JP2023542080A - カルレティキュリンに結合する多機能性分子およびその使用 - Google Patents

カルレティキュリンに結合する多機能性分子およびその使用 Download PDF

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Abstract

ｉ）カルレティキュリンタンパク質に結合する抗原結合性ドメインと；（ｉｉ）免疫細胞エンゲージャー（例えば、ＮＫ細胞エンゲージャー、Ｔ細胞エンゲージャー、Ｂ細胞エンゲージャー、樹状細胞エンゲージャー、もしくはマクロファージ細胞エンゲージャーから選択される）；（ｉｉｉ）サイトカイン分子；および／または（ｉｖ）間質改変部分のうちの１つ、２つ、またはすべてとを含む多機能性分子が開示される。さらに、それをコードする核酸、前述の分子を産生する方法、および前述の分子を使用してがんを処置する方法が開示される。【選択図】図２０－２

Description

関連出願
[0001]本出願は、２０２０年８月２６日に出願された米国仮特許出願第６３／０７０，７６９号の利益を主張し、それぞれの内容全体が参照により本明細書に組み込まれる。
[0002]骨髄増殖性新生物（ＭＰＮ）は、血液細胞を骨髄において異常に成長させる状態の群である。一般的な骨髄増殖性新生物としては、原発性または特発性骨髄線維症（ＭＦ）、本態性血小板増加症（ＥＴ）、真性赤血球増加症（ＰＶ）、および慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）が挙げられる。原発性骨髄線維症は、過剰な瘢痕組織が骨髄に形成され、骨髄の正常な血液細胞を産生する能力を障害する慢性血液がんである。骨髄増殖性新生物、例えば骨髄線維症の処置の改善に関する存続している必要性を考慮すると、骨髄増殖性新生物を標的とする新たな組成物および処置が非常に望ましい。
[0003]とりわけ、ある態様では、（ｉ）カルレティキュリンタンパク質（例えば、野生型もしくは突然変異体カルレティキュリンタンパク質）に結合する第１の抗原結合性ドメイン、例えば、表４、表５、表６、表２４、表２５、表１６、表１７、表１８、もしくは表１９のいずれか１つに開示されるカルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインと、（ｉｉ）ＴＣＲβＶに結合する第２の抗原結合性ドメイン、例えば、表３０、表３１、表３２、表１０、表１１、表１２、もしくは表１３のいずれか１つに開示される抗ＴＣＲβＶ抗原結合性ドメイン、またはＮＫｐ３０に結合する第２の抗原結合性ドメイン、例えば、表７、表８、表３５、表３６、表９、表１０、もしくは表３４に開示される抗ＮＫｐ３０抗原結合性ドメインとを含むポリペプチド分子を含む組成物が、本明細書に開示される。
[0004]一部の実施形態では、ポリペプチド分子は、多機能性ポリペプチド分子である。
[0005]一部の実施形態では、ポリペプチド分子は、多特異性ポリペプチド分子である。
[0006]一部の実施形態では、第２の抗原結合性ドメインはＴＣＲβＶに結合する。
[0007]一部の実施形態では、第２の抗原結合性ドメインはＴ細胞を活性化するか、または第２の抗原結合性ドメインはＴ細胞を活性化しない。
[0008]一部の実施形態では、第２の抗原結合性ドメインはＴＣＲβＶ１２またはＴＣＲβＶ６（例えば、配列番号１０４４のアミノ酸配列を含む）に結合する。
[0009]一部の実施形態では、第２の抗原結合性ドメインは、表３０、表３１、表３２、表１０、表１１、表１２、または表１３に列挙される１つまたは複数のアミノ酸配列を含む。
[0010]一部の実施形態では、第２の抗原結合性ドメインは、（ａ）重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）であって、（ｉ）ＶＨが、表３０、表３１、表１０、表１１、表１２、もしくは表１３における重鎖相補性決定領域１（ＶＨＣＤＲ１）のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＨＣＤＲ１、表３０、表３１、表１０、表１１、表１２、もしくは表１３におけるＶＨＣＤＲ２のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＨＣＤＲ２、および／または表３０、表３１、表１０、表１１、表１２、もしくは表１３におけるＶＨＣＤＲ３のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＨＣＤＲ３を含み、（ｉｉ）ＶＬが、表３０、表３１、表１０、表１１、表１２、もしくは表１３における軽鎖相補性決定領域１（ＶＬＣＤＲ１）のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＬＣＤＲ１、表３０、表３１、表１０、表１１、表１２、もしくは表１３におけるＶＬＣＤＲ２のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＬＣＤＲ２、および／または表３０、表３１、表１０、表１１、表１２、もしくは表１３におけるＶＬＣＤＲ３のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＬＣＤＲ３を含む、重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）；（ｂ）重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）であって、（ｉ）ＶＨが、配列番号３Ａの重鎖相補性決定領域１（ＶＨＣＤＲ１）アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号４ＡのＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号５ＡのＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を含み、かつ／または（ｉｉ）ＶＬが、配列番号６Ａの軽鎖相補性決定領域１（ＶＬＣＤＲ１）アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号７ＡのＶＬＣＤＲ２アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号８ＡのＶＬＣＤＲ３アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を含む、重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）；（ｃ）重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）であって、（ｉ）ＶＨが、配列番号４５Ａの重鎖相補性決定領域１（ＶＨＣＤＲ１）アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号４６ＡのＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号４７ＡのＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を含み、かつ／または（ｉｉ）ＶＬが、配列番号５１Ａの軽鎖相補性決定領域１（ＶＬＣＤＲ１）アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号５２ＡのＶＬＣＤＲ２アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号５３ＡのＶＬＣＤＲ３アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を含む、重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）；ならびに／あるいは（ｄ）重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）であって、（ｉ）ＶＨが、配列番号４８Ａの重鎖相補性決定領域１（ＶＨＣＤＲ１）アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号４９ＡのＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号５０ＡのＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を含み、かつ／または（ｉｉ）ＶＬが、配列番号５４Ａの軽鎖相補性決定領域１（ＶＬＣＤＲ１）アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号５５ＡのＶＬＣＤＲ２アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号５６ＡのＶＬＣＤＲ３アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を含む、重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む。
[0011]一部の実施形態では、第２の抗原結合性ドメインは、
（ａ）重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）であって、
（ｉ）ＶＨが、表３０、表３１、表１０、表１１、表１２、もしくは表１３におけるＶＨのアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含み、かつ／または
（ｉｉ）ＶＬが、表３０、表３１、表１０、表１１、表１２、もしくは表１３におけるＶＬのアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含み、
（ｉｉｉ）ＶＨが、配列番号９Ａのアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含み、かつ／または
（ｉｖ）ＶＬが、配列番号１０Ａのアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含む、重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）；
（ｂ）重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）であって、
（ｉ）ＶＨが、配列番号９Ａのアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含み、かつ／または
（ｉｉ）ＶＬが、配列番号１１Ａのアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含む、重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）；ならびに／あるいは
（ｃ）重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）であって、
（ｉ）ＶＨが、配列番号１３１２Ａのアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含み、かつ／または
（ｉｉ）ＶＬが、配列番号１３１４Ａのアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含む、重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）
を含む。
[0012]一部の実施形態では、第２の抗原結合性ドメインは、（ａ）重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）であって、（ｉ）ＶＨが、配列番号１７Ａの重鎖相補性決定領域１（ＶＨＣＤＲ１）アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号１８ＡのＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号１９ＡのＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を含み、かつ／または（ｉｉ）ＶＬが、配列番号２０Ａの軽鎖相補性決定領域１（ＶＬＣＤＲ１）アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号２１ＡのＶＬＣＤＲ２アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号２２ＡのＶＬＣＤＲ３アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を含む、重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）；（ｂ）重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）であって、（ｉ）ＶＨが、配列番号５７Ａの重鎖相補性決定領域１（ＶＨＣＤＲ１）アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号５８ＡのＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号５９ＡのＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を含み、かつ／または（ｉｉ）ＶＬが、配列番号６３Ａの軽鎖相補性決定領域１（ＶＬＣＤＲ１）アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号６４ＡのＶＬＣＤＲ２アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号６５ＡのＶＬＣＤＲ３アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を含む、重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）；ならびに／あるいは（ｃ）重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）であって、（ｉ）ＶＨが、配列番号６０Ａの重鎖相補性決定領域１（ＶＨＣＤＲ１）アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号６１ＡのＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号６２ＡのＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を含み、かつ／または（ｉｉ）ＶＬが、配列番号６６Ａの軽鎖相補性決定領域１（ＶＬＣＤＲ１）アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号６７ＡのＶＬＣＤＲ２アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号６８ＡのＶＬＣＤＲ３アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を含む、重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む。
[0013]一部の実施形態では、第２の抗原結合性ドメインは、
（ａ）重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）であって、
（ｉ）ＶＨが、配列番号１５Ａのアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含み、かつ／または
（ｉｉ）ＶＬが、配列番号１６Ａのアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含む、重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）；ならびに／あるいは
（ｂ）重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）であって、
（ｉ）ＶＨが、
配列番号２３Ａのアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）、
配列番号２４Ａのアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）、または
配列番号２５Ａのアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含み；かつ／または
（ｉｉ）ＶＬが、
配列番号２６Ａのアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）、
配列番号２７Ａのアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）、
配列番号２８Ａのアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）、
配列番号２９Ａのアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）、または
配列番号３０Ａのアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含む、重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）
を含む。
[0014]一部の実施形態では、本明細書に記載される組成物は、
例えば、Ｎ末端からＣ末端まで、第１のＶＬおよび第１のＣＬを含む第１のポリペプチド、
例えば、Ｎ末端からＣ末端まで、第１のＶＨ、第１のＣＨ１、第１の二量体化ドメイン（例えば、第１のＦｃ）、およびＴＣＲ（例えば、ＴＣＲＶβ）に結合する第１の部分（例えば、ＴＣＲ（例えば、ＴＣＲＶβ）に結合する第１のｓｃＦｖ）を含む第２のポリペプチド、
例えば、Ｎ末端からＣ末端まで、第２のＶＨ、第２のＣＨ１、第２の二量体化ドメイン（例えば、第２のＦｃ）、および任意選択でＴＣＲ（例えば、ＴＣＲＶβ）に結合する第２の部分（例えば、ＴＣＲ（例えば、ＴＣＲＶβ）に結合する第２のｓｃＦｖ）を含む第３のポリペプチド、
例えば、Ｎ末端からＣ末端まで、第２のＶＬおよび第２のＣＬを含む第４のポリペプチド
を含み、
第１のＶＬおよび第１のＶＨは第１のカルレティキュリンタンパク質に結合する第１の抗原結合性ドメインを形成し、第２のＶＬおよび第２のＶＨは第２のカルレティキュリンタンパク質に結合する第３の抗原結合性ドメインを形成し、
任意選択で、第１および第２のカルレティキュリンタンパク質は配列番号６２８５、Ｄ１００１、または６２８６のアミノ酸配列を含み、
任意選択で、第１および第２のカルレティキュリン突然変異体タンパク質は、配列番号６３１３のアミノ酸配列を含む分子、または配列番号６３１４のアミノ酸配列を含む分子からそれぞれ独立して選択され、
任意選択で、多機能性分子は図３Ａまたは３Ｂの構成を含む。
[0015]一部の実施形態では、第２の抗原結合性ドメインはＮＫｐ３０に結合する。
[0016]一部の実施形態では、第２の抗原結合性ドメインは、ＮＫｐ３０に結合する（例えば、それを活性化させる）抗体分子、例えば抗原結合性ドメイン、またはリガンドから選択され、例えば、第２の抗原結合性ドメインが、ＮＫｐ３０に結合する（例えば、それを活性化させる）抗体分子またはリガンドである。
[0017]一部の実施形態では、第２の抗原結合性ドメインは、（ｉ）表７、表３５、表９、表１０、もしくは表３４の重鎖相補性決定領域１（ＶＨＣＤＲ１）のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＨＣＤＲ１、表７、表３５、表９、表１０、もしくは表３４のＶＨＣＤＲ２のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＨＣＤＲ２、および／または表７、表３５、表９、表１０、もしくは表３４のＶＨＣＤＲ３のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域（ＶＨ）、ならびに／あるいは（ｉｉ）表８、表３６、表９、表１０、もしくは表３４の軽鎖相補性決定領域１（ＶＬＣＤＲ１）のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＬＣＤＲ１、表８、表３６、表９、表１０、もしくは表３４のＶＬＣＤＲ２のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＬＣＤＲ２、および／または表８、表３６、表９、表１０、もしくは表３４のＶＬＣＤＲ３のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む。
[0018]一部の実施形態では、第２の抗原結合性ドメインは、（ｉ）配列番号７３１３の重鎖相補性決定領域１（ＶＨＣＤＲ１）アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号６００１のＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列、および／または配列番号７３１５のＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；ならびに／あるいは（ｉｉ）配列番号７３２６の軽鎖相補性決定領域１（ＶＬＣＤＲ１）アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号７３２７のＶＬＣＤＲ２アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号７３２９のＶＬＣＤＲ３アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む。
[0019]一部の実施形態では、第２の抗原結合性ドメインは、（ｉ）配列番号７２９８もしくは７３００～７３０４のいずれかのアミノ酸配列（または配列番号７２９８もしくは７３００～７３０４のいずれかに対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨ；および／または（ｉｉ）配列番号７２９９もしくは７３０５～７３０９のいずれかのアミノ酸配列（または配列番号７２９９もしくは７３０５～７３０９のいずれかに対して少なくとも約９３％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬを含む。
[0020]一部の実施形態では、第２の抗原結合性ドメインは、（ｉ）配列番号７３０２のアミノ酸配列（または７３０２に対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨ、および配列番号７３０５のアミノ酸配列（または７３０５に対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬ；または（ｉｉ）配列番号７３０２のアミノ酸配列（または７３０２に対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨ、および配列番号７３０９のアミノ酸配列（または７３０９に対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬを含む。
[0021]一部の実施形態では、第２の抗原結合性ドメインは、（ｉ）配列番号７３１０のアミノ酸配列（または７３１０に対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）；または（ｉｉ）配列番号７３１１のアミノ酸配列（または７３１１に対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含む。
[0022]一部の実施形態では、第２の抗原結合性ドメインは、配列番号６０００の重鎖相補性決定領域１（ＶＨＣＤＲ１）アミノ酸配列、配列番号６００１のＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列、および／または配列番号６００２のＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）、ならびに（ｉｉ）配列番号６０６３の軽鎖相補性決定領域１（ＶＬＣＤＲ１）アミノ酸配列、配列番号６０６４のＶＬＣＤＲ２アミノ酸配列、および／または配列番号７２９３のＶＬＣＤＲ３アミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む。
[0023]一部の実施形態では、第２の抗原結合性ドメインは、（１）表７、表３５、表９、表１０、もしくは表３４の重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）のアミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＨＦＷＲ１、表７、表３５、表９、表１０、もしくは表３４のＶＨＦＷＲ２のアミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＨＦＷＲ２、表７、表３５、表９、表１０、もしくは表３４のＶＨＦＷＲ３のアミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＨＦＷＲ３、または表７、表３５、表９、表１０、もしくは表３４のＶＨＦＷＲ４のアミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＨＦＷＲ４を含む重鎖可変領域（ＶＨ）、および／あるいは（２）表８、表３６、表９、表１０、もしくは表３４の軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）のアミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＬＦＷＲ１、表８、表３６、表９、表１０、もしくは表３４のＶＬＦＷＲ２のアミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＬＦＷＲ２、表８、表３６、表９、表１０、もしくは表３４のＶＬＦＷＲ３のアミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＬＦＷＲ３、または表８、表３６、表９、表１０、もしくは表３４のＶＬＦＷＲ４のアミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＬＦＷＲ４を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む。
[0024]一部の実施形態では、第２の抗原結合性ドメインは、（１）配列番号６００３の重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６００４のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６００５のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列、または配列番号６００６のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）、および（３）配列番号６０６６の軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６０６７のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号７２９２のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列、または配列番号６０６９のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む。
[0025]一部の実施形態では、第２の抗原結合性ドメインは、
（ｉ）表７、表３５、表９、表１０、もしくは表３４のＶＨのアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨ、および／または
（ｉｉ）表８、表３６、表９、表１０、もしくは表３４のＶＬのアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約９３％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬ
を含む。
[0026]一部の実施形態では、第２の抗原結合性ドメインは、表１０の重鎖のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含む重鎖を含む。
[0027]一部の実施形態では、第２の抗原結合性ドメインは、表１０の軽鎖のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含む軽鎖を含む。
[0028]一部の実施形態では、第２の抗原結合性ドメインは、表１０の重鎖のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含む重鎖、および表１０の軽鎖のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含む軽鎖を含む。
[0029]一部の実施形態では、本明細書に記載される組成物は、
例えば、Ｎ末端からＣ末端まで、第１のＶＬおよび第１のＣＬを含む第１のポリペプチド、
例えば、Ｎ末端からＣ末端まで、第１のＶＨ、第１のＣＨ１、第１の二量体化ドメイン（例えば、第１のＦｃ）、およびＮＫｐ３０に結合する第１の部分（例えば、ＮＫｐ３０に結合する第１の抗体分子またはリガンド）を含む第２のポリペプチド、
例えば、Ｎ末端からＣ末端まで、第２のＶＨ、第２のＣＨ１、第２の二量体化ドメイン（例えば、第２のＦｃ）、および任意選択でＮＫｐ３０に結合する第２の部分（例えば、ＮＫｐ３０に結合する第２の抗体分子またはリガンド）を含む第３のポリペプチド、
例えば、Ｎ末端からＣ末端まで、第２のＶＬおよび第２のＣＬを含む第４のポリペプチド
を含み、
第１のＶＬおよび第１のＶＨは、第１のカルレティキュリンタンパク質に結合する第１の抗原結合性ドメインを形成し、第２のＶＬおよび第２のＶＨは第２のカルレティキュリンタンパク質に結合する第３の抗原結合性ドメインを形成し、
任意選択で、第１および第２のカルレティキュリンタンパク質は配列番号６２８５、Ｄ１００１、または６２８６のアミノ酸配列を含み、
任意選択で、第１および第２のカルレティキュリン突然変異体タンパク質は、配列番号６３１３のアミノ酸配列を含む分子、または配列番号６３１４のアミノ酸配列を含む分子からそれぞれ独立して選択され、
任意選択で、多機能性分子は図３Ａまたは３Ｂの構成を含む。
[0030]一部の実施形態では、カルレティキュリンタンパク質は配列番号６２８５～６３１２またはＤ１００１から選択されるアミノ酸配列を含み、任意選択で、カルレティキュリンタンパク質は配列番号６３１３～６３４６またはＤ１００２～Ｄ１００３から選択されるアミノ酸配列を含む。
[0031]一部の実施形態では、カルレティキュリンタンパク質は配列番号６２８５またはＤ１００１のアミノ酸配列を含む。
[0032]一部の実施形態では、カルレティキュリンタンパク質は配列番号６２８６のアミノ酸配列を含む。
[0033]一部の実施形態では、第１の抗原結合性ドメインはカルレティキュリンタンパク質のＣ末端内に位置するエピトープに結合し、任意選択で、第１の抗原結合性ドメインは配列番号６２８５、Ｄ１００１、または６２８６のアミノ酸配列内に位置するエピトープに結合する。
[0034]一部の実施形態では、本明細書に記載される組成物は、
第２のカルレティキュリンタンパク質に結合する第３の抗原結合性ドメインであって、例えば、第２のカルレティキュリン突然変異体タンパク質が配列番号６２８５、Ｄ１００１または６２８６のアミノ酸配列を含む、第３の抗原結合性ドメイン
をさらに含み、任意選択で、
（ｉ）第３の抗原結合性ドメインは第１の抗原結合性ドメインと異なるか、または
（ｉｉ）第３の抗原結合性ドメインは第１の抗原結合性ドメインと同じである。
[0035]一部の実施形態では、第２のカルレティキュリン分子は第１の抗原結合性ドメインによって結合されるカルレティキュリン分子と同じである。
[0036]一部の実施形態では、第２のカルレティキュリン分子は第１の抗原結合性ドメインによって結合されるカルレティキュリン分子と異なる。
[0037]一部の実施形態では、第２のカルレティキュリンタンパク質は配列番号６２８５～６３１２またはＤ１００１から選択されるアミノ酸配列を含み、任意選択で、第２のカルレティキュリンタンパク質は配列番号６３１３～６３４６またはＤ１００２～Ｄ１００３から選択されるアミノ酸配列を含む。
[0038]一部の実施形態では、第１の抗原結合性ドメインによって結合されるカルレティキュリンタンパク質は配列番号６２８５またはＤ１００１のアミノ酸配列を含み、第２のカルレティキュリンタンパク質は配列番号６２８６のアミノ酸配列を含む。
[0039]一部の実施形態では、第３の抗原結合性ドメインは第２のカルレティキュリンタンパク質のＣ末端内に位置するエピトープに結合し、任意選択で、第３の抗原結合性ドメインは配列番号６２８５、Ｄ１００１、または６２８６のアミノ酸配列内に位置するエピトープに結合する。
[0040]一部の実施形態では、第１の抗原結合性ドメインは、（ｉ）表４、表２４、表２５、もしくは表１７における重鎖相補性決定領域１（ＶＨＣＤＲ１）のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＨＣＤＲ１、表４、表２４、表２５、もしくは表１７におけるＶＨＣＤＲ２のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＨＣＤＲ２、および／または表４、表２４、表２５、もしくは表１７におけるＶＨＣＤＲ３のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；（ｉｉ）表５、表２４、表２５、もしくは表１８における軽鎖相補性決定領域１（ＶＬＣＤＲ１）のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＬＣＤＲ１、表５、表２４、表２５、もしくは表１８におけるＶＬＣＤＲ２のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＬＣＤＲ２、および／または表５、表２４、表２５、もしくは表１８におけるＶＬＣＤＲ３のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；（ｉｉｉ）表２４、表２５、もしくは表１６におけるＶＨのアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨ；（ｉｖ）表２４、表２５、もしくは表１６におけるＶＬのアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約９３％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬ；（ｖ）表４もしくは表６における重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、もしくは９つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＨＦＷＲ１、表４もしくは表６におけるＶＨＦＷＲ２のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、もしくは９つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＨＦＷＲ２、表４もしくは表６におけるＶＨＦＷＲ３のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、もしくは９つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＨＦＷＲ３、および／または表４もしくは表６におけるＶＨＦＷＲ４のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、もしくは９つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＨＦＷＲ４を含むＶＨ、ならびに／あるいは（ｖｉ）表５もしくは表６における軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、もしくは９つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＬＦＷＲ１、表５もしくは表６におけるＶＬＦＷＲ２のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、もしくは９つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＬＦＷＲ２、表５もしくは表６におけるＶＬＦＷＲ３のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、もしくは９つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＬＦＷＲ３、および／または表５もしくは表６におけるＶＬＦＷＲ４のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、もしくは９つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＬＦＷＲ４を含むＶＬを含む。
[0041]一部の実施形態では、多機能性分子は腫瘍標的化部分をさらに含む。
[0042]一部の実施形態では、腫瘍標的化部分は腫瘍抗原に結合する。
[0043]一部の実施形態では、腫瘍抗原は、Ｇ６Ｂ、ＣＤ３４、ＣＤ４１、Ｐ－セレクチン、Ｃｌｅｃ２、ｃＫＩＴ、ＦＬＴ３、ＭＰＬ、ＩＴＧＢ３、ＩＴＧＢ２、ＧＰ５、ＧＰ６、ＧＰ９、ＧＰ１ＢＡ、ＤＳＣ２、ＦＣＧＲ２Ａ、ＴＮＦＲＳＦ１０Ａ、ＴＮＦＲＳＦ１０Ｂ、またはＴＭ４ＳＦ１から選択される。
[0044]一部の実施形態では、腫瘍標的化部分は、例えば、Ｇ６Ｂ、ＣＤ３４、ＣＤ４１、Ｐ－セレクチン、Ｃｌｅｃ２、ｃＫＩＴ、ＦＬＴ３、ＭＰＬ、ＩＴＧＢ３、ＩＴＧＢ２、ＧＰ５、ＧＰ６、ＧＰ９、ＧＰ１ＢＡ、ＤＳＣ２、ＦＣＧＲ２Ａ、ＴＮＦＲＳＦ１０Ａ、ＴＮＦＲＳＦ１０Ｂ、またはＴＭ４ＳＦ１から選択される腫瘍抗原に結合する抗体分子を含む。
[0045]一部の実施形態では、腫瘍標的化部分は、例えば、表３８または表２０に列挙されるＶＨおよび／またはＶＬ配列を含む。
[0046]一部の実施形態では、多機能性分子は、非腫瘍細胞よりも骨髄増殖性新生物細胞に優先的に結合し、任意選択で、多機能性分子と骨髄増殖性新生物細胞との結合は、多機能性分子と非腫瘍細胞との結合よりも１０、２０、３０、４０、５０倍を超えて大きい。
[0047]一部の実施形態では、骨髄増殖性新生物細胞は、骨髄線維症細胞、本態性血小板血症細胞、真性赤血球増加症細胞、または慢性骨髄がん細胞から選択され、任意選択で、骨髄増殖性新生物細胞はＪＡＫ２ Ｖ６１７Ｆ突然変異を含まないか、または骨髄増殖性新生物細胞はＭＰＬ突然変異を含まない。
[0048]一部の実施形態では、本明細書に記載の組成物は、リンカー、例えば、第１の抗原結合性ドメインと第２の抗原結合性ドメインとの間のリンカーをさらに含む。
[0049]一部の実施形態では、リンカーは、切断性リンカー、非切断性リンカー、ペプチドリンカー、可撓性リンカー、剛性リンカー、ヘリックスリンカー、または非ヘリックスリンカーから選択される。
[0050]一部の実施形態では、リンカーはペプチドリンカーである。
[0051]一部の実施形態では、ペプチドリンカーはＧｌｙおよびＳｅｒを含む。
[0052]一部の実施形態では、ペプチドリンカーは、配列番号６２１４～６２１７、または６２２０～６２２１および７７～７８から選択されるアミノ酸配列を含む。
[0053]別の態様では、（ｉ）カルレティキュリンタンパク質（例えば、野生型もしくは突然変異体カルレティキュリンタンパク質）に結合する第１の抗原結合性ドメイン、例えば、表４、表５、表６、表２４、表２５、表１６、表１７、表１８、もしくは表１９のいずれか１つに開示されるカルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインと、（ｉｉ）ＴＣＲβＶに結合する第２の抗原結合性ドメイン、例えば、表３０、表３１、表３２、表１０、表１１、表１２、もしくは表１３のいずれか１つに開示される抗ＴＣＲβＶ抗原結合性ドメイン、またはＮＫｐ３０に結合する第２の抗原結合性ドメイン、例えば、表７、表８、表３５、表３６、表９、表１０、もしくは表３４に開示される抗ＮＫｐ３０抗原結合性ドメインとを含む多機能性分子が、本明細書に開示される。
[0054]一部の実施形態では、第２の抗原結合性ドメインは、ＴＣＲβＶに結合する。
[0055]一部の実施形態では、第２の抗原結合性ドメインはＴ細胞を活性化するか、または第２の抗原結合性ドメインはＴ細胞を活性化しない。
[0056]一部の実施形態では、第２の抗原結合性ドメインは、ＴＣＲβＶ１２またはＴＣＲβＶ６（例えば、配列番号１０４４のアミノ酸配列を含む）に結合する。
[0057]一部の実施形態では、第２の抗原結合性ドメインは、表３０、表３１、表３２、表１０、表１１、表１２、または表１３に列挙される１つまたは複数のアミノ酸配列を含む。
[0058]一部の実施形態では、第２の抗原結合性ドメインは、
（ａ）重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）であって、
（ｉ）ＶＨが、表３０、表３１、表１０、表１１、表１２、もしくは表１３における重鎖相補性決定領域１（ＶＨＣＤＲ１）のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＨＣＤＲ１、表３０、表３１、表１０、表１１、表１２、もしくは表１３におけるＶＨＣＤＲ２のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＨＣＤＲ２、および／または表３０、表３１、表１０、表１１、表１２、もしくは表１３におけるＶＨＣＤＲ３のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＨＣＤＲ３を含み、
（ｉｉ）ＶＬが、表３０、表３１、表１０、表１１、表１２、もしくは表１３における軽鎖相補性決定領域１（ＶＬＣＤＲ１）のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＬＣＤＲ１、表３０、表３１、表１０、表１１、表１２、もしくは表１３におけるＶＬＣＤＲ２のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＬＣＤＲ２、および／または表３０、表３１、表１０、表１１、表１２、もしくは表１３におけるＶＬＣＤＲ３のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＬＣＤＲ３を含む、重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）；
（ｂ）重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）であって、
（ｉ）ＶＨが、配列番号３Ａの重鎖相補性決定領域１（ＶＨＣＤＲ１）アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号４ＡのＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号５ＡのＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を含み、かつ／または
（ｉｉ）ＶＬが、配列番号６Ａの軽鎖相補性決定領域１（ＶＬＣＤＲ１）アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号７ＡのＶＬＣＤＲ２アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号８ＡのＶＬＣＤＲ３アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を含む、重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）；
（ｃ）重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）であって、
（ｉ）ＶＨが、配列番号４５Ａの重鎖相補性決定領域１（ＶＨＣＤＲ１）アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号４６ＡのＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号４７ＡのＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を含み、かつ／または
（ｉｉ）ＶＬが、配列番号５１Ａの軽鎖相補性決定領域１（ＶＬＣＤＲ１）アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号５２ＡのＶＬＣＤＲ２アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号５３ＡのＶＬＣＤＲ３アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を含む、重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）；ならびに／あるいは
（ｄ）重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）であって、
（ｉ）ＶＨが、配列番号４８Ａの重鎖相補性決定領域１（ＶＨＣＤＲ１）アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号４９ＡのＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号５０ＡのＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を含み、かつ／または
（ｉｉ）ＶＬが、配列番号５４Ａの軽鎖相補性決定領域１（ＶＬＣＤＲ１）アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号５５ＡのＶＬＣＤＲ２アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号５６ＡのＶＬＣＤＲ３アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を含む、重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）
を含む。
[0059]一部の実施形態では、第２の抗原結合性ドメインは、
（ａ）重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）であって、
（ｉ）ＶＨが、表３０、表３１、表１０、表１１、表１２、もしくは表１３におけるＶＨのアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含み、かつ／または
（ｉｉ）ＶＬが、表３０、表３１、表１０、表１１、表１２、もしくは表１３におけるＶＬのアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含み、
（ｉｉｉ）ＶＨが、配列番号９Ａのアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含み、かつ／または
（ｉｖ）ＶＬが、配列番号１０Ａのアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含む、重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）；
（ｂ）重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）であって、
（ｉ）ＶＨが、配列番号９Ａのアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含み、かつ／または
（ｉｉ）ＶＬが、配列番号１１Ａのアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含む、重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）；ならびに／あるいは
（ｃ）重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）であって、
（ｉ）ＶＨが、配列番号１３１２Ａのアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含み、かつ／または
（ｉｉ）ＶＬが、配列番号１３１４Ａのアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含む、重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）
を含む。
[0060]一部の実施形態では、第２の抗原結合性ドメインは、
（ａ）重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）であって、
（ｉ）ＶＨが、配列番号１７Ａの重鎖相補性決定領域１（ＶＨＣＤＲ１）アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号１８ＡのＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号１９ＡのＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を含み、かつ／または
（ｉｉ）ＶＬが、配列番号２０Ａの軽鎖相補性決定領域１（ＶＬＣＤＲ１）アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号２１ＡのＶＬＣＤＲ２アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号２２ＡのＶＬＣＤＲ３アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を含む、重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）；
（ｂ）重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）であって、
（ｉ）ＶＨが、配列番号５７Ａの重鎖相補性決定領域１（ＶＨＣＤＲ１）アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号５８ＡのＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号５９ＡのＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を含み、かつ／または
（ｉｉ）ＶＬが、配列番号６３Ａの軽鎖相補性決定領域１（ＶＬＣＤＲ１）アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号６４ＡのＶＬＣＤＲ２アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号６５ＡのＶＬＣＤＲ３アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を含む、重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）；ならびに／あるいは
（ｃ）重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）であって、
（ｉ）ＶＨが、配列番号６０Ａの重鎖相補性決定領域１（ＶＨＣＤＲ１）アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号６１ＡのＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号６２ＡのＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を含み、かつ／または
（ｉｉ）ＶＬが、配列番号６６Ａの軽鎖相補性決定領域１（ＶＬＣＤＲ１）アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号６７ＡのＶＬＣＤＲ２アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号６８ＡのＶＬＣＤＲ３アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を含む、重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）
を含む。
[0061]一部の実施形態では、第２の抗原結合性ドメインは、
（ａ）重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）であって、
（ｉ）ＶＨが、配列番号１５Ａのアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含み、かつ／または
（ｉｉ）ＶＬが、配列番号１６Ａのアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含む、重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）；ならびに／あるいは
（ｂ）重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）であって、
（ｉ）ＶＨが、
配列番号２３Ａのアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）、
配列番号２４Ａのアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）、または
配列番号２５Ａのアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含み；かつ／または
（ｉｉ）ＶＬが、
配列番号２６Ａのアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）、
配列番号２７Ａのアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）、
配列番号２８Ａのアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）、
配列番号２９Ａのアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）、または
配列番号３０Ａのアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含む、重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）
を含む。
[0062]一部の実施形態では、本明細書に記載される多機能性分子は、
例えば、Ｎ末端からＣ末端まで、第１のＶＬおよび第１のＣＬを含む第１のポリペプチド、
例えば、Ｎ末端からＣ末端まで、第１のＶＨ、第１のＣＨ１、第１の二量体化ドメイン（例えば、第１のＦｃ）、およびＴＣＲ（例えば、ＴＣＲＶβ）に結合する第１の部分（例えば、ＴＣＲ（例えば、ＴＣＲＶβ）に結合する第１のｓｃＦｖ）を含む第２のポリペプチド、
例えば、Ｎ末端からＣ末端まで、第２のＶＨ、第２のＣＨ１、第２の二量体化ドメイン（例えば、第２のＦｃ）、および任意選択でＴＣＲ（例えば、ＴＣＲＶβ）に結合する第２の部分（例えば、ＴＣＲ（例えば、ＴＣＲＶβ）に結合する第２のｓｃＦｖ）を含む第３のポリペプチド、
例えば、Ｎ末端からＣ末端まで、第２のＶＬおよび第２のＣＬを含む第４のポリペプチド
を含み、
第１のＶＬおよび第１のＶＨは第１のカルレティキュリンタンパク質に結合する第１の抗原結合性ドメインを形成し、第２のＶＬおよび第２のＶＨは第２のカルレティキュリンタンパク質に結合する第３の抗原結合性ドメインを形成し、
任意選択で、第１および第２のカルレティキュリンタンパク質は配列番号６２８５、Ｄ１００１、または６２８６のアミノ酸配列を含み、
任意選択で、第１および第２のカルレティキュリン突然変異体タンパク質は、配列番号６３１３のアミノ酸配列を含む分子、または配列番号６３１４のアミノ酸配列を含む分子からそれぞれ独立して選択され、
任意選択で、多機能性分子は図３Ａまたは３Ｂの構成を含む。
[0063]一部の実施形態では、第２の抗原結合性ドメインはＮＫｐ３０に結合する。
[0064]一部の実施形態では、第２の抗原結合性ドメインは、ＮＫｐ３０に結合する（例えば、それを活性化させる）抗体分子、例えば抗原結合性ドメイン、またはリガンドから選択され、例えば、第２の抗原結合性ドメインが、ＮＫｐ３０に結合する（例えば、それを活性化させる）抗体分子またはリガンドである。
[0065]一部の実施形態では、第２の抗原結合性ドメインは、
表７、表３５、表９、表１０、もしくは表３４の重鎖相補性決定領域１（ＶＨＣＤＲ１）のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＨＣＤＲ１、表７、表３５、表９、表１０、もしくは表３４のＶＨＣＤＲ２のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＨＣＤＲ２、および／または表７、表３５、表９、表１０、もしくは表３４のＶＨＣＤＲ３のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域（ＶＨ）、ならびに／あるいは
（ｉｉ）表８、表３６、表９、表１０、もしくは表３４の軽鎖相補性決定領域１（ＶＬＣＤＲ１）のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＬＣＤＲ１、表８、表３６、表９、表１０、もしくは表３４のＶＬＣＤＲ２のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＬＣＤＲ２、および／または表８、表３６、表９、表１０、もしくは表３４のＶＬＣＤＲ３のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）
を含む。
[0066]一部の実施形態では、第２の抗原結合性ドメインは、
（ｉ）配列番号７３１３の重鎖相補性決定領域１（ＶＨＣＤＲ１）アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号６００１のＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号７３１５のＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；ならびに／あるいは
（ｉｉ）配列番号７３２６の軽鎖相補性決定領域１（ＶＬＣＤＲ１）アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号７３２７のＶＬＣＤＲ２アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号７３２９のＶＬＣＤＲ３アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）
を含む。
[0067]一部の実施形態では、第２の抗原結合性ドメインは、
（ｉ）配列番号７２９８もしくは７３００～７３０４のいずれかのアミノ酸配列（または配列番号７２９８もしくは７３００～７３０４のいずれかに対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨ；および／または
（ｉｉ）配列番号７２９９もしくは７３０５～７３０９のいずれかのアミノ酸配列（または配列番号７２９９もしくは７３０５～７３０９のいずれかに対して少なくとも約９３％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬ
を含む。
[0068]一部の実施形態では、第２の抗原結合性ドメインは、
（ｉ）配列番号７３０２のアミノ酸配列（または７３０２に対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨ、および配列番号７３０５のアミノ酸配列（または７３０５に対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬ；または
（ｉｉ）配列番号７３０２のアミノ酸配列（または７３０２に対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨ、および配列番号７３０９のアミノ酸配列（または７３０９に対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬ
を含む。
[0069]一部の実施形態では、第２の抗原結合性ドメインは、
（ｉ）配列番号７３１０のアミノ酸配列（または７３１０に対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）；または
（ｉｉ）配列番号７３１１のアミノ酸配列（または７３１１に対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）
を含む。
[0070]一部の実施形態では、第２の抗原結合性ドメインは、
（ｉ）配列番号６０００の重鎖相補性決定領域１（ＶＨＣＤＲ１）アミノ酸配列、配列番号６００１のＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列、および／または配列番号６００２のＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）、ならびに
（ｉｉ）配列番号６０６３の軽鎖相補性決定領域１（ＶＬＣＤＲ１）アミノ酸配列、配列番号６０６４のＶＬＣＤＲ２アミノ酸配列、および／または配列番号７２９３のＶＬＣＤＲ３アミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）
を含む。
[0071]一部の実施形態では、第２の抗原結合性ドメインは、
（１）表７、表３５、表９、表１０、もしくは表３４の重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）のアミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＨＦＷＲ１、表７、表３５、表９、表１０、もしくは表３４のＶＨＦＷＲ２のアミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＨＦＷＲ２、表７、表３５、表９、表１０、もしくは表３４のＶＨＦＷＲ３のアミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＨＦＷＲ３、または表７、表３５、表９、表１０、もしくは表３４のＶＨＦＷＲ４のアミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＨＦＷＲ４を含む重鎖可変領域（ＶＨ）、および／あるいは
（２）表８、表３６、表９、表１０、もしくは表３４の軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）のアミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＬＦＷＲ１、表８、表３６、表９、表１０、もしくは表３４のＶＬＦＷＲ２のアミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＬＦＷＲ２、表８、表３６、表９、表１０、もしくは表３４のＶＬＦＷＲ３のアミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＬＦＷＲ３、または表８、表３６、表９、表１０、もしくは表３４のＶＬＦＷＲ４のアミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＬＦＷＲ４を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）
を含む。
[0072]一部の実施形態では、第２の抗原結合性ドメインは、
（１）配列番号６００３の重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６００４のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６００５のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列、または配列番号６００６のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）、および
（３）配列番号６０６６の軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６０６７のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号７２９２のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列、または配列番号６０６９のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）
を含む。
[0073]一部の実施形態では、第２の抗原結合性ドメインは、
（ｉ）表７、表３５、表９、表１０、もしくは表３４のＶＨのアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨ、および／または
（ｉｉ）表８、表３６、表９、表１０、もしくは表３４のＶＬのアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約９３％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬ
を含む。
[0074]一部の実施形態では、第２の抗原結合性ドメインは、表１０の重鎖のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含む重鎖を含む。
[0075]一部の実施形態では、第２の抗原結合性ドメインは、表１０の軽鎖のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含む軽鎖を含む。
[0076]一部の実施形態では、第２の抗原結合性ドメインは、表１０の重鎖のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含む重鎖、および表１０の軽鎖のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含む軽鎖を含む。
[0077]一部の実施形態では、本明細書に記載される多機能性分子は、
例えば、Ｎ末端からＣ末端まで、第１のＶＬおよび第１のＣＬを含む第１のポリペプチド、
例えば、Ｎ末端からＣ末端まで、第１のＶＨ、第１のＣＨ１、第１の二量体化ドメイン（例えば、第１のＦｃ）、およびＮＫｐ３０に結合する第１の部分（例えば、ＮＫｐ３０に結合する第１の抗体分子またはリガンド）を含む第２のポリペプチド、
例えば、Ｎ末端からＣ末端まで、第２のＶＨ、第２のＣＨ１、第２の二量体化ドメイン（例えば、第２のＦｃ）、および任意選択でＮＫｐ３０に結合する第２の部分（例えば、ＮＫｐ３０に結合する第２の抗体分子またはリガンド）を含む第３のポリペプチド、
例えば、Ｎ末端からＣ末端まで、第２のＶＬおよび第２のＣＬを含む第４のポリペプチド
を含み、
第１のＶＬおよび第１のＶＨは、第１のカルレティキュリンタンパク質に結合する第１の抗原結合性ドメインを形成し、第２のＶＬおよび第２のＶＨは第２のカルレティキュリンタンパク質に結合する第３の抗原結合性ドメインを形成し、
任意選択で、第１および第２のカルレティキュリンタンパク質は配列番号６２８５、Ｄ１００１、または６２８６のアミノ酸配列を含み、
任意選択で、第１および第２のカルレティキュリン突然変異体タンパク質は、配列番号６３１３のアミノ酸配列を含む分子、または配列番号６３１４のアミノ酸配列を含む分子からそれぞれ独立して選択され、
任意選択で、多機能性分子は図３Ａまたは３Ｂの構成を含む。
[0078]一部の実施形態では、カルレティキュリンタンパク質は、配列番号６２８５～６３１２またはＤ１００１から選択されるアミノ酸配列を含み、任意選択で、カルレティキュリンタンパク質は、配列番号６３１３～６３４６またはＤ１００２～Ｄ１００３から選択されるアミノ酸配列を含む。
[0079]一部の実施形態では、カルレティキュリンタンパク質は、配列番号６２８５またはＤ１００１のアミノ酸配列を含む。
[0080]一部の実施形態では、カルレティキュリンタンパク質は、配列番号６２８６のアミノ酸配列を含む。
[0081]一部の実施形態では、第１の抗原結合性ドメインは、カルレティキュリンタンパク質のＣ末端内に位置するエピトープに結合し、任意選択で、第１の抗原結合性ドメインが、配列番号６２８５、Ｄ１００１、または６２８６のアミノ酸配列内に位置するエピトープに結合する。
[0082]一部の実施形態では、本明細書に記載の多機能性分子は、第２のカルレティキュリンタンパク質に結合する第３の抗原結合性ドメインをさらに含み、例えば、第２のカルレティキュリン突然変異体タンパク質は、配列番号６２８５、Ｄ１００１、または６２８６のアミノ酸配列を含み、任意選択で、（ｉ）第３の抗原結合性ドメインは、第１の抗原結合性ドメインと異なるか、または（ｉｉ）第３の抗原結合性ドメインは、第１の抗原結合性ドメインと同じである。
[0083]一部の実施形態では、第２のカルレティキュリン分子は、第１の抗原結合性ドメインによって結合されるカルレティキュリン分子と同じである。
[0084]一部の実施形態では、第２のカルレティキュリン分子は、第１の抗原結合性ドメインによって結合されるカルレティキュリン分子と異なる。
[0085]一部の実施形態では、第２のカルレティキュリンタンパク質は、配列番号６２８５～６３１２またはＤ１００１から選択されるアミノ酸配列を含み、任意選択で、第２のカルレティキュリンタンパク質は、配列番号６３１３～６３４６またはＤ１００２～Ｄ１００３から選択されるアミノ酸配列を含む。
[0086]一部の実施形態では、第１の抗原結合性ドメインによって結合されるカルレティキュリンタンパク質は、配列番号６２８５またはＤ１００１のアミノ酸配列を含み、第２のカルレティキュリンタンパク質は、配列番号６２８６のアミノ酸配列を含む。
[0087]一部の実施形態では、第３の抗原結合性ドメインは、第２のカルレティキュリンタンパク質のＣ末端内に位置するエピトープに結合し、任意選択で、第３の抗原結合性ドメインは、配列番号６２８５、Ｄ１００１、または６２８６のアミノ酸配列内に位置するエピトープに結合する。
[0088]一部の実施形態では、第１の抗原結合性ドメインは、（ｉ）表４、表２４、表２５、もしくは表１７における重鎖相補性決定領域１（ＶＨＣＤＲ１）のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＨＣＤＲ１、表４、表２４、表２５、もしくは表１７におけるＶＨＣＤＲ２のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＨＣＤＲ２、および／または表４、表２４、表２５、もしくは表１７におけるＶＨＣＤＲ３のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；（ｉｉ）表５、表２４、表２５、もしくは表１８における軽鎖相補性決定領域１（ＶＬＣＤＲ１）のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＬＣＤＲ１、表５、表２４、表２５、もしくは表１８におけるＶＬＣＤＲ２のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＬＣＤＲ２、および／または表５、表２４、表２５、もしくは表１８におけるＶＬＣＤＲ３のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；（ｉｉｉ）表２４、表２５、もしくは表１６におけるＶＨのアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨ；（ｉｖ）表２４、表２５、もしくは表１６におけるＶＬのアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約９３％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬ；（ｖ）表４もしくは表６における重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、もしくは９つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＨＦＷＲ１、表４もしくは表６におけるＶＨＦＷＲ２のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、もしくは９つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＨＦＷＲ２、表４もしくは表６におけるＶＨＦＷＲ３のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、もしくは９つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＨＦＷＲ３、および／または表４もしくは表６におけるＶＨＦＷＲ４のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、もしくは９つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＨＦＷＲ４を含むＶＨ、ならびに／あるいは（ｖｉ）表５もしくは表６における軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、もしくは９つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＬＦＷＲ１、表５もしくは表６におけるＶＬＦＷＲ２のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、もしくは９つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＬＦＷＲ２、表５もしくは表６におけるＶＬＦＷＲ３のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、もしくは９つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＬＦＷＲ３、および／または表５もしくは表６におけるＶＬＦＷＲ４のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、もしくは９つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＬＦＷＲ４を含むＶＬを含む。
[0089]一部の実施形態では、多機能性分子は、腫瘍標的化部分をさらに含む。
[0090]一部の実施形態では、腫瘍標的化部分は、腫瘍抗原に結合する。
[0091]一部の実施形態では、腫瘍抗原は、Ｇ６Ｂ、ＣＤ３４、ＣＤ４１、Ｐ－セレクチン、Ｃｌｅｃ２、ｃＫＩＴ、ＦＬＴ３、ＭＰＬ、ＩＴＧＢ３、ＩＴＧＢ２、ＧＰ５、ＧＰ６、ＧＰ９、ＧＰ１ＢＡ、ＤＳＣ２、ＦＣＧＲ２Ａ、ＴＮＦＲＳＦ１０Ａ、ＴＮＦＲＳＦ１０Ｂ、またはＴＭ４ＳＦ１から選択される。
[0092]一部の実施形態では、腫瘍標的化部分は、例えば、Ｇ６Ｂ、ＣＤ３４、ＣＤ４１、Ｐ－セレクチン、Ｃｌｅｃ２、ｃＫＩＴ、ＦＬＴ３、ＭＰＬ、ＩＴＧＢ３、ＩＴＧＢ２、ＧＰ５、ＧＰ６、ＧＰ９、ＧＰ１ＢＡ、ＤＳＣ２、ＦＣＧＲ２Ａ、ＴＮＦＲＳＦ１０Ａ、ＴＮＦＲＳＦ１０Ｂ、またはＴＭ４ＳＦ１から選択される腫瘍抗原に結合する抗体分子を含む。
[0093]一部の実施形態では、腫瘍標的化部分は、例えば、表３８または表２０に列挙されるＶＨおよび／またはＶＬ配列を含む。
[0094]一部の実施形態では、多機能性分子は、非腫瘍細胞よりも骨髄増殖性新生物細胞に優先的に結合し、任意選択で、多機能性分子と骨髄増殖性新生物細胞との結合は、多機能性分子と非腫瘍細胞との結合よりも１０、２０、３０、４０、５０倍を超えて大きい。
[0095]一部の実施形態では、骨髄増殖性新生物細胞は、骨髄線維症細胞、本態性血小板血症細胞、真性赤血球増加症細胞、または慢性骨髄がん細胞から選択され、任意選択で、
骨髄増殖性新生物細胞はＪＡＫ２ Ｖ６１７Ｆ突然変異を含まないか、または
骨髄増殖性新生物細胞はＭＰＬ突然変異を含まない。
[0096]一部の実施形態では、本明細書に記載の多機能性分子は、リンカー、例えば、第１の抗原結合性ドメインと第２の抗原結合性ドメインとの間のリンカーをさらに含む。
[0097]一部の実施形態では、リンカーは、切断性リンカー、非切断性リンカー、ペプチドリンカー、可撓性リンカー、剛性リンカー、ヘリックスリンカー、または非ヘリックスリンカーから選択される。
[0098]一部の実施形態では、リンカーは、ペプチドリンカーである。
[0099]一部の実施形態では、ペプチドリンカーは、ＧｌｙおよびＳｅｒを含む。
[00100]一部の実施形態では、ペプチドリンカーは、配列番号６２１４～６２１７または６２２０～６２２１および７７～７８から選択されるアミノ酸配列を含む。
[00101]別の態様では、本明細書に記載の多機能性分子をコードする核酸分子が本明細書に提供される。
[00102]別の態様では、本明細書に記載の核酸分子を含む、ベクター、例えば、発現ベクターが本明細書に提供される。
[00103]別の態様では、本明細書に記載の核酸分子または本明細書に記載のベクターを含む細胞が本明細書に提供される。
[00104]別の態様では、本明細書に記載される多機能性分子を作製する、例えば、産生する方法であって、適切な条件、例えば、遺伝子発現および／またはホモもしくはヘテロ二量体化に適した条件下で、本明細書に記載される細胞を培養するステップを含む、方法が本明細書に提供される。
[00105]別の態様では、本明細書に記載の組成物、本明細書に記載の多機能性分子、本明細書に記載の核酸分子、本明細書に記載のベクター、または本明細書に記載の細胞と、薬学的に許容される担体、賦形剤、希釈剤、または安定化剤とを含む医薬組成物が本明細書に提供される。
[00106]別の態様では、がんを処置する方法であって、それを必要とする対象に、本明細書に記載の組成物、本明細書に記載の多機能性分子、本明細書に記載の核酸分子、本明細書に記載のベクター、本明細書に記載の細胞、または本明細書に記載の医薬組成物を投与するステップを含み、多機能性分子ががんを処置するのに有効な量で投与される、方法が本明細書に提供される。
[00107]別の態様では、がんを処置するための医薬の製造のための、本明細書に記載の組成物、本明細書に記載の多機能性分子、本明細書に記載の核酸分子、本明細書に記載のベクター、または本明細書に記載の細胞の使用が本明細書に提供される。
[00108]一部の実施形態では、対象は、第１および／または第２のカルレティキュリンタンパク質を発現するがん細胞を有する。
[00109]一部の実施形態では、対象は、ＪＡＫ２ Ｖ６１７Ｆ突然変異を有する。
[00110]一部の実施形態では、対象は、ＪＡＫ２ Ｖ６１７Ｆ突然変異を有しない。
[00111]一部の実施形態では、対象は、ＭＰＬ突然変異を有する。
[00112]一部の実施形態では、対象は、ＭＰＬ突然変異を有しない。
[00113]一部の実施形態では、がんは血液がんであり、任意選択で、がんは、骨髄増殖性新生物、例えば、原発性もしくは特発性骨髄線維症（ＭＦ）、本態性血小板増加症（ＥＴ）、真性赤血球増加症（ＰＶ）、または慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）であり、任意選択で、がんは骨髄線維症である。
[00114]一部の実施形態では、がんは、固形腫瘍がんである。
[00115]一部の実施形態では、本明細書に記載の方法または本明細書に記載の使用は、第２の治療処置を施すステップをさらに含む。
[00116]一部の実施形態では、第２の治療処置は、治療剤（例えば、化学療法剤、生物学的製剤、ホルモン療法）、放射線、または外科手術を含む。
[00117]一部の実施形態では、治療剤は、化学療法剤、または生物学的製剤から選択される。
[00118]別の態様では、試料または対象中のカルレティキュリン（例えば、野生型および／または突然変異体カルレティキュリン）を検出する方法であって、試料または対象を、本明細書に記載の抗カルレティキュリン（例えば、野生型および／または突然変異体カルレティキュリン）抗体分子と接触させるステップ；ならびに抗体分子と試料または対象との複合体の形成を検出するステップを含み、それによってカルレティキュリン（例えば、野生型および／または突然変異体カルレティキュリン）を検出する、方法が本明細書に提供される。
[00119]一部の実施形態では、カルレティキュリン（例えば、野生型および／または突然変異体カルレティキュリン）は、ｉｎ ｖｉｔｒｏまたはｉｎ ｖｉｖｏで検出される。
[00120]一部の実施形態では、本明細書に記載の方法は、参照試料または対象を、抗体分子と接触させるステップ；および抗体分子と参照試料または対象との複合体の形成を検出するステップをさらに含み、参照試料または対象と比較した、試料または対象における複合体の形成における変化、例えば統計学的に有意な変化は、試料または対象におけるカルレティキュリン（例えば、野生型および／または突然変異体カルレティキュリン）の存在を示す。
[00121]一部の実施形態では、本明細書に記載の方法は、対象から試料を取得するステップをさらに含む。
[00122]一部の実施形態では、試料は、血漿、組織（例えば、がん性組織）、生検、血液（例えば、全血）、ＰＢＭＣ、骨髄、および／またはリンパ組織、例えばリンパ節のうちの１つまたは複数を含む。
[00123]一部の実施形態では、試料は、凍結および／または固定されていない。
[00124]一部の実施形態では、試料は、凍結（例えば、瞬間凍結）および／または固定（例えば、ホルマリン固定パラフィン包埋（ＦＦＰＥ））されている。
[00125]一部の実施形態では、対象は、本明細書に記載の疾患または障害（例えば、がん、例えば、骨髄線維症）を有する、または有するリスクがある。
[00126]一部の実施形態では、本明細書に記載の方法は、例えば、マルチパネル法を使用するフロー分析を実施するステップをさらに含む。
[00127]一部の実施形態では、本明細書に記載の方法は、Ｔ細胞クローン性を評価して、例えば、Ｔ細胞悪性腫瘍の存在および／またはレベルを決定するステップをさらに含む。
[00128]一部の実施形態では、本明細書に記載の方法は、生体試料からのカルレティキュリン＋（例えば、野生型カルレティキュリン＋および／または突然変異体カルレティキュリン＋）細胞のレベルを測定するステップ（例えば、カルレティキュリン＋細胞が、例えば、参照試料または対象と比較して枯渇しているかどうかを決定するステップ）をさらに含む。
[00129]一部の実施形態では、本明細書に記載の方法は、カルレティキュリン（例えば、野生型および／または突然変異体カルレティキュリン）の細胞内レベルを測定するステップをさらに含む。
[00130]一部の実施形態では、本明細書に記載の方法は、カルレティキュリン（例えば、野生型および／または突然変異体カルレティキュリン）の膜レベルを測定するステップをさらに含む。
[00131]一部の実施形態では、本明細書に記載の方法は、例えば、（例えば、本明細書に記載の抗体分子を用いた）処置後に、疾患または障害（例えば、がん、例えば、骨髄線維症）の予後、重症度、または存在もしくは非存在の変化について対象を評価するステップをさらに含む。
[00132]一部の実施形態では、抗体分子は、検出可能に標識される。
[00133]別の態様では、対象を評価する方法であって、対象からの試料（例えば、本明細書に記載の試料）を、本明細書に記載の抗カルレティキュリン（例えば、野生型および／または突然変異体カルレティキュリン）抗体分子と接触させるステップ；ならびに抗体分子と試料との複合体の形成を検出するステップを含み、それによって対象を評価する、方法が本明細書に提供される。
[00134]一部の実施形態では、対象は、本明細書に記載の疾患または障害（例えば、がん、例えば、骨髄線維症）を有する、または有するリスクがある。
[00135]一部の実施形態では、対象は、本明細書に記載の抗体分子で処置されていない。
[00136]一部の実施形態では、対象は、本明細書に記載の抗体分子で処置されている。
[00137]別の態様では、本明細書に記載の抗カルレティキュリン（例えば、野生型および／または突然変異体カルレティキュリン）抗体分子と、試料または対象におけるカルレティキュリン（例えば、野生型および／または突然変異体カルレティキュリン）を検出する方法における使用のための使用説明書とを含むキットが本明細書に提供される。
[00138]当業者は、本明細書に記載される本発明の具体的な実施形態に対する多くの均等物を、単に日常的な実験を用いて認識するか、または確認することができる。このような均等物は、以下の実施形態に包含されることが意図される。
[00139]別途定義されない限り、本明細書において使用されるすべての技術用語および科学用語は、本発明が属する技術分野の当業者によって広く理解されているものと同じ意味を有する。本明細書に記載されるものに類似またはそれと同等の方法および材料を、本発明の実施または試験において使用することができるが、好適な方法および材料が、以下に記載されている。本明細書に記載されるすべての刊行物、特許出願、特許、および他の参考文献は、参照によりその全体が組み込まれる。矛盾が生じた場合には、定義を含め、本明細書が優先される。加えて、材料、方法、および実施例は、例示に過ぎず、限定することを意図するものではない。
[00140]本発明の他の特性および利点は、以下の詳細な説明および特許請求の範囲から明らかであろう。
[00141]特許または出願ファイルは、カラーを付して作成された少なくとも１つの図面を含む。カラー図面（複数可）を含むこの特許または特許出願公開の写しは、請求および必要な手数料の納付があった場合に特許庁によって提供される。
[00142]図１Ａ～１Ｂは、抗体Ａ供給源のマウスＶＨおよびＶＬフレームワーク１、ＣＤＲ１、フレームワーク２、ＣＤＲ２、フレームワーク３、ＣＤＲ３、およびフレームワーク４領域の、それらのそれぞれのヒト化配列とのアラインメントを示す図である。Ｋａｂａｔ ＣＤＲを太字で、Ｃｈｏｔｈｉａ ＣＤＲを斜体で、組合せＣＤＲをボックスで示す。復帰突然変異したフレームワークの位置には、二重下線が施される。図１Ａは、マウス抗体Ａ（配列番号１Ａ）およびヒト化抗体Ａ－Ｈ（配列番号９Ａ）のＶＨ配列を示す。図１Ｂは、マウス抗体Ａ（配列番号２Ａ）およびヒト化抗体Ａ－Ｈ（配列番号１０Ａおよび配列番号１１Ａ）のＶＬ配列を示す。 [00142]図１Ａ～１Ｂは、抗体Ａ供給源のマウスＶＨおよびＶＬフレームワーク１、ＣＤＲ１、フレームワーク２、ＣＤＲ２、フレームワーク３、ＣＤＲ３、およびフレームワーク４領域の、それらのそれぞれのヒト化配列とのアラインメントを示す図である。 [00143]図２Ａ～２Ｂは、抗体Ｂ供給源のマウスＶＨおよびＶＬフレームワーク１、ＣＤＲ１、フレームワーク２、ＣＤＲ２、フレームワーク３、ＣＤＲ３、およびフレームワーク４領域の、それらのそれぞれのヒト化配列とのアラインメントを示す図である。Ｋａｂａｔ ＣＤＲを太字で、Ｃｈｏｔｈｉａ ＣＤＲを斜体で、組合せＣＤＲをボックスで示す。復帰突然変異したフレームワークの位置には、二重下線が施される。図２Ａは、マウス抗体Ｂ（配列番号１５Ａ）およびヒト化ＶＨ配列Ｂ－Ｈ．１Ａ～Ｂ－Ｈ．１Ｃ（配列番号２３Ａ～２５Ａ）のＶＨ配列を示す。図２Ｂは、マウス抗体Ｂ（配列番号１６Ａ）およびヒト化ＶＬ配列Ｂ－Ｈ．１Ｄ～Ｂ－Ｈ．１Ｈ（配列番号２６Ａ～３０Ａ）のＶＬ配列を示す。 [00143]図２Ａ～２Ｂは、抗体Ｂ供給源のマウスＶＨおよびＶＬフレームワーク１、ＣＤＲ１、フレームワーク２、ＣＤＲ２、フレームワーク３、ＣＤＲ３、およびフレームワーク４領域の、それらのそれぞれのヒト化配列とのアラインメントを示す図である。 [00143]図２Ａ～２Ｂは、抗体Ｂ供給源のマウスＶＨおよびＶＬフレームワーク１、ＣＤＲ１、フレームワーク２、ＣＤＲ２、フレームワーク３、ＣＤＲ３、およびフレームワーク４領域の、それらのそれぞれのヒト化配列とのアラインメントを示す図である。 [00144]図３は、対応する抗体がマップされたＴＣＲＢＶ遺伝子ファミリーおよびサブファミリーの系統樹を示す図である。サブファミリーの同一性は以下の通りである：サブファミリーＡ：ＴＣＲβ Ｖ６；サブファミリーＢ：ＴＣＲβ Ｖ１０；サブファミリーＣ：ＴＣＲβ Ｖ１２；サブファミリーＤ：ＴＣＲβ Ｖ５；サブファミリーＥ：ＴＣＲβ Ｖ７；サブファミリーＦ：ＴＣＲβ Ｖ１１；サブファミリーＧ：ＴＣＲβ Ｖ１４；サブファミリーＨ：ＴＣＲβ Ｖ１６；サブファミリーＩ：ＴＣＲβ Ｖ１８；サブファミリーＪ：ＴＣＲβ Ｖ９；サブファミリーＫ：ＴＣＲβ Ｖ１３；サブファミリーＬ：ＴＣＲβ Ｖ４；サブファミリーＭ：ＴＣＲβ Ｖ３；サブファミリーＮ：ＴＣＲβ Ｖ２；サブファミリーＯ：ＴＣＲβ Ｖ１５；サブファミリーＰ：ＴＣＲβ Ｖ３０；サブファミリーＱ：ＴＣＲβ Ｖ１９；サブファミリーＲ：ＴＣＲβ Ｖ２７；サブファミリーＳ：ＴＣＲβ Ｖ２８；サブファミリーＴ：ＴＣＲβ Ｖ２４；サブファミリーＵ：ＴＣＲβ Ｖ２０；サブファミリーＶ：ＴＣＲβ Ｖ２５；およびサブファミリーＷ：ＴＣＲβ Ｖ２９サブファミリー。サブファミリーメンバーは、本明細書では「ＴＣＲベータＶ（ＴＣＲβＶ）」というセクションに詳細に記載されている。 [00145]図４Ａ～４Ｃは、抗ＴＣＲ Ｖβ１３．１抗体（Ａ－Ｈ．１）によって６日間、活性化されたヒトＣＤ３＋Ｔ細胞を示す図である。ヒトＣＤ３＋Ｔ細胞を磁気ビーズ分離（負の選択）を用いて単離し、１００ｎＭで、固定化（プレート被覆した）抗ＴＣＲ Ｖβ１３．１（Ａ－Ｈ．１）または抗ＣＤ３ε（ＯＫＴ３）抗体で６日間、活性化した。図４Ａは、抗ＴＣＲ Ｖβ１３．１（Ａ－Ｈ．１）、続く、フローサイトメトリー分析のための二次蛍光色素結合した抗体を用いて、ＴＣＲ Ｖβ１３．１表面発現について評価した、拡大されたＴ細胞の２つの散布図（左：ＯＫＴ３で活性化；右：Ａ－Ｈ．１で活性化）を示す。図４Ｂは、抗ＴＣＲ Ｖβ１３．１（Ａ－Ｈ．１）または抗ＣＤ３ｅ（ＯＫＴ３）によって活性化されたＴＣＲ Ｖβ１３．１陽性Ｔ細胞のパーセンテージ（％）を、総Ｔ細胞（ＣＤ３＋）に対してプロットした図である。図４Ｃは、６０μｌ／分の一定速度で２０秒間、各Ｔ細胞サブセットゲート（ＣＤ３またはＴＣＲ Ｖβ１３．１）における事象の数をカウントすることによって獲得された相対細胞数を示す。データは、３人のドナーからの平均値として示される。 [00145]図４Ａ～４Ｃは、抗ＴＣＲ Ｖβ１３．１抗体（Ａ－Ｈ．１）によって６日間、活性化されたヒトＣＤ３＋Ｔ細胞を示す図である。 [00145]図４Ａ～４Ｃは、抗ＴＣＲ Ｖβ１３．１抗体（Ａ－Ｈ．１）によって６日間、活性化されたヒトＣＤ３＋Ｔ細胞を示す図である。 [00146]図５Ａ～５Ｂは、形質転換された細胞系ＲＰＭＩ８２２６に対する抗ＴＣＲ Ｖβ１３．１抗体（Ａ－Ｈ．１）によって活性化されたヒトＣＤ３＋Ｔ細胞の細胞溶解活性を示す図である。図５Ａは、Ａ－Ｈ．１またはＯＫＴ３で活性化されたヒトＣＤ３＋Ｔ細胞の標的細胞溶解を示す。ヒトＣＤ３＋Ｔ細胞を磁気ビーズ分離（負の選択）を用いて単離し、ＲＰＭＩ８２２６細胞と、５：１の（Ｅ：Ｔ）比で２日間の共培養前に、示された濃度で固定化（プレート被覆した）Ａ－Ｈ．１またはＯＫＴ３で４日間、活性化した。次に、フローサイトメトリー分析を用いて、ＣＦＳＥ／ＣＤ１３８標識したおよび膜不透過性ＤＮＡ色素（ＤＲＡＱ７）についてのＦＡＣＳ染色によって、試料をＲＰＭＩ８２２６細胞の細胞溶解について分析した。図５Ｂは、ＲＰＭＩ－８２２６と、５：１の（Ｅ：Ｔ）比で６日間インキュベートしたＡ－Ｈ．１またはＯＫＴ３で活性化されたヒトＣＤ３＋Ｔ細胞の標的細胞溶解、続く、上記されるように、ＲＰＭＩ８２２６細胞の細胞溶解分析を示す。標的細胞溶解のパーセンテージ（％）は、以下の式、［（ｘ－基底）／（１００％－基底）、式中、ｘは試料の細胞溶解である］を用いて、基底標的細胞溶解（すなわち、抗体処置なし）に対して標準化することによって決定された。示されたデータは、ｎ＝１のドナーの代表的なものである。 [00147]図６Ａ～６Ｂは、示された抗体で活性化されたヒトＰＢＭＣによるＩＦＮｇ産生を示す図である。示された数のドナーからの全血からヒトＰＢＭＣを単離し、続いて、１００Ｎｍで、示された抗体で固相（プレート被覆した）刺激を行った。１日目、２日目、３日目、５日目、または６日目に上清を回収した。図６Ａは、活性化後の１日目、２日目、３日目、５日目、または６日目に、抗ＴＣＲ Ｖβ１３．１抗体（Ａ－Ｈ．１またはＡ－Ｈ．２）または抗ＣＤ３ｅ抗体（ＯＫＴ３またはＳＰ３４－２）で活性化された、示された抗体で活性化されたヒトＰＢＭＣにおけるＩＦＮｇの産生を比較するグラフである。図６Ｂは、活性化後の１日目、２日目、３日目、５日目、または６日目に、示された抗ＴＣＲ Ｖβ１３．１抗体または抗ＣＤ３ｅ抗体（ＯＫＴ３）で活性化された、示された抗体で活性化されたヒトＰＢＭＣにおけるＩＦＮｇ産生を示す。 [00147]図６Ａ～６Ｂは、示された抗体で活性化されたヒトＰＢＭＣによるＩＦＮｇ産生を示す図である。 [00148]図７Ａ～７Ｂは、示された抗体で活性化されたヒトＰＢＭＣによるＩＬ－２産生を示す図である。図６Ａ～６Ｂに記載されるのと類似の実験設定を使用した。 [00148]図７Ａ～７Ｂは、示された抗体で活性化されたヒトＰＢＭＣによるＩＬ－２産生を示す図である。 [00149]図８Ａ～８Ｂは、示された抗体で活性化されたヒトＰＢＭＣによるＩＬ－６産生を示す図である。図６Ａ～６Ｂに記載されるのと類似の実験設定を使用した。 [00149]図８Ａ～８Ｂは、示された抗体で活性化されたヒトＰＢＭＣによるＩＬ－６産生を示す図である。 [00150]図９Ａ～９Ｂは、示された抗体で活性化されたヒトＰＢＭＣによるＴＮＦ－α産生を示す図である。図６Ａ～６Ｂに記載されるのと類似の実験設定を使用した。 [00150]図９Ａ～９Ｂは、示された抗体で活性化されたヒトＰＢＭＣによるＴＮＦ－α産生を示す図である。 [00151]図１０Ａ～１０Ｂは、示された抗体で活性化されたヒトＰＢＭＣによるＩＬ－１β産生を示す図である。図６Ａ～６Ｂに記載されるのと類似の実験設定を使用した。 [00151]図１０Ａ～１０Ｂは、示された抗体で活性化されたヒトＰＢＭＣによるＩＬ－１β産生を示す図である。 [00152]図１１Ａ～１１Ｂは、抗ＣＤ３ｅ抗体ＯＫＴ３によって活性化されたＰＢＭＣと比較した場合、抗ＴＣＲ Ｖβ１３．１抗体Ａ－Ｈ．１によって活性化されたヒトＰＭＢＣにおけるＩＦＮｇ分泌の遅延動態を示すグラフである。図１１Ａは、４人のドナーからのＩＦＮｇ分泌データを示す。図１１Ｂは、追加の４人のドナーからのＩＦＮｇ分泌データを示す。示されたデータは、ｎ＝８のドナーの代表的なものである。 [00152]図１１Ａ～１１Ｂは、抗ＣＤ３ｅ抗体ＯＫＴ３によって活性化されたＰＢＭＣと比較した場合、抗ＴＣＲ Ｖβ１３．１抗体Ａ－Ｈ．１によって活性化されたヒトＰＭＢＣにおけるＩＦＮｇ分泌の遅延動態を示すグラフである。 [00153]図１２は、抗ＣＤ３ｅ抗体（ＯＫＴ３またはＳＰ３４－２）によって活性化されたＰＢＭＣと比較して、抗ＴＣＲ Ｖβ１３．１抗体（Ａ－Ｈ．１またはＡ－Ｈ．２）によって活性化されたヒトＰＢＭＣにおけるＣＤ８＋ ＴＳＣＭおよびＴｅｍｒａ Ｔ細胞サブセットの増加を示す図である。 [00154]図１３Ａ～１３Ｆは、抗ＴＣＲＶｂ抗体の特徴を示す図である。図１３Ａは、抗ＣＤ３（ＯＫＴ３）抗体または抗ＴＣＲＶｂ抗体で活性化されたＴ細胞の増殖を示すグラフである。図１３Ｂは、抗ＴＣＲＶｂ抗体を用いたＣＤ４５ＲＡ＋エフェクターメモリーＣＤ８＋およびＣＤ４＋Ｔ細胞（ＴＥＭＲＡ）細胞の選択的拡大を示す。Ｔｎ＝ナイーブＴ細胞；Ｔｓｃｍ＝幹細胞メモリーＴ細胞；Ｔｃｍ＝中央メモリーＴ細胞；Ｔｅｍ＝エフェクターメモリーＴ細胞；Ｔｅｍｒａ＝エフェクターメモリーＣＤ４５ＲＡ＋Ｔ細胞。図１３Ｃは、抗ＴＣＲＶｂ抗体、または抗ＣＤ３抗体で刺激されたＰＢＭＣによるＩＦＮ－ｇ分泌を示すグラフである。図１３Ｄは、抗ＴＣＲＶｂ抗体、または抗ＣＤ３抗体で刺激されたＴ細胞による標的細胞溶解を示す。細胞を４日間刺激し、続いて、多発性骨髄腫標的細胞と２日間インキュベートして、細胞殺滅の評価を行った。図１３Ｅは、抗ＴＣＲＶｂ抗体、または抗ＣＤ３抗体で刺激されたＴ細胞によるパーフォリン分泌を示すグラフである。パーフォリンは、１００ｎｇ／ｍｌプレート結合した抗体で５日間刺激した後、ＰＢＭＣにおけるＴＣＲＶＢ陽性およびＴＣＲＶＢ陰性Ｔ細胞において、ＦＡＣＳ染色によって分析された。図１３Ｆは、抗ＴＣＲＶｂ抗体、または抗ＣＤ３抗体で刺激されたＴ細胞によるグランザイムＢを示すグラフである。グランザイムＢは、１００ｎｇ／ｍｌプレート結合した抗体で５日間刺激した後、ＰＢＭＣにおけるＴＣＲＶＢ陽性およびＴＣＲＶＢ陰性Ｔ細胞において、ＦＡＣＳ染色により分析された。 [00154]図１３Ａ～１３Ｆは、抗ＴＣＲＶｂ抗体の特徴を示す図である。 [00154]図１３Ａ～１３Ｆは、抗ＴＣＲＶｂ抗体の特徴を示す図である。 [00154]図１３Ａ～１３Ｆは、抗ＴＣＲＶｂ抗体の特徴を示す図である。 [00155]図１４Ａ～１４Ｂは、１００ｎＭの用量で６日間、抗ＴＣＲＶｂ抗体を用いたＰＢＭＣの刺激による、ＩＬ－２およびＩＬ－１５の産生、ならびにヒトＮＫ細胞の拡大を示す図である。図１４Ａは、抗ＴＣＲＶｂ抗体、または抗ＣＤ３抗体で刺激されたＴ細胞におけるＩＬ－２またはＩＬ－１５の分泌を示す。図１４Ｂは、抗ＴＣＲＶｂ抗体もしくは抗ＣＤ３抗体、または対照試料で刺激された細胞におけるＮＫｐ４６染色対ＣＤ５６抗体染色を示すフローサイトメトリードットプロットを示す。 [00155]図１４Ａ～１４Ｂは、１００ｎＭの用量で６日間、抗ＴＣＲＶｂ抗体を用いたＰＢＭＣの刺激による、ＩＬ－２およびＩＬ－１５の産生、ならびにヒトＮＫ細胞の拡大を示す図である。 [00155]図１４Ａ～１４Ｂは、１００ｎＭの用量で６日間、抗ＴＣＲＶｂ抗体を用いたＰＢＭＣの刺激による、ＩＬ－２およびＩＬ－１５の産生、ならびにヒトＮＫ細胞の拡大を示す図である。 [00156]図１５Ａ～１５Ｃは、抗ＴＣＲＶｂ抗体、または抗ＣＤ３抗体で刺激されたＰＢＭＣにおけるサイトカインの分泌を示す図である。 [00156]図１５Ａ～１５Ｃは、抗ＴＣＲＶｂ抗体、または抗ＣＤ３抗体で刺激されたＰＢＭＣにおけるサイトカインの分泌を示す図である。 [00157]図１６Ａ～１６Ｂは、二重標的化ＢＣＭＡ－ＴＣＲｖｂ抗体分子によるＭＭ細胞の殺滅を示す図である。図１６Ａは、以下の二重標的化抗体分子：ＢＣＭＡ－ＴＣＲＶｂ、ＢＣＭＡ－ＣＤ３、または対照－ＴＣＲＶｂ；またはアイソタイプ対照のうちの１つによるｉｎ ｖｉｔｒｏ殺滅を示す。図１６Ｂは、二重標的化ＢＣＭ－ＴＣＲＶｂ抗体によるＭＭ細胞のｉｎ ｖｉｖｏ殺滅を示す。 [00158]図１７は、一方のアーム上でＦｃＲＨ５を認識し、他方のアーム上でＴＣＲＶｂを認識する二重標的化抗体を用いたＭＭ標的細胞の溶解を示す図である。 [00159]図１８Ａ～１８Ｃは、二量体化モジュール、例えば、免疫グロブリン定常ドメインに取り付けられた機能性部分の例示的な形式および構成の模式図である。図１８Ａは、ヘテロ二量体Ｆｃドメインに共有結合によって連結された部分Ａ、Ｂ、ＣおよびＤを示す。図１８Ｂは、ホモ二量体Ｆｃドメインに共有結合によって連結された部分Ａ、Ｂ、ＣおよびＤを示す。図１８Ｃは、ヘテロ二量体重鎖および軽鎖定常ドメイン（例えば、Ｆａｂ ＣＨ１およびＦａｂ ＣＬ）に共有結合によって連結された部分Ａ、Ｂ、ＣおよびＤを示す。一部の実施形態では、機能性部分は、カルレティキュリンタンパク質（例えば、野生型カルレティキュリンタンパク質および／またはカルレティキュリン突然変異体タンパク質）に結合する抗原結合性ドメインである。一部の実施形態では、機能性部分は、野生型カルレティキュリンタンパク質およびほぼ同一の親和性を有するカルレティキュリン突然変異体タンパク質に結合する抗原結合性ドメインである。一部の実施形態では、機能性部分は、野生型カルレティキュリンタンパク質を上回ってカルレティキュリン突然変異体タンパク質に優先的に結合する抗原結合性ドメインであり、例えば、第１のカルレティキュリン突然変異体タンパク質は、配列番号６２８６のアミノ酸配列を含み、野生型カルレティキュリンタンパク質は、配列番号６２８５またはＤ１００１のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、機能性部分は、Ｔ細胞エンゲージャー、ＮＫ細胞エンゲージャー、Ｂ細胞エンゲージャー、樹状細胞エンゲージャー、またはマクロファージ細胞エンゲージャーから選択される免疫細胞エンゲージャーである。一部の実施形態では、機能性部分は、サイトカイン分子である。一部の実施形態では、機能性部分は、間質改変部分である。 [00160]図１９Ａおよび１９Ｂは、カルレティキュリンタンパク質（例えば、野生型カルレティキュリンタンパク質および／またはカルレティキュリン突然変異体タンパク質）に結合する第１の抗原結合性ドメイン（例えば、第１のＦａｂ）と、カルレティキュリンタンパク質（例えば、野生型カルレティキュリンタンパク質および／またはカルレティキュリン突然変異体タンパク質）に結合する第２の抗原結合性ドメイン（例えば、第２のＦａｂ）と、ＣＤ３に結合する１つまたは複数の部分（例えば、ＣＤ３に結合するｓｃＦｖ）とを含む多機能性分子の例示的な形式および構成の模式図である。一実施形態では、第１の抗原結合性ドメイン（例えば、第１のＦａｂ）は、本明細書に開示されるカルレティキュリンタンパク質（例えば、野生型カルレティキュリンタンパク質および／またはカルレティキュリン突然変異体タンパク質）、例えば、表２または３に開示されるカルレティキュリン突然変異体タンパク質、例えば、表２または３に開示される１型または２型カルレティキュリン突然変異体タンパク質、例えば、配列番号６１１３または６３１４のアミノ酸配列を含むカルレティキュリン突然変異体タンパク質に結合する。一実施形態では、第２の抗原結合性ドメイン（例えば、第２のＦａｂ）は、本明細書に開示されるカルレティキュリンタンパク質（例えば、野生型カルレティキュリンタンパク質および／またはカルレティキュリン突然変異体タンパク質）、例えば、表２または３に開示されるカルレティキュリン突然変異体タンパク質、例えば、表２または３に開示される１型または２型カルレティキュリン突然変異体タンパク質、例えば、配列番号６３１３または６３１４のアミノ酸配列を含むカルレティキュリン突然変異体タンパク質に結合する。 [00161]図２０Ａおよび２０Ｂは、カルレティキュリンタンパク質（例えば、野生型カルレティキュリンタンパク質および／またはカルレティキュリン突然変異体タンパク質）に結合する第１の抗原結合性ドメイン（例えば、第１のＦａｂ）と、カルレティキュリンタンパク質（例えば、野生型カルレティキュリンタンパク質および／またはカルレティキュリン突然変異体タンパク質）に結合する第２の抗原結合性ドメイン（例えば、第２のＦａｂ）と、ＴＣＲ（例えば、ＴＣＲβ）に結合する１つまたは複数の部分（例えば、ＴＣＲ（例えば、ＴＣＲβ）に結合するｓｃＦｖ）とを含む多機能性分子の例示的な形式および構成の模式図である。一実施形態では、第１の抗原結合性ドメイン（例えば、第１のＦａｂ）は、本明細書に開示されるカルレティキュリンタンパク質（例えば、野生型カルレティキュリンタンパク質および／またはカルレティキュリン突然変異体タンパク質）、例えば、表２または３に開示されるカルレティキュリン突然変異体タンパク質、例えば、表２または３に開示される１型または２型カルレティキュリン突然変異体タンパク質、例えば、配列番号６３１３または６３１４のアミノ酸配列を含むカルレティキュリン突然変異体タンパク質に結合する。一実施形態では、第２の抗原結合性ドメイン（例えば、第２のＦａｂ）は、本明細書に開示されるカルレティキュリンタンパク質（例えば、野生型カルレティキュリンタンパク質および／またはカルレティキュリン突然変異体タンパク質）、例えば、表２または３に開示されるカルレティキュリン突然変異体タンパク質、例えば、表２または３に開示される１型または２型カルレティキュリン突然変異体タンパク質、例えば、配列番号６３１３または６３１４のアミノ酸配列を含むカルレティキュリン突然変異体タンパク質に結合する。 [00161]図２０Ａおよび２０Ｂは、カルレティキュリンタンパク質（例えば、野生型カルレティキュリンタンパク質および／またはカルレティキュリン突然変異体タンパク質）に結合する第１の抗原結合性ドメイン（例えば、第１のＦａｂ）と、カルレティキュリンタンパク質（例えば、野生型カルレティキュリンタンパク質および／またはカルレティキュリン突然変異体タンパク質）に結合する第２の抗原結合性ドメイン（例えば、第２のＦａｂ）と、ＴＣＲ（例えば、ＴＣＲβ）に結合する１つまたは複数の部分（例えば、ＴＣＲ（例えば、ＴＣＲβ）に結合するｓｃＦｖ）とを含む多機能性分子の例示的な形式および構成の模式図である。 [00162]図２１Ａおよび２１Ｂは、カルレティキュリンタンパク質（例えば、野生型カルレティキュリンタンパク質および／またはカルレティキュリン突然変異体タンパク質）に結合する第１の抗原結合性ドメイン（例えば、第１のＦａｂ）と、カルレティキュリンタンパク質（例えば、野生型カルレティキュリンタンパク質および／またはカルレティキュリン突然変異体タンパク質）に結合する第２の抗原結合性ドメイン（例えば、第２のＦａｂ）と、ＮＫｐ３０に結合する１つまたは複数の部分（例えば、ＮＫｐ３０に結合する抗体分子またはリガンド）とを含む多機能性分子の例示的な形式および構成の模式図である。一実施形態では、第１の抗原結合性ドメイン（例えば、第１のＦａｂ）は、本明細書に開示されるカルレティキュリンタンパク質（例えば、野生型カルレティキュリンタンパク質および／またはカルレティキュリン突然変異体タンパク質）、例えば、表２または３に開示されるカルレティキュリン突然変異体タンパク質、例えば、表２または３に開示される１型または２型カルレティキュリン突然変異体タンパク質、例えば、配列番号６３１３または６３１４のアミノ酸配列を含むカルレティキュリン突然変異体タンパク質に結合する。一実施形態では、第２の抗原結合性ドメイン（例えば、第２のＦａｂ）は、本明細書に開示されるカルレティキュリンタンパク質（例えば、野生型カルレティキュリンタンパク質および／またはカルレティキュリン突然変異体タンパク質）、例えば、表２または３に開示されるカルレティキュリン突然変異体タンパク質、例えば、表２または３に開示される１型または２型カルレティキュリン突然変異体タンパク質、例えば、配列番号６３１３または６３１４のアミノ酸配列を含むカルレティキュリン突然変異体タンパク質に結合する。 [00163]図２２は、ＮＫｐ３０抗体のＮＫ９２細胞への結合を示すグラフである。データは、ＡＦ７４７陽性集団パーセントとして算出した。 [00164]図２３は、ＮＫｐ３０抗体によるＮＫ９２細胞の活性化を示すグラフである。ハムスター抗ＮＫｐ３０ ｍＡｂを使用してデータを生成した。 [00165]図２４Ａ～２４Ｄは、ＴＧＦβ阻害剤を含む例示的な多特異性分子を示す模式図である。一部の実施形態では、ＴＧＦβ阻害剤は、ＴＧＦ－ベータ受容体ＥＣＤホモ二量体を含む。一部の実施形態では、ＴＧＦβ阻害剤は、ＴＧＦＢＲ２ ＥＣＤヘテロ二量体を含む。図２４Ａおよび２４Ｂでは、２つのＴＧＦＢＲ ＥＣＤドメインは、２つのＦｃ領域のＣ末端に連結されている。一部の実施形態では、図２４Ａまたは２４Ｂに示されるＣＨ１－Ｆｃ－ＴＧＦＢＲ ＥＣＤ領域は、配列番号６４０５または３１９３のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、図２４Ａまたは２４Ｂに示されるＦｃ－ＴＧＦＢＲ ＥＣＤ領域は、配列番号６４０７または６４０８のアミノ酸配列を含む。図２４Ｃおよび２４Ｄでは、２つのＴＧＦＢＲ ＥＣＤドメインは、それぞれ、ＣＨ１およびＣＬに連結されている。一部の実施形態では、図２４Ｃまたは２４Ｄに示されるＴＧＦＢＲ ＥＣＤ－ＣＨ１－Ｆｃ領域は、配列番号６４０９または６４１０のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、図２４Ｃまたは２４Ｄに示されるＴＧＦＢＲ ＥＣＤ－ＣＬ領域は、配列番号６４１１または６４１２のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、多特異性分子は、結合部分Ａおよび結合部分Ｂを含む。一部の実施形態では、結合部分Ａまたは結合部分Ｂは、本明細書に開示されるカルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインである。 [00165]図２４Ａ～２４Ｄは、ＴＧＦβ阻害剤を含む例示的な多特異性分子を示す模式図である。 [00166]図２５Ａ～２５Ｂは、野生型カルレティキュリン（ＣＡＬＲ ＷＴ）および２つのカルレティキュリン突然変異体（本明細書に記載される、ＣＡＬＲｉｎｓおよびＣＡＬＲｄｅｌ）に対する抗体６Ｃ１０（ＢＫＭ０１０６）の親ＩｇＧ形態の結合のレベルを示す、酵素結合免疫吸着測定法（ＥＬＩＳＡ）の結果を示す一連のグラフである。図２５Ａは、示された抗原（ＣＡＬＲ ＷＴ、ＣＡＬＲｉｎｓ、またはＣＡＬＲｄｅｌ）がプレートに被覆された場合のＥＬＩＳＡの結果を示す。図２５Ｂは、ＢＫＭ０１０６抗体がプレートに被覆された場合のＥＬＩＳＡの結果を示す。 [00167]図２６Ａ～２６Ｂは、ＦＡＣＳによってアッセイした場合、２つのカルレティキュリン突然変異体（本明細書に記載される、ＣＡＬＲｉｎｓおよびＣＡＬＲｄｅｌ）のうちの１つを発現する細胞への抗体６Ｃ１０（ＢＫＭ０１０６）の親ＩｇＧ形態の結合を示す一連のグラフである。 [00168]図２７は、骨髄線維症のｉｎ ｖｉｖｏマウスモデルでの様々な抗体分子の治療有効性を示すグラフである。試験した抗体分子は、突然変異体カルレティキュリン（ｍｔＣａｌＲ）に対するＡＤＣＣ可能な抗体分子、ｍｔＣａｌＲ結合ドメインおよび別の標的（すなわちＴＣＲｖβまたはＣＤ３）に特異的な第２の結合ドメインおよびＬＡＬＡＰＧバリアントＦｃ領域を含む二特異性抗体を含んでいた。ナイーブマウス脾臓およびビヒクルを対照として使用した。 [00169]図２８は、本明細書に記載される、例示的な抗ＣＤ３抗体分子、ＢＫＭ００２０、ＢＫＭ００２５、ＢＫＭ００２８、ＢＫＭ００３８のヒトＣＤ３ｅ（ｈｕＣＤ３ｅ）およびカニクイザルＣＤ３ｅ（ｃＣＤ３ｅ）へのｉｎ ｖｉｔｒｏでの結合を示す表である。 [00170]図２９は、本明細書に記載される、例示的な抗ＣＤ３抗体分子ＢＫＭ００２０の、ヒトＣＤ３ｅ（ｈｕＣＤ３ｅ）を発現するＪｕｒｋａｔ細胞への結合を示すグラフである。 [00171]図３０Ａおよび３０Ｂは、親和性成熟したヒト化抗体Ａ－Ｈ配列のアラインメントを示す模式図である。図３０Ａは、親和性成熟したヒト化抗体Ａ－Ｈ ＶＬ配列のアラインメント（出現順にそれぞれ配列番号３３７７Ａ～３３８９Ａ）を示す。図３０Ｂは、親和性成熟したヒト化抗体Ａ－Ｈ ＶＨ配列のアラインメント（出現順にそれぞれ配列番号３３９０Ａ～３４３６Ａ）を示す。 [00171]図３０Ａおよび３０Ｂは、親和性成熟したヒト化抗体Ａ－Ｈ配列のアラインメントを示す模式図である。 [00171]図３０Ａおよび３０Ｂは、親和性成熟したヒト化抗体Ａ－Ｈ配列のアラインメントを示す模式図である。 [00171]図３０Ａおよび３０Ｂは、親和性成熟したヒト化抗体Ａ－Ｈ配列のアラインメントを示す模式図である。
[00172]（ｉ）カルレティキュリンタンパク質（例えば、野生型カルレティキュリンタンパク質および／またはカルレティキュリン突然変異体タンパク質）に結合する抗原結合性ドメインであって、例えば、カルレティキュリンタンパク質が、配列番号６２８５、Ｄ１００１、または６２８６のアミノ酸配列を含む、抗原結合性ドメインと、（ｉｉ）（ａ）Ｔ細胞エンゲージャー、ＮＫ細胞エンゲージャー、Ｂ細胞エンゲージャー、樹状細胞エンゲージャー、またはマクロファージ細胞エンゲージャーから選択される免疫細胞エンゲージャー、（ｂ）サイトカイン分子、（ｃ）間質改変部分、および（ｄ）腫瘍標的化部分（例えば、Ｇ６Ｂ、ＣＤ３４、ＣＤ４１、Ｐ－セレクチン、Ｃｌｅｃ２、ｃＫＩＴ、ＦＬＴ３、ＭＰＬ、ＩＴＧＢ３、ＩＴＧＢ２、ＧＰ５、ＧＰ６、ＧＰ９、ＧＰ１ＢＡ、ＤＳＣ２、ＦＣＧＲ２Ａ、ＴＮＦＲＳＦ１０Ａ、ＴＮＦＲＳＦ１０Ｂ、またはＴＭ４ＳＦ１から選択される腫瘍抗原に結合する）のうち１つ、２つまたはすべてとを含む、複数の（例えば、２つ以上の）機能性（または結合特異性）を含む多機能性分子（本明細書において「多特異性分子」とも呼ばれる）が、本明細書に開示される。一部の実施形態では、抗原結合性ドメインは、カルレティキュリンタンパク質（例えば、野生型カルレティキュリンタンパク質または例えば、本明細書に記載される突然変異体カルレティキュリンタンパク質）に結合する。一部の実施形態では、抗原結合性ドメインは、表２または３に開示されるカルレティキュリン突然変異体タンパク質に結合する。一部の実施形態では、抗原結合性ドメインは、表２または３に開示される１型カルレティキュリン突然変異体タンパク質に結合する。一部の実施形態では、抗原結合性ドメインは、表２または３に開示される２型カルレティキュリン突然変異体タンパク質に結合する。一部の実施形態では、抗原結合性ドメインは、表２または３に開示される１型および２型カルレティキュリン突然変異体タンパク質に結合する。一部の実施形態では、Ｔ細胞エンゲージャーは、ＴＣＲのベータサブユニットの可変鎖（ＴＣＲβＶ）、例えば、ＴＣＲβ Ｖ６またはＴＣＲβ Ｖ１２に結合する追加の抗原結合性ドメインを含む。
[00173]一実施形態では、多特異性または多機能性分子は、二特異性（もしくは二機能性）分子、三特異性（もしくは三機能性）分子、または四特異性（もしくは四機能性）分子である。一実施形態では、多特異性または多機能性分子は、二特異性分子である。
[00174]理論に拘泥するものではないが、本明細書に開示される多特異性または多機能性分子は、カルレティキュリンタンパク質を、例えば、表面に発現する細胞の存在下で、免疫細胞（例えば、Ｔ細胞、ＮＫ細胞、Ｂ細胞、樹状細胞またはマクロファージから選択される免疫エフェクター細胞）に局在する（例えば、それを架橋する）および／またはそれを活性化すると予測される。本明細書に記載される多特異性または多機能性分子を使用して、カルレティキュリンタンパク質を発現する細胞の存在下で免疫細胞の近接性および／または活性を増大することは、標的細胞に対する免疫応答を増強し、それによって、より効果的な療法を提供すると予測される。
[00175]（ｉ）間質改変部分と、（ｉｉ）カルレティキュリンタンパク質（例えば、野生型カルレティキュリンタンパク質および／またはカルレティキュリン突然変異体タンパク質）に結合する抗原結合性ドメインであって、例えば、カルレティキュリンタンパク質が、配列番号６２８５、Ｄ１００１、または６２８６のアミノ酸配列を含む、抗原結合性ドメインとを含む新規多機能性、例えば、多特異性分子が開示される。理論に拘泥するものではないが、本明細書に開示される多機能性分子は、とりわけ、がん部位を標的とする（例えば、それに局在する）、および腫瘍間質を変更する、例えば、がん部位付近の腫瘍微小環境を変更すると考えられる。多機能性分子は、免疫細胞エンゲージャー（例えば、Ｔ細胞エンゲージャー、ＮＫ細胞エンゲージャー、Ｂ細胞エンゲージャー、樹状細胞エンゲージャー、またはマクロファージ細胞エンゲージャーのうちの１つ、２つ、３つまたはすべてから選択される）および／またはサイトカイン分子のうちの一方または両方をさらに含み得る。したがって、とりわけ、前述の部分を含む多機能性、例えば、多特異性分子、それをコードする核酸、前述の分子を産生する方法、および前述の分子を使用してがんを処置する方法が本明細書で提供される。
[00176]したがって、とりわけ、前述の部分を含む多特異性または多機能性分子（例えば、多特異性または多機能性抗体分子）、それをコードする核酸、前述の分子を産生する方法、および前述の分子を使用して疾患または障害、例えば、がんを処置する方法が本明細書で提供される。
定義
[00177]一部の実施形態では、多機能性分子は、免疫細胞エンゲージャーを含む。「免疫細胞係合体」とは、免疫細胞、例えば、免疫応答に関与する細胞に結合および／または活性化する１つまたは複数の結合特異性を指す。一部の実施形態では、免疫細胞は、Ｔ細胞、ＮＫ細胞、Ｂ細胞、樹状細胞、および／またはマクロファージ細胞から選択される。免疫細胞エンゲージャーは、抗体分子、受容体分子（例えば、全長受容体、受容体断片、またはそれらの融合体（例えば、受容体－Ｆｃ融合体））、または免疫細胞抗原（例えば、Ｔ細胞、ＮＫ細胞抗原、Ｂ細胞抗原、樹状細胞抗原、および／またはマクロファージ細胞抗原）に結合するリガンド分子（例えば、全長リガンド、リガンド断片、またはそれらの融合体（例えば、リガンド－Ｆｃ融合体））であり得る。一部の実施形態では、免疫細胞エンゲージャーは、標的免疫細胞に特異的に結合し、例えば、標的免疫細胞に優先的に結合する。例えば、免疫細胞エンゲージャーが抗体分子である場合、それは、約１０ｎＭ未満の解離定数で、免疫細胞抗原（例えば、Ｔ細胞抗原、ＮＫ細胞抗原、Ｂ細胞抗原、樹状細胞抗原、および／またはマクロファージ細胞抗原）に結合する。
[00178]本明細書で使用される場合、用語「Ｔ細胞受容体ベータ可変鎖」、「ＴＣＲＶβ」、「ＴＣＲＶｂ」および「ＴＣＲβＶ」は、同義的に使用され、Ｔ細胞受容体の抗原認識ドメインを含むＴ細胞受容体ベータ鎖の細胞外領域を指す。用語ＴＣＲＶβまたはＴＣＲβＶは、ＴＣＲβＶと少なくとも１つの共通エピトープを含む、アイソフォーム、哺乳動物、例えば、ヒトＴＣＲβＶ、ヒトの種相同体およびアナログを含む。ヒトＴＣＲβＶは、限定されないがＴＣＲβ Ｖ６ サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ１０サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ１２サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ５サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ７サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ１１サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ１４サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ１６サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ１８サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ９サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ１３サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ４サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ３サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ２サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ１５サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ３０サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ１９サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ２７サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ２８サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ２４サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ２０サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ２５サブファミリー、またはＴＣＲβ Ｖ２９サブファミリーを含むサブファミリーを含む遺伝子ファミリーを含む。一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ６サブファミリーは、ＴＣＲβ Ｖ６－４＊０１、ＴＣＲβ Ｖ６－４＊０２、ＴＣＲβ Ｖ６－９＊０１、ＴＣＲβ Ｖ６－８＊０１、ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１、ＴＣＲβ Ｖ６－６＊０２、ＴＣＲβ Ｖ６－６＊０１、ＴＣＲβ Ｖ６－２＊０１、ＴＣＲβ Ｖ６－３＊０１またはＴＣＲβ Ｖ６－１＊０１を含む。一部の実施形態では、ＴＣＲβＶは、ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１を含む。ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１は、ＴＲＢＶ６５；ＴＣＲＢＶ６Ｓ５；ＴＣＲＢＶ１３Ｓ１、またはＴＣＲβ Ｖ１３．１としても公知である。ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１、例えば、ヒトＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１のアミノ酸配列は、当該技術分野において公知であり、例えば、ＩＭＧＴ ＩＤ Ｌ３６０９２によって提供される。一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１は、配列番号１０４３の核酸配列、またはその８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上の同一性を有する配列によってコードされる。一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１は、配列番号１０４４のアミノ酸配列、またはその８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上の同一性を有する配列を含む。
[00179]一部の実施形態では、多機能性分子は、サイトカイン分子を含む。本明細書で使用される場合、「サイトカイン分子」とは、サイトカインの全長、断片またはバリアント；さらに、受容体ドメイン、例えば、サイトカイン受容体二量化ドメインを含むサイトカイン；または、天然に存在するサイトカインの少なくとも１つの活性化を誘発する、サイトカイン受容体のアゴニスト、例えば、サイトカイン受容体に対する抗体分子（例えば、アゴニスト抗体）を指す。一部の実施形態では、サイトカイン分子は、インターロイキン－２（ＩＬ－２）、インターロイキン－７（ＩＬ－７）、インターロイキン－１２（ＩＬ－１２）、インターロイキン－１５（ＩＬ－１５）、インターロイキン－１８（ＩＬ－１８）、インターロイキン－２１（ＩＬ－２１）、もしくはインターフェロンγ、またはこれらの断片もしくはバリアント、または前述のサイトカインのいずれかの組合せから選択される。サイトカイン分子は、モノマーまたは二量体であり得る。一部の実施形態では、サイトカイン分子は、サイトカイン受容体二量体化ドメインをさらに含むことができる。他の実施形態では、サイトカイン分子は、サイトカイン受容体のアゴニスト、例えば、ＩＬ－１５ＲａまたはＩＬ－２１Ｒから選択されるサイトカイン受容体に対する抗体分子（例えば、アゴニスト抗体）である。
[00180]本明細書で使用される場合、例えば、抗体分子、サイトカイン分子、受容体分子において使用される用語「分子」は、改変されていない（例えば、天然に存在する）分子の少なくとも１つの機能および／または活性化が残る限り、全長の天然に存在する分子、ならびにバリアント、例えば、機能的バリアント（例えば、切断、断片、突然変異（例えば、実質的に類似の配列）またはその誘導体化された形態）を含む。
[00181]一部の実施形態では、多機能性分子は、間質改変部分を含む。「間質改変部分」とは、本明細書で使用される場合、間質の成分を変更、例えば、分解することができる薬剤、例えば、タンパク質（例えば、酵素）を指す。一部の実施形態では、間質の成分は、例えば、ＥＣＭ成分、例えば、グリコサミノグリカン、例えば、ヒアルロナン（ヒアルロン酸またはＨＡとしても公知である）、コンドロイチン硫酸、コンドロイチン、デルマタン硫酸、ヘパリン硫酸、ヘパリン、エンタクチン、テネイシン、アグリカンおよびケラチン硫酸；または細胞外タンパク質、例えば、コラーゲン、ラミニン、エラスチン、フィブリノーゲン、フィブロネクチン、およびビトロネクチンから選択される。
[00182]特定の用語を以下に定義する。
[00183]本明細書で使用される場合、冠詞「ある（ａ）」および「ある（ａｎ）」は、冠詞の文法的対象物の１つまたは複数、例えば、少なくとも１つを指す。用語「ある（ａ）」または「ある（ａｎ）」の使用は、本明細書における用語「含んでいる」と共に使用される場合、「１つ」を意味し得るが、「１つまたは複数」、「少なくとも１つ」および「１または１を超える」の意味とも一致する。
[00184]本明細書で使用される場合、「約」および「ほぼ」は、一般に、測定の性質または精度を与えられて測定された量についての許容可能な誤差の程度を意味する。誤差の例示的な程度は、所定の範囲の値の２０パーセント（％）以内であり、典型的には１０％以内であり、より典型的には５％以内である。
[00185]本明細書で使用される「抗体分子」とは、少なくとも１つの免疫グロブリン可変ドメイン配列を含む、タンパク質、例えば、免疫グロブリン鎖またはその断片を指す。抗体分子は、抗体（例えば、全長抗体）および抗体断片を包含する。ある実施形態では、抗体分子は、全長抗体の抗原結合もしくは機能的断片、または全長免疫グロブリン鎖を含む。例えば、全長抗体は、天然に存在するか、または正常な免疫グロブリン遺伝子断片の組換えプロセスによって形成される免疫グロブリン（Ｉｇ）分子（例えば、ＩｇＧ抗体）である。一部の実施形態では、抗体分子は、免疫グロブリン分子の免疫学的に活性な抗原結合部分、例えば、抗体断片を指す。抗体断片、例えば、機能性断片は、抗体の一部、例えば、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆ（ａｂ）２、可変断片（Ｆｖ）、ドメイン抗体（ｄＡｂ）、または一本鎖可変断片（ｓｃＦｖ）である。機能性抗体断片は、インタクトな（例えば、全長）抗体によって認識されるものと同じ抗原に結合する。用語「抗体断片」または「機能性断片」はまた、重鎖および軽鎖の可変領域からなる「Ｆｖ」断片、または軽鎖および重鎖の可変領域がペプチドリンカーによって連結されている組換え一本鎖ポリペプチド分子（「ｓｃＦｖタンパク質」）などの可変領域からなる単離された断片を含む。一部の実施形態では、抗体断片は、抗原結合活性を有しない抗体の部分、例えば、Ｆｃ断片または単一アミノ酸残基を含まない。例示的な抗体分子は、全長抗体および抗体断片、例えば、ｄＡｂ（ドメイン抗体）、一本鎖、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、およびＦ（ａｂ’）２断片、ならびに一本鎖可変断片（ｓｃＦｖ）を含む。
[00186]本明細書で使用される場合、「免疫グロブリン可変ドメイン配列」とは、免疫グロブリン可変ドメインの構造を形成することができるアミノ酸配列を指す。例えば、配列は、天然に存在する可変ドメインのアミノ酸配列の全部または一部を含み得る。例えば、配列は、１個、２個、もしくはそれ以上のＮ末端またはＣ末端アミノ酸を含むかまたは含まない場合があり、あるいはタンパク質構造の形成に適合する他の改変を含む場合がある。
[00187]一部の実施形態では、抗体分子は、単一特異性であり、例えば、単一のエピトープに対する結合特異性を含む。一部の実施形態では、抗体分子は、多特異性であり、例えば、それは、複数の免疫グロブリン可変ドメイン配列を含み、第１の免疫グロブリン可変ドメイン配列は、第１のエピトープに対して結合特異性を有し、第２の免疫グロブリン可変ドメイン配列は、第２のエピトープに対して結合特異性を有する。一部の実施形態では、抗体分子は、二特異性抗体分子である。「二特異性抗体分子」とは、本明細書で使用される場合、１を超える（例えば、２、３、４、またはそれを超える）エピトープおよび／または抗原に対する特異性を有する抗体分子を指す。
[00188]本明細書で使用される「抗原」（Ａｇ）とは、例えば、ある種の免疫細胞の活性化および／または抗体生成を伴う、免疫応答を引き起こすことができる分子を指す。ほとんどすべてのタンパク質またはペプチドを含む任意の高分子は、抗原であり得る。抗原はまた、ゲノム組換え体またはＤＮＡから誘導され得る。例えば、免疫応答を誘導することができるタンパク質をコードするヌクレオチド配列または部分的ヌクレオチド配列を含む任意のＤＮＡは、「抗原」をコードする。一部の実施形態では、抗原は、遺伝子の全長ヌクレオチド配列によってのみコードされる必要はなく、また、抗原は、遺伝子によって全くコードされる必要もない。一部の実施形態では、抗原は、生体試料、例えば、組織試料、腫瘍試料、細胞、または他の生体成分を有する流体から合成することができ、または誘導することができる。本明細書で使用される場合、「腫瘍抗原」または同義的に、「がん抗原」は、がん、例えば、がん細胞、または免疫応答を引き起こすことができる腫瘍微小環境上に存在するか、またはそれと関連する任意の分子を含む。本明細書で使用される場合、「免疫細胞抗原」とは、免疫応答を引き起こすことができる免疫細胞上に存在するか、またはそれと関連する任意の分子を含む。
[00189]抗体分子の「抗原結合部位」または「結合部位」とは、抗原結合に関与する抗体分子、例えば、免疫グロブリン（Ｉｇ）分子の一部を指す。一部の実施形態では、抗原結合部位は、重鎖（Ｈ）および軽鎖（Ｌ）の可変領域（Ｖ）のアミノ酸残基によって形成される。超可変領域と呼ばれる、重鎖および軽鎖の可変領域内の３つの高度に分岐ストレッチは、「フレームワーク領域」（ＦＲ）と呼ばれる、より保存された隣接領域間に配置される。ＦＲは、免疫グロブリン中の超可変領域の間で、およびそれに隣接して天然に見出されるアミノ酸配列である。一部の実施形態では、抗体分子において、軽鎖の３つの超可変領域および重鎖の３つの超可変領域は、三次元空間において互いに対して配置されて、結合抗原の三次元表面に相補的な抗原結合表面を形成する。重鎖および軽鎖のそれぞれの３つの超可変領域は、「相補性決定領域」または「ＣＤＲ」と呼ばれる。フレームワーク領域およびＣＤＲは、例えば、Ｋａｂａｔ，Ｅ．Ａ．ら（１９９１年）Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ、第５版、Ｕ．Ｓ．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ ａｎｄ Ｈｕｍａｎ Ｓｅｒｖｉｃｅｓ、ＮＩＨ公開番号９１－３２４２、およびＣｈｏｔｈｉａ，Ｃ．ら（１９８７年）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１９６巻：９０１～９１７ページにおいて定義され、記載されている。各可変鎖（例えば、可変重鎖および可変軽鎖）は、典型的には、３つのＣＤＲおよび４つのＦＲから構成され、アミノ酸の順序：ＦＲ１、ＣＤＲ１、ＦＲ２、ＣＤＲ２、ＦＲ３、ＣＤＲ３、およびＦＲ４でアミノ末端からカルボキシ末端に配列される。
[00190]本明細書で使用される「がん」は、すべてのタイプの発がんプロセスおよび／またはがん性増殖を包含することができる。一部の実施形態では、がんは、原発性腫瘍、ならびに転移性組織、または悪性に形質転換された細胞、組織、もしくは臓器を含む。一部の実施形態では、がんは、がんのすべての組織病理学および病期、例えば、浸潤性／重症度の病期を包含する。一部の実施形態では、がんは、再発がんおよび／または抵抗性がんを含む。用語「がん」および「腫瘍」は、互換的に使用することができる。例えば、両方の用語は、固形腫瘍および液体腫瘍を包含する。本明細書で使用される場合、用語「がん」または「腫瘍」は、前がん、ならびに悪性がんおよび腫瘍を含む。
[00191]本明細書で使用される場合、「免疫細胞」とは、免疫系において機能する、例えば、感染および異物の作用物質に対して防御する、種々の細胞のいずれかを指す。一部の実施形態では、この用語は、白血球、例えば、好中球、好酸球、好塩基球、リンパ球、および単球を含む。先天性白血球には、食細胞（例えば、マクロファージ、好中球、および樹状細胞）、肥満細胞、好酸球、好塩基球、およびナチュラルキラー細胞が含まれる。先天性白血球は、接触を通じてより大きな病原体を攻撃するか、微生物を飲み込んで殺滅させることによって病原体を特定し、排除し、適応免疫応答の活性化のメディエーターである。適応免疫系の細胞は、リンパ球と呼ばれる特殊なタイプの白血球である。Ｂ細胞およびＴ細胞は、重要なタイプのリンパ球であり、骨髄の造血幹細胞に由来する。Ｂ細胞は、体液性免疫応答に関与し、Ｔ細胞は、細胞性免疫応答に関与する。用語「免疫細胞」は、免疫エフェクター細胞を含む。
[00192]「免疫エフェクター細胞」という用語は、本明細書で使用される場合、免疫応答、例えば、免疫エフェクター応答の促進に関与する細胞を指す。免疫エフェクター細胞の例は、限定されないが、Ｔ細胞、例えば、アルファ／ベータＴ細胞およびガンマ／デルタＴ細胞、Ｂ細胞、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞、ナチュラルキラーＴ細胞、および肥満細胞を含む。
[00193]用語「エフェクター機能」または「エフェクター応答」は、細胞の特殊化された機能を指す。Ｔ細胞のエフェクター機能は、例えば、細胞溶解活性、またはサイトカインの分泌を含むヘルパー活性であり得る。
[00194]本発明の組成物および方法は、特定の配列、またはそれに対して実質的に同一もしくは類似の配列、例えば、特定の配列に対して少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％同一である、またはそれ以上同一である配列を有するポリペプチドおよび核酸を包含する。アミノ酸配列との関連で、用語「実質的に同一」が本明細書において使用され、第１および第２のアミノ酸配列が共通の構造ドメインおよび／または共通の機能活性を有し得るように、ｉ）第２のアミノ酸配列と同一であるか、あるいはｉｉ）第２アミノ酸配列における整列されたアミノ酸残基の保存的置換である、十分な数または最小限の数のアミノ酸残基を含有する第１アミノ酸を指す。例えば、共通の構造ドメインを含有するアミノ酸配列は、参照配列、例えば、本明細書で提供される配列に対して少なくとも約８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％の同一性を有する。
[00195]ヌクレオチド配列との関連で、用語「実質的に同一」が本明細書において使用され、第１および第２ヌクレオチド配列が、共通の機能活性を有するポリペプチドをコードする、または共通のポリペプチド構造ドメインまたは共通のポリペプチド機能活性をコードするように、第２核酸配列におけるアラインされたヌクレオチドと同一である、十分な数または最小限の数のヌクレオチドを含有する第１核酸配列を指す。例えば、参照配列、例えば本明細書で提供される配列に対して少なくとも約８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％の同一性を有するヌクレオチド配列。
[00196]用語「バリアント」とは、参照アミノ酸配列と実質的に同一のアミノ酸配列を有するか、または実質的に同一のヌクレオチド配列によりコードされるポリペプチドを指す。一部の実施形態では、バリアントは、機能的バリアントである。
[00197]用語「機能的バリアント」とは、参照アミノ酸配列と実質的に同一のアミノ酸配列を有するポリペプチド、または実質的に同一のヌクレオチド配列によりコードされ、参照アミノ酸配列の１つまたは複数の活性化を有し得るポリペプチドを指す。
[00198]配列間の相同性または配列同一性（これらの用語は本明細書において互換的に使用される）の計算は以下のように行われる。
[00199]２つのアミノ酸配列または２つの核酸配列の同一性パーセントを決定するため、最適な比較目的のために配列がアラインメントされる（例えば、最適アラインメントのために、第１および第２アミノ酸または核酸配列の１つまたは両方にギャップが導入され得、非相同配列は比較目的のために無視され得る）。好ましい実施形態では、比較目的のためにアラインされた参照配列の長さは、参照配列の長さの少なくとも３０％、好ましくは少なくとも４０％、さらに好ましくは少なくとも５０％、６０％、なおさらに好ましくは少なくとも７０％、８０％、９０％、１００％である。次に、対応するアミノ酸位置またはヌクレオチド位置のアミノ酸残基またはヌクレオチドが比較される。第１配列の位置が、第２配列での対応する位置と同じアミノ酸残基またはヌクレオチドによって占められる場合、分子は、その位置にて同一である（本明細書で使用される場合、アミノ酸または核酸「同一性」は、アミノ酸または核酸「相同性」と等しい）。
[00200]２つの配列間の同一性パーセントは、配列によって共有される同一位置の数の関数であり、２つの配列の最適アラインメントのために導入する必要がある、ギャップ数および各ギャップの長さが考慮に入れられる。
[00201]配列の比較および２つの配列間の同一性パーセントの決定は、数学的アルゴリズムを用いて達成することができる。好ましい実施形態では、２つのアミノ酸配列間の同一性パーセントは、Ｂｌｏｓｓｕｍ６２マトリックスまたはＰＡＭ２５０マトリックス、および１６、１４、１２、１０、８、６、または４のギャップの重みおよび１、２、３、４、５、または６の長さの重みのいずれかを用いて、ＧＣＧソフトウェアパッケージ（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｇｃｇ．ｃｏｍにて入手可能である）のＧＡＰプログラムに組み込まれているＮｅｅｄｌｅｍａｎおよびＷｕｎｓｃｈ（（１９７０年）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．４８巻：４４４～４５３ページ）アルゴリズムを用いて決定される。さらに別の好ましい実施形態では、２つのヌクレオチド配列間の同一性パーセントは、ＧＣＧソフトウェアパッケージ（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｇｃｇ．ｃｏｍにて入手可能である）のＧＡＰプログラムを使用して、ＮＷＳｇａｐｄｎａ．ＣＭＰマトリックスおよび４０、５０、６０、７０、または８０のギャップの重みおよび１、２、３、４、５、または６の長さの重みを用いて決定される。特に好ましいセットのパラメーター（および別段の指定がない限り使用されるべきであるもの）は、ギャップペナルティ１２、ギャップ伸張ペナルティ４、およびフレームシフトギャップペナルティ５を有するＢｌｏｓｓｕｍ６２スコアマトリックスである。
[00202]２つのアミノ酸配列間またはヌクレオチド配列間の同一性パーセントは、ＰＡＭ１２０残基重み付け表、ギャップ長ペナルティ１２およびギャップペナルティ４を用いて、ＡＬＩＧＮプログラム（バージョン２．０）に組み込まれたＥ．ＭｅｙｅｒｓおよびＷ．Ｍｉｌｌｅｒ（（１９８９年）ＣＡＢＩＯＳ、４巻：１１～１７ページ）のアルゴリズムを使用して決定することができる。
[00203]本明細書に記載される核酸およびタンパク質配列は、例えば、他のファミリーメンバーまたは関連配列を同定するために、公開データベースに対する検索を行うための「クエリー配列」として用いることができる。このような検索は、Ａｌｔｓｃｈｕｌら（１９９０年）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２１５巻：４０３～１０ページのＮＢＬＡＳＴおよびＸＢＬＡＳＴプログラム（バージョン２．０）を用いて行うことができる。ＢＬＡＳＴヌクレオチド検索は、本発明の核酸分子と相同なヌクレオチド配列を得るために、ＮＢＬＡＳＴプログラム、スコア＝１００、ワードレングス＝１２を用いて行うことができる。ＢＬＡＳＴタンパク質検索は、本発明のタンパク質分子と相同なアミノ酸配列を得るために、ＸＢＬＡＳＴプログラム、スコア＝５０、ワードレングス＝３を用いて行うことができる。比較目的のためのギャップドアラインメントを得るために、ギャップドＢＬＡＳＴは、Ａｌｔｓｃｈｕｌら（１９９７年）Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．２５巻：３３８９～３４０２ページに記載されているように利用することができる。ＢＬＡＳＴおよびギャップドＢＬＡＳＴプログラムを利用する場合、それぞれのプログラム（例えば、ＸＢＬＡＳＴおよびＮＢＬＡＳＴ）のデフォルトパラメーターを使用することができる。ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｎｃｂｉ．ｎｌｍ．ｎｉｈ．ｇｏｖを参照。
[00204]本発明の分子は、それらの機能に実質的な影響を及ぼさない、さらなる保存的または非必須アミノ酸置換を有し得ることが理解される。
[00205]用語「アミノ酸」は、天然または合成のいずれであっても、アミノ官能性と酸官能性の両方を含み、天然に存在するアミノ酸のポリマーに含まれ得るすべての分子を包含することを意図する。例示的なアミノ酸には、天然に存在するアミノ酸；そのアナログ、誘導体および同族体；バリアント側鎖を有するアミノ酸アナログ；ならびに先述のいずれかのすべての立体異性体が含まれる。本明細書で使用される場合、用語「アミノ酸」は、ＤまたはＬ光学異性体とペプチド模倣体の両方を含む。
[00206]「保存的アミノ酸置換」とは、アミノ酸残基が、類似の側鎖を有するアミノ酸残基で置換されるものである。類似の側鎖を有するアミノ酸残基のファミリーは、当該技術分野において定義されている。これらのファミリーには、塩基性側鎖（例えば、リシン、アルギニン、ヒスチジン）、酸性側鎖（例えば、アスパラギン酸、グルタミン酸）、非荷電極性側鎖（例えば、グリシン、アスパラギン、グルタミン、セリン、スレオニン、チロシン、システイン）、非極性側鎖（例えば、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、フェニルアラニン、メチオニン、トリプトファン）、ベータ分枝側鎖（例えば、スレオニン、バリン、イソロイシン）および芳香族側鎖（例えば、チロシン、フェニルアラニン、トリプトファン、ヒスチジン）を有するアミノ酸が含まれる。
[00207]用語「ポリペプチド」、「ペプチド」および「タンパク質」（一本鎖の場合）は、本明細書において互換的に使用され、任意の長さのアミノ酸のポリマーを指す。ポリマーは、直鎖状または分枝鎖状であり得て、修飾アミノ酸を含み得、非アミノ酸により割り込まれ得る。これらの用語はまた、修飾されているアミノ酸ポリマー；例えば、ジスルフィド結合形成、グリコシル化、脂質化、アセチル化、リン酸化、または標識成分とのコンジュゲーションなどの任意の他の操作を包含する。ポリペプチドは、天然源から単離することができ、真核生物もしくは原核生物宿主からの組換え技術により産生することができ、または合成手法の産生物であり得る。
[00208]用語「核酸」、「核酸配列」、「ヌクレオチド配列」、または「ポリヌクレオチド配列」、および「ポリヌクレオチド」は、互換的に使用される。それらは、デオキシリボヌクレオチドまたはリボヌクレオチド、またはそれらのアナログのいずれかの長さのヌクレオチドのポリマー形態を指す。ポリヌクレオチドは、一本鎖または二本鎖のいずれかであり得、一本鎖である場合、コード鎖または非コード（アンチセンス）鎖であり得る。ポリヌクレオチドは、メチル化ヌクレオチドおよびヌクレオチドアナログなどの修飾ヌクレオチドを含み得る。ヌクレオチドの配列は、非ヌクレオチド成分によって割り込まれ得る。ポリヌクレオチドは、重合後、例えば、標識成分とのコンジュゲーションによってさらに修飾され得る。核酸は、組換えポリヌクレオチド、またはゲノム、ｃＤＮＡ、天然に存在しないかもしくは非天然配列で別のポリヌクレオチドに連結されている半合成、または合成起源のポリヌクレオチドであり得る。
[00209]用語「単離された」とは、本明細書で使用される場合、その元の環境または天然の環境（例えば、天然に存在する場合には自然環境）から取り出される材料を指す。例えば、生きている動物に存在する天然に存在するポリヌクレオチドまたはポリペプチドは単離されないが、天然系の共存物質の一部または全部からヒトの介入によって分離された同一のポリヌクレオチドまたはポリペプチドが単離される。このようなポリヌクレオチドは、ベクターの一部であり得、および／またはこのようなポリヌクレオチドもしくはポリペプチドは、組成物の一部であり得、このようなベクターまたは組成物は、天然に見出される環境の一部ではないという点で依然として単離され得る。
[00210]本明細書で使用される場合、用語「トランスフォーミング増殖因子ベータ－１（ＴＧＦ－ベータ１）」とは、ヒトにおいて、遺伝子ＴＧＦＢ１、またはそのオルソログによってコードされるタンパク質を指す。Ｓｗｉｓｓ－Ｐｒｏｔ受託番号Ｐ０１１３７は、例示的なヒトＴＧＦ－ベータ１アミノ酸配列を提供する。例示的な未熟ヒトＴＧＦ－ベータ１アミノ酸配列は、配列番号６３７８で提供される。例示的な成熟ヒトＴＧＦ－ベータ１アミノ酸配列は、配列番号６３９５で提供される。
[00211]本明細書で使用される場合、用語「トランスフォーミング増殖因子ベータ－２（ＴＧＦ－ベータ２）」とは、ヒトにおいて、遺伝子ＴＧＦＢ２、またはそのオルソログによってコードされるタンパク質を指す。Ｓｗｉｓｓ－Ｐｒｏｔ受託番号Ｐ６１８１２は、例示的なヒトＴＧＦ－ベータ２アミノ酸配列を提供する。例示的な未熟ヒトＴＧＦ－ベータ２アミノ酸配列は、配列番号６３７９で提供される。例示的な成熟ヒトＴＧＦ－ベータ２アミノ酸配列は、配列番号６３９６で提供される。
[00212]本明細書で使用される場合、用語「トランスフォーミング増殖因子ベータ－３（ＴＧＦ－ベータ３）」とは、ヒトにおいて、遺伝子ＴＧＦＢ３、またはそのオルソログによってコードされるタンパク質を指す。Ｓｗｉｓｓ－Ｐｒｏｔ受託番号Ｐ１０６００は、例示的なヒトＴＧＦ－ベータ３アミノ酸配列を提供する。例示的な未熟ヒトＴＧＦ－ベータ３アミノ酸配列は、配列番号６３８０で提供される。例示的な成熟ヒトＴＧＦ－ベータ３アミノ酸配列は、配列番号６３９７で提供される。
[00213]本明細書で使用される場合、「ＴＧＦ－ベータ受容体ポリペプチド」とは、ＴＧＦ－ベータ受容体（例えば、ＴＧＦＢＲ１、ＴＧＦＢＲ２またはＴＧＦＢＲ３）またはその断片、またはそのバリアントを指す。
[00214]本明細書で使用される場合、用語「トランスフォーミング増殖因子ベータ受容体１型（ＴＧＦＢＲ１）」（ＡＬＫ－５またはＳＫＲ４としても公知である）とは、ヒトにおいて、遺伝子ＴＧＦＢＲ１、またはそのオルソログによってコードされるタンパク質を指す。Ｓｗｉｓｓ－Ｐｒｏｔ受託番号Ｐ３６８９７は、例示的なヒトＴＧＦＢＲ１アミノ酸配列を提供する。例示的な未熟ヒトＴＧＦＢＲ１アミノ酸配列は、配列番号６３８１、６３８２および６３８３で提供される。例示的な成熟ヒトＴＧＦＢＲ１アミノ酸配列は、配列番号６３９８、６３９９および６４００で提供される。本明細書で使用される場合、「ＴＧＦＢＲ１ポリペプチド」とは、ＴＧＦＢＲ１またはその断片、またはそのバリアントを指す。
[00215]本明細書で使用される場合、用語「トランスフォーミング増殖因子ベータ受容体２型（ＴＧＦＢＲ２）」とは、ヒトにおいて、遺伝子ＴＧＦＢＲ２、またはそのオルソログによってコードされるタンパク質を指す。Ｓｗｉｓｓ－Ｐｒｏｔ受託番号Ｐ３７１７３は、例示的なヒトＴＧＦＢＲ２アミノ酸配列を提供する。例示的未熟ヒトＴＧＦＢＲ２アミノ酸配列は、配列番号６３８４および６３８５で提供される。例示的な成熟ヒトＴＧＦＢＲ２アミノ酸配列は、配列番号６４０１および６４０２で提供される。本明細書で使用される場合、「ＴＧＦＢＲ２ポリペプチド」とは、ＴＧＦＢＲ２またはその断片、またはそのバリアントを指す。
[00216]本明細書で使用される場合、用語「トランスフォーミング増殖因子ベータ受容体３型（ＴＧＦＢＲ３）」とは、ヒトにおいて、遺伝子ＴＧＦＢＲ３、またはそのオルソログによってコードされるタンパク質を指す。Ｓｗｉｓｓ－Ｐｒｏｔ受託番号Ｑ０３１６７は、例示的なヒトＴＧＦＢＲ３アミノ酸配列を提供する。例示的な未熟ヒトＴＧＦＢＲ３アミノ酸配列は、配列番号６３９２および６３９３で提供される。例示的な成熟ヒトＴＧＦＢＲ３アミノ酸配列は、配列番号６４０３および６４０４で提供される。本明細書で使用される場合、「ＴＧＦＢＲ３ポリペプチド」とは、ＴＧＦＢＲ３またはその断片またはそのバリアントを指す。
[00217]本発明の種々の態様を以下にさらに詳細に説明する。追加の定義は、明細書全体にわたって記載される。
抗体分子
[00218]一部の実施形態では、本明細書で記載される多機能性分子、多特異性分子および／または抗原結合性ドメインは、抗体分子を含む。一実施形態では、抗体分子は、がん抗原、例えば、腫瘍抗原または間質抗原に結合する。一部の実施形態では、がん抗原は、例えば、哺乳動物、例えば、ヒトのがん抗原である。他の実施形態では、抗体分子は、免疫細胞抗原、例えば、哺乳動物、例えば、ヒトの免疫細胞抗原に結合する。例えば、抗体分子は、がん抗原または免疫細胞抗原上のエピトープ、例えば、線形エピトープまたは立体構造エピトープに特異的に結合する。
[00219]一実施形態では、抗体分子は単一特異性抗体分子であり、単一のエピトープに結合する。例えば、単一特異性抗体分子は、それぞれが同じエピトープに結合する複数の免疫グロブリン可変ドメイン配列を有する。
[00220]一実施形態では、抗体分子は、多特異性または多機能性抗体分子であり、例えば、それは複数の免疫グロブリン可変ドメイン配列を含み、複数の免疫グロブリン可変ドメイン配列のうちの第１のものは第１のエピトープに対する結合特異性を有し、複数の免疫グロブリン可変ドメイン配列のうちの第２のものは第２のエピトープに対する結合特異性を有する。一実施形態では、第１および第２のエピトープは、同じ抗原、例えば、同じタンパク質（または多量体タンパク質のサブユニット）上にある。一実施形態では、第１および第２のエピトープはオーバーラップする。一実施形態では、第１および第２のエピトープはオーバーラップしない。一実施形態では、第１および第２のエピトープは、異なる抗原、例えば、異なるタンパク質（または多量体タンパク質の異なるサブユニット）上にある。一実施形態では、多特異性抗体分子は、第３、第４または第５の免疫グロブリン可変ドメインを含む。一実施形態では、多特異性抗体分子は、二特異性抗体分子、三特異性抗体分子、または四特異性抗体分子である。
[00221]一実施形態では、多特異性抗体分子は二特異性抗体分子である。二特異性抗体は、２つだけの抗原に対して特異性を有する。二特異性抗体分子は、第１のエピトープに対して結合特異性を有する第１の免疫グロブリン可変ドメイン配列および第２のエピトープに対して結合特異性を有する第２の免疫グロブリン可変ドメイン配列により特徴付けられる。一実施形態では、第１および第２のエピトープは、同じ抗原、例えば、同じタンパク質（または多量体タンパク質のサブユニット）上にある。一実施形態では、第１および第２のエピトープはオーバーラップする。一実施形態では、第１および第２のエピトープはオーバーラップしない。一実施形態では、第１および第２のエピトープは、異なる抗原、例えば、異なるタンパク質（または多量体タンパク質の異なるサブユニット）上にある。一実施形態では、二特異性抗体分子は、第１のエピトープに対して結合特異性を有する重鎖可変ドメイン配列および軽鎖可変ドメイン配列ならびに第２のエピトープに対して結合特異性を有する重鎖可変ドメイン配列および軽鎖可変ドメイン配列を含む。一実施形態では、二特異性抗体分子は、第１のエピトープに対して結合特異性を有する半抗体および第２のエピトープに対して結合特異性を有する半抗体を含む。一実施形態では、二特異性抗体分子は、第１のエピトープに対して結合特異性を有する半抗体、またはその断片、および第２のエピトープに対して結合特異性を有する半抗体、またはその断片を含む。一実施形態では、二特異性抗体分子は、第１のエピトープに対して結合特異性を有するｓｃＦｖもしくはＦａｂ、またはその断片、および第２のエピトープに対して結合特異性を有するｓｃＦｖもしくはＦａｂ、またはその断片を含む。
[00222]一実施形態では、抗体分子は、ダイアボディ、および一本鎖分子の他に、抗体の抗原結合性断片（例えば、Ｆａｂ、Ｆ（ａｂ’）２、およびＦｖ）を含む。例えば、抗体分子は、重（Ｈ）鎖可変ドメイン配列（本明細書でＶＨと略記される）、および軽（Ｌ）鎖可変ドメイン配列（本明細書でＶＬと略記される）を含むことができる。一実施形態では、抗体分子は、重鎖および軽鎖を含むかまたはからなる（本明細書で半抗体と称される。別の例では、抗体分子は、２つの重（Ｈ）鎖可変ドメイン配列および２つの軽（Ｌ）鎖可変ドメイン配列を含み、それによって、２つの抗原結合性部位、例えば、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｃ、Ｆｄ、Ｆｄ’、Ｆｖ、一本鎖抗体（例えばｓｃＦｖ）、単一可変ドメイン抗体、ダイアボディ（Ｄａｂ）（二価および二特異性）、ならびにキメラ（例えば、ヒト化）抗体を形成し、これらは全長抗体の修飾によって産生されるか、または組換えＤＮＡ技術を使用してｄｅ ｎｏｖｏで合成されるものであってもよい。これらの機能的抗体断片は、それらの各々の抗原または受容体と選択的に結合する能力を保持する。抗体および抗体断片は、ＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＭ、ＩｇＤ、およびＩｇＥが挙げられるがそれに限定されない抗体の任意のクラスから、ならびに抗体の任意のサブクラス（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、およびＩｇＧ４）からのものであり得る。抗体分子の調製物は、モノクローナルまたはポリクローナルであり得る。抗体分子はまた、ヒト、ヒト化、ＣＤＲグラフト化、またはｉｎ ｖｉｔｒｏで生成された抗体であり得る。抗体は、例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、またはＩｇＧ４から選択される重鎖定常領域を有し得る。抗体はまた、例えば、カッパまたはラムダから選択される軽鎖を有し得る。「免疫グロブリン」（Ｉｇ）という用語は、本明細書で「抗体」という用語と交換可能に使用される。
[00223]抗体分子の抗原結合性断片の例としては、（ｉ）ＶＬ、ＶＨ、ＣＬおよびＣＨ１ドメインからなる一価断片である、Ｆａｂ断片、（ｉｉ）ヒンジ領域においてジスルフィド架橋によって連結された２つのＦａｂ断片を含む二価断片である、Ｆ（ａｂ’）２断片、（ｉｉｉ）ＶＨおよびＣＨ１ドメインからなる、Ｆｄ断片、（ｉｖ）抗体の単一のアームのＶＬおよびＶＨドメインからなる、Ｆｖ断片、（ｖ）ＶＨドメインからなる、ダイアボディ（ｄＡｂ）断片、（ｖｉ）ラクダまたはラクダ化可変ドメイン、（ｖｉｉ）一本鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）、例えば、Ｂｉｒｄら、（１９８８） Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４２：４２３～４２６ページ；およびＨｕｓｔｏｎら、（１９８８） Ｐｒｏｃ． Ｎａｔｌ． Ａｃａｄ． Ｓｃｉ． ＵＳＡ ８５：５８７９～５８８３ページを参照）、（ｖｉｉｉ）単一ドメイン抗体が挙げられる。これらの抗体断片は、当業者に公知の従来技術を使用して得られ、断片は、インタクトな抗体と同じ方式で有用性についてスクリーニングされる。
[00224]抗体分子としては、インタクトな分子の他に、その機能的断片が挙げられる。抗体分子の定常領域は、抗体の特性を修飾するため（例えば、Ｆｃ受容体結合、抗体グリコシル化、システイン残基の数、エフェクター細胞機能、または補体機能のうちの１つまたは複数を増加または減少させるため）に変更、例えば、突然変異され得る。
[00225]抗体分子はまた単一ドメイン抗体であり得る。単一ドメイン抗体は、その相補性（ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔａｒｙ）決定領域が単一ドメインポリペプチドの部分である抗体を含むことができる。例としては、重鎖抗体、軽鎖を天然に欠いている抗体、従来の４鎖抗体に由来する単一ドメイン抗体、操作された抗体および抗体に由来するもの以外の単一ドメインスキャフォールドが挙げられるがそれに限定されない。単一ドメイン抗体は、当該技術分野における任意のもの、または任意の将来的な単一ドメイン抗体であってもよい。単一ドメイン抗体は、マウス、ヒト、ラクダ、ラマ、魚、サメ、ヤギ、ウサギ、およびウシが挙げられるがそれに限定されない任意の種に由来してもよい。本発明の別の態様によれば、単一ドメイン抗体は、軽鎖を欠いている重鎖抗体として公知の天然に存在する単一ドメイン抗体である。そのような単一ドメイン抗体は、例えば、ＷＯ９４０４６７８に開示されている。明確性の理由から、軽鎖を天然に欠いている重鎖抗体に由来するこの可変ドメインは、４鎖免疫グロブリンの従来のＶＨからそれを区別するためにＶＨＨまたはナノボディとして本明細書で知られる。そのようなＶＨＨ分子は、ラクダ科の種、例えば、ラクダ、ラマ、ヒトコブラクダ、アルパカおよびグアナコにおいて産生された抗体に由来することができる。ラクダ科以外の他の種が、軽鎖を天然に欠いている重鎖抗体を産生することがあり、そのようなＶＨＨは本発明の範囲内である。
[00226]ＶＨおよびＶＬ領域は、「フレームワーク領域」（ＦＲまたはＦＷ）と称されるより保存された領域が差し挟まれた、「相補性決定領域」（ＣＤＲ）と称される超可変性の領域にさらに分割することができる。
[00227]フレームワーク領域およびＣＤＲの範囲は、多数の方法によって精密に定義されている（Ｋａｂａｔ， Ｅ． Ａ．ら、（１９９１） Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ、第５版、Ｕ．Ｓ． Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ ａｎｄ Ｈｕｍａｎ Ｓｅｒｖｉｃｅｓ、ＮＩＨ Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ Ｎｏ． ９１－３２４２；Ｃｈｏｔｈｉａ， Ｃ．ら、（１９８７） Ｊ． Ｍｏｌ． Ｂｉｏｌ． １９６：９０１～９１７ページ；およびＯｘｆｏｒｄ ＭｏｌｅｃｕｌａｒのＡｂＭ抗体モデリングソフトウェアによって使用されるＡｂＭの定義を参照。一般に、例えば、「Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｓｅｑｕｅｎｃｅ ａｎｄ Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ Ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ Ａｎｔｉｂｏｄｙ Ｖａｒｉａｂｌｅ Ｄｏｍａｉｎｓ」、Ａｎｔｉｂｏｄｙ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ Ｌａｂ Ｍａｎｕａｌ（Ｄｕｅｂｅｌ， Ｓ．およびＫｏｎｔｅｒｍａｎｎ， Ｒ．編、Ｓｐｒｉｎｇｅｒ－Ｖｅｒｌａｇ、Ｈｅｉｄｅｌｂｅｒｇ）を参照）。
[00228]「相補性決定領域」、および「ＣＤＲ」という用語は、本明細書で使用される場合、抗原特異性および結合親和性を付与する抗体可変領域内のアミノ酸の配列を指す。一般に、各重鎖可変領域中に３つのＣＤＲ（ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３）および各軽鎖可変領域中に３つのＣＤＲ（ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３）がある。
[00229]所与のＣＤＲの精密なアミノ酸配列の境界は、Ｋａｂａｔら、（１９９１）、「Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ」、第５版、Ｐｕｂｌｉｃ Ｈｅａｌｔｈ Ｓｅｒｖｉｃｅ、Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ、Ｂｅｔｈｅｓｄａ、ＭＤ（「Ｋａｂａｔ」番号付けスキーム）、Ａｌ－Ｌａｚｉｋａｎｉら、（１９９７） ＪＭＢ ２７３、９２７～９４８ページ（「Ｃｈｏｔｈｉａ」番号付けスキーム）に記載のものを含む、多数の公知のスキームのいずれかを使用して決定することができる。本明細書で使用される場合、「Ｃｈｏｔｈｉａ」番号スキームに従って定義されるＣＤＲは、「超可変ループ」と称されることもある。
[00230]例えば、Ｋａｂａｔの下で、重鎖可変ドメイン（ＶＨ）中のＣＤＲアミノ酸残基は、３１～３５（ＨＣＤＲ１）、５０～６５（ＨＣＤＲ２）、および９５～１０２（ＨＣＤＲ３）と番号付けされ、軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）中のＣＤＲアミノ酸残基は、２４～３４（ＬＣＤＲ１）、５０～５６（ＬＣＤＲ２）、および８９～９７（ＬＣＤＲ３）と番号付けされる。Ｃｈｏｔｈｉａの下で、ＶＨ中のＣＤＲアミノ酸は、２６～３２（ＨＣＤＲ１）、５２～５６（ＨＣＤＲ２）、および９５～１０２（ＨＣＤＲ３）と番号付けされ、ＶＬ中のアミノ酸残基は、２６～３２（ＬＣＤＲ１）、５０～５２（ＬＣＤＲ２）、および９１～９６（ＬＣＤＲ３）と番号付けされる。
[00231]各ＶＨおよびＶＬは、典型的には、以下の順序：ＦＲ１、ＣＤＲ１、ＦＲ２、ＣＤＲ２、ＦＲ３、ＣＤＲ３、ＦＲ４でアミノ末端からカルボキシ末端へと並んだ３つのＣＤＲおよび４つのＦＲを含む。
[00232]抗体分子は、ポリクローナルまたはモノクローナル抗体であり得る。
[00233]「モノクローナル抗体」または「モノクローナル抗体組成物」という用語は、本明細書で使用される場合、単一の分子組成の抗体分子の調製物を指す。モノクローナル抗体組成物は、特定のエピトープに対して単一の結合特異性および親和性を表し示す。モノクローナル抗体は、ハイブリドーマ技術によって、またはハイブリドーマ技術を使用しない方法（例えば、組換え法）によって作製することができる。
[00234]抗体は、組換えによって産生することができ、例えば、ファージディスプレイまたはコンビナトリアル法によって産生することができる。
[00235]抗体を生成するためのファージディスプレイおよびコンビナトリアル法は、当該技術分野において公知である（例えば、Ｌａｄｎｅｒら、米国特許第５，２２３，４０９号；Ｋａｎｇら、国際公開ＷＯ９２／１８６１９；Ｄｏｗｅｒら、国際公開ＷＯ９１／１７２７１；Ｗｉｎｔｅｒら、国際公開ＷＯ９２／２０７９１；Ｍａｒｋｌａｎｄら、国際公開ＷＯ９２／１５６７９；Ｂｒｅｉｔｌｉｎｇら、国際公開ＷＯ９３／０１２８８；ＭｃＣａｆｆｅｒｔｙら、国際公開ＷＯ９２／０１０４７；Ｇａｒｒａｒｄら、国際公開ＷＯ９２／０９６９０；Ｌａｄｎｅｒら、国際公開ＷＯ９０／０２８０９；Ｆｕｃｈｓら、（１９９１） Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ９：１３７０～１３７２ページ；Ｈａｙら、（１９９２） Ｈｕｍ Ａｎｔｉｂｏｄ Ｈｙｂｒｉｄｏｍａｓ ３：８１～８５ページ；Ｈｕｓｅら、（１９８９） Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４６：１２７５～１２８１ページ；Ｇｒｉｆｆｔｈｓら、（１９９３） ＥＭＢＯ Ｊ １２：７２５～７３４ページ；Ｈａｗｋｉｎｓら、（１９９２） Ｊ Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ ２２６：８８９～８９６ページ；Ｃｌａｃｋｓｏｎら、（１９９１） Ｎａｔｕｒｅ ３５２：６２４～６２８ページ；Ｇｒａｍら、（１９９２） ＰＮＡＳ ８９：３５７６～３５８０ページ；Ｇａｒｒａｄら、（１９９１） Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ９：１３７３～１３７７ページ；Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍら、（１９９１） Ｎｕｃ Ａｃｉｄ Ｒｅｓ １９：４１３３～４１３７ページ；およびＢａｒｂａｓら、（１９９１） ＰＮＡＳ ８８：７９７８～７９８２ページ（これらのすべての内容はこれにより参照により本明細書に組み込まれる）に記載される通りである）。
[00236]一実施形態では、抗体は、完全ヒト抗体（例えば、ヒト免疫グロブリン配列からの抗体を産生するように遺伝子操作されたマウスにおいて作製される抗体）、または非ヒト抗体、例えば、齧歯動物（マウスもしくはラット）、ヤギ、霊長動物（例えば、サル）、ラクダ抗体である。好ましくは、非ヒト抗体は齧歯動物（マウスまたはラット抗体）である。齧歯動物抗体を産生する方法は当該技術分野において公知である。
[00237]ヒトモノクローナル抗体は、マウス系ではなくヒト免疫グロブリン遺伝子を持つトランスジェニックマウスを使用して生成することができる。目的の抗原を用いて免疫化されたこれらのトランスジェニックマウスからの脾臓細胞を使用して、ヒトタンパク質からのエピトープに対して特異的親和性を有するヒトｍＡｂを分泌するハイブリドーマが産生される（例えば、Ｗｏｏｄら、国際出願ＷＯ９１／００９０６、Ｋｕｃｈｅｒｌａｐａｔｉら、ＰＣＴ国際公開ＷＯ９１／１０７４１；Ｌｏｎｂｅｒｇら、国際出願ＷＯ９２／０３９１８；Ｋａｙら、国際出願９２／０３９１７；Ｌｏｎｂｅｒｇ， Ｎ．ら、１９９４ Ｎａｔｕｒｅ ３６８：８５６～８５９ページ；Ｇｒｅｅｎ， Ｌ．Ｌ．ら、１９９４ Ｎａｔｕｒｅ Ｇｅｎｅｔ． ７：１３～２１ページ；Ｍｏｒｒｉｓｏｎ， Ｓ．Ｌ．ら、１９９４ Ｐｒｏｃ． Ｎａｔｌ． Ａｃａｄ． Ｓｃｉ． ＵＳＡ ８１：６８５１～６８５５ページ；Ｂｒｕｇｇｅｍａｎら、１９９３ Ｙｅａｒ Ｉｍｍｕｎｏｌ ７：３３～４０ページ；Ｔｕａｉｌｌｏｎら、１９９３ ＰＮＡＳ ９０：３７２０～３７２４ページ；Ｂｒｕｇｇｅｍａｎら、１９９１ Ｅｕｒ Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ ２１：１３２３～１３２６ページを参照）。
[00238]抗体分子は、可変領域、またはその部分、例えば、ＣＤＲが、非ヒト生物、例えば、ラットまたはマウスにおいて生成されたものであり得る。キメラ、ＣＤＲグラフト化、およびヒト化抗体は、本発明の範囲内である。非ヒト生物、例えば、ラットまたはマウスにおいて生成され、次に、ヒトにおける抗原性を減少させるために、例えば、可変フレームワークまたは定常領域において修飾された抗体分子は、本発明の範囲内である。
[00239]「有効ヒト」タンパク質は、中和抗体応答、例えば、ヒト抗マウス抗体（ＨＡＭＡ）応答を実質的に誘起しないタンパク質である。ＨＡＭＡは、多数の状況において、例えば、例えば慢性または再発性の疾患状態の処置において、抗体分子が繰り返し投与される場合に、問題となり得る。ＨＡＭＡ応答は、血清からの抗体クリアランスの増加（例えば、Ｓａｌｅｈら、Ｃａｎｃｅｒ Ｉｍｍｕｎｏｌ． Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒ．、３２：１８０～１９０ページ（１９９０）を参照）のため、そしてまた潜在的なアレルギー性反応（例えば、ＬｏＢｕｇｌｉｏら、Ｈｙｂｒｉｄｏｍａ、５：５１１７～５１２３ページ（１９８６）を参照）のため、繰返しの抗体投与を潜在的に有効でないものとさせることがある。
[00240]キメラ抗体は、当該技術分野において公知の組換えＤＮＡ技術によって産生することができる（Ｒｏｂｉｎｓｏｎら、国際公開ＰＣＴ／ＵＳ８６／０２２６９；Ａｋｉｒａら、欧州特許出願第１８４，１８７号；Ｔａｎｉｇｕｃｈｉ， Ｍ．、欧州特許出願第１７１，４９６号；Ｍｏｒｒｉｓｏｎら、欧州特許出願第１７３，４９４号；Ｎｅｕｂｅｒｇｅｒら、国際出願ＷＯ８６／０１５３３；Ｃａｂｉｌｌｙら、米国特許第４，８１６，５６７号；Ｃａｂｉｌｌｙら、欧州特許出願第１２５，０２３号；Ｂｅｔｔｅｒら、（１９８８ Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４０：１０４１～１０４３ページ）；Ｌｉｕら、（１９８７） ＰＮＡＳ ８４：３４３９～３４４３ページ；Ｌｉｕら、１９８７、Ｊ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． １３９：３５２１～３５２６ページ；Ｓｕｎら、（１９８７） ＰＮＡＳ ８４：２１４～２１８ページ；Ｎｉｓｈｉｍｕｒａら、１９８７、Ｃａｎｃ． Ｒｅｓ． ４７：９９９～１００５ページ；Ｗｏｏｄら、（１９８５） Ｎａｔｕｒｅ ３１４：４４６～４４９ページ；およびＳｈａｗら、１９８８、Ｊ． Ｎａｔｌ Ｃａｎｃｅｒ Ｉｎｓｔ． ８０：１５５３～１５５９ページを参照）。
[00241]ヒト化またはＣＤＲグラフト化抗体は、ドナーＣＤＲで置き換えられた（重およびまたは軽免疫グロブリン（ｉｍｍｕｏｇｌｏｂｕｌｉｎ）鎖のうちの）少なくとも１つまたは２つであるが一般に３つすべてのレシピエントＣＤＲを有する。抗体は、非ヒトＣＤＲの少なくとも部分で置き換えられていてもよく、またはＣＤＲの一部のみが非ヒトＣＤＲで置き換えられていてもよい。抗原への結合のために要求されるＣＤＲの数を置き換えることのみが必要である。好ましくは、ドナーは、齧歯動物抗体、例えば、ラットまたはマウス抗体であり、レシピエントは、ヒトフレームワークまたはヒトコンセンサスフレームワークである。典型的には、ＣＤＲを提供する免疫グロブリンは「ドナー」と呼ばれ、フレームワークを提供する免疫グロブリンは「アクセプター」と呼ばれる。一実施形態では、ドナー免疫グロブリンは非ヒト（例えば、齧歯動物）である。アクセプターフレームワークは、天然に存在する（例えば、ヒト）フレームワークもしくはコンセンサスフレームワーク、またはそれに対して約８５％もしくはより高い、好ましくは、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一である配列である。
[00242]本明細書で使用される場合、「コンセンサス配列」という用語は、関連配列のファミリーにおいて最も頻繁に生じるアミノ酸（またはヌクレオチド）から形成される配列を指す（例えば、Ｗｉｎｎａｋｅｒ、Ｆｒｏｍ Ｇｅｎｅｓ ｔｏ Ｃｌｏｎｅｓ（Ｖｅｒｌａｇｓｇｅｓｅｌｌｓｃｈａｆｔ、Ｗｅｉｎｈｅｉｍ、Ｇｅｒｍａｎｙ １９８７）を参照。タンパク質のファミリーにおいて、コンセンサス配列中の各位置は、ファミリーにおいてその位置において最も頻繁に生じるアミノ酸によって占有される。２つのアミノ酸が等しく頻繁に生じる場合、いずれかをコンセンサス配列に含めることができる。「コンセンサスフレームワーク」は、コンセンサス免疫グロブリン配列中のフレームワーク領域を指す。
[00243]抗体分子は、当該技術分野において公知の方法によってヒト化させることができる（例えば、Ｍｏｒｒｉｓｏｎ， Ｓ． Ｌ．、１９８５、Ｓｃｉｅｎｃｅ ２２９：１２０２～１２０７ページ、Ｏｉら、１９８６、ＢｉｏＴｅｃｈｎｉｑｕｅｓ ４：２１４、ならびにＱｕｅｅｎら、米国特許第５，５８５，０８９号、米国特許第５，６９３，７６１号および米国特許第５，６９３，７６２号（これらのすべての内容はこれにより参照により本明細書に組み込まれる）を参照）。
[00244]ヒト化またはＣＤＲグラフト化抗体分子は、ＣＤＲグラフト化またはＣＤＲ置換によって産生することができ、それにおいて免疫グロブリン鎖の１つ、２つ、またはすべてのＣＤＲを置き換えることができる。例えば、米国特許第５，２２５，５３９号；Ｊｏｎｅｓら、１９８６ Ｎａｔｕｒｅ ３２１：５５２～５２５ページ；Ｖｅｒｈｏｅｙａｎら、１９８８ Ｓｃｉｅｎｃｅ ２３９：１５３４；Ｂｅｉｄｌｅｒら、１９８８ Ｊ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． １４１：４０５３～４０６０ページ；Ｗｉｎｔｅｒ、米国特許第５，２２５，５３９号（これらのすべての内容はこれにより明示的に参照により本明細書に組み込まれる）を参照。Ｗｉｎｔｅｒは、本発明のヒト化抗体を調製するために使用され得るＣＤＲグラフト化方法を記載する（１９８７年３月２６日に出願された英国特許出願第２１８８６３８Ａ号；Ｗｉｎｔｅｒ、米国特許第５，２２５，５３９号）（その内容は明示的に参照により本明細書に組み込まれる）。
[00245]具体的なアミノ酸が置換、欠失または付加されたヒト化抗体分子もまた本発明の範囲である。ドナーからのアミノ酸を選択する基準は、米国特許第５，５８５，０８９号、例えば、米国特許第５，５８５，０８９号の第１２～１６欄、例えば、米国特許第５，５８５，０８９号の第１２～１６欄に記載されている（その内容はこれにより参照により本明細書に組み込まれる）。抗体をヒト化する他の技術は、１９９２年１２月２３日に公開されたＰａｄｌａｎら、ＥＰ５１９５９６Ａ１に記載されている。
[00246]抗体分子は一本鎖抗体であり得る。一本鎖抗体（ｓｃＦｖ）は操作されていてもよい（例えば、Ｃｏｌｃｈｅｒ， Ｄ．ら、（１９９９） Ａｎｎ Ｎ Ｙ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ８８０：２６３～８０ページ；およびＲｅｉｔｅｒ， Ｙ．、（１９９６） Ｃｌｉｎ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ ２：２４５～５２ページを参照）。一本鎖抗体は、二量体化または多量体化して、同じ標的タンパク質の異なるエピトープに対して特異性を有する多価抗体を生成することができる。
[00247]さらに他の実施形態では、抗体分子は、例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＭ、ＩｇＡ１、ＩｇＡ２、ＩｇＤ、およびＩｇＥの重鎖定常領域から選択される、特に、例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、およびＩｇＧ４の（例えば、ヒト）重鎖定常領域から選択される重鎖定常領域を有する。別の実施形態では、抗体分子は、例えば、カッパまたはラムダの（例えば、ヒト）軽鎖定常領域から選択される軽鎖定常領域を有する。定常領域は、抗体の特性を修飾するため（例えば、Ｆｃ受容体結合、抗体グリコシル化、システイン残基の数、エフェクター細胞機能、および／または補体機能のうちの１つまたは複数を増加または減少させるため）に変更、例えば、突然変異され得る。一実施形態では、抗体は、エフェクター機能を有し、かつ補体を固定することができる。他の実施形態では、抗体は、エフェクター細胞をリクルートせず、かつ補体を固定しない。別の実施形態では、抗体は、Ｆｃ受容体に結合する低減した能力を有し、または該能力を有しない。例えば、それは、Ｆｃ受容体への結合をサポートしないアイソタイプまたはサブタイプ、断片または他の突然変異体であり、例えば、それは、突然変異誘発されたＦｃ受容体結合性領域を有し、またはそれを欠失している。
[00248]抗体定常領域を変更する方法は当該技術分野において公知である。変更された機能、例えば、エフェクターリガンド、例えば、細胞上のＦｃＲ、または補体のＣ１成分に対する変更された親和性を有する抗体は、抗体の定常部分中の少なくとも１つのアミノ酸残基を異なる残基で置き換えることによって産生することができる（例えば、ＥＰ３８８，１５１Ａ１、米国特許第５，６２４，８２１号および米国特許第５，６４８，２６０号（これらのすべての内容はこれにより参照により本明細書に組み込まれる）を参照）。マウス、または他の種の免疫グロブリンに応用された場合にこれらの機能を低減または排除する類似の種類の変更が記載され得る。
[00249]抗体分子は、誘導体化または別の機能分子（例えば、別のペプチドもしくはタンパク質）に連結させることができる。本明細書で使用される場合、「誘導体化」された抗体分子は、修飾された抗体分子である。誘導体化の方法としては、蛍光部分、放射性ヌクレオチド、毒素、酵素または親和性リガンド、例えば、ビオチンの付加が挙げられるがそれに限定されない。よって、本発明の抗体分子は、免疫接着分子を含む、本明細書に記載の抗体の誘導体化および他に修飾された形態を含むことが意図される。例えば、抗体分子は、１つまたは複数の他の分子実体、例えば、別の抗体（例えば、二特異性抗体もしくはダイアボディ）、検出可能な剤、細胞傷害剤、医薬剤、および／または抗体もしくは抗体部分の別の分子（例えば、ストレプトアビジンコア領域もしくはポリヒスチジンタグ）との会合を媒介することができるタンパク質もしくはペプチドに（化学的カップリング、遺伝子融合、非共有結合的会合またはその他によって）機能的に連結させることができる。
[00250]１つの種類の誘導体化された抗体分子は、（例えば、二特異性抗体を作出するために、同じ種類または異なる種類の）２つまたはより多くの抗体を架橋することによって産生される。好適なクロスリンカーとしては、適切なスペーサー（例えば、ｍ－マレイミドベンゾイル－Ｎ－ヒドロキシスクシンイミドエステル）またはホモ二官能性（例えば、スベリン酸ジサクシンイミジル）によって分離された２つの別個に反応性の基を有するヘテロ二官能性のものが挙げられる。そのようなリンカーは、Ｐｉｅｒｃｅ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｃｏｍｐａｎｙ、Ｒｏｃｋｆｏｒｄ、Ｉｌｌから入手可能である。
多特異性または多機能性抗体分子
[00251]本明細書で定義される多特異性および多機能性分子の例示的な構造は、全体を通じて記載されている。例示的な構造は、Ｗｅｉｄｌｅ Ｕら、（２０１３） Ｔｈｅ Ｉｎｔｒｉｇｕｉｎｇ Ｏｐｔｉｏｎｓ ｏｆ Ｍｕｌｔｉｓｐｅｃｉｆｉｃ Ａｎｔｉｂｏｄｙ Ｆｏｒｍａｔｓ ｆｏｒ Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｃａｎｃｅｒ． Ｃａｎｃｅｒ Ｇｅｎｏｍｉｃｓ ＆ Ｐｒｏｔｅｏｍｉｃｓ １０： １～１８ページ（２０１３）；およびＳｐｉｅｓｓ Ｃら、（２０１５） Ａｌｔｅｒｎａｔｉｖｅ ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｆｏｒｍａｔｓ ａｎｄ ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ ｆｏｒ ｂｉｓｐｅｃｉｆｉｃ ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ． Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ ６７： ９５～１０６ページ（これらのそれぞれの全内容はこれにより参照により本明細書に組み込まれる）にさらに記載されている。
[00252]一部の実施形態では、多特異性抗体分子は、異なる部位が異なる抗原に特異的である１つより多くの抗原結合性部位を含むことができる。一部の実施形態では、多特異性抗体分子は、同じ抗原上の１つより多く（例えば、２つまたはより多く）のエピトープに結合することができる。一部の実施形態では、多特異性抗体分子は、標的細胞（例えば、がん細胞）に特異的な抗原結合性部位および免疫エフェクター細胞に特異的な異なる抗原結合性部位を含む。一部の実施形態では、多特異性抗体分子は、二特異性、三特異性または四特異性抗体分子である。一実施形態では、多特異性抗体分子は二特異性抗体分子である。二特異性抗体分子は、５つの異なる構造群：（ｉ）二特異性免疫グロブリンＧ（ＢｓＩｇＧ）、（ｉｉ）追加の抗原結合性部分を付加されたＩｇＧ、（ｉｉｉ）二特異性抗体断片、（ｉｖ）二特異性融合タンパク質、および（ｖ）二特異性抗体コンジュゲートに分類することができる。
[00253]ＢｓＩｇＧは、各抗原について一価のフォーマットである。例示的なＢｓＩｇＧフォーマットとしては、ｃｒｏｓｓＭａｂ、ＤＡＦ（ｔｗｏ－ｉｎ－ｏｎｅ）、ＤＡＦ（ｆｏｕｒ－ｉｎ－ｏｎｅ）、ＤｕｔａＭａｂ、ＤＴ－ＩｇＧ、ノブ・イン・ホール（ｋｎｏｂｓ－ｉｎ－ｈｏｌｅｓ）共通ＬＣ、ノブ・イン・ホールアセンブリー、電荷対、Ｆａｂアーム交換、ＳＥＥＤボディ、ｔｒｉｏｍａｂ、ＬＵＺ－Ｙ、Ｆｃａｂ、κλボディ、直交Ｆａｂが挙げられるがそれに限定されない。Ｓｐｉｅｓｓら、Ｍｏｌ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． ６７（２０１５）：９５～１０６ページを参照。例示的なＢｓＩｇＧとしては、抗ＣＤ３アームおよび抗ＥｐＣＡＭアームを含有するカツマキソマブ（Ｆｒｅｓｅｎｉｕｓ Ｂｉｏｔｅｃｈ、Ｔｒｉｏｎ Ｐｈａｒｍａ、Ｎｅｏｐｈａｒｍ）、ならびにＣＤ３およびＨＥＲ２を標的化するエルツマキソマブ（Ｎｅｏｖｉｉ Ｂｉｏｔｅｃｈ、Ｆｒｅｓｅｎｉｕｓ Ｂｉｏｔｅｃｈ）が挙げられる。一部の実施形態では、ＢｓＩｇＧは、ヘテロ二量体化のために操作された重鎖を含む。例えば、重鎖は、「ノブ・イントゥー・ホール」（ｋｎｏｂｓ－ｉｎｔｏ－ｈｏｌｅｓ）戦略、ＳＥＥＤプラットフォーム、（例えば、κλボディ中の）共通重鎖、およびヘテロ二量体Ｆｃ領域の使用を使用してヘテロ二量体化のために操作することができる。Ｓｐｉｅｓｓら、Ｍｏｌ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． ６７（２０１５）：９５～１０６ページを参照。ＢｓＩｇＧにおけるホモ二量体の重鎖対合を回避するために使用されてきた戦略としては、ノブ・イン・ホール、デュオボディ（ｄｕｏｂｏｄｙ）、アジメトリック（ａｚｙｍｅｔｒｉｃ）、電荷対、ＨＡ－ＴＦ、ＳＥＥＤボディ、および差次的なプロテインＡ親和性が挙げられる。同文献を参照。ＢｓＩｇＧは、異なる宿主細胞中での成分抗体の別々の発現およびその後の精製／ＢｓＩｇＧへのアセンブリーによって産生することができる。ＢｓＩｇＧはまた、単一の宿主細胞中での成分抗体の発現によって産生することができる。ＢｓＩｇＧは、例えば、プロテインＡおよび逐次的ｐＨ溶出を使用する、親和性クロマトグラフィーを使用して精製することができる。
[00254]追加の抗原結合性部分を付加されたＩｇＧは、二特異性抗体分子の別のフォーマットである。例えば、単一特異性ＩｇＧは、例えば、重鎖または軽鎖のいずれかのＮまたはＣ末端において、追加の抗原結合性単位を単一特異性ＩｇＧに付加することによって二特異性を有するように操作することができる。例示的な追加の抗原結合性単位としては、単一ドメイン抗体（例えば、可変重鎖または可変軽鎖）、操作されたタンパク質スキャフォールド、および対合した抗体可変ドメイン（例えば、単鎖可変断片または可変断片）が挙げられる。同文献を参照。付加されたＩｇＧフォーマットの例としては、二重可変ドメインＩｇＧ（ＤＶＤ－Ｉｇ）、ＩｇＧ（Ｈ）－ｓｃＦｖ、ｓｃＦｖ－（Ｈ）ＩｇＧ、ＩｇＧ（Ｌ）－ｓｃＦｖ、ｓｃＦｖ－（Ｌ）ＩｇＧ、ＩｇＧ（Ｌ，Ｈ）－Ｆｖ、ＩｇＧ（Ｈ）－Ｖ、Ｖ（Ｈ）－ＩｇＧ、ＩｇＧ（Ｌ）－Ｖ、Ｖ（Ｌ）－ＩｇＧ、ＫＩＨ ＩｇＧ－ｓｃＦａｂ、２ｓｃＦｖ－ＩｇＧ、ＩｇＧ－２ｓｃＦｖ、ｓｃＦｖ４－Ｉｇ、ザイボディ（ｚｙｂｏｄｙ）、およびＤＶＩ－ＩｇＧ（４－ｉｎ－１）が挙げられる。Ｓｐｉｅｓｓら、Ｍｏｌ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． ６７（２０１５）：９５～１０６ページを参照。ＩｇＧ－ｓｃＦｖの例は、ＩＧＦ－１ＲおよびＨＥＲ３に結合するＭＭ－１４１（Ｍｅｒｒｉｍａｃｋ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）である。ＤＶＤ－Ｉｇの例としては、ＩＬ－１αおよびＩＬ－１βに結合するＡＢＴ－９８１（ＡｂｂＶｉｅ）、ならびにＴＮＦおよびＩＬ－１７Ａに結合するＡＢＴ－１２２（ＡｂｂＶｉｅ）が挙げられる。
[00255]二特異性抗体断片（ＢｓＡｂ）は、抗体定常ドメインの一部またはすべてを欠いた二特異性抗体分子のフォーマットである。例えば、一部のＢｓＡｂはＦｃ領域を欠いている。一部の実施形態では、二特異性抗体断片は、単一の宿主細胞中でのＢｓＡｂの効率的な発現を許容するペプチドリンカーによって接続された重鎖および軽鎖領域を含む。例示的な二特異性抗体断片としては、ナノボディ、ナノボディ－ＨＡＳ、ＢｉＴＥ、ダイアボディ、ＤＡＲＴ、ＴａｎｄＡｂ、ｓｃＤｉａｂｏｄｙ、ｓｃＤｉａｂｏｄｙ－ＣＨ３、ダイアボディ－ＣＨ３、トリプルボディ、ミニ抗体、ミニボディ、ＴｒｉＢｉミニボディ、ｓｃＦｖ－ＣＨ３ ＫＩＨ、Ｆａｂ－ｓｃＦｖ、ｓｃＦｖ－ＣＨ－ＣＬ－ｓｃＦｖ、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆ（ａｂ’）２－ｓｃＦｖ２、ｓｃＦｖ－ＫＩＨ、Ｆａｂ－ｓｃＦｖ－Ｆｃ、四価ＨＣＡｂ、ｓｃＤｉａｂｏｄｙ－Ｆｃ、ダイアボディ－Ｆｃ、タンデムｓｃＦｖ－Ｆｃ、およびイントラボディが挙げられるがそれに限定されない。同文献を参照。例えば、ＢｉＴＥフォーマットはタンデムｓｃＦｖを含み、成分ｓｃＦｖは、Ｔ細胞上のＣＤ３およびがん細胞上の表面抗原に結合する。
[00256]二特異性融合タンパク質としては、例えば、追加の特異性および／または機能性を加えるために、他のタンパク質に連結された抗体断片が挙げられる。二特異性融合タンパク質の例は、ＨＬＡ提示ペプチドを認識する親和性成熟したＴ細胞受容体に連結された抗ＣＤ３ ｓｃＦｖを含むｉｍｍＴＡＣである。一部の実施形態では、より高い価数を有する二特異性抗体分子を生成するためにドック－アンド－ロック（ｄｏｃｋ－ａｎｄ－ｌｏｃｋ）（ＤＮＬ）法を使用することができる。また、アルブミン結合性タンパク質またはヒト血清アルブミンへの融合は、抗体断片の血清半減期を延長させることができる。同文献を参照。
[00257]一部の実施形態では、ＢｓＡｂ分子を作出するために化学的コンジュゲーション、例えば、抗体および／または抗体断片の化学的コンジュゲーションを使用することができる。同文献を参照。例示的な二特異性抗体コンジュゲートとしては、ＣｏｖＸボディフォーマットが挙げられ、該フォーマットでは、低分子量薬物が、各Ｆａｂアームまたは抗体もしくはその断片中の単一の反応性リシンに部位特異的にコンジュゲートしている。一部の実施形態では、コンジュゲーションは、低分子量薬物の血清半減期を向上させる。例示的なＣｏｖＸボディは、ＶＥＧＦまたはＡｎｇ２のいずれかを阻害する２つの短いペプチドにコンジュゲートした抗体を含むＣＶＸ－２４１（ＮＣＴ０１００４８２２）である。同文献を参照。
[00258]抗体分子は、例えば、宿主系中での少なくとも１つまたは複数の成分の、組換え発現によって産生することができる。例示的な宿主系としては、真核細胞（例えば、哺乳動物細胞、例えば、ＣＨＯ細胞、または昆虫細胞、例えば、ＳＦ９もしくはＳ２細胞）および原核細胞（例えば、Ｅ． ｃｏｌｉ）が挙げられる。二特異性抗体分子は、異なる宿主細胞中での成分の別々の発現およびその後の精製／アセンブリーによって産生することができる。代替的に、抗体分子は、単一の宿主細胞中での成分の発現によって産生することができる。二特異性抗体分子の精製は、例えば、プロテインＡおよび逐次的ｐＨ溶出を使用する、親和性クロマトグラフィーなどの、様々な方法によって行うことができる。他の実施形態では、親和性タグ、例えば、ヒスチジン含有タグ、ｍｙｃタグ、またはストレプトアビジンタグを精製のために使用することができる。
ＣＤＲグラフト化スキャフォールド
[00259]一部の実施形態では、抗体分子は、ＣＤＲグラフト化スキャフォールドドメインである。一部の実施形態では、スキャフォールドドメインは、フィブロネクチンドメイン、例えば、フィブロネクチンＩＩＩ型ドメインに基づく。フィブロネクチンＩＩＩ型（Ｆｎ３）ドメインの全体的なフォールドは、最小の機能的抗体断片、抗体重鎖の可変ドメインのそれに密接に関係する。Ｆｎ３の末端には３つのループがあり、ＢＣ、ＤＥおよびＦＧループの位置は、抗体のＶＨドメインのＣＤＲ１、２および３のそれにおおよそ対応する。Ｆｎ３はジスルフィド結合を有さず、したがって、Ｆｎ３は、抗体およびそれらの断片とは異なり、還元条件下で安定である（例えば、ＷＯ９８／５６９１５、ＷＯ０１／６４９４２、ＷＯ００／３４７８４を参照）。Ｆｎ３ドメインは、例えば、本明細書に記載の抗原／マーカー／細胞に結合するドメインを選択するために、（例えば、本明細書に記載のＣＤＲまたは超可変ループを使用して）修飾または変更することができる。
[00260]一部の実施形態では、スキャフォールドドメイン、例えば、フォールディングしたドメインは、抗体、例えば、モノクローナル抗体の重鎖可変ドメインから３つのベータ鎖を欠失させることにより作出される「ミニボディ」スキャフォールドに基づく（例えば、Ｔｒａｍｏｎｔａｎｏら、１９９４、Ｊ Ｍｏｌ． Ｒｅｃｏｇｎｉｔ． ７：９、およびＭａｒｔｉｎら、１９９４、ＥＭＢＯ Ｊ． １３：５３０３～５３０９ページを参照）。「ミニボディ」は、２つの超可変ループを提示するために使用することができる。一部の実施形態では、スキャフォールドドメインは、Ｖ様ドメイン（例えば、Ｃｏｉａら、ＷＯ９９／４５１１０を参照）、または２つのジスルフィド結合によって一緒に保持された７４残基の６鎖ベータシートサンドイッチであるテンダミスタチン（ｔｅｎｄａｍｉｓｔａｔｉｎ）に由来するドメインである（例えば、ＭｃＣｏｎｎｅｌｌおよびＨｏｅｓｓ、１９９５、Ｊ Ｍｏｌ． Ｂｉｏｌ． ２５０：４６０を参照）。例えば、テンダミスタチンのループは、例えば、本明細書に記載のマーカー／抗原／細胞に結合するドメインを選択するために、（例えば、ＣＤＲまたは超可変ループを使用して）修飾または変更することができる。別の例示的なスキャフォールドドメインは、ＣＴＬＡ－４の細胞外ドメインに由来するベータ－サンドイッチ構造である（例えば、ＷＯ００／６００７０を参照）。
[00261]他の例示的なスキャフォールドドメインとしては、Ｔ細胞受容体、ＭＨＣタンパク質、細胞外ドメイン（例えば、フィブロネクチンＩＩＩ型リピート、ＥＧＦリピート）、プロテアーゼ阻害剤（例えば、Ｋｕｎｉｔｚドメイン、エコチン、およびＢＰＴＩなど）、ＴＰＲリピート、トリフォイル（ｔｒｉｆｏｉｌ）構造、ジンクフィンガードメイン、ＤＮＡ結合性タンパク質、特に、単量体ＤＮＡ結合性タンパク質、ＲＮＡ結合性タンパク質、酵素、例えば、プロテアーゼ（特に、不活性化プロテアーゼ）、ＲＮａｓｅ、シャペロン、例えば、チオレドキシン、および熱ショックタンパク質、ならびに細胞内シグナル伝達ドメイン（例えば、ＳＨ２およびＳＨ３ドメイン）が挙げられるがそれに限定されない。例えば、米国特許出願公開第２００４０００９５３０号および米国特許第７，５０１，１２１号（参照により本明細書に組み込まれる）を参照。
[00262]一部の実施形態では、スキャフォールドドメインは、例えば、以下の基準：（１）アミノ酸配列、（２）いくつかの相同ドメインの配列、（３）三次元構造、および／または（４）ｐＨ、温度、塩分、有機溶媒、酸化剤濃度の範囲にわたる安定性データのうちの１つまたは複数によって評価および選択される。一部の実施形態では、スキャフォールドドメインは、小さい、安定なタンパク質ドメイン、例えば、１００個、７０個、５０個、４０個または３０個未満のアミノ酸のタンパク質である。ドメインは、１つもしくは複数のジスルフィド結合を含んでもよく、または金属、例えば、亜鉛をキレートしてもよい。
抗体ベースの融合物
[00263]抗体のＮまたはＣ末端に取り付けられた追加の結合性実体を含有する様々なフォーマットを生成することができる。単鎖またはジスルフィド安定化ＦｖもしくはＦａｂを有するこれらの融合物は、各抗原に対して二価の結合特異性を有する四価分子の生成をもたらす。ＩｇＧとのｓｃＦｖおよびｓｃＦａｂの組合せは、３つまたはより多くの異なる抗原を認識することができる分子の産生を可能にする。
抗体－Ｆａｂ融合物
[00264]抗体－Ｆａｂ融合物は、第１の標的に対する伝統的な抗体および抗体重鎖のＣ末端に融合した第２の標的に対するＦａｂを含む二特異性抗体である。一般的に、抗体およびＦａｂは共通の軽鎖を有する。抗体融合物は、（１）標的融合物のＤＮＡ配列を操作すること、および（２）標的ＤＮＡを好適な宿主細胞にトランスフェクトして融合タンパク質を発現させることにより産生させることができる。Ｃｏｌｏｍａ， Ｊら、（１９９７） Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈ １５：１５９によって記載されるように、抗体－ｓｃＦｖ融合物は、ＣＨ３ドメインのＣ末端とｓｃＦｖのＮ末端との間の（Ｇｌｙ）－Ｓｅｒリンカーによって連結されてもよいようである。
抗体－ｓｃＦｖ融合物
[00265]抗体－ｓｃＦｖ融合物は、伝統的な抗体および抗体重鎖のＣ末端に融合した特有の特異性のｓｃＦｖを含む二特異性抗体である。ｓｃＦｖは、直接的にまたはリンカーペプチドを通じてｓｃＦｖの重鎖を通じてＣ末端に融合させることができる。抗体融合物は、（１）標的融合物のＤＮＡ配列を操作すること、および（２）標的ＤＮＡを好適な宿主細胞にトランスフェクトして融合タンパク質を発現させることにより産生させることができる。Ｃｏｌｏｍａ， Ｊら、（１９９７） Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈ １５：１５９によって記載されるように、抗体－ｓｃＦｖ融合物は、ＣＨ３ドメインのＣ末端とｓｃＦｖのＮ末端との間の（Ｇｌｙ）－Ｓｅｒリンカーによって連結されてもよいようである。
可変ドメイン免疫グロブリンＤＶＤ
[00266]関連するフォーマットは、より短いリンカー配列によってＶドメインのＮ末端に配置された第２の特異性のＶＨおよびＶＬドメインから構成される二重可変ドメイン免疫グロブリン（ＤＶＤ）である。
[00267]他の例示的な多特異性抗体フォーマットとしては、例えば、以下：米国特許出願公開第２０１６０１１４０５７Ａ１号、米国特許出願公開第２０１３０２４３７７５Ａ１号、米国特許出願公開第２０１４００５１８３３号、米国特許出願公開第２０１３００２２６０１号、米国特許出願公開第２０１５００１７１８７Ａ１号、米国特許出願公開第２０１２０２０１７４６Ａ１号、米国特許出願公開第２０１５０１３３６３８Ａ１号、米国特許出願公開第２０１３０２６６５６８Ａ１号、米国特許出願公開第２０１６０１４５３４０Ａ１号、ＷＯ２０１５１２７１５８Ａ１、米国特許出願公開第２０１５０２０３５９１Ａ１号、米国特許出願公開第２０１４０３２２２２１Ａ１号、米国特許出願公開第２０１３０３０３３９６Ａ１号、米国特許出願公開第２０１１０２９３６１３号、米国特許出願公開第２０１３００１７２００Ａ１号、米国特許出願公開第２０１６０１０２１３５Ａ１号、ＷＯ２０１５１９７５９８Ａ２、ＷＯ２０１５１９７５８２Ａ１、米国特許第９３５９４３７号、米国特許出願公開第２０１５００１８５２９号、ＷＯ２０１６１１５２７４Ａ１、ＷＯ２０１６０８７４１６Ａ１、米国特許出願公開第２００８００６９８２０Ａ１号、米国特許第９１４５５８８Ｂ号、米国特許第７９１９２５７号、および米国特許出願公開第２０１５０２３２５６０Ａ１号に記載のものが挙げられる。全長抗体－Ｆａｂ／ｓｃＦａｂフォーマットを利用する例示的な多特異性分子としては、以下：米国特許第９３８２３２３Ｂ２号、米国特許出願公開第２０１４００７２５８１Ａ１号、米国特許出願公開第２０１４０３０８２８５Ａ１号、米国特許出願公開第２０１３０１６５６３８Ａ１号、米国特許出願公開第２０１３０２６７６８６Ａ１号、米国特許出願公開第２０１４０３７７２６９Ａ１号、米国特許第７７４１４４６Ｂ２号、およびＷＯ１９９５００９９１７Ａ１に記載のものが挙げられる。ドメイン交換フォーマットを利用する例示的な多特異性分子としては、以下：米国特許出願公開第２０１５０３１５２９６Ａ１号、ＷＯ２０１６０８７６５０Ａ１、米国特許出願公開第２０１６００７５７８５Ａ１号、ＷＯ２０１６０１６２９９Ａ１、米国特許出願公開第２０１６０１３０３４７Ａ１号、米国特許出願公開第２０１５０１６６６７０号、米国特許第８７０３１３２Ｂ２号、米国特許出願公開第２０１００３１６６４５号、米国特許第８２２７５７７Ｂ２号、米国特許出願公開第２０１３００７８２４９号に記載のものが挙げられる。
Ｆｃ含有実体（ミニ抗体）
[00268]ミニ抗体としても公知のＦｃ含有実体は、ｓｃＦｖを定常重鎖領域ドメイン３のＣ末端（ＣＨ３－ｓｃＦｖ）および／または異なる特異性を有する抗体のヒンジ領域（ｓｃＦｖ－ヒンジ－Ｆｃ）に融合させることにより生成することができる。ＩｇＧのＣＨ３ドメインのＣ末端に融合した（ペプチドリンカーを有しない）ジスルフィド安定化可変ドメインを有する三価の実体もまた作製することができる。
Ｆｃ含有多特異性分子
[00269]一部の実施形態では、本明細書に開示される多特異性分子は、免疫グロブリン定常領域（例えば、Ｆｃ領域）を含む。例示的なＦｃ領域は、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３またはＩｇＧ４の重鎖定常領域、より特には、ヒトＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、またはＩｇＧ４の重鎖定常領域から選択することができる。
[00270]一部の実施形態では、免疫グロブリン鎖定常領域（例えば、Ｆｃ領域）は、Ｆｃ受容体結合、抗体グリコシル化、システイン残基の数、エフェクター細胞機能、または補体機能のうちの１つまたは複数を増加または減少させるために、変更、例えば、突然変異される。
[00271]他の実施形態では、第１および第２の免疫グロブリン鎖定常領域（例えば、第１および第２のＦｃ領域）の境界部は、例えば、操作されていない境界部、例えば、天然に存在する境界部と比較して、二量体化を増加または減少させるために、変更、例えば、突然変異される。例えば、免疫グロブリン鎖定常領域（例えば、Ｆｃ領域）の二量体化は、第１および第２のＦｃ領域のＦｃ境界部に、対になった孔と突起（「ノブ・イン・ホール」）、静電相互作用、または鎖交換のうちの１つまたは複数を提供し、それによって、例えば、操作されていない境界部と比較して、より高い比のヘテロ多量体：ホモ多量体が形成されることにより、増強させることができる。
[00272]一部の実施形態では、多特異性分子は、例えば、ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域の、３４７、３４９、３５０、３５１、３６６、３６８、３７０、３９２、３９４、３９５、３９７、３９８、３９９、４０５、４０７、または４０９のうちの１つまたは複数から選択される位置において、対になったアミノ酸置換を含む。例えば、免疫グロブリン鎖定常領域（例えば、Ｆｃ領域）は、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、またはＹ４０７Ｖ（例えば、孔またはホールに対応する）、およびＴ３６６Ｗ（例えば、突起またはノブに対応する）から選択される対になったアミノ酸置換を含むことができる。
[00273]他の実施形態では、多機能性分子は、半減期延長剤、例えば、ヒト血清アルブミンまたはヒト血清アルブミンに対する抗体分子を含む。
ヘテロ二量体化抗体分子および作製方法
[00274]正しくない重鎖対合の問題に対処するために多特異性抗体を産生する様々な方法が開示されてきた。例示的な方法は以下に記載される。例示的な多特異性抗体フォーマットおよび前記多特異性抗体を作製する方法もまた、例えば、Ｓｐｅｉｓｓら、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ ６７（２０１５）９５～１０６ページ、およびＫｌｅｉｎら、ｍＡｂ ４：６、６５３～６６３ページ、２０１２年１１月／１２月（これらのそれぞれの内容はこれにより参照により本明細書に組み込まれる）に開示されている。
[00275]ヘテロ二量体化二特異性抗体は天然のＩｇＧ構造に基づき、２つの結合性アームが異なる抗原を認識する。定義された一価（および同時の）抗原結合を可能にするＩｇＧ由来のフォーマットは、軽鎖誤対合を最小化する技術（例えば、共通軽鎖）と組み合わせた強制的な重鎖ヘテロ二量体化により生成される。強制的な重鎖ヘテロ二量体化は、例えば、ノブ・イン・ホールまたは鎖交換操作ドメイン（ＳＥＥＤ）を使用して、得ることができる。
[00276]ノブ・イン・ホール
[00277]米国特許第５，７３１，１１６号、米国特許第７，４７６，７２４号およびＲｉｄｇｗａｙ， Ｊら、（１９９６）Ｐｒｏｔ． Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ ９（７）：６１７～６２１ページに記載されるノブ・イン・ホールは、概して、（１）１つまたは両方の抗体のＣＨ３ドメインを突然変異させてヘテロ二量体化を促進すること、および（２）ヘテロ二量体化を促進する条件下で突然変異した抗体を組み合わせることを伴う。「ノブ」または「突起」は、典型的には、親抗体中の小さいアミノ酸をより大きいアミノ酸で置き換えること（例えば、Ｔ３６６ＹまたはＴ３６６Ｗ）により作出され、「ホール」または「孔」は、親抗体中のより大きい残基をより小さいアミノ酸で置き換えること（例えば、Ｙ４０７Ｔ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａおよび／またはＹ４０７Ｖ）により作出される。
[00278]Ｆｃドメインを含む二特異性抗体のために、Ｆｃ部分の正しいヘテロ二量体化を促進するための重鎖の定常領域への特定の突然変異の導入を利用することができる。いくつかのそのような技術は、Ｋｌｅｉｎら（ｍＡｂ（２０１２）４：６、１～１１ページ）（その内容はこれにより参照により全体が本明細書に組み込まれる）において総説されている。これらの技術としては、抗体重鎖のうちの１つのＣＨ３ドメインのうちの１つへのバルク残基の導入を伴う「ノブ・イントゥー・ホール」（ＫｉＨ）アプローチが挙げられる。このバルク残基は、対になった重鎖の他のＣＨ３ドメイン中の相補的な「ホール」にフィットし、それによって、重鎖の正しい対合が促進される（例えば、米国特許第７６４２２２８号を参照）。
[00279]例示的なＫｉＨ突然変異としては、「ノブ」重鎖中のＳ３５４Ｃ、Ｔ３６６Ｗおよび「ホール」重鎖中のＹ３４９Ｃ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、Ｙ４０７Ｖが挙げられる。他の例示的なＫｉＨ突然変異は、追加の任意選択の安定化性Ｆｃシステイン突然変異と共に、表１において提供される。
Figure 2023542080000002
 [00280]他のＦｃ突然変異はＩｇａｗａおよびＴｓｕｎｏｄａにより提供されており、彼らは、他の鎖のＣＨ３ドメイン中の３つの正に荷電した残基と対合する１つの鎖のＣＨ３ドメイン中の３つの負に荷電した残基を同定した。これらの特定の荷電した残基対は、Ｅ３５６－Ｋ４３９、Ｅ３５７－Ｋ３７０、Ｄ３９９－Ｋ４０９およびその逆である。単独でまたは新たに同定されたジスルフィド架橋と組み合わせて、以下の３つの鎖Ａ中の突然変異：Ｅ３５６Ｋ、Ｅ３５７ＫおよびＤ３９９Ｋの他に、鎖Ｂ中のＫ３７０Ｅ、Ｋ４０９Ｄ、Ｋ４３９Ｅのうちの少なくとも２つを導入することにより、それらは、同時にホモ二量体化を抑制しながら非常に効率的なヘテロ二量体化に有利に働くことができた（Ｍａｒｔｅｎｓ Ｔら、「Ａ ｎｏｖｅｌ ｏｎｅ－ａｒｍｅｄ ａｎｔｉｃ－ Ｍｅｔ ａｎｔｉｂｏｄｙ ｉｎｈｉｂｉｔｓ ｇｌｉｏｂｌａｓｔｏｍａ ｇｒｏｗｔｈ ｉｎ ｖｉｖｏ．」、Ｃｌｉｎ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ ２００６；１２：６１４４～５２ページ；ＰＭＩＤ：１７０６２６９１）。Ｘｅｎｃｏｒは、構造算出および配列情報の組合せに基づいて４１個のバリアント対を定義し、それをその後に最大のヘテロ二量体化についてスクリーニングして、鎖Ａ上のＳ３６４Ｈ、Ｆ４０５Ａ（ＨＡ）および鎖Ｂ上のＹ３４９Ｔ、Ｔ３９４Ｆ（ＴＦ）の組合せを定義した（Ｍｏｏｒｅ ＧＬら、「Ａ ｎｏｖｅｌ ｂｉｓｐｅｃｉｆｉｃ ａｎｔｉｂｏｄｙ ｆｏｒｍａｔ ｅｎａｂｌｅｓ ｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓ ｂｉｖａｌｅｎｔ ａｎｄ ｍｏｎｏｖａｌｅｎｔ ｃｏ－ｅｎｇａｇｅｍｅｎｔ ｏｆ ｄｉｓｔｉｎｃｔ ｔａｒｇｅｔ ａｎｔｉｇｅｎｓ．」、ＭＡｂｓ ２０１１；３：５４６～５７ページ；ＰＭＩＤ：２２１２３０５５）。
[00281]多特異性抗体のヘテロ二量体化を促進するための他の例示的なＦｃ突然変異としては、以下の参考文献（これらのそれぞれの内容はこれにより参照により本明細書に組み込まれる）：ＷＯ２０１６０７１３７７Ａ１、米国特許出願公開第２０１４００７９６８９Ａ１号、米国特許出願公開第２０１６０１９４３８９Ａ１号、米国特許出願公開第２０１６０２５７７６３号、ＷＯ２０１６０７１３７６Ａ２、ＷＯ２０１５１０７０２６Ａ１、ＷＯ２０１５１０７０２５Ａ１、ＷＯ２０１５１０７０１５Ａ１、米国特許出願公開第２０１５０３５３６３６Ａ１号、米国特許出願公開第２０１４０１９９２９４Ａ１号、米国特許第７７５０１２８Ｂ２号、米国特許出願公開第２０１６０２２９９１５Ａ１号、米国特許出願公開第２０１５０３４４５７０Ａ１号、米国特許第８００３７７４Ａ１号、米国特許出願公開第２０１５０３３７０４９Ａ１号、米国特許出願公開第２０１５０１７５７０７Ａ１号、米国特許出願公開第２０１４０２４２０７５Ａ１号、米国特許出願公開第２０１３０１９５８４９Ａ１号、米国特許出願公開第２０１２０１４９８７６Ａ１号、米国特許出願公開第２０１４０２００３３１Ａ１号、米国特許第９３０９３１１Ｂ２号、米国特許第８５８６７１３号、米国特許出願公開第２０１４００３７６２１Ａ１号、米国特許出願公開第２０１３０１７８６０５Ａ１号、米国特許出願公開第２０１４０３６３４２６Ａ１号、米国特許出願公開第２０１４００５１８３５Ａ１号および米国特許出願公開第２０１１００５４１５１Ａ１号に記載のものが挙げられる。
[00282]安定化性システイン突然変異もまた、ＫｉＨおよび他のＦｃヘテロ二量体化促進性バリアントと組み合わせて使用されている（例えば、米国特許第７１８３０７６号を参照）。他の例示的なシステイン修飾としては、例えば、米国特許出願公開第２０１４０３４８８３９Ａ１号、米国特許第７８５５２７５Ｂ２号、および米国特許第９０００１３０Ｂ２号に開示されるものが挙げられる。
[00283]鎖交換操作ドメイン（ＳＥＥＤ）
[00284]鎖交換操作ドメイン（ＳＥＥＤ）Ｃ（Ｈ）３ヘテロ二量体を工作することによって二特異性かつ非対称性の融合タンパク質の設計をサポートするヘテロ二量体Ｆｃプラットフォームが公知である。ヒトＩｇＧおよびＩｇＡ Ｃ（Ｈ）３ドメインのこれらの誘導体は、ヒトＩｇＡおよびＩｇＧ Ｃ（Ｈ）３配列の交互のセグメントから構成される相補的なヒトＳＥＥＤ Ｃ（Ｈ）３ヘテロ二量体を作出する。もたらされるＳＥＥＤ Ｃ（Ｈ）３ドメインの対は、哺乳動物細胞中で発現された場合に優先的に会合してヘテロ二量体を形成する。ＳＥＥＤボディ（Ｓｂ）融合タンパク質は、１つまたは複数の融合パートナーに遺伝子連結されていてもよい［ＩｇＧ１ヒンジ］－Ｃ（Ｈ）２－［ＳＥＥＤ Ｃ（Ｈ）３］からなる（例えば、Ｄａｖｉｓ ＪＨら、「ＳＥＥＤｂｏｄｉｅｓ： ｆｕｓｉｏｎ ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｂａｓｅｄ ｏｎ ｓｔｒａｎｄ ｅｘｃｈａｎｇｅ ｅｎｇｉｎｅｅｒｅｄ ｄｏｍａｉｎ （ＳＥＥＤ） ＣＨ３ ｈｅｔｅｒｏｄｉｍｅｒｓ ｉｎ ａｎ Ｆｃ ａｎａｌｏｇｕｅ ｐｌａｔｆｏｒｍ ｆｏｒ ａｓｙｍｍｅｔｒｉｃ ｂｉｎｄｅｒｓ ｏｒ ｉｍｍｕｎｏｆｕｓｉｏｎｓ ａｎｄ ｂｉｓｐｅｃｉｆｉｃ ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ．」、Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｅｎｇ Ｄｅｓ Ｓｅｌ ２０１０；２３：１９５～２０２ページ；ＰＭＩＤ：２０２９９５４２および米国特許第８８７１９１２号（これらのそれぞれの内容はこれにより参照により本明細書に組み込まれる）を参照）。
[00285]デュオボディ
[00286]正しい重鎖対合を有する二特異性抗体を産生するための「デュオボディ」技術は公知である。デュオボディ技術は、産生後交換反応において安定な二特異性ヒトＩｇＧ１抗体を生成するための３つの基本的なステップを伴う。第１のステップにおいて、第３の定常（ＣＨ３）ドメイン中に単一のマッチした突然変異をそれぞれ含有する２つのＩｇＧ１が、標準的な哺乳動物組換え細胞系を使用して別々に産生される。その後に、これらのＩｇＧ１抗体は、回収および精製のための標準的な方法に従って精製される。産生および精製後（産生後）、２つの抗体は調整された実験室条件下で組み換えられて、非常に高い収率（典型的には＞９５％）で二特異性抗体産物をもたらす（例えば、Ｌａｂｒｉｊｎら、ＰＮＡＳ ２０１３；１１０（１３）：５１４５～５１５０ページおよびＬａｂｒｉｊｎら、Ｎａｔｕｒｅ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ２０１４；９（１０）：２４５０～６３ページ（これらのそれぞれの内容はこれにより参照により本明細書に組み込まれる）を参照）。
[00287]静電相互作用
[00288]ホモ二量体形成が静電気的に不都合であるように荷電性アミノ酸を有するＣＨ３アミノ酸変化を使用して多特異性抗体を作製する方法が開示されている。ＥＰ１８７０４５９およびＷＯ２００９０８９００４は、宿主細胞中での異なる抗体ドメインの共発現の際のヘテロ二量体形成に有利に働くための他の戦略を記載する。これらの方法において、重鎖定常ドメイン３（ＣＨ３）、両方のＣＨ３ドメイン中のＣＨ３－ＣＨ３境界部を作り上げる１つまたは複数の残基は、ホモ二量体形成が静電気的に不都合であり、かつヘテロ二量体化が静電気的に好都合であるように荷電性アミノ酸で置き換えられる。静電相互作用を使用して多特異性分子を作製する追加の方法は、米国特許出願公開第２０１０００１５１３３号、米国特許第８５９２５６２Ｂ２号、米国特許第９２０００６０Ｂ２号、米国特許出願公開第２０１４０１５４２５４Ａ１号、および米国特許第９３５８２８６Ａ１号を含む参考文献（これらのそれぞれの内容はこれにより参照により本明細書に組み込まれる）に記載されている。
[00289]共通軽鎖
[00290]軽鎖誤対合は、二特異性ＩｇＧの均質な調製物を生成するために回避される必要がある。これを達成する１つのやり方は、共通軽鎖の原理、すなわち、１つの軽鎖を共有するが依然として別々の特異性を有する２つのバインダーを組み合わせることの使用を通じたものである。単量体の混合物からの所望の二特異性抗体の形成を増強する例示的な方法は、二特異性抗体のヘテロマー可変重鎖領域のそれぞれと相互作用するための共通の可変軽鎖を提供することによる。共通軽鎖を有する二特異性抗体の組成物およびその産生方法は、例えば、米国特許第７１８３０７６Ｂ２号、米国特許出願公開第２０１１０１７７０７３Ａ１号、ＥＰ２８４７２３１Ａ１、ＷＯ２０１６０７９０８１Ａ１、およびＥＰ３０５５３２９Ａ１（これらのそれぞれの内容はこれにより参照により本明細書に組み込まれる）に開示されている。
[00291]ＣｒｏｓｓＭａｂ
[00292]軽鎖誤対合を低減するための別のオプションはＣｒｏｓｓＭａｂ技術であり、これは、二特異性抗体の１つの半分のＦａｂ中のＣＨ１およびＣＬドメインを交換することによって非特異的Ｌ鎖誤対合を回避する。そのようなクロスオーバーバリアントは結合特異性および親和性を保持するが、Ｌ鎖誤対合が予防されるように２つのアームを異なるものとさせる。（Ｋｌｅｉｎら、上掲に総説されるように）ＣｒｏｓｓＭａｂ技術は、正しい対合の形成を促進するように重鎖と軽鎖との間のドメインスワッピングを伴う。簡潔に述べれば、２つの別個の軽鎖－重鎖対を使用することによって２つの抗原に結合し得る二特異性ＩｇＧ様ＣｒｏｓｓＭａｂ抗体を構築するために、２ステップ修飾プロセスが応用される。最初に、二量体化境界部は、ヘテロ二量体化アプローチ、例えば、ノブ・イントゥー・ホール（ＫｉＨ）技術を使用して各重鎖のＣ末端中に操作されて、１つの抗体（例えば、抗体Ａ）および第２の抗体（例えば、抗体Ｂ）からの２つの別個の重鎖のヘテロ二量体のみが効率的に形成されることが確実にされる。次に、可変重鎖（ＶＨ）および可変軽鎖（ＶＬ）ドメインを一貫したままに保って、１つの抗体の定常重鎖１（ＣＨ１）および定常軽鎖（ＣＬ）ドメインが交換される（抗体Ａ）。ＣＨ１およびＣＬドメインの交換は、修飾抗体（抗体Ａ）軽鎖は修飾抗体（抗体Ａ）重鎖とのみ効率的に二量体化し、非修飾抗体（抗体Ｂ）軽鎖は非修飾抗体（抗体Ｂ）重鎖とのみ効率的に二量体化するため、所望の二特異性ＣｒｏｓｓＭａｂのみが効率的に形成されることを確実にした（例えば、Ｃａｉｎ， Ｃ．、ＳｃｉＢＸ ４（２８）；ｄｏｉ：１０．１０３８／ｓｃｉｂｘ．２０１１．７８３（その内容はこれにより参照により本明細書に組み込まれる）を参照）。
[00293]共通重鎖
[00294]単量体の混合物からの所望の二特異性抗体の形成を増強する例示的な方法は、二特異性抗体のヘテロマー可変軽鎖領域のそれぞれと相互作用するための共通の可変重鎖を提供することによる。共通重鎖を有する二特異性抗体の組成物およびその産生方法は、例えば、米国特許出願公開第２０１２０１８４７１６号、米国特許出願公開第２０１３０３１７２００号、および米国特許出願公開第２０１６０２６４６８５Ａ１号（これらのそれぞれの内容はこれにより参照により本明細書に組み込まれる）に開示されている。
[00295]アミノ酸修飾
[00296]正しい軽鎖対合を有する多特異性抗体の代替的な組成物およびその産生方法としては、様々なアミノ酸修飾が挙げられる。例えば、Ｚｙｍｅｗｏｒｋｓは、軽鎖と重鎖との間の境界部の部分であり、各重鎖と所望の軽鎖との優先的な対合を作製する、ＣＨ１および／もしくはＣＬドメイン中の１つもしくは複数のアミノ酸修飾、ＶＨおよび／もしくはＶＬドメイン中の１つもしくは複数のアミノ酸修飾、またはこれらの組合せを有し、それによって、ヘテロ二量体対の２つの重鎖および２つの軽鎖が細胞中で共発現された場合に、第１のヘテロ二量体の重鎖が、他のものよりも軽鎖の１つと優先的に対合する、ヘテロ二量体を記載する（例えば、ＷＯ２０１５１８１８０５を参照）。他の例示的な方法は、ＷＯ２０１６０２６９４３（Ａｒｇｅｎ－Ｘ）、米国特許出願公開第２０１５０２１１００１号、米国特許出願公開第２０１４００７２５８１Ａ１号、米国特許出願公開第２０１６００３９９４７Ａ１号、および米国特許出願公開第２０１５０３６８３５２号に記載されている。
[00297]ラムダ／カッパフォーマット
[00298]ラムダ軽鎖ポリペプチドおよびカッパ軽鎖ポリペプチドを含む多特異性分子（例えば、多特異性抗体分子）は、ヘテロ二量体化を可能とするために使用することができる。ラムダ軽鎖ポリペプチドおよびカッパ軽鎖ポリペプチドを含む二特異性抗体分子を生成する方法は、ＰＣＴ公開番号ＷＯ２０１８０５７９５５（２０１７年９月２２日に出願されたＰＣＴ／ＵＳ１７／５３０５３に対応する）に開示され、これにより参照により全体が本明細書に組み込まれる。
[00299]一部の実施形態では、多特異性分子は、多特異性抗体分子、例えば、２つの結合特異性を含む抗体分子、例えば、二特異性抗体分子を含む。多特異性抗体分子は、
第１のエピトープに特異的なラムダ軽鎖ポリペプチド１（ＬＬＣＰ１）、
第１のエピトープに特異的な重鎖ポリペプチド１（ＨＣＰ１）、
第２のエピトープに特異的なカッパ軽鎖ポリペプチド２（ＫＬＣＰ２）、および
第２のエピトープに特異的な重鎖ポリペプチド２（ＨＣＰ２）
を含む。
[00300]「ラムダ軽鎖ポリペプチド１（ＬＬＣＰ１）」は、その用語が本明細書で使用される場合、コグネイト重鎖可変領域と組み合わせられた場合に、そのエピトープへの特異的結合を媒介し、ＨＣＰ１と複合体化することができる十分な軽鎖（ＬＣ）配列を含むポリペプチドを指す。一実施形態では、それは、ＣＨ１領域のすべてまたは断片を含む。一実施形態では、ＬＬＣＰ１は、ＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２、ＬＣ－ＣＤＲ３、ＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３、ＦＲ４、およびＣＨ１、またはそのエピトープの特異的結合を媒介し、ＨＣＰ１と複合体化するために十分なこれらからの配列を含む。ＬＬＣＰ１は、そのＨＣＰ１と共に、第１のエピトープに対する特異性を提供する（ＫＬＣＰ２は、そのＨＣＰ２と共に、第２のエピトープに対する特異性を提供する）。本明細書の他の箇所に記載されるように、ＬＬＣＰ１は、ＨＣＰ２に対してよりもＨＣＰ１に対してより高い親和性を有する。
[00301]「カッパ軽鎖ポリペプチド２（ＫＬＣＰ２）」は、その用語が本明細書で使用される場合、コグネイト重鎖可変領域と組み合わせられた場合に、そのエピトープへの特異的結合を媒介し、ＨＣＰ２と複合体化することができる十分な軽鎖（ＬＣ）配列を含むポリペプチドを指す。一実施形態では、それは、ＣＨ１領域のすべてまたは断片を含む。一実施形態では、ＫＬＣＰ２は、ＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２、ＬＣ－ＣＤＲ３、ＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３、ＦＲ４、およびＣＨ１、またはそのエピトープの特異的結合を媒介し、ＨＣＰ２と複合体化するために十分なこれらからの配列を含む。ＫＬＣＰ２は、そのＨＣＰ２と共に、第２のエピトープに対する特異性を提供する（ＬＬＣＰ１は、そのＨＣＰ１と共に、第１のエピトープに対する特異性を提供する）。
[00302]「重鎖ポリペプチド１（ＨＣＰ１）」は、その用語が本明細書で使用される場合、コグネイトＬＬＣＰ１と組み合わせられた場合に、そのエピトープへの特異的結合を媒介し、ＨＣＰ１と複合体化することができる十分な重鎖（ＨＣ）配列、例えば、ＨＣ可変領域配列を含むポリペプチドを指す。一実施形態では、それは、ＣＨ１領域のすべてまたは断片を含む。一実施形態では、それは、ＣＨ２および／またはＣＨ３領域のすべてまたは断片を含む。一実施形態では、ＨＣＰ１は、ＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２、ＨＣ－ＣＤＲ３、ＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３、ＦＲ４、ＣＨ１、ＣＨ２、およびＣＨ３、または（ｉ）そのエピトープの特異的結合を媒介し、ＬＬＣＰ１と複合体化し、（ｉｉ）本明細書に記載されるように、ＫＬＣＰ２とは対照的にＬＬＣＰ１に対して優先的に複合体化し、かつ（ｉｉｉ）本明細書に記載されるように、ＨＣＰ１の別の分子とは対照的にＨＣＰ２に対して優先的に複合体化するために十分なこれらからの配列を含む。ＨＣＰ１は、そのＬＬＣＰ１と共に、第１のエピトープに対する特異性を提供する（ＫＬＣＰ２は、そのＨＣＰ２と共に、第２のエピトープに対する特異性を提供する）。
[00303]「重鎖ポリペプチド２（ＨＣＰ２）」は、その用語が本明細書で使用される場合、コグネイトＬＬＣＰ１と組み合わせられた場合に、そのエピトープへの特異的結合を媒介し、ＨＣＰ１と複合体化することができる十分な重鎖（ＨＣ）配列、例えば、ＨＣ可変領域配列を含むポリペプチドを指す。一実施形態では、それは、ＣＨ１領域のすべてまたは断片を含む。一実施形態では、それは、ＣＨ２および／またはＣＨ３領域のすべてまたは断片を含む。一実施形態では、ＨＣＰ１は、ＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２、ＨＣ－ＣＤＲ３、ＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３、ＦＲ４、ＣＨ１、ＣＨ２、およびＣＨ３、または（ｉ）そのエピトープの特異的結合を媒介し、ＫＬＣＰ２と複合体化し、（ｉｉ）本明細書に記載されるように、ＬＬＣＰ１とは対照的にＫＬＣＰ２に対して優先的に複合体化し、かつ（ｉｉｉ）本明細書に記載されるように、ＨＣＰ２の別の分子とは対照的にＨＣＰ１に対して優先的に複合体化するために十分なこれらからの配列を含む。ＨＣＰ２は、そのＫＬＣＰ２と共に、第２のエピトープに対する特異性を提供する（ＬＬＣＰ１は、そのＨＣＰ１と共に、第１のエピトープに対する特異性を提供する）。
[00304]本明細書に開示される多特異性抗体分子の一部の実施形態では、
[00305]ＬＬＣＰ１は、ＨＣＰ２に対してよりもＨＣＰ１に対してより高い親和性を有し、かつ／または
[00306]ＫＬＣＰ２は、ＨＣＰ１に対してよりもＨＣＰ２に対してより高い親和性を有する。
[00307]一部の実施形態では、ＨＣＰ１に対するＬＬＣＰ１の親和性は、ＨＣＰ２に対するその親和性より十分に高く、それによって、予め選択された条件下、例えば、例えばｐＨ７の水性緩衝液中、例えばｐＨ７の生理食塩水中、または生理的条件下で、多特異性抗体分子の少なくとも７５、８０、９０、９５、９８、９９、９９．５、または９９．９％は、ＨＣＰ１と複合体化した、または結び付けられたＬＬＣＰ１を有する。
[00308]本明細書に開示される多特異性抗体分子の一部の実施形態では、
ＨＣＰ１は、ＨＣＰ１の第２の分子に対してよりもＨＣＰ２に対してより高い親和性を有し、かつ／または
ＨＣＰ２は、ＨＣＰ２の第２の分子に対してよりもＨＣＰ１に対してより高い親和性を有する。
一部の実施形態では、ＨＣＰ２に対するＨＣＰ１の親和性は、ＨＣＰ１の第２の分子に対するその親和性より十分に高く、それによって、予め選択された条件下、例えば、例えばｐＨ７の水性緩衝液中、例えばｐＨ７の生理食塩水中、または生理的条件下で、多特異性抗体分子の少なくとも７５％、８０、９０、９５、９８、９９ ９９．５または９９．９％は、ＨＣＰ２と複合体化した、または結び付けられたＨＣＰ１を有する。
[00309]別の態様では、多特異性抗体分子を作製、または産生する方法が本明細書に開示される。方法は、（ｉ）～（ｉｖ）が会合する条件下で、
（ｉ）第１の重鎖ポリペプチド（例えば、第１の重鎖可変領域（第１のＶＨ）、第１のＣＨ１、第１の重鎖定常領域（例えば、第１のＣＨ２、第１のＣＨ３、または両方）のうちの１つ、２つ、３つまたはすべてを含む重鎖ポリペプチド）を提供するステップ、
（ｉｉ）第２の重鎖ポリペプチド（例えば、第２の重鎖可変領域（第２のＶＨ）、第２のＣＨ１、第２の重鎖定常領域（例えば、第２のＣＨ２、第２のＣＨ３、または両方）のうちの１つ、２つ、３つまたはすべてを含む重鎖ポリペプチド）を提供するステップ、
[00310]（ｉｉｉ）第１の重鎖ポリペプチド（例えば、第１のＶＨ）と優先的に会合するラムダ鎖ポリペプチド（例えば、ラムダ軽鎖可変領域（ＶＬλ）、ラムダ軽鎖定常鎖（ＶＬλ）、または両方）を提供するステップ、および
（ｉｖ）第２の重鎖ポリペプチド（例えば、第２のＶＨ）と優先的に会合するカッパ鎖ポリペプチド（例えば、ラムダ軽鎖可変領域（ＶＬκ）、ラムダ軽鎖定常鎖（ＶＬκ）、または両方）を提供するステップ
を含む。
[00311]一部の実施形態では、第１および第２の重鎖ポリペプチドは、ヘテロ二量体化を増強するＦｃ境界部を形成する。
[00312]一部の実施形態では、（ｉ）～（ｉｖ）（例えば、（ｉ）～（ｉｖ）をコードする核酸）は、単一の細胞、例えば、単一の哺乳動物細胞、例えば、ＣＨＯ細胞に導入される。一部の実施形態では、（ｉ）～（ｉｖ）は、細胞中で発現される。
[00313]一部の実施形態では、（ｉ）～（ｉｖ）（例えば、（ｉ）～（ｉｖ）をコードする核酸）は、異なる細胞、例えば、異なる哺乳動物細胞、例えば、２つまたはより多くのＣＨＯ細胞に導入される。一部の実施形態では、（ｉ）～（ｉｖ）は、細胞中で発現される。
[00314]一実施形態では、方法は、例えば、ラムダおよび／またはカッパ特異的精製、例えば、親和性クロマトグラフィーを使用して、細胞発現抗体分子を精製するステップをさらに含む。
[00315]一部の実施形態では、方法は、細胞発現多特異性抗体分子を評価することをさらに含む。例えば、精製された細胞発現多特異性抗体分子は、質量分析を含む、当該技術分野において公知の技術によって分析することができる。一実施形態では、精製された細胞発現抗体分子は、切断、例えば、パパインを用いて消化されて、Ｆａｂ部分をもたらし、質量分析を使用して評価される。
[00316]一部の実施形態では、方法は、高い収率、例えば、少なくとも７５％、８０、９０、９５、９８、９９ ９９．５または９９．９％で、正しく対になったカッパ／ラムダ多特異性の、例えば、二特異性の抗体分子を産生する。
[00317]他の実施形態では、多特異性の、例えば、二特異性の、抗体分子は、
（ｉ）第１の重鎖ポリペプチド（ＨＣＰ１）（例えば、第１の重鎖可変領域（第１のＶＨ）、第１のＣＨ１、第１の重鎖定常領域（例えば、第１のＣＨ２、第１のＣＨ３、または両方）のうちの１つ、２つ、３つまたはすべてを含む重鎖ポリペプチド）であって、例えば、第１のエピトープに結合する、ＨＣＰ１、
（ｉｉ）第２の重鎖ポリペプチド（ＨＣＰ２）（例えば、第２の重鎖可変領域（第２のＶＨ）、第２のＣＨ１、第２の重鎖定常領域（例えば、第２のＣＨ２、第２のＣＨ３、または両方）のうちの１つ、２つ、３つまたはすべてを含む重鎖ポリペプチド）であって、例えば、第２のエピトープに結合する、ＨＣＰ２、
（ｉｉｉ）第１の重鎖ポリペプチド（例えば、第１のＶＨ）と優先的に会合するラムダ軽鎖ポリペプチド（ＬＬＣＰ１）（例えば、ラムダ軽鎖可変領域（ＶＬｌ）、ラムダ軽鎖定常鎖（ＶＬｌ）、または両方）であって、例えば、第１のエピトープに結合する、ＬＬＣＰ１、および
（ｉｖ）第２の重鎖ポリペプチド（例えば、第２のＶＨ）と優先的に会合するカッパ軽鎖ポリペプチド（ＫＬＣＰ２）（例えば、ラムダ軽鎖可変領域（ＶＬｋ）、ラムダ軽鎖定常鎖（ＶＬｋ）、または両方）であって、例えば、第２のエピトープに結合する、ＫＬＣＰ２
を含む。
[00318]一部の実施形態では、第１および第２の重鎖ポリペプチドは、ヘテロ二量体化を増強するＦｃ境界部を形成する。一部の実施形態では、多特異性抗体分子は、Ｆｃ定常、ＣＨ２－ＣＨ３ドメイン（ノブ修飾を有する）に接続された第１の重鎖可変領域にヘテロ二量体化したハイブリッドＶＬｌ－ＣＬｌを含む第１の結合特異性、およびＦｃ定常、ＣＨ２－ＣＨ３ドメイン（ホール修飾を有する）に接続された第２の重鎖可変領域にヘテロ二量体化したハイブリッドＶＬｋ－ＣＬｋを含む第２の結合特異性を有する。
カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメイン
[00319]本開示は、とりわけ、カルレティキュリン、例えば、野生型カルレティキュリンタンパク質またはカルレティキュリン突然変異体タンパク質に結合する１つまたは複数の抗原結合性ドメインを含む、例えば、含有するように操作された多特異性（例えば、二、三、四特異性）または多機能性分子を提供する。一部の実施形態では、多機能性分子は、野生型カルレティキュリンタンパク質および同様の親和性を有するカルレティキュリン突然変異体タンパク質に結合する。一部の実施形態では、多機能性分子は、野生型カルレティキュリンタンパク質を上回ってカルレティキュリン突然変異体タンパク質に優先的に結合する。
[00320]例示的な野生型ヒトカルレティキュリンは、配列番号６２８５として示されている。
ＥＰＡＶＹＦＫＥＱＦＬＤＧＤＧＷＴＳＲＷＩＥＳＫＨＫＳＤＦＧＫＦＶＬＳＳＧＫＦＹＧＤＥＥＫＤＫＧＬＱＴＳＱＤＡＲＦＹＡＬＳＡＳＦＥＰＦＳＮＫＧＱＴＬＶＶＱＦＴＶＫＨＥＱＮＩＤＣＧＧＧＹＶＫＬＦＰＮＳＬＤＱＴＤＭＨＧＤＳＥＹＮＩＭＦＧＰＤＩＣＧＰＧＴＫＫＶＨＶＩＦＮＹＫＧＫＮＶＬＩＮＫＤＩＲＣＫＤＤＥＦＴＨＬＹＴＬＩＶＲＰＤＮＴＹＥＶＫＩＤＮＳＱＶＥＳＧＳＬＥＤＤＷＤＦＬＰＰＫＫＩＫＤＰＤＡＳＫＰＥＤＷＤＥＲＡＫＩＤＤＰＴＤＳＫＰＥＤＷＤＫＰＥＨＩＰＤＰＤＡＫＫＰＥＤＷＤＥＥＭＤＧＥＷＥＰＰＶＩＱＮＰＥＹＫＧＥＷＫＰＲＱＩＤＮＰＤＹＫＧＴＷＩＨＰＥＩＤＮＰＥＹＳＰＤＰＳＩＹＡＹＤＮＦＧＶＬＧＬＤＬＷＱＶＫＳＧＴＩＦＤＮＦＬＩＴＮＤＥＡＹＡＥＥＦＧＮＥＴＷＧＶＴＫＡＡＥＫＱＭＫＤＫＱＤＥＥＱＲＬＫＥＥＥＥＤＫＫＲＫＥＥＥＥＡＥＤＫＥＤＤＥＤＫＤＥＤＥＥＤＥＥＤＫＥＥＤＥＥＥＤＶＰＧＱＡＫＤＥＬ（配列番号６２８５）
[00321]追加の例示的な野生型ヒトカルレティキュリンは、配列番号Ｄ１００１：
ＭＬＬＳＶＰＬＬＬＧＬＬＧＬＡＶＡＨＨＨＨＨＨＨＨＧＧＧＧＳＥＰＡＶＹＦＫＥＱＦＬＤＧＤＧＷＴＳＲＷＩＥＳＫＨＫＳＤＦＧＫＦＶＬＳＳＧＫＦＹＧＤＥＥＫＤＫＧＬＱＴＳＱＤＡＲＦＹＡＬＳＡＳＦＥＰＦＳＮＫＧＱＴＬＶＶＱＦＴＶＫＨＥＱＮＩＤＣＧＧＧＹＶＫＬＦＰＮＳＬＤＱＴＤＭＨＧＤＳＥＹＮＩＭＦＧＰＤＩＣＧＰＧＴＫＫＶＨＶＩＦＮＹＫＧＫＮＶＬＩＮＫＤＩＲＣＫＤＤＥＦＴＨＬＹＴＬＩＶＲＰＤＮＴＹＥＶＫＩＤＮＳＱＶＥＳＧＳＬＥＤＤＷＤＦＬＰＰＫＫＩＫＤＰＤＡＳＫＰＥＤＷＤＥＲＡＫＩＤＤＰＴＤＳＫＰＥＤＷＤＫＰＥＨＩＰＤＰＤＡＫＫＰＥＤＷＤＥＥＭＤＧＥＷＥＰＰＶＩＱＮＰＥＹＫＧＥＷＫＰＲＱＩＤＮＰＤＹＫＧＴＷＩＨＰＥＩＤＮＰＥＹＳＰＤＰＳＩＹＡＹＤＮＦＧＶＬＧＬＤＬＷＱＶＫＳＧＴＩＦＤＮＦＬＩＴＮＤＥＡＹＡＥＥＦＧＮＥＴＷＧＶＴＫＡＡＥＫＱＭＫＤＫＱＤＥＥＱＲＬＫＥＥＥＥＤＫＫＲＫＥＥＥＥＡＥＤＫＥＤＤＥＤＫＤＥＤＥＥＤＥＥＤＫＥＥＤＥＥＥＤＶＰＧＱＡ（配列番号Ｄ１００１）として示される。
[00322]カルレティキュリン突然変異体タンパク質が、同定され、骨髄がんと関連しているとわかった、例えば、Ｎａｎｇａｌｉａら、Ｎ Ｅｎｇｌ Ｊ Ｍｅｄ．２０１３年１２月１９日；３６９巻（２５号）：２３９１～２４０５頁、Ｋｌａｍｐｆｌら、Ｎ Ｅｎｇｌ Ｊ Ｍｅｄ．２０１３年１２月１９日；３６９巻（２５号）：２３７９～９０頁および米国特許国際公開第２０１７０２６９０９２号を参照（その内容全体はこれにより参照により本明細書に組み込まれる）。突然変異体カルレティキュリンは、野生型カルレティキュリンのコード配列のエキソン９においてフレームシフトを有し、その結果、主に正に荷電したポリペプチドによる、野生型カルレティキュリンのＣ末端の負に荷電したアミノ酸の置換をもたらす。表２は、３８種のカルレティキュリン突然変異体タンパク質の全長アミノ酸配列を開示する。表３は、３６種のカルレティキュリン突然変異体タンパク質のＣ末端アミノ酸配列を開示する。３８種のカルレティキュリン突然変異体タンパク質はすべて、ＲＲＫＭＳＰＡＲＰＲＴＳＣＲＥＡＣＬＱＧＷＴＥＡ（配列番号６２８６）のアミノ酸配列を含む。
[00323]カルレティキュリンの主な突然変異は、１型および２型突然変異である（表２および３を参照）。１型突然変異は、５２ｂｐの欠失（ｃ．１０９２＿１１４３ｄｅｌ）であるが、２型突然変異は、５ｂｐの挿入（ｃ．１１５４＿１１５５ｉｎｓＴＴＧＴＣ）である。
Figure 2023542080000003
Figure 2023542080000004
Figure 2023542080000005
Figure 2023542080000006
Figure 2023542080000007
Figure 2023542080000008
Figure 2023542080000009
Figure 2023542080000010
Figure 2023542080000011
Figure 2023542080000012
 [00324]一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、表４～７、表２４、および表２５に開示される任意のＣＤＲアミノ酸配列、フレームワーク領域（ＦＷＲ）アミノ酸配列、または可変領域アミノ酸配列を含む。
[00325]一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、例えば、表４に記載されるマウス１６Ｂ１１．１抗体に由来する１つ、２つ、３つのＣＤＲを含むＶＨを含む。例えば、一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、配列番号６３５８の重鎖相補性決定領域１（ＶＨＣＤＲ１）アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つもしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）、配列番号６３６０のＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つもしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号２２７のＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つもしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）を含むＶＨを含む。一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、配列番号６３５８の重鎖相補性決定領域１（ＶＨＣＤＲ１）アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つもしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）、配列番号６３６０のＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つもしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号２２７のＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つもしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）を含むＶＨを含む。一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、配列番号６３５８の重鎖相補性決定領域１（ＶＨＣＤＲ１）アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つもしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）、配列番号６３６０のＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つもしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号２２７のＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つもしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）を含むＶＨを含む。一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、配列番号６３５８の重鎖相補性決定領域１（ＶＨＣＤＲ１）アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つもしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）、配列番号６３６０のＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つもしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号２２７のＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つもしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）を含むＶＨを含む。
[00326]代替的に、またはマウス１６Ｂ１１．１抗体に由来する１つ、２つ、３つのＣＤＲを含むＶＨを含むカルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインと組み合わせて、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、例えば、表４に記載されるマウス１６Ｂ１１．１抗体に由来する１つ、２つ、３つのＣＤＲを含むＶＬを含む。例えば、一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、配列番号２５１の軽鎖相補性決定領域１（ＶＬＣＤＲ１）アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つもしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）、配列番号２４６のＶＬＣＤＲ２アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つもしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号２４８のＶＬＣＤＲ３アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つもしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、配列番号２５１のＶＬＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号２５３のＶＬＣＤＲ２アミノ酸配列、および配列番号２５５のＶＬＣＤＲ３アミノ酸配列を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、配列番号２５８のＶＬＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号２６０のＶＬＣＤＲ２アミノ酸配列、および配列番号２６２のＶＬＣＤＲ３アミノ酸配列を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、配列番号２６５のＶＬＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号２６７のＶＬＣＤＲ２アミノ酸配列、および配列番号２６９のＶＬＣＤＲ３アミノ酸配列を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、配列番号２７２のＶＬＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号２７４のＶＬＣＤＲ２アミノ酸配列、および配列番号２７６のＶＬＣＤＲ３アミノ酸配列を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、配列番号２７９のＶＬＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号２８１のＶＬＣＤＲ２アミノ酸配列、および配列番号２８３のＶＬＣＤＲ３アミノ酸配列を含むＶＬを含む。
[00327]一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、配列番号６２５３の重鎖相補性決定領域１（ＶＨＣＤＲ１）アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つもしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）、配列番号６２５４のＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つもしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号６２５５のＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つもしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）を含むＶＨを含む。一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、配列番号６２５３のＶＨＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号６２５４のＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列、および／または配列番号６２５５のＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列を含むＶＨを含む。
[00328]一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、配列番号６２５９の軽鎖相補性決定領域１（ＶＬＣＤＲ１）アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つもしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）、配列番号６２６０のＶＬＣＤＲ２アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つもしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号６２６１のＶＬＣＤＲ３アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つもしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、配列番号６２５９のＶＬＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号６２６０のＶＬＣＤＲ２アミノ酸配列、および配列番号６２６１のＶＬＣＤＲ３アミノ酸配列を含むＶＬを含む。
[00329]一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、例えば、表４に記載されるヒト化１６Ｂ１１．１抗体に由来する１つ、２つ、３つ、または４つのフレームワーク領域を含むＶＨを含む。例えば、一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、配列番号６３５７の重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６３５９のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６３６１のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列、および／または配列番号６２７３のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＨを含む。一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、配列番号６３６２の重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６３６３のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号２２６のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列、および／または配列番号２２８のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＨを含む。一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、配列番号２２９の重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６３６９のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６３７１のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列、および／または配列番号２２８のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＨを含む。一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、配列番号６３７３の重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６３６９のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６３７１のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列、および／または配列番号２２８のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＨを含む。
[00330]一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、配列番号６３７４の軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６３７５のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号２４７のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列、および／または配列番号２４９のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、配列番号２５０の軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号２５２のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号２５４のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列、および／または配列番号２５６のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、配列番号２５７の軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号２５９のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号２６１のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列、および／または配列番号２６３のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、配列番号２６４の軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号２６６のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号２６８のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列、および／または配列番号２７０のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、配列番号２７１の軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号２７３のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号２７５のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列、および／または配列番号２７７のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、配列番号２７８の軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号２８０のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号２８２のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列、および／または配列番号２８４のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＬを含む。
[00331]一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、配列番号６２２４の重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６２２６のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６２２８のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列、および／または配列番号６２３０のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＨを含む。一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、配列番号６２３８の軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６２４０のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６２４２のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列、および／または配列番号６２４４のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、配列番号６２６３のＶＨＦＷＲ１アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）、配列番号６２６４のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）、配列番号６２６５のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、もしくは１１以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号２２８のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＨを含む。一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、配列番号６２７７のＶＬＦＷＲ１アミノ酸配列（または１つ、２つ、もしくは３つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号６２７８のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列（または１つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号６２７９のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列（または１つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号６２８０のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、配列番号６２６３のＶＨＦＷＲ１アミノ酸配列、配列番号６２６４のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６２６５のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列、および／または配列番号２２８のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＨを含む。一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、配列番号６２７７のＶＬＦＷＲ１アミノ酸配列、配列番号６２７８のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６２７９のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列、および／または配列番号６２８０のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＬを含む。
[00332]一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、配列番号６３４７のアミノ酸配列（または配列番号６３４７に対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨを含む。一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、配列番号６３４８のアミノ酸配列（または配列番号６３４８に対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、配列番号６３４９のアミノ酸配列（または配列番号６３４９に対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨを含む。一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、配列番号６３５０のアミノ酸配列（または配列番号６３５０に対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨを含む。一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、配列番号６３５１のアミノ酸配列（または配列番号６３５１に対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨを含む。一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、配列番号６３５２のアミノ酸配列（または配列番号６３５２に対して少なくとも約９３％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、配列番号６３５３のアミノ酸配列（または配列番号６３５３に対して少なくとも約９３％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、配列番号６３５４のアミノ酸配列（または配列番号６３５４に対して少なくとも約９３％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、配列番号６３５５のアミノ酸配列（または配列番号６３５５に対して少なくとも約９３％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、配列番号６３５６のアミノ酸配列（または配列番号６３５６に対して少なくとも約９３％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬを含む。
[00333]一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、配列番号６２４７のアミノ酸配列（または配列番号６２４７に対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨを含む。一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、配列番号６２４９のアミノ酸配列（または配列番号６２４９に対して少なくとも約９３％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、配列番号６２４７のアミノ酸配列を含むＶＨを含む。一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、配列番号６２４９のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、配列番号６２４７のアミノ酸配列を含むＶＨ、および配列番号６２４９のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。
[00334]一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、表４の１つの行に列挙される１つ、２つ、もしくは３つ全部のＣＤＲ配列、またはそれに対して（例えば、１つ、２つ、もしくは３つ全部のＣＤＲ配列に対して）少なくとも７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨを含む。一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、表５の１つの行に列挙される１つ、２つ、もしくは３つ全部のＣＤＲ配列、またはそれに対して（例えば、１つ、２つ、もしくは３つ全部のＣＤＲ配列に対して）少なくとも７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、（ｉ）表４の１つの行に列挙される１つ、２つ、もしくは３つ全部のＣＤＲ配列、またはそれに対して（例えば、１つ、２つ、もしくは３つ全部のＣＤＲ配列に対して）少なくとも７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ；および（ｉｉ）表５の１つの行に列挙される１つ、２つ、もしくは３つ全部のＣＤＲ配列、またはそれに対して（例えば、１つ、２つ、もしくは３つ全部のＣＤＲ配列に対して）少なくとも７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬを含む。
Figure 2023542080000013
Figure 2023542080000014
Figure 2023542080000015
Figure 2023542080000016
[00335]一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、表２４に列挙されるＶＨアミノ酸配列、またはそれに対して少なくとも７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨを含む。一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、表２４に列挙されるＶＬアミノ酸配列、またはそれに対して少なくとも７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、（ｉ）表２４に列挙されるＶＨアミノ酸配列、またはそれに対して少なくとも７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ、および（ｉｉ）表２４に列挙されるＶＬアミノ酸配列、またはそれに対して少なくとも７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬを含む。
Figure 2023542080000019
Figure 2023542080000020
Figure 2023542080000021
 [00336]一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、表２５に列挙されるアミノ酸配列、またはそれに対して少なくとも７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むｓｃＦｖを含む。一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、表２５に列挙されるＶＨアミノ酸配列、またはそれに対して少なくとも７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むｓｃＦｖを含む。一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、表２５に列挙されるＶＬアミノ酸配列、またはそれに対して少なくとも７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むｓｃＦｖを含む。一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、表２５に列挙されるスペーサーアミノ酸配列、またはそれに対して少なくとも７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むｓｃＦｖを含む。
Figure 2023542080000022
 [00337]一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、Ｆｃ領域を含む。一部の実施形態では、Ｆｃ領域は、例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＭ、ＩｇＡ１、ＩｇＡ２、ＩｇＤ、およびＩｇＥの重鎖定常領域から選択される。一部の実施形態では、Ｆｃ領域は、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、およびＩｇＧ４の重鎖定常領域から選択される。一部の実施形態では、Ｆｃ領域は、ＩｇＧ１またはＩｇＧ２（例えば、ヒトＩｇＧ１またはＩｇＧ２）の重鎖定常領域から選択される。一部の実施形態では、重鎖定常領域は、ヒトＩｇＧ２ａである。一部の実施形態では、重鎖定常領域は、マウスＩｇＧ２ａ配列、例えば、以下の配列番号Ｄ１２３、またはそれに対して少なくとも７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む：
ＡＫＴＴＡＰＳＶＹＰＬＡＰＶＣＧＤＴＴＧＳＳＶＴＬＧＣＬＶＫＧＹＦＰＥＰＶＴＬＴＷＮＳＧＳＬＳＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＤＬＹＴＬＳＳＳＶＴＶＴＳＳＴＷＰＳＱＳＩＴＣＮＶＡＨＰＡＳＳＴＫＶＤＫＫＩＥＰＲＧＰＴＩＫＰＣＰＰＣＫＣＰＡＰＮＬＬＧＧＰＳＶＦＩＦＰＰＫＩＫＤＶＬＭＩＳＬＳＰＩＶＴＣＶＶＶＤＶＳＥＤＤＰＤＶＱＩＳＷＦＶＮＮＶＥＶＨＴＡＱＴＱＴＨＲＥＤＹＮＳＴＬＲＶＶＳＡＬＰＩＱＨＱＤＷＭＳＧＫＥＦＫＣＫＶＮＮＫＤＬＰＡＰＩＥＲＴＩＳＫＰＫＧＳＶＲＡＰＱＶＹＶＬＰＰＰＥＥＥＭＴＫＫＱＶＴＬＴＣＭＶＴＤＦＭＰＥＤＩＹＶＥＷＴＮＮＧＫＴＥＬＮＹＫＮＴＥＰＶＬＤＳＤＧＳＹＦＭＹＳＫＬＲＶＥＫＫＮＷＶＥＲＮＳＹＳＣＳＶＶＨＥＧＬＨＮＨＨＴＴＫＳＦＳＲＴＰＧＫ（配列番号Ｄ１２３）
[00338]一部の実施形態では、Ｆｃ領域は、例えば、本明細書に記載されるＦｃ領域バリアントを含む。一部の実施形態では、Ｆｃ領域は、１つまたは複数の突然変異を含む。一部の実施形態では、Ｆｃ領域は、ＬＡＬＡＰＧ突然変異を含む。一部の実施形態では、Ｆｃ領域は、マウスＩｇＧ２ａ－ＬＡＬＡＰＧバリアントのアミノ酸配列、例えば、以下の配列番号Ｄ１２４もしくはＤ１２５の配列、またはそれに対して少なくとも７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む：
ＡＫＴＴＡＰＳＶＹＰＬＡＰＶＣＧＤＴＴＧＳＳＶＴＬＧＣＬＶＫＧＹＦＰＥＰＶＴＬＴＷＮＳＧＳＬＳＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＤＬＹＴＬＳＳＳＶＴＶＴＳＳＴＷＰＳＱＳＩＴＣＮＶＡＨＰＡＳＳＴＫＶＤＫＫＩＥＰＲＧＰＴＩＫＰＣＰＰＣＫＣＰＡＰＮＡＡＧＧＰＳＶＦＩＦＰＰＫＩＫＤＶＬＭＩＳＬＳＰＩＶＴＣＶＶＶＤＶＳＥＤＤＰＤＶＱＩＳＷＦＶＮＮＶＥＶＨＴＡＱＴＱＴＨＲＥＤＹＮＳＴＬＲＶＶＳＡＬＰＩＱＨＱＤＷＭＳＧＫＥＦＫＣＫＶＮＮＫＤＬＧＡＰＩＥＲＴＩＳＫＰＫＧＳＶＲＡＰＱＶＹＶＬＰＰＰＥＥＥＭＴＫＫＱＶＴＬＴＣＭＶＴＤＦＭＰＥＤＩＹＶＥＷＴＮＮＧＫＴＥＬＮＹＫＮＴＥＰＶＬＤＳＤＧＳＹＦＭＹＳＫＬＲＶＥＫＫＮＷＶＥＲＮＳＹＳＣＳＶＶＨＥＧＬＨＮＨＨＴＴＫＳＦＳＲＴＰＧＫ（配列番号Ｄ１２４）
ＡＫＴＴＡＰＳＶＹＰＬＡＰＶＣＧＤＴＴＧＳＳＶＴＬＧＣＬＶＫＧＹＦＰＥＰＶＴＬＴＷＮＳＧＳＬＳＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＤＬＹＴＬＳＳＳＶＴＶＴＳＳＴＷＰＳＱＳＩＴＣＮＶＡＨＰＡＳＳＴＫＶＤＫＫＩＥＰＲＧＰＴＩＫＰＣＰＰＣＫＣＰＡＰＮＡＡＧＧＰＳＶＦＩＦＰＰＫＩＫＤＶＬＭＩＳＬＳＰＩＶＴＣＶＶＶＤＶＳＥＤＤＰＤＶＱＩＳＷＦＶＮＮＶＥＶＨＴＡＱＴＱＴＨＲＥＤＹＮＳＴＬＲＶＶＳＡＬＰＩＱＨＱＤＷＭＳＧＫＥＦＫＣＫＶＮＮＫＤＬＧＡＰＩＥＲＴＩＳＫＰＫＧＳＶＲＡＰＱＶＹＶＬＰＰＣＥＥＥＭＴＫＫＱＶＴＬＷＣＭＶＴＤＦＭＰＥＤＩＹＶＥＷＴＮＮＧＫＴＥＬＮＹＫＮＴＥＰＶＬＤＳＤＧＳＹＦＭＹＳＫＬＲＶＥＫＫＮＷＶＥＲＮＳＹＳＣＳＶＶＨＥＧＬＨＮＨＨＴＴＫＳＦＳＲＴＰＧＫ（配列番号Ｄ１２５）
[00339]一部の実施形態では、Ｆｃ領域は、ヒトＩｇＧ２ａ Ｎ２９７６Ａバリアントのアミノ酸配列、例えば、以下の配列番号Ｄ１３０の配列、またはそれに対して少なくとも７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む：
ＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＫＶＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＬＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＧＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧＫ（配列番号Ｄ１３０）
[00340]一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、軽鎖定常領域、例えば、ＣＬカッパ領域、例えば、ヒトＣＬカッパ領域を含む。一部の実施形態では、軽鎖定常領域は、以下の配列番号Ｄ１２６のアミノ酸配列、またはそれに対して少なくとも７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む：
ＲＡＤＡＡＰＴＶＳＩＦＰＰＳＳＥＱＬＴＳＧＧＡＳＶＶＣＦＬＮＮＦＹＰＫＤＩＮＶＫＷＫＩＤＧＳＥＲＱＮＧＶＬＮＳＷＴＤＱＤＳＫＤＳＴＹＳＭＳＳＴＬＴＬＴＫＤＥＹＥＲＨＮＳＹＴＣＥＡＴＨＫＴＳＴＳＰＩＶＫＳＦＮＲＮＥＣ（配列番号Ｄ１２６）
[00341]一部の実施形態では、軽鎖定常領域は、以下の配列番号Ｄ１３１のアミノ酸配列、またはそれに対して少なくとも７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む：
ＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ（配列番号Ｄ１３１）
追加のカルレティキュリン標的化抗原結合性ドメイン
[00342]一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、表１６～１９に開示される任意のＣＤＲアミノ酸配列または可変領域アミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、配列番号６２５３の重鎖相補性決定領域１（ＶＨＣＤＲ１）アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つもしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）、配列番号２４３のＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つもしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号６２５５のＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つもしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）を含むＶＨを含む。一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、配列番号６２５３のＶＨＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号２４３のＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列、および／または配列番号６２５５のＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列を含むＶＨを含む。一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、配列番号６２５９の軽鎖相補性決定領域１（ＶＬＣＤＲ１）アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つもしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）、配列番号６２６０のＶＬＣＤＲ２アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つもしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号６２６１のＶＬＣＤＲ３アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つもしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、配列番号６２５９のＶＬＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号６２６０のＶＬＣＤＲ２アミノ酸配列、および配列番号６２６１のＶＬＣＤＲ３アミノ酸配列を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、配列番号２４４のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨを含む。一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、配列番号２４５のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約９３％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、配列番号２４４のアミノ酸配列を含むＶＨおよび／または配列番号２４５のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、配列番号６３７２、２３４、２３５、２３６もしくは２３７のアミノ酸配列を含むＶＨ、またはそれに対して少なくとも約８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、配列番号２３８、２３９、２４０、２４１もしくは２４２のアミノ酸配列を含むＶＬ、またはそれに対して少なくとも約８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、配列番号６３７２のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨおよび配列番号２３８のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、配列番号６３７２のアミノ酸配列を含むＶＨおよび配列番号２３８のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、配列番号２３４のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨおよび配列番号２３８のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、配列番号２３４のアミノ酸配列を含むＶＨおよび配列番号２３８のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、配列番号２３５のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨおよび配列番号２３８のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、配列番号２３５のアミノ酸配列を含むＶＨおよび配列番号２３８のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、配列番号２３６のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨおよび配列番号２３８のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、配列番号２３６のアミノ酸配列を含むＶＨおよび配列番号２３８のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、配列番号２３７のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨおよび配列番号２３８のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、配列番号２３７のアミノ酸配列を含むＶＨおよび配列番号２３８のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、配列番号６３７２のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨおよび配列番号２３９のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、配列番号６３７２のアミノ酸配列を含むＶＨおよび配列番号２３９のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、配列番号２３４のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨおよび配列番号２３９のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、配列番号２３４のアミノ酸配列を含むＶＨおよび配列番号２３９のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、配列番号２３５のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨおよび配列番号２３９のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、配列番号２３５のアミノ酸配列を含むＶＨおよび配列番号２３９のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、配列番号２３６のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨおよび配列番号２３９のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、配列番号２３６のアミノ酸配列を含むＶＨおよび配列番号２３９のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、配列番号２３７のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨおよび配列番号２３９のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、配列番号２３７のアミノ酸配列を含むＶＨおよび配列番号２３９のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、配列番号６３７２のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨおよび配列番号２４０のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、配列番号６３７２のアミノ酸配列を含むＶＨおよび配列番号２４０のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、配列番号２３４のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨおよび配列番号２４０のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、配列番号２３４のアミノ酸配列を含むＶＨおよび配列番号２４０のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、配列番号２３５のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨおよび配列番号２４０のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、配列番号２３５のアミノ酸配列を含むＶＨおよび配列番号２４０のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、配列番号２３６のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨおよび配列番号２４０のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、配列番号



２３６のアミノ酸配列を含むＶＨおよび配列番号２４０のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、配列番号２３７のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨおよび配列番号２４０のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、配列番号２３７のアミノ酸配列を含むＶＨおよび配列番号２４０のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、配列番号６３７２のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨおよび配列番号２４１のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、配列番号６３７２のアミノ酸配列を含むＶＨおよび配列番号２４１のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、配列番号２３４のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨおよび配列番号２４１のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、配列番号２３４のアミノ酸配列を含むＶＨおよび配列番号２４１のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、配列番号２３５のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨおよび配列番号２４１のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、配列番号２３５のアミノ酸配列を含むＶＨおよび配列番号２４１のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、配列番号２３６のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨおよび配列番号２４１のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、配列番号２３６のアミノ酸配列を含むＶＨおよび配列番号２４１のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、配列番号２３７のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨおよび配列番号２４１のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、配列番号２３７のアミノ酸配列を含むＶＨおよび配列番号２４１のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、配列番号６３７２のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨおよび配列番号２４２のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、配列番号６３７２のアミノ酸配列を含むＶＨおよび配列番号２４２のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、配列番号２３４のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨおよび配列番号２４２のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、配列番号２３４のアミノ酸配列を含むＶＨおよび配列番号２４２のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、配列番号２３５のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨおよび配列番号２４２のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、配列番号２３５のアミノ酸配列を含むＶＨおよび配列番号２４２のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、配列番号２３６のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨおよび配列番号２４２のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、配列番号２３６のアミノ酸配列を含むＶＨおよび配列番号２４２のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、配列番号２３７のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨおよび配列番号２４２のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、配列番号２３７のアミノ酸配列を含むＶＨおよび配列番号２４２のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。
[00343]一部の実施形態では、カルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインは、配列番号２３６のアミノ酸配列を含むＶＨおよび配列番号２３８のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。
Figure 2023542080000023
Figure 2023542080000024
Figure 2023542080000025
Figure 2023542080000026
Figure 2023542080000027
 免疫細胞エンゲージャー
[00344]本明細書に開示される多特異性または多機能性分子の免疫細胞エンゲージャーは、免疫細胞、例えば、免疫エフェクター細胞への結合、および／またはその活性化を媒介することができる。一部の実施形態では、免疫細胞は、Ｔ細胞、ＮＫ細胞、Ｂ細胞、樹状細胞、もしくはマクロファージ細胞エンゲージャー、またはこれらの組合せから選択される。一部の実施形態では、免疫細胞エンゲージャーは、Ｔ細胞エンゲージャー、ＮＫ細胞エンゲージャー、Ｂ細胞エンゲージャー、樹状細胞エンゲージャー、もしくはマクロファージ細胞エンゲージャーのうちの１つ、２つ、３つ、もしくはすべて、またはこれらの組合せから選択される。免疫細胞エンゲージャーは、免疫系のアゴニストであり得る。一部の実施形態では、免疫細胞エンゲージャーは、抗体分子、リガンド分子（例えば、免疫グロブリン定常領域、例えば、Ｆｃ領域をさらに含むリガンド）、小分子、ヌクレオチド分子であり得る。
Ｔ細胞エンゲージャー
[00345]本開示は、とりわけ、Ｔ細胞への結合および／またはその活性化を媒介する１つまたは複数のＴ細胞エンゲージャーを含有するように操作されている多特異性（例えば、二、三、四特異性）または多機能性分子を提供する。したがって、一部の実施形態では、Ｔ細胞エンゲージャーは、ＴＣＲのベータサブユニットの可変鎖（例えば、ＴＣＲβＶ）、ＣＤ３、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ、ＴＣＲζ、ＩＣＯＳ、ＣＤ２８、ＣＤ２７、ＨＶＥＭ、ＬＩＧＨＴ、ＣＤ４０、４－１ＢＢ、ＯＸ４０、ＤＲ３、ＧＩＴＲ、ＣＤ３０、ＴＩＭ１、ＳＬＡＭ、ＣＤ２またはＣＤ２２６のうちの１つまたは複数に結合する（例えば、一部の実施形態では、それを活性化させる）抗原結合性ドメインまたはリガンドから選択される。他の実施形態では、Ｔ細胞エンゲージャーは、ＴＣＲβＶ、ＣＤ３、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ、ＴＣＲζ、ＩＣＯＳ、ＣＤ２８、ＣＤ２７、ＨＶＥＭ、ＬＩＧＨＴ、ＣＤ４０、４－１ＢＢ、ＯＸ４０、ＤＲ３、ＧＩＴＲ、ＣＤ３０、ＴＩＭ１、ＳＬＡＭ、ＣＤ２またはＣＤ２２６のうちの１つまたは複数に結合し、かつそれを活性化させない抗原結合性ドメインまたはリガンドから選択される。一部の実施形態では、Ｔ細胞エンゲージャーは、ＴＣＲβＶに結合する。
[00346]一部の実施形態では、Ｔ細胞エンゲージャーは、ＣＤ３に結合する（例えば、ＣＤ３に結合する抗原結合性ドメインを含む）。一部の実施形態では、多特異性または多機能性分子は、ＣＤ３に結合するＴ細胞エンゲージャー（例えば、ＣＤ３に結合する抗原結合性ドメインを含む）（例えば、ＣＤ３に結合する抗原結合性ドメインを含む）および例えば、本明細書に記載のカルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインを含む。
[00347]一部の実施形態では、多特異性または多機能性分子（例えば、本明細書に記載される）は、ＣＤ３に結合する抗原結合性ドメインを含む。一部の実施形態では、多特異性または多機能性分子は、ＣＤ３に結合する抗原結合性ドメインおよび例えば、本明細書に記載のカルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインを含む。
[00348]一部の実施形態では、ＣＤ３に結合する抗原結合性ドメインは、表２６および／もしくは表４２に開示される１つもしくは複数のＣＤＲ（例えば、ＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、ＶＨＣＤＲ３、ＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、および／またはＶＬＣＤＲ３）、またはそれに対して少なくとも８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の同一性を有する配列を含む。一部の実施形態では、ＣＤ３に結合する抗原結合性ドメインは、表２６および／もしくは表４２に開示される１つもしくは複数のフレームワーク領域（例えば、ＶＨＦＷＲ１、ＶＨＦＷＲ２、ＶＨＦＷＲ３、ＶＨＦＷＲ４、ＶＬＦＷＲ１、ＶＬＦＷＲ２、ＶＬＦＷＲ３、および／またはＶＬＦＷＲ４）、またはそれに対して少なくとも８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の同一性を有する配列を含む。一部の実施形態では、ＣＤ３に結合する抗原結合性ドメインは、表２７に開示されるＶＨおよび／もしくはＶＬ、またはそれに対して少なくとも８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の同一性を有する配列を含む。
Figure 2023542080000028
Figure 2023542080000029
Figure 2023542080000030
 [00349]一部の実施形態では、多機能性分子（例えば、ｓｃＦｖ、例えば、二特異性ｓｃＦｖ）は、以下のアミノ酸配列（またはそこに含まれるＣＤＲ、ＶＨ、もしくはＶＬ配列）、またはそれに対して少なくとも８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む：
ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＫＳＬＫＬＳＣＥＡＳＧＦＴＦＳＧＹＧＭＨＷＶＲＱＡＰＧＲＧＬＥＳＶＡＹＩＴＳＳＳＩＮＩＫＹＡＤＡＶＫＧＲＦＴＶＳＲＤＮＡＫＮＬＬＦＬＱＭＮＩＬＫＳＥＤＴＡＭＹＹＣＡＲＦＤＷＤＫＮＹＷＧＱＧＴＭＶＴＶＳＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＰＡＳＬＧＤＲＶＴＩＮＣＱＡＳＱＤＩＳＮＹＬＮＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＹＴＮＫＬＡＤＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＲＤＳＳＦＴＩＳＳＬＥＳＥＤＩＧＳＹＹＣＱＱＹＹＮＹＰＷＴＦＧＰＧＴＫＬＥＩＫＧＧＧＧＳＴＩＫＰＣＰＰＣＫＣＰＡＰＮＡＡＧＧＰＳＶＦＩＦＰＰＫＩＫＤＶＬＭＩＳＬＳＰＩＶＴＣＶＶＶＤＶＳＥＤＤＰＤＶＱＩＳＷＦＶＮＮＶＥＶＨＴＡＱＴＱＴＨＲＥＤＹＮＳＴＬＲＶＶＳＡＬＰＩＱＨＱＤＷＭＳＧＫＥＦＫＣＫＶＮＮＫＤＬＧＡＰＩＥＲＴＩＳＫＰＫＧＳＶＲＡＰＱＶＣＶＬＰＰＰＥＥＥＭＴＫＫＱＶＴＬＳＣＡＶＴＤＦＭＰＥＤＩＹＶＥＷＴＮＮＧＫＴＥＬＮＹＫＮＴＥＰＶＬＤＳＤＧＳＹＦＭＶＳＫＬＲＶＥＫＫＮＷＶＥＲＮＳＹＳＣＳＶＶＨＥＧＬＨＮＨＨＴＴＫＳＦＳＲＴＰＧＫ（配列番号Ｄ１２７）。
[00350]一部の実施形態では、多機能性分子（例えば、二特異性抗体分子）は、以下のアミノ酸配列（またはそこに含まれるＣＤＲ（下線）、ＶＨ、もしくは定常領域配列）、またはそれに対して少なくとも８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む：
ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＥＹＷＭＮＷＬＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＧＶＩＫＹＫＹＳＮＹＡＴＥＦＡＥＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＤＳＫＳＳＶＹＬＱＭＮＳＬＫＴＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＧＲＤＶＱＤＹＷＧＱＧＴＭＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＲＶＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＬＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＡＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＣＲＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＷＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧＫ（配列番号Ｄ２１２）。
[00351]一部の実施形態では、多機能性分子（例えば、二特異性抗体分子）は、以下のアミノ酸配列（またはそこに含まれるＣＤＲ（下線）、ＶＬ、もしくは定常領域配列）、またはそれに対して少なくとも８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む：
ＤＩＱＬＴＱＳＰＳＦＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＳＴＳＳＳＶＴＴＮＹＬＨＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＳＴＳＮＬＡＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＥＹＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＣＬＳＳＰＣＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ（配列番号Ｄ２１３）。
[00352]一部の実施形態では、多機能性分子（例えば、ｓｃＦｖ、例えば、二特異性ｓｃＦｖ）は、以下のアミノ酸配列（またはそこに含まれるＣＤＲ（下線）、ＶＨ、もしくはＶＬ配列）、またはそれに対して少なくとも８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む：
ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＡＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＴＦＴＴＹＷＭＨＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＭＧＮＦＮＰＮＮＧＤＴＮＹＮＥＫＦＫＴＲＶＴＭＴＶＤＫＳＴＳＴＡＹＭＥＬＲＳＬＲＳＤＤＭＡＶＹＹＣＡＲＤＤＹＧＲＹＹＦＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＤＩＱＭＴＱＳＰＳＴＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＫＳＳＱＳＬＬＮＳＲＴＲＫＮＹＬＡＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＷＡＦＴＲＥＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＥＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＤＤＦＡＴＹＹＣＫＱＳＦＩＬＲＴＦＧＧＧＴＫＶＥＩＫＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＬＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＡＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＣＴＬＰＰＳＲＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＳＣＡＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＶＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧＫ（配列番号Ｄ２１４）。
ヒトＴ細胞受容体（ＴＣＲ）複合体
[00353]Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）は、Ｔ細胞の表面に見出すことができる。ＴＣＲは、細胞、例えば、抗原提示細胞の表面上に提示される、例えば、主要組織適合性複合体（ＭＨＣ）分子に結合される、抗原、例えば、ペプチドを認識する。ＴＣＲはヘテロ二量体分子であり、アルファ鎖、ベータ鎖、ガンマ鎖またはデルタ鎖を含むことができる。アルファ鎖およびベータ鎖を含むＴＣＲはまた、ＴＣＲαβと呼ばれる。ＴＣＲβ鎖は、以下の領域（セグメントとしても公知である）：可変（Ｖ）、多様（Ｄ）、結合（Ｊ）および定常（Ｃ）からなる（Ｍａｙｅｒ Ｇ．およびＮｙｌａｎｄ Ｊ．（２０１０年）１０章：Ｍａｊｏｒ Ｈｉｓｔｏｃｏｍｐａｔｉｂｉｌｉｔｙ Ｃｏｍｐｌｅｘ ａｎｄ Ｔ－ｃｅｌｌ Ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ－Ｒｏｌｅ ｉｎ Ｉｍｍｕｎｅ Ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ．Ｉｎ：Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ ｏｎ－ｌｉｎｅ、Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｓｏｕｔｈ Ｃａｒｏｌｉｎａ Ｓｃｈｏｏｌ ｏｆ Ｍｅｄｉｃｉｎｅを参照）。ＴＣＲα鎖は、Ｖ、ＪおよびＣ領域からなる。Ｖ（可変）、Ｄ（多様）、Ｊ（結合）、およびＣ（定常）領域の体細胞組換えによるＴ細胞受容体（ＴＣＲ）の再編成は、Ｔ細胞の発生および成熟における決定的な事象である。ＴＣＲ遺伝子再編成は、胸腺で起こる。
[00354]ＴＣＲは、アルファ鎖およびベータ鎖を含むＴＣＲヘテロ二量体、ならびに二量体シグナル伝達分子、例えば、ＣＤ３共受容体、例えば、ＣＤ３δ／εおよび／またはＣＤ３γ／εを含むＴＣＲ複合体として公知である受容体複合体を含み得る。
ＴＣＲベータＶ（ＴＣＲβＶ）
[00355]免疫系の多様性は、膨大な数の病原体に対する防御を可能にする。生殖系列ゲノムの大きさは限られているため、多様性は、Ｖ（Ｄ）Ｊ組換えの過程だけでなく、ヌクレオチドの接合部（Ｖ－ＤセグメントとＤ－Ｊセグメントの間の接合部）の欠失および偽ランダムで鋳型化されていないヌクレオチドの付加によっても達成される。ＴＣＲベータ遺伝子は、多様性を生み出すために遺伝子配列を受ける。
[00356]ＴＣＲ Ｖベータレパートリーは、例えば、機能的遺伝子セグメントにおいて７つの頻繁に起こる不活性化多型、および２つのＶベータ遺伝子セグメントを包含する大きな挿入／欠失関連多型のために、個体と集団との間で変化する。
[00357]本開示は、例えば、本明細書に記載されるように、例えば、ヒトＴＣＲベータＶ鎖（ＴＣＲβＶ）、例えば、ＴＣＲβＶ遺伝子ファミリー（グループとも呼ばれる）、例えば、ＴＣＲβＶサブファミリー（サブグループとも呼ばれる）に結合する、例えば、特異的に結合する、とりわけ、抗体分子およびその断片を提供する。ＴＣＲベータＶファミリーおよびサブファミリーは、当該技術分野において公知であり、例えばＹａｓｓａｉら（２００９年）Ｉｍｍｕｎｏｇｅｎｅｔｉｃｓ ６１巻（７号）４９３～５０２ページ；Ｗｅｉ Ｓ．およびＣｏｎｃａｎｎｏｎ Ｐ．（１９９４年）Ｈｕｍａｎ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ ４１巻（３号）２０１～２０６ページに記載されている。本明細書に記載される抗体は、組換え抗体、例えば、組換え非マウス抗体、例えば、組換えヒトまたはヒト化抗体であり得る。
[00358]ある態様では、本開示は、ヒトＴＣＲβＶ、例えば、ＴＣＲβＶファミリー、例えば、遺伝子ファミリーまたはそのバリアントに結合する抗ＴＣＲβＶ抗体分子を提供する。一部の実施形態では、ＴＣＲＢＶ遺伝子ファミリーは、例えば、本明細書に記載されるように、例えば、図３、表２８または２９に記載されるように、１つまたは複数のサブファミリーを含む。一部の実施態様では、ＴＣＲβＶ遺伝子ファミリーは、ＴＣＲβ Ｖ６サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ１０サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ１２サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ５サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ７サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ１１サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ１４サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ１６サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ１８サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ９サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ１３サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ４サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ３サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ２サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ１５サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ３０サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ１９サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ２７サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ２８サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ２４サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ２０サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ２５サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ２９サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ１サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ１７サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ２１サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ２３サブファミリー、またはＴＣＲβ Ｖ２６サブファミリーを含む。
[00359]一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ６サブファミリーはまた、ＴＣＲβ Ｖ１３．１としても公知である。一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ６サブファミリーは、ＴＣＲβ Ｖ６－４＊０１、ＴＣＲβ Ｖ６－４＊０２、ＴＣＲβ Ｖ６－９＊０１、ＴＣＲβ Ｖ６－８＊０１、ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１、ＴＣＲβ Ｖ６－６＊０２、ＴＣＲβ Ｖ６－６＊０１、ＴＣＲβ Ｖ６－２＊０１、ＴＣＲβ Ｖ６－３＊０１またはＴＣＲβ Ｖ６－１＊０１、またはそれらのバリアントを含む。一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ６は、ＴＣＲβ Ｖ６－４＊０１、またはそのバリアントを含む。一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ６は、ＴＣＲβ Ｖ６－４＊０２、またはそのバリアントを含む。一部の実施形態では、ＴＣＲβＶ６は、ＴＣＲβ Ｖ６－９＊０１、またはそのバリアントを含む。一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ６は、ＴＣＲβ Ｖ６－８＊０１、またはそのバリアントを含む。一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ６は、ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１、またはそのバリアントを含む。一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ６は、ＴＣＲβ Ｖ６－６＊０２、またはそのバリアントを含む。一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ６は、ＴＣＲβ Ｖ６－６＊０１、またはそのバリアントを含む。一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ６は、ＴＣＲ βＶ６－２＊０１、またはそのバリアントを含む。一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ６は、ＴＣＲβ Ｖ６－３＊０１、またはそのバリアントを含む。一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ６は、ＴＣＲβ Ｖ６－１＊０１、またはそのバリアントを含む。
[00360]一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ６は、ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１、またはそのバリアントを含む。一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ６、例えば、ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１は、配列番号１Ａおよび／または配列番号２Ａによって認識され、例えば結合される。一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ６、例えば、ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１は、配列番号９Ａおよび／または配列番号１０Ａによって認識され、例えば結合される。一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ６は、配列番号９Ａおよび／または配列番号１１Ａによって認識され、例えば結合される。
[00361]一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ１０サブファミリーはまた、ＴＣＲβ Ｖ１２としても公知である。一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ１０サブファミリーは、ＴＣＲβ Ｖ１０－１＊０１、ＴＣＲβ Ｖ１０－１＊０２、ＴＣＲβ Ｖ１０－３＊０１もしくはＴＣＲβ Ｖ１０－２＊０１、またはそれらのバリアントを含む。
[00362]一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ１２サブファミリーはまた、ＴＣＲβ Ｖ８．１としても公知である。一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ１２サブファミリーは、ＴＣＲβ Ｖ１２－４＊０１、ＴＣＲβ Ｖ１２－３＊０１、もしくはＴＣＲβ Ｖ１２－５＊０１、またはそれらのバリアントを含む。一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ１２は、配列番号１５Ａおよび／または配列番号１６Ａによって認識され、例えば結合される。一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ１２は、配列番号２３Ａ～２５Ａのいずれか１つ、および／または配列番号２６Ａ～３０Ａのいずれか１つによって認識され、例えば結合される。
[00363]一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ５サブファミリーは、ＴＣＲβ Ｖ５－５＊０１、ＴＣＲβ Ｖ５－６＊０１、ＴＣＲβ Ｖ５－４＊０１、ＴＣＲβ Ｖ５－８＊０１、ＴＣＲβ Ｖ５－１＊０１、またはそれらのバリアントから選択される。
[00364]一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ７サブファミリーは、ＴＣＲβ Ｖ７－７＊０１、ＴＣＲβ Ｖ７－６＊０１、ＴＣＲβ Ｖ７－８＊０２、ＴＣＲβ Ｖ７－４＊０１、ＴＣＲβ Ｖ７－２＊０２、ＴＣＲβ Ｖ７－２＊０３、ＴＣＲβ Ｖ７－２＊０１、ＴＣＲβ Ｖ７－３＊０１、ＴＣＲβ Ｖ７－９＊０３、もしくはＴＣＲβ Ｖ７－９＊０１、またはそれらのバリアントを含む。
[00365]一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ１１サブファミリーは、ＴＣＲβ Ｖ１１－１＊０１、ＴＣＲβ Ｖ１１－２＊０１もしくはＴＣＲβ Ｖ１１－３＊０１、またはそれらのバリアントを含む。
[00366]一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ１４サブファミリーは、ＴＣＲβ Ｖ１４＊０１、またはそのバリアントを含む。
[00367]一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ１６サブファミリーは、ＴＣＲβ Ｖ１６＊０１、またはそのバリアントを含む。
[00368]一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ１８サブファミリーは、ＴＣＲβ Ｖ１８＊０１、またはそのバリアントを含む。
[00369]一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ９サブファミリーは、ＴＣＲβ Ｖ９＊０１もしくはＴＣＲβ Ｖ９＊０２、またはそのバリアントを含む。
[00370]一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ１３サブファミリーは、ＴＣＲβＶ１３＊０１、またはそのバリアントを含む。
[00371]一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ４サブファミリーは、ＴＣＲβ Ｖ４－２＊０１、ＴＣＲβ Ｖ４－３＊０１、もしくはＴＣＲβ Ｖ４－１＊０１、またはそれらのバリアントを含む。
[00372]一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ３サブファミリーは、ＴＣＲβ Ｖ３－１＊０１、またはそのバリアントを含む。
[00373]一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ２サブファミリーは、ＴＣＲβ Ｖ２＊０１、またはそのバリアントを含む。
[00374]一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ１５サブファミリーは、ＴＣＲβ Ｖ１５＊０１、またはそのバリアントを含む。
[00375]一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ３０サブファミリーは、ＴＣＲβ Ｖ３０＊０１、もしくはＴＣＲβ Ｖ３０＊０２、またはそのバリアントを含む。
[00376]一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ１９サブファミリーは、ＴＣＲβ Ｖ１９＊０１、もしくはＴＣＲβ Ｖ１９＊０２、またはそのバリアントを含む。
[00377]一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ２７サブファミリーは、ＴＣＲβ Ｖ２７＊０１、またはそのバリアントを含む。
[00378]一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ２８サブファミリーは、ＴＣＲβ Ｖ２８＊０１、またはそのバリアントを含む。
[00379]一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ２４サブファミリーは、ＴＣＲβ Ｖ２４－１＊０１、またはそのバリアントを含む。
[00380]一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ２０サブファミリーは、ＴＣＲβ Ｖ２０－１＊０１、もしくはＴＣＲβ Ｖ２０－１＊０２、またはそのバリアントを含む。
[00381]一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ２５サブファミリーは、ＴＣＲβ Ｖ２５－１＊０１、またはそのバリアントを含む。
[00382]一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ２９サブファミリーは、ＴＣＲβ Ｖ２９－１＊０１、またはそのバリアントを含む。
Figure 2023542080000031
Figure 2023542080000032
 抗ＴＣＲβＶ抗体
[00383]低い配列類似性（例えば、異なるＴＣＲβＶサブファミリーを認識する異なる抗体分子の中での低い配列同一性）を有するにもかかわらず、ＴＣＲβＶタンパク質上の構造的に保存された領域、例えば、ドメインを認識し、かつ類似の機能（例えば、類似のサイトカインプロファイル）を有する、抗体の新規のクラス、すなわち、本明細書に開示される抗ＴＣＲβＶ抗体分子の発見が本明細書に開示される。そのため、本明細書に開示される抗ＴＣＲβＶ抗体分子は構造－機能関係性を共有する。
[00384]一部の実施形態では、本明細書に開示される抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、ＴＣＲβＶ：ＴＣＲアルファ複合体の境界部を認識しない、例えば、それに結合しない。
[00385]一部の実施形態では、本明細書に開示される抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、ＴＣＲβＶタンパク質の定常領域を認識しない、例えば、それに結合しない。ＴＣＲＢＶ領域の定常領域に結合する例示的な抗体は、Ｖｉｎｅｙら（Ｈｙｂｒｉｄｏｍａ． １９９２ Ｄｅｃ；１１（６）：７０１～１３ページ）に記載されるＪＯＶＩ．１である。
[00386]一部の実施形態では、本明細書に開示される抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、ＴＣＲβＶタンパク質の相補性決定領域（例えば、ＣＤＲ１、ＣＤＲ２および／またはＣＤＲ３）のうちの１つまたは複数（例えば、すべて）を認識しない、例えば、それに結合しない。
[00387]一部の実施形態では、本明細書に開示される抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、ＴＣＲβＶ領域に結合する（例えば、特異的に結合する）。一部の実施形態では、本明細書に開示される抗ＴＣＲβＶ抗体分子の結合は、ＴＣＲβＶ領域以外の受容体または分子に結合するＴ細胞エンゲージャー（「非ＴＣＲβＶ結合性Ｔ細胞エンゲージャー」）のサイトカインプロファイルとは異なるサイトカインプロファイルをもたらす。一部の実施形態では、非ＴＣＲβＶ結合性Ｔ細胞エンゲージャーは、ＣＤ３分子（例えば、ＣＤ３イプシロン（ＣＤ３ｅ）分子）、またはＴＣＲアルファ（ＴＣＲα）分子に結合する抗体を含む。一部の実施形態では、非ＴＣＲβＶ結合性Ｔ細胞エンゲージャーは、ＯＫＴ３抗体またはＳＰ３４－２抗体である。
[00388]一態様では、本開示は、例えば、本明細書に、例えば、図３、表２８、または表２９に記載される、ヒトＴＣＲβＶ、例えば、ＴＣＲβＶ遺伝子ファミリー、例えば、ＴＣＲβＶサブファミリーのうちの１つまたは複数に結合する抗ＴＣＲβＶ抗体分子を提供する。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、ＴＣＲβ Ｖ６サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ１０サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ１２サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ５サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ７サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ１１サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ１４サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ１６サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ１８サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ９サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ１３サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ４サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ３サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ２サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ１５サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ３０サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ１９サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ２７サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ２８サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ２４サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ２０サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ２５サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ２９サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ１サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ１７サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ２１サブファミリー、ＴＣＲβ Ｖ２３サブファミリー、もしくはＴＣＲβ Ｖ２６サブファミリーから選択される１つもしくは複数のＴＣＲβＶサブファミリー、またはそのバリアントに結合する。
[00389]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、ＴＣＲβ Ｖ６－４＊０１、ＴＣＲβ Ｖ６－４＊０２、ＴＣＲβ Ｖ６－９＊０１、ＴＣＲβ Ｖ６－８＊０１、ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１、ＴＣＲβ Ｖ６－６＊０２、ＴＣＲβ Ｖ６－６＊０１、ＴＣＲβ Ｖ６－２＊０１、ＴＣＲβ Ｖ６－３＊０１もしくはＴＣＲβ Ｖ６－１＊０１、またはそのバリアントを含むＴＣＲβ Ｖ６サブファミリーに結合する。一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ６サブファミリーは、ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１、またはそのバリアントを含む。一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ６は、ＴＣＲβ Ｖ６－４＊０１、またはそのバリアントを含む。一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ６は、ＴＣＲβ Ｖ６－４＊０２、またはそのバリアントを含む。一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ６は、ＴＣＲβ Ｖ６－９＊０１、またはそのバリアントを含む。一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ６は、ＴＣＲβ Ｖ６－８＊０１、またはそのバリアントを含む。一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ６は、ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１、またはそのバリアントを含む。一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ６は、ＴＣＲβ Ｖ６－６＊０２、またはそのバリアントを含む。一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ６は、ＴＣＲβ Ｖ６－６＊０１、またはそのバリアントを含む。一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ６は、ＴＣＲβ Ｖ６－２＊０１、またはそのバリアントを含む。一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ６は、ＴＣＲβ Ｖ６－３＊０１、またはそのバリアントを含む。一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ６は、ＴＣＲβ Ｖ６－１＊０１、またはそのバリアントを含む。
[00390]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、ＴＣＲβ Ｖ１０－１＊０１、ＴＣＲβ Ｖ１０－１＊０２、ＴＣＲβ Ｖ１０－３＊０１もしくはＴＣＲβ Ｖ１０－２＊０１、またはそのバリアントを含むＴＣＲβ Ｖ１０サブファミリーに結合する。
[00391]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、ＴＣＲβ Ｖ１２－４＊０１、ＴＣＲβ Ｖ１２－３＊０１もしくはＴＣＲβ Ｖ１２－５＊０１、またはそのバリアントを含むＴＣＲβ Ｖ１２サブファミリーに結合する。
[00392]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、ＴＣＲβ Ｖ５－５＊０１、ＴＣＲβ Ｖ５－６＊０１、ＴＣＲβ Ｖ５－４＊０１、ＴＣＲβ Ｖ５－８＊０１、ＴＣＲβ Ｖ５－１＊０１、またはそのバリアントを含むＴＣＲβ Ｖ５サブファミリーに結合する。
[00393]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、ＴＣＲβ Ｖ１２に結合しないか、または米国特許第５，８６１，１５５号に記載される１６Ｇ８マウス抗体もしくはそのヒト化バージョンの親和性および／もしくは結合特異性より低い（例えば、約１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％または約２、５、もしくは１０倍低い）親和性および／もしくは結合特異性でＴＣＲβ Ｖ１２に結合する。
[00394]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、米国特許第５，８６１，１５５号に記載される１６Ｇ８マウス抗体またはそのヒト化バージョンの親和性および／または結合特異性より高い（例えば、約１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％または約２、５、もしくは１０倍高い）親和性および／または結合特異性でＴＣＲβ Ｖ１２に結合する。
[00395]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、米国特許第５，８６１，１５５号に記載される１６Ｇ８マウス抗体またはそのヒト化バージョンの親和性および／または結合特異性より高い（例えば、約１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％または約２、５、もしくは１０倍高い）親和性および／または結合特異性でＴＣＲβ Ｖ１２以外のＴＣＲβＶ領域（例えば、本明細書に記載されるＴＣＲβＶ領域、例えば、ＴＣＲβ Ｖ６サブファミリー（例えば、ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）に結合する。
[00396]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、ＴＣＲβ Ｖ５－５＊０１にもＴＣＲβ Ｖ５－１＊０１にも結合せず、または米国特許第５，８６１，１５５号に記載されるＴＭ２３マウス抗体もしくはそのヒト化バージョンの親和性および／もしくは結合特異性より低い（例えば、約１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％もしくは約２、５、もしくは１０倍低い）親和性および／もしくは結合特異性でＴＣＲβ Ｖ５－５＊０１もしくはＴＣＲβ Ｖ５－１＊０１に結合する。
[00397]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、米国特許第５，８６１，１５５号に記載されるＴＭ２３マウス抗体またはそのヒト化バージョンの親和性および／または結合特異性より高い（例えば、約１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％または約２、５、もしくは１０倍高い）親和性および／または結合特異性でＴＣＲβ Ｖ５－５＊０１またはＴＣＲβ Ｖ５－１＊０１に結合する。
[00398]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、米国特許第５，８６１，１５５号に記載されるＴＭ２３マウス抗体またはそのヒト化バージョンの親和性および／または結合特異性より高い（例えば、約１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％または約２、５、もしくは１０倍高い）親和性および／または結合特異性でＴＣＲβ Ｖ５－５＊０１またはＴＣＲβ Ｖ５－１＊０１以外のＴＣＲβＶ領域（例えば、本明細書に記載されるＴＣＲβＶ領域、例えば、ＴＣＲβ Ｖ６サブファミリー（例えば、ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）に結合する。
抗ＴＣＲβ Ｖ６抗体
[00399]よって、一態様では、本開示は、ヒトＴＣＲβ Ｖ６、例えば、ＴＣＲβ Ｖ６－４＊０１、ＴＣＲβ Ｖ６－４＊０２、ＴＣＲβ Ｖ６－９＊０１、ＴＣＲβ Ｖ６－８＊０１、ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１、ＴＣＲβ Ｖ６－６＊０２、ＴＣＲβ Ｖ６－６＊０１、ＴＣＲβ Ｖ６－２＊０１、ＴＣＲβ Ｖ６－３＊０１またはＴＣＲβ Ｖ６－１＊０１を含むＴＣＲβ Ｖ６サブファミリーに結合する抗ＴＣＲβＶ抗体分子を提供する。一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ６サブファミリーは、ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１またはそのバリアントを含む。一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ６は、ＴＣＲβ Ｖ６－４＊０１、またはそのバリアントを含む。一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ６は、ＴＣＲβ Ｖ６－４＊０２、またはそのバリアントを含む。一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ６は、ＴＣＲβ Ｖ６－９＊０１、またはそのバリアントを含む。一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ６は、ＴＣＲβ Ｖ６－８＊０１、またはそのバリアントを含む。一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ６は、ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１、またはそのバリアントを含む。一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ６は、ＴＣＲβ Ｖ６－６＊０２、またはそのバリアントを含む。一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ６は、ＴＣＲβ Ｖ６－６＊０１、またはそのバリアントを含む。一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ６は、ＴＣＲβ Ｖ６－２＊０１、またはそのバリアントを含む。一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ６は、ＴＣＲβ Ｖ６－３＊０１、またはそのバリアントを含む。一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ６は、ＴＣＲβ Ｖ６－１＊０１、またはそのバリアントを含む。
[00400]一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１は、配列番号４３Ａの核酸配列、またはその８５％、９０％、９５％、９９％もしくはより高い同一性を有する配列によってコードされる。
[00401]配列番号４３Ａ
ＡＴＧＡＧＣＡＴＣＧＧＣＣＴＣＣＴＧＴＧＣＴＧＴＧＣＡＧＣＣＴＴＧＴＣＴＣＴＣＣＴＧＴＧＧＧＣＡＧＧＴＣＣＡＧＴＧＡＡＴＧＣＴＧＧＴＧＴＣＡＣＴＣＡＧＡＣＣＣＣＡＡＡＡＴＴＣＣＡＧＧＴＣＣＴＧＡＡＧＡＣＡＧＧＡＣＡＧＡＧＣＡＴＧＡＣＡＣＴＧＣＡＧＴＧＴＧＣＣＣＡＧＧＡＴＡＴＧＡＡＣＣＡＴＧＡＡＴＡＣＡＴＧＴＣＣＴＧＧＴＡＴＣＧＡＣＡＡＧＡＣＣＣＡＧＧＣＡＴＧＧＧＧＣＴＧＡＧＧＣＴＧＡＴＴＣＡＴＴＡＣＴＣＡＧＴＴＧＧＴＧＣＴＧＧＴＡＴＣＡＣＴＧＡＣＣＡＡＧＧＡＧＡＡＧＴＣＣＣＣＡＡＴＧＧＣＴＡＣＡＡＴＧＴＣＴＣＣＡＧＡＴＣＡＡＣＣＡＣＡＧＡＧＧＡＴＴＴＣＣＣＧＣＴＣＡＧＧＣＴＧＣＴＧＴＣＧＧＣＴＧＣＴＣＣＣＴＣＣＣＡＧＡＣＡＴＣＴＧＴＧＴＡＣＴＴＣＴＧＴＧＣＣＡＧＣＡＧＴＴＡＣＴＣ
[00402]一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１は、配列番号１０４４のアミノ酸配列、またはその８５％、９０％、９５％、９９％もしくはより高い同一性を有するアミノ酸配列を含む。
[00403]配列番号１０４４
ＭＳＩＧＬＬＣＣＡＡＬＳＬＬＷＡＧＰＶＮＡＧＶＴＱＴＰＫＦＱＶＬＫＴＧＱＳＭＴＬＱＣＡＱＤＭＮＨＥＹＭＳＷＹＲＱＤＰＧＭＧＬＲＬＩＨＹＳＶＧＡＧＩＴＤＱＧＥＶＰＮＧＹＮＶＳＲＳＴＴＥＤＦＰＬＲＬＬＳＡＡＰＳＱＴＳＶＹＦＣＡＳＳＹ
[00404]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβＶ６（例えば、抗ＴＣＲβＶ６－５＊０１）抗体分子は、非マウス抗体分子、例えば、ヒトまたはヒト化抗体分子である。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβＶ６（例えば、抗ＴＣＲβＶ６－５＊０１）抗体分子は、ヒト抗体分子である。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、ヒト化抗体分子である。
[00405]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、単離されているか、または組換えである。
[00406]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、本明細書に記載の抗体、例えば、Ａ－Ｈ．１～Ａ－Ｈ．８５のうちのいずれか１つから選択される抗体、例えば、Ａ－Ｈ．１、Ａ－Ｈ．２もしくはＡ－Ｈ．６８、または表３０に記載されるか、もしくは表３０におけるヌクレオチド配列、もしくは前述の配列のいずれかに対して実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一）の配列によってコードされる抗体からの少なくとも１つの抗原結合性領域、例えば、可変領域またはその抗原結合性断片を含む。
[00407]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβＶ６（例えば、抗ＴＣＲβＶ６－５＊０１）抗体分子は、本明細書に記載の抗体、例えば、Ａ－Ｈ．１～Ａ－Ｈ．８５のうちのいずれか１つから選択される抗体、例えば、Ａ－Ｈ．１、Ａ－Ｈ．２もしくはＡ－Ｈ．６８、または表３０に記載されるか、もしくは表３０中のヌクレオチド配列、もしくは前記配列のいずれかに対して実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一）である配列によってコードされる抗体に由来する少なくとも１つ、２つ、３つまたは４つの可変領域を含む。
[00408]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβＶ６（例えば、抗ＴＣＲβＶ６－５＊０１）抗体分子は、本明細書に記載の抗体、例えば、Ａ－Ｈ．１～Ａ－Ｈ．８５のうちのいずれか１つから選択される抗体、例えば、Ａ－Ｈ．１、Ａ－Ｈ．２もしくはＡ－Ｈ．６８、または表３０に記載されるか、もしくは表３０中のヌクレオチド配列、もしくは前記配列のいずれかに対して実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一）である配列によってコードされる抗体分子に由来する少なくとも１つまたは２つの重鎖可変領域を含む。
[00409]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、配列番号２３１Ａまたは３２９０Ａのコンセンサス配列を有する重鎖可変領域（ＶＨ）を含む。
[00410]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβＶ６（例えば、抗ＴＣＲβＶ６－５＊０１）抗体分子は、本明細書に記載の抗体、例えば、Ａ－Ｈ．１～Ａ－Ｈ．８５のうちのいずれか１つから選択される抗体、例えば、Ａ－Ｈ．１、Ａ－Ｈ．２もしくはＡ－Ｈ．６８、または表３０に記載されるか、もしくは表３０中のヌクレオチド配列、もしくは前記配列のいずれかに対して実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一）である配列によってコードされる抗体に由来する少なくとも１つまたは２つの軽鎖可変領域を含む。
[00411]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子は、配列番号２３０Ａまたは３２８９Ａのコンセンサス配列を有する軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む。
[00412]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、ＩｇＧ４、例えば、ヒトＩｇＧ４の重鎖定常領域を含む。さらに別の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、ＩｇＧ１、例えば、ヒトＩｇＧ１の重鎖定常領域を含む。一実施形態では、重鎖定常領域は、表３２に示されるアミノ酸配列、またはそれに対して実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一）である配列を含む。
[00413]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβＶ６（例えば、抗ＴＣＲβＶ６－５＊０１）抗体分子は、カッパ軽鎖定常領域、例えば、ヒトカッパ軽鎖定常領域を含む。一実施形態では、軽鎖定常領域は、表３２に示されるアミノ酸配列、またはそれに対して実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一）である配列を含む。
[00414]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、本明細書に記載の抗体、例えば、Ａ－Ｈ．１～Ａ－Ｈ．８５のうちのいずれか１つから選択される抗体、例えば、Ａ－Ｈ．１、Ａ－Ｈ．２もしくはＡ－Ｈ．６８、または表３０に記載されるか、もしくは表３０中のヌクレオチド配列、もしくは前述の配列のいずれかに対して実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一）である配列によってコードされる抗体の重鎖可変領域（ＶＨ）からの少なくとも１つ、２つ、または３つの相補性決定領域（ＣＤＲ）を含む。
[00415]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、表３０に示されるか、または表３０に示されるヌクレオチド配列によってコードされるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域からの少なくとも１つ、２つ、または３つのＣＤＲ（またはＣＤＲのまとめてすべて）を含む。一実施形態では、ＣＤＲのうちの１つまたは複数（またはＣＤＲのまとめてすべて）は、表３０に示されるか、または表３０に示されるヌクレオチド配列によってコードされるアミノ酸配列と比較して、１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つまたはより多くの変化、例えば、アミノ酸置換または欠失を有する。
[00416]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、本明細書に記載の抗体、例えば、Ａ－Ｈ．１～Ａ－Ｈ．８５のうちのいずれか１つから選択される抗体、例えば、Ａ－Ｈ．１、Ａ－Ｈ．２もしくはＡ－Ｈ．６８、または表３０に記載されるか、もしくは表３０中のヌクレオチド配列、もしくは前述の配列のいずれかに対して実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一）である配列によってコードされる抗体の軽鎖可変領域からの少なくとも１つ、２つ、または３つの相補性決定領域（ＣＤＲ）を含む。
[00417]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、表３０に示されるか、または表３０に示されるヌクレオチド配列によってコードされるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域からの少なくとも１つ、２つ、または３つのＣＤＲ（またはＣＤＲのまとめてすべて）を含む。一実施形態では、ＣＤＲのうちの１つまたは複数（またはＣＤＲのまとめてすべて）は、表３０に示されるか、または表３０に示されるヌクレオチド配列によってコードされるアミノ酸配列と比較して、１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つまたはより多くの変化、例えば、アミノ酸置換または欠失を有する。
[00418]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、表３０に示されるか、または表３０に示されるヌクレオチド配列によってコードされるアミノ酸配列を含む重鎖および軽鎖可変領域からの少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つまたは６つのＣＤＲ（またはＣＤＲのまとめてすべて）を含む。一実施形態では、ＣＤＲのうちの１つまたは複数（またはＣＤＲのまとめてすべて）は、表３０に示されるか、または表３０に示されるヌクレオチド配列によってコードされるアミノ酸配列と比較して、１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つまたはより多くの変化、例えば、アミノ酸置換または欠失を有する。
[00419]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、本明細書に記載の抗体、例えば、Ａ－Ｈ．１～Ａ－Ｈ．８５のうちのいずれか１つから選択される抗体、例えば、Ａ－Ｈ．１、Ａ－Ｈ．２もしくはＡ－Ｈ．６８、または表３０に記載されるか、もしくは表３０中のヌクレオチド配列によってコードされる抗体からの６つすべてのＣＤＲ、または密接に関連したＣＤＲ、例えば、同一であるか、もしくは少なくとも１つのアミノ酸変更であるが２つ、３つもしくは４つ以下である変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有するＣＤＲを含む。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、本明細書に記載の任意のＣＤＲを含んでもよい。
[00420]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、本明細書に記載の抗体、例えば、Ａ－Ｈ．１～Ａ－Ｈ．８５のうちのいずれか１つから選択される抗体、例えば、Ａ－Ｈ．１、Ａ－Ｈ．２もしくはＡ－Ｈ．６８、もしくは表３０に記載の抗体の重鎖可変領域からのＫａｂａｔらによる少なくとも１つ、２つ、もしくは３つのＣＤＲ（例えば、表３０に示されるＫａｂａｔの定義による少なくとも１つ、２つ、もしくは３つのＣＤＲ）、または前述の配列のいずれかに対して実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一）であるか、もしくは表３０に示されるＫａｂａｔらによる１つ、２つ、もしくは３つのＣＤＲと比較して、少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、２つ、３つもしくは４つ以下の変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有する配列を含む。
[00421]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、本明細書に記載の抗体、例えば、Ａ－Ｈ．１～Ａ－Ｈ．８５のうちのいずれか１つから選択される抗体、例えば、Ａ－Ｈ．１、Ａ－Ｈ．２もしくはＡ－Ｈ．６８、もしくは表３０に記載の抗体の軽鎖可変領域からのＫａｂａｔらによる少なくとも１つ、２つ、もしくは３つのＣＤＲ（例えば、表３０に示されるＫａｂａｔの定義による少なくとも１つ、２つ、もしくは３つのＣＤＲ）、または前述の配列のいずれかに対して実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一）であるか、もしくは表３０に示されるＫａｂａｔらによる１つ、２つ、もしくは３つのＣＤＲと比較して、少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、２つ、３つもしくは４つ以下の変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有する配列を含む。
[00422]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、本明細書に記載の抗体、例えば、Ａ－Ｈ．１～Ａ－Ｈ．８５のうちのいずれか１つから選択される抗体、例えば、Ａ－Ｈ．１、Ａ－Ｈ．２もしくはＡ－Ｈ．６８、もしくは表３０に記載されるか、もしくは表３０におけるヌクレオチド配列によってコードされる抗体の重鎖および軽鎖可変領域からのＫａｂａｔらによる少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つのＣＤＲ（例えば、表３０に示されるＫａｂａｔの定義による少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つのＣＤＲ）、または前述の配列のいずれかに対して実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一）であるか、もしくは表３０に示されるＫａｂａｔらによる１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つのＣＤＲと比較して、少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、２つ、３つもしくは４つ以下の変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有する配列を含む。
[00423]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、本明細書に記載の抗体、例えば、Ａ－Ｈ．１～Ａ－Ｈ．８５のうちのいずれか１つから選択される抗体、例えば、Ａ－Ｈ．１、Ａ－Ｈ．２もしくはＡ－Ｈ．６８、もしくは表３０に記載されるか、もしくは表３０におけるヌクレオチド配列によってコードされる抗体の重鎖および軽鎖可変領域からのＫａｂａｔらによる６つすべてのＣＤＲ（例えば、表３０に示されるＫａｂａｔの定義による６つすべてのＣＤＲ）、または前述の配列のいずれかに対して実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一）であるか、もしくは表３０に示されるＫａｂａｔらによる６つすべてのＣＤＲと比較して、少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、２つ、３つもしくは４つ以下の変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有する配列を含む。一実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、本明細書に記載の任意のＣＤＲを含んでもよい。
[00424]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、本明細書に記載の抗体、例えば、Ａ－Ｈ．１～Ａ－Ｈ．８５のうちのいずれか１つから選択される抗体、例えば、Ａ－Ｈ．１、Ａ－Ｈ．２またはＡ－Ｈ．６８の対応する超可変ループと同じカノニカルな構造、例えば、本明細書に記載の抗体の重鎖および／または軽鎖可変ドメインの少なくともループ１および／またはループ２と同じカノニカルな構造を有する少なくとも１つ、２つ、または３つの超可変ループを含む。例えば、超可変ループのカノニカルな構造の記載についてＣｈｏｔｈｉａら、（１９９２） Ｊ． Ｍｏｌ． Ｂｉｏｌ． ２２７：７９９～８１７ページ；Ｔｏｍｌｉｎｓｏｎら、（１９９２） Ｊ． Ｍｏｌ． Ｂｉｏｌ． ２２７：７７６～７９８ページを参照。これらの構造は、これらの参考文献に記載の表の検査によって決定することができる。
[00425]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβＶ６（例えば、抗ＴＣＲβＶ６－５＊０１）抗体分子は、本明細書に記載の抗体、例えば、Ａ－Ｈ．１～Ａ－Ｈ．８５のうちのいずれか１つから選択される抗体、例えば、Ａ－Ｈ．１、Ａ－Ｈ．２もしくはＡ－Ｈ．６８、もしくは表３０に記載される抗体の重鎖可変領域に由来するＣｈｏｔｈｉａらによる少なくとも１つ、２つ、もしくは３つのＣＤＲ（例えば、表３０に示されるＣｈｏｔｈｉａの定義による少なくとも１つ、２つ、もしくは３つのＣＤＲ）、または前記配列のいずれかに対して実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一）であるか、もしくは表３０に示されるＣｈｏｔｈｉａらによる１つ、２つ、もしくは３つのＣＤＲと比較して、少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、２つ、３つもしくは４つ以下の変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有する配列を含む。
[00426]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβＶ６（例えば、抗ＴＣＲβＶ６－５＊０１）抗体分子は、本明細書に記載の抗体、例えば、Ａ－Ｈ．１～Ａ－Ｈ．８５のうちのいずれか１つから選択される抗体、例えば、Ａ－Ｈ．１、Ａ－Ｈ．２もしくはＡ－Ｈ．６８、もしくは表３０に記載される抗体の軽鎖可変領域に由来するＣｈｏｔｈｉａらによる少なくとも１つ、２つ、もしくは３つのＣＤＲ（例えば、表３０に示されるＣｈｏｔｈｉａの定義による少なくとも１つ、２つ、もしくは３つのＣＤＲ）、または前記配列のいずれかに対して実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一）であるか、もしくは表３０に示されるＣｈｏｔｈｉａらによる１つ、２つ、もしくは３つのＣＤＲと比較して、少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、２つ、３つもしくは４つ以下の変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有する配列を含む。
[00427]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、本明細書に記載の抗体、例えば、Ａ－Ｈ．１～Ａ－Ｈ．８５のうちのいずれか１つから選択される抗体、例えば、Ａ－Ｈ．１、Ａ－Ｈ．２もしくはＡ－Ｈ．６８、もしくは表３０に記載されるか、もしくは表３０におけるヌクレオチド配列によってコードされる抗体の重鎖および軽鎖可変領域からのＣｈｏｔｈｉａらによる少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つのＣＤＲ（例えば、表３０に示されるＣｈｏｔｈｉａの定義による少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つのＣＤＲ）、または前述の配列のいずれかに対して実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一）であるか、もしくは表３０に示されるＣｈｏｔｈｉａらによる１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つのＣＤＲと比較して、少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、２つ、３つもしくは４つ以下の変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有する配列を含む。
[00428]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、本明細書に記載の抗体、例えば、Ａ－Ｈ．１～Ａ－Ｈ．８５のうちのいずれか１つから選択される抗体、例えば、Ａ－Ｈ．１、Ａ－Ｈ．２もしくはＡ－Ｈ．６８、もしくは表３０に記載されるか、もしくは表３０におけるヌクレオチド配列によってコードされる抗体の重鎖および軽鎖可変領域からのＣｈｏｔｈｉａらによる６つすべてのＣＤＲ（例えば、表３０に示されるＣｈｏｔｈｉａの定義による６つすべてのＣＤＲ）、または前述の配列のいずれかに対して実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一）であるか、もしくは表３０に示されるＣｈｏｔｈｉａらによる６つすべてのＣＤＲと比較して、少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、２つ、３つもしくは４つ以下の変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有する配列を含む。一実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、本明細書に記載の任意のＣＤＲを含んでもよい。
[00429]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、Ｋａｂａｔら、Ｃｈｏｔｈｉａらに従って定義されるか、または表３０に記載されるＣＤＲまたは超可変ループの組合せを含む。
[00430]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、ＫａｂａｔおよびＣｈｏｔｈｉａの定義によるＣＤＲまたは超可変ループの任意の組合せを含有し得る。
[00431]一部の実施形態では、表３０に示される組合せＣＤＲは、Ｋａｂａｔ ＣＤＲおよびＣｈｏｔｈｉａ ＣＤＲを含むＣＤＲである。
[00432]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、表３０において組合せＣＤＲとして同定されるＣＤＲまたは超可変ループの組合せを含む。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、表３０に記載される「組合せ」ＣＤＲによるＣＤＲまたは超可変ループの任意の組合せを含有し得る。
[00433]一実施形態、例えば、可変領域、ＣＤＲ（例えば、組合せＣＤＲ、Ｃｈｏｔｈｉａ ＣＤＲもしくはＫａｂａｔ ＣＤＲ）、または本明細書、例えば、表３０において言及される他の配列を含む一実施形態では、抗体分子は、単一特異性抗体分子、二特異性抗体分子、二価抗体分子、二重パラトープ性抗体分子、または抗体の抗原結合性断片を含む抗体分子、例えば、半抗体もしくは半抗体の抗原結合性断片である。ある特定の実施形態では、抗体分子は、例えば本明細書に記載される、多特異性分子、例えば、二特異性分子を含む。
[00434]一実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、
（ｉ）配列番号２Ａ、配列番号１０Ａもしくは配列番号１１Ａの軽鎖相補性決定領域１（ＬＣ ＣＤＲ１）、軽鎖相補性決定領域２（ＬＣ ＣＤＲ２）、および軽鎖相補性決定領域３（ＬＣ ＣＤＲ３）のうちの１つ、２つもしくはすべて、ならびに／または
（ｉｉ）配列番号１Ａもしくは配列番号９Ａの重鎖相補性決定領域１（ＨＣ ＣＤＲ１）、重鎖相補性決定領域２（ＨＣ ＣＤＲ２）、および重鎖相補性決定領域３（ＨＣ ＣＤＲ３）のうちの１つ、２つもしくはすべて
を含む。
[00435]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、配列番号２ＡのＬＣ ＣＤＲ１、ＬＣ ＣＤＲ２、およびＬＣ ＣＤＲ３、ならびに配列番号１ＡのＨＣ ＣＤＲ１、ＨＣ ＣＤＲ２、およびＨＣ ＣＤＲ３を含む。
[00436]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、配列番号１０ＡのＬＣ ＣＤＲ１、ＬＣ ＣＤＲ２、およびＬＣ ＣＤＲ３、ならびに配列番号９ＡのＨＣ ＣＤＲ１、ＨＣ ＣＤＲ２、およびＨＣ ＣＤＲ３を含む。
[00437]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、配列番号１１ＡのＬＣ ＣＤＲ１、ＬＣ ＣＤＲ２、およびＬＣ ＣＤＲ３、ならびに配列番号９ＡのＨＣ ＣＤＲ１、ＨＣ ＣＤＲ２、およびＨＣ ＣＤＲ３を含む。
[00438]一実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、
（ｉ）配列番号６のＬＣ ＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号７ＡのＬＣ ＣＤＲ２アミノ酸配列、もしくは配列番号８ＡのＬＣ ＣＤＲ３アミノ酸配列、および／または
（ｉｉ）配列番号３のＨＣ ＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号４ＡのＨＣ ＣＤＲ２アミノ酸配列、もしくは配列番号５ＡのＨＣ ＣＤＲ３アミノ酸配列
を含む。
[00439]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、
（ｉ）配列番号６ＡのＬＣ ＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号７ＡのＬＣ ＣＤＲ２アミノ酸配列、もしくは配列番号８ＡのＬＣ ＣＤＲ３アミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）、および／または
（ｉｉ）配列番号３ＡのＨＣ ＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号４ＡのＨＣ ＣＤＲ２アミノ酸配列、もしくは配列番号５ＡのＨＣ ＣＤＲ３アミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）
を含む。
[00440]一実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、
（ｉ）配列番号５１ＡのＬＣ ＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号５２ＡのＬＣ ＣＤＲ２アミノ酸配列、もしくは配列番号５３ＡのＬＣ ＣＤＲ３アミノ酸配列、および／または
（ｉｉ）配列番号４５のＨＣ ＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号４６ＡのＨＣ ＣＤＲ２アミノ酸配列、もしくは配列番号４７ＡのＨＣ ＣＤＲ３アミノ酸配列
を含む。
[00441]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、
（ｉ）配列番号５１ＡのＬＣ ＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号５２ＡのＬＣ ＣＤＲ２アミノ酸配列、もしくは配列番号５３ＡのＬＣ ＣＤＲ３アミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）、および／または
（ｉｉ）配列番号４５ＡのＨＣ ＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号４６ＡのＨＣ ＣＤＲ２アミノ酸配列、もしくは配列番号４７ＡのＨＣ ＣＤＲ３アミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）
を含む。
[00442]一実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、
（ｉ）配列番号５４ＡのＬＣ ＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号５５ＡのＬＣ ＣＤＲ２アミノ酸配列、もしくは配列番号５６ＡのＬＣ ＣＤＲ３アミノ酸配列、および／または
（ｉｉ）配列番号４８ＡのＨＣ ＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号４９ＡのＨＣ ＣＤＲ２アミノ酸配列、もしくは配列番号５０ＡのＨＣ ＣＤＲ３アミノ酸配列
を含む。
[00443]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、
（ｉ）配列番号５４ＡのＬＣ ＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号５５ＡのＬＣ ＣＤＲ２アミノ酸配列、もしくは配列番号５６ＡのＬＣ ＣＤＲ３アミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）、および／または
（ｉｉ）配列番号４８ＡのＨＣ ＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号４９ＡのＨＣ ＣＤＲ２アミノ酸配列、もしくは配列番号５０ＡのＨＣ ＣＤＲ３アミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）
を含む。
[00444]一実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子の軽鎖または重鎖可変フレームワーク（例えば、少なくともＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３、および任意選択でＦＲ４を包含する領域）は、（ａ）ヒト軽鎖もしくは重鎖可変フレームワークからのアミノ酸残基、例えば、ヒト成熟抗体、ヒト生殖系列配列、もしくはヒトコンセンサス配列からの軽鎖もしくは重鎖可変フレームワーク残基のうちの少なくとも８０％、８５％、８７％ ９０％、９２％、９３％、９５％、９７％、９８％、もしくは１００％を含む軽鎖もしくは重鎖可変フレームワーク、（ｂ）ヒト軽鎖もしくは重鎖可変フレームワークからのアミノ酸残基、例えば、ヒト成熟抗体、ヒト生殖系列配列、もしくはヒトコンセンサス配列からの軽鎖もしくは重鎖可変フレームワーク残基の２０％～８０％、４０％～６０％、６０％～９０％、もしくは７０％～９５％を含む軽鎖もしくは重鎖可変フレームワーク、（ｃ）非ヒトフレームワーク（例えば、齧歯動物フレームワーク）、または（ｄ）例えば抗原性もしくは細胞傷害性決定因子を除去するように、修飾されている、例えば、脱免疫化（ｄｅｉｍｍｕｎｉｚｅｄ）、もしくは部分的にヒト化されている非ヒトフレームワークから選択することができる。一実施形態では、軽鎖または重鎖可変フレームワーク領域（特に、ＦＲ１、ＦＲ２および／またはＦＲ３）は、ヒト生殖系列遺伝子のＶＬまたはＶＨセグメントのフレームワークに対して少なくとも７０、７５、８０、８５、８７、８８、９０、９２、９４、９５、９６、９７、９８、９９％同一のまたは同一の軽鎖または重鎖可変フレームワーク配列を含む。
[00445]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、Ａ－Ｈ．１～Ａ－Ｈ．８５のうちのいずれか１つ、例えば、Ａ－Ｈ．１、Ａ－Ｈ．２またはＡ－Ｈ．６８のアミノ酸配列からの、例えば、例えば図１Ａ、または配列番号９Ａに示される、可変領域全体中のＦＲ領域のアミノ酸配列からの少なくとも１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、１０個、１５個、２０個またはより多くの変化、例えば、アミノ酸置換または欠失を有する重鎖可変ドメインを含む。
[00446]代替的に、または本明細書に記載の重鎖置換と組み合わせて、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、Ａ－Ｈ．１～Ａ－Ｈ．８５のうちのいずれか１つ、例えば、Ａ－Ｈ．１、Ａ－Ｈ．２またはＡ－Ｈ．６８のアミノ酸配列からの、例えば、例えば図１Ｂ、または配列番号１０Ａもしくは配列番号１１Ａに示される、可変領域全体中のＦＲ領域のアミノ酸配列からの少なくとも１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、１０個、１５個、２０個またはより多くのアミノ酸変化、例えば、アミノ酸置換または欠失を有する軽鎖可変ドメインを含む。
[00447]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、図１Ａに示される１つ、２つ、３つ、もしくは４つの重鎖フレームワーク領域、またはそれに対して実質的に同一の配列を含む。
[00448]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、図１Ｂに示される１つ、２つ、３つ、もしくは４つの軽鎖フレームワーク領域、またはそれに対して実質的に同一の配列を含む。
[00449]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、例えば図１Ｂに示される、Ａ－Ｈ．１またはＡ－Ｈ．２の軽鎖フレームワーク領域１を含む。
[00450]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、例えば図１Ｂに示される、Ａ－Ｈ．１またはＡ－Ｈ．２の軽鎖フレームワーク領域２を含む。
[00451]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、例えば図１Ｂに示される、Ａ－Ｈ．１またはＡ－Ｈ．２の軽鎖フレームワーク領域３を含む。
[00452]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、例えば図１Ｂに示される、Ａ－Ｈ．１またはＡ－Ｈ．２の軽鎖フレームワーク領域４を含む。
[00453]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、例えば、Ｋａｂａｔの番号付けによる１０位における変化、例えば、置換（例えば、保存的置換）を含むフレームワーク領域、例えば、フレームワーク領域１（ＦＲ１）を含む軽鎖可変ドメインを含む。一部の実施形態では、ＦＲ１は、１０位におけるフェニルアラニン、例えば、セリンからフェニルアラニンへの置換を含む。一部の実施形態では、置換は、ヒト生殖系列軽鎖フレームワーク領域配列と比較したものである。
[00454]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、Ｋａｂａｔの番号付けによる本明細書に開示される位置における変化、例えば、置換（例えば、保存的置換）を含むフレームワーク領域、例えば、フレームワーク領域２（ＦＲ２）を含む軽鎖可変ドメインを含む。一部の実施形態では、ＦＲ２は、Ｋａｂａｔの番号付けによる３６位におけるヒスチジン、例えば、３６位における置換、例えば、チロシンからヒスチジンへの置換を含む。一部の実施形態では、ＦＲ２は、Ｋａｂａｔの番号付けによる４６位におけるアラニン、例えば、４６位における置換、例えば、アルギニンからアラニンへの置換を含む。一部の実施形態では、置換は、ヒト生殖系列軽鎖フレームワーク領域配列と比較したものである。
[00455]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、Ｋａｂａｔの番号付けによる本明細書に開示される位置における変化、例えば、置換（例えば、保存的置換）を含むフレームワーク領域、例えば、フレームワーク領域３（ＦＲ３）を含む軽鎖可変ドメインを含む。一部の実施形態では、ＦＲ３は、Ｋａｂａｔの番号付けによる８７位におけるフェニルアラニン、例えば、８７位における置換、例えば、チロシンからフェニルアラニンへの置換を含む。一部の実施形態では、置換は、ヒト生殖系列軽鎖フレームワーク領域配列と比較したものである。
[00456]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、例えば、配列番号１０Ａのアミノ酸配列に示されるように、（ａ）Ｋａｂａｔの番号付けによる１０位におけるフェニルアラニン、例えば、１０位における置換、例えば、セリンからフェニルアラニンへの置換を含むフレームワーク領域１（ＦＲ１）、（ｂ）Ｋａｂａｔの番号付けによる３６位におけるヒスチジン、例えば、３６位における置換、例えば、チロシンからヒスチジンへの置換、およびＫａｂａｔの番号付けによる４６位におけるアラニン、例えば、４６位における置換、例えば、アルギニンからアラニンへの置換を含むフレームワーク領域２（ＦＲ２）、ならびに（ｃ）Ｋａｂａｔの番号付けによる８７位におけるフェニルアラニン、例えば、８７位における置換、例えば、チロシンからフェニルアラニンへの置換を含むフレームワーク領域３（ＦＲ３）を含む軽鎖可変ドメインを含む。一部の実施形態では、置換は、ヒト生殖系列軽鎖フレームワーク領域配列と比較したものである。
[00457]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、例えば、配列番号１１Ａのアミノ酸配列に示されるように、（ａ）Ｋａｂａｔの番号付けによる３６位におけるヒスチジン、例えば、３６位における置換、例えば、チロシンからヒスチジンへの置換、およびＫａｂａｔの番号付けによる４６位におけるアラニン、例えば、４６位における置換、例えば、アルギニンからアラニンへの置換を含むフレームワーク領域２（ＦＲ２）、ならびに（ｂ）Ｋａｂａｔの番号付けによる８７位におけるフェニルアラニン、例えば、８７位における置換、例えば、チロシンからフェニルアラニンへの置換を含むフレームワーク領域３（ＦＲ３）を含む軽鎖可変ドメインを含む。一部の実施形態では、置換は、ヒト生殖系列軽鎖フレームワーク領域配列と比較したものである。
[00458]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、（ａ）Ｋａｂａｔの番号付けによる本明細書に開示される１つまたは複数（例えば、すべて）の位置における変化、例えば、置換（例えば、保存的置換）を含むフレームワーク領域１（ＦＲ１）、（ｂ）Ｋａｂａｔの番号付けによる本明細書に開示される１つまたは複数（例えば、すべて）の位置における変化、例えば、置換（例えば、保存的置換）を含むフレームワーク領域２（ＦＲ２）および（ｃ）Ｋａｂａｔの番号付けによる本明細書に開示される１つまたは複数（例えば、すべて）の位置における変化、例えば、置換（例えば、保存的置換）を含むフレームワーク領域３（ＦＲ３）を含む軽鎖可変ドメインを含む。一部の実施形態では、置換は、ヒト生殖系列軽鎖フレームワーク領域配列と比較したものである。
[00459]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、例えば、図１Ａに示されるように、Ａ－Ｈ．１またはＡ－Ｈ．２の重鎖フレームワーク領域１を含む。
[00460]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、例えば、図１Ａに示されるように、Ａ－Ｈ．１またはＡ－Ｈ．２の重鎖フレームワーク領域２を含む。
[00461]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、例えば、図１Ａに示されるように、Ａ－Ｈ．１またはＡ－Ｈ．２の重鎖フレームワーク領域３を含む。
[00462]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、例えば、図１Ａに示されるように、Ａ－Ｈ．１またはＡ－Ｈ．２の重鎖フレームワーク領域４を含む。
[00463]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、Ｋａｂａｔの番号付けによる本明細書に開示される位置における変化、例えば、置換（例えば、保存的置換）を含むフレームワーク領域、例えば、フレームワーク領域３（ＦＲ３）を含む重鎖可変ドメインを含む。一部の実施形態では、ＦＲ３は、Ｋａｂａｔの番号付けによる７３位におけるスレオニン、例えば、７３位における置換、例えば、グルタミン酸からスレオニンへの置換を含む。一部の実施形態では、ＦＲ３は、Ｋａｂａｔの番号付けによる９４位におけるグリシン、例えば、９４位における置換、例えば、アルギニンからグリシンへの置換を含む。一部の実施形態では、置換は、ヒト生殖系列重鎖フレームワーク領域配列と比較したものである。
[00464]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、例えば、配列番号１０Ａのアミノ酸配列に示されるように、Ｋａｂａｔの番号付けによる７３位におけるスレオニン、例えば、７３位における置換、例えば、グルタミン酸からスレオニンへの置換、およびＫａｂａｔの番号付けによる９４位におけるグリシン、例えば、９４位における置換、例えば、アルギニンからグリシンへの置換を含むフレームワーク領域３（ＦＲ３）を含む重鎖可変ドメインを含む。
[00465]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβＶ６（例えば、抗ＴＣＲβＶ６－５＊０１）抗体分子は、Ａ－Ｈ．１またはＡ－Ｈ．２の重鎖フレームワーク領域１～４、例えば配列番号９Ａ、または図１Ａおよび１Ｂに示されるものを含む。
[00466]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβＶ６（例えば、抗ＴＣＲβＶ６－５＊０１）抗体分子は、Ａ－Ｈ．１の軽鎖フレームワーク領域１～４、例えば配列番号１０Ａ、または図１Ａおよび１Ｂに示されるものを含む。
[00467]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβＶ６（例えば、抗ＴＣＲβＶ６－５＊０１）抗体分子は、Ａ－Ｈ．２の軽鎖フレームワーク領域１～４、例えば配列番号１１Ａ、または図１Ａおよび１Ｂに示されるものを含む。
[00468]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβＶ６（例えば、抗ＴＣＲβＶ６－５＊０１）抗体分子は、Ａ－Ｈ．１の重鎖フレームワーク領域１～４、例えば配列番号９Ａ、およびＡ－Ｈ．１の軽鎖フレームワーク領域１～４、例えば配列番号１０Ａ、または図１Ａおよび１Ｂに示されるものを含む。
[00469]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβＶ６（例えば、抗ＴＣＲβＶ６－５＊０１）抗体分子は、Ａ－Ｈ．２の重鎖フレームワーク領域１～４、例えば配列番号９Ａ、およびＡ－Ｈ．２の軽鎖フレームワーク領域１～４、例えば配列番号１１Ａ、または図１Ａおよび１Ｂに示されるものを含む。
[00470]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子の重鎖もしくは軽鎖可変ドメイン、または両方は、本明細書に開示されるアミノ酸に対して実質的に同一である、例えば、本明細書に記載の抗体、例えば、Ａ－Ｈ．１～Ａ－Ｈ．８５のうちのいずれか１つ、例えば、Ａ－Ｈ．１、Ａ－Ｈ．２もしくはＡ－Ｈ．６８から選択されるか、もしくは表３０に記載されるか、もしくは表３０中のヌクレオチド配列によってコードされる抗体の可変領域に対して少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一である、または本明細書に記載の抗体の可変領域から少なくとも１個もしくは５個の残基、かつ４０個、３０個、２０個、もしくは１０個未満の残基が異なる、アミノ酸配列を含む。
[00471]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、表３０に示されるアミノ酸配列、またはそれに対して実質的に同一の配列（例えば、それに対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一である、もしくは表３０に示される配列から１個、２個、５個、１０個、もしくは１５個以下のアミノ酸残基が異なる配列を有する少なくとも１つ、２つ、３つ、または４つの抗原結合性領域、例えば、可変領域を含む。別の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、表３０に示されるヌクレオチド配列、またはそれに対して実質的に同一の配列（例えば、それに対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一であるか、もしくは表３０に示される配列から３個、６個、１５個、３０個、もしくは４５個以下のヌクレオチドが異なる配列を有する核酸によってコードされるＶＨおよび／またはＶＬドメインを含む。
[00472]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、
配列番号９Ａのアミノ酸配列、配列番号９Ａのアミノ酸配列に対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一であるアミノ酸配列、もしくは配列番号９Ａのアミノ酸配列から１個、２個、５個、１０個、もしくは１５個以下のアミノ酸残基が異なるアミノ酸配列を含むＶＨドメイン、および／または
配列番号１０Ａのアミノ酸配列、配列番号１０Ａのアミノ酸配列に対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一であるアミノ酸配列、もしくは配列番号１０Ａのアミノ酸配列から１個、２個、５個、１０個、もしくは１５個以下のアミノ酸残基が異なるアミノ酸配列を含むＶＬドメイン
を含む。
[00473]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、
配列番号９のアミノ酸配列、配列番号９Ａのアミノ酸配列に対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一であるアミノ酸配列、もしくは配列番号９Ａのアミノ酸配列から１個、２個、５個、１０個、もしくは１５個以下のアミノ酸残基が異なるアミノ酸配列を含むＶＨドメイン、および／または
配列番号１１Ａのアミノ酸配列、配列番号１１のアミノ酸配列に対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一であるアミノ酸配列、もしくは配列番号１１Ａのアミノ酸配列から１個、２個、５個、１０個、もしくは１５個以下のアミノ酸残基が異なるアミノ酸配列を含むＶＬドメイン
を含む。
[00474]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、全長抗体またはその断片（例えば、Ｆａｂ、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ、もしくは一本鎖Ｆｖ断片（ｓｃＦｖ））である。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、モノクローナル抗体または単一の特異性を有する抗体である。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子はまた、ヒト化、キメラ、ラクダ、サメ、またはｉｎ ｖｉｔｒｏで生成された抗体分子であり得る。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、ヒト化抗体分子である。抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子の重鎖および軽鎖は、全長であり得（例えば、抗体は、少なくとも１つ、好ましくは２つの、完全重鎖、および少なくとも１つ、好ましくは２つの、完全軽鎖を含むことができる）、または抗原結合性断片（例えば、Ｆａｂ、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ、一本鎖Ｆｖ断片、単一ドメイン抗体、ダイアボディ（ｄＡｂ）、二価抗体、もしくは二特異性抗体もしくはその断片、その単一ドメインバリアント、もしくはラクダ抗体）を含むことができる。
[00475]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、例えば本明細書に記載される、多特異性分子、例えば、二特異性分子の形態である。
[00476]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＭ、ＩｇＡ１、ＩｇＡ２、ＩｇＤ、およびＩｇＥの重鎖定常領域から選択される重鎖定常領域（Ｆｃ）を有する。一部の実施形態では、Ｆｃ領域は、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、およびＩｇＧ４の重鎖定常領域から選択される。一部の実施形態では、Ｆｃ領域は、ＩｇＧ１またはＩｇＧ２（例えば、ヒトＩｇＧ１、またはＩｇＧ２）の重鎖定常領域から選択される。一部の実施形態では、重鎖定常領域はヒトＩｇＧ１である。一部の実施形態では、Ｆｃ領域は、例えば、本明細書に記載されるように、Ｆｃ領域バリアントを含む。
[00477]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、例えば、カッパまたはラムダ、好ましくはカッパ（例えば、ヒトカッパ）の軽鎖定常領域から選択される軽鎖定常領域を有する。一実施形態では、定常領域は、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子の特性を修飾するため（例えば、Ｆｃ受容体結合、抗体グリコシル化、システイン残基の数、エフェクター細胞機能、または補体機能のうちの１つまたは複数を増加または減少させるため）に変更、例えば、突然変異されている。例えば、定常領域は、例えば、ヒトＩｇＧ１と比較して、Ｆｃ受容体結合を変更するために２９６位（ＭからＹへ）、２９８位（ＳからＴへ）、３００位（ＴからＥへ）、４７７位（ＨからＫへ）および４７８位（ＮからＦへ）において突然変異されている（例えば、突然変異した位置は、配列番号２１２Ａもしくは２１４Ａの１３２位（ＭからＹへ）、１３４位（ＳからＴへ）、１３６位（ＴからＥへ）、３１３位（ＨからＫへ）および３１４位（ＮからＦへ）、または配列番号２１５Ａ、２１６Ａ、２１７Ａもしくは２１８Ａの１３５位（ＭからＹへ）、１３７位（ＳからＴへ）、１３９位（ＴからＥへ）、３１６位（ＨからＫへ）および３１７位（ＮからＦへ）に対応する）。
[00478]抗体Ａ－Ｈ．１は、配列番号３２７８Ａのアミノ酸配列を含む重鎖および配列番号７２Ａのアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。抗体Ａ－Ｈ．２は、配列番号３２７８Ａのアミノ酸配列を含む重鎖および配列番号３２７９Ａのアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。抗体Ａ－Ｈ．６８は、配列番号１３３７Ａのアミノ酸配列、またはそれに対して少なくとも８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を有する配列を含む。
[00479]追加の例示的なヒト化抗ＴＣＲＢ Ｖ６抗体が表３０において提供される。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβ Ｖ６は、表３０において提供されるように、抗体Ａ、例えば、ヒト化された抗体Ａ（抗体Ａ－Ｈ）である。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体は、表３０において提供されるＬＣ ＣＤＲ１、ＬＣ ＣＤＲ２、およびＬＣ ＣＤＲ３のうちの１つもしくは複数（例えば、３つすべて）、ならびに／もしくは表３０において提供されるＨＣ ＣＤＲ１、ＨＣ ＣＤＲ２、およびＨＣ ＣＤＲ３のうちの１つもしくは複数（例えば、３つすべて）、またはこれらに対して少なくとも８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を有する配列を含む。一部の実施形態では、抗体Ａは、表３０において提供される可変重鎖（ＶＨ）および／もしくは可変軽鎖（ＶＬ）、またはこれらに対して少なくとも８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を有する配列を含む。
[00480]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβＶ６（例えば、抗ＴＣＲβＶ６－５＊０１）抗体分子は、表１に記載の抗体のＶＨおよび／もしくはＶＬ、またはそれに対して少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上の同一性を有する配列を含む。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβＶ６（例えば、抗ＴＣＲβＶ６－５＊０１）抗体分子は、表１に記載の抗体のＶＨ、またはそれに対して少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上の同一性を有する配列を含む。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβＶ６（例えば、抗ＴＣＲβＶ６－５＊０１）抗体分子は、表１に記載の抗体のＶＬ、またはそれに対して少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上の同一性を有する配列を含む。
[00481]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβＶ６（例えば、抗ＴＣＲβＶ６－５＊０１）抗体分子は、表１に記載の抗体のＶＨおよびＶＬ、またはそれに対して少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上の同一性を有する配列を含む。
[00482]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβＶ６（例えば、抗ＴＣＲβＶ６－５＊０１）抗体分子は、Ａ－Ｈ．１、Ａ－Ｈ．２、Ａ－Ｈ．３、Ａ－Ｈ．４、Ａ－Ｈ．５、Ａ－Ｈ．６、Ａ－Ｈ．７、Ａ－Ｈ．８、Ａ－Ｈ．９、Ａ－Ｈ．１０、Ａ－Ｈ．１１、Ａ－Ｈ．１２、Ａ－Ｈ．１３、Ａ－Ｈ．１４、Ａ－Ｈ．１５、Ａ－Ｈ．１６、Ａ－Ｈ．１７、Ａ－Ｈ．１８、Ａ－Ｈ．１９、Ａ－Ｈ．２０、Ａ－Ｈ．２１、Ａ－Ｈ．２２、Ａ－Ｈ．２３、Ａ－Ｈ．２４、Ａ－Ｈ．２５、Ａ－Ｈ．２６、Ａ－Ｈ．２７、Ａ－Ｈ．２８、Ａ－Ｈ．２９、Ａ－Ｈ．３０、Ａ－Ｈ．３１、Ａ－Ｈ．３２、Ａ－Ｈ．３３、Ａ－Ｈ．３４、Ａ－Ｈ．３５、Ａ－Ｈ．３６、Ａ－Ｈ．３７、Ａ－Ｈ．３８、Ａ－Ｈ．３９、Ａ－Ｈ．４０、Ａ－Ｈ．１、Ａ－Ｈ．４２、Ａ－Ｈ．４３、Ａ－Ｈ．４４、Ａ－Ｈ．４５、Ａ－Ｈ．４６、Ａ－Ｈ．４７、Ａ－Ｈ．４８、Ａ－Ｈ．４９、Ａ－Ｈ．５０、Ａ－Ｈ．５１、Ａ－Ｈ．５２、Ａ－Ｈ．５３、Ａ－Ｈ．５４、Ａ－Ｈ．５５、Ａ－Ｈ．５６、Ａ－Ｈ．５７、Ａ－Ｈ．５８、Ａ－Ｈ．５９、Ａ－Ｈ．６０、Ａ－Ｈ．６１、Ａ－Ｈ．６２、Ａ－Ｈ．６３、Ａ－Ｈ．６４、Ａ－Ｈ．６５、Ａ－Ｈ．６６、Ａ－Ｈ．６７、Ａ－Ｈ．６８、Ａ－Ｈ．６９、Ａ－Ｈ．７０、Ａ－Ｈ．７１、Ａ－Ｈ．７２、Ａ－Ｈ．７３、Ａ－Ｈ．７４、Ａ－Ｈ．７５、Ａ－Ｈ．７６、Ａ－Ｈ．７７、Ａ－Ｈ．７８、Ａ－Ｈ．７９、Ａ－Ｈ．８０、Ａ－Ｈ．８１、Ａ－Ｈ．８２、Ａ－Ｈ．８３、Ａ－Ｈ．８４、もしくはＡ－Ｈ．８５のＶＨ、またはそれに対して少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上の同一性を有する配列を含む。
[00483]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβＶ６（例えば、抗ＴＣＲβＶ６－５＊０１）抗体分子は、Ａ－Ｈ．１、Ａ－Ｈ．２、Ａ－Ｈ．３、Ａ－Ｈ．４、Ａ－Ｈ．５、Ａ－Ｈ．６、Ａ－Ｈ．７、Ａ－Ｈ．８、Ａ－Ｈ．９、Ａ－Ｈ．１０、Ａ－Ｈ．１１、Ａ－Ｈ．１２、Ａ－Ｈ．１３、Ａ－Ｈ．１４、Ａ－Ｈ．１５、Ａ－Ｈ．１６、Ａ－Ｈ．１７、Ａ－Ｈ．１８、Ａ－Ｈ．１９、Ａ－Ｈ．２０、Ａ－Ｈ．２１、Ａ－Ｈ．２２、Ａ－Ｈ．２３、Ａ－Ｈ．２４、Ａ－Ｈ．２５、Ａ－Ｈ．２６、Ａ－Ｈ．２７、Ａ－Ｈ．２８、Ａ－Ｈ．２９、Ａ－Ｈ．３０、Ａ－Ｈ．３１、Ａ－Ｈ．３２、Ａ－Ｈ．３３、Ａ－Ｈ．３４、Ａ－Ｈ．３５、Ａ－Ｈ．３６、Ａ－Ｈ．３７、Ａ－Ｈ．３８、Ａ－Ｈ．３９、Ａ－Ｈ．４０、Ａ－Ｈ．１、Ａ－Ｈ．４２、Ａ－Ｈ．４３、Ａ－Ｈ．４４、Ａ－Ｈ．４５、Ａ－Ｈ．４６、Ａ－Ｈ．４７、Ａ－Ｈ．４８、Ａ－Ｈ．４９、Ａ－Ｈ．５０、Ａ－Ｈ．５１、Ａ－Ｈ．５２、Ａ－Ｈ．５３、Ａ－Ｈ．５４、Ａ－Ｈ．５５、Ａ－Ｈ．５６、Ａ－Ｈ．５７、Ａ－Ｈ．５８、Ａ－Ｈ．５９、Ａ－Ｈ．６０、Ａ－Ｈ．６１、Ａ－Ｈ．６２、Ａ－Ｈ．６３、Ａ－Ｈ．６４、Ａ－Ｈ．６５、Ａ－Ｈ．６６、Ａ－Ｈ．６７、Ａ－Ｈ．６８、Ａ－Ｈ．６９、Ａ－Ｈ．７０、Ａ－Ｈ．７１、Ａ－Ｈ．７２、Ａ－Ｈ．７３、Ａ－Ｈ．７４、Ａ－Ｈ．７５、Ａ－Ｈ．７６、Ａ－Ｈ．７７、Ａ－Ｈ．７８、Ａ－Ｈ．７９、Ａ－Ｈ．８０、Ａ－Ｈ．８１、Ａ－Ｈ．８２、Ａ－Ｈ．８３、Ａ－Ｈ．８４、もしくはＡ－Ｈ．８５のＶＬ、またはそれに対して少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上の同一性を有する配列を含む。
[00484]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβＶ６（例えば、抗ＴＣＲβＶ６－５＊０１）抗体分子は、Ａ－Ｈ．１、Ａ－Ｈ．２、Ａ－Ｈ．３、Ａ－Ｈ．４、Ａ－Ｈ．５、Ａ－Ｈ．６、Ａ－Ｈ．７、Ａ－Ｈ．８、Ａ－Ｈ．９、Ａ－Ｈ．１０、Ａ－Ｈ．１１、Ａ－Ｈ．１２、Ａ－Ｈ．１３、Ａ－Ｈ．１４、Ａ－Ｈ．１５、Ａ－Ｈ．１６、Ａ－Ｈ．１７、Ａ－Ｈ．１８、Ａ－Ｈ．１９、Ａ－Ｈ．２０、Ａ－Ｈ．２１、Ａ－Ｈ．２２、Ａ－Ｈ．２３、Ａ－Ｈ．２４、Ａ－Ｈ．２５、Ａ－Ｈ．２６、Ａ－Ｈ．２７、Ａ－Ｈ．２８、Ａ－Ｈ．２９、Ａ－Ｈ．３０、Ａ－Ｈ．３１、Ａ－Ｈ．３２、Ａ－Ｈ．３３、Ａ－Ｈ．３４、Ａ－Ｈ．３５、Ａ－Ｈ．３６、Ａ－Ｈ．３７、Ａ－Ｈ．３８、Ａ－Ｈ．３９、Ａ－Ｈ．４０、Ａ－Ｈ．１、Ａ－Ｈ．４２、Ａ－Ｈ．４３、Ａ－Ｈ．４４、Ａ－Ｈ．４５、Ａ－Ｈ．４６、Ａ－Ｈ．４７、Ａ－Ｈ．４８、Ａ－Ｈ．４９、Ａ－Ｈ．５０、Ａ－Ｈ．５１、Ａ－Ｈ．５２、Ａ－Ｈ．５３、Ａ－Ｈ．５４、Ａ－Ｈ．５５、Ａ－Ｈ．５６、Ａ－Ｈ．５７、Ａ－Ｈ．５８、Ａ－Ｈ．５９、Ａ－Ｈ．６０、Ａ－Ｈ．６１、Ａ－Ｈ．６２、Ａ－Ｈ．６３、Ａ－Ｈ．６４、Ａ－Ｈ．６５、Ａ－Ｈ．６６、Ａ－Ｈ．６７、Ａ－Ｈ．６８、Ａ－Ｈ．６９、Ａ－Ｈ．７０、Ａ－Ｈ．７１、Ａ－Ｈ．７２、Ａ－Ｈ．７３、Ａ－Ｈ．７４、Ａ－Ｈ．７５、Ａ－Ｈ．７６、Ａ－Ｈ．７７、Ａ－Ｈ．７８、Ａ－Ｈ．７９、Ａ－Ｈ．８０、Ａ－Ｈ．８１、Ａ－Ｈ．８２、Ａ－Ｈ．８３、Ａ－Ｈ．８４、もしくはＡ－Ｈ．８５のＶＨ、またはそれに対して少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上の同一性を有する配列；およびＡ－Ｈ．１、Ａ－Ｈ．２、Ａ－Ｈ．３、Ａ－Ｈ．４、Ａ－Ｈ．５、Ａ－Ｈ．６、Ａ－Ｈ．７、Ａ－Ｈ．８、Ａ－Ｈ．９、Ａ－Ｈ．１０、Ａ－Ｈ．１１、Ａ－Ｈ．１２、Ａ－Ｈ．１３、Ａ－Ｈ．１４、Ａ－Ｈ．１５、Ａ－Ｈ．１６、Ａ－Ｈ．１７、Ａ－Ｈ．１８、Ａ－Ｈ．１９、Ａ－Ｈ．２０、Ａ－Ｈ．２１、Ａ－Ｈ．２２、Ａ－Ｈ．２３、Ａ－Ｈ．２４、Ａ－Ｈ．２５、Ａ－Ｈ．２６、Ａ－Ｈ．２７、Ａ－Ｈ．２８、Ａ－Ｈ．２９、Ａ－Ｈ．３０、Ａ－Ｈ．３１、Ａ－Ｈ．３２、Ａ－Ｈ．３３、Ａ－Ｈ．３４、Ａ－Ｈ．３５、Ａ－Ｈ．３６、Ａ－Ｈ．３７、Ａ－Ｈ．３８、Ａ－Ｈ．３９、Ａ－Ｈ．４０、Ａ－Ｈ．１、Ａ－Ｈ．４２、Ａ－Ｈ．４３、Ａ－Ｈ．４４、Ａ－Ｈ．４５、Ａ－Ｈ．４６、Ａ－Ｈ．４７、Ａ－Ｈ．４８、Ａ－Ｈ．４９、Ａ－Ｈ．５０、Ａ－Ｈ．５１、Ａ－Ｈ．５２、Ａ－Ｈ．５３、Ａ－Ｈ．５４、Ａ－Ｈ．５５、Ａ－Ｈ．５６、Ａ－Ｈ．５７、Ａ－Ｈ．５８、Ａ－Ｈ．５９、Ａ－Ｈ．６０、Ａ－Ｈ．６１、Ａ－Ｈ．６２、Ａ－Ｈ．６３、Ａ－Ｈ．６４、Ａ－Ｈ．６５、Ａ－Ｈ．６６、Ａ－Ｈ．６７、Ａ－Ｈ．６８、Ａ－Ｈ．６９、Ａ－Ｈ．７０、Ａ－Ｈ．７１、Ａ－Ｈ．７２、Ａ－Ｈ．７３、Ａ－Ｈ．７４、Ａ－Ｈ．７５、Ａ－Ｈ．７６、Ａ－Ｈ．７７、Ａ－Ｈ．７８、Ａ－Ｈ．７９、Ａ－Ｈ．８０、Ａ－Ｈ．８１、Ａ－Ｈ．８２、Ａ－Ｈ．８３、Ａ－Ｈ．８４、もしくはＡ－Ｈ．８５のＶＬ、またはそれに対して少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上の同一性を有する配列を含む。
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 [00485]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、表３０に記載の抗体のＶＨおよび／もしくはＶＬ、またはそれに対して少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％もしくはより高い同一性を有する配列を含む。
[00486]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、表３０に記載の抗体のＶＨおよびＶＬ、またはそれに対して少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％もしくはより高い同一性を有する配列を含む。
[00487]一部の実施形態では、本明細書に開示される抗ＴＣＲＶｂ抗体は、配列番号２３０Ａ（３０位はＧ、Ｅ、ＡもしくはＤであり、３１位はＮもしくはＤであり、３２位はＲもしくはＫであり、３６位はＹもしくはＨであり、かつ／または５６位はＫもしくはＳである）のコンセンサス配列を有するＶＬを有する抗原結合性ドメインを有する。
[00488]一部の実施形態では、本明細書に開示される抗ＴＣＲＶｂ抗体は、配列番号２３１Ａ（２７位はＨもしくはＴもしくはＧもしくはＹであり、２８位はＤもしくはＴもしくはＳであり、３０位はＨもしくはＲもしくはＤもしくはＫもしくはＴであり、３１位はＬもしくはＤもしくはＫもしくはＴもしくはＮであり、３２位はＷもしくはＦもしくはＴもしくはＩもしくはＹもしくはＧであり、４９位はＲもしくはＷであり、５０位はＶもしくはＩもしくはＦであり、５１位はＦもしくはＳもしくはＹであり、５２位はＡもしくはＰであり、５６位はＮもしくはＳであり、５７位はＴもしくはＶもしくはＹもしくはＩであり、５８位はＫもしくはＲであり、９７位はＧもしくはＶであり、９９位はＹもしくはＩであり、１０２位はＹもしくはＡであり、かつ／または１０３位はＤもしくはＧである）のコンセンサス配列を有するＶＨを有する抗原結合性ドメインを有する。
抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体
[00489]よって、一態様では、本開示は、ヒトＴＣＲβ Ｖ１２、例えば、ＴＣＲβ Ｖ１２－４＊０１、ＴＣＲβ Ｖ１２－３＊０１またはＴＣＲβ Ｖ１２－５＊０１を含むＴＣＲβ Ｖ１２サブファミリーに結合する抗ＴＣＲβＶ抗体分子を提供する。一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ１２サブファミリーはＴＣＲβ Ｖ１２－４＊０１を含む。一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ１２サブファミリーはＴＣＲβ Ｖ１２－３＊０１を含む。
[00490]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は非マウス抗体分子、例えば、ヒトまたはヒト化抗体分子である。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子はヒト抗体分子である。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子はヒト化抗体分子である。
[00491]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、単離されているか、または組換えである。
[00492]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、本明細書に記載の抗体、例えば、表３１に記載されるか、もしくは表３１中のヌクレオチド配列によってコードされる抗体からの少なくとも１つの抗原結合性領域、例えば、可変領域もしくはその抗原結合性断片、または前述の配列のいずれかに対して実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一）である配列を含む。
[00493]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβＶ１２抗体分子は、本明細書に記載の抗体、例えば、表３１に記載されるか、もしくは表３１中のヌクレオチド配列、もしくは前記配列のいずれかに対して実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一）である配列によってコードされる抗体に由来する少なくとも１つ、２つ、３つまたは４つの可変領域を含む。
[00494]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβＶ１２抗体分子は、本明細書に記載の抗体、例えば、表３１に記載されるか、もしくは表３１中のヌクレオチド配列、もしくは前記配列のいずれかに対して実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一）である配列によってコードされる抗体に由来する少なくとも１つまたは２つの重鎖可変領域を含む。
[00495]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβＶ１２抗体分子は、本明細書に記載の抗体、例えば、表３１に記載されるか、もしくは表３１中のヌクレオチド配列、もしくは前記配列のいずれかに対して実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一）である配列によってコードされる抗体に由来する少なくとも１つまたは２つの軽鎖可変領域を含む。
[00496]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、ＩｇＧ４、例えば、ヒトＩｇＧ４の重鎖定常領域を含む。さらに別の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、ＩｇＧ１、例えば、ヒトＩｇＧ１の重鎖定常領域を含む。一実施形態では、重鎖定常領域は、表３２に記載のアミノ酸配列、またはそれに対して実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一）である配列を含む。
[00497]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβＶ１２抗体分子は、カッパ軽鎖定常領域、例えば、ヒトカッパ軽鎖定常領域を含む。一実施形態では、軽鎖定常領域は、表３２に記載のアミノ酸配列、またはそれに対して実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一）である配列を含む。
[00498]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβＶ１２抗体分子は、本明細書に記載の抗体、例えば、表３１に記載されるか、もしくは表３１中のヌクレオチド配列、もしくは前記配列のいずれかに対して実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一）である配列によってコードされる抗体の重鎖可変領域に由来する少なくとも１つ、２つ、または３つの相補性決定領域（ＣＤＲ）を含む。
[00499]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、表３１に示されるか、または表３１に示されるヌクレオチド配列によってコードされるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域からの少なくとも１つ、２つ、または３つのＣＤＲ（またはＣＤＲのまとめてすべて）を含む。一実施形態では、ＣＤＲのうちの１つまたは複数（またはＣＤＲのまとめてすべて）は、表３１に示されるか、または表３１に示されるヌクレオチド配列によってコードされるアミノ酸配列と比較して、１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つまたはより多くの変化、例えば、アミノ酸置換または欠失を有する。
[00500]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、本明細書に記載の抗体、例えば、表３１に記載されるか、もしくは表３１中のヌクレオチド配列によってコードされる抗体の軽鎖可変領域からの少なくとも１つ、２つ、もしくは３つの相補性決定領域（ＣＤＲ）、または前述の配列のいずれかに対して実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一）である配列を含む。
[00501]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、表３１に示されるか、または表３１に示されるヌクレオチド配列によってコードされるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域からの少なくとも１つ、２つ、または３つのＣＤＲ（またはＣＤＲのまとめてすべて）を含む。一実施形態では、ＣＤＲのうちの１つまたは複数（またはＣＤＲのまとめてすべて）は、表３１に示されるか、または表３１に示されるヌクレオチド配列によってコードされるアミノ酸配列と比較して、１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つまたはより多くの変化、例えば、アミノ酸置換または欠失を有する。
[00502]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、表３１に示されるか、または表３１に示されるヌクレオチド配列によってコードされるアミノ酸配列を含む重鎖および軽鎖可変領域からの少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つまたは６つのＣＤＲ（またはＣＤＲのまとめてすべて）を含む。一実施形態では、ＣＤＲのうちの１つまたは複数（またはＣＤＲのまとめてすべて）は、表３１に示されるか、または表３１に示されるヌクレオチド配列によってコードされるアミノ酸配列と比較して、１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つまたはより多くの変化、例えば、アミノ酸置換または欠失を有する。
[00503]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、本明細書に記載の抗体、例えば、表３１に記載されるか、もしくは表３１中のヌクレオチド配列によってコードされる抗体からの６つすべてのＣＤＲ、または密接に関連したＣＤＲ、例えば、同一であるか、もしくは少なくとも１つのアミノ酸変更であるが２つ、３つもしくは４つ以下である変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有するＣＤＲを含む。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、本明細書に記載の任意のＣＤＲを含んでもよい。
[00504]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、本明細書に記載の抗体、例えば、表３１に記載される選択された抗体の重鎖可変領域からのＫａｂａｔらによる少なくとも１つ、２つ、もしくは３つのＣＤＲ（例えば、表３１に示されるＫａｂａｔの定義による少なくとも１つ、２つ、もしくは３つのＣＤＲ）、または前述の配列のいずれかに対して実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一）であるか、もしくは表３１に示されるＫａｂａｔらによる１つ、２つ、もしくは３つのＣＤＲと比較して、少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、２つ、３つもしくは４つ以下の変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有する配列を含む。
[00505]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、本明細書に記載の抗体、例えば、表３１に記載される抗体の軽鎖可変領域からのＫａｂａｔらによる少なくとも１つ、２つ、もしくは３つのＣＤＲ（例えば、表３１に示されるＫａｂａｔの定義による少なくとも１つ、２つ、もしくは３つのＣＤＲ）、または前述の配列のいずれかに対して実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一）であるか、もしくは表３１に示されるＫａｂａｔらによる１つ、２つ、もしくは３つのＣＤＲと比較して、少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、２つ、３つもしくは４つ以下の変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有する配列を含む。
[00506]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、本明細書に記載の抗体、例えば、表３１に記載されるか、もしくは表３１中のヌクレオチド配列によってコードされる抗体の重鎖および軽鎖可変領域からのＫａｂａｔらによる少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つのＣＤＲ（例えば、表３１に示されるＫａｂａｔの定義による少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つのＣＤＲ）、または前述の配列のいずれかに対して実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一）であるか、もしくは表３１に示されるＫａｂａｔらによる１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つのＣＤＲと比較して、少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、２つ、３つもしくは４つ以下の変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有する配列を含む。
[00507]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、本明細書に記載の抗体、例えば、表３１に記載されるか、もしくは表３１中のヌクレオチド配列によってコードされるような抗体の重鎖および軽鎖可変領域からのＫａｂａｔらによる６つすべてのＣＤＲ（例えば、表３１に示されるＫａｂａｔの定義による６つすべてのＣＤＲ）、または前述の配列のいずれかに対して実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一）であるか、もしくは表３１に示されるＫａｂａｔらによる６つすべてのＣＤＲと比較して、少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、２つ、３つもしくは４つ以下の変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有する配列を含む。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、本明細書に記載の任意のＣＤＲを含んでもよい。
[00508]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、本明細書に記載の抗体、例えば、表３１に記載の抗体の対応する超可変ループと同じカノニカルな構造、例えば、本明細書に記載の抗体の重鎖および／または軽鎖可変ドメインの少なくともループ１および／またはループ２と同じカノニカルな構造を有する少なくとも１つ、２つ、または３つの超可変ループを含む。例えば、超可変ループのカノニカルな構造の記載についてＣｈｏｔｈｉａら、（１９９２） Ｊ． Ｍｏｌ． Ｂｉｏｌ． ２２７：７９９～８１７ページ；Ｔｏｍｌｉｎｓｏｎら、（１９９２） Ｊ． Ｍｏｌ． Ｂｉｏｌ． ２２７：７７６～７９８ページを参照。これらの構造は、これらの参考文献に記載の表の検査によって決定することができる。
[00509]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、本明細書に記載の抗体、例えば、表３１に記載される選択された抗体の重鎖可変領域からのＣｈｏｔｈｉａらによる少なくとも１つ、２つ、もしくは３つのＣＤＲ（例えば、表３１に示されるＣｈｏｔｈｉａの定義による少なくとも１つ、２つ、もしくは３つのＣＤＲ）、または前述の配列のいずれかに対して実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一）であるか、もしくは表３１に示されるＣｈｏｔｈｉａらによる１つ、２つ、もしくは３つのＣＤＲと比較して、少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、２つ、３つもしくは４つ以下の変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有する配列を含む。
[00510]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、本明細書に記載の抗体、例えば、表３１に記載される抗体の軽鎖可変領域からのＣｈｏｔｈｉａらによる少なくとも１つ、２つ、もしくは３つのＣＤＲ（例えば、表３１に示されるＣｈｏｔｈｉａの定義による少なくとも１つ、２つ、もしくは３つのＣＤＲ）、または前述の配列のいずれかに対して実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一）であるか、もしくは表３１に示されるＣｈｏｔｈｉａらによる１つ、２つ、もしくは３つのＣＤＲと比較して、少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、２つ、３つもしくは４つ以下の変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有する配列を含む。
[00511]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、本明細書に記載の抗体、例えば、表３１に記載されるか、もしくは表３１中のヌクレオチド配列によってコードされる抗体の重鎖および軽鎖可変領域からのＣｈｏｔｈｉａらによる少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つのＣＤＲ（例えば、表３１に示されるＣｈｏｔｈｉａの定義による少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つのＣＤＲ）、または前述の配列のいずれかに対して実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一）であるか、もしくは表３１に示されるＣｈｏｔｈｉａらによる１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つのＣＤＲと比較して、少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、２つ、３つもしくは４つ以下の変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有する配列を含む。
[00512]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、本明細書に記載の抗体、例えば、表３１に記載されるか、もしくは表３１中のヌクレオチド配列によってコードされるような抗体の重鎖および軽鎖可変領域からのＣｈｏｔｈｉａらによる６つすべてのＣＤＲ（例えば、表３１に示されるＣｈｏｔｈｉａの定義による６つすべてのＣＤＲ）、または前述の配列のいずれかに対して実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一）であるか、もしくは表３１に示されるＣｈｏｔｈｉａらによる６つすべてのＣＤＲと比較して、少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、２つ、３つもしくは４つ以下の変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有する配列を含む。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、本明細書に記載の任意のＣＤＲを含んでもよい。
[00513]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、本明細書に記載の抗体、例えば、表３１に記載される選択された抗体の重鎖可変領域からの組合せＣＤＲによる少なくとも１つ、２つ、もしくは３つのＣＤＲ（例えば、表３１に示される組合せＣＤＲの定義による少なくとも１つ、２つ、もしくは３つのＣＤＲ）、または前述の配列のいずれかに対して実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一）であるか、もしくは表３１に示される組合せＣＤＲによる１つ、２つ、もしくは３つのＣＤＲと比較して、少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、２つ、３つもしくは４つ以下の変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有する配列を含む。
[00514]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、本明細書に記載の抗体、例えば、表３１に記載される抗体の軽鎖可変領域からの組合せＣＤＲによる少なくとも１つ、２つ、もしくは３つのＣＤＲ（例えば、表３１に示される組合せＣＤＲの定義による少なくとも１つ、２つ、もしくは３つのＣＤＲ）、または前述の配列のいずれかに対して実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一）であるか、もしくは表３１に示される組合せＣＤＲによる１つ、２つ、もしくは３つのＣＤＲと比較して、少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、２つ、３つもしくは４つ以下の変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有する配列を含む。
[00515]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、本明細書に記載の抗体、例えば、表３１に記載されるか、もしくは表３１におけるヌクレオチド配列によってコードされる抗体の重鎖および軽鎖可変領域からの組合せＣＤＲによる少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つのＣＤＲ（例えば、表３１に示される組合せＣＤＲの定義による少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つのＣＤＲ）、または前述の配列のいずれかに対して実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一）であるか、もしくは表３１に示される組合せＣＤＲによる１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つのＣＤＲと比較して、少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、２つ、３つもしくは４つ以下の変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有する配列を含む。
[00516]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、本明細書に記載の抗体、例えば、表３１に記載されるか、もしくは表３１中のヌクレオチド配列によってコードされるような抗体の重鎖および軽鎖可変領域からの組合せＣＤＲによる６つすべてのＣＤＲ（例えば、表３１に示される組合せＣＤＲの定義による６つすべてのＣＤＲ）、または前述の配列のいずれかに対して実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一）であるか、もしくは表３１に示される組合せＣＤＲによる６つすべてのＣＤＲと比較して、少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、２つ、３つもしくは４つ以下の変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有する配列を含む。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、本明細書に記載の任意のＣＤＲを含んでもよい。
[00517]一部の実施形態では、表３１に示される組合せＣＤＲは、Ｋａｂａｔ ＣＤＲおよびＣｈｏｔｈｉａ ＣＤＲを含むＣＤＲである。
[00518]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、表３１において組合せＣＤＲとして同定されるＣＤＲまたは超可変ループの組合せを含む。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、表３１に記載される「組合せ」ＣＤＲによるＣＤＲまたは超可変ループの任意の組合せを含有し得る。
[00519]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、ＫａｂａｔらおよびＣｈｏｔｈｉａらに従って定義されるか、または表３１に記載されるＣＤＲまたは超可変ループの組合せを含む。
[00520]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、ＫａｂａｔおよびＣｈｏｔｈｉａの定義によるＣＤＲまたは超可変ループの任意の組合せを含有し得る。
[00521]一実施形態では、例えば、本明細書、例えば、表３１において言及される可変領域、ＣＤＲ（例えば、組合せＣＤＲ、Ｃｈｏｔｈｉａ ＣＤＲもしくはＫａｂａｔ ＣＤＲ）、または他の配列を含む一実施形態では、抗体分子は、単一特異性抗体分子、二特異性抗体分子、二価抗体分子、二重パラトープ性抗体分子、または抗体の抗原結合性断片を含む抗体分子、例えば、半抗体もしくは半抗体の抗原結合性断片である。一部の実施形態では、抗体分子は、例えば本明細書に記載される、多特異性分子、例えば、二特異性分子を含む。
[00522]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、
（ｉ）配列番号１６Ａ、配列番号２６Ａ、配列番号２７Ａ、配列番号２８Ａ、配列番号２９Ａもしくは配列番号３０Ａの軽鎖相補性決定領域１（ＬＣ ＣＤＲ１）、軽鎖相補性決定領域２（ＬＣ ＣＤＲ２）、および軽鎖相補性決定領域３（ＬＣ ＣＤＲ３）のうちの１つ、２つもしくはすべて、ならびに／または
（ｉｉ）配列番号１５Ａ、配列番号２３Ａ、配列番号２４Ａもしくは配列番号２５Ａの重鎖相補性決定領域１（ＨＣ ＣＤＲ１）、重鎖相補性決定領域２（ＨＣ ＣＤＲ２）、および重鎖相補性決定領域３（ＨＣ ＣＤＲ３）のうちの１つ、２つもしくはすべてを含む。
[00523]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、
（ｉ）配列番号２０ＡのＬＣ ＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号２１ＡのＬＣ ＣＤＲ２アミノ酸配列、もしくは配列番号２２ＡのＬＣ ＣＤＲ３アミノ酸配列、および／または
（ｉｉ）配列番号１７ＡのＨＣ ＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号１８ＡのＨＣ ＣＤＲ２アミノ酸配列、もしくは配列番号１９ＡのＨＣ ＣＤＲ３アミノ酸配列
を含む。
[00524]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、
（ｉ）配列番号２０ＡのＬＣ ＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号２１ＡのＬＣ ＣＤＲ２アミノ酸配列、および配列番号２ＡのＬＣ ＣＤＲ３アミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）、ならびに／または
（ｉｉ）配列番号１７ＡのＨＣ ＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号１８ＡのＨＣ ＣＤＲ２アミノ酸配列、および配列番号１９ＡのＨＣ ＣＤＲ３アミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）
を含む。
[00525]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、
（ｉ）配列番号６３ＡのＬＣ ＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号６４ＡのＬＣ ＣＤＲ２アミノ酸配列、もしくは配列番号６５ＡのＬＣ ＣＤＲ３アミノ酸配列、および／または
（ｉｉ）配列番号５７ＡのＨＣ ＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号５８ＡのＨＣ ＣＤＲ２アミノ酸配列、もしくは配列番号５９ＡのＨＣ ＣＤＲ３アミノ酸配列
を含む。
[00526]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、
（ｉ）配列番号６３ＡのＬＣ ＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号６４ＡのＬＣ ＣＤＲ２アミノ酸配列、もしくは配列番号６５ＡのＬＣ ＣＤＲ３アミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）、および／または
（ｉｉ）配列番号５７ＡのＨＣ ＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号５８ＡのＨＣ ＣＤＲ２アミノ酸配列、もしくは配列番号５９ＡのＨＣ ＣＤＲ３アミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）
を含む。
[00527]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、
（ｉ）配列番号６６ＡのＬＣ ＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号６７ＡのＬＣ ＣＤＲ２アミノ酸配列、もしくは配列番号６８ＡのＬＣ ＣＤＲ３アミノ酸配列、および／または
（ｉｉ）配列番号６０ＡのＨＣ ＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号６１ＡのＨＣ ＣＤＲ２アミノ酸配列、もしくは配列番号６２ＡのＨＣ ＣＤＲ３アミノ酸配列
を含む。
[00528]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、
（ｉ）配列番号６３ＡのＬＣ ＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号６４ＡのＬＣ ＣＤＲ２アミノ酸配列、もしくは配列番号６５ＡのＬＣ ＣＤＲ３アミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）、および／または
（ｉｉ）配列番号５７ＡのＨＣ ＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号５８ＡのＨＣ ＣＤＲ２アミノ酸配列、もしくは配列番号５９ＡのＨＣ ＣＤＲ３アミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）
を含む。
[00529]一実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子の軽鎖または重鎖可変フレームワーク（例えば、少なくともＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３、および任意選択でＦＲ４を包含する領域）は、（ａ）ヒト軽鎖もしくは重鎖可変フレームワークからのアミノ酸残基、例えば、ヒト成熟抗体、ヒト生殖系列配列、もしくはヒトコンセンサス配列からの軽鎖もしくは重鎖可変フレームワーク残基のうちの少なくとも８０％、８５％、８７％ ９０％、９２％、９３％、９５％、９７％、９８％、もしくは１００％を含む軽鎖もしくは重鎖可変フレームワーク、（ｂ）ヒト軽鎖もしくは重鎖可変フレームワークからのアミノ酸残基、例えば、ヒト成熟抗体、ヒト生殖系列配列、もしくはヒトコンセンサス配列からの軽鎖もしくは重鎖可変フレームワーク残基の２０％～８０％、４０％～６０％、６０％～９０％、もしくは７０％～９５％を含む軽鎖もしくは重鎖可変フレームワーク、（ｃ）非ヒトフレームワーク（例えば、齧歯動物フレームワーク）、または（ｄ）例えば抗原性もしくは細胞傷害性決定因子を除去するように、修飾されている、例えば、脱免疫化、もしくは部分的にヒト化されている非ヒトフレームワークから選択することができる。一実施形態では、軽鎖または重鎖可変フレームワーク領域（特に、ＦＲ１、ＦＲ２および／またはＦＲ３）は、ヒト生殖系列遺伝子のＶＬまたはＶＨセグメントのフレームワークに対して少なくとも７０、７５、８０、８５、８７、８８、９０、９２、９４、９５、９６、９７、９８、９９％同一のまたは同一の軽鎖または重鎖可変フレームワーク配列を含む。
[00530]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、表３１に記載のアミノ酸配列からの、例えば、例えば図２Ａおよび図２Ｂに示されるか、または配列番号２３Ａ～２５Ａにおける、可変領域全体中のＦＲ領域のアミノ酸配列からの少なくとも１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、１０個、１５個、２０個またはより多くの変化、例えば、アミノ酸置換または欠失を有する重鎖可変ドメインを含む。
[00531]代替的に、または本明細書に記載の重鎖置換と組み合わせて、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、本明細書に記載の抗体のアミノ酸配列からの、例えば、例えば図２Ａおよび図２Ｂに示されるか、または配列番号２６Ａ～３０Ａにおける、可変領域全体中のＦＲ領域のアミノ酸配列からの少なくとも１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、１０個、１５個、２０個またはより多くのアミノ酸変化、例えば、アミノ酸置換または欠失を有する軽鎖可変ドメインを含む。
[00532]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、図２Ａに示される１つ、２つ、３つ、もしくは４つの重鎖フレームワーク領域、またはそれに対して実質的に同一の配列を含む。
[00533]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、図２Ｂに示される１つ、２つ、３つ、もしくは４つの軽鎖フレームワーク領域、またはそれに対して実質的に同一の配列を含む。
[00534]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、例えば図２Ｂに示される、軽鎖フレームワーク領域１を含む。
[00535]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、例えば図２Ｂに示される、軽鎖フレームワーク領域２を含む。
[00536]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、例えば図２Ｂに示される、軽鎖フレームワーク領域３を含む。
[00537]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、例えば図２Ｂに示される、軽鎖フレームワーク領域４を含む。
[00538]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、Ｋａｂａｔの番号付けによる本明細書に開示される１つまたは複数の、例えば、すべての、位置における変化、例えば、置換（例えば、保存的置換）を含むフレームワーク領域、例えば、フレームワーク領域１（ＦＲ１）を含む軽鎖を含む。一部の実施形態では、ＦＲ１は、Ｋａｂａｔの番号付けによる１位におけるアスパラギン酸、例えば、１位における置換、例えば、アラニンからアスパラギン酸への置換を含む。一部の実施形態では、ＦＲ１は、Ｋａｂａｔの番号付けによる２位におけるアスパラギン、例えば、２位における置換、例えば、イソロイシンからアスパラギンへの置換、セリンからアスパラギンへの置換またはチロシンからアスパラギンへの置換を含む。一部の実施形態では、ＦＲ１は、Ｋａｂａｔの番号付けによる４位におけるロイシン、例えば、４位における置換、例えば、メチオニンからロイシンへの置換を含む。
[00539]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、Ｋａｂａｔの番号付けによる１位における置換、例えば、アラニンからアスパラギン酸への置換、Ｋａｂａｔの番号付けによる２位における置換、例えば、イソロイシンからアスパラギンへの置換、セリンからアスパラギンへの置換またはチロシンからアスパラギンへの置換、およびＫａｂａｔの番号付けによる４位における置換、例えば、メチオニンからロイシンへの置換を含むフレームワーク領域、例えば、フレームワーク領域１（ＦＲ１）を含む軽鎖を含む。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、Ｋａｂａｔの番号付けによる１位における置換、例えば、アラニンからアスパラギン酸への置換、およびＫａｂａｔの番号付けによる２位における置換、例えば、イソロイシンからアスパラギンへの置換、セリンからアスパラギンへの置換またはチロシンからアスパラギンへの置換を含むフレームワーク領域、例えば、フレームワーク領域１（ＦＲ１）を含む軽鎖を含む。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、Ｋａｂａｔの番号付けによる１位における置換、例えば、アラニンからアスパラギン酸への置換、およびＫａｂａｔの番号付けによる４位における置換、例えば、メチオニンからロイシンへの置換を含むフレームワーク領域、例えば、フレームワーク領域１（ＦＲ１）を含む軽鎖を含む。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、Ｋａｂａｔの番号付けによる２位における置換、例えば、イソロイシンからアスパラギンへの置換、セリンからアスパラギンへの置換またはチロシンからアスパラギンへの置換、およびＫａｂａｔの番号付けによる４位における置換、例えば、メチオニンからロイシンへの置換を含むフレームワーク領域、例えば、フレームワーク領域１（ＦＲ１）を含む軽鎖を含む。一部の実施形態では、置換は、ヒト生殖系列軽鎖フレームワーク領域配列と比較したものである。
[00540]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、Ｋａｂａｔの番号付けによる本明細書に開示される１つまたは複数の、例えば、すべての、位置における変化、例えば、置換（例えば、保存的置換）を含むフレームワーク領域、例えば、フレームワーク領域３（ＦＲ３）を含む軽鎖を含む。一部の実施形態では、ＦＲ３は、Ｋａｂａｔの番号付けによる６６位におけるグリシン、例えば、６６位における置換、例えば、リシンからグリシンへの置換、またはセリンからグリシンへの置換を含む。一部の実施形態では、ＦＲ３は、Ｋａｂａｔの番号付けによる６９位におけるアスパラギン、例えば、６９位における置換、例えば、チロシンからアスパラギンへの置換を含む。一部の実施形態では、ＦＲ３は、Ｋａｂａｔの番号付けによる７１位におけるチロシン、例えば、７１位における置換、例えば、フェニルアラニンからチロシンへの置換、またはアラニンからチロシンへの置換を含む。
[00541]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、Ｋａｂａｔの番号付けによる６６位における置換、例えば、リシンからグリシンへの置換、またはセリンからグリシンへの置換、およびＫａｂａｔの番号付けによる６９位における置換、例えば、チロシンからアスパラギンへの置換を含むフレームワーク領域、例えば、フレームワーク領域３（ＦＲ３）を含む軽鎖を含む。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、Ｋａｂａｔの番号付けによる６６位における置換、例えば、リシンからグリシンへの置換、またはセリンからグリシンへの置換、およびＫａｂａｔの番号付けによる７１位における置換、例えば、フェニルアラニンからチロシンへの置換、またはアラニンからチロシンへの置換を含むフレームワーク領域、例えば、フレームワーク領域３（ＦＲ３）を含む軽鎖を含む。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、Ｋａｂａｔの番号付けによる６９位における置換、例えば、チロシンからアスパラギンへの置換およびＫａｂａｔの番号付けによる７１位における置換、例えば、フェニルアラニンからチロシンへの置換、またはアラニンからチロシンへの置換を含むフレームワーク領域、例えば、フレームワーク領域３（ＦＲ３）を含む軽鎖を含む。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、Ｋａｂａｔの番号付けによる６６位における置換、例えば、リシンからグリシンへの置換、またはセリンからグリシンへの置換、Ｋａｂａｔの番号付けによる６９位における置換、例えば、チロシンからアスパラギンへの置換およびＫａｂａｔの番号付けによる７１位における置換、例えば、フェニルアラニンからチロシンへの置換、またはアラニンからチロシンへの置換を含むフレームワーク領域、例えば、フレームワーク領域３（ＦＲ３）を含む軽鎖を含む。一部の実施形態では、置換は、ヒト生殖系列軽鎖フレームワーク領域配列と比較したものである。
[00542]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、例えば、配列番号２６Ａのアミノ酸配列に示されるように、Ｋａｂａｔの番号付けによる２位における置換、例えば、イソロイシンからアスパラギンへの置換を含むフレームワーク領域１（ＦＲ１）、ならびにＫａｂａｔの番号付けによる６９位における置換、例えば、スレオニンからアスパラギンへの置換およびＫａｂａｔの番号付けによる７１位における置換、例えば、フェニルアラニンからチロシンへの置換を含むフレームワーク領域３（ＦＲ３）を含む軽鎖を含む。一部の実施形態では、置換は、ヒト生殖系列軽鎖フレームワーク領域配列と比較したものである。
[00543]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、例えば、配列番号２７Ａのアミノ酸配列に示されるように、（ａ）Ｋａｂａｔの番号付けによる１位における置換、例えば、アラニンからアスパラギン酸への置換、およびＫａｂａｔの番号付けによる２位における置換、例えば、イソロイシンからアスパラギンへの置換を含むフレームワーク領域１（ＦＲ１）、ならびに（ｂ）Ｋａｂａｔの番号付けによる６９位における置換、例えば、スレオニンからアスパラギンへの置換およびＫａｂａｔの番号付けによる７１位における置換、例えば、フェニルアラニンからチロシンへの置換を含むフレームワーク領域３（ＦＲ３）を含む軽鎖を含む。一部の実施形態では、置換は、ヒト生殖系列軽鎖フレームワーク領域配列と比較したものである。
[00544]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、例えば、配列番号２８Ａのアミノ酸配列に示されるように、（ａ）Ｋａｂａｔの番号付けによる２位における置換、例えば、セリンからアスパラギンへの置換、およびＫａｂａｔの番号付けによる４位における置換、例えば、メチオニンからロイシンへの置換を含むフレームワーク領域１（ＦＲ１）、ならびに（ｂ）Ｋａｂａｔの番号付けによる６９位における置換、例えば、スレオニンからアスパラギンへの置換およびＫａｂａｔの番号付けによる７１位における置換、例えば、フェニルアラニンからチロシンへの置換を含むフレームワーク領域３（ＦＲ３）を含む軽鎖を含む。一部の実施形態では、置換は、ヒト生殖系列軽鎖フレームワーク領域配列と比較したものである。
[00545]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、例えば、配列番号２９Ａのアミノ酸配列に示されるように、（ａ）Ｋａｂａｔの番号付けによる２位における置換、例えば、セリンからアスパラギンへの置換を含むフレームワーク領域１（ＦＲ１）、ならびに（ｂ）Ｋａｂａｔの番号付けによる６６位における置換、例えば、リジンからグリシンへの置換、Ｋａｂａｔの番号付けによる６９位における置換、例えば、スレオニンからアスパラギンへの置換、およびＫａｂａｔの番号付けによる７１位における置換、例えば、アラニンからチロシンへの置換を含むフレームワーク領域３（ＦＲ３）を含む軽鎖を含む。一部の実施形態では、置換は、ヒト生殖系列軽鎖フレームワーク領域配列と比較したものである。
[00546]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、例えば、配列番号２９Ａのアミノ酸配列に示されるように、（ａ）Ｋａｂａｔの番号付けによる２位における置換、例えば、チロシンからアスパラギンへの置換を含むフレームワーク領域１（ＦＲ１）、ならびに（ｂ）Ｋａｂａｔの番号付けによる６６位における置換、例えば、セリンからグリシンへの置換、Ｋａｂａｔの番号付けによる６９位における置換、例えば、スレオニンからアスパラギンへの置換、およびＫａｂａｔの番号付けによる７１位における置換、例えば、アラニンからチロシンへの置換を含むフレームワーク領域３（ＦＲ３）を含む軽鎖を含む。一部の実施形態では、置換は、ヒト生殖系列軽鎖フレームワーク領域配列と比較したものである。
[00547]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、（ａ）Ｋａｂａｔの番号付けによる本明細書に開示される１つまたは複数（例えば、すべて）の位置における変化、例えば、置換（例えば、保存的置換）を含むフレームワーク領域１（ＦＲ１）、および（ｂ）Ｋａｂａｔの番号付けによる本明細書に開示される１つまたは複数（例えば、すべて）の位置における変化、例えば、置換（例えば、保存的置換）を含むフレームワーク領域３（ＦＲ３）を含む軽鎖可変ドメインを含む。一部の実施形態では、置換は、ヒト生殖系列軽鎖フレームワーク領域配列と比較したものである。
[00548]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、例えば図２Ａに示される、重鎖フレームワーク領域１を含む。
[00549]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、例えば図２Ａに示される、重鎖フレームワーク領域２を含む。
[00550]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、例えば図２Ａに示される、重鎖フレームワーク領域３を含む。
[00551]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、例えば図２Ａに示される、重鎖フレームワーク領域４を含む。
[00552]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、重鎖フレームワーク領域１～４、例えば、配列番号２０Ａ～２３Ａ、または図２Ａに示されるものを含む。
[00553]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、軽鎖フレームワーク領域１～４、例えば、配列番号２６Ａ～３０Ａ、または図２Ｂに示されるものを含む。
[00554]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、重鎖フレームワーク領域１～４、例えば、配列番号２３Ａ～２５Ａ、ならびに軽鎖フレームワーク領域１～４、例えば、配列番号２６Ａ～３０Ａ、または図２Ａおよび図２Ｂに示されるものを含む。
[00555]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子の重鎖もしくは軽鎖可変ドメイン、または両方は、本明細書に開示されるアミノ酸に対して実質的に同一である、例えば、本明細書に記載の抗体、例えば、表３１に記載されるか、もしくは表３１中のヌクレオチド配列によってコードされる抗体の可変領域に対して少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一である、または本明細書に記載の抗体の可変領域から少なくとも１個もしくは５個の残基、かつ４０個、３０個、２０個、もしくは１０個未満の残基が異なるアミノ酸配列を含む。
[00556]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、表３１に示されるアミノ酸配列、またはそれに対して実質的に同一の配列（例えば、それに対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一であるか、もしくは表３１に示される配列から１個、２個、５個、１０個、もしくは１５個以下のアミノ酸残基が異なる配列を有する少なくとも１つ、２つ、３つ、または４つの抗原結合性領域、例えば、可変領域を含む。別の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、表３１に示されるヌクレオチド配列、またはそれに対して実質的に同一の配列（例えば、それに対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一であるか、もしくは表３１に示される配列から３個、６個、１５個、３０個、もしくは４５個以下のヌクレオチドが異なる配列を有する核酸によってコードされるＶＨおよび／またはＶＬドメインを含む。
[00557]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβＶ１２抗体分子は、
配列番号２３Ａ、配列番号２４Ａもしくは配列番号２５Ａのアミノ酸配列、配列番号２３Ａ、配列番号２４Ａもしくは配列番号２５Ａのアミノ酸配列に対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一であるアミノ酸配列、または配列番号２３Ａ、配列番号２４Ａもしくは配列番号２５Ａのアミノ酸配列と１、２、５、１０、もしくは１５個以下のアミノ酸残基が異なるアミノ酸配列から選択されるアミノ酸配列を含むＶＨドメイン；ならびに／または
配列番号２６Ａ、配列番号２７Ａ、配列番号２８Ａ、配列番号２９Ａもしくは配列番号３０Ａのアミノ酸配列、配列番号２６Ａ、配列番号２７Ａ、配列番号２８Ａ、配列番号２９Ａもしくは配列番号３０Ａのアミノ酸配列に対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一であるアミノ酸配列、または配列番号２６Ａ、配列番号２７Ａ、配列番号２８Ａ、配列番号２９Ａもしくは配列番号３０Ａのアミノ酸配列と１、２、５、１０、もしくは１５個以下のアミノ酸残基が異なるアミノ酸配列から選択されるアミノ酸配列を含むＶＬドメイン
を含む。
[00558]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβＶ１２抗体分子は、
配列番号２３Ａのアミノ酸配列、配列番号２３Ａのアミノ酸配列に対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一であるアミノ酸配列、または配列番号２３Ａのアミノ酸配列と１、２、５、１０、もしくは１５個以下のアミノ酸残基が異なるアミノ酸配列を含むＶＨドメイン；および
配列番号２６Ａのアミノ酸配列、配列番号２６Ａのアミノ酸配列に対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一であるアミノ酸配列、または配列番号２６Ａのアミノ酸配列と１、２、５、１０、もしくは１５個以下のアミノ酸残基が異なるアミノ酸配列を含むＶＬドメイン
を含む。
[00559]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβＶ１２抗体分子は、
配列番号２３Ａのアミノ酸配列、配列番号２３Ａのアミノ酸配列に対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一であるアミノ酸配列、または配列番号２３Ａのアミノ酸配列と１、２、５、１０、もしくは１５個以下のアミノ酸残基が異なるアミノ酸配列を含むＶＨドメイン；および
配列番号２７Ａのアミノ酸配列、配列番号２７Ａのアミノ酸配列に対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一であるアミノ酸配列、または配列番号２７Ａのアミノ酸配列と１、２、５、１０、もしくは１５個以下のアミノ酸残基が異なるアミノ酸配列を含むＶＬドメイン
を含む。
[00560]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、
配列番号２３Ａのアミノ酸配列、配列番号２３Ａのアミノ酸配列に対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一であるアミノ酸配列、または配列番号２３Ａのアミノ酸配列から１個、２個、５個、１０個、もしくは１５個以下のアミノ酸残基が異なるアミノ酸配列を含むＶＨドメイン、および
配列番号２８Ａのアミノ酸配列、配列番号２８Ａのアミノ酸配列に対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一であるアミノ酸配列、または配列番号２８Ａのアミノ酸配列から１個、２個、５個、１０個、もしくは１５個以下のアミノ酸残基が異なるアミノ酸配列を含むＶＬドメイン
を含む。
[00561]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、
配列番号２３Ａのアミノ酸配列、配列番号２３Ａのアミノ酸配列に対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一であるアミノ酸配列、または配列番号２３Ａのアミノ酸配列から１個、２個、５個、１０個、もしくは１５個以下のアミノ酸残基が異なるアミノ酸配列を含むＶＨドメイン、および
配列番号２９Ａのアミノ酸配列、配列番号２９Ａのアミノ酸配列に対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一であるアミノ酸配列、または配列番号２９Ａのアミノ酸配列から１個、２個、５個、１０個、もしくは１５個以下のアミノ酸残基が異なるアミノ酸配列を含むＶＬドメイン
を含む。
[00562]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、
配列番号２３Ａのアミノ酸配列、配列番号２３Ａのアミノ酸配列に対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一であるアミノ酸配列、または配列番号２３Ａのアミノ酸配列から１個、２個、５個、１０個、もしくは１５個以下のアミノ酸残基が異なるアミノ酸配列を含むＶＨドメイン、および
配列番号３０Ａのアミノ酸配列、配列番号３０Ａのアミノ酸配列に対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一であるアミノ酸配列、または配列番号３０Ａのアミノ酸配列から１個、２個、５個、１０個、もしくは１５個以下のアミノ酸残基が異なるアミノ酸配列を含むＶＬドメイン
を含む。
[00563]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、
配列番号２４Ａのアミノ酸配列、配列番号２４Ａのアミノ酸配列に対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一であるアミノ酸配列、または配列番号２４Ａのアミノ酸配列から１個、２個、５個、１０個、もしくは１５個以下のアミノ酸残基が異なるアミノ酸配列を含むＶＨドメイン、および
配列番号２６Ａのアミノ酸配列、配列番号２６Ａのアミノ酸配列に対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一であるアミノ酸配列、または配列番号２６Ａのアミノ酸配列から１個、２個、５個、１０個、もしくは１５個以下のアミノ酸残基が異なるアミノ酸配列を含むＶＬドメイン
を含む。
[00564]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、
配列番号２４Ａのアミノ酸配列、配列番号２４Ａのアミノ酸配列に対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一であるアミノ酸配列、または配列番号２４Ａのアミノ酸配列から１個、２個、５個、１０個、もしくは１５個以下のアミノ酸残基が異なるアミノ酸配列を含むＶＨドメイン、および
配列番号２７Ａのアミノ酸配列、配列番号２７Ａのアミノ酸配列に対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一であるアミノ酸配列、または配列番号２７Ａのアミノ酸配列から１個、２個、５個、１０個、もしくは１５個以下のアミノ酸残基が異なるアミノ酸配列を含むＶＬドメイン
を含む。
[00565]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、
配列番号２４Ａのアミノ酸配列、配列番号２４Ａのアミノ酸配列に対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一であるアミノ酸配列、または配列番号２４Ａのアミノ酸配列から１個、２個、５個、１０個、もしくは１５個以下のアミノ酸残基が異なるアミノ酸配列を含むＶＨドメイン、および
配列番号２８Ａのアミノ酸配列、配列番号２８Ａのアミノ酸配列に対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一であるアミノ酸配列、または配列番号２８Ａのアミノ酸配列から１個、２個、５個、１０個、もしくは１５個以下のアミノ酸残基が異なるアミノ酸配列を含むＶＬドメイン
を含む。
[00566]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、
配列番号２４Ａのアミノ酸配列、配列番号２４Ａのアミノ酸配列に対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一であるアミノ酸配列、または配列番号２４Ａのアミノ酸配列から１個、２個、５個、１０個、もしくは１５個以下のアミノ酸残基が異なるアミノ酸配列を含むＶＨドメイン、および
配列番号２９Ａのアミノ酸配列、配列番号２９Ａのアミノ酸配列に対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一であるアミノ酸配列、または配列番号２９Ａのアミノ酸配列から１個、２個、５個、１０個、もしくは１５個以下のアミノ酸残基が異なるアミノ酸配列を含むＶＬドメイン
を含む。
[00567]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、
配列番号２４Ａのアミノ酸配列、配列番号２４Ａのアミノ酸配列に対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一であるアミノ酸配列、または配列番号２４Ａのアミノ酸配列から１個、２個、５個、１０個、もしくは１５個以下のアミノ酸残基が異なるアミノ酸配列を含むＶＨドメイン、および
配列番号３０Ａのアミノ酸配列、配列番号３０Ａのアミノ酸配列に対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一であるアミノ酸配列、または配列番号３０Ａのアミノ酸配列から１個、２個、５個、１０個、もしくは１５個以下のアミノ酸残基が異なるアミノ酸配列を含むＶＬドメイン
を含む。
[00568]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、
配列番号２５Ａのアミノ酸配列、配列番号２５Ａのアミノ酸配列に対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一であるアミノ酸配列、または配列番号２５Ａのアミノ酸配列から１個、２個、５個、１０個、もしくは１５個以下のアミノ酸残基が異なるアミノ酸配列を含むＶＨドメイン、および
配列番号２６Ａのアミノ酸配列、配列番号２６Ａのアミノ酸配列に対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一であるアミノ酸配列、または配列番号２６Ａのアミノ酸配列から１個、２個、５個、１０個、もしくは１５個以下のアミノ酸残基が異なるアミノ酸配列を含むＶＬドメイン
を含む。
[00569]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、
配列番号２５Ａのアミノ酸配列、配列番号２５Ａのアミノ酸配列に対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一であるアミノ酸配列、または配列番号２５Ａのアミノ酸配列から１個、２個、５個、１０個、もしくは１５個以下のアミノ酸残基が異なるアミノ酸配列を含むＶＨドメイン、および
配列番号２７Ａのアミノ酸配列、配列番号２７Ａのアミノ酸配列に対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一であるアミノ酸配列、または配列番号２７Ａのアミノ酸配列から１個、２個、５個、１０個、もしくは１５個以下のアミノ酸残基が異なるアミノ酸配列を含むＶＬドメイン
を含む。
[00570]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、
配列番号２５Ａのアミノ酸配列、配列番号２５Ａのアミノ酸配列に対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一であるアミノ酸配列、または配列番号２５Ａのアミノ酸配列から１個、２個、５個、１０個、もしくは１５個以下のアミノ酸残基が異なるアミノ酸配列を含むＶＨドメイン、および
配列番号２８Ａのアミノ酸配列、配列番号２８Ａのアミノ酸配列に対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一であるアミノ酸配列、または配列番号２８Ａのアミノ酸配列から１個、２個、５個、１０個、もしくは１５個以下のアミノ酸残基が異なるアミノ酸配列を含むＶＬドメイン
を含む。
[00571]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、
配列番号２５Ａのアミノ酸配列、配列番号２５Ａのアミノ酸配列に対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一であるアミノ酸配列、または配列番号２５Ａのアミノ酸配列から１個、２個、５個、１０個、もしくは１５個以下のアミノ酸残基が異なるアミノ酸配列を含むＶＨドメイン、および
配列番号２９Ａのアミノ酸配列、配列番号２９Ａのアミノ酸配列に対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一であるアミノ酸配列、または配列番号２９Ａのアミノ酸配列から１個、２個、５個、１０個、もしくは１５個以下のアミノ酸残基が異なるアミノ酸配列を含むＶＬドメイン
を含む。
[00572]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、
配列番号２５Ａのアミノ酸配列、配列番号２５Ａのアミノ酸配列に対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一であるアミノ酸配列、または配列番号２５Ａのアミノ酸配列から１個、２個、５個、１０個、もしくは１５個以下のアミノ酸残基が異なるアミノ酸配列を含むＶＨドメイン、および
配列番号３０Ａのアミノ酸配列、配列番号３０Ａのアミノ酸配列に対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％もしくはそれ以上同一であるアミノ酸配列、または配列番号３０Ａのアミノ酸配列から１個、２個、５個、１０個、もしくは１５個以下のアミノ酸残基が異なるアミノ酸配列を含むＶＬドメイン
を含む。
[00573]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、全長抗体またはその断片（例えば、Ｆａｂ、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ、もしくは一本鎖Ｆｖ断片（ｓｃＦｖ））である。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６（例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ６－５＊０１）抗体分子は、モノクローナル抗体または単一の特異性を有する抗体である。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子はまた、ヒト化、キメラ、ラクダ、サメ、またはｉｎ ｖｉｔｒｏで生成された抗体分子であり得る。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子はヒト化抗体分子である。抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子の重鎖および軽鎖は、全長であり得（例えば、抗体は、少なくとも１つ、好ましくは２つの、完全重鎖、および少なくとも１つ、好ましくは２つの、完全軽鎖を含むことができる）、または抗原結合性断片（例えば、Ｆａｂ、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ、一本鎖Ｆｖ断片、単一ドメイン抗体、ダイアボディ（ｄＡｂ）、二価抗体、もしくは二特異性抗体もしくはその断片、その単一ドメインバリアント、もしくはラクダ抗体）を含むことができる。
[00574]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、例えば本明細書に記載される、多特異性分子、例えば、二特異性分子の形態である。
[00575]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＭ、ＩｇＡ１、ＩｇＡ２、ＩｇＤ、およびＩｇＥの重鎖定常領域から選択される重鎖定常領域（Ｆｃ）を有する。一部の実施形態では、Ｆｃ領域は、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、およびＩｇＧ４の重鎖定常領域から選択される。一部の実施形態では、Ｆｃ領域は、ＩｇＧ１またはＩｇＧ２（例えば、ヒトＩｇＧ１、またはＩｇＧ２）の重鎖定常領域から選択される。一部の実施形態では、重鎖定常領域はヒトＩｇＧ１である。
[00576]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子は、例えば、カッパまたはラムダ、好ましくはカッパ（例えば、ヒトカッパ）の軽鎖定常領域から選択される軽鎖定常領域を有する。一実施形態では、定常領域は、抗ＴＣＲβＶ抗体分子、例えば、抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体分子の特性を修飾するため（例えば、Ｆｃ受容体結合、抗体グリコシル化、システイン残基の数、エフェクター細胞機能、または補体機能のうちの１つまたは複数を増加または減少させるため）に変更、例えば、突然変異されている。例えば、定常領域は、Ｆｃ受容体結合を変更するために２９６位（ＭからＹへ）、２９８位（ＳからＴへ）、３００位（ＴからＥへ）、４７７位（ＨからＫへ）および４７８位（ＮからＦへ）において突然変異されている（例えば、突然変異した位置は、配列番号２１２Ａもしくは２１４Ａの１３２位（ＭからＹへ）、１３４位（ＳからＴへ）、１３６位（ＴからＥへ）、３１３位（ＨからＫへ）および３１４位（ＮからＦへ）、または配列番号２１５Ａ、２１６Ａ、２１７Ａもしくは２１８Ａの１３５位（ＭからＹへ）、１３７位（ＳからＴへ）、１３９位（ＴからＥへ）、３１６位（ＨからＫへ）および３１７位（ＮからＦへ）に対応する）。
[00577]抗体Ｂ－Ｈ．１は、配列番号３２８０Ａのアミノ酸配列を含む第１の鎖および配列番号３２８１Ａのアミノ酸配列を含む第２の鎖を含む。
[00578]本開示の追加の例示的な抗ＴＣＲβ Ｖ１２抗体が表３１において提供される。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβ Ｖ１２は、表３１において提供されるように、抗体Ｂ、例えば、ヒト化された抗体Ｂ（抗体Ｂ－Ｈ）である。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体は、表３１において提供されるＬＣ ＣＤＲ１、ＬＣ ＣＤＲ２、およびＬＣ ＣＤＲ３のうちの１つもしくは複数（例えば、３つすべて）、ならびに／もしくは表３１において提供されるＨＣ ＣＤＲ１、ＨＣ ＣＤＲ２、およびＨＣ ＣＤＲ３のうちの１つもしくは複数（例えば、３つすべて）、またはこれらに対して少なくとも９５％の同一性を有する配列を含む。一部の実施形態では、抗体Ｂは、表３１において提供される可変重鎖（ＶＨ）および／もしくは可変軽鎖（ＶＬ）、またはこれらに対して少なくとも９５％の同一性を有する配列を含む。
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 抗ＴＣＲβ Ｖ５抗体
[00579]よって、一態様では、本開示は、ヒトＴＣＲβ Ｖ５に結合する抗ＴＣＲβＶ抗体分子を提供する。一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ５サブファミリーは、ＴＣＲβ Ｖ５－５＊０１、ＴＣＲβ Ｖ５－６＊０１、ＴＣＲβ Ｖ５－４＊０１、ＴＣＲβ Ｖ５－８＊０１、ＴＣＲβ Ｖ５－１＊０１、またはそのバリアントを含む。
[00580]本開示の例示的な抗ＴＣＲβ Ｖ５抗体が表３３において提供される。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβ Ｖ５は、表３３において提供されるように、抗体Ｃ、例えば、ヒト化された抗体Ｃ（抗体Ｃ－Ｈ）である。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体は、表３３において提供されるＬＣ ＣＤＲ１、ＬＣ ＣＤＲ２、およびＬＣ ＣＤＲ３のうちの１つもしくは複数（例えば、３つすべて）、ならびに／もしくは表３３において提供されるＨＣ ＣＤＲ１、ＨＣ ＣＤＲ２、およびＨＣ ＣＤＲ３のうちの１つもしくは複数（例えば、３つすべて）、またはこれらに対して少なくとも９５％の同一性を有する配列を含む。一部の実施形態では、抗体Ｃは、表３３において提供される可変重鎖（ＶＨ）および／もしくは可変軽鎖（ＶＬ）、またはこれらに対して少なくとも９５％の同一性を有する配列を含む。
Figure 2023542080000070
Figure 2023542080000071
Figure 2023542080000072
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Figure 2023542080000078
Figure 2023542080000079
 [00581]本開示の例示的な抗ＴＣＲβ Ｖ５抗体が表１１において提供される。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβ Ｖ５は、表１１において提供されるように、抗体Ｅ、例えば、ヒト化された抗体Ｅ（抗体Ｅ－Ｈ）である。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体は、表１１において提供されるＬＣ ＣＤＲ１、ＬＣ ＣＤＲ２、およびＬＣ ＣＤＲ３のうちの１つもしくは複数（例えば、３つすべて）、ならびに／もしくは表１１において提供されるＨＣ ＣＤＲ１、ＨＣ ＣＤＲ２、およびＨＣ ＣＤＲ３のうちの１つもしくは複数（例えば、３つすべて）、またはこれらに対して少なくとも９５％の同一性を有する配列を含む。一部の実施形態では、抗体Ｅは、表１１において提供される可変重鎖（ＶＨ）および／もしくは可変軽鎖（ＶＬ）、またはこれらに対して少なくとも９５％の同一性を有する配列を含む。
[00582]一部の実施形態では、抗体Ｅは、配列番号３２８４Ａのアミノ酸配列を含む重鎖および／もしくは配列番号３２８５Ａのアミノ酸配列を含む軽鎖、またはこれらに対して少なくとも９５％の同一性を有する配列を含む。
Figure 2023542080000080
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 [00583]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβ Ｖ５抗体分子は、表３３に記載の抗体のＶＨおよび／もしくはＶＬ、またはそれに対して少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％もしくはより高い同一性を有する配列を含む。
[00584]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβ Ｖ５抗体分子は、表３３に記載の抗体のＶＨおよびＶＬ、またはそれに対して少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％もしくはより高い同一性を有する配列を含む。
[00585]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβ Ｖ５抗体分子は、表１１に記載の抗体のＶＨおよび／もしくはＶＬ、またはそれに対して少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％もしくはより高い同一性を有する配列を含む。
[00586]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβ Ｖ５抗体分子は、表１１に記載の抗体のＶＨおよびＶＬ、またはそれに対して少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％もしくはより高い同一性を有する配列を含む。
抗ＴＣＲβ Ｖ１０抗体
[00587]よって、一態様では、本開示は、ヒトＴＣＲβ Ｖ１０サブファミリーメンバーに結合する抗ＴＣＲβＶ抗体分子を提供する。一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ１０サブファミリーは、ＴＣＲβ Ｖ１２としても公知である。一部の実施形態では、ＴＣＲβ Ｖ１０サブファミリーは、ＴＣＲβ Ｖ１０－１＊０１、ＴＣＲβ Ｖ１０－１＊０２、ＴＣＲβ Ｖ１０－３＊０１もしくはＴＣＲβ Ｖ１０－２＊０１、またはそのバリアントを含む。
[00588]本開示の例示的な抗ＴＣＲβ Ｖ１０抗体が表１２において提供される。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβ Ｖ１０は、表１２において提供されるように、抗体Ｄ、例えば、ヒト化された抗体Ｄ（抗体Ｄ－Ｈ）である。一部の実施形態では、抗体Ｄは、表１２において提供される１つもしくは複数（例えば、３つ）の軽鎖ＣＤＲおよび／もしくは１つもしくは複数（例えば、３つ）の重鎖ＣＤＲ、またはこれらに対して少なくとも９５％の同一性を有する配列を含む。一部の実施形態では、抗体Ｄは、表１２において提供される可変重鎖（ＶＨ）および／もしくは可変軽鎖（ＶＬ）、またはこれらに対して少なくとも９５％の同一性を有する配列を含む。
Figure 2023542080000089
Figure 2023542080000090
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 [00589]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβ Ｖ１０抗体分子は、表１２に記載の抗体のＶＨもしくはＶＬ、またはそれに対して少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％もしくはより高い同一性を有する配列を含む。
[00590]一部の実施形態では、抗ＴＣＲβ Ｖ１０抗体分子は、表１２に記載の抗体のＶＨおよびＶＬ、またはそれに対して少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％もしくはより高い同一性を有する配列を含む。
追加の抗ＴＣＲＶβ抗体
[00591]本開示の追加の例示的な抗ＴＣＲβＶ抗体が表１３において提供される。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体は、例えば、表１３において提供されるように、ヒト化された抗体である。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体は、表１３において提供されるＬＣ ＣＤＲ１、ＬＣ ＣＤＲ２、およびＬＣ ＣＤＲ３のうちの１つもしくは複数（例えば、３つすべて）、ならびに／もしくは表１３において提供されるＨＣ ＣＤＲ１、ＨＣ ＣＤＲ２、およびＨＣ ＣＤＲ３のうちの１つもしくは複数（例えば、３つすべて）、またはこれらに対して少なくとも９５％の同一性を有する配列を含む。一部の実施形態では、抗ＴＣＲβＶ抗体は、表１３において提供される可変重鎖（ＶＨ）および／もしくは可変軽鎖（ＶＬ）、またはこれらに対して少なくとも９５％の同一性を有する配列を含む。
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Figure 2023542080000098
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 抗ＴＣＲＶβ抗体エフェクター機能およびＦｃバリアント
[00592]一部の実施形態では、本明細書に開示される抗ＴＣＲＶβ抗体は、例えば、本明細書に記載されるＦｃ領域を含む。一部の実施形態では、Ｆｃ領域は、野生型Ｆｃ領域、例えば、野生型ヒトＦｃ領域である。一部の実施形態では、Ｆｃ領域は、バリアント、例えば、Ｆｃ領域において少なくとも１個のアミノ酸残基の付加、置換または欠失を含むＦｃ領域を含み、これは、例えば、少なくとも１つのＦｃ受容体に対する親和性の低減または除去をもたらす。
[00593]抗体のＦｃ領域は、Ｆｃ受容体（例えば、ＦｃγＲＩ、ＦｃγＲＩＩＡ、ＦｃγＲＩＩＩＡ）、補体タンパク質ＣＩｑ、およびプロテインＡおよびＧなどの他の分子を含むいくつかの受容体またはリガンドと相互作用する。これらの相互作用は、抗体依存性細胞媒介性細胞傷害（ＡＤＣＣ）、抗体依存性細胞性ファゴサイトーシス（ＡＤＣＰ）および補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）を含む様々なエフェクター機能および下流シグナル伝達事象にとって必須である。
[00594]一部の実施形態では、バリアントＦｃ領域を含む抗ＴＣＲＶβ抗体は、Ｆｃ受容体、例えば、本明細書で記載されたＦｃ受容体に対する親和性を低減した、例えば、除去した。一部の実施形態では、低減した親和性が、野生型Ｆｃ領域を有するその他の点では同様の抗体と比較される。
[00595]一部の実施形態では、バリアントＦｃ領域を含む抗ＴＣＲＶβ抗体は、以下の特性のうちの１つまたは複数を有する：（１）エフェクター機能の低減（例えば、ＡＤＣＣ、ＡＤＣＰおよび／またはＣＤＣの低減）；（２）１つまたは複数のＦｃ受容体への結合の低減；および／または（３）Ｃ１ｑ補体への結合の低減。一部の実施形態では、特性（１）～（３）のうちの任意の１つまたはすべての低減は、野生型Ｆｃ領域を有するその他の点では同様の抗体と比較される。
[00596]一部の実施形態では、バリアントＦｃ領域を含む抗ＴＣＲＶβ抗体は、ヒトＦｃ受容体、例えば、ＦｃγＲＩ、ＦｃγＲＩＩおよび／またはＦｃγＲＩＩＩに対する親和性を低減した。一部の実施形態では、バリアントＦｃ領域を含む抗ＴＣＲＶβ抗体は、ヒトＩｇＧ１領域またはヒトＩｇＧ４領域を含む。
[00597]一部の実施形態では、バリアントＦｃ領域を含む抗ＴＣＲＶβ抗体は、例えば、本明細書に記載されるＴ細胞を活性化するおよび／または拡大する。一部の実施形態では、バリアントＦｃ領域を含む抗ＴＣＲＶβ抗体は、本明細書で記載されるサイトカインプロファイル、例えば、ＴＣＲβＶ領域以外の受容体または分子に結合するＴ細胞エンゲージャー（「非ＴＣＲβＶ結合性Ｔ細胞エンゲージャー」）のサイトカインプロファイルとは異なるサイトカインプロファイルを有する。一部の実施形態では、非ＴＣＲβＶ結合性Ｔ細胞エンゲージャーは、ＣＤ３分子（例えば、ＣＤ３イプシロン（ＣＤ３ｅ）分子）；またはＴＣＲアルファ（ＴＣＲα）分子に結合する抗体を含む。
[00598]例示的なＦｃ領域バリアントは、表１４で提供され、Ｓａｕｎｄｅｒｓ Ｏ、（２０１９） Ｆｒｏｎｔｉｅｒｓ ｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ；１０巻、論文１２９６（その内容全体はこれにより参照により本明細書に組み込まれる）に開示されている。
[00599]一部の実施形態では、本明細書に開示される抗ＴＣＲＶβ抗体は、Ｆｃ領域バリアント、例えば、表１４に開示される突然変異のうちの任意の１つもしくはすべて、または任意の組合せを含む。一部の実施形態では、本明細書に開示される抗ＴＣＲＶβ抗体は、Ａｓｎ２９７Ａｌａ（Ｎ２９７Ａ）突然変異を含む。一部の実施形態では、本明細書に開示される抗ＴＣＲＶβ抗体は、Ｌｅｕ２３４Ａｌａ／Ｌｅｕ２３５Ａｌａ（ＬＡＬＡ）突然変異を含む。
Figure 2023542080000110
 ナチュラルキラー細胞エンゲージャー
[00600]ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞は、抗体非依存性の方式で腫瘍およびウイルス感染細胞を認識および破壊する。ＮＫ細胞の調節は、ＮＫ細胞表面上の受容体を活性化および阻害することによって媒介される。活性化受容体の１つのファミリーは、ＮＫｐ３０、ＮＫｐ４４およびＮＫｐ４６を含む天然細胞傷害性受容体（ＮＣＲ）である。ＮＣＲは、がん細胞上のヘパラン硫酸の認識によって腫瘍標的化を開始させる。ＮＫＧ２Ｄは、活性化キラー（ＮＫ）細胞において刺激性および共刺激性の両方の自然免疫応答を提供する受容体であり、細胞傷害活性に繋がる。ＤＮＡＭ１は、細胞間接着、リンパ球シグナル伝達、細胞傷害性ならびに細胞傷害性Ｔリンパ球（ＣＴＬ）およびＮＫ細胞によって媒介されるリンホカイン分泌に関与する受容体である。ＤＡＰ１０（ＨＣＳＴとしても公知）は、リンパ球様および骨髄性細胞においてＫＬＲＫ１と会合して活性化受容体ＫＬＲＫ１－ＨＣＳＴを形成する膜貫通アダプタータンパク質であり、この受容体は、ＭＨＣクラスＩ鎖関連ＭＩＣＡおよびＭＩＣＢ、ならびにＵ（任意選択でＬ１）６結合性タンパク質（ＵＬＢＰ）などの細胞表面リガンドを発現する標的細胞に対する細胞傷害性の誘発において大きな役割を果たし、ＫＬＲＫ１－ＨＣＳＴ受容体は、腫瘍に対する免疫サーベイランスにおいて役割を果たし、腫瘍細胞の細胞溶解のために要求され、実際に、ＫＬＲＫ１リガンドを発現しない黒色腫細胞は、ＮＫ細胞によって媒介される免疫サーベイランスを免れる。ＣＤ１６は、ＩｇＧのＦｃ領域に対する受容体であり、複合体化または凝集ＩｇＧ、そして単量体ＩｇＧにも結合し、それによって、抗体依存性細胞傷害性（ＡＤＣＣ）およびファゴサイトーシスなどの他の抗体依存性応答を媒介する。
[00601]本開示は、特に、ＮＫ細胞への結合および／またはＮＫ細胞の活性化を媒介する１または複数のＮＫ細胞エンゲージャーを含むように操作された多特異性（例えば、二、三、四特異性）または多機能性分子を提供する。したがって、一部の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、ＮＫｐ３０、ＮＫｐ４０、ＮＫｐ４４、ＮＫｐ４６、ＮＫＧ２Ｄ、ＤＮＡＭ１、ＤＡＰ１０、ＣＤ１６（例えば、ＣＤ１６ａ、ＣＤ１６ｂ、または両方）、ＣＲＴＡＭ、ＣＤ２７、ＰＳＧＬ１、ＣＤ９６、ＣＤ１００（ＳＥＭＡ４Ｄ）、ＮＫｐ８０、ＣＤ２４４（ＳＬＡＭＦ４または２Ｂ４としても公知である）、ＳＬＡＭＦ６、ＳＬＡＭＦ７、ＫＩＲ２ＤＳ２、ＫＩＲ２ＤＳ４、ＫＩＲ３ＤＳ１、ＫＩＲ２ＤＳ３、ＫＩＲ２ＤＳ５、ＫＩＲ２ＤＳ１、ＣＤ９４、ＮＫＧ２Ｃ、ＮＫＧ２Ｅ、またはＣＤ１６０に結合する（例えば、活性化する）抗原結合性ドメインまたはリガンドから選択される。
[00602]一部の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、ＮＫｐ３０に結合する抗原結合性ドメイン（例えば、ＮＫ細胞の表面上に存在する、例えば、発現するかまたは提示されるＮＫｐ３０）であり、表７、８、３５、３６、９、１０、または３４に開示される任意のＣＤＲアミノ酸配列、フレームワーク領域（ＦＷＲ）アミノ酸配列、または可変領域アミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、ＮＫｐ３０に結合する抗原結合性ドメイン（例えば、ＮＫ細胞の表面上に存在する、例えば、発現するかまたは提示されるＮＫｐ３０）であり、米国特許第６，９７９，５４６号、米国特許第９，４４７，１８５号、ＰＣＴ出願公開第２０１５／１２１３８３Ａ１号、ＰＣＴ出願公開第２０１６／１１０４６８Ａ１号、ＰＣＴ出願公開第２００４／０５６３９２Ａ１号、または米国出願公開第２００７０２３１３２２Ａ１号に開示される任意のＣＤＲアミノ酸配列、フレームワーク領域（ＦＷＲ）アミノ酸配列、または可変領域アミノ酸配列を含み、それらの配列は参照により本明細書に組み込まれる。一部の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャー、例えば、ＮＫｐ３０に結合する抗原結合性ドメインの、ＮＫ細胞への結合は、ＮＫ細胞を活性化する。ＮＫｐ３０（例えば、ＮＫ細胞の表面上に存在する、例えば、発現するかまたは提示される、ＮＫｐ３０）に結合する抗原結合性ドメインは、ＮＫｐ３０、ＮＫ細胞、またはその両方を標的化すると言うことができる。
[00603]一部の実施形態では、ＮＫｐ３０に結合する抗原結合性ドメインは、表７、表３４、または表８に開示される１つまたは複数のＣＤＲ（例えば、ＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、ＶＨＣＤＲ３、ＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、および／またはＶＬＣＤＲ３）、またはそれと少なくとも８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の同一性を有する配列を含む。一部の実施形態では、ＮＫｐ３０に結合する抗原結合性ドメインは、表７、表３４、または表８に開示される１つまたは複数のフレームワーク領域（例えば、ＶＨＦＷＲ１、ＶＨＦＷＲ２、ＶＨＦＷＲ３、ＶＨＦＷＲ４、ＶＬＦＷＲ１、ＶＬＦＷＲ２、ＶＬＦＷＲ３、および／またはＶＬＦＷＲ４）、またはそれと少なくとも８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の同一性を有する配列を含む。
[00604]一部の実施形態ではＮＫＰ３０に結合する抗原結合性ドメインは、表３５および／もしくは表３６に開示される１つもしくは複数のＣＤＲ（例えば、ＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、ＶＨＣＤＲ３、ＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、および／またはＶＬＣＤＲ３）、またはそれに対して少なくとも８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の同一性を有する配列を含む。一部の実施形態では、ＮＫＰ３０に結合する抗原結合性ドメインは、表３５および／もしくは表３６に開示される１つもしくは複数のフレームワーク領域（例えば、ＶＨＦＷＲ１、ＶＨＦＷＲ２、ＶＨＦＷＲ３、ＶＨＦＷＲ４、ＶＬＦＷＲ１、ＶＬＦＷＲ２、ＶＬＦＷＲ３、および／またはＶＬＦＷＲ４）、またはそれに対して少なくとも８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の同一性を有する配列を含む。
[00605]一部の実施形態では、ＮＫｐ３０に結合する抗原結合性ドメインは、表９に開示されるＶＨおよび／もしくはＶＬ、またはそれと少なくとも８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の同一性を有する配列を含む。一部の実施形態では、表９に開示されるＶＨドメインのいずれかは、表９に開示されるＶＬドメインのいずれかと対を形成して、ＮＫｐ３０に結合する抗原結合性ドメインを形成することができる。一部の実施形態では、ＮＫｐ３０に結合する抗原結合性ドメインは、表１０に開示されるアミノ酸配列、またはそれと少なくとも８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の同一性を有する配列を含む。
[00606]一部の実施形態では、ＮＫｐ３０に結合する抗原結合性ドメインは、重鎖相補性決定領域１（ＶＨＣＤＲ１）、ＶＨＣＤＲ２、およびＶＨＣＤＲ３を含むＶＨ、ならびに軽鎖相補性決定領域１（ＶＬＣＤＲ１）、ＶＬＣＤＲ２、およびＶＬＣＤＲ３を含むＶＬを含む。
[00607]一部の実施形態では、ＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、およびＶＨＣＤＲ３は、それぞれ、配列番号７３１３、６００１、および７３１５のアミノ酸配列（またはそれと少なくとも８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の同一性を有する配列）を含む。一部の実施形態では、ＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、およびＶＨＣＤＲ３は、それぞれ、配列番号７３１３、６００１、および６００２のアミノ酸配列（またはそれと少なくとも８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の同一性を有する配列）を含む。一部の実施形態では、ＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、およびＶＨＣＤＲ３は、それぞれ、配列番号７３１３、６００８、および６００９のアミノ酸配列（またはそれと少なくとも８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の同一性を有する配列）を含む。一部の実施形態では、ＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、およびＶＨＣＤＲ３は、それぞれ、配列番号７３１３、７３８５、および７３１５のアミノ酸配列（またはそれと少なくとも８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の同一性を有する配列）を含む。一部の実施形態では、ＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、およびＶＨＣＤＲ３は、それぞれ、配列番号７３１３、７３１８、および６００９のアミノ酸配列（またはそれと少なくとも８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の同一性を有する配列）を含む。
[00608]一部の実施形態では、ＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、およびＶＬＣＤＲ３は、それぞれ、配列番号７３２６、７３２７、および７３２９のアミノ酸配列（またはそれと少なくとも８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の同一性を有する配列）を含む。一部の実施形態では、ＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、およびＶＬＣＤＲ３は、それぞれ、配列番号６０６３、６０６４、および７２９３のアミノ酸配列（またはそれと少なくとも８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の同一性を有する配列）を含む。一部の実施形態では、ＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、およびＶＬＣＤＲ３は、それぞれ、配列番号６０７０、６０７１、および６０７２のアミノ酸配列（またはそれと少なくとも８５％、９０％、９５％、もしくは９９％同一性を有する配列）を含む。一部の実施形態では、ＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、およびＶＬＣＤＲ３は、それぞれ、配列番号６０７０、６０６４、および７３２１のアミノ酸配列（またはそれと少なくとも８５％、９０％、９５％、もしくは９９％同一性を有する配列）を含む。
[00609]一部の実施形態では、ＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、ＶＨＣＤＲ３、ＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、およびＶＬＣＤＲ３は、それぞれ、配列番号７３１３、６００１、７３１５、７３２６、７３２７、および７３２９のアミノ酸配列（またはそれと少なくとも８５％、９０％、９５％、もしくは９９％同一性を有する配列）を含む。一部の実施形態では、ＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、ＶＨＣＤＲ３、ＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、およびＶＬＣＤＲ３は、それぞれ、配列番号７３１３、６００１、６００２、６０６３、６０６４、および７２９３のアミノ酸配列（またはそれと少なくとも８５％、９０％、９５％、もしくは９９％同一性を有する配列）を含む。一部の実施形態では、ＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、ＶＨＣＤＲ３、ＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、およびＶＬＣＤＲ３は、それぞれ、配列番号７３１３、６００８、６００９、６０７０、６０７１、および６０７２のアミノ酸配列（またはそれと少なくとも８５％、９０％、９５％、もしくは９９％同一性を有する配列）を含む。一部の実施形態では、ＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、ＶＨＣＤＲ３、ＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、およびＶＬＣＤＲ３は、それぞれ、配列番号７３１３、７３８５、７３１５、６０７０、６０６４、および７３２１のアミノ酸配列（またはそれと少なくとも８５％、９０％、９５％、もしくは９９％同一性を有する配列）を含む。一部の実施形態では、ＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、ＶＨＣＤＲ３、ＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、およびＶＬＣＤＲ３は、それぞれ、配列番号７３１３、７３１８、６００９、６０７０、６０６４、および７３２１のアミノ酸配列（またはそれと少なくとも８５％、９０％、９５％、もしくは９９％同一性を有する配列）を含む。
[00610]一部の実施形態では、ＶＨは、配列番号７２９８もしくは７３００～７３０４からなる群から選択されるアミノ酸配列（またはそれと少なくとも８５％、９０％、９５％、もしくは９９％同一性を有する配列）を含み、および／またはＶＬは、配列番号７２９９もしくは７３０５～７３０９からなる群から選択されるアミノ酸配列（またはそれと少なくとも８５％、９０％、９５％、もしくは９９％同一性を有する配列）を含む。一部の実施形態では、ＶＨおよびＶＬは、それぞれ、配列番号７３０２および７３０５のアミノ酸配列（またはそれと少なくとも８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の同一性を有する配列）を含む。一部の実施形態では、ＶＨおよびＶＬは、それぞれ、配列番号７３０２および７３０９のアミノ酸配列（またはそれと少なくとも８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の同一性を有する配列）を含む。
[00611]一部の実施形態では、ＶＨは、配列番号６１２１または６１２３～６１２８からなる群から選択されるアミノ酸配列（またはそれと少なくとも８５％、９０％、９５％、もしくは９９％同一性を有する配列）を含み、および／またはＶＬは、配列番号７２９４または６１３７～６１４１からなる群から選択されるアミノ酸配列（またはそれと少なくとも８５％、９０％、９５％、もしくは９９％同一性を有する配列）を含む。一部の実施形態では、ＶＨは、配列番号６１２２または６１２９～６１３４からなる群から選択されるアミノ酸配列（またはそれと少なくとも８５％、９０％、９５％、もしくは９９％同一性を有する配列）を含み、および／またはＶＬは、配列番号６１３６または６１４２～６１４７からなる群から選択されるアミノ酸配列（またはそれと少なくとも８５％、９０％、９５％、もしくは９９％同一性を有する配列）を含む。一部の実施形態では、ＶＨおよびＶＬは、それぞれ、配列番号７２９５および７２９６のアミノ酸配列（またはそれと少なくとも８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の同一性を有する配列）を含む。一部の実施形態では、ＶＨおよびＶＬは、それぞれ、配列番号７２９７および７２９６のアミノ酸配列（またはそれと少なくとも８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の同一性を有する配列）を含む。一部の実施形態では、ＶＨおよびＶＬは、それぞれ、配列番号６１２２および６１３６のアミノ酸配列（またはそれと少なくとも８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の同一性を有する配列）を含む。
[00612]一部の実施形態では、ＮＫｐ３０に結合する抗原結合性ドメインは、配列番号７３１０のアミノ酸配列（またはそれと少なくとも８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の同一性を有する配列）を含む。一部の実施形態では、ＮＫｐ３０に結合する抗原結合性ドメインは、配列番号７３１１のアミノ酸配列（またはそれと少なくとも８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の同一性を有する配列）を含む。一部の実施形態では、ＮＫｐ３０に結合する抗原結合性ドメインは、配列番号６１８７、６１８８、６１８９または６１９０のアミノ酸配列（またはそれと少なくとも８５％、９０％、９５％、もしくは９９％同一性を有する配列）を含む。
[00613]一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６０００の重鎖相補性決定領域１（ＶＨＣＤＲ１）アミノ酸配列（または１、２、３、もしくは４個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６００１のＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列（または１、２、３、もしくは４個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、および／または配列番号６００２のＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列（または１、２、３、もしくは４個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）を含むＶＨを含む。一部の実施形態では、ＮＫｐ３０抗原結合性ドメインは、配列番号６０００のＶＨＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号６００１のＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列、および／または配列番号６００２のＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列を含むＶＨを含む。
[00614]一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６０６３の軽鎖相補性決定領域１（ＶＬＣＤＲ１）アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号６０６４のＶＬＣＤＲ２アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号７２９３のＶＬＣＤＲ３アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的化する抗原結合性ドメインは、配列番号６０６３のＶＬＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号６０６４のＶＬＣＤＲ２アミノ酸配列、および配列番号７２９３のＶＬＣＤＲ３アミノ酸配列を含むＶＬを含む。
[00615]一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６０００の重鎖相補性決定領域１（ＶＨＣＤＲ１）アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号６００１のＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号６００２のＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を含むＶＨ、ならびに配列番号６０６３の軽鎖相補性決定領域１（ＶＬＣＤＲ１）アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号６０６４のＶＬＣＤＲ２アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号７２９３のＶＬＣＤＲ３アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、ＮＫｐ３０抗原結合性ドメインは、配列番号６０００のＶＨＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号６００１のＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列、および／または配列番号６００２のＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列を含むＶＨ、ならびに配列番号６０６３のＶＬＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号６０６４のＶＬＣＤＲ２アミノ酸配列、および配列番号７２９３のＶＬＣＤＲ３アミノ酸配列を含むＶＬを含む。
[00616]一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６００７の重鎖相補性決定領域１（ＶＨＣＤＲ１）アミノ酸配列（または１、２、３、もしくは４個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６００８のＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列（または１、２、３、もしくは４個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、および／または配列番号６００９のＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列（または１、２、３、もしくは４個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）を含むＶＨを含む。一部の実施形態では、ＮＫｐ３０抗原結合性ドメインは、配列番号６００７のＶＨＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号６００８のＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列、および／または配列番号６００９のＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列を含むＶＨを含む。
[00617]一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６０７０の軽鎖相補性決定領域１（ＶＬＣＤＲ１）アミノ酸配列（または１、２、３、もしくは４個以下の突然変異、例えば置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６０７１のＶＬＣＤＲ２アミノ酸配列（または１、２、３、もしくは４個以下の突然変異、例えば置換、付加、または欠失を有する配列）、および／または配列番号６０７２のＶＬＣＤＲ３アミノ酸配列（または１、２、３、もしくは４個以下の突然変異、例えば置換、付加、または欠失を有する配列）を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６０７０のＶＬＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号６０７１のＶＬＣＤＲ２アミノ酸配列、および配列番号６０７２のＶＬＣＤＲ３アミノ酸配列を含むＶＬを含む。
[00618]一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６００７の重鎖相補性決定領域１（ＶＨＣＤＲ１）アミノ酸配列（または１、２、３、もしくは４個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６００８のＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列（または１、２、３、もしくは４個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、および／または配列番号６００９のＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列（または１、２、３、もしくは４個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）を含むＶＨ、ならびに配列番号６０７０の軽鎖相補性決定領域１（ＶＬＣＤＲ１）アミノ酸配列（または１、２、３、もしくは４個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６０７１のＶＬＣＤＲ２アミノ酸配列（または１、２、３、もしくは４個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、および／または配列番号６０７２のＶＬＣＤＲ３アミノ酸配列（または１、２、３、もしくは４個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、ＮＫｐ３０抗原結合性ドメインは、配列番号６００７のＶＨＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号６００８のＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列、および／または配列番号６００９のＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列を含むＶＨ、ならびに配列番号６０７０のＶＬＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号６０７１のＶＬＣＤＲ２アミノ酸配列、および配列番号６０７２のＶＬＣＤＲ３アミノ酸配列を含むＶＬを含む。
[00619]一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６００３の重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６００４のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６００５のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列、および／または配列番号６００６のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＨを含む。
[00620]一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６０６６の軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６０６７のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号７２９２のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列、および／または配列番号６０６９のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＬを含む。
[00621]一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６００３の重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６００４のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６００５のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列、および／または配列番号６００６のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＨ、ならびに配列番号６０６６の軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６０６７のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号７２９２のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列、および／または配列番号６０６９のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＬを含む。
[00622]一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６００３のＶＨＦＷＲ１アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６００４のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６００５のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、もしくは１１個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、および／または配列番号６００６のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＨを含む。
[00623]一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６０６６のＶＬＦＷＲ１アミノ酸配列（または１つ、２つ、もしくは３つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号６０６７のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列（または１つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号７２９２のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列（または１つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号６０６９のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＬを含む。
[00624]一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６００３のＶＨＦＷＲ１アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号６００４のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号６００５のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列（または１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、もしくは１１個以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号６００６のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＨ、ならびに配列番号６０６６のＶＬＦＷＲ１アミノ酸配列（または１、２、もしくは３個以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号６０６７のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列（または１個以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号７２９２のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列（または１個以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号６０６９のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＬを含む。
[00625]一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６０１０の重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６０１１のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６０１２のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列、および／または配列番号６０１３のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＨを含む。
[00626]一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６０７３の軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６０７４のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６０７５のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列、および／または配列番号６０７６のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＬを含む。
[00627]一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６０１０の重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６０１１のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６０１２のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列、および／または配列番号６０１３のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＨ、ならびに配列番号６０７３の軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６０７４のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６０７５のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列、および／または配列番号６０７６のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＬを含む。
[00628]一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６０１０のＶＨＦＷＲ１アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６０１１のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６０１２のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列（または１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、もしくは１１個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、および／または配列番号６０１３のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＨを含む。
[00629]一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６０７３のＶＬＦＷＲ１アミノ酸配列（または１、２、もしくは３個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６０７４のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列（または１個以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号６０７５のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列（または、１個以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号６０７６のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＬを含む。
[00630]一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６０１０のＶＨＦＷＲ１アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６０１１のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６０１２のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列（または１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、もしく１１個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、および／または配列番号６０１３のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＨ、ならびに配列番号６０７３のＶＬＦＷＲ１アミノ酸配列（または１、２、もしくは３個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６０７４のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列（または１個以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号６０７５のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列（または１個以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号６０７６のＶＬＦＷＲ４のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。
[00631]一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６０１４の重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６０１５のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６０１６のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列、および／または配列番号６０１７のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＨを含む。
[00632]一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６０１４のＶＨＦＷＲ１アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６０１５のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６０１６のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列（または１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、もしくは１１個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、および／または配列番号６０１７のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＨを含む。
[00633]一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６０７７の軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６０７８のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６０７９のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列、および／または配列番号６０８０のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＬを含む。
[00634]一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６０７７のＶＬＦＷＲ１アミノ酸配列（または１、２、もしくは３個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６０７８のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列（または１個以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号６０７９のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列（または１個以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号６０８０のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＬを含む。
[00635]一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６０１８の重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６０１９のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６０２０のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列、および／または配列番号６０２１のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＨを含む。
[00636]一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６０１８のＶＨＦＷＲ１アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６０１９のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６０２０のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列（または１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、もしくは１１個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、および／または配列番号６０２１のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＨを含む。
[00637]一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６０８１の軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６０８２のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６０８３のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列、および／または配列番号６０８４のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＬを含む。
[00638]一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６０８１のＶＬＦＷＲ１アミノ酸配列（または１、２、もしくは３個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６０８２のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列（または１個以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号６０８３のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列（または１個以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号６０８４のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＬを含む。
[00639]一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６０２２の重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６０２３のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６０２４のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列、および／または配列番号６０２５のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＨを含む。
[00640]一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６０２２のＶＨＦＷＲ１アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６０２３のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６０２４のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列（または１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、もしくは１１個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、および／または配列番号６０２５のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＨを含む。
[00641]一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６０８５の軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６０８６のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６０８７のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列、および／または配列番号６０８８のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＬを含む。
[00642]一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６０８５のＶＬＦＷＲ１アミノ酸配列（または１、２、もしくは３個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６０８６のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列（または１個以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号６０８７のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列（または１個以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号６０８８のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＬを含む。
[00643]一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６０２６の重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６０２７のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６０２８のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列、および／または配列番号６０２９のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＨを含む。
[00644]一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６０２６のＶＨＦＷＲ１アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６０２７のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６０２８のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列（または１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、もしくは１１個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、および／または配列番号６０２９のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＨを含む。
[00645]一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６０８９の軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６０９０のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６０９１のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列、および／または配列番号６０９２のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＬを含む。
[00646]一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６０８９のＶＬＦＷＲ１アミノ酸配列（または１、２、もしくは３個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６０９０のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列（または１個以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号６０９１のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列（または１個以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号６０９２のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＬを含む。
[00647]一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６０３０の重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６０３２のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６０３３のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列、および／または配列番号６０３４のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＨを含む。
[00648]一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６０３０のＶＨＦＷＲ１アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６０３２のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６０３３のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列（または１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、もしくは１１個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、および／または配列番号６０３４のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＨを含む。
[00649]一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６０９３の軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６０９４のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６０９５のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列、および／または配列番号６０９６のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＬを含む。
[00650]一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６０９３のＶＬＦＷＲ１アミノ酸配列（または１、２、もしくは３個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６０９４のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列（または１個以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号６０９５のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列（または１個以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号６０９６のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＬを含む。
[00651]一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６０３５の重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６０３６のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６０３７のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列、および／または配列番号６０３８のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＨを含む。
[00652]一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６０３５のＶＨＦＷＲ１アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６０３６のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６０３７のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列（または１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、もしくは１１個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、および／または配列番号６０３８のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＨを含む。
[00653]一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６０３９の重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６０４０のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６０４１のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列、および／または配列番号６０４２のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＨを含む。
[00654]一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６０３９のＶＨＦＷＲ１アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６０４０のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６０４１のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列（または１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、もしくは１１個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、および／または配列番号６０４２のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＨを含む。
[00655]一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６０９７の軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６０９８のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６０９９のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列、および／または配列番号６１００のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＬを含む。
[00656]一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６０９７のＶＬＦＷＲ１アミノ酸配列（または１、２、もしくは３個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６０９８のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列（または１個以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号６０９９のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列（または１個以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号６１００のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＬを含む。
[00657]一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６０４３の重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６０４４のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６０４５のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列、および／または配列番号６０４６のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＨを含む。
[00658]一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６０４３のＶＨＦＷＲ１アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６０４４のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６０４５のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列（または１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、もしくは１１個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、および／または配列番号６０４６のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＨを含む。
[00659]一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６１０１の軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６１０２のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６１０３のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列、および／または配列番号６１０４のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＬを含む。
[00660]一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６１０１のＶＬＦＷＲ１アミノ酸配列（または１、２、もしくは３個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６１０２のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列（または１個以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号６１０３のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列（または１個以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号６１０４のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＬを含む。
[00661]一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６０４７の重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６０４８のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６０４９のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列、および／または配列番号６０５０のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＨを含む。
[00662]一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６０４７のＶＨＦＷＲ１アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６０４８のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６０４９のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列（または１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、もしくは１１個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、および／または配列番号６０５０のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＨを含む。
[00663]一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６１０５の軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６１０６のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６１０７のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列、および／または配列番号６１０８のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＬを含む。
[00664]一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６１０５のＶＬＦＷＲ１アミノ酸配列（または１、２、もしくは３個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６１０６のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列（または１個以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号６１０７のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列（または１個以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号６１０８のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＬを含む。
[00665]一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６０５１の重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６０５２のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６０５３のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列、および／または配列番号６０５４のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＨを含む。
[00666]一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６０５１のＶＨＦＷＲ１アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６０５２のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６０５３のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列（または１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、もしくは１１個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、および／または配列番号６０５４のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＨを含む。
[00667]一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６１０９の軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６１１０のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６１１１のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列、および／または配列番号６１１２のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＬを含む。
[00668]一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６１０９のＶＬＦＷＲ１アミノ酸配列（または１、２、もしくは３個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６１１０のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列（または１個以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号６１１１のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列（または１個以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号６１１２のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＬを含む。
[00669]
[00670]一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６０５５の重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６０５６のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６０５７のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列、および／または配列番号６０５８のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＨを含む。
[00671]一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６０５５のＶＨＦＷＲ１アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６０５６のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６０５７のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列（または１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、もしくは１１個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、および／または配列番号６０５８のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＨを含む。
[00672]一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６１１３の軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６１１４のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６１１５のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列、および／または配列番号６１１６のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＬを含む。
[00673]一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６１１３のＶＬＦＷＲ１アミノ酸配列（または１、２、もしくは３個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６１１４のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列（または１個以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号６１１５のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列（または１個以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号６１１６のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＬを含む。
[00674]一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６０５９の重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６０６０のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６０６１のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列、および／または配列番号６０６２のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＨを含む。
[00675]一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的とする抗原結合性ドメインは、配列番号６０５９のＶＨＦＷＲ１アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６０６０のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列（またはそれからの１、２、３、４、５、もしくは６個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、配列番号６０６１のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列（または１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、もしくは１１個以下の突然変異、例えば、置換、付加、または欠失を有する配列）、および／または配列番号６０６２のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＨを含む。
[00676]一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的化する抗原結合性ドメインは、配列番号６１１７の軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６１１８のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６１１９のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列、および／または配列番号６１２０のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＬを含む。
[00677]一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的化する抗原結合性ドメインは、配列番号６１１７のＶＬＦＷＲ１アミノ酸配列（もしくは１つ、２つ、もしくは３つだけの突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号６１１８のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列（もしくは１つだけの突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号６１１９のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列（もしくは１つだけの突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号６１２０のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＬを含む。
[00678]一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的化する抗原結合性ドメインは、配列番号６１４８のアミノ酸配列（または配列番号６１４８に対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨを含む。一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的化する抗原結合性ドメインは、配列番号６１４９のアミノ酸配列（または配列番号６１４９に対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨを含む。一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的化する抗原結合性ドメインは、配列番号６１５０のアミノ酸配列（または配列番号６１５０に対して少なくとも約９３％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的化する抗原結合性ドメインは、配列番号６１４８のアミノ酸配列を含むＶＨを含む。一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的化する抗原結合性ドメインは、配列番号６１４９のアミノ酸配列を含むＶＨを含む。一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的化する抗原結合性ドメインは、配列番号６１５０のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。
[00679]一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的化する抗原結合性ドメインは、配列番号６１４８のアミノ酸配列を含むＶＨ、および配列番号６１５０のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的化する抗原結合性ドメインは、配列番号６１４９のアミノ酸配列を含むＶＨ、および配列番号６１５０のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。
[00680]一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的化する抗原結合性ドメインは、配列番号６１５１のアミノ酸配列（または配列番号６１５１に対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨを含む。一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的化する抗原結合性ドメインは、配列番号６１５２のアミノ酸配列（または配列番号６１５２に対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨを含む。一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的化する抗原結合性ドメインは、配列番号６１５３のアミノ酸配列（または配列番号６１５３に対して少なくとも約９３％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的化する抗原結合性ドメインは、配列番号６１５１のアミノ酸配列を含むＶＨを含む。一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的化する抗原結合性ドメインは、配列番号６１５２のアミノ酸配列を含むＶＨを含む。一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的化する抗原結合性ドメインは、配列番号６１５３のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。
[00681]一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的化する抗原結合性ドメインは、配列番号６１５１のアミノ酸配列を含むＶＨ、および配列番号６１５３のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的化する抗原結合性ドメインは、配列番号６１５２のアミノ酸配列を含むＶＨ、および配列番号６１５３のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。
[00682]一部の実施形態では、ＮＫｐ３０を標的化する抗原結合性ドメインはｓｃＦｖを含む。一部の実施形態では、ｓｃＦｖは、配列番号：６１８７～６１９０から選択されるアミノ酸配列、またはそれに対して少なくとも約９３％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
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 [00683]一部の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、ＮＫｐ４６（例えば、ＮＫ細胞の表面上に存在する、例えば、発現または提示されるＮＫｐ４６）に結合する抗原結合性ドメインであり、表１５において開示される任意のＣＤＲアミノ酸配列、フレームワーク領域（ＦＷＲ）アミノ酸配列、または可変領域アミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、ＮＫ細胞へのＮＫ細胞エンゲージャー、例えば、ＮＫｐ４６に結合する抗原結合性ドメインの結合はＮＫ細胞を活性化させる。ＮＫｐ４６（例えば、ＮＫ細胞の表面上に存在する、例えば、発現または提示されるＮＫｐ４６）に結合する抗原結合性ドメインは、ＮＫｐ４６、ＮＫ細胞、または両方を標的化すると言及され得る。
[00684]一部の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、ＮＫＧ２Ｄ（例えば、ＮＫ細胞の表面上に存在する、例えば、発現または提示されるＮＫＧ２Ｄ）に結合する抗原結合性ドメインであり、表１５において開示される任意のＣＤＲアミノ酸配列、フレームワーク領域（ＦＷＲ）アミノ酸配列、または可変領域アミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、ＮＫ細胞へのＮＫ細胞エンゲージャー、例えば、ＮＫＧ２Ｄに結合する抗原結合性ドメインの結合はＮＫ細胞を活性化させる。ＮＫＧ２Ｄ（例えば、ＮＫ細胞の表面上に存在する、例えば、発現または提示されるＮＫＧ２Ｄ）に結合する抗原結合性ドメインは、ＮＫＧ２Ｄ、ＮＫ細胞、または両方を標的化すると言及され得る。
[00685]一部の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、ＣＤ１６（例えば、ＮＫ細胞の表面上に存在する、例えば、発現または提示されるＣＤ１６）に結合する抗原結合性ドメインであり、表１５において開示される任意のＣＤＲアミノ酸配列、フレームワーク領域（ＦＷＲ）アミノ酸配列、または可変領域アミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、ＮＫ細胞へのＮＫ細胞エンゲージャー、例えば、ＣＤ１６に結合する抗原結合性ドメインの結合はＮＫ細胞を活性化させる。ＣＤ１６（例えば、ＮＫ細胞の表面上に存在する、例えば、発現または提示されるＣＤ１６）に結合する抗原結合性ドメインは、ＣＤ１６、ＮＫ細胞、または両方を標的化すると言及され得る。
Figure 2023542080000131
Figure 2023542080000132
 [00686]一実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーはＮＫｐ３０のリガンドであり、例えば、Ｂ７－６であり、例えば、
[00687]ＤＬＫＶＥＭＭＡＧＧＴＱＩＴＰＬＮＤＮＶＴＩＦＣＮＩＦＹＳＱＰＬＮＩＴＳＭＧＩＴＷＦＷＫＳＬＴＦＤＫＥＶＫＶＦＥＦＦＧＤＨＱＥＡＦＲＰＧＡＩＶＳＰＷＲＬＫＳＧＤＡＳＬＲＬＰＧＩＱＬＥＥＡＧＥＹＲＣＥＶＶＶＴＰＬＫＡＱＧＴＶＱＬＥＶＶＡＳＰＡＳＲＬＬＬＤＱＶＧＭＫＥＮＥＤＫＹＭＣＥＳＳＧＦＹＰＥＡＩＮＩＴＷＥＫＱＴＱＫＦＰＨＰＩＥＩＳＥＤＶＩＴＧＰＴＩＫＮＭＤＧＴＦＮＶＴＳＣＬＫＬＮＳＳＱＥＤＰＧＴＶＹＱＣＶＶＲＨＡＳＬＨＴＰＬＲＳＮＦＴＬＴＡＡＲＨＳＬＳＥＴＥＫＴＤＮＦＳ（配列番号６１９８）のアミノ酸配列、その断片、またはそれに対して実質的に同一の（例えば、それに対して９５％～９９．９％同一、もしくは配列番号６１９８のアミノ酸配列に対して少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、５個、１０個もしくは１５個以下の変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有するアミノ酸配列を含む。
[00688]他の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、ウイルスＨＡである、ＮＫｐ４４またはＮＫｐ４６のリガンドである。ウイルスヘマグルチニン（ＨＡ）は、ウイルスの表面上にある糖タンパク質である。ＨＡタンパク質は、シアル酸糖部分を介してウイルスが細胞の膜に結合することを可能とし、これは細胞膜とのウイルス膜の融合に寄与する（例えば、Ｅｕｒ Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ． ２００１ Ｓｅｐ；３１（９）：２６８０～９ページ、「Ｒｅｃｏｇｎｉｔｉｏｎ ｏｆ ｖｉｒａｌ ｈｅｍａｇｇｌｕｔｉｎｉｎｓ ｂｙ ＮＫｐ４４ ｂｕｔ ｎｏｔ ｂｙ ＮＫｐ３０」；およびＮａｔｕｒｅ ２００１ Ｆｅｂ ２２；４０９（６８２３）：１０５５～６０ページ、「Ｒｅｃｏｇｎｉｔｉｏｎ ｏｆ ｈａｅｍａｇｇｌｕｔｉｎｉｎｓ ｏｎ ｖｉｒｕｓ－ｉｎｆｅｃｔｅｄ ｃｅｌｌｓ ｂｙ ＮＫｐ４６ ａｃｔｉｖａｔｅｓ ｌｙｓｉｓ ｂｙ ｈｕｍａｎ ＮＫ ｃｅｌｌｓ」（これらのそれぞれの内容はこれにより参照により本明細書に組み込まれる）を参照）。
[00689]他の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、ＭＩＣＡ、ＭＩＣＢ、またはＵＬＢＰ１から選択されるＮＫＧ２Ｄのリガンドであり、例えば、
（ｉ）ＭＩＣＡは、
ＥＰＨＳＬＲＹＮＬＴＶＬＳＷＤＧＳＶＱＳＧＦＬＴＥＶＨＬＤＧＱＰＦＬＲＣＤＲＱＫＣＲＡＫＰＱＧＱＷＡＥＤＶＬＧＮＫＴＷＤＲＥＴＲＤＬＴＧＮＧＫＤＬＲＭＴＬＡＨＩＫＤＱＫＥＧＬＨＳＬＱＥＩＲＶＣＥＩＨＥＤＮＳＴＲＳＳＱＨＦＹＹＤＧＥＬＦＬＳＱＮＬＥＴＫＥＷＴＭＰＱＳＳＲＡＱＴＬＡＭＮＶＲＮＦＬＫＥＤＡＭＫＴＫＴＨＹＨＡＭＨＡＤＣＬＱＥＬＲＲＹＬＫＳＧＶＶＬＲＲＴＶＰＰＭＶＮＶＴＲＳＥＡＳＥＧＮＩＴＶＴＣＲＡＳＧＦＹＰＷＮＩＴＬＳＷＲＱＤＧＶＳＬＳＨＤＴＱＱＷＧＤＶＬＰＤＧＮＧＴＹＱＴＷＶＡＴＲＩＣＱＧＥＥＱＲＦＴＣＹＭＥＨＳＧＮＨＳＴＨＰＶＰＳＧＫＶＬＶＬＱＳＨＷ（配列番号６１９９）のアミノ酸配列、その断片、もしくはそれに対して実質的に同一の（例えば、それに対して９５％～９９．９％同一、もしくは配列番号６１９９のアミノ酸配列に対して少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、５個、１０個もしくは１５個以下の変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有するアミノ酸配列
を含み、
（ｉｉ）ＭＩＣＢは、
ＡＥＰＨＳＬＲＹＮＬＭＶＬＳＱＤＥＳＶＱＳＧＦＬＡＥＧＨＬＤＧＱＰＦＬＲＹＤＲＱＫＲＲＡＫＰＱＧＱＷＡＥＤＶＬＧＡＫＴＷＤＴＥＴＥＤＬＴＥＮＧＱＤＬＲＲＴＬＴＨＩＫＤＱＫＧＧＬＨＳＬＱＥＩＲＶＣＥＩＨＥＤＳＳＴＲＧＳＲＨＦＹＹＤＧＥＬＦＬＳＱＮＬＥＴＱＥＳＴＶＰＱＳＳＲＡＱＴＬＡＭＮＶＴＮＦＷＫＥＤＡＭＫＴＫＴＨＹＲＡＭＱＡＤＣＬＱＫＬＱＲＹＬＫＳＧＶＡＩＲＲＴＶＰＰＭＶＮＶＴＣＳＥＶＳＥＧＮＩＴＶＴＣＲＡＳＳＦＹＰＲＮＩＴＬＴＷＲＱＤＧＶＳＬＳＨＮＴＱＱＷＧＤＶＬＰＤＧＮＧＴＹＱＴＷＶＡＴＲＩＲＱＧＥＥＱＲＦＴＣＹＭＥＨＳＧＮＨＧＴＨＰＶＰＳＧＫＶＬＶＬＱＳＱＲＴＤ（配列番号６２００）のアミノ酸配列、その断片、もしくはそれに対して実質的に同一の（例えば、それに対して９５％～９９．９％同一、もしくは配列番号６２００のアミノ酸配列に対して少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、５個、１０個もしくは１５個以下の変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有するアミノ酸配列
を含み、または
（ｉｉｉ）ＵＬＢＰ１は、
ＧＷＶＤＴＨＣＬＣＹＤＦＩＩＴＰＫＳＲＰＥＰＱＷＣＥＶＱＧＬＶＤＥＲＰＦＬＨＹＤＣＶＮＨＫＡＫＡＦＡＳＬＧＫＫＶＮＶＴＫＴＷＥＥＱＴＥＴＬＲＤＶＶＤＦＬＫＧＱＬＬＤＩＱＶＥＮＬＩＰＩＥＰＬＴＬＱＡＲＭＳＣＥＨＥＡＨＧＨＧＲＧＳＷＱＦＬＦＮＧＱＫＦＬＬＦＤＳＮＮＲＫＷＴＡＬＨＰＧＡＫＫＭＴＥＫＷＥＫＮＲＤＶＴＭＦＦＱＫＩＳＬＧＤＣＫＭＷＬＥＥＦＬＭＹＷＥＱＭＬＤＰＴＫＰＰＳＬＡＰＧ（配列番号６２０１）のアミノ酸配列、その断片、もしくはそれに対して実質的に同一の（例えば、それに対して９５％～９９．９％同一、もしくは配列番号６２０１のアミノ酸配列に対して少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、５個、１０個もしくは１５個以下の変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有するアミノ酸配列
を含む。
[00690]他の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、ＮＥＣＴＩＮ２またはＮＥＣＬ５から選択されるＤＮＡＭ１のリガンドであり、例えば、
（ｉ）ＮＥＣＴＩＮ２は、
ＱＤＶＲＶＱＶＬＰＥＶＲＧＱＬＧＧＴＶＥＬＰＣＨＬＬＰＰＶＰＧＬＹＩＳＬＶＴＷＱＲＰＤＡＰＡＮＨＱＮＶＡＡＦＨＰＫＭＧＰＳＦＰＳＰＫＰＧＳＥＲＬＳＦＶＳＡＫＱＳＴＧＱＤＴＥＡＥＬＱＤＡＴＬＡＬＨＧＬＴＶＥＤＥＧＮＹＴＣＥＦＡＴＦＰＫＧＳＶＲＧＭＴＷＬＲＶＩＡＫＰＫＮＱＡＥＡＱＫＶＴＦＳＱＤＰＴＴＶＡＬＣＩＳＫＥＧＲＰＰＡＲＩＳＷＬＳＳＬＤＷＥＡＫＥＴＱＶＳＧＴＬＡＧＴＶＴＶＴＳＲＦＴＬＶＰＳＧＲＡＤＧＶＴＶＴＣＫＶＥＨＥＳＦＥＥＰＡＬＩＰＶＴＬＳＶＲＹＰＰＥＶＳＩＳＧＹＤＤＮＷＹＬＧＲＴＤＡＴＬＳＣＤＶＲＳＮＰＥＰＴＧＹＤＷＳＴＴＳＧＴＦＰＴＳＡＶＡＱＧＳＱＬＶＩＨＡＶＤＳＬＦＮＴＴＦＶＣＴＶＴＮＡＶＧＭＧＲＡＥＱＶＩＦＶＲＥＴＰＮＴＡＧＡＧＡＴＧＧ（配列番号６２０２）のアミノ酸配列、その断片、もしくはそれに対して実質的に同一の（例えば、それに対して９５％～９９．９％同一、もしくは配列番号６２０２のアミノ酸配列に対して少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、５個、１０個もしくは１５個以下の変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有するアミノ酸配列を含み、または
（ｉｉ）ＮＥＣＬ５は、
ＷＰＰＰＧＴＧＤＶＶＶＱＡＰＴＱＶＰＧＦＬＧＤＳＶＴＬＰＣＹＬＱＶＰＮＭＥＶＴＨＶＳＱＬＴＷＡＲＨＧＥＳＧＳＭＡＶＦＨＱＴＱＧＰＳＹＳＥＳＫＲＬＥＦＶＡＡＲＬＧＡＥＬＲＮＡＳＬＲＭＦＧＬＲＶＥＤＥＧＮＹＴＣＬＦＶＴＦＰＱＧＳＲＳＶＤＩＷＬＲＶＬＡＫＰＱＮＴＡＥＶＱＫＶＱＬＴＧＥＰＶＰＭＡＲＣＶＳＴＧＧＲＰＰＡＱＩＴＷＨＳＤＬＧＧＭＰＮＴＳＱＶＰＧＦＬＳＧＴＶＴＶＴＳＬＷＩＬＶＰＳＳＱＶＤＧＫＮＶＴＣＫＶＥＨＥＳＦＥＫＰＱＬＬＴＶＮＬＴＶＹＹＰＰＥＶＳＩＳＧＹＤＮＮＷＹＬＧＱＮＥＡＴＬＴＣＤＡＲＳＮＰＥＰＴＧＹＮＷＳＴＴＭＧＰＬＰＰＦＡＶＡＱＧＡＱＬＬＩＲＰＶＤＫＰＩＮＴＴＬＩＣＮＶＴＮＡＬＧＡＲＱＡＥＬＴＶＱＶＫＥＧＰＰＳＥＨＳＧＩＳＲＮ（配列番号６２０３）のアミノ酸配列、その断片、もしくはそれに対して実質的に同一の（例えば、それに対して９５％～９９．９％同一、もしくは配列番号６２０３のアミノ酸配列に対して少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、５個、１０個もしくは１５個以下の変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有するアミノ酸配列を含む。
[00691]さらに他の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、ＮＫＧ２Ｄのアダプターである、ＤＡＰ１０のリガンドである（例えば、Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ Ｕ Ｓ Ａ． ２００５ Ｍａｙ ２４；１０２（２１）：７６４１～７６４６ページ；およびＢｌｏｏｄ、１５ Ｓｅｐｔｅｍｂｅｒ ２０１１ Ｖｏｌｕｍｅ １１８、Ｎｕｍｂｅｒ １１（これらのそれぞれの全内容はこれにより参照により本明細書に組み込まれる）を参照）。
[00692]他の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、ＣＤ１６ａ／ｂリガンドである、ＣＤ１６のリガンド、例えば、抗体Ｆｃ領域をさらに含むＣＤ１６ａ／ｂリガンドである（例えば、Ｆｒｏｎｔ Ｉｍｍｕｎｏｌ． ２０１３；４：７６を参照；これは、ＣＤ１６を通じてＮＫ細胞を誘発するために抗体がＦｃをどのように使用するのかを議論しており、その内容の全体は本明細書に組み込まれる）。
[00693]他の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、ＮＥＣＬ２である、ＣＲＴＡＭのリガンドであり、例えば、ＮＥＣＬ２は、アミノ酸配列：
ＱＮＬＦＴＫＤＶＴＶＩＥＧＥＶＡＴＩＳＣＱＶＮＫＳＤＤＳＶＩＱＬＬＮＰＮＲＱＴＩＹＦＲＤＦＲＰＬＫＤＳＲＦＱＬＬＮＦＳＳＳＥＬＫＶＳＬＴＮＶＳＩＳＤＥＧＲＹＦＣＱＬＹＴＤＰＰＱＥＳＹＴＴＩＴＶＬＶＰＰＲＮＬＭＩＤＩＱＫＤＴＡＶＥＧＥＥＩＥＶＮＣＴＡＭＡＳＫＰＡＴＴＩＲＷＦＫＧＮＴＥＬＫＧＫＳＥＶＥＥＷＳＤＭＹＴＶＴＳＱＬＭＬＫＶＨＫＥＤＤＧＶＰＶＩＣＱＶＥＨＰＡＶＴＧＮＬＱＴＱＲＹＬＥＶＱＹＫＰＱＶＨＩＱＭＴＹＰＬＱＧＬＴＲＥＧＤＡＬＥＬＴＣＥＡＩＧＫＰＱＰＶＭＶＴＷＶＲＶＤＤＥＭＰＱＨＡＶＬＳＧＰＮＬＦＩＮＮＬＮＫＴＤＮＧＴＹＲＣＥＡＳＮＩＶＧＫＡＨＳＤＹＭＬＹＶＹＤＰＰＴＴＩＰＰＰＴＴＴＴＴＴＴＴＴＴＴＴＴＩＬＴＩＩＴＤＳＲＡＧＥＥＧＳＩＲＡＶＤＨ（配列番号６２０４）、その断片、またはそれに対して実質的に同一の（例えば、それに対して９５％～９９．９％同一、もしくは配列番号６２０４のアミノ酸配列に対して少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、５個、１０個もしくは１５個以下の変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有するアミノ酸配列を含む。
[00694]他の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、ＣＤ７０である、ＣＤ２７のリガンドであり、例えば、ＣＤ７０は、アミノ酸配列：
ＱＲＦＡＱＡＱＱＱＬＰＬＥＳＬＧＷＤＶＡＥＬＱＬＮＨＴＧＰＱＱＤＰＲＬＹＷＱＧＧＰＡＬＧＲＳＦＬＨＧＰＥＬＤＫＧＱＬＲＩＨＲＤＧＩＹＭＶＨＩＱＶＴＬＡＩＣＳＳＴＴＡＳＲＨＨＰＴＴＬＡＶＧＩＣＳＰＡＳＲＳＩＳＬＬＲＬＳＦＨＱＧＣＴＩＡＳＱＲＬＴＰＬＡＲＧＤＴＬＣＴＮＬＴＧＴＬＬＰＳＲＮＴＤＥＴＦＦＧＶＱＷＶＲＰ（配列番号６２０５）、その断片、またはそれに対して実質的に同一の（例えば、それに対して９５％～９９．９％同一、もしくは配列番号６２０５のアミノ酸配列に対して少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、５個、１０個もしくは１５個以下の変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有するアミノ酸配列を含む。
[00695]他の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、Ｌ－セレクチン（ＣＤ６２Ｌ）である、ＰＳＧＬ１のリガンドであり、例えば、Ｌ－セレクチンは、アミノ酸配列：
ＷＴＹＨＹＳＥＫＰＭＮＷＱＲＡＲＲＦＣＲＤＮＹＴＤＬＶＡＩＱＮＫＡＥＩＥＹＬＥＫＴＬＰＦＳＲＳＹＹＷＩＧＩＲＫＩＧＧＩＷＴＷＶＧＴＮＫＳＬＴＥＥＡＥＮＷＧＤＧＥＰＮＮＫＫＮＫＥＤＣＶＥＩＹＩＫＲＮＫＤＡＧＫＷＮＤＤＡＣＨＫＬＫＡＡＬＣＹＴＡＳＣＱＰＷＳＣＳＧＨＧＥＣＶＥＩＩＮＮＹＴＣＮＣＤＶＧＹＹＧＰＱＣＱＦＶＩＱＣＥＰＬＥＡＰＥＬＧＴＭＤＣＴＨＰＬＧＮＦＳＦＳＳＱＣＡＦＳＣＳＥＧＴＮＬＴＧＩＥＥＴＴＣＧＰＦＧＮＷＳＳＰＥＰＴＣＱＶＩＱＣＥＰＬＳＡＰＤＬＧＩＭＮＣＳＨＰＬＡＳＦＳＦＴＳＡＣＴＦＩＣＳＥＧＴＥＬＩＧＫＫＫＴＩＣＥＳＳＧＩＷＳＮＰＳＰＩＣＱＫＬＤＫＳＦＳＭＩＫＥＧＤＹＮ（配列番号６２０６）、その断片、またはそれに対して実質的に同一の（例えば、それに対して９５％～９９．９％同一、もしくは配列番号６２０６のアミノ酸配列に対して少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、５個、１０個もしくは１５個以下の変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有するアミノ酸配列を含む。
[00696]他の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、ＮＥＣＬ５である、ＣＤ９６のリガンドであり、例えば、ＮＥＣＬ５は、アミノ酸配列：
ＷＰＰＰＧＴＧＤＶＶＶＱＡＰＴＱＶＰＧＦＬＧＤＳＶＴＬＰＣＹＬＱＶＰＮＭＥＶＴＨＶＳＱＬＴＷＡＲＨＧＥＳＧＳＭＡＶＦＨＱＴＱＧＰＳＹＳＥＳＫＲＬＥＦＶＡＡＲＬＧＡＥＬＲＮＡＳＬＲＭＦＧＬＲＶＥＤＥＧＮＹＴＣＬＦＶＴＦＰＱＧＳＲＳＶＤＩＷＬＲＶＬＡＫＰＱＮＴＡＥＶＱＫＶＱＬＴＧＥＰＶＰＭＡＲＣＶＳＴＧＧＲＰＰＡＱＩＴＷＨＳＤＬＧＧＭＰＮＴＳＱＶＰＧＦＬＳＧＴＶＴＶＴＳＬＷＩＬＶＰＳＳＱＶＤＧＫＮＶＴＣＫＶＥＨＥＳＦＥＫＰＱＬＬＴＶＮＬＴＶＹＹＰＰＥＶＳＩＳＧＹＤＮＮＷＹＬＧＱＮＥＡＴＬＴＣＤＡＲＳＮＰＥＰＴＧＹＮＷＳＴＴＭＧＰＬＰＰＦＡＶＡＱＧＡＱＬＬＩＲＰＶＤＫＰＩＮＴＴＬＩＣＮＶＴＮＡＬＧＡＲＱＡＥＬＴＶＱＶＫＥＧＰＰＳＥＨＳＧＩＳＲＮ（配列番号６２０３）、その断片、またはそれに対して実質的に同一の（例えば、それに対して９５％～９９．９％同一、もしくは配列番号６２０３もしくは６２０４のアミノ酸配列に対して少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、５個、１０個もしくは１５個以下の変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有するアミノ酸配列を含む。
[00697]他の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、ＣＤ７２である、ＣＤ１００（ＳＥＭＡ４Ｄ）のリガンドであり、例えば、ＣＤ７２は、アミノ酸配列：
ＲＹＬＱＶＳＱＱＬＱＱＴＮＲＶＬＥＶＴＮＳＳＬＲＱＱＬＲＬＫＩＴＱＬＧＱＳＡＥＤＬＱＧＳＲＲＥＬＡＱＳＱＥＡＬＱＶＥＱＲＡＨＱＡＡＥＧＱＬＱＡＣＱＡＤＲＱＫＴＫＥＴＬＱＳＥＥＱＱＲＲＡＬＥＱＫＬＳＮＭＥＮＲＬＫＰＦＦＴＣＧＳＡＤＴＣＣＰＳＧＷＩＭＨＱＫＳＣＦＹＩＳＬＴＳＫＮＷＱＥＳＱＫＱＣＥＴＬＳＳＫＬＡＴＦＳＥＩＹＰＱＳＨＳＹＹＦＬＮＳＬＬＰＮＧＧＳＧＮＳＹＷＴＧＬＳＳＮＫＤＷＫＬＴＤＤＴＱＲＴＲＴＹＡＱＳＳＫＣＮＫＶＨＫＴＷＳＷＷＴＬＥＳＥＳＣＲＳＳＬＰＹＩＣＥＭＴＡＦＲＦＰＤ（配列番号６２０７）、その断片、またはそれに対して実質的に同一の（例えば、それに対して９５％～９９．９％同一、もしくは配列番号６２０７のアミノ酸配列に対して少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、５個、１０個もしくは１５個以下の変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有するアミノ酸配列を含む。
[00698]他の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、ＣＬＥＣ２Ｂ（ＡＩＣＬ）である、ＮＫｐ８０のリガンドであり、例えば、ＣＬＥＣ２Ｂ（ＡＩＣＬ）は、アミノ酸配列：
ＫＬＴＲＤＳＱＳＬＣＰＹＤＷＩＧＦＱＮＫＣＹＹＦＳＫＥＥＧＤＷＮＳＳＫＹＮＣＳＴＱＨＡＤＬＴＩＩＤＮＩＥＥＭＮＦＬＲＲＹＫＣＳＳＤＨＷＩＧＬＫＭＡＫＮＲＴＧＱＷＶＤＧＡＴＦＴＫＳＦＧＭＲＧＳＥＧＣＡＹＬＳＤＤＧＡＡＴＡＲＣＹＴＥＲＫＷＩＣＲＫＲＩＨ（配列番号６２０８）、その断片、またはそれに対して実質的に同一の（例えば、それに対して９５％～９９．９％同一、もしくは配列番号６２０８のアミノ酸配列に対して少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、５個、１０個もしくは１５個以下の変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有するアミノ酸配列を含む。
[00699]他の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、ＣＤ４８である、ＣＤ２４４のリガンドであり、例えば、ＣＤ４８は、アミノ酸配列：
ＱＧＨＬＶＨＭＴＶＶＳＧＳＮＶＴＬＮＩＳＥＳＬＰＥＮＹＫＱＬＴＷＦＹＴＦＤＱＫＩＶＥＷＤＳＲＫＳＫＹＦＥＳＫＦＫＧＲＶＲＬＤＰＱＳＧＡＬＹＩＳＫＶＱＫＥＤＮＳＴＹＩＭＲＶＬＫＫＴＧＮＥＱＥＷＫＩＫＬＱＶＬＤＰＶＰＫＰＶＩＫＩＥＫＩＥＤＭＤＤＮＣＹＬＫＬＳＣＶＩＰＧＥＳＶＮＹＴＷＹＧＤＫＲＰＦＰＫＥＬＱＮＳＶＬＥＴＴＬＭＰＨＮＹＳＲＣＹＴＣＱＶＳＮＳＶＳＳＫＮＧＴＶＣＬＳＰＰＣＴＬＡＲＳ（配列番号６２０９）、その断片、またはそれに対して実質的に同一の（例えば、それに対して９５％～９９．９％同一、もしくは配列番号６２０９のアミノ酸配列に対して少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、５個、１０個もしくは１５個以下の変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有するアミノ酸配列を含む。
[00700]一部の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーはウイルスヘマグルチニン（ＨＡ）であり、ＨＡは、インフルエンザウイルスの表面上に見出される糖タンパク質である。それは、上気道中の細胞または赤血球などの膜上にシアル酸を有する細胞へのウイルスの結合の原因となる。ＨＡは、少なくとも１８の異なる抗原を有する。これらのサブタイプは、Ｈ１～Ｈ１８と命名されている。ＮＣＲはウイルスタンパク質を認識することができる。ＮＫｐ４６は、インフルエンザのＨＡならびにセンダイウイルスおよびニューカッスル病ウイルスを含むパラミクソウイルスのＨＡ－ＮＡと相互作用できることが示されている。ＮＫｐ４６の他に、ＮＫｐ４４もまた、異なるインフルエンザサブタイプのＨＡと機能的に相互作用することができる。
[00701]本明細書で記載される多機能性分子のいずれかの一部の実施形態では、免疫細胞エンゲージャーは、ＮＫ細胞エンゲージャー、例えば、ＮＫ細胞への結合およびその活性化を媒介するＮＫ細胞エンゲージャーまたはＮＫ細胞への結合を媒介するが、その活性化を媒介しないＮＫ細胞エンゲージャーである。ある特定の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、ＮＫｐ３０、ＮＫｐ４０、ＮＫｐ４４、ＮＫｐ４６、ＮＫＧ２Ｄ、ＤＮＡＭ１、ＤＡＰ１０、ＣＤ１６（例えば、ＣＤ１６ａ、ＣＤ１６ｂ、または両方）、ＣＲＴＡＭ、ＣＤ２７、ＰＳＧＬ１、ＣＤ９６、ＣＤ１００（ＳＥＭＡ４Ｄ）、ＮＫｐ８０、ＣＤ２４４（ＳＬＡＭＦ４もしくは２Ｂ４としても公知）、ＳＬＡＭＦ６、ＳＬＡＭＦ７、ＫＩＲ２ＤＳ２、ＫＩＲ２ＤＳ４、ＫＩＲ３ＤＳ１、ＫＩＲ２ＤＳ３、ＫＩＲ２ＤＳ５、ＫＩＲ２ＤＳ１、ＣＤ９４、ＮＫＧ２Ｃ、ＮＫＧ２Ｅ、またはＣＤ１６０に結合する（例えば、それを活性化させる）、抗体分子、例えば、抗原結合性ドメイン、またはリガンドから選択され、例えば、ＮＫ細胞エンゲージャーは、ＮＫｐ３０に結合する（例えば、それを活性化させる）抗体分子またはリガンドである。ある特定の一部の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、抗体分子、例えば、抗原結合性ドメインである。
[00702]一部の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、ＮＫ細胞をエンゲージできる。
[00703]一部の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、ＮＫｐ３０、ＮＫｐ４６、ＮＫＧ２Ｄ、またはＣＤ１６に結合する抗体分子、例えば、抗原結合性ドメインである。
[00704]一部の実施形態では、多機能性分子は、
（ｉ）ＮＫｐ３０、ＮＫｐ４６、ＮＫＧ２Ｄ、もしくはＣＤ１６のエピトープ、例えば、本明細書で記載される抗ＮＫｐ３０、抗ＮＫｐ４６、抗ＮＫＧ２Ｄ、もしくは抗ＣＤ１６抗体分子によって認識されるエピトープと同一もしくは同様のエピトープに特異的に結合する、
（ｉｉ）本明細書で記載される抗ＮＫｐ３０、抗ＮＫｐ４６、抗ＮＫＧ２Ｄ、もしくはＣＤ１６抗体分子と同一もしくは同様の結合親和性もしくは特異性、もしくは両方を示す、
（ｉｉｉ）本明細書で記載される抗ＮＫｐ３０、抗ＮＫｐ４６、抗ＮＫＧ２Ｄ、もしくは抗ＣＤ１６抗体分子の結合を阻害する、例えば、競合的に阻害する、
（ｉｖ）本明細書で記載される抗ＮＫｐ３０、抗ＮＫｐ４６、抗ＮＫＧ２Ｄ、もしくは抗ＣＤ１６抗体分子と同一もしくは重複するエピトープに結合する、または
（ｖ）本明細書で記載される抗ＮＫｐ３０、抗ＮＫｐ４６、抗ＮＫＧ２Ｄ、もしくは抗ＣＤ１６分子と結合について競合する、および／または本明細書で記載される抗ＮＫｐ３０、抗ＮＫｐ４６、抗ＮＫＧ２Ｄ、もしくは抗ＣＤ１６分子と同一エピトープに結合する。
[00705]一部の実施形態では、抗ＮＫｐ３０、抗ＮＫｐ４６、抗ＮＫＧ２Ｄ、または抗ＣＤ１６抗体分子は、表７、８、３５、３６、９、１０、１５、または３４から選択される１つまたは複数のＣＤＲ、フレームワーク領域、可変ドメイン、重鎖または軽鎖、または抗原結合性ドメイン、またはそれと実質的に同一の配列を含む。一部の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、ＮＫｐ３０に結合する抗体分子、例えば、抗原結合性ドメインである。一部の実施形態では、リンパ腫細胞またはリンパ球の溶解は、ＮＫｐ３０によって媒介される。一部の実施形態では、多機能性分子は、リンパ腫細胞上の腫瘍抗原またはリンパ球上のＴＲＢＣ１もしくはＴＲＢＣ２の不在下でＮＫ細胞とともにインキュベートされた場合にＮＫ細胞を活性化しない。一部の実施形態では、多機能性分子は、ＮＫ細胞が、ＮＫｐ３０発現性ＮＫ細胞であり、（１）リンパ腫細胞上の腫瘍抗原も存在するか、または（２）リンパ球上のＴＲＢＣ１もしくはＴＲＢＣ２も存在する場合に、ＮＫ細胞を活性化する。一部の実施形態では、多機能性分子は、ＮＫ細胞がＮＫｐ３０発現性ＮＫ細胞ではなく、（１）リンパ腫細胞上の腫瘍抗原も存在するか、または（２）リンパ球上のＴＲＢＣ１もしくはＴＲＢＣ２も存在する場合には、ＮＫ細胞を活性化しない。
[00706]一部の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、
（ｉ）配列番号６０００の重鎖相補性決定領域１（ＶＨＣＤＲ１）アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号６００１のＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号６００２のＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；ならびに
（ｉｉ）配列番号６０６３の軽鎖相補性決定領域１（ＶＬＣＤＲ１）アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号６０６４のＶＬＣＤＲ２アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号７２９３のＶＬＣＤＲ３アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）
を含む。
[00707]一部の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、
（ｉ）配列番号６０００の重鎖相補性決定領域１（ＶＨＣＤＲ１）アミノ酸配列、配列番号６００１のＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列、および／または配列番号６００２のＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）、ならびに
（ｉｉ）配列番号６０６３の軽鎖相補性決定領域１（ＶＬＣＤＲ１）アミノ酸配列、配列番号６０６４のＶＬＣＤＲ２アミノ酸配列、および／または配列番号７２９３のＶＬＣＤＲ３アミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）
を含む。
[00708]一部の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、
（１）配列番号６００３の重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）アミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）、配列番号６００４のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）、配列番号６００５のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）、もしくは配列番号６００６のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）を含む重鎖可変領域（ＶＨ）、および／または
（２）配列番号６０６６の軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）アミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）、配列番号６０６７のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）、配列番号７２９２のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）、もしくは配列番号６０６９のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）
を含む。
[00709]一部の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、
（１）配列番号６００３の重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６００４のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６００５のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列、または配列番号６００６のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）、および
（３）配列番号６０６６の軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６０６７のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号７２９２のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列、または配列番号６０６９のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）
を含む。
[00710]一部の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、
（ｉ）配列番号６１２１のアミノ酸配列（または配列番号６１２１に対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨ、および／または
（ｉｉ）配列番号７２９４のアミノ酸配列（または配列番号７２９４に対して少なくとも約９３％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬ
を含む。
[00711]一部の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、配列番号６１４８もしくは６１４９のアミノ酸配列（または配列番号６１４８もしくは６１４９に対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含む重鎖を含む。
[00712]一部の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、配列番号６１５０のアミノ酸配列（または配列番号６１５０に対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含む軽鎖を含む。
[00713]一部の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、配列番号６１４８もしくは６１４９のアミノ酸配列（または配列番号６１４８もしくは６１４９に対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含む重鎖、および配列番号６１５０のアミノ酸配列（または配列番号６１５０に対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含む軽鎖を含む。
[00714]一部の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、配列番号６０１４の重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）アミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）、配列番号６０１５のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）、配列番号６０１６のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）、または配列番号６０１７のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）を含む重鎖可変領域（ＶＨ）を含む。
[00715]一部の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、配列番号６０１４の重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６０１５のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６０１６のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列、または配列番号６０１７のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）を含む。
[00716]一部の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、配列番号６１２３のアミノ酸配列（または配列番号６１２３に対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨを含む。
[00717]一部の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、配列番号６０１８の重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）アミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）、配列番号６０１９のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）、配列番号６０２０のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）、または配列番号６０２１のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）を含む重鎖可変領域（ＶＨ）を含む。
[00718]一部の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、配列番号６０１８の重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６０１９のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６０２０のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列、または配列番号６０２１のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）を含む。
[00719]一部の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、配列番号６１２４のアミノ酸配列（または配列番号６１２４に対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨを含む。
[00720]一部の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、配列番号６０２２の重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）アミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）、配列番号６０２３のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）、配列番号６０２４のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）、または配列番号６０２５のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）を含む重鎖可変領域（ＶＨ）を含む。ある特定の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、配列番号６０２２の重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６０２３のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６０２４のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列、または配列番号６０２５のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）を含む。ある特定の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、配列番号６１２５のアミノ酸配列（または配列番号６１２５に対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨを含む。
[00721]一部の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、配列番号６０２６の重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）アミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）、配列番号６０２７のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）、配列番号６０２８のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）、または配列番号６０２９のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）を含む重鎖可変領域（ＶＨ）を含む。ある特定の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、配列番号６０２６の重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６０２７のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６０２８のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列、または配列番号６０２９のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）を含む。ある特定の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、配列番号６１２６のアミノ酸配列（または配列番号６１２６に対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨを含む。
[00722]一部の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、配列番号６０３０の重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）アミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）、配列番号６０３２のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）、配列番号６０３３のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）、または配列番号６０３４のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）を含む重鎖可変領域（ＶＨ）を含む。ある特定の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、配列番号６０３０の重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６０３２のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６０３３のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列、または配列番号６０３４のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）を含む。ある特定の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、配列番号６１２７のアミノ酸配列（または配列番号６１２７に対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨを含む。
[00723]一部の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、配列番号６０３５の重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）アミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）、配列番号６０３６のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）、配列番号６０３７のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）、または配列番号６０３８のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）を含む重鎖可変領域（ＶＨ）を含む。
[00724]一部の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、配列番号６０３５の重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６０３６のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６０３７のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列、または配列番号６０３８のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）を含む。ある特定の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、配列番号６１２８のアミノ酸配列（または配列番号６１２８に対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨを含む。
[00725]一部の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、配列番号６０７７の軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）アミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）、配列番号６０７８のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）、配列番号６０７９のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）、または配列番号６０８０のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む。ある特定の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、配列番号６０７７の軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６０７８のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６０７９のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列、または配列番号６０８０のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む。ある特定の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、配列番号６１３７のアミノ酸配列（または配列番号６１３７に対して少なくとも約９３％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬを含む。
[00726]一部の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、配列番号６０８１の軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）アミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）、配列番号６０８２のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）、配列番号６０８３のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）、または配列番号６０８４のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む。
[00727]一部の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、配列番号６０８１の軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６０８２のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６０８３のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列、または配列番号６０８４のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む。ある特定の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、配列番号６１３８のアミノ酸配列（または配列番号６１３８に対して少なくとも約９３％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬを含む。
[00728]一部の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、配列番号６０８５の軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）アミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）、配列番号６０８６のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）、配列番号６０８７のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）、または配列番号６０８８のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む。ある特定の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、配列番号６０８５の軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６０８６のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６０８７のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列、または配列番号６０８８のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む。ある特定の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、配列番号６１３９のアミノ酸配列（または配列番号６１３９に対して少なくとも約９３％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬを含む。
[00729]一部の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、配列番号６０８９の軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）アミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）、配列番号６０９０のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）、配列番号６０９１のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）、または配列番号６０９２のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む。ある特定の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、配列番号６０８９の軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６０９０のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６０９１のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列、または配列番号６０９２のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む。ある特定の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、配列番号６１４０のアミノ酸配列（または配列番号６１４０に対して少なくとも約９３％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬを含む。
[00730]一部の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、配列番号６０９３の軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）アミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）、配列番号６０９４のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）、配列番号６０９５のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）または配列番号６０９６のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む。ある特定の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、配列番号６０９３の軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６０９４のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６０９５のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列、または配列番号６０９６のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む。ある特定の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、配列番号６１４１のアミノ酸配列（または配列番号６１４１に対して少なくとも約９３％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬを含む。
[00731]一部の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、
（ｉ）配列番号６００７の重鎖相補性決定領域１（ＶＨＣＤＲ１）アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つもしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）、配列番号６００８のＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つもしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号６００９のＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つもしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）を含む重鎖可変領域（ＶＨ）と、
（ｉｉ）配列番号６０７０の軽鎖相補性決定領域１（ＶＬＣＤＲ１）アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つもしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）、配列番号６０７１のＶＬＣＤＲ２アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つもしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号６０７２のＶＬＣＤＲ３アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つもしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）と
を含む。ある特定の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、
（ｉ）配列番号６００７の重鎖相補性決定領域１（ＶＨＣＤＲ１）アミノ酸配列、配列番号６００８のＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列、および／または配列番号６００９のＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）と、
（ｉｉ）配列番号６０７０の軽鎖相補性決定領域１（ＶＬＣＤＲ１）アミノ酸配列、配列番号６０７１のＶＬＣＤＲ２アミノ酸配列、および／または配列番号６０７２のＶＬＣＤＲ３アミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）と
を含む。
[00732]一部の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、
（１）配列番号６０１０の重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）アミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）、配列番号６０１１のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）、配列番号６０１２のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）、もしくは配列番号６０１３のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）を含む重鎖可変領域（ＶＨ）、および／または
（２）配列番号６０７３の軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）アミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）、配列番号６０７４のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）、配列番号６０７５のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）、もしくは配列番号６０７６のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）
を含む。ある特定の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、
（１）配列番号６０１０の重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６０１１のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６０１２のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列、または配列番号６０１３のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）と、
（３）配列番号６０７３の軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６０７４のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６０７５のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列、または配列番号６０７６のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）と
を含む。
[00733]一部の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、
（ｉ）配列番号６１２２のアミノ酸配列（または配列番号６１２２に対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨ、および／または
（ｉｉ）配列番号６１３６のアミノ酸配列（または配列番号６１３６に対して少なくとも約９３％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬ
を含む。
[00734]一部の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、配列番号６１５１もしくは６１５２のアミノ酸配列（または配列番号６１５１もしくは６１５２に対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含む重鎖を含む。
[00735]一部の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、配列番号６１５３のアミノ酸配列（または配列番号６１５３に対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含む軽鎖を含む。
[00736]一部の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、配列番号６１５１もしくは６１５２のアミノ酸配列（または配列番号６１５１もしくは６１５２に対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含む重鎖と、配列番号６１５３のアミノ酸配列（または配列番号６１５３に対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含む軽鎖とを含む。
[00737]一部の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、配列番号６０３９の重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）アミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）、配列番号６０４０のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）、配列番号６０４１のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）、または配列番号６０４２のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）を含む重鎖可変領域（ＶＨ）を含む。
[00738]一部の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、配列番号６０３９の重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６０４０のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６０４１のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列、または配列番号６０４２のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）を含む。ある特定の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、配列番号６１２９のアミノ酸配列（または配列番号６１２９に対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨを含む。
[00739]一部の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、配列番号６０４３の重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）アミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）、配列番号６０４４のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）、配列番号６０４５のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）、または配列番号６０４６のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）を含む重鎖可変領域（ＶＨ）を含む。
[00740]一部の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、配列番号６０４３の重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６０４４のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６０４５のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列、または配列番号６０４６のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）を含む。
[00741]一部の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、配列番号６１３０のアミノ酸配列（または配列番号６１３０に対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨを含む。
[00742]一部の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、配列番号６０４７の重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）アミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）、配列番号６０４８のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）、配列番号６０４９のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）、または配列番号６０５０のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）を含む重鎖可変領域（ＶＨ）を含む。ある特定の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、配列番号６０４７の重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６０４８のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６０４９のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列、または配列番号６０５０のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）を含む。ある特定の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、配列番号６１３１のアミノ酸配列（または配列番号６１３１に対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨを含む。
[00743]一部の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、配列番号６０５１の重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）アミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）、配列番号６０５２のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）、配列番号６０５３のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）、または配列番号６０５４のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）を含む重鎖可変領域（ＶＨ）を含む。ある特定の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、配列番号６０５１の重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６０５２のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６０５３のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列、または配列番号６０５４のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）を含む。ある特定の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、配列番号６１３２のアミノ酸配列（または配列番号６１３２に対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨを含む。
[00744]一部の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、配列番号６０５５の重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）アミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）、配列番号６０５６のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）、配列番号６０５７のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）、または配列番号６０５８のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）を含む重鎖可変領域（ＶＨ）を含む。ある特定の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、配列番号６０５５の重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６０５６のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６０５７のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列、または配列番号６０５８のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）を含む。ある特定の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、配列番号６１３３のアミノ酸配列（または配列番号６１３３に対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨを含む。
[00745]一部の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、配列番号６０５９の重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）アミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）、配列番号６０６０のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）、配列番号６０６１のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）、または配列番号６０６２のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）を含む重鎖可変領域（ＶＨ）を含む。ある特定の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、配列番号６０５９の重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６０６０のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６０６１のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列、または配列番号６０６２のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）を含む。ある特定の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、配列番号６１３４のアミノ酸配列（または配列番号６１３４に対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨを含む。
[00746]一部の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、配列番号６０９７の軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）アミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）、配列番号６０９８のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）、配列番号６０９９のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）、または配列番号６１００のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む。ある特定の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、配列番号６０９７の軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６０９８のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６０９９のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列、または配列番号６１００のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む。ある特定の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、配列番号６１４２のアミノ酸配列（または配列番号６１４２に対して少なくとも約９３％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬを含む。
[00747]一部の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、配列番号６１０１の軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）アミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）、配列番号６１０２のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）、配列番号６１０３のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）、または配列番号６１０４のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む。ある特定の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、配列番号６１０１の軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６１０２のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６１０３のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列、または配列番号６１０４のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む。ある特定の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、配列番号６１４３のアミノ酸配列（または配列番号６１４３に対して少なくとも約９３％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬを含む。
[00748]一部の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、配列番号６１０５の軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）アミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）、配列番号６１０６のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）、配列番号６１０７のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）、または配列番号６１０８のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む。ある特定の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、配列番号６１０５の軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６１０６のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６１０７のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列、または配列番号６１０８のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む。ある特定の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、配列番号６１４４のアミノ酸配列（または配列番号６１４４に対して少なくとも約９３％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬを含む。
[00749]一部の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、配列番号６１０９の軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）アミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）、配列番号６１１０のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）、配列番号６１１１のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）、または配列番号６１１２のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む。ある特定の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、配列番号６１０９の軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６１１０のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６１１１のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列、または配列番号６１１２のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む。ある特定の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、配列番号６１４５のアミノ酸配列（または配列番号６１４５に対して少なくとも約９３％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬを含む。
[00750]一部の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、配列番号６１１３の軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）アミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）、配列番号６１１４のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）、配列番号６１１５のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）、または配列番号６１１６のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む。ある特定の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、配列番号６１１３の軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６１１４のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６１１５のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列、または配列番号６１１６のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む。ある特定の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、配列番号６１４６のアミノ酸配列（または配列番号６１４６に対して少なくとも約９３％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬを含む。
[00751]一部の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、配列番号６１１７の軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）アミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）、配列番号６１１８のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）、配列番号６１１９のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）、または配列番号６１２０のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加もしくは欠失を有する配列）を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む。ある特定の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、配列番号６１１７の軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６１１８のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６１１９のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列、または配列番号６１２０のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む。ある特定の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、配列番号６１４７のアミノ酸配列（または配列番号６１４７に対して少なくとも約９３％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬを含む。
[00752]一部の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、ＮＫｐ４６に結合する抗体分子、例えば、抗原結合性ドメインである。ある特定の実施形態では、リンパ腫細胞の溶解は、ＮＫｐ４６によって媒介される。一部の実施形態では、多機能性分子は、リンパ腫細胞上の腫瘍抗原の不在下でＮＫ細胞とともにインキュベートされる場合に、ＮＫ細胞を活性化しない。一部の実施形態では、多機能性分子は、ＮＫ細胞が、ＮＫｐ４６発現性ＮＫ細胞であり、リンパ腫細胞上の腫瘍抗原も存在する場合に、ＮＫ細胞を活性化する。一部の実施形態では、多機能性分子は、ＮＫ細胞が、ＮＫｐ４６発現性ＮＫ細胞ではなく、リンパ腫細胞上の腫瘍抗原も存在する場合には、ＮＫ細胞を活性化しない。一部の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、配列番号６１８２のアミノ酸配列（または配列番号６１８２に対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨを含む。一部の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、配列番号６１８３のアミノ酸配列（または配列番号６１８３に対して少なくとも約９３％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、配列番号６１８１のアミノ酸配列（または配列番号６１８１に対して少なくとも約９３％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むｓｃＦｖを含む。
[00753]一部の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、ＮＫＧ２Ｄに結合する、抗体分子、例えば、抗原結合性ドメインである。ある特定の実施形態では、リンパ腫細胞の溶解は、ＮＫＧ２Ｄによって媒介される。一部の実施形態では、多機能性分子は、リンパ腫細胞上の腫瘍抗原の不在下でＮＫ細胞とともにインキュベートされた場合に、ＮＫ細胞を活性化しない。一部の実施形態では、多機能性分子は、ＮＫ細胞が、ＮＫＧ２Ｄ発現性ＮＫ細胞であり、リンパ腫細胞上の腫瘍抗原も存在する場合に、ＮＫ細胞を活性化する。一部の実施形態では、多機能性分子は、ＮＫ細胞が、ＮＫＧ２Ｄ発現性ＮＫ細胞ではなく、リンパ腫細胞上の腫瘍抗原も存在する場合には、ＮＫ細胞を活性化しない。一部の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、配列番号６１７６のアミノ酸配列（または配列番号６１７６に対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨを含む。一部の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、配列番号６１７７のアミノ酸配列（または配列番号６１７７に対して少なくとも約９３％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、配列番号６１７５のアミノ酸配列（または配列番号６１７５に対して少なくとも約９３％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むｓｃＦｖを含む。一部の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、配列番号６１７９のアミノ酸配列（または配列番号６１７９に対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨを含む。一部の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、配列番号６１８０のアミノ酸配列（または配列番号６１８０に対して少なくとも約９３％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、配列番号６１７８のアミノ酸配列（または配列番号６１７８に対して少なくとも約９３％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むｓｃＦｖを含む。
[00754]一部の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、ＣＤ１６に結合する、抗体分子、例えば、抗原結合性ドメインである。一部の実施形態では、リンパ腫細胞の溶解は、ＣＤ１６によって媒介される。一部の実施形態では、多機能性分子は、リンパ腫細胞上の腫瘍抗原の不在下でＮＫ細胞とともにインキュベートされる場合に、ＮＫ細胞を活性化しない。一部の実施形態では、多機能性分子は、ＮＫ細胞が、ＣＤ１６発現性ＮＫ細胞であり、リンパ腫細胞上の腫瘍抗原も存在する場合に、ＮＫ細胞を活性化する。一部の実施形態では、多機能性分子は、ＮＫ細胞が、ＣＤ１６発現性ＮＫ細胞ではなく、リンパ腫細胞上の腫瘍抗原も存在する場合には、ＮＫ細胞を活性化しない。一部の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、配列番号６１８５のアミノ酸配列（または配列番号６１８５に対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨを含む。一部の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、配列番号６１８６のアミノ酸配列（または配列番号６１８６に対して少なくとも約９３％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、配列番号６１８４のアミノ酸配列（または配列番号６１８４に対して少なくとも約９３％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むｓｃＦｖを含む。
[00755]一部の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、リガンドであり、任意選択で、リガンドは免疫グロブリン定常領域、例えば、Ｆｃ領域をさらに含む。ある特定の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、ＮＫｐ４４またはＮＫｐ４６のリガンド、例えば、ウイルスＨＡである。ある特定の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、ＤＡＰ１０のリガンド、例えば、ＮＫＧ２Ｄの共受容体である。ある特定の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、ＣＤ１６のリガンド、例えば、ＣＤ１６ａ／ｂリガンド、例えば、抗体Ｆｃ領域をさらに含むＣＤ１６ａ／ｂリガンドである。
Ｂ細胞、マクロファージおよび樹状細胞エンゲージャー
[00756]概括的に言えば、Ｂリンパ球としても公知のＢ細胞は、リンパ球サブタイプの白血球の一種である。それらは、抗体を分泌することによって適応免疫系の液性免疫成分において機能する。追加的に、Ｂ細胞は、抗原を提示し（それらはまた、プロフェッショナル抗原提示細胞（ＡＰＣ）として分類される）、サイトカインを分泌する。マクロファージは、ファゴサイトーシスを介して細胞残屑、外来物質、微小生物、がん細胞を貪食および消化する白血球の一種である。ファゴサイトーシスの他に、それらは非特異的な防御（自然免疫）において重要な役割を果たし、そしてまた、リンパ球などの他の免疫細胞を動員することによって特異的な防御機構（適応免疫）の開始を助ける。例えば、それらは、Ｔ細胞への抗原提示主体として重要である。炎症の増加および免疫系の刺激の他に、マクロファージはまた、重要な抗炎症性の役割を果たし、サイトカインの放出を通じて免疫反応を減少させることができる。樹状細胞（ＤＣ）は、抗原材料のプロセシングにおいて機能し、それを細胞表面上で免疫系のＴ細胞に対して提示する抗原提示細胞である。
[00757]本開示は、とりわけ、Ｂ細胞、マクロファージ、および／または樹状細胞への結合および／またはその活性化を媒介する１つまたは複数のＢ細胞、マクロファージ、および／または樹状細胞エンゲージャーを含む、例えば、含有するように操作されている、多特異性（例えば、二、三、四特異性）または多機能性分子を提供する。
[00758]よって、一部の実施形態では、免疫細胞エンゲージャーは、ＣＤ４０リガンド（ＣＤ４０Ｌ）もしくはＣＤ７０リガンド；ＣＤ４０もしくはＣＤ７０に結合する抗体分子；ＯＸ４０に対する抗体分子；ＯＸ４０リガンド（ＯＸ４０Ｌ）；Ｔｏｌｌ様受容体のアゴニスト（例えば、本明細書に記載されるもの、例えば、ＴＬＲ４、例えば、構成的活性型ＴＬＲ４（ｃａＴＬＲ４）、もしくはＴＬＲ９アゴニスト）；４１ＢＢ；ＣＤ２；ＣＤ４７；もしくはＳＴＩＮＧアゴニスト、またはこれらの組合せのうちの１つまたは複数から選択されるＢ細胞、マクロファージ、および／または樹状細胞エンゲージャーを含む。
[00759]一部の実施形態では、Ｂ細胞エンゲージャーは、ＣＤ４０Ｌ、ＯＸ４０Ｌ、もしくはＣＤ７０リガンド、またはＯＸ４０、ＣＤ４０もしくはＣＤ７０に結合する抗体分子である。
[00760]一部の実施形態では、マクロファージエンゲージャーはＣＤ２アゴニストである。一部の実施形態では、マクロファージエンゲージャーは、ＣＤ４０ＬもしくはＣＤ４０に結合する抗原結合性ドメインもしくはリガンド、Ｔｏｌｌ様受容体（ＴＬＲ）アゴニスト（例えば、本明細書に記載されるもの）、例えば、ＴＬＲ９もしくはＴＬＲ４（例えば、ｃａＴＬＲ４（構成的活性型ＴＬＲ４）、ＣＤ４７、またはＳＴＩＮＧアゴニストに結合する抗原結合性ドメインである。一部の実施形態では、ＳＴＩＮＧアゴニストは、環状ジヌクレオチド、例えば、サイクリックジＧＭＰ（ｃｄＧＭＰ）またはサイクリックジＡＭＰ（ｃｄＡＭＰ）である。一部の実施形態では、ＳＴＩＮＧアゴニストはビオチン化されている。
[00761]一部の実施形態では、樹状細胞エンゲージャーはＣＤ２アゴニストである。一部の実施形態では、樹状細胞エンゲージャーは、ＯＸ４０Ｌ、４１ＢＢ、ＴＬＲアゴニスト（例えば、本明細書に記載されるもの）（例えば、ＴＬＲ９アゴニスト、ＴＬＲ４（例えば、ｃａＴＬＲ４（構成的活性型ＴＬＲ４））、ＣＤ４７、またはおよびＳＴＩＮＧアゴニストのうちの１つまたは複数に結合するリガンド、受容体アゴニスト、または抗体分子である。一部の実施形態では、ＳＴＩＮＧアゴニストは、環状ジヌクレオチド、例えば、サイクリックジＧＭＰ（ｃｄＧＭＰ）またはサイクリックジＡＭＰ（ｃｄＡＭＰ）である。一部の実施形態では、ＳＴＩＮＧアゴニストはビオチン化されている。
[00762]他の実施形態では、免疫細胞エンゲージャーは、Ｂ細胞、マクロファージ、および／または樹状細胞のうちの１つまたは複数への結合、またはその活性化を媒介する。例示的なＢ細胞、マクロファージ、および／または樹状細胞エンゲージャーは、ＣＤ４０リガンド（ＣＤ４０Ｌ）もしくはＣＤ７０リガンド；ＣＤ４０もしくはＣＤ７０に結合する抗体分子；ＯＸ４０に対する抗体分子；ＯＸ４０リガンド（ＯＸ４０Ｌ）；Ｔｏｌｌ様受容体アゴニスト（例えば、ＴＬＲ４、例えば、構成的活性型ＴＬＲ４（ｃａＴＬＲ４）もしくはＴＬＲ９アゴニスト）；４１ＢＢアゴニスト；ＣＤ２；ＣＤ４７；もしくはＳＴＩＮＧアゴニスト、またはこれらの組合せのうちの１つまたは複数から選択することができる。
[00763]一部の実施形態では、Ｂ細胞エンゲージャーは、ＣＤ４０Ｌ、ＯＸ４０Ｌ、もしくはＣＤ７０リガンド、またはＯＸ４０、ＣＤ４０もしくはＣＤ７０に結合する抗体分子のうちの１つまたは複数から選択される。
[00764]他の実施形態では、マクロファージ細胞エンゲージャーは、ＣＤ２アゴニスト；ＣＤ４０Ｌ；ＯＸ４０Ｌ；ＯＸ４０、ＣＤ４０もしくはＣＤ７０に結合する抗体分子；Ｔｏｌｌ様受容体アゴニストもしくはその断片（例えば、ＴＬＲ４、例えば、構成的活性型ＴＬＲ４（ｃａＴＬＲ４））；ＣＤ４７アゴニスト；またはＳＴＩＮＧアゴニストのうちの１つまたは複数から選択される。
[00765]他の実施形態では、樹状細胞エンゲージャーは、ＣＤ２アゴニスト、ＯＸ４０抗体、ＯＸ４０Ｌ、４１ＢＢアゴニスト、Ｔｏｌｌ様受容体アゴニストもしくはその断片（例えば、ＴＬＲ４、例えば、構成的活性型ＴＬＲ４（ｃａＴＬＲ４））、ＣＤ４７アゴニスト、またはＳＴＩＮＧアゴニストのうちの１つまたは複数から選択される。
[00766]一実施形態では、ＯＸ４０Ｌは、アミノ酸配列：
[00767]ＱＶＳＨＲＹＰＲＩＱＳＩＫＶＱＦＴＥＹＫＫＥＫＧＦＩＬＴＳＱＫＥＤＥＩＭＫＶＱＮＮＳＶＩＩＮＣＤＧＦＹＬＩＳＬＫＧＹＦＳＱＥＶＮＩＳＬＨＹＱＫＤＥＥＰＬＦＱＬＫＫＶＲＳＶＮＳＬＭＶＡＳＬＴＹＫＤＫＶＹＬＮＶＴＴＤＮＴＳＬＤＤＦＨＶＮＧＧＥＬＩＬＩＨＱＮＰＧＥＦＣＶＬ（配列番号６２１０）、その断片、またはそれに対して実質的に同一である（例えば、それに対して９５％～９９．９％同一であるか、もしくは配列番号６２１０のアミノ酸配列に対して少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、５個、１０個もしくは１５個以下である変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有するアミノ酸配列を含む。
[00768]別の実施形態では、ＣＤ４０Ｌは、アミノ酸配列：
[00769]ＭＱＫＧＤＱＮＰＱＩＡＡＨＶＩＳＥＡＳＳＫＴＴＳＶＬＱＷＡＥＫＧＹＹＴＭＳＮＮＬＶＴＬＥＮＧＫＱＬＴＶＫＲＱＧＬＹＹＩＹＡＱＶＴＦＣＳＮＲＥＡＳＳＱＡＰＦＩＡＳＬＣＬＫＳＰＧＲＦＥＲＩＬＬＲＡＡＮＴＨＳＳＡＫＰＣＧＱＱＳＩＨＬＧＧＶＦＥＬＱＰＧＡＳＶＦＶＮＶＴＤＰＳＱＶＳＨＧＴＧＦＴＳＦＧＬＬＫＬ（配列番号６２１１）、その断片、またはそれに対して実質的に同一である（例えば、それに対して９５％～９９．９％同一であるか、もしくは配列番号６２１１のアミノ酸配列に対して少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、５個、１０個もしくは１５個以下である変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有するアミノ酸配列を含む。
[00770]さらに他の実施形態では、ＳＴＩＮＧアゴニストは、環状ジヌクレオチド、例えば、サイクリックジＧＭＰ（ｃｄＧＭＰ）、サイクリックジＡＭＰ（ｃｄＡＭＰ）、またはこれらの組合せを含み、任意選択で２’，５’または３’，５’リン酸連結を有する。
[00771]一実施形態では、免疫細胞エンゲージャーは、４１ＢＢリガンド、例えば、アミノ酸配列：
[00772]ＡＣＰＷＡＶＳＧＡＲＡＳＰＧＳＡＡＳＰＲＬＲＥＧＰＥＬＳＰＤＤＰＡＧＬＬＤＬＲＱＧＭＦＡＱＬＶＡＱＮＶＬＬＩＤＧＰＬＳＷＹＳＤＰＧＬＡＧＶＳＬＴＧＧＬＳＹＫＥＤＴＫＥＬＶＶＡＫＡＧＶＹＹＶＦＦＱＬＥＬＲＲＶＶＡＧＥＧＳＧＳＶＳＬＡＬＨＬＱＰＬＲＳＡＡＧＡＡＡＬＡＬＴＶＤＬＰＰＡＳＳＥＡＲＮＳＡＦＧＦＱＧＲＬＬＨＬＳＡＧＱＲＬＧＶＨＬＨＴＥＡＲＡＲＨＡＷＱＬＴＱＧＡＴＶＬＧＬＦＲＶＴＰＥＩＰＡＧＬＰＳＰＲＳＥ（配列番号６２１２）、その断片、またはそれに対して実質的に同一である（例えば、それに対して９５％～９９．９％同一であるか、もしくは配列番号６２１２のアミノ酸配列に対して少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、５個、１０個もしくは１５個以下である変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有するアミノ酸配列を含む４１ＢＢリガンドを含む。
Ｔｏｌｌ様受容体
[00773]Ｔｏｌｌ様受容体（ＴＬＲ）は、ショウジョウバエＴｏｌｌタンパク質のホモログである進化的に保存された受容体であり、微生物病原体によって排他的に発現される病原体関連微生物パターン（ＰＡＭＰ）、または壊死したもしくは死にゆく細胞から放出される内因性分子である危険関連分子パターン（ＤＡＭＰ）として公知の高度に保存された構造モチーフを認識する。ＰＡＭＰは、リポ多糖（ＬＰＳ）、ペプチドグリカン（ＰＧＮ）およびリポペプチドなどの様々な細菌細胞壁成分の他に、フラジェリン、細菌ＤＮＡおよびウイルス二本鎖ＲＮＡを含む。ＤＡＭＰは、熱ショックタンパク質などの細胞内タンパク質の他に、細胞外基質からのタンパク質断片を含む。対応するＰＡＭＰまたはＤＡＭＰによるＴＬＲの刺激は、シグナル伝達カスケードを開始させて、ＡＰ－１、ＮＦ－κＢおよびインターフェロン調節因子（ＩＲＦ）などの転写因子の活性化に繋がる。ＴＬＲによるシグナル伝達は、インターフェロン（ＩＦＮ）、炎症促進性サイトカインおよび適応免疫応答を指令するエフェクターサイトカインの産生を含む、様々な細胞応答をもたらす。ＴＬＲは、多数の炎症性および免疫障害に結び付けられており、がんにおいて役割を果たす（Ｒａｋｏｆｆ－Ｎａｈｏｕｍ Ｓ．およびＭｅｄｚｈｉｔｏｖ Ｒ．、２００９． Ｔｏｌｌ－ｌｉｋｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ ａｎｄ ｃａｎｃｅｒ． Ｎａｔ Ｒｅｖｓ Ｃａｎｃｅｒ ９：５７－６３ページ）。
[00774]ＴＬＲは、ロイシンリッチリピート（ＬＲＲ）およびＴｏｌｌ／ＩＬ－１受容体（ＴＩＲ）ドメインと呼ばれる保存された領域を含有する細胞質テイルを含有する細胞外ドメインによって特徴付けられるＩ型膜貫通タンパク質である。１０個のヒトおよび１２個のマウスＴＬＲが特徴付けられており、それらは、ヒトにおけるＴＬＲ１～ＴＬＲ１０、ならびにマウスにおけるＴＬＲ１～ＴＬＲ９、ＴＬＲ１１、ＴＬＲ１２およびＴＬＲ１３であり、ＴＬＲ１０のホモログは偽遺伝子である。ＴＬＲ２は、細菌リポタンパク質、リポマンナンおよびリポタイコ酸を含む、グラム陽性細菌からの様々なＰＡＭＰの認識のために必須である。ＴＬＲ３は、ウイルス由来の二本鎖ＲＮＡに結び付けられている。ＴＬＲ４は、主に、リポ多糖によって活性化される。ＴＬＲ５は細菌フラジェリンを検出し、ＴＬＲ９は、非メチル化ＣｐＧ ＤＮＡに対する応答のために要求される。最後に、ＴＬＲ７およびＴＬＲ８は、小さい合成の抗ウイルス分子を認識し、一本鎖ＲＮＡはそれらの天然リガンドであることが報告された。ＴＬＲ１１は、尿路病原性Ｅ． ｃｏｌｉおよびＴｏｘｏｐｌａｓｍａ ｇｏｎｄｉｉからのプロフィリン様タンパク質を認識することが報告されている。ＴＬＲの特異性のレパートリーは、互いとヘテロ二量体化するＴＬＲの能力によって拡張されるようである。例えば、ＴＬＲ２およびＴＬＲ６の二量体は、ジアシル化リポタンパク質に対する応答のために要求され、ＴＬＲ２およびＴＬＲ１は、相互作用してトリアシル化リポタンパク質を認識する。ＴＬＲの特異性はまた、ＬＰＳに応答してＴＬＲ４と複合体を形成するＭＤ－２およびＣＤ１４などの、様々なアダプターおよびアクセサリー分子によって影響される。
[00775]ＴＬＲシグナル伝達は、炎症性サイトカインの産生に繋がるＭｙＤ８８依存性経路、ならびにＩＦＮ－βの刺激および樹状細胞の成熟と関連付けられるＭｙＤ８８非依存性経路という少なくとも２つの別個の経路からなる。ＭｙＤ８８依存性経路は、ＴＬＲ３を除いてすべてのＴＬＲに共通である（Ａｄａｃｈｉ Ｏら、１９９８、「Ｔａｒｇｅｔｅｄ ｄｉｓｒｕｐｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ＭｙＤ８８ ｇｅｎｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｉｎ ｌｏｓｓ ｏｆ ＩＬ－１－ ａｎｄ ＩＬ－１８－ｍｅｄｉａｔｅｄ ｆｕｎｃｔｉｏｎ．」、Ｉｍｍｕｎｉｔｙ、９（１）：１４３～５０ページ）。ＰＡＭＰまたはＤＡＭＰによって活性化されると、ＴＬＲは、ヘテロまたはホモ二量体化して、細胞質ＴＩＲドメインを介してアダプタータンパク質の動員を誘導する。個々のＴＬＲは、異なるアダプター分子の使用によって異なるシグナル伝達応答を誘導する。ＴＬＲ４およびＴＬＲ２シグナル伝達は、ＭｙＤ８８依存性経路に関与するアダプターＴＩＲＡＰ／Ｍａｌを要求する。ＴＬＲ３は、アダプターＴＲＩＦ／ＴＩＣＡＭ－１を通じて、ＭｙＤ８８非依存性の方式で、二本鎖ＲＮＡに応答してＩＦＮ－βの産生を誘発する。ＴＲＡＭ／ＴＩＣＡＭ－２は、その機能がＴＬＲ４経路に制限されたＭｙＤ８８非依存性経路に関与する別のアダプター分子である。
[00776]ＴＬＲ３、ＴＬＲ７、ＴＬＲ８およびＴＬＲ９は、ウイルス核酸を認識し、Ｉ型ＩＦＮを誘導する。Ｉ型ＩＦＮの誘導に繋がるシグナル伝達の機序は、活性化されるＴＬＲに依存して異なる。それらは、抗ウイルス防御、細胞成長および免疫調節において不可欠な役割を果たすことが公知の転写因子のファミリー、インターフェロン調節因子、ＩＲＦを伴う。３つのＩＲＦ（ＩＲＦ３、ＩＲＦ５およびＩＲＦ７）は、ウイルス媒介性のＴＬＲシグナル伝達の直接的なトランスデューサーとして機能する。ＴＬＲ３およびＴＬＲ４はＩＲＦ３およびＩＲＦ７を活性化させ、ＴＬＲ７およびＴＬＲ８はＩＲＦ５およびＩＲＦ７を活性化させる（Ｄｏｙｌｅ Ｓら、２００２、「ＩＲＦ３ ｍｅｄｉａｔｅｓ ａ ＴＬＲ３／ＴＬＲ４－ｓｐｅｃｉｆｉｃ ａｎｔｉｖｉｒａｌ ｇｅｎｅ ｐｒｏｇｒａｍ．」、Ｉｍｍｕｎｉｔｙ、１７（３）：２５１～６３ページ）。さらには、ＴＬＲ９リガンドＣｐＧ－Ａによって刺激されるＩ型ＩＦＮ産生は、ＰＩ（３）ＫおよびｍＴＯＲによって媒介されることが示されている（Ｃｏｓｔａ－Ｍａｔｔｉｏｌｉ Ｍ．およびＳｏｎｅｎｂｅｒｇ Ｎ． ２００８、「ＲＡＰｐｉｎｇ ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ｏｆ ｔｙｐｅ Ｉ ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ ｉｎ ｐＤＣｓ ｔｈｒｏｕｇｈ ｍＴＯＲ．」、Ｎａｔｕｒｅ Ｉｍｍｕｎｏｌ． ９：１０９７～１０９９ページ）。
[00777]ＴＬＲ－９
[00778]ＴＬＲ９は、ＤＮＡ分子中の非メチル化ＣｐＧ配列を認識する。ＣｐＧ部位は、細菌ゲノムまたはウイルスＤＮＡと比較して脊椎動物ゲノム上で比較的希少（約１％）である。ＴＬＲ９は、Ｂリンパ球、単球、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞、および形質細胞性樹状細胞などの免疫系の多数の細胞によって発現される。ＴＬＲ９は、細胞内、エンドソーム区画内において発現され、ＣｐＧモチーフリッチなＤＮＡへの結合によって免疫系にウイルスおよび細菌感染を警告するように機能する。ＴＬＲ９シグナルは、炎症促進性反応を開始させる細胞の活性化に繋がり、Ｉ型インターフェロンおよびＩＬ－１２などのサイトカインの産生をもたらす。
[00779]ＴＬＲアゴニスト
[00780]ＴＬＲアゴニストは、１つまたは複数のＴＬＲ、例えば、ヒトＴＬＲ－１、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０のうちの１つまたは複数をアゴナイズすることができる。一部の実施形態では、本明細書に記載の付属的剤はＴＬＲアゴニストである。一部の実施形態では、ＴＬＲアゴニストは、ヒトＴＬＲ－９を特異的にアゴナイズする。一部の実施形態では、ＴＬＲ－９アゴニストはＣｐＧ部分である。本明細書で使用される場合、ＣｐＧ部分は、配列：５’－Ｃ－ホスフェート－Ｇ－３’、すなわち、１つのみのホスフェートによって分離されたシトシンおよびグアニンを有する直鎖状ジヌクレオチドである。
[00781]一部の実施形態では、ＣｐＧ部分は、少なくとも１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個、１１個、１２個、１３個、１４個、１５個、１６個、１７個、１８個、１９個、２０個、２１個、２２個、２３個、２４個、２５個、２６個、２７個、２８個、２９個、３０個、またはより多くのＣｐＧジヌクレオチドを含む。一部の実施形態では、ＣｐＧ部分は、１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個、１１個、１２個、１３個、１４個、１５個、１６個、１７個、１８個、１９個、２０個、２１個、２２個、２３個、２４個、２５個、２６個、２７個、２８個、２９個、または３０個のＣｐＧジヌクレオチドからなる。一部の実施形態では、ＣｐＧ部分は、１～５個、１～１０個、１～２０個、１～３０個、１～４０個、１～５０個、５～１０個、５～２０個、５～３０個、１０～２０個、１０～３０個、１０～４０個、または１０～５０個のＣｐＧジヌクレオチドを有する。
[00782]一部の実施形態では、ＴＬＲ－９アゴニストは合成ＯＤＮ（オリゴデオキシヌクレオチド）である。ＣｐＧ ＯＤＮは、特定の配列状況（ＣｐＧモチーフ）において非メチル化ＣｐＧジヌクレオチドを含有する短い合成の一本鎖ＤＮＡ分子である。ＣｐＧ ＯＤＮは、ゲノム細菌ＤＮＡ中に見出される天然のホスホジエステル（ＰＯ）骨格とは対照的に、部分的または完全にホスホロチオエート化（ＰＳ）した骨格を持つ。クラスＡ、ＢおよびＣというＣｐＧ ＯＤＮの３つの主要なクラスがあり、これらは免疫賦活活性において異なる。ＣｐＧ－Ａ ＯＤＮは、ＰＯ中央ＣｐＧ含有パリンドロームモチーフおよびＰＳ修飾３’ポリ－Ｇストリングによって特徴付けられる。それらは、ｐＤＣからの高いＩＦＮ－α産生を誘導するが、ＴＬＲ９依存性ＮＦ－κＢシグナル伝達および炎症促進性サイトカイン（例えば、ＩＬ－６）産生の弱い刺激因子である。ＣｐＧ－Ｂ ＯＤＮは、１つまたは複数のＣｐＧジヌクレオチドを有する全長ＰＳ骨格を含有する。それらは、Ｂ細胞およびＴＬＲ９依存性ＮＦ－κＢシグナル伝達を強く活性化させるが、ＩＦＮ－α分泌を弱く刺激する。ＣｐＧ－Ｃ ＯＤＮは、クラスＡおよびＢの両方の特徴を兼ね備える。それらは、完全なＰＳ骨格およびＣｐＧ含有パリンドロームモチーフを含有する。ＣクラスＣｐＧ ＯＤＮは、ｐＤＣからの強いＩＦＮ－α産生の他に、Ｂ細胞刺激を誘導する。
サイトカイン分子
[00783]サイトカインは、一般に、例えば、シグナル伝達経路を通じて、細胞活性に影響を及ぼすポリペプチドである。よって、多特異性または多機能性ポリペプチドのサイトカインは有用であり、細胞膜の外側からシグナルを伝達して細胞内の応答をモジュレートする受容体媒介性のシグナル伝達と関連付けられ得る。サイトカインは、免疫応答のメディエーターであるタンパク質性のシグナル伝達化合物である。それらは、増殖、分化および細胞生存／アポトーシスを含む多くの異なる細胞機能を制御し、サイトカインはまた、ウイルス感染症および自己免疫疾患を含むいくつかの病態生理学的プロセスに関与する。サイトカインは、自然免疫系（単球、マクロファージ、樹状細胞）ならびに適応免疫系（ＴおよびＢ細胞）の両方の様々な細胞によって様々な刺激下で合成される。サイトカインは、炎症促進性および抗炎症性の２つの群に分類することができる。ＩＦＮγ、ＩＬ－１、ＩＬ－６およびＴＮＦ－アルファを含む炎症促進性サイトカインは、主に、自然免疫細胞およびＴｈ１細胞に由来する。ＩＬ－１０、ＩＬ－４、ＩＬ－１３およびＩＬ－５を含む抗炎症性サイトカインは、Ｔｈ２免疫細胞から合成される。
[00784]本開示は、とりわけ、１つまたは複数のサイトカイン分子、例えば、免疫調節性（例えば、炎症促進性）サイトカインおよびそのバリアント、例えば、機能的バリアントを含む、例えば、それを含有するように操作された多特異性（例えば、二、三、四特異性）または多機能性分子を提供する。よって、一部の実施形態では、サイトカイン分子は、インターロイキンまたはそのバリアント、例えば、機能的バリアントである。一部の実施形態では、インターロイキンは炎症促進性インターロイキンである。一部の実施形態では、インターロイキンは、インターロイキン－２（ＩＬ－２）、インターロイキン－１２（ＩＬ－１２）、インターロイキン－１５（ＩＬ－１５）、インターロイキン－１８（ＩＬ－１８）、インターロイキン－２１（ＩＬ－２１）、インターロイキン－７（ＩＬ－７）、またはインターフェロンガンマから選択される。一部の実施形態では、サイトカイン分子は炎症促進性サイトカインである。
[00785]ある特定の実施形態では、サイトカインは一本鎖サイトカインである。ある特定の実施形態では、サイトカインは、多鎖サイトカインである（例えば、サイトカインは、２つまたはより多くの（例えば、２つの）ポリペプチド鎖を含む。例示的な多鎖サイトカインはＩＬ－１２である。
[00786]有用なサイトカインの例としては、ＧＭ－ＣＳＦ、ＩＬ－１α、ＩＬ－１β、ＩＬ－２、ＩＬ－３、ＩＬ－４、ＩＬ－５、ＩＬ－６、ＩＬ－７、ＩＬ－８、ＩＬ－１０、ＩＬ－１２、ＩＬ－２１、ＩＦＮ－α、ＩＦＮ－β、ＩＦＮ－γ、ＭＩＰ－１α、ＭＩＰ－１β、ＴＧＦ－β、ＴＮＦ－α、およびＴＮＦβが挙げられるがそれに限定されない。一実施形態では、多特異性または多機能性ポリペプチドのサイトカインは、ＧＭ－ＣＳＦ、ＩＬ－２、ＩＬ－７、ＩＬ－８、ＩＬ－１０、ＩＬ－１２、ＩＬ－１５、ＩＬ－２１、ＩＦＮ－α、ＩＦＮ－γ、ＭＩＰ－１α、ＭＩＰ－１βおよびＴＧＦ－βの群から選択されるサイトカインである。一実施形態では、多特異性または多機能性ポリペプチドのサイトカインは、ＩＬ－２、ＩＬ－７、ＩＬ－１０、ＩＬ－１２、ＩＬ－１５、ＩＦＮ－α、およびＩＦＮ－γの群から選択されるサイトカインである。ある特定の実施形態では、サイトカインは、Ｎ－および／またはＯ－グリコシル化部位を除去するために突然変異される。グリコシル化の排除は、組換え産生において得られ得る製造物の均質性を増加させる。ある特定の実施形態では、サイトカインは、ＴＧＦ－βである。ある特定の実施形態では、多特異性または多機能性ポリペプチドは、ＴＧＦ－β阻害剤を含む。
[00787]一実施形態では、多特異性または多機能性ポリペプチドのサイトカインはＩＬ－２である。詳細な実施形態では、ＩＬ－２サイトカインは、活性化Ｔリンパ球細胞の増殖、活性化Ｔリンパ球細胞の分化、細胞傷害性Ｔ細胞（ＣＴＬ）活性、活性化Ｂ細胞の増殖、活性化Ｂ細胞の分化、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞の増殖、ＮＫ細胞の分化、活性化Ｔ細胞またはＮＫ細胞によるサイトカイン分泌、およびＮＫ／リンパ球活性化キラー（ＬＡＫ）抗腫瘍細胞傷害性からなる群から選択される細胞応答のうちの１つまたは複数を誘発することができる。別の特定の実施形態では、ＩＬ－２サイトカインは、ＩＬ－２受容体のアルファ－サブユニットに対して低減した結合親和性を有する突然変異体ＩＬ－２サイトカインである。ベータ－およびガンマ－サブユニット（それぞれＣＤ１２２およびＣＤ１３２としても公知）と共に、アルファ－サブユニット（ＣＤ２５としても公知）は、ヘテロ三量体高親和性ＩＬ－２受容体を形成するが、β－およびγ－サブユニットのみからなる二量体受容体は、中親和性ＩＬ－２受容体と称される。ＰＣＴ特許出願番号ＰＣＴ／ＥＰ２０１２／０５１９９１（これにより参照により全体が本明細書に組み込まれる）に記載されるように、ＩＬ－２受容体のアルファ－サブユニットに対して低減した結合を有する突然変異体ＩＬ－２ポリペプチドは、野生型ＩＬ－２ポリペプチドと比較して、制御性Ｔ細胞中でＩＬ－２シグナル伝達を誘導する低減した能力を有し、Ｔ細胞中でより少ない活性化誘導性細胞死（ＡＩＣＤ）を誘導し、かつｉｎ ｖｉｖｏでの低減した毒性プロファイルを有する。低減した毒性を有するそのようなサイトカインの使用は、Ｆｃドメインの存在に起因して長い血清半減期を有する本発明による多特異性または多機能性ポリペプチドにおいて特に有利である。一実施形態では、本発明による多特異性または多機能性ポリペプチドの突然変異体ＩＬ－２サイトカインは、突然変異されていないＩＬ－２サイトカインと比較して、ＩＬ－２受容体のアルファ－サブユニット（ＣＤ２５）に対する突然変異体ＩＬ－２サイトカインの親和性を低減しまたは消失させるが、中親和性ＩＬ－２受容体（ＩＬ－２受容体のβおよびγサブユニットからなる）に対する突然変異体ＩＬ－２サイトカインの親和性を保存する少なくとも１つのアミノ酸突然変異を含む。一実施形態では、１つまたは複数のアミノ酸突然変異はアミノ酸置換である。詳細な実施形態では、突然変異体ＩＬ－２サイトカインは、ヒトＩＬ－２の残基４２、４５、および７２に対応する位置から選択される１つ、２つまたは３つの位置における１つ、２つまたは３つのアミノ酸置換を含む。より詳細な実施形態では、突然変異体ＩＬ－２サイトカインは、ヒトＩＬ－２の残基４２、４５および７２に対応する位置における３つのアミノ酸置換を含む。よりいっそう詳細な実施形態では、突然変異体ＩＬ－２サイトカインは、アミノ酸置換Ｆ４２Ａ、Ｙ４５ＡおよびＬ７２Ｇを含むヒトＩＬ－２である。一実施形態では、突然変異体ＩＬ－２サイトカインは、ヒトＩＬ－２の３位に対応する位置におけるアミノ酸突然変異を追加的に含み、これはＩＬ－２のＯ－グリコシル化部位を排除する。特に、前記追加のアミノ酸突然変異は、スレオニン残基をアラニン残基によって置き換えるアミノ酸置換である。本発明において有用な特定の突然変異体ＩＬ－２サイトカインは、ヒトＩＬ－２の残基３、４２、４５および７２に対応する位置における４つのアミノ酸置換を含む。特定のアミノ酸置換は、Ｔ３Ａ、Ｆ４２Ａ、Ｙ４５ＡおよびＬ７２Ｇである。ＰＣＴ特許出願番号ＰＣＴ／ＥＰ２０１２／０５１９９１および付加された実施例において実証されるように、前記四重突然変異体ＩＬ－２ポリペプチド（ＩＬ－２ ｑｍ）は、ＣＤ２５への検出可能な結合を呈さず、Ｔ細胞においてアポトーシスを誘導する低減した能力を呈し、制御性Ｔ細胞（Ｔ．ｓｕｂ．ｒｅｇ ｃｅｌｌｓ）においてＩＬ－２シグナル伝達を誘導する低減した能力を呈し、かつｉｎ ｖｉｖｏでの低減した毒性プロファイルを呈する。しかしながら、それは、エフェクター細胞においてＩＬ－２シグナル伝達を活性化させ、エフェクター細胞の増殖を誘導し、かつＮＫ細胞により二次的なサイトカインとしてＩＦＮ－γを生成させる能力を保持する。
[00788]上記の実施形態のいずれかによるＩＬ－２または突然変異体ＩＬ－２サイトカインは、発現または安定性の増加などのさらなる利点を提供する追加の突然変異を含んでもよい。例えば、１２５位におけるシステインは、ジスルフィド架橋によるＩＬ－２二量体の形成を回避するために、アラニンなどの中性アミノ酸で置き換えられてもよい。そのため、ある特定の実施形態では、本発明による多特異性または多機能性ポリペプチドのＩＬ－２または突然変異体ＩＬ－２サイトカインは、ヒトＩＬ－２の残基１２５に対応する位置における追加のアミノ酸突然変異を含む。一実施形態では、前記追加のアミノ酸突然変異はアミノ酸置換Ｃ１２５Ａである。
[00789]特定の実施形態では、多特異性または多機能性ポリペプチドのＩＬ－２サイトカインは、配列番号６３６４
［ＡＰＴＳＳＳＴＫＫＴＱＬＱＬＥＨＬＬＬＤＬＱＭＩＬＮＧＩＮＮＹＫＮＰＫＬＴＲＭＬＴＦＫＦＹＭＰＫＫＡＴＥＬＫＨＬＱＣＬＥＥＥＬＫＰＬＥＥＶＬＮＬＡＱＳＫＮＦＨＬＲＰＲＤＬＩＳＮＩＮＶＩＶＬＥＬＫＧＳＥＴＴＦＭＣＥＹＡＤＥＴＡＴＩＶＥＦＬＮＲＷＩＴＦＡＱＳＩＩＳＴＬＴ］のポリペプチド配列を含む。別の特定の実施形態では、多特異性または多機能性ポリペプチドのＩＬ－２サイトカインは、配列番号６３６５
［ＡＰＡＳＳＳＴＫＫＴＱＬＱＬＥＨＬＬＬＤＬＱＭＩＬＮＧＩＮＮＹＫＮＰＫＬＴＲＭＬＴＡＫＦＡＭＰＫＫＡＴＥＬＫＨＬＱＣＬＥＥＥＬＫＰＬＥＥＶＬＮＧＡＱＳＫＮＦＨＬＲＰＲＤＬＩＳＮＩＮＶＩＶＬＥＬＫＧＳＥＴＴＦＭＣＥＹＡＤＥＴＡＴＩＶＥＦＬＮＲＷＩＴＦＡＱＳＩＩＳＴＬＴ］のポリペプチド配列を含む。
[00790]別の実施形態では、多特異性または多機能性ポリペプチドのサイトカインはＩＬ－１２である。詳細な実施形態では、前記ＩＬ－１２サイトカインは一本鎖ＩＬ－１２サイトカインである。よりいっそう詳細な実施形態では、一本鎖ＩＬ－１２サイトカインは、配列番号６３６６
［ＩＷＥＬＫＫＤＶＹＶＶＥＬＤＷＹＰＤＡＰＧＥＭＶＶＬＴＣＤＴＰＥＥＤＧＩＴＷＴＬＤＱＳＳＥＶＬＧＳＧＫＴＬＴＩＱＶＫＥＦＧＤＡＧＱＹＴＣＨＫＧＧＥＶＬＳＨＳＬＬＬＬＨＫＫＥＤＧＩＷＳＴＤＩＬＫＤＱＫＥＰＫＮＫＴＦＬＲＣＥＡＫＮＹＳＧＲＦＴＣＷＷＬＴＴＩＳＴＤＬＴＦＳＶＫＳＳＲＧＳＳＤＰＱＧＶＴＣＧＡＡＴＬＳＡＥＲＶＲＧＤＮＫＥＹＥＹＳＶＥＣＱＥＤＳＡＣＰＡＡＥＥＳＬＰＩＥＶＭＶＤＡＶＨＫＬＫＹＥＮＹＴＳＳＦＦＩＲＤＩＩＫＰＤＰＰＫＮＬＱＬＫＰＬＫＮＳＲＱＶＥＶＳＷＥＹＰＤＴＷＳＴＰＨＳＹＦＳＬＴＦＣＶＱＶＱＧＫＳＫＲＥＫＫＤＲＶＦＴＤＫＴＳＡＴＶＩＣＲＫＮＡＳＩＳＶＲＡＱＤＲＹＹＳＳＳＷＳＥＷＡＳＶＰＣＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＲＮＬＰＶＡＴＰＤＰＧＭＦＰＣＬＨＨＳＱＮＬＬＲＡＶＳＮＭＬＱＫＡＲＱＴＬＥＦＹＰＣＴＳＥＥＩＤＨＥＤＩＴＫＤＫＴＳＴＶＥＡＣＬＰＬＥＬＴＫＮＥＳＣＬＮＳＲＥＴＳＦＩＴＮＧＳＣＬＡＳＲＫＴＳＦＭＭＡＬＣＬＳＳＩＹＥＤＬＫＭＹＱＶＥＦＫＴＭＮＡＫＬＬＭＤＰＫＲＱＩＦＬＤＱＮＭＬＡＶＩＤＥＬＭＱＡＬＮＦＮＳＥＴＶＰＱＫＳＳＬＥＥＰＤＦＹＫＴＫＩＫＬＣＩＬＬＨＡＦＲＩＲＡＶＴＩＤＲＶＭＳＹＬＮＡＳ］のポリペプチド配列を含む。一実施形態では、ＩＬ－１２サイトカインは、ＮＫ細胞の増殖、ＮＫ細胞の分化、Ｔ細胞の増殖、およびＴ細胞の分化からなる群から選択される細胞応答のうちの１つまたは複数を誘発することができる。
[00791]別の実施形態では、多特異性または多機能性ポリペプチドのサイトカインはＩＬ－１０である。詳細な実施形態では、前記ＩＬ－１０サイトカインは一本鎖ＩＬ－１０サイトカインである。よりいっそう詳細な実施形態では、一本鎖ＩＬ－１０サイトカインは、配列番号６３６７
［ＳＰＧＱＧＴＱＳＥＮＳＣＴＨＦＰＧＮＬＰＮＭＬＲＤＬＲＤＡＦＳＲＶＫＴＦＦＱＭＫＤＱＬＤＮＬＬＬＫＥＳＬＬＥＤＦＫＧＹＬＧＣＱＡＬＳＥＭＩＱＦＹＬＥＥＶＭＰＱＡＥＮＱＤＰＤＩＫＡＨＶＮＳＬＧＥＮＬＫＴＬＲＬＲＬＲＲＣＨＲＦＬＰＣＥＮＫＳＫＡＶＥＱＶＫＮＡＦＮＫＬＱＥＫＧＩＹＫＡＭＳＥＦＤＩＦＩＮＹＩＥＡＹＭＴＭＫＩＲＮＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＳＰＧＱＧＴＱＳＥＮＳＣＴＨＦＰＧＮＬＰＮＭＬＲＤＬＲＤＡＦＳＲＶＫＴＦＦＱＭＫＤＱＬＤＮＬＬＬＫＥＳＬＬＥＤＦＫＧＹＬＧＣＱＡＬＳＥＭＩＱＦＹＬＥＥＶＭＰＱＡＥＮＱＤＰＤＩＫＡＨＶＮＳＬＧＥＮＬＫＴＬＲＬＲＬＲＲＣＨＲＦＬＰＣＥＮＫＳＫＡＶＥＱＶＫＮＡＦＮＫＬＱＥＫＧＩＹＫＡＭＳＥＦＤＩＦＩＮＹＩＥＡＹＭＴＭＫＩＲＮ］のポリペプチド配列を含む。別の詳細な実施形態では、ＩＬ－１０サイトカインは、単量体ＩＬ－１０サイトカインである。より詳細な実施形態では、単量体ＩＬ－１０サイトカインは、配列番号６３６８
［ＳＰＧＱＧＴＱＳＥＮＳＣＴＨＦＰＧＮＬＰＮＭＬＲＤＬＲＤＡＦＳＲＶＫＴＦＦＱＭＫＤＱＬＤＮＬＬＬＫＥＳＬＬＥＤＦＫＧＹＬＧＣＱＡＬＳＥＭＩＱＦＹＬＥＥＶＭＰＱＡＥＮＱＤＰＤＩＫＡＨＶＮＳＬＧＥＮＬＫＴＬＲＬＲＬＲＲＣＨＲＦＬＰＣＥＮＧＧＧＳＧＧＫＳＫＡＶＥＱＶＫＮＡＦＮＫＬＱＥＫＧＩＹＫＡＭＳＥＦＤＩＦＩＮＹＩＥＡＹＭＴＭＫＩＲＮ］のポリペプチド配列を含む。一実施形態では、ＩＬ－１０サイトカインは、サイトカイン分泌の阻害、抗原提示細胞による抗原提示の阻害、酸素ラジカル放出の低減、およびＴ細胞増殖の阻害からなる群から選択される細胞応答のうちの１つまたは複数を誘発することができる。サイトカインがＩＬ－１０である本発明による多特異性または多機能性ポリペプチドは、例えば、炎症性障害の処置における、炎症の下方調節のために特に有用である。
[00792]別の実施形態では、多特異性または多機能性ポリペプチドのサイトカインはＩＬ－１５である。詳細な実施形態では、前記ＩＬ－１５サイトカインは、ＩＬ－１５受容体のα－サブユニットに対して低減した結合親和性を有する突然変異体ＩＬ－１５サイトカインである。理論に拘泥するものではないが、ＩＬ－１５受容体のアルファ－サブユニットへの低減した結合を有する突然変異体ＩＬ－１５ポリペプチドは、野生型ＩＬ－１５ポリペプチドと比較して、身体の全体を通じて線維芽細胞に結合する低減した能力を有し、向上した薬物動態および毒性プロファイルをもたらす。記載される突然変異体ＩＬ－２および突然変異体ＩＬ－１５エフェクター部分などの低減した毒性を有するサイトカインの使用は、Ｆｃドメインの存在に起因して長い血清半減期を有する本発明による多特異性または多機能性ポリペプチドにおいて特に有利である。一実施形態では、本発明による多特異性または多機能性ポリペプチドの突然変異体ＩＬ－１５サイトカインは、突然変異していないＩＬ－１５サイトカインと比較して、ＩＬ－１５受容体のアルファ－サブユニットに対する突然変異体ＩＬ－１５サイトカインの親和性を低減しまたは消失させるが、中親和性ＩＬ－１５／ＩＬ－２受容体（ＩＬ－１５／ＩＬ－２受容体のベータ－およびガンマ－サブユニットからなる）に対する突然変異体ＩＬ－１５サイトカインの親和性を保存する少なくとも１つのアミノ酸突然変異を含む。一実施形態では、アミノ酸突然変異はアミノ酸置換である。詳細な実施形態では、突然変異体ＩＬ－１５サイトカインは、ヒトＩＬ－１５の残基５３に対応する位置においてアミノ酸置換を含む。より詳細な実施形態では、突然変異体ＩＬ－１５サイトカインは、アミノ酸置換Ｅ５３Ａを含むヒトＩＬ－１５である。一実施形態では、突然変異体ＩＬ－１５サイトカインは、ヒトＩＬ－１５の７９位に対応する位置においてアミノ酸突然変異を追加的に含み、これはＩＬ－１５のＮ－グリコシル化部位を排除する。特に、前記追加のアミノ酸突然変異は、アスパラギン残基をアラニン残基によって置き換えるアミノ酸置換である。よりいっそう詳細な実施形態では、ＩＬ－１５サイトカインは、配列番号６３７０
［ＮＷＶＮＶＩＳＤＬＫＫＩＥＤＬＩＱＳＭＨＩＤＡＴＬＹＴＥＳＤＶＨＰＳＣＫＶＴＡＭＫＣＦＬＬＥＬＱＶＩＳＬＡＳＧＤＡＳＩＨＤＴＶＥＮＬＩＩＬＡＮＮＳＬＳＳＮＧＡＶＴＥＳＧＣＫＥＣＥＥＬＥＥＫＮＩＫＥＦＬＱＳＦＶＨＩＶＱＭＦＩＮＴＳ］のポリペプチド配列を含む。一実施形態では、ＩＬ－１５サイトカインは、活性化Ｔリンパ球細胞の増殖、活性化Ｔリンパ球細胞の分化、細胞傷害性Ｔ細胞（ＣＴＬ）活性、活性化Ｂ細胞の増殖、活性化Ｂ細胞の分化、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞の増殖、ＮＫ細胞の分化、活性化Ｔ細胞またはＮＫ細胞によるサイトカイン分泌、およびＮＫ／リンパ球活性化キラー（ＬＡＫ）抗腫瘍細胞傷害性からなる群から選択される細胞応答のうちの１つまたは複数を誘発することができる。
[00793]多特異性または多機能性ポリペプチド中のエフェクター部分として有用な突然変異体サイトカイン分子は、当該技術分野において周知の遺伝学的または化学的方法を使用して欠失、置換、挿入または修飾によって調製することができる。遺伝学的方法は、コーディングＤＮＡ配列の部位特異的突然変異誘発、ＰＣＲ、および遺伝子合成などを含んでもよい。正しいヌクレオチド変化は、例えばシークエンシングによって検証することができる。置換または挿入は、天然アミノ酸残基の他に非天然アミノ酸残基を伴ってもよい。アミノ酸修飾としては、グリコシル化部位の付加もしくは除去または炭水化物の取付けなどの化学修飾の周知の方法が挙げられる。
[00794]一実施形態では、多特異性または多機能性ポリペプチドのサイトカイン、特に一本鎖サイトカインはＧＭ－ＣＳＦである。詳細な実施形態では、ＧＭ－ＣＳＦサイトカインは、顆粒球、単球または樹状細胞において増殖および／または分化を誘発することができる。一実施形態では、多特異性または多機能性ポリペプチドのサイトカイン、特に一本鎖サイトカインはＩＦＮ－αである。詳細な実施形態では、ＩＦＮ－αサイトカインは、ウイルス感染細胞におけるウイルス複製の阻害、および主要組織適合複合体Ｉ（ＭＨＣ Ｉ）の発現の上方調節からなる群から選択される細胞応答のうちの１つまたは複数を誘発することができる。別の詳細な実施形態では、ＩＦＮ－αサイトカインは、腫瘍細胞において増殖を阻害することができる。一実施形態では、多特異性または多機能性ポリペプチドのサイトカイン、特に一本鎖サイトカインはＩＦＮγである。詳細な実施形態では、ＩＦＮ－γサイトカインは、マクロファージ活性の増加、ＭＨＣ分子の発現の増加、およびＮＫ細胞活性の増加の群から選択される細胞応答のうちの１つまたは複数を誘発することができる。一実施形態では、多特異性または多機能性ポリペプチドのサイトカイン、特に一本鎖サイトカインはＩＬ－７である。詳細な実施形態では、ＩＬ－７サイトカインは、Ｔおよび／またはＢリンパ球の増殖を誘発することができる。一実施形態では、多特異性または多機能性ポリペプチドのサイトカイン、特に一本鎖サイトカインはＩＬ－８である。詳細な実施形態では、ＩＬ－８サイトカインは、好中球において走化性を誘発することができる。一実施形態では、多特異性または多機能性ポリペプチドのサイトカイン、特に一本鎖サイトカインはＭＩＰ－１αである。詳細な実施形態では、ＭＩＰ－１αサイトカインは、単球およびＴリンパ球細胞において走化性を誘発することができる。一実施形態では、多特異性または多機能性ポリペプチドのサイトカイン、特に一本鎖サイトカインはＭＩＰ－１βである。詳細な実施形態では、ＭＩＰ－１βサイトカインは、単球およびＴリンパ球細胞において走化性を誘発することができる。一実施形態では、多特異性または多機能性ポリペプチドのサイトカイン、特に一本鎖サイトカインはＴＧＦ－βである。詳細な実施形態では、ＴＧＦ－βサイトカインは、単球における走化性、マクロファージにおける走化性、活性化マクロファージにおけるＩＬ－１発現の上方調節、および活性化Ｂ細胞におけるＩｇＡ発現の上方調節からなる群から選択される細胞応答のうちの１つまたは複数を誘発することができる。
[00795]一実施形態では、本発明の多特異性または多機能性ポリペプチドは、対照サイトカインについてよりも少なくとも約１、１．５、２、２．５、３、３．５、４、４．５、５、５．５、６、６．５、７、７．５、８、８．５、９、９．５または１０倍高い解離定数（ＫＤ）でサイトカイン受容体に結合する。別の実施形態では、多特異性または多機能性ポリペプチドは、２つまたはより多くのエフェクター部分を含む対応する多特異性または多機能性ポリペプチドについてよりも少なくとも２、３、４、５、６、７、８、９、または１０倍高いＫＤでサイトカイン受容体に結合する。別の実施形態では、多特異性または多機能性ポリペプチドは、２つまたはより多くのサイトカインを含む対応する多特異性または多機能性ポリペプチドについてよりも約１０倍高い解離定数ＫＤでサイトカイン受容体に結合する。
[00796]一部の実施形態では、本明細書に開示される多特異性分子は、サイトカイン分子を含む。一部の実施形態では、サイトカイン分子は、サイトカインの全長、断片もしくはバリアント；サイトカイン受容体ドメイン、例えば、サイトカイン受容体二量体化ドメイン；またはサイトカイン受容体のアゴニスト、例えば、サイトカイン受容体に対する抗体分子（例えば、アゴニスト抗体）を含む。
[00797]一部の実施形態では、サイトカイン分子は、ＩＬ－２、ＩＬ－１２、ＩＬ－１５、ＩＬ－１８、ＩＬ－７、ＩＬ－２１、もしくはインターフェロンガンマ、もしくはその断片もしくはバリアント、または上記のサイトカインの任意の組合せから選択される。サイトカイン分子は、単量体または二量体であり得る。一部の実施形態では、サイトカイン分子は、サイトカイン受容体二量体化ドメインをさらに含むことができる。
[00798]他の実施形態では、サイトカイン分子は、サイトカイン受容体のアゴニスト、例えば、ＩＬ－１５ＲａまたはＩＬ－２１Ｒから選択されるサイトカイン受容体に対する抗体分子（例えば、アゴニスト抗体）である。
[00799]一実施形態では、サイトカイン分子は、ＩＬ－１５、例えば、ヒトＩＬ－１５（例えば、アミノ酸配列：
ＮＷＶＮＶＩＳＤＬＫＫＩＥＤＬＩＱＳＭＨＩＤＡＴＬＹＴＥＳＤＶＨＰＳＣＫＶＴＡＭＫＣＦＬＬＥＬＱＶＩＳＬＥＳＧＤＡＳＩＨＤＴＶＥＮＬＩＩＬＡＮＮＳＬＳＳＮＧＮＶＴＥＳＧＣＫＥＣＥＥＬＥＥＫＮＩＫＥＦＬＱＳＦＶＨＩＶＱＭＦＩＮＴＳ（配列番号６１９１）、その断片、またはそれに対して実質的に同一である（例えば、それに対して９５％～９９．９％同一であるか、または配列番号６１９１のアミノ酸配列に対して少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、５個、１０個もしくは１５個以下である変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有する）アミノ酸配列を含む）である。
[00800]一部の実施形態では、サイトカイン分子は、受容体二量体化ドメイン、例えば、ＩＬ１５Ｒアルファ二量体化ドメインを含む。一実施形態では、ＩＬ１５Ｒアルファ二量体化ドメインは、アミノ酸配列：
ＭＡＰＲＲＡＲＧＣＲＴＬＧＬＰＡＬＬＬＬＬＬＬＲＰＰＡＴＲＧＩＴＣＰＰＰＭＳＶＥＨＡＤＩＷＶＫＳＹＳＬＹＳＲＥＲＹＩＣＮＳＧＦＫＲＫＡＧＴＳＳＬＴＥＣＶＬ（配列番号６１９２）、その断片、またはそれに対して実質的に同一である（例えば、それに対して９５％～９９．９％同一であるか、もしくは配列番号６１９２のアミノ酸配列に対して少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、５個、１０個もしくは１５個以下である変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有するアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、多特異性分子のサイトカイン分子（例えば、ＩＬ－１５）および受容体二量体化ドメイン（例えば、ＩＬ１５Ｒアルファ二量体化ドメイン）は、例えば、リンカー（例えば、Ｇｌｙ－Ｓｅｒリンカー、例えば、アミノ酸配列ＳＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＳＧＧＧＧＳＬＱ（配列番号６１９３）を含むリンカーを介して共有結合によって連結される。他の実施形態では、多特異性分子のサイトカイン分子（例えば、ＩＬ－１５）および受容体二量体化ドメイン（例えば、ＩＬ１５Ｒアルファ二量体化ドメイン）は、共有結合的に連結されておらず、例えば、非共有結合的に会合している。
[00801]他の実施形態では、サイトカイン分子は、ＩＬ－２、例えば、ヒトＩＬ－２（例えば、アミノ酸配列：
ＡＰＴＳＳＳＴＫＫＴＱＬＱＬＥＨＬＬＬＤＬＱＭＩＬＮＧＩＮＮＹＫＮＰＫＬＴＲＭＬＴＦＫＦＹＭＰＫＫＡＴＥＬＫＨＬＱＣＬＥＥＥＬＫＰＬＥＥＶＬＮＬＡＱＳＫＮＦＨＬＲＰＲＤＬＩＳＮＩＮＶＩＶＬＥＬＫＧＳＥＴＴＦＭＣＥＹＡＤＥＴＡＴＩＶＥＦＬＮＲＷＩＴＦＣＱＳＩＩＳＴＬＴ（配列番号６１９４）、その断片、またはそれに対して実質的に同一である（例えば、それに対して９５％～９９．９％同一であるか、または配列番号６１９４のアミノ酸配列に対して少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、５個、１０個、もしくは１５個以下である変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有する）アミノ酸配列を含む）である。
[00802]他の実施形態では、サイトカイン分子は、ＩＬ－１８、例えば、ヒトＩＬ－１８（例えば、アミノ酸配列：ＹＦＧＫＬＥＳＫＬＳＶＩＲＮＬＮＤＱＶＬＦＩＤＱＧＮＲＰＬＦＥＤＭＴＤＳＤＣＲＤＮＡＰＲＴＩＦＩＩＳＭＹＫＤＳＱＰＲＧＭ
[00803]ＡＶＴＩＳＶＫＣＥＫＩＳＴＬＳＣＥＮＫＩＩＳＦＫＥＭＮＰＰＤＮＩＫＤＴＫＳＤＩＩＦＦＱＲＳＶＰＧＨＤＮＫＭＱＦＥＳＳＳＹＥＧＹＦＬＡＣＥＫＥＲＤＬＦＫＬＩＬＫＫＥＤＥＬＧＤＲＳＩＭＦＴＶＱＮＥＤ（配列番号６１９５）、その断片、またはそれに対して実質的に同一である（例えば、それに対して９５％～９９．９％同一であるか、または配列番号６１９５のアミノ酸配列に対して少なくとも１個のアミノ酸変更であるが、５、１０もしくは１５個以下の変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有する）アミノ酸配列を含む）である。
[00804]他の実施形態では、サイトカイン分子は、ＩＬ－２１、例えば、ヒトＩＬ－２１（例えば、アミノ酸配列：
ＱＧＱＤＲＨＭＩＲＭＲＱＬＩＤＩＶＤＱＬＫＮＹＶＮＤＬＶＰＥＦＬＰＡＰＥＤＶＥＴＮＣＥＷＳＡＦＳＣＦＱＫＡＱＬＫＳＡＮＴＧＮＮＥＲＩＩＮＶＳＩＫＫＬＫＲＫＰＰＳＴＮＡＧＲＲＱＫＨＲＬＴＣＰＳＣＤＳＹＥＫＫＰＰＫＥＦＬＥＲＦＫＳＬＬＱＫＭＩＨＱＨＬＳＳＲＴＨＧＳＥＤＳ（配列番号６１９６）、その断片、またはそれに対して実質的に同一である（例えば、それに対して９５％～９９．９％同一であるか、または配列番号６１９６のアミノ酸配列に対して少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、５個、１０個、もしくは１５個以下である変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有する）アミノ酸配列を含む）である。
[00805]さらに他の実施形態では、サイトカイン分子は、インターフェロンガンマ、例えば、ヒトインターフェロンガンマ（例えば、アミノ酸配列：
ＱＤＰＹＶＫＥＡＥＮＬＫＫＹＦＮＡＧＨＳＤＶＡＤＮＧＴＬＦＬＧＩＬＫＮＷＫＥＥＳＤＲＫＩＭＱＳＱＩＶＳＦＹＦＫＬＦＫＮＦＫＤＤＱＳＩＱＫＳＶＥＴＩＫＥＤＭＮＶＫＦＦＮＳＮＫＫＫＲＤＤＦＥＫＬＴＮＹＳＶＴＤＬＮＶＱＲＫＡＩＨＥＬＩＱＶＭＡＥＬＳＰＡＡＫＴＧＫＲＫＲＳＱＭＬＦＲＧ（配列番号６１９７）、その断片、またはそれに対して実質的に同一である（例えば、それに対して９５％～９９．９％同一であるか、または配列番号６１９７のアミノ酸配列に対して少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、５個、１０個、もしくは１５個以下である変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有する）アミノ酸配列を含む）である。
ＴＧＦ－β阻害剤
[00806]一態様では、ＴＧＦ－βの調節薬（例えば、ＴＧＦ－β阻害剤）を含む多特異性または多機能性ポリペプチド（例えば、抗体分子）が本明細書で提供される。一部の実施形態では、ＴＧＦ－β阻害剤は、ＴＧＦ－βに結合し、それを阻害する、例えば、ＴＧＦ－βの活性を低減する。一部の実施形態では、ＴＧＦ－β阻害剤はＴＧＦ－β１を阻害する（例えば、その活性を低減する）。一部の実施形態では、ＴＧＦ－β阻害剤はＴＧＦ－β２を阻害する（例えば、その活性を低減する）。一部の実施形態では、ＴＧＦ－β阻害剤はＴＧＦ－β３を阻害する（例えば、その活性を低減する）。一部の実施形態では、ＴＧＦ－β阻害剤はＴＧＦ－β１およびＴＧＦ－β３を阻害する（例えば、それらの活性を低減する）。一部の実施形態では、ＴＧＦ－β阻害剤はＴＧＦ－β１、ＴＧＦ－β２、およびＴＧＦ－β３を阻害する（例えば、それらの活性を低減する）。
[00807]一部の実施形態では、ＴＧＦ－β阻害剤は、ＴＧＦ－βを阻害する（例えば、その活性を低減する）ことができるＴＧＦ－β受容体の一部分（例えば、ＴＧＦ－β受容体の細胞外ドメイン）、またはＴＧＦ－β受容体の機能的断片もしくはバリアントを含む。一部の実施形態では、ＴＧＦ－β阻害剤はＴＧＦＢＲ１ポリペプチド（例えば、ＴＧＦＢＲ１またはその機能的バリアントの細胞外ドメイン）を含む。一部の実施形態では、ＴＧＦ－β阻害剤はＴＧＦＢＲ２ポリペプチド（例えば、ＴＧＦＢＲ２またはその機能的バリアントの細胞外ドメイン）を含む。一部の実施形態では、ＴＧＦ－β阻害剤はＴＧＦＢＲ３ポリペプチド（例えば、ＴＧＦＢＲ３またはその機能的バリアントの細胞外ドメイン）を含む。一部の実施形態では、ＴＧＦ－β阻害剤はＴＧＦＢＲ１ポリペプチド（例えば、ＴＧＦＢＲ１またはその機能的バリアントの細胞外ドメイン）およびＴＧＦＢＲ２ポリペプチド（例えば、ＴＧＦＢＲ２またはその機能的バリアントの細胞外ドメイン）を含む。一部の実施形態では、ＴＧＦ－β阻害剤はＴＧＦＢＲ１ポリペプチド（例えば、ＴＧＦＢＲ１またはその機能的バリアントの細胞外ドメイン）およびＴＧＦＢＲ３ポリペプチド（例えば、ＴＧＦＢＲ３またはその機能的バリアントの細胞外ドメイン）を含む。一部の実施形態では、ＴＧＦ－β阻害剤はＴＧＦＢＲ２ポリペプチド（例えば、ＴＧＦＢＲ２またはその機能的バリアントの細胞外ドメイン）およびＴＧＦＢＲ３ポリペプチド（例えば、ＴＧＦＢＲ３またはその機能的バリアントの細胞外ドメイン）を含む。
[00808]ＴＧＦ－β阻害剤として使用することができる例示的なＴＧＦ－β受容体ポリペプチドは、米国特許第８９９３５２４号、同第９６７６８６３号、同第８６５８１３５号、米国特許出願公開第２０１５００５６１９９号、同第２００７０１８４０５２号、および国際公開第２０１７０３７６３４号に開示されており、これらのすべては全体が参照により本明細書に組み込まれる。
[00809]一部の実施形態では、ＴＧＦ－β阻害剤は、ＴＧＦＢＲ１またはそれに対して実質的に同一の配列（例えば、それに対して少なくとも８０％、８５％、９０％、もしくは９５％同一の配列）の細胞外ドメインを含む。一部の実施形態では、ＴＧＦ－β阻害剤は、配列番号６３８１またはそれに対して実質的に同一の配列（例えば、それに対して少なくとも８０％、８５％、９０％、もしくは９５％同一の配列）の細胞外ドメインを含む。一部の実施形態では、ＴＧＦ－β阻害剤は、配列番号６３８２またはそれに対して実質的に同一の配列（例えば、それに対して少なくとも８０％、８５％、９０％、もしくは９５％同一の配列）の細胞外ドメインを含む。一部の実施形態では、ＴＧＦ－β阻害剤は、配列番号６３８３またはそれに対して実質的に同一の配列（例えば、それに対して少なくとも８０％、８５％、９０％、もしくは９５％同一の配列）の細胞外ドメインを含む。一部の実施形態では、ＴＧＦ－β阻害剤は、配列番号６３９０のアミノ酸配列またはそれに対して実質的に同一の配列（例えば、それに対して少なくとも８０％、８５％、９０％、もしくは９５％同一の配列）を含む。一部の実施形態では、ＴＧＦ－β阻害剤は、配列番号６３９１のアミノ酸配列またはそれに対して実質的に同一の配列（例えば、それに対して少なくとも８０％、８５％、９０％、もしくは９５％同一の配列）を含む。
[00810]一部の実施形態では、ＴＧＦ－β阻害剤は、ＴＧＦＢＲ２またはそれに対して実質的に同一の配列（例えば、それに対して少なくとも８０％、８５％、９０％、もしくは９５％同一の配列）の細胞外ドメインを含む。一部の実施形態では、ＴＧＦ－β阻害剤は、配列番号６３８４またはそれに対して実質的に同一の配列（例えば、それに対して少なくとも８０％、８５％、９０％、もしくは９５％同一の配列）の細胞外ドメインを含む。一部の実施形態では、ＴＧＦ－β阻害剤は、配列番号６３８５またはそれに対して実質的に同一の配列（例えば、それに対して少なくとも８０％、８５％、９０％、もしくは９５％同一の配列）の細胞外ドメインを含む。一部の実施形態では、ＴＧＦ－β阻害剤は、配列番号６３８６のアミノ酸配列またはそれに対して実質的に同一の配列（例えば、それに対して少なくとも８０％、８５％、９０％、もしくは９５％同一の配列）を含む。一部の実施形態では、ＴＧＦ－β阻害剤は、配列番号６３８７のアミノ酸配列またはそれに対して実質的に同一の配列（例えば、それに対して少なくとも８０％、８５％、９０％、もしくは９５％同一の配列）を含む。一部の実施形態では、ＴＧＦ－β阻害剤は、配列番号６３８８のアミノ酸配列またはそれに対して実質的に同一の配列（例えば、それに対して少なくとも８０％、８５％、９０％、もしくは９５％同一の配列）を含む。一部の実施形態では、ＴＧＦ－β阻害剤は、配列番号６３８９のアミノ酸配列またはそれに対して実質的に同一の配列（例えば、それに対して少なくとも８０％、８５％、９０％、もしくは９５％同一の配列）を含む。
[00811]一部の実施形態では、ＴＧＦ－β阻害剤は、ＴＧＦＢＲ３またはそれに対して実質的に同一の配列（例えば、それに対して少なくとも８０％、８５％、９０％、もしくは９５％同一の配列）の細胞外ドメインを含む。一部の実施形態では、ＴＧＦ－β阻害剤は、配列番号６３９２またはそれに対して実質的に同一の配列（例えば、それに対して少なくとも８０％、８５％、９０％、もしくは９５％同一の配列）の細胞外ドメインを含む。一部の実施形態では、ＴＧＦ－β阻害剤は、配列番号６３９３またはそれに対して実質的に同一の配列（例えば、それに対して少なくとも８０％、８５％、９０％、もしくは９５％同一の配列）の細胞外ドメインを含む。一部の実施形態では、ＴＧＦ－β阻害剤は、配列番号６３９４のアミノ酸配列またはそれに対して実質的に同一の配列（例えば、それに対して少なくとも８０％、８５％、９０％、もしくは９５％同一の配列）を含む。
[00812]一部の実施形態では、ＴＧＦ－β阻害剤は１つ以下のＴＧＦ－β受容体細胞外ドメインを含む。一部の実施形態では、ＴＧＦ－β阻害剤は、例えば、リンカーを介して互いに連結された２つ以上（例えば、２つ、３つ、４つ、５つ、またはそれ以上）のＴＧＦ－β受容体細胞外ドメインを含む。
[00813]一部の実施形態では、多特異性分子は図２４Ａ～２４Ｄに示される構成を含む。一部の実施形態では、ＴＧＦβ阻害剤はＴＧＦ－ベータ受容体ＥＣＤホモ二量体を含む。一部の実施形態では、ＴＧＦβ阻害剤はＴＧＦ－ベータ受容体ＥＣＤヘテロ二量体を含む。一部の実施形態では、２つのＴＧＦＢＲ ＥＣＤドメインは２つのＦｃ領域、例えば、２つのＦｃ領域のＣ末端に連結される。一部の実施形態では、２つのＴＧＦＢＲ ＥＣＤドメインは、それぞれ、ＣＨ１およびＣＬに連結される。
Figure 2023542080000133
Figure 2023542080000134
Figure 2023542080000135
Figure 2023542080000136
Figure 2023542080000137
Figure 2023542080000138
Figure 2023542080000139
Figure 2023542080000140
 間質改変部分
[00814]固形腫瘍は、実質（新生細胞）、および新生細胞により誘導され、新生細胞が分散される、間質という、正常組織のものを模倣した、異なっているが相互依存性の２つのコンパートメントを含む別個の構造を有する。すべての腫瘍は、間質を有し、栄養サポートおよび老廃物の除去のために、間質を必要とする。細胞懸濁液として成長する腫瘍（例えば、白血病、腹水腫瘍）の場合、血漿が間質としての機能を果たす（Ｃｏｎｎｏｌｌｙ ＪＬ ｅｔ ａｌ． Ｔｕｍｏｒ Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ａｎｄ Ｔｕｍｏｒ Ｓｔｒｏｍａ Ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ． Ｉｎ： Ｋｕｆｅ ＤＷ ｅｔ ａｌ．， ｅｄｉｔｏｒｓ． Ｈｏｌｌａｎｄ－Ｆｒｅｉ Ｃａｎｃｅｒ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ． ６ｔｈ ｅｄｉｔｉｏｎ． Ｈａｍｉｌｔｏｎ： ＢＣ Ｄｅｃｋｅｒ； ２００３）。間質には、細胞外マトリックス（ＥＣＭ）および細胞外分子とともに、線維芽細胞／筋線維芽細胞、膠細胞、上皮細胞、脂肪細胞、血管細胞、平滑筋細胞、および免疫細胞を含む様々な細胞型が含まれる（Ｌｉ Ｈａｎｃｈｅｎ ｅｔ ａｌ． Ｔｕｍｏｒ Ｍｉｃｒｏｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔ： Ｔｈｅ Ｒｏｌｅ ｏｆ ｔｈｅ Ｔｕｍｏｒ Ｓｔｒｏｍａ ｉｎ Ｃａｎｃｅｒ． Ｊ ｏｆ Ｃｅｌｌｕｌａｒ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ １０１： ８０５－８１５ （２００７））。
[00815]本明細書に記載される間質改変部分としては、間質の成分、例えば、ＥＣＭ成分、例えば、グリコサミノグリカン、例えば、ヒアルロナン（ヒアルロン酸もしくはＨＡとしても知られる）、コンドロイチン硫酸塩、コンドロイチン、デルマタン硫酸塩、ヘパリン硫酸塩、ヘパリン、エンタクチン、テネイシン、アグリカン、およびケラチン硫酸塩；または細胞外タンパク質、例えば、コラーゲン、ラミニン、エラスチン、フィブリノーゲン、フィブロネクチン、およびビトロネクチンを分解することができる部分（例えば、タンパク質、例えば、酵素）が挙げられる。
間質改変酵素
[00816]一部の実施形態では、間質改変部分は酵素である。例えば、間質改変部分としては、ヒアルロニダーゼ、コラゲナーゼ、コンドロイチナーゼ、マトリックスメタロプロテイナーゼ（例えば、マクロファージメタロエラスターゼ）を挙げることができるが、これらに限定されない。
[00817]ヒアルロニダーゼ
[00818]ヒアルロニダーゼは動物界全体に見られる中性および酸性活性酵素の群である。ヒアルロニダーゼは基質特異性および作用の機序に関して多様である。ヒアルロニダーゼには３つの一般的なクラスがある：（１）主要な最終生成物として四糖および六糖を有するエンド－ベータ－Ｎ－アセチルヘキソサミニダーゼである、哺乳動物型ヒアルロニダーゼ（ＥＣ ３．２．１．３５）。これらは、加水分解活性およびトランスグリコシダーゼ活性の両方を有し、ヒアルロナンおよびコンドロイチン硫酸塩を分解することができ；（２）細菌ヒアルロニダーゼ（ＥＣ ４．２．９９．１）は、ヒアルロナンを分解し、様々な程度で、コンドロイチン硫酸塩およびデルマタン硫酸塩を分解する。これらは、主として二糖の最終生成物をもたらすベータ脱離反応によって作動するエンド－ベータ－Ｎ－アセチルヘキソサミニダーゼであり；（３）ヒル、他の寄生虫、および甲殻類に由来するヒアルロニダーゼ（ＥＣ ３．２．１．３６）は、ベータ１－３連結の加水分解を通じて四糖および六糖の最終生成物をもたらす、エンド－ベータ－グルクロニダーゼである。
[00819]哺乳動物ヒアルロニダーゼは、さらに２つの群に分けることができる：（１）中性活性酵素および（２）酸性活性酵素。ヒトゲノムには、ＨＹＡＬ１、ＨＹＡＬ２、ＨＹＡＬ３、ＨＹＡＬ４、ＨＹＡＬＰ１、およびＰＨ２０／ＳＰＡＭ１の６つのヒアルロニダーゼ様遺伝子がある。ＨＹＡＬＰ１は偽遺伝子であり、ＨＹＡＬ３はいずれの公知の基質に対しても酵素活性を有することが示されていない。ＨＹＡＬ４は、コンドロイチナーゼであり、ヒアルロナンに対する活性が欠如している。ＨＹＡＬ１は原型の酸性活性酵素であり、ＰＨ２０は原型の中性活性酵素である。酸性活性ヒアルロニダーゼ、例えば、ＨＹＡＬ１およびＨＹＡＬ２は、中性ｐＨでは触媒活性が欠如している。例えば、ＨＹＡＬ１は、ｉｎ ｖｉｔｒｏにおいて、ｐＨ４．５を超えると触媒活性を有しない（Ｆｒｏｓｔ ａｎｄ Ｓｔｅｒｎ， “Ａ Ｍｉｃｒｏｔｉｔｅｒ－Ｂａｓｅｄ Ａｓｓａｙ ｆｏｒ Ｈｙａｌｕｒｏｎｉｄａｓｅ Ａｃｔｉｖｉｔｙ Ｎｏｔ Ｒｅｑｕｉｒｉｎｇ Ｓｐｅｃｉａｌｉｚｅｄ Ｒｅａｇｅｎｔｓ”， Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ， ｖｏｌ． ２５１， ｐｐ． ２６３－２６９ （１９９７）。ＨＹＡＬ２は酸性活性酵素であり、ｉｎ ｖｉｔｒｏでの特異性活性は非常に低い。
[00820]一部の実施形態では、ヒアルロニダーゼは哺乳動物ヒアルロニダーゼである。一部の実施形態では、ヒアルロニダーゼは組換えヒトヒアルロニダーゼである。一部の実施形態では、ヒアルロニダーゼは中性活性ヒアルロニダーゼである。一部の実施形態では、ヒアルロニダーゼは中性活性可溶性ヒアルロニダーゼである。一部の実施形態では、ヒアルロニダーゼは組換えＰＨ２０中性活性酵素である。一部の実施形態では、ヒアルロニダーゼは組換えＰＨ２０中性活性可溶性酵素である。一部の実施形態では、ヒアルロニダーゼはグリコシル化されている。一部の実施形態では、ヒアルロニダーゼは少なくとも１つのＮ結合型グリカンを有する。組換えヒアルロニダーゼは、当業者に公知の従来的な方法、例えば、米国特許第７７６７４２９号におけるものを使用して、産生することができ、このすべての内容は、参照により本明細書に組み込まれる。
[00821]一部の実施形態では、ヒアルロニダーゼはｒＨｕＰＨ２０である（Ｈｙｌｅｎｅｘ（登録商標）とも称され；現在Ｈａｌｏｚｙｍｅによって製造されており；２００５年にＦＤＡにより承認されている（例えば、Ｓｃｏｄｅｌｌｅｒ Ｐ （２０１４）Ｈｙａｌｕｒｏｎｉｄａｓｅ ａｎｄ ｏｔｈｅｒ Ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ Ｍａｔｒｉｘ Ｄｅｇｒａｄｉｎｇ Ｅｎｚｙｍｅｓ ｆｏｒ Ｃａｎｃｅｒ Ｔｈｅｒａｐｙ： Ｎｅｗ Ｕｓｅｓ ａｎｄ Ｎａｎｏ－ Ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎｓ． Ｊ Ｃａｒｃｉｎｏｇ Ｍｕｔａｇｅ ５：１７８；米国特許第７７６７４２９号；同第８２０２５１７号；同第７４３１３８０号；同第８４５０４７０号；同第８７７２２４６号；同第８５８０２５２号を参照されたく、これらのそれぞれのすべての内容は、参照により本明細書に組み込まれる）。ｒＨｕＰＨ２０は、ヒトヒアルロニダーゼＰＨ２０の可溶性断片をコードするＤＮＡプラスミドを含む、遺伝子操作されたＣＨＯ細胞によって産生される。一部の実施形態では、ヒアルロニダーゼはグリコシル化されている。一部の実施形態では、ヒアルロニダーゼは少なくとも１つのＮ結合型グリカンを有する。組換えヒアルロニダーゼは、当業者に公知の従来的な方法、例えば、米国特許第７７６７４２９号におけるものを使用して、産生することができ、このすべての内容は、参照により本明細書に組み込まれる。一部の実施形態では、ｒＨｕＰＨ２０は、
ＬＮＦＲＡＰＰＶＩＰＮＶＰＦＬＷＡＷＮＡＰＳＥＦＣＬＧＫＦＤＥＰＬＤＭＳＬＦＳＦＩＧＳＰＲＩＮＡＴＧＱＧＶＴＩＦＹＶＤＲＬＧＹＹＰＹＩＤＳＩＴＧＶＴＶＮＧＧＩＰＱＫＩＳＬＱＤＨＬＤＫＡＫＫＤＩＴＦＹＭＰＶＤＮＬＧＭＡＶＩＤＷＥＥＷＲＰＴＷＡＲＮＷＫＰＫＤＶＹＫＮＲＳＩＥＬＶＱＱＱＮＶＱＬＳＬＴＥＡＴＥＫＡＫＱＥＦＥＫＡＧＫＤＦＬＶＥＴＩＫＬＧＫＬＬＲＰＮＨＬＷＧＹＹＬＦＰＤＣＹＮＨＨＹＫＫＰＧＹＮＧＳＣＦＮＶＥＩＫＲＮＤＤＬＳＷＬＷＮＥＳＴＡＬＹＰＳＩＹＬＮＴＱＱＳＰＶＡＡＴＬＹＶＲＮＲＶＲＥＡＩＲＶＳＫＩＰＤＡＫＳＰＬＰＶＦＡＹＴＲＩＶＦＴＤＱＶＬＫＦＬＳＱＤＥＬＶＹＴＦＧＥＴＶＡＬＧＡＳＧＩＶＩＷＧＴＬＳＩＭＲＳＭＫＳＣＬＬＬＤＮＹＭＥＴＩＬＮＰＹＩＩＮＶＴＬＡＡＫＭＣＳＱＶＬＣＱＥＱＧＶＣＩＲＫＮＷＮＳＳＤＹＬＨＬＮＰＤＮＦＡＩＱＬＥＫＧＧＫＦＴＶＲＧＫＰＴＬＥＤＬＥＱＦＳＥＫＦＹＣＳＣＹＳＴＬＳＣＫＥＫＡＤＶＫＤＴＤＡＶＤＶＣＩＡＤＧＶＣＩＤＡＦＬＫＰＰＭＥＴＥＥＰＱＩＦＹＮＡＳＰＳＴＬＳ（配列番号６２１３）のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％（例えば、少なくとも９６％、９７％、９８％、９９％、１００％）同一の配列を有する。
[00822]本明細書において提供される方法のうちのいずれかにおいて、抗ヒアルロナン剤は、ヒアルロナンを分解する薬剤であり得るか、またはヒアルロナンの合成を阻害する薬剤であり得る。例えば、抗ヒアルロナン剤はヒアルロナン分解酵素であり得る。別の例では、抗ヒアルロナン剤はヒアルロナンの合成を阻害する薬剤である。例えば、抗ヒアルロナン剤は、ヒアルロナンの合成を阻害する薬剤、例えば、ＨＡシンターゼに対するセンスもしくはアンチセンス核酸分子であるか、または小分子薬である。例えば、抗ヒアルロナン剤は、４－メチルウンベリフェロン（ＭＵ）もしくはその誘導体、またはレフルノミドもしくはその誘導体である。そのような誘導体としては、例えば、６，７－ジヒドロキシ－４－メチルクマリンまたは５，７－ジヒドロキシ－４－メチルクマリンである、４－メチルウンベリフェロン（ＭＵ）の誘導体が挙げられる。
[00823]本明細書において提供される方法のさらなる例では、ヒアルロナン分解酵素はヒアルロニダーゼである。一部の例では、ヒアルロナン分解酵素は、ＰＨ２０ヒアルロニダーゼ、またはＣ末端グリコシルホスファチジルイノシトール（ＧＰＩ）結合部位もしくはＧＰＩ結合部位の一部分が欠如したその短縮形態である。特定の例では、ヒアルロニダーゼは、ヒト、サル、ウシ、ヒツジ、ラット、マウス、またはモルモットＰＨ２０から選択されるＰＨ２０である。例えば、ヒアルロナン分解酵素は、中性活性であり、Ｎ－グリコシル化されている、ヒトＰＨ２０ヒアルロニダーゼであり、これは、（ａ）全長ＰＨ２０もしくはＰＨ２０のＣ末端短縮形態であるヒアルロニダーゼポリペプチドであって、短縮形態が配列番号６２１３の少なくともアミノ酸残基３６～４６４、例えば、３６～４８１、３６～４８２、３６～４８３を含み、全長ＰＨ２０が配列番号６２１３に記載されるアミノ酸配列を有する、ヒアルロニダーゼポリペプチド；または（ｂ）配列番号６２１３に記載されるアミノ酸配列のポリペプチドもしくは短縮形態と少なくとも８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、もしくはそれ以上の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、ヒアルロニダーゼポリペプチド；または（ｃ）アミノ酸置換を含み、それによって、ヒアルロニダーゼポリペプチドが配列番号６２１３に記載されるポリペプチドもしくはその対応する短縮形態と少なくとも８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、もしくはそれ以上の配列同一性を有するアミノ酸配列を有する、（ａ）もしくは（ｂ）のヒアルロニダーゼポリペプチドから選択される。例示的な例では、ヒアルロナン分解酵素は、ｒＨｕＰＨ２０と表記される組成物を含むＰＨ２０である。
[00824]他の例では、抗ヒアルロナン剤は、ポリマーへのコンジュゲーションによって改変されたヒアルロナン分解酵素である。ポリマーはＰＥＧであってもよく、抗ヒアルロナン剤はＰＥＧ化ヒアルロナン分解酵素である。したがって、本明細書において提供される方法の一部の例では、ヒアルロナン分解酵素はポリマーへのコンジュゲーションによって改変されている。例えば、ヒアルロナン分解酵素はＰＥＧにコンジュゲートされており、したがって、ヒアルロナン分解酵素はＰＥＧ化されている。例示的な例では、ヒアルロナン分解酵素はＰＥＧ化ＰＨ２０酵素（ＰＥＧＰＨ２０）である。本明細書において提供される方法では、コルチコステロイドは、コルチゾン、デキサメタゾン、ヒドロコルチゾン、メチルプレドニゾロン、プレドニゾロン、およびプレドニゾンの中から選択されるグルココルチコイドであり得る。
[00825]コンドロイチナーゼ
[00826]コンドロイチナーゼは、エンドグリコシダーゼ反応を通じてグリコサミノグリカン、特に、コンドロイチンおよびコンドロイチン硫酸塩を分解する、動物界全体に見られる酵素である。一部の実施形態では、コンドロイチナーゼは哺乳動物コンドロイチナーゼである。一部の実施形態では、コンドロイチナーゼは組換えヒトコンドロイチナーゼである。一部の実施形態では、コンドロイチナーゼはＨＹＡＬ４である。他の例示的なコンドロイチナーゼとしては、コンドロイチナーゼＡＢＣ（プロテウス・ブルガリス由来；日本特許出願公開第６－１５３９４７号、Ｔ． Ｙａｍａｇａｔａ ｅｔ ａｌ． Ｊ． Ｂｉｏｌ． Ｃｈｅｍ．， ２４３， １５２３ （１９６８）、Ｓ． Ｓｕｚｕｋｉ ｅｔ ａｌ， Ｊ． Ｂｉｏｌ． Ｃｈｅｍ．， ２４３， １５４３ （１９６８））、コンドロイチナーゼＡＣ（フラボバクテリウム・ヘパリヌム由来；Ｔ． Ｙａｍａｇａｔａ ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ｂｉｏｌ． Ｃｈｅｍ．， ２４３， １５２３ （１９６８））、コンドロイチナーゼＡＣ ＩＩ（アルスロバクター・アウレッセンス由来；Ｋ． Ｈｉｙａｍａ， ａｎｄ Ｓ． Ｏｋａｄａ， Ｊ． Ｂｉｏｌ． Ｃｈｅｍ．， ２５０， １８２４ （１９７５）、Ｋ． Ｈｉｙａｍａ ａｎｄ Ｓ． Ｏｋａｄａ， Ｊ． Ｂｉｏｃｈｅｍ． （Ｔｏｋｙｏ）， ８０， １２０１ （１９７６））、ヒアルロニダーゼＡＣＩＩＩ（フラボバクテリウム種Ｈｐ１０２由来；Ｈｉｒｏｆｕｍｉ Ｍｉｙａｚｏｎｏ ｅｔ ａｌ．， Ｓｅｉｋａｇａｋｕ， ６１， １０２３ （１９８９））、コンドロイチナーゼＢ（フラボバクテリウム・ヘパリヌム由来；Ｙ． Ｍ． Ｍｉｃｈｅｌａｃｃｉ ａｎｄ Ｃ． Ｐ． Ｄｉｅｔｒｉｃｈ， Ｂｉｏｃｈｅｍ． Ｂｉｏｐｈｙｓ． Ｒｅｓ． Ｃｏｍｍｕｎ．， ５６， ９７３ （１９７４）、Ｙ． Ｍ． Ｍｉｃｈｅｌａｃｃｉ ａｎｄ Ｃ． Ｐ． Ｄｉｅｔｒｉｃｈ， Ｂｉｏｃｈｅｍ． Ｊ．， １５１， １２１ （１９７５）、Ｋｅｎｉｃｈｉ Ｍａｅｙａｍａ ｅｔ ａｌ， Ｓｅｉｋａｇａｋｕ， ５７， １１８９ （１９８５））、コンドロイチナーゼＣ（フラボバクテリウム種Ｈｐ１０２由来；Ｈｉｒｏｆｕｍｉ Ｍｉｙａｚｏｎｏ ｅｔ ａｌ， Ｓｅｉｋａｇａｋｕ， ６１， １０２３ （１９３９））などが挙げられる。
[00827]マトリックスメタロプロテイナーゼ
[00828]マトリックスメタロプロテアーゼ（ＭＭＰ）は、細胞外マトリックス（ＥＣＭ）分解に関与する主要なプロテアーゼである亜鉛依存性エンドペプチダーゼである。ＭＭＰは、広範な細胞外分子およびいくつかの生体活性分子を分解することができる。ヒトにおいて、２４個のＭＭＰ遺伝子が特定されており、これらは、ドメイン構成および基質優先性に基づいて、６つの群に分類することができる：コラゲナーゼ（ＭＭＰ－１、－８、および－１３）、ゼラチナーゼ（ＭＭＰ－２およびＭＭＰ－９）、ストロメライシン（ＭＭＰ－３、－１０、および－１１）、マトリライシン（ＭＭＰ－７およびＭＭＰ－２６）、膜型（ＭＴ）－ＭＭＰ（ＭＭＰ－１４、－１５、－１６、－１７、－２４、および－２５）、ならびにその他（ＭＭＰ－１２、－１９、－２０、－２１、－２３、－２７、および－２８）。一部の実施形態では、間質改変部分はヒト組換えＭＭＰ（例えば、ＭＭＰ－１、－２、－３、－４、－５、－６、－７、－８、－９、１０、－１１、－１２、－１３、－１４、１５、－１５、－１７、－１８、－１９、２０、－２１、－２２、－２３、または－２４）である。
[00829]
[00830]コラゲナーゼ
[00831]３つの哺乳動物コラゲナーゼ（ＭＭＰ－１、－８、および－１３）は、コラーゲン性細胞外マトリックスを切断することができる主要な分泌型エンドペプチダーゼである。線維性コラーゲンに加えて、コラゲナーゼは、成長因子を含む複数の他のマトリックスおよび非マトリックスタンパク質を切断することができる。コラゲナーゼは、不活性な代替形態として合成され、一旦活性化されると、それらの活性は、特異的組織メタロプロテイナーゼ阻害剤、ＴＩＭＰによって、ならびに非特異的プロテイナーゼ阻害剤によって阻害される（Ａｌａ－ａｈｏ Ｒ ｅｔ ａｌ． Ｂｉｏｃｈｉｍｉｅ． Ｃｏｌｌａｇｅｎａｓｅｓ ｉｎ ｃａｎｃｅｒ． ２００５ Ｍａｒ－Ａｐｒ；８７（３－４）：２７３－８６）。一部の実施形態では、間質改変部分はコラゲナーゼである。一部の実施形態では、コラゲナーゼはヒト組換えコラゲナーゼである。一部の実施形態では、コラゲナーゼはＭＭＰ－１である。一部の実施形態では、コラゲナーゼはＭＭＰ－８である。一部の実施形態では、コラゲナーゼはＭＭＰ－１３である。
[00832]
[00833]マクロファージメタロエラスターゼ
[00834]ＭＭＰ－１２としても知られるマクロファージメタロエラスターゼ（ＭＭＥ）は、ＭＭＰのストロメライシンサブグループのメンバーであり、可溶性および不溶性エラスチン、ならびにＩＶ型コラーゲン、フィブロネクチン、ラミニン、ビトロネクチン、エンタクチン、ヘパラン、およびコンドロイチン硫酸塩を含む広範なマトリックスおよび非マトリックス基質の加水分解を触媒する（Ｅｒｊａ Ｋｅｒｋｅｌａ ｅｔ ａｌ． Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｖｅ Ｄｅｒｍａｔｏｌｏｇｙ （２０００）１１４， １１１３－１１１９； ｄｏｉ：１０．１０４６／ｊ．１５２３－１７４７．２０００．００９９３）。一部の実施形態では、間質改変部分はＭＭＥである。一部の実施形態では、ＭＭＥはヒト組換えＭＭＥである。一部の実施形態では、ＭＭＥはＭＭＰ－１２である。
さらなる間質改変部分
[00835]一部の実施形態では、間質改変部分は、間質もしくは細胞外マトリックス（ＥＣＭ）成分のレベルもしくは産生の減少；腫瘍線維形成の減少；間質腫瘍輸送の増加；腫瘍灌流の改善；腫瘍微小血管の拡大；腫瘍における間質液圧（ＩＦＰ）の減少；または薬剤、例えば、がん治療薬もしくは細胞療法の、腫瘍もしくは腫瘍血管への浸透もしくは拡散の減少もしくは増強のうちの１つまたは複数を引き起こす。
[00836]一部の実施形態では、減少する間質またはＥＣＭ成分は、グリコサミノグリカンもしくは細胞外タンパク質、またはそれらの組合せから選択される。一部の実施形態では、グリコサミノグリカンは、ヒアルロナン（ヒアルロン酸もしくはＨＡとしても知られる）、コンドロイチン硫酸塩、コンドロイチン、デルマタン硫酸塩、ヘパリン、ヘパリン硫酸塩、エンタクチン、テネイシン、アグリカン、およびケラチン硫酸塩から選択される。一部の実施形態では、細胞外タンパク質は、コラーゲン、ラミニン、エラスチン、フィブリノーゲン、フィブロネクチン、またはビトロネクチンから選択される。一部の実施形態では、間質改変部分は、腫瘍間質または細胞外マトリックス（ＥＣＭ）を分解する酵素分子を含む。一部の実施形態では、酵素分子は、ヒアルロニダーゼ分子、コラゲナーゼ分子、コンドロイチナーゼ分子、マトリックスメタロプロテイナーゼ分子（例えば、マクロファージメタロエラスターゼ）、または前述のもののいずれかのバリアント（例えば、断片）から選択される。「酵素分子」という用語には、酵素の全長、その断片、またはバリアント、例えば、天然に存在する酵素の少なくとも１つの機能的特性を保持する酵素バリアントが含まれる。
[00837]一部の実施形態では、間質改変部分は、ヒアルロン酸のレベルまたは産生を減少させる。他の実施形態では、間質改変部分は、ヒアルロナン分解酵素、ヒアルロナン合成を阻害する薬剤、またはヒアルロン酸に対する抗体分子を含む。
[00838]一部の実施形態では、ヒアルロナン分解酵素は、ヒアルロニダーゼ分子、例えば、全長またはそのバリアント（例えば、その断片）である。一部の実施形態では、ヒアルロナン分解酵素は、中性または酸性のｐＨ、例えば、約４～５のｐＨにおいて活性である。一部の実施形態では、ヒアルロニダーゼ分子は、哺乳動物ヒアルロニダーゼ分子、例えば、組換えヒトヒアルロニダーゼ分子、例えば、全長またはそのバリアント（例えば、その断片、例えば、短縮形態）である。一部の実施形態では、ヒアルロニダーゼ分子は、ＨＹＡＬ１、ＨＹＡＬ２、もしくはＰＨ－２０／ＳＰＡＭ１、またはそのバリアント（例えば、その短縮形態）から選択される。一部の実施形態では、短縮形態は、Ｃ末端グリコシルホスファチジルイノシトール（ＧＰＩ）結合部位またはＧＰＩ結合部位の一部分が欠如している。一部の実施形態では、ヒアルロニダーゼ分子は、グリコシル化されている、例えば、少なくとも１つのＮ結合型グリカンを含む。
[00839]一部の実施形態では、ヒアルロニダーゼ分子は、アミノ酸配列：
ＬＮＦＲＡＰＰＶＩＰＮＶＰＦＬＷＡＷＮＡＰＳＥＦＣＬＧＫＦＤＥＰＬＤＭＳＬＦＳＦＩＧＳＰＲＩＮＡＴＧＱＧＶＴＩＦＹＶＤＲＬＧＹＹＰＹＩＤＳＩＴＧＶＴＶＮＧＧＩＰＱＫＩＳＬＱＤＨＬＤＫＡＫＫＤＩＴＦＹＭＰＶＤＮＬＧＭＡＶＩＤＷＥＥＷＲＰＴＷＡＲＮＷＫＰＫＤＶＹＫＮＲＳＩＥＬＶＱＱＱＮＶＱＬＳＬＴＥＡＴＥＫＡＫＱＥＦＥＫＡＧＫＤＦＬＶＥＴＩＫＬＧＫＬＬＲＰＮＨＬＷＧＹＹＬＦＰＤＣＹＮＨＨＹＫＫＰＧＹＮＧＳＣＦＮＶＥＩＫＲＮＤＤＬＳＷＬＷＮＥＳＴＡＬＹＰＳＩＹＬＮＴＱＱＳＰＶＡＡＴＬＹＶＲＮＲＶＲＥＡＩＲＶＳＫＩＰＤＡＫＳＰＬＰＶＦＡＹＴＲＩＶＦＴＤＱＶＬＫＦＬＳＱＤＥＬＶＹＴＦＧＥＴＶＡＬＧＡＳＧＩＶＩＷＧＴＬＳＩＭＲＳＭＫＳＣＬＬＬＤＮＹＭＥＴＩＬＮＰＹＩＩＮＶＴＬＡＡＫＭＣＳＱＶＬＣＱＥＱＧＶＣＩＲＫＮＷＮＳＳＤＹＬＨＬＮＰＤＮＦＡＩＱＬＥＫＧＧＫＦＴＶＲＧＫＰＴＬＥＤＬＥＱＦＳＥＫＦＹＣＳＣＹＳＴＬＳＣＫＥＫＡＤＶＫＤＴＤＡＶＤＶＣＩＡＤＧＶＣＩＤＡＦＬＫＰＰＭＥＴＥＥＰＱＩＦＹＮＡＳＰＳＴＬＳ（配列番号６２１３）、もしくはその断片、またはそれに対して実質的に同一である（例えば、それに対して９５％～９９．９％同一であるか、または配列番号６２１３のアミノ酸配列に対して少なくとも１個のアミノ酸変更であるが、５、１０もしくは１５個以下の変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有する）アミノ酸配列を含む。
[00840]一部の実施形態では、ヒアルロニダーゼ分子は、
（ｉ）配列番号６２１３の３６～４６４のアミノ酸配列；
（ｉｉ）ＰＨ２０の３６～４８１、３６～４８２、もしくは３６～４８３のアミノ酸配列、ここで、ＰＨ２０は配列番号６２１３に記載されるアミノ酸配列を有する；
（ｉｉｉ）配列番号６２１３に記載されるアミノ酸配列のポリペプチドもしくはその短縮形態に対して少なくとも９５％～１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列；または
（ｉｖ）配列番号６２１３に記載されるアミノ酸配列に対して３０個、２０個、１０個、５つ、もしくはそれよりも少ないアミノ酸置換を有するアミノ酸配列
を含む。一部の実施形態では、ヒアルロニダーゼ分子は、配列番号６２１３のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％（例えば、少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、１００％）同一のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、ヒアルロニダーゼ分子は、配列番号６２１３のヌクレオチド配列に対して少なくとも９５％（例えば、少なくとも９６％、９７％、９８％、９９％、１００％）同一のヌクレオチド配列によってコードされる。
[00841]一部の実施形態では、ヒアルロニダーゼ分子はＰＨ２０、例えば、ｒＨｕＰＨ２０である。一部の実施形態では、ヒアルロニダーゼ分子は、ＨＹＡＬ１であり、アミノ酸配列：
ＦＲＧＰＬＬＰＮＲＰＦＴＴＶＷＮＡＮＴＱＷＣＬＥＲＨＧＶＤＶＤＶＳＶＦＤＶＶＡＮＰＧＱＴＦＲＧＰＤＭＴＩＦＹＳＳＱＧＴＹＰＹＹＴＰＴＧＥＰＶＦＧＧＬＰＱＮＡＳＬＩＡＨＬＡＲＴＦＱＤＩＬＡＡＩＰＡＰＤＦＳＧＬＡＶＩＤＷＥＡＷＲＰＲＷＡＦＮＷＤＴＫＤＩＹＲＱＲＳＲＡＬＶＱＡＱＨＰＤＷＰＡＰＱＶＥＡＶＡＱＤＱＦＱＧＡＡＲＡＷＭＡＧＴＬＱＬＧＲＡＬＲＰＲＧＬＷＧＦＹＧＦＰＤＣＹＮＹＤＦＬＳＰＮＹＴＧＱＣＰＳＧＩＲＡＱＮＤＱＬＧＷＬＷＧＱＳＲＡＬＹＰＳＩＹＭＰＡＶＬＥＧＴＧＫＳＱＭＹＶＱＨＲＶＡＥＡＦＲＶＡＶＡＡＧＤＰＮＬＰＶＬＰＹＶＱＩＦＹＤＴＴＮＨＦＬＰＬＤＥＬＥＨＳＬＧＥＳＡＡＱＧＡＡＧＶＶＬＷＶＳＷＥＮＴＲＴＫＥＳＣＱＡＩＫＥＹＭＤＴＴＬＧＰＦＩＬＮＶＴＳＧＡＬＬＣＳＱＡＬＣＳＧＨＧＲＣＶＲＲＴＳＨＰＫＡＬＬＬＬＮＰＡＳＦＳＩＱＬＴＰＧＧＧＰＬＳＬＲＧＡＬＳＬＥＤＱＡＱＭＡＶＥＦＫＣＲＣＹＰＧＷＱＡＰＷＣＥＲＫＳＭＷ（配列番号６２１８）、もしくはその断片、またはそれに対して実質的に同一である（例えば、それに対して９５％～９９．９％同一であるか、または配列番号６２１８のアミノ酸配列に対して少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、５個、１０個、もしくは１５個以下である変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有するアミノ酸配列を含む。
[00842]一部の実施形態では、ヒアルロナン分解酵素、例えば、ヒアルロニダーゼ分子は、ポリマーをさらに含み、例えば、ポリマー、例えば、ＰＥＧにコンジュゲートされている。一部の実施形態では、ヒアルロナン分解酵素はＰＥＧ化ＰＨ２０酵素（ＰＥＧＰＨ２０）である。一部の実施形態では、ヒアルロナン分解酵素、例えば、ヒアルロニダーゼ分子は、例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、およびＩｇＧ４の重鎖定常領域、より具体的には、ヒトＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、またはＩｇＧ４の重鎖定常領域から選択される、免疫グロブリン鎖定常領域（例えば、Ｆｃ領域）をさらに含む。一部の実施形態では、免疫グロブリン定常領域（例えば、Ｆｃ領域）は、ヒアルロナン分解酵素、例えば、ヒアルロニダーゼ分子に連結、例えば、共有結合的に連結されている。一部の実施形態では、免疫グロブリン鎖定常領域（例えば、Ｆｃ領域）は、Ｆｃ受容体の結合、抗体のグリコシル化、システイン残基の数、エフェクター細胞の機能、または補体機能のうちの１つまたは複数を増加または減少させるように、変更、例えば、突然変異されている。一部の実施形態では、ヒアルロナン分解酵素、例えば、ヒアルロニダーゼ分子は、二量体を形成する。
[00843]一部の実施形態では、間質改変部分は、ヒアルロナンの合成、例えば、ＨＡシンターゼの阻害剤を含む。一部の実施形態では、阻害剤は、ＨＡシンターゼに対するセンスもしくはアンチセンス核酸分子を含むか、または小分子薬である。一部の実施形態では、阻害剤は、４－メチルウンベリフェロン（ＭＵ）もしくはその誘導体（例えば、６，７－ジヒドロキシ－４－メチルクマリンもしくは５，７－ジヒドロキシ－４－メチルクマリン）、またはレフルノミドもしくはその誘導体である。
[00844]一部の実施形態では、間質改変部分はヒアルロン酸に対する抗体分子を含む。
[00845]一部の実施形態では、間質改変部分は、コラゲナーゼ分子、例えば、哺乳動物コラゲナーゼ分子、またはそのバリアント（例えば、断片）を含む。一部の実施形態では、コラゲナーゼ分子は、例えば、
ＹＮＦＦＰＲＫＰＫＷＤＫＮＱＩＴＹＲＩＩＧＹＴＰＤＬＤＰＥＴＶＤＤＡＦＡＲＡＦＱＶＷＳＤＶＴＰＬＲＦＳＲＩＨＤＧＥＡＤＩＭＩＮＦＧＲＷＥＨＧＤＧＹＰＦＤＧＫＤＧＬＬＡＨＡＦＡＰＧＴＧＶＧＧＤＳＨＦＤＤＤＥＬＷＴＬＧＥＧＱＶＶＲＶＫＹＧＮＡＤＧＥＹＣＫＦＰＦＬＦＮＧＫＥＹＮＳＣＴＤＴＧＲＳＤＧＦＬＷＣＳＴＴＹＮＦＥＫＤＧＫＹＧＦＣＰＨＥＡＬＦＴＭＧＧＮＡＥＧＱＰＣＫＦＰＦＲＦＱＧＴＳＹＤＳＣＴＴＥＧＲＴＤＧＹＲＷＣＧＴＴＥＤＹＤＲＤＫＫＹＧＦＣＰＥＴＡＭＳＴＶＧＧＮＳＥＧＡＰＣＶＦＰＦＴＦＬＧＮＫＹＥＳＣＴＳＡＧＲＳＤＧＫＭＷＣＡＴＴＡＮＹＤＤＤＲＫＷＧＦＣＰＤＱＧＹＳＬＦＬＶＡＡＨＥＦＧＨＡＭＧＬＥＨＳＱＤＰＧＡＬＭＡＰＩＹＴＹＴＫＮＦＲＬＳＱＤＤＩＫＧＩＱＥＬＹＧＡＳＰＤＩＤＬＧＴＧＰＴＰＴＬＧＰＶＴＰＥＩＣＫＱＤＩＶＦＤＧＩＡＱＩＲＧＥＩＦＦＦＫＤＲＦＩＷＲＴＶＴＰＲＤＫＰＭＧＰＬＬＶＡＴＦＷＰＥＬＰＥＫＩＤＡＶＹＥＡＰＱＥＥＫＡＶＦＦＡＧＮＥＹＷＩＹＳＡＳＴＬＥＲＧＹＰＫＰＬＴＳＬＧＬＰＰＤＶＱＲＶＤＡＡＦＮＷＳＫＮＫＫＴＹＩＦＡＧＤＫＦＷＲＹＮＥＶＫＫＫＭＤＰＧＦＰＫＬＩＡＤＡＷＮＡＩＰＤＮＬＤＡＶＶＤＬＱＧＧＧＨＳＹＦＦＫＧＡＹＹＬＫＬＥＮＱＳＬＫＳＶＫＦＧＳＩＫＳＤＷＬＧＣ（配列番号６２１９）のアミノ酸配列、もしくはその断片、またはそれに対して実質的に同一である（例えば、それに対して９５％～９９．９％同一であるか、または配列番号６２１９のアミノ酸配列に対して少なくとも１個のアミノ酸変更であるが、５、１０もしくは１５個以下の変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有するアミノ酸配列を含む、コラゲナーゼ分子ＩＶである。
標的化部分
[00846]一部の実施形態では、本明細書に開示される多特異性および／または多機能性分子は腫瘍標的化部分を含む。一部の実施形態では、腫瘍標的化部分は、Ｇ６Ｂ、ＣＤ３４、ＣＤ４１、Ｐ－セレクチン、Ｃｌｅｃ２、ｃＫＩＴ、ＦＬＴ３、ＭＰＬ、ＩＴＧＢ３、ＩＴＧＢ２、ＧＰ５、ＧＰ６、ＧＰ９、ＧＰ１ＢＡ、ＤＳＣ２、ＦＣＧＲ２Ａ、ＴＮＦＲＳＦ１０Ａ、ＴＮＦＲＳＦ１０Ｂ、またはＴＭ４ＳＦ１から選択される腫瘍抗原を標的とする（例えば、それに結合する）。一部の実施形態では、腫瘍標的化部分はＧ６Ｂを標的とする（例えば、それに結合する）。
[00847]Ｇ６Ｂとは、巨核球および血小板阻害受容体Ｇ６ｂまたはＣ６ｏｒｆ２５としても公知のＭＰＩＧ６Ｂを指す。Ｓｗｉｓｓ－Ｐｒｏｔ受託番号Ｏ９５８６６は例示的なヒトＧ６Ｂアミノ酸配列を提供する。一部の実施形態では、Ｇ６ＢまたはＧ６Ｂ分子は天然に存在するＧ６Ｂまたはその機能的バリアントもしくは断片である。
[00848]ＣＤ３４とは、造血前駆細胞抗原ＣＤ３４を指す。Ｓｗｉｓｓ－Ｐｒｏｔ受託番号Ｐ２８９０６は例示的なヒトＣＤ３４アミノ酸配列を提供する。一部の実施形態では、ＣＤ３４またはＣＤ３４分子は天然に存在するＣＤ３４またはその機能的バリアントもしくは断片である。
[00849]ＣＤ４１とは、インテグリンアルファ－ＩＩｂとしても公知のＩＴＧＡ２Ｂを指す。Ｓｗｉｓｓ－Ｐｒｏｔ受託番号Ｐ０８５１４は例示的なヒトＣＤ４１アミノ酸配列を提供する。一部の実施形態では、ＣＤ４１またはＣＤ４１分子は天然に存在するＣＤ４１またはその機能的バリアントもしくは断片である。
[00850]Ｐ－セレクチンとは、ＣＤ６２Ｐ、ＧＭＰ－１４０、またはＬＥＣＡＭ３としても公知のＳＥＬＰを指す。Ｓｗｉｓｓ－Ｐｒｏｔ受託番号Ｐ１６１０９は例示的なヒトＰ－セレクチンアミノ酸配列を提供する。一部の実施形態では、Ｐ－セレクチンまたはＰ－セレクチン分子は天然に存在するＰ－セレクチンまたはその機能的バリアントもしくは断片である。
[00851]Ｃｌｅｃ２とは、Ｃ型レクチンドメインファミリー１メンバーＢとしても公知のＣＬＥＣ１Ｂを指す。Ｓｗｉｓｓ－Ｐｒｏｔ受託番号Ｑ９Ｐ１２６は例示的なヒトＣｌｅｃ２アミノ酸配列を提供する。一部の実施形態では、Ｃｌｅｃ２またはＣｌｅｃ２分子は天然に存在するＣｌｅｃ２またはその機能的バリアントもしくは断片である。
[00852]ｃＫＩＴとは、ＣＤ１１７としても公知の肥満／幹細胞成長因子受容体ｋｉｔを指す。Ｓｗｉｓｓ－Ｐｒｏｔ受託番号Ｐ１０７２１は例示的なヒトｃＫＩＴアミノ酸配列を提供する。一部の実施形態では、ｃＫＩＴまたはｃＫＩＴ分子は天然に存在するｃＫＩＴまたはその機能的バリアントもしくは断片である。
[00853]ＦＬＴ３とは、ＣＤ１３５としても公知の受容体型チロシンタンパク質キナーゼＦＬＴ３を指す。Ｓｗｉｓｓ－Ｐｒｏｔ受託番号Ｐ３６８８８は例示的なヒトＦＬＴ３アミノ酸配列を提供する。一部の実施形態では、ＦＬＴ３またはＦＬＴ３分子は天然に存在するＦＬＴ３またはその機能的バリアントもしくは断片である。
[00854]ＭＰＬとは、ＣＤ１１０としても公知のトロンボポエチン受容体を指す。Ｓｗｉｓｓ－Ｐｒｏｔ受託番号Ｐ４０２３８は例示的なヒトＭＰＬアミノ酸配列を提供する。一部の実施形態では、ＭＰＬまたはＭＰＬ分子は天然に存在するＭＰＬまたはその機能的バリアントもしくは断片である。
[00855]ＩＴＧＢ３とは、ＣＤ６１としても公知のインテグリンベータ－３を指す。Ｓｗｉｓｓ－Ｐｒｏｔ受託番号Ｐ０５１０６は例示的なヒトＩＴＧＢ３アミノ酸配列を提供する。一部の実施形態では、ＩＴＧＢ３またはＩＴＧＢ３分子は天然に存在するＩＴＧＢ３またはその機能的バリアントもしくは断片である。
[00856]ＩＴＧＢ２とは、ＣＤ１８としても公知のインテグリンベータ－２を指す。Ｓｗｉｓｓ－Ｐｒｏｔ受託番号Ｐ０５１０７は例示的なヒトＩＴＧＢ２アミノ酸配列を提供する。一部の実施形態では、ＩＴＧＢ２またはＩＴＧＢ２分子は天然に存在するＩＴＧＢ２またはその機能的バリアントもしくは断片である。
[00857]ＧＰ５とは、ＣＤ４２ｄとしても公知の血小板糖タンパク質Ｖを指す。Ｓｗｉｓｓ－Ｐｒｏｔ受託番号Ｐ４０１９７は例示的なヒトＧＰ５アミノ酸配列を提供する。一部の実施形態では、ＧＰ５またはＧＰ５分子は天然に存在するＧＰ５またはその機能的バリアントもしくは断片である。
[00858]ＧＰ６とは、血小板糖タンパク質ＶＩを指す。Ｓｗｉｓｓ－Ｐｒｏｔ受託番号Ｑ９ＨＣＮ６は例示的なヒトＧＰ６アミノ酸配列を提供する。一部の実施形態では、ＧＰ６またはＧＰ６分子は天然に存在するＧＰ６またはその機能的バリアントもしくは断片である。
[00859]ＧＰ９とは、ＣＤ４２ａとしても公知の血小板糖タンパク質ＩＸを指す。Ｓｗｉｓｓ－Ｐｒｏｔ受託番号Ｐ１４７７０は例示的なヒトＧＰ９アミノ酸配列を提供する。一部の実施形態では、ＧＰ９またはＧＰ９分子は天然に存在するＧＰ９またはその機能的バリアントもしくは断片である。
[00860]ＧＰ１ＢＡとは、ＣＤ４２ｂとしても公知の血小板糖タンパク質Ｉｂアルファ鎖を指す。Ｓｗｉｓｓ－Ｐｒｏｔ受託番号Ｐ０７３５９は例示的なヒトＧＰ１ＢＡアミノ酸配列を提供する。一部の実施形態では、ＧＰ１ＢＡまたはＧＰ１ＢＡ分子は天然に存在するＧＰ１ＢＡまたはその機能的バリアントもしくは断片である。
[00861]ＤＳＣ２とは、カドヘリンファミリーメンバー２としても公知のデスモコリン－２を指す。Ｓｗｉｓｓ－Ｐｒｏｔ受託番号Ｑ０２４８７は例示的なヒトＤＳＣ２アミノ酸配列を提供する。一部の実施形態では、ＤＳＣ２またはＤＳＣ２分子は天然に存在するＤＳＣ２またはその機能的バリアントもしくは断片である。
[00862]ＦＣＧＲ２Ａとは、ＣＤ３２としても公知のＦｃ－ガンマ－ＲＩＩａを指す。Ｓｗｉｓｓ－Ｐｒｏｔ受託番号Ｐ１２３１８は例示的なヒトＦＣＧＲ２Ａアミノ酸配列を提供する。一部の実施形態では、ＦＣＧＲ２ＡまたはＦＣＧＲ２Ａ分子は天然に存在するＦＣＧＲ２Ａまたはその機能的バリアントもしくは断片である。
[00863]ＴＮＦＲＳＦ１０Ａとは、死受容体４、ＴＮＦ関連アポトーシス誘導リガンド受容体１、ＴＲＡＩＬ－Ｒ１、またはＣＤ２６１としても公知の腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリーメンバー１０Ａを指す。Ｓｗｉｓｓ－Ｐｒｏｔ受託番号Ｏ００２２０は例示的なヒトＴＮＦＲＳＦ１０Ａアミノ酸配列を提供する。一部の実施形態では、ＴＮＦＲＳＦ１０ＡまたはＴＮＦＲＳＦ１０Ａ分子は天然に存在するＴＮＦＲＳＦ１０Ａまたはその機能的バリアントもしくは断片である。
[00864]ＴＮＦＲＳＦ１０Ｂとは、死受容体５、ＴＮＦ関連アポトーシス誘導リガンド受容体２、ＴＲＡＩＬ－Ｒ２、またはＣＤ２６２としても公知の腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリーメンバー１０Ｂを指す。Ｓｗｉｓｓ－Ｐｒｏｔ受託番号Ｏ１４７６３は例示的なヒトＴＮＦＲＳＦ１０Ｂアミノ酸配列を提供する。一部の実施形態では、ＴＮＦＲＳＦ１０ＢまたはＴＮＦＲＳＦ１０Ｂ分子は天然に存在するＴＮＦＲＳＦ１０Ｂまたはその機能的バリアントもしくは断片である。
[00865]ＴＭ４ＳＦ１とは、膜貫通４ Ｌ６ファミリーメンバー１を指す。Ｓｗｉｓｓ－Ｐｒｏｔ受託番号Ｐ３０４０８は例示的なヒトＴＭ４ＳＦ１アミノ酸配列を提供する。一部の実施形態では、ＴＭ４ＳＦ１またはＴＭ４ＳＦ１分子は天然に存在するＴＭ４ＳＦ１またはその機能的バリアントもしくは断片である。
[00866]一部の実施形態では、多特異性および／または多機能性分子は１つまたは複数の追加の腫瘍標的化部分を含む。一部の実施形態では、１つまたは複数の追加の腫瘍標的化部分は、第１の腫瘍標的化部分と同じ腫瘍抗原を標的とする（例えば、それに結合する）。一部の実施形態では、１つまたは複数の追加の腫瘍標的化部分は、第１の腫瘍標的化部分と異なる腫瘍抗原を標的とする（例えば、それに結合する）。一部の実施形態では、多特異性および／または多機能性分子は、同じ細胞（例えば、腫瘍細胞）に存在する異なる腫瘍抗原を標的とする複数の腫瘍標的化部分を含む。一部の実施形態では、多特異性および／または多機能性分子は、異なる細胞（例えば、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個、またはより多くの異なる腫瘍細胞）に存在する異なる腫瘍抗原を標的とする複数の腫瘍標的化部分を含む。一部の実施形態では、腫瘍抗原のそれぞれは、Ｇ６Ｂ、ＣＤ３４、ＣＤ４１、Ｐ－セレクチン、Ｃｌｅｃ２、ｃＫＩＴ、ＦＬＴ３、ＭＰＬ、ＩＴＧＢ３、ＩＴＧＢ２、ＧＰ５、ＧＰ６、ＧＰ９、ＧＰ１ＢＡ、ＤＳＣ２、ＦＣＧＲ２Ａ、ＴＮＦＲＳＦ１０Ａ、ＴＮＦＲＳＦ１０Ｂ、またはＴＭ４ＳＦ１から選択される。
[00867]一部の実施形態では、多特異性および／または多機能性分子は、第１の腫瘍標的化部分（例えば、第１の腫瘍抗原を標的とする）および第２の腫瘍標的化部分（例えば、第２の腫瘍抗原を標的とする）を含む。一部の実施形態では、第１および第２の腫瘍抗原は同じ腫瘍細胞に存在する。一部の実施形態では、第１および第３の腫瘍抗原は同じ腫瘍細胞に存在する。一部の実施形態では、第２および第３の腫瘍抗原は同じ腫瘍細胞に存在する。一部の実施形態では、第１、第２、および第３の腫瘍抗原は同じ腫瘍細胞に存在する。一部の実施形態では、第１および第２の腫瘍抗原は異なる腫瘍細胞に存在する。一部の実施形態では、第１および第３の腫瘍抗原は異なる腫瘍細胞に存在する。一部の実施形態では、第２および第３の腫瘍抗原は異なる腫瘍細胞に存在する。一部の実施形態では、第１、第２、および第３の腫瘍抗原は異なる腫瘍細胞に存在する。
[00868]一部の実施形態では、第１、第２、および／または第３の腫瘍抗原は、腫瘍細胞、例えば、骨髄増殖性新生物細胞中で、非腫瘍細胞より高い発現を示す。一部の実施形態では、腫瘍細胞、例えば、骨髄増殖性新生物細胞中での第１、第２、および／または第３の腫瘍抗原の発現は、非腫瘍細胞中での第１、第２、および／または第３の腫瘍抗原の発現より少なくとも１．５、２、４、６、８、または１０倍高い。一部の実施形態では、多機能性分子は非腫瘍細胞よりも腫瘍細胞、例えば、骨髄増殖性新生物細胞に優先的に結合する。一部の実施形態では、多機能性分子と腫瘍細胞、例えば、骨髄増殖性新生物細胞との結合は、多機能性分子と非腫瘍細胞との結合よりも１０、２０、３０、４０、５０倍を超えて大きい。一部の実施形態では、親和性、例えば、腫瘍細胞、例えば、骨髄増殖性新生物細胞に対する第１および第２の腫瘍標的化部分の親和性の組合せは、第１の腫瘍標的化部分または第２の腫瘍標的化部分のうちの一方のみを有する類似した多機能性分子の親和性より大きい。一部の実施形態では、親和性、例えば、腫瘍細胞、例えば、骨髄増殖性新生物細胞に対する第１および第２の腫瘍標的化部分の親和性の組合せは、第１の腫瘍標的化部分または第２の腫瘍標的化部分のうちの一方のみを有する類似した多機能性分子の親和性より少なくとも２、５、１０、２０、３０、４０、５０、７５、または１００倍大きい。
[00869]一部の実施形態では、親和性、例えば、腫瘍細胞、例えば、骨髄増殖性新生物細胞に対する第１、第２、および第３の腫瘍標的化部分の親和性の組合せは、第１の腫瘍標的化部分、第２の腫瘍標的化部分、もしくは第３の腫瘍標的化部分のうちの１つのみを有する類似した多機能性分子、または第１の腫瘍標的化部分、第２の腫瘍標的化部分、もしくは第３の腫瘍標的化部分のうちの２つのみを有する類似した多機能性分子の親和性より大きい。一部の実施形態では、親和性、例えば、腫瘍細胞、例えば、骨髄増殖性新生物細胞に対する第１、第２、および第３の腫瘍標的化部分の親和性の組合せは、第１の腫瘍標的化部分、第２の腫瘍標的化部分、もしくは第３の腫瘍標的化部分のうちの１つのみを有する類似した多機能性分子、または第１の腫瘍標的化部分、第２の腫瘍標的化部分、もしくは第３の腫瘍標的化部分のうちの２つのみを有する類似した多機能性分子の親和性より少なくとも２、５、１０、２０、３０、４０、５０、７５、または１００倍大きい。
[00870]一部の実施形態では、親和性、例えば、第１の腫瘍標的化部分および第２の腫瘍標的化部分の第１および第２の腫瘍抗原に対する親和性の組合せは、（ｉｉｉ）、（ｉｖ）、もしくは（ｖ）単独または多機能性分子の部分としての（ｉｉｉ）、（ｉｖ）、もしくは（ｖ）の、その対応する結合メンバーに対する親和性と等しいか、またはそれより大きい。一部の実施形態では、親和性、例えば、第１の腫瘍標的化部分および第２の腫瘍標的化部分の第１および第２の腫瘍抗原に対する親和性の組合せは、（ｉｉｉ）、（ｉｖ）、もしくは（ｖ）単独または多機能性分子の部分としての（ｉｉｉ）、（ｉｖ）、もしくは（ｖ）の、その対応する結合メンバーに対する親和性より少なくとも２、５、１０、２０、３０、４０、５０、７５、または１００倍大きい。
[00871]一部の実施形態では、親和性、例えば、第１の腫瘍標的化部分、第２の腫瘍標的化部分、および第３の腫瘍標的化部分の第１、第２、および第３の腫瘍抗原に対する親和性の組合せは、（ｉｉｉ）、（ｉｖ）、もしくは（ｖ）単独または多機能性分子の部分としての（ｉｉｉ）、（ｉｖ）、もしくは（ｖ）の、その対応する結合メンバーに対する親和性と等しいか、またはそれより大きい。一部の実施形態では、親和性、例えば、第１の腫瘍標的化部分、第２の腫瘍標的化部分、および第３の腫瘍標的化部分の第１、第２、および第３の腫瘍抗原に対する親和性の組合せは、（ｉｉｉ）、（ｉｖ）、もしくは（ｖ）単独または多機能性分子の部分としての（ｉｉｉ）、（ｉｖ）、もしくは（ｖ）の、その対応する結合メンバーに対する親和性より少なくとも２、５、１０、２０、３０、４０、５０、７５、または１００倍大きい。
[00872]前述の態様の一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＣＤ３４であり、第２の腫瘍抗原はＣＤ４１である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＣＤ３４であり、第２の腫瘍抗原はＧ６Ｂである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＣＤ４１であり、第２の腫瘍抗原はＧ６Ｂである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＣＤ３４であり、第２の腫瘍抗原はＣＤ４１であり、第３の腫瘍抗原はＧ６Ｂである。
[00873]前述の態様の一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＰ－セレクチンであり、第２の腫瘍抗原はＣｌｅｃ２である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＣＤ３４であり、第２の腫瘍抗原はＰ－セレクチンである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＣＤ４１であり、第２の腫瘍抗原はＰ－セレクチンである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＧ６Ｂであり、第２の腫瘍抗原はＰ－セレクチンである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＣＤ３４であり、第２の腫瘍抗原はＣｌｅｃ２である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＣＤ４１であり、第２の腫瘍抗原はＣｌｅｃ２である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＧ６Ｂであり、第２の腫瘍抗原はＣｌｅｃ２である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＣＤ３４であり、第２の腫瘍抗原はＣＤ４１であり、第３の腫瘍抗原はＰ－セレクチンである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＣＤ３４であり、第２の腫瘍抗原はＧ６Ｂであり、第３の腫瘍抗原はＰ－セレクチンである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＣＤ４１であり、第２の腫瘍抗原はＧ６Ｂであり、第３の腫瘍抗原はＰ－セレクチンである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＣＤ３４であり、第２の腫瘍抗原はＣＤ４１であり、第３の腫瘍抗原はＣｌｅｃ２である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＣＤ３４であり、第２の腫瘍抗原はＧ６Ｂであり、第３の腫瘍抗原はＣｌｅｃ２である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＣＤ４１であり、第２の腫瘍抗原はＧ６Ｂであり、第３の腫瘍抗原はＣｌｅｃ２である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＣＤ３４であり、第２の腫瘍抗原はＰ－セレクチンであり、第３の腫瘍抗原はＣｌｅｃ２である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＣＤ４１であり、第２の腫瘍抗原はＰ－セレクチンであり、第３の腫瘍抗原はＣｌｅｃ２である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＧ６Ｂであり、第２の腫瘍抗原はＰ－セレクチンであり、第３の腫瘍抗原はＣｌｅｃ２である。
[00874]前述の態様の一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＣＤ３４であり、第２の腫瘍抗原はＣＤ３４である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＣＤ３４であり、第２の腫瘍抗原はＣＤ４１である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＣＤ３４であり、第２の腫瘍抗原はＧ６Ｂである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＣＤ３４であり、第２の腫瘍抗原はＰ－セレクチンである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＣＤ３４であり、第２の腫瘍抗原はＣｌｅｃ２である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＣＤ３４であり、第２の腫瘍抗原はｃＫＩＴである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＣＤ３４であり、第２の腫瘍抗原はＦＬＴ３である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＣＤ３４であり、第２の腫瘍抗原はＭＰＬである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＣＤ３４であり、第２の腫瘍抗原はＩＴＧＢ３である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＣＤ３４であり、第２の腫瘍抗原はＩＴＧＢ２である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＣＤ３４であり、第２の腫瘍抗原はＧＰ５である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＣＤ３４であり、第２の腫瘍抗原はＧＰ６である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＣＤ３４であり、第２の腫瘍抗原はＧＰ９である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＣＤ３４であり、第２の腫瘍抗原はＧＰ１ＢＡである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＣＤ３４であり、第２の腫瘍抗原はＤＳＣ２である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＣＤ３４であり、第２の腫瘍抗原はＦＣＧＲ２Ａである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＣＤ３４であり、第２の腫瘍抗原はＴＮＦＲＳＦ１０Ａである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＣＤ３４であり、第２の腫瘍抗原はＴＮＦＲＳＦ１０Ｂである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＣＤ３４であり、第２の腫瘍抗原はＴＭ４ＳＦ１である。
[00875]前述の態様の一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＣＤ４１であり、第２の腫瘍抗原はＣＤ３４である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＣＤ４１であり、第２の腫瘍抗原はＣＤ４１である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＣＤ４１であり、第２の腫瘍抗原はＧ６Ｂである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＣＤ４１であり、第２の腫瘍抗原はＰ－セレクチンである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＣＤ４１であり、第２の腫瘍抗原はＣｌｅｃ２である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＣＤ４１であり、第２の腫瘍抗原はｃＫＩＴである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＣＤ４１であり、第２の腫瘍抗原はＦＬＴ３である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＣＤ４１であり、第２の腫瘍抗原はＭＰＬである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＣＤ４１であり、第２の腫瘍抗原はＩＴＧＢ３である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＣＤ４１であり、第２の腫瘍抗原はＩＴＧＢ２である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＣＤ４１であり、第２の腫瘍抗原はＧＰ５である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＣＤ４１であり、第２の腫瘍抗原はＧＰ６である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＣＤ４１であり、第２の腫瘍抗原はＧＰ９である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＣＤ４１であり、第２の腫瘍抗原はＧＰ１ＢＡである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＣＤ４１であり、第２の腫瘍抗原はＤＳＣ２である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＣＤ４１であり、第２の腫瘍抗原はＦＣＧＲ２Ａである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＣＤ４１であり、第２の腫瘍抗原はＴＮＦＲＳＦ１０Ａである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＣＤ４１であり、第２の腫瘍抗原はＴＮＦＲＳＦ１０Ｂである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＣＤ４１であり、第２の腫瘍抗原はＴＭ４ＳＦ１である。
[00876]前述の態様の一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＧ６Ｂであり、第２の腫瘍抗原はＣＤ３４である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＧ６Ｂであり、第２の腫瘍抗原はＣＤ４１である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＧ６Ｂであり、第２の腫瘍抗原はＧ６Ｂである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＧ６Ｂであり、第２の腫瘍抗原はＰ－セレクチンである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＧ６Ｂであり、第２の腫瘍抗原はＣｌｅｃ２である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＧ６Ｂであり、第２の腫瘍抗原はｃＫＩＴである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＧ６Ｂであり、第２の腫瘍抗原はＦＬＴ３である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＧ６Ｂであり、第２の腫瘍抗原はＭＰＬである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＧ６Ｂであり、第２の腫瘍抗原はＩＴＧＢ３である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＧ６Ｂであり、第２の腫瘍抗原はＩＴＧＢ２である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＧ６Ｂであり、第２の腫瘍抗原はＧＰ５である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＧ６Ｂであり、第２の腫瘍抗原はＧＰ６である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＧ６Ｂであり、第２の腫瘍抗原はＧＰ９である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＧ６Ｂであり、第２の腫瘍抗原はＧＰ１ＢＡである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＧ６Ｂであり、第２の腫瘍抗原はＤＳＣ２である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＧ６Ｂであり、第２の腫瘍抗原はＦＣＧＲ２Ａである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＧ６Ｂであり、第２の腫瘍抗原はＴＮＦＲＳＦ１０Ａである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＧ６Ｂであり、第２の腫瘍抗原はＴＮＦＲＳＦ１０Ｂである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＧ６Ｂであり、第２の腫瘍抗原はＴＭ４ＳＦ１である。
[00877]前述の態様の一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＰ－セレクチンであり、第２の腫瘍抗原はＣＤ３４である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＰ－セレクチンであり、第２の腫瘍抗原はＣＤ４１である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＰ－セレクチンであり、第２の腫瘍抗原はＧ６Ｂである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＰ－セレクチンであり、第２の腫瘍抗原はＰ－セレクチンである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＰ－セレクチンであり、第２の腫瘍抗原はＣｌｅｃ２である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＰ－セレクチンであり、第２の腫瘍抗原はｃＫＩＴである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＰ－セレクチンであり、第２の腫瘍抗原はＦＬＴ３である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＰ－セレクチンであり、第２の腫瘍抗原はＭＰＬである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＰ－セレクチンであり、第２の腫瘍抗原はＩＴＧＢ３である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＰ－セレクチンであり、第２の腫瘍抗原はＩＴＧＢ２である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＰ－セレクチンであり、第２の腫瘍抗原はＧＰ５である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＰ－セレクチンであり、第２の腫瘍抗原はＧＰ６である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＰ－セレクチンであり、第２の腫瘍抗原はＧＰ９である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＰ－セレクチンであり、第２の腫瘍抗原はＧＰ１ＢＡである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＰ－セレクチンであり、第２の腫瘍抗原はＤＳＣ２である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＰ－セレクチンであり、第２の腫瘍抗原はＦＣＧＲ２Ａである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＰ－セレクチンであり、第２の腫瘍抗原はＴＮＦＲＳＦ１０Ａである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＰ－セレクチンであり、第２の腫瘍抗原はＴＮＦＲＳＦ１０Ｂである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＰ－セレクチンであり、第２の腫瘍抗原はＴＭ４ＳＦ１である。
[00878]前述の態様の一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＣｌｅｃ２であり、第２の腫瘍抗原はＣＤ３４である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＣｌｅｃ２であり、第２の腫瘍抗原はＣＤ４１である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＣｌｅｃ２であり、第２の腫瘍抗原はＧ６Ｂである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＣｌｅｃ２であり、第２の腫瘍抗原はＰ－セレクチンである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＣｌｅｃ２であり、第２の腫瘍抗原はＣｌｅｃ２である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＣｌｅｃ２であり、第２の腫瘍抗原はｃＫＩＴである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＣｌｅｃ２であり、第２の腫瘍抗原はＦＬＴ３である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＣｌｅｃ２であり、第２の腫瘍抗原はＭＰＬである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＣｌｅｃ２であり、第２の腫瘍抗原はＩＴＧＢ３である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＣｌｅｃ２であり、第２の腫瘍抗原はＩＴＧＢ２である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＣｌｅｃ２であり、第２の腫瘍抗原はＧＰ５である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＣｌｅｃ２であり、第２の腫瘍抗原はＧＰ６である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＣｌｅｃ２であり、第２の腫瘍抗原はＧＰ９である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＣｌｅｃ２であり、第２の腫瘍抗原はＧＰ１ＢＡである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＣｌｅｃ２であり、第２の腫瘍抗原はＤＳＣ２である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＣｌｅｃ２であり、第２の腫瘍抗原はＦＣＧＲ２Ａである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＣｌｅｃ２であり、第２の腫瘍抗原はＴＮＦＲＳＦ１０Ａである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＣｌｅｃ２であり、第２の腫瘍抗原はＴＮＦＲＳＦ１０Ｂである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＣｌｅｃ２であり、第２の腫瘍抗原はＴＭ４ＳＦ１である。
[00879]前述の態様の一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はｃＫＩＴであり、第２の腫瘍抗原はＣＤ３４である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はｃＫＩＴであり、第２の腫瘍抗原はＣＤ４１である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はｃＫＩＴであり、第２の腫瘍抗原はＧ６Ｂである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はｃＫＩＴであり、第２の腫瘍抗原はＰ－セレクチンである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はｃＫＩＴであり、第２の腫瘍抗原はＣｌｅｃ２である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はｃＫＩＴであり、第２の腫瘍抗原はｃＫＩＴである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はｃＫＩＴであり、第２の腫瘍抗原はＦＬＴ３である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はｃＫＩＴであり、第２の腫瘍抗原はＭＰＬである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はｃＫＩＴであり、第２の腫瘍抗原はＩＴＧＢ３である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はｃＫＩＴであり、第２の腫瘍抗原はＩＴＧＢ２である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はｃＫＩＴであり、第２の腫瘍抗原はＧＰ５である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はｃＫＩＴであり、第２の腫瘍抗原はＧＰ６である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はｃＫＩＴであり、第２の腫瘍抗原はＧＰ９である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はｃＫＩＴであり、第２の腫瘍抗原はＧＰ１ＢＡである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はｃＫＩＴであり、第２の腫瘍抗原はＤＳＣ２である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はｃＫＩＴであり、第２の腫瘍抗原はＦＣＧＲ２Ａである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はｃＫＩＴであり、第２の腫瘍抗原はＴＮＦＲＳＦ１０Ａである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はｃＫＩＴであり、第２の腫瘍抗原はＴＮＦＲＳＦ１０Ｂである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はｃＫＩＴであり、第２の腫瘍抗原はＴＭ４ＳＦ１である。
[00880]前述の態様の一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＦＬＴ３であり、第２の腫瘍抗原はＣＤ３４である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＦＬＴ３であり、第２の腫瘍抗原はＣＤ４１である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＦＬＴ３であり、第２の腫瘍抗原はＧ６Ｂである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＦＬＴ３であり、第２の腫瘍抗原はＰ－セレクチンである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＦＬＴ３であり、第２の腫瘍抗原はＣｌｅｃ２である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＦＬＴ３であり、第２の腫瘍抗原はｃＫＩＴである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＦＬＴ３であり、第２の腫瘍抗原はＦＬＴ３である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＦＬＴ３であり、第２の腫瘍抗原はＭＰＬである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＦＬＴ３であり、第２の腫瘍抗原はＩＴＧＢ３である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＦＬＴ３であり、第２の腫瘍抗原はＩＴＧＢ２である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＦＬＴ３であり、第２の腫瘍抗原はＧＰ５である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＦＬＴ３であり、第２の腫瘍抗原はＧＰ６である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＦＬＴ３であり、第２の腫瘍抗原はＧＰ９である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＦＬＴ３であり、第２の腫瘍抗原はＧＰ１ＢＡである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＦＬＴ３であり、第２の腫瘍抗原はＤＳＣ２である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＦＬＴ３であり、第２の腫瘍抗原はＦＣＧＲ２Ａである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＦＬＴ３であり、第２の腫瘍抗原はＴＮＦＲＳＦ１０Ａである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＦＬＴ３であり、第２の腫瘍抗原はＴＮＦＲＳＦ１０Ｂである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＦＬＴ３であり、第２の腫瘍抗原はＴＭ４ＳＦ１である。
[00881]前述の態様の一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＭＰＬであり、第２の腫瘍抗原はＣＤ３４である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＭＰＬであり、第２の腫瘍抗原はＣＤ４１である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＭＰＬであり、第２の腫瘍抗原はＧ６Ｂである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＭＰＬであり、第２の腫瘍抗原はＰ－セレクチンである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＭＰＬであり、第２の腫瘍抗原はＣｌｅｃ２である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＭＰＬであり、第２の腫瘍抗原はｃＫＩＴである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＭＰＬであり、第２の腫瘍抗原はＦＬＴ３である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＭＰＬであり、第２の腫瘍抗原はＭＰＬである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＭＰＬであり、第２の腫瘍抗原はＩＴＧＢ３である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＭＰＬであり、第２の腫瘍抗原はＩＴＧＢ２である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＭＰＬであり、第２の腫瘍抗原はＧＰ５である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＭＰＬであり、第２の腫瘍抗原はＧＰ６である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＭＰＬであり、第２の腫瘍抗原はＧＰ９である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＭＰＬであり、第２の腫瘍抗原はＧＰ１ＢＡである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＭＰＬであり、第２の腫瘍抗原はＤＳＣ２である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＭＰＬであり、第２の腫瘍抗原はＦＣＧＲ２Ａである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＭＰＬであり、第２の腫瘍抗原はＴＮＦＲＳＦ１０Ａである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＭＰＬであり、第２の腫瘍抗原はＴＮＦＲＳＦ１０Ｂである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＭＰＬであり、第２の腫瘍抗原はＴＭ４ＳＦ１である。
[00882]前述の態様の一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＩＴＧＢ３であり、第２の腫瘍抗原はＣＤ３４である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＩＴＧＢ３であり、第２の腫瘍抗原はＣＤ４１である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＩＴＧＢ３であり、第２の腫瘍抗原はＧ６Ｂである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＩＴＧＢ３であり、第２の腫瘍抗原はＰ－セレクチンである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＩＴＧＢ３であり、第２の腫瘍抗原はＣｌｅｃ２である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＩＴＧＢ３であり、第２の腫瘍抗原はｃＫＩＴである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＩＴＧＢ３であり、第２の腫瘍抗原はＦＬＴ３である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＩＴＧＢ３であり、第２の腫瘍抗原はＭＰＬである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＩＴＧＢ３であり、第２の腫瘍抗原はＩＴＧＢ３である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＩＴＧＢ３であり、第２の腫瘍抗原はＩＴＧＢ２である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＩＴＧＢ３であり、第２の腫瘍抗原はＧＰ５である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＩＴＧＢ３であり、第２の腫瘍抗原はＧＰ６である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＩＴＧＢ３であり、第２の腫瘍抗原はＧＰ９である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＩＴＧＢ３であり、第２の腫瘍抗原はＧＰ１ＢＡである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＩＴＧＢ３であり、第２の腫瘍抗原はＤＳＣ２である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＩＴＧＢ３であり、第２の腫瘍抗原はＦＣＧＲ２Ａである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＩＴＧＢ３であり、第２の腫瘍抗原はＴＮＦＲＳＦ１０Ａである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＩＴＧＢ３であり、第２の腫瘍抗原はＴＮＦＲＳＦ１０Ｂである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＩＴＧＢ３であり、第２の腫瘍抗原はＴＭ４ＳＦ１である。
[00883]前述の態様の一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＩＴＧＢ２であり、第２の腫瘍抗原はＣＤ３４である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＩＴＧＢ２であり、第２の腫瘍抗原はＣＤ４１である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＩＴＧＢ２であり、第２の腫瘍抗原はＧ６Ｂである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＩＴＧＢ２であり、第２の腫瘍抗原はＰ－セレクチンである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＩＴＧＢ２であり、第２の腫瘍抗原はＣｌｅｃ２である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＩＴＧＢ２であり、第２の腫瘍抗原はｃＫＩＴである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＩＴＧＢ２であり、第２の腫瘍抗原はＦＬＴ３である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＩＴＧＢ２であり、第２の腫瘍抗原はＭＰＬである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＩＴＧＢ２であり、第２の腫瘍抗原はＩＴＧＢ３である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＩＴＧＢ２であり、第２の腫瘍抗原はＩＴＧＢ２である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＩＴＧＢ２であり、第２の腫瘍抗原はＧＰ５である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＩＴＧＢ２であり、第２の腫瘍抗原はＧＰ６である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＩＴＧＢ２であり、第２の腫瘍抗原はＧＰ９である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＩＴＧＢ２であり、第２の腫瘍抗原はＧＰ１ＢＡである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＩＴＧＢ２であり、第２の腫瘍抗原はＤＳＣ２である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＩＴＧＢ２であり、第２の腫瘍抗原はＦＣＧＲ２Ａである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＩＴＧＢ２であり、第２の腫瘍抗原はＴＮＦＲＳＦ１０Ａである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＩＴＧＢ２であり、第２の腫瘍抗原はＴＮＦＲＳＦ１０Ｂである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＩＴＧＢ２であり、第２の腫瘍抗原はＴＭ４ＳＦ１である。
[00884]前述の態様の一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＧＰ５であり、第２の腫瘍抗原はＣＤ３４である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＧＰ５であり、第２の腫瘍抗原はＣＤ４１である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＧＰ５であり、第２の腫瘍抗原はＧ６Ｂである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＧＰ５であり、第２の腫瘍抗原はＰ－セレクチンである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＧＰ５であり、第２の腫瘍抗原はＣｌｅｃ２である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＧＰ５であり、第２の腫瘍抗原はｃＫＩＴである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＧＰ５であり、第２の腫瘍抗原はＦＬＴ３である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＧＰ５であり、第２の腫瘍抗原はＭＰＬである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＧＰ５であり、第２の腫瘍抗原はＩＴＧＢ３である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＧＰ５であり、第２の腫瘍抗原はＩＴＧＢ２である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＧＰ５であり、第２の腫瘍抗原はＧＰ５である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＧＰ５であり、第２の腫瘍抗原はＧＰ６である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＧＰ５であり、第２の腫瘍抗原はＧＰ９である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＧＰ５であり、第２の腫瘍抗原はＧＰ１ＢＡである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＧＰ５であり、第２の腫瘍抗原はＤＳＣ２である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＧＰ５であり、第２の腫瘍抗原はＦＣＧＲ２Ａである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＧＰ５であり、第２の腫瘍抗原はＴＮＦＲＳＦ１０Ａである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＧＰ５であり、第２の腫瘍抗原はＴＮＦＲＳＦ１０Ｂである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＧＰ５であり、第２の腫瘍抗原はＴＭ４ＳＦ１である。
[00885]前述の態様の一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＧＰ６であり、第２の腫瘍抗原はＣＤ３４である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＧＰ６であり、第２の腫瘍抗原はＣＤ４１である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＧＰ６であり、第２の腫瘍抗原はＧ６Ｂである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＧＰ６であり、第２の腫瘍抗原はＰ－セレクチンである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＧＰ６であり、第２の腫瘍抗原はＣｌｅｃ２である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＧＰ６であり、第２の腫瘍抗原はｃＫＩＴである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＧＰ６であり、第２の腫瘍抗原はＦＬＴ３である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＧＰ６であり、第２の腫瘍抗原はＭＰＬである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＧＰ６であり、第２の腫瘍抗原はＩＴＧＢ３である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＧＰ６であり、第２の腫瘍抗原はＩＴＧＢ２である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＧＰ６であり、第２の腫瘍抗原はＧＰ５である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＧＰ６であり、第２の腫瘍抗原はＧＰ６である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＧＰ６であり、第２の腫瘍抗原はＧＰ９である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＧＰ６であり、第２の腫瘍抗原はＧＰ１ＢＡである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＧＰ６であり、第２の腫瘍抗原はＤＳＣ２である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＧＰ６であり、第２の腫瘍抗原はＦＣＧＲ２Ａである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＧＰ６であり、第２の腫瘍抗原はＴＮＦＲＳＦ１０Ａである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＧＰ６であり、第２の腫瘍抗原はＴＮＦＲＳＦ１０Ｂである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＧＰ６であり、第２の腫瘍抗原はＴＭ４ＳＦ１である。
[00886]前述の態様の一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＧＰ９であり、第２の腫瘍抗原はＣＤ３４である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＧＰ９であり、第２の腫瘍抗原はＣＤ４１である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＧＰ９であり、第２の腫瘍抗原はＧ６Ｂである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＧＰ９であり、第２の腫瘍抗原はＰ－セレクチンである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＧＰ９であり、第２の腫瘍抗原はＣｌｅｃ２である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＧＰ９であり、第２の腫瘍抗原はｃＫＩＴである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＧＰ９であり、第２の腫瘍抗原はＦＬＴ３である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＧＰ９であり、第２の腫瘍抗原はＭＰＬである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＧＰ９であり、第２の腫瘍抗原はＩＴＧＢ３である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＧＰ９であり、第２の腫瘍抗原はＩＴＧＢ２である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＧＰ９であり、第２の腫瘍抗原はＧＰ５である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＧＰ９であり、第２の腫瘍抗原はＧＰ６である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＧＰ９であり、第２の腫瘍抗原はＧＰ９である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＧＰ９であり、第２の腫瘍抗原はＧＰ１ＢＡである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＧＰ９であり、第２の腫瘍抗原はＤＳＣ２である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＧＰ９であり、第２の腫瘍抗原はＦＣＧＲ２Ａである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＧＰ９であり、第２の腫瘍抗原はＴＮＦＲＳＦ１０Ａである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＧＰ９であり、第２の腫瘍抗原はＴＮＦＲＳＦ１０Ｂである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＧＰ９であり、第２の腫瘍抗原はＴＭ４ＳＦ１である。
[00887]前述の態様の一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＧＰ１ＢＡであり、第２の腫瘍抗原はＣＤ３４である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＧＰ１ＢＡであり、第２の腫瘍抗原はＣＤ４１である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＧＰ１ＢＡであり、第２の腫瘍抗原はＧ６Ｂである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＧＰ１ＢＡであり、第２の腫瘍抗原はＰ－セレクチンである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＧＰ１ＢＡであり、第２の腫瘍抗原はＣｌｅｃ２である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＧＰ１ＢＡであり、第２の腫瘍抗原はｃＫＩＴである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＧＰ１ＢＡであり、第２の腫瘍抗原はＦＬＴ３である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＧＰ１ＢＡであり、第２の腫瘍抗原はＭＰＬである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＧＰ１ＢＡであり、第２の腫瘍抗原はＩＴＧＢ３である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＧＰ１ＢＡであり、第２の腫瘍抗原はＩＴＧＢ２である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＧＰ１ＢＡであり、第２の腫瘍抗原はＧＰ５である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＧＰ１ＢＡであり、第２の腫瘍抗原はＧＰ６である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＧＰ１ＢＡであり、第２の腫瘍抗原はＧＰ９である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＧＰ１ＢＡであり、第２の腫瘍抗原はＧＰ１ＢＡである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＧＰ１ＢＡであり、第２の腫瘍抗原はＤＳＣ２である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＧＰ１ＢＡであり、第２の腫瘍抗原はＦＣＧＲ２Ａである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＧＰ１ＢＡであり、第２の腫瘍抗原はＴＮＦＲＳＦ１０Ａである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＧＰ１ＢＡであり、第２の腫瘍抗原はＴＮＦＲＳＦ１０Ｂである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＧＰ１ＢＡであり、第２の腫瘍抗原はＴＭ４ＳＦ１である。
[00888]前述の態様の一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＤＳＣ２であり、第２の腫瘍抗原はＣＤ３４である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＤＳＣ２であり、第２の腫瘍抗原はＣＤ４１である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＤＳＣ２であり、第２の腫瘍抗原はＧ６Ｂである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＤＳＣ２であり、第２の腫瘍抗原はＰ－セレクチンである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＤＳＣ２であり、第２の腫瘍抗原はＣｌｅｃ２である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＤＳＣ２であり、第２の腫瘍抗原はｃＫＩＴである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＤＳＣ２であり、第２の腫瘍抗原はＦＬＴ３である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＤＳＣ２であり、第２の腫瘍抗原はＭＰＬである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＤＳＣ２であり、第２の腫瘍抗原はＩＴＧＢ３である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＤＳＣ２であり、第２の腫瘍抗原はＩＴＧＢ２である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＤＳＣ２であり、第２の腫瘍抗原はＧＰ５である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＤＳＣ２であり、第２の腫瘍抗原はＧＰ６である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＤＳＣ２であり、第２の腫瘍抗原はＧＰ９である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＤＳＣ２であり、第２の腫瘍抗原はＧＰ１ＢＡである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＤＳＣ２であり、第２の腫瘍抗原はＤＳＣ２である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＤＳＣ２であり、第２の腫瘍抗原はＦＣＧＲ２Ａである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＤＳＣ２であり、第２の腫瘍抗原はＴＮＦＲＳＦ１０Ａである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＤＳＣ２であり、第２の腫瘍抗原はＴＮＦＲＳＦ１０Ｂである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＤＳＣ２であり、第２の腫瘍抗原はＴＭ４ＳＦ１である。
[00889]前述の態様の一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＦＣＧＲ２Ａであり、第２の腫瘍抗原はＣＤ３４である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＦＣＧＲ２Ａであり、第２の腫瘍抗原はＣＤ４１である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＦＣＧＲ２Ａであり、第２の腫瘍抗原はＧ６Ｂである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＦＣＧＲ２Ａであり、第２の腫瘍抗原はＰ－セレクチンである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＦＣＧＲ２Ａであり、第２の腫瘍抗原はＣｌｅｃ２である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＦＣＧＲ２Ａであり、第２の腫瘍抗原はｃＫＩＴである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＦＣＧＲ２Ａであり、第２の腫瘍抗原はＦＬＴ３である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＦＣＧＲ２Ａであり、第２の腫瘍抗原はＭＰＬである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＦＣＧＲ２Ａであり、第２の腫瘍抗原はＩＴＧＢ３である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＦＣＧＲ２Ａであり、第２の腫瘍抗原はＩＴＧＢ２である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＦＣＧＲ２Ａであり、第２の腫瘍抗原はＧＰ５である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＦＣＧＲ２Ａであり、第２の腫瘍抗原はＧＰ６である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＦＣＧＲ２Ａであり、第２の腫瘍抗原はＧＰ９である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＦＣＧＲ２Ａであり、第２の腫瘍抗原はＧＰ１ＢＡである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＦＣＧＲ２Ａであり、第２の腫瘍抗原はＤＳＣ２である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＦＣＧＲ２Ａであり、第２の腫瘍抗原はＦＣＧＲ２Ａである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＦＣＧＲ２Ａであり、第２の腫瘍抗原はＴＮＦＲＳＦ１０Ａである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＦＣＧＲ２Ａであり、第２の腫瘍抗原はＴＮＦＲＳＦ１０Ｂである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＦＣＧＲ２Ａであり、第２の腫瘍抗原はＴＭ４ＳＦ１である。
[00890]前述の態様の一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＴＮＦＲＳＦ１０Ａであり、第２の腫瘍抗原はＣＤ３４である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＴＮＦＲＳＦ１０Ａであり、第２の腫瘍抗原はＣＤ４１である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＴＮＦＲＳＦ１０Ａであり、第２の腫瘍抗原はＧ６Ｂである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＴＮＦＲＳＦ１０Ａであり、第２の腫瘍抗原はＰ－セレクチンである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＴＮＦＲＳＦ１０Ａであり、第２の腫瘍抗原はＣｌｅｃ２である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＴＮＦＲＳＦ１０Ａであり、第２の腫瘍抗原はｃＫＩＴである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＴＮＦＲＳＦ１０Ａであり、第２の腫瘍抗原はＦＬＴ３である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＴＮＦＲＳＦ１０Ａであり、第２の腫瘍抗原はＭＰＬである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＴＮＦＲＳＦ１０Ａであり、第２の腫瘍抗原はＩＴＧＢ３である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＴＮＦＲＳＦ１０Ａであり、第２の腫瘍抗原はＩＴＧＢ２である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＴＮＦＲＳＦ１０Ａであり、第２の腫瘍抗原はＧＰ５である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＴＮＦＲＳＦ１０Ａであり、第２の腫瘍抗原はＧＰ６である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＴＮＦＲＳＦ１０Ａであり、第２の腫瘍抗原はＧＰ９である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＴＮＦＲＳＦ１０Ａであり、第２の腫瘍抗原はＧＰ１ＢＡである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＴＮＦＲＳＦ１０Ａであり、第２の腫瘍抗原はＤＳＣ２である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＴＮＦＲＳＦ１０Ａであり、第２の腫瘍抗原はＦＣＧＲ２Ａである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＴＮＦＲＳＦ１０Ａであり、第２の腫瘍抗原はＴＮＦＲＳＦ１０Ａである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＴＮＦＲＳＦ１０Ａであり、第２の腫瘍抗原はＴＭ４ＳＦ１である。
[00891]前述の態様の一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＴＮＦＲＳＦ１０Ｂであり、第２の腫瘍抗原はＣＤ３４である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＴＮＦＲＳＦ１０Ｂであり、第２の腫瘍抗原はＣＤ４１である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＴＮＦＲＳＦ１０Ｂであり、第２の腫瘍抗原はＧ６Ｂである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＴＮＦＲＳＦ１０Ｂであり、第２の腫瘍抗原はＰ－セレクチンである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＴＮＦＲＳＦ１０Ｂであり、第２の腫瘍抗原はＣｌｅｃ２である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＴＮＦＲＳＦ１０Ｂであり、第２の腫瘍抗原はｃＫＩＴである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＴＮＦＲＳＦ１０Ｂであり、第２の腫瘍抗原はＦＬＴ３である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＴＮＦＲＳＦ１０Ｂであり、第２の腫瘍抗原はＭＰＬである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＴＮＦＲＳＦ１０Ｂであり、第２の腫瘍抗原はＩＴＧＢ３である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＴＮＦＲＳＦ１０Ｂであり、第２の腫瘍抗原はＩＴＧＢ２である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＴＮＦＲＳＦ１０Ｂであり、第２の腫瘍抗原はＧＰ５である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＴＮＦＲＳＦ１０Ｂであり、第２の腫瘍抗原はＧＰ６である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＴＮＦＲＳＦ１０Ｂであり、第２の腫瘍抗原はＧＰ９である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＴＮＦＲＳＦ１０Ｂであり、第２の腫瘍抗原はＧＰ１ＢＡである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＴＮＦＲＳＦ１０Ｂであり、第２の腫瘍抗原はＤＳＣ２である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＴＮＦＲＳＦ１０Ｂであり、第２の腫瘍抗原はＦＣＧＲ２Ａである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＴＮＦＲＳＦ１０Ｂであり、第２の腫瘍抗原はＴＮＦＲＳＦ１０Ｂである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＴＮＦＲＳＦ１０Ｂであり、第２の腫瘍抗原はＴＭ４ＳＦ１である。
[00892]前述の態様の一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＴＭ４ＳＦ１であり、第２の腫瘍抗原はＣＤ３４である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＴＭ４ＳＦ１であり、第２の腫瘍抗原はＣＤ４１である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＴＭ４ＳＦ１であり、第２の腫瘍抗原はＧ６Ｂである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＴＭ４ＳＦ１であり、第２の腫瘍抗原はＰ－セレクチンである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＴＭ４ＳＦ１であり、第２の腫瘍抗原はＣｌｅｃ２である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＴＭ４ＳＦ１であり、第２の腫瘍抗原はｃＫＩＴである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＴＭ４ＳＦ１であり、第２の腫瘍抗原はＦＬＴ３である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＴＭ４ＳＦ１であり、第２の腫瘍抗原はＭＰＬである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＴＭ４ＳＦ１であり、第２の腫瘍抗原はＩＴＧＢ３である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＴＭ４ＳＦ１であり、第２の腫瘍抗原はＩＴＧＢ２である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＴＭ４ＳＦ１であり、第２の腫瘍抗原はＧＰ５である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＴＭ４ＳＦ１であり、第２の腫瘍抗原はＧＰ６である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＴＭ４ＳＦ１であり、第２の腫瘍抗原はＧＰ９である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＴＭ４ＳＦ１であり、第２の腫瘍抗原はＧＰ１ＢＡである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＴＭ４ＳＦ１であり、第２の腫瘍抗原はＤＳＣ２である。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＴＭ４ＳＦ１であり、第２の腫瘍抗原はＦＣＧＲ２Ａである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＴＭ４ＳＦ１であり、第２の腫瘍抗原はＴＮＦＲＳＦ１０Ａである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＴＭ４ＳＦ１であり、第２の腫瘍抗原はＴＮＦＲＳＦ１０Ｂである。一部の実施形態では、第１の腫瘍抗原はＴＭ４ＳＦ１であり、第２の腫瘍抗原はＴＭ４ＳＦ１である。
腫瘍抗原を標的とする抗体分子
[00893]一部の実施形態では、腫瘍標的化部分は、表３８に示されるＣＤＲ、フレームワーク領域、もしくは可変領域配列（またはそれに対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有する配列）を含む。
Figure 2023542080000141
Figure 2023542080000142
Figure 2023542080000143
 [00894]一部の実施形態では、第１、第２、または第３の腫瘍抗原はＣＤ３４である。一部の実施形態では、第１、第２、または第３の腫瘍標的化部分は、
（ｉ）配列番号２００１（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）からのＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、および／またはＨＣＤＲ３、
（ｉｉ）配列番号２００１（またはそれに対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有する配列）のＶＨ、
（ｉｉｉ）配列番号２００２（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）からのＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、および／またはＬＣＤＲ３、ならびに／あるいは
（ｉｖ）配列番号２００２（またはそれに対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有する配列）のＶＬ
を含む。
[00895]一部の実施形態では、第１、第２、または第３の腫瘍抗原はＣＤ４１である。一部の実施形態では、第１、第２、または第３の腫瘍標的化部分は、
（ｉ）配列番号２００７（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）からのＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、および／またはＨＣＤＲ３、
（ｉｉ）配列番号２００７（またはそれに対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有する配列）のＶＨ、
（ｉｉｉ）配列番号２００８（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）からのＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、および／またはＬＣＤＲ３、ならびに／あるいは
（ｉｖ）配列番号２００８（またはそれに対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有する配列）のＶＬ
を含む。
[00896]一部の実施形態では、第１、第２、または第３の腫瘍抗原はＰ－セレクチンである。一部の実施形態では、第１、第２、または第３の腫瘍標的化部分は、
（ｉ）配列番号２０１３（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）からのＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、および／またはＨＣＤＲ３、
（ｉｉ）配列番号２０１３（またはそれに対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有する配列）のＶＨ、
（ｉｉｉ）配列番号２０１４（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）からのＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、および／またはＬＣＤＲ３、ならびに／あるいは
（ｉｖ）配列番号２０１４（またはそれに対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有する配列）のＶＬ
を含む。
[00897]一部の実施形態では、第１、第２、または第３の腫瘍抗原はｃＫＩＴである。一部の実施形態では、第１、第２、または第３の腫瘍標的化部分は、
（ｉ）配列番号２００３（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）からのＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、および／またはＨＣＤＲ３、
（ｉｉ）配列番号２００３（またはそれに対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有する配列）のＶＨ、
（ｉｉｉ）配列番号２００４（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）からのＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、および／またはＬＣＤＲ３、ならびに／あるいは
（ｉｖ）配列番号２００４（またはそれに対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有する配列）のＶＬ
を含む。
[00898]一部の実施形態では、第１、第２、または第３の腫瘍抗原はＦＬＴ３である。一部の実施形態では、第１、第２、または第３の腫瘍標的化部分は、
（ｉ）配列番号２００５（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）からのＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、および／またはＨＣＤＲ３、
（ｉｉ）配列番号２００５（またはそれに対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有する配列）のＶＨ、
（ｉｉｉ）配列番号２００６（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）からのＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、および／またはＬＣＤＲ３、ならびに／あるいは
（ｉｖ）配列番号２００６（またはそれに対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有する配列）のＶＬ
を含む。
[00899]一部の実施形態では、第１、第２、または第３の腫瘍抗原はＭＰＬである。一部の実施形態では、第１、第２、または第３の腫瘍標的化部分は、
（ｉ）（ａ）配列番号２００９（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）からのＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、および／またはＨＣＤＲ３、
（ｂ）配列番号２００９（またはそれに対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有する配列）のＶＨ、
（ｃ）配列番号２０１０（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）からのＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、および／またはＬＣＤＲ３、ならびに／または
（ｄ）配列番号２０１０（またはそれに対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有する配列）のＶＬ；あるいは
（ｉｉ）（ａ）配列番号２０１１（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）からのＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、および／またはＨＣＤＲ３、
（ｂ）配列番号２０１１（またはそれに対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有する配列）のＶＨ、
（ｃ）配列番号２０１２（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）からのＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、および／またはＬＣＤＲ３、ならびに／または
（ｄ）配列番号２０１２（またはそれに対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有する配列）のＶＬ
を含む。
[00900]一部の実施形態では、第１、第２、または第３の腫瘍抗原はＤＳＣ２である。一部の実施形態では、第１、第２、または第３の腫瘍標的化部分は、
（ｉ）（ａ）配列番号２０１５（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）からのＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、および／またはＨＣＤＲ３、
（ｂ）配列番号２０１５（またはそれに対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有する配列）のＶＨ、
（ｃ）配列番号２０１６（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）からのＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、および／またはＬＣＤＲ３、ならびに／または
（ｄ）配列番号２０１６（またはそれに対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有する配列）のＶＬ；あるいは
（ｉｉ）（ａ）配列番号２０１７（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）からのＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、および／またはＨＣＤＲ３、
（ｂ）配列番号２０１７（またはそれに対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有する配列）のＶＨ、
（ｃ）配列番号２０１８（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）からのＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、および／またはＬＣＤＲ３、ならびに／または
（ｄ）配列番号２０１８（またはそれに対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有する配列）のＶＬ
を含む。
[00901]一部の実施形態では、第１、第２、または第３の腫瘍抗原はＦＣＧＲ２Ａである。一部の実施形態では、第１、第２、または第３の腫瘍標的化部分は、
（ｉ）（ａ）配列番号２０１９（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）からのＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、および／またはＨＣＤＲ３、
（ｂ）配列番号２０１９（またはそれに対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有する配列）のＶＨ、
（ｃ）配列番号２０２０（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）からのＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、および／またはＬＣＤＲ３、ならびに／または
（ｄ）配列番号２０２０（またはそれに対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有する配列）のＶＬ；
（ｉｉ）（ａ）配列番号２０２１（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）からのＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、および／またはＨＣＤＲ３、
（ｂ）配列番号２０２１（またはそれに対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有する配列）のＶＨ、
（ｃ）配列番号２０２２（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）からのＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、および／またはＬＣＤＲ３、ならびに／または
（ｄ）配列番号２０２２（またはそれに対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有する配列）のＶＬ、あるいは
（ｉｉｉ）（ａ）配列番号２０２３（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）からのＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、および／またはＨＣＤＲ３、
（ｂ）配列番号２０２３（またはそれに対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有する配列）のＶＨ、
（ｃ）配列番号２０２４（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）からのＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、および／またはＬＣＤＲ３、ならびに／または
（ｄ）配列番号２０２４（またはそれに対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有する配列）のＶＬ
を含む。
[00902]一部の実施形態では、第１、第２、または第３の腫瘍抗原はＴＮＦＲＳＦ１０ＡまたはＴＮＦＲＳＦ１０Ｂである。一部の実施形態では、第１、第２、または第３の腫瘍標的化部分は、
（ｉ）（ａ）配列番号２０２５（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）からのＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、および／またはＨＣＤＲ３、
（ｂ）配列番号２０２５（またはそれに対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有する配列）のＶＨ、
（ｃ）配列番号２０２６（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）からのＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、および／またはＬＣＤＲ３、ならびに／または
（ｄ）配列番号２０２６（またはそれに対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有する配列）のＶＬ；あるいは
（ｉｉ）（ａ）配列番号２０２７（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）からのＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、および／またはＨＣＤＲ３、
（ｂ）配列番号２０２７（またはそれに対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有する配列）のＶＨ、
（ｃ）配列番号２０２８（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）からのＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、および／またはＬＣＤＲ３、ならびに／または
（ｄ）配列番号２０２８（またはそれに対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有する配列）のＶＬ；
（ｉｉｉ）（ａ）配列番号２０２９（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）からのＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、および／またはＨＣＤＲ３、
（ｂ）配列番号２０２９（またはそれに対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有する配列）のＶＨ、
（ｃ）配列番号２０３０（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）からのＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、および／またはＬＣＤＲ３、ならびに／または
（ｄ）配列番号２０３０（またはそれに対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有する配列）のＶＬ；
（ｉｖ）（ａ）配列番号２０３１（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）からのＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、および／またはＨＣＤＲ３、
（ｂ）配列番号２０３１（またはそれに対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有する配列）のＶＨ、
（ｃ）配列番号２０３２（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）からのＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、および／またはＬＣＤＲ３、ならびに／または
（ｄ）配列番号２０３２（またはそれに対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有する配列）のＶＬ；あるいは
（ｖ）（ａ）配列番号２０３３（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）からのＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、および／またはＨＣＤＲ３、
（ｂ）配列番号２０３３（またはそれに対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有する配列）のＶＨ、
（ｃ）配列番号２０３４（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）からのＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、および／またはＬＣＤＲ３、ならびに／または
（ｄ）配列番号２０３４（またはそれに対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有する配列）のＶＬ
を含む。
[00903]一部の実施形態では、第１、第２、または第３の腫瘍抗原はＴＭ４ＳＦ１である。一部の実施形態では、第１、第２、または第３の腫瘍標的化部分は、
（ｉ）配列番号２０３５（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）からのＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、および／またはＨＣＤＲ３、
（ｉｉ）配列番号２０３５（またはそれに対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有する配列）のＶＨ、
（ｉｉｉ）配列番号２０３６（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）からのＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、および／またはＬＣＤＲ３、ならびに／あるいは
（ｉｖ）配列番号２０３６（またはそれに対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有する配列）のＶＬ
を含む。
[00904]例示的な抗ＣＤ３４抗体配列
[00905]一態様では、ＣＤ３４標的化部分を含む腫瘍標的化部分を含む多特異性または多機能性分子が本明細書で提供される。別の態様では、抗ＣＤ３４抗体分子（例えば、モノクローナル抗ＣＤ３４抗体分子）が本明細書で提供される。
[00906]一部の実施形態では、ＣＤ３４標的化部分または抗ＣＤ３４抗体分子は、表２０または表２１に開示される抗体またはその抗原結合性断片を含む。一部の実施形態では、ＣＤ３４標的化部分または抗ＣＤ３４抗体分子は、表２０もしくは表２１に開示されるＣＤＲ、フレームワーク領域、もしくは可変領域配列（またはそれに対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有する配列）を含む。
[00907]一部の実施形態では、ＣＤ３４標的化部分または抗ＣＤ３４抗体分子は、配列番号６２３９の重鎖相補性決定領域１（ＶＨＣＤＲ１）アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号６２４１のＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号６２４３のＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を含むＶＨを含む。一部の実施形態では、ＣＤ３４標的化部分または抗ＣＤ３４抗体分子は、配列番号６２３９のＶＨＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号６２４１のＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列、および／または配列番号６２４３のＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列を含むＶＨを含む。一部の実施形態では、ＣＤ３４標的化部分または抗ＣＤ３４抗体分子は、配列番号６２４５の軽鎖相補性決定領域１（ＶＬＣＤＲ１）アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号１２３６のＶＬＣＤＲ２アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号６２４６のＶＬＣＤＲ３アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、ＣＤ３４標的化部分または抗ＣＤ３４抗体分子は、配列番号６２４５のＶＬＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号１２３６のＶＬＣＤＲ２アミノ酸配列、および配列番号６２４６のＶＬＣＤＲ３アミノ酸配列を含むＶＬを含む。
[00908]一部の実施形態では、ＣＤ３４標的化部分または抗ＣＤ３４抗体分子は、配列番号７９、６２２５、６２２７、もしくは６２２９のアミノ酸配列、またはそれに対して少なくとも約８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨを含む。一部の実施形態では、ＣＤ３４標的化部分または抗ＣＤ３４抗体分子は、配列番号６２３１、６２３３、６２３５、もしくは６２３７のアミノ酸配列、またはそれに対して少なくとも約８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、ＣＤ３４標的化部分または抗ＣＤ３４抗体分子は、配列番号７９のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨ、および配列番号６２３１のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、ＣＤ３４標的化部分または抗ＣＤ３４抗体分子は、配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＨ、および配列番号６２３１のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、ＣＤ３４標的化部分または抗ＣＤ３４抗体分子は、配列番号６２２５のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨ、および配列番号６２３１のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、ＣＤ３４標的化部分または抗ＣＤ３４抗体分子は、配列番号６２２５のアミノ酸配列を含むＶＨ、および配列番号６２３１のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、ＣＤ３４標的化部分または抗ＣＤ３４抗体分子は、配列番号６２２７のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨ、および配列番号６２３１のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、ＣＤ３４標的化部分または抗ＣＤ３４抗体分子は、配列番号６２２７のアミノ酸配列を含むＶＨ、および配列番号６２３１のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、ＣＤ３４標的化部分または抗ＣＤ３４抗体分子は、配列番号６２２９のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨ、および配列番号６２３１のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、ＣＤ３４標的化部分または抗ＣＤ３４抗体分子は、配列番号６２２９のアミノ酸配列を含むＶＨ、および配列番号６２３１のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、ＣＤ３４標的化部分または抗ＣＤ３４抗体分子は、配列番号７９のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨ、および配列番号６２３３のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、ＣＤ３４標的化部分または抗ＣＤ３４抗体分子は、配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＨ、および配列番号６２３３のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、ＣＤ３４標的化部分または抗ＣＤ３４抗体分子は、配列番号６２２５のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨ、および配列番号６２３３のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、ＣＤ３４標的化部分または抗ＣＤ３４抗体分子は、配列番号６２２５のアミノ酸配列を含むＶＨ、および配列番号６２３３のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、ＣＤ３４標的化部分または抗ＣＤ３４抗体分子は、配列番号６２２７のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨ、および配列番号６２３３のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、ＣＤ３４標的化部分または抗ＣＤ３４抗体分子は、配列番号６２２７のアミノ酸配列を含むＶＨ、および配列番号６２３３のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、ＣＤ３４標的化部分または抗ＣＤ３４抗体分子は、配列番号６２２９のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨ、および配列番号６２３３のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、ＣＤ３４標的化部分または抗ＣＤ３４抗体分子は、配列番号６２２９のアミノ酸配列を含むＶＨ、および配列番号６２３３のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、ＣＤ３４標的化部分または抗ＣＤ３４抗体分子は、配列番号７９のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨ、および配列番号６２３５のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、ＣＤ３４標的化部分または抗ＣＤ３４抗体分子は、配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＨ、および配列番号６２３５のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、ＣＤ３４標的化部分または抗ＣＤ３４抗体分子は、配列番号６２２５のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨ、および配列番号６２３５のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、ＣＤ３４標的化部分または抗ＣＤ３４抗体分子は、配列番号６２２５のアミノ酸配列を含むＶＨ、および配列番号６２３５のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、ＣＤ３４標的化部分または抗ＣＤ３４抗体分子は、配列番号６２２７のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨ、および配列番号６２３５のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、ＣＤ３４標的化部分または抗ＣＤ３４抗体分子は、配列番号６２２７のアミノ酸配列を含むＶＨ、および配列番号６２３５のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、ＣＤ３４標的化部分または抗ＣＤ３４抗体分子は、配列番号６２２９のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨ、および配列番号６２３５のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、ＣＤ３４標的化部分または抗ＣＤ３４抗体分子は、配列番号６２２９のアミノ酸配列を含むＶＨ、および配列番号６２３５のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、ＣＤ３４標的化部分または抗ＣＤ３４抗体分子は、配列番号７９のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨ、および配列番号６２３７のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、ＣＤ３４標的化部分または抗ＣＤ３４抗体分子は、配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＨ、および配列番号６２３７のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、ＣＤ３４標的化部分または抗ＣＤ３４抗体分子は、配列番号６２２５のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨ、および配列番号６２３７のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、ＣＤ３４標的化部分または抗ＣＤ３４抗体分子は、配列番号６２２５のアミノ酸配列を含むＶＨ、および配列番号６２３７のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、ＣＤ３４標的化部分または抗ＣＤ３４抗体分子は、配列番号６２２７のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨ、および配列番号６２３７のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、ＣＤ３４標的化部分または抗ＣＤ３４抗体分子は、配列番号６２２７のアミノ酸配列を含むＶＨ、および配列番号６２３７のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、ＣＤ３４標的化部分または抗ＣＤ３４抗体分子は、配列番号６２２９のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨ、および配列番号６２３７のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、ＣＤ３４標的化部分または抗ＣＤ３４抗体分子は、配列番号６２２９のアミノ酸配列を含むＶＨ、および配列番号６２３７のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。
[00909]一部の実施形態では、ＣＤ３４標的化部分または抗ＣＤ３４抗体分子は、配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＨ、および配列番号６２３３のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。
Figure 2023542080000144
Figure 2023542080000145
 リンカー
[00910]本明細書に開示される多特異性または多機能性分子は、リンカー、例えば、抗原結合性ドメインとサイトカイン分子との間、抗原結合性ドメインと免疫細胞エンゲージャーとの間、抗原結合性ドメインと間質改変部分との間、サイトカイン分子と免疫細胞エンゲージャーとの間、サイトカイン分子と間質改変部分との間、免疫細胞エンゲージャーと間質改変部分との間、抗原結合性ドメインと免疫グロブリン鎖定常領域との間、サイトカイン分子と免疫グロブリン鎖定常領域との間、免疫細胞エンゲージャーと免疫グロブリン鎖定常領域との間、または間質改変部分と免疫グロブリン鎖定常領域との間のうちの１つまたは複数におけるリンカーをさらに含み得る。一部の実施形態では、リンカーは、切断性リンカー、非切断性リンカー、ペプチドリンカー、可撓性リンカー、剛性リンカー、ヘリックスリンカー、もしくは非ヘリックスリンカー、またはこれらの組合せから選択される。
[00911]一実施形態では、多特異性分子は、１つ、２つ、３つ、または４つのリンカー、例えば、ペプチドリンカーを含み得る。一実施形態では、ペプチドリンカーは、ＧｌｙおよびＳｅｒを含む。一部の実施形態では、ペプチドリンカーは、ＧＧＧＧＳ（配列番号６２１４）；ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ（配列番号６２１５）；ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ（配列番号６２１６）；およびＤＶＰＳＧＰＧＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ（配列番号６２１７）から選択される。一部の実施形態では、ペプチドリンカーは、Ａ（ＥＡＡＡＫ）ｎＡ（配列番号６４１３）ファミリーのリンカー（例えば、Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｅｎｇ． （２００１） １４ （８）： ５２９－５３２に記載される）である。これらは、ｎが２～５の範囲である剛直なヘリックスリンカーである。一部の実施形態では、ペプチドリンカーは、ＡＥＡＡＡＫＥＡＡＡＫＡＡＡ（配列番号６２２０）；ＡＥＡＡＡＫＥＡＡＡＫＥＡＡＡＫＡＡＡ（配列番号６２２１）；ＡＥＡＡＡＫＥＡＡＡＫＥＡＡＡＫＥＡＡＡＫＡＡＡ（配列番号７７）；およびＡＥＡＡＡＫＥＡＡＡＫＥＡＡＡＫＥＡＡＡＫＥＡＡＡＫＡＡＡ（配列番号７８）から選択される。
核酸
[00912]前述の多特異性または多機能性分子をコードする核酸もまた、開示される。
[00913]ある特定の実施形態では、本発明は、本明細書に記載される抗体分子の重鎖および軽鎖可変領域およびＣＤＲまたは超可変ループをコードするヌクレオチド配列を含む核酸を特徴とする。例えば、本発明は、本明細書に開示される抗体分子のうちの１つまたは複数から選択される抗体分子の、重鎖および軽鎖可変領域をそれぞれコードする、第１および第２の核酸を特徴とする。核酸は、本明細書の表に記載されるヌクレオチド配列、またはそれに対して実質的に同一の配列（例えば、それに対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％、もしくはそれ以上同一であるか、または３個、６個、１５個、３０個、もしくは４５個以下のヌクレオチドが、本明細書の表に示される配列と異なる配列を含む。
[00914]ある特定の実施形態では、核酸は、本明細書の表に記載されるアミノ酸配列を有する重鎖可変領域に由来する少なくとも１つ、２つ、もしくは３つのＣＤＲもしくは超可変ループをコードするヌクレオチド配列、またはそれに対して実質的に相同である配列（例えば、それに対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％、もしくはそれ以上同一である、かつ／または１つもしくは複数の置換、例えば、保存的置換を有する配列）を含み得る。他の実施形態では、核酸は、本明細書の表に記載されるアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域に由来する少なくとも１つ、２つ、もしくは３つのＣＤＲもしくは超可変ループをコードするヌクレオチド配列、またはそれに対して実質的に相同である配列（例えば、それに対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％、もしくはそれ以上同一である、かつ／または１つもしくは複数の置換、例えば、保存的置換を有する配列）を含み得る。なおも別の実施形態では、核酸は、本明細書の表に記載されるアミノ酸配列を有する重鎖および軽鎖可変領域に由来する少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つのＣＤＲもしくは超可変ループをコードするヌクレオチド配列、またはそれに対して実質的に相同である配列（例えば、それに対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％、もしくはそれ以上同一である、かつ／または１つもしくは複数の置換、例えば、保存的置換を有する配列）を含み得る。
[00915]ある特定の実施形態では、核酸は、本明細書の表に記載されるヌクレオチド配列を有する重鎖可変領域に由来する少なくとも１つ、２つ、もしくは３つのＣＤＲもしくは超可変ループをコードするヌクレオチド配列、それに対して実質的に相同である配列（例えば、それに対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％、もしくはそれ以上同一である、かつ／または本明細書に記載されるストリンジェンシー条件下においてハイブリダイズすることができる配列）を含み得る。別の実施形態では、核酸は、本明細書の表に記載されるヌクレオチド配列を有する軽鎖可変領域に由来する少なくとも１つ、２つ、もしくは３つのＣＤＲもしくは超可変ループをコードするヌクレオチド配列、またはそれに対して実質的に相同である配列（例えば、それに対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％、もしくはそれ以上同一である、かつ／または本明細書に記載されるストリンジェンシー条件下においてハイブリダイズすることができる配列）を含み得る。なおも別の実施形態では、核酸は、本明細書の表に記載されるヌクレオチド配列を有する重鎖および軽鎖可変領域に由来する少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つのＣＤＲもしくは超可変ループをコードするヌクレオチド配列、またはそれに対して実質的に相同である配列（例えば、それに対して少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％、もしくはそれ以上同一である、かつ／または本明細書に記載されるストリンジェンシー条件下においてハイブリダイズすることができる配列）を含み得る。
[00916]ある特定の実施形態では、核酸は、本明細書に開示されるサイトカイン分子、免疫細胞エンゲージャー、または間質改変部分をコードするヌクレオチド配列を含み得る。
[00917]別の態様では、本出願は、本明細書に記載される核酸を含む宿主細胞およびベクターを特徴とする。核酸は、本明細書において以下により詳細に記載されるように、同じ宿主細胞または別個の宿主細胞に存在する単一のベクターまたは別個のベクターに存在し得る。
ベクター
[00918]さらに、本明細書に記載される多特異性または多機能性分子をコードするヌクレオチド配列を含むベクターが本明細書で提供される。一実施形態では、ベクターは、本明細書に記載の多特異性または多機能性分子をコードするヌクレオチドを含む。一実施形態では、ベクターは、本明細書に記載のヌクレオチド配列を含む。ベクターとしては、ウイルス、プラスミド、コスミド、ラムダファージ、または酵母人工染色体（ＹＡＣ）が挙げられるが、これらに限定されない。
[00919]多数のベクター系を用いることができる。例えば、１つのクラスのベクターは、動物ウイルス、例えば、ウシパピローマウイルス、ポリオーマウイルス、アデノウイルス、ワクシニアウイルス、バキュロウイルス、レトロウイルス（ラウス肉腫ウイルス、ＭＭＴＶ、もしくはＭＯＭＬＶ）、またはＳＶ４０ウイルスなどに由来するＤＮＡエレメントを利用する。別のクラスのベクターは、ＲＮＡウイルス、例えば、セムリキ森林ウイルス、東部ウマ脳炎ウイルス、およびフラビウイルスに由来するＲＮＡエレメントを利用する。
[00920]加えて、ＤＮＡが染色体に安定に組み込まれた細胞を、トランスフェクトされた宿主細胞の選択を可能にする１つまたは複数のマーカーを導入することによって、選択することができる。マーカーは、例えば、栄養要求性宿主に対するプロトトロピー、殺生物剤耐性（例えば、抗生物質）、または重金属、例えば、銅に対する耐性などを提供し得る。選択可能なマーカー遺伝子は、発現させようとするＤＮＡ配列に直接的に連結させるか、または共形質転換によって同じ細胞に導入するかのいずれかを行うことができる。最適なｍＲＮＡの合成には、追加のエレメントも必要とされ得る。これらのエレメントとしては、スプライスシグナル、ならびに転写プロモーター、エンハンサー、および終結シグナルを挙げることができる。
[00921]構築物を含む発現ベクターまたはＤＮＡ配列を、発現のために調製した後、発現ベクターを、適切な宿主細胞にトランスフェクトまたは導入することができる。例えば、プロトプラスト融合、リン酸カルシウム沈降、エレクトロポレーション、レトロウイルス形質導入、ウイルストランスフェクション、遺伝子銃、脂質に基づくトランスフェクション、または他の従来的な技法など、様々な技法を用いてこれを達成することができる。プロトプラスト融合の場合、細胞を、培地において成長させ、適切な活性に関してスクリーニングする。結果として得られたトランスフェクトした細胞の培養、および産生される抗体分子の回収のための方法および条件は、当業者に公知であり、本明細書に基づいて、用いられる具体的な発現ベクターおよび哺乳動物宿主細胞に応じて変更または最適化することができる。
細胞
[00922]別の態様では、本出願は、本明細書に記載される核酸を含む宿主細胞およびベクターを特徴とする。核酸は、同じ宿主細胞または別個の宿主細胞に存在する単一のベクターまたは別個のベクターに存在し得る。宿主細胞は、真核生物細胞、例えば、哺乳動物細胞、昆虫細胞、酵母細胞、または原核生物細胞、例えば、大腸菌であってもよい。例えば、哺乳動物細胞は、培養した細胞または細胞系であり得る。例示的な哺乳動物細胞としては、リンパ球細胞系（例えば、ＮＳＯ）、チャイニーズハムスター卵巣細胞（ＣＨＯ）、ＣＯＳ細胞、卵母細胞、およびトランスジェニック動物に由来する細胞、例えば、乳腺上皮細胞が挙げられる。
[00923]本発明はまた、本明細書に記載される抗体分子をコードする核酸を含む宿主細胞も提供する。
[00924]一実施形態では、宿主細胞は、抗体分子をコードする核酸を含むように遺伝子操作されている。
[00925]一実施形態では、宿主細胞は、発現カセットを使用することによって遺伝子操作されている。「発現カセット」という語句は、ヌクレオチド配列を指し、そのような配列と適合性のある宿主における遺伝子の発現を達成することができる。そのようなカセットとしては、プロモーター、イントロンありまたはなしのオープンリーディングフレーム、終結シグナルを挙げることができる。例えば、誘導性プロモーターなど、発現を達成するのに必要であるかまたは役に立つ追加の因子もまた、使用することができる。
[00926]本発明はまた、本明細書に記載されるベクターを含む宿主細胞も提供する。
[00927]細胞は、真核生物細胞、細菌細胞、昆虫細胞、またはヒト細胞であり得るが、これらに限定されない。好適な真核生物細胞としては、Ｖｅｒｏ細胞、ＨｅＬａ細胞、ＣＯＳ細胞、ＣＨＯ細胞、ＨＥＫ２９３細胞、ＢＨＫ細胞、およびＭＤＣＫＩＩ細胞が挙げられるが、これらに限定されない。好適な昆虫細胞としては、Ｓｆ９細胞が挙げられるが、これに限定されない。
使用および組合せ治療
[00928]本明細書に記載される方法は、本明細書に記載される多特異性または多機能性分子を使用して、例えば、本明細書に記載される医薬組成物を使用して、対象におけるがんを処置するステップを含む。また、対象におけるがんの症状を低減または改善する方法、ならびにがんの成長を阻害するおよび／または１つもしくは複数のがん細胞を殺滅させる方法が、提供される。一部の実施形態では、本明細書に記載される方法は、本明細書に記載されるものまたは本明細書に記載される医薬組成物が投与された対象において、腫瘍のサイズを減少させ、かつ／またはがん細胞の数を減少させる。
[00929]一部の実施形態では、がんは、血液がんである。一部の実施形態では、血液がんは、白血病またはリンパ腫である。本明細書で使用される場合、「血液がん」は、造血系またはリンパ系組織の腫瘍、例えば、血液、骨髄、またはリンパ節に罹患する腫瘍を指す。例示的な血液悪性腫瘍としては、白血病（例えば、急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、有毛細胞性白血病、急性単球性白血病（ＡＭｏＬ）、慢性骨髄単球性白血病（ＣＭＭＬ）、若年性骨髄単球性白血病（ＪＭＭＬ）、もしくは大顆粒リンパ球性白血病）、リンパ腫（例えば、ＡＩＤＳ関連リンパ腫、皮膚Ｔ細胞リンパ腫、ホジキンリンパ腫（例えば、古典的なホジキンリンパ腫もしくは結節性リンパ球優位型ホジキンリンパ腫）、菌状息肉腫、非ホジキンリンパ腫（例えば、Ｂ細胞非ホジキンリンパ腫（例えば、バーキットリンパ腫、小リンパ球性リンパ腫（ＣＬＬ／ＳＬＬ）、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、濾胞性リンパ腫、免疫芽球性大細胞型リンパ腫、前駆Ｂリンパ芽球性リンパ腫、もしくはマントル細胞リンパ腫）、またはＴ細胞非ホジキンリンパ腫（菌状息肉腫、未分化大細胞リンパ腫、もしくは前駆Ｔリンパ芽球性リンパ腫））、原発性中枢神経系リンパ腫、セザリー症候群、ワルデンシュトレーム型マクログロブリン血症）、慢性骨髄増殖性新生物、ランゲルハンス細胞組織球症、多発性骨髄腫／形質細胞新生物、骨髄異形成症候群、または骨髄異形成性／骨髄増殖性新生物が挙げられるが、これらに限定されない。
[00930]一部の実施形態では、がんは、骨髄増殖性新生物、例えば、原発性もしくは特発性骨髄線維症（ＭＦ）、本態性血小板増加症（ＥＴ）、真性赤血球増加症（ＰＶ）、または慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）である。一部の実施形態では、がんは、骨髄線維症である。一部の実施形態では、対象は、骨髄線維症を有する。一部の実施形態では、対象は、カルレティキュリン突然変異、例えば、本明細書に開示されるカルレティキュリン突然変異を有する。一部の実施形態では、対象は、ＪＡＫ２－Ｖ６１７Ｆ突然変異を有しない。一部の実施形態では、対象は、ＪＡＫ２－Ｖ６１７Ｆ突然変異を有する。一部の実施形態では、対象は、ＭＰＬ突然変異を有する。一部の実施形態では、対象は、ＭＰＬ突然変異を有しない。
[00931]一部の実施形態では、がんは、固形がんである。例示的な固形がんとしては、卵巣がん、直腸がん、胃がん、精巣がん、肛門領域のがん、子宮がん、結腸がん、直腸がん、腎細胞癌、肝臓がん、肺の非小細胞癌、小腸のがん、食道のがん、黒色腫、カポジ肉腫、内分泌系のがん、甲状腺のがん、副甲状腺のがん、副腎のがん、骨がん、膵臓がん、皮膚がん、頭頸部のがん、皮膚もしくは眼球の悪性黒色腫、子宮がん、脳幹神経膠腫、下垂体腺腫、類表皮がん、子宮頸の癌 扁平上皮細胞がん、卵管の癌、子宮内膜の癌、膣の癌、軟部組織の肉腫、尿道のがん、外陰部の癌、陰茎のがん、膀胱のがん、腎臓もしくは尿管のがん、腎盂の癌、脊髄軸腫瘍、中枢神経系（ＣＮＳ）の新生物、原発性ＣＮＳリンパ腫、腫瘍血管新生、前記がんの転移病変、またはこれらの組合せが挙げられるが、これらに限定されない。
[00932]一部の実施形態では、多特異性または多機能性分子（または医薬組成物）は、処置または予防しようとする疾患に適した様式で投与される。投与の回数および頻度は、患者の状態、ならびに患者の疾患の種類および重症度などの因子によって決定される。適切な投薬量は、臨床試験によって決定され得る。例えば、「有効量」または「治療量」が示される場合、投与しようとする医薬組成物（または多特異性もしくは多機能性分子）の厳密な量は、腫瘍サイズ、感染または転移の程度、対象の年齢、体重、および状態における個々の違いを考慮して、医師によって決定され得る。一部の実施形態では、本明細書に記載される医薬組成物は、１０４～１０９個の細胞／体重ｋｇ、例えば、１０５～１０６個の細胞／体重ｋｇの投薬量で投与され得、これらの範囲内のすべての整数値が含まれる。一部の実施形態では、本明細書に記載される医薬組成物は、これらの投薬量で複数回投与されてもよい。一部の実施形態では、本明細書に記載される医薬組成物は、免疫療法において説明されている注入技法を使用して投与してもよい（例えば、Ｒｏｓｅｎｂｅｒｇ ｅｔ ａｌ．， Ｎｅｗ Ｅｎｇ． Ｊ． ｏｆ Ｍｅｄ． ３１９：１６７６， １９８８を参照されたい）。
[00933]一部の実施形態では、多特異性もしくは多機能性分子または医薬組成物は、対象に非経口投与される。一部の実施形態では、細胞は、静脈内、皮下、腫瘍内、節内（ｉｎｔｒａｎｏｄａｌｌｙ）、筋肉内、皮内、または腹腔内で、対象に投与される。一部の実施形態では、細胞は、腫瘍またはリンパ節に直接的に、投与される、例えば、注射される。一部の実施形態では、細胞は、注入（例えば、Ｒｏｓｅｎｂｅｒｇ ｅｔ ａｌ．， Ｎｅｗ Ｅｎｇ． Ｊ． ｏｆ Ｍｅｄ． ３１９：１６７６， １９８８に記載される）または静脈内プッシュ（ｉｎｔｒａｖｅｎｏｕｓ ｐｕｓｈ）として投与される。一部の実施形態では、細胞は、注射可能なデポー製剤として投与される。
[00934]一部の実施形態では、対象は、哺乳動物である。一部の実施形態では、対象は、ヒト、サル、ブタ、イヌ、ネコ、ウシ、ヒツジ、ヤギ、ウサギ、ラット、またはマウスである。実施形態では、対象は、ヒトである。一部の実施形態では、対象は、例えば、１８歳未満、例えば、１７歳未満、１６歳未満、１５歳未満、１４歳未満、１３歳未満、１２歳未満、１１歳未満、１０歳未満、９歳未満、８歳未満、７歳未満、６歳未満、５歳未満、４歳未満、３歳未満、２歳未満、１歳未満、またはそれ未満の小児対象である。一部の実施形態では、対象は、成人、例えば、少なくとも１８歳、例えば、少なくとも１９歳、２０歳、２１歳、２２歳、２３歳、２４歳、２５歳、２５～３０歳、３０～３５歳、３５～４０歳、４０～５０歳、５０～６０歳、６０～７０歳、７０～８０歳、または８０～９０歳である。
併用療法
[00935]本明細書に開示される多特異性または多機能性分子は、第２の治療剤または手法と併用して使用することができる。
[00936]一部の実施形態では、多特異性または多機能性分子および第２の治療剤または手法は、対象ががんと診断された後、例えば、がんが対象から除去される前に、投与される／行われる。一部の実施形態では、多特異性または多機能性分子、および第２の治療剤または手法は、同時にまたは並行して投与される／行われる。例えば、１つの処置の送達は、第２の送達を開始する場合、例えば、処置の投与に重複がある場合、なおも生じている。他の実施形態では、多特異性または多機能性分子、および第２の治療剤または手法は、連続的に投与される／行われる。例えば、一方の処置の送達は、他方の処置の送達が開始する前に停止する。
[00937]一部の実施形態では、併用療法は、いずれかの薬剤単独による単独療法よりも、より効果的な処置をもたらすことができる。一部の実施形態では、第１および第２の処置の併用は、第１または第２の処置単独よりも有効である（例えば、症状および／またはがん細胞のより大きな減少をもたらす）。一部の実施形態では、併用療法は、単独療法として投与された場合に類似の効果を達成するために通常必要とされる第１または第２の処置の用量と比較して、第１または第２の処置のより低い用量の使用を可能にする。一部の実施形態では、併用療法は、部分的な相加効果、完全な相加効果、または相加効果より大きい効果を有する。
[00938]一実施形態では、多特異性または多機能性分子は、療法、例えば、がん療法（例えば、抗がん剤、免疫療法、光線力学的療法（ＰＤＴ）、外科手術および／または放射線の１つまたは複数）と併用して投与される。用語「化学療法薬」、「化学療法剤」、および「抗がん剤」は、本明細書において互換的に使用される。多特異性または多機能性分子の投与および療法、例えば、がん療法は、連続的（重複を伴うまたは伴わない）であるかまたは同時であり得る。多特異性または多機能性分子の投与は、療法（例えば、がん療法）の経過中、連続的または断続的であり得る。本明細書に記載される特定の療法は、がんおよび非がん性疾患を処置するために使用することができる。例えば、ＰＤＴの有効性は、本明細書に記載された方法および組成物を用いて、がん性および非がん性状態（例えば、結核）において増強され得る（例えば、Ａｇｏｓｔｉｎｉｓ，Ｐ．ら（２０１１年）ＣＡ Ｃａｎｃｅｒ Ｊ．Ｃｌｉｎ．６１巻：２５０～２８１ページに概説される）。
抗がん療法
[00939]他の実施形態では、多特異性または多機能性分子は、低分子量または小分子量の化学療法剤と併用して投与される。例示的な低分子量または小分子量の化学療法剤には、限定されないが、１３－シス－レチノイン酸（イソトレチノイン、ＡＣＣＵＴＡＮＥ（登録商標））、２－ＣｄＡ（２－クロロデオキシアデノシン、クラドリビン、ＬＥＵＳＴＡＴＩＮ（商標））、５－アザシチジン（アザシチジン、ＶＩＤＡＺＡ（登録商標））、５－フルオロウラシル（５－ＦＵ、フルオロウラシル、ＡＤＲＵＣＩＬ（登録商標））、６－メルカプトプリン（６－ＭＰ、メルカプトプリン、ＰＵＲＩＮＥＴＨＯＬ（登録商標））、６－ＴＧ（６－チオグアニン、チオグアニン、ＴＨＩＯＧＵＡＮ ＴＡＢＬＯＩＤ（登録商標））、アブラキサン（パクリタキセルタンパク質－結合）、アクチノマイシン－Ｄ（ダクチノマイシン、ＣＯＳＭＥＧＥＮ（登録商標））、アリトレチノイン（ＰＡＮＲＥＴＩＮ（登録商標））、オールトランスレチノイン酸（ＡＴＲＡ、トレチノイン、ＶＥＳＡＮＯＩＤ（登録商標））、アルトレタミン（ヘキサメチルメラミン、ＨＭＭ、ＨＥＸＡＬＥＮ（登録商標））、アメトプテリン（メトトレキサート、メトトレキサートナトリウム、ＭＴＸ、ＴＲＥＸＡＬＬ（商標）、ＲＨＥＵＭＡＴＲＥＸ（登録商標））、アミフォスチン（ＥＴＨＹＯＬ（登録商標））、アラビノシルシトシン（Ａｒａ－Ｃ、シタラビン、ＣＹＴＯＳＡＲ－Ｕ（登録商標））、三酸化ヒ素（ＴＲＩＳＥＮＯＸ（登録商標））、アスパラギナーゼ（エルウィニアＬ－アスパラギナーゼ、Ｌ－アスパラギナーゼ、ＥＬＳＰＡＲ（登録商標）、ＫＩＤＲＯＬＡＳＥ（登録商標））、ＢＣＮＵ（カルムスチン、ＢｉＣＮＵ（登録商標））、ベンダムスチン（ＴＲＥＡＮＤＡ（登録商標））、ベキサロテン（ＴＡＲＧＲＥＴＩＮ（登録商標））、ブレオマイシン（ＢＬＥＮＯＸＡＮＥ（登録商標））、ブスルファン（ＢＵＳＵＬＦＥＸ）（登録商標）、ＭＹＬＥＲＡＮ（登録商標））、カルシウムロイコボリン（シトロボラムファクター、フォリン酸、ロイコボリン）、カンプトテシン－１１（ＣＰＴ－１１、イリノテカン、ＣＡＭＰＴＯＳＡＲ（登録商標））、カペシタビン（ＸＥＬＯＤＡ（登録商標））、カルボプラチン（ＰＡＲＡＰＬＡＴＩＮ（登録商標））、カルムスチンウエハー（カルムスチンインプラントを有するプロリフェプロスパン２０、ＧＬＩＡＤＥＬ（登録商標）ウエハー）、ＣＣＩ－７７９（テムシロリムス、ＴＯＲＩＳＥＬ（登録商標））、ＣＣＮＵ（ロムスチン、ＣｅｅＮＵ）、ＣＤＤＰ（シスプラチン、ＰＬＡＴＩＮＯＬ（登録商標）、ＰＬＡＴＩＮＯＬ－ＡＱ（登録商標））、クロラムブシル（ロイケラン）、シクロホスファミド（ＣＹＴＯＸＡＮ（登録商標）、ＮＥＯＳＡＲ（登録商標））、ダカルバジン（ＤＩＣ、ＤＴＩＣ、イミダゾールカルボキサミド、ＤＴＩＣ－ＤＯＭＥ（登録商標））、ダウノマイシン（ダウノルビシン、ダウノルビシン塩酸塩、ルビドマイシンハイドロクロライド、ＣＥＲＵＢＩＤＩＮＥ（登録商標））、デシタビン（ＤＡＣＯＧＥＮ（登録商標））、デキサゾキサン（ＺＩＮＥＣＡＲＤ（登録商標））、ＤＨＡＤ（ミトキサントロン、ＮＯＶＡＮＴＲＯＮＥ（登録商標））、ドセタキセル（ＴＡＸＯＴＥＲＥ（登録商標））、ドキソルビシン（ＡＤＲＩＡＭＹＣＩＮ（登録商標）、ＲＵＢＥＸ（登録商標））、エピルビシン（ＥＬＬＥＮＣＥ（商標））、エストラムスチン（ＥＭＣＹＴ（登録商標））、エトポシド（ＶＰ－１６、リン酸エトポシド、ＴＯＰＯＳＡＲ（登録商標）、ＶＥＰＥＳＩＤ（登録商標）、ＥＴＯＰＯＰＨＯＳ（登録商標））、フロクスウリジン（ＦＵＤＲ（登録商標））、フルダラビン（ＦＬＵＤＡＲＡ（登録商標））、フルオロウラシル（クリーム）（ＣＡＲＡＣ（商標）、ＥＦＵＤＥＸ（登録商標）、ＦＬＵＯＲＯＰＬＥＸ（登録商標））、ゲムシタビン（ＧＥＭＺＡＲ（登録商標））、ヒドロキシ尿素（ＨＹＤＲＥＡ（登録商標）、ＤＲＯＸＩＡ（商標）、ＭＹＬＯＣＥＬ（商標））、イダルビシン（ＩＤＡＭＹＣＩＮ（登録商標））、イフォスファミド（ＩＦＥＸ（登録商標））、イキサベピロン（ＩＸＥＭＰＲＡ（商標））、ＬＣＲ（ロイロクリスチン、ビンクリスチン、ＶＣＲ、ＯＮＣＯＶＩＮ（登録商標）、ＶＩＮＣＡＳＡＲ ＰＦＳ（登録商標））、Ｌ－ＰＡＭ（Ｌ－サルコリシン、メルファラン、フェニルアラニンマスタード、ＡＬＫＥＲＡＮ（登録商標））、メクロレタミン（塩酸メクロレタミン、ムスチン、ナイトロジェンマスタード、ＭＵＳＴＡＲＧＥＮ（登録商標））、メスナ（ＭＥＳＮＥＸ（商標））、マイトマイシン（マイトマイシン－Ｃ、ＭＴＣ、ＭＵＴＡＭＹＣＩＮ（登録商標））、ネララビン（ＡＲＲＡＮＯＮ（登録商標））、オキサリプラチン（ＥＬＯＸＡＴＩＮ（商標））、パクリタキセル（ＴＡＸＯＬ（登録商標）、ＯＮＸＡＬ（商標））、ペガスパルガーゼ（ＰＥＧ－Ｌ－アスパラギナーゼ、ＯＮＣＯＳＰＡＲ（登録商標））、ＰＥＭＥＴＲＥＸＥＤ（ＡＬＩＭＴＡ（登録商標））、ペントスタチン（ＮＩＰＥＮＴ（登録商標））、プロカルバジン（ＭＡＴＵＬＡＮＥ（登録商標））、ストレプトゾシン（ＺＡＮＯＳＡＲ（登録商標））、テモゾロミド（ＴＥＭＯＤＡＲ（登録商標））、テニポシド（ＶＭ－２６、ＶＵＭＯＮ（登録商標））、ＴＥＳＰＡ（チオホスホアミド、チオテパ、ＴＳＰＡ、ＴＨＩＯＰＬＥＸ（登録商標））、トポテカン（ＨＹＣＡＭＴＩＮ（登録商標））、ビンブラスチン（硫酸ビンブラスチン、ビンカロイコブラスチン、ＶＬＢ、ＡＬＫＡＢＡＮ－ＡＱ（登録商標）、ＶＥＬＢＡＮ（登録商標））、ビノレルビン（酒石酸ビノレルビン、ＮＡＶＥＬＢＩＮＥ（登録商標））、およびボリノスタット（ＺＯＬＩＮＺＡ（登録商標））が含まれる。
[00940]別の実施形態では、多特異性または多機能性分子は、生物製剤と併用して投与される。がんの処置に有用な生物製剤は、当該技術分野において公知であり、本発明の結合分子は、例えば、このような公知の生物製剤と組み合わせて投与することができる。例えば、ＦＤＡは、乳がんの処置のために次の生物製剤を承認している：ＨＥＲＣＥＰＴＩＮ（登録商標）（トラスツズマブ、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ Ｉｎｃ．、Ｓｏｕｔｈ Ｓａｎ Ｆｒａｎｃｉｓｃｏ、Ｃａｌｉｆ．；ＨＥＲ２陽性乳がんで抗腫瘍活性化を有するヒト化モノクローナル抗体）；ＦＡＳＬＯＤＥＸ（登録商標）（フルベストラント、ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ、ＬＰ、Ｗｉｌｍｉｎｇｔｏｎ、Ｄｅｌ．；乳がんの処置に使用されるエストロゲン受容体拮抗薬）；ＡＲＩＭＩＤＥＸ（登録商標）（アナストロゾール、ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ、ＬＰ；エストロゲンの作製に必要な酵素であるアロマターゼを遮断する非ステロイド性アロマターゼ阻害剤）；アロマシン（登録商標）（エキセメスタン、Ｐｆｉｚｅｒ Ｉｎｃ．、Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ、Ｎ．Ｙ．；乳がんの処置に使用される不可逆的なステロイド性アロマターゼ不活性化剤）；ＦＥＭＡＲＡ（登録商標）（レトロゾール、Ｎｏｖａｒｔｉｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ、Ｅａｓｔ Ｈａｎｏｖｅｒ、Ｎ．Ｊ．；ＦＤＡにより乳がんを処置するために承認された非ステロイドアロマターゼ阻害剤）；およびＮＯＬＶＡＤＥＸ（登録商標）（タモキシフェン、ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ、ＬＰ；ＦＤＡにより乳がんを処置するために承認された非ステロイド性抗エストロゲン剤）。本発明の結合分子と組み合わせることができる他の生物製剤には、以下が含まれる：ＡＶＡＳＴＩＮ（登録商標）（ベバシズマブ、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ Ｉｎｃ．；血管新生を阻害するように設計された最初のＦＤＡ承認療法）；およびＺＥＶＡＬＩＮ（登録商標）（イブリツモマブチウキセタン、Ｂｉｏｇｅｎ Ｉｄｅｃ、Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ、Ｍａｓｓ；Ｂ細胞リンパ腫の処置のために現在承認されている放射性標識モノクローナル抗体）。
[00941]さらに、ＦＤＡは、結腸直腸がんの処置のために以下の生物製剤を承認した：ＡＶＡＳＴＩＮ（登録商標）；ＥＲＢＩＴＵＸ（登録商標）（セツキシマブ、ＩｍＣｌｏｎｅ Ｓｙｓｔｅｍｓ Ｉｎｃ．、Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ、Ｎ．Ｙ．、およびＢｒｉｓｔｏｌ－Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ、Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ、Ｎ．Ｙ．；上皮成長因子受容体（ＥＧＦＲ）に対して指向されるモノクローナル抗体）；ＧＬＥＥＶＥＣ（登録商標）（メシル酸イマチニブ；プロテインキナーゼ阻害剤）；およびＥＲＧＡＭＩＳＯＬ（登録商標）（レバミゾール塩酸塩、Ｊａｎｓｓｅｎ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａ Ｐｒｏｄｕｃｔｓ、ＬＰ、Ｔｉｔｕｓｖｉｌｌｅ、Ｎ．Ｊ．；デュークスのステージＣ結腸がんを有する患者の外科的切除後に５－フルオロウラシルと併用するアジュバント療法として１９９０年にＦＤＡにより承認された免疫調節薬）。
[00942]肺がんの処置のために、例示的な生物製剤には、ＴＡＲＣＥＢＡ（登録商標）（エルロチニブＨＣＬ、ＯＳＩ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ Ｉｎｃ．、Ｍｅｌｖｉｌｌｅ、Ｎ．Ｙ．；ヒト上皮成長因子受容体１（ＨＥＲ１）経路を標的とするように設計された小分子）が含まれる。
[00943]多発性骨髄腫の処置のために、例示的な生物製剤には、ＶＥＬＣＡＤＥ（登録商標）ベルケイド（ボルテゾミブ、Ｍｉｌｌｅｎｎｉｕｍ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ、Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ Ｍａｓｓ．、プロテアソーム阻害剤）が含まれる。追加の生物製剤には、ＴＨＡＬＩＤＯＭＩＤ（登録商標）（サリドマイド、Ｃｌｅｇｅｎｅ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ、Ｗａｒｒｅｎ、Ｎ．Ｊ．；免疫調節剤であり、骨髄腫細胞の成長と生存を阻害する能力、および抗血管新生を含む複数の作用があるようである）が含まれる。
[00944]追加の例示的ながん療法用抗体には、限定されないが、３Ｆ８、アバゴボマブ、アデカツマブ、アフツズマブ、アラシズマブペゴル、アレムツズマブ（ＣＡＭＰＡＴＨ（登録商標）、ＭＡＢＣＡＭＰＡＴＨ（登録商標））、アルツモマブペンテテート（ＨＹＢＲＩ－ＣＥＡＫＥＲ（登録商標））、アナツモマブマフェナトックス、アンルキンズマブ（ＩＭＡ－６３８）、アポリズマブ、アルシツモマブ（ＣＥＡ－ＳＣＡＮ（登録商標））、バビツキシマブ、ベクツモマブ（ＬＹＭＰＨＯＳＣＡＮ（登録商標））、ベリムマブ（ＢＥＮＬＹＳＴＡ（登録商標）、ＬＹＭＰＨＯＳＴＡＴ－Ｂ（登録商標））、ベシレソマブ（ＳＣＩＮＴＩＭＵＮ（登録商標））、ベバシズマブ（ＡＶＡＳＴＩＮ（登録商標））、ビバツズマブマータンシン、ブリナツモマブ、ブレンツキシマブベドチン、カンツズマブメルタンシン、カプロマブペンデチド（ＰＲＯＳＴＡＳＣＩＮＴ（登録商標））、カツマキソマブ（ＲＥＭＯＶＡＢ（登録商標））、ＣＣ４９、セツキシマブ（Ｃ２２５、ＥＲＢＩＴＵＸ（登録商標））、シタツズマブボガトックス、シクスツムマブ、クリバツズマブテトラキセタン、コナツムマブ、デセツズマブ、デノスマブ（ＰＲＯＬＩＡ（登録商標））、デツモマブ、エクロメキシマブ、エドレコロマブ（ＰＡＮＯＲＥＸ（登録商標））、エロツズマブ、エピツモマブシツキセタン、エプラツズマブ、エルツマキソマブ（ＲＥＸＯＭＵＮ（登録商標））、エタラシズマブ、ファルレツズマブ、フィギツムマブ、フレソリムマブ、ガリキシマブ、ゲムツズマブオゾガミシン（ＭＹＬＯＴＡＲＧ（登録商標））、ギレンツキシマブ、グレンバツムマブベドチン、イブリツモマブ（イブリツモマブチウキセタン、ＺＥＶＡＬＩＮ（登録商標））、イゴボマブ（ＩＮＤＩＭＡＣＩＳ－１２５（登録商標））、インテツムマブ、イノツズマブオゾガマイシン、イピリムマブ、イラツムマブ、ラベツズマブ（ＣＥＡ－ＣＩＤＥ（登録商標））、レキサツムマブ、リンツズマブ、ルカツムマブ、ルミリキシマブ、マパツムマブ、マツズマブ、ミラツズマブ、ミンレツモマブ、ミツモマブ、ナコロマブタフェナトックス、ナプツモマブエスタフェナトックス、ネシツムマブ、ニモツズマブ（ＴＨＥＲＡＣＩＭ（登録商標）、ＴＨＥＲＡＬＯＣ（登録商標））、ノフェツモマブメルペンタン（ＶＥＲＬＵＭＡ（登録商標））、オファツムマブ（ＡＲＺＥＲＲＡ（登録商標））、オララツマブ、オポルツズマブモナトックス、オレゴボマブ（ＯＶＡＲＥＸ（登録商標））、パニツムマブ（ＶＥＣＴＩＢＩＸ（登録商標））、ペムツモマブ（ＴＨＥＲＡＧＹＮ（登録商標））、パーツズマブ（ＯＭＮＩＴＡＲＧ（登録商標））、ピンツモマブ、プリツムマブ、ラムシルマブ、ラニビズマブ（ＬＵＣＥＮＴＩＳ（登録商標））、リロツムマブ、リツキシマブ（ＭＡＢＴＨＥＲＡ（登録商標）、ＲＩＴＵＸＡＮ（登録商標））、ロバツムマブ、サツモマブペンデチド、シブロツズマブ、シルツキシマブ、ソンツズマブ、タカツズマブテトラキセタン（ＡＦＰ－ＣＩＤＥ（登録商標））、タプリツモマブパプトックス、テナツモマブ、ＴＧＮ１４１２、チシリムマブ（トレメリムマブ）、チガツズマブ、ＴＮＸ－６５０、トシツモマブ（ＢＥＸＸＡＲ（登録商標））、トラスツズマブ（ＨＥＲＣＥＰＴＩＮ（登録商標））、トレメリムマブ、ツコツズマブセルモロイキン、ベルツズマブ、ボロシキシマブ、ボツムマブ（ＨＵＭＡＳＰＥＣＴ（登録商標））、ザルツムマブ（ＨＵＭＡＸ－ＥＧＦＲ（登録商標））、およびザノリムマブ（ＨＵＭＡＸ－ＣＤ４（登録商標））が含まれる。
[00945]他の実施形態では、多特異性または多機能性分子は、ウイルスがん治療剤と併用して投与される。例示的なウイルスがん治療剤には、限定されないが、ワクシニアウイルス（ｖｖＤＤ－ＣＤＳＲ）、がん胎児性抗原発現麻疹ウイルス、組換えワクシニアウイルス（ＴＫ－欠失＋ＧＭ－ＣＳＦ）、セネカバレーウイルス－００１、ニューカッスルウイルス、コクサッキーウイルスＡ２１、ＧＬ－ＯＮＣ１、ＥＢＮＡ１ Ｃ末端／ＬＭＰ２キメラタンパク質発現組換え修飾ワクシニアアンカラワクチン、がん胎児性抗原発現麻疹ウイルス、Ｇ２０７腫瘍溶解性ウイルス、ｐ５３を発現する修飾ワクシニアウイルスアンカラワクチン、ＯｎｃｏＶＥＸ ＧＭ－ＣＳＦ修飾ヘルペスシンプレックス１ウイルス、鶏痘ウイルスワクチンベクター、組換えワクシニア前立腺特異抗原ワクチン、ヒトパピローマウイルス１６／１８ Ｌ１ウイルス様粒子／ＡＳ０４ワクチン、ＭＶＡ－ＥＢＮＡ１／ＬＭＰ２ Ｉｎｊ．ワクチン、４価ＨＰＶワクチン、４価ヒトパピローマウイルス（タイプ６、１１、１６、１８）組換えワクチン（ＧＡＲＤＡＳＩＬ（登録商標））、組換え鶏痘－ＣＥＡ（６Ｄ）／ＴＲＩＣＯＭワクチン；組換えワクシニア－ＣＥＡ（６Ｄ）－ＴＲＩＣＯＭワクチン、組換え修飾ワクシニアＡｎｋａｒａ－５Ｔ４ワクチン、組換え鶏痘－ＴＲＩＣＯＭワクチン、腫瘍崩壊性ヘルペスウイルスＮＶ１０２０、ＨＰＶ Ｌ１ ＶＬＰワクチンＶ５０４、ヒトパピローマウイルス二価（タイプ１６および１８）ワクチン（ＣＥＲＶＡＲＩＸ（登録商標））、単純ヘルペスウイルスＨＦ１０、Ａｄ５ＣＭＶ－ｐ５３遺伝子、組換えワクシニアＤＦ３／ＭＵＣ１ワクチン、組換えワクシニア－ＭＵＣ－１ワクチン、組換えワクシニア－ＴＲＩＣＯＭワクチン、ＡＬＶＡＣ ＭＡＲＴ－１ワクチン、ヒトプレプロエンケファリン（ＮＰ２）を発現する複製欠損単純ヘルペスウイルスＩ型（ＨＳＶ－１）ベクター、野生型レオウイルス、レオウイルスタイプ３ディアリング（ＲＥＯＬＹＳＩＮ（登録商標））、腫瘍溶解性ウイルスＨＳＶ１７１６、エプスタイン・バーウイルス標的抗原をコードする組換え改変ワクシニアアンカラ（ＭＶＡ）ベースのワクチン、組換え鶏痘前立腺特異抗原ワクチン、組換えワクシニア前立腺特異抗原ワクチン、組換えワクシニア－Ｂ７．１ワクチン、ｒＡｄ－ｐ５３遺伝子、Ａｄ５－ｄｅｌｔａ２４ＲＧＤ、ＨＰＶワクチン５８０２９９、ＪＸ－５９４（チミジンキナーゼ欠失ワクシニアウイルス＋ＧＭ－ＣＳＦ）、ＨＰＶ－１６／１８ Ｌ１／ＡＳ０４、鶏痘ウイルスワクチンベクター、ワクシニアチロシナーゼワクチン、ＭＥＤＩ－５１７ ＨＰＶ－１６／１８ ＶＬＰ ＡＳ０４ワクチン、単純ヘルペスウイルスＴＫ９９ＵＮのチミジンキナーゼを含むアデノウイルスベクター、ＨｓｐＥ７、ＦＰ２５３／フルダラビン、ＡＬＶＡＣ（２）黒色腫多抗原治療ワクチン、ＡＬＶＡＣ－ｈＢ７．１、カナリア痘－ｈＩＬ－１２黒色腫ワクチン、Ａｄ－ＲＥＩＣ／Ｄｋｋ－３、ｒＡｄ－ＩＦＮ ＳＣＨ ７２１０１５、ＴＩＬ－Ａｄ－ＩＮＦｇ、Ａｄ－ＩＳＦ３５、およびコクサッキーウイルスＡ２１（ＣＶＡ２１、ＣＡＶＡＴＡＫ（登録商標））が含まれる。
[00946]他の実施形態では、多特異性または多機能性分子は、ナノ医薬品と併用して投与される。例示的ながんナノ医薬品には、限定されないが、ＡＢＲＡＸＡＮＥ（登録商標）（パクリタキセル結合アルブミンナノ粒子）、ＣＲＬＸ１０１（直鎖シクロデキストリンベースのポリマーにコンジュゲートしたＣＰＴ）、ＣＲＬＸ２８８（ドセタキセルを生分解性ポリマーポリ（乳酸－ｃｏ－グリコール酸）にコンジュゲートしている）、シタラビンリポソーム（リポソームＡｒａ－Ｃ、ＤＥＰＯＣＹＴ（商標））、ダウノルビシンリポソーム（ＤＡＵＮＯＸＯＭＥ（登録商標））、ドキソルビシンリポソーム（ＤＯＸＩＬ（登録商標）、ＣＡＥＬＹＸ（登録商標））、カプセル化ダウノルビシンクエン酸リポソーム（ＤＡＵＮＯＸＯＭＥ（登録商標））、およびＰＥＧ抗ＶＥＧＦアプタマー（ＭＡＣＵＧＥＮ（登録商標））が含まれる。
[00947]一部の実施形態では、多特異性または多機能性分子は、パクリタキセルまたはパクリタキセル製剤、例えば、ＴＡＸＯＬ（登録商標）、タンパク質結合パクリタキセル（例えば、ＡＢＲＡＸＡＮＥ（登録商標））と併用して投与される。例示的なパクリタキセル製剤には、限定されないが、ナノ粒子アルブミン結合パクリタキセル（ＡＢＲＡＸＡＮＥ（登録商標）、Ａｂｒａｘｉｓ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅにより販売される）、ドコサヘキサエン酸結合パクリタキセル（ＤＨＡ－パクリタキセル、タキソプレキシン、Ｐｒｏｔａｒｇａにより販売される）、ポリグルタミン酸結合パクリタキセル（ＰＧ－パクリタキセル、パクリタキセル・ポリグルメックス、ＣＴ－２１０３、ＸＹＯＴＡＸ、Ｃｅｌｌ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃにより販売される）、腫瘍活性化プロドラッグ（ＴＡＰ）、ＡＮＧ１０５（Ａｎｇｉｏｐｅｐ－２はパクリタキセルの３つの分子に結合し、ＩｍｍｕｎｏＧｅｎにより販売される）、パクリタキセル－ＥＣ－１（パクリタキセルはｅｒｂＢ２認識ペプチドＥＣ－１に結合する；Ｌｉら、Ｂｉｏｐｏｌｙｍｅｒｓ（２００７年）８７巻：２２５～２３０ページを参照）、およびグルコースをコンジュゲートしたパクリタキセル（例えば、２’－パクリタキセルメチル２－グルコピラノシルスクシナート、Ｌｉｕら、Ｂｉｏｏｒｇａｎｉｃ ＆ Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ Ｌｅｔｔｅｒｓ（２００７年）１７巻：６１７～６２０ページを参照）が含まれる。
[00948]がんを処置するための例示的なＲＮＡｉおよびアンチセンスＲＮＡ剤には、限定されないが、ＣＡＬＡＡ－０１、ｓｉＧ１２Ｄ ＬＯＤＥＲ（Ｌｏｃａｌ Ｄｒｕｇ ＥｌｕｔｅＲ）、およびＡＬＮ－ＶＳＰ０２が含まれる。
[00949]他のがん治療剤には、限定されないが、サイトカイン（例えば、アルデスロイキン（ＩＬ－２、インターロイキン－２、ＰＲＯＬＥＵＫＩＮ（登録商標））、アルファインターフェロン（ＩＦＮ－アルファ、インターフェロンアルファ、ＩＮＴＲＯＮ（登録商標）Ａ（インターフェロンアルファ－２ｂ）、ＲＯＦＥＲＯＮ－Ａ（登録商標）（インターフェロンアルファ－２ａ））、エポエチンアルファ（ＰＲＯＣＲＩＴ（登録商標））、フィルグラスチム（Ｇ－ＣＳＦ、顆粒球－コロニー刺激因子、ＮＥＵＰＯＧＥＮ（登録商標））、ＧＭ－ＣＳＦ（顆粒球マクロファージコロニー刺激因子、サルグラモスチム、ＬＥＵＫＩＮＥ（商標））、ＩＬ－１１（インターロイキン－１１、オプレルベキン、ＮＥＵＭＥＧＡ（登録商標））、インターフェロンアルファ－２ｂ（ＰＥＧコンジュゲート）（ＰＥＧインターフェロン、ＰＥＧ－ＩＮＴＲＯＮ（商標））、およびペグフィルグラスチム（ＮＥＵＬＡＳＴＡ（商標））、ホルモン療法剤（例えば、アミノグルテチミド（ＣＹＴＡＤＲＥＮ（登録商標））、アナストロゾール（ＡＲＩＭＩＤＥＸ（登録商標））、ビカルタミド（ＣＡＳＯＤＥＸ（登録商標））、エキセメスタン（ＡＲＯＭＡＳＩＮ（登録商標））、フルオキシメステロン（ＨＡＬＯＴＥＳＴＩＮ（登録商標））、フルタミド（ＥＵＬＥＸＩＮ（登録商標））、フルベストラント（ＦＡＳＬＯＤＥＸ（登録商標））、ゴセレリン（ＺＯＬＡＤＥＸ（登録商標））、レトロゾール（ＦＥＭＡＲＡ（登録商標））、リュープロリド（ＥＬＩＧＡＲＤ（商標）、ＬＵＰＲＯＮ（登録商標）、ＬＵＰＲＯＮ ＤＥＰＯＴ（登録商標）、ＶＩＡＤＵＲ（商標））、メゲストロール（酢酸メゲストロール、ＭＥＧＡＣＥ（登録商標））、ニルタミド（ＡＮＡＮＤＲＯＮ（登録商標）、ＮＩＬＡＮＤＲＯＮ（登録商標））、オクトレオチド（酢酸オクトレオチド、ＳＡＮＤＯＳＴＡＴＩＮ（登録商標）、ＳＡＮＤＯＳＴＡＴＩＮ ＬＡＲ（登録商標））、ラロキシフェン（ＥＶＩＳＴＡ（登録商標））、ロミプロスチム（ＮＰＬＡＴＥ（登録商標））、タモキシフェン（ＮＯＶＡＬＤＥＸ（登録商標））、およびトレミフェン（ＦＡＲＥＳＴＯＮ（登録商標）））、ホスホリパーゼＡ２阻害剤（例えば、アナグレリド（ＡＧＲＹＬＩＮ（登録商標）））、生物応答改変剤（例えば、ＢＣＧ（ＴＨＥＲＡＣＹＳ（登録商標）、ＴＩＣＥ（登録商標））、およびダルベポエチンアルファ（ＡＲＡＮＥＳＰ（登録商標）））、標的治療薬（例えば、ボルテゾミブ（ＶＥＬＣＡＤＥ（登録商標））、ダサチニブ（ＳＰＲＹＣＥＬ（商標））、デニロイキンジフチトックス（ＯＮＴＡＫ（登録商標））、エルロチニブ（ＴＡＲＣＥＶＡ（登録商標））、エベロリムス（ＡＦＩＮＩＴＯＲ（登録商標））、ゲフィチニブ（ＩＲＥＳＳＡ（登録商標））、メシル酸イマチニブ（ＳＴＩ－５７１、ＧＬＥＥＶＥＣ（商標））、ラパチニブ（ＴＹＫＥＲＢ（登録商標））、ソラフェニブ（ＮＥＸＡＶＡＲ（登録商標））、およびＳＵ１１２４８（スニチニブ、ＳＵＴＥＮＴ（登録商標）））、免疫調節薬および抗血管新生薬（例えば、ＣＣ－５０１３（レナリドマイド、ＲＥＶＬＩＭＩＤ（登録商標））、およびサリドマイド（ＴＨＡＬＯＭＩＤ（登録商標）））、グルココルチコステロイド（例えば、コルチゾン（ヒドロコルチゾン、ヒドロコルチゾンリン酸ナトリウム、ヒドロコルチゾンコハク酸ナトリウム、ＡＬＡ－ＣＯＲＴ（登録商標）、ＨＹＤＲＯＣＯＲＴ ＡＣＥＴＡＴＥ（登録商標）、リン酸ヒドロコルトン ＬＡＮＡＣＯＲＴ（登録商標）、ＳＯＬＵ－ＣＯＲＴＥＦ（登録商標））、デカドロン（デキサメタゾン、デキサメタゾン酢酸塩、デキサメタゾンリン酸ナトリウム、ＤＥＸＡＳＯＮＥ（登録商標）、ＤＩＯＤＥＸ（登録商標）、ＨＥＸＡＤＲＯＬ（登録商標）、ＭＡＸＩＤＥＸ（登録商標））、メチルプレドニゾロン（６－メチルプレドニゾロン、酢酸メチルプレドニゾロン、メチルプレドニゾロンコハク酸ナトリウム、ＤＵＲＡＬＯＮＥ（登録商標）、ＭＥＤＲＡＬＯＮＥ（登録商標）、ＭＥＤＲＯＬ（登録商標）、Ｍ－ＰＲＥＤＮＩＳＯＬ（登録商標）、ＳＯＬＵ－ＭＥＤＲＯＬ（登録商標））、プレドニゾロン（ＤＥＬＴＡ－ＣＯＲＴＥＦ（登録商標）、ＯＲＡＰＲＥＤ（登録商標）、ＰＥＤＩＡＰＲＥＤ（登録商標）、ＰＲＥＬＯＮＥ（登録商標））、およびプレドニゾン（ＤＥＬＴＡＳＯＮＥ（登録商標）、ＬＩＱＵＩＤ ＰＲＥＤ（登録商標）、ＭＥＴＩＣＯＲＴＥＮ（登録商標）、ＯＲＡＳＯＮＥ（登録商標）））、およびビスホスホネート（例えば、パミドロネート（ＡＲＥＤＩＡ（登録商標））、およびゾレドロン酸（ＺＯＭＥＴＡ（登録商標））が含まれる。
[00950]一部の実施形態では、多特異性または多機能性分子は、チロシンキナーゼ阻害剤（例えば、受容体チロシンキナーゼ（ＲＴＫ）阻害剤）と併用して使用される。例示的なチロシンキナーゼ阻害剤には、限定されないが、上皮成長因子（ＥＧＦ）経路阻害剤（例えば、上皮成長因子受容体（ＥＧＦＲ）阻害剤）、血管内皮成長因子（ＶＥＧＦ）経路阻害剤（例えば、ＶＥＧＦに対する抗体、ＶＥＧＦトラップ、血管内皮成長因子受容体（ＶＥＧＦＲ）阻害剤（例えば、ＶＥＧＦＲ－１阻害剤、ＶＥＧＦＲ－２阻害剤、ＶＥＧＦＲ－３阻害剤））、血小板由来成長因子（ＰＤＧＦ）経路阻害剤（例えば、血小板由来成長因子受容体（ＰＤＧＦＲ）阻害剤（例えば、ＰＤＧＦＲ－β阻害剤））、ＲＡＦ－１阻害剤、ＫＩＴ阻害剤およびＲＥＴ阻害剤が含まれる。一部の実施形態では、ＡＨＣＭ剤と併用して使用される抗がん剤は、アキシチニブ（ＡＧ０１３７３６）、ボスチニブ（ＳＫＩ－６０６）、セジラニブ（ＲＥＣＥＮＴＩＮ（商標）、ＡＺＤ２１７１）、ダサチニブ（ＳＰＲＹＣＥＬ（登録商標）、ＢＭＳ－３５４８２５）、エルロチニブ（ＴＡＲＣＥＶＡ（登録商標））、ゲフィチニブ（ＩＲＥＳＳＡ（登録商標））、イマチニブ（Ｇｌｅｅｖｅｃ（登録商標）、ＣＧＰ５７１４８Ｂ、ＳＴＩ－５７１）、ラパチニブ（ＴＹＫＥＲＢ（登録商標）、ＴＹＶＥＲＢ（登録商標））、レスタウルチニブ（ＣＥＰ－７０１）、ネラチニブ（ＨＫＩ－２７２）、ニロチニブ（ＴＡＳＩＧＮＡ（登録商標））、セマキサニブ（セマキシニブ、ＳＵ５４１６）、スニチニブ（ＳＵＴＥＮＴ（登録商標）、ＳＵ１１２４８）、トセラニブ（ＰＡＬＬＡＤＩＡ（登録商標））、バンデタニブ（ＺＡＣＴＩＭＡ（登録商標）、ＺＤ６４７４）、バタラニブ（ＰＴＫ７８７、ＰＴＫ／ＺＫ）、トラスツズマブ（ＨＥＲＣＥＰＴＩＮ（登録商標））、ベバシズマブ（ＡＶＡＳＴＩＮ（登録商標））、リツキシマブ（ＲＩＴＵＸＡＮ（登録商標））、セツキシマブ（ＥＲＢＩＴＵＸ（登録商標））、パニツムマブ（ＶＥＣＴＩＢＩＸ（登録商標））、ラニビズマブ（Ｌｕｃｅｎｔｉｓ（登録商標））、ニロチニブ（ＴＡＳＩＧＮＡ（登録商標））、ソラフェニブ（ＮＥＸＡＶＡＲ（登録商標））、アレムツズマブ（ＣＡＭＰＡＴＨ（登録商標））、ゲムツズマブオゾガマイシン（ＭＹＬＯＴＡＲＧ（登録商標））、ＥＮＭＤ－２０７６、ＰＣＩ－３２７６５、ＡＣ２２０、乳酸ドビチニブ（ＴＫＩ２５８、ＣＨＩＲ－２５８）、ＢＩＢＷ ２９９２（ＴＯＶＯＫ（商標））、ＳＧＸ５２３、ＰＦ－０４２１７９０３、ＰＦ－０２３４１０６６、ＰＦ－２９９８０４、ＢＭＳ－７７７６０７、ＡＢＴ－８６９、ＭＰ４７０、ＢＩＢＦ １１２０（ＶＡＲＧＡＴＥＦ（登録商標））、ＡＰ２４５３４、ＪＮＪ－２６４８３３２７、ＭＧＣＤ２６５、ＤＣＣ－２０３６、ＢＭＳ－６９０１５４、ＣＥＰ－１１９８１、チボザニブ（ＡＶ－９５１）、ＯＳＩ－９３０、ＭＭ－１２１、ＸＬ－１８４、ＸＬ－６４７、ＸＬ２２８、ＡＥＥ７８８、ＡＧ－４９０、ＡＳＴ－６、ＢＭＳ－５９９６２６、ＣＵＤＣ－１０１、ＰＤ１５３０３５、ペリチニブ（ＥＫＢ－５６９）、バンデタニブ（ザクティマ）、ＷＺ３１４６、ＷＺ４００２、ＷＺ８０４０、ＡＢＴ－８６９（リニファニブ）、ＡＥＥ７８８、ＡＰ２４５３４（ポナチニブ）、ＡＶ－９５１（チボザニブ）、アキシチニブ、ＢＡＹ ７３－４５０６（レゴラフェニブ）、ブリバニブアラニネート（ＢＭＳ－５８２６６４）、ブリバニブ（ＢＭＳ－５４０２１５）、セジラニブ（ＡＺＤ２１７１）、ＣＨＩＲ－２５８（ドビチニブ）、ＣＰ ６７３４５１、ＣＹＣ１１６、Ｅ７０８０、Ｋｉ８７５１、マシチニブ（ＡＢ１０１０）、ＭＧＣＤ－２６５、モテサニブ二リン酸（ＡＭＧ－７０６）、ＭＰ－４７０、ＯＳＩ－９３０、パゾパニブ塩酸塩、ＰＤ１７３０７４、ソラフェニブトシレート（Ｂａｙ ４３－９００６）、ＳＵ ５４０２、ＴＳＵ－６８（ＳＵ６６６８）、バタラニブ、ＸＬ８８０（ＧＳＫ１３６３０８９、ＥＸＥＬ－２８８０）からなる群から選択される。選択されたチロシンキナーゼ阻害剤は、スニチニブ、エルロチニブ、ゲフィチニブ、またはソラフェニブから選択される。一実施形態では、チロシンキナーゼ阻害剤は、スニチニブである。
[00951]一実施形態では、多特異性または多機能性分子は、抗血管新生剤、または血管標的剤または血管破壊剤のうちの１つまたは複数と併用して投与される。例示的な抗血管新生剤には、限定されないが、とりわけ、ＶＥＧＦ阻害剤（例えば、抗ＶＥＧＦ抗体（例えば、ベバシズマブ）；ＶＥＧＦ受容体阻害剤（例えば、イトラコナゾール）；細胞増殖および／または内皮細胞移動の阻害剤（例えば、カルボキシアミドトリアゾール、ＴＮＰ－４７０）；血管新生刺激剤の阻害剤（例えば、スラミン）が含まれる。血管標的剤（ＶＴＡ）または血管破壊剤（ＶＤＡ）は、中枢壊死を引き起こすがん腫瘍の血管系（血管）を損傷するように設計されている（例えば、Ｔｈｏｒｐｅ，Ｐ．Ｅ．（２００４年）Ｃｌｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．Ｖｏｌ．１０巻：４１５～４２７ページに概説される）。ＶＴＡは、小分子であり得る。例示的な小分子ＶＴＡには、限定されないが、微小管不安定化剤（例えば、コンブレタスタチンＡ－４リン酸二ナトリウム（ＣＡ４Ｐ）、ＺＤ６１２６、ＡＶＥ８０６２、Ｏｘｉ ４５０３）；およびバジメザン（ＡＳＡ４０４）が含まれる。
免疫チェックポイント阻害剤
[00952]他の実施形態では、本明細書に記載される方法は、多特異性または多機能性分子と併用した免疫チェックポイント阻害剤の使用を含む。この方法は、ｉｎ ｖｉｖｏの治療プロトコールにおいて使用することができる。
[00953]一部の実施形態では、免疫チェックポイント阻害剤は、チェックポイント分子を阻害する。例示的なチェックポイント分子には、限定されないが、ＣＴＬＡ４、ＰＤ１、ＰＤ－Ｌ１、ＰＤ－Ｌ２、ＴＩＭ３、ＬＡＧ３、ＣＤ１６０、２Ｂ４、ＣＤ８０、ＣＤ８６、Ｂ７－Ｈ３（ＣＤ２７６）、Ｂ７－Ｈ４（ＶＴＣＮ１）、ＨＶＥＭ（ＴＮＦＲＳＦ１４またはＣＤ２７０）、ＢＴＬＡ、ＫＩＲ、ＭＨＣクラスＩ、ＭＨＣクラスＩＩ、ＧＡＬ９、ＶＩＳＴＡ、ＢＴＬＡ、ＴＩＧＩＴ、ＬＡＩＲ１、およびＡ２ａＲが含まれる。例えば、参照により本明細書に組み込まれるＰａｒｄｏｌｌ．Ｎａｔ．Ｒｅｖ．Ｃａｎｃｅｒ １２．４（２０１２年）：２５２～６４ページを参照されたい。
[00954]一部の実施形態では、免疫チェックポイント阻害剤は、ＰＤ－１阻害剤、例えば、ニボルマブ、ペンブロリズマブまたはピジリズマブなどの抗ＰＤ－１抗体である。ニボルマブ（ＭＤＸ－１１０６、ＭＤＸ－１１０６－０４、ＯＮＯ－４５３８、またはＢＭＳ－９３６５５８とも呼ばれる）は、ＰＤ１を特異的に阻害する完全ヒトＩｇＧ４モノクローナル抗体である。例えば、米国特許第８，００８，４４９号および国際公開第２００６／１２１１６８号を参照されたい。ペンブロリズマブ（Ｌａｍｂｒｏｌｉｚｕｍａｂ、ＭＫ－３４７５、ＭＫ０３４７５、ＳＣＨ－９００４７５、またはＫＥＹＴＲＵＤＡ（登録商標）とも呼ばれる；Ｍｅｒｃｋ）は、ＰＤ－１に結合するヒト化ＩｇＧ４モノクローナル抗体である。例えば、Ｈａｍｉｄ，Ｏ．ら（２０１３年）Ｎｅｗ Ｅｎｇｌａｎｄ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ ３６９巻（２号）：１３４～４４ページ、米国特許第８，３５４，５０９号および国際公開第２００９／１１４３３５号を参照されたい。ピジリズマブ（ＣＴ－０１１またはＣｕｒｅ Ｔｅｃｈとも呼ばれる）は、ＰＤ１に結合するヒト化ＩｇＧ１ｋモノクローナル抗体である。例えば、国際公開第２００９／１０１６１１号を参照されたい。一実施形態では、ＰＤ－１の阻害剤は、実質的に同一または類似の配列、例えば、ニボルマブ、ペンブロリズマブまたはピジリズマブの配列に対して少なくとも８５％、９０％、９５％同一であるまたはそれを超える配列を有する抗体分子である。追加の抗ＰＤ１抗体、例えば、ＡＭＰ ５１４（Ａｍｐｌｉｍｍｕｎｅ）は、例えば、米国特許第８，６０９，０８９号、米国特許出願公開第２０１０／０２８３３０号、および／または米国特許出願公開第２０１２／０１１４６４９号に記載されている。
[00955]一部の実施形態では、ＰＤ－１阻害剤は、イムノアドヘシン、例えば、定常領域（例えば、免疫グロブリンのＦｃ領域）に融合されたＰＤ－１リガンド（例えば、ＰＤ－Ｌ１またはＰＤ－Ｌ２）の細胞外／ＰＤ－１結合部分を含むイムノアドヘシンである。一部の実施形態では、ＰＤ－１阻害剤は、Ｂ７－Ｈ１とＰＤ－１の間の相互作用を遮断するＰＤ－Ｌ２ Ｆｃ融合可溶性受容体であるＡＭＰ－２２４（Ｂ７－ＤＣＩｇ、例えば、国際公開第２０１１／０６６３４２号および国際公開第２０１０／０２７８２７号に記載される）である。
[00956]一部の実施形態では、免疫チェックポイント阻害剤は、ＰＤ－Ｌ１阻害剤、例えば、抗体分子である。一部の実施形態では、ＰＤ－Ｌ１阻害剤は、ＹＷ２４３．５５．Ｓ７０、ＭＰＤＬ３２８０Ａ、ＭＥＤＩ－４７３６、ＭＳＢ－００１０７１８Ｃ、またはＭＤＸ－１１０５である。一部の実施形態では、抗ＰＤ－Ｌ１抗体は、ＭＳＢ００１０７１８Ｃ（Ａ０９－２４６－２とも呼ばれる；Ｍｅｒｃｋ Ｓｅｒｏｎｏ）であり、ＰＤ－Ｌ１に結合するモノクローナル抗体である。例示的なヒト化抗ＰＤ－Ｌ１抗体は、例えば、国際公開第２０１３／０７９１７４号に記載されている。一実施形態では、ＰＤ－Ｌ１阻害剤は、抗ＰＤ－Ｌ１抗体、例えば、ＹＷ２４３．５５．Ｓ７０である。ＹＷ２４３．５５．Ｓ７０抗体は、例えば、国際公開第２０１０／０７７６３４号に記載されている。一実施形態では、ＰＤ－Ｌ１阻害剤は、ＭＤＸ－１１０５（ＢＭＳ－９３６５５９とも呼ばれる）であり、例えば、国際公開第２００７／００５８７４号に記載されている。一実施形態では、ＰＤ－Ｌ１阻害剤は、ＭＤＰＬ３２８０Ａ（Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ／Ｒｏｃｈｅ）であり、ＰＤ－Ｌ１に対するヒトＦｃ最適化ＩｇＧ１モノクローナル抗体である。例えば、米国特許第７，９４３，７４３号および米国特許出願公開第２０１２／００３９９０６号を参照されたい。一実施形態では、ＰＤ－Ｌ１の阻害剤は、実質的に同一または類似の配列、例えば、ＹＷ２４３．５５．Ｓ７０、ＭＰＤＬ３２８０Ａ、ＭＥＤＩ－４７３６、ＭＳＢ－００１０７１８Ｃ、またはＭＤＸ－１１０５の配列に対して少なくとも８５％、９０％、９５％同一であるまたはそれを超える配列を有する抗体分子である。
[00957]一部の実施形態では、免疫チェックポイント阻害剤は、ＰＤ－Ｌ２阻害剤、例えば、ＡＭＰ－２２４（ＰＤ１とＢ７－Ｈ１の間の相互作用を遮断するＰＤ－Ｌ２ Ｆｃ融合可溶性受容体である）である。例えば、国際公開第２０１０／０２７８２７号および国際公開第２０１１／０６６３４２号を参照されたい。
[00958]一実施形態では、免疫チェックポイント阻害剤は、ＬＡＧ－３阻害剤、例えば、抗ＬＡＧ－３抗体分子である。一部の実施形態では、抗ＬＡＧ－３抗体は、ＢＭＳ－９８６０１６（ＢＭＳ９８６０１６とも呼ばれる、Ｂｒｉｓｔｏｌ－Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ）である。ＢＭＳ－９８６０１６および他のヒト化抗ＬＡＧ－３抗体は、例えば、米国特許出願公開第２０１１／０１５０８９２号、国際公開第２０１０／０１９５７０号、および国際公開第２０１４／００８２１８号に記載されている。
[00959]一部の実施形態では、免疫チェックポイント阻害剤は、例えば、米国特許第８，５５２，１５６号、国際公開第２０１１／１５５６０７号、欧州特許第２５８１１１３号および米国特許出願公開第２０１４／０４４７２８号に記載される、抗ＴＩＭ３抗体分子などのＴＩＭ－３阻害剤である。
[00960]一部の実施形態では、免疫チェックポイント阻害剤は、ＣＴＬＡ－４阻害剤、例えば、抗ＣＴＬＡ－４抗体分子である。例示的な抗ＣＴＬＡ４抗体には、トレメリムマブ（以前はチシリムマブ、ＣＰ－６７５，２０６として公知であるＰｆｉｚｅｒのＩｇＧ２モノクローナル抗体）、およびイピリムマブ（ＭＤＸ－０１０とも呼ばれる、ＣＡＳ Ｎｏ．４７７２０２－００－９）が含まれる。他の例示的な抗ＣＴＬＡ－４抗体は、例えば、米国特許第５，８１１，０９７号に記載されている。
ＣＲＳグレード付け
[00961]一部の実施形態では、本明細書に記載される組成物は、他の組成物と比較して、より低いレベルのサイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）を誘導し得る、および／またはＣＲＳを引き起こすより少ない機会しか有しない場合がある（引き起こさない場合もある）。一部の実施形態では、ＣＲＳは、以下のように１～５の重症度でグレード付けすることができる。グレード１～３は、重度ＣＲＳよりも軽度である。グレード４～５は、重度ＣＲＳである。グレード１のＣＲＳでは、対症療法のみが必要であり（例えば、悪心、発熱、疲労、筋肉痛、倦怠感、頭痛）、症状は生命を脅かすものではない。グレード２のＣＲＳでは、症状には、中等度の介入が必要であり、一般に中等度の介入に応答する。グレード２のＣＲＳを有する対象は、輸液もしくは１回の低用量昇圧剤のいずれかに応答する低血圧を発症するか、またはグレード２の臓器毒性もしくは低流量酸素（４０％未満の酸素）に応答する軽度の呼吸器症状を発症する。グレード３のＣＲＳ対象では、低血圧は、一般に、輸液療法または１回の低用量昇圧剤によって回復することができない。これらの対象は、一般に、低流量酸素を超える必要があり、グレード３の臓器毒性（例えば、腎もしくは心機能障害または凝固障害）および／またはグレード４の高トランスアミナーゼ血症を有する。グレード３のＣＲＳ対象は、より積極的な介入、例えば、酸素４０％以上、高用量昇圧剤、および／または複数の昇圧剤が必要である。グレード４のＣＲＳ対象は、グレード４の臓器毒性または人工呼吸器の必要性など、直ちに生命を脅かす症状に苦しんでいる。グレード４のＣＲＳ対象は、一般に、高トランスアミナーゼ血症を有しない。グレード５のＣＲＳ対象では、毒性は、死亡を引き起こす。ＣＲＳをグレード付けるための基準セットは、表３９、表４０、および表４１として本明細書に提供される。別段の規定がない限り、本明細書で使用される場合ＣＲＳは、表４０の基準に従ったＣＲＳを指す。
[00962]一部の実施形態では、ＣＲＳは、表３９に従ってグレード付けされる：
Figure 2023542080000146
Figure 2023542080000147
Figure 2023542080000148
実施例１．α－ＴＲＢＶ６－５抗体クローン抗体Ａのヒト化
[00963]マウスα－ＴＣＲβ抗体クローン抗体Ａ ＶＨおよびＶＬの生殖系列は、ＩＭＧＴ命名法を用いて割り当てられ、ＣＤＲ領域はＫａｂａｔおよびＣｈｏｔｈｉａ分類を組み合わせて定義された。配列番号１Ａおよび配列番号２Ａは、それぞれ、抗体Ａ ＶＨおよびＶＬ配列であり、ＶＨ生殖系列はマウスＩＧＨＶ１Ｓ１２＊０１であり、ＶＬ生殖系列はマウスＩＧＫＶ６－１５＊０１である。配列番号３Ａ～５Ａは、それぞれ、抗体Ａ ＶＨ ＣＤＲ領域１～３であり、配列番号６Ａ～８Ａは、ＶＬ ＣＤＲ領域１～３に対応する（表３０に記載される）。
[00964]抗体Ａ ＶＨおよびＶＬ配列のヒト化は、類似の方法を用いて別々に行われた。ＣＤＲグラフト化の成功に重要であるフレームワーク領域においてアミノ酸位置を同定した。ヒト生殖系列配列は、必要な残基を保存し、全体的に高量の同一性を含むことが同定された。ヒト生殖系列フレームワーク配列が、一致する重要なアミノ酸を含まない場合、マウス配列と一致するように復帰突然変異させた。ＣＤＲ領域を、未変化のヒト生殖系列にグラフト化した。抗体Ａ ＶＨをヒトＩＧＨＶ１－６９＊０１にヒト化し、抗体Ａ ＶＬをＩＧＫＶ１－１７＊０１およびＩＧＫＶ１－２７＊０１にヒト化した。３つすべてのヒト化配列は、ヒト化プロセスの結果として、ＮＧ、ＤＧ、ＮＳ、ＮＮ、ＤＳ、ＮＴ、ＮＸＳ、またはＮＸＴなどの、導入された負のポテンシャルの翻訳後修飾部位を含まないことが確認された。配列番号９Ａは、ヒト化抗体Ａ－Ｈ．１ ＶＨであり、配列番号１０Ａおよび１１Ａは、それぞれ、ヒト化ＶＬ ＩＧＫＶ１－１７＊０１およびＩＧＫＶ１－２７＊０１生殖系列である（表３０に記載される）。図１Ａおよび１Ｂは、ＣＤＲおよびフレームワーク領域（ＦＲ）を示す注釈付きのマウスおよびヒト化配列を示す。
実施例２：α－ＴＲＢＶ１２－３およびＴＲＢＶ１２－４抗体クローン抗体Ｂのヒト化
[00965]マウスα－ＴＣＲβ抗体クローン抗体Ｂ ＶＨおよびＶＬの生殖系列は、ＩＭＧＴ命名法を用いて割り当てられ、ＣＤＲ領域はＫａｂａｔおよびＣｈｏｔｈｉａ分類を組み合わせて定義された。配列番号１５Ａおよび配列番号１６Ａは、それぞれ、抗体Ｂ ＶＨおよびＶＬ配列であり、ＶＨ生殖系列はマウスＩＧＨＶ５－１７＊０２であり、ＶＬ生殖系列はマウスＩＧＫＶ４－５０＊０１である。配列番号１７Ａ～１９Ａは、それぞれ、Ｂ－Ｈ ＶＨ ＣＤＲ領域１～３であり、配列番号２０Ａ～２２Ａは、Ｂ－Ｈ ＶＬ ＣＤＲ領域１～３である（表３１に記載される）。
[00966]実施例１に記載される抗体Ａをヒト化するために適用された方法を用いて、抗体Ｂをヒト化した。抗体Ｂ ＶＨをヒトＩＧＨＶ３－３０＊０１、ＩＧＨＶ３－４８＊０１およびＩＧＨＶ３－６６＊０１にヒト化し、抗体Ｂ ＶＬをヒトＩＧＫＶ１－９＊０１、ＩＧＫＶ１－３９＊０１、ＩＧＫＶ３－１５＊０１、ＩＧＬＶ１－４７＊０１およびＩＧＬＶ３－１０＊０１にヒト化した。配列番号２３Ａ～２５Ａは、Ｂ－Ｈ．１Ａ、Ｂ－Ｈ．１Ｂ、およびＢ－Ｈ．１Ｃヒト化重鎖であり、配列番号２６Ａ～３０Ａは、Ｂ－Ｈ．１Ｄ、Ｂ－Ｈ．１Ｅ、Ｂ－Ｈ．１Ｆ、Ｂ－Ｈ．１Ｇ、およびＢ－Ｈ．１Ｈヒト化軽鎖である（表３１に記載される）。図２Ａおよび２Ｂは、ＣＤＲおよびフレームワーク領域（ＦＲ）を示す注釈付きのマウスおよびヒト化配列を示す。
実施例３：抗ＴＣＲβＶ抗体の特徴
[00967]導入
[00968]がん免疫療法のための腫瘍細胞溶解を促進するためにＴ細胞を再指向させるように設計された現在の二特異性構築物は、典型的には、Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）のＣＤ３ｅサブユニットに対して指向されるモノクローナル抗体（ｍＡｂ）に由来する一本鎖可変断片（ｓｃＦｖ）を利用する。しかしながら、このアプローチには限界があり、このような二特異性構築物の治療可能性の完全な実現を妨げる可能性がある。これまでの研究では、例えば、低い「活性化」用量の抗ＣＤ３ｅ ｍＡｂが長期のＴ細胞機能不全を引き起こし、免疫抑制作用を発揮し得ることが示されている。さらに、抗ＣＤ３ｅ ｍＡｂはすべてのＴ細胞に結合し、したがってすべてのＴ細胞を等しく活性化する。これは、Ｔ細胞の大量活性化に起因する抗ＣＤ３ｅ ｍＡｂの初回投与時の副作用と関連している。これらの多数の活性化Ｔ細胞は相当量のサイトカインを分泌し、そのうち最も重要なものはインターフェロンガンマ（ＩＦＮｇ）である。この過剰量のＩＦＮｇは、次に、例えば、マクロファージを活性化し、その後、ＩＬ－１、ＩＬ－６およびＴＮＦ－αなどの炎症性サイトカインを過剰に産生することができ、サイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）として公知である「サイトカインストーム」を引き起こす。したがって、ＣＲＳを低減させるために必要なエフェクターＴ細胞のサブセットのみに結合し、活性化することができる抗体を開発することは有利であり得る。
[00969]結果
[00970]その目的で、ＴＣＲ（ＴＣＲ Ｖｂ）のベータサブユニットの可変鎖に指向される抗体を同定した。これらの抗ＴＣＲ Ｖｂ抗体は、Ｔ細胞のサブセットに結合し、活性化するが、例えば、ＣＲＳが全く低減しないかまたは顕著には低減しない。プレート結合した抗ＴＣＲ Ｖｂ１３．１ｍＡｂ（Ａ－Ｈ．１およびＡ－Ｈ．２）を用いて、Ａ－Ｈ．１での陽性染色によって定義されるＴ細胞の集団が、（０日目のＴ細胞の約５％から６日目の細胞培養での総Ｔ細胞のほぼ６０％まで）拡大され得ることが示された（図４Ａ～４Ｃ）。この実験のために、ヒトＣＤ３＋Ｔ細胞を磁気ビーズ分離を用いて単離し（負の選択）、１００ｎＭで、固定化（プレート被覆された）Ａ－Ｈ．１またはＯＫＴ３（抗ＣＤ３ｅ）抗体で６日間、活性化した。拡大されたＶｂ１３．１＋Ｔ細胞は、精製ＣＤ３＋Ｔ細胞と共培養した場合、形質転換された細胞系ＲＰＭＩ－８２２６に対して細胞溶解活性化を示す（図５Ａ～５Ｂ）。
[00971]次に、抗ＴＣＲ ＶＢ抗体によって活性化されたＰＢＭＣがサイトカインを産生する能力を評価した。抗ＴＣＲ ＶＢ抗体で活性化されたＰＢＭＣのサイトカイン産生を、（ｉ）抗ＣＤ３ｅ抗体（ＯＫＴ３またはＳＰ３４－２）；（ｉｉ）抗ＴＣＲ ＶＡ １２．１抗体６Ｄ６．６、抗ＴＣＲ ＶＡ２４ＪＡ１８抗体６Ｂ１１などの抗ＴＣＲ Ｖα（ＴＣＲ ＶＡ）抗体；（ｉｉｉ）抗ＴＣＲαβ抗体Ｔ１０Ｂ９；および／または（ｉｖ）アイソタイプ対照（ＢＧＭ０１０９）で活性化されたＰＢＭＣのサイトカイン産生と比較した。試験した抗ＴＣＲ ＶＢ抗体には、ヒト化抗ＴＣＲＶＢ １３．１抗体（Ａ－Ｈ．１またはＡ－Ｈ．２）、マウス抗ＴＣＲ ＶＢ５抗体Ｅ、マウス抗ＴＣＲ ＶＢ８．１抗体Ｂ、およびマウス抗ＴＣＲ ＶＢ１２抗体Ｄが含まれる。ＢＧＭ０１０９は、以下：
ＭＥＴＤＴＬＬＬＷＶＬＬＬＷＶＰＧＳＴＧＧＬＮＤＩＦＥＡＱＫＩＥＷＨＥＧＧＧＧＳＥＰＲＴＤＴＤＴＣＰＮＰＰＤＰＣＰＴＣＰＴＰＤＬＬＧＧＰＳＶＦＩＦＰＰＫＰＫＤＶＬＭＩＳＬＴＰＫＩＴＣＶＶＶＤＶＳＥＥＥＰＤＶＱＦＮＷＹＶＮＮＶＥＤＫＴＡＱＴＥＴＲＱＲＱＹＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＰＩＫＨＱＤＷＭＳＧＫＶＦＫＣＫＶＮＮＮＡＬＰＳＰＩＥＫＴＩＳＫＰＲＧＱＶＲＶＰＱＩＹＴＦＰＰＰＩＥＱＴＶＫＫＤＶＳＶＴＣＬＶＴＧＦＬＰＱＤＩＨＶＥＷＥＳＮＧＱＰＱＰＥＱＮＹＫＮＴＱＰＶＬＤＳＤＧＳＹＦＬＹＳＫＬＮＶＰＫＳＲＷＤＱＧＤＳＦＴＣＳＶＩＨＥＡＬＨＮＨＨＭＴＫＴＩＳＲＳＬＧＮＧＧＧＧＳ（配列番号３２８２Ａ）のアミノ酸配列を含む。
[00972]図６Ａに示されるように、プレート結合したＡ－Ｈ．１またはＡ－Ｈ．２、または抗ＣＤ３ｅ抗体（ＯＫＴ３またはＳＰ３４－２）を用いて、ヒトＰＢＭＣを活性化した場合、Ｔ細胞サイトカインＩＦＮｇが誘導された（図６Ａ）。試験したすべての抗ＴＣＲ ＶＢ抗体は、ＩＦＮｇの産生に対して類似の効果を有した（図６Ｂ）。抗ＴＣＲ ＶＡ抗体は、類似のＩＦＮｇ産生を誘導しなかった。
[00973]ＩＬ－２産生に関して、Ａ－Ｈ．１およびＡ－Ｈ．２で活性化されたＰＢＭＣは、抗ＣＤ３ｅ抗体（ＯＫＴ３またはＳＰ３４－２）で活性化されたＰＢＭＣと比較して、ＩＬ－２産生の増加（図７Ａ）および遅延動態（図７Ｂ）をもたらした。図７Ｂは、抗ＴＣＲ ＶＢ抗体で活性化されたＰＢＭＣが、活性化（プレート被覆された抗体とのインキュベーション）後の５日目または６日目にＩＬ－２のピーク産生を実証することを示す。対照的に、ＯＫＴ３で活性化されたＰＢＭＣにおけるＩＬ－２産生は、活性化後の２日目でピークに達した。ＩＦＮＧと同様に、ＩＬ－２効果（例えば、ＩＬ－２の産生の増強および遅延動態）は、試験したすべての抗ＴＣＲ ＶＢ抗体にわたって類似していた（図７Ｂ）。
[00974]また、サイトカインＩＬ－６、ＩＬ－１βおよびＴＮＦ－αの産生は、「サイトカインストーム」（適切にはＣＲＳ）と関連し、類似の条件下で評価された。図８Ａ、９Ａおよび１０Ａは、抗ＣＤ３ｅ抗体で活性化されたＰＢＭＣがＩＬ－６（図８Ａ）、ＴＮＦ－α（図９Ａ）およびＩＬ－１β（図１０Ａ）の産生を実証するが、Ａ－Ｈ．１またはＡ－Ｈ．２で活性化したＰＢＭＣでは、これらのサイトカインの誘導は、全く観察されないかまたはほとんど観察されなかったことを示す。図９Ｂおよび１０Ｂに示されるように、ＴＮＦ－αおよびＩＬ－１βの産生は、抗ＴＣＲ ＶＢ抗体のいずれかを用いたＰＢＭＣの活性化によって誘導されなかった。
[00975]さらに、Ａ－Ｈ．１活性化されたＣＤ３＋Ｔ細胞によるＩＦＮｇ産生の動態は、抗ＣＤ３ｅ ｍＡｂ（ＯＫＴ３およびＳＰ３４－２）によって活性化されたＣＤ３＋Ｔ細胞により産生されるものに比べて遅延することが注目された（図１１Ａおよび１１Ｂ）。
[00976]最後に、ＴＥＭＲＡとして公知であるメモリーエフェクターＴ細胞のサブセットは、Ａ－Ｈ．１またはＡ－Ｈ．２によって活性化されたＣＤ８＋Ｔ細胞において優先的に拡大することが観察された（図１２）。単離したヒトＰＢＭＣは、１００ｎＭで、固定化（プレート被覆）された抗ＣＤ３ｅまたは抗ＴＣＲ Ｖβ１３．１で６日間、活性化された。６日間のインキュベーション後、Ｔ細胞サブセットは、ナイーブＴ細胞（ＣＤ８＋、ＣＤ９５－、ＣＤ４５ＲＡ＋、ＣＣＲ７＋）、Ｔ幹細胞メモリー（ＴＳＣＭ；ＣＤ８＋、ＣＤ９５＋、ＣＤ４５ＲＡ＋、ＣＣＲ７＋）、Ｔセントラルメモリー（Ｔｃｍ；ＣＤ８＋、ＣＤ９５＋、ＣＤ４５ＲＡ－、ＣＣＲ７＋）、Ｔエフェクターメモリー（Ｔｅｍ；ＣＤ８＋、ＣＤ９５＋、ＣＤ４５ＲＡ－、ＣＣＲ７－）、およびＴエフェクターメモリー再発現ＣＤ４５ＲＡ（Ｔｅｍｒａ；ＣＤ８＋、ＣＤ９５＋、ＣＤ４５ＲＡ＋、ＣＣＲ７－）の表面マーカーに対してＦＡＣＳ染色により同定された。抗ＴＣＲ Ｖβ１３．１抗体（Ａ－Ｈ．１またはＡ－Ｈ．２）によって活性化されたヒトＰＢＭＣは、抗ＣＤ３ｅ抗体（ＯＫＴ３またはＳＰ３４－２）によって活性化されたＰＢＭＣと比較した場合、ＣＤ８＋ＴＳＣＭおよびＴｅｍｒａ Ｔ細胞サブセットを増加させた。類似した拡大は、ＣＤ４＋Ｔ細胞を用いて観察された。
[00977]結論
[00978]この実施例において提供されるデータは、ＴＣＲ Ｖｂに対して指向される抗体が、例えば、Ｔ細胞のサブセットを優先的に活性化し、例えば、腫瘍細胞溶解を促進し得るが、ＣＲＳを促進し得ないＴＥＭＲＡの拡大を導くことができることを示す。したがって、ＦａｂもしくはｓｃＦｖ、またはＴＣＲ Ｖｂに指向されるペプチドのいずれかを利用する二特異性構築物は、例えば、抗ＣＤ３ｅ標的化に関連するＣＲＳの有害な副作用なしに、がん免疫療法のための腫瘍細胞溶解を促進するためにＴ細胞を活性化および再指向させるために使用することができる。
実施例４：ＢＣＭＡおよびＴ細胞エンゲージャーに対する二重標的化抗体分子による多発性骨髄腫（ＭＭ）細胞のオンターゲットＴ細胞媒介性の細胞毒性
[00979]この実施例は、Ｔ細胞上のＴ細胞エンゲージャー、例えば、ＴＣＲＶｂおよびＭＭ細胞上のＢＣＭＡを認識する二重標的化抗体分子による多発性骨髄腫（ＭＭ）細胞のオンターゲットＴ細胞媒介性の細胞毒性を示す。
[00980]図１３Ａに示されるように、プレート結合した抗ＴＣＲＶｂ抗体で５日間、活性化された精製ヒトＴ細胞は、プレート結合した抗ＣＤ３（ＯＫＴ３）抗体で活性化された精製ヒトＴ細胞よりも高速で増殖する。Ｔ細胞の抗ＴＣＲＶｂ抗体刺激は、ＣＤ４５ＲＡ＋エフェクターメモリーＣＤ８＋およびＣＤ４＋Ｔ細胞（ＴＥＭＲＡ）細胞の選択的拡大をもたらした（図１３Ｂ）。ＣＤ８＋およびＣＤ４＋Ｔｅｍｒａ細胞集団の両方は、抗ＴＣＲＶｂ抗体で刺激された場合、非刺激細胞または抗ＣＤ３（ＳＰ３４）抗体で刺激された細胞と比較してより拡大した。抗ＴＣＲＶｂ抗体は、抗ＣＤ３抗体で刺激されたＰＢＭＣと比較して、抗ＴＣＲＶｂ抗体で刺激されたＰＢＭＣによるＩＦＮ－ｇの分泌の遅延をもたらした（図１３Ｃ）。さらに、抗ＴＣＲＶｂ抗体または抗ＣＤ３抗体で刺激されたＴ細胞は、図１３Ｄに示されるように、多発性骨髄腫標的細胞の同等の溶解をもたらした。図１３Ｅ～１３Ｆに示されるように、１００ｎｇ／ｍｌのプレート結合した抗ＴＣＲＶｂ抗体、または抗ＣＤ３抗体で５日間、刺激されたＴ細胞は、パーフォリンおよびグランザイムＢを分泌した。
[00981]抗ＴＣＲＶｂ抗体によるＰＢＭＣの活性化は、抗ＯＫＴ３抗体で活性化されたＰＢＭＣと比較して、ＩＬ－２および／またはＩＬ－１５のより高い産生および／または分泌をもたらした（図１４Ａ）。抗ＴＣＲＶｂ抗体で活性化されたＰＢＭＣは、例えば、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞の拡大および／または生存、例えば、増殖ももたらした（図１４Ｂ）。対照的に、抗ＯＫＴ３抗体で活性化されたＰＢＭＣＳは、ＮＫ細胞拡大をもたらさなかった。さらに、実施例３に記載されるように、抗ＴＣＲＶｂ抗体で活性化されたＰＢＭＣは、ＣＲＳと関連するサイトカインＩＬ－６、ＩＬ－１βおよびＴＮＦ－αの産生をもたらさなかった（図１５）。これらのｉｎ ｖｉｔｒｏ特徴付け研究は、一部の実施形態では、抗ＴＣＲＶｂ抗体は、例えば、Ｔ細胞を活性化および／または刺激して、標的細胞溶解、パーフォリン分泌およびグランザイムＢ分泌、ならびに、例えば、遅延動態を伴うＩＦＮ－ｇの分泌によって証明されるように、Ｔ細胞殺滅を促進することを示す。
[00982]次に、多発性骨髄腫（ＭＭ）細胞を標的とし、殺滅させる、一方のアームではＢＣＭＡを、他方のアームではＴＣＲＶｂを標的とする二重標的化抗体分子の能力を試験した。健康なドナーＰＢＭＣは、ＲＭＰＩ８２２６ ＭＭ細胞系、および以下の二重標的化抗体分子：ＢＣＭＡ－ＴＣＲＶｂ、ＢＣＭＡ－ＣＤ３、もしくは対照－ＴＣＲＶｂのうちの１つとともに同時インキュベートし、または、次に、フローサイトメトリーを用いてアイソタイプ対照標的細胞溶解を評価した。図１６Ａに示されるように、二重標的化ＢＣＭＡ－ＴＣＲＶｂ抗体分子は、ｉｎ ｖｉｔｒｏでＭＭ細胞の殺滅をもたらした。
[00983]二重標的化ＢＣＭＡ－ＴＣＲＶｂ抗体分子は、ＭＭマウスモデルにおいてＭＭ腫瘍成長を阻害するその能力についてｉｎ ｖｉｖｏでさらに試験された。ＮＣＩ－Ｈ９２９細胞系を０日目にＮＯＤ－ｓｃｉｄ ＩＬ２ｒγヌル（ＮＳＧ）レシピエントマウスに注射し、続いて、９日目にＰＢＭＣを送達した。１２日目、１５日目、１８日目および２１日目に、二重標的化ＢＣＭＡ－ＴＣＲＶｂ抗体分子を０．５ｍｇ／ｋｇの用量で腹腔内注射により投与した。図１６Ｂは、二重標的化ＢＣＭＡ－ＴＣＲＶｂ抗体分子によるｉｎ ｖｉｖｏでのＭＭ腫瘍成長の予防、例えば、阻害を示す。これらの結果は、一部の実施形態では、二重標的化ＢＣＭＡ－ＴＣＲＶｂ抗体分子は、例えば、腫瘍細胞、例えば、ＭＭ腫瘍細胞をｉｎ ｖｉｔｒｏおよびｉｎ ｖｉｖｏで殺滅させることができることを実証する。したがって、一部の実施形態では、二重標的化ＢＣＭＡ－ＴＣＲＶｂ抗体分子を、例えば、がん、例えば、血液がん、例えば、ＭＭに対する療法として使用することができる。
実施例５：ＦｃＲＨ５およびＴ細胞エンゲージャーに対する二重標的化抗体分子のｉｎ ｖｉｔｒｏ細胞毒性
[00984]この実施例は、Ｔ細胞上のＴ細胞エンゲージャー、例えば、ＴＣＲＶｂ、およびＭＭ細胞上のＦｃＲＨ５を認識する二重標的化抗体分子による、多発性骨髄腫（ＭＭ）細胞におけるｉｎ ｖｉｔｒｏ細胞毒性を示す。健康なドナーのＰＢＭＣまたは精製Ｔ細胞を、ＭＯＬ８Ｍ ＭＭ細胞系と一方のアームではＦｃＲＨ５および他方のアームではＴＣＲＶｂを標的とする二重標的化抗体分子とともに、またはアイソタイプ対照抗体とともに同時インキュベートした。次に、フローサイトメトリーを用いて、標的細胞溶解を評価した。図１７に示されるように、二重標的化ＦｃＲＨ５－ＴＣＲＶｂ分子は、精製Ｔ細胞またはＰＢＭＣの両方によるＭＭ細胞の殺滅をもたらした。これは、二重標的化ＦｃＲＨ５－ＴＣＲＶｂ分子が、Ｔ細胞などの免疫細胞、例えば、ＰＢＭＣによって、ＭＭ細胞の殺滅を標的化し、促進することができることを示す。
実施例６：抗ＮＫｐ３０抗体を生成するためのアルメニアンハムスターの免疫化
[00985]簡単に述べると、アルメニアンハムスターを、フロイントの完全アジュバント中のヒトＮＫｐ３０タンパク質の細胞外ドメインを用いて免疫化し、フロイントの不完全アジュバント（ＩＦＡ）中のＮＫｐ３０を用いて、１４日目および２８日目に２回追加免疫した。５６日目にさらに１回のＩＦＡ中のブーストを与え、３日後に動物を回収した。脾臓を収集し、Ｐ３Ｘ６３Ａｇ８．６５３マウス骨髄腫細胞系と融合させた。１２５ｕｌ中の０．９×１０＾５細胞／ウェルを９６ウェルプレートに入れ、選択用のＨＡＴまたはＨＴ、ならびに７日目、１１日目および必要に応じてその後のＨｙｂｒｉｄｏｍａ Ｃｌｏｎｉｎｇ Ｆａｃｔｏｒ（最終１％）の非存在または存在下で２０％のウシ胎仔血清、４ｍＭのＬ－グルタミン、１ｍＭのピルビン酸ナトリウム、５０Ｕのペニシリン、５０μｇのストレプトマイシンおよび５０μＭの２－ＭＥを補足した１２５μｌのＩ－２０＋２ＭＥ＋ＨＡＴ（ＩＭＤＭ（４ｇ／Ｌグルコース）を与えた。融合の約２週後（細胞は約５０％コンフルエント）に上清を収集し、結合についてアッセイした。
実施例７：ＮＫｐ３０ ｍＡｂについてのハイブリドーマスクリーニング
[00986]Ｅｘｐｉ２９３細胞にＢＧ１６０（ｈＮＫｐ３０細胞抗原）をトランスフェクトし、１８時間後にスクリーニングを行った。スクリーニングの日に、トランスフェクトされた細胞を０．０５×１０＾６／ｍＬに希釈し、抗アルメニアンハムスターＦｃ Ａｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ ４８８を０．４ｕｇ／ｍＬの最終濃度まで加えた。５０ｕＬ（２，５００細胞）のこの混合物を３８４ウェルプレートの各ウェルに加えた。二次（ｓｅｃｏｎｄａｒｙ）と共に同じ密度の非トランスフェクト２９３細胞を陰性対照として使用した。５ｕＬのハイブリドーマ上清を細胞混合物に加え、プレートを３７℃で１時間インキュベートした。プレートを次にＭｉｒｒｏｒｂａｌｌ上でイメージングした。陽性クローンを同定し、段階希釈によりサブクローニングしてクローン選択ハイブリドーマを得た。同じプロトコールを使用した再確認後にハイブリドーマ細胞を回収し、対応する重鎖および軽鎖配列を取得した。対応する抗体のその後の発現およびさらなる検証のためにＤＮＡをｐｃＤＮＡ３．４にサブクローニングした。
実施例８：ＮＫ９２細胞へのＮＫｐ３０抗体の結合
[00987]０．５％のＢＳＡおよび０．１％のアジ化ナトリウムを含有するＰＢＳ（染色緩衝液）を用いてＮＫ－９２細胞を洗浄し、２００，０００細胞／ウェルで９６ウェルＶ底プレートに加えた。ハムスターＮＫｐ３０抗体を２．０倍段階希釈で細胞に加え、室温で１時間インキュベートした。染色緩衝液を用いてプレートを２回洗浄した。ＡＦ６４７に共役したハムスターＦｃに対する二次抗体（Ｊａｃｋｓｏｎ、１２７－６０５－１６０）を１：１００希釈（１．４ｍｇ／ｍｌストック）で加え、細胞と共に４℃で３０分間インキュベートし、続いて染色緩衝液を用いて洗浄した。細胞をその後に、４％のパラホルムアルデヒドを用いて室温で１０分間固定した。プレートをＣｙｔｏＦＬＥＸ ＬＳ（Ｂｅｃｋｍａｎ Ｃｏｕｌｔｅｒ）上で読み取った。パーセント－ＡＦ７４７陽性集団としてデータを算出した（図２２）。
実施例９：ＮＫ９２細胞系を使用するＮＫｐ３０抗体の活性を測定するためのバイオアッセイ
[00988]ＮＫｐ３０抗体をＰＢＳ中で３倍段階希釈し、平底９６ウェルプレート中２～８℃で終夜インキュベートした。プレートをＰＢＳ中で２回洗浄し、ＩＬ－２を含有する増殖培地に４０，０００個のＮＫ－９２細胞を加えた。３７℃、５％のＣＯ２の加湿されたインキュベーターでプレートを１６～２４時間インキュベートした後に上清を収集した。ＭＳＤアッセイの使用説明書にしたがって上清中のＩＦＮγレベルを測定した（図２３）。ハムスターアイソタイプＩｇＧとインキュベートされた細胞から収集した上清を陰性対照として使用し、ＮＫｐ３０モノクローナル抗体（Ｒ＆Ｄ、クローン２１０８４７）とインキュベートされた細胞からの上清を陽性対照として利用した。ハムスター抗ＮＫｐ３０ ｍＡＢを使用してデータを生成した。
実施例１０：抗カルレティキュリン抗体の特徴
[00989]配列番号６２５０のＶＨおよび配列番号６２５２のＶＬを含むマウス抗カルレティキュリン抗体ＡｂＭ－１（ＢＩＭ００３１とも呼ばれる）をヒト化した。５種のヒト化ＶＨ（表１６に示される配列番号６３７２および２３４～２３７）および５種のヒト化ＶＬ（表１６に示される配列番号２３８～２４２）を生成した。すべてのヒト化ＶＨは、ＨＣＤＲ２中にシステインからアラニンへの置換を含む。表１９に開示されるような抗体ＢＪＭ００４０～ＢＪＭ００６４を合成し、生化学的および機能的活性について特性付けた。
[00990]簡単に述べると、プロテインＡ溶出後に精製タンパク質の発現レベルを測定した。タンパク質を分析用ＳＥＣによって分析して、凝集を評価し、示差走査蛍光測定（ＤＳＦ）によって試験して、より安定した候補を同定した。候補の結合親和性は、ヒトＦｃに融合した突然変異体カルレティキュリンＣ末端ペプチドに対するＥＬＩＳＡアッセイで測定した。結果は、表２２にまとめられた。ＨＣＤＲ２中にシステインからアラニンへの置換を含むヒト化抗体は、親のマウス抗体と比較して凝集の低減を実証した。
Figure 2023542080000149
 実施例１１：ヒト化抗ＮＫｐ３０抗体の生成および特徴付け
[00991]一連のハムスター抗ＮＫｐ３０抗体を選択した。これらの抗体は、ヒトＮＫｐ３０およびカニクイザルＮＫｐ３０に結合し、ＮＫ－９０細胞からのＩＦＮγ産生を誘導することが示された（データ示さず）。例示的なハムスター抗ＮＫｐ３０抗体１５Ｅ１、９Ｇ１、１５Ｈ６、９Ｄ９、３Ａ１２、および１２Ｄ１０のＶＨおよびＶＬ配列を表９に開示する。１５Ｅ１、９Ｇ１、および１５Ｈ６に基づく例示的なヒト化抗ＮＫｐ３０抗体のＶＨおよびＶＬ配列も表９に開示する。これらの抗体のＫａｂａｔ ＣＤＲを表３４および表８に開示する。
[00992]１５Ｅ１に基づく２つのヒト化された構築物を選択した。第１の構築物ＢＪＭ０４０７は、配列番号７３０２のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および配列番号７３０５のアミノ酸配列を含むラムダ軽鎖可変領域を含むＦａｂである。その対応するｓｃＦｖ構築物ＢＪＭ０８５９は配列番号７３１０のアミノ酸配列を含む。第２の構築物ＢＪＭ０４１１は、配列番号７３０２のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および配列番号７３０９のアミノ酸配列を含むカッパ軽鎖可変領域を含むＦａｂである。その対応するｓｃＦｖ構築物ＢＪＭ０８６０は配列番号７３１１のアミノ酸配列を含む。ＢＪＭ０４０７およびＢＪＭ０４１１は、同等の生物物理学的特徴、例えば、ＮＫｐ３０に対する結合親和性および熱安定性を示した。ｓｃＦｖ構築物ＢＪＭ０８５９およびＢＪＭ０８６０もまた同等の生物物理学的特性を示した。
実施例１２．野生型または突然変異体カルレティキュリンへの例示的な抗カルレティキュリン抗体分子の結合
[00993]この実施例では、例示的な抗カルレティキュリン抗体分子、ＢＫＭ０１０６（抗体６Ｃ１０の親ＩｇＧ形態）は、２つのカルレティキュリン突然変異体（ＣＡＬＲｉｎｓおよびＣＡＬＲｄｅｌ、その配列はそれぞれ、配列番号Ｄ１００２およびＤ１００３として表２に列挙される）と比較した、野生型カルレティキュリン（ＣＡＬＲ ＷＴ）ヘの結合を試験された。２つのＥＬＩＳＡ試験を実行し、その１つは、抗原がプレートに被覆され、その１つは抗体がプレートに被覆された。
[00994]抗原がプレートに被覆された実験のため、Ｍａｘｉｓｏｒｐプレートを、ＣＡＬＲ ＷＴ、ＣＡＬＲｉｎ、またはＣＡＬＲｄｅｌタンパク質によって被覆した。プレートを３％ ＢＳＡによってブロッキングした。ＢＫＭ０１０６を１００ｎＭに希釈し、ウェルに添加した。抗ヒトＨＲＰ（Ｊａｃｋｓｏｎ Ｉｍｍｕｎｏｒｅｓｅａｒｃｈ ３０９－０３５－００８）１：２０，０００を各ウェルに添加した。１－Ｓｔｅｐ Ｔｕｒｂｏ ＴＭＢ－ＥＬＩＳＡ基質溶液を添加し、１Ｍ ＨＣｌを添加することによって反応を停止させた。プレートを４５０ｎｍで読み取った。
[00995]抗体がプレートに被覆された実験のため、Ｍａｘｉｓｏｒｐプレートを、ＢＫＭ０１０６によって被覆した。プレートを３％ ＢＳＡによってブロッキングした。ＣＡＬＲ ＷＴ、ＣＡＬＲｉｎｓ、およびＣＡＬＲｄｅｌを１００ｎＭに希釈し、別々のウェルに添加した。抗Ｈｉｓ－Ｔａｇ－ＨＲＰ（Ｓｏｕｔｈｅｒｎ Ｂｉｏｔｅｃｈ ４６０３－０５）１：５，０００を各ウェルに添加した。１－Ｓｔｅｐ Ｔｕｒｂｏ ＴＭＢ－ＥＬＩＳＡ基質溶液を添加し、１Ｍ ＨＣｌを添加することによって反応を停止させた。プレートを４５０ｎｍで読み取った。
[00996]図２５Ａ～２５Ｂに示されるように、例示的な抗体ＢＫＭ０１０６は、ＣＡＬＲｉｎｓおよびＣＡＬＲｄｅｌ突然変異体に結合するが、野生型カルレティキュリンには結合しなかった。
実施例１３．突然変異体カルレティキュリンを発現する細胞への例示的な抗カルレティキュリン抗体分子の結合
[00997]この実施例では、例示的な抗カルレティキュリン抗体分子、ＢＫＭ０１０６（抗体６Ｃ１０の親ＩｇＧ形態）は、突然変異体カルレティキュリン（ＣＡＬＲｉｎｓおよびＣＡＬＲｄｅｌ、その配列はそれぞれ、配列番号Ｄ１００２およびＤ１００３として表２に列挙される）を発現する細胞ヘの結合を試験された。簡単に述べると、Ｅｘｐｉ２９３Ｆ細胞（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ａ１４５２７）に、ＢＨ４７０（ヒトＴｐｏＲ）、ＢＨ４７２（ヒトＪＡＫ２）およびヒトＣＡＬＲｉｎｓ、ヒトＣＡＬＲ ｄｅｌ、またはＢＨ８００（ヒトＣＡＬＲ ＷＴ）細胞抗原のいずれかを三重トランスフェクトした。０．７８、１．５６、３．１２５、６．２５、１２．５、２５、および５０ｎＭのＢＫＭ０１０６およびｈＩｇＧ１アイソタイプ対照をウェルに添加した。細胞を、二次抗体Ａｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ４８８ 抗ヒトＩｇＧ（Ｊａｃｋｓｏｎ ＩｍｍｕｎｏＲｅｓｅａｒｃｈ １０９－５４５－０８８）１：２００とインキュベートした。Ｚｏｍｂｉｅ Ｖｉｏｌｅｔ ＢＶ４１２（ＢｉｏＬｅｇｅｎｄ４２３１１４）Ｖｉａｂｉｌｉｔｙ色素を１：１００で細胞に添加した。
[00998]図２６Ａ～２６Ｂに示されるように、ＢＫＭ０１０６は、類似の応答によりＣＡＬＲｉｎｓおよびＣＡＬＲｄｅｌの両方に結合した。
実施例１４．二特異性抗体により免疫エフェクター細胞へとｍｔＣＡＬＲ＋細胞を架橋することによるｍｔＣＡＬＲ＋細胞標的化
[00999]この実施例では、一連の抗体分子は、同種移植マウスがんモデルにおいて治療有効性について試験された。簡単に述べると、ｍＩｇＧ２ａ骨格を有する代理分子が、例示的な抗カルレティキュリン抗体分子６Ｃ１０および以下のエフェクターアームの各々から生成された。
・ＢＫＭ０２０１－ｍｕｔＣＡＬＲ－６Ｃ１０モノクローナル－ＡＤＣＣ可能
・ＢＫＭ０２０２－ｍｕｔＣＡＬＲ－６Ｃ１０×ＴＣＲｖＢ（２×２）二特異性－ＬＡＬＡＰＧ
・ＢＫＭ０２０４－ｍｕｔＣＡＬＲ－６Ｃ１０×ＣＤ３－２Ｃ１１（１×１）二特異性－ＬＡＬＡＰＧ
[001000]上記の分子の治療有効性は、ｍｔＣＡＬＲ、ｈＭＰＬ、およびｈＪＡＫ２を発現する操作された細胞であるＢａ／Ｆ３細胞を使用して生成した全身性マウスモデルにおいて試験された。試験の１日目に、ＰＢＳ中に懸濁した２×１０６個の操作されたＢａ／Ｆ３ ｍｔＣＡＬＲ、ｈＭＰＬ、ｈＪＡＫ２細胞を、ＰＢＳ中に懸濁し、雌のＢａｌｂ／Ｃマウスに静脈内注射した。マウスを、１ｍｇ／ｋｇまたは５ｍｇ／ｋｇのＣＡＬＲｘ／ＴＣＲｖＢおよび対照二特異性分子の３日毎の投与を、静脈内ボーラス注射により全部で４回（４、７、１０および１３日目）投与して処置した。動物は、人道的エンドポイントをモニターし、体重を週に２回モニターした。全ての動物は、１５日目に安楽死させ、脾臓を摘出し、疾病負荷の代わりとして脾臓重量をモニターした。データは、Ｂａ／Ｆ３ ｍｔＣＡＬＲ、ｈＭＰＬ、ｈＪＡＫ２細胞を移植したマウスにおいて、ビヒクル処置したマウスが、ナイーブマウスと比較して、脾臓重量のほぼ３倍の増加を示し、疾病負荷が増加したことを示唆していることを示した。
[001001]図２７に示されるように、３つの抗体で処置したマウス全てが、ビヒクル対照と比較して、脾臓重量の有意な減少を示した。
実施例１５．例示的な抗ＮＫｐ３０抗体分子のＢｉａｃｏｒｅ分析
[001002]この実施例では、一連の例示的な抗ＮＫｐ３０抗体分子は、ＮＫｐ３０へのそれらの結合親和性について分析された。簡単に述べると、表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）測定は、ＢＩＡｃｏｒｅ Ｔ２００を使用することによって実施した。ヒトＮＫｐ３０（ＢＫＭ０１７９）を、５０ＲＵの応答まで、抗マウスＦｃ抗体によってＣＭ５チップ上に固定化した。各例示的な抗体構築物を、３．９、７．８、１５．６、３１．２、６２．５、および１２５ｎＭの濃度、および流速２０μｌ／ｍｉｎで、ヒトＮＫｐ３０を固定化した表面に注入した。データは、１：１結合モデルを使用してフィットさせた。
[001003]表２３に示されるように、ほとんどの例示的な抗体は、親抗体と比較して、ヒトＮＫｐ３０への保存された親和性を示した。
Figure 2023542080000150
 実施例１６．例示的な抗ＣＤ３抗体分子の産生および評価
[001004]抗ＣＤ３抗体分子の産生
[001005]４匹のＣ５７／ＢＬ６マウスを、配列ＱＤＧＮＥＥＭＧＧＩＴＱＴＰＹＫＶＳＩＳＧＴＴＶＩＬＴＣ（配列番号Ｄ２１５）を持つ、ＫＬＨコンジュゲートＣＤ３ｅペプチドを用いて免疫化した。動物は、４回目の免疫化の３日後に採血し、力価をチェックした。４回目の免疫化後、抗原を用いて動物を２回ブーストした。最後のブーストの３～４日後、動物を、脾臓またはリンパ節組織の回収のために屠殺した。脾臓は、標準的な融合方法を使用して融合させ、２０プレートのハイブリドーマ細胞を産生した。一次スクリーニングは、ＣＤ３ｅタンパク質に続くペプチドへの結合をチェックすることによって、ＥＬＩＳＡを使用して実施した。１つのクローン、４Ｄ４を拡大、およびその後のサブクローニングプロトコールのために選択し、モノクローナルハイブリドーマを生成した。
[001006]ｉｎ ｖｉｔｒｏでのＣＤ３への抗ＣＤ３抗体分子の結合
[001007]この実施例では、例示的なヒト化抗ＣＤ３抗体分子ＢＫＭ００２０、ＢＫＭ００２５、ＢＫＭ００２８、ＢＫＭ００３８（本明細書に記載される）を、表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）を使用して、ヒトまたはカニクイザルＣＤ３ｅへのそれらの結合親和性について試験した。ＳＰＲ測定は、ＢＩＡｃｏｒｅ Ｔ２００を使用することによって実施した。各構築物を、２００ＲＵの応答まで、抗ヒトＦｃ抗体によってＣＭ５チップ上に固定化した。ヒトＣＤ３ｅ（Ａｃｒｏ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ ＣＤＥ－Ｈ５２２３）を５００ｎＭに希釈し、次いで、２倍希釈した。各濃度の分析物を、流速２０μｌ／ｍｉｎで、各抗体を固定化した表面に注入した。データは、１：１結合モデルを使用してフィットさせた。結合親和性の結果は、図２８に示す。ヒトＣＤ３ｅへの親和性は、親と比較して保存され、カニクイザルＣＤ３ｅへの親和性は、親抗体と比較して２～３倍低かった。
[001008]細胞上に発現されたＣＤ３への抗ＣＤ３抗体分子の結合
[001009]例示的なヒト化抗ＣＤ３抗体のＣＤ３発現Ｊｕｒｋａｔ細胞への結合は、ＦＡＣＳを使用して実施された。抗体は、１０μｇ／ｍｌから開始した一連の３倍希釈の濃度で試験し、ＡＦ６４７にコンジュゲートした抗ヒトＩｇＧ二次抗体を使用して検出した。図２９に示されるように、ヒト化抗ＣＤ３ｍＡｂは、ＣＤ３を発現するＪｕｒｋａｔ細胞への強い結合を示した。
実施例１７．抗カルレティキュリン（ＣＡＬＲ）抗体の生成
[001010]２匹のアルメニアンハムスター（８６および８７）を、ｍｕｔＣＡＬＲ５ｂｐｉｎｓ（ＢＪ０２８）抗原を用いて免疫化した。ハムスター＃８６を選択し、標準的な手順を使用して融合を実施した。融合により１２個のハイブリドーマプレートを産生し、ＥＬＩＳＡによってＢＪ０２８（ｍｕｔＣＡＬＲｉｎｓ）、ＢＪ０２７（野生型ＣＡＬＲ）およびＢＩＭ０１６７（ヒトＦｃに融合したＣＡＬＲ突然変異体ペプチド）への結合をスクリーニングした。１５のクローンを、拡大およびサブクローニングのためにさらに選択した。２つのクローンを、さらなる特徴付けおよびシークエンシングのために選択し、Ｖ遺伝子配列を得た。ハムスター配列は、ＣＤＲをヒトフレームワーク上に移植することによってさらにヒト化された。生じるヒト化ｍＡｂは、例えば上記のように、ＢｉａｃｏｒｅおよびＦＡＣＳを使用して結合を試験した。
実施例１８．α－ＴＲＢＶ６－５抗体の最適化
[001011]抗ＴＲＢＶ６－５抗体を最適化し、ヒトおよびカニクイザル抗原への親和性を改善し、熱安定性を改善し、化学安定性傾向を示す配列モチーフを除去した。ＳｃＦｖライブラリーは、無作為突然変異誘発（Ｃａｌｄｗｅｌｌら（１９９２年）Ｒａｎｄｏｍｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｇｅｎｅｓ ｂｙ ＰＣＲ ｍｕｔａｇｅｎｅｓｉｓ．ＰＣＲ Ｍｅｔｈ．４月．２：２８）か、またはＫｕｎｋｅｌ突然変異誘発の改変バージョン（Ｋｕｎｋｅｌ ＴＡ．（１９８５年）Ｒａｐｉｄ ａｎｄ ｅｆｆｉｃｉｅｎｔ ｓｉｔｅ－ｓｐｅｃｉｆｉｃ ｍｕｔａｇｅｎｅｓｉｓ ｗｉｔｈｏｕｔ ｐｈｅｎｏｔｙｐｉｃ ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ．ＰＮＡＳ ８２（２）：４８８～９２ページ）を使用して構築した。親和性改善のため、ヒトおよびカニクイザル抗原に対するライブラリー選択を、標準的なファージディスプレイ（Ｌｅｅ，ＣＭら（２００７年）Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ ｏｆ ｈｕｍａｎ ａｎｔｉｂｏｄｙ ｆｒａｇｍｅｎｔｓ ｂｙ ｐｈａｇｅ ｄｉｓｐｌａｙ． Ｎａｔｕｒｅ ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ２，３００１）およびイーストディスプレイ技術（Ｃｈａｏ Ｇら（２００６年）Ｉｓｏｌａｔｉｎｇ ａｎｄ ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ ｈｕｍａｎ ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ ｕｓｉｎｇ ｙｅａｓｔ ｓｕｒｆａｃｅ ｄｉｓｐｌａｙ．Ｎａｔｕｒｅ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ．１（２）：７５５～６９ページ）を使用して実施した。ファージまたはイースト集団の熱負荷を使用して、熱安定性が改善したクローンを選択した。選択は、ＥＬＩＳＡおよびフローサイトメトリーなどの標準的なスクリーニング法に従い、改善した特性を有する個々のクローンを同定した。ヒットシークエンシングおよび突然変異－活性相関の分析後、第２世代のライブラリーを、上記と同じ方法を使用して構築した。ライブラリー選択および個々のクローンスクリーニングを、より厳しい条件を適用して最大の活性を有するクローンを選択する改変を用いて、上記のように繰り返した。ヒットシークエンシングの後、ｓｃＦｖ遺伝子を、発現、精製、およびトリアージのため、生物学上関連がある抗体フォーマットへと再フォーマットした。
参考文献による組み込み
[001012]本明細書に記載されるすべての刊行物および特許は、個々の刊行物または特許の各々が、参照により組み込まれるように具体的におよび個別に指示されているかのように、それらの全体がこれにより参照により本明細書に組み込まれる。
均等物
[001013]当業者は、本明細書に記載される本発明の具体的な実施形態に対する多くの均等物を、単に日常的な実験を用いて認識するか、または確認することができる。このような均等物は、以下の特許請求の範囲に包含されることが意図される。
例示的な実施形態
[001014]任意の前述の多機能分子、核酸、ベクター、宿主細胞、または方法の追加の特徴は、以下の例示的な実施形態の１つまたは複数を含む。
[001015]当業者は、本明細書に記載される本発明の具体的な実施形態に対する多くの均等物を、単に日常的な実験を用いて認識するか、または確認することができる。このような均等物は、以下の例示的な実施形態に包含されることが意図される。
例示的な実施形態１
[001016]本開示は、とりわけ、（ｉ）カルレティキュリンタンパク質（例えば、野生型または突然変異体カルレティキュリンタンパク質）に結合する抗原結合性ドメインと；（ｉｉ）免疫細胞エンゲージャー（例えば、ＮＫ細胞エンゲージャー、Ｔ細胞エンゲージャー、Ｂ細胞エンゲージャー、樹状細胞エンゲージャー、もしくはマクロファージ細胞エンゲージャーから選択される）；（ｉｉｉ）サイトカイン分子；および／または（ｉｖ）間質改変部分のうちの１つ、２つまたはすべてとを含む新規な多特異性または多機能性分子に関する。用語「多特異性」または「多機能性」は、本明細書において交換可能に使用される。
[001017]理論に拘泥するものではないが、本明細書に開示される多特異性または多機能性分子は、免疫細胞（例えば、ＮＫ細胞、Ｔ細胞、Ｂ細胞、樹状細胞、もしくはマクロファージから選択される免疫エフェクター細胞）を、標的細胞、例えば、カルレティキュリンタンパク質（例えば、野生型もしくは突然変異体カルレティキュリンタンパク質）を発現するがん細胞に標的化（例えば、局在化、架橋、および／もしくは活性化）し、かつ／または腫瘍間質を変更する、例えば、がん部位付近の腫瘍微小環境を変更することが予期される。本明細書に記載される多特異性分子を使用して免疫細胞の近接性および／または活性を増加させることは、標的細胞（例えば、がん細胞）に対する免疫応答を増強させ、それによって、より効果的な療法（例えば、より効果的ながん療法）を実現することが予期される。理論に拘泥するものではないが、標的細胞（例えば、がん細胞）に対する標的化され、局在化された免疫応答は、本明細書に記載される多特異性分子の全身毒性の効果を低下させると考えられる。
[001018]したがって、前述の部分を含む多特異性分子（例えば、多特異性または多機能性抗体分子）、それをコードする核酸、前述の分子を産生する方法、および前述の分子を使用してがんを処置する方法が、とりわけ、本明細書で提供される。
[001019]一態様では、本開示は、試料または対象中のカルレティキュリン（例えば、野生型または突然変異体カルレティキュリン）を検出する方法であって、試料または対象を、本明細書に記載の抗カルレティキュリン抗体分子と接触させるステップ；ならびに抗体分子と試料または対象との複合体の形成を検出するステップを含み、それによってカルレティキュリン（例えば、野生型または突然変異体カルレティキュリン）を検出する、方法を特徴とする。
[001020]一部の実施形態では、カルレティキュリン（例えば、野生型または突然変異体カルレティキュリン）は、ｉｎ ｖｉｔｒｏまたはｉｎ ｖｉｖｏで検出される。
[001021]一部の実施形態では、方法は、参照試料または対象を、抗体分子と接触させるステップ；および抗体分子と参照試料または対象との複合体の形成を検出するステップをさらに含み、参照試料または対象と比較した、試料または対象における複合体の形成における変化、例えば統計学的に有意な変化は、試料または対象におけるカルレティキュリン（例えば、野生型または突然変異体カルレティキュリン）の存在を示す。
[001022]一部の実施形態では、方法は、対象から試料を取得するステップをさらに含む。
[001023]一部の実施形態では、試料は、血漿、組織（例えば、がん組織）、生検、血液（例えば、全血）、ＰＢＭＣ、骨髄、および／またはリンパ組織、例えばリンパ節のうちの１つまたは複数を含む。一部の実施形態では、試料は、凍結および／または固定されていない。一部の実施形態では、試料は、ホルマリン固定（例えば、ホルマリン固定、パラフィン包埋（ＦＦＰＥ））されている。一部の実施形態では、試料は、染色される（例えば、免疫組織化学による分析のため）。一部の実施形態では、試料は、凍結および／または固定されている。
[001024]一部の実施形態では、対象は、本明細書に記載の疾患または障害（例えば、がん、例えば、骨髄線維症）を有する、または有するリスクがある。
[001025]一部の実施形態では、方法は、例えば、マルチパネル法を使用する、フローサイトメトリー分析を実施するステップをさらに含む。一部の実施形態では、方法は、免疫組織化学（ＩＨＣ）分析、例えば、モノクロまたは多重染色フォーマットを実施するステップをさらに含む。一部の実施形態では、ＩＨＣ法は、明視野発色ＩＨＣを含む。実施形態では、明視野発色ＩＨＣ法は、例えば、異なる色素源によって直接標識される、一次抗体による抗原の直接検出を含む。一部の実施形態では、ＩＨＣ法は、蛍光ＩＨＣを含む。実施形態では、蛍光ＩＨＣ法は、例えば、異なる蛍光によって直接標識される、一次抗体による抗原の直接検出を含む。一部の実施形態では、方法は、試料、例えば、固定試料、例えばＦＦＰＥ試料に免疫組織化学を実施するステップをさらに含む。一部の実施形態では、方法は、生体試料からのカルレティキュリン＋（例えば、野生型カルレティキュリン＋または突然変異体カルレティキュリン＋）細胞のレベルを測定するステップ（例えば、カルレティキュリン＋（例えば、野生型カルレティキュリン＋または突然変異体カルレティキュリン＋）細胞が、例えば、参照試料または対象と比較して枯渇しているかどうかを決定するステップ）をさらに含む。一部の実施形態では、方法は、カルレティキュリン（例えば、野生型または突然変異体カルレティキュリン）の細胞内レベルを測定するステップをさらに含む。一部の実施形態では、方法は、カルレティキュリン（例えば、野生型または突然変異体カルレティキュリン）の膜レベルを測定するステップをさらに含む。
[001026]一部の実施形態では、方法は、本明細書に記載される２つまたはそれ以上の検出方法を組み合わせるステップを含む。実施形態では、方法は、核酸ベースの方法および抗体ベースの方法を含む。
[001027]一部の実施形態では、方法は、例えば、（例えば、本明細書に記載の抗体分子を用いた）処置後に、疾患または障害（例えば、がん、例えば、骨髄線維症）の予後、重症度、または存在もしくは非存在の変化について対象を評価するステップをさらに含む。
[001028]一部の実施形態では、抗体分子は、検出可能に標識される。一部の実施形態では、抗体分子は、抗カルレティキュリン（例えば、野生型または突然変異体カルレティキュリン）抗体分子である。
[001029]一態様では、本開示は、対象を評価する方法であって、対象からの試料（例えば、本明細書に記載の試料）を、本明細書に記載の抗カルレティキュリン（例えば、野生型または突然変異体カルレティキュリン）抗体分子と接触させるステップ；および
[001030]抗体分子と試料との複合体の形成を検出するステップを含み、それにより対象を評価する、方法を特徴とする。
[001031]一部の実施形態では、対象は、本明細書に記載の疾患または障害（例えば、がん、例えば、骨髄線維症）を有する、または有するリスクがある。一部の実施形態では、対象は、本明細書に記載の抗体分子で処置されていない。一部の実施形態では、対象は、本明細書に記載の抗体分子で処置されている。
[001032]一態様では、本開示は、本明細書に記載の抗カルレティキュリン（例えば、野生型または突然変異体カルレティキュリン）抗体分子と、例えば、本明細書に記載の方法に従って、試料または対象におけるカルレティキュリン（例えば、野生型または突然変異体カルレティキュリン）を検出する方法における使用のための使用説明書とを含むキットを特徴とする。
[001033]したがって、一態様では、本開示は、
（ｉ）カルレティキュリンタンパク質（例えば、野生型または突然変異体カルレティキュリンタンパク質）に結合する第１の抗原結合性ドメイン、例えば表４、表５、表６、表２４、表２５、表１６、表１７、表１８、または表１９のいずれか１つに開示されるカルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインと、
（ｉｉ）ＴＣＲβＶに結合する第２の抗原結合性ドメイン、例えば表３０、表３１、表３２、表３３、表１１、表１２、もしくは表１３のいずれか１つに開示される抗ＴＣＲβＶ抗原結合性ドメイン、またはＮＫｐ３０に結合する第２の抗原結合性ドメイン、例えば表７、表８、表３５、表３６、表９、表１０、もしくは表３４に開示される抗ＮＫｐ３０抗原結合性ドメインと
を含む、多機能性分子を特徴とする。
[001034]一部の実施形態では、第２の抗原結合性ドメインはＴＣＲβＶに結合する。
[001035]一部の実施形態では、第２の抗原結合性ドメインはＴ細胞を活性化するか、または第２の抗原結合性ドメインはＴ細胞を活性化しない。
[001036]一部の実施形態では、第２の抗原結合性ドメインはＴＣＲβＶ１２またはＴＣＲβＶ６（例えば、配列番号１０４４のアミノ酸配列を含む）に結合する。
[001037]一部の実施形態では、第２の抗原結合性ドメインは、表３０、表３１、表３２、表３３、表１１、表１２、または表１３に列挙される１つまたは複数のアミノ酸配列を含む。
[001038]一部の実施形態では、第２の抗原結合性ドメインは、
（ａ）重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）であって、
（ｉ）ＶＨが、表３０、表３１、表３３、表１１、表１２、もしくは表１３における重鎖相補性決定領域１（ＶＨＣＤＲ１）のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＨＣＤＲ１、表３０、表３１、表３３、表１１、表１２、もしくは表１３におけるＶＨＣＤＲ２のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＨＣＤＲ２、および／または表３０、表３１、表３３、表１１、表１２、もしくは表１３におけるＶＨＣＤＲ３のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＨＣＤＲ３を含み、
（ｉｉ）ＶＬが、表３０、表３１、表３３、表１１、表１２、もしくは表１３における軽鎖相補性決定領域１（ＶＬＣＤＲ１）のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＬＣＤＲ１、表３０、表３１、表３３、表１１、表１２、もしくは表１３におけるＶＬＣＤＲ２のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＬＣＤＲ２、および／または表３０、表３１、表３３、表１１、表１２、もしくは表１３におけるＶＬＣＤＲ３のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＬＣＤＲ３を含む、重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）；
（ｂ）重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）であって、
（ｉ）ＶＨが、配列番号３Ａの重鎖相補性決定領域１（ＶＨＣＤＲ１）アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号４ＡのＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号５ＡのＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を含み、かつ／または
（ｉｉ）ＶＬが、配列番号６Ａの軽鎖相補性決定領域１（ＶＨＣＤＲ１）アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号７ＡのＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号８ＡのＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を含む、重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）；
（ｃ）重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）であって、
（ｉ）ＶＨが、配列番号４５Ａの重鎖相補性決定領域１（ＶＨＣＤＲ１）アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号４６ＡのＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号４７ＡのＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を含み、かつ／または
（ｉｉ）ＶＬが、配列番号５１Ａの軽鎖相補性決定領域１（ＶＨＣＤＲ１）アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号５２ＡのＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号５３ＡのＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を含む、重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）；ならびに／あるいは
（ｄ）重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）であって、
（ｉ）ＶＨが、配列番号４８Ａの重鎖相補性決定領域１（ＶＨＣＤＲ１）アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号４９ＡのＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号５０ＡのＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を含み、かつ／または
（ｉｉ）ＶＬが、配列番号５４Ａの軽鎖相補性決定領域１（ＶＨＣＤＲ１）アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号５５ＡのＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号５６ＡのＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を含む、重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）
を含む。
[001039]一部の実施形態では、第２の抗原結合性ドメインは、
（ａ）重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）であって、
（ｉ）ＶＨが、表３０、表３１、表３３、表１１、表１２、もしくは表１３におけるＶＨのアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含み、かつ／または
（ｉｉ）ＶＬが、表３０、表３１、表３３、表１１、表１２、もしくは表１３におけるＶＬのアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含み、
（ｉｉｉ）ＶＨが、配列番号９Ａのアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含み、かつ／または
（ｉｖ）ＶＬが、配列番号１０Ａのアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含む、重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）；
（ｂ）重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）であって、
（ｉ）ＶＨが、配列番号９Ａのアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含み、かつ／または
（ｉｉ）ＶＬが、配列番号１１Ａのアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含む、重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）；ならびに／あるいは
（ｃ）重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）であって、
（ｉ）ＶＨが、配列番号１３１２Ａのアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含み、かつ／または
（ｉｉ）ＶＬが、配列番号１３１４Ａのアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含む、重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）
を含む。
[001040]一部の実施形態では、第２の抗原結合性ドメインは、
（ａ）重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）であって、
（ｉ）ＶＨが、配列番号１７Ａの重鎖相補性決定領域１（ＶＨＣＤＲ１）アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号１８ＡのＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号１９ＡのＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を含み、かつ／または
（ｉｉ）ＶＬが、配列番号２０Ａの軽鎖相補性決定領域１（ＶＨＣＤＲ１）アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号２１ＡのＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号２２ＡのＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を含む、重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）；
（ｂ）重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）であって、
（ｉ）ＶＨが、配列番号５７Ａの重鎖相補性決定領域１（ＶＨＣＤＲ１）アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号５８ＡのＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号５９ＡのＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を含み、かつ／または
（ｉｉ）ＶＬが、配列番号６３Ａの軽鎖相補性決定領域１（ＶＨＣＤＲ１）アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号６４ＡのＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号６５ＡのＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を含む、重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）；ならびに／あるいは
（ｃ）重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）であって、
（ｉ）ＶＨが、配列番号６０Ａの重鎖相補性決定領域１（ＶＨＣＤＲ１）アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号６１ＡのＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号６２ＡのＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を含み、かつ／または
（ｉｉ）ＶＬが、配列番号６６Ａの軽鎖相補性決定領域１（ＶＨＣＤＲ１）アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号６７ＡのＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号６８ＡのＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を含む、重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）
を含む。
[001041]一部の実施形態では、第２の抗原結合性ドメインは、
[001042]（ａ）重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）であって、
（ｉ）ＶＨが、配列番号１５Ａのアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含み、かつ／または
（ｉｉ）ＶＬが、配列番号１６Ａのアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含む、重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）；ならびに／あるいは
（ｂ）重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）であって、
（ｉ）ＶＨが、
配列番号２３Ａのアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）、
配列番号２４Ａのアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）、または
配列番号２５Ａのアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含み；かつ／または
（ｉｉ）ＶＬが、
配列番号２６Ａのアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）、
配列番号２７Ａのアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）、
配列番号２８Ａのアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）、
配列番号２９Ａのアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）、または
配列番号３０Ａのアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含む、重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）
を含む。
[001043]一部の実施形態では、多機能性分子は、
例えば、Ｎ末端からＣ末端まで、第１のＶＬおよび第１のＣＬを含む第１のポリペプチド、
例えば、Ｎ末端からＣ末端まで、第１のＶＨ、第１のＣＨ１、第１の二量体化ドメイン（例えば、第１のＦｃ）、およびＴＣＲ（例えば、ＴＣＲＶβ）に結合する第１の部分（例えば、ＴＣＲ（例えば、ＴＣＲＶβ）に結合する第１のｓｃＦｖ）を含む第２のポリペプチド、
例えば、Ｎ末端からＣ末端まで、第２のＶＨ、第２のＣＨ１、第２の二量体化ドメイン（例えば、第２のＦｃ）、および任意選択でＴＣＲ（例えば、ＴＣＲＶβ）に結合する第２の部分（例えば、ＴＣＲ（例えば、ＴＣＲＶβ）に結合する第２のｓｃＦｖ）を含む第３のポリペプチド、
例えば、Ｎ末端からＣ末端まで、第２のＶＬおよび第２のＣＬを含む第４のポリペプチド
を含み、
第１のＶＬおよび第１のＶＨは第１のカルレティキュリンタンパク質に結合する第１の抗原結合性ドメインを形成し、第２のＶＬおよび第２のＶＨは第２のカルレティキュリンタンパク質に結合する第３の抗原結合性ドメインを形成し、
任意選択で、第１および第２のカルレティキュリンタンパク質は配列番号６２８５、Ｄ１００１、または６２８６のアミノ酸配列を含み、
任意選択で、第１および第２のカルレティキュリン突然変異体タンパク質は、配列番号６３１３のアミノ酸配列を含む分子、または配列番号６３１４のアミノ酸配列を含む分子からそれぞれ独立して選択され、
任意選択で、多機能性分子は図３Ａまたは３Ｂの構成を含む。
[001044]一部の実施形態では、第２の抗原結合性ドメインはＮＫｐ３０に結合する。
[001045]一部の実施形態では、第２の抗原結合性ドメインは、ＮＫｐ３０に結合する（例えば、それを活性化させる）抗体分子、例えば抗原結合性ドメイン、またはリガンドから選択され、例えば、第２の抗原結合性ドメインが、ＮＫｐ３０に結合する（例えば、それを活性化させる）抗体分子またはリガンドである。
[001046]一部の実施形態では、第２の抗原結合性ドメインは、
（ｉ）表７、表３５、表９、表１０、もしくは表３４の重鎖相補性決定領域１（ＶＨＣＤＲ１）のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＨＣＤＲ１、表７、表３５、表９、表１０、もしくは表３４のＶＨＣＤＲ２のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＨＣＤＲ２、および／または表７、表３５、表９、表１０、もしくは表３４のＶＨＣＤＲ３のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域（ＶＨ）、ならびに／あるいは
（ｉｉ）表８、表３６、表９、表１０、もしくは表３４の軽鎖相補性決定領域１（ＶＬＣＤＲ１）のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＬＣＤＲ１、表８、表３６、表９、表１０、もしくは表３４のＶＬＣＤＲ２のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＬＣＤＲ２、および／または表８、表３６、表９、表１０、もしくは表３４のＶＬＣＤＲ３のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）
を含む。
[001047]一部の実施形態では、第２の抗原結合性ドメインは、
（ｉ）配列番号７３１３の重鎖相補性決定領域１（ＶＨＣＤＲ１）アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号６００１のＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号７３１５のＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；ならびに／あるいは
（ｉｉ）配列番号７３２６の軽鎖相補性決定領域１（ＶＬＣＤＲ１）アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号７３２７のＶＬＣＤＲ２アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号７３２９のＶＬＣＤＲ３アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）
を含む。
[001048]一部の実施形態では、第２の抗原結合性ドメインは、
（ｉ）配列番号７２９８もしくは７３００～７３０４のいずれかのアミノ酸配列（または配列番号７２９８もしくは７３００～７３０４のいずれかに対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨ；および／または
（ｉｉ）配列番号７２９９もしくは７３０５～７３０９のいずれかのアミノ酸配列（または配列番号７２９９もしくは７３０５～７３０９のいずれかに対して少なくとも約９３％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬ
を含む。
[001049]一部の実施形態では、第２の抗原結合性ドメインは、
（ｉ）配列番号７３０２のアミノ酸配列（または７３０２に対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨ、および配列番号７３０５のアミノ酸配列（または７３０５に対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬ；または
（ｉｉ）配列番号７３０２のアミノ酸配列（または７３０２に対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨ、および配列番号７３０９のアミノ酸配列（または７３０９に対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬ
を含む。
[001050]一部の実施形態では、第２の抗原結合性ドメインは、
（ｉ）配列番号７３１０のアミノ酸配列（または７３１０に対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）；または
（ｉｉ）配列番号７３１１のアミノ酸配列（または７３１１に対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）
を含む。
[001051]一部の実施形態では、第２の抗原結合性ドメインは、
（ｉ）配列番号６０００の重鎖相補性決定領域１（ＶＨＣＤＲ１）アミノ酸配列、配列番号６００１のＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列、および／または配列番号６００２のＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）、ならびに
（ｉｉ）配列番号６０６３の軽鎖相補性決定領域１（ＶＬＣＤＲ１）アミノ酸配列、配列番号６０６４のＶＬＣＤＲ２アミノ酸配列、および／または配列番号７２９３のＶＬＣＤＲ３アミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）
を含む。
[001052]一部の実施形態では、第２の抗原結合性ドメインは、
（１）表７、表３５、表９、表１０、もしくは表３４の重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）のアミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＨＦＷＲ１、表７、表３５、表９、表１０、もしくは表３４のＶＨＦＷＲ２のアミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＨＦＷＲ２、表７、表３５、表９、表１０、もしくは表３４のＶＨＦＷＲ３のアミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＨＦＷＲ３、または表７、表３５、表９、表１０、もしくは表３４のＶＨＦＷＲ４のアミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＨＦＷＲ４を含む重鎖可変領域（ＶＨ）、および／あるいは
（２）表８、表３６、表９、表１０、もしくは表３４の軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）のアミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＬＦＷＲ１、表８、表３６、表９、表１０、もしくは表３４のＶＬＦＷＲ２のアミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＬＦＷＲ２、表８、表３６、表９、表１０、もしくは表３４のＶＬＦＷＲ３のアミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＬＦＷＲ３、または表８、表３６、表９、表１０、もしくは表３４のＶＬＦＷＲ４のアミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＬＦＷＲ４を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）
を含む。
[001053]一部の実施形態では、第２の抗原結合性ドメインは、
（１）配列番号６００３の重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６００４のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６００５のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列、または配列番号６００６のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）、および
（３）配列番号６０６６の軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６０６７のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号７２９２のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列、または配列番号６０６９のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）
を含む。
[001054]一部の実施形態では、第２の抗原結合性ドメインは、
（ｉ）表７、表３５、表９、表１０、もしくは表３４のＶＨのアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨ、および／または
（ｉｉ）表８、表３６、表９、表１０、もしくは表３４のＶＬのアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約９３％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬ
を含む。
[001055]一部の実施形態では、第２の抗原結合性ドメインは、表１０の重鎖のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含む重鎖を含む。
[001056]一部の実施形態では、第２の抗原結合性ドメインは、表１０の軽鎖のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含む軽鎖を含む。
[001057]一部の実施形態では、第２の抗原結合性ドメインは、表１０の重鎖のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含む重鎖、および表１０の軽鎖のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含む軽鎖を含む。
[001058]一部の実施形態では、多特異性分子は、
例えば、Ｎ末端からＣ末端まで、第１のＶＬおよび第１のＣＬを含む第１のポリペプチド、
例えば、Ｎ末端からＣ末端まで、第１のＶＨ、第１のＣＨ１、第１の二量体化ドメイン（例えば、第１のＦｃ）、およびＮＫｐ３０に結合する第１の部分（例えば、ＮＫｐ３０に結合する第１の抗体分子またはリガンド）を含む第２のポリペプチド、
例えば、Ｎ末端からＣ末端まで、第２のＶＨ、第２のＣＨ１、第２の二量体化ドメイン（例えば、第２のＦｃ）、および任意選択でＮＫｐ３０に結合する第２の部分（例えば、ＮＫｐ３０に結合する第２の抗体分子またはリガンド）を含む第３のポリペプチド、
例えば、Ｎ末端からＣ末端まで、第２のＶＬおよび第２のＣＬを含む第４のポリペプチド
を含み、
第１のＶＬおよび第１のＶＨは、第１のカルレティキュリンタンパク質に結合する第１の抗原結合性ドメインを形成し、第２のＶＬおよび第２のＶＨは第２のカルレティキュリンタンパク質に結合する第３の抗原結合性ドメインを形成し、
任意選択で、第１および第２のカルレティキュリンタンパク質は配列番号６２８５、Ｄ１００１、または６２８６のアミノ酸配列を含み、
任意選択で、第１および第２のカルレティキュリン突然変異体タンパク質は、配列番号６３１３のアミノ酸配列を含む分子、または配列番号６３１４のアミノ酸配列を含む分子からそれぞれ独立して選択され、
任意選択で、多機能性分子は図３Ａまたは３Ｂの構成を含む。
[001059]一部の実施形態では、カルレティキュリンタンパク質は配列番号６２８５～６３１２またはＤ１００１から選択されるアミノ酸配列を含み、任意選択で、カルレティキュリンタンパク質は配列番号６３１３～６３４６またはＤ１００２～Ｄ１００３から選択されるアミノ酸配列を含む。
[001060]一部の実施形態では、カルレティキュリンタンパク質は配列番号６２８５またはＤ１００１のアミノ酸配列を含む。
[001061]一部の実施形態では、カルレティキュリンタンパク質は配列番号６２８６のアミノ酸配列を含む。
[001062]一部の実施形態では、第１の抗原結合性ドメインはカルレティキュリンタンパク質のＣ末端内に位置するエピトープに結合し、任意選択で、第１の抗原結合性ドメインは配列番号６２８５、Ｄ１００１、または６２８６のアミノ酸配列内に位置するエピトープに結合する。
[001063]一部の実施形態では、多特異性分子は、
第２のカルレティキュリンタンパク質に結合する第３の抗原結合性ドメインであって、例えば、第２のカルレティキュリン突然変異体タンパク質が配列番号６２８５、Ｄ１００１または６２８６のアミノ酸配列を含む、第３の抗原結合性ドメイン
をさらに含み、任意選択で、
（ｉ）第３の抗原結合性ドメインは第１の抗原結合性ドメインと異なるか、または
（ｉｉ）第３の抗原結合性ドメインは第１の抗原結合性ドメインと同じである。
[001064]一部の実施形態では、第２のカルレティキュリン分子は第１の抗原結合性ドメインによって結合されるカルレティキュリン分子と同じである。
[001065]一部の実施形態では、第２のカルレティキュリン分子は第１の抗原結合性ドメインによって結合されるカルレティキュリン分子と異なる。
[001066]一部の実施形態では、第２のカルレティキュリンタンパク質は配列番号６２８５～６３１２またはＤ１００１から選択されるアミノ酸配列を含み、任意選択で、第２のカルレティキュリンタンパク質は配列番号６３１３～６３４６またはＤ１００２～Ｄ１００３から選択されるアミノ酸配列を含む。
[001067]一部の実施形態では、第１の抗原結合性ドメインによって結合されるカルレティキュリンタンパク質は配列番号６２８５またはＤ１００１のアミノ酸配列を含み、第２のカルレティキュリンタンパク質は配列番号６２８６のアミノ酸配列を含む。
[001068]一部の実施形態では、第３の抗原結合性ドメインは第２のカルレティキュリンタンパク質のＣ末端内に位置するエピトープに結合し、任意選択で、第３の抗原結合性ドメインは配列番号６２８５、Ｄ１００１、または６２８６のアミノ酸配列内に位置するエピトープに結合する。
[001069]一部の実施形態では、第１の抗原結合性ドメインは、
（ｉ）表４、表２４、表２５、もしくは表１７における重鎖相補性決定領域１（ＶＨＣＤＲ１）のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＨＣＤＲ１、表４、表２４、表２５、もしくは表１７におけるＶＨＣＤＲ２のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＨＣＤＲ２、および／または表４、表２４、表２５、もしくは表１７におけるＶＨＣＤＲ３のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；
（ｉｉ）表５、表２４、表２５、もしくは表１８における軽鎖相補性決定領域１（ＶＬＣＤＲ１）のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＨＣＤＲ１、表５、表２４、表２５、もしくは表１８におけるＶＬＣＤＲ２のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＨＣＤＲ２、および／または表５、表２４、表２５、もしくは表１８におけるＶＬＣＤＲ３のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＨＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；
（ｉｉｉ）表２４、表２５、もしくは表１６におけるＶＨのアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨ；
（ｉｖ）表２４、表２５、もしくは表１６におけるＶＬのアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約９３％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬ；
（ｖ）表４もしくは表６における重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、もしくは９つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＨＦＷＲ１、表４もしくは表６におけるＶＨＦＷＲ２のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、もしくは９つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＨＦＷＲ２、表４もしくは表６におけるＶＨＦＷＲ３のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、もしくは９つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＨＦＷＲ３、および／または表４もしくは表６におけるＶＨＦＷＲ４のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、もしくは９つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＨＦＷＲ４を含むＶＨ、ならびに／あるいは
（ｖｉ）表５もしくは表６における軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、もしくは９つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＬＦＷＲ１、表５もしくは表６におけるＶＬＦＷＲ２のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、もしくは９つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＬＦＷＲ２、表５もしくは表６におけるＶＬＦＷＲ３のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、もしくは９つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＬＦＷＲ３、および／または表５もしくは表６におけるＶＬＦＷＲ４のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、もしくは９つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＬＦＷＲ４を含むＶＬ
を含む。
[001070]一部の実施形態では、多機能性分子は腫瘍標的化部分をさらに含む。
[001071]一部の実施形態では、腫瘍標的化部分は腫瘍抗原に結合する。
[001072]一部の実施形態では、腫瘍抗原は、Ｇ６Ｂ、ＣＤ３４、ＣＤ４１、Ｐ－セレクチン、Ｃｌｅｃ２、ｃＫＩＴ、ＦＬＴ３、ＭＰＬ、ＩＴＧＢ３、ＩＴＧＢ２、ＧＰ５、ＧＰ６、ＧＰ９、ＧＰ１ＢＡ、ＤＳＣ２、ＦＣＧＲ２Ａ、ＴＮＦＲＳＦ１０Ａ、ＴＮＦＲＳＦ１０Ｂ、またはＴＭ４ＳＦ１から選択される。
[001073]一部の実施形態では、腫瘍標的化部分は、例えば、Ｇ６Ｂ、ＣＤ３４、ＣＤ４１、Ｐ－セレクチン、Ｃｌｅｃ２、ｃＫＩＴ、ＦＬＴ３、ＭＰＬ、ＩＴＧＢ３、ＩＴＧＢ２、ＧＰ５、ＧＰ６、ＧＰ９、ＧＰ１ＢＡ、ＤＳＣ２、ＦＣＧＲ２Ａ、ＴＮＦＲＳＦ１０Ａ、ＴＮＦＲＳＦ１０Ｂ、またはＴＭ４ＳＦ１から選択される腫瘍抗原に結合する抗体分子を含む。
[001074]一部の実施形態では、腫瘍標的化部分は、例えば、表３８または表２０に列挙されるＶＨおよび／またはＶＬ配列を含む。
[001075]一部の実施形態では、多機能性分子は、非腫瘍細胞よりも骨髄増殖性新生物細胞に優先的に結合し、任意選択で、多機能性分子と骨髄増殖性新生物細胞との結合は、多機能性分子と非腫瘍細胞との結合よりも１０、２０、３０、４０、５０倍を超えて大きい。
[001076]一部の実施形態では、骨髄増殖性新生物細胞は、骨髄線維症細胞、本態性血小板血症細胞、真性赤血球増加症細胞、または慢性骨髄がん細胞から選択され、任意選択で、
骨髄増殖性新生物細胞はＪＡＫ２ Ｖ６１７Ｆ突然変異を含まないか、または
骨髄増殖性新生物細胞はＭＰＬ突然変異を含まない。
[001077]一部の実施形態では、多特異性分子は、リンカー、例えば、第１の抗原結合性ドメインと第２の抗原結合性ドメインとの間のリンカーをさらに含む。
[001078]一部の実施形態では、リンカーは、切断性リンカー、非切断性リンカー、ペプチドリンカー、可撓性リンカー、剛性リンカー、ヘリックスリンカー、または非ヘリックスリンカーから選択される。
[001079]一部の実施形態では、リンカーはペプチドリンカーである。
[001080]一部の実施形態では、ペプチドリンカーはＧｌｙおよびＳｅｒを含む。
[001081]一部の実施形態では、ペプチドリンカーは、配列番号６２１４～６２１７、または６２２０～６２２１および７７～７８から選択されるアミノ酸配列を含む。
[001082]別の態様では、本開示は、本明細書に記載される多機能性分子をコードする核酸分子を提供する。
[001083]別の態様では、本開示は、本明細書に記載される核酸分子を含むベクター、例えば、発現ベクターを提供する。
[001084]別の態様では、本開示は、本明細書に記載される核酸分子またはベクターを含む宿主細胞を提供する。
[001085]別の態様では、本開示は、本明細書に記載される多機能性分子を作製する、例えば、産生する方法であって、適切な条件、例えば、遺伝子発現および／またはホモもしくはヘテロ二量体化に適した条件下で、本明細書に記載される宿主細胞を培養するステップを含む、方法を提供する。
[001086]別の態様では、本開示は、本明細書に記載される多機能性分子と、薬学的に許容される担体、賦形剤または安定化剤とを含む医薬組成物を提供する。
[001087]別の態様では、本開示は、がんを処置する方法であって、それを必要とする対象に、本明細書に開示される多機能性分子を投与するステップを含み、多機能性分子ががんを処置するのに有効な量で投与される、方法を提供する。
[001088]別の態様では、本開示は、がんを処置する際における、本明細書に記載される多機能性分子の使用を提供する。別の態様では、本開示は、がんを処置する際における使用のための、本明細書に開示される多機能性分子を提供する。
[001089]一部の実施形態では、対象は第１および／または第２のカルレティキュリンタンパク質を発現するがん細胞を有する。
[001090]一部の実施形態では、対象はＪＡＫ２ Ｖ６１７Ｆ突然変異を有する。
[001091]一部の実施形態では、対象はＪＡＫ２ Ｖ６１７Ｆ突然変異を有しない。
[001092]一部の実施形態では、対象はＭＰＬ突然変異を有する。
[001093]一部の実施形態では、対象はＭＰＬ突然変異を有しない。
[001094]一部の実施形態では、がんは血液がんであり、任意選択で、がんは、骨髄増殖性新生物、例えば、原発性もしくは特発性骨髄線維症（ＭＦ）、本態性血小板増加症（ＥＴ）、真性赤血球増加症（ＰＶ）、または慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）であり、任意選択で、がんは骨髄線維症である。
[001095]一部の実施形態では、がんは固形腫瘍がんである。
[001096]一部の実施形態では、方法または使用は第２の治療処置を施すステップをさらに含む。
[001097]一部の実施形態では、第２の治療処置は、治療剤（例えば、化学療法剤、生物学的製剤、ホルモン療法）、放射線、または外科手術を含む。
[001098]一部の実施形態では、治療剤は化学療法剤または生物学的製剤から選択される。
[001099]別の態様では、本開示は、
（ｉ）カルレティキュリンタンパク質（例えば、野生型または突然変異体カルレティキュリンタンパク質）に結合する第１の抗原結合性ドメインと、
（ｉｉ）（ａ）Ｔ細胞エンゲージャー、ＮＫ細胞エンゲージャー、Ｂ細胞エンゲージャー、樹状細胞エンゲージャー、もしくはマクロファージ細胞エンゲージャーから選択される免疫細胞エンゲージャー；
（ｂ）サイトカイン分子；
（ｃ）間質改変部分；または
（ｄ）例えば、Ｇ６Ｂ、ＣＤ３４、ＣＤ４１、Ｐ－セレクチン、Ｃｌｅｃ２、ｃＫＩＴ、ＦＬＴ３、ＭＰＬ、ＩＴＧＢ３、ＩＴＧＢ２、ＧＰ５、ＧＰ６、ＧＰ９、ＧＰ１ＢＡ、ＤＳＣ２、ＦＣＧＲ２Ａ、ＴＮＦＲＳＦ１０Ａ、ＴＮＦＲＳＦ１０Ｂ、もしくはＴＭ４ＳＦ１から選択される腫瘍抗原に結合する腫瘍標的化部分
のうちの１つ、２つ、またはすべてと
を含む多機能性分子（例えば、それをコードするポリペプチドまたは核酸）を特徴とする。
[001100]ある態様では、本開示は、
（ｉ）カルレティキュリンタンパク質（例えば、野生型または突然変異体カルレティキュリンタンパク質）に結合する第１の抗原結合性ドメインと、
（ｉｉ）免疫細胞エンゲージャーを含む第２の抗原結合性ドメイン（例えば、Ｔ細胞エンゲージャー、例えば、本明細書に記載される、例えば、ＴＣＲβＶに結合する抗原結合性ドメイン）と
を含む多機能性分子（例えば、それをコードするポリペプチドまたは核酸）を特徴とする。
[001101]ある態様では、本開示は、
（ｉ）カルレティキュリンタンパク質（例えば、野生型または突然変異体カルレティキュリンタンパク質）に結合する第１の抗原結合性ドメインと、
（ｉｉ）例えば、Ｇ６Ｂ、ＣＤ３４、ＣＤ４１、Ｐ－セレクチン、Ｃｌｅｃ２、ｃＫＩＴ、ＦＬＴ３、ＭＰＬ、ＩＴＧＢ３、ＩＴＧＢ２、ＧＰ５、ＧＰ６、ＧＰ９、ＧＰ１ＢＡ、ＤＳＣ２、ＦＣＧＲ２Ａ、ＴＮＦＲＳＦ１０Ａ、ＴＮＦＲＳＦ１０Ｂ、またはＴＭ４ＳＦ１から選択される腫瘍抗原に結合する腫瘍標的化部分を含む第２の抗原結合性ドメインと
を含む多機能性分子（例えば、それをコードするポリペプチドまたは核酸）を特徴とする。
[001102]ある態様では、本開示は、
（ｉ）カルレティキュリンタンパク質（例えば、野生型または突然変異体カルレティキュリンタンパク質）に結合する第１の抗原結合性ドメインと、
（ｉｉ）免疫細胞エンゲージャーを含む第２の抗原結合性ドメイン（例えば、Ｔ細胞エンゲージャー、例えば、本明細書に記載される、例えば、ＴＣＲβＶに結合する抗原結合性ドメイン、例えば、本明細書に記載される抗ＴＣＲβＶ抗体分子）と、
（ｉｉｉ）例えば、Ｇ６Ｂ、ＣＤ３４、ＣＤ４１、Ｐ－セレクチン、Ｃｌｅｃ２、ｃＫＩＴ、ＦＬＴ３、ＭＰＬ、ＩＴＧＢ３、ＩＴＧＢ２、ＧＰ５、ＧＰ６、ＧＰ９、ＧＰ１ＢＡ、ＤＳＣ２、ＦＣＧＲ２Ａ、ＴＮＦＲＳＦ１０Ａ、ＴＮＦＲＳＦ１０Ｂ、またはＴＭ４ＳＦ１から選択される腫瘍抗原に結合する腫瘍標的化部分を含む第３の抗原結合性ドメインと
を含む多機能性分子（例えば、それをコードするポリペプチドまたは核酸）を特徴とする。
[001103]一部の実施形態では、多機能性分子は、サイトカイン分子またはサイトカイン分子の調節薬、例えば、本明細書に記載される、例えば、ＴＧＦ－β阻害剤をさらに含む。
[001104]一部の実施形態では、多機能性分子は、ＮＫ細胞エンゲージャー、例えば、本明細書に記載される、例えば、Ｎｋｐ３０に結合する抗原結合性ドメインをさらに含む。
[001105]一部の実施形態では、カルレティキュリンタンパク質（例えば、野生型または突然変異体カルレティキュリンタンパク質）は配列番号６２８５、Ｄ１００１または６２８６のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、野生型カルレティキュリンタンパク質は配列番号６２８５またはＤ１００１のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、カルレティキュリン突然変異体タンパク質は配列番号６２８６のアミノ酸配列を含む。
[001106]一部の実施形態では、第１の抗原結合性ドメインは、配列番号６２２４の重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６２２６のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６２２８のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列、または配列番号６２３０のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）を含む。一部の実施形態では、第１の抗原結合性ドメインは、配列番号６２３２の重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６２３４のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６２３６のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列、または配列番号６２３０のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）を含む。一部の実施形態では、第１の抗原結合性ドメインは、配列番号６２３８の軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６２４０のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６２４２のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列、または配列番号６２４４のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む。
[001107]一部の実施形態では、カルレティキュリンタンパク質（例えば、野生型または突然変異体カルレティキュリンタンパク質）は配列番号６２８５～６３１２またはＤ１００１から選択されるアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、カルレティキュリンタンパク質（例えば、野生型または突然変異体カルレティキュリンタンパク質）は配列番号６３１３～６３４６またはＤ００２～Ｄ１００３から選択されるアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、カルレティキュリンタンパク質（例えば、野生型または突然変異体カルレティキュリンタンパク質）は、表２または３に開示されるカルレティキュリンタンパク質（例えば、野生型または突然変異体カルレティキュリンタンパク質）である。一部の実施形態では、カルレティキュリンタンパク質（例えば、野生型または突然変異体カルレティキュリンタンパク質）は配列番号６２８７のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、カルレティキュリンタンパク質（例えば、野生型または突然変異体カルレティキュリンタンパク質）は配列番号６３１３のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、カルレティキュリンタンパク質（例えば、野生型または突然変異体カルレティキュリンタンパク質）は配列番号６２８８のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、カルレティキュリンタンパク質（例えば、野生型または突然変異体カルレティキュリンタンパク質）は配列番号６３１４のアミノ酸配列を含む。
[001108]一部の実施形態では、多機能性分子は、第２のカルレティキュリンタンパク質（例えば、野生型または突然変異体カルレティキュリンタンパク質）に優先的に結合する第２の抗原結合性ドメインをさらに含む。一部の実施形態では、第２のカルレティキュリンタンパク質（例えば、野生型または突然変異体カルレティキュリンタンパク質）は配列番号６２８６のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、第２の抗原結合性ドメインは第１の抗原結合性ドメインと異なる。一部の実施形態では、第２の抗原結合性ドメインは第１の抗原結合性ドメインと同じである。一部の実施形態では、第２のカルレティキュリンタンパク質（例えば、野生型または突然変異体カルレティキュリンタンパク質）は配列番号６２８７～６３１２から選択されるアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、第２のカルレティキュリンタンパク質（例えば、野生型または突然変異体カルレティキュリンタンパク質）は配列番号６３１３～６３４６またはＤ１００２～Ｄ１００３から選択されるアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、第２のカルレティキュリンタンパク質（例えば、野生型または突然変異体カルレティキュリンタンパク質）は、表２または３に開示されるカルレティキュリンタンパク質（例えば、野生型または突然変異体カルレティキュリンタンパク質）である。一部の実施形態では、第２のカルレティキュリンタンパク質は配列番号６２８７のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、第２のカルレティキュリンタンパク質は配列番号６３１３のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、第２のカルレティキュリンタンパク質は配列番号６２８８のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、第２のカルレティキュリンタンパク質は配列番号６３１４のアミノ酸配列を含む。
[001109]一部の実施形態では、第１のカルレティキュリンタンパク質（例えば、野生型または突然変異体カルレティキュリンタンパク質）は１型カルレティキュリンタンパク質（例えば、野生型または突然変異体カルレティキュリンタンパク質）であり、第２のカルレティキュリンタンパク質（例えば、野生型または突然変異体カルレティキュリンタンパク質）は２型カルレティキュリンタンパク質（例えば、野生型または突然変異体カルレティキュリンタンパク質）である。一部の実施形態では、第１のカルレティキュリンタンパク質は配列番号６２８７のアミノ酸配列を含み、第２のカルレティキュリンタンパク質は配列番号６２８８のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、第１のカルレティキュリンタンパク質は配列番号６３１３のアミノ酸配列を含み、第１のカルレティキュリンタンパク質は配列番号６３１４のアミノ酸配列を含む。
[001110]一部の実施形態では、野生型カルレティキュリンタンパク質は配列番号６２８５またはＤ１００１のアミノ酸配列を含む。
[001111]一部の実施形態では、第１の抗原結合性ドメインは、第１のカルレティキュリンタンパク質（例えば、突然変異体カルレティキュリンタンパク質）および野生型カルレティキュリンタンパク質に対してほぼ同じ親和性（例えば、等しい親和性）を有する。
[001112]一部の実施形態では、第２の抗原結合性ドメインは、第２のカルレティキュリンタンパク質（例えば、突然変異体カルレティキュリンタンパク質）および野生型カルレティキュリンタンパク質に対してほぼ同じ親和性（例えば、等しい親和性）を有する。
[001113]一部の実施形態では、第１の抗原結合性ドメインは、野生型カルレティキュリンタンパク質に対してより第１のカルレティキュリン突然変異体タンパク質に対してより高い親和性を有する。一部の実施形態では、第１の抗原結合性ドメインと第１のカルレティキュリン突然変異体タンパク質との結合に関するＫＤは、第１の抗原結合性ドメインと野生型カルレティキュリンタンパク質との結合に関するＫＤの４０％、３０％、２０％、１０％、１％、０．１％、または０．０１％以下である。一部の実施形態では、第１の抗原結合性ドメインは第１のカルレティキュリン突然変異体タンパク質のＣ末端内に位置するエピトープに結合する。一部の実施形態では、第１の抗原結合性ドメインは配列番号６２８６のアミノ酸配列内に位置するエピトープに結合する。一部の実施形態では、第１の抗原結合性ドメインは野生型カルレティキュリンタンパク質に結合しない。一部の実施形態では、野生型カルレティキュリンタンパク質は配列番号６２８５またはＤ１００１のアミノ酸配列を含む。
[001114]一部の実施形態では、第２の抗原結合性ドメインは、野生型カルレティキュリンタンパク質に対してより第２のカルレティキュリン突然変異体タンパク質に対してより高い親和性を有する。一部の実施形態では、第２の抗原結合性ドメインと第２のカルレティキュリン突然変異体タンパク質との結合に関するＫＤは、第２の抗原結合性ドメインと野生型カルレティキュリンタンパク質との結合に関するＫＤの４０％、３０％、２０％、１０％、１％、０．１％、または０．０１％以下である。一部の実施形態では、第２の抗原結合性ドメインは第２のカルレティキュリン突然変異体タンパク質のＣ末端内に位置するエピトープに結合する。一部の実施形態では、第２の抗原結合性ドメインは配列番号６２８６のアミノ酸配列内に位置するエピトープに結合する。一部の実施形態では、第２の抗原結合性ドメインは野生型カルレティキュリンタンパク質に結合しない。一部の実施形態では、野生型カルレティキュリンタンパク質は配列番号６２８５またはＤ１００１のアミノ酸配列を含む。
[001115]一部の実施形態では、多機能性分子は非腫瘍細胞よりも骨髄増殖性新生物細胞に優先的に結合する。一部の実施形態では、多機能性分子と骨髄増殖性新生物細胞との結合は、多機能性分子と非腫瘍細胞との結合よりも１０、２０、３０、４０、５０倍を超えて大きい。一部の実施形態では、骨髄増殖性新生物細胞は、骨髄線維症細胞、本態性血小板血症細胞、真性赤血球増加症細胞、または慢性骨髄がん細胞から選択される。一部の実施形態では、骨髄増殖性新生物細胞はＪＡＫ２ Ｖ６１７Ｆ突然変異を含まない。一部の実施形態では、骨髄増殖性新生物細胞はＭＰＬ突然変異を含まない。
[001116]一部の実施形態では、第１および／または第２の抗原結合性ドメインは、配列番号６２５３の重鎖相補性決定領域１（ＶＨＣＤＲ１）アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号６２５４のＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号６２５５のＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を含む重鎖可変領域（ＶＨ）を含む。一部の実施形態では、第１および／または第２の抗原結合性ドメインは、配列番号６２５９の軽鎖相補性決定領域１（ＶＬＣＤＲ１）アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号６２６０のＶＬＣＤＲ２アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号６２６１のＶＬＣＤＲ３アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む。
[001117]一部の実施形態では、第１および／または第２の抗原結合性ドメインは、
（ｉ）配列番号６２５３の重鎖相補性決定領域１（ＶＨＣＤＲ１）アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号６２５４のＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号６２５５のＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を含む重鎖可変領域（ＶＨ）、ならびに
（ｉｉ）配列番号６２５９の軽鎖相補性決定領域１（ＶＬＣＤＲ１）アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号６２６０のＶＬＣＤＲ２アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号６２６１のＶＬＣＤＲ３アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）
を含む。
[001118]一部の実施形態では、第１および／または第２の抗原結合性ドメインは、配列番号６２５３のＶＨＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号６２５４のＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列、および配列番号６２５５のＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列を含むＶＨを含む。一部の実施形態では、第１および／または第２の抗原結合性ドメインは、配列番号６２５９のＶＬＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号６２６０のＶＬＣＤＲ２アミノ酸配列、および配列番号６２６１のＶＬＣＤＲ３アミノ酸配列を含むＶＬを含む。
[001119]一部の実施形態では、第１および／または第２の抗原結合性ドメインは、
（ｉ）配列番号６２５３のＶＨＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号６２５４のＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列、および配列番号６２５５のＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列を含むＶＨ、ならびに
（ｉｉ）配列番号６２５９のＶＬＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号６２６０のＶＬＣＤＲ２アミノ酸配列、および配列番号６２６１のＶＬＣＤＲ３アミノ酸配列を含むＶＬ
を含む。
[001120]一部の実施形態では、第１および／または第２の抗原結合性ドメインは、配列番号６２２４の重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６２２６のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６２２８のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列、および／または配列番号６２３０のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＨを含む。一部の実施形態では、第１および／または第２の抗原結合性ドメインは、配列番号６２３８の軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６２４０のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６２４２のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列、および／または配列番号６２４４のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＬを含む。
[001121]一部の実施形態では、第１および／または第２の抗原結合性ドメインは、
（ｉ）配列番号６２２４の重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６２２６のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６２２８のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列、および／または配列番号６２３０のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＨ、ならびに
（ｉｉ）配列番号６２３８の軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６２４０のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６２４２のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列、および／または配列番号６２４４のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＬ
を含む。
[001122]一部の実施形態では、第１および／または第２の抗原結合性ドメインは、配列番号６２６３のＶＨＦＷＲ１アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号６２６４のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号６２６５のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、もしくは１１以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号２２８のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＨを含む。一部の実施形態では、第１および／または第２の抗原結合性ドメインは、配列番号６２７７のＶＬＦＷＲ１アミノ酸配列（または１つ、２つ、もしくは３つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号６２７８のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列（または１つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号６２７９のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列（または１つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号６２８０のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＬを含む。
[001123]一部の実施形態では、第１および／または第２の抗原結合性ドメインは、
（ｉ）配列番号６２６３のＶＨＦＷＲ１アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号６２６４のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号６２６５のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、もしくは１１以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号２２８のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＨ、ならびに
（ｉｉ）配列番号６２７７のＶＬＦＷＲ１アミノ酸配列（または１つ、２つ、もしくは３つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号６２７８のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列（または１つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号６２７９のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列（または１つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号６２８０のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＬ
を含む。
[001124]一部の実施形態では、第１および／または第２の抗原結合性ドメインは、配列番号６２６３のＶＨＦＷＲ１アミノ酸配列、配列番号６２６４のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６２６５のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列、および／または配列番号２２８のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＨを含む。一部の実施形態では、第１および／または第２の抗原結合性ドメインは、配列番号６２７７のＶＬＦＷＲ１アミノ酸配列、配列番号６２７８のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６２７９のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列、および／または配列番号６２８０のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＬを含む。
[001125]一部の実施形態では、第１および／または第２の抗原結合性ドメインは、
（ｉ）配列番号６２６３のＶＨＦＷＲ１アミノ酸配列、配列番号６２６４のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６２６５のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列、および／または配列番号２２８のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＨ、ならびに
（ｉｉ）配列番号６２７７のＶＬＦＷＲ１アミノ酸配列、配列番号６２７８のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６２７９のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列、および／または配列番号６２８０のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＬ
を含む。
[001126]一部の実施形態では、第１および／または第２の抗原結合性ドメインは、配列番号６２４７のアミノ酸配列（または配列番号６２４７に対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨを含む。一部の実施形態では、第１および／または第２の抗原結合性ドメインは、配列番号６２４９のアミノ酸配列（または配列番号６２４９に対して少なくとも約９３％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬを含む。
[001127]一部の実施形態では、第１および／または第２の抗原結合性ドメインは、
（ｉ）配列番号６２４７のアミノ酸配列（または配列番号６２４７に対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨ、および
（ｉｉ）配列番号６２４９のアミノ酸配列（または配列番号６２４９に対して少なくとも約９３％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬ
を含む。
[001128]一部の実施形態では、第１および／または第２の抗原結合性ドメインは、配列番号６２４７のアミノ酸配列を含むＶＨを含む。一部の実施形態では、第１および／または第２の抗原結合性ドメインは、配列番号６２４９のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、第１および／または第２の抗原結合性ドメインは、（ｉ）配列番号６２４７のアミノ酸配列を含むＶＨ、および（ｉｉ）配列番号６２４９のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。
[001129]一部の実施形態では、第１および／または第２の抗原結合性ドメインは、配列番号６２５０に対して少なくとも７０％または７５％の配列同一性のアミノ酸配列を含むＶＨを含む。一部の実施形態では、第１および／または第２の抗原結合性ドメインは、配列番号６２５２に対して少なくとも８５％または９０％の配列同一性のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、第１および／または第２の抗原結合性ドメインは、（ｉ）配列番号６２５０に対して少なくとも７０％または７５％の配列同一性のアミノ酸配列を含むＶＨ、および（ｉｉ）配列番号６２５２に対して少なくとも８５％または９０％の配列同一性のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。
[001130]一部の実施形態では、第１および／または第２の抗原結合性ドメインは、配列番号６２５６の重鎖相補性決定領域１（ＶＨＣＤＲ１）アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号６２５７のＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号６２５８もしくは１１６のＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を含む重鎖可変領域（ＶＨ）を含む。一部の実施形態では、第１および／または第２の抗原結合性ドメインは、配列番号６２５９の軽鎖相補性決定領域１（ＶＬＣＤＲ１）アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号６２６０のＶＬＣＤＲ２アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号６２６１のＶＬＣＤＲ３アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む。
[001131]一部の実施形態では、第１および／または第２の抗原結合性ドメインは、
（ｉ）配列番号６２５６の重鎖相補性決定領域１（ＶＨＣＤＲ１）アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号６２５７のＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号６２５８もしくは１１６のＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を含む重鎖可変領域（ＶＨ）、ならびに
（ｉｉ）配列番号６２５９の軽鎖相補性決定領域１（ＶＬＣＤＲ１）アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号６２６０のＶＬＣＤＲ２アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号６２６１のＶＬＣＤＲ３アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）
を含む。
[001132]一部の実施形態では、第１および／または第２の抗原結合性ドメインは、配列番号６２３２の重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６２３４のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６２３６のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列、および／または配列番号６２３０のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＨを含む。一部の実施形態では、第１および／または第２の抗原結合性ドメインは、配列番号６２３８の軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６２４０のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６２４２のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列、および／または配列番号６２４４のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＬを含む。
[001133]一部の実施形態では、第１および／または第２の抗原結合性ドメインは、
（ｉ）配列番号６２３２の重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６２３４のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６２３６のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列、および／または配列番号６２３０のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＨ、ならびに
（ｉｉ）配列番号６２３８の軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６２４０のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６２４２のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列、および／または配列番号６２４４のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＬ
を含む。
[001134]一部の実施形態では、第１および／または第２の抗原結合性ドメインは、配列番号６２６６の重鎖フレームワーク１（ＶＨＦＷＲ１）アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、もしくは９つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号６２６７のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号６２６８のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、もしくは１１以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号６２６９のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＨを含む。一部の実施形態では、第１および／または第２の抗原結合性ドメインは、配列番号６２７７のＶＬＦＷＲ１アミノ酸配列（または１つ、２つ、もしくは３つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号６２７８のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列（または１つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号６２７９のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列（または１つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号６２８０のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＬを含む。
[001135]一部の実施形態では、第１および／または第２の抗原結合性ドメインは、
（ｉ）配列番号６２６６の重鎖フレームワーク１（ＶＨＦＷＲ１）アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、もしくは９つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号６２６７のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号６２６８のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、もしくは１１以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号６２６９のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＨ、ならびに
（ｉｉ）配列番号６２７７のＶＬＦＷＲ１アミノ酸配列（または１つ、２つ、もしくは３つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号６２７８のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列（または１つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号６２７９のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列（または１つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号６２８０のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列を含むＶＬ
を含む。
[001136]一部の実施形態では、第１および／または第２の抗原結合性ドメインは、配列番号６２４８のアミノ酸配列（または配列番号６２４８に対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨを含む。一部の実施形態では、第１および／または第２の抗原結合性ドメインは、配列番号６２４９のアミノ酸配列（または配列番号６２４９に対して少なくとも約９３％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬを含む。
[001137]一部の実施形態では、第１および／または第２の抗原結合性ドメインは、
（ｉ）配列番号６２４８のアミノ酸配列（または配列番号６２４８に対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨ、および
（ｉｉ）配列番号６２４９のアミノ酸配列（または配列番号６２４９に対して少なくとも約９３％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬ
を含む。
[001138]一部の実施形態では、第１および／または第２の抗原結合性ドメインは、配列番号６２４８のアミノ酸配列を含むＶＨを含む。一部の実施形態では、第１および／または第２の抗原結合性ドメインは、配列番号６２４９のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、第１および／または第２の抗原結合性ドメインは、（ｉ）配列番号６２４８のアミノ酸配列を含むＶＨ、および（ｉｉ）配列番号６２４９のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。
[001139]一部の実施形態では、第１および／または第２の抗原結合性ドメインは、配列番号６２５１に対して少なくとも７０％または７４％の配列同一性のアミノ酸配列を含むＶＨを含む。一部の実施形態では、第１および／または第２の抗原結合性ドメインは、配列番号６２５２に対して少なくとも８５％または９０％の配列同一性のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。一部の実施形態では、第１および／または第２の抗原結合性ドメインは、（ｉ）配列番号６２５１に対して少なくとも７０％もしくは７４％の配列同一性のアミノ酸配列を含むＶＨ、および／または（ｉｉ）配列番号６２５２に対して少なくとも８５％もしくは９０％の配列同一性のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。
[001140]一部の実施形態では、多機能性分子は、Ｔ細胞エンゲージャー、ＮＫ細胞エンゲージャー、Ｂ細胞エンゲージャー、樹状細胞エンゲージャー、またはマクロファージ細胞エンゲージャーから選択される免疫細胞エンゲージャーを含む。一部の実施形態では、免疫細胞エンゲージャーは、免疫細胞、例えば、エフェクター細胞に結合し、それを活性化する。一部の実施形態では、免疫細胞エンゲージャーは、免疫細胞、例えば、エフェクター細胞に結合するが、それを活性化しない。
[001141]一部の実施形態では、免疫細胞エンゲージャーは、Ｔ細胞エンゲージャー、例えば、Ｔ細胞への結合およびその活性化を媒介するＴ細胞エンゲージャー、またはＴ細胞への結合を媒介するが、その活性化を媒介しないＴ細胞エンゲージャーである。一部の実施形態では、Ｔ細胞エンゲージャーは、ＣＤ３、ＴＣＲα、ＴＣＲβ、ＴＣＲγ、ＴＣＲζ、ＩＣＯＳ、ＣＤ２８、ＣＤ２７、ＨＶＥＭ、ＬＩＧＨＴ、ＣＤ４０、４－１ＢＢ、ＯＸ４０、ＤＲ３、ＧＩＴＲ、ＣＤ３０、ＴＩＭ１、ＳＬＡＭ、ＣＤ２、またはＣＤ２２６に結合する。一部の実施形態では、Ｔ細胞エンゲージャーは抗ＣＤ３抗体分子である。一部の実施形態では、Ｔ細胞エンゲージャーは、抗ＴＣＲβ抗体分子、例えば、本明細書に記載される抗ＴＣＲβＶ抗体分子である。
[001142]一部の実施形態では、免疫細胞エンゲージャーは、ＮＫ細胞エンゲージャー、例えば、ＮＫ細胞への結合およびその活性化を媒介するＮＫ細胞エンゲージャー、またはＮＫ細胞への結合を媒介するが、その活性化を媒介しないＮＫ細胞エンゲージャーである。一部の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、ＮＫｐ３０、ＮＫｐ４０、ＮＫｐ４４、ＮＫｐ４６、ＮＫＧ２Ｄ、ＤＮＡＭ１、ＤＡＰ１０、ＣＤ１６（例えば、ＣＤ１６ａ、ＣＤ１６ｂ、もしくは両方）、ＣＲＴＡＭ、ＣＤ２７、ＰＳＧＬ１、ＣＤ９６、ＣＤ１００（ＳＥＭＡ４Ｄ）、ＮＫｐ８０、ＣＤ２４４（ＳＬＡＭＦ４もしくは２Ｂ４としても公知）、ＳＬＡＭＦ６、ＳＬＡＭＦ７、ＫＩＲ２ＤＳ２、ＫＩＲ２ＤＳ４、ＫＩＲ３ＤＳ１、ＫＩＲ２ＤＳ３、ＫＩＲ２ＤＳ５、ＫＩＲ２ＤＳ１、ＣＤ９４、ＮＫＧ２Ｃ、ＮＫＧ２Ｅ、またはＣＤ１６０に結合する（例えば、それを活性化させる）抗体分子、例えば抗原結合性ドメイン、またはリガンドから選択される。一部の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、ＮＫｐ３０に結合する（例えば、それを活性化させる）抗体分子またはリガンドである。一部の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、抗体分子、例えば、抗原結合性ドメインである。一部の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、ＮＫｐ３０またはＮＫｐ４６に結合する抗体分子、例えば、抗原結合性ドメインである。一部の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーはリガンドであり、任意選択で、リガンドは、免疫グロブリン定常領域、例えば、Ｆｃ領域をさらに含む。一部の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、ＮＫｐ４４またはＮＫｐ４６のリガンド、例えば、ウイルスＨＡである。一部の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、ＤＡＰ１０のリガンド、例えば、ＮＫＧ２Ｄに対する共受容体である。一部の実施形態では、ＮＫ細胞エンゲージャーは、ＣＤ１６のリガンド、例えば、ＣＤ１６ａ／ｂリガンド、例えば、抗体Ｆｃ領域をさらに含むＣＤ１６ａ／ｂリガンドである。一部の実施形態では、免疫細胞エンゲージャーは、Ｂ細胞、マクロファージ、および／または樹状細胞のうちの１つまたは複数への結合、またはその活性化、または両方を媒介する。
[001143]一部の実施形態では、免疫細胞エンゲージャーは、ＣＤ４０リガンド（ＣＤ４０Ｌ）もしくはＣＤ７０リガンド；ＣＤ４０もしくはＣＤ７０に結合する抗体分子；ＯＸ４０に対する抗体分子；ＯＸ４０リガンド（ＯＸ４０Ｌ）；Ｔｏｌｌ様受容体のアゴニスト（例えば、ＴＬＲ４、例えば、構成的活性型ＴＬＲ４（ｃａＴＬＲ４）、もしくはＴＬＲ９アゴニスト）；４１ＢＢ；ＣＤ２アゴニスト；ＣＤ４７；もしくはＳＴＩＮＧアゴニスト、またはこれらの組合せのうちの１つまたは複数から選択されるＢ細胞、マクロファージ、および／または樹状細胞エンゲージャーを含む。一部の実施形態では、免疫細胞エンゲージャーは、Ｂ細胞エンゲージャー、例えば、ＣＤ４０Ｌ、ＯＸ４０Ｌ、もしくはＣＤ７０リガンド、またはＯＸ４０、ＣＤ４０もしくはＣＤ７０に結合する抗体分子である。一部の実施形態では、免疫細胞エンゲージャーは、マクロファージ細胞エンゲージャー、例えば、ＣＤ２アゴニスト；ＣＤ４０Ｌ；ＯＸ４０Ｌ；ＯＸ４０、ＣＤ４０もしくはＣＤ７０に結合する抗体分子；Ｔｏｌｌ様受容体（ＴＬＲ）のアゴニスト（例えば、ＴＬＲ４、例えば、構成的活性型ＴＬＲ４（ｃａＴＬＲ４）、もしくはＴＬＲ９アゴニスト）；ＣＤ４７；またはＳＴＩＮＧアゴニストである。一部の実施形態では、免疫細胞エンゲージャーは、樹状細胞エンゲージャー、例えば、ＣＤ２アゴニスト、ＯＸ４０抗体、ＯＸ４０Ｌ、４１ＢＢアゴニスト、Ｔｏｌｌ様受容体アゴニストもしくはその断片（例えば、ＴＬＲ４、例えば、構成的活性型ＴＬＲ４（ｃａＴＬＲ４））、ＣＤ４７アゴニスト、またはＳＴＩＮＧアゴニストである。一部の実施形態では、ＳＴＩＮＧアゴニストは、環状ジヌクレオチド、例えば、サイクリックジＧＭＰ（ｃｄＧＭＰ）、サイクリックジＡＭＰ（ｃｄＡＭＰ）、またはこれらの組合せを含み、任意選択で２’，５’または３’，５’リン酸連結を有し、例えば、ＳＴＩＮＧアゴニストは、多機能性分子に共有結合的にカップリングされる。
[001144]一部の実施形態では、多機能性分子はサイトカイン分子またはその調節薬を含む。一部の実施形態では、サイトカイン分子は、ＴＧＦ－β、インターロイキン－２（ＩＬ－２）、インターロイキン－７（ＩＬ－７）、インターロイキン－１２（ＩＬ－１２）、インターロイキン－１５（ＩＬ－１５）、インターロイキン－１８（ＩＬ－１８）、インターロイキン－２１（ＩＬ－２１）、もしくはインターフェロンガンマ、もしくはその断片もしくはバリアント、または上記のサイトカインの任意の組合せから選択される。一部の実施形態では、サイトカイン分子は単量体または二量体である。一部の実施形態では、サイトカイン分子は、受容体二量体化ドメイン、例えば、ＩＬ１５Ｒアルファ二量体化ドメインをさらに含む。一部の実施形態では、サイトカイン分子（例えば、ＩＬ－１５）および受容体二量体化ドメイン（例えば、ＩＬ１５Ｒアルファ二量体化ドメイン）は、共有結合的に連結されず、例えば、非共有結合的に会合される。
[001145]一部の実施形態では、サイトカイン分子の調節薬はＴＧＦ－β阻害剤を含む。
[001146]一部の実施形態では、多機能性分子は間質改変部分を含む。一部の実施形態では、間質改変部分は、間質もしくは細胞外マトリックス（ＥＣＭ）成分のレベルもしくは産生の減少；腫瘍線維形成の減少；間質腫瘍輸送の増加；腫瘍灌流の改善；腫瘍微小血管の拡大；腫瘍における間質液圧（ＩＦＰ）の減少；または薬剤、例えば、がん治療薬もしくは細胞療法の、腫瘍もしくは腫瘍血管への浸透もしくは拡散の減少もしくは増強のうちの１つまたは複数を引き起こす。一部の実施形態では、減少される間質またはＥＣＭ成分は、グリコサミノグリカンもしくは細胞外タンパク質、またはそれらの組合せから選択される。一部の実施形態では、グリコサミノグリカンは、ヒアルロナン（ヒアルロン酸もしくはＨＡとしても知られる）、コンドロイチン硫酸塩、コンドロイチン、デルマタン硫酸塩、ヘパラン硫酸塩、ヘパリン、エンタクチン、テネイシン、アグリカン、またはケラチン硫酸塩から選択される。一部の実施形態では、細胞外タンパク質は、コラーゲン、ラミニン、エラスチン、フィブリノーゲン、フィブロネクチン、またはビトロネクチンから選択される。一部の実施形態では、間質改変部分は、腫瘍間質または細胞外マトリックス（ＥＣＭ）を分解する酵素分子を含む。一部の実施形態では、酵素分子は、ヒアルロニダーゼ分子、コラゲナーゼ分子、コンドロイチナーゼ分子、マトリックスメタロプロテイナーゼ分子（例えば、マクロファージメタロエラスターゼ）、または前述のもののいずれかのバリアント（例えば、断片）から選択される。一部の実施形態では、間質改変部分は、ヒアルロン酸のレベルまたは産生を減少させる。一部の実施形態では、間質改変部分は、ヒアルロナン分解酵素、ヒアルロナン合成を阻害する薬剤、またはヒアルロン酸に対する抗体分子を含む。一部の実施形態では、ヒアルロナン分解酵素は、ヒアルロニダーゼ分子またはそのバリアント（例えば、その断片）である。一部の実施形態では、ヒアルロナン分解酵素は、中性または酸性のｐＨ、例えば、約４～５のｐＨにおいて活性である。一部の実施形態では、ヒアルロニダーゼ分子は、哺乳動物ヒアルロニダーゼ分子、例えば、組換えヒトヒアルロニダーゼ分子またはそのバリアント（例えば、その短縮形態）である。一部の実施形態では、ヒアルロニダーゼ分子は、ＨＹＡＬ１、ＨＹＡＬ２、もしくはＰＨ－２０／ＳＰＡＭ１、またはそのバリアント（例えば、その短縮形態）から選択される。一部の実施形態では、短縮形態は、Ｃ末端グリコシルホスファチジルイノシトール（ＧＰＩ）結合部位またはＧＰＩ結合部位の一部分が欠如している。一部の実施形態では、ヒアルロニダーゼ分子は、グリコシル化されている、例えば、少なくとも１つのＮ結合型グリカンを含む。一部の実施形態では、ヒアルロニダーゼ分子は、配列番号６２１３のアミノ酸配列、もしくはその断片、またはそれに対して実質的に同一である（例えば、それに対して９５％～９９．９％同一であるか、または配列番号６２１３のアミノ酸配列に対して少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、５個、１０個、もしくは１５個以下である変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有する）アミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、ヒアルロニダーゼ分子は、配列番号６２１３のアミノ酸残基３６～４６４を含む。一部の実施形態では、ヒアルロニダーゼ分子は、ＰＨ２０のアミノ酸残基３６～４８１、３６～４８２、または３６～４８３を含み、ここで、ＰＨ２０は配列番号６２１３のアミノ酸配列を有する。一部の実施形態では、ヒアルロニダーゼ分子は、配列番号６２１３のアミノ酸配列のポリペプチドまたはその短縮形態に対して少なくとも９５％～１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、ヒアルロニダーゼ分子は、配列番号６２１３のアミノ酸配列に対して３０個、２０個、１０個、５つ、またはそれよりも少ないアミノ酸置換を有するアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、ヒアルロニダーゼ分子は、配列番号６２１３のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％（例えば、少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、１００％）同一のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、ヒアルロニダーゼ分子は、配列番号６２１３のヌクレオチド配列に対して少なくとも９５％（例えば、少なくとも９６％、９７％、９８％、９９％、１００％）同一のヌクレオチド配列によってコードされる。一部の実施形態では、ヒアルロニダーゼ分子はＰＨ２０、例えば、ｒＨｕＰＨ２０である。一部の実施形態では、ヒアルロニダーゼ分子は、ＨＹＡＬ１であり、配列番号６２１８のアミノ酸配列、もしくはその断片、またはそれに対して実質的に同一である（例えば、それに対して９５％～９９．９％同一であるか、または配列番号６２１８のアミノ酸配列に対して少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、５個、１０個、もしくは１５個以下である変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有する）アミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、ヒアルロナン分解酵素、例えば、ヒアルロニダーゼ分子は、ポリマーをさらに含み、例えば、ポリマー、例えば、ＰＥＧにコンジュゲートされている。一部の実施形態では、ヒアルロナン分解酵素は、ＰＥＧ化ＰＨ２０酵素（ＰＥＧＰＨ２０）である。一部の実施形態では、ヒアルロナン分解酵素、例えば、ヒアルロニダーゼ分子は、例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、またはＩｇＧ４の重鎖定常領域、より具体的には、ヒトＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、またはＩｇＧ４の重鎖定常領域から選択される、免疫グロブリン鎖定常領域（例えば、Ｆｃ領域）をさらに含む。一部の実施形態では、免疫グロブリン定常領域（例えば、Ｆｃ領域）は、ヒアルロナン分解酵素、例えば、ヒアルロニダーゼ分子に連結、例えば、共有結合的に連結されている。一部の実施形態では、免疫グロブリン鎖定常領域（例えば、Ｆｃ領域）は、Ｆｃ受容体の結合、抗体のグリコシル化、システイン残基の数、エフェクター細胞の機能、または補体機能のうちの１つまたは複数を増加または減少させるように、変更、例えば、突然変異されている。一部の実施形態では、ヒアルロナン分解酵素、例えば、ヒアルロニダーゼ分子は、二量体を形成する。一部の実施形態では、間質改変部分は、ヒアルロナンの合成、例えば、ＨＡシンターゼの阻害剤を含む。一部の実施形態では、阻害剤は、ＨＡシンターゼに対するセンスもしくはアンチセンス核酸分子を含むか、または小分子薬である。一部の実施形態では、阻害剤は、４－メチルウンベリフェロン（ＭＵ）もしくはその誘導体（例えば、６，７－ジヒドロキシ－４－メチルクマリンもしくは５，７－ジヒドロキシ－４－メチルクマリン）、またはレフルノミドもしくはその誘導体である。一部の実施形態では、間質改変部分は、コラゲナーゼ分子、例えば、哺乳動物コラゲナーゼ分子、またはそのバリアント（例えば、断片）を含む。一部の実施形態では、コラゲナーゼ分子は、例えば、配列番号６２１９のアミノ酸配列、もしくはその断片、またはそれに対して実質的に同一である（例えば、それに対して９５％～９９．９％同一であるか、または配列番号６２１９のアミノ酸配列に対して少なくとも１つのアミノ酸変更であるが、５個、１０個、もしくは１５個以下である変更（例えば、置換、欠失、もしくは挿入、例えば、保存的置換）を有するアミノ酸配列を含む、コラゲナーゼ分子ＩＶである。
[001147]一部の実施形態では、多機能性分子は、免疫細胞エンゲージャー（例えば、Ｔ細胞エンゲージャー、ＮＫ細胞エンゲージャー、Ｂ細胞エンゲージャー、樹状細胞エンゲージャー、またはマクロファージ細胞エンゲージャー）およびサイトカイン分子を含む。一部の実施形態では、多機能性分子は、免疫細胞エンゲージャー（例えば、Ｔ細胞エンゲージャー、ＮＫ細胞エンゲージャー、Ｂ細胞エンゲージャー、樹状細胞エンゲージャー、またはマクロファージ細胞エンゲージャー）および間質改変部分を含む。一部の実施形態では、多機能性分子は、サイトカイン分子および間質改変部分を含む。一部の実施形態では、多機能性分子は、免疫細胞エンゲージャー（例えば、Ｔ細胞エンゲージャー、ＮＫ細胞エンゲージャー、Ｂ細胞エンゲージャー、樹状細胞エンゲージャー、またはマクロファージ細胞エンゲージャー）、サイトカイン分子、および間質改変部分を含む。
[001148]一部の実施形態では、多機能性分子は少なくとも２つの非連続的ポリペプチド鎖を含む。
[001149]一部の実施形態では、多機能性分子は、以下の構成：
Ａ，Ｂ－［二量体化モジュール］－Ｃ，－Ｄ
例えば、図１Ａ、１Ｂ、および１Ｃに示される構成を含み、ここで、
（１）二量体化モジュールは、免疫グロブリン定常ドメイン、例えば、重鎖定常ドメイン（例えば、ホモ二量体もしくはヘテロ二量体重鎖定常領域、例えば、Ｆｃ領域）、または免疫グロブリン可変領域（例えば、Ｆａｂ領域）の定常ドメインを含み；
（２）Ａ、Ｂ、Ｃ、およびＤは、独立して、不在であるか；（ｉ）カルレティキュリンタンパク質（例えば、野生型カルレティキュリンタンパク質もしくは突然変異体カルレティキュリンタンパク質）に結合する抗原結合性ドメインであって、カルレティキュリンタンパク質が配列番号６２８６のアミノ酸配列を含む、抗原結合性ドメイン；（ｉｉ）Ｔ細胞エンゲージャー、ＮＫ細胞エンゲージャー、Ｂ細胞エンゲージャー、樹状細胞エンゲージャー、もしくはマクロファージ細胞エンゲージャーから選択される免疫細胞エンゲージャー；（ｉｉｉ）サイトカイン分子；または（ｉｖ）間質改変部分であるが、ただし
Ａ、Ｂ、Ｃ、およびＤのうちの少なくとも１つ、２つ、または３つが、カルレティキュリンタンパク質（例えば、野生型カルレティキュリンタンパク質またはカルレティキュリン突然変異体タンパク質）に結合する抗原結合性ドメインであって、カルレティキュリンタンパク質が配列番号６２８６のアミノ酸配列を含む、抗原結合性ドメインを含むこと、ならびに
残りのＡ、Ｂ、Ｃ、およびＤのうちのいずれかは、不在であるか、または免疫細胞エンゲージャー、サイトカイン分子、もしくは間質改変部分のうちの１つを含むこと
を条件とする。
[001150]一部の実施形態では、
（ｉ）Ａが、カルレティキュリンタンパク質（例えば、野生型カルレティキュリンタンパク質もしくはカルレティキュリン突然変異体タンパク質）に結合する抗原結合性ドメインであって、カルレティキュリンタンパク質が配列番号６２８６のアミノ酸配列を含む、抗原結合性ドメインを含み、Ｂ、Ｃ、もしくはＤが、免疫細胞エンゲージャー、例えば、Ｔ細胞エンゲージャー、例えば、抗ＣＤ３抗体分子を含むか；
（ｉｉ）Ａが、カルレティキュリンタンパク質（例えば、野生型カルレティキュリンタンパク質もしくはカルレティキュリン突然変異体タンパク質）に結合する抗原結合性ドメインであって、カルレティキュリンタンパク質が配列番号６２８６のアミノ酸配列を含む、抗原結合性ドメインを含み、Ｂ、Ｃ、もしくはＤが、サイトカイン分子を含むか；
（ｉｉｉ）Ａが、カルレティキュリンタンパク質（例えば、野生型カルレティキュリンタンパク質もしくはカルレティキュリン突然変異体タンパク質）に結合する抗原結合性ドメインであって、カルレティキュリンタンパク質が配列番号６２８６のアミノ酸配列を含む、抗原結合性ドメインを含み、Ｂ、Ｃ、もしくはＤが、間質改変部分を含むか；
（ｉｖ）Ａが、第１のカルレティキュリンタンパク質（例えば、野生型カルレティキュリンタンパク質もしくはカルレティキュリン突然変異体タンパク質）に結合する第１の抗原結合性ドメインであって、第１のカルレティキュリンタンパク質が配列番号６２８６のアミノ酸配列を含む、第１の抗原結合性ドメインを含み、Ｂが、第２のカルレティキュリンタンパク質（例えば、野生型カルレティキュリンタンパク質もしくはカルレティキュリン突然変異体タンパク質）に結合する第２の抗原結合性ドメインであって、第２のカルレティキュリンタンパク質が配列番号６２８６のアミノ酸配列を含む、第２の抗原結合性ドメインを含み、ＣもしくはＤが、免疫細胞エンゲージャー、例えば、Ｔ細胞エンゲージャー、例えば、抗ＣＤ３抗体分子を含むか；
（ｖ）Ａが、第１のカルレティキュリンタンパク質（例えば、野生型カルレティキュリンタンパク質もしくはカルレティキュリン突然変異体タンパク質）に結合する第１の抗原結合性ドメインであって、第１のカルレティキュリンタンパク質が配列番号６２８６のアミノ酸配列を含む、第１の抗原結合性ドメインを含み、Ｂが、第２のカルレティキュリンタンパク質（例えば、野生型カルレティキュリンタンパク質もしくはカルレティキュリン突然変異体タンパク質）に結合する第２の抗原結合性ドメインであって、第２のカルレティキュリンタンパク質が配列番号６２８６のアミノ酸配列を含む、第２の抗原結合性ドメインを含み、ＣもしくはＤが、サイトカイン分子を含むか；
（ｖｉ）Ａが、第１のカルレティキュリンタンパク質（例えば、野生型カルレティキュリンタンパク質もしくはカルレティキュリン突然変異体タンパク質）に結合する第１の抗原結合性ドメインであって、第１のカルレティキュリンタンパク質が配列番号６２８６のアミノ酸配列を含む、第１の抗原結合性ドメインを含み、Ｂが、第２のカルレティキュリンタンパク質（例えば、野生型カルレティキュリンタンパク質もしくはカルレティキュリン突然変異体タンパク質）に結合する第２の抗原結合性ドメインであって、第２のカルレティキュリンタンパク質が配列番号６２８６のアミノ酸配列を含む、第２の抗原結合性ドメインを含み、ＣもしくはＤが、間質改変部分を含むか；
（ｖｉｉ）Ａが、第１のカルレティキュリンタンパク質（例えば、野生型カルレティキュリンタンパク質もしくはカルレティキュリン突然変異体タンパク質）に結合する第１の抗原結合性ドメインであって、第１のカルレティキュリンタンパク質が配列番号６２８６のアミノ酸配列を含む、第１の抗原結合性ドメインを含み、Ｃが、第２のカルレティキュリンタンパク質（例えば、野生型カルレティキュリンタンパク質もしくはカルレティキュリン突然変異体タンパク質）に結合する第２の抗原結合性ドメインであって、第２のカルレティキュリンタンパク質が配列番号６２８６のアミノ酸配列を含む、第２の抗原結合性ドメインを含み、ＢもしくはＤが、免疫細胞エンゲージャー、例えば、Ｔ細胞エンゲージャー、例えば、抗ＣＤ３抗体分子を含むか；
（ｖｉｉｉ）Ａが、第１のカルレティキュリンタンパク質（例えば、野生型カルレティキュリンタンパク質もしくはカルレティキュリン突然変異体タンパク質）に結合する第１の抗原結合性ドメインであって、第１のカルレティキュリンタンパク質が配列番号６２８６のアミノ酸配列を含む、第１の抗原結合性ドメインを含み、Ｃが、第２のカルレティキュリンタンパク質（例えば、野生型カルレティキュリンタンパク質もしくはカルレティキュリン突然変異体タンパク質）に結合する第２の抗原結合性ドメインであって、第２のカルレティキュリンタンパク質が配列番号６２８６のアミノ酸配列を含む、第２の抗原結合性ドメインを含み、ＢもしくはＤが、サイトカイン分子を含むか；
（ｉｘ）Ａが、第１のカルレティキュリンタンパク質（例えば、野生型カルレティキュリンタンパク質もしくはカルレティキュリン突然変異体タンパク質）に結合する第１の抗原結合性ドメインであって、第１のカルレティキュリンタンパク質が配列番号６２８６のアミノ酸配列を含む、第１の抗原結合性ドメインを含み、Ｃが、第２のカルレティキュリンタンパク質（例えば、野生型カルレティキュリンタンパク質もしくはカルレティキュリン突然変異体タンパク質）に結合する第２の抗原結合性ドメインであって、第２のカルレティキュリンタンパク質が配列番号６２８６のアミノ酸配列を含む、第２の抗原結合性ドメインを含み、ＢもしくはＤが、間質改変部分を含むか；
（ｘ）Ａが、第１のカルレティキュリンタンパク質（例えば、野生型カルレティキュリンタンパク質もしくはカルレティキュリン突然変異体タンパク質）に結合する第１の抗原結合性ドメインであって、第１のカルレティキュリンタンパク質が配列番号６２８６のアミノ酸配列を含む、第１の抗原結合性ドメインを含み、Ｂ、Ｃ、もしくはＤが、（ａ）免疫細胞エンゲージャー、例えば、Ｔ細胞エンゲージャー、例えば、抗ＣＤ３抗体分子および（ｂ）サイトカイン分子を含むか；
（ｘｉ）Ａが、第１のカルレティキュリンタンパク質（例えば、野生型カルレティキュリンタンパク質もしくはカルレティキュリン突然変異体タンパク質）に結合する第１の抗原結合性ドメインであって、第１のカルレティキュリンタンパク質が配列番号６２８６のアミノ酸配列を含む、第１の抗原結合性ドメインを含み、Ｂ、Ｃ、もしくはＤが、（ａ）免疫細胞エンゲージャー、例えば、Ｔ細胞エンゲージャー、例えば、抗ＣＤ３抗体分子および（ｂ）間質改変部分を含むか；
（ｘｉｉ）Ａが、第１のカルレティキュリンタンパク質（例えば、野生型カルレティキュリンタンパク質もしくはカルレティキュリン突然変異体タンパク質）に結合する第１の抗原結合性ドメインであって、第１のカルレティキュリンタンパク質が配列番号６２８６のアミノ酸配列を含む、第１の抗原結合性ドメインを含み、Ｂ、Ｃ、もしくはＤが、（ａ）サイトカイン分子および（ｂ）間質改変部分を含むか；
（ｘｉｉｉ）Ａが、第１のカルレティキュリンタンパク質（例えば、野生型カルレティキュリンタンパク質もしくはカルレティキュリン突然変異体タンパク質）に結合する第１の抗原結合性ドメインであって、第１のカルレティキュリンタンパク質が配列番号６２８６のアミノ酸配列を含む、第１の抗原結合性ドメインを含み、Ｂが、第２のカルレティキュリンタンパク質（例えば、野生型カルレティキュリンタンパク質もしくはカルレティキュリン突然変異体タンパク質）に結合する第２の抗原結合性ドメインであって、第２のカルレティキュリンタンパク質が配列番号６２８６のアミノ酸配列を含む、第２の抗原結合性ドメインを含み、ＣもしくはＤが、（ａ）免疫細胞エンゲージャー、例えば、Ｔ細胞エンゲージャー、例えば、抗ＣＤ３抗体分子および（ｂ）サイトカイン分子を含むか；
（ｘｉｖ）Ａが、第１のカルレティキュリンタンパク質（例えば、野生型カルレティキュリンタンパク質もしくはカルレティキュリン突然変異体タンパク質）に結合する第１の抗原結合性ドメインであって、第１のカルレティキュリンタンパク質が配列番号６２８６のアミノ酸配列を含む、第１の抗原結合性ドメインを含み、Ｂが、第２のカルレティキュリンタンパク質（例えば、野生型カルレティキュリンタンパク質もしくはカルレティキュリン突然変異体タンパク質）に結合する第２の抗原結合性ドメインであって、第２のカルレティキュリンタンパク質が配列番号６２８６のアミノ酸配列を含む、第２の抗原結合性ドメインを含み、ＣもしくはＤが、（ａ）免疫細胞エンゲージャー、例えば、Ｔ細胞エンゲージャー、例えば、抗ＣＤ３抗体分子および（ｂ）間質改変部分を含むか；
（ｘｖ）Ａが、第１のカルレティキュリンタンパク質（例えば、野生型カルレティキュリンタンパク質もしくはカルレティキュリン突然変異体タンパク質）に結合する第１の抗原結合性ドメインであって、第１のカルレティキュリンタンパク質が配列番号６２８６のアミノ酸配列を含む、第１の抗原結合性ドメインを含み、Ｂが、第２のカルレティキュリンタンパク質（例えば、野生型カルレティキュリンタンパク質もしくはカルレティキュリン突然変異体タンパク質）に結合する第２の抗原結合性ドメインであって、第２のカルレティキュリンタンパク質が配列番号６２８６のアミノ酸配列を含む、第２の抗原結合性ドメインを含み、ＣもしくはＤが、（ａ）サイトカイン分子および（ｂ）間質改変部分を含むか；
（ｘｖｉ）Ａが、第１のカルレティキュリンタンパク質（例えば、野生型カルレティキュリンタンパク質もしくはカルレティキュリン突然変異体タンパク質）に結合する第１の抗原結合性ドメインであって、第１のカルレティキュリンタンパク質が配列番号６２８６のアミノ酸配列を含む、第１の抗原結合性ドメインを含み、Ｃが、第２のカルレティキュリンタンパク質（例えば、野生型カルレティキュリンタンパク質もしくはカルレティキュリン突然変異体タンパク質）に結合する第２の抗原結合性ドメインであって、第２のカルレティキュリンタンパク質が配列番号６２８６のアミノ酸配列を含む、第２の抗原結合性ドメインを含み、ＢもしくはＤが、（ａ）免疫細胞エンゲージャー、例えば、Ｔ細胞エンゲージャー、例えば、抗ＣＤ３抗体分子および（ｂ）サイトカイン分子を含むか；
（ｘｖｉｉ）Ａが、第１のカルレティキュリンタンパク質（例えば、野生型カルレティキュリンタンパク質もしくはカルレティキュリン突然変異体タンパク質）に結合する第１の抗原結合性ドメインであって、第１のカルレティキュリンタンパク質が配列番号６２８６のアミノ酸配列を含む、第１の抗原結合性ドメインを含み、Ｃが、第２のカルレティキュリンタンパク質（例えば、野生型カルレティキュリンタンパク質もしくはカルレティキュリン突然変異体タンパク質）に結合する第２の抗原結合性ドメインであって、第２のカルレティキュリンタンパク質が配列番号６２８６のアミノ酸配列を含む、第２の抗原結合性ドメインを含み、ＢもしくはＤが、（ａ）免疫細胞エンゲージャー、例えば、Ｔ細胞エンゲージャー、例えば、抗ＣＤ３抗体分子および（ｂ）間質改変部分を含むか；
（ｘｖｉｉｉ）Ａが、第１のカルレティキュリンタンパク質（例えば、野生型カルレティキュリンタンパク質もしくはカルレティキュリン突然変異体タンパク質）に結合する第１の抗原結合性ドメインであって、第１のカルレティキュリンタンパク質が配列番号６２８６のアミノ酸配列を含む、第１の抗原結合性ドメインを含み、Ｃが、第２のカルレティキュリンタンパク質（例えば、野生型カルレティキュリンタンパク質もしくはカルレティキュリン突然変異体タンパク質）に結合する第２の抗原結合性ドメインであって、第２のカルレティキュリンタンパク質が配列番号６２８６のアミノ酸配列を含む、第２の抗原結合性ドメインを含み、ＢもしくはＤが、（ａ）サイトカイン分子および（ｂ）間質改変部分を含むか；
（ｘｉｘ）Ａが、第１のカルレティキュリンタンパク質（例えば、野生型カルレティキュリンタンパク質もしくはカルレティキュリン突然変異体タンパク質）に結合する第１の抗原結合性ドメインであって、第１のカルレティキュリンタンパク質が配列番号６２８６のアミノ酸配列を含む、第１の抗原結合性ドメインを含み、Ｂ、Ｃ、もしくはＤが、（ａ）免疫細胞エンゲージャー、例えば、Ｔ細胞エンゲージャー、例えば、抗ＣＤ３抗体分子、（ｂ）サイトカイン分子、および（ｃ）間質改変部分を含むか；
（ｘｘ）Ａが、第１のカルレティキュリンタンパク質（例えば、野生型カルレティキュリンタンパク質もしくはカルレティキュリン突然変異体タンパク質）に結合する第１の抗原結合性ドメインであって、第１のカルレティキュリンタンパク質が配列番号６２８６のアミノ酸配列を含む、第１の抗原結合性ドメインを含み、Ｂが、第２のカルレティキュリンタンパク質（例えば、野生型カルレティキュリンタンパク質もしくはカルレティキュリン突然変異体タンパク質）に結合する第２の抗原結合性ドメインであって、第２のカルレティキュリンタンパク質が配列番号６２８６のアミノ酸配列を含む、第２の抗原結合性ドメインを含み、ＣもしくはＤが、（ａ）免疫細胞エンゲージャー、例えば、Ｔ細胞エンゲージャー、例えば、抗ＣＤ３抗体分子、（ｂ）サイトカイン分子、および（ｃ）間質改変部分を含むか；または
（ｘｘｉ）Ａが、第１のカルレティキュリンタンパク質（例えば、野生型カルレティキュリンタンパク質もしくはカルレティキュリン突然変異体タンパク質）に結合する第１の抗原結合性ドメインであって、第１のカルレティキュリンタンパク質が配列番号６２８６のアミノ酸配列を含む、第１の抗原結合性ドメインを含み、Ｃが、第２のカルレティキュリンタンパク質（例えば、野生型カルレティキュリンタンパク質もしくはカルレティキュリン突然変異体タンパク質）に結合する第２の抗原結合性ドメインであって、第２のカルレティキュリンタンパク質が配列番号６２８６のアミノ酸配列を含む、第２の抗原結合性ドメインを含み、ＢもしくはＤが、（ａ）免疫細胞エンゲージャー、例えば、Ｔ細胞エンゲージャー、例えば、抗ＣＤ３抗体分子、（ｂ）サイトカイン分子、および（ｃ）間質改変部分を含む。
[001151]一部の実施形態では、二量体化モジュールは、対になった孔と突起（「ノブ・イン・ホール」）、静電相互作用、または鎖交換のうちの１つまたは複数を含む、１つまたは複数の免疫グロブリン鎖定常領域（例えば、Ｆｃ領域）を含む。一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫グロブリン鎖定常領域（例えば、Ｆｃ領域）は、例えば、ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域の、３４７位、３４９位、３５０位、３５１位、３６６位、３６８位、３７０位、３９２位、３９４位、３９５位、３９７位、３９８位、３９９位、４０５位、４０７位、または４０９位のうちの１つまたは複数から選択される位置に、アミノ酸置換を含む。一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫グロブリン鎖定常領域（例えば、Ｆｃ領域）は、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、もしくはＹ４０７Ｖ（例えば、孔もしくはホールに対応する）、またはＴ３６６Ｗ（例えば、突起もしくはノブに対応する）、またはこれらの組合せから選択されるアミノ酸置換を含む。
[001152]一部の実施形態では、多機能性分子は、リンカー、例えば、抗原結合性ドメインと免疫細胞エンゲージャーとの間、抗原結合性ドメインとサイトカイン分子との間、抗原結合性ドメインと間質改変部分との間、免疫細胞エンゲージャーとサイトカイン分子との間、免疫細胞エンゲージャーと間質改変部分との間、サイトカイン分子と間質改変部分との間、抗原結合性ドメインと二量体化モジュールとの間、免疫細胞エンゲージャーと二量体化モジュールとの間、サイトカイン分子と二量体化モジュールとの間、または間質改変部分と二量体化モジュールとの間のうちの１つまたは複数におけるリンカーをさらに含む。一部の実施形態では、リンカーは、切断性リンカー、非切断性リンカー、ペプチドリンカー、可撓性リンカー、剛性リンカー、ヘリックスリンカー、または非ヘリックスリンカーから選択される。一部の実施形態では、リンカーは、ペプチドリンカーである。一部の実施形態では、ペプチドリンカーは、ＧｌｙおよびＳｅｒを含む。一部の実施形態では、ペプチドリンカーは、配列番号６２１４～６２１７または６２２０～６２２１および７７～７８から選択されるアミノ酸配列を含む。
[001153]一態様では、本発明は、
（ｉ）例えば、カルレティキュリン突然変異体タンパク質が配列番号６２８６のアミノ酸配列を含む、カルレティキュリンタンパク質（例えば、野生型カルレティキュリンタンパク質またはカルレティキュリン突然変異体タンパク質）に結合する抗原結合性ドメイン、および
（ｉｉ）ＣＤ３に結合する部分、例えば、ＣＤ３に結合する抗体分子
を含む、多機能性分子を提供する。
[001154]一部の実施形態では、多機能性分子は、
例えば、Ｎ末端からＣ末端まで、第１のＶＬおよび第１のＣＬを含む第１のポリペプチド、
例えば、Ｎ末端からＣ末端まで、第１のＶＨ、第１のＣＨ１、第１の二量体化ドメイン（例えば、第１のＦｃ）、およびＣＤ３に結合する第１の部分（例えば、ＣＤ３に結合する第１のｓｃＦｖ）を含む第２のポリペプチド、
例えば、Ｎ末端からＣ末端まで、第２のＶＨ、第２のＣＨ１、第２の二量体化ドメイン（例えば、第２のＦｃ）、および任意選択でＣＤ３に結合する第２の部分（例えば、ＣＤ３に結合する第２のｓｃＦｖ）を含む第３のポリペプチド、
例えば、Ｎ末端からＣ末端まで、第２のＶＬおよび第２のＣＬを含む第４のポリペプチド
を含み、
第１のＶＬおよび第１のＶＨは第１のカルレティキュリンタンパク質（例えば、野生型カルレティキュリンタンパク質またはカルレティキュリン突然変異体タンパク質）に結合する第１の抗原結合性ドメインを形成し、第２のＶＬおよび第２のＶＨは第２のカルレティキュリンタンパク質（例えば、野生型カルレティキュリンタンパク質またはカルレティキュリン突然変異体タンパク質）に結合する第２の抗原結合性ドメインを形成し、第１および第２のカルレティキュリンタンパク質は、配列番号６２８６のアミノ酸配列を含み、任意選択で、第１および第２のカルレティキュリンタンパク質は、配列番号６３１３のアミノ酸配列を含む分子、または配列番号６３１４のアミノ酸配列を含む分子からそれぞれ独立して選択される。
[001155]一部の実施形態では、多機能性分子は、図２Ａまたは２Ｂの構成を含む。
[001156]一態様では、本発明は、
（ｉ）例えば、カルレティキュリン突然変異体タンパク質が配列番号６２８６のアミノ酸配列を含む、カルレティキュリンタンパク質（例えば、野生型カルレティキュリンタンパク質またはカルレティキュリン突然変異体タンパク質）に結合する抗原結合性ドメイン、および
（ｉｉ）ＴＣＲ（例えば、ＴＣＲβ）に結合する部分、例えば、ＴＣＲ（例えば、ＴＣＲβ）に結合する抗体分子
を含む、多機能性分子を提供する。
[001157]一部の実施形態では、多機能性分子は、
例えば、Ｎ末端からＣ末端まで、第１のＶＬおよび第１のＣＬを含む第１のポリペプチド、
例えば、Ｎ末端からＣ末端まで、第１のＶＨ、第１のＣＨ１、第１の二量体化ドメイン（例えば、第１のＦｃ）、およびＴＣＲ（例えば、ＴＣＲβ）に結合する第１の部分（例えば、ＴＣＲ（例えば、ＴＣＲβ）に結合する第１のｓｃＦｖ）を含む第２のポリペプチド、
例えば、Ｎ末端からＣ末端まで、第２のＶＨ、第２のＣＨ１、第２の二量体化ドメイン（例えば、第２のＦｃ）、および任意選択で、ＴＣＲ（例えば、ＴＣＲβ）に結合する第２の部分（例えば、ＴＣＲ（例えば、ＴＣＲβ）に結合する第２のｓｃＦｖ）を含む第３のポリペプチド、
例えば、Ｎ末端からＣ末端まで、第２のＶＬおよび第２のＣＬを含む第４のポリペプチド
を含み、
第１のＶＬおよび第１のＶＨは第１のカルレティキュリンタンパク質（例えば、野生型カルレティキュリンタンパク質またはカルレティキュリン突然変異体タンパク質）に結合する第１の抗原結合性ドメインを形成し、第２のＶＬおよび第２のＶＨは第２のカルレティキュリンタンパク質（例えば、野生型カルレティキュリンタンパク質またはカルレティキュリン突然変異体タンパク質）に結合する第２の抗原結合性ドメインを形成し、第１および第２のカルレティキュリンタンパク質は、配列番号６２８６のアミノ酸配列を含み、任意選択で、第１および第２のカルレティキュリンタンパク質は、配列番号６３１３のアミノ酸配列を含む分子、または配列番号６３１４のアミノ酸配列を含む分子からそれぞれ独立して選択される。
[001158]一部の実施形態では、多機能性分子は、図３Ａまたは３Ｂの構成を含む。
[001159]一態様では、本発明は、
（ｉ）例えば、カルレティキュリンタンパク質が配列番号６２８６のアミノ酸配列を含む、カルレティキュリンタンパク質（例えば、野生型カルレティキュリンタンパク質またはカルレティキュリン突然変異体タンパク質）に結合する抗原結合性ドメイン、および
（ｉｉ）ＮＫｐ３０に結合する部分、例えば、ＮＫｐ３０に結合する（例えば、活性化する）抗体分子またはリガンド
を含む、多機能性分子を提供する。
[001160]一部の実施形態では、多機能性分子は、
[001161]例えば、Ｎ末端からＣ末端まで、第１のＶＬおよび第１のＣＬを含む第１のポリペプチド、
例えば、Ｎ末端からＣ末端まで、第１のＶＨ、第１のＣＨ１、第１の二量体化ドメイン（例えば、第１のＦｃ）、およびＮＫｐ３０に結合する第１の部分（例えば、ＮＫｐ３０に結合する第１の抗体分子またはリガンド）を含む第２のポリペプチド、
例えば、Ｎ末端からＣ末端まで、第２のＶＨ、第２のＣＨ１、第２の二量体化ドメイン（例えば、第２のＦｃ）、および任意選択でＮＫｐ３０に結合する第２の部分（例えば、ＮＫｐ３０に結合する第２の抗体分子またはリガンド）を含む第３のポリペプチド、
例えば、Ｎ末端からＣ末端まで、第２のＶＬおよび第２のＣＬを含む第４のポリペプチド
を含み、
第１のＶＬおよび第１のＶＨは第１のカルレティキュリンタンパク質（例えば、野生型カルレティキュリンタンパク質またはカルレティキュリン突然変異体タンパク質）に結合する第１の抗原結合性ドメインを形成し、第２のＶＬおよび第２のＶＨは第２のカルレティキュリンタンパク質（例えば、野生型カルレティキュリンタンパク質またはカルレティキュリン突然変異体タンパク質）に結合する第２の抗原結合性ドメインを形成し、第１および第２のカルレティキュリンタンパク質は、配列番号６２８６のアミノ酸配列を含み、任意選択で、第１および第２のカルレティキュリンタンパク質は、配列番号６３１３のアミノ酸配列を含む分子、または配列番号６３１４のアミノ酸配列を含む分子からそれぞれ独立して選択される。
[001162]一部の実施形態では、多機能性分子は、図４Ａまたは４Ｂの構成を含む。
[001163]別の態様では、本開示は、本明細書に記載される任意の多特異性または多機能性分子をコードする単離された核酸分子を提供する。別の態様では、本開示は、本明細書に記載される多特異性もしくは多機能性分子のいずれかをコードするヌクレオチド配列、またはそれに対して実質的に相同（例えば、それに対して少なくとも８０％、９０％、９５％、もしくは９９．９％同一）であるヌクレオチド配列を含む単離された核酸分子を提供する。別の態様では、本開示は、本明細書に記載される核酸分子またはベクターを含む宿主細胞を提供する。
[001164]別の態様では、本開示は、本明細書に記載される多特異性または多機能性分子ポリペプチドを作製する、例えば、産生する方法であって、適切な条件、例えば、遺伝子発現および／またはホモもしくはヘテロ二量体化に適した条件下で、本明細書に記載される宿主細胞を培養するステップを含む、方法を提供する。
[001165]別の態様では、本開示は、本明細書に記載される多特異性または多機能性分子ポリペプチドと、薬学的に許容される担体、賦形剤、または安定化剤とを含む医薬組成物を提供する。
[001166]別の態様では、本開示は、がんを処置する方法であって、それを必要とする対象に、本明細書に記載される多特異性または多機能性分子ポリペプチドを投与するステップを含み、多特異性抗体ががんを処置するのに有効な量で投与される、方法を提供する。一部の実施形態では、対象は、第１および／または第２のカルレティキュリン突然変異体を発現するがん細胞を有する。一部の実施形態では、対象は、第１、第２、または第３の腫瘍抗原を発現する腫瘍細胞を有する、例えば、対象は、Ｇ６Ｂ、ＣＤ３４、ＣＤ４１、Ｐ－セレクチン、Ｃｌｅｃ２、ｃＫＩＴ、ＦＬＴ３、ＭＰＬ、ＩＴＧＢ３、ＩＴＧＢ２、ＧＰ５、ＧＰ６、ＧＰ９、ＧＰ１ＢＡ、ＤＳＣ２、ＦＣＧＲ２Ａ、ＴＮＦＲＳＦ１０Ａ、ＴＮＦＲＳＦ１０Ｂ、またはＴＭ４ＳＦ１から選択される腫瘍抗原を発現する腫瘍細胞を有する。一部の実施形態では、対象は、ＪＡＫ２ Ｖ６１７Ｆ突然変異を有する。一部の実施形態では、対象は、ＪＡＫ２ Ｖ６１７Ｆ突然変異を有しない。一部の実施形態では、対象は、ＭＰＬ突然変異を有する。一部の実施形態では、対象は、ＭＰＬ突然変異を有しない。一部の実施形態では、がんは血液がんであり、任意選択で、がんは、骨髄増殖性新生物、例えば、原発性もしくは特発性骨髄線維症（ＭＦ）、本態性血小板増加症（ＥＴ）、真性赤血球増加症（ＰＶ）、または慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）である。一部の実施形態では、がんは、骨髄線維症である。一部の実施形態では、がんは、固形腫瘍がんである。一部の実施形態では、固形腫瘍がんは、膵臓がん（例えば、膵臓腺癌）、乳がん、結腸直腸がん、肺がん（例えば、小細胞もしくは非小細胞肺がん）、皮膚がん、卵巣がん、または肝臓がんのうちの１つまたは複数である。
[001167]一部の実施形態では、がん細胞は骨髄増殖性新生物細胞を含む。一部の実施形態では、骨髄増殖性新生物細胞は、骨髄線維症細胞、本態性血小板血症細胞、真性赤血球増加症細胞、または慢性骨髄がん細胞から選択される。一部の実施形態では、骨髄増殖性新生物細胞は骨髄線維症細胞である。一部の実施形態では、骨髄増殖性新生物細胞は本態性血小板血症細胞である。一部の実施形態では、骨髄増殖性新生物細胞は真性赤血球増加症細胞である。一部の実施形態では、骨髄増殖性新生物細胞は慢性骨髄がん細胞である。一部の実施形態では、骨髄増殖性新生物細胞はＪＡＫ２突然変異（例えば、ＪＡＫ２ Ｖ６１７Ｆ突然変異）を含む。一部の実施形態では、骨髄増殖性新生物細胞はカルレティキュリン突然変異を含む。一部の実施形態では、骨髄増殖性新生物細胞はＭＰＬ突然変異を含む。
[001168]一部の実施形態では、方法は第２の治療処置を施すステップをさらに含む。一部の実施形態では、第２の治療処置は、治療剤（例えば、化学療法剤、生物学的製剤、ホルモン療法）、放射線、または外科手術を含む。一部の実施形態では、治療剤は、化学療法剤、または生物学的製剤から選択される。
例示的実施形態２
[001169]１．（ｉ）カルレティキュリンタンパク質（例えば、野生型または突然変異体カルレティキュリンタンパク質）に結合する第１の抗原結合性ドメイン、例えば、表４、表５、表６、表２４、表２５、表１６、表１７、表１８、もしくは表１９のいずれか１つに開示されるカルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインと、
（ｉｉ）ＴＣＲβＶに結合する第２の抗原結合性ドメイン、例えば、表３０、表３１、表３２、表３３、表１１、表１２、もしくは表１３のいずれか１つに開示される抗ＴＣＲβＶ抗原結合性ドメイン、またはＮＫｐ３０に結合する第２の抗原結合性ドメイン、例えば、表７、表８、表３５、表３６、表９、表１０、もしくは表３４に開示される抗ＮＫｐ３０抗原結合性ドメインと
を含む多機能性分子。
[001170]２．第２の抗原結合性ドメインがＴＣＲβＶに結合する、実施形態１に記載の多機能性分子。
[001171]３．第２の抗原結合性ドメインがＴ細胞を活性化するか、または第２の抗原結合性ドメインがＴ細胞を活性化しない、実施形態２に記載の多機能性分子。
[001172]４．第２の抗原結合性ドメインが、ＴＣＲβＶ１２またはＴＣＲβＶ６（例えば、配列番号１０４４のアミノ酸配列を含む）に結合する、実施形態２または３に記載の多機能性分子。
[001173]５．第２の抗原結合性ドメインが、表３０、表３１、表３２、表３３、表１１、表１２、または表１３に列挙される１つまたは複数のアミノ酸配列を含む、実施形態２～４のいずれかに記載の多機能性分子。
[001174]６．第２の抗原結合性ドメインが、
（ａ）重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）であって、
（ｉ）ＶＨが、表３０、表３１、表３３、表１１、表１２、もしくは表１３における重鎖相補性決定領域１（ＶＨＣＤＲ１）のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＨＣＤＲ１、表３０、表３１、表３３、表１１、表１２、もしくは表１３におけるＶＨＣＤＲ２のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＨＣＤＲ２、および／または表３０、表３１、表３３、表１１、表１２、もしくは表１３におけるＶＨＣＤＲ３のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＨＣＤＲ３を含み、
（ｉｉ）ＶＬが、表３０、表３１、表３３、表１１、表１２、もしくは表１３における軽鎖相補性決定領域１（ＶＬＣＤＲ１）のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＬＣＤＲ１、表３０、表３１、表３３、表１１、表１２、もしくは表１３におけるＶＬＣＤＲ２のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＬＣＤＲ２、および／または表３０、表３１、表３３、表１１、表１２、もしくは表１３におけるＶＬＣＤＲ３のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＬＣＤＲ３を含む、重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）；
（ｂ）重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）であって、
（ｉ）ＶＨが、配列番号３の重鎖相補性決定領域１（ＶＨＣＤＲ１）アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号４のＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号５のＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を含み、かつ／または
（ｉｉ）ＶＬが、配列番号６の軽鎖相補性決定領域１（ＶＨＣＤＲ１）アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号７のＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号８のＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を含む、重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）；
（ｃ）重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）であって、
（ｉ）ＶＨが、配列番号４５の重鎖相補性決定領域１（ＶＨＣＤＲ１）アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号４６のＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号４７のＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を含み、かつ／または
（ｉｉ）ＶＬが、配列番号５１の軽鎖相補性決定領域１（ＶＨＣＤＲ１）アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号５２のＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号５３のＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を含む、重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）；ならびに／あるいは
（ｄ）重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）であって、
（ｉ）ＶＨが、配列番号４８の重鎖相補性決定領域１（ＶＨＣＤＲ１）アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号４９のＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号５０のＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を含み、かつ／または
（ｉｉ）ＶＬが、配列番号５４の軽鎖相補性決定領域１（ＶＨＣＤＲ１）アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号５５のＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号５６のＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を含む、重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）
を含む、実施形態２～５のいずれかに記載の多機能性分子。
[001175]７．第２の抗原結合性ドメインが、
（ａ）重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）であって、
（ｉ）ＶＨが、表３０、表３１、表３３、表１１、表１２、もしくは表１３におけるＶＨのアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含み、かつ／または
（ｉｉ）ＶＬが、表３０、表３１、表３３、表１１、表１２、もしくは表１３におけるＶＬのアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含み、
（ｉｉｉ）ＶＨが、配列番号９のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含み、かつ／または
（ｉｖ）ＶＬが、配列番号１０のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含む、重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）；
（ｂ）重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）であって、
（ｉ）ＶＨが、配列番号９のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含み、かつ／または
（ｉｉ）ＶＬが、配列番号１１のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含む、重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）；ならびに／あるいは
（ｃ）重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）であって、
（ｉ）ＶＨが、配列番号１３１２のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含み、かつ／または
（ｉｉ）ＶＬが、配列番号１３１４のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含む、重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）
を含む、実施形態２～５のいずれかに記載の多機能性分子。
[001176]８．第２の抗原結合性ドメインが、
（ａ）重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）であって、
（ｉ）ＶＨが、配列番号１７の重鎖相補性決定領域１（ＶＨＣＤＲ１）アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号１８のＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号１９のＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を含み、かつ／または
（ｉｉ）ＶＬが、配列番号２０の軽鎖相補性決定領域１（ＶＨＣＤＲ１）アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号２１のＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号２２のＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を含む、重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）；
（ｂ）重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）であって、
（ｉ）ＶＨが、配列番号５７の重鎖相補性決定領域１（ＶＨＣＤＲ１）アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号５８のＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号５９のＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を含み、かつ／または
（ｉｉ）ＶＬが、配列番号６３の軽鎖相補性決定領域１（ＶＨＣＤＲ１）アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号６４のＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号６５のＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を含む、重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）；ならびに／あるいは
（ｃ）重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）であって、
（ｉ）ＶＨが、配列番号６０の重鎖相補性決定領域１（ＶＨＣＤＲ１）アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号６１のＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号６２のＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を含み、かつ／または
（ｉｉ）ＶＬが、配列番号６６の軽鎖相補性決定領域１（ＶＨＣＤＲ１）アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号６７のＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号６８のＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を含む、重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）
を含む、実施形態２～５のいずれかに記載の多機能性分子。
[001177]９．第２の抗原結合性ドメインが、
（ａ）重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）であって、
（ｉ）ＶＨが、配列番号１５のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含み、かつ／または
（ｉｉ）ＶＬが、配列番号１６のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含む、重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）；ならびに／あるいは
（ｂ）重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）であって、
（ｉ）ＶＨが、
配列番号２３のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）、
配列番号２４のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）、または
配列番号２５のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含み；かつ／または
（ｉｉ）ＶＬが、
配列番号２６のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）、
配列番号２７のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）、
配列番号２８のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）、
配列番号２９のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）、または
配列番号３０のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含む、重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）
を含む、実施形態２～５のいずれかに記載の多機能性分子。
[001178]１０．例えば、Ｎ末端からＣ末端まで、第１のＶＬおよび第１のＣＬを含む第１のポリペプチド、
[001179]例えば、Ｎ末端からＣ末端まで、第１のＶＨ、第１のＣＨ１、第１の二量体化ドメイン（例えば、第１のＦｃ）、およびＴＣＲ（例えば、ＴＣＲＶβ）に結合する第１の部分（例えば、ＴＣＲ（例えば、ＴＣＲＶβ）に結合する第１のｓｃＦｖ）を含む第２のポリペプチド、
例えば、Ｎ末端からＣ末端まで、第２のＶＨ、第２のＣＨ１、第２の二量体化ドメイン（例えば、第２のＦｃ）、および任意選択でＴＣＲ（例えば、ＴＣＲＶβ）に結合する第２の部分（例えば、ＴＣＲ（例えば、ＴＣＲＶβ）に結合する第２のｓｃＦｖ）を含む第３のポリペプチド、
例えば、Ｎ末端からＣ末端まで、第２のＶＬおよび第２のＣＬを含む第４のポリペプチド
を含み、
第１のＶＬおよび第１のＶＨは第１のカルレティキュリンタンパク質に結合する第１の抗原結合性ドメインを形成し、第２のＶＬおよび第２のＶＨは第２のカルレティキュリンタンパク質に結合する第３の抗原結合性ドメインを形成し、
任意選択で、第１および第２のカルレティキュリンタンパク質は配列番号６２８５、Ｄ１００１、または６２８６のアミノ酸配列を含み、
任意選択で、第１および第２のカルレティキュリン突然変異体タンパク質は、配列番号６３１３のアミノ酸配列を含む分子、または配列番号６３１４のアミノ酸配列を含む分子からそれぞれ独立して選択され、
任意選択で、多機能性分子は図３Ａまたは３Ｂの構成を含む、実施形態２～９のいずれかに記載の多機能性分子。
[001180]１１．第２の抗原結合性ドメインがＮＫｐ３０に結合する、実施形態１に記載の多機能性分子。
[001181]１２．第２の抗原結合性ドメインが、ＮＫｐ３０に結合する（例えば、それを活性化させる）抗体分子、例えば抗原結合性ドメイン、またはリガンドから選択され、例えば、第２の抗原結合性ドメインが、ＮＫｐ３０に結合する（例えば、それを活性化させる）抗体分子またはリガンドである、実施形態１１に記載の多機能性分子。
[001182]１３．第２の抗原結合性ドメインが、
（ｉ）表７、表３５、表９、表１０、もしくは表３４の重鎖相補性決定領域１（ＶＨＣＤＲ１）のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＨＣＤＲ１、表７、表３５、表９、表１０、もしくは表３４のＶＨＣＤＲ２のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＨＣＤＲ２、および／または表７、表３５、表９、表１０、もしくは表３４のＶＨＣＤＲ３のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域（ＶＨ）、ならびに／あるいは
（ｉｉ）表８、表３６、表９、表１０、もしくは表３４の軽鎖相補性決定領域１（ＶＬＣＤＲ１）のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＬＣＤＲ１、表８、表３６、表９、表１０、もしくは表３４のＶＬＣＤＲ２のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＬＣＤＲ２、および／または表８、表３６、表９、表１０、もしくは表３４のＶＬＣＤＲ３のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）
を含む、実施形態１１または１２に記載の多機能性分子。
[001183]１４．第２の抗原結合性ドメインが、
（ｉ）配列番号７３１３の重鎖相補性決定領域１（ＶＨＣＤＲ１）アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号６００１のＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号７３１５のＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；ならびに／あるいは
（ｉｉ）配列番号７３２６の軽鎖相補性決定領域１（ＶＬＣＤＲ１）アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号７３２７のＶＬＣＤＲ２アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号７３２９のＶＬＣＤＲ３アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）
を含む、実施形態１３に記載の多機能性分子。
[001184]１５．第２の抗原結合性ドメインが、
（ｉ）配列番号７２９８もしくは７３００～７３０４のいずれかのアミノ酸配列（または配列番号７２９８もしくは７３００～７３０４のいずれかに対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨ；および／または
（ｉｉ）配列番号７２９９もしくは７３０５～７３０９のいずれかのアミノ酸配列（または配列番号７２９９もしくは７３０５～７３０９のいずれかに対して少なくとも約９３％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬ
を含む、実施形態１３または１４に記載の多機能性分子。
[001185]１６．第２の抗原結合性ドメインが、
（ｉ）配列番号７３０２のアミノ酸配列（または７３０２に対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨ、および配列番号７３０５のアミノ酸配列（または７３０５に対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬ；または
（ｉｉ）配列番号７３０２のアミノ酸配列（または７３０２に対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨ、および配列番号７３０９のアミノ酸配列（または７３０９に対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬ
を含む、実施形態１３～１５のいずれかに記載の多機能性分子。
[001186]１７．第２の抗原結合性ドメインが、
（ｉ）配列番号７３１０のアミノ酸配列（または７３１０に対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）；または
（ｉｉ）配列番号７３１１のアミノ酸配列（または７３１１に対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）
を含む、実施形態１３～１６のいずれかに記載の多機能性分子。
[001187]１８．第２の抗原結合性ドメインが、
（ｉ）配列番号６０００の重鎖相補性決定領域１（ＶＨＣＤＲ１）アミノ酸配列、配列番号６００１のＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列、および／または配列番号６００２のＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）、ならびに
（ｉｉ）配列番号６０６３の軽鎖相補性決定領域１（ＶＬＣＤＲ１）アミノ酸配列、配列番号６０６４のＶＬＣＤＲ２アミノ酸配列、および／または配列番号７２９３のＶＬＣＤＲ３アミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）
を含む、実施形態１１または１２に記載の多機能性分子。
[001188]１９．第２の抗原結合性ドメインが、
（１）表７、表３５、表９、表１０、もしくは表３４の重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）のアミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＨＦＷＲ１、表７、表３５、表９、表１０、もしくは表３４のＶＨＦＷＲ２のアミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＨＦＷＲ２、表７、表３５、表９、表１０、もしくは表３４のＶＨＦＷＲ３のアミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＨＦＷＲ３、または表７、表３５、表９、表１０、もしくは表３４のＶＨＦＷＲ４のアミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＨＦＷＲ４を含む重鎖可変領域（ＶＨ）、および／あるいは
（２）表８、表３６、表９、表１０、もしくは表３４の軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）のアミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＬＦＷＲ１、表８、表３６、表９、表１０、もしくは表３４のＶＬＦＷＲ２のアミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＬＦＷＲ２、表８、表３６、表９、表１０、もしくは表３４のＶＬＦＷＲ３のアミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＬＦＷＲ３、または表８、表３６、表９、表１０、もしくは表３４のＶＬＦＷＲ４のアミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＬＦＷＲ４を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）
を含む、実施形態１１、１２または１８のいずれかに記載の多機能性分子。
[001189]２０．第２の抗原結合性ドメインが、
（１）配列番号６００３の重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６００４のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６００５のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列、または配列番号６００６のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）、および
（３）配列番号６０６６の軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６０６７のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号７２９２のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列、または配列番号６０６９のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）
を含む、実施形態１９に記載の多機能性分子。
[001190]２１．第２の抗原結合性ドメインが、
（ｉ）表７、表３５、表９、表１０、もしくは表３４のＶＨのアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨ、および／または
（ｉｉ）表８、表３６、表９、表１０、もしくは表３４のＶＬのアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約９３％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬ
を含む、実施形態１１、１２または１８～２０のいずれかに記載の多機能性分子。
[001191]２２．第２の抗原結合性ドメインが、表１０の重鎖のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含む重鎖を含む、実施形態１１、１２または１８～２１のいずれかに記載の多機能性分子。
[001192]２３．第２の抗原結合性ドメインが、表１０の軽鎖のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含む軽鎖を含む、実施形態１１、１２、または１８～２２のいずれかに記載の多機能性分子。
[001193]２４．第２の抗原結合性ドメインが、表１０の重鎖のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含む重鎖、および表１０の軽鎖のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含む軽鎖を含む、実施形態１１、１２、または１８～２３のいずれかに記載の多機能性分子。
[001194]２５．例えば、Ｎ末端からＣ末端まで、第１のＶＬおよび第１のＣＬを含む第１のポリペプチド、
例えば、Ｎ末端からＣ末端まで、第１のＶＨ、第１のＣＨ１、第１の二量体化ドメイン（例えば、第１のＦｃ）、およびＮＫｐ３０に結合する第１の部分（例えば、ＮＫｐ３０に結合する第１の抗体分子またはリガンド）を含む第２のポリペプチド、
例えば、Ｎ末端からＣ末端まで、第２のＶＨ、第２のＣＨ１、第２の二量体化ドメイン（例えば、第２のＦｃ）、および任意選択でＮＫｐ３０に結合する第２の部分（例えば、ＮＫｐ３０に結合する第２の抗体分子またはリガンド）を含む第３のポリペプチド、
例えば、Ｎ末端からＣ末端まで、第２のＶＬおよび第２のＣＬを含む第４のポリペプチドを含み、
第１のＶＬおよび第１のＶＨが第１のカルレティキュリンタンパク質に結合する第１の抗原結合性ドメインを形成し、第２のＶＬおよび第２のＶＨが第２のカルレティキュリンタンパク質に結合する第３の抗原結合性ドメインを形成し、
任意選択で、第１および第２のカルレティキュリンタンパク質が配列番号６２８５、Ｄ１００１、または６２８６のアミノ酸配列を含み、
任意選択で、第１および第２のカルレティキュリン突然変異体タンパク質が、配列番号６３１３のアミノ酸配列を含む分子、または配列番号６３１４のアミノ酸配列を含む分子からそれぞれ独立して選択され、
任意選択で、多機能性分子が図３Ａまたは３Ｂの構成を含む、
実施形態１１～２４のいずれかに記載の多機能性分子。
[001195]２６．カルレティキュリンタンパク質が配列番号６２８５～６３１２またはＤ１００１から選択されるアミノ酸配列を含み、任意選択で、カルレティキュリンタンパク質が配列番号６３１３～６３４６またはＤ１００２～Ｄ１００３から選択されるアミノ酸配列を含む、先行する実施形態のいずれかに記載の多機能性分子。
[001196]２７．カルレティキュリンタンパク質が配列番号６２８５またはＤ１００１のアミノ酸配列を含む、先行する実施形態のいずれかに記載の多機能性分子。
[001197]２８．カルレティキュリンタンパク質が配列番号６２８６のアミノ酸配列を含む、先行する実施形態のいずれかに記載の多機能性分子。
[001198]２９．第１の抗原結合性ドメインがカルレティキュリンタンパク質のＣ末端内に位置するエピトープに結合し、任意選択で、第１の抗原結合性ドメインが配列番号６２８５、Ｄ１００１、または６２８６のアミノ酸配列内に位置するエピトープに結合する、先行する実施形態のいずれかに記載の多機能性分子。
[001199]３０．第２のカルレティキュリンタンパク質に結合する第３の抗原結合性ドメインをさらに含み、例えば、第２のカルレティキュリン突然変異体タンパク質が、配列番号６２８５、Ｄ１００１、または６２８６のアミノ酸配列を含み、任意選択で、
（ｉ）第３の抗原結合性ドメインが第１の抗原結合性ドメインと異なるか、または
（ｉｉ）第３の抗原結合性ドメインが第１の抗原結合性ドメインと同じである、
先行する実施形態のいずれかに記載の多機能性分子。
[001200]３１．第２のカルレティキュリン分子が第１の抗原結合性ドメインによって結合されるカルレティキュリン分子と同じである、実施形態３０に記載の多機能性分子。
[001201]３２．第２のカルレティキュリン分子が第１の抗原結合性ドメインによって結合されるカルレティキュリン分子と異なる、実施形態３０に記載の多機能性分子。
[001202]３３．第２のカルレティキュリンタンパク質が配列番号６２８５～６３１２またはＤ１００１から選択されるアミノ酸配列を含み、任意選択で、第２のカルレティキュリンタンパク質が配列番号６３１３～６３４６またはＤ１００２～Ｄ１００３から選択されるアミノ酸配列を含む、実施形態３０～３２のいずれかに記載の多機能性分子。
[001203]３４．第１の抗原結合性ドメインによって結合されるカルレティキュリンタンパク質が配列番号６２８５またはＤ１００１のアミノ酸配列を含み、第２のカルレティキュリンタンパク質が配列番号６２８６のアミノ酸配列を含む、実施形態３３に記載の多機能性分子。
[001204]３５．第３の抗原結合性ドメインが第２のカルレティキュリンタンパク質のＣ末端内に位置するエピトープに結合し、任意選択で、第３の抗原結合性ドメインが配列番号６２８５、Ｄ１００１、または６２８６のアミノ酸配列内に位置するエピトープに結合する、実施形態３０～３４のいずれかに記載の多機能性分子。
[001205]３６．第１の抗原結合性ドメインが、
（ｉ）表４、表２４、表２５、もしくは表１７における重鎖相補性決定領域１（ＶＨＣＤＲ１）のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＨＣＤＲ１、表４、表２４、表２５、もしくは表１７におけるＶＨＣＤＲ２のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＨＣＤＲ２、および／または表４、表２４、表２５、もしくは表１７におけるＶＨＣＤＲ３のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；
（ｉｉ）表５、表２４、表２５、もしくは表１８における軽鎖相補性決定領域１（ＶＬＣＤＲ１）のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＨＣＤＲ１、表５、表２４、表２５、もしくは表１８におけるＶＬＣＤＲ２のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＨＣＤＲ２、および／または表５、表２４、表２５、もしくは表１８におけるＶＬＣＤＲ３のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＨＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；
（ｉｉｉ）表２４、表２５、もしくは表１６におけるＶＨのアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨ；
（ｉｖ）表２４、表２５、もしくは表１６におけるＶＬのアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約９３％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬ；
（ｖ）表４もしくは表６における重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、もしくは９つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＨＦＷＲ１、表４もしくは表６におけるＶＨＦＷＲ２のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、もしくは９つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＨＦＷＲ２、表４もしくは表６におけるＶＨＦＷＲ３のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、もしくは９つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＨＦＷＲ３、および／または表４もしくは表６におけるＶＨＦＷＲ４のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、もしくは９つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＨＦＷＲ４を含むＶＨ、ならびに／あるいは
（ｖｉ）表５もしくは表６における軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、もしくは９つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＬＦＷＲ１、表５もしくは表６におけるＶＬＦＷＲ２のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、もしくは９つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＬＦＷＲ２、表５もしくは表６におけるＶＬＦＷＲ３のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、もしくは９つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＬＦＷＲ３、および／または表５もしくは表６におけるＶＬＦＷＲ４のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、もしくは９つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＬＦＷＲ４を含むＶＬ
を含む、先行する実施形態のいずれかに記載の多機能性分子。
[001206]３７．腫瘍標的化部分をさらに含む、先行する実施形態のいずれかに記載の多機能性分子。
[001207]３８．腫瘍標的化部分が腫瘍抗原に結合する、実施形態３７に記載の多機能性分子。
[001208]３９．腫瘍抗原が、Ｇ６Ｂ、ＣＤ３４、ＣＤ４１、Ｐ－セレクチン、Ｃｌｅｃ２、ｃＫＩＴ、ＦＬＴ３、ＭＰＬ、ＩＴＧＢ３、ＩＴＧＢ２、ＧＰ５、ＧＰ６、ＧＰ９、ＧＰ１ＢＡ、ＤＳＣ２、ＦＣＧＲ２Ａ、ＴＮＦＲＳＦ１０Ａ、ＴＮＦＲＳＦ１０Ｂ、またはＴＭ４ＳＦ１から選択される、実施形態３８に記載の多機能性分子。
[001209]４０．腫瘍標的化部分が、例えば、Ｇ６Ｂ、ＣＤ３４、ＣＤ４１、Ｐ－セレクチン、Ｃｌｅｃ２、ｃＫＩＴ、ＦＬＴ３、ＭＰＬ、ＩＴＧＢ３、ＩＴＧＢ２、ＧＰ５、ＧＰ６、ＧＰ９、ＧＰ１ＢＡ、ＤＳＣ２、ＦＣＧＲ２Ａ、ＴＮＦＲＳＦ１０Ａ、ＴＮＦＲＳＦ１０Ｂ、またはＴＭ４ＳＦ１から選択される腫瘍抗原に結合する抗体分子を含む、実施形態３７に記載の多機能性分子。
[001210]４１．腫瘍標的化部分が、例えば、表３８または表２０に列挙されるＶＨおよび／またはＶＬ配列を含む、実施形態４０に記載の多機能性分子。
[001211]４２．非腫瘍細胞よりも骨髄増殖性新生物細胞に優先的に結合し、任意選択で、多機能性分子と骨髄増殖性新生物細胞との結合が、多機能性分子と非腫瘍細胞との結合よりも１０、２０、３０、４０、５０倍を超えて大きい、先行する実施形態のいずれか１つに記載の多機能性分子。
[001212]４３．骨髄増殖性新生物細胞が、骨髄線維症細胞、本態性血小板血症細胞、真性赤血球増加症細胞、または慢性骨髄がん細胞から選択され、任意選択で、
骨髄増殖性新生物細胞がＪＡＫ２ Ｖ６１７Ｆ突然変異を含まないか、または
骨髄増殖性新生物細胞がＭＰＬ突然変異を含まない、
実施形態４２に記載の多機能性分子。
[001213]４４．リンカー、例えば、第１の抗原結合性ドメインと第２の抗原結合性ドメインとの間のリンカーをさらに含む、先行する実施形態のいずれか１つに記載の多機能性分子。
[001214]４５．リンカーが、切断性リンカー、非切断性リンカー、ペプチドリンカー、可撓性リンカー、剛性リンカー、ヘリックスリンカー、または非ヘリックスリンカーから選択される、実施形態４４に記載の多機能性分子。
[001215]４６．リンカーがペプチドリンカーである、実施形態４４または４５に記載の多機能性分子。
[001216]４７．ペプチドリンカーがＧｌｙおよびＳｅｒを含む、実施形態４６に記載の多機能性分子。
[001217]４８．ペプチドリンカーが、配列番号６２１４～６２１７または６２２０～６２２１および７７～７８から選択されるアミノ酸配列を含む、実施形態４６に記載の多機能性分子。
[001218]４９．先行する実施形態のいずれか１つに記載の多機能性分子をコードする核酸分子。
[001219]５０．実施形態４９に記載の核酸分子を含むベクター、例えば、発現ベクター。
[001220]５１．実施形態４９に記載の核酸分子または実施形態５０に記載のベクターを含む細胞。
[001221]５２．実施形態１～４８のいずれか１つに記載の多機能性分子を作製する、例えば、産生する方法であって、適切な条件、例えば、遺伝子発現および／またはホモもしくはヘテロ二量体化に適した条件下で、実施形態５１に記載の細胞を培養するステップを含む、方法。
[001222]５３．実施形態１～４８のいずれか１つに記載の多機能性分子と、薬学的に許容される担体、賦形剤、または安定化剤とを含む医薬組成物。
[001223]５４．がんを処置する方法であって、それを必要とする対象に、実施形態１～４８のいずれか１つに記載の多機能性分子を投与するステップを含み、多機能性分子ががんを処置するのに有効な量で投与される、方法。
[001224]５５．がんを処置するための医薬の製造のための実施形態１～４８のいずれか１つに記載の多機能性分子の使用。
[001225]５６．対象が第１および／または第２のカルレティキュリンタンパク質を発現するがん細胞を有する、実施形態５４に記載の方法または実施形態５５に記載の使用。
[001226]５７．対象がＪＡＫ２ Ｖ６１７Ｆ突然変異を有する、実施形態５４もしくは５６に記載の方法または実施形態５５もしくは５６に記載の使用。
[001227]５８．対象がＪＡＫ２ Ｖ６１７Ｆ突然変異を有しない、実施形態５４もしくは５６に記載の方法または実施形態５５もしくは５６に記載の使用。
[001228]５９．対象がＭＰＬ突然変異を有する、実施形態５４もしくは５６～５８のいずれか１つに記載の方法または実施形態５５～５８のいずれか１つに記載の使用。
[001229]６０．対象がＭＰＬ突然変異を有しない、実施形態５４もしくは５６～５８のいずれか１つに記載の方法または実施形態５５～５８のいずれか１つに記載の使用。
[001230]６１．がんが、血液がんであり、任意選択で、がんが、骨髄増殖性新生物、例えば、原発性もしくは特発性骨髄線維症（ＭＦ）、本態性血小板増加症（ＥＴ）、真性赤血球増加症（ＰＶ）、または慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）であり、任意選択で、がんが骨髄線維症である、実施形態５４もしくは５６～６０のいずれか１つに記載の方法または実施形態５５～６０のいずれか１つに記載の使用。
[001231]６２．がんが固形腫瘍がんである、実施形態５４もしくは５６～６０のいずれか１つに記載の方法または実施形態５５～６０のいずれか１つに記載の使用。
[001232]６３．第２の治療処置を施すステップをさらに含む、実施形態５４もしくは５６～６２のいずれか１つに記載の方法または実施形態５５～６２のいずれか１つに記載の使用。
[001233]６４．第２の治療処置が、治療剤（例えば、化学療法剤、生物学的製剤、ホルモン療法）、放射線、または外科手術を含む、実施形態６３に記載の方法または実施形態６３に記載の使用。
[001234]６５．治療剤が化学療法剤または生物学的製剤から選択される、実施形態６４に記載の方法または実施形態６４に記載の使用。
[001235]６６．試料または対象中のカルレティキュリン（例えば、野生型および／または突然変異体カルレティキュリン）を検出する方法であって、
試料または対象を、本明細書に記載の抗カルレティキュリン（例えば、野生型および／または突然変異体カルレティキュリン）抗体分子と接触させるステップ；ならびに
抗体分子と試料または対象との複合体の形成を検出するステップ
を含み、それによってカルレティキュリン（例えば、野生型および／または突然変異体カルレティキュリン）を検出する、方法。
[001236]６７．カルレティキュリン（例えば、野生型および／または突然変異体カルレティキュリン）がｉｎ ｖｉｔｒｏまたはｉｎ ｖｉｖｏで検出される、実施形態６６に記載の方法。
[001237]６８．参照試料または対象を、抗体分子と接触させるステップ；および抗体分子と参照試料または対象との複合体の形成を検出するステップをさらに含み、参照試料または対象と比較した、試料または対象における複合体の形成における変化、例えば統計学的に有意な変化が、試料または対象におけるカルレティキュリン（例えば、野生型および／または突然変異体カルレティキュリン）の存在を示す、実施形態６６または６７に記載の方法。
[001238]６９．対象から試料を取得するステップをさらに含む、実施形態６６～６８のいずれかに記載の方法。
[001239]７０．試料が血漿、組織（例えば、がん性組織）、生検、血液（例えば、全血）、ＰＢＭＣ、骨髄、および／またはリンパ組織、例えばリンパ節のうちの１つまたは複数を含む、実施形態６６～６９のいずれかに記載の方法。
[001240]７１．試料が凍結および／または固定されていない、実施形態６６～７０のいずれかに記載の方法。
[001241]７２．試料が凍結（例えば、瞬間凍結）および／または固定（例えば、ホルマリン固定パラフィン包埋（ＦＦＰＥ））されている、実施形態６６～７０のいずれかに記載の方法。
[001242]７３．対象が、本明細書に記載の疾患または障害（例えば、がん、例えば、骨髄線維症）を有する、または有するリスクがある、実施形態６６～７２のいずれかに記載の方法。
[001243]７４．例えば、マルチパネル法を使用するフロー分析を実施するステップをさらに含む、実施形態６６～７３のいずれかに記載の方法。
[001244]７５．Ｔ細胞クローン性を評価して、例えば、Ｔ細胞悪性腫瘍の存在および／またはレベルを決定するステップをさらに含む、実施形態６６～７４のいずれかに記載の方法。
[001245]７６．生体試料からのカルレティキュリン＋（例えば、野生型カルレティキュリン＋および／または突然変異体カルレティキュリン＋）細胞のレベルを測定するステップ（例えば、カルレティキュリン＋細胞が、例えば、参照試料または対象と比較して枯渇しているかどうかを決定するステップ）をさらに含む、実施形態６６～７５のいずれかに記載の方法。
[001246]７７．カルレティキュリン（例えば、野生型および／または突然変異体カルレティキュリン）の細胞内レベルを測定するステップをさらに含む、実施形態６６～７６のいずれかに記載の方法。
[001247]７８．カルレティキュリン（例えば、野生型および／または突然変異体カルレティキュリン）の膜レベルを測定するステップをさらに含む、実施形態６６～７７のいずれかに記載の方法。
[001248]７９．例えば、（例えば、本明細書に記載の抗体分子を用いた）処置後に、疾患または障害（例えば、がん、例えば、骨髄線維症）の予後、重症度、または存在もしくは非存在の変化について対象を評価するステップをさらに含む、実施形態６６～７８のいずれかに記載の方法。
[001249]８０．抗体分子が検出可能に標識されている、実施形態６６～７９のいずれかに記載の方法。
[001250]８１．対象を評価する方法であって、
対象からの試料（例えば、本明細書に記載の試料）を、本明細書に記載の抗カルレティキュリン（例えば、野生型および／または突然変異体カルレティキュリン）抗体分子と接触させるステップ；ならびに
抗体分子と試料との複合体の形成を検出するステップ
を含み、それによって対象を評価する、方法。
[001251]８２．対象が、本明細書に記載の疾患または障害（例えば、がん、例えば、骨髄線維症）を有する、または有するリスクがある、実施形態８１に記載の方法。
[001252]８３．対象が本明細書に記載の抗体分子で処置されていない、実施形態８１または８２に記載の方法。
[001253]８４．対象が本明細書に記載の抗体分子で処置されている、実施形態８１または８２に記載の方法。
[001254]８５．本明細書に記載の抗カルレティキュリン（例えば、野生型および／または突然変異体カルレティキュリン）抗体分子と、試料または対象におけるカルレティキュリン（例えば、野生型および／または突然変異体カルレティキュリン）を検出する方法における使用のための使用説明書とを含むキット。

Claims (135)

  1. （ｉ）野生型または突然変異体カルレティキュリンタンパク質に結合する第１の抗原結合性ドメインと、
    （ｉｉ）ＴＣＲβＶまたはＮＫｐ３０に結合する第２の抗原結合性ドメインと
    を含むポリペプチド分子を含む組成物であって、
    （Ａ）第１の抗原結合性ドメインが、（ｉ）それぞれ表４、表２４、表２５、もしくは表１７における重鎖相補性決定領域１（ＶＨＣＤＲ１）、ＶＨＣＤＲ２およびＶＨＣＤＲ３のアミノ酸配列を有するＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２およびＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；ならびに／または（ｉｉ）それぞれ表５、表２４、表２５、もしくは表１８における軽鎖相補性決定領域１（ＶＨＣＤＲ１）、ＶＬＣＤＲ２およびＶＬＣＤＲ３のアミノ酸配列を有するＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２およびＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む；
    （Ｂ）第２の抗原結合性ドメインが、（ｉ）それぞれ表３０、表３１、表１０、表１１、表１２、もしくは表１３におけるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２およびＶＨＣＤＲ３のアミノ酸配列を有するＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２およびＶＨＣＤＲ３を含むＶＨ；ならびに／または（ｉｉ）それぞれ表３０、表３１、表１０、表１１、表１２、もしくは表１３におけるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２およびＶＬＣＤＲ３のアミノ酸配列を有するＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２およびＶＬＣＤＲ３を含むＶＬを含む；または
    （Ｃ）第２の抗原結合性ドメインが、（ｉ）それぞれ表７、表３５、表９、表１０、もしくは表３４におけるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２およびＶＨＣＤＲ３のアミノ酸配列を有するＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２およびＶＨＣＤＲ３を含むＶＨ；ならびに（ｉｉ）それぞれ表８、表３６、表９、表１０、もしくは表３４におけるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２およびＶＬＣＤＲ３のアミノ酸配列を有するＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２およびＶＬＣＤＲ３を含むＶＬを含む、組成物。
  2. ポリペプチド分子が多機能性ポリペプチド分子である、請求項１に記載の組成物。
  3. ポリペプチド分子が多特異性ポリペプチド分子である、請求項１または２に記載の組成物。
  4. 第２の抗原結合性ドメインがＴＣＲβＶに結合する、請求項１から３のいずれか１項に記載の組成物。
  5. 第２の抗原結合性ドメインがＴ細胞を活性化するか、または第２の抗原結合性ドメインがＴ細胞を活性化しない、請求項４に記載の組成物。
  6. 第２の抗原結合性ドメインがＴＣＲβＶ１２またはＴＣＲβＶ６に結合する、請求項４または５に記載の組成物。
  7. 第２の抗原結合性ドメインが、表３０、表３１、表３２、表１０、表１１、表１２、または表１３に列挙される１つまたは複数のアミノ酸配列を含む、請求項４から６のいずれか１項に記載の組成物。
  8. 第２の抗原結合性ドメインが、
    （ａ）それぞれ表３０、表３１、表１０、表１１、表１２、もしくは表１３におけるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２およびＶＨＣＤＲ３のアミノ酸配列を有するＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２およびＶＨＣＤＲ３を含むＶＨ；ならびに／または（ｉｉ）それぞれ表３０、表３１、表１０、表１１、表１２、もしくは表１３におけるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２およびＶＬＣＤＲ３のアミノ酸配列を有するＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２およびＶＬＣＤＲ３を含むＶＬ；
    （ｂ）重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）であって、
    （ｉ）ＶＨが、配列番号３Ａの重鎖相補性決定領域１（ＶＨＣＤＲ１）アミノ酸配列、配列番号４ＡのＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列、および配列番号５ＡのＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列を含み、かつ／または
    （ｉｉ）ＶＬが、配列番号６Ａの軽鎖相補性決定領域１（ＶＬＣＤＲ１）アミノ酸配列、配列番号７ＡのＶＬＣＤＲ２アミノ酸配列、および配列番号８ＡのＶＬＣＤＲ３アミノ酸配列を含む、重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）；
    （ｃ）重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）であって、
    （ｉ）ＶＨが、配列番号４５Ａの重鎖相補性決定領域１（ＶＨＣＤＲ１）アミノ酸配列、配列番号４６ＡのＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列、および配列番号４７ＡのＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列を含み、かつ／または
    （ｉｉ）ＶＬが、配列番号５１Ａの軽鎖相補性決定領域１（ＶＬＣＤＲ１）アミノ酸配列、配列番号５２ＡのＶＬＣＤＲ２アミノ酸配列、および配列番号５３ＡのＶＬＣＤＲ３アミノ酸配列を含む、重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）；ならびに／あるいは
    （ｄ）重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）であって、
    （ｉ）ＶＨが、配列番号４８Ａの重鎖相補性決定領域１（ＶＨＣＤＲ１）アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、または４つ以下の置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号４９ＡのＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、または４つ以下の置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および配列番号５０ＡのＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列を含み、かつ／または
    （ｉｉ）ＶＬが、配列番号５４Ａの軽鎖相補性決定領域１（ＶＬＣＤＲ１）アミノ酸配列、配列番号５５ＡのＶＬＣＤＲ２アミノ酸配列、および配列番号５６ＡのＶＬＣＤＲ３アミノ酸配列を含む、重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）
    を含む、請求項４から７のいずれか１項に記載の組成物。
  9. 第２の抗原結合性ドメインが、
    （ａ）重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）であって、
    （ｉ）ＶＨが、表３０、表３１、表１０、表１１、表１２、もしくは表１３におけるＶＨのアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含み、かつ／または
    （ｉｉ）ＶＬが、表３０、表３１、表１０、表１１、表１２、もしくは表１３におけるＶＬのアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含み；
    （ｉｉｉ）ＶＨが、配列番号９Ａのアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含み、かつ／または
    （ｉｖ）ＶＬが、配列番号１０Ａのアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含む、重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）；
    （ｂ）重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）であって、
    （ｉ）ＶＨが、配列番号９Ａのアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含み、かつ／または
    （ｉｉ）ＶＬが、配列番号１１Ａのアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含む、重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）；ならびに／あるいは
    （ｃ）重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）であって、
    （ｉ）ＶＨが、配列番号１３１２Ａのアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含み、かつ／または
    （ｉｉ）ＶＬが、配列番号１３１４Ａのアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含む、重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）
    を含む、請求項４から７のいずれか１項に記載の組成物。
  10. 第２の抗原結合性ドメインが、
    （ａ）重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）であって、
    （ｉ）ＶＨが、配列番号１７Ａの重鎖相補性決定領域１（ＶＨＣＤＲ１）アミノ酸配列、配列番号１８ＡのＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列、および配列番号１９ＡのＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列を含み、かつ／または
    （ｉｉ）ＶＬが、配列番号２０Ａの軽鎖相補性決定領域１（ＶＬＣＤＲ１）アミノ酸配列、配列番号２１ＡのＶＬＣＤＲ２アミノ酸配列、および配列番号２２ＡのＶＬＣＤＲ３アミノ酸配列を含む、重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）；
    （ｂ）重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）であって、
    （ｉ）ＶＨが、配列番号５７Ａの重鎖相補性決定領域１（ＶＨＣＤＲ１）アミノ酸配列、配列番号５８ＡのＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列、および配列番号５９ＡのＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列を含み、かつ／または
    （ｉｉ）ＶＬが、配列番号６３Ａの軽鎖相補性決定領域１（ＶＬＣＤＲ１）アミノ酸配列、配列番号６４ＡのＶＬＣＤＲ２アミノ酸配列、および配列番号６５ＡのＶＬＣＤＲ３アミノ酸配列を含む、重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）；ならびに／あるいは
    （ｃ）重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）であって、
    （ｉ）ＶＨが、配列番号６０Ａの重鎖相補性決定領域１（ＶＨＣＤＲ１）アミノ酸配列、配列番号６１ＡのＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列、および配列番号６２ＡのＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列を含み、かつ／または
    （ｉｉ）ＶＬが、配列番号６６Ａの軽鎖相補性決定領域１（ＶＬＣＤＲ１）アミノ酸配列、配列番号６７ＡのＶＬＣＤＲ２アミノ酸配列、および配列番号６８ＡのＶＬＣＤＲ３アミノ酸配列を含む、重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）
    を含む、請求項４から７のいずれか１項に記載の組成物。
  11. 第２の抗原結合性ドメインが、
    （ａ）重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）であって、
    （ｉ）ＶＨが、配列番号１５Ａのアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含み、かつ／または
    （ｉｉ）ＶＬが、配列番号１６Ａのアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含む、重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）；ならびに／あるいは
    （ｂ）重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）であって、
    （ｉ）ＶＨが、
    配列番号２３Ａのアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）、
    配列番号２４Ａのアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）、または
    配列番号２５Ａのアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含み；かつ／または
    （ｉｉ）ＶＬが、
    配列番号２６Ａのアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）、
    配列番号２７Ａのアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）、
    配列番号２８Ａのアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）、
    配列番号２９Ａのアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）、または
    配列番号３０Ａのアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含む、重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）
    を含む、請求項４から７のいずれか１項に記載の組成物。
  12. 第１のＶＬおよび第１のＣＬを含む第１のポリペプチド、
    第１のＶＨ、第１のＣＨ１、第１の二量体化ドメイン、およびＴＣＲＶβに結合する第１の部分を含む第２のポリペプチド、
    第２のＶＨ、第２のＣＨ１、第２の二量体化ドメイン、および任意選択でＴＣＲＶβに結合する第２の部分を含む第３のポリペプチド、
    第２のＶＬおよび第２のＣＬを含む第４のポリペプチド
    を含み、
    第１のＶＬおよび第１のＶＨが第１のカルレティキュリンタンパク質に結合する第１の抗原結合性ドメインを形成し、第２のＶＬおよび第２のＶＨが第２のカルレティキュリンタンパク質に結合する第３の抗原結合性ドメインを形成し、
    任意選択で、第１および第２のカルレティキュリンタンパク質が配列番号６２８５、Ｄ１００１、または６２８６のアミノ酸配列を含み、
    任意選択で、第１および第２のカルレティキュリン突然変異体タンパク質が、配列番号６３１３のアミノ酸配列を含む分子、または配列番号６３１４のアミノ酸配列を含む分子からそれぞれ独立して選択され、
    任意選択で、多機能性分子が図３Ａまたは３Ｂの構成を含む、
    請求項４から１１のいずれか１項に記載の組成物。
  13. 第２の抗原結合性ドメインがＮＫｐ３０に結合する、請求項１から３のいずれか１項に記載の組成物。
  14. 第２の抗原結合性ドメインが、ＮＫｐ３０に結合する抗体分子またはリガンドから選択される、請求項１３に記載の組成物。
  15. 第２の抗原結合性ドメインが、
    （ｉ）それぞれ表７、表３５、表９、表１０、もしくは表３４におけるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２およびＶＨＣＤＲ３のアミノ酸配列を有するＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２およびＶＨＣＤＲ３を含むＶＨ；ならびに（ｉｉ）それぞれ表８、表３６、表９、表１０、もしくは表３４におけるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２およびＶＬＣＤＲ３のアミノ酸配列を有するＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２およびＶＬＣＤＲ３を含むＶＬ
    を含む、請求項１３または１４に記載の組成物。
  16. 第２の抗原結合性ドメインが、
    （ｉ）配列番号７３１３の重鎖相補性決定領域１（ＶＨＣＤＲ１）アミノ酸配列、配列番号６００１のＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列、および配列番号７３１５のＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；ならびに／または
    （ｉｉ）配列番号７３２６の軽鎖相補性決定領域１（ＶＬＣＤＲ１）アミノ酸配列、配列番号７３２７のＶＬＣＤＲ２アミノ酸配列、および配列番号７３２９のＶＬＣＤＲ３アミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）
    を含む、請求項１５に記載の組成物。
  17. 第２の抗原結合性ドメインが、
    （ｉ）配列番号７２９８もしくは７３００～７３０４のいずれかのアミノ酸配列（または配列番号７２９８もしくは７３００～７３０４のいずれかに対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨ；および／または
    （ｉｉ）配列番号７２９９もしくは７３０５～７３０９のいずれかのアミノ酸配列（または配列番号７２９９もしくは７３０５～７３０９のいずれかに対して少なくとも約９３％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬ
    を含む、請求項１５または１６に記載の組成物。
  18. 第２の抗原結合性ドメインが、
    （ｉ）配列番号７３０２のアミノ酸配列（または７３０２に対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨ、および配列番号７３０５のアミノ酸配列（または７３０５に対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬ；または
    （ｉｉ）配列番号７３０２のアミノ酸配列（または７３０２に対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨ、および配列番号７３０９のアミノ酸配列（または７３０９に対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬ
    を含む、請求項１５から１７のいずれか１項に記載の組成物。
  19. 第２の抗原結合性ドメインが、
    （ｉ）配列番号７３１０のアミノ酸配列（または７３１０に対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）；または
    （ｉｉ）配列番号７３１１のアミノ酸配列（または７３１１に対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）
    を含む、請求項１５から１８のいずれか１項に記載の組成物。
  20. 第２の抗原結合性ドメインが、
    （ｉ）配列番号６０００の重鎖相補性決定領域１（ＶＨＣＤＲ１）アミノ酸配列、配列番号６００１のＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列、および配列番号６００２のＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）、ならびに
    （ｉｉ）配列番号６０６３の軽鎖相補性決定領域１（ＶＬＣＤＲ１）アミノ酸配列、配列番号６０６４のＶＬＣＤＲ２アミノ酸配列、および配列番号７２９３のＶＬＣＤＲ３アミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）
    を含む、請求項１３または１４に記載の組成物。
  21. 第２の抗原結合性ドメインが、
    （１）表７、表３５、表９、表１０、もしくは表３４の重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）のアミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＨＦＷＲ１、表７、表３５、表９、表１０、もしくは表３４のＶＨＦＷＲ２のアミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＨＦＷＲ２、表７、表３５、表９、表１０、もしくは表３４のＶＨＦＷＲ３のアミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＨＦＷＲ３、または表７、表３５、表９、表１０、もしくは表３４のＶＨＦＷＲ４のアミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＨＦＷＲ４を含む重鎖可変領域（ＶＨ）、および／あるいは
    （２）表８、表３６、表９、表１０、もしくは表３４の軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）のアミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＬＦＷＲ１、表８、表３６、表９、表１０、もしくは表３４のＶＬＦＷＲ２のアミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＬＦＷＲ２、表８、表３６、表９、表１０、もしくは表３４のＶＬＦＷＲ３のアミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＬＦＷＲ３、または表８、表３６、表９、表１０、もしくは表３４のＶＬＦＷＲ４のアミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＬＦＷＲ４を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）
    を含む、請求項１３、１４、および２０のいずれか１項に記載の組成物。
  22. 第２の抗原結合性ドメインが、
    （１）配列番号６００３の重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６００４のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６００５のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列、または配列番号６００６のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）、および
    （３）配列番号６０６６の軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６０６７のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号７２９２のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列、または配列番号６０６９のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）
    を含む、請求項２１に記載の組成物。
  23. 第２の抗原結合性ドメインが、
    （ｉ）表７、表３５、表９、表１０、もしくは表３４のＶＨのアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨ、および／または
    （ｉｉ）表８、表３６、表９、表１０、もしくは表３４のＶＬのアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約９３％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬ
    を含む、請求項１３、１４、および２０から２２のいずれか１項に記載の組成物。
  24. 第２の抗原結合性ドメインが、表１０の重鎖のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含む重鎖を含む、請求項１３、１４、および２０から２３のいずれか１項に記載の組成物。
  25. 第２の抗原結合性ドメインが、表１０の軽鎖のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含む軽鎖を含む、請求項１３、１４、および２０から２４のいずれか１項に記載の組成物。
  26. 第２の抗原結合性ドメインが、表１０の重鎖のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含む重鎖、および表１０の軽鎖のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含む軽鎖を含む、請求項１３、１４、および２０から２５のいずれか１項に記載の組成物。
  27. 第１のＶＬおよび第１のＣＬを含む第１のポリペプチド、
    第１のＶＨ、第１のＣＨ１、第１の二量体化ドメイン、およびＮＫｐ３０に結合する第１の部分を含む第２のポリペプチド、
    第２のＶＨ、第２のＣＨ１、第２の二量体化ドメイン、および任意選択でＮＫｐ３０に結合する第２の部分を含む第３のポリペプチド、
    第２のＶＬおよび第２のＣＬを含む第４のポリペプチド
    を含み、
    第１のＶＬおよび第１のＶＨが第１のカルレティキュリンタンパク質に結合する第１の抗原結合性ドメインを形成し、第２のＶＬおよび第２のＶＨが第２のカルレティキュリンタンパク質に結合する第３の抗原結合性ドメインを形成し、
    任意選択で、第１および第２のカルレティキュリンタンパク質が配列番号６２８５、Ｄ１００１、または６２８６のアミノ酸配列を含み、
    任意選択で、第１および第２のカルレティキュリン突然変異体タンパク質が、配列番号６３１３のアミノ酸配列を含む分子、または配列番号６３１４のアミノ酸配列を含む分子からそれぞれ独立して選択され、
    任意選択で、多機能性分子が図３Ａまたは３Ｂの構成を含む、
    請求項１３から２６のいずれか１項に記載の組成物。
  28. カルレティキュリンタンパク質が配列番号６２８５～６３１２またはＤ１００１から選択されるアミノ酸配列を含み、任意選択で、カルレティキュリンタンパク質が配列番号６３１３～６３４６またはＤ１００２～Ｄ１００３から選択されるアミノ酸配列を含む、請求項１から２７のいずれか１項に記載の組成物。
  29. カルレティキュリンタンパク質が配列番号６２８５またはＤ１００１のアミノ酸配列を含む、請求項１から２８のいずれか１項に記載の組成物。
  30. カルレティキュリンタンパク質が配列番号６２８６のアミノ酸配列を含む、請求項１から２９のいずれか１項に記載の組成物。
  31. 第１の抗原結合性ドメインがカルレティキュリンタンパク質のＣ末端内に位置するエピトープに結合し、任意選択で、第１の抗原結合性ドメインが配列番号６２８５、Ｄ１００１、または６２８６のアミノ酸配列内に位置するエピトープに結合する、請求項１から３０のいずれか１項に記載の組成物。
  32. 第２のカルレティキュリンタンパク質に結合する第３の抗原結合性ドメインをさらに含み、任意選択で、
    （ｉ）第３の抗原結合性ドメインが第１の抗原結合性ドメインと異なるか、または
    （ｉｉ）第３の抗原結合性ドメインが第１の抗原結合性ドメインと同じである、
    請求項１から３１のいずれか１項に記載の組成物。
  33. 第２のカルレティキュリン分子が第１の抗原結合性ドメインによって結合されるカルレティキュリン分子と同じである、請求項３２に記載の組成物。
  34. 第２のカルレティキュリン分子が第１の抗原結合性ドメインによって結合されるカルレティキュリン分子と異なる、請求項３２に記載の組成物。
  35. 第２のカルレティキュリンタンパク質が配列番号６２８５～６３１２またはＤ１００１から選択されるアミノ酸配列を含み、任意選択で、第２のカルレティキュリンタンパク質が配列番号６３１３～６３４６またはＤ１００２～Ｄ１００３から選択されるアミノ酸配列を含む、請求項３２から３４のいずれか１項に記載の組成物。
  36. 第１の抗原結合性ドメインによって結合されるカルレティキュリンタンパク質が配列番号６２８５またはＤ１００１のアミノ酸配列を含み、第２のカルレティキュリンタンパク質が配列番号６２８６のアミノ酸配列を含む、請求項３５に記載の組成物。
  37. 第３の抗原結合性ドメインが第２のカルレティキュリンタンパク質のＣ末端内に位置するエピトープに結合し、任意選択で、第３の抗原結合性ドメインが配列番号６２８５、Ｄ１００１、または６２８６のアミノ酸配列内に位置するエピトープに結合する、請求項３２から３６のいずれか１項に記載の組成物。
  38. 第１の抗原結合性ドメインが、
    （ｉ）表４、表２４、表２５、もしくは表１７における重鎖相補性決定領域１（ＶＨＣＤＲ１）のアミノ酸配列を有するＶＨＣＤＲ１、表４、表２４、表２５、もしくは表１７におけるＶＨＣＤＲ２のアミノ酸配列を有するＶＨＣＤＲ２、および表４、表２４、表２５、もしくは表１７におけるＶＨＣＤＲ３のアミノ酸配列を有するＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；
    （ｉｉ）表５、表２４、表２５、もしくは表１８における軽鎖相補性決定領域１（ＶＬＣＤＲ１）のアミノ酸配列を有するＶＬＣＤＲ１、表５、表２４、表２５、もしくは表１８におけるＶＬＣＤＲ２のアミノ酸配列を有するＶＬＣＤＲ２、および表５、表２４、表２５、もしくは表１８におけるＶＬＣＤＲ３のアミノ酸配列を有するＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；
    （ｉｉｉ）表２４、表２５、もしくは表１６におけるＶＨのアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨ；
    （ｉｖ）表２４、表２５、もしくは表１６におけるＶＬのアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約９３％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬ；
    （ｖ）表４もしくは表６における重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、もしくは９つ以下の置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＨＦＷＲ１、表４もしくは表６におけるＶＨＦＷＲ２のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、もしくは９つ以下の置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＨＦＷＲ２、表４もしくは表６におけるＶＨＦＷＲ３のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、もしくは９つ以下の置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＨＦＷＲ３、および／または表４もしくは表６におけるＶＨＦＷＲ４のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、もしくは９つ以下の置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＨＦＷＲ４を含むＶＨ、ならびに／あるいは
    （ｖｉ）表５もしくは表６における軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、もしくは９つ以下の置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＬＦＷＲ１、表５もしくは表６におけるＶＬＦＷＲ２のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、もしくは９つ以下の置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＬＦＷＲ２、表５もしくは表６におけるＶＬＦＷＲ３のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、もしくは９つ以下の置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＬＦＷＲ３、および／または表５もしくは表６におけるＶＬＦＷＲ４のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、もしくは９つ以下の置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＬＦＷＲ４を含むＶＬ
    を含む、請求項１から３７のいずれか１項に記載の組成物。
  39. 多機能性分子が腫瘍標的化部分をさらに含む、請求項１から３８のいずれか１項に記載の組成物。
  40. 腫瘍標的化部分が腫瘍抗原に結合する、請求項３９に記載の組成物。
  41. 腫瘍抗原が、Ｇ６Ｂ、ＣＤ３４、ＣＤ４１、Ｐ－セレクチン、Ｃｌｅｃ２、ｃＫＩＴ、ＦＬＴ３、ＭＰＬ、ＩＴＧＢ３、ＩＴＧＢ２、ＧＰ５、ＧＰ６、ＧＰ９、ＧＰ１ＢＡ、ＤＳＣ２、ＦＣＧＲ２Ａ、ＴＮＦＲＳＦ１０Ａ、ＴＮＦＲＳＦ１０Ｂ、またはＴＭ４ＳＦ１から選択される、請求項４０に記載の組成物。
  42. 腫瘍標的化部分が、例えば、Ｇ６Ｂ、ＣＤ３４、ＣＤ４１、Ｐ－セレクチン、Ｃｌｅｃ２、ｃＫＩＴ、ＦＬＴ３、ＭＰＬ、ＩＴＧＢ３、ＩＴＧＢ２、ＧＰ５、ＧＰ６、ＧＰ９、ＧＰ１ＢＡ、ＤＳＣ２、ＦＣＧＲ２Ａ、ＴＮＦＲＳＦ１０Ａ、ＴＮＦＲＳＦ１０Ｂ、またはＴＭ４ＳＦ１から選択される腫瘍抗原に結合する抗体分子を含む、請求項３９に記載の組成物。
  43. 腫瘍標的化部分が、例えば、表３８または表２０に列挙されるＶＨおよび／またはＶＬ配列を含む、請求項４２に記載の組成物。
  44. 多機能性分子が、非腫瘍細胞よりも骨髄増殖性新生物細胞に優先的に結合し、任意選択で、多機能性分子と骨髄増殖性新生物細胞との結合が、多機能性分子と非腫瘍細胞との結合よりも１０、２０、３０、４０、５０倍を超えて大きい、請求項１から４３のいずれか１項に記載の組成物。
  45. 骨髄増殖性新生物細胞が、骨髄線維症細胞、本態性血小板血症細胞、真性赤血球増加症細胞、または慢性骨髄がん細胞から選択され、任意選択で、
    骨髄増殖性新生物細胞がＪＡＫ２ Ｖ６１７Ｆ突然変異を含まないか、または
    骨髄増殖性新生物細胞がＭＰＬ突然変異を含まない、請求項４４に記載の組成物。
  46. リンカー、例えば、第１の抗原結合性ドメインと第２の抗原結合性ドメインとの間のリンカーをさらに含む、請求項１から４５のいずれか１項に記載の組成物。
  47. リンカーが、切断性リンカー、非切断性リンカー、ペプチドリンカー、可撓性リンカー、剛性リンカー、ヘリックスリンカー、または非ヘリックスリンカーから選択される、請求項４６に記載の組成物。
  48. リンカーがペプチドリンカーである、請求項４６または４７に記載の組成物。
  49. ペプチドリンカーがＧｌｙおよびＳｅｒを含む、請求項４８に記載の組成物。
  50. ペプチドリンカーが、配列番号６２１４～６２１７または６２２０～６２２１および７７～７８から選択されるアミノ酸配列を含む、請求項４８に記載の組成物。
  51. （ｉ）カルレティキュリンタンパク質（例えば、野生型または突然変異体カルレティキュリンタンパク質）に結合する第１の抗原結合性ドメイン、例えば、表４、表５、表６、表２４、表２５、表１６、表１７、表１８、もしくは表１９のいずれか１つに開示されるカルレティキュリン標的化抗原結合性ドメインと、
    （ｉｉ）ＴＣＲβＶに結合する第２の抗原結合性ドメイン、例えば、表３０、表３１、表３２、表１０、表１１、表１２、もしくは表１３のいずれか１つに開示される抗ＴＣＲβＶ抗原結合性ドメイン、または
    ＮＫｐ３０に結合する第２の抗原結合性ドメイン、例えば、表７、表８、表３５、表３６、表９、表１０、もしくは表３４に開示される抗ＮＫｐ３０抗原結合性ドメインと
    を含む多機能性分子。
  52. 第２の抗原結合性ドメインがＴＣＲβＶに結合する、請求項５１に記載の多機能性分子。
  53. 第２の抗原結合性ドメインがＴ細胞を活性化するか、または第２の抗原結合性ドメインがＴ細胞を活性化しない、請求項５２に記載の多機能性分子。
  54. 第２の抗原結合性ドメインが、ＴＣＲβＶ１２またはＴＣＲβＶ６（例えば、配列番号１０４４のアミノ酸配列を含む）に結合する、請求項５２または５３に記載の多機能性分子。
  55. 第２の抗原結合性ドメインが、表３０、表３１、表３２、表１０、表１１、表１２、または表１３に列挙される１つまたは複数のアミノ酸配列を含む、請求項５２から５４のいずれか１項に記載の多機能性分子。
  56. 第２の抗原結合性ドメインが、
    （ａ）重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）であって、
    （ｉ）ＶＨが、表３０、表３１、表１０、表１１、表１２、もしくは表１３における重鎖相補性決定領域１（ＶＨＣＤＲ１）のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＨＣＤＲ１、表３０、表３１、表１０、表１１、表１２、もしくは表１３におけるＶＨＣＤＲ２のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＨＣＤＲ２、および／または表３０、表３１、表１０、表１１、表１２、もしくは表１３におけるＶＨＣＤＲ３のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＨＣＤＲ３を含み、
    （ｉｉ）ＶＬが、表３０、表３１、表１０、表１１、表１２、もしくは表１３における軽鎖相補性決定領域１（ＶＬＣＤＲ１）のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＬＣＤＲ１、表３０、表３１、表１０、表１１、表１２、もしくは表１３におけるＶＬＣＤＲ２のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＬＣＤＲ２、および／または表３０、表３１、表１０、表１１、表１２、もしくは表１３におけるＶＬＣＤＲ３のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＬＣＤＲ３を含む、重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）；
    （ｂ）重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）であって、
    （ｉ）ＶＨが、配列番号３Ａの重鎖相補性決定領域１（ＶＨＣＤＲ１）アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号４ＡのＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号５ＡのＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を含み、かつ／または
    （ｉｉ）ＶＬが、配列番号６Ａの軽鎖相補性決定領域１（ＶＨＣＤＲ１）アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号７ＡのＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号８ＡのＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を含む、重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）；
    （ｃ）重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）であって、
    （ｉ）ＶＨが、配列番号４５Ａの重鎖相補性決定領域１（ＶＨＣＤＲ１）アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号４６ＡのＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号４７ＡのＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を含み、かつ／または
    （ｉｉ）ＶＬが、配列番号５１Ａの軽鎖相補性決定領域１（ＶＨＣＤＲ１）アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号５２ＡのＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号５３ＡのＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を含む、重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）；ならびに／あるいは
    （ｄ）重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）であって、
    （ｉ）ＶＨが、配列番号４８Ａの重鎖相補性決定領域１（ＶＨＣＤＲ１）アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号４９ＡのＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号５０ＡのＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を含み、かつ／または
    （ｉｉ）ＶＬが、配列番号５４Ａの軽鎖相補性決定領域１（ＶＨＣＤＲ１）アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号５５ＡのＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号５６ＡのＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を含む、重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）
    を含む、請求項５２から５５のいずれか１項に記載の多機能性分子。
  57. 第２の抗原結合性ドメインが、
    （ａ）重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）であって、
    （ｉ）ＶＨが、表３０、表３１、表１０、表１１、表１２、もしくは表１３におけるＶＨのアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含み、かつ／または
    （ｉｉ）ＶＬが、表３０、表３１、表１０、表１１、表１２、もしくは表１３におけるＶＬのアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含み、
    （ｉｉｉ）ＶＨが、配列番号９Ａのアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含み、かつ／または
    （ｉｖ）ＶＬが、配列番号１０Ａのアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含む、重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）；
    （ｂ）重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）であって、
    （ｉ）ＶＨが、配列番号９Ａのアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含み、かつ／または
    （ｉｉ）ＶＬが、配列番号１１Ａのアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含む、重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）；ならびに／あるいは
    （ｃ）重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）であって、
    （ｉ）ＶＨが、配列番号１３１２Ａのアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含み、かつ／または
    （ｉｉ）ＶＬが、配列番号１３１４Ａのアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含む、重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）
    を含む、請求項５２から５５のいずれか１項に記載の多機能性分子。
  58. 第２の抗原結合性ドメインが、
    （ａ）重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）であって、
    （ｉ）ＶＨが、配列番号１７Ａの重鎖相補性決定領域１（ＶＨＣＤＲ１）アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号１８ＡのＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号１９ＡのＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を含み、かつ／または
    （ｉｉ）ＶＬが、配列番号２０Ａの軽鎖相補性決定領域１（ＶＨＣＤＲ１）アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号２１ＡのＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号２２ＡのＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を含む、重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）；
    （ｂ）重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）であって、
    （ｉ）ＶＨが、配列番号５７Ａの重鎖相補性決定領域１（ＶＨＣＤＲ１）アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号５８ＡのＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号５９ＡのＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を含み、かつ／または
    （ｉｉ）ＶＬが、配列番号６３Ａの軽鎖相補性決定領域１（ＶＨＣＤＲ１）アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号６４ＡのＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号６５ＡのＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を含む、重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）；ならびに／あるいは
    （ｃ）重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）であって、
    （ｉ）ＶＨが、配列番号６０Ａの重鎖相補性決定領域１（ＶＨＣＤＲ１）アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号６１ＡのＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号６２ＡのＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を含み、かつ／または
    （ｉｉ）ＶＬが、配列番号６６Ａの軽鎖相補性決定領域１（ＶＨＣＤＲ１）アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号６７ＡのＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号６８ＡのＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を含む、重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）
    を含む、請求項５２から５５のいずれか１項に記載の多機能性分子。
  59. 第２の抗原結合性ドメインが、
    （ａ）重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）であって、
    （ｉ）ＶＨが、配列番号１５Ａのアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含み、かつ／または
    （ｉｉ）ＶＬが、配列番号１６Ａのアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含む、重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）；ならびに／あるいは
    （ｂ）重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）であって、
    （ｉ）ＶＨが、
    配列番号２３Ａのアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）、
    配列番号２４Ａのアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）、または
    配列番号２５Ａのアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）
    を含み；かつ／または
    （ｉｉ）ＶＬが、
    配列番号２６Ａのアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）、
    配列番号２７Ａのアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）、
    配列番号２８Ａのアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）、
    配列番号２９Ａのアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）、または
    配列番号３０Ａのアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）
    を含む、重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）
    を含む、請求項５２から５５のいずれか１項に記載の多機能性分子。
  60. 例えば、Ｎ末端からＣ末端まで、第１のＶＬおよび第１のＣＬを含む第１のポリペプチド、
    例えば、Ｎ末端からＣ末端まで、第１のＶＨ、第１のＣＨ１、第１の二量体化ドメイン（例えば、第１のＦｃ）、およびＴＣＲ（例えば、ＴＣＲＶβ）に結合する第１の部分（例えば、ＴＣＲ（例えば、ＴＣＲＶβ）に結合する第１のｓｃＦｖ）を含む第２のポリペプチド、
    例えば、Ｎ末端からＣ末端まで、第２のＶＨ、第２のＣＨ１、第２の二量体化ドメイン（例えば、第２のＦｃ）、および任意選択でＴＣＲ（例えば、ＴＣＲＶβ）に結合する第２の部分（例えば、ＴＣＲ（例えば、ＴＣＲＶβ）に結合する第２のｓｃＦｖ）を含む第３のポリペプチド、
    例えば、Ｎ末端からＣ末端まで、第２のＶＬおよび第２のＣＬを含む第４のポリペプチド
    を含み、
    第１のＶＬおよび第１のＶＨが第１のカルレティキュリンタンパク質に結合する第１の抗原結合性ドメインを形成し、第２のＶＬおよび第２のＶＨが第２のカルレティキュリンタンパク質に結合する第３の抗原結合性ドメインを形成し、
    任意選択で、第１および第２のカルレティキュリンタンパク質が配列番号６２８５、Ｄ１００１、または６２８６のアミノ酸配列を含み、
    任意選択で、第１および第２のカルレティキュリン突然変異体タンパク質が、配列番号６３１３のアミノ酸配列を含む分子、または配列番号６３１４のアミノ酸配列を含む分子からそれぞれ独立して選択され、
    任意選択で、多機能性分子が図３Ａまたは３Ｂの構成を含む、
    請求項５２から５９のいずれか１項に記載の多機能性分子。
  61. 第２の抗原結合性ドメインがＮＫｐ３０に結合する、請求項５１に記載の多機能性分子。
  62. 第２の抗原結合性ドメインが、ＮＫｐ３０に結合する（例えば、それを活性化させる）抗体分子、例えば、抗原結合性ドメイン、またはリガンドから選択され、例えば、第２の抗原結合性ドメインが、ＮＫｐ３０に結合する（例えば、それを活性化させる）抗体分子またはリガンドである、請求項６１に記載の多機能性分子。
  63. 第２の抗原結合性ドメインが、
    （ｉ）表７、表３５、表９、表１０、もしくは表３４の重鎖相補性決定領域１（ＶＨＣＤＲ１）のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＨＣＤＲ１、表７、表３５、表９、表１０、もしくは表３４のＶＨＣＤＲ２のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＨＣＤＲ２、および／または表７、表３５、表９、表１０、もしくは表３４のＶＨＣＤＲ３のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域（ＶＨ）、ならびに／あるいは
    （ｉｉ）表８、表３６、表９、表１０、もしくは表３４の軽鎖相補性決定領域１（ＶＬＣＤＲ１）のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＬＣＤＲ１、表８、表３６、表９、表１０、もしくは表３４におけるＶＬＣＤＲ２のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＬＣＤＲ２、および／または表８、表３６、表９、表１０、もしくは表３４におけるＶＬＣＤＲ３のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）
    を含む、請求項６１または６２に記載の多機能性分子。
  64. 第２の抗原結合性ドメインが、
    （ｉ）配列番号７３１３の重鎖相補性決定領域１（ＶＨＣＤＲ１）アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号６００１のＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号７３１５のＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；ならびに／あるいは
    （ｉｉ）配列番号７３２６の軽鎖相補性決定領域１（ＶＬＣＤＲ１）アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、配列番号７３２７のＶＬＣＤＲ２アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）、および／または配列番号７３２９のＶＬＣＤＲ３アミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）
    を含む、請求項６３に記載の多機能性分子。
  65. 第２の抗原結合性ドメインが、
    （ｉ）配列番号７２９８もしくは７３００～７３０４のいずれかのアミノ酸配列（または配列番号７２９８もしくは７３００～７３０４のいずれかに対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨ；および／または
    （ｉｉ）配列番号７２９９もしくは７３０５～７３０９のいずれかのアミノ酸配列（または配列番号７２９９もしくは７３０５～７３０９のいずれかに対して少なくとも約９３％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬ
    を含む、請求項６３または６４に記載の多機能性分子。
  66. 第２の抗原結合性ドメインが、
    （ｉ）配列番号７３０２のアミノ酸配列（または７３０２に対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨ、および配列番号７３０５のアミノ酸配列（または７３０５に対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬ；または
    （ｉｉ）配列番号７３０２のアミノ酸配列（または７３０２に対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨ、および配列番号７３０９のアミノ酸配列（または７３０９に対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬ
    を含む、請求項６３から６５のいずれか１項に記載の多機能性分子。
  67. 第２の抗原結合性ドメインが、
    （ｉ）配列番号７３１０のアミノ酸配列（または７３１０に対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）；または
    （ｉｉ）配列番号７３１１のアミノ酸配列（または７３１１に対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）
    を含む、請求項６３から６６のいずれか１項に記載の多機能性分子。
  68. 第２の抗原結合性ドメインが、
    （ｉ）配列番号６０００の重鎖相補性決定領域１（ＶＨＣＤＲ１）アミノ酸配列、配列番号６００１のＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列、および／または配列番号６００２のＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）、ならびに
    （ｉｉ）配列番号６０６３の軽鎖相補性決定領域１（ＶＬＣＤＲ１）アミノ酸配列、配列番号６０６４のＶＬＣＤＲ２アミノ酸配列、および／または配列番号７２９３のＶＬＣＤＲ３アミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）
    を含む、請求項６１または６２に記載の多機能性分子。
  69. 第２の抗原結合性ドメインが、
    （１）表７、表３５、表９、表１０、もしくは表３４の重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）のアミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＨＦＷＲ１、表７、表３５、表９、表１０、もしくは表３４のＶＨＦＷＲ２のアミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＨＦＷＲ２、表７、表３５、表９、表１０、もしくは表３４のＶＨＦＷＲ３のアミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＨＦＷＲ３、または表７、表３５、表９、表１０、もしくは表３４のＶＨＦＷＲ４のアミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＨＦＷＲ４を含む重鎖可変領域（ＶＨ）、および／あるいは
    （２）表８、表３６、表９、表１０、もしくは表３４の軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）のアミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＬＦＷＲ１、表８、表３６、表９、表１０、もしくは表３４のＶＬＦＷＲ２のアミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＬＦＷＲ２、表８、表３６、表９、表１０、もしくは表３４のＶＬＦＷＲ３のアミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＬＦＷＲ３、または表８、表３６、表９、表１０、もしくは表３４のＶＬＦＷＲ４のアミノ酸配列（またはそれからの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、もしくは６つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＬＦＷＲ４を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）
    を含む、請求項６１、６２、または６８のいずれか１項に記載の多機能性分子。
  70. 第２の抗原結合性ドメインが、
    （１）配列番号６００３の重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６００４のＶＨＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号６００５のＶＨＦＷＲ３アミノ酸配列、または配列番号６００６のＶＨＦＷＲ４アミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）、および
    （３）配列番号６０６６の軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）アミノ酸配列、配列番号６０６７のＶＬＦＷＲ２アミノ酸配列、配列番号７２９２のＶＬＦＷＲ３アミノ酸配列、または配列番号６０６９のＶＬＦＷＲ４アミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）
    を含む、請求項６９に記載の多機能性分子。
  71. 第２の抗原結合性ドメインが、
    （ｉ）表７、表３５、表９、表１０、もしくは表３４のＶＨのアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨ、および／または
    （ｉｉ）表８、表３６、表９、表１０、もしくは表３４のＶＬのアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約９３％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬ
    を含む、請求項６１、６２、および６８から７０のいずれか１項に記載の多機能性分子。
  72. 第２の抗原結合性ドメインが、表１０の重鎖のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含む重鎖を含む、請求項６１、６２、および６８から７１のいずれか１項に記載の多機能性分子。
  73. 第２の抗原結合性ドメインが、表１０の軽鎖のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含む軽鎖を含む、請求項６１、６２、および６８から７２のいずれか１項に記載の多機能性分子。
  74. 第２の抗原結合性ドメインが、表１０の重鎖のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含む重鎖、および表１０の軽鎖のアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含む軽鎖を含む、請求項６１、６２、および６８から７３のいずれか１項に記載の多機能性分子。
  75. 例えば、Ｎ末端からＣ末端まで、第１のＶＬおよび第１のＣＬを含む第１のポリペプチド、
    例えば、Ｎ末端からＣ末端まで、第１のＶＨ、第１のＣＨ１、第１の二量体化ドメイン（例えば、第１のＦｃ）、およびＮＫｐ３０に結合する第１の部分（例えば、ＮＫｐ３０に結合する第１の抗体分子またはリガンド）を含む第２のポリペプチド、
    例えば、Ｎ末端からＣ末端まで、第２のＶＨ、第２のＣＨ１、第２の二量体化ドメイン（例えば、第２のＦｃ）、および任意選択でＮＫｐ３０に結合する第２の部分（例えば、ＮＫｐ３０に結合する第２の抗体分子またはリガンド）を含む第３のポリペプチド、
    例えば、Ｎ末端からＣ末端まで、第２のＶＬおよび第２のＣＬを含む第４のポリペプチド
    を含み、
    第１のＶＬおよび第１のＶＨが第１のカルレティキュリンタンパク質に結合する第１の抗原結合性ドメインを形成し、第２のＶＬおよび第２のＶＨが第２のカルレティキュリンタンパク質に結合する第３の抗原結合性ドメインを形成し、
    任意選択で、第１および第２のカルレティキュリンタンパク質が配列番号６２８５、Ｄ１００１、または６２８６のアミノ酸配列を含み、
    任意選択で、第１および第２のカルレティキュリン突然変異体タンパク質が、配列番号６３１３のアミノ酸配列を含む分子、または配列番号６３１４のアミノ酸配列を含む分子からそれぞれ独立して選択され、
    任意選択で、多機能性分子が図３Ａまたは３Ｂの構成を含む、
    請求項６１から７４のいずれか１項に記載の多機能性分子。
  76. カルレティキュリンタンパク質が配列番号６２８５～６３１２またはＤ１００１から選択されるアミノ酸配列を含み、任意選択で、カルレティキュリンタンパク質が配列番号６３１３～６３４６またはＤ１００２～Ｄ１００３から選択されるアミノ酸配列を含む、請求項５１から７５のいずれか１項に記載の多機能性分子。
  77. カルレティキュリンタンパク質が配列番号６２８５またはＤ１００１のアミノ酸配列を含む、請求項５１から７６のいずれか１項に記載の多機能分子。
  78. カルレティキュリンタンパク質が配列番号６２８６のアミノ酸配列を含む、請求項５１から７７のいずれか１項に記載の多機能分子。
  79. 第１の抗原結合性ドメインがカルレティキュリンタンパク質のＣ末端内に位置するエピトープに結合し、任意選択で、第１の抗原結合性ドメインが配列番号６２８５、Ｄ１００１、または６２８６のアミノ酸配列内に位置するエピトープに結合する、請求項５１から７８のいずれか１項に記載の多機能性分子。
  80. 第２のカルレティキュリンタンパク質に結合する第３の抗原結合性ドメインをさらに含み、例えば、第２のカルレティキュリン突然変異体タンパク質が、配列番号６２８５、Ｄ１００１、または６２８６のアミノ酸配列を含み、任意選択で、
    （ｉ）第３の抗原結合性ドメインが第１の抗原結合性ドメインと異なるか、または
    （ｉｉ）第３の抗原結合性ドメインが第１の抗原結合性ドメインと同じである、
    請求項５１から７９のいずれか１項に記載の多機能性分子。
  81. 第２のカルレティキュリン分子が第１の抗原結合性ドメインによって結合されるカルレティキュリン分子と同じである、請求項８０に記載の多機能性分子。
  82. 第２のカルレティキュリン分子が第１の抗原結合性ドメインによって結合されるカルレティキュリン分子と異なる、請求項８０に記載の多機能性分子。
  83. 第２のカルレティキュリンタンパク質が配列番号６２８５～６３１２またはＤ１００１から選択されるアミノ酸配列を含み、任意選択で、第２のカルレティキュリンタンパク質が配列番号６３１３～６３４６またはＤ１００２～Ｄ１００３から選択されるアミノ酸配列を含む、請求項８０から８２のいずれか１項に記載の多機能性分子。
  84. 第１の抗原結合性ドメインによって結合されるカルレティキュリンタンパク質が配列番号６２８５またはＤ１００１のアミノ酸配列を含み、第２のカルレティキュリンタンパク質が配列番号６２８６のアミノ酸配列を含む、請求項８３に記載の多機能性分子。
  85. 第３の抗原結合性ドメインが第２のカルレティキュリンタンパク質のＣ末端内に位置するエピトープに結合し、任意選択で、第３の抗原結合性ドメインが配列番号６２８５、Ｄ１００１、または６２８６のアミノ酸配列内に位置するエピトープに結合する、請求項８０から８４のいずれか１項に記載の多機能性分子。
  86. 第１の抗原結合性ドメインが、
    （ｉ）表４、表２４、表２５、もしくは表１７における重鎖相補性決定領域１（ＶＨＣＤＲ１）のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＨＣＤＲ１、表４、表２４、表２５、もしくは表１７におけるＶＨＣＤＲ２のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＨＣＤＲ２、および／または表４、表２４、表２５、もしくは表１７におけるＶＨＣＤＲ３のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；
    （ｉｉ）表５、表２４、表２５、もしくは表１８における軽鎖相補性決定領域１（ＶＬＣＤＲ１）のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＨＣＤＲ１、表５、表２４、表２５、もしくは表１８におけるＶＬＣＤＲ２のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＨＣＤＲ２、および／または表５、表２４、表２５、もしくは表１８におけるＶＬＣＤＲ３のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、もしくは４つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＨＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；
    （ｉｉｉ）表２４、表２５、もしくは表１６におけるＶＨのアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約７７％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＨ；
    （ｉｖ）表２４、表２５、もしくは表１６におけるＶＬのアミノ酸配列（またはそれに対して少なくとも約９３％、９５％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）を含むＶＬ；
    （ｖ）表４もしくは表６における重鎖フレームワーク領域１（ＶＨＦＷＲ１）のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、もしくは９つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＨＦＷＲ１、表４もしくは表６におけるＶＨＦＷＲ２のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、もしくは９つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＨＦＷＲ２、表４もしくは表６におけるＶＨＦＷＲ３のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、もしくは９つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＨＦＷＲ３、および／または表４もしくは表６におけるＶＨＦＷＲ４のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、もしくは９つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＨＦＷＲ４を含むＶＨ、ならびに／あるいは
    （ｖｉ）表５もしくは表６における軽鎖フレームワーク領域１（ＶＬＦＷＲ１）のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、もしくは９つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＬＦＷＲ１、表５もしくは表６におけるＶＬＦＷＲ２のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、もしくは９つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＬＦＷＲ２、表５もしくは表６におけるＶＬＦＷＲ３のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、もしくは９つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＬＦＷＲ３、および／または表５もしくは表６におけるＶＬＦＷＲ４のアミノ酸配列（または１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、もしくは９つ以下の突然変異、例えば、置換、付加、もしくは欠失を有する配列）を有するＶＬＦＷＲ４を含むＶＬ
    を含む、請求項５１から８５のいずれか１項に記載の多機能性分子。
  87. 腫瘍標的化部分をさらに含む、請求項５１から８６のいずれか１項に記載の多機能性分子。
  88. 腫瘍標的化部分が腫瘍抗原に結合する、請求項８７に記載の多機能性分子。
  89. 腫瘍抗原が、Ｇ６Ｂ、ＣＤ３４、ＣＤ４１、Ｐ－セレクチン、Ｃｌｅｃ２、ｃＫＩＴ、ＦＬＴ３、ＭＰＬ、ＩＴＧＢ３、ＩＴＧＢ２、ＧＰ５、ＧＰ６、ＧＰ９、ＧＰ１ＢＡ、ＤＳＣ２、ＦＣＧＲ２Ａ、ＴＮＦＲＳＦ１０Ａ、ＴＮＦＲＳＦ１０Ｂ、またはＴＭ４ＳＦ１から選択される、請求項８８に記載の多機能性分子。
  90. 腫瘍標的化部分が、例えば、Ｇ６Ｂ、ＣＤ３４、ＣＤ４１、Ｐ－セレクチン、Ｃｌｅｃ２、ｃＫＩＴ、ＦＬＴ３、ＭＰＬ、ＩＴＧＢ３、ＩＴＧＢ２、ＧＰ５、ＧＰ６、ＧＰ９、ＧＰ１ＢＡ、ＤＳＣ２、ＦＣＧＲ２Ａ、ＴＮＦＲＳＦ１０Ａ、ＴＮＦＲＳＦ１０Ｂ、またはＴＭ４ＳＦ１から選択される腫瘍抗原に結合する抗体分子を含む、請求項８７に記載の多機能性分子。
  91. 腫瘍標的化部分が、例えば、表３８または表２０に列挙されるＶＨおよび／またはＶＬ配列を含む、請求項９０に記載の多機能性分子。
  92. 非腫瘍細胞よりも骨髄増殖性新生物細胞に優先的に結合し、任意選択で、多機能性分子と骨髄増殖性新生物細胞との結合が、多機能性分子と非腫瘍細胞との結合よりも１０、２０、３０、４０、５０倍を超えて大きい、請求項５１から９１のいずれか１項に記載の多機能性分子。
  93. 骨髄増殖性新生物細胞が、骨髄線維症細胞、本態性血小板血症細胞、真性赤血球増加症細胞、または慢性骨髄がん細胞から選択され、任意選択で、
    骨髄増殖性新生物細胞がＪＡＫ２ Ｖ６１７Ｆ突然変異を含まないか、または
    骨髄増殖性新生物細胞がＭＰＬ突然変異を含まない、請求項９２に記載の多機能性分子。
  94. リンカー、例えば、第１の抗原結合性ドメインと第２の抗原結合性ドメインとの間のリンカーをさらに含む、請求項５１から９３のいずれか１項に記載の多機能性分子。
  95. リンカーが、切断性リンカー、非切断性リンカー、ペプチドリンカー、可撓性リンカー、剛性リンカー、ヘリックスリンカー、または非ヘリックスリンカーから選択される、請求項９４に記載の多機能性分子。
  96. リンカーがペプチドリンカーである、請求項９４または９５に記載の多機能性分子。
  97. ペプチドリンカーがＧｌｙおよびＳｅｒを含む、請求項９６に記載の多機能性分子。
  98. ペプチドリンカーが、配列番号６２１４～６２１７または６２２０～６２２１および７７～７８から選択されるアミノ酸配列を含む、請求項９６に記載の多機能性分子。
  99. 請求項５１から９８のいずれか１項に記載の多機能性分子をコードする核酸分子。
  100. 請求項９９に記載の核酸分子を含むベクター、例えば、発現ベクター。
  101. 請求項９９に記載の核酸分子または請求項１００に記載のベクターを含む細胞。
  102. 請求項５１から９８のいずれか１項に記載の多機能性分子を作製する、例えば、産生する方法であって、適切な条件、例えば、遺伝子発現および／またはホモもしくはヘテロ二量体化に適した条件下で、請求項１０１に記載の細胞を培養するステップを含む、方法。
  103. 請求項１から５０のいずれか１項に記載の組成物、請求項５１から９８のいずれか１項に記載の多機能性分子、請求項９９に記載の核酸分子、請求項１００に記載のベクター、または請求項１０１に記載の細胞と、薬学的に許容される担体、賦形剤、希釈剤、または安定化剤とを含む医薬組成物。
  104. がんを処置する方法であって、それを必要とする対象に、請求項１から５０のいずれか１項に記載の組成物、請求項５１から９８のいずれか１項に記載の多機能性分子、請求項９９に記載の核酸分子、請求項１００に記載のベクター、請求項１０１に記載の細胞、または請求項１０３に記載の医薬組成物を投与するステップを含み、多機能性分子ががんを処置するのに有効な量で投与される、方法。
  105. がんを処置するための医薬の製造のための、請求項１から５０のいずれか１項に記載の組成物、請求項５１から９８のいずれか１項に記載の多機能性分子、請求項９９に記載の核酸分子、請求項１００に記載のベクター、または請求項１０１に記載の細胞の使用。
  106. 対象が第１および／または第２のカルレティキュリンタンパク質を発現するがん細胞を有する、請求項１０４に記載の方法または請求項１０５に記載の使用。
  107. 対象がＪＡＫ２ Ｖ６１７Ｆ突然変異を有する、請求項１０４もしくは１０６に記載の方法または請求項１０５もしくは１０６に記載の使用。
  108. 対象がＪＡＫ２ Ｖ６１７Ｆ突然変異を有しない、請求項１０４もしくは１０６に記載の方法または請求項１０５もしくは１０６に記載の使用。
  109. 対象がＭＰＬ突然変異を有する、請求項１０４もしくは１０６から１０８のいずれか１項に記載の方法または請求項１０５から１０８のいずれか１項に記載の使用。
  110. 対象がＭＰＬ突然変異を有しない、請求項１０４もしくは１０６から１０８のいずれか１項に記載の方法または請求項１０５から１０８のいずれか１項に記載の使用。
  111. がんが血液がんであり、
    任意選択で、がんが、骨髄増殖性新生物、例えば、原発性もしくは特発性骨髄線維症（ＭＦ）、本態性血小板増加症（ＥＴ）、真性赤血球増加症（ＰＶ）、または慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）であり、任意選択で、がんが骨髄線維症である、請求項１０４もしくは１０６から１１０のいずれか１項に記載の方法または請求項１０５から１１０のいずれか１項に記載の使用。
  112. がんが固形腫瘍がんである、請求項１０４もしくは１０６から１１０のいずれか１項に記載の方法または請求項１０５から１１０のいずれか１項に記載の使用。
  113. 第２の治療処置を施すステップをさらに含む、請求項１０４もしくは１０６から１１２のいずれか１項に記載の方法または請求項１０５から１１２のいずれか１項に記載の使用。
  114. 第２の治療処置が、治療剤（例えば、化学療法剤、生物学的製剤、ホルモン療法）、放射線、または外科手術を含む、請求項１１３に記載の方法または請求項１１３に記載の使用。
  115. 治療剤が化学療法剤または生物学的製剤から選択される、請求項１１４に記載の方法または請求項１１４に記載の使用。
  116. 試料または対象中のカルレティキュリン（例えば、野生型および／または突然変異体カルレティキュリン）を検出する方法であって、
    試料または対象を、本明細書に記載の抗カルレティキュリン（例えば、野生型および／または突然変異体カルレティキュリン）抗体分子と接触させるステップ；ならびに
    抗体分子と試料または対象との複合体の形成を検出するステップ
    を含み、それによってカルレティキュリン（例えば、野生型および／または突然変異体カルレティキュリン）を検出する、方法。
  117. カルレティキュリン（例えば、野生型および／または突然変異体カルレティキュリン）がｉｎ ｖｉｔｒｏまたはｉｎ ｖｉｖｏで検出される、請求項１１６に記載の方法。
  118. 参照試料または対象を、抗体分子と接触させるステップ；および抗体分子と参照試料または対象との複合体の形成を検出するステップをさらに含み、参照試料または対象と比較した、試料または対象における複合体の形成における変化、例えば統計学的に有意な変化が、試料または対象におけるカルレティキュリン（例えば、野生型および／または突然変異体カルレティキュリン）の存在を示す、請求項１１６または１１７に記載の方法。
  119. 対象から試料を取得するステップをさらに含む、請求項１１６から１１８のいずれか１項に記載の方法。
  120. 試料が血漿、組織（例えば、がん性組織）、生検、血液（例えば、全血）、ＰＢＭＣ、骨髄、および／またはリンパ組織、例えばリンパ節のうちの１つまたは複数を含む、請求項１１６から１１９のいずれか１項に記載の方法。
  121. 試料が凍結および／または固定されていない、請求項１１６から１２０のいずれか１項に記載の方法。
  122. 試料が凍結（例えば、瞬間凍結）および／または固定（例えば、ホルマリン固定パラフィン包埋（ＦＦＰＥ））されている、請求項１１６から１２０のいずれか１項に記載の方法。
  123. 対象が、本明細書に記載の疾患または障害（例えば、がん、例えば、骨髄線維症）を有する、または有するリスクがある、請求項１１６から１２２のいずれか１項に記載の方法。
  124. 例えば、マルチパネル法を使用するフロー分析を実施するステップをさらに含む、請求項１１６から１２３のいずれか１項に記載の方法。
  125. Ｔ細胞クローン性を評価して、例えば、Ｔ細胞悪性腫瘍の存在および／またはレベルを決定するステップをさらに含む、請求項１１６から１２４のいずれか１項に記載の方法。
  126. 生体試料からのカルレティキュリン＋（例えば、野生型カルレティキュリン＋および／または突然変異体カルレティキュリン＋）細胞のレベルを測定するステップ（例えば、カルレティキュリン＋細胞が、例えば、参照試料または対象と比較して枯渇しているかどうかを決定するステップ）をさらに含む、請求項１１６から１２５のいずれか１項に記載の方法。
  127. カルレティキュリン（例えば、野生型および／または突然変異体カルレティキュリン）の細胞内レベルを測定するステップをさらに含む、請求項１１６から１２６のいずれか１項に記載の方法。
  128. カルレティキュリン（例えば、野生型および／または突然変異体カルレティキュリン）の膜レベルを測定するステップをさらに含む、請求項１１６から１２７のいずれか１項に記載の方法。
  129. 例えば、（例えば、本明細書に記載の抗体分子を用いた）処置後に、疾患または障害（例えば、がん、例えば、骨髄線維症）の予後、重症度、または存在もしくは非存在の変化について対象を評価するステップをさらに含む、請求項１１６から１２８のいずれか１項に記載の方法。
  130. 抗体分子が検出可能に標識されている、請求項１１６から１２９のいずれか１項に記載の方法。
  131. 対象を評価する方法であって、
    対象からの試料（例えば、本明細書に記載の試料）を、本明細書に記載の抗カルレティキュリン（例えば、野生型および／または突然変異体カルレティキュリン）抗体分子と接触させるステップ；ならびに
    抗体分子と試料との複合体の形成を検出するステップ
    を含み、それによって対象を評価する、方法。
  132. 対象が、本明細書に記載の疾患または障害（例えば、がん、例えば、骨髄線維症）を有する、または有するリスクがある、請求項１３１に記載の方法。
  133. 対象が本明細書に記載の抗体分子で処置されていない、請求項１３１または１３２に記載の方法。
  134. 対象が本明細書に記載の抗体分子で処置されている、請求項１３１または１３２に記載の方法。
  135. 本明細書に記載の抗カルレティキュリン（例えば、野生型および／または突然変異体カルレティキュリン）抗体分子と、試料または対象におけるカルレティキュリン（例えば、野生型および／または突然変異体カルレティキュリン）を検出する方法における使用のための使用説明書とを含むキット。
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