min (OD-H).
Figure pct00705
4-((S)-2-((S)-2-아미노-3-메틸부탄아미도)-5-우레이도펜탄아미도)벤질2-((2S,4R)-4-(2-((1R,3R)-1-아세톡시-3-((2S,3S)-N-(헥실옥시)-3-메틸-2-((R)-1-메틸피페리딘-2-카복스아미도)펜탄아미도)-4-메틸펜틸)티아졸-4-카복스아미도)-5-(4-하이드록시페닐)-2-메틸펜타노일)히드라진카복실레이트 (39)
무수 DMF(2.0 ㎖) 중의 화합물 38(70.0 ㎎, 47.5 μmol)의 용액을 피페리딘(0.5 ㎖)으로 처리하고 rt에서 30분간 교반하였다. 이어서 용액을 농축 건조시키고 석유 에테르(3 x 5 ㎖)로 습성화하고 Prep-HPLC(암모늄 비카보네이트 시스템)를 통해 추가로 정제시켜 백색 고체로서 화합물 39(35 ㎎, 59%)를 제공하였다. ESI m/z: 1249.5 (M + H)+. 1H NMR (500 MHz, DMSOd6) δ 10.16 (s, 1H), 9.67 (s, 1H), 9.16 (s, 1H), 9.13 (s, 1H), 8.21 (s, 1H), 8.14-8.13 (m, 1H), 7.91-7.85 (m, 1H), 7.61 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.45 (d, J = 10.0 Hz, 1H), 7.31 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 6.99 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 6.61 (d, J = 7.5 Hz, 2H), 6.00-5.99 (m, 1H), 5.76 (dd, J = 10.5, 2.5 Hz,1H), 5.41 (s, 2H), 5.02 (s, 2H), 4.82-4.78 (m, 1H), 4.49-4.47 (m, 1H), 4.47-3.95 (m, 4H), 3.05-3.00 (m, 2H), 2.96-2.91 (m, 1H), 2.85-2.82 (m, 1H), 2.73-2.64 (m, 2H), 2.47-2.34 (m, 4H), 2.10 (s, 3H), 2.09 (s, 3H), 2.03-1.91 (m, 3H), 1.81-1.77 (m, 3H), 1.70-1.68 (m, 1H), 1.64-1.53 (m, 7H), 1.50-1.32 (m, 7H), 1.30-1.24 (m, 5H), 1.20-1.16 (m, 1H), 1.08-1.02 (m, 2H), 0.97 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 0.90-0.82 (m, 17H), 0.78 (d, J = 7.0 Hz, 3H) ppm. 키랄 SFC: Rt: 2.37 min (AD-H), 2.11 min (OJ-H), 및 5.73 min (OD-H).
Figure pct00706
(1R,3R)-1-(4-{[(2R,4S)-4-{N'-[({4-[(2S)-2-[(2S)-2-[1-(4-{2-아자트리사이클로[10.4.0.0^{4,9}]헥사데카-1(12),4(9),5,7,13,15-헥사엔-10-인-2-일}-4-옥소부탄아미도)-3,6,9,12-테트라옥사펜타데칸-15-아미도]-3-메틸부탄아미도]-5-(카바모일아미노)펜탄아미도]페닐}메톡시)카보닐] 히드라진카보닐}-1-(4-하이드록시페닐)-4-메틸부탄-2-일]카바모일}-1,3-티아졸-2-일)-3-[(2S,3S)-N-(헥실옥시)-3-메틸-2-{[(2R)-1-메틸피페리딘-2-일]포름아미도}펜탄아미도]-4-메틸펜틸 아세테이트 (LP2)
무수 DMF(1.0 ㎖) 중의 DIBAC-suc-PEG4-COOH(L-3)(5.7 ㎎, 10.4 μmol), HATU(5.9 ㎎, 15.6 μmol), 및 DIPEA(2.7 ㎎, 20.8 μmol)의 용액을 rt에서 30분간 교반하고, 이어서 화합물 39(13.0 ㎎, 10.4 μmol)를 가하였다. 생성 용액을 LCMS에 의해 모니터된 바와 같이 완료시까지 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 prep-HPLC에 의해 직접 정제시켜(방법 B) 회색 고체로서 LP2(5 ㎎, 27%)를 제공하였다. ESI m/z: 892.5 (M/2 + H)+. 1H NMR (500 MHz, DMSO d6 ) δ 10.02 (s, 1H), 9.67 (s, 1H), 9.13 (s, 1H), 8.24-8.18 (m, 1H), 8.13 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 7.88 (d, J = 8.7 Hz, 2H), 7.77 (t, J = 5.5 Hz, 1H), 7.68 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 7.64-7.41 (m, 6H), 7.40-7.20 (m, 4H), 7.02-6.84 (m, 2H), 6.70-6.29 (m, 2H), 6.04-5.95 (m, 1H), 5.76 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 5.42 (s, 2H), 5.23-4.93 (m, 3H), 4.84-4.75 (m, 1H), 4.43-4.36 (m, 1H), 4.27-4.20 (m, 1H), 4.20-4.01 (m, 3H), 3.96 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 3.65-3.42 (m, 12H), 3.31-3.24 (m, 3H), 3.15-2.99 (m, 3H), 2.97-2.91 (m, 1H), 2.87-2.81 (m, 1H), 2.77-2.54 (m, 3H), 2.48-2.33 (m, 5H), 2.29-2.19 (m, 1H), 2.15-2.05 (m, 5H), 2.04-1.91 (m, 4H), 1.89-1.68 (m, 4H), 1.67-1.49 (m, 9H), 1.45-1.22 (m, 13H), 1.12-0.92 (m, 9H), 0.92-0.77 (m, 20H) ppm.
도 10A에서 DIBAC-링커-페이로드의 합성
Figure pct00707
(S)-5-(4-((4-((S)-2-((S)-2-(((9H-플루오렌-9-일) 메톡시)카보닐아미노)-3-메틸부탄아미도)-5-우레이도펜탄아미도)벤질옥시)카보닐아미노)페닐)-4-아미노-2,2-디메틸펜탄산 (40)
DMF(2 ㎖) 중의 화합물 7e(20 ㎎, 59 μmol) 및 L-2(50 ㎎, 65 μmol)의 혼합물에 HOBt(8.0 ㎎, 59 μmol) 및 DIPEA(15 ㎎, 0.12 μmol)를 가하였다. 반응물을 rt에서 16h 동안 교반하고 LCMS에 의해 모니터하였다. 이어서 생성 혼합물을 역상 크로마토그래피(수성 TFA(0.01%) 중의 0-100% 아세토니트릴)에 의해 직접 정제시켜 백색 고체로서 40(31 ㎎, 54% 수율)을 제공하였다. ESI m/z: 964.1(M+H)+.
Figure pct00708
(S)-5-(4-((4-((S)-2-((S)-2-(((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카보닐아미노)-3-메틸부탄아미도)-5-우레이도펜탄아미도)벤질옥시)카보닐아미노)페닐)-4-아미노-2,2-디메틸펜탄산 (41)
DCM(5 ㎖) 중의 화합물 40(40 ㎎, 41 μmol) 및 TFA(0.5 ㎖)의 혼합물을 25℃에서 0.5h 동안 교반하고, 이어서 진공하에서 농축시켜 갈색 오일로서 41(36 ㎎, 100% 수율)을 제공하였다. ESI m/z: 432.6(M+2H)/2+.
Figure pct00709
(S)-5-(4-((4-((S)-2-((S)-2-(((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카보닐아미노)-3-메틸부탄아미도)-5-우레이도펜탄아미도)벤질옥시)카보닐아미노)페닐)-4-(2-((1R,3R)-1-아세톡시-3-((2S,3S)-N-(헥스-5-이닐)-3-메틸-2-((R)-1-메틸피페리딘-2-카복스아미도) 펜탄아미도)-4-메틸펜틸)티아졸-4-카복스아미도)-2,2-디메틸펜탄산 (42a)
DMF(2 ㎖) 중의 화합물 41(36 ㎎, 41 μmol), DIPEA(21 ㎎, 167 μmol) 및 화합물 28e(32 ㎎, 41 μmol)의 혼합물을 25℃에서 16시간 동안 교반하고 이어서 반응 용액을 RP 크로마토그래피에 의해 정제시켜 백색 고체로서 42a(28 ㎎, 48% 수율)를 제공하였다. ESI m/z: 725(M+2H)/2+.
Figure pct00710
(S)-5-(4-((4-((S)-2-((S)-2-(((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카보닐아미노)-3-메틸부탄아미도)-5-우레이도펜탄아미도)벤질옥시)카보닐아미노)페닐)-4-(2-((1R,3R)-1-아세톡시-4-메틸-3-((2S,3S)-3-메틸-2-((R)-1-메틸피페리딘-2-카복스아미도)-N-(펜트-4-인일옥시)펜탄아미도)펜틸)티아졸-4-카복스아미도)-2,2-디메틸펜탄산 (42b)
DMF(3 ㎖) 중의 화합물 41(40 ㎎, 46 μmol), DIPEA(18 ㎎, 139 μmol) 및 화합물 28c(36 ㎎, 46 μmol)의 혼합물을 25℃에서 16시간 동안 교반하고 RP 크로마토그래피에 의해 정제시켜 백색 고체로서 42b(30 ㎎, 34% 수율)를 제공하였다. ESI m/z: 727(M+2H)/2+.
Figure pct00711
(S)-4-(2-((1R,3R)-1-아세톡시-3-((2S,3S)-N-(헥스-5-이닐)-3-메틸-2-((R)-1-메틸피페리딘-2-카복스아미도)펜탄아미도)-4-메틸펜틸)티아졸-4-카복스아미도)-5-(4-((4-((S)-2-((S)-2-아미노-3-메틸부탄아미도)-5-우레이도펜탄아미도)벤질옥시)카보닐아미노)페닐)-2,2-디메틸펜탄산 (43a)
DMF(1 ㎖) 중의 화합물 42a(40 ㎎, 41 μmol)의 용액에 피페리딘(10 ㎎, 0.12 mmol)을 가하였다. 반응 혼합물을, Fmoc가 LCMS에 따라 완전히 제거될 때까지 rt에서 2h 동안 교반하였다. 생성 혼합물에 역상 플래시 크로마토그래피(수성 TFA(0.01%) 중의 0-100% 아세토니트릴)를 가하여 갈색 오일로서 43a(36 ㎎)를 제공하였다. ESI m/z: 432.6(M+2H)/2+.
Figure pct00712
(S)-4-(2-((1R,3R)-1-아세톡시-3-((2S,3S)-N-(헥스-5-이닐)-3-메틸-2-((R)-1-메틸피페리딘-2-카복스아미도)펜탄아미도)-4-메틸펜틸)티아졸-4-카복스아미도)-5-(4-((4-((S)-2-((S)-2-아미노-3-메틸부탄아미도)-5-우레이도펜탄아미도)벤질옥시)카보닐아미노)페닐)-2,2-디메틸펜탄산 (43b)
DMF(1 ㎖) 중의 화합물 42b(30 ㎎, 20.68 μmol) 및 피페리딘(7.98 ㎎, 165.43 μmol)의 혼합물을 25℃에서 16시간 동안 교반하고 이어서 반응 혼합물을 RP 크로마토그래피에 의해 정제시켜 백색 고체로서 목적하는 생성물 43b(17 ㎎, 67% 수율)를 제공하였다. ESI m/z: 615.8(M+2H)/2+.
LP3의 합성
(4S)-4-({2-[(1R,3R)-1-(아세틸옥시)-3-[(2S,3S)-N-(헥스-5-인-1-일)-3-메틸-2-{[(2R)-1-메틸피페리딘-2-일]포름아미도}펜탄아미도]-4-메틸펜틸]-1,3-티아졸-4-일}포름아미도)-5-(4-{[({4-[(2S)-2-[(2S)-2-[1-(4-{2-아자트리사이클로[10.4.0.04,9]헥사데카-1(12),4(9),5,7,13,15-헥사엔-10-인-2-일}-4-옥소부탄아미도)-3,6,9,12-테트라옥사펜타데칸-15-아미도]-3-메틸부탄아미도]-5-(카바모일아미노)펜탄아미도]페닐}메톡시)카보닐]아미노}페닐)-2,2-디메틸펜탄산 (LP3)
DMF(2 ㎖) 중의 화합물 43a(30 ㎎, 24.42 μmol), DIBAC-suc-PEG4-NHS(L-4)(15.86 ㎎, 24.42 μmol) 및 DIPEA(5.37 ㎎, 41.51 μmol)의 혼합물을 25℃에서 16h 동안 교반하고 이어서 반응 용액을 RP 크로마토그래피(아세토니트릴/수)에 의해 정제시켜 백색 고체로서 LP3(5 ㎎, 35%)을 제공하였다. ESI m/z: 882.1 (M+2H)/2+. 1H NMR (500 MHz, DMSO d6 ) δ 12.15 (s, 1H), 10.02 (s, 1H), 9.68 (s, 1H), 8.16 (s, 2H), 7.89 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.78 (d, J = 5.5 Hz, 2H), 7.68 (d, J = 6.9 Hz, 1H), 7.62 (d, J = 8.3 Hz, 4H), 7.51-7.43 (m, 3H), 7.35 (d, J = 8.0 Hz, 7H), 7.07 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 6.00 (s, 1H), 5.65 (d, J = 13.0 Hz, 1H), 5.43 (s, 2H), 5.03 (d, J = 14.5 Hz, 3H), 4.46 (s, 1H), 4.38 (d, J = 5.3 Hz, 1H), 4.24 (d, J = 6.9 Hz, 2H), 3.74 (s, 1H), 3.59 (s, 3H), 3.47 (s, 14H), 3.31-3.25 (m, 4H), 3.08 (s, 2H), 3.04-2.97 (m, 2H), 2.94 (dd, J = 13.1, 6.4 Hz, 1H), 2.83 (d, J = 10.7 Hz, 1H), 2.75 (s, 2H), 2.67 (dd, J = 15.9, 9.1 Hz, 1H), 2.59 (dd, J = 16.2, 8.0 Hz, 1H), 2.48-2.45 (m, 1H), 2.36 (dd, J = 14.3, 6.4 Hz, 1H), 2.23 (dd, J = 15.6, 7.8 Hz, 3H), 2.14 (s, 4H), 2.07 (s, 3H), 1.98 (ddd, J = 20.0, 13.8, 6.5 Hz, 4H), 1.87 (s, 3H), 1.76 (dd, J = 15.2, 6.8 Hz, 2H), 1.68 (d, J = 11.2 Hz, 2H), 1.61 (d, J = 9.8 Hz, 3H), 1.40 (dd, J = 35.4, 22.6 Hz, 7H), 1.26-1.12 (m, 2H), 1.06 (d, J = 4.2 Hz, 6H), 0.95 (d, J = 6.3 Hz, 3H), 0.82 (d, J = 6.6 Hz, 12H), 0.67 (s, 3H) ppm.
LP4의 합성
(4S)-4-({2-[(1R,3R)-1-(아세틸옥시)-3-[(2S,3S)-N-(헥스-5-인-1-일)-3-메틸-2-{[(2R)-1-메틸피페리딘-2-일]포름아미도}펜탄아미도]-4-메틸펜틸]-1,3-티아졸-4-일}포름아미도)-5-(4-{[({4-[(2S)-2-[(2S)-2-[1-(4-{2-아자트리사이클로[10.4.0.04,9]헥사데카-1(12),4(9),5,7,13,15-헥사엔-10-인-2-일}-4-옥소부탄아미도)-3,6,9,12-테트라옥사펜타데칸-15-아미도]-3-메틸부탄아미도]-2-[2-(카바모일아미노)에톡시]아세트아미도]페닐}메톡시)카보닐]아미노}페닐)-2,2-디메틸펜탄산 (LP4)
DMF(2 ㎖) 중의 화합물 43b(17 ㎎, 14 μmol), DIBAC-suc-PEG4-NHS(L-4)(9 ㎎, 14 μmol) 및 DIPEA(5.4 ㎎, 42 μmol)의 혼합물을 25℃에서 16h 동안 교반하고 이어서 반응 용액을 RP 크로마토그래피(아세토니트릴 및 수)에 의해 정제시켜 백색 고체로서 LP4(5 ㎎, 20%; 반복된 합성에서 67%)을 제공하였다. ESI m/z: 883.1 (M+2H)/2+. 1H NMR (500 MHz, DMSO d6 ) δ 12.01 (s, 1H), 11.16 (s, 1H), 10.00 (s, 1H), 9.68 (s, 1H), 9.63 (s, 1H), 8.95 (s, 1H), 8.18 (s, 1H), 8.10 (s, 1H), 7.87 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.76 (s, 2H), 7.67 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 7.62 (d, J = 8.4 Hz, 3H), 7.52-7.42 (m, 3H), 7.33 (s, 7H), 7.07 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 5.99 (s, 1H), 5.82 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 5.42 (s, 2H), 5.05 (s, 3H), 4.75 (t, J = 8.6 Hz, 1H), 4.42-4.34 (m, 1H), 4.23 (d, J = 8.4 Hz, 3H), 4.10-3.73 (m, 2H), 3.59 (s, 3H), 3.50-3.43 (m, 12H), 3.29 (s, 4H), 3.08 (d, J = 5.7 Hz, 2H), 3.02 (dd, J = 13.4, 6.7 Hz, 2H), 2.96-2.91 (m, 1H), 2.83 (s, 1H), 2.77-2.73 (m, 1H), 2.67 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 2.58 (dd, J = 16.2, 8.0 Hz, 3H), 2.46-2.44 (m, 1H), 2.36 (dt, J = 23.7, 9.1 Hz, 5H), 2.23 (dd, J = 15.5, 7.7 Hz, 1H), 2.14 (s, 3H), 2.07 (s, 1H), 2.03-1.88 (m, 4H), 1.83 (d, J = 6.5 Hz, 2H), 1.75 (dd, J = 14.0, 8.2 Hz, 2H), 1.68 (d, J = 11.1 Hz, 2H), 1.59 (d, J = 9.1 Hz, 2H), 1.47-1.34 (m, 4H), 1.24 (s, 1H), 1.13 (s, 1H), 1.06 (d, J = 11.9 Hz, 6H), 0.97 (d, J = 6.6 Hz, 3H), 0.89 (s, 6H), 0.87-0.80 (m, 10H) ppm.
DIBAC-VA-링커-페이로드의 합성(도 10B)
LP5의 합성
(4S)-4-{[(3급-부톡시)카보닐]아미노}-5-{4-[(2S)-2-[(2S)-2-{[(9H-플루오렌-9-일메톡시)카보닐]아미노}-3-메틸부탄아미도]프로판아미도]페닐}-2,2-디메틸펜탄산 (40b)
Figure pct00713
DMF(3.0 ㎖) 중의 화합물 L-5(Fmoc-VA-OH, 0.21 g, 0.50 mmol)의 용액에 HATU(0.19 g, 0.50 mmol) 및 DIPEA(0.13 g, 1.0 mmol)를 가하였다. 반응 혼합물을 rt에서 10분간 교반한 다음 화합물 7e(0.17 g, 0.50 mmol)를 가하였다. 혼합물을 rt에서 2시간 동안 교반하고, 이를 LCMS에 의해 모니터하였다. 혼합물을 Prep-HPLC에 의해 정제시켜(방법 B) 백색 고체로서 화합물 40b(0.15 g, 40% 수율)를 제공하였다. ESI m/z: 746.3 (M + H2O)+. 1H NMR(DMSO d6 , 400 MHz) (회전이성질체와 함께) δ 9.88 및 9.72 (s, 1H), 8.35 및 8.17 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 7.90-7.87 (m, 2H), 7.76-7.71 (m, 2H), 7.56-7.38 (m, 5 H), 7.32 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 7.05 (t, J = 8.4 Hz, 2H), 6.46 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.46-7.39 (m, 1H), 4.33-4.18 (m, 3H), 3.93-3.85 (m, 1H), 3.70-3.60 (m, 1H), 2.60-2.50 (m, 2H), 2.02-1.93 (m, 1H), 1.72-1.65 (m, 1H), 1.57-1.53 (m, 1H), 1.29-1.17 (m, 12H), 1.06-1.02 (m, 6H), 0.89-0.84 (m, 6H) ppm. Anal. HPLC: 100%, 체류 시간: 7.39 min (방법 B).
(4S)-4-아미노-5-{4-[(2S)-2-[(2S)-2-{[(9H-플루오렌-9-일메톡시)카보닐]아미노}-3-메틸부탄아미도]프로판아미도]페닐}-2,2-디메틸펜탄산 (41b)
Figure pct00714
40 대신에 40b를 사용함을 제외하고, 40 내지 41과 유사한 과정에 따라, 화합물 41b(TFA 염으로서 15 ㎎, 100% 조 수율)를 갈색 오일로서 수득하고, 이를 다음 단계에 직접 사용하였다. ESI m/z: 629.3(M+H)+.
(4S)-4-({2-[(1R,3R)-1-(아세틸옥시)-3-[(2S,3S)-N-(헥스-5-인-1-일)-3-메틸-2-{[(2R)-1-메틸피페리딘-2-일]포름아미도}펜탄아미도]-4-메틸펜틸]-1,3-티아졸-4-일}포름아미도)-5-{4-[(2S)-2-[(2S)-2-{[(9H-플루오렌-9-일메톡시)카보닐]아미노}-3-메틸부탄아미도]프로판아미도]페닐}-2,2-디메틸펜탄산 (42c)
Figure pct00715
41 대신에 41b(15 ㎎, 18 μmol)를 사용함을 제외하고, 41 내지 42a와 유사한 과정에 따라, 화합물 42c(10 ㎎, 2 단계로 46% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. ESI m/z: 1215.6(M+H)+.
(4S)-4-({2-[(1R,3R)-1-(아세틸옥시)-3-[(2S,3S)-N-(헥스-5-인-1-일)-3-메틸-2-{[(2R)-1-메틸피페리딘-2-일]포름아미도}펜탄아미도]-4-메틸펜틸]-1,3-티아졸-4-일}포름아미도)-5-{4-[(2S)-2-[(2S)-2-아미노-3-메틸부탄아미도]프로판아미도]페닐}-2,2-디메틸펜탄산 (43c)
Figure pct00716
42a 대신에 42c(10 ㎎, 8.2 μmol)를 사용함을 제외하고, 42a 내지 43a와 유사한 과정에 따라, 화합물 43c(5 ㎎, 61% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. ESI m/z: 497.4(M/2+H)+.
(4S)-4-({2-[(1R,3R)-1-(아세틸옥시)-3-[(2S,3S)-N-(헥스-5-인-1-일)-3-메틸-2-{[(2R)-1-메틸피페리딘-2-일]포름아미도}펜탄아미도]-4-메틸펜틸]-1,3-티아졸-4-일}포름아미도)-5-{4-[(2S)-2-[(2S)-2-[1-(4-{2-아자트리사이클로[10.4.0.04,9]헥사데카-1(12),4(9),5,7,13,15-헥사엔-10-인-2-일}-4-옥소부탄아미도)-3,6,9,12-테트라옥사펜타데칸-15-아미도]-3-메틸부탄아미도]프로판아미도]페닐}-2,2-디메틸펜탄산 (LP5)
Figure pct00717
DMF(1 ㎖) 중의 화합물 L-3(4.1 ㎎, 7.4 μmol)의 용액에 HATU(2.9 ㎎, 7.5 μmol) 및 DMF(25 ㎕) 중의 DIPEA(1.3 ㎎, 0.01 mmol)의 용액을 가하였다. 반응 혼합물을 rt에서 10분간 교반한 다음 화합물 43c(5.0 ㎎, 5.0 μmol)를 가하였다. 혼합물을 rt에서 1h 동안 교반하고, LCMS에 의해 모니터하였다. 혼합물을 prep-HPLC에 의해 직접 정제시켜(방법 B) 백색 고체로서 화합물 LP5(3 ㎎, 39% 수율)를 제공하였다. ESI m/z: 764.5 (M/2 + H)+. 1H NMR (DMSO d6 , 400 MHz) (회전이성질체와 함께) δ 9.85 및 9.73 (s, 1H), 8.39-8.37 및 8.17-8.12 (m, 2H), 7.99 및 7.87 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.78-7.26 (m, 12H), 7.10-7.06 (m, 2H), 5.64 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 5.02 (d, J = 13.6 Hz, 1H), 4.47-4.07 (m, 5H), 3.75-3.26 (m, 22 H), 3.09-2.74 (m, 6H), 2.60-2.42 (m, 2H), 2.35-1.03 (m, 42H), 0.94-0.65 (m, 16H) ppm. Anal. HPLC: 100%, 체류 시간: 8.18 min (방법 B).
LP6 및 LP7의 합성(도 10C)
(4S)-4-{[(3급-부톡시)카보닐]아미노}-5-{4-[(2S)-5-(카바모일아미노)-2-[(2S)-2-{[(9H-플루오렌-9-일메톡시)카보닐]아미노}-3-메틸부탄아미도]펜탄아미도]페닐}-2,2-디메틸펜탄산 (40c)
Figure pct00718
DCM(20 ㎖) 중의 화합물 L-6(Fmoc-Val-Cit-OH, 0.60 g, 1.2 mmol), 화합물 7e(0.20 g, 0.06 mmol) 및 EEDQ(0.22 g, 0.90 mmol)의 혼합물에 질소 분위기하에서 메탄올 10 ㎖을 가하였으며 혼합물이 투명하게 변하였다. 용액을 암실에서 rt에서 밤새 교반하고, 이를 LCMS에 의해 모니터하였다. 혼합물을 진공하에서 농축시키고 잔사를 prep-HPLC에 의해 정제시켜(방법 B) 백색 고체로서 화합물 40c(85 ㎎, 17% 수율)를 제공하였다. ESI m/z: 815.3 (M + H)+. 1H NMR ( DMSO d6 , 400 MHz) δ 9.94 (s, 1H), 8.11 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 7.89 (d, J = 7.6 Hz, 2H), 7.75 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 7.54-7.30 (m, 7H), 7.05 (t, J = 8.0 Hz, 2H), 6.47 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 6.02-5.94 (m, 1H), 5.41 (s, 2H), 4.45-4.20 (m, 4H), 3.94-3.90 (m, 1H), 3.70-3.62 (m, 1H), 3.04-2.89 (m, 2H), 2.61-2.50 (m, 2H), 2.02-1.94 (m, 1H), 1.72-1.19 (m, 15H), 1.07-1.03 (m, 6H), 0.89-0.84 (m, 6H) ppm. Anal. HPLC: 99%, 체류 시간: 6.90 min (방법 B).
(4S)-4-아미노-5-{4-[(2S)-5-(카바모일아미노)-2-[(2S)-2-{[(9H-플루오렌-9-일메톡시)카보닐]아미노}-3-메틸부탄아미도]펜탄아미도]페닐}-2,2-디메틸펜탄산 (41c)
Figure pct00719
40 대신에 40c를 사용함을 제외하고, 40 내지 41과 유사한 과정에 따라, 화합물 41c(TFA 염으로서 25 ㎎, 100% 조 수율)를 갈색 고체로서 수득하고, 이를 다음 단계에 바로 사용하였다. ESI m/z: 715.3(M+H)+.
(4S)-4-({2-[(1R,3R)-1-(아세틸옥시)-4-메틸-3-[(2S,3S)-3-메틸-2-{[(2R)-1-메틸피페리딘-2-일]포름아미도}-N-(펜틸옥시)펜탄아미도]펜틸]-1,3-티아졸-4-일}포름아미도)-5-{4-[(2S)-5-(카바모일아미노)-2-[(2S)-2-{[(9H-플루오렌-9-일메톡시)카보닐]아미노}-3-메틸부탄아미도]펜탄아미도]페닐}-2,2-디메틸펜탄산 (42d)
Figure pct00720
41 대신에 41c(52 ㎎, 60 μmol)를 사용하고 28e 대신에 28d(61 ㎎, 78 μmol)를 사용함을 제외하고, 41 내지 42a와 유사한 과정에 따라, 화합물 42d(52 ㎎, 2단계로 66% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. ESI m/z: 654.3(M/2+H)+.
(4S)-4-({2-[(1R,3R)-1-(아세틸옥시)-4-메틸-3-[(2S,3S)-3-메틸-2-{[(2R)-1-메틸피페리딘-2-일]포름아미도}-N-(펜틸옥시)펜탄아미도]펜틸]-1,3-티아졸-4-일}포름아미도)-5-{4-[(2S)-2-[(2S)-2-아미노-3-메틸부탄아미도]-5-(카바모일아미노)펜탄아미도]페닐}-2,2-디메틸펜탄산 (43d)
Figure pct00721
42a 대신에 42d(52 ㎎, 40 μmol)를 사용함을 제외하고, 42a 내지 43a와 유사한 과정에 따라, 화합물 43d(37 ㎎, 85% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. ESI m/z: 543.5(M/2+H)+.
(4S)-4-({2-[(1R,3R)-1-(아세틸옥시)-4-메틸-3-[(2S,3S)-3-메틸-2-{[(2R)-1-메틸피페리딘-2-일]포름아미도}-N-(펜틸옥시)펜탄아미도]펜틸]-1,3-티아졸-4-일}포름아미도)-5-{4-[(2S)-2-[(2S)-2-[1-(4-{2-아자트리사이클로[10.4.0.04,9]헥사데카-1(12),4(9),5,7,13,15-헥사엔-10-인-2-일}-4-옥소부탄아미도)-3,6,9,12-테트라옥사펜타데칸-15-아미도]-3-메틸부탄아미도]-5-(카바모일아미노)펜탄아미도]페닐}-2,2-디메틸펜탄산 (LP6)
Figure pct00722
43a 대신에 43d(24 ㎎, 22 μmol)를 사용함을 제외하고, 42a 내지 LP3과 유사한 과정에 따라, 화합물 LP6(24 ㎎, 67% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. ESI m/z: 810.5 (M/2 + H)+. 1H NMR (DMSO d6 , 400 MHz) δ 9.87 (s, 1H), 8.17 (s, 1H), 8.08 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.95-7.86 (m, 1H), 7.86 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 7.76 (t, J = 5.6 Hz, 1H), 7.69-7.66 (m, 1H), 7.62 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 7.55-7.43 (m, 5H), 7.40-7.28 (m,3H), 7.09 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 6.00 (t, J = 5.6 Hz, 1H), 5.80 (dd, J = 6.8, 2.4 Hz, 1H), 5.41 (s, 2H), 5.03 (t, J = 14.4 Hz, 1H), 4.82-4.78 (m, 1H), 4.40-4.34 (m, 1H), 4.24-4.03 (m, 4H), 3.98-3.92 (m, 1H), 3.62-3.28 (m, 23H), 3.13-2.89 (m, 4H), 2.85-2.75 (m, 2H), 2.70-2.62 (m, 1H), 2.62-2.32 (m, 5H), 2.28-2.19 (m, 1H), 2.12 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 2.03-1.86 (m, 5H), 1.81-1.28 (m, 17H), 1.04 (d, J = 8.4 Hz, 6H), 0.97-0.94 (m, 3H), 0.89-0.80 (m, 18H) ppm. Anal. HPLC: 100%, 체류 시간: 8.52 min (방법 B).
LP7의 합성
(4S)-4-({2-[(1R,3R)-1-(아세틸옥시)-3-[(2S,3S)-N-(헥스-5-인-1-일)-3-메틸-2-{[(2R)-1-메틸피페리딘-2-일]포름아미도}펜탄아미도]-4-메틸펜틸]-1,3-티아졸-4-일}포름아미도)-5-{4-[(2S)-5-(카바모일아미노)-2-[(2S)-2-{[(9H-플루오렌-9-일메톡시)카보닐]아미노}-3-메틸부탄아미도]펜탄아미도]페닐}-2,2-디메틸펜탄산 (42e)
Figure pct00723
41 대신에 41c(25 ㎎, 40 μmol)를 사용함을 제외하고, 41 내지 42a와 유사한 과정에 따라, 화합물 42e(36 ㎎, 2 단계로 70% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. ESI m/z: 651.3 (M/2 + H)+. 1H NMR ( DMSO d6 , 400 MHz) δ 9.97 (s, 1H), 8.17 (s, 1H), 8.09 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 7.89 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 7.76-7.67 (m, 3H), 7.52-7.38 (m, 5H), 7.32 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 7.10 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 6.01 (t, J = 4.8 Hz, 1H), 5.67-5.63 (m, 1H), 5.42 (s, 2H), 4.48-4.21 (m, 7H), 3.94-3.90 (m, 1H), 3.78-3.69 (m, 1H), 3.04-2.90 (m, 3H), 2.83-2.67 (m, 4H), 2.33-1.04 (m, 41H), 0.94-0.80 (m, 14H), 0.68-0.66 (m, 3H) ppm. Anal. HPLC: 99%, 체류 시간: 8.35 min (방법 B).
(4S)-4-({2-[(1R,3R)-1-(아세틸옥시)-3-[(2S,3S)-N-(헥스-5-인-1-일)-3-메틸-2-{[(2R)-1-메틸피페리딘-2-일]포름아미도}펜탄아미도]-4-메틸펜틸]-1,3-티아졸-4-일}포름아미도)-5-{4-[(2S)-2-[(2S)-2-아미노-3-메틸부탄아미도]-5-(카바모일아미노)펜탄아미도]페닐}-2,2-디메틸펜탄산 (43e)
Figure pct00724
42a 대신에 42e(26 ㎎, 20 μmol)를 사용함을 제외하고, 42a 내지 43a와 유사한 과정에 따라, 화합물 43e(21 ㎎, 97% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. ESI m/z: 540.3(M/2+H)+.
LP9, LP11 및 LP12의 합성(도 10D)
Figure pct00725
(4S)-4-{[(3급-부톡시)카보닐]아미노}-5-{4-[(2S)-2-{[(9H-플루오렌-9-일메톡시)카보닐]아미노}프로판아미도]-3-플루오로페닐}-2,2-디메틸펜탄산 (B-2)
피리딘(10 ㎖) 중의 화합물 B-1(0.65 g, 1.8 mmol)의 용액에 Fmoc-Ala-Cl(0.91 g, 1.5 mmol) 및 DMAP(10 ㎎, 82 μmol)를 가하고, 반응 혼합물을 RT에서 12시간 동안 교반하며, 이를 LCMS에 의해 모니터하였다. 휘발성 물질을 진공하에서 제거하고 잔사를 역상 플래시 크로마토그래피(수성 TFA(0.03%) 중의 0-100% 아세토니트릴)에 의해 정제시켜 백색 고체로서 조 화합물 B-2(0.66 g, 80% 순도, 57% 수율)를 제공하였다. ESI m/z 548.3(M-Boc+H)+, 670.3(M+Na)+.
Figure pct00726
(4S)-5-{4-[(2S)-2-아미노프로판아미도]-3-플루오로페닐}-4-{[(3급-부톡시)카보닐]아미노}-2,2-디메틸펜탄산 (B-3)
상기 수득된 조 화합물 B-2(0.66 g, 1.0 mmol)를 DMF(2 ㎖)에 용해시키고 피페리딘(0.26 g, 3.1 mmol)을 가하고, 혼합물을 RT에서 12시간 동안 교반하고, 이를 LCMS에 의해 모니터하였다. 반응 혼합물을 역상 플래시 크로마토그래피(수성 TFA(0.03%) 중의 0-100% 아세토니트릴)에 의해 정제시켜 백색 고체로서 화합물 B-3(0.35 g, 80% 수율)를 제공하였다. ESI m/z 370.2(M-tBu+H)+.
Figure pct00727
(4S)-4-{[(3급-부톡시)카보닐]아미노}-5-{4-[(2S)-2-[(2S)-2-{[(9H-플루오렌-9-일메톡시)카보닐]아미노}-3-메틸부탄아미도]프로판아미도]-3-플루오로페닐}-2,2-디메틸펜탄산 (B-4)
DMF(3 ㎖) 중의 화합물 B-3(42 ㎎, 0.10 mmol)의 용액에 Fmoc-Val-OSu(45 ㎎, 0.11 mmol) 및 DIPEA(40 ㎎, 0.31 mmol)를 가하고, 반응 혼합물을 RT에서 16시간 동안 교반하며, 이를 LCMS에 의해 모니터하였다. 생성 혼합물을 역상 플래시 크로마토그래피(수성 TFA(0.03%) 중의 0-100% 아세토니트릴)에 의해 직접 정제시켜 백색 고체로서 조 화합물 B-4(37 ㎎, 50% 수율)를 제공하였다. ESI m/z 647.3(M-Boc+H)+, 770.3(M+Na)+.
Figure pct00728
(4S)-4-아미노-5-{4-[(2S)-2-[(2S)-2-{[(9H-플루오렌-9-일메톡시)카보닐]아미노}-3-메틸부탄아미도]프로판아미도]-3-플루오로페닐}-2,2-디메틸펜탄산 (B-5)
DCM(5 ㎖) 중의 화합물 B-4(75 ㎎, 0.10 mmol)의 용액에 TFA(1 ㎖)를 가하고, 반응 혼합물을, Boc가 완전히 제거될 때까지(LCMS에 의해 모니터됨) RT에서 2시간 동안 교반하였다. 생성 혼합물을 진공하에서 농축시켜 백색 고체로서 조 화합물 B-5(60 ㎎, 92% 수율)를 제공하고, 이를 추가의 정제 없이 다음 단계에 바로 사용하였다. ESI m/z 647.3(M+H)+.
Figure pct00729
(4S)-4-({2-[(1R,3R)-1-(아세틸옥시)-3-[(2S,3S)-N-헥실-3-메틸-2-{[(2R)-1-메틸피페리딘-2-일]포름아미도}펜탄아미도]-4-메틸펜틸]-1,3-티아졸-4-일}포름아미도)-5-{4-[(2S)-2-[(2S)-2-{[(9H-플루오렌-9-일메톡시)카보닐]아미노}-3-메틸부탄아미도]프로판아미도]-3-플루오로페닐}-2,2-디메틸펜탄산 (B-6a)
DMF(5 ㎖) 중의 화합물 B-5(65 ㎎, 0.10 mmol)의 용액에 화합물 A-1a(77 ㎎, 0.10 mmol) 및 DIPEA(40 ㎎, 0.31 mmol)를 가하고, 반응 혼합물을 RT에서 밤새 교반하며, 이를 LCMS에 의해 모니터하였다. 생성 혼합물을 역상 플래시 크로마토그래피(수성 TFA(0.03%) 중의 0-100% 아세토니트릴)에 의해 직접 정제시켜 백색 고체로서 화합물 B-6a(61 ㎎, 50% 수율)를 제공하였다. ESI m/z 619.5(M/2+H)+, 1238.7(M+H)+.
Figure pct00730
(4S)-5-{4-[(2S)-2-[(2S)-2-{[(9H-플루오렌-9-일메톡시)카보닐]아미노}-3-메틸부탄아미도]프로판아미도]-3-플루오로페닐}-4-({2-[(1R,3R)-3-[(2S,3S)-N-헥실-3-메틸-2-{[(2R)-1-메틸피페리딘-2-일]포름아미도}펜탄아미도]-4-메틸-1-[(메틸카바모일)옥시]펜틸]-1,3-티아졸-4-일}포름아미도)-2,2-디메틸펜탄산 (B-6b)
A-1b 대신에 A-1d를 사용함을 제외하고, B-6a와 유사한 과정에 따라, 화합물 B-6b(0.10 g, 64% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. ESI m/z 626.9(M/2+H)+.
Figure pct00731
(4S)-4-({2-[(1R,3R)-1-(아세틸옥시)-3-[(2S,3S)-N-헥실-3-메틸-2-{[(2R)-1-메틸피페리딘-2-일]포름아미도}펜탄아미도]-4-메틸펜틸]-1,3-티아졸-4-일}포름아미도)-5-{4-[(2S)-2-[(2S)-2-아미노-3-메틸부탄아미도]프로판아미도]-3-플루오로페닐}-2,2-디메틸펜탄산 (B-7a)
DMF(5 ㎖) 중의 화합물 B-6a(61 ㎎, 49 μmol)의 용액에 피페리딘(13 ㎎, 0.15 mmol)을 가하고, 혼합물을 Fmoc가 완전히 제거될 때까지(LCMS에 의해 모니터됨) RT에서 2시간 동안 교반하였다. 생성 혼합물을 역상 플래시 크로마토그래피(수성 TFA(0.03%) 중의 0-100% 아세토니트릴)에 의해 직접 정제시켜 백색 고체로서 화합물 B-7a(41 ㎎, 80% 수율)를 제공하였다. ESI m/z 508.1(M/2+H)+.
Figure pct00732
(4S)-5-{4-[(2S)-2-[(2S)-2-아미노-3-메틸부탄아미도]프로판아미도]-3-플루오로페닐}-4-({2-[(1R,3R)-3-[(2S,3S)-N-헥실-3-메틸-2-{[(2R)-1-메틸피페리딘-2-일]포름아미도}펜탄아미도]-4-메틸-1-[(메틸카바모일)옥시]펜틸]-1,3-티아졸-4-일}포름아미도)-2,2-디메틸펜탄산 (B-7b)
B-6a 대신에 B-6b를 사용함을 제외하고, B-7a와 유사한 과정에 따라, 화합물 B-7b(60 ㎎, 70% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. ESI m/z 516.0(M/2+H)+.
Figure pct00733
(4S)-4-({2-[(1R,3R)-1-(아세틸옥시)-3-[(2S,3S)-N-헥실-3-메틸-2-{[(2R)-1-메틸피페리딘-2-일]포름아미도}펜탄아미도]-4-메틸펜틸]-1,3-티아졸-4-일}포름아미도)-5-{4-[(2S)-2-[(2S)-2-[1-(4-{2-아자트리사이클로[10.4.0.04,9]헥사데카-1(12),4(9),5,7,13,15-헥사엔-10-인-2-일}-4-옥소부탄아미도)-3,6,9,12-테트라옥사펜타데칸-15-아미도]-3-메틸부탄아미도]프로판아미도]-3-플루오로페닐}-2,2-디메틸펜탄산 (LP9)
DMF(2 ㎖) 중의 화합물 B-7a(20 ㎎, 20 μmol)의 용액에 B-8a(16 ㎎, 25 μmol) 및 DIPEA(7.3 ㎎, 57 μmol)를 가하고, 반응 용액을 RT에서 2시간 동안 교반하며, 이를 LCMS에 의해 모니터하였다. 생성 용액을 prep-HPLC(수성 암모늄 비카보네이트(10 mM) 중의 0-100% 아세토니트릴)에 의해 직접 정제시켜 백색 고체로서 링커-페이로드 LP9(20 ㎎, 65% 수율)를 제공하였다. ESI m/z 775.2 (M/2 + H)+. 1H NMR (400 MHz, DMSO d6 ) δ 9.56 (s, 1H), 8.22 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 8.17 (s, 1H), 7.87 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.81-7.67 (m, 6H), 7.51-7.45 (m, 3H), 7.38-7.28 (m, 3H), 7.05 (d, J = 11.6 Hz, 1H), 6.92 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 5.65 (d, J = 12.8 Hz, 1H), 5.03 (d, J = 14.0 Hz, 1H), 4.52-4.47 (m, 2H), 4.23-4.19 (m, 2H), 3.62-3.56 (m, 4H), 3.47-3.44 (m, 12H), 3.12-3.03 (m, 2H), 3.01-2.88 (m, 1H), 2.87-2.71 (m, 3H), 2.62-2.55 (m, 1H), 2.47-2.41 (m, 2H), 2.38-2.19 (m, 4H), 2.13 (s, 3H), 2.06 (m, 3H), 2.08-1.81 (m, 6H), 1.79-1.31 (m, 11H), 1.28-1.24 (m, 10H), 1.07 (s, 3H), 1.06 (s, 3H), 0.94 (d, J = 6.4 Hz, 3H), 0.84-0.79 (m, 18H), 0.68 (d, J = 6.0 Hz, 3H) ppm.
Figure pct00734
(4S)-4-({2-[(1R,3R)-1-(아세틸옥시)-3-[(2S,3S)-N-헥실-3-메틸-2-{[(2R)-1-메틸피페리딘-2-일]포름아미도}펜탄아미도]-4-메틸펜틸]-1,3-티아졸-4-일}포름아미도)-5-{4-[(2S)-2-[(2S)-2-[1-({[(1R,8S,9R)-비사이클로[6.1.0]논-4-인-9-일메톡시]카보닐}아미노)-3,6,9,12-테트라옥사펜타데칸-15-아미도]-3-메틸부탄아미도]프로판아미도]-3-플루오로페닐}-2,2-디메틸펜탄산 (LP11)
B-8a 대신에 B-8b를 사용함을 제외하고, 링커-페이로드 LP9와 유사한 과정에 따라, 링커-페이로드 LP11(12 ㎎, 48% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. ESI m/z 719.7 (M/2 + H)+. 1H NMR (400 MHz, DMSO d6 ) δ 9.60 (s, 1H), 8.21 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 8.16 (s, 1H), 7.87 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 7.81-7.71 (m, 2H), 7.64 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 7.07-7.04 (m, 2H), 6.92 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 5.65 (d, J = 11.6 Hz, 1H), 4.51-4.43 (m, 3H), 4.33-4.26 (m, 2H), 4.23-4.19 (m, 2H), 4.03 (d, J = 8.0 Hz, 3H), 3.71-3.63 (m, 6H), 3.58-3.56 (m, 12H), 3.13-3.10 (m, 1H), 2.87-2.73 (m, 2H), 2.48-2.42 (m, 2H), 2.39-2.33 (m, 1H), 2.26-2.15 (m, 6H), 2.13 (s, 3H), 2.06 (m, 3H), 1.97-1.82 (m, 5H), 1.75-1.32 (m, 11H), 1.29-1.23 (m, 12H), 1.08 (s, 3H), 1.07 (s, 3H), 0.95 (d, J = 6.4 Hz, 3H), 0.85-0.80 (m, 18H), 0.68 (d, J = 6.0 Hz, 3H) ppm.
Figure pct00735
(4S)-5-{4-[(2S)-2-[(2S)-2-[1-(4-{2-아자트리사이클로[10.4.0.04,9]헥사데카-1(12),4(9),5,7,13,15-헥사엔-10-인-2-일}-4-옥소부탄아미도)-3,6,9,12-테트라옥사펜타데칸-15-아미도]-3-메틸부탄아미도]프로판아미도]-3-플루오로페닐}-4-({2-[(1R,3R)-3-[(2S,3S)-N-헥실-3-메틸-2-{[(2R)-1-메틸피페리딘-2-일]포름아미도}펜탄아미도]-4-메틸-1-[(메틸카바모일)옥시]펜틸]-1,3-티아졸-4-일}포름아미도)-2,2-디메틸펜탄산 (LP12)
B-7a 대신에 B-7b를 사용함을 제외하고, 링커-페이로드 LP9와 유사한 과정에 따라, 링커-페이로드 LP12(20 ㎎, 65% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. ESI m/z 783.1 (M/2 + H)+. 1H NMR (400 MHz, DMSO d6 ) δ 9.62 (s, 1H), 8.24 (d, J = 6.7 Hz, 1H), 8.13 (s, 1H), 7.89 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.77 (s, 2H), 7.68-7.60 (m, 3H), 7.51-7.29 (m, 8H), 7.09-6.89 (m, 2H), 5.55 (s, 1H), 5.03 (d, J = 14.0 Hz, 1H), 4.50-4.30 (m, 4H), 3.62 (s, 1H), 3.60-3.55 (m, 4H), 3.49-3.42 (m, 9H), 3.38-3.25 (m, 4H), 3.13-3.03 (m, 3H), 2.95 (s, 1H), 2.90-2.34 (m, 8H), 2.27-2.21 (m, 1H), 2.08-1.70 (m, 7H), 1.70-1.45 (m, 6H), 1.30-1.20 (m, 12H), 1.11-1.02 (m, 8H), 1.00-0.83 (m, 25H), 0.69 (s, 3H) ppm.
LP10 및 LP15의 합성(도 10E)
Figure pct00736
(4S)-4-아미노-5-(4-{[({4-[(2S)-5-(카바모일아미노)-2-[(2S)-2-{[(9H-플루오렌-9-일메톡시)카보닐]아미노}-3-메틸부탄아미도]펜탄아미도]페닐}메톡시)카보닐]아미노}페닐)-2,2-디메틸펜탄산 (C-2a)
DMF(2 ㎖) 중의 화합물 D-1(20 ㎎, 59 μmol) 및 Fmoc-vcPAB-PNP(C-1a)(50 ㎎, 65 μmol)의 혼합물에 HOBt(8.0 ㎎, 59 μmol) 및 DIPEA(15 ㎎, 0.12 mmol)를 가하고, 반응 혼합물을 rt에서 밤새 교반하고, 이를 LCMS에 의해 모니터하였다. 이어서 생성 혼합물을 역상 플래시 크로마토그래피(수성 TFA(0.01%) 중의 0-100% 아세토니트릴)에 의해 직접 정제시켜 백색 고체로서 Boc-C-2a(31 ㎎, ESI m/z 964.1(M+H)+)를 제공하고, 이를 DCM(4 ㎖)에 용해시켰다. 용액에 TFA(0.5 ㎖)를 가하고, 반응 혼합물을, Boc가 완전히 제거될 때까지 RT에서 30분 동안 교반하고, 이를 LCMS에 의해 모니터하였다. 휘발성 물질을 진공하에서 제거하여 갈색 오일로서 화합물 C-2a(37 ㎎, 54% 수율, TFA 염)를 제공하였다. ESI m/z 432.6(M/2+H)+.
Figure pct00737
(4S)-4-아미노-5-{4-[(2S)-5-(카바모일아미노)-2-[(2S)-2-{[(9H-플루오렌-9-일메톡시)카보닐]아미노}-3-메틸부탄아미도]펜탄아미도]페닐}-2,2-디메틸펜탄산 (C-2b)
DCM(20 ㎖) 및 메탄올(10 ㎖) 중의 Fmoc-Val-Cit-OH(C-1b)(0.60 g, 1.2 mmol)의 혼합물에 화합물 D-1(0.20 g, 0.59 mmol) 및 EEDQ(0.22 g, 0.90 mmol)를 질소하에서 가하였으며 혼합물이 투명하게 변하였다. 용액을 암실에서 RT에서 밤새 교반하고, 이를 LCMS에 의해 모니터하였다. 혼합물을 진공하에서 농축시키고 잔사를 역상 플래시 크로마토그래피(수성 암모늄 비카보네이트(10 mM) 중의 0-100% 아세토니트릴)에 의해 정제시켜 백색 고체로서 Boc-C-2b(85 ㎎, ESI m/z: 815.3(M+H)+)를 제공하고, 이어서 이를 DCM(10 ㎖)에 용해시켰다. 용액에 TFA(1 ㎖)를 가하고, 혼합물을, Boc가 완전히 제거될 때까지 RT에서 1시간 동안 교반하고, 이를 LCMS에 의해 모니터하였다. 휘발성 물질을 진공하에서 제거하여 갈색 오일로서 화합물 C-2b(84 ㎎, 17% 수율, TFA 염)를 제공하였다. ESI m/z 715.3(M+H)+.
화합물 C-3 및 C-4에 대한 일반적인 과정
DMF(15 mM) 중의 화합물 C-2(1.0 당량)의 혼합물에 DIPEA(3.0 당량) 및 펜타플루오로페닐 에스테르(A-1b,c,e)를 가하고, 반응 혼합물을 RT에서 밤새 교반하고, LCMS에 의해 모니터하였다. 생성 혼합물을 역상 플래시 크로마토그래피(수 중 0-100% 아세토니트릴)에 의해 직접 정제시켜 백색 고체로서 화합물 C-3(30-67% 수율)을 제공하고, 이어서 이를 DMF(40 mM)에 용해시켰다. 용액에 피페리딘(3.0 당량)을 가하고, 혼합물을, Fmoc가 완전히 제거될 때까지 RT에서 2시간 동안 교반하고, 이를 LCMS에 의해 모니터하였다. 생성 혼합물을 역상 플래시 크로마토그래피(수성 TFA(0.01%) 중의 0-100% 아세토니트릴)에 의해 직접 정제시켜 화합물 C-4(활성화된 에스테르로부터 2 단계로 25-67% 수율)를 제공하였다.
Figure pct00738
(4S)-4-({2-[(1R,3R)-1-(아세틸옥시)-4-메틸-3-[(2S,3S)-3-메틸-2-{[(2R)-1-메틸피페리딘-2-일]포름아미도}-N-(펜트-4-인-1-일옥시)펜탄아미도]펜틸]-1,3-티아졸-4-일}포름아미도)-5-(4-{[({4-[(2S)-2-[(2S)-2-아미노-3-메틸부탄아미도]-5-(카바모일아미노)펜탄아미도]페닐}메톡시)카보닐]아미노}페닐)-2,2-디메틸펜탄산 (C-4a)
A-1b로 처리된 C-2a로부터, 화합물 C-3 및 C-4에 대한 일반적인 과정에 따라, 화합물 C-4a(17 ㎎, A-1b로부터 67% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. ESI m/z 615.8(M/2+H)+.
Figure pct00739
(4S)-4-({2-[(1R,3R)-1-(아세틸옥시)-4-메틸-3-[(2S,3S)-3-메틸-2-{[(2R)-1-메틸피페리딘-2-일]포름아미도}-N-(펜틸옥시)펜탄아미도]펜틸]-1,3-티아졸-4-일}포름아미도)-5-{4-[(2S)-2-[(2S)-2-아미노-3-메틸부탄아미도]-5-(카바모일아미노)펜탄아미도]페닐}-2,2-디메틸펜탄산 (C-4b)
A-1c로 처리된 C-2b로부터, 화합물 C-3 및 C-4에 대한 일반적인 과정에 따라, 화합물 C-4b(37 ㎎, A-1c로부터 56% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. ESI m/z 543.5(M/2+H)+.
Figure pct00740
(4S)-5-(4-{[({4-[(2S)-2-[(2S)-2-아미노-3-메틸부탄아미도]-5-(카바모일아미노)펜탄아미도]페닐}메톡시)카보닐]아미노}페닐)-2,2-디메틸-4-({2-[(1R,3R)-4-메틸-3-[(2S,3S)-3-메틸-2-{[(2R)-1-메틸피페리딘-2-일]포름아미도}-N-(펜틸옥시)펜탄아미도]-1-[(메틸카바모일)옥시]펜틸]-1,3-티아졸-4-일}포름아미도)펜탄산 (C-4c)
A-1e로 처리된 C-2a로부터, 화합물 C-3 및 C-4에 대한 일반적인 과정에 따라, 화합물 C-4c(9 ㎎, A-1e로부터 20% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. ESI m/z 1250.1(M+H)+.
Figure pct00741
(4S)-5-{4-[(2S)-2-[(2S)-2-아미노-3-메틸부탄아미도]-5-(카바모일아미노)펜탄아미도]페닐}-2,2-디메틸-4-({2-[(1R,3R)-4-메틸-3-[(2S,3S)-3-메틸-2-{[(2R)-1-메틸피페리딘-2-일]포름아미도}-N-(펜틸옥시)펜탄아미도]-1-[(메틸카바모일)옥시]펜틸]-1,3-티아졸-4-일}포름아미도)펜탄산 (C-4d)
A-1e로 처리된 C-2b로부터, 화합물 C-3 및 C-4에 대한 일반적인 과정에 따라, 화합물 C-4d(9 ㎎, A-1e로부터 29% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. ESI m/z 1101.1(M+H)+.
Figure pct00742
(4S)-5-{4-[(2S)-2-[(2S)-2-[1-(4-{2-아자트리사이클로[10.4.0.04,9]헥사데카-1(12),4(9),5,7,13,15-헥사엔-10-인-2-일}-4-옥소부탄아미도)-3,6,9,12-테트라옥사펜타데칸-15-아미도]-3-메틸부탄아미도]-5-(카바모일아미노)펜탄아미도]페닐}-2,2-디메틸-4-({2-[(1R,3R)-4-메틸-3-[(2S,3S)-3-메틸-2-{[(2R)-1-메틸피페리딘-2-일]포름아미도}-N-(펜틸옥시)펜탄아미도]-1-[(메틸카바모일)옥시]펜틸]-1,3-티아졸-4-일}포름아미도)펜탄산 (LP10)
B-7a 대신에 C-4d를 사용함을 제외하고, LP9와 유사한 과정에 따라, 링커-페이로드 LP10(7 ㎎, 52% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. ESI m/z 818.0 (M/2 + H)+. 1H NMR (400 MHz, DMSO d6 ) δ 9.90-9.80 (m, 1H), 8.15 (s, 4H), 7.80 (s, 1H), 7.68 (d, J = 7.3 Hz, 1H), 7.62 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 7.58-7.27 (m, 10H), 7.09 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 6.01 (s, 1H), 5.67 (d, J = 10.9 Hz, 1H), 5.43 (s, 2H), 5.02 (d, J = 13.9 Hz, 1H), 4.78 (s, 1H), 4.35 (s, 1H), 4.25-3.33 (m, 21H), 3.32-2.53 (m, 14H), 2.46-2.43 (m, 1H), 2.32-2.20 (m, 4H), 2.11 (s, 3H), 2.02-1.95 (m, 5H), 1.82-1.70 (m, 2H), 1.65-1.55 (m, 6H), 1.42-1.28 (m, 9H), 1.24 (s, 1H), 1.16-0.80 (m, 29H) ppm.
Figure pct00743
(4S)-5-(4-{[({4-[(2S)-2-[(2S)-2-[1-(4-{2-아자트리사이클로[10.4.0.04,9]헥사데카-1(12),4(9),5,7,13,15-헥사엔-10-인-2-일}-4-옥소부탄아미도)-3,6,9,12-테트라옥사펜타데칸-15-아미도]-3-메틸부탄아미도]-5-(카바모일아미노)펜탄아미도]페닐}메톡시)카보닐]아미노}페닐)-2,2-디메틸-4-({2-[(1R,3R)-4-메틸-3-[(2S,3S)-3-메틸-2-{[(2R)-1-메틸피페리딘-2-일]포름아미도}-N-(펜틸옥시)펜탄아미도]-1-[(메틸카바모일)옥시]펜틸]-1,3-티아졸-4-일}포름아미도)펜탄산 (LP15)
B-7a 대신에 C-4c를 사용함을 제외하고, 링커-페이로드 LP9와 유사한 과정에 따라, 링커-페이로드 LP15(22 ㎎, 80% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. ESI m/z 892.5 (M/2 + H)+. 1H NMR (400 MHz, DMSO d6 ) δ 9.99 (s, 1H), 9.61 (s, 1H), 8.11-8.09 (m, 2H), 7.86 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 7.75 (t, J = 5.6 Hz, 1H), 7.67-7.65 (m, 1H), 7.61-7.59 (m, 3H), 7.50-7.44 (m, 4H), 7.39-7.36 (m, 2H), 7.34-7.20 (m, 7H), 7.05 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 5.97 (t, J = 5.6 Hz, 1H), 5.67 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 5.40 (s, 2H), 5.04 (s, 3H), 4.78 (t, J = 8.4 Hz, 1H), 4.40-4.34 (m, 1H), 4.23-4.19 (m, 2H), 4.11-4.09 (m, 1H), 4.03-3.92 (m, 3H), 3.65-3.53 (m, 6H), 3.09-2.90 (m, 8H), 2.86-2.81 (m, 1H), 2.76-2.63 (m, 3H), 2.55 (d, J = 4.8 Hz, 3H), 2.46-2.43 (m, 2H), 2.39-2.31 (m, 2H), 2.26-2.16 (m, 3H), 2.10 (s, 3H), 2.01-1.92 (m, 6H), 1.88-1.70 (m, 4H), 1.68-1.48 (m, 9H), 1.46-1.27 (m, 12H), 1.04 (s, 3H), 1.02 (s, 3H), 0.94 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 0.86-0.80 (m, 18H) ppm.
LP13, LP14, LP16, LP17, LP18, LP19, LP20, LP21, LP22, LP23, 및 LP24의 합성(도 10F)
Figure pct00744
(4S)-4-아미노-5-[4-(2-{[(9H-플루오렌-9-일메톡시)카보닐]아미노}아세트아미도)페닐]-2,2-디메틸펜탄산 (D-4a)
DCM(10 ㎖) 중의 D-1(Boc-A-2d)(0.34 g, 1.0 mmol)의 용액에 2,6-루티딘(0.21 g, 2.0 mmol) 및 Fmoc-Gly-Cl(D-2a)(0.45 g, 1.5 mmol)를 가하고, 반응 혼합물을 RT에서 3시간 동안 교반하고, LCMS에 의해 모니터하였다. 생성 혼합물을 에틸 아세테이트(50 ㎖)로 희석하고, 수 및 염수로 세척하고, 무수 황산 나트륨상에서 건조시키고, 진공하에서 농축시켰다. 잔사를 역상 플래시 크로마토그래피(수성 TFA(0.3%) 중의 0-100% 아세토니트릴)에 의해 정제시켜 백색 고체로서 화합물 D-3a(0.31 g, 50% 수율)를 제공하였다. ESI m/z 516.3(M-Boc+H)+.
DCM(5 ㎖) 중의 D-3a(0.31 g, 상기 수득됨)의 용액에 TFA(1.0 ㎖)를 가하고, 혼합물을, Boc가 진공하에서 완전히 제거될 때까지(LCMS에 의해 모니터됨) RT에서 2시간 동안 교반하였다. 휘발성 물질을 진공하에서 제거하여 백색 고체로서 조 화합물 D-4b(0.30 g, D-1로부터 58% 수율)를 제공하였다. ESI m/z: 516.3(M+H)+.
Figure pct00745
(4S)-4-아미노-5-{4-[(2S)-2-{[(9H-플루오렌-9-일메톡시)카보닐]아미노}프로판아미도]페닐}-2,2-디메틸펜탄산 (D-4b)
D-2a 대신에 Fmoc-Ala-Cl(D-2b)를 사용함을 제외하고 화합물 D-4a와 유사한 과정에 따라, 화합물 D-4b(0.31 g, D-1로부터 58% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. ESI m/z 530.3(M+H)+.
Figure pct00746
(4S)-4-아미노-5-{4-[(2S)-4-카복시-2-{[(9H-플루오렌-9-일메톡시)카보닐]아미노}부탄아미도]페닐}-2,2-디메틸펜탄산 (D-4c)
DCM(10 ㎖) 중의 Fmoc-Glu(OtBu)-OH(0.64 g, 1.5 mmol)의 용액에 염화 옥살릴(4.5 mmol)을 가하고, 반응 혼합물을 RT에서 1시간 동안 교반하였다. 생성 혼합물을 진공하에서 농축시켜 화합물 Fmoc-Glu(OtBu)-Cl(D-2c)을 제공하고, 이를 다음 단계에 바로 사용하였다.
D-2a 대신에 화합물 D-2c(상기 수득됨)를 사용함을 제외하고 화합물 D-4a와 유사한 과정에 따라, 화합물 D-4c(0.25 g, D-1로부터 43% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. ESI m/z 588.3(M+H)+.
Figure pct00747
(4S)-4-({2-[(1R,3R)-1-(아세틸옥시)-4-메틸-3-[(2S,3S)-3-메틸-2-{[(2R)-1-메틸피페리딘-2-일]포름아미도}-N-(펜트-4-인-1-일옥시)펜탄아미도]펜틸]-1,3-티아졸-4-일}포름아미도)-5-[4-(2-아미노아세트아미도)페닐]-2,2-디메틸펜탄산 (D-5a)
화합물 A-1b로 처리된 화합물 D-4a로부터 VII 및 VIII에 대한 일반적인 과정에 따라, 화합물 Fmoc-D-5a(77 ㎎, 70% 수율, ESI m/z 552.0(M/2+H)+)를 백색 고체로서 수득하고, 이를 DMF(1 ㎖)에 용해시켰다. 용액에 피페리딘(26 ㎎, 0.31 mmol)을 가하고, 반응 혼합물을, Fmoc가 완전히 제거될 때까지(LCMS에 의해 모니터됨) RT에서 2시간 동안 교반하였다. 생성 용액을 역상 플래시 크로마토그래피(수성 암모늄 비카보네이트(10 mM) 중의 5-75% 아세토니트릴)에 의해 직접 정제시켜 백색 고체로서 화합물 D-5a(26 ㎎, 50% 수율)를 제공하였다. ESI m/z 882.4(M+H)+.
Figure pct00748
(4S)-4-({2-[(1R,3R)-1-(아세틸옥시)-4-메틸-3-[(2S,3S)-3-메틸-2-{[(2R)-1-메틸피페리딘-2-일]포름아미도}-N-(펜트-4-인-1-일옥시)펜탄아미도]펜틸]-1,3-티아졸-4-일}포름아미도)-5-{4-[(2S)-2-아미노프로판아미도]페닐}-2,2-디메틸펜탄산 (D-5b)
D-4a 대신에 화합물 D-4b를 사용함을 제외하고 화합물 D-5a와 유사한 과정에 따라, 화합물 D-5b(25 ㎎, 55% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. ESI m/z 896.5(M+H)+.
Figure pct00749
(4S)-4-({2-[(1R,3R)-1-(아세틸옥시)-4-메틸-3-[(2S,3S)-3-메틸-2-{[(2R)-1-메틸피페리딘-2-일]포름아미도}-N-(펜트-4-인-1-일옥시)펜탄아미도]펜틸]-1,3-티아졸-4-일}포름아미도)-5-{4-[(2S)-2-아미노-4-카복시부탄아미도]페닐}-2,2-디메틸펜탄산 (D-5c)
D-4a 대신에 화합물 D-4c를 사용함을 제외하고 화합물 D-5a와 유사한 과정에 따라, 화합물 D-5c(30 ㎎, 63% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. ESI m/z 478.0(M/2+H)+.
Figure pct00750
(4S)-4-({2-[(1R,3R)-1-(아세틸옥시)-4-메틸-3-[(2S,3S)-3-메틸-2-{[(2R)-1-메틸피페리딘-2-일]포름아미도}-N-(펜틸옥시)펜탄아미도]펜틸]-1,3-티아졸-4-일}포름아미도)-5-[4-(2-아미노아세트아미도)페닐]-2,2-디메틸펜탄산 (D-5d)
A-1b 대신에 화합물 A-1c를 사용함을 제외하고 화합물 D-5a와 유사한 과정에 따라, 화합물 D-5d(15 ㎎, 69% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. ESI m/z 886.2(M+H)+.
D-7 화합물에 대한 일반적인 과정
DMF(6 mM) 중의 화합물 D-5(1.0 당량)의 용액에 DIPEA(2.0 당량) 및 펩티드 활성 에스테르 D-6(1.0 당량)을 가하고, 반응 혼합물을 RT에서 3시간 동안 교반하고, LCMS에 의해 모니터하였다. 반응 혼합물에 피페리딘(5.0 당량)을 가하고, 혼합물을, Fmoc가 완전히 제거될 때까지(LCMS에 의해 모니터됨) RT에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 역상 플래시 크로마토그래피(수성 암모늄 비카보네이트(10 mM) 중의 25-75% 아세토니트릴)에 의해 직접 정제시켜 백색 고체로서 화합물 D-7(35-48% 수율)를 제공하였다.
Figure pct00751
(4S)-4-({2-[(1R,3R)-1-(아세틸옥시)-4-메틸-3-[(2S,3S)-3-메틸-2-{[(2R)-1-메틸피페리딘-2-일]포름아미도}-N-(펜트-4-인-1-일옥시)펜탄아미도]펜틸]-1,3-티아졸-4-일}포름아미도)-5-(4-{2-[2-(2-아미노아세트아미도)아세트아미도]아세트아미도}페닐)-2,2-디메틸펜탄산 (D-7a)
D-6a로 처리된 D-5a로부터 D-7 화합물에 대한 일반적인 과정에 따라, 화합물 D-7a(28 ㎎, 35% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. ESI m/z: 498.7(M/2+H)+.
Figure pct00752
(4S)-4-({2-[(1R,3R)-1-(아세틸옥시)-4-메틸-3-[(2S,3S)-3-메틸-2-{[(2R)-1-메틸피페리딘-2-일]포름아미도}-N-(펜트-4-인-1-일옥시)펜탄아미도]펜틸]-1,3-티아졸-4-일}포름아미도)-5-{4-[(2S)-2-[(2R)-2-[(2S)-2-아미노프로판아미도]프로판아미도]프로판아미도]페닐}-2,2-디메틸펜탄산 (D-7b)
D-6b로 처리된 D-5b로부터 D-7 화합물에 대한 일반적인 과정에 따라, 화합물 D-7b(30 ㎎, 35% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. ESI m/z: 519.8(M/2+H)+. D-7 화합물에 대한 일반적인 과정에 따라, 하기의 화합물을 제조한다.
Figure pct00753
Figure pct00754
(4S)-4-({2-[(1R,3R)-1-(아세틸옥시)-4-메틸-3-[(2S,3S)-3-메틸-2-{[(2R)-1-메틸피페리딘-2-일]포름아미도}-N-(펜트-4-인-1-일옥시)펜탄아미도]펜틸]-1,3-티아졸-4-일}포름아미도)-5-[4-(2-{2-[2-(2-아미노아세트아미도)아세트아미도]아세트아미도}아세트아미도)페닐]-2,2-디메틸펜탄산 (D-7c)
DMF(3 ㎖) 중의 화합물 D-7a(20 ㎎, 20 μmol)의 용액에 Fmoc-Gly-OSu(8 ㎎, 20 μmol) 및 DIPEA(13 ㎎, 0.10 mmol)를 가하였다. 반응 혼합물을 RT에서 3시간 동안 교반한 후에 피페리딘(6.0 ㎎, 70 μmol)을 가하였다. 이어서 혼합물을, Fmoc가 완전히 제거될 때까지(LCMS에 의해 모니터됨) RT에서 추가로 2시간 동안 교반하였다. 생성 혼합물을 역상 플래시 크로마토그래피(수성 암모늄 비카보네이트(10 mM) 중의 25-75% 아세토니트릴)에 의해 직접 정제시켜 백색 고체로서 화합물 D-7c(10 ㎎, 47% 수율)를 제공하였다. ESI m/z: 527.3(M/2+H)+.
Figure pct00755
(4S)-4-({2-[(1R,3R)-1-(아세틸옥시)-4-메틸-3-[(2S,3S)-3-메틸-2-{[(2R)-1-메틸피페리딘-2-일]포름아미도}-N-(펜트-4-인-1-일옥시)펜탄아미도]펜틸]-1,3-티아졸-4-일}포름아미도)-5-(4-{2-[(2S)-2-[2-(2-아미노아세트아미도)아세트아미도]-3-페닐프로판아미도]아세트아미도}페닐)-2,2-디메틸펜탄산 (D-7d)
D-6d로 처리된 D-5a로부터 D-7 화합물에 대한 일반적인 과정에 따라, 화합물 D-7d(11 ㎎, 43% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. ESI m/z: 572.3(M/2+H)+.
Figure pct00756
(4S)-4-({2-[(1R,3R)-1-(아세틸옥시)-4-메틸-3-[(2S,3S)-3-메틸-2-{[(2R)-1-메틸피페리딘-2-일]포름아미도}-N-(펜트-4-인-1-일옥시)펜탄아미도]펜틸]-1,3-티아졸-4-일}포름아미도)-5-{4-[(2S)-2-{2-[2-(2-아미노아세트아미도)아세트아미도]아세트아미도}-4-카복시부탄아미도]페닐}-2,2-디메틸펜탄산 (D-7e)
D-6c로 처리된 D-5c로부터 D-7 화합물에 대한 일반적인 과정에 따라, 화합물 D-7e(15 ㎎, 34% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. ESI m/z: 563.3(M/2+H)+.
Figure pct00757
(4S)-4-({2-[(1R,3R)-1-(아세틸옥시)-4-메틸-3-[(2S,3S)-3-메틸-2-{[(2R)-1-메틸피페리딘-2-일]포름아미도}-N-(펜틸옥시)펜탄아미도]펜틸]-1,3-티아졸-4-일}포름아미도)-5-[4-(2-{2-[2-(2-아미노아세트아미도)아세트아미도]아세트아미도}아세트아미도)페닐]-2,2-디메틸펜탄산 (D-7f)
D-6c로 처리된 D-5d로부터 D-7 화합물에 대한 일반적인 과정에 따라, 화합물 D-7e(10 ㎎, 47% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. ESI m/z: 529.3(M/2+H)+.
Figure pct00758
(4S)-4-({2-[(1R,3R)-1-(아세틸옥시)-4-메틸-3-[(2S,3S)-3-메틸-2-{[(2R)-1-메틸피페리딘-2-일]포름아미도}-N-(펜틸옥시)펜탄아미도]펜틸]-1,3-티아졸-4-일}포름아미도)-5-(4-{2-[(2S)-2-[2-(2-아미노아세트아미도)아세트아미도]-3-페닐프로판아미도]아세트아미도}페닐)-2,2-디메틸펜탄산 (D-7g)
D-6d로 처리된 D-5d로부터 D-7 화합물에 대한 일반적인 과정에 따라, 화합물 D-7g(11 ㎎, 48% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. ESI m/z: 574.3(M/2+H)+.
Figure pct00759
(4S)-4-({2-[(1R,3R)-1-(아세틸옥시)-4-메틸-3-[(2S,3S)-3-메틸-2-{[(2R)-1-메틸피페리딘-2-일]포름아미도}-N-(펜트-4-인-1-일옥시)펜탄아미도]펜틸]-1,3-티아졸-4-일}포름아미도)-5-{4-[2-(2-아미노아세트아미도)아세트아미도]페닐}-2,2-디메틸펜탄산 (D-7h)
D-6e로 처리된 D-5a로부터 D-7 화합물에 대한 일반적인 과정에 따라, 화합물 D-7h(9 ㎎, 48% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. ESI m/z: 470.3(M/2+H)+.
Figure pct00760
(4S)-4-({2-[(1R,3R)-1-(아세틸옥시)-4-메틸-3-[(2S,3S)-3-메틸-2-{[(2R)-1-메틸피페리딘-2-일]포름아미도}-N-(펜트-4-인-1-일옥시)펜탄아미도]펜틸]-1,3-티아졸-4-일}포름아미도)-5-(4-{2-[2-(2-{2-[(2S)-2-아미노-3-하이드록시프로판아미도]아세트아미도}아세트아미도)아세트아미도]아세트아미도}페닐)-2,2-디메틸펜탄산 (D-7i)
D-6f로 처리된 D-5a로부터 D-7 화합물에 대한 일반적인 과정에 따라, 화합물 D-7i(8 ㎎, 35% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. ESI m/z: 570.8(M/2+H)+.
링커-페이로드 LP13, LP14, LP16, LP17, LP18, LP19, LP20, LP21, LP22, LP23, 및 LP24에 대한 일반적인 과정
DMF(10 mM) 중의 화합물 D-7(1.0 당량)(또는 화합물 D-5)의 용액에 활성화된 에스테르 D-8(1.0 당량) 및 DIPEA(5.0 당량)를 가하고, 반응 혼합물을 RT에서 3시간 동안 교반하고, LCMS에 의해 모니터하였다. 생성 혼합물을 Prep-HPLC(수성 암모늄 비카보네이트(10 mM) 중의 0-100% 아세토니트릴)에 의해 직접 정제시켜 백색 고체로서 링커-페이로드 LP8-17(33-87% 수율)을 제공하였다.
Figure pct00761
(4S)-4-({2-[(1R,3R)-1-(아세틸옥시)-4-메틸-3-[(2S,3S)-3-메틸-2-{[(2R)-1-메틸피페리딘-2-일]포름아미도}-N-(펜트-4-인-1-일옥시)펜탄아미도]펜틸]-1,3-티아졸-4-일}포름아미도)-5-[4-(2-{2-[2-(4-{2-아자트리사이클로[10.4.0.04,9]헥사데카-1(12),4(9),5,7,13,15-헥사엔-10-인-2-일}-4-옥소부탄아미도)아세트아미도]아세트아미도}아세트아미도)페닐]-2,2-디메틸펜탄산 (LP13)
D-8a로 처리된 D-7a로부터 링커-페이로드 LP13, LP14 및 LP16-LP24에 대한 일반적인 과정에 따라, 링커-페이로드 LP13(10 ㎎, 33% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다. ESI m/z: 642.5 (M/2 + H)+. 1H NMR (400 MHz, DMSO d6 ) δ 9.66 (s, 1H), 8.18-8.12 (m, 4H), 7.78-7.74 (m, 1H), 7.69-7.64 (m, 1H), 7.62-7.60 (m, 1H), 7.58-7.54 (m, 1H), 7.50-7.44 (m, 4H), 7.39-7.28 (m, 3H), 7.10 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 5.81 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 5.02 (d, J = 14.4 Hz, 1H), 4.75 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 4.25-4.20 (m, 2H), 4.08-4.04 (m, 2H), 3.72 (t, J = 4.4 Hz, 2H), 3.64-3.63 (m, 2H), 3.07-2.96 (m, 1H), 2.85-2.82 (m, 3H), 2.67-2.61 (m, 2H), 2.42-2.27 (m, 6H), 2.12 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 2.08-1.93 (m, 5H), 1.84-1.77 (m, 4H), 1.67-1.60 (m, 3H), 1.51-1.35 (m, 5H), 1.04 (d, J = 10.8 Hz, 6H), 0.96-0.94 (m, 6H), 0.88-0.83 (m, 9H) ppm.
Figure pct00762
(4S)-4-({2-[(1R,3R)-1-(아세틸옥시)-4-메틸-3-[(2S,3S)-3-메틸-2-{[(2R)-1-메틸피페리딘-2-일]포름아미도}-N-(펜트-4-인-1-일옥시)펜탄아미도]펜틸]-1,3-티아졸-4-일}포름아미도)-5-{4-[(2S)-2-[(2R)-2-[(2S)-2-[2-(사이클로옥트-2-인-1-일옥시)아세트아미도]프로판아미도]프로판아미도]프로판아미도]페닐}-2,2-디메틸펜탄산 (LP18)
D-8b로 처리된 D-7b로부터 링커-페이로드 LP13, LP14 및 LP16-LP24에 대한 일반적인 과정에 따라, 링커-페이로드 LP9(12 ㎎, 35% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. ESI m/z: 601.8(M/2+H)+. 링커-페이로드 LP13, LP14 및 LP16-LP24에 대한 일반적인 과정에 따라, 하기의 화합물을 제조할 수 있다
Figure pct00763
(4S)-4-({2-[(1R,3R)-1-(아세틸옥시)-4-메틸-3-[(2S,3S)-3-메틸-2-{[(2R)-1-메틸피페리딘-2-일]포름아미도}-N-(펜트-4-인-1-일옥시)펜탄아미도]펜틸]-1,3-티아졸-4-일}포름아미도)-5-(4-{2-[2-(2-{2-[2-(사이클로옥트-2-인-1-일옥시)아세트아미도]아세트아미도}아세트아미도)아세트아미도]아세트아미도}페닐)-2,2-디메틸펜탄산 (LP19)
D-8b로 처리된 D-7c로부터 링커-페이로드 LP13, LP14 및 LP16-LP24에 대한 일반적인 과정에 따라, 링커-페이로드 LP19(10 ㎎, 87% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다. ESI m/z: 609.4 (M/2 + H)+. 1H NMR (500 MHz, DMSO d6 ) δ 9.73 (s, 1H), 8.23-8.17 (m, 4H), 7.84 (t, J = 5.0 Hz, 1H), 7.55 (d, J = 9.5 Hz, 1H), 7.47 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.11 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 5.80 (d, J = 10.5 Hz, 1H), 4.75 (t, J = 8.5 Hz, 1H), 4.32-4.30 (m, 1H), 4.25-4.24 (m, 1H), 4.16-4.14 (m, 1H), 4.06-4.03 (m, 2H), 3.94-3.91 (m, 1H), 3.86-3.80 (m, 3H), 3.79-3.73 (m, 6H), 2.84-2.82 (m, 3H), 2.67-2.63 (m, 1H), 2.40-2.29 (m, 4H), 2.25-2.18 (m, 1H), 2.12 (s, 3H), 2.09 (s, 3H), 2.02-1.90 (m, 6H), 1.87-1.73 (m, 6H), 1.62-1.55 (m, 6H), 1.48-1.32 (m, 5H), 1.18-1.17 (m, 2H), 1.12-1.06 (m, 1H), 1.03-0.95 (m, 9H), 0.88-0.81 (m, 9H) ppm.
Figure pct00764
(4S)-4-({2-[(1R,3R)-1-(아세틸옥시)-4-메틸-3-[(2S,3S)-3-메틸-2-{[(2R)-1-메틸피페리딘-2-일]포름아미도}-N-(펜트-4-인-1-일옥시)펜탄아미도]펜틸]-1,3-티아졸-4-일}포름아미도)-5-(4-{2-[(2S)-2-{2-[2-(4-{2-아자트리사이클로[10.4.0.04,9]헥사데카-1(12),4(9),5,7,13,15-헥사엔-10-인-2-일}-4-옥소부탄아미도)아세트아미도]아세트아미도}-3-페닐프로판아미도]아세트아미도}페닐)-2,2-디메틸펜탄산 (LP20)
D-8a로 처리된 D-7d로부터 링커-페이로드 LP13, LP14 및 LP16-LP24에 대한 일반적인 과정에 따라, 링커-페이로드 LP20(11 ㎎, 80% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다. ESI m/z: 716.0 (M/2 + H)+. 1H NMR (500 MHz, DMSO d6 ) δ 9.73 (s, 1H), 8.37-8.35 (m, 1H), 8.16 (s, 1H), 8.10-8.09 (m, 1H), 8.05-7.99 (m, 1H), 7.88-7.78 (br s, 1H), 7.69-7.63 (m, 1H), 7.59-7.52 (m, 2H), 7.50-7.42 (m, 5H), 7.37-7.27 (m, 3H), 7.26-7.24 (m, 4H), 7.21-7.16 (m, 2H), 7.11 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 5.82 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 5.23-4.98 (m, 1H), 4.76 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 4.51-4.47 (m, 1H), 4.26-4.23 (m, 2H), 4.06-4.05 (m, 2H), 3.86-3.82 (m, 2H), 3.78-3.69 (m, 1H), 3.62-3.51 (m, 4H), 3.06-3.04 (m, 2H), 2.85-2.78 (m, 4H), 2.70-2.63 (m, 2H), 2.37-2.27 (m, 4H), 2.13 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 2.03-1.94 (m, 5H), 1.84-1.78 (m, 4H), 1.66-1.61 (m, 3H), 1.56-1.52 (m, 1H), 1.47-1.36 (m, 4H), 1.20-1.14 (m, 1H), 1.05 (s, 3H), 1.03 (s, 3H), 0.95 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 0.89-0.82 (m, 9H) ppm.
Figure pct00765
(4S)-4-({2-[(1R,3R)-1-(아세틸옥시)-4-메틸-3-[(2S,3S)-3-메틸-2-{[(2R)-1-메틸피페리딘-2-일]포름아미도}-N-(펜트-4-인-1-일옥시)펜탄아미도]펜틸]-1,3-티아졸-4-일}포름아미도)-5-{4-[(2S)-4-카복시-2-[2-(2-{2-[2-(사이클로옥트-2-인-1-일옥시)아세트아미도]아세트아미도}아세트아미도)아세트아미도]부탄아미도]페닐}-2,2-디메틸펜탄산 (LP21)
D-8b로 처리된 D-7e로부터 링커-페이로드 LP13, LP14 및 LP16-LP24에 대한 일반적인 과정에 따라, 링커-페이로드 LP21(10 ㎎, 58% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다. ESI m/z: 645.4(M/2+H)+.
Figure pct00766
(4S)-4-({2-[(1R,3R)-1-(아세틸옥시)-4-메틸-3-[(2S,3S)-3-메틸-2-{[(2R)-1-메틸피페리딘-2-일]포름아미도}-N-(펜틸옥시)펜탄아미도]펜틸]-1,3-티아졸-4-일}포름아미도)-5-(4-{2-[2-(2-{2-[2-(사이클로옥트-2-인-1-일옥시)아세트아미도]아세트아미도}아세트아미도)아세트아미도]아세트아미도}페닐)-2,2-디메틸펜탄산 (LP23)
D-8b로 처리된 D-7f로부터 링커-페이로드 LP13, LP14 및 LP16-LP24에 대한 일반적인 과정에 따라, 링커-페이로드 LP23(8 ㎎, 69% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다. ESI m/z: 611.5 (M/2 + H)+. 1H NMR (500 MHz, DMSO d6 ) δ 9.73 (s, 1H), 8.23-8.15 (m, 4H), 7.85-7.78 (m, 2H), 7.49-7.46 (m, 3H), 7.11-7.10 (m, 2H), 5.80 (d, J = 10.5 Hz, 1H), 4.81-4.78 (m, 1H), 4.33-4.30 (m, 1H), 4.25-4.16 (m, 2H), 4.09-4.04 (m, 1H), 3.98-3.92 (m, 2H), 3.86-3.80 (m, 3H), 3.79-3.73 (m, 6H), 2.85-2.83 (m, 1H), 2.80-2.76 (m, 1H), 2.70-2.64 (m, 1H), 2.44-2.42 (m, 1H), 2.39-2.32 (m, 1H), 2.27-2.14 (m, 2H), 2.12 (s, 3H), 2.11 (s, 3H), 2.08-2.05 (m, 1H), 2.03-1.90 (m, 5H), 1.85-1.70 (m, 4H), 1.68-1.51 (m, 8H), 1.48-1.29 (m, 9H), 1.20-1.15 (m, 1H), 1.06 (s, 3H), 1.04 (s, 3H), 0.96 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 0.89-0.83 (m, 12H) ppm.
Figure pct00767
(4S)-4-({2-[(1R,3R)-1-(아세틸옥시)-4-메틸-3-[(2S,3S)-3-메틸-2-{[(2R)-1-메틸피페리딘-2-일]포름아미도}-N-(펜틸옥시)펜탄아미도]펜틸]-1,3-티아졸-4-일}포름아미도)-5-(4-{2-[(2S)-2-{2-[2-(4-{2-아자트리사이클로[10.4.0.04,9]헥사데카-1(12),4(9),5,7,13,15-헥사엔-10-인-2-일}-4-옥소부탄아미도)아세트아미도]아세트아미도}-3-페닐프로판아미도]아세트아미도}페닐)-2,2-디메틸펜탄산 (LP24)
D-8a로 처리된 D-7g로부터 링커-페이로드 LP13, LP14 및 LP16-LP24에 대한 일반적인 과정에 따라, 링커-페이로드 LP24(11 ㎎, 80% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다. ESI m/z: 718.0 (M/2 + H)+. 1H NMR (500 MHz, DMSO d6 ) δ 9.26 (s, 1H), 8.37-8.33 (m, 1H), 8.16 (s, 1H), 8.12-8.08 (m, 1H), 8.04-7.97 (m, 1H), 7.82-7.75 (br s, 1H), 7.69-7.63 (m, 1H), 7.58 (t, J = 6.5 Hz, 1H), 7.48-7.43 (m, 6H), 7.35-7.29 (m, 3H), 7.24-7.23 (m, 4H), 7.21-7.16 (m, 2H), 7.11 (d, J = 7.5 Hz, 2H), 6.65 (s, 1H), 5.80 (d, J = 10.0 Hz, 1H), 5.32 (t, J = 4.5 Hz, 1H), 5.02-4.98 (m, 1H), 4.80 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 4.52-4.47 (m, 1H), 4.24-4.22 (m, 1H), 4.16-4.15 (m, 1H), 4.08-4.04 (m, 1H), 3.97-3.95 (m, 1H), 3.87-3.81 (m, 2H), 3.77-3.69 (m, 3H), 3.64-3.58 (m, 6H), 3.07-3.04 (m, 1H), 2.85-2.76 (m, 2H), 2.70-2.63 (m, 2H), 2.44-2.42 (m, 1H), 2.37-2.36 (m, 1H), 2.35-2.27 (m, 1H), 2.11 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 2.02-1.96 (m, 5H), 1.94-1.91 (m, 1H), 1.80-1.78 (m, 2H), 1.68-1.61 (m, 4H), 1.56-1.53 (m, 1H), 1.47-1.44 (m, 2H), 1.39-1.30 (m, 5H), 1.06 (s, 3H), 1.04 (s, 3H), 0.95 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 0.89-0.81 (m, 9H) ppm.
Figure pct00768
(4S)-4-({2-[(1R,3R)-1-(아세틸옥시)-4-메틸-3-[(2S,3S)-3-메틸-2-{[(2R)-1-메틸피페리딘-2-일]포름아미도}-N-(펜트-4-인-1-일옥시)펜탄아미도]펜틸]-1,3-티아졸-4-일}포름아미도)-5-[4-(2-{2-[2-(사이클로옥트-2-인-1-일옥시)아세트아미도]아세트아미도}아세트아미도)페닐]-2,2-디메틸펜탄산 (LP17)
D-8b로 처리된 D-7h로부터 링커-페이로드 LP13, LP14 및 LP16-LP24에 대한 일반적인 과정에 따라, 링커-페이로드 LP17(5 ㎎, 47% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다. ESI m/z: 552.3(M/2+H)+.
Figure pct00769
(4S)-4-({2-[(1R,3R)-1-(아세틸옥시)-4-메틸-3-[(2S,3S)-3-메틸-2-{[(2R)-1-메틸피페리딘-2-일]포름아미도}-N-(펜트-4-인-1-일옥시)펜탄아미도]펜틸]-1,3-티아졸-4-일}포름아미도)-5-(4-{2-[2-(2-{2-[(2S)-2-[2-(사이클로옥트-2-인-1-일옥시)아세트아미도]-3-하이드록시프로판아미도]아세트아미도}아세트아미도)아세트아미도]아세트아미도}페닐)-2,2-디메틸펜탄산 (LP22)
D-8b로 처리된 D-7i로부터 링커-페이로드 LP13, LP14 및 LP16-LP24에 대한 일반적인 과정에 따라, 링커-페이로드 LP22(4 ㎎, 44% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다. ESI m/z: 653.0(M/2+H)+.
Figure pct00770
(4S)-4-({2-[(1R,3R)-1-(아세틸옥시)-4-메틸-3-[(2S,3S)-3-메틸-2-{[(2R)-1-메틸피페리딘-2-일]포름아미도}-N-(펜트-4-인-1-일옥시)펜탄아미도]펜틸]-1,3-티아졸-4-일}포름아미도)-5-(4-{2-[2-(사이클로옥트-2-인-1-일옥시)아세트아미도]아세트아미도}페닐)-2,2-디메틸펜탄산 (LP16)
D-8b로 처리된 D-5a로부터 링커-페이로드 LP13, LP14 및 LP16-LP24에 대한 일반적인 과정에 따라, 링커-페이로드 LP16(10 ㎎, 48% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다. ESI m/z: 523.8(M/2+H)+.
LP25 및 LP26의 합성(도 10G)
Figure pct00771
N-(2-아미노에틸)-2-(사이클로옥틸-2-인-1-일옥시)아세트아미드 (E-1)
DMF(2.0 ㎖) 중의 에틸렌디아민(0.71 g, 12 mmol)의 용액에 DIPEA(0.30 g, 2.4 mmol) 및 DMF(3.0 ㎖) 중의 화합물 D-8b(0.33 g, 1.2 mmol)의 용액을 서서히 가하고, 혼합물을 실온에서 30분간 교반하고, LCMS에 의해 모니터하였다. 생성 혼합물을 역상 플래시 크로마토그래피(수성 암모늄 비카보네이트(0.8 mM) 중의 0-100% 아세토니트릴)에 의해 정제시켜 무색 오일로서 화합물 E-1(0.18 g, 68% 수율)을 제공하였다. ESI m/z: 225.2 (M + H)+. 1H NMR (400 MHz, DMSO d6 ) δ 7.74-7.63 (m, 1H), 4.28 (t, J = 5.8 Hz, 1H), 3.88-3.73 (m, 2H), 3.11-3.00 (m, 4H), 2.58 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 2.27-2.06 (m, 3H), 1.94-1.71 (m, 4H), 1.66-1.54 (m, 2H), 1.45-1.33 (m, 1H) ppm.
Figure pct00772
메틸 (2S,3S,4S,5R,6S)-3,4,5-트리스(아세틸옥시)-6-[2-({2-[2-(사이클로옥트-2-인-1-일옥시)아세트아미도]에틸}카바모일)-4-(하이드록시메틸)페녹시]옥산-2-카복실레이트 (E-3a)
무수 DMF(4 ㎖) 중의 화합물 E-2a(WO201818234A1에 따라 합성됨)(0.11 g, 0.23 mmol) 및 HATU(96 ㎎, 0.25 mmol)의 혼합물에 화합물 E-1(51 ㎎, 0.23 mmol) 및 DIPEA(89 ㎎, 0.69 mmol)를 가하고, 반응 혼합물을, E-2a가 LCMS에 의해 모니터된 바와 같이 완전히 소모될 때까지 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 생성 혼합물을 역상 플래시 크로마토그래피(수성 TFA(0.01%) 중의 0-100% 아세토니트릴)에 의해 정제시켜 백색 고체로서 화합물 E-3a(0.14 g, 90% 수율)를 제공하였다. ESI m/z: 691.4 (M + H)+. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.06-8.04 (m, 1H), 7.64-7.59 (m, 1H), 7.50-7.47 (m, 1H), 7.22-7.18 (m, 1H), 7.01-6.98 (m, 1H), 5.44-5.28 (m, 5H), 4.68 (s, 2H), 4.30-4.21 (m, 2H), 4.10-4.06 (m, 1H), 3.93-3.88 (m, 1H), 3.75 (s, 3H), 3.67-3.48 (m, 2H), 2.21-2.07 (m, 15H), 1.93-1.79 (m, 3H), 1.70-1.38 (m, 3H) ppm.
Figure pct00773
[(2R,3R,4S,5R,6S)-3,4,5-트리스(아세틸옥시)-6-[2-({2-[2-(사이클로옥트-2-인-1-일옥시)아세트아미도]에틸}카바모일)-4-(하이드록시메틸)페녹시]옥산-2-일]메틸 아세테이트 (E-3b)
E-2a 대신에 E-2b를 사용함을 제외하고, E-3a와 유사한 과정에 따라, 화합물 E-3b(0.10 g, 80% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. ESI m/z: 705.3(M+H)+.
Figure pct00774
메틸 (2S,3S,4S,5R,6S)-3,4,5-트리스(아세틸옥시)-6-[2-({2-[2-(사이클로옥트-2-인-1-일옥시)아세트아미도]에틸}카바모일)-4-{[(4-니트로페녹시카보닐)옥시]메틸}페녹시]옥산-2-카복실레이트 (E-4a)
DMF(2.0 ㎖) 중의 화합물 E-3a(0.14 g, 0.20 mmol)의 용액에 비스(4-니트로페닐)카보네이트(55 ㎎, 0.18 mmol) 및 DIPEA(26 ㎎, 0.20 mmol)를 질소하에 0℃에서 가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 30분 동안 및 이어서 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 수(10 ㎖)로 희석하고 에틸 아세테이트(20 ㎖ x 3)로 추출하였다. 합한 유기 용액을 염수(10 ㎖)로 세척하고, 무수 황산 나트륨상에서 건조시키고, 진공하에서 농축시켰다. 잔사를 플래시 크로마토그래피(석유 에테르 중의 40-60% 에틸 아세테이트)에 의해 정제시켜 무색 오일로서 화합물 E-4a(85 ㎎, 49% 수율)를 제공하였다. ESI m/z: 856.0(M+H)+.
Figure pct00775
[(2R,3R,4S,5R,6S)-3,4,5-트리스(아세틸옥시)-6-[2-({2-[2-(사이클로옥트-2-인-1-일옥시)아세트아미도]에틸}카바모일)-4-{[(4-니트로페녹시카보닐)옥시]메틸}페녹시]옥산-2-일]메틸 아세테이트 (E-4b)
E-3a 대신에 E-3b를 사용함을 제외하고, E-4a와 유사한 과정에 따라, 화합물 E-4b(62 ㎎, 50% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. ESI m/z: 870.3(M+H)+.
Figure pct00776
(4S)-4-아미노-5-{4-[({[3-({2-[2-(사이클로옥트-2-인-1-일옥시)아세트아미도]에틸}카바모일)-4-{[(2S,3R,4S,5S,6S)-3,4,5-트리스(아세틸옥시)-6-(메톡시카보닐)옥산-2-일]옥시}페닐]메톡시}카보닐)아미노]페닐}-2,2-디메틸펜탄산 (E-5a)
C-1a 대신에 E-4a를 사용함을 제외하고, C-2a와 유사한 과정에 따라, 화합물 E-5a(30 ㎎, 63% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. ESI m/z: 953.3(M+H)+.
Figure pct00777
(4S)-4-아미노-5-{4-[({[3-({2-[2-(사이클로옥트-2-인-1-일옥시)아세트아미도]에틸}카바모일)-4-{[(2S,3R,4S,5R,6R)-3,4,5-트리스(아세틸옥시)-6-[(아세틸옥시)메틸]옥산-2-일]옥시}페닐]메톡시}카보닐)아미노]페닐}-2,2-디메틸펜탄산 (E-5b)
C-1a 대신에 E-4b를 사용함을 제외하고, C-2a와 유사한 과정에 따라, 화합물 E-5b(28 ㎎, 58% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. ESI m/z: 967.3(M+H)+.
Figure pct00778
(2S,3S,4S,5R,6S)-6-(4-{[({4-[(2S)-2-아미노-4-카복시-4,4-디메틸부틸]페닐}카바모일)옥시]메틸}-2-({2-[2-(사이클로옥트-2-인-1-일옥시)아세트아미도]에틸}카바모일)페녹시)-3,4,5-트리하이드록시옥산-2-카복실산 (E-6a)
메탄올(4 ㎖) 중의 화합물 E-5a(30 ㎎, 31 μmol)의 혼합물에 수성 수산화 리튬(0.1 M, 4 ㎖)을 가하고, 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하고, LCMS에 의해 모니터하였다. 수성 HCl(1 N)로 pH 4로 급냉시킨 후에, 생성 혼합물을 역상 플래시 크로마토그래피(수성 TFA(0.01%) 중의 5-95% 아세토니트릴)에 의해 정제시켜 백색 고체로서 링커-페이로드 E-6a(18 ㎎, 70% 수율)를 제공하였다. ESI m/z: 813.3(M+H)+.
Figure pct00779
(4S)-4-아미노-5-{4-[({[3-({2-[2-(사이클로옥트-2-인-1-일옥시)아세트아미도]에틸}카바모일)-4-{[(2S,3R,4S,5S,6R)-3,4,5-트리하이드록시-6-(하이드록시메틸)옥산-2-일]옥시}페닐]메톡시}카보닐)아미노]페닐}-2,2-디메틸펜탄산 (E-6b)
E-5a 대신에 E-5b를 사용함을 제외하고, E-6a와 유사한 과정에 따라, 화합물 E-6b(18 ㎎, 78% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. ESI m/z: 799.3(M+H)+.
Figure pct00780
(2S,3S,4S,5R,6S)-6-(4-{[({4-[(2S)-2-({2-[(1R,3R)-1-(아세틸옥시)-4-메틸-3-[(2S,3S)-3-메틸-2-{[(2R)-1-메틸피페리딘-2-일]포름아미도}-N-(펜트-4-인-1-일옥시)펜탄아미도]펜틸]-1,3-티아졸-4-일}포름아미도)-4-카복시-4,4-디메틸부틸]페닐}카바모일)옥시]메틸}-2-({2-[2-(사이클로옥트-2-인-1-일옥시)아세트아미도]에틸}카바모일)페녹시)-3,4,5-트리하이드록시옥산-2-카복실산 (LP25)
A-2 대신에 E-6a를 사용함을 제외하고, VII 및 VIII에 대한 일반적인 과정에 따라, 링커-페이로드 LP25(10 ㎎, 36% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. ESI m/z: 701.3(M/2+H)+.
Figure pct00781
(4S)-4-({2-[(1R,3R)-1-(아세틸옥시)-4-메틸-3-[(2S,3S)-3-메틸-2-{[(2R)-1-메틸피페리딘-2-일]포름아미도}-N-(펜트-4-인-1-일옥시)펜탄아미도]펜틸]-1,3-티아졸-4-일}포름아미도)-5-{4-[({[3-({2-[2-(사이클로옥트-2-인-1-일옥시)아세트아미도]에틸}카바모일)-4-{[(2S,3R,4S,5S,6R)-3,4,5-트리하이드록시-6-(하이드록시메틸)옥산-2-일]옥시}페닐]메톡시}카보닐)아미노]페닐}-2,2-디메틸펜탄산 (LP26)
A-2 대신에 E-6b를 사용함을 제외하고, VII 및 VIII에 대한 일반적인 과정에 따라, 링커-페이로드 LP26(8 ㎎, 29% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. ESI m/z: 694.3(M/2+H)+.
ADC 접합
말레이미드-이격기-페이로드의 항체에 대한 비-부위-특이적 접합을 도 13에 개략하며, [3+2] 클릭 반응을 통한 DIBAC-이격기-페이로드의 아지도-기능화된 항체에의 부위-특이적 접합은 도 14에 개략한다.
비-부위-특이적 접합에 대한 일반적인 과정
본 실시예는 티오에테르 결합의 형성을 통한 항체 또는 항원-결합 단편의 쇄간 시스테인에의 말레이미드-이격기-페이로드의 접합 방법을 설명한다. 본 실시예는 도 13에 묘사된 화합물을 지칭한다.
항체 시스테인을 통한 접합을 Adcetrix®-형 ADC(문헌[Mol. Pharm. 2015, 12(6), 1863-71]을 참조하시오)의 제조 방법과 유사한 방법을 사용하여 2 단계로 수행하였다. 단클론 항체(mAb)(50 mM HEPES, 150 mM NaCl 중 10 ㎎/㎖)를 pH 7-8에서 1 mM 디티오쓰레이톨(6 몰 당량의 항체) 또는 TCEP(항체에 대해 2.5 몰 당량)로 37℃에서 30분간 환원시켰다. 젤 여과(G-25, pH 6.3, 나트륨 아세테이트) 후에, DMSO 중의 화합물 LP1 1-10 ㎎/㎖을 환원된 항체에 가하고, 반응물을 rt에서 3-14h 동안 교반하였다. 생성 혼합물을 SEC에 의해 정제시켜 순수한 ADC를 생성시켰다.
부위-특이적 접합에 대한 일반적인 과정
본 실시예는 항체 또는 그의 항원-결합 단편에 대한 사이클로옥틴-링커-페이로드의 부위-특이적 접합 방법을 설명한다. 본 실시예는 도 14에 묘사된 화합물을 지칭한다.
본 실시예에서, 부위-특이적 접합체를 2 단계로 생성시켰다. 첫 번째 단계는 소분자, 예를 들어 아지도-PEG3-아민의, N297Q 돌연변이를 갖는 항체에의 미생물 트랜스글루타미나제(MTG) 기반 효소 부착(본원에서 이후에 "MTG-기반" 접합)이었다. 두 번째 단계는 [2+3] 가환, 예를 들어 아지드와 사이클로옥틴간의 1,3-2극성 가환을 통한(aka 무-구리 클릭 화학) 아지도-기능화된 항체에의 사이클로옥틴-이격기-페이로드의 부착을 사용하였다. 문헌[Baskin, J. M.; Prescher, J. A.; Laughlin, S. T.; Agard, N. J.; Chang, P. V.; Miller, I. A.; Lo, A.; Codelli, J. A.; Bertozzi, C. R. PNAS 2007 , 104 (43), 16793-7.]을 참조하시오. 도 14는 [2+3] 가환을 통해 아지도-기능화된 항체와 접합된 DIBAC 모이어티를 갖는 링커-이격기-페이로드의 일례를 도시한다. 이 공정은 부위-특이적이고 화학량론적인 접합체를 약 50-80% 단리된 수율로 제공하였다.
단계 1: 아지도-기능화된 항체의 제조
PBS(pH 6.5-8.0) 중의, N297Q 돌연변이를 갖는 아글리코실화된 인간 항체 IgG(IgG1, IgG4 등) 또는 인간 IgG1 아이소타입을 ≥200 몰 당량의 아지도-PEG3-아민(MW = 218.26 g/mol)과 혼합하였다. 생성 용액을 MTG(EC 2.3.2.13, Zedira, Darmstadt, Germany로부터, 또는 Ajinomoto, Japan으로부터의 말토덱스트린을 함유하는 ACTIVA TI)(25 U/㎖; 항체 ㎎당 5U MTG)와 혼합하여, 0.5-5 ㎎/㎖ 항체의 최종 농도를 생성시키고, 이어서 상기 용액을 서서히 진탕시키면서 37℃에서 4-24h 동안 배양하였다. 반응을 ESI-MS에 의해 모니터하였다. 반응 종료시, 과잉 아민 및 MTG를 SEC 또는 단백질 A 컬럼 크로마토그래피에 의해 제거하여, 아지도-기능화된 항체를 생성시켰다. 상기 생성물을 SDS-PAGE에 의해 특성화하였다.
특정한 실험에서, 7 ㎖ 무-칼륨 PBS 완충제(pH 7.3) 중의 N297Q 항체(24 ㎎)를 MTG(0.350 ㎖, 35 U, mTGase, Zedira, Darmstadt, Germany)의 존재하에서 >200 몰 당량의 아지도-PEG3-아민(MW = 218.26)과 배양하였다. 반응물을 서서히 혼합하면서 37℃에서 밤새 배양하였다. 과잉 아지도-PEG3-아민 및 mTGase를 크기 배제 크로마토그래피(SEC, Superdex 200 PG, GE Healthcare)에 의해 제거하였다.
단계 2: 표 7의 아지도-기능화된 글루타미닐-변형된 항체(IgG1, IgG4 등)와 사이클로옥틴 함유 링커-페이로드(LP)간의 [2+3] 클릭 반응에 의한 부위-특이적 접합체의 제조. 일반적으로, 아지도-기능화된 아글리코실화된 항체-LP 접합체는 1 ㎖의 수성 매질(예를 들어, PBS, 5% 글리세롤을 함유하는 PBS, HBS) 중의 아지도-기능화된 글루타미닐-변형된 항체(1 ㎎)를 적합한 유기 용매(예를 들어 DMSO, DMF 또는 DMA; 반응 혼합물은 10-20% 유기 용매, v/v를 함유한다)에 용해된 ≥6 몰 당량의 LP와 24℃ 내지 32℃에서 3시간에 걸쳐 배양함으로써 제조되었다. 반응의 진행을 ESI-MS에 의해 모니터하였다. 아지도-기능화된 항체(mAb-PEG3-N3)의 부재는 접합의 완료를 가리켰다. 과잉 링커-페이로드(LP) 및 유기 용매를, PBS로 용출되는 SEC(Waters, Superdex 200 Increase, 1.0 x 30 ㎝, GE Healthcare, 유량 0.8 ㎎/㎖, PBS, pH 7.2)에 의해, 또는 산성 완충제에 의한 용출에 이은 트리스(pH 8.0)에 의한 용출을 통한 단백질 A 컬럼 크로마토그래피에 의해 제거하였다. 정제된 접합체를 SEC, SDS-PAGE, 및 ESI-MS에 의해 분석하였다.
특정한 실시예에서, 0.800 ㎖ PBSg(PGS, 5% 글리세롤, pH 7.4) 중의 아지도-기능화된 항체(1 ㎎)를 rt에서 6시간 동안 6 당량의 DIBAC-Suc-PEG4-VC-PABC-페이로드(DMSO 중의 농도 10 ㎎/㎖)로 처리하고 과잉 링커 페이로드(LP)를 크기 배제 크로마토그래피(SEC, Superdex 200 HR, GE Healthcare)에 의해 제거하였다. 최종 생성물을 한외-원심분리에 의해 농축시키고, UV, SEC, SDS-PAGE 및/또는 ESI-MS에 의해 특성화하였다.
표 7에, LP, 네이키드 항체(항-PRLR Ab, 항-Fel D1 Ab, 및 항-STEAP2 Ab), PEG3-N3 기능화된 항체(항-PRLR N297Q Ab-PEG3-N3, 항-FelD1 N297Q Ab-PEG3-N3, 및 항-STEAP2 N297Q Ab-PEG3-N3), 및 그의 상응하는 ADC를 요약한다. 표 7에서, Ab는 항체를 지칭하고, Ab-PEG3-N3은 PEG3 이격기를 갖는 아지도-기능화된 항체를 지칭한다. 항-PRLR 항체는 서열번호 9 및 13에 따른 HCVR 및 LCVR을 가졌다(상기 H1H6958N2). 항-STEAP2 항체는 서열번호 1 및 5에 따른 HCVR 및 LCVR을 가졌다(상기 H1H7814N).
부위-특이적인 접합체의 목록
링커-페이로드(LP) Ab, N297Q Ab-PEG 3 -N 3 , 또는 N297Q Ab-튜불리신 LP 접합체
EX MW 명칭 MW (Da) DAR
항-PRLR Ab 144591
PEG3-N3 218 항-PRLR N297Q Ab-PEG3-N3 145387 4
Ex1 1656.9 항-PRLR N297Q Ab-LP7 152028 3.9
Ex2 1761.9 항-PRLR N297Q Ab-LP3 152438 3.9
Ex3 1763.9 항-PRLR N297Q Ab-LP4 152454 3.9
항-Fel D1 Ab
(비-결합 대조용)		 145439
PEG3-N3 218 항-Fel D1 N297Q Ab-PEG3-N3 146235 4
Ex4 1656.9 항-Fel D1 N297Q Ab-LP7 152879 4
Ex5 1761.9 항-Fel D1 N297Q Ab-LP3 153291 3.8
Ex6 1763.9 항-Fel D1 N297Q Ab-LP4 153307 3.8
항-STEAP2 Ab 143986
PEG3-N3 218 항-STEAP2 N297Q Ab-PEG3-N3 144785 4
Ex7 1656.9 항-STEAP2 N297Q Ab-LP7 151410 3.8
Ex8 1761.9 항-STEAP2 N297Q Ab-LP3 151833 3.8
Ex9 1763.9 항-STEAP2 N297Q Ab-LP4 151849 3.8
Ex10 1782.9 항-STEAP2 N297Q Ab-LP2 151911 3.8
항체 및 ADC의 특성화를 위한 일반적인 과정
정제된 접합체를 SEC(도 15), ESI-MS 및 SDS-PAGE에 의해 분석하였다.
SEC에 의한 ADC의 특성화
분석학적 SEC 실험을 SuperdexTM 200 Increase(1.0 x 30 ㎝) 컬럼상에서 PBS pH 7.2를 사용하여 0.80 ㎖/분의 유량으로 Waters 1515 장치를 사용하여 실시하고, Waters 2998 PDA를 사용하여 λ = 280 ㎚에서 모니터하였다. 분석 샘플은 200 ㎕ PBS(pH 7.4)와 30-100 ㎕의 시험 샘플로 구성되었다. 예비 SEC 정제를 Superdex 200 PG(2.6 x 60 ㎝) 컬럼상에서 PBS pH 7.2로 용출되는 2 ㎖/분의 유량으로 GE Healthcare로부터의 AKTA Avant 장치를 사용하여 수행하고, λ = 280 ㎚에서 모니터하였다. 도 15의 SEC 결과는 최소의 응집 또는 분해로, 단량체성 mAb 및 그의 접합체에 대한 전형적인 체류 시간을 나타낸다.
LC-ESI-MS에 의한 ADC의 특성화
LC-ESI-MS에 의한 ADC 샘플에 대한 온전한 질량의 측정을 수행하여 약물-페이로드 분포 프로파일을 결정하고 평균 DAR을 산정하였다. 각 시험 샘플(20-50 ng, 5 ㎕)을 Acquity UPLC 단백질 BEH C4 컬럼(10K psi, 300 Å, 1.7 ㎛, 75 ㎛ x 100 ㎜; Cat No. 186003810)상에 로딩하였다. 3분간 탈염 후에, 단백질을 용출시키고 질량 스펙트럼을 Waters Synapt G2-Si 질량 분광계에 의해 획득하였다. 표 7에 요약된 바와 같이, 대부분의 부위-특이적인 ADC는 거의 4DAR을 갖는다.
SDS-PAGE에 의한 ADC의 특성화
SDS-PAGE를 사용하여 ADC의 완전성 및 순도를 분석하였다. 하나의 방법에서, SDS-PAGE 조건은 BenchMark Pre-Stained Protein Ladder(Invitrogen, cat# 10748-010; L# 1671922.)와 함께 비-환원된 및 환원된 샘플(2-4 ㎍)을 포함하였으며 (1.0 ㎜ x 10 웰) Novex 4-20% 트리스-글리신 젤에 레인당 로딩하고 180 V, 300 mA에서 80분간 실행시켰다. 분석 샘플을 Novex 트리스-글리신 SDS 완충제(2X)(Invitrogen, cat# LC2676)를 사용하여 제조하고, 환원된 샘플은 10% 2-머캅토에탄올을 함유하는 SDS 샘플 완충제(2X)로 제조하였다.
시험관내 혈장 안정성
튜불리신 페이로드를 함유하는 전형적인 ADC의 혈장 안정성을 결정하기 위해서, ADC를 시험관내에서 상이한 종으로부터의 혈장과 배양하고, 3일간 생리학적 온도(37℃)에서 배양 후에 DAR을 평가하였다.
분석을 위해서, PBS 완충제 중의 각각의 ADC 샘플(항-PRLR 항체-LP3 또는 항-PRLR 항체-LP4)을 96-웰 플레이트 중에 새로 모은 수컷 마우스, 키노몰구스 원숭이, 래트, 또는 인간 혈장에 50 ㎍/㎖의 최종 농도로 별도로 가하고, 후속적으로 37℃에서 72시간 동안 배양하였다. 배양 후에, 각 샘플(100 ㎕ 최종 부피)을 분석시까지 -80℃에서 개별적으로 동결시켰다.
혈장 샘플로부터의 ADC의 친화성 포획을 KingFisher 96 자기 입자 프로세서(Thermo Electron) 상에서 수행하였다. 먼저, myc-myc 헥사히스티딘 태그(hPRLR ecto-MMH; 서열번호 17; 100 ㎍/㎖)로 표시된 인간 PRLR의 비오틴화된 세포외 도메인을 스트렙트아비딘 상자성 비드(In vitrogen, Cat#60210)상에 고정화시켰다. 튜불리신 ADC를 함유하는 각각의 혈장 샘플(100 ㎕)을 96-웰 플레이트에서 100 ㎕의 비드(부피내에 있는 상업적인 비드)와 함께 실온에서 2시간 동안 600 rpm으로 혼합하였다. 이어서 비드를 600 ㎕의 HBS-EP(GE healthcare, Cat#BR100188)로 3회, 600 ㎕의 H2O로 1회, 및 이어서 600 ㎕의 수 중 10% 아세토니트릴로 1회 세척하였다. 세척에 이어서, 비드를 70 ㎕의 30% 아세토니트릴/70% 수 중의 1% 포름산과 실온에서 15분간 배양함으로써 튜불리신 ADC를 용출시켰다. 이어서 각각의 용출물 샘플을 v-바닥 96-웰 플레이트로 옮기고 이어서 실온에서 20분간 5 mM TCEP(Thermo Fisher, Cat #77720)로 환원시켰다.
환원된 튜불리신 ADC 샘플(10 ㎕/샘플)을 Waters Synapt G2-Si 질량 분광계에 커플링된 1.7 ㎛ BEH300 C4 컬럼(Waters Corporation, Cat# 186005589)상에 주입하였다. 유량은 0.1 ㎖/분이었다(이동상 A: 수 중 0.1% 포름산; 이동상 B: 아세토니트릴 중 0.1% 포름산). LC 구배는 20% B로 출발하고 16분 후에 35% B로 증가하였으며, 이어서 1분 후에 95% B에 도달하였다.
획득된 스펙트럼을 하기의 매개변수로 MaxEnt1 소프트웨어(Waters Corporation)를 사용하여 디콘볼루션하였다(deconvoluted): 질량 범위: 경쇄의 경우 20-30 kDa, 및 중쇄의 경우 40-60 kDa; m/z 범위: 700 Da - 3000 Da; 분해능: 1.0 Da/채널; 절반 높이의 너비: 1.0 Da; 최소 강도 비: 33%; 반복 최대: 25.
인간, 마우스, 래트, 및 키노몰구스 원숭이 혈장과 72-시간 배양 후에 시험된 ADC로부터 관찰된 링커-페이로드의 어떠한 현저한 상실도 존재하지 않았다. 그러나, 튜불리신 페이로드의 아세틸기가 현저한 독성 상실과 함께 하이드록실기(-43 Da)로 가수분해될 수 있음이 보고되었다. 따라서, LC-MS에서 관찰된 가수분해된 종은 약물의 상실로서 간주되었다. 표 8에 도시된 바와 같은 약물/항체 비(DAR)를 하기에 기재된 바와 같이 중쇄의 상이한 종들의 상대적인 풍부성에 기초하여 산정하였다:
Figure pct00782
항-PRLR N297Q 항체-LP3 및 항-PRLR N297Q 항체-LP4의 시험관내 혈장 안정성
배양에 사용된 혈장 유형 항-PRLR N297Q 항체-LP3
(DAR=3.8(0시간째))
72시간 배양후 DAR 		항-PRLR N297Q 항체-LP4
(DAR=4.0(0시간째))
72시간 배양후 DAR
마우스 혈장 2.7 2.7
배양에 사용된 혈장 유형 항-PRLR N297Q 항체-LP3
(DAR=3.8(0시간째))
72시간 배양후 DAR 		항-PRLR N297Q 항체-LP4
(DAR=4.0(0시간째))
72시간 배양후 DAR
키노몰구스 원숭이 혈장 2.7 2.7
래트 혈장 2.7 2.6
인간 혈장 3.0 3.0
세포-기반 사멸 분석에서 튜불리신 페이로드의 시험
인간 세포주를 사멸시키는 개시된 튜불리신 페이로드의 능력을 시험하기 위해서, 시험관내 세포독성 분석을 수행하였다. 개시된 페이로드뿐만 아니라 참조 화합물의 시험관내 세포독성을 CellTiter-Glo 분석 키트(Promega, Cat#G7573)를 사용하여 평가하였으며, 여기에서 존재하는 ATP의 양을 사용하여 배양물 중 생육성 세포의 수를 측정한다. 분석을 위해서, C4-2, HEK293 또는 T47D 세포를 Nunclon 백색 96-웰 플레이트상에서 완전 생육 배지(C42 세포의 경우 4:1의 DME 고 글루코스:햄스 F12, 10% FBS, 100 단위/㎖ 페니실린, 100 ug/㎖ 스트렙토마이신, 53 ug/㎖ 글루타민, 10 ug/㎖ 인슐린, 220 ng/㎖ 비오틴, 12.5 pg/㎖ T3, 12.5 ub/㎖ 아데닌, 4 ug/㎖ 트랜스페린; HEK293의 경우 DME 고 글루코스, 10% FBS, 100 단위/㎖ 페니실린, 100 pg/㎖ 스트렙토마이신, 53 ug/㎖ 글루타민; T47D 세포의 경우 RPMI, 10% FBS, 100 단위/㎖ 페니실린, 100 ug/㎖ 스트렙토마이신, 53 ug/㎖ 글루타민, 10 ug/㎖ 인슐린, 10 mM HEPE, 200 nM 나트륨 피루베이트)에서 4000 세포/웰로 시딩하고 5% CO2에서 37℃에서 밤새 증식시켰다. 세포 생육력 곡선에 대해서, 1:3 연속 희석된 페이로드를 비처리 대조군을 포함하여 세포에 100 nM 내지 15 pM 범위의 최종 농도로 가하고, 이어서 5일간 배양하였다. 5-일 배양 후에, 세포를 실온에서 10분간 100 ㎕의 CellTiter-Glo 시약과 배양하였다. 상대 발광 단위(RLU)를 Victor 플레이트 판독기(PerkinElmer)상에서 측정하였다. IC50 값을 10-포인트 반응 곡선(GraphPad Prism)상에서 4-매개변수 로지스틱 방정식으로부터 측정하였다. 모든 IC50 값을 몰(M) 농도로 나타낸다. 시험된 최대 농도에서 세포 사멸 퍼센트(사멸%)를 하기 식(100 - 생육성 세포%)으로부터 추정하였다. 반복 실험이 수행된 경우 평균±표준편차(SD)를 포함시킨다.
표 9에 나타내는 바와 같이, 본원의 페이로드는 16.4 pM 내지 >100 nM의 IC50 값, 및 8.9% 내지 96.7%의 최대 세포 사멸%로 C4-2 세포에 대한 사멸을 나타내었다. 시험된 상기 개시된 페이로드의 부분집합은 57.2 pM 내지 >100 nM의 IC50 값, 및 4.7% 내지 88.5%의 최대 세포 사멸%로 HEK293 세포에 대한 사멸을 나타내었다. 시험된 상기 개시된 페이로드의 부분집합은 35 pM 내지 >100 nM의 IC50 값, 및 14.6% 내지 84.5%의 최대 세포 사멸%로 T47D 세포에 대한 사멸을 나타내었다. 참조 화합물, MMAE는 283 pM의 IC50 값, 및 93.7%의 최대 세포 사멸%로 C4-2 세포의 사멸을 나타내었다.
튜불리신 페이로드 및 참조 화합물에 의한 C4-2, HEK293 및 T47D 세포에서의 세포독성
C4-2 T47D HEK293
Cmpd IC50 (M) % 사멸 IC50 (nM) % 사멸 IC50 (nM) % 사멸
TubA 1.09E-10 96.4 NT NT NT NT
IVa 6.53E-11 95.2 NT NT NT NT
IVa' 1.08E-08 94.7 1.06E-08 81.9 1.44E-08 74.8
Va 8.03E-10 92.1 NT NT NT NT
VIa 1.86E-09 94.1 NT NT NT NT
VId 2.4E-09 ± 2.2E-09 95.5 ± 2.6 2.51E-09 68.4 5.26E-09 78.5
VIc 1.33E-09 ± 1.11E-09 95.5 ± 1.8 NT NT NT NT
VIe 8.22E-09 ± 6.1E-09 94.4 ± 0.2 2.27E-09 72.7 4.77E-09 76.7
VIb 1.20E-08 96.5 1.36E-08 76.2 2.03E-08 75.4
Va' 1.62E-08 96.5 NT NT NT NT
Vj 5.31E-08 ± 6.64E-08 68.5 ± 39.2 >1.00E-07 14.6 >1.00E-07 4.7
Vk ND ND >1.00E-07 NT >1.00E-07 NT
Vi 6.333E-09 ± 1.39 E-09 96.4 ± 0.5 4.66E-09 71.3 6.79E-09 81.4
Vh 5.09E-10 92 4.58E-10 64.5 7.18E-10 85.6
IVg 1.36E-10 91.7 4.13E-10 62.9 5.39E-10 86.5
IVd 1.64E-11 ± 7.13E-12 93.7 ± 1.8 3.50E-11 84.5 5.72E-11 85.4
Vc 3.60E-11 91.7 6.77E-11 64.9 1.13E-10 86.9
Ve <4.7E-11 92.6 7.31E-11 69.8 1.03E-10 88.5
IVc 9.24E-11 92.2 2.05E-10 81.4 3.07E-10 84.8
Vd 3.84E-10 91.3 4.44E-10 66 5.90E-10 86.3
IVh 6.47E-10 ± 4.86E-11 82 ± 2.8 1.86E-09 71.6 1.76E-09 82.5
Vb 7.00E-11 ± 4.25E-11 92.3 ± 1.7 1.44E-10 66.5 2.89E-10 87.8
IVe 7.42E-11 91.8 1.55E-10 67.2 2.81E-10 86.7
IVf 2.29E-10 93.8 7.82E-10 67.1 1.64E-09 86.0
Vf 9.00E-10 90 3.96E-10 68 6.66E-10 83.8
Vg 3.69E-10 93.2 5.35E-10 65.2 7.00E-10 86.4
IVj 7.16E-09 94.5 1.77E-08 79.9 1.76E-08 75.5
IVk >4.0E-08 66.7 4.74E-08 68.5 4.30E-08 62.7
IVl >2.0E-08 86.5 4.25E-08 66.1 3.98E-08 65.2
VIf 3.12E-10 93.9 3.02E-10 63.2 3.83E-10 85.6
IVm >1.00E-07 8.9 NT NT NT NT
IVn >1.00E-07 30.2 NT NT NT NT
VIg >1.00E-07 10.9 NT NT NT NT
VIh 1.59E-10 93.9 NT NT NT NT
IVo 2.62E-10 93.4 NT NT NT NT
IVp 1.77E-10 94.2 NT NT NT NT
IVs 4.99E-11 93.8 NT NT NT NT
IVt 1.10E-10 94.2 NT NT NT NT
IVu 1.14E-10 93.9 NT NT NT NT
IVvA 1.09E-08 96.7 NT NT NT NT
IVy 1.82E-09 94.4 NT NT NT NT
IVw >1.00E-07 27.9 NT NT NT NT
IVvB 2.15E-11 94.6 NT NT NT NT
VII 2.8E-11 (0.028 nM) NT NT NT NT NT
IX 5.4E-11 (0.054 nM) NT NT NT NT NT
X 6E-11 (0.060 nM) NT NT NT NT NT
MMAE 2.87E-10 ± 9.35E-11 93.7 ± 2.5 NT NT NT NT
NT = 시험 안 됨
MDR 세포 기반 사멸 분석에서 튜불리신 페이로드의 시험
개시된 튜불리신 페이로드의 능력을 추가로 시험하기 위해서, 세포독성 분석을, 약물 내성을 역전시키는 것으로 나타난 약물인 베라파밀(Cancer Res.　1989 Sep 15;49(18):5002-6)과 함께 또는 상기 없이 다중약물 내성(MDR) 세포주를 사용하여 수행하였다. 개시된 페이로드뿐만 아니라 참조 화합물의 시험관내 세포독성을, 5 ug/㎖의 베라파밀과 함께 또는 상기 없이 생육 배지(RPMI, 10% FBS, 100 단위/㎖ 페니실린, 100 ug/㎖ 스트렙토마이신, 53 ug/㎖ 글루타민)에서 1000개의 결장직장암 세포주, HCT15 세포를 사용함을 제외하고 상술한 바와 유사하게 평가하였다.
표 10에 나타내는 바와 같이, 베라파밀의 부재하에서, 본 개시내용의 페이로드는 20 pM 내지 >100 nM의 IC50 값, 및 -3.8 내지 99.7%의 최대 세포 사멸%로 HCT15 세포의 사멸을 나타내었다. 베라파밀의 존재하에서, 본 개시내용의 페이로드는 15 pM 내지 >100 nM의 IC50 값, 및 -0.4% 내지 99.1%의 최대 세포 사멸%로 HCT15 세포의 사멸을 나타내었다. 각각의 페이로드에 대해서, 베라파밀 부재하의 HCT-15 IC50을 베라파밀 존재하의 HCT-15 IC50으로 나누었다(HCT-15 IC50/HCT-15 + 베라파밀 IC50). 다수의 페이로드는 <2.0의 비를 가졌으며, 이는 이들 페이로드가 다중-약물 유출 펌프에 의해 최소로 영향을 받음을 암시한다. 참조 화합물, M4(MMAE)는 23.7의 비를 가졌다.
베라파밀의 존재 또는 부재하에 HCT15 세포에서 튜불리신 페이로드 및 참조 화합물에 의한 세포독성
HCT-15 HCT-15 + 베라파밀 HCT15 IC50 / HCT-15 +베라파밀 IC50
Cmpd IC50 (M) % 사멸 IC50 (M) % 사멸
TubA 5.09E-10 99.1 1.28E-10 99.1 4.0
Va 3.63E-09 98 2.15E-10 99.1 16.9
VIa 5.80E-09 ± 7.8E-09 97 ± 1.9 2.55E-10 98.4 ± 0.7 16.6 ± 9.9
VId >3.00E-08 78.7 4.82E-10 99 >62.2
VIc 1.32E-08 94 2.86E-10 98.8 46.3
VIe >1.00E-07 36.6 2.95E-10 98.8 >338.6
VIb >5.00E-08 54.7 2.88E-09 97.8 >17.3
Va' >1.00E-07 20.9 2.41E-09 98.8 >41.5
Vj >1.00E-07 -3.8 3.92E-08 77.4 >2.6
Vk 1.00E-07 41.5 4.27E-08 83 >2.3
Vh 1.47E-09 97.7 5.87E-10 98.1 2.5
IVg 4.60E-10 97.1 3.28E-10 97.5 1.4
IVd 5.7E-11 ± 2.01E-11 98.2 ± 0.5 4.07E-11 ± 2.2E-11 97.7 ± 1.8 1.57 ± 0.5
Vc 4.75E-10 97.6 1.46E-10 96.7 3.3
Ve 2.73E-10 ± 1.24E-10 98.6 ± 0.7 6.54E-11 ± 5.36E-11 98.2 ± 1.2 5.6 ± 2.7
IVc 3.02E-10 99.2 1.13E-10 98 2.7
Vd 1.93E-09 99.7 3.52E-10 98.7 5.5
IVb 1.51E-10 98 1.03E-10 98.1 1.5
IVh 2.5E-09 ± 3.33E-09 94.6 ± 3.5 NT NT NT
Vb 1.20E-10 ± 1.40E-10 98.8 ± 0.7 3.65E-11 ± 3.12 98.2 ± 0.5 2.8 ± 0.9
IVe 2.95E-10 95.8 1.00E-10 97.6 3.0
IVf 5.54E-10 96.4 6.86E-10 97.7 0.8
Vf 3.36E-09 96.5 3.75E-10 98 9.0
Vg 5.30E-10 94.9 2.37E-10 98 2.2
IVj 7.80E-09 96.4 5.56E-09 98.4 1.4
IVk >30E-09 48.3 >30E-09 87.2 1.0
IVl 2.50E-08 91.6 1.37E-08 93.6 1.8
VIf 2.06E-09 99.1 8.54E-11 98.8 24.1
IVn >3.0E-08 30.9 >3.0E-08 72.4 1.0
VIh 2.63E-10 99 7.16E-11 97.8 3.7
IVo 3.70E-10 98.6 1.09E-10 97.6 3.5
IVp 2.39E-10 98.7 8.64E-11 97.6 2.8
IVr 8.93E-11 99.1 6.24E-11 99 1.4
IVq 4.23E-11 ± 2.21 98.4 ± 0.8 2.25E-11 ± 4.5 E-12 98.6 ± 0.7 1.8 ± 0.6
IVs 1.08E-10 99.1 4.59E-11 98.8 2.4
IVvA 5.27E-09 99.2 1.97E-09 97.1 2.7
IVw 9.73E-09 95.9 4.49E-09 98.3 2.2
IVvB 2.50E-11 97.3 1.50E-11 97.7 1.3
VIi (0.410 nM) (0.217 nM)
VII 1.31E-10 (0.131 nM) NT 2.16E-10 (0.216 nM) NT 0.61
VIII (0.295 nM) NT (0.106 nM) NT
IX (0.171 nM) NT (0.162 nM) NT
X (0.097 nM) (0.116 nM)
MMAE 1.77E-08 ± 1.36E-08 97.1 ± 3.7 7.82E-10 ± 4.11E-10 98.4 ± 0.5 23.7 ± 12.0
NT = 시험 안 됨
MDR 세포주의 패널에서 튜불리신 페이로드의 시험
개시된 튜불리신 페이로드의 능력을 추가로 시험하기 위해서, 세포독성 분석을 다중약물 내성(MDR) 세포주의 패널을 사용하여 수행하였다. 개시된 페이로드뿐만 아니라 참조 화합물의 시험관내 세포독성을, 결장직장암 세포주, HCT15 세포; 소세포 폐암 암종 세포주 NCI-H69의 독소루비신 내성 MDR 유도체, H69AR; 자궁육종 세포주 MES-SA의 미톡산트론 내성 MDR 유도체, MES-SA/MX2; 및 급성 전골수세포성 백혈병 세포주 HL60의 미톡산트론 내성 MDR 유도체, HL60/MX2를 사용함을 제외하고 상술한 바와 유사하게 평가하였다. 이들 분석에서, 세포독성을 페이로드와 72h 및 144h 배양에 이어서 웰당 1000 세포로 통상적인 생육 배지(HCT-15 및 HL60/MX2의 경우 RPMI, 10% FBS, 100 단위/㎖ 페니실린, 100 ug/㎖ 스트렙토마이신, 및 53 ug/㎖ 글루타민; H69-AR의 경우 RPMI, 20% FBS, 100 단위/㎖ 페니실린, 100 ug/㎖ 스트렙토마이신, 및 53 ug/㎖ 글루타민; MES-SA/MX2의 경우 웨이마우스:McCoy(1:1), 10% FBS, 100 단위/㎖ 페니실린, 100 ug/㎖ 스트렙토마이신, 및 53 ug/㎖ 글루타민)에서 평가하였다. 표 11 및 12에 나타낸 바와 같이, 다수의 페이로드가 서브 nM IC50 및 기준선 부근의 수준까지 MDR 세포주의 전체 패널을 사멸시켰으며, 이는 이들 페이로드가 시험된 세포주에서 MDR을 극복함을 암시한다.
튜불리신 페이로드 및 참조 화합물에 의한 HL60/MX2 및 MES-SA/MX2 세포에서의 세포독성
HL60/MX2 MES-SA/MX2
Cmpd IC 50 % 사멸 IC 50 % 사멸
72h 144h 72h 144h 72h 144h 72h 144h
TubA <1.5E-11 <1.5E-11 98 100 5.73E-10 1.33E-09 98.6 99.9
Va 5.53E-10 1.40E-10 96.8 99.9 >1E-07 >1E-07 80.1 69.8
Vh 1.73E-10 <1.5E-11 97.5 99.9 2.98E-09 8.15E-09 98.4 99.8
IVg 1.24E-10 <1.5E-11 98.5 100 8.38E-10 9.99E-10 99.6 100
IVd <1.5E-11 <1.5E-11 98.6 99.9 5.41E-11 1.30E-10 99.5 100
Vc <1.5E-11 <1.5E-11 98.4 99.9 8.95E-11 2.99E-10 99.2 100
Ve <1.5E-11 <1.5E-11 98.3 100 5.20E-10 7.34E-10 98.9 100
IVc <1.5E-11 <1.5E-11 97.7 99.9 3.74E-10 6.04E-10 98.2 99.9
IVh 1.11E-09 <1.5E-11 96.4 100 7.49E-09 8.80E-09 98.5 99.9
Vb <1.5E-11 <1.5E-11 97.9 100 2.13E-10 1.04E-09 99.6 99.9
IVe <1.5E-11 <1.5E-11 97.3 99.9 7.86E-10 2.81E-09 99.6 99.9
IVf 2.22E-10 <1.5E-11 97.2 100 2.57E-09 3.82E-09 99.1 99.9
Vg 1.31E-10 6.10E-11 98 99.9 3.54E-09 5.30E-09 98 99.8
VIh 3.91E-11 <1.5E-11 97.6 99.9 1.26E-09 2.72E-09 98.5 99.8
IVo 3.76E-11 <1.5E-11 98.1 100 1.12E-09 2.96E-09 98.9 99.9
IVp 2.37E-11 <1.5E-11 97.5 99.9 7.92E-10 1.66E-09 98.8 99.9
IVr <1.5E-11 <1.5E-11 98.7 100 1.51E-10 1.76E-10 99.1 100
IVx 9.55E-10 7.70E-10 96.9 100 >1E-07 >1E-07 62.1 33.6
VIi <1.5E-11 <1.5E-11 98.8 99.9 1.49E-10 1.98E-10 99.3 99.9
Vl 1.37E-10 <1.5E-11 97 99.9 4.76E-09 6.91E-09 98.6 99.9
IVq <1.5E-11 <1.5E-11 98.6 100 5.89E-11 1.05E-10 99.4 100
IVs <1.5E-11 <1.5E-11 98.4 100 1.02E-10 2.10E-10 99.2 100
IVt <1.5E-11 <1.5E-11 98.4 100 4.47E-10 7.40E-10 99.3 100
IVu <1.5E-11 <1.5E-11 98 99.9 5.35E-10 1.21E-09 98.8 100
IVvB <1.5E-11 <1.5E-11 98.2 99.8 4.56E-11 6.58E-11 99.1 99.9
MMAE 4.18E-10 1.64E-10 88.7 99.6 3.73E-08 6.83E-10 65.6 58.1
튜불리신 페이로드 및 참조 화합물에 의한 HCT-15 및 H69AR 세포에서의 세포독성
HCT-15 H69AR
Cmpd IC 50 % 사멸 IC 50 % 사멸
72h 144h 72h 144h 72h 144h 72h 144h
IVa 1.66E-10 3.18E-10 97.8 99.6 7.49E-10 1.38E-09 96.1 99.3
VIa 5.42E-09 7.17E-09 94 98.9 1.60E-08 8.01E-08 83.5 91.6
Vh 8.71E-10 1.27E-09 97 99.6 2.59E-09 4.21E-09 93.7 98.4
IVg 1.70E-10 2.23E-10 97.6 99.5 5.53E-10 5.71E-10 95.7 99.2
IVd 8.88E-12 2.95E-11 97.6 99.7 5.64E-11 1.33E-10 96.9 99.5
Vc 3.30E-11 6.75E-11 97.6 99.7 1.54E-10 2.87E-10 96.6 99.4
Ve 9.22E-11 1.58E-10 97.5 99.7 3.31E-10 5.59E-10 96.6 99.5
IVc 1.25E-10 1.65E-10 97.3 99.8 3.60E-10 7.25E-10 96.6 99.3
IVh 1.52E-09 1.53E-09 95.4 99.7 2.93E-09 3.30E-09 90.2 97.5
Vb 6.23E-11 1.27E-10 97.8 99.7 2.72E-10 6.60E-10 97 99.4
IVe 1.33E-10 2.30E-10 98.1 99.6 5.85E-10 1.26E-09 96.5 99
IVf 4.19E-10 3.96E-10 96.9 99.8 1.33E-09 1.55E-09 94.6 98.9
Vg 6.80E-10 9.16E-10 97.6 99.5 2.13E-09 2.72E-09 94.2 98.4
VIh 3.66E-10 5.15E-10 97.9 99.7 1.07E-09 1.73E-09 96.3 99.1
IVo 2.47E-10 3.48E-10 97.3 99.7 7.79E-10 1.27E-09 96.2 99.1
IVp 1.81E-10 2.31E-10 97.6 99.7 6.44E-10 1.12E-09 96.3 99.2
IVr 4.01E-11 6.21E-11 98 99.7 1.37E-10 2.11E-10 96.7 99
IVx 3.45E-08 8.48E-08 84.4 91 >1E-07 >1E-07 48.7 38
VIi 2.55E-11 5.44E-11 97.9 99.7 1.45E-10 2.31E-10 96.7 99.2
Vl 1.50E-09 1.72E-09 96.3 99.7 5.03E-09 6.62E-09 90.4 97.4
IVq <1.5E-11 2.77E-11 98 99.8 6.42E-11 1.28E-10 96.9 99.5
IVs 3.71E-11 5.01E-11 97.6 99.7 1.61E-10 2.81E-10 96.8 99.4
IVt 1.43E-10 1.80E-10 97.6 99.8 4.86E-10 8.19E-10 96.3 99.3
IVu 1.34E-10 2.42E-10 97.9 99.8 6.34E-10 1.04E-09 96.4 99
IVvB <1.5E-11 2.28E-11 97.7 99.6 5.99E-11 1.58E-10 96.9 99.1
MMAE 1.68E-08 ND 93.7 ND 9.23E-10 6.83E-10 66.8 92.7
세포 기반 사멸 분석에서 튜불리신 페이로드 함유 ADC의 시험
개시된 튜불리신 페이로드 및 참조 페이로드와 접합된 항-PRLR 항체의 효능을 평가하기 위한 생물분석을 개발하였다. 상기는 항-PRLR-튜불리신 ADC의 세포내로의 내면화 후 튜불리신 페이로드의 활성, 페이로드의 방출, 및 후속적인 세포독성을 평가하기 위해 개발되었다. 상기 분석을 위해서, HCT15 주를 인간 완전길이 PRLR(수납# NP_000940.1)을 발현하도록 조작하였다. 생성된 안정한 세포주를 본원에서 HCT15/PRLR이라 칭한다. 개시된 페이로드, 참조 화합물, 및 시험된 ADC의 시험관내 세포독성을 통상적인 배양 배지에서 희석된 5 ㎍/㎖의 베라파밀의 존재 또는 부재하에 HCT15/PRLR 세포를 사용하여 본 실시예에 기재된 바와 유사하게 평가하였다. 화합물을 100 nM에서 시작하여 3-배 연속 희석 농도로 시험하였다. 모든 IC50 값을 nM 농도로 나타내며 시험된 최대 농도에서 세포 사멸 퍼센트(사멸%)를 하기 식(100 - 생육성 세포%)으로부터 추정하였다. 이들 데이터를 표 13에 보고하였다.
표 13에 나타내는 바와 같이, 베라파밀의 부재하에서, 개시된 링커-페이로드, 항-PRLR-LP3, 및 항-PRLR-LP4와 접합된 항-PRLR ADC는 HCT15/PRLR 세포 기반 분석에서 각각 90%의 최대 사멸 퍼센트로 0.525 nM의 IC50 값; 및 65%의 최대 사멸 퍼센트로 3.31 nM의 IC50 값에서 세포독성을 나타내었다. 이러한 조건하에서, 하나의 아이소타입 대조용 ADC, 아이소타입 대조용-LP3은 51%의 최대 사멸 퍼센트로 HCT15/PRLR 세포의 일부 보통의 사멸을 나타내었으나, IC50 값은 >50 nM이었다. 베라파밀의 부재하에서, 또 다른 아이소타입 대조용, 아이소타입 대조용-LP4는 HCT15/PRLR 세포의 어떠한 현저한 사멸도 나타내지 않았다. 이러한 조건하에서, 본 발명의 유리 페이로드, IVd 및 Ve는 각각 0.037 nM 및 0.203 nM의 IC50 값, 및 99% 및 99%의 최대 사멸 퍼센트로 HCT15/PRLR 세포의 사멸을 나타내었다.
베라파밀의 존재하에서, 본 발명의 링커 페이로드, 항-PRLR-LP3, 및 항-PRLR-LP4와 접합된 항-PRLR ADC는 HCT15/PRLR 세포 기반 분석에서 각각 91%의 최대 사멸 퍼센트로 0.309 nM의 IC50 값; 및 91%의 최대 사멸 퍼센트로 0.196 nM의 IC50 값에서 세포독성을 나타내었다. 이러한 조건하에서, 2개의 아이소타입 대조용 ADC, 아이소타입 대조용-LP3 및 아이소타입 대조용-LP4는 각각 50 nM 초과의 IC50 값 및 82%의 최대 사멸 퍼센트; 및 50 nM 초과의 IC50 값 및 76%의 최대 사멸 퍼센트의 HCT15/PRLR 세포의 사멸을 나타내었다. 이러한 조건하에서, 개시된 유리 페이로드, IVd 및 Ve는 각각 0.015 nM 및 0.033 nM의 IC50 값, 및 99% 및 99%의 최대 사멸 퍼센트로 HCT15/PRLR 세포의 사멸을 나타내었다. 접합되지 않은 항-PRLR 항체는 베라파밀의 존재 또는 부재하에서 HCT15/PRLR 세포의 어떠한 사멸도 나타내지 않았다.
베라파밀의 존재 또는 부재하에 HCT15/PRLR 세포에서 튜불리신 페이로드, 참조 화합물, 및 ADC에 의한 세포독성
시험품 베라파밀 존재/부재하의 HCT15/PRLR에 대한 IC 50 (nM) 베라파밀 존재/부재하의 HCT15/PRLR에 대한 사멸% 베라파밀 존재하의 HCT15/PRLR에 대한
IC 50 (nM) 		베라파밀 존재하의 HCT15/PRLR에 대한 사멸%
항-PRLR-LP3 0.525 90 0.309 91
항-PRLR-LP4 3.305 65 0.196 91
아이소타입 대조용-LP3 >50nM 51 >50nM 82
아이소타입 대조용-LP4 NS NS >50nM 76
IVd (LP3의 페이로드) 0.037 99 0.015 99
Ve (LP4의 페이로드) 0.203 99 0.033 99
항-PRLR 항체 >50nM 0 >50nM 0
NS = 시험된 농도에서 현저한 사멸 없음
개시된 튜불리신 페이로드, 참조 화합물, 및 상기 페이로드를 사용하는 항체 약물 접합체의 능력을 추가로 시험하기 위해서, 본 실시예에 기재된 바와 같이 C4-2 세포를 사용하여 세포독성 분석을 수행하였다(상기 참조). 상기 연구를 위해서, 항-STEAP2 항체를 접합시켜 튜불리신 페이로드를 선택하고, 화합물을 100 nM에서 시작하여 3-배 연속 희석 농도로 시험하였다. 모든 IC50 값을 nM 농도로 나타내며 시험된 최대 농도에서 세포 사멸 퍼센트를 하기 식(100 - 생육성 세포%)으로부터 추정하였다. 이들 데이터를 표 14에 보고하였다.
표 14에 나타내는 바와 같이, 개시된 링커-페이로드, 항-STEAP2-LP3, 항-STEAP2-LP4, 및 항-STEAP2-LP5와 접합된 항-STEAP2 ADC는 C4-2 세포 기반 분석에서 각각 99%의 최대 사멸 퍼센트로, 0.097 nM의 IC50 값; 99%의 최대 사멸 퍼센트로, 0.15 nM의 IC50 값; 및 96%의 최대 사멸 퍼센트로, 0.28 nM의 IC50의 세포독성을 나타내었다. 참조 ADC, 항-STEAP2-MMAE는 C4-2 세포-기반 분석에서 99%의 최대 사멸 퍼센트로, 0.53 nM의 IC50 값의 세포독성을 나타내었다. 3개의 아이소타입 대조용, 아이소타입 대조용-LP3, 아이소타입 대조용-LP4, 및 아이소타입 대조용-MMAE는 모두 16% 내지 48%의 최대 사멸 퍼센트, 그러나 >100 nM의 IC50 값으로, 오직 최고 시험 농도에서만 C4-2 세포의 일부 보통의 사멸을 나타내었다. 이러한 조건하에서, IVd(LP3의 유리 페이로드) 및 Ve(LP4의 페이로드)는 0.022 nM 및 0.063 nM의 IC50 값으로 C4-2 세포의 사멸을 나타내었고, 이들 둘 다 99%의 최대 사멸 퍼센트를 나타내었다. 유리 참조 페이로드 MMAE는 0.22 nM의 IC50 값, 및 99%의 최대 사멸 퍼센트로 C4-2 세포의 사멸을 나타내었다. 접합되지 않은 항-STEAP2 항체는 C4-2 세포의 어떠한 사멸도 나타내지 않았다.
튜불리신 페이로드, 참조 화합물 및 ADC에 의한 C4-2 세포에서의 세포독성
시험품 IC 50 (nM) 사멸%
항-STEAP2-LP3 0.097 99
항-STEAP2-LP4 0.15 99
항-STEAP2-MMAE 0.53 99
아이소타입 대조용-LP3 >50nM 48
아이소타입 대조용-LP4 >50nM 34
아이소타입 대조용-MMAE >50nM 16
항-STEAP2 Ab >50nM 0
IVd (LP3의 페이로드) 0.022 99
Ve (LP4의 페이로드) 0.063 99
MMAE (LP8의 페이로드) 0.22 99
항-STEAP2 항체
튜불리신에 접합된 항-STEAP2 항체의 생체내 효능을 측정하기 위해서, STEAP2 양성 C4-2 전립선암 이종이식편을 갖는 면역타협된 마우스에서 연구를 수행하였다.
분석을 위해서, STEAP2를 내인성으로 발현하는 7.5 x 106 C4-2 세포(ATCC, Cat# CRL-3314)를 Matrigel(BD Biosciences, Cat# 354234)에 현탁시키고, 수컷 CB17 SCID 마우스(Taconic, Hudson NY)의 좌측 옆구리에 피하 이식하였다. 일단 종양이 220 ㎣의 평균 부피에 도달하였으면(대략 15일째), 마우스를 7개의 그룹으로 무작위 분류하고 꼬리 정맥 주사를 통해 2.5 ㎎/㎏의 단일 용량의 항-STEAT2 접합 항체(항-STEAP2-LP3, 항-STEAP2-LP4, 항-STEAP2-MMAE), 아이소타입 대조용 접합 항체, 또는 비히클을 제공하였다. 비히클 그룹의 평균 크기가 1500 ㎣에 도달할 때까지 1주일에 2회 캘리퍼스로 종양을 측정하였다. 식 (길이 x 너비2)/2를 사용하여 종양 크기를 계산하고 이어서 평균 종양 크기 +/-SEM을 계산하였다. 종양 성장 억제를 하기 식: (1-((T최종-T초기)/(C최종-C초기)))*100(여기에서 처리된 그룹(T) 및 대조용 그룹(C)은 비히클 그룹이 1500 ㎣에 도달한 날의 평균 종양 질량을 나타낸다)에 따라 계산하였다.
본 연구에서, MMAE에 접합된 항-STEAP2 항체를, C4-2 종양 크기를 감소시키는 능력에 대해서 튜불리신 링커-페이로드에 접합된 항-STEAP2 항체(항-STEAP2-LP3 및 항-STEAP2-LP4)와 비교하였다. 표 15에 요약된 바와 같이, 항-STEAP2-MMAE 참조 ADC에 의한 처리는 연구의 완료시 평균 81%의 종양 성장 억제를 생성시켰다. 비교시, 항-STEAP2-LP3 및 항-STEAP2-LP4 ADC에 의한 처리는 각각 평균 108% 및 97%의 종양 성장 감소를 나타내었다. 아이소타입 대조용 ADC에 의한 처리는 평균 31-33%의 종양 크기 감소로 이어졌다. 항-STEAP2 항체는 N297Q 돌연변이를 포함하였다.
항-STEAP2 ADC로 처리된 SCID 마우스에서 연구의 끝에서 C4-2 종양 성장의 억제
처리 그룹 평균 최종 종양 크기 ㎣
(평균 ± SEM)		 평균 종양 성장 억제(%)
PBS 비히클 1539 ± 177 0
아이소타입 대조용-MMAE 2.5 ㎎/㎏ 1140 ± 213 31
아이소타입 대조용-LP3 2.5 ㎎/㎏ 1100 ± 202 33
아이소타입 대조용-LP4 2.5 ㎎/㎏ 1127 ± 192 31
항-STEAP2-MMAE 2.5 ㎎/㎏ 475 ± 118 81
항-STEAP2 N297Q-LP3 2.5 ㎎/㎏ 115 ± 6 108
항-STEAP2 N297Q-LP4 2.5 ㎎/㎏ 258 ± 60 97
CTG-2440 및 CTG-2441 PDX 전립선암 모델에서 STEAP2-튜불리신 ADC의 효능
mAb 클론 ID:
Figure pct00783
실험 과정:
CTG-2440 또는 CTG-2441의 전립선암 환자-유래된 이종이식편(PDX) 종양 단편을 수컷 NOG 마우스의 옆구리에 피하 이식하였다. 일단 종양 부피가 대략 200 ㎣에 도달하였으면, 마우스를 8개의 그룹으로 무작위 분류하고 하기 표 16에 나타낸 스케줄에 따라 처리하였다. 종양 성장을 이식-후 60일간 모니터하였다.
물품 DAR ADC 용량 페이로드 용량 투여 스케줄 총 페이로드 용량
아이소타입 대조용-LP4 3.9-4 3.64-3.72 ㎎/㎏ 80 ug/㎏ QW x3 240 ug/㎏
항-STEAP2 N297Q Ab-LP4 3.9-4 1.82-1.86 ㎎/㎏ 40 ug/㎏ QW x1 40 ug/㎏
항-STEAP2 N297Q Ab-LP4 3.9-4 1.82-1.86 ㎎/㎏ 40 ug/㎏ QW x3 120 ug/㎏
항-STEAP2 N297Q Ab-LP4 3.9-4 3.64-3.72 ㎎/㎏ 80 ug/㎏ QW x3 240 ug/㎏
결과 및 결론:
STEAP2 양성 PDX 모델에서 STEAP2 튜불리신 ADC의 항-종양 효능을 대조용 ADC와 비교하여 평가하였다. 대조용 ADC로 처리된 CTG-2440 종양은 28일 이내에 프로토콜 크기 한계까지 성장하였다. 3.72 ㎎/㎏(80 ug/㎏ 페이로드의 매3주 용량)의 STEAP2 튜불리신 ADC로 처리된 종양의 성장은 체중 변화에 대한 유해 효과 없이 60일간 억제되었다. 항-종양 효능은 용량 의존적이었다. 총 240 ug/㎏의 페이로드 용량으로 완전한 종양 억제가 관찰된 반면, 120 ug/㎏ 및 40 ug/㎏의 총 페이로드 용량으로는 종양 퇴화가 유도되었다. CTG-2440에 대한 종양 부피 데이터를 도 16에 나타낸다.
CTG-2440에 대한 통계표 요약:
Figure pct00784
대조용 ADC로 처리된 CTG-2441 종양은 30일 이내에 프로토콜 크기 한계까지 성장하였다. 3.64 ㎎/㎏(80 ug/㎏ 페이로드의 매3주 용량)의 STEAP2 튜불리신 ADC로 처리된 종양의 성장은 단지 보통의 체중 손실의 관찰과 함께 60일간 억제되었다. 항-종양 효능은 용량 의존적이었다. 120 또는 40 ug/㎏의 총 페이로드 용량으로 완전한 종양 억제가 관찰되었다. 40 ug/㎏의 총 페이로드 용량의 단일 투여에 따라 종양 퇴화가 유도되었다.
CTG-2441에 대한 종양 부피 데이터를 도 17에 나타낸다.
CTG-2441에 대한 통계표 요약:
Figure pct00785
PDX 모델 및 STEAP2 발현 정보:
전립선암 모델은 전이성 거세저항 전립선암(metastatic castrate resistant prostate cancer; mCRPC) 환자의 골 전이로부터 유래되었다. STEAP2 발현은 RNA 서열분석 데이터 및 RNA 원위치 하이브리드화(in situ hybridization)에 의해 확인되었다.

Claims (64)

  1. 하기 화학식 I의 구조를 갖는 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염:
    화학식 I
    Figure pct00786

    상기 식에서
    R1은 C1-C10 알킬이고;
    R3은 -C(O)C1-C5 알킬, -C(O)N(H)C1-C10 알킬, 또는 -(C1-C10 알킬렌)-NR3aR3b이고, 여기에서
    R3a 및 R3b는 각각의 경우에 독립적으로, 수소, 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 및 아실이고, 여기에서 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 및 아실은 임의로 치환되며;
    R4 및 R5는 각각의 경우에 독립적으로, 수소 또는 C1-C5 알킬이고;
    R6은 -OH 또는 -NHNH2이고;
    R7은 각각의 경우에 독립적으로, 수소, -OH, 할로겐, 또는 -NR7aR7b이고, 여기에서
    R7a 및 R7b는 각각의 경우에 독립적으로, 수소, 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 아실, 및 아미노산 잔기이고, 여기에서 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 및 아실은 임의로 치환되며;
    R8은 각각의 경우에 독립적으로, 수소, 중수소, -NHR9, 또는 할로겐이고, 여기에서
    R9는 수소, -C1-C5 알킬, 또는 -C(O)C1-C5 알킬이고;
    m은 1 또는 2이고;
    Q는 -CH2- 또는 -O-이고, 여기에서
    Q가 -O-일 때, R2는 C1-C10 알킬, C1-C10 알키닐, -C1-C10 알킬렌-(5원 헤테로아릴), -C1-C3 알킬렌-Q1-(CH2)n아릴, 또는 C1-C3 하이드록시알킬이거나; 또는
    Q가 -CH2-일 때, R2는 C5-C10 알킬, C1-C10 알키닐, -C1-C10 알킬렌-(5원 헤테로아릴), -C1-C3 알킬렌-Q1-(CH2)n아릴, 또는 C1-C3 하이드록시알킬이고;
    Q1은 -CH2- 또는 -O-이고;
    상기 헤테로아릴은 비치환되거나 또는 알킬, 아미노알킬, 하이드록시알킬, 카복시알킬, 벤질 또는 페닐로 치환되고;
    상기 아릴은 비치환되거나 또는 니트로 또는 아미노로 치환되고;
    n은 1 내지 5의 정수이다.
  2. 제1항에 있어서,
    R1이 C1-C10 알킬이고;
    R3이 -C(O)C1-C5 알킬, -C(O)N(H)C1-C10 알킬, 또는 -(C1-C10 알킬렌)-NR3aR3b이고, 여기에서 R3a 및 R3b가 각각의 경우에 독립적으로, 수소, 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 및 아실이고, 여기에서 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 및 아실은 임의로 치환되며;
    R4 및 R5가 각각의 경우에 독립적으로, 수소 또는 C1-C5 알킬이고;
    R6이 -OH 또는 -NHNH2이고;
    R7이 각각의 경우에 독립적으로, 수소, -OH, 할로겐, 또는 -NR7aR7b이고, 여기에서
    R7a 및 R7b가 각각의 경우에 독립적으로, 수소, 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 및 아실이고, 여기에서 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 및 아실은 임의로 치환되며;
    R8이 각각의 경우에 독립적으로, 수소, 중수소, -NHR9, 또는 할로겐이고, 여기에서
    R9가 수소, -C1-C5 알킬, 또는 -C(O)C1-C5 알킬이고;
    m이 1 또는 2이고;
    Q가 -CH2- 또는 -O-이고, 여기에서
    Q가 -O-일 때, R2가 C1-C10 알킬, C1-C10 알키닐, -C1-C10 알킬렌-(5원 헤테로아릴), -C1-C3 알킬렌-Q1-(CH2)n아릴, 또는 C1-C3 하이드록시알킬이거나; 또는
    Q가 -CH2-일 때, R2가 C5-C10 알킬, C1-C10 알키닐, -C1-C10 알킬렌-(5원 헤테로아릴), -C1-C3 알킬렌-Q1-(CH2)n아릴, 또는 C1-C3 하이드록시알킬이고;
    Q1이 -CH2- 또는 -O-이고;
    상기 헤테로아릴이 비치환되거나 또는 알킬, 아미노알킬, 하이드록시알킬, 카복시알킬, 벤질 또는 페닐로 치환되고;
    상기 아릴이 비치환되거나 또는 니트로 또는 아미노로 치환되고;
    n이 1 내지 5의 정수인
    화합물.
  3. 제1항에 있어서,
    Q가 -CH2-이고;
    R2가 C5-C10 알킬이고;
    R3이 -C(O)C1-C5 알킬이고;
    R4가 수소이고;
    R5가 C1-C5 알킬이고;
    R7이 할로겐인 화합물.
  4. 제3항에 있어서,
    하기 화학식 II의 구조에 따른 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염:
    화학식 II
    Figure pct00787
    .
  5. 제4항에 있어서,
    하기로 이루어지는 그룹 중에서 선택된 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염:
    Figure pct00788
    ; 및
    Figure pct00789
    .
  6. 제1항에 있어서,
    Q가 -CH2-이고;
    R2가 C5-C10 알킬이고;
    R3이 -C(O)C1-C5 알킬이고;
    R4 및 R5가 메틸이고;
    R7이 -OH, 할로겐 또는 -NH2이고;
    R8이 각각의 경우에 독립적으로 수소, 중수소, -NHR9, 또는 할로겐이고, 여기에서
    R9가 수소 또는 -C1-C5 알킬이고;
    m이 1 또는 2인 화합물.
  7. 제6항에 있어서,
    하기 화학식 III의 구조에 따른 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염:
    화학식 III
    Figure pct00790
    .
  8. 제7항에 있어서,
    하기로 이루어지는 그룹 중에서 선택된 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염:
    Figure pct00791
    ;
    Figure pct00792
    ;
    Figure pct00793

    Figure pct00794
    ;
    Figure pct00795
    ;
    Figure pct00796
    ; 및
    Figure pct00797
    .
  9. 제1항에 있어서,
    Q가 -CH2-이고;
    R2가 C1-C10 알키닐이고;
    R6이 -OH인 화합물.
  10. 제9항에 있어서,
    하기 화학식 IV의 구조에 따른 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염:
    화학식 IV
    Figure pct00798
    .
  11. 제10항에 있어서,
    하기로 이루어지는 그룹 중에서 선택된 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염:
    Figure pct00799

    Figure pct00800
    및
    Figure pct00801
    .
  12. 제1항에 있어서,
    Q가 -CH2-이고;
    R2가 위치이성질체성 -C1-C10 알킬렌-(5원 헤테로아릴)이고, 여기에서 상기 헤테로아릴이 비치환되거나 또는 알킬, 아미노알킬, 하이드록시알킬, 카복시알킬, 벤질, 또는 페닐로 치환되며;
    R3이 -C(O)C1-C5 알킬이고;
    R4 및 R5가 C1-C5 알킬이고;
    R6이 -OH이고;
    R7이 -NH2인 화합물.
  13. 제12항에 있어서,
    하기 화학식 V의 구조에 따른 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염:
    화학식 V
    Figure pct00802
    .
  14. 제13항에 있어서,
    하기 화학식 VI 또는 화학식 VII의 구조에 따른 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염:
    화학식 VI
    Figure pct00803

    화학식 VII
    Figure pct00804

    상기 식들에서,
    R10은 수소, 메틸, -CH2CH2NH2, -CH2CH2OH, -CH2COOH, -CH2CH2CH2COOH, 벤질 또는 페닐이다.
  15. 제14항에 있어서,
    하기로 이루어지는 그룹 중에서 선택된 화합물; 또는 그의 위치이성질체; 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염:
    Figure pct00805

    Figure pct00806
    및
    Figure pct00807
    .
  16. 제1항에 있어서,
    Q가 -O-이고;
    R2가 C1-C10 알킬이고;
    R7이 -OH 또는 -NH2인 화합물.
  17. 제16항에 있어서,
    하기 화학식 VIII의 구조에 따른 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염:
    화학식 VIII
    Figure pct00808
    .
  18. 제17항에 있어서,
    R3이 -C(O)Me인 화합물.
  19. 제18항에 있어서,
    하기로 이루어지는 그룹 중에서 선택된 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염:
    Figure pct00809
  20. 제17항에 있어서,
    R3이 -C(O)N(H)C1-C10 알킬이고;
    R4가 수소이고;
    R5가 C1-C5 알킬이고;
    R6 및 R7이 -OH인 화합물.
  21. 제20항에 있어서,
    하기 화학식 IX의 구조를 갖는 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염:
    화학식 IX
    Figure pct00810

    상기 식에서, R11은 C1-C10 알킬이다.
  22. 제21항에 있어서,
    하기로 이루어지는 그룹 중에서 선택된 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염:
    Figure pct00811

    Figure pct00812
    ; 및
    Figure pct00813
    .
  23. 제17항에 있어서,
    R3이 -C(O)N(H)C1-C10 알킬인 화합물.
  24. 제23항에 있어서,
    Figure pct00814

    인 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염.
  25. 제1항에 있어서,
    Q가 -O-이고;
    R2가 C1-C10 알키닐이고;
    R3이 -C(O)C1-C5 알킬이고;
    R6이 -OH인 화합물.
  26. 제25항에 있어서,
    하기 화학식 X의 구조에 따른 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염:
    화학식 X
    Figure pct00815
    .
  27. 제26항에 있어서,
    하기로 이루어지는 그룹 중에서 선택된 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염:
    Figure pct00816

    Figure pct00817
    및
    Figure pct00818

    Figure pct00819
    .
  28. 제1항에 있어서,
    Q가 -O-이고;
    R2가 C1-C10 알키닐이고;
    R3이 -C(O)N(H)C1-C10 알킬이고;
    R6이 -OH인 화합물.
  29. 제28항에 있어서,
    하기 화학식 XI의 구조에 따른 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염:
    화학식 XI
    Figure pct00820
    .
  30. 제29항에 있어서,
    Figure pct00821

    인 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염.
  31. 제1항에 있어서,
    Q가 -O-이고;
    R2가 C1-C3 알킬렌-Q1-(CH2)n아릴; 또는 C1-C3 하이드록시알킬이고;
    R3이 -C(O)C1-C5 알킬이고;
    R4가 수소이고;
    R5가 C1-C5 알킬이고;
    R6 및 R7이 -OH인 화합물.
  32. 제31항에 있어서,
    하기 화학식 XII의 구조를 갖는 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염:
    화학식 XII
    Figure pct00822
    .
  33. 제32항에 있어서,
    R2가 C1-C3 알킬렌-O-(CH2)n아릴인 화합물.
  34. 제33항에 있어서,
    하기로 이루어지는 그룹 중에서 선택된 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염:
    Figure pct00823
    및
    Figure pct00824
    .
  35. 제32항에 있어서,
    R2가 C1-C3 하이드록시알킬인 화합물.
  36. 제35항에 있어서,
    Figure pct00825

    인 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염.
  37. 하기 화학식 A, B, C 또는 D의 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염:
    화학식 A
    Figure pct00826

    화학식 B
    Figure pct00827

    화학식 C
    Figure pct00828

    화학식 D
    Figure pct00829

    상기 식들에서,
    L은 링커이고;
    BA는 결합제이고;
    k는 1 내지 30의 정수이고;
    R1은 C1-C10 알킬이고;
    R3은 -C(O)C1-C5 알킬, -C(O)N(H)C1-C10 알킬, 또는 -(C1-C10 알킬렌)-NR3aR3b이고, 여기에서
    R3a 및 R3b는 각각의 경우에 독립적으로, 수소, 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 및 아실이고, 여기에서 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 및 아실은 임의로 치환되며;
    R4 및 R5는 각각의 경우에 독립적으로, 수소 또는 C1-C5 알킬이고;
    R6은 -OH, -O-, -NHNH2 또는 -NHNH-이고;
    R7은 각각의 경우에 독립적으로, 수소, -OH, -O-, 할로겐, 또는 -NR7aR7b이고, 여기에서
    R7a 및 R7b는 각각의 경우에 독립적으로, 결합, 수소, 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 아실, 및 아미노산 잔기이고, 여기에서 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 및 아실은 임의로 치환되며;
    R8은 각각의 경우에 독립적으로, 수소, 중수소, -NHR9, 또는 할로겐이고, 여기에서
    R9는 수소, -C1-C5 알킬, 또는 -C(O)C1-C5 알킬이고;
    m은 1 또는 2이고;
    Q는 -CH2- 또는 -O-이고, 여기에서
    Q가 -O-일 때, R2는 C1-C10 알킬, C1-C10 알키닐, 위치이성질체성 C1-C10 트리아졸릴렌, -C1-C10 알킬렌-(5원 헤테로아릴), 위치이성질체성 -C1-C10 알킬렌-(5원 헤테로아릴렌), -C1-C3 알킬렌-Q1-(CH2)n아릴, C1-C3 하이드록시알킬, 또는 C1-C10 알킬에테르이거나; 또는
    Q가 -CH2-일 때, R2는 C5-C10 알킬, C1-C10 알키닐, 위치이성질체성 C1-C10 트리아졸릴렌, -C1-C10 알킬렌-(5원 헤테로아릴), 위치이성질체성 -C1-C10 알킬렌-(5원 헤테로아릴렌), -C1-C3 알킬렌-Q1-(CH2)n아릴, C1-C3 하이드록시알킬, 또는 C1-C10 알킬에테르이고;
    Q1은 -CH2- 또는 -O-이고;
    상기 위치이성질체성 트리아졸릴렌은 비치환되거나 또는 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 및 아실로 치환되고;
    상기 헤테로아릴 또는 위치이성질체성 헤테로아릴렌은 비치환되거나 또는 알킬, 아미노알킬, -알킬렌-NH-, 하이드록시알킬, -알킬렌-O-, 카복시알킬, -알킬렌-COO-, 벤질 또는 페닐로 치환되고;
    상기 아릴은 비치환되거나 또는 니트로, 아미노, 또는 -NH-로 치환되고;
    n은 1 내지 5의 정수이다.
  38. 제37항에 있어서,
    L이 링커이고;
    BA가 결합제이고;
    k가 1 내지 30의 정수이고;
    R1이 C1-C10 알킬이고;
    R3이 -C(O)C1-C5 알킬, -C(O)N(H)C1-C10 알킬, 또는 -(C1-C10 알킬렌)-NR3aR3b이고, 여기에서
    R3a 및 R3b가 각각의 경우에 독립적으로, 수소, 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 및 아실이고, 여기에서 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 및 아실이 임의로 치환되며;
    R4 및 R5가 각각의 경우에 독립적으로, 수소 또는 C1-C5 알킬이고;
    R6이 -OH, -O-, -NHNH2 또는 -NHNH-이고;
    R7이 각각의 경우에 독립적으로, 수소, -OH, -O-, 할로겐, 또는 -NR7aR7b이고, 여기에서
    R7a 및 R7b가 각각의 경우에 독립적으로, 결합, 수소, 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 및 아실이며, 여기에서 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 및 아실이 임의로 치환되고;
    R8이 각각의 경우에 독립적으로, 수소, 중수소, -NHR9, 또는 할로겐이고, 여기에서
    R9가 수소, -C1-C5 알킬, 또는 -C(O)C1-C5 알킬이고;
    m이 1 또는 2이고;
    Q가 -CH2- 또는 -O-이고, 여기에서
    Q가 -O-일 때, R2가 C1-C10 알킬, C1-C10 알키닐, 위치이성질체성 C1-C10 트리아졸릴렌, -C1-C10 알킬렌-(5원 헤테로아릴), 위치이성질체성 -C1-C10 알킬렌-(5원 헤테로아릴렌), -C1-C3 알킬렌-Q1-(CH2)n아릴, C1-C3 하이드록시알킬, 또는 C1-C10 알킬에테르이거나; 또는
    Q가 -CH2-일 때, R2가 C5-C10 알킬, C1-C10 알키닐, 위치이성질체성 C1-C10 트리아졸릴렌, -C1-C10 알킬렌-(5원 헤테로아릴), 위치이성질체성 -C1-C10 알킬렌-(5원 헤테로아릴렌)-, -C1-C3 알킬렌-Q1-(CH2)n아릴, C1-C3 하이드록시알킬, 또는 C1-C10 알킬에테르이고;
    Q1이 -CH2- 또는 -O-이고;
    상기 위치이성질체성 트리아졸릴렌이 비치환되거나 또는 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 및 아실로 치환되고;
    상기 헤테로아릴 또는 위치이성질체성 헤테로아릴렌이 비치환되거나 또는 알킬, 아미노알킬, -알킬렌-NH-, 하이드록시알킬, -알킬렌-O-, 카복시알킬, -알킬렌-COO-, 벤질 또는 페닐로 치환되고;
    상기 아릴이 비치환되거나 또는 니트로, 아미노, 또는 -NH-로 치환되고;
    n이 1 내지 5의 정수인
    화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염.
  39. 제1항 내지 제38항 중 어느 한 항의 화합물 및 약학적으로 허용가능한 부형제, 담체 또는 희석제를 포함하는 약학 조성물.
  40. 대상체(subject)에게 치료 유효량의 제1항 내지 제39항 중 어느 한 항의 화합물 또는 약학 조성물을 투여함을 포함하는, 상기 대상체에서 암을 치료하는 방법.
  41. 대상체에게 치료 유효량의 제1항 내지 제40항 중 어느 한 항의 화합물 또는 약학 조성물을 투여함을 포함하는, 상기 대상체에서 암을 치료하는 방법으로서, 상기 암이 신세포 암종, 췌장암종, 두경부암, 전립선암, 거세-저항성(castrate-resistant) 전립선암, 악성 신경교종, 골육종(osteosarcoma), 결장직장암, 위암, 중피종(mesothelioma), 악성 중피종, 다발성 골수종, 난소암, 폐암, 소세포 폐암, 비-소세포 폐암, 활막 육종(synovial sarcoma), 갑상선암, 유방암, PRLR 양성(PRLR+) 유방암, 흑색종, 급성 골수성 백혈병, 성인 T-세포 백혈병, 성상세포종(astrocytomas), 방광암, 자궁경부암, 담관암종(cholangiocarcinoma), 자궁내막암, 식도암, 교모세포종(glioblastomata), 카포시육종(Kaposi's sarcoma), 신장암, 평활근육종(leiomyosarcomas), 간암, 림프종, MFH/섬유육종, 비인두암(nasopharyngeal cancer), 횡문근육종(rhabdomyosarcoma), 결장암, 위암, 자궁암, 잔류암(residual cancer), 및 윌름 종양(Wilms' tumor)으로 이루어지는 그룹 중에서 선택되는 방법.
  42. PRLR 및 STEAP2로 이루어지는 그룹 중에서 선택된 항원을 발현하는 종양을 치료하는 방법.
  43. 제38항에 있어서,
    하기 화학식 A', B', C' 또는 D'를 갖는 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염 또는 전구약물(prodrug):
    [화학식 A']
    Figure pct00830

    [화학식 B']
    Figure pct00831

    [화학식 C']
    Figure pct00832

    [화학식 D']
    Figure pct00833

    상기 식들에서,
    SP1 및 SP2는, 존재하는 경우, 이격기이고;
    각각의 AA는 아미노산이고;
    p1은 1 내지 10의 정수이다.
  44. 제43항에 있어서,
    SP2 이격기는, 존재하는 경우,
    Figure pct00834
    또는
    Figure pct00835
    이고;
    (AA)p는
    Figure pct00836
    또는
    Figure pct00837
    이고;
    SP1은
    Figure pct00838
    이고,
    여기에서 RG'는 반응성 기 RG와 결합제와의 반응에 따른 반응성 기 잔기이고;
    Figure pct00839
    는 결합제에 대한 직접 또는 간접 결합이고;
    b는 1 내지 4의 정수이다.
  45. 제38항 내지 제44항 중 어느 한 항에 있어서,
    결합제가 화학식 H2N-LL-X에 따른 1차 아민 화합물로 변형된 항체이고, 여기에서 LL이 하기로 이루어지는 그룹 중에서 선택된 2가 링커인 화합물:
    2가 폴리에틸렌 글리콜(PEG) 기;
    -(CH2) n -;
    -(CH2CH2O) n -(CH2) p -;
    -(CH2) n -N(H)C(O)-(CH2) m -;
    -(CH2CH2O) n -N(H)C(O)-(CH2CH2O) m -(CH2) p -;
    -(CH2) n -C(O)N(H)-(CH2) m -;
    -(CH2CH2O) n -C(O)N(H)-(CH2CH2O) m -(CH2) p -;
    -(CH2) n -N(H)C(O)-(CH2CH2O) m -(CH2) p -;
    -(CH2CH2O) n -N(H)C(O)-(CH2) m -;
    -(CH2) n -C(O)N(H)-(CH2CH2O) m -(CH2) p -; 및
    -(CH2CH2O) n -C(O)N(H)-(CH2) m -;
    상기에서, n은 1 내지 12 중에서 선택된 정수이고;
    m은 0 내지 12 중에서 선택된 정수이고;
    p는 0 내지 2 중에서 선택된 정수이고;
    X는 -SH, -N3, -C≡CH, -C(O)H, 테트라졸,
    Figure pct00840
    및
    Figure pct00841
    로 이루어지는 그룹 중에서 선택된다.
  46. 제45항에 있어서,
    결합제가 하기 화학식에 따른 1차 아민으로 변형된 항체인 화합물:
    Figure pct00842
    .
  47. 링커에 결합된 제1항 내지 제36항 중 어느 한 항의 화합물을 포함하는 링커-페이로드(linker-payload)로서, 상기 링커가 항체 또는 그의 항원 결합 단편과 반응성인 모이어티(moiety)를 포함하는 링커-페이로드.
  48. 제47항에 있어서,
    링커가 피페리딘 질소, 제1항 내지 제36항 중 어느 한 항의 화합물의 R2, R6 또는 R7에 결합되는 링커-페이로드.
  49. 하기 화학식 LPa, LPb, LPc 또는 LPd의 링커-페이로드 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염:
    화학식 LPa
    Figure pct00843

    화학식 LPb
    Figure pct00844

    화학식 LPc
    Figure pct00845
    또는
    화학식 LPd
    Figure pct00846

    상기 식들에서,
    L은 링커이고;
    R1은 C1-C10 알킬이고;
    R3은 -C(O)C1-C5 알킬, -C(O)N(H)C1-C10 알킬, 또는 -(C1-C10 알킬렌)-NR3aR3b이고, 여기에서
    R3a 및 R3b는 각각의 경우에 독립적으로, 수소, 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 및 아실이고, 여기에서 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 및 아실은 임의로 치환되며;
    R4 및 R5는 각각의 경우에 독립적으로, 수소 또는 C1-C5 알킬이고;
    R6은 -OH, -O-, -NHNH2 또는 -NHNH-이고;
    R7은 각각의 경우에 독립적으로, 수소, -OH, -O-, 할로겐, 또는 -NR7aR7b이고, 여기에서
    R7a 및 R7b는 각각의 경우에 독립적으로, 결합, 수소, 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 아실, 및 아미노산 잔기이고, 여기에서 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 및 아실은 임의로 치환되며;
    R8은 각각의 경우에 독립적으로, 수소, 중수소, -NHR9, 또는 할로겐이고, 여기에서
    R9는 수소, -C1-C5 알킬, 또는 -C(O)C1-C5 알킬이고;
    m은 1 또는 2이고;
    Q는 -CH2- 또는 -O-이고, 여기에서
    Q가 -O-일 때, R2는 C1-C10 알킬, C1-C10 알키닐, 위치이성질체성 C1-C10 트리아졸릴렌, -C1-C10 알킬렌-(5원 헤테로아릴), 위치이성질체성 -C1-C10 알킬렌-(5원 헤테로아릴렌), -C1-C3 알킬렌-Q1-(CH2)n아릴, C1-C3 하이드록시알킬, 또는 C1-C10 알킬에테르이거나; 또는
    Q가 -CH2-일 때, R2는 C5-C10 알킬, C1-C10 알키닐, 위치이성질체성 C1-C10 트리아졸릴렌, -C1-C10 알킬렌-(5원 헤테로아릴), 위치이성질체성 -C1-C10 알킬렌-(5원 헤테로아릴렌), -C1-C3 알킬렌-Q1-(CH2)n아릴, C1-C3 하이드록시알킬, 또는 C1-C10 알킬에테르이고;
    Q1은 -CH2- 또는 -O-이고;
    상기 위치이성질체성 트리아졸릴렌은 비치환되거나 또는 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 및 아실로 치환되고;
    상기 헤테로아릴 또는 위치이성질체성 헤테로아릴렌은 비치환되거나 또는 알킬, 아미노알킬, -알킬렌-NH-, 하이드록시알킬, -알킬렌-O-, 카복시알킬, -알킬렌-COO-, 벤질 또는 페닐로 치환되고;
    상기 아릴은 비치환되거나 또는 니트로, 아미노, 또는 -NH-로 치환되고;
    n은 1 내지 5의 정수이다.
  50. 제49항에 있어서,
    L이 링커이고;
    R1이 C1-C10 알킬이고;
    R3이 -C(O)C1-C5 알킬, -C(O)N(H)C1-C10 알킬, 또는 -(C1-C10 알킬렌)-NR3aR3b이고, 여기에서
    R3a 및 R3b가 각각의 경우에 독립적으로, 수소, 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 및 아실이고, 여기에서 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 및 아실이 임의로 치환되며;
    R4 및 R5가 각각의 경우에 독립적으로, 수소 또는 C1-C5 알킬이고;
    R6이 -OH, -O-, -NHNH2 또는 -NHNH-이고;
    R7이 각각의 경우에 독립적으로, 수소, -OH, -O-, 할로겐, 또는 -NR7aR7b이고, 여기에서
    R7a 및 R7b가 각각의 경우에 독립적으로, 결합, 수소, 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 및 아실이며, 여기에서 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 및 아실이 임의로 치환되고;
    R8이 각각의 경우에 독립적으로, 수소, 중수소, -NHR9, 또는 할로겐이고, 여기에서
    R9가 수소, -C1-C5 알킬, 또는 -C(O)C1-C5 알킬이고;
    m이 1 또는 2이고;
    Q가 -CH2- 또는 -O-이고, 여기에서
    Q가 -O-일 때, R2가 C1-C10 알킬, C1-C10 알키닐, 위치이성질체성 C1-C10 트리아졸릴렌, -C1-C10 알킬렌-(5원 헤테로아릴), 위치이성질체성 -C1-C10 알킬렌-(5원 헤테로아릴렌), -C1-C3 알킬렌-Q1-(CH2)n아릴, C1-C3 하이드록시알킬, 또는 C1-C10 알킬에테르이거나; 또는
    Q가 -CH2-일 때, R2가 C5-C10 알킬, C1-C10 알키닐, 위치이성질체성 C1-C10 트리아졸릴렌, -C1-C10 알킬렌-(5원 헤테로아릴), 위치이성질체성 -C1-C10 알킬렌-(5원 헤테로아릴렌)-, -C1-C3 알킬렌-Q1-(CH2)n아릴, C1-C3 하이드록시알킬, 또는 C1-C10 알킬에테르이고;
    Q1이 -CH2- 또는 -O-이고;
    상기 위치이성질체성 트리아졸릴렌이 비치환되거나 또는 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 및 아실로 치환되고;
    상기 헤테로아릴 또는 위치이성질체성 헤테로아릴렌이 비치환되거나 또는 알킬, 아미노알킬, -알킬렌-NH-, 하이드록시알킬, -알킬렌-O-, 카복시알킬, -알킬렌-COO-, 벤질 또는 페닐로 치환되고;
    상기 아릴이 비치환되거나 또는 니트로, 아미노, 또는 -NH-로 치환되고;
    n이 1 내지 5의 정수인
    링커-페이로드 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염.
  51. 제50항에 있어서,
    하기 화학식 LPa', LPb', LPc' 또는 LPd'를 갖는 링커 페이로드 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염:
    화학식 LPa'
    Figure pct00847

    화학식 LPb'
    Figure pct00848

    화학식 LPc'
    Figure pct00849
    또는
    화학식 LPd'
    Figure pct00850

    상기 식들에서,
    SP1 및 SP2는, 존재하는 경우, 이격기이고;
    각각의 AA는 아미노산이고;
    p1은 1 내지 10의 정수이다.
  52. 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 포함하는 항체-약물 접합체로서, 상기 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 제1항 내지 제36항 중 어느 한 항의 화합물에 접합된 항체-약물 접합체.
  53. 제1항 내지 제52항 중 어느 한 항에 있어서,
    아릴이 페닐, 나프틸, 플루오레닐, 아줄레닐, 안트릴, 펜안트릴, 및 피레닐을 포함하고; 헤테로아릴이 피리딜, 피라지닐, 피리미디닐, 피리다지닐, 퀴놀리닐, 이소퀴놀리닐, 신놀리닐, 퀴나졸리닐, 퀴녹살리닐, 프탈라지닐, 프테리디닐, 벤조푸라닐, 디벤조푸라닐, 벤조티오페닐, 벤즈옥사졸릴, 벤즈티아졸릴, 디벤조티오페닐, 인돌릴, 인돌리닐, 벤즈이미다졸릴, 인다졸릴, 및 벤즈트리아졸릴을 포함하고;
    아실이 -C(O)R3c를 포함하고, 여기에서 R3c가 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 아릴, 및 헤테로아릴을 포함하는 화합물 또는 링커-페이로드.
  54. 제51항에 있어서,
    하기로 이루어지는 그룹 중에서 선택되는 링커-페이로드:
    Figure pct00851
    ;


    Figure pct00852

    Figure pct00853

    Figure pct00854

    Figure pct00855

    Figure pct00856
    및
    Figure pct00857
    .
  55. 결합제를 제53항의 링커-페이로드와 접촉시킴을 포함하는, 항체-약물 접합체의 제조 방법.
  56. 하기로 이루어지는 그룹 중에서 선택된 화합물:
    Figure pct00858

    Figure pct00859

    Figure pct00860

    Figure pct00861

    Figure pct00862

    Figure pct00863

    Figure pct00864

    Figure pct00865

    Figure pct00866

    Figure pct00867

    Figure pct00868

    Figure pct00869

    Figure pct00870

    Figure pct00871

    Figure pct00872

    Figure pct00873

    Figure pct00874

    Figure pct00875

    상기에서, BA는 결합제이고; k는 1, 2, 3 또는 4이다.
  57. 제56항에 있어서,
    BA가 항체 또는 그의 항원-결합 단편인 화합물.
  58. 제56항 또는 제57항에 있어서,
    BA가 접합에 사용되는 적어도 하나의 글루타민 잔기를 포함하는 트랜스글루타미나제-변형된 항체 또는 그의 항원-결합 단편인 화합물.
  59. 제56항 또는 제57항에 있어서,
    BA가 접합에 사용되는 적어도 2개의 글루타민 잔기를 포함하는 트랜스글루타미나제-변형된 항체 또는 그의 항원-결합 단편인 화합물.
  60. 제56항 또는 제57항에 있어서,
    BA가 접합에 사용되는 적어도 4개의 글루타민 잔기를 포함하는 트랜스글루타미나제-변형된 항체 또는 그의 항원-결합 단편인 화합물.
  61. 제60항에 있어서,
    BA가 트랜스글루타미나제-변형된 항체 또는 그의 항원-결합 단편이고, 여기에서 접합이 2개의 Q295 잔기에 존재하고; k가 2인 화합물.
  62. 제60항에 있어서,
    BA가 트랜스글루타미나제-변형된 항체 또는 그의 항원-결합 단편이고, 여기에서 접합이 2개의 Q295 잔기 및 2개의 N297Q 잔기에 존재하고; k가 4인 화합물.
  63. 하기로 이루어지는 그룹 중에서 선택된 제1항의 화합물에 접합된 항체 또는 그의 항원-결합 단편을 포함하는 항체-약물 접합체:
    Figure pct00876

    Figure pct00877

    Figure pct00878

    Figure pct00879

    Figure pct00880

    Figure pct00881

    Figure pct00882
    및
    Figure pct00883
  64. 제56항 내지 제63항 중 어느 한 항에 있어서,
    BA 또는 항체 또는 그의 항원-결합 단편이 항-PRLR 또는 항-STEAP2인 화합물.
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