JP2022512401A - ハーボキシジエンスプライシング調節薬抗体－薬物コンジュゲート及びその使用方法 - Google Patents
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Abstract
ヒト腫瘍学標的に結合するリンカー－薬物化合物及び抗体－薬物コンジュゲートが開示される。このリンカー－薬物化合物及び抗体－薬物コンジュゲートはハーボキシジエンスプライシング薬物部分を含む。本開示は更に、本明細書に提供される抗体－薬物コンジュゲートを投与することによる新生物障害の治療における使用のための方法及び組成物に関する。【選択図】なし
Description
本開示は、２０１８年１２月１３日に出願された米国仮特許出願第６２／７７９，４００号明細書；２０１８年１２月１３日に出願された米国仮特許出願第６２／７７９，４０６号明細書；及び２０１９年１１月２７日に出願された米国仮特許出願第６２／９４１，２２０号明細書に対する優先権の利益を主張する。前述の出願は全て、全体として参照により本明細書に援用される。
本開示は、ハーボキシジエンスプライシング調節薬と、抗体又はその抗原結合断片、例えばヒト腫瘍学抗原標的に結合するものとを含む抗体－薬物コンジュゲート（ＡＤＣ）に関する。本開示は更に、標的抗原を発現する癌、及び／又はＲＮＡスプライシングを破綻させることによる治療が適用可能な癌の治療又は診断に有用な方法及び組成物、並びにそうした組成物の作製方法に関する。
ヒトゲノムにおけるタンパク質コード遺伝子の大部分は、複数のエクソン（コード領域）がイントロン（非コード領域）により隔てられて構成されている。遺伝子発現の結果、単一の前駆体メッセンジャーＲＮＡ（プレｍＲＮＡ）となる。続いてスプライシングと呼ばれる過程によってプレｍＲＮＡからイントロン配列が取り除かれると、成熟メッセンジャーＲＮＡ（ｍＲＮＡ）となる。選択的スプライシングでは、様々な組み合わせのエクソンが包含されることにより、個別的なタンパク質アイソフォームをコードするｍＲＮＡが生じる。
ＲＮＡスプライシングは、５つの核内低分子ＲＮＡ（ｓｎＲＮＡ Ｕ１、Ｕ２、Ｕ４、Ｕ５、及びＵ６）と関連タンパク質とで構成される動的多タンパク質－ＲＮＡ複合体であるスプライセオソームによって触媒される。スプライセオソームはプレｍＲＮＡ上に集合して、イントロンの切り出し及びエクソンのライゲーションを触媒する複数のＲＮＡ及びタンパク質相互作用の動的カスケードを構築する（Ｍａｔｅｒａ ａｎｄ Ｗａｎｇ（２０１４）Ｎａｔ Ｒｅｖ Ｍｏｌ Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌ．１５（２）：１０８－２１）。多くの遺伝子に影響を与えるＲＮＡスプライシングの異常制御にヒト疾患を関係付けるエビデンスが増えつつある（Ｓｃｏｔｔｉ ａｎｄ Ｓｗａｎｓｏｎ（２０１６）Ｎａｔ Ｒｅｖ Ｇｅｎｅｔ．１７（１）：１９－３２）。
スプライセオソームは、癌生物学の重要な標的である。現在、幾つかの研究において、癌細胞のスプライシングプロファイル、並びにスプライシング因子それ自体の重大な変化が実証されている（Ａｇｒａｗａｌ ｅｔ ａｌ．（２０１８）Ｃｕｒｒ Ｏｐｉｎ Ｇｅｎｅｔ Ｄｅｖ．４８：６７－７４）。選択的スプライシングは、エクソン包含／除去、イントロンリテンション、又は潜在的スプライス部位の使用率の違いにつながり得る（Ｓｅｉｌｅｒ ｅｔ ａｌ．（２０１８）Ｃｅｌｌ Ｒｅｐ．２３（１）：２８２－２９６）。まとめると、これらのイベントは、腫瘍発生又は治療抵抗性に寄与し得る機能変化を説明する（Ｓｉｅｇｆｒｉｅｄ ａｎｄ Ｋａｒｎｉ（２０１８）Ｃｕｒｒ Ｏｐｉｎ Ｇｅｎｅｔ Ｄｅｖ．４８：１６－２１）。
ある種の天然産物は、ＳＦ３ｂスプライセオソーム複合体と結合することができる。これらの小分子は、イントロンリテンション及び／又はエクソンスキッピングを増進することによりスプライシングを調節する（Ｔｅｎｇ ｅｔ ａｌ．（２０１７）Ｎａｔ Ｃｏｍｍｕｎ．８：１５５２２）。例えば、ストレプトミセス属種（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｓｐ．）Ａ７８４７から単離された天然に存在するポリケチドであるハーボキシジエン（Ｉｓａａｃ ｅｔ ａｌ．（１９９２）Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．５７：７２２０－２６）及びその誘導体は、スプライシングを調節することが示されている。例えば、Ｉｍａｉｚｕｍｉ ｅｔ ａｌ．（２０１７）Ｊ．Ａｎｔｉｂｉｏｔ．７０：６７５－７９を参照のこと。結果として生じる転写物のかなりの割合が、ナンセンス変異依存ｍＲＮＡ分解機構（ＮＭＤ）を惹起する未成熟終止コドンを含む。更に、カノニカルなスプライシングが損なわれるため、カノニカルな転写物が著しく減少し、これが細胞の機能及び生存能力に負の影響を与え得る。このため、スプライシング調節薬は癌の治療に有望な薬物クラスとなっている（Ｐｕｔｈｅｎｖｅｅｔｉｌ ｅｔ ａｌ．（２０１６）Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ Ｃｈｅｍ．２７：１８８０－８）。
癌原遺伝子ヒト上皮成長因子受容体２（ＨＥＲ２）は、ヒト上皮成長因子受容体（ＥＧＦＲ）ファミリーに属する膜貫通型チロシンキナーゼ受容体をコードする（Ｋｉｎｇ ｅｔ ａｌ．（１９８５）Ｓｃｉｅｎｃｅ ２２９：９７４－６）。ＨＥＲ２の過剰発現はＰＩ３Ｋ－ＡＫＴ－ｍＴＯＲ経路などの成長因子シグナル伝達経路の構成的活性化を可能にし、従って浸潤性乳癌の約２０％を含め、幾つかの癌種で発癌ドライバーとして働く（Ｓｌａｍｏｎ ｅｔ ａｌ．（１９８９）Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４４：７０７－１２；Ｇａｊｒｉａ ａｎｄ Ｃｈａｎｄａｒｌａｐａｔｙ（２０１１）Ｅｘｐｅｒｔ Ｒｅｖ Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ Ｔｈｅｒ．１１：２６３－７５）。ＨＥＲ２増幅が形質転換表現型を媒介することを所与とすれば、及びＨＥＲ２発現は大部分が悪性細胞に限られているため、ＨＥＲ２は、ある種の癌のターゲティング及び／又は新規癌治療の送達に有望な抗原である（Ｐａｒａｋｈ ｅｔ ａｌ．（２０１７）Ｃａｎｃｅｒ Ｔｒｅａｔ Ｒｅｖ．５９：１－２１）。標的化した癌療法送達のための更なる抗原としては、限定はされないが、ＣＤ１３８（別名シンデカン－１）及びエフリンＡ型受容体２（ＥＰＨＡ２）が挙げられる。
ＣＤ１３８は、細胞形態の維持及び周囲微小環境との相互作用に必須の細胞表面ヘパラン硫酸プロテオグリカンである（Ａｋｌ ｅｔ ａｌ．（２０１５）Ｏｎｃｏｔａｒｇｅｔ ６（３０）：２８６９３－７１５；Ｓｚａｔｍａｒｉ ｅｔ ａｌ．（２０１５）Ｄｉｓ Ｍａｒｋｅｒｓ ２０１５：７９６０５２）。概して、癌細胞においてＣＤ１３８発現が失われると、細胞外マトリックスへの細胞接着が減少し、細胞運動性及び侵入が亢進する（Ｔｅｎｇ ｅｔ ａｌ．（２０１２）Ｍａｔｒｉｘ Ｂｉｏｌ．３１：３－１６）。間質ＣＤ１３８発現の増加もまた、フィブロネクチン産生及び細胞外マトリックス組織を変化させる（Ｙａｎｇ ｅｔ ａｌ．（２０１１）Ａｍ Ｊ Ｐａｔｈｏｌ．１７８：３２５－３５）。加えて、間質線維芽細胞におけるＣＤ１３８発現の増加は血管新生及び癌の進行に関連する（Ｍａｅｄａ ｅｔ ａｌ．（２００６）Ｏｎｃｏｇｅｎｅ ２５：１４０８－１２）。ＣＤ１３８発現はＢ細胞発生中に増加し、その存在は形質細胞の特徴である（Ｒｉｂａｔｔｉ（２０１７）Ｉｍｍｕｎｏｌ Ｌｅｔｔ．１８８：６４－７）。ＣＤ１３８発現は、形質細胞の悪性腫瘍である多発性骨髄腫で維持される。従ってＣＤ１３８は、幾つかの癌及び他の血液学的悪性腫瘍の標的化した治療に魅力的な抗原である（Ｓｈｅｒｂｅｎｏｕ ｅｔ ａｌ．（２０１５）Ｂｌｏｏｄ Ｒｅｖ．２９（２）：８１－９１；Ｗｉｊｄｅｎｅｓ ｅｔ ａｌ．（１９９６）Ｂｒ Ｊ Ｈａｅｍａｔｏｌ．９４（２）：３１８－２３）。
ＥＰＨＡ２は、幾つかの悪性癌由来細胞株及び進行型の癌で多量に過剰発現する膜貫通糖タンパク質である（Ｗｙｋｏｓｋｙ ａｎｄ Ｄｅｂｉｎｓｋｉ（２００８）Ｍｏｌ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｆ．６（１２）：１７９５－１８０６）。例えば、ＥＰＨＡ２は、ＧＢＭ患者腫瘍の約６１％（Ｗｙｋｏｓｋｙ ｅｔ ａｌ．（２００８）Ｃｌｉｎ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．１４：１９９－２０８）、卵巣癌の７６％（Ｔｈａｋｅｒ ｅｔ ａｌ．（２００４）Ｃｌｉｎ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．１０：５１４５－５０）、及び前立腺腺癌の８５％（Ｚｅｎｇ ｅｔ ａｌ．（２００３）Ａｍ Ｊ Ｐａｔｈｏｌ．１６３：２２７１－６）に強力に過剰発現する。ＥＰＨＡ２タンパク質は、患者腫瘍における割合及び腫瘍内の細胞における割合で見て高度に過剰発現するものであり、リガンド結合時にインターナライズすることのできる細胞膜局在性受容体である（Ｗａｌｋｅｒ－Ｄａｎｉｅｌｓ ｅｔ ａｌ．（２００２）Ｍｏｌ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．１：７９－８７）。更に、ＥＰＨＡ２の発現は、予後不良、転移増加、及び生存低下に関連する。従って、その発現パターン、局在、及び癌患者の転帰における機能的重要性のために、ＥＰＨＡ２は、新規抗癌療法の標的化した送達に魅力的なもう一つの抗原である。
様々な実施形態において、本開示は、一部には、抗新生物細胞性の生物学的活性を有する新規ハーボキシジエンスプライシング調節薬を提供する。このハーボキシジエンスプライシング調節薬は、哺乳類における腫瘍成長を遅らせ、阻害し、及び／又は逆転させるため、単独で、又はＡＤＣの一部として使用されてもよく、ヒト癌患者の治療に有用であり得る。様々な実施形態において、本開示は、ハーボキシジエンスプライシング調節薬を用いた新規抗体－薬物コンジュゲートを提供する。
本開示は、より具体的には、様々な実施形態において、新生物細胞に結合してそれを殺傷する能力を有する抗体－薬物コンジュゲート（ＡＤＣ）化合物に関する。様々な実施形態において、本明細書に開示されるＡＤＣ化合物は、ハーボキシジエンスプライシング調節薬を完全長抗体又は抗原結合断片に結び付けるリンカーを含む。様々な実施形態において、ＡＤＣ化合物はまた、結合後に標的細胞にインターナライズする能力も有する。
一部の実施形態において、本抗体－薬物コンジュゲートは、式（Ｉ）：Ａｂ－（Ｌ－Ｈ）ｐ［式中、Ａｂは、新生物細胞を標的化する抗体又は抗原結合断片であり；Ｈは、ハーボキシジエンスプライシング調節薬であり；Ｌは、ＡｂをＨに共有結合的に結び付けるリンカーであり；及びｐは、１～１５の整数である］の抗体－薬物コンジュゲートである。
一部の実施形態において、Ｈ、ハーボキシジエンスプライシング調節薬は、Ｌに任意の原子を介して共有結合的に結び付いている式（Ｉ）の化合物：
又はその薬学的に許容可能な塩［式中：
Ｙは、Ｏ、Ｓ、ＮＲ６、及びＣＲ６Ｒ７から選択され；
Ｒ１、Ｒ２、及びＲ３は、各々独立に、水素、ヒドロキシル、－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－Ｏ－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、及びＣ１～Ｃ６アルキル基から選択され；
Ｒ４は、水素、Ｃ１～Ｃ６アルキル基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ３～Ｃ８ヘテロシクリル）基、及び－Ｃ（＝Ｏ）－ＮＲ６Ｒ７から選択され；
Ｒ５は、水素、ヒドロキシル、－ＣＨ２－ＯＨ、－ＣＯ２Ｈ、－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－ＮＲ６Ｒ７、－ＮＲ６－Ｃ（＝Ｏ）－Ｒ８、－Ｏ－Ｃ（＝Ｏ）－ＮＲ６Ｒ７、－ＮＲ６－Ｃ（＝Ｏ）－Ｒ８、及び－ＮＲ６－Ｃ（＝Ｏ）－ＮＲ６Ｒ７から選択され；
Ｒ６及びＲ７は、各々独立に、水素、－Ｒ８、－Ｃ（＝Ｏ）－Ｒ８、及び－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－Ｒ８から選択され；及び
Ｒ８は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基、Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル基、及びＣ３～Ｃ８ヘテロシクリル基から選択され、
ここでＲ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、及びＲ８は、各々独立に、ハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１～Ｃ６アルキル基、－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－ＣＯ２Ｈ、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ３～Ｃ８ヘテロシクリル）基、－ＮＲ６Ｒ７、Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル基、Ｃ１～Ｃ６アルキルヒドロキシ基、Ｃ１～Ｃ６アルキルアルコキシ基、ベンジル基、及びＣ３～Ｃ８ヘテロシクリル基（この各々は、ハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１～Ｃ３アルキル基、Ｃ１～Ｃ３アルコキシ基、Ｃ１～Ｃ３ハロアルキル基、－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）（Ｃ１～Ｃ３アルキル）、及び－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ３アルキル）から選択される０又は１個の基で独立に置換されていてもよい）から独立に選択される０～３個の基で置換され、及び
ここでＬに共有結合的に結び付いている原子の原子価を超えることはない］を含む。
又はその薬学的に許容可能な塩［式中：
Ｙは、Ｏ、Ｓ、ＮＲ６、及びＣＲ６Ｒ７から選択され；
Ｒ１、Ｒ２、及びＲ３は、各々独立に、水素、ヒドロキシル、－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－Ｏ－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、及びＣ１～Ｃ６アルキル基から選択され；
Ｒ４は、水素、Ｃ１～Ｃ６アルキル基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ３～Ｃ８ヘテロシクリル）基、及び－Ｃ（＝Ｏ）－ＮＲ６Ｒ７から選択され；
Ｒ５は、水素、ヒドロキシル、－ＣＨ２－ＯＨ、－ＣＯ２Ｈ、－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－ＮＲ６Ｒ７、－ＮＲ６－Ｃ（＝Ｏ）－Ｒ８、－Ｏ－Ｃ（＝Ｏ）－ＮＲ６Ｒ７、－ＮＲ６－Ｃ（＝Ｏ）－Ｒ８、及び－ＮＲ６－Ｃ（＝Ｏ）－ＮＲ６Ｒ７から選択され；
Ｒ６及びＲ７は、各々独立に、水素、－Ｒ８、－Ｃ（＝Ｏ）－Ｒ８、及び－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－Ｒ８から選択され；及び
Ｒ８は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基、Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル基、及びＣ３～Ｃ８ヘテロシクリル基から選択され、
ここでＲ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、及びＲ８は、各々独立に、ハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１～Ｃ６アルキル基、－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－ＣＯ２Ｈ、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ３～Ｃ８ヘテロシクリル）基、－ＮＲ６Ｒ７、Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル基、Ｃ１～Ｃ６アルキルヒドロキシ基、Ｃ１～Ｃ６アルキルアルコキシ基、ベンジル基、及びＣ３～Ｃ８ヘテロシクリル基（この各々は、ハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１～Ｃ３アルキル基、Ｃ１～Ｃ３アルコキシ基、Ｃ１～Ｃ３ハロアルキル基、－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）（Ｃ１～Ｃ３アルキル）、及び－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ３アルキル）から選択される０又は１個の基で独立に置換されていてもよい）から独立に選択される０～３個の基で置換され、及び
ここでＬに共有結合的に結び付いている原子の原子価を超えることはない］を含む。
一部の実施形態において、Ｈ、ハーボキシジエンスプライシング調節薬は、Ｌに任意の原子を介して共有結合的に結び付いている式（Ｉａ）の化合物：
又はその薬学的に許容可能な塩［式中：
Ｒ９は、Ｃ３～Ｃ８ヘテロシクリル基から選択され；
Ｒ１０は、Ｈ及びＣ１～Ｃ６アルキル基から選択され、
ここでＲ９及びＲ１０は、各々独立に、ハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１～Ｃ３アルキル基、Ｃ１～Ｃ３アルコキシ基、－ＮＨ２、－ＮＨ－（Ｃ１～Ｃ３アルキル）、及び－Ｎ－（Ｃ１～Ｃ３アルキル）２から独立に選択される０～３個の基で置換され、及び
ここでＬに共有結合的に結び付いている原子の原子価を超えることはない］を含む。
又はその薬学的に許容可能な塩［式中：
Ｒ９は、Ｃ３～Ｃ８ヘテロシクリル基から選択され；
Ｒ１０は、Ｈ及びＣ１～Ｃ６アルキル基から選択され、
ここでＲ９及びＲ１０は、各々独立に、ハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１～Ｃ３アルキル基、Ｃ１～Ｃ３アルコキシ基、－ＮＨ２、－ＮＨ－（Ｃ１～Ｃ３アルキル）、及び－Ｎ－（Ｃ１～Ｃ３アルキル）２から独立に選択される０～３個の基で置換され、及び
ここでＬに共有結合的に結び付いている原子の原子価を超えることはない］を含む。
一部の実施形態において、Ｈ、ハーボキシジエンスプライシング調節薬は、Ｌに任意の原子を介して共有結合的に結び付いている式（Ｉｂ）の化合物：
又はその薬学的に許容可能な塩［式中：
Ｒ１１は、
（式中、＊は、Ｒ１１が化合物の残りの部分に結合する点を表す）から選択され；
Ｒ１２及びＲ１３は、各々独立に、Ｈ及びメチルから選択され；及び
ここでＬに共有結合的に結び付いている原子の原子価を超えることはない］を含む。
又はその薬学的に許容可能な塩［式中：
Ｒ１１は、
（式中、＊は、Ｒ１１が化合物の残りの部分に結合する点を表す）から選択され；
Ｒ１２及びＲ１３は、各々独立に、Ｈ及びメチルから選択され；及び
ここでＬに共有結合的に結び付いている原子の原子価を超えることはない］を含む。
一部の実施形態において、Ｈ、ハーボキシジエンスプライシング調節薬は、任意の原子を介してＬに共有結合的に結び付いている式（ＩＩ）の化合物：
又はその薬学的に許容可能な塩［式中：
Ｘは、ヒドロキシル又はＮＲ６Ｒ７であり；
Ｒ６及びＲ７は、各々独立に、水素、－Ｒ８、－Ｃ（＝Ｏ）－Ｒ８、－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－Ｒ８、－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）－Ｏ－Ｃ（＝Ｏ）－Ｒ８、及び－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）－Ｒ８から選択され；及び
Ｒ８は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基、Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル基、及びＣ３～Ｃ８ヘテロシクリル基から選択され、
ここでＲ６、Ｒ７、及びＲ８は、各々独立に、ハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１～Ｃ６アルキル基、－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－ＣＯ２Ｈ、－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ３～Ｃ８ヘテロシクリル）基、－ＮＲ６Ｒ７、Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル基、Ｃ１～Ｃ６アルキルヒドロキシ基、Ｃ１～Ｃ６アルキルアルコキシ基、ベンジル基、及びＣ３～Ｃ８ヘテロシクリル基（この各々は、ハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１～Ｃ３アルキル基、Ｃ１～Ｃ３アルコキシ基、Ｃ１～Ｃ３ハロアルキル基、－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）（Ｃ１～Ｃ３アルキル）、及び－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ３アルキル）から選択される０又は１個の基で独立に置換されていてもよい）から独立に選択される０～３個の基で置換され、及び
ここでＬに共有結合的に結び付いている原子の原子価を超えることはない］を含む。
又はその薬学的に許容可能な塩［式中：
Ｘは、ヒドロキシル又はＮＲ６Ｒ７であり；
Ｒ６及びＲ７は、各々独立に、水素、－Ｒ８、－Ｃ（＝Ｏ）－Ｒ８、－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－Ｒ８、－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）－Ｏ－Ｃ（＝Ｏ）－Ｒ８、及び－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）－Ｒ８から選択され；及び
Ｒ８は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基、Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル基、及びＣ３～Ｃ８ヘテロシクリル基から選択され、
ここでＲ６、Ｒ７、及びＲ８は、各々独立に、ハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１～Ｃ６アルキル基、－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－ＣＯ２Ｈ、－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ３～Ｃ８ヘテロシクリル）基、－ＮＲ６Ｒ７、Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル基、Ｃ１～Ｃ６アルキルヒドロキシ基、Ｃ１～Ｃ６アルキルアルコキシ基、ベンジル基、及びＣ３～Ｃ８ヘテロシクリル基（この各々は、ハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１～Ｃ３アルキル基、Ｃ１～Ｃ３アルコキシ基、Ｃ１～Ｃ３ハロアルキル基、－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）（Ｃ１～Ｃ３アルキル）、及び－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ３アルキル）から選択される０又は１個の基で独立に置換されていてもよい）から独立に選択される０～３個の基で置換され、及び
ここでＬに共有結合的に結び付いている原子の原子価を超えることはない］を含む。
一部の実施形態において、Ｈ、ハーボキシジエンスプライシング調節薬は、任意の原子を介してＬに共有結合的に結び付いている式（ＩＩａ）の化合物：
又はその薬学的に許容可能な塩［式中：
Ｚは、ＮＲ９及びＯから選択され；
Ｒ９は、水素及びＣ１～Ｃ６アルキル基から選択され；
Ｒ１０及びＲ１１は、各々独立に、水素、ハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１～Ｃ６アルキル基、－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－ＣＯ２Ｈ、－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ３～Ｃ８ヘテロシクリル）基、Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル基、Ｃ１～Ｃ６アルキルヒドロキシ基、Ｃ１～Ｃ６アルキルアルコキシ基、ベンジル基、及びＣ３～Ｃ８ヘテロシクリル基から選択され；
Ｒ１２は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基、Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル基、Ｃ３～Ｃ８ヘテロシクリル基から選択され、
ここでＲ９、Ｒ１０、Ｒ１１、及びＲ１２は、各々独立に、ハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１～Ｃ３アルキル基、Ｃ１～Ｃ３アルコキシ基、及びＣ１～Ｃ３ハロアルキル基から選択される０又は１個の基で置換され；
ｔは、１、２、３、４、５、及び６から選択される整数であり；及び
ここでＬに共有結合的に結び付いている原子の原子価を超えることはない］を含む。
又はその薬学的に許容可能な塩［式中：
Ｚは、ＮＲ９及びＯから選択され；
Ｒ９は、水素及びＣ１～Ｃ６アルキル基から選択され；
Ｒ１０及びＲ１１は、各々独立に、水素、ハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１～Ｃ６アルキル基、－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－ＣＯ２Ｈ、－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ３～Ｃ８ヘテロシクリル）基、Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル基、Ｃ１～Ｃ６アルキルヒドロキシ基、Ｃ１～Ｃ６アルキルアルコキシ基、ベンジル基、及びＣ３～Ｃ８ヘテロシクリル基から選択され；
Ｒ１２は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基、Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル基、Ｃ３～Ｃ８ヘテロシクリル基から選択され、
ここでＲ９、Ｒ１０、Ｒ１１、及びＲ１２は、各々独立に、ハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１～Ｃ３アルキル基、Ｃ１～Ｃ３アルコキシ基、及びＣ１～Ｃ３ハロアルキル基から選択される０又は１個の基で置換され；
ｔは、１、２、３、４、５、及び６から選択される整数であり；及び
ここでＬに共有結合的に結び付いている原子の原子価を超えることはない］を含む。
一部の実施形態において、Ｈ、ハーボキシジエンスプライシング調節薬は、任意の原子を介してＬに共有結合的に結び付いている式（ＩＩｂ）の化合物：
又はその薬学的に許容可能な塩［式中：
Ｒ１３は、
（式中、＊は、Ｒ１３が化合物の残りの部分に結合する点を表す）から選択され；
Ｒ１４及びＲ１５は、各々独立に、水素及びメチルから選択され；及び
ここでＬに共有結合的に結び付いている原子の原子価を超えることはない］を含む。
又はその薬学的に許容可能な塩［式中：
Ｒ１３は、
（式中、＊は、Ｒ１３が化合物の残りの部分に結合する点を表す）から選択され；
Ｒ１４及びＲ１５は、各々独立に、水素及びメチルから選択され；及び
ここでＬに共有結合的に結び付いている原子の原子価を超えることはない］を含む。
一部の実施形態において、Ｈ、ハーボキシジエンスプライシング調節薬は、任意の原子を介してＬに共有結合的に結び付いている式（ＩＩＩ）の化合物：
又はその薬学的に許容可能な塩［式中：
Ｒ１、Ｒ２、及びＲ３は、各々独立に、水素、ヒドロキシル、－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－Ｏ－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、及びＣ１～Ｃ６アルキル基から選択され；
Ｒ６及びＲ７は、各々独立に、水素、－Ｒ８、－Ｃ（＝Ｏ）－Ｒ８、及び－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－Ｒ８から選択され；
Ｒ８は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基、Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル基、及びＣ３～Ｃ８ヘテロシクリル基から選択され；及び
Ｒ９は、Ｈ、
から選択され；
ここでＲ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ６、Ｒ７、及びＲ８は、各々独立に、ハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１～Ｃ６アルキル基、－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－ＣＯ２Ｈ、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ３～Ｃ８ヘテロシクリル）基、－ＮＲ６Ｒ７、Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル基、Ｃ１～Ｃ６アルキルヒドロキシ基、Ｃ１～Ｃ６アルキルアルコキシ基、ベンジル基、及びＣ３～Ｃ８ヘテロシクリル基（この各々は、ハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１～Ｃ３アルキル基、Ｃ１～Ｃ３アルコキシ基、Ｃ１～Ｃ３ハロアルキル基、－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）（Ｃ１～Ｃ３アルキル）、及び－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ３アルキル）から選択される０又は１個の基で独立に置換されていてもよい）から独立に選択される０～３個の基で置換され、
ここでＬに共有結合的に結び付いている原子の原子価を超えることはなく；及び
式中、＊は、Ｒ９が化合物の残りの部分に結合する点を表す］を含む。
又はその薬学的に許容可能な塩［式中：
Ｒ１、Ｒ２、及びＲ３は、各々独立に、水素、ヒドロキシル、－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－Ｏ－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、及びＣ１～Ｃ６アルキル基から選択され；
Ｒ６及びＲ７は、各々独立に、水素、－Ｒ８、－Ｃ（＝Ｏ）－Ｒ８、及び－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－Ｒ８から選択され；
Ｒ８は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基、Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル基、及びＣ３～Ｃ８ヘテロシクリル基から選択され；及び
Ｒ９は、Ｈ、
から選択され；
ここでＲ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ６、Ｒ７、及びＲ８は、各々独立に、ハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１～Ｃ６アルキル基、－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－ＣＯ２Ｈ、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ３～Ｃ８ヘテロシクリル）基、－ＮＲ６Ｒ７、Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル基、Ｃ１～Ｃ６アルキルヒドロキシ基、Ｃ１～Ｃ６アルキルアルコキシ基、ベンジル基、及びＣ３～Ｃ８ヘテロシクリル基（この各々は、ハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１～Ｃ３アルキル基、Ｃ１～Ｃ３アルコキシ基、Ｃ１～Ｃ３ハロアルキル基、－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）（Ｃ１～Ｃ３アルキル）、及び－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ３アルキル）から選択される０又は１個の基で独立に置換されていてもよい）から独立に選択される０～３個の基で置換され、
ここでＬに共有結合的に結び付いている原子の原子価を超えることはなく；及び
式中、＊は、Ｒ９が化合物の残りの部分に結合する点を表す］を含む。
一部の実施形態において、リンカーは切断可能なペプチド部分を含む。一部の実施形態において、切断可能なペプチド部分は酵素によって切断可能である。一部の実施形態において、切断可能なペプチド部分又はリンカーはアミノ酸単位を含む。一部の実施形態において、アミノ酸単位はバリン－シトルリン（「Ｖａｌ－Ｃｉｔ」又は「ＶＣ」）を含む。一部の他の実施形態において、アミノ酸単位はバリン－アラニン（「Ｖａｌ－Ａｌａ」又は「ＶＡ」）を含む。一部の他の実施形態において、アミノ酸単位はグルタミン酸－バリン－シトルリン（「Ｇｌｕ－Ｖａｌ－Ｃｉｔ」又は「ＥＶＣ」）を含む。一部の他の実施形態において、アミノ酸単位はアラニン－アラニン－アスパラギン（「Ａｌａ－Ａｌａ－Ａｓｎ」又は「ＡＡＮ」）を含む。
一部の実施形態において、リンカーは切断可能なグルクロニド部分を含む。一部の実施形態において、切断可能なグルクロニド部分は酵素によって切断可能である。一部の実施形態において、切断可能なグルクロニド部分はグルクロニダーゼによって切断可能である。一部の実施形態において、切断可能なグルクロニド部分はβ－グルクロニダーゼによって切断可能である。
一部の実施形態において、リンカーは少なくとも１つのスペーサー単位を含む。一部の実施形態において、スペーサー単位又はリンカーはポリエチレングリコール（ＰＥＧ）部分を含む。一部の実施形態において、ＰＥＧ部分は－（ＰＥＧ）ｍ－を含み、ｍは１～１０の整数である。一部の実施形態において、ｍは２である。一部の他の実施形態において、スペーサー単位又はリンカーはアルキル部分を含む。一部の実施形態において、アルキル部分は－（ＣＨ２）ｎ－を含み、ｎは１～１０の整数である。一部の実施形態において、ｎは２である。一部の実施形態において、ｎは５である。一部の実施形態において、ｎは６である。
一部の実施形態において、スペーサー単位はマレイミド（Ｍａｌ）部分を介して抗体又は抗原結合断片に結び付いている（「Ｍａｌ－スペーサー単位」）。一部の実施形態において、Ｍａｌ－スペーサー単位は抗体又は抗原結合断片上のシステイン残基との反応性を有する。一部の実施形態において、Ｍａｌ－スペーサー単位は抗体又は抗原結合断片上のシステイン残基を介して抗体又は抗原結合断片につなぎ合わされる。
一部の実施形態において、リンカーはＭａｌ－スペーサー単位と切断可能なペプチド部分とを含む。一部の実施形態において、切断可能なペプチド部分はアミノ酸単位を含む。一部の実施形態において、切断可能なペプチド部分又はアミノ酸単位はＶａｌ－Ｃｉｔを含む。一部の実施形態において、切断可能なペプチド部分又はアミノ酸単位はＶａｌ－Ａｌａを含む。一部の実施形態において、切断可能なペプチド部分又はアミノ酸単位はＧｌｕ－Ｖａｌ－Ｃｉｔを含む。一部の実施形態において、切断可能なペプチド部分又はアミノ酸単位はＡｌａ－Ａｌａ－Ａｓｎを含む。一部の実施形態において、Ｍａｌ－スペーサー単位はアルキル部分を含む。一部の実施形態において、Ｍａｌ－スペーサー単位はＰＥＧ部分を含む。一部の実施形態において、Ｍａｌ－スペーサー単位はマレイミドカプロイル（ＭＣ）を含む。
一部の実施形態において、Ｍａｌ－スペーサー単位は抗体又は抗原結合断片をリンカーの切断可能部分に結び付ける。一部の実施形態において、リンカーの切断可能部分は切断可能なペプチド部分を含む。一部の実施形態において、切断可能なペプチド部分はアミノ酸単位を含む。一部の実施形態において、切断可能なペプチド部分又はアミノ酸単位は、Ｖａｌ－Ｃｉｔ、Ｖａｌ－Ａｌａ、Ｇｌｕ－Ｖａｌ－Ｃｉｔ、又はＡｌａ－Ａｌａ－Ａｓｎを含む。一部の実施形態において、リンカーはＭＣ－Ｖａｌ－Ｃｉｔを含む。一部の実施形態において、リンカーはＭＣ－Ｖａｌ－Ａｌａを含む。一部の実施形態において、リンカーはＭＣ－Ｇｌｕ－Ｖａｌ－Ｃｉｔを含む。一部の実施形態において、リンカーはＭＣ－Ａｌａ－Ａｌａ－Ａｓｎを含む。一部の実施形態において、Ｍａｌ－スペーサー単位はアルキル部分を含む。一部の実施形態において、Ｍａｌ－スペーサー単位はＰＥＧ部分を含む。一部の実施形態において、Ｍａｌ－スペーサー単位はマレイミドカプロイル（ＭＣ）を含む。
一部の実施形態において、リンカーの切断可能部分はハーボキシジエンスプライシング調節薬に直接つなぎ合わされるか、又はスペーサー単位がリンカーの切断可能部分をハーボキシジエンスプライシング調節薬に結び付ける。一部の実施形態において、コンジュゲートの切断により、抗体又は抗原結合断片及びリンカーからハーボキシジエンスプライシング調節薬が放出される。一部の実施形態において、リンカーの切断可能部分をハーボキシジエンスプライシング調節薬に結び付けるスペーサー単位は自己犠牲性である。
一部の実施形態において、リンカーの切断可能部分をハーボキシジエンスプライシング調節薬に結び付けるスペーサー単位はｐ－アミノベンジルオキシカルボニル（ｐＡＢＣ）を含む。一部の実施形態において、ｐＡＢＣはリンカーの切断可能部分をハーボキシジエンスプライシング調節薬に結び付ける。一部の実施形態において、リンカーの切断可能部分は切断可能なペプチド部分を含む。一部の実施形態において、切断可能なペプチド部分はアミノ酸単位を含む。一部の実施形態において、切断可能なペプチド部分又はアミノ酸単位は、Ｖａｌ－Ｃｉｔ、Ｖａｌ－Ａｌａ、Ｇｌｕ－Ｖａｌ－Ｃｉｔ、又はＡｌａ－Ａｌａ－Ａｓｎを含む。一部の実施形態において、リンカーはＶａｌ－Ｃｉｔ－ｐＡＢＣを含む。一部の他の実施形態において、リンカーはＶａｌ－Ａｌａ－ｐＡＢＣを含む。一部の実施形態において、リンカーはＧｌｕ－Ｖａｌ－Ｃｉｔ－ｐＡＢＣを含む。一部の実施形態において、リンカーはＡｌａ－Ａｌａ－Ａｓｎ－ｐＡＢＣを含む。
一部の実施形態において、リンカーの切断可能部分をハーボキシジエンスプライシング調節薬に結び付けるスペーサー単位はｐ－アミノベンジル（ｐＡＢ）を含む。一部の実施形態において、ｐＡＢはリンカーの切断可能部分をハーボキシジエンスプライシング調節薬に結び付ける。一部の実施形態において、リンカーの切断可能部分は切断可能なペプチド部分を含む。一部の実施形態において、切断可能なペプチド部分はアミノ酸単位を含む。一部の実施形態において、切断可能なペプチド部分又はアミノ酸単位は、Ｖａｌ－Ｃｉｔ、Ｖａｌ－Ａｌａ、Ｇｌｕ－Ｖａｌ－Ｃｉｔ、又はＡｌａ－Ａｌａ－Ａｓｎを含む。一部の実施形態において、リンカーはＶａｌ－Ｃｉｔ－ｐＡＢを含む。一部の他の実施形態において、リンカーはＶａｌ－Ａｌａ－ｐＡＢを含む。一部の他の実施形態において、リンカーはＧｌｕ－Ｖａｌ－Ｃｉｔ－ｐＡＢを含む。一部の他の実施形態において、リンカーはＡｌａ－Ａｌａ－Ａｓｎ－ｐＡＢを含む。
様々な実施形態において、リンカーは非切断可能リンカーである。一部の実施形態において、ＡＤＣのハーボキシジエンスプライシング調節薬は抗体又は抗原結合断片の分解によって放出される。一部の実施形態において、リンカーは、標的細胞によるインターナリゼーション及び標的細胞内での分解を受けても抗体及び薬物の少なくとも１つのアミノ酸と共有結合的に会合したままである。
一部の実施形態において、リンカーは、少なくとも１つのスペーサー単位を含む非切断可能リンカーである。一部の実施形態において、スペーサー単位又はリンカーはポリエチレングリコール（ＰＥＧ）部分を含む。一部の実施形態において、ＰＥＧ部分は－（ＰＥＧ）ｍ－を含み、ｍは１～１０の整数である。一部の実施形態において、ｍは２である。一部の他の実施形態において、スペーサー単位又はリンカーはアルキル部分を含む。一部の実施形態において、アルキル部分は－（ＣＨ２）ｎ－又は－（ＣＨ２）ｎ－Ｏ－（ＣＨ２）ｎを含み、ｎは１～１０の整数である。一部の実施形態において、ｎは２である。一部の実施形態において、ｎは５である。一部の実施形態において、ｎは６である。
一部の実施形態において、非切断可能リンカーのスペーサー単位はマレイミド（Ｍａｌ）部分を介して抗体又は抗原結合断片に結び付いている（「Ｍａｌ－スペーサー単位」）。一部の実施形態において、Ｍａｌ－スペーサー単位は抗体又は抗原結合断片上のシステイン残基との反応性を有する。一部の実施形態において、Ｍａｌ－スペーサー単位は抗体又は抗原結合断片上のシステイン残基を介して抗体又は抗原結合断片につなぎ合わされる。一部の実施形態において、Ｍａｌ－スペーサー単位はアルキル部分を含む。一部の実施形態において、Ｍａｌ－スペーサー単位はＰＥＧ部分を含む。一部の実施形態において、リンカー又はＭａｌ－スペーサー単位はマレイミドカプロイル（ＭＣ）を含む。一部の実施形態において、リンカー又はＭａｌ－スペーサー単位はマレイミドカプロイル（ＭＣ）と少なくとも１つの追加的なスペーサー単位とを含む。一部の実施形態において、リンカー又はＭａｌ－スペーサー単位はＭＣ－（ＰＥＧ）２を含む。一部の実施形態において、リンカー又はＭａｌ－スペーサー単位はＭＣ－（ＰＥＧ）２と少なくとも１つの追加的なスペーサー単位とを含む。一部の実施形態において、リンカー又はＭａｌ－スペーサー単位はＭａｌ－Ｈｅｘを含む。一部の実施形態において、リンカー又はＭａｌ－スペーサー単位はＭａｌ－Ｈｅｘと少なくとも１つの追加的なスペーサー単位とを含む。一部の実施形態において、リンカー又はＭａｌ－スペーサー単位はＭａｌ－Ｅｔを含む。一部の実施形態において、リンカー又はＭａｌ－スペーサー単位はＭａｌ－Ｅｔと少なくとも１つの追加的なスペーサー単位とを含む。一部の実施形態において、リンカー又はＭａｌ－スペーサー単位はＭａｌ－Ｅｔ－Ｏ－Ｅｔを含む。一部の実施形態において、リンカー又はＭａｌ－スペーサー単位はＭａｌ－Ｅｔ－Ｏ－Ｅｔと少なくとも１つの追加的なスペーサー単位とを含む。一部の実施形態において、Ｍａｌ－スペーサー単位は抗体又は抗原結合断片をハーボキシジエンスプライシング調節薬に結び付ける。
一部の実施形態において、Ａｂは、本明細書に開示される抗体又は結合ドメイン配列のいずれかから選択される。一部の実施形態において、Ａｂは、ＨＥＲ２及び／又はＨＥＲ２を発現する新生物細胞を標的化する抗体又は結合ドメイン配列である。一部の実施形態において、Ａｂは、ＣＤ１３８及び／又はＣＤ１３８を発現する新生物細胞を標的化する抗体又は結合ドメイン配列である。一部の実施形態において、Ａｂは、ＥＰＨＡ２及び／又はＥＰＨＡ２を発現する新生物細胞を標的化する抗体又は結合ドメイン配列である。一部の実施形態において、Ａｂは、ＭＳＬＮ及び／又はＭＳＬＮを発現する新生物細胞を標的化する抗体又は結合ドメイン配列である。一部の実施形態において、Ａｂは、ＦＯＬＨ１及び／又はＦＯＬＨ１を発現する新生物細胞を標的化する抗体又は結合ドメイン配列である。一部の実施形態において、Ａｂは、ＣＤＨ６及び／又はＣＤＨ６を発現する新生物細胞を標的化する抗体又は結合ドメイン配列である。一部の実施形態において、Ａｂは、ＣＥＡＣＡＭ５及び／又はＣＥＡＣＡＭ５を発現する新生物細胞を標的化する抗体又は結合ドメイン配列である。一部の実施形態において、Ａｂは、ＣＦＣ１Ｂ及び／又はＣＦＣ１Ｂを発現する新生物細胞を標的化する抗体又は結合ドメイン配列である。一部の実施形態において、Ａｂは、ＥＮＰＰ３及び／又はＥＮＰＰ３を発現する新生物細胞を標的化する抗体又は結合ドメイン配列である。一部の実施形態において、Ａｂは、ＦＯＬＲ１及び／又はＦＯＬＲ１を発現する新生物細胞を標的化する抗体又は結合ドメイン配列である。一部の実施形態において、Ａｂは、ＨＡＶＣＲ１及び／又はＨＡＶＣＲ１を発現する新生物細胞を標的化する抗体又は結合ドメイン配列である。一部の実施形態において、Ａｂは、ＫＩＴ及び／又はＫＩＴを発現する新生物細胞を標的化する抗体又は結合ドメイン配列である。一部の実施形態において、Ａｂは、ＭＥＴ及び／又はＭＥＴを発現する新生物細胞を標的化する抗体又は結合ドメイン配列である。一部の実施形態において、Ａｂは、ＭＵＣ１６及び／又はＭＵＣ１６を発現する新生物細胞を標的化する抗体又は結合ドメイン配列である。一部の実施形態において、Ａｂは、ＳＬＣ３９Ａ６及び／又はＳＬＣ３９Ａ６を発現する新生物細胞を標的化する抗体又は結合ドメイン配列である。一部の実施形態において、Ａｂは、ＳＬＣ４４Ａ４及び／又はＳＬＣ４４Ａ４を発現する新生物細胞を標的化する抗体又は結合ドメイン配列である。一部の実施形態において、Ａｂは、ＳＴＥＡＰ１及び／又はＳＴＥＡＰ１を発現する新生物細胞を標的化する抗体又は結合ドメイン配列である。一部の実施形態において、Ａｂは、別の癌抗原を標的化する抗体又は結合ドメイン配列である。
一部の実施形態において、Ｌは、本明細書に開示されるリンカーのいずれか、又は本明細書に開示されるリンカー成分の任意の組み合わせから選択される。一部の実施形態において、Ｌは、ＭＣ－Ｖａｌ－Ｃｉｔ－ｐＡＢＣ、Ｍａｌ－（ＰＥＧ）２－ＣＯ、ＭＣ－Ｖａｌ－Ａｌａ－ｐＡＢ、ＭＣ－Ｖａｌ－Ａｌａ－ｐＡＢＣ、ＭＣ－Ｖａｌ－Ｃｉｔ－ｐＡＢ、Ｍａｌ－Ｈｅｘ、Ｍａｌ－Ｅｔ、又はＭａｌ－Ｅｔ－Ｏ－Ｅｔを含むリンカーである。一部の実施形態において、リンカーはまた、１つ以上の追加的なスペーサー単位も含み得る。一部の実施形態において、Ｌは、ＡＤＬ１、ＡＤＬ２、ＡＤＬ５、ＡＤＬ６、ＡＤＬ７、ＡＤＬ１０、ＡＤＬ１２、ＡＤＬ１３、ＡＤＬ１４、ＡＤＬ１５、ＡＤＬ２１、ＡＤＬ２２、又はＡＤＬ２３リンカーである。一部の実施形態において、Ｌは、ＡＤＬ１、ＡＤＬ２、ＡＤＬ５、ＡＤＬ６、ＡＤＬ７、ＡＤＬ１２、ＡＤＬ１３、ＡＤＬ１４、ＡＤＬ１５、ＡＤＬ２１、又はＡＤＬ２３リンカーである。一部の実施形態において、Ｌは、ＡＤＬ１２、ＡＤＬ１４、又はＡＤＬ１５リンカーである。一部の実施形態において、ＡＤＬ１、ＡＤＬ２、ＡＤＬ５、ＡＤＬ６、ＡＤＬ７、ＡＤＬ１２、ＡＤＬ１３、ＡＤＬ１４、ＡＤＬ１５、ＡＤＬ２１、又はＡＤＬ２３リンカーはまた、１つ以上の追加的なスペーサー単位も含み得る。一部の実施形態において、ＬはＡＤＬ１リンカーであり、任意選択で１つ以上の追加的なスペーサー単位を含み得る。一部の実施形態において、ＬはＡＤＬ２リンカーであり、任意選択で１つ以上の追加的なスペーサー単位を含み得る。一部の実施形態において、ＬはＡＤＬ５リンカーであり、任意選択で１つ以上の追加的なスペーサー単位を含み得る。一部の実施形態において、ＬはＡＤＬ６リンカーであり、任意選択で１つ以上の追加的なスペーサー単位を含み得る。一部の実施形態において、ＬはＡＤＬ７リンカーであり、任意選択で１つ以上の追加的なスペーサー単位を含み得る。一部の実施形態において、ＬはＡＤＬ１２リンカーであり、任意選択で１つ以上の追加的なスペーサー単位を含み得る。一部の実施形態において、ＬはＡＤＬ１４リンカーであり、任意選択で１つ以上の追加的なスペーサー単位を含み得る。一部の実施形態において、ＬはＡＤＬ１５リンカーであり、任意選択で１つ以上の追加的なスペーサー単位を含み得る。本明細書に記載されるＡＤＣの様々な実施形態において、ｐは１～１０である。様々な実施形態において、ｐは２～８である。様々な実施形態において、ｐは４～８である。一部の実施形態において、ｐは４である。一部の実施形態において、ｐは８である。
一部の実施形態において、ランダムなコンジュゲーションが起こるＡＤＣのプールが提供され、プール中の平均ｐは約２～約８である。一部の実施形態において、ランダムなコンジュゲーションが起こるＡＤＣのプールが提供され、プール中の平均ｐは約４～約８である。一部の実施形態において、ランダムなコンジュゲーションが起こるＡＤＣのプールが提供され、プール中の平均ｐは約４である。一部の実施形態において、ランダムなコンジュゲーションが起こるＡＤＣのプールが提供され、プール中の平均ｐは約８である。記載されるＡＤＣのいずれかの複数のコピーを含む組成物（例えば、医薬組成物）であって、組成物中のＡＤＣの平均薬物負荷量（平均ｐ）が約３．５～約５．５（例えば約４）、又は約７～約９（例えば約８）である組成物が本明細書に提供される。
一部の実施形態において、ＡＤＣの抗体又は抗原結合断片（Ａｂ）は、血液学的悪性腫瘍又は固形腫瘍に由来する新生物細胞を標的化する。一部の実施形態において、抗体又は抗原結合断片は、血液学的悪性腫瘍に由来する新生物細胞を標的化する。一部の実施形態において、血液学的悪性腫瘍は、Ｂ細胞悪性腫瘍、白血病（例えば、急性骨髄性白血病）、リンパ腫、及び骨髄腫（例えば、多発性骨髄腫）から選択される。一部の実施形態において、血液学的悪性腫瘍は、急性骨髄性白血病及び多発性骨髄腫から選択される。一部の実施形態において、抗体又は抗原結合断片は、固形腫瘍に由来する新生物細胞を標的化する。一部の実施形態において、固形腫瘍は、乳癌（例えば、ＨＥＲ２陽性乳癌）、胃癌（例えば、胃腺癌）、前立腺癌、卵巣癌、肺癌（例えば、肺腺癌）、子宮癌（例えば、漿液性子宮内膜癌）、唾液管癌、黒色腫、結腸癌、子宮頸癌、膵癌、腎癌、結腸直腸癌、及び食道癌から選択される。一部の実施形態において、固形腫瘍は、ＨＥＲ２陽性乳癌、胃腺癌、前立腺癌、及び骨肉腫から選択される。
様々な実施形態において、ＡＤＣの抗体又は抗原結合断片（Ａｂ）は抗ＨＥＲ２抗体又はその抗原結合断片である。一部の実施形態において、抗体又は抗原結合断片はＨＥＲ２に結合し、ＨＥＲ２を発現する新生物細胞を標的化する（即ち、このＡＤＣは、ＨＥＲ２を発現する新生物細胞を標的化する）。一部の実施形態において、ＡＤＣの抗体又は抗原結合断片はインターナリゼーション性抗ＨＥＲ２抗体又はそのインターナリゼーション性抗原結合断片である。
一部の実施形態において、抗ＨＥＲ２抗体又は抗原結合断片は、配列番号１（ＨＣＤＲ１）、配列番号２（ＨＣＤＲ２）、及び配列番号３（ＨＣＤＲ３）のアミノ酸配列を含む３つの重鎖相補性決定領域（ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、及びＨＣＤＲ３）と；配列番号４（ＬＣＤＲ１）、配列番号５（ＬＣＤＲ２）、及び配列番号６（ＬＣＤＲ３）のアミノ酸配列を含む３つの軽鎖相補性決定領域（ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３）とを含む。一部の実施形態において、抗ＨＥＲ２抗体又は抗原結合断片はインターナリゼーション性抗体又はインターナリゼーション性抗原結合断片である。一部の実施形態において、抗ＨＥＲ２抗体又は抗原結合断片はヒトフレームワーク配列を含む。一部の実施形態において、抗ＨＥＲ２抗体又は抗原結合断片は、配列番号１９のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号２０のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含む。一部の実施形態において、抗ＨＥＲ２抗体又は抗原結合断片はヒトＩｇＧ重鎖定常領域を含む。一部の実施形態において、抗ＨＥＲ２抗体又は抗原結合断片はヒトＩｇＧ１重鎖定常領域を含む。一部の実施形態において、抗ＨＥＲ２抗体又は抗原結合断片はヒトＩｇカッパ又はラムダ軽鎖定常領域を含む。一部の実施形態において、抗ＨＥＲ２抗体又は抗原結合は、配列番号１９の重鎖可変ドメインと配列番号２０の軽鎖可変ドメインとを含む抗体と同じエピトープへの結合に関して競合し、及び／又はそれに結合する。
様々な実施形態において、ＡＤＣの抗体又は抗原結合断片（Ａｂ）は抗ＣＤ１３８抗体又はその抗原結合断片である。一部の実施形態において、抗体又は抗原結合断片はＣＤ１３８に結合し、ＣＤ１３８を発現する新生物細胞を標的化する（即ち、このＡＤＣは、ＣＤ１３８を発現する新生物細胞を標的化する）。一部の実施形態において、ＡＤＣの抗体又は抗原結合断片はインターナリゼーション性抗ＣＤ１３８抗体又はそのインターナリゼーション性抗原結合断片である。
一部の実施形態において、抗ＣＤ１３８抗体又は抗原結合断片は、配列番号７（ＨＣＤＲ１）、配列番号８（ＨＣＤＲ２）、及び配列番号９（ＨＣＤＲ３）のアミノ酸配列を含む３つの重鎖相補性決定領域（ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、及びＨＣＤＲ３）と；配列番号１０（ＬＣＤＲ１）、配列番号１１（ＬＣＤＲ２）、及び配列番号１２（ＬＣＤＲ３）のアミノ酸配列を含む３つの軽鎖相補性決定領域（ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３）とを含む。一部の実施形態において、抗ＣＤ１３８抗体又は抗原結合断片はインターナリゼーション性抗体又はインターナリゼーション性抗原結合断片である。一部の実施形態において、抗ＣＤ１３８抗体又は抗原結合断片はヒトフレームワーク配列を含む。一部の実施形態において、抗ＣＤ１３８抗体又は抗原結合断片は、配列番号２１のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号２２のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含む。一部の実施形態において、抗ＣＤ１３８抗体又は抗原結合断片はマウスＩｇＧ２ａ重鎖定常領域を含む。一部の実施形態において、抗ＣＤ１３８抗体又は抗原結合断片はマウスＩｇカッパ軽鎖定常領域を含む。一部の実施形態において、抗ＣＤ１３８抗体又は抗原結合断片はヒトＩｇＧ重鎖定常領域を含む。一部の実施形態において、抗ＣＤ１３８抗体又は抗原結合断片はヒトＩｇＧ２ａ重鎖定常領域を含む。一部の実施形態において、抗ＣＤ１３８抗体又は抗原結合断片はヒトＩｇカッパ又はラムダ軽鎖定常領域を含む。一部の実施形態において、抗ＣＤ１３８抗体又は抗原結合は、配列番号２１の重鎖可変ドメインと配列番号２２の軽鎖可変ドメインとを含む抗体と同じエピトープへの結合に関して競合し、及び／又はそれに結合する。
様々な実施形態において、ＡＤＣの抗体又は抗原結合断片（Ａｂ）は抗ＥＰＨＡ２抗体又はその抗原結合断片である。一部の実施形態において、抗体又は抗原結合断片はＥＰＨＡ２に結合し、ＥＰＨＡ２を発現する新生物細胞を標的化する（即ち、このＡＤＣは、ＥＰＨＡ２を発現する新生物細胞を標的化する）。一部の実施形態において、ＡＤＣの抗体又は抗原結合断片はインターナリゼーション性抗ＥＰＨＡ２抗体又はそのインターナリゼーション性抗原結合断片である。
一部の実施形態において、抗ＥＰＨＡ２抗体又は抗原結合断片は、配列番号１３（ＨＣＤＲ１）、配列番号１４（ＨＣＤＲ２）、及び配列番号１５（ＨＣＤＲ３）のアミノ酸配列を含む３つの重鎖相補性決定領域（ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、及びＨＣＤＲ３）と；配列番号１６（ＬＣＤＲ１）、配列番号１７（ＬＣＤＲ２）、及び配列番号１８（ＬＣＤＲ３）のアミノ酸配列を含む３つの軽鎖相補性決定領域（ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３）とを含む。一部の実施形態において、抗ＥＰＨＡ２抗体又は抗原結合断片はインターナリゼーション性抗体又はインターナリゼーション性抗原結合断片である。一部の実施形態において、抗ＥＰＨＡ２抗体又は抗原結合断片はヒトフレームワーク配列を含む。一部の実施形態において、抗ＥＰＨＡ２抗体又は抗原結合断片は、配列番号２３のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号２４のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含む。一部の実施形態において、抗ＥＰＨＡ２抗体又は抗原結合断片はヒトＩｇＧ重鎖定常領域を含む。一部の実施形態において、抗ＥＰＨＡ２抗体又は抗原結合断片はヒトＩｇＧ１重鎖定常領域を含む。一部の実施形態において、抗ＥＰＨＡ２抗体又は抗原結合断片はヒトＩｇカッパ又はラムダ軽鎖定常領域を含む。一部の実施形態において、抗ＥＰＨＡ２抗体又は抗原結合は、配列番号２３の重鎖可変ドメインと配列番号２４の軽鎖可変ドメインとを含む抗体と同じエピトープへの結合に関して競合し、及び／又はそれに結合する。
一部の実施形態において、本明細書には、式（Ｉ）の化合物：
又はその薬学的に許容可能な塩［式中：
Ｙは、Ｏ、Ｓ、ＮＲ６、及びＣＲ６Ｒ７から選択され；
Ｒ１、Ｒ２、及びＲ３は、各々独立に、水素、ヒドロキシル、－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－Ｏ－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、及びＣ１～Ｃ６アルキル基から選択され；
Ｒ４は、水素、Ｃ１～Ｃ６アルキル基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ３～Ｃ８ヘテロシクリル）基、及び－Ｃ（＝Ｏ）－ＮＲ６Ｒ７から選択され；
Ｒ５は、水素、ヒドロキシル、－ＣＨ２－ＯＨ、－ＣＯ２Ｈ、－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－ＮＲ６Ｒ７、－ＮＲ６－Ｃ（＝Ｏ）－Ｒ８、－Ｏ－Ｃ（＝Ｏ）－ＮＲ６Ｒ７、－ＮＲ６－Ｃ（＝Ｏ）－Ｒ８、及び－ＮＲ６－Ｃ（＝Ｏ）－ＮＲ６Ｒ７から選択され；
Ｒ６及びＲ７は、各々独立に、水素、－Ｒ８、－Ｃ（＝Ｏ）－Ｒ８、及び－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－Ｒ８から選択され；及び
Ｒ８は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基、Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル基、及びＣ３～Ｃ８ヘテロシクリル基から選択され、
ここでＲ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、及びＲ８は、各々独立に、ハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１～Ｃ６アルキル基、－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－ＣＯ２Ｈ、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ３～Ｃ８ヘテロシクリル）基、－ＮＲ６Ｒ７、Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル基、Ｃ１～Ｃ６アルキルヒドロキシ基、Ｃ１～Ｃ６アルキルアルコキシ基、ベンジル基、及びＣ３～Ｃ８ヘテロシクリル基（この各々は、ハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１～Ｃ３アルキル基、Ｃ１～Ｃ３アルコキシ基、Ｃ１～Ｃ３ハロアルキル基、－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）（Ｃ１～Ｃ３アルキル）、及び－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ３アルキル）から選択される０又は１個の基で独立に置換されていてもよい）から独立に選択される０～３個の基で置換される］が開示される。
又はその薬学的に許容可能な塩［式中：
Ｙは、Ｏ、Ｓ、ＮＲ６、及びＣＲ６Ｒ７から選択され；
Ｒ１、Ｒ２、及びＲ３は、各々独立に、水素、ヒドロキシル、－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－Ｏ－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、及びＣ１～Ｃ６アルキル基から選択され；
Ｒ４は、水素、Ｃ１～Ｃ６アルキル基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ３～Ｃ８ヘテロシクリル）基、及び－Ｃ（＝Ｏ）－ＮＲ６Ｒ７から選択され；
Ｒ５は、水素、ヒドロキシル、－ＣＨ２－ＯＨ、－ＣＯ２Ｈ、－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－ＮＲ６Ｒ７、－ＮＲ６－Ｃ（＝Ｏ）－Ｒ８、－Ｏ－Ｃ（＝Ｏ）－ＮＲ６Ｒ７、－ＮＲ６－Ｃ（＝Ｏ）－Ｒ８、及び－ＮＲ６－Ｃ（＝Ｏ）－ＮＲ６Ｒ７から選択され；
Ｒ６及びＲ７は、各々独立に、水素、－Ｒ８、－Ｃ（＝Ｏ）－Ｒ８、及び－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－Ｒ８から選択され；及び
Ｒ８は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基、Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル基、及びＣ３～Ｃ８ヘテロシクリル基から選択され、
ここでＲ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、及びＲ８は、各々独立に、ハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１～Ｃ６アルキル基、－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－ＣＯ２Ｈ、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ３～Ｃ８ヘテロシクリル）基、－ＮＲ６Ｒ７、Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル基、Ｃ１～Ｃ６アルキルヒドロキシ基、Ｃ１～Ｃ６アルキルアルコキシ基、ベンジル基、及びＣ３～Ｃ８ヘテロシクリル基（この各々は、ハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１～Ｃ３アルキル基、Ｃ１～Ｃ３アルコキシ基、Ｃ１～Ｃ３ハロアルキル基、－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）（Ｃ１～Ｃ３アルキル）、及び－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ３アルキル）から選択される０又は１個の基で独立に置換されていてもよい）から独立に選択される０～３個の基で置換される］が開示される。
一部の実施形態において、本明細書には、式（Ｉａ）の化合物：
又はその薬学的に許容可能な塩［式中：
Ｒ９は、Ｃ３～Ｃ８ヘテロシクリル基から選択され；及び
Ｒ１０は、Ｈ及びＣ１～Ｃ６アルキル基から選択され、
ここでＲ９及びＲ１０は、各々独立に、ハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１～Ｃ３アルキル基、Ｃ１～Ｃ３アルコキシ基、－ＮＨ２、－ＮＨ－（Ｃ１～Ｃ３アルキル）、及び－Ｎ－（Ｃ１～Ｃ３アルキル）２から独立に選択される０～３個の基で置換される］が提供される。
又はその薬学的に許容可能な塩［式中：
Ｒ９は、Ｃ３～Ｃ８ヘテロシクリル基から選択され；及び
Ｒ１０は、Ｈ及びＣ１～Ｃ６アルキル基から選択され、
ここでＲ９及びＲ１０は、各々独立に、ハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１～Ｃ３アルキル基、Ｃ１～Ｃ３アルコキシ基、－ＮＨ２、－ＮＨ－（Ｃ１～Ｃ３アルキル）、及び－Ｎ－（Ｃ１～Ｃ３アルキル）２から独立に選択される０～３個の基で置換される］が提供される。
一部の実施形態において、本明細書には、式（Ｉｂ）の化合物：
又はその薬学的に許容可能な塩［式中：
Ｒ１１は、
（式中、＊は、Ｒ１１が化合物の残りの部分に結合する点を表す）から選択され；及び
Ｒ１２及びＲ１３は、各々独立に、Ｈ及びメチルから選択される］が提供される。
又はその薬学的に許容可能な塩［式中：
Ｒ１１は、
（式中、＊は、Ｒ１１が化合物の残りの部分に結合する点を表す）から選択され；及び
Ｒ１２及びＲ１３は、各々独立に、Ｈ及びメチルから選択される］が提供される。
一部の実施形態において、本明細書には、式（ＩＩ）の化合物：
又はその薬学的に許容可能な塩［式中：
Ｘは、ＮＲ６Ｒ７であり；
Ｒ６及びＲ７は、各々独立に、水素、－Ｒ８、－Ｃ（＝Ｏ）－Ｒ８、－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－Ｒ８、－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）－Ｏ－Ｃ（＝Ｏ）－Ｒ８、及び－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）－Ｒ８から選択され；及び
Ｒ８は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基、Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル基、及びＣ３～Ｃ８ヘテロシクリル基から選択され、
ここでＲ６、Ｒ７、及びＲ８は、各々独立に、ハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１～Ｃ６アルキル基、－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－ＣＯ２Ｈ、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ３～Ｃ８ヘテロシクリル）基、－ＮＲ６Ｒ７、Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル基、Ｃ１～Ｃ６アルキルヒドロキシ基、Ｃ１～Ｃ６アルキルアルコキシ基、ベンジル基、及びＣ３～Ｃ８ヘテロシクリル基（この各々は、ハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１～Ｃ３アルキル基、Ｃ１～Ｃ３アルコキシ基、Ｃ１～Ｃ３ハロアルキル基、－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）（Ｃ１～Ｃ３アルキル）、及び－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ３アルキル）から選択される０又は１個の基で独立に置換されていてもよい）から独立に選択される０～３個の基で置換される］が提供される。
又はその薬学的に許容可能な塩［式中：
Ｘは、ＮＲ６Ｒ７であり；
Ｒ６及びＲ７は、各々独立に、水素、－Ｒ８、－Ｃ（＝Ｏ）－Ｒ８、－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－Ｒ８、－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）－Ｏ－Ｃ（＝Ｏ）－Ｒ８、及び－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）－Ｒ８から選択され；及び
Ｒ８は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基、Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル基、及びＣ３～Ｃ８ヘテロシクリル基から選択され、
ここでＲ６、Ｒ７、及びＲ８は、各々独立に、ハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１～Ｃ６アルキル基、－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－ＣＯ２Ｈ、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ３～Ｃ８ヘテロシクリル）基、－ＮＲ６Ｒ７、Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル基、Ｃ１～Ｃ６アルキルヒドロキシ基、Ｃ１～Ｃ６アルキルアルコキシ基、ベンジル基、及びＣ３～Ｃ８ヘテロシクリル基（この各々は、ハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１～Ｃ３アルキル基、Ｃ１～Ｃ３アルコキシ基、Ｃ１～Ｃ３ハロアルキル基、－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）（Ｃ１～Ｃ３アルキル）、及び－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ３アルキル）から選択される０又は１個の基で独立に置換されていてもよい）から独立に選択される０～３個の基で置換される］が提供される。
一部の実施形態において、本明細書には、式（ＩＩａ）の化合物：
又はその薬学的に許容可能な塩［式中：
Ｚは、ＮＲ９及びＯから選択され；
Ｒ９は、水素及びＣ１～Ｃ６アルキル基から選択され；
Ｒ１０及びＲ１１は、各々独立に、水素、ハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１～Ｃ６アルキル基、－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－ＣＯ２Ｈ、－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ３～Ｃ８ヘテロシクリル）基、Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル基、Ｃ１～Ｃ６アルキルヒドロキシ基、Ｃ１～Ｃ６アルキルアルコキシ基、ベンジル基、及びＣ３～Ｃ８ヘテロシクリル基から選択され；
Ｒ１２は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基、Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル基、Ｃ３～Ｃ８ヘテロシクリル基から選択され、
ここでＲ９、Ｒ１０、Ｒ１１、及びＲ１２は、各々独立に、ハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１～Ｃ３アルキル基、Ｃ１～Ｃ３アルコキシ基、及びＣ１～Ｃ３ハロアルキル基から選択される０又は１個の基で置換され；及び
ｔは、１、２、３、４、５、及び６から選択される整数である］が提供される。
又はその薬学的に許容可能な塩［式中：
Ｚは、ＮＲ９及びＯから選択され；
Ｒ９は、水素及びＣ１～Ｃ６アルキル基から選択され；
Ｒ１０及びＲ１１は、各々独立に、水素、ハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１～Ｃ６アルキル基、－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－ＣＯ２Ｈ、－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ３～Ｃ８ヘテロシクリル）基、Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル基、Ｃ１～Ｃ６アルキルヒドロキシ基、Ｃ１～Ｃ６アルキルアルコキシ基、ベンジル基、及びＣ３～Ｃ８ヘテロシクリル基から選択され；
Ｒ１２は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基、Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル基、Ｃ３～Ｃ８ヘテロシクリル基から選択され、
ここでＲ９、Ｒ１０、Ｒ１１、及びＲ１２は、各々独立に、ハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１～Ｃ３アルキル基、Ｃ１～Ｃ３アルコキシ基、及びＣ１～Ｃ３ハロアルキル基から選択される０又は１個の基で置換され；及び
ｔは、１、２、３、４、５、及び６から選択される整数である］が提供される。
一部の実施形態において、本明細書には、式（ＩＩｂ）の化合物：
又はその薬学的に許容可能な塩［式中：
Ｒ１３は、
（式中、＊は、Ｒ１３が化合物の残りの部分に結合する点を表す）から選択され；及び
Ｒ１４及びＲ１５は、各々独立に、水素及びメチルから選択される］が提供される。
又はその薬学的に許容可能な塩［式中：
Ｒ１３は、
（式中、＊は、Ｒ１３が化合物の残りの部分に結合する点を表す）から選択され；及び
Ｒ１４及びＲ１５は、各々独立に、水素及びメチルから選択される］が提供される。
一部の実施形態において、本明細書には、式（ＩＩＩ）の化合物：
又はその薬学的に許容可能な塩［式中：
Ｒ１、Ｒ２、及びＲ３は、各々独立に、水素、ヒドロキシル、－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－Ｏ－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、及びＣ１～Ｃ６アルキル基から選択され；
Ｒ６及びＲ７は、各々独立に、水素、－Ｒ８、－Ｃ（＝Ｏ）－Ｒ８、及び－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－Ｒ８から選択され；
Ｒ８は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基、Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル基、及びＣ３～Ｃ８ヘテロシクリル基から選択され；及び
Ｒ９は、Ｈ、
から選択され；
ここでＲ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ６、Ｒ７、及びＲ８は、各々独立に、ハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１～Ｃ６アルキル基、－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－ＣＯ２Ｈ、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ３～Ｃ８ヘテロシクリル）基、－ＮＲ６Ｒ７、Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル基、Ｃ１～Ｃ６アルキルヒドロキシ基、Ｃ１～Ｃ６アルキルアルコキシ基、ベンジル基、及びＣ３～Ｃ８ヘテロシクリル基（この各々は、ハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１～Ｃ３アルキル基、Ｃ１～Ｃ３アルコキシ基、Ｃ１～Ｃ３ハロアルキル基、－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）（Ｃ１～Ｃ３アルキル）、及び－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ３アルキル）から選択される０又は１個の基で独立に置換されていてもよい）から独立に選択される０～３個の基で置換され；及び
式中、＊は、Ｒ９が化合物の残りの部分に結合する点を表す］が提供される。
又はその薬学的に許容可能な塩［式中：
Ｒ１、Ｒ２、及びＲ３は、各々独立に、水素、ヒドロキシル、－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－Ｏ－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、及びＣ１～Ｃ６アルキル基から選択され；
Ｒ６及びＲ７は、各々独立に、水素、－Ｒ８、－Ｃ（＝Ｏ）－Ｒ８、及び－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－Ｒ８から選択され；
Ｒ８は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基、Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル基、及びＣ３～Ｃ８ヘテロシクリル基から選択され；及び
Ｒ９は、Ｈ、
から選択され；
ここでＲ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ６、Ｒ７、及びＲ８は、各々独立に、ハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１～Ｃ６アルキル基、－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－ＣＯ２Ｈ、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ３～Ｃ８ヘテロシクリル）基、－ＮＲ６Ｒ７、Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル基、Ｃ１～Ｃ６アルキルヒドロキシ基、Ｃ１～Ｃ６アルキルアルコキシ基、ベンジル基、及びＣ３～Ｃ８ヘテロシクリル基（この各々は、ハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１～Ｃ３アルキル基、Ｃ１～Ｃ３アルコキシ基、Ｃ１～Ｃ３ハロアルキル基、－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）（Ｃ１～Ｃ３アルキル）、及び－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ３アルキル）から選択される０又は１個の基で独立に置換されていてもよい）から独立に選択される０～３個の基で置換され；及び
式中、＊は、Ｒ９が化合物の残りの部分に結合する点を表す］が提供される。
一部の実施形態において、本明細書には、
及びその薬学的に許容可能な塩から選択される化合物
［式中、Ｌは、抗体に共有結合的に結び付いているリンカーである］が提供される。
及びその薬学的に許容可能な塩から選択される化合物
［式中、Ｌは、抗体に共有結合的に結び付いているリンカーである］が提供される。
また、様々な実施形態において、本明細書には、例えば、新生物性障害、例えば癌の治療における、記載されるＡＤＣ化合物、ハーボキシジエン化合物、及び組成物についての治療的使用も提供される。特定の態様において、本開示は、ＨＥＲ２、ＣＤ１３８、ＥＰＨＡ２、ＭＳＬＮ、ＦＯＬＨ１、ＣＤＨ６、ＣＥＡＣＡＭ５、ＣＦＣ１Ｂ、ＥＮＰＰ３、ＦＯＬＲ１、ＨＡＶＣＲ１、ＫＩＴ、ＭＥＴ、ＭＵＣ１６、ＳＬＣ３９Ａ６、ＳＬＣ４４Ａ４、又はＳＴＥＡＰ１など、ＡＤＣの抗体又は抗原結合断片によって標的化される抗原を発現する新生物性障害、例えば癌を治療する方法を提供する。
特定の態様において、本開示は、新生物性障害を有する又は有する疑いがある対象を、記載されるＡＤＣ又は組成物のいずれか１つの治療有効量及び／又は治療有効レジメンを対象に投与することにより治療する方法を提供する。一部の実施形態において、新生物性障害は血液学的悪性腫瘍又は固形腫瘍である。一部の実施形態において、新生物性障害は血液学的悪性腫瘍である。一部の実施形態において、血液学的悪性腫瘍は、Ｂ細胞悪性腫瘍、白血病、リンパ腫、及び骨髄腫から選択される。一部の実施形態において、血液学的悪性腫瘍は、急性骨髄性白血病及び多発性骨髄腫から選択される。一部の実施形態において、新生物性障害は固形腫瘍である。一部の実施形態において、固形腫瘍は、乳癌（例えば、ＨＥＲ２陽性乳癌）、胃癌（例えば、胃腺癌）、前立腺癌、卵巣癌、肺癌（例えば、肺腺癌）、子宮癌（例えば、漿液性子宮内膜癌）、唾液管癌、黒色腫、結腸癌、子宮頸癌、膵癌、腎癌、結腸直腸癌、及び食道癌から選択される。一部の実施形態において、固形腫瘍は、ＨＥＲ２陽性乳癌、胃腺癌、前立腺癌、及び骨肉腫から選択される。
一部の実施形態において、本抗体－薬物コンジュゲート又は組成物による治療は、標的抗原を発現しないが、標的抗原を発現する新生物細胞に隣接する新生物細胞のバイスタンダー殺傷を誘導する。一部の実施形態において、対象は、標的抗原を発現する１つ以上の新生物細胞を有する。
一部の実施形態において、標的抗原はＨＥＲ２である。一部の実施形態において、１つ以上の新生物細胞は、ＨＥＲ２を発現する乳癌、卵巣癌、胃癌、肺癌（例えば、肺腺癌）、子宮癌（例えば、漿液性子宮内膜癌）、骨肉腫、又は唾液管癌にある。一部の実施形態において、対象は、（ａ）単独投与時の抗ＨＥＲ２抗体及び／又は（ｂ）単独投与時のハーボキシジエンスプライシング調節薬による治療に不応性又は難反応性である。一部の実施形態において、対象は、単独投与時のハーボキシジエンスプライシング調節薬による治療に不忍容、不応性、又は難反応性である。
一部の実施形態において、標的抗原はＣＤ１３８である。一部の実施形態において、１つ以上の新生物細胞は、ＣＤ１３８を発現する多発性骨髄腫にある。一部の実施形態において、対象は、（ａ）単独投与時の抗ＣＤ１３８抗体及び／又は（ｂ）単独投与時のハーボキシジエンスプライシング調節薬による治療に不応性又は難反応性である。一部の実施形態において、対象は、単独投与時のハーボキシジエンスプライシング調節薬による治療に不忍容、不応性、又は難反応性である。
一部の実施形態において、標的抗原はＥＰＨＡ２である。一部の実施形態において、１つ以上の新生物細胞は、ＥＰＨＡ２を発現する乳癌、前立腺癌、卵巣癌、肺癌、黒色腫、結腸癌、又は食道癌にある。一部の実施形態において、対象は、（ａ）単独投与時の抗ＥＰＨＡ２抗体及び／又は（ｂ）単独投与時のハーボキシジエンスプライシング調節薬による治療に不応性又は難反応性である。一部の実施形態において、対象は、単独投与時のハーボキシジエンスプライシング調節薬による治療に不忍容、不応性、又は難反応性である。
一部の実施形態において、標的抗原はＭＳＬＮである。一部の実施形態において、１つ以上の新生物細胞は、ＭＳＬＮを発現する卵巣癌、子宮頸癌、膵癌、又は肺癌（例えば、肺腺癌）にある。一部の実施形態において、対象は、（ａ）単独投与時の抗ＭＳＬＮ抗体及び／又は（ｂ）単独投与時のスプライシング調節薬による治療に不応性又は難反応性である。一部の実施形態において、対象は、単独投与時のスプライシング調節薬による治療に不忍容、不応性、又は難反応性である。
一部の実施形態において、標的抗原はＦＯＬＨ１である。一部の実施形態において、１つ以上の新生物細胞は、ＦＯＬＨ１を発現する前立腺癌にある。一部の実施形態において、対象は、（ａ）単独投与時の抗ＦＯＬＨ１抗体及び／又は（ｂ）単独投与時のスプライシング調節薬による治療に不応性又は難反応性である。一部の実施形態において、対象は、単独投与時のスプライシング調節薬による治療に不忍容、不応性、又は難反応性である。
一部の実施形態において、標的抗原はＣＤＨ６である。一部の実施形態において、１つ以上の新生物細胞は、ＣＤＨ６を発現する腎癌にある。一部の実施形態において、対象は、（ａ）単独投与時の抗ＣＤＨ６抗体及び／又は（ｂ）単独投与時のスプライシング調節薬による治療に不応性又は難反応性である。一部の実施形態において、対象は、単独投与時のスプライシング調節薬による治療に不忍容、不応性、又は難反応性である。
一部の実施形態において、標的抗原はＣＥＡＣＡＭ５である。一部の実施形態において、１つ以上の新生物細胞は、ＣＥＡＣＡＭ５を発現する結腸直腸癌にある。一部の実施形態において、対象は、（ａ）単独投与時の抗ＣＥＡＣＡＭ５抗体及び／又は（ｂ）単独投与時のスプライシング調節薬による治療に不応性又は難反応性である。一部の実施形態において、対象は、単独投与時のスプライシング調節薬による治療に不忍容、不応性、又は難反応性である。
一部の実施形態において、標的抗原はＣＦＣ１Ｂである。一部の実施形態において、１つ以上の新生物細胞は、ＣＦＣ１Ｂを発現する膵癌にある。一部の実施形態において、対象は、（ａ）単独投与時の抗ＣＦＣ１Ｂ抗体及び／又は（ｂ）単独投与時のスプライシング調節薬による治療に不応性又は難反応性である。一部の実施形態において、対象は、単独投与時のスプライシング調節薬による治療に不忍容、不応性、又は難反応性である。
一部の実施形態において、標的抗原はＥＮＰＰ３である。一部の実施形態において、１つ以上の新生物細胞は、ＥＮＰＰ３を発現する腎癌にある。一部の実施形態において、対象は、（ａ）単独投与時の抗ＥＮＰＰ３抗体及び／又は（ｂ）単独投与時のスプライシング調節薬による治療に不応性又は難反応性である。一部の実施形態において、対象は、単独投与時のスプライシング調節薬による治療に不忍容、不応性、又は難反応性である。
一部の実施形態において、標的抗原はＦＯＬＲ１である。一部の実施形態において、１つ以上の新生物細胞は、ＦＯＬＲ１を発現する卵巣癌にある。一部の実施形態において、対象は、（ａ）単独投与時の抗ＦＯＬＲ１抗体及び／又は（ｂ）単独投与時のスプライシング調節薬による治療に不応性又は難反応性である。一部の実施形態において、対象は、単独投与時のスプライシング調節薬による治療に不忍容、不応性、又は難反応性である。
一部の実施形態において、標的抗原はＨＡＶＣＲ１である。一部の実施形態において、１つ以上の新生物細胞は、ＨＡＶＣＲ１を発現する腎癌又は食道癌にある。一部の実施形態において、対象は、（ａ）単独投与時の抗ＨＡＶＣＲ１抗体及び／又は（ｂ）単独投与時のスプライシング調節薬による治療に不応性又は難反応性である。一部の実施形態において、対象は、単独投与時のスプライシング調節薬による治療に不忍容、不応性、又は難反応性である。
一部の実施形態において、標的抗原はＫＩＴである。一部の実施形態において、１つ以上の新生物細胞は、ＫＩＴを発現する腎癌にある。一部の実施形態において、対象は、（ａ）単独投与時の抗ＫＩＴ抗体及び／又は（ｂ）単独投与時のスプライシング調節薬による治療に不応性又は難反応性である。一部の実施形態において、対象は、単独投与時のスプライシング調節薬による治療に不忍容、不応性、又は難反応性である。
一部の実施形態において、標的抗原はＭＥＴである。一部の実施形態において、１つ以上の新生物細胞は、ＭＥＴを発現する腎癌又は食道癌にある。一部の実施形態において、対象は、（ａ）単独投与時の抗ＭＥＴ抗体及び／又は（ｂ）単独投与時のスプライシング調節薬による治療に不応性又は難反応性である。一部の実施形態において、対象は、単独投与時のスプライシング調節薬による治療に不忍容、不応性、又は難反応性である。
一部の実施形態において、標的抗原はＭＵＣ１６である。一部の実施形態において、１つ以上の新生物細胞は、ＭＵＣ１６を発現する卵巣癌、子宮頸癌、又は乳癌にある。一部の実施形態において、対象は、（ａ）単独投与時の抗ＭＵＣ１６抗体及び／又は（ｂ）単独投与時のスプライシング調節薬による治療に不応性又は難反応性である。一部の実施形態において、対象は、単独投与時のスプライシング調節薬による治療に不忍容、不応性、又は難反応性である。
一部の実施形態において、標的抗原はＳＬＣ３９Ａ６である。一部の実施形態において、１つ以上の新生物細胞は、ＳＬＣ３９Ａ６を発現する乳癌又は前立腺癌にある。一部の実施形態において、対象は、（ａ）単独投与時の抗ＳＬＣ３９Ａ６抗体及び／又は（ｂ）単独投与時のスプライシング調節薬による治療に不応性又は難反応性である。一部の実施形態において、対象は、単独投与時のスプライシング調節薬による治療に不忍容、不応性、又は難反応性である。
一部の実施形態において、標的抗原はＳＬＣ４４Ａ４である。一部の実施形態において、１つ以上の新生物細胞は、ＳＬＣ４４Ａ４を発現する前立腺癌にある。一部の実施形態において、対象は、（ａ）単独投与時の抗ＳＬＣ４４Ａ４抗体及び／又は（ｂ）単独投与時のスプライシング調節薬による治療に不応性又は難反応性である。一部の実施形態において、対象は、単独投与時のスプライシング調節薬による治療に不忍容、不応性、又は難反応性である。
一部の実施形態において、標的抗原はＳＴＥＡＰ１である。一部の実施形態において、１つ以上の新生物細胞は、ＳＴＥＡＰ１を発現する前立腺癌にある。一部の実施形態において、対象は、（ａ）単独投与時の抗ＳＴＥＡＰ１抗体及び／又は（ｂ）単独投与時のスプライシング調節薬による治療に不応性又は難反応性である。一部の実施形態において、対象は、単独投与時のスプライシング調節薬による治療に不忍容、不応性、又は難反応性である。
特定の他の態様において、本開示は、新生物性障害を有する又は有する疑いがある対象において、記載されるＡＤＣ又は組成物のいずれか１つの治療有効量及び／又は治療有効レジメンを対象に投与することにより腫瘍の成長を低減又は阻害する方法を提供する。
一部の実施形態において、本抗体－薬物コンジュゲート又は組成物による治療は、標的抗原を発現しないが、標的抗原を発現する新生物腫瘍細胞に隣接する新生物腫瘍細胞のバイスタンダー殺傷を誘導する。一部の実施形態において、腫瘍は、標的抗原を発現する１つ以上の新生物細胞を含む。
一部の実施形態において、標的抗原はＨＥＲ２である。一部の実施形態において、１つ以上の新生物細胞は、ＨＥＲ２を発現する乳癌、卵巣癌、胃癌、肺癌（例えば、肺腺癌）、子宮癌（例えば、漿液性子宮内膜癌）、骨肉腫、又は唾液管癌に由来する。一部の実施形態において、腫瘍は、（ａ）単独投与時の抗ＨＥＲ２抗体及び／又は（ｂ）単独投与時のハーボキシジエンスプライシング調節薬による治療に抵抗性又は難治性である。
一部の実施形態において、標的抗原はＣＤ１３８である。一部の実施形態において、１つ以上の新生物細胞は、ＣＤ１３８を発現する多発性骨髄腫に由来する。一部の実施形態において、腫瘍は、（ａ）単独投与時の抗ＣＤ１３８抗体及び／又は（ｂ）単独投与時のハーボキシジエンスプライシング調節薬による治療に抵抗性又は難治性である。
一部の実施形態において、標的抗原はＥＰＨＡ２である。一部の実施形態において、１つ以上の新生物細胞は、ＥＰＨＡ２を発現する乳癌、前立腺癌、卵巣癌、肺癌、黒色腫、結腸癌、又は食道癌に由来する。一部の実施形態において、腫瘍は、（ａ）単独投与時の抗ＥＰＨＡ２抗体及び／又は（ｂ）単独投与時のハーボキシジエンスプライシング調節薬による治療に抵抗性又は難治性である。
一部の実施形態において、標的抗原はＭＳＬＮである。一部の実施形態において、１つ以上の新生物細胞は、ＭＳＬＮを発現する卵巣癌、子宮頸癌、膵癌、又は肺癌（例えば、肺腺癌）に由来する。一部の実施形態において、腫瘍は、（ａ）単独投与時の抗ＭＳＬＮ抗体及び／又は（ｂ）単独投与時のスプライシング調節薬による治療に抵抗性又は難治性である。
一部の実施形態において、標的抗原はＦＯＬＨ１である。一部の実施形態において、１つ以上の新生物細胞は、ＦＯＬＨ１を発現する前立腺癌に由来する。一部の実施形態において、腫瘍は、（ａ）単独投与時の抗ＦＯＬＨ１抗体及び／又は（ｂ）単独投与時のスプライシング調節薬による治療に抵抗性又は難治性である。
一部の実施形態において、標的抗原はＣＤＨ６である。一部の実施形態において、１つ以上の新生物細胞は、ＣＤＨ６を発現する腎癌に由来する。一部の実施形態において、腫瘍は、（ａ）単独投与時の抗ＣＤＨ６抗体及び／又は（ｂ）単独投与時のスプライシング調節薬による治療に抵抗性又は難治性である。
一部の実施形態において、標的抗原はＣＥＡＣＡＭ５である。一部の実施形態において、１つ以上の新生物細胞は、ＣＥＡＣＡＭ５を発現する結腸直腸癌に由来する。一部の実施形態において、腫瘍は、（ａ）単独投与時の抗ＣＥＡＣＡＭ５抗体及び／又は（ｂ）単独投与時のスプライシング調節薬による治療に抵抗性又は難治性である。
一部の実施形態において、標的抗原はＣＦＣ１Ｂである。一部の実施形態において、１つ以上の新生物細胞は、ＣＦＣ１Ｂを発現する膵癌に由来する。一部の実施形態において、腫瘍は、（ａ）単独投与時の抗ＣＦＣ１Ｂ抗体及び／又は（ｂ）単独投与時のスプライシング調節薬による治療に抵抗性又は難治性である。
一部の実施形態において、標的抗原はＥＮＰＰ３である。一部の実施形態において、１つ以上の新生物細胞は、ＥＮＰＰ３を発現する腎癌に由来する。一部の実施形態において、腫瘍は、（ａ）単独投与時の抗ＥＮＰＰ３抗体及び／又は（ｂ）単独投与時のスプライシング調節薬による治療に抵抗性又は難治性である。
一部の実施形態において、標的抗原はＦＯＬＲ１である。一部の実施形態において、１つ以上の新生物細胞は、ＦＯＬＲ１を発現する卵巣癌に由来する。一部の実施形態において、腫瘍は、（ａ）単独投与時の抗ＦＯＬＲ１抗体及び／又は（ｂ）単独投与時のスプライシング調節薬による治療に抵抗性又は難治性である。
一部の実施形態において、標的抗原はＨＡＶＣＲ１である。一部の実施形態において、１つ以上の新生物細胞は、ＨＡＶＣＲ１を発現する腎癌又は食道癌に由来する。一部の実施形態において、腫瘍は、（ａ）単独投与時の抗ＨＡＶＣＲ１抗体及び／又は（ｂ）単独投与時のスプライシング調節薬による治療に抵抗性又は難治性である。
一部の実施形態において、標的抗原はＫＩＴである。一部の実施形態において、１つ以上の新生物細胞は、ＫＩＴを発現する腎癌に由来する。一部の実施形態において、腫瘍は、（ａ）単独投与時の抗ＫＩＴ抗体及び／又は（ｂ）単独投与時のスプライシング調節薬による治療に抵抗性又は難治性である。
一部の実施形態において、標的抗原はＭＥＴである。一部の実施形態において、１つ以上の新生物細胞は、ＭＥＴを発現する腎癌又は食道癌に由来する。一部の実施形態において、腫瘍は、（ａ）単独投与時の抗ＭＥＴ抗体及び／又は（ｂ）単独投与時のスプライシング調節薬による治療に抵抗性又は難治性である。
一部の実施形態において、標的抗原はＭＵＣ１６である。一部の実施形態において、１つ以上の新生物細胞は、ＭＵＣ１６を発現する卵巣癌、子宮頸癌、又は乳癌に由来する。一部の実施形態において、腫瘍は、（ａ）単独投与時の抗ＭＵＣ１６抗体及び／又は（ｂ）単独投与時のスプライシング調節薬による治療に抵抗性又は難治性である。
一部の実施形態において、標的抗原はＳＬＣ３９Ａ６である。一部の実施形態において、１つ以上の新生物細胞は、ＳＬＣ３９Ａ６を発現する乳癌又は前立腺癌に由来する。一部の実施形態において、腫瘍は、（ａ）単独投与時の抗ＳＬＣ３９Ａ６抗体及び／又は（ｂ）単独投与時のスプライシング調節薬による治療に抵抗性又は難治性である。
一部の実施形態において、標的抗原はＳＬＣ４４Ａ４である。一部の実施形態において、１つ以上の新生物細胞は、ＳＬＣ４４Ａ４を発現する前立腺癌に由来する。一部の実施形態において、腫瘍は、（ａ）単独投与時の抗ＳＬＣ４４Ａ４抗体及び／又は（ｂ）単独投与時のスプライシング調節薬による治療に抵抗性又は難治性である。
一部の実施形態において、標的抗原はＳＴＥＡＰ１である。一部の実施形態において、１つ以上の新生物細胞は、ＳＴＥＡＰ１を発現する前立腺癌に由来する。一部の実施形態において、腫瘍は、（ａ）単独投与時の抗ＳＴＥＡＰ１抗体及び／又は（ｂ）単独投与時のスプライシング調節薬による治療に抵抗性又は難治性である。
更に他の態様において、本開示は、新生物性障害を有する又は有する疑いがある対象に、記載されるＡＤＣ又は組成物のいずれか１つによる治療が奏効するかどうかを、対象からの生体試料を提供すること、及びその生体試料にＡＤＣ又は組成物を接触させることにより決定する方法を提供する。一部の実施形態において、生体試料は腫瘍試料である。一部の実施形態において、腫瘍試料は腫瘍生検又は血液試料である。一部の実施形態において、血液試料は、血液、血液分画物、又は血液若しくは血液分画物から得られる細胞から選択される。一部の実施形態において、対象は、標的抗原を発現する１つ以上の新生物細胞を有する。一部の実施形態において、標的抗原はＨＥＲ２である。一部の実施形態において、１つ以上の新生物細胞は、ＨＥＲ２を発現する乳癌、卵巣癌、胃癌、肺癌（例えば、肺腺癌）、子宮癌（例えば、漿液性子宮内膜癌）、骨肉腫、又は唾液管癌に由来する。一部の実施形態において、標的抗原はＣＤ１３８である。一部の実施形態において、１つ以上の新生物細胞は、ＣＤ１３８を発現する多発性骨髄腫に由来する。一部の実施形態において、標的抗原はＥＰＨＡ２である。一部の実施形態において、１つ以上の新生物細胞は、ＥＰＨＡ２を発現する乳癌、前立腺癌、卵巣癌、肺癌、黒色腫、結腸癌、又は食道癌に由来する。一部の実施形態において、標的抗原はＭＳＬＮである。一部の実施形態において、１つ以上の新生物細胞は、ＭＳＬＮを発現する卵巣癌、子宮頸癌、膵癌、又は肺癌（例えば、肺腺癌）に由来する。一部の実施形態において、標的抗原はＦＯＬＨ１である。一部の実施形態において、１つ以上の新生物細胞は、ＦＯＬＨ１を発現する前立腺癌に由来する。一部の実施形態において、標的抗原はＣＤＨ６である。一部の実施形態において、１つ以上の新生物細胞は、ＣＤＨ６を発現する腎癌に由来する。一部の実施形態において、標的抗原はＣＥＡＣＡＭ５である。一部の実施形態において、１つ以上の新生物細胞は、ＣＥＡＣＡＭ５を発現する結腸直腸癌に由来する。一部の実施形態において、標的抗原はＣＦＣ１Ｂである。一部の実施形態において、１つ以上の新生物細胞は、ＣＦＣ１Ｂを発現する膵癌に由来する。一部の実施形態において、標的抗原はＥＮＰＰ３である。一部の実施形態において、１つ以上の新生物細胞は、ＥＮＰＰ３を発現する腎癌に由来する。一部の実施形態において、標的抗原はＦＯＬＲ１である。一部の実施形態において、１つ以上の新生物細胞は、ＦＯＬＲ１を発現する卵巣癌に由来する。一部の実施形態において、標的抗原はＨＡＶＣＲ１である。一部の実施形態において、１つ以上の新生物細胞は、ＨＡＶＣＲ１を発現する腎癌又は食道癌に由来する。一部の実施形態において、標的抗原はＫＩＴである。一部の実施形態において、１つ以上の新生物細胞は、ＫＩＴを発現する腎癌に由来する。一部の実施形態において、標的抗原はＭＥＴである。一部の実施形態において、１つ以上の新生物細胞は、ＭＥＴを発現する腎癌又は食道癌に由来する。一部の実施形態において、標的抗原はＭＵＣ１６である。一部の実施形態において、１つ以上の新生物細胞は、ＭＵＣ１６を発現する卵巣癌、子宮頸癌、又は乳癌に由来する。一部の実施形態において、標的抗原はＳＬＣ３９Ａ６である。一部の実施形態において、１つ以上の新生物細胞は、ＳＬＣ３９Ａ６を発現する乳癌又は前立腺癌に由来する。一部の実施形態において、標的抗原はＳＬＣ４４Ａ４である。一部の実施形態において、１つ以上の新生物細胞は、ＳＬＣ４４Ａ４を発現する前立腺癌に由来する。一部の実施形態において、標的抗原はＳＴＥＡＰ１である。一部の実施形態において、１つ以上の新生物細胞は、ＳＴＥＡＰ１を発現する前立腺癌に由来する。
更に、本明細書には、様々な実施形態において、ＡＤＣと、薬学的に許容可能な希釈剤、担体、及び／又は賦形剤とを含む医薬組成物が提供される。記載されるＡＤＣ化合物及び組成物の作製方法もまた開示される。
開示される組成物及び方法は、以下の詳細な説明を参照することにより更に容易に理解され得る。
本文書全体を通じて、記載は組成物及び当該組成物の使用方法に言及している。本開示が、ある組成物に関連する特徴又は実施形態を記載又は特許請求する場合、かかる特徴又は実施形態は、その組成物の使用方法にも等しく適用可能である。同様に、本開示が、ある組成物の使用方法に関連する特徴又は実施形態を記載又は特許請求する場合、かかる特徴又は実施形態は、その組成物にも等しく適用可能である。
値の範囲が表されるとき、それには、その範囲内にある任意の特定の値を用いる実施形態が含まれる。更に、範囲で記述される値への言及には、当該範囲内にある一つ一つの値が含まれる。全ての範囲はその端点を含み、且つ組み合わせ可能である。先行語「約」の使用によって値が近似値として表されるとき、その特定の値が別の実施形態を成すことは理解されるであろう。特定の数値への言及には、文脈上特に明確に指示されない限り、少なくとも当該の特定の値が含まれる。「又は」の使用は、それが使用されている具体的な文脈上特に指示されない限り、「及び／又は」を意味するものとする。
明確にするため、本明細書に別々の実施形態の文脈で記載される本開示の組成物及び方法の特定の特徴がまた、単一の実施形態に組み合わせて提供されてもよいことが理解されるべきである。逆に、簡略にするため、単一の実施形態の文脈で記載される本開示の組成物及び方法の様々な特徴がまた、別々に又は任意の部分的な組み合わせで提供されてもよい。
本明細書に引用する全ての参考文献は、あらゆる目的で参照によって援用される。参考文献と本明細書が矛盾する場合、本明細書が優先するものとする。
定義
本明細書及び特許請求の範囲全体を通じて、記載の態様に関して様々な用語が用いられる。特に指示されない限り、かかる用語には、当該技術分野におけるその通常の意味が与えられるべきである。他の具体的に定義される用語は、本明細書に提供される定義と整合するように解釈されるべきである。
本明細書及び特許請求の範囲全体を通じて、記載の態様に関して様々な用語が用いられる。特に指示されない限り、かかる用語には、当該技術分野におけるその通常の意味が与えられるべきである。他の具体的に定義される用語は、本明細書に提供される定義と整合するように解釈されるべきである。
本明細書で使用されるとき、単数形「ａ」、「ａｎ」、及び「ｔｈｅ」は、文脈上特に明確に指示されない限り、複数形を含む。
数的な値及び範囲の文脈で用語「約」又は「近似的に」は、当業者には本明細書に含まれる教示から明らかなとおり、反応混合物中に所望の量の核酸又はポリペプチドを有するなど、実施形態が意図したとおりに動作し得るような、記載される値又は範囲を近似する又はそれに近い値又は範囲を指す。一部の実施形態において、約とは、ある数的な量の±１０％を意味する。
用語「抗体－薬物コンジュゲート」、「抗体コンジュゲート」、「コンジュゲート」、「イムノコンジュゲート」、及び「ＡＤＣ」は同義的に使用され、１つ以上の治療化合物（例えば、ハーボキシジエンスプライシング調節薬）が１つ以上の抗体又は抗原結合断片に連結されているものを指し、一般式：Ａｂ－（Ｌ－Ｈ）ｐ（式Ｉ）［式中、Ａｂ＝抗体又は抗原結合断片、Ｌ＝リンカー部分、Ｈ＝ハーボキシジエンスプライシング調節薬（例えば、ハーボキシジエン又はその誘導体）、及びｐ＝各抗体又は抗原結合断片当たりの薬物部分の数］によって定義される。ハーボキシジエンスプライシング調節薬を含むＡＤＣはまた、本明細書では、より具体的に「ハーボキシジエンスプライシング調節薬負荷抗体」又は「ＳＭＬＡ」と称されることもある。ハーボキシジエンスプライシング調節薬を含むＡＤＣでは、「ｐ」は、抗体又は抗原結合断片に連結したハーボキシジエンスプライシング調節薬の数を指す。一部の実施形態において、リンカーＬは、抗体又は抗原結合断片とハーボキシジエンスプライシング調節薬との間に切断可能部分を含んでもよい。一部の実施形態において、リンカーＬは、１つ又は複数のスペーサー単位によって抗体又は抗原結合断片及びハーボキシジエンスプライシング調節薬のいずれか一方又は両方に結び付くことのできる切断可能部分を含んでもよい。一部の実施形態において、スペーサー単位が切断可能部分をハーボキシジエンスプライシング調節薬に結び付けるとき、それは自己犠牲性スペーサー単位である。他の実施形態において、リンカーＬは切断可能部分を含まず、非切断可能リンカーである。一部の実施形態において、リンカーＬは、抗体又は抗原結合断片及びハーボキシジエンスプライシング調節薬に直接結び付くことのできる少なくとも１つのスペーサー単位を含んでもよい。例示的切断可能及び非切断可能リンカーは、本明細書に記載及び例示される。
用語「抗体」は、最も広義には、免疫グロブリン分子の可変領域内にある少なくとも１つの抗原認識部位を介してタンパク質、ポリペプチド、炭水化物、ポリヌクレオチド、脂質、又は前述の組み合わせなどの標的を認識し、それに特異的に結合する免疫グロブリン分子を指して使用される。抗体の重鎖は重鎖可変ドメイン（ＶＨ）と重鎖定常領域（ＣＨ）とで構成される。軽鎖は軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）と軽鎖定常ドメイン（ＣＬ）とで構成される。本願の目的上、成熟重鎖及び軽鎖可変ドメインは、各々が、３つの相補性決定領域（ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３）を４つのフレームワーク領域（ＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３、及びＦＲ４）内に、Ｎ末端からＣ末端にＦＲ１、ＣＤＲ１、ＦＲ２、ＣＤＲ２、ＦＲ３、ＣＤＲ３、及びＦＲ４に並んで含む。「抗体」は、天然に存在するものであっても、又は従来のハイブリドーマ技術によって作製されるモノクローナル抗体など、人工的であってもよい。用語「抗体」には、完全長モノクローナル抗体及び完全長ポリクローナル抗体、並びに、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ、及び単鎖抗体などの抗体断片が含まれる。抗体は、５つの主要な免疫グロブリンクラス：ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧ、及びＩｇＭ、又はそのサブクラス（例えば、アイソタイプＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４）のうちのいずれか１つであり得る。この用語は更に、ヒト抗体、キメラ抗体、ヒト化抗体、及び所望の生物学的活性を示す（例えば、標的抗原に結合する、標的抗原発現細胞内にインターナライズする）限りにおいて、抗原認識部位を含有する任意の修飾免疫グロブリン分子を包含する。
用語「モノクローナル抗体」は、本明細書で使用されるとき、実質的に均質な抗体の集団から得られる抗体を指し、即ち、その集団を占める個々の抗体は、少量で存在し得る可能性のある天然に存在する突然変異を除いては同一である。モノクローナル抗体は高度に特異的であり、単一の抗原エピトープを対象とする。対照的に、従来の（ポリクローナル）抗体製剤は、典型的には、異なるエピトープを対象とする（又はそれに特異的な）多数の抗体を含む。修飾語句「モノクローナル」は、その抗体が実質的に均質な抗体集団から得られているという性格を指示するものであり、その抗体が任意の特定の方法によって作製されている必要があると解釈されてはならない。例えば、本開示において使用されることになるモノクローナル抗体は、Ｋｏｈｌｅｒ ｅｔ ａｌ．（１９７５）Ｎａｔｕｒｅ ２５６：４９５によって最初に記載されたハイブリドーマ法によって作製されてもよく、又は組換えＤＮＡ法によって作製されてもよい（例えば、米国特許第４，８１６，５６７号明細書を参照のこと）。モノクローナル抗体はまた、例えば、Ｃｌａｃｋｓｏｎ ｅｔ ａｌ．（１９９１）Ｎａｔｕｒｅ ３５２：６２４－８、及びＭａｒｋｓ ｅｔ ａｌ．（１９９１）Ｊ Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ．２２２：５８１－９７に記載される技法を用いて、ファージ抗体ライブラリから単離されてもよい。
本明細書に記載されるモノクローナル抗体は、具体的には、重鎖及び／又は軽鎖の一部分が、特定の種に由来する又は特定の抗体クラス若しくはサブクラスに属する抗体中の対応する配列と同一又は相同である一方、１つ又は複数の鎖の残りの部分が、別の種に由来する又は別の抗体クラス若しくはサブクラスに属する抗体中の対応する配列と同一又は相同である「キメラ」抗体、並びに標的抗原に特異的に結合し及び／又は所望の生物学的活性を呈する限りにおいて、かかる抗体の断片を含む。
用語「ヒト抗体」は、本明細書で使用されるとき、ヒトによって産生される抗体又はヒトによって産生される抗体のアミノ酸配列を有する抗体を指す。
用語「キメラ抗体」は、本明細書で使用されるとき、免疫グロブリン分子のアミノ酸配列が２つ以上の種に由来する抗体を指す。一部の例では、重鎖及び軽鎖の両方の可変領域が、所望の特異性、親和性、及び活性を有する一つの種に由来する抗体の可変領域に対応する一方、定常領域が、別の種（例えば、ヒト）に由来する抗体と相同であり、それにより後者の種における免疫応答が最小限に抑えられる。
本明細書で使用されるとき、用語「ヒト化抗体」は、非ヒト（例えば、マウス）抗体並びにヒト抗体からの配列を含む抗体の形態を指す。かかる抗体は、非ヒト免疫グロブリンに由来する最小限の配列を含むキメラ抗体である。概して、ヒト化抗体は、少なくとも１つ、及び典型的には２つの可変ドメインの実質的に全てを含むことになり、ここでは超可変ループの全て又は実質的に全てが非ヒト免疫グロブリンのものに対応し、フレームワーク（ＦＲ）領域の全て又は実質的に全てがヒト免疫グロブリン配列のものである。ヒト化抗体は任意選択でまた、免疫グロブリン定常領域（Ｆｃ）、典型的にはヒト免疫グロブリンのＦｃの少なくとも一部分も含むことになる。ヒト化抗体は、抗体特異性、親和性、及び／又は活性の精緻化及び最適化のため、Ｆｖフレームワーク領域及び／又は置き換えられた非ヒト残基内のいずれかにある残基の置換によって更に修飾されてもよい。
抗体の「抗原結合断片」又は「抗原結合部分」という用語は、本明細書で使用されるとき、抗原（例えば、ＨＥＲ２、ＣＤ１３８、ＥＰＨＡ２、ＭＳＬＮ、ＦＯＬＨ１、ＣＤＨ６、ＣＥＡＣＡＭ５、ＣＦＣ１Ｂ、ＥＮＰＰ３、ＦＯＬＲ１、ＨＡＶＣＲ１、ＫＩＴ、ＭＥＴ、ＭＵＣ１６、ＳＬＣ３９Ａ６、ＳＬＣ４４Ａ４、又はＳＴＥＡＰ１）に特異的に結合する能力を保持している抗体又はタンパク質の１つ以上の断片を指す。抗原結合断片はまた、抗原発現細胞にインターナライズする能力も保持していてよい。一部の実施形態において、抗原結合断片はまた、免疫エフェクター活性も保持している。完全長抗体の断片が完全長抗体の抗原結合機能を果たし得ることが示されている。抗体の「抗原結合断片」又は「抗原結合部分」という用語の範囲内に包含される結合断片の例としては、（ｉ）ＶＬ、ＶＨ、ＣＬ、及びＣＨ１ドメインからなる一価断片であるＦａｂ断片；（ｉｉ）ヒンジ領域でジスルフィド架橋によって連結した２つのＦａｂ断片を含む二価断片であるＦ（ａｂ’）２断片；（ｉｉｉ）ＶＨ及びＣＨ１ドメインからなるＦｄ断片；（ｉｖ）抗体の単一アームのＶＬ及びＶＨドメインからなるＦｖ断片；（ｖ）単一の可変ドメイン、例えばＶＨドメインを含むｄＡｂ断片（例えば、Ｗａｒｄ ｅｔ ａｌ．（１９８９）Ｎａｔｕｒｅ ３４１：５４４－６；及び国際公開第１９９０／００５１４４号パンフレットを参照のこと）；及び（ｖｉ）単離された相補性決定領域（ＣＤＲ）が挙げられる。更に、Ｆｖ断片の２つのドメイン、ＶＬ及びＶＨは別個の遺伝子によってコードされるが、組換え方法を用いると、これらを合成リンカーによってつなぎ合わせることができ、ＶＬ及びＶＨ領域が対になって一価分子を形成する単一のタンパク質鎖（単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）として知られる）として作製することが可能となる。例えば、Ｂｉｒｄ ｅｔ ａｌ．（１９８８）Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４２：４２３－６；及びＨｕｓｔｏｎ ｅｔ ａｌ．（１９８８）Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８５：５８７９－８３を参照のこと。かかる単鎖抗体もまた、抗体の「抗原結合断片」又は「抗原結合部分」という用語の範囲内に包含されることが意図され、当該技術分野では、結合時に細胞内にインターナライズすることのできる例示的なタイプの結合断片として公知である（例えば、Ｚｈｕ ｅｔ ａｌ．（２０１０）９：２１３１－４１；Ｈｅ ｅｔ ａｌ．（２０１０）Ｊ Ｎｕｃｌ Ｍｅｄ．５１：４２７－３２；及びＦｉｔｔｉｎｇ ｅｔ ａｌ．（２０１５）ＭＡｂｓ ７：３９０－４０２を参照のこと）。特定の実施形態において、ｓｃＦｖ分子は融合タンパク質に組み込まれてもよい。ダイアボディなど、他の形態の単鎖抗体もまた包含される。ダイアボディは、ＶＨ及びＶＬドメインが単一のポリペプチド鎖上に発現する二価の二重特異性抗体であるが、同じ鎖上の２つのドメイン間での対合を許容しないほど短いリンカーを使用し、従ってそれらのドメインが強制的に別の鎖の相補ドメインと対合して２つの抗原結合部位を作り出す（例えば、Ｈｏｌｌｉｇｅｒ ｅｔ ａｌ．（１９９３）Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ．ＵＳＡ ９０：６４４４－８；及びＰｏｌｊａｋ ｅｔ ａｌ．（１９９４）Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ２：１１２１－３を参照）。抗原結合断片は、当業者に公知の従来技法を用いて得られ、そうした結合断片は、インタクトな抗体と同じ方法で有用性（例えば、結合親和性、インターナリゼーション）に関してスクリーニングされる。抗原結合断片は、インタクトなタンパク質が例えばプロテアーゼ又は化学的切断によって切断されることにより調製されてもよい。
「インターナリゼーション性」は、抗体又は抗原結合断片に関連して本明細書で使用されるとき、細胞への結合時に細胞の脂質二重層膜を通って内部コンパートメント、好ましくは細胞の分解性コンパートメントの中に取り込まれる（即ち、「インターナライズされる」）能力を有する抗体又は抗原結合断片を指す。例えば、インターナリゼーション性抗ＨＥＲ２抗体は、細胞膜上のＨＥＲ２への結合後に細胞内に取り込まれる能力を有するものである。一部の実施形態において、本明細書に開示されるＡＤＣに使用される抗体又は抗原結合断片は細胞表面抗原（例えば、ＨＥＲ２）を標的化し、且つインターナリゼーション性抗体又はインターナリゼーション性抗原結合断片である（即ち、このＡＤＣは抗原結合後に細胞膜を通って移行する）。一部の実施形態において、インターナリゼーション性抗体又は抗原結合断片は細胞表面上の受容体に結合する。細胞膜上の受容体を標的化するインターナリゼーション性抗体又はインターナリゼーション性抗原結合断片は、受容体介在性エンドサイトーシスを誘導し得る。一部の実施形態において、インターナリゼーション性抗体又はインターナリゼーション性抗原結合断片は、受容体介在性エンドサイトーシスによって細胞内に取り込まれる。
「非インターナリゼーション性」は、抗体又は抗原結合断片に関連して本明細書で使用されるとき、細胞への結合時に細胞表面に留まる抗体又は抗原結合断片を指す。一部の実施形態において、本明細書に開示されるＡＤＣに使用される抗体又は抗原結合断片は細胞表面抗原を標的化し、且つ非インターナリゼーション性抗体又は非インターナリゼーション性抗原結合断片である（即ち、このＡＤＣは抗原結合後に細胞表面に留まり、細胞膜を通って移行しない）。一部の実施形態において、非インターナリゼーション性抗体又は抗原結合断片は非インターナリゼーション性受容体又は他の細胞表面抗原に結合する。例示的非インターナリゼーション性細胞表面抗原としては、限定はされないが、ＣＡ１２５及びＣＥＡが挙げられ、非インターナリゼーション性抗原標的に結合する抗体についてもまた、当該技術分野において公知である（例えば、Ｂａｓｔ ｅｔ ａｌ．（１９８１）Ｊ Ｃｌｉｎ Ｉｎｖｅｓｔ．６８（５）：１３３１－７；Ｓｃｈｏｌｌｅｒ ａｎｄ Ｕｒｂａｎ（２００７）Ｂｉｏｍａｒｋ Ｍｅｄ．１（４）：５１３－２３；及びＢｏｕｄｏｕｓｑ ｅｔ ａｌ．（２０１３）ＰＬｏＳ Ｏｎｅ ８（７）：ｅ６９６１３を参照のこと）。
用語「ヒト上皮成長因子受容体２」、「ＨＥＲ２」、又は「ＨＥＲ２／ＮＥＵ」は、本明細書で使用されるとき、任意の天然形態のヒトＨＥＲ２を指す。この用語は、完全長ＨＥＲ２（例えば、ＵｎｉＰｒｏｔ参照配列：Ｐ０４６２６；配列番号３１）、並びに細胞プロセシングによって生じ得る任意の形態のヒトＨＥＲ２を包含する。この用語はまた、限定はされないが、ヒトＨＥＲ２の１つ以上の生物学的機能を保持しているスプライス変異体、アレル変異体、及びアイソフォームを含め、ヒトＨＥＲ２の機能性変異体又は断片も包含する（即ち、この用語が野生型タンパク質のみを指して使用されることが文脈上指示されない限り、変異体及び断片が包含される）。ＨＥＲ２はヒトから単離することができ、又は組換え的に若しくは合成方法により作製されてもよい。
用語「抗ＨＥＲ２抗体」又は「ＨＥＲ２に結合する抗体」は、ＨＥＲ２に結合する、例えば特異的に結合する任意の形態の抗体又はその断片を指し、モノクローナル抗体（完全長モノクローナル抗体を含む）、ポリクローナル抗体、及びＨＥＲ２に結合する、例えば特異的に結合する限りにおいて、生物学的に機能性の抗体断片を包含する。米国特許第５，８２１，３３７号明細書は、例示的抗ＨＥＲ２抗体配列を含め、例示的ＨＥＲ２結合配列を提供しており、それに関して参照により本明細書に援用される。一部の実施形態において、本明細書に開示されるＡＤＣに使用される抗ＨＥＲ２抗体は、インターナリゼーション性抗体又はインターナリゼーション性抗体断片である。トラスツズマブ（米国特許第５，８２１，３３７号明細書；Ｍｏｌｉｎａ ｅｔ ａｌ．（２００１）Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．６１（１２）：４７４４－９）が、例示的抗ヒトＨＥＲ２抗体である。
用語「シンデカン－１」、「ＳＤＣ１」、又は「ＣＤ１３８」は、本明細書で使用されるとき、任意の天然形態のヒトＣＤ１３８を指す。この用語は、完全長ＣＤ１３８（例えば、ＵｎｉＰｒｏｔ参照配列：Ｐ１８８２７；配列番号３２）、並びに細胞プロセシングによって生じ得る任意の形態のヒトＣＤ１３８を包含する。この用語はまた、限定はされないが、ヒトＣＤ１３８の１つ以上の生物学的機能を保持しているスプライス変異体、アレル変異体、及びアイソフォームを含め、ヒトＣＤ１３８の機能性変異体又は断片も包含する（即ち、この用語が野生型タンパク質のみを指して使用されることが文脈上指示されない限り、変異体及び断片が包含される）。ＣＤ１３８はヒトから単離することができ、又は組換え的に若しくは合成方法により作製されてもよい。
用語「抗ＣＤ１３８抗体」又は「ＣＤ１３８に結合する抗体」は、ＣＤ１３８に結合する、例えば特異的に結合する任意の形態の抗体又はその断片を指し、モノクローナル抗体（完全長モノクローナル抗体を含む）、ポリクローナル抗体、及びＣＤ１３８に結合する、例えば特異的に結合する限りにおいて、生物学的に機能性の抗体断片を包含する。一部の実施形態において、本明細書に開示されるＡＤＣに使用される抗ＣＤ１３８抗体は、インターナリゼーション性抗体又はインターナリゼーション性抗体断片である。Ｂ－Ｂ４（Ｔａｓｓｏｎｅ ｅｔ ａｌ．（２００４）Ｂｌｏｏｄ １０４：３６８８－９６）が、例示的抗ヒトＣＤ１３８抗体である。
用語「エフリンＡ型受容体２」又は「ＥＰＨＡ２」は、本明細書で使用されるとき、任意の天然形態のヒトＥＰＨＡ２を指す。この用語は、完全長ＥＰＨＡ２（例えば、ＵｎｉＰｒｏｔ参照配列：Ｐ２９３１７；配列番号３３）、並びに細胞プロセシングによって生じ得る任意の形態のヒトＥＰＨＡ２を包含する。この用語はまた、限定はされないが、ヒトＥＰＨＡ２の１つ以上の生物学的機能を保持しているスプライス変異体、アレル変異体、及びアイソフォームを含め、ヒトＥＰＨＡ２の機能性変異体又は断片も包含する（即ち、この用語が野生型タンパク質のみを指して使用されることが文脈上指示されない限り、変異体及び断片が包含される）。ＥＰＨＡ２はヒトから単離することができ、又は組換え的に若しくは合成方法により作製されてもよい。
用語「抗ＥＰＨＡ２抗体」又は「ＥＰＨＡ２に結合する抗体」は、ＥＰＨＡ２に結合する、例えば特異的に結合する任意の形態の抗体又はその断片を指し、モノクローナル抗体（完全長モノクローナル抗体を含む）、ポリクローナル抗体、及びＥＰＨＡ２に結合する、例えば特異的に結合する限りにおいて、生物学的に機能性の抗体断片を包含する。国際公開第２００７／０３０６４２号パンフレットは、例示的抗ＥＰＨＡ２抗体配列を含め、例示的ＥＰＨＡ２結合配列を提供しており、それに関して参照により本明細書に援用される。一部の実施形態において、本明細書に開示されるＡＤＣに使用される抗ＥＰＨＡ２抗体は、インターナリゼーション性抗体又はインターナリゼーション性抗体断片である。１Ｃ１（国際公開第２００７／０３０６４２号パンフレット；Ｊａｃｋｓｏｎ ｅｔ ａｌ．（２００８）Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．６８（２２）：９３６７－７４）が、例示的抗ヒトＥＰＨＡ２抗体である。
用語「メソテリン」又は「ＭＳＬＮ」は、本明細書で使用されるとき、任意の天然形態のヒトＭＳＬＮを指す。この用語は、完全長ＭＳＬＮ（例えば、ＵｎｉＰｒｏｔ参照配列：Ｑ１３４２１；配列番号９４）、並びに細胞プロセシングによって生じ得る任意の形態のヒトＭＳＬＮを包含する。この用語はまた、限定はされないが、ヒトＭＳＬＮの１つ以上の生物学的機能を保持しているスプライス変異体、アレル変異体、及びアイソフォームを含め、ヒトＭＳＬＮの機能性変異体又は断片も包含する（即ち、この用語が野生型タンパク質のみを指して使用されることが文脈上指示されない限り、変異体及び断片が包含される）。ＭＳＬＮはヒトから単離することができ、又は組換え的に若しくは合成方法により作製されてもよい。
用語「抗ＭＳＬＮ抗体」又は「ＭＳＬＮに結合する抗体」は、ＭＳＬＮに結合する、例えば特異的に結合する任意の形態の抗体又はその断片を指し、モノクローナル抗体（完全長モノクローナル抗体を含む）、ポリクローナル抗体、及びＭＳＬＮに結合する、例えば特異的に結合する限りにおいて、生物学的に機能性の抗体断片を包含する。国際公開第２０１１／０７４６２１号パンフレットは、例示的抗ＭＳＬＮ抗体配列を含め、例示的ＭＳＬＮ結合配列を提供しており、それに関して参照により本明細書に援用される。一部の実施形態において、本明細書に開示されるＡＤＣに使用される抗ＭＳＬＮ抗体は、インターナリゼーション性抗体又はインターナリゼーション性抗体断片である。１１－２５、ＩＣ１４－３０、ＩＣ７－４、ＩＣ１７－３５及び２－９が、例示的抗ヒトＭＳＬＮ抗体である。
用語「グルタミン酸カルボキシペプチダーゼ２」又は「ＦＯＬＨ１」は、本明細書で使用されるとき、任意の天然形態のヒトＦＯＬＨ１を指す。この用語は、完全長ＦＯＬＨ１（例えば、ＵｎｉＰｒｏｔ参照配列：Ｑ０４６０９；配列番号９５）、並びに細胞プロセシングによって生じ得る任意の形態のヒトＦＯＬＨ１を包含する。この用語はまた、限定はされないが、ヒトＦＯＬＨ１の１つ以上の生物学的機能を保持しているスプライス変異体、アレル変異体、及びアイソフォームを含め、ヒトＦＯＬＨ１の機能性変異体又は断片も包含する（即ち、この用語が野生型タンパク質のみを指して使用されることが文脈上指示されない限り、変異体及び断片が包含される）。ＦＯＬＨ１はヒトから単離することができ、又は組換え的に若しくは合成方法により作製されてもよい。
用語「抗ＦＯＬＨ１抗体」又は「ＦＯＬＨ１に結合する抗体」は、ＦＯＬＨ１に結合する、例えば特異的に結合する任意の形態の抗体又はその断片を指し、モノクローナル抗体（完全長モノクローナル抗体を含む）、ポリクローナル抗体、及びＦＯＬＨ１に結合する、例えば特異的に結合する限りにおいて、生物学的に機能性の抗体断片を包含する。国際公開第２０１９／０１２２６０号パンフレット及び国際公開第２０１７／２１２２５０号パンフレットは、例示的抗ＦＯＬＨ１抗体配列を含め、例示的ＦＯＬＨ１結合配列を提供しており、それに関して参照により本明細書に援用される。一部の実施形態において、本明細書に開示されるＡＤＣに使用される抗ＦＯＬＨ１抗体は、インターナリゼーション性抗体又はインターナリゼーション性抗体断片である。Ｊ５９１（脱免疫化）が、例示的抗ヒトＦＯＬＨ１抗体である。
用語「カドヘリン－６」又は「ＣＤＨ６」は、本明細書で使用されるとき、任意の天然形態のヒトＣＤＨ６を指す。この用語は、完全長ＣＤＨ６（例えば、ＵｎｉＰｒｏｔ参照配列：Ｐ５５２８５；配列番号９６）、並びに細胞プロセシングによって生じ得る任意の形態のヒトＣＤＨ６を包含する。この用語はまた、限定はされないが、ヒトＣＤＨ６の１つ以上の生物学的機能を保持しているスプライス変異体、アレル変異体、及びアイソフォームを含め、ヒトＣＤＨ６の機能性変異体又は断片も包含する（即ち、この用語が野生型タンパク質のみを指して使用されることが文脈上指示されない限り、変異体及び断片が包含される）。ＣＤＨ６はヒトから単離することができ、又は組換え的に若しくは合成方法により作製されてもよい。
用語「抗ＣＤＨ６抗体」又は「ＣＤＨ６に結合する抗体」は、ＣＤＨ６に結合する、例えば特異的に結合する任意の形態の抗体又はその断片を指し、モノクローナル抗体（完全長モノクローナル抗体を含む）、ポリクローナル抗体、及びＣＤＨ６に結合する、例えば特異的に結合する限りにおいて、生物学的に機能性の抗体断片を包含する。国際公開第２０１８／１８５６１８号パンフレットは、例示的抗ＣＤＨ６抗体配列を含め、例示的ＣＤＨ６結合配列を提供しており、それに関して参照により本明細書に援用される。一部の実施形態において、本明細書に開示されるＡＤＣに使用される抗ＣＤＨ６抗体は、インターナリゼーション性抗体又はインターナリゼーション性抗体断片である。
用語「癌胎児性抗原関連細胞接着分子５」又は「ＣＥＡＣＡＭ５」は、本明細書で使用されるとき、任意の天然形態のヒトＣＥＡＣＡＭ５を指す。この用語は、完全長ＣＥＡＣＡＭ５（例えば、ＵｎｉＰｒｏｔ参照配列：Ｐ０６７３１；配列番号９７）、並びに細胞プロセシングによって生じ得る任意の形態のヒトＣＥＡＣＡＭ５を包含する。この用語はまた、限定はされないが、ヒトＣＥＡＣＡＭ５の１つ以上の生物学的機能を保持しているスプライス変異体、アレル変異体、及びアイソフォームを含め、ヒトＣＥＡＣＡＭ５の機能性変異体又は断片も包含する（即ち、この用語が野生型タンパク質のみを指して使用されることが文脈上指示されない限り、変異体及び断片が包含される）。ＣＥＡＣＡＭ５はヒトから単離することができ、又は組換え的に若しくは合成方法により作製されてもよい。
用語「抗ＣＥＡＣＡＭ５抗体」又は「ＣＥＡＣＡＭ５に結合する抗体」は、ＣＥＡＣＡＭ５に結合する、例えば特異的に結合する任意の形態の抗体又はその断片を指し、モノクローナル抗体（完全長モノクローナル抗体を含む）、ポリクローナル抗体、及びＣＥＡＣＡＭ５に結合する、例えば特異的に結合する限りにおいて、生物学的に機能性の抗体断片を包含する。米国特許出願公開第２０１５／０１２５３８６号明細書は、例示的抗ＣＥＡＣＡＭ５抗体配列を含め、例示的ＣＥＡＣＡＭ５結合配列を提供しており、それに関して参照により本明細書に援用される。一部の実施形態において、本明細書に開示されるＡＤＣに使用される抗ＣＥＡＣＡＭ５抗体は、インターナリゼーション性抗体又はインターナリゼーション性抗体断片である。ｈＭＮ１４が、例示的抗ヒトＣＥＡＣＡＭ５抗体である。
用語「クリプティックファミリータンパク質１Ｂ」又は「ＣＦＣ１Ｂ」は、本明細書で使用されるとき、任意の天然形態のヒトＣＦＣ１Ｂを指す。この用語は、完全長ＣＦＣ１Ｂ（例えば、ＵｎｉＰｒｏｔ参照配列：Ｐ０ＣＧ３６；配列番号９８）、並びに細胞プロセシングによって生じ得る任意の形態のヒトＣＦＣ１Ｂを包含する。この用語はまた、限定はされないが、ヒトＣＦＣ１Ｂの１つ以上の生物学的機能を保持しているスプライス変異体、アレル変異体、及びアイソフォームを含め、ヒトＣＦＣ１Ｂの機能性変異体又は断片も包含する（即ち、この用語が野生型タンパク質のみを指して使用されることが文脈上指示されない限り、変異体及び断片が包含される）。ＣＦＣ１Ｂはヒトから単離することができ、又は組換え的に若しくは合成方法により作製されてもよい。
用語「抗ＣＦＣ１Ｂ抗体」又は「ＣＦＣ１Ｂに結合する抗体」は、ＣＦＣ１Ｂに結合する、例えば特異的に結合する任意の形態の抗体又はその断片を指し、モノクローナル抗体（完全長モノクローナル抗体を含む）、ポリクローナル抗体、及びＣＦＣ１Ｂに結合する、例えば特異的に結合する限りにおいて、生物学的に機能性の抗体断片を包含する。国際公開第２００２／０８８１７０号パンフレットは、例示的抗ＣＦＣ１Ｂ抗体配列を含め、例示的ＣＦＣ１Ｂ結合配列を提供しており、それに関して参照により本明細書に援用される。一部の実施形態において、本明細書に開示されるＡＤＣに使用される抗ＣＦＣ１Ｂ抗体は、インターナリゼーション性抗体又はインターナリゼーション性抗体断片である。
用語「エクトヌクレオチドピロホスファターゼ／ホスホジエステラーゼファミリーメンバー３」又は「ＥＮＰＰ３」は、本明細書で使用されるとき、任意の天然形態のヒトＥＮＰＰ３を指す。この用語は、完全長ＥＮＰＰ３（例えば、ＵｎｉＰｒｏｔ参照配列：Ｏ１４６３８；配列番号９９）、並びに細胞プロセシングによって生じ得る任意の形態のヒトＥＮＰＰ３を包含する。この用語はまた、限定はされないが、ヒトＥＮＰＰ３の１つ以上の生物学的機能を保持しているスプライス変異体、アレル変異体、及びアイソフォームを含め、ヒトＥＮＰＰ３の機能性変異体又は断片も包含する（即ち、この用語が野生型タンパク質のみを指して使用されることが文脈上指示されない限り、変異体及び断片が包含される）。ＥＮＰＰ３はヒトから単離することができ、又は組換え的に若しくは合成方法により作製されてもよい。
用語「抗ＥＮＰＰ３抗体」又は「ＥＮＰＰ３に結合する抗体」は、ＥＮＰＰ３に結合する、例えば特異的に結合する任意の形態の抗体又はその断片を指し、モノクローナル抗体（完全長モノクローナル抗体を含む）、ポリクローナル抗体、及びＥＮＰＰ３に結合する、例えば特異的に結合する限りにおいて、生物学的に機能性の抗体断片を包含する。Ｄｏｎａｔｅ ｅｔ ａｌ．（（２０１６）Ｃｌｉｎ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．２２（８）：１９８９－９９）は、例示的抗ＥＮＰＰ３抗体配列を含め、例示的ＥＮＰＰ３結合配列を提供しており、それに関して参照により本明細書に援用される。一部の実施形態において、本明細書に開示されるＡＤＣに使用される抗ＥＮＰＰ３抗体は、インターナリゼーション性抗体又はインターナリゼーション性抗体断片である。
用語「葉酸受容体α」又は「ＦＯＬＲ１」は、本明細書で使用されるとき、任意の天然形態のヒトＦＯＬＲ１を指す。この用語は、完全長ＦＯＬＲ１（例えば、ＵｎｉＰｒｏｔ参照配列：Ｐ１５３２８；配列番号１００）、並びに細胞プロセシングによって生じ得る任意の形態のヒトＦＯＬＲ１を包含する。この用語はまた、限定はされないが、ヒトＦＯＬＲ１の１つ以上の生物学的機能を保持しているスプライス変異体、アレル変異体、及びアイソフォームを含め、ヒトＦＯＬＲ１の機能性変異体又は断片も包含する（即ち、この用語が野生型タンパク質のみを指して使用されることが文脈上指示されない限り、変異体及び断片が包含される）。ＦＯＬＲ１はヒトから単離することができ、又は組換え的に若しくは合成方法により作製されてもよい。
用語「抗ＦＯＬＲ１抗体」又は「ＦＯＬＲ１に結合する抗体」は、ＦＯＬＲ１に結合する、例えば特異的に結合する任意の形態の抗体又はその断片を指し、モノクローナル抗体（完全長モノクローナル抗体を含む）、ポリクローナル抗体、及びＦＯＬＲ１に結合する、例えば特異的に結合する限りにおいて、生物学的に機能性の抗体断片を包含する。国際公開第２００５／０８０４３１号パンフレット及びＣｏｎｅｙ ｅｔ ａｌ．（（１９９１）Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．５１（２２）：６１２５－３２）は、例示的抗ＦＯＬＲ１抗体配列を含め、例示的ＦＯＬＲ１結合配列を提供しており、それに関して参照により本明細書に援用される。一部の実施形態において、本明細書に開示されるＡＤＣに使用される抗ＦＯＬＲ１抗体は、インターナリゼーション性抗体又はインターナリゼーション性抗体断片である。ファルレツズマブ及びＭＯｖ１９が、例示的抗ヒトＦＯＬＲ１抗体である。
用語「Ａ型肝炎ウイルス細胞受容体１」又は「ＨＡＶＣＲ１」は、本明細書で使用されるとき、任意の天然形態のヒトＨＡＶＣＲ１を指す。この用語は、完全長ＨＡＶＣＲ１（例えば、ＵｎｉＰｒｏｔ参照配列：Ｑ９６Ｄ４２；配列番号１０１）、並びに細胞プロセシングによって生じ得る任意の形態のヒトＨＡＶＣＲ１を包含する。この用語はまた、限定はされないが、ヒトＨＡＶＣＲ１の１つ以上の生物学的機能を保持しているスプライス変異体、アレル変異体、及びアイソフォームを含め、ヒトＨＡＶＣＲ１の機能性変異体又は断片も包含する（即ち、この用語が野生型タンパク質のみを指して使用されることが文脈上指示されない限り、変異体及び断片が包含される）。ＨＡＶＣＲ１はヒトから単離することができ、又は組換え的に若しくは合成方法により作製されてもよい。
用語「抗ＨＡＶＣＲ１抗体」又は「ＨＡＶＣＲ１に結合する抗体」は、ＨＡＶＣＲ１に結合する、例えば特異的に結合する任意の形態の抗体又はその断片を指し、モノクローナル抗体（完全長モノクローナル抗体を含む）、ポリクローナル抗体、及びＨＡＶＣＲ１に結合する、例えば特異的に結合する限りにおいて、生物学的に機能性の抗体断片を包含する。Ｔｈｏｍａｓ ｅｔ ａｌ．（（２０１６）Ｍｏｌ Ｃａｎｃｅｒ Ｔｈｅｒ．１５（１２）：２９４６－５４）は、例示的抗ＨＡＶＣＲ１抗体配列を含め、例示的ＨＡＶＣＲ１結合配列を提供しており、それに関して参照により本明細書に援用される。一部の実施形態において、本明細書に開示されるＡＤＣに使用される抗ＨＡＶＣＲ１抗体は、インターナリゼーション性抗体又はインターナリゼーション性抗体断片である。
用語「マスト／幹細胞成長因子受容体Ｋｉｔ」又は「ＫＩＴ」は、本明細書で使用されるとき、任意の天然形態のヒトＫＩＴを指す。この用語は、完全長ＫＩＴ（例えば、ＵｎｉＰｒｏｔ参照配列：Ｐ１０７２１；配列番号１０２）、並びに細胞プロセシングによって生じ得る任意の形態のヒトＫＩＴを包含する。この用語はまた、限定はされないが、ヒトＫＩＴの１つ以上の生物学的機能を保持しているスプライス変異体、アレル変異体、及びアイソフォームを含め、ヒトＫＩＴの機能性変異体又は断片も包含する（即ち、この用語が野生型タンパク質のみを指して使用されることが文脈上指示されない限り、変異体及び断片が包含される）。ＫＩＴはヒトから単離することができ、又は組換え的に若しくは合成方法により作製されてもよい。
用語「抗ＫＩＴ抗体」又は「ＫＩＴに結合する抗体」は、ＫＩＴに結合する、例えば特異的に結合する任意の形態の抗体又はその断片を指し、モノクローナル抗体（完全長モノクローナル抗体を含む）、ポリクローナル抗体、及びＫＩＴに結合する、例えば特異的に結合する限りにおいて、生物学的に機能性の抗体断片を包含する。Ｓｈｉ ｅｔ ａｌ．（（２０１６）Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ １１３（３３）：Ｅ４７８４－９３）及びＡｂｒａｍｓ ｅｔ ａｌ．（（２０１８）Ｃｌｉｎ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．２４（１７）：４２９７－３０８）は、例示的抗ＫＩＴ抗体配列を含め、例示的ＫＩＴ結合配列を提供しており、それに関して参照により本明細書に援用される。一部の実施形態において、本明細書に開示されるＡＤＣに使用される抗ＫＩＴ抗体は、インターナリゼーション性抗体又はインターナリゼーション性抗体断片である。
用語「肝細胞増殖因子受容体」又は「ＭＥＴ」は、本明細書で使用されるとき、任意の天然形態のヒトＭＥＴを指す。この用語は、完全長ＭＥＴ（例えば、ＵｎｉＰｒｏｔ参照配列：Ｐ０８５８１；配列番号１０３）、並びに細胞プロセシングによって生じ得る任意の形態のヒトＭＥＴを包含する。この用語はまた、限定はされないが、ヒトＭＥＴの１つ以上の生物学的機能を保持しているスプライス変異体、アレル変異体、及びアイソフォームを含め、ヒトＭＥＴの機能性変異体又は断片も包含する（即ち、この用語が野生型タンパク質のみを指して使用されることが文脈上指示されない限り、変異体及び断片が包含される）。ＭＥＴはヒトから単離することができ、又は組換え的に若しくは合成方法により作製されてもよい。
用語「抗ＭＥＴ抗体」又は「ＭＥＴに結合する抗体」は、ＭＥＴに結合する、例えば特異的に結合する任意の形態の抗体又はその断片を指し、モノクローナル抗体（完全長モノクローナル抗体を含む）、ポリクローナル抗体、及びＭＥＴに結合する、例えば特異的に結合する限りにおいて、生物学的に機能性の抗体断片を包含する。Ｙａｎｇ ｅｔ ａｌ．（（２０１９）Ａｃｔａ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ Ｓｉｎ．）は、例示的抗ＭＥＴ抗体配列を含め、例示的ＭＥＴ結合配列を提供しており、それに関して参照により本明細書に援用される。一部の実施形態において、本明細書に開示されるＡＤＣに使用される抗ＭＥＴ抗体は、インターナリゼーション性抗体又はインターナリゼーション性抗体断片である。
用語「ムチン－１６」又は「ＭＵＣ１６」は、本明細書で使用されるとき、任意の天然形態のヒトＭＵＣ１６を指す。この用語は、完全長ＭＵＣ１６（例えば、ＵｎｉＰｒｏｔ参照配列：Ｑ８ＷＸＩ７；配列番号１０４）、並びに細胞プロセシングによって生じ得る任意の形態のヒトＭＵＣ１６を包含する。この用語はまた、限定はされないが、ヒトＭＵＣ１６の１つ以上の生物学的機能を保持しているスプライス変異体、アレル変異体、及びアイソフォームを含め、ヒトＭＵＣ１６の機能性変異体又は断片も包含する（即ち、この用語が野生型タンパク質のみを指して使用されることが文脈上指示されない限り、変異体及び断片が包含される）。ＭＵＣ１６はヒトから単離することができ、又は組換え的に若しくは合成方法により作製されてもよい。
用語「抗ＭＵＣ１６抗体」又は「ＭＵＣ１６に結合する抗体」は、ＭＵＣ１６に結合する、例えば特異的に結合する任意の形態の抗体又はその断片を指し、モノクローナル抗体（完全長モノクローナル抗体を含む）、ポリクローナル抗体、及びＭＵＣ１６に結合する、例えば特異的に結合する限りにおいて、生物学的に機能性の抗体断片を包含する。Ｌｉｕ ｅｔ ａｌ．（（２０１６）Ａｎｎ Ｏｎｃｏｌ．２７（１１）：２１２４－３０）は、例示的抗ＭＵＣ１６抗体配列を含め、例示的ＭＵＣ１６結合配列を提供しており、それに関して参照により本明細書に援用される。一部の実施形態において、本明細書に開示されるＡＤＣに使用される抗ＭＵＣ１６抗体は、インターナリゼーション性抗体又はインターナリゼーション性抗体断片である。
用語「亜鉛トランスポーターＺＩＰ６」又は「ＳＬＣ３９Ａ６」は、本明細書で使用されるとき、任意の天然形態のヒトＳＬＣ３９Ａ６を指す。この用語は、完全長ＳＬＣ３９Ａ６（例えば、ＵｎｉＰｒｏｔ参照配列：Ｑ１３４３３；配列番号１０５）、並びに細胞プロセシングによって生じ得る任意の形態のヒトＳＬＣ３９Ａ６を包含する。この用語はまた、限定はされないが、ヒトＳＬＣ３９Ａ６の１つ以上の生物学的機能を保持しているスプライス変異体、アレル変異体、及びアイソフォームを含め、ヒトＳＬＣ３９Ａ６の機能性変異体又は断片も包含する（即ち、この用語が野生型タンパク質のみを指して使用されることが文脈上指示されない限り、変異体及び断片が包含される）。ＳＬＣ３９Ａ６はヒトから単離することができ、又は組換え的に若しくは合成方法により作製されてもよい。
用語「抗ＳＬＣ３９Ａ６抗体」又は「ＳＬＣ３９Ａ６に結合する抗体」は、ＳＬＣ３９Ａ６に結合する、例えば特異的に結合する任意の形態の抗体又はその断片を指し、モノクローナル抗体（完全長モノクローナル抗体を含む）、ポリクローナル抗体、及びＳＬＣ３９Ａ６に結合する、例えば特異的に結合する限りにおいて、生物学的に機能性の抗体断片を包含する。Ｓｕｓｓｍａｎ ｅｔ ａｌ．（（２０１４）Ｍｏｌ Ｃａｎｃｅｒ Ｔｈｅｒ．１３（１２）：２９９１－３０００）は、例示的抗ＳＬＣ３９Ａ６抗体配列を含め、例示的ＳＬＣ３９Ａ６結合配列を提供しており、それに関して参照により本明細書に援用される。一部の実施形態において、本明細書に開示されるＡＤＣに使用される抗ＳＬＣ３９Ａ６抗体は、インターナリゼーション性抗体又はインターナリゼーション性抗体断片である。
用語「コリントランスポーター様タンパク質４」又は「ＳＬＣ４４Ａ４」は、本明細書で使用されるとき、任意の天然形態のヒトＳＬＣ４４Ａ４を指す。この用語は、完全長ＳＬＣ４４Ａ４（例えば、ＵｎｉＰｒｏｔ参照配列：Ｑ５３ＧＤ３；配列番号１０６）、並びに細胞プロセシングによって生じ得る任意の形態のヒトＳＬＣ４４Ａ４を包含する。この用語はまた、限定はされないが、ヒトＳＬＣ４４Ａ４の１つ以上の生物学的機能を保持しているスプライス変異体、アレル変異体、及びアイソフォームを含め、ヒトＳＬＣ４４Ａ４の機能性変異体又は断片も包含する（即ち、この用語が野生型タンパク質のみを指して使用されることが文脈上指示されない限り、変異体及び断片が包含される）。ＳＬＣ４４Ａ４はヒトから単離することができ、又は組換え的に若しくは合成方法により作製されてもよい。
用語「抗ＳＬＣ４４Ａ４抗体」又は「ＳＬＣ４４Ａ４に結合する抗体」は、ＳＬＣ４４Ａ４に結合する、例えば特異的に結合する任意の形態の抗体又はその断片を指し、モノクローナル抗体（完全長モノクローナル抗体を含む）、ポリクローナル抗体、及びＳＬＣ４４Ａ４に結合する、例えば特異的に結合する限りにおいて、生物学的に機能性の抗体断片を包含する。Ｍａｔｔｉｅ ｅｔ ａｌ．（（２０１６）Ｍｏｌ Ｃａｎｃｅｒ Ｔｈｅｒ．１５（１１）：２６７９－８７）は、例示的抗ＳＬＣ４４Ａ４抗体配列を含め、例示的ＳＬＣ４４Ａ４結合配列を提供しており、それに関して参照により本明細書に援用される。一部の実施形態において、本明細書に開示されるＡＤＣに使用される抗ＳＬＣ４４Ａ４抗体は、インターナリゼーション性抗体又はインターナリゼーション性抗体断片である。
用語「メタロレダクターゼＳＴＥＡＰ１」又は「ＳＴＥＡＰ１」は、本明細書で使用されるとき、任意の天然形態のヒトＳＴＥＡＰ１を指す。この用語は、完全長ＳＴＥＡＰ１（例えば、ＵｎｉＰｒｏｔ参照配列：Ｑ９ＵＨＥ８；配列番号１０７）、並びに細胞プロセシングによって生じ得る任意の形態のヒトＳＴＥＡＰ１を包含する。この用語はまた、限定はされないが、ヒトＳＴＥＡＰ１の１つ以上の生物学的機能を保持しているスプライス変異体、アレル変異体、及びアイソフォームを含め、ヒトＳＴＥＡＰ１の機能性変異体又は断片も包含する（即ち、この用語が野生型タンパク質のみを指して使用されることが文脈上指示されない限り、変異体及び断片が包含される）。ＳＴＥＡＰ１はヒトから単離することができ、又は組換え的に若しくは合成方法により作製されてもよい。
用語「抗ＳＴＥＡＰ１抗体」又は「ＳＴＥＡＰ１に結合する抗体」は、ＳＴＥＡＰ１に結合する、例えば特異的に結合する任意の形態の抗体又はその断片を指し、モノクローナル抗体（完全長モノクローナル抗体を含む）、ポリクローナル抗体、及びＳＴＥＡＰ１に結合する、例えば特異的に結合する限りにおいて、生物学的に機能性の抗体断片を包含する。国際公開第２００８／０５２１８７号パンフレットは、例示的抗ＳＴＥＡＰ１抗体配列を含め、例示的ＳＴＥＡＰ１結合配列を提供しており、それに関して参照により本明細書に援用される。一部の実施形態において、本明細書に開示されるＡＤＣに使用される抗ＳＴＥＡＰ１抗体は、インターナリゼーション性抗体又はインターナリゼーション性抗体断片である。
本明細書で使用されるとき、用語「特異的」、「特異的に結合する（ｓｐｅｃｉｆｉｃａｌｌｙ ｂｉｎｄｓ）」、及び「特異的に結合する（ｂｉｎｄｓ ｓｐｅｃｉｆｉｃａｌｌｙ）」は、タンパク質及び他の生物学的物質の異種集団中における抗体又は抗原結合断片（例えば、抗ＨＥＲ２抗体）と標的抗原（例えば、ＨＥＲ２）との間の結合反応を指す。抗体は、所与の一組の条件下で適切な抗原への結合を無関係な抗原又は抗原混合物への結合と比較することにより、結合の特異性に関して試験することができる。抗体が無関係な抗原又は抗原混合物と比べて少なくとも２、５、７倍、好ましくは１０倍以上高い親和性で適切な抗原に結合する場合、それは特異的と見なされる。「特異的抗体」又は「標的特異的抗体」は、標的抗原（例えば、ＨＥＲ２）にのみ結合し、しかし他の抗原には結合しない（又は最小限の結合しか呈しない）ものである。特定の実施形態において、標的抗原（例えば、ＨＥＲ２）に特異的に結合する抗体又は抗原結合断片は、１×１０－６Ｍ未満、１×１０－７Ｍ未満、１×１０－８Ｍ未満、１×１０－９Ｍ未満、１×１０－１０Ｍ未満、１×１０－１１Ｍ未満、１×１０－１２Ｍ未満、又は１×１０－１３Ｍ未満のＫＤを有する。特定の実施形態において、ＫＤは１ｐＭ～５００ｐＭである。一部の実施形態において、ＫＤは５００ｐＭ～１μＭ、１μＭ～１００ｎＭ、又は１００ｍＭ～１０ｎＭである。
用語「エピトープ」は、抗体によって認識され、且つ特異的に結合される能力を有する抗原の一部分を指す。抗原がポリペプチドであるとき、エピトープは連続アミノ酸で形成されてもよく、又はポリペプチドが三次構造に折り畳まれることにより隣り合って並ぶ非連続アミノ酸で形成されてもよい。抗体によって結合されるエピトープは、抗原－抗体複合体の直接的な視覚化によるエピトープ同定用のＸ線結晶学、並びに抗体による抗原の断片又は突然変異変種への結合のモニタリング、又は抗体及び抗原の種々の部分の溶媒露出度のモニタリングを含め、当該技術分野において公知の任意のエピトープマッピング技法を用いて同定されてもよい。抗体エピトープのマッピングに使用される例示的戦略としては、限定はされないが、アレイベースのオリゴペプチドスキャニング、タンパク質限定分解、部位特異的突然変異誘発、ハイスループット突然変異誘発マッピング、水素－重水素交換、及び質量分析法が挙げられる（例えば、Ｇｅｒｓｈｏｎｉ ｅｔ ａｌ．（２００７）２１：１４５－５６；及びＨａｇｅｒ－Ｂｒａｕｎ ａｎｄ Ｔｏｍｅｒ（２００５）Ｅｘｐｅｒｔ Ｒｅｖ Ｐｒｏｔｅｏｍｉｃｓ ２：７４５－５６を参照のこと）。
競合的結合及びエピトープビニングもまた、同一の又は重複するエピトープを共有する抗体の決定に用いることができる。競合的結合は、“Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ，Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ，”Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ，Ｈａｒｌｏｗ ａｎｄ Ｌａｎｅ（１ｓｔ ｅｄｉｔｉｏｎ １９８８，２ｎｄ ｅｄｉｔｉｏｎ ２０１４）に記載されるアッセイなど、クロスブロッキングアッセイを用いて評価することができる。一部の実施形態では、クロスブロッキングアッセイにおいて参照抗体又は結合タンパク質（例えば、表２～表４に特定されるものから選択されるＣＤＲ及び／又は可変ドメインを含む結合タンパク質）によるＨＥＲ２などの標的抗原への結合が試験抗体又は結合タンパク質によって少なくとも約５０％（例えば、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、９９％、９９．５％、又はそれ以上、又は間にある任意のパーセンテージ）だけ低下するとき、及び／又はその逆のとき、競合的結合が同定される。一部の実施形態において、競合的結合は、共有されている若しくは同様の（例えば、部分的に重複している）エピトープに起因し得るか、又は抗体若しくは結合タンパク質が近傍のエピトープに結合する立体障害に起因し得る（例えば、Ｔｚａｒｔｏｓ，Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ（Ｍｏｒｒｉｓ，ｅｄ．（１９９８）ｖｏｌ．６６，ｐｐ．５５－６６）を参照のこと）。一部の実施形態では、競合的結合を用いて、同様のエピトープを共有する結合タンパク質群を分取することができる。例えば、結合に関して競合する結合タンパク質は、重複する又は近傍のエピトープを有する結合タンパク質群として「ビンに入れる」ことができ、一方、競合しないものは、重複する又は近傍のエピトープを有しない別の結合タンパク質群に分けられる。
用語「ｋｏｎ」又は「ｋａ」は、抗体／抗原複合体を形成するための抗原への抗体の会合についてのオン速度定数を指す。この速度は、表面プラズモン共鳴、バイオレイヤー干渉法、又はＥＬＩＳＡアッセイなどの標準アッセイを用いて決定することができる。
用語「ｋｏｆｆ」又は「ｋｄ」は、抗体／抗原複合体からの抗体の解離についてのオフ速度定数を指す。この速度は、表面プラズモン共鳴、バイオレイヤー干渉法、又はＥＬＩＳＡアッセイなどの標準アッセイを用いて決定することができる。
用語「ＫＤ」は、特定の抗体－抗原相互作用の平衡解離定数を指す。ＫＤは、ｋａ／ｋｄによって計算される。この速度は、表面プラズモン共鳴、バイオレイヤー干渉法、又はＥＬＩＳＡアッセイなどの標準アッセイを用いて決定することができる。
用語「ｐ」又は「ハーボキシジエンスプライシング調節薬負荷量」又は「ハーボキシジエンスプライシング調節薬：抗体比」又は「ハーボキシジエンスプライシング調節薬対抗体比」又は「ＨＡＲ」は、各抗体又は抗原結合断片当たりのハーボキシジエンスプライシング調節薬の数、即ち、ハーボキシジエンスプライシング調節薬負荷量、又は本明細書に開示されるＡＤＣ中の各抗体又は抗原結合断片（Ａｂ）当たりの－Ｌ－Ｈ部分の数を指す。ハーボキシジエンスプライシング調節薬を含むＡＤＣでは、「ｐ」は、抗体又は抗原結合断片に連結したハーボキシジエンスプライシング調節薬の数を指す。例えば、抗体又は抗原結合断片に２つのハーボキシジエンスプライシング調節薬（例えば、各々がＨ３の構造を有する２つの化合物）が連結している場合、ｐ＝２である。本明細書に記載されるとおりのＡＤＣの複数のコピーを含む組成物では、「平均ｐ」は、各抗体又は抗原結合断片当たりの－Ｌ－Ｈ部分の数の平均を指し、「平均ハーボキシジエンスプライシング調節薬負荷量」とも称される。
「リンカー」又は「リンカー部分」は、本明細書では、化合物、通常はハーボキシジエンスプライシング調節薬薬物部分などの薬物部分を抗体又は抗原結合断片などの別の部分に共有結合的につなぎ合わせる能力を有する任意の化学的部分を指して使用される。リンカーは、化合物又は抗体が活性のままである条件で、酸誘導切断、ペプチダーゼ誘導切断、光に基づく切断、エステラーゼ誘導切断、及び／又はジスルフィド結合切断を起こし易くてもよく、又はそれに対して実質的に抵抗性であってもよい。
用語「薬剤」は、本明細書では、化学的化合物、化学的化合物の混合物、生物学的巨大分子、又は生物学的材料から作られる抽出物を指して使用される。用語「療法剤」又は「薬物」は、生物学的過程を調節する能力を有する、及び／又は生物学的活性を有する薬剤を指す。本明細書に記載されるハーボキシジエンスプライシング調節薬は、例示的療法剤である。
用語「化学療法剤」又は「抗癌剤」は、本明細書では、作用機序に関わらず、癌の治療に有効なあらゆる薬剤を指して使用される。転移又は血管新生の阻害が、高い頻度で化学療法剤の特性である。化学療法剤には、抗体、生体分子、及び小分子が含まれ、本明細書に記載されるハーボキシジエンスプライシング調節薬が包含される。化学療法剤は、細胞傷害剤又は細胞増殖抑制剤であり得る。用語「細胞増殖抑制剤」は、細胞成長及び／又は細胞の増大を阻害し又は抑制する薬剤を指す。用語「細胞傷害剤」は、主に細胞の発現活性及び／又は機能への干渉によって細胞死を引き起こす物質を指す。
本明細書で使用されるとき、用語「ハーボキシジエンスプライシング調節薬」、「ハーボキシジエンスプライセオソーム調節薬」、又は「ハーボキシジエンスプライス調節薬」は、スプライセオソームの成分と相互作用することにより抗癌活性を有する、且つ構造的にハーボキシジエンと関連性のある化合物を指す。一部の実施形態において、ハーボキシジエンスプライシング調節薬は、標的細胞におけるスプライシングの速度又は形態を変化させる。阻害性薬剤として機能するハーボキシジエンスプライシング調節薬は、例えば、無制御な細胞増殖を減少させる能力を有する。一部の実施形態において、ハーボキシジエンスプライシング調節薬は、ＳＦ３ｂスプライセオソーム複合体に結合することにより作用し得る。かかる調節薬は天然に存在するものであってもよく、又はハーボキシジエンの合成誘導体若しくは類似体であってもよい。本明細書で使用されるとき、ハーボキシジエンスプライシング調節薬などに言及するときの用語「誘導体」及び「類似体」は、ハーボキシジエンと本質的に同じ、同様の、又は亢進した生物学的機能又は活性を保持しているが、化学的又は生物学的構造は変化している任意のかかる化合物を意味する。一部の実施形態において、ハーボキシジエンスプライシング調節薬はハーボキシジエン誘導体である。
本明細書で使用されるとき、「ハーボキシジエンスプライシング調節薬薬物部分」は、ＡＤＣ又は組成物のうちハーボキシジエンスプライシング調節薬化合物の構造を提供する成分、例えば、式（Ｉ）のＡＤＣ中、又は－Ｌ－Ｈを含む組成物中のハーボキシジエンスプライシング調節薬（Ｈ）成分を指す。
本明細書で使用されるとき、「スプライセオソーム」は、プレｍＲＮＡセグメントなど、１つ以上のＲＮＡセグメントからイントロンを取り除くリボ核タンパク質複合体を指す。
用語「相同体」は、例えば、対応する位置において同じ又は同様である化学的残基の配列を有することにより、別の分子との相同性を呈する分子を指す。
用語「～を阻害する」又は「～の阻害」は、本明細書で使用されるとき、測定可能な量だけ減少させることを意味し、必須ではないが、完全な防止又は阻害を含み得る。
用語「標的陰性」、「標的抗原陰性」、又は「抗原陰性」は、細胞又は組織による標的抗原発現がないことを指す。用語「標的陽性」、「標的抗原陽性」、又は「抗原陽性」は、標的抗原発現があることを指す。例えば、標的抗原を発現しない細胞又は細胞株は、標的陰性と記載されてもよく、一方、標的抗原を発現する細胞又は細胞株は、標的陽性と記載されてもよい。
用語「バイスタンダー殺傷」又は「バイスタンダー効果」は、標的陽性細胞の存在下における標的陰性細胞の殺傷を指し、ここで標的陽性細胞の非存在下では、標的陰性細胞の殺傷は観察されない。標的陽性細胞と標的陰性細胞との間の細胞間接触、又は少なくとも近接性が、バイスタンダー殺傷を可能にする。この種の殺傷は、標的陰性細胞の無差別な殺傷を指す「オフターゲット殺傷」と区別可能である。「オフターゲット殺傷」は標的陽性細胞の非存在下でも観察され得る。
用語「新生物障害」及び「癌」は、本明細書では、無制御な増殖、不死性、転移能、急激な成長及び増殖速度、及び／又はある種の形態学的特徴など、癌を引き起こす細胞に典型的な特性を備える細胞の存在を指して同義的に使用される。多くの場合に、癌細胞は腫瘍又は塊の形態であり得るが、かかる細胞は対象体内に単独で存在してもよく、又は白血病細胞若しくはリンパ腫細胞のように、独立した細胞として血流中に循環してもよい。用語「新生物障害」及び「癌」には、血液学的悪性腫瘍、固形腫瘍、肉腫、癌腫並びに他の固形及び非固形腫瘍癌を含め、あらゆる種類の癌及び癌転移が含まれる。血液学的悪性腫瘍には、Ｂ細胞悪性腫瘍、血液の癌（白血病）、形質細胞の癌（骨髄腫、例えば多発性骨髄腫）、又はリンパ節の癌（リンパ腫）が含まれ得る。例示的Ｂ細胞悪性腫瘍には、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、濾胞性リンパ腫、マントル細胞リンパ腫、及びびまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫が含まれる。白血病には、急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、慢性骨髄球性白血病（ＣＭＬ）、慢性骨髄単球性白血病（ＣＭＭＬ）、急性単球性白血病（ＡＭｏＬ）等が含まれ得る。リンパ腫には、ホジキンリンパ腫及び非ホジキンリンパ腫が含まれ得る。他の血液学的悪性腫瘍には、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）が含まれ得る。固形腫瘍には、腺癌、例えば、乳癌、膵癌、前立腺癌、結腸又は結腸直腸癌、肺癌、胃癌、子宮頸癌、子宮内膜癌、卵巣癌、胆管癌、神経膠腫、黒色腫など、癌腫が含まれ得る。
用語「腫瘍」及び「新生物」は、前癌病変を含め、良性又は悪性いずれかの、過剰な細胞成長又は増殖によって生じる任意の組織塊を指す。
用語「腫瘍細胞」及び「新生物細胞」は同義的に使用され、非腫瘍原性細胞及び癌幹細胞の両方を含め、腫瘍又は新生物に由来する個々の細胞又は全細胞集団を指す。本明細書で使用されるとき、用語「腫瘍細胞」は、単に再生・分化能を欠いている腫瘍細胞を指す場合には用語「非腫瘍原性」で修飾され、そうした腫瘍細胞が癌幹細胞と区別されることになる。
用語「対象」及び「患者」は、本明細書では、限定はされないが、ヒト、非ヒト霊長類、げっ歯類などを含めた任意の哺乳類など、任意の動物を指して同義的に使用される。一部の実施形態において、哺乳類はマウスである。一部の実施形態において、哺乳類はヒトである。一部の実施形態において、対象はマウスである。一部の実施形態において、対象はヒトである。
用語「共投与」又は１つ以上の療法剤「と併用した」投与は、同時に行われる投与及びいずれの順序であれ連続的な投与を含む。
「医薬組成物」は、投与を可能にし、続いて１つ又は複数の活性成分の意図した生物学的活性を提供するような形態、及び／又は治療効果を実現するような形態の調製物であって、その製剤が投与されるであろう対象にとって許容し難いほど毒性の高い追加の構成成分を含有しない調製物を指す。医薬組成物は無菌であり得る。
「医薬賦形剤」は、アジュバント、担体、ｐＨ調整剤及び緩衝剤、等張化剤、湿潤剤、保存剤などの材料を含む。
「薬学的に許容可能」は、動物、より詳細にはヒトにおける使用が連邦政府若しくは州政府の規制機関によって承認済み若しくは承認見込みであること、又は米国薬局方若しくは他の一般に認められている薬局方に掲載されていることを意味する。
「薬学的に許容可能な塩」は、親化合物の所望の生物学的活性を保持している、且つ望ましくない毒物学的効果を与えない塩である。かかる塩の例は、（ａ）無機酸、例えば、塩酸、臭化水素酸、硫酸、リン酸、硝酸などと形成される酸付加塩；及び有機酸、例えば、酢酸、シュウ酸、酒石酸、コハク酸、マレイン酸、フマル酸、グルコン酸、クエン酸、リンゴ酸、アスコルビン酸、安息香酸、タンニン酸、パルミチン酸、アルギン酸、ポリグルタミン酸、ナフタレンスルホン酸、メタンスルホン酸、ｐ－トルエンスルホン酸、ナフタレンジスルホン酸、ポリガラクツロン酸などと形成される塩；及び（ｂ）塩素、臭素、及びヨウ素などの元素アニオンから形成される塩である。例えば、Ｈａｙｎｅｓ ｅｔ ａｌ．“Ｃｏｍｍｅｎｔａｒｙ：Ｏｃｃｕｒｒｅｎｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｌｙ Ａｃｃｅｐｔａｂｌｅ Ａｎｉｏｎｓ ａｎｄ Ｃａｔｉｏｎｓ ｉｎ ｔｈｅ Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ Ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ Ｄａｔａｂａｓｅ，”Ｊ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，ｖｏｌ．９４，ｎｏ．１０（２００５）、及びＢｅｒｇｅ ｅｔ ａｌ．“Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓａｌｔｓ，”Ｊ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，ｖｏｌ．６６，ｎｏ．１（１９７７）（これらは参照によって本明細書に援用される）を参照のこと。
用語「有効量」は、本明細書で使用されるとき、具体的に記載される目的を果たすのに十分な、例えば、投与後に、腫瘍成長速度又は腫瘍容積の低減、癌の症状の低減、又は他の何らかの治療有効性を示すものなど、治療効果を生み出すのに十分な、本明細書に記載される化合物、ＡＤＣ、又は組成物（例えば、ハーボキシジエンスプライシング調節薬又はＡＤＣ）の量を指す。有効量は、記載される目的に関連したルーチンの方法で決定することができる。用語「治療有効量」は、腫瘍細胞の成長又は広がり、腫瘍のサイズ又は数、及び／又はその他の、癌のレベル、ステージ、進行及び／又は重症度の尺度の検出可能な殺傷、低減、及び／又は阻害に有効な、本明細書に記載される化合物、ＡＤＣ、又は組成物の量を指す。治療有効量は、意図される適用（インビトロ又はインビボ）、又は治療下の対象及び疾患状態、例えば、対象の体重及び年齢、疾患状態の重症度、投与方法などに応じて異なってもよく、当業者が容易に決定することができる。この用語はまた、標的細胞において特定の応答、例えば細胞成長の阻害を誘導するであろう用量にも適用される。具体的な用量は、例えば、詳細な医薬組成物、対象並びにその年齢及び既存の健康状態又は健康状態に関するリスク、従うべき投与レジメン、疾患の重症度、それが他の薬剤と併用して投与されるかどうか、投与タイミング、それが投与される組織、及びそれが運ばれる物理的送達システムに応じて異なり得る。癌の場合、ＡＤＣの治療有効量は、癌細胞の数を低減し、腫瘍サイズを低減し、腫瘍転移を阻害し（例えば、減速又は停止させ）、腫瘍成長を阻害し（例えば、減速又は停止させ）、及び／又は１つ以上の症状を緩和することができる。
「予防有効量」は、所望の予防的結果を実現するのに必要な投薬量及び期間で有効な量を指す。典型的には、予防的用量は対象において疾患に先立ち、又は疾患の初期ステージで使用されるため、予防有効量は治療有効量より少ないことになる。
本明細書で使用されるとき、「治療すること」又は「療法的」及び文法的に関連する用語は、代替的な治療モダリティから生じる生存の長期化、低い罹患率、及び／又は副作用の軽減など、疾患の任意の帰結の任意の改善を指す。当該技術分野においては容易に理解されるとおり、疾患の完全な根絶が包含されるが、治療行為に必須ではない。「治療」又は「治療する」は、本明細書で使用されるとき、対象、例えば患者への記載されるＡＤＣ又は組成物の投与を指す。治療とは、例えば癌などの障害、障害の症状又は障害になり易い素因を治癒すること、癒すこと、緩和すること、軽減すること、変化させること、改善すること、寛解させること、和らげること、向上させること又はそれに影響を及ぼすことであり得る。一部の実施形態において、ある病態を有する対象を治療することに加えて、本明細書に開示される組成物はまた、当該の病態が発症する可能性を防止又は低減するため予防的に提供することもできる。
一部の実施形態において、標識されたＡＤＣが使用される。好適な「標識」としては、放射性核種、酵素、基質、補因子、阻害薬、蛍光部分、化学発光部分、磁性粒子などが挙げられる。
「タンパク質」とは、本明細書で使用されるとき、少なくとも２つの共有結合的に結び付いたアミノ酸を意味する。この用語は、ポリペプチド、オリゴペプチド、及びペプチドを包含する。一部の実施形態において、２つ以上の共有結合的に結び付いたアミノ酸は、ペプチド結合によって結び付いている。例えばタンパク質が発現システム及び宿主細胞を使用して組換えで作られるとき、タンパク質は、天然に存在するアミノ酸及びペプチド結合で構成され得る。或いは、タンパク質は、合成アミノ酸（例えば、ホモフェニルアラニン、シトルリン、オルニチン、及びノルロイシン）、又はペプチドミメティクス構造、即ち、ペプトイドなどの「ペプチド又はタンパク質類似体」を含んでもよい。ペプトイドは、その側鎖がα炭素（アミノ酸の場合のように）でなく、むしろペプチド骨格の窒素原子に付加されている例示的ペプチドミメティクスクラスであり、ペプチドと比較して異なる水素結合及びコンホメーション特徴を有する（例えば、Ｓｉｍｏｎ ｅｔ ａｌ．（１９９２）Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８９：９３６７を参照のこと）。そのため、ペプトイドは、タンパク質分解又は他の生理学的な若しくは貯蔵上の条件に抵抗性があり、細胞膜の透過に有効であり得る。かかる合成アミノ酸は、特に抗体のインビトロ合成時に当該技術分野において周知の従来方法によって取り入れられてもよい。加えて、ペプチドミメティクス、合成及び天然に存在する残基／構造の任意の組み合わせを用いることができる。「アミノ酸」にはまた、プロリン及びヒドロキシプロリンなど、イミノ酸残基も含まれる。アミノ酸「Ｒ基」又は「側鎖」は（Ｌ）配置又は（Ｓ）配置のいずれであってもよい。具体的な実施形態において、アミノ酸は（Ｌ）配置又は（Ｓ）配置である。
「組換えタンパク質」は、当該技術分野において公知の任意の技法及び方法を用いた組換え技術を用いて、即ち組換え核酸の発現を通じて作られたタンパク質である。組換えタンパク質の作製方法及び技法は当該技術分野において周知である。
「単離された」タンパク質は、例えば、所与の試料中の全タンパク質の少なくとも約５重量％、又は少なくとも約５０重量％を占める、その自然状態で通常それに付随している材料の少なくとも一部を伴わないものである。状況によっては、単離タンパク質は全タンパク質含量の５重量％～９９．９重量％を占め得ることが理解される。例えば、このタンパク質の濃度レベルが増加したものとなるように、誘導性プロモーター又は高発現プロモーターを用いてこのタンパク質の濃度を大幅に高めてもよい。この定義には、当該技術分野において公知の多種多様な生物及び／又は宿主細胞における抗体の産生が含まれる。
アミノ酸配列について、配列同一性及び／又は類似性は、限定はされないが、Ｓｍｉｔｈ ａｎｄ Ｗａｔｅｒｍａｎ（１９８１）Ａｄｖ Ａｐｐｌ Ｍａｔｈ．２：４８２の局所的配列同一性アルゴリズム、Ｎｅｅｄｌｅｍａｎ ａｎｄ Ｗｕｎｓｃｈ（１９７０）Ｊ Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ．４８：４４３の配列同一性アラインメントアルゴリズム、Ｐｅａｒｓｏｎ ａｎｄ Ｌｉｐｍａｎ（１９８８）Ｐｒｏｃ Ｎａｔ Ａｃａｄ Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８５：２４４４の類似性検索法、これらのアルゴリズムのコンピューター化された実装（Ｗｉｓｃｏｎｓｉｎ Ｇｅｎｅｔｉｃｓ Ｓｏｆｔｗａｒｅ Ｐａｃｋａｇｅ、Ｇｅｎｅｔｉｃｓ Ｃｏｍｐｕｔｅｒ Ｇｒｏｕｐ、５７５ Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｄｒｉｖｅ，Ｍａｄｉｓｏｎ，Ｗｉｓ．におけるＧＡＰ、ＢＥＳＴＦＩＴ、ＦＡＳＴＡ、及びＴＦＡＳＴＡ）、Ｄｅｖｅｒｅｕｘ ｅｔ ａｌ．（１９８４）Ｎｕｃｌ Ａｃｉｄ Ｒｅｓ．１２：３８７－９５によって記載されるＢｅｓｔ Ｆｉｔシーケンスプログラムであって、好ましくはデフォルト設定を使用するもの、又は目視検査によることを含め、当該技術分野において公知の標準技法を用いて決定されてもよい。好ましくは、パーセント同一性は、ＦａｓｔＤＢによって以下のパラメータ：ミスマッチペナルティ１；ギャップペナルティ１；ギャップサイズペナルティ０．３３；及びジョイニングペナルティ３０に基づき計算される（“Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｓｅｑｕｅｎｃｅ Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ ａｎｄ Ａｎａｌｙｓｉｓ，”Ｍａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌｅ Ｓｅｑｕｅｎｃｉｎｇ ａｎｄ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ｓｅｌｅｃｔｅｄ Ｍｅｔｈｏｄｓ ａｎｄ Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ，ｐｐ．１２７－１４９（１９８８），Ａｌａｎ Ｒ．Ｌｉｓｓ，Ｉｎｃ）。
有用なアルゴリズムの例は、ＰＩＬＥＵＰである。ＰＩＬＥＵＰは、一群の関連性のある配列から漸進的ペアワイズアラインメントを用いて多重配列アラインメントを作成する。これはまた、アラインメントの作成に使用されたクラスタリング関係を示すツリーもプロットすることができる。ＰＩＬＥＵＰは、Ｆｅｎｇ ＆ Ｄｏｏｌｉｔｔｌｅ（１９８７）Ｊ Ｍｏｌ Ｅｖｏｌ．３５：３５１－６０の漸進的アラインメント法の単純化を用いる；この方法は、Ｈｉｇｇｉｎｓ ａｎｄ Ｓｈａｒｐ（１９８９）ＣＡＢＩＯＳ ５：１５１－３によって記載されるものと同様である。デフォルトギャップ重み付け３．００、デフォルトギャップ長さ重み付け０．１０、及び重み付き末端ギャップを含む有用なＰＩＬＥＵＰパラメータ。
有用なアルゴリズムの別の例は、Ａｌｔｓｃｈｕｌ ｅｔ ａｌ．（１９９０）Ｊ Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ．２１５：４０３－１０；Ａｌｔｓｃｈｕｌ ｅｔ ａｌ．（１９９７）Ｎｕｃｌ Ａｃｉｄ Ｒｅｓ．２５：３３８９－４０２；及びＫａｒｉｎ ｅｔ ａｌ．（１９９３）Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ．ＵＳＡ ９０：５８７３－８７に記載されるＢＬＡＳＴアルゴリズムである。特に有用なＢＬＡＳＴプログラムはＷＵ－ＢＬＡＳＴ－２プログラムであり、これは、Ａｌｔｓｃｈｕｌ ｅｔ ａｌ．（１９９６）Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ ２６６：４６０－８０から得られたものである。ＷＵ－ＢＬＡＳＴ－２は幾つかの検索パラメータを使用し、そのほとんどがデフォルト値に設定される。調整可能なパラメータは以下の値：オーバーラップ幅＝ｌ、オーバーラップ率＝０．１２５、ワード閾値（Ｔ）＝ＩＩを用いて設定される。ＨＳＰ Ｓ及びＨＳＰ Ｓ２パラメータは動的な値であり、特定の配列の組成及び目的の配列の検索が行われている特定のデータベースの組成に応じてプログラムそれ自体によって確立される；しかしながら、感度を高めるため、これらの値が調整されてもよい。
更なる有用なアルゴリズムは、Ａｌｔｓｃｈｕｌ ｅｔ ａｌ．（１９９７）Ｎｕｃｌ Ａｃｉｄ Ｒｅｓ．２５：３３８９－４０２によって報告されるとおりのギャップ付きＢＬＡＳＴである。ギャップ付きＢＬＡＳＴは、ＢＬＯＳＵＭ－６２置換スコア；９に設定された閾値Ｔパラメータ；２ヒット法によるギャップなし伸長の開始、ｋのギャップ長に１０＋ｋのコストを課し；１６に設定されたＸｕ、及びデータベース検索段階について４０に設定され、アルゴリズムの出力段階について６７に設定されたＸｇを使用する。ギャップ付きアラインメントは約２２ビットに対応するスコアによって開始される。
概して、本明細書に開示されるタンパク質及びその変異体、例えば、標的抗原（ＨＥＲ２、ＣＤ１３８、又はＥＰＨＡ２、ＭＳＬＮ、ＦＯＬＨ１、ＣＤＨ６、ＣＥＡＣＡＭ５、ＣＦＣ１Ｂ、ＥＮＰＰ３、ＦＯＬＲ１、ＨＡＶＣＲ１、ＫＩＴ、ＭＥＴ、ＭＵＣ１６、ＳＬＣ３９Ａ６、ＳＬＣ４４Ａ４、又はＳＴＥＡＰ１など）の変異体及び抗体可変ドメインの変異体（個々の変異体ＣＤＲを含む）の間のアミノ酸相同性、類似性、又は同一性は、本明細書に示される配列と少なくとも８０％であり、例えば、少なくとも８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、ほぼ１００％、又は１００％の相同性又は同一性である。
同じように、本明細書に特定される抗体及び他のタンパク質の核酸配列に関する「パーセント（％）核酸配列同一性」は、抗原結合タンパク質のコード配列中のヌクレオチド残基と同一である候補配列中にあるヌクレオチド残基のパーセンテージとして定義される。具体的な方法は、デフォルトパラメータに設定した、オーバーラップ幅及びオーバーラップ率をそれぞれ１及び０．１２５に設定したＷＵ－ＢＬＡＳＴ－２のＢＬＡＳＴＮモジュールを利用する。
アミノ酸配列変異を導入する部位又は領域は予め決められているが、突然変異それ自体は予め決められたものでなくてもよい。例えば、所与の部位における突然変異のパフォーマンスを最適化するため、標的コドン又は領域でランダム突然変異誘発を行い、発現した抗原結合タンパク質ＣＤＲ変異体を所望の活性の最適な組み合わせに関してスクリーニングしてもよい。既知の配列を有するＤＮＡ中の予め決められた部位に置換突然変異を作り出す技法は、例えば、ＭＩ３プライマー突然変異誘発及びＰＣＲ突然変異誘発など、周知である。
「アルキル」又は「アルキル基」は、本明細書で使用されるとき、完全に飽和している直鎖、分枝状、又は環状炭化水素鎖を意味する。特定の実施形態において、アルキル基は１～８個の炭素原子を含有し得る（「Ｃ１～Ｃ８アルキル」）。特定の実施形態において、アルキル基は１～６個の炭素原子を含有し得る（「Ｃ１～Ｃ６アルキル」）。特定の実施形態において、アルキル基は１～３個の炭素原子を含有する。なおも他の実施形態において、アルキル基は２～３個の炭素原子を含有し、更に他の実施形態においてアルキル基は１～２個の炭素原子を含有する。
「アルキルアルコキシ」は、本明細書で使用されるとき、アルコキシ基で置換されているアルキル基を意味する。
「アルコキシ」は、本明細書で使用されるとき、上記に定義したとおりのアルキル基が酸素（「アルコキシ」）原子によって炭素主鎖に結び付いているものを指す。
「アルキルヒドロキシ」は、本明細書で使用されるとき、ヒドロキシル基で置換されているアルキル基を意味する。
「ヒドロキシ」又は「ヒドロキシル」は、本明細書で使用されるとき、－ＯＨを指す。
「炭素環」又は「カルボシクリル」は、本明細書で使用されるとき、芳香族（例えば、アリール）及び非芳香族（例えば、シクロアルキル）の両方の基を含む。特定の実施形態において、炭素環基は３～１０個の炭素原子を含有する（「３～１０員炭素環」）。特定の実施形態において、炭素環基は３～８個の炭素原子を含有する（「３～８員炭素環」）。特定の実施形態において、炭素環基は３～６個の炭素原子を含有する（「３～６員炭素環」）。特定の実施形態において、炭素環基は３～５個の炭素原子を含有する（「３～５員炭素環」）。
「ハロアルキル」は、本明細書で使用されるとき、１つ以上のハロゲン原子で置換されているアルキル基を指す。
「ハロゲン」は、任意のハロゲンの基、例えば、－Ｆ、－Ｃｌ、－Ｂｒ、又は－Ｉを指す。
用語「ヘテロ環」、「ヘテロシクリル」、及び「ヘテロ環式」は、本明細書で使用されるとき、環に少なくとも１個のヘテロ原子を含有する単環式ヘテロ環、二環式ヘテロ環、又は三環式ヘテロ環を意味する。
単環式ヘテロ環は、Ｏ、Ｎ、及びＳから独立に選択される少なくとも１個のヘテロ原子を含有する３、４、５、６、７、又は８員環である。一部の実施形態において、ヘテロ環は、Ｏ、Ｎ及びＳから選択される１個のヘテロ原子を含有する３又は４員環である。一部の実施形態において、ヘテロ環は、０又は１個の二重結合と、Ｏ、Ｎ及びＳから選択される１、２又は３個のヘテロ原子とを含有する５員環である。一部の実施形態において、ヘテロ環は、０、１又は２個の二重結合と、Ｏ、Ｎ及びＳから選択される１、２又は３個のヘテロ原子とを含有する６、７、又は８員環である。単環式ヘテロ環の代表的な例としては、限定はされないが、アゼチジニル、アゼパニル、アジリジニル、ジアゼパニル、１，３－ジオキサニル、１，３－ジオキソラニル、ジヒドロピラニル（３，４－ジヒドロ－２Ｈ－ピラン－６－イルを含む）、１，３－ジチオラニル、１，３－ジチアニル、イミダゾリニル、イミダゾリジニル、イソチアゾリニル、イソチアゾリジニル、イソオキサゾリニル、イソオキサゾリジニル、モルホリニル、オキサジアゾリニル、オキサジアゾリジニル、オキサゾリニル、オキサゾリジニル、ピペラジニル、ピペリジニル、ピラニル、ピラゾリニル、ピラゾリジニル、ピロリニル、ピロリジニル、テトラヒドロフラニル、テトラヒドロピラニル（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－４－イルを含む）、テトラヒドロチエニル、チアジアゾリニル、チアジアゾリジニル、チアゾリニル、チアゾリジニル、チオモルホリニル、１，１－ジオキシドチオモルホリニル（チオモルホリンスルホン）、チオピラニル、及びトリチアニルが挙げられる。
本開示の二環式ヘテロ環には、合計５～１２個の環原子を有するアリール基と縮合した単環式ヘテロ環、又は単環式シクロアルキルと縮合した単環式ヘテロ環、又は単環式シクロアルケニルと縮合した単環式ヘテロ環、又は単環式ヘテロ環と縮合した単環式ヘテロ環が含まれ得る。二環式ヘテロ環の例としては、限定はされないが、３，４－ジヒドロ－２Ｈ－ピラニル、１，３－ベンゾジオキソリル、１，３－ベンゾジチオリル、２，３－ジヒドロ－１，４－ベンゾジオキシニル、２，３－ジヒドロ－１－ベンゾフラニル、２，３－ジヒドロ－１－ベンゾチエニル、２，３－ジヒドロ－１Ｈ－インドリル、及び１，２，３，４－テトラヒドロキノリニルが挙げられる。
用語「ヘテロ環」、「ヘテロシクリル」、及び「ヘテロ環式」は、ヘテロアリールを包含する。「ヘテロアリール」は、１つ以上の閉環を有する環状部分であって、環のうちの少なくとも１つに１個以上のヘテロ原子（酸素、窒素又は硫黄）があるものを指し、ここで環のうちの少なくとも１つは芳香族であり、１つ又は複数の環は独立に縮合、及び／又は架橋されていてもよい。例としては、限定なしに、フェニル、チオフェニル、トリアゾリル、ピリジニル、ピリミジニル、ピリダジニル、及びピラジニルが挙げられる。
本明細書に記載されるとおり、本開示の化合物は、「任意選択で置換されている」部分を含み得る。概して、用語「置換されている」は、用語「任意選択で」が前に付くか否かに関わらず、指定される部分の１つ以上の水素が好適な置換基に置き換えられることを意味する。特に指示されない限り、「任意選択で置換されている」基は、その基の各置換可能な位置に好適な置換基を有してもよく、いずれかの所与の構造において２つ以上の位置が、指定の基から選択される２つ以上の置換基で置換されていてもよいとき、置換基は各位置で同じであっても又は異なっても、いずれであってもよい。本開示に基づき想定される置換基の組み合わせは、好ましくは安定化合物又は化学的に実現可能な化合物の形成をもたらすものである。
当業者は、「置換」又は「～で置換されている」又は「存在なし」に、かかる置換又は存在なしが置換される原子及び置換基の許容される原子価に従うもので、且つその置換又は存在なしの結果、安定化合物、例えば、転位、環化、脱離等によるなどの転換を自発的に起こさない化合物が生じるという黙示的条件が含まれることを理解するであろう。本開示の目的上、窒素などのヘテロ原子は、水素置換基、及び／又はそのヘテロ原子の原子価を満たす本明細書に記載される有機化合物の任意の許容される置換基を有し得る。
「安定」は、本明細書に開示される目的の１つ以上のためのその生成、検出、並びに特定の実施形態では、その回収、精製、及び使用を可能にする条件に供されたときも実質的に化学的及び／又は物理的に変化しない化合物を指す。一部の実施形態において、安定化合物又は化学的に実現可能な化合物は、４０℃以下の温度で水分の非存在下又は他の化学反応条件下に少なくとも１週間置いたとき実質的に変化しないものである。一部の実施形態において、本明細書に開示される化合物は安定である。
本明細書に教示されるエナンチオマーには、特定の１つ又は複数の不斉中心に実質的に単一のエナンチオマーを含む、例えば、９０％、９２％、９５％、９８％、又は９９％以上の、又は１００％に等しい単一のエナンチオマーを含む「エナンチオ純粋な」異性体が含まれ得る。「不斉中心」又は「キラル中心」は、４つの異なる置換基を含む四面体炭素原子を指す。
本明細書に記載される化合物はまた、かかる化合物を構成する原子の１つ以上に非天然比率の同位体原子も含み得る。例えば、化合物は、例えば、重水素（２Ｈ）、トリチウム（３Ｈ）、炭素１３（１３Ｃ）、又は炭素１４（１４Ｃ）などの放射性同位体で放射性標識されてもよい。本明細書に開示される化合物の同位体変種は全て、放射性か否かに関わらず、本開示の範囲内に包含されることが意図される。加えて、本明細書に記載される化合物の互変異性型は全て、特許請求される本開示の範囲内にあることが意図される。
抗体－薬物コンジュゲート
本開示の抗体－薬物コンジュゲート（ＡＤＣ）化合物は、抗癌活性を有するものを含む。詳細には、本ＡＤＣ化合物は、ハーボキシジエンスプライシング調節薬にコンジュゲートした（即ち、リンカーによって共有結合的に結び付いた）抗体又は抗原結合断片（その抗原結合断片を含む）を含み、例えば、ここでハーボキシジエンスプライシング調節薬は、抗体又は抗原結合断片にコンジュゲートされていないとき、細胞傷害効果又は細胞増殖抑制効果を有する。様々な実施形態において、ハーボキシジエンスプライシング調節薬は、抗体又は抗原結合断片にコンジュゲートされていないとき、ＳＦ３ｂスプライセオソーム複合体に結合し、及び／又はそれと相互作用する能力を有する。様々な実施形態において、ハーボキシジエンスプライシング調節薬は、抗体又は抗原結合断片にコンジュゲートされていないとき、インビトロ及び／又はインビボＲＮＡスプライシングを調節する能力を有する。ＲＮＡスプライシングを標的化することにより、様々な実施形態において、本明細書に開示されるハーボキシジエンスプライシング調節薬及びＡＤＣは強力な抗増殖剤である。様々な実施形態において、本明細書に開示されるハーボキシジエンスプライシング調節薬及びＡＤＣは、活発に分裂する細胞及び静止細胞の両方を標的化することができる。
本開示の抗体－薬物コンジュゲート（ＡＤＣ）化合物は、抗癌活性を有するものを含む。詳細には、本ＡＤＣ化合物は、ハーボキシジエンスプライシング調節薬にコンジュゲートした（即ち、リンカーによって共有結合的に結び付いた）抗体又は抗原結合断片（その抗原結合断片を含む）を含み、例えば、ここでハーボキシジエンスプライシング調節薬は、抗体又は抗原結合断片にコンジュゲートされていないとき、細胞傷害効果又は細胞増殖抑制効果を有する。様々な実施形態において、ハーボキシジエンスプライシング調節薬は、抗体又は抗原結合断片にコンジュゲートされていないとき、ＳＦ３ｂスプライセオソーム複合体に結合し、及び／又はそれと相互作用する能力を有する。様々な実施形態において、ハーボキシジエンスプライシング調節薬は、抗体又は抗原結合断片にコンジュゲートされていないとき、インビトロ及び／又はインビボＲＮＡスプライシングを調節する能力を有する。ＲＮＡスプライシングを標的化することにより、様々な実施形態において、本明細書に開示されるハーボキシジエンスプライシング調節薬及びＡＤＣは強力な抗増殖剤である。様々な実施形態において、本明細書に開示されるハーボキシジエンスプライシング調節薬及びＡＤＣは、活発に分裂する細胞及び静止細胞の両方を標的化することができる。
様々な実施形態において、本開示は、少なくとも一部には、ある種の生物学的に活性なハーボキシジエンスプライシング調節薬が、ＡＤＣに使用すると向上した特性をもたらし得るという発見に基づく。ハーボキシジエンスプライシング調節薬は、単独で使用したとき、望ましく向上した特徴（例えば、ロバストなＳＦ３ｂスプライセオソーム複合体結合、強力なＲＮＡスプライシング調節）を示し得るが、様々な実施形態において、ハーボキシジエンスプライシング調節薬は、抗体又は抗原結合断片にコンジュゲートすると、同じ望ましく向上した特徴の減少を呈し得る。従って、ヒト療法剤、例えば、腫瘍学的薬剤としての使用のためのＡＤＣの開発及び生産には、所望の１つ又は複数の標的に結合し且つ単独で癌の治療に使用される薬物に結び付く能力を有する抗体を同定する以上のことが必要となり得る。抗体をハーボキシジエンスプライシング調節薬に連結すると、抗体及びハーボキシジエンスプライシング調節薬の一方又は両方の活性に大きい効果が及ぶこともあり、この効果は、選択されるリンカー及び／又はハーボキシジエンスプライシング調節薬の種類に応じて異なることになる。従って、一部の実施形態において、ＡＤＣの成分は、（ｉ）抗体及びハーボキシジエンスプライシング調節薬部分が単独で呈する１つ以上の治療特性が保持される、（ｉｉ）抗体又は抗原結合断片の特異的結合特性が維持される；（ｉｉｉ）ハーボキシジエンスプライシング調節薬負荷量及びハーボキシジエンスプライシング調節薬対抗体比が最適化される；（ｉｖ）抗体又は抗原結合断片との安定した結び付きによるハーボキシジエンスプライシング調節薬部分の送達、例えば細胞内送達が可能である；（ｖ）標的部位に輸送又は送達されるまではインタクトなコンジュゲートとしてＡＤＣの安定性が保持される；（ｖｉ）投与前又は投与後のＡＤＣの凝集が最小限となる；（ｖｉｉ）細胞環境における切断後又は他の放出機構後にハーボキシジエンスプライシング調節薬部分の治療効果、例えば細胞傷害効果が実現する；（ｖｉｉｉ）抗体及びハーボキシジエンスプライシング調節薬部分単独と同等か又はそれより優れたインビボ抗癌治療有効性を呈する；（ｉｘ）ハーボキシジエンスプライシング調節薬部分によるオフターゲット殺傷が最小限となる；及び／又は（ｘ）望ましい薬物動態学的特性及び薬力学特性、製剤化可能性、及び毒物学的／免疫学的プロファイルを呈するように選択される。治療的使用のための向上したＡＤＣの同定には、これらの特性の各々が必要であり得る（Ａｂ ｅｔ ａｌ．（２０１５）Ｍｏｌ Ｃａｎｃｅｒ Ｔｈｅｒ．１４：１６０５－１３）。
様々な実施形態において、本明細書に開示されるＡＤＣは、予測外にも、上記に挙げたカテゴリーの一部又は各々において有利な特性を呈する。例えば、一部の実施形態では、本明細書に開示されるＡＤＣコンストラクトは、意外にも、別のリンカー及び／又は薬物部分（例えば、別のハーボキシジエンスプライシング調節薬）を含むＡＤＣと比較したとき、有利なハーボキシジエンスプライシング調節薬負荷量、凝集、及び／又は安定性プロファイルを呈し、及び／又は抗体結合機能、薬物活性、及び／又は向上したバイスタンダー殺傷を維持している一方、オフターゲット殺傷は減少する。一部の実施形態において、本明細書に開示されるＡＤＣコンストラクトは、別のリンカー及び／又はハーボキシジエンスプライシング調節薬部分を使用するＡＤＣと比較したとき、優れた安定性、活性、効力、又は他の効果（インビボ又はインビトロで測定される）を実証する。一部の実施形態において、本明細書に開示されるＡＤＣコンストラクトは、単回用量として投与したときインビボ治療有効性を呈する。一部の実施形態において、本明細書に開示されるＡＤＣコンストラクトは、意外にも、別のリンカー及び／又はハーボキシジエンスプライシング調節薬部分を使用するＡＤＣと比較したとき、安定している。
本開示のＡＤＣ化合物は、有効用量の細胞傷害剤又は細胞増殖抑制剤を癌細胞又は腫瘍組織に選択的に送達し得る。開示されるＡＤＣは、それぞれの標的抗原（例えば、ＨＥＲ２、ＣＤ１３８、ＥＰＨＡ２、ＭＳＬＮ、ＦＯＬＨ１、ＣＤＨ６、ＣＥＡＣＡＭ５、ＣＦＣ１Ｂ、ＥＮＰＰ３、ＦＯＬＲ１、ＨＡＶＣＲ１、ＫＩＴ、ＭＥＴ、ＭＵＣ１６、ＳＬＣ３９Ａ６、ＳＬＣ４４Ａ４、又はＳＴＥＡＰ１）を発現する細胞に対して強力な細胞傷害活性及び／又は細胞増殖抑制活性を有することが発見された。一部の実施形態において、ＡＤＣの細胞傷害活性及び／又は細胞増殖抑制活性は細胞の標的抗原発現に依存する。一部の実施形態において、開示されるＡＤＣは特に、オフターゲット殺傷を最小限に抑えつつ、標的抗原を発現する癌細胞を殺傷するのに有効である。一部の実施形態において、開示されるＡＤＣは、標的抗原を発現しない癌細胞に対しては細胞傷害効果及び／又は細胞増殖抑制効果を呈しない。
ＨＥＲ２を発現する例示的癌としては、限定はされないが、乳癌、胃癌、膀胱癌、尿路上皮細胞癌、食道癌、肺癌（例えば、肺腺癌）、子宮癌（例えば、漿液性子宮内膜癌）、唾液管癌、子宮頸癌、子宮内膜癌、及び卵巣癌が挙げられる（Ｅｎｇｌｉｓｈ ｅｔ ａｌ．（２０１３）Ｍｏｌ Ｄｉａｇｎ Ｔｈｅｒ．１７：８５－９９）。
ＣＤ１３８を発現する例示的癌としては、限定はされないが、胸腔内癌（例えば、肺癌、中皮腫）、皮膚癌（例えば、基底細胞癌、扁平上皮癌）、頭頸部癌（例えば、喉頭、下咽頭、鼻咽頭）、乳癌、泌尿生殖器癌（例えば、子宮頸癌、卵巣癌、子宮内膜癌、前立腺癌、膀胱癌、尿路上皮癌）、血液学的悪性腫瘍（例えば、多発性骨髄腫などの骨髄腫、Ｂ細胞悪性腫瘍、ホジキンリンパ腫）、及び甲状腺癌が挙げられる（Ｓｚａｔｍａｒｉ ｅｔ ａｌ．（２０１５）Ｄｉｓ Ｍａｒｋｅｒｓ ２０１５：７９６０５２）。
ＥＰＨＡ２を発現する例示的癌としては、乳癌、脳癌、卵巣癌、膀胱癌、膵癌、食道癌、肺癌、前立腺癌、黒色腫、食道癌、及び胃癌が挙げられる（Ｔａｎｄｏｎ ｅｔ ａｌ．（２０１１）Ｅｘｐｅｒｔ Ｏｐｉｎ Ｔｈｅｒ Ｔａｒｇｅｔｓ １５（１）：３１－５１）。
一部の実施形態において、ＡＤＣが切断されると、抗体又は抗原結合断片及びリンカーからハーボキシジエンスプライシング調節薬が放出される。一部の実施形態において、リンカー及び／又はハーボキシジエンスプライシング調節薬は、バイスタンダー殺傷（隣接細胞の殺傷）を促進するように設計される。一部の実施形態において、リンカー及び／又はハーボキシジエンスプライシング調節薬は、細胞インターナリゼーション後の切断及び隣接細胞へのリンカー－ハーボキシジエンスプライシング調節薬部分及び／又はハーボキシジエンスプライシング調節薬部分単独の拡散を通じてバイスタンダー殺傷を促進するように設計される。一部の実施形態において、リンカーは細胞インターナリゼーションを増進する。一部の実施形態において、リンカーは、細胞外環境では切断が最小限に抑えられ、それによってオフターゲット組織（例えば、非癌性組織）に対する毒性が低下する一方、標的組織へのＡＤＣ結合、及びＡＤＣの抗体又は抗原結合断片によって標的化される抗原を発現しないが、当該の抗原を発現する標的癌組織を取り囲む癌性組織のバイスタンダー殺傷は維持するように設計される。一部の実施形態において、ハーボキシジエンスプライシング調節薬部分、又はＡＤＣの切断によって産生されるハーボキシジエンスプライシング調節薬部分の異化産物は、標的細胞又は隣接細胞による取り込み（即ち、細胞透過性）を促進するように設計される。かかるハーボキシジエンスプライシング調節薬部分及び異化産物は、本明細書では「バイスタンダー活性」と称されてもよく、一方、細胞透過性が低下した薬物部分又は異化産物は、「バイスタンダー不活性」と称されてもよい。
一部の実施形態において、開示されるＡＤＣはまた、バイスタンダー殺傷活性を実証するが、オフターゲット細胞傷害性は低い。理論によって拘束されるものではないが、ＡＤＣのバイスタンダー殺傷活性は、固形腫瘍へのその透過性が限られている場合、及び／又は腫瘍細胞間での標的抗原発現が不均一な場合に特に有益であり得る。一部の実施形態において、切断可能リンカーを含むＡＤＣは、非切断可能リンカーを含むＡＤＣによる同等の治療と比べてバイスタンダー殺傷に特に有効であり、及び／又は向上したバイスタンダー殺傷活性を実証する。一部の実施形態において、本明細書に開示されるＡＤＣは、薬物部分それ自体と比べて溶解度及び標的細胞透過性の向上を呈する。一部の実施形態において、本明細書に開示されるＡＤＣは、ハーボキシジエンスプライシング調節薬部分それ自体と比べて細胞傷害性の向上を呈する。一部の実施形態において、本明細書に開示されるＡＤＣは、単独でのハーボキシジエンスプライシング調節薬として評価したとき低い細胞傷害性を呈する薬物部分を使用するが、しかし意外にも、単独でのハーボキシジエンスプライシング調節薬として評価したとき高い細胞傷害性を有する他のハーボキシジエンスプライシング調節薬部分を含むＡＤＣよりも良好である。一部の実施形態において、ハーボキシジエンスプライシング調節薬の切断及び放出が、非切断可能リンカーを含むＡＤＣによる同等の治療と比べてＡＤＣの細胞傷害性を向上させる。他の実施形態において、ハーボキシジエンスプライシング調節薬の切断及び放出は、ＡＤＣが望ましい生物学的活性を備えるために必須というわけではない。一部の実施形態において、スペーサー長さが増加した非切断可能リンカー（例えば、ＡＤＬ１２）を含むＡＤＣが、切断可能リンカー（例えば、ＡＤＬ１、ＡＤＬ５）を含むＡＤＣによる同等の治療と比べて同じ又は同程度の細胞傷害性をもたらし、及び意外にも、より短い非切断可能リンカーを含むＡＤＣによる同等の治療と比べて優れた細胞傷害性をもたらす。一部の実施形態において、カルボニル基を含まないスペーサー長さが増加した非切断可能リンカー（例えば、ＡＤＬ１２）を含むＡＤＣは、切断可能リンカー（例えば、ＡＤＬ１、ＡＤＬ５）を含むＡＤＣによる同等の治療と比べて同じ又は同程度の細胞傷害性をもたらし、及び意外にも、カルボニル基を含む同じ又は同程度のスペーサー長さを有する非切断可能リンカー（例えば、ＡＤＬ１０）を含むＡＤＣによる同等の治療と比べて優れた細胞傷害性をもたらす。一部の実施形態において、非切断可能ＭＣリンカーからカルボニル基を取り除くと（例えば、ＡＤＬ１２）、修飾されていない非切断可能ＭＣリンカー（例えば、ＡＤＬ１０）を含むＡＤＣによる同等の治療と比べて５０倍より大きい、７５倍より大きい、１００倍より大きい、１５０倍より大きい、又は２００倍より大きい細胞傷害性の増加が生じ得る。一部の実施形態において、非切断可能ＭＣリンカーからカルボニル基を取り除き（例えば、ＡＤＬ１２）、スペーサー長さを増加させると（例えば、少なくとも１つのスペーサー単位の付加）、修飾されていない非切断可能ＭＣリンカー（例えば、ＡＤＬ１０）を含むＡＤＣによる同等の治療と比べて５０倍より大きい、７５倍より大きい、１００倍より大きい、１５０倍より大きい、又は２００倍より大きい細胞傷害性の増加が生じ得る。
本明細書には、腫瘍細胞を標的化する抗体又はその抗原結合断片（Ａｂ）と、スプライシング調節薬薬物部分（Ｄ）と、ＡｂをＤに共有結合的に結び付けるリンカー部分（Ｌ）とを含むＡＤＣ化合物が提供される。特定の態様において、抗体又は抗原結合断片は、腫瘍関連抗原（例えば、ＨＥＲ２、ＣＤ１３８、ＥＰＨＡ２、ＭＳＬＮ、ＦＯＬＨ１、ＣＤＨ６、ＣＥＡＣＡＭ５、ＣＦＣ１Ｂ、ＥＮＰＰ３、ＦＯＬＲ１、ＨＡＶＣＲ１、ＫＩＴ、ＭＥＴ、ＭＵＣ１６、ＳＬＣ３９Ａ６、ＳＬＣ４４Ａ４、又はＳＴＥＡＰ１）に高い特異性及び高い親和性で結合することが可能である。特定の実施形態において、抗体又は抗原結合断片は結合時に標的細胞内、例えば細胞における分解性のコンパートメント内にインターナライズされる。様々な実施形態において、標的細胞への結合時にインターナライズし、分解を起こし、ハーボキシジエンスプライシング調節薬部分を放出して癌細胞を殺傷するＡＤＣが使用されてもよい。ハーボキシジエンスプライシング調節薬部分は、ＡＤＣの抗体及び／又はリンカー部分から、酵素作用、加水分解、酸化、又は任意の他の機構によって放出されてもよい。
例示的ＡＤＣは、式（Ｉ）：
Ａｂ－（Ｌ－Ｈ）ｐ （Ｉ）
（式中、Ａｂ＝抗体又は抗原結合断片、Ｌ＝リンカー部分、Ｈ＝ハーボキシジエンスプライシング調節薬薬物部分、及びｐ＝各抗体又は抗原結合断片当たりのスプライシング調節薬薬物部分の数）を有する。
Ａｂ－（Ｌ－Ｈ）ｐ （Ｉ）
（式中、Ａｂ＝抗体又は抗原結合断片、Ｌ＝リンカー部分、Ｈ＝ハーボキシジエンスプライシング調節薬薬物部分、及びｐ＝各抗体又は抗原結合断片当たりのスプライシング調節薬薬物部分の数）を有する。
特定の実施形態において、記載されるＡＤＣ及び組成物における使用のためのハーボキシジエンスプライシング調節薬ターゲティング部分は、抗体又は抗原結合断片である。記載されるＡＤＣ及び組成物における使用のための他の例示的薬物ターゲティング部分もまた本明細書に提供され、記載される。一部の実施形態において、ハーボキシジエンスプライシング調節薬ターゲティング部分は、種々の細胞結合剤及び非抗体足場のいずれか１つであってよい。一部の実施形態において、ハーボキシジエンスプライシング調節薬ターゲティング部分は細胞結合剤である。本明細書で使用されるとき、用語「細胞結合剤」は、動物（例えば、ヒト）細胞に結合し、且つハーボキシジエンスプライシング調節薬部分（例えば、本明細書に開示されるとおりのハーボキシジエンスプライシング調節薬薬物部分）を送達する能力を有する任意の薬剤を指す。この用語は、本明細書に開示される例示的抗体及び抗原結合断片（例えば、モノクローナル抗体並びにＦａｂ及びｓｃＦＶなどのその断片）を包含する。この用語は更に、例示的細胞結合剤、例えば、ＤＡＲＰｉｎ、デュオボディ（ｄｕｏｂｏｄｙ）、二環状ペプチド、ナノボディ、センチリン、ＭＳＨ（メラニン細胞刺激ホルモン）、受容体－Ｆｃ融合分子、Ｔ細胞受容体構造、アンドロゲン及びエストロゲンなどのステロイドホルモン、成長因子、ＥＧＦなどのコロニー刺激因子、及び他の非抗体足場を包含する。様々な実施形態において、非抗体足場は、広くは２つの構造クラス、即ちドメインサイズの化合物（約６～２０ｋＤａ）及び制約されたペプチド（約２～４ｋＤａ）に分けることができる。例示的なドメインサイズの足場としては、限定はされないが、アフィボディ（ａｆｆｉｂｏｄｙ）、アフィリン（ａｆｆｉｌｉｎ）、アンチカリン（ａｎｔｉｃａｌｉｎ）、アトリマー（ａｔｒｉｍｅｒ）、ＤＡＲＰｉｎ、ＦＮ３足場（例えば、アドネクチン及びセンチリン）、フィノマー（ｆｙｎｏｍｅｒ）、クニッツドメイン、プロネクチン（ｐｒｏｎｅｃｔｉｎ）、Ｏボディ（Ｏ－ｂｏｄｙ）、及び受容体－Ｆｃ融合タンパク質が挙げられ、一方、例示的な制約されたペプチドとしては、アビマー（ａｖｉｍｅｒ）、二環状ペプチド、及びＣｙｓノットが挙げられる。一部の実施形態において、記載されるＡＤＣ及び組成物に使用される薬物ターゲティング部分は、アフィボディ（ａｆｆｉｂｏｄｙ）、アフィリン（ａｆｆｉｌｉｎ）、アンチカリン（ａｎｔｉｃａｌｉｎ）、アトリマー（ａｔｒｉｍｅｒ）、ＤＡＲＰｉｎ、アドネクチン又はセンチリンなどのＦＮ３足場、フィノマー（ｆｙｎｏｍｅｒ）、クニッツドメイン、プロネクチン（ｐｒｏｎｅｃｔｉｎ）、Ｏボディ（Ｏ－ｂｏｄｙ）、アビマー（ａｖｉｍｅｒ）、二環状ペプチド、及びＣｙｓノットから選択される。一部の実施形態において、記載されるＡＤＣ及び組成物に使用される薬物ターゲティング部分は、受容体－Ｆｃ融合タンパク質、例えばＨＥＲ２－Ｆｃキメラ融合タンパク質である。非抗体足場については、例えば、Ｖａｚｑｕｅｚ－Ｌｏｍｂａｒｄｉ ｅｔ ａｌ．（２０１５）Ｄｒｕｇ Ｄｉｓ Ｔｏｄａｙ ２０（１０）：１２７１－８３にレビューされている。
抗体
式（Ｉ）の抗体又は抗原結合断片（Ａｂ）は、その範囲内に、癌細胞上の標的抗原に特異的に結合する任意の抗体又は抗原結合断片を含む。抗体又は抗原結合断片は、例えばＢＩＡｃｏｒｅ（登録商標）分析によって測定したとき≦１ｍＭ、≦１００ｎＭ又は≦１０ｎＭ、又は間にある任意の大きさの解離定数（ＫＤ）で標的抗原に結合し得る。特定の実施形態において、ＫＤは１ｐＭ～５００ｐＭである。一部の実施形態において、ＫＤは５００ｐＭ～１μＭ、１μＭ～１００ｎＭ、又は１００ｍＭ～１０ｎＭである。
式（Ｉ）の抗体又は抗原結合断片（Ａｂ）は、その範囲内に、癌細胞上の標的抗原に特異的に結合する任意の抗体又は抗原結合断片を含む。抗体又は抗原結合断片は、例えばＢＩＡｃｏｒｅ（登録商標）分析によって測定したとき≦１ｍＭ、≦１００ｎＭ又は≦１０ｎＭ、又は間にある任意の大きさの解離定数（ＫＤ）で標的抗原に結合し得る。特定の実施形態において、ＫＤは１ｐＭ～５００ｐＭである。一部の実施形態において、ＫＤは５００ｐＭ～１μＭ、１μＭ～１００ｎＭ、又は１００ｍＭ～１０ｎＭである。
一部の実施形態において、抗体又は抗原結合断片は４本鎖抗体（免疫グロブリン又は完全長抗体若しくはインタクトな抗体とも称される）であり、２本の重鎖と２本の軽鎖とを含む。一部の実施形態において、抗体又は抗原結合断片は、２本鎖ハーフボディ（ｈａｌｆ ｂｏｄｙ）（１本の軽鎖及び１本の重鎖）、又は免疫グロブリンの抗原結合断片である。一部の実施形態において、抗体又は抗原結合断片は、標的癌抗原に結合し及び／又は免疫グロブリンの機能を提供する能力を保持している免疫グロブリンの抗原結合断片である。
一部の実施形態において、抗体又は抗原結合断片は、ある抗体又はその抗原結合断片である。一部の実施形態において、抗体又は抗原結合断片は、インターナリゼーション性抗体又はそのインターナリゼーション性抗原結合断片である。一部の実施形態において、インターナリゼーション性抗体又はそのインターナリゼーション性抗原結合断片は、細胞の表面に発現する標的癌抗原に結合し、結合時に細胞に侵入する。一部の実施形態において、ＡＤＣのハーボキシジエンスプライシング調節薬薬物部分は、標的癌抗原を発現する細胞にＡＤＣが侵入してそこに存在するようになった後（即ち、ＡＤＣがインターナライズされ終えた後）、例えば、切断によるか、抗体又は抗原結合断片の分解によるか、又は任意の他の好適な放出機構により、ＡＤＣの抗体又は抗原結合断片から放出される。
本開示の例示的抗体のアミノ酸配列を表２～表４に示す。
様々な実施形態において、本明細書に開示されるＡＤＣは、上記の表に挙げられる任意の一組の重鎖及び軽鎖可変ドメインを含んでもよく、又は重鎖及び軽鎖の組からの一組の６つのＣＤＲ配列を、例えば、それらの６つのＣＤＲを選択のヒトドナー抗体フレームワークに移植することにより含んでもよい。様々な実施形態において、本明細書に開示されるＡＤＣは、ＡＤＣがその標的癌抗原に（例えば、１×１０－８Ｍ未満のＫＤで）結合する能力を保持し、且つ本明細書に開示されるＡＤＣの１つ以上の機能特性（例えば、インターナライズする能力、ＲＮＡスプライシングを調節する能力、細胞成長を阻害する能力等）を保持している限りは、上記の表に挙げられる配列と相同なアミノ酸配列を含み得る。
一部の実施形態において、ＡＤＣは、ヒト重鎖及び軽鎖定常ドメイン又はその断片を更に含む。例えば、ＡＤＣは、ヒトＩｇＧ重鎖定常ドメイン（ＩｇＧ１など）及びヒトカッパ又はラムダ軽鎖定常ドメインを含んでもよい。様々な実施形態において、記載されるＡＤＣの抗体又は抗原結合断片は、ヒト免疫グロブリンＧサブタイプ１（ＩｇＧ１）重鎖定常ドメインをヒトＩｇカッパ軽鎖定常ドメインと共に含む。
様々な他の実施形態において、ＡＤＣの標的癌抗原はヒト上皮成長因子受容体２（ＨＥＲ２）である。
様々な実施形態において、抗ＨＥＲ２抗体又はその抗原結合断片は、以下のとおりの３つの重鎖ＣＤＲ及び３つの軽鎖ＣＤＲ：Ｋａｂａｔ付番方式によって定義したとき、配列番号１からなる重鎖ＣＤＲ１（ＨＣＤＲ１）、配列番号２からなる重鎖ＣＤＲ２（ＨＣＤＲ２）、配列番号３からなる重鎖ＣＤＲ３（ＨＣＤＲ３）；配列番号４からなる軽鎖ＣＤＲ１（ＬＣＤＲ１）、配列番号５からなる軽鎖ＣＤＲ２（ＬＣＤＲ２）、及び配列番号６からなる軽鎖ＣＤＲ３（ＬＣＤＲ３）を含む。
様々な実施形態において、抗ＨＥＲ２抗体又はその抗原結合断片は、配列番号１９のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号２０のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。一部の実施形態において、抗ＨＥＲ２抗体又はその抗原結合断片は、配列番号１９の重鎖可変領域アミノ酸配列及び配列番号２０の軽鎖可変領域アミノ酸配列、又は開示される配列と少なくとも９５％同一の配列を含む。一部の実施形態において、抗ＨＥＲ２抗体又はその抗原結合断片は、配列番号１９と少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％同一の重鎖可変領域アミノ酸配列及び／又は配列番号２０と少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％同一の軽鎖可変領域アミノ酸配列を有する。
様々な実施形態において、抗ＨＥＲ２抗体又はその抗原結合断片はインターナリゼーション性抗体又はインターナリゼーション性抗原結合断片である。様々な実施形態において、抗ＨＥＲ２抗体は、ヒトＩｇＧ１重鎖定常ドメイン及びヒトＩｇカッパ軽鎖定常ドメインを含む。
様々な実施形態において、抗ＨＥＲ２抗体は、配列番号１９の重鎖アミノ酸配列又は配列番号１９と少なくとも９５％同一の配列、及び配列番号２０の軽鎖アミノ酸配列又は配列番号２０と少なくとも９５％同一の配列を含む。詳細な実施形態において、抗ＨＥＲ２抗体は、配列番号１９の重鎖アミノ酸配列及び配列番号２０の軽鎖アミノ酸配列、又は開示される配列と少なくとも９５％同一の配列を含む。一部の実施形態において、抗ＨＥＲ２抗体は、配列番号１９と少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％同一の重鎖アミノ酸配列及び配列番号２０と少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％同一の軽鎖アミノ酸配列を有する。様々な実施形態において、抗ＨＥＲ２抗体はトラスツズマブ、又はその抗原結合断片である。
様々な実施形態において、抗ＨＥＲ２抗体又はその抗原結合断片はトラスツズマブの３つの重鎖ＣＤＲ及び３つの軽鎖ＣＤＲを含み、又はここでＣＤＲは、ＨＣＤＲ１（配列番号１）、ＨＣＤＲ２（配列番号２）、ＨＣＤＲ３（配列番号３）；ＬＣＤＲ１（配列番号４）、ＬＣＤＲ２（配列番号５）、及びＬＣＤＲ３（配列番号６）のアミノ酸付加、欠失又は置換を１、２、３、４、５、又は６個以下しか含まない。
様々な他の実施形態において、ＡＤＣの標的癌抗原はヒトシンデカン－１（ＣＤ１３８）である。
様々な実施形態において、抗ＣＤ１３８抗体又はその抗原結合断片は、以下のとおりの３つの重鎖ＣＤＲ及び３つの軽鎖ＣＤＲ：Ｋａｂａｔ付番方式によって定義したとき、配列番号７からなる重鎖ＣＤＲ１（ＨＣＤＲ１）、配列番号８からなる重鎖ＣＤＲ２（ＨＣＤＲ２）、配列番号９からなる重鎖ＣＤＲ３（ＨＣＤＲ３）；配列番号１０からなる軽鎖ＣＤＲ１（ＬＣＤＲ１）、配列番号１１からなる軽鎖ＣＤＲ２（ＬＣＤＲ２）、及び配列番号１２からなる軽鎖ＣＤＲ３（ＬＣＤＲ３）を含む。
様々な実施形態において、抗ＣＤ１３８抗体又はその抗原結合断片は、配列番号２１のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号２２のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。一部の実施形態において、抗ＣＤ１３８抗体又はその抗原結合断片は、配列番号２１の重鎖可変領域アミノ酸配列及び配列番号２２の軽鎖可変領域アミノ酸配列、又は開示される配列と少なくとも９５％同一の配列を含む。一部の実施形態において、抗ＣＤ１３８抗体又はその抗原結合断片は、配列番号２１と少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％同一の重鎖可変領域アミノ酸配列及び／又は配列番号２２と少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％同一の軽鎖可変領域アミノ酸配列を有する。
様々な実施形態において、抗ＣＤ１３８抗体又はその抗原結合断片はインターナリゼーション性抗体又はインターナリゼーション性抗原結合断片である。様々な実施形態において、抗ＣＤ１３８抗体は、マウスＩｇＧ２ａ重鎖定常ドメイン及びマウスＩｇカッパ軽鎖定常ドメインを含む。様々な実施形態において、抗ＣＤ１３８抗体は、ヒトＩｇＧ２ａ重鎖定常ドメイン及びヒトＩｇカッパ軽鎖定常ドメインを含む。
様々な実施形態において、抗ＣＤ１３８抗体は、配列番号２１の重鎖アミノ酸配列又は配列番号２１と少なくとも９５％同一の配列、及び配列番号２２の軽鎖アミノ酸配列又は配列番号２２と少なくとも９５％同一の配列を含む。詳細な実施形態において、抗ＣＤ１３８抗体は、配列番号２１の重鎖アミノ酸配列及び配列番号２２の軽鎖アミノ酸配列、又は開示される配列と少なくとも９５％同一の配列を含む。一部の実施形態において、抗ＣＤ１３８抗体は、配列番号２１と少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％同一の重鎖アミノ酸配列及び配列番号２２と少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％同一の軽鎖アミノ酸配列を有する。様々な実施形態において、抗ＣＤ１３８抗体はＢ－Ｂ４、又はその抗原結合断片である。
様々な実施形態において、抗ＣＤ１３８抗体又はその抗原結合断片はＢ－Ｂ４の３つの重鎖ＣＤＲ及び３つの軽鎖ＣＤＲを含み、又はここでＣＤＲは、ＨＣＤＲ１（配列番号７）、ＨＣＤＲ２（配列番号８）、ＨＣＤＲ３（配列番号９）；ＬＣＤＲ１（配列番号１０）、ＬＣＤＲ２（配列番号１１）、及びＬＣＤＲ３（配列番号１２）のアミノ酸付加、欠失又は置換を１、２、３、４、５、又は６個以下しか含まない。
様々な他の実施形態において、ＡＤＣの標的癌抗はヒトエフリンＡ型受容体２（ＥＰＨＡ２）である。
様々な実施形態において、抗ＥＰＨＡ２抗体又はその抗原結合断片は、以下のとおりの３つの重鎖ＣＤＲ及び３つの軽鎖ＣＤＲ：Ｋａｂａｔ付番方式によって定義したとき、配列番号１３からなる重鎖ＣＤＲ１（ＨＣＤＲ１）、配列番号１４からなる重鎖ＣＤＲ２（ＨＣＤＲ２）、配列番号１５からなる重鎖ＣＤＲ３（ＨＣＤＲ３）；配列番号１６からなる軽鎖ＣＤＲ１（ＬＣＤＲ１）、配列番号１７からなる軽鎖ＣＤＲ２（ＬＣＤＲ２）、及び配列番号１８からなる軽鎖ＣＤＲ３（ＬＣＤＲ３）を含む。
様々な実施形態において、抗ＥＰＨＡ２抗体又はその抗原結合断片は、配列番号２３のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号２４のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。一部の実施形態において、抗ＥＰＨＡ２抗体又はその抗原結合断片は、配列番号２３の重鎖可変領域アミノ酸配列及び配列番号２４の軽鎖可変領域アミノ酸配列、又は開示される配列と少なくとも９５％同一の配列を含む。一部の実施形態において、抗ＥＰＨＡ２抗体又はその抗原結合断片は、配列番号２３と少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％同一の重鎖可変領域アミノ酸配列及び／又は配列番号２４と少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％同一の軽鎖可変領域アミノ酸配列を有する。
様々な実施形態において、抗ＥＰＨＡ２抗体又はその抗原結合断片はインターナリゼーション性抗体又はインターナリゼーション性抗原結合断片である。様々な実施形態において、抗ＥＰＨＡ２抗体は、ヒトＩｇＧ１重鎖定常ドメイン及びヒトＩｇカッパ軽鎖定常ドメインを含む。
様々な実施形態において、抗ＥＰＨＡ２抗体は、配列番号２３の重鎖アミノ酸配列又は配列番号２３と少なくとも９５％同一の配列、及び配列番号２４の軽鎖アミノ酸配列又は配列番号２４と少なくとも９５％同一の配列を含む。詳細な実施形態において、抗ＥＰＨＡ２抗体は、配列番号２３の重鎖アミノ酸配列及び配列番号２４の軽鎖アミノ酸配列、又は開示される配列と少なくとも９５％同一の配列を含む。一部の実施形態において、抗ＥＰＨＡ２抗体は、配列番号２３と少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％同一の重鎖アミノ酸配列及び配列番号２４と少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％同一の軽鎖アミノ酸配列を有する。一部の実施形態において、抗ＥＰＨＡ２抗体は、配列番号２３のヌクレオチド配列によってコードされる重鎖；及び配列番号２４のヌクレオチド配列によってコードされる軽鎖を含む。様々な実施形態において、抗ＥＰＨＡ２抗体は１Ｃ１、又はその抗原結合断片である。
様々な実施形態において、抗ＥＰＨＡ２抗体又はその抗原結合断片は１Ｃ１の３つの重鎖ＣＤＲ及び３つの軽鎖ＣＤＲを含み、又はここでＣＤＲは、ＨＣＤＲ１（配列番号１３）、ＨＣＤＲ２（配列番号１４）、ＨＣＤＲ３（配列番号１５）；ＬＣＤＲ１（配列番号１６）、ＬＣＤＲ２（配列番号１７）、及びＬＣＤＲ３（配列番号１８）のアミノ酸付加、欠失又は置換を１、２、３、４、５、又は６個以下しか含まない。
様々な実施形態において、アミノ酸置換は単一残基のものである。挿入は通常、約１～約２０アミノ酸残基程度であり得るが、生物学的機能（例えば、標的抗原への結合）が保持されている限りは、著しく大きい挿入が許容されてもよい。欠失は通常、約１～約２０アミノ酸残基の範囲であるが、場合によっては欠失ははるかに大きくてもよい。置換、欠失、挿入、又はこれらの任意の組み合わせを用いることにより、最終的な誘導体又は変異体に達し得る。概して、これらの変更は、分子の変化、特に抗原結合タンパク質の免疫原性及び特異性の変化を最小限に抑えるため、少数のアミノ酸に対して行われる。しかしながら、特定の状況では、より大きい変更が許容されてもよい。概して、表６として示す以下のチャートに従い保存的置換が行われる。
表６に示されるものよりも保存性の低い置換を選択することにより、機能又は免疫学的アイデンティティの実質的な変更が行われる。例えば、変化領域におけるポリペプチド骨格の構造、例えばαヘリックス又はβシート構造；標的部位における分子の電荷又は疎水性；又は側鎖のバルクに一層重大な影響を及ぼす置換が行われてもよい。一般にポリペプチドの特性に最も大きい変更を生じさせ得る置換は、（ａ）親水性残基、例えばセリル又はスレオニルが、疎水性残基、例えば、ロイシル、イソロイシル、フェニルアラニル、バリル又はアラニルの代わりに（又はそれによって）置換されるもの；（ｂ）システイン又はプロリンが任意の他の残基の代わりに（又はそれによって）置換されるもの；（ｃ）電気陽性側鎖を有する残基、例えば、リシル、アルギニル、又はヒスチジルが、電気陰性残基、例えば、グルタミル又はアスパルチルの代わりに（又はそれによって）置換されるもの；又は（ｄ）バルク性側鎖を有する残基、例えばフェニルアラニンが、側鎖を有しないもの、例えばグリシンの代わりに（又はそれによって）置換されるものである。
ＡＤＣに変異体抗体配列が使用される様々な実施形態において、変異体は典型的には同じ定性的生物学的活性を呈し、同じ免疫応答を誘発することになるが、変異体はまた、必要に応じて抗原結合タンパク質の特徴を改変するように選択されてもよい。或いは、変異体は、抗原結合タンパク質の生物学的活性が変化するように設計されてもよい。例えば、グリコシル化部位を変化させるか、又は取り除いてもよい。
癌細胞を標的化するため、本明細書に使用されるＡＤＣと共に様々な抗体が使用されてもよい。以下に示すとおり、本明細書に開示されるＡＤＣのリンカー－ペイロードは、意外にも、種々の腫瘍抗原標的化抗体と共に有効である。腫瘍細胞に発現するが健常細胞には発現しない、又は健常細胞と比べて腫瘍細胞で高度に発現する好適な抗原は、それらに対する抗体と同じく、当該技術分野において公知である。これらの抗体は、本明細書に開示されるリンカー及びハーボキシジエンスプライシング調節薬ペイロードと共に使用されてもよい。一部の実施形態において、抗体又は抗原結合断片はＨＥＲ２を標的化し、ＨＥＲ２標的化抗体又は抗原結合断片はトラスツズマブである。一部の実施形態において、抗体又は抗原結合断片はＣＤ１３８を標的化し、ＣＤ１３８標的化抗体又は抗原結合断片はＢ－Ｂ４である。一部の実施形態において、抗体又は抗原結合断片はＥＰＨＡ２を標的化し、ＥＰＨＡ２標的化抗体又は抗原結合断片は１Ｃ１である。一部の実施形態において、開示されるリンカー及びハーボキシジエンスプライシング調節薬ペイロードは、意外にも幾つかの異なる腫瘍標的化抗体と共に有効であるが、トラスツズマブなどのＨＥＲ２標的化抗体、Ｂ－Ｂ４などのＣＤ１３８標的化抗体、及び１Ｃ１などのＥＰＨＡ２標的化抗体が、特に向上した薬物：抗体比、凝集レベル、安定性（即ち、インビトロ及びインビボ安定性）、腫瘍標的化（即ち、細胞傷害性、効力）、及び／又は治療有効性をもたらした。治療有効性の向上はインビトロ又はインビボで測定することができ、腫瘍成長速度の低下及び／又は腫瘍容積の減少を含み得る。
特定の実施形態では、同じ標的に対する別の抗体又は異なる抗原標的に対する抗体が使用され、上記に記載される有利な機能特性（例えば、安定性の向上、腫瘍標的化の向上、治療有効性の向上等）の少なくとも一部をもたらす。一部の実施形態では、開示されるリンカー及びハーボキシジエンスプライシング調節薬ペイロードを別のＨＥＲ２標的化、ＣＤ１３８標的化、又はＥＰＨＡ２標的化抗体又は抗原結合断片にコンジュゲートしたとき、これらの有利な機能特性の一部又は全てが観察される。一部の他の実施形態では、開示されるリンカー及びハーボキシジエンスプライシング調節薬ペイロードをＨＥＲ２標的化抗体又は抗原結合断片にコンジュゲートしたとき、これらの有利な機能特性の一部又は全てが観察される。一部の実施形態において、抗体又は抗原結合断片はＨＥＲ２を標的化する。一部の実施形態において、ＨＥＲ２標的化抗体又は抗原結合断片はトラスツズマブである。一部の他の実施形態において、開示されるリンカー及びハーボキシジエンスプライシング調節薬ペイロードをＣＤ１３８標的化抗体又は抗原結合断片にコンジュゲートしたとき、これらの有利な機能特性の一部又は全てが観察される。一部の実施形態において、抗体又は抗原結合断片はＣＤ１３８を標的化する。一部の実施形態において、ＣＤ１３８標的化抗体又は抗原結合断片はＢ－Ｂ４である。一部の他の実施形態において、開示されるリンカー及びハーボキシジエンスプライシング調節薬ペイロードをＥＰＨＡ２標的化抗体又は抗原結合断片にコンジュゲートしたとき、これらの有利な機能特性の一部又は全てが観察される。一部の実施形態において、抗体又は抗原結合断片はＥＰＨＡ２を標的化する。一部の実施形態において、ＥＰＨＡ２標的化抗体又は抗原結合断片は１Ｃ１である。
リンカー
様々な実施形態において、ＡＤＣのリンカーは、治療上有効であるのに十分に細胞外で安定している。一部の実施形態において、リンカーは細胞の外部で安定しており、そのためＡＤＣは細胞外条件に存在するとき（例えば、細胞への輸送又は送達前は）インタクトなままである。ＡＤＣの文脈で使用される用語「インタクト」は、抗体又は抗原結合断片が薬物部分（例えば、ハーボキシジエンスプライシング調節薬）に結び付いたままであることを意味する。本明細書で使用されるとき、「安定」は、リンカー又はリンカーを含むＡＤＣの文脈では、ＡＤＣが細胞外条件下に存在するときＡＤＣの試料中にあるリンカーのうち切断される（又は全ＡＤＣの場合、他の点でインタクトでない）ものが２０％以下、約１５％以下、約１０％以下、約５％以下、約３％以下、又は約１％以下（又は間にある任意のパーセンテージ）であることを意味する。一部の実施形態において、本明細書に開示されるリンカー及び／又はＡＤＣは、意外にも、別のリンカーと及び／又は別のリンカー及び／又はハーボキシジエンスプライシング調節薬ペイロードを有するＡＤＣと比較して安定している。一部の実施形態において、本明細書に開示されるＡＤＣは、約４８時間超、６０時間超、約７２時間超、約８４時間超、又は約９６時間超インタクトなままであることができる。
様々な実施形態において、ＡＤＣのリンカーは、治療上有効であるのに十分に細胞外で安定している。一部の実施形態において、リンカーは細胞の外部で安定しており、そのためＡＤＣは細胞外条件に存在するとき（例えば、細胞への輸送又は送達前は）インタクトなままである。ＡＤＣの文脈で使用される用語「インタクト」は、抗体又は抗原結合断片が薬物部分（例えば、ハーボキシジエンスプライシング調節薬）に結び付いたままであることを意味する。本明細書で使用されるとき、「安定」は、リンカー又はリンカーを含むＡＤＣの文脈では、ＡＤＣが細胞外条件下に存在するときＡＤＣの試料中にあるリンカーのうち切断される（又は全ＡＤＣの場合、他の点でインタクトでない）ものが２０％以下、約１５％以下、約１０％以下、約５％以下、約３％以下、又は約１％以下（又は間にある任意のパーセンテージ）であることを意味する。一部の実施形態において、本明細書に開示されるリンカー及び／又はＡＤＣは、意外にも、別のリンカーと及び／又は別のリンカー及び／又はハーボキシジエンスプライシング調節薬ペイロードを有するＡＤＣと比較して安定している。一部の実施形態において、本明細書に開示されるＡＤＣは、約４８時間超、６０時間超、約７２時間超、約８４時間超、又は約９６時間超インタクトなままであることができる。
リンカーが細胞外で安定しているかどうかは、例えば、ＡＤＣを血漿中に所定の時間（例えば、２、４、６、８、１６、２４、４８、又は７２時間）にわたって含め、次に血漿中に存在する遊離薬物部分の量を定量化することにより決定し得る。安定性は、ＡＤＣが標的腫瘍細胞に局在化するのに十分な時間を与え、薬物部分の早過ぎる放出（これは、正常組織及び腫瘍組織の両方が無差別に損傷することにより、ＡＤＣの治療指数が低下する可能性がある）を防止し得る。一部の実施形態において、リンカーは標的細胞の外部では安定しており、細胞の内部に入ると、ＡＤＣから薬物部分を放出し、薬物がその標的に（例えば、ＳＦ３ｂスプライセオソーム複合体に）結合できるようになる。従って、有効なリンカーは、（ｉ）抗体又は抗原結合断片の特異的結合特性を維持しており；（ｉｉ）抗体又は抗原結合断片との安定した結び付きによる薬物部分の送達、例えば細胞内送達を可能にし；（ｉｉｉ）ＡＤＣがその標的部位に輸送又は送達され終えるまで安定していてインタクトなままであり；及び（ｉｖ）切断後又は別の放出機構後に薬物部分の治療効果、例えば細胞傷害効果を実現するものということになる。
リンカーは、ＡＤＣの物理化学的特性に影響し得る。多くの細胞傷害剤が本質的に疎水性であることに伴い、それを更なる疎水性部分を持つ抗体に連結すると、凝集につながり得る。ＡＤＣ凝集体は不溶性であり、多くの場合に抗体上に実現可能な薬物負荷量を制限し、これはＡＤＣの効力に悪影響を及ぼし得る。生物学的製剤のタンパク質凝集体はまた、一般に、免疫原性の増加とも関係付けられている。以下に示すとおり、本明細書に開示されるリンカーは、凝集レベルが低い、且つ望ましい薬物負荷量レベルのＡＤＣをもたらす。
リンカーは、「切断可能」又は「非切断可能」であってもよい（Ｄｕｃｒｙ ａｎｄ Ｓｔｕｍｐ（２０１０）Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ Ｃｈｅｍ．２１：５－１３）。切断可能リンカーは、特定の環境因子に供されたとき、例えば標的細胞内にインターナライズされたとき薬物部分（例えば、ハーボキシジエンスプライシング調節薬）を放出するように設計され、一方、非切断可能リンカーは、概して抗体又は抗原結合断片それ自体の分解に頼る。
一部の実施形態において、リンカーは非切断可能リンカーである。一部の実施形態において、ＡＤＣのハーボキシジエンスプライシング調節薬薬物部分は抗体又は抗原結合断片の分解によって放出される。非切断可能リンカーは、標的細胞によるインターナリゼーション及びその内部での分解を受けても、抗体及び薬物の少なくとも１つのアミノ酸と共有結合的に会合したままの傾向がある。数多くの例示的非切断可能リンカーが本明細書に記載され、他にも当該技術分野では公知である。例示的非切断可能リンカーは、チオエーテル、シクロヘキシル、Ｎ－スクシンイミジル４－（Ｎ－マレイミドメチル）シクロヘキサン－１カルボキシレート（ＳＭＣＣ）、又はＮ－ヒドロキシスクシンイミド（ＮＨＳ）、１個以上のポリエチレングリコール（ＰＥＧ）部分、例えば、１、２、３、４、５、又は６個のＰＥＧ部分、又は１個以上のアルキル部分を含み得る。
一部の実施形態において、リンカーは切断可能リンカーである。切断可能リンカーとは、切断可能部分を含む任意のリンカーを指す。本明細書で使用されるとき、用語「切断可能部分」は、切断されることのできる任意の化学結合を指す。好適な切断可能化学結合は当該技術分野において周知であり、限定はされないが、酸不安定性結合、プロテアーゼ／ペプチダーゼ不安定性結合、光不安定性結合、ジスルフィド結合、及びエステラーゼ不安定性結合が挙げられる。切断可能部分を含むリンカーは、リンカーの特定の部位における切断により、ＡＤＣからのハーボキシジエンスプライシング調節薬薬物部分の放出を可能にし得る。
一部の実施形態において、リンカーは細胞内条件下で切断可能であり、従って細胞内環境ではリンカーの切断によることで十分に抗体又は抗原結合断片からハーボキシジエンスプライシング調節薬薬物部分が放出されて薬物が活性化し、及び／又は薬物が治療上有効になる。一部の実施形態において、ハーボキシジエンスプライシング調節薬薬物部分は、ＡＤＣの抗体又は抗原結合断片に特異的な抗原を発現する細胞内にＡＤＣが入るまでは抗体又は抗原結合断片から切断されず、細胞に入り次第、ハーボキシジエンスプライシング調節薬薬物部分は抗体又は抗原結合断片から切断される。一部の実施形態において、リンカーは、切断時にリンカー又は抗体若しくは抗原結合断片のいかなる一部分もハーボキシジエンスプライシング調節薬薬物部分に結合したまま残ることのないような位置にある切断可能部分を含む。例示的切断可能リンカーとしては、酸不安定性リンカー、プロテアーゼ／ペプチダーゼ感受性リンカー、光不安定性リンカー、ジメチル含有、ジスルフィド含有、又はスルホンアミド含有リンカーが挙げられる。
一部の実施形態において、リンカーはｐＨ感受性リンカーであり、特定のｐＨ値で加水分解に対する感受性がある。典型的には、ｐＨ感受性リンカーは酸性条件下で切断可能である。この切断戦略は、概して、エンドソーム（ｐＨ約５～６）及びリソソーム（ｐＨ約４．８）の細胞内コンパートメントのｐＨがサイトゾル（ｐＨ約７．４）と比較したとき低いことを利用して、ヒドラゾンなど、リンカー中の酸不安定性基の加水分解を引き起こすものである（Ｊａｉｎ ｅｔ ａｌ．（２０１５）Ｐｈａｒｍ Ｒｅｓ ３２：３５２６－４０）。一部の実施形態において、リンカーは酸不安定性及び／又は加水分解性リンカーである。例えば、リソソーム内で加水分解性であり、且つ酸不安定性基（例えば、ヒドラゾン、セミカルバゾン、チオセミカルバゾン、ｃｉｓ－アコニット酸アミド、オルトエステル、アセタール、ケタールなど）を含有する酸不安定性リンカーを使用することができる。例えば、米国特許第５，１２２，３６８号明細書；同第５，８２４，８０５号明細書；同第５，６２２，９２９号明細書；Ｄｕｂｏｗｃｈｉｋ ａｎｄ Ｗａｌｋｅｒ（１９９９）Ｐｈａｒｍ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ ８３：６７－１２３；Ｎｅｖｉｌｌｅ ｅｔ ａｌ．（１９８９）Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ．２６４：１４６５３－６１を参照のこと。かかるリンカーは、血中にあるものなど、中性ｐＨ条件下で比較的安定しているが、リソソームの近似的ｐＨであるｐＨ５．５又は５．０を下回ると不安定である。特定の実施形態において、加水分解性リンカーはチオエーテルリンカー（例えば、アシルヒドラゾン結合を介して療法剤に結び付いたチオエーテルなど）である（例えば、米国特許第５，６２２，９２９号明細書を参照のこと）。
一部の実施形態において、リンカーは還元条件下で切断可能である。一部の実施形態において、リンカーは、グルタチオン又はジチオスレイトールなどの還元剤の存在下で切断可能である。一部の実施形態において、リンカーは切断可能なジスルフィドリンカー又は切断可能なスルホンアミドリンカーである。
一部の実施形態において、リンカーは切断可能なジスルフィドリンカーである。種々のジスルフィドリンカーが、例えば、ＳＡＴＡ（Ｎ－スクシンイミジル－５－アセチルチオアセテート）、ＳＰＤＰ（Ｎ－スクシンイミジル－３－（２－ピリジルジチオ）プロピオネート）、ＳＰＤＢ（Ｎ－スクシンイミジル－３－（２－ピリジルジチオ）ブチレート）及びＳＭＰＴ（Ｎ－スクシンイミジルオキシカルボニル－α－メチル－α－（２－ピリジル－ジチオ）トルエン）、ＳＰＤＢとＳＭＰＴを使用して形成することのできるものを含め、当該技術分野において公知である。例えば、Ｔｈｏｒｐｅ ｅｔ ａｌ．（１９８７）Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．４７：５９２４－３１；Ｗａｗｒｚｙｎｃｚａｋ ｅｔ ａｌ．，Ｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｃｏｎｊｕｇａｔｅｓ：Ａｎｔｉｂｏｄｙ Ｃｏｎｊｕｇａｔｅｓ ｉｎ Ｒａｄｉｏｉｍａｇｅｒｙ ａｎｄ Ｔｈｅｒａｐｙ ｏｆ Ｃａｎｃｅｒ（Ｃ．Ｗ．Ｖｏｇｅｌ ｅｄ．，Ｏｘｆｏｒｄ Ｕ．Ｐｒｅｓｓ，１９８７）を参照のこと。また、米国特許第４，８８０，９３５号明細書も参照のこと。ジスルフィドリンカーは、典型的には、そのジスルフィド結合の切断を促進し得る細胞内チオールが多量にあることを利用して用いられる。最も多量にある細胞内チオール、還元型グルタチオンの細胞内濃度は概して１～１０ｎＭの範囲であり、これは血中に約５μＭで最も多量にある低分子チオール（即ち、システイン）の約１，０００倍の高さである（Ｇｏｌｄｍａｃｈｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ｉｎ Ｃａｎｃｅｒ Ｄｒｕｇ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ ａｎｄ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ：Ａｎｔｉｂｏｄｙ－Ｄｒｕｇ Ｃｏｎｊｕｇａｔｅｓ ａｎｄ Ｉｍｍｕｎｏｔｏｘｉｎｓ（Ｇ．Ｌ．Ｐｈｉｌｌｉｐｓ ｅｄ．，Ｓｐｒｉｎｇｅｒ，２０１３））。タンパク質ジスルフィドイソメラーゼファミリーの細胞内酵素もまた、ジスルフィドリンカーの細胞内切断に寄与し得る。本明細書で使用されるとき、切断可能なジスルフィドリンカーとは、切断可能なジスルフィド部分を含む任意のリンカーを指す。用語「切断可能なジスルフィド部分」は、例えばチオール又は酵素によって切断及び／又は還元されることのできるジスルフィド結合を指す。
一部の実施形態において、リンカーは切断可能なスルホンアミドリンカーである。本明細書で使用されるとき、切断可能なスルホンアミドリンカーは、切断可能なスルホンアミド部分を含む任意のリンカーを指す。用語「切断可能なスルホンアミド部分」は、スルホンアミド基、即ちアミン基につながっているスルホニル基を指し、ここでは硫黄－窒素結合が切断されることができる。
一部の実施形態において、リンカーは、分岐した多官能性リンカー部分を介して２つ以上の薬物部分を抗体又は抗原結合断片に共有結合的に結び付けるための樹状型リンカーであってもよい。例えば、Ｓｕｎ ｅｔ ａｌ．（２００２）Ｂｉｏｏｒｇ Ｍｅｄ Ｃｈｅｍ Ｌｅｔｔ．１２：２２１３－５；Ｓｕｎ ｅｔ ａｌ．（２００３）Ｂｉｏｏｒｇ Ｍｅｄ Ｃｈｅｍ．１１：１７６１－８を参照のこと。樹状リンカーは薬物対抗体のモル比、即ち薬物負荷量を増加させることができ、これはＡＤＣの効力に関係する。従って、抗体又は抗原結合断片が１つの反応性システインチオール基のみを担持する場合、例えば、樹状リンカーによって多数のハーボキシジエンスプライシング調節薬薬物部分を結び付けてもよい。一部の実施形態において、リンカー部分又はリンカー－薬物部分は、還元型ジスルフィド架橋化学又はリジン限定利用技術によって抗体又は抗原結合断片に結び付けてもよい。例えば、国際公開第２０１３／１７３３９１号パンフレット及び同第２０１３／１７３３９３号パンフレットを参照のこと。
一部の実施形態において、リンカーは、細胞内環境に（例えば、リソソーム又はエンドソーム又はカベオラの中に）存在する切断剤、例えば酵素によって切断可能である。リンカーは、例えば、細胞内ペプチダーゼ又は限定はされないがリソソーム若しくはエンドソームプロテアーゼを含めたプロテアーゼ酵素によって切断されるペプチドリンカーであってもよい。
一部の実施形態において、リンカーは切断可能なペプチドリンカーである。本明細書で使用されるとき、切断可能なペプチドリンカーとは、切断可能なペプチド部分を含む任意のリンカーを指す。用語「切断可能なペプチド部分」は、細胞内環境に存在する薬剤によって切断されることのできる任意の化学結合連結アミノ酸（天然又は合成アミノ酸誘導体）を指す。例えば、リンカーは、カテプシン、例えばカテプシンＢなどのペプチダーゼによって切断可能なバリン－アラニン（Ｖａｌ－Ａｌａ）配列、又はバリン－シトルリン（Ｖａｌ－Ｃｉｔ）配列を含んでもよい。一部の実施形態において、リンカーはグルタミン酸－バリン－シトルリン配列（Ｇｌｕ－Ｖａｌ－Ｃｉｔ）を含んでもよい。一部の実施形態において、リンカーは酵素切断可能なリンカーであり、リンカー中の切断可能なペプチド部分は酵素によって切断可能である。一部の実施形態において、切断可能なペプチド部分はリソソーム酵素、例えばカテプシンによって切断可能である。一部の実施形態において、リンカーはカテプシン切断可能リンカーである。一部の実施形態において、リンカー中の切断可能なペプチド部分は、カテプシンＢ、Ｃ、Ｆ、Ｈ、Ｋ、Ｌ、Ｏ、Ｓ、Ｖ、Ｘ、又はＷなど、リソソームシステインカテプシンによって切断可能である。一部の実施形態において、切断可能なペプチド部分はカテプシンＢによって切断可能である。カテプシンＢによって切断され得る例示的ジペプチドは、バリン－シトルリン（Ｖａｌ－Ｃｉｔ）である（Ｄｕｂｏｗｃｈｉｋ ｅｔ ａｌ．（２００２）Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ Ｃｈｅｍ．１３：８５５－６９）。
一部の実施形態において、リンカー又はリンカー中の切断可能なペプチド部分はアミノ酸単位を含む。一部の実施形態において、アミノ酸単位はプロテアーゼによるリンカーの切断を可能にし、従って、１つ以上のリソソーム酵素など、１つ以上の細胞内プロテアーゼへの曝露時にＡＤＣからのハーボキシジエンスプライシング調節薬薬物部分の放出を促進する（Ｄｏｒｏｎｉｎａ ｅｔ ａｌ．（２００３）Ｎａｔ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．２１：７７８－８４；Ｄｕｂｏｗｃｈｉｋ ａｎｄ Ｗａｌｋｅｒ（１９９９）Ｐｈａｒｍ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ ８３：６７－１２３）。例示的アミノ酸単位としては、限定はされないが、ジペプチド、トリペプチド、テトラペプチド、及びペンタペプチドが挙げられる。例示的ジペプチドとしては、限定はされないが、バリン－アラニン（Ｖａｌ－Ａｌａ）、バリン－シトルリン（Ｖａｌ－Ｃｉｔ）、アラニン－アスパラギン（Ａｌａ－Ａｓｎ）、アラニン－フェニルアラニン（Ａｌａ－Ｐｈｅ）、フェニルアラニン－リジン（Ｐｈｅ－Ｌｙｓ）、アラニン－リジン（Ａｌａ－Ｌｙｓ）、アラニン－バリン（Ａｌａ－Ｖａｌ）、バリン－リジン（Ｖａｌ－Ｌｙｓ）、リジン－リジン（Ｌｙｓ－Ｌｙｓ）、フェニルアラニン－シトルリン（Ｐｈｅ－Ｃｉｔ）、ロイシン－シトルリン（Ｌｅｕ－Ｃｉｔ）、イソロイシン－シトルリン（Ｉｌｅ－Ｃｉｔ）、トリプトファン－シトルリン（Ｔｒｐ－Ｃｉｔ）、及びフェニルアラニン－アラニン（Ｐｈｅ－Ａｌａ）が挙げられる。例示的トリペプチドとしては、限定はされないが、アラニン－アラニン－アスパラギン（Ａｌａ－Ａｌａ－Ａｓｎ）、グリシン－バリン－シトルリン（Ｇｌｙ－Ｖａｌ－Ｃｉｔ）、グリシン－グリシン－グリシン（Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ）、フェニルアラニン－フェニルアラニン－リジン（Ｐｈｅ－Ｐｈｅ－Ｌｙｓ）、グルタミン酸－バリン－シトルリン（Ｇｌｕ－Ｖａｌ－Ｃｉｔ）（例えば、Ａｎａｍｉ ｅｔ ａｌ．（２０１８）Ｎａｔ Ｃｏｍｍ．９：２５１２を参照のこと）、及びグリシン－フェニルアラニン－リジン（Ｇｌｙ－Ｐｈｅ－Ｌｙｓ）が挙げられる。他の例示的アミノ酸単位としては、限定はされないが、例えば米国特許第６，２１４，３４５号明細書に記載されるとおりの、Ｇｌｙ－Ｐｈｅ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ（配列番号３４）、Ｇｌｙ－Ｐｈｅ－Ｌｅｕ－Ｇｌｙ（配列番号３５）、Ａｌａ－Ｌｅｕ－Ａｌａ－Ｌｅｕ（配列番号３６）、Ｐｈｅ－Ｎ９－トシル－Ａｒｇ、及びＰｈｅ－Ｎ９－ニトロ－Ａｒｇが挙げられる。一部の実施形態において、リンカー中のアミノ酸単位はＶａｌ－Ａｌａを含む。一部の実施形態において、リンカー中のアミノ酸単位はＶａｌ－Ｃｉｔを含む。一部の実施形態において、リンカー中のアミノ酸単位はＧｌｕ－Ｖａｌ－Ｃｉｔを含む。アミノ酸単位は、天然に存在するアミノ酸残基及び／又は微量アミノ酸及び／又は天然に存在しないアミノ酸類似体、例えばシトルリンなどを含み得る。アミノ酸単位は、特定の酵素、例えば、腫瘍関連プロテアーゼ、リソソームプロテアーゼ、例えばカテプシンＢ、Ｃ、Ｄ、又はＳなど、又はプラスミンプロテアーゼによる酵素的切断向けに設計し、最適化することができる。
一部の実施形態において、リンカーは切断可能なβ－グルクロニドリンカーである。本明細書で使用されるとき、切断可能なβ－グルクロニドリンカーとは、切断可能なβ－グルクロニド部分を含む任意のリンカーを指す。例示的な切断可能なβ－グルクロニドリンカーは、構造：
を含む。
を含む。
用語「切断可能なβ－グルクロニド部分」は、β－グルクロニダーゼ活性を有する薬剤によって切断されることのできるグリコシド結合を指す。一部の実施形態において、リンカーは、β－グルクロニダーゼによって切断されることのできるグリコシド結合を含む。β－グルクロニダーゼは、β配置を有するグルクロニドのグリコシド結合の加水分解を触媒するＵＤＰ－グルクロノシルトランスフェラーゼである。
一部の実施形態において、本明細書に開示されるＡＤＣは、リンカー中に、酵素によって切断可能である切断可能なβ－グルクロニド部分を含む。一部の実施形態において、リンカー中の切断可能なβ－グルクロニド部分は、リソソーム酵素、例えばβ－グルクロニダーゼによって切断可能である。一部の実施形態において、リンカーはβ－グルクロニダーゼ切断可能リンカーである。一部の実施形態において、リンカー中の切断可能なβ－グルクロニド部分は、ＡＤＣのインターナリゼーション後にβ－グルクロニダーゼによるリンカーの切断を可能にし、それによって細胞環境内でのＡＤＣからの薬物部分の放出を促進する。
一部の実施形態において、本明細書に開示される任意のＡＤＣにおけるリンカーは、抗体又は抗原結合断片を薬物部分（例えば、ハーボキシジエンスプライシング調節薬薬物部分）につなぎ合わせる少なくとも１つのスペーサー単位を含み得る。一部の実施形態において、抗体又は抗原結合断片と切断可能部分との間のスペーサー単位は、存在する場合、リンカー中の切断部位（例えば、切断可能なペプチド部分）を抗体又は抗原結合断片につなぎ合わせる。一部の実施形態において、薬物部分と切断可能部分との間のスペーサー単位は、存在する場合、リンカー中の切断部位（例えば、切断可能なペプチド部分）を薬物部分につなぎ合わせる。一部の実施形態において、切断部位は存在せず、スペーサー単位が抗体又は抗原結合断片を薬物部分に連結するために使用される。
一部の実施形態において、リンカー、及び／又はリンカー中のスペーサー単位は実質的に親水性である。親水性リンカーを使用すると、薬物が抵抗性癌細胞から多剤耐性（ＭＤＲ）又は機能的に類似の輸送体によって押し出され得る程度が低下し得る。一部の実施形態において、親水性リンカーは、１個以上のポリエチレングリコール（ＰＥＧ）部分、例えば、１、２、３、４、５、又は６個のＰＥＧ部分を含み得る。一部の実施形態において、リンカーは２個のＰＥＧ部分を含む。
一部の実施形態において、リンカー中のスペーサー単位は１個以上のＰＥＧ部分を含む。一部の実施形態において、スペーサー単位は１個以上の－（ＰＥＧ）ｍ－を含み、ｍは１～１０の整数である（即ち、ｍは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、又は１０であり得る）。一部の実施形態において、ｍは、１～１０；２～８；２～６；２～５；２～４；又は２～３の範囲である。一部の実施形態において、ｍは２である。一部の実施形態において、スペーサー単位は、（ＰＥＧ）２、（ＰＥＧ）３、（ＰＥＧ）４、（ＰＥＧ）５、（ＰＥＧ）６、（ＰＥＧ）７、（ＰＥＧ）８、（ＰＥＧ）９、又は（ＰＥＧ）１０を含む。一部の実施形態において、スペーサー単位は（ＰＥＧ）２を含む。
一部の実施形態において、リンカー中のスペーサー単位はアルキル部分を含む。一部の実施形態において、スペーサー単位は１個以上の－（ＣＨ２）ｎ－を含み、ｎは１～１０の整数である（即ち、ｎは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、又は１０であり得る）。一部の実施形態において、ｎは、１～１０；２～８；２～６；２～５；２～４；又は２～３の範囲である。一部の実施形態において、ｎは２である。一部の実施形態において、ｎは５である。一部の実施形態において、ｎは６である。一部の実施形態において、スペーサー単位は、（ＣＨ２）２、（ＣＨ２）３、（ＣＨ２）４、（ＣＨ２）５、（ＣＨ２）６、（ＣＨ２）７、（ＣＨ２）８、（ＣＨ２）９、又は（ＣＨ２）１０を含む。一部の実施形態において、スペーサー単位は（ＣＨ２）２（「Ｅｔ」）を含む。一部の実施形態において、スペーサー単位は（ＣＨ２）６（「Ｈｅｘ」）を含む。一部の実施形態において、スペーサー単位は（ＣＨ２）２－Ｏ－（ＣＨ２）２（「Ｅｔ－Ｏ－Ｅｔ」）を含む。
スペーサー単位は、例えば抗体又は抗原結合断片を薬物部分に直接、或いは間接的に連結するために用いられ得る。一部の実施形態において、スペーサー単位は抗体又は抗原結合断片をハーボキシジエンスプライシング調節薬薬物部分に直接連結する。一部の実施形態において、抗体又は抗原結合断片とハーボキシジエンスプライシング調節薬薬物部分とは、１個以上のＰＥＧ部分（例えば、（ＰＥＧ）２）、又は１個以上のアルキル部分（例えば、（ＣＨ２）２、（ＣＨ２）６、又は（ＣＨ２）２－Ｏ－（ＣＨ２）２）を含むスペーサー単位を介して結び付けられる。一部の実施形態において、スペーサー単位は抗体又は抗原結合断片をハーボキシジエンスプライシング調節薬薬物部分に間接的に連結する。一部の実施形態において、スペーサー単位は抗体又は抗原結合断片をハーボキシジエンスプライシング調節薬薬物部分に、切断可能部分（例えば、切断可能なペプチド又は切断可能なβ－グルクロニド）及び／又はスペーサー単位を抗体又は抗原結合断片につなぎ合わせるための結び付ける部分、例えばマレイミド部分を通じて間接的に連結する。
スペーサー単位は、様々な実施形態において、マレイミド（Ｍａｌ）部分を介して抗体又は抗原結合断片（即ち、抗体又は抗原結合断片）に結び付く。
Ｍａｌを介して抗体又は抗原結合断片に結び付くスペーサー単位は、本明細書では「Ｍａｌ－スペーサー単位」と称される。用語「Ｍａｌ」又は「マレイミド部分」は、本明細書で使用されるとき、マレイミド基を含有し、且つスルフヒドリル基、例えば抗体又は抗原結合断片上のシステイン残基のスルフヒドリル基との反応性を有する化合物を意味する。スルフヒドリル基（チオール類）との反応性を有する他の官能基としては、限定はされないが、ヨードアセトアミド、ブロモアセトアミド、ビニルピリジン、ジスルフィド、ピリジルジスルフィド、イソシアネート、及びイソチオシアネートが挙げられる。一部の実施形態において、Ｍａｌ－スペーサー単位は抗体又は抗原結合断片上のシステイン残基との反応性を有する。一部の実施形態において、Ｍａｌ－スペーサー単位はシステイン残基を介して抗体又は抗原結合断片につなぎ合わされる。一部の実施形態において、Ｍａｌ－スペーサー単位はＰＥＧ部分を含む。一部の実施形態において、Ｍａｌ－スペーサー単位はアルキル部分を含む。
特定の実施形態において、リンカーはＭａｌ－スペーサー単位と切断可能なペプチド部分とを含む。一部の実施形態において、切断可能なペプチド部分はアミノ酸単位を含む。一部の実施形態において、アミノ酸単位はＶａｌ－Ｃｉｔを含む。一部の実施形態において、アミノ酸単位はＶａｌ－Ａｌａを含む。一部の実施形態において、アミノ酸単位はＧｌｕ－Ｖａｌ－Ｃｉｔを含む。一部の実施形態において、リンカーはＭａｌ－スペーサー単位とＶａｌ－Ｃｉｔとを含む。一部の実施形態において、リンカーはＭａｌ－スペーサー単位とＶａｌ－Ａｌａとを含む。一部の実施形態において、リンカーはＭａｌ－スペーサー単位とＶａｌ－Ｃｉｔとを含み、ここでＭａｌ－スペーサー単位はマレイミドカプロイル（ＭＣ）を含む。一部の実施形態において、リンカーはＭａｌ－スペーサー単位とＶａｌ－Ａｌａとを含み、ここでＭａｌ－スペーサー単位はマレイミドカプロイル（ＭＣ）を含む。一部の実施形態において、リンカーはＭａｌ－スペーサー単位と切断可能なβ－グルクロニド部分とを含む。
一部の実施形態において、リンカーは構造：Ｍａｌ－スペーサー単位を含む。一部の実施形態において、Ｍａｌ－スペーサー単位はマレイミドカプロイル（ＭＣ）を含む。一部の実施形態において、リンカーは構造：ＭＣを含む。一部の実施形態において、リンカーは構造：Ｍａｌ－（ＣＨ２）２（「Ｍａｌ－Ｅｔ」）を含む。一部の実施形態において、リンカーは構造：Ｍａｌ－（ＣＨ２）６（「Ｍａｌ－Ｈｅｘ」）を含む。一部の実施形態において、リンカーは構造：Ｍａｌ－（ＣＨ２）２－Ｏ－（ＣＨ２）２（「Ｍａｌ－Ｅｔ－Ｏ－Ｅｔ」）を含む。一部の実施形態において、リンカーは構造：Ｍａｌ－（ＰＥＧ）２を含む。一部の実施形態において、リンカーは構造：Ｍａｌ－（ＰＥＧ）２－ＣＯを含む。
様々な実施形態において、Ｍａｌ－スペーサー単位は抗体又は抗原結合断片を切断可能なペプチド部分に結び付ける。一部の実施形態において、リンカーはＭａｌ－スペーサー単位－ペプチドを含む。一部の実施形態において、リンカーは構造：Ｍａｌ－スペーサー単位－Ｖａｌ－Ｃｉｔを含む。一部の実施形態において、Ｍａｌ－スペーサー単位はマレイミドカプロイル（ＭＣ）を含む。一部の実施形態において、リンカーは構造：ＭＣ－Ｖａｌ－Ｃｉｔを含む。
一部の実施形態において、リンカーは構造：Ｍａｌ－スペーサー単位－Ｖａｌ－Ａｌａを含む。一部の実施形態において、Ｍａｌ－スペーサー単位はマレイミドカプロイル（ＭＣ）を含む。一部の実施形態において、リンカーは構造：ＭＣ－Ｖａｌ－Ａｌａを含む。
様々な実施形態において、Ｍａｌ－スペーサー単位は抗体又は抗原結合断片を切断可能なβ－グルクロニド部分に結び付ける。一部の実施形態において、リンカーはＭａｌ－スペーサー単位－β－グルクロニドを含む。一部の実施形態において、リンカーはＭＣ－β－グルクロニドを含む。
様々な実施形態において、リンカーの切断可能部分はハーボキシジエンスプライシング調節薬薬物部分に直接つなぎ合わされる。他の実施形態では、スペーサー単位を使用してリンカーの切断可能部分がハーボキシジエンスプライシング調節薬薬物部分に結び付けられる。様々な実施形態において、ハーボキシジエンスプライシング調節薬はリンカーの切断可能部分にスペーサー単位によって結び付けられる。
スペーサー単位は「自己犠牲性」又は「非自己犠牲性」であってもよい。「非自己犠牲性」スペーサー単位は、リンカーの切断を受けてもスペーサー単位の一部又は全てがハーボキシジエンスプライシング調節薬薬物部分に結合したまま残るものである。非自己犠牲性スペーサー単位の例としては、限定はされないが、グリシンスペーサー単位及びグリシン－グリシンスペーサー単位が挙げられる。非自己犠牲性スペーサー単位は、時間が経つと最終的には分解し得るが、細胞条件下においても、連結した未変性薬物部分全体を直ちに放出することはない。「自己犠牲性」スペーサー単位は細胞内条件下で未変性薬物部分の放出を可能にする。「未変性薬物」又は「未変性薬物部分」は、スペーサー単位の切断／分解後にスペーサー単位の一部又は他の化学修飾が残らないものである。
自己犠牲化学は当該技術分野において公知であり、開示されるＡＤＣのために容易に選択することができる。様々な実施形態において、リンカーの切断可能部分をハーボキシジエンスプライシング調節薬薬物部分に結び付けるスペーサー単位は自己犠牲性であり、細胞内条件下で切断可能部分の切断と同時又はその直前／直後に自己犠牲を起こす。一部の実施形態において、ハーボキシジエンスプライシング調節薬は自己犠牲性スペーサー単位によってリンカーの切断可能部分に結び付けられる。特定の実施形態において、ハーボキシジエンスプライシング調節薬は自己犠牲性スペーサー単位によってリンカーの切断可能部分に結び付けられ、この切断可能部分はＶａｌ－Ｃｉｔを含み、マレイミドカプロイル（ＭＣ）が切断可能部分を抗体又は抗原結合断片につなぎ合わせる。特定の実施形態において、ハーボキシジエンスプライシング調節薬は自己犠牲性スペーサー単位によってリンカーの切断可能部分に結び付けられ、この切断可能部分はＶａｌ－Ａｌａを含み、マレイミドカプロイル（ＭＣ）が切断可能部分を抗体又は抗原結合断片につなぎ合わせる。特定の実施形態において、ハーボキシジエンスプライシング調節薬は自己犠牲性スペーサー単位によってリンカーの切断可能部分に結び付けられ、この切断可能部分はＧｌｕ－Ｖａｌ－Ｃｉｔを含み、マレイミドカプロイル（ＭＣ）が切断可能部分を抗体又は抗原結合断片につなぎ合わせる。特定の実施形態において、ハーボキシジエンスプライシング調節薬は、ｐＡＢＣ又はｐＡＢ自己犠牲性スペーサー単位及びＶａｌ－Ｃｉｔ切断可能部分につなぎ合わされたリンカー中のＭａｌ－スペーサー単位（例えば、ＭＣ）を介して抗体又は抗原結合断片につなぎ合わされる。特定の他の実施形態において、ハーボキシジエンスプライシング調節薬は、ｐＡＢＣ又はｐＡＢ自己犠牲性スペーサー単位及びＶａｌ－Ａｌａ切断可能部分につなぎ合わされたリンカー中のＭａｌ－スペーサー単位（例えば、ＭＣ）を介して抗体又は抗原結合断片につなぎ合わされる。特定の他の実施形態において、ハーボキシジエンスプライシング調節薬は、ｐＡＢＣ又はｐＡＢ自己犠牲性スペーサー単位及びＧｌｕ－Ｖａｌ－Ｃｉｔ切断可能部分につなぎ合わされたリンカー中のＭａｌ－スペーサー単位（例えば、ＭＣ）を介して抗体又は抗原結合断片につなぎ合わされる。
特定の実施形態において、リンカー中の自己犠牲性スペーサー単位はｐ－アミノベンジル単位を含む。一部の実施形態において、ｐ－アミノベンジルアルコール（ｐＡＢＯＨ）はアミド結合を介してアミノ酸単位又はリンカー中の他の切断可能部分に結び付けられ、ｐＡＢＯＨと薬物部分との間にカルバミン酸塩、メチルカルバミン酸塩、又は炭酸塩が作られる（Ｈａｍａｎｎ ｅｔ ａｌ．（２００５）Ｅｘｐｅｒｔ Ｏｐｉｎ Ｔｈｅｒ Ｐａｔｅｎｔｓ １５：１０８７－１０３）。一部の実施形態において、自己犠牲性スペーサー単位はｐ－アミノベンジルオキシカルボニル（ｐＡＢＣ）であるか、又はそれを含む。理論によって拘束されるものではないが、ｐＡＢＣの自己犠牲には自発的１，６－脱離反応が関わるものと思われる（Ｊａｉｎ ｅｔ ａｌ．（２０１５）Ｐｈａｒｍ Ｒｅｓ．３２：３５２６－４０）。
様々な実施形態において、開示されるＡＤＣに使用されるｐ－アミノベンジルオキシカルボニル（ｐＡＢＣ）の構造は、以下に示される：
様々な実施形態において、自己犠牲性スペーサー単位はリンカーの切断可能部分をハーボキシジエンスプライシング調節薬に結び付ける。一部の実施形態において、自己犠牲性スペーサー単位はｐＡＢＣである。一部の実施形態において、ｐＡＢＣはリンカーの切断可能部分をハーボキシジエンスプライシング調節薬に結び付ける。一部の実施形態において、ｐＡＢＣは切断可能部分の切断時に自己犠牲を起こし、ハーボキシジエンスプライシング調節薬がＡＤＣからその未変性の活性形態で放出される。
一部の実施形態において、抗ＨＥＲ２抗体又は抗原結合断片は、ＭＣ－Ｖａｌ－Ｃｉｔ－ｐＡＢＣを含むリンカーによってハーボキシジエンスプライシング調節薬につなぎ合わされる。他の実施形態において、抗ＨＥＲ２抗体又は抗原結合断片は、ＭＣ－Ｖａｌ－Ａｌａ－ｐＡＢＣを含むリンカーによってハーボキシジエンスプライシング調節薬につなぎ合わされる。
一部の実施形態において、抗ＣＤ１３８抗体又は抗原結合断片は、ＭＣ－Ｖａｌ－Ｃｉｔ－ｐＡＢＣを含むリンカーによってハーボキシジエンスプライシング調節薬につなぎ合わされる。他の実施形態において、抗ＣＤ１３８抗体又は抗原結合断片は、ＭＣ－Ｖａｌ－Ａｌａ－ｐＡＢＣを含むリンカーによってハーボキシジエンスプライシング調節薬につなぎ合わされる。
一部の実施形態において、抗ＥＰＨＡ２抗体又は抗原結合断片は、ＭＣ－Ｖａｌ－Ｃｉｔ－ｐＡＢＣを含むリンカーによってハーボキシジエンスプライシング調節薬につなぎ合わされる。他の実施形態において、抗ＥＰＨＡ２抗体又は抗原結合断片は、ＭＣ－Ｖａｌ－Ａｌａ－ｐＡＢＣを含むリンカーによってハーボキシジエンスプライシング調節薬につなぎ合わされる。
一部の実施形態において、ｐＡＢＣはリンカー中の切断可能なペプチド部分の切断時に自己犠牲を起こす。一部の実施形態において、切断可能なペプチド部分はアミノ酸単位を含む。一部の実施形態において、リンカーはアミノ酸単位－ｐＡＢＣを含む。一部の実施形態において、アミノ酸単位はＶａｌ－Ｃｉｔである。一部の実施形態において、リンカーはＶａｌ－Ｃｉｔ－ｐＡＢＣを含む。一部の実施形態において、アミノ酸単位はＧｌｕ－Ｖａｌ－Ｃｉｔである。一部の実施形態において、リンカーはＧｌｕ－Ｖａｌ－Ｃｉｔ－ｐＡＢＣを含む。一部の実施形態において、アミノ酸単位はＶａｌ－Ａｌａである。一部の実施形態において、リンカーはＶａｌ－Ａｌａ－ｐＡＢＣを含む。一部の実施形態において、アミノ酸単位はＡｌａ－Ａｌａ－Ａｓｎである。一部の実施形態において、リンカーはＡｌａ－Ａｌａ－Ａｓｎ－ｐＡＢＣを含む。
一部の実施形態において、ｐＡＢＣはリンカー中の切断可能なβ－グルクロニド部分の切断時に自己犠牲を起こす。一部の実施形態において、リンカーはβ－グルクロニド－ｐＡＢＣを含む。
特定の実施形態において、リンカー中の自己犠牲性スペーサー単位はｐ－アミノベンジル単位を含む。一部の実施形態において、リンカー中の自己犠牲性スペーサー単位はｐ－アミノベンジル（ｐＡＢ）を含む。一部の実施形態において、ｐＡＢの自己犠牲には自発的１，６－脱離反応が関わる。
様々な実施形態において、開示されるＡＤＣに使用されるｐ－アミノベンジル（ｐＡＢ）の構造は、以下に示される：
様々な実施形態において、自己犠牲性スペーサー単位はリンカーの切断可能部分をハーボキシジエンスプライシング調節薬に結び付ける。一部の実施形態において、自己犠牲性スペーサー単位はｐＡＢである。一部の実施形態において、ｐＡＢはリンカーの切断可能部分をハーボキシジエンスプライシング調節薬に結び付ける。一部の実施形態において、ｐＡＢは切断可能部分の切断時に自己犠牲を起こし、ハーボキシジエンスプライシング調節薬がＡＤＣからその未変性の活性形態で放出される。
一部の実施形態において、抗ＨＥＲ２抗体又は抗原結合断片は、ＭＣ－Ｖａｌ－Ｃｉｔ－ｐＡＢを含むリンカーによってハーボキシジエンスプライシング調節薬につなぎ合わされる。他の実施形態において、抗ＨＥＲ２抗体又は抗原結合断片は、ＭＣ－Ｖａｌ－Ａｌａ－ｐＡＢを含むリンカーによってハーボキシジエンスプライシング調節薬につなぎ合わされる。
一部の実施形態において、抗ＣＤ１３８抗体又は抗原結合断片は、ＭＣ－Ｖａｌ－Ｃｉｔ－ｐＡＢを含むリンカーによってハーボキシジエンスプライシング調節薬につなぎ合わされる。他の実施形態において、抗ＣＤ１３８抗体又は抗原結合断片は、ＭＣ－Ｖａｌ－Ａｌａ－ｐＡＢを含むリンカーによってハーボキシジエンスプライシング調節薬につなぎ合わされる。
一部の実施形態において、抗ＥＰＨＡ２抗体又は抗原結合断片は、ＭＣ－Ｖａｌ－Ｃｉｔ－ｐＡＢを含むリンカーによってハーボキシジエンスプライシング調節薬につなぎ合わされる。他の実施形態において、抗ＥＰＨＡ２抗体又は抗原結合断片は、ＭＣ－Ｖａｌ－Ａｌａ－ｐＡＢを含むリンカーによってハーボキシジエンスプライシング調節薬につなぎ合わされる。
一部の実施形態において、ｐＡＢはリンカー中の切断可能なペプチド部分の切断時に自己犠牲を起こす。一部の実施形態において、切断可能なペプチド部分はアミノ酸単位を含む。一部の実施形態において、リンカーはアミノ酸単位－ｐＡＢを含む。一部の実施形態において、アミノ酸単位はＶａｌ－Ｃｉｔである。一部の実施形態において、リンカーはＶａｌ－Ｃｉｔ－ｐＡＢを含む。一部の実施形態において、アミノ酸単位はＶａｌ－Ａｌａである。一部の実施形態において、リンカーはＶａｌ－Ａｌａ－ｐＡＢを含む。一部の実施形態において、アミノ酸単位はＧｌｕ－Ｖａｌ－Ｃｉｔである。一部の実施形態において、リンカーはＧｌｕ－Ｖａｌ－Ｃｉｔ－ｐＡＢを含む。一部の実施形態において、アミノ酸単位はＡｌａ－Ａｌａ－Ａｓｎである。一部の実施形態において、リンカーはＡｌａ－Ａｌａ－Ａｓｎ－ｐＡＢを含む。
一部の実施形態において、ｐＡＢはリンカー中の切断可能なβ－グルクロニド部分の切断時に自己犠牲を起こす。一部の実施形態において、リンカーはβ－グルクロニド－ｐＡＢを含む。
一部の他の実施形態において、ハーボキシジエンスプライシング調節薬は非自己犠牲性スペーサー単位によってリンカーの切断可能部分に結び付けられる。特定の実施形態において、ハーボキシジエンスプライシング調節薬は非自己犠牲性スペーサー単位によってリンカーの切断可能部分に結び付けられ、この切断可能部分はＶａｌ－Ｃｉｔを含み、マレイミドカプロイル（ＭＣ）が切断可能部分を抗体又は抗原結合断片につなぎ合わせる。特定の実施形態において、ハーボキシジエンスプライシング調節薬は非自己犠牲性スペーサー単位によってリンカーの切断可能部分に結び付けられ、この切断可能部分はＶａｌ－Ａｌａを含み、マレイミドカプロイル（ＭＣ）が切断可能部分を抗体又は抗原結合断片につなぎ合わせる。
様々な態様において、ＡＤＣの抗体又は抗原結合断片はリンカーを介してハーボキシジエンスプライシング調節薬薬物部分にコンジュゲートされ、ここでリンカーは、Ｍａｌ－スペーサー単位（例えば、ＭＣ）と切断可能なアミノ酸単位とｐＡＢＣとを含む。一部の実施形態において、スペーサー単位はアルキル部分を含む。一部の実施形態において、Ｍａｌ－スペーサー単位はマレイミドカプロイル（ＭＣ）を含む。一部の実施形態において、リンカーはＭａｌ－スペーサー単位－アミノ酸単位－ｐＡＢＣを含む。一部の実施形態において、リンカーはＭＣ－アミノ酸単位－ｐＡＢＣを含む。一部の実施形態において、リンカーはＭＣ－Ｖａｌ－Ｃｉｔ－ｐＡＢＣを含む。一部の実施形態において、リンカーはＭＣ－Ｖａｌ－Ａｌａ－ｐＡＢＣを含む。一部の実施形態において、リンカーはＭＣ－Ｇｌｕ－Ｖａｌ－Ｃｉｔ－ｐＡＢＣを含む。一部の実施形態において、リンカーはＭＣ－Ａｌａ－Ａｌａ－Ａｓｎ－ｐＡＢＣを含む。
様々な他の態様において、ＡＤＣの抗体又は抗原結合断片はリンカーを介してハーボキシジエンスプライシング調節薬薬物部分にコンジュゲートされ、ここでリンカーは、Ｍａｌ－スペーサー単位（例えば、ＭＣ）と切断可能なアミノ酸単位とｐＡＢとを含む。一部の実施形態において、スペーサー単位はアルキル部分を含む。一部の実施形態において、Ｍａｌ－スペーサー単位はマレイミドカプロイル（ＭＣ）を含む。一部の実施形態において、リンカーはＭａｌ－スペーサー単位－アミノ酸単位－ｐＡＢを含む。一部の実施形態において、リンカーはＭＣ－アミノ酸単位－ｐＡＢを含む。一部の実施形態において、リンカーはＭＣ－Ｖａｌ－Ｃｉｔ－ｐＡＢを含む。一部の実施形態において、リンカーはＭＣ－Ｖａｌ－Ａｌａ－ｐＡＢを含む。一部の実施形態において、リンカーはＭＣ－Ｇｌｕ－Ｖａｌ－Ｃｉｔ－ｐＡＢを含む。一部の実施形態において、リンカーはＭＣ－Ａｌａ－Ａｌａ－Ａｓｎ－ｐＡＢを含む。
様々な他の態様において、ＡＤＣの抗体又は抗原結合断片はリンカーを介してハーボキシジエンスプライシング調節薬薬物部分にコンジュゲートされ、ここでリンカーは、Ｍａｌ－スペーサー単位（例えば、ＭＣ）と切断可能なβ－グルクロニドとｐＡＢＣとを含む。一部の実施形態において、リンカーはＭａｌ－スペーサー単位－β－グルクロニド－ｐＡＢＣを含む。一部の実施形態において、リンカーはＭＣ－β－グルクロニド－ｐＡＢＣを含む。
更に他の態様において、ＡＤＣの抗体又は抗原結合断片はリンカーを介してハーボキシジエンスプライシング調節薬薬物部分にコンジュゲートされ、ここでリンカーは、Ｍａｌ－スペーサー単位（例えば、ＭＣ）と切断可能なβ－グルクロニドとｐＡＢとを含む。一部の実施形態において、リンカーはＭａｌ－スペーサー単位－β－グルクロニド－ｐＡＢを含む。一部の実施形態において、リンカーはＭＣ－β－グルクロニド－ｐＡＢを含む。
様々な実施形態において、ＡＤＣ化合物は、式（Ｉ）：
Ａｂ－（Ｌ－Ｈ）ｐ （Ｉ）
［式中、Ａｂは、新生物細胞を標的化する抗体又は抗原結合断片であり；
Ｈは、ハーボキシジエンスプライシング調節薬であり；
Ｌは、ＡｂをＤに共有結合的に結び付けるリンカーであり；及び
ｐは、１～１５の整数である］を有する。
Ａｂ－（Ｌ－Ｈ）ｐ （Ｉ）
［式中、Ａｂは、新生物細胞を標的化する抗体又は抗原結合断片であり；
Ｈは、ハーボキシジエンスプライシング調節薬であり；
Ｌは、ＡｂをＤに共有結合的に結び付けるリンカーであり；及び
ｐは、１～１５の整数である］を有する。
一部の実施形態において、ＡＤＣの抗体又は抗原結合断片（Ａｂ）はリンカーを介してハーボキシジエンスプライシング調節薬薬物部分にコンジュゲートされ、ここでリンカーは、本明細書に開示される又は参照により援用されるリンカーのいずれかであるか、又は本明細書に開示される又は参照により援用されるリンカーのいずれかの１つ以上の成分を含む。
一部の実施形態において、リンカーは、切断後にリンカー又は抗体若しくは抗原結合断片のいかなる一部分もハーボキシジエンスプライシング調節薬に結合したまま残ることのないような位置にある切断可能部分を含む。一部の実施形態において、切断可能部分は切断可能なペプチド部分、例えば、Ｖａｌ－Ｃｉｔ又はＶａｌ－Ａｌａなどのアミノ酸単位である。一部の実施形態において、アミノ酸単位又はリンカーはＶａｌ－Ｃｉｔを含む。一部の実施形態において、アミノ酸単位又はリンカーはＶａｌ－Ａｌａを含む。一部の実施形態において、アミノ酸単位又はリンカーはＧｌｕ－Ｖａｌ－Ｃｉｔを含む。
一部の実施形態において、リンカーは、抗体又は抗原結合断片を切断可能部分につなぎ合わせる少なくとも１つのスペーサー単位を含む。一部の実施形態において、リンカーは、抗体又は抗原結合断片を薬物部分につなぎ合わせる少なくとも１つのスペーサー単位を含む。一部の実施形態において、スペーサー単位又はリンカーは少なくとも１つのアルキル部分を含む。
一部の実施形態において、リンカー中のスペーサー単位はＭａｌ部分を介して抗体又は抗原結合断片に結び付いている（「Ｍａｌ－スペーサー単位」）。一部の実施形態において、Ｍａｌ－スペーサー単位は少なくとも１つのアルキル部分を含む。一部の実施形態において、リンカーはマレイミドカプロイル（ＭＣ）を含む。一部の実施形態において、リンカーはＭａｌ－（ＣＨ２）２（「Ｍａｌ－Ｅｔ」）を含む。一部の実施形態において、リンカーはＭａｌ－（ＣＨ２）６（「Ｍａｌ－Ｈｅｘ」）を含む。一部の実施形態において、リンカーはＭａｌ－（ＣＨ２）２－Ｏ－（ＣＨ２）２（「Ｍａｌ－Ｅｔ－Ｏ－Ｅｔ」）を含む。一部の実施形態において、リンカーはＭａｌ－（ＰＥＧ）２－ＣＯを含む。一部の実施形態において、Ｍａｌ－スペーサー単位は抗体又は抗原結合断片を薬物部分に結び付ける。
一部の実施形態において、Ｍａｌ－スペーサー単位又はリンカーは、Ｍａｌ－（ＰＥＧ）２、Ｍａｌ－（ＰＥＧ）３、Ｍａｌ－（ＰＥＧ）４、Ｍａｌ－（ＰＥＧ）５、Ｍａｌ－（ＰＥＧ）６、Ｍａｌ－（ＰＥＧ）７、又はＭａｌ－（ＰＥＧ）８を含む。一部の実施形態において、Ｍａｌ－スペーサー単位又はリンカーはＭａｌ－（ＰＥＧ）２を含む。一部の実施形態において、Ｍａｌ－スペーサー単位又はリンカーは、Ｍａｌ－（ＰＥＧ）２－ＣＯ、Ｍａｌ－（ＰＥＧ）３－ＣＯ、Ｍａｌ－（ＰＥＧ）４－ＣＯ、Ｍａｌ－（ＰＥＧ）５－ＣＯ、Ｍａｌ－（ＰＥＧ）６－ＣＯ、Ｍａｌ－（ＰＥＧ）７－ＣＯ、又はＭａｌ－（ＰＥＧ）８－ＣＯを含む。一部の実施形態において、Ｍａｌ－スペーサー単位又はリンカーはＭａｌ－（ＰＥＧ）２－ＣＯを含む。一部の実施形態において、Ｍａｌ－スペーサー単位又はリンカーはＭａｌ－（ＰＥＧ）２－ＣＯと少なくとも１つの追加的なスペーサー単位とを含む。一部の実施形態において、Ｍａｌ－（ＰＥＧ）２－ＣＯは抗体又は抗原結合断片を薬物部分に結び付ける。一部の実施形態において、リンカーはＭａｌ－（ＰＥＧ）２－ＣＯを含むか、又はそれからなる。「Ｍａｌ－（ＰＥＧ）２－ＣＯ」リンカーの例は、本明細書ではまた、「ＡＤＬ２」又は「ＡＤＬ２」リンカーとも称される。
一部の実施形態において、Ｍａｌ－スペーサー単位又はリンカーはＭＣを含む。一部の実施形態において、Ｍａｌ－スペーサー単位又はリンカーはＭＣと少なくとも１つの追加的なスペーサー単位とを含む。一部の実施形態において、ＭＣは抗体又は抗原結合断片を薬物部分に結び付ける。一部の実施形態において、リンカーはＭＣを含むか、又はそれからなる。「ＭＣ」リンカーの例は、本明細書ではまた、「ＡＤＬ１０」又は「ＡＤＬ１０」リンカーとも称される。
一部の実施形態において、Ｍａｌ－スペーサー単位又はリンカーはＭａｌ－（ＣＨ２）６（「Ｍａｌ－Ｈｅｘ」）を含む。一部の実施形態において、Ｍａｌ－スペーサー単位又はリンカーはＭａｌ－Ｈｅｘと少なくとも１つの追加的なスペーサー単位とを含む。一部の実施形態において、Ｍａｌ－Ｈｅｘは抗体又は抗原結合断片を薬物部分に結び付ける。一部の実施形態において、リンカーはＭａｌ－Ｈｅｘを含む。「Ｍａｌ－Ｈｅｘ」リンカーの例は、本明細書ではまた、「ＡＤＬ１２」又は「ＡＤＬ１２」リンカーとも称される。
一部の実施形態において、Ｍａｌ－スペーサー単位又はリンカーはＭａｌ－（ＣＨ２）２（「Ｍａｌ－Ｅｔ」）を含む。一部の実施形態において、Ｍａｌ－スペーサー単位又はリンカーはＭａｌ－Ｅｔと少なくとも１つの追加的なスペーサー単位とを含む。一部の実施形態において、Ｍａｌ－Ｅｔは抗体又は抗原結合断片を薬物部分に結び付ける。一部の実施形態において、リンカーはＭａｌ－Ｅｔを含む。「Ｍａｌ－Ｅｔ」リンカーの例は、本明細書ではまた、「ＡＤＬ１４」又は「ＡＤＬ１４」リンカーとも称される。
一部の実施形態において、Ｍａｌ－スペーサー単位又はリンカーはＭａｌ－（ＣＨ２）２－Ｏ－（ＣＨ２）２（「Ｍａｌ－Ｅｔ－Ｏ－Ｅｔ」）を含む。一部の実施形態において、Ｍａｌ－スペーサー単位又はリンカーはＭａｌ－Ｅｔ－Ｏ－Ｅｔと少なくとも１つの追加的なスペーサー単位とを含む。一部の実施形態において、Ｍａｌ－Ｅｔ－Ｏ－Ｅｔは抗体又は抗原結合断片を薬物部分に結び付ける。一部の実施形態において、リンカーはＭａｌ－Ｅｔ－Ｏ－Ｅｔを含む。「Ｍａｌ－Ｅｔ－Ｏ－Ｅｔ」リンカーの例は、本明細書ではまた、「ＡＤＬ１５」又は「ＡＤＬ１５」リンカーとも称される。
一部の他の実施形態において、Ｍａｌ－スペーサー単位は抗体又は抗原結合断片をリンカーの切断可能部分に結び付ける。一部の実施形態において、リンカーの切断可能部分は切断可能なペプチド部分、例えばアミノ酸単位である。一部の実施形態において、切断可能なペプチド部分はＶａｌ－Ｃｉｔ又はＶａｌ－Ａｌａである。一部の実施形態において、Ｍａｌ－スペーサー単位又はリンカーはＭＣを含む。一部の実施形態において、リンカーはＭＣ－Ｖａｌ－Ｃｉｔを含む。一部の実施形態において、リンカーはＭＣ－Ｖａｌ－Ａｌａを含む。一部の実施形態において、リンカーはＭＣ－Ｇｌｕ－Ｖａｌ－Ｃｉｔを含む。一部の実施形態において、リンカーはＭＣ－Ａｌａ－Ａｌａ－Ａｓｎを含む。
一部の実施形態において、スペーサー単位はリンカーの切断可能部分をハーボキシジエンスプライシング調節薬に結び付ける。一部の実施形態において、切断可能部分をハーボキシジエンスプライシング調節薬に結び付けるスペーサー単位は自己犠牲性である。
一部の実施形態において、スペーサー単位はｐＡＢＣを含む。一部の実施形態において、ｐＡＢＣは切断可能部分をハーボキシジエンスプライシング調節薬に結び付ける。一部の実施形態において、切断可能部分は切断可能なペプチド部分、例えばアミノ酸単位である。一部の実施形態において、リンカーはアミノ酸単位－ｐＡＢＣを含む。
一部の実施形態において、リンカーはＶａｌ－Ｃｉｔ－ｐＡＢＣを含む。一部の実施形態において、リンカーは、Ｖａｌ－Ｃｉｔ－ｐＡＢＣと、リンカーを抗体又は抗原結合断片につなぎ合わせるＭＣ Ｍａｌ－スペーサー単位とを含む。一部の実施形態において、リンカーはＭＣ－Ｖａｌ－Ｃｉｔ－ｐＡＢＣを含む。一部の実施形態において、リンカーはＭＣ－Ｖａｌ－Ｃｉｔ－ｐＡＢＣと少なくとも１つの追加的なスペーサー単位とを含む。ＭＣ－Ｖａｌ－Ｃｉｔ－ｐＡＢＣリンカーの例は、本明細書ではまた、「ＡＤＬ１」又は「ＡＤＬ１」リンカーとも称される。
一部の実施形態において、リンカーはＶａｌ－Ａｌａ－ｐＡＢＣを含む。一部の実施形態において、リンカーは、Ｖａｌ－Ａｌａ－ｐＡＢＣと、リンカーを抗体又は抗原結合断片につなぎ合わせるＭＣ Ｍａｌ－スペーサー単位とを含む。一部の実施形態において、リンカーはＭＣ－Ｖａｌ－Ａｌａ－ｐＡＢＣを含む。一部の実施形態において、リンカーはＭＣ－Ｖａｌ－Ａｌａ－ｐＡＢＣと少なくとも１つの追加的なスペーサー単位とを含む。ＭＣ－Ｖａｌ－Ａｌａ－ｐＡＢＣリンカーの例は、本明細書ではまた、「ＡＤＬ６」又は「ＡＤＬ６」リンカーとも称される。
一部の実施形態において、リンカーはＧｌｕ－Ｖａｌ－Ｃｉｔ－ｐＡＢＣを含む。一部の実施形態において、リンカーは、Ｇｌｕ－Ｖａｌ－Ｃｉｔ－ｐＡＢＣと、リンカーを抗体又は抗原結合断片につなぎ合わせるＭＣ Ｍａｌ－スペーサー単位とを含む。一部の実施形態において、リンカーはＭＣ－Ｇｌｕ－Ｖａｌ－Ｃｉｔ－ｐＡＢＣを含む。一部の実施形態において、リンカーはＭＣ－Ｇｌｕ－Ｖａｌ－Ｃｉｔ－ｐＡＢＣと少なくとも１つの追加的なスペーサー単位とを含む。ＭＣ－Ｇｌｕ－Ｖａｌ－Ｃｉｔ－ｐＡＢＣリンカーの例は、本明細書ではまた、「ＡＤＬ２３」又は「ＡＤＬ２３」リンカーとも称される。
一部の実施形態において、リンカーはＡｌａ－Ａｌａ－Ａｓｎ－ｐＡＢＣを含む。一部の実施形態において、リンカーは、Ａｌａ－Ａｌａ－Ａｓｎ－ｐＡＢＣと、リンカーを抗体又は抗原結合断片につなぎ合わせるＭＣ Ｍａｌ－スペーサー単位とを含む。一部の実施形態において、リンカーはＭＣ－Ａｌａ－Ａｌａ－Ａｓｎ－ｐＡＢＣを含む。一部の実施形態において、リンカーはＭＣ－Ａｌａ－Ａｌａ－Ａｓｎ－ｐＡＢＣと少なくとも１つの追加的なスペーサー単位とを含む。ＭＣ－Ａｌａ－Ａｌａ－Ａｓｎ－ｐＡＢＣリンカーの例は、本明細書ではまた、「ＡＤＬ２１」又は「ＡＤＬ２１」リンカーとも称される。
一部の他の実施形態において、スペーサー単位はｐＡＢを含む。一部の実施形態において、ｐＡＢは切断可能部分をハーボキシジエンスプライシング調節薬に結び付ける。一部の実施形態において、切断可能部分は切断可能なペプチド部分、例えばアミノ酸単位である。一部の実施形態において、リンカーはアミノ酸単位－ｐＡＢを含む。
一部の実施形態において、リンカーはＶａｌ－Ａｌａ－ｐＡＢを含む。一部の実施形態において、リンカーは、Ｖａｌ－Ａｌａ－ｐＡＢと、リンカーを抗体又は抗原結合断片につなぎ合わせるＭＣ Ｍａｌ－スペーサー単位とを含む。一部の実施形態において、リンカーはＭＣ－Ｖａｌ－Ａｌａ－ｐＡＢを含む。一部の実施形態において、リンカーはＭＣ－Ｖａｌ－Ａｌａ－ｐＡＢと少なくとも１つの追加的なスペーサー単位とを含む。ＭＣ－Ｖａｌ－Ａｌａ－ｐＡＢリンカーの例は、本明細書ではまた、「ＡＤＬ５」又は「ＡＤＬ５」リンカーとも称される。
一部の実施形態において、リンカーはＶａｌ－Ｃｉｔ－ｐＡＢを含む。一部の実施形態において、リンカーは、Ｖａｌ－Ｃｉｔ－ｐＡＢと、リンカーを抗体又は抗原結合断片につなぎ合わせるＭＣ Ｍａｌ－スペーサー単位とを含む。一部の実施形態において、リンカーはＭＣ－Ｖａｌ－Ｃｉｔ－ｐＡＢを含む。一部の実施形態において、リンカーはＭＣ－Ｖａｌ－Ｃｉｔ－ｐＡＢと少なくとも１つの追加的なスペーサー単位とを含む。ＭＣ－Ｖａｌ－Ｃｉｔ－ｐＡＢリンカーの例は、本明細書ではまた、「ＡＤＬ７」又は「ＡＤＬ７」リンカーとも称される。
一部の実施形態において、リンカーはβ－グルクロニド－ｐＡＢＣを含む。一部の実施形態において、リンカーは、β－グルクロニド－ｐＡＢＣと、リンカーを抗体又は抗原結合断片につなぎ合わせるＭＣ Ｍａｌ－スペーサー単位とを含む。一部の実施形態において、リンカーはＭＣ－β－グルクロニド－ｐＡＢＣを含む。一部の実施形態において、リンカーはＭＣ－β－グルクロニド－ｐＡＢＣと少なくとも１つの追加的なスペーサー単位とを含む。ＭＣ－β－グルクロニド－ｐＡＢＣの例は、本明細書ではまた、「ＡＤＬ１３」又は「ＡＤＬ１３」リンカーとも称される。
一部の実施形態において、リンカーはβ－グルクロニド－ｐＡＢを含む。一部の実施形態において、リンカーは、β－グルクロニド－ｐＡＢと、リンカーを抗体又は抗原結合断片につなぎ合わせるＭＣ Ｍａｌ－スペーサー単位とを含む。一部の実施形態において、リンカーはＭＣ－β－グルクロニド－ｐＡＢを含む。
一部の実施形態において、抗体又は抗原結合断片は、ＡＤＬ１、ＡＤＬ２、ＡＤＬ５、ＡＤＬ６、ＡＤＬ７、ＡＤＬ１２、ＡＤＬ１３、ＡＤＬ１４、ＡＤＬ１５、ＡＤＬ２１、又はＡＤＬ２３リンカーを介してハーボキシジエンスプライシング調節薬薬物部分にコンジュゲートされる。様々な実施形態において、本明細書に開示されるＡＤＬ１、ＡＤＬ２、ＡＤＬ５、ＡＤＬ６、ＡＤＬ７、ＡＤＬ１２、ＡＤＬ１３、ＡＤＬ１４、ＡＤＬ１５、ＡＤＬ２１、又はＡＤＬ２３リンカーとハーボキシジエンスプライシング調節薬薬物部分とを含むＡＤＣは、治療用ＡＤＣに望ましい特性を実証することが発見されている。様々な実施形態において、それらの特性としては、限定はされないが、いずれも他のリンカー－ペイロードを用いるＡＤＣと比較したときの、有効な薬物負荷レベル、低い凝集レベル、貯蔵条件下での又は体内で循環中にあるときの安定性（例えば、血清安定性）、非コンジュゲート化抗体と同等の標的発現細胞に対する親和性の保持、標的発現細胞に対する強力な細胞傷害性、低いオフターゲット細胞殺傷レベル、高レベルのバイスタンダー殺傷、及び／又は有効なインビボ抗癌活性が挙げられる。例えば、様々な実施形態において、本明細書に開示されるＡＤＬ１、ＡＤＬ２、ＡＤＬ５、ＡＤＬ６、ＡＤＬ７、ＡＤＬ１２、ＡＤＬ１３、ＡＤＬ１４、ＡＤＬ１５、ＡＤＬ２１、又はＡＤＬ２３リンカーとハーボキシジエンスプライシング調節薬薬物部分とを含むＡＤＣは、他のリンカー－ペイロード（例えば、ＡＤＬ１０リンカー及びハーボキシジエンスプライシング調節薬薬物部分）を用いるＡＤＣと比較したとき、標的発現細胞の成長及び／又は増殖を阻害する能力の増加を呈する。様々な実施形態において、本明細書に開示されるＡＤＬ１、ＡＤＬ２、ＡＤＬ５、ＡＤＬ６、ＡＤＬ７、ＡＤＬ１２、ＡＤＬ１３、ＡＤＬ１４、ＡＤＬ１５、ＡＤＬ２１、又はＡＤＬ２３リンカーとハーボキシジエンスプライシング調節薬薬物部分とを含むＡＤＣは、意外にも、他のスプライシング調節薬ベースのＡＤＣ（例えば、タイランスタチンＡ系ＡＤＣ、例えば、Ｐｕｔｈｅｎｖｅｅｔｉｌ ｅｔ ａｌ．Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ Ｃｈｅｍ．（２０１６）２７：１８８０－８に報告されるとおり）と比較したとき生体内安定性（例えば、血漿安定性）の増加を呈する。
一部の実施形態において、本明細書に開示されるＡＤＬ１、ＡＤＬ２、ＡＤＬ５、ＡＤＬ６、ＡＤＬ７、ＡＤＬ１２、ＡＤＬ１３、ＡＤＬ１４、ＡＤＬ１５、ＡＤＬ２１、又はＡＤＬ２３リンカーとハーボキシジエンスプライシング調節薬薬物部分との特定の組み合わせによってもたらされる良好な又は優れた機能特性は、例えば、トラスツズマブなどの抗ＨＥＲ２抗体；Ｂ－Ｂ４などの抗ＣＤ１３８抗体；又は１Ｃ１などの抗ＥＰＨＡ２抗体にコンジュゲートされたリンカー－ペイロードで観察され得る。
一部の実施形態において、ＡＤＣは、ＡＤＬ１－ハーボキシジエンスプライシング調節薬と、新生物細胞を標的化し及びそこにインターナライズする能力を保持している抗体又はその抗原結合断片を含む抗体又は抗原結合断片とを含む。一部の実施形態において、ＡＤＣは、ＡＤＬ２－ハーボキシジエンスプライシング調節薬と、新生物細胞を標的化し及びそこにインターナライズする能力を保持している抗体又はその抗原結合断片を含む抗体又は抗原結合断片とを含む。一部の実施形態において、ＡＤＣは、ＡＤＬ５－ハーボキシジエンスプライシング調節薬と、新生物細胞を標的化し及びそこにインターナライズする能力を保持している抗体又はその抗原結合断片を含む抗体又は抗原結合断片とを含む。一部の実施形態において、ＡＤＣは、ＡＤＬ６－ハーボキシジエンスプライシング調節薬と、新生物細胞を標的化し及びそこにインターナライズする能力を保持している抗体又はその抗原結合断片を含む抗体又は抗原結合断片とを含む。一部の実施形態において、ＡＤＣは、ＡＤＬ７－ハーボキシジエンスプライシング調節薬と、新生物細胞を標的化し及びそこにインターナライズする能力を保持している抗体又はその抗原結合断片を含む抗体又は抗原結合断片とを含む。一部の実施形態において、ＡＤＣは、ＡＤＬ１２－ハーボキシジエンスプライシング調節薬と、新生物細胞を標的化し及びそこにインターナライズする能力を保持している抗体又はその抗原結合断片を含む抗体又は抗原結合断片とを含む。一部の実施形態において、ＡＤＣは、ＡＤＬ１３－ハーボキシジエンスプライシング調節薬と、新生物細胞を標的化し及びそこにインターナライズする能力を保持している抗体又はその抗原結合断片を含む抗体又は抗原結合断片とを含む。一部の実施形態において、ＡＤＣは、ＡＤＬ１４－ハーボキシジエンスプライシング調節薬と、新生物細胞を標的化し及びそこにインターナライズする能力を保持している抗体又はその抗原結合断片を含む抗体又は抗原結合断片とを含む。一部の実施形態において、ＡＤＣは、ＡＤＬ１５－ハーボキシジエンスプライシング調節薬と、新生物細胞を標的化し及びそこにインターナライズする能力を保持している抗体又はその抗原結合断片を含む抗体又は抗原結合断片とを含む。
一部の実施形態において、ＡＤＣは、ＡＤＬ１－ハーボキシジエンスプライシング調節薬と、ＨＥＲ２を発現する新生物細胞を標的化する抗体又はその抗原結合断片とを含む。一部の実施形態において、ＡＤＣは、ＡＤＬ２－ハーボキシジエンスプライシング調節薬と、ＨＥＲ２を発現する新生物細胞を標的化する抗体又はその抗原結合断片とを含む。一部の実施形態において、ＡＤＣは、ＡＤＬ５－ハーボキシジエンスプライシング調節薬と、ＨＥＲ２を発現する新生物細胞を標的化する抗体又はその抗原結合断片とを含む。一部の実施形態において、ＡＤＣは、ＡＤＬ６－ハーボキシジエンスプライシング調節薬と、ＨＥＲ２を発現する新生物細胞を標的化する抗体又はその抗原結合断片とを含む。一部の実施形態において、ＡＤＣは、ＡＤＬ７－ハーボキシジエンスプライシング調節薬と、ＨＥＲ２を発現する新生物細胞を標的化する抗体又はその抗原結合断片とを含む。一部の実施形態において、ＡＤＣは、ＡＤＬ１２－ハーボキシジエンスプライシング調節薬と、ＨＥＲ２を発現する新生物細胞を標的化する抗体又はその抗原結合断片とを含む。一部の実施形態において、ＡＤＣは、ＡＤＬ１３－ハーボキシジエンスプライシング調節薬と、ＨＥＲ２を発現する新生物細胞を標的化する抗体又はその抗原結合断片とを含む。一部の実施形態において、ＡＤＣは、ＡＤＬ１４－ハーボキシジエンスプライシング調節薬と、ＨＥＲ２を発現する新生物細胞を標的化する抗体又はその抗原結合断片とを含む。一部の実施形態において、ＡＤＣは、ＡＤＬ１５－ハーボキシジエンスプライシング調節薬と、ＨＥＲ２を発現する新生物細胞を標的化する抗体又はその抗原結合断片とを含む。
一部の実施形態において、ＨＥＲ２を発現する新生物細胞を標的化する抗体又はその抗原結合断片はインターナリゼーション性抗体又はインターナリゼーション性抗原結合断片である。一部の実施形態において、ＨＥＲ２を発現する新生物細胞を標的化する抗体又はその抗原結合断片は、配列番号１（ＨＣＤＲ１）、配列番号２（ＨＣＤＲ２）、及び配列番号３（ＨＣＤＲ３）のアミノ酸配列を含む３つの重鎖相補性決定領域（ＨＣＤＲ）と；配列番号４（ＬＣＤＲ１）、配列番号５（ＬＣＤＲ２）、及び配列番号６（ＬＣＤＲ３）のアミノ酸配列を含む３つの軽鎖相補性決定領域（ＬＣＤＲ）とを含む。
一部の実施形態において、ＡＤＣは、式（Ｉ）：
Ａｂ－（Ｌ－Ｈ）ｐ （Ｉ）
［式中：
（ｉ）Ａｂは、配列番号１（ＨＣＤＲ１）、配列番号２（ＨＣＤＲ２）、及び配列番号３（ＨＣＤＲ３）のアミノ酸配列を含む３つの重鎖相補性決定領域（ＨＣＤＲ）と；配列番号４（ＬＣＤＲ１）、配列番号５（ＬＣＤＲ２）、及び配列番号６（ＬＣＤＲ３）のアミノ酸配列を含む３つの軽鎖相補性決定領域（ＬＣＤＲ）とを含む抗ＨＥＲ２抗体又はその抗原結合断片であり；
（ｉｉ）Ｈは、ハーボキシジエンスプライシング調節薬であり；
（ｉｉｉ）Ｌは、ＡＤＬ１、ＡＤＬ２、ＡＤＬ５、ＡＤＬ６、ＡＤＬ７、ＡＤＬ１２、ＡＤＬ１３、ＡＤＬ１４、ＡＤＬ１５、ＡＤＬ２１、又はＡＤＬ２３を含むリンカーであり；及び
（ｉｖ）ｐは、１～１５の整数である］を有する。
Ａｂ－（Ｌ－Ｈ）ｐ （Ｉ）
［式中：
（ｉ）Ａｂは、配列番号１（ＨＣＤＲ１）、配列番号２（ＨＣＤＲ２）、及び配列番号３（ＨＣＤＲ３）のアミノ酸配列を含む３つの重鎖相補性決定領域（ＨＣＤＲ）と；配列番号４（ＬＣＤＲ１）、配列番号５（ＬＣＤＲ２）、及び配列番号６（ＬＣＤＲ３）のアミノ酸配列を含む３つの軽鎖相補性決定領域（ＬＣＤＲ）とを含む抗ＨＥＲ２抗体又はその抗原結合断片であり；
（ｉｉ）Ｈは、ハーボキシジエンスプライシング調節薬であり；
（ｉｉｉ）Ｌは、ＡＤＬ１、ＡＤＬ２、ＡＤＬ５、ＡＤＬ６、ＡＤＬ７、ＡＤＬ１２、ＡＤＬ１３、ＡＤＬ１４、ＡＤＬ１５、ＡＤＬ２１、又はＡＤＬ２３を含むリンカーであり；及び
（ｉｖ）ｐは、１～１５の整数である］を有する。
一部の実施形態において、ＨＥＲ２を発現する新生物細胞を標的化する抗体又はその抗原結合断片は、配列番号１９のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号２０のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含む。一部の実施形態において、ＨＥＲ２を発現する新生物細胞を標的化する抗体又はその抗原結合断片は、ヒトＩｇＧ１重鎖定常ドメインとヒトＩｇカッパ軽鎖定常ドメインとを含む。一部の実施形態において、抗体はトラスツズマブである。一部の実施形態において、ｐは、１～１０、２～８、又は４～８の整数である。一部の実施形態において、ｐは４である。一部の実施形態において、ｐは８である。
一部の実施形態において、ＡＤＣは、ＡＤＬ１－ハーボキシジエンスプライシング調節薬と、ＣＤ１３８を発現する新生物細胞を標的化する抗体又はその抗原結合断片とを含む。一部の実施形態において、ＡＤＣは、ＡＤＬ２－ハーボキシジエンスプライシング調節薬と、ＣＤ１３８を発現する新生物細胞を標的化する抗体又はその抗原結合断片とを含む。一部の実施形態において、ＡＤＣは、ＡＤＬ５－ハーボキシジエンスプライシング調節薬と、ＣＤ１３８を発現する新生物細胞を標的化する抗体又はその抗原結合断片とを含む。一部の実施形態において、ＡＤＣは、ＡＤＬ６－ハーボキシジエンスプライシング調節薬と、ＣＤ１３８を発現する新生物細胞を標的化する抗体又はその抗原結合断片とを含む。一部の実施形態において、ＡＤＣは、ＡＤＬ７－ハーボキシジエンスプライシング調節薬と、ＣＤ１３８を発現する新生物細胞を標的化する抗体又はその抗原結合断片とを含む。一部の実施形態において、ＡＤＣは、ＡＤＬ１２－ハーボキシジエンスプライシング調節薬と、ＣＤ１３８を発現する新生物細胞を標的化する抗体又はその抗原結合断片とを含む。一部の実施形態において、ＡＤＣは、ＡＤＬ１３－ハーボキシジエンスプライシング調節薬と、ＣＤ１３８を発現する新生物細胞を標的化する抗体又はその抗原結合断片とを含む。一部の実施形態において、ＡＤＣは、ＡＤＬ１４－ハーボキシジエンスプライシング調節薬と、ＣＤ１３８を発現する新生物細胞を標的化する抗体又はその抗原結合断片とを含む。一部の実施形態において、ＡＤＣは、ＡＤＬ１５－ハーボキシジエンスプライシング調節薬と、ＣＤ１３８を発現する新生物細胞を標的化する抗体又はその抗原結合断片とを含む。
一部の実施形態において、ＣＤ１３８を発現する新生物細胞を標的化する抗体又はその抗原結合断片はインターナリゼーション性抗体又はインターナリゼーション性抗原結合断片である。一部の実施形態において、ＣＤ１３８を発現する新生物細胞を標的化する抗体又はその抗原結合断片は、配列番号７（ＨＣＤＲ１）、配列番号８（ＨＣＤＲ２）、及び配列番号９（ＨＣＤＲ３）のアミノ酸配列を含む３つの重鎖相補性決定領域（ＨＣＤＲ）と；配列番号１０（ＬＣＤＲ１）、配列番号１１（ＬＣＤＲ２）、及び配列番号１２（ＬＣＤＲ３）のアミノ酸配列を含む３つの軽鎖相補性決定領域（ＬＣＤＲ）とを含む。
一部の実施形態において、ＡＤＣは、式（Ｉ）：
Ａｂ－（Ｌ－Ｈ）ｐ （Ｉ）
［式中：
（ｉ）Ａｂは、配列番号７（ＨＣＤＲ１）、配列番号８（ＨＣＤＲ２）、及び配列番号９（ＨＣＤＲ３）のアミノ酸配列を含む３つの重鎖相補性決定領域（ＨＣＤＲ）と；配列番号１０（ＬＣＤＲ１）、配列番号１１（ＬＣＤＲ２）、及び配列番号１２（ＬＣＤＲ３）のアミノ酸配列を含む３つの軽鎖相補性決定領域（ＬＣＤＲ）とを含む抗ＣＤ１３８抗体又はその抗原結合断片であり；
（ｉｉ）Ｈは、ハーボキシジエンスプライシング調節薬であり；
（ｉｉｉ）Ｌは、ＡＤＬ１、ＡＤＬ２、ＡＤＬ５、ＡＤＬ６、ＡＤＬ７、ＡＤＬ１２、ＡＤＬ１３、ＡＤＬ１４、ＡＤＬ１５、ＡＤＬ２１、又はＡＤＬ２３を含むリンカーであり；及び
（ｉｖ）ｐは、１～１５の整数である］を有する。
Ａｂ－（Ｌ－Ｈ）ｐ （Ｉ）
［式中：
（ｉ）Ａｂは、配列番号７（ＨＣＤＲ１）、配列番号８（ＨＣＤＲ２）、及び配列番号９（ＨＣＤＲ３）のアミノ酸配列を含む３つの重鎖相補性決定領域（ＨＣＤＲ）と；配列番号１０（ＬＣＤＲ１）、配列番号１１（ＬＣＤＲ２）、及び配列番号１２（ＬＣＤＲ３）のアミノ酸配列を含む３つの軽鎖相補性決定領域（ＬＣＤＲ）とを含む抗ＣＤ１３８抗体又はその抗原結合断片であり；
（ｉｉ）Ｈは、ハーボキシジエンスプライシング調節薬であり；
（ｉｉｉ）Ｌは、ＡＤＬ１、ＡＤＬ２、ＡＤＬ５、ＡＤＬ６、ＡＤＬ７、ＡＤＬ１２、ＡＤＬ１３、ＡＤＬ１４、ＡＤＬ１５、ＡＤＬ２１、又はＡＤＬ２３を含むリンカーであり；及び
（ｉｖ）ｐは、１～１５の整数である］を有する。
一部の実施形態において、ＣＤ１３８を発現する新生物細胞を標的化する抗体又はその抗原結合断片は、配列番号２１のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号２２のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含む。一部の実施形態において、ＣＤ１３８を発現する新生物細胞を標的化する抗体又はその抗原結合断片は、マウスＩｇＧ２ａ重鎖定常ドメインとマウスＩｇカッパ軽鎖定常ドメインとを含む。一部の実施形態において、ＣＤ１３８を発現する新生物細胞を標的化する抗体又はその抗原結合断片は、ヒトＩｇＧ２ａ重鎖定常ドメインとヒトＩｇカッパ軽鎖定常ドメインとを含む。一部の実施形態において、抗体はＢ－Ｂ４である。一部の実施形態において、ｐは、１～１０、２～８、又は４～８の整数である。一部の実施形態において、ｐは４である。一部の実施形態において、ｐは８である。
一部の実施形態において、ＡＤＣは、ＡＤＬ１－ハーボキシジエンスプライシング調節薬と、ＥＰＨＡ２を発現する新生物細胞を標的化する抗体又はその抗原結合断片とを含む。一部の実施形態において、ＡＤＣは、ＡＤＬ２－ハーボキシジエンスプライシング調節薬と、ＥＰＨＡ２を発現する新生物細胞を標的化する抗体又はその抗原結合断片とを含む。一部の実施形態において、ＡＤＣは、ＡＤＬ５－ハーボキシジエンスプライシング調節薬と、ＥＰＨＡ２を発現する新生物細胞を標的化する抗体又はその抗原結合断片とを含む。一部の実施形態において、ＡＤＣは、ＡＤＬ６－ハーボキシジエンスプライシング調節薬と、ＥＰＨＡ２を発現する新生物細胞を標的化する抗体又はその抗原結合断片とを含む。一部の実施形態において、ＡＤＣは、ＡＤＬ７－ハーボキシジエンスプライシング調節薬と、ＥＰＨＡ２を発現する新生物細胞を標的化する抗体又はその抗原結合断片とを含む。一部の実施形態において、ＡＤＣは、ＡＤＬ１２－ハーボキシジエンスプライシング調節薬と、ＥＰＨＡ２を発現する新生物細胞を標的化する抗体又はその抗原結合断片とを含む。一部の実施形態において、ＡＤＣは、ＡＤＬ１３－ハーボキシジエンスプライシング調節薬と、ＥＰＨＡ２を発現する新生物細胞を標的化する抗体又はその抗原結合断片とを含む。一部の実施形態において、ＡＤＣは、ＡＤＬ１４－ハーボキシジエンスプライシング調節薬と、ＥＰＨＡ２を発現する新生物細胞を標的化する抗体又はその抗原結合断片とを含む。一部の実施形態において、ＡＤＣは、ＡＤＬ１５－ハーボキシジエンスプライシング調節薬と、ＥＰＨＡ２を発現する新生物細胞を標的化する抗体又はその抗原結合断片とを含む。
一部の実施形態において、ＥＰＨＡ２を発現する新生物細胞を標的化する抗体又はその抗原結合断片はインターナリゼーション性抗体又はインターナリゼーション性抗原結合断片である。一部の実施形態において、ＥＰＨＡ２を発現する新生物細胞を標的化する抗体又はその抗原結合断片は、配列番号１３（ＨＣＤＲ１）、配列番号１４（ＨＣＤＲ２）、及び配列番号１５（ＨＣＤＲ３）のアミノ酸配列を含む３つの重鎖相補性決定領域（ＨＣＤＲ）と；配列番号１６（ＬＣＤＲ１）、配列番号１７（ＬＣＤＲ２）、及び配列番号１８（ＬＣＤＲ３）のアミノ酸配列を含む３つの軽鎖相補性決定領域（ＬＣＤＲ）とを含む。
一部の実施形態において、ＡＤＣは、式（Ｉ）：
Ａｂ－（Ｌ－Ｈ）ｐ （Ｉ）
［式中：
（ｉ）Ａｂは、配列番号１３（ＨＣＤＲ１）、配列番号１４（ＨＣＤＲ２）、及び配列番号１５（ＨＣＤＲ３）のアミノ酸配列を含む３つの重鎖相補性決定領域（ＨＣＤＲ）と；配列番号１６（ＬＣＤＲ１）、配列番号１７（ＬＣＤＲ２）、及び配列番号１８（ＬＣＤＲ３）のアミノ酸配列を含む３つの軽鎖相補性決定領域（ＬＣＤＲ）とを含む抗ＥＰＨＡ２抗体又はその抗原結合断片であり；
（ｉｉ）Ｈは、ハーボキシジエンスプライシング調節薬であり；
（ｉｉｉ）Ｌは、ＡＤＬ１、ＡＤＬ２、ＡＤＬ５、ＡＤＬ６、ＡＤＬ７、ＡＤＬ１２、ＡＤＬ１３、ＡＤＬ１４、ＡＤＬ１５、ＡＤＬ２１、又はＡＤＬ２３を含むリンカーであり；及び
（ｉｖ）ｐは、１～１５の整数である］を有する。
Ａｂ－（Ｌ－Ｈ）ｐ （Ｉ）
［式中：
（ｉ）Ａｂは、配列番号１３（ＨＣＤＲ１）、配列番号１４（ＨＣＤＲ２）、及び配列番号１５（ＨＣＤＲ３）のアミノ酸配列を含む３つの重鎖相補性決定領域（ＨＣＤＲ）と；配列番号１６（ＬＣＤＲ１）、配列番号１７（ＬＣＤＲ２）、及び配列番号１８（ＬＣＤＲ３）のアミノ酸配列を含む３つの軽鎖相補性決定領域（ＬＣＤＲ）とを含む抗ＥＰＨＡ２抗体又はその抗原結合断片であり；
（ｉｉ）Ｈは、ハーボキシジエンスプライシング調節薬であり；
（ｉｉｉ）Ｌは、ＡＤＬ１、ＡＤＬ２、ＡＤＬ５、ＡＤＬ６、ＡＤＬ７、ＡＤＬ１２、ＡＤＬ１３、ＡＤＬ１４、ＡＤＬ１５、ＡＤＬ２１、又はＡＤＬ２３を含むリンカーであり；及び
（ｉｖ）ｐは、１～１５の整数である］を有する。
一部の実施形態において、ＥＰＨＡ２を発現する新生物細胞を標的化する抗体又はその抗原結合断片は、配列番号２３のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号２４のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含む。一部の実施形態において、ＥＰＨＡ２を発現する新生物細胞を標的化する抗体又はその抗原結合断片は、ヒトＩｇＧ１重鎖定常ドメインとヒトＩｇカッパ軽鎖定常ドメインとを含む。一部の実施形態において、抗体は１Ｃ１である。一部の実施形態において、ｐは、１～１０、２～８、又は４～８の整数である。一部の実施形態において、ｐは４である。一部の実施形態において、ｐは８である。
ハーボキシジエンスプライシング調節薬
一部の実施形態において、抗体－薬物コンジュゲートは、式（Ｉ）：Ａｂ－（Ｌ－Ｈ）ｐ［式中、Ａｂは、新生物細胞を標的化する抗体又は抗原結合断片であり；Ｈは、ハーボキシジエンスプライシング調節薬であり；Ｌは、ＡｂをＨに共有結合的に結び付けるリンカーであり；及びｐは、１～１５の整数である］の抗体－薬物コンジュゲートである。
一部の実施形態において、抗体－薬物コンジュゲートは、式（Ｉ）：Ａｂ－（Ｌ－Ｈ）ｐ［式中、Ａｂは、新生物細胞を標的化する抗体又は抗原結合断片であり；Ｈは、ハーボキシジエンスプライシング調節薬であり；Ｌは、ＡｂをＨに共有結合的に結び付けるリンカーであり；及びｐは、１～１５の整数である］の抗体－薬物コンジュゲートである。
一部の実施形態において、Ｈ、ハーボキシジエンスプライシング調節薬は、Ｌに任意の原子を介して共有結合的に結び付いている式（Ｉ）の化合物：
又はその薬学的に許容可能な塩［式中：
Ｙは、Ｏ、Ｓ、ＮＲ６、及びＣＲ６Ｒ７から選択され；
Ｒ１、Ｒ２、及びＲ３は、各々独立に、水素、ヒドロキシル、－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－Ｏ－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、及びＣ１～Ｃ６アルキル基から選択され；
Ｒ４は、水素、Ｃ１～Ｃ６アルキル基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ３～Ｃ８ヘテロシクリル）基、及び－Ｃ（＝Ｏ）－ＮＲ６Ｒ７から選択され；
Ｒ５は、水素、ヒドロキシル、－ＣＨ２－ＯＨ、－ＣＯ２Ｈ、－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－ＮＲ６Ｒ７、－ＮＲ６－Ｃ（＝Ｏ）－Ｒ８、－Ｏ－Ｃ（＝Ｏ）－ＮＲ６Ｒ７、－ＮＲ６－Ｃ（＝Ｏ）－Ｒ８、及び－ＮＲ６－Ｃ（＝Ｏ）－ＮＲ６Ｒ７から選択され；
Ｒ６及びＲ７は、各々独立に、水素、－Ｒ８、－Ｃ（＝Ｏ）－Ｒ８、及び－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－Ｒ８から選択され；及び
Ｒ８は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基、Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル基、及びＣ３～Ｃ８ヘテロシクリル基から選択され、
ここでＲ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、及びＲ８は、各々独立に、ハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１～Ｃ６アルキル基、－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－ＣＯ２Ｈ、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ３～Ｃ８ヘテロシクリル）基、－ＮＲ６Ｒ７、Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル基、Ｃ１～Ｃ６アルキルヒドロキシ基、Ｃ１～Ｃ６アルキルアルコキシ基、ベンジル基、及びＣ３～Ｃ８ヘテロシクリル基（この各々は、ハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１～Ｃ３アルキル基、Ｃ１～Ｃ３アルコキシ基、Ｃ１～Ｃ３ハロアルキル基、－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）（Ｃ１～Ｃ３アルキル）、及び－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ３アルキル）から選択される０又は１個の基で独立に置換されていてもよい）から独立に選択される０～３個の基で置換され、及び
ここでＬに共有結合的に結び付いている原子の原子価を超えることはない］を含む。
又はその薬学的に許容可能な塩［式中：
Ｙは、Ｏ、Ｓ、ＮＲ６、及びＣＲ６Ｒ７から選択され；
Ｒ１、Ｒ２、及びＲ３は、各々独立に、水素、ヒドロキシル、－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－Ｏ－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、及びＣ１～Ｃ６アルキル基から選択され；
Ｒ４は、水素、Ｃ１～Ｃ６アルキル基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ３～Ｃ８ヘテロシクリル）基、及び－Ｃ（＝Ｏ）－ＮＲ６Ｒ７から選択され；
Ｒ５は、水素、ヒドロキシル、－ＣＨ２－ＯＨ、－ＣＯ２Ｈ、－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－ＮＲ６Ｒ７、－ＮＲ６－Ｃ（＝Ｏ）－Ｒ８、－Ｏ－Ｃ（＝Ｏ）－ＮＲ６Ｒ７、－ＮＲ６－Ｃ（＝Ｏ）－Ｒ８、及び－ＮＲ６－Ｃ（＝Ｏ）－ＮＲ６Ｒ７から選択され；
Ｒ６及びＲ７は、各々独立に、水素、－Ｒ８、－Ｃ（＝Ｏ）－Ｒ８、及び－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－Ｒ８から選択され；及び
Ｒ８は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基、Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル基、及びＣ３～Ｃ８ヘテロシクリル基から選択され、
ここでＲ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、及びＲ８は、各々独立に、ハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１～Ｃ６アルキル基、－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－ＣＯ２Ｈ、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ３～Ｃ８ヘテロシクリル）基、－ＮＲ６Ｒ７、Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル基、Ｃ１～Ｃ６アルキルヒドロキシ基、Ｃ１～Ｃ６アルキルアルコキシ基、ベンジル基、及びＣ３～Ｃ８ヘテロシクリル基（この各々は、ハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１～Ｃ３アルキル基、Ｃ１～Ｃ３アルコキシ基、Ｃ１～Ｃ３ハロアルキル基、－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）（Ｃ１～Ｃ３アルキル）、及び－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ３アルキル）から選択される０又は１個の基で独立に置換されていてもよい）から独立に選択される０～３個の基で置換され、及び
ここでＬに共有結合的に結び付いている原子の原子価を超えることはない］を含む。
一部の実施形態において、Ｈ、ハーボキシジエンスプライシング調節薬は、Ｌに任意の原子を介して共有結合的に結び付いている式（Ｉａ）の化合物：
又はその薬学的に許容可能な塩［式中：
Ｒ９は、Ｃ３～Ｃ８ヘテロシクリル基から選択され；
Ｒ１０は、Ｈ及びＣ１～Ｃ６アルキル基から選択され、
ここでＲ９及びＲ１０は、各々独立に、ハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１～Ｃ３アルキル基、Ｃ１～Ｃ３アルコキシ基、－ＮＨ２、－ＮＨ－（Ｃ１～Ｃ３アルキル）、及び－Ｎ－（Ｃ１～Ｃ３アルキル）２から独立に選択される０～３個の基で置換され、及び
ここでＬに共有結合的に結び付いている原子の原子価を超えることはない］を含む。
又はその薬学的に許容可能な塩［式中：
Ｒ９は、Ｃ３～Ｃ８ヘテロシクリル基から選択され；
Ｒ１０は、Ｈ及びＣ１～Ｃ６アルキル基から選択され、
ここでＲ９及びＲ１０は、各々独立に、ハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１～Ｃ３アルキル基、Ｃ１～Ｃ３アルコキシ基、－ＮＨ２、－ＮＨ－（Ｃ１～Ｃ３アルキル）、及び－Ｎ－（Ｃ１～Ｃ３アルキル）２から独立に選択される０～３個の基で置換され、及び
ここでＬに共有結合的に結び付いている原子の原子価を超えることはない］を含む。
一部の実施形態において、Ｈ、ハーボキシジエンスプライシング調節薬は、Ｌに任意の原子を介して共有結合的に結び付いている式（Ｉｂ）の化合物：
又はその薬学的に許容可能な塩［式中：
Ｒ１１は、
（式中、＊は、Ｒ１１が化合物の残りの部分に結合する点を表す）から選択され；
Ｒ１２及びＲ１３は、各々独立に、Ｈ及びメチルから選択され；及び
ここでＬに共有結合的に結び付いている原子の原子価を超えることはない］を含む。
又はその薬学的に許容可能な塩［式中：
Ｒ１１は、
（式中、＊は、Ｒ１１が化合物の残りの部分に結合する点を表す）から選択され；
Ｒ１２及びＲ１３は、各々独立に、Ｈ及びメチルから選択され；及び
ここでＬに共有結合的に結び付いている原子の原子価を超えることはない］を含む。
一部の実施形態において、Ｈ、ハーボキシジエンスプライシング調節薬は、任意の原子を介してＬに共有結合的に結び付いている式（ＩＩ）の化合物：
又はその薬学的に許容可能な塩［式中：
Ｘは、ヒドロキシル又はＮＲ６Ｒ７であり；
Ｒ６及びＲ７は、各々独立に、水素、－Ｒ８、－Ｃ（＝Ｏ）－Ｒ８、－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－Ｒ８、－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）－Ｏ－Ｃ（＝Ｏ）－Ｒ８、及び－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）－Ｒ８から選択され；及び
Ｒ８は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基、Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル基、及びＣ３～Ｃ８ヘテロシクリル基から選択され、
ここでＲ６、Ｒ７、及びＲ８は、各々独立に、ハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１～Ｃ６アルキル基、－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－ＣＯ２Ｈ、－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ３～Ｃ８ヘテロシクリル）基、－ＮＲ６Ｒ７、Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル基、Ｃ１～Ｃ６アルキルヒドロキシ基、Ｃ１～Ｃ６アルキルアルコキシ基、ベンジル基、及びＣ３～Ｃ８ヘテロシクリル基（この各々は、ハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１～Ｃ３アルキル基、Ｃ１～Ｃ３アルコキシ基、Ｃ１～Ｃ３ハロアルキル基、－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）（Ｃ１～Ｃ３アルキル）、及び－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ３アルキル）から選択される０又は１個の基で独立に置換されていてもよい）から独立に選択される０～３個の基で置換され、及び
ここでＬに共有結合的に結び付いている原子の原子価を超えることはない］を含む。
又はその薬学的に許容可能な塩［式中：
Ｘは、ヒドロキシル又はＮＲ６Ｒ７であり；
Ｒ６及びＲ７は、各々独立に、水素、－Ｒ８、－Ｃ（＝Ｏ）－Ｒ８、－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－Ｒ８、－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）－Ｏ－Ｃ（＝Ｏ）－Ｒ８、及び－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）－Ｒ８から選択され；及び
Ｒ８は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基、Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル基、及びＣ３～Ｃ８ヘテロシクリル基から選択され、
ここでＲ６、Ｒ７、及びＲ８は、各々独立に、ハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１～Ｃ６アルキル基、－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－ＣＯ２Ｈ、－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ３～Ｃ８ヘテロシクリル）基、－ＮＲ６Ｒ７、Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル基、Ｃ１～Ｃ６アルキルヒドロキシ基、Ｃ１～Ｃ６アルキルアルコキシ基、ベンジル基、及びＣ３～Ｃ８ヘテロシクリル基（この各々は、ハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１～Ｃ３アルキル基、Ｃ１～Ｃ３アルコキシ基、Ｃ１～Ｃ３ハロアルキル基、－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）（Ｃ１～Ｃ３アルキル）、及び－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ３アルキル）から選択される０又は１個の基で独立に置換されていてもよい）から独立に選択される０～３個の基で置換され、及び
ここでＬに共有結合的に結び付いている原子の原子価を超えることはない］を含む。
一部の実施形態において、Ｈ、ハーボキシジエンスプライシング調節薬は、任意の原子を介してＬに共有結合的に結び付いている式（ＩＩａ）の化合物：
又はその薬学的に許容可能な塩［式中：
Ｚは、ＮＲ９及びＯから選択され；
Ｒ９は、水素及びＣ１～Ｃ６アルキル基から選択され；
Ｒ１０及びＲ１１は、各々独立に、水素、ハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１～Ｃ６アルキル基、－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－ＣＯ２Ｈ、－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ３～Ｃ８ヘテロシクリル）基、Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル基、Ｃ１～Ｃ６アルキルヒドロキシ基、Ｃ１～Ｃ６アルキルアルコキシ基、ベンジル基、及びＣ３～Ｃ８ヘテロシクリル基から選択され；
Ｒ１２は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基、Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル基、Ｃ３～Ｃ８ヘテロシクリル基から選択され、
ここでＲ９、Ｒ１０、Ｒ１１、及びＲ１２は、各々独立に、ハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１～Ｃ３アルキル基、Ｃ１～Ｃ３アルコキシ基、及びＣ１～Ｃ３ハロアルキル基から選択される０又は１個の基で置換され；
ｔは、１、２、３、４、５、及び６から選択される整数であり；及び
ここでＬに共有結合的に結び付いている原子の原子価を超えることはない］を含む。
又はその薬学的に許容可能な塩［式中：
Ｚは、ＮＲ９及びＯから選択され；
Ｒ９は、水素及びＣ１～Ｃ６アルキル基から選択され；
Ｒ１０及びＲ１１は、各々独立に、水素、ハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１～Ｃ６アルキル基、－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－ＣＯ２Ｈ、－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ３～Ｃ８ヘテロシクリル）基、Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル基、Ｃ１～Ｃ６アルキルヒドロキシ基、Ｃ１～Ｃ６アルキルアルコキシ基、ベンジル基、及びＣ３～Ｃ８ヘテロシクリル基から選択され；
Ｒ１２は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基、Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル基、Ｃ３～Ｃ８ヘテロシクリル基から選択され、
ここでＲ９、Ｒ１０、Ｒ１１、及びＲ１２は、各々独立に、ハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１～Ｃ３アルキル基、Ｃ１～Ｃ３アルコキシ基、及びＣ１～Ｃ３ハロアルキル基から選択される０又は１個の基で置換され；
ｔは、１、２、３、４、５、及び６から選択される整数であり；及び
ここでＬに共有結合的に結び付いている原子の原子価を超えることはない］を含む。
一部の実施形態において、Ｈ、ハーボキシジエンスプライシング調節薬は、任意の原子を介してＬに共有結合的に結び付いている式（ＩＩｂ）の化合物：
又はその薬学的に許容可能な塩［式中：
Ｒ１３は、
（式中、＊は、Ｒ１３が化合物の残りの部分に結合する点を表す）から選択され；
Ｒ１４及びＲ１５は、各々独立に、水素及びメチルから選択され；及び
ここでＬに共有結合的に結び付いている原子の原子価を超えることはない］を含む。
又はその薬学的に許容可能な塩［式中：
Ｒ１３は、
（式中、＊は、Ｒ１３が化合物の残りの部分に結合する点を表す）から選択され；
Ｒ１４及びＲ１５は、各々独立に、水素及びメチルから選択され；及び
ここでＬに共有結合的に結び付いている原子の原子価を超えることはない］を含む。
一部の実施形態において、Ｈ、ハーボキシジエンスプライシング調節薬は、任意の原子を介してＬに共有結合的に結び付いている式（ＩＩＩ）の化合物：
又はその薬学的に許容可能な塩［式中：
Ｒ１、Ｒ２、及びＲ３は、各々独立に、水素、ヒドロキシル、－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－Ｏ－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、及びＣ１～Ｃ６アルキル基から選択され；
Ｒ６及びＲ７は、各々独立に、水素、－Ｒ８、－Ｃ（＝Ｏ）－Ｒ８、及び－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－Ｒ８から選択され；
Ｒ８は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基、Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル基、及びＣ３～Ｃ８ヘテロシクリル基から選択され；及び
Ｒ９は、Ｈ、
から選択され；
ここでＲ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ６、Ｒ７、及びＲ８は、各々独立に、ハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１～Ｃ６アルキル基、－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－ＣＯ２Ｈ、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ３～Ｃ８ヘテロシクリル）基、－ＮＲ６Ｒ７、Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル基、Ｃ１～Ｃ６アルキルヒドロキシ基、Ｃ１～Ｃ６アルキルアルコキシ基、ベンジル基、及びＣ３～Ｃ８ヘテロシクリル基（この各々は、ハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１～Ｃ３アルキル基、Ｃ１～Ｃ３アルコキシ基、Ｃ１～Ｃ３ハロアルキル基、－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）（Ｃ１～Ｃ３アルキル）、及び－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ３アルキル）から選択される０又は１個の基で独立に置換されていてもよい）から独立に選択される０～３個の基で置換され、
ここでＬに共有結合的に結び付いている原子の原子価を超えることはなく；及び
式中、＊は、Ｒ９が化合物の残りの部分に結合する点を表す］を含む。
又はその薬学的に許容可能な塩［式中：
Ｒ１、Ｒ２、及びＲ３は、各々独立に、水素、ヒドロキシル、－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－Ｏ－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、及びＣ１～Ｃ６アルキル基から選択され；
Ｒ６及びＲ７は、各々独立に、水素、－Ｒ８、－Ｃ（＝Ｏ）－Ｒ８、及び－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－Ｒ８から選択され；
Ｒ８は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基、Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル基、及びＣ３～Ｃ８ヘテロシクリル基から選択され；及び
Ｒ９は、Ｈ、
から選択され；
ここでＲ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ６、Ｒ７、及びＲ８は、各々独立に、ハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１～Ｃ６アルキル基、－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－ＣＯ２Ｈ、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ３～Ｃ８ヘテロシクリル）基、－ＮＲ６Ｒ７、Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル基、Ｃ１～Ｃ６アルキルヒドロキシ基、Ｃ１～Ｃ６アルキルアルコキシ基、ベンジル基、及びＣ３～Ｃ８ヘテロシクリル基（この各々は、ハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１～Ｃ３アルキル基、Ｃ１～Ｃ３アルコキシ基、Ｃ１～Ｃ３ハロアルキル基、－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）（Ｃ１～Ｃ３アルキル）、及び－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ３アルキル）から選択される０又は１個の基で独立に置換されていてもよい）から独立に選択される０～３個の基で置換され、
ここでＬに共有結合的に結び付いている原子の原子価を超えることはなく；及び
式中、＊は、Ｒ９が化合物の残りの部分に結合する点を表す］を含む。
一部の実施形態において、抗体又は抗原結合断片は、ＨＥＲ２、ＣＤ１３８、ＥＰＨＡ２、ＭＳＬＮ、ＦＯＬＨ１、ＣＤＨ６、ＣＥＡＣＡＭ５、ＣＦＣ１Ｂ、ＥＮＰＰ３、ＦＯＬＲ１、ＨＡＶＣＲ１、ＫＩＴ、ＭＥＴ、ＭＵＣ１６、ＳＬＣ３９Ａ６、ＳＬＣ４４Ａ４、及び／又はＳＴＥＡＰ１を発現する細胞を標的化する。
一部の実施形態において、抗体又は抗原結合断片はＨＥＲ２発現細胞を標的化する。一部の実施形態において、抗体又は抗原結合断片は抗ＨＥＲ２抗体又は抗原結合断片である。一部の実施形態において、抗体又は抗原結合断片は、配列番号１（ＨＣＤＲ１）、配列番号２（ＨＣＤＲ２）、及び配列番号３（ＨＣＤＲ３）のアミノ酸配列を含む３つの重鎖相補性決定領域（ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、及びＨＣＤＲ３）と；配列番号４（ＬＣＤＲ１）、配列番号５（ＬＣＤＲ２）、及び配列番号６（ＬＣＤＲ３）のアミノ酸配列を含む３つの軽鎖相補性決定領域（ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３）とを含む。一部の実施形態において、抗体又は抗原結合断片は、配列番号１９のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号２０のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含む。一部の実施形態において、抗体又は抗原結合断片はヒトＩｇＧ１重鎖定常領域を含む。一部の実施形態において、抗体又は抗原結合断片はヒトＩｇカッパ軽鎖定常領域を含む。
一部の他の実施形態において、抗体又は抗原結合断片はＣＤ１３８発現細胞を標的化する。一部の実施形態において、抗体又は抗原結合断片は抗ＣＤ１３８抗体又は抗原結合断片である。一部の実施形態において、抗体又は抗原結合断片は、配列番号７（ＨＣＤＲ１）、配列番号８（ＨＣＤＲ２）、及び配列番号９（ＨＣＤＲ３）のアミノ酸配列を含む３つの重鎖相補性決定領域（ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、及びＨＣＤＲ３）と；配列番号１０（ＬＣＤＲ１）、配列番号１１（ＬＣＤＲ２）、及び配列番号１２（ＬＣＤＲ３）のアミノ酸配列を含む３つの軽鎖相補性決定領域（ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３）とを含む。一部の実施形態において、抗体又は抗原結合断片は、配列番号２１のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号２２のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含む。一部の実施形態において、抗体又は抗原結合断片はマウスＩｇＧ２ａ重鎖定常領域を含む。一部の実施形態において、抗体又は抗原結合断片はマウスＩｇカッパ軽鎖定常領域を含む。一部の実施形態において、抗体又は抗原結合断片はヒトＩｇＧ２ａ重鎖定常領域を含む。一部の実施形態において、抗体又は抗原結合断片はヒトＩｇカッパ軽鎖定常領域を含む。
一部の他の実施形態において、抗体又は抗原結合断片はＥＰＨＡ２発現細胞を標的化する。一部の実施形態において、抗体又は抗原結合断片は抗ＥＰＨＡ２抗体又は抗原結合断片である。一部の実施形態において、抗体又は抗原結合断片は、配列番号１３（ＨＣＤＲ１）、配列番号１４（ＨＣＤＲ２）、及び配列番号１５（ＨＣＤＲ３）のアミノ酸配列を含む３つの重鎖相補性決定領域（ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、及びＨＣＤＲ３）と；配列番号１６（ＬＣＤＲ１）、配列番号１７（ＬＣＤＲ２）、及び配列番号１８（ＬＣＤＲ３）のアミノ酸配列を含む３つの軽鎖相補性決定領域（ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３）とを含む。一部の実施形態において、抗体又は抗原結合断片は、配列番号２３のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号２４のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含む。一部の実施形態において、抗体又は抗原結合断片はヒトＩｇＧ１重鎖定常領域を含む。一部の実施形態において、抗体又は抗原結合断片はヒトＩｇカッパ軽鎖定常領域を含む。
一部の他の実施形態において、抗体又は抗原結合断片はＭＳＬＮ発現細胞を標的化する。一部の実施形態において、抗体又は抗原結合断片は抗ＭＳＬＮ抗体又は抗原結合断片である。
一部の他の実施形態において、抗体又は抗原結合断片はＦＯＬＨ１発現細胞を標的化する。一部の実施形態において、抗体又は抗原結合断片は抗ＦＯＬＨ１抗体又は抗原結合断片である。
一部の他の実施形態において、抗体又は抗原結合断片はＣＤＨ６発現細胞を標的化する。一部の実施形態において、抗体又は抗原結合断片は抗ＣＤＨ６抗体又は抗原結合断片である。
一部の他の実施形態において、抗体又は抗原結合断片はＣＥＡＣＡＭ５発現細胞を標的化する。一部の実施形態において、抗体又は抗原結合断片は抗ＣＥＡＣＡＭ５抗体又は抗原結合断片である。
一部の他の実施形態において、抗体又は抗原結合断片はＣＦＣ１Ｂ発現細胞を標的化する。一部の実施形態において、抗体又は抗原結合断片は抗ＣＦＣ１Ｂ抗体又は抗原結合断片である。
一部の他の実施形態において、抗体又は抗原結合断片はＥＮＰＰ３発現細胞を標的化する。一部の実施形態において、抗体又は抗原結合断片は抗ＥＮＰＰ３抗体又は抗原結合断片である。
一部の他の実施形態において、抗体又は抗原結合断片はＦＯＬＲ１発現細胞を標的化する。一部の実施形態において、抗体又は抗原結合断片は抗ＦＯＬＲ１抗体又は抗原結合断片である。
一部の他の実施形態において、抗体又は抗原結合断片はＨＡＶＣＲ１発現細胞を標的化する。一部の実施形態において、抗体又は抗原結合断片は抗ＨＡＶＣＲ１抗体又は抗原結合断片である。
一部の他の実施形態において、抗体又は抗原結合断片はＫＩＴ発現細胞を標的化する。一部の実施形態において、抗体又は抗原結合断片は抗ＫＩＴ抗体又は抗原結合断片である。
一部の他の実施形態において、抗体又は抗原結合断片はＭＥＴ発現細胞を標的化する。一部の実施形態において、抗体又は抗原結合断片は抗ＭＥＴ抗体又は抗原結合断片である。
一部の他の実施形態において、抗体又は抗原結合断片はＭＵＣ１６発現細胞を標的化する。一部の実施形態において、抗体又は抗原結合断片は抗ＭＵＣ１６抗体又は抗原結合断片である。
一部の他の実施形態において、抗体又は抗原結合断片はＳＬＣ３９Ａ６発現細胞を標的化する。一部の実施形態において、抗体又は抗原結合断片は抗ＳＬＣ３９Ａ６抗体又は抗原結合断片である。
一部の他の実施形態において、抗体又は抗原結合断片はＳＬＣ４４Ａ４発現細胞を標的化する。一部の実施形態において、抗体又は抗原結合断片は抗ＳＬＣ４４Ａ４抗体又は抗原結合断片である。
一部の他の実施形態において、抗体又は抗原結合断片はＳＴＥＡＰ１発現細胞を標的化する。一部の実施形態において、抗体又は抗原結合断片は抗ＳＴＥＡＰ１抗体又は抗原結合断片である。
一部の実施形態において、Ｌは、本明細書に開示されるリンカーのいずれか、又は本明細書に開示されるリンカー成分の任意の組み合わせから選択される。一部の実施形態において、Ｌは、ＭＣ－Ｖａｌ－Ｃｉｔ－ｐＡＢＣ、Ｍａｌ－（ＰＥＧ）２－ＣＯ、ＭＣ－Ｖａｌ－Ａｌａ－ｐＡＢ、ＭＣ－Ｖａｌ－Ａｌａ－ｐＡＢＣ、ＭＣ－Ｖａｌ－Ｃｉｔ－ｐＡＢ、Ｍａｌ－Ｈｅｘ、Ｍａｌ－Ｅｔ、又はＭａｌ－Ｅｔ－Ｏ－Ｅｔを含むリンカーである。一部の実施形態において、リンカーはまた、１つ以上の追加的なスペーサー単位も含み得る。一部の実施形態において、Ｌは、ＡＤＬ１、ＡＤＬ２、ＡＤＬ５、ＡＤＬ６、ＡＤＬ７、ＡＤＬ１２、ＡＤＬ１３、ＡＤＬ１４、ＡＤＬ１５、ＡＤＬ２１、又はＡＤＬ２３リンカーである。一部の実施形態において、Ｌは、ＡＤＬ１２、ＡＤＬ１４、又はＡＤＬ１５リンカーである。一部の実施形態において、ＡＤＬ１、ＡＤＬ２、ＡＤＬ５、ＡＤＬ６、ＡＤＬ７、ＡＤＬ１２、ＡＤＬ１３、ＡＤＬ１４、ＡＤＬ１５、ＡＤＬ２１、又はＡＤＬ２３リンカーはまた、１つ以上の追加的なスペーサー単位も含み得る。
特定の実施形態では、リンカー部分の前駆体である中間体を適切な条件下でハーボキシジエンスプライシング調節薬部分と反応させる。特定の実施形態では、ハーボキシジエンスプライシング調節薬及び／又は中間体若しくはリンカー上の反応基が使用される。続いてハーボキシジエンスプライシング調節薬と中間体との間の反応生成物、又は誘導体化ハーボキシジエンスプライシング調節薬（ハーボキシジエンスプライシング調節薬＋リンカー）を適切な条件下で抗体又は抗原結合断片と反応させる。或いは、中間体又はリンカーは、初めに抗体若しくは抗原結合断片、又は誘導体化抗体若しくは抗原結合断片と反応させて、次に薬物又は誘導体化薬物と反応させてもよい。
ハーボキシジエンスプライシング調節薬部分及び／又はリンカー部分を抗体又は抗原結合断片に共有結合的に結び付けるには、幾つもの異なる反応が利用可能である。これは多くの場合に、リジンのアミン基、グルタミン酸及びアスパラギン酸の遊離カルボン酸基、システインのスルフヒドリル基、及び芳香族アミノ酸の様々な部分を含め、抗体又は抗原結合断片の１つ以上のアミノ酸残基の反応によって達成される。例えば、非特異的に共有結合的に結び付けることが、ハーボキシジエンスプライシング調節薬部分上のカルボキシ基（又はアミノ基）を抗体又は抗原結合断片上のアミノ基（又はカルボキシ基）に連結するカルボジイミド反応を用いて行われてもよい。加えて、ジアルデヒド類又はイミドエステル類などの二官能性薬剤もまた、ハーボキシジエンスプライシング調節薬部分上のアミノ基を抗体又は抗原結合断片上のアミノ基に連結するために用いられてもよい。また、薬物（例えば、ハーボキシジエンスプライシング調節薬）を結合剤に結び付けるためにシッフ塩基反応も利用可能である。この方法には、グリコール基又はヒドロキシ基を含有する薬物の過ヨウ素酸酸化が関わり、ひいてはアルデヒドが形成され、次にはそれが結合剤と反応する。結び付きは、結合剤のアミノ基とのシッフ塩基の形成により起こる。イソチオシアン酸塩もまた、薬物を結合剤に共有結合的に結び付けるためのカップリング剤として使用し得る。他の技法が当業者に公知であり、本開示の範囲内にある。当該技術分野において公知の様々な化学を用いて作成し、抗体又は抗原結合断片に連結することのできる薬物部分の例としては、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、例えば、本明細書に記載及び例示されるハーボキシジエンスプライシング調節薬が挙げられる。
リンカー－ハーボキシジエンスプライシング調節薬／ハーボキシジエンスプライシング調節薬化合物
更に、本明細書には、例示的リンカー－ハーボキシジエンスプライシング調節薬（Ｌ－Ｈ）化合物、並びにかかる化合物の複数のコピーを含む組成物が開示される。様々な実施形態において、本明細書に開示されるリンカー－ハーボキシジエンスプライシング調節薬化合物は、一般式：Ｌ－Ｈ［式中、Ｌ＝リンカー部分、及びＨ＝ハーボキシジエンスプライシング調節薬］によって定義することができる。特定の実施形態において、開示されるＬ－Ｈ化合物は、本明細書に記載されるＡＤＣにおける使用に好適である。
更に、本明細書には、例示的リンカー－ハーボキシジエンスプライシング調節薬（Ｌ－Ｈ）化合物、並びにかかる化合物の複数のコピーを含む組成物が開示される。様々な実施形態において、本明細書に開示されるリンカー－ハーボキシジエンスプライシング調節薬化合物は、一般式：Ｌ－Ｈ［式中、Ｌ＝リンカー部分、及びＨ＝ハーボキシジエンスプライシング調節薬］によって定義することができる。特定の実施形態において、開示されるＬ－Ｈ化合物は、本明細書に記載されるＡＤＣにおける使用に好適である。
一部の実施形態において、本明細書には、式（Ｉ）の化合物：
又はその薬学的に許容可能な塩［式中：
Ｙは、Ｏ、Ｓ、ＮＲ６、及びＣＲ６Ｒ７から選択され；
Ｒ１、Ｒ２、及びＲ３は、各々独立に、水素、ヒドロキシル、－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－Ｏ－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、及びＣ１～Ｃ６アルキル基から選択され；
Ｒ４は、水素、Ｃ１～Ｃ６アルキル基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ３～Ｃ８ヘテロシクリル）基、及び－Ｃ（＝Ｏ）－ＮＲ６Ｒ７から選択され；
Ｒ５は、水素、ヒドロキシル、－ＣＨ２－ＯＨ、－ＣＯ２Ｈ、－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－ＮＲ６Ｒ７、－ＮＲ６－Ｃ（＝Ｏ）－Ｒ８、－Ｏ－Ｃ（＝Ｏ）－ＮＲ６Ｒ７、－ＮＲ６－Ｃ（＝Ｏ）－Ｒ８、及び－ＮＲ６－Ｃ（＝Ｏ）－ＮＲ６Ｒ７から選択され；
Ｒ６及びＲ７は、各々独立に、水素、－Ｒ８、－Ｃ（＝Ｏ）－Ｒ８、及び－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－Ｒ８から選択され；及び
Ｒ８は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基、Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル基、及びＣ３～Ｃ８ヘテロシクリル基から選択され、
ここでＲ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、及びＲ８は、各々独立に、ハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１～Ｃ６アルキル基、－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－ＣＯ２Ｈ、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ３～Ｃ８ヘテロシクリル）基、－ＮＲ６Ｒ７、Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル基、Ｃ１～Ｃ６アルキルヒドロキシ基、Ｃ１～Ｃ６アルキルアルコキシ基、ベンジル基、及びＣ３～Ｃ８ヘテロシクリル基（この各々は、ハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１～Ｃ３アルキル基、Ｃ１～Ｃ３アルコキシ基、Ｃ１～Ｃ３ハロアルキル基、－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）（Ｃ１～Ｃ３アルキル）、及び－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ３アルキル）から選択される０又は１個の基で独立に置換されていてもよい）から独立に選択される０～３個の基で置換される］が開示される。
又はその薬学的に許容可能な塩［式中：
Ｙは、Ｏ、Ｓ、ＮＲ６、及びＣＲ６Ｒ７から選択され；
Ｒ１、Ｒ２、及びＲ３は、各々独立に、水素、ヒドロキシル、－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－Ｏ－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、及びＣ１～Ｃ６アルキル基から選択され；
Ｒ４は、水素、Ｃ１～Ｃ６アルキル基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ３～Ｃ８ヘテロシクリル）基、及び－Ｃ（＝Ｏ）－ＮＲ６Ｒ７から選択され；
Ｒ５は、水素、ヒドロキシル、－ＣＨ２－ＯＨ、－ＣＯ２Ｈ、－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－ＮＲ６Ｒ７、－ＮＲ６－Ｃ（＝Ｏ）－Ｒ８、－Ｏ－Ｃ（＝Ｏ）－ＮＲ６Ｒ７、－ＮＲ６－Ｃ（＝Ｏ）－Ｒ８、及び－ＮＲ６－Ｃ（＝Ｏ）－ＮＲ６Ｒ７から選択され；
Ｒ６及びＲ７は、各々独立に、水素、－Ｒ８、－Ｃ（＝Ｏ）－Ｒ８、及び－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－Ｒ８から選択され；及び
Ｒ８は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基、Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル基、及びＣ３～Ｃ８ヘテロシクリル基から選択され、
ここでＲ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、及びＲ８は、各々独立に、ハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１～Ｃ６アルキル基、－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－ＣＯ２Ｈ、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ３～Ｃ８ヘテロシクリル）基、－ＮＲ６Ｒ７、Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル基、Ｃ１～Ｃ６アルキルヒドロキシ基、Ｃ１～Ｃ６アルキルアルコキシ基、ベンジル基、及びＣ３～Ｃ８ヘテロシクリル基（この各々は、ハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１～Ｃ３アルキル基、Ｃ１～Ｃ３アルコキシ基、Ｃ１～Ｃ３ハロアルキル基、－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）（Ｃ１～Ｃ３アルキル）、及び－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ３アルキル）から選択される０又は１個の基で独立に置換されていてもよい）から独立に選択される０～３個の基で置換される］が開示される。
一部の実施形態において、本明細書には、Ｌに任意の原子を介して共有結合的に結び付いている式（Ｉａ）の化合物：
又はその薬学的に許容可能な塩［式中：
Ｒ９は、Ｃ３～Ｃ８ヘテロシクリル基から選択され；及び
Ｒ１０は、Ｈ及びＣ１～Ｃ６アルキル基から選択され、
ここでＲ９及びＲ１０は、各々独立に、ハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１～Ｃ３アルキル基、Ｃ１～Ｃ３アルコキシ基、－ＮＨ２、－ＮＨ－（Ｃ１～Ｃ３アルキル）、及び－Ｎ－（Ｃ１～Ｃ３アルキル）２から独立に選択される０～３個の基で置換される］が提供される。
又はその薬学的に許容可能な塩［式中：
Ｒ９は、Ｃ３～Ｃ８ヘテロシクリル基から選択され；及び
Ｒ１０は、Ｈ及びＣ１～Ｃ６アルキル基から選択され、
ここでＲ９及びＲ１０は、各々独立に、ハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１～Ｃ３アルキル基、Ｃ１～Ｃ３アルコキシ基、－ＮＨ２、－ＮＨ－（Ｃ１～Ｃ３アルキル）、及び－Ｎ－（Ｃ１～Ｃ３アルキル）２から独立に選択される０～３個の基で置換される］が提供される。
一部の実施形態において、本明細書には、式（Ｉｂ）の化合物：
又はその薬学的に許容可能な塩［式中：
Ｒ１１は、
（式中、＊は、Ｒ１１が化合物の残りの部分に結合する点を表す）から選択され；
Ｒ１２及びＲ１３は、各々独立に、Ｈ及びメチルから選択される］が提供される。
又はその薬学的に許容可能な塩［式中：
Ｒ１１は、
（式中、＊は、Ｒ１１が化合物の残りの部分に結合する点を表す）から選択され；
Ｒ１２及びＲ１３は、各々独立に、Ｈ及びメチルから選択される］が提供される。
一部の実施形態において、本明細書には、式（ＩＩ）の化合物：
又はその薬学的に許容可能な塩［式中：
Ｘは、ヒドロキシル又はＮＲ６Ｒ７であり；
Ｒ６及びＲ７は、各々独立に、水素、－Ｒ８、－Ｃ（＝Ｏ）－Ｒ８、－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－Ｒ８、－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）－Ｏ－Ｃ（＝Ｏ）－Ｒ８、及び－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）－Ｒ８から選択され；及び
Ｒ８は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基、Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル基、及びＣ３～Ｃ８ヘテロシクリル基から選択され、
ここでＲ６、Ｒ７、及びＲ８は、各々独立に、ハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１～Ｃ６アルキル基、－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－ＣＯ２Ｈ、－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ３～Ｃ８ヘテロシクリル）基、－ＮＲ６Ｒ７、Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル基、Ｃ１～Ｃ６アルキルヒドロキシ基、Ｃ１～Ｃ６アルキルアルコキシ基、ベンジル基、及びＣ３～Ｃ８ヘテロシクリル基（この各々は、ハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１～Ｃ３アルキル基、Ｃ１～Ｃ３アルコキシ基、Ｃ１～Ｃ３ハロアルキル基、－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）（Ｃ１～Ｃ３アルキル）、及び－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ３アルキル）から選択される０又は１個の基で独立に置換されていてもよい）から独立に選択される０～３個の基で置換される］が提供される。
又はその薬学的に許容可能な塩［式中：
Ｘは、ヒドロキシル又はＮＲ６Ｒ７であり；
Ｒ６及びＲ７は、各々独立に、水素、－Ｒ８、－Ｃ（＝Ｏ）－Ｒ８、－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－Ｒ８、－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）－Ｏ－Ｃ（＝Ｏ）－Ｒ８、及び－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）－Ｒ８から選択され；及び
Ｒ８は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基、Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル基、及びＣ３～Ｃ８ヘテロシクリル基から選択され、
ここでＲ６、Ｒ７、及びＲ８は、各々独立に、ハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１～Ｃ６アルキル基、－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－ＣＯ２Ｈ、－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ３～Ｃ８ヘテロシクリル）基、－ＮＲ６Ｒ７、Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル基、Ｃ１～Ｃ６アルキルヒドロキシ基、Ｃ１～Ｃ６アルキルアルコキシ基、ベンジル基、及びＣ３～Ｃ８ヘテロシクリル基（この各々は、ハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１～Ｃ３アルキル基、Ｃ１～Ｃ３アルコキシ基、Ｃ１～Ｃ３ハロアルキル基、－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）（Ｃ１～Ｃ３アルキル）、及び－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ３アルキル）から選択される０又は１個の基で独立に置換されていてもよい）から独立に選択される０～３個の基で置換される］が提供される。
一部の実施形態において、本明細書には、式（ＩＩａ）の化合物：
又はその薬学的に許容可能な塩［式中：
Ｚは、ＮＲ９及びＯから選択され；
Ｒ９は、水素及びＣ１～Ｃ６アルキル基から選択され；
Ｒ１０及びＲ１１は、各々独立に、水素、ハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１～Ｃ６アルキル基、－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－ＣＯ２Ｈ、－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ３～Ｃ８ヘテロシクリル）基、Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル基、Ｃ１～Ｃ６アルキルヒドロキシ基、Ｃ１～Ｃ６アルキルアルコキシ基、ベンジル基、及びＣ３～Ｃ８ヘテロシクリル基から選択され；
Ｒ１２は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基、Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル基、Ｃ３～Ｃ８ヘテロシクリル基から選択され、
ここでＲ９、Ｒ１０、Ｒ１１、及びＲ１２は、各々独立に、ハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１～Ｃ３アルキル基、Ｃ１～Ｃ３アルコキシ基、及びＣ１～Ｃ３ハロアルキル基から選択される０又は１個の基で置換され；及び
ｔは、１、２、３、４、５、及び６から選択される整数である］が提供される。
又はその薬学的に許容可能な塩［式中：
Ｚは、ＮＲ９及びＯから選択され；
Ｒ９は、水素及びＣ１～Ｃ６アルキル基から選択され；
Ｒ１０及びＲ１１は、各々独立に、水素、ハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１～Ｃ６アルキル基、－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－ＣＯ２Ｈ、－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ３～Ｃ８ヘテロシクリル）基、Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル基、Ｃ１～Ｃ６アルキルヒドロキシ基、Ｃ１～Ｃ６アルキルアルコキシ基、ベンジル基、及びＣ３～Ｃ８ヘテロシクリル基から選択され；
Ｒ１２は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基、Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル基、Ｃ３～Ｃ８ヘテロシクリル基から選択され、
ここでＲ９、Ｒ１０、Ｒ１１、及びＲ１２は、各々独立に、ハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１～Ｃ３アルキル基、Ｃ１～Ｃ３アルコキシ基、及びＣ１～Ｃ３ハロアルキル基から選択される０又は１個の基で置換され；及び
ｔは、１、２、３、４、５、及び６から選択される整数である］が提供される。
一部の実施形態において、本明細書には、式（ＩＩｂ）の化合物：
又はその薬学的に許容可能な塩［式中：
Ｒ１３は、
（式中、＊は、Ｒ１３が化合物の残りの部分に結合する点を表す）から選択され；及び
Ｒ１４及びＲ１５は、各々独立に、水素及びメチルから選択される］が提供される。
又はその薬学的に許容可能な塩［式中：
Ｒ１３は、
（式中、＊は、Ｒ１３が化合物の残りの部分に結合する点を表す）から選択され；及び
Ｒ１４及びＲ１５は、各々独立に、水素及びメチルから選択される］が提供される。
一部の実施形態において、本明細書には、式（ＩＩＩ）の化合物：
又はその薬学的に許容可能な塩［式中：
Ｒ１、Ｒ２、及びＲ３は、各々独立に、水素、ヒドロキシル、－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－Ｏ－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、及びＣ１～Ｃ６アルキル基から選択され；
Ｒ６及びＲ７は、各々独立に、水素、－Ｒ８、－Ｃ（＝Ｏ）－Ｒ８、及び－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－Ｒ８から選択され；
Ｒ８は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基、Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル基、及びＣ３～Ｃ８ヘテロシクリル基から選択され；及び
Ｒ９は、Ｈ、
から選択され、
ここでＲ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ６、Ｒ７、及びＲ８は、各々独立に、ハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１～Ｃ６アルキル基、－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－ＣＯ２Ｈ、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ３～Ｃ８ヘテロシクリル）基、－ＮＲ６Ｒ７、Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル基、Ｃ１～Ｃ６アルキルヒドロキシ基、Ｃ１～Ｃ６アルキルアルコキシ基、ベンジル基、及びＣ３～Ｃ８ヘテロシクリル基（この各々は、ハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１～Ｃ３アルキル基、Ｃ１～Ｃ３アルコキシ基、Ｃ１～Ｃ３ハロアルキル基、－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）（Ｃ１～Ｃ３アルキル）、及び－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ３アルキル）から選択される０又は１個の基で独立に置換されていてもよい）から独立に選択される０～３個の基で置換され；及び
式中、＊は、Ｒ９が化合物の残りの部分に結合する点を表す］が提供される。
又はその薬学的に許容可能な塩［式中：
Ｒ１、Ｒ２、及びＲ３は、各々独立に、水素、ヒドロキシル、－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－Ｏ－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、及びＣ１～Ｃ６アルキル基から選択され；
Ｒ６及びＲ７は、各々独立に、水素、－Ｒ８、－Ｃ（＝Ｏ）－Ｒ８、及び－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－Ｒ８から選択され；
Ｒ８は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基、Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル基、及びＣ３～Ｃ８ヘテロシクリル基から選択され；及び
Ｒ９は、Ｈ、
から選択され、
ここでＲ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ６、Ｒ７、及びＲ８は、各々独立に、ハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１～Ｃ６アルキル基、－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－ＣＯ２Ｈ、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ３～Ｃ８ヘテロシクリル）基、－ＮＲ６Ｒ７、Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル基、Ｃ１～Ｃ６アルキルヒドロキシ基、Ｃ１～Ｃ６アルキルアルコキシ基、ベンジル基、及びＣ３～Ｃ８ヘテロシクリル基（この各々は、ハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１～Ｃ３アルキル基、Ｃ１～Ｃ３アルコキシ基、Ｃ１～Ｃ３ハロアルキル基、－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）（Ｃ１～Ｃ３アルキル）、及び－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ３アルキル）から選択される０又は１個の基で独立に置換されていてもよい）から独立に選択される０～３個の基で置換され；及び
式中、＊は、Ｒ９が化合物の残りの部分に結合する点を表す］が提供される。
一部の実施形態において、本明細書には、化合物Ｈ１、又はその薬学的に許容可能な塩が提供される。一部の実施形態において、本明細書には、化合物Ｈ４、又はその薬学的に許容可能な塩が提供される。一部の実施形態において、本明細書には、化合物Ｈ５、又はその薬学的に許容可能な塩が提供される。一部の実施形態において、本明細書には、化合物Ｈ６、又はその薬学的に許容可能な塩が提供される。一部の実施形態において、本明細書には、化合物Ｈ７、又はその薬学的に許容可能な塩が提供される。一部の実施形態において、本明細書には、化合物Ｈ８、又はその薬学的に許容可能な塩が提供される。一部の実施形態において、本明細書には、化合物Ｈ９、又はその薬学的に許容可能な塩が提供される。一部の実施形態において、本明細書には、化合物Ｈ１０、又はその薬学的に許容可能な塩が提供される。一部の実施形態において、本明細書には、化合物Ｈ２、又はその薬学的に許容可能な塩が提供される。一部の実施形態において、本明細書には、化合物Ｈ３、又はその薬学的に許容可能な塩が提供される。一部の実施形態において、本明細書には、化合物Ｈ１２、又はその薬学的に許容可能な塩が提供される。一部の実施形態において、本明細書には、化合物Ｈ１３、又はその薬学的に許容可能な塩が提供される。一部の実施形態において、本明細書には、化合物Ｈ１４、又はその薬学的に許容可能な塩が提供される。一部の実施形態において、本明細書には、化合物Ｈ１５、又はその薬学的に許容可能な塩が提供される。一部の実施形態において、本明細書には、化合物Ｈ１６、又はその薬学的に許容可能な塩が提供される。一部の実施形態において、本明細書には、化合物Ｈ１７、又はその薬学的に許容可能な塩が提供される。一部の実施形態において、本明細書には、化合物Ｈ１８、又はその薬学的に許容可能な塩が提供される。一部の実施形態において、本明細書には、化合物Ｈ１９、又はその薬学的に許容可能な塩が提供される。一部の実施形態において、本明細書には、化合物Ｈ２０、又はその薬学的に許容可能な塩が提供される。一部の実施形態において、本明細書には、化合物Ｈ２１、又はその薬学的に許容可能な塩が提供される。一部の実施形態において、本明細書には、化合物Ｈ２２、又はその薬学的に許容可能な塩が提供される。一部の実施形態において、本明細書には、化合物Ｈ２３、又はその薬学的に許容可能な塩が提供される。一部の実施形態において、本明細書には、化合物Ｈ２４、又はその薬学的に許容可能な塩が提供される。一部の実施形態において、本明細書には、化合物Ｈ２５、又はその薬学的に許容可能な塩が提供される。
一部の実施形態において、本明細書には、
及びその薬学的に許容可能な塩
（式中、Ｌは、抗体に共有結合的に結び付いているリンカーである）
から選択される化合物が提供される。
及びその薬学的に許容可能な塩
（式中、Ｌは、抗体に共有結合的に結び付いているリンカーである）
から選択される化合物が提供される。
一部の実施形態において、リンカーは少なくとも１つの切断可能なペプチド部分を含む。一部の実施形態において、少なくとも１つの切断可能なペプチド部分は酵素によって切断可能である。一部の実施形態において、リンカー又は切断可能なペプチド部分は少なくとも１つのアミノ酸単位を含む。一部の実施形態において、少なくとも１つのアミノ酸単位は、アルギニン、ヒスチジン、リジン、アスパラギン酸、グルタミン酸、セリン、スレオニン、アスパラギン、グルタミン、システイン、セレノシステイン、グリシン、プロリン、アラニン、バリン、イソロイシン、メチオニン、フェニルアラニン、チロシン、トリプトファン、及びシトルリンから選択される。一部の実施形態において、少なくとも１つのアミノ酸単位は、アラニン、シトルリン、及びバリンから選択される。一部の実施形態において、リンカーは、シトルリン及びバリンを含む。一部の実施形態において、リンカーは、アラニン及びバリンを含む。
一部の実施形態において、リンカーは、スルホンアミド、β－グルクロニド、ジスルフィド、及びカルボニルから選択される部分を含む。一部の実施形態において、リンカーはスルホンアミドを含む。一部の実施形態において、リンカーはβ－グルクロニドを含む。一部の実施形態において、リンカーはジスルフィドを含む。一部の実施形態において、リンカーはカルボニルを含む。
一部の実施形態において、リンカーはスペーサー単位を含む。一部の実施形態において、スペーサー単位は、アルキル基及びポリエチレングリコール（ＰＥＧ）部分から選択される。一部の実施形態において、アルキル基はＣ１～Ｃ１２アルキル基である。一部の実施形態において、アルキル基はＣ１～Ｃ６アルキル基である。一部の実施形態において、アルキル基はメチレンである。一部の実施形態において、アルキル基はエチレンである。一部の実施形態において、アルキル基はｎ－プロピレンである。一部の実施形態において、アルキル基はｎ－ブチレンである。一部の実施形態において、アルキル基はｎ－ペンチレンである。一部の実施形態において、アルキル基はｎ－ヘキシレンである。一部の実施形態において、ＰＥＧ部分は－（ＰＥＧ）ｍ－を含み、式中、ｍは１～１０の整数である。一部の実施形態において、ｍは１である。一部の実施形態において、ｍは２である。一部の実施形態において、ｍは３である。一部の実施形態において、ｍは４である。一部の実施形態において、ｍは５である。一部の実施形態において、ｍは６である。
一部の実施形態において、リンカーはマレイミド（Ｍａｌ）部分（「Ｍａｌ－スペーサー単位」）を含む。一部の実施形態において、リンカーは自己犠牲性スペーサー単位を含む。一部の実施形態において、自己犠牲性スペーサー単位は、ｐ－アミノベンジルオキシカルボニル（ｐＡＢＣ）及びｐ－アミノベンジル（ｐＡＢ）から選択される。
一部の実施形態において、リンカーは、Ｍａｌ－スペーサー単位とアルキル基と少なくとも１つのアミノ酸単位と自己犠牲性スペーサーとを含む。一部の実施形態において、少なくとも１つのアミノ酸単位は、アラニン、シトルリン、及びバリンから選択される。一部の実施形態において、少なくとも１つのアミノ酸単位は、アラニン及びバリンを含む。一部の実施形態において、少なくとも１つのアミノ酸単位は、シトルリン及びバリンを含む。一部の実施形態において、自己犠牲性スペーサーは、ｐＡＢ及びｐＡＢＣから選択される。一部の実施形態において、自己犠牲性スペーサーはｐＡＢを含む。一部の実施形態において、自己犠牲性スペーサーはｐＡＢＣを含む。一部の実施形態において、アルキル基はＣ１～Ｃ６アルキル基を含む。
一部の実施形態において、リンカーは、Ｍａｌ－スペーサー単位とＰＥＧ部分と少なくとも１つのアミノ酸単位と自己犠牲性スペーサーとを含む。一部の実施形態において、少なくとも１つのアミノ酸単位は、アラニン、シトルリン、及びバリンから選択される。一部の実施形態において、少なくとも１つのアミノ酸単位は、アラニン及びバリンを含む。一部の実施形態において、少なくとも１つのアミノ酸単位は、シトルリン及びバリンを含む。一部の実施形態において、自己犠牲性スペーサーは、ｐＡＢ及びｐＡＢＣから選択される。一部の実施形態において、自己犠牲性スペーサーはｐＡＢを含む。一部の実施形態において、自己犠牲性スペーサーはｐＡＢＣを含む。一部の実施形態において、ＰＥＧ部分は－（ＰＥＧ）ｍ－を含み、式中、ｍは１～６の整数である。
薬物負荷量
薬物負荷量はｐによって表され、本明細書ではハーボキシジエンスプライシング調節薬対抗体比（ＨＡＲ）とも称される。薬物負荷量は各抗体又は抗原結合断片当たり１～１０個の薬物部分の範囲であってもよい。一部の実施形態において、ｐは１～１０の整数である。一部の実施形態において、ｐは、１～１０、１～９、１～８、１～７、１～６、１～５、１～４、１～３、又は１～２の整数である。一部の実施形態において、ｐは、２～１０、２～９、２～８、２～７、２～６、２～５、２～４、又は２～３の整数である。一部の実施形態において、ｐは１～８の整数である。一部の実施形態において、ｐは２～５の整数である。一部の実施形態において、ｐは２～４の整数である。一部の実施形態において、ｐは３～４の整数である。他の実施形態において、ｐは４～８の整数である。他の実施形態において、ｐは、１、２、３、４、５、６、７、又は８、好ましくは４又は８である。
薬物負荷量はｐによって表され、本明細書ではハーボキシジエンスプライシング調節薬対抗体比（ＨＡＲ）とも称される。薬物負荷量は各抗体又は抗原結合断片当たり１～１０個の薬物部分の範囲であってもよい。一部の実施形態において、ｐは１～１０の整数である。一部の実施形態において、ｐは、１～１０、１～９、１～８、１～７、１～６、１～５、１～４、１～３、又は１～２の整数である。一部の実施形態において、ｐは、２～１０、２～９、２～８、２～７、２～６、２～５、２～４、又は２～３の整数である。一部の実施形態において、ｐは１～８の整数である。一部の実施形態において、ｐは２～５の整数である。一部の実施形態において、ｐは２～４の整数である。一部の実施形態において、ｐは３～４の整数である。他の実施形態において、ｐは４～８の整数である。他の実施形態において、ｐは、１、２、３、４、５、６、７、又は８、好ましくは４又は８である。
薬物負荷量は、抗体又は抗原結合断片上の結び付く部位の数によって制限され得る。一部の実施形態において、ＡＤＣのリンカー部分（Ｌ）は、抗体又は抗原結合断片上の１つ以上のアミノ酸残基上の化学的に活性な基を通じて抗体又は抗原結合断片に結び付く。例えば、リンカーは、遊離アミノ、イミノ、ヒドロキシル、チオール、又はカルボキシル基を介して抗体又は抗原結合断片に（例えば、Ｎ末端又はＣ末端に、１つ以上のリジン残基のεアミノ基に、１つ以上のグルタミン酸又はアスパラギン酸残基の遊離カルボン酸基に、又は１つ以上のシステイン残基のスルフヒドリル基に）結び付けられてもよい。リンカーが結び付けられる部位は、抗体又は抗原結合断片のアミノ酸配列中の天然残基であってもよく、或いはそれは、例えばＤＮＡ組換え技術による（例えば、アミノ酸配列にシステイン残基を導入することによる）か、又はタンパク質生化学によって（例えば、還元、ｐＨ調整、又は加水分解によって）抗体又は抗原結合断片に導入されてもよい。
一部の実施形態において、抗体又は抗原結合断片にコンジュゲートすることのできる薬物部分の数は、遊離システイン残基の数によって制限される。例えば、結び付きがシステインチオール基である場合に、抗体がシステインチオール基を１個又は数個しか有しないこともあり、又はリンカーを結び付け得る十分な反応性のあるチオール基を１個又は数個しか有しないこともある。概して、抗体は、薬物部分に連結し得る遊離及び反応性システインチオール基をあまり多く含まない。実際、抗体中のほとんどのシステインチオール残基は、鎖間又は鎖内のいずれかのジスルフィド結合に関与する。従ってシステインへのコンジュゲーションには、一部の実施形態では、抗体の少なくとも部分的な還元が必要であり得る。リンカー－毒素を抗体に過剰に結び付けると、ジスルフィド結合の形成に利用可能なシステイン残基が還元されることにより抗体が不安定になり得る。従って、最適な薬物：抗体比は、抗体又は抗原結合断片を不安定にすることなくＡＤＣの効力を（各抗体当たりに結び付く薬物部分の数を増加させることにより）増加させなければならない。一部の実施形態において、最適な比は、２、４、６、又は８であり得る。
一部の実施形態において、１つ以上の遊離システイン残基を生じさせるため、抗体又は抗原結合断片はコンジュゲーション前に還元条件に曝露される。抗体は、一部の実施形態では、ジチオスレイトール（ＤＴＴ）又はトリス（２－カルボキシエチル）ホスフィン（ＴＣＥＰ）などの還元剤によって部分的又は完全還元条件下で還元されてもよく、それにより反応性システインチオール基が生じ得る。制限されたモル当量のＴＣＥＰによる部分的還元を通じて不対のシステインを生じさせてもよく、このＴＣＥＰは、鎖内ジスルフィド結合をインタクトなままとしながら、軽鎖と重鎖（各Ｈ－Ｌ対形成につき１つの対）及びヒンジ領域における２つの重鎖（ヒトＩｇＧ１の場合には各Ｈ－Ｈ対形成につき２つの対）を連結する鎖間ジスルフィド結合を還元することができる（Ｓｔｅｆａｎｏ ｅｔ ａｌ．（２０１３）Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ．１０４５：１４５－７１）。実施形態において、抗体内のジスルフィド結合は、例えば還元及び酸化電圧を交互に印加する作用電極を利用することにより電気化学的に還元される。この手法は、分析的装置（例えば、電気化学的検出装置、ＮＭＲ分光計、又は質量分析計）又は化学的分離装置（例えば、液体クロマトグラフィー（例えば、ＨＰＬＣ）又は電気泳動装置（例えば、米国特許出願公開第２０１４００６９８２２号明細書を参照））とのジスルフィド結合還元のオンライン結合を可能にし得る。特定の実施形態において、抗体は、システインなど、アミノ酸残基上の反応性求核基を露出させるため変性条件に供される。
ＡＤＣの薬物負荷量は、別様に、例えば、（ｉ）抗体に対する薬物－リンカー中間体又はリンカー試薬のモル過剰を制限すること；（ｉｉ）コンジュゲーション反応時間又は温度を制限すること；（ｉｉｉ）システインチオール修飾のための部分的又は制限的還元条件；及び／又は（ｉｖ）リンカー－薬物の結び付きの数及び／又は位置の制御のためシステイン残基の数及び位置が修飾されるように抗体のアミノ酸配列を組換え技術により改変することによって制御されてもよい。
一部の実施形態において、抗体又は抗原結合断片のアミノ酸配列に遊離システイン残基が導入される。例えば、親抗体の１つ以上のアミノ酸がシステインアミノ酸に置き換えられているシステイン改変抗体を調製することができる。任意の形態の抗体をこのように改変してもよく、即ち突然変異させてもよい。例えば、親Ｆａｂ抗体断片を改変して、「ＴｈｉｏＦａｂ」と称されるシステイン改変Ｆａｂを形成してもよい。同様に、親モノクローナル抗体を改変して「ＴｈｉｏＭａｂ」を形成してもよい。ＴｈｉｏＦａｂでは単一の部位突然変異が単一の改変システイン残基を生じさせるが、一方、ＴｈｉｏＭａｂではＩｇＧ抗体の二量体の性質に起因して、単一の部位突然変異が２つの改変システイン残基を生じさせる。親ポリペプチドのアミノ酸配列変異体をコードするＤＮＡは、当該技術分野において公知の種々の方法により調製することができる（例えば、国際公開第２００６／０３４４８８号パンフレットに記載される方法を参照のこと）。これらの方法としては、限定はされないが、先に調製しておいた、そのポリペプチドをコードするＤＮＡの部位特異的（又はオリゴヌクレオチド媒介性）突然変異誘発、ＰＣＲ突然変異誘発、及びカセット突然変異誘発による調製が挙げられる。組換え抗体の変異体はまた、制限酵素断片操作によるか、又は合成オリゴヌクレオチドによるオーバーラップエクステンションＰＣＲにより構築されてもよい。式（Ｉ）のＡＤＣとしては、限定はされないが、１、２、３、又は４つの改変システインアミノ酸を有する抗体が挙げられる（Ｌｙｏｎ ｅｔ ａｌ．（２０１２）Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｅｎｚｙｍｏｌ．５０２：１２３－３８）。一部の実施形態では、抗体又は抗原結合断片には、改変を用いることなく１つ以上の遊離システイン残基が既に存在し、その場合、既存の遊離システイン残基を使用して抗体又は抗原結合断片を薬物部分にコンジュゲートし得る。
複数のコピーの抗体又は抗原結合断片及びリンカー部分を含む反応混合物中において、２つ以上の求核基が薬物－リンカー中間体又はリンカー部分試薬、続いて薬物部分試薬と反応する場合、そこで得られる生成物は、混合物中の抗体又は抗原結合断片の各コピーに結び付いた１つ以上の薬物部分の分布を有するＡＤＣ化合物の混合物であり得る。一部の実施形態において、コンジュゲーション反応から得られるＡＤＣの混合物の薬物負荷量は、各抗体又は抗原結合断片当たりに結び付いた薬物部分１～１０個の範囲である。各抗体又は抗原結合断片当たりの平均薬物部分数（即ち、平均薬物負荷量、又は平均ｐ）は、当該技術分野において公知の任意の従来方法、例えば、質量分析（例えば、逆相ＬＣ－ＭＳ）、及び／又は高速液体クロマトグラフィー（例えば、ＨＩＣ－ＨＰＬＣ）により計算し得る。一部の実施形態において、各抗体又は抗原結合断片当たりの平均薬物部分数は、疎水性相互作用クロマトグラフィー－高速液体クロマトグラフィー（ＨＩＣ－ＨＰＬＣ）により決定される。一部の実施形態において、各抗体又は抗原結合断片当たりの平均薬物部分数は、逆相液体クロマトグラフィー質量分析（ＬＣ－ＭＳ）により決定される。一部の実施形態において、各抗体又は抗原結合断片当たりの平均薬物部分数は、約１．５～約３．５、約２．５～約４．５、約３．５～約５．５、約４．５～約６．５、約５．５～約７．５、約６．５～約８．５、又は約７．５～約９．５である。一部の実施形態において、各抗体又は抗原結合断片当たりの平均薬物部分数は、約２～約４、約３～約５、約４～約６、約５～約７、約６～約８、約７～約９、約２～約８、又は約４～約８である。
一部の実施形態において、各抗体又は抗原結合断片当たりの平均薬物部分数は約２である。一部の実施形態において、各抗体又は抗原結合断片当たりの平均薬物部分数は、約１．５、約１．６、約１．７、約１．８、約１．９、約２、約２．１、約２．２、約２．３、約２．４、又は約２．５である。一部の実施形態において、各抗体又は抗原結合断片当たりの平均薬物部分数は２である。
一部の実施形態において、各抗体又は抗原結合断片当たりの平均薬物部分数は約４である。一部の実施形態において、各抗体又は抗原結合断片当たりの平均薬物部分数は、約３．５、約３．６、約３．７、約３．８、約３．９、約４、約４．１、約４．２、約４．３、約４．４、又は約４．５である。一部の実施形態において、各抗体又は抗原結合断片当たりの平均薬物部分数は４である。
一部の実施形態において、各抗体又は抗原結合断片当たりの平均薬物部分数は約８である。一部の実施形態において、各抗体又は抗原結合断片当たりの平均薬物部分数は、約７．５、約７．６、約７．７、約７．８、約７．９、約８、約８．１、約８．２、約８．３、約８．４、又は約８．５である。一部の実施形態において、各抗体又は抗原結合断片当たりの平均薬物部分数は８である。
様々な実施形態において、用語「約」は、各抗体又は抗原結合断片当たりの平均薬物部分数に関して使用されるとき、±１０％を意味する。
個々のＡＤＣ化合物、又は「種」は、混合物中に質量スペクトル法によって同定し、ＵＰＬＣ又はＨＰＬＣ、例えば疎水性相互作用クロマトグラフィー（ＨＩＣ－ＨＰＬＣ）によって分離し得る。特定の実施形態では、例えば電気泳動法又はクロマトグラフィーにより、コンジュゲーション混合物から単一の負荷量値の均一な又はほぼ均一なＡＤＣ生成物を分離し得る。
一部の実施形態において、薬物負荷量が高くなると（例えば、ｐ＞８）、ある種の抗体－薬物コンジュゲートの凝集、不溶性、毒性、又は細胞透過性の喪失が生じ得る。薬物負荷量が高くなると、ある種のＡＤＣの薬物動態（例えば、クリアランス）にもまた悪影響が及び得る。一部の実施形態において、薬物負荷量が低くなると（例えば、ｐ＜２）、標的発現細胞及び／又はバイスタンダー細胞に対するある種のＡＤＣの効力が低下し得る。一部の実施形態において、本開示のＡＤＣの薬物負荷量は、約２～約８；約２～約６；約２～約５；約３～約５；約２～約４；又は約４～約８の範囲である。
一部の実施形態では、例えば抗体又は抗原結合断片上の鎖内ジスルフィドの部分的還元を用いて約２の薬物負荷量及び／又は平均薬物負荷量が実現され、これが有益な特性をもたらす。一部の実施形態において、例えば抗体又は抗原結合断片上の鎖内ジスルフィドの部分的還元を用いて約４の薬物負荷量及び／又は平均薬物負荷量が実現され、これが有益な特性をもたらす。一部の実施形態において、例えば抗体又は抗原結合断片上の鎖内ジスルフィドの部分的還元を用いて約８の薬物負荷量及び／又は平均薬物負荷量が実現され、これが有益な特性をもたらす。一部の実施形態において、薬物負荷量及び／又は平均薬物負荷量が約２に満たないと、標的抗原への結合に関してＡＤＣと競合し及び／又は治療有効性の低下をもたらし得る非コンジュゲート化抗体種のレベルが許容し難いほど高くなり得る。一部の実施形態において、薬物負荷量及び／又は平均薬物負荷量が約８を超えると、生成物の不均一性及び／又はＡＤＣ凝集のレベルが許容し難いほど高くなり得る。薬物負荷量及び／又は平均薬物負荷量が約８を超えるとまた、抗体又は抗原結合断片を安定させるために必要な１つ以上の化学結合が失われることに起因して、ＡＤＣの安定性にも影響が及び得る。
本開示は、記載されるＡＤＣの作製方法を含む。簡潔に言えば、ＡＤＣは、本抗体又は抗原結合断片のような抗体又は抗原結合断片、薬物部分（例えば、ハーボキシジエンスプライシング調節薬）、及び薬物部分と抗体又は抗原結合断片とをつなぎ合わせるリンカーを含む。一部の実施形態において、ＡＤＣは、薬物部分及び抗体又は抗原結合断片に共有結合的に結び付くための反応性官能基を有するリンカーを用いて調製することができる。例えば、一部の実施形態では、抗体又は抗原結合断片のシステインチオールが、リンカー又は薬物－リンカー中間体の反応性官能基（例えば、マレイミド部分）と結合を形成してＡＤＣを作り出すことができる。ＡＤＣの作成は、当業者に公知の任意の技法により達成することができる。
一部の実施形態において、ＡＤＣは、抗体又は抗原結合断片にリンカー及び薬物部分（例えば、ハーボキシジエンスプライシング調節薬）を順次接触させることにより作製され、即ち初めに抗体又は抗原結合断片がリンカーに共有結合的に連結され、次にこの予め形成された抗体－リンカー中間体が薬物部分と反応する。抗体－リンカー中間体は、薬物部分との接触前に精製ステップに供されても、又は供されなくてもよい。他の実施形態では、ＡＤＣは、リンカーを薬物部分と反応させることによって予め形成されたリンカー－薬物化合物を抗体又は抗原結合断片に接触させることにより作製される。予め形成されたリンカー－薬物化合物は、抗体又は抗原結合断片との接触前に精製ステップに供されても、又は供されなくてもよい。他の実施形態では、抗体又は抗原結合断片を１つの反応混合物中でリンカー及び薬物部分に接触させて、抗体又は抗原結合断片とリンカーとの間、及びリンカーと薬物部分との間の共有結合的結合の同時形成が実現される。このＡＤＣ作製方法は、反応混合物にリンカーを加える前に抗体又は抗原結合断片を抗体又は抗原結合断片に接触させる反応、及びその逆の反応を含み得る。特定の実施形態において、ＡＤＣは、コンジュゲーションを許容する条件下で、ＡＤＬ１－ハーボキシジエンスプライシング調節薬（例えば、ＡＤＬ１－７９３９２）又はＡＤＬ５－ハーボキシジエンスプライシング調節薬（例えば、ＡＤＬ５－０３４９）など、薬物部分につなぎ合わされたリンカーと抗体又は抗原結合断片を反応させることにより作製される。
上記に記載される方法のとおり調製したＡＤＣは、精製ステップに供されてもよい。精製ステップは、タンパク質を精製するための当該技術分野において公知の任意の生化学的方法、又はそれらの方法の任意の組み合わせを含み得る。そうした方法としては、限定はされないが、タンジェンシャルフローろ過（ＴＦＦ）、アフィニティークロマトグラフィー、イオン交換クロマトグラフィー、任意の電荷又は等電点に基づくクロマトグラフィー、混合モードクロマトグラフィー、例えば、ＣＨＴ（セラミックヒドロキシアパタイト）、疎水性相互作用クロマトグラフィー、サイズ排除クロマトグラフィー、透析、ろ過、選択的沈殿、又はこれらの任意の組み合わせが挙げられる。
治療的使用及び組成物
本明細書には、障害、例えば新生物障害についての対象の治療における開示されるＡＤＣ及び組成物の使用方法が開示される。ＡＤＣは単独で、又は第２の療法剤と組み合わせて投与されてもよく、任意の薬学的に許容可能な製剤、投薬量、及び投与レジメンで投与されてもよい。ＡＤＣ治療有効性は、毒性並びに有効性の指標に関して評価され、それに応じて調整されてもよい。有効性の尺度としては、限定はされないが、インビトロ又はインビボで観察される細胞増殖抑制効果及び／又は細胞傷害効果、腫瘍容積の低下、腫瘍増殖抑制率、及び／又は生存の延長が挙げられる。
本明細書には、障害、例えば新生物障害についての対象の治療における開示されるＡＤＣ及び組成物の使用方法が開示される。ＡＤＣは単独で、又は第２の療法剤と組み合わせて投与されてもよく、任意の薬学的に許容可能な製剤、投薬量、及び投与レジメンで投与されてもよい。ＡＤＣ治療有効性は、毒性並びに有効性の指標に関して評価され、それに応じて調整されてもよい。有効性の尺度としては、限定はされないが、インビトロ又はインビボで観察される細胞増殖抑制効果及び／又は細胞傷害効果、腫瘍容積の低下、腫瘍増殖抑制率、及び／又は生存の延長が挙げられる。
ＡＤＣが細胞に細胞増殖抑制効果及び／又は細胞傷害効果を及ぼすかどうかを決定する方法は公知である。例えば、ＡＤＣの細胞傷害活性又は細胞増殖抑制活性は、標的タンパク質を発現する哺乳類細胞を細胞培養培地中でＡＤＣに曝露すること；約６時間～約６日の期間にわたって細胞を培養すること；及び細胞生存能力を測定することにより測定し得る。細胞ベースのインビトロアッセイはまた、生存能力（増殖）、細胞傷害性、及びＡＤＣのアポトーシス誘導（カスパーゼ活性化）の測定に用いられてもよい。
ＡＤＣが細胞増殖抑制効果を及ぼすかどうかの決定には、チミジン取り込みアッセイを用いてもよい。例えば、９６ウェルの１ウェル当たり５，０００細胞の密度でプレーティングした標的抗原を発現する癌細胞を７２時間の期間にわたって培養し、その７２時間の期間中最後の８時間の間、０．５μＣｉの３Ｈ－チミジンに曝露することができる。培養物の細胞への３Ｈ－チミジンの取り込みは、ＡＤＣの存在下及び非存在下で測定される。
細胞傷害性の決定には、壊死又はアポトーシス（プログラム細胞死）が測定されてもよい。壊死は、典型的には細胞膜の透過性の増加；細胞の腫脹、及び細胞膜の破裂を伴う。アポトーシスは、例えばＤＮＡ断片化を測定することにより定量化し得る。ＤＮＡ断片化をインビトロで定量的に決定する市販の測光的方法が利用可能である。かかるアッセイの例は、ＴＵＮＥＬ（これは、断片化したＤＮＡにおける標識ヌクレオチドの取り込みを検出する）及びＥＬＩＳＡベースのアッセイを含め、Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａ（１９９９）Ｎｏ．２，ｐｐ．３４－３７（Ｒｏｃｈｅ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌｓ）に記載されている。
アポトーシスはまた、細胞の形態学的変化を測定することにより決定されてもよい。例えば、壊死と同様に、ある種の色素（例えば、例としてアクリジンオレンジ又は臭化エチジウムなどの蛍光色素）の取り込みを測定することにより、細胞膜の完全性の喪失を決定し得る。アポトーシス細胞数の測定方法については、Ｄｕｋｅ ａｎｄ Ｃｏｈｅｎ，Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ（Ｃｏｌｉｇａｎ ｅｔ ａｌ．，ｅｄｓ．（１９９２）ｐｐ．３．１７．１－３．１７．１６）によって記載されている。細胞はまた、ＤＮＡ色素（例えば、アクリジンオレンジ、臭化エチジウム、又はヨウ化プロピジウム）で標識し、核の内膜に沿ったクロマチン凝縮及び辺縁趨向に関して細胞を観察することもできる。アポトーシスはまた、一部の実施形態では、カスパーゼ活性をスクリーニングすることにより決定されてもよい。一部の実施形態では、Ｃａｓｐａｓｅ－Ｇｌｏ（登録商標）アッセイを用いてカスパーゼ－３及びカスパーゼ－７の活性を測定することができる。一部の実施形態では、このアッセイは、カスパーゼ活性、ルシフェラーゼ活性、及び細胞溶解に関して最適化された試薬中に発光性のカスパーゼ－３／７基質を提供する。一部の実施形態では、「添加－混合－測定（ａｄｄ－ｍｉｘ－ｍｅａｓｕｒｅ）」フォーマットでＣａｓｐａｓｅ－Ｇｌｏ（登録商標）３／７試薬を加えると、細胞溶解、続いて基質のカスパーゼ切断、及びルシフェラーゼによって生じる「グロー型」発光シグナルの生成が起こり得る。一部の実施形態において、発光はカスパーゼ活性の存在量に比例してもよく、アポトーシスの指標として働き得る。アポトーシスを決定するため測定し得る他の形態学的変化としては、例えば、細胞質凝集、膜ブレブ形成の増加、及び細胞萎縮が挙げられる。癌細胞に対するこれらの効果のうちのいずれかの決定により、ＡＤＣが癌の治療において有用であることが示される。
細胞生存能力は、例えば、細胞において、ニュートラルレッド、トリパンブルー、クリスタルバイオレット、又はＡＬＡＭＡＲ（商標）ブルーなどの色素の取り込みを決定することにより測定されてもよい（例えば、Ｐａｇｅ ｅｔ ａｌ．（１９９３）Ｉｎｔｌ Ｊ Ｏｎｃｏｌｏｇｙ ３：４７３－６を参照のこと）。かかるアッセイでは、色素を含有する培地中で細胞がインキュベートされ、細胞が洗浄され、及び細胞による色素の取り込みを反映する残留色素が分光光度法で測定される。細胞生存能力はまた、例えば、代謝活性を有する細胞の指標であるＡＴＰを定量化することにより測定されてもよい。特定の実施形態において、調製されたＡＤＣ又はハーボキシジエンスプライシング調節薬化合物のインビトロ効力及び／又は細胞生存能力は、本明細書に提供される例に記載されるとおり、ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ－Ｇｌｏ（登録商標）発光細胞生存能力アッセイを用いて判定されてもよい。このアッセイでは、特定の実施形態において、単一の試薬（ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ－Ｇｌｏ（登録商標）試薬）が、血清補足培地で培養されている細胞に直接加えられる。試薬を加えると、細胞溶解及びＡＴＰの存在量に比例した発光シグナルの生成が起こる。ＡＴＰの量は、培養下に存在する細胞の数に正比例する。タンパク質結合色素スルホローダミンＢ（ＳＲＢ）もまた、細胞傷害性の測定に使用することができる（Ｓｋｅｈａｎ ｅｔ ａｌ．（１９９０）Ｊ Ｎａｔｌ Ｃａｎｃｅｒ Ｉｎｓｔ．８２：１１０７－１２）。
開示されるＡＤＣはまた、バイスタンダー殺傷活性に関して評価されてもよい。バイスタンダー殺傷活性は、例えば、１つが標的抗原陽性及び１つが標的抗原陰性の２つの細胞株を用いるアッセイにより決定されてもよい。特定の実施形態では、アッセイの設計により、標的陰性細胞のみを追跡することが可能である。特定の実施形態では、細胞を３つの条件下にプレーティングする：（ｉ）標的陰性細胞単独（タグ付加又は標識されている）；（ｉｉ）標的陽性細胞単独；及び（ｉｉｉ）標的陰性細胞と標的陽性細胞との共培養。次に細胞をＡＤＣで処理し、続いて細胞傷害性をモニタする。ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ－Ｇｌｏ（登録商標）試薬でプレートを読み取ると、全ての細胞集団の生存能力をモニタすることができる。ＯｎｅＧｌｏ（登録商標）試薬でプレートを読み取ると、タグ付加又は標識された標的陰性細胞のみがシグナルを生じる。標的陽性細胞と混合したときの標的陰性細胞の殺傷がバイスタンダー殺傷の指標となる一方、標的陽性細胞がないときの標的陰性細胞の殺傷がオフターゲット殺傷の指標となる。
特定の態様において、本開示は、ＲＮＡスプライシングを破綻させることにより癌細胞又は癌組織を殺傷し、その成長を阻害又は調節し、又はその代謝を妨害する方法を特徴とする。本方法は、ＲＮＡスプライシングの破綻によって治療利益を得る任意の対象で用いることができる。ＲＮＡスプライシングの破綻が有益となり得る対象としては、限定はされないが、血液学的悪性腫瘍又は固形腫瘍などの新生物障害を有する又は有するリスクがある者が挙げられる。特定の実施形態において、血液学的悪性腫瘍は、Ｂ細胞悪性腫瘍、血液の癌（白血病）、形質細胞の癌（骨髄腫、例えば多発性骨髄腫）、又はリンパ節の癌（リンパ腫）である。特定の実施形態において、血液学的悪性腫瘍は、急性骨髄性白血病又は多発性骨髄腫である。特定の実施形態において、白血病は、急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、慢性骨髄球性白血病（ＣＭＬ）、慢性骨髄単球性白血病（ＣＭＭＬ）、又は急性単球性白血病（ＡＭｏＬ）である。特定の実施形態において、リンパ腫は、ホジキンリンパ腫又は非ホジキンリンパ腫である。特定の実施形態において、血液学的悪性腫瘍は、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）である。特定の実施形態において、固形腫瘍は、乳癌、膵癌、前立腺癌、結腸又は結腸直腸癌、肺癌、胃癌、子宮頸癌、子宮内膜癌、卵巣癌、胆管癌、神経膠腫、又は黒色腫などの癌腫である。特定の実施形態において、固形腫瘍は、乳癌、胃癌、前立腺癌、卵巣癌、肺癌（例えば、肺腺癌）、子宮癌（例えば、漿液性子宮内膜癌）、唾液管癌、黒色腫、結腸癌、子宮頸癌、膵癌、腎癌、結腸直腸癌、又は食道癌である。特定の実施形態において、肺癌は肺腺癌である。特定の実施形態において、子宮癌は漿液性子宮内膜癌である。
様々な実施形態において、開示されるＡＤＣは、ＨＥＲ２発現新生物細胞又は組織など、ＨＥＲ２を発現する任意の細胞又は組織において投与されてもよい。例示的実施形態には、ＨＥＲ２媒介性細胞シグナル伝達を阻害する方法又は細胞を殺傷する方法が含まれる。本方法は、癌性細胞又は転移性病変など、ＨＥＲ２を発現する任意の細胞又は組織で用いることができる。ＨＥＲ２を発現する癌の非限定的な例としては、乳癌、胃癌、膀胱癌、尿路上皮細胞癌、食道癌、肺癌（例えば、肺腺癌）、子宮癌（例えば、漿液性子宮内膜癌）、唾液管癌、子宮頸癌、子宮内膜癌、及び卵巣癌が挙げられる（Ｅｎｇｌｉｓｈ ｅｔ ａｌ．（２０１３）Ｍｏｌ Ｄｉａｇｎ Ｔｈｅｒ．１７：８５－９９）。ＨＥＲ２発現細胞の非限定的な例としては、ＨＣＣ１９５４及びＳＫＢＲ３ヒト乳管癌細胞、Ｎ８７ヒト胃癌細胞、及びＨＥＲ２又はその一部分をコードする組換え核酸を含む細胞が挙げられる。
様々な実施形態において、開示されるＡＤＣは、ＣＤ１３８発現新生物細胞又は組織など、ＣＤ１３８を発現する任意の細胞又は組織において投与されてもよい。例示的実施形態には、ＣＤ１３８媒介性細胞シグナル伝達を阻害する方法又は細胞を殺傷する方法が含まれる。本方法は、癌性細胞又は転移性病変など、ＣＤ１３８を発現する任意の細胞又は組織で用いることができる。ＣＤ１３８を発現する癌の非限定的な例としては、胸腔内癌（例えば、肺癌、中皮腫）、皮膚癌（例えば、基底細胞癌、扁平上皮癌）、頭頸部癌（例えば、喉頭、下咽頭、鼻咽頭）、乳癌、泌尿生殖器癌（例えば、子宮頸癌、卵巣癌、子宮内膜癌、前立腺癌、膀胱癌、尿路上皮癌）、血液学的悪性腫瘍（例えば、多発性骨髄腫などの骨髄腫、ホジキンリンパ腫）、及び甲状腺癌が挙げられる（Ｓｚａｔｍａｒｉ ｅｔ ａｌ．（２０１５）Ｄｉｓ Ｍａｒｋｅｒｓ ２０１５：７９６０５２）。ＣＤ１３８発現細胞の非限定的な例としては、ＭＯＬＰ８ヒト多発性骨髄腫細胞、及びＣＤ１３８又はその一部分をコードする組換え核酸を含む細胞が挙げられる。
様々な実施形態において、開示されるＡＤＣは、ＥＰＨＡ２発現新生物細胞又は組織など、ＥＰＨＡ２を発現する任意の細胞又は組織において投与されてもよい。例示的実施形態には、ＥＰＨＡ２媒介性細胞シグナル伝達を阻害する方法又は細胞を殺傷する方法が含まれる。本方法は、癌性細胞又は転移性病変など、ＥＰＨＡ２を発現する任意の細胞又は組織で用いることができる。ＥＰＨＡ２を発現する癌の非限定的な例としては、乳癌、脳癌、卵巣癌、膀胱癌、膵癌、食道癌、肺癌、前立腺癌、黒色腫、食道癌、及び胃癌が挙げられる（Ｔａｎｄｏｎ ｅｔ ａｌ．（２０１１）Ｅｘｐｅｒｔ Ｏｐｉｎ Ｔｈｅｒ Ｔａｒｇｅｔｓ １５（１）：３１－５１。ＥＰＨＡ２発現細胞の非限定的な例としては、ＰＣ３ヒト前立腺癌細胞、及びＥＰＨＡ２又はその一部分をコードする組換え核酸を含む細胞が挙げられる。
例示的方法は、有効量、即ち、細胞を殺傷するのに十分な量の本明細書に記載されるとおりのＡＤＣを細胞に接触させるステップを含む。本方法は、培養下の細胞に対して、例えばインビトロ、インビボ、エキソビボ、又はインサイチューで使用することができる。例えば、ＨＥＲ２を発現する細胞（例えば、腫瘍又は転移性病変の生検により回収された細胞；樹立癌細胞株からの細胞；又は組換え細胞）を培養培地中でインビトロ培養することができ、接触させるステップは、培養培地にＡＤＣを加えることにより影響を受け得る。本方法は、詳細にはＨＥＲ２を発現する腫瘍細胞を含めた、ＨＥＲ２を発現する細胞の殺傷を生じさせることになる。或いは、本ＡＤＣは、インビボで効果を及ぼすための任意の好適な投与経路（例えば、静脈内、皮下、又は腫瘍組織との直接的な接触）によって対象に投与することができる。この手法は、他の細胞表面抗原（例えば、ＣＤ１３８、ＥＰＨＡ２）を標的化する抗体に用いることができる。
開示されるＡＤＣ治療組成物のインビボ効果は、好適な動物モデルで評価することができる。例えば、異種癌モデルを使用してもよく、ここでは癌外植片又は継代異種移植片組織がヌードマウス又はＳＣＩＤマウスなどの免疫不全動物に導入される（Ｋｌｅｉｎ ｅｔ ａｌ．（１９９７）Ｎａｔｕｒｅ Ｍｅｄ．３：４０２－８）。有効性は、腫瘍形成の阻害、腫瘍退縮又は転移などを測定するアッセイを用いて予測し得る。
アポトーシスなどの機構による腫瘍死滅の促進を評価するインビボアッセもまた用いることができる。一実施形態において、治療組成物で治療された腫瘍担持マウスからの異種移植片をアポトーシスフォーカスの存在に関して調べ、未治療の対照異種移植片担持マウスと比較することができる。治療したマウスの腫瘍にアポトーシスフォーカスがどの程度見られるかが、組成物の治療有効性の指標を与える。
更に、本明細書には、新生物障害、例えば癌の治療方法が提供される。本明細書に開示されるＡＤＣは、治療目的で非ヒト哺乳類又はヒト対象に投与することができる。治療的方法は、新生物障害を有する又は有する疑いがある対象に、癌細胞表面に発現する抗原に結合するか、そこでの結合に利用可能であるか、又はそこに局在化するターゲティング抗体に連結したハーボキシジエンスプライシング調節薬を含むＡＤＣ又は組成物の治療有効量を投与することを伴う。一部の実施形態において、本抗体－薬物コンジュゲート又は組成物による治療は、標的抗原を発現しないが、標的抗原を発現する新生物細胞に隣接する新生物細胞のバイスタンダー殺傷を誘導する。
例示的実施形態は、ＨＥＲ２を発現する細胞にハーボキシジエンスプライシング調節薬を送達する方法であって、ＨＥＲ２エピトープに免疫特異的に結合する抗体にハーボキシジエンスプライシング調節薬をコンジュゲートすること、及び細胞をＡＤＣに曝露することを含む方法である。本開示のＡＤＣが適応となるＨＥＲ２を発現する例示的腫瘍細胞としては、胃癌細胞及び乳管癌細胞が挙げられる。
別の例示的実施形態は、ＣＤ１３８を発現する細胞にハーボキシジエンスプライシング調節薬を送達する方法であって、ＣＤ１３８エピトープに免疫特異的に結合する抗体にハーボキシジエンスプライシング調節薬をコンジュゲートすること、及び細胞をＡＤＣに曝露することを含む方法である。本開示のＡＤＣが適応となるＣＤ１３８を発現する例示的腫瘍細胞としては、多発性骨髄腫細胞が挙げられる。
別の例示的実施形態は、ＥＰＨＡ２を発現する細胞にハーボキシジエンスプライシング調節薬を送達する方法であって、ＥＰＨＡ２エピトープに免疫特異的に結合する抗体にハーボキシジエンスプライシング調節薬をコンジュゲートすること、及び細胞をＡＤＣに曝露することを含む方法である。本開示のＡＤＣが適応となるＥＰＨＡ２を発現する例示的腫瘍細胞としては、前立腺癌細胞が挙げられる。
別の例示的実施形態は、腫瘍（例えば、ＨＥＲ２発現腫瘍、ＣＤ１３８発現腫瘍、ＥＰＨＡ２発現腫瘍）の成長を低減又は阻害する方法であって、治療有効量のＡＤＣ又はＡＤＣを含む組成物を投与することを含む方法である。一部の実施形態において、治療は、患者の腫瘍の成長を低減又は阻害し、転移性病変の数又はサイズを低減し、腫瘍負荷を低減し、原発腫瘍負荷を低減し、侵襲性を低減し、生存期間を延長させ、及び／又はクオリティ・オブ・ライフを維持し又は向上させるのに十分である。一部の実施形態において、腫瘍は、単独投与時のＡＤＣの抗体又は抗原結合断片（例えば、抗ＨＥＲ２抗体、抗ＣＤ１３８抗体、抗ＥＰＨＡ２抗体）による治療に抵抗性又は難治性であり、及び／又は腫瘍は、単独投与時のハーボキシジエンスプライシング調節薬薬物部分による治療に抵抗性又は難治性である。
特定の態様において、本開示は、ＨＥＲ２発現腫瘍の成長を低減又は阻害する方法を提供する。特定の実施形態において、本抗体－薬物コンジュゲート又は組成物による治療は、ＨＥＲ２を発現しないが、ＨＥＲ２を実に発現する新生物腫瘍細胞に隣接する腫瘍細胞のバイスタンダー殺傷を誘導する。例示的ＨＥＲ２発現腫瘍型としては、限定はされないが、ＨＥＲ２を発現する乳癌、胃癌、膀胱癌、尿路上皮細胞癌、食道癌、肺癌（例えば、肺腺癌）、子宮癌（例えば、漿液性子宮内膜癌）、唾液管癌、子宮頸癌、子宮内膜癌、及び卵巣癌に由来する腫瘍が挙げられる。特定の実施形態において、ＨＥＲ２発現腫瘍は、ＨＥＲ２を発現する乳癌、卵巣癌、胃癌、肺癌（例えば、肺腺癌）、子宮癌（例えば、漿液性子宮内膜癌）、骨肉腫、又は唾液管癌に由来する腫瘍である。特定の実施形態において、ＨＥＲ２発現腫瘍は肺腺癌又は漿液性子宮内膜癌である。
特定の態様において、本開示は、ＣＤ１３８発現腫瘍の成長を低減又は阻害する方法を提供する。特定の実施形態において、本抗体－薬物コンジュゲート又は組成物による治療は、ＣＤ１３８を発現しないが、ＣＤ１３８を実に発現する新生物腫瘍細胞に隣接する腫瘍細胞のバイスタンダー殺傷を誘導する。例示的ＣＤ１３８発現腫瘍型としては、限定はされないが、ＣＤ１３８を発現する胸腔内癌（例えば、肺癌、中皮腫）、皮膚癌（例えば、基底細胞癌、扁平上皮癌）、頭頸部癌（例えば、喉頭、下咽頭、鼻咽頭）、乳癌、泌尿生殖器癌（例えば、子宮頸癌、卵巣癌、子宮内膜癌、前立腺癌、膀胱癌、尿路上皮癌）、及び甲状腺癌に由来する腫瘍が挙げられる。
特定の態様において、本開示は、ＥＰＨＡ２発現腫瘍の成長を低減又は阻害する方法を提供する。特定の実施形態において、本抗体－薬物コンジュゲート又は組成物による治療は、ＥＰＨＡ２を発現しないが、ＥＰＨＡ２を実に発現する新生物腫瘍細胞に隣接する腫瘍細胞のバイスタンダー殺傷を誘導する。例示的ＥＰＨＡ２発現腫瘍型としては、限定はされないが、ＥＰＨＡ２を発現する乳癌、脳癌、卵巣癌、膀胱癌、膵癌、食道癌、肺癌、前立腺癌、黒色腫、食道癌、及び胃癌に由来する腫瘍が挙げられる。特定の実施形態において、ＥＰＨＡ２発現腫瘍は、ＥＰＨＡ２を発現する乳癌、前立腺癌、卵巣癌、肺癌、黒色腫、結腸癌、又は食道癌に由来する腫瘍である。
更に、本開示の抗体は、獣医学的目的で、又はヒト疾患の動物モデルとして、ＡＤＣが結合能を有する抗原を発現する非ヒト哺乳類に投与されてもよい。後者に関して、かかる動物モデルは、開示されるＡＤＣの治療有効性の評価（例えば、投薬量及び投与の時間経過の試験）に有用であり得る。
更に、本明細書には、開示されるＡＤＣ及び組成物の治療的使用が提供される。例示的実施形態は、新生物障害（例えば、ＨＥＲ２発現癌、ＣＤ１３８発現癌、ＥＰＨＡ２発現癌）の治療におけるＡＤＣの使用である。別の例示的実施形態は、新生物障害（例えば、ＨＥＲ２発現癌、ＣＤ１３８発現癌、ＥＰＨＡ２発現癌）の治療における使用のためのＡＤＣである。標的抗原（例えば、ＨＥＲ２、ＣＤ１３８、ＥＰＨＡ２、ＭＳＬＮ、ＦＯＬＨ１、ＣＤＨ６、ＣＥＡＣＡＭ５、ＣＦＣ１Ｂ、ＥＮＰＰ３、ＦＯＬＲ１、ＨＡＶＣＲ１、ＫＩＴ、ＭＥＴ、ＭＵＣ１６、ＳＬＣ３９Ａ６、ＳＬＣ４４Ａ４、又はＳＴＥＡＰ１）を発現する癌を有する対象の同定方法は当該技術分野において公知であり、開示されるＡＤＣによる治療に好適な患者の同定に用いることができる。
別の例示的実施形態は、新生物障害（例えば、ＨＥＲ２発現癌、ＣＤ１３８発現癌、ＥＰＨＡ２発現癌）の治療用医薬品の製造方法におけるＡＤＣの使用である。
前述の方法の実施において使用される治療組成物は、所望の送達方法に好適な薬学的に許容可能な担体を含む医薬組成物に製剤化されてもよい。例示的実施形態は、本開示のＡＤＣと薬学的に許容可能な担体とを含む医薬組成物である。好適な担体には、治療組成物と組み合わせたとき、治療組成物の抗腫瘍機能を保持し、且つ概して患者の免疫系と反応しない任意の材料が含まれる。薬学的に許容可能な担体には、生理的に適合性のあるあらゆる溶媒、分散媒、コーティング、抗細菌剤及び抗真菌剤、等張剤及び吸収遅延剤などが含まれる。薬学的に許容可能な担体の例としては、水、生理食塩水、リン酸緩衝生理食塩水、デキストロース、グリセロール、エタノール、メシル酸塩などのうちの１つ以上、並びにこれらの組み合わせが挙げられる。多くの場合、組成物中には等張剤、例えば、糖類、マンニトール、ソルビトールなどの多価アルコール類、又は塩化ナトリウムが含まれる。薬学的に許容可能な担体は、湿潤剤又は乳化剤、保存剤又は緩衝剤など、ＡＤＣの保存期間又は有効性を亢進させる少量の補助物質を更に含み得る。
治療製剤は、可溶化され、治療組成物を腫瘍部位に送達可能な任意の経路によって投与されてもよい。潜在的に有効な投与経路としては、限定はされないが、静脈内、非経口、腹腔内、筋肉内、腫瘍内、皮内、臓器内、同所性などが挙げられる。治療用タンパク質調製物は凍結乾燥し、滅菌粉末として例えば真空下で保存し、次に注射前に静菌水中（例えば、ベンジルアルコール保存剤を含有する）又は滅菌水中に再構成することができる。治療製剤は、ＡＤＣ又はその薬学的に許容可能な塩、例えばメシル酸塩を含み得る。
一部の実施形態において、ＡＤＣは、連日、隔月、又は間の任意の期間で患者に投与される。前述の方法を用いた癌治療のための投薬量及び投与プロトコルは、方法及び標的の癌によって異なることになり、概して当該技術分野で認められている幾つもの他の要因に依存することになる。
様々な送達システムが公知であり、本開示の１つ以上のＡＤＣの投与に用いることができる。ＡＤＣの投与方法としては、限定はされないが、非経口投与（例えば、皮内、筋肉内、腹腔内、静脈内及び皮下）、硬膜外投与、腫瘍内投与、及び粘膜投与（例えば、鼻腔内及び経口経路）が挙げられる。加えて、例えば、インへラー又は噴霧器、及びエアロゾル化性薬剤を含む製剤の使用による肺内投与が用いられてもよい。例えば、米国特許第６，０１９，９６８号明細書、同第５，９８５，３２０号明細書、同第５，９８５，３０９号明細書、同第５，９３４，２７２号明細書、同第５，８７４，０６４号明細書、同第５，８５５，９１３号明細書、同第５，２９０，５４０号明細書、及び同第４，８８０，０７８号明細書；及び国際公開第１９９２／０１９２４４号パンフレット、同第１９９７／０３２５７２号パンフレット、同第１９９７／０４４０１３号パンフレット、同第１９９８／０３１３４６号パンフレット、及び同第１９９９／０６６９０３号パンフレットに記載される肺内投与用の組成物及び方法を参照のこと。ＡＤＣは、任意の好都合な経路、例えば、注入若しくはボーラス注射によるか、又は上皮若しくは皮膚粘膜内層（例えば、口腔粘膜、直腸及び腸粘膜等）からの吸収により投与されてもよい。投与は全身投与又は局所投与のいずれであってもよい。
本明細書に開示される治療組成物は、無菌で、且つ製造及び貯蔵条件下で安定しているものであり得る。一部の実施形態において、ＡＤＣ、又は医薬組成物のうちの１つ以上が、乾燥滅菌凍結乾燥粉末又は水分を含まない濃縮物としてハーメチックシール容器に供給され、これは対象への投与に適切な濃度となるように（例えば、水又は生理食塩水で）再構成することができる。一部の実施形態において、予防用又は治療用薬剤又は医薬組成物のうちの１つ以上は、少なくとも５ｍｇ、少なくとも１０ｍｇ、少なくとも１５ｍｇ、少なくとも２５ｍｇ、少なくとも３５ｍｇ、少なくとも４５ｍｇ、少なくとも５０ｍｇ、少なくとも７５ｍｇ、又は少なくとも１００ｍｇ、又は間の任意の量の単位投薬量の乾燥滅菌凍結乾燥粉末としてハーメチックシール容器に供給される。一部の実施形態において、凍結乾燥ＡＤＣ又は医薬組成物は当初の容器に２℃～８℃で保存される。一部の実施形態において、本明細書に記載されるＡＤＣ又は医薬組成物のうちの１つ以上は、ハーメチックシール容器、例えば薬剤の分量及び濃度を表示する容器に液体形態で供給される。一部の実施形態において、投与される組成物の液体形態は、少なくとも０．２５ｍｇ／ｍＬ、少なくとも０．５ｍｇ／ｍＬ、少なくとも１ｍｇ／ｍＬ、少なくとも２．５ｍｇ／ｍＬ、少なくとも５ｍｇ／ｍＬ、少なくとも８ｍｇ／ｍＬ、少なくとも１０ｍｇ／ｍＬ、少なくとも１５ｍｇ／ｍＬ、少なくとも２５ｍｇ／ｍＬ、少なくとも５０ｍｇ／ｍＬ、少なくとも７５ｍｇ／ｍＬ、又は少なくとも１００ｍｇ／ｍＬ ＡＤＣのハーメチックシール容器に供給される。液体形態は、当初の容器に２℃～８℃で保存されてもよい。
一部の実施形態において、開示されるＡＤＣは、非経口投与に好適な医薬組成物に配合することができる。注射用溶液は、フリント若しくはアンバーバイアル、アンプル、又はプレフィルドシリンジ、又は他の公知の送達若しくは保存装置内にある液体又は凍結乾燥剤形のいずれかで構成されてもよい。
本明細書に記載される組成物は種々の形態であってよい。それらとしては、例えば、液体、半固体、及び固体剤形、例えば、液体溶液（例えば、注射用及び注入用溶液）、分散液又は懸濁液、錠剤、丸薬、散剤、リポソーム、及び坐薬などが挙げられる。好ましい形態は、意図される投与様式及び治療上の適用に依存する。
様々な実施形態において、治療は、許容可能な投与経路によるＡＤＣ調製物の単回ボーラス又は反復投与を含む。
最も有効な投与レジメンの決定等を助けるため、所与の試料中の標的抗原レベル（例えば標的抗原発現細胞レベル）に関して患者が評価されてもよい。例示的実施形態は、本開示のＡＤＣによる治療が患者に奏効するかどうかを決定する方法であって、患者からの生体試料を提供すること、及び生体試料にＡＤＣを接触させることを含む方法である。例示的生体試料としては、炎症性滲出物、血液、血清、腸液、便試料、又は腫瘍生検（例えば、標的抗原を発現する癌、例えば、ＨＥＲ２発現癌、ＣＤ１３８発現癌、ＥＰＨＡ２発現癌を有する又はそのリスクがある患者に由来する腫瘍生検）などの組織又は体液が挙げられる。一部の実施形態において、対象から試料（例えば、組織及び／又は体液）を入手することができ、好適な免疫学的方法を用いて標的抗原（例えば、ＨＥＲ２、ＣＤ１３８、ＥＰＨＡ２、ＭＳＬＮ、ＦＯＬＨ１、ＣＤＨ６、ＣＥＡＣＡＭ５、ＣＦＣ１Ｂ、ＥＮＰＰ３、ＦＯＬＲ１、ＨＡＶＣＲ１、ＫＩＴ、ＭＥＴ、ＭＵＣ１６、ＳＬＣ３９Ａ６、ＳＬＣ４４Ａ４、又はＳＴＥＡＰ１）のタンパク質発現を検出及び／又は測定することができる。かかる評価はまた、療法全体を通じたモニタリングのためにも用いられ、他のパラメータの評価と組み合わせて療法の成功を判断するのに有用である。
一部の実施形態において、ＡＤＣの有効性は、対象からの腫瘍試料にＡＤＣを接触させること、及び腫瘍成長速度又は容積を評価することにより評価されてもよい。一部の実施形態において、ＡＤＣが有効であると決定された場合には、それを対象に投与し得る。
上記の治療手法は、多種多様な追加の手術、化学療法、又は放射線療法レジメンのいずれか１つと組み合わせることができる。一部の実施形態において、本明細書に開示されるＡＤＣ又は組成物は、１つ以上の追加の療法剤、例えば１つ以上の化学療法剤と共製剤化され、及び／又は共投与される。化学療法剤の非限定的な例としては、アルキル化剤、例えば、ナイトロジェンマスタード、エチレンイミン化合物、及びスルホン酸アルキル；代謝拮抗薬、例えば、葉酸、プリン又はピリミジン拮抗薬；抗有糸分裂剤、例えば、エリブリン又はエリブリンメシル酸塩（Ｈａｌａｖｅｎ（商標））、ビンカアルカロイド類、及びアウリスタチン類などの抗チューブリン剤；細胞傷害性抗生物質；ＤＮＡ発現又は複製に損傷を与える又はそれを妨害する化合物、例えば、ＤＮＡ副溝結合剤；及び成長因子受容体拮抗薬が挙げられる。一部の実施形態において、化学療法剤は細胞傷害剤又は細胞増殖抑制剤であってもよい。細胞傷害剤の例としては、限定はされないが、エリブリン又はエリブリンメシル酸塩（Ｈａｌａｖｅｎ（商標））、アウリスタチン類（例えば、モノメチルアウリスタチンＥ（ＭＭＡＥ）、モノメチルアウリスタチンＦ（ＭＭＡＦ））、メイタンシノイド類（例えば、メイタンシン）、ドラスタチン類、デュオスタチン類、クリプトフィシン類、ビンカアルカロイド類（例えば、ビンクリスチン、ビンブラスチン）、タキサン類、タキソール類、及びコルヒチン類などの抗有糸分裂剤；アントラサイクリン類（例えば、ダウノルビシン、ドキソルビシン、ジヒドロキシアントラセンジオン（ｄｉｈｙｄｒｏｘｙａｎｔｈｒａｃｉｎｄｉｏｎｅ））；細胞傷害性抗生物質（例えば、マイトマイシン類、アクチノマイシン類、デュオカルマイシン類（例えば、ＣＣ－１０６５）、オーレオマイシン類（ａｕｒｏｍｙｃｉｎｓ）、デュオマイシン類（ｄｕｏｍｙｃｉｎｓ）、カリケアマイシン類、エンドマイシン類、フェノマイシン類）；アルキル化剤（例えば、シスプラチン）；インターカレート剤（例えば、臭化エチジウム）；トポイソメラーゼ阻害薬（例えば、エトポシド、テニポシド（ｔｅｎｏｐｏｓｉｄｅ））；Ａｔ２１１、Ｉ１３１、Ｉ１２５、Ｙ９０、Ｒｅ１８６、Ｒｅ１８８、Ｓｍ１５３、Ｂｉ２１２又は２１３、Ｐ３２などの放射性同位体、及びルテチウムの放射性同位体（例えば、Ｌｕ１７７）；及び細菌、真菌、植物又は動物起源の毒素（例えば、リシン（例えば、リシンＡ鎖）、ジフテリア毒素、シュードモナス属（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）外毒素Ａ（例えば、ＰＥ４０）、エンドトキシン、ミトゲリン（ｍｉｔｏｇｅｌｌｉｎ）、コンブレスタチン、レストリクトシン、ゲロニン、αサルシン、アブリン（例えば、アブリンＡ鎖）、モデシン（例えば、モデシンＡ鎖）、クリシン（ｃｕｒｉｃｉｎ）、クロチン、サボンソウ（Ｓａｐａｏｎａｒｉａ ｏｆｆｉｃｉｎａｌｉｓ）阻害薬、グルココルチコイド）が挙げられる。
また、本明細書には、例えば上記に記載される方法に係る癌の治療用医薬品の製造における開示されるＡＤＣのうちの１つ以上の使用も開示される。一部の実施形態において、本明細書に開示されるＡＤＣは、例えば上記に記載される方法に係る癌の治療に使用される。
様々な実施形態において、本明細書に記載される臨床検査及び治療上の適用における使用のためのキットが、本開示の範囲内にある。かかるキットは、バイアル、チューブなどの１つ以上の容器であって、その各々が本明細書に開示される方法で使用される別個の要素のうちの１つを含む容器を受けるように区画化されている運搬手段、パッケージ、又は容器を、本明細書に記載される使用など、使用に関する説明書を含む表示又は添付文書と共に含み得る。キットは、薬物部分を含む容器を含み得る。本開示はまた、薬剤の分量を表示するアンプル又はサッシェなどのハーメチックシール容器にパッケージングされたＡＤＣのうちの１つ以上、又はその医薬組成物も提供する。
キットは、上記に記載される容器と、それに関連する１つ以上の他の容器であって、緩衝液、希釈剤、フィルタ、針、シリンジ；内容物を列挙する運搬手段、パッケージ、容器、バイアル及び／又はチューブの表示及び／又は使用説明書、及び使用説明書を含む添付文書を含めた、商業的観点及び使用者の観点から望ましい材料を含む容器とを含み得る。
本組成物が特定の治療法、又は予後判定、予防、診断、若しくは臨床検査適用などの非治療的適用に使用されることを指示するため、容器上又は容器と共に表示が存在してもよい。表示はまた、本明細書に記載されるものなど、インビボ又はインビトロのいずれかの使用についての指図を指示してもよい。指図及び／又は他の情報はまた、キットと共に又はキット上に含まれる１つ又は複数の添付文書又は１つ又は複数の表示に含まれてもよい。表示は容器上にあっても、又はそれに付随してもよい。表示は、表示を形成する英字、数字、又は他の文字が容器それ自体に成形又はエッチングされているとき、容器上にあるとし得る。表示は、それが同時に容器も保持する入れ物又は運搬手段の中に例えば添付文書として存在するとき、容器に付随するとし得る。表示は、本組成物が本明細書に記載される癌などの病態の診断又は治療に使用されることを指示し得る。
ネオ抗原及び使用方法
本明細書にはまた、様々な実施形態において、患者の免疫系がクリアランスの標的とし得る腫瘍細胞のネオ抗原を誘導することにより患者を治療する方法も開示される。理論によって拘束されるものではないが、様々な実施形態において、ハーボキシジエンスプライシング調節薬を単独で、及び／又はＡＤＣ若しくは組成物の一部として投与すると、免疫応答を誘導する、例えばイントロン常在内因性レトロウイルスが再発現する結果として二本鎖ＲＮＡ免疫応答を誘導するネオ抗原が生じ、及び／又は免疫原性細胞死を誘導するネオ抗原が生じ得る。
本明細書にはまた、様々な実施形態において、患者の免疫系がクリアランスの標的とし得る腫瘍細胞のネオ抗原を誘導することにより患者を治療する方法も開示される。理論によって拘束されるものではないが、様々な実施形態において、ハーボキシジエンスプライシング調節薬を単独で、及び／又はＡＤＣ若しくは組成物の一部として投与すると、免疫応答を誘導する、例えばイントロン常在内因性レトロウイルスが再発現する結果として二本鎖ＲＮＡ免疫応答を誘導するネオ抗原が生じ、及び／又は免疫原性細胞死を誘導するネオ抗原が生じ得る。
本明細書で使用されるとき、用語「ネオ抗原」は、免疫系が過去に曝露したことのない、１つ以上の腫瘍特異的突然変異から生じる及び／又はハーボキシジエンスプライシング調節薬（例えば、単独での、及び／又はＡＤＣ若しくは組成物の一部としての、本明細書に開示されるハーボキシジエンスプライシング調節薬の任意の１つ以上）への腫瘍の曝露から生じる任意の抗原を指す。腫瘍特異的突然変異には、ミスセンス突然変異、フレームシフト、転座、及びｍＲＮＡスプライシング変異体、並びにリン酸化及びグリコシル化などの翻訳後プロセシングに影響を与える突然変異が含まれ得る。これらの例示的突然変異は、様々な実施形態において、非同義的コード変化及び／又はｍＲＮＡプロセシング（例えば、スプライシング）を変化させる突然変異に由来し得る。これらの例示的突然変異は全て、様々な実施形態において、適切なＴ細胞受容体が判別することのできる分子変化を生じさせ得る。様々な好ましい実施形態において、例示的ネオ抗原は、単独での、及び／又はＡＤＣ若しくは組成物の一部としてのハーボキシジエンスプライシング調節薬の送達によって誘導されるネオ抗原である。様々な実施形態において、ハーボキシジエンスプライシング調節薬（例えば、本明細書に開示されるハーボキシジエンスプライシング調節薬の任意の１つ以上）の送達は、免疫系が過去に曝露したことのない１つ以上の新規ペプチドドメインを含有するタンパク質の翻訳を生じさせる新規ｍＲＮＡスプライシングを誘導することができる。様々な実施形態において、腫瘍特異的突然変異は、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又はハーボキシジエンスプライシング調節薬若しくはＡＤＣを含む組成物の送達又は投与によって生じるｍＲＮＡスプライシング変異体であってもよい。
理論によって拘束されるものではないが、様々な実施形態において、単独での、及びＡＤＣ又は組成物の一部としてのハーボキシジエンスプライシング調節薬の送達は、様々な遺伝子のオープンリーディングフレーム及び／又はコード配列に変化を生じさせる新規ｍＲＮＡスプライシング（例えば、エクソンスキッピング、イントロンリテンション）を誘導し得る。様々な実施形態において、これらの変化した遺伝子は、免疫系が外来性と認識する１つ以上の新規ペプチドドメインを含有するタンパク質に翻訳される。様々な実施形態において、これらの１つ以上の新規ペプチドドメインは、ハーボキシジエンスプライシング調節薬治療がなければタンパク質に存在せず、又はヒトプロテオームのいかなる他の部分にも存在しない。様々な実施形態において、１つ以上の新規ペプチドドメインを含有するタンパク質はプロテアソームによって分解されて新規ペプチド断片を作り出すことができ、この断片が、例えばＭＨＣ提示を介して免疫ペプチド提示機構の基質として働く。様々な実施形態において、ネオ抗原に相当するこの新規ペプチド断片は、例えば腫瘍細胞上の、ＭＨＣ１が結合したペプチドームにおいて提示されることができる。
様々な実施形態において、単独での、及びＡＤＣ又は組成物の一部としてのハーボキシジエンスプライシング調節薬の送達は、１つ以上の腫瘍細胞固有イベント（例えば、細胞成長停止）につながり得る。様々な実施形態において、１つ又は複数の腫瘍細胞固有イベントは、（１）貪食細胞による会合亢進（Ｂｒａｃｃｉ ｅｔ ａｌ．（２０１４）Ｃｅｌｌ Ｄｅａｔｈ Ｄｉｆｆｅｒ．２１（１）：１５－２５）；（２）腫瘍流入領域リンパ節への新規ペプチド断片の輸送による抗原提示細胞との会合；（３）貪食された腫瘍細胞からの新規ペプチド断片を抗原提示細胞がプロセシングし、その断片をネオ抗原として循環中のナイーブＴ細胞集団に提示すること；（４）新規ペプチド断片が、その断片をネオ抗原として認識する受容体を発現するＴ細胞と相互作用すること；（５）エフェクターＴ細胞応答の成熟及び活性化（例えば、ＣＤ４＋及び／又はＣＤ８＋ Ｔ細胞；及び／又は（６）ハーボキシジエンスプライシング調節薬治療に曝露された、及びその表面ＭＨＣ１複合体上にネオ抗原に相当する新規ペプチド断片を提示する更なる腫瘍細胞とのＴ細胞の会合につながり得る。様々な実施形態において、１つ又は複数の腫瘍細胞固有イベントは、直接的にも、或いは間接的にも、エフェクター機能のＴ細胞会合及び／又はネオ抗原を提示する腫瘍細胞の死滅をもたらし得る。
また、理論により拘束されるものではないが、様々な実施形態において、単独での、及びＡＤＣ又は組成物の一部としてのハーボキシジエンスプライシング調節薬の送達は、イントロン常在内因性レトロウイルスの再発現を生じさせ、二本鎖ＲＮＡ免疫応答につながり得る。
更に、理論により拘束されるものではないが、様々な実施形態において、単独での、及びＡＤＣ又は組成物の一部としてのハーボキシジエンスプライシング調節薬の送達は、スプライス調節薬の誘導による突然変異由来ネオ抗原の放出によって惹起される免疫原性細胞死につながり得る。様々な実施形態において、単独での、及びＡＤＣ又は組成物の一部としてのハーボキシジエンスプライシング調節薬の送達は、二本鎖ＲＮＡ免疫応答を誘導し得る。様々な実施形態において、二本鎖ＲＮＡ免疫応答は、イントロン常在内因性レトロウイルスが再発現することにより起こり得る。様々な実施形態において、二本鎖ＲＮＡ免疫応答により、腫瘍細胞死が起こり得る。様々な実施形態において、単独での、及びＡＤＣ又は組成物の一部としてのハーボキシジエンスプライシング調節薬の送達は、免疫原性細胞死を誘導し得る。様々な実施形態において、免疫原性細胞死は、突然変異由来ネオ抗原の放出及び／又は腫瘍細胞に対する宿主免疫応答により起こり得る。
従って、様々な実施形態において、１つ以上のハーボキシジエンスプライシング調節薬及び／又はＡＤＣ及び／又はハーボキシジエンスプライシング調節薬若しくはＡＤＣを含む組成物、例えば、本明細書に開示される任意のハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又は組成物を投与することによってネオ抗原を誘導することを含む治療方法が開示される。様々な実施形態において、本方法は、ネオ抗原の誘導がなかったならば必要となったであろうよりも低い投薬量のハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又は組成物を投与することを含む。一部の実施形態において、本方法は、１つ以上の初期導入用量を投与してネオ抗原を産生させ、免疫応答を誘導すること（例えば、ナイーブＴ細胞を記憶細胞に変換させること）と、続く低減した投薬量又は投与頻度（即ち、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又は組成物とネオ抗原の免疫ターゲティングとの併用効果に起因する）を含む。一部の実施形態において、治療は、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又は組成物を投与してネオ抗原ベースの免疫応答を誘導することと、少なくとも１つの追加療法（例えば、第２の抗癌療法）との併用を含み得る。例えば、一部の実施形態では、治療は、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又は組成物を投与してネオ抗原ベースの免疫応答を誘導することと、１つ以上のチェックポイント阻害薬との併用を含み得る。一部の実施形態において、治療は、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又は組成物を投与してネオ抗原ベースの免疫応答を誘導することと、１つ以上のサイトカイン又はサイトカイン類似体との併用を含み得る。一部の実施形態において、治療は、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又は組成物を投与してネオ抗原ベースの免疫応答を誘導することと、１つ以上のネオ抗原ワクチンとの併用を含み得る。一部の他の実施形態において、治療は、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又は組成物を投与してネオ抗原ベースの免疫応答を誘導することと、１つ以上の改変腫瘍標的化Ｔ細胞（例えば、ＣＡＲ－Ｔ）との併用を含み得る。
一部の実施形態では、ネオ抗原を使用して、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又は組成物による治療の有効性をモニタすることができる。例えば、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又は組成物の投与後に患者試料（例えば、腫瘍生検）を入手し、ネオ抗原に関して、又は免疫応答若しくは炎症反応の同定因子に関してスクリーニングすることができる。ネオ抗原及び／又は免疫応答が検出された場合、更なる治療を例えば低減した投薬量で提供することができる。
様々な実施形態において、１つ以上のハーボキシジエンスプライシング調節薬及び／又はＡＤＣ及び／又はハーボキシジエンスプライシング調節薬若しくはＡＤＣを含む組成物、例えば、本明細書に開示される任意のハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又は組成物を投与することによって二本鎖ＲＮＡ免疫応答を誘導することを含む治療方法が開示される。
様々な実施形態において、１つ以上のハーボキシジエンスプライシング調節薬及び／又はＡＤＣ及び／又はハーボキシジエンスプライシング調節薬若しくはＡＤＣを含む組成物、例えば、本明細書に開示される任意のハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又は組成物を投与することによって免疫原性細胞死を誘導することを含む治療方法が開示される。
様々な実施形態において、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又はハーボキシジエンスプライシング調節薬を含む組成物の投与は、任意の公知の抗癌療法と併用することができる。現行の腫瘍科治療に利用可能な免疫活性化戦略の例としては、限定はされないが、免疫チェックポイント阻害薬（ＩＣＩ）分子による治療、サイトカイン又はサイトカイン類似体による治療、腫瘍関連ワクチンの接種、及び腫瘍標的化Ｔ細胞の改変（例えば、腫瘍浸潤リンパ球の拡大又はＣＡＲ－Ｔ）が挙げられる。これらの技術は主に、既に存在している腫瘍抗原（突然変異又は細胞表面タンパク質の異常発現のいずれか）に対する免疫応答を亢進させ又は誘導することに焦点を置いている。これらの戦略のうちの１つ以上に、抗原性Ｔ細胞応答の誘導能を有する１つ以上の突然変異が関わり得る。例えば、チェックポイント阻害に対する患者奏効は非同義突然変異荷重と相関し得る。加えて、既存の突然変異及びそれらの突然変異の抗原性に頼る癌ワクチン手法が用いられてもよい。
ハーボキシジエンスプライシング調節薬及び／又はかかる調節薬を含むＡＤＣは、多系統に起こる広範囲のトランスクリプトーム変化を誘導し得る。これらのｍＲＮＡ変化が翻訳されると、複数のＨＬＡアイソタイプにわたって高親和性のＭＨＣ１結合ネオペプチドを生み出すロバストな再現性のあるタンパク質変化が生じ得る。理論により拘束されるものではないが、トランスクリプトーム及びプロテオームの数多くの変化に起因して、ハーボキシジエンスプライシング調節薬及び／又はＡＤＣによる治療は、潜在的に応答性のネオ抗原の数を増強して適応免疫応答の関与を亢進させ得る。
本明細書に記載されるとき、用語「ハーボキシジエンスプライシング調節薬」、「スプライシング調節薬」、「スプライセオソーム調節薬」、又は「スプライス調節薬」は、スプライセオソームの成分と相互作用することにより抗癌活性を有する化合物を指す。一部の実施形態において、スプライシング調節薬は、標的細胞におけるスプライシングの速度又は形態を変化させる。例えば、阻害性薬剤として機能するハーボキシジエンスプライシング調節薬は、無制御な細胞増殖を低下させる能力を有する。詳細には、一部の実施形態では、ハーボキシジエンスプライシング調節薬は、ＳＦ３ｂスプライセオソーム複合体を阻害することにより作用し得る。一部の実施形態において、ハーボキシジエンスプライシング調節薬は、本明細書に開示されるハーボキシジエンスプライシング調節薬の任意の１つ以上から選択される。一部の実施形態において、ハーボキシジエンスプライシング調節薬は、単独の薬剤として使用され、細胞に送達され、及び／又は対象に投与される。一部の他の実施形態において、ハーボキシジエンスプライシング調節薬は、ＡＤＣ（例えば、本明細書に開示される例示的ＡＤＣのいずれかから選択されるＡＤＣ）の一部として使用され、細胞に送達され、及び／又は対象に投与される。一部の他の実施形態において、ハーボキシジエンスプライシング調節薬は、ハーボキシジエンスプライシング調節薬の複数のコピー又はハーボキシジエンスプライシング調節薬を担持するＡＤＣの複数のコピーを含む組成物の一部として使用され、細胞に送達され、及び／又は対象に投与される。かかる組成物は本明細書に開示される。
一部の実施形態において、ＡＤＣ（例えば、本明細書に開示される例示的ＡＤＣのいずれかから選択されるＡＤＣ）の一部として使用され、細胞に送達され、及び／又は対象に投与されるハーボキシジエンスプライシング調節薬は、単独の薬剤として使用され、細胞に送達され、及び／又は対象に投与されるハーボキシジエンスプライシング調節薬と比べて付加的な治療利益をもたらす。例えば、一部の実施形態では、ＡＤＣの一部として使用され、細胞に送達され、及び／又は対象に投与されるハーボキシジエンスプライシング調節薬は、標的抗原（即ち、ＡＤＣの抗体部分によって標的化される抗原）を発現する新生物細胞へのハーボキシジエンスプライシング調節薬の標的化した送達をもたらす。一部の実施形態において、かかる標的化されたハーボキシジエンスプライシング調節薬送達は、オフターゲット治療及び／又はオフターゲット細胞傷害性を低減する。一部の実施形態において、かかる標的化された送達は、標的抗原を発現しない健常細胞上ではなく、新生物細胞上での腫瘍選択的ネオ抗原提示を増進する。一部の実施形態において、かかる標的化された送達は、例えば、ネオ抗原に相当する新規ｍＲＮＡ及びＭＨＣ結合ペプチドの選択的スプライシング及び誘導の少なくとも７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、又は９９％が、オフターゲット細胞よりむしろ、標的化された新生物細胞において起こることにつながる。従って、理論により拘束されるものではないが、一部の実施形態では、本明細書に開示されるとおりのＡＤＣによる治療後にはネオ抗原が腫瘍細胞上に優先的に発現するため、エフェクターＴ細胞プライミング及び／又は拡大（例えば、ネオ抗原ワクチンを使用）の後、免疫系は健常細胞でなく、むしろネオ抗原提示新生物細胞を優先的に攻撃し得る。
免疫誘導及び治療レジメン：
様々な実施形態において、本開示は、有効量のハーボキシジエンスプライシング調節薬、ハーボキシジエンスプライシング調節薬ベースの抗体－薬物コンジュゲート（ＡＤＣ）、又はハーボキシジエンスプライシング調節薬若しくはＡＤＣを含む組成物を新生物細胞に接触させることにより少なくとも１つのネオ抗原を誘導する方法を提供する。様々な実施形態において、本開示は、有効量のハーボキシジエンスプライシング調節薬、ハーボキシジエンスプライシング調節薬ベースの抗体－薬物コンジュゲート（ＡＤＣ）、又はハーボキシジエンスプライシング調節薬若しくはＡＤＣを含む組成物を新生物細胞に接触させることにより二本鎖ＲＮＡ免疫応答を誘導する方法を提供する。様々な実施形態において、本開示は、有効量のハーボキシジエンスプライシング調節薬、ハーボキシジエンスプライシング調節薬ベースの抗体－薬物コンジュゲート（ＡＤＣ）、又はハーボキシジエンスプライシング調節薬若しくはＡＤＣを含む組成物を新生物細胞に接触させることにより免疫原性細胞死を誘導する方法を提供する。
様々な実施形態において、本開示は、有効量のハーボキシジエンスプライシング調節薬、ハーボキシジエンスプライシング調節薬ベースの抗体－薬物コンジュゲート（ＡＤＣ）、又はハーボキシジエンスプライシング調節薬若しくはＡＤＣを含む組成物を新生物細胞に接触させることにより少なくとも１つのネオ抗原を誘導する方法を提供する。様々な実施形態において、本開示は、有効量のハーボキシジエンスプライシング調節薬、ハーボキシジエンスプライシング調節薬ベースの抗体－薬物コンジュゲート（ＡＤＣ）、又はハーボキシジエンスプライシング調節薬若しくはＡＤＣを含む組成物を新生物細胞に接触させることにより二本鎖ＲＮＡ免疫応答を誘導する方法を提供する。様々な実施形態において、本開示は、有効量のハーボキシジエンスプライシング調節薬、ハーボキシジエンスプライシング調節薬ベースの抗体－薬物コンジュゲート（ＡＤＣ）、又はハーボキシジエンスプライシング調節薬若しくはＡＤＣを含む組成物を新生物細胞に接触させることにより免疫原性細胞死を誘導する方法を提供する。
一部の実施形態において、新生物細胞はインビトロ細胞培養物中に存在する。一部の実施形態において、新生物細胞は対象から入手される。一部の実施形態において、新生物細胞は対象に存在する。一部の実施形態において、新生物細胞は血液学的悪性腫瘍又は固形腫瘍に由来する。一部の実施形態において、血液学的悪性腫瘍は、Ｂ細胞悪性腫瘍、白血病、リンパ腫、及び骨髄腫から選択される。一部の実施形態において、血液学的悪性腫瘍は、急性骨髄性白血病及び多発性骨髄腫から選択される。一部の実施形態において、固形腫瘍は、乳癌（例えば、ＨＥＲ２陽性乳癌）、胃癌（例えば、胃腺癌）、前立腺癌、卵巣癌、肺癌（例えば、肺腺癌）、子宮癌（例えば、漿液性子宮内膜癌）、唾液管癌、黒色腫、結腸癌、子宮頸癌、膵癌、腎癌、結腸直腸癌、及び食道癌から選択される。一部の実施形態において、固形腫瘍は、ＨＥＲ２陽性乳癌、胃腺癌、前立腺癌、及び骨肉腫から選択される。
様々な実施形態において、本開示は、新生物障害を有する又は有する疑いがある対象において、有効量のハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又はハーボキシジエンスプライシング調節薬若しくはＡＤＣを含む組成物を対象に投与することにより少なくとも１つのネオ抗原及び／又はＴ細胞応答を誘導する方法を更に提供する。また本明細書には、様々な実施形態において、新生物障害を有する又は有する疑いがある対象を、有効量のハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又はハーボキシジエンスプライシング調節薬若しくはＡＤＣを含む組成物を対象に投与することにより治療する方法も提供され、ここでハーボキシジエンスプライシング調節薬、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物の投与は、少なくとも１つのネオ抗原及び／又はＴ細胞応答を誘導する。
様々な他の実施形態において、本開示は、新生物障害を有する又は有する疑いがある対象において、有効量のハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又はハーボキシジエンスプライシング調節薬若しくはＡＤＣを含む組成物を対象に投与することにより二本鎖ＲＮＡ免疫応答を誘導する方法を提供する。また本明細書には、様々な実施形態において、新生物障害を有する又は有する疑いがある対象を、有効量のハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又はハーボキシジエンスプライシング調節薬若しくはＡＤＣを含む組成物を対象に投与することにより治療する方法も提供され、ここでハーボキシジエンスプライシング調節薬、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物の投与は、二本鎖ＲＮＡ免疫応答を誘導する。
なおも他の実施形態において、本開示は、新生物障害を有する又は有する疑いがある対象において、有効量のハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又はハーボキシジエンスプライシング調節薬若しくはＡＤＣを含む組成物を対象に投与することにより免疫原性細胞死を誘導する方法を提供する。更に本明細書には、様々な実施形態において、新生物障害を有する又は有する疑いがある対象を、有効量のハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又はハーボキシジエンスプライシング調節薬若しくはＡＤＣを含む組成物を対象に投与することにより治療する方法が提供され、ここでハーボキシジエンスプライシング調節薬、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物の投与は、免疫原性細胞死を誘導する。
一部の実施形態において、本開示は、新生物障害を有する又は有する疑いがある対象を、第２の薬剤を含む１つ以上の追加療法との併用で、有効量のハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又はハーボキシジエンスプライシング調節薬若しくはＡＤＣを含む組成物を対象に投与することにより治療する方法を更に提供し、ここでハーボキシジエンスプライシング調節薬、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物の投与は、免疫原性細胞死を誘導する。
本明細書に記載される治療的方法の一部の実施形態において、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、抗体－薬物コンジュゲート、組成物、又は第２の薬剤の投与される量は、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、抗体－薬物コンジュゲート、組成物、又は第２の薬剤の標準的な投薬量と比較したとき、少なくとも１つのネオ抗原及び／又はＴ細胞応答の誘導が理由で低減される。一部の実施形態において、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、抗体－薬物コンジュゲート、組成物、又は第２の薬剤の投与量は、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、抗体－薬物コンジュゲート、組成物、又は第２の薬剤の標準的な投薬量と比較したとき、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、７５％、又は９０％低減される。一部の実施形態において、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、抗体－薬物コンジュゲート、組成物、又は第２の薬剤は、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、抗体－薬物コンジュゲート、組成物、又は第２の薬剤の標準的な投与レジメンと比較したとき、少なくとも１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、７５％、又は９０％低い頻度で投与される。一部の実施形態において、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、抗体－薬物コンジュゲート、組成物、又は第２の薬剤の投与量及び／又は投薬量は、全身毒性の低下及び／又は忍容性の向上をもたらす。
本明細書で使用されるとき、用語「標準的な投薬量」又は「標準的な投与レジメン」は、療法剤についての任意の通常の又はルーチンの投与レジメン、例えば、製造者によって提案されるレジメン、規制当局によって承認されているレジメン、又は他の形で平均的な患者の必要に応えるためヒト対象で試験されるレジメンを指す。一部の実施形態において、療法剤は、抗癌活性を有するハーボキシジエンスプライシング調節薬、抗体、又は抗体－薬物コンジュゲートである。
例えば、本明細書に開示される例示的抗ＨＥＲ２抗体であるトラスツズマブの標準的な投与レジメンは、９０分かけて静脈内投与される８ｍｇ／ｋｇ（１週目）と、それに続く３週間毎に３０～９０分かけて静脈内投与される６ｍｇ／ｋｇ（４週目から療法サイクルの終了時まで）であってもよい（Ｈｅｒｃｅｐｔｉｎ（登録商標）（トラスツズマブ）ＦＤＡ表示補足、２０１７）。
別の例として、例示的抗ＣＴＬＡ４チェックポイント阻害薬抗体であるイピリムマブの標準的な投与レジメンは、４用量にわたって３週間毎に９０分かけて静脈内投与される３ｍｇ／ｋｇであってもよい（Ｙｅｒｖｏｙ（登録商標）（イピリムマブ）ＦＤＡ表示補足、２０１８）。イピリムマブの別の標準的な投与レジメンは、４用量にわたって３週間毎に９０分かけて静脈内投与される１０ｍｇ／ｋｇと、それに続く最長３年間の１２週間毎の１０ｍｇ／ｋｇであってもよい（Ｙｅｒｖｏｙ（登録商標）（イピリムマブ）ＦＤＡ表示補足、２０１８）。
別の例として、例示的抗ＰＤ１チェックポイント阻害薬抗体であるニボルマブの標準的な投与レジメンは、２週間毎に６０分かけて静脈内投与される３ｍｇ／ｋｇであってもよい（Ｏｐｄｉｖｏ（登録商標）（ニボルマブ）ＦＤＡ表示、２０１５）。
別の例として、例示的抗ＰＤＬ１チェックポイント阻害薬抗体であるアテゾリズマブの標準的な投与レジメンは、３週間毎に６０分かけて静脈内投与される１２００ｍｇであってもよい（Ｔｅｃｅｎｔｒｉｑ（登録商標）（アテゾリズマブ）ＦＤＡ表示補足、２０１８）。
更に別の例として、例示的抗ＨＥＲ２抗体－薬物コンジュゲートであるＴ－ＤＭ１の標準的な投与レジメンは、３週間毎に９０分かけて静脈内投与される３．６ｍｇ／ｋｇであってもよい（Ｋａｄｃｙｌａ（登録商標）（Ｔ－ＤＭ１）ＦＤＡ表示補足、２０１６）。
一部の実施形態において、本明細書に記載される方法は、少なくとも１つの追加療法（例えば、チェックポイント阻害薬、ネオ抗原ワクチン、サイトカイン又はサイトカイン類似体、ＣＡＲ－Ｔ等）を投与することを更に含み得る。一部の実施形態において、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、抗体－薬物コンジュゲート、組成物、及び／又は少なくとも１つの追加療法の投与される量は、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、抗体－薬物コンジュゲート、組成物、及び／又は少なくとも１つの追加療法の標準的な投薬量と比較したとき、少なくとも１つのネオ抗原及び／又はＴ細胞応答の誘導が理由で低減される。一部の実施形態において、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、抗体－薬物コンジュゲート、組成物、及び／又は少なくとも１つの追加療法の投与される量は、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、抗体－薬物コンジュゲート、組成物、及び／又は少なくとも１つの追加療法の標準的な投薬量と比較したとき、二本鎖ＲＮＡ免疫応答の誘導が理由で低減される。一部の実施形態において、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、抗体－薬物コンジュゲート、組成物、及び／又は少なくとも１つの追加療法の投与される量は、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、抗体－薬物コンジュゲート、組成物、及び／又は少なくとも１つの追加療法の標準的な投薬量と比較したとき、免疫原性細胞死の誘導が理由で低減される。一部の実施形態において、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、抗体－薬物コンジュゲート、組成物、及び／又は少なくとも１つの追加療法の投与量は、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、抗体－薬物コンジュゲート、組成物、及び／又は少なくとも１つの追加療法の標準的な投薬量と比較したとき、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、７５％、又は９０％低減される。一部の実施形態において、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、抗体－薬物コンジュゲート、組成物、及び／又は少なくとも１つの追加療法は、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、抗体－薬物コンジュゲート、組成物、及び／又は少なくとも１つの追加療法の標準的な投与レジメンと比較したとき、少なくとも１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、７５％、又は９０％低い頻度で投与される。一部の実施形態において、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、抗体－薬物コンジュゲート、組成物、及び／又は少なくとも１つの追加療法の投与量及び／又は投薬量は、全身毒性の低下及び／又は忍容性の向上をもたらす。
一部の実施形態において、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物の投与は、少なくとも１つの追加療法の投与前に開始される。他の実施形態において、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物の投与は、少なくとも１つの追加療法の投与後に開始される。なおも他の実施形態において、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物の投与は、少なくとも１つの追加療法の投与と同時に開始される。
一部の実施形態において、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物の投与は、初回投与後に少なくとも１回反復される。一部の実施形態において、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物の反復投与に使用される量は、初回投与に使用される量と比較したとき低減される。一部の実施形態において、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物の反復投与に使用される量は、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物の標準的な投薬量と比較したとき低減される。一部の実施形態において、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物の反復投与に使用される量は、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物の標準的な投薬量又は初回投薬量と比較したとき、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、７５％、又は９０％低減される。
一部の実施形態において、少なくとも１つの追加療法の投与は、初回投与後に少なくとも１回反復される。一部の実施形態において、少なくとも１つの追加療法の反復投与に使用される量は、初回投与に使用される量と比較したとき低減される。一部の実施形態において、少なくとも１つの追加療法の反復投与に使用される量は、少なくとも１つの追加療法の標準的な投薬量と比較したとき低減される。一部の実施形態において、少なくとも１つの追加療法の反復投与に使用される量は、少なくとも１つの追加療法の標準的な投薬量又は初回投薬量と比較したとき、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、７５％、又は９０％低減される。
一部の実施形態において、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物の反復投与は、少なくとも１つの追加療法の反復投与と同時である。一部の実施形態において、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物の投与は、少なくとも１つの追加療法の反復投与と逐次的であるか、又は時間をずらされる。
一部の実施形態において、少なくとも１つの追加療法は、チェックポイント阻害薬、例えば、本明細書に開示される任意のチェックポイント阻害薬を投与することを含む。一部の実施形態において、対象は、単独投与時のチェックポイント阻害薬に不忍容、不応性、又は難反応性である。一部の実施形態において、チェックポイント阻害薬は、ＰＤ１／ＰＤＬ１、ＣＴＬＡ４、ＯＸ４０、ＣＤ４０、ＬＡＧ３、ＴＩＭ３、ＧＩＴＲ、及び／又はＫＩＲを標的化する。一部の実施形態において、チェックポイント阻害薬は、ＣＴＬＡ４、ＯＸ４０、ＣＤ４０、及び／又はＧＩＴＲを標的化する。一部の実施形態において、チェックポイント阻害薬は、その標的に対する阻害活性又はアゴニスト活性を有する抗体である。一部の実施形態において、チェックポイント阻害薬は阻害抗体又は他の類似の阻害性分子で標的化する。他の実施形態において、チェックポイント阻害薬はアゴニスト抗体又は他の類似のアゴニスト分子で標的化する。
一部の他の実施形態において、少なくとも１つの追加療法は、ネオ抗原ワクチン、例えば、本明細書に開示される任意のネオ抗原ワクチンを投与することを含む。一部の実施形態において、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又は組成物は、ネオ抗原ワクチンの投与前に投与される。一部の実施形態において、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又は組成物は、ネオ抗原ワクチンの投与後に投与される。一部の実施形態において、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又は組成物は、ネオ抗原ワクチンの投与と同時に投与される。一部の実施形態において、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又は組成物の投与は、初回投与後に少なくとも１回反復される。一部の実施形態において、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又は組成物の反復投与に使用される量は、初回投与に使用される量と比較したとき低減される。
一部の実施形態において、ネオ抗原ワクチンは少なくとも１つのネオ抗原ペプチドを含む。一部の実施形態において、少なくとも１つのネオ抗原ペプチドは約１０～約５０アミノ酸長の範囲である。一部の実施形態において、少なくとも１つのネオ抗原ペプチドは約１０～約３５アミノ酸長の範囲である。一部の実施形態において、少なくとも１つのネオ抗原ペプチドは約１５～約２５アミノ酸長の範囲である。一部の実施形態において、少なくとも１つのネオ抗原ペプチドは１つ又は２つ以上のネオ抗原配列を含む。
一部の実施形態において、ネオ抗原配列及び／又は抗原性部分は約１０～約５０アミノ酸長の範囲である。一部の実施形態において、少なくとも１つのネオ抗原ペプチドは約１０～約３５アミノ酸長の範囲である。一部の実施形態において、ネオ抗原配列及び／又は抗原性部分は約１５～約２５アミノ酸長の範囲である。一部の実施形態において、ネオ抗原配列及び／又は抗原性部分は約１０～約２０アミノ酸長の範囲である。一部の実施形態において、ネオ抗原配列及び／又は抗原性部分はカノニカルペプチド配列（例えば、表８において下線が付されている例示的カノニカルペプチド配列のいずれか）と排他的に重複せず、又はそれからならない。
ネオ抗原配列の「抗原性部分」又は「抗原性断片」という用語は、本明細書で使用されるとき、Ｔ細胞応答（例えば、１つ又は複数のエフェクターＴ細胞集団の抗原特異的拡大及び／又は成熟）を誘導する能力を保持しているネオ抗原配列の１つ以上の断片を指す。抗原性部分はまた、一部の実施形態では、抗原提示細胞（例えば、樹状細胞）によってインターナライズされ、プロセシングされ、及び／又は提示される能力を保持していてもよい。一部の実施形態において、抗原性部分はまた、Ｔ細胞プライミング機能も保持している。一部の実施形態において、ネオ抗原配列の抗原性部分は約１０～約５０アミノ酸長の範囲である。一部の実施形態において、ネオ抗原配列の抗原性部分は約１０～約３５アミノ酸長の範囲である。一部の実施形態において、ネオ抗原配列の抗原性部分は約１５～約２５アミノ酸長の範囲である。一部の実施形態において、ネオ抗原配列の抗原性部分は約１０～約２０アミノ酸長の範囲である。一部の実施形態において、ネオ抗原配列の抗原性部分（例えば、配列番号６６～９３のいずれか１つの抗原性部分）、又はそのコードｍＲＮＡは、ネオ抗原ワクチンとして製剤化される。
抗原性部分の例示的実施形態は、配列番号６６のアミノ酸４５～５３に隣接する１つ又は複数の領域である。抗原性部分の別の例示的実施形態は、配列番号６６のアミノ酸８２～９０に隣接する１つ又は複数の領域である。一部の実施形態において、抗原性部分は、対象において発現する少なくとも１つのＨＬＡアレル（例えば、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１）に結合する能力を有する。一部の他の実施形態において、抗原性部分は、新生物障害に罹患している対象集団中の対象の少なくとも１０％、少なくとも１５％、少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、又は少なくとも４５％に発現する少なくとも１つのＨＬＡアレルに結合する能力を有する。一部の実施形態において、抗原性部分は、新生物障害に罹患している対象集団の少なくとも１％、少なくとも５％、又は少なくとも１０％に存在する腫瘍に対するＴ細胞応答を誘発する能力を有する。
一部の実施形態において、抗原性部分はカノニカルペプチド配列と排他的に重複せず、又はそれからならない。用語「カノニカルペプチド配列」は、本明細書で使用されるとき、ハーボキシジエンスプライシング調節薬との接触がない（例えば、単独での、及び／又はＡＤＣ若しくは組成物の一部としてのハーボキシジエンスプライシング調節薬との接触がない）ヒトプロテオームに存在する、及び／又は免疫が過去に曝露したことがある任意の連続ペプチド配列を指す。一部の実施形態において、カノニカルペプチド配列は、カノニカル転写物オープンリーディングフレームに由来し、及び／又はそれによってコードされる。表８において例示的カノニカルペプチド配列に下線を付す。
一部の実施形態において、ハーボキシジエンスプライシング調節薬が（例えば、単独で、及び／又はＡＤＣ若しくは組成物の一部として）投与されるとき、カノニカルペプチド配列は、ハーボキシジエンスプライシング調節薬によって誘導される異常スプライシングイベントに先行する直ちに５’側のインフレーム２４ヌクレオチドに由来し、及び／又はそれによってコードされ得る。従って、一部の実施形態では、カノニカルペプチド配列は、ハーボキシジエンスプライシング調節薬によって誘導されるネオ抗原配列の直ちにＮ末端側８アミノ酸を含むか、又はそれからなる。一部の実施形態において、５’エクソン配列がコドンの終結ヌクレオチドで終結するとき、カノニカルペプチド配列はそのエクソンの終わりで終結する。一部の他の実施形態において、５’エクソン配列がコドンの３つのヌクレオチドのうちの１つ又は２つで終結するとき、カノニカルペプチド配列は、その不完全なコドンに先行する２４ヌクレオチドに由来し、及び／又はそれによってコードされる。一部の実施形態において、異常スプライシングイベントの３’側のｍＲＮＡ配列は、５’エクソンに由来する同じオープンリーディングフレーム内において、そこで翻訳が終結し得る終止コドンに達するまで翻訳され得る。一部の実施形態において、異常スプライシングイベント（例えば、エクソンスキッピング）の結果としてカノニカル転写物オープンリーディングフレームが保存されるとき、Ｃ末端配列は、Ｃ末端８アミノ酸をコードする更なる２４ヌクレオチドが翻訳され得る。これに関連して、一部の実施形態では、異常エクソンジャンクションにまたがる領域のみがネオ抗原配列をコードし得る。一部の実施形態において、オープンリーディングフレームがシフトするとき（例えば、イントロンリテンション）、完全なＣ末端配列（３’ｍＲＮＡによってコードされる）がネオ抗原配列をコードし得る。
一部の実施形態において、ネオ抗原配列の抗原性部分は、ネオ抗原配列をカノニカルペプチド配列と比較すること；及びカノニカルペプチド配列と排他的に重複しない、それからならない、及び／又はそれとアラインメントしないネオ抗原配列中の一部分を選び出すことにより選択される。ネオ抗原配列の抗原性部分は、一部の実施形態では、完全長ネオ抗原配列（例えば、抗原性部分の由来であるネオ抗原配列）と同じようにして抗原性及び／又はＴ細胞プライミング機能に関してスクリーニングすることができる。一部の実施形態において、ネオ抗原配列の抗原性部分は、本明細書に記載される例示的Ｔ細胞プライミング実験など、Ｔ細胞プライミングアッセイを用いて抗原性及び／又はＴ細胞プライミング機能が評価される。
一部の実施形態において、ネオ抗原配列は、対象に特異的なネオ抗原配列である。一部の実施形態において、ネオ抗原配列は、対象向けに個別化されたネオ抗原ワクチンである。一部の実施形態において、対象向けに個別化されたネオ抗原ワクチンの作成に使用されるネオ抗原配列は、対象に発現する少なくとも１つのＨＬＡアレルに結合する能力を有する。一部の実施形態において、個別化されたネオ抗原ワクチンは、例えばハーボキシジエンスプライシング調節薬又はＡＤＣの投与後に、対象の腫瘍に発現するネオ抗原を同定し、及び患者の腫瘍に認められるネオ抗原配列を含むワクチンを選択することにより選択される。
用語「個別化された」は、ネオ抗原ワクチンについての記載に使用されるとき、患者において産生される１つ以上のネオ抗原、好ましくは患者においてハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又は組成物への曝露後に同定されるものを同定し、次にそれらのネオ抗原のうちの１つ以上を同じ患者用のワクチンのベースとして使用することにより作成されるワクチンを指す。従って、一部の実施形態では、患者にハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又は組成物を与え、その治療によって産生されたネオ抗原に関してスクリーニングする。一部の実施形態において、選択されたネオ抗原ワクチンは、本明細書に開示される、且つハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又は組成物への曝露後に患者に存在することが確認されたネオ抗原ペプチド又はｍＲＮＡを含む。一部の実施形態において、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、若しくは組成物及び／又はペプチド若しくはｍＲＮＡワクチンは患者に１回又は反復して投与されてもよい。その後、一部の実施形態では、それらのネオ抗原のうちの１つ以上を使用して、患者に与える個別化されたワクチンが作成される。一部の実施形態において、個別化されたワクチンの作成に使用される１つ以上のネオ抗原は、１つ以上の患者特異的ＨＬＡアレルに対して結合親和性を有する。一部の実施形態において、患者は、１つ以上のネオ抗原に結合する１つ以上のＭＨＣ１アレルを発現する。所与のネオ抗原が特異的ＭＨＣ１アレルに結合するかどうかの予測は、当該技術分野において公知の任意の計算的予測方法を用いて決定することができる。例示的な計算的予測方法については、例えば、Ｍｅｙｄａｎ ｅｔ ａｌ．（２０１３）ＢＭＣ Ｂｉｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ １４（Ｓｕｐｐｌ．２）：Ｓ１３（これは、かかる方法について参照により本明細書に援用される）に開示されている。
一部の他の実施形態において、ネオ抗原配列はユニバーサルネオ抗原配列である。一部の実施形態において、ネオ抗原配列はユニバーサルネオ抗原ワクチンである。
用語「ユニバーサル」は、ネオ抗原ワクチンについての記載に使用されるとき、好ましくはハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又は組成物への曝露後に、複数の患者及び／又は患者組織試料において産生されるネオ抗原をシーケンシングすることによって認められる共通の又は既知の１つ又は複数のネオ抗原をベースとするペプチド又はｍＲＮＡ配列を有するワクチンを指す。ワクチンに使用されるペプチド又はｍＲＮＡ配列があらゆる患者に存在する必要はなく、むしろ少なくとも一部の患者又は患者組織試料に認められることで十分である。一部の実施形態において、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、若しくは組成物及び／又はペプチド若しくはｍＲＮＡワクチンは患者に１回又は反復して投与されてもよい。その後、一部の実施形態では、当該のペプチド又はｍＲＮＡ配列が更なる患者のワクチン接種に使用される。一部の実施形態では、患者にハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又は組成物を与え、次に既知のネオ抗原のペプチド又はｍＲＮＡワクチンを与えることにより、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又は組成物によって産生されるネオ抗原に対する免疫応答を亢進させる。一部の実施形態では、患者にユニバーサルペプチド又はｍＲＮＡワクチンを与え、次にハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又は組成物を１回又は反復して与える。一部の実施形態において、ユニバーサルネオ抗原ワクチンの作成に使用される１つ又は複数のネオ抗原配列は、所与の患者集団における全体的なＭＨＣ１アレル頻度に基づき選択される（Ｍａｉｅｒｓ ｅｔ ａｌ．（２００７）Ｈｕｍ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．６８（９）：７７９－８８）。
一部の実施形態において、ネオ抗原（例えば、ユニバーサルネオ抗原）配列は、新生物障害に罹患している対象集団中の対象の少なくとも１０％、少なくとも１５％、少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、又は少なくとも４５％に発現する少なくとも１つのＨＬＡアレルに結合する能力を有する。一部の実施形態において、ネオ抗原配列は、新生物障害に罹患している対象集団の少なくとも１％、少なくとも５％、又は少なくとも１０％に存在する腫瘍に対するＴ細胞応答を誘発する能力を有する。
一部の実施形態において、ネオ抗原配列は、有効量のハーボキシジエンスプライシング調節薬、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物を投与することにより対象において誘導される少なくとも１つのネオ抗原ペプチド、又はそのコードｍＲＮＡをシーケンシングすることによって同定されている。一部の実施形態において、少なくとも１つのネオ抗原ペプチドは、有効量のハーボキシジエンスプライシング調節薬、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物を新生物細胞に接触させることにより誘導されるネオ抗原配列を含む。一部の実施形態において、新生物細胞はインビトロ細胞培養物中に存在する。一部の実施形態において、新生物細胞は対象から入手される。一部の実施形態において、新生物細胞は対象に存在する。
一部の実施形態において、ネオ抗原ワクチンは、少なくとも１つのネオ抗原ペプチドと、薬学的に許容可能な担体（例えば、本明細書に記載される例示的担体のいずれか）とを含む。一部の実施形態において、少なくとも１つのネオ抗原ペプチドは薬学的に許容可能な担体に連結される。一部の実施形態において、薬学的に許容可能な担体は、ペプチド、血清アルブミン、キーホールリンペットヘモシアニン、免疫グロブリン、チログロブリン、オボアルブミン、トキソイド又は弱毒化トキソイド誘導体、サイトカイン、及びケモカインから選択される。一部の実施形態において、ネオ抗原ペプチドと薬学的に許容可能な担体とはリンカーを介して共有結合的に結び付けられる。一部の実施形態において、ネオ抗原ペプチドと薬学的に許容可能な担体とは融合タンパク質として発現する。一部の実施形態において、ネオ抗原ワクチンは、少なくとも１つのネオ抗原ペプチドと薬学的に許容可能な希釈剤とを含む。一部の実施形態において、ネオ抗原ワクチンは、少なくとも１つのネオ抗原ペプチドと薬学的に許容可能なアジュバントとを含む。
一部の実施形態において、ネオ抗原ワクチンは少なくとも１つのネオ抗原ｍＲＮＡを含む。一部の実施形態において、少なくとも１つのネオ抗原ｍＲＮＡは１つ又は２つ以上のネオ抗原配列をコードする。
一部の実施形態において、ネオ抗原配列は、対象に特異的なネオ抗原配列である。一部の実施形態において、ネオ抗原配列は、対象向けに個別化されたネオ抗原ワクチンである。一部の実施形態において、ネオ抗原配列は、対象に発現する少なくとも１つのＨＬＡアレルに結合する能力を有する。
一部の他の実施形態において、ネオ抗原配列はユニバーサルネオ抗原配列である。一部の実施形態において、ネオ抗原配列はユニバーサルネオ抗原ワクチンである。一部の実施形態において、ネオ抗原配列は、新生物障害に罹患している対象集団中の対象の少なくとも１０％、少なくとも１５％、少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、又は少なくとも４５％に発現する少なくとも１つのＨＬＡアレルに結合する能力を有する。一部の実施形態において、ネオ抗原配列は、新生物障害に罹患している対象集団の少なくとも１％、少なくとも５％、又は少なくとも１０％に存在する腫瘍に対するＴ細胞応答を誘発する能力を有する。
一部の実施形態において、ネオ抗原配列は、少なくとも１つのネオ抗原のタンパク質配列をシーケンシングすることによって同定されている。一部の実施形態において、ネオ抗原配列は、有効量のハーボキシジエンスプライシング調節薬、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物を投与することにより対象において誘導されるネオ抗原をコードする少なくとも１つのｍＲＮＡをシーケンシングすることによって同定されている。一部の実施形態において、少なくとも１つのネオ抗原ｍＲＮＡは、有効量のハーボキシジエンスプライシング調節薬、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物を新生物細胞に接触させることにより誘導されるネオ抗原配列をコードする。一部の実施形態において、新生物細胞はインビトロ細胞培養物中に存在する。一部の実施形態において、新生物細胞は対象から入手される。一部の実施形態において、新生物細胞は対象に存在する。
一部の実施形態において、ネオ抗原ワクチンは、少なくとも１つのネオ抗原ｍＲＮＡと、薬学的に許容可能な担体（例えば、本明細書に記載される例示的担体のいずれか）とを含む。一部の実施形態において、少なくとも１つのネオ抗原ｍＲＮＡは薬学的に許容可能な担体に連結される。一部の実施形態において、薬学的に許容可能な担体は、ペプチド、血清アルブミン、キーホールリンペットヘモシアニン、免疫グロブリン、チログロブリン、オボアルブミン、トキソイド又は弱毒化トキソイド誘導体、サイトカイン、及びケモカインから選択される。一部の実施形態において、ネオ抗原ワクチンは、少なくとも１つのネオ抗原ｍＲＮＡと薬学的に許容可能な希釈剤とを含む。一部の実施形態において、ネオ抗原ワクチンは、少なくとも１つのネオ抗原ｍＲＮＡと薬学的に許容可能なアジュバントとを含む。一部の実施形態において、ネオ抗原ｍＲＮＡは封入剤に封入される。一部の実施形態において、封入剤はリポソームである。一部の実施形態において、封入剤はナノ粒子である。
一部の実施形態において、少なくとも１つの追加療法は、サイトカイン又はサイトカイン類似体、例えば、本明細書に開示される任意のサイトカイン又はサイトカイン類似体を投与することを含む。一部の実施形態において、対象は、単独投与時のサイトカイン又はサイトカイン類似体に不忍容、不応性、又は難反応性である。一部の実施形態において、サイトカイン又はサイトカイン類似体はＴ細胞エンハンサーを含む。一部の実施形態において、サイトカイン又はサイトカイン類似体は、ＩＬ－２、ＩＬ－１０、ＩＬ－１２、ＩＬ－１５、ＩＦＮγ、及び／又はＴＮＦαを含む。一部の実施形態において、サイトカイン又はサイトカイン類似体は、ＩＬ－２、ＩＬ－１０、ＩＬ－１２、及び／又はＩＬ－１５を含む。一部の実施形態において、サイトカイン又はサイトカイン類似体を投与すると、ネオ抗原の誘導及び提示に起因して、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物の投与後のＴ細胞プライミングが亢進する。
一部の実施形態において、少なくとも１つの追加療法は、改変腫瘍標的化Ｔ細胞（即ち、ＣＡＲ－Ｔ）、例えば、本明細書に開示される任意のＣＡＲ－Ｔ療法を投与することを含む。
一部の実施形態において、本明細書に記載される方法は、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物の投与後に対象において１つ以上のネオ抗原及び／又はＴ細胞応答を検出すること、及び、任意選択で、１つ以上のネオ抗原及び／又はＴ細胞応答が検出された場合、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物の投与を継続することを更に含み得る。一部の実施形態において、対象における１つ以上のネオ抗原及び／又はＴ細胞応答の検出により、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物による治療の有効性が指示される。一部の実施形態において、１つ以上のネオ抗原及び／又はＴ細胞応答が検出された場合、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物と併せて、追加療法による治療が継続される。一部の実施形態において、１つ以上のネオ抗原及び／又はＴ細胞応答が検出された場合、低減した投薬量及び／又は頻度で治療が継続される。
一部の実施形態において、本明細書に記載される方法は、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物の投与後に対象において二本鎖ＲＮＡ免疫応答を検出すること、及び、任意選択で、二本鎖ＲＮＡ免疫応答が検出された場合、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物の投与を継続することを更に含み得る。一部の実施形態において、対象における二本鎖ＲＮＡ免疫応答の検出により、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物による治療の有効性が指示される。一部の実施形態において、二本鎖ＲＮＡ免疫応答が検出された場合、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物と併せて、追加療法による治療が継続される。一部の実施形態において、二本鎖ＲＮＡ免疫応答が検出された場合、低減した投薬量及び／又は頻度で治療が継続される。
一部の実施形態において、本明細書に記載される方法は、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物の投与後に対象において免疫原性細胞死を検出すること、及び、任意選択で、免疫原性細胞死が検出された場合、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物の投与を継続することを更に含み得る。一部の実施形態において、対象における免疫原性細胞死の検出により、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物による治療の有効性が指示される。一部の実施形態において、免疫原性細胞死が検出された場合、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物と併せて、追加療法による治療が継続される。一部の実施形態において、免疫原性細胞死が検出された場合、低減した投薬量及び／又は頻度で治療が継続される。
一部の実施形態において、対象は約１５０個以下の突然変異の非同義突然変異荷重を有する。一部の実施形態において、対象は約１００個以下の突然変異の非同義突然変異荷重を有する。一部の実施形態において、対象は約５０個以下の突然変異の非同義突然変異荷重を有する。一部の実施形態において、対象は、新生物障害、例えば、血液学的悪性腫瘍又は固形腫瘍を有するか、又はそれを有する疑いがある。一部の実施形態において、血液学的悪性腫瘍は、Ｂ細胞悪性腫瘍、白血病、リンパ腫、及び骨髄腫から選択される。一部の実施形態において、血液学的悪性腫瘍は、急性骨髄性白血病及び多発性骨髄腫から選択される。一部の実施形態において、固形腫瘍は、乳癌、胃癌、前立腺癌、卵巣癌、肺癌、子宮癌、唾液管癌、黒色腫、結腸癌、子宮頸癌、膵癌、腎癌、結腸直腸癌、及び食道癌から選択される。一部の実施形態において、固形腫瘍は、ＨＥＲ２陽性乳癌、胃腺癌、前立腺癌、及び骨肉腫から選択される。
様々な実施形態において、本開示は、新生物障害を有する又は有する疑いがある対象を治療する方法であって、（ａ）有効量のハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又はハーボキシジエンスプライシング調節薬若しくはＡＤＣを含む組成物を対象に投与することであって、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物の投与が少なくとも１つのネオ抗原及び／又はＴ細胞応答を誘導すること；（ｂ）ハーボキシジエンスプライシング調節薬、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物の投与後に対象において１つ以上のネオ抗原及び／又はＴ細胞応答を検出すること；及び（ｃ）１つ以上のネオ抗原及び／又はＴ細胞応答が検出された場合、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物の投与を継続することを含む方法を更に提供する。一部の実施形態において、対象における１つ以上のネオ抗原及び／又はＴ細胞応答の検出により、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物による治療の有効性が指示される。一部の実施形態において、１つ以上のネオ抗原は配列番号３７～６５のいずれか１つのアミノ酸配列を含む。一部の実施形態において、１つ以上のネオ抗原は配列番号３７のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態において、１つ以上のネオ抗原は配列番号３９のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態において、１つ以上のネオ抗原は配列番号４６～４９のいずれか１つのアミノ酸配列を含む。
ハーボキシジエンスプライシング調節薬／ＡＤＣと免疫チェックポイント阻害との併用：
様々な実施形態において、本明細書に記載されるとおりの癌を有する患者は、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又は組成物とチェックポイント阻害薬療法との併用で治療することができる。免疫チェックポイントは、免疫応答を減速又は停止させて、免疫細胞の無制御な活性による過剰な組織損傷を防ぐ抑制経路である。本明細書で使用されるとき、用語「チェックポイント阻害薬」は、こうした抑制経路のうちの１つ以上を阻害し、それにより更なる広範な免疫活性を可能にする、任意の小分子化学的化合物、抗体、核酸分子、又はポリペプチド、又はその任意の断片を含めた任意の療法剤を指すことが意図される。
様々な実施形態において、本明細書に記載されるとおりの癌を有する患者は、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又は組成物とチェックポイント阻害薬療法との併用で治療することができる。免疫チェックポイントは、免疫応答を減速又は停止させて、免疫細胞の無制御な活性による過剰な組織損傷を防ぐ抑制経路である。本明細書で使用されるとき、用語「チェックポイント阻害薬」は、こうした抑制経路のうちの１つ以上を阻害し、それにより更なる広範な免疫活性を可能にする、任意の小分子化学的化合物、抗体、核酸分子、又はポリペプチド、又はその任意の断片を含めた任意の療法剤を指すことが意図される。
免疫チェックポイント阻害による患者の治療は、ある種の臨床適応にロバストな有効性を有することが示されている。最近になって、ＦＤＡは、組織系統に依存せず、高マイクロサテライト不安定性を呈する腫瘍を有する患者におけるチェックポイント阻害薬の使用を承認した。この承認は、一部には、奏効率が突然変異荷重と正の相関関係にあるという観察に基づくものであった（Ｒｉｚｖｉ ｅｔ ａｌ．（２０１５）Ｓｃｉｅｎｃｅ ３４８（６２３０）：１２４－８；Ｈｅｌｌｍａｎｎ ｅｔ ａｌ．（２０１８）Ｃａｎｃｅｒ Ｃｅｌｌ ３３（５）：８５３－８６１）。文献からの推定では、絶対数の点で、及び系統毎にばらつきがあるが、概して、約１５０～２５０個の突然変異の閾値を上回ると奏効確率が上昇することが裏付けられる。ＴＣＧＡデータの分析が示すところによれば、成人発症型腫瘍系統の大部分が比較的低い非同義突然変異荷重を有する（Ｖｏｇｅｌｓｔｅｉｎ ｅｔ ａｌ．（２０１３）Ｓｃｉｅｎｃｅ ３３９：１５４９－５８）。ほとんどの系統について、非同義突然変異率中央値は、チェックポイント阻害薬の奏効可能性が向上する閾値をはるかに下回る患者１人当たり約３０～８０である。
例えば、ＨＥＲ２陽性乳癌は、患者試料１例当たりに存在する非同義突然変異の中央値が約６０個であることが示されている。しかしながら、上述のとおり、チェックポイント阻害薬の治療有効性閾値は約１５０～２５０個の非同義突然変異の範囲であると推定され、即ち、この閾値を上回る患者は、完全寛解、部分寛解、及び／又は病勢安定を示す可能性が高く、一方、この閾値を下回る患者は病勢進行を呈する可能性が高い。従って、腫瘍細胞上に提示される見かけ上の非同義突然変異数及び／又はネオ抗原数を亢進させる戦略が望ましく、それにより例えばチェックポイント阻害薬療法の全体的な奏効確率が亢進し得る。サイトカイン（及びその類似体）も同様の作用機序によって働くため、かかる戦略は、サイトカインベースの療法の全体的な奏効確率もまた亢進させ得る。
ＨＥＲ２陽性乳癌における現在の奏効率は約１５～２５％である（ＣＴＩ ＮＣＴ０２１２９５５６）。本明細書に開示される様々な実施形態において、チェックポイント阻害薬及び／又はサイトカイン療法と併用したハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又は組成物による治療によれば、かかる奏効率が向上し得る。様々な実施形態において、チェックポイント阻害薬及び／又はサイトカイン療法と併用したハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又は組成物による治療は、任意の成人発症型腫瘍、特に非同義突然変異率中央値が推定約１５０個の突然変異の閾値を下回るものに適用され得る。様々な実施形態において、単独での、又は追加療法（例えば、チェックポイント阻害薬療法、サイトカイン療法）との併用での本開示のハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又は組成物による治療に好適な例示的癌種としては、限定はされないが、食道癌、非ホジキンリンパ腫、結腸直腸癌、頭頸部癌、胃癌、子宮内膜癌、膵臓腺癌、卵巣癌、前立腺癌、肝細胞癌、膠芽腫、乳癌（例えば、ＨＥＲ２陽性乳癌）、肺癌（例えば、非小細胞肺癌）、慢性リンパ球性白血病、及び急性骨髄性白血病が挙げられる。他の例示的な好適な癌種は、例えば、Ｖｏｇｅｌｓｔｅｉｎ ｅｔ ａｌ．（２０１３）Ｓｃｉｅｎｃｅ ３３９：１５４９－５８（これは全体として参照により本明細書に援用される）に特定されている。
多くのチェックポイント阻害薬療法が慢性的な腫瘍関連抗原発現に基づくことに伴い、有効性のため、及び応答性Ｔ細胞集団の「再ブースト」のため、定期的な治療ブーストが必要である。本明細書に記載されるハーボキシジエンスプライシング調節薬又はＡＤＣ由来ネオ抗原の誘導可能な性質から、慢性的抗原刺激によって引き起こされることの多いＴ細胞枯渇を抑えつつ、ネオ抗原応答性Ｔ細胞の免疫応答を亢進させるように設計され得る治療的投与レジメンが提供される。例えば、一部の実施形態では、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又は組成物の初回用量を対象に投与して、異常スプライシング及びネオ抗原ペプチドの産生を惹起する。タンパク質産生及び抗原提示に十分な時間の経過後、一部の実施形態では、次に対象にチェックポイント阻害薬の初回用量を投与して、エフェクターＴ細胞プライミング及び拡大をブーストし、及び／又は亢進させる。一部の実施形態において、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又は組成物とチェックポイント阻害薬との用量間の待機期間は、約２、約３、約４、約５、約６、又は約７日である。一部の実施形態において、待機期間は約３日～約５日である。一部の実施形態において、チェックポイント阻害薬は、ＣＴＬＡ４、ＯＸ４０、ＣＤ４０、及び／又はＧＩＴＲを標的化する。一部の実施形態において、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又は組成物とチェックポイント阻害薬との併用療法利益は相加的又は超相加的であり得る。
一部の実施形態において、Ｔ細胞プライミング及び拡大に十分な期間の経過後、次に対象に、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又は組成物の第２の用量又は後続用量を投与して、ネオ抗原ペプチドの再提示を惹起する。一部の実施形態において、チェックポイント阻害薬の初回用量と、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又は組成物の第２の用量又は後続用量との間の待機期間は、約２、約３、約４、又は約５週間である。一部の実施形態において、待機期間は約３週間である。ハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又は組成物の第２の用量又は後続用量を受けて、一部の実施形態では、免疫系がネオ抗原提示腫瘍細胞に会合し、及び／又は腫瘍細胞殺傷を誘発し得る。一部の実施形態では、二次的Ｔ細胞プライミング及び拡大を可能にした後、次に対象にチェックポイント阻害薬の第２の用量又は後続用量が投与され、記憶エフェクターＴ細胞集団が更に拡大される。
一部の実施形態において、この例示的初期治療レジメンに続くハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又は組成物の投与はパルス投与であることができ、即ち、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又は組成物は、抗原提示、Ｔ細胞会合及び／又は腫瘍細胞殺傷、及び／又は記憶Ｔ細胞集団の回復に十分な長い間隔で（例えば、約４週間毎、約５週間毎、約６週間毎に）投与されてもよい。後の時点で、一部の実施形態では、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又は組成物治療は、枯渇したＴ細胞集団へのエフェクター機能の回復を標的化する１つ以上のチェックポイント阻害薬と併用されてもよい。例えば、一部の実施形態では、後の時点で、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又は組成物治療は、ＰＤ１／ＰＤＬ１、ＬＡＧ３、及び／又はＴＩＭ３を標的化する１つ以上のチェックポイント阻害薬と併用されてもよい。一部の実施形態において、ネオ抗原提示及びプライミングがパルス状の性質であることにより、チェックポイント阻害薬及び／又はハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又は組成物を低い頻度及び／又は低い用量で投与することが可能となり得る。一部の実施形態において、ネオ抗原提示がパルス状の性質であることにより、同時のハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又は組成物治療なしに投与したときのチェックポイント阻害薬と比較すると、例えば、チェックポイント阻害薬の標準的な投与レジメンで観察されることの多い有害反応の潜在的リスクが低下することにより、チェックポイント阻害薬（例えば、イピリムマブなどの抗ＣＴＬＡ４抗体）に１つ以上の治療利益がもたらされ得る。
特定の実施形態において、チェックポイント阻害薬は、細胞傷害性Ｔリンパ球関連抗原（ＣＴＬＡ４）経路の阻害薬である。ＣＴＬＡ４は、ＣＤ１５２としても知られ、免疫応答を下方制御するタンパク質受容体である。ＣＴＬＡ４は制御性Ｔ細胞に構成的に発現するが、従来のＴ細胞では活性化後にのみ上方制御される。本明細書で使用されるとき、用語「ＣＴＬＡ４阻害薬」とは、ＣＴＬＡ４及び／又はＣＴＬＡ４経路の任意の阻害薬を指すことが意図される。例示的ＣＴＬＡ４阻害薬としては、限定はされないが、抗ＣＴＬＡ４抗体が挙げられる。ヒトにおける使用のためのＣＴＬＡ４遮断抗体は、抗腫瘍免疫のマウスモデルで見られる前臨床活性に基づき開発された。例示的抗ＣＴＬＡ４抗体としては、限定はされないが、イピリムマブ（ＭＤＸ－０１０）及びトレメリムマブ（ＣＰ－６７５，２０６）が挙げられ、これらは両方とも完全ヒトである。イピリムマブは、血漿中半減期が約１２～１４日のＩｇＧ１である；トレメリムマブは、血漿中半減期が約２２日のＩｇＧ２である。例えば、Ｐｈａｎ ｅｔ ａｌ．（２００３）Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ．１００：８３７２－７；Ｒｉｂａｓ ｅｔ ａｌ．（２００５）Ｊ Ｃｌｉｎ Ｏｎｃｏｌ．２３：８９６８－７７；Ｗｅｂｅｒ ｅｔ ａｌ．（２００８）Ｊ Ｃｌｉｎ Ｏｎｃｏｌ．２６：５９５０－６を参照のこと。一部の実施形態において、抗ＣＴＬＡ４抗体はイピリムマブである。
特定の実施形態において、チェックポイント阻害薬は、プログラム死－１（ＰＤ１）経路の阻害薬である。プログラム細胞死１（ＰＤ１）経路は、腫瘍細胞が活性Ｔ細胞免疫監視を切り抜けるため会合し得る主要な免疫制御スイッチに相当する。ＰＤ１のリガンド（ＰＤＬ１及びＰＤＬ２）は様々な腫瘍に構成的に発現し、又は誘導され得る。腫瘍細胞上でのＰＤＬ１（及び程度は低いがＰＤＬ２）の高発現は、様々な他の固形腫瘍種における予後及び生存不良と相関することが分かっている。更に、ＰＤ１は、悪性黒色腫患者において腫瘍特異的Ｔ細胞拡大を制御することが示唆されている。これらの観察は、ＰＤ１／ＰＤＬ１経路が腫瘍免疫回避において決定的な役割を果たすものであり、治療介入に魅力的な標的と見なし得ることを示唆している。本明細書で使用されるとき、用語「ＰＤ１阻害薬」は、ＰＤ１及び／又はＰＤ１経路の任意の阻害薬を指すことが意図される。例示的ＰＤ１阻害薬としては、限定はされないが、抗ＰＤ１及び抗ＰＤＬ１抗体が挙げられる。特定の実施形態において、チェックポイント阻害薬は抗ＰＤ１抗体である。例示的抗ＰＤ１抗体としては、限定はされないが、ニボルマブ及びペンブロリズマブ（ＭＫ－３４７５）が挙げられる。例えば、ニボルマブは、ＰＤ１受容体とそのリガンドＰＤＬ１及びＰＤＬ２との相互作用、それによる細胞性免疫応答の抑制を破綻させる完全ヒト免疫グロブリンＧ４（ＩｇＧ４）ＰＤ１免疫チェックポイント阻害薬抗体である（Ｇｕｏ ｅｔ ａｌ．（２０１７）Ｊ Ｃａｎｃｅｒ ８（３）：４１０－６）。一部の実施形態において、抗ＰＤ１抗体はニボルマブである。例えば、ペンブロリズマブは、ＰＤ１とそのリガンドＰＤＬ１及びＰＤＬ２との間の相互作用を直接遮断するように設計されたＩｇＧ４／κアイソタイプの強力で高度に選択的なヒト化ｍＡｂである。ペンブロリズマブは、健康ヒトドナー、癌患者、及び霊長類からの培養血液細胞においてＴリンパ球免疫応答を強力に亢進させる。ペンブロリズマブはまた、インターロイキン－２（ＩＬ－２）、腫瘍壊死因子α（ＴＮＦα）、インターフェロンγ（ＩＦＮγ）、及び他のサイトカインのレベルを調節することも報告されている。例示的抗ＰＤＬ１抗体としては、限定はされないが、アテゾリズマブ、アベルマブ、及びデュルバルマブが挙げられる。例えば、アテゾリズマブは、非常に多くの種類の悪性細胞上に発現するＰＤＬ１を標的化することによりＰＤ１／ＰＤＬ１相互作用を遮断することが報告されているＩｇＧ１ヒト化ｍＡｂである。ＰＤ１／ＰＤＬ１経路のこの遮断は、抗腫瘍免疫防御機構を刺激し得る（Ａｂｄｉｎ ｅｔ ａｌ．（２０１８）Ｃａｎｃｅｒｓ（Ｂａｓｅｌ）１０（２）：３２）。一部の実施形態において、抗ＰＤＬ１抗体はアテゾリズマブである。
特定の実施形態において、チェックポイント阻害薬は、ＰＤ１／ＰＤＬ１、ＣＴＬＡ４、ＯＸ４０、ＣＤ４０、ＬＡＧ３、ＴＩＭ３、ＧＩＴＲ、及び／又はＫＩＲを標的化する。特定の実施形態において、チェックポイント阻害薬は、ＣＴＬＡ４、ＯＸ４０、ＣＤ４０、及び／又はＧＩＴＲを標的化する。特定の実施形態において、チェックポイント阻害薬は、阻害抗体又は他の類似の阻害性分子（例えば、阻害性抗ＣＴＬＡ４又は抗ＰＤ１／ＰＤＬ１抗体）で標的化する。特定の他の実施形態において、チェックポイント阻害薬は、標的のアゴニストで標的化する；このクラスの例としては、刺激性標的ＯＸ４０、ＣＤ４０、及び／又はＧＩＴＲが挙げられる。一部の実施形態において、ＯＸ４０、ＣＤ４０、及び／又はＧＩＴＲを標的化するチェックポイント阻害薬は、アゴニスト抗体である。ＯＸ４０に仕向けられるアゴニスト抗体は、制御性Ｔ細胞抑制を阻害することと、一方でエフェクターＴ細胞機能を亢進させることとの二重の役割を有し得る。アゴニスト抗ＧＩＴＲ抗体はまた、制御性Ｔ細胞によって誘導される抑制に対するエフェクターＴ細胞の抵抗性を高めることも示されている（Ｋａｒａｋｉ ｅｔ ａｌ．（２０１６）Ｖａｃｃｉｎｅｓ（Ｂａｓｅｌ）４（４）：３７）。同様に、アゴニストＣＤ４０抗体はＴ細胞依存的抗腫瘍活性も実証している。樹状細胞上でＣＤ４０が活性化すると、腫瘍抗原の交差提示が増加し、結果的に活性化腫瘍標的化エフェクターＴ細胞の数が増加する（Ｅｌｌｍａｒｋ ｅｔ ａｌ．（２０１５）Ｏｎｃｏｉｍｍｕｎｏｌ．４（７）：ｅ１０１１４８４）。
特定の実施形態において、チェックポイント阻害薬はＣＴＬＡ４を標的化する（例えば、抗ＣＴＬＡ４抗体）。特定の実施形態において、ＣＴＬＡ４の標的化は、ナイーブＴ細胞のプライミング及び活性化を促進する。特定の実施形態において、チェックポイント阻害薬はＯＸ４０を標的化する（例えば、抗ＯＸ４０抗体）。特定の実施形態において、ＯＸ４０の標的化は、エフェクターＴ細胞の拡大を亢進させる。特定の実施形態において、チェックポイント阻害薬はＣＤ４０を標的化する（例えば、抗ＣＤ４０抗体）。特定の実施形態において、ＣＤ４０の標的化は、Ｔ細胞の「寛容原性」プライミング及び／又は制御性Ｔ細胞の形成を阻害する。特定の実施形態において、チェックポイント阻害薬はＧＩＴＲを標的化する（例えば、抗ＧＩＴＲ抗体）。特定の実施形態において、ＧＩＴＲの標的化は、制御性Ｔ細胞の活性を阻害する。特定の実施形態において、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又は組成物とＣＴＬＡ４標的化、ＯＸ４０標的化、ＣＤ４０標的化、及び／又はＧＩＴＲ標的化薬剤とによる併用療法の利益（例えば、少なくとも１つの症状又は疾患進行リスク／速度に及ぼす効果）は相加的である。一部の実施形態において、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又は組成物とＣＴＬＡ４標的化、ＯＸ４０標的化、ＣＤ４０標的化、及び／又はＧＩＴＲ標的化薬剤とによる併用療法の利益は超相加的（即ち、相乗的）である。
チェックポイント阻害薬治療戦略は、抗原性が弱い又は低い腫瘍に対するＴ細胞応答のプライミングが治療によって促進される及び／又は亢進するか（例えば、ＣＴＬＡ４）、又は腫瘍抗原に応答するが、抗原提示の慢性的性質に起因して「枯渇した」状態になったＴ細胞が治療によって回復する及び／又は再活性化する（例えば、ＰＤ１、ＰＤＬ１）という仮説に基づく（Ｃｈｅｎ ａｎｄ Ｍｅｌｌｍａｎ（２０１３）Ｉｍｍｕｎｉｔｙ ３９（１）：１－１０）。好適なチェックポイント阻害療法及び薬剤の例、例えば、抗ＰＤ１、抗ＰＤＬ１、又は抗ＣＴＬＡ４抗体については、当該技術分野において公知である。例えば、国際公開第２００１／０１４４２４号パンフレット 国際公開第２０１３／１７３２２３号パンフレット、国際公開第２０１６／００７２３５号パンフレットを参照のこと。
チェックポイント阻害薬療法後のこれらのプライミングされたＴ細胞応答と、プライミングされた免疫系が応答し得るネオ抗原を腫瘍細胞に誘導する治療との組み合わせは、有益な相乗作用をもたらし得る。ハーボキシジエンスプライシング調節薬又はＡＤＣから生じるネオ抗原は、Ｔ細胞プライミングのために提示されたことがまだないため、ＣＴＬＡ４阻害薬との併用が特に有益であり得る。一部の実施形態において、治療は、１つ以上のハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又は組成物を投与してネオ抗原の産生を誘導し、その前、それと同時、又はその後に、ＣＴＬＡ４阻害薬の初回投与を続けてＣＤ８ Ｔ細胞プライミングを刺激することを含む。一部の実施形態において、例えばネオ抗原応答性ＣＤ８集団のプライミング及び／又は活性化を更に刺激するため、ＣＴＬＡ４阻害薬の追加投与が患者に提供される。一部の実施形態において、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又は組成物の追加投与を患者に与えることにより、腫瘍によるネオ抗原提示を増加させることができる。ハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又は組成物及びチェックポイント阻害薬療法の反復投与は、同時に、又は時間をずらした間隔で行うことができる。一部の実施形態において、治療は、ＰＤ１／ＰＤＬ１阻害薬共治療を投与することであって、例えばそれにより腫瘍微小環境内で枯渇したネオ抗原標的化Ｔ細胞のエフェクター機能を回復させることを更に含む。
用語「併用」又は「併用療法」は、本明細書で使用されるとき、１つ以上のハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又は組成物を追加の薬剤又は療法（例えば、チェックポイント阻害薬、サイトカイン又はサイトカイン類似体、ネオ抗原ワクチン、ＣＡＲ－Ｔ）と一緒に、投与される薬剤のうちの１つ以上の共作用による有益な（即ち、相加的又は相乗的な）効果を提供することを意図した治療レジメンの一環として投与することを指す。一部の実施形態において、併用にはまた、限定はされないが、化学療法剤、抗血管新生剤、及び免疫抑制を低減する薬剤（例えば、第２のチェックポイント阻害薬）を含めた１つ以上の追加の薬剤も含まれ得る。併用の有益な効果としては、限定はされないが、療法剤の併用によって生じる薬物動態学的又は薬力学的共作用が挙げられる。これらの療法剤の併用での投与は、典型的には、定義付けられた期間（例えば、選択の併用に応じて数分間、数時間、数日間、又は数週間）にわたって行われる。
「併用して」投与される又は「共投与」は、本明細書で使用されるとき、対象が医学的病態（例えば、新生物障害）に罹患している間に対象に２つ以上の異なる治療が送達されることを意味する。例えば、一部の実施形態では、２つ以上の治療は、対象が疾患又は障害と診断された後、且つその疾患又は障害が治癒又は消失する前か、又は対象がその疾患のリスクがあると同定されたとき、しかし対象がその症状を発症する前に送達される。一部の実施形態において、一方の治療の送達は、第２の治療の送達の開始時になおも行われており、そのため重複がある。一部の実施形態において、第１及び第２の治療は同時に開始される。この種の送達は、本明細書では時に、「同時」、「並行」、又は「併用」送達と称される。他の実施形態では、一方の治療の送達が第２の治療の送達の開始前に終わる。この種の送達は、本明細書では時に、「連続」又は「逐次」送達と称される。
一部の実施形態において、２つの治療（例えば、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又は組成物及びチェックポイント阻害薬）は同じ組成物中に含まれる。かかる組成物は、任意の適切な形態で、及び任意の好適な経路によって投与されてもよい。他の実施形態において、２つの治療（例えば、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又は組成物及びチェックポイント阻害薬）は、別個の組成物で、任意の適切な形態で、及び任意の好適な経路によって投与される。例えば、一部の実施形態では、ハーボキシジエンスプライシング調節薬又はＡＤＣを含む組成物及びチェックポイント阻害薬を含む組成物が、並行して、又はいずれの順序であれ異なる時点で逐次的に投与されてもよい；いずれの場合にも、それらは所望の治療的又は予防的効果をもたらすように時間的に十分に近接して投与されなければならない。
同時送達又は逐次送達のいずれの実施形態においても、併用投与であることにより、治療は一層有効となり得る。一部の実施形態において、第１の治療は、第２の治療がない中で第１の治療が投与されたならば見られたであろうよりも有効性が高く、例えば、より少ない第１の治療で（例えば、より低い用量で）等価な効果が見られる。一部の実施形態において、第１の治療は、症状、又は疾患若しくは障害に関連する他のパラメータの低減が、第２の治療がない中で第１の治療を送達して観察されるであろうよりも大きくなるなど有効性が高くなる。他の実施形態において、同様の状況が第２の治療でも観察される。一部の実施形態において、併用療法の利益（例えば、少なくとも１つの症状又は疾患進行リスク／速度に対する効果）は相加的である。一部の実施形態において、併用療法の利益は超相加的である。
様々な実施形態において、本開示は、新生物障害を有する又は有する疑いがある対象を、有効量のハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又はハーボキシジエンスプライシング調節薬若しくはＡＤＣを含む組成物；及び少なくとも１つの追加療法（例えば、チェックポイント阻害薬療法、サイトカイン又はサイトカイン類似体、ネオ抗原ワクチン、ＣＡＲ－Ｔ）を対象に投与することにより治療する方法を提供する。一部の実施形態において、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又は組成物の投与は、少なくとも１つのネオ抗原及び／又はＴ細胞応答を誘導する。一部の実施形態において、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又は組成物の投与は、二本鎖ＲＮＡ免疫応答を誘導する。一部の実施形態において、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又は組成物の投与は免疫原性細胞死を誘導する。一部の実施形態において、少なくとも１つの追加療法は、少なくとも１つ、少なくとも２つ、少なくとも３つ、少なくとも４つ、又は少なくとも５つの追加療法を含み得る。例えば、一部の実施形態では、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又は組成物は、２つのチェックポイント療法と併用して、即ち、２つの異なるチェックポイント阻害薬を使用して投与されてもよい。一部の他の実施形態において、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又は組成物は、チェックポイント阻害薬療法及びネオ抗原ワクチンと併用して投与されてもよい。
併用療法の一部の実施形態において、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物及び／又は少なくとも１つの追加療法の投与量は、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物及び／又は少なくとも１つの追加療法の標準的な投薬量と比較したとき、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、７５％、又は９０％低減される。一部の実施形態において、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物及び／又は少なくとも１つの追加療法は、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物及び／又は少なくとも１つの追加療法の標準的な投与レジメンと比較したとき、少なくとも１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、７５％、又は９０％低い頻度で投与される。一部の実施形態において、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物及び／又は少なくとも１つの追加療法の投与量及び／又は投薬量は、全身毒性の低下及び／又は忍容性の向上をもたらす。
一部の実施形態において、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物の投与は、少なくとも１つの追加療法の投与前に開始される。一部の実施形態において、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物の投与は、少なくとも１つの追加療法の投与後に開始される。一部の実施形態において、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物の投与は、少なくとも１つの追加療法の投与と同時に開始される。
一部の実施形態において、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物の投与は、初回投与後に少なくとも１回反復される。一部の実施形態において、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物の反復投与に使用される量は、初回投与に使用される量と比較したとき低減される。一部の実施形態において、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物の反復投与に使用される量は、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物の標準的な投薬量と比較したとき低減される。一部の実施形態において、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物の反復投与に使用される量は、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物の標準的な投薬量と比較したとき、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、７５％、又は９０％低減される。
一部の実施形態において、少なくとも１つの追加療法の投与は、初回投与後に少なくとも１回反復される。一部の実施形態において、少なくとも１つの追加療法の反復投与に使用される量は、初回投与に使用される量と比較したとき低減される。一部の実施形態において、少なくとも１つの追加療法の反復投与に使用される量は、少なくとも１つの追加療法の標準的な投薬量と比較したとき低減される。一部の実施形態において、少なくとも１つの追加療法の反復投与に使用される量は、少なくとも１つの追加療法の標準的な投薬量と比較したとき、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、７５％、又は９０％低減される。
一部の実施形態において、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物の反復投与は、少なくとも１つの追加療法の反復投与と同時である。一部の実施形態において、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物の反復投与は、少なくとも１つの追加療法の反復投与と逐次的であるか、又は時間をずらされる。
様々な実施形態において、本開示は、新生物障害を有する又は有する疑いがある対象を、有効量のハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又はハーボキシジエンスプライシング調節薬若しくはＡＤＣを含む組成物；及びチェックポイント阻害薬療法を対象に投与することにより治療する方法を提供する。一部の実施形態において、チェックポイント阻害薬療法は、少なくとも１つのチェックポイント阻害薬を投与することを含む。一部の実施形態において、対象は、単独投与時の少なくとも１つのチェックポイント阻害薬に不忍容、不応性、又は難反応性である。一部の実施形態において、対象は、例えば、免疫関連効果評価基準（ｉｍｍｕｎｅ－ｒｅｌａｔｅｄ Ｒｅｓｐｏｎｓｅ Ｃｒｉｔｅｒｉａ：ｉｒＲＣ）及び／又は免疫関連固形癌効果評価基準（Ｒｅｓｐｏｎｓｅ Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ Ｃｒｉｔｅｒｉａ ｉｎ Ｓｏｌｉｄ Ｔｕｍｏｒｓ：ｉｒＲＥＣＩＳＴ）を用いて決定したとき、少なくとも１つのチェックポイント阻害薬に不応性又は難反応性であると見なされ得る。例えば、Ｗｏｌｃｈｏｋ ｅｔ ａｌ．（２００９）Ｃｌｉｎ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．１５（２３）：７４１２－２０；Ｂｏｈｎｓａｃｋ ｅｔ ａｌ．“Ａｄａｐｔａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ Ｉｍｍｕｎｅ－Ｒｅｌａｔｅｄ Ｒｅｓｐｏｎｓｅ Ｃｒｉｔｅｒｉａ：ｉｒＲＥＣＩＳＴ”（Ａｂｓｔｒａｃｔ ４９５８）ＥＳＭＯ ２０１４を参照のこと。例示的評価基準には、評価される治療が免疫腫瘍学的薬物（例えば、チェックポイント阻害薬）である場合に、治療中に癌患者の腫瘍が改善したとき（「奏効する」）、同じままであるとき（「安定化する」）、又は悪化したとき（「進行する」）を定義するため当該技術分野で用いられているものが含まれ得る。一部の実施形態において、それぞれのチェックポイント阻害薬（例えば、イピリムマブ）について特定される１つ又は２つ以上の有害な（グレード２以上の）事象が対象に見られる場合、その対象は少なくとも１つのチェックポイント阻害薬に不忍容と見なされ得る。一部の実施形態において、例えば、腸炎、肝炎、皮膚炎（中毒性表皮壊死症を含む）、ニューロパチー、及び内分泌病から選択される１つ以上の有害事象が対象に見られる場合、その対象はイピリムマブ治療に不忍容と見なされ得る（Ｙｅｒｖｏｙ（登録商標）（イピリムマブ）ＦＤＡ表示補足、２０１８）。
一部の実施形態において、チェックポイント阻害薬は、ＰＤ１／ＰＤＬ１、ＣＴＬＡ４、ＯＸ４０、ＣＤ４０、ＬＡＧ３、ＴＩＭ３、ＧＩＴＲ、及び／又はＫＩＲを標的化する。一部の実施形態において、チェックポイント阻害薬は、ＣＴＬＡ４、ＯＸ４０、ＣＤ４０、及び／又はＧＩＴＲを標的化する。一部の実施形態において、チェックポイント阻害薬は阻害抗体又は他の類似の阻害性分子で標的化する。一部の他の実施形態において、チェックポイント阻害薬はアゴニスト抗体又は他の類似のアゴニスト分子で標的化する。一部の実施形態において、チェックポイント阻害薬は細胞傷害性Ｔリンパ球関連抗原４経路（ＣＴＬＡ４）阻害薬を含む。一部の実施形態において、ＣＴＬＡ４阻害薬は抗ＣＴＬＡ４抗体である。一部の実施形態において、抗ＣＴＬＡ４抗体はイピリムマブである。一部の実施形態において、チェックポイント阻害薬はプログラム死－１経路（ＰＤ１）阻害薬を含む。一部の実施形態において、ＰＤ１阻害薬は抗ＰＤ１抗体である。一部の実施形態において、抗ＰＤ１抗体はニボルマブである。一部の実施形態において、ＰＤ１阻害薬は抗ＰＤＬ１抗体である。一部の実施形態において、抗ＰＤＬ１抗体はアテゾリズマブである。一部の実施形態において、チェックポイント阻害薬はＣＴＬＡ４阻害薬及びＰＤ１阻害薬を含む。一部の実施形態において、チェックポイント阻害薬はＯＸ４０を標的化する。一部の実施形態において、チェックポイント阻害薬はＣＤ４０を標的化する。一部の実施形態において、チェックポイント阻害薬はＧＩＴＲを標的化する。一部の実施形態において、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又は組成物とチェックポイント阻害薬（例えば、ＣＴＬＡ４標的化、ＰＤ１／ＰＤＬ１標的化、ＯＸ４０標的化、ＣＤ４０標的化、及び／又はＧＩＴＲ標的化抗体又は分子）とによる併用療法の利益（例えば、少なくとも１つの症状又は疾患進行リスク／速度に及ぼす効果）は相加的である。一部の実施形態において、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又は組成物とチェックポイント阻害薬（例えば、ＣＴＬＡ４標的化、ＰＤ１／ＰＤＬ１、ＯＸ４０標的化、ＣＤ４０標的化、及び／又はＧＩＴＲ標的化抗体又は分子）とによる併用療法の利益は超相加的（即ち、相乗的）である。
様々な実施形態において、本開示は、新生物障害を有する又は有する疑いがある対象を、有効量のハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又はハーボキシジエンスプライシング調節薬若しくはＡＤＣを含む組成物；及びサイトカイン又はサイトカイン類似体療法を対象に投与することにより治療する方法を提供する。一部の実施形態において、サイトカイン又はサイトカイン類似体療法は、少なくとも１つのサイトカイン又はサイトカイン類似体を投与することを含む。一部の実施形態において、対象は、単独投与時の少なくとも１つのサイトカイン又はサイトカイン類似体に不忍容、不応性、又は難反応性である。
一部の実施形態において、サイトカイン又はサイトカイン類似体はＴ細胞エンハンサーを含む。一部の実施形態において、サイトカイン又はサイトカイン類似体は、ＩＬ－２、ＩＬ－１０、ＩＬ－１２、ＩＬ－１５、ＩＦＮγ、及び／又はＴＮＦαを含む。一部の実施形態において、サイトカイン又はサイトカイン類似体は、ＩＬ－２、ＩＬ－１０、ＩＬ－１２、及び／又はＩＬ－１５を含む。一部の実施形態において、サイトカイン又はサイトカイン類似体を投与すると、ネオ抗原の誘導及び提示に起因して、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物の投与後のＴ細胞プライミングが亢進する。
一部の実施形態において、サイトカイン又はサイトカイン類似体はＩＬ－２を含む。一部の実施形態において、ＩＬ－２はエフェクター細胞へのシグナルをブーストしてその拡大を促進する（Ｒｏｓｅｎｂｅｒｇ（２０１４）Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ．１９２（１２）：５４５１－８）。一部の実施形態において、サイトカイン又はサイトカイン類似体はＩＬ－１０を含む。一部の実施形態において、ＩＬ－１０はＣＤ８＋ Ｔ細胞プライミング及び活性化をブーストする（Ｍｕｍｍ ｅｔ ａｌ．（２０１１）Ｃａｎｃｅｒ Ｃｅｌｌ ２０（６）：７８１－９６）。一部の実施形態において、サイトカイン又はサイトカイン類似体はＩＬ－１２を含む。一部の実施形態において、ＩＬ－１２は自然免疫応答と適応免疫応答とを結び付けて抗原特異的プライミング及びターゲティングをブーストする（Ｔｕｇｕｅｓ ｅｔ ａｌ．（２０１５）Ｃｅｌｌ Ｄｅａｔｈ Ｄｉｆｆｅｒ．２２（２）：２３７－４６）。一部の実施形態において、サイトカイン又はサイトカイン類似体はＩＬ－１５を含む。一部の実施形態において、ＩＬ－１５はＴエフェクター（ＣＤ８）細胞プライミング及び／又は活性化をブーストする。一部の実施形態において、サイトカイン又はサイトカイン類似体はＩＦＮγを含む。一部の実施形態において、ＩＦＮγはＴエフェクター細胞によるＩＦＮγ分泌を補足する。一部の実施形態において、サイトカイン又はサイトカイン類似体はＴＮＦαを含む。一部の実施形態において、ＴＮＦαはＴエフェクター細胞によるＴＮＦα分泌を補足する。
一部の実施形態では、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又は組成物の初回用量を対象に投与して、異常スプライシング及びネオ抗原ペプチドの産生を惹起する。タンパク質産生及び抗原提示に十分な時間の経過後、一部の実施形態では、次に対象にサイトカイン又はサイトカイン類似体の初回用量を投与して、エフェクターＴ細胞プライミング及び拡大をブーストし、及び／又は亢進させる。一部の実施形態において、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又は組成物とサイトカイン又はサイトカイン類似体との用量間の待機期間は、約２、約３、約４、約５、約６、又は約７日である。一部の実施形態において、待機期間は約３日～約５日である。一部の実施形態において、サイトカイン又はサイトカイン類似体は、ＩＬ－２、ＩＬ－１０、ＩＬ－１２、ＩＬ－１５、ＩＦＮγ、及び／又はＴＮＦαである。一部の実施形態において、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又は組成物とサイトカイン又はサイトカイン類似体との併用療法利益は相加的又は超相加的であり得る。
一部の他の実施形態では、サイトカイン又はサイトカイン類似体の初回用量を対象に投与して、エフェクターＴ細胞プライミング及び拡大をブーストし、及び／又は亢進させる。待機期間後、一部の実施形態では、次に対象にハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又は組成物の初回用量を投与して、異常スプライシング及びネオ抗原ペプチドの産生を惹起する。一部の実施形態において、サイトカイン又はサイトカイン類似体とハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又は組成物との用量間の待機期間は、約２、約３、約４、約５、約６、又は約７日である。一部の実施形態において、待機期間は約３日～約５日である。一部の実施形態において、サイトカイン又はサイトカイン類似体は、ＩＬ－２、ＩＬ－１０、ＩＬ－１２、ＩＬ－１５、ＩＦＮγ、及び／又はＴＮＦαである。一部の実施形態において、サイトカイン又はサイトカイン類似体とハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又は組成物との併用療法利益は相加的又は超相加的であり得る。
一部の実施形態では、Ｔ細胞プライミング及び拡大に十分な期間の経過後、次に対象に、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又は組成物の第２の用量又は後続用量を投与してネオ抗原ペプチドの再提示を惹起する。一部の実施形態において、サイトカイン又はサイトカイン類似体の初回用量とハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又は組成物の第２の用量又は後続用量との間の待機期間は、約２、約３、約４、又は約５週間である。一部の実施形態において、待機期間は約３週間である。一部の実施形態において、サイトカイン又はサイトカイン類似体の後続用量は、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又は組成物の後続用量の間に投与され、例えば割り込ませてもよい。ハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又は組成物の第２の用量又は後続用量を受けて、一部の実施形態では、免疫系がネオ抗原提示腫瘍細胞に会合し、及び／又は腫瘍細胞殺傷を誘発し得る。一部の実施形態において、この例示的初期治療レジメン後、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又は組成物の投与はパルス投与であることができ、即ち、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又は組成物は、抗原提示、Ｔ細胞会合及び／又は腫瘍細胞殺傷、及び／又は記憶Ｔ細胞集団の回復に十分な長い間隔で（例えば、約４週間毎、約５週間毎、約６週間毎に）投与されてもよい。
一部の実施形態において、対象は約１５０個以下の突然変異の非同義突然変異荷重を有する。一部の実施形態において、対象は約１００個以下の突然変異の非同義突然変異荷重を有する。一部の実施形態において、対象は約５０個以下の突然変異の非同義突然変異荷重を有する。一部の実施形態において、対象は、新生物障害、例えば、血液学的悪性腫瘍又は固形腫瘍を有するか、又はそれを有する疑いがある。一部の実施形態において、血液学的悪性腫瘍は、Ｂ細胞悪性腫瘍、白血病、リンパ腫、及び骨髄腫から選択される。一部の実施形態において、血液学的悪性腫瘍は、急性骨髄性白血病及び多発性骨髄腫から選択される。一部の実施形態において、固形腫瘍は、乳癌、胃癌、前立腺癌、卵巣癌、肺癌、子宮癌、唾液管癌、黒色腫、結腸癌、子宮頸癌、膵癌、腎癌、結腸直腸癌、及び食道癌から選択される。一部の実施形態において、固形腫瘍は、ＨＥＲ２陽性乳癌、胃腺癌、前立腺癌、及び骨肉腫から選択される。
ハーボキシジエンスプライシング調節薬／ＡＤＣとネオ抗原ワクチンとの併用：
様々な実施形態において、本明細書に記載されるとおりの癌を有する患者は、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又は組成物とネオ抗原ワクチンとの併用で治療することができる。理論により拘束されるものではないが、単独で、又は免疫チェックポイント阻害薬（ＩＣＩ）分子と併用して使用されるワクチンは、初期試験で有望であったが（Ｏｔｔ ｅｔ ａｌ．（２０１７）Ｎａｔｕｒｅ ５４７（７６６２）：２１７－２１；Ｓａｈｉｎ ｅｔ ａｌ．（２０１７）Ｎａｔｕｒｅ ５４７（７６６２）：２２２－６）、概して患者腫瘍突然変異のシーケンシングが必要である（Ｏｔｔ ｅｔ ａｌ．（２０１７）Ｎａｔｕｒｅ ５４７（７６６２）：２１７－２１；Ａｌｄｏｕｓ ａｎｄ Ｄｏｎｇ（２０１８）Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２６（１０）：２８４２－９）。このように、ワクチンは多くの場合に、十分な数の抗原性の非同義突然変異があるかに依存する。概して、突然変異負荷が極めて低い腫瘍は僅かな抗原候補しか提供せず、急激に増殖する腫瘍では、患者特異的ワクチンの同定及び生産に使える時間が限られている。
様々な実施形態において、本明細書に記載されるとおりの癌を有する患者は、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又は組成物とネオ抗原ワクチンとの併用で治療することができる。理論により拘束されるものではないが、単独で、又は免疫チェックポイント阻害薬（ＩＣＩ）分子と併用して使用されるワクチンは、初期試験で有望であったが（Ｏｔｔ ｅｔ ａｌ．（２０１７）Ｎａｔｕｒｅ ５４７（７６６２）：２１７－２１；Ｓａｈｉｎ ｅｔ ａｌ．（２０１７）Ｎａｔｕｒｅ ５４７（７６６２）：２２２－６）、概して患者腫瘍突然変異のシーケンシングが必要である（Ｏｔｔ ｅｔ ａｌ．（２０１７）Ｎａｔｕｒｅ ５４７（７６６２）：２１７－２１；Ａｌｄｏｕｓ ａｎｄ Ｄｏｎｇ（２０１８）Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２６（１０）：２８４２－９）。このように、ワクチンは多くの場合に、十分な数の抗原性の非同義突然変異があるかに依存する。概して、突然変異負荷が極めて低い腫瘍は僅かな抗原候補しか提供せず、急激に増殖する腫瘍では、患者特異的ワクチンの同定及び生産に使える時間が限られている。
現在までのところ、大部分の患者に広範な免疫原性があり得るワクチンを開発しようとする試みは、高頻度に突然変異するか、異所的に過剰発現するか、又は増幅するかのいずれかのタンパク質、及び／又は生物内に「自己」タンパク質として存在するタンパク質に焦点が置かれている。加えて、これらのタンパク質は、多くの場合に免疫学的に限定された組織に発現し（例えば、神経内分泌腫瘍型に発現する神経細胞マーカー）、一方、他のものは、胚発生時に正常に発現し得る（例えば、癌胎児性抗原）。従って、かかるタンパク質を抗原として使用するワクチンの有用性は、多くの場合に、抗原のうちの１つ以上が提示される特定の腫瘍系統又はサブセットに限られている。ワクチンの有用性はまた、患者腫瘍試料のシーケンシングによって確認することも必要となり得るが、これには時間がかかり得る。
更に、これらの抗原が「自己」タンパク質として存在すれば、免疫系がそれを「自己」として認識するようにプライミングされ、ひいては応答しない可能性もあり得る。又は、それ以外にも、免疫系がそうした抗原に対してエフェクター応答を開始可能な場合、その抗原が発現し得る組織におけるオンターゲット副作用につながり得る。これらのいずれの場合にも、鍵となる課題のうちの一つは、多くの抗原ペプチドが「パッセンジャー」遺伝子（即ち、腫瘍発生の過程で突然変異し又は増幅するが、腫瘍それ自体が生存又は増殖を継続することにおいて決定的な役割は果たさない遺伝子）に由来することである。このように、これらの遺伝子は、腫瘍進行に重大な影響を与えることなくサイレンシングされ得るため、ひいては腫瘍がそれらの抗原に対する免疫応答から「逃れる」ことが可能になり得る。理論によって拘束されることを望むものではないが、この機構は腫瘍進化において役割を果たし得るものであり、ここでは強力な抗原性のあるランダム突然変異が多くの場合に腫瘍発生の初期段階で腫瘍によって「対抗選択」される（Ｄｕｎｎ ｅｔ ａｌ．（２００４）Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２２：３２９－６０）。
加えて、あるエビデンスは、慢性的な抗原提示及び免疫刺激が免疫細胞アネルギー及び枯渇につながり得ることも示している（Ｐａｒｄｏｌｌ（２０１２）Ｎａｔ．Ｒｅｖ．Ｃａｎｃｅｒ １２（４）：２５２－６４）。ＩＣＩは枯渇した免疫細胞表現型を抑制するか（α－ＰＤ１／ＰＤ－Ｌ１）、又は更なる免疫細胞応答を促進するか（α－ＣＴＬＡ４）のいずれかであることが示されているとおり、これらの表現型は、現在のＩＣＩ治療の背後にある療法の理論的根拠の基礎をなす。注目すべきことに、α－ＣＴＬＡ４療法では、ある一部の患者が、Ｔ細胞活性化の促進及び自己反応性免疫応答を抑止する免疫寛容機構の破壊に原因を帰し得る重篤な免疫関連有害事象を呈することが報告されている。
これらの手法（即ち、ネオ抗原に対するデノボ免疫応答を惹起し若しくは亢進させること又は既存の免疫応答のアネルギー若しくは枯渇を抑制解除すること）は両方とも、慢性的免疫活性化に関係している。このように、これらの手法は、アネルギー、編集、及び免疫会合を抑制するように設計された他の腫瘍媒介性機構に対して感受性がある。
対照的に、本明細書に開示されるハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又は組成物による治療は、ネオ抗原に相当する配列に対する免疫応答を誘導し得る。一部の実施形態において、ネオ抗原の提示により、適応免疫系が会合し、活性化する標的が一層多様となる。一部の実施形態において、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又は組成物が選択的スプライシング及び結果として生じるネオ抗原を急性的に誘導可能であることにより、突然変異由来ネオ抗原への慢性的な曝露に起因する免疫系の疲労リスクが低減され、及び／又は腫瘍細胞が療法を回避するように適合する能力が制限され得る。一部の実施形態において、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又は組成物をネオ抗原ワクチンと併用して投与すると、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又は組成物によって産生されるネオ抗原に対する免疫応答が亢進する。一部の実施形態において、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又は組成物は、ワクチン接種の前、その最中、又はその後に投与される。一部の実施形態において、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又は組成物及び／又はワクチンは、治療の経過中に１回又は２回以上投与されてもよい。一部の実施形態において、治療の経過中にワクチンは１回投与され、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又は組成物は２回以上投与される。一部の実施形態において、治療の経過中にワクチンは１回投与され、次に１つ以上のブースターが投与される。
本明細書で使用されるとき、用語「ネオ抗原ワクチン」は、１つ以上の免疫原性ネオ抗原ペプチド又はｍＲＮＡ、例えば、少なくとも２、少なくとも３、少なくとも４、少なくとも５つ、又はそれ以上のネオ抗原ペプチドのプール試料を指す。用語「ワクチン」は、疾患（例えば、新生物障害、例えば、血液学的悪性腫瘍又は固形腫瘍）の予防及び／又は治療のため免疫を生じさせる組成物を指す。従って、ワクチンは、免疫原性薬剤を含む医薬品であり、ヒト又は動物においてワクチン接種後に特異的免疫防御及び保護物質を生じさせるために使用することが意図される。ネオ抗原ワクチンは、薬学的に許容可能な担体、希釈剤、賦形剤、及び／又はアジュバントを更に含むことができる。
本明細書で使用されるとき、用語「免疫原性」は、免疫応答、例えばＴ細胞応答を誘発することのできる任意の薬剤又は組成物を指す。免疫応答は抗体媒介性又は細胞媒介性、又は両方であり得る。
一部の実施形態では、患者にハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又は組成物を与え、次に既知のネオ抗原のペプチド又はｍＲＮＡワクチンを与えることにより、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又は組成物によって産生されるネオ抗原に対する免疫応答を亢進させる。一部の他の実施形態では、患者にハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又は組成物を与え、その治療によって産生されたネオ抗原に関してスクリーニングする。その後、それらのネオ抗原のうちの１つ以上を使用して、患者に与える個別化されたワクチンが作成される。これらの実施形態のいずれにおいても、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、若しくは組成物及び／又はペプチド若しくはｍＲＮＡワクチンは患者に１回又は反復して投与されてもよい。
様々な実施形態において、ワクチンに好適なネオ抗原は、患者の１つ以上の組織試料からの（例えば、腫瘍生検からの）スプライシングの変化及びロバストな発現を伴う転写物のパネルをスクリーニングすることによって同定し得る。一部の実施形態において、変異体タンパク質配列は、スクリーニングされた試料において、ジャンクションにわたるアミノ酸変化に隣接するタンパク質配列の一部分（最大１２アミノ酸）を保持しながらの、異常にスプライシングされたｍＲＮＡジャンクションにまたがる翻訳に基づき同定される。一部の実施形態において、これらのジャンクションにわたるペプチド断片が、例えばＮｅｔＭＨＣ１などのツールを使用して、ＭＨＣ１アレルに対する高親和性結合に関してスキャンされる（Ｎｉｅｌｓｅｎ ｅｔ ａｌ．（２００３）Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｓｃｉ １２（５）：１００７－１７；Ａｎｄｒｅａｔｔａ ａｎｄ Ｎｅｉｌｓｅｎ（２０１６）Ｂｉｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ ３２（４）：５１１－７）。これらの結果により、ユニークな患者ＨＬＡアレル構成に対する予測される高親和性結合剤となるようにネオペプチドをフィルタリングし、並びに種々の集団で高頻度に見られるＨＬＡアレルに幅広く結合すると予測されるネオペプチドのプールをアセンブルすることが可能となる（Ｍａｉｅｒｓ ｅｔ ａｌ．（２００７）Ｈｕｍ Ｉｍｍｕｎｏｌ ６８（９）：７７９－８８）。様々な実施形態において、同定されたネオペプチドは次に、例えば好適な担体又はアジュバントとのコンジュゲーションによりワクチンとして製剤化されるか（Ｏｔｔ ｅｔ ａｌ．（２０１７）Ｎａｔｕｒｅ ５４７（７６６２）：２１７－２１）、又はｍＲＮＡとしての送達用に製剤化される（Ｓａｈｉｎ ｅｔ ａｌ．（２０１７）Ｎａｔｕｒｅ ５４７（７６６２）：２２２－６）。
一部の実施形態において、選択されるネオ抗原は、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又は組成物に対する個々の患者（ｐａｔｅｎｔ）の腫瘍応答のスクリーニングにより、治療の結果生じる１つ以上のネオ抗原を続くワクチン接種への使用のため同定することに基づく。他の実施形態において、ネオ抗原は、例えば、異なる患者からの試料パネルのスクリーニングにより、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又は組成物によって産生される共通のネオ抗原を同定することに基づき選択され、次に将来の患者用のユニバーサルワクチンとして使用される。
理論により拘束されるものではないが、一部の実施形態では、ユニバーサルネオ抗原ワクチンを使用すれば、選択されるネオ抗原は腫瘍突然変異に依存せず、むしろハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又は組成物によって産生され且つ概して生体によって外来性と認識されるネオ抗原を模倣するため、各患者の腫瘍のユニークな突然変異状態についてシーケンシング及び分析する必要性を回避し得る。加えて、一部の実施形態では、患者の腫瘍細胞は、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又は組成物によって産生されるネオ抗原を模倣するものと比較したとき、腫瘍突然変異に依存する１つ以上のネオ抗原の産生から離れて突然変異する可能性が高くなり得るため、ネオ抗原ワクチンの使用は特に有効であり得る。これにより、大部分の患者にわたって幅広く免疫原性があり得るバルクワクチンの製剤化が可能となり、治療レジームの開始が早まり得る。患者は、本明細書に概説されるスケジュールに従いワクチン接種を受け得るとともに、続くワクチン接種の完了前に、例えばネオ抗原ペプチドの発現を誘導するため、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又は組成物によって更に治療される可能性がある。一部の実施形態では、患者はハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又は組成物をワクチン接種の前、それと同時、又はその後に投与されてもよい。一部の実施形態では、患者はハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又は組成物を投与され、ユニバーサルネオ抗原のパネルに見られる１つ以上のネオ抗原に関してスクリーニングされ、その対象において同定された少なくとも１つのユニバーサルネオ抗原を含むユニバーサルネオ抗原ワクチンを接種される。一部の実施形態では、患者はハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又は組成物をワクチン接種後１回又は２回以上投与されてもよい。ハーボキシジエンスプライシング調節薬又はＡＤＣ又は組成物及び／又はワクチンは、治療の経過中に１回又は２回以上投与されてもよい。
様々な実施形態において、ワクチンは１つ又は２つ以上のネオ抗原ペプチド又はｍＲＮＡを含み得る。様々な実施形態において、ワクチンは１つ又は２つ以上のロングネオ抗原ペプチドを含み得る。かかる「ロング」ネオ抗原ペプチドは、様々な実施形態において、樹状細胞などのプロフェッショナル抗原提示細胞で効率的なインターナリゼーション、プロセシング、及び交差提示を起こす。同様に、ロングワクチンペプチドは、他のコンテクストでは、ヒトにおいて細胞傷害性Ｔ細胞を誘導することが示されている（Ｍｅｌｉｅｆ ａｎｄ ｖａｎ ｄｅｒ Ｂｕｒｇ（２００８）Ｎａｔ Ｒｅｖ Ｃａｎｃｅｒ ８（５）：３５１－６０）。様々な実施形態において、ネオ抗原ペプチドは、ネオ抗原ペプチド配列それ自体を隣接アミノ酸配列に加えて含むように伸長される。様々な実施形態において、伸長ペプチド配列は、抗原提示細胞、例えば樹状細胞によるタンパク質取り込みを促進する。様々な実施形態において、伸長ペプチド配列は、種々のＨＬＡアイソタイプのモデルにおいて効率的な抗原提示及びＴ細胞プライミングを可能にする。様々な実施形態において、長いネオ抗原ペプチド及び／又は伸長ペプチド配列は、短いネオ抗原ペプチド及び／又は短いペプチド配列（例えば、約１０アミノ酸長未満又は約５アミノ酸長未満のペプチド配列）と比較したとき、抗原提示細胞（例えば、樹状細胞）による取り込みの増加、抗原提示の増加、及び／又はＴ細胞プライミングの増加を呈する。一部の実施形態において、ロングネオ抗原ペプチドは約５～約５０アミノ酸長の範囲である。一部の実施形態において、ロングネオ抗原ペプチドは約１０～約５０アミノ酸長の範囲である。一部の実施形態において、少なくとも１つのネオ抗原ペプチドは約１０～約３５アミノ酸長の範囲である。一部の実施形態において、ロングネオ抗原ペプチドは約１５～約２５アミノ酸長の範囲である。
一部の実施形態において、ネオ抗原配列及び／又は抗原性部分は約１０～約３５アミノ酸長の範囲である。一部の実施形態において、ネオ抗原配列及び／又は抗原性部分は約１５～約２５アミノ酸長の範囲である。一部の実施形態において、ネオ抗原配列及び／又は抗原性部分は約１０～約２０アミノ酸長の範囲である。一部の実施形態において、ネオ抗原配列及び／又は抗原性部分はカノニカルペプチド配列（例えば、表８において下線が付されている例示的カノニカルペプチド配列のいずれか）と排他的に重複せず、又はそれからならない。
例示的ロングネオ抗原ペプチドのアミノ酸配列を表８に示す。
これらの例示的ネオ抗原ペプチドは、プラジエノライドスプライシング調節薬を含有するＡＤＣの投与後に生成されるが、しかしながら、類似の作用機序（即ち、類似のスプライシング調節機構）を所与とすれば、ハーボキシジエンスプライシング調節薬によって類似のネオ抗原ペプチドが産生され得る。
表７に掲載される２９個のネオペプチドのタンパク質配列は、伸長させることができる。伸長タンパク質配列は、ネオペプチド配列それ自体を隣接アミノ酸配列に加えて両方とも取り込む。伸長タンパク質配列は、樹状細胞によるタンパク質取り込みをより良好に促進し、異なるＨＬＡアイソタイプのモデルにおける抗原提示及びＴ細胞プライミングを可能にする。２９個の伸長ネオペプチドのアミノ酸配列を表８に示す。
本明細書で使用されるとき、ネオ抗原ペプチド又はｍＲＮＡワクチンは、その断片が免疫原性の潜在的能力を保持している限り、ネオ抗原ペプチドの断片又はそのコードｍＲＮＡの使用を包含する。
一部の実施形態において、ネオ抗原ワクチンは少なくとも１つのネオ抗原ペプチドを含む。一部の実施形態において、ネオ抗原ワクチンは、少なくとも２、少なくとも３、少なくとも４、少なくとも５、少なくとも６、少なくとも７、少なくとも８、少なくとも９、少なくとも１０、少なくとも１２、少なくとも１５、又は少なくとも２０のネオ抗原ペプチドを含む。一部の実施形態において、１つ又は複数のネオ抗原ペプチドは約５～約５０アミノ酸長の範囲である。一部の実施形態において、１つ又は複数のネオ抗原ペプチドは約１０～約５０アミノ酸長の範囲である。一部の実施形態において、少なくとも１つのネオ抗原ペプチドは約１０～約３５アミノ酸長の範囲である。一部の実施形態において、１つ又は複数のネオ抗原ペプチドは約１５～約２５アミノ酸長の範囲である。
様々な実施形態において、本開示は、新生物障害を有する又は有する疑いがある対象を、有効量のハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又はハーボキシジエンスプライシング調節薬若しくはＡＤＣを含む組成物；及びネオ抗原ワクチンを対象に投与することにより治療する方法を提供する。ネオ抗原ワクチンは、例えば、ペプチド又はｍＲＮＡネオ抗原ワクチンであってもよい。一部の実施形態において、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又は組成物は、ネオ抗原ワクチンの投与前に投与される。一部の実施形態において、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又は組成物は、ネオ抗原ワクチンの投与後に投与される。一部の実施形態において、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又は組成物は、ネオ抗原ワクチンの投与と同時に投与される。一部の実施形態において、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又は組成物の投与は、初回投与後に少なくとも１回反復される。一部の実施形態において、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又は組成物の反復投与に使用される量は、初回投与に使用される量と比較したとき低減される。
様々な実施形態において、本開示は、新生物障害を有する又は有する疑いがある対象の治療における使用のための、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又はハーボキシジエンスプライシング調節薬若しくはＡＤＣを含む組成物と；ネオ抗原ワクチン（例えば、ユニバーサルネオ抗原ワクチン）とを含む併用を更に提供する。一部の実施形態において、ネオ抗原ワクチンはペプチド又はｍＲＮＡネオ抗原ワクチンである。一部の実施形態において、併用は少なくとも１つの追加療法を更に含む。一部の実施形態において、少なくとも１つの追加療法は、少なくとも１つ、少なくとも２つ、少なくとも３つ、少なくとも４つ、又は少なくとも５つの追加療法を含む。
様々な実施形態において、本開示は、新生物障害を有する又は有する疑いがある対象を、（ａ）有効量のハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又はハーボキシジエンスプライシング調節薬若しくはＡＤＣを含む組成物を対象に投与すること；（ｂ）ハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又は組成物の投与後に対象において１つ以上のネオ抗原を検出すること；（ｃ）１つ以上のネオ抗原をユニバーサルネオ抗原のパネルと比較すること；及び（ｄ）対象に存在する少なくとも１つのユニバーサルネオ抗原を含むユニバーサルネオ抗原ワクチンを対象に投与することにより治療する方法を更に提供する。一部の実施形態において、ユニバーサルネオ抗原ワクチンは、単独で、又は少なくとも１つの追加療法と併用して投与される。一部の実施形態において、少なくとも１つの追加療法は、少なくとも１つ、少なくとも２つ、少なくとも３つ、少なくとも４つ、又は少なくとも５つの追加療法を含む。
一部の実施形態において、少なくとも１つの追加療法は、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又は組成物の反復投与を含む。一部の実施形態において、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又は組成物の反復投与は、ユニバーサルネオ抗原ワクチンの投与前に開始される。一部の実施形態において、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又は組成物の反復は、ユニバーサルネオ抗原ワクチンの投与後に開始される。一部の実施形態において、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又は組成物の反復投与は、ユニバーサルネオ抗原ワクチンの投与と同時に開始される。一部の実施形態において、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又は組成物の反復投与に使用される量は、初回投与に使用される量と比較したとき低減される。一部の実施形態において、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又は組成物の初回投与及び／又は反復投与に使用される量は、ワクチン治療なしに使用されるときのハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又は組成物の標準的な投薬量と比較したとき低減される。一部の実施形態において、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又は組成物の初回投与及び／又は反復投与に使用される量は、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又は組成物の標準的な投薬量と比較したとき、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、７５％、又は９０％低減される。
一部の実施形態において、少なくとも１つの追加療法は、チェックポイント阻害薬（例えば、本明細書に記載される例示的チェックポイント阻害薬のいずれか）を投与することを含む。一部の実施形態において、チェックポイント阻害薬の投与は、ユニバーサルネオ抗原ワクチンの投与及び／又はハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又は組成物の反復投与の前に開始される。一部の実施形態において、チェックポイント阻害薬の投与は、ユニバーサルネオ抗原ワクチンの投与及び／又はハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又は組成物の反復の後に開始される。一部の実施形態において、チェックポイント阻害薬の投与は、ユニバーサルネオ抗原ワクチンの投与及び／又はハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又は組成物の反復投与と同時に開始される。一部の実施形態において、チェックポイント阻害薬の投与は、初回投与後に少なくとも１回反復される。一部の実施形態において、チェックポイント阻害薬の反復投与に使用される量は、初回投与に使用される量と比較したとき低減される。一部の実施形態において、チェックポイント阻害薬の反復投与に使用される量は、チェックポイント阻害薬の標準的な投薬量と比較したとき低減される。一部の実施形態において、チェックポイント阻害薬の反復投与に使用される量は、チェックポイント阻害薬の標準的な投薬量と比較したとき、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、７５％、又は９０％低減される。一部の実施形態において、対象は、単独投与時のチェックポイント阻害薬に不忍容、不応性、又は難反応性である。
また本明細書には、様々な実施形態において、少なくとも１つのネオ抗原ペプチド又は少なくとも１つのネオ抗原ｍＲＮＡを含むネオ抗原ワクチンも提供される。一部の実施形態において、ネオ抗原ワクチンは少なくとも１つのネオ抗原ペプチドを含む。一部の他の実施形態において、ネオ抗原ワクチンは少なくとも１つのネオ抗原ｍＲＮＡを含む。
また本明細書には、様々な実施形態において、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又はハーボキシジエンスプライシング調節薬若しくはＡＤＣを含む組成物と；ネオ抗原ワクチン（例えば、ユニバーサルネオ抗原ワクチン）とを含むキットも提供される。一部の実施形態において、ネオ抗原ワクチンはペプチド又はｍＲＮＡネオ抗原ワクチンである。一部の実施形態において、キットは、限定はされないが、使用説明書；他の薬剤、例えば１つ以上の追加の療法剤；ハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、組成物、及び／又はネオ抗原ワクチンを治療的投与用に調製するための装置、容器、又は他の材料；薬学的に許容可能な担体；及びハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、組成物、及び／又はネオ抗原ワクチンを患者に投与するための装置、容器、又は他の材料を含めた、１つ以上の追加の構成要素を更に含む。使用説明書には、例えば新生物障害を有する又は有する疑いがある患者における推奨される投薬量及び／又は投与方法を含めた治療上の適用に関する手引きが含まれ得る。様々な実施形態において、キットには更に、治療上の使用、例えば、患者の新生物障害を治療又は予防するためのハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又は組成物、及びネオ抗原ワクチンの使用に関する説明書が入っている。様々な実施形態において、キットには更に、少なくとも１つの追加の療法剤（例えば、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又は組成物、及びネオ抗原ワクチンと一緒に投与するためのもの、例えば、チェックポイント阻害薬）が入っている。様々な実施形態において、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、組成物、及び／又はネオ抗原ワクチンは、医薬組成物として製剤化される。
本明細書に開示される方法及び組成物の一部の実施形態において、ネオ抗原ワクチンは少なくとも１つのネオ抗原ペプチドを含む。一部の実施形態において、少なくとも１つのネオ抗原ペプチドは約１０～約５０アミノ酸長の範囲である。一部の実施形態において、少なくとも１つのネオ抗原ペプチドは約１０～約３５アミノ酸長の範囲である。一部の実施形態において、少なくとも１つのネオ抗原ペプチドは約１５～約２５アミノ酸長の範囲である。
一部の実施形態において、少なくとも１つのネオ抗原ペプチドは、本明細書に開示されるネオ抗原配列を１つ又は２つ以上含む。
一部の実施形態において、ネオ抗原配列及び／又は抗原性部分は約１０～約３５アミノ酸長の範囲である。一部の実施形態において、ネオ抗原配列及び／又は抗原性部分は約１５～約２５アミノ酸長の範囲である。一部の実施形態において、ネオ抗原配列及び／又は抗原性部分は約１０～約２０アミノ酸長の範囲である。一部の実施形態において、ネオ抗原配列及び／又は抗原性部分はカノニカルペプチド配列（例えば、表８において下線が付されている例示的カノニカルペプチド配列のいずれか）と排他的に重複せず、又はそれからならない。
一部の実施形態において、ネオ抗原配列は、対象に特異的なネオ抗原配列である。一部の実施形態において、ネオ抗原配列は、対象向けに個別化されたネオ抗原ワクチンである。一部の実施形態において、ネオ抗原配列は、対象に発現する少なくとも１つのＨＬＡアレルに結合する能力を有する。
一部の他の実施形態において、ネオ抗原配列はユニバーサルネオ抗原配列である。一部の実施形態において、ネオ抗原配列はユニバーサルネオ抗原ワクチンである。一部の実施形態において、ネオ抗原配列は、新生物障害に罹患している対象集団中の対象の少なくとも１０％、少なくとも１５％、少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、又は少なくとも４５％に発現する少なくとも１つのＨＬＡアレルに結合する能力を有する。一部の実施形態において、ネオ抗原配列は、新生物障害に罹患している対象集団の少なくとも１％、少なくとも５％、又は少なくとも１０％に存在する腫瘍に対するＴ細胞応答を誘発する能力を有する。
一部の実施形態において、ネオ抗原配列は、有効量のハーボキシジエンスプライシング調節薬、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物を投与することにより対象において誘導される少なくとも１つのネオ抗原ペプチドをシーケンシングすることによって同定されている。一部の実施形態において、少なくとも１つのネオ抗原ペプチドは有効量のハーボキシジエンスプライシング調節薬、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物を新生物細胞に接触させることにより誘導されるネオ抗原配列を含む。一部の実施形態において、新生物細胞はインビトロ細胞培養物中に存在する。一部の実施形態において、新生物細胞は対象から入手される。一部の実施形態において、新生物細胞は対象に存在する。
一部の実施形態において、ネオ抗原ワクチンは少なくとも１つのネオ抗原ペプチド又はｍＲＮＡと薬学的に許容可能な担体とを含む。様々な実施形態において、ネオ抗原ペプチド又はｍＲＮＡは、免疫応答を誘発する助けとなる好適な担体に連結することができる。免疫原性薬剤（例えば、ネオ抗原ペプチド又はｍＲＮＡ）に連結するための例示的担体としては、血清アルブミン、キーホールリンペットヘモシアニン、免疫グロブリン分子、チログロブリン、オボアルブミン、破傷風トキソイド、又は他の病原性細菌由来の、例えばジフテリア、大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）、コレラ、若しくはＨ．ピロリ（Ｈ．ｐｙｌｏｒｉ）などのトキソイド、又は弱毒化毒素誘導体が挙げられる。免疫応答を刺激する又は亢進させるための他の担体としては、サイトカイン、例えば、ＩＬ－１、ＩＬ－１α及びβペプチド、ＩＬ－２、γＩＮＦ、ＩＬ－１０、ＧＭ－ＣＳＦなど、並びにケモカイン、例えばＭ１Ｐ１α及びβ及びＲＡＮＴＥＳなどが挙げられる。免疫原性薬剤はまた、例えば、国際公開第９７／１７６１３号パンフレット及び国際公開第９７／１７６１４号パンフレットに記載されるとおりの、組織間輸送を亢進させるペプチドに連結することもできる。一部の実施形態において、薬学的に許容可能な担体は、ペプチド、血清アルブミン、キーホールリンペットヘモシアニン、免疫グロブリン、チログロブリン、オボアルブミン、トキソイド又は弱毒化トキソイド誘導体、サイトカイン、及びケモカインから選択される。
一部の実施形態において、ネオ抗原ペプチド又はｍＲＮＡは薬学的に許容可能な担体に連結されてもよい。免疫原性薬剤は、化学的架橋によって担体に連結することができる。免疫原性ペプチドを担体に連結する技法としては、Ｎ－スクシンイミジル－３－（２－ピリジル－チオ）プロピオネート（ＳＰＤＰ）及びスクシンイミジル４－（Ｎ－マレイミドメチル）シクロヘキサン－１－カルボキシレート（ＳＭＣＣ）（ペプチドがスルフヒドリル基を欠いている場合、これはシステイン残基の付加によって提供されてもよい）を使用したジスルフィド結合の形成が挙げられる。これらの試薬は、それ自体と一つのタンパク質上のペプチドシステイン残基との間にジスルフィド結合を作り出し、リジン上のε－アミノ、又は他のアミノ酸における他の遊離アミノ基を介してアミド結合を作り出す。種々のかかるジスルフィド／アミド形成剤が、Ｊａｎｓｅｎ ｅｔ ａｌ．（（１９８２）Ｉｍｍｕｎ Ｒｅｖ．６２：１８５）に記載されている。他の二官能性カップリング剤は、ジスルフィド結合よりむしろチオエーテルを形成する。これらのチオエーテル形成剤の多くは市販されており、６－マレイミドカプロン酸、２－ブロモ酢酸、及び２－ヨード酢酸、４－（Ｎ－マレイミド－メチル）シクロヘキサン－１－カルボン酸の反応性エステルが挙げられる。カルボキシル基は、それをスクシンイミド又は１－ヒドロキシル－２－ニトロ－４－スルホン酸、ナトリウム塩と組み合わせることにより活性化させることができる。一部の実施形態において、ネオ抗原ペプチドと薬学的に許容可能な担体とはリンカーを介して共有結合的に結び付けられる。
ネオ抗原及び他のかかる免疫原性ペプチドはまた、担体との融合タンパク質として発現させることもできる。免疫原性ペプチドは、アミノ末端、カルボキシル末端、又はペプチド内のいずれかの部位で（内部的に）担体に連結することができる。一部の実施形態において、融合タンパク質には免疫原性ペプチドの複数のリピートが存在してもよい。一部の実施形態において、ネオ抗原ペプチドと薬学的に許容可能な担体とは融合タンパク質として発現する。
一部の実施形態において、ネオ抗原ワクチンは、少なくとも１つのネオ抗原ペプチド又はそのコードｍＲＮＡと薬学的に許容可能な希釈剤とを含む。一部の実施形態において、ネオ抗原ワクチンは、少なくとも１つのネオ抗原ペプチド又はそのコードｍＲＮＡと薬学的に許容可能なアジュバント（例えば、本明細書に記載されるとおりのアジュバント）とを含む。
本明細書に開示される方法及び組成物の一部の実施形態において、ネオ抗原ワクチンは少なくとも１つのネオ抗原ｍＲＮＡを含む。一部の実施形態において、少なくとも１つのネオ抗原ｍＲＮＡは１つ又は２つ以上のネオ抗原配列をコードする。
一部の実施形態において、ネオ抗原配列及び／又は抗原性部分は約１０～約５０アミノ酸長の範囲である。一部の実施形態において、少なくとも１つのネオ抗原ペプチドは約１０～約３５アミノ酸長の範囲である。一部の実施形態において、ネオ抗原配列及び／又は抗原性部分は約１５～約２５アミノ酸長の範囲である。一部の実施形態において、ネオ抗原配列及び／又は抗原性部分は約１０～約２０アミノ酸長の範囲である。一部の実施形態において、ネオ抗原配列及び／又は抗原性部分はカノニカルペプチド配列（例えば、表８において下線が付されている例示的カノニカルペプチド配列のいずれか）と排他的に重複せず、又はそれからならない。
一部の実施形態において、ネオ抗原配列は、対象に特異的なネオ抗原配列である。一部の実施形態において、ネオ抗原配列は、対象向けに個別化されたネオ抗原ワクチンである。一部の実施形態において、ネオ抗原配列は、対象に発現する少なくとも１つのＨＬＡアレルに結合する能力を有する。
一部の他の実施形態において、ネオ抗原配列はユニバーサルネオ抗原配列である。一部の実施形態において、ネオ抗原配列はユニバーサルネオ抗原ワクチンである。一部の実施形態において、ネオ抗原配列は、新生物障害に罹患している対象集団中の対象の少なくとも１０％、少なくとも１５％、少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、又は少なくとも４５％に発現する少なくとも１つのＨＬＡアレルに結合する能力を有する。一部の実施形態において、ネオ抗原配列は、新生物障害に罹患している対象集団の少なくとも１％、少なくとも５％、又は少なくとも１０％に存在する腫瘍に対するＴ細胞応答を誘発する能力を有する。
一部の実施形態において、ネオ抗原配列は、有効量のハーボキシジエンスプライシング調節薬、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物を投与することにより対象において誘導される少なくとも１つのネオ抗原ｍＲＮＡをシーケンシングすることによって同定されている。一部の実施形態において、少なくとも１つのネオ抗原ｍＲＮＡは、有効量のハーボキシジエンスプライシング調節薬、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物を新生物細胞に接触させることにより誘導されるネオ抗原配列をコードする。一部の実施形態において、新生物細胞はインビトロ細胞培養物中に存在する。一部の実施形態において、新生物細胞は対象から入手される。一部の実施形態において、新生物細胞は対象に存在する。
一部の実施形態において、ネオ抗原ワクチンは少なくとも１つのネオ抗原ｍＲＮＡと薬学的に許容可能な担体とを含む。一部の実施形態において、少なくとも１つのネオ抗原ｍＲＮＡは薬学的に許容可能な担体に連結される。一部の実施形態において、薬学的に許容可能な担体は、ペプチド、血清アルブミン、キーホールリンペットヘモシアニン、免疫グロブリン、チログロブリン、オボアルブミン、トキソイド又は弱毒化トキソイド誘導体、サイトカイン、及びケモカインから選択される。
一部の実施形態において、ネオ抗原ワクチンは、少なくとも１つのネオ抗原ｍＲＮＡと薬学的に許容可能な希釈剤とを含む。一部の実施形態において、ネオ抗原ワクチンは、少なくとも１つのネオ抗原ｍＲＮＡと薬学的に許容可能なアジュバント（例えば、本明細書に記載されるとおりのアジュバント）とを含む。
一部の実施形態において、ネオ抗原ｍＲＮＡは封入剤に封入される。一部の実施形態において、封入剤はネオ抗原ｍＲＮＡを分解から保護し、ワクチン送達を向上させる（ＭｃＮａｍａｒａ ｅｔ ａｌ．（２０１５）Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ Ｒｅｓ．２０１５：７９４５２８）。一部の実施形態において、封入剤はリポソームである。一部の実施形態において、リポソームは、Ｎ－［１－（２，３－ジオレオイルオキシ（ｄｉｏｌｅｏｌｏｘｙ））プロピル］－Ｎ，Ｎ，Ｎ－トリメチルアンモニウムクロリド１（ＤＯＴＡＰ）などのカチオン性リポソームである。一部の実施形態において、封入剤はナノ粒子である。一部の実施形態において、ナノ粒子はネオ抗原ｍＲＮＡをヌクレアーゼ分解から保護し、及び／又は細胞取り込み及び／又は送達効率を亢進させる。一部の実施形態において、ナノ粒子は、完全に分解性となるように改変されてもよい。一部の実施形態において、ナノ粒子は、ｐＨ応答性ポリ－（ｂ－アミノエステル）（ＰＢＡＥ）コアがリン脂質シェルに包まれた生分解性コア－シェル構造ナノ粒子である（Ｓｕ ｅｔ ａｌ．（２０１１）Ｍｏｌ Ｐｈａｒｍ．８（３）：７７４－８７）。一部の実施形態において、かかるナノ粒子は、インビボでのｍＲＮＡの送達及び抗腫瘍免疫応答の誘発において特に効率的である。
一部の実施形態において、対象は約１５０個以下の突然変異の非同義突然変異荷重を有する。一部の実施形態において、対象は約１００個以下の突然変異の非同義突然変異荷重を有する。一部の実施形態において、対象は約５０個以下の突然変異の非同義突然変異荷重を有する。一部の実施形態において、対象は、新生物障害、例えば、血液学的悪性腫瘍又は固形腫瘍を有するか、又はそれを有する疑いがある。一部の実施形態において、血液学的悪性腫瘍は、Ｂ細胞悪性腫瘍、白血病、リンパ腫、及び骨髄腫から選択される。一部の実施形態において、血液学的悪性腫瘍は、急性骨髄性白血病及び多発性骨髄腫から選択される。一部の実施形態において、固形腫瘍は、乳癌、胃癌、前立腺癌、卵巣癌、肺癌、子宮癌、唾液管癌、黒色腫、結腸癌、子宮頸癌、膵癌、腎癌、結腸直腸癌、及び食道癌から選択される。一部の実施形態において、固形腫瘍は、ＨＥＲ２陽性乳癌、胃腺癌、前立腺癌、及び骨肉腫から選択される。
本明細書で使用されるとき、「アジュバント」は、付随する免疫原性薬剤、例えばネオ抗原ペプチド又はｍＲＮＡに対する免疫応答を増加させ、増幅し、又は調節する能力を有する物質を指す。特定の実施形態において、本開示のネオ抗原は、アジュバント、即ち、それ自体は適応免疫応答を引き起こさないが、付随するネオ抗原に対する応答を増幅し又は調節する物質と併用して投与することができる。免疫応答を誘発するため、開示されるネオ抗原との併用で種々のアジュバントを使用することができる。一部の実施形態において、１つ又は複数のアジュバントは、応答の定性的形態に影響を及ぼし得るネオ抗原のコンホメーション変化を引き起こすことなくネオ抗原に対する固有の応答を増強するように選択される。一部の実施形態において、１つ又は複数のアジュバントは、Ｔエフェクター（例えば、ＣＤ８）細胞プライミング及び／又は活性化を亢進させるように選択される。
特定の実施形態において、アジュバントは、水酸化アルミニウム、リン酸アルミニウム、及び硫酸アルミニウムなどのアルミニウム塩（ミョウバン）である。かかるアジュバントは、３－Ｏ－脱アシル化モノホスホリルリピドＡ（ＭＰＬ）又は３－ＤＭＰ、ポリグルタミン酸又はポリリジンなどの重合体又は単量体アミノ酸など、他の特定の免疫賦活剤と共に又はそれ無しで使用することができる。かかるアジュバントは、ムラミルペプチド（例えば、Ｎ－アセチルムラミル－Ｌ－スレオニル－Ｄ－イソグルタミン（ｔｈｒ－ＭＤＰ）、Ｎ－アセチル－ノルムラミル－Ｌ－アラニル－Ｄ－イソグルタミン（ｎｏｒ－ＭＤＰ）、Ｎ－アセチルムラミル－Ｌ－アラニル－Ｄ－イソグルタミニル－Ｌ－アラニン－２－（１’－２’ジパルミトイル－ｓｎ－グリセロ－３－ヒドロキシホスホリルオキシ）－エチルアミン（ＭＴＰ－ＰＥ）、Ｎ－アセチルグルコサミニル（ａｃｅｔｙｌｇｌｕｃｓａｍｉｎｙｌ）－Ｎ－アセチルムラミル－Ｌ－Ａｌ－Ｄ－イソｇｌｕ－Ｌ－Ａｌａ－ジパルミトキシプロピルアミド（ＤＴＰ－ＤＰＰ））、又は他の細菌細胞壁構成成分など、他の特定の免疫賦活剤と共に又はそれ無しで使用することができる。他のアジュバントは水中油型エマルションであり、（ａ）Ｍｏｄｅｌ １１０Ｙマイクロフルイダイザー（Ｍｉｃｒｏｆｌｕｉｄｉｃｓ）などのマイクロフルイダイザーを使用してサブミクロン粒子に製剤化された、５％スクアレン、０．５％Ｔｗｅｅｎ ８０、及び０．５％Ｓｐａｎ ８５を含有する（任意選択で様々な量のＭＴＰ－ＰＥを含有する）ＭＦ５９（国際公開第９０／１４８３７号パンフレット）、（ｂ）サブミクロンエマルションにマイクロ流体化されるか、又はより大きい粒径のエマルションが生成されるようにボルテックスされるかのいずれかの、１０％スクアレン、０．４％Ｔｗｅｅｎ ８０、５％プルロニックブロック化ポリマーＬ１２１、及びｔｈｒ－ＭＤＰを含有するＳＡＦ、及び（ｃ）２％スクアレン、０．２％Ｔｗｅｅｎ ８０、及び１つ以上の細菌細胞壁構成成分であって、モノホスホリルリピドＡ（ＭＰＬ）、トレハロースジミコレート（ＴＤＭ）、及び細胞壁骨格（ＣＷＳ）からなる群からの細菌細胞壁構成成分、例えばＭＰＬ－ＦＣＷＳ（Ｄｅｔｏｘ（商標））を含有するＲｉｂｉ（商標）アジュバントシステム（ＲＡＳ）（Ｒｉｂｉ ＩｍｍｕｎｏＣｈｅｍ）が挙げられる。一部の実施形態において、アジュバントは、Ｓｔｉｍｕｌｏｎ（商標）（ＱＳ２１）などのサポニン、又はＩＳＣＯＭ（免疫刺激複合体）及びＩＳＣＯＭＡＴＲＩＸなどのそれから生成される粒子である。他のアジュバントとしては、完全フロイントアジュバント（ＣＦＡ）及び不完全フロイントアジュバント（ＩＦＡ）、サイトカイン、例えば、インターロイキン（ＩＬ－１、ＩＬ－２、及びＩＬ－１２）、マクロファージコロニー刺激因子（Ｍ－ＣＳＦ）、及び腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）などが挙げられる。
アジュバントは免疫原性薬剤（例えば、ネオ抗原ペプチド又はｍＲＮＡ）と共に単一の組成物として投与することができ、又は免疫原性薬剤の投与前、それと同時、若しくはその後に投与することができる。一部の実施形態において、免疫原性薬剤とアジュバントとは同じバイアルに包装して供給することができ、又は別個のバイアルに包装して使用前に混合することができる。一部の実施形態において、免疫原性薬剤及びアジュバントは、意図される治療上の適用を指示する表示を伴い包装することができる。一部の実施形態において、免疫原性薬剤とアジュバントとが別個に包装される場合、包装には、使用前に混合するよう指示が含まれ得る。アジュバント及び／又は担体の選択は、アジュバントを含有する免疫原性製剤の安定性、投与経路、投薬スケジュール、ワクチンを接種される種に対するアジュバントの有効性に依存し、ヒトでは、薬学的に許容可能なアジュバントとは、関連する規制当局によってヒト投与が承認済みのもの、又は承認見込みのものである。例えば、完全フロイントアジュバントはヒト投与に好適でない。しかしながら、ミョウバン、ＭＰＬ又は不完全フロイントアジュバント（Ｃｈａｎｇ ｅｔ ａｌ．（１９９８）Ａｄｖ Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖ Ｒｅｖ．３２：１７３－１８６）は、単独で、又は任意選択で、ミョウバン、ＱＳ２１、及びＭＰＬのうちのいずれか、及びこれらの全ての組み合わせとの併用で、ヒト投与に好適である。
様々な実施形態において、本開示は、少なくとも１つのネオ抗原をスクリーニングして同定する方法を更に提供する。より具体的には、様々な実施形態において、本開示は、（ａ）有効量のハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又はハーボキシジエンスプライシング調節薬若しくはＡＤＣを含む組成物を新生物細胞に接触させること；（ｂ）ハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又は組成物を新生物細胞に接触させた後、少なくとも１つの選択的にスプライシングされたｍＲＮＡ転写物を検出すること；（ｃ）少なくとも１つの選択的にスプライシングされたｍＲＮＡ転写物から少なくとも１つのペプチドへの翻訳を予測すること；及び（ｄ）少なくとも１つのペプチドを参照プロテオームと比較することによって少なくとも１つのネオ抗原を同定する方法を提供し、ここで少なくとも１つのペプチドが参照プロテオームのいかなるペプチドとも一致しない場合、少なくとも１つのネオ抗原が同定される。様々な実施形態において、本方法は、１つ以上の追加の新生物細胞と接触させて少なくとも１つのユニバーサルネオ抗原を同定することを更に含む。様々な実施形態において、１つ以上の追加の新生物細胞又は試料（例えば、組織生検）で本方法を繰り返すことにより、（例えば、ネオ抗原ワクチンでの使用に）好適なネオ抗原が確認され、及び／又は１つ以上のユニバーサルネオ抗原が同定される。
様々な他の実施形態において、本開示は、（ａ）有効量のハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又はハーボキシジエンスプライシング調節薬若しくはＡＤＣを含む組成物を新生物細胞に接触させること；（ｂ）ハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又は組成物を新生物細胞に接触させた後、潜在的ネオ抗原配列を含む少なくとも１つのペプチドを検出すること；及び（ｃ）少なくとも１つのペプチドを参照プロテオームと比較することによって少なくとも１つのネオ抗原を同定する方法を提供し、ここで少なくとも１つのペプチドが参照プロテオームのいかなるペプチドとも一致しない場合、少なくとも１つのネオ抗原が同定される。様々な実施形態において、本方法は、１つ以上の追加の新生物細胞と接触させて少なくとも１つのユニバーサルネオ抗原を同定することを更に含む。様々な実施形態において、１つ以上の追加の新生物細胞又は試料（例えば、組織生検）で本方法を繰り返すことにより、（例えば、ネオ抗原ワクチンでの使用に）好適なネオ抗原が確認され、及び／又は１つ以上のユニバーサルネオ抗原が同定される。
本明細書に記載されるネオ抗原同定方法の一部の実施形態において、少なくとも１つの選択的にスプライシングされたｍＲＮＡ転写物を検出することは、ＲＮＡｓｅｑを含む。一部の実施形態において、少なくとも１つの選択的にスプライシングされたｍＲＮＡ転写物の翻訳を予測することは、少なくとも１つの転写物に関するパーセントスプライスイン（ｄＰＳＩ）値の変化を定量化することを含む。一部の実施形態において、少なくとも１つの選択的にスプライシングされたｍＲＮＡ転写物の翻訳を予測することは、ＲｉｂｏＳｅｑ及び／又はリボソームプロファイリングを含む。
本明細書に記載されるネオ抗原同定方法の一部の実施形態において、本方法は、予測される主要組織適合遺伝子複合体（ＭＨＣ）結合に関して少なくとも１つのペプチドを評価することを更に含む。一部の実施形態において、予測ＭＨＣ結合は、少なくとも１つのペプチドの未補正親和性予測結合強度を測定することにより決定される。一部の実施形態において、約５００ｎＭ以上の未補正親和性予測結合強度がＭＨＣ結合を示す。一部の実施形態において、予測ＭＨＣ結合は、一系列のランダムペプチドに関して予測結合強度の分布を同定し；及び少なくとも１つのペプチドの予測結合強度をその分布と比較することにより決定される。一部の実施形態において、分布の上位２％にある予測結合強度が弱いＭＨＣ結合を示す。一部の実施形態において、分布の上位０．５％にある予測結合強度が強いＭＨＣ結合を示す。
本明細書に記載されるネオ抗原同定方法の一部の実施形態において、新生物細胞はインビトロ細胞培養物中に存在する。一部の実施形態において、新生物細胞は対象から入手される。一部の実施形態において、新生物細胞は対象に存在する。
また本明細書には、様々な実施形態において、（ａ）本明細書に開示される例示的同定方法のいずれかを用いて少なくとも１つのネオ抗原（例えば、少なくとも１つのネオ抗原ペプチド又はそのコードｍＲＮＡ）を同定すること；及び（ｂ）少なくとも１つのネオ抗原を薬学的に許容可能な担体、希釈剤、又はアジュバント（例えば、本明細書に記載される薬学的に許容可能な担体、希釈剤、又はアジュバントのいずれか）と共に製剤化することによってネオ抗原ワクチンを作製する方法も提供される。
一部の実施形態において、少なくとも１つのネオ抗原及び／又は抗原性部分は約１０～約５０アミノ酸長の範囲である。一部の実施形態において、少なくとも１つのネオ抗原ペプチドは約１０～約３５アミノ酸長の範囲である。一部の実施形態において、少なくとも１つのネオ抗原及び／又は抗原性部分は約１５～約２５アミノ酸長の範囲である。一部の実施形態において、少なくとも１つのネオ抗原及び／又は抗原性部分は約１０～約２０アミノ酸長の範囲である。一部の実施形態において、少なくとも１つのネオ抗原及び／又は抗原性部分はカノニカルペプチド配列（例えば、表８において下線が付されている例示的カノニカルペプチド配列のいずれか）と排他的に重複せず、又はそれからならない。
一部の実施形態において、ワクチンに使用される少なくとも１つのネオ抗原は、薬学的に許容可能な担体に連結される。一部の実施形態において、薬学的に許容可能な担体は、ペプチド、血清アルブミン、キーホールリンペットヘモシアニン、免疫グロブリン、チログロブリン、オボアルブミン、トキソイド又は弱毒化トキソイド誘導体、サイトカイン、及びケモカインから選択される。
ハーボキシジエンスプライシング調節薬／ＡＤＣと改変Ｔ細胞（ＣＡＲ－Ｔ）との併用：
様々な実施形態において、本明細書に記載されるとおりの癌を有する患者は、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又は組成物と１つ以上の改変腫瘍標的化Ｔ細胞（即ち、ＣＡＲ－Ｔ）との併用で治療することができる。従って、様々な実施形態において、本開示は、新生物障害を有する又は有する疑いがある対象を、有効量のハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又はハーボキシジエンスプライシング調節薬若しくはＡＤＣを含む組成物；及び改変腫瘍標的化Ｔ細胞（即ち、ＣＡＲ－Ｔ）を対象に投与することにより治療する方法を提供する。様々な実施形態において、キメラＴ細胞受容体は、同定されたネオ抗原との反応性を有する抗原認識配列を使用して改変することができる。
様々な実施形態において、本明細書に記載されるとおりの癌を有する患者は、ハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又は組成物と１つ以上の改変腫瘍標的化Ｔ細胞（即ち、ＣＡＲ－Ｔ）との併用で治療することができる。従って、様々な実施形態において、本開示は、新生物障害を有する又は有する疑いがある対象を、有効量のハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又はハーボキシジエンスプライシング調節薬若しくはＡＤＣを含む組成物；及び改変腫瘍標的化Ｔ細胞（即ち、ＣＡＲ－Ｔ）を対象に投与することにより治療する方法を提供する。様々な実施形態において、キメラＴ細胞受容体は、同定されたネオ抗原との反応性を有する抗原認識配列を使用して改変することができる。
例えば、様々な実施形態において、ハーボキシジエンスプライシング調節薬又はＡＤＣによって誘導される細胞表面タンパク質の細胞外ドメインの変化を標的化するため、キメラ抗原反応性Ｔ細胞受容体（ＣＡＲ）を改変してもよく、これは初めに、細胞表面発現ネオ抗原タンパク質ドメインを認識する抗体を同定することによる。次に選択的標的化及び活性化のため、かかる抗体の抗原認識配列をＴ細胞受容体ドメインと融合させることができる。
様々な他の実施形態において、腫瘍細胞の抗原提示機構をハーボキシジエンスプライシング調節薬由来又はＡＤＣ由来ネオ抗原と共に統合する戦略が用いられる。一部の実施形態では、既知の高頻度に出現するＨＬＡアレル（例えば、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１）を含有する細胞をハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又は組成物で処理することができ、リガンドミクスによりＭＨＣ１結合ネオ抗原が同定される。一部の実施形態では、これらのペプチドを使用して、同じＨＬＡアレルを発現する健常ドナーからのＴ細胞をプライミングし及び／又は拡大することができる。一部の実施形態では、かかるＴ細胞を単離し、Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）α鎖及びβ鎖をシーケンシングしてコグネイト抗原認識／可変領域を同定することができる。一部の実施形態では、次にコグネイトＣＡＲを改変することができる。
一部の実施形態において、ＣＡＲ配列は、現在利用可能なプロトコルを用いて患者由来Ｔ細胞集団にクローニングされ、拡大される。一部の実施形態において、次にハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又は組成物による治療後、改変Ｔ細胞が輸注されて患者の循環に戻される。ハーボキシジエンスプライシング調節薬、ＡＤＣ、又は組成物による治療後、一部の実施形態では、腫瘍細胞が抗原を提示し始め得る。一部の実施形態において、改変されたＴ細胞集団は抗原提示腫瘍細胞に会合し、それを殺傷することができる。
当業者には、本明細書に記載される本開示の方法の他の好適な変形及び適合が自明であり、本開示又は本明細書に開示される実施形態の範囲から逸脱することなく好適な均等物を用いて行われ得ることが容易に理解されるであろう。ここで本開示を詳細に記載したが、あくまでも説明のために含まれる、限定することは意図しない以下の例を参照することにより、それが更に明確に理解されるであろう。
実施例１
構造を表９～表１１に示したペイロード、リンカー、及びコンジュゲート可能なリンカー－ペイロード（リンカー－薬物、Ｌ－Ｈ）化合物の合成方法について記載する。コンジュゲート可能なリンカー－ペイロードは抗体－薬物コンジュゲート（ＡＤＣ）の調製において使用した。例示的ＡＤＣは実施例３～５に記載する。
構造を表９～表１１に示したペイロード、リンカー、及びコンジュゲート可能なリンカー－ペイロード（リンカー－薬物、Ｌ－Ｈ）化合物の合成方法について記載する。コンジュゲート可能なリンカー－ペイロードは抗体－薬物コンジュゲート（ＡＤＣ）の調製において使用した。例示的ＡＤＣは実施例３～５に記載する。
１．１ 試薬及び材料
以下の合成方法に使用される出発材料は、市販されているか、或いは標準方法により公知の材料から容易に調製できるかのいずれかである。開示されるコンジュゲート可能なリンカー－ペイロードは、本明細書に記載される反応及び技法を用いて調製することができる。以下に記載される合成方法の説明において、特に指示されない限り、提案される反応条件は全て、溶媒、反応雰囲気、反応温度、実験の所要時間、及びワークアップ手順の選択を含め、当該の反応に標準的な条件となるように選択され得ることが理解されるべきである。有機合成分野の当業者によれば、分子の様々な部分に存在する官能基が、提案される試薬及び反応と適合しなければならないことが理解される。反応条件との適合性がない置換基は当業者には明らかであり、従って本明細書では別の方法が指示される。
以下の合成方法に使用される出発材料は、市販されているか、或いは標準方法により公知の材料から容易に調製できるかのいずれかである。開示されるコンジュゲート可能なリンカー－ペイロードは、本明細書に記載される反応及び技法を用いて調製することができる。以下に記載される合成方法の説明において、特に指示されない限り、提案される反応条件は全て、溶媒、反応雰囲気、反応温度、実験の所要時間、及びワークアップ手順の選択を含め、当該の反応に標準的な条件となるように選択され得ることが理解されるべきである。有機合成分野の当業者によれば、分子の様々な部分に存在する官能基が、提案される試薬及び反応と適合しなければならないことが理解される。反応条件との適合性がない置換基は当業者には明らかであり、従って本明細書では別の方法が指示される。
分取液体クロマトグラフィー質量分析（ＬＣ／ＭＳ）は、Ｗａｔｅｒｓ ＡｕｔｏＰｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ Ｓｙｓｔｅｍ及びＸＴｅｒｒａ ＭＳ Ｃ１８カラム（５μｍ、１９ｍｍ×１００ｍｍ）を使用して酸性移動相条件下で行った。核磁気共鳴（ＮＭＲ）スペクトルは、Ｖａｒｉａｎ機器（Ａｇｉｌｅｎｔ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）を使用して４００ＭＨｚで記録した。マイクロ波加熱は、Ｂｉｏｔａｇｅ Ｅｍｒｙｓ Ｌｉｂｅｒａｔｏｒ又はＩｎｉｔｉａｔｏｒマイクロ波を使用して実施した。カラムクロマトグラフィーは、Ｔｅｌｅｄｙｎｅ Ｉｓｃｏ Ｃｏｍｂｉｆｌａｓｈ Ｒｆ２００ｄを使用して実行した。溶媒除去は、Ｂｕｅｃｈｉロータリーエバポレータ又はＧｅｎｅｖａｃ遠心エバポレータのいずれかを使用して実行した。
用語／略語：本明細書で使用されるとき、用語「不活性化された」は、反応器（例えば、反応槽、フラスコ、ガラス反応器）中の空気が、本質的に水分を含まない窒素又はアルゴンなどの不活性ガスに置き換えられることを指す。本明細書では以下の略語を使用する：ＤＣＭ＝ジクロロメタン、ＤＭＦ＝ジメチルホルムアミド、ＨＰＬＣ＝高速液体クロマトグラフィー、ＫＨＭＤＳ＝カリウムビス（トリメチルシリル）アミド、ＬＣ／ＭＳ＝液体クロマトグラフィー－質量分析法、ＭｅＯＨ＝メタノール、ＲＴ＝室温、ＴＢＳＣｌ＝ｔｅｒｔ－ブチルジメチルシリルクロリド、ＴＨＦ＝テトラヒドロフラン、ＴＬＣ＝薄層クロマトグラフィー。多重度は以下の略語を用いて指示される：ｓ＝一重線、ｄ＝二重線、ｔ＝三重線、ｑ＝四重線、ｑｕｉｎｔ＝五重線、ｓｘｔ＝六重線、ｍ＝多重線、ｄｄ＝二重線の二重線、ｄｄｄ＝二重線の二重線の二重線、ｄｔ＝三重線の二重線、ｂｒ ｓ＝幅広一重線。
ＬＣ／ＭＳ：移動相＝Ａ（Ｈ２Ｏ中０．１％ギ酸）及びＢ（アセトニトリル中０．１％ギ酸）。グラジエント＝Ｂ ５％～９５％、１．８分。カラム＝Ｗａｔｅｒｓ Ａｃｑｕｉｔｙ ＢＥＨ Ｃ１８カラム（１．７μｍ、２．１×５０ｍｍ）。
１．２ ＡＤＬ１－Ｈ１、ＡＤＬ１－Ｈ２、ＡＤＬ１－Ｈ３、及びＡＤＬ１－Ｈ４の調製
１．２．１ 概要－一般的手順１
ステップ１：発酵及びバイオコンバージョン
１０ｍＬのＳＹ－３２培地（１％Ｄ－グルコース、１％可溶性デンプン、０．５％バクトソイトン、０．５％酵母エキス、０．２％硫酸アンモニウム、０．２％ＮａＣｌ及び２．３％ＴＥＳ、ｐＨ８．０）が入った試験管内の第１の種培養物に、日本の土壌から分離されたサッカロトリクス属種（Ｓａｃｃｈａｒｏｔｈｒｉｘ ｓｐ．）ＥＡＳ－ＡＢ４５６４の２０パーセントグリセロールストック溶液を接種した。この第１の種培養物を２００ｒｐｍのレシプロシェーカーにおいて２８℃で２日間振盪した。発酵後、第１の種培養物を、各々１００ｍＬの新しいＳＹ－３２培地が入った三角フラスコ内の第２の滅菌種培養物に１％ｖ／ｖで接種した。第２の種培養物を２００ｒｐｍのロータリーシェーカー（Ｉｗａｓｈｉｙａ ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ ＳＣ－１４４－ＧＲ）において２８℃で２日間振盪した。発酵後、２５０ｍＬの第２の培養物を、１０Ｌの新しいＳＹ－３２培地及び２ｍＬの消泡剤ＰＥ－Ｍが入った１５Ｌ発酵槽（Ｓａｎｋｉ ｓｅｉｋｉ ＭＡＴ－１５）に接種した。発酵は２８℃で撹拌及び曝気条件下（４５０ｒｐｍ、１０Ｌ／分）に行った。４８時間後、培養ブロスを３０００ｒｐｍで１０分間遠心した。上清の除去後、微生物ペレットに１０Ｌの２０ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ７．０）を加えて微生物細胞を洗浄した。この懸濁液を３０００ｒｐｍで１０分間遠心した。洗浄緩衝液の除去後、微生物ペレットに１０Ｌの反応緩衝液（１％Ｄ－グルコース、０．２％塩化マグネシウム六水和物、２．３％ＴＥＳ及び１．３ｇのハーボキシジエン、ｐＨ８．０）を加え、懸濁液を１５Ｌ発酵槽に移した。バイオコンバージョンは、撹拌及び曝気（４５０ｒｐｍ、１０Ｌ／分）しながら２８℃で６時間行った。
１．２．１ 概要－一般的手順１
ステップ１：発酵及びバイオコンバージョン
１０ｍＬのＳＹ－３２培地（１％Ｄ－グルコース、１％可溶性デンプン、０．５％バクトソイトン、０．５％酵母エキス、０．２％硫酸アンモニウム、０．２％ＮａＣｌ及び２．３％ＴＥＳ、ｐＨ８．０）が入った試験管内の第１の種培養物に、日本の土壌から分離されたサッカロトリクス属種（Ｓａｃｃｈａｒｏｔｈｒｉｘ ｓｐ．）ＥＡＳ－ＡＢ４５６４の２０パーセントグリセロールストック溶液を接種した。この第１の種培養物を２００ｒｐｍのレシプロシェーカーにおいて２８℃で２日間振盪した。発酵後、第１の種培養物を、各々１００ｍＬの新しいＳＹ－３２培地が入った三角フラスコ内の第２の滅菌種培養物に１％ｖ／ｖで接種した。第２の種培養物を２００ｒｐｍのロータリーシェーカー（Ｉｗａｓｈｉｙａ ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ ＳＣ－１４４－ＧＲ）において２８℃で２日間振盪した。発酵後、２５０ｍＬの第２の培養物を、１０Ｌの新しいＳＹ－３２培地及び２ｍＬの消泡剤ＰＥ－Ｍが入った１５Ｌ発酵槽（Ｓａｎｋｉ ｓｅｉｋｉ ＭＡＴ－１５）に接種した。発酵は２８℃で撹拌及び曝気条件下（４５０ｒｐｍ、１０Ｌ／分）に行った。４８時間後、培養ブロスを３０００ｒｐｍで１０分間遠心した。上清の除去後、微生物ペレットに１０Ｌの２０ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ７．０）を加えて微生物細胞を洗浄した。この懸濁液を３０００ｒｐｍで１０分間遠心した。洗浄緩衝液の除去後、微生物ペレットに１０Ｌの反応緩衝液（１％Ｄ－グルコース、０．２％塩化マグネシウム六水和物、２．３％ＴＥＳ及び１．３ｇのハーボキシジエン、ｐＨ８．０）を加え、懸濁液を１５Ｌ発酵槽に移した。バイオコンバージョンは、撹拌及び曝気（４５０ｒｐｍ、１０Ｌ／分）しながら２８℃で６時間行った。
５－ヒドロキシハーボキシジエンの単離
上述の混合物（１０Ｌ）にＸＡＤ－７ＨＰ（４００ｇ）を加え、この混合物を３００ｒｐｍで３０分間撹拌した（ＥＹＥＬＡ ＭＡＺＥＬＡ Ｚ）。撹拌後、染色及び検査用篩（０．２５ｍｍ開口及び０．１６ｍｍワイヤ直径）を使用してＸＡＤ－７ＨＰの分離を決定した。同じ操作を繰り返した。収集されたＸＡＤ－７ＨＰを１Ｌのアセトンによって抽出し、溶媒を真空除去した。逆相ＭＰＬＣ（Ｙａｍａｚｅｎ ＥＰＣＬＣ－Ｗ－ｐｒｅｐ ２ＸＹ）によってグラジエント溶離法（ＹＭＣ－ＤｉｓｐｏＰａｃｋ ＡＴ ＯＤＳ－２５ １２０ｇ、０．１％ギ酸を添加した水中２５～５５％アセトニトリル、１５分間）で抽出物を精製すると、２９．５％の変換収率で５－ＯＨハーボキシジエン（３９７．４７ｍｇ）が得られた。１Ｈ－ＮＭＲ及び質量分析データは文献値と一致した。例えば、欧州特許第０７８１７７２ Ｂ１号明細書及びＧｈｏｓｈ ｅｔ ａｌ．（２０１４）Ｏｒｇ．Ｌｅｔｔ．１６：３１５４－５７を参照のこと。
上述の混合物（１０Ｌ）にＸＡＤ－７ＨＰ（４００ｇ）を加え、この混合物を３００ｒｐｍで３０分間撹拌した（ＥＹＥＬＡ ＭＡＺＥＬＡ Ｚ）。撹拌後、染色及び検査用篩（０．２５ｍｍ開口及び０．１６ｍｍワイヤ直径）を使用してＸＡＤ－７ＨＰの分離を決定した。同じ操作を繰り返した。収集されたＸＡＤ－７ＨＰを１Ｌのアセトンによって抽出し、溶媒を真空除去した。逆相ＭＰＬＣ（Ｙａｍａｚｅｎ ＥＰＣＬＣ－Ｗ－ｐｒｅｐ ２ＸＹ）によってグラジエント溶離法（ＹＭＣ－ＤｉｓｐｏＰａｃｋ ＡＴ ＯＤＳ－２５ １２０ｇ、０．１％ギ酸を添加した水中２５～５５％アセトニトリル、１５分間）で抽出物を精製すると、２９．５％の変換収率で５－ＯＨハーボキシジエン（３９７．４７ｍｇ）が得られた。１Ｈ－ＮＭＲ及び質量分析データは文献値と一致した。例えば、欧州特許第０７８１７７２ Ｂ１号明細書及びＧｈｏｓｈ ｅｔ ａｌ．（２０１４）Ｏｒｇ．Ｌｅｔｔ．１６：３１５４－５７を参照のこと。
ステップ２：メチル２－（（２Ｒ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－４－ヒドロキシ－６－（（Ｓ，２Ｅ，４Ｅ）－７－（（２Ｒ，３Ｒ）－３－（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）－４－ヒドロキシ－３－メトキシペンタン－２－イル）－２－メチルオキシラン－２－イル）－６－メチルヘプタ－２，４－ジエン－２－イル）－５－メチルテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）アセテートの合成
０℃でＴＨＦ（２ｍＬ）及びＭｅＯＨ（０．５ｍＬ）中の２－（（２Ｒ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－４－ヒドロキシ－６－（（Ｓ，２Ｅ，４Ｅ）－７－（（２Ｒ，３Ｒ）－３－（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）－４－ヒドロキシ－３－メトキシペンタン－２－イル）－２－メチルオキシラン－２－イル）－６－メチルヘプタ－２，４－ジエン－２－イル）－５－メチルテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）酢酸（４５ｍｇ、０．０９９ｍｍｏｌ）の溶液に、トリメチルシリルジアゾメタン（ヘキサン中２．０Ｍ、０．１４８ｍＬ、０．２９７ｍｍｏｌ）を滴下して加えた。次に得られた混合物を室温になるまで徐々に加温し、１時間撹拌した後、０℃に冷却した。次に酢酸（０．０１７ｍＬ、０．２９７ｍｍｏｌ）を加え、３０分間撹拌した。次にこの混合物をＡｃＯＥｔ及び飽和重炭酸ナトリウム水溶液で希釈した。有機層を分離し、水及びブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させて、ろ過し、真空濃縮した。分離された残渣をシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、メチル２－（（２Ｒ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－４－ヒドロキシ－６－（（Ｓ，２Ｅ，４Ｅ）－７－（（２Ｒ，３Ｒ）－３－（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）－４－ヒドロキシ－３－メトキシペンタン－２－イル）－２－メチルオキシラン－２－イル）－６－メチルヘプタ－２，４－ジエン－２－イル）－５－メチルテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）アセテートを無色の油として得た（３６．１ｍｇ、７８％収率）。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム－ｄ）０．８０（ｄ，Ｊ＝６．８３Ｈｚ，３Ｈ）０．８６（ｄ，Ｊ＝６．８３Ｈｚ，３Ｈ）１．０３（ｄ，Ｊ＝６．８３Ｈｚ，３Ｈ）１．１６（ｄ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，３Ｈ）１．２０－１．２４（ｍ，１Ｈ）１．２６（ｓ，３Ｈ）１．３１－１．３４（ｍ，３Ｈ）１．４０－１．５９（ｍ，２Ｈ）１．６３（ｂｒ．ｓ．，２Ｈ）１．６９（ｓ，３Ｈ）１．８７（ｄｄ，Ｊ＝１３．６６，４．８８Ｈｚ，１Ｈ）２．０３（ｄｄｄ，Ｊ＝１０．３７，４．０２，２．２０Ｈｚ，１Ｈ）２．４２（ｄｄ，Ｊ＝１５．６１，６．３４Ｈｚ，２Ｈ）２．５４（ｄ，Ｊ＝９．８Ｈｚ，２Ｈ）２．６２（ｄｄ，Ｊ＝１５．６，６．３Ｈｚ，１Ｈ）２．９５（ｔ，Ｊ＝５．３７Ｈｚ，１Ｈ）３．３３－３．４４（ｍ，２Ｈ）３．５２（ｓ，３Ｈ）３．６５（ｓ，３Ｈ）３．７９－３．９０（ｍ，２Ｈ）５．４５（ｄｄ，Ｊ＝１５．１２，８．７８Ｈｚ，１Ｈ）５．８８（ｄ，Ｊ＝１１．２２Ｈｚ，１Ｈ）６．２１（ｄｄ，Ｊ＝１５．１２，１０．７３Ｈｚ，１Ｈ）．
０℃でＴＨＦ（２ｍＬ）及びＭｅＯＨ（０．５ｍＬ）中の２－（（２Ｒ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－４－ヒドロキシ－６－（（Ｓ，２Ｅ，４Ｅ）－７－（（２Ｒ，３Ｒ）－３－（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）－４－ヒドロキシ－３－メトキシペンタン－２－イル）－２－メチルオキシラン－２－イル）－６－メチルヘプタ－２，４－ジエン－２－イル）－５－メチルテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）酢酸（４５ｍｇ、０．０９９ｍｍｏｌ）の溶液に、トリメチルシリルジアゾメタン（ヘキサン中２．０Ｍ、０．１４８ｍＬ、０．２９７ｍｍｏｌ）を滴下して加えた。次に得られた混合物を室温になるまで徐々に加温し、１時間撹拌した後、０℃に冷却した。次に酢酸（０．０１７ｍＬ、０．２９７ｍｍｏｌ）を加え、３０分間撹拌した。次にこの混合物をＡｃＯＥｔ及び飽和重炭酸ナトリウム水溶液で希釈した。有機層を分離し、水及びブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させて、ろ過し、真空濃縮した。分離された残渣をシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、メチル２－（（２Ｒ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－４－ヒドロキシ－６－（（Ｓ，２Ｅ，４Ｅ）－７－（（２Ｒ，３Ｒ）－３－（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）－４－ヒドロキシ－３－メトキシペンタン－２－イル）－２－メチルオキシラン－２－イル）－６－メチルヘプタ－２，４－ジエン－２－イル）－５－メチルテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）アセテートを無色の油として得た（３６．１ｍｇ、７８％収率）。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム－ｄ）０．８０（ｄ，Ｊ＝６．８３Ｈｚ，３Ｈ）０．８６（ｄ，Ｊ＝６．８３Ｈｚ，３Ｈ）１．０３（ｄ，Ｊ＝６．８３Ｈｚ，３Ｈ）１．１６（ｄ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，３Ｈ）１．２０－１．２４（ｍ，１Ｈ）１．２６（ｓ，３Ｈ）１．３１－１．３４（ｍ，３Ｈ）１．４０－１．５９（ｍ，２Ｈ）１．６３（ｂｒ．ｓ．，２Ｈ）１．６９（ｓ，３Ｈ）１．８７（ｄｄ，Ｊ＝１３．６６，４．８８Ｈｚ，１Ｈ）２．０３（ｄｄｄ，Ｊ＝１０．３７，４．０２，２．２０Ｈｚ，１Ｈ）２．４２（ｄｄ，Ｊ＝１５．６１，６．３４Ｈｚ，２Ｈ）２．５４（ｄ，Ｊ＝９．８Ｈｚ，２Ｈ）２．６２（ｄｄ，Ｊ＝１５．６，６．３Ｈｚ，１Ｈ）２．９５（ｔ，Ｊ＝５．３７Ｈｚ，１Ｈ）３．３３－３．４４（ｍ，２Ｈ）３．５２（ｓ，３Ｈ）３．６５（ｓ，３Ｈ）３．７９－３．９０（ｍ，２Ｈ）５．４５（ｄｄ，Ｊ＝１５．１２，８．７８Ｈｚ，１Ｈ）５．８８（ｄ，Ｊ＝１１．２２Ｈｚ，１Ｈ）６．２１（ｄｄ，Ｊ＝１５．１２，１０．７３Ｈｚ，１Ｈ）．
ステップ３：カルバメート合成
０℃でジクロロメタン（０．０４Ｍ）中のメチル２－（（２Ｒ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－４－ヒドロキシ－６－（（Ｓ，２Ｅ，４Ｅ）－７－（（２Ｒ，３Ｒ）－３－（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）－４－ヒドロキシ－３－メトキシペンタン－２－イル）－２－メチルオキシラン－２－イル）－６－メチルヘプタ－２，４－ジエン－２－イル）－５－メチルテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）アセテート（１．０当量、０．０７５ｍｍｏｌ）、カルボノクロリド酸４－ニトロフェニル（２当量）、ヒューニッヒ塩基（０．０６５ｍＬ、４．５当量）の混合物にＤＭＡＰ（０．０５当量）を加えた。次にこの混合物を室温に加温し、１６時間撹拌した。この混合物にピペラジン（１０当量）を加え、得られた混合物を更に１時間撹拌した。次にこの混合物をＤＣＭで希釈し、有機層を分離し、水及びブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させて、ろ過し、真空濃縮した。得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィーにより精製し、次にアミノ官能化シリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、所望の生成物を得た。
０℃でジクロロメタン（０．０４Ｍ）中のメチル２－（（２Ｒ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－４－ヒドロキシ－６－（（Ｓ，２Ｅ，４Ｅ）－７－（（２Ｒ，３Ｒ）－３－（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）－４－ヒドロキシ－３－メトキシペンタン－２－イル）－２－メチルオキシラン－２－イル）－６－メチルヘプタ－２，４－ジエン－２－イル）－５－メチルテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）アセテート（１．０当量、０．０７５ｍｍｏｌ）、カルボノクロリド酸４－ニトロフェニル（２当量）、ヒューニッヒ塩基（０．０６５ｍＬ、４．５当量）の混合物にＤＭＡＰ（０．０５当量）を加えた。次にこの混合物を室温に加温し、１６時間撹拌した。この混合物にピペラジン（１０当量）を加え、得られた混合物を更に１時間撹拌した。次にこの混合物をＤＣＭで希釈し、有機層を分離し、水及びブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させて、ろ過し、真空濃縮した。得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィーにより精製し、次にアミノ官能化シリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、所望の生成物を得た。
ステップ４：カルボン酸合成
ＭｅＯＨ（０．０２Ｍ ｍｌ）中のステップ３から得られたメチルエステル（１．０当量、０．０３９ｍｍｏｌ）の混合物に水酸化ナトリウム水溶液（１．０当量、２Ｎ）を加えた。この混合物を４０℃に加温し、その温度で４時間撹拌した。次に得られた混合物を０℃に冷却し、塩酸水溶液（２００μＬ、２Ｎ）で中和した。次にこの混合物を真空濃縮し、得られた残渣を分取ＨＰＬＣ（Ｈ２Ｏ／ＭｅＣＮ／ＨＣＯＯＨ＝８０／２０／０．１～６０／４０／０．１）により精製して、所望の生成物を得た。
ＭｅＯＨ（０．０２Ｍ ｍｌ）中のステップ３から得られたメチルエステル（１．０当量、０．０３９ｍｍｏｌ）の混合物に水酸化ナトリウム水溶液（１．０当量、２Ｎ）を加えた。この混合物を４０℃に加温し、その温度で４時間撹拌した。次に得られた混合物を０℃に冷却し、塩酸水溶液（２００μＬ、２Ｎ）で中和した。次にこの混合物を真空濃縮し、得られた残渣を分取ＨＰＬＣ（Ｈ２Ｏ／ＭｅＣＮ／ＨＣＯＯＨ＝８０／２０／０．１～６０／４０／０．１）により精製して、所望の生成物を得た。
１．２．２ Ｈ１の合成
（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，６Ｒ）－２－（（Ｓ，２Ｅ，４Ｅ）－７－（（２Ｒ，３Ｒ）－３－（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）－４－ヒドロキシ－３－メトキシペンタン－２－イル）－２－メチルオキシラン－２－イル）－６－メチルヘプタ－２，４－ジエン－２－イル）－６－（２－メトキシ－２－オキソエチル）－３－メチルテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－４－イルピペラジン－１－カルボキシレート
セクション１．２．１のステップ３のとおり表題化合物を合成して淡黄色の油を得た（２２．３ｍｇ、５２％収率）。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム－ｄ）δ ｐｐｍ ０．７１（ｄ，Ｊ＝６．８３Ｈｚ，３Ｈ）０．８５（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，３Ｈ）１．０３（ｄ，Ｊ＝６．８３Ｈｚ，３Ｈ）１．１６（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，３Ｈ）１．２０－１．２５（ｍ，１Ｈ）１．２６（ｓ，３Ｈ）１．３７（ｑ，Ｊ＝１１．５５Ｈｚ，１Ｈ）１．５１（ｄｔ，Ｊ＝８．９０，６．５２Ｈｚ，１Ｈ）１．６３－１．６７（ｍ，１Ｈ）１．６９（ｓ，３Ｈ）１．８３－２．０７（ｍ，１０Ｈ）２．１１－２．１７（ｍ，１Ｈ）２．３６－２．４５（ｍ，２Ｈ）２．５１－２．６２（ｍ，２Ｈ）２．８１（ｓ，４Ｈ）２．９５（ｔ，Ｊ＝５．１２Ｈｚ，１Ｈ）３．４０－３．４９（ｍ，４Ｈ）３．５２（ｓ，３Ｈ）３．６５（ｓ，３Ｈ）３．８０－３．９４（ｍ，２Ｈ）４．５６（ｔｄ，Ｊ＝１０．９８，４．３９Ｈｚ，１Ｈ）５．４６（ｄｄ，Ｊ＝１５．１２，８．７８Ｈｚ，１Ｈ）５．９０（ｄ，Ｊ＝１０．２４Ｈｚ，１Ｈ）６．２１（ｄｄ，Ｊ＝１５．１２，１０．７３Ｈｚ，１Ｈ）．
（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，６Ｒ）－２－（（Ｓ，２Ｅ，４Ｅ）－７－（（２Ｒ，３Ｒ）－３－（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）－４－ヒドロキシ－３－メトキシペンタン－２－イル）－２－メチルオキシラン－２－イル）－６－メチルヘプタ－２，４－ジエン－２－イル）－６－（２－メトキシ－２－オキソエチル）－３－メチルテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－４－イルピペラジン－１－カルボキシレート
セクション１．２．１のステップ３のとおり表題化合物を合成して淡黄色の油を得た（２２．３ｍｇ、５２％収率）。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム－ｄ）δ ｐｐｍ ０．７１（ｄ，Ｊ＝６．８３Ｈｚ，３Ｈ）０．８５（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，３Ｈ）１．０３（ｄ，Ｊ＝６．８３Ｈｚ，３Ｈ）１．１６（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，３Ｈ）１．２０－１．２５（ｍ，１Ｈ）１．２６（ｓ，３Ｈ）１．３７（ｑ，Ｊ＝１１．５５Ｈｚ，１Ｈ）１．５１（ｄｔ，Ｊ＝８．９０，６．５２Ｈｚ，１Ｈ）１．６３－１．６７（ｍ，１Ｈ）１．６９（ｓ，３Ｈ）１．８３－２．０７（ｍ，１０Ｈ）２．１１－２．１７（ｍ，１Ｈ）２．３６－２．４５（ｍ，２Ｈ）２．５１－２．６２（ｍ，２Ｈ）２．８１（ｓ，４Ｈ）２．９５（ｔ，Ｊ＝５．１２Ｈｚ，１Ｈ）３．４０－３．４９（ｍ，４Ｈ）３．５２（ｓ，３Ｈ）３．６５（ｓ，３Ｈ）３．８０－３．９４（ｍ，２Ｈ）４．５６（ｔｄ，Ｊ＝１０．９８，４．３９Ｈｚ，１Ｈ）５．４６（ｄｄ，Ｊ＝１５．１２，８．７８Ｈｚ，１Ｈ）５．９０（ｄ，Ｊ＝１０．２４Ｈｚ，１Ｈ）６．２１（ｄｄ，Ｊ＝１５．１２，１０．７３Ｈｚ，１Ｈ）．
２－（（２Ｒ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－６－（（Ｓ，２Ｅ，４Ｅ）－７－（（２Ｒ，３Ｒ）－３－（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）－４－ヒドロキシ－３－メトキシペンタン－２－イル）－２－メチルオキシラン－２－イル）－６－メチルヘプタ－２，４－ジエン－２－イル）－５－メチル－４－（（ピペラジン－１－カルボニル）オキシ）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）酢酸（Ｈ１）
セクション１．２．１のステップ４のとおり表題化合物を合成して無色の油を得た（１６．０ｍｇ、７３％収率）。ＬＣ／ＭＳ（ＥＳＩ，ｍ／ｚ），５６７．７７［Ｍ＋Ｈ］＋．
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，メタノール－ｄ４）δ ｐｐｍ ０．７２（ｄ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，３Ｈ）０．８０（ｄ，Ｊ＝６．８３Ｈｚ，３Ｈ）１．０３（ｄ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，３Ｈ）１．０８（ｄ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，３Ｈ）１．１７（ｄｄ，Ｊ＝１３．２，１１．２Ｈｚ，１Ｈ）１．２５（ｓ，３Ｈ）１．３６（ｑ，Ｊ＝１１．４Ｈｚ，１Ｈ）１．４５－１．５０（ｍ，２Ｈ）１．６８（ｓ，３Ｈ）１．９０（ｄｄ，Ｊ＝１３．４２，４．１５Ｈｚ，１Ｈ）２．１４（ｄｄ，Ｊ＝１１．７１，３．９０Ｈｚ，１Ｈ）２．３６－２．５２（ｍ，３Ｈ）２．６３（ｄ，Ｊ＝９．２７Ｈｚ，１Ｈ）２．９５（ｄｄ，Ｊ＝５．８５，４．３９Ｈｚ，１Ｈ）３．１７（ｂｒ．ｓ，４Ｈ）３．４６－３．５３（ｍ，４Ｈ）３．５６－３．６０（ｍ，１Ｈ）３．６９ ｎｒ．ｓ，４Ｈ）３．７４－３．８２（ｍ，２Ｈ）３．８５－３．９２（ｍ，１Ｈ）４．５８（ｔｄ，Ｊ＝１０．４９，４．３９Ｈｚ，１Ｈ）５．４９（ｄｄ，Ｊ＝１５．１２，８．７８Ｈｚ，１Ｈ）５．９４（ｄ，Ｊ＝１０．７３Ｈｚ，１Ｈ）６．２８（ｄｄ，Ｊ＝１４．８８，１０．９８Ｈｚ，１Ｈ）．
セクション１．２．１のステップ４のとおり表題化合物を合成して無色の油を得た（１６．０ｍｇ、７３％収率）。ＬＣ／ＭＳ（ＥＳＩ，ｍ／ｚ），５６７．７７［Ｍ＋Ｈ］＋．
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，メタノール－ｄ４）δ ｐｐｍ ０．７２（ｄ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，３Ｈ）０．８０（ｄ，Ｊ＝６．８３Ｈｚ，３Ｈ）１．０３（ｄ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，３Ｈ）１．０８（ｄ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，３Ｈ）１．１７（ｄｄ，Ｊ＝１３．２，１１．２Ｈｚ，１Ｈ）１．２５（ｓ，３Ｈ）１．３６（ｑ，Ｊ＝１１．４Ｈｚ，１Ｈ）１．４５－１．５０（ｍ，２Ｈ）１．６８（ｓ，３Ｈ）１．９０（ｄｄ，Ｊ＝１３．４２，４．１５Ｈｚ，１Ｈ）２．１４（ｄｄ，Ｊ＝１１．７１，３．９０Ｈｚ，１Ｈ）２．３６－２．５２（ｍ，３Ｈ）２．６３（ｄ，Ｊ＝９．２７Ｈｚ，１Ｈ）２．９５（ｄｄ，Ｊ＝５．８５，４．３９Ｈｚ，１Ｈ）３．１７（ｂｒ．ｓ，４Ｈ）３．４６－３．５３（ｍ，４Ｈ）３．５６－３．６０（ｍ，１Ｈ）３．６９ ｎｒ．ｓ，４Ｈ）３．７４－３．８２（ｍ，２Ｈ）３．８５－３．９２（ｍ，１Ｈ）４．５８（ｔｄ，Ｊ＝１０．４９，４．３９Ｈｚ，１Ｈ）５．４９（ｄｄ，Ｊ＝１５．１２，８．７８Ｈｚ，１Ｈ）５．９４（ｄ，Ｊ＝１０．７３Ｈｚ，１Ｈ）６．２８（ｄｄ，Ｊ＝１４．８８，１０．９８Ｈｚ，１Ｈ）．
１．２．３ Ｈ２の合成
（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，６Ｒ）－２－（（Ｓ，２Ｅ，４Ｅ）－７－（（２Ｒ，３Ｒ）－３－（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）－４－ヒドロキシ－３－メトキシペンタン－２－イル）－２－メチルオキシラン－２－イル）－６－メチルヘプタ－２，４－ジエン－２－イル）－６－（２－メトキシ－２－オキソエチル）－３－メチルテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－４－イル１，４－ジアゼパン－１－カルボキシレート
セクション１．２．１のステップ３のとおり表題化合物を合成した（３０．３ｍｇ、６０％収率）。
１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，クロロホルム－ｄ）δ ｐｐｍ ０．７１（ｄ，Ｊ＝６．１１Ｈｚ，３Ｈ）０．８４（ｄ，Ｊ＝６．７３Ｈｚ，３Ｈ）１．００－１．０５（ｍ，４Ｈ）１．１６（ｄ，Ｊ＝６．１１Ｈｚ，３Ｈ）１．１９－１．２４（ｍ，１Ｈ）１．２６（ｓ，３Ｈ）１．３２－１．４０（ｍ，１Ｈ）１．５１（ｄｔ，Ｊ＝９．１７，６．４２Ｈｚ，１Ｈ）１．６３－１．６７（ｍ，１Ｈ）１．６９（ｓ，３Ｈ）１．７３－１．８１（ｍ，３Ｈ）１．８３－１．９０（ｍ，２Ｈ）２．０７－２．１８（ｍ，１Ｈ）２．４１（ｄｄ，Ｊ＝１５．２８，６．１１Ｈｚ，２Ｈ）２．５１－２．６０（ｍ，２Ｈ）２．８２－２．９５（ｍ，５Ｈ）３．４１－３．４９（ｍ，４Ｈ）３．５１（ｓ，３Ｈ）３．６４（ｓ，３Ｈ）３．７９－３．９５（ｍ，２Ｈ）４．５７（ｔｄ，Ｊ＝１０．７０，４．２８Ｈｚ，１Ｈ）５．４５（ｄｄ，Ｊ＝１４．９８，８．８６Ｈｚ，１Ｈ）５．９０（ｄ，Ｊ＝１１．００Ｈｚ，１Ｈ）６．２０（ｄｄ，Ｊ＝１４．９８，１０．７０Ｈｚ，１Ｈ）．
（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，６Ｒ）－２－（（Ｓ，２Ｅ，４Ｅ）－７－（（２Ｒ，３Ｒ）－３－（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）－４－ヒドロキシ－３－メトキシペンタン－２－イル）－２－メチルオキシラン－２－イル）－６－メチルヘプタ－２，４－ジエン－２－イル）－６－（２－メトキシ－２－オキソエチル）－３－メチルテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－４－イル１，４－ジアゼパン－１－カルボキシレート
セクション１．２．１のステップ３のとおり表題化合物を合成した（３０．３ｍｇ、６０％収率）。
１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，クロロホルム－ｄ）δ ｐｐｍ ０．７１（ｄ，Ｊ＝６．１１Ｈｚ，３Ｈ）０．８４（ｄ，Ｊ＝６．７３Ｈｚ，３Ｈ）１．００－１．０５（ｍ，４Ｈ）１．１６（ｄ，Ｊ＝６．１１Ｈｚ，３Ｈ）１．１９－１．２４（ｍ，１Ｈ）１．２６（ｓ，３Ｈ）１．３２－１．４０（ｍ，１Ｈ）１．５１（ｄｔ，Ｊ＝９．１７，６．４２Ｈｚ，１Ｈ）１．６３－１．６７（ｍ，１Ｈ）１．６９（ｓ，３Ｈ）１．７３－１．８１（ｍ，３Ｈ）１．８３－１．９０（ｍ，２Ｈ）２．０７－２．１８（ｍ，１Ｈ）２．４１（ｄｄ，Ｊ＝１５．２８，６．１１Ｈｚ，２Ｈ）２．５１－２．６０（ｍ，２Ｈ）２．８２－２．９５（ｍ，５Ｈ）３．４１－３．４９（ｍ，４Ｈ）３．５１（ｓ，３Ｈ）３．６４（ｓ，３Ｈ）３．７９－３．９５（ｍ，２Ｈ）４．５７（ｔｄ，Ｊ＝１０．７０，４．２８Ｈｚ，１Ｈ）５．４５（ｄｄ，Ｊ＝１４．９８，８．８６Ｈｚ，１Ｈ）５．９０（ｄ，Ｊ＝１１．００Ｈｚ，１Ｈ）６．２０（ｄｄ，Ｊ＝１４．９８，１０．７０Ｈｚ，１Ｈ）．
２－（（２Ｒ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－４－（（１，４－ジアゼパン－１－カルボニル）オキシ）－６－（（Ｓ，２Ｅ，４Ｅ）－７－（（２Ｒ，３Ｒ）－３－（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）－４－ヒドロキシ－３－メトキシペンタン－２－イル）－２－メチルオキシラン－２－イル）－６－メチルヘプタ－２，４－ジエン－２－イル）－５－メチルテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）酢酸（Ｈ２）
セクション１．２．１のステップ４のとおり表題化合物を合成して無色の油を得た（２０．９ｍｇ、７１％収率）。ＬＣ／ＭＳ（ＥＳＩ，ｍ／ｚ），５８１．８１［Ｍ＋Ｈ］＋．
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，メタノール－ｄ４）δ ｐｐｍ ０．７４（ｄ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，３Ｈ）０．８０（ｄ，Ｊ＝７．３２Ｈｚ，３Ｈ）１．０３（ｄ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，３Ｈ）１．０８（ｄ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，３Ｈ）１．１２－１．２３（ｍ，１Ｈ）１．２５（ｓ，３Ｈ）１．３１－１．４１（ｍ，１Ｈ）１．４１－１．５３（ｍ，１Ｈ）１．６３－１．７４（ｍ，４Ｈ）１．８４－１．９３（ｍ，１Ｈ）２．０４（ｂｒ．ｓ．，２Ｈ）２．１１－２．２１（ｍ，１Ｈ）２．３４－２．５４（ｍ，３Ｈ）２．６３（ｄ，Ｊ＝９．２７Ｈｚ，１Ｈ）２．９０－２．９８（ｍ，２Ｈ）３．２１－３．３６（ｍ，７Ｈ）３．５０（ｓ，３Ｈ）３．５３－３．６６（ｍ，２Ｈ）３．６９－３．７９（ｍ，３Ｈ）３．８３－３．９５（ｍ，１Ｈ）４．５７（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）５．４９（ｄｄ，Ｊ＝１４．８８，９．０３Ｈｚ，１Ｈ）５．９４（ｄ，Ｊ＝１０．７３Ｈｚ，１Ｈ）６．２４－６．３６（ｍ，１Ｈ）．
セクション１．２．１のステップ４のとおり表題化合物を合成して無色の油を得た（２０．９ｍｇ、７１％収率）。ＬＣ／ＭＳ（ＥＳＩ，ｍ／ｚ），５８１．８１［Ｍ＋Ｈ］＋．
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，メタノール－ｄ４）δ ｐｐｍ ０．７４（ｄ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，３Ｈ）０．８０（ｄ，Ｊ＝７．３２Ｈｚ，３Ｈ）１．０３（ｄ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，３Ｈ）１．０８（ｄ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，３Ｈ）１．１２－１．２３（ｍ，１Ｈ）１．２５（ｓ，３Ｈ）１．３１－１．４１（ｍ，１Ｈ）１．４１－１．５３（ｍ，１Ｈ）１．６３－１．７４（ｍ，４Ｈ）１．８４－１．９３（ｍ，１Ｈ）２．０４（ｂｒ．ｓ．，２Ｈ）２．１１－２．２１（ｍ，１Ｈ）２．３４－２．５４（ｍ，３Ｈ）２．６３（ｄ，Ｊ＝９．２７Ｈｚ，１Ｈ）２．９０－２．９８（ｍ，２Ｈ）３．２１－３．３６（ｍ，７Ｈ）３．５０（ｓ，３Ｈ）３．５３－３．６６（ｍ，２Ｈ）３．６９－３．７９（ｍ，３Ｈ）３．８３－３．９５（ｍ，１Ｈ）４．５７（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）５．４９（ｄｄ，Ｊ＝１４．８８，９．０３Ｈｚ，１Ｈ）５．９４（ｄ，Ｊ＝１０．７３Ｈｚ，１Ｈ）６．２４－６．３６（ｍ，１Ｈ）．
１．２．４ Ｈ３の合成
（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，６Ｒ）－２－（（Ｓ，２Ｅ，４Ｅ）－７－（（２Ｒ，３Ｒ）－３－（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）－４－ヒドロキシ－３－メトキシペンタン－２－イル）－２－メチルオキシラン－２－イル）－６－メチルヘプタ－２，４－ジエン－２－イル）－６－（２－メトキシ－２－オキソエチル）－３－メチルテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－４－イル３－（メチルアミノ）ピロリジン－１－カルボキシレート
セクション１．２．１のステップ３のとおり表題化合物を合成して無色の油を得た（９．６ｍｇ、１９％収率）。
１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，クロロホルム－ｄ）δ ｐｐｍ ０．７１（ｄ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，３Ｈ）０．８５（ｄ，Ｊ＝６．７３Ｈｚ，３Ｈ）０．９９－１．０５（ｍ，４Ｈ）１．１７（ｄ，Ｊ＝６．１１Ｈｚ，４Ｈ）１．２７（ｓ，３Ｈ）１．３２－１．４５（ｍ，１Ｈ）１．４９－１．６８（ｍ，６Ｈ）１．７０（ｓ，３Ｈ）１．８８（ｄｄ，Ｊ＝１３．４５，４．８９Ｈｚ，１Ｈ）２．００－２．０８（ｍ，１Ｈ）２．１０－２．１７（ｍ，１Ｈ）２．３８－２．４７（ｍ，５Ｈ）２．５２－２．６１（ｍ，２Ｈ）２．９４（ｔ，Ｊ＝５．５０Ｈｚ，１Ｈ）３．１７－３．２６（ｍ，１Ｈ）３．４３（ｄ，Ｊ＝１０．４Ｈｚ，２Ｈ）３．５２（ｓ，４Ｈ）３．６５（ｓ，３Ｈ）３．７８－３．８６（ｍ，１Ｈ）３．８７－３．９５（ｍ，１Ｈ）４．５１－４．５７（ｍ，１Ｈ）５．４５（ｄｄ，Ｊ＝１４．９８，８．８６Ｈｚ，１Ｈ）５．９０（ｄ，Ｊ＝１０．３９Ｈｚ，１Ｈ）６．２１（ｄｄ，Ｊ＝１４．９８，１０．７０Ｈｚ，１Ｈ）．
（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，６Ｒ）－２－（（Ｓ，２Ｅ，４Ｅ）－７－（（２Ｒ，３Ｒ）－３－（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）－４－ヒドロキシ－３－メトキシペンタン－２－イル）－２－メチルオキシラン－２－イル）－６－メチルヘプタ－２，４－ジエン－２－イル）－６－（２－メトキシ－２－オキソエチル）－３－メチルテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－４－イル３－（メチルアミノ）ピロリジン－１－カルボキシレート
セクション１．２．１のステップ３のとおり表題化合物を合成して無色の油を得た（９．６ｍｇ、１９％収率）。
１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，クロロホルム－ｄ）δ ｐｐｍ ０．７１（ｄ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，３Ｈ）０．８５（ｄ，Ｊ＝６．７３Ｈｚ，３Ｈ）０．９９－１．０５（ｍ，４Ｈ）１．１７（ｄ，Ｊ＝６．１１Ｈｚ，４Ｈ）１．２７（ｓ，３Ｈ）１．３２－１．４５（ｍ，１Ｈ）１．４９－１．６８（ｍ，６Ｈ）１．７０（ｓ，３Ｈ）１．８８（ｄｄ，Ｊ＝１３．４５，４．８９Ｈｚ，１Ｈ）２．００－２．０８（ｍ，１Ｈ）２．１０－２．１７（ｍ，１Ｈ）２．３８－２．４７（ｍ，５Ｈ）２．５２－２．６１（ｍ，２Ｈ）２．９４（ｔ，Ｊ＝５．５０Ｈｚ，１Ｈ）３．１７－３．２６（ｍ，１Ｈ）３．４３（ｄ，Ｊ＝１０．４Ｈｚ，２Ｈ）３．５２（ｓ，４Ｈ）３．６５（ｓ，３Ｈ）３．７８－３．８６（ｍ，１Ｈ）３．８７－３．９５（ｍ，１Ｈ）４．５１－４．５７（ｍ，１Ｈ）５．４５（ｄｄ，Ｊ＝１４．９８，８．８６Ｈｚ，１Ｈ）５．９０（ｄ，Ｊ＝１０．３９Ｈｚ，１Ｈ）６．２１（ｄｄ，Ｊ＝１４．９８，１０．７０Ｈｚ，１Ｈ）．
２－（（２Ｒ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－６－（（Ｓ，２Ｅ，４Ｅ）－７－（（２Ｒ，３Ｒ）－３－（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）－４－ヒドロキシ－３－メトキシペンタン－２－イル）－２－メチルオキシラン－２－イル）－６－メチルヘプタ－２，４－ジエン－２－イル）－５－メチル－４－（（３－（メチルアミノ）ピロリジン－１－カルボニル）オキシ）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）酢酸（Ｈ３）
セクション１．２．１のステップ４のとおり表題化合物を合成して無色の油を得た（９．８ｍｇ、定量的収率）。ＬＣ／ＭＳ（ＥＳＩ，ｍ／ｚ），５８１．８１［Ｍ＋Ｈ］＋．
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，メタノール－ｄ４）δ ｐｐｍ ０．７１（ｄ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，３Ｈ）０．８５（ｄ，Ｊ＝６．８３Ｈｚ，３Ｈ）１．０２（ｄ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，３Ｈ）１．１６（ｄ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，３Ｈ）１．２２－１．２４（ｍ，１Ｈ）１．２６（ｓ，３Ｈ）１．３１－１．４２（ｍ，１Ｈ）１．４５－１．６６（ｍ，４Ｈ）１．６９（ｓ，３Ｈ）１．８７（ｄｄ，Ｊ＝１３．６６，４．８８Ｈｚ，１Ｈ）２．０２－２．２０（ｍ，２Ｈ）２．３８－２．５１（ｍ，４Ｈ）２．５１－２．６０（ｍ，２Ｈ）２．９４（ｔ，Ｊ＝５．１２Ｈｚ，１Ｈ）３．０８－３．２６（ｍ，２Ｈ）３．３３－３．４０（ｍ，１Ｈ）３．４３（ｄ，Ｊ＝９．７６Ｈｚ，２Ｈ）３．５１（ｓ，３Ｈ）３．６４（ｓ，３Ｈ）３．８３－３．９４（ｍ，１Ｈ）４．５１－４．５９（ｍ，１Ｈ）５．４５（ｄｄ，Ｊ＝１５．１２，８．７８Ｈｚ，１Ｈ）５．８９（ｄ，Ｊ＝１０．７３Ｈｚ，１Ｈ）６．２０（ｄｄ，Ｊ＝１５．１２，１０．７３Ｈｚ，１Ｈ）．
セクション１．２．１のステップ４のとおり表題化合物を合成して無色の油を得た（９．８ｍｇ、定量的収率）。ＬＣ／ＭＳ（ＥＳＩ，ｍ／ｚ），５８１．８１［Ｍ＋Ｈ］＋．
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，メタノール－ｄ４）δ ｐｐｍ ０．７１（ｄ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，３Ｈ）０．８５（ｄ，Ｊ＝６．８３Ｈｚ，３Ｈ）１．０２（ｄ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，３Ｈ）１．１６（ｄ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，３Ｈ）１．２２－１．２４（ｍ，１Ｈ）１．２６（ｓ，３Ｈ）１．３１－１．４２（ｍ，１Ｈ）１．４５－１．６６（ｍ，４Ｈ）１．６９（ｓ，３Ｈ）１．８７（ｄｄ，Ｊ＝１３．６６，４．８８Ｈｚ，１Ｈ）２．０２－２．２０（ｍ，２Ｈ）２．３８－２．５１（ｍ，４Ｈ）２．５１－２．６０（ｍ，２Ｈ）２．９４（ｔ，Ｊ＝５．１２Ｈｚ，１Ｈ）３．０８－３．２６（ｍ，２Ｈ）３．３３－３．４０（ｍ，１Ｈ）３．４３（ｄ，Ｊ＝９．７６Ｈｚ，２Ｈ）３．５１（ｓ，３Ｈ）３．６４（ｓ，３Ｈ）３．８３－３．９４（ｍ，１Ｈ）４．５１－４．５９（ｍ，１Ｈ）５．４５（ｄｄ，Ｊ＝１５．１２，８．７８Ｈｚ，１Ｈ）５．８９（ｄ，Ｊ＝１０．７３Ｈｚ，１Ｈ）６．２０（ｄｄ，Ｊ＝１５．１２，１０．７３Ｈｚ，１Ｈ）．
１．２．５ Ｈ１２の合成
セクション１．２．１のステップ３（１３．８ｍｇ、９１％収率）及びステップ４のとおり表題化合物を合成して、白色のアモルファス固体（ａｒｍｏｐｈｏｕｓ ｓｏｌｉｄ）を得た（４．５８ｍｇ、７６％収率）。ＬＣ／ＭＳ（ＥＳＩ，ｍ／ｚ），５８１．５５［Ｍ＋Ｈ］＋．
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム－ｄ）δ ｐｐｍ ０．７１（ｄ，Ｊ＝６．８３Ｈｚ，３Ｈ）０．８５（ｄ，Ｊ＝６．８３Ｈｚ，３Ｈ）１．０３（ｄ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，３Ｈ）１．１６（ｄ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，３Ｈ）１．２６（ｓ，４Ｈ）１．４８－１．５７（ｍ，１Ｈ）１．６１－１．６８（ｍ，１Ｈ）１．８９（ｄｄ，Ｊ＝１３．６６，４．３９Ｈｚ，１Ｈ）２．２０（ｂｒ ｄ，Ｊ＝８．２９Ｈｚ，１Ｈ）２．３０（ｓ，４Ｈ）２．３３－２．５１（ｍ，６Ｈ）２．５２－２．５７（ｍ，２Ｈ）２．５７－２．６３（ｍ，１Ｈ）２．７８－３．２１（ｍ，９Ｈ）３．３５－３．６６（ｍ，９Ｈ）３．７０－３．９９（ｍ，２Ｈ）４．５２（ｂｒ ｄ，Ｊ＝３．９０Ｈｚ，１Ｈ）５．４１－５．５８（ｍ，１Ｈ）５．９２（ｂｒ ｄ，Ｊ＝１１．２２Ｈｚ，１Ｈ）６．１３－６．２９（ｍ，１Ｈ）．
セクション１．２．１のステップ３（１３．８ｍｇ、９１％収率）及びステップ４のとおり表題化合物を合成して、白色のアモルファス固体（ａｒｍｏｐｈｏｕｓ ｓｏｌｉｄ）を得た（４．５８ｍｇ、７６％収率）。ＬＣ／ＭＳ（ＥＳＩ，ｍ／ｚ），５８１．５５［Ｍ＋Ｈ］＋．
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム－ｄ）δ ｐｐｍ ０．７１（ｄ，Ｊ＝６．８３Ｈｚ，３Ｈ）０．８５（ｄ，Ｊ＝６．８３Ｈｚ，３Ｈ）１．０３（ｄ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，３Ｈ）１．１６（ｄ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，３Ｈ）１．２６（ｓ，４Ｈ）１．４８－１．５７（ｍ，１Ｈ）１．６１－１．６８（ｍ，１Ｈ）１．８９（ｄｄ，Ｊ＝１３．６６，４．３９Ｈｚ，１Ｈ）２．２０（ｂｒ ｄ，Ｊ＝８．２９Ｈｚ，１Ｈ）２．３０（ｓ，４Ｈ）２．３３－２．５１（ｍ，６Ｈ）２．５２－２．５７（ｍ，２Ｈ）２．５７－２．６３（ｍ，１Ｈ）２．７８－３．２１（ｍ，９Ｈ）３．３５－３．６６（ｍ，９Ｈ）３．７０－３．９９（ｍ，２Ｈ）４．５２（ｂｒ ｄ，Ｊ＝３．９０Ｈｚ，１Ｈ）５．４１－５．５８（ｍ，１Ｈ）５．９２（ｂｒ ｄ，Ｊ＝１１．２２Ｈｚ，１Ｈ）６．１３－６．２９（ｍ，１Ｈ）．
１．２．６ Ｈ４の合成
スキーム２のとおりＨ４を合成した：
ステップ１：２，５－ジオキソピロリジン－１－イル２－（（２Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－６－（（Ｓ，２Ｅ，４Ｅ）－７－（（２Ｒ，３Ｒ）－３－（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）－４－ヒドロキシ－３－メトキシペンタン－２－イル）－２－メチルオキシラン－２－イル）－６－メチルヘプタ－２，４－ジエン－２－イル）－５－メチルテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）アセテート
０℃でＤＣＭ（１０ｍｌ）中の２－（（２Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－６－（（Ｓ，２Ｅ，４Ｅ）－７－（（２Ｒ，３Ｒ）－３－（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）－４－ヒドロキシ－３－メトキシペンタン－２－イル）－２－メチルオキシラン－２－イル）－６－メチルヘプタ－２，４－ジエン－２－イル）－５－メチルテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）酢酸（ハーボキシジエン、３００ｍｇ、０．６８４ｍｍｏｌ）の混合物にＤＣＣ（３１０ｍｇ、１．５０５ｍｍｏｌ）を加え、得られた混合物を１５分間撹拌した。次に、この混合物にＮ－ヒドロキシコハク酸アミド（１７３ｍｇ、１．５０５ｍｍｏｌ）を加えた。得られた混合物（ｍｉｘｔｕｘｅ）を室温に加温し、１６時間撹拌した。続いて、混合物をセライトでろ過し、ろ過ケーキをＤＣＭで洗浄した。ろ液を真空濃縮し、得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（１２ｇ、ヘプタン／ＡｃＯＥｔ＝５０／５０～０／１００）により精製して、表題化合物を無色（ｃｏｌｏｒｏｌｅｓｓ）の固体として得た（３５７ｍｇ、９７％収率）。
１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，クロロホルム－ｄ）δ ｐｐｍ ０．６６（ｄ，Ｊ＝６．７３Ｈｚ，３Ｈ）０．８３－０．８９（ｍ，３Ｈ）１．０３（ｄ，Ｊ＝６．７３Ｈｚ，３Ｈ）１．１７（ｄ，Ｊ＝６．１Ｈｚ，３Ｈ）１．１９－１．２５（ｍ，４Ｈ）１．２７（ｓ，３Ｈ）１．３９－１．５６（ｍ，３Ｈ）１．５９（ｓ，３Ｈ）１．７０（ｓ，３Ｈ）１．７９－１．９３（ｍ，３Ｈ）２．３６－２．４３（ｍ，１Ｈ）２．５２－２．５５（ｍ，２Ｈ）２．７０（ｄｄ，Ｊ＝１５．２８，７．３４Ｈｚ，１Ｈ）２．８１（ｂｒ．ｓ．，３Ｈ）２．８３－２．９０（ｍ，１Ｈ）２．９５（ｔ，Ｊ＝５．５０Ｈｚ，１Ｈ）３．３４（ｄ，Ｊ＝９．７８Ｈｚ，１Ｈ）３．５２（ｓ，３Ｈ）３．７９－３．８７（ｍ，２Ｈ）５．４３（ｄｄ，Ｊ＝１５．２８，９．１７Ｈｚ，１Ｈ）５．８８（ｄ，Ｊ＝１１．００Ｈｚ，１Ｈ）６．２１－６．２６（ｍ，１Ｈ）．
スキーム２のとおりＨ４を合成した：
ステップ１：２，５－ジオキソピロリジン－１－イル２－（（２Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－６－（（Ｓ，２Ｅ，４Ｅ）－７－（（２Ｒ，３Ｒ）－３－（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）－４－ヒドロキシ－３－メトキシペンタン－２－イル）－２－メチルオキシラン－２－イル）－６－メチルヘプタ－２，４－ジエン－２－イル）－５－メチルテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）アセテート
０℃でＤＣＭ（１０ｍｌ）中の２－（（２Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－６－（（Ｓ，２Ｅ，４Ｅ）－７－（（２Ｒ，３Ｒ）－３－（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）－４－ヒドロキシ－３－メトキシペンタン－２－イル）－２－メチルオキシラン－２－イル）－６－メチルヘプタ－２，４－ジエン－２－イル）－５－メチルテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）酢酸（ハーボキシジエン、３００ｍｇ、０．６８４ｍｍｏｌ）の混合物にＤＣＣ（３１０ｍｇ、１．５０５ｍｍｏｌ）を加え、得られた混合物を１５分間撹拌した。次に、この混合物にＮ－ヒドロキシコハク酸アミド（１７３ｍｇ、１．５０５ｍｍｏｌ）を加えた。得られた混合物（ｍｉｘｔｕｘｅ）を室温に加温し、１６時間撹拌した。続いて、混合物をセライトでろ過し、ろ過ケーキをＤＣＭで洗浄した。ろ液を真空濃縮し、得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（１２ｇ、ヘプタン／ＡｃＯＥｔ＝５０／５０～０／１００）により精製して、表題化合物を無色（ｃｏｌｏｒｏｌｅｓｓ）の固体として得た（３５７ｍｇ、９７％収率）。
１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，クロロホルム－ｄ）δ ｐｐｍ ０．６６（ｄ，Ｊ＝６．７３Ｈｚ，３Ｈ）０．８３－０．８９（ｍ，３Ｈ）１．０３（ｄ，Ｊ＝６．７３Ｈｚ，３Ｈ）１．１７（ｄ，Ｊ＝６．１Ｈｚ，３Ｈ）１．１９－１．２５（ｍ，４Ｈ）１．２７（ｓ，３Ｈ）１．３９－１．５６（ｍ，３Ｈ）１．５９（ｓ，３Ｈ）１．７０（ｓ，３Ｈ）１．７９－１．９３（ｍ，３Ｈ）２．３６－２．４３（ｍ，１Ｈ）２．５２－２．５５（ｍ，２Ｈ）２．７０（ｄｄ，Ｊ＝１５．２８，７．３４Ｈｚ，１Ｈ）２．８１（ｂｒ．ｓ．，３Ｈ）２．８３－２．９０（ｍ，１Ｈ）２．９５（ｔ，Ｊ＝５．５０Ｈｚ，１Ｈ）３．３４（ｄ，Ｊ＝９．７８Ｈｚ，１Ｈ）３．５２（ｓ，３Ｈ）３．７９－３．８７（ｍ，２Ｈ）５．４３（ｄｄ，Ｊ＝１５．２８，９．１７Ｈｚ，１Ｈ）５．８８（ｄ，Ｊ＝１１．００Ｈｚ，１Ｈ）６．２１－６．２６（ｍ，１Ｈ）．
ステップ２：（Ｓ）－５－ヒドロキシ－２－（２－（（２Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－６－（（Ｓ，２Ｅ，４Ｅ）－７－（（２Ｒ，３Ｒ）－３－（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）－４－ヒドロキシ－３－メトキシペンタン－２－イル）－２－メチルオキシラン－２－イル）－６－メチルヘプタ－２，４－ジエン－２－イル）－５－メチルテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）アセトアミド）ペンタン酸
ＤＭＦ（２ｍＬ）中のステップ１で得られた化合物（４０ｍｇ、０．０７５ｍｍｏｌ）と（Ｓ）－２－アミノ－５－ヒドロキシペンタン酸（１９．８８ｍｇ、０．１４９ｍｍｏｌ）との混合物にＤＩＰＥＡ（０．０６５ｍＬ、０．３７３ｍｍｏｌ）を加えた。得られた混合物を室温で４時間撹拌し、次にＡｃＯＥｔで希釈した。有機層を分離し、水及びブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させて、ろ過し、真空濃縮した。得られた残渣をステップ３で更なる精製なしに使用した。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム－ｄ）δ ｐｐｍ ０．６６（ｄ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，３Ｈ）０．８５（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，３Ｈ）１．０３（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，３Ｈ）１．１５（ｄ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，３Ｈ）１．１９－１．２３（ｍ，２Ｈ）１．２７（ｓ，３Ｈ）１．４０－１．６１（ｍ，６Ｈ）１．７２（ｓ，３Ｈ）１．８２－１．９３（ｍ，３Ｈ）２．３７－２．４３（ｍ，２Ｈ）２．５６（ｄ，Ｊ＝９．８Ｈｚ，１Ｈ）２．９９（ｔ，Ｊ＝５．３Ｈｚ，１Ｈ）３．３３（ｄ，Ｊ＝９．８Ｈｚ，１Ｈ）３．５２（ｓ，３Ｈ）３．５４－３．７０（ｍ，４Ｈ）３．８１－３．８７（ｍ，２Ｈ）４．５６（ｄ，Ｊ＝５．４Ｈｚ，１Ｈ）５．４８（ｄｄ，Ｊ＝１５．１２，８．２９Ｈｚ，１Ｈ）５．８９（ｄ，Ｊ＝１１．２Ｈｚ，１Ｈ）６．２２（ｄｄ，Ｊ＝１５．１，１０．７Ｈｚ，１Ｈ）７．３０（ｄ，Ｊ＝７．３Ｈｚ １Ｈ）．
ＤＭＦ（２ｍＬ）中のステップ１で得られた化合物（４０ｍｇ、０．０７５ｍｍｏｌ）と（Ｓ）－２－アミノ－５－ヒドロキシペンタン酸（１９．８８ｍｇ、０．１４９ｍｍｏｌ）との混合物にＤＩＰＥＡ（０．０６５ｍＬ、０．３７３ｍｍｏｌ）を加えた。得られた混合物を室温で４時間撹拌し、次にＡｃＯＥｔで希釈した。有機層を分離し、水及びブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させて、ろ過し、真空濃縮した。得られた残渣をステップ３で更なる精製なしに使用した。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム－ｄ）δ ｐｐｍ ０．６６（ｄ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，３Ｈ）０．８５（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，３Ｈ）１．０３（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，３Ｈ）１．１５（ｄ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，３Ｈ）１．１９－１．２３（ｍ，２Ｈ）１．２７（ｓ，３Ｈ）１．４０－１．６１（ｍ，６Ｈ）１．７２（ｓ，３Ｈ）１．８２－１．９３（ｍ，３Ｈ）２．３７－２．４３（ｍ，２Ｈ）２．５６（ｄ，Ｊ＝９．８Ｈｚ，１Ｈ）２．９９（ｔ，Ｊ＝５．３Ｈｚ，１Ｈ）３．３３（ｄ，Ｊ＝９．８Ｈｚ，１Ｈ）３．５２（ｓ，３Ｈ）３．５４－３．７０（ｍ，４Ｈ）３．８１－３．８７（ｍ，２Ｈ）４．５６（ｄ，Ｊ＝５．４Ｈｚ，１Ｈ）５．４８（ｄｄ，Ｊ＝１５．１２，８．２９Ｈｚ，１Ｈ）５．８９（ｄ，Ｊ＝１１．２Ｈｚ，１Ｈ）６．２２（ｄｄ，Ｊ＝１５．１，１０．７Ｈｚ，１Ｈ）７．３０（ｄ，Ｊ＝７．３Ｈｚ １Ｈ）．
ステップ３：メチル（Ｓ）－５－ヒドロキシ－２－（２－（（２Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－６－（（Ｓ，２Ｅ，４Ｅ）－７－（（２Ｒ，３Ｒ）－３－（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）－４－ヒドロキシ－３－メトキシペンタン－２－イル）－２－メチルオキシラン－２－イル）－６－メチルヘプタ－２，４－ジエン－２－イル）－５－メチルテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）アセトアミド）ペンタノエート
０℃でＴＨＦ（２ｍＬ）及びメタノール（０．５ｍＬ）中のステップ２から得られた化合物（３５ｍｇ、０．０６３ｍｍｏｌ）の混合物にトリメチルシリルジアゾメタン（ヘキサン中２．０Ｍ、０．０９５ｍＬ、０．１９ｍｍｏｌ）を加えた。次にこの混合物を室温に加温し、１時間撹拌した。続いて、この混合物を０℃に冷却し、酢酸を加えることによりクエンチした。得られた混合物を３０分間撹拌し、次に真空濃縮した。得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（１２ｇ、ヘプタン／ＡｃＯＥｔ＝９０／１０～３０／７０）により精製して、表題化合物を得た（１５．７ｍｇ、４４％収率）。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム－ｄ）δ ｐｐｍ ０．６６（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，３Ｈ）０．８５（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，３Ｈ）１．０３（ｄ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，３Ｈ）１．１６（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，３Ｈ）１．１９－１．２３（ｍ，３Ｈ）１．２７（ｓ，３Ｈ）１．４７－１．７０（ｍ，７Ｈ）１．７３（ｓ，３Ｈ）１．７７－１．９４（ｍ，６Ｈ）２．３４－２．５９（ｍ，５Ｈ）２．９６（ｔ，Ｊ＝５．４Ｈｚ １Ｈ）３．２９－３．４０（ｍ，１Ｈ）３．５２（ｓ，３Ｈ）３．５６－３．６６（ｍ，３Ｈ）３．７０（ｓ，３Ｈ）３．７７－３．８９（ｍ，１Ｈ）４．６１（ｔｄ，Ｊ＝８．０５，４．８８Ｈｚ，１Ｈ）５．４６（ｄｄ，Ｊ＝１５．１２，８．７８Ｈｚ，１Ｈ）５．８９（ｄ，Ｊ＝１０．７３Ｈｚ，１Ｈ）６．２３（ｄｄ，Ｊ＝１５．１２，１０．７３Ｈｚ，１Ｈ）７．１０（ｄ，Ｊ＝８．２９Ｈｚ，１Ｈ）．
０℃でＴＨＦ（２ｍＬ）及びメタノール（０．５ｍＬ）中のステップ２から得られた化合物（３５ｍｇ、０．０６３ｍｍｏｌ）の混合物にトリメチルシリルジアゾメタン（ヘキサン中２．０Ｍ、０．０９５ｍＬ、０．１９ｍｍｏｌ）を加えた。次にこの混合物を室温に加温し、１時間撹拌した。続いて、この混合物を０℃に冷却し、酢酸を加えることによりクエンチした。得られた混合物を３０分間撹拌し、次に真空濃縮した。得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（１２ｇ、ヘプタン／ＡｃＯＥｔ＝９０／１０～３０／７０）により精製して、表題化合物を得た（１５．７ｍｇ、４４％収率）。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム－ｄ）δ ｐｐｍ ０．６６（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，３Ｈ）０．８５（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，３Ｈ）１．０３（ｄ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，３Ｈ）１．１６（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，３Ｈ）１．１９－１．２３（ｍ，３Ｈ）１．２７（ｓ，３Ｈ）１．４７－１．７０（ｍ，７Ｈ）１．７３（ｓ，３Ｈ）１．７７－１．９４（ｍ，６Ｈ）２．３４－２．５９（ｍ，５Ｈ）２．９６（ｔ，Ｊ＝５．４Ｈｚ １Ｈ）３．２９－３．４０（ｍ，１Ｈ）３．５２（ｓ，３Ｈ）３．５６－３．６６（ｍ，３Ｈ）３．７０（ｓ，３Ｈ）３．７７－３．８９（ｍ，１Ｈ）４．６１（ｔｄ，Ｊ＝８．０５，４．８８Ｈｚ，１Ｈ）５．４６（ｄｄ，Ｊ＝１５．１２，８．７８Ｈｚ，１Ｈ）５．８９（ｄ，Ｊ＝１０．７３Ｈｚ，１Ｈ）６．２３（ｄｄ，Ｊ＝１５．１２，１０．７３Ｈｚ，１Ｈ）７．１０（ｄ，Ｊ＝８．２９Ｈｚ，１Ｈ）．
ステップ４：（Ｓ）－４－（２－（（２Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－６－（（Ｓ，２Ｅ，４Ｅ）－７－（（２Ｒ，３Ｒ）－３－（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）－４－ヒドロキシ－３－メトキシペンタン－２－イル）－２－メチルオキシラン－２－イル）－６－メチルヘプタ－２，４－ジエン－２－イル）－５－メチルテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）アセトアミド）－５－メトキシ－５－オキソペンチルピペラジン－１－カルボキシレート
室温でＤＣＭ（１ｍＬ）中のステップ３で生成された化合物（１５．７ｍｇ、０．０２８ｍｍｏｌ）と４－クロロギ酸ニトロフェニル（１１．１５ｍｇ、０．０５５ｍｍｏｌ）とヒューニッヒ塩基（０．０２４ｍＬ、０．１３８ｍｍｏｌ）との混合物にＤＭＡＰ（１．６８９ｍｇ、０．０１４ｍｍｏｌ）を加えた。得られた混合物を室温で１６時間撹拌した。続いて、ピペラジン（２３．８２ｍｇ、０．２７７ｍｍｏｌ）を加え、混合物を更に１時間撹拌した。次に、この混合物をＤＣＭで希釈し、有機層を分離し、水及びブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させて、ろ過し、真空濃縮した。粗製残渣を次のステップで精製なしに使用した。
室温でＤＣＭ（１ｍＬ）中のステップ３で生成された化合物（１５．７ｍｇ、０．０２８ｍｍｏｌ）と４－クロロギ酸ニトロフェニル（１１．１５ｍｇ、０．０５５ｍｍｏｌ）とヒューニッヒ塩基（０．０２４ｍＬ、０．１３８ｍｍｏｌ）との混合物にＤＭＡＰ（１．６８９ｍｇ、０．０１４ｍｍｏｌ）を加えた。得られた混合物を室温で１６時間撹拌した。続いて、ピペラジン（２３．８２ｍｇ、０．２７７ｍｍｏｌ）を加え、混合物を更に１時間撹拌した。次に、この混合物をＤＣＭで希釈し、有機層を分離し、水及びブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させて、ろ過し、真空濃縮した。粗製残渣を次のステップで精製なしに使用した。
ステップ５：（Ｓ）－２－（２－（（２Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－６－（（Ｓ，２Ｅ，４Ｅ）－７－（（２Ｒ，３Ｒ）－３－（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）－４－ヒドロキシ－３－メトキシペンタン－２－イル）－２－メチルオキシラン－２－イル）－６－メチルヘプタ－２，４－ジエン－２－イル）－５－メチルテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）アセトアミド）－５－（（ピペラジン－１－カルボニル）オキシ）ペンタン酸（Ｈ４）
ステップ４で得られた残渣（１５ｍｇ、０．０２２ｍｍｏｌ）とＭｅＯＨ（１ｍＬ）との混合物に水酸化ナトリウム水溶液（２Ｎ、１００μｌ、０．２０ｍｍｏｌ）を加えた。この混合物を４０℃に加温し、２時間撹拌した。次に混合物を０℃に冷却し、塩酸水溶液（１００μＬ、２Ｎ）を加えた。次に得られた混合物を真空濃縮し、得られた残渣を分取ＨＰＬＣ（Ｈ２Ｏ／ＭｅＣＮ／ＮＨ３水溶液＝６０／４０／０．１～３０／７０／０．１）により精製して、表題化合物を無色の油として得た（７．０ｍｇ、ステップ４及び５で４８％収率）。ＬＣ／ＭＳ（ＥＳＩ，ｍ／ｚ），６６６．９０［Ｍ＋Ｈ］＋．
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，メタノール－ｄ４）δ ｐｐｍ ０．６５（ｄ，Ｊ＝６．８３Ｈｚ，３Ｈ）０．８１（ｄ，Ｊ＝７．３２Ｈｚ，３Ｈ）０．９８－１．０４（ｍ，３Ｈ）１．０８（ｄ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，３Ｈ）１．１７（ｄ，Ｊ＝１１．７１Ｈｚ，１Ｈ）１．２２－１．２８（ｍ，４Ｈ）１．３５（ｄ，Ｊ＝６．８３Ｈｚ，１Ｈ）１．４６－１．６６（ｍ，１０Ｈ）１．７０（ｓ ３Ｈ）１．８２－１．９４（ｍ，３Ｈ）２．２５－２．３１（ｍ，１Ｈ）２．３６－２．４５（ｍ，２Ｈ）２．６１－２．６５（ｍ，１Ｈ）２．９５（ｄｄ，Ｊ＝６．１０，４．１５Ｈｚ，１Ｈ）３．１４（ｂｒ．ｓ．，２Ｈ）３．５０（ｓ，３Ｈ）３．６２－３．７１（ｍ，４Ｈ）３．７６（ｔ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，１Ｈ）４．０３（ｄｄ，Ｊ＝４．１５，１．７１Ｈｚ，１Ｈ）４．２９（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）５．４５（ｄ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，１Ｈ）５．８７（ｄ，Ｊ＝１０．７３Ｈｚ，１Ｈ）６．２７（ｄｄ，Ｊ＝１５．１２，１０．７３Ｈｚ，１Ｈ）．
ステップ４で得られた残渣（１５ｍｇ、０．０２２ｍｍｏｌ）とＭｅＯＨ（１ｍＬ）との混合物に水酸化ナトリウム水溶液（２Ｎ、１００μｌ、０．２０ｍｍｏｌ）を加えた。この混合物を４０℃に加温し、２時間撹拌した。次に混合物を０℃に冷却し、塩酸水溶液（１００μＬ、２Ｎ）を加えた。次に得られた混合物を真空濃縮し、得られた残渣を分取ＨＰＬＣ（Ｈ２Ｏ／ＭｅＣＮ／ＮＨ３水溶液＝６０／４０／０．１～３０／７０／０．１）により精製して、表題化合物を無色の油として得た（７．０ｍｇ、ステップ４及び５で４８％収率）。ＬＣ／ＭＳ（ＥＳＩ，ｍ／ｚ），６６６．９０［Ｍ＋Ｈ］＋．
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，メタノール－ｄ４）δ ｐｐｍ ０．６５（ｄ，Ｊ＝６．８３Ｈｚ，３Ｈ）０．８１（ｄ，Ｊ＝７．３２Ｈｚ，３Ｈ）０．９８－１．０４（ｍ，３Ｈ）１．０８（ｄ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，３Ｈ）１．１７（ｄ，Ｊ＝１１．７１Ｈｚ，１Ｈ）１．２２－１．２８（ｍ，４Ｈ）１．３５（ｄ，Ｊ＝６．８３Ｈｚ，１Ｈ）１．４６－１．６６（ｍ，１０Ｈ）１．７０（ｓ ３Ｈ）１．８２－１．９４（ｍ，３Ｈ）２．２５－２．３１（ｍ，１Ｈ）２．３６－２．４５（ｍ，２Ｈ）２．６１－２．６５（ｍ，１Ｈ）２．９５（ｄｄ，Ｊ＝６．１０，４．１５Ｈｚ，１Ｈ）３．１４（ｂｒ．ｓ．，２Ｈ）３．５０（ｓ，３Ｈ）３．６２－３．７１（ｍ，４Ｈ）３．７６（ｔ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，１Ｈ）４．０３（ｄｄ，Ｊ＝４．１５，１．７１Ｈｚ，１Ｈ）４．２９（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）５．４５（ｄ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，１Ｈ）５．８７（ｄ，Ｊ＝１０．７３Ｈｚ，１Ｈ）６．２７（ｄｄ，Ｊ＝１５．１２，１０．７３Ｈｚ，１Ｈ）．
１．２．７ ＭＣ－Ｖａｌ－Ｃｉｔ－ｐＡＢＣリンカー－ペイロードの一般的合成手順
スキーム３に、ＭＣ－Ｖａｌ－Ｃｉｔ－ｐＡＢＣリンカー－ペイロードの一般的合成手順を概説する。
ＤＭＦ（０．０２８Ｍ）中のペイロード（例えば、前述のステップにより合成された化合物；１．０当量）と４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（６－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）ヘキサンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル（４－ニトロフェニル）カーボネート（１．０当量）との混合物に室温でＤＩＰＥＡ（３．０３当量）を加えた。得られた混合物を室温で１６時間撹拌し、真空濃縮し、得られた残渣を逆相分取ＨＰＬＣ（Ｈ２Ｏ／ＭｅＣＮ／ＨＣＯＯＨ＝６０／４０／０．１～４０／６０／０．１）により精製して、所望の化合物を得た。
スキーム３に、ＭＣ－Ｖａｌ－Ｃｉｔ－ｐＡＢＣリンカー－ペイロードの一般的合成手順を概説する。
ＤＭＦ（０．０２８Ｍ）中のペイロード（例えば、前述のステップにより合成された化合物；１．０当量）と４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（６－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）ヘキサンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル（４－ニトロフェニル）カーボネート（１．０当量）との混合物に室温でＤＩＰＥＡ（３．０３当量）を加えた。得られた混合物を室温で１６時間撹拌し、真空濃縮し、得られた残渣を逆相分取ＨＰＬＣ（Ｈ２Ｏ／ＭｅＣＮ／ＨＣＯＯＨ＝６０／４０／０．１～４０／６０／０．１）により精製して、所望の化合物を得た。
１．２．８ ＡＤＬ１－Ｈ１の合成
セクション１．２．７に概説される一般的手順のとおりＡＤＬ１－Ｈ１（２－（（２Ｒ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－４－（（４－（（（４－（（Ｒ）－２－（（Ｓ）－２－（６－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）ヘキサンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）オキシ）カルボニル）ピペラジン－１－カルボニル）オキシ）－６－（（Ｓ，２Ｅ，４Ｅ）－７－（（２Ｒ，３Ｒ）－３－（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）－４－ヒドロキシ－３－メトキシペンタン－２－イル）－２－メチルオキシラン－２－イル）－６－メチルヘプタ－２，４－ジエン－２－イル）－５－メチルテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）酢酸）を合成し、無色の油として得た（１２．７ｍｇ、３９％収率）。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，メタノール－ｄ４）δ ｐｐｍ ０．７１（ｄ，Ｊ＝５．８５Ｈｚ，４Ｈ）０．８０（ｄ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，３Ｈ）０．９４（ｄｄ，Ｊ＝ ６．１，３．２Ｈｚ，６Ｈ）１．０１（ｄ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，３Ｈ）１．０８（ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，３Ｈ）１．１３－１．１９（ｍ，１Ｈ）１．２５（ｓ，４Ｈ）１．２９－１．３６（ｍ，２Ｈ）１．４６－１．６５（ｍ，７Ｈ）１．６８（ｓ，３Ｈ）１．７１－１．７６（ｍ，１Ｈ）１．８４－１．９３（ｍ，２Ｈ）２．０２－２．１５（ｍ，２Ｈ）２．２５（ｔ，Ｊ＝７．３２Ｈｚ，２Ｈ）２．３７－２．５１（ｍ，３Ｈ）２．５８－２．６７（ｍ，２Ｈ）２．７９（ｓ，４Ｈ）２．８２－２．９６（ｍ，２Ｈ）３．０８－３．２３（ｍ，８Ｈ）３．３９－３．５４（ｍ，１５Ｈ）３．７６（ｔ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，１Ｈ）３．８５－３．９７（ｍ，２Ｈ）４．１３（ｄ，Ｊ＝７．３２Ｈｚ，１Ｈ）４．４６－４．５８（ｍ，２Ｈ）５．０７（ｓ，２Ｈ）５．４８（ｄｄ，Ｊ＝１４．８８，９．０３Ｈｚ，１Ｈ）５．９３（ｄ，Ｊ＝１０．７３Ｈｚ，１Ｈ）６．２８（ｄｄ，Ｊ＝１４．８８，１０．９８Ｈｚ，１Ｈ）７．３０（ｄ，Ｊ＝７．８１Ｈｚ，２Ｈ）７．５７（ｄ，Ｊ＝７．８１Ｈｚ，２Ｈ）．
セクション１．２．７に概説される一般的手順のとおりＡＤＬ１－Ｈ１（２－（（２Ｒ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－４－（（４－（（（４－（（Ｒ）－２－（（Ｓ）－２－（６－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）ヘキサンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）オキシ）カルボニル）ピペラジン－１－カルボニル）オキシ）－６－（（Ｓ，２Ｅ，４Ｅ）－７－（（２Ｒ，３Ｒ）－３－（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）－４－ヒドロキシ－３－メトキシペンタン－２－イル）－２－メチルオキシラン－２－イル）－６－メチルヘプタ－２，４－ジエン－２－イル）－５－メチルテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）酢酸）を合成し、無色の油として得た（１２．７ｍｇ、３９％収率）。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，メタノール－ｄ４）δ ｐｐｍ ０．７１（ｄ，Ｊ＝５．８５Ｈｚ，４Ｈ）０．８０（ｄ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，３Ｈ）０．９４（ｄｄ，Ｊ＝ ６．１，３．２Ｈｚ，６Ｈ）１．０１（ｄ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，３Ｈ）１．０８（ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，３Ｈ）１．１３－１．１９（ｍ，１Ｈ）１．２５（ｓ，４Ｈ）１．２９－１．３６（ｍ，２Ｈ）１．４６－１．６５（ｍ，７Ｈ）１．６８（ｓ，３Ｈ）１．７１－１．７６（ｍ，１Ｈ）１．８４－１．９３（ｍ，２Ｈ）２．０２－２．１５（ｍ，２Ｈ）２．２５（ｔ，Ｊ＝７．３２Ｈｚ，２Ｈ）２．３７－２．５１（ｍ，３Ｈ）２．５８－２．６７（ｍ，２Ｈ）２．７９（ｓ，４Ｈ）２．８２－２．９６（ｍ，２Ｈ）３．０８－３．２３（ｍ，８Ｈ）３．３９－３．５４（ｍ，１５Ｈ）３．７６（ｔ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，１Ｈ）３．８５－３．９７（ｍ，２Ｈ）４．１３（ｄ，Ｊ＝７．３２Ｈｚ，１Ｈ）４．４６－４．５８（ｍ，２Ｈ）５．０７（ｓ，２Ｈ）５．４８（ｄｄ，Ｊ＝１４．８８，９．０３Ｈｚ，１Ｈ）５．９３（ｄ，Ｊ＝１０．７３Ｈｚ，１Ｈ）６．２８（ｄｄ，Ｊ＝１４．８８，１０．９８Ｈｚ，１Ｈ）７．３０（ｄ，Ｊ＝７．８１Ｈｚ，２Ｈ）７．５７（ｄ，Ｊ＝７．８１Ｈｚ，２Ｈ）．
１．２．９ ＡＤＬ１－Ｈ４
セクション１．２．７に概説される一般的手順のとおりＡＤＬ１－Ｈ４（（Ｓ）－５－（（４－（（（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（６－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）ヘキサンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）オキシ）カルボニル）ピペラジン－１－カルボニル）オキシ）－２－（２－（（２Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－６－（（Ｓ，２Ｅ，４Ｅ）－７－（（２Ｒ，３Ｒ）－３－（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）－４－ヒドロキシ－３－メトキシペンタン－２－イル）－２－メチルオキシラン－２－イル）－６－メチルヘプタ－２，４－ジエン－２－イル）－５－メチルテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）アセトアミド）ペンタン酸）を合成し、無色の油として得た（２．４ｍｇ、４４％収率）。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，メタノール－ｄ４）δ ｐｐｍ ０．６４（ｄ，Ｊ＝６．５０Ｈｚ，３Ｈ）０．８０（ｄ，Ｊ＝６．８０Ｈｚ，３Ｈ）０．８４－０．８９（ｍ，１Ｈ）０．８９－０．９７（ｍ，６Ｈ）０．９７－１．０３（ｍ，２Ｈ）１．０８（ｄ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，３Ｈ）１．１０－１．１６（ｍ，１Ｈ）１．２２－１．２５（ｍ，３Ｈ）１．２５－１．３２（ｍ，６Ｈ）１．４９－１．６６（ｍ，９Ｈ）１．６９（ｓ，３Ｈ）１．８０－１．９５（ｍ，３Ｈ）１．９５－２．１５（ｍ，２Ｈ）２．２５（ｔ，Ｊ＝７．２０Ｈｚ，２Ｈ）２．３３－２．４８（ｍ，１Ｈ）２．６２（ｄ，Ｊ＝９．７６Ｈｚ，１Ｈ）２．９１－２．９８（ｍ，１Ｈ）３．０４－３．１３（ｍ，１Ｈ）３．３９－３．４７（ｍ，７Ｈ）３．４９（ｓ，３Ｈ）３．６３（ｓ，１Ｈ）３．７６（ｔ，Ｊ＝６．５０Ｈｚ，１Ｈ）３．９９（ｂｒ．ｓ，１Ｈ）４．１４（ｄ，Ｊ＝７．２０Ｈｚ，１Ｈ）４．４４－４．５１（ｍ，１Ｈ）４．４４－４．５１（ｍ，１Ｈ）５．０７（ｂｒ．ｓ，２Ｈ）５．４３（ｄｄ，Ｊ＝１５．３７，９．０３Ｈｚ，１Ｈ）５．８２－５．９０（ｍ，１Ｈ）６．１９－６．３６（ｍ，１Ｈ）６．７７（ｓ，１Ｈ）７．３０（ｄ，Ｊ＝８．２９Ｈｚ，２Ｈ）７．５７（ｄ，Ｊ＝８．７８Ｈｚ，２Ｈ）．
セクション１．２．７に概説される一般的手順のとおりＡＤＬ１－Ｈ４（（Ｓ）－５－（（４－（（（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（６－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）ヘキサンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）オキシ）カルボニル）ピペラジン－１－カルボニル）オキシ）－２－（２－（（２Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－６－（（Ｓ，２Ｅ，４Ｅ）－７－（（２Ｒ，３Ｒ）－３－（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）－４－ヒドロキシ－３－メトキシペンタン－２－イル）－２－メチルオキシラン－２－イル）－６－メチルヘプタ－２，４－ジエン－２－イル）－５－メチルテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）アセトアミド）ペンタン酸）を合成し、無色の油として得た（２．４ｍｇ、４４％収率）。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，メタノール－ｄ４）δ ｐｐｍ ０．６４（ｄ，Ｊ＝６．５０Ｈｚ，３Ｈ）０．８０（ｄ，Ｊ＝６．８０Ｈｚ，３Ｈ）０．８４－０．８９（ｍ，１Ｈ）０．８９－０．９７（ｍ，６Ｈ）０．９７－１．０３（ｍ，２Ｈ）１．０８（ｄ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，３Ｈ）１．１０－１．１６（ｍ，１Ｈ）１．２２－１．２５（ｍ，３Ｈ）１．２５－１．３２（ｍ，６Ｈ）１．４９－１．６６（ｍ，９Ｈ）１．６９（ｓ，３Ｈ）１．８０－１．９５（ｍ，３Ｈ）１．９５－２．１５（ｍ，２Ｈ）２．２５（ｔ，Ｊ＝７．２０Ｈｚ，２Ｈ）２．３３－２．４８（ｍ，１Ｈ）２．６２（ｄ，Ｊ＝９．７６Ｈｚ，１Ｈ）２．９１－２．９８（ｍ，１Ｈ）３．０４－３．１３（ｍ，１Ｈ）３．３９－３．４７（ｍ，７Ｈ）３．４９（ｓ，３Ｈ）３．６３（ｓ，１Ｈ）３．７６（ｔ，Ｊ＝６．５０Ｈｚ，１Ｈ）３．９９（ｂｒ．ｓ，１Ｈ）４．１４（ｄ，Ｊ＝７．２０Ｈｚ，１Ｈ）４．４４－４．５１（ｍ，１Ｈ）４．４４－４．５１（ｍ，１Ｈ）５．０７（ｂｒ．ｓ，２Ｈ）５．４３（ｄｄ，Ｊ＝１５．３７，９．０３Ｈｚ，１Ｈ）５．８２－５．９０（ｍ，１Ｈ）６．１９－６．３６（ｍ，１Ｈ）６．７７（ｓ，１Ｈ）７．３０（ｄ，Ｊ＝８．２９Ｈｚ，２Ｈ）７．５７（ｄ，Ｊ＝８．７８Ｈｚ，２Ｈ）．
１．２．１０ ＡＤＬ１－Ｈ２
セクション１．２．７に概説される一般的手順のとおりＡＤＬ１－Ｈ２（２－（（２Ｒ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－４－（（４－（（（４－（（Ｒ）－２－（（Ｒ）－２－（６－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）ヘキサンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）オキシ）カルボニル）－１，４－ジアゼパン－１－カルボニル）オキシ）－６－（（Ｓ，２Ｅ，４Ｅ）－７－（（２Ｒ，３Ｒ）－３－（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）－４－ヒドロキシ－３－メトキシペンタン－２－イル）－２－メチルオキシラン－２－イル）－６－メチルヘプタ－２，４－ジエン－２－イル）－５－メチルテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）酢酸）を合成し、無色の油として得た（１０．４ｍｇ、３４％収率）。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，メタノール－ｄ４）δ ｐｐｍ ０．６１－０．６８（ｍ，３Ｈ）０．７９（ｄ，Ｊ＝６．８３Ｈｚ，３Ｈ）０．９４（ｔ，Ｊ＝６．１０Ｈｚ，６Ｈ）１．０２（ｄ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，３Ｈ）１．０４－１．１０（ｍ，３Ｈ）１．１０－１．１７（ｍ，１Ｈ）１．１９－１．３１（ｍ，８Ｈ）１．４２－１．４９（ｍ，２Ｈ）１．５１－１．６５（ｍ，８Ｈ）１．６７（ｓ，３Ｈ）１．６９－１．７８（ｂｒ．ｓ，３Ｈ）１．８３－１．９３（ｍ，２Ｈ）１．９４（ｓ，１Ｈ）２．００－２．１０（ｍ，２Ｈ）２．２５（ｔ，Ｊ＝７．３２Ｈｚ，２Ｈ）２．３０－２．３８（ｍ，１Ｈ）２．３８－２．４９（ｍ，２Ｈ）２．６３（ｄ，Ｊ＝９．２７Ｈｚ，１Ｈ）２．９４（ｔ，Ｊ＝５．１２Ｈｚ，１Ｈ）３．０５－３．２１（ｍ，２Ｈ）３．３９－３．４８（ｍ，７Ｈ）３．４９（ｓ，３Ｈ）３．５２－３．６３（ｍ，５Ｈ）３．６７－３．８１（ｍ，２Ｈ）３．９０（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）４．１７（ｔ，Ｊ＝７．３０Ｈｚ，１Ｈ）４．４５－４．５５（ｍ，２Ｈ）５．００－５．０８（ｍ，２Ｈ）５．４８（ｄｄ，Ｊ＝１４．８８，９．５１Ｈｚ，１Ｈ）５．８７－５．９５（ｍ，１Ｈ）６．２３－６．３２（ｍ，１Ｈ）６．７６（ｓ，Ｊ＝４．０１Ｈｚ，２Ｈ）７．２８（ｑ，Ｊ＝７．８１Ｈｚ，２Ｈ）７．５８（ｔ，Ｊ＝７．０７Ｈｚ，２Ｈ）．
セクション１．２．７に概説される一般的手順のとおりＡＤＬ１－Ｈ２（２－（（２Ｒ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－４－（（４－（（（４－（（Ｒ）－２－（（Ｒ）－２－（６－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）ヘキサンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）オキシ）カルボニル）－１，４－ジアゼパン－１－カルボニル）オキシ）－６－（（Ｓ，２Ｅ，４Ｅ）－７－（（２Ｒ，３Ｒ）－３－（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）－４－ヒドロキシ－３－メトキシペンタン－２－イル）－２－メチルオキシラン－２－イル）－６－メチルヘプタ－２，４－ジエン－２－イル）－５－メチルテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）酢酸）を合成し、無色の油として得た（１０．４ｍｇ、３４％収率）。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，メタノール－ｄ４）δ ｐｐｍ ０．６１－０．６８（ｍ，３Ｈ）０．７９（ｄ，Ｊ＝６．８３Ｈｚ，３Ｈ）０．９４（ｔ，Ｊ＝６．１０Ｈｚ，６Ｈ）１．０２（ｄ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，３Ｈ）１．０４－１．１０（ｍ，３Ｈ）１．１０－１．１７（ｍ，１Ｈ）１．１９－１．３１（ｍ，８Ｈ）１．４２－１．４９（ｍ，２Ｈ）１．５１－１．６５（ｍ，８Ｈ）１．６７（ｓ，３Ｈ）１．６９－１．７８（ｂｒ．ｓ，３Ｈ）１．８３－１．９３（ｍ，２Ｈ）１．９４（ｓ，１Ｈ）２．００－２．１０（ｍ，２Ｈ）２．２５（ｔ，Ｊ＝７．３２Ｈｚ，２Ｈ）２．３０－２．３８（ｍ，１Ｈ）２．３８－２．４９（ｍ，２Ｈ）２．６３（ｄ，Ｊ＝９．２７Ｈｚ，１Ｈ）２．９４（ｔ，Ｊ＝５．１２Ｈｚ，１Ｈ）３．０５－３．２１（ｍ，２Ｈ）３．３９－３．４８（ｍ，７Ｈ）３．４９（ｓ，３Ｈ）３．５２－３．６３（ｍ，５Ｈ）３．６７－３．８１（ｍ，２Ｈ）３．９０（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）４．１７（ｔ，Ｊ＝７．３０Ｈｚ，１Ｈ）４．４５－４．５５（ｍ，２Ｈ）５．００－５．０８（ｍ，２Ｈ）５．４８（ｄｄ，Ｊ＝１４．８８，９．５１Ｈｚ，１Ｈ）５．８７－５．９５（ｍ，１Ｈ）６．２３－６．３２（ｍ，１Ｈ）６．７６（ｓ，Ｊ＝４．０１Ｈｚ，２Ｈ）７．２８（ｑ，Ｊ＝７．８１Ｈｚ，２Ｈ）７．５８（ｔ，Ｊ＝７．０７Ｈｚ，２Ｈ）．
１．２．１１ ＡＤＬ１－Ｈ３
セクション１．２．７に概説される一般的手順のとおりＡＤＬ１－Ｈ３（２－（（２Ｒ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－４－（（３－（（（（４－（（Ｒ）－２－（（Ｒ）－２－（６－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）ヘキサンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）オキシ）カルボニル）（メチル）アミノ）ピロリジン－１－カルボニル）オキシ）－６－（（Ｓ，２Ｅ，４Ｅ）－７－（（２Ｒ，３Ｒ）－３－（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）－４－ヒドロキシ－３－メトキシペンタン－２－イル）－２－メチルオキシラン－２－イル）－６－メチルヘプタ－２，４－ジエン－２－イル）－５－メチルテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）酢酸）を合成し、無色の油として得た（１８．８ｍｇ、３７％収率）。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，メタノール－ｄ４） δ ｐｐｍ ０．７２（ｄ，Ｊ＝６．８３Ｈｚ，３Ｈ）０．８０（ｄ，Ｊ＝６．８３Ｈｚ，３Ｈ）０．９０－０．９７（ｍ，６Ｈ）１．０２（ｄ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，３Ｈ）１．０８（ｄ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，３Ｈ）１．１６（ｄｄ，Ｊ＝１２．９３，１１．４６Ｈｚ，１Ｈ）１．２２－１．２８（ｍ，４Ｈ）１．２８－１．３７（ｍ，２Ｈ）１．４４－１．６７（ｍ，８Ｈ）１．６８（ｓ，３Ｈ）１．９０（ｄｄ，Ｊ＝１３．４２，４．１５Ｈｚ，２Ｈ）２．００－２．１５（ｍ，４Ｈ）２．２５（ｔ，Ｊ＝７．３２Ｈｚ，２Ｈ）２．３８－２．５２（ｍ，３Ｈ）２．６３（ｄ，Ｊ＝９．２７Ｈｚ，１Ｈ）２．８４（ｓ，３Ｈ）２．９３－２．９７（ｍ，１Ｈ）３．０８（ｄ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，１Ｈ）３．１６（ｄ，Ｊ＝６．８３Ｈｚ，１Ｈ）３．４２－３．４７（ｍ，３Ｈ）３．４９（ｓ，３Ｈ）３．５１－３．５７（ｍ，２Ｈ）３．７６（ｔ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，１Ｈ）３．８５－３．９２（ｍ，１Ｈ）４．１４－４．１９（ｍ，１Ｈ）４．４７－４．５５（ｍ，２Ｈ）４．７１（ｄ，Ｊ＝７．３２Ｈｚ，１Ｈ）５．０６（ｓ，２Ｈ）５．４８（ｄｄ，Ｊ＝１４．８８，９．０３Ｈｚ，１Ｈ）５．９３（ｄ，Ｊ＝１１．２２Ｈｚ，１Ｈ）６．２８（ｄｄ，Ｊ＝１４．８８，１０．９８Ｈｚ，１Ｈ）６．７６（ｓ，Ｊ＝５．１３Ｈｚ，２Ｈ）７．３０（ｄ，Ｊ＝８．２９Ｈｚ，２Ｈ）７．５６（ｄ，Ｊ＝８．２９Ｈｚ，２Ｈ）．
セクション１．２．７に概説される一般的手順のとおりＡＤＬ１－Ｈ３（２－（（２Ｒ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－４－（（３－（（（（４－（（Ｒ）－２－（（Ｒ）－２－（６－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）ヘキサンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）オキシ）カルボニル）（メチル）アミノ）ピロリジン－１－カルボニル）オキシ）－６－（（Ｓ，２Ｅ，４Ｅ）－７－（（２Ｒ，３Ｒ）－３－（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）－４－ヒドロキシ－３－メトキシペンタン－２－イル）－２－メチルオキシラン－２－イル）－６－メチルヘプタ－２，４－ジエン－２－イル）－５－メチルテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）酢酸）を合成し、無色の油として得た（１８．８ｍｇ、３７％収率）。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，メタノール－ｄ４） δ ｐｐｍ ０．７２（ｄ，Ｊ＝６．８３Ｈｚ，３Ｈ）０．８０（ｄ，Ｊ＝６．８３Ｈｚ，３Ｈ）０．９０－０．９７（ｍ，６Ｈ）１．０２（ｄ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，３Ｈ）１．０８（ｄ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，３Ｈ）１．１６（ｄｄ，Ｊ＝１２．９３，１１．４６Ｈｚ，１Ｈ）１．２２－１．２８（ｍ，４Ｈ）１．２８－１．３７（ｍ，２Ｈ）１．４４－１．６７（ｍ，８Ｈ）１．６８（ｓ，３Ｈ）１．９０（ｄｄ，Ｊ＝１３．４２，４．１５Ｈｚ，２Ｈ）２．００－２．１５（ｍ，４Ｈ）２．２５（ｔ，Ｊ＝７．３２Ｈｚ，２Ｈ）２．３８－２．５２（ｍ，３Ｈ）２．６３（ｄ，Ｊ＝９．２７Ｈｚ，１Ｈ）２．８４（ｓ，３Ｈ）２．９３－２．９７（ｍ，１Ｈ）３．０８（ｄ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，１Ｈ）３．１６（ｄ，Ｊ＝６．８３Ｈｚ，１Ｈ）３．４２－３．４７（ｍ，３Ｈ）３．４９（ｓ，３Ｈ）３．５１－３．５７（ｍ，２Ｈ）３．７６（ｔ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，１Ｈ）３．８５－３．９２（ｍ，１Ｈ）４．１４－４．１９（ｍ，１Ｈ）４．４７－４．５５（ｍ，２Ｈ）４．７１（ｄ，Ｊ＝７．３２Ｈｚ，１Ｈ）５．０６（ｓ，２Ｈ）５．４８（ｄｄ，Ｊ＝１４．８８，９．０３Ｈｚ，１Ｈ）５．９３（ｄ，Ｊ＝１１．２２Ｈｚ，１Ｈ）６．２８（ｄｄ，Ｊ＝１４．８８，１０．９８Ｈｚ，１Ｈ）６．７６（ｓ，Ｊ＝５．１３Ｈｚ，２Ｈ）７．３０（ｄ，Ｊ＝８．２９Ｈｚ，２Ｈ）７．５６（ｄ，Ｊ＝８．２９Ｈｚ，２Ｈ）．
１．３ ＡＤＬ１－Ｈ５、ＡＤＬ１－Ｈ６、及びＡＤＬ１－Ｈ７の調製
１．３．１ 概要－一般的手順２
ステップ１：２－（（２Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－６－（（Ｓ，２Ｅ，４Ｅ）－７－（（２Ｒ，３Ｒ）－３－（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）－４－ヒドロキシ－３－メトキシペンタン－２－イル）－２－メチルオキシラン－２－イル）－６－メチルヘプタ－２，４－ジエン－２－イル）－５－メチルテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）アセトアミド
ＴＨＦ（１５ｍＬ）中の２－（（２Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－６－（（Ｓ，２Ｅ，４Ｅ）－７－（（２Ｒ，３Ｒ）－３－（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）－４－ヒドロキシ－３－メトキシペンタン－２－イル）－２－メチルオキシラン－２－イル）－６－メチルヘプタ－２，４－ジエン－２－イル）－５－メチルテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）酢酸（ハーボキシジエン、７５０ｍｇ、１．７１ｍｍｏｌ）とトリエチルアミン（１．１９２ｍＬ、８．５５ｍｍｏｌ）との混合物に０℃でクロロギ酸エチル（０．７６７ｍＬ、５．１３ｍｍｏｌ）を加えた。得られた混合物を０℃で３０分間撹拌し、次にメタノール中のアンモニア（７Ｍ、３．６６ｍＬ、２５．６５ｍｍｏｌ）を加えた。得られた混合物を同じ温度で更に３０分間撹拌した後、真空濃縮し、得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ヘプタン／ＡｃＯＥｔ＝５０／５０～０／１００、次にＡｃＯＥｔ＝８０／２０）により精製して、表題化合物を無色の固体として得た（６３２ｍｇ、８５％収率）。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム－ｄ）δ ｐｐｍ ０．６７（ｄ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，３Ｈ）０．８５（ｄ，Ｊ＝６．７Ｈｚ， ３Ｈ）１．０５（ｄ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，３Ｈ）１．１６（ｄ，Ｊ＝６．７Ｈｚ，３Ｈ）１．２０－１．２５（ｍ，３Ｈ）１．２７（ｓ，３Ｈ）１．３４－１．４５（ｍ，１Ｈ）１．４９－１．６５（ｍ，７Ｈ）１．７１（ｓ，３Ｈ）１．８２－１．９７（ｍ，２Ｈ）２．０１－２．０５（ｍ，１Ｈ）２．３３－２．４８（ｍ，３Ｈ）２．５４（ｄ，Ｊ＝９．２７Ｈｚ，２Ｈ）２．９５－２．９９（ｍ，１Ｈ）３．３４（ｄ，Ｊ＝１０．０Ｈｚ，１Ｈ）３．５２（ｓ，３Ｈ）３．６３－３．７０（ｍ，１Ｈ）３．８０－３．８７（ｍ，１Ｈ）４．０８－４．１４（ｍ，１Ｈ）５．２４－５．３３（ｍ，１Ｈ）５．４７（ｄｄ，Ｊ＝１５．１２，９．２７Ｈｚ，１Ｈ）５．９０（ｄ，Ｊ＝１０．７３Ｈｚ，１Ｈ）６．２２（ｄｄ，Ｊ＝１４．８８，１０．９８Ｈｚ，１Ｈ）６．６１（ｂｒ．ｓ，１Ｈ）．
１．３．１ 概要－一般的手順２
ステップ１：２－（（２Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－６－（（Ｓ，２Ｅ，４Ｅ）－７－（（２Ｒ，３Ｒ）－３－（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）－４－ヒドロキシ－３－メトキシペンタン－２－イル）－２－メチルオキシラン－２－イル）－６－メチルヘプタ－２，４－ジエン－２－イル）－５－メチルテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）アセトアミド
ＴＨＦ（１５ｍＬ）中の２－（（２Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－６－（（Ｓ，２Ｅ，４Ｅ）－７－（（２Ｒ，３Ｒ）－３－（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）－４－ヒドロキシ－３－メトキシペンタン－２－イル）－２－メチルオキシラン－２－イル）－６－メチルヘプタ－２，４－ジエン－２－イル）－５－メチルテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）酢酸（ハーボキシジエン、７５０ｍｇ、１．７１ｍｍｏｌ）とトリエチルアミン（１．１９２ｍＬ、８．５５ｍｍｏｌ）との混合物に０℃でクロロギ酸エチル（０．７６７ｍＬ、５．１３ｍｍｏｌ）を加えた。得られた混合物を０℃で３０分間撹拌し、次にメタノール中のアンモニア（７Ｍ、３．６６ｍＬ、２５．６５ｍｍｏｌ）を加えた。得られた混合物を同じ温度で更に３０分間撹拌した後、真空濃縮し、得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ヘプタン／ＡｃＯＥｔ＝５０／５０～０／１００、次にＡｃＯＥｔ＝８０／２０）により精製して、表題化合物を無色の固体として得た（６３２ｍｇ、８５％収率）。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム－ｄ）δ ｐｐｍ ０．６７（ｄ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，３Ｈ）０．８５（ｄ，Ｊ＝６．７Ｈｚ， ３Ｈ）１．０５（ｄ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，３Ｈ）１．１６（ｄ，Ｊ＝６．７Ｈｚ，３Ｈ）１．２０－１．２５（ｍ，３Ｈ）１．２７（ｓ，３Ｈ）１．３４－１．４５（ｍ，１Ｈ）１．４９－１．６５（ｍ，７Ｈ）１．７１（ｓ，３Ｈ）１．８２－１．９７（ｍ，２Ｈ）２．０１－２．０５（ｍ，１Ｈ）２．３３－２．４８（ｍ，３Ｈ）２．５４（ｄ，Ｊ＝９．２７Ｈｚ，２Ｈ）２．９５－２．９９（ｍ，１Ｈ）３．３４（ｄ，Ｊ＝１０．０Ｈｚ，１Ｈ）３．５２（ｓ，３Ｈ）３．６３－３．７０（ｍ，１Ｈ）３．８０－３．８７（ｍ，１Ｈ）４．０８－４．１４（ｍ，１Ｈ）５．２４－５．３３（ｍ，１Ｈ）５．４７（ｄｄ，Ｊ＝１５．１２，９．２７Ｈｚ，１Ｈ）５．９０（ｄ，Ｊ＝１０．７３Ｈｚ，１Ｈ）６．２２（ｄｄ，Ｊ＝１４．８８，１０．９８Ｈｚ，１Ｈ）６．６１（ｂｒ．ｓ，１Ｈ）．
ステップ２：２－（（２Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－６－（（Ｓ，２Ｅ，４Ｅ）－７－（（２Ｒ，３Ｒ）－３－（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）－３－メトキシ－４－（（トリエチルシリル）オキシ）ペンタン－２－イル）－２－メチルオキシラン－２－イル）－６－メチルヘプタ－２，４－ジエン－２－イル）－５－メチルテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）アセトアミド
０℃でＤＣＭ（１５ｍＬ）中のステップ１から分離された化合物（７１９ｍｇ、１．４４６ｍｍｏｌ）とトリエチルアミン（２．０１５ｍＬ、１４．４５８ｍｍｏｌ）との混合物に、クロロトリエチルシラン（１０９０ｍｇ、７．２２９ｍｍｏｌ）及びＮ，Ｎ－ジメチルピリジン－４－アミン（１７７ｍｇ、１．４４６ｍｍｏｌ）を加えた。次に得られた混合物を室温に加温し、１６時間撹拌した。撹拌後、この混合物をＤＣＭ（１００ｍＬ）で希釈し、混合物を水及びブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させて、ろ過し、真空濃縮した。得られた残渣をＡｃＯＥｔ（１００ｍＬ）及びアミノ官能化シリカ（５０ｇ）と合わせた。得られた懸濁液を室温で１６時間撹拌し、次にろ過した。ろ液をＡｃＯＥｔ／ＭｅＯＨ（９／１、１５０ｍＬ）で洗浄した。合わせた母液を真空濃縮し、分離された残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（４０ｇ、ヘプタン／ＡｃＯＥｔ＝７０／３０～０／１００）により精製して、表題化合物を無色の固体として得た（８０７ｍｇ、定量的収率）。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム－ｄ）δ ｐｐｍ ０．６０（ｑ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，６Ｈ）０．６７（ｄ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，３Ｈ）０．７６（ｄ，Ｊ＝７．３２Ｈｚ，３Ｈ）０．９５（ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，９Ｈ）１．０４（ｔｄ，Ｊ＝３．３，１．７Ｈｚ，６Ｈ）１．１７－１．２０（ｍ，１Ｈ）１．２４（ｓ，３Ｈ）１．３４－１．４６（ｍ，２Ｈ）１．５０－１．５８（ｍ，１Ｈ）１．６１（ｓ，３Ｈ）１．７０（ｓ，３Ｈ）１．８２－１．９２（ｍ，２Ｈ）２．３３－２．４５（ｍ，３Ｈ）２．６３（ｄ，Ｊ＝９．２７Ｈｚ，１Ｈ）３．０５－３．０９（ｍ，１Ｈ），３．３４（ｄ，Ｊ＝９．７６Ｈｚ，１Ｈ）３．５０（ｓ，３Ｈ）３．６２－３．７０（ｍ，１Ｈ）３．８５（ｔ，Ｊ＝６．５９Ｈｚ，１Ｈ）５．２９（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）５．４８（ｄｄ，Ｊ＝１４．８８，８．５４Ｈｚ，１Ｈ）５．９０（ｄ，Ｊ＝１０．７３Ｈｚ，１Ｈ）６．２１（ｄｄ，Ｊ＝１４．６４，１１．２２Ｈｚ，１Ｈ）６．６３（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）．
０℃でＤＣＭ（１５ｍＬ）中のステップ１から分離された化合物（７１９ｍｇ、１．４４６ｍｍｏｌ）とトリエチルアミン（２．０１５ｍＬ、１４．４５８ｍｍｏｌ）との混合物に、クロロトリエチルシラン（１０９０ｍｇ、７．２２９ｍｍｏｌ）及びＮ，Ｎ－ジメチルピリジン－４－アミン（１７７ｍｇ、１．４４６ｍｍｏｌ）を加えた。次に得られた混合物を室温に加温し、１６時間撹拌した。撹拌後、この混合物をＤＣＭ（１００ｍＬ）で希釈し、混合物を水及びブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させて、ろ過し、真空濃縮した。得られた残渣をＡｃＯＥｔ（１００ｍＬ）及びアミノ官能化シリカ（５０ｇ）と合わせた。得られた懸濁液を室温で１６時間撹拌し、次にろ過した。ろ液をＡｃＯＥｔ／ＭｅＯＨ（９／１、１５０ｍＬ）で洗浄した。合わせた母液を真空濃縮し、分離された残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（４０ｇ、ヘプタン／ＡｃＯＥｔ＝７０／３０～０／１００）により精製して、表題化合物を無色の固体として得た（８０７ｍｇ、定量的収率）。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム－ｄ）δ ｐｐｍ ０．６０（ｑ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，６Ｈ）０．６７（ｄ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，３Ｈ）０．７６（ｄ，Ｊ＝７．３２Ｈｚ，３Ｈ）０．９５（ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，９Ｈ）１．０４（ｔｄ，Ｊ＝３．３，１．７Ｈｚ，６Ｈ）１．１７－１．２０（ｍ，１Ｈ）１．２４（ｓ，３Ｈ）１．３４－１．４６（ｍ，２Ｈ）１．５０－１．５８（ｍ，１Ｈ）１．６１（ｓ，３Ｈ）１．７０（ｓ，３Ｈ）１．８２－１．９２（ｍ，２Ｈ）２．３３－２．４５（ｍ，３Ｈ）２．６３（ｄ，Ｊ＝９．２７Ｈｚ，１Ｈ）３．０５－３．０９（ｍ，１Ｈ），３．３４（ｄ，Ｊ＝９．７６Ｈｚ，１Ｈ）３．５０（ｓ，３Ｈ）３．６２－３．７０（ｍ，１Ｈ）３．８５（ｔ，Ｊ＝６．５９Ｈｚ，１Ｈ）５．２９（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）５．４８（ｄｄ，Ｊ＝１４．８８，８．５４Ｈｚ，１Ｈ）５．９０（ｄ，Ｊ＝１０．７３Ｈｚ，１Ｈ）６．２１（ｄｄ，Ｊ＝１４．６４，１１．２２Ｈｚ，１Ｈ）６．６３（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）．
ステップ３：アリル（（（２Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－６－（（Ｓ，２Ｅ，４Ｅ）－７－（（２Ｒ，３Ｒ）－３－（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）－３－メトキシ－４－（（トリエチルシリル）オキシ）ペンタン－２－イル）－２－メチルオキシラン－２－イル）－６－メチルヘプタ－２，４－ジエン－２－イル）－５－メチルテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）メチル）カルバメート
アリルアルコール（２０ｍＬ）中のステップ２で分離された化合物（８０７ｍｇ、１．４６２ｍｍｏｌ）と二酢酸ヨードベンゼン（１４１３ｍｇ、４．３８７ｍｍｏｌ）との混合物を６０℃に加熱し、３時間撹拌した。次に混合物を室温に冷却し、それにＡｃＯＥｔ及び重炭酸ナトリウム水溶液（各１００ｍＬ）を加えた。有機相を分離し、水相をＡｃＯＥｔで抽出した。合わせた有機抽出物を水及びブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させて、ろ過し、真空濃縮した。得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（４０ｇ、ヘプタン／ＡｃＯＥｔ＝９０／１０～５０／５０）により精製して、表題化合物を無色の油として得た（６６３ｍｇ、７５％収率）。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム－ｄ）δ ｐｐｍ ０．５５－０．６７（ｍ，９Ｈ）０．７７（ｄ，Ｊ＝６．７Ｈｚ，３Ｈ）０．８７（ｔ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，２Ｈ）０．９５（ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，９Ｈ）１．０４（ｔ，Ｊ＝５．５Ｈｚ，６Ｈ）１．１６－１．３２（ｍ，９Ｈ）１．３９－１．５３（ｍ，２Ｈ）１．５８（ｓ，３Ｈ）１．６９（ｓ，３Ｈ）１．８０－１．９１（ｍ，２Ｈ）２．４０（ｂｒ．ｓ，１Ｈ）２．６４（ｄ，Ｊ＝９．２７Ｈｚ，１Ｈ）３．０１－３．１０（ｍ，２Ｈ）３．２６（ｄ，Ｊ＝１０．２４Ｈｚ，１Ｈ）３．３５－３．４４（ｍ，２Ｈ）３．５０（ｓ，３Ｈ）３．８５（ｔ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，１Ｈ）４．５４（ｄ，Ｊ＝５．３７Ｈｚ，２Ｈ）５．１２（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）５．１９（ｄｔ，Ｊ＝１０．４９，１．１０Ｈｚ，１Ｈ）５．２５－５．３３（ｍ，１Ｈ）５．４５（ｄｄ，Ｊ＝１５．１２，８．７８Ｈｚ，１Ｈ）５．８５－５．９７（ｍ，２Ｈ）６．２２（ｄｄ，Ｊ＝１４．８８，１０．９８Ｈｚ，１Ｈ）．
アリルアルコール（２０ｍＬ）中のステップ２で分離された化合物（８０７ｍｇ、１．４６２ｍｍｏｌ）と二酢酸ヨードベンゼン（１４１３ｍｇ、４．３８７ｍｍｏｌ）との混合物を６０℃に加熱し、３時間撹拌した。次に混合物を室温に冷却し、それにＡｃＯＥｔ及び重炭酸ナトリウム水溶液（各１００ｍＬ）を加えた。有機相を分離し、水相をＡｃＯＥｔで抽出した。合わせた有機抽出物を水及びブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させて、ろ過し、真空濃縮した。得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（４０ｇ、ヘプタン／ＡｃＯＥｔ＝９０／１０～５０／５０）により精製して、表題化合物を無色の油として得た（６６３ｍｇ、７５％収率）。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム－ｄ）δ ｐｐｍ ０．５５－０．６７（ｍ，９Ｈ）０．７７（ｄ，Ｊ＝６．７Ｈｚ，３Ｈ）０．８７（ｔ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，２Ｈ）０．９５（ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，９Ｈ）１．０４（ｔ，Ｊ＝５．５Ｈｚ，６Ｈ）１．１６－１．３２（ｍ，９Ｈ）１．３９－１．５３（ｍ，２Ｈ）１．５８（ｓ，３Ｈ）１．６９（ｓ，３Ｈ）１．８０－１．９１（ｍ，２Ｈ）２．４０（ｂｒ．ｓ，１Ｈ）２．６４（ｄ，Ｊ＝９．２７Ｈｚ，１Ｈ）３．０１－３．１０（ｍ，２Ｈ）３．２６（ｄ，Ｊ＝１０．２４Ｈｚ，１Ｈ）３．３５－３．４４（ｍ，２Ｈ）３．５０（ｓ，３Ｈ）３．８５（ｔ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，１Ｈ）４．５４（ｄ，Ｊ＝５．３７Ｈｚ，２Ｈ）５．１２（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）５．１９（ｄｔ，Ｊ＝１０．４９，１．１０Ｈｚ，１Ｈ）５．２５－５．３３（ｍ，１Ｈ）５．４５（ｄｄ，Ｊ＝１５．１２，８．７８Ｈｚ，１Ｈ）５．８５－５．９７（ｍ，２Ｈ）６．２２（ｄｄ，Ｊ＝１４．８８，１０．９８Ｈｚ，１Ｈ）．
ステップ４：（（２Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－６－（（Ｓ，２Ｅ，４Ｅ）－７－（（２Ｒ，３Ｒ）－３－（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）－３－メトキシ－４－（（トリエチルシリル）オキシ）ペンタン－２－イル）－２－メチルオキシラン－２－イル）－６－メチルヘプタ－２，４－ジエン－２－イル）－５－メチルテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）メタンアミン
ステップ３で得られた化合物（６６３ｍｇ、１．０９１ｍｍｏｌ）とＴＨＦ（１５ｍＬ、１８３．０６５ｍｍｏｌ）との混合物にボラン－ジメチルアミン錯体（６４３ｍｇ、１０．９０６ｍｍｏｌ）を加えた。ベッセルを窒素でパージした後、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（３７．８ｍｇ、０．０３３ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温で１時間撹拌した。次にこの混合物をＡｃＯＥｔ及び飽和重炭酸ナトリウム水溶液（各１００ｍＬ）で希釈し、相を分離させた。水層をＡｃＯＥｔ（５０ｍＬ×３）で抽出し、次に合わせた有機画分を水及びブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させて、ろ過し、真空濃縮した。得られた残渣をアミノ官能化（ａｍｉｎｏ－ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌｉｅｄ）シリカゲルクロマトグラフィー（４０ｇ、ヘプタン／ＡｃＯＥｔ＝７０／３０～０／１００）により精製して（ｐｕｒｉｅｄ）、表題化合物を白色固体として得た（５２５ｍｇ、９２％収率）。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム－ｄ）δ ｐｐｍ ０．６０（ｑ，Ｊ＝７．８０Ｈｚ，６Ｈ）０．６５（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，３Ｈ）０．７７（ｄ，Ｊ＝６．８３Ｈｚ，３Ｈ）０．９５（ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，９Ｈ）１．０３（ｄｄ，Ｊ＝９．０，６．６Ｈｚ，６Ｈ）１．１４－１．２１（ｍ，１Ｈ）１．２３（ｓ，３Ｈ），１．３０－１．３４（ｍ，１Ｈ）１．４２（ｄｄｄ，Ｊ＝９．４，７，２．７Ｈｚ，１Ｈ）１．４８－１．５９（ｍ，６Ｈ）１．７０（ｓ，３Ｈ）１．８１－１．９１（ｍ，２Ｈ）２．３４－２．４４（ｍ，１Ｈ）２．６２－２．７４（ｍ，３Ｈ）３．０６（ｄｄ，Ｊ＝６．８３，２．９３Ｈｚ，１Ｈ）３．２５－３．３１（ｍ，２Ｈ）３．５０（ｓ，３Ｈ）３．８１－３．８９（ｑｕｉｎ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，１Ｈ）５．４４（ｄｄ，Ｊ＝１５．１２，８．７８Ｈｚ，１Ｈ）５．８８（ｄ，Ｊ＝１０．７３Ｈｚ，１Ｈ）６．２２（ｄｄ，Ｊ＝１５．１２，１０．７３Ｈｚ，１Ｈ）．
ステップ３で得られた化合物（６６３ｍｇ、１．０９１ｍｍｏｌ）とＴＨＦ（１５ｍＬ、１８３．０６５ｍｍｏｌ）との混合物にボラン－ジメチルアミン錯体（６４３ｍｇ、１０．９０６ｍｍｏｌ）を加えた。ベッセルを窒素でパージした後、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（３７．８ｍｇ、０．０３３ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温で１時間撹拌した。次にこの混合物をＡｃＯＥｔ及び飽和重炭酸ナトリウム水溶液（各１００ｍＬ）で希釈し、相を分離させた。水層をＡｃＯＥｔ（５０ｍＬ×３）で抽出し、次に合わせた有機画分を水及びブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させて、ろ過し、真空濃縮した。得られた残渣をアミノ官能化（ａｍｉｎｏ－ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌｉｅｄ）シリカゲルクロマトグラフィー（４０ｇ、ヘプタン／ＡｃＯＥｔ＝７０／３０～０／１００）により精製して（ｐｕｒｉｅｄ）、表題化合物を白色固体として得た（５２５ｍｇ、９２％収率）。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム－ｄ）δ ｐｐｍ ０．６０（ｑ，Ｊ＝７．８０Ｈｚ，６Ｈ）０．６５（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，３Ｈ）０．７７（ｄ，Ｊ＝６．８３Ｈｚ，３Ｈ）０．９５（ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，９Ｈ）１．０３（ｄｄ，Ｊ＝９．０，６．６Ｈｚ，６Ｈ）１．１４－１．２１（ｍ，１Ｈ）１．２３（ｓ，３Ｈ），１．３０－１．３４（ｍ，１Ｈ）１．４２（ｄｄｄ，Ｊ＝９．４，７，２．７Ｈｚ，１Ｈ）１．４８－１．５９（ｍ，６Ｈ）１．７０（ｓ，３Ｈ）１．８１－１．９１（ｍ，２Ｈ）２．３４－２．４４（ｍ，１Ｈ）２．６２－２．７４（ｍ，３Ｈ）３．０６（ｄｄ，Ｊ＝６．８３，２．９３Ｈｚ，１Ｈ）３．２５－３．３１（ｍ，２Ｈ）３．５０（ｓ，３Ｈ）３．８１－３．８９（ｑｕｉｎ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，１Ｈ）５．４４（ｄｄ，Ｊ＝１５．１２，８．７８Ｈｚ，１Ｈ）５．８８（ｄ，Ｊ＝１０．７３Ｈｚ，１Ｈ）６．２２（ｄｄ，Ｊ＝１５．１２，１０．７３Ｈｚ，１Ｈ）．
ステップ５：６－ヒドロキシ－Ｎ－（（（２Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－６－（（Ｓ，２Ｅ，４Ｅ）－７－（（２Ｒ，３Ｒ）－３－（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）－４－ヒドロキシ－３－メトキシペンタン－２－イル）－２－メチルオキシラン－２－イル）－６－メチルヘプタ－２，４－ジエン－２－イル）－５－メチルテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）メチル）－Ｎ－メチルヘキサンアミド（ｍｅｔｈｙｌｈｅｘａｎａｍｉｄｅ）
ＴＨＦ（２ｍＬ）中のステップ５で分離された化合物（１３３ｍｇ、０．２５４ｍｍｏｌ）と６－メトキシ－６－オキソヘキサン酸（０．０５６ｍｌ、０．３８１ｍｍｏｌ）との混合物にＨＡＴＵ（１４５ｍｇ、０．３８１ｍｍｏｌ）を加え、次に混合物を室温で１６時間撹拌した。続いて、ＡｃＯＥｔを加え、得られた混合物を水及びブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させて、ろ過し、真空濃縮した。得られた残渣をＴＨＦ（２ｍＬ）と合わせ、０℃に冷却した。次に、水素化ホウ素リチウム（２２．１ｍｇ、１．０１６ｍｍｏｌ）を加え、混合物を同じ温度で３０分間撹拌した。続いて、この混合物を室温に加温し、更に１時間撹拌した。この混合物に飽和塩化アンモニウム水溶液を加え、続いてＡｃＯＥｔ及び水を加えた。有機相を分離し、水及びブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させて、ろ過し、真空濃縮した。次に得られた残渣をＴＨＦ（５ｍＬ、６１．０２ｍｍｏｌ）に溶解させて、ＴＢＡＦ（ＴＨＦ中１Ｍ溶液、０．５０８ｍＬ、０．５０８ｍｍｏｌ）を０℃で加えた。得られた混合物を０℃で３０分間撹拌し、次に室温に加温し、続いて室温で更に２時間撹拌した。次にこの混合物をＡｃＯＥｔで希釈し、有機相を分離し、水及びブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させて、ろ過し、真空濃縮した。得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（４０ｇシリカ、０～１００％ヘプタン／ＥｔＯＡｃ）により精製して、表題化合物を無色の油として得た（１１３ｍｇ、８５％収率）。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム－ｄ）δ ｐｐｍ ０．６４（ｄ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，３Ｈ）０．８４（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，３Ｈ）１．０３（ｄ，Ｊ＝６．３Ｈ，３Ｈ）１．１４（ｄ，Ｊ＝６．３Ｈ，３Ｈ）１．１７－１．２１（ｍ，３Ｈ）１．２５（ｓ，３Ｈ）１．２７－１．４０（ｍ，３Ｈ）１．４６－１．６０（ｍ，６Ｈ）１．６０－１．６７（ｍ，２Ｈ）１．６９（ｓ，３Ｈ）１．７７－１．９２（ｍ，３Ｈ）２．１５（ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，２Ｈ）２．４０（ｂｒ．ｓ，１Ｈ）２．５３（ｄ，Ｊ＝９．７６Ｈｚ，２Ｈ）２．９２－３．０２（ｍ，２Ｈ）３．２６（ｄ，Ｊ＝９．７６Ｈｚ，１Ｈ）３．３４－３．４５（ｍ，１Ｈ）３．５０（ｓ，３Ｈ）３．５２－３．６２（ｍ，３Ｈ）３．８０－３．８３（ｍ，１Ｈ）５．４５（ｄｄ，Ｊ＝１５．１２，８．７８Ｈｚ，１Ｈ）５．８９（ｄ，Ｊ＝１０．７３Ｈｚ，１Ｈ）５．９６（ｂｒ．ｓ，１Ｈ）６．２３（ｄｄ，Ｊ＝１４．８８，１０．９８Ｈｚ，１Ｈ）．
ＴＨＦ（２ｍＬ）中のステップ５で分離された化合物（１３３ｍｇ、０．２５４ｍｍｏｌ）と６－メトキシ－６－オキソヘキサン酸（０．０５６ｍｌ、０．３８１ｍｍｏｌ）との混合物にＨＡＴＵ（１４５ｍｇ、０．３８１ｍｍｏｌ）を加え、次に混合物を室温で１６時間撹拌した。続いて、ＡｃＯＥｔを加え、得られた混合物を水及びブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させて、ろ過し、真空濃縮した。得られた残渣をＴＨＦ（２ｍＬ）と合わせ、０℃に冷却した。次に、水素化ホウ素リチウム（２２．１ｍｇ、１．０１６ｍｍｏｌ）を加え、混合物を同じ温度で３０分間撹拌した。続いて、この混合物を室温に加温し、更に１時間撹拌した。この混合物に飽和塩化アンモニウム水溶液を加え、続いてＡｃＯＥｔ及び水を加えた。有機相を分離し、水及びブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させて、ろ過し、真空濃縮した。次に得られた残渣をＴＨＦ（５ｍＬ、６１．０２ｍｍｏｌ）に溶解させて、ＴＢＡＦ（ＴＨＦ中１Ｍ溶液、０．５０８ｍＬ、０．５０８ｍｍｏｌ）を０℃で加えた。得られた混合物を０℃で３０分間撹拌し、次に室温に加温し、続いて室温で更に２時間撹拌した。次にこの混合物をＡｃＯＥｔで希釈し、有機相を分離し、水及びブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させて、ろ過し、真空濃縮した。得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（４０ｇシリカ、０～１００％ヘプタン／ＥｔＯＡｃ）により精製して、表題化合物を無色の油として得た（１１３ｍｇ、８５％収率）。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム－ｄ）δ ｐｐｍ ０．６４（ｄ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，３Ｈ）０．８４（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，３Ｈ）１．０３（ｄ，Ｊ＝６．３Ｈ，３Ｈ）１．１４（ｄ，Ｊ＝６．３Ｈ，３Ｈ）１．１７－１．２１（ｍ，３Ｈ）１．２５（ｓ，３Ｈ）１．２７－１．４０（ｍ，３Ｈ）１．４６－１．６０（ｍ，６Ｈ）１．６０－１．６７（ｍ，２Ｈ）１．６９（ｓ，３Ｈ）１．７７－１．９２（ｍ，３Ｈ）２．１５（ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，２Ｈ）２．４０（ｂｒ．ｓ，１Ｈ）２．５３（ｄ，Ｊ＝９．７６Ｈｚ，２Ｈ）２．９２－３．０２（ｍ，２Ｈ）３．２６（ｄ，Ｊ＝９．７６Ｈｚ，１Ｈ）３．３４－３．４５（ｍ，１Ｈ）３．５０（ｓ，３Ｈ）３．５２－３．６２（ｍ，３Ｈ）３．８０－３．８３（ｍ，１Ｈ）５．４５（ｄｄ，Ｊ＝１５．１２，８．７８Ｈｚ，１Ｈ）５．８９（ｄ，Ｊ＝１０．７３Ｈｚ，１Ｈ）５．９６（ｂｒ．ｓ，１Ｈ）６．２３（ｄｄ，Ｊ＝１４．８８，１０．９８Ｈｚ，１Ｈ）．
ステップ６：カルバメートの一般的合成手順
ＤＣＭ（０．０５Ｍ）中のステップ５から分離された化合物（２８．３ｍｇ、０．０５４ｍｍｏｌ）とクロロギ酸４－ニトロフェニル（２．０当量）とヒューニッヒ塩基（５当量）との混合物にＤＭＡＰ（０．５当量）を加えた。得られた混合物を室温で１６時間撹拌した。次に、アミン（２．０当量）を加え、混合物を更に１時間撹拌した。次に、この混合物をジクロロメタンで希釈し、有機層を分離し、水及びブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させて、ろ過し、真空濃縮した。次に得られた残渣をアミノ官能化シリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、所望の化合物を得た。
ＤＣＭ（０．０５Ｍ）中のステップ５から分離された化合物（２８．３ｍｇ、０．０５４ｍｍｏｌ）とクロロギ酸４－ニトロフェニル（２．０当量）とヒューニッヒ塩基（５当量）との混合物にＤＭＡＰ（０．５当量）を加えた。得られた混合物を室温で１６時間撹拌した。次に、アミン（２．０当量）を加え、混合物を更に１時間撹拌した。次に、この混合物をジクロロメタンで希釈し、有機層を分離し、水及びブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させて、ろ過し、真空濃縮した。次に得られた残渣をアミノ官能化シリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、所望の化合物を得た。
１．３．２ ＡＤＬ１－Ｈ５の合成
１．３．２．１ Ｈ５の合成
６－（（（（２Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－６－（（Ｓ，２Ｅ，４Ｅ）－７－（（２Ｒ，３Ｒ）－３－（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）－４－ヒドロキシ－３－メトキシペンタン－２－イル）－２－メチルオキシラン－２－イル）－６－メチルヘプタ－２，４－ジエン－２－イル）－５－メチルテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）メチル）アミノ）－６－オキソヘキシルピペラジン－１－カルボキシレート（Ｈ５）
セクション１．３．１に概説されるステップ１～６を用いて表題化合物を無色の油として得た（２４．５ｍｇ、７１％収率）。ＬＣ／ＭＳ（ＥＳＩ，ｍ／ｚ），６３６．８９［Ｍ＋Ｈ］＋．
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム－ｄ）δ ｐｐｍ ０．６５（ｄ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，３Ｈ）０．８５（ｄ，Ｊ＝６．８３Ｈｚ，３Ｈ）０．９５（ｄｄ，Ｊ＝１６．８，６．６Ｈｚ，１Ｈ）１．０３（ｄ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，３Ｈ）１．１５（ｄ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，３Ｈ）１．１８－１．２５（ｍ，２Ｈ）１．２６（ｓ，３Ｈ）１．２９－１．４０（ｍ，３Ｈ）１．４７－１．６９（ｍ，８Ｈ）１．７０（ｓ，３Ｈ）１．７９－１．９２（ｍ，２Ｈ）１．９２－２．０７（ｍ，４Ｈ）２．１５（ｔ，Ｊ＝７．５６Ｈｚ，２Ｈ）２．３６－２．４５（ｍ，１Ｈ）２．５４（ｄ，Ｊ＝９．２７Ｈｚ，１Ｈ）２．８０（ｂｒ．ｓ．，４Ｈ）２．８９－３．０４（ｍ，２Ｈ）３．２７（ｄ，Ｊ＝１０．２４Ｈｚ，１Ｈ）３．３５－３．４６（ｍ，５Ｈ）３．５１（ｓ，３Ｈ）３．５２－３．５８（ｍ，２Ｈ）３．８３（ｔ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，１Ｈ）４．０５（ｔ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，２Ｈ）５．４６（ｄｄ，Ｊ＝１５．１２，８．７８Ｈｚ，１Ｈ）５．８２－５．９５（ｍ，２Ｈ）６．２４（ｄｄ，Ｊ＝１５．１２，１０．７３Ｈｚ，１Ｈ）．
１．３．２．１ Ｈ５の合成
６－（（（（２Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－６－（（Ｓ，２Ｅ，４Ｅ）－７－（（２Ｒ，３Ｒ）－３－（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）－４－ヒドロキシ－３－メトキシペンタン－２－イル）－２－メチルオキシラン－２－イル）－６－メチルヘプタ－２，４－ジエン－２－イル）－５－メチルテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）メチル）アミノ）－６－オキソヘキシルピペラジン－１－カルボキシレート（Ｈ５）
セクション１．３．１に概説されるステップ１～６を用いて表題化合物を無色の油として得た（２４．５ｍｇ、７１％収率）。ＬＣ／ＭＳ（ＥＳＩ，ｍ／ｚ），６３６．８９［Ｍ＋Ｈ］＋．
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム－ｄ）δ ｐｐｍ ０．６５（ｄ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，３Ｈ）０．８５（ｄ，Ｊ＝６．８３Ｈｚ，３Ｈ）０．９５（ｄｄ，Ｊ＝１６．８，６．６Ｈｚ，１Ｈ）１．０３（ｄ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，３Ｈ）１．１５（ｄ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，３Ｈ）１．１８－１．２５（ｍ，２Ｈ）１．２６（ｓ，３Ｈ）１．２９－１．４０（ｍ，３Ｈ）１．４７－１．６９（ｍ，８Ｈ）１．７０（ｓ，３Ｈ）１．７９－１．９２（ｍ，２Ｈ）１．９２－２．０７（ｍ，４Ｈ）２．１５（ｔ，Ｊ＝７．５６Ｈｚ，２Ｈ）２．３６－２．４５（ｍ，１Ｈ）２．５４（ｄ，Ｊ＝９．２７Ｈｚ，１Ｈ）２．８０（ｂｒ．ｓ．，４Ｈ）２．８９－３．０４（ｍ，２Ｈ）３．２７（ｄ，Ｊ＝１０．２４Ｈｚ，１Ｈ）３．３５－３．４６（ｍ，５Ｈ）３．５１（ｓ，３Ｈ）３．５２－３．５８（ｍ，２Ｈ）３．８３（ｔ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，１Ｈ）４．０５（ｔ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，２Ｈ）５．４６（ｄｄ，Ｊ＝１５．１２，８．７８Ｈｚ，１Ｈ）５．８２－５．９５（ｍ，２Ｈ）６．２４（ｄｄ，Ｊ＝１５．１２，１０．７３Ｈｚ，１Ｈ）．
１．３．２．２ ＡＤＬ１－Ｈ５の合成
１－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（６－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）ヘキサンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）４－（６－（（（（２Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－６－（（Ｓ，２Ｅ，４Ｅ）－７－（（２Ｒ，３Ｒ）－３－（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）－４－ヒドロキシ－３－メトキシペンタン－２－イル）－２－メチルオキシラン－２－イル）－６－メチルヘプタ－２，４－ジエン－２－イル）－５－メチルテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）メチル）アミノ）－６－オキソヘキシル）ピペラジン－１，４－ジカルボキシレート（ＡＤＬ１－Ｈ５）
セクション１．２．７に概説される手順を用いて表題化合物を無色の油として得た（２５．８ｍｇ、５４％収率）。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，メタノール－ｄ４）δ ｐｐｍ ０．６５（ｄ，Ｊ＝６．８３Ｈｚ，３Ｈ）０．８０（ｄ，Ｊ＝６．８３Ｈｚ，３Ｈ）０．９４（ｄｄ，Ｊ＝６．３４，４．３９Ｈｚ，７Ｈ）１．０１（ｄ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，３Ｈ）１．０７（ｄ，Ｊ＝６．３０Ｈｚ，４Ｈ）１．１１－１．３８（ｍ，１４Ｈ）１．４５－１．６６（ｍ，１４Ｈ）１．６９（ｓ，３Ｈ）１．７０－１．７９（ｍ，１Ｈ）１．８０－１．９２（ｍ，３Ｈ）２．００－２．０９（ｍ，１Ｈ）２．１７（ｔ，Ｊ＝７．０７Ｈｚ，２Ｈ）２．２５（ｔ，Ｊ＝７．３２Ｈｚ，３Ｈ）２．４２（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）２．６３（ｄ，Ｊ＝９．７６Ｈｚ，１Ｈ）２．９５（ｄｄ，Ｊ＝５．８５，４．３９Ｈｚ，１Ｈ）３．０２－３．１１（ｍ，２Ｈ）３．１７（ｄ，Ｊ＝６．８３Ｈｚ，１Ｈ）３．３７－３．４８（ｍ，１４Ｈ）３．５０（ｓ，４Ｈ）３．５３（ｔ，Ｊ＝４．５０Ｈｚ，２Ｈ）３．６３－３．６７（ｍ，２Ｈ）３．７６（ｔ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，１Ｈ）４．０５（ｔ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，３Ｈ）４．１４（ｄ，Ｊ＝７．３２Ｈｚ，１Ｈ）４．４８（ｄｄ，Ｊ＝８．７８，４．８８Ｈｚ，１Ｈ）５．０６（ｓ，２Ｈ）５．４６（ｄｄ，Ｊ＝１５．１２，８．７８Ｈｚ，１Ｈ）５．９０（ｄ，Ｊ＝１０．７３Ｈｚ，１Ｈ）６．２０－６．３８（ｍ，１Ｈ）６．７６（ｓ ２Ｈ）７．３０（ｄ，Ｊ＝８．２９Ｈｚ，２Ｈ）７．５７（ｄ，Ｊ＝８．２９Ｈｚ，２Ｈ）．
１－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（６－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）ヘキサンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）４－（６－（（（（２Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－６－（（Ｓ，２Ｅ，４Ｅ）－７－（（２Ｒ，３Ｒ）－３－（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）－４－ヒドロキシ－３－メトキシペンタン－２－イル）－２－メチルオキシラン－２－イル）－６－メチルヘプタ－２，４－ジエン－２－イル）－５－メチルテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）メチル）アミノ）－６－オキソヘキシル）ピペラジン－１，４－ジカルボキシレート（ＡＤＬ１－Ｈ５）
セクション１．２．７に概説される手順を用いて表題化合物を無色の油として得た（２５．８ｍｇ、５４％収率）。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，メタノール－ｄ４）δ ｐｐｍ ０．６５（ｄ，Ｊ＝６．８３Ｈｚ，３Ｈ）０．８０（ｄ，Ｊ＝６．８３Ｈｚ，３Ｈ）０．９４（ｄｄ，Ｊ＝６．３４，４．３９Ｈｚ，７Ｈ）１．０１（ｄ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，３Ｈ）１．０７（ｄ，Ｊ＝６．３０Ｈｚ，４Ｈ）１．１１－１．３８（ｍ，１４Ｈ）１．４５－１．６６（ｍ，１４Ｈ）１．６９（ｓ，３Ｈ）１．７０－１．７９（ｍ，１Ｈ）１．８０－１．９２（ｍ，３Ｈ）２．００－２．０９（ｍ，１Ｈ）２．１７（ｔ，Ｊ＝７．０７Ｈｚ，２Ｈ）２．２５（ｔ，Ｊ＝７．３２Ｈｚ，３Ｈ）２．４２（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）２．６３（ｄ，Ｊ＝９．７６Ｈｚ，１Ｈ）２．９５（ｄｄ，Ｊ＝５．８５，４．３９Ｈｚ，１Ｈ）３．０２－３．１１（ｍ，２Ｈ）３．１７（ｄ，Ｊ＝６．８３Ｈｚ，１Ｈ）３．３７－３．４８（ｍ，１４Ｈ）３．５０（ｓ，４Ｈ）３．５３（ｔ，Ｊ＝４．５０Ｈｚ，２Ｈ）３．６３－３．６７（ｍ，２Ｈ）３．７６（ｔ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，１Ｈ）４．０５（ｔ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，３Ｈ）４．１４（ｄ，Ｊ＝７．３２Ｈｚ，１Ｈ）４．４８（ｄｄ，Ｊ＝８．７８，４．８８Ｈｚ，１Ｈ）５．０６（ｓ，２Ｈ）５．４６（ｄｄ，Ｊ＝１５．１２，８．７８Ｈｚ，１Ｈ）５．９０（ｄ，Ｊ＝１０．７３Ｈｚ，１Ｈ）６．２０－６．３８（ｍ，１Ｈ）６．７６（ｓ ２Ｈ）７．３０（ｄ，Ｊ＝８．２９Ｈｚ，２Ｈ）７．５７（ｄ，Ｊ＝８．２９Ｈｚ，２Ｈ）．
１．３．３ ＡＤＬ１－Ｈ６の合成
１．３．３．１ Ｈ６の合成
６－（（（（２Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－６－（（Ｓ，２Ｅ，４Ｅ）－７－（（２Ｒ，３Ｒ）－３－（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）－４－ヒドロキシ－３－メトキシペンタン－２－イル）－２－メチルオキシラン－２－イル）－６－メチルヘプタ－２，４－ジエン－２－イル）－５－メチルテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）メチル）アミノ）－６－オキソヘキシル１，４－ジアゼパン－１－カルボキシレート（Ｈ６）
セクション１．３．１に概説されるステップ１～６を用いて表題化合物を無色の油として得た（１５．３ｍｇ、４３％収率）。ＬＣ／ＭＳ（ＥＳＩ，ｍ／ｚ），６５０．９２［Ｍ＋Ｈ］＋．
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム－ｄ）δ ｐｐｍ ０．６５（ｄ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，３Ｈ）０．８５（ｄ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，３Ｈ）０．９３－１．００（ｍ，１Ｈ）１．０３（ｄ，Ｊ＝６．８３Ｈｚ，３Ｈ）１．１６（ｄ，Ｊ＝６．８３Ｈｚ，３Ｈ）１．１８－１．２４（ｍ，２Ｈ）１．２７（ｓ，３Ｈ）１．２９－１．４１（ｍ，３Ｈ）１．４９－１．５５（ｍ，２Ｈ）１．５９－１．６８（ｍ，５Ｈ）１．７１（ｓ，３Ｈ）１．７３－１．９２（ｍ，７Ｈ）２．１６（ｔ，Ｊ＝７．５６Ｈｚ，２Ｈ）２．３６－２．４６（ｍ，１Ｈ）２．５４（ｄ，Ｊ＝９．２７Ｈｚ，１Ｈ）２．８１－２．９３（ｍ，４Ｈ）２．９３－３．０４（ｍ，２Ｈ）３．２７（ｄ，Ｊ＝９．７６Ｈｚ，１Ｈ）３．３７－３．４９（ｍ，４Ｈ）３．５２（ｓ，３Ｈ）３．５４－３．５９（ｍ，２Ｈ）３．７９－３．８８（ｍ，１Ｈ）４．０５（ｔ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，２Ｈ）５．４６（ｄｄ，Ｊ＝１５．１２，８．７８Ｈｚ，１Ｈ）５．８２－５．９６（ｍ，２Ｈ）６．２４（ｄｄ，Ｊ＝１５．１２，１０．７３Ｈｚ，１Ｈ）．
１．３．３．１ Ｈ６の合成
６－（（（（２Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－６－（（Ｓ，２Ｅ，４Ｅ）－７－（（２Ｒ，３Ｒ）－３－（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）－４－ヒドロキシ－３－メトキシペンタン－２－イル）－２－メチルオキシラン－２－イル）－６－メチルヘプタ－２，４－ジエン－２－イル）－５－メチルテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）メチル）アミノ）－６－オキソヘキシル１，４－ジアゼパン－１－カルボキシレート（Ｈ６）
セクション１．３．１に概説されるステップ１～６を用いて表題化合物を無色の油として得た（１５．３ｍｇ、４３％収率）。ＬＣ／ＭＳ（ＥＳＩ，ｍ／ｚ），６５０．９２［Ｍ＋Ｈ］＋．
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム－ｄ）δ ｐｐｍ ０．６５（ｄ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，３Ｈ）０．８５（ｄ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，３Ｈ）０．９３－１．００（ｍ，１Ｈ）１．０３（ｄ，Ｊ＝６．８３Ｈｚ，３Ｈ）１．１６（ｄ，Ｊ＝６．８３Ｈｚ，３Ｈ）１．１８－１．２４（ｍ，２Ｈ）１．２７（ｓ，３Ｈ）１．２９－１．４１（ｍ，３Ｈ）１．４９－１．５５（ｍ，２Ｈ）１．５９－１．６８（ｍ，５Ｈ）１．７１（ｓ，３Ｈ）１．７３－１．９２（ｍ，７Ｈ）２．１６（ｔ，Ｊ＝７．５６Ｈｚ，２Ｈ）２．３６－２．４６（ｍ，１Ｈ）２．５４（ｄ，Ｊ＝９．２７Ｈｚ，１Ｈ）２．８１－２．９３（ｍ，４Ｈ）２．９３－３．０４（ｍ，２Ｈ）３．２７（ｄ，Ｊ＝９．７６Ｈｚ，１Ｈ）３．３７－３．４９（ｍ，４Ｈ）３．５２（ｓ，３Ｈ）３．５４－３．５９（ｍ，２Ｈ）３．７９－３．８８（ｍ，１Ｈ）４．０５（ｔ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，２Ｈ）５．４６（ｄｄ，Ｊ＝１５．１２，８．７８Ｈｚ，１Ｈ）５．８２－５．９６（ｍ，２Ｈ）６．２４（ｄｄ，Ｊ＝１５．１２，１０．７３Ｈｚ，１Ｈ）．
１．３．３．２ ＡＤＬ１－Ｈ６の合成
１－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（６－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）ヘキサンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）４－（６－（（（（２Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－６－（（Ｓ，２Ｅ，４Ｅ）－７－（（２Ｒ，３Ｒ）－３－（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）－４－ヒドロキシ－３－メトキシペンタン－２－イル）－２－メチルオキシラン－２－イル）－６－メチルヘプタ－２，４－ジエン－２－イル）－５－メチルテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）メチル）アミノ）－６－オキソヘキシル）１，４－ジアゼパン－１，４－ジカルボキシレート（ＡＤＬ－Ｈ６）
セクション１．２．７に概説される手順を用いて表題化合物を無色の油として得た（１１．６ｍｇ、５２％収率）。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，メタノール－ｄ４）δ ｐｐｍ ０．６５（ｄ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，３Ｈ）０．８０（ｄ，Ｊ＝６．８３Ｈｚ，２Ｈ）０．９４（ｄｄ，Ｊ＝６．８３，４．３９Ｈｚ，６Ｈ）０．９８－１．１６（ｍ，９Ｈ）１．１９－１．３６（ｍ，９Ｈ）１．４４－１．６５（ｍ，１４Ｈ）１．６９（ｓ，３Ｈ）１．７１－１．７８（ｍ，４Ｈ）１．８０－１．９２（ｍ，３Ｈ）２．００－２．１０（ｍ，１Ｈ）２．１１－２．１９（ｍ，２Ｈ）２．２５（ｔ，Ｊ＝７．５６Ｈｚ，３Ｈ）３．０３－３．２１（ｍ，４Ｈ）３．３６－３．４９（ｍ，１０Ｈ）３．４９－３．５１（ｍ，３Ｈ）３．５１－３．５７（ｍ，１２Ｈ）３．６２－３．６７（ｍ，８Ｈ）３．７０－３．８２（ｍ，１Ｈ）３．９７－４．０５（ｍ，２Ｈ）４．１４（ｄ，Ｊ＝７．３２Ｈｚ，１Ｈ）４．４６－４．５２（ｍ，１Ｈ）５．００－５．０８（ｍ，３Ｈ）５．３５－５．５２（ｍ，１Ｈ）５．３５－５．５２（ｍ，１Ｈ）５．８７－５．９５（ｍ，１Ｈ）６．２４－６．３３（ｍ，１Ｈ）６．７６（ｓ，２Ｈ）７．２６－７．３７（ｍ，３Ｈ）７．５７（ｄ，Ｊ＝７．３２Ｈｚ，３Ｈ）８．１９－８．２４（ｍ，１Ｈ）．
１－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（６－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）ヘキサンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）４－（６－（（（（２Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－６－（（Ｓ，２Ｅ，４Ｅ）－７－（（２Ｒ，３Ｒ）－３－（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）－４－ヒドロキシ－３－メトキシペンタン－２－イル）－２－メチルオキシラン－２－イル）－６－メチルヘプタ－２，４－ジエン－２－イル）－５－メチルテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）メチル）アミノ）－６－オキソヘキシル）１，４－ジアゼパン－１，４－ジカルボキシレート（ＡＤＬ－Ｈ６）
セクション１．２．７に概説される手順を用いて表題化合物を無色の油として得た（１１．６ｍｇ、５２％収率）。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，メタノール－ｄ４）δ ｐｐｍ ０．６５（ｄ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，３Ｈ）０．８０（ｄ，Ｊ＝６．８３Ｈｚ，２Ｈ）０．９４（ｄｄ，Ｊ＝６．８３，４．３９Ｈｚ，６Ｈ）０．９８－１．１６（ｍ，９Ｈ）１．１９－１．３６（ｍ，９Ｈ）１．４４－１．６５（ｍ，１４Ｈ）１．６９（ｓ，３Ｈ）１．７１－１．７８（ｍ，４Ｈ）１．８０－１．９２（ｍ，３Ｈ）２．００－２．１０（ｍ，１Ｈ）２．１１－２．１９（ｍ，２Ｈ）２．２５（ｔ，Ｊ＝７．５６Ｈｚ，３Ｈ）３．０３－３．２１（ｍ，４Ｈ）３．３６－３．４９（ｍ，１０Ｈ）３．４９－３．５１（ｍ，３Ｈ）３．５１－３．５７（ｍ，１２Ｈ）３．６２－３．６７（ｍ，８Ｈ）３．７０－３．８２（ｍ，１Ｈ）３．９７－４．０５（ｍ，２Ｈ）４．１４（ｄ，Ｊ＝７．３２Ｈｚ，１Ｈ）４．４６－４．５２（ｍ，１Ｈ）５．００－５．０８（ｍ，３Ｈ）５．３５－５．５２（ｍ，１Ｈ）５．３５－５．５２（ｍ，１Ｈ）５．８７－５．９５（ｍ，１Ｈ）６．２４－６．３３（ｍ，１Ｈ）６．７６（ｓ，２Ｈ）７．２６－７．３７（ｍ，３Ｈ）７．５７（ｄ，Ｊ＝７．３２Ｈｚ，３Ｈ）８．１９－８．２４（ｍ，１Ｈ）．
１．３．４ ＡＤＬ１－Ｈ７の合成
１．３．４．１ Ｈ７の合成
６－（（（（２Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－６－（（Ｓ，２Ｅ，４Ｅ）－７－（（２Ｒ，３Ｒ）－３－（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）－４－ヒドロキシ－３－メトキシペンタン－２－イル）－２－メチルオキシラン－２－イル）－６－メチルヘプタ－２，４－ジエン－２－イル）－５－メチルテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）メチル）アミノ）－６－オキソヘキシル３－（メチルアミノ）ピロリジン－１－カルボキシレート（Ｈ７）
セクション１．３．１に概説されるステップ１～６を用いて表題化合物を無色の油として得た（２６．６ｍｇ、７６％収率）。ＬＣ／ＭＳ（ＥＳＩ，ｍ／ｚ），６５０．８８［Ｍ＋Ｈ］＋．
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム－ｄ）δ ｐｐｍ ０．６５（ｄ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，３Ｈ）０．８５（ｄ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，３Ｈ）０．９３－０．９９（ｍ，１Ｈ）１．０４（ｄ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，３Ｈ）１．１６（ｄｄ，Ｊ＝６．３４，０．９８Ｈｚ，３Ｈ）１．１９－１．２２（ｍ，２Ｈ）１．２７（ｓ，３Ｈ）１．３１－１．４１（ｍ，３Ｈ）１．４７－１．６７（ｍ，８Ｈ）１．７０（ｓ，４Ｈ）１．８０－１．８７（ｍ，２Ｈ）１．８９（ｄ，Ｊ＝３．９０Ｈｚ，１Ｈ）２．０３（ｄｄ，Ｊ＝１２．６８，６．３４Ｈｚ，１Ｈ）２．１５（ｔ，Ｊ＝７．３２Ｈｚ，２Ｈ）２．４１（ｍ，３Ｈ）２．５４（ｄ，Ｊ＝９．７６Ｈｚ，１Ｈ）２．９４－３．１３（ｍ，２Ｈ）３．２０（ｍ，１Ｈ）３．２７（ｄ，Ｊ＝９．７６Ｈｚ，１Ｈ）３．３５－３．５０（ｍ，３Ｈ）３．５１（ｓ，３Ｈ）３．５３－３．６０（ｍ，２Ｈ）３．７９－３．８８（ｍ，１Ｈ）４．０４（ｔ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，２Ｈ）５．４６（ｄｄ，Ｊ＝１５．１２，８．７８Ｈｚ，１Ｈ）５．８２－５．９６（ｍ，２Ｈ）６．２４（ｄｄ，Ｊ＝１４．８８，１０．９８Ｈｚ，１Ｈ）．
１．３．４．１ Ｈ７の合成
６－（（（（２Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－６－（（Ｓ，２Ｅ，４Ｅ）－７－（（２Ｒ，３Ｒ）－３－（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）－４－ヒドロキシ－３－メトキシペンタン－２－イル）－２－メチルオキシラン－２－イル）－６－メチルヘプタ－２，４－ジエン－２－イル）－５－メチルテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）メチル）アミノ）－６－オキソヘキシル３－（メチルアミノ）ピロリジン－１－カルボキシレート（Ｈ７）
セクション１．３．１に概説されるステップ１～６を用いて表題化合物を無色の油として得た（２６．６ｍｇ、７６％収率）。ＬＣ／ＭＳ（ＥＳＩ，ｍ／ｚ），６５０．８８［Ｍ＋Ｈ］＋．
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム－ｄ）δ ｐｐｍ ０．６５（ｄ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，３Ｈ）０．８５（ｄ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，３Ｈ）０．９３－０．９９（ｍ，１Ｈ）１．０４（ｄ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，３Ｈ）１．１６（ｄｄ，Ｊ＝６．３４，０．９８Ｈｚ，３Ｈ）１．１９－１．２２（ｍ，２Ｈ）１．２７（ｓ，３Ｈ）１．３１－１．４１（ｍ，３Ｈ）１．４７－１．６７（ｍ，８Ｈ）１．７０（ｓ，４Ｈ）１．８０－１．８７（ｍ，２Ｈ）１．８９（ｄ，Ｊ＝３．９０Ｈｚ，１Ｈ）２．０３（ｄｄ，Ｊ＝１２．６８，６．３４Ｈｚ，１Ｈ）２．１５（ｔ，Ｊ＝７．３２Ｈｚ，２Ｈ）２．４１（ｍ，３Ｈ）２．５４（ｄ，Ｊ＝９．７６Ｈｚ，１Ｈ）２．９４－３．１３（ｍ，２Ｈ）３．２０（ｍ，１Ｈ）３．２７（ｄ，Ｊ＝９．７６Ｈｚ，１Ｈ）３．３５－３．５０（ｍ，３Ｈ）３．５１（ｓ，３Ｈ）３．５３－３．６０（ｍ，２Ｈ）３．７９－３．８８（ｍ，１Ｈ）４．０４（ｔ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，２Ｈ）５．４６（ｄｄ，Ｊ＝１５．１２，８．７８Ｈｚ，１Ｈ）５．８２－５．９６（ｍ，２Ｈ）６．２４（ｄｄ，Ｊ＝１４．８８，１０．９８Ｈｚ，１Ｈ）．
１．３．４．２ ＡＤＬ１－Ｈ７の合成
６－（（（（２Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－６－（（Ｓ，２Ｅ，４Ｅ）－７－（（２Ｒ，３Ｒ）－３－（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）－４－ヒドロキシ－３－メトキシペンタン－２－イル）－２－メチルオキシラン－２－イル）－６－メチルヘプタ－２，４－ジエン－２－イル）－５－メチルテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）メチル）アミノ）－６－オキソヘキシル３－（（（（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（６－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）ヘキサンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）オキシ）カルボニル）（メチル）アミノ）ピロリジン－１－カルボキシレート（ＡＤＬ１－Ｈ７）
セクション１．２．７に概説される手順を用いて（混合物は２時間ではなく１６時間撹拌した）、表題化合物を無色の油として得た（２０．１ｍｇ、５４％収率）。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，メタノール－ｄ４）δ ｐｐｍ ０．６５（ｄ，Ｊ＝６．３０Ｈｚ，３Ｈ）０．８０（ｄ，Ｊ＝６．８３Ｈｚ，３Ｈ）０．９４（ｄｄ，Ｊ＝６．５９，４．６３Ｈｚ，７Ｈ）１．０１（ｄ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，３Ｈ）１．０８（ｄ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，４Ｈ）１．１１－１．２３（ｍ，４Ｈ）１．２３－１．２７（ｍ，６Ｈ）１．２７－１．３８（ｍ，５Ｈ）１．４３－１．６５（ｍ，１４Ｈ）１．６９（ｓ，３Ｈ）１．７０－１．７７（ｍ，１Ｈ）１．８０－１．９２（ｍ，３Ｈ）２．００－２．０９（ｍ，３Ｈ）２．１７（ｔ，Ｊ＝７．３２Ｈｚ，２Ｈ）２．２５（ｔ，Ｊ＝７．３０Ｈｚ，３Ｈ）２．３８－２．４６（ｍ，１Ｈ）２．６３（ｄ，Ｊ＝９．２７Ｈｚ，１Ｈ）２．８３（ｓ，３Ｈ）２．８４（ｓ，３Ｈ）２．９２－２．９６（ｍ，１Ｈ）２．９７（ｓ，３Ｈ）３．０２－３．２１（ｍ，４Ｈ）３．３０－３．４２（ｍ，３Ｈ）３．４５（ｔ，Ｊ＝７．０７Ｈｚ，３Ｈ）３．５０（ｓ，３Ｈ）３．５１－３．５８（ｍ，３Ｈ）３．７２－３．８０（ｍ，１Ｈ）４．０３（ｔ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，２Ｈ）４．１５（ｄ，Ｊ＝７．３２Ｈｚ，１Ｈ）４．４９（ｄｄ，Ｊ＝９．０３，５．１２Ｈｚ，１Ｈ）５．０６（ｓ，２Ｈ）５．４６（ｄｄ，Ｊ＝１４．８８，９．０３Ｈｚ，１Ｈ）５．９０（ｄ，Ｊ＝１１．２２Ｈｚ，１Ｈ）６．２８（ｄｄ，Ｊ＝１４．８８，１０．９８Ｈｚ，１Ｈ）６．７６（ｓ，２Ｈ）７．３０（ｄ，Ｊ＝５．９０Ｈｚ，２Ｈ）７．５７（ｄ，Ｊ＝８．２９Ｈｚ，２Ｈ）７．９５（ｓ，１Ｈ）．
６－（（（（２Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－６－（（Ｓ，２Ｅ，４Ｅ）－７－（（２Ｒ，３Ｒ）－３－（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）－４－ヒドロキシ－３－メトキシペンタン－２－イル）－２－メチルオキシラン－２－イル）－６－メチルヘプタ－２，４－ジエン－２－イル）－５－メチルテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）メチル）アミノ）－６－オキソヘキシル３－（（（（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（６－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）ヘキサンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）オキシ）カルボニル）（メチル）アミノ）ピロリジン－１－カルボキシレート（ＡＤＬ１－Ｈ７）
セクション１．２．７に概説される手順を用いて（混合物は２時間ではなく１６時間撹拌した）、表題化合物を無色の油として得た（２０．１ｍｇ、５４％収率）。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，メタノール－ｄ４）δ ｐｐｍ ０．６５（ｄ，Ｊ＝６．３０Ｈｚ，３Ｈ）０．８０（ｄ，Ｊ＝６．８３Ｈｚ，３Ｈ）０．９４（ｄｄ，Ｊ＝６．５９，４．６３Ｈｚ，７Ｈ）１．０１（ｄ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，３Ｈ）１．０８（ｄ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，４Ｈ）１．１１－１．２３（ｍ，４Ｈ）１．２３－１．２７（ｍ，６Ｈ）１．２７－１．３８（ｍ，５Ｈ）１．４３－１．６５（ｍ，１４Ｈ）１．６９（ｓ，３Ｈ）１．７０－１．７７（ｍ，１Ｈ）１．８０－１．９２（ｍ，３Ｈ）２．００－２．０９（ｍ，３Ｈ）２．１７（ｔ，Ｊ＝７．３２Ｈｚ，２Ｈ）２．２５（ｔ，Ｊ＝７．３０Ｈｚ，３Ｈ）２．３８－２．４６（ｍ，１Ｈ）２．６３（ｄ，Ｊ＝９．２７Ｈｚ，１Ｈ）２．８３（ｓ，３Ｈ）２．８４（ｓ，３Ｈ）２．９２－２．９６（ｍ，１Ｈ）２．９７（ｓ，３Ｈ）３．０２－３．２１（ｍ，４Ｈ）３．３０－３．４２（ｍ，３Ｈ）３．４５（ｔ，Ｊ＝７．０７Ｈｚ，３Ｈ）３．５０（ｓ，３Ｈ）３．５１－３．５８（ｍ，３Ｈ）３．７２－３．８０（ｍ，１Ｈ）４．０３（ｔ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，２Ｈ）４．１５（ｄ，Ｊ＝７．３２Ｈｚ，１Ｈ）４．４９（ｄｄ，Ｊ＝９．０３，５．１２Ｈｚ，１Ｈ）５．０６（ｓ，２Ｈ）５．４６（ｄｄ，Ｊ＝１４．８８，９．０３Ｈｚ，１Ｈ）５．９０（ｄ，Ｊ＝１１．２２Ｈｚ，１Ｈ）６．２８（ｄｄ，Ｊ＝１４．８８，１０．９８Ｈｚ，１Ｈ）６．７６（ｓ，２Ｈ）７．３０（ｄ，Ｊ＝５．９０Ｈｚ，２Ｈ）７．５７（ｄ，Ｊ＝８．２９Ｈｚ，２Ｈ）７．９５（ｓ，１Ｈ）．
１．４ ＡＤＬ１－Ｈ８、ＡＤＬ１－Ｈ９、及びＡＤＬ１－Ｈ１０の合成
１．４．１ 概要－一般的手順４
ステップ１：３－ヒドロキシプロパン酸ｔｅｒｔ－ブチル
ＤＭＦ（３０ｍＬ）中の水素化ナトリウム（２６９ｍｇ、６．１５７ｍｍｏｌ）の混合物に０℃で３－ヒドロキシプロパン酸ｔｅｒｔ－ブチル（０．９０９ｍＬ、６．１５７ｍｍｏｌ）を加えた。この混合物を０℃で１時間撹拌し、次にブロモ酢酸メチル（０．６２４ｍＬ、６．１５７ｍｍｏｌ）を滴下して加えた。得られた混合物を室温に加温し、室温で１６時間撹拌した。続いて、飽和塩化アンモニウム水溶液を加え、混合物をＡｃＯＥｔで抽出した。次に合わせた有機抽出物を水及びブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させて、ろ過し、真空濃縮した。分離された残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（８０ｇ、ヘプタン／ＡｃＯＥｔ＝８０／２０～５０／５０）により精製して、表題化合物（９７ｍｇ、７％収率）を無色の油として得た。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム－ｄ）δ ｐｐｍ １．４２（ｓ，９Ｈ）２．４９－２．５８（ｍ，２Ｈ）３．４１（ｓ，３Ｈ）３．６９－３．７９（ｍ，２Ｈ）４．０５－４．１３（ｍ，２Ｈ）．
１．４．１ 概要－一般的手順４
ステップ１：３－ヒドロキシプロパン酸ｔｅｒｔ－ブチル
ＤＭＦ（３０ｍＬ）中の水素化ナトリウム（２６９ｍｇ、６．１５７ｍｍｏｌ）の混合物に０℃で３－ヒドロキシプロパン酸ｔｅｒｔ－ブチル（０．９０９ｍＬ、６．１５７ｍｍｏｌ）を加えた。この混合物を０℃で１時間撹拌し、次にブロモ酢酸メチル（０．６２４ｍＬ、６．１５７ｍｍｏｌ）を滴下して加えた。得られた混合物を室温に加温し、室温で１６時間撹拌した。続いて、飽和塩化アンモニウム水溶液を加え、混合物をＡｃＯＥｔで抽出した。次に合わせた有機抽出物を水及びブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させて、ろ過し、真空濃縮した。分離された残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（８０ｇ、ヘプタン／ＡｃＯＥｔ＝８０／２０～５０／５０）により精製して、表題化合物（９７ｍｇ、７％収率）を無色の油として得た。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム－ｄ）δ ｐｐｍ １．４２（ｓ，９Ｈ）２．４９－２．５８（ｍ，２Ｈ）３．４１（ｓ，３Ｈ）３．６９－３．７９（ｍ，２Ｈ）４．０５－４．１３（ｍ，２Ｈ）．
ステップ２：３－（２－メトキシ－２－オキソエトキシ）プロパン酸
ジクロロメタン（２ｍＬ）及びＴＦＡ（２ｍＬ）中の３－（２－メトキシ－２－オキソエトキシ）プロパン酸ｔｅｒｔ－ブチル（６６ｍｇ、０．３０２ｍｍｏｌ）の混合物を室温で３時間撹拌した。次にこの混合物を濃縮乾固して、表題化合物を無色の油として得た（５８ｍｇ、１００％）。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム－ｄ）δ ｐｐｍ ２．６２－２．７８（ｍ，２Ｈ）３．７６（ｓ，３Ｈ）３．７８－３．８５（ｍ，２Ｈ）４．１４（ｄ，Ｊ＝１．９５Ｈｚ，２Ｈ）．
ジクロロメタン（２ｍＬ）及びＴＦＡ（２ｍＬ）中の３－（２－メトキシ－２－オキソエトキシ）プロパン酸ｔｅｒｔ－ブチル（６６ｍｇ、０．３０２ｍｍｏｌ）の混合物を室温で３時間撹拌した。次にこの混合物を濃縮乾固して、表題化合物を無色の油として得た（５８ｍｇ、１００％）。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム－ｄ）δ ｐｐｍ ２．６２－２．７８（ｍ，２Ｈ）３．７６（ｓ，３Ｈ）３．７８－３．８５（ｍ，２Ｈ）４．１４（ｄ，Ｊ＝１．９５Ｈｚ，２Ｈ）．
ステップ３：Ｎ－（（（２Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－６－（（Ｓ，２Ｅ，４Ｅ）－７－（（２Ｒ，３Ｒ）－３－（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）－４－ヒドロキシ－３－メトキシペンタン－２－イル）－２－メチルオキシラン－２－イル）－６－メチルヘプタ－２，４－ジエン－２－イル）－５－メチルテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）メチル）－３－（２－ヒドロキシエトキシ）プロペンアミド
ＴＨＦ（５ｍＬ）中の（（２Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－６－（（Ｓ，２Ｅ，４Ｅ）－７－（（２Ｒ，３Ｒ）－３－（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）－３－メトキシ－４－（（トリエチルシリル）オキシ）ペンタン－２－イル）－２－メチルオキシラン－２－イル）－６－メチルヘプタ－２，４－ジエン－２－イル）－５－メチルテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）メタンアミン（１３３ｍｇ、０．２５４ｍｍｏｌ）と３－（２－メトキシ－２－オキソエトキシ）プロパン酸（６１．７ｍｇ、０．３８１ｍｍｏｌ）との混合物に室温でＨＡＴＵ（１４５ｍｇ、０．３８１ｍｍｏｌ）及びＤＩＰＥＡ（２２１μＬ、１．２７ｍｍｏｌ）を加えた。この混合物を１６時間撹拌し、次にＡｃＯＥｔで希釈した。有機層を分離し、水及びブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させて、ろ過し、真空濃縮した。
ＴＨＦ（５ｍＬ）中の（（２Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－６－（（Ｓ，２Ｅ，４Ｅ）－７－（（２Ｒ，３Ｒ）－３－（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）－３－メトキシ－４－（（トリエチルシリル）オキシ）ペンタン－２－イル）－２－メチルオキシラン－２－イル）－６－メチルヘプタ－２，４－ジエン－２－イル）－５－メチルテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）メタンアミン（１３３ｍｇ、０．２５４ｍｍｏｌ）と３－（２－メトキシ－２－オキソエトキシ）プロパン酸（６１．７ｍｇ、０．３８１ｍｍｏｌ）との混合物に室温でＨＡＴＵ（１４５ｍｇ、０．３８１ｍｍｏｌ）及びＤＩＰＥＡ（２２１μＬ、１．２７ｍｍｏｌ）を加えた。この混合物を１６時間撹拌し、次にＡｃＯＥｔで希釈した。有機層を分離し、水及びブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させて、ろ過し、真空濃縮した。
分離された残渣をＴＨＦ（５ｍＬ）に溶解させて０℃に冷却し、次に水素化ホウ素リチウム（２２．１２ｍｇ、１．０１６ｍｍｏｌ）を加えた。得られた混合物を同じ温度で３０分間撹拌し、次に室温に加温し、更に２時間撹拌した。続いて、飽和塩化アンモニウム水溶液及び水を加え、水層をＡｃＯＥｔで抽出した。合わせた有機層を水及びブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させて、真空濃縮した。次に分離された残渣をＴＨＦ（５ｍＬ）に溶解させて、ＴＢＡＦ（ＴＨＦ溶液中１Ｍ、０．５０８ｍＬ、０．５０８ｍｍｏｌ）を０℃で加えた。０℃で３０分間撹拌後、混合物を室温に加温し、２時間撹拌した。続いて、この混合物をＡｃＯＥｔで希釈し、有機層を分離し、水及びブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させて、ろ過し、真空濃縮した。得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（２４ｇ、ヘプタン／ＡｃＯＥｔ＝７０／３０～０／１００、次にＡｃＯＥｔ／ＭｅＯＨ＝８０／２０）により精製して、表題化合物（６８ｍｇ、５１％収率）を無色の油として得た。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム－ｄ）δ ｐｐｍ ０．６５（ｄ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，３Ｈ）０．８５（ｄ，Ｊ＝６．８３Ｈｚ，３Ｈ）１．０４（ｄ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，３Ｈ）１．１６（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，４Ｈ）１．１９－１．２２（ｍ，２Ｈ）１．２７（ｓ，３Ｈ）１．４２－１．６５（ｍ，４Ｈ）１．７１（ｓ，３Ｈ）１．７９－１．９２（ｍ，２Ｈ）２．３７－２．５０（ｍ，４Ｈ）２．５４（ｄ，Ｊ＝９．２７Ｈｚ，２Ｈ）２．８９－３．０５（ｍ，２Ｈ）３．２８（ｄ，Ｊ＝１０．２４Ｈｚ，１Ｈ）３．４１（ｔｄ，Ｊ＝８．５４，２．４４Ｈｚ，１Ｈ）３．５２（ｓ，３Ｈ）３．５４－３．５９（ｍ，２Ｈ）３．６１－３．６８（ｍ，２Ｈ）３．６９－３．７６（ｍ，２Ｈ）３．７８－３．９１（ｍ，２Ｈ）５．４３－５．５２（ｍ，１Ｈ）５．９２（ｄ，Ｊ＝１０．７３Ｈｚ，１Ｈ）６．２４（ｄｄ，Ｊ＝１５．１２，１０．７３Ｈｚ，１Ｈ）６．７７（ｍ，１Ｈ）．
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム－ｄ）δ ｐｐｍ ０．６５（ｄ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，３Ｈ）０．８５（ｄ，Ｊ＝６．８３Ｈｚ，３Ｈ）１．０４（ｄ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，３Ｈ）１．１６（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，４Ｈ）１．１９－１．２２（ｍ，２Ｈ）１．２７（ｓ，３Ｈ）１．４２－１．６５（ｍ，４Ｈ）１．７１（ｓ，３Ｈ）１．７９－１．９２（ｍ，２Ｈ）２．３７－２．５０（ｍ，４Ｈ）２．５４（ｄ，Ｊ＝９．２７Ｈｚ，２Ｈ）２．８９－３．０５（ｍ，２Ｈ）３．２８（ｄ，Ｊ＝１０．２４Ｈｚ，１Ｈ）３．４１（ｔｄ，Ｊ＝８．５４，２．４４Ｈｚ，１Ｈ）３．５２（ｓ，３Ｈ）３．５４－３．５９（ｍ，２Ｈ）３．６１－３．６８（ｍ，２Ｈ）３．６９－３．７６（ｍ，２Ｈ）３．７８－３．９１（ｍ，２Ｈ）５．４３－５．５２（ｍ，１Ｈ）５．９２（ｄ，Ｊ＝１０．７３Ｈｚ，１Ｈ）６．２４（ｄｄ，Ｊ＝１５．１２，１０．７３Ｈｚ，１Ｈ）６．７７（ｍ，１Ｈ）．
ステップ４：カルバメートの合成
ＤＣＭ（０．０４Ｍ）中のＮ－（（（２Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－６－（（Ｓ，２Ｅ，４Ｅ）－７－（（２Ｒ，３Ｒ）－３－（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）－４－ヒドロキシ－３－メトキシペンタン－２－イル）－２－メチルオキシラン－２－イル）－６－メチルヘプタ－２，４－ジエン－２－イル）－５－メチルテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）メチル）－３－（２－ヒドロキシエトキシ）プロパンアミド（１．０当量、０．０４３ｍｍｏｌ）とクロロギ酸４－ニトロフェニル（２．０当量、０．０８６ｍｍｏｌ）とＤＩＰＥＡ（５．０当量）との混合物に室温でＤＭＡＰ（５．０当量）を加えた。この混合物を室温で１６時間撹拌し、次にピペラジン（１０．０当量）を加え、混合物を更に１時間撹拌した。次に、得られた混合物をジクロロメタンで希釈し、有機層を分離し、水及びブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させて、ろ過し、真空濃縮した。得られた残渣をアミノ官能化シリカゲルクロマトグラフィー（ヘプタン／ＡｃＯＥｔ＝５０／５０～０／１００）により精製すると、所望の（ｄｅｓｒｉｒｅｄ）化合物が提供された。
ＤＣＭ（０．０４Ｍ）中のＮ－（（（２Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－６－（（Ｓ，２Ｅ，４Ｅ）－７－（（２Ｒ，３Ｒ）－３－（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）－４－ヒドロキシ－３－メトキシペンタン－２－イル）－２－メチルオキシラン－２－イル）－６－メチルヘプタ－２，４－ジエン－２－イル）－５－メチルテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）メチル）－３－（２－ヒドロキシエトキシ）プロパンアミド（１．０当量、０．０４３ｍｍｏｌ）とクロロギ酸４－ニトロフェニル（２．０当量、０．０８６ｍｍｏｌ）とＤＩＰＥＡ（５．０当量）との混合物に室温でＤＭＡＰ（５．０当量）を加えた。この混合物を室温で１６時間撹拌し、次にピペラジン（１０．０当量）を加え、混合物を更に１時間撹拌した。次に、得られた混合物をジクロロメタンで希釈し、有機層を分離し、水及びブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させて、ろ過し、真空濃縮した。得られた残渣をアミノ官能化シリカゲルクロマトグラフィー（ヘプタン／ＡｃＯＥｔ＝５０／５０～０／１００）により精製すると、所望の（ｄｅｓｒｉｒｅｄ）化合物が提供された。
１．４．２ ＡＤＬ１－Ｈ８の合成
１．４．２．１ Ｈ８の合成
２－（３－（（（（２Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－６－（（Ｓ，２Ｅ，４Ｅ）－７－（（２Ｒ，３Ｒ）－３－（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）－４－ヒドロキシ－３－メトキシペンタン－２－イル）－２－メチルオキシラン－２－イル）－６－メチルヘプタ－２，４－ジエン－２－イル）－５－メチルテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）メチル）アミノ）－３－オキソプロポキシ）エチルピペラジン－１－カルボキシレート（Ｈ８）
セクション１．４．１に概説されるステップ１～４を用いて表題化合物を淡黄色の油として得た（１９．２ｍｇ、７０％収率）。ＬＣ／ＭＳ（ＥＳＩ，ｍ／ｚ），６３８．７８［Ｍ＋Ｈ］＋．
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム－ｄ）δ ｐｐｍ ０．６５（ｄ，Ｊ＝６．８３Ｈｚ，３Ｈ）０．８５（ｄ，Ｊ＝６．８３Ｈｚ，３Ｈ）０．９６（ｄｄ，Ｊ＝１８．５４，６．３４Ｈｚ，１Ｈ）１．０３（ｄ，Ｊ＝５．８５Ｈｚ，３Ｈ）１．１６（ｄ，Ｊ＝５．８５Ｈｚ，４Ｈ）１．１８－１．２５（ｍ，２Ｈ）１．２７（ｓ，３Ｈ）１．２９－１．３９（ｍ，１Ｈ）１．４１－１．６３（ｍ，４Ｈ）１．７０（ｓ，３Ｈ）１．７７－１．９７（ｍ，７Ｈ）２．４４（ｔ，Ｊ＝５．６１Ｈｚ，２Ｈ）２．４７－２．５７（ｍ，１Ｈ）２．８０（ｂｒ．ｓ．，４Ｈ）２．８５－２．９９（ｍ，１Ｈ）２．９９－３．０９（ｍ，１Ｈ）３．２７（ｄ，Ｊ＝９．７６Ｈｚ，１Ｈ）３．３６－３．４８（ｍ，５Ｈ）３．５２（ｓ，３Ｈ）３．５４－３．５９（ｍ，１Ｈ）３．５９－３．６８（ｍ，２Ｈ）３．６８－３．７４（ｍ，２Ｈ）３．７７－３．９０（ｍ，１Ｈ）４．１５－４．２３（ｍ，２Ｈ）４．３６（ｔ，Ｊ＝６．１０Ｈｚ，１Ｈ）５．４４（ｄｄ，Ｊ＝１４．８８，８．５４Ｈｚ，１Ｈ）５．８８（ｄ，Ｊ＝１０．７３Ｈｚ，１Ｈ）６．２３（ｄｄ，Ｊ＝１４．８８，１０．９８Ｈｚ，１Ｈ）６．４１（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）．
１．４．２．１ Ｈ８の合成
２－（３－（（（（２Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－６－（（Ｓ，２Ｅ，４Ｅ）－７－（（２Ｒ，３Ｒ）－３－（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）－４－ヒドロキシ－３－メトキシペンタン－２－イル）－２－メチルオキシラン－２－イル）－６－メチルヘプタ－２，４－ジエン－２－イル）－５－メチルテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）メチル）アミノ）－３－オキソプロポキシ）エチルピペラジン－１－カルボキシレート（Ｈ８）
セクション１．４．１に概説されるステップ１～４を用いて表題化合物を淡黄色の油として得た（１９．２ｍｇ、７０％収率）。ＬＣ／ＭＳ（ＥＳＩ，ｍ／ｚ），６３８．７８［Ｍ＋Ｈ］＋．
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム－ｄ）δ ｐｐｍ ０．６５（ｄ，Ｊ＝６．８３Ｈｚ，３Ｈ）０．８５（ｄ，Ｊ＝６．８３Ｈｚ，３Ｈ）０．９６（ｄｄ，Ｊ＝１８．５４，６．３４Ｈｚ，１Ｈ）１．０３（ｄ，Ｊ＝５．８５Ｈｚ，３Ｈ）１．１６（ｄ，Ｊ＝５．８５Ｈｚ，４Ｈ）１．１８－１．２５（ｍ，２Ｈ）１．２７（ｓ，３Ｈ）１．２９－１．３９（ｍ，１Ｈ）１．４１－１．６３（ｍ，４Ｈ）１．７０（ｓ，３Ｈ）１．７７－１．９７（ｍ，７Ｈ）２．４４（ｔ，Ｊ＝５．６１Ｈｚ，２Ｈ）２．４７－２．５７（ｍ，１Ｈ）２．８０（ｂｒ．ｓ．，４Ｈ）２．８５－２．９９（ｍ，１Ｈ）２．９９－３．０９（ｍ，１Ｈ）３．２７（ｄ，Ｊ＝９．７６Ｈｚ，１Ｈ）３．３６－３．４８（ｍ，５Ｈ）３．５２（ｓ，３Ｈ）３．５４－３．５９（ｍ，１Ｈ）３．５９－３．６８（ｍ，２Ｈ）３．６８－３．７４（ｍ，２Ｈ）３．７７－３．９０（ｍ，１Ｈ）４．１５－４．２３（ｍ，２Ｈ）４．３６（ｔ，Ｊ＝６．１０Ｈｚ，１Ｈ）５．４４（ｄｄ，Ｊ＝１４．８８，８．５４Ｈｚ，１Ｈ）５．８８（ｄ，Ｊ＝１０．７３Ｈｚ，１Ｈ）６．２３（ｄｄ，Ｊ＝１４．８８，１０．９８Ｈｚ，１Ｈ）６．４１（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）．
１．４．２．２ Ｈ８の合成
１－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（６－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）ヘキサンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）４－（２－（３－（（（（２Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－６－（（Ｓ，２Ｅ，４Ｅ）－７－（（２Ｒ，３Ｒ）－３－（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）－４－ヒドロキシ－３－メトキシペンタン－２－イル）－２－メチルオキシラン－２－イル）－６－メチルヘプタ－２，４－ジエン－２－イル）－５－メチルテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）メチル）アミノ）－３－オキソプロポキシ）エチル）ピペラジン－１，４－ジカルボキシレート（ＡＤＬ１－Ｈ８）
セクション１．２．７に概説されるものと同様の手順を用いて表題化合物を無色の油として得た（１８．３ｍｇ、６０％収率）。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，メタノール－ｄ４）δ ｐｐｍ ０．６５（ｄ，Ｊ＝６．３０Ｈｚ，３Ｈ）０．８０（ｄ，Ｊ＝６．８３Ｈｚ，３Ｈ）０．９４（ｄｄ，Ｊ＝６．５９，４．１５Ｈｚ，７Ｈ）１．０１（ｄ，Ｊ＝６．８３Ｈｚ，３Ｈ）１．０８（ｄ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，３Ｈ）１．１０－１．２３（ｍ，４Ｈ）１．２５（ｓ，３Ｈ）１．２６－１．３２（ｍ，３Ｈ）１．４４－１．６５（ｍ，１０Ｈ）１．６８（ｓ，３Ｈ）１．７０－１．７５（ｍ，１Ｈ）１．８０－１．９２（ｍ，３Ｈ）２．００－２．０９（ｍ，１Ｈ）２．２５（ｔ，Ｊ＝７．５６Ｈｚ，２Ｈ）２．４１（ｔ，Ｊ＝５．８５Ｈｚ，２Ｈ）２．６３（ｄ，Ｊ＝９．２７Ｈｚ，１Ｈ）２．９５（ｄｄ，Ｊ＝６．３４，４．３９Ｈｚ，１Ｈ）３．０８（ｄｔ，Ｊ＝１３．０５，６．４０Ｈｚ，１Ｈ）３．１４－３．２１（ｍ，１Ｈ）３．３８－３．４８（ｍ，１４Ｈ）３．４９（ｓ，４Ｈ）３．５８－３．６５（ｍ，２Ｈ）３．６９（ｔ，Ｊ＝６．１０Ｈｚ，２Ｈ）３．７２－３．８０（ｍ，１Ｈ）４．１３－４．１９（ｍ，３Ｈ）４．４８（ｄｄ，Ｊ＝９．０２，５．１２Ｈｚ，１Ｈ）５．０７（ｓ，２Ｈ）５．４６（ｄｄ，Ｊ＝１５．１２，９．２７Ｈｚ，１Ｈ）５．９０（ｄ，Ｊ＝１０．２４Ｈｚ，１Ｈ）６．２８（ｄｄ，Ｊ＝１４．８８，１０．９８Ｈｚ，１Ｈ）６．７６（ｓ，２Ｈ）７．３０（ｄ，Ｊ＝８．７８Ｈｚ，２Ｈ）７．５７（ｄ，Ｊ＝７．２５Ｈｚ，２Ｈ）．
１－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（６－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）ヘキサンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）４－（２－（３－（（（（２Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－６－（（Ｓ，２Ｅ，４Ｅ）－７－（（２Ｒ，３Ｒ）－３－（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）－４－ヒドロキシ－３－メトキシペンタン－２－イル）－２－メチルオキシラン－２－イル）－６－メチルヘプタ－２，４－ジエン－２－イル）－５－メチルテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）メチル）アミノ）－３－オキソプロポキシ）エチル）ピペラジン－１，４－ジカルボキシレート（ＡＤＬ１－Ｈ８）
セクション１．２．７に概説されるものと同様の手順を用いて表題化合物を無色の油として得た（１８．３ｍｇ、６０％収率）。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，メタノール－ｄ４）δ ｐｐｍ ０．６５（ｄ，Ｊ＝６．３０Ｈｚ，３Ｈ）０．８０（ｄ，Ｊ＝６．８３Ｈｚ，３Ｈ）０．９４（ｄｄ，Ｊ＝６．５９，４．１５Ｈｚ，７Ｈ）１．０１（ｄ，Ｊ＝６．８３Ｈｚ，３Ｈ）１．０８（ｄ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，３Ｈ）１．１０－１．２３（ｍ，４Ｈ）１．２５（ｓ，３Ｈ）１．２６－１．３２（ｍ，３Ｈ）１．４４－１．６５（ｍ，１０Ｈ）１．６８（ｓ，３Ｈ）１．７０－１．７５（ｍ，１Ｈ）１．８０－１．９２（ｍ，３Ｈ）２．００－２．０９（ｍ，１Ｈ）２．２５（ｔ，Ｊ＝７．５６Ｈｚ，２Ｈ）２．４１（ｔ，Ｊ＝５．８５Ｈｚ，２Ｈ）２．６３（ｄ，Ｊ＝９．２７Ｈｚ，１Ｈ）２．９５（ｄｄ，Ｊ＝６．３４，４．３９Ｈｚ，１Ｈ）３．０８（ｄｔ，Ｊ＝１３．０５，６．４０Ｈｚ，１Ｈ）３．１４－３．２１（ｍ，１Ｈ）３．３８－３．４８（ｍ，１４Ｈ）３．４９（ｓ，４Ｈ）３．５８－３．６５（ｍ，２Ｈ）３．６９（ｔ，Ｊ＝６．１０Ｈｚ，２Ｈ）３．７２－３．８０（ｍ，１Ｈ）４．１３－４．１９（ｍ，３Ｈ）４．４８（ｄｄ，Ｊ＝９．０２，５．１２Ｈｚ，１Ｈ）５．０７（ｓ，２Ｈ）５．４６（ｄｄ，Ｊ＝１５．１２，９．２７Ｈｚ，１Ｈ）５．９０（ｄ，Ｊ＝１０．２４Ｈｚ，１Ｈ）６．２８（ｄｄ，Ｊ＝１４．８８，１０．９８Ｈｚ，１Ｈ）６．７６（ｓ，２Ｈ）７．３０（ｄ，Ｊ＝８．７８Ｈｚ，２Ｈ）７．５７（ｄ，Ｊ＝７．２５Ｈｚ，２Ｈ）．
１．４．３ ＡＤＬ１－Ｈ９の合成
１．４．３．１ Ｈ９の合成
２－（３－（（（（２Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－６－（（Ｓ，２Ｅ，４Ｅ）－７－（（２Ｒ，３Ｒ）－３－（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）－４－ヒドロキシ－３－メトキシペンタン－２－イル）－２－メチルオキシラン－２－イル）－６－メチルヘプタ－２，４－ジエン－２－イル）－５－メチルテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）メチル）アミノ）－３－オキソプロポキシ）エチル１，４－ジアゼパン－１－カルボキシレート（Ｈ９）
セクション１．４．１に概説されるステップ１～４を用いて表題化合物を無色の油として得た（２１．１ｍｇ、７５％収率）。ＬＣ／ＭＳ（ＥＳＩ，ｍ／ｚ），６５２．８６［Ｍ＋Ｈ］＋．
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム－ｄ）δ ｐｐｍ ０．６５（ｄ，Ｊ＝６．８３Ｈｚ，３Ｈ）０．８５（ｄ，Ｊ＝７．３２Ｈｚ，３Ｈ）０．９２－１．００（ｍ，１Ｈ）１．０３（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈ，３Ｈ）１．１６（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈ，３Ｈ）１．２０－１．２４（ｍ，１Ｈ）１．２７（ｓ，４Ｈ）１．４７－１．６０（ｍ，４Ｈ）１．７０（ｓ，３Ｈ）１．７３－１．９０（ｍ，８Ｈ）２．３７－２．４７（ｍ，３Ｈ）２．５３（ｄ，Ｊ＝９．８Ｈｚ，１Ｈ）２．８１－２．８６（ｍ，２Ｈ）２．８７－２．９２（ｍ，２Ｈ）２．９４－２．９７（ｍ，１Ｈ）２．９９－３．０７（ｍ，１Ｈ）３．２７（ｄ，Ｊ＝９．７６Ｈｚ，１Ｈ）３．３８－３．５０（ｍ，４Ｈ）３．５２（ｓ，３Ｈ）３．５５－３．５９（ｍ，１Ｈ）３．６１－３．６８（ｍ，２Ｈ）３．６８－３．７４（ｍ，２Ｈ）３．７７－３．９１（ｍ，１Ｈ）４．１９（ｂｒ．ｓ．，２Ｈ）４．３７（ｔ，Ｊ＝６．１０Ｈｚ，１Ｈ）５．４１－５．５０（ｍ，１Ｈ）５．８９（ｄ，Ｊ＝１１．２２Ｈｚ，１Ｈ）６．２３（ｄｄ，Ｊ＝１４．８８，１０．９８Ｈｚ，１Ｈ）６．４６（ｄｄ，Ｊ＝３．１７，１．２２Ｈｚ，１Ｈ）．
１．４．３．１ Ｈ９の合成
２－（３－（（（（２Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－６－（（Ｓ，２Ｅ，４Ｅ）－７－（（２Ｒ，３Ｒ）－３－（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）－４－ヒドロキシ－３－メトキシペンタン－２－イル）－２－メチルオキシラン－２－イル）－６－メチルヘプタ－２，４－ジエン－２－イル）－５－メチルテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）メチル）アミノ）－３－オキソプロポキシ）エチル１，４－ジアゼパン－１－カルボキシレート（Ｈ９）
セクション１．４．１に概説されるステップ１～４を用いて表題化合物を無色の油として得た（２１．１ｍｇ、７５％収率）。ＬＣ／ＭＳ（ＥＳＩ，ｍ／ｚ），６５２．８６［Ｍ＋Ｈ］＋．
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム－ｄ）δ ｐｐｍ ０．６５（ｄ，Ｊ＝６．８３Ｈｚ，３Ｈ）０．８５（ｄ，Ｊ＝７．３２Ｈｚ，３Ｈ）０．９２－１．００（ｍ，１Ｈ）１．０３（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈ，３Ｈ）１．１６（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈ，３Ｈ）１．２０－１．２４（ｍ，１Ｈ）１．２７（ｓ，４Ｈ）１．４７－１．６０（ｍ，４Ｈ）１．７０（ｓ，３Ｈ）１．７３－１．９０（ｍ，８Ｈ）２．３７－２．４７（ｍ，３Ｈ）２．５３（ｄ，Ｊ＝９．８Ｈｚ，１Ｈ）２．８１－２．８６（ｍ，２Ｈ）２．８７－２．９２（ｍ，２Ｈ）２．９４－２．９７（ｍ，１Ｈ）２．９９－３．０７（ｍ，１Ｈ）３．２７（ｄ，Ｊ＝９．７６Ｈｚ，１Ｈ）３．３８－３．５０（ｍ，４Ｈ）３．５２（ｓ，３Ｈ）３．５５－３．５９（ｍ，１Ｈ）３．６１－３．６８（ｍ，２Ｈ）３．６８－３．７４（ｍ，２Ｈ）３．７７－３．９１（ｍ，１Ｈ）４．１９（ｂｒ．ｓ．，２Ｈ）４．３７（ｔ，Ｊ＝６．１０Ｈｚ，１Ｈ）５．４１－５．５０（ｍ，１Ｈ）５．８９（ｄ，Ｊ＝１１．２２Ｈｚ，１Ｈ）６．２３（ｄｄ，Ｊ＝１４．８８，１０．９８Ｈｚ，１Ｈ）６．４６（ｄｄ，Ｊ＝３．１７，１．２２Ｈｚ，１Ｈ）．
１．４．３．２ ＡＤＬ１－Ｈ９の合成
１－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（６－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）ヘキサンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）４－（２－（３－（（（（２Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－６－（（Ｓ，２Ｅ，４Ｅ）－７－（（２Ｒ，３Ｒ）－３－（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）－４－ヒドロキシ－３－メトキシペンタン－２－イル）－２－メチルオキシラン－２－イル）－６－メチルヘプタ－２，４－ジエン－２－イル）－５－メチルテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）メチル）アミノ）－３－オキソプロポキシ）エチル）１，４－ジアゼパン－１，４－ジカルボキシレート（ＡＤＬ１－Ｈ９）
セクション１．２．７に概説されるものと同様の手順を用いて表題化合物を得た（２５．２ｍｇ、７２％収率）。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，メタノール－ｄ４）δ ｐｐｍ ０．６５（ｄ，Ｊ＝６．３０Ｈｚ，３Ｈ）０．８０（ｄ，Ｊ＝６．８３Ｈｚ，３Ｈ）０．９３（ｔ，Ｊ＝５．８５Ｈｚ，７Ｈ）１．０１（ｄ，Ｊ＝６．３０Ｈｚ，３Ｈ）１．０８（ｄ，Ｊ＝６．３０Ｈｚ，３Ｈ）１．１１－１．２１（ｍ，２Ｈ）１．２１－１．３２（ｍ，７Ｈ）１．４３－１．６５（ｍ，１０Ｈ）１．６９（ｓ，３Ｈ）１．７０－１．９１（ｍ，５Ｈ）２．０５（ｑ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，１Ｈ）２．２５（ｔ，Ｊ＝７．３２Ｈｚ，２Ｈ）２．３６－２．４８（ｍ，３Ｈ）２．６３（ｄ，Ｊ＝９．２７Ｈｚ，１Ｈ）２．９５（ｄｄ，Ｊ＝５．８５，４．３９Ｈｚ，１Ｈ）３．０３－３．１３（ｍ，２Ｈ）３．１３－３．２１（ｍ，１Ｈ）３．３７－３．４８（ｍ，７Ｈ）３．４８－３．５９（ｍ，８Ｈ）３．６２－３．７０（ｍ，２Ｈ）３．７６（ｑｕｉｎ，Ｊ＝６．４６Ｈｚ，１Ｈ）４．１１－４．２２（ｍ，２Ｈ）４．４７－４．５３（ｍ，１Ｈ）５．０２－５．０９（ｍ，２Ｈ）５．４５（ｄｄ，Ｊ＝１４．８８，９．０３Ｈｚ，１Ｈ）５．９０（ｄ，Ｊ＝１０．７３Ｈｚ，１Ｈ）６．２８（ｄｄ，Ｊ＝１４．６４，１１．２２Ｈｚ，１Ｈ）６．７６（ｓ，２Ｈ）７．２６－７．３７（ｍ，２Ｈ）７．５７（ｄ，Ｊ＝７．８１Ｈｚ，２Ｈ）．
１－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（６－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）ヘキサンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）４－（２－（３－（（（（２Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－６－（（Ｓ，２Ｅ，４Ｅ）－７－（（２Ｒ，３Ｒ）－３－（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）－４－ヒドロキシ－３－メトキシペンタン－２－イル）－２－メチルオキシラン－２－イル）－６－メチルヘプタ－２，４－ジエン－２－イル）－５－メチルテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）メチル）アミノ）－３－オキソプロポキシ）エチル）１，４－ジアゼパン－１，４－ジカルボキシレート（ＡＤＬ１－Ｈ９）
セクション１．２．７に概説されるものと同様の手順を用いて表題化合物を得た（２５．２ｍｇ、７２％収率）。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，メタノール－ｄ４）δ ｐｐｍ ０．６５（ｄ，Ｊ＝６．３０Ｈｚ，３Ｈ）０．８０（ｄ，Ｊ＝６．８３Ｈｚ，３Ｈ）０．９３（ｔ，Ｊ＝５．８５Ｈｚ，７Ｈ）１．０１（ｄ，Ｊ＝６．３０Ｈｚ，３Ｈ）１．０８（ｄ，Ｊ＝６．３０Ｈｚ，３Ｈ）１．１１－１．２１（ｍ，２Ｈ）１．２１－１．３２（ｍ，７Ｈ）１．４３－１．６５（ｍ，１０Ｈ）１．６９（ｓ，３Ｈ）１．７０－１．９１（ｍ，５Ｈ）２．０５（ｑ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，１Ｈ）２．２５（ｔ，Ｊ＝７．３２Ｈｚ，２Ｈ）２．３６－２．４８（ｍ，３Ｈ）２．６３（ｄ，Ｊ＝９．２７Ｈｚ，１Ｈ）２．９５（ｄｄ，Ｊ＝５．８５，４．３９Ｈｚ，１Ｈ）３．０３－３．１３（ｍ，２Ｈ）３．１３－３．２１（ｍ，１Ｈ）３．３７－３．４８（ｍ，７Ｈ）３．４８－３．５９（ｍ，８Ｈ）３．６２－３．７０（ｍ，２Ｈ）３．７６（ｑｕｉｎ，Ｊ＝６．４６Ｈｚ，１Ｈ）４．１１－４．２２（ｍ，２Ｈ）４．４７－４．５３（ｍ，１Ｈ）５．０２－５．０９（ｍ，２Ｈ）５．４５（ｄｄ，Ｊ＝１４．８８，９．０３Ｈｚ，１Ｈ）５．９０（ｄ，Ｊ＝１０．７３Ｈｚ，１Ｈ）６．２８（ｄｄ，Ｊ＝１４．６４，１１．２２Ｈｚ，１Ｈ）６．７６（ｓ，２Ｈ）７．２６－７．３７（ｍ，２Ｈ）７．５７（ｄ，Ｊ＝７．８１Ｈｚ，２Ｈ）．
１．４．４ ＡＤＬ１－Ｈ１０の合成
１．４．４．１ Ｈ１０の合成
２－（３－（（（（２Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－６－（（Ｓ，２Ｅ，４Ｅ）－７－（（２Ｒ，３Ｒ）－３－（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）－４－ヒドロキシ－３－メトキシペンタン－２－イル）－２－メチルオキシラン－２－イル）－６－メチルヘプタ－２，４－ジエン－２－イル）－５－メチルテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）メチル）アミノ）－３－オキソプロポキシ）エチル３－（メチルアミノ）ピロリジン－１－カルボキシレート（Ｈ１０）
セクション１．４．１に概説されるステップ１～４を用いて表題化合物を無色の油として得た（２４．８ｍｇ、８８％収率）。ＬＣ／ＭＳ（ＥＳＩ，ｍ／ｚ），６５２．９１［Ｍ＋Ｈ］＋．
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム－ｄ）δ ｐｐｍ ０．６５（ｄ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，３Ｈ）０．８５（ｄ，Ｊ＝６．８３Ｈｚ，３Ｈ）０．９６（ｄｄ，Ｊ＝１８．７８，６．５９Ｈｚ，１Ｈ）１．０３（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，３Ｈ）１．１６（ｄ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，３Ｈ）１．１８－１．２５（ｍ，３Ｈ）１．２７（ｓ ３Ｈ）１．２０－１．３２（ｍ，５Ｈ）１．４１－１．６３（ｍ，４Ｈ）１．７０（ｓ，３Ｈ）１．７２－１．９０（ｍ，４Ｈ）２．０２（ｄｄ，Ｊ＝１２．４４，６．１０Ｈｚ，２Ｈ）２．４１（ｓ ３Ｈ）２．４３－２．５０（ｍ，２Ｈ）２．５４（ｄ，Ｊ＝９．７６Ｈｚ，１Ｈ）２．９５（ｔ，Ｊ＝５．３７Ｈｚ，１Ｈ）３．０１－３．１４（ｍ，１Ｈ）３．１８－３．２４（ｍ，１Ｈ）３．２７（ｄ，Ｊ＝９．７Ｈｚ，１Ｈ）３．３８－３．４９（ｍ，２Ｈ）３．５２（ｓ，６Ｈ）３．６１－３．６５（ｍ，２Ｈ）３．６９－３．７４（ｍ，２Ｈ）３．８３（ｑｕｉｎ，Ｊ＝５．９８Ｈｚ，１Ｈ）４．１５－４．２２（ｍ，１Ｈ）４．３４（ｔ，Ｊ＝６．１０Ｈｚ，１Ｈ）５．４４（ｄｄ，Ｊ＝１５．１２，８．７８Ｈｚ，１Ｈ）５．８８（ｄ，Ｊ＝１１．２２Ｈｚ，１Ｈ）６．２３（ｄｄ，Ｊ＝１４．８８，１０．９８Ｈｚ，１Ｈ）６．４３－６．５１（ｍ，１Ｈ）．
１．４．４．１ Ｈ１０の合成
２－（３－（（（（２Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－６－（（Ｓ，２Ｅ，４Ｅ）－７－（（２Ｒ，３Ｒ）－３－（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）－４－ヒドロキシ－３－メトキシペンタン－２－イル）－２－メチルオキシラン－２－イル）－６－メチルヘプタ－２，４－ジエン－２－イル）－５－メチルテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）メチル）アミノ）－３－オキソプロポキシ）エチル３－（メチルアミノ）ピロリジン－１－カルボキシレート（Ｈ１０）
セクション１．４．１に概説されるステップ１～４を用いて表題化合物を無色の油として得た（２４．８ｍｇ、８８％収率）。ＬＣ／ＭＳ（ＥＳＩ，ｍ／ｚ），６５２．９１［Ｍ＋Ｈ］＋．
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム－ｄ）δ ｐｐｍ ０．６５（ｄ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，３Ｈ）０．８５（ｄ，Ｊ＝６．８３Ｈｚ，３Ｈ）０．９６（ｄｄ，Ｊ＝１８．７８，６．５９Ｈｚ，１Ｈ）１．０３（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，３Ｈ）１．１６（ｄ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，３Ｈ）１．１８－１．２５（ｍ，３Ｈ）１．２７（ｓ ３Ｈ）１．２０－１．３２（ｍ，５Ｈ）１．４１－１．６３（ｍ，４Ｈ）１．７０（ｓ，３Ｈ）１．７２－１．９０（ｍ，４Ｈ）２．０２（ｄｄ，Ｊ＝１２．４４，６．１０Ｈｚ，２Ｈ）２．４１（ｓ ３Ｈ）２．４３－２．５０（ｍ，２Ｈ）２．５４（ｄ，Ｊ＝９．７６Ｈｚ，１Ｈ）２．９５（ｔ，Ｊ＝５．３７Ｈｚ，１Ｈ）３．０１－３．１４（ｍ，１Ｈ）３．１８－３．２４（ｍ，１Ｈ）３．２７（ｄ，Ｊ＝９．７Ｈｚ，１Ｈ）３．３８－３．４９（ｍ，２Ｈ）３．５２（ｓ，６Ｈ）３．６１－３．６５（ｍ，２Ｈ）３．６９－３．７４（ｍ，２Ｈ）３．８３（ｑｕｉｎ，Ｊ＝５．９８Ｈｚ，１Ｈ）４．１５－４．２２（ｍ，１Ｈ）４．３４（ｔ，Ｊ＝６．１０Ｈｚ，１Ｈ）５．４４（ｄｄ，Ｊ＝１５．１２，８．７８Ｈｚ，１Ｈ）５．８８（ｄ，Ｊ＝１１．２２Ｈｚ，１Ｈ）６．２３（ｄｄ，Ｊ＝１４．８８，１０．９８Ｈｚ，１Ｈ）６．４３－６．５１（ｍ，１Ｈ）．
１．４．４．２ ＡＤＬ１－Ｈ１０の合成
セクション１．２．７に概説されるものと同様の手順を用いて表題化合物を無色の油として得た（２２．１ｍｇ、５７％収率）。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，メタノール－ｄ４）δ ｐｐｍ ０．６５（ｄ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，３Ｈ）０．８０（ｄ，Ｊ＝６．８３Ｈｚ，３Ｈ）０．９４（ｄｄ，Ｊ＝６．３４，４．８８Ｈｚ，８Ｈ）１．０１（ｄｄ，Ｊ＝３．９０，２．９３Ｈｚ，４Ｈ）１．０８（ｄ，Ｊ＝６．３０Ｈｚ，３Ｈ）１．１１－１．２２（ｍ，３Ｈ）１．２２－１．３１（ｍ，７Ｈ）１．４４－１．６５（ｍ，１０Ｈ）１．６８（ｓ ３Ｈ）１．７１－１．９１（ｍ，４Ｈ）１．９９－２．０９（ｍ，３Ｈ）２．２５（ｔ，Ｊ＝７．５６Ｈｚ，２Ｈ）２．４１（ｔ，Ｊ＝５．８５Ｈｚ，２Ｈ）２．６２（ｄ，Ｊ＝９．２７Ｈｚ，１Ｈ）２．８４（ｍ，４Ｈ）２．９３－２．９９（ｍ，２Ｈ）３．０４－３．１３（ｍ，２Ｈ）３．１３－３．２１（ｍ，１Ｈ）３．４３（ｔ，Ｊ＝７．０７Ｈｚ，２Ｈ）３．５０（ｓ，３Ｈ）３．５２－３．５６（ｍ，２Ｈ）３．６１（ｔ，Ｊ＝４．３９Ｈｚ，２Ｈ）３．６９（ｔ，Ｊ＝５．３７Ｈｚ，２Ｈ）３．７３－３．７９（ｍ，１Ｈ）４．１５（ｄ，Ｊ＝７．３２Ｈｚ，３Ｈ）４．４９（ｄｄ，Ｊ＝９．０３，５．１２Ｈｚ，１Ｈ）５．０６（ｓ，２Ｈ）５．４５（ｄｄ，Ｊ＝１４．８８，９．０３Ｈｚ，１Ｈ）５．９０（ｄ，Ｊ＝１１．２２Ｈｚ，１Ｈ）６．２８（ｄｄ，Ｊ＝１４．８８，１０．９８Ｈｚ，１Ｈ）６．７６（ｓ，Ｊ＝４．５６Ｈｚ，２Ｈ）７．３０（ｄ，Ｊ＝８．２９Ｈｚ，２Ｈ）７．５７（ｄ，Ｊ＝８．２９Ｈｚ，２Ｈ）．
セクション１．２．７に概説されるものと同様の手順を用いて表題化合物を無色の油として得た（２２．１ｍｇ、５７％収率）。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，メタノール－ｄ４）δ ｐｐｍ ０．６５（ｄ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，３Ｈ）０．８０（ｄ，Ｊ＝６．８３Ｈｚ，３Ｈ）０．９４（ｄｄ，Ｊ＝６．３４，４．８８Ｈｚ，８Ｈ）１．０１（ｄｄ，Ｊ＝３．９０，２．９３Ｈｚ，４Ｈ）１．０８（ｄ，Ｊ＝６．３０Ｈｚ，３Ｈ）１．１１－１．２２（ｍ，３Ｈ）１．２２－１．３１（ｍ，７Ｈ）１．４４－１．６５（ｍ，１０Ｈ）１．６８（ｓ ３Ｈ）１．７１－１．９１（ｍ，４Ｈ）１．９９－２．０９（ｍ，３Ｈ）２．２５（ｔ，Ｊ＝７．５６Ｈｚ，２Ｈ）２．４１（ｔ，Ｊ＝５．８５Ｈｚ，２Ｈ）２．６２（ｄ，Ｊ＝９．２７Ｈｚ，１Ｈ）２．８４（ｍ，４Ｈ）２．９３－２．９９（ｍ，２Ｈ）３．０４－３．１３（ｍ，２Ｈ）３．１３－３．２１（ｍ，１Ｈ）３．４３（ｔ，Ｊ＝７．０７Ｈｚ，２Ｈ）３．５０（ｓ，３Ｈ）３．５２－３．５６（ｍ，２Ｈ）３．６１（ｔ，Ｊ＝４．３９Ｈｚ，２Ｈ）３．６９（ｔ，Ｊ＝５．３７Ｈｚ，２Ｈ）３．７３－３．７９（ｍ，１Ｈ）４．１５（ｄ，Ｊ＝７．３２Ｈｚ，３Ｈ）４．４９（ｄｄ，Ｊ＝９．０３，５．１２Ｈｚ，１Ｈ）５．０６（ｓ，２Ｈ）５．４５（ｄｄ，Ｊ＝１４．８８，９．０３Ｈｚ，１Ｈ）５．９０（ｄ，Ｊ＝１１．２２Ｈｚ，１Ｈ）６．２８（ｄｄ，Ｊ＝１４．８８，１０．９８Ｈｚ，１Ｈ）６．７６（ｓ，Ｊ＝４．５６Ｈｚ，２Ｈ）７．３０（ｄ，Ｊ＝８．２９Ｈｚ，２Ｈ）７．５７（ｄ，Ｊ＝８．２９Ｈｚ，２Ｈ）．
１．５ ＡＤＬ２－Ｈ１の合成
２－（（２Ｒ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－４－（（４－（３－（２－（２－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）エトキシ）エトキシ）プロパノイル）ピペラジン－１－カルボニル）オキシ）－６－（（Ｓ，２Ｅ，４Ｅ）－７－（（２Ｒ，３Ｒ）－３－（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）－４－ヒドロキシ－３－メトキシペンタン－２－イル）－２－メチルオキシラン－２－イル）－６－メチルヘプタ－２，４－ジエン－２－イル）－５－メチルテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）酢酸（ＡＤＬ２－Ｈ１）
ＤＭＦ（１ｍＬ）中のＨ１（例えば、セクション１．２．２を参照のこと；２２．５ｍｇ、０．０３ｍｍｏｌ）の混合物に２，５－ジオキソピロリジン－１－イル３－｛２－［２－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）エトキシ］エトキシ｝プロパノエート（１０．５５ｍｇ、０．０３ｍｍｏｌ）及びＤＩＰＥＡ（０．０１６ｍＬ、０．０８９ｍｍｏｌ）を加えた。得られた混合物を室温で４時間撹拌した。次に、溶媒を真空除去し、得られた残渣を逆相クロマトグラフィー（ＯＤＳ、２４ｇ、Ｈ２Ｏ／ＭｅＣＮ＝９５／５～６０／４０）により精製して、表題化合物を無色の油として得た（１５．７ｍｇ、６５％収率）。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，メタノール－ｄ４）δ ｐｐｍ ０．７３（ｄ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，４Ｈ）０．９７－１．１５（ｍ，１３Ｈ）１．２１（ｓ，２Ｈ）１．２８－１．４１（ｍ，１Ｈ）１．４２－１．６２（ｍ，２Ｈ）１．６９（ｄ，Ｊ＝４．３９Ｈｚ，４Ｈ）２．０８－２．２０（ｍ，１Ｈ）２．３３－２．３９（ｍ，１Ｈ）２．４２－２．５８（ｍ，３Ｈ）２．６３（ｔ，Ｊ＝５．３０Ｈｚ，２Ｈ）２．９１－２．９４（ｍ，１Ｈ）３．３３（ｄ，Ｊ＝３．４１Ｈｚ，１Ｈ）３．３６（ｄ，Ｊ＝１．９５Ｈｚ，２Ｈ）３．４４－３．６０（ｍ，１８Ｈ）３．６０－３．６７（ｍ，４Ｈ）３．６９（ｔ，Ｊ＝５．３７Ｈｚ，２Ｈ）３．７５－３．７８（ｍ，１Ｈ）３．８１－４．００（ｍ，２Ｈ）４．２２－４．３１（ｍ，１Ｈ）４．５２－４．６０（ｍ，１Ｈ）５．５８－５．７２（ｍ，１Ｈ）５．８９－６．００（ｍ，１Ｈ）６．１３－６．３１（ｍ，１Ｈ）６．７１－６．８９（ｍ，２Ｈ）．
２－（（２Ｒ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－４－（（４－（３－（２－（２－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）エトキシ）エトキシ）プロパノイル）ピペラジン－１－カルボニル）オキシ）－６－（（Ｓ，２Ｅ，４Ｅ）－７－（（２Ｒ，３Ｒ）－３－（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）－４－ヒドロキシ－３－メトキシペンタン－２－イル）－２－メチルオキシラン－２－イル）－６－メチルヘプタ－２，４－ジエン－２－イル）－５－メチルテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）酢酸（ＡＤＬ２－Ｈ１）
ＤＭＦ（１ｍＬ）中のＨ１（例えば、セクション１．２．２を参照のこと；２２．５ｍｇ、０．０３ｍｍｏｌ）の混合物に２，５－ジオキソピロリジン－１－イル３－｛２－［２－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）エトキシ］エトキシ｝プロパノエート（１０．５５ｍｇ、０．０３ｍｍｏｌ）及びＤＩＰＥＡ（０．０１６ｍＬ、０．０８９ｍｍｏｌ）を加えた。得られた混合物を室温で４時間撹拌した。次に、溶媒を真空除去し、得られた残渣を逆相クロマトグラフィー（ＯＤＳ、２４ｇ、Ｈ２Ｏ／ＭｅＣＮ＝９５／５～６０／４０）により精製して、表題化合物を無色の油として得た（１５．７ｍｇ、６５％収率）。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，メタノール－ｄ４）δ ｐｐｍ ０．７３（ｄ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，４Ｈ）０．９７－１．１５（ｍ，１３Ｈ）１．２１（ｓ，２Ｈ）１．２８－１．４１（ｍ，１Ｈ）１．４２－１．６２（ｍ，２Ｈ）１．６９（ｄ，Ｊ＝４．３９Ｈｚ，４Ｈ）２．０８－２．２０（ｍ，１Ｈ）２．３３－２．３９（ｍ，１Ｈ）２．４２－２．５８（ｍ，３Ｈ）２．６３（ｔ，Ｊ＝５．３０Ｈｚ，２Ｈ）２．９１－２．９４（ｍ，１Ｈ）３．３３（ｄ，Ｊ＝３．４１Ｈｚ，１Ｈ）３．３６（ｄ，Ｊ＝１．９５Ｈｚ，２Ｈ）３．４４－３．６０（ｍ，１８Ｈ）３．６０－３．６７（ｍ，４Ｈ）３．６９（ｔ，Ｊ＝５．３７Ｈｚ，２Ｈ）３．７５－３．７８（ｍ，１Ｈ）３．８１－４．００（ｍ，２Ｈ）４．２２－４．３１（ｍ，１Ｈ）４．５２－４．６０（ｍ，１Ｈ）５．５８－５．７２（ｍ，１Ｈ）５．８９－６．００（ｍ，１Ｈ）６．１３－６．３１（ｍ，１Ｈ）６．７１－６．８９（ｍ，２Ｈ）．
１．６ ＡＤＬ２－Ｈ１１の合成
ステップ１：（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）－４－（（２Ｒ，３Ｒ）－３－（（Ｓ，３Ｅ，５Ｅ）－６－（（２Ｓ，３Ｓ，６Ｒ）－６－（アミノメチル）－３－メチルテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）－２－メチルヘプタ－３，５－ジエン－１－イル）－３－メチルオキシラン－２－イル）－３－メトキシペンタン－２－オール（Ｈ１１）の合成
ＴＨＦ（１ｍＬ）中の（（２Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－６－（（Ｓ，２Ｅ，４Ｅ）－７－（（２Ｒ，３Ｒ）－３－（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）－３－メトキシ－４－（（トリエチルシリル）オキシ）ペンタン－２－イル）－２－メチルオキシラン－２－イル）－６－メチルヘプタ－２，４－ジエン－２－イル）－５－メチルテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）メタンアミン（３２ｍｇ、０．０６１ｍｍｏｌ）の混合物にＴＢＡＦ（ＴＨＦ中１Ｍ溶液、０．１８３ｍＬ、０．１８３ｍｍｏｌ）を加えた。得られた混合物を室温で２時間撹拌し、次にＡｃＯＥｔで希釈した。有機相を分離し、水及びブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させて、ろ過し、真空濃縮した。分離された残渣をアミノ官能化シリカゲルクロマトグラフィー（２４ｇ、ヘプタン／ＡｃＯＥｔ＝５０／５０～０／１００、次にＡｃＯＥｔ／ＭｅＯＨ＝８０／２０）により精製すると、表題化合物が無色の油として提供された（１５．１ｍｇ、６０．４％収率）。ＬＣ／ＭＳ（ＥＳＩ，ｍ／ｚ），４１０．０７［Ｍ＋Ｈ］＋．
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム－ｄ）δ ｐｐｍ ０．６５（ｄ，Ｊ＝６．８０Ｈｚ，３Ｈ）０．８６（ｄ，Ｊ＝６．８０Ｈｚ，３Ｈ）１．０３（ｄ，Ｊ＝６．８０Ｈｚ，３Ｈ）１．１６（ｄ，Ｊ＝６．３０Ｈｚ，４Ｈ）１．１９－１．２４（ｍ，２Ｈ）１．２７（ｓ，３Ｈ）１．２９－１．３８（ｍ，１Ｈ）１．４４－１．５７（ｍ，３Ｈ）１．６２－１．６６（ｍ，１Ｈ）１．７１（ｓ，５Ｈ）１．７４－１．９３（ｍ，３Ｈ）２．３４－２．４５（ｍ，１Ｈ）２．５４（ｄ，Ｊ＝９．００Ｈｚ，１Ｈ）２．６２－２．７４（ｍ，２Ｈ）２．９２－２．９８（ｍ，１Ｈ）３．２４－３．３２（ｍ，２Ｈ）３．５２（ｓ，３Ｈ）３．７９－３．８８（ｍ，１Ｈ）５．３９－５．４８（ｍ，１Ｈ）５．８８（ｄ，Ｊ＝１０．７３Ｈｚ，１Ｈ）６．２３（ｄｄｄ，Ｊ＝１４．６４，１１．２２，３．４１Ｈｚ，１Ｈ）．
ステップ１：（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）－４－（（２Ｒ，３Ｒ）－３－（（Ｓ，３Ｅ，５Ｅ）－６－（（２Ｓ，３Ｓ，６Ｒ）－６－（アミノメチル）－３－メチルテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）－２－メチルヘプタ－３，５－ジエン－１－イル）－３－メチルオキシラン－２－イル）－３－メトキシペンタン－２－オール（Ｈ１１）の合成
ＴＨＦ（１ｍＬ）中の（（２Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－６－（（Ｓ，２Ｅ，４Ｅ）－７－（（２Ｒ，３Ｒ）－３－（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）－３－メトキシ－４－（（トリエチルシリル）オキシ）ペンタン－２－イル）－２－メチルオキシラン－２－イル）－６－メチルヘプタ－２，４－ジエン－２－イル）－５－メチルテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）メタンアミン（３２ｍｇ、０．０６１ｍｍｏｌ）の混合物にＴＢＡＦ（ＴＨＦ中１Ｍ溶液、０．１８３ｍＬ、０．１８３ｍｍｏｌ）を加えた。得られた混合物を室温で２時間撹拌し、次にＡｃＯＥｔで希釈した。有機相を分離し、水及びブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させて、ろ過し、真空濃縮した。分離された残渣をアミノ官能化シリカゲルクロマトグラフィー（２４ｇ、ヘプタン／ＡｃＯＥｔ＝５０／５０～０／１００、次にＡｃＯＥｔ／ＭｅＯＨ＝８０／２０）により精製すると、表題化合物が無色の油として提供された（１５．１ｍｇ、６０．４％収率）。ＬＣ／ＭＳ（ＥＳＩ，ｍ／ｚ），４１０．０７［Ｍ＋Ｈ］＋．
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム－ｄ）δ ｐｐｍ ０．６５（ｄ，Ｊ＝６．８０Ｈｚ，３Ｈ）０．８６（ｄ，Ｊ＝６．８０Ｈｚ，３Ｈ）１．０３（ｄ，Ｊ＝６．８０Ｈｚ，３Ｈ）１．１６（ｄ，Ｊ＝６．３０Ｈｚ，４Ｈ）１．１９－１．２４（ｍ，２Ｈ）１．２７（ｓ，３Ｈ）１．２９－１．３８（ｍ，１Ｈ）１．４４－１．５７（ｍ，３Ｈ）１．６２－１．６６（ｍ，１Ｈ）１．７１（ｓ，５Ｈ）１．７４－１．９３（ｍ，３Ｈ）２．３４－２．４５（ｍ，１Ｈ）２．５４（ｄ，Ｊ＝９．００Ｈｚ，１Ｈ）２．６２－２．７４（ｍ，２Ｈ）２．９２－２．９８（ｍ，１Ｈ）３．２４－３．３２（ｍ，２Ｈ）３．５２（ｓ，３Ｈ）３．７９－３．８８（ｍ，１Ｈ）５．３９－５．４８（ｍ，１Ｈ）５．８８（ｄ，Ｊ＝１０．７３Ｈｚ，１Ｈ）６．２３（ｄｄｄ，Ｊ＝１４．６４，１１．２２，３．４１Ｈｚ，１Ｈ）．
ステップ２：３－（２－（３－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）プロポキシ）エトキシ）－Ｎ－（（（２Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－６－（（Ｓ，２Ｅ，４Ｅ）－７－（（２Ｒ，３Ｒ）－３－（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）－４－ヒドロキシ－３－メトキシペンタン－２－イル）－２－メチルオキシラン－２－イル）－６－メチルヘプタ－２，４－ジエン－２－イル）－５－メチルテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）メチル）プロパンアミド（ＡＤＬ２－Ｈ１１）の合成
ＤＭＦ（１ｍＬ、１２．９１５ｍｍｏｌ）中のステップ１から得られた化合物（１５．１ｍｇ、０．０３７ｍｍｏｌ）の混合物に２，５－ジオキソピロリジン－１－イル３－｛２－［２－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）エトキシ］エトキシ｝プロパノエート（１３．１ｍｇ、０．０３７ｍｍｏｌ）及びＤＩＰＥＡ（０．０１９ｍｌ、０．１１１ｍｍｏｌ）を加えた。得られた混合物を室温で１６時間撹拌した。続いて、この混合物を真空濃縮し、得られた残渣を逆相クロマトグラフィー（ＯＤＳ、２４ｇ、Ｈ２Ｏ／ＭｅＣＮ＝９５／５～６０／４０）により精製して、表題化合物を無色の油として得た（１４．９ｍｇ、６２％収率）。
ＤＭＦ（１ｍＬ、１２．９１５ｍｍｏｌ）中のステップ１から得られた化合物（１５．１ｍｇ、０．０３７ｍｍｏｌ）の混合物に２，５－ジオキソピロリジン－１－イル３－｛２－［２－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）エトキシ］エトキシ｝プロパノエート（１３．１ｍｇ、０．０３７ｍｍｏｌ）及びＤＩＰＥＡ（０．０１９ｍｌ、０．１１１ｍｍｏｌ）を加えた。得られた混合物を室温で１６時間撹拌した。続いて、この混合物を真空濃縮し、得られた残渣を逆相クロマトグラフィー（ＯＤＳ、２４ｇ、Ｈ２Ｏ／ＭｅＣＮ＝９５／５～６０／４０）により精製して、表題化合物を無色の油として得た（１４．９ｍｇ、６２％収率）。
１．７ Ｈ１８、Ｈ２０、Ｈ２３、Ｈ１６、Ｈ１５、Ｈ２４、Ｈ１３、Ｈ１４、Ｈ１７、Ｈ１９、及びＨ２１の合成
Ｈ１８、Ｈ２０、Ｈ２３、Ｈ１６、Ｈ１５、Ｈ２４、Ｈ１３、Ｈ１４、Ｈ１７、Ｈ１９、及びＨ２１を以下の一般的手順によって調製した（一般的手順１．７）。
ＤＭＦ（０．０２８Ｍ）中の２，５－ジオキソピロリジン－１－イル２－（（２Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－６－（（Ｓ，２Ｅ，４Ｅ）－７－（（２Ｒ，３Ｒ）－３－（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）－４－ヒドロキシ－３－メトキシペンタン－２－イル）－２－メチルオキシラン－２－イル）－６－メチルヘプタ－２，４－ジエン－２－イル）－５－メチルテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）アセテート（１．０当量）の溶液にアミン（１６ｍｇ、０．０５６ｍｍｏｌ）及びＤＩＰＥＡ（２．０当量）を加えた。この反応混合物を室温で１６時間撹拌し、次に混合物をＨＰＬＣにより精製すると、所望の生成物が提供された。
Ｈ１８、Ｈ２０、Ｈ２３、Ｈ１６、Ｈ１５、Ｈ２４、Ｈ１３、Ｈ１４、Ｈ１７、Ｈ１９、及びＨ２１を以下の一般的手順によって調製した（一般的手順１．７）。
ＤＭＦ（０．０２８Ｍ）中の２，５－ジオキソピロリジン－１－イル２－（（２Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－６－（（Ｓ，２Ｅ，４Ｅ）－７－（（２Ｒ，３Ｒ）－３－（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）－４－ヒドロキシ－３－メトキシペンタン－２－イル）－２－メチルオキシラン－２－イル）－６－メチルヘプタ－２，４－ジエン－２－イル）－５－メチルテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）アセテート（１．０当量）の溶液にアミン（１６ｍｇ、０．０５６ｍｍｏｌ）及びＤＩＰＥＡ（２．０当量）を加えた。この反応混合物を室温で１６時間撹拌し、次に混合物をＨＰＬＣにより精製すると、所望の生成物が提供された。
１．７．１ Ｈ２０の合成
一般的手順１．７を用いて、Ｈ２０を無色のアモルファス生成物として得た（１５．７ｍｇ、０．０２２ｍｍｏｌ、７９％収率）。ＬＣ／ＭＳ（ＥＳＩ，ｍ／ｚ），７０７．９９［Ｍ＋Ｈ］＋．
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム－ｄ）δ ｐｐｍ ０．６６（ｄ，Ｊ＝６．８３Ｈｚ，３Ｈ）０．８５（ｄ，Ｊ＝６．８３Ｈｚ，３Ｈ）１．０４（ｄ，Ｊ＝６．８３Ｈｚ，３Ｈ）１．１６（ｄ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，３Ｈ）１．１８－１．２５（ｍ，２Ｈ）１．２７（ｓ，４Ｈ）１．３０－１．５９（ｍ，８Ｈ）１．７１－１．８０（ｍ，２Ｈ）１．８１－１．８９（ｍ，２Ｈ）２．３５（ｂｒ ｄ，Ｊ＝３．９０Ｈｚ，２Ｈ）２．３８－２．４４（ｍ，１Ｈ）２．５２－２．６０（ｍ，４Ｈ）２．７９－２．８６（ｍ，４Ｈ）２．９６（ｔ，Ｊ＝５．３７Ｈｚ，１Ｈ）３．０６－３．１６（ｍ，１Ｈ）３．２４－３．３０（ｍ，１Ｈ）３．３２（ｄ，Ｊ＝９．７６Ｈｚ，１Ｈ）３．５２（ｓ，３Ｈ）３．６４（ｂｒ ｄ，Ｊ＝４．３９Ｈｚ，５Ｈ）３．７１（ｓ，３Ｈ）３．８３（ｔ，Ｊ＝５．８５Ｈｚ，１Ｈ）４．３０－４．４２（ｍ，１Ｈ）５．４０－５．５３（ｍ，３Ｈ）５．８９（ｂｒ ｄ，Ｊ＝１０．７３Ｈｚ，１Ｈ）６．１６－６．２８（ｍ，１Ｈ）６．７５（ｂｒ ｔ，Ｊ＝５．８５Ｈｚ，１Ｈ）．
一般的手順１．７を用いて、Ｈ２０を無色のアモルファス生成物として得た（１５．７ｍｇ、０．０２２ｍｍｏｌ、７９％収率）。ＬＣ／ＭＳ（ＥＳＩ，ｍ／ｚ），７０７．９９［Ｍ＋Ｈ］＋．
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム－ｄ）δ ｐｐｍ ０．６６（ｄ，Ｊ＝６．８３Ｈｚ，３Ｈ）０．８５（ｄ，Ｊ＝６．８３Ｈｚ，３Ｈ）１．０４（ｄ，Ｊ＝６．８３Ｈｚ，３Ｈ）１．１６（ｄ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，３Ｈ）１．１８－１．２５（ｍ，２Ｈ）１．２７（ｓ，４Ｈ）１．３０－１．５９（ｍ，８Ｈ）１．７１－１．８０（ｍ，２Ｈ）１．８１－１．８９（ｍ，２Ｈ）２．３５（ｂｒ ｄ，Ｊ＝３．９０Ｈｚ，２Ｈ）２．３８－２．４４（ｍ，１Ｈ）２．５２－２．６０（ｍ，４Ｈ）２．７９－２．８６（ｍ，４Ｈ）２．９６（ｔ，Ｊ＝５．３７Ｈｚ，１Ｈ）３．０６－３．１６（ｍ，１Ｈ）３．２４－３．３０（ｍ，１Ｈ）３．３２（ｄ，Ｊ＝９．７６Ｈｚ，１Ｈ）３．５２（ｓ，３Ｈ）３．６４（ｂｒ ｄ，Ｊ＝４．３９Ｈｚ，５Ｈ）３．７１（ｓ，３Ｈ）３．８３（ｔ，Ｊ＝５．８５Ｈｚ，１Ｈ）４．３０－４．４２（ｍ，１Ｈ）５．４０－５．５３（ｍ，３Ｈ）５．８９（ｂｒ ｄ，Ｊ＝１０．７３Ｈｚ，１Ｈ）６．１６－６．２８（ｍ，１Ｈ）６．７５（ｂｒ ｔ，Ｊ＝５．８５Ｈｚ，１Ｈ）．
１．７．２ Ｈ２３の合成
一般的手順１．７からＨ２３を得た（６．９ｍｇ、３７％収率）。ＬＣ／ＭＳ（ＥＳＩ，ｍ／ｚ），６６５．９６［Ｍ＋Ｈ］＋．
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，メタノール－ｄ４）δ ｐｐｍ ０．６６（ｄ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，３Ｈ）０．８０（ｄ，Ｊ＝６．８３Ｈｚ，３Ｈ）１．０２（ｄ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，３Ｈ）１．０８（ｄ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，３Ｈ）１．１２－１．２３（ｍ，２Ｈ）１．２５（ｓ，４Ｈ）１．３１－１．３７（ｍ，１Ｈ）１．４３－１．５５（ｍ，２Ｈ）１．６３（ｂｒ ｄ，Ｊ＝１３．１７Ｈｚ，１Ｈ）１．６７（ｓ，３Ｈ）１．８１－１．９３（ｍ，３Ｈ）２．２１－２．４０（ｍ，１Ｈ）２．６３（ｄ，Ｊ＝９．７６Ｈｚ，１Ｈ）２．７４（ｓ，２Ｈ）２．９２－２．９７（ｍ，１Ｈ）３．０５（ｂｒ ｓ，３Ｈ）３．１２－３．２２（ｍ，１Ｈ）３．３１－３．３８（ｍ，２Ｈ）３．５０（ｓ，３Ｈ）３．６３（ｂｒ ｓ，４Ｈ）３．６８－３．７８（ｍ，２Ｈ）４．２３（ｂｒ ｄ，Ｊ＝４．３９Ｈｚ，１Ｈ）５．４５（ｄｄ，Ｊ＝１５．１２，８．７８Ｈｚ，１Ｈ）５．８９（ｂｒ ｄ，Ｊ＝１０．７３Ｈｚ，１Ｈ）６．２７（ｄｄ，Ｊ＝１４．８８，１０．９８Ｈｚ，１Ｈ）．
一般的手順１．７からＨ２３を得た（６．９ｍｇ、３７％収率）。ＬＣ／ＭＳ（ＥＳＩ，ｍ／ｚ），６６５．９６［Ｍ＋Ｈ］＋．
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，メタノール－ｄ４）δ ｐｐｍ ０．６６（ｄ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，３Ｈ）０．８０（ｄ，Ｊ＝６．８３Ｈｚ，３Ｈ）１．０２（ｄ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，３Ｈ）１．０８（ｄ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，３Ｈ）１．１２－１．２３（ｍ，２Ｈ）１．２５（ｓ，４Ｈ）１．３１－１．３７（ｍ，１Ｈ）１．４３－１．５５（ｍ，２Ｈ）１．６３（ｂｒ ｄ，Ｊ＝１３．１７Ｈｚ，１Ｈ）１．６７（ｓ，３Ｈ）１．８１－１．９３（ｍ，３Ｈ）２．２１－２．４０（ｍ，１Ｈ）２．６３（ｄ，Ｊ＝９．７６Ｈｚ，１Ｈ）２．７４（ｓ，２Ｈ）２．９２－２．９７（ｍ，１Ｈ）３．０５（ｂｒ ｓ，３Ｈ）３．１２－３．２２（ｍ，１Ｈ）３．３１－３．３８（ｍ，２Ｈ）３．５０（ｓ，３Ｈ）３．６３（ｂｒ ｓ，４Ｈ）３．６８－３．７８（ｍ，２Ｈ）４．２３（ｂｒ ｄ，Ｊ＝４．３９Ｈｚ，１Ｈ）５．４５（ｄｄ，Ｊ＝１５．１２，８．７８Ｈｚ，１Ｈ）５．８９（ｂｒ ｄ，Ｊ＝１０．７３Ｈｚ，１Ｈ）６．２７（ｄｄ，Ｊ＝１４．８８，１０．９８Ｈｚ，１Ｈ）．
１．７．３ Ｈ１６の合成
一般的手順１．７を用いてＨ１６を無色のアモルファス生成物として得た（６．４ｍｇ、３４％収率）。ＬＣ／ＭＳ（ＥＳＩ，ｍ／ｚ），６７９．８６［Ｍ＋Ｈ］＋．
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム－ｄ）δ ｐｐｍ ０．６７（ｂｒ ｄ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，３Ｈ）０．８５（ｂｒ ｄ，Ｊ＝６．８３Ｈｚ，３Ｈ）１．０１－１．０６（ｍ，３Ｈ）１．１４－１．１９（ｍ，３Ｈ）１．１９－１．２８（ｍ，５Ｈ）１．４３（ｂｒ ｄｄ，Ｊ＝１２．２０，９．７６Ｈｚ，１Ｈ）１．４７－１．５５（ｍ，１Ｈ）１．６１－１．６４（ｍ，１Ｈ）１．７１（ｂｒ ｄ，Ｊ＝７．３２Ｈｚ，３Ｈ）１．８３－１．９０（ｍ，２Ｈ）２．０３－２．２０（ｍ，１Ｈ）２．３７－２．４４（ｍ，３Ｈ）２．４９－２．５６（ｍ，５Ｈ）２．７５（ｂｒ ｓ，１Ｈ）２．７８－２．８４（ｍ，３Ｈ）２．８７－２．９４（ｍ，１Ｈ）２．９４－２．９８（ｍ，１Ｈ）３．３５（ｂｒ ｄｄ，Ｊ＝１３．４１，１０．００Ｈｚ，２Ｈ）３．５２（ｓ，４Ｈ）３．６０（ｂｒ ｓ，４Ｈ）３．６９（ｂｒ ｓ，３Ｈ）３．７１（ｓ，４Ｈ）３．８３（ｔｄ，Ｊ＝１２．５６，６．５９Ｈｚ，２Ｈ）４．０６－４．２０（ｍ，１Ｈ）４．５７－４．６８（ｍ，１Ｈ）５．４７（ｔｄ，Ｊ＝１５．９８，８．５４Ｈｚ，１Ｈ）５．８１－５．９６（ｍ，１Ｈ）６．１４－６．３６（ｍ，１Ｈ）．
一般的手順１．７を用いてＨ１６を無色のアモルファス生成物として得た（６．４ｍｇ、３４％収率）。ＬＣ／ＭＳ（ＥＳＩ，ｍ／ｚ），６７９．８６［Ｍ＋Ｈ］＋．
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム－ｄ）δ ｐｐｍ ０．６７（ｂｒ ｄ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，３Ｈ）０．８５（ｂｒ ｄ，Ｊ＝６．８３Ｈｚ，３Ｈ）１．０１－１．０６（ｍ，３Ｈ）１．１４－１．１９（ｍ，３Ｈ）１．１９－１．２８（ｍ，５Ｈ）１．４３（ｂｒ ｄｄ，Ｊ＝１２．２０，９．７６Ｈｚ，１Ｈ）１．４７－１．５５（ｍ，１Ｈ）１．６１－１．６４（ｍ，１Ｈ）１．７１（ｂｒ ｄ，Ｊ＝７．３２Ｈｚ，３Ｈ）１．８３－１．９０（ｍ，２Ｈ）２．０３－２．２０（ｍ，１Ｈ）２．３７－２．４４（ｍ，３Ｈ）２．４９－２．５６（ｍ，５Ｈ）２．７５（ｂｒ ｓ，１Ｈ）２．７８－２．８４（ｍ，３Ｈ）２．８７－２．９４（ｍ，１Ｈ）２．９４－２．９８（ｍ，１Ｈ）３．３５（ｂｒ ｄｄ，Ｊ＝１３．４１，１０．００Ｈｚ，２Ｈ）３．５２（ｓ，４Ｈ）３．６０（ｂｒ ｓ，４Ｈ）３．６９（ｂｒ ｓ，３Ｈ）３．７１（ｓ，４Ｈ）３．８３（ｔｄ，Ｊ＝１２．５６，６．５９Ｈｚ，２Ｈ）４．０６－４．２０（ｍ，１Ｈ）４．５７－４．６８（ｍ，１Ｈ）５．４７（ｔｄ，Ｊ＝１５．９８，８．５４Ｈｚ，１Ｈ）５．８１－５．９６（ｍ，１Ｈ）６．１４－６．３６（ｍ，１Ｈ）．
１．７．４ Ｈ１５の合成
一般的手順１．７により、Ｈ１６の合成中の副生成物としてＨ１５を得た（６．６ｍｇ、３５％収率）。ＬＣ／ＭＳ（ＥＳＩ，ｍ／ｚ），６６５．４６［Ｍ＋Ｈ］＋．
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，メタノール－ｄ４）δ ｐｐｍ ０．６６（ｂｒ ｄ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，４Ｈ）０．８１（ｂｒ ｄ，Ｊ＝５．８５Ｈｚ，３Ｈ）０．９９－１．０４（ｍ，４Ｈ）１．０７－１．１０（ｍ，４Ｈ）１．１７（ｂｒ ｓ，１Ｈ）１．１９－１．２７（ｍ，５Ｈ）１．４６－１．５５（ｍ，２Ｈ）１．６５（ｂｒ ｓ，１Ｈ）１．６８（ｓ，４Ｈ）１．８２－１．９５（ｍ，２Ｈ）２．００－２．１８（ｍ，１Ｈ）２．２９－２．４９（ｍ，４Ｈ）２．６１－２．６７（ｍ，４Ｈ）２．９２－３．０３（ｍ，５Ｈ）３．３４（ｂｒ ｄ，Ｊ＝１０．２４Ｈｚ，１Ｈ）３．５０（ｓ，３Ｈ）３．５８－３．７７（ｍ，８Ｈ）４．２８（ｔ，Ｊ＝９．７６Ｈｚ，１Ｈ）５．４０－５．５３（ｍ，１Ｈ）５．８３－５．９９（ｍ，１Ｈ）６．２８（ｄｄ，Ｊ＝１４．６３，１０．７３Ｈｚ，１Ｈ）．
一般的手順１．７により、Ｈ１６の合成中の副生成物としてＨ１５を得た（６．６ｍｇ、３５％収率）。ＬＣ／ＭＳ（ＥＳＩ，ｍ／ｚ），６６５．４６［Ｍ＋Ｈ］＋．
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，メタノール－ｄ４）δ ｐｐｍ ０．６６（ｂｒ ｄ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，４Ｈ）０．８１（ｂｒ ｄ，Ｊ＝５．８５Ｈｚ，３Ｈ）０．９９－１．０４（ｍ，４Ｈ）１．０７－１．１０（ｍ，４Ｈ）１．１７（ｂｒ ｓ，１Ｈ）１．１９－１．２７（ｍ，５Ｈ）１．４６－１．５５（ｍ，２Ｈ）１．６５（ｂｒ ｓ，１Ｈ）１．６８（ｓ，４Ｈ）１．８２－１．９５（ｍ，２Ｈ）２．００－２．１８（ｍ，１Ｈ）２．２９－２．４９（ｍ，４Ｈ）２．６１－２．６７（ｍ，４Ｈ）２．９２－３．０３（ｍ，５Ｈ）３．３４（ｂｒ ｄ，Ｊ＝１０．２４Ｈｚ，１Ｈ）３．５０（ｓ，３Ｈ）３．５８－３．７７（ｍ，８Ｈ）４．２８（ｔ，Ｊ＝９．７６Ｈｚ，１Ｈ）５．４０－５．５３（ｍ，１Ｈ）５．８３－５．９９（ｍ，１Ｈ）６．２８（ｄｄ，Ｊ＝１４．６３，１０．７３Ｈｚ，１Ｈ）．
１．７．５ Ｈ２４の合成
一般的手順１．７を用いてＨ２４を無色のアモルファス生成物として得た（１２．１ｍｇ、９４％収率）。ＬＣ／ＭＳ（ＥＳＩ，ｍ／ｚ），６９３．７２［Ｍ＋Ｈ］＋．
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，メタノール－ｄ４）δ ｐｐｍ ０．６６（ｄ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，３Ｈ）０．８０（ｄ，Ｊ＝６．８３Ｈｚ，３Ｈ）１．０２（ｄ，Ｊ＝６．８３Ｈｚ，４Ｈ）１．０８（ｄ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，４Ｈ）１．３２－１．３７（ｍ，８Ｈ）１．４４－１．５０（ｍ，４Ｈ）１．６５－１．６８（ｍ，５Ｈ）１．７５－１．９６（ｍ，４Ｈ）２．１９－２．３９（ｍ，３Ｈ）２．４０－２．５２（ｍ，２Ｈ）２．６３（ｄ，Ｊ＝９．２７Ｈｚ，１Ｈ）２．８０（ｓ，３Ｈ）２．９５（ｄｄ，Ｊ＝６．３４，４．３９Ｈｚ，１Ｈ）３．０６－３．１５（ｍ，１Ｈ）３．３１－３．４０（ｍ，２Ｈ）３．５０（ｓ，３Ｈ）３．６５－３．７２（ｍ，７Ｈ）３．７３－３．８０（ｍ，２Ｈ）４．１０－４．２４（ｍ，１Ｈ）５．４７（ｄｄ，Ｊ＝１５．１２，９．２７Ｈｚ，１Ｈ）５．８９（ｄ，Ｊ＝１０．２４Ｈｚ，１Ｈ）６．２８（ｄｄ，Ｊ＝１５．１２，１０．７３Ｈｚ，１Ｈ）．
一般的手順１．７を用いてＨ２４を無色のアモルファス生成物として得た（１２．１ｍｇ、９４％収率）。ＬＣ／ＭＳ（ＥＳＩ，ｍ／ｚ），６９３．７２［Ｍ＋Ｈ］＋．
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，メタノール－ｄ４）δ ｐｐｍ ０．６６（ｄ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，３Ｈ）０．８０（ｄ，Ｊ＝６．８３Ｈｚ，３Ｈ）１．０２（ｄ，Ｊ＝６．８３Ｈｚ，４Ｈ）１．０８（ｄ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，４Ｈ）１．３２－１．３７（ｍ，８Ｈ）１．４４－１．５０（ｍ，４Ｈ）１．６５－１．６８（ｍ，５Ｈ）１．７５－１．９６（ｍ，４Ｈ）２．１９－２．３９（ｍ，３Ｈ）２．４０－２．５２（ｍ，２Ｈ）２．６３（ｄ，Ｊ＝９．２７Ｈｚ，１Ｈ）２．８０（ｓ，３Ｈ）２．９５（ｄｄ，Ｊ＝６．３４，４．３９Ｈｚ，１Ｈ）３．０６－３．１５（ｍ，１Ｈ）３．３１－３．４０（ｍ，２Ｈ）３．５０（ｓ，３Ｈ）３．６５－３．７２（ｍ，７Ｈ）３．７３－３．８０（ｍ，２Ｈ）４．１０－４．２４（ｍ，１Ｈ）５．４７（ｄｄ，Ｊ＝１５．１２，９．２７Ｈｚ，１Ｈ）５．８９（ｄ，Ｊ＝１０．２４Ｈｚ，１Ｈ）６．２８（ｄｄ，Ｊ＝１５．１２，１０．７３Ｈｚ，１Ｈ）．
１．７．６ Ｈ１８の合成
一般的手順１．７を用いてＨ１８を無色のアモルファス生成物として得た（８．１ｍｇ、５３％収率）。ＬＣ／ＭＳ（ＥＳＩ，ｍ／ｚ），６７８．６８［Ｍ－Ｈ］＋．
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム－ｄ）δ ｐｐｍ ０．６７（ｂｒ ｄ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，３Ｈ）０．８７（ｄ，Ｊ＝６．８３Ｈｚ，３Ｈ）１．０３（ｂｒ ｄ，Ｊ＝６．８３Ｈｚ，３Ｈ）１．１５－１．２４（ｍ，５Ｈ）１．２８（ｓ，３Ｈ）１．５０－１．６７（ｍ，５Ｈ）１．７５（ｂｒ ｓ，１Ｈ）１．８２－１．９４（ｍ，３Ｈ）２．３７－２．４４（ｍ，３Ｈ）２．５６－２．６０（ｍ，４Ｈ）２．７１－２．９３（ｍ，３Ｈ）３．００（ｂｒ ｔ，Ｊ＝５．１２Ｈｚ，１Ｈ）３．３７（ｂｒ ｄ，Ｊ＝１０．２４Ｈｚ，１Ｈ）３．５３（ｓ，３Ｈ）３．５５－３．６３（ｍ，１Ｈ）３．６５－３．７６（ｍ，３Ｈ）３．８３－３．９１（ｍ，１Ｈ）４．０４（ｂｒ ｄ，Ｊ＝４．３９Ｈｚ，１Ｈ）４．０８－４．１６（ｍ，１Ｈ）４．４１－４．５３（ｍ，２Ｈ）５．４２－５．５５（ｍ，１Ｈ）５．９１（ｂｒ ｄ，Ｊ＝１０．７３Ｈｚ，１Ｈ）６．１４－６．２８（ｍ，１Ｈ）７．２１（ｂｒ ｄ，Ｊ＝７．３２Ｈｚ，１Ｈ）．
一般的手順１．７を用いてＨ１８を無色のアモルファス生成物として得た（８．１ｍｇ、５３％収率）。ＬＣ／ＭＳ（ＥＳＩ，ｍ／ｚ），６７８．６８［Ｍ－Ｈ］＋．
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム－ｄ）δ ｐｐｍ ０．６７（ｂｒ ｄ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，３Ｈ）０．８７（ｄ，Ｊ＝６．８３Ｈｚ，３Ｈ）１．０３（ｂｒ ｄ，Ｊ＝６．８３Ｈｚ，３Ｈ）１．１５－１．２４（ｍ，５Ｈ）１．２８（ｓ，３Ｈ）１．５０－１．６７（ｍ，５Ｈ）１．７５（ｂｒ ｓ，１Ｈ）１．８２－１．９４（ｍ，３Ｈ）２．３７－２．４４（ｍ，３Ｈ）２．５６－２．６０（ｍ，４Ｈ）２．７１－２．９３（ｍ，３Ｈ）３．００（ｂｒ ｔ，Ｊ＝５．１２Ｈｚ，１Ｈ）３．３７（ｂｒ ｄ，Ｊ＝１０．２４Ｈｚ，１Ｈ）３．５３（ｓ，３Ｈ）３．５５－３．６３（ｍ，１Ｈ）３．６５－３．７６（ｍ，３Ｈ）３．８３－３．９１（ｍ，１Ｈ）４．０４（ｂｒ ｄ，Ｊ＝４．３９Ｈｚ，１Ｈ）４．０８－４．１６（ｍ，１Ｈ）４．４１－４．５３（ｍ，２Ｈ）５．４２－５．５５（ｍ，１Ｈ）５．９１（ｂｒ ｄ，Ｊ＝１０．７３Ｈｚ，１Ｈ）６．１４－６．２８（ｍ，１Ｈ）７．２１（ｂｒ ｄ，Ｊ＝７．３２Ｈｚ，１Ｈ）．
１．７．７ Ｈ１３の合成
一般的手順１．７を用いてＨ１３を無色のアモルファス生成物として得た（６．７ｍｇ、３６．７％収率）。ＬＣ／ＭＳ（ＥＳＩ，ｍ／ｚ），６５２．８６［Ｍ＋Ｈ］＋．
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，メタノール－ｄ４）δ ｐｐｍ ０．６６（ｄ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，３Ｈ）０．８１（ｄ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，３Ｈ）１．０２（ｄ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，３Ｈ）１．０５－１．１０（ｍ，３Ｈ）１．１４－１．２３（ｍ，２Ｈ）１．２６（ｓ，４Ｈ）１．３４－１．５２（ｍ，２Ｈ）１．５２－１．５９（ｍ，１Ｈ）１．６５（ｂｒ ｓ，１Ｈ）１．７０（ｓ，４Ｈ）１．８２－１．９２（ｍ，２Ｈ）２．４１（ｑｄ，Ｊ＝１４．３９，６．１０Ｈｚ，３Ｈ）２．６３（ｄ，Ｊ＝９．７６Ｈｚ，１Ｈ）２．７３（ｂｒ ｄ，Ｊ＝４．３９Ｈｚ，３Ｈ）２．９５（ｂｒ ｔ，Ｊ＝５．１２Ｈｚ，２Ｈ）２．９９－３．０９（ｍ，３Ｈ）３．３０－３．３６（ｍ，１Ｈ）３．５０（ｓ，３Ｈ）３．５３－３．６５（ｍ，２Ｈ）３．６５－３．７８（ｍ，４Ｈ）４．２４－４．４２（ｍ，２Ｈ）４．５５（ｂｒ ｓ，１Ｈ）５．３６－５．５５（ｍ，１Ｈ）５．８９（ｂｒ ｄ，Ｊ＝１０．７３Ｈｚ，１Ｈ）６．２１－６．４３（ｍ，１Ｈ）．
一般的手順１．７を用いてＨ１３を無色のアモルファス生成物として得た（６．７ｍｇ、３６．７％収率）。ＬＣ／ＭＳ（ＥＳＩ，ｍ／ｚ），６５２．８６［Ｍ＋Ｈ］＋．
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，メタノール－ｄ４）δ ｐｐｍ ０．６６（ｄ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，３Ｈ）０．８１（ｄ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，３Ｈ）１．０２（ｄ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，３Ｈ）１．０５－１．１０（ｍ，３Ｈ）１．１４－１．２３（ｍ，２Ｈ）１．２６（ｓ，４Ｈ）１．３４－１．５２（ｍ，２Ｈ）１．５２－１．５９（ｍ，１Ｈ）１．６５（ｂｒ ｓ，１Ｈ）１．７０（ｓ，４Ｈ）１．８２－１．９２（ｍ，２Ｈ）２．４１（ｑｄ，Ｊ＝１４．３９，６．１０Ｈｚ，３Ｈ）２．６３（ｄ，Ｊ＝９．７６Ｈｚ，１Ｈ）２．７３（ｂｒ ｄ，Ｊ＝４．３９Ｈｚ，３Ｈ）２．９５（ｂｒ ｔ，Ｊ＝５．１２Ｈｚ，２Ｈ）２．９９－３．０９（ｍ，３Ｈ）３．３０－３．３６（ｍ，１Ｈ）３．５０（ｓ，３Ｈ）３．５３－３．６５（ｍ，２Ｈ）３．６５－３．７８（ｍ，４Ｈ）４．２４－４．４２（ｍ，２Ｈ）４．５５（ｂｒ ｓ，１Ｈ）５．３６－５．５５（ｍ，１Ｈ）５．８９（ｂｒ ｄ，Ｊ＝１０．７３Ｈｚ，１Ｈ）６．２１－６．４３（ｍ，１Ｈ）．
１．７．８ Ｈ１４の合成
一般的手順１．７を用いてＨ１４を無色のアモルファス固体として得た（１５．５ｍｇ、８３％収率）。ＬＣ／ＭＳ（ＥＳＩ，ｍ／ｚ），６６６．９０［Ｍ＋Ｈ］＋．
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム－ｄ）δ ｐｐｍ ０．６５（ｂｒ ｄ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，３Ｈ）０．８５（ｂｒ ｄ，Ｊ＝６．８３Ｈｚ，３Ｈ）１．０２（ｂｒ ｄ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，３Ｈ）１．１４－１．２８（ｍ，８Ｈ）１．３８－１．５７（ｍ，２Ｈ）１．５７－１．６５（ｍ，２Ｈ）１．８１－１．８９（ｍ，２Ｈ）２．０４－２．１９（ｍ，２Ｈ）２．４１（ｂｒ ｄ，Ｊ＝４．８８Ｈｚ，３Ｈ）２．５４（ｄ，Ｊ＝９．７６Ｈｚ，１Ｈ）２．６５（ｓ，３Ｈ）２．９１－３．０３（ｍ，５Ｈ）３．３３（ｂｒ ｄ，Ｊ＝９．７６Ｈｚ，１Ｈ）３．５２（ｓ，３Ｈ）３．７０（ｂｒ ｓ，５Ｈ）３．８１－３．８７（ｍ，１Ｈ）４．０８－４．１８（ｍ，２Ｈ）４．５２（ｂｒ ｄ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，１Ｈ）５．４５（ｂｒ ｄｄ，Ｊ＝１５．１２，８．７８Ｈｚ，１Ｈ）５．８９（ｂｒ ｄ，Ｊ＝１０．７３Ｈｚ，１Ｈ）６．２１（ｂｒ ｄｄ，Ｊ＝１４．８８，１０．９８Ｈｚ，２Ｈ）７．１５（ｂｒ ｄ，Ｊ＝７．３２Ｈｚ，１Ｈ）．
一般的手順１．７を用いてＨ１４を無色のアモルファス固体として得た（１５．５ｍｇ、８３％収率）。ＬＣ／ＭＳ（ＥＳＩ，ｍ／ｚ），６６６．９０［Ｍ＋Ｈ］＋．
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム－ｄ）δ ｐｐｍ ０．６５（ｂｒ ｄ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，３Ｈ）０．８５（ｂｒ ｄ，Ｊ＝６．８３Ｈｚ，３Ｈ）１．０２（ｂｒ ｄ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，３Ｈ）１．１４－１．２８（ｍ，８Ｈ）１．３８－１．５７（ｍ，２Ｈ）１．５７－１．６５（ｍ，２Ｈ）１．８１－１．８９（ｍ，２Ｈ）２．０４－２．１９（ｍ，２Ｈ）２．４１（ｂｒ ｄ，Ｊ＝４．８８Ｈｚ，３Ｈ）２．５４（ｄ，Ｊ＝９．７６Ｈｚ，１Ｈ）２．６５（ｓ，３Ｈ）２．９１－３．０３（ｍ，５Ｈ）３．３３（ｂｒ ｄ，Ｊ＝９．７６Ｈｚ，１Ｈ）３．５２（ｓ，３Ｈ）３．７０（ｂｒ ｓ，５Ｈ）３．８１－３．８７（ｍ，１Ｈ）４．０８－４．１８（ｍ，２Ｈ）４．５２（ｂｒ ｄ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，１Ｈ）５．４５（ｂｒ ｄｄ，Ｊ＝１５．１２，８．７８Ｈｚ，１Ｈ）５．８９（ｂｒ ｄ，Ｊ＝１０．７３Ｈｚ，１Ｈ）６．２１（ｂｒ ｄｄ，Ｊ＝１４．８８，１０．９８Ｈｚ，２Ｈ）７．１５（ｂｒ ｄ，Ｊ＝７．３２Ｈｚ，１Ｈ）．
１．７．９ Ｈ１７の合成
一般的手順１．７を用いてＨ１７を無色のアモルファス固体として得た（１２．９４ｍｇ、６８％収率）。ＬＣ／ＭＳ（ＥＳＩ，ｍ／ｚ），６８０．６６［Ｍ＋Ｈ］＋．
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，メタノール－ｄ４）δ ｐｐｍ ０．６６（ｄ，Ｊ＝６．８３Ｈｚ，４Ｈ）０．８１（ｄ，Ｊ＝７．３２Ｈｚ，３Ｈ）０．９７－１．０４（ｍ，５Ｈ）１．０８（ｄ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，５Ｈ）１．１０－１．１６（ｍ，２Ｈ）１．２０－１．２３（ｍ，１Ｈ）１．２５（ｓ，４Ｈ）１．６９（ｄ，Ｊ＝０．９８Ｈｚ，４Ｈ）１．８３（ｂｒ ｄ，Ｊ＝３．４１Ｈｚ，１Ｈ）１．８７（ｂｒ ｄ，Ｊ＝４．３９Ｈｚ，１Ｈ）１．９０（ｂｒ ｄ，Ｊ＝４．３９Ｈｚ，１Ｈ）２．２４－２．３０（ｍ，１Ｈ）２．４０（ｂｒ ｄｄ，Ｊ＝１３．９０，９．０２Ｈｚ，２Ｈ）２．５８－２．６２（ｍ，５Ｈ）２．６４（ｓ，１Ｈ）２．８４（ｂｒ ｔ，Ｊ＝４．８８Ｈｚ，５Ｈ）２．９５（ｄｄ，Ｊ＝６．３４，４．３９Ｈｚ，１Ｈ）３．３０－３．３２（ｍ，１Ｈ）３．５０（ｓ，３Ｈ）３．５６－３．６４（ｍ，６Ｈ）３．７４－３．７９（ｍ，１Ｈ）４．０２（ｂｒ ｔ，Ｊ＝５．３７Ｈｚ，３Ｈ）４．３２－４．３５（ｍ，１Ｈ）４．３５－４．３７（ｍ，１Ｈ）５．４５（ｄｄ，Ｊ＝１５．１２，８．７８Ｈｚ，１Ｈ）５．８５－５．９１（ｍ，１Ｈ）６．２７（ｄｄ，Ｊ＝１５．１２，１０．７３Ｈｚ，１Ｈ）．
一般的手順１．７を用いてＨ１７を無色のアモルファス固体として得た（１２．９４ｍｇ、６８％収率）。ＬＣ／ＭＳ（ＥＳＩ，ｍ／ｚ），６８０．６６［Ｍ＋Ｈ］＋．
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，メタノール－ｄ４）δ ｐｐｍ ０．６６（ｄ，Ｊ＝６．８３Ｈｚ，４Ｈ）０．８１（ｄ，Ｊ＝７．３２Ｈｚ，３Ｈ）０．９７－１．０４（ｍ，５Ｈ）１．０８（ｄ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，５Ｈ）１．１０－１．１６（ｍ，２Ｈ）１．２０－１．２３（ｍ，１Ｈ）１．２５（ｓ，４Ｈ）１．６９（ｄ，Ｊ＝０．９８Ｈｚ，４Ｈ）１．８３（ｂｒ ｄ，Ｊ＝３．４１Ｈｚ，１Ｈ）１．８７（ｂｒ ｄ，Ｊ＝４．３９Ｈｚ，１Ｈ）１．９０（ｂｒ ｄ，Ｊ＝４．３９Ｈｚ，１Ｈ）２．２４－２．３０（ｍ，１Ｈ）２．４０（ｂｒ ｄｄ，Ｊ＝１３．９０，９．０２Ｈｚ，２Ｈ）２．５８－２．６２（ｍ，５Ｈ）２．６４（ｓ，１Ｈ）２．８４（ｂｒ ｔ，Ｊ＝４．８８Ｈｚ，５Ｈ）２．９５（ｄｄ，Ｊ＝６．３４，４．３９Ｈｚ，１Ｈ）３．３０－３．３２（ｍ，１Ｈ）３．５０（ｓ，３Ｈ）３．５６－３．６４（ｍ，６Ｈ）３．７４－３．７９（ｍ，１Ｈ）４．０２（ｂｒ ｔ，Ｊ＝５．３７Ｈｚ，３Ｈ）４．３２－４．３５（ｍ，１Ｈ）４．３５－４．３７（ｍ，１Ｈ）５．４５（ｄｄ，Ｊ＝１５．１２，８．７８Ｈｚ，１Ｈ）５．８５－５．９１（ｍ，１Ｈ）６．２７（ｄｄ，Ｊ＝１５．１２，１０．７３Ｈｚ，１Ｈ）．
１．７．１０ Ｈ１９の合成
一般的手順１．７を用いてＨ１９を無色のアモルファス固体として得た（５．５３ｍｇ、５６．４％収率）。ＬＣ／ＭＳ（ＥＳＩ，ｍ／ｚ），６９４．０８［Ｍ＋Ｈ］＋．
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，メタノール－ｄ４）δ ｐｐｍ ０．６６（ｄ，Ｊ＝６．８３Ｈｚ，３Ｈ）０．８１（ｄ，Ｊ＝６．８３Ｈｚ，３Ｈ）０．９５－０．９５（ｍ，１Ｈ）１．０２（ｄ，Ｊ＝６．８３Ｈｚ，３Ｈ）１．０８（ｄ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，３Ｈ）１．１２－１．２２（ｍ，２Ｈ）１．２６（ｓ，４Ｈ）１．３４－１．５２（ｍ，７Ｈ）１．６２（ｂｒ ｄ，Ｊ＝１３．６６Ｈｚ，２Ｈ）１．６８（ｓ，４Ｈ）１．８１－１．９３（ｍ，３Ｈ）２．０８－２．０８（ｍ，１Ｈ）２．２０－２．３９（ｍ，２Ｈ）２．３９－２．５０（ｍ，１Ｈ）２．６１－２．６８（ｍ，４Ｈ）２．９０－２．９７（ｍ，５Ｈ）３．１１－３．１５（ｍ，２Ｈ）３．３０－３．３４（ｍ，１Ｈ）３．５０（ｓ，３Ｈ）３．５６－３．６２（ｍ，４Ｈ）３．７６（ｔ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，１Ｈ）４．１１－４．２２（ｍ，１Ｈ）５．４５（ｄｄ，Ｊ＝１５．１２，８．７８Ｈｚ，１Ｈ）５．９０（ｂｒ ｄ，Ｊ＝１１．２２Ｈｚ，１Ｈ）６．２９（ｄｄ，Ｊ＝１４．８８，１０．９８Ｈｚ，１Ｈ）．
一般的手順１．７を用いてＨ１９を無色のアモルファス固体として得た（５．５３ｍｇ、５６．４％収率）。ＬＣ／ＭＳ（ＥＳＩ，ｍ／ｚ），６９４．０８［Ｍ＋Ｈ］＋．
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，メタノール－ｄ４）δ ｐｐｍ ０．６６（ｄ，Ｊ＝６．８３Ｈｚ，３Ｈ）０．８１（ｄ，Ｊ＝６．８３Ｈｚ，３Ｈ）０．９５－０．９５（ｍ，１Ｈ）１．０２（ｄ，Ｊ＝６．８３Ｈｚ，３Ｈ）１．０８（ｄ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，３Ｈ）１．１２－１．２２（ｍ，２Ｈ）１．２６（ｓ，４Ｈ）１．３４－１．５２（ｍ，７Ｈ）１．６２（ｂｒ ｄ，Ｊ＝１３．６６Ｈｚ，２Ｈ）１．６８（ｓ，４Ｈ）１．８１－１．９３（ｍ，３Ｈ）２．０８－２．０８（ｍ，１Ｈ）２．２０－２．３９（ｍ，２Ｈ）２．３９－２．５０（ｍ，１Ｈ）２．６１－２．６８（ｍ，４Ｈ）２．９０－２．９７（ｍ，５Ｈ）３．１１－３．１５（ｍ，２Ｈ）３．３０－３．３４（ｍ，１Ｈ）３．５０（ｓ，３Ｈ）３．５６－３．６２（ｍ，４Ｈ）３．７６（ｔ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，１Ｈ）４．１１－４．２２（ｍ，１Ｈ）５．４５（ｄｄ，Ｊ＝１５．１２，８．７８Ｈｚ，１Ｈ）５．９０（ｂｒ ｄ，Ｊ＝１１．２２Ｈｚ，１Ｈ）６．２９（ｄｄ，Ｊ＝１４．８８，１０．９８Ｈｚ，１Ｈ）．
１．７．１１ Ｈ２１の合成
一般的手順１．７を用いてＨ２１を得て、これは無色のアモルファス固体として得られた（１２．３ｍｇ、６２．１％収率）。ＬＣ／ＭＳ（ＥＳＩ，ｍ／ｚ），７０８．０３［Ｍ＋Ｈ］＋．
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム－ｄ）δ ｐｐｍ ０．６７（ｂｒ ｄ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，３Ｈ）０．８５（ｂｒ ｄ，Ｊ＝６．８３Ｈｚ，３Ｈ）１．０２（ｂｒ ｄ，Ｊ＝６．８３Ｈｚ，３Ｈ）１．１５－１．２９（ｍ，９Ｈ）１．２９－１．４２（ｍ，３Ｈ）１．４７－１．６３（ｍ，６Ｈ）１．７４－１．７９（ｍ，１Ｈ）１．８６（ｂｒ ｄｄ，Ｊ＝１３．１７，３．９０Ｈｚ，２Ｈ）２．４０（ｂｒ ｄ，Ｊ＝５．３７Ｈｚ，３Ｈ）２．５１－２．５５（ｍ，４Ｈ）２．７８（ｂｒ ｓ，４Ｈ）２．９６（ｂｒ ｔ，Ｊ＝５．１２Ｈｚ，１Ｈ）３．１８（ｔｄ，Ｊ＝１２．０７，６．１０Ｈｚ，２Ｈ）３．３７（ｂｒ ｄ，Ｊ＝９．７６Ｈｚ，１Ｈ）３．５２（ｓ，３Ｈ）３．５７（ｂｒ ｓ，４Ｈ）３．６９（ｓ，４Ｈ）３．８４（ｂｒ ｔ，Ｊ＝５．８５Ｈｚ，１Ｈ）４．５０－４．５７（ｍ，１Ｈ）４．８５－４．９３（ｍ，２Ｈ）５．４４（ｂｒ ｄｄ，Ｊ＝１５．１２，８．７８Ｈｚ，１Ｈ）５．９２（ｂｒ ｄ，Ｊ＝１０．２４Ｈｚ，１Ｈ）６．１５－６．３８（ｍ，１Ｈ）７．２４－７．２９（ｍ，２Ｈ）８．２４（ｂｒ ｓ，１Ｈ）．
一般的手順１．７を用いてＨ２１を得て、これは無色のアモルファス固体として得られた（１２．３ｍｇ、６２．１％収率）。ＬＣ／ＭＳ（ＥＳＩ，ｍ／ｚ），７０８．０３［Ｍ＋Ｈ］＋．
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム－ｄ）δ ｐｐｍ ０．６７（ｂｒ ｄ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，３Ｈ）０．８５（ｂｒ ｄ，Ｊ＝６．８３Ｈｚ，３Ｈ）１．０２（ｂｒ ｄ，Ｊ＝６．８３Ｈｚ，３Ｈ）１．１５－１．２９（ｍ，９Ｈ）１．２９－１．４２（ｍ，３Ｈ）１．４７－１．６３（ｍ，６Ｈ）１．７４－１．７９（ｍ，１Ｈ）１．８６（ｂｒ ｄｄ，Ｊ＝１３．１７，３．９０Ｈｚ，２Ｈ）２．４０（ｂｒ ｄ，Ｊ＝５．３７Ｈｚ，３Ｈ）２．５１－２．５５（ｍ，４Ｈ）２．７８（ｂｒ ｓ，４Ｈ）２．９６（ｂｒ ｔ，Ｊ＝５．１２Ｈｚ，１Ｈ）３．１８（ｔｄ，Ｊ＝１２．０７，６．１０Ｈｚ，２Ｈ）３．３７（ｂｒ ｄ，Ｊ＝９．７６Ｈｚ，１Ｈ）３．５２（ｓ，３Ｈ）３．５７（ｂｒ ｓ，４Ｈ）３．６９（ｓ，４Ｈ）３．８４（ｂｒ ｔ，Ｊ＝５．８５Ｈｚ，１Ｈ）４．５０－４．５７（ｍ，１Ｈ）４．８５－４．９３（ｍ，２Ｈ）５．４４（ｂｒ ｄｄ，Ｊ＝１５．１２，８．７８Ｈｚ，１Ｈ）５．９２（ｂｒ ｄ，Ｊ＝１０．２４Ｈｚ，１Ｈ）６．１５－６．３８（ｍ，１Ｈ）７．２４－７．２９（ｍ，２Ｈ）８．２４（ｂｒ ｓ，１Ｈ）．
１．８ Ｈ２２及びＨ２５の合成
Ｈ２２及びＨ２５を以下の一般的手順によって調製した。
ステップ１：ジクロロメタン（２ｍｌ）中の（（２Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－６－（（Ｓ，２Ｅ，４Ｅ）－７－（（２Ｒ，３Ｒ）－３－（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）－３－メトキシ－４－（（トリエチルシリル）オキシ）ペンタン－２－イル）－２－メチルオキシラン－２－イル）－６－メチルヘプタ－２，４－ジエン－２－イル）－５－メチルテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－ｌ）メタンアミン（１６．６ｍｇ、０．０２７ｍｍｏｌ）及び４－カルボキシ－１－シクロヘキサンメタノール（シス・トランス混合物、５．１１ｍｇ、０．０３２ｍｍｏｌ）の溶液に室温でＥＤＣ（６．２０ｍｇ、０．０３２ｍｍｏｌ）及びＨＯＢＴ（４．５４ｍｇ、０．０３ｍｍｏｌ）を加えた。この反応混合物を室温で１６時間撹拌した。次に、この混合物をジクロロメタンで希釈し、有機層を水及びブラインで洗浄し、次に無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。固体をろ過し、ろ液を濃縮し、シリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、所望の生成物を無色の油として得た（８．３ｍｇ、４７％収率）
Ｈ２２及びＨ２５を以下の一般的手順によって調製した。
ステップ１：ジクロロメタン（２ｍｌ）中の（（２Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－６－（（Ｓ，２Ｅ，４Ｅ）－７－（（２Ｒ，３Ｒ）－３－（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）－３－メトキシ－４－（（トリエチルシリル）オキシ）ペンタン－２－イル）－２－メチルオキシラン－２－イル）－６－メチルヘプタ－２，４－ジエン－２－イル）－５－メチルテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－ｌ）メタンアミン（１６．６ｍｇ、０．０２７ｍｍｏｌ）及び４－カルボキシ－１－シクロヘキサンメタノール（シス・トランス混合物、５．１１ｍｇ、０．０３２ｍｍｏｌ）の溶液に室温でＥＤＣ（６．２０ｍｇ、０．０３２ｍｍｏｌ）及びＨＯＢＴ（４．５４ｍｇ、０．０３ｍｍｏｌ）を加えた。この反応混合物を室温で１６時間撹拌した。次に、この混合物をジクロロメタンで希釈し、有機層を水及びブラインで洗浄し、次に無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。固体をろ過し、ろ液を濃縮し、シリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、所望の生成物を無色の油として得た（８．３ｍｇ、４７％収率）
ステップ２：室温でジクロロメタン（１ｍｌ）中の４－（ヒドロキシメチル）－Ｎ－（（（２Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－６－（（Ｓ，２Ｅ，４Ｅ）－７－（（２Ｒ，３Ｒ）－３－（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）－３－メトキシ－４－（（トリエチルシリル）オキシ）ペンタン－２－イル）－２－メチルオキシラン－２－イル）－６－メチルヘプタ－２，４－ジエン－２－イル）－５－メチルテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）メチル）シクロヘキサンカルボキサミド（２１ｍｇ、０．０３２ｍｍｏｌ）及びＤＩＰＥＡ（０．０２８ｍｌ、０．１５８ｍｍｏｌ）のシス、トランス混合物の溶液にカルボノクロリド酸４－ニトロフェニル（１２．７５ｍｇ、０．０６３ｍｍｏｌ）及びＤＭＡＰ（１．９３２ｍｇ、０．０１６ｍｍｏｌ）を少量ずつ加えた。得られた混合物を同じ温度で１６時間撹拌した。次に、１－メチルピペラジン（３１．７ｍｇ、０．３１６ｍｍｏｌ）を加え、更に１時間撹拌した。この反応混合物をジクロロメタンで希釈し、有機層（ｏｒｇａｎｉｃ ｌａｙｔｅｒ）を水及びブラインで洗浄し、次にＮａ２ＳＯ４で乾燥させた。固体をろ過し、ろ液を濃縮乾固した。得られた残渣を１．０ｍＬのＭｅＯＨ及び１０ｍｇのｐ－ＴｓＯＨに溶解させて、室温で２時間撹拌した。この反応物を１００ｕＬのＤＩＰＥＡを加えることによりクエンチし、次に溶媒を真空除去した。得られた残渣をＮＨ－シリカゲルクロマトグラフィー（Ｈｅｐ／ＡｃＯＥｔ＝５０／５０～０／１００）により精製して、Ｈ２５及びＨ２２を得た。
１．８．１ Ｈ２５の合成
Ｈ２５は無色のアモルファス生成物として得られた（７．０ｍｇ、３２．７％収率）。ＬＣ／ＭＳ（ＥＳＩ，ｍ／ｚ），６７６．９４［Ｍ＋Ｈ］＋．
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム－ｄ）δ ｐｐｍ ０．６８（ｄ，Ｊ＝６．８３Ｈｚ，３Ｈ）１．０２（ｄ，Ｊ＝７．３２Ｈｚ，３Ｈ）１．１０（ｄ，Ｊ＝６．８３Ｈｚ，３Ｈ）１．１７（ｄ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，４Ｈ）１．２５（ｓ，３Ｈ）１．４７－１．６２（ｍ，１１Ｈ）１．７１（ｓ，３Ｈ）１．８０－１．８６（ｍ，４Ｈ）２．１３（ｓ，１Ｈ）２．２７－２．３６（ｍ，１０Ｈ）２．４９－２．６５（ｍ，１Ｈ）２．９９－３．１２（ｍ，１Ｈ）３．２９（ｄ，Ｊ＝１０．２０Ｈｚ，１Ｈ）３．３２（ｓ，４Ｈ）３．４７（ｂｒ ｔ，Ｊ＝４．８８Ｈｚ，４Ｈ）３．７２－３．７３（ｍ，１Ｈ）３．７３－３．７４（ｍ，１Ｈ）３．９９（ｄ，Ｊ＝６．８３Ｈｚ，２Ｈ）４．２１－４．３６（ｍ，１Ｈ）５．５６－５．７１（ｍ，１Ｈ）５．９２（ｓ，１Ｈ）６．１８－６．３１（ｍ，１Ｈ）．
Ｈ２５は無色のアモルファス生成物として得られた（７．０ｍｇ、３２．７％収率）。ＬＣ／ＭＳ（ＥＳＩ，ｍ／ｚ），６７６．９４［Ｍ＋Ｈ］＋．
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム－ｄ）δ ｐｐｍ ０．６８（ｄ，Ｊ＝６．８３Ｈｚ，３Ｈ）１．０２（ｄ，Ｊ＝７．３２Ｈｚ，３Ｈ）１．１０（ｄ，Ｊ＝６．８３Ｈｚ，３Ｈ）１．１７（ｄ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，４Ｈ）１．２５（ｓ，３Ｈ）１．４７－１．６２（ｍ，１１Ｈ）１．７１（ｓ，３Ｈ）１．８０－１．８６（ｍ，４Ｈ）２．１３（ｓ，１Ｈ）２．２７－２．３６（ｍ，１０Ｈ）２．４９－２．６５（ｍ，１Ｈ）２．９９－３．１２（ｍ，１Ｈ）３．２９（ｄ，Ｊ＝１０．２０Ｈｚ，１Ｈ）３．３２（ｓ，４Ｈ）３．４７（ｂｒ ｔ，Ｊ＝４．８８Ｈｚ，４Ｈ）３．７２－３．７３（ｍ，１Ｈ）３．７３－３．７４（ｍ，１Ｈ）３．９９（ｄ，Ｊ＝６．８３Ｈｚ，２Ｈ）４．２１－４．３６（ｍ，１Ｈ）５．５６－５．７１（ｍ，１Ｈ）５．９２（ｓ，１Ｈ）６．１８－６．３１（ｍ，１Ｈ）．
１．８．２ Ｈ２２の合成
Ｈ２２は無色のアモルファス生成物として得られた（５．６ｍｇ、２６．２％収率）。ＬＣ／ＭＳ（ＥＳＩ，ｍ／ｚ），６７６．８９［Ｍ＋Ｈ］＋．
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム－ｄ）δ ｐｐｍ ０．６８（ｄ，Ｊ＝６．８３Ｈｚ，３Ｈ）１．０２（ｄ，Ｊ＝６．８３Ｈｚ，３Ｈ）１．１０（ｄ，Ｊ＝７．３２Ｈｚ，３Ｈ）１．１４（ｄ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，３Ｈ）１．１７（ｓ，３Ｈ）１．２１－１．４１（ｍ，２Ｈ）１．４９－１．５５（ｍ，５Ｈ）１．５８－１．６２（ｍ，６Ｈ）１．７０（ｓ，３Ｈ）１．８０－１．８６（ｍ，４Ｈ）２．２６－２．３０（ｍ，４Ｈ）２．３５（ｂｒ ｓ，４Ｈ）２．４６－２．５７（ｍ，１Ｈ）２．８９（ｄｄ，Ｊ＝３．６６，２．２０Ｈｚ，１Ｈ）３．０１－３．１１（ｍ，１Ｈ）３．２７（ｄ，Ｊ＝９．７６Ｈｚ，１Ｈ）３．３８（ｓ，３Ｈ）３．４７（ｂｒ ｔ，Ｊ＝４．８８Ｈｚ，４Ｈ）３．５３（ｄｄｄ，Ｊ＝１０．２４，６．８３，３．４１Ｈｚ，１Ｈ）３．７６（ｄ，Ｊ＝５．３７Ｈｚ，１Ｈ）３．８９（ｄｄ，Ｊ＝６．３４，１．９５Ｈｚ，１Ｈ）３．９９（ｄ，Ｊ＝７．３２Ｈｚ，２Ｈ）５．６８－５．７７（ｍ，１Ｈ）５．９１（ｄ，Ｊ＝１１．２２Ｈｚ，１Ｈ）６．１８（ｄｄ，Ｊ＝１４．８８，１０．９８Ｈｚ，１Ｈ）．
Ｈ２２は無色のアモルファス生成物として得られた（５．６ｍｇ、２６．２％収率）。ＬＣ／ＭＳ（ＥＳＩ，ｍ／ｚ），６７６．８９［Ｍ＋Ｈ］＋．
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム－ｄ）δ ｐｐｍ ０．６８（ｄ，Ｊ＝６．８３Ｈｚ，３Ｈ）１．０２（ｄ，Ｊ＝６．８３Ｈｚ，３Ｈ）１．１０（ｄ，Ｊ＝７．３２Ｈｚ，３Ｈ）１．１４（ｄ，Ｊ＝６．３４Ｈｚ，３Ｈ）１．１７（ｓ，３Ｈ）１．２１－１．４１（ｍ，２Ｈ）１．４９－１．５５（ｍ，５Ｈ）１．５８－１．６２（ｍ，６Ｈ）１．７０（ｓ，３Ｈ）１．８０－１．８６（ｍ，４Ｈ）２．２６－２．３０（ｍ，４Ｈ）２．３５（ｂｒ ｓ，４Ｈ）２．４６－２．５７（ｍ，１Ｈ）２．８９（ｄｄ，Ｊ＝３．６６，２．２０Ｈｚ，１Ｈ）３．０１－３．１１（ｍ，１Ｈ）３．２７（ｄ，Ｊ＝９．７６Ｈｚ，１Ｈ）３．３８（ｓ，３Ｈ）３．４７（ｂｒ ｔ，Ｊ＝４．８８Ｈｚ，４Ｈ）３．５３（ｄｄｄ，Ｊ＝１０．２４，６．８３，３．４１Ｈｚ，１Ｈ）３．７６（ｄ，Ｊ＝５．３７Ｈｚ，１Ｈ）３．８９（ｄｄ，Ｊ＝６．３４，１．９５Ｈｚ，１Ｈ）３．９９（ｄ，Ｊ＝７．３２Ｈｚ，２Ｈ）５．６８－５．７７（ｍ，１Ｈ）５．９１（ｄ，Ｊ＝１１．２２Ｈｚ，１Ｈ）６．１８（ｄｄ，Ｊ＝１４．８８，１０．９８Ｈｚ，１Ｈ）．
実施例２
ＡＤＣの調製に使用される例示的ハーボキシジエンスプライセオソーム調節薬ペイロードをプロファイリングした。ＳＦ３ｂ複合体への結合性、インビトロスプライシング活性、及び細胞成長の阻害能力に関してペイロードを評価した。
ＡＤＣの調製に使用される例示的ハーボキシジエンスプライセオソーム調節薬ペイロードをプロファイリングした。ＳＦ３ｂ複合体への結合性、インビトロスプライシング活性、及び細胞成長の阻害能力に関してペイロードを評価した。
２．１ インビトロスプライシング（ＩＶＳ）
無細胞系でのペイロード活性を評価するため、インビトロスプライシングアッセイを実施した。ペイロードを核抽出物及びプレｍＲＮＡ基質ミニ遺伝子とインキュベートした。
無細胞系でのペイロード活性を評価するため、インビトロスプライシングアッセイを実施した。ペイロードを核抽出物及びプレｍＲＮＡ基質ミニ遺伝子とインキュベートした。
ＨｅＬａ核抽出物調製：ＨｅＬａ Ｓ３細胞ペレットを低張性緩衝液（１０ｍＭ ＨＥＰＥＳ ｐＨ７．９、１．５ｍＭ ＭｇＣｌ２、１０ｍＭ ＫＣｌ、０．２ｍＭ ＰＭＳＦ、０．５ｍＭ ＤＴＴ）に再懸濁し、懸濁液を合計５パック細胞容積（ＰＣＶ）となるようにした。遠心後、上清を廃棄し、細胞を低張性緩衝液で３ＰＣＶとなるようにして、氷上で１０分間インキュベートした。ダウンス型ホモジナイザーを使用して細胞を溶解させ、次に遠心した。上清を廃棄し、１／２パック核容積（ｐａｃｋｅｄ ｎｕｃｌｅａｒ ｖｏｌｕｍｅ：ＰＮＶ）の低塩濃度緩衝液（２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ ｐＨ７．９、１．５ｍＭ ＭｇＣｌ２、２０ｍＭ ＫＣｌ、０．２ｍＭ ＥＤＴＡ、２５％グリセロール、０．２ｍＭ ＰＭＳＦ、０．５ｍＭ ＤＴＴ）、続いて１／２ＰＮＶの高塩濃度緩衝液（１．４Ｍ ＫＣｌを除いて低塩濃度緩衝液と同じ）でペレットを再懸濁した。核を穏やかに３０分間混合した後、遠心した。次に上清（核抽出物）を保存緩衝液（２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ ｐＨ７．９、１００ｍＭ ＫＣｌ、０．２ｍＭ ＥＤＴＡ、２０％グリセロール、０．２ｍＭ ＰＭＳＦ、０．５ｍＭ ＤＴＴ）に透析した。タンパク質濃度は、ＮａｎｏＤｒｏｐ ８０００紫外可視分光光度計（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）を使用して決定した。
ＩＶＳ：全てのＡｄ２由来配列（Ｐｅｌｌｉｚｚｏｎｉ ｅｔ ａｌ．（１９９８）Ｃｅｌｌ ９５（５）：６１５－２４）を５’ＥｃｏＲＩ及び３’ＸｂａＩ制限部位を用いてｐｃＤＮＡ３．１（＋）ベクター（Ｐｒｏｍｅｇａ）にクローニングした。これらのプラスミドをＸｂａＩを用いて線状化し、インビトロ転写反応のＤＮＡ鋳型として使用した。ＦｔｚΔｉ無イントロンプラスミド（Ｌｕｏ ａｎｄ Ｒｅｅｄ（１９９９）９６（２６）：１４９３７－４２）をＥｃｏＲＩを用いて線状化した。全てのＲＮＡをインビトロ転写し、次に、それぞれＭＥＧＡＳｃｒｉｐｔ Ｔ７（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）及びＭｅｇａＣｌｅａｒ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）キットを使用して精製した。Ａｄ２変異体プレｍＲＮＡを使用したスプライシング反応については、ＨｅＬａ Ｓ３から調製した８μｇ核抽出物、２ｎｇプレｍＲＮＡ、０．２ｎｇ ＦＴＺΔｉ、及び様々な濃度の化合物又はＤＭＳＯを使用して１μＬ反応物を調製した。３０℃で１５分間プレインキュベートした後、１μＬスプライシング活性化緩衝液（０．５ｍＭ ＡＴＰ、２０ｍＭクレアチンリン酸、１．６ｍＭ ＭｇＣｌ２）を加え、反応物を３０℃で９０分間インキュベートした。次に反応物を１３μＬ ＤＭＳＯでクエンチし、ＲＴ－ｑＰＣＲに２５ｎＬを使用した。ＴａｑＭａｎ ＲＮＡ－ｔｏ－ＣＴ １－ｓｔｅｐキット（Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）、スプライシング反応からのＲＮＡ、Ａｄ２（フォワード：ＡＣＴＣＴＣＴＴＣＣＧＣＡＴＣＧＣＴＧＴ；リバース：ＣＣＧＡＣＧＧＧＴＴＴＣＣＧＡＴＣＣＡＡ；プローブ：ＣＴＧＴＴＧＧＧＣＴＣＧＣＧＧＴＴＧ）及びＦｔｚ（フォワード：ＴＧＧＣＡＴＣＡＧＡＴＴＧＣＡＡＡＧＡＣ；リバース：ＡＣＧＣＣＧＧＧＴＧＡＴＧＴＡＴＣＴＡＴ；プローブ：ＣＧＡＡＡＣＧＣＡＣＣＣＧＴＣＡＧＡＣＧ）ｍＲＮＡプライマー－プローブセットを使用してＲＴ－ｑＰＣＲ反応物を調製した。形成されたスプライシング産物の非線形回帰曲線フィッティングにはＰｒｉｓｍ ７（Ｇｒａｐｈｐａｄ）を使用し、対照（ＤＭＳＯ）試料に対して正規化した。
試験した全てのペイロードがＳＦ３ｂ複合体に特異的に結合し、同様の結合プロファイルを実証することを考えれば、全てのペイロードがまた、スプライシングも同程度に調節するはずであると仮定された。全てのペイロードがＡｄ２．２プレｍＲＮＡのスプライシングを有意に調節した（表１３を参照のこと）。ペイロードの存在下では、スプライス産物量の低下が観察された。
２．２ 細胞生存能力
ＨＣＣ１９５４（Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ（ＡＴＣＣ））乳管癌細胞を平底９６ウェル組織培養プレート（Ｃｏｒｎｉｎｇ）内の１０％ウシ胎仔血清（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）を補足した総容積９０μＬの組織培養培地に２０００細胞／ウェルでプレーティングした。細胞を化合物の２００ｎＭ～０．０３ｎΜの３倍段階希釈液で処理した。各濃度をトリプリケートで試験した。処理時点で、ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ－Ｇｌｏ（登録商標）２．０発光細胞生存能力アッセイを製造者の推奨に従い使用して（Ｐｒｏｍｅｇａ；＃Ｇ９２４１）、未処理細胞のプレートを評価した。ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ－Ｇｌｏ（登録商標）２．０試薬を培地に加え、インキュベートし、ＥｎＶｉｓｉｏｎ Ｍｕｌｔｉｌａｂｅｌ Ｒｅａｄｅｒ（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ）でアッセイした。値は０時点（Ｔ０）を表す。１４４時間の化合物処理後（Ｔ１４４）における生存細胞数もまた、ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ－Ｇｌｏ（登録商標）２．０発光細胞生存能力アッセイを用いて決定した。時点０（Ｔ０）、ＤＭＳＯ対照成長（Ｃ）、及び化合物の存在下での試験成長（Ｔ１４４）の発光値を用いて、各々の化合物濃度レベルでの成長率を計算した。成長阻害率は、Ｔ１４４≧Ｔ０の濃度について［（Ｔ１４４－Ｔ０）／（Ｃ－Ｔ０）］×１００、又はＴ１４４＜Ｔ０の濃度について［（Ｔ１４４－Ｔ０）／Ｔ０］×１００として計算した。Ｐｒｉｓｍ ７（Ｇｒａｐｈｐａｄ）並びに非線形回帰分析及びｌｏｇ（ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ）ｖｓ．反応－可変傾斜（４パラメータ）を用いたフィッティングを使用して用量反応曲線プロットを作成した。
ＨＣＣ１９５４（Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ（ＡＴＣＣ））乳管癌細胞を平底９６ウェル組織培養プレート（Ｃｏｒｎｉｎｇ）内の１０％ウシ胎仔血清（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）を補足した総容積９０μＬの組織培養培地に２０００細胞／ウェルでプレーティングした。細胞を化合物の２００ｎＭ～０．０３ｎΜの３倍段階希釈液で処理した。各濃度をトリプリケートで試験した。処理時点で、ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ－Ｇｌｏ（登録商標）２．０発光細胞生存能力アッセイを製造者の推奨に従い使用して（Ｐｒｏｍｅｇａ；＃Ｇ９２４１）、未処理細胞のプレートを評価した。ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ－Ｇｌｏ（登録商標）２．０試薬を培地に加え、インキュベートし、ＥｎＶｉｓｉｏｎ Ｍｕｌｔｉｌａｂｅｌ Ｒｅａｄｅｒ（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ）でアッセイした。値は０時点（Ｔ０）を表す。１４４時間の化合物処理後（Ｔ１４４）における生存細胞数もまた、ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ－Ｇｌｏ（登録商標）２．０発光細胞生存能力アッセイを用いて決定した。時点０（Ｔ０）、ＤＭＳＯ対照成長（Ｃ）、及び化合物の存在下での試験成長（Ｔ１４４）の発光値を用いて、各々の化合物濃度レベルでの成長率を計算した。成長阻害率は、Ｔ１４４≧Ｔ０の濃度について［（Ｔ１４４－Ｔ０）／（Ｃ－Ｔ０）］×１００、又はＴ１４４＜Ｔ０の濃度について［（Ｔ１４４－Ｔ０）／Ｔ０］×１００として計算した。Ｐｒｉｓｍ ７（Ｇｒａｐｈｐａｄ）並びに非線形回帰分析及びｌｏｇ（ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ）ｖｓ．反応－可変傾斜（４パラメータ）を用いたフィッティングを使用して用量反応曲線プロットを作成した。
全てのペイロードについてＨＥＲ２増幅ＨＣＣ１９５４乳癌細胞で細胞生存能力用量反応を決定した。試験したペイロードのほとんどが、低いナノモル濃度範囲のＧＩ５０値（即ち、細胞増殖の５０％の減少を生じさせるための化合物の濃度）を呈した（表１３を参照のこと）。
実施例３
実施例２で評価した例示的ペイロード化合物を例示的抗ＨＥＲ２抗体（トラスツズマブ）に抗体のシステイン残基を介してコンジュゲートした。例示的抗ＨＥＲ２ ＡＤＣの調製及び評価を以下に記載する。
実施例２で評価した例示的ペイロード化合物を例示的抗ＨＥＲ２抗体（トラスツズマブ）に抗体のシステイン残基を介してコンジュゲートした。例示的抗ＨＥＲ２ ＡＤＣの調製及び評価を以下に記載する。
３．１ 抗体
抗ＨＥＲ２ ＡＤＣ（本明細書ではＳＭＬＡとも称される）の調製には、トラスツズマブ抗体（「ＡＢ１８５」）（Ｍｏｌｉｎａ ｅｔ ａｌ．（２００１）Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．６１（１２）：４７４４－９）を使用した。
抗ＨＥＲ２ ＡＤＣ（本明細書ではＳＭＬＡとも称される）の調製には、トラスツズマブ抗体（「ＡＢ１８５」）（Ｍｏｌｉｎａ ｅｔ ａｌ．（２００１）Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．６１（１２）：４７４４－９）を使用した。
３．２ バイオコンジュゲーション
ＰＢＳ緩衝液（ｐＨ７．０）中１０ｍｇ／ｍＬの抗体（トラスツズマブ）を５ｍＭ ＴＣＥＰ（２～４モル当量）（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ；＃７７７２０）と混合して鎖間ジスルフィド結合を破壊した。この反応物を２２℃で３時間、穏やかに混合した。次にプロピレングリコール（１５％ｖ／ｖ）、続いて８モル当量のリンカー－ペイロード（ＤＭＳＯ中６ｍＭストック）を加え、溶液を十分に混合した。この反応物を２２℃のインキュベーター内の回転プレートに置いた。２時間のコンジュゲーション後、反応混合物を精製して、コンジュゲートしなかったペイロードをＤＰＢＳ（ｐＨ７．５）中にＡＫＴＡ ＧＥ Ｍ１５０（ＨｉＴｒａｐ（商標）２６／１０脱塩カラム；流量：３ｍＬ／分）（ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ Ｂｉｏ－Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）によって取り除いた。得られたコンジュゲートをＡｍｉｃｏｎ限外ろ過（３０ｋＤａ、Ｕｌｔｒａ－４）（ＥＭＤ Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）によって濃縮し、０．２２μｍ ＰＶＤＦ使い捨てフィルタ（ＥＭＤ Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）で滅菌ろ過にかけた。最終的な澄明溶液をＵＶ－ＶＩＳによって測定して、抗体濃度（［ｍＡｂ］；モル／Ｌ）及びコンジュゲート化したペイロード濃度（［ＬＤ］；モル／Ｌ）をランベルト・ベールの法則（Ａ＝Ｅ・ｃ・ｌ）及び以下の式により決定した：
Ａ２８０ｎｍ＝ＥｍＡｂ ２８０ｎｍ×［ｍＡｂ］×ｌ＋ＥＬＤ ２８０ｎｍ×［ＬＤ］×ｌ
Ａ２５２ｎｍ＝ＥｍＡｂ ２５２ｎｍ×［ｍＡｂ］×ｌ＋ＥＬＤ ２５２ｎｍ×［ＬＤ］×ｌ
ＥｍＡｂ ２８０ｎｍ：トラスツズマブ＝２１３，３８０ｃｍ－１Ｍ－１
ＥｍＡｂ ２５２ｎｍ：トラスツズマブ＝７９，１１２ｃｍ－１Ｍ－１
ＥＬＤ ２８０ｎｍ＝８００ｃｍ－１Ｍ－１
ＥＬＤ ２５２ｎｍ＝３１，０００ｃｍ－１Ｍ－１
略語：ｃ－モル濃度；ｌ－光路長（Ｎａｎｏｄｒｏｐ：０．１ｃｍ）；Ｅ－モル吸光係数；Ａ－吸光度。
ＰＢＳ緩衝液（ｐＨ７．０）中１０ｍｇ／ｍＬの抗体（トラスツズマブ）を５ｍＭ ＴＣＥＰ（２～４モル当量）（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ；＃７７７２０）と混合して鎖間ジスルフィド結合を破壊した。この反応物を２２℃で３時間、穏やかに混合した。次にプロピレングリコール（１５％ｖ／ｖ）、続いて８モル当量のリンカー－ペイロード（ＤＭＳＯ中６ｍＭストック）を加え、溶液を十分に混合した。この反応物を２２℃のインキュベーター内の回転プレートに置いた。２時間のコンジュゲーション後、反応混合物を精製して、コンジュゲートしなかったペイロードをＤＰＢＳ（ｐＨ７．５）中にＡＫＴＡ ＧＥ Ｍ１５０（ＨｉＴｒａｐ（商標）２６／１０脱塩カラム；流量：３ｍＬ／分）（ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ Ｂｉｏ－Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）によって取り除いた。得られたコンジュゲートをＡｍｉｃｏｎ限外ろ過（３０ｋＤａ、Ｕｌｔｒａ－４）（ＥＭＤ Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）によって濃縮し、０．２２μｍ ＰＶＤＦ使い捨てフィルタ（ＥＭＤ Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）で滅菌ろ過にかけた。最終的な澄明溶液をＵＶ－ＶＩＳによって測定して、抗体濃度（［ｍＡｂ］；モル／Ｌ）及びコンジュゲート化したペイロード濃度（［ＬＤ］；モル／Ｌ）をランベルト・ベールの法則（Ａ＝Ｅ・ｃ・ｌ）及び以下の式により決定した：
Ａ２８０ｎｍ＝ＥｍＡｂ ２８０ｎｍ×［ｍＡｂ］×ｌ＋ＥＬＤ ２８０ｎｍ×［ＬＤ］×ｌ
Ａ２５２ｎｍ＝ＥｍＡｂ ２５２ｎｍ×［ｍＡｂ］×ｌ＋ＥＬＤ ２５２ｎｍ×［ＬＤ］×ｌ
ＥｍＡｂ ２８０ｎｍ：トラスツズマブ＝２１３，３８０ｃｍ－１Ｍ－１
ＥｍＡｂ ２５２ｎｍ：トラスツズマブ＝７９，１１２ｃｍ－１Ｍ－１
ＥＬＤ ２８０ｎｍ＝８００ｃｍ－１Ｍ－１
ＥＬＤ ２５２ｎｍ＝３１，０００ｃｍ－１Ｍ－１
略語：ｃ－モル濃度；ｌ－光路長（Ｎａｎｏｄｒｏｐ：０．１ｃｍ）；Ｅ－モル吸光係数；Ａ－吸光度。
３．３ 生物物理学的特性決定
例示的抗ＨＥＲ２ ＡＤＣに関して、それぞれ、液体クロマトグラフィー質量分析（ＬＣ／ＭＳ）、サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）、及び逆相高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）により、ハーボキシジエンスプライシング調節薬対抗体比（ＨＡＲ）、凝集率、及び非コンジュゲート化ペイロード率を分析した。概して、コンジュゲートは２％未満の遊離薬物を含み、１０％未満の凝集を含んだ。
例示的抗ＨＥＲ２ ＡＤＣに関して、それぞれ、液体クロマトグラフィー質量分析（ＬＣ／ＭＳ）、サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）、及び逆相高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）により、ハーボキシジエンスプライシング調節薬対抗体比（ＨＡＲ）、凝集率、及び非コンジュゲート化ペイロード率を分析した。概して、コンジュゲートは２％未満の遊離薬物を含み、１０％未満の凝集を含んだ。
３．３．１ ＬＣ／ＭＳ分析－ＨＡＲ
Ａｇｉｌｅｎｔ Ｇ６２２４Ａ Ａｃｃｕｒａｔｅ Ｍａｓｓ ＴＯＦ質量分析計に結合したＡｇｉｌｅｎｔ １２９０ ＵＰＬＣシステムを使用してＬＣ／ＭＳ分析を実施した。コンジュゲートをＰＮＧａｓｅ Ｆ（Ｎｅｗ Ｅｎｇｌａｎｄ Ｂｉｏｌａｂｓ；＃Ｐ０７０５Ｌ）によって３７℃で４時間脱グリコシルし、８Ｍ Ｇｄｎ－ＨＣｌ（Ｓｉｇｍａ；＃Ｇ９２８４）で変性させて、最後にＤＴＴ（５ｍＭ終濃度）（Ｐｒｏｍｅｇａ；＃Ｖ３１５１）を用いて軽鎖ドメインと重鎖ドメインとに分離した。調製した試料をＡｇｉｌｅｎｔ ＰＬＲＰ－Ｓカラム（２．１×１５０ｍｍ、８μｍ）に注入し、２５％Ｂ～５０％Ｂのグラジエントによって室温（ＲＴ）で２８分かけて溶出させた。移動相Ａは０．０５％ＴＦＡ含有水であり、移動相Ｂは０．０４％ＴＦＡ含有アセトニトリルであり、流量は１ｍＬ／分であった。デコンボリューション質量スペクトルから、軽鎖（Ｌ０又はＬ１）及び重鎖（Ｈ０、Ｈ１、Ｈ２、及びＨ３）について非コンジュゲート化ピーク及び薬物コンジュゲートピークの強度を加重平均することによりＨＡＲを計算した。式：（ＨＡＲＬＣ×２）＋（ＨＡＲＨＣ×２）＝総ＨＡＲを用いて、インタクトなコンジュゲートの総ＤＡＲを計算した。例示的抗ＨＥＲ２ ＡＤＣのＨＡＲ値を表１２に報告する。
Ａｇｉｌｅｎｔ Ｇ６２２４Ａ Ａｃｃｕｒａｔｅ Ｍａｓｓ ＴＯＦ質量分析計に結合したＡｇｉｌｅｎｔ １２９０ ＵＰＬＣシステムを使用してＬＣ／ＭＳ分析を実施した。コンジュゲートをＰＮＧａｓｅ Ｆ（Ｎｅｗ Ｅｎｇｌａｎｄ Ｂｉｏｌａｂｓ；＃Ｐ０７０５Ｌ）によって３７℃で４時間脱グリコシルし、８Ｍ Ｇｄｎ－ＨＣｌ（Ｓｉｇｍａ；＃Ｇ９２８４）で変性させて、最後にＤＴＴ（５ｍＭ終濃度）（Ｐｒｏｍｅｇａ；＃Ｖ３１５１）を用いて軽鎖ドメインと重鎖ドメインとに分離した。調製した試料をＡｇｉｌｅｎｔ ＰＬＲＰ－Ｓカラム（２．１×１５０ｍｍ、８μｍ）に注入し、２５％Ｂ～５０％Ｂのグラジエントによって室温（ＲＴ）で２８分かけて溶出させた。移動相Ａは０．０５％ＴＦＡ含有水であり、移動相Ｂは０．０４％ＴＦＡ含有アセトニトリルであり、流量は１ｍＬ／分であった。デコンボリューション質量スペクトルから、軽鎖（Ｌ０又はＬ１）及び重鎖（Ｈ０、Ｈ１、Ｈ２、及びＨ３）について非コンジュゲート化ピーク及び薬物コンジュゲートピークの強度を加重平均することによりＨＡＲを計算した。式：（ＨＡＲＬＣ×２）＋（ＨＡＲＨＣ×２）＝総ＨＡＲを用いて、インタクトなコンジュゲートの総ＤＡＲを計算した。例示的抗ＨＥＲ２ ＡＤＣのＨＡＲ値を表１２に報告する。
３．３．２ ＳＥＣ分析－凝集
ＴＯＳＯＮ－Ｇ３０００ＳＷＸＬ（＃００８５４１）カラムを使用して、０．２５ｍＭ塩化カリウム及び１５％（ｖ／ｖ）ＩＰＡを含有する０．２Ｍリン酸カリウム（ｐＨ７）中、０．７５ｍＬ／分の流量でサイズ排除クロマトグラフィーを実施した。高分子量の単量体コンジュゲート成分について、２８０ｎｍにおけるピーク面積吸光度を曲線下面積積分により決定した。例示的抗ＨＥＲ２ ＡＤＣの単量体率を表１２に報告する。
ＴＯＳＯＮ－Ｇ３０００ＳＷＸＬ（＃００８５４１）カラムを使用して、０．２５ｍＭ塩化カリウム及び１５％（ｖ／ｖ）ＩＰＡを含有する０．２Ｍリン酸カリウム（ｐＨ７）中、０．７５ｍＬ／分の流量でサイズ排除クロマトグラフィーを実施した。高分子量の単量体コンジュゲート成分について、２８０ｎｍにおけるピーク面積吸光度を曲線下面積積分により決定した。例示的抗ＨＥＲ２ ＡＤＣの単量体率を表１２に報告する。
３．３．３ ＨＰＬＣ分析－遊離ハーボキシジエンスプライシング調節薬
目的のコンジュゲートを１０容量のアセトニトリルによって氷上で２時間沈殿させて、スピンダウンした。次に残留非コンジュゲート化ペイロードを含有する上清をＡｇｉｌｅｎｔ Ｐｏｒｏｓｈｅｌｌ １２０ ＳＢ－Ｃ１８ １２０Ａカラム（４．６×１００ｍｍ、２．７μｍ）に注入し、４５％Ｂ～７０％Ｂのグラジエントにより室温で１０分間かけて溶出させた。移動相Ａは１００％水であり、移動相Ｂは１００％アセトニトリルであり、流量は０．６ｍＬ／分で、２５２ｎｍで検出した。ＵＶ検出により、非コンジュゲート化リンカー－ペイロードの外部検量線との比較で残留遊離ハーボキシジエンスプライシング調節薬の量を定量化した。例示的抗ＨＥＲ２ ＡＤＣの遊離ハーボキシジエンスプライシング調節薬率を表１２に報告する。
目的のコンジュゲートを１０容量のアセトニトリルによって氷上で２時間沈殿させて、スピンダウンした。次に残留非コンジュゲート化ペイロードを含有する上清をＡｇｉｌｅｎｔ Ｐｏｒｏｓｈｅｌｌ １２０ ＳＢ－Ｃ１８ １２０Ａカラム（４．６×１００ｍｍ、２．７μｍ）に注入し、４５％Ｂ～７０％Ｂのグラジエントにより室温で１０分間かけて溶出させた。移動相Ａは１００％水であり、移動相Ｂは１００％アセトニトリルであり、流量は０．６ｍＬ／分で、２５２ｎｍで検出した。ＵＶ検出により、非コンジュゲート化リンカー－ペイロードの外部検量線との比較で残留遊離ハーボキシジエンスプライシング調節薬の量を定量化した。例示的抗ＨＥＲ２ ＡＤＣの遊離ハーボキシジエンスプライシング調節薬率を表１２に報告する。
３．４ 結合特性決定
３．４．１ 標的陽性細胞へのＦＡＣＳ結合
非コンジュゲート化抗ＨＥＲ２抗体及び抗ＨＥＲ２ ＡＤＣによる標的陽性細胞への結合について、フローサイトメトリーにより間接免疫蛍光法を用いて評価した。ＨＥＲ２を内因的に発現する乳癌細胞株であるＪＩＭＴ１細胞（ＤＳＭＺ）をＶ字底９６ウェルプレート（Ｇｒｅｉｎｅｒ Ｂｉｏ－Ｏｎｅ）にプレーティングし（５×１０４細胞／ウェル）、アッセイ培地（１０％（ｗ／ｖ）胎仔ウシ血清アルブミン（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）を補足したＲＰＭＩ－１６４０）中に様々な濃度に希釈した試験化合物と共に４℃で２時間インキュベートした。次に細胞をＰＢＳ＋２％ＦＢＳ（ＦＡＣＳ緩衝液）で洗浄し、フィコエリトリン標識（ＰＥ）ヤギ抗ヒト免疫グロブリンＧ（ＩｇＧ）抗体（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）によって暗所下４℃で４０分間染色した。細胞を冷ＦＡＣＳ緩衝液で洗浄し、ＦｌｕｒｏＦｉｘ緩衝液（Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ）によって室温で３０分間固定した。固定液をＦＡＣＳ緩衝液で洗い流した。固定した細胞をＰＥの幾何平均蛍光に関してＬＳＲＦｏｒｔｅｓｓａフローサイトメーター（ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ）を使用して分析した。対照としてトラスツズマブ及びＴ－ＤＭ１（トラスツズマブにコンジュゲートしたＤＭ１）を含めた。
３．４．１ 標的陽性細胞へのＦＡＣＳ結合
非コンジュゲート化抗ＨＥＲ２抗体及び抗ＨＥＲ２ ＡＤＣによる標的陽性細胞への結合について、フローサイトメトリーにより間接免疫蛍光法を用いて評価した。ＨＥＲ２を内因的に発現する乳癌細胞株であるＪＩＭＴ１細胞（ＤＳＭＺ）をＶ字底９６ウェルプレート（Ｇｒｅｉｎｅｒ Ｂｉｏ－Ｏｎｅ）にプレーティングし（５×１０４細胞／ウェル）、アッセイ培地（１０％（ｗ／ｖ）胎仔ウシ血清アルブミン（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）を補足したＲＰＭＩ－１６４０）中に様々な濃度に希釈した試験化合物と共に４℃で２時間インキュベートした。次に細胞をＰＢＳ＋２％ＦＢＳ（ＦＡＣＳ緩衝液）で洗浄し、フィコエリトリン標識（ＰＥ）ヤギ抗ヒト免疫グロブリンＧ（ＩｇＧ）抗体（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）によって暗所下４℃で４０分間染色した。細胞を冷ＦＡＣＳ緩衝液で洗浄し、ＦｌｕｒｏＦｉｘ緩衝液（Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ）によって室温で３０分間固定した。固定液をＦＡＣＳ緩衝液で洗い流した。固定した細胞をＰＥの幾何平均蛍光に関してＬＳＲＦｏｒｔｅｓｓａフローサイトメーター（ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ）を使用して分析した。対照としてトラスツズマブ及びＴ－ＤＭ１（トラスツズマブにコンジュゲートしたＤＭ１）を含めた。
３．５ インビトロ分析
３．５．１ 細胞生存能力
幾つかのＨＥＲ２増幅細胞株で抗ＨＥＲ２ ＡＤＣが細胞成長を阻害するその能力に関して試験した。ＨＣＣ１９５４（ＡＴＣＣ）、２０００細胞／ウェル）細胞株を使用した。細胞生存能力分析はセクション２．３に記載のとおり実施した。
３．５．１ 細胞生存能力
幾つかのＨＥＲ２増幅細胞株で抗ＨＥＲ２ ＡＤＣが細胞成長を阻害するその能力に関して試験した。ＨＣＣ１９５４（ＡＴＣＣ）、２０００細胞／ウェル）細胞株を使用した。細胞生存能力分析はセクション２．３に記載のとおり実施した。
意外にも、結合プロファイルが同様で（表１３を参照）、且つペイロードが同様の生化学的特性を有するにも関わらず、全てのＡＤＣがＨＣＣ１９５４細胞において活性というわけではなかった。例えば、ＡＤＬ２リンカーを含むＡＤＣは細胞成長の阻害能力が低かった（例えば、ＡＤＬ１－Ｈ１及びＡＤＬ２－Ｈ１の活性を比較されたい）。
３．５．２ ＡＤＣペイロードのＣａｃｏ－２透過性
Ｃａｃｏ－２細胞をトランズウェル（ｔｒａｎｓｗｅｌｌ）２４ウェルプレートにおいて３７℃、９５％湿度、５％ＣＯ２で２１日間培養した。細胞単層の完全性をＴＥＥＲ（経上皮電気抵抗）及びルシファーイエローによって確認した。ペイロードは細胞単層の両側にデュプリケートで１０μＭで別々にスパイクした。処理直後（ｔ＝０）及び２時間のインキュベーション後に両方のチャンバからアリコートを採取することにより、頂端側から側底側への（Ａ－Ｂ）方向及び側底側から頂端側への（Ｂ－Ａ）方向の透過速度を決定した。試料は、内部標準を含有する有機溶媒でタンパク質沈殿させて、ＬＣ－ＭＳ／ＭＳ（ＳＣＩＥＸ；ＡＰＩ ５５００）により分析した。両方向におけるペイロード／内部標準の経時的面積比反応を用いて透過性（ｃｍ／秒）値を求めた。Ｂ－Ａ／Ａ－Ｂの除算によって外向きフラックス比を計算した。低透過性及び高透過性並びに外向きフラックスについての対照化合物は予想どおり挙動した。透過性値を表１２に報告する。
Ｃａｃｏ－２細胞をトランズウェル（ｔｒａｎｓｗｅｌｌ）２４ウェルプレートにおいて３７℃、９５％湿度、５％ＣＯ２で２１日間培養した。細胞単層の完全性をＴＥＥＲ（経上皮電気抵抗）及びルシファーイエローによって確認した。ペイロードは細胞単層の両側にデュプリケートで１０μＭで別々にスパイクした。処理直後（ｔ＝０）及び２時間のインキュベーション後に両方のチャンバからアリコートを採取することにより、頂端側から側底側への（Ａ－Ｂ）方向及び側底側から頂端側への（Ｂ－Ａ）方向の透過速度を決定した。試料は、内部標準を含有する有機溶媒でタンパク質沈殿させて、ＬＣ－ＭＳ／ＭＳ（ＳＣＩＥＸ；ＡＰＩ ５５００）により分析した。両方向におけるペイロード／内部標準の経時的面積比反応を用いて透過性（ｃｍ／秒）値を求めた。Ｂ－Ａ／Ａ－Ｂの除算によって外向きフラックス比を計算した。低透過性及び高透過性並びに外向きフラックスについての対照化合物は予想どおり挙動した。透過性値を表１２に報告する。
３．５．３ ＡＤＣペイロードの化学安定性
ハーボキシジエンスプライシング調節薬をＭｃｉｌｖａｎｅ（クエン酸塩－リン酸塩）緩衝液、ｐＨ５．５（Ｂｏｓｔｏｎ Ｂｉｏｐｒｏｄｕｃｔｓ；＃ＢＢ－２４６６）中において２０μＭの終濃度（ストック溶液からの０．５％未満のＤＭＳＯ）でインキュベートした。ハーボキシジエンスプライシング調節薬溶液及び内部標準を９６ウェルプレートにピペッティングし、ＵＰＬＣ（Ｗａｔｅｒｓ Ａｑｕｉｔｙ Ｈクラス）にかけ、初期クロマトグラフィーシグナル（ｔ＝０）に関して分析した。カラムはＷａｔｅｒｓ ＵＰＬＣ ＨＳＳ Ｔ３ １．８μｍ ２．１×５０ｍｍカラム（＃１８６００３５３８）であった。移動相Ａ９５％～１０％のグラジエントを１分かけて用い、ここでＡは水中０．１％ギ酸であり、移動相Ｂはアセトニトリル中０．１％ギ酸であった（流量０．９ｍＬ／分）。ハーボキシジエンスプライシング調節薬溶液の残りは３７℃でプレート振盪機（Ｅｐｐｅｎｄｏｒｆ ＴｈｅｒｍｏＭｉｘｅｒ）上に保持した。３７℃でのインキュベーション後２４、７２、及び９６時間の時点でＵＰＬＣによる試料分析を繰り返した。ハーボキシジエンスプライシング調節薬及び内部標準の面積比反応は３時点：０時点、１日目、及び３日目又は４日目のいずれかで決定した。０時点を１００に設定した。後の時点の面積比反応を０時点と比較した。残存率は以下のとおり計算した：（面積比Ｘ日目／面積比０時点）×１００＝残存率％。Ｅｘｃｅｌで％残存率の対数及び時点を比較して線の傾きを計算した。Ｅｘｃｅｌでｌｎ（２）／傾きにより半減期を計算した。表１２に報告する。
ハーボキシジエンスプライシング調節薬をＭｃｉｌｖａｎｅ（クエン酸塩－リン酸塩）緩衝液、ｐＨ５．５（Ｂｏｓｔｏｎ Ｂｉｏｐｒｏｄｕｃｔｓ；＃ＢＢ－２４６６）中において２０μＭの終濃度（ストック溶液からの０．５％未満のＤＭＳＯ）でインキュベートした。ハーボキシジエンスプライシング調節薬溶液及び内部標準を９６ウェルプレートにピペッティングし、ＵＰＬＣ（Ｗａｔｅｒｓ Ａｑｕｉｔｙ Ｈクラス）にかけ、初期クロマトグラフィーシグナル（ｔ＝０）に関して分析した。カラムはＷａｔｅｒｓ ＵＰＬＣ ＨＳＳ Ｔ３ １．８μｍ ２．１×５０ｍｍカラム（＃１８６００３５３８）であった。移動相Ａ９５％～１０％のグラジエントを１分かけて用い、ここでＡは水中０．１％ギ酸であり、移動相Ｂはアセトニトリル中０．１％ギ酸であった（流量０．９ｍＬ／分）。ハーボキシジエンスプライシング調節薬溶液の残りは３７℃でプレート振盪機（Ｅｐｐｅｎｄｏｒｆ ＴｈｅｒｍｏＭｉｘｅｒ）上に保持した。３７℃でのインキュベーション後２４、７２、及び９６時間の時点でＵＰＬＣによる試料分析を繰り返した。ハーボキシジエンスプライシング調節薬及び内部標準の面積比反応は３時点：０時点、１日目、及び３日目又は４日目のいずれかで決定した。０時点を１００に設定した。後の時点の面積比反応を０時点と比較した。残存率は以下のとおり計算した：（面積比Ｘ日目／面積比０時点）×１００＝残存率％。Ｅｘｃｅｌで％残存率の対数及び時点を比較して線の傾きを計算した。Ｅｘｃｅｌでｌｎ（２）／傾きにより半減期を計算した。表１２に報告する。
実施例４
以下に記載するとおり例示的ペイロード化合物を評価した。
以下に記載するとおり例示的ペイロード化合物を評価した。
４．１ インビトロ分析
４．１．１ 細胞生存能力
例示的ペイロード化合物についてＨＥＲ２増幅ＨＣＣ１９５４乳癌細胞及びＮＣＩ－Ｎ８７胃癌細胞で細胞生存能力用量反応を決定した。
４．１．１ 細胞生存能力
例示的ペイロード化合物についてＨＥＲ２増幅ＨＣＣ１９５４乳癌細胞及びＮＣＩ－Ｎ８７胃癌細胞で細胞生存能力用量反応を決定した。
ＨＣＣ１９５４（Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ（ＡＴＣＣ））乳管癌細胞又はＮＣＩ－Ｎ８７（ＡＴＣＣ）胃癌細胞を平底３８４ウェル組織培養プレート（Ｃｏｒｎｉｎｇ）内の１０％ウシ胎仔血清（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）を補足した総容積３０μＬの組織培養培地に５００細胞／ウェルでプレーティングした。細胞を化合物の１００００ｎＭ～０．０１ｎΜの４倍段階希釈液で処理した。各濃度をトリプリケートで試験した。処理時点で、ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ－Ｇｌｏ（登録商標）２．０発光細胞生存能力アッセイを製造者の推奨に従い使用して（Ｐｒｏｍｅｇａ；＃Ｇ９２４１）、未処理細胞のプレートを評価した。ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ－Ｇｌｏ（登録商標）２．０試薬を培地に加え、インキュベートし、ＥｎＶｉｓｉｏｎ Ｍｕｌｔｉｌａｂｅｌ Ｒｅａｄｅｒ（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ）でアッセイした。値は０時点（Ｔ０）を表す。７２時間（Ｔ７２）又は１４４時間（Ｔ１４４）の化合物処理後における生存細胞数もまた、ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ－Ｇｌｏ（登録商標）２．０発光細胞生存能力アッセイを用いて決定した。時点０（Ｔ０）、ＤＭＳＯ対照成長（Ｃ）、及び化合物の存在下での試験成長（Ｔ７２又はＴ１４４）の発光値を用いて、各々の化合物濃度レベルでの成長率を計算した。成長阻害率は、（例えば）Ｔ１４４≧Ｔ０の濃度について［（Ｔ１４４－Ｔ０）／（Ｃ－Ｔ０）］×１００、又はＴ１４４＜Ｔ０の濃度について［（Ｔ１４４－Ｔ０）／Ｔ０］×１００として計算した。Ｐｒｉｓｍ ８（Ｇｒａｐｈｐａｄ）並びに非線形回帰分析及びｌｏｇ（ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ）ｖｓ．反応－可変傾斜（４パラメータ）を用いたフィッティングを使用して用量反応曲線プロットを作成した。
図１Ａ～図１Ｄは、ＨＥＲ２増幅乳癌細胞（ＨＣＣ１９５４）及び胃癌細胞（ＮＣＩ－Ｎ８７）における例示的ペイロード化合物の生存率用量反応を示す。図１Ａは、７２時間インキュベートした後のＨＣＣ１９５４細胞の生存率用量反応を示す。図１Ｂは、７２時間インキュベートした後のＮＣＩ－Ｎ８７細胞の生存率用量反応を示す。図１Ｃは、１４４時間インキュベートした後のＨＣＣ１９５４細胞の生存率用量反応を示す。図１Ｄは、１４４時間インキュベートした後のＮＣＩ－Ｎ８７細胞の生存率用量反応を示す。表１４は、試験した全ての化合物のＧＩ５０、ＬＤ５０、及びＲｍｉｎ値を示す。
４．１．２ インセルスプライシングＰＤアッセイ
漸増濃度の例示的ペイロード化合物で処理したＨＣＣ１９５４及びＮＣＩ－Ｎ８７細胞においてＳＬＣ２５Ａ１９成熟転写物のスプライシングもまた調べた。
漸増濃度の例示的ペイロード化合物で処理したＨＣＣ１９５４及びＮＣＩ－Ｎ８７細胞においてＳＬＣ２５Ａ１９成熟転写物のスプライシングもまた調べた。
ＨＣＣ１９５４又はＮＣＩ－Ｎ８７細胞（ＡＴＣＣ）を２０μＬ／ウェルの１０００細胞／ウェルでＲＰＭＩ＋１０％ＦＢＳ培地（ＡＴＣＣ）にプレーティングした。細胞を４倍希釈用量反応で化合物によって処理した。６時間後、細胞をＰＢＳ洗浄し、２５μＬ／ｍＬのＲＮＡｓｉｎ（Ｐｒｏｍｅｇａ）を含有する３０μＬのＣＬ緩衝液（ＩｇｅＰａｌ ＣＡ－６３０、５Ｍ ＮａＣｌ、１ＭトリスＨＣｌ 水中１Ｍ ｐＨ７．４）で溶解させて、揺動機上において室温で２０分間インキュベートした。得られた混合物（１μＬ）を使用して、製造者の推奨に従い以下のＴａｑｍａｎプライマー：ＳＬＣ２５Ａ１９（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、Ｈｓ００２２２２６５＿ｍ１）；ＲＰＬＰＯ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、Ｈｓ９９９９９９０２＿ｍ１）によるＴａｑｍａｎ Ｆａｓｔ Ｖｉｒｕｓ １－Ｓｔｅｐマスターミックス（Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）逆転写ＰＣＲ反応でスプライシング調節を判定した。
図２Ａ及び図２Ｂは、ＨＥＲ２増幅乳癌細胞（ＨＣＣ１９５４）（図２Ａ）及び胃癌細胞（ＮＣＩ－Ｎ８７）（図２Ｂ）におけるスプライシングアッセイの結果を示す。表１４は、試験した全ての化合物のＩＣ５０値を示す。
Claims (751)
- 式（Ｉ）：
Ａｂ－（Ｌ－Ｈ）ｐ （Ｉ）
［式中：
Ａｂは、新生物細胞を標的化する抗体又は抗原結合断片であり；
Ｈは、ハーボキシジエンスプライシング調節薬であり；
Ｌは、ＡｂをＨに共有結合的に結び付けるリンカーであり；及び
ｐは、１～１５の整数である］
の抗体－薬物コンジュゲート。 - 前記ハーボキシジエンスプライシング調節薬が、Ｌに任意の原子を介して共有結合的に結び付いている式（Ｉ）の化合物：
又はその薬学的に許容可能な塩［式中：
Ｙは、Ｏ、Ｓ、ＮＲ６、及びＣＲ６Ｒ７から選択され；
Ｒ１、Ｒ２、及びＲ３は、各々独立に、水素、ヒドロキシル、－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－Ｏ－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、及びＣ１～Ｃ６アルキル基から選択され；
Ｒ４は、水素、Ｃ１～Ｃ６アルキル基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ３～Ｃ８ヘテロシクリル）基、及び－Ｃ（＝Ｏ）－ＮＲ６Ｒ７から選択され；
Ｒ５は、水素、ヒドロキシル、－ＣＨ２－ＯＨ、－ＣＯ２Ｈ、－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－ＮＲ６Ｒ７、－ＮＲ６－Ｃ（＝Ｏ）－Ｒ８、－Ｏ－Ｃ（＝Ｏ）－ＮＲ６Ｒ７、－ＮＲ６－Ｃ（＝Ｏ）－Ｒ８、及び－ＮＲ６－Ｃ（＝Ｏ）－ＮＲ６Ｒ７から選択され；
Ｒ６及びＲ７は、各々独立に、水素、－Ｒ８、－Ｃ（＝Ｏ）－Ｒ８、及び－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－Ｒ８から選択され；及び
Ｒ８は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基、Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル基、及びＣ３～Ｃ８ヘテロシクリル基から選択され、
ここでＲ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、及びＲ８は、各々独立に、ハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１～Ｃ６アルキル基、－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－ＣＯ２Ｈ、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ３～Ｃ８ヘテロシクリル）基、－ＮＲ６Ｒ７、Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル基、Ｃ１～Ｃ６アルキルヒドロキシ基、Ｃ１～Ｃ６アルキルアルコキシ基、ベンジル基、及びＣ３～Ｃ８ヘテロシクリル基（この各々は、ハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１～Ｃ３アルキル基、Ｃ１～Ｃ３アルコキシ基、Ｃ１～Ｃ３ハロアルキル基、－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）（Ｃ１～Ｃ３アルキル）、及び－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ３アルキル）から選択される０又は１個の基で独立に置換されていてもよい）から独立に選択される０～３個の基で置換され、及び
ここでＬに共有結合的に結び付いている前記原子の原子価を超えることはない］を含む、請求項１に記載の抗体－薬物コンジュゲート。 - 前記ハーボキシジエンスプライシング調節薬が、Ｌに任意の原子を介して共有結合的に結び付いている式（Ｉａ）の化合物：
又はその薬学的に許容可能な塩［式中：
Ｒ９は、Ｃ３～Ｃ８ヘテロシクリル基から選択され；
Ｒ１０は、Ｈ及びＣ１～Ｃ６アルキル基から選択され、
ここでＲ９及びＲ１０は、各々独立に、ハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１～Ｃ３アルキル基、Ｃ１～Ｃ３アルコキシ基、－ＮＨ２、－ＮＨ－（Ｃ１～Ｃ３アルキル）、及び－Ｎ－（Ｃ１～Ｃ３アルキル）２から独立に選択される０～３個の基で置換され、及び
ここでＬに共有結合的に結び付いている前記原子の原子価を超えることはない］を含む、請求項１又は２に記載の抗体－薬物コンジュゲート。 - 前記ハーボキシジエンスプライシング調節薬が、Ｌに任意の原子を介して共有結合的に結び付いている式（Ｉｂ）の化合物：
又はその薬学的に許容可能な塩［式中：
Ｒ１１は、
（式中、＊は、Ｒ１１が前記化合物の残りの部分に結合する点を表す）から選択され；
Ｒ１２及びＲ１３は、各々独立に、Ｈ及びメチルから選択され；及び
ここでＬに共有結合的に結び付いている前記原子の原子価を超えることはない］を含む、請求項１～３のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート。 - 前記ハーボキシジエンスプライシング調節薬が任意の原子を介してＬに共有結合的に結び付いており、
前記ハーボキシジエンスプライシング調節薬が、Ｈ１、Ｈ２、Ｈ３、及びＨ１２から選択され；及び
Ｌに共有結合的に結び付いている前記原子の原子価を超えることはない、請求項１～４のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート。 - Ｌが前記ハーボキシジエンスプライシング調節薬に共有結合的に結び付いており（「Ｌ－Ｈ」）、及びＬ－Ｈが、以下の構造：
及びその薬学的に許容可能な塩から選択される構造を有する、請求項１又は２に記載の抗体－薬物コンジュゲート。 - 前記ハーボキシジエンスプライシング調節薬が、任意の原子を介してＬに共有結合的に結び付いている式（ＩＩ）：
又はその薬学的に許容可能な塩［式中：
Ｘは、ヒドロキシル又はＮＲ６Ｒ７であり；
Ｒ６及びＲ７は、各々独立に、水素、－Ｒ８、－Ｃ（＝Ｏ）－Ｒ８、－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－Ｒ８、－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）－Ｏ－Ｃ（＝Ｏ）－Ｒ８、及び－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）－Ｒ８から選択され；及び
Ｒ８は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基、Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル基、及びＣ３～Ｃ８ヘテロシクリル基から選択され、
ここでＲ６、Ｒ７、及びＲ８は、各々独立に、ハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１～Ｃ６アルキル基、－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－ＣＯ２Ｈ、－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ３～Ｃ８ヘテロシクリル）基、－ＮＲ６Ｒ７、Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル基、Ｃ１～Ｃ６アルキルヒドロキシ基、Ｃ１～Ｃ６アルキルアルコキシ基、ベンジル基、及びＣ３～Ｃ８ヘテロシクリル基（この各々は、ハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１～Ｃ３アルキル基、Ｃ１～Ｃ３アルコキシ基、Ｃ１～Ｃ３ハロアルキル基、－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）（Ｃ１～Ｃ３アルキル）、及び－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ３アルキル）から選択される０又は１個の基で独立に置換されていてもよい）から独立に選択される０～３個の基で置換され、及び
ここでＬに共有結合的に結び付いている前記原子の原子価を超えることはない］のスプライシング調節薬である、請求項１に記載の抗体－薬物コンジュゲート。 - 前記ハーボキシジエンスプライシング調節薬が、任意の原子を介してＬに共有結合的に結び付いている式（ＩＩａ）：
又はその薬学的に許容可能な塩［式中：
Ｚは、ＮＲ９及びＯから選択され；
Ｒ９は、水素及びＣ１～Ｃ６アルキル基から選択され；
Ｒ１０及びＲ１１は、各々独立に、水素、ハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１～Ｃ６アルキル基、－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－ＣＯ２Ｈ、－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ３～Ｃ８ヘテロシクリル）基、Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル基、Ｃ１～Ｃ６アルキルヒドロキシ基、Ｃ１～Ｃ６アルキルアルコキシ基、ベンジル基、及びＣ３～Ｃ８ヘテロシクリル基から選択され；
Ｒ１２は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基、Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル基、Ｃ３～Ｃ８ヘテロシクリル基から選択され、
ここでＲ９、Ｒ１０、Ｒ１１、及びＲ１２は、各々独立に、ハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１～Ｃ３アルキル基、Ｃ１～Ｃ３アルコキシ基、及びＣ１～Ｃ３ハロアルキル基から選択される０又は１個の基で置換され；
ｔは、１、２、３、４、５、及び６から選択される整数であり；及び
ここでＬに共有結合的に結び付いている前記原子の原子価を超えることはない］のスプライシング調節薬である、請求項１又は７に記載の抗体－薬物コンジュゲート。 - 前記ハーボキシジエンスプライシング調節薬が、任意の原子を介してＬに共有結合的に結び付いている式（ＩＩｂ）：
又はその薬学的に許容可能な塩［式中：
Ｒ１３は、
（式中、＊は、Ｒ１３が前記化合物の残りの部分に結合する点を表す）から選択され；
Ｒ１４及びＲ１５は、各々独立に、水素及びメチルから選択され；及び
ここでＬに共有結合的に結び付いている前記原子の原子価を超えることはない］のスプライシング調節薬である、請求項１、７、又は８に記載の抗体－薬物コンジュゲート。 - 前記ハーボキシジエンスプライシング調節薬が任意の原子を介してＬに共有結合的に結び付いており；
前記ハーボキシジエンスプライシング調節薬が、Ｈ４、Ｈ１３、Ｈ１４、Ｈ１５、Ｈ１６、Ｈ１７、Ｈ１８、Ｈ１９、Ｈ２０、Ｈ２１、Ｈ２３、及びＨ２４から選択され；及び
Ｌに共有結合的に結び付いている前記原子の原子価を超えることはない、請求項１、７、８、又は９に記載の抗体－薬物コンジュゲート。 - Ｌが前記ハーボキシジエンスプライシング調節薬に共有結合的に結び付いており（「Ｌ－Ｈ」）、及びＬ－Ｈが、以下の構造：
及びその薬学的に許容可能な塩から選択される構造を有する、請求項１又は７に記載の抗体－薬物コンジュゲート。 - 前記ハーボキシジエンスプライシング調節薬が、任意の原子を介してＬに共有結合的に結び付いている式（ＩＩＩ）：
又はその薬学的に許容可能な塩［式中：
Ｒ１、Ｒ２、及びＲ３は、各々独立に、水素、ヒドロキシル、－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－Ｏ－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、及びＣ１～Ｃ６アルキル基から選択され；
Ｒ６及びＲ７は、各々独立に、水素、－Ｒ８、－Ｃ（＝Ｏ）－Ｒ８、及び－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－Ｒ８から選択され；
Ｒ８は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基、Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル基、及びＣ３～Ｃ８ヘテロシクリル基から選択され；及び
Ｒ９は、Ｈ、
から選択され；
ここでＲ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ６、Ｒ７、及びＲ８は、各々独立に、ハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１～Ｃ６アルキル基、－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－ＣＯ２Ｈ、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ３～Ｃ８ヘテロシクリル）基、－ＮＲ６Ｒ７、Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル基、Ｃ１～Ｃ６アルキルヒドロキシ基、Ｃ１～Ｃ６アルキルアルコキシ基、ベンジル基、及びＣ３～Ｃ８ヘテロシクリル基（この各々は、ハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１～Ｃ３アルキル基、Ｃ１～Ｃ３アルコキシ基、Ｃ１～Ｃ３ハロアルキル基、－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）（Ｃ１～Ｃ３アルキル）、及び－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ３アルキル）から選択される０又は１個の基で独立に置換されていてもよい）から独立に選択される０～３個の基で置換され、
ここでＬに共有結合的に結び付いている前記原子の原子価を超えることはなく；及び
式中、＊は、Ｒ９が前記化合物の残りの部分に結合する点を表す］のスプライシング調節薬である、請求項１に記載の抗体－薬物コンジュゲート。 - 前記ハーボキシジエンスプライシング調節薬が任意の原子を介してＬに共有結合的に結び付いており；
前記ハーボキシジエンスプライシング調節薬が、Ｈ５、Ｈ６、Ｈ７、Ｈ８、Ｈ９、Ｈ１０、Ｈ１１、Ｈ２２、及びＨ２５から選択され；及び
Ｌに共有結合的に結び付いている前記原子の原子価を超えることはない、請求項１又は１２に記載の抗体－薬物コンジュゲート。 - 前記リンカーが前記ハーボキシジエンスプライシング調節薬に共有結合的に結び付いており（「Ｌ－Ｈ」）、及びＬ－Ｈが、以下の構造：
及びその薬学的に許容可能な塩から選択される構造を有する、請求項１又は１２に記載の抗体－薬物コンジュゲート。 - 前記ハーボキシジエンスプライシング調節薬が任意の原子を介してＬに共有結合的に結び付いており；
前記ハーボキシジエンスプライシング調節薬が、Ｈ１、Ｈ２、Ｈ３、Ｈ４、Ｈ５、Ｈ６、Ｈ７、Ｈ８、Ｈ９、Ｈ１０、Ｈ１１、Ｈ１２、Ｈ１３、Ｈ１４、Ｈ１５、Ｈ１６、Ｈ１７、Ｈ１８、Ｈ１９、Ｈ２０、Ｈ２１、Ｈ２２、Ｈ２３、Ｈ２４、及びＨ２５から選択され；及び
Ｌに共有結合的に結び付いている前記原子の原子価を超えることはない、請求項１に記載の抗体－薬物コンジュゲート。 - 前記ハーボキシジエンスプライシング調節薬がＨ１である、請求項１５に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記ハーボキシジエンスプライシング調節薬がＨ２である、請求項１５に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記ハーボキシジエンスプライシング調節薬がＨ３である、請求項１５に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記ハーボキシジエンスプライシング調節薬がＨ４である、請求項１５に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記ハーボキシジエンスプライシング調節薬がＨ５である、請求項１５に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記ハーボキシジエンスプライシング調節薬がＨ６である、請求項１５に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記ハーボキシジエンスプライシング調節薬がＨ７である、請求項１５に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記ハーボキシジエンスプライシング調節薬がＨ８である、請求項１５に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記ハーボキシジエンスプライシング調節薬がＨ９である、請求項１５に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記ハーボキシジエンスプライシング調節薬がＨ１０である、請求項１５に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記ハーボキシジエンスプライシング調節薬がＨ１１である、請求項１５に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記ハーボキシジエンスプライシング調節薬がＨ１２である、請求項１５に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記ハーボキシジエンスプライシング調節薬がＨ１３である、請求項１５に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記ハーボキシジエンスプライシング調節薬がＨ１４である、請求項１５に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記ハーボキシジエンスプライシング調節薬がＨ１５である、請求項１５に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記ハーボキシジエンスプライシング調節薬がＨ１６である、請求項１５に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記ハーボキシジエンスプライシング調節薬がＨ１７である、請求項１５に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記ハーボキシジエンスプライシング調節薬がＨ１８である、請求項１５に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記ハーボキシジエンスプライシング調節薬がＨ１９である、請求項１５に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記ハーボキシジエンスプライシング調節薬がＨ２０である、請求項１５に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記ハーボキシジエンスプライシング調節薬がＨ２１である、請求項１５に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記ハーボキシジエンスプライシング調節薬がＨ２２である、請求項１５に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記ハーボキシジエンスプライシング調節薬がＨ２３である、請求項１５に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記ハーボキシジエンスプライシング調節薬がＨ２４である、請求項１５に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記リンカーが切断可能リンカーである、請求項１～３９のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記リンカーが切断可能なペプチド部分を含む、請求項４０に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記切断可能なペプチド部分が酵素によって切断可能である、請求項４１に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記切断可能なペプチド部分又はリンカーがアミノ酸単位を含む、請求項４０～４２のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記アミノ酸単位がバリン－シトルリン（Ｖａｌ－Ｃｉｔ）を含む、請求項４３に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記アミノ酸単位がバリン－アラニン（Ｖａｌ－Ａｌａ）を含む、請求項４３に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記アミノ酸単位がグルタミン－バリン－シトルリン（Ｇｌｕ－Ｖａｌ－Ｃｉｔ）を含む、請求項４３に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記アミノ酸単位がアラニン－アラニン－アスパラギン（Ａｌａ－Ａｌａ－Ａｓｎ）を含む、請求項４３に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記リンカーが切断可能なグルクロニド部分を含む、請求項４０に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記切断可能なグルクロニド部分が酵素によって切断可能である、請求項４８に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記切断可能なグルクロニド部分がグルクロニダーゼによって切断可能である、請求項４８又は４９に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記切断可能なグルクロニド部分がβ－グルクロニダーゼによって切断可能である、請求項４８～５０のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記リンカーが少なくとも１つのスペーサー単位を含む、請求項１～５１のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記スペーサー単位又はリンカーがポリエチレングリコール（ＰＥＧ）部分を含む、請求項５２に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記ＰＥＧ部分が－（ＰＥＧ）ｍ－を含み、ｍが１～１０の整数である、請求項５３に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- ｍが２である、請求項５４に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記スペーサー単位又はリンカーがアルキル部分を含む、請求項５２に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記アルキル部分が－（ＣＨ２）ｎ－を含み、ｎが１～１０の整数である、請求項５６に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- ｎが２である、請求項５７に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- ｎが５である、請求項５７に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- ｎが６である、請求項５７に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記スペーサー単位がマレイミド（Ｍａｌ）部分を介して前記抗体又は抗原結合断片に結び付いている（「Ｍａｌ－スペーサー単位」）、請求項５２～６０のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記Ｍａｌ－スペーサー単位が前記抗体又は抗原結合断片上のシステイン残基との反応性を有する、請求項６１に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記Ｍａｌ－スペーサー単位が前記抗体又は抗原結合断片上のシステイン残基を介して前記抗体又は抗原結合断片につなぎ合わされる、請求項６１又は６２に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記リンカーが前記Ｍａｌ－スペーサー単位と切断可能なペプチド部分とを含む、請求項６１～６３のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記切断可能なペプチド部分がアミノ酸単位を含む、請求項６４に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記切断可能なペプチド部分又はアミノ酸単位がＶａｌ－Ｃｉｔを含む、請求項６４又は６５に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記切断可能なペプチド部分又はアミノ酸単位がＶａｌ－Ａｌａを含む、請求項６４又は６５に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記切断可能なペプチド部分又はアミノ酸単位がＧｌｕ－Ｖａｌ－Ｃｉｔを含む、請求項６４又は６５に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記切断可能なペプチド部分又はアミノ酸単位がＡｌａ－Ａｌａ－Ａｓｎを含む、請求項６４又は６５に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記Ｍａｌ－スペーサー単位がアルキル部分を含む、請求項６１～６９のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記Ｍａｌ－スペーサー単位がＰＥＧ部分を含む、請求項６１～６９のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記Ｍａｌ－スペーサー単位がマレイミドカプロイル（ＭＣ）を含む、請求項６１～７１のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記Ｍａｌ－スペーサー単位が前記抗体又は抗原結合断片を前記リンカーの前記切断可能部分に結び付ける、請求項６１～７２のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記リンカーの前記切断可能部分が切断可能なペプチド部分を含む、請求項７３に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記切断可能なペプチド部分がアミノ酸単位を含む、請求項７４に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記切断可能なペプチド部分又はアミノ酸単位が、Ｖａｌ－Ｃｉｔ、Ｖａｌ－Ａｌａ、Ｇｌｕ－Ｖａｌ－Ｃｉｔ、又はＡｌａ－Ａｌａ－Ａｓｎを含む、請求項７４又は７５に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記リンカーがＭＣ－Ｖａｌ－Ｃｉｔを含む、請求項７３～７６のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記リンカーがＭＣ－Ｖａｌ－Ａｌａを含む、請求項７３～７６のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記リンカーがＭＣ－Ｇｌｕ－Ｖａｌ－Ｃｉｔを含む、請求項７３～７６のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記リンカーがＭＣ－Ａｌａ－Ａｌａ－Ａｓｎを含む、請求項７３～７６のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記Ｍａｌ－スペーサー単位がアルキル部分を含む、請求項７３～８０のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記Ｍａｌ－スペーサー単位がＰＥＧ部分を含む、請求項７３～８０のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記Ｍａｌ－スペーサー単位がマレイミドカプロイル（ＭＣ）を含む、請求項７３～８２のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記リンカーの前記切断可能部分が前記スプライシング調節薬に直接つなぎ合わされるか、又はスペーサー単位が前記リンカーの前記切断可能部分を前記スプライシング調節薬に結び付ける、請求項５２～８３のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記コンジュゲートの切断により、前記抗体又は抗原結合断片及びリンカーから前記スプライシング調節薬が放出される、請求項８４に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記リンカーの前記切断可能部分を前記スプライシング調節薬に結び付ける前記スペーサー単位が自己犠牲性である、請求項８４又は８５に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記リンカーの前記切断可能部分を前記スプライシング調節薬に結び付ける前記スペーサー単位がｐ－アミノベンジルオキシカルボニル（ｐＡＢＣ）を含む、請求項８４～８６のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記ｐＡＢＣが前記リンカーの前記切断可能部分を前記スプライシング調節薬に結び付ける、請求項８７に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記リンカーの前記切断可能部分が切断可能なペプチド部分を含む、請求項８７又は８８に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記切断可能なペプチド部分がアミノ酸単位を含む、請求項８９に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記切断可能なペプチド部分又はアミノ酸単位が、Ｖａｌ－Ｃｉｔ、Ｖａｌ－Ａｌａ、Ｇｌｕ－Ｖａｌ－Ｃｉｔ、又はＡｌａ－Ａｌａ－Ａｓｎを含む、請求項８９又は９０に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記リンカーがＶａｌ－Ｃｉｔ－ｐＡＢＣを含む、請求項８７～９１のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記リンカーがＶａｌ－Ａｌａ－ｐＡＢＣを含む、請求項８７～９１のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記リンカーがＧｌｕ－Ｖａｌ－Ｃｉｔ－ｐＡＢＣを含む、請求項８７～９１のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記リンカーがＡｌａ－Ａｌａ－Ａｓｎ－ｐＡＢＣを含む、請求項８７～９１のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記リンカーの前記切断可能部分を前記スプライシング調節薬に結び付ける前記スペーサー単位がｐ－アミノベンジル（ｐＡＢ）を含む、請求項８４～８６のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記ｐＡＢが前記リンカーの前記切断可能部分を前記スプライシング調節薬に結び付ける、請求項９６に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記リンカーの前記切断可能部分が切断可能なペプチド部分を含む、請求項９６又は９７に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記切断可能なペプチド部分がアミノ酸単位を含む、請求項９８に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記切断可能なペプチド部分又はアミノ酸単位が、Ｖａｌ－Ｃｉｔ、Ｖａｌ－Ａｌａ、Ｇｌｕ－Ｖａｌ－Ｃｉｔ、又はＡｌａ－Ａｌａ－Ａｓｎを含む、請求項９８又は９９に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記リンカーがＶａｌ－Ｃｉｔ－ｐＡＢを含む、請求項９６～１００のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記リンカーがＶａｌ－Ａｌａ－ｐＡＢを含む、請求項９６～１００のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記リンカーがＧｌｕ－Ｖａｌ－Ｃｉｔ－ｐＡＢを含む、請求項９６～１００のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記リンカーがＡｌａ－Ａｌａ－Ａｓｎ－ｐＡＢを含む、請求項９６～１００のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記リンカーが非切断可能リンカーである、請求項１～３９のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記リンカーが少なくとも１つのスペーサー単位を含む、請求項１０５に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記スペーサー単位又はリンカーがポリエチレングリコール（ＰＥＧ）部分を含む、請求項１０５又は１０６に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記ＰＥＧ部分が－（ＰＥＧ）ｍ－を含み、ｍが１～１０の整数である、請求項１０７に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- ｍが２である、請求項１０８に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記スペーサー単位又はリンカーがアルキル部分を含む、請求項１０５又は１０６に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記アルキル部分が－（ＣＨ２）ｎ－を含み、ｎが１～１０の整数である、請求項１１０に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- ｎが２である、請求項１１１に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- ｎが５である、請求項１１１に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- ｎが６である、請求項１１１に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記スペーサー単位がマレイミド（Ｍａｌ）部分を介して前記抗体又は抗原結合断片に結び付いている（「Ｍａｌ－スペーサー単位」）、請求項１０６～１１４のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記Ｍａｌ－スペーサー単位が前記抗体又は抗原結合断片上のシステイン残基との反応性を有する、請求項１１５に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記Ｍａｌ－スペーサー単位が前記抗体又は抗原結合断片上のシステイン残基を介して前記抗体又は抗原結合断片につなぎ合わされる、請求項１１５又は１１６に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記Ｍａｌ－スペーサー単位がアルキル部分を含む、請求項１１５～１１７のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記Ｍａｌ－スペーサー単位がＰＥＧ部分を含む、請求項１１５～１１７のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記リンカー又はＭａｌ－スペーサー単位がマレイミドカプロイル（ＭＣ）を含む、請求項１１５～１１９のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記リンカー又はＭａｌ－スペーサー単位がマレイミドカプロイル（ＭＣ）と少なくとも１つの追加的なスペーサー単位とを含む、請求項１２０に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記リンカー又はＭａｌ－スペーサー単位がＭＣ－（ＰＥＧ）２を含む、請求項１１５～１１９のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記リンカー又はＭａｌ－スペーサー単位がＭＣ－（ＰＥＧ）２と少なくとも１つの追加的なスペーサー単位とを含む、請求項１２２に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記リンカー又はＭａｌ－スペーサー単位がＭａｌ－Ｈｅｘを含む、請求項１１５～１１９のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記リンカー又はＭａｌ－スペーサー単位がＭａｌ－Ｈｅｘと少なくとも１つの追加的なスペーサー単位とを含む、請求項１２４に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記リンカー又はＭａｌ－スペーサー単位がＭａｌ－Ｅｔを含む、請求項１１５～１１９のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記リンカー又はＭａｌ－スペーサー単位がＭａｌ－Ｅｔと少なくとも１つの追加的なスペーサー単位とを含む、請求項１２６に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記リンカー又はＭａｌ－スペーサー単位がＭａｌ－Ｅｔ－Ｏ－Ｅｔを含む、請求項１１５～１１９のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記リンカー又はＭａｌ－スペーサー単位がＭａｌ－Ｅｔ－Ｏ－Ｅｔと少なくとも１つの追加的なスペーサー単位とを含む、請求項１２８に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記Ｍａｌ－スペーサー単位が前記抗体又は抗原結合断片を前記スプライシング調節薬に結び付ける、請求項１１５～１２９のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記リンカーがＭＣ－Ｖａｌ－Ｃｉｔ－ｐＡＢＣを含む、請求項１１５～１３０のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記リンカーがＭＣ－（ＰＥＧ）２－ＣＯを含む、請求項１１５～１３０のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記抗体又は抗原結合断片が、血液学的悪性腫瘍又は固形腫瘍に由来する新生物細胞を標的化する、請求項１～１３２のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記抗体又は抗原結合断片が、血液学的悪性腫瘍に由来する新生物細胞を標的化する、請求項１～１３３のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記血液学的悪性腫瘍が、Ｂ細胞悪性腫瘍、白血病、リンパ腫、及び骨髄腫から選択される、請求項１３３又は１３４に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記血液学的悪性腫瘍が、急性骨髄性白血病及び多発性骨髄腫から選択される、請求項１３３～１３５のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記抗体又は抗原結合断片が、固形腫瘍に由来する新生物細胞を標的化する、請求項１～１３３のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記固形腫瘍が、乳癌、胃癌、前立腺癌、卵巣癌、肺癌、子宮癌、唾液管癌、黒色腫、結腸癌、子宮頸癌、膵癌、腎癌、結腸直腸癌、及び食道癌から選択される、請求項１３３又は１３７に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記抗体又は抗原結合断片がＨＥＲ２発現細胞を標的化する、請求項１～１３８のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記抗体又は抗原結合断片が抗ＨＥＲ２抗体又は抗原結合断片である、請求項１３９に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記抗体又は抗原結合断片が、配列番号１（ＨＣＤＲ１）、配列番号２（ＨＣＤＲ２）、及び配列番号３（ＨＣＤＲ３）のアミノ酸配列を含む３つの重鎖相補性決定領域（ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、及びＨＣＤＲ３）と；配列番号４（ＬＣＤＲ１）、配列番号５（ＬＣＤＲ２）、及び配列番号６（ＬＣＤＲ３）のアミノ酸配列を含む３つの軽鎖相補性決定領域（ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３）とを含む、請求項１３９又は１４０に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記抗体又は抗原結合断片が、配列番号１９のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号２０のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含む、請求項１３９～１４１のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記抗体又は抗原結合断片がヒトＩｇＧ１重鎖定常領域を含む、請求項１３９～１４２のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記抗体又は抗原結合断片がヒトＩｇカッパ軽鎖定常領域を含む、請求項１３９～１４３のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記抗体又は抗原結合断片がＣＤ１３８発現細胞を標的化する、請求項１～１３８のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記抗体又は抗原結合断片が抗ＣＤ１３８抗体又は抗原結合断片である、請求項１４５に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記抗体又は抗原結合断片が、配列番号７（ＨＣＤＲ１）、配列番号８（ＨＣＤＲ２）、及び配列番号９（ＨＣＤＲ３）のアミノ酸配列を含む３つの重鎖相補性決定領域（ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、及びＨＣＤＲ３）と；配列番号１０（ＬＣＤＲ１）、配列番号１１（ＬＣＤＲ２）、及び配列番号１２（ＬＣＤＲ３）のアミノ酸配列を含む３つの軽鎖相補性決定領域（ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３）とを含む、請求項１４５又は１４６に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記抗体又は抗原結合断片が、配列番号２１のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号２２のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含む、請求項１４５～１４７のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記抗体又は抗原結合断片がヒトＩｇＧ２ａ重鎖定常領域を含む、請求項１４５～１４８のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記抗体又は抗原結合断片がヒトＩｇカッパ軽鎖定常領域を含む、請求項１４５～１４９のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記抗体又は抗原結合断片がＥＰＨＡ２発現細胞を標的化する、請求項１～１３８のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記抗体又は抗原結合断片が抗ＥＰＨＡ２抗体又は抗原結合断片である、請求項１５１に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記抗体又は抗原結合断片が、配列番号１３（ＨＣＤＲ１）、配列番号１４（ＨＣＤＲ２）、及び配列番号１５（ＨＣＤＲ３）のアミノ酸配列を含む３つの重鎖相補性決定領域（ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、及びＨＣＤＲ３）と；配列番号１６（ＬＣＤＲ１）、配列番号１７（ＬＣＤＲ２）、及び配列番号１８（ＬＣＤＲ３）のアミノ酸配列を含む３つの軽鎖相補性決定領域（ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３）とを含む、請求項１５１又は１５２に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記抗体又は抗原結合断片が、配列番号２３のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号２４のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含む、請求項１５１～１５３のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記抗体又は抗原結合断片がヒトＩｇＧ１重鎖定常領域を含む、請求項１５１～１５４のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記抗体又は抗原結合断片がヒトＩｇカッパ軽鎖定常領域を含む、請求項１５１～１５５のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記抗体又は抗原結合断片がＭＳＬＮ発現細胞を標的化する、請求項１～１３８のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記抗体又は抗原結合断片が抗ＭＳＬＮ抗体又は抗原結合断片である、請求項１５７に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記抗体又は抗原結合断片がＦＯＬＨ１発現細胞を標的化する、請求項１～１３８のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記抗体又は抗原結合断片が抗ＦＯＬＨ１抗体又は抗原結合断片である、請求項１５９に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記抗体又は抗原結合断片がＣＤＨ６発現細胞を標的化する、請求項１～１３８のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記抗体又は抗原結合断片が抗ＣＤＨ６抗体又は抗原結合断片である、請求項１６１に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記抗体又は抗原結合断片がＣＥＡＣＡＭ５発現細胞を標的化する、請求項１～１３８のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記抗体又は抗原結合断片が抗ＣＥＡＣＡＭ５抗体又は抗原結合断片である、請求項１６３に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記抗体又は抗原結合断片がＣＦＣ１Ｂ発現細胞を標的化する、請求項１～１３８のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記抗体又は抗原結合断片が抗ＣＦＣ１Ｂ抗体又は抗原結合断片である、請求項１６５に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記抗体又は抗原結合断片がＥＮＰＰ３発現細胞を標的化する、請求項１～１３８のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記抗体又は抗原結合断片が抗ＥＮＰＰ３抗体又は抗原結合断片である、請求項１６７に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記抗体又は抗原結合断片がＦＯＬＲ１発現細胞を標的化する、請求項１～１３８のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記抗体又は抗原結合断片が抗ＦＯＬＲ１抗体又は抗原結合断片である、請求項１６９に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記抗体又は抗原結合断片がＨＡＶＣＲ１発現細胞を標的化する、請求項１～１３８のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記抗体又は抗原結合断片が抗ＨＡＶＣＲ１抗体又は抗原結合断片である、請求項１７１に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記抗体又は抗原結合断片がＫＩＴ発現細胞を標的化する、請求項１～１３８のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記抗体又は抗原結合断片が抗ＫＩＴ抗体又は抗原結合断片である、請求項１７３に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記抗体又は抗原結合断片がＭＥＴ発現細胞を標的化する、請求項１～１３８のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記抗体又は抗原結合断片が抗ＭＥＴ抗体又は抗原結合断片である、請求項１７５に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記抗体又は抗原結合断片がＭＵＣ１６発現細胞を標的化する、請求項１～１３８のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記抗体又は抗原結合断片が抗ＭＵＣ１６抗体又は抗原結合断片である、請求項１７７に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記抗体又は抗原結合断片がＳＬＣ３９Ａ６発現細胞を標的化する、請求項１～１３８のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記抗体又は抗原結合断片が抗ＳＬＣ３９Ａ６抗体又は抗原結合断片である、請求項１７９に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記抗体又は抗原結合断片がＳＬＣ４４Ａ４発現細胞を標的化する、請求項１～１３８のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記抗体又は抗原結合断片が抗ＳＬＣ４４Ａ４抗体又は抗原結合断片である、請求項１８１に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記抗体又は抗原結合断片がＳＴＥＡＰ１発現細胞を標的化する、請求項１～１３８のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 前記抗体又は抗原結合断片が抗ＳＴＥＡＰ１抗体又は抗原結合断片である、請求項１８３に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- ｐが１～１０である、請求項１～１８４のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- ｐが２～８である、請求項１～１８５のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- ｐが４～８である、請求項１～１８６のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- ｐが４である、請求項１～１８７のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- ｐが８である、請求項１～１８７のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
- 式（Ｉ）の化合物：
又はその薬学的に許容可能な塩［式中：
Ｙは、Ｏ、Ｓ、ＮＲ６、及びＣＲ６Ｒ７から選択され；
Ｒ１、Ｒ２、及びＲ３は、各々独立に、水素、ヒドロキシル、－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－Ｏ－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、及びＣ１～Ｃ６アルキル基から選択され；
Ｒ４は、水素、Ｃ１～Ｃ６アルキル基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ３～Ｃ８ヘテロシクリル）基、及び－Ｃ（＝Ｏ）－ＮＲ６Ｒ７から選択され；
Ｒ５は、水素、ヒドロキシル、－ＣＨ２－ＯＨ、－ＣＯ２Ｈ、－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－ＮＲ６Ｒ７、－ＮＲ６－Ｃ（＝Ｏ）－Ｒ８、－Ｏ－Ｃ（＝Ｏ）－ＮＲ６Ｒ７、－ＮＲ６－Ｃ（＝Ｏ）－Ｒ８、及び－ＮＲ６－Ｃ（＝Ｏ）－ＮＲ６Ｒ７から選択され；
Ｒ６及びＲ７は、各々独立に、水素、－Ｒ８、－Ｃ（＝Ｏ）－Ｒ８、及び－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－Ｒ８から選択され；及び
Ｒ８は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基、Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル基、及びＣ３～Ｃ８ヘテロシクリル基から選択され、
ここでＲ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、及びＲ８は、各々独立に、ハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１～Ｃ６アルキル基、－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－ＣＯ２Ｈ、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ３～Ｃ８ヘテロシクリル）基、－ＮＲ６Ｒ７、Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル基、Ｃ１～Ｃ６アルキルヒドロキシ基、Ｃ１～Ｃ６アルキルアルコキシ基、ベンジル基、及びＣ３～Ｃ８ヘテロシクリル基（この各々は、ハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１～Ｃ３アルキル基、Ｃ１～Ｃ３アルコキシ基、Ｃ１～Ｃ３ハロアルキル基、－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）（Ｃ１～Ｃ３アルキル）、及び－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ３アルキル）から選択される０又は１個の基で独立に置換されていてもよい）から独立に選択される０～３個の基で置換される］。 - 式（Ｉａ）の化合物：
又はその薬学的に許容可能な塩［式中：
Ｒ９は、Ｃ３～Ｃ８ヘテロシクリル基から選択され；及び
Ｒ１０は、Ｈ及びＣ１～Ｃ６アルキル基から選択され、
ここでＲ９及びＲ１０は、各々独立に、ハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１～Ｃ３アルキル基、Ｃ１～Ｃ３アルコキシ基、－ＮＨ２、－ＮＨ－（Ｃ１～Ｃ３アルキル）、及び－Ｎ－（Ｃ１～Ｃ３アルキル）２から独立に選択される０～３個の基で置換される］である、請求項１９０に記載の化合物。 - 式（Ｉｂ）の化合物：
又はその薬学的に許容可能な塩［式中：
Ｒ１１は、
（式中、＊は、Ｒ１１が前記化合物の残りの部分に結合する点を表す）から選択され；及び
Ｒ１２及びＲ１３は、各々独立に、Ｈ及びメチルから選択される］である、請求項１９０又は１９１に記載の化合物。 - Ｈ１、又はその薬学的に許容可能な塩である、請求項１９０に記載の化合物。
- Ｈ２、又はその薬学的に許容可能な塩である、請求項１９０に記載の化合物。
- Ｈ３、又はその薬学的に許容可能な塩である、請求項１９０に記載の化合物。
- Ｈ１２、又はその薬学的に許容可能な塩である、請求項１９０に記載の化合物。
- 式（ＩＩ）：
又はその薬学的に許容可能な塩［式中：
Ｘは、ＮＲ６Ｒ７であり；
Ｒ６及びＲ７は、各々独立に、水素、－Ｒ８、－Ｃ（＝Ｏ）－Ｒ８、－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－Ｒ８、－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）－Ｏ－Ｃ（＝Ｏ）－Ｒ８、及び－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）－Ｒ８から選択され；及び
Ｒ８は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基、Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル基、及びＣ３～Ｃ８ヘテロシクリル基から選択され、
ここでＲ６、Ｒ７、及びＲ８は、各々独立に、ハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１～Ｃ６アルキル基、－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－ＣＯ２Ｈ、－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ３～Ｃ８ヘテロシクリル）基、－ＮＲ６Ｒ７、Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル基、Ｃ１～Ｃ６アルキルヒドロキシ基、Ｃ１～Ｃ６アルキルアルコキシ基、ベンジル基、及びＣ３～Ｃ８ヘテロシクリル基（この各々は、ハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１～Ｃ３アルキル基、Ｃ１～Ｃ３アルコキシ基、Ｃ１～Ｃ３ハロアルキル基、－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）（Ｃ１～Ｃ３アルキル）、及び－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ３アルキル）から選択される０又は１個の基で独立に置換されていてもよい）から独立に選択される０～３個の基で置換される］。 - 式（ＩＩａ）：
又はその薬学的に許容可能な塩［式中：
Ｚは、ＮＲ９及びＯから選択され；
Ｒ９は、水素及びＣ１～Ｃ６アルキル基から選択され；
Ｒ１０及びＲ１１は、各々独立に、水素、ハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１～Ｃ６アルキル基、－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－ＣＯ２Ｈ、－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ３～Ｃ８ヘテロシクリル）基、Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル基、Ｃ１～Ｃ６アルキルヒドロキシ基、Ｃ１～Ｃ６アルキルアルコキシ基、ベンジル基、及びＣ３～Ｃ８ヘテロシクリル基から選択され；
Ｒ１２は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基、Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル基、Ｃ３～Ｃ８ヘテロシクリル基から選択され、
ここでＲ９、Ｒ１０、Ｒ１１、及びＲ１２は、各々独立に、ハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１～Ｃ３アルキル基、Ｃ１～Ｃ３アルコキシ基、及びＣ１～Ｃ３ハロアルキル基から選択される０又は１個の基で置換され；及び
ｔは、１、２、３、４、５、及び６から選択される整数である］である、請求項１９７に記載の化合物。 - 式（ＩＩｂ）：
又はその薬学的に許容可能な塩［式中：
Ｒ１３は、
（式中、＊は、Ｒ１３が前記化合物の残りの部分に結合する点を表す）から選択され；及び
Ｒ１４及びＲ１５は、各々独立に、水素及びメチルから選択される］である、請求項１９７又は１９８に記載の化合物。 - Ｈ４、又はその薬学的に許容可能な塩である、請求項１９７に記載の化合物。
- Ｈ１３、又はその薬学的に許容可能な塩である、請求項１９７に記載の化合物。
- Ｈ１４、又はその薬学的に許容可能な塩である、請求項１９７に記載の化合物。
- Ｈ１５、又はその薬学的に許容可能な塩である、請求項１９７に記載の化合物。
- Ｈ１６、又はその薬学的に許容可能な塩である、請求項１９７に記載の化合物。
- Ｈ１７、又はその薬学的に許容可能な塩である、請求項１９７に記載の化合物。
- Ｈ１８、又はその薬学的に許容可能な塩である、請求項１９７に記載の化合物。
- Ｈ１９、又はその薬学的に許容可能な塩である、請求項１９７に記載の化合物。
- Ｈ２０、又はその薬学的に許容可能な塩である、請求項１９７に記載の化合物。
- Ｈ２１、又はその薬学的に許容可能な塩である、請求項１９７に記載の化合物。
- Ｈ２３、又はその薬学的に許容可能な塩である、請求項１９７に記載の化合物。
- Ｈ２４、又はその薬学的に許容可能な塩である、請求項１９７に記載の化合物。
- 式（ＩＩＩ）の化合物：
又はその薬学的に許容可能な塩［式中：
Ｒ１、Ｒ２、及びＲ３は、各々独立に、水素、ヒドロキシル、－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－Ｏ－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、及びＣ１～Ｃ６アルキル基から選択され；
Ｒ６及びＲ７は、各々独立に、水素、－Ｒ８、－Ｃ（＝Ｏ）－Ｒ８、及び－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－Ｒ８から選択され；
Ｒ８は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基、Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル基、及びＣ３～Ｃ８ヘテロシクリル基から選択され；及び
Ｒ９は、Ｈ、
から選択され；
ここでＲ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ６、Ｒ７、及びＲ８は、各々独立に、ハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１～Ｃ６アルキル基、－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－ＣＯ２Ｈ、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ１～Ｃ６アルキル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル）基、－Ｃ（＝Ｏ）－（Ｃ３～Ｃ８ヘテロシクリル）基、－ＮＲ６Ｒ７、Ｃ３～Ｃ８カルボシクリル基、Ｃ１～Ｃ６アルキルヒドロキシ基、Ｃ１～Ｃ６アルキルアルコキシ基、ベンジル基、及びＣ３～Ｃ８ヘテロシクリル基（この各々は、ハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１～Ｃ３アルキル基、Ｃ１～Ｃ３アルコキシ基、Ｃ１～Ｃ３ハロアルキル基、－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）（Ｃ１～Ｃ３アルキル）、及び－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ３アルキル）から選択される０又は１個の基で独立に置換されていてもよい）から独立に選択される０～３個の基で置換され；及び
式中、＊は、Ｒ９が前記化合物の残りの部分に結合する点を表す］。 - Ｈ５、又はその薬学的に許容可能な塩である、請求項２１２に記載の化合物。
- Ｈ６、又はその薬学的に許容可能な塩である、請求項２１２に記載の化合物。
- Ｈ７、又はその薬学的に許容可能な塩である、請求項２１２に記載の化合物。
- Ｈ８、又はその薬学的に許容可能な塩である、請求項２１２に記載の化合物。
- Ｈ９、又はその薬学的に許容可能な塩である、請求項２１２に記載の化合物。
- Ｈ１０、又はその薬学的に許容可能な塩である、請求項２１２に記載の化合物。
- Ｈ２２、又はその薬学的に許容可能な塩である、請求項２１２に記載の化合物。
- 請求項１９０～２１９のいずれか一項に記載の化合物、又はその薬学的に許容可能な塩と、薬学的に許容可能な担体とを含む医薬組成物。
- 請求項１～１８９のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲートの複数のコピーを含む組成物であって、前記組成物中の前記抗体－薬物コンジュゲートの平均ｐが約３．５～約５．５である、組成物。
- 前記組成物中の前記抗体－薬物コンジュゲートの平均ｐが約４である、請求項２２１に記載の組成物。
- 請求項１～１８９のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲートの複数のコピーを含む組成物であって、前記組成物中の前記抗体－薬物コンジュゲートの平均ｐが約７～約９である、組成物。
- 前記組成物中の前記抗体－薬物コンジュゲートの平均ｐが約８である、請求項２２３に記載の組成物。
- 新生物性障害を有する又は有する疑いがある対象を治療する方法であって、治療有効量の請求項１～１８９のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート、請求項１９０～２１９のいずれか一項に記載の化合物、又は請求項２２０～２２４のいずれか一項に記載の組成物を前記対象に投与することを含む方法。
- 前記新生物性障害が血液学的悪性腫瘍又は固形腫瘍である、請求項２２５に記載の方法。
- 前記新生物性障害が血液学的悪性腫瘍である、請求項２２５又は２２６に記載の方法。
- 前記血液学的悪性腫瘍が、急性骨髄性白血病及び多発性骨髄腫から選択される、請求項２２７に記載の方法。
- 前記新生物性障害が固形腫瘍である、請求項２２５又は２２６に記載の方法。
- 前記固形腫瘍が、乳癌、胃癌、前立腺癌、卵巣癌、肺癌、子宮癌、唾液管癌、黒色腫、結腸癌、子宮頸癌、膵癌、腎癌、結腸直腸癌、及び食道癌から選択される、請求項２２９に記載の方法。
- 前記対象が、標的抗原を発現する１つ以上の新生物細胞を有する、請求項２２５～２３０のいずれか一項に記載の方法。
- 前記標的抗原がＨＥＲ２である、請求項２３１に記載の方法。
- 前記１つ以上の新生物細胞が、ＨＥＲ２を発現する乳癌、卵巣癌、胃癌、肺癌、子宮癌、骨肉腫、又は唾液管癌に由来する、請求項２３１又は２３２に記載の方法。
- 前記肺癌が肺腺癌であり、及び／又は前記子宮癌が漿液性子宮内膜癌である、請求項２３３に記載の方法。
- 前記対象が、（ａ）単独投与時の抗ＨＥＲ２抗体及び／又は（ｂ）単独投与時のスプライシング調節薬による治療に不応性又は難反応性である、請求項２３２～２３４のいずれか一項に記載の方法。
- 前記対象が、単独投与時のスプライシング調節薬による治療に不忍容、不応性、又は難反応性である、請求項２３２～２３５のいずれか一項に記載の方法。
- 前記標的抗原がＣＤ１３８である、請求項２３１に記載の方法。
- 前記１つ以上の新生物細胞が、ＣＤ１３８を発現する多発性骨髄腫に由来する、請求項２３１又は２３７に記載の方法。
- 前記対象が、（ａ）単独投与時の抗ＣＤ１３８抗体及び／又は（ｂ）単独投与時のスプライシング調節薬による治療に不応性又は難反応性である、請求項２３７又は２３８に記載の方法。
- 前記対象が、単独投与時のスプライシング調節薬による治療に不忍容、不応性、又は難反応性である、請求項２３７～２３９のいずれか一項に記載の方法。
- 前記標的抗原がＥＰＨＡ２である、請求項２３１に記載の方法。
- 前記１つ以上の新生物細胞が、ＥＰＨＡ２を発現する乳癌、前立腺癌、卵巣癌、肺癌、黒色腫、結腸癌、又は食道癌に由来する、請求項２３１又は２４１に記載の方法。
- 前記対象が、（ａ）単独投与時の抗ＥＰＨＡ２抗体及び／又は（ｂ）単独投与時のスプライシング調節薬による治療に不応性又は難反応性である、請求項２４１又は２４２に記載の方法。
- 前記対象が、単独投与時のスプライシング調節薬による治療に不忍容、不応性、又は難反応性である、請求項２４１～２４３のいずれか一項に記載の方法。
- 新生物性障害を有する又は有する疑いがある対象における腫瘍の成長を低減又は阻害する方法であって、治療有効量の請求項１～１８９のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート、請求項１９０～２１９のいずれか一項に記載の化合物、又は請求項２２０～２２４のいずれか一項に記載の組成物を前記対象に投与することを含む方法。
- 前記腫瘍が、標的抗原を発現する１つ以上の新生物細胞を含む、請求項２４５に記載の方法。
- 前記標的抗原がＨＥＲ２である、請求項２４６に記載の方法。
- 前記１つ以上の新生物細胞が、ＨＥＲ２を発現する乳癌、卵巣癌、胃癌、肺癌、子宮癌、骨肉腫、又は唾液管癌に由来する、請求項２４６又は２４７に記載の方法。
- 前記肺癌が肺腺癌であり、及び／又は前記子宮癌が漿液性子宮内膜癌である、請求項２４８に記載の方法。
- 前記腫瘍が、（ａ）単独投与時の抗ＨＥＲ２抗体及び／又は（ｂ）単独投与時のスプライシング調節薬による治療に抵抗性又は難治性である、請求項２４７～２４９のいずれか一項に記載の方法。
- 前記標的抗原がＣＤ１３８である、請求項２４６に記載の方法。
- 前記１つ以上の新生物細胞が、ＣＤ１３８を発現する多発性骨髄腫に由来する、請求項２４６又は２５１に記載の方法。
- 前記腫瘍が、（ａ）単独投与時の抗ＣＤ１３８抗体及び／又は（ｂ）単独投与時のスプライシング調節薬による治療に抵抗性又は難治性である、請求項２５１又は２５２に記載の方法。
- 前記標的抗原がＥＰＨＡ２である、請求項２４６に記載の方法。
- 前記１つ以上の新生物細胞が、ＥＰＨＡ２を発現する乳癌、前立腺癌、卵巣癌、肺癌、黒色腫、結腸癌、又は食道癌に由来する、請求項２４６又は２５４に記載の方法。
- 前記腫瘍が、（ａ）単独投与時の抗ＥＰＨＡ２抗体及び／又は（ｂ）単独投与時のスプライシング調節薬による治療に抵抗性又は難治性である、請求項２５４又は２５５に記載の方法。
- 新生物性障害を有する又は有する疑いがある対象に、請求項１～１８９のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート、請求項１９０～２１９のいずれか一項に記載の化合物、又は請求項２２０～２２４のいずれか一項に記載の組成物による治療が奏効するかどうかを決定する方法であって、前記対象からの生体試料を提供すること、及び請求項１～１８９のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート、請求項１９０～２１９のいずれか一項に記載の化合物、又は請求項２２０～２２４のいずれか一項に記載の組成物を前記生体試料に接触させることを含む方法。
- 前記生体試料が腫瘍試料である、請求項２５７に記載の方法。
- 前記腫瘍試料が腫瘍生検又は血液試料である、請求項２５８に記載の方法。
- 前記血液試料が、血液、血液分画物、又は前記血液若しくは血液分画物から得られる細胞から選択される、請求項２５９に記載の方法。
- 前記対象が、標的抗原を発現する１つ以上の新生物細胞を有する、請求項２５７～２６０のいずれか一項に記載の方法。
- 前記標的抗原がＨＥＲ２である、請求項２６１に記載の方法。
- 前記１つ以上の新生物細胞が、ＨＥＲ２を発現する乳癌、卵巣癌、胃癌、肺癌、子宮癌、骨肉腫、又は唾液管癌に由来する、請求項２６１又は２６２に記載の方法。
- 前記肺癌が肺腺癌であり、及び／又は前記子宮癌が漿液性子宮内膜癌である、請求項２６３に記載の方法。
- 前記標的抗原がＣＤ１３８である、請求項２６１に記載の方法。
- 前記１つ以上の新生物細胞が、ＣＤ１３８を発現する多発性骨髄腫に由来する、請求項２６１又は２６５に記載の方法。
- 前記標的抗原がＥＰＨＡ２である、請求項２６１に記載の方法。
- 前記１つ以上の新生物細胞が、ＥＰＨＡ２を発現する乳癌、前立腺癌、卵巣癌、肺癌、黒色腫、結腸癌、又は食道癌に由来する、請求項２６１又は２６７に記載の方法。
- 新生物性障害の治療における使用のための、請求項１～１８９のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート、請求項１９０～２１９のいずれか一項に記載の化合物、請求項２２０～２２４のいずれか一項に記載の組成物。
- 前記新生物性障害が、標的抗原を発現する１つ以上の新生物細胞を有することによって特徴付けられる、請求項２６９に記載の使用のための抗体－薬物コンジュゲート、化合物、又は組成物。
- 前記標的抗原がＨＥＲ２である、請求項２７０に記載の使用のための抗体－薬物コンジュゲート、化合物、又は組成物。
- 前記新生物性障害が、ＨＥＲ２を発現する乳癌、卵巣癌、胃癌、肺癌、子宮癌、骨肉腫、又は唾液管癌である、請求項２７０又は２７１に記載の使用のための抗体－薬物コンジュゲート、化合物、又は組成物。
- 前記肺癌が肺腺癌であり、及び／又は前記子宮癌が漿液性子宮内膜癌である、請求項２７２に記載の抗体－薬物コンジュゲート、化合物、又は組成物。
- 前記標的抗原がＣＤ１３８である、請求項２７０に記載の使用のための抗体－薬物コンジュゲート、化合物、又は組成物。
- 前記新生物性障害が、ＣＤ１３８を発現する多発性骨髄腫である、請求項２７０又は２７４に記載の使用のための抗体－薬物コンジュゲート、化合物、又は組成物。
- 前記標的抗原がＥＰＨＡ２である、請求項２７０に記載の使用のための抗体－薬物コンジュゲート、化合物、又は組成物。
- 前記新生物性障害が、ＥＰＨＡ２を発現する乳癌、前立腺癌、卵巣癌、肺癌、黒色腫、結腸癌、又は食道癌である、請求項２７０又は２７６に記載の使用のための抗体－薬物コンジュゲート、化合物、又は組成物。
- 新生物性障害の治療における、請求項１～１８９のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート、請求項１９０～２１９のいずれか一項に記載の化合物、又は請求項２２０～２２４のいずれか一項に記載の組成物の使用。
- 前記新生物性障害が、標的抗原を発現する１つ以上の新生物細胞を有することによって特徴付けられる、請求項２７８に記載の使用。
- 前記標的抗原がＨＥＲ２である、請求項２７９に記載の使用。
- 前記新生物性障害が、ＨＥＲ２を発現する乳癌、卵巣癌、胃癌、肺癌、子宮癌、骨肉腫、又は唾液管癌である、請求項２７９又は２８０に記載の使用。
- 前記肺癌が肺腺癌であり、及び／又は前記子宮癌が漿液性子宮内膜癌である、請求項２８１に記載の使用。
- 前記標的抗原がＣＤ１３８である、請求項２７９に記載の使用。
- 前記新生物性障害が、ＣＤ１３８を発現する多発性骨髄腫である、請求項２７９又は２８３に記載の使用。
- 前記標的抗原がＥＰＨＡ２である、請求項２７９に記載の使用。
- 前記新生物性障害が、ＥＰＨＡ２を発現する乳癌、前立腺癌、卵巣癌、肺癌、黒色腫、結腸癌、又は食道癌である、請求項２７９又は２８５に記載の使用。
- 新生物性障害の治療用医薬品の製造方法における、請求項１～１８９のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート、請求項１９０～２１９のいずれか一項に記載の化合物、又は請求項２２０～２２４のいずれか一項に記載の組成物の使用。
- 前記新生物性障害が、標的抗原を発現する１つ以上の新生物細胞を有することによって特徴付けられる、請求項２８７に記載の使用。
- 前記標的抗原がＨＥＲ２である、請求項２８８に記載の使用。
- 前記新生物性障害が、ＨＥＲ２を発現する乳癌、卵巣癌、胃癌、肺癌、子宮癌、骨肉腫、又は唾液管癌である、請求項２８８又は２８９に記載の使用。
- 前記肺癌が肺腺癌であり、及び／又は前記子宮癌が漿液性子宮内膜癌である、請求項２９０に記載の使用。
- 前記標的抗原がＣＤ１３８である、請求項２８８に記載の使用。
- 前記新生物性障害が、ＣＤ１３８を発現する多発性骨髄腫である、請求項２８８又は２９２に記載の使用。
- 前記標的抗原がＥＰＨＡ２である、請求項２８８に記載の使用。
- 前記新生物性障害が、ＥＰＨＡ２を発現する乳癌、前立腺癌、卵巣癌、肺癌、黒色腫、結腸癌、又は食道癌である、請求項２８８又は２９４に記載の使用。
- コンジュゲーションを許容する条件下で、スプライシング調節薬につなぎ合わされたリンカーと抗体又は抗原結合断片を反応させることを含む、請求項１～１８９のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲートの作製方法。
- 少なくとも１つのネオ抗原を誘導する方法であって、有効量の請求項１～１８９のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート、請求項１９０～２１９のいずれか一項に記載の化合物、又は請求項２２０～２２４のいずれか一項に記載の組成物を新生物細胞と接触させて、それにより少なくとも１つのネオ抗原の産生を誘導することを含む方法。
- 前記新生物細胞がインビトロ細胞培養物中に存在する、請求項２９７に記載の方法。
- 前記新生物細胞が対象から入手される、請求項２９７又は２９８に記載の方法。
- 前記新生物細胞が対象に存在する、請求項２９７に記載の方法。
- 前記新生物細胞が血液学的悪性腫瘍又は固形腫瘍に由来する、請求項２９７～３００のいずれか一項に記載の方法。
- 前記血液学的悪性腫瘍が、Ｂ細胞悪性腫瘍、白血病、リンパ腫、及び骨髄腫から選択される、請求項３０１に記載の方法。
- 前記血液学的悪性腫瘍が、急性骨髄性白血病及び多発性骨髄腫から選択される、請求項３０１又は３０２に記載の方法。
- 前記固形腫瘍が、乳癌、胃癌、前立腺癌、卵巣癌、肺癌、子宮癌、唾液管癌、黒色腫、結腸癌、子宮頸癌、膵癌、腎癌、結腸直腸癌、及び食道癌から選択される、請求項３０１に記載の方法。
- 新生物性障害を有する又は有する疑いがある対象において少なくとも１つのネオ抗原及び／又はＴ細胞応答を誘導する方法であって、有効量の請求項１～１８９のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート、請求項１９０～２１９のいずれか一項に記載の化合物、又は請求項２２０～２２４のいずれか一項に記載の組成物を前記対象に投与することを含む方法。
- 新生物性障害を有する又は有する疑いがある対象を治療する方法であって、有効量の請求項１～１８９のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート、請求項１９０～２１９のいずれか一項に記載の化合物、又は請求項２２０～２２４のいずれか一項に記載の組成物を前記対象に投与することを含み、前記化合物、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物の投与が少なくとも１つのネオ抗原及び／又はＴ細胞応答を誘導する、方法。
- 前記化合物、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物の投与される量が、前記化合物、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物の標準的な投薬量と比較したとき、少なくとも１つのネオ抗原及び／又はＴ細胞応答の誘導が理由で低減される、請求項３０５又は３０６に記載の方法。
- 前記化合物、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物の投与量が、前記化合物、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物の標準的な投薬量と比較したとき、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、７５％、又は９０％低減される、請求項３０５～３０７のいずれか一項に記載の方法。
- 前記化合物、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物が、前記化合物、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物の標準的な投与レジメンと比較したとき、少なくとも１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、７５％、又は９０％低い頻度で投与される、請求項３０５～３０８のいずれか一項に記載の方法。
- 前記化合物、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物の投与量及び／又は投薬量が、全身毒性の低下及び／又は忍容性の向上をもたらす、請求項３０５～３０９のいずれか一項に記載の方法。
- 少なくとも１つの追加療法を投与することを更に含む、請求項３０５～３１０のいずれか一項に記載の方法。
- 前記化合物、抗体－薬物コンジュゲート、組成物、及び／又は前記少なくとも１つの追加療法の投与される量が、前記化合物、抗体－薬物コンジュゲート、組成物、及び／又は前記少なくとも１つの追加療法の標準的な投薬量と比較したとき、少なくとも１つのネオ抗原及び／又はＴ細胞応答の誘導が理由で低減される、請求項３１１に記載の方法。
- 前記化合物、抗体－薬物コンジュゲート、組成物、及び／又は前記少なくとも１つの追加療法の投与量が、前記スプライシング調節薬、抗体－薬物コンジュゲート、組成物、及び／又は前記少なくとも１つの追加療法の標準的な投薬量と比較したとき、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、７５％、又は９０％低減される、請求項３１１又は３１２に記載の方法。
- 前記化合物、抗体－薬物コンジュゲート、組成物、及び／又は前記少なくとも１つの追加療法が、前記化合物、抗体－薬物コンジュゲート、組成物、及び／又は前記少なくとも１つの追加療法の標準的な投与レジメンと比較したとき、少なくとも１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、７５％、又は９０％低い頻度で投与される、請求項３１１～３１３のいずれか一項に記載の方法。
- 前記化合物、抗体－薬物コンジュゲート、組成物、及び／又は前記少なくとも１つの追加療法の投与量及び／又は投薬量が、全身毒性の低下及び／又は忍容性の向上をもたらす、請求項３１１～３１４のいずれか一項に記載の方法。
- 前記化合物、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物の投与が、前記少なくとも１つの追加療法の投与前に開始される、請求項３１１～３１５のいずれか一項に記載の方法。
- 前記化合物、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物の投与が、前記少なくとも１つの追加療法の投与後に開始される、請求項３１１～３１５のいずれか一項に記載の方法。
- 前記化合物、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物の投与が、前記少なくとも１つの追加療法の投与と同時に開始される、請求項３１１～３１５のいずれか一項に記載の方法。
- 前記化合物、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物の投与が、初回投与後に少なくとも１回反復される、請求項３０５～３１８のいずれか一項に記載の方法。
- 前記化合物、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物の反復投与に使用される量が、初回投与に使用される量と比較したとき低減される、請求項３１９に記載の方法。
- 前記化合物、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物の反復投与に使用される量が、前記化合物、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物の標準的な投薬量と比較したとき低減される、請求項３１９又は３２０に記載の方法。
- 前記化合物、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物の反復投与に使用される量が、前記化合物、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物の標準的な投薬量と比較したとき、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、７５％、又は９０％低減される、請求項３１９～３２１のいずれか一項に記載の方法。
- 前記少なくとも１つの追加療法の投与が、初回投与後に少なくとも１回反復される、請求項３１１～３２２のいずれか一項に記載の方法。
- 前記少なくとも１つの追加療法の反復投与に使用される量が、初回投与に使用される量と比較したとき低減される、請求項３２３に記載の方法。
- 前記少なくとも１つの追加療法の反復投与に使用される量が、前記少なくとも１つの追加療法の標準的な投薬量と比較したとき低減される、請求項３２３又は３２４に記載の方法。
- 前記少なくとも１つの追加療法の反復投与に使用される量が、前記少なくとも１つの追加療法の標準的な投薬量と比較したとき、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、７５％、又は９０％低減される、請求項３２３～３２５のいずれか一項に記載の方法。
- 前記化合物、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物の反復投与が、前記少なくとも１つの追加療法の反復投与と同時である、請求項３１９～３２６のいずれか一項に記載の方法。
- 前記化合物、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物の反復投与が、前記少なくとも１つの追加療法の反復投与と逐次的であるか、又は時間をずらされる、請求項３１９～３２６のいずれか一項に記載の方法。
- 前記少なくとも１つの追加療法が、チェックポイント阻害薬を投与することを含む、請求項３１１～３２８のいずれか一項に記載の方法。
- 前記対象が、単独投与時の前記チェックポイント阻害薬に不忍容、不応性、又は難反応性である、請求項３２９に記載の方法。
- 前記チェックポイント阻害薬が、ＣＴＬＡ４、ＰＤ１、ＰＤＬ１、ＯＸ４０、ＣＤ４０、ＧＩＴＲ、ＬＡＧ３、ＴＩＭ３、及び／又はＫＩＲを標的化する、請求項３２９又は３３０に記載の方法。
- 前記チェックポイント阻害薬が、ＣＴＬＡ４、ＯＸ４０、ＣＤ４０、及び／又はＧＩＴＲを標的化する、請求項３２９～３３１のいずれか一項に記載の方法。
- 前記チェックポイント阻害薬が細胞傷害性Ｔリンパ球関連抗原４経路（ＣＴＬＡ４）阻害薬を含む、請求項３２９～３３２のいずれか一項に記載の方法。
- 前記ＣＴＬＡ４阻害薬が抗ＣＴＬＡ４抗体である、請求項３３３に記載の方法。
- 前記抗ＣＴＬＡ４抗体がイピリムマブである、請求項３３４に記載の方法。
- 前記チェックポイント阻害薬がプログラム死－１経路（ＰＤ１）阻害薬を含む、請求項３２９～３３２のいずれか一項に記載の方法。
- 前記ＰＤ１阻害薬が抗ＰＤ１抗体である、請求項３３６に記載の方法。
- 前記抗ＰＤ１抗体がニボルマブである、請求項３３７に記載の方法。
- 前記ＰＤ１阻害薬が抗ＰＤＬ１抗体である、請求項３３６に記載の方法。
- 前記抗ＰＤＬ１抗体がアテゾリズマブである、請求項３３９に記載の方法。
- 前記チェックポイント阻害薬がＣＴＬＡ４阻害薬及びＰＤ１阻害薬を含む、請求項３２９～３３２のいずれか一項に記載の方法。
- 前記ＣＴＬＡ４阻害薬が抗ＣＴＬＡ４抗体である、請求項３４１に記載の方法。
- 前記抗ＣＴＬＡ４抗体がイピリムマブである、請求項３４２に記載の方法。
- 前記ＰＤ１阻害薬が抗ＰＤ１抗体である、請求項３４１に記載の方法。
- 前記抗ＰＤ１抗体がニボルマブである、請求項３４４に記載の方法。
- 前記ＰＤ１阻害薬が抗ＰＤＬ１抗体である、請求項３４１に記載の方法。
- 前記抗ＰＤＬ１抗体がアテゾリズマブである、請求項３４６に記載の方法。
- 前記少なくとも１つの追加療法が、ネオ抗原ワクチンを投与することを含む、請求項３１１～３２８のいずれか一項に記載の方法。
- 前記化合物、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物が、前記ネオ抗原ワクチンの投与前に投与される、請求項３４８に記載の方法。
- 前記化合物、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物が、前記ネオ抗原ワクチンの投与後に投与される、請求項３４８に記載の方法。
- 前記化合物、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物が、前記ネオ抗原ワクチンの投与と同時に投与される、請求項３４８に記載の方法。
- 前記化合物、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物の投与が、初回投与後に少なくとも１回反復される、請求項３４８～３５１のいずれか一項に記載の方法。
- 前記化合物、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物の反復投与に使用される量が、初回投与に使用される量と比較したとき低減される、請求項３５２に記載の方法。
- 前記ネオ抗原ワクチンが少なくとも１つのネオ抗原ペプチドを含む、請求項３４８～３５３のいずれか一項に記載の方法。
- 前記少なくとも１つのネオ抗原ペプチドが約１０～約３５アミノ酸長の範囲である、請求項３５４に記載の方法。
- 前記少なくとも１つのネオ抗原ペプチドが約１５～約２５アミノ酸長の範囲である、請求項３５４又は３５５に記載の方法。
- 前記少なくとも１つのネオ抗原ペプチドが１つ又は２つ以上のネオ抗原配列を含む、請求項３５４～３５６のいずれか一項に記載の方法。
- 前記ネオ抗原配列が、前記対象に特異的なネオ抗原配列である、請求項３５７に記載の方法。
- 前記ネオ抗原配列がユニバーサルネオ抗原配列である、請求項３５７に記載の方法。
- 前記ネオ抗原配列が、前記対象向けに個別化されたネオ抗原ワクチンである、請求項３５８に記載の方法。
- 前記ネオ抗原配列が、有効量の前記化合物、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物を投与することにより前記対象において誘導される少なくとも１つのネオ抗原をシーケンシングすることによって同定されている、請求項３６０に記載の方法。
- 前記ネオ抗原配列が、前記対象に発現する少なくとも１つのＨＬＡアレルに結合する能力を有する、請求項３６０又は３６１に記載の方法。
- 前記ネオ抗原配列がユニバーサルネオ抗原ワクチンである、請求項３５９に記載の方法。
- 前記ネオ抗原配列が、前記新生物性障害に罹患している対象集団中の対象の少なくとも１０％、少なくとも１５％、少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、又は少なくとも４５％に発現する少なくとも１つのＨＬＡアレルに結合する能力を有する、請求項３６３に記載の方法。
- 前記ネオ抗原配列が、前記新生物性障害に罹患している対象集団の少なくとも１％、少なくとも５％、又は少なくとも１０％に存在する腫瘍に対するＴ細胞応答を誘発する能力を有する、請求項３６３又は３６４に記載の方法。
- 前記少なくとも１つのネオ抗原ペプチドが、有効量の前記スプライシング調節薬、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物を新生物細胞に接触させることにより誘導されるネオ抗原配列を含む、請求項３５４～３６５のいずれか一項に記載の方法。
- 前記ネオ抗原ワクチンが少なくとも１つのネオ抗原ペプチドと薬学的に許容可能な担体とを含む、請求項３４８に記載の方法。
- 前記少なくとも１つのネオ抗原ペプチドが前記薬学的に許容可能な担体に連結される、請求項３６７に記載の方法。
- 前記薬学的に許容可能な担体が、ペプチド、血清アルブミン、キーホールリンペットヘモシアニン、免疫グロブリン、チログロブリン、オボアルブミン、トキソイド又は弱毒化トキソイド誘導体、サイトカイン、及びケモカインから選択される、請求項３６７又は３６８に記載の方法。
- 前記ネオ抗原ペプチドと前記薬学的に許容可能な担体とがリンカーを介して共有結合的に結び付いている、請求項３６７～３６９のいずれか一項に記載の方法。
- 前記ネオ抗原ペプチドと前記薬学的に許容可能な担体とが融合タンパク質として発現する、請求項３６７～３６９のいずれか一項に記載の方法。
- 前記ネオ抗原ワクチンが少なくとも１つのネオ抗原ペプチドと薬学的に許容可能な希釈剤とを含む、請求項３４８に記載の方法。
- 前記ネオ抗原ワクチンが少なくとも１つのネオ抗原ペプチドと薬学的に許容可能なアジュバントとを含む、請求項３４８に記載の方法。
- 前記新生物細胞がインビトロ細胞培養物中に存在する、請求項３６６に記載の方法。
- 前記新生物細胞が前記対象から入手される、請求項３６６又は３７４に記載の方法。
- 前記新生物細胞が前記対象に存在する、請求項３６６に記載の方法。
- 前記ネオ抗原ワクチンが少なくとも１つのネオ抗原ｍＲＮＡを含む、請求項３４８～３５３のいずれか一項に記載の方法。
- 前記少なくとも１つのネオ抗原ｍＲＮＡが１つ又は２つ以上のネオ抗原配列をコードする、請求項３７７に記載の方法。
- 前記ネオ抗原配列が、前記対象に特異的なネオ抗原配列である、請求項３７８に記載の方法。
- 前記ネオ抗原配列がユニバーサルネオ抗原配列である、請求項３７８に記載の方法。
- 前記ネオ抗原配列が、前記対象向けに個別化されたネオ抗原ワクチンである、請求項３７９に記載の方法。
- 前記ネオ抗原配列が、有効量の前記化合物、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物を投与することにより前記対象において誘導される少なくとも１つのネオ抗原をシーケンシングすることによって同定されている、請求項３８１に記載の方法。
- 前記ネオ抗原配列が、前記対象に発現する少なくとも１つのＨＬＡアレルに結合する能力を有する、請求項３８１又は３８２に記載の方法。
- 前記ネオ抗原配列がユニバーサルネオ抗原ワクチンである、請求項３８０に記載の方法。
- 前記ネオ抗原配列が、前記新生物性障害に罹患している対象集団中の対象の少なくとも１０％、少なくとも１５％、少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、又は少なくとも４５％に発現する少なくとも１つのＨＬＡアレルに結合する能力を有する、請求項３８４に記載の方法。
- 前記ネオ抗原配列が、前記新生物性障害に罹患している対象集団の少なくとも１％、少なくとも５％、又は少なくとも１０％に存在する腫瘍に対するＴ細胞応答を誘発する能力を有する、請求項３８４又は３８５に記載の方法。
- 前記少なくとも１つのネオ抗原ｍＲＮＡが、有効量の前記化合物、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物を新生物細胞に接触させることにより誘導されるネオ抗原配列をコードする、請求項３７８～３８６のいずれか一項に記載の方法。
- 前記ネオ抗原ワクチンが少なくとも１つのネオ抗原ｍＲＮＡと薬学的に許容可能な担体とを含む、請求項３７７に記載の方法。
- 前記少なくとも１つのネオ抗原ｍＲＮＡが前記薬学的に許容可能な担体に連結される、請求項３８８に記載の方法。
- 前記薬学的に許容可能な担体が、ペプチド、血清アルブミン、キーホールリンペットヘモシアニン、免疫グロブリン、チログロブリン、オボアルブミン、トキソイド又は弱毒化トキソイド誘導体、サイトカイン、及びケモカインから選択される、請求項３８８又は３８９に記載の方法。
- 前記ネオ抗原ワクチンが少なくとも１つのネオ抗原ｍＲＮＡと薬学的に許容可能な希釈剤とを含む、請求項３７７に記載の方法。
- 前記ネオ抗原ワクチンが少なくとも１つのネオ抗原ｍＲＮＡと薬学的に許容可能なアジュバントとを含む、請求項３７７に記載の方法。
- 前記ネオ抗原ｍＲＮＡが封入剤に封入される、請求項３７７～３９２のいずれか一項に記載の方法。
- 前記封入剤がリポソームである、請求項３９３に記載の方法。
- 前記封入剤がナノ粒子である、請求項３９３に記載の方法。
- 前記新生物細胞がインビトロ細胞培養物中に存在する、請求項３８７に記載の方法。
- 前記新生物細胞が前記対象から入手される、請求項３８７又は３９６に記載の方法。
- 前記新生物細胞が前記対象に存在する、請求項３８７に記載の方法。
- 前記少なくとも１つの追加療法が、サイトカイン又はサイトカイン類似体を投与することを含む、請求項３１１～３２８のいずれか一項に記載の方法。
- 前記対象が、単独投与時の前記サイトカイン又はサイトカイン類似体に不忍容、不応性、又は難反応性である、請求項３９９に記載の方法。
- 前記サイトカイン又はサイトカイン類似体がＴ細胞エンハンサーを含む、請求項３９９又は４００に記載の方法。
- 前記サイトカイン又はサイトカイン類似体が、ＩＬ－２、ＩＬ－１０、ＩＬ－１２、ＩＬ－１５、ＩＦＮγ、及び／又はＴＮＦαを含む、請求項３９９～４０１のいずれか一項に記載の方法。
- 前記少なくとも１つの追加療法が、改変腫瘍標的化Ｔ細胞を投与することを含む、請求項３１１～３２８のいずれか一項に記載の方法。
- 前記化合物、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物の投与後に前記対象において１つ以上のネオ抗原及び／又はＴ細胞応答を検出することを更に含む、請求項３０５～４０３のいずれか一項に記載の方法。
- １つ以上のネオ抗原及び／又はＴ細胞応答が検出された場合、前記化合物、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物の投与を継続することを更に含む、請求項４０４に記載の方法。
- １つ以上のネオ抗原及び／又はＴ細胞応答が検出された場合、前記化合物、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物の投与をより低頻度及び／又は低減した投薬量で継続することを更に含む、請求項４０４又は４０５に記載の方法。
- 前記対象における１つ以上のネオ抗原及び／又はＴ細胞応答の検出により、前記化合物、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物による治療の有効性が指示される、請求項４０４～４０６のいずれか一項に記載の方法。
- 前記対象が約１５０個以下の突然変異の非同義突然変異荷重を有する、請求項３０５～４０７のいずれか一項に記載の方法。
- 前記対象が約１００個以下の突然変異の非同義突然変異荷重を有する、請求項３０５～４０８のいずれか一項に記載の方法。
- 前記対象が約５０個以下の突然変異の非同義突然変異荷重を有する、請求項３０５～４０９のいずれか一項に記載の方法。
- 前記新生物性障害が血液学的悪性腫瘍又は固形腫瘍である、請求項３０５～４１０のいずれか一項に記載の方法。
- 前記血液学的悪性腫瘍が、Ｂ細胞悪性腫瘍、白血病、リンパ腫、及び骨髄腫から選択される、請求項４１１に記載の方法。
- 前記血液学的悪性腫瘍が、急性骨髄性白血病及び多発性骨髄腫から選択される、請求項４１１又は４１２に記載の方法。
- 前記固形腫瘍が、乳癌、胃癌、前立腺癌、卵巣癌、肺癌、子宮癌、唾液管癌、黒色腫、結腸癌、子宮頸癌、膵癌、腎癌、結腸直腸癌、及び食道癌から選択される、請求項４１１に記載の方法。
- 新生物性障害を有する又は有する疑いがある対象を治療する方法であって、
（ａ）有効量の請求項１～１８９のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート、請求項１９０～２１９のいずれか一項に記載の化合物、又は請求項２２０～２２４のいずれか一項に記載の組成物を前記対象に投与することであって、前記化合物、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物の投与が少なくとも１つのネオ抗原及び／又はＴ細胞応答を誘導すること；
（ｂ）前記化合物、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物の投与後に前記対象において１つ以上のネオ抗原及び／又はＴ細胞応答を検出すること；及び
（ｃ）１つ以上のネオ抗原及び／又はＴ細胞応答が検出された場合、前記化合物、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物の投与を継続すること
を含む方法。 - 前記対象における１つ以上のネオ抗原及び／又はＴ細胞応答の検出により、前記化合物、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物による治療の有効性が指示される、請求項４１５に記載の方法。
- 新生物性障害を有する又は有する疑いがある対象を治療する方法であって、有効量の請求項１～１８９のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート、請求項１９０～２１９のいずれか一項に記載の化合物、又は請求項２２０～２２４のいずれか一項に記載の組成物；及び少なくとも１つの追加療法を前記対象に投与することを含む方法。
- 前記少なくとも１つの追加療法が、少なくとも１つ、少なくとも２つ、少なくとも３つ、少なくとも４つ、又は少なくとも５つの追加療法を含む、請求項４１７に記載の方法。
- 前記化合物、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物の投与が少なくとも１つのネオ抗原及び／又はＴ細胞応答を誘導する、請求項４１７又は４１８に記載の方法。
- 前記化合物、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物及び／又は前記少なくとも１つの追加療法の投与量が、前記化合物、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物及び／又は前記少なくとも１つの追加療法の標準的な投薬量と比較したとき、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、７５％、又は９０％低減される、請求項４１７～４１９のいずれか一項に記載の方法。
- 前記化合物、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物及び／又は前記少なくとも１つの追加療法が、前記化合物、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物及び／又は前記少なくとも１つの追加療法の標準的な投与レジメンと比較したとき、少なくとも１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、７５％、又は９０％低い頻度で投与される、請求項４１７～４２０のいずれか一項に記載の方法。
- 前記化合物、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物及び／又は前記少なくとも１つの追加療法の投与量及び／又は投薬量が、全身毒性の低下及び／又は忍容性の向上をもたらす、請求項４１７～４２１のいずれか一項に記載の方法。
- 前記化合物、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物の投与が、前記少なくとも１つの追加療法の投与前に開始される、請求項４１７～４２２のいずれか一項に記載の方法。
- 前記化合物、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物の投与が、前記少なくとも１つの追加療法の投与後に開始される、請求項４１７～４２２のいずれか一項に記載の方法。
- 前記化合物、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物の投与が、前記少なくとも１つの追加療法の投与と同時に開始される、請求項４１７～４２２のいずれか一項に記載の方法。
- 前記化合物、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物の投与が、初回投与後に少なくとも１回反復される、請求項４１７～４２５のいずれか一項に記載の方法。
- 前記化合物、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物の反復投与に使用される量が、初回投与に使用される量と比較したとき低減される、請求項４２６に記載の方法。
- 前記化合物、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物の反復投与に使用される量が、前記化合物、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物の標準的な投薬量と比較したとき低減される、請求項４２６又は４２７に記載の方法。
- 前記化合物、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物の反復投与に使用される量が、前記化合物、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物の標準的な投薬量と比較したとき、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、７５％、又は９０％低減される、請求項４２６～４２８のいずれか一項に記載の方法。
- 前記少なくとも１つの追加療法の投与が、初回投与後に少なくとも１回反復される、請求項４１７～４２９のいずれか一項に記載の方法。
- 前記少なくとも１つの追加療法の反復投与に使用される量が、初回投与に使用される量と比較したとき低減される、請求項４３０に記載の方法。
- 前記少なくとも１つの追加療法の反復投与に使用される量が、前記少なくとも１つの追加療法の標準的な投薬量と比較したとき低減される、請求項４３０又は４３１に記載の方法。
- 前記少なくとも１つの追加療法の反復投与に使用される量が、前記少なくとも１つの追加療法の標準的な投薬量と比較したとき、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、７５％、又は９０％低減される、請求項４３０～４３２のいずれか一項に記載の方法。
- 前記化合物、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物の反復投与が、前記少なくとも１つの追加療法の反復投与と同時である、請求項４２６～４３３のいずれか一項に記載の方法。
- 前記化合物、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物の反復投与が、前記少なくとも１つの追加療法の反復投与と逐次的であるか、又は時間をずらされる、請求項４２６～４３３のいずれか一項に記載の方法。
- 前記少なくとも１つの追加療法が、チェックポイント阻害薬を投与することを含む、請求項４１７～４３５のいずれか一項に記載の方法。
- 前記対象が、単独投与時の前記チェックポイント阻害薬に不忍容、不応性、又は難反応性である、請求項４３６に記載の方法。
- 前記チェックポイント阻害薬が、ＣＴＬＡ４、ＰＤ１、ＰＤＬ１、ＯＸ４０、ＣＤ４０、ＧＩＴＲ、ＬＡＧ３、ＴＩＭ３、及び／又はＫＩＲを標的化する、請求項４３６又は４３７に記載の方法。
- 前記チェックポイント阻害薬が、ＣＴＬＡ４、ＯＸ４０、ＣＤ４０、及び／又はＧＩＴＲを標的化する、請求項４３６～４３８のいずれか一項に記載の方法。
- 前記チェックポイント阻害薬が細胞傷害性Ｔリンパ球関連抗原４経路（ＣＴＬＡ４）阻害薬を含む、請求項４３６～４３９のいずれか一項に記載の方法。
- 前記ＣＴＬＡ４阻害薬が抗ＣＴＬＡ４抗体である、請求項４４０に記載の方法。
- 前記抗ＣＴＬＡ４抗体がイピリムマブである、請求項４４１に記載の方法。
- 前記チェックポイント阻害薬がプログラム死－１経路（ＰＤ１）阻害薬を含む、請求項４３６～４３９のいずれか一項に記載の方法。
- 前記ＰＤ１阻害薬が抗ＰＤ１抗体である、請求項４４３に記載の方法。
- 前記抗ＰＤ１抗体がニボルマブである、請求項４４４に記載の方法。
- 前記ＰＤ１阻害薬が抗ＰＤＬ１抗体である、請求項４４３に記載の方法。
- 前記抗ＰＤＬ１抗体がアテゾリズマブである、請求項４４６に記載の方法。
- 前記チェックポイント阻害薬がＣＴＬＡ４阻害薬及びＰＤ１阻害薬を含む、請求項４３６～４３９のいずれか一項に記載の方法。
- 前記ＣＴＬＡ４阻害薬が抗ＣＴＬＡ４抗体である、請求項４４８に記載の方法。
- 前記抗ＣＴＬＡ４抗体がイピリムマブである、請求項４４９に記載の方法。
- 前記ＰＤ１阻害薬が抗ＰＤ１抗体である、請求項４４８に記載の方法。
- 前記抗ＰＤ１抗体がニボルマブである、請求項４５１に記載の方法。
- 前記ＰＤ１阻害薬が抗ＰＤＬ１抗体である、請求項４４８に記載の方法。
- 前記抗ＰＤＬ１抗体がアテゾリズマブである、請求項４５３に記載の方法。
- 前記少なくとも１つの追加療法が、ネオ抗原ワクチンを投与することを含む、請求項４１７～４３５のいずれか一項に記載の方法。
- 前記化合物、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物が、前記ネオ抗原ワクチンの投与前に投与される、請求項４５５に記載の方法。
- 前記化合物、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物が、前記ネオ抗原ワクチンの投与後に投与される、請求項４５５に記載の方法。
- 前記化合物、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物が、前記ネオ抗原ワクチンの投与と同時に投与される、請求項４５５に記載の方法。
- 前記化合物、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物の投与が、初回投与後に少なくとも１回反復される、請求項４５５～４５８のいずれか一項に記載の方法。
- 前記化合物、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物の反復投与に使用される量が、初回投与に使用される量と比較したとき低減される、請求項４５９に記載の方法。
- 前記ネオ抗原ワクチンが少なくとも１つのネオ抗原ペプチドを含む、請求項４５５～４６０のいずれか一項に記載の方法。
- 前記少なくとも１つのネオ抗原ペプチドが約１０～約３５アミノ酸長の範囲である、請求項４６１に記載の方法。
- 前記少なくとも１つのネオ抗原ペプチドが約１５～約２５アミノ酸長の範囲である、請求項４６１又は４６２に記載の方法。
- 前記少なくとも１つのネオ抗原ペプチドが１つ又は２つ以上のネオ抗原配列を含む、請求項４６１～４６３のいずれか一項に記載の方法。
- 前記ネオ抗原配列が、前記対象に特異的なネオ抗原配列である、請求項４６４に記載の方法。
- 前記ネオ抗原配列がユニバーサルネオ抗原配列である、請求項４６４に記載の方法。
- 前記ネオ抗原配列が、前記対象向けに個別化されたネオ抗原ワクチンである、請求項４６５に記載の方法。
- 前記ネオ抗原配列が、有効量の前記化合物、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物を投与することにより前記対象において誘導される少なくとも１つのネオ抗原をシーケンシングすることによって同定されている、請求項４６７に記載の方法。
- 前記ネオ抗原配列が、前記対象に発現する少なくとも１つのＨＬＡアレルに結合する能力を有する、請求項４６７又は４６８に記載の方法。
- 前記ネオ抗原配列がユニバーサルネオ抗原ワクチンである、請求項４６６に記載の方法。
- 前記ネオ抗原配列が、前記新生物性障害に罹患している対象集団中の対象の少なくとも１０％、少なくとも１５％、少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、又は少なくとも４５％に発現する少なくとも１つのＨＬＡアレルに結合する能力を有する、請求項４７０に記載の方法。
- 前記ネオ抗原配列が、前記新生物性障害に罹患している対象集団の少なくとも１％、少なくとも５％、又は少なくとも１０％に存在する腫瘍に対するＴ細胞応答を誘発する能力を有する、請求項４７０又は４７１に記載の方法。
- 前記少なくとも１つのネオ抗原ペプチドが、有効量の前記化合物、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物を新生物細胞に接触させることにより誘導されるネオ抗原配列を含む、請求項４６４～４７２のいずれか一項に記載の方法。
- 前記ネオ抗原ワクチンが少なくとも１つのネオ抗原ペプチドと薬学的に許容可能な担体とを含む、請求項４５５に記載の方法。
- 前記少なくとも１つのネオ抗原ペプチドが前記薬学的に許容可能な担体に連結される、請求項４７４に記載の方法。
- 前記薬学的に許容可能な担体が、ペプチド、血清アルブミン、キーホールリンペットヘモシアニン、免疫グロブリン、チログロブリン、オボアルブミン、トキソイド又は弱毒化トキソイド誘導体、サイトカイン、及びケモカインから選択される、請求項４７４又は４７５に記載の方法。
- 前記ネオ抗原ペプチドと前記薬学的に許容可能な担体とがリンカーを介して共有結合的に結び付いている、請求項４７４～４７６のいずれか一項に記載の方法。
- 前記ネオ抗原ペプチドと前記薬学的に許容可能な担体とが融合タンパク質として発現する、請求項４７４～４７６のいずれか一項に記載の方法。
- 前記ネオ抗原ワクチンが少なくとも１つのネオ抗原ペプチドと薬学的に許容可能な希釈剤とを含む、請求項４５５に記載の方法。
- 前記ネオ抗原ワクチンが少なくとも１つのネオ抗原ペプチドと薬学的に許容可能なアジュバントとを含む、請求項４５５に記載の方法。
- 前記新生物細胞がインビトロ細胞培養物中に存在する、請求項４７３に記載の方法。
- 前記新生物細胞が前記対象から入手される、請求項４７３又は４８１に記載の方法。
- 前記新生物細胞が前記対象に存在する、請求項４７３に記載の方法。
- 前記ネオ抗原ワクチンが少なくとも１つのネオ抗原ｍＲＮＡを含む、請求項４５５～４６０のいずれか一項に記載の方法。
- 前記少なくとも１つのネオ抗原ｍＲＮＡが１つ又は２つ以上のネオ抗原配列をコードする、請求項４８４に記載の方法。
- 前記ネオ抗原配列が、前記対象に特異的なネオ抗原配列である、請求項４８５に記載の方法。
- 前記ネオ抗原配列がユニバーサルネオ抗原配列である、請求項４８５に記載の方法。
- 前記ネオ抗原配列が、前記対象向けに個別化されたネオ抗原ワクチンである、請求項４８６に記載の方法。
- 前記ネオ抗原配列が、有効量の前記化合物、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物を投与することにより前記対象において誘導される少なくとも１つのネオ抗原をシーケンシングすることによって同定されている、請求項４８８に記載の方法。
- 前記ネオ抗原配列が、前記対象に発現する少なくとも１つのＨＬＡアレルに結合する能力を有する、請求項４８８又は４８９に記載の方法。
- 前記ネオ抗原配列がユニバーサルネオ抗原ワクチンである、請求項４８７に記載の方法。
- 前記ネオ抗原配列が、前記新生物性障害に罹患している対象集団中の対象の少なくとも１０％、少なくとも１５％、少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、又は少なくとも４５％に発現する少なくとも１つのＨＬＡアレルに結合する能力を有する、請求項４９１に記載の方法。
- 前記ネオ抗原配列が、前記新生物性障害に罹患している対象集団の少なくとも１％、少なくとも５％、又は少なくとも１０％に存在する腫瘍に対するＴ細胞応答を誘発する能力を有する、請求項４９１又は４９２に記載の方法。
- 前記少なくとも１つのネオ抗原ｍＲＮＡが、有効量の前記化合物、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物を新生物細胞に接触させることにより誘導されるネオ抗原配列をコードする、請求項４８４～４９３のいずれか一項に記載の方法。
- 前記ネオ抗原ワクチンが少なくとも１つのネオ抗原ｍＲＮＡと薬学的に許容可能な担体とを含む、請求項４８４に記載の方法。
- 前記少なくとも１つのネオ抗原ｍＲＮＡが前記薬学的に許容可能な担体に連結される、請求項４９５に記載の方法。
- 前記薬学的に許容可能な担体が、ペプチド、血清アルブミン、キーホールリンペットヘモシアニン、免疫グロブリン、チログロブリン、オボアルブミン、トキソイド又は弱毒化トキソイド誘導体、サイトカイン、及びケモカインから選択される、請求項４９５又は４９６に記載の方法。
- 前記ネオ抗原ワクチンが少なくとも１つのネオ抗原ｍＲＮＡと薬学的に許容可能な希釈剤とを含む、請求項４８４に記載の方法。
- 前記ネオ抗原ワクチンが少なくとも１つのネオ抗原ｍＲＮＡと薬学的に許容可能なアジュバントとを含む、請求項４８４に記載の方法。
- 前記ネオ抗原ｍＲＮＡが封入剤に封入される、請求項４８４～４９９のいずれか一項に記載の方法。
- 前記封入剤がリポソームである、請求項５００に記載の方法。
- 前記封入剤がナノ粒子である、請求項５００に記載の方法。
- 前記新生物細胞がインビトロ細胞培養物中に存在する、請求項４９４に記載の方法。
- 前記新生物細胞が前記対象から入手される、請求項４９４又は５０３に記載の方法。
- 前記新生物細胞が前記対象に存在する、請求項４９４に記載の方法。
- 前記少なくとも１つの追加療法が、サイトカイン又はサイトカイン類似体を投与することを含む、請求項４１７～４３５のいずれか一項に記載の方法。
- 前記対象が、単独投与時の前記サイトカイン又はサイトカイン類似体に不忍容、不応性、又は難反応性である、請求項５０６に記載の方法。
- 前記サイトカイン又はサイトカイン類似体がＴ細胞エンハンサーを含む、請求項５０６又は５０７に記載の方法。
- 前記サイトカイン又はサイトカイン類似体が、ＩＬ－２、ＩＬ－１０、ＩＬ－１２、ＩＬ－１５、ＩＦＮγ、及び／又はＴＮＦαを含む、請求項５０６～５０８のいずれか一項に記載の方法。
- 前記少なくとも１つの追加療法が、改変腫瘍標的化Ｔ細胞を投与することを含む、請求項４１７～４３５のいずれか一項に記載の方法。
- 前記対象が約１５０個以下の突然変異の非同義突然変異荷重を有する、請求項４１７～５１０のいずれか一項に記載の方法。
- 前記対象が約１００個以下の突然変異の非同義突然変異荷重を有する、請求項４１７～５１１のいずれか一項に記載の方法。
- 前記対象が約５０個以下の突然変異の非同義突然変異荷重を有する、請求項４１７～５１２のいずれか一項に記載の方法。
- 前記新生物性障害が血液学的悪性腫瘍又は固形腫瘍である、請求項４１７～５１３のいずれか一項に記載の方法。
- 前記血液学的悪性腫瘍が、Ｂ細胞悪性腫瘍、白血病、リンパ腫、及び骨髄腫から選択される、請求項５１４に記載の方法。
- 前記血液学的悪性腫瘍が、急性骨髄性白血病及び多発性骨髄腫から選択される、請求項５１４又は５１５に記載の方法。
- 前記固形腫瘍が、乳癌、胃癌、前立腺癌、卵巣癌、肺癌、子宮癌、唾液管癌、黒色腫、結腸癌、子宮頸癌、膵癌、腎癌、結腸直腸癌、及び食道癌から選択される、請求項５１４に記載の方法。
- 少なくとも１つのネオ抗原を同定する方法であって、
（ａ）有効量の請求項１～１８９のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート、請求項１９０～２１９のいずれか一項に記載の化合物、又は請求項２２０～２２４のいずれか一項に記載の組成物を新生物細胞に接触させること；
（ｂ）前記化合物、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物を前記新生物細胞に接触させた後、少なくとも１つの選択的にスプライシングされたｍＲＮＡ転写物を検出すること；
（ｃ）前記少なくとも１つの選択的にスプライシングされたｍＲＮＡ転写物から少なくとも１つのペプチドへの翻訳を予測すること；及び
（ｄ）前記少なくとも１つのペプチドを参照プロテオームと比較することであって、前記少なくとも１つのペプチドが前記参照プロテオームのいかなるペプチドとも一致しない場合、少なくとも１つのネオ抗原が同定されること
を含む方法。 - 少なくとも１つの選択的にスプライシングされたｍＲＮＡ転写物を検出することが、ＲＮＡｓｅｑを含む、請求項５１８に記載の方法。
- 前記少なくとも１つの選択的にスプライシングされたｍＲＮＡ転写物の翻訳を予測することが、前記少なくとも１つの転写物に関するパーセントスプライスイン（ｄＰＳＩ）値の変化を定量化することを含む、請求項５１８又は５１９に記載の方法。
- 前記少なくとも１つの選択的にスプライシングされたｍＲＮＡ転写物の翻訳を予測することが、ＲｉｂｏＳｅｑ及び／又はリボソームプロファイリングを含む、請求項５１８～５２０のいずれか一項に記載の方法。
- 予測される主要組織適合遺伝子複合体（ＭＨＣ）結合に関して前記少なくとも１つのペプチドを評価することを更に含む、請求項５１８～５２１のいずれか一項に記載の方法。
- 予測ＭＨＣ結合が、前記少なくとも１つのペプチドの未補正親和性予測結合強度を測定することにより決定される、請求項５２２に記載の方法。
- 約５００ｎＭ以上の未補正親和性予測結合強度がＭＨＣ結合を示す、請求項５２３に記載の方法。
- 予測ＭＨＣ結合が、一系列のランダムペプチドに関して予測結合強度の分布を同定し；及び前記少なくとも１つのペプチドの予測結合強度を前記分布と比較することにより決定される、請求項５２２～５２４のいずれか一項に記載の方法。
- 前記分布の上位２％にある予測結合強度が弱いＭＨＣ結合を示す、請求項５２５に記載の方法。
- 前記分布の上位０．５％にある予測結合強度が強いＭＨＣ結合を示す、請求項５２５に記載の方法。
- 前記新生物細胞がインビトロ細胞培養物中に存在する、請求項５１８～５２７のいずれか一項に記載の方法。
- 前記新生物細胞が前記対象から入手される、請求項５２８に記載の方法。
- 前記新生物細胞が前記対象に存在する、請求項５１８～５２７のいずれか一項に記載の方法。
- １つ以上の追加の新生物細胞と接触させて少なくとも１つのユニバーサルネオ抗原を同定することを更に含む、請求項５１８～５３０のいずれか一項に記載の方法。
- 少なくとも１つのネオ抗原を同定する方法であって、
（ａ）有効量の請求項１～１８９のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート、請求項１９０～２１９のいずれか一項に記載の化合物、又は請求項２２０～２２４のいずれか一項に記載の組成物を新生物細胞に接触させること；
（ｂ）前記化合物、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物を前記新生物細胞に接触させた後、潜在的ネオ抗原配列を含む少なくとも１つのペプチドを検出すること；及び
（ｃ）前記少なくとも１つのペプチドを参照プロテオームと比較することであって、前記少なくとも１つのペプチドが前記参照プロテオームのいかなるペプチドとも一致しない場合、少なくとも１つのネオ抗原が同定されること
を含む方法。 - 予測される主要組織適合遺伝子複合体（ＭＨＣ）結合に関して前記少なくとも１つのペプチドを評価することを更に含む、請求項５３２に記載の方法。
- 予測ＭＨＣ結合が、前記少なくとも１つのペプチドの未補正親和性予測結合強度を測定することにより決定される、請求項５３３に記載の方法。
- 約５００ｎＭ以上の未補正親和性予測結合強度がＭＨＣ結合を示す、請求項５３４に記載の方法。
- 予測ＭＨＣ結合が、一系列のランダムペプチドに関して予測結合強度の分布を同定し；及び前記少なくとも１つのペプチドの予測結合強度を前記分布と比較することにより決定される、請求項５３３～５３５のいずれか一項に記載の方法。
- 前記分布の上位２％にある予測結合強度が弱いＭＨＣ結合を示す、請求項５３６に記載の方法。
- 前記分布の上位０．５％にある予測結合強度が強いＭＨＣ結合を示す、請求項５３６に記載の方法。
- 前記新生物細胞がインビトロ細胞培養物中に存在する、請求項５３２～５３８のいずれか一項に記載の方法。
- 前記新生物細胞が前記対象から入手される、請求項５３９に記載の方法。
- 前記新生物細胞が前記対象に存在する、請求項５３２～５３８のいずれか一項に記載の方法。
- １つ以上の追加の新生物細胞と接触させて少なくとも１つのユニバーサルネオ抗原を同定することを更に含む、請求項５３２～５４１のいずれか一項に記載の方法。
- ネオ抗原ワクチンの作製方法であって、
（ａ）請求項５１８～５４２のいずれか一項に記載の方法を用いて少なくとも１つのネオ抗原を同定すること；及び
（ｂ）前記少なくとも１つのネオ抗原を薬学的に許容可能な担体、希釈剤、又はアジュバントと共に製剤化すること
を含む方法。 - 前記少なくとも１つのネオ抗原が前記薬学的に許容可能な担体に連結される、請求項５４３に記載の方法。
- 前記薬学的に許容可能な担体が、ペプチド、血清アルブミン、キーホールリンペットヘモシアニン、免疫グロブリン、チログロブリン、オボアルブミン、トキソイド又は弱毒化トキソイド誘導体、サイトカイン、及びケモカインから選択される、請求項５４４に記載の方法。
- 新生物性障害を有する又は有する疑いがある対象を治療する方法であって、
（ａ）有効量の請求項１～１８９のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート、請求項１９０～２１９のいずれか一項に記載の化合物、又は請求項２２０～２２４のいずれか一項に記載の組成物を前記対象に投与すること；
（ｂ）前記化合物、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物の投与後に、前記対象において１つ以上のネオ抗原を検出すること；
（ｃ）前記１つ以上のネオ抗原をユニバーサルネオ抗原のパネルと比較すること；及び
（ｄ）前記対象に存在する少なくとも１つのユニバーサルネオ抗原を含むユニバーサルネオ抗原ワクチンを前記対象に投与すること
を含む方法。 - 前記ユニバーサルネオ抗原ワクチンが、単独で、又は少なくとも１つの追加療法と併用して投与される、請求項５４６に記載の方法。
- 前記少なくとも１つの追加療法が、少なくとも１つ、少なくとも２つ、少なくとも３つ、少なくとも４つ、又は少なくとも５つの追加療法を含む、請求項５４７に記載の方法。
- 前記少なくとも１つの追加療法が、前記化合物、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物の反復投与を含む、請求項５４７又は５４８に記載の方法。
- 前記化合物、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物の反復投与が、前記ユニバーサルネオ抗原ワクチンの投与前に開始される、請求項５４９に記載の方法。
- 前記化合物、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物の反復が、前記ユニバーサルネオ抗原ワクチンの投与後に開始される、請求項５４９に記載の方法。
- 前記化合物、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物の反復投与が、前記ユニバーサルネオ抗原ワクチンの投与と同時に開始される、請求項５４９に記載の方法。
- 前記化合物、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物の反復投与に使用される量が、初回投与に使用される量と比較したとき低減される、請求項５４９～５５２のいずれか一項に記載の方法。
- 前記化合物、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物の反復投与に使用される量が、前記化合物、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物の標準的な投薬量と比較したとき低減される、請求項５４９～５５３のいずれか一項に記載の方法。
- 前記化合物、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物の反復投与に使用される量が、前記化合物、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物の標準的な投薬量と比較したとき、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、７５％、又は９０％低減される、請求項５４９～５５４のいずれか一項に記載の方法。
- 前記少なくとも１つの追加療法が、チェックポイント阻害薬を投与することを含む、請求項５４７～５５５のいずれか一項に記載の方法。
- 前記チェックポイント阻害薬の投与が、前記ユニバーサルネオ抗原ワクチンの投与前及び／又は前記化合物、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物の反復投与前に開始される、請求項５５６に記載の方法。
- 前記チェックポイント阻害薬の投与が、前記ユニバーサルネオ抗原ワクチンの投与後及び／又は前記化合物、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物の反復後に開始される、請求項５５６に記載の方法。
- 前記チェックポイント阻害薬の投与が、前記ユニバーサルネオ抗原ワクチンの投与及び／又は前記化合物、抗体－薬物コンジュゲート、又は組成物の反復投与と同時に開始される、請求項５５６に記載の方法。
- 前記チェックポイント阻害薬の投与が、初回投与後に少なくとも１回反復される、請求項５５６～５５９のいずれか一項に記載の方法。
- 前記チェックポイント阻害薬の反復投与に使用される量が、初回投与に使用される量と比較したとき低減される、請求項５６０に記載の方法。
- 前記チェックポイント阻害薬の反復投与に使用される量が、前記チェックポイント阻害薬の標準的な投薬量と比較したとき低減される、請求項５６０又は５６１に記載の方法。
- 前記チェックポイント阻害薬の反復投与に使用される量が、前記チェックポイント阻害薬の標準的な投薬量と比較したとき、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、７５％、又は９０％低減される、請求項５６０～５６２のいずれか一項に記載の方法。
- 前記対象が、単独投与時の前記チェックポイント阻害薬に不忍容、不応性、又は難反応性である、請求項５５６～５６３のいずれか一項に記載の方法。
- 前記チェックポイント阻害薬が、ＣＴＬＡ４、ＰＤ１、ＰＤＬ１、ＯＸ４０、ＣＤ４０、ＧＩＴＲ、ＬＡＧ３、ＴＩＭ３、及び／又はＫＩＲを標的化する、請求項５５６～５６４のいずれか一項に記載の方法。
- 前記チェックポイント阻害薬が、ＣＴＬＡ４、ＯＸ４０、ＣＤ４０、及び／又はＧＩＴＲを標的化する、請求項５５６～５６５のいずれか一項に記載の方法。
- 前記チェックポイント阻害薬が細胞傷害性Ｔリンパ球関連抗原４経路（ＣＴＬＡ４）阻害薬を含む、請求項５５６～５６６のいずれか一項に記載の方法。
- 前記ＣＴＬＡ４阻害薬が抗ＣＴＬＡ４抗体である、請求項５６７に記載の方法。
- 前記抗ＣＴＬＡ４抗体がイピリムマブである、請求項５６８に記載の方法。
- 前記チェックポイント阻害薬がプログラム死－１経路（ＰＤ１）阻害薬を含む、請求項５５６～５６６のいずれか一項に記載の方法。
- 前記ＰＤ１阻害薬が抗ＰＤ１抗体である、請求項５７０に記載の方法。
- 前記抗ＰＤ１抗体がニボルマブである、請求項５７１に記載の方法。
- 前記ＰＤ１阻害薬が抗ＰＤＬ１抗体である、請求項５７０に記載の方法。
- 前記抗ＰＤＬ１抗体がアテゾリズマブである、請求項５７３に記載の方法。
- 前記チェックポイント阻害薬がＣＴＬＡ４阻害薬及びＰＤ１阻害薬を含む、請求項５５６～５６６のいずれか一項に記載の方法。
- 前記ＣＴＬＡ４阻害薬が抗ＣＴＬＡ４抗体である、請求項５７５に記載の方法。
- 前記抗ＣＴＬＡ４抗体がイピリムマブである、請求項５７６に記載の方法。
- 前記ＰＤ１阻害薬が抗ＰＤ１抗体である、請求項５７５に記載の方法。
- 前記抗ＰＤ１抗体がニボルマブである、請求項５７８に記載の方法。
- 前記ＰＤ１阻害薬が抗ＰＤＬ１抗体である、請求項５７５に記載の方法。
- 前記抗ＰＤＬ１抗体がアテゾリズマブである、請求項５８０に記載の方法。
- 前記ユニバーサルネオ抗原ワクチンが少なくとも１つのネオ抗原ペプチドを含む、請求項５４６～５８１のいずれか一項に記載の方法。
- 前記少なくとも１つのネオ抗原ペプチドが約１０～約３５アミノ酸長の範囲である、請求項５８２に記載の方法。
- 前記少なくとも１つのネオ抗原ペプチドが約１５～約２５アミノ酸長の範囲である、請求項５８２又は５８３に記載の方法。
- 前記少なくとも１つのネオ抗原ペプチドが１つ又は２つ以上のユニバーサルネオ抗原配列を含む、請求項５８２～５８４のいずれか一項に記載の方法。
- 前記ユニバーサルネオ抗原配列が、前記新生物性障害に罹患している対象集団中の対象の少なくとも１０％、少なくとも１５％、少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、又は少なくとも４５％に発現する少なくとも１つのＨＬＡアレルに結合する能力を有する、請求項５８５に記載の方法。
- 前記ユニバーサルネオ抗原配列が、前記新生物性障害に罹患している対象集団の少なくとも１％、少なくとも５％、又は少なくとも１０％に存在する腫瘍に対するＴ細胞応答を誘発する能力を有する、請求項５８５又は５８６に記載の方法。
- 前記ユニバーサルネオ抗原ワクチンが少なくとも１つのネオ抗原ペプチドと薬学的に許容可能な担体とを含む、請求項５８２に記載の方法。
- 前記少なくとも１つのネオ抗原ペプチドが前記薬学的に許容可能な担体に連結される、請求項５８８に記載の方法。
- 前記薬学的に許容可能な担体が、ペプチド、血清アルブミン、キーホールリンペットヘモシアニン、免疫グロブリン、チログロブリン、オボアルブミン、トキソイド又は弱毒化トキソイド誘導体、サイトカイン、及びケモカインから選択される、請求項５８８又は５８９に記載の方法。
- 前記ネオ抗原ペプチドと前記薬学的に許容可能な担体とがリンカーを介して共有結合的に結び付いている、請求項５８８～５９０のいずれか一項に記載の方法。
- 前記ネオ抗原ペプチドと前記薬学的に許容可能な担体とが融合タンパク質として発現する、請求項５８８～５９０のいずれか一項に記載の方法。
- 前記ユニバーサルネオ抗原ワクチンが少なくとも１つのネオ抗原ペプチドと薬学的に許容可能な希釈剤とを含む、請求項５８２に記載の方法。
- 前記ユニバーサルネオ抗原ワクチンが少なくとも１つのネオ抗原ペプチドと薬学的に許容可能なアジュバントとを含む、請求項５８２に記載の方法。
- 前記ユニバーサルネオ抗原ワクチンが少なくとも１つのネオ抗原ｍＲＮＡを含む、請求項５４６～５８１のいずれか一項に記載の方法。
- 前記少なくとも１つのネオ抗原ｍＲＮＡが１つ又は２つ以上のユニバーサルネオ抗原配列をコードする、請求項５９５に記載の方法。
- 前記ユニバーサルネオ抗原配列が、前記新生物性障害に罹患している対象集団中の対象の少なくとも１０％、少なくとも１５％、少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、又は少なくとも４５％に発現する少なくとも１つのＨＬＡアレルに結合する能力を有する、請求項５９６に記載の方法。
- 前記ユニバーサルネオ抗原配列が、前記新生物性障害に罹患している対象集団の少なくとも１％、少なくとも５％、又は少なくとも１０％に存在する腫瘍に対するＴ細胞応答を誘発する能力を有する、請求項５９６又は５９７に記載の方法。
- 前記ユニバーサルネオ抗原ワクチンが少なくとも１つのネオ抗原ｍＲＮＡと薬学的に許容可能な担体とを含む、請求項５９５に記載の方法。
- 前記少なくとも１つのネオ抗原ｍＲＮＡが前記薬学的に許容可能な担体に連結される、請求項５９９に記載の方法。
- 前記薬学的に許容可能な担体が、ペプチド、血清アルブミン、キーホールリンペットヘモシアニン、免疫グロブリン、チログロブリン、オボアルブミン、トキソイド又は弱毒化トキソイド誘導体、サイトカイン、及びケモカインから選択される、請求項５９９又は６００に記載の方法。
- 前記ユニバーサルネオ抗原ワクチンが少なくとも１つのネオ抗原ｍＲＮＡと薬学的に許容可能な希釈剤とを含む、請求項５９５に記載の方法。
- 前記ユニバーサルネオ抗原ワクチンが少なくとも１つのネオ抗原ｍＲＮＡと薬学的に許容可能なアジュバントとを含む、請求項５９５に記載の方法。
- 前記ネオ抗原ｍＲＮＡが封入剤に封入される、請求項５９５～６０３のいずれか一項に記載の方法。
- 前記封入剤がリポソームである、請求項６０４に記載の方法。
- 前記封入剤がナノ粒子である、請求項６０４に記載の方法。
- 前記対象が約１５０個以下の突然変異の非同義突然変異荷重を有する、請求項５４６～６０６のいずれか一項に記載の方法。
- 前記対象が約１００個以下の突然変異の非同義突然変異荷重を有する、請求項５４６～６０７のいずれか一項に記載の方法。
- 前記対象が約５０個以下の突然変異の非同義突然変異荷重を有する、請求項５４６～６０８のいずれか一項に記載の方法。
- 前記新生物性障害が血液学的悪性腫瘍又は固形腫瘍である、請求項５４６～６０９のいずれか一項に記載の方法。
- 前記血液学的悪性腫瘍が、Ｂ細胞悪性腫瘍、白血病、リンパ腫、及び骨髄腫から選択される、請求項６１０に記載の方法。
- 前記血液学的悪性腫瘍が、急性骨髄性白血病及び多発性骨髄腫から選択される、請求項６１０又は６１１に記載の方法。
- 前記固形腫瘍が、乳癌、胃癌、前立腺癌、卵巣癌、肺癌、子宮癌、唾液管癌、黒色腫、結腸癌、子宮頸癌、膵癌、腎癌、結腸直腸癌、及び食道癌から選択される、請求項６１０に記載の方法。
- 少なくとも１つのネオ抗原ペプチドを含むネオ抗原ワクチンであって、前記少なくとも１つのネオ抗原ペプチドが、有効量の請求項１～１８９のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート、請求項１９０～２１９のいずれか一項に記載の化合物、又は請求項２２０～２２４のいずれか一項に記載の組成物を新生物細胞に接触させることにより誘導されるネオ抗原配列を含む、ネオ抗原ワクチン。
- 前記少なくとも１つのネオ抗原ペプチドが約１０～約３５アミノ酸長の範囲である、請求項６１４に記載のネオ抗原ワクチン。
- 前記少なくとも１つのネオ抗原ペプチドが約１５～約２５アミノ酸長の範囲である、請求項６１４又は６１５に記載のネオ抗原ワクチン。
- 薬学的に許容可能な担体を更に含む、請求項６１４～６１６のいずれか一項に記載のネオ抗原ワクチン。
- 前記少なくとも１つのネオ抗原ペプチドが前記薬学的に許容可能な担体に連結される、請求項６１７に記載のネオ抗原ワクチン。
- 前記薬学的に許容可能な担体が、ペプチド、血清アルブミン、キーホールリンペットヘモシアニン、免疫グロブリン、チログロブリン、オボアルブミン、トキソイド又は弱毒化トキソイド誘導体、サイトカイン、及びケモカインから選択される、請求項６１７又は６１８に記載のネオ抗原ワクチン。
- 前記ネオ抗原ペプチドと前記薬学的に許容可能な担体とがリンカーを介して共有結合的に結び付いている、請求項６１７～６１９のいずれか一項に記載のネオ抗原ワクチン。
- 前記ネオ抗原ペプチドと前記薬学的に許容可能な担体とが融合タンパク質として発現する、請求項６１７～６１９のいずれか一項に記載のネオ抗原ワクチン。
- 薬学的に許容可能な希釈剤を更に含む、請求項６１４～６１６のいずれか一項に記載のネオ抗原ワクチン。
- 薬学的に許容可能なアジュバントを更に含む、請求項６１４～６１６のいずれか一項に記載のネオ抗原ワクチン。
- 前記新生物細胞がインビトロ細胞培養物中に存在する、請求項６１４～６２３のいずれか一項に記載のネオ抗原ワクチン。
- 前記新生物細胞が対象から入手される、請求項６１４～６２４のいずれか一項に記載のネオ抗原ワクチン。
- 前記新生物細胞が対象に存在する、請求項６１４～６２３のいずれか一項に記載のネオ抗原ワクチン。
- 少なくとも１つのネオ抗原ｍＲＮＡを含むネオ抗原ワクチンであって、前記少なくとも１つのネオ抗原ｍＲＮＡが、有効量の請求項１～１８９のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート、請求項１９０～２１９のいずれか一項に記載の化合物、又は請求項２２０～２２４のいずれか一項に記載の組成物を新生物細胞に接触させることにより誘導されるネオ抗原配列をコードする、ネオ抗原ワクチン。
- 薬学的に許容可能な担体を更に含む、請求項６２７に記載のネオ抗原ワクチン。
- 前記少なくとも１つのネオ抗原ｍＲＮＡが前記薬学的に許容可能な担体に連結される、請求項６２８に記載のネオ抗原ワクチン。
- 前記薬学的に許容可能な担体が、ペプチド、血清アルブミン、キーホールリンペットヘモシアニン、免疫グロブリン、チログロブリン、オボアルブミン、トキソイド又は弱毒化トキソイド誘導体、サイトカイン、及びケモカインから選択される、請求項６２８又は６２９に記載のネオ抗原ワクチン。
- 薬学的に許容可能な希釈剤を更に含む、請求項６２７に記載のネオ抗原ワクチン。
- 薬学的に許容可能なアジュバントを更に含む、請求項６２７に記載のネオ抗原ワクチン。
- 前記ネオ抗原ｍＲＮＡが封入剤に封入される、請求項６２７～６３２のいずれか一項に記載のネオ抗原ワクチン。
- 前記封入剤がリポソームである、請求項６３３に記載のネオ抗原ワクチン。
- 前記封入剤がナノ粒子である、請求項６３３に記載のネオ抗原ワクチン。
- 前記新生物細胞がインビトロ細胞培養物中に存在する、請求項６２７～６３５のいずれか一項に記載のネオ抗原ワクチン。
- 前記新生物細胞が対象から入手される、請求項６２７～６３６のいずれか一項に記載のネオ抗原ワクチン。
- 前記新生物細胞が対象に存在する、請求項６２７～６３５のいずれか一項に記載のネオ抗原ワクチン。
- 新生物性障害を有する又は有する疑いがある対象を治療する方法であって、治療有効量の請求項１９０～２１９のいずれか一項に記載の化合物又は請求項２２０に記載の医薬組成物を前記対象に投与することを含む方法。
- 新生物性障害を有する又は有する疑いがある対象における腫瘍の成長を低減又は阻害する方法であって、治療有効量の請求項１９０～２１９のいずれか一項に記載の化合物又は請求項２２０に記載の医薬組成物を前記対象に投与することを含む方法。
-
及びその薬学的に許容可能な塩
［式中、Ｌは、抗体に共有結合的に結び付いているリンカーである］から選択される化合物。 -
又はその薬学的に許容可能な塩である、請求項６４１に記載の化合物。 -
又はその薬学的に許容可能な塩である、請求項６４１に記載の化合物。 -
又はその薬学的に許容可能な塩である、請求項６４１に記載の化合物。 -
又はその薬学的に許容可能な塩である、請求項６４１に記載の化合物。 -
又はその薬学的に許容可能な塩である、請求項６４１に記載の化合物。 -
又はその薬学的に許容可能な塩である、請求項６４１に記載の化合物。 -
又はその薬学的に許容可能な塩である、請求項６４１に記載の化合物。 -
又はその薬学的に許容可能な塩である、請求項６４１に記載の化合物。 -
又はその薬学的に許容可能な塩である、請求項６４１に記載の化合物。 -
又はその薬学的に許容可能な塩である、請求項６４１に記載の化合物。 -
又はその薬学的に許容可能な塩である、請求項６４１に記載の化合物。 -
又はその薬学的に許容可能な塩である、請求項６４１に記載の化合物。 -
又はその薬学的に許容可能な塩である、請求項６４１に記載の化合物。 -
又はその薬学的に許容可能な塩である、請求項６４１に記載の化合物。 -
又はその薬学的に許容可能な塩である、請求項６４１に記載の化合物。 -
又はその薬学的に許容可能な塩である、請求項６４１に記載の化合物。 -
又はその薬学的に許容可能な塩である、請求項６４１に記載の化合物。 -
又はその薬学的に許容可能な塩である、請求項６４１に記載の化合物。 -
又はその薬学的に許容可能な塩である、請求項６４１に記載の化合物。 -
又はその薬学的に許容可能な塩である、請求項６４１に記載の化合物。 -
又はその薬学的に許容可能な塩である、請求項６４１に記載の化合物。 -
又はその薬学的に許容可能な塩である、請求項６４１に記載の化合物。 -
又はその薬学的に許容可能な塩である、請求項６４１に記載の化合物。 -
又はその薬学的に許容可能な塩である、請求項６４１に記載の化合物。 -
又はその薬学的に許容可能な塩である、請求項６４１に記載の化合物。 -
又はその薬学的に許容可能な塩である、請求項６４１に記載の化合物。 -
又はその薬学的に許容可能な塩である、請求項６４１に記載の化合物。 -
又はその薬学的に許容可能な塩である、請求項６４１に記載の化合物。 -
又はその薬学的に許容可能な塩である、請求項６４１に記載の化合物。 -
又はその薬学的に許容可能な塩である、請求項６４１に記載の化合物。 -
又はその薬学的に許容可能な塩である、請求項６４１に記載の化合物。 -
又はその薬学的に許容可能な塩である、請求項６４１に記載の化合物。 -
又はその薬学的に許容可能な塩である、請求項６４１に記載の化合物。 -
又はその薬学的に許容可能な塩である、請求項６４１に記載の化合物。 -
又はその薬学的に許容可能な塩である、請求項６４１に記載の化合物。 -
又はその薬学的に許容可能な塩である、請求項６４１に記載の化合物。 -
又はその薬学的に許容可能な塩である、請求項６４１に記載の化合物。 - 前記リンカーが切断可能リンカーである、請求項６４１～６７８のいずれか一項に記載の化合物。
- 前記リンカーが切断可能なペプチド部分を含む、請求項６７９に記載の化合物。
- 前記切断可能なペプチド部分が酵素によって切断可能である、請求項６８０に記載の化合物。
- 前記切断可能なペプチド部分又はリンカーがアミノ酸単位を含む、請求項６７９～６８１のいずれか一項に記載の化合物。
- 前記アミノ酸単位がバリン－シトルリン（Ｖａｌ－Ｃｉｔ）を含む、請求項６８２に記載の化合物。
- 前記アミノ酸単位がバリン－アラニン（Ｖａｌ－Ａｌａ）を含む、請求項６８２に記載の化合物。
- 前記アミノ酸単位がグルタミン－バリン－シトルリン（Ｇｌｕ－Ｖａｌ－Ｃｉｔ）を含む、請求項６８２に記載の化合物。
- 前記アミノ酸単位がアラニン－アラニン－アスパラギン（Ａｌａ－Ａｌａ－Ａｓｎ）を含む、請求項６８２に記載の化合物。
- 前記リンカーが切断可能なグルクロニド部分を含む、請求項６７９に記載の化合物。
- 前記切断可能なグルクロニド部分が酵素によって切断可能である、請求項６８７に記載の化合物。
- 前記切断可能なグルクロニド部分がグルクロニダーゼによって切断可能である、請求項６８７又は６８８に記載の化合物。
- 前記切断可能なグルクロニド部分がβ－グルクロニダーゼによって切断可能である、請求項６８７～６８９のいずれか一項に記載の化合物。
- 前記リンカーが少なくとも１つのスペーサー単位を含む、請求項６４１～６９０のいずれか一項に記載の化合物。
- 前記スペーサー単位又はリンカーがポリエチレングリコール（ＰＥＧ）部分を含む、請求項６９１に記載の化合物。
- 前記ＰＥＧ部分が－（ＰＥＧ）ｍ－を含み、ｍが１～１０の整数である、請求項６９２に記載の化合物。
- ｍが２である、請求項６９３に記載の化合物。
- 前記スペーサー単位又はリンカーがアルキル部分を含む、請求項６９３に記載の化合物。
- 前記アルキル部分が－（ＣＨ２）ｎ－を含み、ｎが１～１０の整数である請求項６９５に記載の化合物。
- ｎが２である、請求項６９６に記載の化合物。
- ｎが５である、請求項６９６に記載の化合物。
- ｎが６である、請求項６９６に記載の化合物。
- 前記スペーサー単位がマレイミド（Ｍａｌ）部分を介して前記抗体又は抗原結合断片に結び付いている（「Ｍａｌ－スペーサー単位」）、請求項６９１～６９９のいずれか一項に記載の化合物。
- 前記Ｍａｌ－スペーサー単位が前記抗体又は抗原結合断片上のシステイン残基との反応性を有する、請求項７００に記載の化合物。
- 前記Ｍａｌ－スペーサー単位が前記抗体又は抗原結合断片上のシステイン残基を介して前記抗体又は抗原結合断片につなぎ合わされる、請求項７００又は７０１に記載の化合物。
- 前記リンカーが前記Ｍａｌ－スペーサー単位と切断可能なペプチド部分とを含む、請求項７００～７０２のいずれか一項に記載の化合物。
- 前記切断可能なペプチド部分がアミノ酸単位を含む、請求項７０３に記載の化合物。
- 前記切断可能なペプチド部分又はアミノ酸単位がＶａｌ－Ｃｉｔを含む、請求項７０３又は７０４に記載の化合物。
- 前記切断可能なペプチド部分又はアミノ酸単位がＶａｌ－Ａｌａを含む、請求項７０３又は７０４に記載の化合物。
- 前記切断可能なペプチド部分又はアミノ酸単位がＧｌｕ－Ｖａｌ－Ｃｉｔを含む、請求項７０３又は７０４に記載の化合物。
- 前記切断可能なペプチド部分又はアミノ酸単位がＡｌａ－Ａｌａ－Ａｓｎを含む、請求項７０３又は７０４に記載の化合物。
- 前記Ｍａｌ－スペーサー単位がアルキル部分を含む、請求項７００～７０８のいずれか一項に記載の化合物。
- 前記Ｍａｌ－スペーサー単位がＰＥＧ部分を含む、請求項７００～７０８のいずれか一項に記載の化合物。
- 前記Ｍａｌ－スペーサー単位がマレイミドカプロイル（ＭＣ）を含む、請求項７００～７１０のいずれか一項に記載の化合物。
- 前記Ｍａｌ－スペーサー単位が前記抗体又は抗原結合断片を前記リンカーの前記切断可能部分に結び付ける、請求項７００～７１１のいずれか一項に記載の化合物。
- 前記リンカーの前記切断可能部分が切断可能なペプチド部分を含む、請求項７１２に記載の化合物。
- 前記切断可能なペプチド部分がアミノ酸単位を含む、請求項７１３に記載の化合物。
- 前記切断可能なペプチド部分又はアミノ酸単位が、Ｖａｌ－Ｃｉｔ、Ｖａｌ－Ａｌａ、Ｇｌｕ－Ｖａｌ－Ｃｉｔ、又はＡｌａ－Ａｌａ－Ａｓｎを含む、請求項７１３又は７１４に記載の化合物。
- 前記リンカーがＭＣ－Ｖａｌ－Ｃｉｔを含む、請求項７１２～７１５のいずれか一項に記載の化合物。
- 前記リンカーがＭＣ－Ｖａｌ－Ａｌａを含む、請求項７１２～７１５のいずれか一項に記載の化合物。
- 前記リンカーがＭＣ－Ｇｌｕ－Ｖａｌ－Ｃｉｔを含む、請求項７１２～７１５のいずれか一項に記載の化合物。
- 前記リンカーがＭＣ－Ａｌａ－Ａｌａ－Ａｓｎを含む、請求項７１２～７１５のいずれか一項に記載の化合物。
- 前記Ｍａｌ－スペーサー単位がアルキル部分を含む、請求項７１２～７１９のいずれか一項に記載の化合物。
- 前記Ｍａｌ－スペーサー単位がＰＥＧ部分を含む、請求項７１２～７１９のいずれか一項に記載の化合物。
- 前記Ｍａｌ－スペーサー単位がマレイミドカプロイル（ＭＣ）を含む、請求項７１２～７２１のいずれか一項に記載の化合物。
- 前記リンカーの前記切断可能部分が前記スプライシング調節薬に直接つなぎ合わされるか、又はスペーサー単位が前記リンカーの前記切断可能部分を前記スプライシング調節薬に結び付ける、請求項６９１～７２２のいずれか一項に記載の化合物。
- 前記コンジュゲートの切断により、前記抗体又は抗原結合断片及びリンカーから前記スプライシング調節薬が放出される、請求項７２３に記載の化合物。
- 前記リンカーの前記切断可能部分を前記スプライシング調節薬に結び付ける前記スペーサー単位が自己犠牲性である、請求項７２３又は７２４に記載の化合物。
- 前記リンカーの前記切断可能部分を前記スプライシング調節薬に結び付ける前記スペーサー単位がｐ－アミノベンジルオキシカルボニル（ｐＡＢＣ）を含む、請求項７２３～７２５のいずれか一項に記載の化合物。
- 前記ｐＡＢＣが前記リンカーの前記切断可能部分を前記スプライシング調節薬に結び付ける、請求項７２６に記載の化合物。
- 前記リンカーの前記切断可能部分が切断可能なペプチド部分を含む、請求項７２６又は７２７に記載の化合物。
- 前記切断可能なペプチド部分がアミノ酸単位を含む、請求項７２８に記載の化合物。
- 前記切断可能なペプチド部分又はアミノ酸単位が、Ｖａｌ－Ｃｉｔ、Ｖａｌ－Ａｌａ、Ｇｌｕ－Ｖａｌ－Ｃｉｔ、又はＡｌａ－Ａｌａ－Ａｓｎを含む、請求項７２８又は７２９に記載の化合物。
- 前記リンカーがＶａｌ－Ｃｉｔ－ｐＡＢＣを含む、請求項７２６～７３０のいずれか一項に記載の化合物。
- 前記リンカーがＶａｌ－Ａｌａ－ｐＡＢＣを含む、請求項７２６～７３０のいずれか一項に記載の化合物。
- 前記リンカーがＧｌｕ－Ｖａｌ－Ｃｉｔ－ｐＡＢＣを含む、請求項７２６～７３０のいずれか一項に記載の化合物。
- 前記リンカーがＡｌａ－Ａｌａ－Ａｓｎ－ｐＡＢＣを含む、請求項７２６～７３０のいずれか一項に記載の化合物。
- 前記リンカーの前記切断可能部分を前記スプライシング調節薬に結び付ける前記スペーサー単位がｐ－アミノベンジル（ｐＡＢ）を含む、請求項７２３～７２５のいずれか一項に記載の化合物。
- 前記ｐＡＢが前記リンカーの前記切断可能部分を前記スプライシング調節薬に結び付ける、請求項７３５に記載の化合物。
- 前記リンカーの前記切断可能部分が切断可能なペプチド部分を含む、請求項７３５又は７３６に記載の化合物。
- 前記切断可能なペプチド部分がアミノ酸単位を含む、請求項７３７に記載の化合物。
- 前記切断可能なペプチド部分又はアミノ酸単位が、Ｖａｌ－Ｃｉｔ、Ｖａｌ－Ａｌａ、Ｇｌｕ－Ｖａｌ－Ｃｉｔ、又はＡｌａ－Ａｌａ－Ａｓｎを含む、請求項７３７又は７３８に記載の化合物。
- 前記リンカーがＶａｌ－Ｃｉｔ－ｐＡＢを含む、請求項７３５～７３９のいずれか一項に記載の化合物。
- 前記リンカーがＶａｌ－Ａｌａ－ｐＡＢを含む、請求項７３５～７３９のいずれか一項に記載の化合物。
- 前記リンカーがＧｌｕ－Ｖａｌ－Ｃｉｔ－ｐＡＢを含む、請求項７３５～７３９のいずれか一項に記載の化合物。
- 前記リンカーがＡｌａ－Ａｌａ－Ａｓｎ－ｐＡＢを含む、請求項７３５～７３９のいずれか一項に記載の化合物。
- 前記リンカーが非切断可能リンカーである、請求項６４１～６７８のいずれか一項に記載の化合物。
- 前記リンカーが少なくとも１つのスペーサー単位を含む、請求項７４４に記載の化合物。
- 前記スペーサー単位又はリンカーがポリエチレングリコール（ＰＥＧ）部分を含む、請求項７４４又は７４５に記載の化合物。
- 前記ＰＥＧ部分が－（ＰＥＧ）ｍ－を含み、ｍが１～１０の整数である、請求項７４６に記載の化合物。
- ｍが２である、請求項７４７に記載の化合物。
- 前記スペーサー単位又はリンカーがアルキル部分を含む、請求項７４４又は７４５に記載の化合物。
- 前記アルキル部分が－（ＣＨ２）ｎ－を含み、ｎが１～１０の整数である、請求項７４９に記載の化合物。
- 抗体－薬物コンジュゲートの作製方法であって、コンジュゲーションを許容する条件下で、請求項６４１～７５０のいずれか一項に記載の化合物と抗体又は抗原結合断片を反応させることを含む方法。
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Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2015535004A (ja) * | 2012-11-05 | 2015-12-07 | ファイザー・インク | スプライソスタチン類似体 |
| WO2017156454A1 (en) * | 2016-03-10 | 2017-09-14 | The Regents Of The University Of California | Anti-cancer and splce modulating compounds and methods |
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|---|---|---|---|---|
| US4816567A (en) | 1983-04-08 | 1989-03-28 | Genentech, Inc. | Recombinant immunoglobin preparations |
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| CA2017507C (en) | 1989-05-25 | 1996-11-12 | Gary Van Nest | Adjuvant formulation comprising a submicron oil droplet emulsion |
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| CA2235226A1 (en) | 1995-11-10 | 1997-05-15 | Elan Corporation, Plc | Peptides which enhance transport across tissues and methods of identifying and using the same |
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Non-Patent Citations (7)
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| ACS CHEMICAL BIOLOGY, vol. 9(3), JPN6024001754, 2014, pages 643 - 648, ISSN: 0005243429 * |
| BIOCONJUGATE CHEMISTRY, vol. 27(8), JPN6024001755, 2016, pages 1880 - 1888, ISSN: 0005243430 * |
| JOURNAL OF THE AMERICAN CHEMICAL SOCIETY, vol. 140(26), JPN6024001753, 2018, pages 8303 - 8320, ISSN: 0005243428 * |
| PLOS ONE, vol. 12(5), JPN6024001758, 2017, pages 0178452, ISSN: 0005243434 * |
| THE JOURNAL OF ANTIBIOTICS, vol. 53(9), JPN6024001756, 2000, pages 863 - 872, ISSN: 0005243432 * |
| THE JOURNAL OF ANTIBIOTICS, vol. 55(10), JPN6024001757, 2002, pages 855 - 862, ISSN: 0005243433 * |
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