KR20170138494A - 항-ｔｙｒ０３ 항체 및 이의 용도 - Google Patents

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KR20170138494A
KR20170138494A KR1020177033168A KR20177033168A KR20170138494A KR 20170138494 A KR20170138494 A KR 20170138494A KR 1020177033168 A KR1020177033168 A KR 1020177033168A KR 20177033168 A KR20177033168 A KR 20177033168A KR 20170138494 A KR20170138494 A KR 20170138494A
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바네싸 두옹
띠에리 망귀
엘렌느 아에겔
이자벨 베르나르-삐에로
플로랑 뒤푸르
프랑수와 라드바니
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엘살리스 비오떼끄
상뜨로 나쇼날 드 라 러쉐르쉐 샹띠피크
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Abstract

본 발명은 인간 Tyro3 수용체의 세포외 도메인, 특히 면역글로불린-유사 도메인 Ig-1에 결합하고 상기 수용체에 대한 인간 Gas6의 결합을 감소시키거나 억제시키는 항체, 특히 인간 또는 인간화된 항체에 관한 것이다. 본 발명은 또한 과증식성 질환 또는 감염성 질환의 진단, 예방 또는 치료시의 이들 항체의 사용에 관한 것이다.

Description

항-ＴＹＲ０３ 항체 및 이의 용도
본 발명은 의약 분야, 특히 Tyro3 수용체 타이로신 키나제의 세포외 도메인(extracellular domain)에 결합하는 항체에 관한 것이다. 이들 항체는, 특히 치료 및 진단 목적에서, 유리한 특성을 나타낸다.
Byk, Dtk, Rse, Rek, Sky 또는 Tif로도 공지된 Tyro3는 수용체 타이로신 키나제의 Tyro3/Axl/Mer(TAM) 계열의 구성원(member)이다.
타이로신 카나제 수용체는 특이적인 리간드(specific ligand)에 결합할 수 있는, 세포외 도메인, 전이막 도메인(transmembrane domain), 및 선택된 세포내 기질에 결합하여 포스포릴화할 수 있는, 세포내 촉매 도메인으로 구성되어 있다. 세포외 영역에 대한 리간드의 결합은 궁극적으로 세포외 시그날을 형질도입(transduce)하여 유전자 발현에 있어서의 변화를 유발하는, 세포내 단백질의 포스포릴화를 통해 이벤트(event)의 캐스케이드(cascade)를 개시하는 이의 효소적 활성화를 가져오는 타이로신 카나제 수용체내 일련의 구조적 재배열을 유발한다.
TAM 수용체는 2개의 면역글로불린(Ig)-관련 도메인 및 2개의 피브로넥틴 제III형(FNIII)-관련 도메인에 이어서 단일의 전이막 나선(transmembrane helix) 및 세포질성 타이로신 키나제 도메인을 포함하는 N-말단 세포외 도메인을 함유한다. 리간드 결합시, 수용체는 이량체화되어 타이로신 카나제가 활성화된다.
이들 수용체는 약 43% 아미노산 서열 동질성(sequence identity)을 나타내고 단백질 S에는 존재하지만 Gas6에는 존재하지 않는 트롬빈 절단 부위를 제외하고는 동일한 복합체 다중-도메인 구조를 공유하는 동종 리간드 Gas6(성장 구속 특이적인 유전자-6) 및/또는 단백질 S에 의해 활성화될 수 있다.
최근의 연구는 TAM 수용체가 면역성, 지혈 및 염증에서 중요한 역할을 함을 나타내어 왔다(Zheng et al. J. Immunol 2015, 194; Rothlin et al. Cell. 2007, 131, 1124-1136). 이들 수용체, 및 특히 Tyro3는 또한 종양형성 및 종양 세포 생존과 관련된 것으로 밝혀졌다(Linger et al. Adv Cancer Res, 2008; 100:35-83; Van der Meer et al., Blood. 2014; 213(16):2460-2469). 이들 발견을 기반으로, Tyro3는 방광암, 흑색종 또는 유방암과 같은 Tyro3 과-발현 암에 대한 치료제 개발용 표적으로서(WO 2010/031828; Ekyalongo et al. Anticancer Res. 2014 Jul;34(7):3337-45.) 또는 면역 반응을 향상시키기 위한 표적으로서(Lemke and Rothlin, Nat Rev Immunol. 2008; 8(5):327-336) 확인되었다.
TAM 수용체 억제제는 Gas6 또는 단백질 S 또는 세포외 도메인에 특이적으로 결합하여 리간드와 수용체 사이의 상호작용을 방지하는 것들과 같은 수용체 활성을 감소시키는 분자, Gas6 또는 단백질 S 농도를 감소시키는 분자, 구성적 Tyro 3 활성화를 억제하는 분자 및 세포내 도메인에 결합하여 수용체의 시그날링(signalling)을 방지하는 분자를 포함한다. 선택성 억제제는 작은 분자, 타이로신 키나제 도메인을 결여한 가용성 수용체, 또는 항체의 형태일 수 있다.
Tyro3 수용체는 TAM 수용체의 최소 연구된 것이며, 지금까지, 당해 수용체의 치료학적인 선택성 억제를 위한 효과적인 시도는 없다. Tyro3에 대한 일부 쥐 항체가 시판되거나 흑색종에서 당해 수용체의 활성을 연구하기 위해 데마레스트(Demarest) 등(Biochemistry 2013, 52, 3102-3118)에 의해 기술되어 왔다. 그러나, 인간 환자의 치료시 쥐 모노클로날 항체의 사용은 항체에 대한 숙주 면역 반응을 생성하므로 치료의 효능을 절충한다.
따라서, Tyro3에 효과적으로 및 특이적으로 결합하여 이의 활성을 조절하는 인간 또는 인간화된 항체에 대한 강력한 요구가 존재한다.
발명의 요약
본 발명은 항-Tyro3 항체 및 이의 사용 방법을 제공한다.
제1 국면에서, 본 발명은 인간 Tyro3 수용체의 면역글로불린-유사 도메인 Ig-1에 결합하고, 인간 Axl 및 Mer 수용체에는 결합하지 않으며, 인간 Tyro3 수용체에 대한 인간 Gas6의 결합을 감소시키거나 억제시키는, 분리된 인간 또는 인간화된 항체에 관한 것이다.
특히, 본 발명의 항체는 서열 번호: 10의 경쇄 가변 영역의 CDR-L1으로 이루어지거나, 또는 필수적으로 이루어진 CDR-L1을 포함하고/하거나 서열 번호; 11의 중쇄 가변 영역의 CDR-H1으로 이루어지거나 또는 필수적으로 이루어진 CDR-H1을 포함할 수 있다.
항체는 인간 Tyro3의 면역글로불린-유사 도메인 Ig-2에 추가로 결합할 수 있다. 특히, 인간 Tyro3의 면역글로불린-유사 도메인 Ig-1 및 Ig-2에 결합하는 항체는 하기를 포함할 수 있다:
서열 번호: 10의 경쇄 가변 영역의 CDR-L1으로 이루어지거나, 또는 필수적으로 이루어진 CDR-L1, 및 서열 번호: 88, 102, 116, 130, 144 또는 158의 CDR-L2 및 CDR-L3으로 이루어지거나, 또는 필수적으로 이루어진, CDR-L2 및 CDR-L3를 포함하는 경쇄, 및
서열 번호: 11의 중쇄 가변 영역의 CDR-H1으로 이루어지거나, 또는 필수적으로 이루어진 CDR-H1, 및 서열 번호: 89, 103, 117, 131, 145 또는 159의 중쇄 가변 영역의 CDR-H2 및 CDR-H3으로 이루어지거나, 또는 필수적으로 이루어진, CDR-H2 및 CDR-H3을 포함하는 중쇄.
또한, 항체는, 면역글로불린-유사 도메인 Ig-2에는 결합하지 않고, 인간 Tyro3의 면역글로불린-유사 도메인 Ig-1에 결합할 수 있다. 특히, 당해 항체는:
서열 번호: 10의 경쇄 가변 영역의 CDR-L1으로 이루어지거나, 또는 필수적으로 이루어진, CDR-L1, 및 서열 번호: 10, 32, 46, 60 또는 74의 경쇄 가변 영역의 CDR-L2 및 CDR-L3으로 이루어지거나, 또는 필수적으로 이루어진, CDR-L2 및 CDR-L3을 포함하는 경쇄, 및
서열 번호: 11의 중쇄 가변 영역의 CDR-H1으로 이루어지거나, 또는 필수적으로 이루어진 CDR-H1, 및 서열 번호: 11, 33, 47, 61 또는 75의 중쇄 가변 영역의 CDR-H2 및 CDR-H3으로 이루어지거나, 또는 필수적으로 이루어진, CDR-H2 및 CDR-H3을 포함하는 중쇄를 포함할 수 있다.
특히, 본 발명의 항체는:
서열 번호: 10의 경쇄 가변 영역의 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3으로 이루어지거나, 또는 필수적으로 이루어진, CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3를 포함하는 경쇄, 및 서열 번호: 11의 중쇄 가변 영역의 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3으로 이루어지거나, 또는 필수적으로 이루어진 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3를 포함하는 중쇄를 포함하거나, 또는
서열 번호: 32의 경쇄 가변 영역의 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3으로 이루어지거나, 또는 필수적으로 이루어진, CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3을 포함하는 경쇄, 및 서열 번호: 33의 중쇄 가변 영역의 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3으로 이루어지거나, 또는 필수적으로 이루어진, CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3을 포함하는 중쇄를 포함하거나, 또는
서열 번호: 46의 경쇄 가변 영역의 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3으로 이루어지거나, 또는 필수적으로 이루어진, CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3을 포함하는 경쇄, 및 서열 번호: 47의 중쇄 가변 영역의 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3으로 이루어지거나, 또는 필수적으로 이루어진, CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3을 포함하는 중쇄를 포함하거나, 또는
서열 번호: 60의 경쇄 가변 영역의 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3으로 이루어지거나, 또는 필수적으로 이루어진, CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3를 포함하는 경쇄, 및 서열 번호: 61의 중쇄 가변 영역의 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3으로 이루어지거나, 또는 필수적으로 이루어진, CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3을 포함하는 중쇄를 포함하거나, 또는
서열 번호: 74의 경쇄 가변 영역의 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3으로 이루어지거나, 또는 필수적으로 이루어진, CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3을 포함하는 경쇄, 및 서열 번호: 75의 중쇄 가변 영역의 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3으로 이루어지거나, 또는 필수적으로 이루어진, CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3을 포함하는 중쇄를 포함하거나, 또는
서열 번호: 88의 경쇄 가변 영역의 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3으로 이루어지거나, 또는 필수적으로 이루어진, CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3을 포함하는 경쇄, 및 서열 번호: 89의 중쇄 가변 영역의 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3으로 이루어지거나, 또는 필수적으로 이루어진, CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3을 포함하는 중쇄를 포함하거나, 또는
서열 번호: 102의 경쇄 가변 영역의 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3으로 이루어지거나, 또는 필수적으로 이루어진, CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3을 포함하는 경쇄, 및 서열 번호: 103의 중쇄 가변 영역의 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3으로 이루어지거나, 또는 필수적으로 이루어진, CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3을 포함하는 중쇄를 포함하거나, 또는
서열 번호: 116의 경쇄 가변 영역의 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3으로 이루어지거나, 또는 필수적으로 이루어진, CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3을 포함하는 경쇄, 및 서열 번호: 117의 중쇄 가변 영역의 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3으로 이루어지거나, 또는 필수적으로 이루어진, CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3을 포함하는 중쇄를 포함하거나, 또는
서열 번호: 130의 경쇄 가변 영역의 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3으로 이루어지거나, 또는 필수적으로 이루어진, CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3을 포함하는 경쇄, 및 서열 번호; 131의 중쇄 가변 영역의 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3으로 이루어지거나, 또는 필수적으로 이루어진, CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3을 포함하는 중쇄를 포함하거나, 또는
서열 번호:144의 경쇄 가변 영역의 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3으로 이루어지거나, 또는 필수적으로 이루어진, CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3을 포함하는 경쇄, 및 서열 번호: 145의 중쇄 가변 영역의 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3으로 이루어지거나, 또는 필수적으로 이루어진, CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3을 포함하는 중쇄를 포함하거나, 또는
서열 번호: 158의 경쇄 가변 영역의 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3으로 이루어지거나, 또는 필수적으로 이루어진, CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3을 포함하는 경쇄, 및 서열 번호: 159의 중쇄 가변 영역의 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3으로 이루어지거나, 또는 필수적으로 이루어진, CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3을 포함하는 중쇄를 포함할 수 있다.
상기 항체는 Tyro3 수용체의 억제제, 바람직하게는 Tyro3 리간드와 Tyro3의 세포외 도메인의 결합을 감소시키거나 차단하는, 및/또는, Tyro3 매개된 시그날 형질도입을 감소시키거나 차단하는, 및/또는 Tyro3 포스포릴화를 감소시키거나 차단하는, 및/또는 Tyro3 이량체화를 감소시키거나 차단하는, 억제제일 수 있다.
항체는 IgG1, IgG2, IgG3 또는 IgG4 항체, 바람직하게는 IgG1 항체일 수 있다.
또 다른 국면에서, 본 발명은:
(a) 본 발명의 항체를 암호화하는 핵산 서열, 및
(b) (a)의 서열 중 어느 것에 대해 상보성인 핵산으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 분리된 핵산 분자에 관한 것이다.
본 발명은 본 발명의 핵산을 포함하는 벡터에 관한 것이다.
본 발명은 또한 본 발명의 핵산 또는 벡터를 포함하는 숙주 세포에 관한 것이다.
추가의 국면에서, 본 발명의 항체의 생산방법으로, 본 발명의 숙주 세포를 상기 항체의 발현에 적합한 조건하에서 배양하는 단계, 및 임의로 항체를 회수하는 단계를 포함하는, 항체의 생산 방법에 관한 것이다.
또 다른 국면에서, 본 발명은, 본 발명의 항체, 핵산, 벡터 또는 숙주 세포, 및 약제학적으로 허용되는 담체 또는 부형제를 포함하는 약제학적 조성물에 관한 것이다.
마지막 국면에서, 본 발명은, 과증식성 질환 또는 감염성 질환의 진단, 예방 또는 치료에 사용하기 위한, 본 발명의 항체 또는 약제학적 조성물과도 관련된다.
도 1: 생산된 인간 Tyro3 세포외 도메인(ECD)의 상이한 단편의 개략도.
도 2　: 이중 샌드위치 ELISA 설계.
도 3: hTyro 3 ECD에 대한 scFvs/IgG의 ELISA 결합 검정. 도 3a : ScFv에 대한 결과. 도 3b: IgG에 대한 결과.
도 4: hTyro 3, hAxl 또는 hMer의 정제된 세포외 도메인을 미세역가플레이트 위에 피복시키고 항-Tyro 3 scFv (1μg/mL)의 존재하에서 항온처리하였다. 도 4a . 2410, 2411, 2412, 2413, 2414, 2415 scFv. 도 4b . 2717 및 2718 scFv. 도 4c . 2709, 2710, 2711 및 2713 scFv. 결합된 단편은 항-Myc - HRP 항체로 나타내었다.
도 5: 항-Tyro3 scFv를 사용한 GAS6 경쟁 검정. 도 5a . 완전한 길이(Full-length)의 Tyro3에 대한 scFv 및 MAB859의 결합. 완전한 길이의 Tyro3을 ELISA 미세역가 플레이트위에 피복시켰다. scFv를 10μg/mL에서 사용하고 MAB859를 3개의 농도에서 사용하였다: 1μg/mL(MAB859-1), 5μg/mL(MAB859-5) 및 10μg/mL(MAB859-10). 완전한 길이의 Tyro3에 대한 scFv 결합을 항-HIS-HRP 항체를 사용하여 및 MAB859를 항-마우스-HRP 항체를 사용하여 검출하였다. 검출 항체 만을 사용한 음성 대조군이 나타나 있다(항-HIS 또는 항-마우스). 도 5b . Tyro3/GAS6 결합에 있어서 scFv의 효과. 바이오티닐화된 GAS6(2.5μg/mL) 단독 또는 scFv/GAS6 혼합물을 실온에서 1시간 동안 완전한 길이의 Tyro3 피복된 플레이트에 적용시켰다. Tyro3에 대한 GAS6의 결합을 스트렙타비딘-HRP(400ng/mL)로 검출하였다. 스트렙타비딘-HRP 단독의 존재하에서 측정된 OD를 나타내었다.
도 6: scFv(도 6a) 및 IgG 양식(도 6b)에서 항-Tyro3의 시노몰구스 Tyro3 ECD에 대한 교차-반응성.
도 7: scFv 양식에서 항-Tyro3의 쥐 Tyro3 ECD에 대한 교차-반응성.
도 8: Tyro3 ECD의 구조적 도메인에 대한 항-Tyro3 scFv의 에피토프 제한.
도 9: 살아있는 세포에서 항-Tyro3 IgG의 결합. HEK293 세포를, 재조합체 인간 Tyro3를 발현하도록 형질감염시키고 HEK293 형질감염되지 않은 세포를 Live-Dead NIR 염료로 염색하고 TYRO 3-특이적인 MAB859 모노클로날 항체, 이의 동형 대조군(상부 패널) 또는 개개 항-Tyro3 IgG(중간 및 하부 패널)과 함께 항온처리하였다. IgG 동형 대조군은 IGX2656이다. MAB002 및 MAB859 결합을 PE-접합된 염소 항-마우스 Ig Ab(BD Pharmingen)를 사용하여 나타내었다. 항-Tyro3 IgG 결합은 PE-접합된 마우스-항 인간 람다 경쇄 Ab를 사용하여 나타내었다. 데이타를 ARIA III 유동 세포분석기(Becton Dickinson)를 사용하여 획득하고 Kaluza 소프트웨어(Beckman Coulter)를 사용하여 분석하였다. 나타낸 막대그래프는 HEK293 세포의 특징적인 크기 및 HE293 세포의 미립자측정법(granulometry)을 나타내는 살아있는 세포로 한정한다. 항-Tyro3 IgGTyro3-특이적인 결합은 형질감염되지 않은 세포(회색 선)와 비교하여 Tyro3-형질감염된 세포(검정색 선)의 형광성 강도 증가로 나타낸다.
도 10: 본 발명의 상이한 포획된 항-hTYRO3와 인간 Tyro3 단백질의 세포외 도메인 사이의 상호작용으로부터의 센소그램 추적.
도 11: octet K2에서 BiolayerInterferometry (BLI)로 평가한 항-인간 Tyro3 IgG의 역학적 매개변수.
발명의 상세한 설명
정의
본원에 사용된 것으로서, 용어 "Tyro3", "Tyro3 타이로신 카나제" 또는 "Tyro3 수용체"는 Tyro3 단백질, 바람직하게는 인간 Tyro3 단백질을 말한다. 인간 Tyro3(유전자 확인번호(Gene ID): 7301)는 또한 Byk, Dtk, Rse, Rek, Sky 또는 Tif로 알려져 있으며, 수용체 타이로신 카나제의 Tyro3/Axl/Mer(TAM) 계열의 구성원이다. 폴리뉴클레오타이드 및 아미노산 서열은 당해 분야에 잘 공지되어 있다. 참고 서열은 각각 진뱅크(Genbank) 수탁 번호 제MN_006293.2호 및 제NP_006284.2호이다. 전사체(transcriptome) 데이타베이스 유니젠(UniGene)에서 인간 Tyro3에 대한 참고 도입은 Hs.381282이다. Tyro3 수용체는 2개의 면역글로불린(Ig)-관련된 도메인을 포함하는 N-말단 세포외 도메인, Ig-1 및 Ig-2, 및 2개의 피브로넥틴 제III형(FNIII)-관련된 도메인, FNIII-1 및 FNIII-2에 이어, 단일 전이막 나선형 및 세포질성 타이로신 키나제 도메인으로 구성되어 있다. 도메인 각각의 위치는 알려져 있으며 공공 데이타베이스에서 용이하게 접근가능하다. Uniprot 수탁 번호 제Q06418호(서열 번호: 1)로 개시된 인간 Tyro3 단백질의 세포외 도메인은 서열 번호: 1의 41번 위치로부터 128번 위치의 제1의 Ig 도메인(Ig-1), 서열 번호:1의 139번 위치로부터 220번 위치의 제2의 Ig 도메인(Ig-2), 서열 번호: 1의 227번 위치로부터 320번 위치의 제1의 FNIII 도메인(FNIII-1), 및 서열 번호: 1의 325번 위치로부터 416번 위치의 제2의 FNIII 도메인(FNIII-2)을 포함한다. Tyro3 단백질-타이로신 키나제 도메인은 서열 번호: 1의 518번 위치로부터 790번 위치까지 연장되어 있다.
본원에 정의된 것으로서, "불변 영역(constant region)"은 경쇄 또는 중쇄 면역글로불린 불변 영역 유전자들 중 하나에 의해 암호화된 항체-기원한 불변 영역을 의미한다. 본원에 사용된 것으로서 "불변 경쇄" 또는 "경쇄 불변 영역"은 카파(Ckappa) 또는 람다(Clambda) 경쇄에 의해 암호화된 항체의 영역을 의미한다. 불변 경쇄는 전형적으로 단일 도메인을 포함하며, 본원에 정의된 것으로서 C카파, 또는 C람다의 108-214번 위치를 말하고, 여기서 번호매김은 EU 색인(EU index)(Kabat et al., 1991, Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5th Ed., United States Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda)에 따른다. 본원에 사용된 것으로서 "불변 중쇄" 또는 "중쇄 불변 영역"은 항체의 동형(isotype)을 각각 IgM, IgD, IgG, IgA, 또는 IgE로서 정의하기 위한, 뮤(mu), 델타, 감마, 알파, 또는 엡실론 유전자에 의해 암호화된 항체의 영역을 의미한다. 완전한 길이의 IgG 항체의 경우, 본원에 정의된 것으로서, 불변 중쇄는 CH1 도메인의 N-말단 내지 CH3 도메인의 C-말단을 말하므로, 118-447번 위치를 포함하며, 여기서 번호매김은 EU 색인에 다른다.
항체의 "가변 영역(variable region)" 또는 "가변 도메인(variable domain)"은 항체의 중쇄 또는 경쇄의 아미노-말단 도메인을 말한다. 중쇄의 가변 도메인은 "VH"로 언급될 수 있다. 경쇄의 가변 도메인은 "VL"로서 언급될 수 있다. 이들 도메인은 일반적으로 항체의 가장 가변성인 부분이며 항원-결합 부위를 함유한다. 경쇄 또는 중쇄 가변 영역(VL 또는 VH)은 "상보성 결정 영역" 또는 "CDR"로 언급된 3개의 초가변 영역에 의해 차단된 골격 영역으로 이루어진다. 골격 영역과 CDR의 정도는 예를 들면, Kabat(참고: "Sequences of Proteins of Immunological Interest," E. Kabat et al., U.S. Department of Health and Human Services, (1983)), 및 Chothia에 정확하게 정의되어 있다. 구성 경쇄 및 중쇄의 합해진 골격 영역인, 항체의 골격 영역은 CDR의 위치를 제공하고 정렬(align)하며, 이는 주로 항원에 대한 결합에 관여한다.
본원에 사용된 것으로서 "골격(framework)" 또는 "FR" 영역은 CDR로서 정의된 영역을 제외한 항체 가변 도메인의 영역을 의미한다. 각각의 항체 가변 도메인 골격은 CDR(FR1, FR2, FR3 및 FR4)에 의해 분리된 연속 영역으로 추가로 세분될 수 있다.
본원에 사용된 것으로서 용어 "초가변 영역(hypervariable region)"은 항원 결합에 관여하는 항체의 아미노산 잔기를 말한다. 초가변 영역은 일반적으로 "상보성-결정 영역" 또는 "CDR"로부터의 아미노산 잔기(예를 들면, 경쇄 가변 도메인의 24-34번(L1), 50-56번(L2) 및 89-97(L3)번 잔기 및 중쇄 가변 도메인의 31-35번(H1), 50-65번(H2) 및 95-102번(H3) 잔기; Kabat et al. 1991) 및/또는 "초가변 루프"로부터의 아미노산 잔기(예를 들면, 경쇄 가변 도메인의 26-32번(L1), 50-52번(L2) 및 91-96번(L3) 잔기 및 중쇄 가변 도메인의 26-32번(H1), 53-55번(H2) 및 96-101번(H3) 잔기; Chothia and Lesk, J. Mol. Biol 1987;196:901-917)를 포함한다. AbM CDR은 Kabat CDR과 Chothia 구조 루프 사이의 절충부를 나타내며, Oxford Molecular's AbM 항체 모델링 소프트웨어에 의해 사용된다. "접촉" CDR은 이용가능한 복합체 결정 구조의 분석을 기반으로 한다. IMGT 유일한 번호매김은 항원 수용체, 쇄 유형, 또는 종에 상관없이 가변 도메인을 비교하기 위해 정의되어 왔다 (Lefranc M.-P., Immunology Today 18, 509 (1997); Lefranc M.-P., The Immunologist, 7, 132-136 (1999); Lefranc, M.-P., et al., Dev. Comp. Immunol., 27, 55-77 (2003)). 전형적으로, 상기 영역내 아미노산 잔기의 번호매김은 Kabat 등의 상기 문헌에 기술된 방법으로 수행된다.
용어 "Kabat 위치" 또는 "Kabat에서와 같은 "가변 도메인 잔기 번호매김" 또는 "Kabat에서와 같은 아미노산 위치 번호매김" 및 이의 변형은 Kabat 등의 상기 문헌에서 항체의 편집의 중쇄 가변 도메인 또는 경쇄 가변 도메인에 대해 사용된 번호매김 시스템을 말한다. 당해 번호매김 시스템을 사용하여, 실제 선형 아미노산 서열은 가변 도메인의 FR 또는 CDR로의 단축, 또는 삽입에 상응하는 보다 적은 또는 추가의 아미노산을 함유할 수 있다. 잔기의 Kabat 번호매김은 "표준" Kabat 번호매김 서열을 사용하여 항체의 서열의 상동성 영역에서의 정렬에 의해 제공된 항체에 대해 측정될 수 있다.
본 명세서에 사용된 것으로서, 용어 "약"은 값 ± 규정된 값의 10%의 범위, 보다 바람직하게는 값 ± 규정된 값의 5%의 범위를 말한다. 예를 들면, "약 1"은 10%가 고려되는 경우 0.9 내지 1.1 및 5%가 고려되는 경우 0.95 내지 1.05를 의미한다.
본원에 사용된 것으로서, 용어 "필수적으로 이루어진(consisting essentially of)"은 참고 서열과 적어도 80, 85, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98 또는 99% 서열 동질성을 갖는 아미노산 서열을 말한다. 서열은 참고 서열에 대해 치환, 바람직하게는 구성적 치환, 삽입 또는 결실을 함유할 수 있다. 바람직하게는, 서열은 참고 서열에 대해 1 내지 10개의 치환, 삽입 또는 결실, 보다 바람직하게는 참고 서열에 대해 1, 2, 3, 4 또는 5개, 보다 더 바람직하게는 1 또는 2개의 치환, 삽입 또는 결실을 말한다. 특정 구현예에서, 치환, 삽입 및/또는 결실은 CDR의 외부 영역(즉, 골격 영역)에서 발생한다.
본원에 사용된 것으로서, 용어 "서열 동질성(sequence identity)" 또는 "동질성(identity)"은 2개의 폴리펩타이드 서열의 정렬로부터의 위치내 일치(동일한 아미노산 잔기)의 수(%)를 말한다. 서열 동질성은 서열 갭(gap)을 최소화하면서 오버랩(overlap) 또는 동질성을 최대화하기 위해 정렬하는 경우 서열을 비교함으로써 측정된다. 특히, 서열 동질성은 2개의 서열의 길이에 의존하여 수학적인 전체 또는 국소 정렬 알고리즘의 수 중 어느 것을 사용하여 측정할 수 있다. 유사한 길이의 서열은 바람직하게는 전체 길이에 걸쳐 임의로 서열을 정렬하는 전체 정렬 알고리즘(예를 들면: Needleman and Wunsch algorithm; Needleman and Wunsch, 1970)을 사용하여 정렬하지만, 실질적으로 상이한 길이의 서열은 국소 정렬 알고리즘(예를 들면, 스미쓰 앤 워터만 알고리즘(Smith and Waterman algorithm)(Smith and Waterman, 1981) 또는 알트슐 알코리즘(Altschul algorithm)(Altschul et al., 1997; Altschul et al., 2005))을 사용하여 바람직하게 정렬한다. 퍼센트 아미노산 서열 동질성의 측정 목적을 위한 정렬은 당해 분야의 기술내에 있는 다양한 방법, 예를 들면, 인터넷 웹 사이트, 예를 들면 http://www.ncbi.nlm.nih.gov/igblast/or http://www.ebi.ac.uk/Tools/emboss/에서 이용가능한 공공 이용가능한 컴퓨터 소프트웨어로 달성할 수 있다. 당해 분야의 숙련가는 비교되는 서열의 전체 길이에 걸쳐 최대 정렬을 달성하는데 요구되는 어떠한 알고리즘도 포함하는, 정렬을 측정하기 위한 적절한 매개변수를 측정할 수 있다. 본원의 목적을 위해, 아미노산 서열 동질성 값%는 니들만-운슈 알고리즘(Needleman-Wunsch algorithm)을 사용하여 2개의 서열의 최적의 전체 정렬을 생성하는 쌍식 서열 정렬 프로그램 EMBOSS Needle을 사용하여 생성된 값을 말하며, 여기서 모든 조사 매개변수는 디폴트 값(default value)으로 설정된다: 즉, 점수매김 매트릭스 = BLOSUM62, 갭 오픈(Gap open) = 10, 갭 연장(Gap extend) = 0.5, 종결 갭 패널티(End gap penalty) = 거짓, 종결 갭 오픈(End gap open) = 10 및 종결 갭 연장(and End gap extend) = 0.5.
"보존적(conservative)" 아미노산 치환은, 아미노산 잔기가 유사한 물리화학적 특성을 갖는 단일 쇄를 갖는 아미노산 잔기로 치환된다. 유사한 측쇄를 갖는 아미노산 잔기의 계열은 당해 분야에 공지되어 있으며 염기성 측쇄(예를 들면, 라이신, 아르기닌, 히스티딘), 산성 측쇄(예를 들면, 아스파르트산, 글루탐산), 하전되지 않은 극성 측쇄(예를 들면, 글리신, 아스파라긴, 글루탐산, 세린, 트레오닌, 타이로신, 시스테인, 트립토판), 비극성 측쇄(예를 들면, 알라닌, 발린, 루이신, 이소루이신, 프롤린, 페닐알라닌, 메티오닌), 베타 분지된 측쇄(예를 들면, 트레오닌, 발린, 이소루이신) 및 방향족 측쇄(예를 들면, 타이로신, 페닐알라닌, 트립토판, 히스티딘)를 갖는 아미노산을 포함한다.
본원에 사용된 것으로서, 폴리펩타이드 또는 핵산과 관련하여, 용어 "정제된(purified)" 또는 "분리된(isolated)"은 이의 천연 매질 또는 천연 형태가 아닌 폴리펩타이드 또는 핵산을 말한다. 따라서, 용어 "분리된"은 이의 원래의 환경, 예를 들면, 이것이 천연적으로 존재하는 경우 천연 환경으로부터 제거된 폴리펩타이드 또는 핵산을 말한다. 예를 들면, 분리된 폴리펩타이드는 이것이 일반적으로 관련되거나 이것과 일반적으로 혼합되거나 용액 속에 있는 세포의 적어도 일부 단백질 또는 다른 성분을 결여하고 있다. 분리된 폴리펩타이드는 세포 용해물 속에 함유된 천연적으로 생산된 상기 폴리펩타이드; 정제되거나 부분 정제된 형태의 폴리펩타이드, 재조합체 폴리펩타이드, 세포에 의해 발현되거나 분비된 폴리펩타이드, 및 또한 이종 숙주 세포 또는 배양물 속의 폴리펩타이드를 포함한다. 핵산과 관련하여, 용어 분리된 또는 정제된은 예를 들면, 핵산이 이의 천연의 게놈 맥락으로 존재하지 않음(예를 들면, 벡터 내, 발현 카세트로서, 프로모터에 연결되어, 또는 이종 숙주 세포 내에 인공적으로 도입됨)을 나타낸다.
본 발명의 항체
본 발명은 인간 대상체에서 Tyro3 수용체 활성을 효과적으로 및 선택적으로 조절하는데 치료학적으로 유용한 신규 항체의 생성을 기반으로 한다.
따라서, 제1 국면에서, 본 발명은 인간 Tyro3 수용체의 세포외 도메인에 결합하는 항체에 관한 것이다.
본원에서 용어 "항체"는 가장 광범위한 의미로 사용되며, 이들이 바람직한 생물학적 활성을 나타내는 한, 구체적으로 모노클로날 항체(완전한 길이의 모노클로날 항체 포함), 폴리클로날 항체, 다중특이적 항체(예를 들면, 이특이적 항체), 항체 단편 및 이의 유도체를 포함한다. 일부 구현예에서, 항체는 항체와 하나 이상의 다른 단백질 또는 펩타이드와의 공유결합성 또는 비-공유결합성 연합으로 형성된, 보다 큰 융합 분자의 일부분일 수 있다.
일부 구현예에서, 항체는 완전한 길이의 항체이다. 본원에 사용된 것으로서, 용어 "완전한 길이의 항체(full length antibody)"는 천연의 항체 구조와 실질적으로 유사한 구조를 갖는 항체를 말하며, 하기 정의한 바와 같은 항체 단편이 아니다. 상기 용어는 특히 Fc 영역을 함유하는 중쇄를 갖는 항체를 말한다. 바람직한 구현예에서, 항체는 IgG1, IgG2, IgG3 및 IgG4로부터 선택된 완전한 길이의 IgG 항체, 바람직하게는 완전한 길이의 IgG1 항체이다.
일부 다른 구현예에서, 항체는 항체 단편이다. "항체 단편(antibody fragment)"은 완전한 길이의 항체의 일부, 일반적으로 이의 항원 결합 또는 가변 도메인이다. 항체 단편의 예는 Fab, Fab', F(ab)2, F(ab')2, F(ab)3, Fv(전형적으로 항체의 단일 아암(arm)의 VL 및 VH 도메인), 단일-쇄 Fv (ScFv), dsFv, Fd(전형적으로 VH 및 CH1 도메인) 및 dAb(전형적으로 VH 도메인) 단편, 미니보디(minibody), 디아보디(diabody), 트리아보디(triabody), 테트라보디(tetrabody), 카파 보디(kappa body), 선형 항체, 단일-쇄 항체 분자, 항체 단편으로부터 형성된 다중특이적인 항체, 및 항원-결합 기능을 보유하는 다른 항체 단편(예를 들면, Holliger and Hudson, Nat Biotechnol. 2005 Sep;23(9):1126-36)을 포함한다. 항체 단편은, 온전한 항체(intact)의 단백질용해성 분해(proteolytic digestion) 및 재조합체 숙주 세포(예를 들면, 이. 콜라이(E. coli) 또는 파아지(phage))를 비제한적으로 포함하는 다양한 기술로 제조될 수 있다. 이들 기술은 숙련가에게 잘 공지되어 있으며 문헌에 집중적으로 기술되어 있다.
항체의 파파인 분해(Papain digestion)는 각각 단일의 항원-결합 부위를 지닌 "Fab" 단편, 및 잔류 "Fc" 단편으로 불리는 2개의 동일한 항원-결합 단편을 생산하며, 이의 명칭은 용이하게 결정화하는 이의 능력을 반영한다. 펩신 처리는 2개의 항원-결합 부위를 가지며 여전히 항원과 교차-결합할 수 있는 F(ab')2 단편을 생산한다.
본원에 사용된 것으로서 "Fab", "Fab 단편" 또는 "Fab 영역"은 VH, CH1, VL, 및 CL 면역글로불린 도메인을 포함하는 폴리펩타이드를 의미한다. Fab는 분리된 당해 영역, 또는 본원에 기술된 폴리펩타이드의 문맥에서의 당해 영역을 의미할 수 있다.
Fab' 단편은 항체 힌지 영역(antibody hinge region)으로부터 하나 이상의 시스테인을 포함하는 중쇄 CH1 도메인의 카복시 말단에서 약간의 잔기의 첨가에 의해 Fab 단편과는 상이하다. F(ab')2 항체 단편은 이들 사이에 힌지 시스테인을 갖는 Fab' 단편의 쌍으로서 원래 생산되었다. 항체 단편의 다른 화학적 커플링이 또한 알려져 있다.
본원에 사용된 것으로서 "Fv", "Fv 영역" 또는 "Fv 단편"은 단일 항체의 VL 및 VH 도메인을 포함하는 폴리펩타이드를 의미한다. 당해 단편은 완전한 항원-결합 부위를 함유하는 최소 항체 단편이다. 일 구현예에서, 2개의 쇄 Fv 종은 강력한, 비-공유결합성 연합된 하나의 중쇄 가변 도메인 및 하나의 경쇄 가변 도메인으로 이루어진다. 단일 쇄 Fv(scFv) 종에서, 하나의 중쇄 가변 도메인 및 하나의 경쇄 가변 도메인은 굴곡성 펩타이드 링커에 의해 공유결합으로 연결됨으로써 경쇄 및 중쇄는 2개의 쇄 Fv 종내의 것과 유사한 "이량체" 구조로 연합될 수 있다. Fv는 분리시 당해 영역 또는 본원에 기술된 바와 같은 폴리펩타이드와 관련하여 당해 영역을 말할 수 있다.
"단일-쇄 Fv" 또는 "scFv" 항체 단편은 항체의 VH 및 VL 도메인을 포함하며, 여기서 이들 도메인은 단일 폴리펩타이드 쇄로 존재한다. scFv의 고찰을 위해서는, 문헌 "Pluckthun in The Pharmacology of Monoclonal Antibodies, vol. 113, Rosenburg and Moore eds. Springer-Verlag, New York, pp. 269-315 (1994)"을 참고한다.
본원에 사용된 것으로서 "Fc", "Fc 단편" 또는 "Fc 영역"은 제1의 불변 영역 면역글로불린 도메인을 제외한 항체의 불변 영역을 포함하는 폴리펩타이드를 의미한다. 따라서, Fc는 IgA, IgD, 및 IgG의 마지막 2개의 불변 영역 면역글로불린 도메인, 및 IgE 및 IgM의 마지막 3개의 불변 영역 면역글로불린 도메인, 및 이들 도메인에 대한 굴곡성 힌지 N-말단을 말한다. IgA 및 IgM의 경우, Fc는 J 쇄를 포함한다. IgG의 경우, Fc는 면역글로불린 도메인 Cγ2(CH2) 및 Cγ3(CH3) 및 Cγ1와 Cγ2 사이의 힌지를 포함한다. Fc 영역의 경계선이 변할 수 있지만, 인간 IgG 중쇄 Fc 영역은 일반적으로 카복실-말단에 대해 C226, P230 또는 A231 위치에서 아미노산 잔기로부터 뻗어있는 것으로 정의되며, 여기서 번호매김은 EU 색인에 따른다. Fc 영역의 C-말단 라이신(EU 번호매김 시스템에 따른 447번 잔기)은 예를 들면, 항체의 생산 또는 정제 동안, 또는 항체의 중쇄를 암호화하는 핵산을 재조합적으로 가공함으로써 제거될 수 있다. 따라서, 완전한 항체의 조성물은 제거된 모든 K447 잔기를 지닌 항체 집단, 제거된 K447 잔기가 없는 항체 집단 및 K447 잔기의 존재 및 부재하에서의 항체의 혼합물을 갖는 항체 집단을 포함할 수 있다. Fc는 분리시 당해 영역 및 본원에 기술된 바와 같은 폴리펩타이드와 관련하여 당해 영역을 말할 수 있다.
용어 "디아보디"는 2개의 항원-결합 부위를 지닌 항체 단편을 말하며, 당해 단편은 동일한 폴리뉴클레오타이드 쇄(VH-VL)내 경쇄 가변 도메인(VL)에 연결된 중쇄 가변 도메인(VH)를 포함한다. 동일한 쇄에서 2개의 도메인들 사이에 쌍화(pairing)를 허용하기에 너무 짧은 링커를 사용함으로써, 도메인이 다른 쇄의 상보성 도메인과 쌍을 이루도록 하여 2개의 항원-결합 부위를 생성시킨다. 디아보디는 2가 또는 이중특이적일 수 있다. 디아보디는 예를 들면, Hudson et al., Nat. Med. 9:129-134 (2003); 및 Hollinger et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90: 6444-6448 (1993). Triabodies and tetrabodies are also described in Hudson et al., Nat. Med. 9:129-134 (2003)에 보다 완전하게 기술되어 있다.
일부 바람직한 구현예에서, 항체는 Fab', F(ab)2, F(ab')2, F(ab)3, Fv, 단일쇄 Fv(ScFv) 단편 및 디아보디로 이루어진 그룹으로부터 선택된 항체 단편이다.
본원에 사용된 것으로서, 용어 "항체 유도체"는 본원에 제공된 항체, 예를 들면, 완전한 길이의 항체 또는 항체의 단편을 말하며, 여기서 하나 이상의 아미노산은 예를 들면, 알킬화, PEG화, 아실화, 에스테르 또는 아미드 형성 등에 의해 화학적으로 변형된다. 특히, 당해 용어는 당해 분야에 공지되고 용이하게 이용가능한 추가의 비단백질성 잔기를 함유하도록 추가로 변형된 본원에 제공된 항체를 말할 수 있다. 항체의 유도체화에 적합한 잔기는 수용성 중합체를 포함하나 이에 한정되지 않는다. 수용성 중합체의 예는 PEG, 에틸렌 글리콜/프로필렌 글리콜의 공중합체, 카복시메틸셀룰로즈, 덱스트란 및 폴리비닐 알코올의 공중합체를 포함하나, 이에 한정되지 않는다.
유도체는 또한 세포독성제, 형광성 잔기, 진단 방사선동위원소 또는 영상화제와 같은 검출가능한 잔기; 또는 아가로즈 비드 등과 같은 고체 지지체를 포함하나 이에 한정되지 않는 하나 이상의 이종 분자(들)에 접합된 본 발명의 항-Tyro3 항체를 포함하는 면역접합체일 수 있다. 세포독성제의 예는 화학치료제 또는 약물, 성장 억제제, 독소(예를 들면, 단백질 독소, 세균, 진균, 식물, 또는 동물 기원의 효소적으로 활성인 독소, 또는 이의 단편), 또는 방사활성 동위원소를 포함하나, 이에 한정되지 않는다. 항체와 세포독성제의 접합은 당해 분야의 숙련가에게 잘 공지된 다양한 이작용성 단백질 커플링제를 사용하에 제조할 수 있다. 링커는 세포내에서 세포독성 약물의 방출을 촉진하는 "절단가능한 링커"일 수 있다. 예를 들면, 산-분해가능한 링커, 펩티다제-민감성 링커, 광분해가능한 링커, 디메틸 링커 또는 이황화물-함유 링커(Chari et al., Cancer Res. 52: 127-131 (1992))가 사용될 수 있다.
본 발명의 항체는 작용성 Fc 영역(functional Fc region), 천연 서열 Fc 영역 또는 변이체 Fc 영역을 포함할 수 있다.
"작용성 Fc 영역(functional Fc region)"은 천연 서열 Fc 영역의 효과기 작용(effector function)을 지닌다. 예시적인 "효과기 작용"은 C1q 결합; 세포 의존성 세포독성(CDC); Fc 수용체 결합; 항체 의존성 세포 세포독성(ADCC), 식균작용, 항체 의존성 세포 식균작용(ADCP), 세포 표면 수용체의 하향 조절 등을 포함한다. 이러한 효과기 작용은 일반적으로 결합 도메인(예를 들면, 항체 가변 도메인)과 결합될 Fc 영역을 필요로 하며 다양하게 잘 공지된 검정을 사용하여 평가할 수 있다.
"천연 서열 Fc 영역(native sequence Fc region)"은 천연에서 발견된 Fc 영역의 아미노산 서열과 동일한 아미노산 서열을 포함한다. 천연의 서열 인간 Fc 영역은 천연 서열 인간 IgG1 Fc 영역(비-A 및 A 동종이인자형); 천연 서열 인간 IgG2 Fc 영역; 천연 서열 인간 IgG3 Fc 영역; 및 천연 서열 인간 IgG4 Fc 영역, 및 천연적으로 존재하는 이의 변이체를 포함한다.
"변이체 Fc 영역(variant Fc region)"은 적어도 하나의 아미노산 변형, 바람직하게는 하나 이상의 아미노산 치환(들)에 의해 천연 서열 Fc 영역의 것과 상이한 아미노산 서열을 포함한다. 바람직하게는, 변이체 Fc 영역은 천연 서열 Fc 영역 또는 모 폴리펩타이드의 Fc 영역과 비교하여 적어도 하나의 아미노산 치환, 예를 들면, 약 1 내지 약 10개의 아미노산 치환, 및 바람직하게는 천연 서열 Fc 영역 또는 모 폴리펩타이드의 Fc영역내에 약 1 내지 약 5개의 아미노산 치환을 갖는다. 본원의 변이체 Fc 영역은 바람직하게는 천연 서열 Fc 영역 및/또는 모 폴리펩타이드의 Fc 영역과 적어도 약 80% 상동성, 및 가장 바람직하게는 이와 적어도 약 90% 상동성, 보다 바람직하게는 이와 적어도 약 95% 상동성을 지닐 것이다.
특정 구현예에서, 본원에 제공된 항체는 다중특이적 항체, 예를 들면, 이특이적 항체이다. 다중특이적 항체는 적어도 2개의 상이한 부위에 대해 결합 특이성을 갖는 모노클로날 항체이다. 특정의 구현예에서, 결합 특이성 중의 하나는 Tyro3, 특히 인간 Tyro3의 세포외 도메인에 대한 것이고, 다른 것은 어떠한 다른 항원에 대한 것이다. 특정의 구현예에서, 이특이적 항체는 Tyro3의 상이한 에피토프에 결합할 수 있다. 이특이적 항체는 또한 Tyro3를 발현하는 세포에 세포독성제를 국지화(localize)하는데 사용될 수 있다. 이특이적 항체는 완전한 길이의 항체 또는 항체 단편으로서 제조될 수 있다.
다중특이적 항체를 제조하는 기술은 상이한 특이성을 갖는 2개의 면역글로불린 중쇄-경쇄 쌍의 재조합 동시-발현(참고: Milstein and Cuello, Nature 305: 537 (1983), WO 93/08829, 및 Traunecker et al., EMBO J. 10: 3655 (1991)), 및 "놉-인-홀(knob-in-hole)" 가공(참고: 예를 들면, 미국 특허 제5,731,168호)을 포함하나, 이에 한정되지 않는다. 다중-특이적 항체는 또한 항체 Fc-이종이량체 분자를 제조하기 위한 정전기 스티어링 효과(electrostatic steering effect)의 가공(WO 2009/089004A1); 2개 이상의 항체 또는 단편의 교차-결합(참고: 예를 들면, 미국 특허 제4,676,980호, 및 Brennan et al., Science 229: 81 (1985)); 이-특이적 항체를 생산하기 위한 루이신 지퍼(leucine zipper) 사용(참고: 예를 들면, Kostelny et al., J. Immunol., 148(5): 1547-1553 (1992)); 이특이적 항체 단편을 제조하기 위한 "디아보디" 기술의 사용(참고: 예를 들면, Hollinger et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 90:6444- 6448 (1993)); 및 단일-쇄 Fv(sFv) 이량체의 사용(참고: 예를 들면, Gruber et al., J. Immunol152:5368 (1994)); 및 예를 들면, Tutt et al. J. Immunol. 147: 60 (1991)에 기술된 바와 같은 삼특이적 항체의 제조에 의해 제조될 수 있다. "옥토푸스 항체(Octopus antibody)"를 포함하는 3개 이상의 작용성 항원 결합 부위를 지닌 가공된 항체가 본원에 또한 포함된다(참고: 예를 들면, US 2006/0025576A1).
바람직한 구현예에서, 항체는 분리된 항체이다. "분리된(isolated)" 항체는 이의 천연 환경의 성분으로부터 분리된 것이다. 특히, 상기 항체는 예를 들면, 전기영동(예를 들면, SDS-PAGE, 등전점 전기영동(IEF), 모세관 전기영동) 또는 크로마토그래피(예를 들면, 이온 교환 또는 역상 HPLC)에 의해 측정된 것으로서 순도가 95% 또는 99% 이상이 되도록 정제될 수 있다. 항체 순도의 평가에 대한 방법의 고찰을 위해서는 예를 들면, Flatman et al., J. Chromatogr. B 848:79-87 (2007)을 참고한다.
본 발명의 항체는 폴리클로날 또는 모노클로날 항체일 수 있다. 바람직하게는, 항체는 모노클로날 항체이다. 본원에 사용된 것으로서 용어 "모노클로날 항체"는 실질적으로 동종 항체의 집단으로부터 수득된 항체, 즉, 상기 집단을 포함하는 개개 항체가 소량으로 존재할 수 있는 가능한 천연적으로 존재하는 돌연변이를 제외하고는 동일함을 의미한다. 모노클로날 항체는 고도로 특이적이며, 단일의 항원 부위에 대해 지시된다. 또한, 상이한 결정인자(에피토프)에 대해 지시된 상이한 항체를 전형적으로 포함하는 통상의 (폴리클로날) 항체와는 대조적으로, 각각의 모노클로날 항체는 항원에서의 단일 결정인자에 대해 지시된다. 개질인자 "모노클로날"은 항체의 실질적으로 동종 집단으로부터 수득된 항체의 특징을 나타내며 어떠한 특수 방법에 의해 항체의 생산을 필요로 하는 것으로 해석되지 않아야 한다. 예를 들면, 본 발명에 따라 사용될 수 있는 모노클로날 항체는 Kohler et al., Nature 256:495 (1975)에 의해 최초 기술된 하이브리도마 방법에 의해 제조될 수 있거나, 재조합체 DNA 분자에 의해 제조될 수 있다. "모노클로날 항체"는 또한 예를 들면, Clackson et al., Nature 352:624-628 (1991) 및 Marks et al., J. Mol. Biol. 222:581-597 (1991)에 기술된 기술을 사용하여 파아지 항체 라이브러리(phage antibody library)로부터 분리할 수 있다.
본 발명의 항체는 키메라, 인간화된 또는 인간 항체일 수 있다.
"키메라(chimeric)" 항체는 중쇄 및/또는 경쇄의 일부가 특수한 종으로부터 기원하거나 특수한 항체 부류 또는 소부류에 속하는 항체 내 상응하는 서열과 동일하거나 상동성이고, 쇄(들)의 나머지는 다른 종으로부터 기원하거나 다른 항체 부류 또는 소부류에 속하는 항체내 상응하는 서열과 동일하거나 상동성인 항체, 및 이들이 바람직한 생물학적 활성을 나타내는 한 이러한 항체의 단편을 포함한다(Morrison et al., Proc. Natl. Acad Sci. USA 81:6851-6855 (1984)). 바람직하게는, 항체의 골격의 적어도 일부는 인간 콘센수스 골격 서열(human consensus framework sequence)이다.
"비-인간(예를 들면, 쥐) 항체의 "인간화된(humanized)" 형태는 비-인간 면역글로불린으로부터 기원한 최소의 서열을 함유하는 키메라 항체이다. 대부분의 경우, 인간화된 항체는 인간 면역글로불린(수령자 항체)이며, 여기서 수령자의 초가변 영역 잔기는 비-인간 종(공여자 항체), 예를 들면, 바람직한 특이성, 친화성, 및 능력을 갖는 마우스, 랫트, 토끼 또는 비인간 영장류로부터의 초가변 영역 잔기로 치환된다. 또한, 인간화된 항체는 수용자 항체 또는 공여자 항체 속에 존재하지 않는 잔기를 포함할 수 있다. 이들 변형은 항체 수행능을 추가로 정의하기 위해 제조된다. 일반적으로, 인간화된 항체는 적어도 하나, 및 전형적으로 2개의 가변 도메인 중 실질적으로 모두를 포함할 것이며, 여기서 초가변 영역의 모두 또는 실질적으로 모두는 비-인간 면역글로불린의 것에 상응하고 FR의 모두 또는 실질적으로 모두는 인간 면역글로불린 서열의 것이다. 인간화된 항체는 임의로 또한 면역글로불린 불변 영역 (Fc)의 적어도 일부, 전형적으로 인간 면역글로불린의 적어도 일부를 포함한다(Jones et al., Nature 321:522-525 (1986); Reichmann et al., Nature 332:323.329 (1988); 및 Presta, Curr. Op. Struct. Biol. 2:593-596 (1992)).
키메라 또는 인간화된 항체는 당해 분야의 숙련가에게 잘 공지되고 문헌에 집중적으로 기술된 다양한 기술로 제조할 수 있다.
"인간 항체" 또는 "완전한 인간 항체"는 인간에 의해 생산된 항체의 것에 상응하고/하거나 본원에 기술된 바와 같은 인간 항체를 제조하기 위한 기술 중 어느 것을 사용하여 제조된 아미노산 서열을 지닌 것이다. 인간 항체의 이러한 정의는 구체적으로 비-인간 항원-결합 잔기를 포함하는 인간화된 항체는 배제시킨다. 인간 항체는 파아지-디스플레이 라이브러리(phage-display library)를 포함하는, 당해 분야에 공지된 다양한 기술을 사용하여 생산할 수 있다. Hoogenboom and Winter, J. Mol. Biol., 227:381 (1991); Marks et al., J. Mol. Biol., 222:581 (1991). 또한 인간 모노클로날 항체의 제조를 위해 Cole et al., Monoclonal Antibodies and Cancer Therapy, Alan R. Liss, p. 77 (1985); Boerner et al., J. Immunol., 147(1):86-95 (1991)에 기술된 방법이 이용가능하다. 또한 van Dijk and van de Winkel, Curr. Opin. Pharmacol., 5: 368-74 (2001)을 참고한다. 인간 항체는 항원성 챌린지에 대한 반응시 이러한 항체를 생산하도록 변형되었지만, 이의 내인성 유전자자리(endogenous loci)가 장애를 입고 인간 유전자자리로 치환된 형질도입 동물, 예를 들면, 면역화된 제노마우스(xenomouse)에 항원을 투여함으로써 제조할 수 있다(참고: 예를 들면, XENOMOUSETM 기술에 대해서 예를 들면, 미국 특허 제6,075,181호 및 제6,150,584호). 또한 인간 B-세포 하이브리도마 기술을 통해 생성된 인간 항체와 관련하여 예를 들면, Li et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 103:3557-3562 (2006)을 참고한다.
바람직한 구현예에서, 본 발명의 항체는 인간 또는 인간화된 모노클로날 항체, 보다 바람직하게는 인간 모노클로날 항체이다.
본 발명의 항-Tyro3 항체는 Tyro3, 특히 인간 Tyro3에 대해 고 특이성 또는 선택성을 나타낸다.
본원에 사용된 것으로서, "특이적인 결합(specific binding)" 또는 "특이성(specificity)"은 Tyro3과 같은 항원에 표시된 에피토프에 검출가능하게 결합하지만 다른 단백질 또는 구조(예를 들면, 다른 TAM 수용체)와 검출가능한 반응성을 비교적 거의 갖지 않는 항체의 능력을 말한다. 항체 특이성은 실험 단락에 기술된 바와 같은 ELISA 결합 검정과 같은 잘-공지된 방법을 사용하여 교차-반응성을 측정함으로써 측정할 수 있다. 특이성은 예를 들면, 특이적인 항원에 대한 결합 대 다른 관련되지 않은 분자에 대한 비특이적인 결합에 있어서 친화성(affinit)/결합성(avidity)의 약 10:1, 약 20:1, 약 50:1, 약 100:1, 10.000:1 이상의 비를 나타낼 수 있다.
"선택적 결합" 또는 "선택성"은 하나 이상의 다른 생물학적 분자, 구조, 세포, 조직 등과는 대치되는 것으로서, 특수 영역, 표적, 또는 펩타이드에 대한 단백질의 우선적인 결합을 말한다. Tyro3-결합 항체는 특수 유기체(예를 들면, 쥐 유기체와 대치되는 것으로서 인간)에서 생산된 Tyro3 수용체에 대해 및/또는 Tyro3 수용체의 특수한 부위(예를 들면, 특수한 에피토프 또는 항원 결정인자 영역)에 대해 선택성일 수 있다. 예를 들면, 선택성은 경쟁적 ELISA 또는 Biacore 검정에 의해 측정할 수 있다. 선택성을 표시하는 친화성/결합성에 있어서의 차이는 어떠한 검출가능한 선호도(예를 들면, 검출가능한 경우 1:10, 1:100, 1:1000 이상을 포함하여, 1:1.1 이상, 또는 약 1:5 이상의 비가 적합할 수 있다)일 수 있다.
바람직하게는, 본 발명의 항-Tyro3 항체는 인간 Tyro3에 특이적/선택적으로 결합한다. 특히, 상기 항체는 인간Axl 및 Mer 수용체 및/또는 쥐 Tyro3과 같은 비-영장류 Tyro3, 및 특히 이들 수용체의 세포외 도메인에 유의적으로 결합하지 않는다.
일부 구현예에서, 항-Tyro3 항체는 인간 Axl 및 Mer 수용체의 세포외 도메인에 특이적으로 결합하지 않는다. 인간 Axl 단백질의 서열은 Uniprot 수탁 번호 제P30530호(서열 번호: 6)로 개시되어 있으며 세포외 도메인은 서열 번호: 6의 26번 위치 내지 451번 위치에 연장된다. 인간 Mer 단백질의 서열은 Uniprot 수탁 번호 제Q12866호(서열 번호: 7)에 개시되어 있으며 세포외 도메인은 서열 번호: 7의 21번 위치 내지 505번 위치에 연장되어 있다.
일부 구현예에서, 항-Tyro3 항체는 쥐 Tyro3의 세포외 도메인에 유의적으로 결합하지 않는다. 쥐 Tyro3 단백질의 서열은 Uniprot 수탁 번호 제P55144호(서열 번호: 8)에 개시되어 있으며 세포외 도메인은 서열 번호: 8의 31번 위치 내지 419번 위치에 연장되어 있다.
바람직한 구현예에서, 항-Tyro3 항체는 인간 Axl 및 Mer 수용체의 세포외 도메인에 유의적으로 결합하지 않으며 쥐 Tyro3의 세포외 도메인에 결합하지 않는다.
바람직하게는, 항-Tyro3 항체는 시노몰구스 원숭이(cynomolgus monkey)(또는 마카카 파스키쿨라리스(Macaca fascicularis)) Tyro3 수용체의 세포외 도메인에 추가로 결합한다. 시노몰구스 원숭이 Tyro3 단백질의 세포외 도메인의 서열은 서열 번호: 9에 개시되어 있다. 특수 구현예에서, 항-Tyro3 항체는 인간 Axl 및 Mer 수용체의 세포외 도메인에 유의적으로 결합하지 않으며 쥐 Tyro3의 세포외 도메인에 결합하지 않고 시노몰구스 원숭이 Tyro3 수용체의 세포외 도메인에 결합한다.
다른 구현예에서, 항-Tyro3 항체는 인간 Axl 및 Mer 수용체의 세포외 도메인에 유의적으로 결합하지 않으나 쥐 Tyro3의 세포외 도메인에 결합한다. 당해 항체는 예를 들면, 서열 번호: 1의 310번 위치 내지 340번 위치에 연장된 Tyro3의 세포외 도메인의 부위와 같은, 인간 및 쥐 Tyro3에서 상동성인 수용체의 단편에 대해 지시될 수 있다.
항-Tyro3 항체는 Tyro3 리간드의 결합의 경쟁적 억제제, 즉, Tyro3 수용체에 결합하여 상기 수용체, 및 특히 인간 Tyro3 수용체의 세포외 도메인에 대한 Tyro3 리간드의 결합을 유의적으로 감소시키거나 억제시키는 항체일 수 있다. 경쟁적 억제제는 Tyro3에 Tyro3 리간드보다 더 큰 친화성으로 결합할 수 있다. 경쟁 검정은 당해 분야의 표준 기술(예를 들면, 경쟁적 ELISA 또는 다른 결합 검정)을 사용하여 수행할 수 있다.
Tyro3 리간드는 GAS6 단백질 또는 단백질 S, 바람직하게는 GAS6 단백질, 보다 바람직하게는 인간 GAS6 단백질일 수 있다.
GAS6 (성장 정지-특이적인 6)는 구조적으로 혈장 비타민 K-의존성 단백질의 계열에 속한다. GAS6는 TAM 계열; Tyro3, AXL 및 MER의 수용체 타이로신 키나제와 이의 상호작용을 통해 성장 인자-유사 특성을 갖는다. 인간 GAS6은 인지질 막에 대한 결합을 매개하는 감마-카복시글루타메이트가 풍부한 도메인, 4개의 상피 성장 인자-유사 도메인, 및 2개의 라미닌 G-유사 도메인으로 이루어진 678개 아미노산 단백질이다. 전사체 데이타베이스 UniGene에서 인간 GAS6에 대한 참고 조회번호는 Hs.646346이다.
단백질 S는 혈액 응고 캐스케이드(cascade)에서 항응고제이다. 이는 인자 V 및 인자 VIII을 분해함으로써 혈액 응고를 억제하는 프로테아제인, 활성화된 단백질 C에 대한 보조-인자로서 작용한다. 전사체 데이타베이스 UniGene에서 인간 단백질 S에 대한 참고 조회번호는 Hs.64016이다. Gas6 및 단백질 S는 전체적으로 44%의 아미노산 서열 동질성을 가지며, 동일한 복합체 다중-도메인 구조를 공유하고, 도메인의 당해 구조를 나타내는 마우스 및 인간 게놈에서 암호화된 단지 2개의 단백질이다.
본 발명의 항-Tyro3 항체는 인간 Tyro3 수용체에 대한 인간 Gas6의 결합을 적어도 10%, 바람직하게는 약 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85 내지 약 90%(실험 단락에서 기술된 바와 같은 경쟁적 ELISA를 기반으로 한 항체의 포화 수준에서 차단된 리간드의 퍼센트)까지 감소시키거나 억제시킬 수 있다. 특히, 본 발명의 항-Tyro3 항체는 인간 Tyro3 수용체에 대한 인간 Gas6의 결합을 약 25% 내지 약 75%, 바람직하게는 약 50% 내지 75% 및 보다 바람직하게는 약 60% 내지 약 75%의 범위로 감소시키거나 억제할 수 있다.
본 발명의 항-Tyro3 항체는 Tyro3 수용체의 억제제(inhibitor)/길항제(antagonist) 또는 효능제(agonist)일 수 있다.
바람직한 구현예에서, 항-Tyro3 항체는 Tyro3의 억제제, 즉 Tyro3 수용체의 적어도 하나의 활성을 억제하거나 감소시키는 항체이다.
"Tyro3 수용체 활성" 또는 "Tyro3 활성"은 Tyro3의 어떠한 생물학적 활성, 예를 들면, Tyro3 수용체에 대한 Tyro3 리간드, 예를 들면, Gas6 또는 단백질 S의 결합에 의해 향상되거나 유도된 활성을 포함한다. 특히, Tyro3 수용체는 세포 생존 및 증식, 정자형성, 면역조절 및 식균작용을 조절하는데 관여하는 것으로 밝혀졌다. 당해 수용체는 또한 에볼라 및 마르부르그 바이러스(Marburg virus)에 대한 세포 도입 인자로서 확인되어 왔다.
항체는, 예를 들면, Tyro3 리간드(예를 들면, Gas6)와 Tyro3의 세포외 도메인의 결합을 감소시키거나 차단시킴에 의해, 및/또는 Tyro3 매개된 시그날 형질유도를 감소시키거나 차단시킴에 의해, 및/또는 Tyro3 포스포릴화를 감소시키거나 차단시킴에 의해, 및/또는 Tyro3 이량체화를 감소시키거나 차단시킴에 의해, Tyro3 활성을 억제할 수 있다. 억제 활성은 당해 분야에 공지된 어떠한 방법에 의해서도 용이하게 분석할 수 있다. 특히 당해 활성을 결합 검정, 경쟁적 결합 검정 또는 인산화 또는 자가인산화 검정을 통해 측정할 수 있다.
일부 다른 구현예에서, 항-Tyro3 항체는 Tyro3의 효능제(agonist), 즉 Tyro3 수용체의 활성을 자극하는 항체이다. 효능제는, 예를 들면, 수용체에 대한 Tyro3 리간드의 결합을 촉진시킬 수 있는데, 수용체의 이량체화를 유도하거나 촉진시키고, 및/또는 Tyro3 인산화를 유도하거나 촉진시키고, 및/또는 Tyro3 매개된 시그날 형질도입을 증진시킬 수 있다. 효능제 활성은 위에서 기술된 바와 같은 당해 분야에 공지된 어떠한 방법에 의해서도 용이하게 검정할 수 있다.
본 발명의 항-Tyro3 항체는 인간 Tyro3 수용체의 세포외 도메인(서열 번호: 1의 41번 내지 429번 위치)에 결합한다. 항체는 2개의 면역글로불린-유사 도메인, Ig-1 및 Ig-2 중 1개 또는 수개, 및/또는 2개의 피브로넥틴 제III형-유사 도메인, FNIII-1 및 FNIII-2 중 1개 또는 수개에 결합할 수 있다.
바람직한 구현예에서, 항체는 인간 Tyro3 수용체의 면역글로불린-유사 도메인 Ig-1에 결합한다. 특히, 이러한 항체는 다음의 아미노산 서열을 포함하거나, 이것으로 필수적으로 이루어지거나, 또는 이것으로 이루어진 폴리펩타이드에 결합할 수 있다:
AGLKLMGAPVKLTVSQGQPVKLNCSVEGMEEPDIQWVKDGAVVQNLDQLYIPVSEQHWIGFLSLKSVERSDAGRYWCQVEDGGETEISQPVWLT(서열 번호: 2).
일부 다른 구현예에서, 항체는 인간 Tyro3 수용체의 면역글로불린-유사 도메인 Ig-1에 결합하며 인간 Tyro3의 면역글로불린-유사 도메인 Ig-2에 결합하지 않는다. 바람직하게는, 항체는 인간 Tyro3 수용체의 면역글로불린-유사 도메인 Ig-1에 특이적으로 또는 선택적으로 결합한다. 특히, 이러한 항체는 서열 번호: 2의 아미노산 서열을 포함하거나, 이것으로 필수적으로 이루어지거나, 또는 이것으로 이루어진 폴리펩타이드, 및 서열 번호: 3의 아미노산 서열을 포함하거나, 이것으로 필수적으로 이루어지거나, 또는 이것으로 이루어진 폴리펩타이드에 결합할 수 있으며, 서열 번호: 4의 아미노산 서열을 포함하거나, 이것으로 필수적으로 이루어지거나, 또는 이것으로 이루어진 폴리펩타이드에 결합하지 않거나, 유의적으로 결합하지 않는다.
특수한 구현예에서, 항체는 서열 번호: 10의 경쇄 가변 영역의 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3 및 서열 번호: 11의 중쇄 가변 영역의 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 1, 2, 3, 4, 5 또는 6개, 바람직하게는 6개의, CDR을 포함한다. 바람직하게는, 상기 항체는 인간 Tyro3 수용체의 면역글로불린-유사 도메인 Ig-1에 결합하며 인간 Tyro3의 면역글로불린-유사 도메인 Ig-2에 특이적으로 결합하지 않는다.
특히, 항체는 서열 번호: 10의 경쇄 가변 영역의 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 1, 2 또는 3개, 바람직하게는 3개의 CDR을 포함하는 경쇄 및/또는 서열 번호: 11의 중쇄 가변 영역의 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 1, 2 또는 3개, 바람직하게는 3개의 CDR을 포함하는 중쇄를 포함할 수 있다.
바람직하게는, 항체는 서열 번호: 10의 경쇄 가변 영역의 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3을 포함하는 경쇄 및 서열 번호: 11의 중쇄 가변 영역의 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3을 포함하는 중쇄를 포함한다.
보다 특수한 구현예에서, 항체는 아미노산
SYELTQPPSVSVSPGQTARITCSGDALPKKYAYWYQQKSGQAPVLVIYEDEKRASGIPERFSGSSSGTMATLTISGAQVEDEADYYCYSQERNGNYAVFGGGTKLTVL(서열 번호: 10)으로 이루어지거나, 또는 필수적으로 이루어진 경쇄 가변 영역 및
아미노산
EVQLVQSGADVKKPGASLTISCQASGYTFTDYWISWVRQKPGKGLEWMGQIVPRASRTNYGPSFQGHVTISADRSTATAYLQWRSLEASDTAMYYCVRPYFQTSGGTIPEYYQHWGPGTLVTVSS
(서열 번호: 11)으로 이루어지거나, 또는 필수적으로 이루어진 중쇄 가변 영역을 포함한다.
서열 번호: 10 및 11의 가변 영역의 Chothia, AbM, Kabat, Contact 및 IMGT 정의 시스템에 따른 CDR의 서열은 하기 제공된다.
[표 1] 서열 번호: 10 및 11의 가변 영역의 CDR의 서열
가변 영역 CDR 정의 서열 서열 번호
서열 번호: 10의 경쇄 가변 영역 CDR-L1
 Chothia SGDALPKKYAY 12
AbM SGDALPKKYAY 12
Kabat SGDALPKKYAY 12
Contact KKYAYWY 13
IMGT ALPKKY 14
CDR-L2
 Chothia EDEKRAS 15
AbM EDEKRAS 15
Kabat EDEKRAS 15
Contact LVIYEDEKRA 16
IMGT EDE
CDR-L3
 Chothia YSQERNGNYAV 17
AbM YSQERNGNYAV 17
Kabat YSQERNGNYAV 17
Contact YSQERNGNYA 18
IMGT YSQERNGNYAV 17
서열 번호: 11의 중쇄 가변 영역 CDR-H1
 Chothia GYTFTDY 19
AbM GYTFTDYWIS 20
Kabat DYWIS 21
Contact TDYWIS 22
IMGT GYTFTDYW 23
CDR-H2
 Chothia VPRASR 24
AbM QIVPRASRTN 25
Kabat QIVPRASRTNYGPSFQG 26
Contact WMGQIVPRASRTN 27
IMGT IVPRASRT 28
CDR-H3
 Chothia PYFQTSGGTIPEYYQH 29
AbM PYFQTSGGTIPEYYQH 29
Kabat PYFQTSGGTIPEYYQH 29
Contact VRPYFQTSGGTIPEYYQ 30
IMGT VRPYFQTSGGTIPEYYQH 31
다른 특수한 구현예에서, 항체는 서열 번호: 32의 경쇄 가변 영역의 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3 및 서열 번호: 33의 중쇄 가변 영역의 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 1개, 2개, 3개, 4개, 5개 또는 6개, 바람직하게는 6개의 CDR을 포함한다. 바람직하게는, 상기 항체는 인간 Tyro3 수용체의 면역글로불린-유사 도메인 Ig-1에 결합하며 인간 Tyro3의 면역글로불린-유사 도메인 Ig-2에는 유의적으로 결합하지 않는다.
특히, 항체는 서열 번호: 32의 경쇄 가변 영역의 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 1개, 2개 또는 3개, 바람직하게는 3개의 CDR을 포함하는 경쇄 및/또는 서열 번호: 33의 중쇄 가변 영역의 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 1개, 2개 또는 3개, 바람직하게는 3개의 CDR을 포함하는 중쇄를 포함할 수 있다.
바람직하게는, 항체는 서열 번호: 32의 경쇄 가변 영역의 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3를 포함하는 경쇄 및 서열 번호; 33의 중쇄 가변 영역의 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3을 포함하는 중쇄를 포함한다.
보다 특수한 구현예에서, 항체는 아미노산
SYELTQPPSVSVSPGQTARITCSGDALPKKYAYWYQQKSGQAPVLVIYEDWKRASGIPERFSGSSSGTMATLTISGAQVEDEADYYCYSQERKGNYFVFGGGTKLTVL (서열 번호: 32)으로 이루어지거나, 또는 필수적으로 이루어진 경쇄 가변 영역 및 아미노산
EVQLVQSGADVKKPGASLTISCQASGYTFTDYWISWVRQKPGKGLEWMGQINRHASNTMYGPSFQGHVTISADRSTATAYLQWRSLEASDTAMYYCVRSGGATSGGTIPEYYQHWGPGTLVTVSS
(서열 번호: 33)으로 이루어지거나, 또는 필수적으로 이루어진 중쇄 가변 영역을 포함한다.
서열 번호: 32 및 33의 가변 영역의 Chothia, AbM, Kabat, Contact 및 IMGT 정의 시스템에 따른 CDR의 서열은 하기 제공된다.
[표 2] 서열 번호: 32 및 33의 가변 영역의 CDR의 서열
가변 영역 CDR 정의 서열 서열 번호
서열 번호: 32의 경쇄 가변 영역 CDR-L1
 Chothia SGDALPKKYAY 12
AbM SGDALPKKYAY 12
Kabat SGDALPKKYAY 12
Contact KKYAYWY 13
IMGT ALPKKY 14
CDR-L2
 Chothia EDWKRAS 34
AbM EDWKRAS 34
Kabat EDWKRAS 34
Contact LVIYEDWKRA 35
IMGT EDW
CDR-L3
 Chothia YSQERKGNYFV 36
AbM YSQERKGNYFV 36
Kabat YSQERKGNYFV 36
Contact YSQERKGNYF 37
IMGT YSQERKGNYFV 36
서열 번호: 33중쇄 가변 영역 CDR-H1
 Chothia GYTFTDY 19
AbM GYTFTDYWIS 20
Kabat DYWIS 21
Contact TDYWIS 22
IMGT GYTFTDYW 23
CDR-H2
 Chothia NRHASN 38
AbM QINRHASNTM 39
Kabat QINRHASNTMYGPSFQG 40
Contact WMGQINRHASNTM 41
IMGT INRHASNT 42
CDR-H3
 Chothia SGGATSGGTIPEYYQH 43
AbM SGGATSGGTIPEYYQH 43
Kabat SGGATSGGTIPEYYQH 43
Contact VRSGGATSGGTIPEYYQ 44
IMGT VRSGGATSGGTIPEYYQH 45
추가의 특수한 구현예에서, 항체는 서열 번호: 46의 경쇄 가변 영역의 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3 및 서열 번호: 47의 중쇄 가변 영역의 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 1개, 2개, 3개, 4개, 5개 또는 6개, 바람직하게는 6개의 CDR을 포함한다. 바람직하게는, 상기 항체는 인간 Tyro3 수용체의 면역글로불린-유사 도메인 Ig-1에 결합하며 인간 Tyro3의 면역글로불린-유사 도메인 Ig-2에는 유의적으로 결합하지 않는다.
특히, 항체는 서열 번호; 46의 경쇄 가변 영역의 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 1개, 2개 또는 3개, 바람직하게는 3개의 CDR을 포함하는 경쇄 및/또는 서열 번호; 47의 중쇄 가변 영역의 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 1개, 2개 또는 3개, 바람직하게는 3개의 CDR을 포함하는 중쇄를 포함할 수 있다.
바람직하게는, 항체는 서열 번호: 46의 경쇄 가변 영역의 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3를 포함하는 경쇄 및 서열 번호: 47의 중쇄 가변 영역의 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3을 포함하는 중쇄를 포함한다.
보다 특수한 구현예에서, 항체는 아미노산
SYELTQPPSVSVSPGQTARITCSGDALPKKYAYWYQQKSGQAPVLVIYEDKKRVSGIPERFSGSSSGTMATLTISGAQVEDEADYYCYSLAVDGNYGVFGGGTKLTVL (서열 번호: 46)로 이루어지거나, 또는 필수적으로 이루어진 경쇄 가변 영역 및 아미노산
EVQLVQSGADVKKPGASLTISCQASGYTFTDYWISWVRQKPGKGLEWMGAISRNGSTTYYGPSFQGHVTISADRSTATAYLQWRSLEASDTAMYYCVRSGGLTSGGTIPEYYQHWGPGTLVPVSSVD
(서열 번호: 47)으로 이루어지거나, 또는 필수적으로 이루어진 중쇄 가변 영역을 포함한다.
서열 번호: 46 및 47의 가변 영역의 Chothia, AbM, Kabat, Contact 및 IMGT 정의 시스템에 따른 CDR의 서열은 하기 제공된다.
[표 3] 서열 번호: 46 및 47의 가변 영역의 CDR의 서열
가변 영역 CDR 정의 서열 서열 번호
서열 번호: 46의 경쇄 가변 영역 CDR-L1
 Chothia SGDALPKKYAY 12
AbM SGDALPKKYAY 12
Kabat SGDALPKKYAY 12
Contact KKYAYWY 13
IMGT ALPKKY 14
CDR-L2
 Chothia EDKKRVS 48
AbM EDKKRVS 48
Kabat EDKKRVS 48
Contact LVIYEDKKRV 49
IMGT EDK
CDR-L3
 Chothia YSLAVDGNYGV 50
AbM YSLAVDGNYGV 50
Kabat YSLAVDGNYGV 50
Contact YSLAVDGNYG 51
IMGT YSLAVDGNYGV 50
서열 번호: 47의 중쇄 가변 영역 CDR-H1
 Chothia GYTFTDY 19
AbM GYTFTDYWIS 20
Kabat DYWIS 21
Contact TDYWIS 22
IMGT GYTFTDYW 23
CDR-H2
 Chothia SRNGST 52
AbM AISRNGSTTY 53
Kabat AISRNGSTTYYGPSFQG 54
Contact WMGAISRNGSTTY 55
IMGT ISRNGSTT 56
CDR-H3
 Chothia SGGLTSGGTIPEYYQH 57
AbM SGGLTSGGTIPEYYQH 57
Kabat SGGLTSGGTIPEYYQH 57
Contact VRSGGLTSGGTIPEYYQ 58
IMGT VRSGGLTSGGTIPEYYQH 59
추가의 특수한 구현예에서, 항체는 서열 번호: 60의 경쇄 가변 영역의 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3 및 서열 번호: 61의 중쇄 가변 영역의 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 1개, 2개, 3개, 4개, 5개 또는 6개, 바람직하게는 6개의 CDR을 포함한다. 바람직하게는, 상기 항체는 인간 Tyro3 수용체의 면역글로불린-유사 도메인 Ig-1에 결합하며 인간 Tyro3의 면역글로불린-유사 도메인 Ig-2에는 유의적으로 결합하지 않는다.
특히, 항체는 서열 번호: 60의 경쇄 가변 영역의 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 1개, 2개 또는 3개, 바람직하게는 3개의 CDR을 포함하는 경쇄 및/또는 서열 번호: 61의 중쇄 가변 영역의 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 1개, 2개 또는 3개, 바람직하게는 3개의 CDR을 포함하는 중쇄를 포함할 수 있다.
바람직하게는, 항체는 서열 번호: 60의 경쇄 가변 영역의 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3를 포함하는 경쇄 및 서열 번호: 61의 중쇄 가변 영역의 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3을 포함하는 중쇄를 포함한다.
보다 특수한 구현예에서, 항체는 아미노산
SYELTQPPSVSVSPGQTARITCSGDALPKKYAYWYQQKSGQAPVLVIYEDSKRPSGIPERFSGSSSGTMATLTISGAQVEDEADYYCYSQNPQGNYFVFGGGTKLTVL (서열 번호: 60)으로 이루어지거나, 또는 필수적으로 이루어진 경쇄 가변 영역 및 아미노산
EVQLVQSGADVKKPGASLTISCQASGYTFTDYWISWVRQKPGKGLEWMGVINKYASWTRYGPSFQGHVTISADRSTATAYLQWRSLEASDTAMYYCVRSGGLTSGGTIPEYYQHWGPGTLVTVSS
(서열 번호: 61)으로 이루어지거나, 또는 필수적으로 이루어진 중쇄 가변 영역을 포함한다.
서열 번호: 60 및 61의 가변 영역의 Chothia, AbM, Kabat, Contact 및 IMGT 정의 시스템에 따른 CDR의 서열은 하기 제공된다.
[표 4] 서열 번호: 60 및 61의 가변 영역의 CDR의 서열
가변 영역 CDR 정의 서열 서열 번호
서열 번호: 60의 경쇄 가변 영역 CDR-L1
 Chothia SGDALPKKYAY 12
AbM SGDALPKKYAY 12
Kabat SGDALPKKYAY 12
Contact KKYAYWY 13
IMGT ALPKKY 14
CDR-L2
 Chothia EDSKRPS 62
AbM EDSKRPS 62
Kabat EDSKRPS 62
Contact LVIYEDSKRP 63
IMGT EDS
CDR-L3
 Chothia YSQNPQGNYFV 64
AbM YSQNPQGNYFV 64
Kabat YSQNPQGNYFV 64
Contact YSQNPQGNYF 65
IMGT YSQNPQGNYFV 64
서열 번호: 61의 중쇄 가변 영역 CDR-H1
 Chothia GYTFTDY 19
AbM GYTFTDYWIS 20
Kabat DYWIS 21
Contact TDYWIS 22
IMGT GYTFTDYW 23
CDR-H2
 Chothia NKYASW 66
AbM VINKYASWTR 67
Kabat VINKYASWTRYGPSFQG 68
Contact WMGVINKYASWTR 69
IMGT INKYASWT 70
CDR-H3
 Chothia SGGLTSGGTIPEYYQH 71
AbM SGGLTSGGTIPEYYQH 71
Kabat SGGLTSGGTIPEYYQH 71
Contact VRSGGLTSGGTIPEYYQ 72
IMGT VRSGGLTSGGTIPEYYQH 73
특수한 구현예에서, 항체는 서열 번호: 74의 경쇄 가변 영역의 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3 및 서열 번호: 75의 중쇄 가변 영역의 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 1개, 2개, 3개, 4개, 5개 또는 6개, 바람직하게는 6개의 CDR을 포함한다. 바람직하게는, 상기 항체는 인간 Tyro3 수용체의 면역글로불린-유사 도메인 Ig-1에 결합하며 인간 Tyro3의 면역글로불린-유사 도메인 Ig-2에는 유의적으로 결합하지 않는다.
특히, 항체는 서열 번호: 74의 경쇄 가변 영역의 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 1개, 2개 또는 3개, 바람직하게는 3개의 CDR을 포함하는 경쇄 및/또는 서열 번호; 75의 중쇄 가변 영역의 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 1개, 2개 또는 3개, 바람직하게는 3개의 CDR을 포함하는 중쇄를 포함할 수 있다.
바람직하게는, 항체는 서열 번호: 74의 경쇄 가변 영역의 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3를 포함하는 경쇄 및 서열 번호: 75의 중쇄 가변 영역의 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3을 포함하는 중쇄를 포함한다.
보다 특수한 구현예에서, 항체는 아미노산
SYELTQPPSVSVSPGQTARITCSGDALPKKYAYWYQQKSGQAPVLVIYEDNKRGSGIPERFSGSSSGTMATLTISGAQVEDEADYYCYSKSPEGNYMVFGGGTKLTVL (서열 번호: 74)로 이루어지거나, 또는 필수적으로 이루어진 경쇄 가변 영역 및 아미노산
EVQLVQSGADVKKPGASLTISCQASGYTFTDYWISWVRQKPGKGLEWMGEIFLPPSTTVYGPSFQGHVTISADRSTATAYLQWRSLEASDTAMYYCVRQTRLTSGGTIPEYYQHWGPGTLVTVSS
(서열 번호: 75)로 이루어지거나, 또는 필수적으로 이루어진 중쇄 가변 영역을 포함한다.
서열 번호: 74 및 75의 가변 영역의 Chothia, AbM, Kabat, Contact 및 IMGT 정의 시스템에 따른 CDR의 서열은 하기 제공된다.
[표 5] 서열 번호: 74 및 75의 가변 영역의 CDR의 서열
가변 영역 CDR 정의 서열 서열 번호
서열 번호: 74의 경쇄 가변 영역 CDR-L1
 Chothia SGDALPKKYAY 12
AbM SGDALPKKYAY 12
Kabat SGDALPKKYAY 12
Contact KKYAYWY 13
IMGT ALPKKY 14
CDR-L2
 Chothia EDNKRGS 76
AbM EDNKRGS 76
Kabat EDNKRGS 76
Contact LVIYEDNKRG 77
IMGT EDN
CDR-L3
 Chothia YSKSPEGNYMV 78
AbM YSKSPEGNYMV 78
Kabat YSKSPEGNYMV 78
Contact YSKSPEGNYM 79
IMGT YSKSPEGNYMV 78
서열 번호: 75의 중쇄 가변 영역 CDR-H1
 Chothia GYTFTDY 19
AbM GYTFTDYWIS 20
Kabat DYWIS 21
Contact TDYWIS 22
IMGT GYTFTDYW 23
CDR-H2
 Chothia FLPPST 80
AbM EIFLPPSTTV 81
Kabat EIFLPPSTTVYGPSFQG 82
Contact WMGEIFLPPSTTV 83
IMGT IFLPPSTT 84
CDR-H3
 Chothia QTRLTSGGTIPEYYQH 85
AbM QTRLTSGGTIPEYYQH 85
Kabat QTRLTSGGTIPEYYQH 85
Contact VRQTRLTSGGTIPEYYQ 86
IMGT VRQTRLTSGGTIPEYYQH 87
일부 구현예에서, 항체는 인간 Tyro3의 면역글로불린-유사 도메인 Ig-1에는 결합하지만 면역글로불린-유사 도메인 Ig-2에는 결합하지 않거나 유의적으로 결합하지 않으며,
서열 번호: 10의 경쇄 가변 영역의 CDR-L1으로 이루어지거나 또는 필수적으로 이루어진 CDR-L1, 및 서열 번호: 10, 32, 46, 60 또는 74, 바람직하게는 서열 번호; 10, 32, 46 또는 60의 경쇄 가변 영역의 CDR-L2 및 CDR-L3으로 이루어지거나 또는 필수적으로 이루어진 CDR-L2 및 CDR-L3를 포함하는 경쇄, 및
서열 번호: 11의 중쇄 가변 영역의 CDR-H1으로 이루어지거나 또는 필수적으로 이루어진 CDR-H1, 및 서열 번호: 11, 33, 47, 61 또는 75, 바람직하게는 서열 번호: 11, 33, 47 또는 61의 중쇄 가변 영역의 CDR-H2 및 CDR-H3으로 이루어지거나 또는 필수적으로 이루어진 CDR-H2 및 CDR-H3을 포함하는 중쇄를 포함한다.
일부 구현예에서, 항체는 인간 Tyro3 수용체의 면역글로불린-유사 도메인 Ig-1에 결합하며 인간 Tyro3의 면역글로불린-유사 도메인 Ig-2에 결합한다. 특히, 이러한 항체는
- 서열 번호: 2의 아미노산 서열로 필수적으로 이루어지거나 또는 상기 서열로 이루어진 폴리펩타이드, 및
- 다음 아미노산을 포함하거나, 필수적으로 이루어지거나, 또는 이루어진 폴리펩타이드:
AGLKLMGAPVKLTVSQGQPVKLNCSVEGMEEPDIQWVKDGAVVQNLDQLYIPVSEQHWIGFLSLKSVERSDAGRYWCQVEDGGETEISQPVWLTVEGVPFFTVEPKDLAVPPNAPFQLSCEAVGPPEPVTIVWWRGTTKIGGPAPSPSVLNVTGVTQSTMFSCEAHNLKGLASSRTATVHLQ (서열 번호: 3), 및
- 다음 아미노산을 포함하거나, 필수적으로 이루어지거나, 또는 이루어진 폴리펩타이드:
VPFFTVEPKDLAVPPNAPFQLSCEAVGPPEPVTIVWWRGTTKIGGPAPSPSVLNVTGVTQSTMFSCEAHNLKGLASSRTATVHLQALPAAPFNITVTKLSSSNASVAWMPGADGRALLQSCTVQVTQAPGGWEVLAVVVPVPPFTCLLRDLVPATNYSLRVRCANALGPSPYADWVPFQTKGLA
(서열 번호: 4)에 결합할 수 있다.
특수한 구현예에서, 항체는 서열 번호: 88의 경쇄 가변 영역의 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3 및 서열 번호: 89의 중쇄 가변 영역의 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 1개, 2개, 3개, 4개, 5개 또는 6개, 바람직하게는 6개의 CDR을 포함한다. 바람직하게는, 상기 항체는 인간 Tyro3 수용체의 면역글로불린-유사 도메인 Ig-1에 결합하고 인간 Tyro3의 면역글로불린-유사 도메인 Ig-2에 결합한다.
특히, 항체는 서열 번호: 88의 경쇄 가변 영역의 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 1개, 2개 또는 3개, 바람직하게는 3개의 CDR을 포함하는 경쇄 및/또는 서열 번호: 89의 중쇄 가변 영역의 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 1개, 2개 또는 3개, 바람직하게는 3개의 CDR을 포함하는 중쇄를 포함할 수 있다.
바람직하게는, 항체는 서열 번호: 88의 경쇄 가변 영역의 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3를 포함하는 경쇄 및 서열 번호: 89의 중쇄 가변 영역의 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3을 포함하는 중쇄를 포함한다.
보다 특수한 구현예에서, 항체는 아미노산
SYELTQPPSVSVSPGQTARITCSGDALPKKYAYWYQQKSGQAPVLVIYEDSKRSSGIPERFSGSSSGTMATLTISGAQVEDEADYYCYSANQRGNYMVFGGGTKLTVL (서열 번호: 88)으로 이루어지거나, 또는 필수적으로 이루어진 경쇄 가변 영역 및 아미노산
EVQLVQSGADVKKPGASLTISCQASGYTFTDYWISWVRQKPGKGLEWMGSITRSSSRTHYGPSFQGHVTISADRSTATAYLQWRSLEASDTAMYYCVRGYTHLRTWGPGTLVTVSS
(서열 번호: 89)으로 이루어지거나, 또는 필수적으로 이루어진 중쇄 가변 영역을 포함한다.
서열 번호: 88 및 89의 가변 영역의 Chothia, AbM, Kabat, Contact 및 IMGT 정의 시스템에 따른 CDR의 서열은 하기 제공된다.
[표 6] 서열 번호: 88 및 89의 가변 영역의 CDR의 서열
가변 영역 CDR 정의 서열 서열 번호
서열 번호: 88의 경쇄 가변 영역 CDR-L1
 Chothia SGDALPKKYAY 12
AbM SGDALPKKYAY 12
Kabat SGDALPKKYAY 12
Contact KKYAYWY 13
IMGT ALPKKY 14
CDR-L2
 Chothia EDSKRSS 90
AbM EDSKRSS 90
Kabat EDSKRSS 90
Contact LVIYEDSKRS 91
IMGT EDS
CDR-L3
 Chothia YSANQRGNYMV 92
AbM YSANQRGNYMV 92
Kabat YSANQRGNYMV 92
Contact YSANQRGNYM 93
IMGT YSANQRGNYMV 92
서열 번호: 89의 중쇄 가변 영역 CDR-H1
 Chothia GYTFTDY 19
AbM GYTFTDYWIS 20
Kabat DYWIS 21
Contact TDYWIS 22
IMGT GYTFTDYW 23
CDR-H2
 Chothia TRSSSR 94
AbM SITRSSSRTH 95
Kabat SITRSSSRTHYGPSFQG 96
Contact WMGSITRSSSRTH 97
IMGT ITRSSSRT 98
CDR-H3
 Chothia GYTHLRT 99
AbM GYTHLRT 99
Kabat GYTHLRT 99
Contact VRGYTHLR 100
IMGT VRGYTHLRT 101
특수한 구현예에서, 항체는 서열 번호: 102의 경쇄 가변 영역의 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3 및 서열 번호: 103의 중쇄 가변 영역의 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 1개, 2개, 3개, 4개, 5개 또는 6개, 바람직하게는 6개의 CDR을 포함한다. 바람직하게는, 상기 항체는 인간 Tyro3 수용체의 면역글로불린-유사 도메인 Ig-1에 결합하고 인간 Tyro3의 면역글로불린-유사 도메인 Ig-2에 결합한다.
특히, 항체는 서열 번호: 102의 경쇄 가변 영역의 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 1개, 2개 또는 3개, 바람직하게는 3개의 CDR을 포함하는 경쇄 및/또는 서열 번호: 103의 중쇄 가변 영역의 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 1개, 2개 또는 3개, 바람직하게는 3개의 CDR을 포함하는 중쇄를 포함할 수 있다.
바람직하게는, 항체는 서열 번호: 102의 경쇄 가변 영역의 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3를 포함하는 경쇄 및 서열 번호: 103의 중쇄 가변 영역의 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3을 포함하는 중쇄를 포함한다.
보다 특수한 구현예에서, 항체는 아미노산
SYELTQPPSVSVSPGQTARITCSGDALPKKYAYWYQQKSGQAPVLVIYEDAKRVSGIPERFSGSSSGTMATLTISGAQVEDEADYYCYSASANGNYRVFGGGTKLTVL (서열 번호: 102)로 이루어지거나, 또는 필수적으로 이루어진 경쇄 가변 영역 및 아미노산
EVQLVQSGADVKKPGASLTISCQASGYTFTDYWISWVRQKPGKGLEWMGRIRPLLSHTMYGPSFQGHVTISADRSTATAYLQWRSLEASDTAMYYCVRSWLATSGGTIPEYYQHWGPGTLVTVSS
(서열 번호: 103)로 이루어지거나, 또는 필수적으로 이루어진 중쇄 가변 영역을 포함한다.
서열 번호: 102 및 103의 가변 영역의 Chothia, AbM, Kabat, Contact 및 IMGT 정의 시스템에 따른 CDR의 서열은 하기 제공된다.
[표 7] 서열 번호: 102 및 103의 가변 영역의 CDR의 서열
가변 영역 CDR 정의 서열 서열 번호
서열 번호: 102의 경쇄 가변 영역 CDR-L1
 Chothia SGDALPKKYAY 12
AbM SGDALPKKYAY 12
Kabat SGDALPKKYAY 12
Contact KKYAYWY 13
IMGT ALPKKY 14
CDR-L2
 Chothia EDAKRVS 104
AbM EDAKRVS 104
Kabat EDAKRVS 104
Contact LVIYEDAKRV 105
IMGT EDA
CDR-L3
 Chothia YSASANGNYRV 106
AbM YSASANGNYRV 106
Kabat YSASANGNYRV 106
Contact YSASANGNYR 107
IMGT YSASANGNYRV 106
서열 번호: 103의 중쇄 가변 영역 CDR-H1
 Chothia GYTFTDY 19
AbM GYTFTDYWIS 20
Kabat DYWIS 21
Contact TDYWIS 22
IMGT GYTFTDYW 23
CDR-H2
 Chothia RPLLSH 108
AbM RIRPLLSHTM 109
Kabat RIRPLLSHTMYGPSFQG 110
Contact WMGRIRPLLSHTM 111
IMGT IRPLLSHT 112
CDR-H3
 Chothia SWLATSGGTIPEYYQH 113
AbM SWLATSGGTIPEYYQH 113
Kabat SWLATSGGTIPEYYQH 113
Contact VRSWLATSGGTIPEYYQ 114
IMGT VRSWLATSGGTIPEYYQH 115
특수한 구현예에서, 항체는 서열 번호: 116의 경쇄 가변 영역의 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3 및 서열 번호: 117의 중쇄 가변 영역의 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 1개, 2개, 3개, 4개, 5개 또는 6개, 바람직하게는 6개의 CDR을 포함한다. 바람직하게는, 상기 항체는 인간 Tyro3 수용체의 면역글로불린-유사 도메인 Ig-1에 결합하고 인간 Tyro3의 면역글로불린-유사 도메인 Ig-2에 결합한다.
특히, 항체는 서열 번호: 116의 경쇄 가변 영역의 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 1개, 2개 또는 3개, 바람직하게는 3개의 CDR을 포함하는 경쇄 및/또는 서열 번호: 117의 중쇄 가변 영역의 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 1개, 2개 또는 3개, 바람직하게는 3개의 CDR을 포함하는 중쇄를 포함할 수 있다.
바람직하게는, 항체는 서열 번호: 116의 경쇄 가변 영역의 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3를 포함하는 경쇄 및 서열 번호: 117의 중쇄 가변 영역의 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3을 포함하는 중쇄를 포함한다.
보다 특수한 구현예에서, 항체는 아미노산
SYELTQPPSVSVSPGQTARITCSGDALPKKYAYWYQQKSGQAPVLVIYEDDKRLSGIPERFSGSSSGTMATLTISGAQVEDEADYYCYSTEINGNYAVFGGGTKLTVL (서열 번호: 116)으로 이루어지거나, 또는 필수적으로 이루어진 경쇄 가변 영역, 및 아미노산
EVQLVQSGADVKKPGASLTISCQASGYTFTDYWISWVRQKPGKGLEWMGRIHTYQSSTRYGPSFQGHVTISADRSTATAYLQWRSLEASDTAMYYCVRHHSTTTANPYSSWGPGTLVTVSS
(서열 번호: 117)으로 이루어지거나, 또는 필수적으로 이루어진 중쇄 가변 영역을 포함한다.
서열 번호: 116 및 117의 가변 영역의 Chothia, AbM, Kabat, Contact 및 IMGT 정의 시스템에 따른 CDR의 서열은 하기 제공된다.
[표 8] 서열 번호: 116 및 117의 가변 영역의 CDR의 서열
가변 영역 CDR 정의 서열 서열 번호
서열 번호: 116의 경쇄 가변 영역 CDR-L1
 Chothia SGDALPKKYAY 12
AbM SGDALPKKYAY 12
Kabat SGDALPKKYAY 12
Contact KKYAYWY 13
IMGT ALPKKY 14
CDR-L2
 Chothia EDDKRLS 118
AbM EDDKRLS 118
Kabat EDDKRLS 118
Contact LVIYEDDKRL 119
IMGT EDD
CDR-L3
 Chothia YSTEINGNYAV 120
AbM YSTEINGNYAV 120
Kabat YSTEINGNYAV 120
Contact YSTEINGNYA 121
IMGT YSTEINGNYAV 120
서열 번호: 117의 중쇄 가변 영역 CDR-H1
 Chothia GYTFTDY 19
AbM GYTFTDYWIS 20
Kabat DYWIS 21
Contact TDYWIS 22
IMGT GYTFTDYW 23
CDR-H2
 Chothia HTYQSS 122
AbM RIHTYQSSTR 123
Kabat RIHTYQSSTRYGPSFQG 124
Contact WMGRIHTYQSSTR 125
IMGT IHTYQSST 126
CDR-H3
 Chothia HHSTTTANPYSS 127
AbM HHSTTTANPYSS 127
Kabat HHSTTTANPYSS 127
Contact VRHHSTTTANPYS 128
IMGT VRHHSTTTANPYSS 129
특수한 구현예에서, 항체는 서열 번호: 130의 경쇄 가변 영역의 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3 및 서열 번호: 131의 중쇄 가변 영역의 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 1개, 2개, 3개, 4개, 5개 또는 6개, 바람직하게는 6개의 CDR을 포함한다. 바람직하게는, 상기 항체는 인간 Tyro3 수용체의 면역글로불린-유사 도메인 Ig-1 및 인간 Tyro3의 면역글로불린-유사 도메인 Ig-2에 결합한다.
특히, 항체는 서열 번호: 130의 경쇄 가변 영역의 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 1개, 2개 또는 3개, 바람직하게는 3개의 CDR을 포함하는 경쇄 및/또는 서열 번호: 131의 중쇄 가변 영역의 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 1개, 2개 또는 3개, 바람직하게는 3개의 CDR을 포함하는 중쇄를 포함할 수 있다.
바람직하게는, 항체는 서열 번호: 130의 경쇄 가변 영역의 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3를 포함하는 경쇄 및 서열 번호: 131의 중쇄 가변 영역의 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3을 포함하는 중쇄를 포함한다.
보다 특수한 구현예에서, 항체는 아미노산
SYELTQPPSVSVSPGQTARITCSGDALPKKYAYWYQQKSGQAPVLVIYEDKKRISGIPERFSGSSSGTMATLTISGAQVEDEADYYCYSTSTGGNYMVFGGGTKLTVL (서열 번호: 130)로 이루어지거나, 또는 필수적으로 이루어진 경쇄 가변 영역 및 아미노산
EVQLVQSGADVKKPGASLTISCQASGYTFTDYWISWVRQKPGKGLEWMGQIRGPASATHYGPSFQGHVTISADRSTATAYLQWRSLEASDTAMYYCVRHQQQTSGGTIPEYYQHWGPGTLVTVSS
(서열 번호: 131)로 이루어지거나, 또는 필수적으로 이루어진 중쇄 가변 영역을 포함한다.
서열 번호: 130 및 131의 가변 영역의 Chothia, AbM, Kabat, Contact 및 IMGT 정의 시스템에 따른 CDR의 서열은 하기 제공된다.
[표 9] 서열 번호: 130 및 131의 가변 영역의 CDR의 서열
가변 영역 CDR 정의 서열 서열 번호
서열 번호: 130의 경쇄 가변 영역 CDR-L1
 Chothia SGDALPKKYAY 12
AbM SGDALPKKYAY 12
Kabat SGDALPKKYAY 12
Contact KKYAYWY 13
IMGT ALPKKY 14
CDR-L2
 Chothia EDKKRIS 132
AbM EDKKRIS 132
Kabat EDKKRIS 132
Contact LVIYEDKKRI 133
IMGT EDK
CDR-L3
 Chothia YSTSTGGNYMV 134
AbM YSTSTGGNYMV 134
Kabat YSTSTGGNYMV 134
Contact YSTSTGGNYM 135
IMGT YSTSTGGNYMV 134
서열 번호: 131의 중쇄 가변 영역 CDR-H1
 Chothia GYTFTDY 19
AbM GYTFTDYWIS 20
Kabat DYWIS 21
Contact TDYWIS 22
IMGT GYTFTDYW 23
CDR-H2
 Chothia RGPASA 136
AbM QIRGPASATH 137
Kabat QIRGPASATHYGPSFQG 138
Contact WMGQIRGPASATH 139
IMGT IRGPASAT 140
CDR-H3
 Chothia HQQQTSGGTIPEYYQH 141
AbM HQQQTSGGTIPEYYQH 141
Kabat HQQQTSGGTIPEYYQH 141
Contact VRHQQQTSGGTIPEYYQ 142
IMGT VRHQQQTSGGTIPEYYQH 143
특수한 구현예에서, 항체는 서열 번호: 144의 경쇄 가변 영역의 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3 및 서열 번호: 145의 중쇄 가변 영역의 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 1개, 2개, 3개, 4개, 5개 또는 6개, 바람직하게는 6개의 CDR을 포함한다. 바람직하게는, 상기 항체는 인간 Tyro3 수용체의 면역글로불린-유사 도메인 Ig-1 및 인간 Tyro3의 면역글로불린-유사 도메인 Ig-2에 결합한다.
특히, 항체는 서열 번호: 144의 경쇄 가변 영역의 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 1개, 2개 또는 3개, 바람직하게는 3개의 CDR을 포함하는 경쇄 및/또는 서열 번호: 145의 중쇄 가변 영역의 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 1개, 2개 또는 3개, 바람직하게는 3개의 CDR을 포함하는 중쇄를 포함할 수 있다.
바람직하게는, 항체는 서열 번호: 144의 경쇄 가변 영역의 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3를 포함하는 경쇄 및 서열 번호: 145의 중쇄 가변 영역의 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3을 포함하는 중쇄를 포함한다.
보다 특수한 구현예에서, 항체는 아미노산
SYELTQPPSVSVSPGQTARITCSGDALPKKYAYWYQQKSGQAPVLVIYEDAKRSSGIPERFSGSSSGTMATLTISGAQVEDEADYYCYSLSDSGNYFVFGGGTKLTVL (서열 번호: 144)로 이루어지거나, 또는 필수적으로 이루어진 경쇄 가변 영역 및 아미노산
EVQLVQSGADVKKPGASLTISCQASGYTFTDYWISWVRQKPGKGLEWMGQIRGQHSSTLYGPSFQGHVTISADRSTATAYLQWRSLEASDTAMYYCVRHGASTSGGTIPEYYQHWGPGTLVTVSS
(서열 번호: 145)로 이루어지거나, 또는 필수적으로 이루어진 중쇄 가변 영역을 포함한다.
서열 번호: 144 및 145의 가변 영역의 Chothia, AbM, Kabat, Contact 및 IMGT 정의 시스템에 따른 CDR의 서열은 하기 제공된다.
[표 10] 서열 번호: 144 및 145의 가변 영역의 CDR의 서열
가변 영역 CDR 정의 서열 서열 번호
서열 번호: 144의 경쇄 가변 영역 CDR-L1
 Chothia SGDALPKKYAY 12
AbM SGDALPKKYAY 12
Kabat SGDALPKKYAY 12
Contact KKYAYWY 13
IMGT ALPKKY 14
CDR-L2
 Chothia EDAKRSS 146
AbM EDAKRSS 146
Kabat EDAKRSS 146
Contact LVIYEDAKRS 147
IMGT EDA
CDR-L3
 Chothia YSLSDSGNYFV 148
AbM YSLSDSGNYFV 148
Kabat YSLSDSGNYFV 148
Contact YSLSDSGNYF 149
IMGT YSLSDSGNYFV 148
서열 번호: 145의 중쇄 가변 영역 CDR-H1
 Chothia GYTFTDY 19
AbM GYTFTDYWIS 20
Kabat DYWIS 21
Contact TDYWIS 22
IMGT GYTFTDYW 23
CDR-H2
 Chothia RGQHSS 150
AbM QIRGQHSSTL 151
Kabat QIRGQHSSTLYGPSFQG 152
Contact WMGQIRGQHSSTL 153
IMGT IRGQHSST 154
CDR-H3
 Chothia HGASTSGGTIPEYYQH 155
AbM HGASTSGGTIPEYYQH 155
Kabat HGASTSGGTIPEYYQH 155
Contact VRHGASTSGGTIPEYYQ 156
IMGT VRHGASTSGGTIPEYYQH 157
특수한 구현예에서, 항체는 서열 번호: 158의 경쇄 가변 영역의 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3 및 서열 번호: 159의 중쇄 가변 영역의 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 1개, 2개, 3개, 4개, 5개 또는 6개, 바람직하게는 6개의 CDR을 포함한다. 바람직하게는, 상기 항체는 인간 Tyro3 수용체의 면역글로불린-유사 도메인 Ig-1 및 인간 Tyro3의 면역글로불린-유사 도메인 Ig-2에 결합한다.
특히, 항체는 서열 번호: 158의 경쇄 가변 영역의 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 1개, 2개 또는 3개, 바람직하게는 3개의 CDR을 포함하는 경쇄 및/또는 서열 번호: 159의 중쇄 가변 영역의 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 1개, 2개 또는 3개, 바람직하게는 3개의 CDR을 포함하는 중쇄를 포함할 수 있다.
바람직하게는, 항체는 서열 번호: 158의 경쇄 가변 영역의 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3를 포함하는 경쇄 및 서열 번호: 159의 중쇄 가변 영역의 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3을 포함하는 중쇄를 포함한다.
보다 특수한 구현예에서, 항체는 아미노산
SYELTQPPSVSVSPGQTARITCSGDALPKKYAYWYQQKSGQAPVLVIYEDHKRASGIPERFSGSSSGTMATLTISGAQVEDEADYYCYSISPAGNYGVFGGGTKLTVL (서열 번호: 158)로 이루어지거나, 또는 필수적으로 이루어진 경쇄 가변 영역 및 아미노산
EVQLVQSGADVKKPGASLTISCQASGYTFTDYWISWVRQKPGKGLEWMGRISRHGSQTYYGPSFQGHVTISADRSTATAYLQWRSLEASDTAMYYCVRAGGQTSGGTIPEYYQHWGPGTLVTVSS
(서열 번호: 159)로 이루어지거나, 또는 필수적으로 이루어진 중쇄 가변 영역을 포함한다.
서열 번호: 158 및 159의 가변 영역의 Chothia, AbM, Kabat, Contact 및 IMGT 정의 시스템에 따른 CDR의 서열은 하기 제공된다.
[표 11] 서열 번호: 158 및 159의 가변 영역의 CDR의 서열
가변 영역 CDR 정의 서열 서열 번호
서열 번호: 158의 경쇄 가변 영역 CDR-L1
 Chothia SGDALPKKYAY 12
AbM SGDALPKKYAY 12
Kabat SGDALPKKYAY 12
Contact KKYAYWY 13
IMGT ALPKKY 14
CDR-L2
 Chothia EDHKRAS 160
AbM EDHKRAS 160
Kabat EDHKRAS 160
Contact LVIYEDHKRA 161
IMGT EDH
CDR-L3
 Chothia YSISPAGNYGV 162
AbM YSISPAGNYGV 162
Kabat YSISPAGNYGV 162
Contact YSISPAGNYG 163
IMGT YSISPAGNYGV 162
서열 번호: 159의 중쇄 가변 영역 CDR-H1
 Chothia GYTFTDY 19
AbM GYTFTDYWIS 20
Kabat DYWIS 21
Contact TDYWIS 22
IMGT GYTFTDYW 23
CDR-H2
 Chothia SRHGSQ 164
AbM RISRHGSQTY 165
Kabat RISRHGSQTYYGPSFQG 166
Contact WMGRISRHGSQTY 167
IMGT ISRHGSQT 168
CDR-H3
 Chothia AGGQTSGGTIPEYYQH 169
AbM AGGQTSGGTIPEYYQH 169
Kabat AGGQTSGGTIPEYYQH 169
Contact VRAGGQTSGGTIPEYYQ 170
IMGT VRAGGQTSGGTIPEYYQH 171
일부 구현예에서, 항체는 인간 Tyro3의 면역글로불린-유사 도메인 Ig-1 및 면역글로불린-유사 도메인 Ig-2에 결합하며
서열 번호: 10의 경쇄 가변 영역의 CDR-L1으로 이루어지거나 또는 필수적으로 이루어진 CDR-L1, 및 서열 번호: 88, 102, 116, 130, 144 또는 158, 바람직하게는 서열 번호: 102, 116, 130, 144 또는 158의 CDR-L2 및 CDR-L3으로 이루어지거나 또는 필수적으로 이루어진 CDR-L2 및 CDR-L3를 포함하는 경쇄, 및
서열 번호: 11의 중쇄 가변 영역의 CDR-H1으로 이루어지거나 또는 필수적으로 이루어진 CDR-H1, 및 서열 번호: 89, 103, 117, 131, 145 또는 159, 바람직하게는 서열 번호: 103, 117, 131, 145 또는 159의 중쇄 가변 영역의 CDR-H2 및 CDR-H3으로 이루어지거나 또는 필수적으로 이루어진 CDR-H2 및 CDR-H3를 포함하는 중쇄를 포함한다.
다른 구현예에서, 항체는 인간 Tyro3 수용체의 피브로넥틴 III 도메인 FNIII-1에 결합한다. 특히, 이러한 항체는
- 서열 번호; 4의 아미노산 서열을 포함하거나, 필수적으로 이루어지거나, 또는 이루어진 폴리펩타이드, 및
- 다음의 아미노산 서열로 필수적으로 이루어지거나, 또는 이루어진 폴리펩타이드에 결합할 수 있으며:
AAPFNITVTKLSSSNASVAWMPGADGRALLQSCTVQVTQAPGGWEVLAVVVPVPPFTCLLRDLVPATNYSLRVRCANALGPSPYADWVPFQTKGLAPASAPQNLHAIRTDSGLILEWEEVIPEAPLEGPLGPYKLSWVQDNGTQDELTVEGTRANLTGWDPQKDLIVRVCVSNAVGCGPWSQPLVVSSHDR (서열 번호: 5),
서열 번호; 2 또는 3의 아미노산 서열로 필수적으로 이루어지거나, 또는 이루어진 폴리펩타이드에는 결합하지 않는다.
특수한 구현예에서, 항체는 서열 번호: 172의 경쇄 가변 영역의 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3 및 서열 번호: 173의 중쇄 가변 영역의 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 1개, 2개, 3개, 4개, 5개 또는 6개, 바람직하게는 6개의 CDR을 포함한다. 바람직하게는, 상기 항체는 인간 Tyro3 수용체의 피브로넥틴 III 도메인 FNIII-1에 결합한다.
특히, 항체는 서열 번호: 172의 경쇄 가변 영역의 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 1개, 2개 또는 3개, 바람직하게는 3개의 CDR을 포함하는 경쇄 및/또는 서열 번호: 173의 중쇄 가변 영역의 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 1개, 2개 또는 3개, 바람직하게는 3개의 CDR을 포함하는 중쇄를 포함할 수 있다.
바람직하게는, 항체는 서열 번호: 172의 경쇄 가변 영역의 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3를 포함하는 경쇄 및 서열 번호: 173의 중쇄 가변 영역의 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3을 포함하는 중쇄를 포함한다.
보다 특수한 구현예에서, 항체는 아미노산
SYELTQPPSVSVSPGQTARITCSGDALPKKYAYWYQQKSGQAPVLVIYEDTKRHSGIPERFSGSSSGTMATLTISGAQVEDEADYYCYSAEHRGNYAVFGGGTKLTVL (서열 번호: 172)로 이루어지거나, 또는 필수적으로 이루어진 경쇄 가변 영역 및 아미노산
EVQLVQSGADVKKPGASLTISCQASGYTFTDYWISWVRQKPGKGLEWMGHINPMRSTTTYGPSFQGHVTISADRSTATAYLQWHSLEASDTAMYYCVRNDNHDDYTYTDDWGPGTLVTVSS
(서열 번호: 173)으로 이루어지거나, 또는 필수적으로 이루어진 중쇄 가변 영역을 포함한다.
서열 번호: 172 및 173의 가변 영역의 Chothia, AbM, Kabat, Contact 및 IMGT 정의 시스템에 따른 CDR의 서열은 하기 제공된다.
[표 12] 서열 번호: 172 및 173의 가변 영역의 CDR의 서열
가변 영역 CDR 정의 서열 서열 번호
서열 번호: 172의 경쇄 가변 영역 CDR-L1
 Chothia SGDALPKKYAY 12
AbM SGDALPKKYAY 12
Kabat SGDALPKKYAY 12
Contact KKYAYWY 13
IMGT ALPKKY 14
CDR-L2
 Chothia EDTKRHS 174
AbM EDTKRHS 174
Kabat EDTKRHS 174
Contact LVIYEDTKRH 175
IMGT EDT
CDR-L3
 Chothia YSAEHRGNYAV 176
AbM YSAEHRGNYAV 176
Kabat YSAEHRGNYAV 176
Contact YSAEHRGNYA 177
IMGT YSAEHRGNYAV 176
서열 번호: 173의 중쇄 가변 영역 CDR-H1
 Chothia GYTFTDY 19
AbM GYTFTDYWIS 20
Kabat DYWIS 21
Contact TDYWIS 22
IMGT GYTFTDYW 23
CDR-H2
 Chothia NPMRST 178
AbM HINPMRSTTT 179
Kabat HINPMRSTTTYGPSFQG 180
Contact WMGHINPMRSTTT 181
IMGT INPMRSTT 182
CDR-H3
 Chothia NDNHDDYTYTDD 183
AbM NDNHDDYTYTDD 183
Kabat NDNHDDYTYTDD 183
Contact VRNDNHDDYTYTD 184
IMGT VRNDNHDDYTYTDD 185
바람직한 구현예에서, 항체는, 서열 번호: 10의 경쇄 가변 영역의 CDR-L1으로 이루어지거나 또는 필수적으로 이루어진 CDR-L1, 및/또는 서열 번호: 11의 중쇄 가변 영역의 CDR-H1으로 이루어지거나 또는 필수적으로 이루어진 CDR-H1를 포함한다. 바람직하게는 항체는 서열 번호: 10의 경쇄 가변 영역의 CDR-L1으로 이루어진 CDR-L1을 포함하고 서열 번호: 11의 중쇄 가변 영역의 CDR-H1으로 이루어진 CDR-H1을 포함한다.
보다 특수한 바람직한 구현예에서, 항체는 Kabat 정의에 따른 다음의 CDR 중의 1개, 2개, 3개, 4개, 5개 또는 6개, 바람직하게는 6개를 포함한다:
- 아미노산 컨센수스 서열 SGDALPKKYAY(서열 번호: 12)로 이루어지거나, 또는 필수적으로 이루어진 CDR-L1;
- 아미노산 컨센수스 EDX1RX2(여기서, X1은 E, W, K, S, N, A, D, H 또는 T, 바람직하게는 E, W, K, S, N, A, D 또는 H이고, X2는 A, V, P, G, S, V, L, I 또는 H, 바람직하게는 A, V, P, G, S, V, L 또는 I이다)(서열 번호: 186)으로 이루어지거나, 또는 필수적으로 이루어진 CDR-L2;
- 아미노산 컨센수스 YSX1X2X3X4GNYX5V(여기서, X1은 Q, L, K, A, T, L 또는 I이고, X2는 E, A, N 또는 S이며, X3은 R, V, P, Q, A, I, T, D 또는 H, 바람직하게는 R, V, P, Q, A, I, T 또는 D이고, X4는 N, K, D, Q, E, R, G, S 또는 A이고, X5는 A, F, G, M 또는 R이다)(서열 번호: 187)로 이루어지거나, 또는 필수적으로 이루어진 CDR-L3;
- 아미노산 컨센수스 서열 DYWIS(서열 번호: 21)로 이루어지거나, 또는 필수적으로 이루어진 CDR-H1;
- 아미노산 컨센수스 X1IX2X3X4X5SX6TX7YGPSFQG(여기서, X1은 Q, A, V, E, S, R 또는 H, 바람직하게는 Q, A, V, E, S 또는 R이고, X2는 V, N, S, F, T, R 또는 H이며, X3은 P, R, K, L, T 또는 G이고, X4는 R, H, N, Y, P, S, L, Q 또는 M이며, 바람직하게는 R, H, N, Y, P, S, L 또는 Q이고, X5는 A, G, P, S, L, Q H 또는 R, 바람직하게는 A, G, P, S, L, Q 또는 H이고, X6은 R, N, T, W, H, S, A 또는 Q이고, X7은 N, M, Y, R, V, H, L 또는 T, 바람직하게는 N, M, Y, R, V, H 또는 L이다)(서열 번호: 188)로 이루어지거나, 또는 필수적으로 이루어진 CDR-H2; 및/또는
- 아미노산 컨센수스 X1X2X3X4TSGGTIPEYYQH(여기서, X1은 P, S, Q, H 또는 A이고, X2는 Y, G, T, W 또는 Q이며, X3은 F, G, R, L, Q 또는 A이고, X4는 Q, A, L 또는 S이다)(서열 번호: 189)로 이루어지거나, 또는 필수적으로 이루어진 CDR-H3, 또는 다음의 아미노산 서열: GYTHLRT(서열 번호: 99), HHSTTTANPYSS(서열 번호: 127) 또는 NDNHDDYTYTDD(서열 번호: 183) 중의 하나로 이루어지거나, 또는 필수적으로 이루어진 CDR-H3, 바람직하게는 위에서 정의한 바와 같은 아미노산 컨센수스 X1X2X3X4TSGGTIPEYYQH(서열 번호: 189)로 이루어지거나, 또는 필수적으로 이루어진 CDR-H3.
본 발명의 항체는 어떠한 적합한 골격 가변 도메인 서열을 포함할 수 있으며, 단, Tyro3에 대한 결합 활성은 실질적으로 유지된다. 특수한 구현예에서, 항체의 가변 도메인 골격은 CDR(FR1, CDR1, FR2, CDR2, FR3, CDR3 및 FR4)을 분리하는 영역에 의해 서열 번호: 10 및 11에 정의된 바와 같다.
바람직한 구현예에서, 항체는 완전한 길이의 IgG 항체, 즉, IgG1, IgG2, IgG3 또는 IgG4, 바람직하게는 IgG1 항체이다. 항체는 위에서 정의된 바와 같은 경쇄 및 중쇄의 가변 영역, 불변 인간 IgG 쇄, 바람직하게는 IgG1 쇄, 및 인간 람다 또는 카파 쇄, 바람직하게는 람다 쇄를 포함할 수 있다. 불변 인간 IgG1 쇄의 예시적인 서열은 서열 번호: 190에 설정되어 있다. 불변 인간 람다 쇄의 예시적인 서열은 서열 번호: 191에 설정되어 있다.
바람직한 구현예에서, 항체는 인간 Tyro3 수용체에 고 친화성으로 결합한다. "결합 친화성(binding affinity)"은 일반적으로 분자(예를 들면, 항체)의 단일 결합 부위와 이의 결합 파트너(예를 들면, 항원) 사이의 비공유결합성 상호작용의 합의 강도를 말한다. 달리 나타내지 않는 한, 본원에 사용된 것으로서, "결합 친화성"은 결합쌍의 구성원(예를 들면, 항체 및 항원) 사이의 1:1 상호작용을 반영하는 고유의 결합 친화성을 말한다. 이의 파트너 Y에 대한 분자 X의 친화성은 일반적으로 해리 상수(Kd)로 나타낼 수 있다. 친화성은 본원에 기술된 것들을 포함하는, 당해 분야에 공지된 일반적인 방법으로 측정할 수 있다. 저-친화성 항체는 일반적으로 항원에 서서히 결합하며 용이하게 해리되는 경향이 있는 반면, 고-친화성 항체는 일반적으로 항원에 보다 신속하게 결합하여 보다 길게 결합하여 남는 경향이 있다. 결합 친화성을 측정하는 다양한 방법은 당해 분야에 공지되어 있으며, 이중 어느 것도 본 발명의 목적을 위해 사용될 수 있다.
특정의 구현예에서, 본원에 제공된 항체는 10-5M 이하의 해리 상수(Kd), 바람직하게는 9, 8, 7, 6, 5, 4, 3, 2 또는 1.10-6M 이하의 Kd, 보다 바람직하게는 9, 8, 7, 6, 5, 4, 3, 2 또는 1의 10-7M 이하의 Kd, 및 심지어 보다 바람직하게는 9, 8, 7, 6, 5, 4, 3, 2 또는 1.10-8M 이하의 Kd를 갖는다. 가장 바람직한 구현예에서, 본원에 제공된 항체는 9, 8, 7, 6, 5, 4, 3, 2 또는 1.10-9M 이하의 해리 상수를 갖는다.
특수한 구현예에서, 본 발명의 항체는 3.1x10-7M 이하의 해리 상수(Kd)를 가지며 바람직하게는 중쇄 및 경쇄의 가변 도메인 또는 표 13 및 14에 기술된 바와 같은 ScFv 2410, 2412, 2413, 2414, 2415, 2710, 2711 또는 2713의 CDR 서열을 갖는 항체의 그룹으로부터 선택된다. 다른 구현예에서, 본 발명의 항체는 1.4x10-7M 이하의 해리 상수(Kd)를 가지며 바람직하게는 중쇄 및 경쇄의 가변 도메인 또는 표 13 및 14에 기술된 ScFv 2410, 2412, 2413, 2415, 2710, 또는 2713의 CDR 서열을 갖는 항체의 그룹으로부터 선택된다. 추가의 구현예에서, 본 발명의 항체는 7.4x10-8M 이하의 해리 상수(Kd)를 가지며 바람직하게는 중쇄 및 경쇄의 가변 도메인을 갖고 표 13 및 14에 기술된 ScFv 2410, 2415, 2710, 또는 2713의 CDR 서열을 갖는 항체의 그룹으로부터 선택된다. 추가의 구현예에서, 본 발명의 항체는 4x10-8M 이하의 해리 상수(Kd)를 가지고 바람직하게는 중쇄 및 경쇄의 가변 도메인을 가지며 표 13 및 14에 기술된 ScFv 2713의 CDR 서열을 갖는 항체의 그룹으로부터 선택된다.
Kd는 당해 분야의 숙련가에게 공지된 어떠한 기술을 사용하여서도 측정될 수 있다. 특히 항-Tyro3 항체와 인간 Tyro3 ECD(서열 번호: 1의 40 내지 429번 위치) 사이의 결합 친화성을 측정하기 위하여, Biacore T100(GE Healthcare, 스웨덴 업살라 소재)을 사용한 표면 플라스몬 공명(SPR) 측정을 affibody®(AFFIBODY AB 참고 제품 번호 10.0623.02.0005)로 피복된 S 시리즈(Series S) CM5 센서 칩(sensor chip)에서 수행할 수 있다. 100RU 근처의 최대 반응을 갖기 위한 IgG의 포획은 15초 내지 55초 주입 시간을 사용하여 달성할 수 있다. 역학적 측정을 위하여, 0.15 내지 10μM의 인간 Tyro3 ECD의 용액을 PBS-P 완충액 속에 25℃에서 30μl/분의 유동 속도로 주입할 수 있다. 평형 해리 상수(KD)는 이종 리간드 모델 및 1:1 모델(BIAcore Evaluation Software version 3.2)을 사용하여 계산할 수 있다. 평형 해리 상수(Kd)는 koff/kon의 비로 계산한다[참고: 예를 들면, Chen et al., J. Mol. Biol. 293:865-881 (1999)]. Kd, koff(또는 Kdis) 및 kon 상수는 또한 하기 실험 단락(참고: 실시예 5)에 기술된 바와 같이 이층 간섭굴절측정법(biolayer interferometry: BLI)으로 측정할 수 있다.
일부 특수한 구현예에서, 본 발명의 항체는 1x104M-1s-1 이상, 바람직하게는 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9x104M-1s-1 이상의 kon 상수를 갖는다. 보다 바람직하게는, 본 발명의 항체는 1x105M-1s-1 이상, 바람직하게는 1.2x105M-1s-1 이상의 kon 상수를 가지며, 바람직하게는 중쇄 및 경쇄의 가변 도메인을 갖는 항체 및 표 13 및 14에 기술된 ScFv 2410 또는 2713의 CDR 서열을 갖는 항체이다.
일부 특수한 구현예에서, 본 발명의 항체는 1x10-2s-1 이하, 바람직하게는 9, 8, 7, 6, 5, 4x10-3s-1 이하의 koff 상수를 갖는다. 보다 바람직하게는, 본 발명의 항체는 3x10-3s-1 이하의 koff 상수를 갖고 바람직하게는 중쇄 및 경쇄의 가변 도메인을 가지거나 표 13 및 14에 기술된 ScFv 2710의 CDR 서열을 갖는 항체이다.
일부 구현예에서, 본 발명은 인간 Tyro3에 대한 결합에 있어서 상기 기술된 바와 같은 항체, 및 보다 특히 표 13에 기술된 항체로 이루어진 그룹으로부터 선택된 항체, 즉, 항체 2410, 2414, 2709, 2710, 2717, 2411, 2412, 2413, 2415, 2711, 2713 및 2718로 이루어진 그룹으로부터 선택된 항체와 경쟁하는 인간 또는 인간화된 항체를 제공한다. 항체는, 이것이 필수적으로 동일한 에피토프에 결합하는 경우 다른 것과 경쟁한다. ELISA, 방사면역학적 검정, 웨스턴 블롯 검정, 또는 BIACORE 분석의 사용을 기반으로 하는 프로토콜(protocol)이 단순한 경쟁 시험에서 사용하기에 적합하다. 단순한 경쟁 검정에서 표면은 바람직하게는 BIACORE 칩(또는 표면 플라스마 공명 분석과 경쟁하는 다른 지지체)이다. 대조군 항체(예를 들면, 표 13에 기술된 항체 중 하나)는 포화 농도의 항원에서 표면과 접촉되며 항원을 수반하는 표면에 대한 대조군 항체의 결합이 측정된다. 대조군 항체의 상기 결합은 후보물 항체의 존재하에서 항원을 수반하는 표면에 대한 대조군 항체의 결합과 비교된다. 검정 시험에서, 후보물 항체의 존재하에 대조군 항체의 결합에 있어서의 유의적인 감소는 후보물 항체가 대조군 항체와 동일한 에피토프를 필수적으로 인식하며 따라서 당해 항체와 경쟁함을 나타낸다. 대조군 항체의 결합을 적어도 약 30, 40 또는 50%, 바람직하게는 적어도 약 60, 70% 이상 감소시키는 어떠한 후보물 항체도 대조군 항체와 경쟁하는 항체로 고려될 수 있다. 대조군과 후보물 항체 사이의 순서는 역전될 수 있음, 다시 말해서, 대조군 항체가 우선 표면에 결합할 수 있고 후보물 항체가 경쟁 시험에서 표면과 후속적으로 결합됨이 이해될 것이다.
특정의 구현예에서, 본 발명의 항체는 항체가 글리코실화되는 정도까지 증가되거나 감소하도록 변경된다. 항체에 대한 글리코실화 부위의 첨가 또는 결실은 아미노산 서열을 변경하여 하나 이상의 글리코실화 부위가 생성되거나 제거되도록 함으로써 편리하게 달성될 수 있다.
항체가 Fc 영역을 포함하는 경우, 이에 부착된 탄수화물은 변경될 수 있다. 포유동물 세포에 의해 생산된 천연 항체(native antibody)는 전형적으로 Fc 영역의 CD2 도메인의 Asn297에 대해 N-연결로 일반적으로 부착된 측쇄의, 이원 올리코사카라이드를 포함한다(참고: 예를 들면, Wright et al. TIBTECH, 1997, 15:26-32). 올리고사카라이드는 다양한 탄수화물, 예를 들면, 만노즈, N-아세틸 글루코사민(GlcNAc), 갈락토즈, 및 시알산, 및 이원, 올리고사카라이드 구조의 "줄기"내 GlcNAc에 부착된 푸코즈를 포함할 수 있다. 일부 구현예에서, 본 발명의 항체 내 올리고사카라이드의 변형은 특정의 증진된 특성을 갖는 항체 변이체를 생성하도록 제조될 수 있다.
일 구현예에서, Fc 영역에 부착된(직접 또는 간접적으로) 푸코즈가 결핍된 탄수화물 구조를 갖는 항체 변이체가 제공된다. 예를 들면, 이러한 항체 속의 푸코즈의 양은 1% 내지 80%, 1% 내지 65%, 5% 내지 65% 또는 20% 내지 40%일 수 있다. 푸코즈의 양은 MALDI-TOF 질량 분광계에 의해 측정된 것으로서 Asn 297(예를 들면, 복합체, 하이브리드 및 고 만노즈 구조)에 부착된 모든 당구조의 합에 대해 Asn297에서 당 쇄내 푸코즈의 평균 양을 계산함으로써 측정된다. Asn297은 Fc 영역(Fc 영역 잔기의 Eu 번호매김)에서 대략 297번 위치에 위치한 아스파라긴 잔기를 말하지만; Asn297은 항체내 약간의 서열 변화로 인하여, 또한 297번 위치의 상부 또는 하부로 약 ±3개 아미노산, 즉, 294번 내지 300번에 위치할 수 있다. "탈푸코실화된" 또는 "푸코즈-결핍성" 항체 변이체와 관련된 공보의 예는 Okazaki et al. J. Mol. Biol. 336: 1239-1249 (2004) 및 Yamane-Ohnuki N, Satoh M. mAbs. 2009;1:230-236을 포함하나, 이에 한정되지 않는다. 탈푸코실화된 항체를 생산할 수 있는 세포주의 예는 단백질 푸코실화에 결함이 있는 Led 3 CHO 세포(Ripka et al. Arch. Biochem. Biophys. 249:533-545 (1986)), 및 알파-1,6-푸코실트랜스퍼라제 유전자와 같은 녹아웃 세포주(knockout cell line), FUT8, 녹아웃 CHO 세포(참고: 예를 들면, Yamane-Ohnuki et al. Biotech. Bioeng. 87: 614 (2004); Kanda, Y. et al., Biotechnol. Bioeng., 94(4):680-688 (2006))를 포함한다.
특정의 구현예에서, 시스테인 가공된 항체, 예를 들면, "thioMAbs"를 생성하는 것이 바람직할 수 있으며, 여기서 항체의 하나 이상의 잔기는 시스테인 잔기로 치환된다. 특수 구현예에서, 치환된 잔기는 항체의 접근가능한 부위에서 일어난다. 이들 잔기를 시스테인으로 치환함으로써, 반응성 티올 그룹은 항체의 접근가능한 부위에 위치하고 항체를 약물 잔기 또는 링커-약물 잔기와 같은 다른 잔기에 접합시켜 본원에 추가로 기술된 바와 같은, 면역접합체를 생성하는데 사용할 수 있다. 특정의 구현예에서, 다음의 잔기들 중 하나 이상이 시스테인으로 치환될 수 있다: 경쇄의 V205(Kabat 번호매김); 중쇄의 A118(EU 번호매김); 및 중쇄 Fc 영역의 S400(EU 번호매김). 시스테인 가공된 항체는 예를 들면, 미국 특허 제7,521,541호에 기술된 바와 같이 생성시킬 수 있다.
핵산, 벡터, 숙주 세포 및 재조합체 생산
또 다른 국면에서, 본 발명은 위에서 기술한 바와 같은, 본 발명의 항체를 암호화하는 핵산, 또는 상기 암호화 서열에 대해 상보성인 핵산에 관한 것이다. 바람직하게는, 핵산은 분리되거나 정제된 핵산이다.
핵산은 DNA(cDNA 또는 gDNA), RNA, 또는 2개의 혼합물일 수 있다. 이는 단일 쇄 형태 또는 이중 쇄 형태 또는 이들 2개의 혼합물일 수 있다. 이는 예를 들면, 변형된 결합, 변형된 퓨린 또는 피리미딘 염기, 또는 변형된 당을 포함하는 변형된 뉴클레오타이드를 포함할 수 있다. 이는 화학적 합성, 재조합, 및 돌연변이유발을 포함하는, 당해 분야의 숙련가에게 공지된 어떠한 방법에 의해서도 제조할 수 있다. 본 발명에 따른 핵산은 본 발명에 다른 항체의 서열로부터 유추될 수 있으며 코돈 사용은, 핵산이 전사될 숙주 세포에 따라 채택될 수 있다. 이들 단계는 당해 분야의 숙련가에게 잘 공지된 방법에 따라 수행될 수 있으며 이들 중 일부는 문헌 매뉴얼: Sambrook et al. (Sambrook J, Russell D (2001) Molecular cloning: a laboratory manual, Third Edition Cold Spring Harbor)에 기술되어 있다.
본 발명의 핵산은 항체의 경쇄를 포함하는 핵산 서열 및/또는 항체의 중쇄를 포함하는 아미노산 서열을 암호화할 수 있거나, 이러한 암호화된 서열에 대해 상보성일 수 있다.
본 발명은 또한 본 발명의 핵산을 포함하는 벡터를 추가로 포함한다. 임의로, 벡터는 본 발명의 수개의 핵산을 포함할 수 있다. 특히, 벡터는 조절 영역, 즉, 하나 이상의 조절 서열을 포함하는 영역에 작동적으로 연결된 본 발명의 핵산을 포함할 수 있다. 임의로, 벡터는 수개의 조절 영역에 작동적으로 연결된 본 발명의 수개의 핵산을 포함할 수 있다.
용어 "조절 서열(control sequence)"은 암호화 영역의 발현에 필요한 핵산 서열을 의미한다. 조절 서열은 내인성 또는 이종일 수 있다. 잘-공지되고 당해 분야의 숙련가에 의해 현재 사용되는 조절 서열이 바람직할 것이다. 이러한 조절 서열은 프로모터, 시그날 펩타이드 서열 및 전사 터미네이터(transcription terminator)를 포함하나, 이에 한정되지 않는다.
용어 "작동적으로 연결된"은, 조절 서열이 암호화 영역의 발현을 지시하는 방식으로 조절 서열이 암호화 서열에 대해 적절한 위치에 위치하는 구조를 의미한다.
본 발명은 또한 숙주 세포를 형질전환하거나, 형질감염시키거나 형질유도하기 위한 본 발명에 따른 핵산 또는 벡터의 용도에 관한 것이다.
본 발명은 또한 본 발명의 1개 또는 수개의 핵산 및/또는 본 발명의 1개 또는 수개의 벡터를 포함하는 숙주 세포를 제공한다.
용어 "숙주 세포"는 또한 복제 동안 발생하는 돌연변이로 인하여 모 숙주 세포와 동일하지 않은 모 숙주 세포의 어떠한 후대 세포도 포함한다.
항체-암호화 벡터를 클로닝(cloning)하거나 발현시키기에 적합한 숙주 세포는 본원에 기술된 원핵 또는 진핵 세포를 포함한다.
예를 들면, 항체는 특히 글리코실화의 경우, 세균내에서 생산될 수 있으며 Fc 효과기 기능은 필요하지 않다. 세균내에서 항체 단편 및 폴리펩타이드의 발현을 위해서는, 예를 들면, 미국 특허 제5,648,237호, 제5,789,199호, 및 제5,840,523호를 참고한다.(참고: 또한 이. 콜라이 내에서 항체 단편의 발현을 기술하고 있는, Charlton, Methods in Molecular Biology, Vol. 248 (B.K.C. Lo, ed., Humana Press, Totowa, NJ, 2003), pp. 245-254). 발현 후, 항체는 가용성 분획으로 세균 세포 용해물로부터 분리될 수 있으며 추가로 정제될 수 있다.
원핵세포 외에도, 섬유상 진균 또는 효모와 같은 진핵세포 미생물은 이의 글리코실화경로가 "인간화"되어, 부분적으로 또는 완전히 인간 글리코실화 양식을 지닌 항체를 생산하는 진균 및 효모 균주를 포함하는, 항체-암호화 벡터에 적합한 클로닝 또는 발현 숙주이다. 참고: Gerngross, Nat. Biotech. 22: 1409-1414 (2004), 및 Li et al., Nat. Biotech. 24:210-215 (2006).
글리코실화된 항체의 발현에 적합한 숙주 세포는 또한 다세포 유기체(무척추동물 및 척추동물)로부터 기원한다. 무척추동물 세포의 예는 식물 및 곤충 세포를 포함한다. 특히 스포도프테라 프루기페르다(Spodoptera frugiperda) 세포의 형질감염을 위해 곤충 세포와 함께 사용될 수 있는 다수의 바큘로바이러스 균주가 확인되어 왔다. 식물 세포 배양물 또한 숙주로서 이용할 수 있다. 참고: 예를 들면, 미국 특허 제5,959,177호, 제6,040,498호, 제6,420,548호, 제7,125,978호, 및 제6,417,429호.
척추동물 세포가 또한 숙주로 사용될 수 있다. 예를 들면, 현탁액 속에서 성장하도록 조정된 포유동물 세포주가 유용할 수 있다. 유용한 포유동물 세포주의 다른 예는 SV40 (COS-7)에 의해 형질전환된 원숭이 신장 CV1 세포주; 인간 배아 신장 세포주(예를 들면, Graham et al., J. Gen Virol. 36:59 (1977)에 기술된 바와 같은 293 또는 293 세포); 아기 햄스터 신장 세포(BHK); 마우스 세르톨리 세포(Sertoli cell)(예를 들면, Mather, Biol. Reprod. 23:243-251 (1980)에 기술된 바와 같은 TM4 세포); 원숭이 신장 세포(CV1); 아프리카 녹색 원숭이 신장 세포(VERO- 76); 인간 자궁경부 암종 세포(HELA); 개 신장 세포(MDCK; 버팔로 랫트 간 세포(BRL 3A); 인간 폐 세포(W138); 인간 간 세포(Hep G2); 마우스 유방 종양(MMT 060562); 예를 들면, Mather et al., Annals N. Y. Acad. Sci. 383:44-68 (1982)에 기술된 바와 같은 TRI 세포; MRC 5 세포; 및 FS4 세포이다. 다른 유용한 포유동물 숙주 세포주는 DHFR- CHO 세포(Urlaub et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 77:4216 (1980))를 포함하는 차이니즈 햄스너 난소(CHO) 세포; 및 Y0, NS0 및 Sp2/0와 같은 흑색종 세포주를 포함한다. 항체 생산에 적합한 특정의 포유동물 숙주 세포주에 대해서는, 예를 들면, Yazaki and Wu, Methods in Molecular Biology, Vol. 248 (B.K.C. Lo, ed., Humana Press, Totowa, NJ), pp. 255- 268 (2003)를 참고한다.
본 발명은 또한, 상기 제공된 바와 같은, 본 발명의 핵산 또는 본 발명의 벡터를 포함하는 숙주 세포를 항체의 발현에 적합한 조건하에 배양하는 단계, 및 임의로 숙주 세포 또는 숙주 세포 배양 배지로부터 항체를 회수하는 단계를 포함하는, 본 발명의 항체의 생산 방법에 관한 것이다. 임의로, 회수된 항체는 추가로 정제되거나 분리될 수 있다. 적합한 배지, 배양 조건 및 생산 방법은 당해 분야의 숙련가에게 잘 공지되어 있으며 숙주 세포 및 생산될 항체에 따라 용이하게 선택될 수 있다.
약제학적 조성물
본 발명은 또한 본 발명의 항체, 핵산, 벡터 또는 숙주 세포를 포함하는 약제학적 조성물에 관한 것이다. 조성물은 본 발명의 1개 또는 수개의 항체, 본 발명의 1개 또는 수개의 핵산 및/또는 본 발명의 1개 또는 수개의 벡터 및/또는 본 발명의 1개 또는 수개의 숙주 세포를 포함할 수 있다. 바람직하게는, 약제학적 조성물은 본 발명의 1개 또는 수개의 항체를 포함한다.
본 발명의 항체를 포함하는 약제학적 조성물은 약제학적으로 유용한 조성물을 제조하기 위한 공지된 방법에 따라 제형화될 수 있으며, 이에 의해, 바람직한 순도를 갖는 항체는 임의의 생리학적으로 허용되는 담체, 부형제 또는 안정화제와 수용성 액제, 동결건조되거나 다른 무수 제형의 형태로 혼합된다(Remington: The Science and Practice of Pharmacy 20th edition (2000)).
본원에 사용된 것으로서, 용어 "약제학적 제형" 또는 "약제학적 조성물"은 활성 성분의 생물학적 활성이 효과적이 되도록 하는 형태이고, 제형이 투여될 수 있는 대상체에 대해 허용불가능하게 독성인 추가의 성분을 함유하지 않는 제제를 말한다. 바람직하게는, 이러한 제형은 멸균, 즉, 무균성이거나 모든 살아있는 미생물 및 이의 포자를 함유하지 않는다.
허용되는 담체, 부형제, 또는 안정화제는 사용된 용량 및 농도에서 수용체에 대해 비독성이고, 완충제, 안정화제, 방부제, 등장성 제제(isotonifier), 비-이온성 세제, 항산화제 및 다른 기타의 첨가제를 포함하나, 이에 한정되지 않는다.
완충제는 pH를 생리학적 조건과 유사한 범위로 유지하는 것을 돕는다. 이들은 바람직하게는 약 1mM 내지 약 50mM의 범위의 농도에서 존재한다. 본 발명과 함께 사용하기에 적합한 완충제는 유기산 및 무기산 둘 다 및 시트레이트, 석시네이트, 타르트레이트, 푸마레이트, 글루코네이트, 옥살레이트, 락테이트 및 아세테이트 완충제, 및 또한 포스페이트 완충제, 히스티딘 완충제와 같은 이들의 염 및 트리스와 같은 트리메틸아민 염을 포함하나, 이에 한정되지 않는다.
방부제는 미생물의 성장을 지연시키기 위해 첨가될 수 있으며 0.2% 내지 1%(w/v) 범위의 양으로 첨가될 수 있다. 본 발명과 함께 사용하기에 적합한 방부제는 페놀, 부틸 또는 벤질 알코올; 메타-크레졸; 메틸 또는 프로필 파라벤과 같은 알킬 파라벤; 옥타데실디메틸벤질 암모늄 클로라이드, 벤즈알코늄 할라이드(예를 들면, 클로라이드, 브로마이드, 요오다이드); 헥사메토늄 또는 벤제토늄 클로라이드; 카테콜; 레조르시놀; 사이클로헥사놀; 및 3-펜타놀을 포함하나, 이에 한정되지 않는다.
등장성 제제는 본 발명의 액체 조성물의 등장성을 보증하기 위해 첨가될 수 있으며 다가 당 알코올, 바람직하게는 글리세린, 에리트리톨, 아라비톨, 크실리톨, 소르비톨 및 만니톨과 같은 3가 또는 그 이상의 당 알코올을 포함한다.
안정화제는 기능에 있어서 증량제(bulking agent)로부터 치료제를 가용화시키거나 변성 또는 용기 벽에 대한 부착을 방지하는 것을 돕는 첨가제까지의 범위일 수 있는 광범위한 범주의 부형제를 말한다. 대표적인 안정화제는 다가 당 알코올(상기 나열됨); 아르기닌, 라이신, 글리신, 글루탐산, 아스파라긴, 히스티딘, 알라닌, 오르니틴, L-루이신, 2-페닐알라닌, 글루탐산, 트레오닌 등과 같은 아미노산, 락토즈, 트레할로즈, 스타키오스(stachyose), 전분, 만니톨, 소르비톨, 크실리톨, 리비톨, 미오이니시톨, 갈락티톨, 이노시톨과 같은 사이클리톨을 포함하는 글리세롤 등과 같은 유기 당 또는 당 알코올; 폴리에틸렌 글리콜; 아미노산 중합체; 우레아, 글루타티온, 티옥트산, 나트륨 티오글리콜레이트, 티오글리세롤, 알파-모노티오글리세롤 및 나트륨 티오 설페이트와 같은 황 함유 환원제; 저 분자량 폴리펩타이드(즉, <10개 잔기); 인간 혈청 알부민, 소 혈청 알부민, 젤라틴 또는 면역글로불린과 같은 단백질; 폴리비닐피롤리돈과 같은 친수성 중합체, 크실로즈, 만노즈, 프럭토즈, 글루코즈와 같은 모노사카라이드; 락토즈, 말토즈, 슈크로즈와 같은 디사카라이드 및 라피노즈와 같은 트리사카라이드; 덱스트란과 같은 폴리사카라이드일 수 있다. 안정화제는 치료제의 중량부당 0.1 내지 10,000중량의 범위로 존재할 수 있다.
비-이온성 표면활성제 또는 세제(또한 "습윤제"로서 공지됨)는 치료제를 가용화시키고 교반-유도된 응집에 대해 치료학적 단백질을 보호하기 위해 가해질 수 있다. 적합한 비-이온성 표면활성제는 폴리소르베이트(20, 80 등), 폴록사머(184, 188 등), PLURONICSTM, 폴리올, 폴리옥시에틸렌 소르비탄 모노에테르(TWEENTM-20, TWEENTM-80 등)을 포함하나, 이에 한정되지 않는다. 비-이온성 표면활성제는 약 0.05 mg/ml 내지 약 1.0 mg/ml, 바람직하게는 약 0.07 mg/ml 내지 약 0.2 mg/ml의 범위로 존재할 수 있다.
추가의 기타 부형제는 증량제(예를 들면, 전분), 킬레이팅제(chelating agent)(예를 들면, EDTA), 항산화제(예를 들면, 아스코르브산, 메티오닌, 비타민 E), 및 공용매를 포함하나, 이에 한정되지 않는다.
활성 성분은 또한 예를 들면, 코아세르베이션 기술(coacervation technique)에 의해 또는 계면 중합(interfacial polymerization)에 의해 제조된 미세캅셀, 예를 들면, 하이드록시메틸셀룰로즈 또는 젤라틴-미세캅셀 및 폴리-(메틸메타크릴레이트)미세캅셀 각각 속에, 콜로이드성 약물 전달 시스템(예를 들면, 리포좀, 알부민 마이크로페어(albumin microphere), 미세유제, 나노-입자 및 나노캅셀) 속에 또는 거대유액 속에 가둘 수 있다. 이러한 기술은 Remington: The Science and Practice of Pharmacy 20th edition (2000)에 개시되어 있다.
약제학적 조성물의 형태, 투여 경로, 용량 및 용법은 치료될 상태, 질병의 중증도, 환자의 연령, 체중 및 성별 등에 의존한다.
투여를 위해 사용된 투여량은 다양한 매개변수의 함수로서, 및 특히 사용된 투여 방식, 관련된 병리학, 또는 대안적으로 치료의 바람직한 기간의 함수로서 조정될 수 있다.
본 발명의 약제학적 조성물은 국소, 경구, 비경구, 비강내, 정맥내, 근육내, 피하 또는 안구내 투여 등을 위해 제형화될 수 있다.
바람직하게는, 약제학적 조성물은 주사될 수 있는 제형이다. 이들은 특히 등장성, 멸균, 염수 용액(인산 일나트륨 또는 인산이나트륨, 염화나트륨, 염화칼륨, 염화칼슘 또는 염화마그네슘 등 또는 이러한 염들이 혼합물), 또는 경우에 따라, 멸균수 또는 생리학적 염수의 첨가시, 주사가능한 용액의 구성을 허용하는 무수, 특히 동결-건조된 조성물일 수 있다.
멸균 주사가능한 용액은 활성 화합물을 필요한 경우, 상기 나열한 다양한 다른 성분이 들어있는 적절한 용매 속에서 요구되는 양으로 혼입한 후, 여과된 멸균으로 제조할 수 있다. 멸균 주사가능한 용액의 제조를 위한 멸균 분말의 경우에, 제제의 바람직한 방법은 이의 앞서 멸균-여과된 용액으로부터 활성 성분 및 어떠한 추가의 바람직한 성분의 분말을 수득하는 진공-건조 및 동결-건조 기술이다.
정맥내 또는 근육내 주사와 같은 비경구 투여용으로 제형화된 조성물 외에도, 다른 약제학적으로 허용되는 형태는 예를 들면, 경구 투여용 정제 또는 다른 고체; 시간에 따른 방출 캅셀(time release capsule); 및 현재 사용된 어떠한 다른 형태도 포함한다.
본 발명의 약제학적 조성물은 본 발명의 1개 또는 수개의 항체를 포함할 수 있다.
약제학적 조성물은 1개 또는 수개의 추가의 활성 화합물을 추가로 포함할 수 있다. 추가의 활성 화합물의 예는 화학치료학적 약물, 항생제, 항기생충제, 항진균제 또는 항바이러스제를 포함하나, 이에 한정되지 않는다.
화학치료학적 약물의 예는 타목시펜, 아로마타제 억제제, 트라스투주마브, GnRH-유사체, 겜시타빈, 도세탁셀, 파클리탁셀, 미토마이신, 시스플라틴, 카르보플라틴, 옥살리플라틴, 독소루비신, 다우노루비신, 도세탁셀, 사이클로포스파미드, 에피루비신, 플루오로우라실, 메토트렉세이트, 미토잔트론, 빈블라스틴, 빈크리스틴, 비노렐빈, 블레오마이신, 에스트라무스틴 포스페이트 또는 에토포시드 포스페이트를 포함하나, 이에 한정되지 않는다.
항생제의 예는 아목시실린, 클라리트로마이신, 세푸록심, 세팔렉신, 시프로플록사신, 독시사이클린, 메트로니다졸, 테르비나핀, 레보플록사신, 니트로푸란토인, 테트라사이클린, 및 아지트로마이신을 포함하나, 이에 한정되지 않는다.
항-진균제의 예는 클로트리마졸, 부테나핀, 부토코나졸, 시클로피록스, 클리오퀴놀, 클로트리마졸, 에코나졸, 플루코나졸, 플루사이토신, 그리세오풀빈, 할로프로긴, 이트라코나졸, 케토코나졸, 미코나졸, 나프티핀, 니스타틴, 옥시코나졸, 술코나졸, 테르비나핀, 테르코나졸, 티오코나졸, 및 톨나프테이트를 포함하나, 이에 한정되지 않는다.
항-바이러스제의 예는 지도부딘, 디다노신, 잘시타빈, 스타부딘, 라미부딘, 아바카비르, 테노포비르, 네비라핀, 델라비르딘, 에파비렌즈, 사퀴나비르, 리토나비르, 이디나비르, 넬피나비르, 사퀴나비르, 암프레나비르, 및 로피나비르를 포함하나, 이에 한정되지 않는다.
특수한 장애 또는 상태의 치료에 효과적일 본 발명의 항체의 양은 장애 또는 상태의 특성에 의존할 것이며, 표준 임상 기술로 측정할 수 있다.
바람직한 구현예에서, 각각의 투여량은 체중 kg당 약 0.1mg 내지 약 25mg, 또는 보다 바람직하게는, 체중 kg당 약 1mg내지 약 10mg의 항체의 범위일 수 있다.
투여용의 투여 스케쥴은 질병의 유형, 질병의 중증도, 및 치료학적 제제에 대한 대상체의 민감성을 포함하는 다수의 임상 요인에 따라 1개월에 1회 내지 매일로 변할 수 있다.
치료학적 및 진단학적 적용
본 발명은 또한 고증식성 질환 또는 감염성 질환의 예방 또는 치료시 사용하기 위한 본 발명의 항체 또는 본 발명의 약제학적 조성물에 관한 것이다.
본 발명은 질환의 치료용 의약으로서 본 발명의 항체 또는 본 발명의 약제학적 조성물의 용도에 관한 것이다. 본 발명은 또한 의약의 생산 및 제조를 위한 본 발명의 항체의 용도에 관한 것이다.
특히, 본 발명은 유효량의 본 발명의 항체 또는 조성물을 고증식성 질환으로 고생하는 대상체에게 투여함을 포함하여, 상기 대상체에서 고증식성 질환을 치료하는 방법에 관한 것이다.
본원에 사용된 것으로서, 용어 "대상체" 또는 "환자"는 포유동물, 바람직하게는 인간이다.
유효량은 치료학적 또는 예방학적 유효량일 수 있다. "치료학적 유효량"은 바람직한 치료학적 또는 예방학적 결과를 달성하는데 필요한 용량에서 및 시간의 기간 동안 효과적인 양을 말한다. 본 발명의 항체 또는 조성물의 치료학적 유효량은 질환 상태, 개인의 연령, 성별, 및 체중과 같은 인자, 및 개인에서 바람직한 반응을 유발하는 항체 또는 조성물의 능력에 따라 변할 수 있다. 치료학적 유효량은 항체 또는 조성물의 어떠한 독성 또는 유해한 효과가 치료학적으로 이득인 효과보다 더 큰 양을 포함한다. "예방학적 유효량"은 바람직한 예방학적 결과를 달성하는데 필요한 용량에서 및 시간의 기간 동안 효과적인 양을 말한다. 전형적으로, 그러나 필수적이지는 않게, 예방학적 투여량은 질병 이전에 또는 조기 단계에 대상체에서 사용되므로, 예방학적 유효량은 치료학적 유효량 미만일 수 있다.
용어 "과증식성 질환"은 비정상적인 세포 증식의 일부 정도와 관련된 질환을 말한다. 일 구현예에서, 과증식성 질환은 암이다.
용어 "암"은 조절되지 않은 세포 성장/증식에 의해 전형적으로 특징화된 포유동물에서 생리학적 조건을 말하거나 기술한다. 암의 예는 암종, 림프종(예를 들면, 호지킨 림프종(Hodgkin's lymphoma) 및 비-호지킨 림프종(non-Hodgkin's lymphoma)), 아세포종, 육종, 및 백혈병을 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 이러한 암의 보다 특수한 예는 편평 세포 암, 소-세포 폐 암, 비-소 세포 폐 암, 폐의 선암, 폐의 편평 암종, 복막의 암, 간세포 암, 위장 암, 췌장 암, 신경교종, 자궁경부 암, 난소 암, 간 암, 방광 암, 간 종양, 골육종, 흑색종, 유방 암, 결장 암, 결장직장 암, 자궁 내막 또는 자궁 암종, 타액선 암종, 신장 암, 간 암, 전립샘 암, 음문 암, 갑상선 암, 간 암종, 백혈병 및 다른 림프구증식성 질환, 및 두부 및 경부 암의 다양한 유형을 포함하나, 이에 한정되지 않는다. 바람직한 구현예에서, 암은 방광 종양, 확산성 거대 B-세포 림프종, 타액 선의 선낭 암종, 버킷 림프종(Burkitt lymphoma), 다발성 흑색종, 췌장 관세포암, 모발 세포 백혈병, 전이성 전립선 암(metastactic prostate cancer), 흑색종, 결장직장 암으로부터 선택된다.
본 발명은 또한 감염성 질환으로 고생하는 대상체에게 유효량의 항체 또는 조성물을 투여함을 포함하여, 상기 대상체를 치료하는 방법에 관한 것이다.
대상체는 예를 들면, 바이러스, 세균, 진균 또는 기생충일 수 있는 병원체에 의해 유발될 수 있다.
본원에 제공된 방법으로 치료할 수 있는 감염성 세균의 예는 그람-양성 세균(예를 들면, 스트렙토코쿠스(Streptococcus), 스타필로코쿠스(Staphylococcus), 코리네박테리움(Corynebacterium), 리스테리아(Listeria), 바실러스(Bacillus) 및 클로스트리디움(Clostridium)) 또는 그람-음성 세균(예를 들면, 살모넬라(Salmonella), 시겔라(Shigella), 엔테로박테리아세아에(Enterobacteriaceae), 슈도모나스(Pseudomonas), 모락셀라(Moraxella), 헬리코박터(Helicobacter), 스테노트로포모나스(Stenotrophomonas), 브델로비브리오(Bdellovibrio), 아세트산 박테리아(acetic acid bacteria), 알파-프로테오박테리아(alpha- proteobacteria), 에스케리키아 콜라이(Escherichia coli), 나이세리아 고노로에아에(Neisseria gonorrhoeae), 나이세리아 메닝기티디스(Neisseria meningitidis), 모락셀라 카타랄리스(Moraxella catarrhalis), 헤모필루스 인플루엔자에(Hemophilus influenzae), 클렙시엘라 뉴모니아에(Klebsiella pneumoniae), 레지오넬라 뉴모필라(Legionella pneumophila), 슈도모나스 아에루기노사(Pseudomonas aeruginosa), 프로테우스 미라빌리스(Proteus mirabilis), 엔테로박터 클로아카에(Enterobacter cloacae) 및 세라티아 마르세스센스(Serratia marcescens)를 포함하나, 이에 한정되지 않는다. 예시적인 감염성 세균은 헬리코박터 필로리스(Helicobacter pyloris), 보렐리아 부르그도르페리(Borelia burgdorferi), 레지오넬라 뉴모필리아(Legionella pneumophilia), 마이코박테리아 아종(Mycobacteria sps)(예를 들면, 엠. 투베르쿨로시스(M. tuberculosis), 엠. 아비움(M. avium), 엠, 인트라셀룰라에(M. intracellulare), 엠. 칸사이(M. kansaii), 엠. 고르도나에(M. gordonae)), 스타필로코쿠스 아우레우스(Staphylococcus aureus), 나이세리아 고노로에아에(Neisseria gonorrhoeae), 나이세리아 메닝기티디스(Neisseria meningitidis), 리스테리아 모노사이토게네스(Listeria monocytogenes), 스트렙토코쿠스 피오게네스(Streptococcus pyogenes)(그룹 A 스트렙토코쿠스), 스트렙토코쿠스 아갈라티아에(Streptococcus agalactiae)(그룹 B 스트렙토코쿠스), 스트렙토코쿠스(비리단스 그룹(viridans group), 스트렙토코쿠스 파에칼리스(Streptococcus faecalis), 스트렙토코쿠스 보비스(Streptococcus bovis), 스트렙토코쿠스(Streptococcus)(아나에로빅 아종(anaerobic sps.)), 스트렙토코쿠스 뉴모니아에(Streptococcus pneumoniae), 병원성 캄필로박터 아종(pathogenic Campylobacter sp.), 엔테로코쿠스 아종(Enterococcus sp.), 해모필루스인플루엔자에(Haemophilusinfluenzae), 바실러스 안트라키스(Bacillus anthracis), 코리네박테리움 디프테리아에(corynebacterium diphtheriae), 코리네박테리움 아종(corynebacterium sp .), 에리시펠로트릭스 루시오파티아에(Erysipelothrix rhusiopathiae), 클로스트리디움 페르프링거스(Clostridium perfringers), 클로스트리디움 테타니(Clostridium tetani), 엔테로박터 아에로게네스(Enterobacter aerogenes), 클렙시엘라 뉴모니아에(Klebsiella pneumoniae), 파스투렐라 물토시다(Pasturella multocida), 박테로이데스 아종(Bacteroides sp .), 푸소박테리움 뉴클레아툼(Fusobacterium nucleatum), 스트렙토바실러스 모닐리포르미스(Streptobacillus moniliformis), 트레포네마 팔리디움(Treponema pallidium), 트레포네마 페르테누에(Treponema pertenue), 렙토스피라(Leptospira), 및 악티노마이세스 이스라엘리(Actinomyces israelli)를 포함하나, 이에 한정되지 않는다.
본원에 제공된 방법으로 치료될 수 있는 감염성 진균의 예는 크립토코쿠스 네오포르만스(Cryptococcus neoformans), 히스토플라스마 캅술라툼(Histoplasma capsulatum), 콕시디오이데스 임미티스(Coccidioides immitis), 블라스토마이세스 데르마티티디스(Blastomyces dermatitidis), 클라미디아 트라초마티스(Chlamydia trachomatis), 및 칸디다 알비칸스(Candida albicans)를 포함하나, 이에 한정되지 않는다.
본원에 제공된 방법으로 치료될 수 있는 감염성 기생충의 예는 플라스모디움 팔시파룸(Plasmodium falciparum) 및 톡소플라스마 곤디이(Toxoplasma gondii)를 포함하나, 이에 한정되지 않는다.
본원에 제공된 방법으로 치료될 수 있는 바이러스의 예는 다음 바이러스 계열의 구성원과 같은 엔벨로프된 바이러스(enveloped virus)를 포함하나, 이에 한정되지 않는다: 레트로비리다에(Retroviridae)(예를 들면, HIV(예를 들면, HIV1 및 HIV2), MLV, SIV, FIV, 인간 T-세포 백혈병 바이러스 1 및 2, XMRV, 및 콜티바이러스(Coltivirus)(예를 들면, CTFV 또는 반나 바이러스(Banna virus)); 토가비리다에(Togaviridae)(예를 들면, 알파바이러스(alphavirus)(예를 들면, 로스 리버 바이러스(Ross River virus), 신드비스 바이러스(Sindbis virus), 세믈리키 포레스트 바이러스(Semliki Forest Virus), 오냥용 바이러스(O'nyong'nyong virus), 치쿵군야 바이러스(Chikungunya virus), 동부형마 뇌막염 바이러스(Eastern equine encephalitis virus), 서부마 뇌막염 바이러스(Western equine encephalitis virus), 베네주엘라 마 뇌막염 바이러스(Venezuelan equine encephalitis virus) 또는 루벨라 바이러스(rubella viruses)); 플라비리다에(Flaviridae)(예를 들면, 뎅기열 바이러스, 뇌염 바이러스(예를 들면, 웨스트 나일 바이러스(West Nile virus) 또는 일본 뇌염 바이러스(Japanese encephalitis virus), 황열병 바이러스(yellow fever virus)); 코로나비리다에(Coronaviridae)(예를 들면, SARS 바이러스 또는 토로바이러스(Torovirus)와 같은 코로나바이러스); 라브도비리다에(Rhabdoviridae)(예를 들면, 수포성 구내염 바이러스, 광견병 바이러스(rabies virus)); 파라믹소비리다에(Paramyxoviridae)(예를 들면, 파라인플루엔자 바이러스, 볼거리 바이러스(mumps virus), 홍역 바이러스(measles virus), 호흡기 세포융합 바이러스(respiratory syncytial virus), 센다이 바이러스(sendai virus), 및 메토뉴모바이러스(metopneumovirus)); 오르토믹소비리다에(Orthomyxoviridae)(예를 들면, 인플루엔자 바이러스); 분야비리다에(Bunyaviridae)(예를 들면, 한탄 바이러스(Hantaan virus), 분야 바이러스(bunya virus)(예를 들면, 라 크로쎄 바이러스(La Crosse virus), 플레보바이러스(phlebovirus), 및 나이로 바이러스(Nairo virus)); 헤파드나비리다에(Hepadnaviridae)(B형 간염 바이러스); 헤르페스비리다에(Herpesviridae)(헤르페스 단성 바이러스(herpes simplex virus: HSV) 1 및 HSV-2, 바리셀라 조스터 바이러스(varicella zoster virus), 사이토메갈로바이러스(cytomegalovirus: CMV), HHV-8, HHV-6, HHV-7, 및 슈도라비에스 바이러스(pseudorabies virus)); 필로비리다에(Filoviridae)(에볼라 바이러스(Ebola virus) 및 마르부르그 바이러스(Marburg virus)를 포함하는 필로바이러스) 및 폭시이리다에(Poxyiridae)(바리올라 바이러스(variola virus), 박시니아 바이러스(vaccinia virus), 폭스 바이러스(pox virus)(예를 들면, 스몰 폭스(small pox), 원숭이 폭스(monkey pox), 및 몰루스쿰 콘타기오숨 바이러스(Molluscum contagiosum virus)), 야타박스 바이러스(yatabox virus)(예를 들면, 타나폭스(Tanapox) 및 야바폭스(Yabapox))를 포함하나, 이에 한정되지 않는다. 다음의 계열의 구성원과 같은 비-엔벨로프된 바이러스를 또한 본원에 제공된 방법으로 치료할 수 있다: 칼시비리다에(Calciviridae)(예를 들면, 위장염을 유발하는 균주); 아레나비리다에(Arenaviridae)(LCMV, 라싸(Lassa), 쥬닌(Junin), 마츄포(Machupo) 및 구아나리토(Guanarito) 바이러스와 같은 출혈열 바이러스(hemorrhagic fever virus)); 레오비리다에(Reoviridae)(예를 들면, 레오바이러스(reovirus), 오르비바이러스(orbivirus) 및 로타바이러스(rotavirus)); 비르나비리다에(Birnaviridae); 파르보비리다에(Parvoviridae)(인간 보카바이러스 아데노-관련 바이러스(Human bocavirus adeno-associated virus)와 같은 파르보바이러스); 파필로마비리다에(Papillomaviridae)(예를 들면, 파필로마바이러스(papillomavirus)); 파포바비리다에(Papovaviridae)(파필로마 바이러스(papilloma virus), 폴요마 바이러스(polyoma virus)); 아데노비리다에(Adenoviridae)(아데노바이러스(adenovirus)); 피코르나비리다에(Picornaviridae)(엔테로바이러스(enterovirus), 엔테릭 바이러스(enteric virus), 폴리오바이러스(Poliovirus), 콕사키에바이러스(coxsackievirus), 헤파토바이러스(hepatovirus), 카디오바이러스(cardiovirus), 아프토바이러스(aptovirus), 에코바이러스(echovirus), A형 간염 바이러스, 수족구병 바이러스(Foot and mouth disease virus), 및 리노바이러스(rhinovirus)) 및 이리도비리다에(Iridoviridae)(예를 들면, 아프리칸 스와인 열 바이러스(African swine fever virus)). 본원에 제공된 방법을 사용하여 치료될 수 있는 다른 바이러스는 분류되지 않은 바이러스(예를 들면, 해면모양 뇌병증의 유생기생충, 델타 간염인자의 제제(B형 간염 바이러스의 결함이 있는 부수체(satellite)로 고려됨), 비-A형, 비-B형 간염 인자(부류 1 = 내부적으로 전염됨; 부류 2 = 비경구적으로 전염됨(예를 들면, C형 간염); 칼시바이러스(calcivirus)(예를 들면, 노로바이러스(Norovirus), 노르웍(Norwalk) 및 관련 바이러스); 헤페바이러스(Hepevirus)(예를 들면, E형, JC형 및 BK형 간염 바이러스) 및 아스트로바이러스(astrovirus))를 포함한다.
본 발명의 방법에서, 본 발명의 항체는 예방되거나 치료될 질병에 따라 선택될 수 있는 다른 활성 성분과 함께 사용될 수 있다. 다른 활성 성분의 예는 화학치료학적 약물, 항생제, 항기생충제, 항바이러스제 또는 항진균제를 포함하나, 이에 한정되지 않는다. 상기 나타낸 이러한 조합 치료요법은 조합된 투여(여기서 2개 이상의 치료제가 동일한 또는 별도의 제형 속에 포함된다), 및 별도의 투여(이 경우 본 발명의 항체의 투여는 추가의 치료제 및/또는 보조제의 투여 전에, 동시에, 및/또는 후에 일어날 수 있다)를 포함한다. 본 발명의 항체는 또한 방사선 치료요법과 함께 사용될 수 있다.
본 발명의 항체(및 어떠한 추가의 치료제)는 비경구, 폐내, 및 비강내, 및 바람직하게는 국소 치료를 포함하는 어떠한 적합한 수단에 의해서도 투여될 수 있다. 비경구 주입은 근육내, 정맥내, 동맥내, 복강내, 또는 피하 투여를 포함한다. 투여는 투여가 일시적이거나 장기간인 것에 일부 의존하여, 어떠한 적합한 경로, 예를 들면, 정맥내 또는 피하 투여와 같은 주사에 의해 이루어질 수 있다. 다양한 시점에 걸쳐 단일 또는 다중 투여, 거환 투여, 및 펄스 주입(pulse infusion)을 포함하나, 이에 한정되지 않는 다양한 투여 스케쥴이 본원에서 고려된다.
본 발명은 또한 질환의 진단 또는 검출 방법에서 사용하기 위한 본 발명의 항체 또는 약제학적 조성물에 관한 것이다. 본 발명은 또한 생물학적 샘플 속에서 Tyro3의 존재를 검출하는 방법에 관한 것이다.
본 발명의 항-Tyro3 항체 중 어느 것도 생물학적 샘플 속에서 Tyro3의 존재를 검출하는데 유용할 수 있다. 본원에 사용된 것으로서 용어 "검출하는"은 정량적 또는 정성적 검출을 포함한다. 특정의 구현예에서, 생물학적 샘플은 요로상피, 유방, 췌장, 식도, 폐 또는 뇌와 같은 세포 또는 조직을 포함한다.
상기 방법은 생물학적 샘플 속에 존재하는 경우 Tyro3에 대한 항체의 결합을 허용하는 조건 하에서, 본 발명의 항체와 생물학적 샘플을 접촉시키고, 복합체가 항체와 Tyro3 사이에 형성되는지를 검출함을 포함할 수 있다. 이러한 방법은 시험관내(in vitro) 또는 생체내(in vivo) 방법일 수 있다.
본 발명의 항체를 사용하여 진단할 수 있는 예시적인 질환은 암(예를 들면, 유방, 폐, 췌장, 뇌, 신장, 난소, 위, 백혈구, 자궁, 자궁내막, 결장, 전립샘, 갑상선, 간의 암, 골육종, 및/또는 흑색종)을 포함한다.
본 발명의 항체는 또한 예를 들면, Tyro3이 환자의 선택을 위한 생체표지자인 경우, 항-Tyro3 항체를 사용하는 치료요법에 적합한 대상체를 선택하는데 사용될 수 있다.
따라서, 본 발명은 또한 항-Tyro3 항체를 사용한 치료요법을 위해 질환, 특히 암으로 고생하는 대상체를 선택하거나, 질환, 특히 암으로 고생하는 대상체가 항-Tyro3 항체를 사용한 치료요법으로부터 유리하도록 허용되는지를 결정하는 방법에 관한 것이다.
일부 구현예에서, 치료 또는 진단 방법에 사용된 본 발명의 항체는 표지될 수 있다. 표지는 직접 검출된 표지 또는 잔기(예를 들면, 형광성, 발색성, 전자-밀도, 화학발광성, 및 방사활성 표지), 및 예를 들면, 효소 반응 또는 분자 상호작용을 통해 간접적으로 검출되는 효소 또는 리간드와 같은 잔기를 포함하나, 이에 한정되지 않는다.
다음의 실시예는 예증의 목적을 위해 제공되며 제한되지 않는다.
실시예 (EXAMPLES)
실시예 1 파아지 디스플레이(phage display)에 의한 완전한(fully) 인간 항-Tyro3 scFvs의 생성 - ScFvs의 IgGs로의 전환
항-Tyro3 항체, 즉, 항-Tyro3 scFv, 및 전환에 의한 상응하는 항-Tyro3 면역글로불린 (IgGs)을 인간 Tyro3 단백질(서열 번호: 1)에 상응하는 단백질의 세포외 도메인을 구체적으로 인식하기 위해 선택하였다. 이들 항-Tyro3 scFv는, TAM 수용체 계열의 다른 구성원인, 인간 AXL (서열 번호:6) 및 인간 MER 단백질(서열 번호:7) 각각을 인식하지 않도록 선택되었다.
항- Tyro3 ScFv의 스크리닝(screening)
ScFv 클론을 생성시키고 다음에 대해 특이적인 scFv를 나타내는 파아지를 스크리닝함으로써 신속한 액체 스크리닝(Rapid Liquid Screening: RLS)을 사용하여 선택하였다:
- 비-바이오티닐화된 hTyro3으로 인간 Fc(R&D Biotech로부터 구입)에 융합된 인간 Tyro3 (hTyro3) 단백질(서열 번호 1의 41번 위치로부터 428번 위치)의 세포외 도메인(ECD)(재조합체 인간 Dtk-Fc 키메라, R&D Systems, 미네소타주 미네아폴리스 소재; 제품 번호: 859-DK)
- 세균 발현된 전체 hTyro3 ECD(서열 번호: 1의 41번 위치로부터 430번 위치: 1; AxioMx, 제품 번호 pAX1635), 또는
- 인간과 쥐 Tyro3 ECD 사이의 100% 상동성 영역으로부터 및 잠재적인 글리코실화 부위가 부재하는 세균 발현된 펩타이드(아미노산 서열 DWVPFQTKGLAPASAPQNLHAIRTDSGLIL (서열 번호: 192)을 지님). 당해 펩타이드는 Tyro3 서열의 도메인 FNIII 1의 말단에서 서열 번호: 1의 310번 위치 내지 340번 위치의 서열에 상응한다.
바이오티닐화된 말토즈-결합 단백질(MBP) 융합체로서 모두 3개의 단백질인, 세균 발현된 단백질을 합성하고, 클로닝하며, 발현시켰다.
단일 콜로니를 스크리닝하고, 양성 클론을 확인하며, 항체 클론을 서열분석하고, 독특한 서열을 확인하였다. 양성의 독특한 결합인자를 이후에 R&D Systems으로부터의 쥐Tyro3 ECD-인간 Fc (759-DT-100)에 대한 결합에 대해 시험하였다.
ScFv 정제 및 특이성 시험
단백질 생산을 위해, 선도(lead) scFv를 단백질 생산 벡터(AxioMx; 제품 번호: pAPIII6)내로 클로닝하고, 성공적으로 클로닝된 scFv를 NEB 터보 적격성 이. 콜라이(Turbo Competent E. coli)(New England Biolabs [NEB], 매사츄세츠주 입스위치(Ipswich) 소재; 제품 번호: C2984H)내로 형질전환시켰다. 항체를 이. 콜라이내에서 발현시키고 HisPur Cobalt Resin(Thermo Scientific, 제품 번호: 89965)를 사용하는 친화성 크로마토그래피로 정제하였다.
ELISA를 다음의 ECD-Fc 융합체에 결합하는 정제된 단백질의 능력을 평가하기 위해 수행하였다: hTyro3, mTyro3, hAXL(R&D Systems, 제품 번호: 154-AL-100), 및 hMER (R&D Systems, 제품 번호: 891-MR-100). OriGene (OriGene Technologies,매사츄세츠주 록빌 소재, MD; 제품 번호: TP308260)로부터의 완전한 길이의(FL) hTyro3에 대한 결합을 또한 평가하였다.
일단 예측된 기준을 지닌 scFv가 확인되면, 전체 IgG1/람다 IgGs 및 IgG 생산으로서 ScFv의 IgG로의 전환을 수행하였다.
ScFv의 IgG로의 전환
각각의 경쇄 및 중쇄의 가변 영역의 아미노산 서열을 선택된 ScFv 뉴클레오타이드 서열의 해독으로부터 유추하였다. 선택된 항 Tyro3 ScFv의 경쇄 및 중쇄의 가변 영역의 아미노산 서열을 하기 나타낸다. 이들 아미노산 서열은 IgG 전환 후 상응하는 IgG 분자의 가변 영역을 구성한다.
[표 13] 선택된 ScFv의 중쇄 및 경쇄의 가변 도메인의 아미노산 서열
항체 VL 서열 VH 서열
2410 서열 번호: 10 서열 번호: 11
2414 서열 번호: 32 서열 번호: 33
2709 서열 번호: 46 서열 번호: 47
2710 서열 번호: 60 서열 번호: 61
2717 서열 번호: 74 서열 번호: 75
2411 서열 번호: 88 서열 번호: 89
2412 서열 번호: 102 서열 번호: 103
2413 서열 번호: 116 서열 번호: 117
2415 서열 번호: 130 서열 번호: 131
2711 서열 번호: 144 서열 번호: 145
2713 서열 번호: 158 서열 번호: 159
2718 서열 번호: 172 서열 번호: 173
ScFv 중쇄를 EcoRI 및 NheI 클로닝 부위를 사용하여 pAX 1566 (Invivogen; pFUSE2ss-CHIg-hG1)내로 클로닝하는 한편 scFv 경쇄는 EcoRI 및 AvrII 클로닝 부위를 사용하여 pAX 1642 (Invivogen; pFUSE2ss-CLIg-hl2)내로 클로닝하였다. 서열-확인된 클론을 NEB 5 알파 세포내로 형질전환시키고 형질감염 등급 DNA를 Qiafilter Maxiprep 키트(Qiagen, 12263)를 사용하여 제조하였다. 포유동물 발현을 위해, 유리-유형 CHO 세포(Life Technologies, R800-07)를 제조업자의 지시에 따라 FreeStyle Max 시약(Life Technologies, 16447-100)을 사용하여 중쇄 및 경쇄 작제물로 동시-형질감염시켰다. 세포 상층액을 형질감염 6일 후 원심분리에 의해 수집하고 단백질 A 세파로즈 컬럼(Life Technologies, 101042)에 로딩(loading)하였다. 단백질 A 수지를 10배 컬럼 용적의 PBS-T (PBS/0.1% 트윈-20)로 2X 세척하고 3개 컬럼 용적의 글리신, pH 3.5으로 용출시켰다. pH를 1M 트리스, pH 9.0로 중화시켰다. IgG는 Amicon Ultra-4 원심분리 필터(Millipore, UFC801024)를 사용하여 PBS로 완충제 교환되었다(buffer exchanged). IgG를 SDS-PAGE 및 꼬마지에 블루 염색(Coomassie Blue staining)로 분석하고 IgG 농도는 꼬마지에 플러스 검정(Coomassie Plus assay)(Thermo Scientific, 1856210)으로 측정하였다. 내독소 수준을 LAL 크로모겐 검정(Chromogenic assay)(Thermo Scientific, 88282)으로 측정하였다.
실시예 2: 본 발명의 항 Tyro3 IgG의 각각의 쇄에 대한 CDR 영역의 정의
항-Tyro3 항체의 상보성 결정 영역은 항 Tyro3 IgG의 경쇄 및 중쇄 서열을 한편으로는 IMGT 데이타베이스(http://www.imgt.org/)로부터의 인간 V 질의 분석 도구에 제출하고, 다른 한편으로는 Protein Sequence and Structure Analysis of Antibody Variable Dopmains.　In:　Antibody Engineering Lab Manual　(Ed.: Duebel, S. and Kontermann, R., Springer-Verlag, Heidelberg)에 기술된 ABYSIS 데이타베이스(http://www.bioinf.org.uk/abs/)로부터의 요청 도구에 제출함으로써 정의하였다. 본 발명의 각각의 항-Tyro3 항체에 대해 IMGT 및 ABYSIS에 따른 CDR 한계 결정(delimitation) 결과를 하기 나타낸 바와 같이, 표 1 내지 12에 요약한다.
[표 14] 선택된 항- Tyro3 항체의 CDR 서열을 나타내는 표의 목록.
항체 나타낸 CDR 서열:
2410 표 1
2414 표 2
2709 표 3
2710 표 4
2717 표 5
2411 표 6
2412 표 7
2413 표 8
2415 표 9
2711 표 10
2713 표 11
2718 표 12
실시예 3: 재조합체 his-strep 태그된 Tyro3 세포외 도메인( ECD ), 및 이의 단편의 생산
본원에 기술된 상이한 결합 검정 실험을 위하여, 인간, 시노몰구스 및 쥐 종으로부터의 전체 Tyro3 ECD에 상응하는 단백질 서열을 UniProt Knowledge base(UniProtKB) 데이타베이스에 의해 제공된 정보를 기반으로 정의하였다. 인간 Tyro3 단백질의 완전한 세포외 도메인(또는 ECD)의 상응하는 단백질 서열은 서열 번호: 1의 41번 내지 429번 아미노산에 상응한다. 쥐 Tyro3의 경우, ECD는 서열 번호: 8의 21 내지 505번 아미노산에 상응한다. 시노몰구스의 경우, ECD의 서열은 서열 번호: 9에 기술되어 있다.
hTyro3 ECD의 상이한 단편을 또한 생산하였다(도 1). 이들 단편은 Ig-1 도메인, Ig-1 및 Ig-2 도메인, Ig-1, Ig-2 및 FNIII-1 도메인, Ig-2 및 FNIII-1 도메인, 또는 FNIII-1 및 FNIII-2 도메인을 포함하였다. Ig-1 도메인, Ig-1 및 Ig-2 도메인, Ig-2 및 FNIII-1 도메인, 및 FNIII-1 및 FNIII-2 도메인에 상응하는 아미노산 서열은 서열 번호: 2, 3, 4 및 5에 각각 기술되어 있다.
이들 상이한 단백질에 상응하는 DNA 서열을 인간에서 발현하기 위해 코돈-최적화하고, 유전자-합성하고, 조립하여 pCDNA3.3 I-neo(Life Technologies)내로 클로닝하였다. 이들 작제물 모두에 대해, 일반적인 시그날 서열(METDTLLLWVLLLWVPGSTG (서열 번호: 193))을 재조합체 단백질의 분비에 사용하였다. 트롬빈 절단 부위에 이어 스트렙타비딘 태그에 커플링된 옥타-히스티딘(8xHis)-태그(tag)로 이루어진 C-말단 태그 (LVPRGSSAHHHHHHHHSAWSHPQFEK(서열 번호: 194))를 가하여 검출(항-히스티딘 또는 항-strep 태그 항체에 의함), 친화성 정제 또는 니트릴로트리아세트산(NTA)/Ni2+ 표면 또는 Strepmab immoplate (IBA Lifesciences) 위에 단백질의 선택적 고정화를 촉진시켰다.
인간 및 시노몰구스 Tyro3 단백질을 HEK 293 Freestyle 세포내로 일시적으로 형질감염시키고 정제하였다. 다른 구조물은 포유동물 HEK 293 freestyle 세포(Life technologies)의 하우스 최적화된 일시적인 형질감염 방법에서 사용하는 분비된 단백질로서 성공적으로 발현되었다. 요약하면, 각각의 작제물을 암호화하는 pcDNA3.3 플라스미드를 증폭시키고 내독소 유리된 미디 프렙스(midi preps)(Macherey Nalgene)를 제조하였다. 이들 플라스미드를 사용하여 293 Freestyle 세포(life technologies)를 전기천공하였다. 이후에 단백질을 7일에 걸쳐 34℃에서 8% CO2 진탕 항온처리기 속에서 32℃에서 전기천공 후 24시간째에 첨가된 1mM의 부티르산나트륨의 존재하에 생산하였다. 발현된 단백질을 8000rpm에서 10분 동안 원심분리하여 세포로부터 분리하고 상층액을 정제 전에 0.22μm 여과하였다. 포유동물 세포내에서 발현된 8xHis-태그된 재조합체 Tyro3 단백질을 Ni-NTA 아가로즈(고도로 가교결합된 6% 아가로즈 매트릭스 중의, 니트릴로트리아세트산(NTA), 테트라덴테이트 킬레이팅 리간드)를 사용하는 천연 조건하에서 정제하였다. 수지에 결합된 단백질을 이미다졸과의 경쟁에 의해 용출시켰다. 이후에, 단백질을 추가로 정제하고 완충액을 PBS IX 완충액 속에서 제조 HiLoad 26/56 Superdex 200 겔 여과 컬럼(GE healthcare) 상에서 교환하였다. 단백질을 -80℃에 저장하기 전에 0.22μm로 여과하였다. 단백질 농도를 자외선-가시성 분광학을 사용하여 측정하였다.
모든 정제된 Tyro3 작제물의 순도, 질량 및 온전성을 SDS PAGE 전기영동에 이어 꼬마지에 블루 염색 및 HRP-접합된 스트렙탁틴(IBA life sciences)을 사용하는 면역-블롯 검정으로 점검하였다. 단백질을 또한 Bio SEC-3, (7.8 x 300) HPLC 겔 여과 컬럼에서 작제물의 크기에 따른 150Å 또는 300Å 공극 크기를 사용하여 분석하였다.
실시예 4. hTyro 3- ECD에 대한 scFvs / IgG의 ELISA 결합 검정
ELISA 결합 검정을 수행하여 인간 Tyro3 ECD 단백질에 결합하는 각각의 항-Tyro3 scFv 및 각각의 상응하는 전환된 IgG의 능력을 점검하고 비교하였다(도 2).
인간 Tyro3 ECD 단백질을 생산하고 실시예 3에 기술된 바와 같은 겔 여과로 정제하였다. 당해 단백질은 겉보기 분자량(apparent molecular weight)이 대략 88 Kda(글리코실화 추가의 질량 없음)인 이량체성 당단백질로서 생산되었다.
이중 샌드위치 ELISA를 개발하였다. 당해 검정은 항-strep mAb (IBA biotech로부터의 StrepMAB-Immo 피복된 미세플레이트)로 예비-피복된 ELISA 플레이트에서 직접 포획된 고정화된 strep-태그된 전체 인간 Tyro3 ECD에서 시험할 항-Tyro3 항체의 결합을 측정하는 것으로 이루어진다. 요약하면, 96웰의 StrepMAB-Immo 피복된 미세플레이트를 300μL의 PBS 트윈 0.2%(ELISA 세척 용액으로 언급됨)으로 3회 세척하였다. 과량의 정제된 Strep 태그된 hTyro3 ECD 단백질의 포획을 실온에서 1시간 항온처리함으로써 달성하였다. 이들 실험에서, PBS, BSA 1% (ELISA 희석 용액으로 언급됨) 속에 희석된 3μg의 정제된 단백질을 웰 당으로 고정화시켰다. 웰을 300μL의 세척 용액으로 3회 세척하였다. 웰 표면에서 비-특이적인 결합 부위를 60분 동안 실온에서 200μL/웰의 차단 용액(PBS, BSA 3 %)으로 차단시켰다. 웰을 300μL의 세척 용액으로 5회 세척하였다. 이후에, ELISA 희석 용액 속에서 희석된 시험할 100μl (2개)의 상이한 농도의 항-Tyro3 항체를 웰 당으로 가하고 1시간 동안 실온에서 항온처리하였다. 관련없는 대조군 IgG2656을 또한 당해 실험에 가하였다. ScFv 양식의 항-Tyro3 항체의 경우, 실험을 6개의 농도를 사용하여 2회 수행하였다(도 3a). IgG 양식의 항-Tyro3 항체의 경우, 실험을 9개 농도로 2회 수행하였다(도 3b). 제1 희석에 대한 ScFv 출발 농도는 10 μg/mL (또는 2718의 경우 30μg/mL) 이었으며 이후 ELISA 희석 용액 중 3배 희석을 수행하였다. IgG 실험을 위해, 제1 희석을 위한 출발 농도는 3μg/ml이었으며 이후 ELISA 희석 용액 속에서 3배 희석을 수행하였다. 웰을 300μL의 세척 용액으로 5회 세척하였다. 이후에, 평가될 항-Tyro3 항체의 특성에 따라(참고: 표 15, 제1 컬럼), 포획된 Tyro3 작제물에서의 이들의 결합은 표 15(3번째 컬럼)에 기재된 100μl/웰의 상응하는 HRP-접합된 제2 항체를 ELISA 희석 용액 속에 희석된 나타낸 희석(표 15의 제4 컬럼)에서 가하여 나타내었다. 혼합물을 실온에서 60분 동안 항온처리하였다. 웰을 300μL의 세척 용액으로 5회 세척하였다. 서양 고추냉이 퍼옥시다제 활성의 표시를 100μL/웰의 즉석 사용 TMB 용액으로 실현시키고 5 내지 30분 동안 실온에서 혼합 하에 및 광의 부재하에서 항온처리하였다. 450 nm 및 540 nm에서의 광학 밀도를 Labsystems iEMS MF 장치를 사용하여 판독하였다.
[표 15] ELISA 결합 검정 조건
1차 항체 초기 희석 2차 항체 희석
항-Tyro3 scFv
또는 관련없는 735 ScFv		 10μg/mL
또는 2718의 경우 30μg/mL		 쥐 HRP 접합된 항 Flag 항체 (Sigma aldrich로부터의 M2) 1/10000
항-Tyro3 scFv
또는 관련없는 735 ScFv
항-Tyro3 IgG 또는 대조군의 관련없는 IgG 2656 10μg/mL
항-Tyro3 IgG 또는
대조군의 관련없는 IgG 2656		 염소 HRP-커플링된 항-인간 IgG1(Bethyl Laboratories로부터의 키트) 1/75000
N18 염소 항 hTyro3(인간, 마우스 및 랫트 Tyro3과 교차 반응) 1/30 토끼 항 염소 HRP-커플링된 2차 항체 1/10000
N18 염소 항-hTyro3
D38C6 토끼 모노클로날 항-hTyro3
(쥐 및 시아노 Tyro3#5585과 교차 반응)(Cell Signaling Technology )		 1/2000
D38C6 토끼 항 hTyro3 염소 항 토끼 HRP-커플링된 2차 항체 1/10000
실시예 5 바이오층 인터페로메트리 ( biolayer interferometry: BLI )를 사용한 항-Tyro3 IgG의 친화성 측정
20mg의 인간 Tyro3의 재조합체 8his-strep-태그된 세포외 도메인(ECD)(서열 번호: 1의 40 내지 429번 위치)을 Hiload Superdex S200 26/60 위에서 겔 여과하였다. 시험할 항 인간Tyro3 IgG를 겔 여과로 또한 정제하였다.
친화성 측정을 항-인간 역학(AHC) 1회용 섬유-광학 바이오센서 팁(disposable fiber-optic biosensor tip)이 장착된 Octet K2 장치(Pall/ ForteBio)에서 바이오층 인터페로메트리를 사용하여 수행하였다. 모든 실험을 30℃에서 추천된 Fortebio 이동 완충액(0.1%(w/v) 소 혈청 알부민(BSA) 및 0.02% (v/v) 트윈_20이 들어있는 PBS) 속에서 수행하였다. 당해 완충액을 또한 리간드 (본원에서는 항체) 및 분석물(본원에서는 인간 Tyro3 단백질의 세포외 도메인)의 희석을 위해 사용하였다. 96-웰 미세플레이트(노 블랙 폴리프로필렌 저 결합 플레이트(No. Black polypropylene low binding plate), Greiner Bio-One, 독일 프릭켄하우젠 소재) 속의 샘플을 1000rpm에서 교반하였다. AHC 바이오센서(Pall Collaboration; 참고 :18-5060)를 사용하여, 팁을 5.625μg/mL(37.5nM)의 상이한 항-hTYRO3으로 10분 동안 포화시키면, 이는 전형적으로 0.3nm의 포획 수준을 생성하였다. 동적 상수를 각각의 정제된 항체(분자량 150 kDa) 각각에 대해 6개의 농도(37.5 또는 62.5(실험에 따라), 및 125, 250, 500, 1000 & 2500 nM)에서 희석된 인간 Tyro3의 세포외 도메인을 가함으로써 측정하였다. 측정 사이에, 항-인간 Tyro3 바이오센서 표면은 이들을 10mM 글리신, pH 1.5 속에서 5초의 3회 주기에 이어서, PBS 속에서 5초까지 노출시킴으로써 재생시켰다. 연합 상을 300초 동안 측정하고, 해리 상은 해리 단계에 따라 300초 동안 상호작용에 의존한다. 모든 측정을 이중 참고 감산을 사용하여, 즉, 인간 Tyro3 단백질의 세포외 도메인의 각각의 농도에 노출된 리간드가 없는 조절 센서 및 이동 완충액에만 제출된 리간드를 지닌 참고 웰을 감함으로써 기본선 이동(baseline drift)대해 교정하였다. 각각의 항체에 대한 친화성, 결합(kon) 및 해리 속도 상수(koff)를 ForteBio 데이타 분석 소프트웨어 9.0에서 1:1 상호작용 모델 핏팅 글로발(model fitting global), 센서로 연결된 Rmax를 적용시켜 계산하였다. 일반적으로 이종 결합에 의해 유발된, 소프트웨어로 확실하게 핏팅되지 않을 수 있는 곡선(대부분 완전한 R2 < 0.925)은 추가의 분석으로부터 배제하였다. 결과는 도 10 및 11에 나타낸다.
실시예 6: 특이성 ELISA
R&D Systems로부터의 hTyro 3 (859-DK-100), hAxl (154-AL-100) 또는 hMer (891-MR-100)의 세포외 도메인을 PBS 중 96-웰 미세역가 플레이트(1μg/well)에 피복시키고 4℃에서 밤새 항온처리하였다. 플레이트를 PBS로 3회 세척하고 PBS/3% BSA 속에서 1시간 동안 실온에서 차단시켰다. 플레이트를 상기와 같이 세척하고 scFv를 1μg/mL (PBS 속에 희석됨)에서 가하고 1시간 동안 실온에서 항온처리하였다. 플레이트를 PBST (PBS/0.01% 트윈-20)으로 3회 세척하고 제2 항체 항-FLAG-HRP를 1시간 동안 실온에서 가하였다(Abcam, ab49763, 차단 완충액 중 1/5000 희석). 플레이트를 상기와 같이 PBST로 세척하고 시그날을 Ultra-TMB 시약(Thermo Scientific, 34028)으로 전개시켰다.
도 4에 나타낸 결과는, 선택된 Tyro3 scFv가 hAxl 또는 hMer과 교차-반응하지 않음을 나타낸다.
실시예 7: GAS6 경쟁 검정
미세역가플레이트를 인간 재조합체 완전한 길이의 Tyro3 단백질로 PBS 중의 2.5μg/mL, 100μl/웰(OriGene # TP308260)에서 피복하고 밤새 4℃에서 항온처리하였다. 플레이트를 PBS로 3회 세척하고 PBS/3% BSA 속에서 1시간 동안 실온에서 차단시켰다. 플레이트를 상기와 같이 세척하고 항체(항-Tyro3 scFv 또는 MAB859), 바이오티닐화된 GAS6 또는 항체/GAS6 혼합물을 1시간 동안 실온에서 적용시켰다. 플레이트를 PBST (PBS/0.01% 트윈-20)으로 3회 세척하고 차단 완충액 속에 희석된 제2 항체를 1시간 동안 실온에서 가하였다. 완전한 길이의 Tyro3에 대한 GAS6 결합을 0.4μg/mL의 스트렙타비딘-HRP(Abcam, ab7403)으로, ScFv 결합을 항-His-HRP 항체(Sigma-Aldrich, A7058, 1/5000 희석)로 검출하고 MAB859 결합을 항-마우스-HRP(Abcam, ab6728 1/10000 희석)으로 검출하였다. 플레이트를 PBST로 세정하고 시그날을 Ultra-TMB 시약(Thermo Scientific, 34028)으로 전개하였다.
GAS6의 부재하에서 및 GAS6의 존재하에서 이들 경쟁 검정의 결과를 도 5a 및 5b에 각각 나타낸다.
실시예 8: 시노몰구스 및 쥐 Tyro3 ECD에 대한 항- Tyro3 scFv 및 IgG의 교차-반응성
당해 검정의 목적은 쥐(murine) 및 시노몰구스(cynomolgus) Tyro3 단백질에 대한 항-Tyro3 scFv 및 IgG의 교차-반응성을 평가하기 위한 것이었다. 당해 검정은 실시예 4에 기술되고 도 2에 나타낸 바와 같은 이중 샌드위치 ELISA에서, 실시예 3에 기술된 바와 같이 제조된 항-Tyro3 항체시노몰구스 또는 쥐 Tyro3 ECD의 결합을 측정하는 것으로 이루어진다.
이들 실험에서, 5μg/mL(PBS, BSA 1% 희석 용액 속에 희석됨)의 최종 희석에서 100μL의 시노몰구스 및 쥐 Tyro3 strep 태그된 ECD 단백질을 각각의 웰(및 따라서 웰당 대략 500ng의 Tyro3 단백질)에 가하였다.
1차 및 2차 항체 및 이들의 사용된 조건을 표 16에 기술한다.
[표 16] 시노몰구스 및 쥐 Tyro3 ECD에 대한 항- Tyro3 scFv 및 IgG의 교차-반응성을 측정하기 위해 사용된 항체
1차 항체 초기 희석 2차 항체 희석
항-Tyro3 scFv
또는 관련없는 735 ScFv 		인간, 시노몰구스 및 쥐Tyro3에 대해 10μg/mL
항-Tyro3 scFv
또는 관련없는 735 ScFv		 항 Flag 항체(Sigma aldrich로부터의 M2)에 접합된 쥐 HRP 1/10000
항-Tyro3 IgG 또는 대조군의 관련없는IgG2656 인간 및 시노몰구스 Tyro3에 대해 3μg/mL,
쥐 Tyro3에 대해 10μg/mL
항-Tyro3 IgG 또는 대조군의 관련없는 IgG2656 염소 HRP-커플링된 항-인간 IgG1(Bethyl Laboratories로부터의 키트) 1/75000
D38C6 토끼 항hTyro3 1/2000
D38C6 토끼 항hTyro3 염소 항 토끼 HRP-커플링된 2차 항체 1/10000
scFv 양식 및 IgG 양식에서 항-Tyro3의 시노몰구스 Tyro3 ECD에 대한 교차-반응성을 도 6a 및 6b에 각각 나타낸다.
scFv 양식에서 항-Tyro3의 쥐 Tyro3 ECD에 대한 교차-반응성을 도 7에 나타낸다.
실시예 9 항 - Tyro3 scFv의 에피토프 맵핑
당해 검정의 목적은 Ig 유사(Ig1 또는 Ig2) 또는 피브로넥틴(FnIII 1 또는 2) 도메인 중에서 인간 Tyro3 ECD의 소 도메인(sub domain)에 대한 본 발명의 각각의 항 Tyro의 결합 영역을 정의하기 위한 것이었다.
당해 검정은 인간 Tyro3 ECD의 상이한 단편에 대한 항-Tyro3 scFv의 결합을 측정하는 것으로 이루어진다. 실시예 4에 기술된 이중 샌드위치 ELISA를 사용하였으며 실시예 3에 기술된 생산된 Tyro3 단편 대략 500ng/웰(PBS, BSA 1% 속에 희석된 5μg/mL의 희석에서 100μL/웰)mL)을 고정화시켰다.
1차 및 2차 항체 및 이들의 사용된 조건은 표 17에 기술되어 있다.
[표 17] 항- Tyro3 scFv의 에피토프 맵핑에 사용된 항체
항- Tyro3 항체 초기 희석 2차 항체 희석
항 Tyro3 scFv
또는 관련없는 735 ScFv		 10μg/mL
항 Tyro3 scFv
또는 관련없는 735 ScFv		 M2-항 DKK flag HRP 1/10000
Tyro3의 상이한 도메인(도 8에 나타낸 바와 같음)에 대한 결합 결과에 따라서, 3개의 소 부류의 항-Tyro3 항체를 확인하였다:
Ig1 및 Ig2(2411, 2412, 2413, 2415, 2711 및 2713)에 대한 결합인자;
Ig1에 결합하고 Ig2(2410, 2414,2709, 2710 및 2717)에 결합하지 않는 결합인자(2717의 경우가 특별하며, 2717의 에피토프는 Ig1-Ig2 단편(Ig1에 대한 결합 및 Ig1-Ig2 단편에 대해서는 모두 비 결합)에 보다 더 접근가능하지 않지만 이는 다른 도메인이 예를 들면, 완전한 Tyro3 ECD에 존재하는 경우 더 이상 이러한 경우가 아니다); 및 최종적으로 FNIII 1 도메인(2718 ScFv)에 대한 결합인자.
실시예 10: 살아있는 세포에서의 항-Tyro 3 IgG의 결합
Tyro3을 과발현하는 세포에 대한 항-Tyro3 IgG결합을 평가하기 위하여, 재조합체 인간 Tyro3을 발현하도록 형질감염된 HEK293 세포 및 내인성 Tyro3을 발현하는 형질감염되지 않은 HEK293 세포를 사용하였다.
Tyro3 과발현은 5E5 세포를 PBS 속에서 30분 동안 4℃에서 Live-Dead NIR 염료(Life Technologies, #L10119) 및 1μg의 Tyro3-특이적인 MAB859 모노클로날 항체(R&D Systems) 또는 이의 동형 대조군(MAB002, R&D systems)에 노출시켜 조절하였다. 세포를 PBS-세척하고 100μL의 PBS 속에서 30분 동안 4℃에서 1:100 PE-접합된 염소-항 마우스 Ig Ab(BD Pharmingen)와 함께 항온처리하였다. 세포를 세척하고 적어도 10,000개의 살아있는 세포의 PE 형광성을 ARIA III 유동 세포분석기(Beckton Dickinson) (도 9의 상부 패널) 에 즉시 기록하였다.
형질감염되지 않은 세포보다 Tyro3-형질감염된 세포에 추가로 결합하는 개개의 IgG 능력을 측정하기 위하여, 5E5 형질감염되지 않은 및 Tyro3-형질감염된 세포를 Live-Dead NIR 염료(Life Technologies, #L10119) 및 PBS 중 1μg의 각각의 IgX에 30분 동안 4℃에서 노출시켰다. 세포를 PBS-세척하고 100μL의 PBS 중 20μL의 PE-접합된 마우스-항 인간 람다 경쇄 Ab(BD Pharmingen)와 함께 30분 동안 4℃에서 항온처리하였다. 세포를 세척하고 적어도 10,000개의 살아있는 세포의 PE 형광성을 ARIA III 유동 세포분석기(Beckton Dickinson)에 즉시 기록하였다(도 9의 중간 및 하부 패널). 과발현된 Tyro3에 결합하는 IgG 능력을 형질감염되지 않은 및 Tyro3-형질감염된 세포의 PE 발현 프로파일을 나타내는 오버레이 히스토그램(overlay histogram)으로 측정하였다. 오버레이 히스토그램 플롯은 Kaluza 소프트웨어(Beckman Coulter)를 사용하고 특징적인 크기 및 미립자측정법의 HEK 세포를 지닌 세포로 제한시켜 수득하였으며, HEK 세포 중에서 사멸하 세포는 배제하였다(나타내지 않음).
SEQUENCE LISTING <110> ELSALYS BIOTECH CENTRE NATIONAL DE LA RECHERCHE SCIENTIFIQUE INSTITUT CURIE <120> Anti-Tyro3 antibodies and uses thereof <130> B2010PC <160> 194 <170> KopatentIn 2.0 <210> 1 <211> 890 <212> PRT <213> Homo sapiens <220> <221> SIGNAL <222> (1)..(40) <220> <221> MISC_FEATURE <222> (41)..(128) <223> immunoglobulin-like domain Ig-1 <220> <221> MISC_FEATURE <222> (139)..(220) <223> immunoglobulin-like domain Ig-2 <220> <221> MISC_FEATURE <222> (227)..(320) <223> Fibronectin type III-like domain FNIII-1 <220> <221> MISC_FEATURE <222> (325)..(416) <223> Fibronectin type III-like domain FNIII-2 <220> <221> MISC_FEATURE <222> (518)..(790) <223> Tyrosine kinase domain <400> 1 Met Ala Leu Arg Arg Ser Met Gly Arg Pro Gly Leu Pro Pro Leu Pro 1 5 10 15 Leu Pro Pro Pro Pro Arg Leu Gly Leu Leu Leu Ala Ala Leu Ala Ser 20 25 30 Leu Leu Leu Pro Glu Ser Ala Ala Ala Gly Leu Lys Leu Met Gly Ala 35 40 45 Pro Val Lys Leu Thr Val Ser Gln Gly Gln Pro Val Lys Leu Asn Cys 50 55 60 Ser Val 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Pro Val Pro Pro Phe Thr Cys Leu Leu Arg Asp Leu 275 280 285 Val Pro Ala Thr Asn Tyr Ser Leu Arg Val Arg Cys Ala Asn Ala Leu 290 295 300 Gly Pro Ser Pro Tyr Ala Asp Trp Val Pro Phe Gln Thr Lys Gly Leu 305 310 315 320 Ala Pro Ala Ser Ala Pro Gln Asn Leu His Ala Ile Arg Thr Asp Ser 325 330 335 Gly Leu Ile Leu Glu Trp Glu Glu Val Ile Pro Glu Ala Pro Leu Glu 340 345 350 Gly Pro Leu Gly Pro Tyr Lys Leu Ser Trp Val Gln Asp Asn Gly Thr 355 360 365 Gln Asp Glu Leu Thr Val Glu Gly Thr Arg Ala Asn Leu Thr Gly Trp 370 375 380 Asp Pro Gln Lys Asp Leu Ile Val Arg Val Cys Val Ser Asn Ala Val 385 390 395 400 Gly Cys Gly Pro Trp Ser Gln Pro Leu Val Val Ser Ser His Asp Arg 405 410 415 Ala Gly Gln Gln Gly Pro Pro His Ser Arg Thr Ser Trp Val Pro Val 420 425 430 Val Leu Gly Val Leu Thr Ala Leu Val Thr Ala Ala Ala Leu Ala Leu 435 440 445 Ile Leu Leu Arg Lys Arg Arg Lys Glu Thr Arg Phe Gly Gln Ala Phe 450 455 460 Asp Ser Val Met Ala Arg Gly Glu Pro Ala Val His Phe Arg Ala Ala 465 470 475 480 Arg Ser Phe Asn Arg Glu Arg Pro Glu Arg Ile Glu Ala Thr Leu Asp 485 490 495 Ser Leu Gly Ile Ser Asp Glu Leu Lys Glu Lys Leu Glu Asp Val Leu 500 505 510 Ile Pro Glu Gln Gln Phe Thr Leu Gly Arg Met Leu Gly Lys Gly Glu 515 520 525 Phe Gly Ser Val Arg Glu Ala Gln Leu Lys Gln Glu Asp Gly Ser Phe 530 535 540 Val Lys Val Ala Val Lys Met Leu Lys Ala Asp Ile Ile Ala Ser Ser 545 550 555 560 Asp Ile Glu Glu Phe Leu Arg Glu Ala Ala Cys Met Lys Glu Phe Asp 565 570 575 His Pro His Val Ala Lys Leu Val Gly Val Ser Leu Arg Ser Arg Ala 580 585 590 Lys Gly Arg Leu Pro Ile Pro Met Val Ile Leu Pro Phe Met Lys His 595 600 605 Gly Asp Leu His Ala Phe Leu Leu Ala Ser Arg Ile Gly Glu Asn Pro 610 615 620 Phe Asn Leu Pro Leu Gln Thr Leu Ile Arg Phe Met Val Asp Ile Ala 625 630 635 640 Cys Gly Met Glu Tyr Leu Ser Ser Arg Asn Phe Ile His Arg Asp Leu 645 650 655 Ala Ala Arg Asn Cys Met Leu Ala Glu Asp Met Thr Val Cys Val Ala 660 665 670 Asp Phe Gly Leu Ser Arg Lys Ile Tyr Ser Gly Asp Tyr Tyr Arg Gln 675 680 685 Gly Cys Ala Ser Lys Leu Pro Val Lys Trp Leu Ala Leu Glu Ser Leu 690 695 700 Ala Asp Asn Leu Tyr Thr Val Gln Ser Asp Val Trp Ala Phe Gly Val 705 710 715 720 Thr Met Trp Glu Ile Met Thr Arg Gly Gln Thr Pro Tyr Ala Gly Ile 725 730 735 Glu Asn Ala Glu Ile Tyr Asn Tyr Leu Ile Gly Gly Asn Arg Leu Lys 740 745 750 Gln Pro Pro Glu Cys Met Glu Asp Val Tyr Asp Leu Met Tyr Gln Cys 755 760 765 Trp Ser Ala Asp Pro Lys Gln Arg Pro Ser Phe Thr Cys Leu Arg Met 770 775 780 Glu Leu Glu Asn Ile Leu Gly Gln Leu Ser Val Leu Ser Ala Ser Gln 785 790 795 800 Asp Pro Leu Tyr Ile Asn Ile Glu Arg Ala Glu Glu Pro Thr Ala Gly 805 810 815 Gly Ser Leu Glu Leu Pro Gly Arg Asp Gln Pro Tyr Ser Gly Ala Gly 820 825 830 Asp Gly Ser Gly Met Gly Ala Val Gly Gly Thr Pro Ser Asp Cys Arg 835 840 845 Tyr Ile Leu Thr Pro Gly Gly Leu Ala Glu Gln Pro Gly Gln Ala Glu 850 855 860 His Gln Pro Glu Ser Pro Leu Asn Glu Thr Gln Arg Leu Leu Leu Leu 865 870 875 880 Gln Gln Gly Leu Leu Pro His Ser Ser Cys 885 890 <210> 2 <211> 94 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 2 Ala Gly Leu Lys Leu Met Gly Ala Pro Val Lys Leu Thr Val Ser Gln 1 5 10 15 Gly Gln Pro Val Lys Leu Asn Cys Ser Val Glu Gly Met Glu Glu Pro 20 25 30 Asp Ile Gln Trp Val Lys Asp Gly Ala Val Val Gln Asn Leu Asp Gln 35 40 45 Leu Tyr Ile Pro Val Ser Glu Gln His Trp Ile Gly Phe Leu Ser Leu 50 55 60 Lys Ser Val Glu Arg Ser Asp Ala Gly Arg Tyr Trp Cys Gln Val Glu 65 70 75 80 Asp Gly Gly Glu Thr Glu Ile Ser Gln Pro Val Trp Leu Thr 85 90 <210> 3 <211> 182 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 3 Ala Gly Leu Lys Leu Met Gly Ala Pro Val Lys Leu Thr Val Ser Gln 1 5 10 15 Gly Gln Pro Val Lys Leu Asn Cys Ser Val Glu Gly Met Glu Glu Pro 20 25 30 Asp Ile Gln Trp Val Lys Asp Gly Ala Val Val Gln Asn Leu Asp Gln 35 40 45 Leu Tyr Ile Pro Val Ser Glu Gln His Trp Ile Gly Phe Leu Ser Leu 50 55 60 Lys Ser Val Glu Arg Ser Asp Ala Gly Arg Tyr Trp Cys Gln Val Glu 65 70 75 80 Asp Gly Gly Glu Thr Glu Ile Ser Gln Pro Val Trp Leu Thr Val Glu 85 90 95 Gly Val Pro Phe Phe Thr Val Glu Pro Lys Asp Leu Ala Val Pro Pro 100 105 110 Asn Ala Pro Phe Gln Leu Ser Cys Glu Ala Val Gly Pro Pro Glu Pro 115 120 125 Val Thr Ile Val Trp Trp Arg Gly Thr Thr Lys Ile Gly Gly Pro Ala 130 135 140 Pro Ser Pro Ser Val Leu Asn Val Thr Gly Val Thr Gln Ser Thr Met 145 150 155 160 Phe Ser Cys Glu Ala His Asn Leu Lys Gly Leu Ala Ser Ser Arg Thr 165 170 175 Ala Thr Val His Leu Gln 180 <210> 4 <211> 184 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 4 Val Pro Phe Phe Thr Val Glu Pro Lys Asp Leu Ala Val Pro Pro Asn 1 5 10 15 Ala Pro Phe Gln Leu Ser Cys Glu Ala Val Gly Pro Pro Glu Pro Val 20 25 30 Thr Ile Val Trp Trp Arg Gly Thr Thr Lys Ile Gly Gly Pro Ala Pro 35 40 45 Ser Pro Ser Val Leu Asn Val Thr Gly Val Thr Gln Ser Thr Met Phe 50 55 60 Ser Cys Glu Ala His Asn Leu Lys Gly Leu Ala Ser Ser Arg Thr Ala 65 70 75 80 Thr Val His Leu Gln Ala Leu Pro Ala Ala Pro Phe Asn Ile Thr Val 85 90 95 Thr Lys Leu Ser Ser Ser Asn Ala Ser Val Ala Trp Met Pro Gly Ala 100 105 110 Asp Gly Arg Ala Leu Leu Gln Ser Cys Thr Val Gln Val Thr Gln Ala 115 120 125 Pro 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Leu Pro Tyr Phe Leu Glu Glu 130 135 140 Pro Glu Asp Arg Thr Val Ala Ala Asn Thr Pro Phe Asn Leu Ser Cys 145 150 155 160 Gln Ala Gln Gly Pro Pro Glu Pro Val Asp Leu Leu Trp Leu Gln Asp 165 170 175 Ala Val Pro Leu Ala Thr Ala Pro Gly His Gly Pro Gln Arg Ser Leu 180 185 190 His Val Pro Gly Leu Asn Lys Thr Ser Ser Phe Ser Cys Glu Ala His 195 200 205 Asn Ala Lys Gly Val Thr Thr Ser Arg Thr Ala Thr Ile Thr Val Leu 210 215 220 Pro Gln Gln Pro Arg Asn Leu His Leu Val Ser Arg Gln Pro Thr Glu 225 230 235 240 Leu Glu Val Ala Trp Thr Pro Gly Leu Ser Gly Ile Tyr Pro Leu Thr 245 250 255 His Cys Thr Leu Gln Ala Val Leu Ser Asp Asp Gly Met Gly Ile Gln 260 265 270 Ala Gly Glu Pro Asp Pro Pro Glu Glu Pro Leu Thr Ser Gln Ala Ser 275 280 285 Val Pro Pro His Gln Leu Arg Leu Gly Ser Leu His Pro His Thr Pro 290 295 300 Tyr His Ile Arg Val Ala Cys Thr Ser Ser Gln Gly Pro Ser Ser Trp 305 310 315 320 Thr His Trp Leu Pro Val Glu Thr Pro Glu Gly Val Pro Leu Gly Pro 325 330 335 Pro Glu Asn Ile Ser Ala Thr Arg Asn Gly Ser Gln Ala Phe Val His 340 345 350 Trp Gln Glu Pro Arg Ala Pro Leu Gln Gly Thr Leu Leu Gly Tyr Arg 355 360 365 Leu Ala Tyr Gln Gly Gln Asp Thr Pro Glu Val Leu Met Asp Ile Gly 370 375 380 Leu Arg Gln Glu Val Thr Leu Glu Leu Gln Gly Asp Gly Ser Val Ser 385 390 395 400 Asn Leu Thr Val Cys Val Ala Ala Tyr Thr Ala Ala Gly Asp Gly Pro 405 410 415 Trp Ser Leu Pro Val Pro Leu Glu Ala Trp Arg Pro Gly Gln Ala Gln 420 425 430 Pro Val His Gln Leu Val Lys Glu Pro Ser Thr Pro Ala Phe Ser Trp 435 440 445 Pro Trp Trp Tyr Val Leu Leu Gly Ala Val Val Ala Ala Ala Cys Val 450 455 460 Leu Ile Leu Ala Leu Phe Leu Val His Arg Arg Lys Lys Glu Thr Arg 465 470 475 480 Tyr Gly Glu Val Phe Glu Pro Thr Val Glu Arg Gly Glu Leu Val Val 485 490 495 Arg Tyr Arg Val Arg Lys Ser Tyr Ser Arg Arg Thr Thr Glu Ala Thr 500 505 510 Leu Asn Ser Leu Gly Ile Ser Glu Glu Leu Lys Glu Lys Leu Arg Asp 515 520 525 Val Met Val Asp Arg His Lys Val Ala Leu Gly Lys Thr Leu Gly Glu 530 535 540 Gly Glu Phe Gly Ala Val Met Glu Gly Gln 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Thr 35 40 45 Pro Leu Leu Ser Leu Pro His Ala Ser Gly Tyr Gln Pro Ala Leu Met 50 55 60 Phe Ser Pro Thr Gln Pro Gly Arg Pro His Thr Gly Asn Val Ala Ile 65 70 75 80 Pro Gln Val Thr Ser Val Glu Ser Lys Pro Leu Pro Pro Leu Ala Phe 85 90 95 Lys His Thr Val Gly His Ile Ile Leu Ser Glu His Lys Gly Val Lys 100 105 110 Phe Asn Cys Ser Ile Ser Val Pro Asn Ile Tyr Gln Asp Thr Thr Ile 115 120 125 Ser Trp Trp Lys Asp Gly Lys Glu Leu Leu Gly Ala His His Ala Ile 130 135 140 Thr Gln Phe Tyr Pro Asp Asp Glu Val Thr Ala Ile Ile Ala Ser Phe 145 150 155 160 Ser Ile Thr Ser Val Gln Arg Ser Asp Asn Gly Ser Tyr Ile Cys Lys 165 170 175 Met Lys Ile Asn Asn Glu Glu Ile Val Ser Asp Pro Ile Tyr Ile Glu 180 185 190 Val Gln Gly Leu Pro His Phe Thr Lys Gln Pro Glu Ser Met Asn Val 195 200 205 Thr Arg Asn Thr Ala Phe Asn Leu Thr Cys Gln Ala Val Gly Pro Pro 210 215 220 Glu Pro Val Asn Ile Phe Trp Val Gln Asn Ser Ser Arg Val Asn Glu 225 230 235 240 Gln Pro Glu Lys Ser Pro Ser Val Leu Thr Val Pro Gly Leu Thr Glu 245 250 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Ser Glu Gly Leu Ala Gln Gly Ser Thr Leu Ala Pro Leu Asp Leu Asn 885 890 895 Ile Asp Pro Asp Ser Ile Ile Ala Ser Cys Thr Pro Arg Ala Ala Ile 900 905 910 Ser Val Val Thr Ala Glu Val His Asp Ser Lys Pro His Glu Gly Arg 915 920 925 Tyr Ile Leu Asn Gly Gly Ser Glu Glu Trp Glu Asp Leu Thr Ser Ala 930 935 940 Pro Ser Ala Ala Val Thr Ala Glu Lys Asn Ser Val Leu Pro Gly Glu 945 950 955 960 Arg Leu Val Arg Asn Gly Val Ser Trp Ser His Ser Ser Met Leu Pro 965 970 975 Leu Gly Ser Ser Leu Pro Asp Glu Leu Leu Phe Ala Asp Asp Ser Ser 980 985 990 Glu Gly Ser Glu Val Leu Met 995 <210> 8 <211> 880 <212> PRT <213> Mus musculus <220> <221> SIGNAL <222> (1)..(30) <220> <221> DOMAIN <222> (31)..(419) <223> Extracellular domain <400> 8 Met Ala Leu Arg Arg Ser Met Gly Trp Pro Gly Leu Arg Pro Leu Leu 1 5 10 15 Leu Ala Gly Leu Ala Ser Leu Leu Leu Pro Gly Ser Ala Ala Ala Gly 20 25 30 Leu Lys Leu Met Gly Ala Pro Val Lys Met Thr Val Ser Gln Gly Gln 35 40 45 Pro Val Lys Leu Asn Cys Ser Val Glu Gly Met Glu Asp Pro Asp Ile 50 55 60 His Trp Met Lys Asp Gly Thr Val Val Gln Asn Ala Ser Gln Val Ser 65 70 75 80 Ile Ser Ile Ser Glu His Ser Trp Ile Gly Leu Leu Ser Leu Lys Ser 85 90 95 Val Glu Arg Ser Asp Ala Gly Leu Tyr Trp Cys Gln Val Lys Asp Gly 100 105 110 Glu Glu Thr Lys Ile Ser Gln Ser Val Trp Leu Thr Val Glu Gly Val 115 120 125 Pro Phe Phe Thr Val Glu Pro Lys Asp Leu Ala Val Pro Pro Asn Ala 130 135 140 Pro Phe Gln Leu Ser Cys Glu Ala Val Gly Pro Pro Glu Pro Val Thr 145 150 155 160 Ile Tyr Trp Trp Arg Gly Leu Thr Lys Val Gly Gly Pro Ala Pro Ser 165 170 175 Pro Ser Val Leu Asn Val Thr Gly Val Thr Gln Arg Thr Glu Phe Ser 180 185 190 Cys Glu Ala Arg Asn Ile Lys Gly Leu Ala Thr Ser Arg Pro Ala Ile 195 200 205 Val Arg Leu Gln Ala Pro Pro Ala Ala Pro Phe Asn Thr Thr Val Thr 210 215 220 Thr Ile Ser Ser Tyr Asn Ala Ser Val Ala Trp Val Pro Gly Ala Asp 225 230 235 240 Gly Leu Ala Leu Leu His Ser Cys Thr Val Gln Val Ala His Ala Pro 245 250 255 Gly Glu Trp Glu Ala Leu Ala Val Val Val Pro Val Pro Pro Phe Thr 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SIGNAL <222> (1)..(20) <220> <221> DOMAIN <222> (21)..(409) <223> extracellular domain <400> 9 Met Glu Thr Asp Thr Leu Leu Leu Trp Val Leu Leu Leu Trp Val Pro 1 5 10 15 Gly Ser Thr Gly Ala Gly Leu Lys Leu Met Gly Ala Pro Val Lys Leu 20 25 30 Thr Val Ser Gln Gly Gln Pro Val Lys Leu Asn Cys Ser Val Glu Gly 35 40 45 Met Glu Glu Pro Asp Ile Gln Trp Val Lys Asp Gly Ala Val Val Gln 50 55 60 Asn Leu Asp Gln Leu Tyr Ile Pro Val Ser Glu Gln His Trp Ile Gly 65 70 75 80 Phe Leu Ser Leu Lys Ser Ala Glu Arg Ser Asp Ala Gly Arg Tyr Trp 85 90 95 Cys Gln Val Glu Asp Gly Gly Glu Thr Glu Ile Ser Gln Pro Val Trp 100 105 110 Leu Thr Val Glu Gly Val Pro Phe Phe Thr Val Glu Pro Lys Asp Leu 115 120 125 Ala Val Pro Pro Asn Ala Pro Phe Gln Leu Ser Cys Glu Ala Val Gly 130 135 140 Pro Pro Glu Pro Val Thr Ile Val Trp Trp Arg Gly Thr Thr Lys Ile 145 150 155 160 Gly Gly Pro Ala Pro Ser Pro Ser Val Leu Asn Val Thr Gly Val Thr 165 170 175 Gln Ser Thr Met Phe Ser Cys Glu Ala His Asn Leu Lys Gly Leu Ala 180 185 190 Ser Ser Arg Thr Ala Thr Val His Leu Gln Ala Leu Pro Ala Ala Pro 195 200 205 Phe Asn Val Thr Val Thr Lys Leu Ser Ser Ser Asn Ala Ser Val Ala 210 215 220 Trp Met Pro Gly Ala Asp Gly Arg Ala Leu Leu Gln Ser Cys Thr Val 225 230 235 240 Gln Val Thr Gln Ala Pro Gly Gly Trp Glu Val Leu Ala Val Val Val 245 250 255 Pro Val Pro Pro Phe Thr Cys Leu Leu Arg Asp Leu Val Pro Ala Thr 260 265 270 Asn Tyr Ser Leu Arg Val Arg Cys Ala Asn Ala Leu Gly Pro Ser Pro 275 280 285 Tyr Ala Asp Trp Val Pro Phe Gln Thr Lys Gly Leu Ala Pro Ala Ser 290 295 300 Ala Pro Gln Asn Leu His Ala Ile Arg Thr Asp Ser Gly Leu Ile Leu 305 310 315 320 Glu Trp Glu Glu Val Ile Pro Glu Gly Pro Leu Glu Gly Pro Leu Gly 325 330 335 Pro Tyr Lys Leu Ser Trp Val Gln Asp Asn Gly Thr Gln Asp Glu Leu 340 345 350 Thr Val Glu Gly Thr Arg Ala Asn Leu Thr Gly Trp Asp Pro Gln Lys 355 360 365 Asp Leu Ile Val Arg Val Cys Val Ser Asn Ala Val Gly Cys Gly Pro 370 375 380 Trp Ser Gln Pro Leu Val Val Ser Ser His Asp His Ala Gly Gln Gln 385 390 395 400 Gly 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Asp Glu Lys Arg Ala Ser 1 5 <210> 16 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-L2 of IGX2410 according to Contact definition <400> 16 Leu Val Ile Tyr Glu Asp Glu Lys Arg Ala 1 5 10 <210> 17 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-L3 of IGX2410 according to Chothia, AbM, Kabat or IMGT definition <400> 17 Tyr Ser Gln Glu Arg Asn Gly Asn Tyr Ala Val 1 5 10 <210> 18 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-L3 of IGX2410 according to Contact definition <400> 18 Tyr Ser Gln Glu Arg Asn Gly Asn Tyr Ala 1 5 10 <210> 19 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-H1 according to Chothia definition <400> 19 Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr 1 5 <210> 20 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-H1 according to AbM definition <400> 20 Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr Trp Ile Ser 1 5 10 <210> 21 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-H1 according to Kabat definition <400> 21 Asp Tyr Trp Ile Ser 1 5 <210> 22 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-H1 according to Contact definition <400> 22 Thr Asp Tyr Trp Ile Ser 1 5 <210> 23 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-H1 according to IMGT definition <400> 23 Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr Trp 1 5 <210> 24 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-H2 of IGX2410 according to Chothia definition <400> 24 Val Pro Arg Ala Ser Arg 1 5 <210> 25 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-H2 of IGX2410 according to AbM definition <400> 25 Gln Ile Val Pro Arg Ala Ser Arg Thr Asn 1 5 10 <210> 26 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-H2 of IGX2410 according to Kabat definition <400> 26 Gln Ile Val Pro Arg Ala Ser Arg Thr Asn Tyr Gly Pro Ser Phe Gln 1 5 10 15 Gly <210> 27 <211> 13 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-H2 of IGX2410 according to Contact definition <400> 27 Trp Met Gly Gln Ile Val Pro Arg Ala Ser Arg Thr Asn 1 5 10 <210> 28 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-H2 of IGX2410 according to IMGT definition <400> 28 Ile Val Pro Arg Ala Ser Arg Thr 1 5 <210> 29 <211> 16 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-H3 of IGX2410 according to Chothia, AbM or Kabat definition <400> 29 Pro Tyr Phe Gln Thr Ser Gly Gly Thr Ile Pro Glu Tyr Tyr Gln His 1 5 10 15 <210> 30 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-H3 of IGX2410 according to Contact definition <400> 30 Val Arg Pro Tyr Phe Gln Thr Ser Gly Gly Thr Ile Pro Glu Tyr Tyr 1 5 10 15 Gln <210> 31 <211> 18 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-H3 of IGX2410 according to IMGT definition <400> 31 Val Arg Pro Tyr Phe Gln Thr Ser Gly Gly Thr Ile Pro Glu Tyr Tyr 1 5 10 15 Gln His <210> 32 <211> 108 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Light chain variable region of IGX2414 <400> 32 Ser Tyr Glu Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Val Ser Pro Gly Gln 1 5 10 15 Thr Ala Arg Ile Thr Cys Ser Gly Asp Ala Leu Pro Lys Lys Tyr Ala 20 25 30 Tyr Trp Tyr Gln Gln Lys Ser Gly Gln Ala Pro Val Leu Val Ile Tyr 35 40 45 Glu Asp Trp Lys Arg Ala Ser Gly Ile Pro Glu Arg Phe Ser Gly Ser 50 55 60 Ser Ser Gly Thr Met Ala Thr Leu Thr Ile Ser Gly Ala Gln Val Glu 65 70 75 80 Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Tyr Ser Gln Glu Arg Lys Gly Asn Tyr 85 90 95 Phe Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu 100 105 <210> 33 <211> 125 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Heavy chain variable region of IGX2414 <400> 33 Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Asp Val Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Leu Thr Ile Ser Cys Gln Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr 20 25 30 Trp Ile Ser Trp Val Arg Gln Lys Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Gln Ile Asn Arg His Ala Ser Asn Thr Met Tyr Gly Pro Ser Phe 50 55 60 Gln Gly His Val Thr Ile Ser Ala Asp Arg Ser Thr Ala Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Trp Arg Ser Leu Glu Ala Ser Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys 85 90 95 Val Arg Ser Gly Gly Ala Thr Ser Gly Gly Thr Ile Pro Glu Tyr Tyr 100 105 110 Gln His Trp Gly Pro Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 125 <210> 34 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-L2 of IGX2414 according to Chothia, AbM or Kabat definition <400> 34 Glu Asp Trp Lys Arg Ala Ser 1 5 <210> 35 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-L2 of IGX2414 according to Contact definition <400> 35 Leu Val Ile Tyr Glu Asp Trp Lys Arg Ala 1 5 10 <210> 36 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-L3 of IGX2414 according to Chothia, AbM, Kabat or IMGT definition <400> 36 Tyr Ser Gln Glu Arg Lys Gly Asn Tyr Phe Val 1 5 10 <210> 37 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-L3 of IGX2414 according to Contact definition <400> 37 Tyr Ser Gln Glu Arg Lys Gly Asn Tyr Phe 1 5 10 <210> 38 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-H2 of IGX2414 according to Chothia definition <400> 38 Asn Arg His Ala Ser Asn 1 5 <210> 39 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-H2 of IGX2414 according to AbM definition <400> 39 Gln Ile Asn Arg His Ala Ser Asn Thr Met 1 5 10 <210> 40 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-H2 of IGX2414 according to Kabat definition <400> 40 Gln Ile Asn Arg His Ala Ser Asn Thr Met Tyr Gly Pro Ser Phe Gln 1 5 10 15 Gly <210> 41 <211> 13 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-H2 of IGX2414 according to Contact definition <400> 41 Trp Met Gly Gln Ile Asn Arg His Ala Ser Asn Thr Met 1 5 10 <210> 42 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-H2 of IGX2414 according to IMGT definition <400> 42 Ile Asn Arg His Ala Ser Asn Thr 1 5 <210> 43 <211> 16 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-H3 of IGX2414 according to Chothia, AbM or Kabat definition <400> 43 Ser Gly Gly Ala Thr Ser Gly Gly Thr Ile Pro Glu Tyr Tyr Gln His 1 5 10 15 <210> 44 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-H3 of IGX2414 according to Contact definition <400> 44 Val Arg Ser Gly Gly Ala Thr Ser Gly Gly Thr Ile Pro Glu Tyr Tyr 1 5 10 15 Gln <210> 45 <211> 18 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-H3 of IGX2414 according to IMGT definition <400> 45 Val Arg Ser Gly Gly Ala Thr Ser Gly Gly Thr Ile Pro Glu Tyr Tyr 1 5 10 15 Gln His <210> 46 <211> 108 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Light chain variable region of IGX2709 <400> 46 Ser Tyr Glu Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Val Ser Pro Gly Gln 1 5 10 15 Thr Ala Arg Ile Thr Cys Ser Gly Asp Ala Leu Pro Lys Lys Tyr Ala 20 25 30 Tyr Trp Tyr Gln Gln Lys Ser Gly Gln Ala Pro Val Leu Val Ile Tyr 35 40 45 Glu Asp Lys Lys Arg Val Ser Gly Ile Pro Glu Arg Phe Ser Gly Ser 50 55 60 Ser Ser Gly Thr Met Ala Thr Leu Thr Ile Ser Gly Ala Gln Val Glu 65 70 75 80 Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Tyr Ser Leu Ala Val Asp Gly Asn Tyr 85 90 95 Gly Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu 100 105 <210> 47 <211> 127 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Heavy chain variable region of IGX2709 <400> 47 Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Asp Val Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Leu Thr Ile Ser Cys Gln Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr 20 25 30 Trp Ile Ser Trp Val Arg Gln Lys Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Ala Ile Ser Arg Asn Gly Ser Thr Thr Tyr Tyr Gly Pro Ser Phe 50 55 60 Gln Gly His Val Thr Ile Ser Ala Asp Arg Ser Thr Ala Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Trp Arg Ser Leu Glu Ala Ser Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys 85 90 95 Val Arg Ser Gly Gly Leu Thr Ser Gly Gly Thr Ile Pro Glu Tyr Tyr 100 105 110 Gln His Trp Gly Pro Gly Thr Leu Val Pro Val Ser Ser Val Asp 115 120 125 <210> 48 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-L2 of IGX2709 according to Chothia, AbM or Kabat definition <400> 48 Glu Asp Lys Lys Arg Val Ser 1 5 <210> 49 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-L2 of IGX2709 according to Contact definition <400> 49 Leu Val Ile Tyr Glu Asp Lys Lys Arg Val 1 5 10 <210> 50 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-L3 of IGX2709 according to Chothia, AbM, Kabat or IMGT definition <400> 50 Tyr Ser Leu Ala Val Asp Gly Asn Tyr Gly Val 1 5 10 <210> 51 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-L3 of IGX2709 according to Contact definition <400> 51 Tyr Ser Leu Ala Val Asp Gly Asn Tyr Gly 1 5 10 <210> 52 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-H2 of IGX2709 according to Chothia definition <400> 52 Ser Arg Asn Gly Ser Thr 1 5 <210> 53 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-H2 of IGX2709 according to AbM definition <400> 53 Ala Ile Ser Arg Asn Gly Ser Thr Thr Tyr 1 5 10 <210> 54 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-H2 of IGX2709 according to Kabat definition <400> 54 Ala Ile Ser Arg Asn Gly Ser Thr Thr Tyr Tyr Gly Pro Ser Phe Gln 1 5 10 15 Gly <210> 55 <211> 13 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-H2 of IGX2709 according to Contact definition <400> 55 Trp Met Gly Ala Ile Ser Arg Asn Gly Ser Thr Thr Tyr 1 5 10 <210> 56 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-H2 of IGX2709 according to IMGT definition <400> 56 Ile Ser Arg Asn Gly Ser Thr Thr 1 5 <210> 57 <211> 16 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-H3 of IGX2709 according to Chothia, AbM or Kabat definition <400> 57 Ser Gly Gly Leu Thr Ser Gly Gly Thr Ile Pro Glu Tyr Tyr Gln His 1 5 10 15 <210> 58 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-H3 of IGX2709 according to Contact definition <400> 58 Val Arg Ser Gly Gly Leu Thr Ser Gly Gly Thr Ile Pro Glu Tyr Tyr 1 5 10 15 Gln <210> 59 <211> 18 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-H3 of IGX2709 according to IMGT definition <400> 59 Val Arg Ser Gly Gly Leu Thr Ser Gly Gly Thr Ile Pro Glu Tyr Tyr 1 5 10 15 Gln His <210> 60 <211> 108 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Light chain variable region of IGX2710 <400> 60 Ser Tyr Glu Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Val Ser Pro Gly Gln 1 5 10 15 Thr Ala Arg Ile Thr Cys Ser Gly Asp Ala Leu Pro Lys Lys Tyr Ala 20 25 30 Tyr Trp Tyr Gln Gln Lys Ser Gly Gln Ala Pro Val Leu Val Ile Tyr 35 40 45 Glu Asp Ser Lys Arg Pro Ser Gly Ile Pro Glu Arg Phe Ser Gly Ser 50 55 60 Ser Ser Gly Thr Met Ala Thr Leu Thr Ile Ser Gly Ala Gln Val Glu 65 70 75 80 Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Tyr Ser Gln Asn Pro Gln Gly Asn Tyr 85 90 95 Phe Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu 100 105 <210> 61 <211> 125 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Heavy chain variable region of IGX2710 <400> 61 Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Asp Val Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Leu Thr Ile Ser Cys Gln Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr 20 25 30 Trp Ile Ser Trp Val Arg Gln Lys Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Val Ile Asn Lys Tyr Ala Ser Trp Thr Arg Tyr Gly Pro Ser Phe 50 55 60 Gln Gly His Val Thr Ile Ser Ala Asp Arg Ser Thr Ala Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Trp Arg Ser Leu Glu Ala Ser Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys 85 90 95 Val Arg Ser Gly Gly Leu Thr Ser Gly Gly Thr Ile Pro Glu Tyr Tyr 100 105 110 Gln His Trp Gly Pro Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 125 <210> 62 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-L2 of IGX2710 according to Chothia, AbM or Kabat definition <400> 62 Glu Asp Ser Lys Arg Pro Ser 1 5 <210> 63 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-L2 of IGX2710 according to Contact definition <400> 63 Leu Val Ile Tyr Glu Asp Ser Lys Arg Pro 1 5 10 <210> 64 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-L3 of IGX2710 according to Chothia, AbM, Kabat or IMGT definition <400> 64 Tyr Ser Gln Asn Pro Gln Gly Asn Tyr Phe Val 1 5 10 <210> 65 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-L3 of IGX2710 according to Contact definition <400> 65 Tyr Ser Gln Asn Pro Gln Gly Asn Tyr Phe 1 5 10 <210> 66 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-H2 of IGX2710 according to Chothia definition <400> 66 Asn Lys Tyr Ala Ser Trp 1 5 <210> 67 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-H2 of IGX2710 according to AbM definition <400> 67 Val Ile Asn Lys Tyr Ala Ser Trp Thr Arg 1 5 10 <210> 68 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-H2 of IGX2710 according to Kabat definition <400> 68 Val Ile Asn Lys Tyr Ala Ser Trp Thr Arg Tyr Gly Pro Ser Phe Gln 1 5 10 15 Gly <210> 69 <211> 13 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-H2 of IGX2710 according to Contact definition <400> 69 Trp Met Gly Val Ile Asn Lys Tyr Ala Ser Trp Thr Arg 1 5 10 <210> 70 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-H2 of IGX2710 according to IMGT definition <400> 70 Ile Asn Lys Tyr Ala Ser Trp Thr 1 5 <210> 71 <211> 16 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-H3 of IGX2710 according to Chothia, AbM or Kabat definition <400> 71 Ser Gly Gly Leu Thr Ser Gly Gly Thr Ile Pro Glu Tyr Tyr Gln His 1 5 10 15 <210> 72 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-H3 of IGX2710 according to Contact definition <400> 72 Val Arg Ser Gly Gly Leu Thr Ser Gly Gly Thr Ile Pro Glu Tyr Tyr 1 5 10 15 Gln <210> 73 <211> 18 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-H3 of IGX2710 according to IMGT definition <400> 73 Val Arg Ser Gly Gly Leu Thr Ser Gly Gly Thr Ile Pro Glu Tyr Tyr 1 5 10 15 Gln His <210> 74 <211> 108 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Light chain variable region of IGX2717 <400> 74 Ser Tyr Glu Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Val Ser Pro Gly Gln 1 5 10 15 Thr Ala Arg Ile Thr Cys Ser Gly Asp Ala Leu Pro Lys Lys Tyr Ala 20 25 30 Tyr Trp Tyr Gln Gln Lys Ser Gly Gln Ala Pro Val Leu Val Ile Tyr 35 40 45 Glu Asp Asn Lys Arg Gly Ser Gly Ile Pro Glu Arg Phe Ser Gly Ser 50 55 60 Ser Ser Gly Thr Met Ala Thr Leu Thr Ile Ser Gly Ala Gln Val Glu 65 70 75 80 Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Tyr Ser Lys Ser Pro Glu Gly Asn Tyr 85 90 95 Met Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu 100 105 <210> 75 <211> 125 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Heavy chain variable region of IGX2717 <400> 75 Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Asp Val Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Leu Thr Ile Ser Cys Gln Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr 20 25 30 Trp Ile Ser Trp Val Arg Gln Lys Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Glu Ile Phe Leu Pro Pro Ser Thr Thr Val Tyr Gly Pro Ser Phe 50 55 60 Gln Gly His Val Thr Ile Ser Ala Asp Arg Ser Thr Ala Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Trp Arg Ser Leu Glu Ala Ser Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys 85 90 95 Val Arg Gln Thr Arg Leu Thr Ser Gly Gly Thr Ile Pro Glu Tyr Tyr 100 105 110 Gln His Trp Gly Pro Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 125 <210> 76 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-L2 of IGX2717 according to Chothia, AbM or Kabat definition <400> 76 Glu Asp Asn Lys Arg Gly Ser 1 5 <210> 77 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-L2 of IGX2717 according to Contact definition <400> 77 Leu Val Ile Tyr Glu Asp Asn Lys Arg Gly 1 5 10 <210> 78 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> sequence of CDR-L3 of IGX2717 according to Chothia, AbM, Kabat or IMGT definition <400> 78 Tyr Ser Lys Ser Pro Glu Gly Asn Tyr Met Val 1 5 10 <210> 79 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-L3 of IGX2717 according to Contact definition <400> 79 Tyr Ser Lys Ser Pro Glu Gly Asn Tyr Met 1 5 10 <210> 80 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> sequence of CDR-H2 of IGX2717 according to Chothia definition <400> 80 Phe Leu Pro Pro Ser Thr 1 5 <210> 81 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-H2 of IGX2717 according to AbM definition <400> 81 Glu Ile Phe Leu Pro Pro Ser Thr Thr Val 1 5 10 <210> 82 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-H2 of IGX2717 according to Kabat definition <400> 82 Glu Ile Phe Leu Pro Pro Ser Thr Thr Val Tyr Gly Pro Ser Phe Gln 1 5 10 15 Gly <210> 83 <211> 13 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-H2 of IGX2717 according to Contact definition <400> 83 Trp Met Gly Glu Ile Phe Leu Pro Pro Ser Thr Thr Val 1 5 10 <210> 84 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-H2 of IGX2717 according to IMGT definition <400> 84 Ile Phe Leu Pro Pro Ser Thr Thr 1 5 <210> 85 <211> 16 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-H3 of IGX2717 according to Chothia, AbM or Kabat definition <400> 85 Gln Thr Arg Leu Thr Ser Gly Gly Thr Ile Pro Glu Tyr Tyr Gln His 1 5 10 15 <210> 86 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-H3 of IGX2717 according to Contact definition <400> 86 Val Arg Gln Thr Arg Leu Thr Ser Gly Gly Thr Ile Pro Glu Tyr Tyr 1 5 10 15 Gln <210> 87 <211> 18 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-H3 of IGX2717 according to IMGT definition <400> 87 Val Arg Gln Thr Arg Leu Thr Ser Gly Gly Thr Ile Pro Glu Tyr Tyr 1 5 10 15 Gln His <210> 88 <211> 108 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Light chain variable region of IGX2411 <400> 88 Ser Tyr Glu Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Val Ser Pro Gly Gln 1 5 10 15 Thr Ala Arg Ile Thr Cys Ser Gly Asp Ala Leu Pro Lys Lys Tyr Ala 20 25 30 Tyr Trp Tyr Gln Gln Lys Ser Gly Gln Ala Pro Val Leu Val Ile Tyr 35 40 45 Glu Asp Ser Lys Arg Ser Ser Gly Ile Pro Glu Arg Phe Ser Gly Ser 50 55 60 Ser Ser Gly Thr Met Ala Thr Leu Thr Ile Ser Gly Ala Gln Val Glu 65 70 75 80 Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Tyr Ser Ala Asn Gln Arg Gly Asn Tyr 85 90 95 Met Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu 100 105 <210> 89 <211> 116 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Heavy chain variable region of IGX2411 <400> 89 Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Asp Val Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Leu Thr Ile Ser Cys Gln Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr 20 25 30 Trp Ile Ser Trp Val Arg Gln Lys Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Ser Ile Thr Arg Ser Ser Ser Arg Thr His Tyr Gly Pro Ser Phe 50 55 60 Gln Gly His Val Thr Ile Ser Ala Asp Arg Ser Thr Ala Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Trp Arg Ser Leu Glu Ala Ser Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys 85 90 95 Val Arg Gly Tyr Thr His Leu Arg Thr Trp Gly Pro Gly Thr Leu Val 100 105 110 Thr Val Ser Ser 115 <210> 90 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> sequence of CDR-L2 of IGX2411 according to Chothia, AbM or Kabat definition <400> 90 Glu Asp Ser Lys Arg Ser Ser 1 5 <210> 91 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> sequence of CDR-L2 of IGX2411 according to Contact definition <400> 91 Leu Val Ile Tyr Glu Asp Ser Lys Arg Ser 1 5 10 <210> 92 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> sequence of CDR-L3 of IGX2411 acording to Chothia, AbM, Kabat or IMGT definition <400> 92 Tyr Ser Ala Asn Gln Arg Gly Asn Tyr Met Val 1 5 10 <210> 93 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-L3 of IGX2411 according to Contact definition <400> 93 Tyr Ser Ala Asn Gln Arg Gly Asn Tyr Met 1 5 10 <210> 94 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> sequence of CDR-H2 of IGX2411 according to Chothia definition <400> 94 Thr Arg Ser Ser Ser Arg 1 5 <210> 95 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> sequence of CDR-H2 of IGX2411 according to AbM definition <400> 95 Ser Ile Thr Arg Ser Ser Ser Arg Thr His 1 5 10 <210> 96 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-H2 of IGX2411 according to Kabat definition <400> 96 Ser Ile Thr Arg Ser Ser Ser Arg Thr His Tyr Gly Pro Ser Phe Gln 1 5 10 15 Gly <210> 97 <211> 13 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-H2 of IGX2411 according to Contact definition <400> 97 Trp Met Gly Ser Ile Thr Arg Ser Ser Ser Arg Thr His 1 5 10 <210> 98 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> sequence of CDR-H2 of IGX2411 according to IMGT definition <400> 98 Ile Thr Arg Ser Ser Ser Arg Thr 1 5 <210> 99 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-H3 of IGX2411 according to Chothia, AbM or Kabat definition <400> 99 Gly Tyr Thr His Leu Arg Thr 1 5 <210> 100 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> sequence of CDR-H3 of IGX2411 according to Contact definition <400> 100 Val Arg Gly Tyr Thr His Leu Arg 1 5 <210> 101 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> sequence of CDR-H3 of IGX2411 according to IMGT definition <400> 101 Val Arg Gly Tyr Thr His Leu Arg Thr 1 5 <210> 102 <211> 108 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Light chain variable region of IGX2412 <400> 102 Ser Tyr Glu Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Val Ser Pro Gly Gln 1 5 10 15 Thr Ala Arg Ile Thr Cys Ser Gly Asp Ala Leu Pro Lys Lys Tyr Ala 20 25 30 Tyr Trp Tyr Gln Gln Lys Ser Gly Gln Ala Pro Val Leu Val Ile Tyr 35 40 45 Glu Asp Ala Lys Arg Val Ser Gly Ile Pro Glu Arg Phe Ser Gly Ser 50 55 60 Ser Ser Gly Thr Met Ala Thr Leu Thr Ile Ser Gly Ala Gln Val Glu 65 70 75 80 Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Tyr Ser Ala Ser Ala Asn Gly Asn Tyr 85 90 95 Arg Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu 100 105 <210> 103 <211> 125 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Heavy chain variable region of IGX2412 <400> 103 Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Asp Val Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Leu Thr Ile Ser Cys Gln Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr 20 25 30 Trp Ile Ser Trp Val Arg Gln Lys Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Arg Ile Arg Pro Leu Leu Ser His Thr Met Tyr Gly Pro Ser Phe 50 55 60 Gln Gly His Val Thr Ile Ser Ala Asp Arg Ser Thr Ala Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Trp Arg Ser Leu Glu Ala Ser Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys 85 90 95 Val Arg Ser Trp Leu Ala Thr Ser Gly Gly Thr Ile Pro Glu Tyr Tyr 100 105 110 Gln His Trp Gly Pro Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 125 <210> 104 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-L2 of IGX2412 according to Chothia, AbM or Kabat definition <400> 104 Glu Asp Ala Lys Arg Val Ser 1 5 <210> 105 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> sequence of CDR-L2 of IGX2412 according to Contact definition <400> 105 Leu Val Ile Tyr Glu Asp Ala Lys Arg Val 1 5 10 <210> 106 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> sequence of CDR-L3 of IGX2412 according to Chothia, AbM, Kabat or IMGT definition <400> 106 Tyr Ser Ala Ser Ala Asn Gly Asn Tyr Arg Val 1 5 10 <210> 107 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> sequence of CDR-L3 of IGX2412 according to Contact definition <400> 107 Tyr Ser Ala Ser Ala Asn Gly Asn Tyr Arg 1 5 10 <210> 108 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-H2 of IGX2412 according to Chothia definition <400> 108 Arg Pro Leu Leu Ser His 1 5 <210> 109 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> sequence of CDR-H2 of IGX2412 according to AbM definition <400> 109 Arg Ile Arg Pro Leu Leu Ser His Thr Met 1 5 10 <210> 110 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> sequence of CDR-H2 of IGX2412 according to Kabat definition <400> 110 Arg Ile Arg Pro Leu Leu Ser His Thr Met Tyr Gly Pro Ser Phe Gln 1 5 10 15 Gly <210> 111 <211> 13 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> sequence of CDR-H2 of IGX2412 according to Contact definition <400> 111 Trp Met Gly Arg Ile Arg Pro Leu Leu Ser His Thr Met 1 5 10 <210> 112 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> sequence of CDR-H2 of IGX2412 according to IMGT definition <400> 112 Ile Arg Pro Leu Leu Ser His Thr 1 5 <210> 113 <211> 16 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> sequence of CDR-H3 of IGX2412 according to Chothia, AbM or Kabat definition <400> 113 Ser Trp Leu Ala Thr Ser Gly Gly Thr Ile Pro Glu Tyr Tyr Gln His 1 5 10 15 <210> 114 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> sequence of CDR-H3 of IGX2412 according to Contact definition <400> 114 Val Arg Ser Trp Leu Ala Thr Ser Gly Gly Thr Ile Pro Glu Tyr Tyr 1 5 10 15 Gln <210> 115 <211> 18 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> sequence of CDR-H3 of IGX2412 according to IMGT definition <400> 115 Val Arg Ser Trp Leu Ala Thr Ser Gly Gly Thr Ile Pro Glu Tyr Tyr 1 5 10 15 Gln His <210> 116 <211> 108 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Light chain variable region of IGX2413 <400> 116 Ser Tyr Glu Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Val Ser Pro Gly Gln 1 5 10 15 Thr Ala Arg Ile Thr Cys Ser Gly Asp Ala Leu Pro Lys Lys Tyr Ala 20 25 30 Tyr Trp Tyr Gln Gln Lys Ser Gly Gln Ala Pro Val Leu Val Ile Tyr 35 40 45 Glu Asp Asp Lys Arg Leu Ser Gly Ile Pro Glu Arg Phe Ser Gly Ser 50 55 60 Ser Ser Gly Thr Met Ala Thr Leu Thr Ile Ser Gly Ala Gln Val Glu 65 70 75 80 Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Tyr Ser Thr Glu Ile Asn Gly Asn Tyr 85 90 95 Ala Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu 100 105 <210> 117 <211> 121 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Heavy chain variable region of IGX2413 <400> 117 Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Asp Val Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Leu Thr Ile Ser Cys Gln Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr 20 25 30 Trp Ile Ser Trp Val Arg Gln Lys Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Arg Ile His Thr Tyr Gln Ser Ser Thr Arg Tyr Gly Pro Ser Phe 50 55 60 Gln Gly His Val Thr Ile Ser Ala Asp Arg Ser Thr Ala Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Trp Arg Ser Leu Glu Ala Ser Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys 85 90 95 Val Arg His His Ser Thr Thr Thr Ala Asn Pro Tyr Ser Ser Trp Gly 100 105 110 Pro Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 118 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-L2 of IGX2413 according to Chothia, AbM or Kabat definition <400> 118 Glu Asp Asp Lys Arg Leu Ser 1 5 <210> 119 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-L2 of IGX2413 according to Contact definition <400> 119 Leu Val Ile Tyr Glu Asp Asp Lys Arg Leu 1 5 10 <210> 120 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-L3 of IGX2413 according to Chothia, AbM, Kabat or IMGT definition <400> 120 Tyr Ser Thr Glu Ile Asn Gly Asn Tyr Ala Val 1 5 10 <210> 121 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-L3 of IGX2413 according to Contact definition <400> 121 Tyr Ser Thr Glu Ile Asn Gly Asn Tyr Ala 1 5 10 <210> 122 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-H2 of IGX2413 according to Chothia definition <400> 122 His Thr Tyr Gln Ser Ser 1 5 <210> 123 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-H2 of IGX2413 according to AbM definition <400> 123 Arg Ile His Thr Tyr Gln Ser Ser Thr Arg 1 5 10 <210> 124 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-H2 of IGX2413 according to Kabat definition <400> 124 Arg Ile His Thr Tyr Gln Ser Ser Thr Arg Tyr Gly Pro Ser Phe Gln 1 5 10 15 Gly <210> 125 <211> 13 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-H2 of IGX2413 according to Contact definition <400> 125 Trp Met Gly Arg Ile His Thr Tyr Gln Ser Ser Thr Arg 1 5 10 <210> 126 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-H2 of IGX2413 according to IMGT definition <400> 126 Ile His Thr Tyr Gln Ser Ser Thr 1 5 <210> 127 <211> 12 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-H3 of IGX2413 according to Chothia, AbM or Kabat definition <400> 127 His His Ser Thr Thr Thr Ala Asn Pro Tyr Ser Ser 1 5 10 <210> 128 <211> 13 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-H3 of IGX2413 according to Contact definition <400> 128 Val Arg His His Ser Thr Thr Thr Ala Asn Pro Tyr Ser 1 5 10 <210> 129 <211> 14 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-H3 of IGX2413 according to IMGT definition <400> 129 Val Arg His His Ser Thr Thr Thr Ala Asn Pro Tyr Ser Ser 1 5 10 <210> 130 <211> 108 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Light chain variable region of IGX2415 <400> 130 Ser Tyr Glu Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Val Ser Pro Gly Gln 1 5 10 15 Thr Ala Arg Ile Thr Cys Ser Gly Asp Ala Leu Pro Lys Lys Tyr Ala 20 25 30 Tyr Trp Tyr Gln Gln Lys Ser Gly Gln Ala Pro Val Leu Val Ile Tyr 35 40 45 Glu Asp Lys Lys Arg Ile Ser Gly Ile Pro Glu Arg Phe Ser Gly Ser 50 55 60 Ser Ser Gly Thr Met Ala Thr Leu Thr Ile Ser Gly Ala Gln Val Glu 65 70 75 80 Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Tyr Ser Thr Ser Thr Gly Gly Asn Tyr 85 90 95 Met Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu 100 105 <210> 131 <211> 125 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Heavy chain variable region of IGX2415 <400> 131 Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Asp Val Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Leu Thr Ile Ser Cys Gln Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr 20 25 30 Trp Ile Ser Trp Val Arg Gln Lys Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Gln Ile Arg Gly Pro Ala Ser Ala Thr His Tyr Gly Pro Ser Phe 50 55 60 Gln Gly His Val Thr Ile Ser Ala Asp Arg Ser Thr Ala Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Trp Arg Ser Leu Glu Ala Ser Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys 85 90 95 Val Arg His Gln Gln Gln Thr Ser Gly Gly Thr Ile Pro Glu Tyr Tyr 100 105 110 Gln His Trp Gly Pro Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 125 <210> 132 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-L2 of IGX2415 according to Chothia, AbM or Kabat definition <400> 132 Glu Asp Lys Lys Arg Ile Ser 1 5 <210> 133 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-L2 of IGX2415 according to Contact definition <400> 133 Leu Val Ile Tyr Glu Asp Lys Lys Arg Ile 1 5 10 <210> 134 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-L3 of IGX2415 according to Chothia, AbM, Kabat or IMGT definition <400> 134 Tyr Ser Thr Ser Thr Gly Gly Asn Tyr Met Val 1 5 10 <210> 135 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-L3 of IGX2415 according to Contact definition <400> 135 Tyr Ser Thr Ser Thr Gly Gly Asn Tyr Met 1 5 10 <210> 136 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-H2 of IGX2415 according to Chothia definition <400> 136 Arg Gly Pro Ala Ser Ala 1 5 <210> 137 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-H2 of IGX2415 according to AbM definition <400> 137 Gln Ile Arg Gly Pro Ala Ser Ala Thr His 1 5 10 <210> 138 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-H2 of IGX2415 according to Kabat definition <400> 138 Gln Ile Arg Gly Pro Ala Ser Ala Thr His Tyr Gly Pro Ser Phe Gln 1 5 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Gln Ile Arg Gly Gln His Ser Ser Thr Leu Tyr Gly Pro Ser Phe 50 55 60 Gln Gly His Val Thr Ile Ser Ala Asp Arg Ser Thr Ala Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Trp Arg Ser Leu Glu Ala Ser Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys 85 90 95 Val Arg His Gly Ala Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ile Pro Glu Tyr Tyr 100 105 110 Gln His Trp Gly Pro Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 125 <210> 146 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-L2 of IGX2711 according to Chothia, AbM or Kabat definition <400> 146 Glu Asp Ala Lys Arg Ser Ser 1 5 <210> 147 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-L2 of IGX2711 according to Contact definition <400> 147 Leu Val Ile Tyr Glu Asp Ala Lys Arg Ser 1 5 10 <210> 148 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-L3 of IGX2711 according to Chothia, AbM, Kabat or IMGT definition <400> 148 Tyr Ser Leu Ser Asp Ser Gly Asn Tyr Phe Val 1 5 10 <210> 149 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-L3 of IGX2711 according to Contact definition <400> 149 Tyr Ser Leu Ser Asp Ser Gly Asn Tyr Phe 1 5 10 <210> 150 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-H2 of IGX2711 according to Chothia definition <400> 150 Arg Gly Gln His Ser Ser 1 5 <210> 151 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-H2 of IGX2711 according to AbM definition <400> 151 Gln Ile Arg Gly Gln His Ser Ser Thr Leu 1 5 10 <210> 152 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-H2 of IGX2711 according to Kabat definition <400> 152 Gln Ile Arg Gly Gln His Ser Ser Thr Leu Tyr Gly Pro Ser Phe Gln 1 5 10 15 Gly <210> 153 <211> 13 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-H2 of IGX2711 according to Contact definition <400> 153 Trp Met Gly Gln Ile Arg Gly Gln His Ser Ser Thr Leu 1 5 10 <210> 154 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-H2 of IGX2711 according to IMGT definition <400> 154 Ile Arg Gly Gln His Ser Ser Thr 1 5 <210> 155 <211> 16 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-H3 of IGX2711 according to Chothia, AbM or Kabat definition <400> 155 His Gly Ala Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ile Pro Glu Tyr Tyr Gln His 1 5 10 15 <210> 156 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-H3 of IGX2711 according to Contact definition <400> 156 Val Arg His Gly Ala Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ile Pro Glu Tyr Tyr 1 5 10 15 Gln <210> 157 <211> 18 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-H3 of IGX2711 according to IMGT definition <400> 157 Val Arg His Gly Ala Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ile Pro Glu Tyr Tyr 1 5 10 15 Gln His <210> 158 <211> 108 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Light chain variable region of IGX2713 <400> 158 Ser Tyr Glu Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Val Ser Pro Gly Gln 1 5 10 15 Thr Ala Arg Ile Thr Cys Ser Gly Asp Ala Leu Pro Lys Lys Tyr Ala 20 25 30 Tyr Trp Tyr Gln 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Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 125 <210> 160 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-L2 of IGX2713 according to Chothia, AbM or Kabat definition <400> 160 Glu Asp His Lys Arg Ala Ser 1 5 <210> 161 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-L2 of IGX2713 according to Contact definition <400> 161 Leu Val Ile Tyr Glu Asp His Lys Arg Ala 1 5 10 <210> 162 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-L3 of IGX2713 according to Chothia, AbM, Kabat or IMGT definition <400> 162 Tyr Ser Ile Ser Pro Ala Gly Asn Tyr Gly Val 1 5 10 <210> 163 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-L3 of IGX2713 according to Contact definition <400> 163 Tyr Ser Ile Ser Pro Ala Gly Asn Tyr Gly 1 5 10 <210> 164 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-H2 of IGX2713 according to Chothia definition <400> 164 Ser Arg His Gly Ser Gln 1 5 <210> 165 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-H2 of IGX2713 according to AbM definition <400> 165 Arg Ile Ser Arg His Gly Ser Gln Thr Tyr 1 5 10 <210> 166 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-H2 of IGX2713 according to Kabat definition <400> 166 Arg Ile Ser Arg His Gly Ser Gln Thr Tyr Tyr Gly Pro Ser Phe Gln 1 5 10 15 Gly <210> 167 <211> 13 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-H2 of IGX2713 according to Contact definition <400> 167 Trp Met Gly Arg Ile Ser Arg His Gly Ser Gln Thr Tyr 1 5 10 <210> 168 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-H2 of IGX2713 according to IMGT definition <400> 168 Ile Ser Arg His Gly Ser Gln Thr 1 5 <210> 169 <211> 16 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-H3 of IGX2713 according to Chothia, AbM or Kabat definition <400> 169 Ala Gly Gly Gln Thr Ser Gly Gly Thr Ile Pro Glu Tyr Tyr Gln His 1 5 10 15 <210> 170 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-H3 of IGX2713 according to Contact definition <400> 170 Val Arg Ala Gly Gly Gln Thr Ser Gly Gly Thr Ile Pro Glu Tyr Tyr 1 5 10 15 Gln <210> 171 <211> 18 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-H3 of IGX2713 according to IMGT definition <400> 171 Val Arg Ala Gly Gly Gln Thr Ser Gly Gly Thr Ile Pro Glu Tyr Tyr 1 5 10 15 Gln His <210> 172 <211> 108 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Light chain variable region of IGX2718 <400> 172 Ser Tyr Glu Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Val Ser Pro Gly Gln 1 5 10 15 Thr Ala Arg Ile Thr Cys Ser Gly Asp Ala Leu Pro Lys Lys Tyr Ala 20 25 30 Tyr Trp Tyr Gln Gln Lys Ser Gly Gln Ala Pro Val Leu Val Ile Tyr 35 40 45 Glu Asp Thr Lys Arg His Ser Gly Ile Pro Glu Arg Phe Ser Gly Ser 50 55 60 Ser Ser Gly Thr Met Ala Thr Leu Thr Ile Ser Gly Ala Gln Val Glu 65 70 75 80 Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Tyr Ser Ala Glu His Arg Gly Asn Tyr 85 90 95 Ala Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu 100 105 <210> 173 <211> 121 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Heavy chain variable region of IGX2718 <400> 173 Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Asp Val Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Leu Thr Ile Ser Cys Gln Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr 20 25 30 Trp Ile Ser Trp Val Arg Gln Lys Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly His Ile Asn Pro Met Arg Ser Thr Thr Thr Tyr Gly Pro Ser Phe 50 55 60 Gln Gly His Val Thr Ile Ser Ala Asp Arg Ser Thr Ala Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Trp His Ser Leu Glu Ala Ser Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys 85 90 95 Val Arg Asn Asp Asn His Asp Asp Tyr Thr Tyr Thr Asp Asp Trp Gly 100 105 110 Pro Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 174 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-L2 of IGX2718 according to Chothia, AbM or Kabat definition <400> 174 Glu Asp Thr Lys Arg His Ser 1 5 <210> 175 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-L2 of IGX2718 according to Contact definition <400> 175 Leu Val Ile Tyr Glu Asp Thr Lys Arg His 1 5 10 <210> 176 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-L3 of IGX2718 according to Chothia, AbM, Kabat or IMGT definition <400> 176 Tyr Ser Ala Glu His Arg Gly Asn Tyr Ala Val 1 5 10 <210> 177 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-L3 of IGX2718 according to Contact definition <400> 177 Tyr Ser Ala Glu His Arg Gly Asn Tyr Ala 1 5 10 <210> 178 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-H2 of IGX2718 according to Chothia definition <400> 178 Asn Pro Met Arg Ser Thr 1 5 <210> 179 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-H2 of IGX2718 according to AbM definition <400> 179 His Ile Asn Pro Met Arg Ser Thr Thr Thr 1 5 10 <210> 180 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-H2 of IGX2718 according to Kabat definition <400> 180 His Ile Asn Pro Met Arg Ser Thr Thr Thr Tyr Gly Pro Ser Phe Gln 1 5 10 15 Gly <210> 181 <211> 13 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-H2 of IGX2718 according to Contact definition <400> 181 Trp Met Gly His Ile Asn Pro Met Arg Ser Thr Thr Thr 1 5 10 <210> 182 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-H2 of IGX2718 according to IMGT definition <400> 182 Ile Asn Pro Met Arg Ser Thr Thr 1 5 <210> 183 <211> 12 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-H3 of IGX2718 according to Chothia, AbM or Kabat definition <400> 183 Asn Asp Asn His Asp Asp Tyr Thr Tyr Thr Asp Asp 1 5 10 <210> 184 <211> 13 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-H3 of IGX2718 according to Contact definition <400> 184 Val Arg Asn Asp Asn His Asp Asp Tyr Thr Tyr Thr Asp 1 5 10 <210> 185 <211> 14 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Sequence of CDR-H3 of IGX2718 according to IMGT definition <400> 185 Val Arg Asn Asp Asn His Asp Asp Tyr Thr Tyr Thr Asp Asp 1 5 10 <210> 186 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Consensus sequence of CDR-L2 <220> <221> MISC_FEATURE <222> (3)..(3) <223> X is E, W, K, S, N, A, D, H or T <220> <221> MISC_FEATURE <222> (5)..(5) <223> X is A, V, P, G, S, V, L, I or H <400> 186 Glu Asp Xaa Arg Xaa 1 5 <210> 187 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Consensus sequence of CDR-L3 <220> <221> MISC_FEATURE <222> (3)..(3) <223> X is Q, L, K, A, T, L or I <220> <221> MISC_FEATURE <222> (4)..(4) <223> X is E, A, N or S <220> <221> MISC_FEATURE <222> (5)..(5) <223> X is R, V, P, Q, A, I, T, D or H <220> <221> MISC_FEATURE <222> (6)..(6) <223> X is N, K, D, Q, E, R, G, S or A <220> <221> MISC_FEATURE <222> (10)..(10) <223> X is A, F, G, M or R <400> 187 Tyr Ser Xaa Xaa Xaa Xaa Gly Asn Tyr Xaa Val 1 5 10 <210> 188 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Consensus sequence of CDR-H2 <220> <221> MISC_FEATURE <222> (1)..(1) <223> X is Q, A, V, E, S, R or H <220> <221> MISC_FEATURE <222> (3)..(3) <223> X is V, N, S, F, T, R or H <220> <221> MISC_FEATURE <222> (4)..(4) <223> X is P, R, K, L, T or G <220> <221> MISC_FEATURE <222> (5)..(5) <223> X is R, H, N, Y, P, S, L, Q or M <220> <221> MISC_FEATURE <222> (6)..(6) <223> X is A, G, P, S, L, Q H or R <220> <221> MISC_FEATURE <222> (8)..(8) <223> X is R, N, T, W, H, S, A or Q <220> <221> MISC_FEATURE <222> (10)..(10) <223> X is N, M, Y, R, V, H, L or T <400> 188 Xaa Ile Xaa Xaa Xaa Xaa Ser Xaa Thr Xaa Tyr Gly Pro Ser Phe Gln 1 5 10 15 Gly <210> 189 <211> 16 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Consensus sequence of CDR-H3 <220> <221> MISC_FEATURE <222> (1)..(1) <223> X is P, S, Q, H or A <220> <221> MISC_FEATURE <222> (2)..(2) <223> X is Y, G, T, W or Q <220> <221> MISC_FEATURE <222> (3)..(3) <223> X is F, G, R, L, Q or A <220> <221> MISC_FEATURE <222> (4)..(4) <223> X is Q, A, L or S <400> 189 Xaa Xaa Xaa Xaa Thr Ser Gly Gly Thr Ile Pro Glu Tyr Tyr Gln His 1 5 10 15 <210> 190 <211> 330 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 190 Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys 1 5 10 15 Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr 20 25 30 Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser 35 40 45 Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser 50 55 60 Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr 65 70 75 80 Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys 85 90 95 Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys 100 105 110 Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro 115 120 125 Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys 130 135 140 Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp 145 150 155 160 Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu 165 170 175 Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu 180 185 190 His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn 195 200 205 Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly 210 215 220 Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu 225 230 235 240 Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr 245 250 255 Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn 260 265 270 Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe 275 280 285 Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn 290 295 300 Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr 305 310 315 320 Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 325 330 <210> 191 <211> 106 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 191 Gly Gln Pro Lys Ala Ala Pro Ser Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser 1 5 10 15 Glu Glu Leu Gln Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp 20 25 30 Phe Tyr Pro Gly Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Ser Ser Pro 35 40 45 Val Lys Ala Gly Val Glu Thr Thr Thr Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn 50 55 60 Lys Tyr Ala Ala Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys 65 70 75 80 Ser His Arg Ser Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val 85 90 95 Glu Lys Thr Val Ala Pro Thr Glu Cys Ser 100 105 <210> 192 <211> 30 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 192 Asp Trp Val Pro Phe Gln Thr Lys Gly Leu Ala Pro Ala Ser Ala Pro 1 5 10 15 Gln Asn Leu His Ala Ile Arg Thr Asp Ser Gly Leu Ile Leu 20 25 30 <210> 193 <211> 20 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> signal peptide <400> 193 Met Glu Thr Asp Thr Leu Leu Leu Trp Val Leu Leu Leu Trp Val Pro 1 5 10 15 Gly Ser Thr Gly 20 <210> 194 <211> 26 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> C-terminal Tag comprising a thrombine cleavage site followed by an octa-histidine (8xHis)-tag coupled to a streptavidin tag <400> 194 Leu Val Pro Arg Gly Ser Ser Ala His His His His His His His His 1 5 10 15 Ser Ala Trp Ser His Pro Gln Phe Glu Lys 20 25

Claims (15)

  1. 인간 Tyro3 수용체의 면역글로불린-유사 도메인 Ig-1에 결합하고, 인간 Axl 및 Mer 수용체에 결합하지 않으며, 인간 Tyro3 수용체에 대한 인간 Gas6의 결합을 감소시키거나 억제시키는, 분리된 인간 또는 인간화된 항체.
  2. 청구항 1에 있어서,
    서열 번호: 10의 경쇄 가변 영역의 CDR-L1으로 이루어지거나 또는 필수적으로 이루어진 CDR-L1을 포함하고/하거나, 서열 번호: 11의 중쇄 가면 영역의 CDR-H1으로 이루어지거나 또는 필수적으로 이루어진 CDR-H1을 포함하는, 항체.
  3. 청구항 1 또는 청구항 2에 있어서,
    인간 Tyro3의 면역글로불린-유사 도메인 Ig-2에 추가로 결합하는, 항체.
  4. 청구항 1 내지 청구항 3 중의 어느 한 항에 있어서,
    하기를 포함하는, 항체:
    서열 번호: 10의 경쇄 가변 영역의 CDR-L1으로 이루어지거나 또는 필수적으로 이루어진 CDR-L1, 및 서열 번호: 88, 102, 116, 130, 144 또는 158의 경쇄 가변 영역의 CDR-L2 및 CDR-L3으로 이루어지거나 또는 필수적으로 이루어진 CDR-L2 및 CDR-L3를 포함하는 경쇄, 및
    서열 번호: 11의 중쇄 가변 영역의 CDR-H1으로 이루어지거나 또는 필수적으로 이루어진 CDR-H1, 및 서열 번호: 89, 103, 117, 131, 145 또는 159의 중쇄 가변 영역의 CDR-H2 및 CDR-H3으로 이루어지거나 또는 필수적으로 이루어진 CDR-H2 및 CDR-H3을 포함하는 중쇄.
  5. 청구항 1 또는 청구항 2에 있어서,
    인간 Tyro3의 면역글로불린-유사 도메인 Ig-2에는 결합하지 않는, 항체.
  6. 청구항 1, 청구항 2 및 청구항 5 중의 어느 한 항에 있어서,
    하기를 포함하는, 항체:
    서열 번호: 10의 경쇄 가변 영역의 CDR-L1으로 이루어지거나 또는 필수적으로 이루어진 CDR-L1, 및 서열 번호: 10, 32, 46, 60 또는 74의 경쇄 가변 영역의 CDR-L2 및 CDR-L3으로 이루어지거나 또는 필수적으로 이루어진 CDR-L2 및 CDR-L3을 포함하는 경쇄, 및
    서열 번호: 11의 중쇄 가변 영역의 CDR-H1으로 이루어지거나 또는 필수적으로 이루어진 CDR-H1, 및 서열 번호: 11, 33, 47, 61 또는 75의 중쇄 가변 영역의CDR-H2 및 CDR-H3으로 이루어지거나 또는 필수적으로 이루어진 CDR-H2 및 CDR-H3을 포함하는 중쇄.
  7. 청구항 1 또는 청구항 2에 있어서,
    서열 번호: 10의 경쇄 가변 영역의 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3으로 이루어지거나 또는 필수적으로 이루어진, CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3를 포함하는 경쇄, 및 서열 번호: 11의 중쇄 가변 영역의 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3으로 이루어지거나 또는 필수적으로 이루어진 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3를 포함하는 중쇄를 포함하거나, 또는
    서열 번호: 32의 경쇄 가변 영역의 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3으로 이루어지거나 또는 필수적으로 이루어진 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3을 포함하는 경쇄, 및 서열 번호: 33의 중쇄 가변 영역의 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3으로 이루어지거나 또는 필수적으로 이루어진, CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3을 포함하는 중쇄를 포함하거나, 또는
    서열 번호: 46의 경쇄 가변 영역의 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3으로 이루어지거나 또는 필수적으로 이루어진 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3을 포함하는 경쇄, 및 서열 번호: 47의 중쇄 가변 영역의 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3으로 이루어지거나, 또는 필수적으로 이루어진 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3을 포함하는 중쇄를 포함하거나, 또는
    서열 번호: 60의 경쇄 가변 영역의 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3으로 이루어지거나 또는 필수적으로 이루어진 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3를 포함하는 경쇄, 및 서열 번호: 61의 중쇄 가변 영역의 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3으로 이루어지거나, 또는 필수적으로 이루어진 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3을 포함하는 중쇄를 포함하거나, 또는
    서열 번호: 74의 경쇄 가변 영역의 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3으로 이루어지거나 또는 필수적으로 이루어진 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3을 포함하는 경쇄, 및 서열 번호: 75의 중쇄 가변 영역의 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3으로 이루어지거나, 또는 필수적으로 이루어진 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3을 포함하는 중쇄를 포함하거나, 또는
    서열 번호: 88의 경쇄 가변 영역의 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3으로 이루어지거나 또는 필수적으로 이루어진 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3을 포함하는 경쇄, 및 서열 번호: 89의 중쇄 가변 영역의 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3으로 이루어지거나 또는 필수적으로 이루어진 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3을 포함하는 중쇄를 포함하거나, 또는
    서열 번호: 102의 경쇄 가변 영역의 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3으로 이루어지거나 또는 필수적으로 이루어진 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3을 포함하는 경쇄, 및 서열 번호: 103의 중쇄 가변 영역의 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3으로 이루어지거나 또는 필수적으로 이루어진 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3을 포함하는 중쇄를 포함하거나, 또는
    서열 번호: 116의 경쇄 가변 영역의 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3으로 이루어지거나 또는 필수적으로 이루어진 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3을 포함하는 경쇄, 및 서열 번호: 117의 중쇄 가변 영역의 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3으로 이루어지거나 또는 필수적으로 이루어진 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3을 포함하는 중쇄를 포함하거나, 또는
    서열 번호: 130의 경쇄 가변 영역의 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3으로 이루어지거나 또는 필수적으로 이루어진 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3을 포함하는 경쇄, 및 서열 번호; 131의 중쇄 가변 영역의 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3으로 이루어지거나 또는 필수적으로 이루어진 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3을 포함하는 중쇄를 포함하거나, 또는
    서열 번호: 144의 경쇄 가변 영역의 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3으로 이루어지거나 또는 필수적으로 이루어진 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3을 포함하는 경쇄, 및 서열 번호: 145의 중쇄 가변 영역의 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3으로 이루어지거나, 또는 필수적으로 이루어진 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3을 포함하는 중쇄를 포함하거나, 또는
    서열 번호: 158의 경쇄 가변 영역의 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3으로 이루어지거나 또는 필수적으로 이루어진 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3을 포함하는 경쇄, 및 서열 번호: 159의 중쇄 가변 영역의 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3으로 이루어지거나 또는 필수적으로 이루어진 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3을 포함하는 중쇄를 포함하는, 항체.
  8. 청구항 1 내지 청구항 6 중의 어느 한 항에 있어서,
    항체가, Tyro3 수용체의 억제제(inhibitor)인, 바람직하게는 Tyro3 리간드와 Tyro3의 세포외 도메인의 결합을 감소시키거나 차단함에 의한, 및/또는 Tyro3 매개된 시그날 형질도입을 감소시키거나 차단함에 의한, 및/또는 Tyro3 포스포릴화(phosphorylation)를 감소시키거나 차단함에 의한, 및/또는 Tyro3 이량체화(dimerization)를 감소시키거나 차단함에 의한, Tyro3 수용체의 억제제(inhibitor)인, 항체.
  9. 청구항 1 내지 청구항 7 중의 어느 한 항에 있어서,
    IgG1, IgG2, IgG3 또는 IgG4 항체, 바람직하게는 IgG1 항체인, 항체.
  10. (a) 청구항 1 내지 청구항 9 중의 어느 한 항에 따른 항체를 암호화하는 핵산 서열, 및
    (b) (a)의 서열들 중 어느 것에 대해 상보성인 핵산,
    으로 이루어진 그룹으로부터 선택되는, 분리된 핵산 분자.
  11. 청구항 10에 따른 핵산을 포함하는 벡터.
  12. 청구항 10에 따른 핵산 또는 청구항 11에 따른 벡터를 포함하는 숙주 세포.
  13. 청구항 1 내지 청구항 9 중의 어느 한 항에 따른 항체의 생산 방법으로,
    청구항 12에 따른 세포를 항체의 발현에 적합한 조건하에서 배양하는 단계, 및 임의로 상기 항체를 회수하는 단계를 포함하는, 항체의 생산 방법.
  14. 하기를 포함하는, 약제학적 조성물:
    청구항 1 내지 청구항 9 중의 어느 한 항에 따른 항체, 청구항 10에 따른 핵산 분자, 청구항 11에 따른 벡터, 또는 청구항 12에 따른 세포, 및
    약제학적으로 허용되는 담체 또는 부형제.
  15. 과증식성 질환(hyperproliferative disease) 또는 감염성 질환(infectious disease)의 진단, 예방 또는 치료시 사용하기 위한, 청구항 1 내지 청구항 9 중의 어느 한 항에 따른 항체, 또는 청구항 14에 따른 약제학적 조성물.
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Families Citing this family (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2020047462A2 (en) 2018-08-30 2020-03-05 HCW Biologics, Inc. Methods of treating aging-related disorders
EP3843788A1 (en) 2018-08-30 2021-07-07 HCW Biologics, Inc. Single-chain chimeric polypeptides and uses thereof
CN112996805A (zh) 2018-08-30 2021-06-18 Hcw生物科技公司 多链嵌合多肽和其用途
AU2020294797A1 (en) 2019-06-21 2021-12-23 HCW Biologics, Inc. Multi-chain chimeric polypeptides and uses thereof
CA3169231A1 (en) 2020-02-11 2021-08-19 HCW Biologics, Inc. Methods of treating age-related and inflammatory diseases
AU2021220196A1 (en) 2020-02-11 2022-08-04 HCW Biologics, Inc. Methods of activating regulatory T cells
AU2021219720A1 (en) 2020-02-11 2022-08-04 HCW Biologics, Inc. Chromatography resin and uses thereof
CA3181417A1 (en) 2020-04-29 2021-11-04 HCW Biologics, Inc. Anti-cd26 proteins and uses thereof
CA3184756A1 (en) 2020-06-01 2021-12-09 HCW Biologics, Inc. Methods of treating aging-related disorders
WO2021247003A1 (en) 2020-06-01 2021-12-09 HCW Biologics, Inc. Methods of treating aging-related disorders
WO2023168363A1 (en) 2022-03-02 2023-09-07 HCW Biologics, Inc. Method of treating pancreatic cancer

Family Cites Families (20)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4676980A (en) 1985-09-23 1987-06-30 The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services Target specific cross-linked heteroantibodies
US5959177A (en) 1989-10-27 1999-09-28 The Scripps Research Institute Transgenic plants expressing assembled secretory antibodies
US6075181A (en) 1990-01-12 2000-06-13 Abgenix, Inc. Human antibodies derived from immunized xenomice
US6150584A (en) 1990-01-12 2000-11-21 Abgenix, Inc. Human antibodies derived from immunized xenomice
EP0604580A1 (en) 1991-09-19 1994-07-06 Genentech, Inc. EXPRESSION IN E. COLI OF ANTIBODY FRAGMENTS HAVING AT LEAST A CYSTEINE PRESENT AS A FREE THIOL, USE FOR THE PRODUCTION OF BIFUNCTIONAL F(ab') 2? ANTIBODIES
WO1993008829A1 (en) 1991-11-04 1993-05-13 The Regents Of The University Of California Compositions that mediate killing of hiv-infected cells
US5789199A (en) 1994-11-03 1998-08-04 Genentech, Inc. Process for bacterial production of polypeptides
US5840523A (en) 1995-03-01 1998-11-24 Genetech, Inc. Methods and compositions for secretion of heterologous polypeptides
US5731168A (en) 1995-03-01 1998-03-24 Genentech, Inc. Method for making heteromultimeric polypeptides
US6040498A (en) 1998-08-11 2000-03-21 North Caroline State University Genetically engineered duckweed
WO2000024758A1 (en) * 1998-10-26 2000-05-04 Ludwig Institute For Cancer Research ISOLATED NUCLEIC ACID MOLECULES WHICH ENCODE T CELL INDUCIBLE FACTORS (TIFs), THE PROTEINS ENCODED, AND USES THEREOF
US7125978B1 (en) 1999-10-04 2006-10-24 Medicago Inc. Promoter for regulating expression of foreign genes
KR100797667B1 (ko) 1999-10-04 2008-01-23 메디카고 인코포레이티드 외래 유전자의 전사를 조절하는 방법
LT2857516T (lt) 2000-04-11 2017-09-11 Genentech, Inc. Multivalentiniai antikūnai ir jų panaudojimas
NZ580115A (en) 2004-09-23 2010-10-29 Genentech Inc Cysteine engineered antibody light chains and conjugates
WO2006104978A2 (en) * 2005-03-25 2006-10-05 Curagen Corporation Antibodies against the tenascin major antigens
ES2774337T3 (es) 2008-01-07 2020-07-20 Amgen Inc Método para fabricación de moléculas heterodímeras Fc de anticuerpos utilizando efectos de conducción electrostática
EP2165710A1 (en) 2008-09-19 2010-03-24 Institut Curie Tyrosine kinase receptor Tyro3 as a therapeutic target in the treatment of a bladder tumor
NZ628923A (en) * 2009-11-24 2016-02-26 Medimmune Ltd Targeted binding agents against b7-h1
CN103080136B (zh) * 2010-06-18 2015-08-12 霍夫曼-拉罗奇有限公司 抗Axl抗体及使用方法

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