CZ305619B6 - Způsoby modifikace eukaryotických buněk - Google Patents
Způsoby modifikace eukaryotických buněk Download PDFInfo
- Publication number
- CZ305619B6 CZ305619B6 CZ2003-2192A CZ20032192A CZ305619B6 CZ 305619 B6 CZ305619 B6 CZ 305619B6 CZ 20032192 A CZ20032192 A CZ 20032192A CZ 305619 B6 CZ305619 B6 CZ 305619B6
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- locus
- gene
- site
- mouse
- human
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 124
- 210000003527 eukaryotic cell Anatomy 0.000 title claims abstract description 55
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims abstract description 173
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims abstract description 99
- 101150117115 V gene Proteins 0.000 claims abstract description 57
- 108010067060 Immunoglobulin Variable Region Proteins 0.000 claims abstract description 39
- 101150008942 J gene Proteins 0.000 claims abstract description 30
- 101150097493 D gene Proteins 0.000 claims abstract description 28
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 claims abstract description 28
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 claims abstract description 28
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 claims abstract description 16
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 claims description 142
- 230000004048 modification Effects 0.000 claims description 92
- 238000012986 modification Methods 0.000 claims description 92
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 claims description 71
- 239000013598 vector Substances 0.000 claims description 67
- 230000008685 targeting Effects 0.000 claims description 64
- 230000006798 recombination Effects 0.000 claims description 57
- 238000005215 recombination Methods 0.000 claims description 57
- 238000002744 homologous recombination Methods 0.000 claims description 53
- 230000006801 homologous recombination Effects 0.000 claims description 53
- 108700028369 Alleles Proteins 0.000 claims description 44
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims description 42
- 238000011144 upstream manufacturing Methods 0.000 claims description 42
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 claims description 40
- 230000002759 chromosomal effect Effects 0.000 claims description 34
- 210000001368 germline stem cell Anatomy 0.000 claims description 27
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 claims description 24
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 claims description 24
- 241001529936 Murinae Species 0.000 claims description 22
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 claims description 14
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims description 13
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims description 13
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims description 13
- 108700005091 Immunoglobulin Genes Proteins 0.000 claims description 12
- 238000003753 real-time PCR Methods 0.000 claims description 12
- 210000004602 germ cell Anatomy 0.000 claims description 7
- 238000009396 hybridization Methods 0.000 claims description 7
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 claims description 6
- 238000011830 transgenic mouse model Methods 0.000 claims description 6
- 102000017727 Immunoglobulin Variable Region Human genes 0.000 claims description 5
- 238000012207 quantitative assay Methods 0.000 claims description 5
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 claims description 4
- 210000004978 chinese hamster ovary cell Anatomy 0.000 claims description 3
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 claims description 3
- 210000002980 germ line cell Anatomy 0.000 claims description 3
- 210000004408 hybridoma Anatomy 0.000 claims description 3
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 claims description 3
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 claims description 2
- 230000004544 DNA amplification Effects 0.000 claims 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 abstract description 7
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 abstract 1
- 210000004436 artificial bacterial chromosome Anatomy 0.000 description 33
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 28
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 25
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 20
- RXWNCPJZOCPEPQ-NVWDDTSBSA-N puromycin Chemical compound C1=CC(OC)=CC=C1C[C@H](N)C(=O)N[C@H]1[C@@H](O)[C@H](N2C3=NC=NC(=C3N=C2)N(C)C)O[C@@H]1CO RXWNCPJZOCPEPQ-NVWDDTSBSA-N 0.000 description 20
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 18
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 16
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 15
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 15
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 15
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 15
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 14
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 14
- 208000024191 minimally invasive lung adenocarcinoma Diseases 0.000 description 13
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 13
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 13
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 11
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 11
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 10
- 238000011161 development Methods 0.000 description 10
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 10
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 10
- 238000012239 gene modification Methods 0.000 description 10
- 230000005017 genetic modification Effects 0.000 description 10
- 235000013617 genetically modified food Nutrition 0.000 description 10
- 229950010131 puromycin Drugs 0.000 description 10
- 108091026890 Coding region Proteins 0.000 description 8
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 8
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 8
- 108091008146 restriction endonucleases Proteins 0.000 description 8
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 7
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 7
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 7
- 230000008569 process Effects 0.000 description 7
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 7
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 6
- 108010051219 Cre recombinase Proteins 0.000 description 6
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 6
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 6
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 6
- 238000010369 molecular cloning Methods 0.000 description 6
- 241000894007 species Species 0.000 description 6
- 108700008625 Reporter Genes Proteins 0.000 description 5
- 230000027455 binding Effects 0.000 description 5
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 5
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 5
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 5
- 230000010354 integration Effects 0.000 description 5
- 229960004927 neomycin Drugs 0.000 description 5
- 230000008707 rearrangement Effects 0.000 description 5
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 5
- 241001432959 Chernes Species 0.000 description 4
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 4
- 108010025815 Kanamycin Kinase Proteins 0.000 description 4
- 229930193140 Neomycin Natural products 0.000 description 4
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 4
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 4
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 4
- 238000004520 electroporation Methods 0.000 description 4
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 4
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 4
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 4
- 210000001938 protoplast Anatomy 0.000 description 4
- UNFWWIHTNXNPBV-WXKVUWSESA-N spectinomycin Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](NC)[C@@H](O)[C@H]([C@@H]([C@H]1O1)O)NC)[C@]2(O)[C@H]1O[C@H](C)CC2=O UNFWWIHTNXNPBV-WXKVUWSESA-N 0.000 description 4
- 229960000268 spectinomycin Drugs 0.000 description 4
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 4
- 108020004705 Codon Proteins 0.000 description 3
- 102000053602 DNA Human genes 0.000 description 3
- 206010059866 Drug resistance Diseases 0.000 description 3
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 3
- YQYJSBFKSSDGFO-UHFFFAOYSA-N Epihygromycin Natural products OC1C(O)C(C(=O)C)OC1OC(C(=C1)O)=CC=C1C=C(C)C(=O)NC1C(O)C(O)C2OCOC2C1O YQYJSBFKSSDGFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 101100356230 Escherichia coli (strain K12) recT gene Proteins 0.000 description 3
- 241000829100 Macaca mulatta polyomavirus 1 Species 0.000 description 3
- 108700026244 Open Reading Frames Proteins 0.000 description 3
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 3
- 238000002105 Southern blotting Methods 0.000 description 3
- 108091081024 Start codon Proteins 0.000 description 3
- 210000002459 blastocyst Anatomy 0.000 description 3
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 3
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 3
- 238000003209 gene knockout Methods 0.000 description 3
- 238000010363 gene targeting Methods 0.000 description 3
- 101150066555 lacZ gene Proteins 0.000 description 3
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 3
- 230000008488 polyadenylation Effects 0.000 description 3
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 3
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 3
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 3
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 3
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 3
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 3
- 230000009261 transgenic effect Effects 0.000 description 3
- 101100355997 Bacillus subtilis (strain 168) recA gene Proteins 0.000 description 2
- 238000001712 DNA sequencing Methods 0.000 description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 2
- 101100301301 Escherichia coli (strain K12) recE gene Proteins 0.000 description 2
- 108060002716 Exonuclease Proteins 0.000 description 2
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 2
- 241000699660 Mus musculus Species 0.000 description 2
- 102000011755 Phosphoglycerate Kinase Human genes 0.000 description 2
- 108020004682 Single-Stranded DNA Proteins 0.000 description 2
- 101001099217 Thermotoga maritima (strain ATCC 43589 / DSM 3109 / JCM 10099 / NBRC 100826 / MSB8) Triosephosphate isomerase Proteins 0.000 description 2
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 2
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 230000032823 cell division Effects 0.000 description 2
- 210000000349 chromosome Anatomy 0.000 description 2
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 2
- 239000003623 enhancer Substances 0.000 description 2
- 102000013165 exonuclease Human genes 0.000 description 2
- 230000006870 function Effects 0.000 description 2
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 2
- 238000011065 in-situ storage Methods 0.000 description 2
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 2
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 2
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 2
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 2
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000035800 maturation Effects 0.000 description 2
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 2
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 2
- 101150047627 pgk gene Proteins 0.000 description 2
- 238000002823 phage display Methods 0.000 description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 2
- 230000022532 regulation of transcription, DNA-dependent Effects 0.000 description 2
- 230000004044 response Effects 0.000 description 2
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 2
- 230000011664 signaling Effects 0.000 description 2
- 238000010809 targeting technique Methods 0.000 description 2
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 2
- CXNPLSGKWMLZPZ-GIFSMMMISA-N (2r,3r,6s)-3-[[(3s)-3-amino-5-[carbamimidoyl(methyl)amino]pentanoyl]amino]-6-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)-3,6-dihydro-2h-pyran-2-carboxylic acid Chemical compound O1[C@@H](C(O)=O)[C@H](NC(=O)C[C@@H](N)CCN(C)C(N)=N)C=C[C@H]1N1C(=O)N=C(N)C=C1 CXNPLSGKWMLZPZ-GIFSMMMISA-N 0.000 description 1
- GRRNUXAQVGOGFE-KPBUCVLVSA-N (3'r,3as,4s,4'r,5'r,6r,6'r,7s,7as)-4-[(1r,2s,3r,5s,6r)-3-amino-2,6-dihydroxy-5-(methylamino)cyclohexyl]oxy-6'-[(1s)-1-amino-2-hydroxyethyl]-6-(hydroxymethyl)spiro[4,6,7,7a-tetrahydro-3ah-[1,3]dioxolo[4,5-c]pyran-2,2'-oxane]-3',4',5',7-tetrol Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](NC)C[C@@H](N)[C@H](O)[C@H]1O[C@H]1[C@H]2OC3([C@@H]([C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]([C@@H](N)CO)O3)O)O[C@H]2[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 GRRNUXAQVGOGFE-KPBUCVLVSA-N 0.000 description 1
- 108091008875 B cell receptors Proteins 0.000 description 1
- 101150017740 B6 gene Proteins 0.000 description 1
- 241001457926 Brachys Species 0.000 description 1
- 101000808896 Caenorhabditis elegans Potential E3 ubiquitin-protein ligase ariadne-2 Proteins 0.000 description 1
- LZZYPRNAOMGNLH-UHFFFAOYSA-M Cetrimonium bromide Chemical compound [Br-].CCCCCCCCCCCCCCCC[N+](C)(C)C LZZYPRNAOMGNLH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 108010077544 Chromatin Proteins 0.000 description 1
- 101001091269 Escherichia coli Hygromycin-B 4-O-kinase Proteins 0.000 description 1
- 241000701959 Escherichia virus Lambda Species 0.000 description 1
- 108091029865 Exogenous DNA Proteins 0.000 description 1
- 108700024394 Exon Proteins 0.000 description 1
- 108010046276 FLP recombinase Proteins 0.000 description 1
- 108010087819 Fc receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000009109 Fc receptors Human genes 0.000 description 1
- 241000287828 Gallus gallus Species 0.000 description 1
- 206010064571 Gene mutation Diseases 0.000 description 1
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 description 1
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 description 1
- 238000012450 HuMAb Mouse Methods 0.000 description 1
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 1
- 206010068052 Mosaicism Diseases 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 238000012408 PCR amplification Methods 0.000 description 1
- 241000276498 Pollachius virens Species 0.000 description 1
- 229920001744 Polyaldehyde Polymers 0.000 description 1
- 102000007056 Recombinant Fusion Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010008281 Recombinant Fusion Proteins Proteins 0.000 description 1
- 241000283984 Rodentia Species 0.000 description 1
- 101001091268 Streptomyces hygroscopicus Hygromycin-B 7''-O-kinase Proteins 0.000 description 1
- 108091036066 Three prime untranslated region Proteins 0.000 description 1
- 108700019146 Transgenes Proteins 0.000 description 1
- 241000209140 Triticum Species 0.000 description 1
- 235000021307 Triticum Nutrition 0.000 description 1
- 210000002593 Y chromosome Anatomy 0.000 description 1
- 241000209149 Zea Species 0.000 description 1
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 1
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 1
- 238000007792 addition Methods 0.000 description 1
- 230000009824 affinity maturation Effects 0.000 description 1
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 1
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 1
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 1
- 230000000692 anti-sense effect Effects 0.000 description 1
- 210000003578 bacterial chromosome Anatomy 0.000 description 1
- 102000005936 beta-Galactosidase Human genes 0.000 description 1
- 108010005774 beta-Galactosidase Proteins 0.000 description 1
- 230000001588 bifunctional effect Effects 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 230000005540 biological transmission Effects 0.000 description 1
- CXNPLSGKWMLZPZ-UHFFFAOYSA-N blasticidin-S Natural products O1C(C(O)=O)C(NC(=O)CC(N)CCN(C)C(N)=N)C=CC1N1C(=O)N=C(N)C=C1 CXNPLSGKWMLZPZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000001109 blastomere Anatomy 0.000 description 1
- 229910000389 calcium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001506 calcium phosphate Substances 0.000 description 1
- 235000011010 calcium phosphates Nutrition 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 235000013330 chicken meat Nutrition 0.000 description 1
- 210000003483 chromatin Anatomy 0.000 description 1
- 239000013611 chromosomal DNA Substances 0.000 description 1
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 1
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 1
- 230000003750 conditioning effect Effects 0.000 description 1
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 1
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 description 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000006073 displacement reaction Methods 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 1
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 1
- 210000002257 embryonic structure Anatomy 0.000 description 1
- 238000007824 enzymatic assay Methods 0.000 description 1
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 102000034287 fluorescent proteins Human genes 0.000 description 1
- 108091006047 fluorescent proteins Proteins 0.000 description 1
- 238000007429 general method Methods 0.000 description 1
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 description 1
- 235000003869 genetically modified organism Nutrition 0.000 description 1
- 238000012268 genome sequencing Methods 0.000 description 1
- 238000011331 genomic analysis Methods 0.000 description 1
- PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N gold Chemical compound [Au] PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000010931 gold Substances 0.000 description 1
- 229910052737 gold Inorganic materials 0.000 description 1
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 1
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 230000003426 interchromosomal effect Effects 0.000 description 1
- 238000011901 isothermal amplification Methods 0.000 description 1
- 229930027917 kanamycin Natural products 0.000 description 1
- 229960000318 kanamycin Drugs 0.000 description 1
- SBUJHOSQTJFQJX-NOAMYHISSA-N kanamycin Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CN)O[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](N)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)O)[C@H](N)C[C@@H]1N SBUJHOSQTJFQJX-NOAMYHISSA-N 0.000 description 1
- 229930182823 kanamycin A Natural products 0.000 description 1
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 1
- 238000011031 large-scale manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 1
- 210000001161 mammalian embryo Anatomy 0.000 description 1
- 238000013507 mapping Methods 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 1
- 239000013264 metal-organic assembly Substances 0.000 description 1
- 230000003278 mimic effect Effects 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 231100000219 mutagenic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003505 mutagenic effect Effects 0.000 description 1
- 108091027963 non-coding RNA Proteins 0.000 description 1
- 102000042567 non-coding RNA Human genes 0.000 description 1
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 1
- 206010073131 oligoastrocytoma Diseases 0.000 description 1
- 210000000287 oocyte Anatomy 0.000 description 1
- 238000005457 optimization Methods 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 238000013492 plasmid preparation Methods 0.000 description 1
- 210000001236 prokaryotic cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 1
- 230000000644 propagated effect Effects 0.000 description 1
- 238000003906 pulsed field gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 238000004445 quantitative analysis Methods 0.000 description 1
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 description 1
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 description 1
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 1
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 1
- 238000010187 selection method Methods 0.000 description 1
- 210000003765 sex chromosome Anatomy 0.000 description 1
- 230000000392 somatic effect Effects 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- 230000009897 systematic effect Effects 0.000 description 1
- 108010040614 terminase Proteins 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 238000010399 three-hybrid screening Methods 0.000 description 1
- 238000001890 transfection Methods 0.000 description 1
- 230000010474 transient expression Effects 0.000 description 1
- QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H tricalcium bis(phosphate) Chemical compound [Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P21/00—Preparation of peptides or proteins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
- A01K67/00—Rearing or breeding animals, not otherwise provided for; New or modified breeds of animals
- A01K67/027—New or modified breeds of vertebrates
- A01K67/0275—Genetically modified vertebrates, e.g. transgenic
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
- A01K67/00—Rearing or breeding animals, not otherwise provided for; New or modified breeds of animals
- A01K67/027—New or modified breeds of vertebrates
- A01K67/0275—Genetically modified vertebrates, e.g. transgenic
- A01K67/0278—Knock-in vertebrates, e.g. humanised vertebrates
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/46—Hybrid immunoglobulins
- C07K16/461—Igs containing Ig-regions, -domains or -residues form different species
- C07K16/462—Igs containing a variable region (Fv) from one specie and a constant region (Fc) from another
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
- C12N15/67—General methods for enhancing the expression
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
- C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
- C12N15/85—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for animal cells
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
- C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
- C12N15/85—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for animal cells
- C12N15/8509—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for animal cells for producing genetically modified animals, e.g. transgenic
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/87—Introduction of foreign genetic material using processes not otherwise provided for, e.g. co-transformation
- C12N15/90—Stable introduction of foreign DNA into chromosome
- C12N15/902—Stable introduction of foreign DNA into chromosome using homologous recombination
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/87—Introduction of foreign genetic material using processes not otherwise provided for, e.g. co-transformation
- C12N15/90—Stable introduction of foreign DNA into chromosome
- C12N15/902—Stable introduction of foreign DNA into chromosome using homologous recombination
- C12N15/907—Stable introduction of foreign DNA into chromosome using homologous recombination in mammalian cells
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
- A01K2207/00—Modified animals
- A01K2207/15—Humanized animals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
- A01K2217/00—Genetically modified animals
- A01K2217/05—Animals comprising random inserted nucleic acids (transgenic)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
- A01K2227/00—Animals characterised by species
- A01K2227/10—Mammal
- A01K2227/105—Murine
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
- A01K2267/00—Animals characterised by purpose
- A01K2267/01—Animal expressing industrially exogenous proteins
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/10—Immunoglobulins specific features characterized by their source of isolation or production
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
- C07K2317/21—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin from primates, e.g. man
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
- C07K2317/24—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin containing regions, domains or residues from different species, e.g. chimeric, humanized or veneered
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/51—Complete heavy chain or Fd fragment, i.e. VH + CH1
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/515—Complete light chain, i.e. VL + CL
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2800/00—Nucleic acids vectors
- C12N2800/20—Pseudochromosomes, minichrosomosomes
- C12N2800/204—Pseudochromosomes, minichrosomosomes of bacterial origin, e.g. BAC
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Environmental Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Mycology (AREA)
- Biodiversity & Conservation Biology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Animal Husbandry (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)
Abstract
Způsob náhrady endogenního genového lokusu pro variabilní oblast imunoglobulinu plně ortologním lidským genovým lokusem nebo částečně náhradou V a J nebo V, D a J genových segmentů ortologními lidskými V a J nebo V, D a J genovými segmenty v izolované myší zárodečné kmenové buňce pro vytvoření modifikovaného imunoglobulinového lokusu, který se může přeskupit pro vytvoření hybridních protilátek s obsahem lidské variabilní oblasti a myší konstantní nebo Fc oblasti. Způsob náhrady endogenního genového lokusu pro variabilní oblast imunoglobulinu, hybridní lokus imunoglobulinu, geneticky modifikovaná eurokaryotická buňka, myší zárodečná buňka, myš a způsob přípravy lidské protilátky, způsob vytváření zárodečné kmenové buňky, jakož i endogenní genový lokus.
Description
Způsoby modifikace eukaryotických buněk
Tato přihláška si nárokuje prioritu z americké přihlášky vynálezu 09/784 859 podané 16. února 2001. Další citované publikace se stávají součástí následujícího popisu.
Oblast techniky
Vynález se týká způsobů konstrukce a použití velkých vektorů DNA k zacílení cestou homologové rekombinace a k jakékoliv žádoucí modifikaci endogenních genů a chromozomálních umístění do eukaryotických buněk. Tyto velké cílící vektoiy DNA pro eukaryotické buňky, nazývané LTVEC, jsou odvozeny z fragmentů klonované genomové DNA, větších než jakých se obvykle jinak používá pro homologové zacílení do eukaryotických buněk. Vynález se dále týká rychlého a pohodlného způsobu detekce eukaryotických buněk, do kterých se LTVEC správně zacílil a modifikoval žádoucí endogenní genové nebo chromozomální místo. Vynález se také týká použití takových buněk ke generaci organismů vykazujících genetickou modifikaci, samotných organismů a jejich použití.
Dosavadní stav techniky
Použití velkých zacílovacích vektorů pro eukaryotické buňky, nazývaných LTVEC, poskytuje ve srovnání s běžnými způsoby podstatné přednosti. Například, jelikož jsou tyto vektory odvozeny z fragmentů DNA větších než běžně používaných k vytváření zacílovacích vektorů, mohou se LTVEC rychleji a pohodlně generovat z dostupných knihoven velkých genomových fragmentů DNA (jako jsou knihovny BAC a PAC) a pak zacílit vytvořené vektory za použití běžných technologií. Kromě toho větší modifikace jakož také modifikace zasahující větší genomové regiony se dají pohodlněji generovat než s použitím běžných technologií. Kromě toho využívá tento vynález výhody dlouhých regionů ke zvýšení zacílovací frekvence míst „tvrdě na cíl“ a zmenšuje případnou přednost použitím isogenických DNA v těchto zacílovacích vektorech.
Vynález se tak týká rychlého, pohodlného a účinného způsobu pro systematické modifikování prakticky všech endogenních genů a chromozomálních míst daného organismu.
Genové zacílení pomocí homologové rekombinace mezi homologovou exogenní DNA a endogenními chromozomálními sekvencemi se osvědčilo jako mimořádně hodnotný způsob k vytváření delecí, insercí, konstrukčních mutací, správných genových mutací, zavedení transgenů nebo provádění jiných genetických modifikací v myších. Běžné způsoby používají standardních zacílovacích vektorů s regionovou homologií do endogenní DNA zpravidla zahrnující méně než 10 až 20 kb, k začlenění žádoucí genetické modifikace do zárodečných kmenových myších buněk (ES), následné injektování změněných buněk ES do myších embryí k přenesení těchto konstruovaných genetických modifikací do myší zárodečné linie (Smithies a kol., Nature 317, str. 230 až 234, 1985; Thomas a kol., Cell, 51, str. 503 až 512, 1987; Koller a kol., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 86, str. 8927 až 8931, 1989; Kuhn a kol., Science 254, str. 707 až 710, 1991; Thomas a kol., Nature 346, str. 847 až 850, 1990; Schwartzberg a kol., Science 246, str. 799 až 803, 1989; Doetschman a kol., Nature 330, str. 576 až 578, 1987; Thomson a kol., Cell 5, str. 313 až 321, 1989; DeChiara a kol., Nature 345, str. 78 až 80, 1990; americký patentový spis 5 789215 udělený 4. srpna 1998 pro GenPharm International). V těchto běžných způsobech detekce řídce se vyskytujících ES buněk, do kterých byly správně zacíleny standardní zacílovací vektory a přičemž byly modifikovány žádoucí endogenní geny nebo chromozomální místa, vyžadují sekvenční informaci vně homologových zacílovacích sekvencí obsažených v zacílovacím vektoru. Jakožto testy pro úspěšné zacílení se uvádějí standardní Southern blotting nebo dlouhé PCR (Cheng a kol., Nature 369, str. 684 až 685, 1994; Foord a Rose, PCR Methods Appl. 3, str. 149 až 161, 1994; Ponce a Micol, Nucleic Acid Res. 20, str. 623, 1992; americký patentový spis
- 1 CZ 305619 B6
436149 udělený společnosti Takara Shuzo Co. Ltd.) ze sekvencí vně zacílovacího vektoru a zahrnující celé homologové rameno (níže definováno); proto jelikož rozměrové podmínky omezují tyto způsoby, je velikost homologových ramen omezena celkově na méně než 10 až 20 kb (Joyner, The Practical Approach Series. 293, 1999).
Schopnost využít zacílovaných vektorů s homolovými rameny většími než používanými v běžných způsobech by byla mimořádně hodnotná. Například by mohly být takové zacílovací vektory rychleji a pohodlněji generovány z dostupných knihoven obsahujících velké genomové inzerty (například knihoven BAC nebo PAC) než zacílovací vektory získané běžnými technologiemi, ve kterých takové genomové inzerty musejí být rozsáhle charakterizovány a upravovány před použitím. Kromě toho by mohly být pohodlněji vytvářeny větší modifikace i modifikace zabírající větší genomové regiony v menším počtu stupňů než při použití běžných technologií. Dále by použití dlouhých homologických regionů mohlo zvyšovat zacílovací frekvenci míst „hard to target“ v eukaryotických buňkách, jelikož se zdá, že cílení homologových rekombinací v eukaryotických buňkách souvisí s celkovou homologií uvnitř zacílovacího vektoru (Deng a Capecchi, Mol. Cell Biol. 12, str. 3365 až 3371, 1992). Kromě toho by mohla zvýšená zacílovací frekvence, získaná použitím dlouhých homologových ramen, zmenšovat jakoukoli potenciální přednost, která může být odvozena od použití isogenické DNA v těchto zacílovacích vektorech.
Problém konstrukce přesných modifikací do velmi rozsáhlých genomových fragmentů, jako jsou fragmenty klonované v knihovnách BAC, byl ve velké míře řešen použitím homologických rekombinací v bakteriích (Zhang a kol., Nat Genet 20, str. 123 až 128, 1998; Yang a kol., Nat. Biotechnol. 15, str. 859 až 865, 1997; Angrand a kol., Nucleic Acids Res. 27, str. 16, 1999; Muyrers a kol., Nucleic Acids Res. 27, str. 1555 až 1557, 1999; Narayana a koL, Gene Ther. 6, str. 442 až 447, 1999) umožňujících konstrukci vektorů, obsahujících velké homologické regiony eukaryotických endogenních genů nebo chromozomálních míst. Avšak jakkoliv vytvořené nebyly tyto vektory obecně použitelné pro modifikaci endogenních genů nebo chromozomálních míst cestou homologové rekombinace, vzhledem k obtížnosti detekce řídce se vyskytujících zacílovacích dějů, když jsou homologová ramena větší než 10 až 20 kb (Joyner, The Practical Approach Series 293, 1999). V důsledku toho musejí být rozsáhle upravovány vektory generované s použitím bakteriální homologové rekombinace z genomových fragmentů BAC, před použitím jako zacílovací vektory (Hill a kol., Gemomics, 64, str. 111 až 113, 2000). Proto existuje stále potřeba rychlé a pohodlné metodiky, která umožní použití zacílovacích vektorů obsahujících velké homologické regiony k modifikaci endogenních genů nebo chromozomálních míst v eukaryotických buňkách.
Vynález se proto týká nových způsobů, které umožní použití zacílovacích vektorů obsahujících velké homologické regiony tak, že modifikují endogenní geny nebo chromozomální místa v eukaryotických buňkách cestou homologové rekombinace. Takové způsoby čelí shora uvedeným nedostatkům běžných technologií. Kromě toho je pracovníkům v oboru jasné, že způsoby podle vynálezu jsou snadno použitelné s kteroukoli genomovou DNA každého eukaryotického organismu příkladně, tedy bez záměru na jakémkoliv omezení, živočichů jako jsou myši, krysy, ostatní hlodavci nebo lidé, stejně jako rostlin, jako jsou sója, kukuřice a pšenice.
Podstata vynálezu
Předmětem tohoto vynálezu je způsob náhrady endogenního genového lokusu pro variabilní oblast imunoglobulinu plně ortologním lidským genovým lokusem nebo částečně náhradou V a J nebo V, D a J genových segmentů ortologními lidskými V a J nebo V, D a J genovými segmenty v izolované myší zárodečné kmenové buňce (ES) pro vytvoření modifikovaného imunoglobulinového lokusu, který se může přeskupit pro vytvoření hybridních protilátek s obsahem lidské variabilní oblasti a myší konstantní nebo Fc oblasti, jehož podstata spočívá v tom, že
-2CZ 305619 B6
a) získá se velký klonovaný genomový fragment větší než 20 kb, obsahující ortologní lidské V a J nebo V, D a J genové segmenty,
b) používá se bakteriální homologní rekombinace ke genetické modifikaci klonovaného genomového fragmentu podle odstavce (a) k vytvoření velkého zacílovacího vektoru pro použití v myší zárodečné kmenové buňce (LTVEC),
c) zavádí se LTVEC podle odstavce (b) do myší zárodečné kmenové buňky k plné nebo částečné náhradě endogenního genového lokusu pro variabilní imunoglobulin a
d) detekuje se modifikace alely na endogenním genovém lokusu pro variabilní oblast imunoglobulinu pro identifikaci myší zárodečné kmenové buňky, která prodělala homologní rekombinaci k plné nebo částečné náhradě endogenního genového lokusu pro variabilní oblast imunoglobulinu.
Výhodné provedení způsobu podle vynálezu spočívá v tom, že
e) získá se velký klonovaný genomový fragment větší než 20 kb, obsahující část ortologního lidského genového lokusu, který obsahuje variabilní oblast genových segmentů ve srovnání s V a J nebo V, D a J genovými segmenty fragmentu podle odstavce (a),
f) používá se bakteriální homologní rekombinace pro genetickou modifikaci klonovaného genomového fragmentu podle odstavce (e) k vytvoření druhého LTVEC,
g) zavádí se druhý LTVEC podle odstavce (f) do myší zárodečné kmenové buňky identifikované podle odstavce (d) k plné nebo částečné náhradě endogenního genového lokusu pro variabilní oblast imunoglobulinu a
h) detekuje se modifikace alely na endogenním genovém lokusu pro variabilní oblast imunoglobulinu pro identifikaci myší zárodečné kmenové buňky, která prodělala homologní rekombinaci k plné nebo částečné náhradě endogenního genového lokusu pro variabilní oblast imunoglobulinu.
Výhodné provedení svrchu popsaného způsobu podle tohoto vynálezu spočívá v tom, že se kroky podle odstavce (e) až (h) opakují, dokud se endogenní genový lokus pro variabilní oblast imunoglobulinu nenahradí plně ortologním lidským genovým lokusem.
Výhodné provedení některého ze způsobů podle tohoto vynálezu spočívá v tom, že variabilním genovým lokusem imunoglobulinu je lokus zvolený ze souboru sestávajícího z:
a) variabilního genového lokusu kapa lehkého řetězce,
b) variabilního genového lokusu lambda lehkého řetězce, a
c) variabilního genového lokusu těžkého řetězce.
Výhodné provedení jakéhokoli ze svrchu popsaných způsobů podle tohoto vynálezu spočívá v tom, že LTVEC obsahuje homologová ramena, která v celku jsou větší než 20 kb.
Výhodné provedení jakéhokoli ze svrchu popsaných způsobů podle tohoto vynálezu spočívá v tom, že velký klonovaný genomový fragment je větší než 100 kb.
Předmětem tohoto vynálezu je také způsob náhrady endogenní variabilní oblasti imunoglobulinu plně ortologním genovým lokusem nebo částečné náhrady jako V a J nebo V, D a J genových segmentů ortologními lidskými V a J nebo V, D a J genovými segmenty pro vytvoření modifikovaného imunoglobulinového lokusu, který se může přeskupit pro vytvoření hybridních protilá
-3CZ 305619 B6 tek s obsahem lidských variabilních oblastí a myších konstantních nebo Fc oblastí, jehož podstata spočívá v tom, že
a) vytváří se LTVEC větší než 20 kb, obsahující místo pro místně specifickou rekombinaci, ve směru homologové rameno obsahující oblasti bezprostředně přiléhající k J segmentům genového lokusu pro variabilní oblast imunoglobulinu, nikoliv však je zahrnující, a proti směru homologové rameno uvnitř genomového lokusu pro variabilní oblast,
b) vytváří se LTVEC větší než 20 kb, obsahující místo pro místně specifickou rekombinaci, proti směru homologové rameno obsahující oblasti přiléhající k nejvíce distálnímu V genovému segmentu, avšak neobsahujícímu žádné V genové segmenty genového lokusu pro variabilní oblast imunoglobulinu a ve směru homologového ramene uvnitř genového lokusu pro variabilní oblast,
c) zavádí se LTVECs podle odstavce (a) a (b) do myši zárodečné kmenové buňky,
d) detekuje se modifikace alely na endogenním genovém lokusu pro variabilní oblast imunoglobulinu pro identifikaci myší zárodečné kmenové buňky, ve které místa pro místně specifickou rekombinaci lemují endogenní genový lokus pro variabilní oblast,
e) vytváří se vektor obsahující sekvence pro místně specifickou rekombinaci lemující plně ortologní genový lokus nebo jeho část, a
f) zavádí se vektor podle odstavce (e) do myší zárodečné kmenové buňky, identifikované podle odstavce (d), takže rekombinaci se nahradí endogenní genový lokus pro variabilní oblast imunoglobulinu plně ortologním genovým lokusem nebo jeho části.
Výhodné provedení svrchu popsaného způsobu podle tohoto vynálezu spočívá v tom, že místa pro místně specifickou rekombinaci jsou zvolena ze souboru zahrnujícího LoxP, Lox511 a Lox2272.
Výhodné provedení jakéhokoli ze dvou svrchu popsaných způsobů podle tohoto vynálezu spočívá v tom, že uvedené LTVECs pokaždé obsahují homologová ramena, které jsou v celku větší než 20 kb.
Výhodné provedení jakéhokoli ze tří svrchu popsaných způsobů podle tohoto vynálezu spočívá v tom, že LTVECs jsou větší než 100 kb.
Předmětem tohoto vynálezu je taktéž hybridní lokus imunoglobulinu, který zahrnuje lidské V a J nebo V, D a J genové segmenty operativně vázané k myší konstantní oblasti genů na endogenním chromozomálním lokusu imunoglobulinu, kde uvedený lokus se může přeskupit pro vytvoření hybridních protilátek obsahujících lidské variabilní oblasti a myší konstantní nebo Fc oblasti.
Výhodným provedením svrchu uvedeného předmětu vynálezu je hybridní lokus imunoglobulinu, který zahrnuje lidské V, D a J nebo V a J genové oblasti operativně vázané k myší konstantní oblasti genů na endogenním chromozomálním lokusu imunoglobulinu.
Předmětem tohoto vynálezu je rovněž geneticky modifikovaná eukaryotická buňka, která zahrnuje svrchu definovaný lokus.
Předmětem tohoto vynálezu je také geneticky modifikovaná eukaryotická buňka popsaná výše, kterou je myší zárodečná kmenová buňka (ES).
Předmětem tohoto vynálezu je též myší zárodečná kmenová buňka popsaná zde bezprostředně výše, ve které:
-4CZ 305619 B6
- myší variabilní lokus oblasti s těžkým řetězcem je nahrazen plně lidským variabilním genovým lokusem s těžkým řetězcem nebo z části nahrazen jeho V a J nebo V, D a J genovými segmenty s ortologními V a J nebo V, D a J genovými segmenty lidského variabilního lokusu genu s těžkým řetězcem,
- myší variabilní oblast lokusu kapa s lehkým řetězcem je nahrazena plně lidským variabilním lokusem genu kapa s lehkým řetězcem nebo z části nahrazena jeho V a J nebo V, D a J genovými segmenty s ortologními V a J nebo V, D a J genovými segmenty lidské variabilní oblasti lokusu s lehkým řetězcem, nebo
- myší variabilní oblast lokusu lambda s lehkým řetězcem je nahrazena plně myším variabilním lokusem genu lambda s lehkým řetězcem nebo z části nahrazena jeho V a J nebo V, D a J genovými segmenty s ortologními V a J nebo V, D a J genovými segmenty lidské lambda variabilní oblasti lokusu s lehkým řetězcem.
Výhodným provedením svrchu uvedeného předmětu vynálezu je myší zárodečná kmenová buňka definovaná výše, ve které variabilní oblast lokusů genu s těžkým a lehkým řetězcem je nahrazena plně jejími lidskými homology nebo orthology.
Předmětem tohoto vynálezu je taky myš zahrnující lokus popsaný výše.
Předmětem tohoto vynálezu je transgenní myš, která je genom zahrnující variabilní oblast lokusů genu s těžkým a/nebo lehkým řetězcem operativně vázanou na endogenní myší konstantní oblasti lokusů, takže takové myši vytvářejí sérum obsahující protilátky zahrnující lidské variabilní oblasti a myší konstantní nebo Fc oblasti s odezvou na antigenovou stimulaci.
Další částí předmětu tohoto vynálezu je způsob přípravy lidské protilátky, jehož podstata spočívá v tom, že
a) myš definovaná výše se vystavuje stimulaci antigenem, takže myš produkuje protilátku proti antigenu,
b) izolují se DNA sekvence kódující lidské variabilní oblasti z těchto myší,
c) operativně se vážou DNA sekvence kódující variabilní oblasti podle odstavce (b) k DNA kódujícím lidským konstantním oblastem do buněk schopným exprese aktivních protilátek,
d) nechávají se růst buňky za podmínek, při kterých se exprimují lidské protilátky a
e) izoluje se protilátka.
Výhodným provedením svrchu uvedeného předmětu vynálezu je způsob, jehož podstata spočívá v tom, že zahrnuje izolaci DNA sekvencí kódujících variabilních oblastí s těžkým a lehkým řetězcem z protilátek a operativně vázání DNA sekvencí kódujících uvedené variabilní oblasti na DNA kódující konstantní oblasti s těžkým a lehkým řetězcem.
Výhodným provedením jakéhokoli ze dvou naposledy svrchu uvedených předmětů vynálezu je způsob, jehož podstatou je, že buňkou je CHO buňka, nebo jehož podstatou je, že DNA sekvence podle kroku (b) se izolují z hybridomu vytvořeného ze sleziny myši vystavené stimulaci antigenem v kroku (a), nebo jehož podstatou je, že DNA sekvence se izolují s použitím PCR.
Předmětem tohoto vynálezu je taktéž způsob vytváření v myší zárodečné kmenové buňce endogenního genového lokusu lemovaného ve směru nebo proti směru nebo v obou směrech místem pro místně specifickou rekombinací, jehož podstata v tom, že
-5CZ 305619 B6
a) vytváří se LTVEC větší než 20 kb, obsahující místo pro místně specifickou rekombinaci, ve směru homologové rameno obsahující oblasti, který lemuje 3' zakončení endogenní lokusové oblasti genu a proti směru homologové rameno uvnitř lokusu, a/nebo se vytváří LTVEC větší než 20 kb, obsahující místo pro místně specifickou rekombinaci, proti směru homologové rameno obsahující oblast, které lemuje 5' zakončení endogenní lokusové oblasti genu a po směru homologové rameno uvnitř lokusu,
b) zavádí se LTVEC nebo LTVECs podle odstavce (a) do myší zárodečné kmenové buňky a
c) detekuje se modifikace alely na endogenním genovém lokusu pro identifikaci myší zárodečné kmenové buňky podle odstavce (b), ve které endogenní genový lokus je lemován ve směru nebo proti směru nebo ve směru i proti směru místem pro místně specifickou rekombinaci.
Výhodným provedením svrchu uvedeného předmětu vynálezu je způsob, jehož podstata spočívá v tom, že alespoň LTVEC(s) obsahuje(í) homologová ramena, která v celku jsou větší než 20 kb.
Výhodným provedením jakéhokoli ze dvou naposledy svrchu uvedených předmětů vynálezu je způsob, jehož podstatou je, že LTVEC(s) je (jsou) větší než 100 kb.
Dalším výhodným provedením svrchu uvedeného předmětu vynálezu je způsob vytváření, v myší zárodečné kmenové buňce, endogenního genového lokusu pro variabilní imunoglobulin lemovaného místem pro místně specifickou rekombinaci, jehož podstata spočívá v tom, že
a) vytváří se LTVEC větší než 20 kb, obsahující místo pro místně specifickou rekombinaci a: (I) ve směru homologové rameno obsahující oblasti bezprostředně přiléhající k J segmentům genového lokusu pro variabilní oblast imunoglobulinu, nikoliv však je zahrnující, a proti směru homologové rameno uvnitř variabilního genomového lokusu, nebo (II) proti směru homologové rameno obsahující oblast přiléhající k nejvíce distálnímu V genovému segmentu, avšak neobsahující žádné V genové segmenty, genového lokusu pro variabilní oblast imunoglobulinu a ve směru homologové rameno uvnitř lokusu,
b) zavádí se LTVEC podle odstavce (a) do myší zárodečné kmenové buňky a
c) detekuje se modifikace alely na variabilním genovém lokusu, takže se identifikují myší zárodečné kmenové buňky podle odstavce (b), kde:
místo pro místně specifickou rekombinaci zaváděné pomocí LTVEC podle odstavce (a) (I) lemuje zakončení ve směru endogenního genového lokusu pro variabilní imunoglobulin, nebo místo pro místně specifickou rekombinaci zaváděné pomocí LTVEC podle odstavce (a) (II) lemuje zakončení proti směru endogenního genového lokusu pro variabilní oblast imunoglobulinu.
Výhodným provedením svrchu uvedeného předmětu vynálezu je způsob, jehož podstata spočívá v tom, že endogenní genový lokus pro variabilní imunoglobulin lemovaný místy pro místně specifickou rekombinaci je vytvářen tím, že
a) vytváří se LTVEC větší než 20 kb, obsahující místo pro místně specifickou rekombinaci, ve směru homologové rameno obsahující oblast, bezprostředně přiléhající k J segmentům genového lokusu pro variabilní oblast imunoglobulinu, nikoliv však je zahrnující, a proti směru homologové rameno uvnitř lokusu,
-6CZ 305619 B6
b) vytváří se LTVEC větší než 20 kb, obsahující místo pro místně specifickou rekombinaci, proti směru homologové rameno obsahující oblast přiléhající co nejvíce k distálnímu V genovému segmentu, avšak neobsahujícího žádné V genové segmenty genového lokusu pro variabilní oblast imunoglobulinu a po směru rameno uvnitř lokusu,
c) zavádí se LTVECs podle odstavců (a) a (b) do myší zárodečné kmenové buňky a
d) detekuje se modifikace alely na variabilním genovém lokusu, takže se identifikují myší zárodečné kmenové buňky podle odstavce (c), přičemž místa pro místně specifickou rekombinaci lemují endogenní genový lokus pro variabilní oblast imunoglobulinu.
Výhodným provedením jakéhokoli ze dvou naposledy svrchu uvedených předmětů je způsob, jehož podstatou je, že LTVEC nebo LTVECs obsahuje(í) homologová ramena, která v celku jsou větší než 20 kb.
Výhodným provedením jakéhokoli ze tří naposledy svrchu uvedených předmětů vynálezu je způsob, jehož podstatou je, že LTVEC nebo LTVECs je větší než 100 kb.
Výhodným provedením jakéhokoli způsobu vytváření podle tohoto vynálezu je způsob, jehož podstata spočívá v tom, že místo(a) pro místně specifickou rekombinaci je (jsou) zvoleno(a) ze souboru zahrnujícího LoxP, Lox511 a Lox2272.
Výhodným provedením podle tohoto vynálezu je jakýkoli způsob, jehož podstata spočívá v tom, že zahrnuje použití kvantitativní zkoušky k detekci modifikace allely. Přitom je obzvláště výhodný způsob, jehož podstata spočívá v tom, že kvantitativní zkouška zahrnuje kvantitativní PCR, FISH, komparativní hybridizaci imobilizovaného vzorku. Z těchto případů je ještě výhodnějším provedením podle tohoto vynálezu způsob, jehož podstata spočívá v tom, že kvantitativní PCR zahrnuje technologii TaqMan® nebo kvantitativní PCR za použití molekulárního majáku.
Předmětem tohoto vynálezu v neposledním případu je endogenní genový lokus pro variabilní imunoglobulin lemovaný místem nebo místy pro místně specifickou rekombinaci.
Předmětem tohoto vynálezu konečně je myší zárodečná kmenová buňka obsahující endogenní genový lokus pro variabilní imunoglobulin lemovaný místem nebo místy pro místně specifickou rekombinaci.
Vynález blíže objasňuje následující podrobný popis s připojenými obrázky.
Objasnění výkresů
Na obr. 1 je schematický diagram vytváření typického LTVEC s použitím bakteriální homologové rekombinace.
(hlbl = homologový box 1; hlb2 = homologový box 2; RE = restrikční enzymové místo); donor fragment = donorový fragment; reporter/selection marker = reportér/selekční znak; modification cassette = modifikační kazeta; Locus to be modified = místo, které se má modifikovat; Large genomic clone (e.g. BAC o PAC) = velký genomový klon (například BAC nebo PAC); bacterial homologous recombination = bakteriální homologová rekombinace; Locus replaced w/modification cassette = místo nahrazené systémem w/modifikační kazeta).
Na obr. 2 je schematický diagram donorového fragmentu a vektoru LTVEC pro myš OCR10.
(hlbl 1 = homologový box 1: lacZ = β-galaktosidáza ORF; SV40 polyA = fragment DNA odvozený od Simian Viru 40, obsahujícího polyadenylační místo a signál: PGKp = promotor myší
-7CZ 305619 B6 fosfoglycerát kinázy; EM7 = bakteriový promotor; neo = neomycinfosfotransferáza, PGK polyA = 3' ultratranslační region odvozený z genu PGK a obsahující polyaldehydační místo a signál; hlb2 = homologový box 2; modification cassette = modifikační kaseta; bacterial homologous recombination = bakteriální homologová rekombinace).
Na obr. 3A až 3D jsou sekvence myší OCRlOcDNA, homologový box 1 (hlbl), homologový box 2 (hlb2) a TaqMan® sondy a primery použité v kvantitativním testu PCR k detekcí modifikace alely (MOA) v buňkách ES zacílených použitím mOCRlOLTVEC.
hbl: páry bází 1 až 211 hb2: páry bází 1586 až 1801
TaqMan® sonda a odpovídající PCR primerový set odvozený z moOCRlO exonu 3:
Sonda TAQMAN®: nukleotidy 608 až 639 horní kmen
Primer ex3-5': nukleotidy 390 až 410- horní kmen
Primer ex3-3': nukleotidy 445 až 461- dolní kmen
TaqMan® sonda a odpovídající PCR primerový set odvozený z mOCRlO exonu 4:
Sonda TAQMAN®: nukleotidy 608 až 639 horní kmen
Primer ex3-5': nukleotidy 586 až 605- horní kmen
Primer ex3-3': nukleotidy 642 až 662- dolní kmen
Na obr. 4A až 4D je schematický diagram dvou vektorů LTVEC konstruovaných k náhradě myšího úseku VDJ lidským úsekem VDJ.
Na obr. 4A jsou izolovány velké inzerty (BAC) klonů zabírající celý region VDJ lidského místa s těžkým řetězcem.
Na obr. 4B jsou v tomto příkladě velké inzerty (BAC) klonů izolované z konců myšího VDJ regionu jako zdroj homologových ramen, kterých je použito k přímé integraci cestou homologové rekombinace lidských segmentů VDJ ve dvoustupňovém procesu.
Na obr. 4C až 4D je v prvním stupni zkonstruován vektor LTVEC 1 (obr. 4D) bakteriovou homologovou rekombinací v E.coli LTVEC 1 a obsahuje v tomto pořadí: velké myší homologové rameno odvozené z regionu proti směru z myšího DJ regionu, avšak jehož absolutní koncové body nejsou významné; kaseta kódující volitelný markerový funkcionál v buňkách ES (PGKneomycinR v tomto příkladě); místo loxP; velký lidský insert zasahující od několika V genových segmentů skrz celý DJ region; myší homologové rameno obsahující region bezprostředně sousedící, avšak neobsahující myší J-segmenty. Ve druhém stupni je zkonstruován vektor LTVEC2 (obr. 4C) bakteriální homologovou rekombinací v E.coli. LTVEC2 a obsahuje v tomto pořadí: velké myší homologové rameno obsahující region sousedící s nejvzdálenější myším V genovým segmentem, avšak neobsahující žádný myší V genový segment; velký insert obsahující velký počet distálních segmentů lidských V genů; mutantové místo loxP nazvaný 1οχ511 v opačné orientaci vůči místům přírodního typu loxP v LTVEC2 a LTVEC 1 (toto místo nebude rekombinovat s místy přírodního typu loxP, ale spíše bude rekombinovat s jinými místy lox5121); místo loxP přírodního typu; druhý selektovatelný marker (PGH-hydroxymycinR v tomto příkladě); a myší homologové rameno odvozené z regionu V, avšak jehož absolutní koncové body nejsou důležité.
-8CZ 305619 B6
Definice „Zacílovací vektor“ je konstrukt DNA, který obsahuje sekvence „homologové“ vůči endogenním chromozomálním sekvencím nukleové kyseliny lemujícím alespoň jednu žádanou genetickou modifikaci. Lemující homologové sekvence, nazývané „homologové ramena“ zaměřují zacílovací vektor do specifického chromozomálního umístění uvnitř genomu pomocí homologie, která existuje mezi homologovanými rameny a odpovídající endogenní sekvenci a začleňuje žádanou genetickou modifikaci způsobem označovaným jako „homologová rekombinace“.
„Homologová“ znamená dvě nebo několik sekvencí nukleových kyselin, které jsou buď totožné nebo dostatečně podobné, aby byly schopny vzájemně hybridizovat nebo se podrobit intermolekulámí výměně.
„Genové zacílení“ je modifikace endogenního chromozomálního místa inzercí, delecí nebo náhradou endogenní sekvence cestou homologové rekombinace použitím zacílovacího vektoru.
„Genový knokaut“ je genetická modifikace způsobená rozrušením genetické informace zakódované v chromozomálním místě.
„Genový knockin“ je genetická modifikace způsobená náhradou genetické informace zakódované v chromozomálním místě odlišnou sekvencí DNA.
„Knockout organismus“ je organismu, ve kterém významný podíl buněk organismu prodělává genový knockout.
„Knockin organismus“ je organismus, ve kterém významný podíl buněk organismu přechovává genový knockin.
„Markér“ nebo „selektovatelný markér“ je selekční marker, který umožňuje izolaci řídce se vyskytujících transfektovaných buněk expresujících marker z většiny zpracovaných buněk v populaci. Jako takové markerové geny se příkladně, tedy bez záměru na jakémkoliv omezení, uvádějí neomycinfosfotransferáza a hygromycin B fosfotransferázy nebo fluoreskující proteiny, jako je GFP.
„ES buňka“ je zárodečná kmenová buňka. Tato buňka je obvykle odvozena z vnitřní buněčné hmoty embrya ve stavu blastocytu.
„ES buněčný klon“ je subpopulace buněk odvozených z jediné buňky populace ES buněk následující po začlenění DNA a následné selekci.
„Lemující DNA“ je segment DNA, který je souběžný a sousední s příslušným referenčním bodem.
„LTVECs“ jsou velké cílové vektory pro eukaryotické buňky, které jsou odvozeny z fragmentů klonované genomové DNA větší než obvykle používané jinými přístupy určenými k homologovému zacílení do eukaryotických buněk.
„Non-human organism“ je organismus, který není normálně veřejností považován za lidský.
„Modifikace alely“ (MOA) je modifikace přesné sekvence DNA jedné alely alespoň jednoho genu nebo alespoň jednoho genu nebo chromozomálního místa v genomu. Tato modifikace alely (MOA) zahrnuje příkladně, tedy bez záměru na jakémkoli omezení, deleci, substituci nebo inzerci tak malého jako je jednoho nukleotidu nebo delece mnoha kilobází zaujímající geny nebo
-9CZ 305619 B6 příslušná chromozomální místa stejně jako kterékoli ze všech možných modifikací mezi těmito dvěma extrémy.
„Ortologová“ sekvence je sekvence z jednoho druhu která je funkčně ekvivalentní se sekvencí v jiném druhu.
Následující podrobný popis a příklady vynálezu toliko objasňují, nijak jej však neomezují.
Vynálezem je nový, rychlý, dynamický a účinný způsob vytváření a skrínování eukaryonických buněk, které obsahují modifikované geny chromozomálních míst. V těchto buňkách mohou být modifikacemi genové knockouty, knokiny, bodové mutace nebo velké genové inserty nebo delece nebo jiné modifikace. Jako neomezující příklad mohou tyto buňky být zárodečné kmenové buňky, které jsou užitečné pro vytváření knockoutu nebo knockinu organismů a obzvláště knockoutu nebo knockinu myší pro účely stanovení funkce genů, které byly změněny, deletovány a/nebo inertovány.
Způsob podle vynálezu je především kombinací:
1. bakteriální homologové rekombinace k přesné konstrukci žádané genetické modifikace uvnitř velkého klonovaného genomového fragmentu DNA, čímž se vytváří velký zacílovací vektor k použití v eukaryotických buňkách (LTVEC).
2. přímého začlenění těchto vektorů LTVEC do eukaryotických buněk k modifikaci odpovídajících endogenních genů nebo sledovaných chromozomálních míst v těchto buňkách a
3. analýz k určení těchto vzácných eukaryotických buněk, ve kterých byla cílová alela záměrně modifikována, zahrnující kvantitativní test pro modifikaci alely (MOA) mateřské alely.
Je třeba zdůraznit, že dřívější způsoby k detekci úspěšné homologové rekombinace v eukaryotických buňkách není možno použít ve spojení s LTVEC podle vynálezu vzhledem k dlouhým homologovým ramenům v LTVEC. Používání LTVEC k záměrné modifikaci endogenních genů nebo chromozomálních míst v eukaryotických buňkách cestou homologové rekombinace je umožněno novým použitím testu ke stanovení vzácných eukaryotických buněk, ve kterých zacílené alely byly podle potřeby modifikovány, přičemž takový test zahrnuje kvantitativní test pro modifikace alely (MOA) mateřské alely za použití například kvantitativní PCR nebo jiného vhodného kvantitativního testu pro MOA.
Schopnost využít zacílovacích vektorů s homologovými rameny většími než jsou ramena používaná v běžných způsobech je mimořádně cenné z těchto důvodů:
1. Zacílující vektory se vytvářejí rychleji a pohodlněji z dostupných knihoven obsahujících velké genomové inserty (například z knihoven BAC a PAC) než zacílovací vektory připravované s použitím známých technologií, ve kterých musejí být genomové inserty rozsáhle charakterizovány a „upravovány“ před použitím (podrobně vysvětlených níže). Kromě toho musí být známa minimální sekvenční informace o sledovaných místech, je tedy pouze nutno znát přibližně 80 až 100 nukleotidů, kterých je potřeba k vytvoření homologových boxů (podrobně popsaných níže) a k vytvoření sond, kterých může být použito při kvantitativních zkouškách MOA (podrobně popsaných níže).
2. Větší modifikace stejně jako modifikace zasahující větší genomové regiony se vytvářejí pohodlněji a za použití menšího počtu stupňů než při použití dosavadních technologií. Například způsob podle vynálezu umožňuje přesnou modifikaci velkého místa, které nemůže být přizpůsobeno tradičními zacílovacího vektory na bázi plazmidu, vzhledem k jejich rozměrovým omezením. Vynález také umožňuje jednostupňovou modifikaci jakéhokoli daného místa v četných bodech (například zavedením specifické mutace na rozdílných exonech
- 10CZ 305619 B6 multiexonového genu), zmírňující potřebu konstruovat několik zacílovacích vektorů a provádět několik běhů zacílování a skrínování pro homologové rekombinace v ES buňkách.
3. Použití dlouhých regionů homologie (dlouhých homologových ramen) zvyšuje cílovou frekvenci „tvrdě na cíl“ míst v eukaryotických buňkách, v souladu s dřívějšími poznatky, že zacílení homologické rekombinace v eukaryotických buňkách je závislé na celkové homologii obsažené uvnitř zacílovacího vektoru.
4. Zvýšená zacílovací frekvence, získaná použitím dlouhých homologových ramen, zmenšuje případnou přednost plynoucí z použití isogenové DNA v těchto zacílovacích vektorech.
5. Použití kvantitativních MOA testů pro skrínování eukaryotických buněk pro homologovou rekombinaci umocňuje nejenom použití LTVEC jako zacílovacích vektorů (přednosti uvedené shora), ale také zkracuje dobu pro identifikaci korektně modifikovaných eukaryotických buněk ze zpravidla několika dní na několik hodin. Kromě toho aplikace kvantitativních MOA nevyžaduje použití sond umístěných vně endogenních genů nebo chromozomálních míst, která jsou modifikována, což odstraňuje potřebu znát sekvenci lemující modifikovaný gen nebo místo. To je významné zlepšení ve srovnání se skrínováním prováděným v minulosti a činí skrínování méně náročné na laboratorní intensitu a značně zlevňuje skrínování výskytu homologové rekombinace v eukaryotických buňkách.
Mnohé z popisovaných způsobů použitých ke konstrukci vektorů DNA jsou standardní způsoby molekulové biologie dobře známé pracovníkům v oboru (například J. Sambrook, E. F. Fritsch a T. Maniatis; Molecular Cloning, A Laboratory Manual, druhé vydání, sv. 1,2 a 3 1989, Current Protocols in Molecular Biology, vydavatel Asubel a koi., Greene Publ. Assoc. Wiley Interscience, NY). Veškeré sekvencování DNA se provádí o sobě známými způsoby s použitím sekvenceru ABI 373A DNA a Taq Dideoxy Terminator Cycle Sequencing Kit (Applied Biosystems Inc. Foster City, CA).
Stupeň 1. Získání velkého genomového DNA klonu obsahujícího geny nebo chromozomální sledovaná místa
Geny nebo sledovaná místa se mohou selektovat na základě specifických kritérií, jako jsou podrobné strukturální nebo funkční hodnoty, nebo mohou být selektovány, chybí-li takové podrobné informace, jako předpověděné potenciální geny nebo genové fragmenty na základě různých projektů sekvencování genomu. Především není nutno znát úplnou sekvenci a genovou strukturu sledovaných genů k použití způsobu podle vynálezu pro produkci vektorů LCTVEC. Ve skutečnosti jedinou nutnou sekvenční informací je přibližně 80 až 100 nukleotidů pro získání sledovaného genomového klonu a pro generaci homologových boxů použitých k vytvoření LTVEC (popsaného podrobně níže) a k vytvoření sond pro použití v kvantitativních testech MOA.
Jakmile jsou sledovaný gen nebo místo selektovány, získá se genomový klon obsahující tento gen nebo místo. Tento klon se může získat jednou z různých cest, včetně, avšak bez záměru na jakémkoliv omezení, skrínováním vhodných knihoven DNA (například BAC, PAC, YAC nebo cosmid) standardní hybridizací nebo způsoby PCR, nebo jakýmkoli jiným způsobem známým pracovníkům v oboru.
Stupeň 2. Připevnění homologových boxů 1 a 2 k modifikační kazetě a vytvoření vektoru LTVEC
Homologové boxy vyznačují místa bakteriální homologové rekombinace, kterých se používá k vytvoření vektorů LTVEC z velkých klonovaných genomových fragmentů (obr. 1). Homologové boxy jsou krátké segmenty DNA, obvykle dvouřetězcové a s délkou nejméně 40 nukleotidů, které jsou homologové k regionům uvnitř velkého klonového genomového fragmentu lemujícího
- 11 CZ 305619 B6 „regionem určeným k modifikaci“. Homologové boxy jsou přivěšeny k modifikační kazetě tak, že po homologové rekombinaci v bakterii modifikační kazeta nahradí modifikovaný region (obr. 1). Technika vytváření zacílovacího vektoru za použití bakteriální homologové rekombinace může být provedena v různých systémech (Yang a kol., Nat. Biotechnol. 15, str. 859 až 865, 1997; Muyrers a kol., Nucleic Acids Res. 27, str. 1555 až 1557, 1999; Angrand a kol. Nucleic Acids Re. 27, el6, 1999; Narayanan a koi., Gene Ther. 6, str. 442 až 447, 1999; Yu a koi., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 97, str. 5978 až 5983, 2000). Jeden příklad oblíbené technologie běžně používané je ET klonování (Zhang a kol., Nat Genet 20, str. 123 až 128, 1998; Narayanan a kol., Gene Ther. 6, str. 442 až 447, 1999) a varianty této technologie (Yu a kol., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 97, str. 5978 až 5983, 2000). ET se týká recE (Hall a Kolodner, Proč. Nati. Acad. Sci. USA 91, str. 3205 až 3209, 1994) a recT proteinů (Kusano a kol., Gene 138, str. 17 až 25, 1994), které vykonávají homologovou rekombinační reakci. RecE je exonukleáza, která upravuje jeden kmen lineární dvouřetězcová DNA (v podstatě donor fragmentu DNA popsáno shora) 5' a 3', čímž ponechává za sebou lineární dvouřetězcový fragment se 3' jednořetězcovým převisem. Tento jednořetězcový převis je povlečen recT proteinem, který má vázací aktivitu jednořetězcové DNA (ssDNA) (Kovali a Matthews, Science 177, str. 1824 až 1827, 1997). ET klonování se provádí s použitím E. coli, který přechodně expresuje genový produkt E. coli recE a recT (Hall a Kolonder, Proč. Nati. Acad. Sci. USA 91, str. 3205 až 3209, 1994; Clark a kol., Cold Spring. Harb Symp Quant Biol. 49, str. 453 až 462, 1984; Noirot a Kolonder, J. Biol. Chern. 27Š, str. 12274 až 12280, 1998; Thresher a kol., J. Mol. Biol. 254, str. 364 až 371, 1995; Kolonder a koi., Mol. Microbiol. 11, str. 23 až 30, 1994; Hall a kol., J. Bacteriol. 175, str. 227 až 287, 1993) a bakteriofág lambda proteinu lambdagam (Murphy, J. Bacteriol. 173, str. 5808 až 5821, 1991; Poteete a kol., J. Bacteriol. 170, str. 2012 až 2021, 1988). Lambdagam proteinu je třeba k chránění donoru fragmentu DNA před degradací exonukleázovým systémem recBC (Myers a Stahl, Annu. Rev. Genet. 28, str. 49 až 70, 1994) a je ho třeba pro účinné ET klonování v hostitelech recBC, jako je často používaný kmen E. coli FHlOb.
Region, který má být modifikován nebo nahrazen použitím bakteriální homologové rekombinace může čítat od nuly nukleotidů v délce (vytvořením začlenění do původního místa) až do několika desítek kilobáz (delecí a/nebo náhradou původního místa). V závislosti na modifikaci kazety může být výsledkem modifikace, při které
a) se vypouští kódující sekvence, genové segmenty nebo regulační elementy,
b) změní se kódovací sekvence, genové segmenty nebo regulační elementy včetně substitucí, adicí a fůzí (například epitopových tagů nebo vytváření bifunkčních proteinů jako jsou proteiny s GFP),
c) inzerují se nové kódující regiony, genové segmenty nebo regulační elementy, jako jsou selektovatelné markerové geny nebo reportérové geny nebo se zavádějí nové geny pod endogenní transkripční kontrolou,
d) vytváří se kondiční alely, například zavedením míst loxP lemujících region, který má být vystřižen Cre kombinézou (Abremski a Hoess, J. Biol. Chem, 259, str. 1509 až 1514, 1984) nebo míst FRT lemujících region, který má být vystřižen rekombinázou Flp (Andrews a kol., Cell, 40, str. 795 až 803, 1985; Meyer-Leon a kol., Cold Spring Harb. Symp. Quant. Biol. 49, str. 797 až 804, 1984; Cox, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 80, str. 4223 až 4227, 1983), nebo
e) nahrazuje se kódující sekvence nebo genové segmenty z jednoho druhu orthologovými kódovacími sekvencemi odlišných druhů, například náhradou myšího genetického místa orthologovým lidským genetickým místem ke konstrukci myši, kde takové parciální místo bylo „humanizováno“.
-12CZ 305619 B6
Některé nebo všechny tyto modifikace mohou být začleněny do LTVEC. Specifickým, avšak neomezujícím příkladem, kde endogenní kódovací sekvence je úplně vypuštěna a současně nahrazena jak reportérovým genem tak selektovatelným markérem, je příklad 1, dokládající přednosti způsobu podle vynálezu ve srovnáni s dosavadními technologiemi.
Stupeň 3 (případný). Ověření, že každý LTVEC byl zkonstruován správně
Pro ověření, že každý LTVEC byl konstruován správně, se provádí:
a) Diagnostická PCR k ověření nových spojů vytvořených začleněním donorového fragmentu do sledovaných genů nebo chromozomálních míst. Takto získané fragmenty PCR se mohou sekvencovat k dalšímu ověření nových spojů, vytvořených začleněním donorového fragmentu do sledovaných genů nebo chromozomálních míst,
b) Digesce diagnostického restrikčního enzymu k ujištění, že do LTVEC byly začleněny pouze žádoucí modifikace během bakteriálního homologového rekombinačního procesu,
c) Přímé sekvencování LTVEC, obzvláště regionů zahrnujících modifikační místo k ověření nových spojů vytvořených začleněním donorového fragmentu do sledovaných genů nebo chromozomálních míst.
Stupeň 4. Čištění, příprava a linearizace LTVEC DNA pro začlenění do eukaryotických buněk.
a. Příprava LTVEC DNA
Připraví se miniprep DNA (J. Sambrook J., E. F. Fritsch a T. Maniatis. Molecular Cloning A Laboratory Manual, druhé vydání, sv. 1, 2 a 3, 1989; Tillett a Neilan, Biotechniques 24, str. 568 až 570, 572, 1998 http//www.quagen.com/literature/handbooks/plkmini/plm-399.pdf) vybraného LTVEC a retransformuje se miniprep LTVEC DNA do E. coli použitím elektroporace (J. Sambrook, E. F. Fritsch a T. Maniatis, Molecular Cloning A Laboratory Manual, druhé vydání, sv. 1, 2 a 3, 1989). Tento stupeň je nutný k vyčištění plazmidu kódujícího rekombigenní proteiny, kterých se použije pro stupeň bakteriální homologový rekombinantní stupeň (Zhang a kol., Nat Genet, 30, str. 123 až 128, 1998; Narayanan a kol., Gene Ther 6, str. 442 až 447, 1999). Je užitečné vyčistit tento plazmid (a), jelikož je to plazmid s vysokým počtem kopií a může snižovat výtěžek získaný ve velkém seznamu LTVEC prep; (b) k vyloučení možnosti indukce exprese rekombinogenických proteinů a (c) jelikož může zatemnit fyzikální mapování LTVEC. Před zavedením LTVEC do eukaiyotických buněk, se připraví větší množství LTVEC DNA standardní metodologií (http:/www/piagen.com/literature/handbooks/plk/plklow.pdf; J. Sambrook, E. F. Fritsch a T. Maniatis, Molecular Cloning A Laboratory Manual, druhé vydání, sv. 1, 2 a 3, 1989; Tillett a Neilan, Biotechniques 24, str. 568 až 570, 572, 1998). Tento stupeň lze však obejít, použije-li se metody bakteriální homologické rekombinace, která používá rekombinogenního prophagu, tedy kde geny kódující rekombinogenní proteiny jsou začleněny do bakteriálního chromozomu (Yu a kol., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 97, str. 4978 až 5983, 2000).
b. Linearizace LTVEC DNA
K přípravě LTVEC k zvedání do eukaryotických buněk, je LTVEC předběžně linearizován způsobem, který vypouští modifikované geny nebo chromozomální místa DNA lemovaná dlouhými homologovými rameny. To se může provést linearizací LTVEC, s výhodou v kostře vektoru jakýmkoli vhodným restrikčním enzymem, který digestuje pouze vzácně. Jakožto příklady vhodných restrikčních enzymů se uvádějí Notl, Pad, Sfil, Srfl, Swal, Fsel. Volba restrikčního enzymu může být určena experimentálně (tedy testováním několika různých kandidátů „rare cutters“) nebo, je-li sekvence LTVEC známa, analyzováním té sekvence a zvolením vhodného restrikčního enzymu na základě analýzy. V případech kdy LTVEC má vektorovou kostru obsahující vzácná místa jako místa CosN, mohou být štěpena enzymy rozpoznávajícími taková místa,
- 13CZ 305619 B6 například lambda terminázou (Shizuya a kol., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 89, str. 8794 až 8797, 1992; Becker a Gold, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 75, str. 4199 až 4203, 1978; Rackwitz a koi., Gene 40, str. 259 až 266, 1985).
Stupeň 5. Začlenění LTVEC do eukaryotických buněk a selekce buněk, kde došlo k úspěšnému začlenění LTVEC
LTVEC DNA může být začleněna do eukaryotických buněk použitím standardní metodologie, jako je transfekce zprostředkovaná fosforečnanem vápenatým, lipidy nebo elektroporací (J. Sambrook, E. F. Fritsch a T. Maniatis: Molecular Cloning, A Laboratory Manual, druhé vydání, sv. 1, 2 a 3, 1989). Buňky, do kterých byl LTVEC začleněn úspěšně, se mohou selektovat vystavením selekčním činidlům v závislosti na selektovatelném markerovém genu, který byl zakonstruován do LTVEC. Jako neomezující příklad se uvádí, že je-li selektovatelným markérem neomycinfosfotransferázový (neo) gen (Beck a kol., Gene 19, str. 327 až 336, 1982), pak mohou být buňky, které pojmuly LTVEC, selektovány v prostředí obsahujícím G418; buňky, které nemají LTVEC zahynout, zatímco buňky, které pojmuly LTVEC přežijí (Santerre a kol., Gene 30, str. 147 až 156, 1984). Jiné vhodné selektovatelné markéry obsahují jakoukoli drogu, která má aktivitu v eukaryotických buňkách (Joyner, The Practival Approach Series, 293, 1999), jako je hydromycin B (Santerre a kol., Gene 30, str. 147 až 156, 1984; Bernard a kol., Exp. Cell. Res. 158, str. 237 až 243, 1985; Giordano a McAllister, Gene 88, str. 285 až 288, 1990), Blasticidin S. (Izumi a kol., Exp. Cell. Res. 197, str. 229 až 233, 1991) a další, které jsou běžné pracovníkům v oboru.
Stupeň 6. Screen pro homologické rekombinantní děje v eukaryotických buňkách za použití kvantitativního testu pro modifikaci alely (MOA)
Eukaryotické buňky, které byly s úspěchem modifikovány zacílením LTVEC do sledovaného místa, se mohou identifikovat použitím řady přístupů, které mohou zjistit modifikaci alely uvnitř sledovaného místa a které nezávisejí na testech zabírajících celé homologové rameno nebo ramena. Takovými přístupy mohou být příkladně:
a) kvantitativní PCR s použitím TaqMan® (Lie a Petrolpoulos, Curr. Opin. Biotechnol. 9, str. 43 až 48, 1998),
b) kvantitativní test MOA s použitím molekulárních signálů (Tan a kol., Chemistry 6, str. 1107 až 1111,2000),
c) fluorescence v místě hybridizace FISH (Laan a kol., Hum. Genet. 96, str.275 až 280, 1995) nebo komparativní genomová hybridizace (CGH) (Forozan a kol., Trends Genet. 13, str. 405 až 409, 1997; Thompson a Gray, J. Cell. Biochem. Suppl., str. 139 až 143, 1993; Houldsworth a Chaganti, Am. J. Pathol. 145, str. 1253 až 1260, 1994),
d) isothermní zesílení DNA (Lizardi a kol., Nat. Genet. 19, str. 225 až 232, 1998; Mitra a Church, Nucleic Acids Res. 27:e34, 1999) a
e) kvantitativní hybridizace na imobilizovanou sondu (Southern, J. Mol. Biol. 98, str. 503, 1975; Kafatos F. C.; Jones C. W., Efstratiadis A., Nucleic Acids Res. 7(6), str. 1541 až 1552, 1979).
Vynález objasňuje příklad, ve kterém je použito TaqMan® kvantitativní PCR ke skrínování pro úspěšně zacílené eukaryotických buněk. V tomto neomezujícím příkladě je použito TaqMan® k identifikaci eukaryotických buněk, které byly podrobeny homologové rekombinaci, přičemž část jedné ze dvou endogenních alel v diploidním genomu byla nahrazena jinou sekvencí. Na rozdíl od tradičních způsobů, při kterých rozdíl v délce restrikčního fragmentu zabírajícího celé homologové rameno nebo ramena indikuje modifikaci jedné ze dvou alel, kvantitativní způsob
- 14CZ 305619 B6
TaqMan® zjistí modifikaci jedné alely změřením redukce v počtu kopií (polovinou) nemodifikované alely. Sonda zjistí nemodifikovanou alelu a nikoli modifikovanou alelu. Proto je způsob nezávislý na přesné povaze modifikace a není omezen na přemístění sekvencí popisované v tomto příkladě. TaqMan® se používá ke kvantifikaci počtu kopií matrice DNA v genomovém vzorku DNA, zvláště porovnáním s referenčním genem (Lie a Petropoulos, Curr. Opin. Biotechnol. 9, str. 43 až 48, 1998). Referenční gen se hodnotí v téže genomové DNA jako cílený gen nebo místo. Proto se provádějí dvě zesílení TaqMan® (každé se svou příslušnou sondou). Jedna sonda TaqMan® určuje prahový cyklus „Cť‘ (Thresold Cycle, „Ct“) referenčního genu, zatímco druhá sonda určuje „Ct“ regionu cíleného genu nebo místa, které jsou nahrazeny úspěšným zacílením. Ct je kvantita, která reflektuje množství výchozí DNA pro každou sondu TaqMan®, tedy méně hojná sekvence vyžaduje více cyklů PCR k dosažení prahového cyklu. Výsledkem snížení počtu kopií matricové sekvence na polovinu pro reakci TaqMan® je nárůst o alespoň jednu jednotku Ct. Výsledkem reakcí TaqMan® v buňkách, kde jedna alela cílového genu nebo místa byla nahrazena homologovou rekombinaci, je nárůst o jeden Ct pro cílovou TaqMan® reakci bez nárůstu Ct pro referenční gen při porovnání s DNA z necílených buněk. To umožňuje pohotovou detekci modifikace jedné alely sledovaného genu v eukaryotických buňkách za použití LTVEC.
Jak je uvedeno shora, modifikací skrínování alel (MOA) je použití kterékoli metody, která detekuje modifikaci jedné alely k identifikaci buněk, které byly podrobeny homologové rekombinaci. Nepožaduje se, aby cílové alely byly stejné (homologové), ve skutečnosti mohou obsahovat polymorfísmus, jak je tomu u progeny vycházející zcrosingu dvou různých myších kmenů. Kromě toho, jednou speciální situací, která je také skrínováním MOA, je zacílení genů, které jsou normálně obsaženy jako jediná kopie v buňkách tak, že některé jsou na pohlavních chromozomech a obzvláště na chromozomu Y. V tomto případě může být použito způsobů k detekci modifikace samotné cílové alely, jako je kvantitativní PCR, Southern blotting a podobné metody k detekci cíleného jevu. Je zřejmé, že může být použito způsobu podle vynálezu k vytvoření modifikovaných eukaryotických buněk i když jsou alely polymorfní nebo vyskytují-li se v jediné kopii v cílených buňkách.
Stupeň 8. Použití geneticky modifikovaných eukaryotických buněk
a) Geneticky modifikovaných eukaryotických buněk, generovaných způsoby popsaných ve stupních 1 až 7, může být použito v jakémkoli pokusu in vitro nebo in vivo, kde je žádoucí změna genotypu buňky.
b) Geneticky modifikovaných eukaryotických buněk, generovaných způsoby popsaných ve stupnicích 1 až 7, může být použito také ke generování organismu nesoucího genetickou modifikaci. Geneticky modifikovaný organismus může být generován různými způsoby, přičemž se příkladně uvádí:
1. Modifikované embryonické kmenové buňky (ES) jako jsou často používané krysí nebo myší ES buňky. ES buněk může být použito k vytvoření geneticky modifikovaných krys nebo myší standardní blastocytovou injekční technologií nebo agregačními technikami (Robertson, Practical Approach Series, 254, 1987; Wood a koi., Nature 365, str. 87 až 89, 1993; Joyner, The Practical Approach Series 293, 1999), tetraploydovou blastocytovou injekcí (Wang a kol., Meeh. Dev. 62, str. 137 až 145, 1997) nebo nukleárním transferem a klonováním (Wakayama a kol., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 96, str. 14984 až 14989, 1999). Es buňky, odvozené z jiných organismů jako jsou králíci (Wang a kol., Mech. Dev. 62, str. 137 až 145, 1997); Schoonjans a kol., Mol. Reprod. Dev. 45, str. 439 až 443, 1996) nebo kuřata (Pain a kol., Development 122, str. 2339 až 2348, 1997) nebo jiných druhů, jsou také vhodné ke genetické transformaci způsobem podle vynálezu.
2. Modifikovaných protoplastů může být použito ke generování geneticky modifikovaných rostlin (například americký patentový spis číslo US 5 350689, „Zea mays plants and transgenic Zea mays plants regenerated from protoplasts or protoplast-derived cells“ a americký patentový
-15CZ 305619 B6 spis číslo US 5 408189, „Regeneration of plants from cultured guard cell protoplasts“ a uvedené odkazy).
3. Nukleový transfer z modifikovaných eukaryotických buněk na oocyty ke generování klonovaných organismů s modifikovanou alelou (Wakayama a kol., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 96, str. 14984 až 14989, 1999; Baguisi a kol., Nat. Biotechnol 17, str. 456 až 461, 1999; Wilmut a kol., Reprod. Fertil Dev. 10, str. 639 až 643, 1998; Wilmut a kol., Nature 385, str. 810 až 813, 1997; Wakayama a kol., Nat. Genet 24, str. 108 až 109, 2000); Wakayama a kol., Nature 394, str. 369 až 374, 1998); Rideout a kol., Nat. Genet. 24, str. 109 až 110, 2000); Campbell a kol., Nature 380, str. 64 až 66, 1006).
4. Fúze buněk k transferu modifikované alely do jiné buňky včetně transferu konstruovaného chromozomu a použití takových buněk ke generování organismu nesoucího modifikovanou alelu nebo konstruovaný chromozom (Kuroiwa a kol., Nat. Biotechnol. 18, str. 1086 až 1090, 2000).
5. Způsob podle vynálezu je také vhodný pro jakékoli jiné přístupy, kterých bylo použito nebo jež mají ještě být objeveny.
Ačkoli jsou způsoby, použité při provádění jednotlivých stupňů způsobu podle vynálezu, běžné pro pracovníky v oboru, novost způsobu podle vynálezu spočívá v jedinečné kombinaci takových stupňů a technik svázaných s nikdy dosud popsaným způsobem zavádění LTVEC přímo do eukaryotických buněk k modifikování chromozomálního místa a s použitím kvantitativních testů MOA k identifikaci eukaryotických buněk, které byly přiměřeně modifikovány. Tato nová kombinace představuje významné zlepšení oproti dřívějším technologiím pro vytváření organismů majících modifikace endogenních genů nebo chromozomálních míst.
Vynález objasňují, nijak však neomezují následující příklady praktického provedení.
Příklady uskutečnění vynálezu
Příklad 1
Konstrukce myších ES buněk vykazujících deleci genu OCR10
a. Selekce velkého klonu genomové DNA obsahující mOCRlO
Bakteriový umělý chromozom (BAC) nesoucí velký genomový fragment DNA, který obsahuje kódovací sekvenci myšího genu OCR10 (mOCRlO) se získá skrínováním seřazené myší genomové knihovny DNA BAC (Incyte Genomics) za použití PCR. Primery, použité ke skrínování této knihovny, byly odvozeny z mOCRlO genu cDNA sekvence.
Použije se dvou příměrových párů:
(a) OCR10. RAA(5'-AGCTACCAGCTGCAGATGCGGGCAG-3') a
OCR10. PVIrc(5'-CTCCCCAGCCTGGGTCTGAAAGATGACG-3'), který zesílí 102bp DNA a (b) OCR10.TDY(5'-GACCTCACTTGCTACACTGACTAC-3') a
OCR10.QETrc(5'-ACTTGTGTAGGCTGCAGAAGGTCTCTTG-3'), který zesílí 1500 bp DNA.
Tento OCR10 BAC obsahuje přibližně 180 kb genomové DNA včetně úplně kódující sekvence mOCRlO. Tohoto BAC klonu se použije ke generování LTVEC, kterého se pak použije k deleci části kódovacího regionu mOCRlO, přičemž se současně zavede reporterový gen, jehož počáteč
- 16CZ 305619 B6 ní kodon přesně nahradí počáteční kodon OCR 10, stejně jako inzerce selektovatelného markerového genu vhodného k selekci E.coli a savčích buněk následující reportérovy gen (obr. 2). Reportérovy gen (v tomto neomezujícím příkladě LacZ, jehož sekvence je snadno dostupná pracovníkům v oboru) kóduje E.coli β-galaktosinásový enzym. Jelikož poloha začlenění LacZ (jeho počáteční kodon je v téže poloze jako počáteční kodon mOCRlO) exprese lacZ by měla napodobovat expresi mOCRlO, jak se pozoruje v jiných příkladech, kde byla provedena podobná přemístění LacZ za použití dříve uvedených technologií (viz „Gene trap strategies in ES cells“, W. Wurst a A. Gossler, Joyner, The Practival Approach Series 293, 1999). Gen LacZ umožňuje provedení jednoduchého a standardního enzymatického testu, který odhaluje jeho expresní modely in situ a tak nahrazuje test, který reflektuje normální expresní modely přemístěných genů nebo chromozomálních míst.
b. Konstrukce donorového fragmentu a generace LTVEC
Modifikační kazetou, použitou ke konstrukci mOCRlOLTVEC je lacZ-SV40polyA-PGKpEM7-neoPGK polyA kazeta, přičemž lacZ je markerový gen, jak popsáno shora, SV40polyA je fragment odvozený od Simian Virus 40 (Subramanian a kol., Prog. Nucleic Acid Res. Mol. Biol. 19, str. 157 až 164, 1976; Thimmappaya a kol., J. Biol. Chern. 253, str. 1613 až 1618, 1978; Dhar a koi., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 71, str. 371 až 375, 1974; Reddy a koi., Science 200, str. 494 až 502, 1978) a obsahující polyadenylační místo a signál (Subramanian a kol., Prog. Nucleic Acid Res. Mol. Biol. 19, str. 157 až 164, 1976; Thimmappaya a kol., J. Biol. Chern. 253, str. 1613 až 1618, 1978; Dhar a koi., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 71, str. 371 až 375, 1974; Reddy a koi., Science 200, str. 494 až 502, 1978), PGKp je (PGK) promotor myší fosfoglycerátkinázy (Adra a kol., Gne 60, str. 65 až 74, 1987) (kterého se používalo extensivně ke hnaní exprese droze resistentních genů v savčích buňkách), EM7 je silný bakteriální promotor, který má přednost umožňovat pozitivní selekci v bakterii úplného konstruktu LTVEC hnaním exprese neomycinfosfotransferázového (neo) genu, přičemž neo je selektovatelný marker, který uděluje Kanamycinovou odolnost v prokaryotických buňkách a G418 odolnost v eukaryotických buňkách (Beck a kol., Gene 19, str. 327 až 336, 1982) a PGK polyA je 3' netranslatovaný region odvozený od genu PGK a obsahující polyadenylační místo a signál (Boer a kol., Biochem Genet 28, str. 299 až 308, 1990).
Při konstrukci mOCRlOLTVEC se napřed generuje donorový fragment, sestávající zmOCRlO homologového boxu 1 (hbl), připojeného proti směru z genu LacZ v modifikační kazetě a OCR10 homologového boxu 2 (hb2) připojeného po směru neo-PGK polyA sekvence v modifikační kazetě (obr. 2) za použití standardní rekombinační genetické konstrukční technologie. Homologový box 1 (hbl) sestává z 211 bp netranslatované sekvence bezprostředně proti směru počátečního methioninu mOCRlO otevřeného čtecího rámce (mOCRlOORF) (obr. 3A-3D). Homologový box 2 (hb2) sestává z posledního 216 bp mOCRlQORF, končícího na stop kodonu (obr. 3A-3D).
V důsledku toho, při použití bakteriální homologové rekombinace (Zhang a kol., Nat. Genet 20, str. 123 až 128, 1998; Angrand a kol., Nucleic Acids Res. 27:el6, 1999; Muyrers a kol., Nucleic Acids Res. 27, str. 1555 až 1557, 1999; Narayanan a koi., Gene Ther. 6, str. 442 až 447, 1999; Yu a koi., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 97, str. 5978 až 5983, 2000), se tohoto fragmentu použilo k přesné náhradě kódujícího regionu OCR 10 (od počátečního methioninu ke stop kodonu) sinsertní kasetou, vedoucí ke konstrukci OCR10LTVEC (obr. 2). Byla tedy v tomto mOCRlOLTVEC kódující sekvence mOCRlO nahrazena insertní kasetou vytvářející přibližně deleci 20 kb v místě mOCRlO při ponechání přibližně 130 kb homologie proti směru (homologové rameno proti směru) a 32 kb homologii po směru (homologové rameno po směru).
Je významné, že LTVEC může být rychlejší a pohodlněji generován z dostupných knihoven BAC než zacílovací vektory připravené s použitím technologií známých ze stavu techniky, jelikož je potřeba pouze jediného bakteriálního rekombinantního kroku a jediné sekvenční informace je potřeba ke generování homologových boxů. Na rozdíl od toho dřívější přístupy ke generování
- 17CZ 305619 B6 zacílovacích vektorů používající bakteriální homologové rekombinace potřebují, aby byly velké zacílovací vektory „upraveny“ před jejich zavedením do ES buněk (Hill a kol. Genomics 64, str. Ill až 113, 2000). Tato úprava je nutná, vzhledem k potřebě vytvoření dostatečně krátkých homologových ramen k přizpůsobení skrínovacích metod používaných v dřívějších přístupech. Jedním hlavním nedostatkem Hillovy metody (Hill a kol.) je, že k úpravě jsou nutné dva kroky přídavné homologové rekombinace (jeden k úpravě regionu proti směru modifikovaného místa jeden k úpravě regionu po směru modifikovaného místa). K tomu je potřeba podstatně více sekvenčních informací, včetně sekvenční informace zahrnující upravované místo.
Kromě toho je další předností, objasněnou shora uvedeným příkladem, možnost v jednom kroku snadno generovat velké delece genu zahrnujícího nOCRlO (přibližně 20 kb). Na rozdíl od toho s použitím dřívějších technologií je potřeba k provedení stejné úlohy několik kroků a mohou zahrnovat značení regionů po směru a proti směru kódující sekvence s místy loxP za účelem použití Cre rekombinázy k odstranění sekvence lemované těmito místy po začlenění modifikovaného místa do eukaryotických buněk. To může být nedosažitelné v jednom kroku a může tedy vyžadovat konstrukci dvou zacílovacích vektorů s použitím různých selekčních markérů a dvou sekvenčních zacílovacích dějů do buněk ES, jednoho k zavedení místa loxP do regionu proti směru kódovací sekvence a druhého k zavedení místa loxP do regionu po směru kódovací sekvence. Připomíná se také, že vytváření velkých delecí probíhá často s nízkou účinností s použitím dřívějších zacílovacích technologií do eukaryotických buněk, jelikož frekvence k dosažení homologové rekombinace může být nízká, použije-li se zacílovacích vektorů obsahujících velké delece lemované poměrně krátkými homologovými rameny. Vysoká účinnost dosahovaná použitím způsobu podle vynálezu (jak uvedeno níže) je způsobena velmi dlouhými homologovými rameny obsaženými v LTVEC, která zvyšuje rychlost homologických rekombinací v eukaryotických buňkách.
c. Ověřen, příprava a zavedení OCR10LTVECDNA do ES buněk
Sekvence obklopující spojení inzertní kasety a homologové sekvence se ověřuje sekvencováním DNA. Velikost mOCRlOLTVEC se ověřuje restrikční analýzou následovanou gelovou elektroforézou s pulzním polem („pulsed field gel electrophoresis“, PFGE) (Cantor a kol., Annu. Rev. Biophys. Biophys. Chern. 17, str. 287 až 304, 1988; Schwartz a Cantor, Cell, 37, str. 67 až 75, 1984). Provede se ve velkém měřítku standardní plazmidová příprava mOCRlOLTVEC, plazmidová DNA se digestuje s restrikčním enzymem Notl, který stříhá ve vektorové kostře mOCRlOLTVEC k vytvoření lineární DNA. Pak se linearizovaná DNA začlení do myších ES buněk elektroporací (Robertson, Practical Approach Series 254, 1987; Joyner, The Practical Approach Series 293, 1999; J. Sambrook, E. F. Fritsch a T. Maniatis, Molecular Cloning A Laboratory Manual, druhé vydání, sv. 1, 2 a 3, 1989). Úspěšně s mOCRlOLTVEC transfektované ES buňky se selektují pro prostředí obsahující G418 standardními způsoby selekce (Robertson, Practical Approach Series, 254, 1987; Joyner, The Practical Approach Series 293, 1999).
d. Identifikace zacílených klonů ES buněk s použitím testu kvantitativní modifikace alely (MOA)
K identifikaci ES buněk, ve kterých byly nahrazeny jeden nebo dva endogenní geny mOCRlO sekvencí modifikační kasety, se analyzují DNA z jednotlivých klonů ES buněk kvantitativní PCR s použitím standardní popsané metodologie TaqMan® (Applied Biosystems, TaqMan® Universal PCR Master Mix, katalogové číslo P/N 4304437, též http://www.pebiodocs.com/pebiodocs/ 04304449. pgf). Použité primery a sondy TaqMan® jsou popsány na obr. 3A až 3D. Skrínuje se celkem 69 nezávislých klonů ES buněk a 3 byly shledány jako pozitivní, tedy jako klony, ve kterých byla nahrazena jedna endogenní sekvence kódující mOCRlO shora popsanou modifikační kasetou.
-18CZ 305619 B6
Test MOA má několik předností:
(i) není nutné použití sondy vně modifikovaného místa, čímž není nutné znát sekvenci lemující modifikované místo, (ii) vyžaduje velmi málo času k provedení ve srovnání s běžnou Southern blot metodikou, používanou podle stavu techniky (Robertson, Practical Appeoach, Series 254, 1987, Joyner, The Practical Appeoach Series 293, 1999), čímž se zkrátí doba identifikace korektně modifikovaných buněk z typických několika dnů na jen několik hodin.
To je významné zlepšení oproti skrínování podle stavu techniky a představuje méně pracný a nákladově výhodnější přístup skrínování pro homologové rekombinační děje v eukaryotických buňkách.
Ještě další předností způsobu podle vynálezu je, že je také nadřazený dřívějším technologiím vzhledem ke své schopnosti zacílit obtížná místa. Při použití dosavadních technologií bylo předvedeno, že pro určitá místa může být frekvence úspěšného zacílení tak nízká jako 1 ve 2000 integračních dějů, snad dokonce nižší. S použitím způsobu podle vynálezu lze tak obtížná místa zacílit daleko účinněji s použitím LTVEC, který obsahuje dlouhá homologová ramena (tedy větší než taková, která připouštěly dřívější technologie). Jako shora popsaný příklad, nepředstavující žádné omezení, se zacílilo místo OCR 10, tedy místo, které bylo dříve považováno za nepřístupné pro zacílení za použití technologie známé ze stavu techniky. Při použití způsobu podle vynálezu je možné úspěšné zacílení ve 3 ze 69 ES klonů buněk, ve kterých mOCRlOLTVEC (obsahující více než 160 kb homologových ramen a zavádějící 20 kb delecí) byl integrován, zatímco s použitím dosavadní technologie pro zacílení ES buněk (Joyner, The Practical Approach Series 293, 1999) s použitím vektoru na bázi plazmidu s homologovými rameny kratšími než 10 až 20 kb při zavedení delece menší než 15 kb, nebyly identifikovány žádné děje mezi více než 600 integranty vektoru. To zřetelně dokládá nadřazenost způsobu podle vynálezu oproti technologiím, známým ze stavu techniky.
Příklad 2
Zvětšená zacilovací frekvence a odstranění potřeby použít isogenní DNA při použití LTVEC jako zacílovacích vektorů
Jak bylo uvedeno shora, měla by zvýšená zacilovací frekvence získaná použitím dlouhých homologových ramen snižovat případný prospěch odvozený z použití genomové DNA v konstrukci LTVEC, který je isogenní, tedy identický v sekvenci s DNA zacílované eukaryotické buňky. K otestování této domněnky se zkonstruovaly četné LTVEC s použitím genomové DNA odvozené z téhož myšího subkmene jako zacílovaná eukaryotická buňka (podle předpokladu isogenní) a četné LTVEC s použitím genomové DNA odvozené z myších subkmenů lišících se od kmenů zachovaných eukaryotických buněk (podle předpokladu neisogenních). Dvě sady LTVEC vykazovaly podobné zacilovací sekvence v rozsahu 1 až 13 % (tabulka I), což značí, že rychlost úspěšného zacílování za použití LTVEC nezávisí na isogenicitě.
V tabulce I jsou uvedeny hodnoty souhrnu genového zacílení s použitím BAC klonovacích vektorů (ES buňky jsou vždy CJ7).
-19CZ 305619 B6
Tabulka 1
Neisogenické
Beisogenni
Přibližně (Kb)
Cílový Popis Původ Velikost Aral Ari2 Del +klo- T zacígen DBA LTVEC ny lení
| OGB | LacZ-ATG fůze | SvJ | 147 | 50 | 90 | 5 | 4 | 4,0 |
| OCRIO(A) | LacZ-ATG fůze | SvJ | 150 | 135 | 8 | 20 | 1 | L4 |
| OCBIO(B) | LacZ-ATG fůze | SvJ | 169 | 130 | 32 | 20 | 3 | 4,3 |
| MA61 | LacZ-ATG fůze | SvJ | 95 | B/D | B/D | 30 | 3 | 5,6 |
| NA16 | LacZ-ATG fůze | SvJ | 120 | N/D | B/D | 8 | 8 | 13,0 |
| Isogennl | ||||||||
| ROBI | intracell-LacZ fůze | CJ7 | 55 | 14 | 14 | 20 | 5 | 5 |
| ROIRt | iutrácell*3xiyc fůze | CJ7 | 55 | 14 | 14 | 20 | 2 | 2 |
| R0R2 | lutace brachy* daklyly a Hyc tag | CJ7 | 45 | 11 | 24 | 0,5 2 | 2 |
N/D znamená nestanoveno ίο Vytváření LTVEC a jejich přímé použití jako zacílujících vektorů kombinované se skrínováním MOA pro homologační rekombinační děje v ES buňkách je tedy nový způsob konstruování geneticky modifikovaných míst, který je rychlý, nenákladný a představuje významné zlepšení oproti namáhavým, časově náročným způsobům známým ze stavu techniky. Otevírá tak možnost rychlých genomových funkčních analýz ve velkém měřítku a in vivo v podstatě jakýchkoli genů 15 v organickém genomu ve zlomku času a nákladů ve srovnání se způsoby známými ze stavu techniky.
Příklad 3
Použití LTVECu k produkci chimemích a humánních protilátek
a. Úvod
Protilátka se skládají ze dvou řetězců, těžkého a lehkého řetězce, z nichž každý se skládá ze dvou domén, variabilní a konstantní domény. Variabilní region proti látkového proteinu je N-koncová část protilátky, která váže antigen. Variabilní doména těžkého řetězce je kódovaná DNA variabilního genového místa s těžkým řetězcem, která se skládá z variabilního (V), diversního (D) a spo
-20CZ 305619 B6 jovacího (J) genového segmentu. Variabilní domény lehkého řetězce jsou kódovány DNA variabilního genového místa s lehkým řetězcem, kapa a lambda, které se skládají z variabilního (V) a spojovacího (J) genového segmentu.
Přeskupení variabilního regionu (VDJK/VJ) genů během počátečního vývoje B-buněk je primárním mechanismem, přičemž imunitní systém produkuje protilátky schopné rozeznat obrovský počet antigenů, se kterými se může setkat. V podstatě přeskupením DNA během vývoje B-buněk se shromáždí obrovský repertoár variabilních sekvencí regionu (VDJ/VJ), které se pak následně spojí na konstantní (C) region k vytvoření kompletních těžkých a lehkých řetězců, které se spojí k vytvoření protilátky. Po shromáždění funkčních protilátek, zavede somatická hypermutace, která se objeví v sekundárních hypoidních orgánech, další diversitu, která umožní organismu vybrat a optimalizovat afinitu protilátky.
Produkce protilátek na různé antigeny v nehumánních vzorcích napřed představovala velký slib pro výrobu protilátek ve velkém měřítku, kterých by bylo možno použít v humánní terapeutice. Rozdílnost druhů však vede k produkci protilátek lidmi, kteří inaktivují cizí protilátky a způsobují alergické reakce. Konaly se proto pokusy k „polidštění“ (humanizaci) protilátek, aby byly rozlišovány s menší pravděpodobností jako cizí v lidech. Zpočátku tento proces zahrnoval kombinaci antigen vázajících částí protilátek odvozených z myší s konstantním regionem lidských protilátek, čímž se vytvářely rekombinantní regionem lidských protilátek, čímž se vytvářely rekombinantní protilátky, které byly méně imunogenní v lidech. Druhým vyvinutým přístupem byl fágový displej, při kterém jsou lidské V regiony klonovány do fágové displejové knihovny a regiony s vhodnými vazbovými charakteristikami se spojují na lidské konstantní regiony k vytvoření lidských protilátek. Tato technologie je však omezená nedostatkem vývoje protilátek a afinitní dospělosti, který se přirozeně vyskytuje v B-buňkách.
Později byly endogenní geny z myší vyřazeny a geny nahrazeny jejich lidskými protějšky k produkci výhradně lidských protilátek. Avšak použití těchto konstruktů osvětlilo význam endogenního konstantního regionu ve vývoji a optimalizaci protilátek v B-buňkách. Myši produkující plně lidské protilátky snížily imunitní odezvy. Může to být proto, že lidské protilátky produkované transgenickými myšmi s výhradně lidskými konstrukty měly sníženou afinitu ve srovnání s jejich myšími protějšky. Snížená afinita by mohla ovlivnit zralost a přežití B-buněk. Podle toho silně oslavované metody výroby humanizovaných protilátek v myších a v jiných organismech, kde endogenní proměnné a konstantní regiony myší jsou vyřazeny a nahrazeny jejich lidskými protějšky, nevedly tedy k optimálním protilátkám.
Použití chimemích protilátek, které používají lidských variabilních regionů (VDJ/VJ) s myšími konstantními regiony prostřednictvím zrání B-buněk, následované následným konstruováním protilátek k nahrazení myších konstantních regionů jejich lidskými protějšky je popsáno (americký patentový spis US 5 770429, zveřejněný 23. června 1998). Avšak jediná metodologie, která tehdy existovala pro přípravu takových chimér, byla přepnutá, přičemž transformace chimér je pouze vzácným jevem, který se vyskytuje pouze v těžkých řetězcích. Proto dosud neexistoval mechanismus pro výrobu, v transgenických zvířatech, náhrady celého variabilního genu ve velkém měřítku kódující segmenty s lidskými geny, tím produkovat chiméry jak v těžkých, tak v lehkých řetězcích. S použitím technologie podle vynálezu jsou generovány chimemí protilátky, které pak mohou být měněny prostřednictvím standardní technologie, k vytvoření lidských protilátek s velkou afinitou.
b. Stručný popis
Připraví se transgenická myš, která produkuje protilátky obsahující lidské variabilní regiony (VDJ/VJ) a myší konstantní regiony. To se provede přímým nahrazením in situ myších variabilních regionových (DVJ/VJ) genů jejich lidskými protějšky. Výsledné hybridní imunoglobulinové loci se podrobí přírodnímu procesu přeskupení během vývoje B-buněk k vytvoření hybridních protilátek.
-21 CZ 305619 B6
Následně se připraví plně lidské protilátky náhradou myších konstantních regionů žádoucími lidskými protějšky. Tento přístup vyvolá terapeutické protilátky daleko účinněji než dosavadní metody, například „polidštění“ myších monoklonálních protilátek nebo generace plně lidských protilátek v myších Hu-MAb. Dále je tento způsob úspěšný v produkci terapeutických protilátek pro mnoho antigenů, pro které dosavadní metody selhávaly. Tato myš vytváří protilátky, které jsou lidským (VDJ/VJ)-myším konstantním regionem, který bude mít následující přednosti oproti dosavadním dostupným HuMAb myším, které produkují totálně lidské protilátky. Protilátky generované novou myší si podrží myší Fc regiony, které budou účinněji vzájemně působit s ostatními složkami myšího B-buněčného receptorového komplexu, včetně signálních složek potřebných pro příslušnou diferenciaci B-buněk (jako jsou Iga a Igb). K tomu budou myší Fc regiony více specifické než lidské Fc regiony například v interakcích s Fc receptory myších buněk a komplentámích molekul. Tyto interakce jsou významné pro silné a specifické imunitní odezvy, pro proliferaci a zrání B-buněk a pro afinitní dospívání protilátek.
Jelikož jde o přímou substituci lidských regionů V-D-J/V-J za ekvivalentní regiony myších loci, zůstávají nedotčeny všechny sekvence potřebné pro správnou transkripci, rekombinaci a/nebo přesmyk tříd. Například se ukázalo, že myší imunoglobulinový intronický zesilovač transkripce s těžkým řetězcem, Em, je rozhodující pro rekombinaci V-D-J stejně jako genová exprese s těžkým řetězcem během starších stadií vývoje B-buněk (Ronai D., Berru M. a Shulman M., J. Mol. Cell Biol. 19, str. 7031 až 7040, 1999), zatímco imunoglobulinový 3' zesilovač transkripce regionu s těžkým řetězcem se jeví jako kritický pro přesmyk tříd (Pan Q., Petit-Frere C., Stavnezer J. a Hammarstrom, L., Eur. J. Immunol. 30, str. 1019 až 1029, 2000) stejně jako exprese s těžkým řetězcem při pozdějších stadiích diferenciace B-buněk (Ong J., Stevens S., Roeder R. G. A Eckhardt L. A., J. Immunol. 160, str. 4896 až 4903, 1998). Vzhledem k těmto různým, avšak rozhodujícím funkcím transkripčních řídicích elementů, je žádoucí zachovat tyto sekvence nedotčené.
Žádoucí rekombinantní děje, ke kterým dochází na imunoglobulinových loci během normálního průběhu diferenciace B-buněk může zvětšovat frekvenci nenormálních, neproduktivních imunoglobulinových přeskupení, když jsou tyto loci zařazeny při nesprávných chromozomálních umístěních nebo v násobných kopiích jako u běžně dostupných myší. S redukcemi produktivního imunoglobulinového přeskupení a proto příslušného signalizování při specifických krocích vývoje B-buněk jsou nenormální buňky eliminovány. Redukce počtu B-buněk v počátečních stadiích vývoje významně snižuje konečnou celkovou populaci B-buněk a silně omezuje imunitní odezvu myší. Jelikož bude pouze jedno, chimemí místo těžkého nebo lehkého řetězce (jako protilehlé mutované imunoglobulinové loci a s lidskými transgenickými loci integrovanými v oddělených chromozomálních lokacích pro těžké a lehké řetězce v běžně dostupných myších) nemělo by být žádné trans-štěpení nebo trans-přeskupování terapeuticky iorelevantních chimérických protilátek (Willers J., Kolb C. a Weiler E., Immunobiology 200, str. 150 až 164, 2000; Fuijeda S., Lin Y. Q., Saxon A. a Zhang K., J. Immunol. 157, str. 3450 až 3459, 1996).
Substituce lidských regionů C-D-J nebo V-J do pravých myších chromozomálních imunoglobulinových loci by měla být podstatně stabilnější se zvětšenými transmisními rychlostmi na progeny a mozaicismus genotypu B-buněk ve srovnání s běžně dostupnými myšmi (Tomizuka K., Shoinohara T., Yoshida H., Uejima H., Ohguma A., Tanaka S., Sato K., Oshimura M. a Ishida I., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 97, str. 722 až 727, 2000). Kromě toho začlenění lidských variabilních regionů (VDJ/VJ) do pravých myších loci in vivo zachová příslušnou globální regulaci chromatinové dostupnosti prve předvedené jako významné pro přiměřené časované rekombinantní děje (Haines B. B. a Brodeur P. H., Eur. J. Immunol. 28, str. 4228 až 4235,1998).
Přibližně třetina lidských protilátek obsahuje lambda lehké řetězce. Proto náhrada myších lambda V-J sekvencí s lehkým řetězcem lambda V-J sekvencí s lehkým řetězcem odvozených z lidského umístění poslouží ke zvětšení repertoáru protilátek, stejně jako k těsnějšímu přiblížení pravé
-22CZ 305619 B6 lidské imunitní odezvě, čímž se zvětší pravděpodobnost získání terapeuticky užitečných protilátek.
Další předností začleňování lidských sekvencí do pravých myších imunoglobulinových loci je, že jsou zavedena nová integrační místa, která mohou dát vznik mutagenických přerušení v začleňovacím místě a předem zamezí izolaci životaschopných homozygosních myší. To silně zjednoduší produkci a uchování množení myší kolonie.
V dalším textu se popisuje nový způsob produkce protilátek se všemi shora zmíněnými přednostmi. Pracovníkům v oboru je zřejmé, že zde popisovaný obecný způsob může být modifikován k dosažení stejných výsledků.
c. Materiály a způsoby
Přesné nahrazení myšího variabilního regionu s těžkým řetězcem (VDJ) lidským protějškem se popisuje na příkladu s použitím kombinace homologové a pro umístění specifické rekombinace bs použitím dvoustupňového procesu. Pracovníkům v oboru je zřejmé, že nahrazení myšího umístění homologovým nebo ortologovým lidským lukusem se může provádět v jednom nebo v několika stupních. Vynález navrhuje nahrazení myšího místa jako celku nebo části s každou integrací cestou homologové rekombinace.
Izolují se velké insertní klony (BAC) zahrnující celý region VDJ lidského místa s těžkým řetězcem (obr. 4A). Sekvence tohoto celého regionu je dostupná v následujících řadách genové banky GenBank (ABO19437, ABO19438, ABO19439, ABO19440, ABO19441, X97051 a X55713). V tomto příkladě jsou velké inserty (BAC) klonů izolovány od konců myšího regionu VDJ jako zdroj homologových ramen (obr. 4B), kterých se použije k přímé integraci ve dvoustupňovém procesu.
V prvním stupni se zkonstruuje LTVEC 1 (obr. 40) bakteriální rekombinací zE.coli LTVEC 1 obsahuje postupně: velké myší homologové rameno odvozené z regionu proti směru z myšího regionu DJ, ale jehož koncové body nejsou významné; kazetu kódující volitelný markerový funkcionál v buňkách ES (PGK-neomycinR v tomto příkladě); loxP místo; velký lidský insert zasahující od několika V genových segmentů přes celý region DJ; myší homologové rameno obsahující těsně sousedící region, avšak neobsahující, myší J segmenty. Zakončení 5' po směru ramene a umístění míst loxP definují 3' zakončení regionu k nahrazení v umístění. Myší buňky ES se transformují standardními technikami, například elektroporací, s linearizovaným LTVEC 1. Jelikož výsledkem přímého začlenění LTVEC 1 je modifikace endogenního variabilního genového umístění, mohou být skrínovány resistentní kolonie pro správné zacílení za použití testu MOA. Tyto zacílené ES buňky mohou dát vznik myším, které produkují protilátky s hybridními těžkými řetězci. Bude však výhodnější postupovat s následnými stupni, které eliminují zbytek myších variabilních segmentů.
Ve druhém stupni se zkonstruuje LTVEC2 bakteriální homologovou rekombinaci v E.coli. LTVEC2 obsahuje postupně: velké myší homologové rameno obsahující region sousedící s nejvzdálenějším myším segmentem V genu, avšak neobsahující žádné myší V genové segmenty; velký insert obsahující velký počet distálních lidských V genových segmentů; mutant loxP místo nazvané 1οχ511 (Hoess R. H., Wierzbicki A. a Abremski K.., Nucleic Acids. Res. 14, str. 2287 až 2300, 1986) v opačné orientaci loxP přírodního typu v LTVEC2 a LTVEC 1 (toto místo nebude rekombinovat s místy loxP přírodního typu, ale bude spíše rekombinovat s ostatními místy 1οχ511); přírodního typ loxP místa; druhý selektovatelný marker (PGK-hygromycinR v tomto příkladě); myší homologové rameno odvozené z regionu V, avšak jehož absolutní koncové body nejsou významné. Konec 3' ve směru homologového ramene a umístění loxP míst definuje konec 5' regionu nahrazovaného v místě. Myší buňky ES, které byly správně zaměřeny s LTVEC 1, se pak transformují standardními technikami s linearizovaným LTVEC2 a skrínují se hygromycinu resistantní kolonie pro správné zacílení za použití testu MOA pro modifikaci endogenního
-23CZ 305619 B6 valiabilního genového místa. Správně zacílené buňky ES, pocházející z této transformace, jsou nadále označovány jako dvojité zacílené ES buňky („double targeted ES cells“).
Následující přechodná exprese rekombinázy CRE ve dvojitě zacílených buňkách vede k vypuštění zbytku myšího V regionu. Alternativně mohou být dvojitě zacílené ES buňky injektovány do hostitelských blastocytů k produkci chimemí myši. Množení výsledné chimemí myši s myší exprimující rekombinázu CRE dříve ve vývoji vede k vypuštění zbytku myšího V regionu v potomstvu Fl. Tato pozdější alternativa zvyšuje pravděpodobnost, že hybridní umístění s těžkým řetězem projde zárodečnou linií, jelikož zahrnuje pěstování ES buněk pro další generace.
Začlenění lox511 do LTVEC2 umožní vložení přídavných lidských v genových segmentů do hybridního umístění. Jedním přístupem by bylo použití bakteriální homologové rekombinace k lemování velkého klonu genomové DNA obsahující mnoho přídavných segmentů lidského V genu s místy 1οχ511 a loxP. Kotransformace takového modifikovaného velkého genomového klonu DNA do dvojitě zacílených ES buněk s plazmidem, který přechodně expresuje rekombinázu CRE vede k zavedení přídavných V genových segmentů výměnou kazet (Bethke B. a Sauer B., Nucleic Acids Res. 25, str. 2828 až 2834, 1997).
Druhým přístupem k začlenění dodatečných V genových segmentů je nezávisle zacílit velký genomový klon DNA obsahující mnoho přídavných lidských V genových segmentů do myšího místa použitím například stejných myších homologových ramen obsažených v LTVEC2. V tom případě by byly přídavné lidské V genové segmenty v sousedství míst 1οχ511 a loxP a cílených ES buněk by se použilo k vytvoření myši. Myši odvozené z dvojitě zacílených buněk a myši odvozené z ES buněk obsahujících přídavné V genové segmenty by se rozmnožily s třetí myší, která zaměřuje expresi CRE rekombinázy během redukčního dělení buněk. Těsná blízkost dvou rekombinantních loci během párování při dělení buněk by vedlo k CRE vyvolané interchromozomální rekombinaci, jaká byla patrna v jiných systémech (Hérault Y. Rassoulzadegan M, Cuzin F. a Duboule D., Nature Genetics 20, str. 381 až 384, 1998).
Jiný přístup je podobný předešlému, ale spíše než zavedení míst loxP a 1οχ511 lidskými LTVEC 1 a 2 se zavedou do myší LTVEC a pak se použije CRE ke specifickému zacílení do lidských loci záměnou kazet cestou lemování míst loxP a lox511. Dále uvedená metodologie ukazuje, jak může být technologie LTVEC použito k umístění lemovacích místně specifických rekombinačních míst na konec kteréhokoli endogenního genu v kterémkoli nehumánním živočichu.
Myší LTVEC 1 obsahuje kazetu vloženou bakteriální rekombinaci ve směru a sousedící sJ regionem. Tato kazeta obsahuje místo loxP a bakteriální/savčí selektovatelný marker jako je hygromycinová odolnost. LTVEC 1 obsahuje postupně: velké homologové rameno odvozené od regionu proti směru z myšího regionu DJ (avšak uvnitř variabilního genového místa), ale jehož absolutní konečné body nejsou významné; kazetu kódující selektovatelný markerový funkcionál v ES buňkách (PGK-hygromycin R v tomto příkladě); místo loxP; a homologové rameno obsahující region bezprostředně sousedící s myšími J segmenty ale neobsahující je. Konec 5' ve směru homologového ramene a umístění míst loxP definují konec 3' regionu k nahrazení v místě. Modifikace konce 3' endogenního variabilního genu v místě vložení kazety umožňuje detekci správně zavedených LTVEC 1 do ES buněk testem MOA. Markéry drogové odolnosti jsou lemovány místo FRT. Začlenění míst FRT umožňuje odstranění veškerých zbývajících markérů drogové odolnosti FLP buď v ES buňkách nebo zkřížením výsledné myši s myší, která expresuje FLP v buňkách, které mají potenciál zárodečné linie.
LTVEC2 se zkonstruuje bakteriální rekombinaci k vložení kazety ve směru nej vzdálenějšího V regionu loci. Tato kazeta obsahuje místo lox511 a bakteriálně/savčí selektovatelný marker, jako je neomycinová odolnost. LTVEC2 obsahuje postupně: velké homologové rameno obsahující region sousedící s nejvzdálenějším myším V genovým segmentem, avšak neobsahující žádné myší V genové segmenty; místo 1οχ511 v opačné orientaci vůči místům loxP přírodního typu v LTVEC2 a LTVEC 1; místo loxP přírodního typu; druhý selektovatelný maker (PGK neomycin
-24CZ 305619 B6
R v tomto příkladě); a myší homologové rameno odvozené z V regionu (a proto uvnitř variabilního genového místa), avšak jehož absolutní koncové body nejsou významné. Konec 3' homologovaného ramene proti směru a umístění míst loxP definují konec 5' regionu k nahrazení v místě. Modifikace konce 5' endogenního variabilního genu v místě vložení kazety umožňuje detekci správně začleněného LTVEC2 v ES buňkách testem MOA. Tyto LTVEC jsou zavedeny společně nebo postupně do ES buněk za použití standardních technik a skrínují se na správné zacílení testem MOA.
Lidská BAC obsahující region VDJ/VJ, v části nebo jako celek, je modifikována bakteriální rekombinaci k inzerci kazet, které lemují lidské sekvence s místy 1οχ511 a loxP. Kazeta proti směru se inzertuje těsně proti směru regionu, který nahradí myší variabilní region a obsahuje postupně místo 1οχ511 následované bakteriálně/savčím selektovatelným markérem, jako je puromycinová odolnost. Kazeta ve směru se inzertuje ve směru J regionu a přiléhá k němu a obsahuje postupně místo loxP následované selektovatelným markérem pro bakterie, jako je spektinomycinová odolnost.
K začlenění velkého kusu lidského variabilního regionu ke kterému dochází na samotné BAC izolované od knihovny může být použito různých způsobů. Několik z nich je popsáno dále.
Místa loxP a Iox511 mohou být začleněna odděleně bakteriální rekombinaci na překrývající BAC, které navzájem rekombinují, když jsou transformovány do ES buněk. V tomto případě má BAC ve směru jednu kazetu, rekombinovanou právě ve směru regionu, který nahradí myší variabilní region, který má místo 1οχ511 následované volitelným bakteriálně/savčím volitelným markérem, jako je neomycinová odolnost. BAC proti směru má jednu kazetu, rekombinovanou právě proti směru a sousedící region J, který obsahuje bakteriálně/savčí volitelný marker, jako je puromycinová odolnost následovaný místem loxP. Jestliže se tyto dva nepřekrývají, vážou přídavné BAC, které vážou BAC ve směru a v protisměru překrývanou homologií jsou začleněny do schématu. Ty jsou modifikovány bakteriální rekombinaci aby obsahovaly bakteriálně/savčí volitelný marker, jako je puromycinová odolnost a BAC ve směru a v protisměru jsou modifikovány, aby obsahovaly kazety loxP a 1οχ511, které nesou markéry neomycinové a hygromycinové odolnosti.
Lidské BAC jsou společně transformovány CRE rekombinázou do linie ES buněk obsahující variabilně-region-ubočující rekombinační místa 1οχ511 a loxP. Použije-li se překrývajících BAC, dochází k homologové rekombinaci mezi nimi k vytvoření velkého fragmentu DNA a sousedící místa loxP a 1οχ511 zacilují tento velký fragment do myšího umístění. Buňky jsou vybrány pro puromycinovou odolnost a skrínují se pro nahrazení myšího variabilního regionu. Alternativně mohou být napřed vypuštěny myší sekvence cestou dvou míst loxP a pak mohou být zavedeny lidské sekvence cestou zbývajících míst 1οχ511 a loxP.
Čtvrtá BAC může být začleněna, jestliže LTVEC 1 obsahuje také třetí místo specifického rekombinačního místa, například lox2272 (Anal Biochem. 290(2), str. 260 až 271, 15. března 2001) právě po směru bakteriálně/savčího resistančního genu, jako je puromycinová odolnost, vytvořením LTVEC postupně s genem puromycinové odolnosti, místa loxP a místa lox2272, následované lidskými sekvencemi. Když je BAC začleněna do myšího imunoglobulinového umístění, mohou místa 1οχ511 a lox2272 sloužit jako recipient ve druhém průběhu výměny kazet, přičemž je gen puromycinové odolnosti nahrazen přídavnou protisměrovou částí lidského imunoglobulinového umístění variabilního regionu a odlišným bakteriálně/savčím resistenčním genem lemovaným místy 1οχ511 a lox2272.
Jiným způsobem pro začlenění většího úseku lidského variabilního regionu je kombinace sekvencí z několikanásobné BAC in vitro s použitím vzácným restrikčním endonukleázových štěpných míst. To se provádí za použití bakteriální homologové rekombinace k inzerci místa loxP a genu spectinomycinové odolnosti těsně po směru posledního J většinou po směru BAC a vložením druhého bakteriálního selektovatelného markéru a vzácného místa I-Ceul na konci proti směru lidských sekvencí po směru BAC. Místo 1οχ511 a bakteriálně/savčí selektovatelný marker,
-25CZ 305619 B6 například puromycinová odolnost, se inzertuje na konec proti směru druhé BAC obsahující region lidského variabilního regionu proti směru od sekvencí v první BAC. Místo AnICeul se inzertuje do konce po směru druhé BAC. Po digesci BAC s I-Ceul a Notl, což je jedinečné ve vektorové části obou modifikovaných BAC, se obě BAC ligují a rekombinant se selektuje v bakterii pro puromycinovou a spectinomycinovou odolnost. Výsledná větší BAC obsahuje, postupně, místo lox511, proti směru lidské sekvence, místo I-Ceul, po směru lidské sekvence, místo loxP a gen spectinomycinové odolnosti. Region mezi místy 1οχ511 a loxP se začlení do inzertuje do myšího imunoglobulinu záměnou kazet a selekcí puromycinu jak shora popsáno.
Třetí způsob inzerce většího úseku lidského variabilního regionu ke kombinaci sekvencí z několikanásobné BAC je stejný jak shora popsáno, avšak s použitím bakteriální homologové rekombinace místo restrikční digesce/ligace. Použije se stejné selekce rekombinantních BAC v bakterii, s tou výjimkou, že se digestuje pouze jedna ze dvou BAC, jejíž konce po digesci by byly konstruovány jako homologové kjiné „recipientní“ BAC a recipientní BAC by byla modifikována v bakteriálním kmeni, aby byla přípustná pro homologovou rekombinaci.
Koncové stupně vytváření myši produkující lidské variabilní/myší konstantní monoklonální protilátky se provádějí ekvivalentní variabilní regionovou substitucí na umístění lambda a kapal lehkého řetězce a množením všech tří hybridních míst do homozygocity spolu v téže myši. Výsledná transgenická myš bude mít genom obsahující plně lidský variabilní těžký a lehký řetězec variabilního genového loci operativně vázané na plně endogenní myší konstantní region, takže myš produkuje sérum obsahující protilátku obsahující lidský variabilní region a myší konstantní region v odezvě na antigenovou stimulaci. Takové myši může pak být použito jako zdroje DNA kódující variabilní regiony lidských protilátek. Použitím standardní rekombinantní technologie je DNA kódující variabilní regiony těžkého a lehkého řetězce protilátky operativně vázána na DNA kódující lidské těžké a lehké řetězce konstantních regionů v buňkách, jako jsou CHO buňky, které jsou schopné expresovat aktivní protilátky. Buňky se kultivují za vhodných podmínek k expresi plně lidských protilátek, které se pak získají. Variabilní region kódující sekvence mohou být izolovány, například zesílením PCR nebo klonováním DNA. Ve výhodném provedení se používá hybridom, získaný z transgenických myší, obsahujících několik nebo všechna imunoglobulinová loci lidského variabilního regionu (Kohler a Milstein, Eur. J. Immunol. 6, str. 511 až 519, 1976), jako zdroje DNA kódující lidské variabilní regiony.
V souhrnu vytváří přístup produkce LTVEC a jejich přímé použití jako zacílovacích vektorů kombinované se skrímováním MOA pro homologové rekombinantní děje v ES buňkách, nový způsob konstruování geneticky modifikovaných loci, který je rychlý, nenákladný a představuje významné zlepšení oproti namáhavým, časově náročným způsobům dříve používaným. Je tím otevřena možnost rychlé funkční genomové analýzy in vivo ve velkém měřítku v podstatě všech genů v genomu organismu za zlomek času a nákladů potřebných v dosavadních technologiích.
Ačkoli je vynález popsán v některých detailech jako objasnění a příklady, je pracovníkům v oboru zřejmé, že některé změny a modifikace mohou být provedeny bez odchýlení od podstaty a rozsahu vynálezu uvedeného v následujících patentových nárocích.
Průmyslová využitelnost
Zacílovací vektory kombinované se skrímováním MOA pro homologové rekombinantní děje v ES buňkách jako způsob konstruování geneticky modifikovaných loci, který je rychlý, nenákladný a umožňuje rychlé funkční genomové analýzy in vivo ve velkém měřítku v podstatě všech genů v genomu organismu za zlomek času a nákladů potřebných v dosavadních technologiích.
Claims (36)
- PATENTOVÉ NÁROKY1. Způsob náhrady endogenního genového lokusu pro variabilní oblast imunoglobulinu plně ortologním lidským genovým lokusem nebo částečně náhradou V a J nebo V, D a J genových segmentů ortologními lidskými V a J nebo V, D a J genovými segmenty v izolované myší zárodečné kmenové buňce (ES) pro vytvoření modifikovaného imunoglobulinového lokusu, který se může přeskupit pro vytvoření hybridních protilátek s obsahem lidské variabilní oblasti a myší konstantní nebo Fc oblasti, vyznačující se tím, žea) získá se velký klonovaný genomový fragment větší než 20 kb, obsahující ortologní lidské V a J nebo V, D a J genové segmenty,b) používá se bakteriální homologní rekombinace ke genetické modifikaci klonovaného genomového fragmentu podle odstavce (a) k vytvoření velkého zacílovacího vektoru pro použití v myší zárodečné kmenové buňce (LTVEC),c) zavádí se LTVEC podle odstavce (b) do myší zárodečné kmenové buňky kplné nebo částečné náhradě endogenního genového lokusu pro variabilní imunoglobulin ad) detekuje se modifikace alely na endogenním genovém lokusu pro variabilní oblast imunoglobulinu pro identifikaci myší zárodečné kmenové buňky, která prodělala homologní rekombinaci k plné nebo částečné náhradě endogenního genového lokusu pro variabilní oblast imunoglobulinu.
- 2. Způsob podle nároku 1, vyznačující se tím, žee) získá se velký klonovaný genomový fragment větší než 20 kb, obsahující část ortologního lidského genového lokusu, který obsahuje variabilní oblast genových segmentů ve srovnání s V a J nebo V, D a J genovými segmenty fragmentu podle odstavce (a),f) používá se bakteriální homologní rekombinace pro genetickou modifikaci klonovaného genomového fragmentu podle odstavce (e) k vytvoření druhého LTVEC,g) zavádí se druhý LTVEC podle odstavce (f) do myší zárodečné kmenové buňky identifikované podle odstavce (d) k plné nebo částečné náhradě endogenního genového lokusu pro variabilní oblast imunoglobulinu ah) detekuje se modifikace alely na endogenním genovém lokusu pro variabilní oblast imunoglobulinu pro identifikaci myší zárodečné kmenové buňky, která prodělala homologní rekombinaci k plné nebo částečné náhradě endogenního genového lokusu pro variabilní oblast imunoglobulinu.
- 3. Způsob podle nároku 2, vyznačující se tím, že se kroky podle odstavce (e) až (h) opakují, dokud se endogenní genový lokus pro variabilní oblast imunoglobulinu nenahradí plně ortologním lidským genovým lokusem.
- 4. Způsob podle jakéhokoli z nároků 1 až 3, vyznačující se tím, že variabilním genovým lokusem imunoglobulinu je lokus zvolený ze souboru sestávajícího z:a) variabilního genového lokusu kapa lehkého řetězce,b) variabilního genového lokusu lambda lehkého řetězce, ac) variabilního genového lokusu těžkého řetězce.-27 CZ 305619 Β6
- 5. Způsob podle jakéhokoli z předcházejících nároků, vyznačující se tím, že LTVEC obsahuje homologová ramena, která v celku jsou větší než 20 kb.
- 6. Způsob podle jakéhokoli z předcházejících nároků, vyznačující se tím, že velký klonovaný genomový fragment je větší než 100 kb.
- 7. Způsob náhrady endogenní variabilní oblasti imunoglobulinu plně ortologním genovým lokusem nebo částečné náhrady jako V a J nebo V, D a J genových segmentů ortologními lidskými V a J nebo V, D a J genovými segmenty pro vytvoření modifikovaného imunoglobulinového lokusu, který se může přeskupit pro vytvoření hybridních protilátek s obsahem lidských variabilních oblastí a myších konstantních nebo Fc oblastí, vyznačující se tím, žea) vytváří se LTVEC větší než 20 kb, obsahující místo pro místně specifickou rekombinací, ve směru homologové rameno obsahující oblast bezprostředně přiléhající k J segmentům genového lokusu pro variabilní oblast imunoglobulinu, nikoliv však je zahrnující, a proti směru homologové rameno uvnitř genomového lokusu pro variabilní oblast,b) vytváří se LTVEC větší než 20 kb, obsahující místo pro místně specifickou rekombinací, proti směru homologové rameno obsahující oblasti přiléhající k nejvíce distálnímu V genovému segmentu, avšak neobsahujícímu žádné V genové segmenty genového lokusu pro variabilní oblast imunoglobulinu a ve směru homologové rameno uvnitř genového lokusu pro variabilní oblast,c) zavádí se LTVECs podle odstavce (a) a (b) do myší zárodečné kmenové buňky,d) detekuje se modifikace alely na endogenním genovém lokusu pro variabilní oblast imunoglobulinu pro identifikaci myší zárodečné kmenové buňky, ve které místa pro místně specifickou rekombinací lemují endogenní genový lokus pro variabilní oblast,e) vytváří se vektor obsahující sekvence pro místně specifickou rekombinací lemující plně ortologní genový lokus nebo jeho část, af) zavádí se vektor podle odstavce (e) do myší zárodečné kmenové buňky, identifikované podle odstavce (d), takže rekombinací se nahradí endogenní genový lokus pro variabilní oblast imunoglobulinu plně ortologním genovým lokusem nebo jeho částí.
- 8. Způsob podle nároku 7, vyznačující se tím, že místa pro místně specifickou rekombinaci jsou zvolena ze souboru zahrnujícího LoxP, Lox511 a Lox2272.
- 9. Způsob podle nároku 7 nebo 8, vyznačující se tím, že uvedené LTVECs pokaždé obsahují homologová ramena, které jsou v celku větší než 20 kb.
- 10. Způsob podle jakéhokoli z nároků 7 až 9, vyznačující se tím, že LTVECs jsou větší než 100 kb.
- 11. Hybridní lokus imunoglobulinu, který zahrnuje lidské V a J nebo V, D a J genovové segmenty operativně vázané k myší konstantní oblasti genů na endogenním chromozomálním lokusu imunoglobulinu, kde uvedený lokus se může přeskupit pro vytvoření hybridních protilátek obsahujících lidské variabilní oblasti a myší konstantní nebo Fc oblasti.
- 12. Hybridní lokus imunoglobulinu podle nároku 11, který zahrnuje lidské V, D a J nebo V a J genovové oblasti operativně vázané k myší konstantní oblasti genů na endogenním chromozomálním lokusu imunoglobulinu.-28CZ 305619 B6
- 13. Geneticky modifikovaná eukaryotická buňka, která zahrnuje svrchu definovaný lokus podle nároku 11 nebo 12.
- 14. Geneticky modifikovaná eukaryotická buňka podle nároku 13, kterou je myší zárodečná kmenová buňka (ES).
- 15. Myší zárodečná kmenová buňka podle nároku 14, ve které:- myší variabilní lokus oblasti s těžkým řetězcem je nahrazen plně lidským variabilním genovým lokusem s těžkým řetězcem nebo z části nahrazen jeho V a J nebo V, D a J genovými segmenty s ortologními V a J nebo V, D a J genovými segmenty lidského variabilního lokusu genu s těžkým řetězcem,- myší variabilní oblast lokusu kapa s lehkým řetězcem je nahrazena plně lidským variabilním lokusem genu kapa s lehkým řetězcem nebo z části nahrazena jeho V a J nebo V, D a J genovými segmenty s ortologními V a J nebo V, D a J genovými segmenty lidské variabilní oblasti lokusu s lehkým řetězcem, nebo- myší variabilní oblast lokusu lambda s lehkým řetězcem je nahrazena plně myším variabilním lokusem genu lambda s lehkým řetězcem nebo z části nahrazena jeho V a J nebo V, D a J genovými segmenty s ortologními V a J nebo V, D a J genovými segmenty lidské lambda variabilní oblasti lokusu s lehkým řetězcem.
- 16. Myší zárodečná kmenová buňka podle nároku 14, ve které variabilní oblast lokusů genu s těžkým a lehkým řetězcem je nahrazena plně jejími lidskými homology nebo orthology.
- 17. Myš zahrnující lokus podle nároku 11 nebo 12.
- 18. Transgenní myš, která má genom zahrnující variabilní oblast lokusů genu s těžkým a/nebo lehkým řetězcem operativně vázanou na endogenní myší konstantní oblasti lokusů, takže takové myši vytvářejí sérum obsahující protilátky zahrnující lidské variabilní oblasti a myší konstantní nebo Fc oblasti s odezvou na antigenovou stimulaci.
- 19. Způsob přípravy lidské protilátky, v y z n a č u j í c í se tím, žea) myš podle nároku 17 nebo 18 se vystavuje stimulaci antigenem, takže myš produkuje protilátku proti antigenu,b) izolují se DNA sekvence kódující lidské variabilní oblasti z těchto myší,c) operativně se vážou DNA sekvence kódující variabilní oblasti podle odstavce (b) k DNA kódujícím lidským konstantním oblastem do buněk schopným exprese aktivních protilátek,d) nechávají se růst buňky za podmínek, při kterých se exprimují lidské protilátky ae) izoluje se protilátka.
- 20. Způsob podle nároku 19, vyznačující se tím, že zahrnuje izolaci DNA sekvencí kódujících variabilní oblasti s těžkým a lehkým řetězcem z protilátek a operativně vázání DNA sekvencí kódujících uvedené variabilní oblasti na DNA kódující konstantní oblasti s těžkým a lehkým řetězcem.
- 21. Způsob podle nároku 19 nebo 20, vyznačující se tím, že buňkou je CHO buňka.-29CZ 305619 B6
- 22. Způsob podle nároku 19 nebo 20, vyznačující se tím, že DNA sekvence podle kroku (b) se izolují zhybridomu vytvořeného ze sleziny myši vystavené stimulaci antigenem v kroku (a).
- 23. Způsob podle nároku 19 nebo 20, vyznačující se tím, že DNA sekvence se izolují použitím PCR.
- 24. Způsob vytváření v myší zárodečné kmenové buňce endogenního genového lokusu lemovaného ve směru nebo proti směru nebo v obou směrech místem pro místně specifickou rekombinaci, vyznačující se tím, žea) vytváří se LTVEC větší než 20 kb, obsahující místo pro místně specifickou rekombinaci, ve směru homologové rameno obsahující oblasti, který lemuje 3' zakončení endogenní lokusové oblasti genu a proti směru homologové rameno uvnitř lokusu, a/nebo se vytváří LTVEC větší než 20 kb, obsahující místo pro místně specifickou rekombinaci, proti směru homologové rameno obsahující oblast, které lemuje 5' zakončení endogenní lokusové oblasti genu a po směru homologové rameno uvnitř lokusu,b) zavádí se LTVEC nebo LTVECs podle odstavce (a) do myší zárodečné kmenové buňky ac) detekuje se modifikace alely na endogenním genovém lokusu pro identifikaci myší zárodečné kmenové buňky podle odstavce (b), ve které endogenní genový lokus je lemován ve směru nebo proti směru nebo ve směru i proti směru místem pro místně specifickou rekombinaci.
- 25. Způsob podle nároku 24, vyznačující se tím, že alespoň LTVEC(s) obsahuje(í) homologová ramena, která v celku jsou větší než 20 kb.
- 26. Způsob podle nároku 24 nebo 25, vyznačující se tím, že LTVEC(s) je (jsou) větší než 100 kb.
- 27. Způsob vytváření, v myší zárodečné kmenové buňce, endogenního genového lokusu pro variabilní imunoglobulin lemovaného místem pro místně specifickou rekombinaci, vyznačující se tím, žea) vytváří se LTVEC větší než 20 kb, obsahující místo pro místně specifickou rekombinaci a: (I) ve směru homologové rameno obsahující oblasti bezprostředně přiléhající k J segmentům genového lokusu pro variabilní oblast imunoglobulinu, nikoliv však je zahrnující, a proti směru homologové rameno uvnitř variabilního genomového lokusu, nebo (II) proti směru homologové rameno obsahující oblast přiléhající k nejvíce distálnímu V genovému segmentu, avšak neobsahující žádné V genové segmenty, genového lokusu pro variabilní oblast imunoglobulinu a ve směru homologové rameno uvnitř lokusu,b) zavádí se LTVEC podle odstavce (a) do myší zárodečné kmenové buňky ac) detekuje se modifikace alely na variabilním genovém lokusu, takže se identifikují myší zárodečné kmenové buňky podle odstavce (b), kde:místo pro místně specifickou rekombinaci zaváděné pomocí LTVEC podle odstavce (a) (I) lemuje zakončení ve směru endogenního genového lokusu pro variabilní imunoglobulin, nebo místo pro místně specifickou rekombinaci zaváděné pomocí LTVEC podle odstavce (a) (II) lemuje zakončení proti směru endogenního genového lokusu pro variabilní oblast imunoglobulinu.-30CZ 305619 B6
- 28. Způsob podle nároku 27, vyznačující se tím, že endogenní genový lokus pro variabilní imunoglobulin lemovaný místy pro místně specifickou rekombinaci je vytvářen tím, žea) vytváří se LTVEC větší než 20 kb, obsahující místo pro místně specifickou rekombinaci, ve směru homologové rameno obsahující oblast bezprostředně přiléhající k J segmentům genového lokusu pro variabilní oblast imunoglobulinu, nikoliv však je zahrnující, a proti směru homologové rameno uvnitř lokusu,b) vytváří se LTVEC větší než 20 kb, obsahující místo pro místně specifickou rekombinaci, proti směru homologové rameno obsahující oblast přiléhající co nejvíce k distálnímu V genovému segmentu, avšak neobsahujícího žádné V genové segmenty genového lokusu pro variabilní oblast imunoglobulinu a po směru rameno uvnitř lokusu,c) zavádí se LTVECs podle odstavců (a) a (b) do myší zárodečné kmenové buňky ad) detekuje se modifikace alely na variabilním genovém lokusu, takže se identifikují myší zárodečné kmenové buňky podle odstavce (c), přičemž místa pro místně specifickou rekombinaci lemují endogenní genový lokus pro variabilní oblast imunoglobulinu.
- 29. Způsob podle nároku 27 nebo 28, vyznačující se tím, že LTVEC nebo LTVECs obsahuje(í) homologová ramena, která v celku jsou větší než 20 kb.
- 30. Způsob podle jakéhokoli z nároků 27 až 29, vyznačující se tím, že každý LTVEC nebo LTVECs je větší než 100 kb.
- 31. Způsob podle jakéhokoli z nároků 24 až 30, vyznačující se tím, že místo(a) pro místně specifickou rekombinaci je (jsou) zvoleno(a) ze souboru zahrnujícího LoxP, Lox511 a Lox2272.
- 32. Způsob podle jakéhokoli z nároků 1 až 10 a 24 až 30, vyznačující se tím, že zahrnuje použití kvantitativní zkoušky k detekci modifikace alely.
- 33. Způsob podle nároku 32, vyznačující se tím, že kvantitativní zkouška zahrnuje kvantitativní PCR, FISH, komparativní genomovou hybridizaci, izotermickou DNA amplifikaci a kvantitativní hybridizaci imobilizováného vzorku.
- 34. Způsob podle nároku 33, vyznačující se tím, že kvantitativní PCR zahrnuje technologii TaqMan® nebo kvantitativní PCR za použití molekulárního majáku.
- 35. Endogenní genový lokus pro variabilní imunoglobulin lemovaný místem nebo místy pro místně specifickou rekombinaci.
- 36. Myší zárodečná kmenová buňka obsahující endogenní genový lokus pro variabilní imunoglobulin lemovaný místem nebo místy pro místně specifickou rekombinaci.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US09/784,859 US6596541B2 (en) | 2000-10-31 | 2001-02-16 | Methods of modifying eukaryotic cells |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CZ20032192A3 CZ20032192A3 (en) | 2004-03-17 |
| CZ305619B6 true CZ305619B6 (cs) | 2016-01-13 |
Family
ID=25133744
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CZ2003-2192A CZ305619B6 (cs) | 2001-02-16 | 2002-02-15 | Způsoby modifikace eukaryotických buněk |
Country Status (19)
| Country | Link |
|---|---|
| US (21) | US6596541B2 (cs) |
| EP (9) | EP2787075B2 (cs) |
| JP (7) | JP4412900B2 (cs) |
| AU (1) | AU2002244023B2 (cs) |
| CA (1) | CA2438390C (cs) |
| CY (8) | CY1113964T1 (cs) |
| CZ (1) | CZ305619B6 (cs) |
| DE (6) | DE10010741T1 (cs) |
| DK (9) | DK1360287T4 (cs) |
| ES (8) | ES2391391T5 (cs) |
| HK (4) | HK1057058A1 (cs) |
| HU (1) | HU231221B1 (cs) |
| MX (2) | MXPA03007325A (cs) |
| NZ (1) | NZ527629A (cs) |
| PL (1) | PL217086B1 (cs) |
| PT (8) | PT3085779T (cs) |
| TR (2) | TR201907641T4 (cs) |
| WO (1) | WO2002066630A1 (cs) |
| ZA (1) | ZA200306275B (cs) |
Families Citing this family (1035)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6908744B1 (en) * | 2000-03-14 | 2005-06-21 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Methods of stimulating cartilage formation |
| US6596541B2 (en) | 2000-10-31 | 2003-07-22 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Methods of modifying eukaryotic cells |
| US20050144655A1 (en) | 2000-10-31 | 2005-06-30 | Economides Aris N. | Methods of modifying eukaryotic cells |
| GB0115256D0 (en) | 2001-06-21 | 2001-08-15 | Babraham Inst | Mouse light chain locus |
| EP3269235B1 (en) | 2001-11-30 | 2022-01-26 | Amgen Fremont Inc. | Transgenic mice bearing human ig lambda light chain genes |
| EP1463512B1 (en) | 2002-01-11 | 2014-05-28 | biOasis Technologies Inc. | Use of p97 as an enzyme delivery system for the delivery of therapeutic lysosomal enzymes |
| EP1474522B1 (en) * | 2002-01-18 | 2012-03-07 | Morphotek, Inc. | A method for generating engineered cells for locus specific gene regulation and analysis |
| USRE47770E1 (en) | 2002-07-18 | 2019-12-17 | Merus N.V. | Recombinant production of mixtures of antibodies |
| CA2965865C (en) | 2002-07-18 | 2021-10-19 | Merus N.V. | Recombinant production of mixtures of antibodies |
| WO2004022738A1 (en) * | 2002-09-09 | 2004-03-18 | California Institute Of Technology | Methods and compositions for the generation of humanized mice |
| US20100069614A1 (en) * | 2008-06-27 | 2010-03-18 | Merus B.V. | Antibody producing non-human mammals |
| EP2395016A3 (en) | 2003-05-30 | 2012-12-19 | Merus B.V. | Design and use of paired variable regions of specific binding molecules |
| GB2408980B (en) * | 2003-12-09 | 2006-06-07 | Nat Biolog Standards Board | Genetic reference materials |
| JP2008512987A (ja) | 2004-07-22 | 2008-05-01 | エラスムス・ユニヴァーシティ・メディカル・センター・ロッテルダム | 結合分子 |
| EP2505058A1 (en) | 2006-03-31 | 2012-10-03 | Medarex, Inc. | Transgenic animals expressing chimeric antibodies for use in preparing human antibodies |
| PL2041177T3 (pl) | 2006-06-02 | 2012-09-28 | Regeneron Pharma | Przeciwciała o wysokim powinowactwie przeciw ludzkiemu receptorowi IL 6 |
| WO2007147167A2 (en) * | 2006-06-16 | 2007-12-21 | Porous Power Technologies, Llc | Optimized microporous structure of electrochemical cells |
| DK2769992T3 (da) | 2006-10-02 | 2021-03-22 | Regeneron Pharma | Humane antistoffer med høj affinitet for human IL-4-receptor |
| US7608693B2 (en) | 2006-10-02 | 2009-10-27 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | High affinity human antibodies to human IL-4 receptor |
| NO347649B1 (no) * | 2006-12-14 | 2024-02-12 | Regeneron Pharma | Humant antistoff eller antistoff fragment som spesifikt binder human deltaliknende ligand 4 (hDII4), nukleinsyremolekyl som koder for slike og vektor og vert-vektorsystemer, samt fremgangsmåte for fremstilling, sammensetning og anvendelse. |
| EA019636B1 (ru) | 2007-03-22 | 2014-05-30 | Байоджен Айдек Ма Инк. | Связывающие белки, включающие антитела, производные антител и фрагменты антител, которые специфически связываются с cd154, и их применения |
| AU2008259939B2 (en) * | 2007-06-01 | 2014-03-13 | Open Monoclonal Technology, Inc. | Compositions and methods for inhibiting endogenous immunoglobulin genes and producing transgenic human idiotype antibodies |
| RU2473564C2 (ru) | 2007-08-10 | 2013-01-27 | Ридженерон Фармасьютикалз, Инк. | Антитела человека с высокой аффинностью к фактору роста нервов человека |
| EP3255144A1 (en) * | 2007-08-10 | 2017-12-13 | E. R. Squibb & Sons, L.L.C. | Recombineering construct for preparing transgenic mice capable of producing human immunoglobulin |
| GB0718029D0 (en) * | 2007-09-14 | 2007-10-24 | Iti Scotland Ltd | Two step cluster deletion and humanisation |
| WO2009041613A1 (ja) | 2007-09-26 | 2009-04-02 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | 抗体定常領域改変体 |
| NZ586149A (en) | 2007-12-10 | 2012-05-25 | Ablexis Llc | Methods for sequential replacement of targeted region by homologous recombination |
| WO2009103082A2 (en) * | 2008-02-17 | 2009-08-20 | Porous Power Technologies, Llc | Lamination configurations for battery applications using pvdf highly porous film |
| US20090227163A1 (en) * | 2008-03-05 | 2009-09-10 | Bernard Perry | Protective Apparel with Porous Material Layer |
| US20090226683A1 (en) * | 2008-03-05 | 2009-09-10 | Bernard Perry | Porous Material Uses in Furniture |
| EP2098536A1 (en) | 2008-03-05 | 2009-09-09 | 4-Antibody AG | Isolation and identification of antigen- or ligand-specific binding proteins |
| US20090223155A1 (en) * | 2008-03-05 | 2009-09-10 | Bernard Perry | Building Construction Applications for Porous Material |
| US20090222995A1 (en) * | 2008-03-05 | 2009-09-10 | Bernard Perry | Bedding Applications for Porous Material |
| EP2631302A3 (en) * | 2008-03-31 | 2014-01-08 | Genentech, Inc. | Compositions and methods for treating and diagnosing asthma |
| KR20110020860A (ko) * | 2008-05-23 | 2011-03-03 | 알리바 바이오파마수티컬스, 아이엔씨. | 유전자 삽입동물에서 단일 ｖｌ 도메인 항체를 생산하는 방법 |
| US20100122358A1 (en) * | 2008-06-06 | 2010-05-13 | Crescendo Biologics Limited | H-Chain-only antibodies |
| US20090328240A1 (en) * | 2008-06-24 | 2009-12-31 | Sing George L | Genetically modified mice as predictors of immune response |
| AU2014203150C1 (en) * | 2008-06-27 | 2018-10-18 | Merus N.V. | Antibody producing non-human mammals |
| ES2906344T3 (es) * | 2008-06-27 | 2022-04-18 | Merus Nv | Animal murino transgénico productor de anticuerpos |
| LT2346994T (lt) | 2008-09-30 | 2022-03-10 | Ablexis, Llc | Knock-in pelė, skirta chimerinių antikūnų gamybai |
| JO3672B1 (ar) | 2008-12-15 | 2020-08-27 | Regeneron Pharma | أجسام مضادة بشرية عالية التفاعل الكيماوي بالنسبة لإنزيم سبتيليسين كنفرتيز بروبروتين / كيكسين نوع 9 (pcsk9). |
| US20130064834A1 (en) | 2008-12-15 | 2013-03-14 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Methods for treating hypercholesterolemia using antibodies to pcsk9 |
| RU2011129459A (ru) | 2008-12-18 | 2013-01-27 | Эрасмус Юниверсити Медикал Сентр Роттердам | Трансгенные животные (не человек), экспрессирующие гуманизированные антитела, и их применение |
| US20100178567A1 (en) * | 2008-12-24 | 2010-07-15 | Porous Power Technologies, Llc | Mat Forming Spacers in Microporous Membrane Matrix |
| GB0905023D0 (en) | 2009-03-24 | 2009-05-06 | Univ Erasmus Medical Ct | Binding molecules |
| MX2011010012A (es) | 2009-03-25 | 2011-12-06 | Genentech Inc | NUEVOS ANTICUERPOS ANTI-A5ß1 Y SUS USOS. |
| US9276246B2 (en) | 2009-05-20 | 2016-03-01 | Samsung Electronics Co., Ltd. | Treatment and adhesive for microporous membranes |
| TWI513465B (zh) | 2009-06-25 | 2015-12-21 | Regeneron Pharma | 以ｄｌｌ４拮抗劑與化學治療劑治療癌症之方法 |
| JP2012531212A (ja) | 2009-07-03 | 2012-12-10 | アビペップ ピーティーワイ リミテッド | イムノコンジュゲート及びその作製方法 |
| CN102638971B (zh) * | 2009-07-08 | 2015-10-07 | 科马布有限公司 | 动物模型及治疗分子 |
| US9445581B2 (en) | 2012-03-28 | 2016-09-20 | Kymab Limited | Animal models and therapeutic molecules |
| DK3056082T3 (en) | 2009-10-06 | 2018-12-17 | Regeneron Pharma | RE-MODIFIED MICE AND INPUT |
| KR101553244B1 (ko) * | 2009-12-10 | 2015-09-15 | 리제너론 파마슈티칼스 인코포레이티드 | 중쇄 항체를 만드는 마우스 |
| WO2011072266A2 (en) | 2009-12-11 | 2011-06-16 | Atyr Pharma, Inc. | Aminoacyl trna synthetases for modulating hematopoiesis |
| SG10201408415PA (en) | 2009-12-21 | 2015-01-29 | Regeneron Pharma | HUMANIZED FCγ R MICE |
| KR101961495B1 (ko) | 2009-12-23 | 2019-03-22 | 아비펩 피티와이 리미티트 | 면역-컨쥬게이트 및 그 제조방법 ２ |
| US20130045492A1 (en) * | 2010-02-08 | 2013-02-21 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Methods For Making Fully Human Bispecific Antibodies Using A Common Light Chain |
| US20130185821A1 (en) * | 2010-02-08 | 2013-07-18 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Common Light Chain Mouse |
| US20120021409A1 (en) | 2010-02-08 | 2012-01-26 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Common Light Chain Mouse |
| US9796788B2 (en) | 2010-02-08 | 2017-10-24 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Mice expressing a limited immunoglobulin light chain repertoire |
| RU2724663C2 (ru) | 2010-02-08 | 2020-06-25 | Ридженерон Фармасьютикалз, Инк. | Мышь с общей легкой цепью |
| US20110200595A1 (en) | 2010-02-18 | 2011-08-18 | Roche Glycart | TREATMENT WITH A HUMANIZED IgG CLASS ANTI EGFR ANTIBODY AND AN ANTIBODY AGAINST INSULIN LIKE GROWTH FACTOR 1 RECEPTOR |
| SI2536748T1 (sl) | 2010-02-18 | 2014-12-31 | Genentech, Inc. | Nevrogulinski antagonisti in njihova uporaba pri zdravljenju raka |
| KR101899835B1 (ko) | 2010-03-24 | 2018-09-19 | 제넨테크, 인크. | 항-ｌｒｐ６ 항체 |
| US9580491B2 (en) | 2010-03-31 | 2017-02-28 | Ablexis, Llc | Genetic engineering of non-human animals for the production of chimeric antibodies |
| EP2563380B1 (en) | 2010-04-26 | 2018-05-30 | aTyr Pharma, Inc. | Innovative discovery of therapeutic, diagnostic, and antibody compositions related to protein fragments of cysteinyl-trna synthetase |
| JP6294074B2 (ja) | 2010-04-27 | 2018-03-14 | エータイアー ファーマ， インコーポレイテッド | イソロイシルｔＲＮＡ合成酵素のタンパク質フラグメントに関連した治療用、診断用および抗体組成物の革新的発見 |
| US8993723B2 (en) | 2010-04-28 | 2015-03-31 | Atyr Pharma, Inc. | Innovative discovery of therapeutic, diagnostic, and antibody compositions related to protein fragments of alanyl-tRNA synthetases |
| US9068177B2 (en) | 2010-04-29 | 2015-06-30 | Atyr Pharma, Inc | Innovative discovery of therapeutic, diagnostic, and antibody compositions related to protein fragments of glutaminyl-tRNA synthetases |
| CA2797393C (en) | 2010-04-29 | 2020-03-10 | Atyr Pharma, Inc. | Innovative discovery of therapeutic, diagnostic, and antibody compositions related to protein fragments of valyl trna synthetases |
| AU2011248490B2 (en) | 2010-04-29 | 2016-11-10 | Pangu Biopharma Limited | Innovative discovery of therapeutic, diagnostic, and antibody compositions related to protein fragments of Asparaginyl tRNA synthetases |
| WO2011140132A2 (en) | 2010-05-03 | 2011-11-10 | Atyr Pharma, Inc. | Innovative discovery of therapeutic, diagnostic, and antibody compositions related to protein fragments of phenylalanyl-alpha-trna synthetases |
| CN103140233B (zh) | 2010-05-03 | 2017-04-05 | Atyr 医药公司 | 与甲硫氨酰‑tRNA合成酶的蛋白片段相关的治疗、诊断和抗体组合物的发现 |
| WO2011139986A2 (en) | 2010-05-03 | 2011-11-10 | Atyr Pharma, Inc. | Innovative discovery of therapeutic, diagnostic, and antibody compositions related to protein fragments of arginyl-trna synthetases |
| JP6008844B2 (ja) | 2010-05-04 | 2016-10-19 | エータイアー ファーマ， インコーポレイテッド | ｐ３８ＭＵＬＴＩ−ｔＲＮＡ合成酵素複合体のタンパク質フラグメントに関連した治療用、診断用および抗体組成物の革新的発見 |
| JP6396656B2 (ja) | 2010-05-14 | 2018-09-26 | エータイアー ファーマ， インコーポレイテッド | フェニルアラニルβｔＲＮＡ合成酵素のタンパク質フラグメントに関連した治療用、診断用および抗体組成物の革新的発見 |
| CN104711218B (zh) | 2010-06-11 | 2018-09-25 | 瑞泽恩制药公司 | 由xy es细胞制备能育的xy雌性动物 |
| US9242014B2 (en) | 2010-06-15 | 2016-01-26 | The Regents Of The University Of California | Receptor tyrosine kinase-like orphan receptor 1 (ROR1) single chain Fv antibody fragment conjugates and methods of use thereof |
| CN103228130B (zh) * | 2010-06-17 | 2016-03-16 | 科马布有限公司 | 动物模型及治疗分子 |
| TW201204388A (en) | 2010-06-18 | 2012-02-01 | Genentech Inc | Anti-Axl antibodies and methods of use |
| JP6009441B2 (ja) | 2010-06-22 | 2016-10-19 | リジェネロン・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッドＲｅｇｅｎｅｒｏｎ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ， Ｉｎｃ． | ハイブリッド軽鎖マウス |
| CN103097418A (zh) | 2010-07-09 | 2013-05-08 | 霍夫曼-拉罗奇有限公司 | 抗神经毡蛋白抗体及使用方法 |
| JP6116479B2 (ja) | 2010-07-12 | 2017-04-19 | エータイアー ファーマ， インコーポレイテッド | グリシルｔＲＮＡ合成酵素のタンパク質フラグメントに関連した治療用、診断用および抗体組成物の革新的発見 |
| US20120100166A1 (en) | 2010-07-15 | 2012-04-26 | Zyngenia, Inc. | Ang-2 Binding Complexes and Uses Thereof |
| WO2012010582A1 (en) | 2010-07-21 | 2012-01-26 | Roche Glycart Ag | Anti-cxcr5 antibodies and methods of use |
| US10662256B2 (en) | 2010-07-26 | 2020-05-26 | Trianni, Inc. | Transgenic mammals and methods of use thereof |
| CA2806233C (en) | 2010-07-26 | 2021-12-07 | Trianni, Inc. | Transgenic animals and methods of use |
| US10793829B2 (en) | 2010-07-26 | 2020-10-06 | Trianni, Inc. | Transgenic mammals and methods of use thereof |
| NZ606824A (en) | 2010-08-02 | 2015-05-29 | Regeneron Pharma | Mice that make binding proteins comprising vl domains |
| EP2600895A1 (en) | 2010-08-03 | 2013-06-12 | Hoffmann-La Roche AG | Chronic lymphocytic leukemia (cll) biomarkers |
| WO2012017003A1 (en) | 2010-08-05 | 2012-02-09 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Anti-mhc antibody anti-viral cytokine fusion protein |
| PT2603530T (pt) | 2010-08-13 | 2018-01-09 | Roche Glycart Ag | Anticorpos anti-fap e métodos de utilização |
| CN103168049B (zh) | 2010-08-13 | 2015-10-07 | 罗切格利卡特公司 | 抗生腱蛋白-c a2抗体及使用方法 |
| KR20130100125A (ko) | 2010-08-13 | 2013-09-09 | 제넨테크, 인크. | 질환의 치료를 위한, ＩＬ-1β 및 ＩＬ-18에 대한 항체 |
| CA2808539C (en) | 2010-08-25 | 2021-05-25 | Atyr Pharma, Inc. | Innovative discovery of therapeutic, diagnostic, and antibody compositions related to protein fragments of tyrosyl-trna synthetases |
| SG187886A1 (en) | 2010-08-31 | 2013-04-30 | Genentech Inc | Biomarkers and methods of treatment |
| NZ609567A (en) | 2010-11-05 | 2015-05-29 | Transbio Ltd | Markers of endothelial progenitor cells and uses thereof |
| ES2607086T3 (es) | 2010-11-10 | 2017-03-29 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Métodos y composiciones para la inmunoterapia de enfermedades neuronales |
| US8771696B2 (en) | 2010-11-23 | 2014-07-08 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Method of reducing the severity of stress hyperglycemia with human antibodies to the glucagon receptor |
| JO3756B1 (ar) * | 2010-11-23 | 2021-01-31 | Regeneron Pharma | اجسام مضادة بشرية لمستقبلات الجلوكاجون |
| CA2817380C (en) | 2010-12-16 | 2019-06-04 | Genentech, Inc. | Diagnosis and treatments relating to th2 inhibition |
| TWI589589B (zh) | 2010-12-20 | 2017-07-01 | 建南德克公司 | 抗間皮素（ｍｅｓｏｔｈｅｌｉｎ）抗體及免疫接合物 |
| KR20130118925A (ko) | 2010-12-22 | 2013-10-30 | 제넨테크, 인크. | 항-pcsk9 항체 및 사용 방법 |
| JP2014502607A (ja) | 2011-01-03 | 2014-02-03 | エフ．ホフマン−ラ ロシュ アーゲー | 抗ｄｉｇ抗体およびペプチドと結合体化しているジゴキシゲニンの複合体の薬学的組成物 |
| EP2663579B1 (en) | 2011-01-14 | 2017-04-26 | The Regents of the University of California | Therapeutic antibodies against ror-1 protein and methods for use of same |
| EP2650016A1 (en) | 2011-01-28 | 2013-10-16 | Sanofi | Human antibodies to PSCK9 for use in methods of treatment based on particular dosage regimens (11565) |
| MX367075B (es) | 2011-01-28 | 2019-08-05 | Sanofi Biotechnology | Anticuerpos humanos frente a pcsk9 para su uso en metodos de tratamiento de grupos concretos de pacientes. |
| SG10201600899PA (en) | 2011-02-08 | 2016-03-30 | Medimmune Llc | Antibodies that specifically bind staphylococcus aureus alpha toxin and methods of use |
| ES2948210T3 (es) | 2011-02-15 | 2023-09-06 | Regeneron Pharma | Ratones humanizados con M-CSF y uso de los mismos |
| PL2578688T5 (pl) | 2011-02-25 | 2023-05-29 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Myszy adam6 |
| US9624294B2 (en) | 2011-03-14 | 2017-04-18 | Cellmid Limited | Antibody recognizing N-domain of midkine |
| HUE041335T2 (hu) | 2011-03-29 | 2019-05-28 | Roche Glycart Ag | Antitest FC-variánsok |
| TW201249867A (en) | 2011-04-01 | 2012-12-16 | Astellas Pharma Inc | Novel anti-human il-23 receptor antibody |
| CN103596983B (zh) | 2011-04-07 | 2016-10-26 | 霍夫曼-拉罗奇有限公司 | 抗fgfr4抗体及使用方法 |
| CA2833404A1 (en) | 2011-04-21 | 2012-10-26 | Garvan Institute Of Medical Research | Modified variable domain molecules and methods for producing and using them b |
| AR088782A1 (es) | 2011-04-29 | 2014-07-10 | Sanofi Sa | Sistemas de ensayo y metodos para identificar y caracterizar farmacos hipolipemiantes |
| ES2541535T3 (es) | 2011-05-12 | 2015-07-21 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Ensayo de liberación de neuropéptido para canales de sodio |
| WO2012155019A1 (en) | 2011-05-12 | 2012-11-15 | Genentech, Inc. | Multiple reaction monitoring lc-ms/ms method to detect therapeutic antibodies in animal samples using framework signature pepides |
| PT2710035T (pt) | 2011-05-16 | 2017-06-05 | Hoffmann La Roche | Agonistas do fgfr1 e métodos de utilização |
| CN106432506A (zh) | 2011-05-24 | 2017-02-22 | 泽恩格尼亚股份有限公司 | 多价和单价多特异性复合物及其用途 |
| ES2828482T3 (es) | 2011-06-13 | 2021-05-26 | Csl Ltd | Anticuerpos contra el g-csfr y su uso |
| US8623666B2 (en) | 2011-06-15 | 2014-01-07 | Hoffmann-La Roche Inc. | Method for detecting erythropoietin (EPO) receptor using anti-human EPO receptor antibodies |
| KR20140045440A (ko) | 2011-06-30 | 2014-04-16 | 제넨테크, 인크. | 항-c-met 항체 제제 |
| WO2013006706A1 (en) | 2011-07-05 | 2013-01-10 | Bioasis Technologies Inc. | P97-antibody conjugates and methods of use |
| AU2012279018B2 (en) | 2011-07-05 | 2017-06-08 | Children's Medical Center Corporation | N-terminal deleted GP120 immunogens |
| WO2013015821A1 (en) | 2011-07-22 | 2013-01-31 | The Research Foundation Of State University Of New York | Antibodies to the b12-transcobalamin receptor |
| US9120858B2 (en) | 2011-07-22 | 2015-09-01 | The Research Foundation Of State University Of New York | Antibodies to the B12-transcobalamin receptor |
| AR087305A1 (es) | 2011-07-28 | 2014-03-12 | Regeneron Pharma | Formulaciones estabilizadas que contienen anticuerpos anti-pcsk9, metodo de preparacion y kit |
| US8722019B2 (en) | 2011-08-05 | 2014-05-13 | Bioasis Technologies, Inc. | P97 fragments with transfer activity |
| MY172718A (en) * | 2011-08-05 | 2019-12-11 | Regeneron Pharma | Humanized universal light chain mice |
| US8986952B2 (en) | 2011-08-11 | 2015-03-24 | Astellas Pharma Inc. | Anti-human NGF antibody |
| KR20140057326A (ko) | 2011-08-17 | 2014-05-12 | 제넨테크, 인크. | 뉴레귤린 항체 및 그의 용도 |
| EP2744825A1 (en) | 2011-08-17 | 2014-06-25 | F.Hoffmann-La Roche Ag | Inhibition of angiogenesis in refractory tumors |
| KR20140054303A (ko) | 2011-08-19 | 2014-05-08 | 리제너론 파아마슈티컬스, 인크. | 항-Ｔｉｅ２ 항체 및 이의 용도 |
| CA2844141A1 (en) | 2011-08-23 | 2013-02-28 | Roche Glycart Ag | Anti-mcsp antibodies |
| KR101886983B1 (ko) | 2011-08-23 | 2018-08-08 | 로슈 글리카트 아게 | 2 개의 ｆａｂ 단편을 포함하는 fc-부재 항체 및 이용 방법 |
| EP2747781B1 (en) | 2011-08-23 | 2017-11-15 | Roche Glycart AG | Bispecific antibodies specific for t-cell activating antigens and a tumor antigen and methods of use |
| CA2846083A1 (en) | 2011-09-15 | 2013-03-21 | Genentech, Inc. | Methods of promoting differentiation |
| CA2848201C (en) | 2011-09-16 | 2020-10-27 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Methods for reducing lipoprotein(a) levels by administering an inhibitor of proprotein convertase subtilisin kexin-9 (pcsk9) |
| AU2012312515A1 (en) | 2011-09-19 | 2014-03-13 | Genentech, Inc. | Combination treatments comprising c-met antagonists and B-raf antagonists |
| JP2014533930A (ja) * | 2011-09-19 | 2014-12-18 | カイマブ・リミテッド | 免疫グロブリン遺伝子多様性の操作およびマルチ抗体治療薬 |
| WO2013041845A2 (en) | 2011-09-19 | 2013-03-28 | Kymab Limited | Animals, repertoires & methods |
| CA2791109C (en) | 2011-09-26 | 2021-02-16 | Merus B.V. | Generation of binding molecules |
| EP2761008A1 (en) | 2011-09-26 | 2014-08-06 | Kymab Limited | Chimaeric surrogate light chains (slc) comprising human vpreb |
| WO2013052095A2 (en) | 2011-10-03 | 2013-04-11 | Duke University | Vaccine |
| BR112014008212A2 (pt) | 2011-10-05 | 2017-06-13 | Genentech Inc | método para tratar uma condição hepática, método de indução por diferenciação hepática e método de redução de proliferação anormal do ducto biliar |
| TW201321414A (zh) | 2011-10-14 | 2013-06-01 | Genentech Inc | 抗－ＨｔｒＡ１抗體及其使用方法 |
| CA2850836A1 (en) | 2011-10-15 | 2013-04-18 | Genentech, Inc. | Methods of using scd1 antagonists |
| SG10202010120XA (en) * | 2011-10-17 | 2020-11-27 | Regeneron Pharma | Restricted immunoglobulin heavy chain mice |
| WO2013059531A1 (en) | 2011-10-20 | 2013-04-25 | Genentech, Inc. | Anti-gcgr antibodies and uses thereof |
| PL3262932T3 (pl) | 2011-10-28 | 2019-10-31 | Regeneron Pharma | Genetycznie zmodyfikowany główny układ zgodności tkankowej myszy |
| US9591835B2 (en) | 2011-10-28 | 2017-03-14 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Genetically modified major histocompatibility complex animals |
| PL3424947T3 (pl) * | 2011-10-28 | 2021-06-14 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Myszy z genetycznie zmodyfikowanym receptorem komórek t |
| WO2013063391A2 (en) | 2011-10-28 | 2013-05-02 | Trianni, Inc. | Transgenic animals and methods of use |
| KR101926442B1 (ko) | 2011-10-28 | 2018-12-12 | 리제너론 파아마슈티컬스, 인크. | 키메라 주요 조직적합성 복합체 （ｍｈｃ） ｉｉ 분자들을 발현하는 유전자 변형된 마우스 |
| US9043996B2 (en) | 2011-10-28 | 2015-06-02 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Genetically modified major histocompatibility complex animals |
| GB2496375A (en) * | 2011-10-28 | 2013-05-15 | Kymab Ltd | A non-human assay vertebrate comprising human antibody loci and human epitope knock-in, and uses thereof |
| CA2852709A1 (en) | 2011-10-28 | 2013-05-02 | Patrys Limited | Pat-lm1 epitopes and methods for using same |
| MX2014004991A (es) | 2011-10-28 | 2014-05-22 | Genentech Inc | Combinaciones terapeuticas y metodos para tratar el melanoma. |
| TW201326193A (zh) | 2011-11-21 | 2013-07-01 | Genentech Inc | 抗－ｃ－ｍｅｔ抗體之純化 |
| US9253965B2 (en) * | 2012-03-28 | 2016-02-09 | Kymab Limited | Animal models and therapeutic molecules |
| GB201122047D0 (en) * | 2011-12-21 | 2012-02-01 | Kymab Ltd | Transgenic animals |
| WO2013083497A1 (en) | 2011-12-06 | 2013-06-13 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Antibody formulation |
| CA2859408C (en) | 2011-12-20 | 2020-06-16 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Humanized light chain mice |
| JP2015503907A (ja) | 2011-12-22 | 2015-02-05 | エフ．ホフマン−ラ ロシュ アーゲーＦ． Ｈｏｆｆｍａｎｎ−Ｌａ Ｒｏｃｈｅ Ａｋｔｉｅｎｇｅｓｅｌｌｓｃｈａｆｔ | 真核細胞のための全長抗体提示システムおよびその使用 |
| CN113896787A (zh) | 2011-12-22 | 2022-01-07 | 弗·哈夫曼-拉罗切有限公司 | 表达载体元件组合、新的生产用细胞产生方法及其在重组产生多肽中的用途 |
| EP3816284A1 (en) | 2011-12-22 | 2021-05-05 | F. Hoffmann-La Roche AG | Expression vector for antibody production in eukaryotic cells |
| AR089425A1 (es) * | 2011-12-22 | 2014-08-20 | Astellas Pharma Inc | Anticuerpo ctgf (factor de crecimiento de tejido conectivo) antihumano |
| WO2013096791A1 (en) | 2011-12-23 | 2013-06-27 | Genentech, Inc. | Process for making high concentration protein formulations |
| SG11201404198TA (en) | 2012-01-18 | 2014-08-28 | Genentech Inc | Anti-lrp5 antibodies and methods of use |
| CN104168920A (zh) | 2012-01-18 | 2014-11-26 | 霍夫曼-拉罗奇有限公司 | 使用fgf19调控剂的方法 |
| PL2809150T3 (pl) | 2012-02-01 | 2020-04-30 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Humanizowane myszy wykazujące ekspresję łańcuchów ciężkich zawierających domeny VL |
| AU2013216753B2 (en) | 2012-02-11 | 2017-09-21 | Genentech, Inc. | R-spondin translocations and methods using the same |
| ES2676031T3 (es) | 2012-02-15 | 2018-07-16 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Cromatografía de afinidad basada en el receptor Fc |
| EP2814514B1 (en) | 2012-02-16 | 2017-09-13 | Atyr Pharma, Inc. | Histidyl-trna synthetases for treating autoimmune and inflammatory diseases |
| US9371391B2 (en) | 2012-02-28 | 2016-06-21 | Astellas Pharma Inc. | Anti-human IL-23 receptor antibody and encoding polynucleotides |
| CN108101983A (zh) | 2012-03-02 | 2018-06-01 | 瑞泽恩制药公司 | 艰难梭状芽孢杆菌毒素的人源抗体 |
| EP3165086A1 (en) | 2012-03-06 | 2017-05-10 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Common light chain mouse |
| SI2825558T1 (sl) | 2012-03-13 | 2019-08-30 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Kombinirana terapija za zdravljenje raka jajčnikov |
| PT2825037T (pt) | 2012-03-16 | 2019-08-07 | Regeneron Pharma | Animais não humanos que expressam sequências de imunoglobulinas sensíveis ao ph |
| US20140013456A1 (en) | 2012-03-16 | 2014-01-09 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Histidine Engineered Light Chain Antibodies and Genetically Modified Non-Human Animals for Generating the Same |
| HUE053310T2 (hu) | 2012-03-16 | 2021-06-28 | Regeneron Pharma | Hisztidinmódosított könnyûlánc antitestek és genetikailag módosított rágcsálók ugyanennek az elõállítására |
| SG10201607727PA (en) | 2012-03-16 | 2016-11-29 | Regeneron Pharma | Mice that produce antigen-binding proteins with ph-dependent binding characteristics |
| BR112014024017A8 (pt) | 2012-03-27 | 2017-07-25 | Genentech Inc | Métodos de tratamento de um tipo de câncer, de tratamento do carcinoma, para selecionar uma terapia e para quantificação e inibidor de her3 |
| GB2502127A (en) * | 2012-05-17 | 2013-11-20 | Kymab Ltd | Multivalent antibodies and in vivo methods for their production |
| US10251377B2 (en) | 2012-03-28 | 2019-04-09 | Kymab Limited | Transgenic non-human vertebrate for the expression of class-switched, fully human, antibodies |
| JP2015512635A (ja) | 2012-03-28 | 2015-04-30 | カイマブ・リミテッド | クラススイッチした完全ヒト抗体の発現のためのトランスジェニック非−ヒト脊椎動物 |
| AR090549A1 (es) | 2012-03-30 | 2014-11-19 | Genentech Inc | Anticuerpos anti-lgr5 e inmunoconjugados |
| TWI619729B (zh) | 2012-04-02 | 2018-04-01 | 再生元醫藥公司 | 抗－ｈｌａ－ｂ*２７抗體及其用途 |
| AU2013249985B2 (en) | 2012-04-20 | 2017-11-23 | Merus N.V. | Methods and means for the production of Ig-like molecules |
| ES2683071T3 (es) | 2012-04-25 | 2018-09-24 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Direccionamiento mediado por nucleasas con grandes vectores de direccionamiento |
| AU2013256596A1 (en) | 2012-05-01 | 2014-10-09 | Genentech, Inc. | Anti-PMEL17 antibodies and immunoconjugates |
| JO3820B1 (ar) | 2012-05-03 | 2021-01-31 | Regeneron Pharma | أجسام مضادة بشرية لـ fel d1وطرق لاستخدامها |
| WO2013170191A1 (en) | 2012-05-11 | 2013-11-14 | Genentech, Inc. | Methods of using antagonists of nad biosynthesis from nicotinamide |
| CA2870876C (en) | 2012-05-23 | 2019-10-01 | Genentech, Inc. | Selection method for therapeutic agents |
| AR092325A1 (es) | 2012-05-31 | 2015-04-15 | Regeneron Pharma | Formulaciones estabilizadas que contienen anticuerpos anti-dll4 y kit |
| JP2015525071A (ja) * | 2012-06-05 | 2015-09-03 | リジェネロン・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッドＲｅｇｅｎｅｒｏｎ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ， Ｉｎｃ． | 共通の軽鎖を用いて完全ヒト型二重特異性抗体を作製するための方法 |
| KR102436654B1 (ko) * | 2012-06-12 | 2022-08-26 | 리제너론 파마슈티칼스 인코포레이티드 | 제한된 면역글로불린 중쇄 유전자좌를 가지는 인간화된 비-인간 동물 |
| MX2014014830A (es) | 2012-06-15 | 2015-05-11 | Genentech Inc | Anticuerpos anti-pcsk9, formulaciones, dosificacion y metodos de uso. |
| WO2014006124A1 (en) | 2012-07-04 | 2014-01-09 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Covalently linked antigen-antibody conjugates |
| EP3339328A1 (en) | 2012-07-04 | 2018-06-27 | F. Hoffmann-La Roche AG | Anti-biotin antibodies and methods of use |
| MX353951B (es) | 2012-07-04 | 2018-02-07 | Hoffmann La Roche | Anticuerpos de anti-teofilina y metodos de uso. |
| CN110042114B (zh) | 2012-07-05 | 2024-09-10 | 弗·哈夫曼-拉罗切有限公司 | 表达和分泌系统 |
| SG11201500087VA (en) | 2012-07-09 | 2015-02-27 | Genentech Inc | Immunoconjugates comprising anti-cd22 antibodies |
| AU2013288932A1 (en) | 2012-07-09 | 2014-12-11 | Genentech, Inc. | Immunoconjugates comprising anti - CD79b antibodies |
| MX2015000315A (es) | 2012-07-09 | 2015-07-06 | Genentech Inc | Anticuerpos anti-cd22 e inmunoconjugados. |
| JP2015523380A (ja) | 2012-07-09 | 2015-08-13 | ジェネンテック， インコーポレイテッド | 抗ｃｄ７９ｂ抗体を含む免疫複合体 |
| PL2872157T3 (pl) | 2012-07-12 | 2020-07-13 | Hangzhou Dac Biotech Co., Ltd | Koniugaty wiążących komórkę cząsteczek ze środkami cytotoksycznymi |
| PE20150361A1 (es) | 2012-07-13 | 2015-03-14 | Roche Glycart Ag | Anticuerpos biespecificos anti-vegf/anti-ang-2 y su utilizacion en el tratamiento de enfermedades vasculares oculares |
| WO2014018375A1 (en) | 2012-07-23 | 2014-01-30 | Xenon Pharmaceuticals Inc. | Cyp8b1 and uses thereof in therapeutic and diagnostic methods |
| AU2013296557B2 (en) | 2012-07-31 | 2019-04-18 | Bioasis Technologies Inc. | Dephosphorylated lysosomal storage disease proteins and methods of use thereof |
| JP6464085B2 (ja) | 2012-08-07 | 2019-02-06 | ジェネンテック， インコーポレイテッド | 神経膠芽腫の治療のための併用療法 |
| CN110624107A (zh) | 2012-08-21 | 2019-12-31 | 赛诺菲生物技术公司 | 通过施用il-4r拮抗剂治疗或预防哮喘的方法 |
| IL282082B (en) | 2012-08-23 | 2022-08-01 | Seagen Inc | Antibody-drug conjugates (adc) binding to 158p1d7 proteins |
| CN104662044B (zh) | 2012-08-24 | 2018-10-30 | 加利福尼亚大学董事会 | 用于治疗ror1癌症并抑制转移的抗体和疫苗 |
| EP2703009A1 (en) | 2012-08-31 | 2014-03-05 | Sanofi | Combination treatments involving antibodies to human PCSK9 |
| EP2703008A1 (en) | 2012-08-31 | 2014-03-05 | Sanofi | Human antibodies to PCSK9 for use in methods of treating particular groups of subjects |
| EP2706070A1 (en) | 2012-09-06 | 2014-03-12 | Sanofi | Combination treatments involving antibodies to human PCSK9 |
| RS57520B1 (sr) | 2012-09-07 | 2018-10-31 | Regeneron Pharma | Postupci za lečenje atopijskog dermatitisa primenom antagonista il-4r |
| KR20240045263A (ko) | 2012-09-07 | 2024-04-05 | 예일 유니버시티 | 유전적으로 변형된 비-인간 동물 및 이것들의 사용 방법 |
| WO2014056783A1 (en) | 2012-10-08 | 2014-04-17 | Roche Glycart Ag | Fc-free antibodies comprising two fab-fragments and methods of use |
| CA2887133C (en) * | 2012-10-12 | 2022-05-03 | Glycovaxyn Ag | Methods of host cell modification |
| EP2914621B1 (en) | 2012-11-05 | 2023-06-07 | Foundation Medicine, Inc. | Novel ntrk1 fusion molecules and uses thereof |
| EP4389764A3 (en) | 2012-11-05 | 2024-08-14 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Genetically modified non-human animals and methods of use thereof |
| AU2013341361A1 (en) | 2012-11-06 | 2015-06-04 | Medimmune, Llc | Antibodies to S. aureus surface determinants |
| CA2884431A1 (en) | 2012-11-08 | 2014-05-15 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Her3 antigen binding proteins binding to the beta-hairpin of her3 |
| CN104968367B (zh) | 2012-11-13 | 2018-04-13 | 弗·哈夫曼-拉罗切有限公司 | 抗血凝素抗体和使用方法 |
| TW201438736A (zh) | 2012-11-14 | 2014-10-16 | Regeneron Pharma | 以ｄｌｌ４拮抗劑治療卵巢癌之方法 |
| WO2014080251A1 (en) | 2012-11-24 | 2014-05-30 | Hangzhou Dac Biotech Co., Ltd. | Hydrophilic linkers and their uses for conjugation of drugs to cell binding molecules |
| PT2931030T (pt) | 2012-12-14 | 2020-08-03 | Open Monoclonal Tech Inc | Polinucleótidos que codificam anticorpos de roedores com idiótipos humanos e animais que os compreendem |
| WO2014107739A1 (en) | 2013-01-07 | 2014-07-10 | Eleven Biotherapeutics, Inc. | Antibodies against pcsk9 |
| US10980804B2 (en) | 2013-01-18 | 2021-04-20 | Foundation Medicine, Inc. | Methods of treating cholangiocarcinoma |
| WO2014116749A1 (en) | 2013-01-23 | 2014-07-31 | Genentech, Inc. | Anti-hcv antibodies and methods of using thereof |
| EP2953452A1 (en) | 2013-02-06 | 2015-12-16 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | B cell lineage based immunogen design with humanized animals |
| CA2898618A1 (en) | 2013-02-07 | 2014-08-14 | Csl Limited | Il-11r binding proteins and uses thereof |
| KR102313047B1 (ko) * | 2013-02-20 | 2021-10-19 | 리제너론 파아마슈티컬스, 인크. | 사람화된 ｔ-세포 보조-수용체를 발현하는 마우스 |
| LT2840892T (lt) | 2013-02-20 | 2018-07-25 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Nežmogaus tipo gyvūnai su modifikuotomis imunoglobulino sunkiųjų grandinių sekomis |
| JP6475172B2 (ja) | 2013-02-20 | 2019-02-27 | リジェネロン・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッドＲｅｇｅｎｅｒｏｎ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ， Ｉｎｃ． | ラットの遺伝子組換え |
| US20150342163A1 (en) | 2013-02-22 | 2015-12-03 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Genetically modified major histocompatibility complex mice |
| CA2900097A1 (en) | 2013-02-22 | 2014-08-28 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Methods of treating cancer and preventing drug resistance |
| CN105164154B (zh) | 2013-02-22 | 2019-06-07 | 瑞泽恩制药公司 | 表达人源化主要组织相容性复合物的小鼠 |
| EP2961772A1 (en) | 2013-02-26 | 2016-01-06 | Roche Glycart AG | Anti-mcsp antibodies |
| KR20150123250A (ko) | 2013-03-06 | 2015-11-03 | 제넨테크, 인크. | 암 약물 내성의 치료 및 예방 방법 |
| KR102309653B1 (ko) * | 2013-03-11 | 2021-10-08 | 리제너론 파아마슈티컬스, 인크. | 키메라 주요 조직적합성 복합체 （ｍｈｃ） 제ｉｉ부류 분자를 발현하는 유전자전이 마우스 |
| KR20150126863A (ko) | 2013-03-13 | 2015-11-13 | 리제너론 파마슈티칼스 인코포레이티드 | 공통 경쇄 마우스 |
| RU2689664C2 (ru) | 2013-03-13 | 2019-05-28 | Регенерон Фарматютикалз, Инк. | Мыши, экспрессирующие ограниченный репертуар легких цепей иммуноглобулина |
| EP2970433B1 (en) | 2013-03-13 | 2019-09-18 | Bioasis Technologies Inc. | Fragments of p97 and uses thereof |
| US9562099B2 (en) | 2013-03-14 | 2017-02-07 | Genentech, Inc. | Anti-B7-H4 antibodies and immunoconjugates |
| WO2014152358A2 (en) | 2013-03-14 | 2014-09-25 | Genentech, Inc. | Combinations of a mek inhibitor compound with an her3/egfr inhibitor compound and methods of use |
| RU2015139054A (ru) | 2013-03-14 | 2017-04-19 | Дженентек, Инк. | Способы лечения рака и профилактики лекарственной резистентности рака |
| EP2967012B1 (en) | 2013-03-14 | 2020-09-16 | Erasmus University Medical Center Rotterdam | Transgenic non-human mammal for antibody production |
| US10377817B2 (en) | 2013-03-14 | 2019-08-13 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Human antibodies to GREM1 |
| JP6436965B2 (ja) | 2013-03-14 | 2018-12-12 | ジェネンテック， インコーポレイテッド | 抗ｂ７−ｈ４抗体及びイムノコンジュゲート |
| NZ712314A (en) | 2013-03-15 | 2021-07-30 | Genentech Inc | Biomarkers and methods of treating pd-1 and pd-l1 related conditions |
| SG10201706210WA (en) | 2013-03-15 | 2017-09-28 | Genentech Inc | Compositions and methods for diagnosis and treatment of hepatic cancers |
| EP3424530A1 (en) | 2013-03-15 | 2019-01-09 | Zyngenia, Inc. | Multivalent and monovalent multispecific complexes and their uses |
| WO2014144292A2 (en) * | 2013-03-15 | 2014-09-18 | Sanofi Pasteur Biologics , Llc | Antibodies against clostridium difficile toxins and methods of using the same |
| EP2970471A2 (en) | 2013-03-15 | 2016-01-20 | F. Hoffmann-La Roche AG | Anti-crth2 antibodies and their use |
| US10993420B2 (en) | 2013-03-15 | 2021-05-04 | Erasmus University Medical Center | Production of heavy chain only antibodies in transgenic mammals |
| CN105188766B (zh) | 2013-03-15 | 2019-07-12 | 瑞泽恩制药公司 | 生物活性分子、其偶联物及治疗用途 |
| US9598485B2 (en) | 2013-03-15 | 2017-03-21 | Ac Immune S.A. | Anti-tau antibodies and methods of use |
| CA2905123A1 (en) | 2013-03-15 | 2014-09-18 | Genentech, Inc. | Methods of treating cancer and preventing cancer drug resistance |
| US9788534B2 (en) | 2013-03-18 | 2017-10-17 | Kymab Limited | Animal models and therapeutic molecules |
| RS62263B1 (sr) | 2013-04-16 | 2021-09-30 | Regeneron Pharma | Ciljana modifikacija genoma pacova |
| AU2014261631B2 (en) | 2013-04-29 | 2019-02-14 | F. Hoffmann-La Roche Ag | FcRn-binding abolished anti-IGF-1R antibodies and their use in the treatment of vascular eye diseases |
| JP6618893B2 (ja) | 2013-04-29 | 2019-12-11 | エフ．ホフマン−ラ ロシュ アーゲーＦ． Ｈｏｆｆｍａｎｎ−Ｌａ Ｒｏｃｈｅ Ａｋｔｉｅｎｇｅｓｅｌｌｓｃｈａｆｔ | Ｆｃ受容体結合が変更された非対称抗体および使用方法 |
| SG10201800492PA (en) | 2013-04-29 | 2018-03-28 | Hoffmann La Roche | Human fcrn-binding modified antibodies and methods of use |
| US9783618B2 (en) | 2013-05-01 | 2017-10-10 | Kymab Limited | Manipulation of immunoglobulin gene diversity and multi-antibody therapeutics |
| US11707056B2 (en) * | 2013-05-02 | 2023-07-25 | Kymab Limited | Animals, repertoires and methods |
| US9783593B2 (en) | 2013-05-02 | 2017-10-10 | Kymab Limited | Antibodies, variable domains and chains tailored for human use |
| US20140331339A1 (en) * | 2013-05-03 | 2014-11-06 | Kymab Limited | Transgenic Non-Human Assay Vertebrates, Assays and Kits |
| PE20151926A1 (es) | 2013-05-20 | 2016-01-07 | Genentech Inc | Anticuerpos de receptores de antitransferrina y metodos de uso |
| TWI682780B (zh) | 2013-05-30 | 2020-01-21 | 美商再生元醫藥公司 | 醫藥組成物用於製造治療與ｐｃｓｋ９功能獲得性突變有關之體染色體顯性高膽固醇血症的藥物之用途 |
| US10111953B2 (en) | 2013-05-30 | 2018-10-30 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Methods for reducing remnant cholesterol and other lipoprotein fractions by administering an inhibitor of proprotein convertase subtilisin kexin-9 (PCSK9) |
| EP2810955A1 (en) | 2013-06-07 | 2014-12-10 | Sanofi | Methods for inhibiting atherosclerosis by administering an inhibitor of PCSK9 |
| KR20160024906A (ko) | 2013-06-07 | 2016-03-07 | 사노피 바이오테크놀로지 | Ｐｃｓｋ9의 억제제를 투여함에 의한 죽상경화증의 억제 방법 |
| EP2862877A1 (en) | 2013-10-18 | 2015-04-22 | Sanofi | Methods for inhibiting atherosclerosis by administering an inhibitor of PCSK9 |
| KR20230066127A (ko) | 2013-06-21 | 2023-05-12 | 사노피 바이오테크놀로지 | Il-4r 길항제를 투여함에 의한 비용종증의 치료 방법 |
| JP6510518B2 (ja) | 2013-08-01 | 2019-05-08 | アジェンシス，インコーポレイテッド | Ｃｄ３７タンパク質に結合する抗体薬物結合体（ａｄｃ） |
| IL294443A (en) | 2013-08-07 | 2022-09-01 | Regeneron Pharma | Lincrna-free nonhuman animals |
| PT3031913T (pt) | 2013-08-09 | 2019-05-31 | Astellas Pharma Inc | Novo anticorpo anti-receptor de tslp humana |
| US10935554B2 (en) | 2013-08-23 | 2021-03-02 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Diagnostic tests and methods for assessing safety, efficacy or outcome of allergen-specific immunotherapy (SIT) |
| BR112016004023A2 (pt) | 2013-08-26 | 2022-11-16 | Regeneron Pharma | Composição, métodos para preparar uma composição e para tratar uma doença, e, composto |
| US20150093399A1 (en) | 2013-08-28 | 2015-04-02 | Bioasis Technologies, Inc. | Cns-targeted conjugates having modified fc regions and methods of use thereof |
| US10456470B2 (en) | 2013-08-30 | 2019-10-29 | Genentech, Inc. | Diagnostic methods and compositions for treatment of glioblastoma |
| US10617755B2 (en) | 2013-08-30 | 2020-04-14 | Genentech, Inc. | Combination therapy for the treatment of glioblastoma |
| CN107074879B (zh) | 2013-09-02 | 2022-04-15 | 杭州多禧生物科技有限公司 | 应用于细胞结合分子-药物共轭体的新型细胞毒性分子 |
| CN105518027A (zh) | 2013-09-17 | 2016-04-20 | 豪夫迈·罗氏有限公司 | 使用抗lgr5抗体的方法 |
| DE202014010413U1 (de) | 2013-09-18 | 2015-12-08 | Kymab Limited | Zellen und Organismen |
| TR201909967T4 (tr) | 2013-09-18 | 2019-07-22 | Regeneron Pharma | Histidin ile işlenmiş hafif zincirli antikorlar ve bunu üretmeye yönelik genetik olarak modifiye edilmiş insan olmayan hayvanlar. |
| SG10201802295XA (en) | 2013-10-01 | 2018-04-27 | Kymab Ltd | Animal Models and Therapeutic Molecules |
| CN105814078A (zh) | 2013-10-11 | 2016-07-27 | 豪夫迈·罗氏有限公司 | Nsp4抑制剂及其使用方法 |
| CN105814085A (zh) | 2013-10-11 | 2016-07-27 | 赛诺菲生物技术公司 | Pcsk9抑制剂用于治疗高血脂症的用途 |
| CN105744954B (zh) | 2013-10-18 | 2021-03-05 | 豪夫迈·罗氏有限公司 | 抗rspo2和/或抗rspo3抗体及其用途 |
| KR20160068802A (ko) | 2013-10-23 | 2016-06-15 | 제넨테크, 인크. | 호산구성 장애를 진단 및 치료하는 방법 |
| PL3065774T3 (pl) | 2013-11-06 | 2021-12-13 | Janssen Biotech, Inc | Przeciwciała anty-ccl17 |
| US10428157B2 (en) | 2013-11-12 | 2019-10-01 | Sanofi Biotechnology | Dosing regimens for use with PCSK9 inhibitors |
| EP3071597B1 (en) | 2013-11-21 | 2020-07-29 | F.Hoffmann-La Roche Ag | Anti-alpha-synuclein antibodies and methods of use |
| EP3460063B1 (en) | 2013-12-11 | 2024-03-13 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Methods and compositions for the targeted modification of a genome |
| RU2725520C2 (ru) | 2013-12-11 | 2020-07-02 | Регенерон Фармасьютикалс, Инк. | Способы и композиции для направленной модификации генома |
| PE20160712A1 (es) | 2013-12-13 | 2016-07-26 | Genentech Inc | Anticuerpos e inmunoconjugados anti-cd33 |
| KR20160089531A (ko) | 2013-12-17 | 2016-07-27 | 제넨테크, 인크. | Pd-1 축 결합 길항제 및 항-her2 항체를 사용하여 her2-양성 암을 치료하는 방법 |
| RU2016128726A (ru) | 2013-12-17 | 2018-01-23 | Дженентек, Инк. | Способы лечения злокачественных опухолей с использованием антагонистов связывания по оси pd-1 и антитела против cd20 |
| CN106102774A (zh) | 2013-12-17 | 2016-11-09 | 豪夫迈·罗氏有限公司 | 包含ox40结合激动剂和pd‑1轴结合拮抗剂的组合疗法 |
| DK3736292T3 (da) | 2013-12-17 | 2024-07-22 | Genentech Inc | Anti-CD3-antistoffer og fremgangsmåder til anvendelse |
| TWI670283B (zh) | 2013-12-23 | 2019-09-01 | 美商建南德克公司 | 抗體及使用方法 |
| US10294301B2 (en) | 2013-12-24 | 2019-05-21 | Astellas Pharma Inc. | Anti-human BDCA-2 antibody |
| BR112016014945A2 (pt) | 2014-01-03 | 2018-01-23 | F. Hoffmann-La Roche Ag | conjugado, formulação farmacêutica e uso |
| CA2933384A1 (en) | 2014-01-03 | 2015-07-09 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Bispecific anti-hapten/anti-blood brain barrier receptor antibodies, complexes thereof and their use as blood brain barrier shuttles |
| CA2930154A1 (en) | 2014-01-03 | 2015-07-09 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Covalently linked helicar-anti-helicar antibody conjugates and uses thereof |
| WO2015103549A1 (en) | 2014-01-03 | 2015-07-09 | The United States Of America, As Represented By The Secretary Department Of Health And Human Services | Neutralizing antibodies to hiv-1 env and their use |
| CN105899534B (zh) | 2014-01-15 | 2020-01-07 | 豪夫迈·罗氏有限公司 | 具有修饰的FCRN和保持的蛋白A结合性质的Fc区变体 |
| TWI681969B (zh) | 2014-01-23 | 2020-01-11 | 美商再生元醫藥公司 | 針對ｐｄ-１的人類抗體 |
| TWI680138B (zh) | 2014-01-23 | 2019-12-21 | 美商再生元醫藥公司 | 抗ｐｄ-ｌ１之人類抗體 |
| CA2935393A1 (en) | 2014-01-24 | 2015-07-30 | Genentech, Inc. | Methods of using anti-steap1 antibodies and immunoconjugates |
| WO2015116852A1 (en) | 2014-01-29 | 2015-08-06 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Methods for treating rheumatoid arthritis by administering an il-6r antibody |
| EP3102608B1 (en) | 2014-02-03 | 2019-09-18 | Bioasis Technologies Inc. | P97 fusion proteins |
| SG10201901076WA (en) | 2014-02-08 | 2019-03-28 | Genentech Inc | Methods of treating alzheimer's disease |
| TWI705824B (zh) | 2014-02-08 | 2020-10-01 | 美商建南德克公司 | 治療阿茲海默症之方法 |
| EP3825332A1 (en) | 2014-02-12 | 2021-05-26 | F. Hoffmann-La Roche AG | Anti-jagged1 antibodies and methods of use |
| US20150231236A1 (en) | 2014-02-14 | 2015-08-20 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Methods for treating patients with hypercholesterolemia that is not adequately controlled by moderate-dose statin therapy |
| US10392605B2 (en) | 2014-02-19 | 2019-08-27 | Bioasis Technologies Inc. | P97-IDS fusion proteins |
| KR20160124165A (ko) | 2014-02-21 | 2016-10-26 | 제넨테크, 인크. | 항-il-13/il-17 이중특이적 항체 및 그의 용도 |
| IL315136A (en) | 2014-02-21 | 2024-10-01 | Sanofi Biotechnology | Methods for treating or preventing asthma by adding an IL-4R antagonist |
| ES2960619T3 (es) | 2014-02-28 | 2024-03-05 | Hangzhou Dac Biotech Co Ltd | Enlazadores cargados y sus usos para la conjugación |
| JP6644717B2 (ja) | 2014-03-14 | 2020-02-12 | ジェネンテック， インコーポレイテッド | 異種ポリペプチドを分泌させるための方法及び組成物 |
| CN114642661A (zh) | 2014-03-17 | 2022-06-21 | 赛诺菲生物技术公司 | 用于降低心血管风险的方法 |
| AU2015231025A1 (en) | 2014-03-21 | 2016-09-15 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Vl antigen binding proteins exhibiting distinct binding characteristics |
| WO2015140591A1 (en) | 2014-03-21 | 2015-09-24 | Nordlandssykehuset Hf | Anti-cd14 antibodies and uses thereof |
| KR102601491B1 (ko) | 2014-03-21 | 2023-11-13 | 리제너론 파마슈티칼스 인코포레이티드 | 단일 도메인 결합 단백질을 생산하는 비-인간 동물 |
| JP2017516458A (ja) | 2014-03-24 | 2017-06-22 | ジェネンテック， インコーポレイテッド | ｃ−ｍｅｔ拮抗剤による癌治療及びｃ−ｍｅｔ拮抗剤のＨＧＦ発現との相関 |
| PE20161571A1 (es) | 2014-03-31 | 2017-02-07 | Genentech Inc | Anticuerpos anti-ox40 y metodos de uso |
| EP3126386A1 (en) | 2014-03-31 | 2017-02-08 | F. Hoffmann-La Roche AG | Combination therapy comprising anti-angiogenesis agents and ox40 binding agonists |
| JP6666262B2 (ja) | 2014-04-02 | 2020-03-13 | エフ．ホフマン−ラ ロシュ アーゲーＦ． Ｈｏｆｆｍａｎｎ−Ｌａ Ｒｏｃｈｅ Ａｋｔｉｅｎｇｅｓｅｌｌｓｃｈａｆｔ | 多重特異性抗体の軽鎖誤対合を検出するための方法 |
| WO2015153912A1 (en) | 2014-04-03 | 2015-10-08 | Igm Biosciences, Inc. | Modified j-chain |
| AP2016009549A0 (en) | 2014-04-18 | 2016-11-30 | Acceleron Pharma Inc | Methods for increasing red blood cell levels and treating sickle-cell disease |
| WO2015164615A1 (en) | 2014-04-24 | 2015-10-29 | University Of Oslo | Anti-gluten antibodies and uses thereof |
| CN106413757B (zh) | 2014-05-01 | 2022-01-14 | 比奥阿赛斯技术有限公司 | p97-多核苷酸结合物 |
| RU2711744C1 (ru) | 2014-05-19 | 2020-01-21 | Ридженерон Фармасьютикалз, Инк. | Генетически модифицированные животные, отличные от человека, экспрессирующие epo человека |
| CN106414499A (zh) | 2014-05-22 | 2017-02-15 | 基因泰克公司 | 抗gpc3抗体和免疫偶联物 |
| WO2015179835A2 (en) | 2014-05-23 | 2015-11-26 | Genentech, Inc. | Mit biomarkers and methods using the same |
| MX2016015609A (es) * | 2014-05-30 | 2017-08-02 | Regeneron Pharma | Animales con dipeptidil peptidasa iv (dpp4) humanizada. |
| EP3708671A1 (en) * | 2014-06-06 | 2020-09-16 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Methods and compositions for modifying a targeted locus |
| MX2016016233A (es) | 2014-06-11 | 2017-03-31 | Genentech Inc | Anticuerpos anti-lgr5 y sus usos. |
| US20230190750A1 (en) | 2014-06-13 | 2023-06-22 | Genentech, Inc. | Methods of treating and preventing cancer drug resistance |
| EP3154566B1 (en) | 2014-06-13 | 2022-08-03 | Acceleron Pharma Inc. | Actrii antagonist for the treatment or prevention of a cutaneous ulcer in a subject that has anemia |
| CA2953499C (en) | 2014-06-23 | 2023-10-24 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Nuclease-mediated dna assembly |
| TWI713453B (zh) | 2014-06-23 | 2020-12-21 | 美商健生生物科技公司 | 干擾素α及ω抗體拮抗劑 |
| US9902971B2 (en) | 2014-06-26 | 2018-02-27 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Methods for producing a mouse XY embryonic (ES) cell line capable of producing a fertile XY female mouse in an F0 generation |
| TW201623329A (zh) | 2014-06-30 | 2016-07-01 | 亞佛瑞司股份有限公司 | 針對骨調素截斷變異體的疫苗及單株抗體暨其用途 |
| RU2021100991A (ru) | 2014-07-10 | 2021-03-01 | Аффирис Аг | Вещества и способы для применения при предупреждении и/или лечении болезни гентингтона |
| JP2017526641A (ja) | 2014-07-11 | 2017-09-14 | ジェネンテック， インコーポレイテッド | Ｎｏｔｃｈ経路阻害 |
| WO2016011052A1 (en) | 2014-07-14 | 2016-01-21 | Genentech, Inc. | Diagnostic methods and compositions for treatment of glioblastoma |
| CN114306592A (zh) | 2014-07-16 | 2022-04-12 | 赛诺菲生物技术公司 | 用于治疗患有高胆固醇血症的高心血管风险患者的方法 |
| AU2015289613B2 (en) | 2014-07-16 | 2021-07-01 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Methods for treating patients with heterozygous familial hypercholesterolemia (heFH) |
| CA2957250A1 (en) | 2014-08-15 | 2016-02-18 | Adynxx, Inc. | Oligonucleotide decoys for the treatment of pain |
| EP3191518B1 (en) | 2014-09-12 | 2020-01-15 | Genentech, Inc. | Anti-b7-h4 antibodies and immunoconjugates |
| AR101846A1 (es) | 2014-09-12 | 2017-01-18 | Genentech Inc | Anticuerpos anti-cll-1 e inmunoconjugados |
| PT3191135T (pt) | 2014-09-12 | 2020-11-12 | Genentech Inc | Anticorpos anti-her2 e imunoconjugados |
| US9657099B2 (en) | 2014-09-16 | 2017-05-23 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Anti-glucagon antibodies |
| JP6730261B2 (ja) | 2014-09-17 | 2020-07-29 | ジェネンテック， インコーポレイテッド | 抗ｈｅｒ２抗体を含む免疫複合体 |
| CA2959428A1 (en) | 2014-09-19 | 2016-03-24 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Chimeric antigen receptors |
| EP3689910A3 (en) | 2014-09-23 | 2020-12-02 | F. Hoffmann-La Roche AG | Method of using anti-cd79b immunoconjugates |
| EA036658B1 (ru) | 2014-09-23 | 2020-12-04 | Регенерон Фармасьютикалз, Инк. | Антитела к il-25 и их применения |
| ES2741387T3 (es) | 2014-10-15 | 2020-02-10 | Regeneron Pharma | Métodos y composiciones para generar o mantener células pluripotentes |
| CN107074938A (zh) | 2014-10-16 | 2017-08-18 | 豪夫迈·罗氏有限公司 | 抗‑α‑突触核蛋白抗体和使用方法 |
| AU2015336946A1 (en) | 2014-10-23 | 2017-04-13 | La Trobe University | Fn14-binding proteins and uses thereof |
| US10626176B2 (en) | 2014-10-31 | 2020-04-21 | Jounce Therapeutics, Inc. | Methods of treating conditions with antibodies that bind B7-H4 |
| MX2017005751A (es) | 2014-11-03 | 2018-04-10 | Genentech Inc | Métodos y biomarcadores para predecir la eficacia y evaluación de un tratamiento con agonista de ox40. |
| SG11201703448QA (en) | 2014-11-03 | 2017-05-30 | Genentech Inc | Assays for detecting t cell immune subsets and methods of use thereof |
| RU2017119428A (ru) | 2014-11-06 | 2018-12-06 | Дженентек, Инк. | Комбинированная терапия, включающая применение агонистов, связывающихся с ох40, и ингибиторов tigit |
| KR20170076697A (ko) | 2014-11-06 | 2017-07-04 | 에프. 호프만-라 로슈 아게 | 개질된 FCRN-결합 특성 및 단백질 A-결합 특성을 가진 Fc-영역 변이체 |
| ES2749383T3 (es) | 2014-11-06 | 2020-03-20 | Hoffmann La Roche | Variantes de la región Fc con unión al FcRn modificada y procedimientos de uso |
| EA201791029A1 (ru) | 2014-11-10 | 2017-12-29 | Дженентек, Инк. | Антитела против интерлейкина-33 и их применение |
| EP3217787B1 (en) | 2014-11-10 | 2019-04-17 | F.Hoffmann-La Roche Ag | Animal model for nephropathy and agents for treating the same |
| MX2017006286A (es) | 2014-11-14 | 2018-01-23 | Sanofi Biotechnology | Metodos para tratar sinusitis cronica con polipos nasales por administracion de un antagonista de il-4r. |
| EP3875481A1 (en) | 2014-11-14 | 2021-09-08 | The U.S.A. as represented by the Secretary, Department of Health and Human Services | Neutralizing antibodies to ebola virus glycoprotein and their use |
| WO2016077666A1 (en) | 2014-11-14 | 2016-05-19 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Method for generating high affinity antibodies |
| BR112017010198A2 (pt) | 2014-11-17 | 2017-12-26 | Genentech Inc | terapia de combinação compreendendo agonistas de ligação a ox40 e antagonistas de ligação ao eixo de pd-1 |
| EP3221362B1 (en) | 2014-11-19 | 2019-07-24 | F.Hoffmann-La Roche Ag | Anti-transferrin receptor antibodies and methods of use |
| EP3221364B1 (en) | 2014-11-19 | 2020-12-16 | Genentech, Inc. | Antibodies against bace1 and use thereof for neural disease immunotherapy |
| EP3221361B1 (en) | 2014-11-19 | 2021-04-21 | Genentech, Inc. | Anti-transferrin receptor / anti-bace1 multispecific antibodies and methods of use |
| DK3789402T3 (da) | 2014-11-20 | 2022-09-19 | Hoffmann La Roche | Kombinationsbehandling med T-celleaktiverende bispecifikke antigenbindende molekyler og PD-1-aksebindende antagonister |
| SI3221457T1 (sl) | 2014-11-21 | 2019-08-30 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Postopki in sestavki za ciljno genetsko modifikacijo z uporabo vodilnih RNK v parih |
| CN113016720B (zh) | 2014-11-24 | 2023-02-21 | 瑞泽恩制药公司 | 表达人源化cd3复合物的非人类动物 |
| JP6554280B2 (ja) * | 2014-11-28 | 2019-07-31 | 株式会社デンソーテン | データ処理装置、画像処理方法、及び、プログラム |
| MA41119A (fr) | 2014-12-03 | 2017-10-10 | Acceleron Pharma Inc | Méthodes de traitement de syndromes myélodysplasiques et d'anémie sidéroblastique |
| AR102918A1 (es) | 2014-12-05 | 2017-04-05 | Genentech Inc | Anticuerpos anti-cd79b y métodos de uso |
| MX2017007491A (es) | 2014-12-10 | 2018-05-04 | Genentech Inc | Anticuerpos del receptor de la barrera hematoencefálica y métodos para su uso. |
| SG11201700841QA (en) | 2014-12-19 | 2017-03-30 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Anti-myostatin antibodies, polypeptides containing variant fc regions, and methods of use |
| MY183415A (en) | 2014-12-19 | 2021-02-18 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Anti-c5 antibodies and methods of use |
| TWI701258B (zh) | 2014-12-19 | 2020-08-11 | 美商再生元醫藥公司 | 流行性感冒病毒血球凝集素之人類抗體 |
| WO2016100819A1 (en) | 2014-12-19 | 2016-06-23 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Methods and compositions for targeted genetic modification through single-step multiple targeting |
| WO2016094962A1 (en) | 2014-12-19 | 2016-06-23 | Monash University | Il-21 antibodies |
| US20160200815A1 (en) | 2015-01-05 | 2016-07-14 | Jounce Therapeutics, Inc. | Antibodies that inhibit tim-3:lilrb2 interactions and uses thereof |
| WO2016117346A1 (en) | 2015-01-22 | 2016-07-28 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | A combination of two or more anti-c5 antibodies and methods of use |
| TWI710573B (zh) | 2015-01-26 | 2020-11-21 | 美商再生元醫藥公司 | 抗伊波拉病毒醣蛋白之人類抗體 |
| KR102605798B1 (ko) | 2015-02-05 | 2023-11-23 | 추가이 세이야쿠 가부시키가이샤 | 이온 농도 의존적 항원 결합 도메인을 포함하는 항체, Fc 영역 개변체, IL-8에 결합하는 항체, 및 그들의 사용 |
| AU2016219534B2 (en) | 2015-02-09 | 2021-07-01 | Massachusetts Institute Of Technology | Multi-specific antibodies with affinity for human A33 antigen and dota metal complex and uses thereof |
| CA2975899A1 (en) | 2015-02-13 | 2016-08-18 | Biommune Technologies Inc. | Antibodies to l-type voltage gated channels and related methods |
| SG11201707195SA (en) | 2015-03-09 | 2017-10-30 | Agensys Inc | Antibody drug conjugates (adc) that bind to flt3 proteins |
| ES2830173T3 (es) | 2015-03-16 | 2021-06-03 | Regeneron Pharma | Animal no humano que presenta función de las neuronas motoras superiores e inferiores y percepción sensorial disminuidas |
| MX2017011486A (es) | 2015-03-16 | 2018-06-15 | Genentech Inc | Métodos de detección y cuantificación de il-13 y sus usos en el diagnóstico y tratamiento de enfermedades asociadas a th2. |
| WO2016146833A1 (en) | 2015-03-19 | 2016-09-22 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Biomarkers for nad(+)-diphthamide adp ribosyltransferase resistance |
| CN107438622A (zh) | 2015-03-19 | 2017-12-05 | 瑞泽恩制药公司 | 选择结合抗原的轻链可变区的非人动物 |
| HUE049081T2 (hu) | 2015-03-20 | 2020-09-28 | The United States Of America As | GP120 elleni neutralizáló antitestek és alkalmazásuk |
| CN107530428B (zh) | 2015-03-23 | 2022-05-13 | 震动疗法股份有限公司 | Icos的抗体 |
| EP3273998B1 (en) | 2015-03-27 | 2019-09-04 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Maytansinoid derivatives, conjugates thereof, and methods of use |
| AU2016246698B2 (en) | 2015-04-06 | 2022-06-02 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Humanized T cell mediated immune responses in non-human animals |
| MA54328A (fr) | 2015-04-06 | 2021-10-06 | Acceleron Pharma Inc | Hétéromultimères de récepteur de type i et de type ii de la superfamille de tgf-bêta et leurs utilisations |
| MA41919A (fr) | 2015-04-06 | 2018-02-13 | Acceleron Pharma Inc | Hétéromultimères alk4:actriib et leurs utilisations |
| WO2016164637A1 (en) | 2015-04-07 | 2016-10-13 | Alector Llc | Anti-sortilin antibodies and methods of use thereof |
| AU2016246695A1 (en) | 2015-04-07 | 2017-10-26 | Genentech, Inc. | Antigen binding complex having agonistic activity and methods of use |
| FI3282835T3 (fi) | 2015-04-13 | 2023-07-20 | Regeneron Pharma | Humanisoituja sirpa-il15-poistogeenisiä hiiriä ja niiden käyttömenetelmiä |
| EP3913052A1 (en) | 2015-04-24 | 2021-11-24 | F. Hoffmann-La Roche AG | Methods of identifying bacteria comprising binding polypeptides |
| JP2018520642A (ja) | 2015-05-01 | 2018-08-02 | ジェネンテック， インコーポレイテッド | マスク抗ｃｄ３抗体及びその使用方法 |
| WO2016179194A1 (en) | 2015-05-04 | 2016-11-10 | Jounce Therapeutics, Inc. | Lilra3 and method of using the same |
| EP3936524A3 (en) | 2015-05-11 | 2022-06-15 | F. Hoffmann-La Roche AG | Compositions and methods of treating lupus nephritis |
| LT3294770T (lt) | 2015-05-12 | 2020-12-28 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Vėžio gydymo ir diagnostikos būdai |
| US10395759B2 (en) | 2015-05-18 | 2019-08-27 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Methods and systems for copy number variant detection |
| US10285388B2 (en) | 2015-05-29 | 2019-05-14 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Non-human animals having a disruption in a C9ORF72 locus |
| ES2789500T5 (es) | 2015-05-29 | 2023-09-20 | Hoffmann La Roche | Procedimientos terapéuticos y de diagnóstico para el cáncer |
| CN107771182A (zh) | 2015-05-29 | 2018-03-06 | 豪夫迈·罗氏有限公司 | 人源化抗埃博拉病毒糖蛋白抗体和使用方法 |
| EP3302552A1 (en) | 2015-06-02 | 2018-04-11 | H. Hoffnabb-La Roche Ag | Compositions and methods for using anti-il-34 antibodies to treat neurological diseases |
| WO2016196975A1 (en) | 2015-06-03 | 2016-12-08 | The United States Of America, As Represented By The Secretary Department Of Health & Human Services | Neutralizing antibodies to hiv-1 env and their use |
| RU2732122C2 (ru) | 2015-06-05 | 2020-09-11 | Дженентек, Инк. | Антитела против тау-белка и способы их применения |
| MX2017015937A (es) | 2015-06-08 | 2018-12-11 | Genentech Inc | Métodos de tratamiento del cáncer con anticuerpos anti-ox40 y antagonistas de unión al eje de pd-1. |
| MX2017014740A (es) | 2015-06-08 | 2018-08-15 | Genentech Inc | Métodos de tratamiento del cáncer con anticuerpos anti-ox40. |
| JP7497953B2 (ja) | 2015-06-12 | 2024-06-11 | アレクトル エルエルシー | 抗ｃｄ３３抗体及びその使用方法 |
| US11136390B2 (en) | 2015-06-12 | 2021-10-05 | Alector Llc | Anti-CD33 antibodies and methods of use thereof |
| US10017577B2 (en) | 2015-06-15 | 2018-07-10 | Genentech, Inc. | Antibodies and immunoconjugates |
| EP3916018A1 (en) | 2015-06-16 | 2021-12-01 | Genentech, Inc. | Anti-cd3 antibodies and methods of use |
| US10501545B2 (en) | 2015-06-16 | 2019-12-10 | Genentech, Inc. | Anti-CLL-1 antibodies and methods of use |
| AR105026A1 (es) | 2015-06-16 | 2017-08-30 | Genentech Inc | ANTICUERPOS MADURADOS POR AFINIDAD Y HUMANIZADOS PARA FcRH5 Y MÉTODOS PARA SU USO |
| CA2986263A1 (en) | 2015-06-17 | 2016-12-22 | Genentech, Inc. | Methods of treating locally advanced or metastatic breast cancers using pd-1 axis binding antagonists and taxanes |
| KR20180012859A (ko) | 2015-06-17 | 2018-02-06 | 제넨테크, 인크. | 항-her2 항체 및 이용 방법 |
| HUE057952T2 (hu) | 2015-06-24 | 2022-06-28 | Hoffmann La Roche | Anti-transzferrin receptor antitestek testreszabott affinitással |
| JP2018520153A (ja) | 2015-06-29 | 2018-07-26 | ジェネンテック， インコーポレイテッド | 臓器移植における使用のためのｉｉ型抗ｃｄ２０抗体 |
| CA2991973C (en) | 2015-07-12 | 2021-12-07 | Suzhou M-Conj Biotech Co., Ltd. | Bridge linkers for conjugation of a cell-binding molecule |
| US9839687B2 (en) | 2015-07-15 | 2017-12-12 | Suzhou M-Conj Biotech Co., Ltd. | Acetylenedicarboxyl linkers and their uses in specific conjugation of a cell-binding molecule |
| EP3331550B1 (en) | 2015-08-04 | 2022-11-02 | Acceleron Pharma Inc. | Composition for treating myeloproliferative disorders |
| WO2017024146A1 (en) | 2015-08-05 | 2017-02-09 | Janssen Biotech, Inc. | Anti-cd154 antibodies and methods of using them |
| TW201713690A (zh) | 2015-08-07 | 2017-04-16 | 再生元醫藥公司 | 抗ａｎｇｐｔｌ８抗體及其用途 |
| CN105384825B (zh) | 2015-08-11 | 2018-06-01 | 南京传奇生物科技有限公司 | 一种基于单域抗体的双特异性嵌合抗原受体及其应用 |
| CN107922507B (zh) | 2015-08-18 | 2022-04-05 | 瑞泽恩制药公司 | 抗pcsk9抑制性抗体用来治疗接受脂蛋白单采的高脂血症患者 |
| WO2017035241A1 (en) | 2015-08-24 | 2017-03-02 | Trianni, Inc. | Enhanced production of immunoglobulins |
| US9862760B2 (en) | 2015-09-16 | 2018-01-09 | Novartis Ag | Polyomavirus neutralizing antibodies |
| PE20181336A1 (es) | 2015-09-18 | 2018-08-21 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Anticuerpos que se unen a interleucina 8 (il-8) y sus usos |
| JP6959912B2 (ja) | 2015-09-23 | 2021-11-05 | ジェネンテック， インコーポレイテッド | 抗ｖｅｇｆ抗体の最適化変異体 |
| MX2018003533A (es) | 2015-09-24 | 2019-04-25 | Abvitro Llc | Composiciones de anticuerpo de virus de inmunodeficiencia humana (vih) y metodos de uso. |
| TWI811892B (zh) | 2015-09-25 | 2023-08-11 | 美商建南德克公司 | 抗tigit抗體及使用方法 |
| CN108368510B (zh) | 2015-09-30 | 2023-09-01 | 詹森生物科技公司 | 特异性结合人cd40的激动性抗体和使用方法 |
| US10618978B2 (en) | 2015-09-30 | 2020-04-14 | Igm Biosciences, Inc. | Binding molecules with modified J-chain |
| WO2017059387A1 (en) | 2015-09-30 | 2017-04-06 | Igm Biosciences, Inc. | Binding molecules with modified j-chain |
| JP6657392B2 (ja) | 2015-10-02 | 2020-03-04 | エフ・ホフマン−ラ・ロシュ・アクチェンゲゼルシャフト | 二重特異性抗ヒトｃｄ２０／ヒトトランスフェリン受容体抗体及び使用方法 |
| AR106189A1 (es) | 2015-10-02 | 2017-12-20 | Hoffmann La Roche | ANTICUERPOS BIESPECÍFICOS CONTRA EL A-b HUMANO Y EL RECEPTOR DE TRANSFERRINA HUMANO Y MÉTODOS DE USO |
| MA43345A (fr) | 2015-10-02 | 2018-08-08 | Hoffmann La Roche | Conjugués anticorps-médicaments de pyrrolobenzodiazépine et méthodes d'utilisation |
| SI3356404T1 (sl) | 2015-10-02 | 2021-11-30 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Protitelesa proti PD1 in postopki uporabe |
| TWI756187B (zh) | 2015-10-09 | 2022-03-01 | 美商再生元醫藥公司 | 抗ｌａｇ３抗體及其用途 |
| MA43354A (fr) | 2015-10-16 | 2018-08-22 | Genentech Inc | Conjugués médicamenteux à pont disulfure encombré |
| MA45326A (fr) | 2015-10-20 | 2018-08-29 | Genentech Inc | Conjugués calichéamicine-anticorps-médicament et procédés d'utilisation |
| AU2016342269A1 (en) | 2015-10-22 | 2018-03-29 | Jounce Therapeutics, Inc. | Gene signatures for determining icos expression |
| EP3184547A1 (en) | 2015-10-29 | 2017-06-28 | F. Hoffmann-La Roche AG | Anti-tpbg antibodies and methods of use |
| WO2017075173A2 (en) | 2015-10-30 | 2017-05-04 | Genentech, Inc. | Anti-factor d antibodies and conjugates |
| CA3001362C (en) | 2015-10-30 | 2020-10-13 | Genentech, Inc. | Anti-htra1 antibodies and methods of use thereof |
| SG11201803520PA (en) | 2015-11-03 | 2018-05-30 | Janssen Biotech Inc | Antibodies specifically binding pd-1 and their uses |
| EP3370754A4 (en) | 2015-11-04 | 2019-10-23 | Acceleron Pharma Inc. | METHODS FOR INCREASING ERYTHROCYTE RATES AND TREATING INEFFECTIVE ERYTHROPOISIS |
| WO2017079768A1 (en) | 2015-11-08 | 2017-05-11 | Genentech, Inc. | Methods of screening for multispecific antibodies |
| KR20180096645A (ko) | 2015-11-23 | 2018-08-29 | 악셀레론 파마 인코포레이티드 | 눈 질환의 치료 방법 |
| US10813346B2 (en) | 2015-12-03 | 2020-10-27 | Trianni, Inc. | Enhanced immunoglobulin diversity |
| EP3178848A1 (en) | 2015-12-09 | 2017-06-14 | F. Hoffmann-La Roche AG | Type ii anti-cd20 antibody for reducing formation of anti-drug antibodies |
| AU2016368469B2 (en) | 2015-12-09 | 2023-11-02 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Type II anti-CD20 antibody for reducing formation of anti-drug antibodies |
| AU2016371034A1 (en) | 2015-12-17 | 2018-05-31 | Janssen Biotech, Inc. | Antibodies specifically binding HLA-DR and their uses |
| CA3005592C (en) | 2015-12-18 | 2024-01-23 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Anti-c5 antibodies and methods of use |
| WO2017112775A1 (en) | 2015-12-22 | 2017-06-29 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Combination of anti-pd-1 antibodies and bispecific anti-cd20/anti-cd3 antibodies to treat cancer |
| AR107303A1 (es) | 2016-01-08 | 2018-04-18 | Hoffmann La Roche | Métodos de tratamiento de cánceres positivos para ace utilizando antagonistas de unión a eje pd-1 y anticuerpos biespecíficos anti-ace / anti-cd3, uso, composición, kit |
| CA3011359A1 (en) | 2016-01-13 | 2017-07-20 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Rodents having an engineered heavy chain diversity region |
| CA3011739A1 (en) | 2016-01-20 | 2017-07-27 | Genentech, Inc. | High dose treatments for alzheimer's disease |
| MA43094B1 (fr) | 2016-01-25 | 2020-10-28 | Regeneron Pharma | Dérivés de maytansinoïde, leurs conjugués, et procédés d'utilisation |
| DK3411476T3 (da) | 2016-02-04 | 2024-07-15 | Trianni Inc | Forøget produktion af immunoglobuliner |
| NZ745249A (en) | 2016-02-12 | 2021-07-30 | Regeneron Pharma | Methods and systems for detection of abnormal karyotypes |
| AU2017221425A1 (en) * | 2016-02-16 | 2018-08-23 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Non-human animals having a mutant kynureninase gene |
| US20170233466A1 (en) | 2016-02-17 | 2017-08-17 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Methods for Treating or Preventing Atherosclerosis by Administering an Inhibitor of ANGPTL3 |
| WO2017151502A1 (en) | 2016-02-29 | 2017-09-08 | Genentech, Inc. | Therapeutic and diagnostic methods for cancer |
| MA43734A (fr) | 2016-03-03 | 2018-11-28 | Regeneron Pharma | Procédés de traitement de patients atteints d'hyperlipidémie par administration d'un inhibiteur de pcsk9 en combinaison avec un inhibiteur d'angptl3 |
| CA3016552A1 (en) | 2016-03-15 | 2017-09-21 | Genentech, Inc. | Methods of treating cancers using pd-1 axis binding antagonists and anti-gpc3 antibodies |
| JP6943872B2 (ja) | 2016-03-25 | 2021-10-06 | ジェネンテック， インコーポレイテッド | 多重全抗体及び抗体複合体化薬物定量化アッセイ |
| JP2019515369A (ja) | 2016-03-29 | 2019-06-06 | リジェネロン・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッドＲｅｇｅｎｅｒｏｎ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ， Ｉｎｃ． | 遺伝的バリアント−表現型解析システムおよび使用方法 |
| EP3228630A1 (en) | 2016-04-07 | 2017-10-11 | IMBA-Institut für Molekulare Biotechnologie GmbH | Combination of an apelin antagonist and an angiogenesis inhibitor for the treatment of cancer |
| EP3439689B1 (en) | 2016-04-08 | 2021-10-13 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Methods for treating hyperlipidemia with an angptl8 inhibitor and an angptl3 inhibitor |
| WO2017180864A1 (en) | 2016-04-14 | 2017-10-19 | Genentech, Inc. | Anti-rspo3 antibodies and methods of use |
| WO2017181111A2 (en) | 2016-04-15 | 2017-10-19 | Genentech, Inc. | Methods for monitoring and treating cancer |
| AU2017248766A1 (en) | 2016-04-15 | 2018-11-01 | Genentech, Inc. | Methods for monitoring and treating cancer |
| CA3021884A1 (en) | 2016-04-28 | 2017-11-02 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Methods for treating patients with familial hypercholesterolemia |
| SG11201809620UA (en) | 2016-05-02 | 2018-11-29 | Hoffmann La Roche | The contorsbody - a single chain target binder |
| CN109071640B (zh) | 2016-05-11 | 2022-10-18 | 豪夫迈·罗氏有限公司 | 经修饰抗生腱蛋白抗体及使用方法 |
| TW202408578A (zh) | 2016-05-13 | 2024-03-01 | 美商再生元醫藥公司 | 藉由投予pd-1抑制劑治療皮膚癌之方法 |
| WO2017201449A1 (en) | 2016-05-20 | 2017-11-23 | Genentech, Inc. | Protac antibody conjugates and methods of use |
| AU2017268458B2 (en) | 2016-05-20 | 2022-07-21 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Methods for breaking immunological tolerance using multiple guide RNAS |
| CN109313200B (zh) | 2016-05-27 | 2022-10-04 | 豪夫迈·罗氏有限公司 | 用于表征位点特异性抗体-药物缀合物的生物分析性方法 |
| CN110603266A (zh) | 2016-06-02 | 2019-12-20 | 豪夫迈·罗氏有限公司 | 用于治疗癌症的ii型抗cd20抗体和抗cd20/cd3双特异性抗体 |
| EP3252078A1 (en) | 2016-06-02 | 2017-12-06 | F. Hoffmann-La Roche AG | Type ii anti-cd20 antibody and anti-cd20/cd3 bispecific antibody for treatment of cancer |
| CA3026088A1 (en) | 2016-06-03 | 2017-12-07 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Non-human animals expressing exogenous terminal deoxynucleotidyltransferase |
| IL262996B2 (en) | 2016-06-06 | 2024-03-01 | Hoffmann La Roche | Fusion proteins for ophthalmology with increased grip in the eye |
| US10639378B2 (en) | 2016-06-06 | 2020-05-05 | Genentech, Inc. | Silvestrol antibody-drug conjugates and methods of use |
| WO2017214089A1 (en) | 2016-06-06 | 2017-12-14 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Non-human animals expressing antibodies with human lambda light chains |
| GB201610162D0 (en) | 2016-06-10 | 2016-07-27 | Imp Innovations Ltd And Inst Pasteur | Methods |
| UA124734C2 (uk) | 2016-06-14 | 2021-11-10 | Рідженерон Фармасьютікалз, Інк. | Антитіло проти с5 і його застосування |
| WO2017223405A1 (en) | 2016-06-24 | 2017-12-28 | Genentech, Inc. | Anti-polyubiquitin multispecific antibodies |
| IL299099A (en) | 2016-06-27 | 2023-02-01 | Univ California | Combinations of cancer treatments |
| EP3478717B1 (en) | 2016-07-04 | 2022-01-05 | F. Hoffmann-La Roche AG | Novel antibody format |
| SI3496739T1 (sl) | 2016-07-15 | 2021-06-30 | Acceleron Pharma Inc. | Sestave, ki zajemajo polipeptide actriia, za uporabo pri zdravljenju pljučne hipertenzije |
| TW201815821A (zh) | 2016-07-18 | 2018-05-01 | 美商再生元醫藥公司 | 抗茲卡病毒抗體及使用方法 |
| WO2018014260A1 (en) | 2016-07-20 | 2018-01-25 | Nanjing Legend Biotech Co., Ltd. | Multispecific antigen binding proteins and methods of use thereof |
| FI3490582T3 (fi) | 2016-07-27 | 2024-08-01 | Acceleron Pharma Inc | Koostumuksia käytettäväksi myelofibroosin hoitamisessa |
| AU2017302657A1 (en) | 2016-07-29 | 2019-02-14 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Mice comprising mutations resulting in expression of c-truncated fibrillin-1 |
| CN117986372A (zh) | 2016-07-29 | 2024-05-07 | 中外制药株式会社 | 显示增加的备选fviii辅因子功能活性的双特异性抗体 |
| JP2019530434A (ja) | 2016-08-05 | 2019-10-24 | ジェネンテック， インコーポレイテッド | アゴニスト活性を有する多価及び多重エピトープ抗体ならびに使用方法 |
| MX2019001448A (es) | 2016-08-05 | 2019-09-13 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Composicion para profilaxis o tratamiento de enfermedades relacionadas con interleucina 8 (il-8). |
| EP3497129A1 (en) | 2016-08-08 | 2019-06-19 | H. Hoffnabb-La Roche Ag | Therapeutic and diagnostic methods for cancer |
| EP3282019A1 (en) | 2016-08-09 | 2018-02-14 | Medizinische Universität Wien | Genotyping and treatment of cancer, in particular chronic lymphocytic leukemia |
| WO2018031662A1 (en) | 2016-08-11 | 2018-02-15 | Genentech, Inc. | Pyrrolobenzodiazepine prodrugs and antibody conjugates thereof |
| EP3497126A4 (en) | 2016-08-12 | 2020-04-08 | Janssen Biotech, Inc. | ANTIBODIES OF FC MODIFIED ANTI-TNFR SUPERFAMILY HAVING IMPROVED AGONIST ACTIVITY AND METHODS OF USE THEREOF |
| CN109863170B (zh) | 2016-08-12 | 2024-08-16 | 詹森生物科技公司 | 具有增强的激动作用和效应子功能的工程化抗体及其他含Fc结构域分子 |
| CA3031783A1 (en) | 2016-08-29 | 2018-03-08 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Anti-gremlin-1 (grem1) antibodies and methods of use thereof for treating pulmonary arterial hypertension |
| SG10201607778XA (en) | 2016-09-16 | 2018-04-27 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Anti-Dengue Virus Antibodies, Polypeptides Containing Variant Fc Regions, And Methods Of Use |
| EP3515932B1 (en) | 2016-09-19 | 2023-11-22 | F. Hoffmann-La Roche AG | Complement factor based affinity chromatography |
| AU2017331739A1 (en) | 2016-09-23 | 2019-03-07 | Csl Limited | Coagulation factor binding proteins and uses thereof |
| RS64550B1 (sr) | 2016-09-23 | 2023-09-29 | Hoffmann La Roche | Upotreba il-13 antagonista za lečenje atopičnog dermatitisa |
| CA3038548A1 (en) | 2016-09-30 | 2018-04-05 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Non-human animals having a hexanucleotide repeat expansion in a c9orf72 locus |
| CA3039074A1 (en) | 2016-10-05 | 2018-04-12 | Acceleron Pharma Inc. | Compositions and method for treating kidney disease |
| CN110139674B (zh) | 2016-10-05 | 2023-05-16 | 豪夫迈·罗氏有限公司 | 制备抗体药物缀合物的方法 |
| CA3038712A1 (en) | 2016-10-06 | 2018-04-12 | Genentech, Inc. | Therapeutic and diagnostic methods for cancer |
| WO2018068201A1 (en) | 2016-10-11 | 2018-04-19 | Nanjing Legend Biotech Co., Ltd. | Single-domain antibodies and variants thereof against ctla-4 |
| AU2017345786B2 (en) | 2016-10-21 | 2024-08-01 | Adimab, Llc | Anti-respiratory syncytial virus antibodies, and methods of their generation and use |
| US11479600B2 (en) | 2016-10-21 | 2022-10-25 | Adimab, Llc | Anti-respiratory syncytial virus antibodies, and methods of their generation and use |
| BR112019008063A2 (pt) | 2016-10-21 | 2019-07-02 | Adimab Llc | anticorpos contra o vírus sincicial anti-respiratório e métodos de sua geração e uso |
| EP3532091A2 (en) | 2016-10-29 | 2019-09-04 | H. Hoffnabb-La Roche Ag | Anti-mic antibidies and methods of use |
| JP6868250B2 (ja) | 2016-10-31 | 2021-05-12 | 国立大学法人鳥取大学 | ヒト抗体産生非ヒト動物及びそれを用いたヒト抗体作製法 |
| CA3039992A1 (en) | 2016-11-02 | 2018-05-11 | Jounce Therapeutics, Inc. | Antibodies to pd-1 and uses thereof |
| MX2019005256A (es) | 2016-11-04 | 2019-08-05 | Regeneron Pharma | Animales no humanos que tienen un locus de la cadena ligera lambda de inmunoglobulina modificado geneticamente. |
| US10711032B2 (en) | 2016-11-08 | 2020-07-14 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Steroids and protein-conjugates thereof |
| CN110099682B (zh) | 2016-11-14 | 2023-03-31 | 杭州多禧生物科技有限公司 | 偶联连接体，含有此连接体的细胞结合分子-药物偶联物及其制备和应用 |
| AU2017363143B2 (en) | 2016-11-17 | 2022-07-28 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Methods of treating obesity with anti-ANGPTL8 antibodies |
| TW201829463A (zh) | 2016-11-18 | 2018-08-16 | 瑞士商赫孚孟拉羅股份公司 | 抗hla-g抗體及其用途 |
| WO2018091720A1 (en) | 2016-11-21 | 2018-05-24 | INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) | Methods and pharmaceutical compositions for the prophylactic treatment of metastases |
| JP7071975B2 (ja) | 2016-11-29 | 2022-05-19 | リジェネロン・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッド | オピオイド嗜癖を避けるための医薬組成物 |
| WO2018102152A1 (en) | 2016-11-30 | 2018-06-07 | Croda International Plc | An aqueous binder system, a coating composition & a coating |
| MX2019006334A (es) | 2016-12-07 | 2019-08-01 | Genentech Inc | Anticuerpos antitau y métodos de uso. |
| CA3045294A1 (en) | 2016-12-07 | 2018-06-14 | Genentech, Inc. | Anti-tau antibodies and methods of use |
| JP6996516B2 (ja) | 2016-12-13 | 2022-01-17 | アステラス製薬株式会社 | 抗ヒトｃｄ７３抗体 |
| KR102293106B1 (ko) | 2016-12-21 | 2021-08-24 | 에프. 호프만-라 로슈 아게 | 항체의 시험관 내 당조작 방법 |
| CA3044920C (en) | 2016-12-21 | 2022-06-28 | Roberto Falkenstein | In vitro glycoengineering of antibodies |
| CA3043158A1 (en) | 2016-12-21 | 2018-06-28 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Re-use of enzymes in in vitro glycoengineering of antibodies |
| US11352417B2 (en) | 2016-12-22 | 2022-06-07 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Method of treating an allergy with allergen-specific monoclonal antibodies |
| US11464216B2 (en) | 2016-12-27 | 2022-10-11 | National University Corporation Gunma University | Production method for conditional knockout animal |
| TW202311284A (zh) | 2017-01-03 | 2023-03-16 | 美商再生元醫藥公司 | 抗金黃色葡萄球菌溶血素ａ毒素之人類抗體 |
| WO2018136823A1 (en) | 2017-01-19 | 2018-07-26 | Open Monoclonal Technology, Inc. | Human antibodies from transgenic rodents with multiple heavy chain immunoglobulin loci |
| KR102619197B1 (ko) | 2017-01-23 | 2024-01-03 | 리제너론 파마슈티칼스 인코포레이티드 | Hsd17b13 변종 및 이것의 용도 |
| US10713373B2 (en) * | 2017-02-09 | 2020-07-14 | Lifesite, Inc. | Computing system with information storage mechanism and method of operation thereof |
| CN118557758A (zh) | 2017-02-10 | 2024-08-30 | 瑞泽恩制药公司 | 用于免疫-pet成像的放射性标记的抗-lag3抗体 |
| JP6995127B2 (ja) | 2017-02-10 | 2022-02-04 | ジェネンテック， インコーポレイテッド | 抗トリプターゼ抗体、その組成物、及びその使用 |
| EP3580235B1 (en) | 2017-02-10 | 2024-05-01 | The United States of America, as represented by the Secretary, Department of Health and Human Services | Neutralizing antibodies to plasmodium falciparum circumsporozoite protein and their use |
| AU2018228873A1 (en) | 2017-03-01 | 2019-08-29 | Genentech, Inc. | Diagnostic and therapeutic methods for cancer |
| PE20191758A1 (es) | 2017-03-22 | 2019-12-12 | Genentech Inc | Composiciones de anticuerpo optimizadas para el tratamiento de trastornos oculares |
| CN110382525B (zh) | 2017-04-03 | 2023-10-20 | 豪夫迈·罗氏有限公司 | 免疫缀合物 |
| JP7247101B2 (ja) | 2017-04-03 | 2023-03-28 | エフ・ホフマン－ラ・ロシュ・アクチェンゲゼルシャフト | Ｓｔｅａｐ－１に結合する抗体 |
| PE20191494A1 (es) | 2017-04-03 | 2019-10-21 | Hoffmann La Roche | Inmunoconjugados de un anticuerpo anti-pd-1 con un il-2 mutante o con il-15 |
| CA3053360A1 (en) | 2017-04-05 | 2018-10-11 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Anti-lag3 antibodies |
| US11603407B2 (en) | 2017-04-06 | 2023-03-14 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Stable antibody formulation |
| US11767520B2 (en) | 2017-04-20 | 2023-09-26 | Atyr Pharma, Inc. | Compositions and methods for treating lung inflammation |
| CR20190480A (es) | 2017-04-21 | 2019-11-20 | Genentech Inc | Uso de antagonistas de klk5 para el tratamiento de una enfermedad |
| EP3615572A1 (en) | 2017-04-27 | 2020-03-04 | Tesaro Inc. | Antibody agents directed against lymphocyte activation gene-3 (lag-3) and uses thereof |
| WO2018213097A1 (en) | 2017-05-15 | 2018-11-22 | University Of Rochester | Broadly neutralizing anti-influenza monoclonal antibody and uses thereof |
| AU2018270784B2 (en) | 2017-05-18 | 2024-05-16 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Cyclodextrin protein drug conjugates |
| KR20240096746A (ko) | 2017-06-01 | 2024-06-26 | 리제너론 파마슈티칼스 인코포레이티드 | Bet v 1에 대한 인간 항체 및 이것의 사용 방법 |
| MA52459A (fr) | 2017-06-05 | 2021-03-10 | Janssen Biotech Inc | Anticorps se liant spécifiquement à pd-1 et leurs méthodes d'utilisation |
| CA3065171A1 (en) | 2017-06-05 | 2018-12-13 | Janssen Biotech, Inc. | Engineered multispecific antibodies and other multimeric proteins with asymmetrical ch2-ch3 region mutations |
| US20190031774A1 (en) | 2017-06-09 | 2019-01-31 | Sanofi Biotechnology | Methods for treating hyperlipidemia in diabetic patients by administering a pcsk9 inhibitor |
| JP7401312B2 (ja) | 2017-06-28 | 2023-12-19 | リジェネロン・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッド | 抗ヒトパピローマウイルス（ｈｐｖ）抗原結合性タンパク質およびその使用方法 |
| CN111065650A (zh) | 2017-07-21 | 2020-04-24 | 特里安尼公司 | 单链VH-L1-Cκ-L2-CH1-抗体 |
| MX2020000604A (es) | 2017-07-21 | 2020-09-10 | Genentech Inc | Métodos terapéuticos y de diagnóstico para el cáncer. |
| JP7304846B2 (ja) | 2017-07-24 | 2023-07-07 | リジェネロン・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッド | 抗ｃｄ８抗体およびその使用 |
| WO2019020480A1 (en) | 2017-07-24 | 2019-01-31 | INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) | ANTIBODIES AND PEPTIDES FOR TREATING HCMV RELATED DISEASES |
| TWI799432B (zh) | 2017-07-27 | 2023-04-21 | 美商再生元醫藥公司 | 抗ctla-4抗體及其用途 |
| CN117700548A (zh) | 2017-08-03 | 2024-03-15 | 艾利妥 | 抗cd33抗体及其使用方法 |
| WO2019051164A1 (en) | 2017-09-07 | 2019-03-14 | Augusta University Research Institute, Inc. | ANTIBODIES AGAINST PROTEIN 1 OF PROGRAMMED CELL DEATH |
| BR112020004977A2 (pt) | 2017-09-29 | 2020-10-06 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | moléculas de ligação de antígenos biespecíficas que ligam antígeno alvo de staphyocococcus e componente de complemento e usos dos mesmos |
| JP6496095B1 (ja) | 2017-09-29 | 2019-04-03 | 中外製薬株式会社 | 血液凝固第ｖｉｉｉ因子（ｆｖｉｉｉ）補因子機能代替活性を有する多重特異性抗原結合分子および当該分子を有効成分として含有する薬学的製剤 |
| DK3476942T3 (da) | 2017-10-27 | 2022-04-19 | Trianni Inc | Lange kimlinje-dh-gener og antistoffer med lang hcdr3 |
| AU2018359219A1 (en) | 2017-10-30 | 2020-04-23 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Methods for treating or preventing asthma by administering an IL-4R antagonist |
| WO2019086394A1 (en) | 2017-11-01 | 2019-05-09 | F. Hoffmann-La Roche Ag | The compbody - a multivalent target binder |
| AU2018358904A1 (en) | 2017-11-01 | 2020-04-16 | F. Hoffmann-La Roche Ag | TriFab-contorsbody |
| WO2019090263A1 (en) | 2017-11-06 | 2019-05-09 | Genentech, Inc. | Diagnostic and therapeutic methods for cancer |
| SG11202002665UA (en) | 2017-11-30 | 2020-04-29 | Regeneron Pharma | Anti-trkb monoclonal antibodies and methods of use |
| JP7430636B2 (ja) * | 2017-12-05 | 2024-02-13 | リジェネロン・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッド | 操作された免疫グロブリンラムダ軽鎖を有する非ヒト動物及びその使用 |
| EP3724226A1 (en) | 2017-12-13 | 2020-10-21 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Anti-c5 antibody combinations and uses thereof |
| WO2019126194A1 (en) | 2017-12-18 | 2019-06-27 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Angptl8 assay and uses thereof |
| MX2020006119A (es) | 2017-12-21 | 2020-08-24 | Hoffmann La Roche | Anticuerpos de union a hla-a2/wt1. |
| KR20200103706A (ko) | 2017-12-22 | 2020-09-02 | 조운스 테라퓨틱스, 인크. | Lilrb2에 대한 항체 |
| WO2019126472A1 (en) | 2017-12-22 | 2019-06-27 | Genentech, Inc. | Use of pilra binding agents for treatment of a disease |
| TW201930350A (zh) | 2017-12-28 | 2019-08-01 | 大陸商南京傳奇生物科技有限公司 | 針對ｐｄ－ｌ１之抗體及其變異體 |
| CA3082280A1 (en) | 2017-12-28 | 2019-07-04 | Nanjing Legend Biotech Co., Ltd. | Single-domain antibodies and variants thereof against tigit |
| CN111886246A (zh) | 2017-12-29 | 2020-11-03 | 艾莱克特有限责任公司 | 抗tmem106b抗体及其使用方法 |
| SG11202006510XA (en) | 2018-01-08 | 2020-08-28 | Regeneron Pharma | Steroids and antibody-conjugates thereof |
| EP3740507A4 (en) | 2018-01-15 | 2022-08-24 | Nanjing Legend Biotech Co., Ltd. | SINGLE DOMAIN ANTIBODIES AND VARIANTS THEREOF AGAINST PD-1 |
| WO2019143636A1 (en) | 2018-01-16 | 2019-07-25 | Lakepharma, Inc. | Bispecific antibody that binds cd3 and another target |
| US20190225689A1 (en) | 2018-01-22 | 2019-07-25 | Janssen Biotech, Inc. | Methods of treating cancers with antagonistic anti-pd-1 antibodies |
| CA3088194A1 (en) | 2018-01-26 | 2019-08-01 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Human antibodies to influenza hemagglutinin |
| PL3638698T3 (pl) | 2018-01-26 | 2021-09-06 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Przeciwciała i fragmenty wiążące antygen anty-TMPRSS2 |
| WO2019152715A1 (en) | 2018-01-31 | 2019-08-08 | Alector Llc | Anti-ms4a4a antibodies and methods of use thereof |
| AR115360A1 (es) | 2018-02-08 | 2021-01-13 | Genentech Inc | Moléculas de unión al antígeno y métodos de uso |
| TWI829667B (zh) | 2018-02-09 | 2024-01-21 | 瑞士商赫孚孟拉羅股份公司 | 結合gprc5d之抗體 |
| JP7418337B2 (ja) | 2018-02-09 | 2024-01-19 | ジェネンテック， インコーポレイテッド | マスト細胞媒介性炎症性疾患の治療法及び診断法 |
| WO2019165434A1 (en) | 2018-02-26 | 2019-08-29 | Genentech, Inc. | Dosing for treatment with anti-tigit and anti-pd-l1 antagonist antibodies |
| JP7426940B2 (ja) | 2018-03-06 | 2024-02-02 | サノフィ・バイオテクノロジー | 心血管リスクを低減するためのｐｃｓｋ９阻害剤の使用 |
| US20200040103A1 (en) | 2018-03-14 | 2020-02-06 | Genentech, Inc. | Anti-klk5 antibodies and methods of use |
| MX2020009296A (es) | 2018-03-15 | 2020-11-13 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Anticuerpos anti-virus del dengue que tienen reactividad cruzada con el virus zika y metodos de uso. |
| EP3940382B1 (en) | 2018-03-24 | 2024-07-03 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Methods for identifying hla-associated tumor peptides |
| WO2019190922A1 (en) | 2018-03-24 | 2019-10-03 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Genetically modified non-human animals for generating therapeutic antibodies against peptide-mhc complexes, methods of making and uses thereof |
| JP7328243B2 (ja) | 2018-03-26 | 2023-08-16 | リジェネロン・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッド | 治療薬を試験するためのヒト化げっ歯類 |
| KR20200135435A (ko) | 2018-03-26 | 2020-12-02 | 리제너론 파아마슈티컬스, 인크. | 항-PfRH5 항체 및 이의 항원 결합 단편 |
| JP2021519073A (ja) | 2018-03-29 | 2021-08-10 | ジェネンテック， インコーポレイテッド | 哺乳動物細胞におけるラクトジェニック活性の制御 |
| TW202003567A (zh) | 2018-03-30 | 2020-01-16 | 大陸商南京傳奇生物科技有限公司 | 針對lag-3之單一結構域抗體及其用途 |
| WO2019192432A1 (zh) | 2018-04-02 | 2019-10-10 | 上海博威生物医药有限公司 | 结合淋巴细胞活化基因-3(lag-3)的抗体及其用途 |
| TW202011029A (zh) | 2018-04-04 | 2020-03-16 | 美商建南德克公司 | 偵測及定量fgf21之方法 |
| AR115052A1 (es) | 2018-04-18 | 2020-11-25 | Hoffmann La Roche | Anticuerpos multiespecíficos y utilización de los mismos |
| AR114789A1 (es) | 2018-04-18 | 2020-10-14 | Hoffmann La Roche | Anticuerpos anti-hla-g y uso de los mismos |
| CA3096703A1 (en) | 2018-05-03 | 2019-11-07 | University Of Rochester | Anti-influenza neuraminidase monoclonal antibodies and uses thereof |
| KR20210008008A (ko) | 2018-05-09 | 2021-01-20 | 리제너론 파마슈티칼스 인코포레이티드 | 항-msr1 항체 및 이의 사용 방법 |
| JP2021524255A (ja) | 2018-05-24 | 2021-09-13 | ヤンセン バイオテツク，インコーポレーテツド | 単一特異性及び二重特異性抗体抗−ｔｍｅｆｆ２抗体並びにそれらの使用 |
| CR20200568A (es) | 2018-05-24 | 2021-02-26 | Janssen Biotech Inc | Antcuerpos anti-cd3 y usos de estos |
| JP7361727B2 (ja) | 2018-05-24 | 2023-10-16 | ヤンセン バイオテツク，インコーポレーテツド | Ｐｓｍａ結合剤及びその使用 |
| CR20200566A (es) | 2018-05-25 | 2021-02-19 | Alector Llc | Anticuerpos anti-sirpa y metodos de utilización de los mismos |
| EP3802604A1 (en) | 2018-05-31 | 2021-04-14 | Glyconex Inc. | Therapeutic antibodies binding to biantennary lewis b and lewis y antigens |
| CN117442717A (zh) | 2018-06-01 | 2024-01-26 | 大有华夏生物医药集团有限公司 | 治疗疾病或病况的组合物及其用途 |
| SG11202011778QA (en) | 2018-06-01 | 2020-12-30 | Regeneron Pharma | Methods and systems for sparse vector-based matrix transformations |
| IL305557A (en) | 2018-06-14 | 2023-10-01 | Regeneron Pharma | Non-human animals with transgenic DH–DH rearrangement capacity, and their uses |
| EA202190056A1 (ru) | 2018-06-19 | 2021-05-28 | Ридженерон Фармасьютикалз, Инк. | АНТИТЕЛА ПРОТИВ ФАКТОРА XII/XIIa И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ |
| TWI819011B (zh) | 2018-06-23 | 2023-10-21 | 美商建南德克公司 | 以pd-1 軸結合拮抗劑、鉑劑及拓撲異構酶ii 抑制劑治療肺癌之方法 |
| AU2019293589A1 (en) | 2018-06-29 | 2021-01-21 | Alector Llc | Anti-SIRP-beta1 antibodies and methods of use thereof |
| TW202428612A (zh) | 2018-07-10 | 2024-07-16 | 美商雷傑納榮製藥公司 | 修飾結合分子以最小化已存在的交互作用 |
| SI3618928T1 (sl) | 2018-07-13 | 2023-04-28 | Alector Llc | Protitelesa proti sortilinu in postopki za uporabo le-teh |
| JP7386224B2 (ja) | 2018-07-16 | 2023-11-24 | リジェネロン・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッド | 抗ｉｌ３６ｒ抗体 |
| BR112021000772A2 (pt) | 2018-07-17 | 2021-04-13 | Humabs Biomed Sa | Anticorpos contra espécies de campilobacter |
| KR20210034622A (ko) | 2018-07-18 | 2021-03-30 | 제넨테크, 인크. | Pd-1 축 결합 길항제, 항 대사제, 및 백금 제제를 이용한 폐암 치료 방법 |
| WO2020023644A2 (en) | 2018-07-24 | 2020-01-30 | Medimmune, Llc | Antibody directed against s. aureus clumping factor a (clfa) |
| WO2020033872A1 (en) | 2018-08-10 | 2020-02-13 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | A pharmaceutical composition for safe and effective treatment of knee and/or hip pain |
| BR112021002037A2 (pt) | 2018-08-10 | 2021-05-04 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | molécula de ligação de antígeno anti-cd137 e uso da mesma |
| TW202021618A (zh) | 2018-08-17 | 2020-06-16 | 美商２３與我有限公司 | 抗ｉｌ１ｒａｐ抗體及其使用方法 |
| MX2021002422A (es) | 2018-08-29 | 2021-07-15 | Regeneron Pharma | Métodos y composiciones para el tratamiento de sujetos que padecen artritis reumatoide. |
| SG11202101552SA (en) | 2018-08-31 | 2021-03-30 | Alector Llc | Anti-cd33 antibodies and methods of use thereof |
| GB201814281D0 (en) | 2018-09-03 | 2018-10-17 | Femtogenix Ltd | Cytotoxic agents |
| US12097219B2 (en) | 2018-09-10 | 2024-09-24 | Legend Biotech Ireland Limited | Single-domain antibodies against CLL1 and constructs thereof |
| CA3112612C (en) | 2018-09-13 | 2024-02-27 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Complement factor h gene knockout rat as a model of c3 glomerulopathy |
| JP2022501332A (ja) | 2018-09-19 | 2022-01-06 | ジェネンテック， インコーポレイテッド | 膀胱がんの治療方法および診断方法 |
| AU2019342133A1 (en) | 2018-09-21 | 2021-04-22 | Genentech, Inc. | Diagnostic methods for triple-negative breast cancer |
| US20200109200A1 (en) | 2018-10-09 | 2020-04-09 | Genentech, Inc. | Methods and systems for determining synapse formation |
| TW202035443A (zh) | 2018-10-09 | 2020-10-01 | 美商麥迪紐有限責任公司 | 抗金黃色葡萄球菌抗體的組合 |
| CN113196061A (zh) | 2018-10-18 | 2021-07-30 | 豪夫迈·罗氏有限公司 | 肉瘤样肾癌的诊断和治疗方法 |
| SG11202101037QA (en) | 2018-10-23 | 2021-02-25 | Regeneron Pharma | Anti-npr1 antibodies and uses thereof |
| WO2020086858A1 (en) | 2018-10-24 | 2020-04-30 | Genentech, Inc. | Conjugated chemical inducers of degradation and methods of use |
| SG11202104463YA (en) | 2018-10-31 | 2021-05-28 | Astellas Pharma Inc | Anti-human fn14 antibody |
| US20220025058A1 (en) | 2018-11-06 | 2022-01-27 | INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) | Methods and pharmaceutical compositions for the treatment of acute myeloid leukemia by eradicating leukemic stem cells |
| US12024556B2 (en) | 2018-11-21 | 2024-07-02 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Anti-Staphylococcus antibodies and uses thereof |
| AU2018451747A1 (en) | 2018-12-06 | 2021-06-17 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Combination therapy of diffuse large B-cell lymphoma comprising an anti-CD79b immunoconjugates, an alkylating agent and an anti-CD20 antibody |
| WO2020123275A1 (en) | 2018-12-10 | 2020-06-18 | Genentech, Inc. | Photocrosslinking peptides for site specific conjugation to fc-containing proteins |
| EP3894543A1 (en) | 2018-12-14 | 2021-10-20 | INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) | Isolated mhc-derived human peptides and uses thereof for stimulating and activating the suppressive function of cd8cd45rc low tregs |
| GB201820547D0 (en) | 2018-12-17 | 2019-01-30 | Oxford Univ Innovation | Modified antibodies |
| GB201820554D0 (en) | 2018-12-17 | 2019-01-30 | Univ Oxford Innovation Ltd | BTLA antibodies |
| JP2022514290A (ja) | 2018-12-20 | 2022-02-10 | ジェネンテック， インコーポレイテッド | 改変抗体ｆｃおよび使用方法 |
| AR117327A1 (es) | 2018-12-20 | 2021-07-28 | 23Andme Inc | Anticuerpos anti-cd96 y métodos de uso de estos |
| US20220089694A1 (en) | 2018-12-20 | 2022-03-24 | The U.S.A., As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services | Ebola virus glycoprotein-specific monoclonal antibodies and uses thereof |
| CA3120799A1 (en) | 2018-12-20 | 2020-06-25 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Nuclease-mediated repeat expansion |
| CA3120474A1 (en) | 2018-12-21 | 2020-06-25 | 23Andme, Inc. | Anti-il-36 antibodies and methods of use thereof |
| JOP20210186A1 (ar) | 2019-01-10 | 2023-01-30 | Janssen Biotech Inc | مستضدات البروستاتا المستحدثة واستخداماتها |
| KR20210116525A (ko) | 2019-01-14 | 2021-09-27 | 제넨테크, 인크. | Pd-1 축 결합 길항제 및 rna 백신으로 암을 치료하는 방법 |
| EP3914291A2 (en) | 2019-01-22 | 2021-12-01 | F. Hoffmann-La Roche AG | Immunoglobulin a antibodies and methods of production and use |
| CN113329770A (zh) | 2019-01-24 | 2021-08-31 | 中外制药株式会社 | 新型癌抗原及所述抗原的抗体 |
| GB201901197D0 (en) | 2019-01-29 | 2019-03-20 | Femtogenix Ltd | G-A Crosslinking cytotoxic agents |
| SG11202107272SA (en) | 2019-02-01 | 2021-07-29 | Regeneron Pharma | Anti-il2 receptor gamma antigen-binding proteins |
| AU2020223205A1 (en) | 2019-02-12 | 2021-08-05 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Compositions and methods for using bispecific antibodies to bind complement and a target antigen |
| US11478553B2 (en) | 2019-02-15 | 2022-10-25 | Wuxi Biologies Ireland Limited | Process for preparing antibody-drug conjugates with improved homogeneity |
| US12109273B2 (en) | 2019-02-15 | 2024-10-08 | Wuxi Xdc Singapore Private Limited | Process for preparing antibody-drug conjugates with improved homogeneity |
| WO2020169472A2 (en) | 2019-02-18 | 2020-08-27 | INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) | Methods of inducing phenotypic changes in macrophages |
| CA3125380A1 (en) | 2019-02-18 | 2020-08-27 | Biocytogen Pharmaceuticals (Beijing) Co., Ltd. | Genetically modified non-human animals with humanized immunoglobulin locus |
| BR112021016173A2 (pt) | 2019-02-22 | 2021-11-03 | Regeneron Pharma | Roedor geneticamente modificado, métodos de produção de um roedor geneticamente modificado e de produção de um anticorpo anti-nav1.7, célula ou tecido isolado de roedor, linhagem celular imortalizada, embrião de roedor, construto de ácido nucleico de direcionamento, e, hibridoma |
| CA3130695A1 (en) | 2019-02-27 | 2020-09-03 | Genentech, Inc. | Dosing for treatment with anti-tigit and anti-cd20 or anti-cd38 antibodies |
| TW202045547A (zh) | 2019-03-01 | 2020-12-16 | 美商艾洛基因醫療公司 | 靶向ｄｌｌ３的嵌合抗原受體和結合劑 |
| CN113474653A (zh) | 2019-03-08 | 2021-10-01 | 豪夫迈·罗氏有限公司 | 用于检测和定量细胞外囊泡上的膜相关蛋白的方法 |
| SG11202108454RA (en) | 2019-04-04 | 2021-09-29 | Regeneron Pharma | Non-human animals comprising a humanized coagulation factor 12 locus |
| CA3133359C (en) | 2019-04-04 | 2023-04-11 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Methods for scarless introduction of targeted modifications into targeting vectors |
| KR20210150509A (ko) | 2019-04-10 | 2021-12-10 | 리제너론 파마슈티칼스 인코포레이티드 | Ret에 결합하는 인간 항체 및 그것의 사용 방법 |
| CA3136602A1 (en) | 2019-04-15 | 2020-10-22 | Qwixel Therapeutics Llc | Fusion protein composition(s) comprising targeted masked type i interferons (ifna and ifnb) and an antibody against tumor antigen, for use in the treatment of cancer |
| JP2022529985A (ja) | 2019-04-19 | 2022-06-27 | ヤンセン バイオテツク，インコーポレーテツド | 抗ｐｓｍａ／ｃｄ３抗体で前立腺癌を治療する方法 |
| KR20220002967A (ko) | 2019-04-19 | 2022-01-07 | 제넨테크, 인크. | 항 mertk 항체 및 이의 사용 방법 |
| AU2020261411A1 (en) | 2019-04-26 | 2021-10-14 | Allogene Therapeutics, Inc. | Methods of manufacturing allogeneic car T cells |
| TW202106334A (zh) | 2019-05-01 | 2021-02-16 | 法商賽諾菲生物技術公司 | 藉由投予ｉｌ－３３拮抗劑治療或預防哮喘之方法 |
| AU2020270376A1 (en) | 2019-05-03 | 2021-10-07 | Genentech, Inc. | Methods of treating cancer with an anti-PD-L1 antibody |
| US20220227853A1 (en) | 2019-05-03 | 2022-07-21 | The United States Of America,As Represented By The Secretary,Department Of Health And Human Services | Neutralizing antibodies to plasmodium falciparum circumsporozoite protein and their use |
| AU2020275415A1 (en) | 2019-05-14 | 2021-11-25 | Genentech, Inc. | Methods of using anti-CD79B immunoconjugates to treat follicular lymphoma |
| US20230085439A1 (en) | 2019-05-21 | 2023-03-16 | University Of Georgia Research Foundation, Inc. | Antibodies that bind human metapneumovirus fusion protein and their use |
| JP2022534867A (ja) | 2019-06-04 | 2022-08-04 | リジェネロン・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッド | ベータスリップ変異を有するヒト化ｔｔｒ遺伝子座を含む非ヒト動物と使用方法 |
| MA56117A (fr) | 2019-06-05 | 2022-04-13 | Regeneron Pharma | Animaux non humains ayant un répertoire de chaînes légères lambda limité exprimé à partir du locus kappa et leurs utilisations |
| CN113939595A (zh) | 2019-06-07 | 2022-01-14 | 瑞泽恩制药公司 | 包括人源化白蛋白基因座的非人动物 |
| KR20220019755A (ko) | 2019-06-11 | 2022-02-17 | 리제너론 파마슈티칼스 인코포레이티드 | PcrV에 결합하는 항-PcrV 항체, 항-PcrV 항체를 포함하는 조성물, 및 이의 사용 방법 |
| CN114423450A (zh) | 2019-06-11 | 2022-04-29 | 艾利妥有限责任公司 | 用于疗法中的抗分拣蛋白抗体 |
| CA3141266A1 (en) | 2019-06-12 | 2020-12-17 | Sarah J. Hatsell | Human antibodies to bone morphogenetic protein 6 |
| JP2022537269A (ja) | 2019-06-21 | 2022-08-25 | リジェネロン・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッド | Ｍｕｃ１６およびｃｄ３に結合する二重特異性抗原結合分子の４－１ｂｂ共刺激と組み合わせての使用 |
| WO2020257681A1 (en) | 2019-06-21 | 2020-12-24 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Use of bispecific antigen-binding molecules that bind psma and cd3 in combination with 4-1bb co-stimulation |
| US20230025327A1 (en) | 2019-06-29 | 2023-01-26 | Hangzhou Dac Biotech Co., Ltd. | Conjugates of tubulysin derivatives and cell binding molecules and methods of making |
| US20220369609A1 (en) | 2019-07-01 | 2022-11-24 | Trianni, Inc. | Transgenic mammals and methods of use thereof |
| WO2021003149A1 (en) | 2019-07-01 | 2021-01-07 | Trianni, Inc. | Transgenic mammals and methods of use |
| WO2021001289A1 (en) | 2019-07-02 | 2021-01-07 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Immunoconjugates comprising a mutant interleukin-2 and an anti-cd8 antibody |
| AR119393A1 (es) | 2019-07-15 | 2021-12-15 | Hoffmann La Roche | Anticuerpos que se unen a nkg2d |
| BR112022000740A2 (pt) | 2019-07-16 | 2022-07-05 | Sanofi Biotechnology | Métodos para tratamento ou prevenção de asma por administração de um antagonista de il-4r |
| CR20220025A (es) | 2019-07-26 | 2022-05-04 | Janssen Biotech Inc | Proteínas que comprenden dominios de unión al antígeno de la peptidasa 2 relacionada con la calicreína y sus usos |
| MX2022001156A (es) | 2019-07-31 | 2022-02-22 | Hoffmann La Roche | Anticuerpos que se fijan a gprc5d. |
| EP4004045A1 (en) | 2019-07-31 | 2022-06-01 | F. Hoffmann-La Roche AG | Antibodies binding to gprc5d |
| CN114341181A (zh) | 2019-07-31 | 2022-04-12 | 艾莱克特有限责任公司 | 抗ms4a4a抗体及其使用方法 |
| KR20220044563A (ko) | 2019-08-05 | 2022-04-08 | 리제너론 파아마슈티컬스, 인크. | Il-4r 길항제를 투여함에 의해 아토피 피부염을 치료하기 위한 방법 |
| US11504426B2 (en) | 2019-08-05 | 2022-11-22 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Methods for treating allergy and enhancing allergen-specific immunotherapy by administering an IL-4R antagonist |
| CA3149494A1 (en) | 2019-08-12 | 2021-02-18 | Purinomia Biotech, Inc. | Methods and compositions for promoting and potentiating t-cell mediated immune responses through adcc targeting of cd39 expressing cells |
| MX2022001799A (es) | 2019-08-15 | 2022-03-11 | Janssen Biotech Inc | Materiales y metodos para fragmentos variables de cadena unica mejorados. |
| DK3785536T3 (da) | 2019-08-28 | 2022-03-28 | Trianni Inc | Adam6-knockin-mus |
| TW202118512A (zh) | 2019-09-12 | 2021-05-16 | 美商建南德克公司 | 治療狼瘡性腎炎之組成物及方法 |
| AU2020349509A1 (en) | 2019-09-18 | 2022-03-31 | Genentech, Inc. | Anti-KLK7 antibodies, anti-KLK5 antibodies, multispecific anti-KLK5/KLK7 antibodies, and methods of use |
| MX2022003266A (es) | 2019-09-20 | 2022-04-11 | Genentech Inc | Dosis para anticuerpos anti-triptasa. |
| EP4034160A1 (en) | 2019-09-27 | 2022-08-03 | Janssen Biotech, Inc. | Anti-ceacam antibodies and uses thereof |
| WO2021057978A1 (zh) | 2019-09-27 | 2021-04-01 | 南京金斯瑞生物科技有限公司 | 抗vhh域抗体及其用途 |
| MX2022003610A (es) | 2019-09-27 | 2022-04-20 | Genentech Inc | Administracion de dosis para tratamiento con anticuerpos antagonistas anti-tigit y anti-pd-l1. |
| WO2021058729A1 (en) | 2019-09-27 | 2021-04-01 | INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) | Anti-müllerian inhibiting substance type i receptor antibodies and uses thereof |
| US20220324962A1 (en) | 2019-09-27 | 2022-10-13 | INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) | Anti-müllerian inhibiting substance antibodies and uses thereof |
| AU2020357550A1 (en) | 2019-10-04 | 2022-05-05 | Tae Life Sciences, Llc | Antibody compositions comprising Fc mutations and site-specific conjugation properties |
| MX2022004443A (es) | 2019-10-18 | 2022-05-02 | Genentech Inc | Metodos para usar inmunoconjugados anti-cd79b para tratar linfoma difuso de linfocitos b grandes. |
| BR112022007923A2 (pt) | 2019-10-28 | 2022-07-26 | Regeneron Pharma | Anticorpo recombinante isolado ou fragmento de ligação ao antígeno deste, composição farmacêutica, molécula de polinucleotídeo, vetor, célula, e, método para prevenir, tratar ou melhorar pelo menos um sintoma da infecção por influenza |
| WO2021092171A1 (en) | 2019-11-06 | 2021-05-14 | Genentech, Inc. | Diagnostic and therapeutic methods for treatment of hematologic cancers |
| EP4057980A1 (en) | 2019-11-15 | 2022-09-21 | F. Hoffmann-La Roche AG | Prevention of visible particle formation in aqueous protein solutions |
| US12018289B2 (en) | 2019-11-18 | 2024-06-25 | Janssen Biotech, Inc. | Vaccines based on mutant CALR and JAK2 and their uses |
| WO2021099600A1 (en) | 2019-11-22 | 2021-05-27 | INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) | Inhibitors of adrenomedullin for the treatment of acute myeloid leukemia by eradicating leukemic stem cells |
| WO2021108363A1 (en) | 2019-11-25 | 2021-06-03 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Crispr/cas-mediated upregulation of humanized ttr allele |
| IL293282A (en) | 2019-11-25 | 2022-07-01 | Mabloc Llc | Yellow fever antiviral antibodies and methods of making and using them |
| JP2023504172A (ja) | 2019-12-02 | 2023-02-01 | リジェネロン・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッド | ペプチド－ｍｈｃ ｉｉタンパク質構築物およびそれらの使用 |
| AU2020398168A1 (en) | 2019-12-06 | 2022-07-28 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Methods for treating COPD by administering an IL-33 antagonist |
| CA3161037A1 (en) | 2019-12-09 | 2021-06-17 | Sanofi Biotechnology | Methods for treating digitally-identified il-4/il-13 related disorders |
| EP3992974A1 (en) | 2020-11-02 | 2022-05-04 | Sanofi Biotechnology | Methods for treating digitally-identified il-4/il-13 related disorders |
| CA3161347A1 (en) | 2019-12-10 | 2021-06-17 | Shazia ALI | Use of a pcsk9 inhibitor to treat homozygous familial hypercholesterolemia |
| KR20220127252A (ko) | 2019-12-13 | 2022-09-19 | 알렉터 엘엘씨 | 항-mertk 항체 및 이의 사용 방법 |
| TW202128767A (zh) | 2019-12-13 | 2021-08-01 | 美商建南德克公司 | 抗ly6g6d抗體及其使用方法 |
| PE20221282A1 (es) | 2019-12-18 | 2022-09-05 | Hoffmann La Roche | Anticuerpos que se unen a hla-a2/mage-a4 |
| WO2021119761A1 (en) | 2019-12-20 | 2021-06-24 | Hudson Institute of Medical Research | Cxcl10 binding proteins and uses thereof |
| MX2022007958A (es) | 2019-12-23 | 2022-10-07 | Sanofi Biotechnology | Metodos para tratar o prevenir el asma alergica mediante la administracion de un antagonista de il-33 y/o un antagonista de il-4r. |
| IL294226A (en) | 2019-12-27 | 2022-08-01 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Anti-ctla-4 antibodies and their use |
| JP2023509759A (ja) | 2020-01-08 | 2023-03-09 | リジェネロン・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッド | 質量スペクトル分析においてシグナルを増強するためのアミノ酸の使用 |
| CN110818795B (zh) | 2020-01-10 | 2020-04-24 | 上海复宏汉霖生物技术股份有限公司 | 抗tigit抗体和使用方法 |
| CN115348874A (zh) | 2020-01-24 | 2022-11-15 | 里珍纳龙药品有限公司 | 蛋白质-抗病毒化合物偶联物 |
| WO2021194481A1 (en) | 2020-03-24 | 2021-09-30 | Genentech, Inc. | Dosing for treatment with anti-tigit and anti-pd-l1 antagonist antibodies |
| KR20220132597A (ko) | 2020-01-27 | 2022-09-30 | 리제너론 파아마슈티컬스, 인크. | 단백질의 번역 후 변형에 대한 탠덤 질량 태그 다중화 정량화 |
| WO2022050954A1 (en) | 2020-09-04 | 2022-03-10 | Genentech, Inc. | Dosing for treatment with anti-tigit and anti-pd-l1 antagonist antibodies |
| EP4096396A1 (en) | 2020-01-28 | 2022-12-07 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Non-human animals comprising a humanized pnpla3 locus and methods of use |
| US11598756B2 (en) | 2020-01-30 | 2023-03-07 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Platform for native liquid chromatography-mass spectrometry |
| CA3164559A1 (en) | 2020-01-31 | 2021-08-05 | Lars Mueller | Methods of inducing neoepitope-specific t cells with a pd-1 axis binding antagonist and an rna vaccine |
| CA3166241A1 (en) | 2020-01-31 | 2021-08-05 | Jikang WU | High confidence compound identification by liquid chromatography-mass spectrometry |
| BR112022015374A2 (pt) | 2020-02-03 | 2022-10-11 | Vir Biotechnology Inc | Anticorpos contra sars-cov-2 e métodos de uso dos mesmos |
| EP3862023A1 (en) | 2020-02-05 | 2021-08-11 | Hangzhou DAC Biotech Co, Ltd | Conjugates of cell-binding molecules with cytotoxic agents |
| WO2021158883A1 (en) | 2020-02-07 | 2021-08-12 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Non-human animals comprising a humanized klkb1 locus and methods of use |
| CN115427457A (zh) | 2020-02-10 | 2022-12-02 | 瑞泽恩制药公司 | 抗tmprss2抗体和抗原结合片段 |
| KR20220140786A (ko) | 2020-02-10 | 2022-10-18 | 상하이 에스쿠겐 바이오테크놀로지 컴퍼니 리미티드 | 클라우딘18.2 항체 및 그것의 사용 |
| KR20220139357A (ko) | 2020-02-10 | 2022-10-14 | 상하이 에스쿠겐 바이오테크놀로지 컴퍼니 리미티드 | Cldn18.2 항체 및 그의 사용 |
| MX2022009769A (es) | 2020-02-11 | 2022-11-09 | Regeneron Pharma | Anticuerpos anti-acvr1 y usos de los mismos. |
| TW202140012A (zh) | 2020-02-12 | 2021-11-01 | 比利時商健生藥品公司 | 用於治療尿路上皮癌的ｆｇｆｒ酪胺酸激酶抑制劑和抗ｐｄ１藥劑 |
| TW202144395A (zh) | 2020-02-12 | 2021-12-01 | 日商中外製藥股份有限公司 | 用於癌症之治療的抗cd137抗原結合分子 |
| CN117964757A (zh) | 2020-02-14 | 2024-05-03 | 吉利德科学公司 | 与ccr8结合的抗体和融合蛋白及其用途 |
| TW202144389A (zh) | 2020-02-14 | 2021-12-01 | 美商健生生物科技公司 | 在多發性骨髓瘤中表現之新抗原及其用途 |
| TW202144388A (zh) | 2020-02-14 | 2021-12-01 | 美商健生生物科技公司 | 在卵巢癌中表現之新抗原及其用途 |
| AU2021227687B2 (en) | 2020-02-26 | 2023-02-23 | Vir Biotechnology, Inc. | Antibodies against SARS-CoV-2 and methods of using the same |
| KR20220145859A (ko) | 2020-02-28 | 2022-10-31 | 상하이 헨리우스 바이오테크, 인크. | 항cd137 작제물, 다중 특이적 항체 및 그 용도 |
| AU2021225920A1 (en) | 2020-02-28 | 2022-09-15 | Shanghai Henlius Biotech, Inc. | Anti-CD137 construct and use thereof |
| IL296256A (en) | 2020-03-13 | 2022-11-01 | Genentech Inc | Antibodies against interleukin-33 and uses thereof |
| IL302351A (en) | 2020-03-13 | 2023-06-01 | Janssen Biotech Inc | Materials and methods for binding SIGLEC-3/CD33 |
| KR20220156575A (ko) | 2020-03-19 | 2022-11-25 | 제넨테크, 인크. | 동종형 선택적 항-tgf-베타 항체 및 이용 방법 |
| US20230102342A1 (en) | 2020-03-23 | 2023-03-30 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Non-human animals comprising a humanized ttr locus comprising a v30m mutation and methods of use |
| JP2023519213A (ja) | 2020-03-24 | 2023-05-10 | ジェネンテック， インコーポレイテッド | Ｔｉｅ２結合剤および使用方法 |
| TW202202620A (zh) | 2020-03-26 | 2022-01-16 | 美商建南德克公司 | 經修飾之哺乳動物細胞 |
| CN115427450A (zh) | 2020-03-27 | 2022-12-02 | 瑞泽恩制药公司 | 通过施用il-4r拮抗剂治疗特应性皮炎的方法 |
| CN116075525A (zh) | 2020-03-31 | 2023-05-05 | 艾莱克特有限责任公司 | 抗mertk抗体及其使用方法 |
| US20230107644A1 (en) | 2020-04-01 | 2023-04-06 | University Of Rochester | Monoclonal antibodies against the hemagglutinin (ha) and neuraminidase (na) of influenza h3n2 viruses |
| AU2020340881A1 (en) | 2020-04-02 | 2021-10-21 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Anti-SARS-CoV-2-spike glycoprotein antibodies and antigen-binding fragments |
| EP4127724A1 (en) | 2020-04-03 | 2023-02-08 | Genentech, Inc. | Therapeutic and diagnostic methods for cancer |
| WO2021203053A1 (en) | 2020-04-03 | 2021-10-07 | Vir Biotechnology, Inc. | Immunotherapy targeting a conserved region in sars coronaviruses |
| EP4135846A1 (en) | 2020-04-14 | 2023-02-22 | VIR Biotechnology, Inc. | Antibodies against sars-cov-2 and methods of using the same |
| US11885779B2 (en) | 2020-04-14 | 2024-01-30 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Ultraviolet monitoring of chromatography performance by orthogonal partial least squares |
| CR20220512A (es) | 2020-04-15 | 2022-11-07 | Hoffmann La Roche | Inmunoconjugados |
| WO2021211984A1 (en) | 2020-04-16 | 2021-10-21 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Diels-alder conjugation methods |
| CR20220531A (es) | 2020-04-24 | 2022-11-28 | Hoffmann La Roche | Modulacion de enzimas y vías con compuestos de sulfhidrilo y sus derivados |
| CN115916822A (zh) | 2020-04-24 | 2023-04-04 | 基因泰克公司 | 使用抗CD79b免疫缀合物的方法 |
| MX2021015024A (es) | 2020-04-28 | 2022-01-18 | Univ Rockefeller | Anticuerpos anti-sars-cov-2 ampliamente neutralizantes y métodos de uso de los mismos. |
| WO2021222167A1 (en) | 2020-04-28 | 2021-11-04 | Genentech, Inc. | Methods and compositions for non-small cell lung cancer immunotherapy |
| KR20230087414A (ko) | 2020-05-03 | 2023-06-16 | 레베나 (쑤저우) 바이오파마 컴퍼니 리미티드 | 항-Trop-2 항체를 포함하는 항체-약물 접합체 (ADCS), 상기 ADCS를 포함하는 조성물, 및 이의 제조 및 사용 방법 |
| CA3177169A1 (en) | 2020-05-08 | 2021-11-11 | Vir Biotechnology, Inc. | Antibodies against sars-cov-2 |
| CN115551553A (zh) | 2020-05-12 | 2022-12-30 | Inserm(法国国家健康医学研究院) | 治疗皮肤t细胞淋巴瘤和tfh起源淋巴瘤的新方法 |
| IL298099A (en) | 2020-05-12 | 2023-01-01 | Regeneron Pharma | Antibodies against glp1r agonist and methods of using them |
| CN115605184A (zh) | 2020-05-15 | 2023-01-13 | 豪夫迈·罗氏有限公司（Ch） | 防止胃肠外蛋白质溶液中的可见颗粒形成 |
| EP4153130A1 (en) | 2020-05-19 | 2023-03-29 | F. Hoffmann-La Roche AG | The use of chelators for the prevention of visible particle formation in parenteral protein solutions |
| AU2021277398A1 (en) | 2020-05-22 | 2023-02-02 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Methods for treating eosinophilic esophagitis by administering an IL-4R inhibitor |
| AU2021282179A1 (en) | 2020-05-26 | 2023-01-19 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Anti-SARS-CoV-2-spike glycoprotein antibodies and antigen-binding fragments |
| TW202210510A (zh) | 2020-05-27 | 2022-03-16 | 美商健生生物科技公司 | 包含ｃｄ３抗原結合域之蛋白質及其用途 |
| CN116323665A (zh) | 2020-05-29 | 2023-06-23 | 23和我公司 | 抗cd200r1抗体及其使用方法 |
| JP2023529842A (ja) | 2020-06-02 | 2023-07-12 | ダイナミキュア バイオテクノロジー エルエルシー | 抗ｃｄ９３構築物およびその使用 |
| EP4158034A4 (en) * | 2020-06-02 | 2024-07-03 | Biocytogen Pharmaceuticals Beijing Co Ltd | GENETICALLY MODIFIED NON-HUMAN ANIMALS HAVING A LIGHT-CHAIN IMMUNOGLOBULIN LOCUS |
| CN116529260A (zh) | 2020-06-02 | 2023-08-01 | 当康生物技术有限责任公司 | 抗cd93构建体及其用途 |
| WO2021247925A1 (en) | 2020-06-03 | 2021-12-09 | Vir Biotechnology, Inc. | Structure-guided immunotherapy against sars-cov-2 |
| MX2022015206A (es) | 2020-06-08 | 2023-01-05 | Hoffmann La Roche | Anticuerpos anti-hbv y metodos de uso. |
| RU2751237C1 (ru) * | 2020-06-10 | 2021-07-12 | Регенерон Фармасьютикалс, Инк. | Способы и композиции для направленной модификации генома |
| GB202008860D0 (en) | 2020-06-11 | 2020-07-29 | Univ Oxford Innovation Ltd | BTLA antibodies |
| JP2023529206A (ja) | 2020-06-12 | 2023-07-07 | ジェネンテック， インコーポレイテッド | がん免疫療法のための方法及び組成物 |
| JP2023530274A (ja) | 2020-06-12 | 2023-07-14 | ヴィア・バイオテクノロジー・インコーポレイテッド | ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染の抗体療法 |
| CA3181820A1 (en) | 2020-06-16 | 2021-12-23 | Genentech, Inc. | Methods and compositions for treating triple-negative breast cancer |
| IL299103A (en) | 2020-06-18 | 2023-02-01 | Regeneron Pharma | Formulations of activin A antibody and methods of its use |
| TW202200616A (zh) | 2020-06-18 | 2022-01-01 | 美商建南德克公司 | 使用抗tigit抗體及pd-1軸結合拮抗劑之治療 |
| WO2021259880A1 (en) | 2020-06-22 | 2021-12-30 | Almirall, S.A. | Anti-il-36 antibodies and methods of use thereof |
| MX2022016453A (es) | 2020-06-24 | 2023-02-01 | Genentech Inc | Lineas celulares resistentes a la apoptosis. |
| CN115988960A (zh) | 2020-06-25 | 2023-04-18 | 株式会社湖美宝 | 杂合转基因动物 |
| JP2023531968A (ja) | 2020-07-01 | 2023-07-26 | リジェネロン・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッド | 抗ｂｅｔ ｖ １抗体を使用してアレルギーを治療する方法 |
| CN116133689A (zh) | 2020-07-07 | 2023-05-16 | 豪夫迈·罗氏有限公司 | 作为治疗性蛋白质制剂的稳定剂的替代表面活性剂 |
| WO2022015656A1 (en) | 2020-07-13 | 2022-01-20 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Camptothecin analogs conjugated to a glutamine residue in a protein, and their use |
| JP2023534458A (ja) | 2020-07-17 | 2023-08-09 | ジェネンテック， インコーポレイテッド | 抗Ｎｏｔｃｈ２抗体及び使用方法 |
| MX2023000888A (es) | 2020-07-21 | 2023-02-22 | Genentech Inc | Inductores quimicos de degradacion conjugados con anticuerpo de brm y metodos de estos. |
| GB2597532A (en) | 2020-07-28 | 2022-02-02 | Femtogenix Ltd | Cytotoxic compounds |
| KR20230133832A (ko) | 2020-07-29 | 2023-09-19 | 다이내믹큐어 바이오테크놀로지 엘엘씨 | 항-cd93 구축물 및 그의 용도 |
| CA3190307A1 (en) | 2020-07-29 | 2022-02-03 | Janssen Biotech, Inc. | Proteins comprising hla-g antigen binding domains and their uses |
| WO2022032137A1 (en) | 2020-08-07 | 2022-02-10 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Methods for treating refractory hypercholesterolemia involving an angptl3 inhibitor |
| EP3954393A1 (en) | 2020-08-13 | 2022-02-16 | Bioasis Technologies Inc. | Combination therapies for delivery across the blood brain barrier |
| WO2022046925A1 (en) | 2020-08-26 | 2022-03-03 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Method of treating an allergy with allergen-specific monoclonal antibodies |
| EP4204558A2 (en) | 2020-08-28 | 2023-07-05 | Genentech, Inc. | Crispr/cas9 multiplex knockout of host cell proteins |
| EP4211155A1 (en) | 2020-09-11 | 2023-07-19 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Identification and production of antigen-specific antibodies |
| MX2023002974A (es) | 2020-09-14 | 2023-05-25 | Regeneron Pharma | Conjugados de anticuerpo-farmaco que comprenden peptidomimeticos glp1 y usos de los mismos. |
| MX2023002901A (es) | 2020-09-14 | 2023-06-01 | Ichnos Sciences SA | Anticuerpos que se unen a la proteína auxiliar del receptor de interleucina-1 (il1rap) y usos de estos. |
| EP4217385A2 (en) | 2020-09-28 | 2023-08-02 | VIR Biotechnology, Inc. | Antibodies against sars-cov-2 |
| WO2022076289A1 (en) | 2020-10-05 | 2022-04-14 | Sanofi Biotechnology | Methods for treating asthma in pediatric subjects by administering an il-4r antagonist |
| KR20230082632A (ko) | 2020-10-05 | 2023-06-08 | 제넨테크, 인크. | 항-fcrh5/항-cd3 이중특이성 항체를 사용한 치료를 위한 투약 |
| KR20230084157A (ko) | 2020-10-08 | 2023-06-12 | 주식회사 휴맵 | 인간화 면역글로불린 유전자좌를 포함하는 게놈을 가지는 형질전환 비인간-동물 제조방법 |
| KR20230086765A (ko) | 2020-10-13 | 2023-06-15 | 얀센 바이오테크 인코포레이티드 | 분화 클러스터 iv 및/또는 viii을 조절하기 위한 바이오-조작된 t 세포 매개 면역, 물질 및 기타 방법 |
| WO2022081718A1 (en) | 2020-10-14 | 2022-04-21 | Five Prime Therapeutics, Inc. | Anti-c-c chemokine receptor 8 (ccr8) antibodies and methods of use thereof |
| JP2023545566A (ja) | 2020-10-20 | 2023-10-30 | エフ・ホフマン－ラ・ロシュ・アクチェンゲゼルシャフト | Ｐｄ－１軸結合アンタゴニストとｌｒｒｋ２阻害剤との併用療法 |
| CA3190569A1 (en) | 2020-10-22 | 2022-04-28 | Christopher Daly | Anti-fgfr2 antibodies and methods of use thereof |
| IL302277A (en) | 2020-10-22 | 2023-06-01 | Janssen Biotech Inc | Proteins containing delta-like ligand antigen binding domains (DLL3) and uses thereof |
| WO2022093981A1 (en) | 2020-10-28 | 2022-05-05 | Genentech, Inc. | Combination therapy comprising ptpn22 inhibitors and pd-l1 binding antagonists |
| CA3196539A1 (en) | 2020-11-04 | 2022-05-12 | Chi-Chung Li | Dosing for treatment with anti-cd20/anti-cd3 bispecific antibodies |
| KR20230100732A (ko) | 2020-11-04 | 2023-07-05 | 제넨테크, 인크. | 항-cd20/항-cd3 이중특이성 항체의 피하 투여 |
| TW202227481A (zh) | 2020-11-04 | 2022-07-16 | 美國洛克菲勒大學 | 中和抗sars-cov-2抗體 |
| KR20230095113A (ko) | 2020-11-04 | 2023-06-28 | 제넨테크, 인크. | 항-cd20/항-cd3 이중특이적 항체들과 항-cd79b 항체 약물 접합체들을 이용한 치료를 위한 투약 |
| AR124063A1 (es) | 2020-11-16 | 2023-02-08 | Astellas Pharma Inc | Anticuerpo biespecífico anti-tspan8 / anti-cd3 y anticuerpo anti-tspan8 |
| MX2023005581A (es) | 2020-11-16 | 2023-05-29 | Hoffmann La Roche | Glucoformas de fab ricas en manosa. |
| JP2023551666A (ja) | 2020-11-23 | 2023-12-12 | ヴィア・バイオテクノロジー・インコーポレイテッド | Ａ型インフルエンザウイルスに対する抗体 |
| EP4247845A1 (en) | 2020-11-23 | 2023-09-27 | VIR Biotechnology, Inc. | Anti-influenza antibodies and combinations thereof |
| EP4247495A1 (en) | 2020-11-23 | 2023-09-27 | VIR Biotechnology, Inc. | Broadly neutralizing antibodies against influenza neuraminidase |
| EP4251279A1 (en) | 2020-11-25 | 2023-10-04 | VIR Biotechnology, Inc. | Antibodies that bind to multiple betacoronaviruses |
| US20240101681A1 (en) | 2020-12-02 | 2024-03-28 | Alector Llc | Methods of use of anti-sortilin antibodies |
| WO2022126113A1 (en) | 2020-12-09 | 2022-06-16 | Trianni, Inc. | Heavy chain-only antibodies |
| IL303626A (en) | 2020-12-16 | 2023-08-01 | Regeneron Pharma | Mice expressing human FC alpha receptors |
| WO2022132904A1 (en) | 2020-12-17 | 2022-06-23 | The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services | Human monoclonal antibodies targeting sars-cov-2 |
| AU2021399841A1 (en) | 2020-12-17 | 2023-07-06 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Anti-hla-g antibodies and use thereof |
| IL303542A (en) | 2020-12-18 | 2023-08-01 | Regeneron Pharma | Immunoglobulin proteins that bind to NPR1 agonists |
| IL303371A (en) | 2020-12-20 | 2023-08-01 | Regeneron Pharma | Methods for the identification of degraded disulfides in biocompounds |
| US20240317849A1 (en) | 2020-12-23 | 2024-09-26 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Nucleic acids encoding anchor modified antibodies and uses thereof |
| BR112023011689A2 (pt) | 2020-12-23 | 2023-10-31 | Regeneron Pharma | Método para obter uma célula produtora de anticorpos, anticorpo, e, célula hospedeira de mamífero |
| CA3204515A1 (en) | 2021-01-08 | 2022-07-14 | Jamie M. Orengo | Methods for treating peanut allergy and enhancing peanut allergen-specific immunotherapy by administering an il-4r antagonist |
| WO2022148853A1 (en) | 2021-01-11 | 2022-07-14 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Immunoconjugates |
| EP4279594A1 (en) | 2021-01-13 | 2023-11-22 | Astellas Pharma Inc. | Multispecific antibody bonding to actriia, actriib, and fn14 |
| US12060411B2 (en) | 2021-01-15 | 2024-08-13 | The Rockefeller University | Neutralizing anti-SARS-CoV-2 antibodies |
| WO2022159875A1 (en) | 2021-01-25 | 2022-07-28 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Anti-pdgf-b antibodies and mehods of use for treating pulmonary arterial hypertension (pah) |
| WO2022159842A1 (en) | 2021-01-25 | 2022-07-28 | Vir Biotechnology, Inc. | Antibody combination therapies for sars-cov-2 infection |
| MX2023008909A (es) | 2021-01-28 | 2023-10-23 | Janssen Biotech Inc | Proteínas de unión a psma y usos de estas. |
| CA3210753A1 (en) | 2021-02-09 | 2022-08-18 | University Of Georgia Research Foundation, Inc. | Human monoclonal antibodies against pneumococcal antigens |
| JP2024506315A (ja) | 2021-02-09 | 2024-02-13 | ザ ユナイテッド ステイツ オブ アメリカ アズ リプリゼンテッド バイ ザ セクレタリー、デパートメント オブ ヘルス アンド ヒューマン サービシーズ | コロナウイルスのスパイクタンパク質を標的とする抗体 |
| WO2022173745A1 (en) | 2021-02-09 | 2022-08-18 | Humabs Biomed Sa | Antibodies against respiratory syncytial virus, human metapneumovirus and pneumonia virus of mice and methods of using the same |
| EP4301418A1 (en) | 2021-03-03 | 2024-01-10 | Sorrento Therapeutics, Inc. | Antibody-drug conjugates comprising an anti-bcma antibody |
| WO2022187863A1 (en) | 2021-03-05 | 2022-09-09 | Dynamicure Biotechnology Llc | Anti-vista constructs and uses thereof |
| WO2022187626A1 (en) | 2021-03-05 | 2022-09-09 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Anti-sars-cov-2-variant-spike glycoprotein antibodies and antigen-binding fragments |
| EP4304732A1 (en) | 2021-03-12 | 2024-01-17 | Genentech, Inc. | Anti-klk7 antibodies, anti-klk5 antibodies, multispecific anti-klk5/klk7 antibodies, and methods of use |
| MX2023010812A (es) | 2021-03-15 | 2023-09-27 | Genentech Inc | Composiciones y metodos para tratar la nefritis lupica. |
| JP2024512002A (ja) | 2021-03-18 | 2024-03-18 | アレクトル エルエルシー | 抗ｔｍｅｍ１０６ｂ抗体、及び、その使用方法 |
| WO2022197877A1 (en) | 2021-03-19 | 2022-09-22 | Genentech, Inc. | Methods and compositions for time delayed bio-orthogonal release of cytotoxic agents |
| WO2022204274A1 (en) | 2021-03-23 | 2022-09-29 | Alector Llc | Anti-tmem106b antibodies for treating and preventing coronavirus infections |
| WO2022204202A1 (en) | 2021-03-23 | 2022-09-29 | Vir Biotechnology, Inc. | Antibodies that bind to multiple sarbecoviruses |
| IL306103A (en) | 2021-03-24 | 2023-11-01 | Janssen Biotech Inc | The antibody targets CD22 and CD79B |
| AU2022242125A1 (en) | 2021-03-24 | 2023-11-09 | Janssen Biotech, Inc. | Proteins comprising cd3 antigen binding domains and uses thereof |
| WO2022204724A1 (en) | 2021-03-25 | 2022-09-29 | Dynamicure Biotechnology Llc | Anti-igfbp7 constructs and uses thereof |
| AR125255A1 (es) | 2021-04-02 | 2023-06-28 | Regeneron Pharma | Métodos de predicción y modulación de la glicación de una proteína |
| AR125344A1 (es) | 2021-04-15 | 2023-07-05 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Anticuerpo anti-c1s |
| WO2022220603A1 (ko) | 2021-04-16 | 2022-10-20 | 고려대학교 산학협력단 | 코로나-19 바이러스 표적 인간 항체 |
| CA3215965A1 (en) | 2021-04-19 | 2022-10-27 | Amy Shen | Modified mammalian cells |
| US11926661B2 (en) | 2021-04-20 | 2024-03-12 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Human antibodies to artemin and methods of use thereof |
| BR112023021950A2 (pt) | 2021-04-22 | 2023-12-19 | Astellas Pharma Inc | Anticorpo bispecífico anti-cldn4/anti-cd137 |
| AU2021443318A1 (en) | 2021-04-30 | 2023-09-07 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Dosing for combination treatment with anti-cd20/anti-cd3 bispecific antibody and anti-cd79b antibody drug conjugate |
| JP2024509664A (ja) | 2021-04-30 | 2024-03-05 | エフ・ホフマン－ラ・ロシュ・アクチェンゲゼルシャフト | 抗ｃｄ２０／抗ｃｄ３二重特異性抗体による治療のための投薬 |
| MX2023012974A (es) | 2021-05-04 | 2023-11-15 | Regeneron Pharma | Agonistas multiespecificos de receptores del fgf21 y sus usos. |
| JP2024516996A (ja) | 2021-05-05 | 2024-04-18 | トリアニ・インコーポレイテッド | トランスジェニック哺乳動物およびその使用方法 |
| EP4334343A2 (en) | 2021-05-06 | 2024-03-13 | The Rockefeller University | Neutralizing anti-sars- cov-2 antibodies and methods of use thereof |
| EP4337695A1 (en) | 2021-05-11 | 2024-03-20 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Anti-tmprss6 antibodies and uses thereof |
| IL308351A (en) | 2021-05-12 | 2024-01-01 | Genentech Inc | Methods for using anti-CD79B immunoconjugates to treat diffuse large B-cell lymphoma |
| JP2024521107A (ja) | 2021-05-21 | 2024-05-28 | ジェネンテック， インコーポレイテッド | 目的の組換え産物を産生するための修飾細胞 |
| EP4347642A2 (en) | 2021-05-24 | 2024-04-10 | VIR Biotechnology, Inc. | Engineered polypeptides |
| CN113278071B (zh) | 2021-05-27 | 2021-12-21 | 江苏荃信生物医药股份有限公司 | 抗人干扰素α受体1单克隆抗体及其应用 |
| CN117480184A (zh) | 2021-06-04 | 2024-01-30 | 中外制药株式会社 | 抗ddr2抗体及其用途 |
| TW202313045A (zh) | 2021-06-09 | 2023-04-01 | 瑞士商赫孚孟拉羅股份公司 | 用於癌症治療之組合療法 |
| EP4355786A1 (en) | 2021-06-16 | 2024-04-24 | Alector LLC | Bispecific anti-mertk and anti-pdl1 antibodies and methods of use thereof |
| JP2024527493A (ja) | 2021-06-16 | 2024-07-25 | アレクトル エルエルシー | 一価の抗ＭｅｒＴＫ抗体及びその使用方法 |
| EP4355785A1 (en) | 2021-06-17 | 2024-04-24 | Amberstone Biosciences, Inc. | Anti-cd3 constructs and uses thereof |
| KR20240021943A (ko) | 2021-06-18 | 2024-02-19 | 남미 테라퓨틱스, 인크. | 암의 치료에 사용하기 위한 마스킹된 유형 I 인터페론 (IFNα 및 IFNβ)을 포함하는 융합 단백질 조성물(들) 및 그의 방법 |
| CA3221833A1 (en) | 2021-06-25 | 2022-12-29 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Anti-ctla-4 antibody |
| CA3220353A1 (en) | 2021-06-25 | 2022-12-29 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Use of anti-ctla-4 antibody |
| JP2024527344A (ja) | 2021-07-05 | 2024-07-24 | リジェネロン・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッド | 抗体応答を抗原に適合させるための抗体の利用 |
| CA3225575A1 (en) | 2021-07-14 | 2023-01-19 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Anti-sars-cov-2-spike glycoprotein antibodies and antigen-binding fragments |
| JP2024527606A (ja) | 2021-07-14 | 2024-07-25 | ジェネンテック， インコーポレイテッド | 抗ｃ－ｃモチーフケモカイン受容体８（ｃｃｒ８）抗体及び使用方法 |
| WO2023004386A1 (en) | 2021-07-22 | 2023-01-26 | Genentech, Inc. | Brain targeting compositions and methods of use thereof |
| EP4373859A1 (en) | 2021-07-22 | 2024-05-29 | F. Hoffmann-La Roche AG | Heterodimeric fc domain antibodies |
| EP4377345A1 (en) | 2021-07-26 | 2024-06-05 | Sanofi Biotechnology | Methods for treating chronic spontaneous urticaria by administering an il-4r antagonist |
| EP4376895A2 (en) | 2021-07-28 | 2024-06-05 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Protein-antiviral compound conjugates |
| EP4380980A1 (en) | 2021-08-03 | 2024-06-12 | F. Hoffmann-La Roche AG | Bispecific antibodies and methods of use |
| CN117897409A (zh) | 2021-08-13 | 2024-04-16 | 基因泰克公司 | 抗类胰蛋白酶抗体的给药 |
| JP2024532263A (ja) | 2021-08-23 | 2024-09-05 | リジェネロン・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッド | Ｉｌ－４ｒアンタゴニストを投与することによってアトピー性皮膚炎を治療する方法 |
| JP2024535712A (ja) | 2021-08-27 | 2024-10-02 | ヤンセン バイオテツク，インコーポレーテツド | 抗ｐｓｍａ抗体及びその使用 |
| EP4396223A1 (en) | 2021-08-30 | 2024-07-10 | Genentech, Inc. | Anti-polyubiquitin multispecific antibodies |
| WO2023034871A1 (en) | 2021-09-01 | 2023-03-09 | Vir Biotechnology, Inc. | High concentration antibody therapies for sars-cov-2 infection |
| WO2023034866A1 (en) | 2021-09-01 | 2023-03-09 | Vir Biotechnology, Inc. | Antibody therapies for sars-cov-2 infection in pediatric subjects |
| CN113603775B (zh) | 2021-09-03 | 2022-05-20 | 江苏荃信生物医药股份有限公司 | 抗人白介素-33单克隆抗体及其应用 |
| CN113683694B (zh) | 2021-09-03 | 2022-05-13 | 江苏荃信生物医药股份有限公司 | 一种抗人tslp单克隆抗体及其应用 |
| WO2023039442A1 (en) | 2021-09-08 | 2023-03-16 | Vir Biotechnology, Inc. | Broadly neutralizing antibody combination therapies for sars-cov-2 infection |
| EP4405392A1 (en) | 2021-09-24 | 2024-07-31 | Janssen Biotech, Inc. | Proteins comprising cd20 binding domains, and uses thereof |
| TW202321308A (zh) | 2021-09-30 | 2023-06-01 | 美商建南德克公司 | 使用抗ｔｉｇｉｔ抗體、抗ｃｄ３８抗體及ｐｄ—１軸結合拮抗劑治療血液癌症的方法 |
| CA3232212A1 (en) | 2021-10-01 | 2023-04-06 | Ping XIANG | Transgenic rodents for cell line identification and enrichment |
| AR127269A1 (es) | 2021-10-08 | 2024-01-03 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Formulación de anticuerpo anti-hla-dq2.5 |
| CN118139648A (zh) | 2021-10-14 | 2024-06-04 | 豪夫迈·罗氏有限公司 | 用于治疗癌症的替代的PD1-IL7v免疫缀合物 |
| CA3234731A1 (en) | 2021-10-14 | 2023-04-20 | F. Hoffmann-La Roche Ag | New interleukin-7 immunoconjugates |
| EP4419558A1 (en) | 2021-10-19 | 2024-08-28 | Alector LLC | Anti-cd300lb antibodies and methods of use thereof |
| EP4419557A1 (en) | 2021-10-20 | 2024-08-28 | Sanofi Biotechnology | Methods for treating prurigo nodularis by administering an il-4r antagonist |
| CN118414168A (zh) | 2021-10-22 | 2024-07-30 | 里珍纳龙药品有限公司 | 因子xi a2结构域结合抗体和其使用方法 |
| CN118251491A (zh) | 2021-10-28 | 2024-06-25 | 瑞泽恩制药公司 | 用于敲除C5的CRISPR/Cas相关方法及组合物 |
| EP4429456A1 (en) | 2021-11-10 | 2024-09-18 | Trianni, Inc. | Transgenic mammals and methods of use thereof |
| EP4430072A1 (en) | 2021-11-10 | 2024-09-18 | Genentech, Inc. | Anti-interleukin-33 antibodies and uses thereof |
| EP4433506A1 (en) | 2021-11-16 | 2024-09-25 | Genentech, Inc. | Methods and compositions for treating systemic lupus erythematosus (sle) with mosunetuzumab |
| EP4433500A1 (en) | 2021-11-19 | 2024-09-25 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Methods and compositions for reducing centralized pain |
| MX2024006205A (es) | 2021-11-22 | 2024-08-19 | Janssen Biotech Inc | Composiciones que comprenden agentes de unión multiespecíficos potenciados para una respuesta inmunitaria. |
| EP4442274A1 (en) | 2021-12-01 | 2024-10-09 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Method for preparing antibody-containing formulation |
| EP4444416A1 (en) | 2021-12-06 | 2024-10-16 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Antagonist anti-npr1 antibodies and methods of use thereof |
| KR20240117571A (ko) | 2021-12-08 | 2024-08-01 | 리제너론 파마슈티칼스 인코포레이티드 | 돌연변이 마이오실린 질환 모델 및 이의 용도 |
| AU2022411573A1 (en) | 2021-12-17 | 2024-06-27 | Shanghai Henlius Biologics Co., Ltd. | Anti-ox40 antibodies and methods of use |
| EP4448578A1 (en) | 2021-12-17 | 2024-10-23 | Shanghai Henlius Biotech, Inc. | Anti-ox40 antibodies, multispecific antibodies and methods of use |
| KR20240135618A (ko) | 2021-12-30 | 2024-09-11 | 리제너론 파아마슈티컬스, 인크. | Il-4/il-13 길항제를 투여하여 아토피 행진을 약화시키는 방법 |
| US20230287138A1 (en) | 2022-01-12 | 2023-09-14 | Regneron Pharmaceuticals, Inc. | Protein-drug conjugates comprising camptothecin analogs and methods of use thereof |
| US20230277682A1 (en) | 2022-01-14 | 2023-09-07 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Verrucarin a derivatives and antibody drug conjugates thereof |
| TW202340251A (zh) | 2022-01-19 | 2023-10-16 | 美商建南德克公司 | 抗ｎｏｔｃｈ２抗體及結合物及其使用方法 |
| WO2023147399A1 (en) | 2022-01-27 | 2023-08-03 | The Rockefeller University | Broadly neutralizing anti-sars-cov-2 antibodies targeting the n-terminal domain of the spike protein and methods of use thereof |
| WO2023150620A1 (en) | 2022-02-02 | 2023-08-10 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Crispr-mediated transgene insertion in neonatal cells |
| WO2023150798A1 (en) | 2022-02-07 | 2023-08-10 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Compositions and methods for defining optimal treatment timeframes in lysosomal disease |
| WO2023152581A1 (en) | 2022-02-09 | 2023-08-17 | Janssen Biotech, Inc. | Method of treating cancer with psmaxcd3 antibody |
| KR20240142563A (ko) | 2022-02-10 | 2024-09-30 | 더 유나이티드 스테이츠 오브 어메리카, 애즈 리프리젠티드 바이 더 세크러테리, 디파트먼트 오브 헬쓰 앤드 휴먼 서비씨즈 | 코로나바이러스를 광범위하게 표적으로 하는 인간 모노클로날 항체 |
| US20230257432A1 (en) | 2022-02-11 | 2023-08-17 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Compositions and methods for screening 4r tau targeting agents |
| TW202337497A (zh) | 2022-02-18 | 2023-10-01 | 中國大陸商重慶明道浩悅生物科技有限公司 | 鼻內調配物及抗sars-cov-2棘蛋白抗體 |
| WO2023173026A1 (en) | 2022-03-10 | 2023-09-14 | Sorrento Therapeutics, Inc. | Antibody-drug conjugates and uses thereof |
| WO2023180353A1 (en) | 2022-03-23 | 2023-09-28 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Combination treatment of an anti-cd20/anti-cd3 bispecific antibody and chemotherapy |
| WO2023179740A1 (en) | 2022-03-25 | 2023-09-28 | Shanghai Henlius Biotech , Inc. | Anti-msln antibodies and methods of use |
| AU2022450448A1 (en) | 2022-04-01 | 2024-10-10 | Genentech, Inc. | Dosing for treatment with anti-fcrh5/anti-cd3 bispecific antibodies |
| WO2023201256A1 (en) | 2022-04-12 | 2023-10-19 | Vir Biotechnology, Inc. | High dose antibody therapies for sars-cov-2 infection |
| TW202404637A (zh) | 2022-04-13 | 2024-02-01 | 瑞士商赫孚孟拉羅股份公司 | 抗ｃｄ２０／抗ｃｄ３雙特異性抗體之醫藥組成物及使用方法 |
| WO2023212586A1 (en) | 2022-04-27 | 2023-11-02 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Methods for selecting patients for treatment with an ngf antagonist |
| WO2023215737A1 (en) | 2022-05-03 | 2023-11-09 | Genentech, Inc. | Anti-ly6e antibodies, immunoconjugates, and uses thereof |
| WO2023219613A1 (en) | 2022-05-11 | 2023-11-16 | Genentech, Inc. | Dosing for treatment with anti-fcrh5/anti-cd3 bispecific antibodies |
| TW202411247A (zh) | 2022-05-23 | 2024-03-16 | 瑞士商休曼生物醫藥股份公司 | 針對流感神經胺酸酶的廣泛中和抗體 |
| WO2023230448A1 (en) | 2022-05-23 | 2023-11-30 | Vir Biotechnology, Inc. | Combination immunotherapy for influenza |
| WO2023235699A1 (en) | 2022-05-31 | 2023-12-07 | Jounce Therapeutics, Inc. | Antibodies to lilrb4 and uses thereof |
| WO2023240058A2 (en) | 2022-06-07 | 2023-12-14 | Genentech, Inc. | Prognostic and therapeutic methods for cancer |
| WO2023245078A1 (en) | 2022-06-15 | 2023-12-21 | Humabs Biomed Sa | Anti-parvovirus antibodies and uses thereof |
| WO2024006472A1 (en) | 2022-06-30 | 2024-01-04 | Vir Biotechnology, Inc. | Antibodies that bind to multiple sarbecoviruses |
| WO2024011251A1 (en) | 2022-07-08 | 2024-01-11 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Methods for treating eosinophilic esophagitis in pediatric by administering an il-4r antagonist |
| WO2024015816A1 (en) | 2022-07-12 | 2024-01-18 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Antibodies to ciliary neurotrophic factor receptor (cntfr) and methods of use thereof |
| TW202417042A (zh) | 2022-07-13 | 2024-05-01 | 美商建南德克公司 | 用抗ｆｃｒｈ５／抗ｃｄ３雙特異性抗體進行治療之給藥 |
| WO2024020432A1 (en) | 2022-07-19 | 2024-01-25 | Genentech, Inc. | Dosing for treatment with anti-fcrh5/anti-cd3 bispecific antibodies |
| WO2024020057A1 (en) | 2022-07-19 | 2024-01-25 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Genetically modified animal model and its use to model the human immune system |
| WO2024020564A1 (en) | 2022-07-22 | 2024-01-25 | Genentech, Inc. | Anti-steap1 antigen-binding molecules and uses thereof |
| TW202423963A (zh) | 2022-07-27 | 2024-06-16 | 瑞士商休曼斯生物醫藥公司 | 針對ｒｓｖ及ｍｐｖ副黏液病毒之廣效中和抗體 |
| WO2024026471A1 (en) | 2022-07-29 | 2024-02-01 | Alector Llc | Cd98hc antigen-binding domains and uses therefor |
| WO2024026474A1 (en) | 2022-07-29 | 2024-02-01 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Compositions and methods for transferrin receptor (tfr)-mediated delivery to the brain and muscle |
| TW202415679A (zh) | 2022-07-29 | 2024-04-16 | 美商阿列克特有限責任公司 | 抗ｇｐｎｍｂ抗體及其使用方法 |
| WO2024026472A2 (en) | 2022-07-29 | 2024-02-01 | Alector Llc | Transferrin receptor antigen-binding domains and uses therefor |
| US20240052051A1 (en) | 2022-07-29 | 2024-02-15 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Anti-tfr:payload fusions and methods of use thereof |
| WO2024030829A1 (en) | 2022-08-01 | 2024-02-08 | The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services | Monoclonal antibodies that bind to the underside of influenza viral neuraminidase |
| WO2024044770A1 (en) | 2022-08-26 | 2024-02-29 | Core Biotherapeutics, Inc. | Oligonucleotides for the treatment of breast cancer |
| WO2024047021A1 (en) | 2022-08-29 | 2024-03-07 | Sanofi | Methods for treating chronic inducible cold urticaria by administering an il-4r antagonist |
| WO2024049949A1 (en) | 2022-09-01 | 2024-03-07 | Genentech, Inc. | Therapeutic and diagnostic methods for bladder cancer |
| WO2024054929A1 (en) | 2022-09-07 | 2024-03-14 | Dynamicure Biotechnology Llc | Anti-vista constructs and uses thereof |
| WO2024054822A1 (en) | 2022-09-07 | 2024-03-14 | The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services | Engineered sars-cov-2 antibodies with increased neutralization breadth |
| WO2024073606A1 (en) | 2022-09-28 | 2024-04-04 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Antibody resistant modified receptors to enhance cell-based therapies |
| US20240224964A9 (en) | 2022-09-29 | 2024-07-11 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Correction of hepatosteatosis in humanized liver animals through restoration of il6/il6r/gp130 signaling in human hepatocytes |
| TW202421664A (zh) | 2022-10-07 | 2024-06-01 | 美商建南德克公司 | 用抗ｃ—ｃ模體趨化因子受體８（ｃｃｒ８）抗體治療癌症之方法 |
| WO2024086796A1 (en) | 2022-10-20 | 2024-04-25 | Alector Llc | Anti-ms4a4a antibodies with amyloid-beta therapies |
| TW202426505A (zh) | 2022-10-25 | 2024-07-01 | 美商建南德克公司 | 癌症之治療及診斷方法 |
| US20240150474A1 (en) | 2022-10-27 | 2024-05-09 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Anti-acvri antibodies and their use in the treatment of trauma-induced heterotopic ossification |
| WO2024097714A1 (en) | 2022-11-01 | 2024-05-10 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Methods for treating hand and foot dermatitis by administering an il-4r antagonist |
| WO2024097741A1 (en) | 2022-11-04 | 2024-05-10 | Gilead Sciences, Inc. | Anticancer therapies using anti-ccr8 antibody, chemo and immunotherapy combinations |
| WO2024098002A1 (en) | 2022-11-04 | 2024-05-10 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Calcium voltage-gated channel auxiliary subunit gamma 1 (cacng1) binding proteins and cacng1-mediated delivery to skeletal muscle |
| WO2024102369A1 (en) | 2022-11-07 | 2024-05-16 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Factor xi catalytic domain-binding antibodies and methods of use thereof |
| WO2024102734A1 (en) | 2022-11-08 | 2024-05-16 | Genentech, Inc. | Compositions and methods of treating childhood onset idiopathic nephrotic syndrome |
| WO2024100170A1 (en) | 2022-11-11 | 2024-05-16 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Antibodies binding to hla-a*02/foxp3 |
| WO2024107765A2 (en) | 2022-11-14 | 2024-05-23 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Compositions and methods for fibroblast growth factor receptor 3-mediated delivery to astrocytes |
| US20240158515A1 (en) | 2022-11-14 | 2024-05-16 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Anti-fgfr3 antibodies and antigen-binding fragments and methods of use thereof |
| WO2024112818A1 (en) | 2022-11-22 | 2024-05-30 | Humabs Biomed Sa | Engineered anti-sars-cov-2 antibodies and uses thereof |
| WO2024112935A1 (en) | 2022-11-23 | 2024-05-30 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Methods for improving bone growth by administering an il-4r antagonist |
| WO2024118593A1 (en) | 2022-11-28 | 2024-06-06 | Allogene Therapeutics Inc. | Claudin 18.2 targeting chimeric antigen receptors and binding agents and uses thereof |
| WO2024118998A2 (en) | 2022-12-01 | 2024-06-06 | Vir Biotechnology, Inc. | Engineered anti-sars-cov-2 antibodies and methods of using the same |
| WO2024129594A1 (en) | 2022-12-12 | 2024-06-20 | Genentech, Inc. | Optimizing polypeptide sialic acid content |
| WO2024137381A1 (en) | 2022-12-19 | 2024-06-27 | The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services | Monoclonal antibodies for treating sars-cov-2 infection |
| WO2024137731A2 (en) | 2022-12-21 | 2024-06-27 | Genzyme Corporation | Anti‑pd‑1×4‑1bb binding proteins |
| US20240269308A1 (en) | 2022-12-21 | 2024-08-15 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Prodrugs of topoisomerase i inhibitor for adc conjugations and methods of use thereof |
| WO2024138155A1 (en) | 2022-12-22 | 2024-06-27 | The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services | Ebolavirus (sudan and zaire) antibodies from non-human primates and human vaccinees |
| WO2024148232A2 (en) | 2023-01-06 | 2024-07-11 | Alector Llc | Anti-il18 binding protein antibodies and methods of use thereof |
| WO2024148240A1 (en) | 2023-01-06 | 2024-07-11 | Lassen Therapeutics 1, Inc. | ANTI-IL-11Rα ANTIBODIES FOR TREATING THYROID EYE DISEASE |
| WO2024148241A1 (en) | 2023-01-06 | 2024-07-11 | Lassen Therapeutics 1, Inc. | Anti-il-18bp antibodies |
| US20240247069A1 (en) | 2023-01-13 | 2024-07-25 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Fgfr3 binding molecules and methods of use thereof |
| WO2024155807A1 (en) | 2023-01-18 | 2024-07-25 | Genentech, Inc. | Multispecific antibodies and uses thereof |
| WO2024155604A1 (en) | 2023-01-18 | 2024-07-25 | Gilead Sciences, Inc. | Chimeric transgenic immunoglobulin mice with an altered heavy chain locus and methods of making and using same |
| WO2024153722A1 (en) | 2023-01-20 | 2024-07-25 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Immunoconjugates |
| US20240279350A1 (en) | 2023-02-16 | 2024-08-22 | Sanofi | CD40-Binding Proteins |
| US20240299601A1 (en) | 2023-02-17 | 2024-09-12 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Radiolabeled anti-lag3 antibodies for immuno-pet imaging |
| WO2024191785A1 (en) | 2023-03-10 | 2024-09-19 | Genentech, Inc. | Fusions with proteases and uses thereof |
| US20240345083A1 (en) | 2023-03-15 | 2024-10-17 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Methods for obtaining antibody molecules with high affinity |
| WO2024197119A1 (en) | 2023-03-22 | 2024-09-26 | Sanofi Biotechnology | Methods for treating chronic obstructive pulmonary disease (copd) by administering an il-4r antagonist |
| WO2024206341A1 (en) | 2023-03-27 | 2024-10-03 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Methods for treating eosinophilic gastroenteritis by administering an il-4r antagonist |
| US20240327522A1 (en) | 2023-03-31 | 2024-10-03 | Genentech, Inc. | Anti-alpha v beta 8 integrin antibodies and methods of use |
| WO2024211211A1 (en) | 2023-04-03 | 2024-10-10 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Methods of improving transplant survival using il-2 receptor gamma chain antibodies |
| WO2024211236A2 (en) | 2023-04-05 | 2024-10-10 | Sorrento Therapeutics, Inc. | Antibody-drug conjugates and uses thereof |
| WO2024211234A1 (en) | 2023-04-05 | 2024-10-10 | Sorrento Therapeutics, Inc. | Antibody-drug conjugates and uses thereof |
| WO2024211235A1 (en) | 2023-04-05 | 2024-10-10 | Sorrento Therapeutics, Inc. | Antibody-drug conjugates and uses thereof |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1994002602A1 (en) * | 1992-07-24 | 1994-02-03 | Cell Genesys, Inc. | Generation of xenogeneic antibodies |
Family Cites Families (69)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4816567A (en) | 1983-04-08 | 1989-03-28 | Genentech, Inc. | Recombinant immunoglobin preparations |
| US5350689A (en) | 1987-05-20 | 1994-09-27 | Ciba-Geigy Corporation | Zea mays plants and transgenic Zea mays plants regenerated from protoplasts or protoplast-derived cells |
| US5202238A (en) | 1987-10-27 | 1993-04-13 | Oncogen | Production of chimeric antibodies by homologous recombination |
| GB8823869D0 (en) * | 1988-10-12 | 1988-11-16 | Medical Res Council | Production of antibodies |
| FR2646438B1 (fr) | 1989-03-20 | 2007-11-02 | Pasteur Institut | Procede de remplacement specifique d'une copie d'un gene present dans le genome receveur par l'integration d'un gene different de celui ou se fait l'integration |
| WO1991000906A1 (en) | 1989-07-12 | 1991-01-24 | Genetics Institute, Inc. | Chimeric and transgenic animals capable of producing human antibodies |
| JP3068180B2 (ja) | 1990-01-12 | 2000-07-24 | アブジェニックス インコーポレイテッド | 異種抗体の生成 |
| US6657103B1 (en) | 1990-01-12 | 2003-12-02 | Abgenix, Inc. | Human antibodies derived from immunized xenomice |
| US6075181A (en) | 1990-01-12 | 2000-06-13 | Abgenix, Inc. | Human antibodies derived from immunized xenomice |
| US6713610B1 (en) | 1990-01-12 | 2004-03-30 | Raju Kucherlapati | Human antibodies derived from immunized xenomice |
| US6673986B1 (en) | 1990-01-12 | 2004-01-06 | Abgenix, Inc. | Generation of xenogeneic antibodies |
| US5614396A (en) * | 1990-06-14 | 1997-03-25 | Baylor College Of Medicine | Methods for the genetic modification of endogenous genes in animal cells by homologous recombination |
| US5877397A (en) * | 1990-08-29 | 1999-03-02 | Genpharm International Inc. | Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies of various isotypes |
| US7041871B1 (en) * | 1995-10-10 | 2006-05-09 | Genpharm International, Inc. | Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies |
| US6255458B1 (en) * | 1990-08-29 | 2001-07-03 | Genpharm International | High affinity human antibodies and human antibodies against digoxin |
| US5625126A (en) * | 1990-08-29 | 1997-04-29 | Genpharm International, Inc. | Transgenic non-human animals for producing heterologous antibodies |
| US5770429A (en) * | 1990-08-29 | 1998-06-23 | Genpharm International, Inc. | Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies |
| AU2515992A (en) | 1991-08-20 | 1993-03-16 | Genpharm International, Inc. | Gene targeting in animal cells using isogenic dna constructs |
| JPH07503132A (ja) | 1991-12-17 | 1995-04-06 | ジェンファーム インターナショナル，インコーポレイティド | 異種抗体を産生することができるトランスジェニック非ヒト動物 |
| DE4228162C1 (de) | 1992-08-25 | 1994-01-13 | Rajewsky Klaus Dr | Verfahren zum Ersetzen homologer Genabschnitte aus Säugern in der Keimbahn von nicht-menschlichen Säugern |
| US5436149A (en) | 1993-02-19 | 1995-07-25 | Barnes; Wayne M. | Thermostable DNA polymerase with enhanced thermostability and enhanced length and efficiency of primer extension |
| JPH08509612A (ja) * | 1993-04-26 | 1996-10-15 | ジェンファーム インターナショナル インコーポレイテッド | 異種抗体を産生することができるトランスジェニック非ヒト動物 |
| US6096878A (en) | 1993-05-10 | 2000-08-01 | Japan Tobacco Inc. | Human immunoglobulin VH gene segments and DNA fragments containing the same |
| US5523226A (en) | 1993-05-14 | 1996-06-04 | Biotechnology Research And Development Corp. | Transgenic swine compositions and methods |
| US5508189A (en) | 1994-04-26 | 1996-04-16 | Pepperdine University | Regeneration of plants from cultured guard cell protoplasts |
| US6130364A (en) | 1995-03-29 | 2000-10-10 | Abgenix, Inc. | Production of antibodies using Cre-mediated site-specific recombination |
| US6069010A (en) * | 1995-09-11 | 2000-05-30 | Axys Pharmaceuticals, Inc. | High throughput gene inactivation with large scale gene targeting |
| US5928914A (en) * | 1996-06-14 | 1999-07-27 | Albert Einstein College Of Medicine Of Yeshiva University, A Division Of Yeshiva University | Methods and compositions for transforming cells |
| US5763715A (en) | 1996-10-08 | 1998-06-09 | Stone & Webster Engineering Corp. | Butadiene removal system for ethylene plants with front end hydrogenation systems |
| KR20080059467A (ko) | 1996-12-03 | 2008-06-27 | 아브게닉스, 인크. | 복수의 ｖｈ 및 ｖｋ 부위를 함유하는 사람 면역글로불린유전자좌를 갖는 형질전환된 포유류 및 이로부터 생성된항체 |
| US6075859A (en) | 1997-03-11 | 2000-06-13 | Qualcomm Incorporated | Method and apparatus for encrypting data in a wireless communication system |
| GB9823930D0 (en) * | 1998-11-03 | 1998-12-30 | Babraham Inst | Murine expression of human ig\ locus |
| DK1151010T3 (da) | 1999-02-05 | 2006-01-09 | Therapeutic Human Polyclonals | Humane polyklonale antistoffer fra antigene ikke-humane dyr |
| US6833268B1 (en) | 1999-06-10 | 2004-12-21 | Abgenix, Inc. | Transgenic animals for producing specific isotypes of human antibodies via non-cognate switch regions |
| US6355412B1 (en) | 1999-07-09 | 2002-03-12 | The European Molecular Biology Laboratory | Methods and compositions for directed cloning and subcloning using homologous recombination |
| AU7491800A (en) | 1999-09-15 | 2001-04-17 | Therapeutic Human Polyclonals, Inc. | Immunotherapy with substantially human polyclonal antibody preparations purifiedfrom genetically engineered birds |
| GB2356897B (en) | 1999-12-01 | 2003-05-14 | Secr Defence | Improved nozzle |
| US20020028488A1 (en) | 2000-06-19 | 2002-03-07 | Sujay Singh | Transgenic avian species for making human and chimeric antibodies |
| AU2001284703B2 (en) | 2000-08-03 | 2007-03-22 | Therapeutic Human Polyclonals Inc. | Production of humanized antibodies in transgenic animals |
| US20050144655A1 (en) | 2000-10-31 | 2005-06-30 | Economides Aris N. | Methods of modifying eukaryotic cells |
| US6586251B2 (en) | 2000-10-31 | 2003-07-01 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Methods of modifying eukaryotic cells |
| US7105348B2 (en) | 2000-10-31 | 2006-09-12 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Methods of modifying eukaryotic cells |
| US6596541B2 (en) | 2000-10-31 | 2003-07-22 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Methods of modifying eukaryotic cells |
| EP3269235B1 (en) | 2001-11-30 | 2022-01-26 | Amgen Fremont Inc. | Transgenic mice bearing human ig lambda light chain genes |
| US20050246782A1 (en) | 2002-03-22 | 2005-11-03 | Origen Therapeutics | Transgenic aves producing human polyclonal antibodies |
| US20030182675A1 (en) | 2002-03-22 | 2003-09-25 | Origen Therapeutics | Functional disruption of avian immunoglobulin genes |
| WO2004072115A2 (en) | 2003-02-05 | 2004-08-26 | Therapeutic Human Polyclonals, Inc. | Suppression of endogenous immunoglobulin expression in transgenic non-human animals expressing humanized or human antibodies |
| MXPA06000562A (es) | 2003-07-15 | 2006-03-30 | Therapeutic Human Polyclonals | Loci de inmunoglobulina humanizada. |
| WO2005019463A1 (en) | 2003-08-11 | 2005-03-03 | Therapeutic Human Polyclonals, Inc. | Improved transgenesis with humanized immunoglobulin loci |
| US7618403B2 (en) | 2004-05-14 | 2009-11-17 | Mcneil-Ppc, Inc. | Fluid management device with fluid transport element for use within a body |
| RS52036B (en) | 2004-12-21 | 2012-04-30 | Medimmune Limited | ANGIOPOETIN-2 ANTIBODIES AND ITS USES |
| CA2603081C (en) * | 2005-04-04 | 2013-09-03 | Sinexus, Inc. | Device and methods for treating paranasal sinus conditions |
| KR101232139B1 (ko) | 2005-12-13 | 2013-02-12 | 엘지디스플레이 주식회사 | 액정 표시 장치 |
| PL2041177T3 (pl) | 2006-06-02 | 2012-09-28 | Regeneron Pharma | Przeciwciała o wysokim powinowactwie przeciw ludzkiemu receptorowi IL 6 |
| DK2769992T3 (da) | 2006-10-02 | 2021-03-22 | Regeneron Pharma | Humane antistoffer med høj affinitet for human IL-4-receptor |
| NO347649B1 (no) | 2006-12-14 | 2024-02-12 | Regeneron Pharma | Humant antistoff eller antistoff fragment som spesifikt binder human deltaliknende ligand 4 (hDII4), nukleinsyremolekyl som koder for slike og vektor og vert-vektorsystemer, samt fremgangsmåte for fremstilling, sammensetning og anvendelse. |
| MY147651A (en) | 2007-07-31 | 2012-12-31 | Regeneron Pharma | Human antibodies to human cd20 and method of using thereof |
| RU2473564C2 (ru) | 2007-08-10 | 2013-01-27 | Ридженерон Фармасьютикалз, Инк. | Антитела человека с высокой аффинностью к фактору роста нервов человека |
| US8321568B2 (en) | 2008-03-31 | 2012-11-27 | Amazon Technologies, Inc. | Content management |
| US8194152B2 (en) | 2008-09-05 | 2012-06-05 | CSR Technology, Inc. | Image processing under flickering lighting conditions using estimated illumination parameters |
| CN102638971B (zh) | 2009-07-08 | 2015-10-07 | 科马布有限公司 | 动物模型及治疗分子 |
| JO3182B1 (ar) | 2009-07-29 | 2018-03-08 | Regeneron Pharma | مضادات حيوية بشرية عالية الالفة مع تولد الاوعية البشرية - 2 |
| RU2724663C2 (ru) | 2010-02-08 | 2020-06-25 | Ридженерон Фармасьютикалз, Инк. | Мышь с общей легкой цепью |
| US20120021409A1 (en) | 2010-02-08 | 2012-01-26 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Common Light Chain Mouse |
| JP6009441B2 (ja) | 2010-06-22 | 2016-10-19 | リジェネロン・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッドＲｅｇｅｎｅｒｏｎ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ， Ｉｎｃ． | ハイブリッド軽鎖マウス |
| PL2578688T5 (pl) | 2011-02-25 | 2023-05-29 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Myszy adam6 |
| EP4389764A3 (en) | 2012-11-05 | 2024-08-14 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Genetically modified non-human animals and methods of use thereof |
| RU2725520C2 (ru) | 2013-12-11 | 2020-07-02 | Регенерон Фармасьютикалс, Инк. | Способы и композиции для направленной модификации генома |
| SI3221457T1 (sl) | 2014-11-21 | 2019-08-30 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Postopki in sestavki za ciljno genetsko modifikacijo z uporabo vodilnih RNK v parih |
-
2001
- 2001-02-16 US US09/784,859 patent/US6596541B2/en not_active Expired - Lifetime
-
2002
- 2002-02-15 DK DK02709544.7T patent/DK1360287T4/da active
- 2002-02-15 DE DE10010741.6T patent/DE10010741T1/de active Pending
- 2002-02-15 ES ES02709544T patent/ES2391391T5/es not_active Expired - Lifetime
- 2002-02-15 PT PT16171559T patent/PT3085779T/pt unknown
- 2002-02-15 EP EP14172420.3A patent/EP2787075B2/en not_active Expired - Lifetime
- 2002-02-15 EP EP19172361.8A patent/EP3572508B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2002-02-15 DE DE19203913.9T patent/DE19203913T1/de active Pending
- 2002-02-15 ES ES16171561T patent/ES2744220T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2002-02-15 DK DK19203913.9T patent/DK3626819T3/da active
- 2002-02-15 WO PCT/US2002/004500 patent/WO2002066630A1/en active Application Filing
- 2002-02-15 EP EP16171561.0A patent/EP3085780B2/en not_active Expired - Lifetime
- 2002-02-15 ES ES16171559T patent/ES2725712T5/es not_active Expired - Lifetime
- 2002-02-15 DK DK10010741.6T patent/DK2264163T3/en active
- 2002-02-15 PT PT100107416T patent/PT2264163E/pt unknown
- 2002-02-15 NZ NZ527629A patent/NZ527629A/en not_active IP Right Cessation
- 2002-02-15 MX MXPA03007325A patent/MXPA03007325A/es active IP Right Grant
- 2002-02-15 PT PT141636423T patent/PT2767588T/pt unknown
- 2002-02-15 DK DK14163642.3T patent/DK2767588T3/da active
- 2002-02-15 CZ CZ2003-2192A patent/CZ305619B6/cs not_active IP Right Cessation
- 2002-02-15 EP EP14163642.3A patent/EP2767588B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2002-02-15 CA CA2438390A patent/CA2438390C/en not_active Expired - Lifetime
- 2002-02-15 EP EP19203913.9A patent/EP3626819B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2002-02-15 PT PT192039139T patent/PT3626819T/pt unknown
- 2002-02-15 ES ES14172420T patent/ES2608362T5/es not_active Expired - Lifetime
- 2002-02-15 TR TR2019/07641T patent/TR201907641T4/tr unknown
- 2002-02-15 PL PL364281A patent/PL217086B1/pl unknown
- 2002-02-15 DE DE19172361.8T patent/DE19172361T1/de active Pending
- 2002-02-15 TR TR2018/02443T patent/TR201802443T4/tr unknown
- 2002-02-15 AU AU2002244023A patent/AU2002244023B2/en not_active Expired
- 2002-02-15 PT PT16171561T patent/PT3085780T/pt unknown
- 2002-02-15 DE DE14172437.7T patent/DE14172437T1/de active Pending
- 2002-02-15 ES ES14163642T patent/ES2827482T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2002-02-15 DE DE14172420.3T patent/DE14172420T1/de active Pending
- 2002-02-15 ES ES10010741.6T patent/ES2556767T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2002-02-15 DK DK14172420.3T patent/DK2787075T3/en active
- 2002-02-15 EP EP16171559.4A patent/EP3085779B2/en not_active Expired - Lifetime
- 2002-02-15 PT PT141724203T patent/PT2787075T/pt unknown
- 2002-02-15 EP EP10010741.6A patent/EP2264163B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2002-02-15 EP EP14172437.7A patent/EP2786657B1/en not_active Revoked
- 2002-02-15 DK DK14172437.7T patent/DK2786657T3/en active
- 2002-02-15 ES ES14172437.7T patent/ES2660749T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2002-02-15 JP JP2002566337A patent/JP4412900B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 2002-02-15 ES ES19203913T patent/ES2869225T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2002-02-15 DK DK16171559.4T patent/DK3085779T3/da active
- 2002-02-15 PT PT2709544T patent/PT1360287E/pt unknown
- 2002-02-15 PT PT141724377T patent/PT2786657T/pt unknown
- 2002-02-15 EP EP02709544.7A patent/EP1360287B2/en not_active Expired - Lifetime
- 2002-02-15 DE DE14163642.3T patent/DE14163642T1/de active Pending
- 2002-02-15 HU HU0303187A patent/HU231221B1/hu unknown
- 2002-02-15 DK DK19172361.8T patent/DK3572508T3/da active
- 2002-02-15 DK DK16171561.0T patent/DK3085780T3/da active
-
2003
- 2003-07-21 US US10/624,044 patent/US20040018626A1/en not_active Abandoned
- 2003-08-13 ZA ZA200306275A patent/ZA200306275B/en unknown
- 2003-08-15 MX MX2013012216A patent/MX343591B/es unknown
- 2003-12-18 HK HK03109205.9A patent/HK1057058A1/xx not_active IP Right Cessation
- 2003-12-18 HK HK11100421.6A patent/HK1146298A1/xx not_active IP Right Cessation
-
2006
- 2006-11-09 US US11/595,427 patent/US8791323B2/en not_active Expired - Fee Related
-
2009
- 2009-07-29 JP JP2009177054A patent/JP5345463B2/ja not_active Expired - Lifetime
-
2011
- 2011-06-07 US US13/154,976 patent/US9376699B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2011-06-20 US US13/164,176 patent/US8502018B2/en not_active Expired - Lifetime
-
2012
- 2012-02-17 JP JP2012032592A patent/JP5692863B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 2012-12-10 CY CY20121101202T patent/CY1113964T1/el unknown
- 2012-12-10 JP JP2012269458A patent/JP5805056B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 2012-12-19 US US13/719,842 patent/US10227625B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2012-12-19 US US13/719,819 patent/US9708635B2/en not_active Expired - Fee Related
-
2013
- 2013-09-24 US US14/035,432 patent/US10378037B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2013-09-25 US US14/036,784 patent/US10378040B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2013-09-25 US US14/036,530 patent/US9382567B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2013-09-25 US US14/036,774 patent/US10378039B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2013-09-25 US US14/036,514 patent/US9388446B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2013-09-25 US US14/036,518 patent/US10378038B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2013-09-25 US US14/036,778 patent/US20140020124A1/en not_active Abandoned
- 2013-09-25 US US14/036,892 patent/US9528136B2/en not_active Expired - Lifetime
- 2013-09-25 US US14/036,865 patent/US20140017782A1/en not_active Abandoned
- 2013-10-04 US US14/046,279 patent/US9371553B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2013-10-04 US US14/046,285 patent/US10584364B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2013-10-04 US US14/046,291 patent/US10526630B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2013-11-14 US US14/080,114 patent/US9353394B2/en not_active Expired - Fee Related
-
2014
- 2014-06-16 JP JP2014123104A patent/JP2014176391A/ja not_active Withdrawn
- 2014-10-22 HK HK14110567.6A patent/HK1198259A1/xx not_active IP Right Cessation
- 2014-10-22 HK HK14110568.5A patent/HK1198260A1/xx not_active IP Right Cessation
-
2015
- 2015-12-22 CY CY20151101177T patent/CY1117254T1/el unknown
-
2016
- 2016-07-19 US US15/213,947 patent/US10640800B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2016-08-19 JP JP2016161032A patent/JP6426670B2/ja not_active Expired - Lifetime
-
2017
- 2017-01-20 CY CY20171100087T patent/CY1118500T1/el unknown
-
2018
- 2018-04-03 JP JP2018071505A patent/JP6402368B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 2018-04-26 CY CY20181100437T patent/CY1120265T1/el unknown
-
2019
- 2019-06-05 CY CY20191100592T patent/CY1122059T1/el unknown
- 2019-09-17 CY CY20191100968T patent/CY1122039T1/el unknown
-
2020
- 2020-11-11 CY CY20201101065T patent/CY1123912T1/el unknown
-
2021
- 2021-06-14 CY CY20211100526T patent/CY1124458T1/el unknown
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1994002602A1 (en) * | 1992-07-24 | 1994-02-03 | Cell Genesys, Inc. | Generation of xenogeneic antibodies |
Non-Patent Citations (5)
| Title |
|---|
| Brüggemann M. and Taussig M.: " Production of human antibody repertoires in transgenic mice", Curr. Opin. Biotechnol., Vol. 8, 455-458, 1997 * |
| Brüggemann M.: " Human antibody expression in transgenic mice", Archivum Immunologiae et Therapiae Experimentalis, Vol. 49, 203-208, 2001 * |
| Jessen J.R. et al.: "Modification of bacterial artificial chromosomes through chi-stimulated homologous recombination and its application in zebrafish transgenesis", PNAS, Vol. 95(9), 5121-5126, 1998 * |
| Lie Y.S. et al.: "Advances in quantitative PCR technology: 5' nuclease assays", Curr. Opin. Biotechnol., Vol. 9(1), 43-48, 1998 * |
| Yang X.W. et al.: "'Homologous recombination based modification in Escherichia coli and germline transmission in transgenic mice of a bacterial artificial chromosome", Nat. Biotechnol.. Vol. 15(9), 859-865, 1997 * |
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US10640800B2 (en) | Mice that produce hybrid antibodies | |
| US7105348B2 (en) | Methods of modifying eukaryotic cells | |
| AU2002244023A1 (en) | Methods of modifying eukaryotic cells |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MK4A | Patent expired |
Effective date: 20220215 |