KR20220101745A - 암을 치료하기 위한 키메릭 항원 수용체 변형 t 세포의 용도 - Google Patents

암을 치료하기 위한 키메릭 항원 수용체 변형 t 세포의 용도 Download PDF

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KR20220101745A
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칼 에이치. 준
브루체 엘. 레빈
데이비드 엘. 포터
마이클 디. 카로스
마이클 씨. 밀온
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더 트러스티스 오브 더 유니버시티 오브 펜실바니아
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Abstract

본 발명은 인간에서 암을 치료하기 위한 조성물 및 방법을 제공한다. 본 발명은 CAR을 발현하기 위해 유전적으로 변형된 T 세포를 투여하는 단계를 포함하되, 상기 CAR은 항원 결합 도메인, 막통과 도메인, 공자극성 신호전달 영역 및 CD3 제타 신호전달 도메인을 포함한다.

Description

암을 치료하기 위한 키메릭 항원 수용체 변형 T 세포의 용도{USE OF CHIMERIC ANTIGEN RECEPTOR-MODIFIED T CELLS TO TREAT CANCER}
본 발명은 암을 치료하기 위한 키메릭 항원 수용체 변형 T 세포의 용도에 관한 것이다.
관련 출원서의 교차 참조
본 출원서는 2010년 12월 9일자로 출원된 미국 가출원 제 61/421,470 호, 및 2011년 6월 29일자로 출원된 미국 가출원 제 61/502,649 호에 대한 우선권을 주장하며, 이의 모든 개시내용은 본원에서 전체가 참고로 인용된다.
만성 림프구성 백혈병(CLL)을 포함한 B-세포 악성 종양을 앓고 있는 대부분의 환자는 이들 질병으로 인해 사망할 것이다. 환자를 치료하기 위한 하나의 접근법은 키메릭 항원 수용체(CAR)의 발현을 통해 종양 세포 상에 발현된 표적 항원에 대한 T 세포를 유전적으로 변형시키는 것이다. CAR은 인간 백혈구 항원 의존성 방식으로 세포 표면 항원을 인식하도록 설계된 항원 수용체이다. 이러한 유형의 환자를 치료하기 위해 CAR를 발현하는 유전적으로 변형된 세포를 이용하려는 시도는 매우 제한된 성공만을 이루어냈다. 예를 들어, Brentjens 등, 2010, Molecular Therapy 18:4, 666-668, Morgan 등, 2010, Molecular Therapy, 2010년 2월 23일자로 온라인 상에 공개, pages 1-9, 및 Till 등, 2008, Blood. 112:2261-2271을 참고한다.
대부분의 암에서, 종양 특이적 항원은 아직까지 명확하게 정의되어 있지 않지만, B 세포 악성 종양에서는 CD19는 매력적인 종양 표적이다. CD19의 발현은 정상 및 악성 B 세포에 제한되어(Uckun 등, Blood. 1988, 71:13-29), CD19는 CAR을 안전하게 시험하기 위한 널리 허용된 표적이다. CAR이 내생성 T-세포 수용체와 유사한 방식으로 T-세포 활성화를 개시할 수 있을 지라도, 현재까지 이러한 기술의 임상적 적용에 대한 주요 장애로는 CAR+ T 세포의 제한된 생체 내(in vivo) 확장, 주입 이후의 상기 세포의 신속한 소실, 및 실망스러운 임상적 활성이 있었다(Jena 등, Blood. 2010,116:1035-1044; 및 Uckun 등, Blood. 1988, 71: 13-29).
따라서 생체 내에서 확장할 수 있는 CAR를 이용하여 암을 치료하기 위한 조성물 및 방법에 대한 당해 기술분야에서의 필요성이 절실하다. 본 발명은 이러한 필요성을 제시한다.
발명의 요약
본 발명은 키메릭 항원 수용체(CAR)를 암호화하는 단리된 핵산 서열에 있어서, 상기 CAR은 항원 결합 도메인, 막통과 도메인, 공자극성 신호전달 영역, 및 CD3 제타 신호전달 도메인을 포함하고, 이때 상기 CD3 제타 신호전달 도메인은 서열번호 24의 아미노산 서열을 포함하는 것을 특징으로 하는, 단리된 핵산 서열을 포함한다.
하나의 실시형태에서, 상기 핵산서열은 서열번호 12의 아미노산 서열을 포함하는 것을 특징으로 하는, 단리된 핵산 서열을 포함한다.
하나의 실시형태에서, 상기 핵산서열은 서열번호 8의 핵산 서열을 포함하는 것을 특징으로 하는, 단리된 핵산 서열을 포함한다.
하나의 실시형태에서, 상기 항원 결합 도메인은 항체 또는 이의 항원 결합 단편인 것을 특징으로 하는, 단리된 핵산 서열을 포함하고, 상기 항원 결합 단편은 Fab 또는 scFv인 것을 특징으로 하는, 단리된 핵산 서열을 포함한다.
하나의 실시형태에서, 상기 항원 결합 도메인은 종양 항원에 결합하는 것을 특징으로 하는, 단리된 핵산 서열을 포함한다.
하나의 실시형태에서, 상기 종양 항원은 혈액학적 악성 종양과 연관된 것을 특징으로 하는, 단리된 핵산 서열을 포함하고, 상기 종양 항원은 고형 종양과 연관된 것을 특징으로 하는, 단리된 핵산 서열을 포함하며, 상기 종양 항원은 CD19, CD20, CD22, ROR1, 메소텔린(mesothelin), CD33/IL3Ra, c-Met, PSMA, 당지질 F77, EGFRvIII, GD-2, NY-ESO-1 TCR, MAGE A3 TCR, 및 임의의 이의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는, 단리된 핵산 서열을 포함한다.
하나의 실시형태에서, 상기 공자극성 신호전달 영역은 CD27, CD28, 4-1BB, OX40, CD30, CD40, PD-1, ICOS, 림프구 기능 연관 항원-1(LFA-1), CD2, CD7, LIGHT, NKG2C, B7-H3, CD83과 특이적으로 결합하는 리간드, 및 임의의 이의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택된 공자극성 분자의 세포 내 도메인을 포함하는 것을 특징으로 하는, 단리된 핵산 서열을 포함한다.
하나의 실시형태에서, 상기 CD3 제타 신호전달 도메인은 서열번호 18의 핵산 서열에 의해 암호화되는 것을 특징으로 하는, 단리된 핵산 서열을 포함한다.
본 발명은 항원 결합 도메인, 막통과 도메인, 공자극성 신호전달 영역 및 CD3 제타 신호전달 도메인을 포함하는 단리된 키메릭 항원 수용체(CAR)에 있어서, 상기 CD3 제타 신호전달 도메인은 서열번호 24의 아미노산 서열을 포함하는 것을 특징으로 하는, 단리된 키메릭 항원 수용체(CAR)를 포함한다.
하나의 실시형태에서, 상기 CAR은 서열번호 12의 아미노산 서열을 포함하는 것을 특징으로 하는, 단리된 CAR를 포함한다.
하나의 실시형태에서, 상기 항원 결합 도메인은 항체 또는 이의 항원 결합 단편인 것을 특징으로 하는, 단리된 CAR를 포함하며, 상기 항원 결합 단편은 Fab 또는 scFv인 것을 특징으로 하는, 단리된 CAR를 포함한다.
하나의 실시형태에서, 상기 항원 결합 도메인은 종양 항원과 결합하는 것을 특징으로 하는, 단리된 CAR를 포함하고, 상기 종양 항원은 혈액학적 악성 종양과 연관된 것을 특징으로 하는, 단리된 CAR를 포함하며, 상기 종양 항원은 고형 종양과 연관된 것을 특징으로 하는, 단리된 CAR를 포함한다. 상기 종양 항원은 CD19, CD20, CD22, ROR1, 메소텔린, CD33/IL3Ra, c-Met, PSMA, 당지질 F77, EGFRvIII, GD-2, NY-ESO-1 TCR, MAGE A3 TCR, 및 임의의 이의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는, 단리된 CAR를 포함한다.
하나의 실시형태에서, 상기 공자극성 신호전달 영역은 CD27, CD28, 4-1BB, OX40, CD30, CD40, PD-1, ICOS, 림프구 기능 연관 항원-1(LFA-1), CD2, CD7, LIGHT, NKG2C, B7-H3, CD83과 특이적으로 결합하는 리간드, 및 임의의 이의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택된 공자극성 분자의 세포 내 도메인을 포함하는 것을 특징으로 하는, 단리된 CAR를 포함한다.
본 발명은 키메릭 항원 수용체(CAR)를 암호화하는 핵산 서열을 포함하는 세포에 있어서, 상기 CAR은 항원 결합 도메인, 막통과 도메인, 공자극성 신호전달 영역, 및 서열번호 24의 아미노산 서열을 포함하는 CD3 제타 신호전달 도메인을 포함하는 것을 특징으로 하는, 세포를 포함한다.
하나의 실시형태에서, 상기 CAR은 서열번호 12의 아미노산 서열을 포함하는 것을 특징으로 하는, 세포를 포함한다.
하나의 실시형태에서, 상기 핵산은 서열번호 8의 핵산 서열을 포함하는 것을 특징으로 하는, 세포를 포함한다.
하나의 실시형태에서, 상기 항원 결합 도메인은 항체 또는 이의 항원 결합 단편인 것을 특징으로 하는, 세포를 포함하고, 상기 항원 결합 단편은 Fab 또는 scFv인 것을 특징으로 하는, 세포를 포함한다.
하나의 실시형태에서, 상기 항원 결합 도메인은 종양 항원과 결합하는 것을 특징으로 하는, 세포를 포함한다. 상기 종양 항원은 혈액학적 악성 종양과 연관된 것을 특징으로 하는, 세포를 포함하고, 상기 종양 항원은 고형 종양과 연관된 것을 특징으로 하는, 세포를 포함한다. 상기 종양 항원은 CD19, CD20, CD22, ROR1, 메소텔린, CD33/IL3Ra, c-Met, PSMA, 당지질 F77, EGFRvIII, GD-2, NY-ESO-1 TCR, MAGE A3 TCR, 및 임의의 이의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는, 세포를 포함한다.
하나의 실시형태에서, 상기 공자극성 신호전달 영역은 CD27, CD28, 4-1BB, OX40, CD30, CD40, PD-1, ICOS, 림프구 기능 연관 항원-1(LFA-1), CD2, CD7, LIGHT, NKG2C, B7-H3, CD83과 특이적으로 결합하는 리간드, 및 임의의 이의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택된 공자극성 분자의 세포 내 도메인을 포함하는 것을 특징으로 하는, 세포를 포함한다.
하나의 실시형태에서, 상기 CD3 제타 신호전달 도메인은 서열번호 18의 핵산 서열에 의해 암호화되는 것을 특징으로 하는, 세포를 포함한다.
하나의 실시형태에서, 상기 세포는 T 세포, 자연 살해(NK) 세포, 세포 독성 T 림프구(CTL) 및 조절용 T 세포로 이루어진 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는, 세포를 포함한다.
하나의 실시형태에서, 상기 세포는 상기 항원 결합 도메인이 이의 상응하는 항원과 결합하는 경우에 항-종양 면역성을 나타내는 것을 특징으로 하는, 세포를 포함한다.
본 발명은 키메릭 항원 수용체(CAR)를 암호화하는 핵산 서열을 포함하는 벡터에 있어서, 상기 CAR은 항원 결합 도메인, 공자극성 신호전달 영역 및 CD3 제타 신호전달 도메인을 포함하고, 상기 CD3 제타 신호전달 도메인은 서열번호 24의 아미노산 서열을 포함하는 것을 특징으로 하는, 벡터를 포함한다.
하나의 실시형태에서, 상기 CAR은 서열번호 12의 아미노산 서열을 포함하는 것을 특징으로 하는, 벡터를 포함한다.
하나의 실시형태에서, CAR을 암호화하는 상기 단리된 핵산 서열은 서열번호 8의 핵산 서열을 포함하는 것을 특징으로 하는, 벡터를 포함한다.
하나의 실시형태에서, 상기 항원 결합 도메인은 항체 또는 이의 항원 결합 단편인 것을 특징으로 하는, 벡터를 포함한다. 상기 항원 결합 단편은 Fab 또는 scFv인 것을 특징으로 하는, 벡터를 포함한다.
하나의 실시형태에서, 상기 항원 결합 도메인은 종양 항원과 결합하는 것을 특징으로 하는, 벡터를 포함한다. 상기 종양 항원은 혈액학적 악성 종양과 연관된 것을 특징으로 하는, 벡터를 포함한다. 상기 종양 항원은 고형 종양과 연관된 것을 특징으로 하는, 벡터를 포함한다. 상기 종양 항원은 CD19, CD20, CD22, ROR1, 메소텔린, CD33/IL3Ra, c-Met, PSMA, 당지질 F77, EGFRvIII, GD-2, NY-ESO-1 TCR, MAGE A3 TCR, 및 임의의 이의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는, 벡터를 포함한다.
하나의 실시형태에서, 상기 공자극성 신호전달 영역은 CD27, CD28, 4-1BB, OX40, CD30, CD40, PD-1, ICOS, 림프구 기능 연관 항원-1(LFA-1), CD2, CD7, LIGHT, NKG2C, B7-H3, CD83과 특이적으로 결합하는 리간드, 및 임의의 이의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택된 공자극성 분자의 세포 내 도메인을 포함하는 것을 특징으로 하는, 벡터를 포함한다.
하나의 실시형태에서, 상기 CD3 제타 신호전달 도메인은 서열번호 18의 핵산 서열에 의해 암호화되는 것을 특징으로 하는, 벡터를 포함한다.
본 발명은 포유동물에서 표적 세포 개체군 또는 조직에 대한 T 세포 매개 면역 반응을 자극하기 위한 방법에 있어서, 상기 방법은 CAR을 발현하기 위해 유전적으로 변형된 유효량의 세포를 포유동물에 투여하는 단계를 포함하되, 상기 CAR은 항원 결합 도메인, 공자극성 신호전달 영역, 및 서열번호 24의 아미노산 서열을 포함하는 CD3 제타 신호전달 도메인을 포함하고, 상기 항원 결합 도메인은 상기 표적 세포 개체군 또는 조직을 특이적으로 인식하도록 선택되는 것을 특징으로 하는, 방법을 포함한다.
본 발명은 또한 포유동물에서 항-종양 면역성을 제공하는 방법에 있어서, 상기 방법은 CAR을 발현하기 위해 유전적으로 변형된 유효량의 세포를 포유동물에 투여하는 단계를 포함하되, 상기 CAR은 항원 결합 도메인, 공자극성 신호전달 영역, 및 서열번호 24의 아미노산 서열을 포함하는 CD3 제타 신호전달 도메인을 포함하여, 상기 포유동물에서 항-종양 면역성을 제공하는 것을 특징으로 하는, 방법을 포함한다.
본 발명은 종양 항원의 증가된 발현과 연관된 질병, 질환 또는 이상을 앓고 있는 포유동물을 치료하는 방법에 있어서, 상기 방법은 CAR을 발현하기 위해 유전적으로 변형된 유효량의 세포를 포유동물에 투여하는 단계를 포함하되, 상기 CAR은 항원 결합 도메인, 공자극성 신호전달 영역, 및 서열번호 24의 아미노산 서열을 포함하는 CD3 제타 신호전달 도메인을 포함하여, 상기 포유동물을 치료하는 것을 특징으로 하는, 방법을 포함한다.
하나의 실시형태에서, 상기 세포는 자가성 T 세포인 것을 특징으로 하는, 방법을 포함한다.
하나의 실시형태에서, 상기 종양 항원는 CD19, CD20, CD22, ROR1, 메소텔린, CD33/IL3Ra, c-Met, PSMA, 당지질 F77, EGFRvIII, GD-2, NY-ESO-1 TCR, MAGE A3 TCR, 및 임의의 이의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는, 방법을 포함한다.
본 발명은 만성 림프구성 백혈병을 앓는 인간을 치료하는 방법에 있어서, 상기 방법은 CAR을 발현하기 위해 유전적으로 변형된 T 세포를 인간에 투여하는 단계를 포함하되, 상기 CAR은 항원 결합 도메인, 공자극성 신호전달 영역, 및 서열번호 24의 아미노산 서열을 포함하는 CD3 제타 신호전달 도메인을 포함하는 것을 특징으로 하는, 방법을 포함한다.
하나의 실시형태에서, 상기 인간은 적어도 하나의 화학 요법제에 대해 내성이 있는 것을 특징으로 하는, 방법을 포함한다.
하나의 실시형태에서, 상기 만성 림프구성 백혈병은 난치성 CD19+ 백혈병 및 림프종인 것을 특징으로 하는, 방법을 포함한다.
본 발명은 암으로 진단된 인간에서 유전적으로 조작된 T 세포의 존속 개체군을 생성하는 방법에 있어서, 상기 방법은 CAR을 발현하기 위해 유전적으로 조작된 T 세포를 인간에 투여하는 단계를 포함하되, 상기 CAR은 항원 결합 도메인, 공자극성 신호전달 영역, 및 서열번호 24의 아미노산 서열을 포함하는 CD3 제타 신호전달 도메인을 포함하고, 상기 유전적으로 조작된 T 세포의 존속 개체군은 투여 이후에 적어도 1개월 동안 존속하는 것을 특징으로 하는, 방법을 포함한다.
하나의 실시형태에서, 상기 유전적으로 조작된 T 세포의 존속하는 개체군은 상기 인간에 투여된 T 세포, 상기 인간에 투여된 T 세포의 자손, 및 이의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택된 적어도 하나의 세포를 포함하는 것을 특징으로 하는, 방법을 포함한다.
하나의 실시형태에서, 상기 유전적으로 조작된 T 세포의 존속 개체군은 메모리 T 세포를 포함하는 것을 특징으로 하는, 방법을 포함한다.
하나의 실시형태에서, 상기 암은 만성 림프구성 백혈병인 것을 특징으로 하는, 방법을 포함한다. 상기 만성 림프구성 백혈병은 난치성 CD19+ 백혈병 및 림프종인 것을 특징으로 하는, 개체군의 생성 방법과 만성 림프구성 백혈병은 치료되는 것을 특징으로 하는, 개체군의 생성 방법을 포함한다.
하나의 실시형태에서, 상기 유전적으로 조작된 T 세포의 존속 개체군은 투여 이후에 적어도 3개월 동안 상기 인간에서 존속하는 것을 특징으로 하는, 개체군의 생성 방법을 포함한다.
하나의 실시형태에서, 상기 유전적으로 조작된 T 세포의 존속하는 개체군은 투여 이후 적어도 4개월, 5개월, 6개월, 7개월, 8개월, 9개월, 10개월, 11개월, 12개월, 2년, 또는 3년 동안 상기 인간에서 존속하는 것을 특징으로 하는, 개체군의 생성 방법을 포함한다.
본 발명은 암으로 진단된 인간에서 유전적으로 조작된 T 세포의 개체군을 확장하는 방법에 있어서, 상기 방법은 CAR을 발현하기 위해 유전적으로 조작된 T 세포를 인간에 투여하는 단계를 포함하되, 상기 CAR은 항원 결합 도메인, 공자극성 신호전달 영역, 및 서열번호 24의 아미노산 서열을 포함하는 CD3 제타 신호전달 도메인을 포함하고, 상기 투여된 유전적으로 조작된 T 세포는 상기 인간에서 자손 T 세포의 개체군을 생성하는 것을 특징으로 하는, 방법을 포함한다.
하나의 실시형태에서, 상기 인간에서 상기 자손 T 세포는 메모리 T 세포를 포함하는 것을 특징으로 하는, 방법을 포함한다.
하나의 실시형태에서, 상기 T 세포는 자가성 T 세포인 것을 특징으로 하는, 방법을 포함한다.
하나의 실시형태에서, 상기 인간은 적어도 하나의 화학 요법제에 대해 내성이 있는 것을 특징으로 하는, 방법을 포함한다.
하나의 실시형태에서, 상기 암은 만성 림프구성 백혈병인 것을 특징으로 하는, 방법을 포함한다. 상기 만성 림프구성 백혈병은 난치성 CD19+ 백혈병 및 림프종인 것을 특징으로 하는, 방법을 포함한다.
하나의 실시형태에서, 상기 자손 T 세포의 개체군은 투여 이후에 적어도 3개월 동안 상기 인간에서 존속하는 것을 특징으로 하는, 방법을 포함한다.
하나의 실시형태에서, 상기 자손 T 세포의 개체군은 투여 이후에 적어도 4개월, 5개월, 6개월, 7개월, 8개월, 9개월, 10개월, 11개월, 12개월, 2년, 또는 3년 동안 상기 인간에서 존속하는 것을 특징으로 하는, 방법을 포함한다.
하나의 실시형태에서, 상기 암은 치료되는 것을 특징으로 하는, 방법을 포함한다.
본 발명의 바람직한 실시형태의 하기 상세한 설명은 첨부된 도면을 참고하여 나타내는 경우에 더욱 양호하게 이해될 것이다. 본 발명을 예시할 목적으로, 현재 바람직한 실시형태가 도면에 도시되어 있다. 그러나 본 발명은 도면에 도시된 실시형태의 정확한 배열 및 방편에 제한되지 않는 것으로 이해되어야 한다.
도 1A 내지 도 1C를 포함한 도 1은 유전자 전달 벡터 및 이식 유전자, 유전자 변형된 T 세포의 제조 및 임상적 프로토콜 설계를 개략적으로 보여주는 일련의 이미지이다. 도 1A는 주요 기능 요소를 나타내는 렌티바이러스 벡터 및 이식 유전자를 나타낸다. FMC63 쥐 단일 클론성 항체로부터 유래한 항-CD19 scFv, 인간 CD8α 힌지(hinge) 및 막통과 도메인, 및 인간 4-1BB 및 CD3 제타 신호전달 도메인의 발현을 지시하는 수포성 구내염 바이러스 단백질 G 위형(pseudo유형)의 임상적 등급 렌티바이러스 벡터(pELPs 19BBz로 명명됨)를 제조하였다. 상기 이식 유전자의 항구적 발현은 EF-1α(연장 인자-1α 프로모터); LTR, 긴 말단 반복서열; RRE, rev 반응 요소; 중심 폴리피리미딘 트랙(cPPT); 및 중심 종결 서열(CTS)의 포함에 의해 나타났다. 도면은 일정한 축적으로 도시되지 않았다. 도 1B는 T 세포의 제조를 나타낸다. 자가성 세포는 아페레시스(apheresis)를 통해 수득되었고, T 세포는 단핵성 세포 수비(cell elutriation)에 의해 부유화되고 세척되었으며, 잔류 백혈병 세포는 T 세포의 수동 선택 및 활성화를 위해 항-CD3/CD28로 코팅된 상자성 비드를 첨가함으로써 고갈되었다. 렌티바이러스 벡터는 세포 활성화 시점에 첨가되고, 배양 개시 3일 후에 세척하였다. 세포는 8 내지 12일 동안 교반용 플랫폼 장치(WAVE 생물 반응기 시스템) 상에서 배양하였다. 배양 마지막 날에 상기 비드를 자기장 상에 통과시킴으로써 제거하였으며, CART19 T 세포를 수확하고, 불용해성 배지에서 냉동 보존하였다. 도 1C는 임상적 프로토콜 설계를 나타낸다. 환자를 상술한 바와 같은 림프구 제거 화학요법에 적용한 후, 15 내지 20분의 기간에 걸쳐 정맥 내 중력 유동 적하에 의해 첫 번째 CART19을 주입하였다. 상기 주입은 화학요법이 완료된 지 최초 1 내지 5일 이후에 3일 동안에 걸친 분할 투여량 접근법(10%, 30% 및 60%)을 이용하여 이루어졌다. 종료점 검정은 연구 4번째 주에 수행되었다. 능동 모니터링이 끝날 무렵에 개체를 FDA 지침서에 따라 장기간 추적 조사를 위한 목적지 프로토콜로 전임하였다.
도 2A 내지 도 2F를 포함한 도 2는 CART19 세포가 혈액 및 골수의 생체 내 증식 및 존속이 지속됨을 증명한 일련의 이미지이다. 도 2A 및 도 2D에서 도시된 바와 같은 UPN 01, 도 2B 및 도 2E에서 도시된 바와 같은 UPN 02 및 도 2C 및 도 2F에서 도시된 바와 같은 UPN 03으로부터 수득된 샘플인 도 2A 내지 도 2C에 도시된 바와 같은 전혈 또는 도 2D 내지 도 2F에 도시된 바와 골수로부터 단리된 DNA를 CART19 서열을 검출하고 정량화하기 위해 정량화된 검정을 이용하는 Q-PCR 분석에 대량으로 적용하였다. 각각의 데이터 포인트(data point)는 최대 % CV가 1.56% 미만인 상태에서 100 내지 200ng의 게놈 DNA에 대한 3회 측정치의 평균을 나타낸다. 상기 검정을 위한 성공/실패 파라미터에는 참고용 샘플의 증폭 기울기 및 효율, 및 참고용 샘플의 증폭에 대한 기존의 범위가 포함되어 있다. 표준 곡선 범위에 의해 확립된 검정에 대한 정량화의 하한치는 게놈 DNA의 마이크로그램(㎍) 당 이식 유전자 2개의 복사수였고; 이 같은 수치 미만의 샘플 값은 추정치로서 고려되며, 적어도 2/3 복제수가 상기 값에 대한 % CV가 15%인 상태에서 Ct 값을 생성하는 경우에 제시된다. CART19 세포는 UPN 01 및 UPN 03에 대해 0일째, 1일째 및 2일째 날에 주입되었고, UPN 02에 대해 0일째, 1일째, 2일째 및 11일째 날에 주입되었다.
도 3A 내지 도 3D를 포함한 도 3은 CART19 세포의 주입 및 도 3D에 도시된 바와 같이 UPN 03으로부터 골수에서 동일한 분석물질의 일련의 평가 이후의 표시된 날짜에 도 3A에 도시된 바와 같은 UPN 01, 도 3B에 도시된 바와 같은 UPN 02 및 도 3C에 도시된 바와 같은 UPN 03에서의 혈청 사이토카인, 케모카인 및 사이토카인 수용체에서의 변화를 종단적으로 측정한, CAR T 세포의 주입 전후에 혈청 및 골수 사이토카인을 증명한 일련의 이미지이다. 샘플은 루미넥스(Luminex) 비드 배열 기술 및 기-조립되고 실증된 다중분석 키트를 이용하는 다중 분석에 적용하였다. 3배 이상의 변화를 갖는 분석물질이 표시되어 있으며, 도 3A 내지 도 3C에 도시된 바와 같은 기준선으로부터의 상대적인 변화, 또는 도 3D에 도시된 바와 같은 절대값으로서 작도된다. 각각의 시점에서의 각각의 분석물질에 대한 절대값은 표준 곡선에 대한 80 내지 120%의 관측/예상 절사값(cutoff value)에 의해 결정된 정량화 상항치 및 하한치(ULOQ 및 LLOQ)와 함께 3배의 8점 희석 시리즈에 대한 재조합 단백질 기반 표준 곡선으로부터 결정되었다. 각각의 샘플은 산정된 평균값 및 대부분의 경우에 10% 미만의 % CV로 2회 평가되었다. 절대값에 대한 광범위한 범위의 정황에서 통합된 데이터 표현을 조절 위해 데이터는 각각의 분석물질에 대한 기준선 값에 대해 배수 변화로서 나타낸다. 기준선 값이 검출 불가능한 경우, 표준 곡선의 최저치의 절반을 기준선 값으로 사용하였다. 분석물질 및 기준선(0번째 날)의 값에 대한 표준 곡선 범위(UPN 01, UPN 02 및 UPN 03에 대해 괄호 안에 순서대로 나열됨: 전체 단위는 pg/㎖임): IL1-Rα: 35.5-29,318(689, 301, 287); IL-6: 2.7-4,572(7, 10.1, 8.7); IFN-γ: 11.2-23,972(2.8, ND, 4.2 ); CXCL10: 2.1-5,319(481, 115, 287 ); MIP-1β: 3.3-7,233(99.7, 371, 174 ); MCP-1: 4.8-3,600(403, 560, 828); CXCL9: 48.2-3,700(1,412, 126, 177); IL2-Rα: 13.4-34,210(4,319, 9,477, 610); IL-8: 2.4-5,278(15.3, 14.5, 14.6); IL-10: 6.7-13,874(8.5, 5.4, 0.7); MIP-1α: 7.1-13,778(57.6, 57.3, 48.1).
도 4A 내지 도 4D를 포함한 도 4는 CART19의 장기간 표면 발현 및 기능적 메모리 CAR의 생체 내 확립을 나타낸 일련의 이미지이다. 도 4A는 말초 및 골수에서 CAR 발현 CD3+ 림프구의 검출 및 B 세포의 부재를 나타낸다. CART19 세포의 주입 후 169일째 날에 UPN 03으로부터 수득된 새로이 가공된 말초 혈액 또는 골수 단핵성 세포는 CAR19의 표면 발현(상부) 또는 B 세포의 부재(하부)는 유동 세포분석법으로 측정되었으며; 대조군으로서 건강한 기증자 ND365로부터 수득된 PBMC를 염색하였다. CD3+ 및 B 세포 개체군에 대한 게이팅(gating) 전략은 도 9에 나타나 있다. CD3+ 림프구에서의 CAR19 발현을 평가하기 위해, 샘플을 CD14-PE-Cy7 및 CD16-PE-Cy7(덤프 채널) 및 CD3-FITC에 대한 항체로 동시 염색하고, CD3+ 상에서 수동적으로 게이팅하였으며, CD8a-PE, 및 알렉사(Alexa)-647에 접합된 항-CAR19 유전자형 항체로 동시 염색함으로써 CD8+ 및 CD8-림프구 구획에서의 CAR19 발현에 대해 측정하였다. 작도에서의 데이터는 덤프음성채널/CD3 양성 세포 개체군 상에서 게이팅된다. B 세포의 존재를 평가하기 위해, 샘플을 CD14-APC 및 CD3-FITC(덤프 채널)에 대한 항체로 동시 염색하고, CD20-PE 및 CD19-PE-Cy-7에 대한 항체로 동시 염색함으로써 덤프 음성 채널 분획에서의 B 세포의 존재에 대해 평가하였다. 모든 경우에, 음성 게이트 4분원(gate quadrant)이 도 4B 및 도 4C에 도시된 바와 같이 비-염색 대조군 상에서 발현되었다. CD4+(도 4B) 및 CD8+(도 4C) T 세포의 서브셋의 T 세포 면역 표현형 검사가 도시되어 있다. T 세포 주입 후 56일째 및 169일째 날에 아페레시스에 의해 수득된 UPN 03으로부터의 냉동된 말초 혈액 샘플을 어떠한 인자의 첨가 없이 배양 배지에 하룻밤 동안 방치하고, 세척하고, T 세포 메모리, 활성화 및 고갈에 대한 마커의 발현을 위한 다중 파라미터 면역 표현형 검사를 실시하였다. 도 8에 도시된 바와 같은 게이팅 전략은 덤프음성채널(CD14, CD16, 라이브/데드 아쿠아(live/dead aqua)) 및 CD3 양성 세포에 대한 초기 게이팅과 그 이후의 CD4+ 및 CD8+ 세포에 대한 양성 게이팅을 포함한다. 게이트 및 4분원은 FMO 대조군(CAR, CD45RA, PD-1, CD25, CD127, 및 CCR7)을 이용하여 확립되거나, 양성 세포 개체군(CD3, CD4, 및 CD8) 상에서 게이팅 및 명확하게 설명된 서브셋(CD27, CD28, 및 CD57)에 의해 확립되었으며; 데이터는 사건의 객관적인 가시화를 위한 이중 지수 변환 이후에 표시되었다. 도 4D는 존속하는 CAR 세포의 기능적 역량을 나타낸다. T 세포 주입 주입 후 56일째 및 169일째 날에 아페레시스에 의해 수득된 UPN 03으로부터의 냉동된 말초 혈액 샘플은 어떠한 인자의 첨가 없이 배양 배지에서 하룻밤 동안 방치하고, 세척하였으며, CD107 과립 감소 검정을 이용하여 CD19 발현 표적 세포를 인식하는 능력에 대해 생체 외에서 직접 평가하였다. 항-CD28, 항-CD49d 및 CD107-FITC의 존재 하에 2시간의 배양 이후에 세포 혼합물을 수확하고, 세척하였으며, CD19 발현 표적에 반응하여 과립 감소하도록 하는 CART19 세포의 능력을 평가하기 위해 다중 파라미터 유동 세포 분석법에 적용하였다. 상기 게이팅 전략은 덤프음성채널(CD14-PE-Cy7, CD16-PE-Cy7, 라이브/데드 아쿠아) 및 CD3-PE 양성 세포 상에서의 초기 게이팅, 및 그 이후의 CD8-PE-텍사스 레드(Texas Red) 양성 세포에 대한 게이팅을 포함하고 있었으며; 제시된 데이터는 CD8+ 게이팅된 개체군을 위한 것이었다. 모든 경우에, 음성 게이트 4분원은 비-염색 대조군 상에서 확립되었다.
도 5A 내지 도 5C를 포함한 도 5는 CART19 세포의 주입 이후에 임상적 반응을 평가하는 실험 결과를 나타낸 일련의 이미지이다. 도 5A는 UPN 02가 최소 반응(R/B, 화살표)으로 2사이클의 리툭시맵(rituximab) 및 벤다무스틴(bendamustine)으로 처리되었다는 것을 나타낸다. CART19 T 세포는 벤다무스틴만(B, 화살표)으로 처리한지 초기 4일 이후에 주입되었다. 리툭시맵 및 벤다무스틴 내성 백혈병은 주입 18일 이내에 절대 림프구 개수(ALC)에서 60,600/㎕에서 200/㎕로 감소에 의해 나타낸 바와 같이 혈액으로부터 신속하게 제거되었다. 코르티코스테로이드 처리는 불안감 및 비감염성 발열 증상으로 인해 주입 후 18일째 날에 시작되었다. 참고용 라인(점선)은 ALC에 대한 정상 상한치를 나타낸다. 도 5B는 CD20에 대한 UPN 01 및 UPN 03 환자로부터 얻은 순차적인 골수 생검 또는 응고 검체를 염색하는 예시적인 실험의 결과를 나타낸다. 환자 둘 모두에 존재하는 백혈병에 의한 전처리 침윤은 세포충실도(cellularity) 및 3계통 조혈(trilineage hematopoiesis)의 정상화가 동반되는 후처리 검체 상에는 존재하지 않았다. UPN 01은 유동 세포 분석법, 세포 유전학 및 형광 원위치 형셩법(flourescence in situ hybridization, FISH) 를 시행한 바, 어떠한 CLL세포도 검출되지 않았으며, 골수 또는 혈액에서의 유동 세포 분석법에 의해 검출된 정상 B 세포를 갖지 않았다. UPN 03은 +23일째 날에 유동 세포 분석법에 의해 확인된 5%의 잔류 정상 CD5 음성 B 세포를 가졌으며, 이는 이들이 다클론성임을 나타냈으며; +176일째 날에는 어떠한 정상 B 세포가 검출되지 않았다. 도 5C는 화학요법 내성의 일반적인 림프샘 장애의 신속한 분해능을 평가하기 위해 순차적인 CT 이미지화를 이용한 실험 결과를 나타낸다. 좌우 엽액량(Bilateral axillary mass)은 화살표 및 원으로 표시된 바와 같이 주입 후 83일째(UPN 01) 및 31일째(UPN 03) 정도에 분해되었다.
도 6A 내지 도 6C를 포함한 도 6은 UPN 01, UPN 02 및 UPN 03에 대해 순환 중인 절대 림프구의 개수 및 총 CART19+ 세포를 나타내는 일련의 이미지이다. 순환 중인 총 CART19+ 세포에 대한 림프구(총 정상 세포 및 CLL 세포)의 총수는 혈액의 부피가 5.0ℓ이라는 가정 하에 CBC 값으로부터의 절대 림프구 개수를 이용하여 3개의 개체 모두에 대해 작도된다. 순환 중인 CART19 세포의 총수는 도 2에 도시된 바와 같이 절대 림프구 개수를 갖는 직렬식 CBC 값 및 Q-PCR 마킹 값을 이용하여 산정되었으며, 복사수/㎍ DNA를 본원에서 다른 경우에 개시된 바와 같이 평균 마킹율(%)로 변환하였다. 상기 Q-PCR 마킹율(%)은 주입 생성물의 유동 세포 분석 특성화 및 샘플로부터의 데이터와 밀접하게 관련(2 미만의 배수 변이)이 있는 것으로 밝혀졌으며, 이때 수반되는 유동 세포 분석법 데이터는 염색에 의해 직접적으로 CART19 세포를 계산하는데 이용 가능하였다.
도 7A 내지 도 7D를 포함한 도 7은 T 세포 주입 후 71일째 날에 UPN-01 PBMC 중의 CART19 양성 세포의 직접적인 생체 외(ex vivo) 검출을 포함하는 실험을 나타낸 일련의 이미지이다. 주입 후 71일째 날에 새로운 아페레시스 이후에 수집되거나 T 세포 생성물(기준선)의 제조를 위해 아페레시스 시점에 냉동되고 염색 이전에 생존 가능하게 해동된 UPN-01 PBMC는 표면 상의 CAR19 일부분을 발현하는 CART19 세포의 존재 여부를 검출하기 위해 유동 세포 분석법을 적용하였다. 림프구에서 CAR19의 발현을 평가하기 위해, 샘플을 CD3-PE, 및 알렉사-647에 접합된 항-CAR19 유전자형 항체와 동시 염색하고, CD3-PE 단독으로 동시 염색하였다(CAR19를 위한 FMO). 도 7A는 초기 림프구 게이트가 전방 및 측면 산란(FSC 대 SSC)에 기초하여 확립된 후, CD3+ 세포 상의 게이팅에 의해 확립되었다는 것을 나타낸다. 도 7B는 CD3+ 림프구 게이트를 나타내고; 도 7C는 CAR 유전자형 염색을 나타내고; 도 7D는 CAR 유전자형 FMO를 나타낸다. CAR19 양성 게이트는 CAR19 FMO 샘플 상에서 확립되었다.
도 8A 내지 도 8C를 포함한 도 8은 UPN 03 혈액 검체에서의 다색성 유동 세포 분석법을 이용함으로써 CART19 발현을 확인하기 위한 게이팅 전략을 나타낸 일련의 이미지이다. 도 8C에 대한 게이팅 전략은 56일째 날의 UPN 03 샘플에 대해 도시되어 있으며, 169일째 날의 UPN 03 샘플에 대해 사용된 전략을 나타낸다. 도 8A는 덤프(CD14, CD16, 라이브/데드 아쿠아) 음성 및 CD3 양성인 일차 게이트를 나타낸다. 도 8B는 CD4 양성 및 CD8 양성인 이차 게이트를 나타낸다. 도 8C는 CAR19 양성 및 CAR19 음성인 삼차 게이트를 나타내며, 이들은 CAR FMO 샘플(가장 오른쪽 패널) 상에서 발현되었다.
도 9는 혈액 및 골수 검체에서의 CART19 발현 및 B 세포를 직접적으로 확인하기 위한 게이팅 전략을 나타낸다. 말초 및 골수에서의 CAR 발현 CD3+ 림프구의 검출 및 B 세포의 부재를 나타내는 도 4A에 대한 게이팅 전략: 좌측 작도: 세포 게이트; 상부 패널: CD3+ 세포에 대한 양성 게이트; 및 하부 패널: B 세포에 대한 음성 게이트(CD14 음성 및 CD3 음성). NC365는 건강한 기증자로부터의 말초 혈액 대조군 세포이다.
도 10은 환자의 인구 통계 및 반응을 요약한 이미지이다.
도 11은 CART-19 세포의 제조 공정을 나타낸다.
도 12A 내지 도 12D를 포함한 도 12는 환자에서의 임상적 반응을 나타낸 일련의 이미지이다. 도 12A는 환자로부터 T 세포를 감염시키기 위해 사용된 렌티바이러스 벡터를 나타낸다. FMC63 쥐 단일 클론성 항체로부터 유래한 항-CD19 scFv, 인간 CD8α 힌지 및 막통과 도메인, 및 인간 4-1BB 및 CD3ζ 신호전달 도메인의 발현을 지시하는 수포성 구내염 바이러스 단백질 G(pELPs 19-BB-z)의 위형의 임상적 등급의 렌티바이러스 벡터를 제조하였다. 도 12A의 하면에서 CAR19 이식 유전자의 세부사항은 주요 기능 요소를 나타낸다. 도면은 일정한 축적으로 도시되지 않는다. 3'LTR은 3' 긴 말단 반복서열을 나타내고; 5'LTR은 5' 긴 말단 반복서열을 나타내며; Amp R은 암피실린 저항 유전자를 나타내고; 소 GH Poly A는 폴리아데닐화 꼬리를 갖는 소 성장 호르몬을 나타내고; cPPT/CTS는 중심 종결 서열을 갖는 중심 폴리푸린 트랙을 나타내고; EF-1α는 연장 인자 1-알파를 나타내며; env는 외피를 나타내고; gag는 그룹 특이적 항원을 나타내고; pol은 폴리머라아제 및 역전사 효소를 암호화하는 HIV 유전자를 나타내고; R은 반복서열을 나타내고; RRE는 rev 반응 요소를 나타내고; scFv는 단일-체인 가변성 단편을 나타내고; TM은 횡단막을 나타내고; WPRE는 우드처크(Woodchuck) 간염 바이러스의 전사후 조절용 요소를 나타낸다. 도 12B는 첫 번째 CART19-세포 주입 이후의 1일째부터 28일째까지의 혈청 크레아틴, 요산, 및 젖산 탈수소효소(LDH)의 수준을 나타낸다. 상기 피크 수준은 종양 용해 증후군으로 인한 입원과 일치한다. 도 12C는 화학요법(CART19-세포 주입 전 -1일째) 후 3일째, 및 CART19-세포 주입(헤마톡실린(hematoxylin) 및 에오신(eosin)) 후 23일째 및 6개월째 날에 수득된 골수-생검 검체를 나타낸다. 기준선 검체는 총 세포충실도의 40%를 차지하는 작고 성숙한 림프구의 지배적으로 간질성인 집성체에 의해 침유된 3계통 조혈을 갖는 과세포성 골수(60%)를 나타낸다. 23일째 날에 수득된 검체는 T 세포와 CD5 음성 B 세포의 혼합물과 함께 만성 림프성 백혈병(CLL)에 대해 음성인 잔류 림프성 집성체(10%)를 나타낸다. 주입 후 6개월째 수득된 검체는 림프성 집성체의 부재 및 CLL의 계속적인 부재와 더불어 3계통 조혈을 나타낸다. 도 12D는 환자가 상기 연구에 등록하기 전에 수득된 조영 증강된 CT 스캔, 및 첫 번째 주입 이후 31일째 및 104일째 수득된 조영 증강된 CT 스캔을 나타낸다. 전-주입 CT 스캔은 1㎝ 대 3㎝ 크기의 좌우 엽액량을 나타낸다. 겨드랑이 림프샘 장애의 회귀는 주입 1개월 이내에 발생하고, 유지되었다. 화살표는 치료요법 이전의 다양한 확대된 림프절을 강조하며, 요법 이후의 상당한 CT 스캔 상의 림프절 반응을 강조하고 있다.
도 13A 내지 도 13E를 포함한 도 13은 키메릭 항원 수용체 T-세포의 주입 전후의 혈청 및 골수 사이토카인을 나타낸 일련의 이미지이다. 사이토카인 인터페론-γ(도 13A), 인터페론-γ 자극 케모카인인 C-X-C 모티프 케모카인 10(CXCL10)(도 13B) 및 C-X-C 모티프 리간드 9(CXCL9)(도 13C), 및 인터류킨-6(도 13D)에 대한 일련의 측정은 주어진 시점에 수행되었다. 이들 염증성 사이토카인 및 케모카인의 증가는 종양 용해 증후군의 발현과 일치하였다. 낮은 수준의 인터류킨-6이 기준선에서 검출되는 반면, 인터페론-γ, CXCL9 및 CXCL10은 기준선에서의 검출 제한치 미만이었다. 괄호 안에 주어진 환자에서의 분석물질 및 기준선 값에 대한 표준-곡선 범위는 하기와 같다: 인터페론-γ는 1㎖ 당 11.2 내지 23,972pg(1㎖ 당 1.4pg); CXCL10은 1㎖ 당 2.1 내지 5,319pg(1㎖ 당 274pg)이고; CXCL9는 1㎖ 당 48.2 내지 3,700pg(1㎖ 당 177pg)이고; 인터류킨-6은 1㎖ 당 2.7 내지 4,572pg(1㎖ 당 8.3pg)이고; 종양 괴사 인자 α(TNF-α)는 1㎖ 당 1.9 내지 4,005(검출 불능)이고; 가용성 인터류킨-2 수용체는 1㎖ 당 13.4 내지 34,210pg(1㎖ 당 644pg)이다. 도 13E는 골수에서의 면역 반응의 유도를 나타낸다. 사이토카인 TNF-α, 인터류킨-6, 인터페론-γ, 케모카인 CXCL9 및 가용성 인터류킨-2 수용체는 CART19 세포 주입 전후에 주어진 날짜에 골수 흡인물로부터 수득된 상등액에서 측정되었다. 인터류킨-6, 인터페론-γ, CXCL9 및 가용성 인터류킨-2 수용체 수준에서의 증가는 종양 용해 증후군, 피크 키메릭 항원 수용체 T 세포의 침윤, 및 백혈병 침윤의 소거와 일치하였다.
도 14A 내지 도 14C를 포함한 도 14는 키메릭 항원 수용체 T 세포의 생체 내 확장 및 존속을 나타낸 일련의 이미지이다. 게놈 DNA(gDNA)는 키메릭 항원 수용체 T-세포의 주입 전후의 일련의 시점에 수집된 환자의 전혈(도 14A) 및 골수 흡인물(도 14B)의 샘플로부터 단리되고, 정량적 실시간 폴리머라아제 연쇄 반응(PCR) 분석을 위해 사용되었다. 유전자 도입 DNA 및 CAR19를 발현하는 림프구의 비율(%)에 기초하여 평가된 바와 같이, 키메릭 항원 수용체 T 세포는 말초 혈액 및 골수에서 초기 이식 수준보다 1,000배 이상 높은 수준까지 증가하였다. 키메릭 항원 수용체 T 세포의 피크 수준은 일시적으로는 종양 용해 증후군과 연관이 있었다. 0일째 수득된 혈액 샘플, 및 1일째 수득된 골수 샘플은 기준선에서 어떠한 PCR 신호를 갖지 않았다. 기준선에서의 골수 흡인물의 유동 세포 분석(도 14C)은 소량의 T 세포와 함께 면역 글로불린 카파 경쇄의 염색에 의해 평가된 바와 같이 클론성인 CD19+CD5+ 세포에 의해 현저한 침윤을 나타낸다. 주입 후 31일째 날에 CD5+ T 세포가 존재했으며, 어떠한 정상 B 세포 또는 악성 B 세포도 검출되지 않았다. 수치는 각각의 4분원에서 세포의 상대적인 빈도를 나타낸다. x축 및 y축 둘 모두는 로그10 축척을 나타낸다. 게이팅 전략은 좌측의 박스 내의 CD19+ 및 CD5+ 세포의 초기 게이팅, 및 CD19+CD5+ 서브셋 상의 면역 글로불린 카파 및 람다의 발현의 후속적인 확인(우측 박스)을 포함한다.
본 발명은 혈액학적 악성 종양 및 고형 종양을 포함하지만 이에 한정되지 않는 암을 치료하기 위한 조성물 및 방법에 관한 것이다. 본 발명은 키메릭 항원 수용체(CAR)를 발현하기 위해 형질 도입된 T 세포의 입양 세포 전달의 전략에 관한 것이다. CAR은 특이적 항-종양 세포성 면역 활성을 나타내는 키메릭 단백질을 생성하기 위해 T 세포 수용체 활성화 세포 내 도메인과 목적하는 항원(예를 들어, 종양 항원)에 대한 항체 기반 특이성을 조합하는 분자이다.
본 발명은 일반적으로 목적하는 CAR을 안정적으로 발현하기 위해 유전적으로 변형된 세포에 관한 것이다. CAR을 발현하는 T 세포는 본원에서 CAR T 세포 또는 CAR 변형된 T 세포로 지칭된다. 바람직하게는, 상기 세포는 이의 표면 상에 항체 결합 도메인을 안정하게 발현하여 MHC에 독립적인 신규한 항원 특이성을 부여하기 위해 유전적으로 변형될 수 있다. 몇몇의 경우, 상기 T 세포는 CD3-제타 체인 또는 FcγRI 단백질의 세포 내 도메인과 특정 항체의 항원 인식 도메인을 조합하는 CAR을 단일 키메릭 단백질 내로 안정적으로 발현하기 위해 유전적으로 변형된다.
하나의 실시형태에서, 본 발명의 CAR은 항원 인식 도메인을 갖는 세포 외 도메인, 막통과 도메인 및 세포질 도메인을 포함한다. 하나의 실시형태에서, 자연적으로 상기 CAR 내의 도메인 중 하나와 연관이 있는 막통과 도메인이 사용된다. 다른 실시형태에서, 상기 막통과 도메인은 수용체 복합체의 기타 멤버와의 상호작용을 최소화하기 위해 동일하거나 상이한 표면 막 단백질의 막통과 도메인에 대한 이 같의 도메인의 결합을 피하도록 아미노산 치환에 의해 선택되거나 변형될 수 있다. 바람직하게는, 상기 막통과 도메인은 CD8α 힌지 도메인이다.
세포질 도메인에 대하여, 본 발명의 CAR은 CD28 및/또는 4-1BB 신호전달 도메인 자체를 포함하도록 설계될 수 있거나, 본 발명의 CAR의 배경에서 유용한 임의의 기타 목적하는 세포질 도메인(들)과 조합될 수 있다. 하나의 실시형태에서, 상기 CAR의 세포질 도메인은 CD3-제타의 신호전달 도메인을 추가로 포함하도록 설계될 수 있다. 예를 들어, 상기 CAR의 세포질 도메인은 CD3-제타, 4-1BB 및 CD28 신호전달 모듈 및 이의 조합을 포함하지만, 이에 제한되지 않는다. 따라서 본 발명은 CAR T 세포, 및 주입 요법을 위한 이들의 사용 방법을 제공한다.
하나의 실시형태에서, 본 발명의 CAR T 세포는 목적하는 CAR, 예를 들어 항-CD19, CD8α 힌지 및 막통과 도메인, 및 인간 4-1BB 및 CD3제타 신호전달 도메인을 포함하는 CAR을 포함하는 렌티바이러스 벡터를 세포에 도입함으로써 생성될 수 있다. 본 발명의 CAR T 세포는 생체 내에서 복제할 수 있으며, 이는 종양 억제의 유지를 초래할 수 있는 장기간 존속을 초래한다.
하나의 실시형태에서, 본 발명은 림프구 주입을 이용하여 암을 앓고 있는 환자 또는 암에 걸릴 위험성이 있는 환자의 치료를 위해 CAR을 발현하는 유전적으로 변형된 T 세포를 투여하는 것에 관한 것이다. 바람직하게는, 자가성 림프구 주입은 치료에 사용된다. 자가성 PBMC는 치료가 필요한 환자로부터 수집되고, T 세포는 본원에 개시되고 당해 기술분야에 공지된 방법을 이용하여 활성화되고 증식되고, 이후에 환자에 다시 주입된다.
또 다른 실시형태에서, 본 발명은 일반적으로 CLL이 발병할 위험성이 있는 환자의 치료에 관한 것이다. 본 발명은 또한 악성 종양, 또는 환자에서의 화학요법 및/또는 면역 요법이 환자에서 유의한 면역 억제를 초래하여, 환자에서 CLL이 발병할 위험성을 증가시키는 자가 면역 질환을 치료하는 것에 관한 것이다.
본 발명은 CD3-제타 및 4-1BB 공자극성 도메인(CART19 T 세포로도 지칭됨) 둘 모두를 포함하는 항-CD19 CAR을 발현하는 T 세포의 사용을 포함한다. 본 발명의 CART19 T 세포는 강력한 생체 내 T 세포의 증식을 초래하며, 혈액 및 골수에서 증가된 시간 동안에 높은 수준으로 유지되는 CD19 특이적 메모리 세포를 발현시킬 수 있다. 몇몇의 경우, 환자에 주입된 본 발명의 CART19 T 세포는 진전된 화학요법 내성 CLL을 앓는 환자의 생체 내 백혈병 세포를 제거할 수 있다. 그러나 본 발명은 CART19 T 세포에 제한되지 않는다. 오히려, 본 발명은 CD137(4-1BB) 신호전달 도메인, CD28 신호전달 도메인, a CD3제타 신호전달 도메인, 및 임의의 이의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 세포 내 도메인과 융합된 임의의 항원 결합 일부분을 포함한다.
정의
본원에서 달리 정의되지 않는 한, 본원에서 사용된 모든 기술적 및 과학적 용어는 본 발명이 속하는 당해 기술분야의 통상의 사람에 의해 일반적으로 이해되는 바와 동일한 의미를 갖는다. 본원에서 개시된 방법 및 재료 유사하거나 등가인 임의의 방법 및 재료가 본 발명의 시험을 위한 실시에 사용될 수 있을 지라도, 바람직한 재료 및 방법이 본원에 개시되어 있다. 본 발명을 개시하고 청구할 때 하기 용어가 사용될 것이다.
또한 본원에 사용된 용어는 특정 실시형태를 개시할 목적으로만 개시되며, 제한할 의도는 없는 것으로 이해되어야 한다.
관사는 관사의 하나 또는 하나 이상(즉, 적어도 하나)의 문법적 목적을 지칭하기 위해 본원에서 사용된다. 일례로, "하나의 요소"는 하나 또는 그 이상의 요소를 의미한다.
양, 시간적 지속 등과 같은 측정 가능한 값을 지칭하는 경우에 본원에서 사용된 바와 같은 "약"은 이 같은 변형값이 본원에 개시된 방법을 수행하기에 적절함에 따라 구체적인 값으로부터 ±20% 또는 ±10%, 더욱 바람직하게는 ±5%, 더욱더 바람직하게는 ±1%, 및 더더욱 바람직하게는 ±0.1%의 변형값을 포함한다는 것으로 의미한다.
본원에서 사용된 바와 같은 "활성화"는 검출 가능한 세포성 증식을 유도하기 위해 충분히 자극되어 있는 T 세포의 상태를 지칭한다. 활성화는 또한 유도된 사이토카인 생성 및 검출 가능한 효과기의 기능과 연관되어 있을 수 있다. "활성화된 T 세포"란 용어는 기타 물건들 중에서 세포 분열을 경험하고 있는 T 세포를 지칭한다.
본원에서 사용된 바와 같은 "항체"란 용어는 항원과 특이적으로 결합하는 면역 글로불린 분자를 지칭한다. 항체는 천연 공급원 또는 재조합 공급원에서 유래한 온전한 면역 글로불린일 수 있으며, 온전한 면역 글로불린의 면역 반응성 일부일 수 있다. 항체는 전형적으로 면역 글로불린 분자의 사량체이다. 본 발명에 따른 항체는, 예를 들어 단일쇄 항체 및 인간화된 항체뿐만 아니라 다클론성 항체, 단일 클론성 항체, Fv, Fab 및 F(ab)2를 포함하는 다양한 형태로 존재할 수 있다(Harlow 등, 1999, In: Using Antibodies: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press, NY; Harlow 등, 1989, In: Antibodies: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor, New York; Houston 등, 1988, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85: 5879-5883; 및 Bird 등, 1988, Science 242: 423-426).
"항체 단편"이란 용어는 온전한 항체의 일부를 지칭하며, 온전한 항체의 항원성 결정 가변성 영역을 지칭한다. 항체 단편의 예로는 항체 단편으로부터 형성된 Fab, Fab', F(ab')2, 및 Fv 단편, 일차 항체, scFv 항체, 및 다중 특이성 항체를 들 수 있지만, 이에 제한되지 않는다.
본원에서 사용된 바와 같은 "항체 중쇄"는 이들의 자연적으로 발생하는 구성에서 모든 항체 분자에 존재하는 2가지 유형의 폴리펩티드쇄 중 보다 큰 유형을 지칭한다.
본원에서 사용된 바와 같은 "항체 경쇄"는 이들의 자연적으로 발생하는 구성에서 모든 항체 분자에 존재하는 2가지 유형의 폴리펩티드쇄 중 보다 작은 유형을 지칭한다. k 및 l 경쇄는 2개의 주요 항체 경쇄 아이소타입(isotype)을 지칭한다.
본원에서 사용된 바와 같은 "합성 항체"란 용어는, 예를 들어 본원에 개시된 바와 같은 박테리오파지에 의해 발현된 항체와 같이 재조합 DNA 기술을 이용하여 생성된 항체를 의미한다. 상기 용어는 또한 항체를 암호화하는 DNA 분자의 합성에 의해 생성되었던 항체를 의미하는 것으로 이해되어야 하며, 이때 상기 DNA 분자는 항체 단백질을 발현하거나, 상기 항체를 구체화하는 아미노산 서열을 발현하며, 이때 상기 DNA 또는 아미노산 서열은 당해 기술분야에서 이용 가능하거나 널리 공지된 합성 DNA 또는 아미노산 서열 기술을 이용하여 수득되었다.
본원에서 사용된 바와 같은 "항원" 또는 "Ag"이란 용어는 면역 반응을 유발하는 분자로서 정의된다. 이러한 면역 반응은 항체의 생성, 또는 특정 면역학적 적격 세포의 활성화, 또는 이들 둘 모두를 포함할 수 있다. 당업자는 실질적으로 모든 단백질 또는 펩티드를 포함한 임의의 거대 분자가 항원으로 작용할 수 있다는 것을 이해할 것이다. 더욱이, 항원은 재조합 DNA 또는 게놈 DNA로부터 유래할 수 있다. 따라서 당업자는 면역 반응을 유도하는 단백질을 암호화하는 뉴클레오티드 서열 또는 부분 뉴클레오티드 서열을 포함하는 임의의 DNA가 이 같은 용어가 본원에서 사용됨에 따라 "항원"을 암호화한다는 것을 이해할 것이다. 더욱이, 당해 기술분야의 숙련자는 항원이 유전자의 전장 뉴클레오티드 서열에 의해서만 암호화될 필요가 없다는 것을 이해할 것이다. 본 발명이 하나 이상의 유전자의 부분 뉴클레오티드 서열의 용도를 포함하지만 이에 한정되지 않으며, 이들 뉴클레오티드 서열이 목적하는 면역 반응을 유도하기 위해 다양한 조합으로 배열된다는 것이 매우 자명하다. 게다가, 당업자는 항원이 전적으로 "유전자"에 의해 암호화될 필요가 없다는 것을 이해할 것이다. 항원이 생성되거나 합성될 수 있거나, 생물학적 샘플로부터 유래할 수 있다는 것이 매우 자명하다. 이 같은 생물학적 샘플로는 조직 샘플, 종양 샘플, 세포 또는 생물학적 유체를 들 수 있지만, 이에 제한되지 않는다.
본원에서 사용된 바와 같은 "항-종양 효과"란 용어는 종양 부피에서의 감소, 종양 세포 개수에서의 감소, 전이 개수의 감소, 평균 예상 수명의 증가, 또는 암적인 이상과 연관된 다양한 생리학적 증상의 개선에 의해 증명될 수 있는 생물학적 효과를 지칭한다. "항-종양 효과"는 또한 먼저 종양 발생의 예방에서 본 발명의 펩티드, 폴리뉴클레오티드, 세포 및 항체의 능력에 의해 증명될 수 있다.
본 발명에 따르면, "자가 항원"이란 용어는 이질적인 것으로서 면역 시스템에 의해 잘못 인식되는 임의의 자체 항원을 의미한다. 자가 항원은 세포 표면 수용체를 포함하는 세포성 단백질, 인단백질(phosphoprotein), 세포성 표면 단백질, 세포성 지질, 핵산, 및 당단백질을 포함하지만, 이에 제한되지 않는다.
본원에서 사용된 바와 같은 "자가 면역 질환"이란 용어는 자가 면역 반응으로부터 유래하는 질환으로서 정의된다. 자가 면역 질환은 자체 항원에 대한 부적절한 과잉 반응의 결과이다. 자가 면역 질환의 예로는 기타 질병 중에서 애디슨병, 원형 탈모증, 강직성 척추염, 자가 면역 간염, 자가 면역 이하선염, 크론병, 당뇨병(I형), 수포성 표피 박리증, 부고환염, 사구체신염, 그레이브스병, 길랑-바레 증후군(Guillain-Barr syndrome), 하시모도병, 용혈성 빈혈, 전신성 홍반 낭창, 다발성 경화증, 중증 근무력증, 심상성 천포창(pemphigus vulgaris), 건선, 류머티즘열, 류머티즘성 관절염, 유육종증, 경피증, 쇼그렌 증후군(Sjogren's syndrome), 척추 관절염, 갑상선염, 맥관염, 백반(vitiligo), 점액 수종, 악성 빈혈, 및 궤양성 대장염을 들 수 있지만, 이에 제한되지 않는다.
본원에서 사용된 바와 같이, "자가성"이란 용어는 동일한 개인으로부터 유래하고, 이후에 다시 상기 개인에게 도입될 수 있는 임의의 재료를 지칭하는 것으로 의미한다.
"동종성"은 동일한 종의 다른 동물에서 유래한 이식편을 지칭한다.
"이종성"은 다른 종의 동물에서 유래한 이식편을 지칭한다.
본원에서 사용된 바와 같은 "암"이란 용어는 변종 세포의 신속하고 제어되지 않은 성장을 특징으로 하는 질병으로서 정의된다. 암 세포는 국부적으로 또는 혈류 및 림프계를 통해 체내의 기타 부분으로 퍼져나갈 수 있다. 다양한 암의 예로는 유방암, 전립선암, 난소암, 자궁 경부암, 피부암, 췌장암, 대장암, 신장암, 간암, 뇌암, 림프종, 백혈병, 폐암 등을 들 수 있지만, 이에 제한되지 않는다.
본원에서 상기 용어가 사용되는 경우, "공자극성 리간드"는 항원 제시 세포(예를 들어, aAPC, 수지상 세포, B 세포 등) 상의 분자를 포함하며, 이때 상기 항원 제시 세포는 T 세포 상의 동종의 공자극성 분자를 특이적으로 결합시켜, 예를 들어 펩티드와 함께 로딩된 MHC 분자와 TCR/CD3 복합체의 결합에 의해 일차 신호 이외에도 증식, 활성화, 분화 등을 포함하지만 이에 제한되지 않은 T 세포 반응을 매개하는 신호를 제공한다. 공자극성 리간드로는 CD7, B7-1(CD80), B7-2(CD86), PD-L1, PD-L2, 4-1BBL, OX40L, 유도성 공자극성 리간드(ICOS-L), 세포간 접착 분자(ICAM), CD30L, CD40, CD70, CD83, HLA-G, MICA, MICB, HVEM, 림포톡신(lymphotoxin) 베타 수용체, 3/TR6, ILT3, ILT4, HVEM, 톨(Toll) 리간드 수용체를 결합시키는 강화제(agonist) 또는 항체, 및 B7-H3과 특이적으로 결합하는 리간드를 들 수 있지만, 이에 제한되지 않는다. 그 중에서도 공자극성 리간드는 또한 T 세포 상에 존재하는 공자극성 분자와 특이적으로 결합하는 항체, 예를 들어 이에 제한되지 않지만 CD27, CD28, 4-1BB, OX40, CD30, CD40, PD-1, ICOS, 림프구 기능 연관 항원-1(LFA-1), CD2, CD7, LIGHT, NKG2C, B7-H3, 및 CD83과 특이적으로 결합하는 리간드를 포함한다.
"공자극성 분자"는 공자극성 리간드와 특이적으로 결합하여 T 세포에 의한 공자극성 반응, 예를 들어 이에 제한되지 않지만 증식을 매개하는 T 세포 상의 동종의 결합 파트너(binding partner)를 지칭한다. 공자극성 분자는 MHC 클래스 I 분자, BTLA 및 톨 리간드 수용체를 포함하지만, 이에 제한되지 않는다.
본원에서 사용된 바와 같이, "공자극성 신호"는 TCR/CD3 연결(ligation)과 같은 일차 신호와 함께 T 세포 증식 및/또는 주요 분자의 상향조절(upregulation) 또는 하향조절(downregulation)을 초래하는 신호를 지칭한다.
"질병"은 동물의 건강 상태이며, 여기서 상기 동물은 항상성을 유지할 수 없으며, 상기 질병이 개선되지 않는 경우에 동물의 건강이 계속해서 악화된다. 대조적으로, 동물에서의 "질환"은 동물이 항상성을 유지할 수 있지만, 동물의 건강 상태가 질환이 없을 때와 비교해서 덜 유리한 건강 상태이다. 치료하지 않은 채로 방치하는 경우, 질환은 필연적으로 동물의 건강 상태의 추가적인 손실을 야기하지는 않는다.
본원에서 사용된 바와 같은 "유효량"은 치료적 또는 예방적 효과를 제공하는 양을 의미한다.
"암호화"란 뉴클레오티드(즉, rRNA, tRNA 및 mRNA)의 제한된 서열 및 아미노산의 제한된 서열 중 하나를 구비한 생물학적 공정에서 기타 고분자 및 거대 분자의 합성을 위한 주형으로 작용하기 위해 유전자, cDNA 또는 mRNA와 같은 폴리뉴클레오티드 중의 뉴클레오티드의 특정 서열의 고유 특성, 및 이들로부터 유래한 생물학적 특성을 지칭한다. 따라서 유전자는 이 같은 유전자에 상응하는 mRNA의 전사 및 번역이 세포 또는 기타 생물학적 시스템에서 단백질을 생성하는 경우에 단백질을 암호화한다. mRNA 서열과 동일하고 일반적으로는 서열 목록으로 제공되는 뉴클레오티드 서열인 코딩 가닥 및 유전자 또는 cDNA의 전사를 위한 주형으로 사용되는 비코딩 가닥 둘 모두는 이 같은 유전자 또는 cDNA의 단백질 또는 기타 생성물을 암호화하는 것으로 지칭될 수 있다.
본원에서 사용된 바와 같이, "내생성"은 유기체, 세포, 조직 또는 시스템으로부터의 임의의 재료 또는 이의 내부에서 생성되는 임의의 재료를 지칭한다.
본원에서 사용된 바와 같이, "외생성"이란 용어는 유기체, 세포, 조직 또는 시스템으로부터 도입되거나 외부에서 생성되는 임의의 재료를 지칭한다.
본원에서 사용된 바와 같은 "발현"이란 용어는 자신의 프로모터에 의해 구동되는 특정 뉴클레오티드 서열의 전사 및/또는 번역으로서 정의된다.
"발현 벡터"는 뉴클레오티드 서열이 발현되도록 작동 가능하게 연결된 발현 제어 서열을 포함하는 재조합 폴리뉴클레오티드를 함유하는 벡터를 지칭한다. 발현 벡터는 발현을 위해 충분한 시스 작용 요소(cis-acting element)를 포함하지만, 발현을 위한 기타 요소는 숙주 세포에 의해 제공되거나, 시험관 내(in vitro) 발현 시스템에서 제공될 수 있다. 발현 벡터는 당해 기술분야에 공지된 모든 벡터, 예를 들어 코스미드(cosmid), 플라스미드(예를 들어, 노출형(naked)이거나 리포좀에 포함됨), 및 재조합 폴리뉴클레오티드를 혼입하는 바이러스(예를 들어, 렌티바이러스, 레트로바이러스, 아데노바이러스, 및 아데노 연관 바이러스)를 포함한다.
"상동성"은 2개의 폴리펩티드 또는 2개의 핵산 분자 사이의 서열 유사성 또는 서열 동일성을 지칭한다. 2개의 비교된 서열 둘 모두에서의 위치는 동일한 염기 또는 아미노산 단량체 서브유닛에 의해 차지되는 경우, 예를 들어 2개의 DNA 분자에서의 위치가 아데닌에 의해 차지되는 경우, 분자는 그 위치에서 상동성이다. 2개의 서열 사이의 상동성의 비율(%)은 X 100과 비교한 위치의 개수로 나눈 2개의 서열이 고유하는 정합 또는 상동성 위치의 개수의 함수이다. 예를 들어, 2개의 서열 내의 10개의 위치 중 6개가 정합하거나 상동성인 경우, 상기 2개의 서열은 상동성이 60%이다. 일례로, ATTGCC 및 TATGGC의 DNA 서열은 50%의 상동성을 나타낸다. 일반적으로, 2개의 서열이 최대 상동성을 나타내기 위해 배열되는 경우에 비교가 이루어진다.
본원에서 사용된 바와 같이, "면역 글로불린" 또는 "Ig"이란 용어는 항체로서 기능을 하는 단백질의 부류로서 정의된다. B 세포에 의해 발현되는 항체는 종종 BCR(B 세포 수용체) 또는 항원 수용체로서 지칭된다. 이러한 단백질의 부류에 포함된 5개의 멤버는 IgA, IgG, IgM, IgD, 및 IgE이다. IgA는 체내 분비물, 예를 들어 타액, 눈물, 모유, 위장관 분비물, 및 호흡관 및 비뇨생식관의 점액 분비물에 존재하는 일차 항체이다. IgG는 가장 일반적인 혈중 항체이다. IgM는 대부분의 개체에서 일차 면역 반응에서 생성되는 주요 면역 글로불린이다. 이는 응집, 보체 고정 및 기타 항체 반응에서 가장 효율적인 면역 글로불린이며, 박테리아 및 바이러스에 대한 방어에서 중요하다. IgD는 항체 기능이 알려져 있지 않지만 항원 수용체로서 작용할 수 있는 면역 글로불린이다. IgE는 알레르겐(allergen)에 노출 시에 비만 세포 및 호염기성 세포로부터의 매개물질의 방출을 야기함으로써 즉시형 과민반응을 매개하는 면역 글로불린이다.
본원에서 사용된 바와 같이, "교육용 재료"는 간행물, 기록물, 도면, 또는 본 발명의 조성물 및 방법의 유용성을 제공하기 위해 사용될 수 있는 임의의 기타 발현 매체를 포함한다. 본 발명의 키트의 교육용 재료는, 예를 들어 본 발명의 핵산, 펩티드 및/또는 조성물을 함유하는 용기에 고정될 수 있거나, 상기 핵산, 펩티드 및/또는 조성물을 함유하는 용기와 함께 선적될 수 있다. 대안적으로는, 상기 교육용 재료는 상기 교육용 재료 및 화합물이 수령인에 의해 협조적으로 사용될 수 있도록 본 발명에 따라 상기 용기와는 별도로 선적될 수 있다.
"단리"는 천연 상태로부터 변경되거나 제거된 것을 의미한다. 예를 들어, 살아있는 동물에 자연적으로 존재하는 핵산 또는 펩티드는 "단리"된 것이 아니지만, 이의 자연 상태의 공존하는 재료로부터 부분적으로 또는 완전하게 분리된 동일한 핵산 또는 펩티드는 "단리"된 것이다. 단리된 핵산 또는 단백질은 실질적으로 정제된 형태로 존재할 수 있거나, 예를 들어 숙주 세포와 같이 선천적이지 못한 환경에 존재할 수 있다.
본 발명의 배경에서, 일반적으로 나타나는 핵산 염기에 대한 하기 약어가 사용된다. "A"는 아데노신을 지칭하고, "C"는 시토신을 지칭하고, "G"는 구아닌을 지칭하고, "T"는 티미딘을 지칭하며, "U"는 우리딘을 지칭한다.
달리 규명하지 않는 한, "아미노산 서열을 암호화하는 뉴클레오티드 서열"은 서로에 대한 축중 버전(degenerate version)이고 동일한 아미노산 서열을 암호화하는 모든 뉴클레오티드 서열을 포함한다. "단백질 또는 RNA를 암호화하는 뉴클레오티드 서열"이란 표현은 몇몇 버전에서 단백질을 암호화하는 뉴클레오티드 서열이 인트론(들)을 함유하는 정도로 인트론을 또한 포함할 수 있다.
본원에서 사용된 바와 같은 "렌티바이러스"는 레트로바이러스과(Retroviridae) 패밀리의 속(genus)을 지칭한다. 렌티바이러스는 비-분열성 세포를 감염시킬 수 있는 레트로바이러스 중에서도 특이하지만, 이들은 숙주 세포의 DNA 내로 유의한 양의 유전자 정보를 전달하여, 이들이 유전자 전달 벡터의 가장 효율적인 방법 중 하나이다. HIV, SIV 및 FIV는 모두 렌티바이러스의 일례이다. 렌티바이러스에서 유래한 벡터는 생체 내에서 유의한 수준의 유전자 전달을 달성하기 위한 수단을 제공한다.
본원에서 사용된 바와 같이, "조절"란 용어는 처리 또는 화합물의 부재 하에 개체에서의 반응 수준, 및/또는 다르게는 동일하지만 처리되지 않은 개체에서의 반응 수준과 비교해서 개체에서의 반응 수준에서의 검출 가능한 증가 또는 감소를 매개하는 것을 의미한다. 상기 용어는 고유의 신호 또는 반응을 방해하고/하거나 상기 고유의 신호 또는 반응에 영향을 주어 개체, 바람직하게는 인간에서 이로운 치료적 반응을 매개하는 것을 포함한다.
달리 규명하지 않는 한, "아미노산 서열을 암호화하는 뉴클레오티드 서열"은 서로에 대한 축중 버전이고 동일한 아미노산 서열을 암호화하는 모든 뉴클레오티드 서열을 포함한다. 단백질 및 RNA를 암호화하는 뉴클레오티드 서열은 인트론을 포함할 수 있다.
"작동 가능한 연결"이란 용어는 이종성 핵산 서열의 발현을 초래하는 조절용 서열과 이종성 핵산 서열 사이의 기능적인 연결을 지칭한다. 예를 들어, 제1 핵산 서열이 제2 핵산 서열과 기능적인 관계 하에 위치한 경우에 상기 제1 핵산 서열은 상기 제2 핵산 서열과 작동 가능하게 연결되어 있다. 예를 들어, 프로모터가 코딩 서열의 전사 또는 발현에 영향을 미치는 경우에 상기 프로모터는 코딩 서열에 작동 가능하게 연결되어 있다. 작동 가능하게 연결된 DNA 서열은 일반적으로는 연속되어 있으며, 2개의 단백질 코딩 영역을 연결하는데 필요한 경우에는 동일한 리딩 프레임(reading frame) 내에 있다.
"과발현된" 종양 항원 또는 상기 종양 항원의 "과발현"이란 용어는 환자의 특정 조직 또는 기관으로부터 유래한 정상 세포에서의 발현 수준에 비해 이 같은 조직 또는 기관 내의 고형 종양과 같은 질병 구역에서 유래한 세포에서의 종양 항원의 비정상적인 발현 수준을 나타내도록 의도된다. 종양 항원의 과발현을 특징으로 하는 고형 종양 또는 혈액학적 악성 종양을 갖는 환자는 당해 기술분야에 공지된 표준 검정에 의해 결정될 수 있다.
면역성 조성물의 "비경구" 투여는, 예를 들어 피하(s.c.), 정맥 내(i.v.), 근육내(i.m.) 또는 흉골내 주사 또는 주입 기법을 포함한다.
"환자", "개체", "개인" 등의 용어는 본원에서 상호 교환 가능하게 사용되며, 시험관 내 또는 원위치(in situ)에서 본원에 개시된 방법에 적용 가능한 임의의 동물 또는 이의 세포를 지칭한다. 특정의 비제한적인 실시형태에서, 환자, 개체 또는 개인은 인간이다.
본원에서 사용된 바와 같은 "폴리뉴클레오티드"이란 용어는 뉴클레오티드의 쇄로서 정의된다. 더욱이, 핵산은 뉴클레오티드의 고분자이다. 따라서 본원에서 사용된 바와 같은 핵산 및 폴리뉴클레오티드는 상호 교환 가능하다. 당해 기술분야의 숙련자는 핵산이 단량체성 "뉴클레오티드"로 가수분해 될 수 있는 폴리뉴클레오티드라는 일반적인 지식을 갖는다. 단량체성 뉴클레오티드는 뉴클레오시드로 가수분해 될 수 있다. 본원에서 사용된 바와 같이, 폴리뉴클레오티드는 재조합 수단, 즉 통상적인 클로닝 기술 및 PCRTM을 이용하여 재조합 라이브러리 또는 세포 게놈으로부터의 핵산 서열의 클로닝을 포함하지만 이에 포함되지 않는, 당해 기술분야에서 이용 가능한 임의의 수단, 및 합성 수단에 의해 수득되는 모든 핵산 서열을 포함하지만, 이에 제한되지 않는다.
본원에서 사용된 바와 같이, "펩티드", "폴리펩티드" 및 "단백질"이란 용어는 상호 교환 가능하게 사용되며, 펩티드 결합에 의해 공유 결하된 아미노산 잔기로 구성된 화합물을 지칭한다. 단백질 또는 펩티드는 적어도 2개의 아미노산을 포함해야 하며, 단백질 또는 펩티드의 서열을 포함할 수 있는 아미노산의 최대 개수에 대한 어떠한 제한도 없다. 폴리펩티드는 펩티드 결합에 의해 서로 연결된 2개 이상의 아미노산을 포함하는 임의의 펩티드 또는 단백질을 포함한다. 본원에서 사용된 바와 같이, 상기 용어는 당해 기술분야에서 펩티드, 올리고 펩티드 및 소량체로서 일반적으로 지칭되는 단쇄, 및 많은 유형이 존재하는 단백질로서 당해 기술분야에서 일반적으로 지칭되는 장쇄 둘 모두를 지칭한다. 기타 펩티드 중에서, "폴리펩티드"는, 예를 들어 생물학적으로 활성인 단편, 실질적으로 상동성인 폴리펩티드, 올리고 펩티드, 동질 이량체, 이질 이량체, 폴리펩티드의 변형체, 변형된 폴리펩티드, 유도체, 유사체, 및 융합 단백질을 포함한다. 상기 폴리펩티드는 천연 펩티드, 재조합 펩티드, 합성 펩티드, 또는 이의 조합을 포함한다.
본원에서 사용된 바와 같은 "프로모터"란 용어는 세포의 합성 기관, 또는 폴리뉴클레오티드 서열의 특정 전사를 개시하기 위해 요구되는 도입된 합성 기관에 의해 인식되는 DNA 서열로서 정의된다.
본원에서 사용된 바와 같이, "프로모터/조절용 서열"이란 용어는 프로모터/조절용 서열에 작동 가능하게 연결된 유전자 산물의 발현을 위해 요구되는 핵산 서열을 의미한다. 몇몇의 경우, 이러한 서열은 코어 프로모터 서열일 수 있으며, 기타 예에서 이러한 서열은 또한 유전자 산물의 발현을 위해 요구되는 인핸서 서열 및 기타 조절용 요소를 포함할 수 있다. 프로모터/조절용 서열은, 예를 들어 조직 특이적 방식으로 유전자 산물을 발현하는 것일 수 있다.
"항구적" 프로모터는 유전자 산물을 암호화하거나 구체화하는 폴리뉴클레오티드와 작동 가능하게 연결되는 경우에 유전자 산물을 세포의 대부분 또는 모든 생리학적 이상 하에 세포에서 생성되도록 하는 뉴클레오티드 서열이다.
"유도성" 프로모터는 유전자 산물을 암호화하거나 구체화하는 폴리뉴클레오티드와 작동 가능하게 연결되는 경우에 상기 프로모터에 상응하는 유도인자(inducer)가 세포에 존재할 때만 유전자 산물이 실질적으로 세포에서 생성되도록 하는 뉴클레오티드 서열이다.
"조직 특이적" 프로모터는 유전자에 의해 암호화되거나 구체화된 폴리뉴클레오티드와 작동 가능하게 연결되는 경우에 세포가 프로모터에 상응하는 조직 유형의 세포일 때만 실질적으로 세포에서 생성되도록 하는 뉴클레오티드 서열이다.
항체에 대해서 본원에서 사용된 바와 같이 "특이적 결합"이란 용어는 특정 항원을 이식하지만, 샘플 중에서 기타 분자를 실질적으로 인식하거나 결합하지 못하는 항체를 의미한다. 예를 들어, 하나의 종으로부터의 항원에 특이적으로 결합하는 항체는 또한 하나 이상의 종으로부터의 그 같은 항원에 대해서도 결합할 수 있다. 그러나 이 같은 종간 반응성은 그 자체가 항체의 분류를 특이적인 것으로 변경하지는 않는다. 다른 예에서, 항원에 특이적으로 결합하는 항체는 또한 항원의 상이한 대립 유전자 형태에 결합할 수 있다. 그러나 이 같은 교차 반응성은 그 자체가 항체의 분류를 특이적인 것으로 변경하지는 않는다. 몇몇의 경우, "특정 결합" 또는 "특이적 결합"이란 용어는 제 2 화학종과 항체, 단백질 또는 펩티드의 상호작용이 상기 화학종 상의 특정한 구조(예를 들어, 항원성 결정인자 또는 에피토프(epitope))의 존재에 의존한다는 것을 의미하도록 상기 상호작용을 참고하여 사용될 수 있지만, 예를 들어 항체는 일반적으로 단백질이 아닌 특정 단백질 구조를 인식하고 결합한다. 항체가 에피토프 "A"에 대해 특이적인 경우, 표지 "A" 및 항체를 포함하는 반응물에서 에피토프 A(또는 유리 비표지 A)를 포함하는 분자의 존재는 항체에 결합한 표지 A의 양을 감소시킬 것이다.
"자극"이란 용어는 자극 분자(예를 들어, a TCR/CD3 복합체)와 이의 동종 리간드가 결합하여 TCR/CD3 복합체를 통한 신호 형질 도입을 포함하지만 이에 한정되지 않는 신호 형질 도입 사건을 매개함으로써 유도된 일차 반응을 의미한다. 자극은 TGF-β의 하향조절, 및/또는 세포 골격 구조의 재구성 등와 같이 특정 분자의 변경된 발현을 매개할 수 있다.
용어가 본원에서 사용되는 경우, "자극 분자"는 항원 제시 세포에 존재하는 동종 자극 리간드와 특이적으로 결합하는 T 세포 상의 분자를 의미한다.
본원에서 사용된 바와 같이, "자극 리간드"는 항원 제시 세포(예를 들어, aAPC, 수지상 세포, B 세포 등) 상에 존재하는 경우에 T 세포 상의 동종 결합 파트너("자극 분자"로서 지칭됨)와 특이적으로 결합하여 활성화, 면역 반응의 개시, 증식 등을 포함하지만 이에 제한되지 않는 T 세포에 의한 일차 반응을 매개할 수 있는 리간드를 의미한다. 자극 리간드는 당해 기술분야에 널리 공지되어 있으며, 그 중에서도 펩티드가 로딩된 MHC 클래스 I 분자, 항-CD3 항체, 초강화제 항-CD28 항체, 및 초강화제 항-CD2 항체를 포함한다.
"개체"란 용어는 면역 반응이 유도될 수 있는 살아 있는 유기체(예를 들어, 포유동물)를 포함하는 것으로 의도된다. 개체의 예로는 인간, 개, 고양이, 쥐, 생쥐 및 이의 유전자 도입종을 들 수 있다.
본원에서 사용된 바와 같이, "실질적으로 정제된" 세포는 기타 세포 유형이 본질적으로 존재하지 않는 세포이다. 실질적으로 정제된 세포는 또한 이의 자연적으로 발생하는 상태에서 세포가 정상적으로 연관되어 있는 기타 세포 유형과는 분리되어 있는 세포를 지칭한다. 몇몇의 경우, 실질적으로 정제된 세포의 개체군은 세포의 상동성 개체군을 지칭한다. 기타 예에서, 이러한 용어는 단순히 이들의 자연 상태에서 이들이 자연적으로 연관되어 있는 세포와는 분리되어 있었던 세포를 지칭한다. 몇몇 실시형태에서, 상기 세포는 시험관 내에서 배양된다. 기타 실시형태에서, 상기 세포는 시험관 내에서 배양되지 않는다.
본원에서 사용된 바와 같은 "치료"란 용어는 처치 및/또는 예방을 의미한다. 치료적 효과는 질병 상태의 억제, 완화, 또는 소거에 의해 수득된다.
"치료적 유효량"이란 용어는 연구원, 수의사, 의사 또는 기타 임상의에 의해 탐구되고 있는 조직, 시스템 또는 개체의 생물학적 반응 또는 의약 반응을 유도할 청구주제 화합물의 양을 지칭한다. "치료적 유효량"이란 용어는 화합물이 투여되는 경우에 치료될 질환 또는 질병의 하나 이상의 징후 또는 증상의 발생을 예방하거나 어느 정도 완화하기에 충분한 화합물의 양을 포함한다. 치료적 유효량은 화합물, 질병 및 이의 중증도, 및 치료될 개체의 나이, 체중 등에 의존하여 상이할 수 있다.
본원에서 용어가 사용되는 경우 질병의 "치료"는 개체가 경험한 질병 또는 질환의 적어도 하나의 징후 또는 증상의 빈도 또는 중증도를 감소시키는 것을 의미한다.
본원에서 사용된 바와 같은 "형질 감염" 또는 "형질전환" 또는 "형질 도입"이란 용어는 숙주 세포 내로 외생성 핵산이 전달되거나 도입되는 공정을 지칭한다. "형질 감염" 또는 "형질전환" 또는 "형질 도입"된 세포는 외생성 핵산으로 형질 감염, 형질전환 또는 형질 도입되어 있는 것이다. 상기 세포는 일차 청구주제 세포 및 그의 자손을 포함한다.
본원에서 사용된 바와 같은 "전사 조절 하의" 또는 "작동 가능하게 연결된"이라 표현은 RNA 폴리머라아제에 의한 전사의 개시 및 폴리뉴클레오티드의 발현을 제어하기 위해 프로모터가 폴리뉴클레오티드에 대해 정확한 위치 및 배양으로 존재한다는 것을 의미한다.
"벡터"는 단리된 핵산을 포함하는 물질 및 단리된 핵산을 세포의 내부로 전달하기 위해 사용될 수 있는 물질의 조성물이다. 선형 폴리뉴클레오티드, 이온성 또는 양친매성 화합물과 연관된 폴리뉴클레오티드, 플라스미드 및 바이러스를 포함하지만 이에 제한되지 않은 다수의 벡터는 당해 기술분야에 공지되어 있다. 따라서 "벡터"란 용어는 자가 복제하는 플라스미드 또는 바이러스를 포함한다. 상기 용어는 또한, 예를 들어 폴리리신 화합물, 리포좀 등과 같이 세포 내로의 핵산의 전달을 조장하는 비-플라스미드 및 비-바이러스성 화합물을 포함하는 것으로 이해되어야 한다. 바이러스성 벡터의 예로는 아데노바이러스성 벡터, 아데노 연관 바이러스 벡터, 레트로바이러스성 벡터 등을 들 수 있지만, 이에 제한되지 않는다.
범위: 본원의 개시내용 전반에 걸쳐 본 발명의 다양한 양태가 범위의 포맷으로 제시될 수 있다. 범위의 포맷에서의 개시내용은 편의 및 간결성을 위한 것으로, 본 발명의 범주에 대한 유연성 없는 제한으로 파악되어서는 안되는 것으로 이해되어야 한다. 따라서 범위에 대한 개시내용은 이러한 범위 내의 각각 수치뿐만 아니라 가능한 하위 범위 모들 구체적으로 개시하고 있는 것으로 고려되어야 한다. 예를 들어, 1 내지 6과 같은 범위에 대한 개시내용은 이러한 범위의 개별 숫자, 예를 들어, 1, 2, 2.7, 3, 4, 5, 5.3 및 6뿐만 아니라 1 내지 3, 1 내지 4, 1 내지 5, 2 내지 4, 2 내지 6, 3 내지 6 등과 같이 하위 범위를 구체적으로 개시하고 있는 것으로 고려되어야 한다. 이는 상기 범위의 크기와는 무관하게 적용된다.
상세한 설명
본 발명은 기타 질병들 중에서 암을 치료하기 위한 조성물 및 방법을 제공한다. 상기 암은 혈액학적 악성 종양, 고형 종양, 또는 일차 또는 전이성 종양일 수 있다. 바람직하게는, 상기 암은 혈액학적 악성 종양이고, 더욱 바람직하게는 상기 암은 만성 림프구성 백혈병(CLL)이다. 본 발명의 조성물 및 방법을 이용하여 치료 가능한 기타 질병으로는 자가 면역 질환뿐만 아니라 바이러스성, 박테리아성 및 기생체성 감염을 들 수 있다.
하나의 실시형태에서, 본 발명은 CAR T 세포가 항-종양 특성을 나타내는 CAR을 발현하도록 조작된 세포(예를 들어, T 세포)를 제공한다. 본 발명의 CAR은 T 세포 항원 수용체 복합체의 제타 체인(예를 들어, CD3 제타)의 세포 내 신호전달 도메인에 융합된 항원 결합 도메인을 갖는 세포 외 도메인을 포함하도록 조작될 수 있다. 본 발명의 CAR은 T 세포에서 발현되는 경우에 항원 결합 특이성에 기초하여 항원 인식을 재지향할 수 있다. 예시적인 항원은 CD19인데, 이는 이러한 항원이 악성 B 세포 상에서 발현되기 때문이다. 그러나 본 발명은 CD19를 표적화하는데 제한되지 않는다. 오히려 본 발명은 이의 동종 항원에 결합하는 경우에 종양 세포가 성장하지 못하게 하고 죽도록 조장되도록 종양 세포에 영향을 미치거나, 그렇지 않는 경우에 환자에서 종양 부하(tumor burden)가 감소하거나 제거되도록 영향을 받는 임의의 항원 결합 일부분을 포함한다. 항원 결합 일부분은 바람직하게는 공자극성 분자 및 제타 체인 중 하나 이상으로부터 세포 내 도메인과 융합된다. 바람직하게는, 항원 결합 일부분은 CD137(4-1BB) 신호전달 도메인, CD28 신호전달 도메인, CD3제타 신호 도메인 및 이의 임의의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 세포 내 도메인과 융합된다.
하나의 실시형태에서, 본 발명의 CAR은 CD137(4-1BB) 신호전달 도메인을 포함한다. 이는 본 발명이 부분적으로는 CAR 매개 T-세포 반응이 공자극성 도메인의 첨가와 더불어 증강될 수 있다는 발견에 기초하기 때문이다. 예를 들어, CD137(4-1BB) 신호전달 도메인이 포함됨으로 인해 CD137(4-1BB)을 발현하도록 조작되지 않은 동일한 CAR T 세포와 비교시, CAR T 세포의 항-종양 활성 및 생체 내 존속이 유의하게 증가되었다.
조성물
본 발명은 세포 외 및 세포 내 도메인을 포함하는 키메릭 항원 수용체(CAR)를 제공한다. 상기 세포 외 도메인은 다르게는 항원 결합 일부분으로 지칭되는 표적 특이적 결합 요소를 포함한다. 상기 세포 내 도메인 또는 다르게는 상기 세포질 도메인은 공자극성 신호전달 영역 및 제타 체인 일부를 포함한다. 상기 공자극성 신호전달 영역은 공자극성 분자의 세포 내 도메인을 포함하는 CAR의 일부를 지칭한다. 공자극성 분자는 항원에 대한 림프구의 효율적인 반응을 위해 요구되는 항원 수용체 또는 이들의 리간드가 아닌 세포 표면 분자이다.
상기 CAR의 세포 외 도메인과 막통과 도메인 사이, 또는 상기 CAR의 세포질 도메인과 막통과 도메인 사이에는 스페이서 도메인이 혼입되어 있을 수 있다. 본원에서 사용된 바와 같이, "스페이서 도메인"이란 용어는 일반적으로 폴리펩티드쇄에서 막통과 도메인을 세포 외 도메인 및 세포질 도메인 중 하나에 연결시키는 기능을 갖는 임의의 올리고펩티드 또는 폴리펩티드를 의미한다. 스페이서 도메인은 최대 300개의 아미노산, 바람직하게는 10 내지 100개의 아미노산 및 가장 바람직하게는 25 내지 50개의 아미노산을 포함할 수 있다.
항원 결합 일부분
하나의 실시형태에서, 본 발명의 CAR은 다르게는 항원 결합 일부분으로 지칭되는 표적 특이적 결합 요소를 포함한다. 일부분의 선택은 표적 세포의 표면을 한정하는 리간드의 유형 및 개수에 의존한다. 예를 들어, 항원 결합 도메인은 특정한 질병 상태와 연관이 있는 표적 세포 상의 세포 표면 마커로서 작용하는 리간드를 인식하도록 선택될 수 있다. 따라서 본 발명의 CAR에서 항원 일부분 도메인을 위한 리간드로서 작용할 수 있는 세포 표면 마커의 예로는 바이러스성 감염, 박테리아성 감염, 기생체성 감염, 자가 면역 질환 및 암 세포와 연관된 마커를 들 수 있다.
하나의 실시형태에서, 본 발명의 CAR은 종양 세포 상의 항원에 특이적으로 결합하는 목적하는 항원 결합 일부분을 조작하는 방식으로 원하는 종양 항원을 표적화하도록 조작될 수 있다. 본 발명의 배경에서, "종양 항원", "과증식성 질환 항원" 또는 "과증식성 질환과 연관된 항원"은 암과 같은 특정 과증식성 질환에서 일반적인 항원을 지칭한다. 본원에서 토의된 항원은 단순히 예로서 포함된다. 상기 목록은 제한적인 것으로 의도되지 않으며, 추가의 예들이 당해 기술분야의 숙련자에게 매우 자명할 것이다.
종양 항원은 면역 반응, 특히 T-세포 매개 면역 반응을 유도하는 종양 세포에 의해 생성된 단백질이다. 본 발명의 항원 결합 일부분의 선택은 치료될 암의 특정한 유형에 의존한 것이다. 종양 항원은 당해 기술분야에 널리 공지되어 있으며, 예를 들어 신경교종 연관 항원, 암태아 항원(CEA), β-인간 융모성 고나도트로핀, 알파-페토프로테인(α-fetoprotein, AFP), 렉틴 반응성 AFP, 타이로글로불린(thyroglobulin), RAGE-1, MN-CA IX, 인간 텔로머라제 역전사 효소(telomerase reverse transcriptase), RU1, RU2(AS), 장내 카르복시에스테라아제(intestinal carboxyl esterase), mut hsp70-2, M-CSF, 프로스타아제(prostase), 전립선 특이적 항원(PSA), PAP, NY-ESO-1, LAGE-1a, p53, 프로스테인(prostein), PSMA, Her2/neu, 서바이빈(survivin) 및 텔로머라제, 전립선-암종 종양 항원-1 (PCTA-1), MAGE, ELF2M, 중성구 엘라스타제, ephrinB2, CD22, 인슐린 성장 인자(IGF)-I, IGF-II, IGF-I 수용체 및 메소텔린을 포함한다.
하나의 실시형태에서, 상기 종양 항원은 악성 종양과 연관된 하나 이상의 항원성 암 에피토프를 포함한다. 악성 종양은 면역 공격(immune attack)을 위한 표적 항원으로서 작용할 수 있는 다수의 단백질을 발현시킨다. 이들 분자로는 흑색종의 경우에 MART-1, 티로시나아제(tyrosinase) 및 GP 100, 및 전립선암의 경우에 전립선 산 포스파타제(PAP) 및 전립선 특이적 항원(PSA)과 같은 조직 특이적 항원을 들 수 있지만, 이에 제한되지 않는다. 기타 표적 분자는 종양 유전자 HER-2/Neu/ErbB-2와 같은 형질전환 관련 분자의 그룹에 속한다. 또 다른 표적 항원의 그룹은 암태아 항원(CEA)과 같은 종양 태아성 항원이다. B-세포 림프종에서 상기 종양 특이적 유전자형 면역 글로불린은 개별 종양에 특이적인 정확히 종양 특이적 면역 글로불린 항원을 구성한다. CD19, CD20 및 CD37과 같은 B-세포 분화 항원은 B-세포 림프종에서 표적 항원의 기타 후보물질이다. 몇몇 이들 항원(CEA, HER-2, CD19, CD20, 유전자형)은 단일 클론성 항체를 이용한 수동 면역 요법을 위한 표적으로서 사용되어 왔지만, 제한적으로 성공하였다.
본 발명에서 지칭된 종양 항원의 유형은 또한 종양 특이적 항원(TSA) 또는 종양 연관 항원(TAA)일 수 있다. TSA는 종양 세포에 대해 특이적이며, 체내의 기타 세포 상에 나타나지는 않는다. TAA 연관 항원은 종양 세포에 대해 특이하지 않으며, 대신에 항원에 대한 면역학적 내성 상태를 유도하지 못하는 조건 하에서 정상 세포 상에서 발현된다. 종양 상에서의 항원의 발현은 면역 시스템이 항원에 반응하도록 할 수 있는 조건 하에서 발생할 수 있다. TAA는 면역 시스템이 성숙하지 않아서 반응할 수 없거나, 이들이 정상적으로는 정상 세포 상에서 극도로 낮은 수준으로 존재하지만 종양 세포 상에서는 훨씬 높은 수준으로 발현되는 경우에 태아 발생 도중에 정상 세포 상에서 발현되는 항원일 수 있다.
TSA 또는 TAA 항원의 비제한적인 예로는 하기와 같다: MART-1/MelanA (MART-I), gp100 (Pmel 17), 티로시나아제, TRP-1, 및 TRP-2와 같은 분화 항원; MAGE-1, MAGE-3, BAGE, GAGE-1, GAGE-2, 및 p15와 같은 종양 특이적 다중 계통 항원; CEA와 같은 과발현된 태아성 항원; p53, Ras, HER-2/neu와 같은 과발현된 종양 유전자 및 돌연변이된 종양-억제 유전자; BCR-ABL, E2A-PRL, H4-RET, IGH-IGK, MYL-RAR와 같이 염색체 전좌로부터 유래된 독특한 종양 항원; 및 엡스타인-바(Epstein Barr) 바이러스 항원인 EBVA 및 인간 파필로마바이러스(HPV) 항원인 E6 및 E7과 같은 바이러스성 항원. 기타 대형의 단백질 기반 항원으로는 TSP-180, MAGE-4, MAGE-5, MAGE-6, RAGE, NY-ESO, p185erbB2, p180erbB-3, c-met, nm-23H1, PSA, TAG-72, CA 19-9, CA 72-4, CAM 17.1, NuMa, K-ras, 베타-카테닌(beta-Catenin), CDK4, Mum-1, p 15, p 16, 43-9F, 5T4, 791Tgp72, 알파-페토프로테인, 베타-HCG, BCA225, BTAA, CA 125, CA 15-3/CA 27.29/BCAA, CA 195, CA 242, CA-50, CAM43, CD68/P1, CO-029, FGF-5, G250, Ga733/EpCAM, HTgp-175, M344, MA-50, MG7-Ag, MOV18, NB/70K, NY-CO-1, RCAS1, SDCCAG16, TA-90/Mac-2 결합 단백질/사이클로필린 C 연관 단백질, TAAL6, TAG72, TLP, 및 TPS를 들 수 있다.
바람직한 실시형태에서, 상기 CAR의 항원 결합 일부분의 일부는 CD19, CD20, CD22, ROR1, 메소텔린, CD33/IL3Ra, c-Met, PSMA, 당지질 F77, EGFRvIII, GD-2, MY-ESO-1 TCR, MAGE A3 TCR 등을 포함하지만 이에 제한되지 않는 항원을 표적화한다.
표적화될 목적하는 항원에 의존하여 본 발명의 CAR은 목적하는 항원 표적에 특이적인 적절한 항원 결합 일부분을 포함하도록 조작될 수 있다. 예를 들어, CD19가 표적화되어야 할 목적하는 항원인 경우에 CD19에 대한 항체는 본 발명의 CAR로의 혼입을 위해 항원 결합 일부분으로서 사용될 수 있다.
하나의 실시형태에서, 본 발명의 CAR의 항원 결합 일부분의 일부는 CD19를 표적화한다. 바람직하게는, 본 발명의 CAR 내의 항원 결합 일부분의 일부는 항-CD19 scFV이며, 이때 상기 항-CD19 scFV의 핵산 서열은 서열번호 14로 개시된 서열을 포함한다. 하나의 실시형태에서, 항-CD19 scFV는 서열번호 20의 아미노산 서열을 암호화하는 핵산 서열을 포함한다. 다른 실시형태에서, 본 발명의 CAR의 항-CD19 scFV 일부는 서열번호 20으로 개시된 아미노산 서열을 포함한다.
막통과 도메인
막통과 도메인에 대하여, CAR은 상기 CAR의 세포 외 도메인에 융합되어 있는 막통과 도메인을 포함하도록 설계될 수 있다. 하나의 실시형태에서, 상기 CAR의 도메인 중 하나와 자연적으로 연관되어 있는 막통과 도메인이 사용된다. 몇몇의 경우, 상기 막통과 도메인은 수용체 복합체의 기타 멤버와의 상호작용을 최소화하기 위해 동일하거나 상이한 표면 막 단백질의 막통과 도메인에 대한 이 같은 도메인의 결합을 피하기 위해 선택되거나 아미노산 치환에 의해 변형될 수 있다.
막통과 도메인은 천연 및 합성 공급원 중 하나로부터 유래할 수 있다. 상기 공급원이 천연형인 경우, 상기 도메인은 임의의 막 결합형 단백질 또는 횡단막 단백질로부터 유래할 수 있다. 본 발명에서 특별히 사용되는 횡단막 영역은 T-세포 수용체의 알파, 베타 또는 제타 체인(적어도 이들의 횡단막 영역(들)), CD28, CD3 엡실론, CD45, CD4, CD5, CD8, CD9, CD16, CD22, CD33, CD37, CD64, CD80, CD86, CD134, CD137 및 CD154로부터 유래할 수 있다. 대안적으로는, 상기 막통과 도메인은 합성된 것일 수 있으며, 이러한 경우에 이는 류신 및 발린과 같이 지배적으로 소수성인 잔기를 포함할 것이다. 바람직하게는 페닐알라닌, 트립토판 및 발린의 트리플릿(삼중t)은 합성 막통과 도메인의 각 말단에서 발견될 것이다. 임의적으로는, 짧은 올리고펩티드 또는 폴리펩티드 링커, 바람직하게는 2와 10개 아미노산 길이를 갖는 링커는 막통과 도메인과 CAR의 세포질 신호전달 도메인 사이의 연결을 형성할 수 있다. 글리신-세린 더블릿은 특히 적합한 링커를 제공한다.
바람직하게는, 본 발명의 CAR 내의 막통과 도메인은 CD8 막통과 도메인이다. 하나의 실시형태에서, 상기 CD8 막통과 도메인은 서열번호 16의 핵산 서열을 포함한다. 하나의 실시형태에서, 상기 CD8 막통과 도메인은 서열번호 22의 아미노산 서열을 암호화하는 핵산 서열을 포함한다. 다른 실시형태에서, 상기 CD8 막통과 도메인은 서열번호 22의 아미노산 서열을 포함한다.
몇몇의 경우, 본 발명의 CAR의 막통과 도메인은 CD8α 힌지 도메인을 포함한다. 하나의 실시형태에서, 상기 CD8 힌지 도메인은 서열번호 15의 핵산 서열을 포함한다. 하나의 실시형태에서, 상기 CD8 힌지 도메인은 서열번호 21의 아미노산 서열을 암호화하는 핵산 서열을 포함한다. 다른 실시형태에서, 상기 CD8 힌지 도메인은 서열번호 21의 아미노산 서열을 포함한다.
세포질 도메인
본 발명의 CAR의 세포질 도메인 또는 다르게는 세포 내 신호전달 도메인은 CAR이 위치하고 있었던 면역 세포의 상 효과기 기능들 중 적어도 하나를 활성화시키는 역할을 한다. "효과기 기능"이란 용어는 세포의 구체화된 기능을 지칭한다. T 세포의 효과기 기능은, 예를 들어 사이토카인의 분비를 포함한 세포 용해성 활성 또는 헬퍼(helper) 활성일 수 있다. 따라서 "세포 내 신호전달 도메인"이란 용어는 효과기 기능 신호를 변환하고 세포가 구체화된 기능을 수행하도록 지시하는 단백질의 일부를 지칭한다. 일반적으로 세포 내 신호전달 도메인 전체가 이용될 수 있는 반면, 많은 경우에 체인 전체를 사용할 필요가 없다. 세포 내 신호전달 도메인의 절두된 일부가 사용되도록 연장시키기 위해선 이 같이 절단된 일부가 효과기 기능 신호를 변환하여 온전한 체인을 대신하여 사용될 수 있다. 따라서 "세포 내 신호전달 도메인"이란 용어는 효과기 기능 신호를 변환하기에 충분한 세포 내 신호전달 도메인의 임의의 절두된 일부를 포함하는 것으로 의미한다.
본 발명의 CAR에 사용하기 위한 세포 내 신호전달 도메인의 바람직한 예로는 항원 수용체 관여(engagement) 이후에 신호 형질 도입을 개시하도록 협조적으로 작용하는 T 세포 수용체(TCR) 및 보조 수용체의 세포질 서열뿐만 아니라, 이들 서열의 임의의 유도체 또는 변이체, 및 동일한 기능적 능력을 갖는 임의의 합성 서열을 들 수 있다.
TCR이 단독으로는 생성된 신호가 T 세포의 완전한 활성화에 불충분하고, 이차 또는 공자극성 신호가 또한 요구된다는 것이 공지되어 있다. 따라서 T 세포 활성화는 세포질 신호전달 서열의 2개의 특이한 부류에 의해 매개되는 것으로 언급될 수 있으며, 상기 2개의 부류에는 TCR을 통한 항원 의존성 일차 활성화를 개시하는 신호전달 서열(일차 세포질 신호전달 서열) 및 이차 또는 공자극성 신호를 제공하기 위해 항원 의존성 방식으로 작용하는 신호전달 서열(이차 세포질 신호전달 서열)이 있다.
일차 세포질 신호전달 서열은 자극 방식 및 억제 방식 중 하나로 TCR 복합체의 일차 활성화를 조절한다. 자극 방식으로 작용하는 일차 세포질 신호전달 서열은 면역 수용체 티로신 기반 활성화 모티프 또는 ITAM으로 공지되어 있는 신호전달 모티프를 함유할 수 있다.
본 발명에서 특별히 사용되는 일차 세포질 신호전달 서열을 함유하는 ITAM의 예로는 TCR 제타, FcR 감마, FcR 베타, CD3 감마, CD3 델타, CD3 엡실론, CD5, CD22, CD79a, CD79b 및 CD66d로부터 유래한 ITAM을 들 수 있다. 본 발명의 CAR 내의 세포질 신호전달 분자는 CD3 제타에서 유래한 세포질 신호전달 서열을 포함하는 것이 특히 바람직하다.
바람직한 실시형태에서, 상기 CAR의 세포질 도메인은 CD3-제타 신호전달 도메인 자체를 포함하거나 본 발명의 CAR의 배경에서 유용한 임의의 기타 목적하는 세포질 도메인(들)과 조합된 CD3-제타 신호전달 도메인을 포함하도록 설계될 수 있다. 예를 들어, 상기 CAR의 세포질 도메인은 CD3 제타 체인 일부 및 공자극성 신호전달 영역을 포함할 수 있다. 상기 공자극성 신호전달 영역은 공자극성 분자의 세포 내 도메인을 포함하는 CAR의 일부를 지칭한다. 공자극성 분자는 항원에 대한 림프구의 효율적인 반응을 위해 요구되는 항원 수용체 또는 이들의 리간드가 아닌 세포 표면 분자이다. 이 같은 분자의 예로는 CD27, CD28, 4-1BB(CD137), OX40, CD30, CD40, PD-1, ICOS, 림프구 기능 연관 항원-1(LFA-1), CD2, CD7, LIGHT, NKG2C, B7-H3, 및 CD83과 특이적으로 결합하는 리간드 등을 들 수 있다. 따라서 본 발명이 공자극성 신호전달 요소로서 4-1BB와 함께 주로 예시될지라도 기타 공자극성 요소는 본 발명의 범주 내에 있다.
본 발명의 CAR의 세포질 신호전달 일부 내에 있는 세포질 신호전달 서열은 무작위 또는 구체화된 순서로 서로 연결될 수 있다 임의적으로는, 짧은 올리고펩티드 또는 폴리펩티드 링커, 바람직하게는 2와 10개 아미노산 길이를 갖는 링커는 연결을 형성할 수 있다. 글리신-세린 더블릿은 특히 적합한 링커를 제공한다.
하나의 실시형태에서, 상기 세포질 도메인은 CD3-제타의 신호전달 도메인 및 CD28의 신호전달 도메인을 포함하도록 설계되었다. 다른 실시형태에서, 상기 세포질 도메인은 CD3-제타의 신호전달 도메인 및 4-1BB의 신호전달 도메인을 포함하도록 설계된다. 또 다른 실시형태에서, 상기 세포질 도메인은 CD3-제타의 신호전달 도메인 및 CD28 및 4-1BB의 신호전달 도메인을 포함하도록 설계되었다.
하나의 실시형태에서, 본 발명의 CAR 내의 세포질 도메인은 4-1BB의 신호전달 도메인 및 CD3-제타의 신호전달 도메인을 포함하도록 설계되되, 상기 4-1BB의 신호전달 도메인은 서열번호 17로 개시된 핵산 서열을 포함하고, 상기 CD3-제타의 신호전달 도메인은 서열번호 18로 개시된 핵산 서열을 포함한다.
하나의 실시형태에서, 본 발명의 CAR 내의 세포질 도메인은 4-1BB의 신호전달 도메인 및 CD3-제타의 신호전달 도메인을 포함하도록 설계되되, 상기 4-1BB의 신호전달 도메인은 서열번호 23의 아미노산 서열을 암호화하는 핵산 서열을 포함하고, 상기 CD3-제타의 신호전달 도메인은 서열번호 24의 아미노산 서열을 암호화하는 핵산 서열을 포함한다.
하나의 실시형태에서, 본 발명의 CAR 내의 세포질 도메인은 4-1BB의 신호전달 도메인 및 CD3-제타의 신호전달 도메인을 포함하도록 설계되되, 상기 4-1BB의 신호전달 도메인은 서열번호 23으로 개시된 아미노산 서열을 포함하고, 상기 CD3-제타의 신호전달 도메인은 서열번호 24로 개시된 아미노산 서열을 포함한다.
벡터
본 발명은 CAR의 서열을 포함하는 DNA 구조체를 포함하되, 여기서 상기 서열은 세포 내 도메인의 핵산 서열에 작동 가능하게 연결된 항원 결합 일부분의 핵산 서열을 포함한다. 본 발명의 CAR에 사용될 수 있는 예시적인 세포 내 도메인으로는 CD3-제타, CD28, 4-1BB 등의 세포 내 도메인을 들 수 있지만, 본 발명에서는 이에 제한되지 않는다. 몇몇의 경우, 상기 CAR은 CD3-제타, CD28, 4-1BB 등의 임의의 조합을 포함할 수 있다.
하나의 실시형태에서, 본 발명의 CAR은 항-CD19 scFv, 인간 CD8 힌지 및 막통과 도메인, 및 인간 4-1BB 및 CD3제타 신호전달 도메인을 포함한다. 하나의 실시형태에서, 본 발명의 CAR은 서열번호 8로 개시된 핵산 서열을 포함한다. 다른 실시형태에서, 본 발명의 CAR은 서열번호 12의 아미노산 서열을 암호화하는 핵산 서열을 포함한다. 다른 실시형태에서, 본 발명의 CAR은 서열번호 12로 개시된 아미노산 서열을 포함한다.
목적하는 분자를 코딩하는 핵산 서열은 당해 기술분야에 공지된 재조합 방법을 이용하여 수득될 수 있으며, 예를 들어 표준 기법을 이용하여 상기 유전자를 발현하는 세포로부터 라이브러리를 스크리닝하거나, 상기 동일한 유전자를 포함하도록 공지된 벡터로부터 유전자를 유도하거나, 상기 동일한 유전자를 포함하는 세포 및 조직으로부터 직접 단리함으로써 수득될 수 있다. 대안적으로는, 상기 관심이 있는 유전자는 클로닝이 아닌 합성에 의해 생성될 수 있다.
본 발명은 또한 본 발명의 DNA가 삽입되어 있는 벡터를 제공한다. 렌티바이러스와 같은 레트로바이러스에서 유래한 벡터는 이들이 이식 유전자의 장기간 안정한 통합 및 딸세포에서의 상기 유전자의 증식을 허용하기 때문에 장기간 유전자 전달을 달성하기에 적합한 도구이다. 렌티바이러스 벡터는 간세포와 같은 비증식성 세포를 형질 도입할 수 있다는 점에서 쥐 백혈병 바이러스와 같은 암-레트로바이러스로부터 유래한 벡터에 대한 부가적인 이점을 갖는다. 이들은 또한 면역성이 낮다는 부가적인 이점을 갖는다.
간단하게 요약하면, CAR을 암호화하는 천연 또는 합성 핵산의 발현은 전형적으로 CAR 폴리펩티드 또는 이의 일부를 암호화하는 핵산을 프로모터에 작동 가능하게 연결하고 상기 구조체를 발현 벡터에 도입함으로써 달성된다. 상기 벡터는 복제 및 통합 진핵생물용으로 적합할 수 있다. 전형적인 클로닝 벡터는 전사 및 번역 종결인자, 개시 서열, 및 목적하는 핵산 서열의 발현의 조절에 유용한 프로모터를 포함한다.
본 발명의 발현 구조체는 또한 표준 유전자 전달 프로토콜을 이용하여 핵산 면역화 및 유전자 요법을 위해 사용될 수 있다. 유전자 전달을 위한 방법이 당해 기술분야에 공지되어 있다. 예를 들어, 본원에서 전체가 참고로 인용된 미국 특허 제 5,399,346 호, 제 5,580,859 호 및 제 5,589,466 호를 참고한다. 다른 실시형태에서, 본 발명은 유전자 요법 벡터를 제공한다.
상기 핵산은 다수 유형의 벡터 내로 클로닝될 수 있다. 예를 들어, 상기 핵산은 플라스미드, 파지미드(phagemid), 파지 유도체, 동물 바이러스 및 코스미드를 포함하지만 이에 제한되지 않는 벡터 내로 클로닝될 수 있다. 특히 관심이 있는 벡터로는 발현 벡터, 복제 벡터, 탐침 생성 벡터 및 시퀀싱 벡터를 들 수 있다.
또한 상기 발현 벡터는 바이러스성 벡터의 형태인 세포에 제공될 수 있다. 바이러스성 벡터 기술은 당해 기술분야에 널리 공지되어 있으며, 예를 들어 샘브룩(Sambrook) 등(2001, Molecular Cloning: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory, New York)에 개시되어 있으며, 기타 바이러스학 및 분자생물학 설명서에 개시되어 있다. 벡터로서 유용한 바이러스로는 레트로바이러스, 아데노바이러스, 아데노 연관 바이러스, 포진 바이러스 및 렌티바이러스를 들 수 있지만, 이에 제한되지 않는다. 일반적으로, 적합한 벡터는 적어도 하나의 유기체에서 기능적인 복제 기원, 프로모터 서열, 편리한 제한 엔도뉴클레아제 부위 및 하나 이상의 선택 가능한 마커를 포함한다(예를 들어, 국제 공개공보 제 WO 01/96584 호; 제 WO 01/29058 호; 및 미국 특허 제 6,326,193 호).
다수의 바이러스 기반 시스템은 포유동물 세포 내로의 유전자 전달을 위해 개발되었다. 예를 들어, 레트로바이러스는 유전자 전달 시스템을 위한 편리한 플랫폼(platform)을 제공한다. 선택된 유전자는 벡터 내로 삽입되고, 당해 기술분야에 공지된 기법을 이용하여 레트로바이러스성 입자에 패키징(packaging)된다. 이어 재조합 바이러스는 단리되어, 생체 내 및 생체 외 중 하나에서 개체의 세포로 전달될 수 있다. 다수의 레트로바이러스성 시스템이 당해 기술분야에 공지되어 있다. 몇몇 실시형태에서, 아데노바이러스 벡터가 사용된다. 다수의 아데노바이러스 벡터가 당해 기술분야에 공지되어 있다. 하나의 실시형태에서, 렌티바이러스 벡터가 사용된다.
부가적인 프로모터 요소, 예를 들어 인핸서는 전사 개시의 빈도를 조절한다. 전형적으로는, 최근에 다수의 프로모터가 출발 부위의 하류에 기능 요소를 또한 함유하도록 나타나 있을지라도 상기 출발 부위의 상류에서 30 내지 110bp 영역에 프로모터 요소가 위치한다. 프로모터 요소들 사이의 간격은 종종 가요성이어서, 프로모터 기능은 요소들이 삽입되거나 서로에 대해 이동하는 경우에 보존된다. 티미딘 키나아제(tk) 프로모터에서 프로모터 요소들 사이의 간격은 활성이 감소하기 시작하기 전에는 50bp까지 증가할 수 있다. 프로모터에 따라 개별 요소가 전사를 활성하기 위해 협조적 또는 독립적으로 기능할 수 있는 것으로 보인다.
적합한 프로모터의 하나의 예는 즉시형 초기 사이토메갈로바이러스(CMV) 프로모터 서열이다. 이러한 프로모터 서열은 자신에 작동 가능하게 연결된 임의의 폴리뉴클레오티드 서열의 발현을 높은 수준으로 구동할 수 있는 강력한 항구적 프로모터 서열이다. 적합한 프로모터의 다른 예는 연장 성장 인자-1α(EF-1α)이다. 그러나 액틴 프로모터, 미오신 프로모터, 헤모글로빈 프로모터 및 크레아틴 키나아제 프로모터를 포함하지만 이에 제한되지 않은 인간 유전자 프로모터뿐만 아니라, 원숭이 바이러스 40(SV40) 초기 프로모터, 생쥐 유방 종양 바이러스(MMTV), 인간 면역 결핍 바이러스(HIV) 긴 말단 반복서열(LTR) 프로모터, MoMuLV 프로모터, 조류 백혈병 바이러스 프로모터, 엡스타인-바 바이러스 즉시형 초기 프로모터, 및 라우스 육종 바이러스 프로모터를 포함하는 기타 항구적 프로모터 서열은 또한 사용될 수 있다. 또한 본 발명은 항구적 프로모터의 용도에 제한되지 않아야 한다. 유도성 프로모터는 본 발명의 일부로서 고려된다. 유도성 프로모터의 용도는 이 같은 발현이 요구되는 경우에 상기 유도성 프로모터가 작동 가능하게 연결되어 있는 폴리뉴클레오티드 서열을 발현을 시작할 수 있거나 상기 발현이 요구되지 않는 경우에 발현을 중단할 수 있는 분자 스위치를 제공한다. 유도성 프로모터의 예로는 메탈로티오닌 프로모터, 글루코코티코이드 프로모터, 프로게스테론 프로모터 및 테트라사이클린 프로모터를 들 수 있지만, 이에 제한되지 않는다.
CAR 폴리펩티드 또는 이의 일부의 발현을 평가하기 위해, 세포 내로 도입될 발현 벡터는 또한 바이러스성 벡터를 통해 형질 감염되거나 감염되는 것으로 생각되는 세포의 개체군으로부터 발현 세포의 확인 및 선택을 조장하기 위해 선택 가능한 마커 유전자 및 리포터 유전자 중 하나 또는 둘 모두를 포함할 수 있다. 기타 양태에서, 선택 가능한 마커는 DNA 개별 단편 상에서 존재할 수 있으며, 공-형질 감염 과정에 사용될 수 있다. 선택 가능한 마커 및 리포터 유전자 둘 모두는 숙주 세포에서 발현을 가능케 하기 위해 적절한 조절용 서열의 측면에 위치할 수 있다. 유용한 선택 가능한 마커로는, 예를 들어 neo 등과 같은 항생제 저항 유전자를 들 수 있다.
리포터 유전자는 잠재적으로 형질 감염된 세포를 확인하고 조절용 서열의 기능성을 평가하기 위해 사용된다. 일반적으로, 리포터 유전자는 수취성 유기체 또는 조직에 존재하지 않거나 이에 의해 발현되지 않으며, 몇몇 용이하게 검출 가능한 특성, 예를 들어, 효소 활성에 의해 발현이 확인된 폴리펩티드를 암호화하는 유전자이다. 리포터 유전자의 발현은 DNA가 수취성 세포 내로 도입된 이후 적절한 시간에 검정된다. 적합한 리포터 유전자는 루시페라아제, 베타-갈락토시다아제, 클로람페니콜 아세틸 전이효소, 분비된 알카라인 포스파타제 또는 녹색 형광 단백질 유전자(예를 들어, Ui-Tei 등, 2000 FEBS Letters 479: 79-82)를 암호화하는 유전자를 포함할 수 있다. 적합한 발현 시스템은 널리 공지되어 있으며, 공지된 방법으로 제조되거나 공업적으로 수득될 수 있다. 일반적으로, 리포터 유전자의 가장 높은 발현 수준을 나타내는 최소 5' 측부 영역을 갖는 구조체는 프로모터로서 확인되었다. 이 같은 프로모터 영역은 포터 유전자에 연결될 수 있으며, 프로모터 구동 전사를 조정하는 능력 때문에 약제를 평가하기 위해 사용될 수 있다.
세포 내로 유전자를 도입하고 발현하는 방법은 당해 기술분야에 공지되어 있다. 발현 벡터의 배경에서, 상기 벡터는 당해 기술분야에 공지된 임의의 방법에 의해 숙주 세포, 예를 들어, 포유동물 세포, 박테리아성 세포, 효모 세포 또는 곤충 세포 내로 신속하게 도입될 수 있다. 예를 들어, 발현 벡터는 물리적, 화학적 또는 생물학적 수단에 의해 숙주 세포에 전달될 수 있다.
폴리뉴클레오티드를 숙주 세포 내로 도입하는 물리적 방법으로는 인산칼슘 침전, 리포펙션(lipofection), 입자 충격, 미세주사, 전기 천공 등을 들 수 있다. 벡터 및/또는 외생성 핵산을 포함하는 세포를 생성하는 방법은 당해 기술분야에 널리 공지되어 있다. 예를 들어, 샘브룩 등(2001, Molecular Cloning: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory, New York)을 참고한다. 숙주 세포 내로의 폴리뉴클레오티드의 도입을 위한 바람직한 방법은 인산칼슘 형질 감염이다.
대상 폴리뉴클레오티드를 숙주 세포에 도입하기 위한 생물학적 방법으로는 DNA 및 RNA 벡터의 사용을 들 수 있다. 바이러스성 벡터, 및 특히 레트로바이러스성 벡터는 유전자를 포유동물 세포, 예를 들어 인간 세포 내로 삽입하기 위해 가장 광범위하게 사용된 방법이다. 기타 바이러스성 벡터는 렌티바이러스, 수두 바이러스, 단순 포진 바이러스 I, 아데노바이러스, 아데노 연관 바이러스 등으로부터 유래할 수 있다. 예를 들어, 미국 특허 제 5,350,674 호 및 제 5,585,362 호를 참고한다.
폴리뉴클레오티드를 숙주 세포 내로 도입하기 위한 화학적 수단으로는 거대 분자 복합체, 나노캡슐, 미소구체, 비드, 및 수중유 유제, 미셀, 혼합 미셀 및 리포좀을 포함하는 지질 기반 시스템과 같은 콜로이드성 분산 시스템을 들 수 있다. 시험관 내 및 생체 내에서 전달 비히클로서 사용하기 위한 예시적인 콜로이드성 시스템은 리포좀(예를 들어, 인공 막소포)이다.
비-바이러스성 전달 시스템이 사용되는 경우에 예시적인 전달 비히클은 리포좀이다. 지질 제형의 사용은 숙주 세포 내로의 핵산의 도입(시험관 내, 생체 외 또는 생체 내)을 위해 고려된다. 다른 양태에서, 상기 핵산은 지질과 연관될 수 있다. 지질과 연관된 핵산은 리포좀의 수정 내부에 캡슐화되거나, 리포좀의 지질 이중층 내에 산재하거나, 리포좀 및 올리고뉴클레오티드 둘 모두와 연관이 있는 연결 분자를 통해 리포좀에 부착되거나, 리포좀에 포획되거나, 리포좀과 착체를 형성하거나, 지질을 함유하는 용액에 분산되거나, 지질과 혼합되거나, 지질과 조합되거나, 지질 중의 현탁액으로서 포함되거나, 미셀과 함께 포함되거나 착체를 형성하거나, 다르게는 지질과 연관되어 있다. 지질, 지질/DNA 또는 지질/발현 벡터 연관 조성물은 용액 중의 임의의 특정한 구조에 제한되지 않는다. 예를 들어, 이들은 미셀로서 이중층 구조에 존재할 수 있거나, "붕괴된" 구조로 존재할 수 있다. 이들은 용액 중에서 단순하게 산재되어 있을 수 있으며, 이로 인해 가능하게도 크기 또는 형태가 균일하지 않는 집성체가 형성된다. 지질은 자연적으로 발생하는 지질 또는 합성 지질일 수 있는 지방 물질이다. 예를 들어, 지질은 지방산, 알코올, 아민, 아미노 알코올 및 알데하이드와 같은 장쇄 지방족 탄화수소 및 이들의 유도체를 포함하는 화합물의 부류뿐만 아니라 세포질에서 자연적으로는 발생하는 지방 비말(fatty droplet)을 포함한다.
사용에 적합한 지질은 공업용 공급원으로부터 수득될 수 있다. 예를 들어, 디미리스틸 포스파디틸콜린("DMPC")은 미주리주 세인트루이스에 소재한 시그마(Sigma)사로부터 수득될 수 있고, 디세틸포스페이트("DCP")는 뉴욕주 플레인뷰에 소재한 케이앤드케이 래보레토리스(K & K Laboratories)사로부터 수득될 수 있고, 콜레스테롤("choi")은 칼바이오캠-베링(Calbiochem-Behring)사로부터 수득될 수 있고, 디미리스틸 포스파티딜글리세롤("DMPG") 및 기타 지질은 알라바마주 버밍햄에 소재한 아반띠 폴라 리비즈(Avanti Polar Lipids, Inc.)사로부터 수득될 수 있다. 클로로포름 또는 클로로포름/메탄올 중의 지질의 저장 용액은 약 -20℃에서 저장될 수 있다. 클로로포름은 메탄올보다 용이하게 증발하기 때문에 유일한 용매로서 사용된다. "리포좀"은 동봉된 지질 이중층 또는 집성체의 생성에 의해 형성된 다양한 단일 및 다중 라멜라성 지질 비히클을 포함하는 일반적인 용어이다. 리포좀은 인지질 이중층 막 및 내부 수성 배지가 구비된 수포성 구조를 갖는 것으로 특징지어질 수 있다. 다중 라멜라성 리포좀은 수성 배지에 의해 분리된 다중 지질층을 갖는다. 이들은 과량의 수용액에서 인지질이 현탁되는 경우에 동시에 형성된다. 지질 성분은 폐쇄된 구조의 형성 이전에 자가 재배열을 경험하고, 물 및 지질 이중층에 용해된 용질을 포획한다(Ghosh 등, 1991 Glycobiology 5: 505-10). 그러나 용액에서 정상 수포성 구조와는 상이한 구조를 갖는 조성물이 또한 포함된다. 예를 들어, 상기 지질은 미셀 구조를 나타낼 수 있거나, 지질 분자의 불균일한 집성체로서 단순히 존재할 수 있다. 또한 리포펙타민-핵산 복합체가 고려된다.
외생성 핵산을 숙주 세포 내로 도입하거나 다르게는 세포를 본 발명의 억제제에 노출시키기 위해 사용된 상기 방법과는 무관하게, 숙주 세포에서 재조합 DNA 서열의 존재를 확인하기 위해 다양한 검정이 수행될 수 있다. 이 같은 검정으로는, 예를 들어 서던 및 노던 블롯팅(Southern and Northern blotting), RT-PCR 및 PCR과 같이 당해 기술분야의 숙련자에게 널리 공지된 "분자 생물학적" 검정; 예를 들어 본 발명의 범주 이내에 있는 약제를 확인하기 위해 본원에서 개시된 검정 또는 면역학적 수단(ELISAs 및 Western blots)에 의해 특정 펩티드의 존재 또는 부재를 검출하는 것과 같은 "생화학적" 검정을 들 수 있다.
T 세포의 공급원
본 발명의 T 세포의 증식 및 유전자 변형 이전에 T 세포의 공급원은 개체로부터 수득된다. T 세포는 말초 혈액 단핵성 세포, 골수, 림프절 조직, 재대혈, 흉선 조직, 감염 부위, 복수 부위 또는 흉막 유출 부위로부터의 조직, 비장 조직, 및 종양을 포함한 다수의 공급원으로부터 수득될 수 있다. 본 발명의 특정 실시형태에서, 당해 기수분야에서 이용 가능한 다수의 임의의 T 세포주가 사용될 수 있다. 본 발명의 특정 실시형태에서, T 세포는 피콜TM(FicollTM) 분리와 같이 당업자에게 공지된 다수의 임의의 기법을 이용하여 개체로부터 수집된 혈액 단위로 수득될 수 있다. 하나의 바람직한 실시형태에서, 개체의 순환 혈액으로부터의 세포는 아페레시스에 의해 수득된다. 아페레시스 생성물은 전형적으로는 T 세포, 단핵 세포, 과립구, B 세포, 기타 핵 형성 백혈구 세포, 적혈구 세포 및 혈소판을 포함한 림프구를 포함한다. 하나의 실시형태에서, 상기 아페레시스에 의해 수집된 세포는 플라즈마 분획을 제거하고 후족적인 가공 단계를 위해 상기 세포를 적절한 완충액 또는 배지에 넣기 위해 세척될 수 있다. 본 발명의 하나의 실시형태에서, 상기 세포는 인산 완충 식염수(PBS)로 세척한다. 대안적인 실시형태에서, 세척액에는 칼슘이 결핍되고, 마그네슘이 결핍될 수 있거나, 모두가 2가 양이온이 아닌 경우에 많은 것이 결핍될 수 있다. 또한 놀랍게도, 칼슘의 부재 하에서의 초기 활성화 단계는 변형된 활성화를 초래한다. 당해 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자는 세척 단계는 제조사의 지시에 따라 반자동화된 "통과형(flow-through)" 원심분리기(예를 들어, Cobe 2991 세포 프로세서, Baxter CytoMate 또는 Haemonetics Cell Saver 5)를 이용하는 것과 같이 당해 기술분야의 숙련자에게 공지된 방법에 의해 달성될 수 있다는 것을 용이하게 인식할 수 있다. 세척 이후, 상기 세포는, 예를 들어 Ca2+ 부재 PBS, Mg2+ 부재 PBS, 플라즈마라이트(PlasmaLyte) A, 또는 완충액의 유무에 따른 기타 식염수 용액과 같은 다양한 생체 적합성 완충액에 재현탁될 수 있다. 대안적으로는, 상기 아페레시스 샘플의 바람직하지 못한 성분은 제거될 수 있으며, 상기 세포는 배양 배지에 직접 현탁될 수 있다.
다른 실시형태에서, T 세포는 적혈구 세포를 용해하고, 예를 들어 PERCOLLTM 구배를 통한 원심분리 또는 역류 원심분리성 수비에 의해 단핵 세포를 고갈시킴으로써 말초 혈액 림프구로부터 단리된다. CD3+, CD28+, CD4+, CD8+, CD45RA+ 및 CD45RO+ T세포와 같은 세포의 특정 하위 개체군은 양성 또는 음성 선택 기법에 의해 추가로 단리될 수 있다. 예를 들어, 하나의 실시형태에서, T 세포는 목적하는 T 세포의 양성 선택을 위해 충분한 기간 동안 DYNABEADS® M-450 CD3/CD28 T와 같은 항-CD3/항-CD28(즉, 3x28) 접합 비드와 함께 배양함으로써 단리된다. 하나의 실시형태에서, 상기 기간은 약 30분이다. 또 다른 실시형태에서, 상기 기간은 30분 내지 36시간의 범위이며, 그 이상일 수 있으며, 이들 사이의 모든 값은 정수이다. 또 다른 실시형태에서, 상기 기간은 적어도 1시간, 2시간, 3시간, 4시간, 5시간 또는 6시간이다. 또 다른 바람직한 실시형태에서, 상기 기간은 10시간 내지 24시간이다. 하나의 바람직한 실시형태에서, 상기 배양 기간은 24시간이다. 백혈병을 앓는 환자로부터 T 세포의 단리를 위해 더욱 긴 배양 시간, 예를 들어 24시간의 사용은 세포 수율을 증가시킬 수 있다. 더욱 긴 배양 시간은 기타 세포 유형과 비교해서 T 세포의 수가 적은 임의의 상황, 예를 들어 종양 조직 또는 면역 저하(immune-compromising)된 개인으로부터 종양 침윤성 림프구(TIL)를 단리하는 것과 같은 상황에서 T 세포를 단리하기 위해 사용될 수 있다. 또한 더욱 긴 배양 시간의 사용은 CD8+ T 세포의 포획 효율을 증가시킬 수 있다. 따라서 T 세포가 CD3/CD28 비드에 결합하도록 상기 시간을 단순히 감소시키거나 증가시키는 것 및/또는 T 세포에 대한 비드의 비율을 증가시키거나 감소시킴으로써(본원에서 추가로 개시된 바와 같음), T 세포의 하위 개체군은 배양 개시 시점 또는 공정 도중의 기타 시점이 우선적으로 선택될 수 있다. 부가적으로는, 비드 또는 기타 표면의 항-CD3 및/또는 항-CD28 항체의 비율을 증가시키거나 감소시킴으로써 T 세포의 하위 개체군은 배양 개시 시점 또는 기타 목적하는 시점이 우선적으로 선택될 수 있다. 당업자는 여러 번의 선택이 또한 본 발명의 배경에 사용될 수 있다는 것을 인식할 수 있다. 특정 실시형태에서, 선택 과정을 수행하고, 활성화 및 확장 공정에서 "선택되지 않은" 세포를 이용하는 것이 바람직할 수 있다. "선택되지 않은" 세포는 또한 추가 회수의 선택이 적용될 수도 있다.
음성 선택에 의한 T 세포 개체군의 부유화는 음성으로 선택된 세포에 특이적인 표면 마커로 향하는 항체의 조합에 의해 달성될 수 있다. 하나의 방법은 음성으로 선택된 세포 상에 존재하는 세포 표면 마커로 향하는 단일 클론성 항체의 칵테일(cocktail)을 이용하는 음자성 면역 부착법 또는 유동 세포 분석법을 통한 세포 분류 및/또는 선택이다. 예를 들어, 음성 선택에 의해 CD4+ 세포용으로 부유화하기 위해, 단일 클론성 항체 칵테일은 전형적으로는 CD14, CD20, CD11b, CD16, HLA-DR 및 CD8에 대한 항체를 포함한다. 특정 실시형태에서, 전형적으로 CD4+, CD25+, CD62Lhi, GITR+ 및 FoxP3+를 발현하는 조절용 T 세포용으로 부유화하거나 양성으로 선택하는 것이 바람직할 수 있다. 대안적으로는, 특정 실시형태에서는 T 조절용 세포는 항-C25 접합 비드 또는 기타 유사한 선택 방법으로 고갈될 수 있다.
양성 또는 음성 선택에 의한 세포의 목적하는 개체군을 단리하기 위해, 세포 및 표면(예를 들어, 비드와 같은 입자)의 농도는 다를 수 있다. 특정 실시형태에서, 세포 및 비드의 최대 접촉을 확보하기 위해 비드 및 세포가 함께 혼합되어 있는 부피를 유의하게 증가시키는 것(즉, 세포의 농도를 증가시키는 것)이 바람직할 수 있다. 예를 들어, 하나의 실시형태에서, 1㎖ 당 20억 개의 세포 농도가 사용된다. 하나의 실시형태에서, 1㎖ 당 10억 개의 세포 농도가 사용된다. 또 다른 실시형태에서, 1㎖ 당 1억 개 초과의 세포가 사용된다. 또 다른 실시형태에서, 1㎖ 당 1천만, 1천5백만, 2천만, 2천5백만, 3천만, 3천5백만, 4천만, 4천5백만 또는 5천만 개 세포의 세포 농도가 사용된다. 또 다른 실시형태에서, 1㎖ 당 7천5백만, 8천만, 8천5백만, 9천만, 9천5백만 또는 1억 개 세포의 세포 농도가 사용된다. 또 다른 실시형태에서, 1㎖ 당 1억 2천5백만 또는 1억 5천만 개의 세포 농도가 사용될 수 있다. 고농도의 사용은 세포 수율, 세포 활성화 및 세포 확장의 증가를 초래할 수 있다. 또한 높은 세포 농도의 사용은 CD28 음성 T 세포와 같이 관심이 있는 표적 항원을 약하게 발현할 수 있는 세포의 더욱 효율적인 포획을 허용하거나, 이때 다수의 종양 세포가 존재하는 샘플(즉, 백혈병성 혈액, 종양 조직 등)로부터 상기 세포의 더욱 효율적인 포획을 허용한다. 이 같은 세포의 개체군은 치료적 값을 가질 수 있으며, 상기 세포의 개체군을 수득하는 것이 바람직할 수 있다. 예를 들어, 고농도의 세포의 사용은 정상적으로는 더욱 약한 CD28 발현을 나타내는 CD8+ T 세포의 더욱 효율적인 선택을 허용한다.
관련 실시형태에서, 더욱 낮은 농도의 세포를 이용하는 것이 바람직할 수 있다. T 세포와 표면(예를 들어, 비드와 같은 입자)의 혼합물을 유의하게 희석함으로써 입자와 세포 사이의 상호작용을 최소화된다. 이는 다량의 목적하는 항원을 발현하여 상기 입자에 결합되는 세포를 위해 선택된다. 예를 들어, CD4+ T 세포는 더욱 높은 수준의 CD28을 발현하고, 희석 농도에서 CD8+ T 세포보다 더욱 효율적으로 포획된다. 하나의 실시형태에서, 사용된 세포의 농도는 5×106/㎖이다. 기타 실시형태에서, 사용된 농도는 약 1×105/㎖ 내지 1×106/㎖일 수 있으며, 이들 사이에 있는 임의의 정수 값이다.
기타 실시형태에서, 상기 세포는 2 내지 10℃ 및 실온 중 하나에서 변하는 속도로 변하는 시간의 길이 동안 회전자 상에서 배양될 수 있다.
자극을 위한 T 세포는 또한 세척 단계 이후에 냉동될 수 있다. 이론에 결부되지 않기를 바라면서, 냉동 단계 및 후속적인 해동 단계는 세포 개체군 내의 과립구를 제거하고 어느 정도는 단핵 세포를 제거함으로써 더욱 균일한 생성물을 제공한다. 플라즈마 및 혈소판을 제거하는 세척 단계 이후, 상기 세포는 동결액에 현탁될 수 있다. 많은 동결액 및 파라미터가 당해 기술분야에 공지되어 있고, 이러한 배경에서 유용할지라도, 하나의 방법은 20% DMSO 및 8% 인간 혈청 알부민을 함유하는 PBS, 또는 10% 덱스트란 40 및 5% 덱스트로오스를 함유하는 배양 배지, 20% 인간 혈청 알부민 및 7.5% DMSO, 또는 31.25% 플라즈마라이트-A, 31.25% 덱스트로오스 5%, 0.45% NaCl, 10% 덱스트란 40 및 5% 덱스트로오스, 20% 인간 혈청 알부민, 및 7.5% DMSO, 및 예를 들어 헤스판(Hespan) 및 플라즈마라이트 A를 함유하는 기타 적합한 세포 동결 배지의 이용을 포함한다. 이어 상기 세포는 1분 당 1°의 속도로 -80℃까지 냉동되고, 기화상태의 액체 질소 저장 탱크에 저장된다. -20℃에서 또는 액체 질소 중에서 제어되지 않는 즉시형 동결뿐만 아니라 기타 제어된 동결 방법이 사용될 수 있다.
특정 실시형태에서, 냉동에서 보존된 세포는 상술한 바와 같이 해동하고, 세척하며, 본 발명의 방법을 이용한 활성화 이전에 실온에서 1시간 동안 방치한다.
본원에서 개시된 바와 같이 증식된 세포가 필요로 할 시기 이전의 기간에 개체로부터 혈액 샘플 또는 아페레시스 생성물을 수집하는 것이 본 발명의 배경에서 또한 고려된다. 상기와 같이, 확장될 세포의 공급원은 임의의 필요한 시점에 수집될 수 있으며, T 세포 같이 목적하는 세포는 본원에서 개시된 바와 같은 T 세포 요법으로부터 이점을 가질 수 있는 다수의 임의의 질병 또는 이상에 대해 T 세포 요법에서 추후에 사용하기 위해 단리되고 냉동된다. 하나의 실시형태에서, 혈액 샘플 또는 아페레시스는 일반적으로 건강한 개체로부터 얻어진다. 특정 실시형태에서, 혈액 샘플 또는 아페레시스는 질병에 걸릴 위험이 있지만 아직까지 질병에 걸리지 않은 일반적으로 건강한 개체로부터 얻어지고, 및 관심이 있는 세포는 추후의 사용을 위해 단리되고 냉동된다. 특정 실시형태에서, 상기 T 세포는 증식되고, 냉동되며, 추후의 시간에 사용될 수 있다. 특정 실시형태에서, 샘플은 본원에서 개시된 바와 같은 특정한 질병의 진단 직후지만 임의의 치료 이전에 환자로부터 수집된다. 또 다른 실시형태에서, 상기 세포는 다수의 임의의 관련된 치료 양식 이전에 개체에서 유래한 혈액 샘플 또는 아페레시스로부터 단리되며, 이때 상기 관련된 치료 양식으로는 나탈리주맙(natalizumab), 에팔리주맙(efalizumab) 및 항바이러스제와 같은 약제, 사이클로스포린, 아자티오프린(azathioprine), 메토트렉세이트(methotrexate), 마이코페놀레이트(mycophenolate) 및 FK506과 같은 면역 억제제, CAMPATH, 항-CD3 항체, 사이톡산(cytoxan), 플루다라빈(fludarabine), 사이클로스포린, FK506, 라파마이신(rapamycin), 마이코페놀산, 스테로이드류 및 FR901228과 같은 항체 또는 기타 면역 절제제, 및 방사선요법을 들 수 있지만, 이에 제한되지 않는다. 이들 약제는 칼슘 의존성 포스파타아제인 칼시뉴린(calcineurin)(사이클로스포린 및 FK506)을 억제하거나, 성장 인자 유도 신호전달(라파마이신)에 중요한 p70S6 키나아제를 억제한다(Liu 등, Cell 66: 807-815, 1991; Henderson 등, Immun. 73: 316-321, 1991; Bierer 등, Curr. Opin. Immun. 5: 763-773, 1993). 또 다른 실시형태에서, 상기 세포는 환자를 위해 단리 하여, 골수 또는 줄기세포 이식, 및 플루다라빈, 외부 방사선 요법(XRT) 또는 싸이클로포스파마이드(cyclophosphamide)와 같은 화학요법제 및 OKT3 또는 CAMPATH와 같은 항체 중 하나를 이용하는 T 세포 절제 요법(예를 들어, 이전, 동시 또는 이후)과 함께 추후 사용을 위해 냉동된다. 다른 실시형태에서, 상기 세포는 CD20과 반응하는 약제, 예를 들어 리툭산(Rituxan)과 같은 B-세포 절제 요법 이전에 단리하여, 상기 B-세포 절제 요법 이후에 추후 사용을 위하 냉동될 수 있다.
본 발명의 또 다른 실시형태에서, T 세포는 치료 직후에 환자로부터 수득된다. 이와 관련하여, 특정 암 치료 이후, 면역 시스템을 손상시키는 약제에 의한 특별한 치료에서, 그리고 상기 치료에 의해 환자가 정상적으로 회복할 수 있는 기간 동안의 치료 직후에 수득된 T 세포의 양이 최적일 수 있으며, 생체 외에서 증식하는 이들의 능력을 위해 개선될 수 있는 것으로 관측되었다. 마찬가지로, 본원에 개시된 방법을 이용한 생체 외 조작 이후에 이들 세포는 증강된 이식 및 생체 내 증식을 위해 바람직한 상태일 수 있다. 따라서 이러한 회복 단계 도중에 조혈 계통의 T 세포, 수지상 세포 또는 기타 세포를 포함한 혈액 세포를 수집하기 위해 본 발명의 배경 내에서 고려된다. 또한 특정 실시형태에서, 고정화(예를 들어, GM-CSF와의 고정화) 및 컨디셔닝 양생법(conditioning regimen)은 특히 요법 이후에 소정의 시간의 창 도중에 특정한 세포 유형의 재증식, 재순환, 재생, 및/또는 확장이 선호되는 개체에서 이상을 야기하기 위해 사용될 수 있다. 예시적인 세포 유형으로는 T 세포, B 세포, 수지상 세포, 및 상기 면역 시스템의 기타 세포를 들 수 있다.
T 세포의 활성화 및 증식
바람직한 CAR을 발현하기 위해 T 세포의 유전자 변형 이전이든 이후이든 간에, 상기 T 세포는, 예를 들어 일반적으로는 미국 특허 제 6,352,694 호; 제 6,534,055 호; 제 6,905,680 호; 제 6,692,964 호; 제 5,858,358 호; 제 6,887,466 호; 제 6,905,681 호; 제 7,144,575 호; 제 7,067,318 호; 제 7,172,869 호; 제 7,232,566 호; 제 7,175,843 호; 제 5,883,223 호; 제 6,905,874 호; 제 6,797,514 호; 및 제 6,867,041 호, 및 미국 특허출원 제 2006-0121005 호에 개시된 방법을 이용하여 활성화되고 증식될 수 있다.
일반적으로, 본 발명의 T 세포는 CD3/TCR 복합체 연관 신호를 자극하는 약제 및 T 세포의 표면 상의 공자극성 분자를 자극하는 리간드가 부착되어 있는 표면과의 접촉에 의해 증식된다. 특히, T 세포 개체군은 항-CD3 항체 또는 이의 항원 결합 단편, 또는 표면 상에 고정된 항-CD2 항체와의 접촉, 또는 칼슘 이온 투과 담체(calcium ionophore)와 함께 단백질 키나아제 C 활성인자(예를 들어, 브리오스타틴(bryostatin))와의 접촉에 의한 것과 같이 본원에 개시된 바와 같이 자극될 수 있다. T 세포의 표면 상의 보조 분자의 공자극을 위해 상기 보조 분자와 결합하는 리간드가 사용된다. 예를 들어, T 세포의 개체군은 T 세포의 증식을 자극하기에 적절한 조건 하에 항-CD3 항체 및 항-CD28 항체와 접촉될 수 있다. CD4+ T 세포 및 CD8+ T 세포 중 하나의 증식을 자극하기 위해, 항-CD3 항체 및 항-CD28 항체가 사용된다. 항-CD28 항체의 예로는 9.3, B-T3, 및 XR-CD28(디아클론(Diaclone), 프랑스 베샹송(Besancon) 소재)을 들 수 있으며, 이들은 당해 기술분야에 일반적으로 공지된 기타 방법으로서 사용될 수 있다(Berg 등, Transplant Proc. 30(8): 3975-3977, 1998; Haanen 등, J. Exp. Med. 190(9): 1319-1328, 1999; Garland 등, J. Immunol Meth. 227(1-2): 53-63, 1999 등 참조).
특정 실시형태에서, T 세포를 위한 일차 자극 신호 및 공자극성 신호는 상이한 프로토콜에 의해 제공될 수 있다. 예를 들어, 각각의 신호를 제공하는 약제는 용액 상태일 수 있거나, 표면에 결합되어 있을 수 있다. 표면에 결합되어 있는 경우, 상기 약제는 동일한 표면 (즉, "시스" 형태) 또는 개별 표면(즉, "트랜스" 형태)에 결합될 수 있다. 대안적으로는, 하나의 약제가 표면에 결합될 수 있고, 기타 약제는 용액 상태일 수 있다. 하나의 실시형태에서, 공자극성 신호를 제공하는 약제는 세포 표면에 결합되어 있고, 일차 활성화 신호를 제공하는 약제는 용액 상태이거나 표면에 결합되어 있다. 특정 실시형태에서, 상기 약제 둘 모두는 용액 상태일 수 있다. 다른 실시형태에서, 상기 약제는 가용성 형태일 수 있으며, 이어 Fc 수용체를 발현하는 세포 또는 항체, 또는 상기 약제와 결합하는 기타 결합 약제와 같은 표면에 가교될 수 있다. 이와 관련하여, 예를 들어 본 발명에서 T 세포를 활성화시키고 증식하는데 사용하기 위해 고려되는 인공 항원 제시 세포(aAPC)에 대해서는 미국 특허 출원 제 2004-0101519 호 및 제 2006-0034810 호를 참조한다.
하나의 실시형태에서, 상기 2개의 약제는 비드 상에 고정되는데, 동일한 비드, 즉 "시스" 상에 또는 개별 비드, 즉 "트랜스"에 고정된다. 일례로, 일차 활성화 신호를 제공하는 약제는 항-CD3 항체 또는 이의 항원 결합 단편이고, 공자극성 신호를 제공하는 약제는 항-CD28 항체 또는 이의 항원 결합 단편이며, 상기 약제 둘 모두는 등가의 분자량으로 동일한 비드에 동시 고정된다. 하나의 실시형태에서, CD4+ T 세포 확장 및 T 세포 성장을 위한 비드에 결합된 각 항체의 1:1의 비율이 사용된다. 본 발명의 특정한 양태에서, 비드에 결합된 항-CD3:CD28 항체의 비율은 1:1의 비율을 이용하여 관측된 증식에 비해 T 세포 증식에서의 증가가 관측되도록 사용된다. 하나의 특정한 실시형태에서, 1:1의 비율을 이용하여 관측된 확장에 비해 약 1 내지 약 3배의 증가가 관측된다. 하나의 실시형태에서, 비드에 결합된 CD3:CD28 항체의 비율은 100:1 내지 1:100의 범위이고, 모든 정수 값이 상기 범위 사이에 존재한다. 본 발명의 하나의 양태에서, 항-CD3 항체보다 상기 입자에 더 많은 항-CD28 항체가 결합한다. 즉, CD3:CD28의 비율은 1미만이다. 본 발명의 특정 실시형태에서, 비드에 결합된 항-CD3 항체에 대한 항-CD28 항체의 비율은 2:1을 초과한다. 하나의 특정 실시형태에서, 비드에 결합된 항체의 1:100 CD3:CD28의 비율이 사용된다. 다른 실시형태에서, 비드에 결합된 항체의 1:75 CD3:CD28의 비율이 사용된다. 또 다른 실시형태에서, 비드에 결합된 항체의 1:50 CD3:CD28의 비율이 사용된다. 다른 실시형태에서, 비드에 결합된 항체의 1:30 CD3:CD28의 비율이 사용된다. 하나의 바람직한 실시형태에서, 비드에 결합된 항체의 1:10 CD3:CD28의 비율이 사용된다. 다른 실시형태에서, 비드에 결합된 항체의 1:3 CD3:CD28의 비율이 사용된다. 또 다른 실시형태에서, 비드에 결합된 항체의 3:1 CD3:CD28의 비율이 사용된다.
1:500 내지 500:1 범위의 세포에 대한 입자의 비율, 및 이들 사이의 임의의 정수값은 T 세포 또는 기타 표적 세포를 자극하기 위해 사용될 수 있다. 당해 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자가 용이하게 인지하는 바와 같이, 상기 세포에 대한 입자의 비율은 표적 세포에 대한 입자 크기에 의존할 수 있다. 예를 들어, 크기가 작은 비드는 소수의 세포와만 결합하는 반면, 대형 비드는 많은 세포와 결합할 수 있다. 특정 실시형태에서, 상기 입자에 대한 세포의 비율은 1:100 내지 100:1의 범위이고, 이들 사이의 임의의 정수 값을 포함하며, 또 다른 실시형태에서는 상기 비율이 1:9 내지 9:1의 범위를 포함하고, 이들 사이의 임의의 정수 값을 포함하며, 또한 T 세포를 자극하기 위해 사용될 수 있다. T 세포의 자극을 야기하는 T 세포에 대한 항-CD3- 및 항-CD28 결합 입자의 비율은 상술한 바와 같이 변할 수 있지만, 특정 바람직한 값으로는 1:100, 1:50, 1:40, 1:30, 1:20, 1:10, 1:9, 1:8, 1:7, 1:6, 1:5, 1:4, 1:3, 1:2, 1:1, 2:1, 3:1, 4:1, 5:1, 6:1, 7:1, 8:1, 9:1, 10:1, 및 15:1을 들 수 있으며, 이때 하나의 바람직한 비율은 T 세포 당 적어도 1:1의 입자이다. 하나의 실시형태에서, 1:1 이하의 세포 에 대한 입자의 비율이 사용된다. 하나의 특정 실시형태에서, 바람직한 입자:세포 비율은 1:5이다. 또 다른 실시형태에서, 세포에 대한 입자의 비율은 자극 날짜에 따라 다를 수 있다. 예를 들어, 하나의 실시형태에서, 세포에 대한 입자의 비율은 첫째 날에는 1:1 내지 10:1의 범위이고, 부가적인 입자를 그 이후에 최대 10일 동안 매일 또는 하루걸러 1:1에서 1:10까지의 최종 비율(첨가한 날의 세포 개수에 기초함)로 세포에 첨가한다. 하나의 특정 실시형태에서, 세포에 대한 입자의 비율은 자극 첫째 날에 1:1이고, 자극 4일 및 5일째 날에 1:5로 조절한다. 다른 실시형태에서, 입자는 자극 첫째 날에 1:1의 최종 비율, 및 자극 4일 및 5일째 날에 1:5의 최종 비율로 매일 또는 하루걸러 첨가한다. 다른 실시형태에서, 세포에 대한 입자의 비율은 자극 첫째 날에 2:1이고, 자극 4일 및 5일째 날에 1:10로 조절한다. 다른 실시형태에서, 입자는 자극 첫째 날에 1:1의 최종 비율, 및 자극 4일 및 5일째 날에 1:10의 최종 비율로 매일 또는 하루걸러 첨가한다. 당해 기술분야의 숙련자라면, 다양한 기타 비율이 본 발명에서 사용하기에 적합할 수 있다는 것을 인지할 것이다. 특히, 입자 크기, 및 세포 크기 및 유형에 따라 비율이 변한 것이다.
본 발명의 또 다른 실시형태에서, T 세포와 같은 세포는 약제 코팅된 비드와 조합되고, 상기 비드 및 세포는 후속적으로 분리된 후, 상기 세포를 배양한다. 대안적인 실시형태에서, 배양 이전에 약제 코팅된 비드 세포를 분지하지 않고 함께 배양한다. 또 다른 실시형태에서, 상기 비드 및 세포는 먼저 자력과 같은 힘을 가하여 농축하며, 이는 세포 표면 마커의 연결을 증가하여 세포 자극을 유도한다.
일예로, 세포 표면 단백질은 항-CD3 및 항-CD28이 부착된 상자성 비드가 T 세포와 접촉하도록 함으로써 연결될 수 있다. 하나의 실시형태에서, 상기 세포(예를 들어, 104 내지 109개의 T세포) 및 비드(예를 들어, 1:1 비율의 DYNABEADS® M-450 CD3/CD28 T 상자성 비드)가 완충액, 바람직하게는 PBS(칼슘 및 마그네슘과 같은 2가 양이온의 부재)에서 조합된다. 또한, 당해 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자라면, 임의의 세포 농도가 사용될 수 있다는 것을 용이하게 인지할 수 있다. 예를 들어, 상기 표적 세포는 상기 샘플에 매우 희박할 수 있으며, 상기 샘플의 0.01%만을 포함할 수 있거나, 전체 샘플(즉, 100%)은 관심이 있는 표적 세포를 포함할 수 있다. 따라서 임의의 세포 개수는 본 발명의 배경 이내에 있다. 특정 실시형태에서, 세포와 입자의 최대 접촉을 확보하기 위해 세포 및 입자를 함께 혼합한 부피를 유의하게 감소시키는 것(즉 세포의 농도를 증가시키는 것)이 바람직할 수 있다. 예를 들어, 하나의 실시형태에서, 1㎖ 당 약 20억 개의 세포 농도가 사용된다. 다른 실시형태에서, 1㎖ 당 1억 개 초과의 세포 농도가 사용된다. 또 다른 실시형태에서, 1㎖ 당 1천만, 1천5백만, 2천만, 2천5백만, 3천만, 3천5백, 4천만, 4천5백만, 또는 5천만 개의 세포 농도가 사용된다. 또 다른 실시형태에서, 1㎖ 당 7천5백만, 8천만, 8천5백만, 9천만, 9천5백만, 또는 1억만 개의의 세포 농도가 사용된다. 또 다른 실시형태에서, 1㎖ 당 1억2천5백 또는 1억5천만 개의 세포 농도가 사용될 수 있다. 고농도의 사용은 세포 수율의 증가, 세포 활성화, 및 세포 증식을 초래할 수 있다. 또한 높은 세포 농도의 사용은 CD28 음성 T 세포와 같이 관심이 있는 표적 항원을 약하게 발현할 수 있는 세포의 더욱 효율적인 포획을 허용한다. 이 같은 세포의 개체군은 치료적 값을 가질 수 있으며, 특정 실시형태에서 수득하는 것이 바람직할 수 있다. 예를 들어, 고농도의 세포의 사용은 정상적으로는 더욱 약한 CD28 발현을 나타내는 CD8+ T 세포의 더욱 효율적인 선택을 허용한다.
본 발명의 하나의 실시형태에서, 상기 혼합물은 수 시간(약 3시간) 내지 약 14일 또는 이들 사이의 임의의 정수 값의 시간 동안 배양할 수 있다. 다른 실시형태에서, 상기 혼합물은 21일 동안 배양할 수 있다. 본 발명의 하나의 실시형태에서, 상기 비드 및 T 세포는 약 8일 동안 함께 배양한다. 다른 실시형태에서, 상기 비드 및 T 세포는 2 내지 3일 동안 함께 배양한다. 몇몇 자극 주기는 또한 T 세포의 배양 시간이 60일 이상일 수 있도록 요구될 수 있다. T 세포 배양에 적절한 조건으로는 증식 및 생존력에 필요한 인자를 함유할 수 있는 적절한 배지(예를 들어, 최소 필수 배지 또는 RPMI 배지 1640 또는 X-vivo 15(론자(Lonza)))를 들 수 있으며, 이때 상기 적절한 배지는 혈청(예를 들어, 소 또는 인간 태아 혈청), 인터류킨-2(IL-2), 인슐린, IFN-γ, IL-4, IL-7, GM-CSF, IL-10, IL-12, IL-15, TGFβ, 및 당업자에 공지된 세포의 성장을 위한 TNF-α 또는 임의의 기타 첨가제를 포함한다. 세포의 성장을 위한 기타 첨가제로는 계면활성제, 플라즈마네이트(plasmanate), 및 N-아세틸-시스테인 및 2-메르캅토에탄올과 같은 환원제를 들 수 있지만, 이에 제한되지 않는다. 배지는 RPMI 1640, AIM-V, DMEM, MEM, α-MEM, F-12, X-Vivo 15, 및 X-Vivo 20을 포함할 수 있으며, 옵티마이저(optimizer)는 첨가된 아미노산, 피루브산나트륨 및 비타민과 함께 무혈청이거나 적절한 양의 혈청(또는 플라즈마) 또는 제한된 세트의 호르몬, 및/또는 T 세포의 성장 및 증식에 충분한 양의 사이토카인(들)이 보충된 상태이다. 항생제, 예를 들어 페니실린 및 스트렙토마이신은 개체 내로 주입되어야 하는 세포의 배양이 아닌 실험용 배양에서만 포함될 수 있다. 표적 세포는 성장을 지원하는데 필요한 조건, 예를 들어 적절한 온도(예를 들어, 37℃) 및 대기조건(5% CO2를 포함하는 대기)하에 유지된다.
다양한 자극 기간에 노출되었던 T 세포는 상이한 특징을 나타낼 수 있다. 예를 들어, 전형적인 혈액 또는 아페레시스된 말초 혈액 단핵성 세포 생성물은 세포 독성 또는 억제 T 세포 개체군(TC, CD8+)보다 많은 헬퍼 T 세포 개체군(TH, CD4+)을 갖는다. CD3 및 CD28 수용체를 자극함으로써 T 세포의 생체 외 확장은 약 8 내지 9일째 이전에 주로 TH 세포로 이루어진 T 세포의 개체군을 생성하지만, 약 8 내지 9일째 이후에는 상기 T 세포의 개체군은 TC 세포의 점진적으로 초과하는 개체군을 포함한다. 따라서 치료 목적에 따라 주로 TH 세포로 구성된 T 세포 개체군으로 개체를 주입하는 것이 유리할 수 있다. 유사하게도, TC 세포의 항원 특이적 서브셋이 단리되는 경우, 이는 이러한 서브셋을 더욱 크게 증식하는데 이로울 수 있다.
CD4 및 CD8 마커 이외에도 또한 기타 표현형 마커는 유의하게 다르지만, 세포 확장 공정 과정 동안에 주로 복제 가능하게 다르다. 따라서 이 같은 복제 가능성은 특정한 목적을 위해 활성화된 T 세포 생성물를 테일러링(tailoring)하는 능력을 가능케 한다.
치료 적용
본 발명은 렌티바이러스 벡터(LV)로 형질 도입된 세포(예를 들어, T 세포)를 포함한다. 예를 들어, 상기 LV는 특정 항체의 항원 인식 도메인을 CD3-제타, CD28, 4-1BB 또는 임의의 이의 조합의 세포 내 도메인을 조합하는 CAR을 암호화한다. 따라서 몇몇의 경우, 상기 형질 도입된 T 세포는 CAR 매개 T-세포 반응을 유도할 수 있다.
본 발명은 종양 항원에 대한 일차 T 세포의 특이성을 재지향(redirecting)하기 위한 CAR의 용도를 제공한다. 따라서 본 발명은 포유동물에서 표적 세포 개체군 또는 조직에 대한 T 세포 매개 면역 반응을 자극하기 위한 방법을 제공하며, 상기 방법은 CAR을 발현하는 T 세포를 포유동물에 투여하는 단계를 포함하되, 상기 CAR은 소정의 표적과 특이적으로 상호작용하는 결합 일부분, 예를 들어 인간 CD3 제타의 세포 내 도메인을 포함하는 제타 체인 일부, 및 공자극성 신호전달 영역을 포함한다.
하나의 실시형태에서, 본 발명은 세포성 요법의 유형을 포함하며, 이때 T 세포는 CAR을 발현하기 위해 유전적으로 변형되어 있으며, 상기 CAR T 세포는 이의 치료가 필요한 환자에게 주입된다. 주입된 세포는 환자에서 종양 세포를 살해할 수 있다. 항체 요법과는 달리, CAR T 세포는 생체 내에서 복제하여, 지속된 종양 제어를 야기할 수 있는 장기간 존속을 초래할 수 있다.
하나의 실시형태에서, 본 발명의 CAR T 세포는 강력한 생체 내 T 세포 증식을 경험할 수 있으며, 증가된 양의 시간 동안 존속할 수 있다. 다른 실시형태에서, 본 발명의 CAR T 세포는 임의의 부가적인 종양 형성 또는 성장을 억제하도록 반응성화될 수 있는 특정 메모리 T 세포로 발달한다. 예를 들어, 본 발명의 CART19 세포는 강력한 생체 내 T 세포 확장을 경험할 수 있고, 혈액 및 골수에서 증가된 양의 시간 동안 높은 수준으로 존속할 수 있으며, 특정 메모리 T 세포를 형성할 수 있다는 것은 예상치 못한 것이었다. 임의의 특정한 이론에 결부되지 않기를 바라면서, CAR T 세포는 대체 항원을 발현하는 표적 세포와 충돌 및 이의 후속적인 제거 시에 생체 내에서 중추 메모리 유사 상태로 분화할 수 있다.
임의의 특정한 이론에 결부되지 않기를 바라면서, 상기 CAR 변형 T 세포에 의해 유도된 항-종양 면역성 반응은 능동 또는 수동 면역 반응일 수 있다. 또한, 상기 CAR 매개 면역 반응은 CAR 변형 T 세포가 CAR 내의 항원 결합 일부분에 대해 특이적인 면역 반응을 유도하는 입양 면역 요법 접근법의 일부일 수 있다. 예를 들어, CART19 세포는 CD19를 발현하는 세포에 대해 특이적인 면역 반응을 유도한다.
본원에 개시된 데이터는 FMC63 쥐 단일 클론성 항체에서 유래한 항-CD19 scFv, 인간 CD8α 힌지 및 막통과 도메인, 및 인간 4-1BB 및 CD3제타 신호전달 도메인을 포함하는 렌티바이러스 벡터를 구체적으로 개시하고 있을지라도, 본 발명은 본원의 다른 곳에서 개시된 바와 같은 구조체의 성분 각각에 대한 다수의 임의의 변이치를 포함하는 것으로 이해되어야 한다. 즉, 본 발명은 상기 항원 결합 일부분에 대해 특이적인 CAR 매개 T-세포 반응을 발생하기 위해 CAR 내의 임의의 항원 결합 일부분의 용도를 포함한다. 예를 들어, 본 발명의 CAR 내의 항원 결합 일부분은 암을 치료할 목적으로 종양 항원을 표적화할 수 있다.
치료될 수 있는 암은 혈관 생성된 종양뿐만 아니라 혈관이 생성되지 않거나 아직까지 실절적으로 혈관이 생성되지 않는 종양을 포함한다. 상기 암은 비-고형 종양(예를 들어, 혈액학적 종양, 예를 들어 백혈병 및 림프종)을 포함할 수 있거나, 고형 종양을 포함할 수 있다. 본 발명의 CAR로 치료될 암의 유형으로는 암종, 아세포종, 및 육종, 및 특정 백혈병 또는 림프성 악성 종양, 양성 및 악성 종양, 및 악성 종양, 예를 들어, 육종, 암종 및 흑색종을 들 수 있지만, 이에 제한되지 않는다. 성인성 종양/암 및 소아성 종양/암이 또한 포함된다.
혈액 암은 혈액 또는 골수의 암이다. 혈액(또는 조혈성) 암의 예로는 급성 백혈병(예를 들어, 급성 림프구성 백혈병, 급성 림프구성 백혈병, 급성 골수성 백혈병 및 골수모세포성, 전림프구성, 골수 단구성, 단구성 및 적백혈병), 만성 백혈병(예를 들어, 만성 림프구성(과립구성) 백혈병, 만성 골수성 백혈병, 및 만성 림프구성 백혈병), 진성 적혈구 증가증, 림프종, 호지킨병, 비-호지킨 림프종(지연형 및 높은 단계의 형태), 다발성 골수종, 왈덴스트룀 마크로글로불린 혈증(Waldenstrom's macroglobulinemia), 중쇄 질병, 골수이형성 증후군, 모발 세포 백혈병 및 골수이형성증을 포함한 백혈병을 들 수 있다.
고형 종양은 일반적으로 피낭 또는 액체 구역을 포함하지 않는 비정상적인 조직 덩어리이다. 고형 종양은 양성 또는 악성일 수 있다. 상이한 유형의 고형 종양은 이들(예를 들어, 육종, 암종 및 림프종)을 형성하는 세포의 유형에 대해 명명되어 있다. 육종 및 암종과 같은 고형 종양의 예로는 섬유육종, 점액육종, 지방육종, 연골육종, 골육종, 및 기타 육종, 윤활막종(synovioma), 중피종(mesothelioma), 유위(Ewing) 종양, 평활근육종, 횡문근육종, 직장 암종, 림프성 악성 종양, 췌장암, 유방암, 폐암, 난소암, 전립선암, 간세포성 암종, 편평 세포 암종, 기저 세포 암종, 선암, 땀샘 암종, 수질 갑상선 암종, 유두성 갑상선 암종, 갈색 세포종, 피지선 암종, 유두성 암종, 유두성 선암, 수질성 암종, 기관지 암종, 신장 세포 암종, 간종양, 담관 암종, 융모막암종, 윌름즈 종양(Wilms' tumor), 자궁 경부암, 고환 종양, 정상피종(seminoma), 방광이 암종, 흑색종, 및 CNS 종양(예를 들어, 신경교종(예를 들어,뇌간 신경교종 및 혼합형 신경교종), 교아세포종(다형성 교아세포종으로도 공지됨), 성상세포종, CNS 림프종, 배아세포종, 수질아세포종, 신경초종 두개인두종(Schwannoma craniopharyogioma), 상의세포종(ependymoma), 송과체종(pinealoma), 혈관모세포종, 청신경종(acoustic neuroma), 희소돌기 아교세포종(oligodendroglioma), 수막종, 신경아세포종, 망막아세포종 및 뇌전이)을 들 수 있다.
하나의 실시형태에서, 본 발명의 CAR의 항원 결합 일부분의 일부는 특정한 암을 치료하기 위해 설계된다. 예를 들어, CD19를 표적화하기 위해 설계된 CAR은 전-B ALL(소아성 적응증), 성인성 ALL, 외투 세포 림프종, 미만성 거대 B-세포 림프종, 동종이계 골수 이식 후 구원(salvage) 등을 들 수 있지만 이에 제한되지 않는 암 및 질환을 치료하기 위해 사용될 수 있다.
다른 실시형태에서, 상기 CAR은 미만성 거대 B-세포 림프종을 치료하기 위해 CD22를 표적화하도록 설계될 수 있다.
하나의 실시형태에서, 전-B ALL(소아성 적응증), 성인성 ALL, 외투 세포 림프종, 미만성 거대 B-세포 림프종, 동종이계 골수 이식 후 구원 등을 포함하지만 이에 제한되지 않는 암 및 질환은 CD19, CD20, CD22 및 ROR1을 표적화하는 CAR의 조합을 이용하여 치료될 수 있다.
하나의 실시형태에서, 상기 CAR은 중피종, 췌장암, 난소암 등을 치료하기 위해 메소텔린을 표적화하도록 설계될 수 있다.
하나의 실시형태에서, 상기 CAR은 급성 골수성 백혈병 등을 치료하기 위해 CD33/IL3Ra를 표적화하도록 설계될 수 있다.
하나의 실시형태에서, 상기 CAR은 삼중 음성 유방암, 비-소세포 폐암 등을 치료하기 위해 c-Met를 표적화하도록 설계될 수 있다.
하나의 실시형태에서, 상기 CAR는 전립선암 등을 치료하기 위해 PSMA를 표적화하도록 설계될 수 있다.
하나의 실시형태에서, 상기 CAR는 전립선암 등을 치료하기 위해 당지질 F77을 표적화하도록 설계될 수 있다.
하나의 실시형태에서, 상기 CAR는 교아세포종 등을 치료하기 위해 EGFRvⅢ를 표적화하도록 설계될 수 있다.
하나의 실시형태에서, 상기 CAR는 신경아세포종, 흑색종 등을 치료하기 위해 GD-2를 표적화하도록 설계될 수 있다.
하나의 실시형태에서, 상기 CAR는 골수종, 육종, 흑색종 등을 치료하기 위해 NY-ESO-1 TCR을 표적화하도록 설계될 수 있다.
하나의 실시형태에서, 상기 CAR는 골수종, 육종, 흑색종 등 을 치료하기 위해 MAGE A3 TCR을 표적화하도록 설계될 수 있다.
그러나 본 발명은 본원에 개시된 항원 표적 및 질병에만 제한되는 것으로 이해되어서는 안 된다. 오히려, 본 발명은 질병을 치료하기 위해 CAR이 사용될 수 있는 질병과 연관이 있는 임의의 항원성 표적을 포함하는 것으로 이해되어야 한다.
본 발명의 CAR 변형 T 세포는 또한 포유동물에서 생체 외 면역화 및/또는 생체 내 요법을 위한 백신의 유형으로서 작용할 수 있다. 바람직하게는, 포유동물은 인간이다.
생체 외 면역화에 대하여, 하기들 중 적어도 하나가 세포를 포유동물에 투여하기 이전에 시험관 내에서 발생한다: i) 세포의 증식, ii) 세포 내로의 CAR을 암호화하는 핵산의 도입, 및/또는 iii) 세포의 냉동 보존.
생체 외 과정은 당해 기술분야에 널리 공지되어 있으며, 하기에 더욱 상세하게 토의되어 있다. 간단하게, 세포는 포유동물(바람직하게는 인간)로부터 단리되어, 본원에 개시된 CAR을 발현하는 벡터로 유전적으로 변형된다(즉, 시험관 내에서 형질 도입되거나 형질 감염됨). CAR 변형 세포는 치료적 효과을 제공하기 위해 포유동물 수취인에 투여될 수 있다. 포유동물 수취인은 인간일 수 있으며, CAR 변형 세포는 상기 수취인에 대해 자가성일 수 있다. 대안적으로는, 상기 세포는 동종성, 동계성(syngeneic) 또는 이종성일 수 있다.
조혈 모세포 및 전구 세포의 생체 외 확장 과정은 본원에서 참고로 인용된 미국 특허 제 5,199,942 호에 개시되어 있으며, 본 발명의 세포에 적용될 수 있다. 기타 적합한 방법이 당해 기술분야에 공지되어 있으며, 따라서 본 발명은 세포의 생체 외 확장을 위한 임의의 특정한 방법에 제한되지 않는다. 간단하게도, T 세포의 생체 외 배양 및 확장은 (1) 말초 혈액 수확물 또는 골수 외식편으로부터 CD34+ 조혈 모세포 및 전구 세포를 수집하는 단계; 및 (2) 이 같은 세포를 생체 외에서 확장하는 단계를 포함한다. 미국 특허 제 5,199,942 호에 개시된 세포성 성장 인자 이외에도, flt3-L, IL-1, IL-3 및 c-kit 리간드와 같은 기타 인자가 세포의 배양 및 확장을 위해 사용될 수 있다.
생체 외 면역화의 측면에서 세포 기반 백신을 사용한다는 것 이외에도, 본 발명은 또한 환자에서 항원에 대항하는 면역 반응을 유도하기 위해 생체 내 면역화를 위한 조성물 및 방법을 제공한다.
일반적으로, 본원에서 개시된 바와 같이 활성화되고 확장된 세포는 면역 저하된 개인에서 발생하는 질병의 치료 및 예방에 이용될 수 있다. 특히, 본 발명의 CAR 변형 T 세포는 CLL의 치료에 사용된다. 특정 실시형태에서, 본 발명의 세포는 CLL에 걸릴 위험이 있는 환자의 치료에 사용된다. 따라서 본 발명은 CLL의 치료 또는 예방을 위한 방법을 제공하며, 이때 상기 방법은 이의 치료가 필요한 개체에 본 발명의 CAR 변형 T 세포를 치료적 유효량으로 투여하는 단계를 포함한다.
본 발명의 CAR 변형 T 세포는 단독으로 투여되거나, 희석제 및/또는 IL-2 또는 기타 사이토카인과 같은 기타 성분, 또는 세포 개체군과 함께 약학 조성물로서 투여될 수 있다. 간단하게는, 본 발명의 약학 조성물은 하나 이상의 약학적으로 또는 생리학적으로 허용 가능한 담체, 희석제 또는 부형제와 함께 본원에서 개시된 바와 같은 표적 세포 개체군을 포함할 수 있다. 이 같은 조성물은 중성 완충 식염수, 인산 완충 식염수 등과 같은 완충액; 글루코오스, 만노오스, 수크로오스 또는 덱스트란 등과 같은 탄수화물; 만니톨; 단백질; 폴리펩티드 또는 글리신과 같은 아미노산; 항산화제; EDTA 또는 글루타티온과 같은 킬레이트제; 보조제(예를 들어, 수산화알루미늄); 및 보존제를 포함할 수 있다. 본 발명의 조성물은 정맥 내 투여를 위해 제형화하는 것이 바람직하다.
본 발명의 약학 조성물은 치료(예방)될 질병에 적절한 방식으로 투여될 수 있다. 적절한 투여량이 임상 시험에 의해 결정될지라도 투여량 및 투여 빈도는 환자의 조건, 환자 질병의 유형 및 중증도와 같은 인자에 의해 결정될 것이다.
" 면역학적 유효량", " 항-종양 유효량", "종양 억제 유효량" 또는 "치료량"이 나타나 있는 경우, 투여될 본 발명의 조성물의 정확한 양은 나이, 체중, 종양의 크기, 감염 또는 전이 정도, 환자(개체)의 조건에서의 개인차를 고려하여 전문의에 의해 결정될 수 있다. 일반적으로는 본원에서 개시된 T 세포를 포함하는 약학 조성물은 체중(㎏) 당 104 내지 109개의 세포 투여량, 적합하게는 체중당 105 내지 106 세포투여량(이들 범위 내에 있는 모든 정수 값을 포함함)으로 투여될 수 있는 것으로 언급될 수 있다. T 세포 조성물은 또한 이들 투여량에서 수회 투여될 수 있다. 상기 세포는 면역 요법에서 일반적으로 공지되어 있는 주입 기법을 이용하여 투여될 수 있다(예를 들어, Rosenberg 등, New Eng. J. of Med. 319: 1676, 1988). 특정한 환자를 위한 최적의 투여량 및 치료 양생법은 질병의 징후에 대해 환자를 모니터링하고 그 결과로서 치료를 조절함으로써 의약 분야의 숙련자에 의해 용이하게 결정될 수 있다.
특정 실시형태에서, 이는 활성화된 T 세포를 개체에 투여한 후 후속적으로 다시 수혈하고(또는 아페레시스를 수행하고), 본 발명에 따라 이로부터 T 세포를 활성화하고, 이들 활성화되고 증식된 T 세포로 환자에 재주입하기 위해 요구될 수 있다. 이러한 공정은 수 주일마다 수회 수행될 수 있다. 특정 실시형태에서, T 세포는 10cc 내지 400cc의 수혈액으로부터 활성화될 수 있다. 특정 실시형태에서, T 세포는 20cc, 30cc, 40cc, 50cc, 60cc, 70cc, 80cc, 90cc 또는 100cc의 수혈액으로부터 활성화된다. 이론과 결부되지 않은 채, 다중 수혈/다중 재주입 프로토콜은 T 세포의 특정 개체군을 선별하도록 작용할 수 있다.
개별 조성물의 투여는 에어로졸 흡입, 주사, 섭취, 수혈, 주입 또는 이식을 포함한 임의의 편리한 방식으로 수행될 수 있다. 본원에서 개시된 조성물은 환자에 피하, 피내, 종양 내, 결절 내, 수질 내, 근육 내 투여될 수 있거나, 정맥 내(i.v.) 주사에 의해 투여되거나, 또는 복막 내 투여될 수 있다. 하나의 실시형태에서, 본 발명의 T 세포 조성물은 피내 또는 피하 주사에 의해 환자에 투여된다. 다른 실시형태에서, 본 발명의 T 세포 조성물은 바람직하게는 정맥 내 주사에 의해 투여된다. 상기 T 세포의 조성물은 종양, 림프절 또는 감염 부위 내로 직접 주사될 수 있다.
본 발명의 특정 실시형태에서, 본원에 개시된 방법, 또는 T 세포가 치료적 수준까지 증식된 당해 기술분야에 공지된 기타 방법을 이용하여 활성화되고 증식된 세포는 다수의 임의의 관련된 처리 양식(예를 들어, 이전, 동시 또는 이후)과 함께 환자에 투여되며, 이때 상기 관련된 처리 양식으로는 항바이러스성 요법, 시도포비르(cidofovir) 및 인터류킨-2, 시타라빈(Cytarabine, ARA-C로도 공지됨) 등과 같은 약제의 처리, 또는 MS 환자를 위한 나탈리주맙 처리 또는 건선 환자를 위한 에팔리주맙 처리, 또는 PML 환자를 위한 기타 처리를 들 수 있지만, 이에 제한되지 않는다. 또 다른 실시형태에서, 본 발명의 T 세포는 화학요법, 방사선, 사이클로스포린, 아자티오프린, 메토트렉세이트, 마이코페놀레이트, 및 FK506과 같은 면역 억제제, 항체, 또는 CAM PATH와 같은 기타 면역 절제제, 항-CD3 항체 또는 기타 항체 요법, 사이톡신, 플루다리빈(fludaribine), 사이클로스포린, FK506, 라파마이신, 마이코페놀산, 스테로이드류, FR901228, 사이토카인류 및 방사선요법과 함께 사용될 수 있다. 이들 약물은 칼슘 의존성 포스파타아제 칼시뉴린(사이클로스포린 및 FK506)을 억제하거나, 성장 인자 유도 신호전달(라파마이신)에 중요한 p70S6 키나아제를 억제한다(Liu 등, Cell 66: 807-815, 1991; Henderson 등, Immun. 73: 316-321, 1991; Bierer 등, Curr. Opin. Immun. 5: 763-773, 1993). 또 다른 실시형태에서, 본 발명의 세포 조성물은 골수 이식, 및 플루다라빈, 외부 방사선 요법(XRT) 또는 싸이클로포스파마이드와 같은 화학요법제 및 OKT3 또는 CAMPATH와 같은 항체 중 하나를 이용하는 T 세포 절제 요법(예를 들어, 이전, 동시 또는 이후)과 함께 환자에 투여된다. 다른 실시형태에서, 본 발명의 세포 조성물은 CD20과 반응하는 약제, 예를 들어 리툭산과 같은 B-세포 절제 요법 이후에 투여된다. 예를 들어, 하나의 실시형태에서, 개체는 높은 투여량의 화학요법 이후에 말초 혈액 줄기세포 이식에 의한 표준 치료를 경험할 수 있다. 특정 실시형태에서, 이식 이후에 개체는 본 발명의 확장된 면역 세포의 주입액을 투여 받는다. 부가적인 실시형태에서, 확장된 세포는 수술 이전 또는 이후에 투여된다.
환자에 투여될 상기 치료 투여량은 치료되는 조건의 정확한 특성, 및 치료받을 수취인에 따라 다를 것이다. 인간 투여를 위한 투여량의 스케일링(scaling)은 당해 기술분야에서 허용된 관행에 따라 수행될 수 있다. 예를 들어 CAMPATH에 대한 복용량은 일반적으로 성인 환자에 있어서 1 내지 약 100㎎의 범위일 것이고, 일반적으로는 1일과 30일 사이의 기간 동안에 매일 투여될 것이다. 바람직한 1일 복용량은 몇몇의 경우 1일 최대 40㎎ 이상의 복용량이 사용될 수 있을 지라도(미국 특허 제 6,120,766 호에 개시됨) 1일 1 내지 10㎎이다.
실험예
본 발명은 하기 실험예를 참고하여 상세하게 추가로 개시되어 있다. 이들 실시예는 단지 예시를 목적으로 제공되며, 달리 규명하지 않는 한 제한적인 것으로 의도되지 않는다. 따라서 본 발명은 결코 하기 실시예에 제한되는 것으로 이해되어서는 안 되지만, 오히려 본원에 개시된 교시의 결과로서 자명하게 되는 임의의 모든 변형예를 포함하는 것으로 이해되어야 한다.
추가적인 상세한 설명 없이, 상술한 상세한 설명 및 하기 예시적인 실시예를 이용하여 당해 기술분야의 통상의 지식을 가진 자는 본 발명의 화합물을 제조하고 이용하며, 청구된 방법을 실행할 수 있는 것으로 여겨진다. 따라서 하기 실시예는 특이적으로는 본 발명의 바람직한 실시형태를 나타내며, 개시 내용의 나머지 부분을 임의의 방식으로 제한하는 것으로 이해되어서는 안 된다.
실시예 1: 키메릭 수용체를 발현하는 T 세포는 진전된 백혈병을 앓는 환자에서 메모리 및 강력한 항-종양 효과를 확립한다
키메릭 항원 수용체(CAR)를 발현하도록 조작된 림프구는 이전의 임상 시험에서 최소 생체 내 확장 및 항-종양 효과가 있는 것으로 증명되었다. 본원에서 제시된 결과에 따르면, CD137을 함유한 CAR T 세포는 진전된 만성 림프구성 백혈병(CLL)이 치료된 3명의 환자 중 3명에서 주입 이후에 강력한 비-교차 저항성 임상적 활성을 갖는 것으로 증명된다. 상기 조작된 T 세포는 생체 내에서 1천배 이상 확장되고, 골수로 트래피킹(trafficking)하며, 계속해서 적어도 6개월 동안 기능적 CAR을 높은 수준으로 발현한다. 대략, 각각의 주입된 CAR+ T 세포는 적어도 1,000개의 CLL 세포를 소거하였다. CD19 특정 면역 반응은 혈액 및 골수에서 증명되었으며, 3명의 환자 중 2명에서 완전한 경감이 동반되었다. 상기 세포의 일부는 메모리 CAR+ T 세포로서 존속하였으며, 이는 B 세포 악성 종양의 효과적인 치료를 위해 이러한 비-MHC 제한적 접근법의 가능성을 나타낸다.
하기에 이들 실험에서 이용된 재료 및 방법이 개시된다.
재료 및 방법
일반적인 실험용 성명서
연구 샘플 가공, 동결, 및 실험용 분석은 샘플 수령, 가공, 동결, 및 분석을 위한 확립된 SOP 및/또는 프로토콜과 함께 우수 실험실 운영 기준(principles of Good Laboratory Practice) 하에 운영되는 펜실베이니아 대학교의 번역 및 상관관계 연구 실험(Translational and Correlative Studies Laboratory )에서 수행되었다. 검정 성능 및 데이터 보고는 MIATA 지침과 일치한다(Janetzki 등, 2009, Immunity 31: 527-528).
프로토콜 설계
임상 시험(NCT01029366)은 도 1에 도시된 바와 같이 수행되었다. 적어도 이전 2회의 치료 섭생법 이후에 지속되는 질병과 함께 CD19 양성 혈액학적 악성 종양을 앓고 있고, 동종성 줄기세포 이식에 적합하지 않은 환자는 상기 임상 시험에 적합하였다. 종양 재등급화(tumor restaging) 이후, CART19 제조를 위한 말초 혈액 T 세포는 아페레시스에 의해 수집되었고, 주입 이전의 1주 도중에 도 10에 나타나 있는 바와 같은 단일 화학요법 과정이 개체에 적용된다. CART19 세포는 도 10에 나타나 있는 복용량으로 3일 분할 투여량 섭생법(10%, 30% 및 60%)을 이용하여 정맥 내 주입에 의해 투여되었으며, 이용 가능한 경우에 두 번째 복용량은 10일째 투여되었고, 환자 UPN 02만이 두 번째 주입을 위한 충분한 세포를 가졌다. 개체는 적어도 6개월 동안 빈번한 간격으로 독성 및 반응에 대해 평가되었다. 상기 프로토콜은 미국 식약청(US Food and Drug Administration), 재조합 DNA 자문위원회(Recombinant DNA Advisory Committee) 및 펜실베니아 대학교의 임상시험심사위원회(Institutional Review Board)에 의해 승인되었다. 주입 첫째 날을 연구 0일째 날로 설정되었다.
개체: 임상 요약
진료 요약은 도 10에 대략적으로 도시되어 있으며, 상세한 이력은 본원의 다른 곳에서 제공된다. 환자 UPN 01은 먼저 55세의 나이로 단계 II의 B 세포 CLL을 앓는 것으로 진단되었다. 상기 환자는 자각 증상은 없었으며, 진행성 림프구 증가증, 혈소판 감소증, 선병증(adenopathy) 및 비장 비대증에 대한 요법이 요구될 때까지 약 1 내지 1/2년 동안 관찰되었다. 시간이 경과함에 따라 상기 환자는 이전 차수의 요법을 받았다. 대부분의 최근 요법은 최소 반응으로 CART19 세포 주입 2개월 전에 2회의 펜토스타틴(pentostatin), 싸이클로포스파마이드 및 리툭시맵을 받는 것이었다. 이어 상기 환자는 CART-19 세포의 주입 이전에 림프구 제거 화학요법으로서 1회의 벤다무스틴을 투여 받았다.
환자 UPN 02는 피로 및 백혈구 증가증을 앓는 것으로 나타날 때에 상기 환자는 먼저 68세의 나이로 CLL을 앓고 있는 것으로 진단을 받았다. 상기 환자는 요법이 필요한 진행성 백혈구 증가증 (195,000/㎕), 빈혈증 및 혈소판 감소증이 발현하였을 때 4년 동안 비교적 안정하였다. 핵형 분석에 따르면, CLL 세포는 염색체 17p의 결실을 갖는 것으로 나타났다. 진행성 질병으로 인해, 환자는 부분적인 반응 상태로 알렘투주맙(alemtuzumab)으로 치료하였지만, 1년 반 이내에 상기 환자는 진행성 질병을 가졌다. 상기 환자는 부분적인 반응으로 18주 동안 알렘투주맙으로 치료를 받았고, 1년간 진행이 없는 기간을 가졌다. 이어 상기 환자는 유의한 반응이 없는 상태로 리툭시맵과 함께 2회의 벤다무스틴을 투여 받았다(도 5A). 상기 환자는 CART-19 세포의 주입 이전에 림프구 제거 화학요법으로서 단일 약제인 벤다무스틴을 투여 받았다.
환자 UPN 03은 자각 증상이 없는 단계 I의 CLL을 앓는 50세의 나이인 것으로 나타났고, 수 년 동안 관찰이 이어졌다. 상기 환자는 요법이 요구되는 진행성 백혈구 증가증(백혈구 개수: 92,000/㎕) 및 진행성 선병증을 가졌다. 상기 환자는 플루다라빈과 함께 2회의 리툭시맵을 투여 받았으며, 그 결과 혈액 개수의 정상화 및 선병증의 완치는 아니지만 유의한 개선을 초래하였다. 상기 환자는 약 3년간 진행이 없는 기간을 가졌다. 핵형 실험에 따르면, 세포가 FISH에 의해 염색체 17p의 결실을 포함하는 것으로 나타났으며, 그 결과 200개의 세포 중 170개에서 TP53 결실이 증명되었다. 차기 수년에 걸쳐, 상기 환자는 진행성 백혈구 증가증 및 선병증에 대해 3회의 상이한 차수의 요법을 받았으며(도 10), 마지막으로 CART19 세포의 주입 6개월 전에 부분적인 반응 상태에서 알렘투주맙을 투여 받았다. 상기 환자는 ART-19 세포의 주입 이전에 림프구 제거 화학요법으로서 펜토스타틴 및 싸이클로포스파마이드를 투여 받았다.
벡터 생성
CD19-BB-z 이식 유전자(GeMCRIS 0607-793)를 Milone 등, 2009, Mol Ther. 17: 1453-1464에 개시된 바와 같이 설계하고 구성하였다. 렌티바이러스 벡터는 Zufferey 등, 1997, Nature biotechnol 15: 871-875에 개시된 바와 같이 렌티겐 코포레이션(Lentigen Corporation)사에서 3-플라스미드 생성 접근법을 이용하여 현재 우수한 제조 기준(good manufacturing practice)에 따라 생산하였다.
CART19 세포 생성물의 제조
항-CD3 및 항-CD28 단일 클론성 항체로 코팅된 상자성 폴리스티렌 비드를 이용하는 T 세포의 제조 방법은 개시되어 있다(Laport 등, 2003, Blood 102: 2004-2013). 렌티바이러스성 형질 도입은 개시된 바와 같이 수행되었다(Levine 등, 2006, Proc Natl Acad Sci USA 103: 17372-17377).
종양 부하의 산정 방법
기준선에서의 CLL 부하는 도 10에 도시된 바와 같이 평가되었다. CLL 세포의 양은 하기에 개시된 바와 같이 골수, 혈액 및 이차 림프성 조직에서 산정되었다.
골수: 건강한 성인에서, 골수는 총 체중의 약 5%를 나타낸다(Woodard 등, 1960, Phys Med Biol, 5: 57-59; Bigler 등, 1976, Health Phys 31: 213-218). 장골능(iliac crest) 샘플 내의 골수는 나이가 들면서 불활성(지방) 골수의 비율(%)이 증가하는데, 5세의 나이에는 총 골수의 20%에서 35세의 나이 정도에는 약 50%까지 증가하며, 이때 이는 65세의 나이가 될 때까지는 안정하게 유지된 후에 75세의 나이 정도에는 불활성 골수가 약 67%까지 증가한다(Hartsock 등, 1965, Am J Clin Path 43: 326-331). 35세의 남성의 경우 활성(적색) 및 불활성(지방) 골수의 총 골격 중량에 대한 국제 표준치는 각각 1,170g 및 2,480g로 현재 설정되어 있다(방사선 호보에 사용하기 위한 기본적인 해부 및 생리학적 데이터: The Skeleton in Annals of the ICRP, Vol. 25 (ed. Smith, H.) 58-68(1995년 옥스퍼드의 국제 방사선 보호 위원회(International Commission on Radiological Protection)의 제2 위원회 태스크 그룹의 보고서)). 35세 와 65세 사이의 성인 남성은 활성(적색) 골수로서 1.6% 및 불활성(지방) 골수로서 3.4%로 구성된 체중의 총 5.0%를 나타내는 골수를 갖는다(방사선 호보에 사용하기 위한 기본적인 해부 및 생리학적 데이터: The Skeleton in Annals of the ICRP, Vol. 25 (ed. Smith, H.) 58-68(1995년 옥스퍼드의 국제 방사선 보호 위원회의 제2 위원회 태스크 그룹의 보고서)). 골수 생검 및 흡인물 검체에 기초하여, 기준선에서 3명의 환자에 대한 CLL 세포의 중량은 표 1에 나타나 있는 바와 같이 산정하였다. 이어 총 CLL 골수량의 이들 측정치는 1㎏ = 1012개의 세포를 이용하여 골수에서 총 CLL 세포수로 전환되었으며, 얻어진 수치는 도 10에 도시되어 있다. 이들 산정은 CLL이 골수에서 균일한 분포를 갖는다는 가정에 기반을 두고 있다. 환자 UPN 01에 있어서, 벤다무스틴 화학요법 이전에 수득되었던 골수 생검에 대해 산정이 나타나 있고, 벤다무스틴 및 전-CART19 주입 이후에 수득된 흡인물에 대해 산정이 나타나 있다. 첫째 날의 흡입물에 대한 기술적 제한으로 인해 첫째 날의 흡입물에 대해서는 14일째 날의 생검 검체에 비해 수치가 덜 정확하다. 환자 UPN 02는 CLL에 의한 골수의 완전한 교체를 나타내는 단일 전처리 생검 검체를 갖는다. 이러한 환자는 CART19 후 30일째 날에 검체는 변화가 없다. 환자 UPN 03에 대한 골수 부하는 화학요법 후 생검 및 CART19 주입 전 생검에 기초하여 산정되었다.
골수량
활성 골수 중량(㎏) 불활성 골수 중량(㎏) 골수 총량(㎏)
정상 남성(ICRP 참고용 표준) 1.17 2.48 3.65
14일째 UPN 01(95% 세포) 3.47 0.18 3.65
47일째 UPN 02(95% 세포) 3.47 0.18 3.65
1일째 UPN 03(60% 세포) 2.19 1.46 3.65
CLL의 중량(㎏)
14일째 UPN 01(70% CLL) 2.43
1일째 UPN 01(응고에 의한 50% CLL) 1.73
47일째 UPN 02(95% 초과의 CLL) 3.29
1일째 UPN 03(40% CLL) 0.88
혈액: 환자 UPN 02만이 CART19 주입 전에 혈액에서 실질적인 CLL 종양 부하를 갖는다. 유동 세포 분석법에 따르면, 상기 세포는 희미한 표면 카파-제한된 CD5+ CD10-CD19+ CD20(dim)+ CD23(가변성)+ IgM-B 세포 개체군과 함께 클론성 개체군으로서 전형적인 표현형을 갖는 것으로 나타난다. CLL 세포의 약 35%가 CD38을 동시 발현하였다. 상기 CLL 부하는 3회 벤다무스틴 화학요법에 의해 제거되지 않았으며, CART19 주입 시에 존재하였다. CART19 주입 시, 혈액 중의 CLL 개수는 1㎕ 당 55,000개의 세포였다. 혈액 부피가 5.0L라고 가정하면, 환자 UPN 02는 0일째 날에 혈액 중의 CLL세포는 2.75×1011개였다. 환자 UPN 01 및 03에서 전체 정상 WBC가 주어지면, 이들 환자에서 순환성 질병 부하는 산정되지 않았으며, 이는 총 체내 부하의 약간의 과소평가를 초래할 수 있다.이차 림프성 조직: 림프샘 장애 및 비장 비대증의 부피는 FDA 승인 소프트웨어를 이용하여 축성 CT 스캔 상에서 정량화되었다. 상기 부피는 오직 흉부, 복부 및 골반에 대한 것이었다. T1 척추뼈 몸체에서 총 대퇴 동맥의 분기 수준까지의 양을 모든 환자에서 측정하였으며, 일부에서는 서혜부 구역 내의 결절이 또한 포함되었다. 머리/목 및 사지 내의 결절은 분석에서 제외되었고, 기준선 CLL 표적 세포수에서 제외되었으며, 이는 또한 총 체내 부하에서 약간의 과소평가를 초래할 수 있었다. 환자 UPN 01 및 03은 6개월을 넘어서 완전한 경감이 지속되었으며, 따라서 수식(기준선 부피 - 3개월째의 부피)을 이용하여 기준선으로부터의 종양 부하의 감소를 결정하였지만, 환자 UPN 02는 선병증에서 질병이 안정하였으며, 따라서 기준선 종양의 양은 연령대 대비 건강한 남성에서 참고용 비장 부피를 뺌으로서 평가된다(Harris 등, 2010, Eur J Radiol 75: e97-e101). 기준선 종양의 양은 밀도 접근법(1㎏/L 밀도, 및 1㎏ = 1,012개의 세포) 또는 부피 접근법(형태가 구형이라고 가정하면 CLL 세포의 직경은 10μM 또는 600fL임)을 이용하여 CLL 세포로 변환하였으며, 2개의 값 모두는 도 10에 제시되어 있다. 3명의 환자에서 이차 림프성 조직 내의 종양 부피는 이용 가능한 CT 스캔으로부터 산정된 바와 같이 하기 표 2에 나타나 있다.
종양 부피
환자 연구 일자 LN 부피(㎣) 비장 부피(㎣) 총 부피(㎣)
UPN 01 -37 239655 1619180 1858835
1개월 105005 1258575 1363580
3개월 65060 1176625 1241685
UPN 02 -24 115990 1166800 1282790
1개월 111755 940960 1052715
UPN 03 -10 239160 435825 674985
1개월 111525 371200 482725
3개월 47245 299860 347105
환자 UPN 01에 대한 기준선 CT 스캔은 2회의 펜토스타틴/싸이클로포스파마이드/리툭시맵 주입 8일 후에 수행되었으며, 이전 CT 스캔에 비해 이러한 화학요법 섭생법에 대한 반응을 나타내지 않았다. 환자는 CART19 이전에 1회의 벤다무스틴을 투여 받았으며, 따라서 UPN 01에 있어서 -37일째 날로부터 +31일째 날까지의 종양 부피의 변화는 CART19뿐만 아니라 벤다무스틴의 가능한 기여도를 배제할 수 없었다. 유사하게도, UPN 03에 있어서 종양 부피의 변화는 1회의 펜타스타틴(pentastatin)/싸이클로포스파마이드와 CART19의 조합된 효과를 반영한다.환자에서 효과적인 생체 내 E:T 비율을 평가하기 위한 방법살해된 종양 세포의 수에 대한 주입된 CAR T 세포의 E:T 비율은 CAR T 세포의 주사 시에 존재하는 종양 세포수 및 주입된 CAR T 세포수를 이용하여 산정되었다(Carpenito 등, 2009, Proc Natl Acad Sci U S A 106: 3360-3365). 본 발명에 있어서, 도 10에 도시된 바와 같이 주입된 CART19+ T 세포의 수는 생체 내에 존재하는 CART19+ T 세포의 절대 수치를 충분히 정확하고 정밀하게 결정하는 것이 가능하기 때문에 사용되었다. 혈액 및 골수에서의 CART19 확장에 대한 이용 가능한 데이터는 도 2 및 도 6에 도시된 바와 같이 강력하다. 그러나 이차 림프성 조직과 같은 기타 부위로의 CART19의 트래피킹을 결정하는 것이 불가능하였으며, 그 결과 종양의 최대 감소 시에 생체 내에서 달성된 CART19 세포의 총수에 대한 실질적인 불확실성을 야기하였다. 표 3으로부터의 산정된 값은 효과적인 E:T 비율을 유도하기 위해 사용되었다.
생체 내에서 달성된 산정된 CART19 E:T 비율
환자 종양 부하(기준선 및 델타) 주입된 CART19+ 세포 생체 내 E:T
골수
기준선		 혈액
기준선		 결절/비장1
기준선		 CLL 부하의 총 변화
UPN 01 1.70E+12 N/A 8.1E+11 2.51E+12 1.13E+09 1:2200
UPN 02 3.20E+12 2.75E+11 1.6E+12 2.74E+112 5.80E+08 1:1000
UPN 03 8.80E+11 N/A 4.4E+11 1.32E+12 1.42E+07 1:93,000
범위 1000-93,000
1 = 밀도 및 부피 방법의 평균2 = 환자 UPN02는 골수에서는 반응하지 않았으며, 비장 및 림프절에서 CT에 의해 측정된 종양의 양에서 선병증(3.1E+11 세포)의 부분적인 감소를 나타냈다. 혈액 중에서의 반응을 위해 도 5A를 참고한다.샘플 가공 및 동결
샘플(말초 혈액 및 골수)은 라벤더색 상부(K2EDTA) 또는 적색 상부(첨가제 무) 진공 채혈관(vacutainer tube, 벡톤 디킨슨(Becton Dickinson))에서 수집하고, 수혈 2시간 이내에 TCSL로 보냈다. 샘플을 확립된 실험실용 SOP에 따라 수령 30분 이내에 가공하였다. 말초 혈액 및 골수 단핵성 세포는 피콜-파크(GE Health care사, 17-1440-03)를 이용한 피콜 밀도 구배 원심분리를 통해 정제되고, 5100 Cryo 1° 냉동 용기를 이용하여 4% 인간 혈청 알부민(Gemini Bio-Products사, 800-120), 2% 헤타스타치(Novaplus사, NDC0409-7248-49) 및 10% DMSO(Sigma사, D2650)가 보충된 RPMI(Gibco사 11875-135)에서 냉동하였으며, -80℃에서 24 내지 72시간 이후에 세포를 장기간 저장을 위해 액체 질소로 이동시켰다. 아페레시스 샘플은 펜실베이니아 대학 병원의 혈액은행을 통해 수득되었으며, 피콜 구배 정제에 의해 CVPF에서 가공되고, 상술한 바와 같이 냉동하였다. 해동 직후의 생존력이 평가되었을 때 85%를 초과하였다. 혈청 단리를 위해, 샘플은 실온에서 1.5 내지 2시간 동안 응고하도록 하였으며, 혈청은 원심분리에 의해 단리되고, 100㎕의 단일 사용 분취량은 -80℃에 냉동하였다.
세포주
K562(CML, CD19 음성)는 ATCC(CCL-243)로부터 수득되었다. K562/CD19는 까르민 까르페니또(Carmine Carpenito)의 위대한 업적이며, CD19 분자를 발현하기 위해 100%의 빈도로 K562가 렌티바이러스성으로 형질 도입된 것이다. CD19 양성의 비-T, 비-B ALL 전구체 B 세포주(Hurwitz 등, 1979, Int J Cancer 23: 174-1800)이고 CD19 항원을 발현하는 것으로 확인된 NALM-6은 로렌스 쿠퍼(Laurence Cooper)의 위대한 업적이었다. 상기 세포주는 R10 배지(10% 소 태아 혈청(하이클론(Hyclone)이 보충된 RPMI 1640(집코, 11875)) 및 1% 펜-스트렙(Pen-Strep)(집코, 15140-122)에서 유지되었다. 건강한 기증자로부터의 말초 단핵성 세포(ND365)는 펜실베니아 대학교의 인간 면역학 코어(Human Immunology Core)로부터 아페레시스에 의해 수득하고, 가공하고, 상술한 바와 같이 냉동하였다.
DNA 단리 및 Q-PCR 분석
전혈 또는 골수 샘플은 라벤더색 상부(K3EDTA) BD 진공 채혈관(벡톤 디킨슨)에서 수집하였다. 게놈 DNA는 QIAamp DNA 혈액 미디 키트(blood midi kit, Qiagen사)를 이용하여 전혈로부터 직접 단리하였고, 확립된 실험실용 SOP는 분광 광도계로 정량화하고, -80℃에서 저장하였다. 게놈 DNA 샘플에 대한 Q-PCR 분석은 통합된 CD19 CAR 이식 유전자 서열을 검출하기 위해 123 내지 200ng 게놈 DNA/시점 ABI Taqman 기술 및 실증된 검정을 이용하여 대량으로 수행되었다. 표준 곡선 기울기 및 r2 값을 포함한 성공/실패 파라미터 범위, 참고용 샘플(1,000개의 복제수/플라스미드 스파이크)을 정확하게 정량화하기 위한 능력, 및 건강한 기증자 DNA 샘플에서의 무증폭은 정량화 연구 및 예정된 허용 범위로부터 산정되었다. CD19 CAR 이식 유전자를 위한 프라이머/탐침은 Milone 등, 2009, Mol Ther 17: 1453-1464에서 상술한 바와 같다. 복제수/단위 DNA를 결정하기 위해, 100ng의 비-형질 도입된 대조군 게놈 DNA 내로 스파이킹(spiking)된 106-5개의 복제수의 렌티바이러스 플라스미드로 구성된 8점 표준 곡선을 생성하였다. 각각의 데이터 점(샘플, 표준 곡선, 참고용 샘플)은 보고된 평균값으로 3회 평가되었다. 환자 UPN 01에 있어서, 모든 보고된 값은 0.46% 미만의 CV(%)로 3/3 복제사본(replicate)에서 양성 Ct 값으로부터 유래하였다. 환자 UPN 02에 있어서, +177일째 날의 샘플(양성의 2/3 복제사본 및 높은CV(%))을 제외하면 모든 보고된 값은 0.72% 미만의 CV(%)로 3/3 복제사본에서 양성 Ct 값으로부터 유래하였다. 환자 UPN 03에 있어서, +1일째 날의 샘플(양성의 2/3 복제사본 및 0.8%의 CV) 및 +3일째 날의 샘플(양성의 2/3 복제사본 및 0.67%의 CV)을 제외하면 모든 보고된 값은 1.56% 미만의 CV(%)로 3/3 복제사본에서 양성 Ct 값으로부터 유래하였다. 검정을 위한 정량화(LLOQ) 하한치는 2개의 복제수/㎍ DNA(10개의 복제수/200ng 입력 DNA)에서 표준 곡선으로부터 결정되었지만, LLOQ 미만의 평균값(즉, 보고 가능하지만 정량화 할 수 없음)이 근접치인 것으로 고려된다. 문의된 DNA의 양을 조절하기 위한 평행 증폭 반응은 12 내지 20ng의 입력 게놈 DNA, CDKN1A 유전자(유전자은행: Z85996)(센스 프라이머: GAAAGCTGACTGCCCCTATTTG; 서열번호: 25, 안티센스 프라이머: GAGAGGAAGTGCTGGGAACAAT; 서열번호: 26, 탐침: VIC- CTC CCC AGT CTC TTT; 서열번호: 27)의 상류에 있는 비-전사된 게놈 서열에 대해 특이적인 조합, 및 대조군 게놈 DNA의 희석에 의해 생성된 8점 표준 곡선을 이용하여 수행되었지만, 이들 증폭 반응은 보정 인자(CF)(검출(ng)/입력(ng))를 생성하였다. 이식 유전자의 복제수/DNA(㎍)는 하기 식에 따라 산정되었다: CD19 표준 곡선/입력 DNA(ng)×CF×1000ng으로부터 산정된 복제수. 이러한 검정의 정확성은 하기 수식에 따라 Q-PCR을 이용하여 주입된 세포 생성물의 마킹을 정량화하는 능력에 의해 결정되었다: 평균 마킹 = 검출된 복제수/입력 DNA×6.3pg의 DNA/남성 체세포×CF 대 CAR 특이적 검출 시약을 이용한 유동 세포 분석법에 의한 이식 유전자 양성(transgenic positivity). 이들 맹검 결정은 UPN 01주입 생성물에 대해 22.68%의 마킹(유동 세포 분석법에 의해 22.6%의 마킹), UPN 02 주입 생성물에 대해 32.33%의 마킹(유동 세포 분석법에 의해 23%의 마킹), 및 UPN 03 주입 생성물에 대해 4.3%의 마킹(유동 세포 분석법에 의해 4.7%의 마킹)을 생성하였다.
사이토카인 분석
가용성 사이토카인 인자의 정량화는 루미넥스 비드 배열 기술 및 라이프 테크놀로지스(Life technologies; 인비트로젠(Invitrogen)사)로부터 구입한 키트를 이용하여 수행되었다. 검정은 3배 희석 시리즈를 이용하여 생성된 8점 표준 곡선과 함께 제조사의 프로토콜에 따라 수행되었다. 각각의 표준 점 및 샘플은 1:3 희석액에서 3회 평가되었지만, 2회 측정치에 대한 산정된 CV(%)는 15% 미만이었다. 데이터는 바이오플렉스(Bioplex) 200 상에서 얻어졌으며, 5-파라미터 로지스틱 회귀 분석을 이용하는 바이오플렉스 매니저(Bioplex Manager) 5.0 버전 소프트웨어로 분석하였다. 표준 곡선 정량화 범위는 80 내지 120%(관측값/기대값) 범위로 결정되었다. 개인 분석물질 정량화 범위는 도면의 범례에 보고되어 있다.
CAR 기능을 검출하기 위한 세포성 검정
세포는 표적 세포에 대한 반응에서 CD107 과립의 감소량을 측정함으로써 해동 및 TCM에서 하룻밤 동안의 방치 이후에 기능성에 대해 평가되었다. 과립 감소 검정은 Betts 등, 2003, J Immunol Methods 281: 65­78에 본질적으로 개시되어 있는 CD49d(벡톤 디킨슨), 항-CD28, 모넨신(monensin, 이-바이오사이언스(e-Bioscience)) 및 CD107a-FITC 항체(이-바이오사이언스)의 부재 하에 37℃에서 2시간 동안 48웰 플레이트에서 500㎕의 최종 부피로 1×106 PBMC 및 0.25×106 표적 세포를 이용하여 수행되었다.
항체 시약
하기 항체는 이들 연구를 위해 사용되었다: 알렉사 647에 접합된 쥐의 항-CD19 CAR 항체인 MDA-CAR은 비풀렌듀 예나(Bipulendu) 및 로렌스 쿠퍼(엠디 앤더슨(MD Anderson) 암센터) 박사의 위대한 업적이었다. 다중 파라미터 면역 표현형 검사 및 기능적 검정을 위해: 항-CD3-A700, 항-CD8-PE-Cy7, 항-PD-1-FITC 항-CD25-AF488, 항-CD28-PercP-Cy5.5, 항-CD57-eF450, 항-CD27-APC-eF780, 항-CD17-APC-eF780, 항-CD45RA-eF605NC, 및 CD107a-FITC(모두 이-바이오사이언스사로부터 구입), 항-CD4-PE-텍사스 레드 및 라이브/데드 아쿠아(라이프 테크놀로지스사로부터 구입) 및 항-CD14-V500, 항-CD16-V500(벡톤 디킨슨사로부터 구입). 일반적인 면역 표현형 검사를 위해: CD3-PE, CD14-APC, CD14-PE-Cy7, CD16-FITC, CD16­PE-Cy7 및 CD19-PE-Cy7, CD20-PE(모두 벡톤 디킨슨사로부터 구입).
다중 파라미터 유동 세포 분석법
세포는 피콜-파크 가공 직후, 또는 냉동된 경우에 5% 인간 AB 혈청(겜콜(GemCall), 100-512), 1% 헤피즈(Hepes)(집코, 15630-080), 1% 펜-스트렙(집코, 15140-122), 1% 글루타맥스(Glutamax)(집코, 35050-061) 및 0.2% N-아세틸 시스테인(아레리칸 레전트(American Regent), NDC0517-7610-03)이 보충된 T 세포 배지(TCM)(X-vivo 15(론자, 04-418Q)에서 2×106 세포/㎖의 밀도로 하룻밤 동안 방치 이후에 유동 세포 분석법으로 평가되었다. 다중 파라미터 면역 표현형 검사는 본문에 개시된 바와 같이 FMO 염료를 이용하여 총 4×106개의 세포/조건 상에서 수행되었다. 세포는 제조사에 의해 추천되는 항체 및 시약의 농도를 이용하여 얼음 상에서 30분 동안 1×106 세포/100㎕ PBS의 밀도로 염색되고, 세척하고, 0.5% 파라포름알데하이드에서 재현탁하고, 상기 항체 조합의 검출 및 분리를 위해 청색(488㎚), 바이올렛(405㎚), 녹색(532㎚) 및 적색(633㎚) 레이저 및 적절한 필터 세트가 구비된 변형 LSRII(BD 면역세포분석 시스템(Immunocytometry system))을 이용하여 얻어졌다. 최소 100,000개의 CD3+ 세포가 각 염료에 대해 얻어졌다. 기능적 검정을 위해 세포를 세척하고, 표면 마커에 대해 염색하고, 0.5% 파라포름알데하이드에 재현탁하고, 상기와 같이 수득하였지만, 최소 50,000개의 CD3+ 사건(event)이 각각의 염색 조건에 대해 수집되었다. 보상 값은 단일 항체 염료 및 BD 보상 비드(벡톤 디킨슨)를 이용하여 확립되었고, 산정되었으며, 기기에 의해 자동적으로 적용되었다. 데이터는 FlowJo 소프트웨어(8.8.4 버전, Treestar사)를 이용하여 분석하였다. 일반적인 면역 표현형 검사를 위해, 세포는 청색(488㎚) 및 적색(633㎚) 레이저가 구비된 아큐리(Accuri) C6 세포분석기를 이용하여 얻어졌다. 보상 값은 단일 항체 염료 및 BD 보상 비드(벡톤 디킨슨)를 이용하여 확립되었으며, 수동으로 산정하였다. 데이터는 C-Flow 소프트웨어 분석 패키지(1.0.264.9 버전, 아큐리 세포분석기)를 이용하여 분석하였다.
환자의 과거 의료 이력과 치료요법에 대한 반응
임상적 치료 요약은 도 10에 대략적으로 나타나 있다. 환자 UPN 01은 먼저 55세의 나이로 단계 II B 세포 CLL로 진단되었다. 상기 환자는 자각 증상은 없었으며, 진행성 림프구 증가증, 혈소판 감소증, 선병증 및 비장 비대증에 대한 요법이 요구될 때까지 약 1 내지 1/2년 동안 관측되었다. 4회의 플루다라빈 이후에, 상기 환자는 혈액 개수의 완전한 표준화 및 CT 스캔에 의한 완전한 반응을 나타냈다. 림프구 증가증 및 혈소판 감소증은 자각 증상이 없으며 선병증은 증가한 상태로 5개월 이내에 진행이 현저했다. 상기 환자는 약 3년 동안 증상 없이 관측되었으며, 추후에 진행성 백혈구 증가증, 빈혈증 및 혈소판 감소증에 대해 리툭시맵 및 플루다라빈의 처치를 필요로 하였다. 상기 환자는 혈액 개수의 부분적인 개선으로 플루다라빈과 함께 4회의 리툭시맵으로 치료 받았다. 또한 상기 환자는 백혈구 증가증(WBC: 150,000/㎕) 및 혈소판 감소증(혈소판: 30,000/㎕)에 의해 증명된 요법이 요구되는 1년 이내에 진행을 나타냈으며, 혈액 개수의 정상화로 알렘투주맙으로 치료 받았다. 13개월 이내에 진행이 현저하였다. 이어 상기 환자는 유의한 반응 없이 단일 약제인 리툭시맵을 투여 받았으며, 그 이후에 최소 반응으로 리툭시맵, 싸이클로포스파마이드, 빈크리스틴 및 프레드니손(R-CVP)을 2회 투여 받은 후 레날리도마이드(lenalidomide)를 투여 받았다. 레날리도마이드는 독성으로 인해 중단되었다. 상기 환자는 최소 반응으로 2회의 펜토스타틴, 싸이클로포스파마이드 및 리툭시맵을 투여 받았다.
추후, 상기 환자는 CART19 세포의 주입 4일 전에 림프구 제거 화학요법으로서 벤다무스틴을 투여 받았다. 요법 이전에 WBC는 14,200/㎕이고, 헤모글로빈은 11.4gm/dl이고, 혈소판 개수는 78,000/㎕이고, ALC는 8000/㎕이었다. CT 스캔에서는 확산성 선병증이 나타났으며, 골수는 CLL로 광범위하게 침윤되었다(세포의 67%). 상기 환자는 1.6×107 CART-19 세포/㎏(FACS에 의해 평가된 바와 같이 총 1.13×109개의 CART19 세포)를 투여 받았다. 주입에 의한 독성은 없었다. 상기 환자는 벤다무스틴 주입 약 10일 이후 및 CART19 세포 주입 6일 이후에 호증구 감소증으로 되었으며, 첫 번째 CART19를 주입한지 초기 10일 이후에 환자는 신열, 오한 및 일시적인 저혈압이 발병하였다. 동시에, 흉부 X선 및 CT 스캔에서는 항생제로 치료 받은 좌상엽 폐렴이 발견되었다. 신열은 약 2주 동안 존속되었으며, 호중구 회복이 있는 경우에 치유되었다. 상기 환자는 추가적인 감염성 또는 체질 증상은 없었다.
상기 환자는 도 5에 도시된 바와 같이 신속하고 완전한 반응을 달성하였다. 후 주입 1개월과 6개월 사이에 어떠한 순환성 CLL 세포도 유동 세포 분석법에 의해 혈액에서 검출되지 않았다. CART-19 세포의 주입 후 1, 3 및 6개월 시점에 골수에서는 형태학 및 유동 세포 분석법 시험에 의해 림프구성 침윤물의 부재가 지속되는 것으로 나타났다. 주입 후 1개월 및 3개월 시점의 CT 스캔에서는 비정상적인 선병증의 완치가 나타났다. 상기 환자는 지속적인 백혈구 감소증(WBC: 1000 내지 3900/㎕) 및 혈소판 감소증(혈소판: 약 100,000/㎕) 및 경미한 저감마글로불린 혈증(IgG 525㎎/㎗, 정상 650 내지 2,000㎎/㎗)을 나타냈지만, 감염성 합병증은 없었다.
환자 UPN 02는 77세 나이로 CART19 세포로 치료 받았다. 상기 환자는 관상 동맥 질환의 관련된 이력을 가지고 있었으며, 먼저 환자에서 피로 및 백혈구 증가증이 나타났을 때 2000년에 68세의 나이로 CLL을 진단 받았다. 상기 환자는 치료가 필요한 진행성 백혈구 증가증(195,000/㎕), 빈혈증 및 혈소판 감소증이 발병했던 4년 동안 상대적으로 안정하였다. 그 당시의 유전자 검사에 따르면, CLL 세포는 염색체 17p의 결실을 갖는 것으로 나타났다. 진행성 질병으로 인해, 상기 환자는 부분적인 반응 및 혈액 개수에서의 개선으로 12주 과정으로 알렘투주맙으로 치료 받았다. 1년 6개월 이내에 상기 환자는 진행성 백혈구 증가증, 빈혈증, 혈소판 감소증, 및 비장 비대증에 걸렸다. 핵형 분석에 따르면, 현재 염색체 13q의 결실과 함께 염색체 17p의 결실이 있는 것으로 확인되었다. 상기 환자는 백혈구 증가증의 개선 및 빈혈증 및 비장 비대증의 안정화로 18주 동안 알렘투주맙으로 치료 받았다. 상기 환자에서는 1년 이내에 진행성 백혈구 증가증, 빈혈증 및 혈소판 감소증의 흔적이 나타났다. 치료는 리툭시맵과 함께 2회의 벤다무스틴 주입을 포함하며, 이는 도 5A에 도시된 바와 같이 안정한 질명을 초래하지만, 유의한 개선은 없었다.
상기 환자는 CART-19 세포의 주입 이전에 림프구 제거 화학요법으로서 벤다무스틴을 단독으로 투여 받았다. 상기 환자는 24시간 동안 102°F 정도의 높은 일시적인 신열로 인해 악화된 3회 분할 주입에서 4.3×106 CART19 세포/kg(총 4.1×108개의 세포)를 투여 받았다. 첫 번째 주입 후 11일째 날, 상기 환자는 증강된 4.1×108(4.3×106/kg) CART19 세포를 투여 받았으며, 이러한 주입은 24시간 입원을 요하는 저산소혈증 없이 신열, 오한 및 호흡 장애에 의해 악화되었다. 심장성 허혈증에 대한 증거는 없었으며, 상기 증상은 치유되었다. 첫 번째 CART-19의 주입 후 15일째, 및 증강된 CART19 세포의 주입 후 4일째 날에 상기 환자는 높은 신열(최대 104℉), 오한 및 오한으로 병원에 입원했다. 혈액 및 소변 배양 및 CXR을 이용한 광범위한 검사로는 감염 공급원을 확인하지 못했다. 상기 환자는 호흡 장애로 불평을 호소했지만, 저산소혈증은 없었다. 초음파 심장 진단도(echocardiogram)에 따르면, 심각한 운동 감소(hypokinesis)가 나타났다. 방출 분획은 20%였다. 상기 환자는 1일 동안 1㎏ 당 1㎎의 프레드니손, 및 약 1주일 동안 1㎏ 당 0.3㎎의 프레드니손을 투여 받았다. 이는 신열 및 신부전증의 완치를 초래했다.
높은 신열의 발생과 동시에 환자는 도 5A에 도시된 바와 같이 말초 혈액에서 신속한 림프구의 감소를 나타냈다. 환자가 백혈구 개수의 정상화를 나타낼지라도, 상기 환자는 지속적인 순환성 CLL, 안정하고 경미한 빈혈증 및 혈소판 감소증을 나타냈다. 골수는 극적인 말초 혈액 세포수 감소에도 불구하고 요법 이후 1개월째에 CLL의 지속적이고 광범위한 침윤을 나타냈으며, CT 스캔에 따르면 선병증 및 비장 비대증의 부분적인 감소가 나타났다. CART19 세포의 주입 5개월 후에 상기 환자는 진행성 림프구 증가증에 걸렸다. 주입 9개월 이후에 상기 환자는 안정하고 경미한 빈혈증과 함께 림프구 증가증(16,500/㎕), 및 안정한 선병증과 함께 혈소판 감소증을 나타냈다. 상기 환자는 자각 증상이 없는 상태였으며, 추가의 요법도 받지 않았다.
환자 UPN 03은 50세의 나이로 자각 증상이 없는 단계 I의 CLL로 진단을 받았으며, 6년 동안에 관찰이 이어졌다. 추후, 상기 환자는 치료가 요구되는 진행성 백혈구 증가증(백혈구 개수 92,000/㎕) 및 진행성 선병증을 나타냈다. 상기 환자는 플루다라빈과 함께 2회의 리툭시맵을 투여 받았으며, 이는 혈액 개수의 정상화 및 선병증의 완치는 아니지만 유의한 개선을 초래하였다. 상기 환자는 치료가 요구되는 신속 진행성 백혈구 증가증(WBC 165,000/㎕) 및 진행성 선병증으로 다음 6개월에 걸쳐 이어지는 약 3년간 진행이 없는 기간을 가졌다. 상기 환자는 혈액 개수의 정상화 및 촉진성 선병증(palpable adenopathy)의 치유로 플루다라빈과 함께 1회의 플루다라빈 및 3회의 리툭시맵을 투여 받았다. 상기 환자는 신속하게 진행되는 백혈구 증가증 및 선병증에 다시 걸릴 때가지 약 20개월간 진행이 없는 기간을 가졌다. 이때 골수는 CLL에 의해 광범위하게 침윤되었으며, 핵형 분석에 따르면 200개의 세포 중 170개에서 TP53 결실을 증명한 FISH에 의해 상기 세포가 염색체 17p의 결실을 포함하는 것으로 나타났다. 상기 환자는 벤다무스틴과 함께 1회의 리툭시맵을 투여 받은 후, 4회의 벤다무스틴만을 투여 받았다(리툭시맵에 대한 심각한 알레르기 반응으로 인함). 상기 환자는 혈액 개수의 초기 정상화를 나타냈으며, 요법의 중단 직후에 진행성 백혈구 증가증 및 선병증을 나타냈다.
자가성 T 세포는 환자 UPN3으로부터 아페레시스에 의해 수집되고, 냉동 보존된다. 이어 상기 환자는 우수한 혈액학적 반응으로 11주 내내 알렘투주맙으로 치료 받았다. 선병증의 완치는 없었지만 개선은 있었다. 상기 환자는 다음 6개월에 걸쳐 활성적이지만 안정한 질병을 나타냈다. 추후, 상기 환자는 CART19 세포의 주입 이전에 림프구 제거 화학요법으로서 펜토스타틴 및 싸이클로포스파마이드를 투여 받았다.
화학요법 이후 3일째 이지만 세포 주입 이전에 골수는 CLL에 의한 약 40%의 연루로 과세포성(60%)이었다. 표 3 및 (Bonyhadi 등, 2005, J Immunol 174: 2366-2375)에 나타나 있는 바와 같이, CLL 환자로부터 아페레시스 수집에 본질적인 제조 제한으로 인해 상기 환자에는 3일에 걸쳐 1㎏ 당 총 1.46×105 CART19+ 세포(총 1.42×107개의 CART19+ 세포)를 주입하였다. 주입에 의한 독성은 없었다. 첫 번째 주입 14일 이후, 상기 환자는 증상에 따라 치료되는 오한, 102℉ 정도의 높은 신열, 오한, 메스꺼움 및 설사가 나타나기 시작했다. 상기 환자는 호흡기 또는 심장 증후군은 없었다. 주입 후 22일째 날에 종양 용해 증후군이 진단되었으며, 이는 증가된 LDH 및 요산에 의해 확인되고, 신부전에 의해 악화되었다. 상기 환자는 입원해서, 요산 및 신장 기능의 정상화로 유체 소생법 및 라스부리카제(rasburicase)로 치료를 받았다. CXR 및 혈액, 소변 및 대변 배양에 의한 세부적인 임상적 평가가 수행되었으며, 모두 음성 또는 정상이었다.
CART-19 주입 1개월 이내에 상기 환자는 형태학, 유동 세포 분석법, 세포유전학 분석 및 FISH 분석에 의해 혈액 및 골수로부터 순환성 CLL을 제거하였으며, CT 스캔에 따르면 비정상적인 선병증의 치유를 나타냈다(도 5C). 상기 환자의 경감이 CART19 세포의 초기 주입으로부터 8개월을 넘어 지속되었다.
현재, 실험 결과가 개시된다.
임상 프로토콜
진전된 화학요법 내성 CLL을 앓는 3명의 환자는 도 1에 도시된 바와 같이 실험적인 임상 시험에 등록하였다. 모든 환자는 도 10에 도시된 바와 같이 다양한 화학요법 및 생물학적 섭생법으로 광범위하게 예비 치료를 받았다. 상기 환자 중 2명은 통상적인 요법에 대한 빈약한 반응 및 신속한 진행을 예시하는 결실인 p53 결핍 CLL을 앓고 있었다(Dohner 등, 1995, Blood, 851580-1589). 환자 각각은 예비 화학요법 이후에 광범위한 골수 침윤(40 내지 95%) 및 림프샘 장애를 포함한 큰 종양 부하를 나타냈지만, 환자 UPN 02는 또한 유의한 말초 림프구 증가증을 나타냈다. CART19 T 세포는 도 1B에 도시된 바와 같이 제조되었으며, 상기 세포 제조 및 각 환자에 대한 생성물의 특성화의 세부사항은 표 4에 나타나 있다. 모든 환자는 CART19 T 세포의 주입 1 내지 4일 전에 림프구 제거 화학요법으로 예비 치료을 받았다. 분할 투여량 세포 주입 스케줄은 도 1A에 도시된 바와 같이 상기 시험에서 4-1BB 공자극성 신호전달 도메인을 혼입하는 CAR을 검사하였기 때문에 사용되었다.
아페레시스 생성물 및 CART19 생성물의 방출 기준
검정 사양 UPN 01 UPN 02 UPN 03
아페레시스 생성물
CD45+의 CD3+에 대한 유동 세포분석 N/A 4.46% 2.29% 2.67%
CART19 생성물
주입된 총 세포수 약 2-5×109 5×109 1.275×109
1.275×109
[총 2.55×109]		 3×108
세포 생존 가능성 70% 이상 96.2% 95.3(90.5)1 90.3
CD3+ 세포(%) 80% 이상 88.9% 98.8 98.9
잔류 비드# 100개 이하의 비드/3×106 세포 3.95 1 4
내독소 3.5이하의 EU/㎖ 0.5미만의 EU/㎖ 0.5미만의 EU/㎖ 0.5미만의 EU/㎖
마이코플라즈마 음성 음성 음성 음성
멸균
(Bactec)		 성장 못함 성장 못함 성장 못함 성장 못함
진균 배양 성장 못함 성장 못함 성장 못함 성장 못함
BAS ELISA 1㎍ 이하/㎖ 0.5 미만/㎖ 0.5 미만/㎖ 0.5 미만/㎖
복제 캄피턴트 렌티바이러스(RCL) RCL
검출 불가		 검출 불가 미확정2 미확정2
혈질 도입 효율(scFv 발현) 20% 이상 22.6% 23% 4.74%4
벡터 DNA 서열(CART19 PCR) 0.2-3 복제수/세포 0.153 0.275 0.101
1 = 두 번째 복용량.2 = 12일째 날에 LOQ 미만의 검정 값으로, 벡터 생성으로부터의 플라스미드 DNA의 전달과 일치하는 확장에서 초기부터 감소함. 정보 수정안으로서 FDA에 제출됨.3 = FACS에 의한 표면 염색에 기초한 생성물 방출.4 = 외부 DSMC 및 IRB에 의한 방출 기준을 위해 제공된 치료 제외.
CART19의 생체 내 증식 및 존속 및 골수로의 트래피킹
CD3/CD28 비드를 사용하여 증식되고 4-1BB 신호전달 도메인을 발현하는 CAR+ T 세포는 4-1BB가 결핍된 CAR에 대해 개선된 것으로 여겨진다. Q-PCR 검정은 혈액 및 골수에서 CART19 세포의 정량적 트래피킹을 가능케 하기 위해 개발되었다. 모든 환자는 도 2A 및 도 2C에 도시된 바와 같이 적어도 6개월 동안 혈액 내의 CART19-세포의 증식 및 존속을 나타냈다. 놀랍게도, 환자 UPN 01 및 UPN 03은 주입 후 첫 1개월 동안에 혈액 내의 CAR+ T 세포의 확장이 1,000 내지 10,000배였다. 피크 확장 수준은 환자 UPN 01(15일째 날) 및 환자 UPN 03(23일째 날)에서 주입 후 임상적 증상의 발현과 일치하였다. 더욱이, 일차 역학으로 모델링될 수 있는 초기 감쇄 이후, CART19 T 세포 수준은 주입 후 90일째 날에서 180일째 날까지 3명의 환자 모두에서 안정화되었다. 유의하게도, 비록 도 2D 내지 도 2F에서 도시된 바와 같이 혈액에서 관측된 것보다 5배 내지 10배 정도 낮을 지라도 CART19 T 세포는 또한 환자 모두에서 골수로 트래피킹되었다. 환자 UPN 01 및 03은 소실(T1/2)이 약 35일로서 로그 선형 감쇄를 나타냈다.
CART19 주입 이후 혈액 및 골수 구획에서의 특정 면역 반응의 유도
모든 환자로부터의 혈청 샘플을 수집하고, 사이토카인 수준을 정량적으로 결정하기 위해 배치(batch) 분석하였으며, 그 결과 도 3에 도시된 바와 같이 잠재성 독성을 평가하고 CART19 세포 기능의 증거를 제공하기 위해 사이토카인, 케모카인 및 기타 가용성 인자의 패널을 평가하였다. 30개의 검사된 분석물질 중, 4개의 사이토카인(IL-6, INF-γ, IL-8 및 IL-10), 5개의 케모카인(MIP-1α, MIP-1β, MCP-1, CXCL9, CXCL10) 및 IL-1Rα 및 IL-2Rα에 대한 가용성 수용체를 포함한 11개의 분석물질이 기준선에서 3배 이상의 변화를 나타냈다. 이들 중 인터페론-γ는 기준선에서 가장 큰 상대적인 변화를 나타냈다. 흥미롭게도, UPN 01 및 UPN 03에서 사이토카인 증가에 대한 피크 시간은 앞서 개시된 임상적 증상 및 각 환자에서 혈액 내의 CART19 세포의 피크 수준과 일시적으로 서로 관련이 있었다. 오직 경미한 변화가 아마도 이러한 환자에 제공된 코르티코스테로이드 치료 결과서 환자 UPN 02에서 나타났다. 가용성 IL-2의 증가는 비로 4-1BB 신호전달 도메인을 갖는 CAR+ T 세포를 개발하기 위한 예비 임상적 원리(rationale)들 중 하나가 CD28 신호전달 도메인에 비해 IL-2의 분비를 개시하는 경향에서의 감소일지라도 환자의 혈청에서 검출되지 않았다(Milone 등, 2009, Mol Ther. 17: 1453-1464). 이는 이전 연구에서 CAR+ T 세포가 조절용 T 세포에 의해 잠재적으로 억제되는 것으로 나타났을 지라도 지속된 임상적 활성과 관련이 있을 수 있다(Lee 등, 2011, Cancer Res 71: 2871-2881), 상기 조절용 T 세포는 실질적인 양의 IL-2를 분비하는 CAR에 의해 유도될 수 있거나 주입 후 외생성 IL-2의 제공에 의해 유도될 수 있는 세포이다. 최종적으로, UPN 03의 골수 흡인물로부터의 상층액에서 사이토카인 분비의 강력한 유도는 도 3D에 도시된 바와 같이 관측되었으며, 이는 또한 종양 용해 증후군의 발명 및 완치와 일치하였다.
혈액 내 메모리 CART19 세포의 개체군의 장기간 발현 및 확립
CAR 매개 암 면역 요법에서의 주요 논점은 최적화된 세포 제도 및 공자극 도메인이 유전적으로 변형된 T 세포의 존손을 증강시키고, 환자에서 CAR+ 메모리 T 세포의 확립을 허용하는 지의 여부이다. 이전 연구에 따르면, 주입 이후에 CAR의 강력한 증식, 장기간 존속 및/또는 T 세포 상의 발현이 증명되지 않았다(Kershaw 등, 2006, Clin Cancer Res 12: 6106-6115; Lamers 등, 2006, J Clin Oncol 24: e20-e22; Till 등, 2008, Blood, 112, 2261-2271; Savoldo 등, 2011, J Clin Invest doi: 10.1172/JCI46110). 주입 후 169일째 날에 혈액 및 골수 모두로부터의 샘플의 유동 세포 분석에 따르면, UPN 03에서 세포를 발현하는 CAR19의 존재(도 4A 및 도 4B) 및 도 4A에 도시된 바와 같은 B 세포의 부재가 들어났다. 놀랍게도, Q-PCR 검정에 의해 3명의 환자 모두는 도 2 및 도 6에 도시된 바와 같이 4개월 및 그 이상 동안 존속하는 CAR+ 세포를 가졌다. 유동 세포 분석법에 의한 CAR+ 세포의 생체 내 빈도는 CART19 이식 유전자에 대한 PCR 검정으로부터 수득된 값과 밀접하게 일치하였다. 중요하게도, 도 4A에 도시된 바와 같이 CAR19+ 세포가 CD16 양성 또는 CD14 양성 서브셋에서 검출될 수 없음에 따라 환자 UPN 03에서 CD3+ 세포만이 CAR19를 발현하였다. CAR 발현은 또한 도 7에 도시된 바와 같이 주입 후 71일째 날에 환자 UPN 01의 혈액 내에서 4.2%의 T 세포의 표면 상에서 검출되었다.
다음으로, 다색성 유동 세포 분석법은, 도 8에 도시된 항-CAR 유전자형 항체 (MDA-647) 및 게이팅 전략을 이용하여 UPN 03에서 CART19 세포의 발현, 표현형 및 기능을 추가로 특성화하도록 상세한 연구를 수행하기 위해 사용되었다. CAR19 발현에 기초하여 CD8+ 및 CD4+ 세포 둘 모두에서 메모리 및 활성화 마커의 발현에서의 현저한 차이가 관측되었다. 56일째 날에, CART19 CD8+ 세포는 주로 도 4C에 도시된 바와 같이 항원에 대한 장기간의 강력한 노출과 일치하는 효과기 메모리 표현형(CCR7-CD27-CD28-)을 나타냈다. 대조적으로, CAR 음성 CD8+ 세포는 세포의 서브셋에서의 CCR7 발현 및 CD27+/CD28- 및 CD27+/CD28+ 분획에서의 실질적인 개수와 함께 효과기와 중추 메모리 세포의 혼합물로 이루어져 있었다. CART19 및 CAR 음성 세포 개체군 둘 모두가 실질적으로 CD57을 발현할지라도, 이러한 분자는 균일하게 CART19 세포에서의 PD-1과 동시 발현되며, 이는 이들 세포의 광대한 복제 이력을 반영할 가능성이 있다. CAR 음성 세포 개체군과는 대조적으로, 전체 CART19 CD8+ 개체군은 CD25 및 CD127 둘 모두의 발현을 하지 못했다. 169일째 날 정도에, CAR 음성 세포 개체군의 표현형은 56일째 날의 샘플과 유사하게 유지되었으며, CART19 개체군은 PD-1 음성, CD57 음성 및 CD127 양성인 CAR+ 세포뿐만 아니라, 중추 메모리 세포의 특징, CCR7의 현저한 발현, 및 CD27 및 CD28의 더욱 높은 수준과 함께 소수 개체군을 포함하도록 발달하였다.
CD4+ 구획에서, 56일째 날에 CART19 세포는 도 4B에 도시된 바와 같이 CCR7의 균일한 결핍, CD57+ 구획 및 CD57-구획 둘 모두 내에 분포한 CD27+/CD28+/PD-1+ 세포의 우점종(predominance), 및 CD25 및 CD127 발현의 본질적인 부재를 특징으로 하였다. 대조적으로, 이러한 시점에서의 CAR 음성 세포는 CCR7, CD27 및 PD-1 발현에서 이질적이며, CD127을 발현시키고, 또한 실질적인 CD25+/CD127-(잠재성 조절용 T 세포) 개체군을 포함하고 있었다. 169일째 날 정도에, CD28 발현이 모든 CAR+CD4+ 세포에서 균일하게 양성으로 유지되는 반면, CART19 CD4+ 세포의 분획은 CCR7의 발현, CD27-세포의 더욱 높은 비율(%), PD-1 음성 서브셋의 발생, 및 CD127 발현의 획득과 함께 중추 메모리 표현형으로 발달하였다. CAR 음성 세포는 CD27 발현에서의 감소 및 CD25+/CD127-세포의 비율(%)에서의 감소를 제외하고 이들의 56일째 날의 대응물과 매우 일관되어 있는 상태이다.
CART19 세포는 혈액에서 6개월 이후에서 효과기 기능을 유지할 수 있다
짧은 존속 및 부적절한 생체 내 증식 이외에도, CAR+ T 세포를 이용한 이전 시험의 제한은 주입된 T 세포의 생체 내 기능적 활성의 신속한 상실이었다. 환자 UPN 01 및 03에서의 높은 수준의 CART19 세포의 존속 및 CAR19 분자의 표면 발현은 저온 보존된 말초 혈액 샘플로부터 회수된 세포에서의 항-CD19 특이적 효과기 기능을 직접 검사하기 위한 기회를 제공한다. 환자 UPN 03으로부터의 PBMC는 CD19 발현에 대해 양성 또는 음성인 표적 세포와 함께 배양되었다(도 4d). CART19 T 세포의 강력한 CD19 특이적 효과기 기능은 표면 CD107a 발현에 의해 평가된 바와 같이 CD19 양성이지만 CD19 음성이 아닌 표적 세포에 대해 특정한 과립 감소에 의해 증명되었다. 현저하게도, CD19 양성 표적에 대한 CART19 개체군의 노출은 표준 유동 세포 염색에서 동일한 효과기 세포에서 CAR19의 표면 발현을 위해 도 8에 도시된 바와 같이 표면 CAR-19의 신속한 내재화(internalization)를 유도하였다. 표적 세포 상에 공자극성 분자의 존재는 NALM-6 세포주가 CD80 또는 CD86을 발현하지 않기 때문에 CART19 세포의 과립 감소를 개시하기 위해 요구되지 않는다(Brentjens 등, 2007, Clin Cancer Res 13: 5426-5435). 효과기 기능은 주입 56일째 날에 명백히 나타났고, 169일째 날의 시점에도 유지되었다. CAR+ 및 CAR-T 세포의 강력한 효과기 기능은 또한 약리학적 자극에 의해 증명될 수 있다.
CART19 세포의 임상적 활성
임의의 환자에서 상기 주입 이후 4 동안에 일시적인 발열 반응이 아닌 유의한 독성이 관측되지 않았다. 그러나 모든 환자는 후속적으로 첫 번째 주입 후 7일째 날과 21일째 날 사이에 유의한 임상적 독성 및 실험용 독성을 발현하였다. 이들 독성은 기간이 짧으며, 가역적이었다. 현재까지 치료를 받은 3명의 환자 중, 표준 기준에 따라 CART19 주입 후 6개월 초과의 기간에 CR이 2명이고 PR이 1명이다(Hallek 등, 2008, Blood 111: 5446). 각각의 환자에 대한 과거의 의료 이력 및 요법에 대한 반응에 대한 세부사항은 도 10에 도시되어 있다.
간단하게 말해서, 환자 UPN 01은 주입 한지 초기 10일 이후에 오한 및 일시적인 저혈압과 함께 발열 증상을 발현하였다. 신열은 약 2주 동안 존속하였으며, 치유되었지만, 상기 환자는 추가의 체질 증상은 없었다. 상기 환자는 도 5에 도시된 바와 같이 신속하고 완전한 반응을 달성하였다. 주입 후 1일째 날과 6일째 날 사이에 유동 세포 분석법에 의해 혈액 내에서는 어떠한 순환성 CLL 세포가 검출되지 않았다. CART19 세포의 주입 후 1개월, 3개월 및 6개월째 날에 골수는 도 5B에 도시된 바와 같이 형태학 및 유동 세포 분석에 의해 림프구성 침윤물의 지속적인 부재를 나타냈다. 주입 후 1개월 및 3개월 날의 CT 스캔에 따르면, 도 5C에 도시된 바와 같이 선병증의 치유가 나타난다. 완치는 이러한 보고 시기에 추가의 10개월 이상 동안 지속되었다.
환자 UPN 02는 리툭시맵과 함께 2회의 벤다무스틴으로 치료 받았으며, 그 결과 도 5A에 도시된 바와 같이 안정한 질병을 초래하였다. 상기 환자는 CART19 T 세포의 주입 이전에 림프구 제거 화학요법으로서 3번째 복용량의 벤다무스틴을 투여 받았다. 상기 환자는 첫 번째 주입 이후 11일째 날 및 두 번째 CART19 세포의 증강 당일에 24시간의 입원을 요하는 40℃까지의 신열, 오한 및 호흡곤란을 나타냈다. 신열 및 신체 증상은 존속하였으며, 15일째 날에 상기 환자는 일시적인 신부전증을 나타냈지만, 모든 증상은 18일째 날에 코르티코스테로이드 요법을 개시한 이후에 치유되었다. CART19 주입 이후, 및 높은 신열의 발병과 동시에 상기 환자는 도 5A에 도시된 바와 같이 말초 혈액으로부터 p53 결핍 CLL 세포의 신속한 제거 및 선병증의 부분적인 감소를 나타냈으며, 골수는 극적인 말초 혈액 세포수의 감소에도 불구하고 요법 1개월 이후에 CLL의 지속적이고 광범위한 침윤을 나타냈다. 상기 환자는 자각 증상이 없는 상태이다.
환자 UPN 03은 CART19 세포의 주입 이전에 림프구 제거 화학요법으로서 펜토스타틴 및 싸이클로포스파마이드를 투여 받았다. 화학요법 3일 후지만 세포 주입 이전에, 골수는 CLL에 의한 약 50%의 연루로 과세포성(60%)이었다. 상기 환자는 낮은 복용량의 CART19 세포(3일에 걸쳐 분할 투여된 1.5×105 CAR+ T 세포/㎏)를 투여 받았다. 또한 주입에 의한 급성 독성은 없었다. 그러나 첫 번째 주입 14일 후에 상기 환자는 오한, 신열, 메스꺼움 및 설사가 나타나기 시작했다. 주입 후 22일째 정도에 종양 용해 증후군은 입원을 요하는 것으로 진단되었다. 상기 환자는 체질 증상의 치유를 나타냈고, CART19 주입 1개월 이내에 상기 환자는 형태학, 유동 세포 분석법, 세포유전학 분석 및 FISH 분석에 의해 혈액 및 골수로부터 순환성 CLL의 제거를 나타냈다. CT 스캔에 따르면, 도 5B 및 도 5C에 도시된 바와 같이 비정상적인 선병증의 치유가 나타났다. 완치는 초기 CART19 세포의 주입 시부터 8개월 이상 지속되었다.
CLL 표적 세포에 대한 생체 내 CART19 효과기 비율의 고려
비록 주입 이후에 이들 계산으로 T 세포의 확장을 설명할 수 없을지라도, 예비 임상적 연구에 따르면 대형 종양은 제거될 수 있으며, 2.2×107개의 CAR의 주입은 인간화된 생쥐에서 1:42의 생체 내 E:T 비율을 위해 1×109개의 세포로 구성된 종양을 소적할 수 있는 것으로 나타났다(Carpenito 등, 2009, Proc Natl Acad Sci USA 106: 3360-3365). 시간의 경과에 따른 CLL 종양 부하의 추정은 주입된 CAR+ T 세포의 개수에 기초하여 3명의 개체의 생체 내에서 달성된 종양 감소 및 추정된 CART19 E:T 비율에 의해 산정되었다. 골수, 혈액 및 이차 림프성 조직에서 CLL 부하량을 측정함으로써 종양 부하를 산정하였다. 도 10에 도시된 바와 같은 기준선 종양 부하에 따르면, 각각의 환자는 CART19 주입 이전에 1012 개의 차수로 CLL 세포(즉 1㎏의 종양 부하량)를 갖는 것으로 나타나 있다. 환자 UPN 03은 용적 CT 스캔 분석 방법에 따라 1-일째 날(즉, 화학요법 이후 및 CART19 주입 이전)에 골수에서 8.8×1011개의 CLL 세포의 추정된 기준선 종양 부하, 및 3.3 내지 5.5×1011개의 CLL 세포의 이차 림프성 조직에서의 측정된 종야의 양을 가졌다. 총 초기 종양 부하(1.3×1012 CLL 세포)의 추정치를 이용하여 1.4×107개의 CART19 세포로만 UPN 03에 주입하고 치료 이후에 어떠한 CLL 세포가 검출 불가능하였다고 가정하면, 현저한 1:93,000의 E:T 비율이 달성되었다. 유사한 산정에 의해 1:2200 및 1:1000의 효과적인 생체 내 E:T 비율이 표 3에 나타나 있는 바와 같이 UPN 01 및 UPN 02에 대해 산정되었다. 결국, 1,000배 초과의 생체 내 CART19 확장과 조합된 CART19 T 세포의 일련의 살해 기여는 CART19 세포에 의해 매개되는 강력한 항-백혈병성 효과에 기여할 가능성이 있었다.
키메릭 수용체를 발현하는 T 세포는 진전된 백혈병을 앓는 환자에서 메모리 및 강력한 항-종양 효과를 확립한다
CAR의 제한된 생체 내 발현 및 효과기 기능은 1차 생성 CAR을 검사하는 시험에서 주요 제한요소였다(Kershaw 등, 2006, Clin Cancer Res 12: 6106-6115; Lamers 등, 2006, J Clin Oncol 24: e20-e22; Till 등, 2008, Blood, 112, 2261-2271; Park 등, 2007, Mol Ther 15: 825­833; Pule 등, 2008, Nat Med 14: 1264-1270). 4-1BB 신호전달 모듈을 포함하는 CAR의 증강된 존속을 증명하는 예비 임상적 모델링(Milone 등, 2009, Mol Ther. 17: 1453-1464; Carpenito 등, 2009, Proc Natl Acad Sci USA 106: 3360-3365)에 기초하여, 렌티바이러스 벡터 기술에 의해 조작된 CAR의 2차 생성을 발현하도록 실험을 설계하였다. 이러한 CAR의 2차 생성은 만성 HIV 감염 환경에서도 안전한 것으로 밝혀졌다(Levine 등, 2006, Proc Natl Acad Sci USA 103: 17372-17377). 현재의 결과에 따르면, 이러한 2차 생성 CAR이 T 세포에서 발현되고, 중추 메모리 T 세포의 이식을 조장하도록 설계된 조건 하에서 배양되었을 경우(Rapoport 등, 2005, Nat Med 11: 1230-1237; Bondanza 등, 2006, Blood 107: 1828-1836), 이번 보고에 비해 주입 이후의 CAR T 세포의 개선된 확장이 관측되는 것으로 나타난다. CART19 세포는 CD19 특이적 세포성 메모리를 확립하였고, 생체 내에서 이전에는 달성되지 않았던 E:T 비율로 종양 세포를 살해하였다.
CART19는 4-1BB 신호전달 도메인을 혼입하기 위한 첫 번째 CAR 시험 및 렌티바이러스 벡터 기술을 이용하기 위한 첫 번째 CAR 시험이다. 현재 결과에 따르면, CD19 특이성을 나타냈던 "종양 침윤성 림프구"의 사실상(de facto) 확립과 함께 종양 부위에 대한 CAR의 효율적인 트래피킹이 증명된다. 현저한 생체 내 확장은 환자로부터 직접 회수한 CAR은 수개월 동안 생체 내에서 효과기 기능을 유지할 수 있다는 첫 번째 증명을 가능케 하였다. 이전 연구에 따르면, 1차 생성 CAR의 바이러스 특이적 T 세포 내로의 도입이 일차 T 세포에 있어서 바람직한 것으로 제시되었지만(Pule 등, 2008, Nat Med 14: 1264-1270), 최적으로 공자극된 일차 T 세포 내로 도입된 2차 생성 CAR에 대한 결과는 이러한 개념에 대한 이의를 제기한다. 임의의 특정한 이론에 결부되지 않기를 바라면서, 3명의 환자 모두에서 킬로그램 크기의 종양 부하의 용해로 임상적 효과가 충분하고 선례가 없었으며, 상기 환자 중 2명에서 잠재적으로 위험할 정도로 높은 수준의 사이토카인의 지연 방출이 동반된다는 경계의 주석도 제기되고 있다. 전형적인 사이토카인 폭풍 효과는 관측되지 않았다. 그러나 현재의 연구는 3일간에 걸쳐 CART19의 신중한 주입에 의해 이러한 가능성을 완화하도록 설계되었다.
매우 낮은 복용량의 CAR이 강력한 임상적 반응을 유도할 수 있는 것으로 밝혀졌다. 이는 CART19 벡터 설계의 안전성을 증명한 시험적인 연구였다. 이전 시험에서 검사된 것보다 수십 배 정도 낮은 복용량의 CART19 세포가 임상적인 이점을 가질 수 있다는 관측은 더욱 광범위한 규모로 CAR 요법의 추후 실행 및 CD19가 아닌 표적에 대하여 CAR을 검사하는 시험의 설계를 위한 중요한 암시를 내포할 수 있다.
현재의 연구에 따르면, 추가로 중추 메모리 및 효과기 T 세포 둘 모두에서 CART19가 발현되는 것으로 나타나 있으며, 이는 이전 연구에 비해 이들의 장기간 생존에 기여할 가능성이 있다. 임의의 특정한 이론에 결부되지 않기를 바라면서, CAR T는 대체 항원을 발현하는 표적 세포(예를 들어, CLL 종양 세포 또는 정상 B 세포)와 충돌 및 이의 후속적인 제거 시에 생체 내에서 중추 메모리 유사 상태로 분화할 수 있다. 실제로, 4-1BB의 신호전달은 TCR 신호전달의 배경에서 메모리의 발달을 조장하는 것으로 보고되어 있었다(Sabbagh 등, 2007, Trends Immunol 28: 333-339).
CART19의 연장된 증식 및 생존은 이전에 보고되지 않았던 CAR T 세포의 약물 동력학의 양태를 밝혀냈다. 혈청 및 골수에서 사이토카인 방출의 동력학은 피크 CART19 수준과 관련이 있어, CD19를 발현하는 세포성 표적이 제한적이 되는 경우에 감쇄가 개시될 가능성이 있는 것으로 관측되었다. CART19의 연장된 생존에 대한 기작은 상술한 4-1BB 도메인의 도입 또는 천연 TCR 및/또는 CAR을 통한 신호전달과 관련이 있을 수 있다. 흥미로운 가능성은 상기 연장된 생존이 골수 검체에서 확인되었던 CART19의 개체군과 관련이 있고, 이로 인해 골수에서 B 세포 전구와의 충돌에 의해 CD19 CAR이 유지될 수 있다는 가설이 제안된다는 것이다. 생체 내에서 CART19 세포의 초기 확장을 추진하는 것이 이러한 논쟁과 관련이 있습니까? 라는 질문과 관련된 드문 예외(Savoldo 등, 2011, J Clin Invest doi: 10.1172/JCI46110; Pule 등, 2008, Nat Med 14: 1264-12700)로서, 현재의 연구는 IL-2 주입이 생략되어 있는 유일한 시험이어서, CART19 세포는 항상성 사이토카인에 반응하여 확장될 가능성이 있거나, 백혈병성 표적 및/또는 정상 B 세포 상에 발현된 CD19에 반응하여 확장될 가능성이 더욱 크다. 후자의 경우, 정상 세포 상에서 CART19이 자가 재생이 일어나서, "자가 백신화/증강" 및 그에 따른 장기간 종양 면역 감시에 의한 CAR 메모리를 위한 기작을 제공할 가능성이 있음에 따라 이는 CD19 및 CD20과 같은 정상 APC 상의 표적에 대한 CAR에 있어서 매력적인 특성이 될 수 있다. CART19 항상성 기작은 세포 고유 또는 비고유의 존족 기작을 규명하기 위해 추가의 연구를 필요로 할 수 있다. 이들 결과에 앞서, 대부분의 연구원들은 면역 요법의 일시적인 형태로서 CAR 요법을 고려하였지만, 최적화된 신호전달 도메인을 갖는 CAR은 장기간 면역 감시뿐만 아니라 경감 유도 및 통합 둘 모두에서 역할을 할 수 있다.
p53 결핍 백혈병을 앓는 2명의 환자를 포함한 3명의 환자 모두에서 강력한 항-백혈병성 효과가 관측되었다. CAR을 이용한 이전 연구는 림프구 제거 화학요법으로부터 항-종양 효과를 분리하는 데 어려움이 있었다. 그러나 현재의 연구에서 생체 내 CAR 확장과 동시에 일어나고 상기 생체 내 CAR 확장에 의존할 가능성이 있는 플루다라빈-난치성 환자에서 임상적 암(Clin Cancer)의 동력학과 결부된 지연된 사이토카인 방출은 CART19가 강력한 항-종양 효과를 조정한다는 것을 보여준다. 현재의 결과는 CAR의 효과를 증가시키는데 있어 화학요법에 대한 역할을 배제하지 않는다.
기타 센터에서 계속되는 연구로부터의 결과와 벡터, 이식 유전자 및 세포의 제조과정의 면밀한 비교는 CAR T 세포의 지속적인 기능을 생체 내에서 수득하기 위해 요구되는 주요 특성을 완전하게 이해하기 위해 요구될 수 있다. 항체 요법과 달리, CAR 변형 T 세포는 생체 내에서 복제할 잠재성을 가지며, 장기간 존속은 지속된 종양 제어를 야기할 수 있다. 비-교차 저항성 살해 T 세포로 구성된 맞춤형 요법의 이용 가능성은 B 세포 악성 종양을 앓는 환자의 결과를 개선시키기 위한 잠재성을 갖는다. 예를 들어 리툭시맵 및 베비시주맵(bevicizumab)과 같은 약제를 이용한 항체 요법의 제한은 반복적인 항체 주입을 요구하는 요법으로, 불편하면서도 비용이 높다. CART19 세포의 단일 주입 이후에 T 세포 상에서 발현된 항-CD19 scFv를 이용한 장기간 항체 요법(이러한 경우 현재까지 치료를 받은 3명의 환자 중 3명 모두에 있어서 적어도 6개월 동안)의 전달(이러한 경우 현재까지 치료를 받은 3명의 환자 중 3명 모두에 있어서 적어도 6개월 동안의 전달)은 편의성 및 비용 절약을 포함한 다수의 실질적인 이점을 갖는다.
실시예 2: 만성 림프성 백혈병에서의 키메릭 항원 수용체 변형 T 세포
CD137(T 세포[4-1BB] 내의 공자극성 수용체) 및 CD3-제타(T-세포 항원 수용체의 신호-형질 도입 성분) 신호전달 도메인과 결합되고 B-세포 항원 CD19에 대해 특이성을 갖는 키메릭 항원 수용체를 발현하는 렌티바이러스 벡터를 설계하였다. 난치성 만성 림프구성 백혈병(CLL)을 앓는 환자 내로 주입된 낮은 복용량(1㎏의 체중 당 약 1.5×105개의 세포)의 자가성 키메릭 항원 수용체 변형 T 세포는 생체 내의 초기 이식 수준 정도보다 1,000배 정도 더 높은 수준까지 확장하는 것으로 관측되었다. 또한 환자는 종양 용해 증후군의 지연된 발병 및 완전한 완화를 나타내는 것으로 관측되었다.
종양 용해 증후군과는 별도로, 키메릭 항원 수용체 T 세포와 관련된 유일한 기타 3/4 등급 독성 효과가 림프구 감소증이었다. 조작된 세포는 혈액 및 골수에서 적어도 6개월 동안 높은 수준으로 존속하였으며, 계속해서 키메릭 항원 수용체를 발현하였다. 특정 면역 반응은 골수에서 검출되었으며, 이는 CD19를 발현하는 정상 B 세포 및 백혈병 세포의 손실이 동반되었다. 저감마글로불린 혈증은 예상되는 만성 독성 효과였다.
이하 이들 실험에 이용된 재료 및 방법이 개시되어 있다.
재료 및 방법
연구 과정
이전에 보고된 바와 같이 예비 임상적 안전성 검사에 적용되었던 자가 불활성화 렌티바이러스 벡터(GeMCRIS 0607-793)를 설계하였다(Milone 등, 2009, Mol Ther. 17: 1453-64). T 세포의 제조 방법은 또한 이전에 개시되어 있었다(Porter 등, 2006, Blood, 107:1325-31). 정량적 폴리머라아제 연쇄 반응(PCR) 분석은 혈액 및 골수에서 메릭 항원 수용체 T 세포를 검출하기 위해 수행되었다. 정량화의 하한치는 표준 곡선으로부터 결정되었지만, 상기 정량화의 하한치 미만의 평균 값(즉, 보고 가능하지만 정량화 할 수 없음)이 근접치인 것으로 고려된다. 상기 검정의 정량화의 하한치는 1㎍의 게놈 DNA 당 25개의 복제수이었다.
가용성 인자의 분석은 1회 사용을 위해 분취량으로 분리되어 -80℃에서 저장된 전혈 및 골수에서 유래한 혈청을 사용하여 수행되었다. 가용성 사이토카인 인자의 정량화는 루미넥스 비드 배열 기술 및 시약(라이프 테크놀로지스)을 사용하여 수행되었다.
첫 번째 아페레시스
12 내지 15ℓ의 아페레시스 과정은 아페레시스 센터에서 수행된다. 말초 혈액 단핵성 세포(PBMC)는 이러한 과정 도중에 CART-19 T 세포의 생성을 위해 수득된다. 1회의 적혈구 아페레시스(leukapheresis)로부터 적어도 50×109개의 백혈구 세포를 수확하여 CART-19 T 세포를 제조하였다. 기준선 혈액 백혈구를 또한 수득하여 냉동 보존한다.
세포 감소(cytroreductive) 화학요법
화학요법은 CART-19 세포가 상기 화학요법이 완료된 이후에 1일 내지 2일 정도 주어질 수 있도록 주입 약 5일 내지 10일 이전에 시작한다. 따라서 화학요법의 개시 타이밍은 섭생법의 기간에 의존한다. 상기 화학요법의 목적은 CART-19 세포의 이식 및 항상성 확장을 조장하기 위해 림프구 감소증을 유도하는 것이다. 화학요법은 또한 질병 종양의 부하를 감소시키기 위해 선택될 수 있다.
세포 감소 화학요법은 지역 종양학자에 의해 선택되고 투여된다. 화학요법의 선택은 환자의 잠재적인 질병 또는 이전 치료법에 의존한다. 플루다라빈(30㎎/m2/일×3일) 및 싸이클로포스파마이드(300㎎/m2/일×3일)는 입양 면역 요법을 조장하는데 있어 이들 약제의 사용에 가장 많은 경험이 있는 경우에 정선된 약제이다. CHOP, HyperCVAD, EPOCH, DHAP, ICE 또는 기타 섭생법을 포함한, FDA에 의해 승인된 약물을 이용한 몇몇 기타 허용 가능한 섭생법이 적절하다.
재등급화 평가
제한된 재등급화는 기준선 종양 부하의 측정을 제공하기 위해 화학요법의 완료 시에 수행된다. 이는 이미지화, 신체검사 및 최소 잔류 질병(MRD) 평가를 포함한다. 개체는 사전 주입 검사를 위해 신체검사, 위해 사건의 문서화, 및 혈액학, 화학 및 임신 진단(적용 가능한 경우)을 위한 채혈을 실시한다.
CART-19 T 세포의 제조
자가성 T 세포는 CD19에 대해 특이성을 갖는 세포 외 단일 체인 항체(scFv)를 발현하기 위해 조작된다. 세포 외 scFv는 악성 세포의 표면 및 정상 B 세포 상에서의 발현에 제한되는 분자인 CD19를 발현하는 세포에 대해 상기 형질 도입된 T 세포의 특이성을 재지향할 수 있다. CD19 scFv 이외에도, 상기 세포는 TCRζ 체인, 및 4-1BB 및 TCRζ 신호전달 모듈로 구성된 직렬식 신호전달 도메인 중 하나로 구성된 세포 내 신호전달 분자를 발현하도록 형질 도입된다. 상기 scFv는 생쥐 단일 클론성 항체에서 유래하며, 따라서 생쥐 서열을 포함하고, 상기 신호전달 도메인은 전적으로 고유의 인간 서열로 이루어져 있다. CART-19 T 세포는 아페레시스에 의해 T 세포를 단리함으로써 제조되며, 렌티바이러스 벡터 기술(Dropulic 등, 2006, Human Gene Therapy, 17: 577-88; Naldini 등, 1996, Science, 272: 263-7; Dull 등, 1998, J Virol. 72: 8463-71)을 이용하여 CD4 및 CD8 T 세포 내로 scFv:TCRζ:4-1BB를 도입한다. 몇몇 환자에서는 대조군 scFv:TCRζ:가 경쟁적 재증식 실험을 위해 일부 세포에 도입된다. 이들 수용체는 MHC 의존성 방식으로 항원에 결합하고, 따라서 하나의 수용체 구조체는 CD19 항원 양성 종양을 앓는 환자의 개체군을 치료하기 위해 사용될 수 있다는 점에서 "보편적"이다.
CAR 구조체는 펜실베이니아 대학교에서 개발되었고, 임상적 등급 벡터는 렌티겐 코포레이션사에서 제조되었다. CART-19 세포는 도 11에 도시된 공정에 따라 펜실베이니아 대학교의 임상적 세포 및 백신 생성 시설(Clinical Cell and Vaccine Production Facility)에서 제조된다. 세포 배양이 끝날 무렵에 상기 세포는 불용해성 냉동배지에서 냉동 보존된다. 총 2.5×109 내지 5×109개의 세포 주입액을 포함하는 CART-19 형질 도입된 T 세포의 1회 복용량은 1 또는 2 봉지 단위로 투여된다. 각각의 봉지에는 봉지 당 약 2.5 내지 5×109개의 자가성 T 세포와 함께 하기 불용해성 등급의 시약(%v/v)들, 즉 31.25%v/v의 플라즈마라이트-A, 31.25%v/v의 덱스트로오스(5%), 0.45%v/v의 NaCl, 최대 7.50%v/v의 DMSO, 1.00%v/v의 덱스트란 40 및 5.00%v/v의 인간 혈청 알부민이 함유되어 있다. 증가된 안전성을 위해, 첫 번째 복용량은 0일, 1일 및 2일째 날에 분할 투여량으로서 주어지며, 0일째 날에 세포의 약 10%, 1일째 날에 세포의 30%, 및 2일째 날에 세포의 60%이다.
저장
CART-19-형질 도입된 T 세포를 함유하는 봉지(10 내지 100㎖의 용량)는 모니터링되는 -135℃ 냉동 장치에서 혈액은행 조건으로 저장된다. 주입 봉지는 필요할 때까지 냉동 장치에서 저장된다.
세포 해동
연구용 제약분야에 상기 세포를 기록한 이후, 냉동된 세포는 드라이아이스에서 개체의 머리맡에 갖다 놓는다. 36℃ 내지 38℃로 유지되는 수욕(water bath)을 이용하여 한번에 한 봉지씩 머리맡에서 상기 세포를 해동한다. 상기 세포가 녹을 때까지만 봉지를 부드럽게 마사지 한다. 냉동된 덩어리가 용기에 남아 있어서는 안 된다. CART-19 세포 생성물이 손상되거나 봉지가 누수되는 것처럼 보이거나, 혹은 더렵혀진 것처럼 보이는 경우, 이는 주입되어서는 안 된다.
예비 마취
*T 세포 주입의 부작용으로는 일시적인 신열, 오한 및/또는 메스꺼움을 들 수 있다. 개체는 CART-19 세포의 주입 이전에 650㎎의 아세트아미노펜을 경구 투여로 예비 마취시키고, 25 내지 50㎎의 디펜하이드라민 염산염으로 경구 또는 정맥 내 투여로 예비 마취시키는 것이 추천되고 있다. 이들 약물 투여는 필요한 경우에 6시간 마다 반복될 수 있다. 비스테로이드성 항-염증 약물 투여 과정은 환자가 아세트아미노펜에 의해 누그러지지 않는 신열을 계속해서 갖는 경우에 처방될 수 있다. 환자는 생명을 위협하는 응급상황의 경우를 제외하고 임의의 시기에 하이드로코르티손, 프레드니손, 프레드니솔론(솔루-메드롤(Solu-Medrol)사) 또는 덱사메타손(데카드론(Decadron))과 같은 전신성 코르티코스테로이드를 투여 받는 않는 것이 추천되고 있으며, 이는 이것이 T 세포에 악영향을 미칠 수 있기 때문이다. 코르티코스테로이드가 신속한 주입 반응을 위해 요구되는 경우에 100㎎의 하이드로코르티손의 초기 복용량이 추천된다.
투여/주입
화학요법이 완료된 지 1 내지 2일 이후에 주입이 시작된다. 첫 번째 주입 당일에는 환자는 차액(differential)을 갖는 CBC를 가지며, CD3, CD4 및 CD8의 평가는 화학요법이 부분적으로는 림프구 감소증을 유도하기 위해 제공되기 때문에 중요하다. 임의의 특정한 이론에 결부되지 않기를 바라면서, 2.5-5×109개의 CART-19 세포의 초기 정맥 내 복용량은 이러한 프로토콜에 있어서 최적인 것으로 여겨진다. 건강한 성인에서 약 1×1012개의 T 세포가 존재하기 때문에 제안된 총 복용량은 T 세포의 총 신체 용적의 약 0.5%에 상응한다(Roederer, 1995, Nat Med. 1: 621-7; Macallan 등, 2003, Eur J Immunol. 33: 2316-26). 첫 번째 복용량은 0일째(10%), 1일째(30%) 및 2일째(60%) 날에 분할 투여량을 이용하여 투여된다. 개체는 단리된 공간에서 주입을 받는다. 세포는 본원의 다른 부분에서 개시된 바와 같이 환자의 머리맡에서 용해한다. 상기 용해된 세포는 주입 기간이 약 10 내지 15분이 되도록 허용되는 한 신속한 주입 속도로 제공된다. 상기 형질 도입된 T 세포는 3-웨이 콕마개(3-way stopcock)가 구비되고 라텍스가 없는 18게이지 Y형 혈액 세트를 통해 1분 당 약 10㎖ 내지 20㎖의 유속으로 신속한 정맥 내 주입을 통해 투여된다. 주입 기간은 약 15분이다. 한 봉지 또는 두 봉지의 CART-19 변형된 세포는 얼음 위에 놓고, 세포는 차가운 상태로 개체에 투여된다. CART-19 세포의 혼합물을 투여 받은 개체에서, 혼합을 조장하기 위해 상기 세포를 Y-어댑터(Y-adapter)를 이용하여 동시에 투여된다. 개체는 본원의 다른 부분에서 개시된 바와 같이 주입하여 예비 마취시킨다. 개체의 생명 징후가 평가되고, 산소포화도 측정법(pulse oximetry)은 복용 이전, 주입이 끝날 무렵, 및 그 이후에 1시간 동안 매 15분마다 수행되며, 이들이 안정하고 만족스러울 때까지 수행된다. 기준선 CART-19의 수준을 결정하기 위한 혈액 샘플은 주입 전 및 주입 20분 후에 수득된다. 이들 전술한 세포 감소 화학요법으로부터 독성을 경험한 환자는 이들 독성이 해결될 때까지 이들의 주입 스케줄을 연기하였다. T 세포 주입의 지연을 허용케 하는 특정 독성으로는 1) 폐: 95% 초과의 포화도 또는 진행성인 흉부 X선 상의 방사선학적 이상의 존재 유지하기 위해 보충 산소에 대한 요건; 2) 심장: 의학적인 관리에 의해 제어되지 않는 새로운 심장성 부정맥; 3) 혈압증진 지지체(pressor support)가 요구되는 저혈압; 및 4) 활성 감염: T 세포의 주입 48시간 이내의 박테리아, 진균 또는 바이러스용 양성 혈액 배양을 들 수 있다. 칼륨 및 요산용 혈청 샘플은 첫 번째 주입 이전에 수집하고, 또한 후속적인 각각의 주입 2시간 후에 수집한다.
이식 및 존속을 평가하기 위한 주입 후의 실험실
개체는 초기 CART-19 세포의 주입 후 4일째 및 10일재 날에 내원하여 혈청 사이토카인 수준을 위해 채혈을 하였고, CART-19 세포의 부재를 평가하기 위해 CART-19 PCR을 수행하였다. 개체는 3주 동안 1주에 1회씩 내원하여 신체검사, 위해 사건의 문서화, 및 혈액학, 화학, CART-19 세포의 이식 및 존속 및 연구 실험을 위한 채혈을 실시한다.
두 번째 주입
임의의 특정한 이론에 결부되지 않기를 바라면서, 환자가 첫 번째 복용량에 대해 적절한 내성을 나타내고 충분한 CART-19 세포가 제조되었다면 CART-19 세포의 두 번째 복용량이 11일째 날에 환자에 제공될 수 있는 것으로 여겨진다. 복용량은 총 2 내지 5×109개의 세포이다. 칼륨 및 요산용 혈청 샘플은 상기 주입 2시간 후에 수집될 수 있다.
두 번째 아페레시스
2ℓ의 아페레시스 과정은 아페레시스 센터에서 수행된다. PBMC는 연구용으로 수득되고, 냉동 보존된다. 개체는 신체검사, 위해 사건의 문서화, 및 혈액학, 화학, CART-19 세포의 이식 및 존속 및 연구 실험을 위한 채혈을 실시한다. 또한 종양 부하의 측정을 제공하기 위해 재등급화가 수행된다. 재등급화 검사는 질병 유형에 의해 결정되며, 이미지화, MRD 평가, 골수 흡인물 및 생검 및/또는 림프절 생검을 포함한다.
주입 2 내지 6개월 후의 월별 평가
개체는 CART-19 세포의 주입 후 2 내지 6개월 기간 동안에 매월 내원한다. 이들 연구 방문에서 개체는 병용 약물치료, 신체검사, 위해 사건의 문서화, 및 혈액학, 화학, CART-19 세포의 이식 및 존속 및 연구 실험을 위한 채혈을 실시한다. HIV DNA 검정은 검출 가능한 RCL의 존재를 제외시키기 위해 CART-19 세포의 주입 후 2 내지 6개월째 날에 수행된다.
주입 후 최대 2년간 분기 평가
*개체는 주입 후 2년이 될 때까지 분기별로 평가를 받는다. 이들 연구 방문에서 개체는 병용 약물치료, 신체검사, 위해 사건의 문서화, 및 혈액학, 화학, CART-19 세포의 이식 및 존속 및 연구 실험을 위한 수혈을 경험한다. HIV DNA 검정은 검출 가능한 RCL의 존재를 제외시키기 위해 CART-19 세포의 주입 후 3개월 및 6개월째 날에 수행된다.
이하 실험 결과가 개시되어 있다.
환자 이력
1996년에 환자는 단계 1의 CLL의 진단을 받았다. 그는 먼저 진행성 백혈구 증가증 및 선병증에 대해 관측한지 6년 이후에 치료를 필요로 하였다. 2002년에 그는 플루다라빈에 더해서 2회의 리툭시맵으로 치료를 받았지만, 이러한 치료는 혈액 개수의 정상화 및 선병증의 부분적인 치유를 초래하였다. 2006년에 그는 다시 혈액 개수의 정상화 및 선병증의 부분적인 퇴화와 함께 질병의 진행으로 인해 4회의 리툭시맵 및 플루다라빈을 투여 받았다. 이러한 반응은 20개월간 진행이 없는 기간 및 2년간 치료가 없는 기간이 이어졌다. 2009년 2월에 그는 신속 진행성 백혈구 증가증 및 재발성 선병증을 나타냈다. 그의 골수는 CLL에 의해 광범위하게 침윤되어 있었다. 세포유전학 분석에 따르면, 15개의 세포 중 3개의 세포가 염색체 17p의 결실을 포함하는 것으로 나타났고, 형광 원위치 혼성화(FISH) 검사에 따르면 200개의 세포 중 170개의 세포가 염색체 17p 상의 TP53을 포함한 결실을 가졌다. 그는 (심각한 알레르기 반응으로 인해) 리툭시맵 없이 1회 및 부가적인 3회의 벤다무스틴의 투여에 대해 벤다무스틴과 함께 리툭시맵을 투여 받았다. 이러한 치료는 림프구 증가증에서 일시적인 개선만을 초래하였다. 진행성 선병증은 요법 이후에 컴퓨터 단층 촬영(CT)에 의해 문서화되었다.
자가성 T 세포는 적혈구 아페레시스에 의해 수집되어, 냉동 보존되었다. 이어 상기 환자는 개선된 조혈 및 선병증의 부분적인 치유로 인해 11주 동안 알렘투주맙(항-CD52/성숙한 림프구/세포 표면 항원)을 투여 받았다. 다음 6개월에 걸쳐 그는 지속적이고 광범위한 골수 연루와 함께 안정한 질병을 나타냈고, 1 내지 3㎝ 크기의 다중 림프절과 함께 확산성 선병증을 나타냈다. 2010년 7월에 상기 환자는 키메릭 항원 수용체 변형 T 세포의 단계 1 임상 시험에 등록하였다.
세포 주입
상기 환자로부터의 자가성 T 세포를 해동하고, CD19 특이적 키메릭 항원 수용체를 발현하기 위해 렌티바이러스로 형질 도입하였으며(도 12A), 티바이러스 벡터 및 관련된 서열을 위한 서열 식별자는 표 5에 나타나 있다. 세포 주입 4일 전에 상기 환자는 리툭시맵의 투여 없이 림프구의 고갈을 위해 설계된 화학요법(1㎡의 체표면 구역 당 4㎎의 복용량의 펜토스타틴 및 1㎡의 체표면 구역 당 600㎎의 복용량의 싸이클로포스파마이드)을 투여 받았다(Lamanna 등, 2006, J Clin Oncol. 24: 1575-81). 화학요법 3일 후지만 세포 주입 이전에 골수는 CLL에 의한 약 40%의 연루로 과세포성이었다. 백혈병 세포는 카파 경쇄 및 CD5, CD19, CD20, 및 CD23을 발현하였다. 세포유전학 분석에 따르면, 2개의 개별적인 클론이 나타났으며, 둘 모두는 염색체 17p의 손실을 초래하고, TP53 좌위(locus)인 (46,XY,del(17)(p12)[5]/46,XY,der(17)t(17;21)(q10;q10)[5]/46,XY[14])를 초래하였다. 화학요법 4일 후, 상기 환자는 3회 연속 정맥 내 1일 주입(1일째 날에 10%, 2일째 날에 30%, 및 3일째 날에 60%)으로 분할된 총 1.42×107개의 형질 도입된 세포(1㎏ 당 1.46×105개의 세포)를 얻기 위해 총 3×108개의 T 세포를 투여 받았으며, 상기 세포 중 5%는 형질 도입되었다. 주입 이후에는 어떠한 사이토카인도 투여되지 않았다. 주입에 의한 독성 효과는 현저하지 않았다.
pELPS-CD19-BBz 전달 벡터에 대한 서열 식별자
서열번호 동일성
서열번호 1 pELPS-CD19-BBZ 전달 벡터(핵산 서열)
서열번호 2 RSV의 U3(핵산 서열)
서열번호 3 HIV R 반복서열(핵산 서열)
서열번호 4 HIV U5 반복서열(핵산 서열)
서열번호 5 부분 Gag/Pol(핵산 서열)
서열번호 6 cPPT(핵산 서열)
서열번호 7 EF1α 프로모터(핵산 서열)
서열번호 8 CD19-BB제타 CAR(핵산 서열)
서열번호 9 Hu 우드처크 PRE(핵산 서열)
서열번호 10 R 반복서열(핵산 서열)
서열번호 11 U5 반복서열(핵산 서열)
서열번호 12 CD19-BB제타 CAR(아미노산 서열)
서열번호 13 CD8 리더(핵산 서열)
서열번호 14 항-CD19scFv(핵산 서열)
서열번호 15 CD8 힌지(핵산 서열)
서열번호 16 CD8 횡단막(핵산 서열)
서열번호 17 4-1BB(핵산 서열)
서열번호 18 CD3제타(핵산 서열)
서열번호 19 CD8 리더(아미노산 서열)
서열번호 20 항-CD19scFv(아미노산 서열)
서열번호 21 CD8 힌지(아미노산 서열)
서열번호 22 CD8 횡단막(아미노산 서열)
서열번호 23 4-1BB(아미노산 서열)
서열번호 24 CD3제타(아미노산 서열)
임상적 반응 및 평가첫 번째 주입 후 14일째, 환자는 2등급의 피로와 연관된 오한 및 약간의 신열이 나타나기 시작했다. 다음 5일에 걸쳐 오한이 증대했고, 그의 체온은 39.2℃(102.5℉)까지 상승하였으며, 오한, 발한, 식욕감퇴, 메스꺼움 및 설사가 발병하였다. 그는 호흡기 또는 심장 증후군을 나타내지 않았다. 신열로 인해 흉부 방사선 촬영 및 혈액, 소변 및 대변 배양을 수행하였으며, 모두 음성이거나 정상이었다. 종양 용해 증후군은 주입 후 22일째 날에 진단 받았다(도 12B). 요산 수준은 1㎗ 당 10.6㎎(1ℓ 당 630.5μmol)이고, 인 수준은 1㎗ 당 4.7㎎(1ℓ 당 1.5mmol)이고(정상 범위는 1ℓ 당 2.4 내지 4.7㎎[1ℓ 당 0.8 내지 1.5mmol]임), 젖산 탈수소효소 수준은 1ℓ 당 1,130U이다(정상 범위는 98 내지 192U임). 급성 신장 손상의 흔적은 없었으며, 이때 크레아틴 수준은 1㎗ 당 2.60㎎(1ℓ 당 229.8μmol)이다(기준선 수준은 1㎗ 당 1.0㎎ 미만[1ℓ 당 88.4μmol 미만]임). 상기 환자는 입원하여, 유체 소생법 및 라스부리카제로 치료를 받았다. 상기 요산 수준은 24시간 이내에 정상 수준으로 되돌아 왔으며, 상기 크레아틴 수준은 3일 이내에 정상 수준으로 되돌아 왔고, 그는 입원 4일째 날에 퇴원하였다. 상기 젖산 탈수소효소 수준은 점진적으로 감소하여 다음 1개월에 걸쳐 정상이 되었다.CART19-세포의 주입 후 28일째 날 정도에, 선병증은 더 이상 촉진성이 아니었으며, 23일째 날에 골수에서 CLL의 흔적이 없었다(도 12C). 핵형은 15개의 세포(46,XY) 중 15개 세포에서 현재 정상이며, FISH 검사는 검증된 200개의 세포 중 198개의 세포에서 TP53의 결실에 대해 음성이었지만, 이는 음성 대조군에서 정상적인 제한치 내에 있는 것으로 고려된다. 유동 세포 분석에 따르면, 어떠한 잔류 CLL도 나타나지 않았으며, B 세포는 검출 불가능하였다(CD5 + CD10 - CD19 + CD23 + 림프구 게이트 내의 세포의 1% 미만). 주입 후 31일째 날에 수행된 CT 스캐닝에 따르면, 선병증의 치유가 나타났다(도 12D).CART19-세포의 주입 3개월 및 6개월 이후에 신체검사는 촉진성 선병증 없이 평범한 상태가 유지되었으며, CART19-세포의 주입 3개월째 날에 수행된 CT 스캐닝에 따르면 지속된 완화가 나타났다(도 12D). 3개월 및 6개월 동안의 골수 연구에 따르면, 형태학적 분석, 핵형 분석(46,XY) 또는 유동 세포 분석에 의한 CLL의 흔적은 없는 것으로 나타났으며, 정상 B 세포의 결핍도 또한 계속되었다. 완화는 10개월 동안 지속되었다.
CART19 세포의 독성
세포 주입은 급성 독성 효과를 나타나지 않았다. 언급된 유일한 심각한(3 또는 4등급) 위해 사건은 상술한 3등급의 종양 용해 증후군이었다. 상기 환자는 기준선에서 1등급의 림프구 감소증 및 2 또는 3등급의 림프구 감소증을 나타냈으며, 이는 요법 이후 첫째 날에 시작하여 적어도 10개월째 날까지 계속되었다. 1㎟ 당 140개의 세포의 절대 림프구 개수를 갖는 4등급의 림프구 감소증이 19일째 날에 기록되었으며, 22일째 날로부터 적어도 10개월째 날까지 상기 절대 림프구 개수는 1㎟ 당 390 내지 780개의 세포 범위였다(2 또는 3등급의 림프구 감소증). 상기 환자는 19일째 날로부터 26일째 날까지 일시적인 1등급의 혈소판 감소증(혈소판 개수: ㎟ 당 98,000 내지 131,000개의 세포)을 나타냈으며, 17일째 날로부터 33일째 날까지 1 또는 2등급의 호중구 감소증(절대 호중구 개수: ㎟ 당 1,090 내지 1,630개의 세포)을 나타냈다. 상기 연구 치료와 관련이 있을 가능성이 있는 기타 징후 및 증상은 아미노전달효소 및 알카라인 포스파타제 수준에서 1 및 2등급 증가를 포함하며, 이는 첫 번째 주입 17일째 발병하여 33일째 정도에 치유되었다. 1 및 2등급의 신체 증상은 신열, 오한, 발한, 근육통, 투통 및 피로로 이루어져 있다. 2등급의 저감마글로불린 혈증은 정맥 내 면역 글로불린의 주입으로 치료되었다.
혈청 및 골수 사이토카인의 분석
환자의 임상적 반응은 기준선 수준에 비해 160배 높은 인터페론-γ, 인터페론-γ 반응성 케모카인인 CXCL9 및 CXCL10, 및 인터류킨-6의 수준과 함께 염증성 사이토카인의 수준에서의 지연된 증가가 동반되었다. 사이토카인 수준에서의 일시적인 증가는 임상적 증상에 필적하였으며, 첫 번째 CART19-세포의 주입 17 내지 23일째 날에 정점에 도달했다.
일련의 골수 흡인물로부터의 상층액은 사이토카인에 대해 측정하였으며, 면역 활성화의 흔적이 나타났다(도 13E). 인터페론-γ, CXCL9, 인터류킨-6 및 가용성 인터류킨-2 수용체의 유의한 증가는 T-세포 주입 전 당일 날에 기준선 수준과 비교해서 현저하였지만, 상기 피크 값은 첫 번째 CART19-세포 주입 후 23일째 날에 정점에 도달했다. 골수 사이토카인의 증가는 골수로부터 백혈병 세포의 제거와 일치하였다. 혈청 및 골수의 종양 괴사 인자 α는 변함없이 유지되었다.
키메릭 항원 수용체 T 세포의 증식 및 존속
첫 번째 주입 이후 첫째 날에 시작하여 실시간 PCR을 통해 항-CD19 키메릭 항원 수용체(CAR19)를 암호화하는 DNA를 검출하였다(도 14A). 상기 세포의 생체 내 3의 로그 이상의 확장은 주입 21일째 날에 현저하였다. 피크 수준에서 혈액 내의 CART19 세포는 순환성 림프구의 20% 이상을 차지하고 있지만, 이들 피크 수준은 체질 증상의 발생, 종양 용해 증후군(도 12B), 및 혈청 사이토카인 수준에서의 증가(도 13A 내지 도 13D)와 일치하였다. CART19 세포는 상기 값이 피크 수준에서 10의 인수 정도 감소하였을지라도 주입 6개월 이후에도 높은 수준으로 검출 가능한 상태로 유지되었다. 혈액 내의 키메릭 항원 수용체 T 세포의 배가 시간은 약 1.2일이며, 제거 반감기는 31일이었다.
골수 내의 키메릭 항원 수용체 T 세포
CART19 세포는 첫 번째 주입 이후 23일째 날에 시작하여 골수 검체에서 확인되었으며(도 14B), 적어도 6개월 동안 존속하였으며, 감쇄 반감기는 34일이었다. 골수에서 CART19 세포의 가장 높은 수준은 첫 번째 주입 23일 이후의 첫 번째 평가에서 확인되었으며, 사이토카인-분비 프로파일에 의해 표시된 바와 같이 면역 반응의 유도와 일치하였다(도 13E). 골수 흡인물의 유동 세포 분석에 따르면, 주입 1개월 이후에 존재하지 않았던 기준선 및 주입 3개월 이후에 수득된 샘플 내의 CD5+CD19+ 세포의 클론성 확장이 나타났다(데이터 미 도시). 정상 B 세포는 치료 이후에는 검출되지 않았다(도 14C).
유전적으로 변형된 자가성 CART19 세포에 의한 치료
CD3-제타 및 CD137(4-1BB) 신호전달 도메인에 연결된 항-CD19를 발현하는 렌티바이러스 벡터에 의한 형질 도입을 통해 CD19를 표적화하도록 유전적으로 변형된 자가성 T 세포에 의한 치료 3주 후에 종양 용해 증후군의 지연된 발현 및 완전한 반응이 본원에 개시되어 있다. 유전적으로 변형된 세포는 주입 이후 적어도 6개월 동안 골수에서 높은 수준으로 존재하였다. 골수에서 CD19 특이적 면역 반응의 발생은 사이토카인의 일시적인 방출 및 백혈병 세포의 제거에 의해 증명되었으며, 이는 키메릭 항원 수용체 T 세포의 피크 침윤과 일치하였다. 세포성 면역 치료요법 이후에 종양 용해 증후군의 발현은 이전에는 보고되지 않았다(Baeksgaard 등, 2003, Cancer Chemother Pharacol. 51: 187-92).
표적 특정 종양 항원에 대한 자가성 T 세포의 유전자 조작은 암 요법에 있어서 매력적인 전략이다(Sadelain 등, 2009, Curr Opin Immunol. 21: 215-23; Jena 등, 2010, Blood 116: 1035-44). 본원에 개시된 접근법의 중요한 특징은 메릭 항원 수용체 T 세포가 HLA 무제한 방식으로 종양 표적을 인식할 수 있어, "맞춤형" 키메릭 항원 수용체가 매우 다양한 조직학적 특징을 갖는 종양에 대해 구성될 수 있다는 것이다. HIV 유래 렌티바이러스 벡터는 레트로바이러스성 벡터의 사용에 대해 몇몇 이점을 가질 수 있는 접근법인 암 요법용으로 사용되었다(June 등, 2009, Nat Rev Immunol. 9: 704-16).
키메릭 항원 수용체 T 세포에 대한 이전 시험에서, 객관적인 종양 반응은 경미하였으며, 변형된 세포의 생체 내 증식은 지속되지 않았다(Kershaw 등, 2006, Clin Cancer Res. 12: 6106-15; Till 등, 2008, Blood 112: 2261-71; Pule 등, 2008, Nat Med. 14: 1264-70). 브렌헨스(Brentjens) 및 동료들은 CD28 신호전달 도메인에 연결된 CD19-표적화된 키메릭 항원 수용체에 대한 임상 시험의 예비 결과를 보고하고, 진전된 CLL을 앓는 3명의 환자 중 2명에서 일시적인 종양 반응을 발견하였지만(Brentjens 등, 2010, Mol Ther. 18: 666-8), 키메릭 항원 수용체는 순환으로부터 신속하게 사라졌다.
매우 낮은 복용량으로 주입된 키메릭 항원 수용체 T 세포는 임상적으로 명백한 항-종양 반응을 초래할 수 있다는 것이 예상치 못한 것이었다. 실제로, 1㎏ 당 주입된 1.5×105개의 키메릭 항원 수용체 T 세포의 복용량은 키메릭 항원 수용체 또는 유전자 도입 T-세포 수용체를 발현하도록 변형된 T 세포에 대한 이전 연구에서 사용된 복용량보다 수십 배 낮았다(Kershaw 등, 2006, Clin Cancer Res. 12: 6106-15; Brentjens 등, 2010, Mol Ther. 18: 666-8; Morgan 등, 2010, Mol Ther. 18: 843-51; Johnson 등, 2009, Blood, 114: 535-46). 임의의 특정한 이론에 대한 결부 없이, 화학요법은 키메릭 항원 수용체의 효과를 증강시킬 수 있는 것으로 사료된다.
4-1BB 신호전달 도메인의 포함함으로써 환자의 혈액 및 골수에서 CART19세포가 장기간 존속하게 된다. 정상 B 세포의 CART19-세포 매개 제거는 쥐 서열을 포함하는 단일쇄 Fv 항체 단편을 발현하는 CART19 세포가 거부 반응을 일으키지 않기 때문에 키메릭 항원 수용체에 대한 면역학적 내성의 유도를 조장하였을 가능성이 있다. 이러한 환자 검출 가능한 CD19 양성 백혈병 세포의 부재라고 가정하면서 임의의 특정한 이론에 결부되지 않는 경우, 상기 키메릭 항원 수용체 T 세포의 항상성은 상기 세포들이 골수에서 나타나기 시작함에 따라 초기 B-세포 전구체에 의해 전달된 자극으로부터 적어도 부분적으로 달성되었다는 것이 가능하다. 본 발명은 "메모리" 키메릭 항원 수용체 T 세포를 유지하기 위해 새로운 기작이 존재할 수 있다는 발견에 관한 것이다.
정상 및 악성 B 세포에 제한된 발현과 함께 CD19가 매력적인 종양 표적일지라도, 키메릭 항원 수용체 T 세포의 존속이 장기간 B-세포 결핍을 조정할 수 있다는 관심이 있다. 사실상, 환자에서는 주입 후 6개월 동안 혈액 및 골수에서 B 세포가 존재하지 않았다. 이러한 환자는 재발성 감염을 나타내지 않았다. 리툭시맵을 이용하여 CD20을 통해 B 세포를 표적화하는 것은 B-세포 신생물을 갖는 환자에 있어서는 효과적인 상대적으로 안전한 전략이며, 장기간 B-세포 림프구 감소증은 관리 가능하다(Molina, 2008, Ann Rev Med, 59: 237-50]). 리툭시맵으로 치료 받은 환자는 요법의 중단 이후에 수개월 이내에 B 세포의 재발을 나타내는 것으로 보고되어 있다. 항-B-세포 T 세포가 생체 내에서 존속하는 환자에서 이 같은 회복이 일어나는 지에 대해서는 아직 명확하지 않다.
TP53 결실과 함께 CLL을 앓는 환자는 표준 요법 이후에 잠시 동안 완화된다(Dohner 등, 1995, Blood, 85: 1580-9). 동종성 골수 이식은 진전된 CLL을 앓는 환자에서 장기간의 완화를 유도했던 유리한 접근법이었다(Gribben 등, 2011, Biol Blood Marrow Transplant, 17: Suppl: S63-S70). 그러나 상기 얻어진 강력한 이식편 대 종양 효과는 종종 노인 환자, 즉 CLL에 전형적으로 감염된 환자에서 특히 심각한 고빈도의 만성 이식편 대 숙주 질병으로 인한 상당한 이병률과 연관이 있다(Gribben 등, 2011, Biol Blood Marrow Transplant, 17: Suppl: S63-S70; Sorror 등, 2008, Blood, 111: 446-52). 본원에서 제시된 데이터에 따르면, 유전적으로 변형된 자가성 T 세포는 이러한 제한을 우회할 수 있는 것으로 제안된다.
활발한 생체 내 키메릭 항원 수용체 T-세포 확장 및 현저한 항백혈병 활성과 조합된 종양 용해 증후군 및 사이토카인 분비의 지연된 개시는 CART19 세포의 실질적이고 지속된 효과기 기능을 암시한다. 본원에서 개시된 실험은 이러한 요법의 유효성을 강조하며, 강력한 신호전달 도메인에 연결된 키메릭 항원 수용체의 형질 도입을 통해 CD19(및 기타 표적)를 표적화하도록 유전적으로 변형된 자가성 T 세포의 상세한 연구를 위한 지원을 제공한다. 항체 매개 요법과는 달리, 키메릭 항원 수용체 변형 T 세포는 생체 내에서 복제할 가능성을 가지며, 장기간 존속은 지속된 종양 제어를 초래할 수 있다. 진전된 CLL을 앓는 2명의 기타 환자는 또한 이러한 프로토콜에 따라 CART19 주입액을 투여 받았으며, 3명 모두는 종양 반응을 나타냈다. 이들 발견은 B-세포 신생물에 대한 CD19-재지향된 T 세포에 대한 계속된 연구를 보장한다.
본원에 인용된 각각 및 모든 특허, 특허 출원 및 공개공보의 개시내용은 본원에서 그 전체가 참고로 인용된다. 본 발명이 특정 실시형태를 참고하여 개시되었을지라도, 본 발명의 기타 실시형태 및 변형형태는 본 발명의 진의 및 범주에서 벗어나지 않는 한 당해 기술분야의 기타 숙련자에 의해 고안될 수 있다는 것이 자명하다. 첨부된 특허청구범위는 이 같은 실시형태 및 등가의 변형형태 모두를 포함하는 것으로 이해되도록 의도된다.
SEQUENCE LISTING <110> The Trustees of the University of Pennsylvania June, Carl H Porter, David L Kalos, Michael Levine, Bruce L <120> USE OF CHIMERIC ANTIGEN RECEPTOR-MODIFIED T CELLS TO TREAT CANCER <130> 46483-6001-00-WO.601218 <150> 61/421,470 <151> 2010-12-09 <150> 61/502,649 <151> 2010-06-29 <160> 27 <170> PatentIn version 3.5 <210> 1 <211> 9174 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Chemically Synthesized <400> 1 gcgcgctcac tggccgtcgt tttacaacgt cgtgactggg aaaaccctgg cgttacccaa 60 cttaatcgcc ttgcagcaca tccccctttc gccagctggc gtaatagcga agaggcccgc 120 accgatcgcc cttcccaaca gttgcgcagc ctgaatggcg aatgggacgc gccctgtagc 180 ggcgcattaa gcgcggcggg tgtggtggtt acgcgcagcg tgaccgctac acttgccagc 240 gccctagcgc ccgctccttt cgctttcttc ccttcctttc tcgccacgtt cgccggcttt 300 ccccgtcaag ctctaaatcg ggggctccct ttagggttcc gatttagtgc tttacggcac 360 ctcgacccca aaaaacttga ttagggtgat ggttcacgta gtgggccatc gccctgatag 420 acggtttttc gccctttgac gttggagtcc acgttcttta atagtggact cttgttccaa 480 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tggtaactag agatccctca gaccctttta 60 gtcagtgtgg aaaatctcta gcag 84 <210> 12 <211> 486 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Chemically Synthesized <400> 12 Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu 1 5 10 15 His Ala Ala Arg Pro Asp Ile Gln Met Thr Gln Thr Thr Ser Ser Leu 20 25 30 Ser Ala Ser Leu Gly Asp Arg Val Thr Ile Ser Cys Arg Ala Ser Gln 35 40 45 Asp Ile Ser Lys Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Asp Gly Thr 50 55 60 Val Lys Leu Leu Ile Tyr His Thr Ser Arg Leu His Ser Gly Val Pro 65 70 75 80 Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Ser Leu Thr Ile 85 90 95 Ser Asn Leu Glu Gln Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Phe Cys Gln Gln Gly 100 105 110 Asn Thr Leu Pro Tyr Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Thr 115 120 125 Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu 130 135 140 Val Lys Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Ala Pro Ser Gln Ser 145 150 155 160 Leu Ser Val Thr Cys Thr Val Ser Gly Val Ser Leu Pro Asp Tyr Gly 165 170 175 Val Ser 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Asn Ser Lys Ser Gln Val Phe Leu Lys Met Asn Ser Leu Gln 195 200 205 Thr Asp Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys Ala Lys His Tyr Tyr Tyr Gly 210 215 220 Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Ser Val Thr Val 225 230 235 240 Ser Ser <210> 21 <211> 47 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Chemically Synthesized <400> 21 Thr Thr Thr Pro Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala 1 5 10 15 Ser Gln Pro Leu Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly 20 25 30 Gly Ala Val His Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr 35 40 45 <210> 22 <211> 22 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Chemically Synthesized <400> 22 Ile Trp Ala Pro Leu Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu 1 5 10 15 Val Ile Thr Leu Tyr Cys 20 <210> 23 <211> 42 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Chemically Synthesized <400> 23 Lys Arg Gly Arg Lys Lys Leu Leu Tyr Ile Phe Lys Gln Pro Phe Met 1 5 10 15 Arg Pro Val Gln Thr Thr Gln Glu Glu Asp Gly Cys Ser Cys Arg Phe 20 25 30 Pro Glu Glu Glu Glu Gly Gly Cys Glu Leu 35 40 <210> 24 <211> 112 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Chemically Synthesized <400> 24 Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Lys Gln Gly 1 5 10 15 Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr 20 25 30 Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys 35 40 45 Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys 50 55 60 Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg 65 70 75 80 Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala 85 90 95 Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg 100 105 110 <210> 25 <211> 22 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Chemically Synthesized <400> 25 gaaagctgac tgcccctatt tg 22 <210> 26 <211> 22 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Chemically Synthesized <400> 26 gagaggaagt gctgggaaca at 22 <210> 27 <211> 15 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Chemically Synthesized <400> 27 ctccccagtc tcttt 15

Claims (1)

  1. 키메릭 항원 수용체(chimeric antigen receptor, CAR)를 암호화하는 핵산 서열을 포함하는 인간 T 세포의 용도로서,
    상기 CAR은 서열 번호: 20의 아미노산 서열을 포함하는 CD19 항원 결합 도메인, CD8α 힌지 도메인, CD8α 막통과 도메인, 4-1BB 공자극성 신호 전달 영역, 및 CD3 제타 신호 전달 도메인을 포함하고, 여기에서 상기 T 세포는 CD19+ 혈액학적 암(hematological cancer)이 있는 인간 유래인 것을 특징으로 하는,
    인간 T 세포의 용도.
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Families Citing this family (1089)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CA2516320C (en) 2003-02-18 2015-05-26 Kevin Slawin Induced activation in dendritic cells
US20130266551A1 (en) * 2003-11-05 2013-10-10 St. Jude Children's Research Hospital, Inc. Chimeric receptors with 4-1bb stimulatory signaling domain
US7435596B2 (en) 2004-11-04 2008-10-14 St. Jude Children's Research Hospital, Inc. Modified cell line and method for expansion of NK cell
CA2700573C (en) 2006-09-26 2016-11-22 Cedars-Sinai Medical Center Cancer stem cell antigen vaccines and methods
WO2008039969A2 (en) 2006-09-28 2008-04-03 Cedars-Sinai Medical Center Cancer vaccines and vaccination methods
DK2279253T3 (en) 2008-04-09 2017-02-13 Maxcyte Inc Construction and application of therapeutic compositions of freshly isolated cells
EP2328923B1 (en) 2008-09-02 2016-01-13 Cedars-Sinai Medical Center Cd133 epitopes
US8415150B2 (en) * 2009-02-24 2013-04-09 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Methods for treating progressive multifocal leukoencephalopathy (PML)
US10426740B1 (en) 2010-08-18 2019-10-01 Avm Biotechnology, Llc Compositions and methods to inhibit stem cell and progenitor cell binding to lymphoid tissue and for regenerating germinal centers in lymphatic tissues
EP2630158B1 (en) 2010-10-22 2018-12-12 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Discovery of regulatory t cells programmed to suppress an immune response
SG10201510092QA (en) * 2010-12-09 2016-01-28 Univ Pennsylvania Use of chimeric antigen receptor-modified t cells to treat cancer
CN103748236B (zh) 2011-04-15 2018-12-25 约翰·霍普金斯大学 安全测序系统
ES2654060T3 (es) 2011-10-20 2018-02-12 The U.S.A. As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Receptores de antígenos quiméricos anti-CD22
US9272002B2 (en) * 2011-10-28 2016-03-01 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Fully human, anti-mesothelin specific chimeric immune receptor for redirected mesothelin-expressing cell targeting
ES2959443T3 (es) * 2012-02-22 2024-02-26 Univ Pennsylvania Uso del dominio de señalización de CD2 en receptores de antígenos quiméricos de segunda generación
MX2014010183A (es) 2012-02-22 2015-03-20 Univ Pennsylvania Composiciones y metodos para generar una poblacion persistente de celulas t utiles para el tratamiento de cancer.
SI2817338T1 (sl) 2012-02-24 2017-11-30 Abbvie Stemcentrx Llc Modulatorji DLL3 in postopki uporabe
AU2013235726B2 (en) 2012-03-23 2017-04-20 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Anti-mesothelin chimeric antigen receptors
EA201990959A1 (ru) 2012-04-11 2020-02-10 Дзе Юнайтед Стейтс Оф Америка, Эз Репрезентед Бай Дзе Секретари, Департмент Оф Хелс Энд Хьюман Сёрвисез Химерные антигенные рецепторы, нацеленные на антиген созревания b-клеток
KR102437522B1 (ko) 2012-05-25 2022-08-26 셀렉티스 면역요법을 위한 동종이형 및 면역억제제 저항성인 ｔ 세포의 조작 방법
AU2013289971A1 (en) 2012-07-13 2015-01-22 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Enhancing activity of CAR T cells by co-introducing a bispecific antibody
WO2014012001A2 (en) * 2012-07-13 2014-01-16 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Use of cart19 to deplete normal b cells to induce tolerance
MX2015000428A (es) * 2012-07-13 2015-03-12 Univ Pennsylvania Composiciones y metodos para regular celulas t car.
KR20240000614A (ko) * 2012-07-13 2024-01-02 더 트러스티스 오브 더 유니버시티 오브 펜실베니아 형질도입된 ｔ 세포의 투여 적합성을 평가하는 방법
EP2872617A4 (en) * 2012-07-13 2015-12-09 Univ Pennsylvania EXTENSION OF EPITOPES IN RELATION TO T CAR LYMPHOCYTES
SI4019041T1 (sl) 2012-07-13 2023-04-28 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Obladovanje toksičnosti za protitumorsko delovanje CARS
WO2014031687A1 (en) * 2012-08-20 2014-02-27 Jensen, Michael Method and compositions for cellular immunotherapy
BR112015004522A2 (pt) * 2012-09-04 2017-11-21 Cellectis receptor de antígeno quimérico multicadeia e usos destes
JP6307085B2 (ja) * 2012-09-27 2018-04-04 ザ・ユナイテッド・ステイツ・オブ・アメリカ・アズ・リプリゼンテッド・バイ・ザ・セクレタリー・デパートメント・オブ・ヘルス・アンド・ヒューマン・サービシーズＴｈｅ Ｕｎｉｔｅｄ Ｓｔａｔｅｓ ｏｆ Ａｍｅｒｉｃａ，ａｓ ｒｅｐｒｅｓｅｎｔｅｄ ｂｙ ｔｈｅ Ｓｅｃｒｅｔａｒｙ，Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ ａｎｄ Ｈｕｍａｎ Ｓｅｒｖｉｃｅｓ メソテリン抗体および強力な抗腫瘍活性を惹起するための方法
US10548957B2 (en) 2012-09-28 2020-02-04 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Targeted expansion of Qa-1-peptide-specific regulatory CD8 T cells to ameliorate arthritis
EP2904106A4 (en) * 2012-10-01 2016-05-11 Univ Pennsylvania COMPOSITIONS AND METHODS FOR TARGETING STROMAL CELLS FOR THE TREATMENT OF CANCER
WO2014055657A1 (en) 2012-10-05 2014-04-10 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Use of a trans-signaling approach in chimeric antigen receptors
WO2014055771A1 (en) * 2012-10-05 2014-04-10 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Human alpha-folate receptor chimeric antigen receptor
US10072078B2 (en) 2012-10-24 2018-09-11 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services M971 chimeric antigen receptors
AU2013338393B2 (en) 2012-10-29 2017-05-11 The Johns Hopkins University Papanicolaou test for ovarian and endometrial cancers
AU2015210373B2 (en) * 2012-12-20 2017-04-06 Celgene Corporation Chimeric antigen receptors
AU2013204922B2 (en) * 2012-12-20 2015-05-14 Celgene Corporation Chimeric antigen receptors
KR20220100093A (ko) * 2013-02-06 2022-07-14 안트로제네시스 코포레이션 개선된 특이성을 갖는 변경된 t 림프구
US10137182B2 (en) 2013-02-14 2018-11-27 Immunocellular Therapeutics, Ltd. Cancer vaccines and vaccination methods
CN105142677B (zh) 2013-02-15 2019-08-30 加利福尼亚大学董事会 嵌合抗原受体及其使用方法
CN111139256A (zh) 2013-02-20 2020-05-12 诺华股份有限公司 使用人源化抗EGFRvIII嵌合抗原受体治疗癌症
ES2814962T3 (es) 2013-02-20 2021-03-29 Novartis Ag Fijación eficaz como objetivo de la leucemia humana primaria utilizando células T modificadas con receptor de antígeno quimérico anti-CD123
JP6462591B2 (ja) 2013-02-22 2019-01-30 アッヴィ・ステムセントルクス・エル・エル・シー 新規抗体コンジュゲートおよびその使用
EP3811954A1 (en) 2013-02-26 2021-04-28 Memorial Sloan Kettering Cancer Center Compositions and methods for immunotherapy
AU2014225788B2 (en) * 2013-03-05 2018-03-29 Baylor College Of Medicine Engager cells for immunotherapy
CA2905352A1 (en) * 2013-03-14 2014-09-25 Bellicum Pharmaceuticals, Inc. Methods for controlling t cell proliferation
US9587237B2 (en) 2013-03-14 2017-03-07 Elwha Llc Compositions, methods, and computer systems related to making and administering modified T cells
US9499855B2 (en) * 2013-03-14 2016-11-22 Elwha Llc Compositions, methods, and computer systems related to making and administering modified T cells
US20160145348A1 (en) 2013-03-14 2016-05-26 Fred Hutchinson Cancer Research Center Compositions and methods to modify cells for therapeutic objectives
CN105518018B (zh) * 2013-03-15 2020-04-03 细胞基因公司 修饰的t淋巴细胞
WO2014145152A2 (en) 2013-03-15 2014-09-18 Gpb Scientific, Llc On-chip microfluidic processing of particles
KR102466666B1 (ko) 2013-03-15 2022-11-15 메모리얼 슬로안 케터링 캔서 센터 면역치료용 조성물 및 방법
WO2014145075A2 (en) 2013-03-15 2014-09-18 The Trustees Of Princeton University Methods and devices for high throughpout purification
US9745368B2 (en) 2013-03-15 2017-08-29 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Targeting cytotoxic cells with chimeric receptors for adoptive immunotherapy
US20150064153A1 (en) 2013-03-15 2015-03-05 The Trustees Of Princeton University High efficiency microfluidic purification of stem cells to improve transplants
US9657105B2 (en) * 2013-03-15 2017-05-23 City Of Hope CD123-specific chimeric antigen receptor redirected T cells and methods of their use
UY35468A (es) * 2013-03-16 2014-10-31 Novartis Ag Tratamiento de cáncer utilizando un receptor quimérico de antígeno anti-cd19
US9790282B2 (en) 2013-03-25 2017-10-17 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Anti-CD276 polypeptides, proteins, and chimeric antigen receptors
ES2777940T3 (es) 2013-05-03 2020-08-06 Ohio State Innovation Foundation Células efectoras inmunitarias genomanipuladas con un receptor de antígeno químico específico de CS1
EP2994530A4 (en) 2013-05-10 2016-11-16 Whitehead Biomedical Inst PROTEIN MODIFICATION OF LIVING CELLS USING SORTASE
US11077144B2 (en) 2013-05-13 2021-08-03 Cellectis CD19 specific chimeric antigen receptor and uses thereof
PT2997141T (pt) * 2013-05-13 2022-11-23 Cellectis Recetor de antigénio quimérico específico para cd19 e utilizações do mesmo
US11311575B2 (en) * 2013-05-13 2022-04-26 Cellectis Methods for engineering highly active T cell for immunotherapy
WO2014186469A2 (en) 2013-05-14 2014-11-20 Board Of Regents, The University Of Texas System Human application of engineered chimeric antigen receptor (car) t-cells
AU2014268364A1 (en) * 2013-05-24 2015-12-10 Board Of Regents, The University Of Texas System Chimeric antigen receptor-targeting monoclonal antibodies
CA2912389C (en) 2013-06-10 2020-01-28 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Methods and compositions for reducing immunosupression by tumor cells
US10208125B2 (en) 2013-07-15 2019-02-19 University of Pittsburgh—of the Commonwealth System of Higher Education Anti-mucin 1 binding agents and uses thereof
CN105848671B (zh) 2013-08-28 2019-12-13 艾伯维施特姆森特克斯有限责任公司 位点特异性抗体缀合方法和组合物
EP3038636B1 (en) 2013-08-30 2018-11-07 Board of Regents, The University of Texas System Administration of kynurenine depleting enzymes for tumor therapy
EP3757130A1 (en) 2013-09-26 2020-12-30 Costim Pharmaceuticals Inc. Methods for treating hematologic cancers
US9765142B2 (en) 2013-10-11 2017-09-19 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services TEM8 antibodies and their use in treatment and detection of tumors
JP6734774B2 (ja) 2013-10-15 2020-08-05 ザ スクリプス リサーチ インスティテュート ペプチドキメラ抗原受容体ｔ細胞スイッチおよびその使用
US20150238631A1 (en) * 2013-10-15 2015-08-27 The California Institute For Biomedical Research Chimeric antigen receptor t cell switches and uses thereof
BR112016007695A2 (pt) * 2013-10-17 2017-09-12 Nat Univ Singapore receptor quimérico que desencadeia a citotoxicidade celular mediada por anticorpo contra múltiplos tumores
US10144770B2 (en) * 2013-10-17 2018-12-04 National University Of Singapore Chimeric receptors and uses thereof in immune therapy
CN104561069A (zh) * 2013-10-23 2015-04-29 深圳先进技术研究院 含重组嵌合抗原受体基因表达盒的微环dna重组母质粒、含该表达盒的微环dna及应用
WO2015069922A2 (en) 2013-11-06 2015-05-14 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Alk antibodies, conjugates, and chimeric antigen receptors, and their use
US20150140036A1 (en) 2013-11-13 2015-05-21 Novartis Institutes For Biomedical Research, Inc. Low, immune enhancing, dose mtor inhibitors and uses thereof
WO2015077717A1 (en) 2013-11-25 2015-05-28 The Broad Institute Inc. Compositions and methods for diagnosing, evaluating and treating cancer by means of the dna methylation status
AU2014352638B2 (en) 2013-11-25 2018-08-02 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Chimeric antigen receptors to control HIV infection
WO2015085147A1 (en) 2013-12-05 2015-06-11 The Broad Institute Inc. Polymorphic gene typing and somatic change detection using sequencing data
RU2701346C1 (ru) * 2013-12-06 2019-09-25 Дзе Юнайтед Стейтс Оф Америка, Эз Репрезентед Бай Дзе Секретари, Департмент Оф Хелс Энд Хьюман Сёрвисез Химерные антигенные рецепторы, специфичные в отношении рецептора тимусного стромального лимфопоэтина, и способы их применения
JP6779785B2 (ja) * 2013-12-19 2020-11-04 ノバルティス アーゲー ヒトメソテリンキメラ抗原受容体およびその使用
CA2934436A1 (en) * 2013-12-20 2015-06-25 Cellectis Method of engineering multi-input signal sensitive t cell for immunotherapy
WO2015090229A1 (en) * 2013-12-20 2015-06-25 Novartis Ag Regulatable chimeric antigen receptor
CA2934073A1 (en) 2013-12-20 2015-06-25 The Broad Institute, Inc. Combination therapy with neoantigen vaccine
WO2015103549A1 (en) 2014-01-03 2015-07-09 The United States Of America, As Represented By The Secretary Department Of Health And Human Services Neutralizing antibodies to hiv-1 env and their use
EP3626748A1 (en) * 2014-01-13 2020-03-25 Stephen J. Forman Chimeric antigen receptors (cars) having mutations in the fc spacer region and methods for their use
ES2963718T3 (es) 2014-01-21 2024-04-01 Novartis Ag Capacidad presentadora de antígenos de células CAR-T potenciada mediante introducción conjunta de moléculas co-estimuladoras
JOP20200094A1 (ar) 2014-01-24 2017-06-16 Dana Farber Cancer Inst Inc جزيئات جسم مضاد لـ pd-1 واستخداماتها
JOP20200096A1 (ar) 2014-01-31 2017-06-16 Children’S Medical Center Corp جزيئات جسم مضاد لـ tim-3 واستخداماتها
EP3105333B1 (en) * 2014-02-10 2020-04-08 Emory University Expression of chimeric polypeptide with variable lymphocyte receptors on immune cells and uses for treating cancer
MX2016010345A (es) * 2014-02-14 2017-01-23 Cellectis Celulas para inmunoterapia diseñadas para dirigir antigeno presente tanto en celulas inmunes y celulas patologicas.
EA035259B1 (ru) 2014-02-14 2020-05-21 Иммьюн Дизайн Корп. Иммунотерапия рака с применением комбинации местной и системной иммунной стимуляции
CN106414748B (zh) * 2014-02-14 2021-05-28 得克萨斯州大学系统董事会 嵌合抗原受体及制备方法
WO2015123527A1 (en) 2014-02-14 2015-08-20 Bellicum Pharmaceuticals, Inc. Methods for activating t cells using an inducible chimeric polypeptide
AU2015218633A1 (en) 2014-02-21 2016-09-01 Abbvie Stemcentrx Llc Anti-DLL3 antibodies and drug conjugates for use in melanoma
AU2015220762B2 (en) * 2014-02-21 2019-05-02 Cellectis Method for in situ inhibition of regulatory T cells
CN106279434B (zh) * 2014-02-24 2020-07-03 西比曼生物科技（上海）有限公司 工程化cd20靶向性的nkt细胞及其制备方法和应用
JP2017507950A (ja) 2014-02-27 2017-03-23 リセラ・コーポレイションＬｙｃｅｒａ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ レチノイン酸受容体関連オーファン受容体ガンマのアゴニストを使用する養子細胞療法及び関連治療方法
CN104877028A (zh) * 2014-02-28 2015-09-02 百奥迈科生物技术有限公司 抗dota嵌合抗原受体修饰的t细胞及其抗肿瘤的应用
US11885807B2 (en) 2014-03-05 2024-01-30 Autolus Limited Method for depleting malignant T-cells
US11385233B2 (en) 2015-03-05 2022-07-12 Autolus Limited Methods of depleting malignant T-cells
RU2021101502A (ru) * 2014-03-05 2021-06-25 ЮСиЭл БИЗНЕС ЛТД ХИМЕРНЫЙ АНТИГЕННЫЙ РЕЦЕПТОР (CAR) С АНТИГЕНСВЯЗЫВАЮЩИМИ ДОМЕНАМИ К КОНСТАНТНОЙ ОБЛАСТИ β Т-КЛЕТОЧНОГО РЕЦЕПТОРА
GB201403972D0 (en) 2014-03-06 2014-04-23 Ucl Business Plc Chimeric antigen receptor
EP3119423B1 (en) 2014-03-15 2022-12-14 Novartis AG Treatment of cancer using chimeric antigen receptor
WO2015143224A1 (en) * 2014-03-19 2015-09-24 Ambrx, Inc. Chimeric antigen receptor-modified t-cells
HUE045480T2 (hu) 2014-03-19 2019-12-30 Cellectis CD123-specifikus kiméra antigénreceptorok rák immunoterápiához
TW202214691A (zh) 2014-03-21 2022-04-16 美商艾伯維有限公司 抗-egfr抗體及抗體藥物結合物
WO2015150526A2 (en) * 2014-04-03 2015-10-08 Cellectis Cd33 specific chimeric antigen receptors for cancer immunotherapy
TWI746420B (zh) * 2014-04-07 2021-11-21 美商密內瓦生物技術公司 抗ｎｍｅ抗體
RU2718542C2 (ru) 2014-04-07 2020-04-08 Новартис Аг Лечение злокачественной опухоли с использованием химерного рецептора антигена против cd19
US20170029774A1 (en) 2014-04-10 2017-02-02 Seattle Children's Hospital (dba Seattle Children' Research Institute) Production of engineered t-cells by sleeping beauty transposon coupled with methotrexate selection
JP6698546B2 (ja) 2014-04-14 2020-05-27 セレクティスＣｅｌｌｅｃｔｉｓ 癌免疫療法のためのｂｃｍａ（ｃｄ２６９）特異的キメラ抗原受容体
CA2946312A1 (en) 2014-04-23 2015-10-29 Juno Therapeutics, Inc. Methods for isolating, culturing, and genetically engineering immune cell populations for adoptive therapy
MX370018B (es) 2014-04-25 2019-11-28 Bluebird Bio Inc Metodos mejorados para la elaboracion de terapias celulares adoptivas.
WO2015164739A1 (en) * 2014-04-25 2015-10-29 Bluebird Bio, Inc. Kappa/lambda chimeric antigen receptors
HRP20211910T1 (hr) * 2014-04-25 2022-03-18 2Seventy Bio, Inc. Mnd promotor himerni antigen receptori
GB2540694A (en) * 2014-04-29 2017-01-25 Seattle Children's Hospital (Dba Seattle Children's Res Institute) CCR5 disruption of cells expressing anti-hiv chimeric antigen receptor (CAR) derived from broadly neutralizing antibodies
CA2947429A1 (en) 2014-05-02 2015-11-05 Emory University Humanized variable lymphocyte receptors (vlr) and compositions and uses related thereto
CN113604491A (zh) 2014-05-02 2021-11-05 宾夕法尼亚大学董事会 嵌合自身抗体受体t细胞的组合物和方法
GB201407852D0 (en) 2014-05-02 2014-06-18 Iontas Ltd Preparation of libraries od protein variants expressed in eukaryotic cells and use for selecting binding molecules
US9896441B2 (en) 2014-05-05 2018-02-20 Lycera Corporation Tetrahydroquinoline sulfonamide and related compounds for use as agonists of RORγ and the treatment of disease
EP3209641A4 (en) 2014-05-05 2018-06-06 Lycera Corporation Benzenesulfonamido and related compounds for use as agonists of ror and the treatement of disease
GB2541599B (en) * 2014-05-14 2020-05-20 Carsgen Therapeutics Ltd Nucleic acid for coding chimeric antigen receptor protein and T lymphocyte for expression of chimeric antigen receptor protein
CN112175911B (zh) 2014-05-15 2023-10-13 新加坡国立大学 经修饰的自然杀伤细胞及其用途
MX2016015834A (es) 2014-06-02 2017-07-19 Us Health Receptores quiméricos de antigeno que tienen como diana a cd-19.
KR102485855B1 (ko) 2014-06-06 2023-01-09 2세븐티 바이오, 인코포레이티드 개선된 t 세포 조성물
AU2015276131A1 (en) * 2014-06-17 2016-11-17 Cellectis CD123 specific multi-chain chimeric antigen receptor
GB201506423D0 (en) * 2015-04-15 2015-05-27 Tc Biopharm Ltd Gamma delta T cells and uses thereof
KR20170032406A (ko) 2014-07-15 2017-03-22 주노 쎄러퓨티크스 인코퍼레이티드 입양 세포 치료를 위한 조작된 세포
ES2805475T3 (es) * 2014-07-21 2021-02-12 Novartis Ag Tratamiento del cáncer utilizando un receptor antigénico quimérico de CD33
US11542488B2 (en) 2014-07-21 2023-01-03 Novartis Ag Sortase synthesized chimeric antigen receptors
WO2016014530A1 (en) 2014-07-21 2016-01-28 Novartis Ag Combinations of low, immune enhancing. doses of mtor inhibitors and cars
EP3172237A2 (en) 2014-07-21 2017-05-31 Novartis AG Treatment of cancer using humanized anti-bcma chimeric antigen receptor
KR20170037625A (ko) * 2014-07-21 2017-04-04 노파르티스 아게 Cll-1 키메라 항원 수용체를 사용한 암의 치료
CA2956307A1 (en) * 2014-07-29 2016-02-04 Pfizer Inc. Egfrviii specific chimeric antigen receptors for cancer immunotherapy
CN106922148B (zh) * 2014-07-29 2021-10-15 瑟勒提斯公司 用于癌症免疫疗法的ror1(ntrkr1)特异性的嵌合抗原受体
US20170209492A1 (en) 2014-07-31 2017-07-27 Novartis Ag Subset-optimized chimeric antigen receptor-containing t-cells
WO2016016343A1 (en) 2014-07-31 2016-02-04 Cellectis Ror1 specific multi-chain chimeric antigen receptor
WO2016025880A1 (en) 2014-08-14 2016-02-18 Novartis Ag Treatment of cancer using gfr alpha-4 chimeric antigen receptor
TW202140557A (zh) 2014-08-19 2021-11-01 瑞士商諾華公司 使用cd123嵌合抗原受體治療癌症
EP3985394A1 (en) 2014-08-27 2022-04-20 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Intracellular osteopontin regulates the lineage commitment of lymphoid subsets
TWI805109B (zh) 2014-08-28 2023-06-11 美商奇諾治療有限公司 對cd19具專一性之抗體及嵌合抗原受體
EP2990416B1 (en) * 2014-08-29 2018-06-20 GEMoaB Monoclonals GmbH Universal chimeric antigen receptor expressing immune cells for targeting of diverse multiple antigens and method of manufacturing the same and use of the same for treatment of cancer, infections and autoimmune disorders
EP3186371A4 (en) 2014-08-29 2018-01-10 Board of Regents, The University of Texas System Administration of kynurenine depleting enzymes for tumor therapy
EP3189148A4 (en) 2014-09-02 2018-05-02 Bellicum Pharmaceuticals, Inc. Costimulation of chimeric antigen receptors by myd88 and cd40 polypeptides
DK3189073T3 (da) 2014-09-04 2020-03-30 Cellectis Trophoblast-glycoprotein (5t4, tpbg)-specifikke kimære antigenreceptorer til cancerimmunterapi
MA40595A (fr) 2014-09-09 2021-05-26 Unum Therapeutics Récepteurs chimériques et utilisations de ceux-ci en thérapie immunitaire
WO2016040892A1 (en) 2014-09-13 2016-03-17 Novartis Ag Combination therapies
US10604582B2 (en) 2014-09-17 2020-03-31 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health Anti-CD276 antibodies (B7H3)
CA2961636A1 (en) 2014-09-17 2016-03-24 Boris ENGELS Targeting cytotoxic cells with chimeric receptors for adoptive immunotherapy
EP3194433B1 (en) 2014-09-19 2019-05-22 City of Hope Costimulatory chimeric antigen receptor t cells targeting il13r 2
WO2016054153A1 (en) 2014-10-02 2016-04-07 The Wistar Institute Of Anatomy And Biology Methods and compositions for treating cancer
AU2015327868A1 (en) 2014-10-03 2017-04-20 Novartis Ag Combination therapies
CA2963327A1 (en) 2014-10-07 2016-04-14 Cellectis Method for modulating car-induced immune cells activity
KR20170068504A (ko) 2014-10-08 2017-06-19 노파르티스 아게 키메라 항원 수용체 요법에 대한 치료 반응성을 예측하는 바이오마커 및 그의 용도
DK3205720T3 (da) * 2014-10-09 2019-10-07 Univ Yamaguchi Car-eksprimeringsvektor og car-eksprimerende t-celler
AU2015332533B2 (en) 2014-10-14 2018-08-30 Halozyme, Inc. Compositions of adenosine deaminase-2 (ADA2), variants thereof and methods of using same
ES2879612T3 (es) 2014-10-20 2021-11-22 Juno Therapeutics Inc Métodos y composiciones para dosificación en terapia celular adoptiva
WO2016069993A1 (en) * 2014-10-31 2016-05-06 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Compositions and methods of stimulating and expanding t cells
WO2016069283A1 (en) 2014-10-31 2016-05-06 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Altering gene expression in cart cells and uses thereof
WO2016073748A1 (en) * 2014-11-05 2016-05-12 Board Of Regents, The University Of Texas System Biomarkers and targets for cancer immunotherapy
WO2016073755A2 (en) 2014-11-05 2016-05-12 Board Of Regents, The University Of Texas System Gene modified immune effector cells and engineered cells for expansion of immune effector cells
LT3215601T (lt) 2014-11-05 2020-08-25 Juno Therapeutics, Inc. Transdukcijos ir ląstelės apdorojimo būdai
ES2806126T3 (es) 2014-11-05 2021-02-16 Univ Texas Receptores de antígenos quiméricos (CAR) dirigidos de forma selectiva a complejos proteicos
US9879087B2 (en) 2014-11-12 2018-01-30 Siamab Therapeutics, Inc. Glycan-interacting compounds and methods of use
ES2941897T3 (es) * 2014-11-12 2023-05-26 Seagen Inc Compuestos que interaccionan con glicanos y procedimientos de uso
CN105601746B (zh) * 2014-11-21 2021-02-19 三生国健药业（上海）股份有限公司 一种嵌合Fc受体的融合蛋白及其制备方法和应用
CA2969456A1 (en) * 2014-12-03 2016-06-09 Juno Therapeutics, Inc. Methods and compositions for adoptive cell therapy
US20180334490A1 (en) 2014-12-03 2018-11-22 Qilong H. Wu Methods for b cell preconditioning in car therapy
KR102602417B1 (ko) 2014-12-05 2023-11-16 메모리얼 슬로안 케터링 캔서 센터 G-단백질 커플화 수용체를 표적화하는 항체 및 이의 사용 방법
IL310130A (en) 2014-12-05 2024-03-01 Memorial Sloan Kettering Cancer Center G-protein receptor-directed chimeric antigen receptors and their use
IL290459B2 (en) 2014-12-05 2023-11-01 Hope City Modified T cells - CS1-targeted chimeric antigen receptor
MY191537A (en) * 2014-12-05 2022-06-30 Memorial Sloan Kettering Cancer Center Chimeric antigen receptors targeting b-cell maturation antigen and uses thereof
CN107206076B (zh) 2014-12-05 2021-07-09 纪念斯隆-凯特琳癌症中心 靶向b-细胞成熟抗原的抗体及其用途
WO2016093878A1 (en) * 2014-12-08 2016-06-16 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Anti-cd70 chimeric antigen receptors
ES2750725T3 (es) 2014-12-12 2020-03-26 Bluebird Bio Inc Receptores de antígeno quiméricos BCMA
EP3230441A4 (en) 2014-12-12 2018-10-03 Voyager Therapeutics, Inc. Compositions and methods for the production of scaav
US11384350B2 (en) 2014-12-15 2022-07-12 The Regents Of The University Of California Cytotoxic molecules responsive to intracellular ligands for selective T cell mediated killing
CA3008162A1 (en) 2014-12-15 2016-06-23 The Regents Of The University Of California Bispecific or-gate chimeric antigen receptor responsive to cd19 and cd20
US10993997B2 (en) 2014-12-19 2021-05-04 The Broad Institute, Inc. Methods for profiling the t cell repertoire
EP3234193B1 (en) 2014-12-19 2020-07-15 Massachusetts Institute of Technology Molecular biomarkers for cancer immunotherapy
CN107002045A (zh) * 2014-12-24 2017-08-01 Ucl商务股份有限公司 细胞
AU2015374296B2 (en) * 2014-12-29 2021-09-02 Novartis Ag Methods of making chimeric antigen receptor-expressing cells
MA41346A (fr) 2015-01-12 2017-11-21 Juno Therapeutics Inc Eléments régulateurs post-transcriptionnels d'hépatite modifiée
AU2016206457B2 (en) 2015-01-16 2021-11-11 Juno Therapeutics, Inc. Antibodies and chimeric antigen receptors specific for ROR1
WO2016115482A1 (en) 2015-01-16 2016-07-21 Novartis Pharma Ag Phosphoglycerate kinase 1 (pgk) promoters and methods of use for expressing chimeric antigen receptor
CN107438618A (zh) 2015-01-26 2017-12-05 塞勒克提斯公司 赋予结合至cd123的嵌合抗原受体用于治疗复发性/难治性急性骨髓性淋巴瘤或母细胞性浆细胞样树突状细胞肿瘤的t细胞受体敲除的工程化免疫细胞
US10640570B2 (en) * 2015-01-29 2020-05-05 Regents Of The University Of Minnesota Chimeric antigen receptors, compositions, and methods
WO2016126608A1 (en) 2015-02-02 2016-08-11 Novartis Ag Car-expressing cells against multiple tumor antigens and uses thereof
DK3253865T3 (da) 2015-02-06 2022-08-15 Nat Univ Singapore Fremgangsmåder til forbedring af virkningen af terapeutiske immunceller
CA2976236A1 (en) 2015-02-09 2016-08-18 Research Development Foundation Engineered immunoglobulin fc polypeptides displaying improved complement activation
US20160228544A1 (en) * 2015-02-11 2016-08-11 Ensysce Biosciences, Inc. Single Walled Carbon Nanotube Polynucleotide Complexes and Methods Related Thereto
CN107530424A (zh) 2015-02-20 2018-01-02 俄亥俄州国家创新基金会 针对nkg2d和肿瘤相关抗原的二价抗体
MA41613A (fr) * 2015-02-23 2018-01-02 Abbvie Stemcentrx Llc Récepteurs antigéniques chimériques anti-dll3 et procédés d'utilisation desdits récepteurs
AU2016222850B2 (en) 2015-02-24 2021-04-01 Board Of Regents, The University Of Texas System Selection methods for genetically-modified T cells
CN108064283B (zh) 2015-02-24 2024-01-09 加利福尼亚大学董事会 结合触发的转录开关及其使用方法
CN107249602B (zh) * 2015-02-27 2021-09-28 美商生物细胞基因治疗有限公司 靶向血液恶性肿瘤之嵌合抗原受体（car）、其组合物及使用方法
WO2016138846A1 (en) * 2015-03-02 2016-09-09 Shanghai Sidansai Biotechnology Co., Ltd Reducing immune tolerance induced by pd‐l1
US10195272B2 (en) 2015-03-02 2019-02-05 The Nemours Foundation Adoptive t-cell therapy using FcεRI-based chimeric antigen receptors for treating IgE-mediated allergic diseases
MX2017011201A (es) * 2015-03-05 2018-01-30 Hutchinson Fred Cancer Res Proteinas de fusion inmunomoduladoras y usos de las mismas.
WO2016145298A1 (en) 2015-03-12 2016-09-15 The Regents Of The University Of California METHODS FOR TREATING CANCER WITH RORgamma INHIBITORS
US10738116B2 (en) 2015-03-19 2020-08-11 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Dual specific anti-CD22-anti-CD19 chimeric antigen receptors
US10562960B2 (en) 2015-03-20 2020-02-18 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Neutralizing antibodies to gp120 and their use
US10800828B2 (en) 2015-03-26 2020-10-13 The Scripps Research Institute Switchable non-scFv chimeric receptors, switches, and methods of use thereof to treat cancer
US20190119385A1 (en) * 2015-03-27 2019-04-25 University Of Southern California Hla-g as a novel target for car t-cell immunotherapy
AU2016243124A1 (en) * 2015-03-27 2017-11-02 University Of Southern California CAR T-cell therapy directed to LHR for the treatment of solid tumors
AU2016243043B2 (en) * 2015-04-02 2021-12-09 Memorial Sloan Kettering Cancer Center TNFRSF14/ HVEM proteins and methods of use thereof
KR20170132793A (ko) 2015-04-03 2017-12-04 유레카 쎄라퓨틱스, 인코포레이티드 Afp 펩티드/mhc 복합체를 표적화하는 구축물 및 그의 용도
CN107708720A (zh) 2015-04-06 2018-02-16 苏伯多曼有限责任公司 含有从头结合结构域的多肽及其用途
AU2016246457B2 (en) 2015-04-06 2020-10-15 Cytoimmune Therapeutics, Inc. EGFR-directed car therapy for glioblastoma
LT3280729T (lt) 2015-04-08 2022-08-10 Novartis Ag Terapijos cd20, terapijos cd22 ir kombinuotos terapijos su cd19 chimerinį antigeno receptorių (car) ekspresuojančia ląstele
EP3283113A4 (en) 2015-04-15 2018-12-05 The California Institute for Biomedical Research Optimized pne-based chimeric receptor t cell switches and uses thereof
WO2016166568A1 (en) 2015-04-16 2016-10-20 Juno Therapeutics Gmbh Methods, kits and apparatus for expanding a population of cells
JP7114457B2 (ja) 2015-04-17 2022-08-08 ザ トラスティーズ オブ ザ ユニバーシティ オブ ペンシルバニア キメラ抗原受容体発現細胞の有効性および増殖を改善するための方法
EP3286211A1 (en) 2015-04-23 2018-02-28 Novartis AG Treatment of cancer using chimeric antigen receptor and protein kinase a blocker
EP3288638A1 (en) 2015-04-25 2018-03-07 The General Hospital Corporation Anti-fugetactic agent and anti-cancer agent combination therapy and compositions for the treatment of cancer
US20180355318A1 (en) * 2015-04-29 2018-12-13 Fred Hutchinson Cancer Research Center Modified hematopoietic stem/progenitor and non-t effector cells, and uses thereof
EP3288570A4 (en) 2015-04-29 2018-11-21 Fred Hutchinson Cancer Research Center Modified stem cells and uses thereof
WO2016174652A1 (en) 2015-04-30 2016-11-03 Technion Research & Development Foundation Limited Chimeric antigen receptors and methods of their use
US20180291089A1 (en) * 2015-04-30 2018-10-11 University Of Southern California Secretory tnt car cell immunotherapy
EP3288580A4 (en) 2015-05-01 2018-12-26 The Regents of The University of California Glycan-dependent immunotherapeutic molecules
WO2016179343A1 (en) 2015-05-05 2016-11-10 Lycera Corporation DIHYDRO-2H-BENZO[b][1,4]OXAZINE SULFONAMIDE AND RELATED COMPOUNDS FOR USE AS AGONISTS OF RORy AND THE TREATMENT OF DISEASE
EP3729967A1 (en) 2015-05-06 2020-10-28 Snipr Technologies Limited Altering microbial populations & modifying microbiota
US10968426B2 (en) 2015-05-08 2021-04-06 President And Fellows Of Harvard College Universal donor stem cells and related methods
US20200316231A1 (en) * 2015-05-10 2020-10-08 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Compositions And Methods For Imaging Immune Cells
US11253616B2 (en) 2017-09-06 2022-02-22 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Small molecules for dual function positron emission tomography (PET) and cell suicide switches
WO2016180467A1 (en) * 2015-05-11 2016-11-17 Biontech Cell & Gene Therapies Gmbh Enhancing the effect of car-engineered t cells by means of nucleic acid vaccination
US10906982B2 (en) 2015-05-15 2021-02-02 The General Hospital Corporation Antagonistic anti-tumor necrosis factor receptor 2 antibodies
PT3298033T (pt) * 2015-05-18 2020-09-22 Tcr2 Therapeutics Inc Composições e utilizações médicas para reprogramação de tcr utilizando proteínas de fusão
US20180147271A1 (en) * 2015-05-18 2018-05-31 Bluebird Bio, Inc. Anti-ror1 chimeric antigen receptors
US10752670B2 (en) 2015-05-20 2020-08-25 Cellectis Anti-GD3 specific chimeric antigen receptors for cancer immunotherapy
US10434153B1 (en) 2015-05-20 2019-10-08 Kim Leslie O'Neill Use of car and bite technology coupled with an scFv from an antibody against human thymidine kinase 1 to specifically target tumors
JP6857141B2 (ja) 2015-05-20 2021-04-14 ノバルティス アーゲー エベロリムスとダクトリシブとの薬学的組合せ
US10835585B2 (en) 2015-05-20 2020-11-17 The Broad Institute, Inc. Shared neoantigens
EP4218778A3 (en) 2015-05-28 2023-08-23 Kite Pharma, Inc. Diagnostic methods for t cell therapy
JP7121496B2 (ja) * 2015-05-28 2022-08-18 アルモ・バイオサイエンシーズ・インコーポレイテッド 癌治療で使用するためのペグ化インターロイキン－１０
SG10201913613SA (en) 2015-05-28 2020-03-30 Kite Pharma Inc Methods of conditioning patients for t cell therapy
WO2016196384A1 (en) 2015-05-29 2016-12-08 Fred Hutchinson Cancer Research Center Compositions for cellular immunotherapy
CN108174607A (zh) 2015-05-29 2018-06-15 朱诺治疗学股份有限公司 用于遗传工程改造的细胞中调节抑制性相互作用的组合物和方法
KR102647100B1 (ko) 2015-05-30 2024-03-13 몰레큘러 템플레이츠, 인코퍼레이션. 탈면역된 시가 독소 a 서브유닛 스캐폴드 및 이를 포함하는 세포-표적화 분자
WO2016197064A1 (en) 2015-06-04 2016-12-08 Epstein Alan L Lym-1 and lym-2 targeted car cell immunotherapy
CA2987069A1 (en) * 2015-06-05 2016-12-08 Novartis Ag Flow-through paramagnetic particle-based cell separation and paramagnetic particle removal
KR20180023949A (ko) 2015-06-09 2018-03-07 메모리얼 슬로안-케터링 캔서 센터 인간 hla에 의해 제시된 ebv 잠복성 막 단백질 2a 펩티드에 특이적인 t 세포 수용체-유사 항체 작용제
EP4272757A3 (en) 2015-06-10 2023-12-27 ImmunityBio, Inc. Modified nk-92 cells for treating cancer
WO2016201225A1 (en) 2015-06-11 2016-12-15 Lycera Corporation Aryl dihydro-2h-benzo[b][1,4]oxazine sulfonamide and related compounds for use as agonists of rory and the treatment of disease
AU2016274989A1 (en) * 2015-06-12 2017-11-02 Immunomedics, Inc. Disease therapy with chimeric antigen receptor (car) constructs and t cells (car-t) or nk cells (car-nk) expressing car constructs
EP3307877B1 (en) 2015-06-12 2020-11-18 Lentigen Technology, Inc. Method to treat cancer with engineered t-cells
CN105177031B (zh) * 2015-06-12 2018-04-24 北京艺妙神州医疗科技有限公司 嵌合抗原受体修饰的t细胞及其用途
EP3436575A1 (en) 2015-06-18 2019-02-06 The Broad Institute Inc. Novel crispr enzymes and systems
CN108026151B (zh) * 2015-06-19 2022-07-15 塞巴斯蒂安·科博尔德 Pd-1-cd28融合蛋白及其在医学中的用途
JP6961497B2 (ja) 2015-06-25 2021-11-05 アイセル・ジーン・セラピューティクス・エルエルシー キメラ抗体受容体（ＣＡＲｓ）の構成およびその使用方法
US11173179B2 (en) 2015-06-25 2021-11-16 Icell Gene Therapeutics Llc Chimeric antigen receptor (CAR) targeting multiple antigens, compositions and methods of use thereof
WO2017004252A1 (en) 2015-06-30 2017-01-05 The Arizona Board Of Regents On Behalf Of The University Of Arizona Redirected cells with mhc chimeric receptors and methods of use in immunotherapy
MA42902A (fr) * 2015-07-08 2018-05-16 Univ Johns Hopkins Lymphocytes infiltrant la moelle (mil) en tant que source de lymphocytes t pour une thérapie par des récepteurs chimériques d'un antigène (car)
US11116795B2 (en) * 2015-07-10 2021-09-14 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Treatment of a canine CD20 positive disease or condition using a canine CD20-specific chimeric antigen receptor
MA42895A (fr) 2015-07-15 2018-05-23 Juno Therapeutics Inc Cellules modifiées pour thérapie cellulaire adoptive
WO2017015427A1 (en) 2015-07-21 2017-01-26 Novartis Ag Methods for improving the efficacy and expansion of immune cells
US10493139B2 (en) * 2015-07-24 2019-12-03 Innovative Cellular Therapeutics CO., LTD. Humanized anti-CD19 antibody and use thereof with chimeric antigen receptor
JP7032304B2 (ja) 2015-07-28 2022-03-08 ザ トラスティーズ オブ ザ ユニバーシティ オブ ペンシルバニア キメラ抗原受容体を発現する改変された単球／マクロファージおよびその使用
CN108472314A (zh) 2015-07-31 2018-08-31 明尼苏达大学董事会 修饰的细胞和治疗方法
US10975148B2 (en) 2015-08-05 2021-04-13 CellabMED Inc. Chimeric antigen receptors, and T cells in which chimeric antigen receptor is expressed
EP3331913A1 (en) 2015-08-07 2018-06-13 Novartis AG Treatment of cancer using chimeric cd3 receptor proteins
JP7162530B2 (ja) 2015-08-07 2022-10-28 シアトル チルドレンズ ホスピタル （ディービーエイ シアトル チルドレンズ リサーチ インスティテュート） 固形腫瘍を標的とする二重特異性ｃａｒ ｔ細胞
US11286531B2 (en) 2015-08-11 2022-03-29 The Johns Hopkins University Assaying ovarian cyst fluid
US11352439B2 (en) 2015-08-13 2022-06-07 Kim Leslie O'Neill Macrophage CAR (MOTO-CAR) in immunotherapy
CN106467906B (zh) * 2015-08-20 2019-09-27 北京马力喏生物科技有限公司 构建体、转基因淋巴细胞及其制备方法和用途
US10976232B2 (en) 2015-08-24 2021-04-13 Gpb Scientific, Inc. Methods and devices for multi-step cell purification and concentration
WO2017040380A2 (en) 2015-08-28 2017-03-09 Research Development Foundation Engineered antibody fc variants
WO2017040324A1 (en) 2015-08-28 2017-03-09 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Methods and compositions for cells expressing a chimeric intracellular signaling molecule
EP4218777A3 (en) * 2015-08-28 2023-08-23 The Trustees of the University of Pennsylvania Methods and compositions for cells expressing a chimeric intracellular signaling molecule
EP4014996A1 (en) * 2015-08-31 2022-06-22 Helixmith Co., Ltd Anti-sialyl tn chimeric antigen receptors
US11747346B2 (en) 2015-09-03 2023-09-05 Novartis Ag Biomarkers predictive of cytokine release syndrome
CN114891116A (zh) 2015-09-11 2022-08-12 生物权威（英国）有限公司 嵌合抗原受体及其用途
MA44909A (fr) 2015-09-15 2018-07-25 Acerta Pharma Bv Association thérapeutique d'un inhibiteur du cd19 et d'un inhibiteur de la btk
MX2018003308A (es) 2015-09-18 2018-11-09 The General Hospital Corp Dba Massacsetts General Hospital Suministro localizado de agente anti-fuctactico para tratamiento del cancer.
MX2018003317A (es) * 2015-09-18 2018-11-09 The General Hospital Corp Dba Massacsetts General Hospital Celulas t modificadas que tienen propiedades anti-fuctacticas y sus usos.
MA42951A (fr) 2015-09-22 2018-08-01 Univ Pennsylvania Méthode de réacheminement de lymphocytes t pour le traitement d'une infection par le vih
BR112018005931A2 (pt) 2015-09-24 2018-10-09 Abvitro Llc composições de anticorpo para hiv e métodos de uso
WO2017053902A1 (en) 2015-09-25 2017-03-30 Abvitro Llc High throughput process for t cell receptor target identification of natively-paired t cell receptor sequences
JP2018534264A (ja) 2015-09-28 2018-11-22 リージェンツ オブ ザ ユニバーシティ オブ ミネソタ 自己免疫および同種免疫への治療的介入としてのキメラ抗原受容体（ｃａｒ）ｔ細胞
WO2017058752A1 (en) * 2015-09-28 2017-04-06 Trustees Of Dartmouth College Chimeric antigen receptor anti-inflammatory cells and methods of use
EP3747462A1 (en) * 2015-10-06 2020-12-09 City of Hope Chimeric antigen receptors targeted to psca
CA2997809A1 (en) 2015-10-07 2017-04-13 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Il-7r-alpha specific antibodies for treating acute lymphoblastic leukemia
US11517590B2 (en) * 2015-10-08 2022-12-06 National University Corporation Tokai National Higher Education And Research System Method for preparing genetically-modified T cells which express chimeric antigen receptor
WO2017059796A1 (en) 2015-10-08 2017-04-13 Shanghai Sidansai Biotechnology Co., Ltd Activation and expansion of t cells
CN105153315B (zh) * 2015-10-09 2019-04-02 重庆精准生物技术有限公司 免疫抑制受体联合肿瘤抗原嵌合受体及其应用
EP3359694A4 (en) * 2015-10-09 2019-07-17 Guardant Health, Inc. POPULATION-BASED TREATMENT TREATMENT USING CELL-FREE DNA
ES2778651T3 (es) 2015-10-09 2020-08-11 Miltenyi Biotec Technology Inc Receptores de antígeno quimérico y métodos de uso
WO2017069958A2 (en) 2015-10-09 2017-04-27 The Brigham And Women's Hospital, Inc. Modulation of novel immune checkpoint targets
CN105924530B (zh) * 2015-10-13 2019-08-06 中国人民解放军总医院 嵌合抗原受体及其基因和重组表达载体、car20-nkt细胞及其制备方法和应用
CN106755023A (zh) * 2015-10-15 2017-05-31 中国人民解放军军事医学科学院附属医院 带安全开关的嵌合抗原受体免疫细胞及其制备方法与应用
WO2017064222A1 (en) 2015-10-16 2017-04-20 Ludwig-Maximilians-Universität München Cxcr6-transduced t cells for targeted tumor therapy
IL258491B2 (en) 2015-10-16 2023-09-01 Univ Columbia Preparations and methods for inhibiting antigens of a particular lineage
AU2016341131A1 (en) 2015-10-19 2018-05-10 University Of Massachusetts Anti-cancer and anti-inflammatory therapeutics and methods thereof
JP6952029B2 (ja) 2015-10-20 2021-10-20 カイト ファーマ インコーポレイテッドＫｉｔｅ Ｐｈａｒｍａ， Ｉｎｃ Ｔ細胞療法用のｔ細胞を調製する方法
MA45488A (fr) 2015-10-22 2018-08-29 Juno Therapeutics Gmbh Procédés, kits et appareil de culture de cellules
MA45489A (fr) 2015-10-22 2018-08-29 Juno Therapeutics Gmbh Procédés de culture de cellules, kits et appareil associés
CN108474002B (zh) 2015-10-22 2023-05-23 朱诺治疗学有限公司 用于转导的方法、反应剂盒、反应剂和设备
KR20180091820A (ko) * 2015-10-23 2018-08-16 소렌토 쎄라퓨틱스, 인코포레이티드 프로그래밍 가능한 범용 세포 수용체 및 이의 사용 방법
CN105132445B (zh) * 2015-10-23 2018-10-02 马健颖 一种特异识别肿瘤细胞的受体蛋白、t淋巴细胞及nk细胞
EP3368075B1 (en) 2015-10-27 2020-01-29 Board of Regents, The University of Texas System Chimeric antigen receptor molecules and uses thereof
WO2017075451A1 (en) 2015-10-28 2017-05-04 The Broad Institute Inc. Compositions and methods for evaluating and modulating immune responses by detecting and targeting pou2af1
WO2017075478A2 (en) 2015-10-28 2017-05-04 The Broad Institute Inc. Compositions and methods for evaluating and modulating immune responses by use of immune cell gene signatures
WO2017075465A1 (en) 2015-10-28 2017-05-04 The Broad Institute Inc. Compositions and methods for evaluating and modulating immune responses by detecting and targeting gata3
WO2017079703A1 (en) 2015-11-05 2017-05-11 Juno Therapeutics, Inc. Vectors and genetically engineered immune cells expressing metabolic pathway modulators and uses in adoptive cell therapy
MA44314A (fr) * 2015-11-05 2018-09-12 Juno Therapeutics Inc Récepteurs chimériques contenant des domaines induisant traf, et compositions et méthodes associées
JP7066613B2 (ja) 2015-11-12 2022-05-13 シージェン インコーポレイテッド グリカン相互作用化合物および使用方法
CN105331585A (zh) * 2015-11-13 2016-02-17 科济生物医药（上海）有限公司 携带pd-l1阻断剂的嵌合抗原受体修饰的免疫效应细胞
EP3377086A1 (en) 2015-11-19 2018-09-26 The Brigham and Women's Hospital, Inc. Lymphocyte antigen cd5-like (cd5l)-interleukin 12b (p40) heterodimers in immunity
CN105384826A (zh) * 2015-11-19 2016-03-09 广州熙帝生物科技有限公司 表达嵌合抗原受体的脐血有核细胞及其应用
CN116121281A (zh) * 2015-11-27 2023-05-16 卡瑟里克斯私人有限公司 经遗传修饰的细胞及其用途
ES2928167T3 (es) 2015-12-03 2022-11-15 Juno Therapeutics Inc Composiciones y métodos para reducir las respuestas inmunitarias contra receptores de antígenos quiméricos
WO2017096329A1 (en) 2015-12-03 2017-06-08 Juno Therapeutics, Inc. Modified chimeric receptors and related compositions and methods
KR20180133840A (ko) 2015-12-04 2018-12-17 노파르티스 아게 면역종양학을 위한 조성물 및 방법
WO2017095525A1 (en) * 2015-12-04 2017-06-08 David Scott Antigen-specific t cells for inducing immune tolerance
EP3384294B1 (en) 2015-12-04 2021-10-13 Juno Therapeutics, Inc. Methods and compositions related to toxicity associated with cell therapy
WO2017099712A1 (en) 2015-12-07 2017-06-15 Bluebird Bio, Inc. Improved t cell compositions
US10953003B2 (en) 2015-12-14 2021-03-23 X4 Pharmaceuticals, Inc. Methods for treating cancer
WO2017106332A1 (en) 2015-12-14 2017-06-22 X4 Pharmaceuticals, Inc. Methods for treating cancer
PL3393468T3 (pl) 2015-12-22 2023-01-23 X4 Pharmaceuticals, Inc. Metody leczenia niedoboru odporności
EP3393504A1 (en) 2015-12-22 2018-10-31 Novartis AG Mesothelin chimeric antigen receptor (car) and antibody against pd-l1 inhibitor for combined use in anticancer therapy
KR20180099768A (ko) 2015-12-30 2018-09-05 노파르티스 아게 증진된 효능을 갖는 면역 이펙터 세포 요법
GB201600328D0 (en) 2016-01-08 2016-02-24 Univ Oslo Hf Anti-CD37 chimeric antigen receptors and immune cells expressing them
CN116334113A (zh) 2016-01-08 2023-06-27 加利福尼亚大学董事会 有条件活性的异二聚体多肽及其使用方法
CN105950645A (zh) * 2016-01-11 2016-09-21 灏灵赛奥（天津）生物科技有限公司 Car-cd19抗原受体的人源化融合基因片段、其构建方法及应用
US11505599B2 (en) 2016-01-14 2022-11-22 Memorial Sloan-Kettering Cancer Center T cell receptor-like antibodies specific for Foxp3-derived peptides
WO2017123911A1 (en) * 2016-01-15 2017-07-20 The Wistar Institute Of Anatomy And Biology Methods and compositions for treating cancer
US10221242B2 (en) 2016-01-21 2019-03-05 Pfizer Inc. Antibodies specific for epidermal growth factor receptor variant III and their uses
TWI755547B (zh) 2016-01-21 2022-02-21 美商輝瑞股份有限公司 靶向表皮生長因子受體變異體iii之嵌合型抗原受體
CN105567640A (zh) * 2016-01-27 2016-05-11 苏州佰通生物科技有限公司 一种嵌合抗原受体脂肪干细胞及其制备方法
MX2018010061A (es) 2016-02-23 2019-07-04 Immune Design Corp Preparaciones de vectores retrovirales de genomas multiples, y metodos y sistemas para producir y usar las mismas.
WO2017151860A1 (en) 2016-03-02 2017-09-08 Broard Of Regents, The University Of Texas System Human kynureninase enzyme variants having improved pharmacological properties
CN109153714A (zh) 2016-03-04 2019-01-04 诺华股份有限公司 表达多重嵌合抗原受体(car)分子的细胞及其用途
CA3017603A1 (en) * 2016-03-14 2017-09-21 Wisconsin Alumni Research Foundation Methods of t cell expansion and activation
WO2017161212A1 (en) 2016-03-16 2017-09-21 Juno Therapeutics, Inc. Methods for adaptive design of a treatment regimen and related treatments
US20190287013A1 (en) 2016-03-16 2019-09-19 Juno Therapeutics, Inc. Methods for determining dosing of a therapeutic agent and related treatments
JP6561372B2 (ja) 2016-03-17 2019-08-21 国立大学法人山口大学 免疫機能制御因子を発現する免疫担当細胞及び発現ベクター
CA3015369A1 (en) 2016-03-18 2017-09-21 Oliver Press Compositions and methods for cd20 immunotherapy
WO2017165571A1 (en) 2016-03-22 2017-09-28 Seattle Children's Hospital (dba Seattle Children's Research Institute) Early intervention methods to prevent or ameliorate toxicity
WO2017165683A1 (en) 2016-03-23 2017-09-28 Novartis Ag Cell secreted minibodies and uses thereof
WO2017173410A1 (en) 2016-04-01 2017-10-05 Amgen Inc. Chimeric receptors to flt3 and methods of use thereof
CN109219445B (zh) * 2016-04-01 2022-08-26 上海煦顼技术有限公司 嵌合抗原受体修饰细胞治疗癌症的应用
AR108427A1 (es) 2016-04-01 2018-08-22 Kite Pharma Inc Antígeno quimérico y receptores de células t y métodos de uso
US10654934B2 (en) 2016-04-01 2020-05-19 Innovative Cellular Therapeutics CO., LTD. Use of chimeric antigen receptor modified cells to treat cancer
KR102522622B1 (ko) 2016-04-01 2023-04-18 카이트 파마 인코포레이티드 Bcma 결합 분자 및 그의 사용 방법
CN109641008B (zh) 2016-04-01 2021-03-23 凯德药业股份有限公司 嵌合受体及其方法和用途
WO2017177230A1 (en) 2016-04-08 2017-10-12 X4 Pharmaceuticals, Inc. Methods for treating cancer
AU2017246289A1 (en) 2016-04-08 2018-10-11 Emory University Methods of treating cancer and infectious diseases using cell based therapies
WO2017180587A2 (en) 2016-04-11 2017-10-19 Obsidian Therapeutics, Inc. Regulated biocircuit systems
CN106399255B (zh) * 2016-04-13 2019-10-18 阿思科力(苏州)生物科技有限公司 Pd-1 car-t细胞及其制备方法和应用
US10188749B2 (en) 2016-04-14 2019-01-29 Fred Hutchinson Cancer Research Center Compositions and methods to program therapeutic cells using targeted nucleic acid nanocarriers
KR20180134385A (ko) 2016-04-15 2018-12-18 노파르티스 아게 선택적 단백질 발현을 위한 조성물 및 방법
MA43552A (fr) 2016-04-15 2018-11-07 Alpine Immune Sciences Inc Protéines immunomodulatrices à variants de cd80 et leurs utilisations
EP3446119A1 (en) 2016-04-18 2019-02-27 The Broad Institute Inc. Improved hla epitope prediction
CN105907719B (zh) * 2016-04-18 2019-10-18 阿思科力(苏州)生物科技有限公司 Anti ROBO1 CAR-T细胞及其制备和应用
ES2937699T3 (es) * 2016-04-22 2023-03-30 Crage Medical Co Ltd Composiciones y métodos de inmunoterapia celular
WO2017192536A1 (en) 2016-05-02 2017-11-09 University Of Kansas Eliminating mhc restriction from the t cell receptor as a strategy for immunotherapy
MX2018013445A (es) 2016-05-06 2019-09-09 Juno Therapeutics Inc Celulas diseñadas geneticamente y metodos para obtener las mismas.
WO2017195153A1 (en) * 2016-05-11 2017-11-16 The University Of Chicago Methods of treating cancers with ct45 targeted therapies
ES2901215T3 (es) 2016-05-27 2022-03-21 Aadigen Llc Péptidos y nanopartículas para la liberación intracelular de moléculas de edición del genoma
EP3464366A1 (en) * 2016-05-27 2019-04-10 The U.S.A. As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Flt3-specific chimeric antigen receptors and methods using same
CN105837693A (zh) * 2016-05-30 2016-08-10 李斯文 一种基于bcma的抗原嵌合受体及其制备方法和应用
WO2017210617A2 (en) 2016-06-02 2017-12-07 Porter, David, L. Therapeutic regimens for chimeric antigen receptor (car)- expressing cells
CA3026453A1 (en) 2016-06-03 2017-12-07 Memorial Sloan-Kettering Cancer Center Adoptive cell therapies as early treatment options
GB201609811D0 (en) 2016-06-05 2016-07-20 Snipr Technologies Ltd Methods, cells, systems, arrays, RNA and kits
WO2017213979A1 (en) * 2016-06-06 2017-12-14 St. Jude Children's Research Hospital Anti-cd7 chimeric antigen receptor and method of use thereof
MA45341A (fr) 2016-06-06 2019-04-10 Hutchinson Fred Cancer Res Procédés de traitement de malignités de lymphocytes b au moyen d'une thérapie cellulaire adoptive
CA3025667A1 (en) * 2016-06-08 2017-12-14 Intrexon Corporation Cd33 specific chimeric antigen receptors
BR112018075649A2 (pt) 2016-06-08 2019-04-09 Abbvie Inc. anticorpos anti-b7-h3 e conjugados de fármaco de anticorpo
TW202304996A (zh) 2016-06-08 2023-02-01 美商艾伯維有限公司 抗-b7-h3抗體及抗體藥物結合物
CA3027047A1 (en) 2016-06-08 2017-12-14 Abbvie Inc. Anti-cd98 antibodies and antibody drug conjugates
JP2019522643A (ja) 2016-06-08 2019-08-15 アッヴィ・インコーポレイテッド 抗ｃｄ９８抗体及び抗体薬物コンジュゲート
MX2018015274A (es) 2016-06-08 2019-10-07 Abbvie Inc Anticuerpos anti-cd98 y conjugados de anticuerpo y farmaco.
US20200002421A1 (en) 2016-06-08 2020-01-02 Abbvie Inc. Anti-b7-h3 antibodies and antibody drug conjugates
WO2017223239A1 (en) 2016-06-21 2017-12-28 X4 Pharmaceuticals, Inc. Cxcr4 inhibitors and uses thereof
CN109641838A (zh) 2016-06-21 2019-04-16 X4 制药有限公司 Cxcr4抑制剂及其用途
EP3471726A4 (en) 2016-06-21 2019-10-09 X4 Pharmaceuticals, Inc. CXCR4 INHIBITORS AND USES THEREOF
EP3474867A4 (en) 2016-06-24 2020-05-20 iCell Gene Therapeutics LLC CHIMERIC ANTIGEN (CAR) RECEPTORS, COMPOSITIONS AND RELATED METHODS
CN106117367B (zh) * 2016-06-24 2020-02-11 安徽未名细胞治疗有限公司 一种her-3特异性嵌合抗原受体及其应用
CN110291402B (zh) 2016-06-27 2023-09-01 朱诺治疗学股份有限公司 鉴定肽表位的方法、结合此类表位的分子和相关用途
MA45491A (fr) 2016-06-27 2019-05-01 Juno Therapeutics Inc Épitopes à restriction cmh-e, molécules de liaison et procédés et utilisations associés
AU2017291262A1 (en) 2016-06-30 2019-01-03 F. Hoffmann-La Roche Ag Improved adoptive T-cell therapy
EP4269562A3 (en) 2016-07-12 2023-12-27 Kite Pharma, Inc. Antigen binding molecules and methods of use thereof
JP2018035137A (ja) 2016-07-13 2018-03-08 マブイミューン ダイアグノスティックス エイジーＭａｂｉｍｍｕｎｅ Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ Ａｇ 新規な抗線維芽細胞活性化タンパク質（ｆａｐ）結合薬剤およびその使用
CA3030837A1 (en) 2016-07-15 2018-01-18 Novartis Ag Treatment and prevention of cytokine release syndrome using a chimeric antigen receptor in combination with a kinase inhibitor
US11242386B2 (en) * 2016-07-18 2022-02-08 Helix Biopharma Corp. CEACAM6 CAR immune cells to treat cancers
KR102565885B1 (ko) * 2016-07-20 2023-08-09 유니버시티 오브 유타 리서치 파운데이션 Cd229 car t 세포 및 이의 사용 방법
US11384156B2 (en) 2016-07-25 2022-07-12 The Nemours Foundation Adoptive T-cell therapy using EMPD-specific chimeric antigen receptors for treating IgE-mediated allergic diseases
US11471488B2 (en) 2016-07-28 2022-10-18 Alpine Immune Sciences, Inc. CD155 variant immunomodulatory proteins and uses thereof
WO2018023025A1 (en) 2016-07-28 2018-02-01 Novartis Ag Combination therapies of chimeric antigen receptors adn pd-1 inhibitors
WO2018022945A1 (en) 2016-07-28 2018-02-01 Alpine Immune Sciences, Inc. Cd112 variant immunomodulatory proteins and uses thereof
EP3491013A1 (en) 2016-07-28 2019-06-05 Alpine Immune Sciences, Inc. Cd155 variant immunomodulatory proteins and uses thereof
AU2017301880C1 (en) 2016-07-29 2022-04-21 Juno Therapeutics, Inc. Immunomodulatory polypeptides and related compositions and methods
JP2019521695A (ja) 2016-07-29 2019-08-08 ジュノー セラピューティクス インコーポレイテッド 複製可能ウイルスの存在または非存在を評価するための方法
CN110088133B (zh) * 2016-07-29 2023-12-08 朱诺治疗学股份有限公司 抗独特型抗体及相关方法
CN110267677A (zh) 2016-08-01 2019-09-20 诺华股份有限公司 使用与原m2巨噬细胞分子抑制剂组合的嵌合抗原受体治疗癌症
US11242376B2 (en) 2016-08-02 2022-02-08 TCR2 Therapeutics Inc. Compositions and methods for TCR reprogramming using fusion proteins
US11078481B1 (en) 2016-08-03 2021-08-03 KSQ Therapeutics, Inc. Methods for screening for cancer targets
US11630103B2 (en) 2016-08-17 2023-04-18 The Broad Institute, Inc. Product and methods useful for modulating and evaluating immune responses
WO2018045177A1 (en) 2016-09-01 2018-03-08 Chimera Bioengineering, Inc. Gold optimized car t-cells
EP4282969A3 (en) 2016-09-02 2024-01-31 Lentigen Technology, Inc. Compositions and methods for treating cancer with duocars
CA3039136A1 (en) 2016-09-02 2018-03-08 The Regents Of The University Of California Methods and compositions involving interleukin-6 receptor alpha-binding single chain variable fragments
US11078483B1 (en) 2016-09-02 2021-08-03 KSQ Therapeutics, Inc. Methods for measuring and improving CRISPR reagent function
US20190262399A1 (en) 2016-09-07 2019-08-29 The Broad Institute, Inc. Compositions and methods for evaluating and modulating immune responses
BR112019004662A2 (pt) 2016-09-12 2019-05-28 Juno Therapeutics Inc conjuntos de sacos de biorreator de perfusão
WO2018057585A1 (en) 2016-09-21 2018-03-29 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Chimeric antigen receptor (car) that targets chemokine receptor ccr4 and its use
CA3037528A1 (en) * 2016-09-23 2018-03-29 University Of Southern California Chimeric antigen receptors and compositions and methods of use thereof
US10626187B2 (en) 2016-09-28 2020-04-21 Kite Pharma, Inc. Antigen binding molecules specific for an anti-CD19 scFv
WO2018063985A1 (en) 2016-09-28 2018-04-05 Atossa Genetics Inc. Methods of adoptive cell therapy
WO2018067618A1 (en) 2016-10-03 2018-04-12 Juno Therapeutics, Inc. Hpv-specific binding molecules
US10525083B2 (en) 2016-10-07 2020-01-07 Novartis Ag Nucleic acid molecules encoding chimeric antigen receptors comprising a CD20 binding domain
PL3445787T3 (pl) 2016-10-07 2021-05-31 TCR2 Therapeutics Inc. Kompozycje i sposoby reprogramowania receptorów limfocytów t przy użyciu białek fuzyjnych
WO2018067991A1 (en) 2016-10-07 2018-04-12 The Brigham And Women's Hospital, Inc. Modulation of novel immune checkpoint targets
CN107151654B (zh) * 2016-10-11 2020-05-05 深圳宾德生物技术有限公司 一种人源t淋巴细胞的培养基及其制备方法和应用
MX2019004181A (es) 2016-10-13 2019-10-30 Juno Therapeutics Inc Métodos y composiciones de inmunoterapia que implican moduladores de la ruta metabólica de triptófano.
CN107936120B (zh) * 2016-10-13 2021-03-09 上海赛比曼生物科技有限公司 Cd19靶向性的嵌合抗原受体及其制法和应用
GB2573406B (en) 2016-10-18 2021-11-10 Univ Minnesota Tumor infiltrating lymphocytes and methods of therapy
US11174306B2 (en) 2016-10-19 2021-11-16 The Scripps Research Institute Chimeric antigen receptor effector cell switches with humanized targeting moieties and/or optimized chimeric antigen receptor interacting domains and uses thereof
US11331380B2 (en) 2016-10-20 2022-05-17 Celgene Corporation Cereblon-based heterodimerizable chimeric antigen receptors
CN110352245A (zh) 2016-10-20 2019-10-18 高山免疫科学股份有限公司 可分泌变体免疫调节蛋白和工程化细胞疗法
TWI788307B (zh) 2016-10-31 2023-01-01 美商艾歐凡斯生物治療公司 用於擴增腫瘤浸潤性淋巴細胞之工程化人造抗原呈現細胞
CA3040914A1 (en) 2016-11-03 2018-05-24 Juno Therapeutics, Inc. Combination therapy of a cell based therapy and a microglia inhibitor
EP3534938A2 (en) 2016-11-03 2019-09-11 Juno Therapeutics, Inc. Combination therapy of a t cell therapy and a btk inhibitor
US11332713B2 (en) 2016-11-16 2022-05-17 KSQ Therapeutics, Inc. Gene-regulating compositions and methods for improved immunotherapy
US11401330B2 (en) 2016-11-17 2022-08-02 Seagen Inc. Glycan-interacting compounds and methods of use
SG10201912387PA (en) 2016-11-22 2020-02-27 Nat Univ Singapore Blockade of cd7 expression and chimeric antigen receptors for immunotherapy of t-cell malignancies
JP7291396B2 (ja) 2016-11-22 2023-06-15 ティーシーアール２ セラピューティクス インク． 融合タンパク質を用いたｔｃｒの再プログラミングのための組成物及び方法
MX2019006090A (es) 2016-11-23 2019-08-21 Novartis Ag Metodos para mejorar la respuesta inmune con everolimus, dactolisib o ambos.
WO2018102752A1 (en) * 2016-12-02 2018-06-07 Cartesian Therapeutics, Inc. Cancer immuno therapy with highly enriched cd8+ chimeric antigen receptor t cells
EP3548083A1 (en) 2016-12-03 2019-10-09 Juno Therapeutics, Inc. Methods for modulation of car-t cells
CN110545826A (zh) 2016-12-03 2019-12-06 朱诺治疗学股份有限公司 用于与激酶抑制剂组合使用治疗性t细胞的方法和组合物
AU2017368333A1 (en) 2016-12-03 2019-06-13 Juno Therapeutics, Inc. Methods for determining CAR-T cells dosing
CN110249046A (zh) 2016-12-05 2019-09-17 朱诺治疗学股份有限公司 用于过继细胞疗法的工程化细胞的产生
CN108165568B (zh) * 2016-12-07 2020-12-08 上海恒润达生生物科技有限公司 一种培养CD19CAR-iNKT细胞方法及用途
CN107058315B (zh) * 2016-12-08 2019-11-08 上海优卡迪生物医药科技有限公司 敲减人PD-1的siRNA、重组表达CAR-T载体及其构建方法和应用
MX2019006631A (es) 2016-12-12 2019-11-12 Seattle Childrens Hospital Dba Seattle Childrens Res Inst Variantes quimericas de factores de transcripcion con sensibilidad aumentada a induccion por ligando de farmaco de expresion transgenica en celulas mamiferas.
CN108218994A (zh) * 2016-12-14 2018-06-29 上海恒润达生生物科技有限公司 一种方法培养t记忆干细胞
AU2017378482A1 (en) 2016-12-16 2019-07-11 B-Mogen Biotechnologies, Inc. Enhanced hAT family transposon-mediated gene transfer and associated compositions, systems, and methods
US11278570B2 (en) 2016-12-16 2022-03-22 B-Mogen Biotechnologies, Inc. Enhanced hAT family transposon-mediated gene transfer and associated compositions, systems, and methods
CN108276493B (zh) * 2016-12-30 2023-11-14 南京传奇生物科技有限公司 一种嵌合抗原受体及其应用
WO2018119518A1 (en) 2017-01-01 2018-07-05 Lee Chi Yu Gregory Rp215 chimeric antigen receptor construct and methods of making and using same
EP4032550A3 (en) 2017-01-05 2022-10-19 Innovative Cellular Therapeutics Holdings, Ltd. Humanized anti-cd19 antibody and use thereof with chimeric antigen receptor
US11566061B2 (en) 2017-01-05 2023-01-31 Fred Hutchinson Cancer Center Systems and methods to improve vaccine efficacy
BR112019013940A2 (pt) 2017-01-06 2020-02-11 Iovance Biotherapeutics, Inc. Método de tratar um câncer com uma população de linfócitos infiltrantes de tumor, processo para preparação de uma população de linfócitos infiltrantes de tumor, população de linfócitos infiltrantes de tumor, e, composição farmacêutica.
EP3565638B8 (en) 2017-01-06 2024-04-10 BicycleRD Limited Bicycle conjugate for treating cancer
EP3346001A1 (en) * 2017-01-06 2018-07-11 TXCell Monospecific regulatory t cell population with cytotoxicity for b cells
CA3049165A1 (en) 2017-01-06 2018-07-12 Iovance Biotherapeutics, Inc. Expansion of tumor infiltrating lymphocytes with potassium channel agonists and therapeutic uses thereof
CN108285920A (zh) * 2017-01-09 2018-07-17 上海恒润达生生物科技有限公司 一种体内检测cart细胞表达的技术及其用途
US11821027B2 (en) 2017-01-10 2023-11-21 Juno Therapeutics, Inc. Epigenetic analysis of cell therapy and related methods
GB201700553D0 (en) 2017-01-12 2017-03-01 Genagon Therapeutics Ab Therapeutic agents
WO2018132695A1 (en) * 2017-01-13 2018-07-19 Celdara Medical, Llc Chimeric antigen receptors targeting tim-1
MA47325A (fr) 2017-01-20 2019-11-27 Juno Therapeutics Gmbh Conjugués de surface cellulaire et compositions cellulaires et méthodes associées
EP3574116A1 (en) 2017-01-24 2019-12-04 The Broad Institute, Inc. Compositions and methods for detecting a mutant variant of a polynucleotide
CN108342363B (zh) * 2017-01-25 2021-02-12 北京马力喏生物科技有限公司 共表达抗msln嵌合抗原受体和免疫检查点抑制分子的转基因淋巴细胞及其用途
WO2018140725A1 (en) 2017-01-26 2018-08-02 Novartis Ag Cd28 compositions and methods for chimeric antigen receptor therapy
RU2674894C2 (ru) * 2017-01-30 2018-12-13 Общество с ограниченной ответственностью "ПЛАНТА" Новые люциферазы и способы их использования
WO2018144597A1 (en) * 2017-01-31 2018-08-09 University Of Pittsburgh - Of The Commonwealth System Of Higher Education Methods of sensitizing cancer cells to immune cell killing
US20190375815A1 (en) 2017-01-31 2019-12-12 Novartis Ag Treatment of cancer using chimeric t cell receptor proteins having multiple specificities
AU2018219226A1 (en) 2017-02-07 2019-08-15 Seattle Children's Hospital (dba Seattle Children's Research Institute) Phospholipid ether (PLE) CAR T cell tumor targeting (CTCT) agents
BR112019016657A2 (pt) 2017-02-12 2020-04-07 Neon Therapeutics Inc métodos baseados em hla e composições e usos destes
US11046775B2 (en) 2017-02-14 2021-06-29 Kite Pharma, Inc. CD70 binding molecules and methods of use thereof
CA3052779A1 (en) 2017-02-17 2018-08-23 Fred Hutchinson Cancer Research Center Combination therapies for treatment of bcma-related cancers and autoimmune disorders
JP7228522B2 (ja) 2017-02-27 2023-02-24 ジュノー セラピューティクス インコーポレイテッド 細胞療法における投薬に関する組成物、製造物品、および方法
EP3585880A1 (en) 2017-02-27 2020-01-01 Life Technologies Corporation Expansion of populations of t cells by the use of modified serum free media
WO2018160731A1 (en) 2017-02-28 2018-09-07 Novartis Ag Shp inhibitor compositions and uses for chimeric antigen receptor therapy
CN110582288A (zh) 2017-02-28 2019-12-17 恩多塞特公司 用于car t细胞疗法的组合物和方法
US11629340B2 (en) 2017-03-03 2023-04-18 Obsidian Therapeutics, Inc. DHFR tunable protein regulation
JP7341900B2 (ja) * 2017-03-03 2023-09-11 オブシディアン セラピューティクス， インコーポレイテッド 免疫療法のためのｃｄ１９組成物及び方法
SG11201907889YA (en) 2017-03-03 2019-09-27 Seattle Genetics Inc Glycan-interacting compounds and methods of use
TW201837175A (zh) 2017-03-13 2018-10-16 美商凱特製藥公司 用於黑色素瘤之嵌合抗原受體及其用途
US20200077644A1 (en) 2017-03-14 2020-03-12 Juno Therapeutics, Inc. Methods for cryogenic storage
WO2018170023A1 (en) 2017-03-16 2018-09-20 Alpine Immune Sciences, Inc. Pd-l2 variant immunomodulatory proteins and uses thereof
MX2019010887A (es) 2017-03-16 2019-10-15 Alpine Immune Sciences Inc Proteinas inmunomoduladoras de cb80 variante y usos de estas.
EP3596116B1 (en) 2017-03-16 2023-09-06 Alpine Immune Sciences, Inc. Pd-l1 variant immunomodulatory proteins and uses thereof
CA3055784A1 (en) 2017-03-17 2018-09-20 Fred Hutchinson Cancer Research Center Immunomodulatory fusion proteins and uses thereof
MX2019011272A (es) 2017-03-22 2019-10-24 Novartis Ag Composiciones y metodos para inmunooncologia.
MX2019011324A (es) 2017-03-23 2020-01-21 Massachusetts Gen Hospital Bloqueo de cxcr4/cxcr7 y tratamiento de enfermedad asociada con el virus del papiloma humano.
US10426797B2 (en) * 2017-03-24 2019-10-01 Lentigen Technology, Inc. Compositions and methods for treating cancer with anti-CD33 immunotherapy
US11896616B2 (en) 2017-03-27 2024-02-13 National University Of Singapore Stimulatory cell lines for ex vivo expansion and activation of natural killer cells
CA3056439A1 (en) 2017-03-27 2018-10-04 National University Of Singapore Truncated nkg2d chimeric receptors and uses thereof in natural killer cell immunotherapy
WO2018183842A1 (en) 2017-03-31 2018-10-04 The Board Of Trustees Of The Leland Standford Junior University Methods of treating t cell exhaustion by inhibiting or modulating t cell receptor signaling
CA3054443A1 (en) 2017-04-01 2018-10-14 Avm Biotechnology, Llc Replacement of cytotoxic preconditioning before cellular immunotherapy
WO2018183921A1 (en) 2017-04-01 2018-10-04 The Broad Institute, Inc. Methods and compositions for detecting and modulating an immunotherapy resistance gene signature in cancer
AR111360A1 (es) 2017-04-03 2019-07-03 Kite Pharma Inc Tratamiento usando células t de receptor quimérico incorporando células t polifuncionales optimizadas
US20230190796A1 (en) 2017-04-07 2023-06-22 Juno Therapeutics, Inc. Engineered cells expressing prostate-specific membrane antigen (psma) or a modified form thereof and related methods
EP3610266A4 (en) 2017-04-12 2021-04-21 Massachusetts Eye and Ear Infirmary TUMOR SIGNATURE OF METASTASIS, COMPOSITIONS OF SUBSTANCES AND USES THEREOF
MA54103A (fr) 2017-04-14 2021-09-15 Juno Therapeutics Inc Procédés d'évaluation de la glycosylation de surface cellulaire
AU2018251187B2 (en) 2017-04-14 2024-03-28 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Compositions and methods for transient gene therapy with enhanced stability
CN108727497A (zh) * 2017-04-17 2018-11-02 沈阳美达博生物科技有限公司 一种cd19抗体及其应用
KR20190141190A (ko) 2017-04-18 2019-12-23 후지필름 셀룰러 다이내믹스, 인코포레이티드 항원-특이적 면역 이펙터 세포
EP3612629A1 (en) 2017-04-18 2020-02-26 The Broad Institute, Inc. Compositions for detecting secretion and methods of use
CN110753555A (zh) 2017-04-19 2020-02-04 得克萨斯州大学系统董事会 表达工程化抗原受体的免疫细胞
JOP20180040A1 (ar) 2017-04-20 2019-01-30 Gilead Sciences Inc مثبطات pd-1/pd-l1
CA3059939A1 (en) 2017-04-21 2018-10-25 Kyn Therapeutics Indole ahr inhibitors and uses thereof
JOP20180042A1 (ar) 2017-04-24 2019-01-30 Kite Pharma Inc نطاقات ربط مولد ضد متوافقة مع البشر وطرق الاستخدام
AU2018260380A1 (en) 2017-04-27 2019-11-07 Juno Therapeutics Gmbh Oligomeric particle reagents and methods of use thereof
WO2018201056A1 (en) 2017-04-28 2018-11-01 Novartis Ag Cells expressing a bcma-targeting chimeric antigen receptor, and combination therapy with a gamma secretase inhibitor
BR112019022893A2 (pt) 2017-05-01 2020-05-19 Juno Therapeutics Inc combinação de uma terapia celular e um composto imunomodulatório
SG11201910127XA (en) * 2017-05-02 2019-11-28 Chongqing Prec Biotech Company Limited Chimeric antigen receptor against human cd19 antigen and its application
CN107226867B (zh) * 2017-07-25 2018-02-06 重庆精准生物技术有限公司 抗人cd19抗原的嵌合抗原受体及其应用
JP7349365B2 (ja) * 2017-05-10 2023-09-22 アイオバンス バイオセラピューティクス，インコーポレイテッド 液性腫瘍からの腫瘍浸潤リンパ球の拡大培養及びその治療的使用
US11622977B2 (en) 2017-05-12 2023-04-11 Crispr Therapeutics Ag Materials and methods for engineering cells and uses thereof in immuno-oncology
US11166985B2 (en) 2017-05-12 2021-11-09 Crispr Therapeutics Ag Materials and methods for engineering cells and uses thereof in immuno-oncology
US10415017B2 (en) 2017-05-17 2019-09-17 Thunder Biotech, Inc. Transgenic macrophages, chimeric antigen receptors, and associated methods
EP3406733A1 (en) 2017-05-24 2018-11-28 SIB Swiss Institute of Bioinformatics Kinase mutants and uses thereof
KR102641269B1 (ko) 2017-05-24 2024-02-26 이펙터 테라퓨틱스, 인크. 개선된 항종양 면역 반응을 위한 조성물 및 방법
EP3630807A1 (en) 2017-05-25 2020-04-08 Leidos, Inc. Pd-1 and ctla-4 dual inhibitor peptides
JP7014820B2 (ja) 2017-05-26 2022-02-01 カイト ファーマ インコーポレイテッド 胚性間葉系始原細胞の製造方法及び使用方法
CA3065126A1 (en) 2017-06-01 2018-12-06 Innovative Cellular Therapeutics CO., LTD. Chimeric antigen receptor cell preparation and uses thereof
EP3631468A1 (en) 2017-06-02 2020-04-08 Juno Therapeutics, Inc. Articles of manufacture and methods related to toxicity associated with cell therapy
MX2019014268A (es) 2017-06-02 2020-08-03 Juno Therapeutics Inc Artículos de manufactura y métodos para tratamiento usando terapia celular adoptiva.
EP3631805A4 (en) * 2017-06-02 2021-03-24 Mayo Foundation for Medical Education and Research SYSTEM AND METHOD FOR PROVIDING EXPERTISE FROM CLINICAL RESULTS IN DISEASE TREATMENT
US11897953B2 (en) 2017-06-14 2024-02-13 The Broad Institute, Inc. Compositions and methods targeting complement component 3 for inhibiting tumor growth
PT3538645T (pt) 2017-06-20 2021-04-15 Inst Curie Células imunológicas deficitárias em suv39h1
AU2018289428A1 (en) 2017-06-21 2020-02-06 The General Hospital Corporation Methods and compositions for chimeric antigen receptor targeting cancer cells
US20210147800A1 (en) 2017-06-22 2021-05-20 Board Of Regents, The University Of Texas System Methods for producing regulatory immune cells and uses thereof
CN110785187B (zh) 2017-06-22 2024-04-05 诺华股份有限公司 针对cd73的抗体分子及其用途
WO2018237173A1 (en) 2017-06-22 2018-12-27 Novartis Ag ANTIBODY MOLECULES DIRECTED AGAINST CD73 AND CORRESPONDING USES
JP7401312B2 (ja) 2017-06-28 2023-12-19 リジェネロン・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッド 抗ヒトパピローマウイルス（ｈｐｖ）抗原結合性タンパク質およびその使用方法
MX2019015155A (es) 2017-06-29 2020-08-03 Juno Therapeutics Inc Modelo de raton para valorar toxicidades asociadas con inmunoterapias.
WO2019006418A2 (en) 2017-06-30 2019-01-03 Intima Bioscience, Inc. ADENO-ASSOCIATED VIRAL VECTORS FOR GENE THERAPY
US11235004B2 (en) 2017-06-30 2022-02-01 Innovative Cellular Therapeutics Holdings, Ltd. Lymphocyte cell lines and uses thereof
US20220233588A1 (en) 2017-06-30 2022-07-28 Cellectis Cellular immunotherapy for repetitive administration
CN107287164A (zh) * 2017-07-07 2017-10-24 青岛协和华美医学诊断技术有限公司 靶向cd19的嵌合抗原受体t细胞、制备方法及应用
CN107365798B (zh) * 2017-07-13 2020-07-14 山东省齐鲁细胞治疗工程技术有限公司 一种携带iCasp9自杀基因的CD19-CAR-T细胞及其应用
EP3655026A4 (en) * 2017-07-17 2021-07-28 Janssen Biotech, Inc. ANTIGBINDING REGIONS AGAINST FIBRONECTIN TYPE III DOMAINS AND METHOD OF USING THEREOF
SG11202000606TA (en) 2017-07-29 2020-02-27 Juno Therapeutics Inc Reagents for expanding cells expressing recombinant receptors
CA3071624A1 (en) 2017-07-31 2019-02-07 Lentigen Technology, Inc. Compositions and methods for treating cancer with anti-cd19/cd20 immunotherapy
EP3665308A1 (en) 2017-08-07 2020-06-17 The Johns Hopkins University Methods and materials for assessing and treating cancer
MX2020001491A (es) 2017-08-09 2020-08-06 Juno Therapeutics Inc Metodos y composiciones para preparar celulas geneticamente modificadas.
ES2959953T3 (es) 2017-08-09 2024-02-29 Juno Therapeutics Inc Métodos para producir composiciones celulares genéticamente modificadas y composiciones relacionadas
US20190038733A1 (en) 2017-08-10 2019-02-07 National University Of Singapore T cell receptor-deficient chimeric antigen receptor t-cells and methods of use thereof
US10696650B2 (en) 2017-08-17 2020-06-30 Ikena Oncology, Inc. AHR inhibitors and uses thereof
CN111065399B (zh) 2017-09-01 2023-11-28 Gpb科学有限公司 使用微流体制备治疗活性细胞的方法
US20210071258A1 (en) 2017-09-01 2021-03-11 Juno Therapeutics, Inc. Gene expression and assessment of risk of developing toxicity following cell therapy
EP3679370A1 (en) 2017-09-07 2020-07-15 Juno Therapeutics, Inc. Methods of identifying cellular attributes related to outcomes associated with cell therapy
CN107557337B (zh) * 2017-09-15 2020-06-26 山东兴瑞生物科技有限公司 一种抗ror1安全型嵌合抗原受体修饰的免疫细胞及其应用
CN114533863A (zh) 2017-09-15 2022-05-27 凯德药业股份有限公司 用于进行具有监管链和身份链生物样品跟踪的患者特异性免疫疗法规程的方法和系统
CN111247239A (zh) 2017-09-15 2020-06-05 生命技术公司 用于培养和扩充细胞的组合物和方法
SG11202002520UA (en) * 2017-09-19 2020-04-29 Univ British Columbia Anti-hla-a2 antibodies and methods of using the same
CA3076337A1 (en) 2017-09-19 2019-03-28 Massachusetts Institute Of Technology Compositions for chimeric antigen receptor t cell therapy and uses thereof
CN109517820B (zh) 2017-09-20 2021-09-24 北京宇繁生物科技有限公司 一种靶向HPK1的gRNA以及HPK1基因编辑方法
BR112020005519A2 (pt) 2017-09-20 2020-10-27 The University Of British Columbia novos anticorpos anti-hla-a2 e usos dos mesmos
CN111511388A (zh) 2017-09-21 2020-08-07 博德研究所 用于靶向核酸编辑的系统、方法和组合物
AU2018338192B2 (en) 2017-09-22 2022-03-03 Kite Pharma, Inc. Chimeric polypeptides and uses thereof
US10844371B2 (en) 2017-09-22 2020-11-24 Kite Pharma, Inc. Antigen binding molecules and methods of use thereof
WO2019060693A1 (en) 2017-09-22 2019-03-28 Kymera Therapeutics, Inc. CRBN LIGANDS AND USES THEREOF
US11623932B2 (en) 2017-09-22 2023-04-11 Kymera Therapeutics, Inc. Protein degraders and uses thereof
CA3077187A1 (en) * 2017-09-26 2019-04-04 Longwood University Pd1-specific chimeric antigen receptor as an immunotherapy
CN109554349B (zh) * 2017-09-27 2022-06-24 亘喜生物科技（上海）有限公司 Pd-1基因表达沉默的工程化免疫细胞
EP3687575A4 (en) * 2017-09-29 2021-06-30 National Health Research Institutes METHODS AND COMPOSITIONS FOR INCREASING SURVIVAL AND FUNCTIONALITY OF ANTITUMOR AND ANTIVIRUS T CELLS
JP2020537515A (ja) 2017-10-03 2020-12-24 ジュノー セラピューティクス インコーポレイテッド Ｈｐｖ特異的結合分子
US11780932B2 (en) 2017-10-09 2023-10-10 Wisconsin Alumni Research Foundation Antibodies targeting glioblastoma stem-like cells and methods of use thereof
MA50360A (fr) 2017-10-10 2020-08-19 Alpine Immune Sciences Inc Protéines immunomodulatrices de variants de ctla-4 et leurs utilisations
JP2021501570A (ja) 2017-10-18 2021-01-21 ノバルティス アーゲー 選択的タンパク質分解のための組成物及び方法
MX2020004540A (es) 2017-10-18 2020-08-03 Alpine Immune Sciences Inc Proteinas inmunomoduladoras de ligando icos variante y composiciones y metodos relacionados.
WO2019079564A1 (en) 2017-10-18 2019-04-25 Kite Pharma, Inc. METHODS OF DELIVERY OF CHIMERIC ANTIGEN RECEPTOR IMMUNOTHERAPY
CN109694854B (zh) * 2017-10-20 2023-11-21 亘喜生物科技（上海）有限公司 通用型嵌合抗原受体t细胞制备技术
US11732257B2 (en) 2017-10-23 2023-08-22 Massachusetts Institute Of Technology Single cell sequencing libraries of genomic transcript regions of interest in proximity to barcodes, and genotyping of said libraries
US20210030793A1 (en) * 2017-10-26 2021-02-04 St. Jude Children's Research Hospital, Inc. Methods and compositions for treating cd33+ cancers and improving in vivo persistence of chimeric antigen receptor t cells
WO2019084427A1 (en) 2017-10-27 2019-05-02 Kite Pharma, Inc. T-LYMPHOCYTE RECEPTOR ANTIGEN BINDING MOLECULES AND METHODS OF USE THEREOF
WO2019089798A1 (en) 2017-10-31 2019-05-09 Novartis Ag Anti-car compositions and methods
AU2018360599A1 (en) 2017-11-01 2020-05-07 Juno Therapeutics, Inc. Process for generating therapeutic compositions of engineered cells
JP2021502113A (ja) 2017-11-01 2021-01-28 エディタス・メディシン，インコーポレイテッド 免疫療法のためのｔ細胞におけるｔｇｆｂｒ２のｃｒｉｓｐｒ−ｃａｓ９編集のための方法、組成物、および構成要素
WO2019089848A1 (en) 2017-11-01 2019-05-09 Juno Therapeutics, Inc. Methods associated with tumor burden for assessing response to a cell therapy
CA3080904A1 (en) 2017-11-01 2019-05-09 Juno Therapeutics, Inc. Antibodies and chimeric antigen receptors specific for b-cell maturation antigen
KR20200116077A (ko) 2017-11-01 2020-10-08 주노 쎄러퓨티크스 인코퍼레이티드 B 세포 성숙 항원에 특이적인 키메라 항원 수용체 및 암호화 폴리뉴클레오타이드
WO2019089982A1 (en) 2017-11-01 2019-05-09 Juno Therapeutics, Inc. Method of assessing activity of recombinant antigen receptors
US20210132042A1 (en) 2017-11-01 2021-05-06 Juno Therapeutics, Inc. Methods of assessing or monitoring a response to a cell therapy
MA50859A (fr) 2017-11-01 2020-09-09 Celgene Corp Procédé pour la production d'une composition de lymphocytes t
AU2018360031A1 (en) * 2017-11-03 2020-05-21 Lentigen Technology, Inc. Compositions and methods for treating cancer with anti-ROR1 immunotherapy
KR20200079312A (ko) 2017-11-06 2020-07-02 에디타스 메디신, 인코포레이티드 면역요법을 위한 t 세포 내 cblb의 crispr-cas9 편집 방법, 조성물 및 성분
AU2018359907A1 (en) 2017-11-06 2020-05-07 Fred Hutchinson Cancer Center Combination of a cell therapy and a gamma secretase inhibitor
CA3079999A1 (en) * 2017-11-07 2019-05-16 The Board Of Regents Of The University Of Texas System Targeting lilrb4 with car-t or car-nk cells in the treatment of cancer
MA50571A (fr) 2017-11-10 2020-09-16 Juno Therapeutics Inc Réservoirs cryogéniques à système fermé
EP3707160A1 (en) 2017-11-10 2020-09-16 The U.S.A. as represented by the Secretary, Department of Health and Human Services Chimeric antigen receptors targeting tumor antigens
WO2019094983A1 (en) 2017-11-13 2019-05-16 The Broad Institute, Inc. Methods and compositions for treating cancer by targeting the clec2d-klrb1 pathway
WO2019099440A1 (en) 2017-11-14 2019-05-23 Arcellx, Inc. Multifunctional immune cell therapies
US11377482B2 (en) 2017-11-14 2022-07-05 Arcellx, Inc. D-domain containing polypeptides and uses thereof
WO2019099639A1 (en) 2017-11-15 2019-05-23 Navartis Ag Bcma-targeting chimeric antigen receptor, cd19-targeting chimeric antigen receptor, and combination therapies
EP3710471A1 (en) 2017-11-16 2020-09-23 Kite Pharma, Inc. Modified chimeric antigen receptors and methods of use
EP3714041A1 (en) 2017-11-22 2020-09-30 Iovance Biotherapeutics, Inc. Expansion of peripheral blood lymphocytes (pbls) from peripheral blood
CN109837244A (zh) * 2017-11-25 2019-06-04 深圳宾德生物技术有限公司 一种敲除pd1的靶向cd19的嵌合抗原受体t细胞及其制备方法和应用
MX2020005651A (es) 2017-11-30 2020-10-28 Novartis Ag Receptor de antigeno quimerico dirigido a bcma y usos del mismo.
US20210198372A1 (en) 2017-12-01 2021-07-01 Juno Therapeutics, Inc. Methods for dosing and for modulation of genetically engineered cells
US20210363272A1 (en) * 2017-12-04 2021-11-25 COARE Holdings, Inc Anti-dclk1 antibodies and chimeric antigen receptors, and compositions and methods of use thereof
EP3720949A1 (en) 2017-12-08 2020-10-14 Juno Therapeutics, Inc. Serum-free media formulation for culturing cells and methods of use thereof
US20200384025A1 (en) 2017-12-08 2020-12-10 Juno Therapeutics, Inc. Process for producing a composition of engineered t cells
CN112203680A (zh) 2017-12-08 2021-01-08 朱诺治疗学股份有限公司 用于细胞疗法的表型标记和相关方法
WO2019118937A1 (en) 2017-12-15 2019-06-20 Juno Therapeutics, Inc. Anti-cct5 binding molecules and methods of use thereof
WO2019118873A2 (en) 2017-12-15 2019-06-20 Iovance Biotherapeutics, Inc. Systems and methods for determining the beneficial administration of tumor infiltrating lymphocytes, and methods of use thereof and beneficial administration of tumor infiltrating lymphocytes, and methods of use thereof
WO2019117976A1 (en) 2017-12-17 2019-06-20 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Peptide hydrogels and use thereof
WO2019126186A1 (en) 2017-12-18 2019-06-27 Neon Therapeutics, Inc. Neoantigens and uses thereof
US10966999B2 (en) 2017-12-20 2021-04-06 Institute Of Organic Chemistry And Biochemistry Ascr, V.V.I. 3′3′ cyclic dinucleotides with phosphonate bond activating the sting adaptor protein
JP7098748B2 (ja) 2017-12-20 2022-07-11 インスティチュート オブ オーガニック ケミストリー アンド バイオケミストリー エーエスシーアール，ヴイ．ヴイ．アイ． Ｓｔｉｎｇアダプタータンパク質を活性化するホスホン酸結合を有する２’３’環状ジヌクレオチド
CN108018312B (zh) * 2017-12-20 2019-09-10 上海优卡迪生物医药科技有限公司 一种t淋巴细胞白血病的car-t治疗载体及其构建方法和应用
GB201721833D0 (en) * 2017-12-22 2018-02-07 Cancer Research Tech Ltd Fusion proteins
EP3731869A4 (en) 2017-12-26 2021-09-22 Kymera Therapeutics, Inc. KINASES IRAQ DEGRADATION AGENTS AND THEIR USES
CN109970866B (zh) * 2017-12-28 2022-10-04 上海细胞治疗研究院 一种cd28双向激活共刺激分子受体及其用途
CN109970864A (zh) * 2017-12-28 2019-07-05 上海细胞治疗研究院 一种双向激活共刺激分子受体及其用途
CN109971712B (zh) * 2017-12-28 2023-06-20 上海细胞治疗研究院 特异性靶向cd19抗原且高水平稳定表达pd-1抗体的car-t细胞及用途
WO2019136288A1 (en) * 2018-01-05 2019-07-11 Maxcyte, Inc. Chronic car treatment for cancer
EP3737408A1 (en) 2018-01-08 2020-11-18 Novartis AG Immune-enhancing rnas for combination with chimeric antigen receptor therapy
US11919937B2 (en) 2018-01-09 2024-03-05 Board Of Regents, The University Of Texas System T cell receptors for immunotherapy
CA3088161A1 (en) * 2018-01-11 2019-07-18 Innovative Cellular Therapeutics Inc. Modified cell expansion and uses thereof
US10561686B2 (en) 2018-01-12 2020-02-18 Innovative Cellular Therapeutics CO., LTD. Modified cell expansion and uses thereof
US11485743B2 (en) 2018-01-12 2022-11-01 Kymera Therapeutics, Inc. Protein degraders and uses thereof
US11512080B2 (en) 2018-01-12 2022-11-29 Kymera Therapeutics, Inc. CRBN ligands and uses thereof
JP2021510738A (ja) 2018-01-15 2021-04-30 ファイザー・インク ４−１ｂｂと組み合わせたキメラ抗原受容体免疫治療製品の投与方法
BR112020014913A2 (pt) 2018-01-22 2020-12-08 Seattle Children's Hospital (dba Seattle Children's Research Institute) Métodos para uso de células t car
MX2020007799A (es) 2018-01-29 2020-09-18 Merck Patent Gmbh Inhibidores de cinasa no derrepresible de control de aminoacido general 2 (gcn2) y sus usos.
EP3746071A4 (en) 2018-01-29 2021-09-01 Merck Patent GmbH GCN2 INHIBITORS AND THEIR USES
KR102115236B1 (ko) * 2018-01-29 2020-05-27 (주)에스엠티바이오 췌장 또는 담관계암 치료를 위한 키메라 항원 수용체
EP3746569A1 (en) 2018-01-31 2020-12-09 Juno Therapeutics, Inc. Methods and reagents for assessing the presence or absence of replication competent virus
US20210069246A1 (en) 2018-01-31 2021-03-11 Celgene Corporation Combination therapy using adoptive cell therapy and checkpoint inhibitor
WO2019152660A1 (en) 2018-01-31 2019-08-08 Novartis Ag Combination therapy using a chimeric antigen receptor
US20200390814A1 (en) 2018-02-02 2020-12-17 Arizona Board Of Regents On Behalf Of Arizona State University Dna-chimeric antigen receptor t cells for immunotherapy
US20210087511A1 (en) * 2018-02-09 2021-03-25 Global Life Sciences Solutions Usa Llc Bioprocessing methods for cell therapy
TW201934575A (zh) 2018-02-11 2019-09-01 大陸商江蘇恆瑞醫藥股份有限公司 一種分離的嵌合抗原受體以及包含其的修飾ｔ細胞及用途
CN110157677A (zh) * 2018-02-12 2019-08-23 深圳宾德生物技术有限公司 一种靶向性t淋巴细胞及其制备方法和应用
US10596165B2 (en) 2018-02-12 2020-03-24 resTORbio, Inc. Combination therapies
EP4227302A1 (en) 2018-02-13 2023-08-16 Gilead Sciences, Inc. Pd-1/pd-l1 inhibitors
EP3752203A1 (en) 2018-02-13 2020-12-23 Novartis AG Chimeric antigen receptor therapy in combination with il-15r and il15
EP3752531A1 (en) 2018-02-14 2020-12-23 Kite Pharma, Inc. Anti-idiotypic antibodies directed to the antigen-binding portion of an bcma-binding molecule
AU2019222550B2 (en) 2018-02-16 2022-10-27 Kite Pharma, Inc. Modified pluripotent stem cells and methods of making and use
CN112272706A (zh) 2018-02-17 2021-01-26 旗舰先锋创新V股份有限公司 用于膜蛋白递送的组合物和方法
CA3093078A1 (en) 2018-03-06 2019-09-12 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Prostate-specific membrane antigen cars and methods of use thereof
WO2019170845A1 (en) 2018-03-09 2019-09-12 Ospedale San Raffaele S.R.L. Il-1 antagonist and toxicity induced by cell therapy
WO2019175328A1 (en) 2018-03-14 2019-09-19 Imba - Institut Für Molekulare Biotechnologie Gmbh Bh4pathwayactivationandusethereoffortreatingcancer
CN112040986A (zh) 2018-03-15 2020-12-04 Ksq治疗公司 用于改进的免疫疗法的基因调控组合物和方法
US20190284553A1 (en) 2018-03-15 2019-09-19 KSQ Therapeutics, Inc. Gene-regulating compositions and methods for improved immunotherapy
DE102018108612A1 (de) 2018-03-21 2019-09-26 Immatics US, Inc. Verfahren zur erhöhung der persistenz von adoptiv infundierten t-zellen
US10760075B2 (en) 2018-04-30 2020-09-01 Snipr Biome Aps Treating and preventing microbial infections
JP7410868B2 (ja) 2018-04-05 2024-01-10 ジュノー セラピューティクス インコーポレイテッド Ｔ細胞受容体およびそれを発現する操作された細胞
EP3775238A1 (en) 2018-04-05 2021-02-17 Juno Therapeutics, Inc. Methods of producing cells expressing a recombinant receptor and related compositions
CN111954675A (zh) 2018-04-06 2020-11-17 捷克共和国有机化学与生物化学研究所 3’3’-环二核苷酸
TW202005654A (zh) 2018-04-06 2020-02-01 捷克科學院有機化學與生物化學研究所 ２，２，─環二核苷酸
TWI818007B (zh) 2018-04-06 2023-10-11 捷克科學院有機化學與生物化學研究所 2'3'-環二核苷酸
PE20211396A1 (es) 2018-04-10 2021-07-27 Amgen Inc Receptores quimericos de dll3 y metodos para su uso
TW202322828A (zh) 2018-04-12 2023-06-16 美商凱特製藥公司 利用腫瘤微環境之特性之嵌合受體ｔ細胞治療
US20210079384A1 (en) 2018-04-13 2021-03-18 The Johns Hopkins University Non-invasive detection of response to a targeted therapy
US20210155986A1 (en) 2018-04-13 2021-05-27 The Johns Hopkins University Non-invasive detection of response to immunotherapy
US10973834B2 (en) 2018-04-16 2021-04-13 Arrys Therapeutics, Inc. EP4 inhibitors and use thereof
JP7432851B2 (ja) 2018-04-16 2024-02-19 ボード オブ リージェンツ，ザ ユニバーシティ オブ テキサス システム ヒトキヌレニナーゼ酵素及びその使用
US10869888B2 (en) 2018-04-17 2020-12-22 Innovative Cellular Therapeutics CO., LTD. Modified cell expansion and uses thereof
KR102251028B1 (ko) 2018-04-18 2021-05-12 앱클론(주) 스위치 분자 및 스위처블 키메라 항원 수용체
KR102591947B1 (ko) 2018-04-19 2023-10-25 길리애드 사이언시즈, 인코포레이티드 Pd-1/pd-l1 억제제
US20210161958A1 (en) * 2018-04-19 2021-06-03 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Compositions and methods for treating melanoma with a chimeric antigen receptor
US11059826B2 (en) 2018-04-24 2021-07-13 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Pteridinone compounds and uses thereof
PL3784666T3 (pl) 2018-04-24 2022-07-18 Merck Patent Gmbh Związki przeciwproliferacyjne i ich zastosowania
US20210047405A1 (en) 2018-04-27 2021-02-18 Novartis Ag Car t cell therapies with enhanced efficacy
WO2019213282A1 (en) 2018-05-01 2019-11-07 Novartis Ag Biomarkers for evaluating car-t cells to predict clinical outcome
AU2019262131A1 (en) 2018-05-02 2020-11-19 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Compositions and methods of phospholipase A2 receptor chimeric autoantibody receptor T cells
CN112584902A (zh) 2018-05-03 2021-03-30 朱诺治疗学股份有限公司 嵌合抗原受体（car）t细胞疗法和激酶抑制剂的组合疗法
US20190359645A1 (en) 2018-05-03 2019-11-28 Institute Of Organic Chemistry And Biochemistry Ascr, V.V.I. 2'3'-cyclic dinucleotides comprising carbocyclic nucleotide
CN108753774B (zh) * 2018-05-03 2021-03-30 山东省齐鲁细胞治疗工程技术有限公司 干扰il-6表达的cd19-car-t细胞及其应用
EP3790958A1 (en) 2018-05-08 2021-03-17 Life Technologies Corporation Compositions and methods for culturing and expanding cells
KR20210008502A (ko) 2018-05-11 2021-01-22 크리스퍼 테라퓨틱스 아게 암을 치료하기 위한 방법 및 조성물
JP6899975B2 (ja) 2018-05-14 2021-07-07 ギリアード サイエンシーズ， インコーポレイテッド Ｍｃｌ−１阻害剤
JP2021525069A (ja) 2018-05-18 2021-09-24 ザ ジョンズ ホプキンス ユニバーシティ 癌を査定および／または処置するためのセルフリーｄｎａ
WO2019227003A1 (en) 2018-05-25 2019-11-28 Novartis Ag Combination therapy with chimeric antigen receptor (car) therapies
AR126019A1 (es) 2018-05-30 2023-09-06 Novartis Ag Anticuerpos frente a entpd2, terapias de combinación y métodos de uso de los anticuerpos y las terapias de combinación
CN108715859B (zh) * 2018-05-31 2021-08-03 中国医学科学院血液病医院(中国医学科学院血液学研究所) 靶向cd22的嵌合抗原受体及其应用
US20210214459A1 (en) 2018-05-31 2021-07-15 Novartis Ag Antibody molecules to cd73 and uses thereof
JP7398396B2 (ja) 2018-06-01 2023-12-14 ノバルティス アーゲー Ｂｃｍａに対する結合分子及びその使用
US20200003758A1 (en) 2018-06-01 2020-01-02 Kite Pharma, Inc. Chimeric antigen receptor t cell therapy
AU2019277660A1 (en) * 2018-06-01 2021-01-21 Mayo Foundation For Medical Education And Research Materials and methods for treating cancer
US20210371932A1 (en) 2018-06-01 2021-12-02 Massachusetts Institute Of Technology Methods and compositions for detecting and modulating microenvironment gene signatures from the csf of metastasis patients
US20210123075A1 (en) 2018-06-08 2021-04-29 Novartis Ag Compositions and methods for immunooncology
US20220403001A1 (en) 2018-06-12 2022-12-22 Obsidian Therapeutics, Inc. Pde5 derived regulatory constructs and methods of use in immunotherapy
BR112020025048A2 (pt) 2018-06-13 2021-04-06 Novartis Ag Receptores de antígeno quimérico de bcma e usos dos mesmos
KR20190141511A (ko) * 2018-06-14 2019-12-24 주식회사 녹십자랩셀 신규 펩티드, 이를 포함하는 키메라 항원 수용체 및 이를 발현하는 면역 세포
US20210363219A1 (en) 2018-06-15 2021-11-25 Alpine Immune Sciences, Inc. Pd-1 variant immunomodulatory proteins and uses thereof
AU2019288669A1 (en) 2018-06-21 2021-01-21 B-Mogen Biotechnologies, Inc. Enhanced hat family transposon-mediated gene transfer and associated compositions, systems, and methods
US20210155941A1 (en) 2018-06-22 2021-05-27 Kite Pharma Eu B.V. Compositions and methods for making engineered t cells
US11180531B2 (en) 2018-06-22 2021-11-23 Bicycletx Limited Bicyclic peptide ligands specific for Nectin-4
US11292792B2 (en) 2018-07-06 2022-04-05 Kymera Therapeutics, Inc. Tricyclic CRBN ligands and uses thereof
AR116109A1 (es) 2018-07-10 2021-03-31 Novartis Ag Derivados de 3-(5-amino-1-oxoisoindolin-2-il)piperidina-2,6-diona y usos de los mismos
PT3820572T (pt) 2018-07-13 2023-11-10 Gilead Sciences Inc Inibidores pd-1/pd-l1
JPWO2020017479A1 (ja) 2018-07-17 2021-08-02 ノイルイミューン・バイオテック株式会社 抗ｇｐｃ３一本鎖抗体を含むｃａｒ
JOP20210011A1 (ar) 2018-07-18 2021-01-17 Amgen Inc مستقبلات خيمرية لـ steap1 وطرق استخدامها
WO2020018825A1 (en) 2018-07-19 2020-01-23 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Chimeric antigen receptors with bcma specificity and uses thereof
CN108949759B (zh) * 2018-07-23 2021-06-01 合肥一兮生物科技有限公司 敲减人IL-15的siRNA、CD19 CAR表达载体、CAR-T细胞及构建方法和应用
KR20210038922A (ko) 2018-08-02 2021-04-08 카이트 파마 인코포레이티드 키메라 항원 수용체 요법 t 세포 확장 동역학 및 그의 용도
MX2021001523A (es) 2018-08-09 2021-05-27 Juno Therapeutics Inc Procesos para generar células modificadas y composiciones de las mismas.
US20210230671A1 (en) 2018-08-09 2021-07-29 Juno Therapeutics, Inc. Methods for assessing integrated nucleic acids
SG11202101169PA (en) * 2018-08-10 2021-03-30 Eutilex Co Ltd Chimeric antigen receptor that binds hla-dr and car-t cell
WO2020068304A2 (en) 2018-08-20 2020-04-02 The Broad Institute, Inc. Inhibitors of rna-guided nuclease target binding and uses thereof
WO2020041387A1 (en) 2018-08-20 2020-02-27 The Brigham And Women's Hospital, Inc. Degradation domain modifications for spatio-temporal control of rna-guided nucleases
WO2020041384A1 (en) 2018-08-20 2020-02-27 The Broad Institute, Inc. 3-phenyl-2-cyano-azetidine derivatives, inhibitors of rna-guided nuclease activity
CN110856724B (zh) * 2018-08-24 2022-05-27 杭州康万达医药科技有限公司 包含核酸及car修饰的免疫细胞的治疗剂及其应用
US20210292711A1 (en) 2018-08-28 2021-09-23 Fred Hutchinson Cancer Research Center Methods and compositions for adoptive t cell therapy incorporating induced notch signaling
CN113423725A (zh) 2018-08-28 2021-09-21 Vor生物制药股份有限公司 遗传工程化造血干细胞及其用途
US20220348682A1 (en) 2018-08-30 2022-11-03 Innovative Cellular Therapeutics Holdings, Ltd. Chimeric antigen receptor cells for treating solid tumor
US10548889B1 (en) 2018-08-31 2020-02-04 X4 Pharmaceuticals, Inc. Compositions of CXCR4 inhibitors and methods of preparation and use
US20210171909A1 (en) 2018-08-31 2021-06-10 Novartis Ag Methods of making chimeric antigen receptor?expressing cells
US11866494B2 (en) * 2018-08-31 2024-01-09 Innovative Cellular Therapeutics Holdings, Ltd. CAR T therapy through uses of co-stimulation
JP2021534783A (ja) 2018-08-31 2021-12-16 ノバルティス アーゲー キメラ抗原受容体発現細胞を作製する方法
CN113164419A (zh) 2018-09-07 2021-07-23 皮克医疗公司 Eif4e抑制剂和其用途
EP3850366A1 (en) 2018-09-11 2021-07-21 Juno Therapeutics, Inc. Methods for mass spectrometry analysis of engineered cell compositions
JP2022501361A (ja) 2018-09-19 2022-01-06 アルパイン イミューン サイエンシズ インコーポレイテッド バリアントｃｄ８０融合タンパク質および関連構築物の方法および使用
CA3155291A1 (en) 2018-09-24 2020-04-02 The Medical College Of Wisconsin, Inc. Anti-cd30 antibodies and methods of use
WO2020069409A1 (en) 2018-09-28 2020-04-02 Novartis Ag Cd19 chimeric antigen receptor (car) and cd22 car combination therapies
BR112021004383A2 (pt) 2018-09-28 2021-08-03 Massachusetts Institute Of Technology proteína de fusão imunomoduladora, composição farmacêutica, ácido nucleico, vetor de expressão, célula transformada, método para a produção de uma proteína de fusão imunomoduladora, método para ativar, aumentar ou promover uma resposta por uma célula imune em um sujeito, método para inibir, reduzir ou suprimir uma resposta por uma célula imune em um sujeito, método para reduzir ou inibir o crescimento do tumor, método para tratar câncer em um sujeito, kit, uso de uma proteína de fusão imunomoduladora e método para reduzir ou inibir o crescimento do tumor ou tratar o câncer em um sujeito
EP3856779A1 (en) 2018-09-28 2021-08-04 Novartis AG Cd22 chimeric antigen receptor (car) therapies
AU2019354391A1 (en) 2018-10-01 2021-05-06 Adicet Therapeutics, Inc. Compositions and methods regarding engineered and non- engineered γδ-Τ cells for treatment of hematological tumors
US20210382068A1 (en) 2018-10-02 2021-12-09 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Hla single allele lines
EP3860717A1 (en) 2018-10-03 2021-08-11 Gilead Sciences, Inc. Imidozopyrimidine derivatives
EP3488851A1 (en) 2018-10-03 2019-05-29 AVM Biotechnology, LLC Immunoablative therapies
US11851663B2 (en) 2018-10-14 2023-12-26 Snipr Biome Aps Single-vector type I vectors
WO2020081730A2 (en) 2018-10-16 2020-04-23 Massachusetts Institute Of Technology Methods and compositions for modulating microenvironment
MX2021004588A (es) 2018-10-22 2022-01-18 Shanghai Genbase Biotechnology Co Ltd Anticuerpo anti-cldn18.2 y sus usos.
CA3117539A1 (en) 2018-10-23 2020-04-30 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Ny-eso-1 t cell receptors and methods of use thereof
EP3870600A1 (en) 2018-10-24 2021-09-01 Obsidian Therapeutics, Inc. Er tunable protein regulation
AU2019366355B2 (en) 2018-10-24 2022-10-13 Gilead Sciences, Inc. PD-1/PD-L1 inhibitors
US20210379149A1 (en) * 2018-10-25 2021-12-09 Innovative Cellular Therapeutics Holdings, Ltd. Increasing or Maintaining T-Cell Subpopulations in Adoptive T-Cell Therapy
WO2020092455A2 (en) 2018-10-29 2020-05-07 The Broad Institute, Inc. Car t cell transcriptional atlas
WO2020092057A1 (en) 2018-10-30 2020-05-07 Yale University Compositions and methods for rapid and modular generation of chimeric antigen receptor t cells
CN113227089A (zh) 2018-10-31 2021-08-06 吉利德科学公司 作为hpk1抑制剂的取代的6-氮杂苯并咪唑化合物
WO2020089343A1 (en) 2018-10-31 2020-05-07 Juno Therapeutics Gmbh Methods for selection and stimulation of cells and apparatus for same
TWI721624B (zh) 2018-10-31 2021-03-11 美商基利科學股份有限公司 經取代之6-氮雜苯并咪唑化合物
EP3873943A2 (en) 2018-11-01 2021-09-08 Juno Therapeutics, Inc. Methods for treatment using chimeric antigen receptors specific for b-cell maturation antigen
KR20210100624A (ko) 2018-11-06 2021-08-17 주노 쎄러퓨티크스 인코퍼레이티드 유전적으로 조작된 ｔ 세포를 제조하는 방법
CN113260368B (zh) * 2018-11-07 2023-08-29 舒迪安生物技术公司 抗gpc3嵌合抗原受体(car)与反式共刺激分子的组合及其治疗用途
CN109503717A (zh) * 2018-11-07 2019-03-22 南京卡提医学科技有限公司 嵌合抗原受体DAP12-T2A-CD8α-CD19scfv-NKp44及其用途
CN109467604A (zh) * 2018-11-07 2019-03-15 南京卡提医学科技有限公司 嵌合抗原受体DAP12-T2A-CD8α-CD19scFv-TREM1及其用途
CA3117978A1 (en) 2018-11-08 2020-05-14 Juno Therapeutics, Inc. Methods and combinations for treatment and t cell modulation
AU2019378883A1 (en) 2018-11-14 2021-06-03 Flagship Pioneering Innovations V, Inc. Fusosome compositions for T cell delivery
JP2022513062A (ja) 2018-11-16 2022-02-07 ジュノー セラピューティクス インコーポレイテッド Ｂ細胞悪性腫瘍を処置するために、操作されたｔ細胞を投薬する方法
WO2020106621A1 (en) 2018-11-19 2020-05-28 Board Of Regents, The University Of Texas System A modular, polycistronic vector for car and tcr transduction
US10918667B2 (en) 2018-11-20 2021-02-16 Innovative Cellular Therapeutics CO., LTD. Modified cell expressing therapeutic agent and uses thereof
EP3887518A2 (en) 2018-11-28 2021-10-06 Board of Regents, The University of Texas System Multiplex genome editing of immune cells to enhance functionality and resistance to suppressive environment
EP3886874A1 (en) 2018-11-29 2021-10-06 Board of Regents, The University of Texas System Methods for ex vivo expansion of natural killer cells and use thereof
US20220088070A1 (en) 2018-11-30 2022-03-24 Juno Therapeutics, Inc. Methods for treatment using adoptive cell therapy
MX2021006154A (es) 2018-11-30 2021-08-24 Kymera Therapeutics Inc Degradadores de cinasas asociadas al receptor de interleucina 1 (irak) y usos de los mismos.
WO2020113188A2 (en) 2018-11-30 2020-06-04 Juno Therapeutics, Inc. Methods for dosing and treatment of b cell malignancies in adoptive cell therapy
EP4198057A1 (en) 2018-12-05 2023-06-21 F. Hoffmann-La Roche AG Diagnostic methods and compositions for cancer immunotherapy
EP3891272A4 (en) * 2018-12-07 2023-03-29 Gracell Biotechnologies (Shanghai) Co., Ltd. COMPOSITIONS AND METHODS FOR IMMUNOTHERAPY
MX2021006783A (es) 2018-12-10 2021-07-15 Amgen Inc Transposasa de piggybac mutada.
EP3894011A1 (en) 2018-12-11 2021-10-20 Obsidian Therapeutics, Inc. Membrane bound il12 compositions and methods for tunable regulation
CA3177829A1 (en) 2018-12-12 2020-06-18 Kite Pharma, Inc. Chimeric antigen and t cell receptors and methods of use
US20220062394A1 (en) 2018-12-17 2022-03-03 The Broad Institute, Inc. Methods for identifying neoantigens
EP3670530A1 (en) 2018-12-18 2020-06-24 Max-Delbrück-Centrum für Molekulare Medizin in der Helmholtz-Gemeinschaft Cd22-specific t cell receptors and adoptive t cell therapy for treatment of b cell malignancies
CN113271945A (zh) 2018-12-20 2021-08-17 诺华股份有限公司 包含3-(1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮衍生物的给药方案和药物组合
EP3670659A1 (en) 2018-12-20 2020-06-24 Abivax Biomarkers, and uses in treatment of viral infections, inflammations, or cancer
MX2021007556A (es) 2018-12-21 2021-09-10 Biontech Us Inc Método y sistemas de predicción de epítopos específicos de hla de clase ii y caracterización de células t cd4+.
AU2020205000A1 (en) * 2019-01-06 2021-06-17 Abintus Bio, Inc. Car T Cell methods and constructs
US11739156B2 (en) 2019-01-06 2023-08-29 The Broad Institute, Inc. Massachusetts Institute of Technology Methods and compositions for overcoming immunosuppression
US20220096651A1 (en) 2019-01-29 2022-03-31 Juno Therapeutics, Inc. Antibodies and chimeric antigen receptors specific for receptor tyrosine kinase like orphan receptor 1 (ror1)
AU2020222346B2 (en) 2019-02-15 2021-12-09 Novartis Ag Substituted 3-(1-oxoisoindolin-2-yl)piperidine-2,6-dione derivatives and uses thereof
MX2021009763A (es) 2019-02-15 2021-09-08 Novartis Ag Derivados de 3-(1-oxo-5-(piperidin-4-il)isoindolin-2-il)piperidina -2,6-diona y usos de los mismos.
SG11202108655TA (en) 2019-02-15 2021-09-29 Univ Southern California Lym-1 and lym-2 antibody compositions and improved car constructs
SG11202107825WA (en) 2019-02-25 2021-09-29 Novartis Ag Mesoporous silica particles compositions for viral delivery
MX2021010288A (es) * 2019-03-01 2021-09-23 Iovance Biotherapeutics Inc Expansion de linfocitos infiltrantes de tumores a partir de tumores liquidos y usos terapeuticos de los mismos.
SG11202108011UA (en) 2019-03-01 2021-08-30 Allogene Therapeutics Inc Dll3 targeting chimeric antigen receptors and binding agents
CN113766956A (zh) 2019-03-05 2021-12-07 恩卡尔塔公司 Cd19定向性嵌合抗原受体及其在免疫疗法中的用途
CN113543851A (zh) 2019-03-07 2021-10-22 捷克共和国有机化学与生物化学研究所 2’3’-环二核苷酸及其前药
KR20210137518A (ko) 2019-03-07 2021-11-17 인스티튜트 오브 오가닉 케미스트리 앤드 바이오케미스트리 에이에스 씨알 브이.브이.아이. 3'3'-사이클릭 다이뉴클레오티드 및 이의 프로드럭
EP3935065A1 (en) 2019-03-07 2022-01-12 Institute of Organic Chemistry and Biochemistry ASCR, V.V.I. 3'3'-cyclic dinucleotide analogue comprising a cyclopentanyl modified nucleotide as sting modulator
CA3128971A1 (en) 2019-03-08 2020-09-17 Klinikum Der Universitat Munchen Ccr8 expressing lymphocytes for targeted tumor therapy
CA3132840A1 (en) 2019-03-08 2020-09-17 Obsidian Therapeutics, Inc. Human carbonic anhydrase 2 compositions and methods for tunable regulation
WO2020186101A1 (en) 2019-03-12 2020-09-17 The Broad Institute, Inc. Detection means, compositions and methods for modulating synovial sarcoma cells
WO2020191079A1 (en) 2019-03-18 2020-09-24 The Broad Institute, Inc. Compositions and methods for modulating metabolic regulators of t cell pathogenicity
EA202192555A1 (ru) 2019-03-19 2021-11-25 Фундасио Привада Институт Д'Инвестигасио Онколохика Де Валь Эброн Комбинированная терапия для лечения рака
US20230074800A1 (en) 2019-03-21 2023-03-09 Novartis Ag Car-t cell therapies with enhanced efficacy
AU2020253990A1 (en) 2019-04-02 2021-10-28 Bicycletx Limited Bicycle toxin conjugates and uses thereof
CA3135802A1 (en) 2019-04-05 2020-10-08 Kymera Therapeutics, Inc. Stat degraders and uses thereof
EP3953455A1 (en) 2019-04-12 2022-02-16 Novartis AG Methods of making chimeric antigen receptor-expressing cells
TW202210480A (zh) 2019-04-17 2022-03-16 美商基利科學股份有限公司 類鐸受體調節劑之固體形式
TWI751517B (zh) 2019-04-17 2022-01-01 美商基利科學股份有限公司 類鐸受體調節劑之固體形式
EP3959320A1 (en) 2019-04-24 2022-03-02 Novartis AG Compositions and methods for selective protein degradation
MX2021013005A (es) 2019-04-26 2021-12-10 Allogene Therapeutics Inc Metodos de fabricacion de celulas car-t alogenicas.
TW202106704A (zh) 2019-04-26 2021-02-16 美商艾洛基因醫療公司 抗利妥昔單抗嵌合抗原受體及其用途
WO2020222176A1 (en) 2019-04-30 2020-11-05 Crispr Therapeutics Ag Allogeneic cell therapy of b cell malignancies using genetically engineered t cells targeting cd19
KR20220016474A (ko) 2019-05-01 2022-02-09 주노 쎄러퓨티크스 인코퍼레이티드 변형된 ｃｄ247 유전자 자리로부터 키메라 수용체를 발현하는 세포, 관련 폴리뉴클레오타이드 및 방법
SG11202111360YA (en) 2019-05-01 2021-11-29 Juno Therapeutics Inc Cells expressing a recombinant receptor from a modified tgfbr2 locus, related polynucleotides and methods
BR112021021996A2 (pt) 2019-05-03 2022-01-11 Kite Pharma Inc Métodos para administração de imunoterapia com receptores de antígeno quimérico
EP3967329A4 (en) 2019-05-07 2023-06-14 Gracell Biotechnologies (Shanghai) Co., Ltd. AGAINST BCMA GM IMMUNE CELLS AND THEIR USE
WO2020236967A1 (en) 2019-05-20 2020-11-26 The Broad Institute, Inc. Random crispr-cas deletion mutant
AU2020279371A1 (en) 2019-05-22 2021-12-23 Leidos, Inc. LAG 3 binding peptides
WO2020237025A1 (en) 2019-05-23 2020-11-26 Gilead Sciences, Inc. Substituted exo-methylene-oxindoles which are hpk1/map4k1 inhibitors
EP3973072A1 (en) 2019-05-23 2022-03-30 Vogelsang, Matjaz Method for removal of nucleic acids impurities from liquid composition comprising genetically engineered particles or proteins
WO2020243371A1 (en) 2019-05-28 2020-12-03 Massachusetts Institute Of Technology Methods and compositions for modulating immune responses
CN114502540A (zh) 2019-05-31 2022-05-13 医肯纳肿瘤学公司 Tead抑制剂和其用途
CN113905757A (zh) * 2019-06-05 2022-01-07 中外制药株式会社 抗体切割位点结合分子
JP2022535380A (ja) 2019-06-07 2022-08-08 ジュノー セラピューティクス インコーポレイテッド 自動化ｔ細胞培養
MA56206A (fr) 2019-06-12 2022-04-20 Juno Therapeutics Inc Combinaison thérapeutique d'une thérapie cytotoxique à médiation cellulaire et d'un inhibiteur d'une protéine de la famille bcl2 pro-survie
CA3140668A1 (en) 2019-06-12 2020-12-17 Obsidian Therapeutics, Inc. Ca2 compositions and methods for tunable regulation
WO2020252404A1 (en) 2019-06-12 2020-12-17 Obsidian Therapeutics, Inc. Ca2 compositions and methods for tunable regulation
KR20220034792A (ko) 2019-06-21 2022-03-18 카이트 파마 인코포레이티드 TGF-β 수용체 및 이의 사용 방법
JP2022539032A (ja) 2019-06-24 2022-09-07 チルドレンズ ホスピタル ロサンゼルス ヒト胸腺細胞形成およびｔ細胞機能を強化するためのｂｃｌ１１ｂ過剰発現
US20210009718A1 (en) 2019-06-25 2021-01-14 Gilead Sciences, Inc. FLT3L-Fc FUSION PROTEINS AND METHODS OF USE
JP2022538974A (ja) 2019-06-26 2022-09-07 マサチューセッツ インスチテュート オブ テクノロジー 免疫調節融合タンパク質－金属水酸化物錯体およびその方法
EP3994270A1 (en) 2019-07-02 2022-05-11 Fred Hutchinson Cancer Research Center Recombinant ad35 vectors and related gene therapy improvements
MX2022000174A (es) 2019-07-02 2022-05-20 Us Health Anticuerpos monoclonales que se enlazan a egfrviii y sus usos.
GB201909573D0 (en) 2019-07-03 2019-08-14 Cancer Research Tech Ltd Modulation of T cell cytotoxicity and related therapy
EP3998083A4 (en) 2019-07-12 2023-08-23 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha ANTI-MUTATION TYPE FGFR3 ANTIBODY AND USE THEREOF
WO2021011907A1 (en) 2019-07-18 2021-01-21 Gpb Scientific, Inc. Ordered processing of blood products to produce therapeutically active cells
KR20220042161A (ko) 2019-07-23 2022-04-04 엥스띠뛰 퀴리 Suv39h1에 결함이 있는 면역 세포
EP4004049A1 (en) 2019-07-24 2022-06-01 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Chimeric antigen receptors with mage-a4 specificity and uses thereof
CN110305849B (zh) * 2019-08-01 2021-03-30 广东万海细胞生物科技有限公司 稳定表达car的t细胞及其制备方法与应用
GB201911066D0 (en) 2019-08-02 2019-09-18 Achilles Therapeutics Ltd T cell therapy
CN114585645A (zh) * 2019-08-09 2022-06-03 A2生物治疗公司 对杂合性丧失作出响应的细胞表面受体
US20220282333A1 (en) 2019-08-13 2022-09-08 The General Hospital Corporation Methods for predicting outcomes of checkpoint inhibition and treatment thereof
US20220298222A1 (en) 2019-08-22 2022-09-22 Juno Therapeutics, Inc. Combination therapy of a t cell therapy and an enhancer of zeste homolog 2 (ezh2) inhibitor and related methods
US20220298501A1 (en) 2019-08-30 2022-09-22 The Broad Institute, Inc. Crispr-associated mu transposase systems
CN114600172A (zh) 2019-08-30 2022-06-07 朱诺治疗学股份有限公司 用于将细胞分类的机器学习方法
US20230092895A1 (en) 2019-08-30 2023-03-23 Obsidian Therapeutics, Inc. Tandem cd19 car-based compositions and methods for immunotherapy
WO2021043804A1 (en) 2019-09-02 2021-03-11 Institut Curie Immunotherapy targeting tumor neoantigenic peptides
JP2022546537A (ja) 2019-09-03 2022-11-04 アロジーン セラピューティクス，インコーポレイテッド Ｔ細胞療法のためのｔ細胞の調製方法
EP4025698A1 (en) 2019-09-03 2022-07-13 Sana Biotechnology, Inc. Cd24-associated particles and related methods and uses thereof
WO2021046451A1 (en) 2019-09-06 2021-03-11 Obsidian Therapeutics, Inc. Compositions and methods for dhfr tunable protein regulation
AU2020344553A1 (en) 2019-09-09 2022-04-07 Scribe Therapeutics Inc. Compositions and methods for use in immunotherapy
EP4028413A1 (en) 2019-09-10 2022-07-20 Obsidian Therapeutics, Inc. Ca2-il15 fusion proteins for tunable regulation
WO2021051088A1 (en) * 2019-09-13 2021-03-18 Ohio State Innovation Foundation Nk cell immunotherapy compositions, methods of making and methods of using same
BR112022004451A2 (pt) 2019-09-13 2022-06-21 Nimbus Saturn Inc Antagonistas de hpk1 e usos dos mesmos
WO2021053559A1 (en) 2019-09-18 2021-03-25 Novartis Ag Entpd2 antibodies, combination therapies, and methods of using the antibodies and combination therapies
US20220331363A1 (en) 2019-09-20 2022-10-20 Shanghai GenBase Biotechnology Co., Ltd. Bcma-targeted antibody and chimeric antigen receptor
WO2021055915A1 (en) * 2019-09-20 2021-03-25 The University Of North Carolina At Chapel Hill Modified t cells and methods of preparing the same
WO2021061648A1 (en) 2019-09-23 2021-04-01 Massachusetts Institute Of Technology Methods and compositions for stimulation of endogenous t cell responses
KR102287180B1 (ko) * 2019-10-01 2021-08-09 충북대학교 산학협력단 Cd138에 특이적으로 결합하는 키메릭 항원 수용체, 이를 발현하는 면역세포 및 이의 항암 용도
EP4038190A1 (en) 2019-10-03 2022-08-10 Artisan Development Labs, Inc. Crispr systems with engineered dual guide nucleic acids
US11793787B2 (en) 2019-10-07 2023-10-24 The Broad Institute, Inc. Methods and compositions for enhancing anti-tumor immunity by targeting steroidogenesis
WO2021076908A1 (en) 2019-10-18 2021-04-22 Forty Seven, Inc. Combination therapies for treating myelodysplastic syndromes and acute myeloid leukemia
EP4048304A1 (en) 2019-10-22 2022-08-31 Institut Curie Immunotherapy targeting tumor neoantigenic peptides
WO2021081330A1 (en) 2019-10-23 2021-04-29 Kite Pharma, Inc. Anti-idiotypic antigen binding molecules and methods of use thereof
CN110679588A (zh) * 2019-10-23 2020-01-14 厦门生命互联科技有限公司 一种嵌合抗原受体t细胞冻存介质及用途
TWI717880B (zh) * 2019-10-24 2021-02-01 中國醫藥大學附設醫院 Hla-g特異性嵌合抗原受體、核酸、hla-g特異性嵌合抗原受體表達質體、表達hla-g特異性嵌合抗原受體細胞、其用途以及用於治療癌症之醫藥組合物
US11844800B2 (en) 2019-10-30 2023-12-19 Massachusetts Institute Of Technology Methods and compositions for predicting and preventing relapse of acute lymphoblastic leukemia
CA3159380A1 (en) 2019-10-30 2021-05-06 Juno Therapeutics Gmbh Cell selection and/or stimulation devices and methods of use
WO2021087064A1 (en) 2019-10-31 2021-05-06 Forty Seven, Inc. Anti-cd47 and anti-cd20 based treatment of blood cancer
WO2021085504A1 (ja) 2019-11-01 2021-05-06 京都府公立大学法人 Ｂ細胞抗体受容体、及びその利用
KR20220122615A (ko) 2019-11-07 2022-09-02 주노 쎄러퓨티크스 인코퍼레이티드 Ｔ 세포 요법 및 (ｓ)-3-[4-(4-모르폴린-4-일메틸-벤질옥시)-1-옥소-1,3-디하이드로-이소인돌-2-일]-피페리딘-2,6-디온의 병용
TWI778443B (zh) 2019-11-12 2022-09-21 美商基利科學股份有限公司 Mcl1抑制劑
WO2021101271A1 (ko) 2019-11-20 2021-05-27 주식회사 지아이셀 T 세포 배양용 배지 조성물 및 이를 이용한 t 세포의 배양 방법
MX2022006391A (es) 2019-11-26 2022-06-24 Novartis Ag Receptores de antigeno quimerico que se unen a bcma y cd19 y usos de los mismos.
CN115279764A (zh) 2019-11-26 2022-11-01 医肯纳肿瘤学公司 多晶型咔唑衍生物及其用途
CN115916817A (zh) 2019-12-06 2023-04-04 朱诺治疗学股份有限公司 针对bcma靶向结合结构域的抗独特型抗体及相关组合物和方法
EP4069742A1 (en) 2019-12-06 2022-10-12 Juno Therapeutics, Inc. Anti-idiotypic antibodies to gprc5d-targeted binding domains and related compositions and methods
AU2020395318A1 (en) 2019-12-06 2022-06-09 Juno Therapeutics, Inc. Methods related to toxicity and response associated with cell therapy for treating B cell malignancies
EP4076524A4 (en) 2019-12-17 2023-11-29 Kymera Therapeutics, Inc. IRAQ DEGRADERS AND USES THEREOF
EP4076520A4 (en) 2019-12-17 2024-03-27 Kymera Therapeutics Inc IRAQ DEGRADERS AND USES THEREOF
KR20220116257A (ko) 2019-12-20 2022-08-22 노파르티스 아게 골수섬유증 및 골수이형성 증후군을 치료하기 위한, 데시타빈 또는 항 pd-1 항체 스파르탈리주맙을 포함하거나 또는 포함하지 않는, 항 tim-3 항체 mbg453 및 항 tgf-베타 항체 nis793의 조합물
JP2023509394A (ja) 2019-12-23 2023-03-08 カイメラ セラピューティクス， インコーポレイテッド Ｓｍａｒｃａ分解剤およびそれらの使用
PE20230376A1 (es) 2019-12-24 2023-03-06 Carna Biosciences Inc Compuestos moduladores de la diacilglicerol quinasa
JP7088902B2 (ja) * 2019-12-27 2022-06-21 クレージュ メディカル カンパニー，リミテッド キメラ抗原受容体タンパク質をコードする核酸およびキメラ抗原受容体タンパク質を発現するｔリンパ球
EP4081344A1 (en) 2019-12-28 2022-11-02 GPB Scientific, Inc. Microfluidic cartridges for processing particles and cells
CN113150167A (zh) * 2020-01-22 2021-07-23 中国人民解放军总医院第五医学中心 一种能够反转pd-1免疫抑制信号的car t细胞结构em1设计
KR20220130158A (ko) 2020-01-23 2022-09-26 더 칠드런스 메디칼 센터 코포레이션 인간 만능 줄기 세포로부터의 무-간질 t 세포 분화
MX2022009137A (es) 2020-01-24 2022-10-21 Regeneron Pharma Antígeno expresado preferentemente en receptores de linfocitos t de melanoma (prame) y sus métodos de uso.
BR112022014501A2 (pt) 2020-01-24 2022-09-20 Juno Therapeutics Inc Métodos para dosagem e tratamento de linfoma folicular e linfoma de zona marginal em terapia celular adotiva
KR20220146480A (ko) 2020-01-28 2022-11-01 주노 쎄러퓨티크스 인코퍼레이티드 Ｔ 세포 형질도입 방법
WO2021155897A1 (en) 2020-02-03 2021-08-12 MVZ Prof. Niendorf Pathologie Hamburg-West GmbH Marker set for the diagnosis and treatment of cancer
CN115768443A (zh) 2020-02-12 2023-03-07 朱诺治疗学股份有限公司 Cd19定向嵌合抗原受体t细胞组合物和方法及其用途
JP2023519099A (ja) 2020-02-12 2023-05-10 ジュノー セラピューティクス インコーポレイテッド Ｂｃｍａ指向性キメラ抗原受容体ｔ細胞組成物ならびにその方法および使用
BR112022014623A2 (pt) 2020-02-14 2022-09-13 Jounce Therapeutics Inc Anticorpos e proteínas de fusão que se ligam a ccr8 e usos dos mesmos
CA3168337A1 (en) 2020-02-17 2021-08-26 Marie-Andree Forget Methods for expansion of tumor infiltrating lymphocytes and use thereof
CA3173737A1 (en) 2020-02-27 2021-09-02 Novartis Ag Methods of making chimeric antigen receptor-expressing cells
IL295604A (en) 2020-02-27 2022-10-01 Novartis Ag Methods for producing cells expressing a chimeric antigen receptor
CN111269326A (zh) * 2020-02-28 2020-06-12 南京北恒生物科技有限公司 新型嵌合抗原受体及其用途
AR121506A1 (es) 2020-03-03 2022-06-08 Pic Therapeutics Inc Inhibidores del eif4e y sus usos
WO2022074464A2 (en) 2020-03-05 2022-04-14 Neotx Therapeutics Ltd. Methods and compositions for treating cancer with immune cells
KR20220166282A (ko) 2020-03-10 2022-12-16 매사추세츠 인스티튜트 오브 테크놀로지 조작된 기억-유사 nk 세포 및 이의 조성물을 생성하기 위한 방법
EP4118112A1 (en) 2020-03-10 2023-01-18 Massachusetts Institute of Technology Compositions and methods for immunotherapy of npm1c-positive cancer
CN113402612A (zh) 2020-03-17 2021-09-17 西比曼生物科技（香港）有限公司 靶向cd19和cd20的联合嵌合抗原受体及其应用
MX2022011602A (es) 2020-03-19 2023-01-04 Kymera Therapeutics Inc Degradadores de la proteína de homólogo de ratón de minuto 2 (mdm2) y usos de los mismos.
WO2021202604A1 (en) 2020-03-31 2021-10-07 Sana Biotechnology, Inc. Targeted lipid particles and compositions and uses thereof
EP3892720A1 (en) 2020-04-06 2021-10-13 Innovative Cellular Therapeutics Holdings, Ltd. Presenting cell and use thereof in cell therapy
CA3179800A1 (en) 2020-04-10 2021-10-14 Juno Therapeutics, Inc. Methods and uses related to cell therapy engineered with a chimeric antigen receptor targeting b-cell maturation antigen
WO2021211663A1 (en) * 2020-04-14 2021-10-21 St. Jude Children's Research Hospital, Inc. Chimeric myd88 receptors
US20210324331A1 (en) * 2020-04-15 2021-10-21 Amgen Inc. Process for generating genetically engineered autologous t cells
GB202005599D0 (en) 2020-04-17 2020-06-03 Univ London Modulation of t cell cytotoxicity and related therapy
WO2021222330A2 (en) 2020-04-28 2021-11-04 Juno Therapeutics, Inc. Combination of bcma-directed t cell therapy and an immunomodulatory compound
GB202006254D0 (en) 2020-04-28 2020-06-10 Institute Of Cancer Res Anti-cancer vaccines and related therapy
KR20230002554A (ko) 2020-04-28 2023-01-05 아킬레스 테라퓨틱스 유케이 리미티드 T 세포 요법
US20210338833A1 (en) 2020-05-01 2021-11-04 Massachusetts Institute Of Technology Chimeric antigen receptor-targeting ligands and uses thereof
CA3181922A1 (en) 2020-05-01 2021-11-04 Gilead Sciences, Inc. Cd73 inhibiting 2,4-dioxopyrimidine compounds
WO2021221783A1 (en) 2020-05-01 2021-11-04 Massachusetts Institute Of Technology Methods for identifying chimeric antigen receptor-targeting ligands and uses thereof
JP2023525020A (ja) 2020-05-05 2023-06-14 リジェネロン・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッド Ｃｄ２８ゼータ及びｃｄ３ゼータを含むｃａｒ
WO2021228999A1 (en) 2020-05-12 2021-11-18 Institut Curie Neoantigenic epitopes associated with sf3b1 mutations
JP2023528215A (ja) 2020-05-13 2023-07-04 ジュノー セラピューティクス インコーポレイテッド 臨床応答に関連する特徴量の特定方法およびその使用
US20230181641A1 (en) 2020-05-13 2023-06-15 Juno Therapeutics, Inc. Process for producing donor-batched cells expressing a recombinant receptor
WO2021231954A1 (en) * 2020-05-15 2021-11-18 Precision Biosciences, Inc. Methods for immunotherapy
CA3178726A1 (en) 2020-05-21 2021-11-25 Gregory LIZEE T cell receptors with vgll1 specificity and uses thereof
EP4157864A1 (en) 2020-05-27 2023-04-05 Antion Biosciences SA Adapter molecules to re-direct car t cells to an antigen of interest
TW202210483A (zh) 2020-06-03 2022-03-16 美商凱麥拉醫療公司 Irak降解劑之結晶型
CN115867294A (zh) 2020-06-04 2023-03-28 凯瑞斯马治疗公司 嵌合抗原受体的新型构建体
WO2021244654A1 (en) * 2020-06-05 2021-12-09 Nanjing Legend Biotech Co., Ltd. Activation induced cytokine production in immune cells
JP2023530238A (ja) 2020-06-08 2023-07-14 ヤンセン バイオテツク，インコーポレーテツド キメラ抗原発現免疫細胞のインビトロ腫瘍殺傷活性を決定するための細胞ベースのアッセイ
AU2021288224A1 (en) 2020-06-11 2023-01-05 Novartis Ag ZBTB32 inhibitors and uses thereof
KR20230027056A (ko) 2020-06-23 2023-02-27 노파르티스 아게 3-(1-옥소이소인돌린-2-일)피페리딘-2,6-디온 유도체를 포함하는 투약 요법
US20230293530A1 (en) 2020-06-24 2023-09-21 Yeda Research And Development Co. Ltd. Agents for sensitizing solid tumors to treatment
KR20230042283A (ko) 2020-06-26 2023-03-28 주노 테라퓨틱스 게엠베하 재조합 수용체를 조건부로 발현하는 조작된 ｔ 세포, 관련된 폴리뉴클레오티드 및 방법
CN116490518A (zh) 2020-07-17 2023-07-25 西穆尔克斯股份有限公司 用于重定向免疫抑制信号传导的嵌合MyD88受体及相关组合物和方法
KR102297396B1 (ko) 2020-07-29 2021-09-06 (주)티카로스 면역시냅스를 안정화시키는 키메라 항원 수용체(car) t 세포
AU2021316727A1 (en) 2020-07-30 2023-03-02 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Immune cells defective for SOCS1
WO2022026496A2 (en) 2020-07-31 2022-02-03 Leidos, Inc. Lag3 binding peptides
EP4188549A1 (en) 2020-08-03 2023-06-07 Novartis AG Heteroaryl substituted 3-(1-oxoisoindolin-2-yl)piperidine-2,6-dione derivatives and uses thereof
JP2023536326A (ja) 2020-08-05 2023-08-24 ジュノー セラピューティクス インコーポレイテッド Ｒｏｒ１標的結合ドメインに対する抗イディオタイプ抗体ならびに関連する組成物および方法
KR20230074718A (ko) 2020-08-13 2023-05-31 사나 바이오테크놀로지, 인크. 저면역원성 세포로 감작된 환자를 치료하는 방법 및 관련 방법 및 조성물
EP4196579A1 (en) 2020-08-13 2023-06-21 Yale University Compositions and methods for engineering and selection of car t cells with desired phenotypes
AU2021326504A1 (en) 2020-08-14 2023-02-23 Kite Pharma, Inc Improving immune cell function
WO2022038158A1 (en) 2020-08-17 2022-02-24 Bicycletx Limited Bicycle conjugates specific for nectin-4 and uses thereof
IL300500A (en) 2020-08-20 2023-04-01 A2 Biotherapeutics Inc Preparations and methods for the treatment of mesothelin positive cancer
IL300497A (en) 2020-08-20 2023-04-01 A2 Biotherapeutics Inc Compositions and methods for treating CEACAM-positive cancer
EP4199960A2 (en) 2020-08-21 2023-06-28 Novartis AG Compositions and methods for in vivo generation of car expressing cells
WO2022046760A2 (en) 2020-08-25 2022-03-03 Kite Pharma, Inc. T cells with improved functionality
US20230302135A1 (en) * 2020-08-26 2023-09-28 Arizona Board Of Regents On Behalf Of The University Of Arizona Hybrid allosteric receptor-engineered stem cells
CA3198203A1 (en) 2020-10-12 2022-04-21 Leidos, Inc. Immunomodulatory peptides
JP2023545472A (ja) * 2020-10-16 2023-10-30 ネオンク テクノロジーズ インク． Ｃｎｓ感染症の治療のためのｐｏｈとレムデシビルとの組み合わせ
CN116528879A (zh) 2020-10-28 2023-08-01 凯德药业股份有限公司 用于表征t细胞杂质的流式细胞术方法
AU2021374083A1 (en) 2020-11-06 2023-06-01 Novartis Ag Anti-cd19 agent and b cell targeting agent combination therapy for treating b cell malignancies
WO2022104109A1 (en) 2020-11-13 2022-05-19 Catamaran Bio, Inc. Genetically modified natural killer cells and methods of use thereof
KR20230107617A (ko) 2020-11-13 2023-07-17 노파르티스 아게 키메라 항원 수용체(car)-발현 세포를 사용한 병용 요법
CN112195250A (zh) * 2020-11-20 2021-01-08 山东省医学科学院附属医院 一种qPCR试剂盒及应用
WO2022120353A1 (en) 2020-12-02 2022-06-09 Ikena Oncology, Inc. Tead inhibitors and uses thereof
US11661459B2 (en) 2020-12-03 2023-05-30 Century Therapeutics, Inc. Artificial cell death polypeptide for chimeric antigen receptor and uses thereof
WO2022133030A1 (en) 2020-12-16 2022-06-23 Juno Therapeutics, Inc. Combination therapy of a cell therapy and a bcl2 inhibitor
US11883432B2 (en) 2020-12-18 2024-01-30 Century Therapeutics, Inc. Chimeric antigen receptor system with adaptable receptor specificity
WO2022140159A1 (en) 2020-12-24 2022-06-30 Kite Pharma, Inc. Prostate cancer chimeric antigen receptors
WO2022147444A2 (en) 2020-12-30 2022-07-07 Alaunos Therapeutics, Inc. Recombinant vectors comprising polycistronic expression cassettes and methods of use thereof
KR20230137900A (ko) 2020-12-31 2023-10-05 사나 바이오테크놀로지, 인크. Car-t 활성을 조정하기 위한 방법 및 조성물
AU2022205653A1 (en) 2021-01-10 2023-07-27 Kite Pharma, Inc. T cell therapy
JP2024503027A (ja) 2021-01-11 2024-01-24 サナ バイオテクノロジー，インコーポレイテッド Ｃｄ８標的ウイルスベクターの使用方法
CA3204630A1 (en) 2021-01-11 2022-07-14 Nicholas Keen Methods for treating cancer
JP2024505428A (ja) 2021-01-14 2024-02-06 アンスティテュ キュリー Ｈｅｒ２単一ドメイン抗体バリアントおよびそのｃａｒ
AR124681A1 (es) 2021-01-20 2023-04-26 Abbvie Inc Conjugados anticuerpo-fármaco anti-egfr
US20240115607A1 (en) 2021-01-26 2024-04-11 Cytocares (Shanghai) Inc. Chimeric antigen receptor (car) constructs and nk cells expressing car constructs
AU2022214547A1 (en) * 2021-01-27 2023-08-17 H. Lee Moffitt Cancer Center And Research Institute Inc. Bi-specific car t cells for b cell malignancies
EP4284937A1 (en) 2021-01-28 2023-12-06 Allogene Therapeutics, Inc. Methods for transducing immune cells
EP4284512A1 (en) 2021-01-28 2023-12-06 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for treating cytokine release syndrome
BR112023015584A2 (pt) 2021-02-02 2023-10-24 Liminal Biosciences Ltd Antagonistas de gpr84 e usos dos mesmos
KR20230145446A (ko) 2021-02-15 2023-10-17 카이메라 쎄라퓨틱스 인코포레이티드 Irak4 분해제 및 이의 용도
AU2022223981A1 (en) 2021-02-20 2023-09-07 Kite Pharma, Inc. Gene markers for selecting immunotherapies
KR20230165771A (ko) 2021-03-03 2023-12-05 주노 쎄러퓨티크스 인코퍼레이티드 T 세포 요법 및 dgk 억제제의 조합
KR20230154317A (ko) 2021-03-05 2023-11-07 상하이 젠베이스 바이오테크놀로지 씨오., 엘티디. 항-cldn6 항체 및 이의 용도
JP2024509192A (ja) 2021-03-05 2024-02-29 ニンバス サターン， インコーポレイテッド Ｈｐｋ１アンタゴニスト及びその使用
IL305809A (en) 2021-03-11 2023-11-01 Mnemo Therapeutics Cancer neoantigenic peptides and their use
AU2022234333A1 (en) 2021-03-11 2023-09-28 Kite Pharma, Inc. Improving immune cell function
AU2022233019A1 (en) 2021-03-11 2023-09-28 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Tumor neoantigenic peptides
WO2022189620A1 (en) 2021-03-11 2022-09-15 Institut Curie Transmembrane neoantigenic peptides
WO2022196719A1 (ja) 2021-03-17 2022-09-22 第一三共株式会社 抗アセチルコリン受容体自己抗体に対するキメラ受容体をコードする遺伝子
CA3208944A1 (en) 2021-03-22 2022-09-29 Edith NALBANDIAN Method to assess potency of viral vector particles
WO2022204070A1 (en) 2021-03-22 2022-09-29 Juno Therapeutics, Inc. Methods of determining potency of a therapeutic cell composition
AU2022252220A1 (en) 2021-03-29 2023-10-12 Juno Therapeutics, Inc. Combination of a car t cell therapy and an immunomodulatory compound for treatment of lymphoma
KR20240005700A (ko) 2021-03-29 2024-01-12 주노 쎄러퓨티크스 인코퍼레이티드 체크포인트 억제제 요법 및 car t 세포 요법의 조합을 사용한 투여 및 치료 방법
TW202304979A (zh) 2021-04-07 2023-02-01 瑞士商諾華公司 抗ＴＧＦβ抗體及其他治療劑用於治療增殖性疾病之用途
EP4320435A1 (en) 2021-04-09 2024-02-14 Achilles Therapeutics UK Limited Batch release assay for pharmaceutical products relating to t cell therapies
GB202109886D0 (en) 2021-07-08 2021-08-25 Achilles Therapeutics Uk Ltd Assay
TW202302145A (zh) 2021-04-14 2023-01-16 美商基利科學股份有限公司 ＣＤ４７／ＳＩＲＰα結合及ＮＥＤＤ８活化酶Ｅ１調節次單元之共抑制以用於治療癌症
WO2022221028A1 (en) 2021-04-16 2022-10-20 Kite Pharma, Inc. Taci/bcma dual binding molecules
WO2022221737A1 (en) 2021-04-16 2022-10-20 Juno Therapeutics, Inc. T cell therapy in patients who have had prior stem cell transplant
CA3215081A1 (en) 2021-04-16 2022-10-20 Alfredo C. Castro Mek inhibitors and uses thereof
EP4322959A2 (en) 2021-04-16 2024-02-21 Celgene Corporation Combination therapies with bcma-directed t cell therapy
EP4323943A1 (en) 2021-04-16 2024-02-21 Kite Pharma, Inc. Methods and systems for scheduling a patient-specific immunotherapy procedure
AU2022261141A1 (en) * 2021-04-23 2023-11-30 Myeloid Therapeutics, Inc. Compositions and methods for conditioning patients for cell therapy
AR125461A1 (es) 2021-04-27 2023-07-19 Takeda Pharmaceuticals Co Células presentadoras de antígeno recombinante
EP4330381A1 (en) 2021-04-27 2024-03-06 Novartis AG Viral vector production system
IL308231A (en) 2021-05-04 2024-01-01 Regeneron Pharma MAGE-44-specific chimeric antigen receptors and their uses
WO2022234009A2 (en) 2021-05-06 2022-11-10 Juno Therapeutics Gmbh Methods for stimulating and transducing t cells
IL308227A (en) 2021-05-14 2024-01-01 Kite Pharma Inc T-cell chemical antigen receptor therapy
TW202313094A (zh) 2021-05-18 2023-04-01 美商基利科學股份有限公司 使用ＦＬＴ３Ｌ—Ｆｃ融合蛋白之方法
EP4340851A1 (en) 2021-05-19 2024-03-27 Sana Biotechnology, Inc. Hypoimmunogenic rhd negative primary t cells
US20230013874A1 (en) 2021-05-24 2023-01-19 Kite Pharma, Inc. Chimeric antigen receptor
EP4346827A1 (en) * 2021-05-26 2024-04-10 Emory University Jak inhibitors for managing conditions in patients with down's syndrome or other trisomy
KR20240013135A (ko) 2021-05-27 2024-01-30 사나 바이오테크놀로지, 인크. 조작된 hla-e 또는 hla-g를 포함하는 저면역원성 세포
AU2022280957A1 (en) 2021-05-28 2023-11-30 Sana Biotechnology, Inc. Lipid particles containing a truncated baboon endogenous retrovirus (baev) envelope glycoprotein and related methods and uses
WO2022256448A2 (en) 2021-06-01 2022-12-08 Artisan Development Labs, Inc. Compositions and methods for targeting, editing, or modifying genes
AU2022288058A1 (en) 2021-06-07 2023-11-16 Agonox, Inc. Cxcr5, pd-1, and icos expressing tumor reactive cd4 t cells and their use
KR20240019811A (ko) 2021-06-08 2024-02-14 카이트 파마 인코포레이티드 Gpc3 결합 분자
CA3223311A1 (en) 2021-06-18 2022-12-22 Andrea BARGHETTI Compositions and methods for targeting, editing or modifying human genes
CN117580946A (zh) 2021-06-22 2024-02-20 阿基里斯治疗英国有限公司 用于产生抗原特异性t细胞的方法
CN117396478A (zh) 2021-06-23 2024-01-12 吉利德科学公司 二酰基甘油激酶调节化合物
WO2022271677A1 (en) 2021-06-23 2022-12-29 Gilead Sciences, Inc. Diacylglyercol kinase modulating compounds
AU2022299051A1 (en) 2021-06-23 2023-12-07 Gilead Sciences, Inc. Diacylglyercol kinase modulating compounds
CA3222439A1 (en) 2021-06-23 2022-12-29 Gilead Sciences, Inc. Diacylglyercol kinase modulating compounds
KR20240026507A (ko) 2021-06-29 2024-02-28 플래그쉽 파이어니어링 이노베이션스 브이, 인크. 타노트랜스미션을 촉진시키도록 엔지니어링된 면역 세포 및 이의 용도
CA3225985A1 (en) 2021-07-01 2023-01-05 Indapta Therapeutics, Inc. Engineered natural killer (nk) cells and related methods
US20230027004A1 (en) 2021-07-01 2023-01-26 Kite Pharma, Inc. Closed-system and method for autologous and allogeneic cell therapy manufacturing
IL309431A (en) 2021-07-02 2024-02-01 Kite Pharma Inc A method for identifying variants in gene products from gene constructs used in cell therapy applications
WO2023281097A1 (en) 2021-07-09 2023-01-12 Immunic Ag Methods for treating cancer
AU2022309875A1 (en) 2021-07-14 2024-01-25 Sana Biotechnology, Inc. Altered expression of y chromosome-linked antigens in hypoimmunogenic cells
WO2023288338A2 (en) * 2021-07-16 2023-01-19 Sana Biotechnology, Inc. Polycistronic vectors for cell-based therapies
WO2023004300A2 (en) * 2021-07-19 2023-01-26 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Chimeric antigen receptor (car)-t signaling optimization for tuning antigen activation threshold
US20230190799A1 (en) * 2021-07-21 2023-06-22 City Of Hope Chimeric antigen receptor t cells targeting cea and anti-cea-il2 immunocytokines for cancer therapy
KR20240027077A (ko) 2021-07-30 2024-02-29 카이트 파마 인코포레이티드 세포 요법-유도 독성의 모니터링 및 관리
WO2023015217A1 (en) 2021-08-04 2023-02-09 Sana Biotechnology, Inc. Use of cd4-targeted viral vectors
IL310550A (en) 2021-08-04 2024-03-01 Univ Colorado Regents LAT-activating chimeric antigen receptor T cells and methods of using them
WO2023019128A1 (en) * 2021-08-09 2023-02-16 The Trustees Of The University Of Pennyslvania Optimizing t cell differentiation state with micrornas
AU2022326565A1 (en) 2021-08-11 2024-02-08 Sana Biotechnology, Inc. Genetically modified cells for allogeneic cell therapy
AU2022325232A1 (en) 2021-08-11 2024-02-08 Sana Biotechnology, Inc. Genetically modified primary cells for allogeneic cell therapy
WO2023019203A1 (en) 2021-08-11 2023-02-16 Sana Biotechnology, Inc. Inducible systems for altering gene expression in hypoimmunogenic cells
WO2023019225A2 (en) 2021-08-11 2023-02-16 Sana Biotechnology, Inc. Genetically modified cells for allogeneic cell therapy to reduce instant blood mediated inflammatory reactions
WO2023019227A1 (en) 2021-08-11 2023-02-16 Sana Biotechnology, Inc. Genetically modified cells for allogeneic cell therapy to reduce complement-mediated inflammatory reactions
WO2023021113A1 (en) 2021-08-18 2023-02-23 Julius-Maximilians-Universität Würzburg Hybrid tumor/cancer therapy based on targeting the resolution of or inducing transcription-replication conflicts (trcs)
AU2022330406A1 (en) 2021-08-20 2024-03-07 Novartis Ag Methods of making chimeric antigen receptor–expressing cells
CA3228536A1 (en) 2021-08-24 2023-03-02 Yugang Guo Il-10 expressing cells for enhanced cancer immunotherapies
WO2023028238A1 (en) 2021-08-25 2023-03-02 PIC Therapeutics, Inc. Eif4e inhibitors and uses thereof
IL310924A (en) 2021-08-25 2024-04-01 Pic Therapeutics Inc EIF4E inhibitors and their uses
CA3232833A1 (en) 2021-09-27 2023-03-30 Kathleen Mcginness Chimeric receptor polypeptides in combination with trans metabolism molecules that re-direct glucose metabolites out of the glycolysis pathway and therapeutic uses thereof
WO2023069936A1 (en) 2021-10-18 2023-04-27 Kite Pharma, Inc. Signaling domains for chimeric antigen receptors
TW202330504A (zh) 2021-10-28 2023-08-01 美商基利科學股份有限公司 嗒𠯤—３（２ｈ）—酮衍生物
US11919869B2 (en) 2021-10-29 2024-03-05 Gilead Sciences, Inc. CD73 compounds
WO2023081735A1 (en) 2021-11-03 2023-05-11 Celgene Corporation Chimeric antigen receptors specific for b-cell maturation antigen for use in treating myeloma
WO2023081715A1 (en) 2021-11-03 2023-05-11 Viracta Therapeutics, Inc. Combination of car t-cell therapy with btk inhibitors and methods of use thereof
WO2023091909A1 (en) 2021-11-16 2023-05-25 Sotio Biotech Inc. Treatment of myxoid/round cell liposarcoma patients
WO2023092119A2 (en) 2021-11-22 2023-05-25 Ludwig Institute For Cancer Research Ltd Methods for predicting responsiveness to a cancer therapy
WO2023105000A1 (en) 2021-12-09 2023-06-15 Zygosity Limited Vector
WO2023115041A1 (en) 2021-12-17 2023-06-22 Sana Biotechnology, Inc. Modified paramyxoviridae attachment glycoproteins
TW202342498A (zh) 2021-12-17 2023-11-01 美商薩那生物科技公司 經修飾副黏液病毒科融合醣蛋白
WO2023114984A1 (en) 2021-12-17 2023-06-22 Ikena Oncology, Inc. Tead inhibitors and uses thereof
WO2023122615A1 (en) 2021-12-22 2023-06-29 Gilead Sciences, Inc. Ikaros zinc finger family degraders and uses thereof
WO2023122581A2 (en) 2021-12-22 2023-06-29 Gilead Sciences, Inc. Ikaros zinc finger family degraders and uses thereof
WO2023122337A1 (en) 2021-12-23 2023-06-29 Sana Biotechnology, Inc. Chimeric antigen receptor (car) t cells for treating autoimmune disease and associated methods
WO2023126458A1 (en) 2021-12-28 2023-07-06 Mnemo Therapeutics Immune cells with inactivated suv39h1 and modified tcr
AR128124A1 (es) 2021-12-30 2024-03-27 Tr1X Inc Células t cd4⁺ que expresan il-10 y receptores de antígenos quiméricos y usos de estos
WO2023133595A2 (en) 2022-01-10 2023-07-13 Sana Biotechnology, Inc. Methods of ex vivo dosing and administration of lipid particles or viral vectors and related systems and uses
WO2023137471A1 (en) 2022-01-14 2023-07-20 Tune Therapeutics, Inc. Compositions, systems, and methods for programming t cell phenotypes through targeted gene activation
WO2023137472A2 (en) 2022-01-14 2023-07-20 Tune Therapeutics, Inc. Compositions, systems, and methods for programming t cell phenotypes through targeted gene repression
EP4215245A1 (en) 2022-01-19 2023-07-26 Innovative Cellular Therapeutics Holdings, Ltd. Enhanced chimeric antigen receptor cells in hypoxic tumor microenvironment
WO2023139269A1 (en) 2022-01-21 2023-07-27 Mnemo Therapeutics Modulation of suv39h1 expression by rnas
TW202340168A (zh) 2022-01-28 2023-10-16 美商基利科學股份有限公司 Ｐａｒｐ７抑制劑
WO2023147515A1 (en) 2022-01-28 2023-08-03 Juno Therapeutics, Inc. Methods of manufacturing cellular compositions
WO2023150518A1 (en) 2022-02-01 2023-08-10 Sana Biotechnology, Inc. Cd3-targeted lentiviral vectors and uses thereof
WO2023150181A1 (en) 2022-02-01 2023-08-10 President And Fellows Of Harvard College Methods and compositions for treating cancer
WO2023150647A1 (en) 2022-02-02 2023-08-10 Sana Biotechnology, Inc. Methods of repeat dosing and administration of lipid particles or viral vectors and related systems and uses
WO2023154890A2 (en) * 2022-02-11 2023-08-17 Fred Hutchinson Cancer Center Chimeric antigen receptors binding steap1
WO2023154578A1 (en) 2022-02-14 2023-08-17 Sana Biotechnology, Inc. Methods of treating patients exhibiting a prior failed therapy with hypoimmunogenic cells
WO2023159001A1 (en) 2022-02-15 2023-08-24 Kite Pharma, Inc. Predicting adverse events from immunotherapy
WO2023158836A1 (en) 2022-02-17 2023-08-24 Sana Biotechnology, Inc. Engineered cd47 proteins and uses thereof
WO2023164440A1 (en) 2022-02-22 2023-08-31 Juno Therapeutics, Inc. Proteinase 3 (pr3) chimeric autoantibody receptor t cells and related methods and uses
TW202340457A (zh) 2022-02-28 2023-10-16 美商凱特製藥公司 同種異體治療細胞
WO2023167882A1 (en) 2022-03-01 2023-09-07 Artisan Development Labs, Inc. Composition and methods for transgene insertion
WO2023172883A1 (en) 2022-03-07 2023-09-14 Alpine Immune Sciences, Inc. Immunomodulatory proteins of variant cd80 polypeptides, cell therapies thereof and related methods and uses
WO2023170606A1 (en) 2022-03-08 2023-09-14 Alentis Therapeutics Ag Use of anti-claudin-1 antibodies to increase t cell availability
WO2023173057A1 (en) 2022-03-10 2023-09-14 Ikena Oncology, Inc. Mek inhibitors and uses thereof
WO2023173053A1 (en) 2022-03-10 2023-09-14 Ikena Oncology, Inc. Mek inhibitors and uses thereof
WO2023173137A1 (en) 2022-03-11 2023-09-14 Yale University Compositions and methods for efficient and stable genetic modification of eukaryotic cells
WO2023173123A1 (en) 2022-03-11 2023-09-14 Sana Biotechnology, Inc. Genetically modified cells and compositions and uses thereof
WO2023178181A1 (en) 2022-03-17 2023-09-21 Gilead Sciences, Inc. Ikaros zinc finger family degraders and uses thereof
WO2023178348A1 (en) 2022-03-18 2023-09-21 The Regents Of The University Of Colorado, A Body Corporate Genetically engineered t-cell co-receptors and methods of use thereof
US20230355796A1 (en) 2022-03-24 2023-11-09 Gilead Sciences, Inc. Combination therapy for treating trop-2 expressing cancers
WO2023180552A1 (en) 2022-03-24 2023-09-28 Institut Curie Immunotherapy targeting tumor transposable element derived neoantigenic peptides in glioblastoma
GB202204386D0 (en) 2022-03-28 2022-05-11 Cambridge Entpr Ltd Engineered immune cell platform
WO2023193015A1 (en) 2022-04-01 2023-10-05 Sana Biotechnology, Inc. Cytokine receptor agonist and viral vector combination therapies
TW202345901A (zh) 2022-04-05 2023-12-01 美商基利科學股份有限公司 用於治療結腸直腸癌之組合療法
WO2023196921A1 (en) 2022-04-06 2023-10-12 The Regents Of The University Of Colorado, A Body Corporate Granzyme expressing t cells and methods of use
WO2023196933A1 (en) 2022-04-06 2023-10-12 The Regents Of The University Of Colorado, A Body Corporate Chimeric antigen receptor t cells and methods of use thereof
TW202400138A (zh) 2022-04-21 2024-01-01 美商基利科學股份有限公司 Ｋｒａｓ ｇ１２ｄ調節化合物
WO2023211889A1 (en) 2022-04-25 2023-11-02 Ikena Oncology, Inc. Polymorphic compounds and uses thereof
WO2023211972A1 (en) 2022-04-28 2023-11-02 Medical University Of South Carolina Chimeric antigen receptor modified regulatory t cells for treating cancer
WO2023213969A1 (en) 2022-05-05 2023-11-09 Juno Therapeutics Gmbh Viral-binding protein and related reagents, articles, and methods of use
WO2023214325A1 (en) 2022-05-05 2023-11-09 Novartis Ag Pyrazolopyrimidine derivatives and uses thereof as tet2 inhibitors
WO2023220644A1 (en) 2022-05-10 2023-11-16 Yale University Compositions and methods of synthetic ctla-4 tails for reprogramming of car-t cells and enhancement of anti-tumor efficacy
WO2023220655A1 (en) 2022-05-11 2023-11-16 Celgene Corporation Methods to overcome drug resistance by re-sensitizing cancer cells to treatment with a prior therapy via treatment with a t cell therapy
WO2023220641A2 (en) 2022-05-11 2023-11-16 Juno Therapeutics, Inc. Methods and uses related to t cell therapy and production of same
EP4279085A1 (en) 2022-05-20 2023-11-22 Mnemo Therapeutics Compositions and methods for treating a refractory or relapsed cancer or a chronic infectious disease
WO2023230548A1 (en) 2022-05-25 2023-11-30 Celgene Corporation Method for predicting response to a t cell therapy
WO2023230581A1 (en) 2022-05-25 2023-11-30 Celgene Corporation Methods of manufacturing t cell therapies
WO2023230205A1 (en) 2022-05-25 2023-11-30 Ikena Oncology, Inc. Mek inhibitors and uses thereof
US20230392119A1 (en) 2022-05-27 2023-12-07 Kite Pharma, Inc. Compositions and methods for preparing engineered lymphocytes for cell therapy
WO2023230272A1 (en) 2022-05-27 2023-11-30 Kite Pharma, Inc. Non-viral delivery of cell therapy constructs
WO2023240143A1 (en) 2022-06-09 2023-12-14 Kite Pharma, Inc. Methods of preparing lymphocytes for cell therapy cross reference to related applications
WO2023239940A1 (en) 2022-06-10 2023-12-14 Research Development Foundation Engineered fcriib selective igg1 fc variants and uses thereof
WO2023242343A1 (en) 2022-06-15 2023-12-21 Immunoscape Pte. Ltd. Human t cell receptors specific for antigenic peptides derived from mitogen-activated protein kinase 8 interacting protein 2 (mapk8ip2), epstein-barr virus or human endogenous retrovirus, and uses thereof
WO2023250400A1 (en) 2022-06-22 2023-12-28 Juno Therapeutics, Inc. Treatment methods for second line therapy of cd19-targeted car t cells
WO2024006960A1 (en) 2022-06-29 2024-01-04 Juno Therapeutics, Inc. Lipid nanoparticles for delivery of nucleic acids
WO2024007020A1 (en) 2022-06-30 2024-01-04 Indapta Therapeutics, Inc. Combination of engineered natural killer (nk) cells and antibody therapy and related methods
US20240116928A1 (en) 2022-07-01 2024-04-11 Gilead Sciences, Inc. Cd73 compounds
WO2024026377A1 (en) 2022-07-27 2024-02-01 Sana Biotechnology, Inc. Methods of transduction using a viral vector and inhibitors of antiviral restriction factors
WO2024026107A2 (en) 2022-07-28 2024-02-01 Lentigen Technology, Inc. Chimeric antigen receptor therapies for treating solid tumors
WO2024030441A1 (en) 2022-08-02 2024-02-08 National University Corporation Hokkaido University Methods of improving cellular therapy with organelle complexes
WO2024028364A1 (en) 2022-08-02 2024-02-08 Liminal Biosciences Limited Aryl-triazolyl and related gpr84 antagonists and uses thereof
WO2024028365A1 (en) 2022-08-02 2024-02-08 Liminal Biosciences Limited Substituted pyridone gpr84 antagonists and uses thereof
WO2024028363A1 (en) 2022-08-02 2024-02-08 Liminal Biosciences Limited Heteroaryl carboxamide and related gpr84 antagonists and uses thereof
WO2024033879A1 (en) 2022-08-10 2024-02-15 Takeda Pharmaceutical Company Limited Hypoimmunogenic modified cells
WO2024040207A1 (en) 2022-08-19 2024-02-22 Sotio Biotech Inc. Genetically engineered natural killer (nk) cells with chimeric receptor polypeptides in combination with trans metabolism molecules and therapeutic uses thereof
WO2024040208A1 (en) 2022-08-19 2024-02-22 Sotio Biotech Inc. Genetically engineered immune cells with chimeric receptor polypeptides in combination with multiple trans metabolism molecules and therapeutic uses thereof
WO2024044779A2 (en) 2022-08-26 2024-02-29 Juno Therapeutics, Inc. Antibodies and chimeric antigen receptors specific for delta-like ligand 3 (dll3)
US20240091261A1 (en) 2022-08-26 2024-03-21 Kite Pharma, Inc. Immune cell function
WO2024054944A1 (en) 2022-09-08 2024-03-14 Juno Therapeutics, Inc. Combination of a t cell therapy and continuous or intermittent dgk inhibitor dosing
WO2024056809A1 (en) 2022-09-15 2024-03-21 Novartis Ag Treatment of autoimmune disorders using chimeric antigen receptor therapy
WO2024064642A2 (en) 2022-09-19 2024-03-28 Tune Therapeutics, Inc. Compositions, systems, and methods for modulating t cell function
WO2024064824A2 (en) 2022-09-21 2024-03-28 Yale University Compositions and methods for identification of membrane targets for enhancement of nk cell therapy
US20240091351A1 (en) 2022-09-21 2024-03-21 Gilead Sciences, Inc. FOCAL IONIZING RADIATION AND CD47/SIRPa DISRUPTION ANTICANCER COMBINATION THERAPY
WO2024062138A1 (en) 2022-09-23 2024-03-28 Mnemo Therapeutics Immune cells comprising a modified suv39h1 gene
WO2024073583A1 (en) 2022-09-30 2024-04-04 Caribou Biosciences, Inc. Anti-ror1 chimeric antigen receptors (cars), car-nk cells and related methods

Family Cites Families (97)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR901228A (fr) 1943-01-16 1945-07-20 Deutsche Edelstahlwerke Ag Système d'aimant à entrefer annulaire
US4882282A (en) * 1985-08-16 1989-11-21 Immunex Corporation DNA sequences encoding bovine interleukin-2
US5906936A (en) 1988-05-04 1999-05-25 Yeda Research And Development Co. Ltd. Endowing lymphocytes with antibody specificity
US6303121B1 (en) 1992-07-30 2001-10-16 Advanced Research And Technology Method of using human receptor protein 4-1BB
US6352694B1 (en) 1994-06-03 2002-03-05 Genetics Institute, Inc. Methods for inducing a population of T cells to proliferate using agents which recognize TCR/CD3 and ligands which stimulate an accessory molecule on the surface of the T cells
US6534055B1 (en) 1988-11-23 2003-03-18 Genetics Institute, Inc. Methods for selectively stimulating proliferation of T cells
US5858358A (en) 1992-04-07 1999-01-12 The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Navy Methods for selectively stimulating proliferation of T cells
US6905680B2 (en) 1988-11-23 2005-06-14 Genetics Institute, Inc. Methods of treating HIV infected subjects
US5703055A (en) 1989-03-21 1997-12-30 Wisconsin Alumni Research Foundation Generation of antibodies through lipid mediated DNA delivery
US5399346A (en) 1989-06-14 1995-03-21 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services Gene therapy
US5585362A (en) 1989-08-22 1996-12-17 The Regents Of The University Of Michigan Adenovirus vectors for gene therapy
US6319494B1 (en) 1990-12-14 2001-11-20 Cell Genesys, Inc. Chimeric chains for receptor-associated signal transduction pathways
WO1992010591A1 (en) 1990-12-14 1992-06-25 Cell Genesys, Inc. Chimeric chains for receptor-associated signal transduction pathways
US7049136B2 (en) 1991-03-07 2006-05-23 The General Hospital Corporation Redirection of cellular immunity by receptor chimeras
NZ241855A (en) 1991-03-07 1994-04-27 Gen Hospital Corp Use of therapeutic cells to obtain cellular response to infection, tumours or autoimmune-generated cells, cells with chimaeric receptors (with binding component and destruction signal), dna encoding the receptor, vectors and antibodies to receptor
US6004811A (en) 1991-03-07 1999-12-21 The Massachussetts General Hospital Redirection of cellular immunity by protein tyrosine kinase chimeras
US5199942A (en) 1991-06-07 1993-04-06 Immunex Corporation Method for improving autologous transplantation
GB9125768D0 (en) 1991-12-04 1992-02-05 Hale Geoffrey Therapeutic method
IL104570A0 (en) 1992-03-18 1993-05-13 Yeda Res & Dev Chimeric genes and cells transformed therewith
US8211422B2 (en) 1992-03-18 2012-07-03 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Chimeric receptor genes and cells transformed therewith
US5350674A (en) 1992-09-04 1994-09-27 Becton, Dickinson And Company Intrinsic factor - horse peroxidase conjugates and a method for increasing the stability thereof
US7211259B1 (en) 1993-05-07 2007-05-01 Immunex Corporation 4-1BB polypeptides and DNA encoding 4-1BB polypeptides
AU697482B2 (en) * 1993-09-16 1998-10-08 Indiana University Research And Technology Corporation Human receptor H4-1BB
EP0758394B1 (en) 1994-05-02 2002-11-20 Bernd Groner Bifunctional protein, preparation and use
US7175843B2 (en) 1994-06-03 2007-02-13 Genetics Institute, Llc Methods for selectively stimulating proliferation of T cells
US5712149A (en) 1995-02-03 1998-01-27 Cell Genesys, Inc. Chimeric receptor molecules for delivery of co-stimulatory signals
US6103521A (en) 1995-02-06 2000-08-15 Cell Genesys, Inc. Multispecific chimeric receptors
RU2167676C2 (ru) 1995-02-24 2001-05-27 Дзе Дженерал Хоспитал Корпорейшн Перенаправление клеточного иммунитета посредством химерных рецепторов
US7067318B2 (en) 1995-06-07 2006-06-27 The Regents Of The University Of Michigan Methods for transfecting T cells
US6692964B1 (en) 1995-05-04 2004-02-17 The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Navy Methods for transfecting T cells
GB9526131D0 (en) 1995-12-21 1996-02-21 Celltech Therapeutics Ltd Recombinant chimeric receptors
US5874240A (en) 1996-03-15 1999-02-23 Human Genome Sciences, Inc. Human 4-1BB receptor splicing variant
WO1998018809A1 (en) 1996-10-25 1998-05-07 Cell Genesys, Inc. Targeted cytolysis of cancer cells
GB9713473D0 (en) 1997-06-25 1997-09-03 Celltech Therapeutics Ltd Biological products
US20030060444A1 (en) 1997-06-25 2003-03-27 Celltech Therapeutics, Ltd. Cell activation process and reagents therefor
GB9722779D0 (en) * 1997-10-28 1997-12-24 Isis Innovation Human CD8 as an inhibitor of the cellular immune system
DK1047449T3 (da) * 1997-10-28 2004-01-26 Univ British Columbia Immunologiske præparater og anvendelse deraf til forbigående ændring af myelin i centralnervesystemet hos pattedyr for at fremme neuronal regenerering
GB9809658D0 (en) 1998-05-06 1998-07-01 Celltech Therapeutics Ltd Biological products
JP2002524081A (ja) 1998-09-04 2002-08-06 スローン − ケッタリング インスティチュート フォー キャンサー リサーチ 前立腺−特異的膜抗原に特異的な融合受容体およびその使用
AU2472400A (en) * 1998-10-20 2000-05-08 City Of Hope CD20-specific redirected T cells and their use in cellular immunotherapy of CD20+ malignancies
AU4418900A (en) 1999-04-16 2000-11-02 Celltech Therapeutics Limited Synthetic transmembrane components
WO2001029058A1 (en) 1999-10-15 2001-04-26 University Of Massachusetts Rna interference pathway genes as tools for targeted genetic interference
GB9925848D0 (en) 1999-11-01 1999-12-29 Celltech Therapeutics Ltd Biological products
US6326193B1 (en) 1999-11-05 2001-12-04 Cambria Biosciences, Llc Insect control agent
WO2001034843A1 (en) 1999-11-10 2001-05-17 The Uab Research Foundation Lentiviral vector transduction of hematopoietic stem cells
US6797514B2 (en) 2000-02-24 2004-09-28 Xcyte Therapies, Inc. Simultaneous stimulation and concentration of cells
US7572631B2 (en) 2000-02-24 2009-08-11 Invitrogen Corporation Activation and expansion of T cells
AU4328801A (en) 2000-02-24 2001-09-03 Xcyte Therapies Inc Simultaneous stimulation and concentration of cells
US6867041B2 (en) 2000-02-24 2005-03-15 Xcyte Therapies, Inc. Simultaneous stimulation and concentration of cells
IL136511A0 (en) * 2000-06-01 2001-06-14 Gavish Galilee Bio Appl Ltd Genetically engineered mhc molecules
WO2001096584A2 (en) 2000-06-12 2001-12-20 Akkadix Corporation Materials and methods for the control of nematodes
GB0025307D0 (en) 2000-10-16 2000-11-29 Celltech Chiroscience Ltd Biological products
WO2002077029A2 (en) 2000-11-07 2002-10-03 City Of Hope Cd19-specific redirected immune cells
US7070995B2 (en) * 2001-04-11 2006-07-04 City Of Hope CE7-specific redirected immune cells
US20090257994A1 (en) * 2001-04-30 2009-10-15 City Of Hope Chimeric immunoreceptor useful in treating human cancers
EP1392818A4 (en) 2001-04-30 2005-01-05 Hope City FOR THE TREATMENT OF CANCER DISEASES IN HUMAN CERTAIN IMMUNE RECEPTOR
US7514537B2 (en) * 2001-04-30 2009-04-07 City Of Hope Chimeric immunoreceptor useful in treating human gliomas
US20030148982A1 (en) 2001-11-13 2003-08-07 Brenner Malcolm K. Bi-spcific chimeric T cells
US7745140B2 (en) 2002-01-03 2010-06-29 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Activation and expansion of T-cells using an engineered multivalent signaling platform as a research tool
US7446190B2 (en) * 2002-05-28 2008-11-04 Sloan-Kettering Institute For Cancer Research Nucleic acids encoding chimeric T cell receptors
JP3878522B2 (ja) * 2002-07-18 2007-02-07 株式会社日立製作所 ベンチュリ式燃料供給装置を備えたエンジンの空燃比制御方法及びその方法を備えた燃料制御装置
US20050129671A1 (en) 2003-03-11 2005-06-16 City Of Hope Mammalian antigen-presenting T cells and bi-specific T cells
US7402431B2 (en) * 2004-03-01 2008-07-22 Immunovative Therapies, Ltd. T-cell therapy formulation
WO2005019429A2 (en) 2003-08-22 2005-03-03 Potentia Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for enhancing phagocytosis or phagocyte activity
US7435596B2 (en) 2004-11-04 2008-10-14 St. Jude Children's Research Hospital, Inc. Modified cell line and method for expansion of NK cell
US20050113564A1 (en) * 2003-11-05 2005-05-26 St. Jude Children's Research Hospital Chimeric receptors with 4-1BB stimulatory signaling domain
WO2005118788A2 (en) 2004-05-27 2005-12-15 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Novel artificial antigen presenting cells and uses therefor
US7994298B2 (en) 2004-09-24 2011-08-09 Trustees Of Dartmouth College Chimeric NK receptor and methods for treating cancer
EP3530321A1 (en) 2004-12-10 2019-08-28 Peter MacCallum Cancer Institute Methods and compositions for adoptive immunotherapy
US7581948B2 (en) * 2005-12-21 2009-09-01 Johns Manville Burner apparatus and methods for making inorganic fibers
US7551486B2 (en) * 2006-05-15 2009-06-23 Apple Inc. Iterative memory cell charging based on reference cell value
US20100105136A1 (en) * 2006-10-09 2010-04-29 The General Hospital Corporation Chimeric t-cell receptors and t-cells targeting egfrviii on tumors
EP1916259A1 (en) * 2006-10-26 2008-04-30 Institut National De La Sante Et De La Recherche Medicale (Inserm) Anti-glycoprotein VI SCFV fragment for treatment of thrombosis
US20080131415A1 (en) 2006-11-30 2008-06-05 Riddell Stanley R Adoptive transfer of cd8 + t cell clones derived from central memory cells
US20080311098A1 (en) * 2007-02-14 2008-12-18 Lapointe Rejean Compounds and methods for modulating the immune response against antigens
US7448191B2 (en) * 2007-02-14 2008-11-11 Deere & Company Mower deck lift system with transport lock
CA2584494A1 (en) * 2007-03-27 2008-09-27 Jeffrey A. Medin Vector encoding therapeutic polypeptide and safety elements to clear transduced cells
AU2008233051B2 (en) 2007-03-30 2014-04-10 Memorial Sloan-Kettering Cancer Center Constitutive expression of costimulatory ligands on adoptively transferred T lymphocytes
WO2009091826A2 (en) 2008-01-14 2009-07-23 The Board Of Regents Of The University Of Texas System Compositions and methods related to a human cd19-specific chimeric antigen receptor (h-car)
WO2009097140A1 (en) 2008-01-30 2009-08-06 Memorial Sloan-Kettering Cancer Center Methods for off -the -shelf tumor immunotherapy using allogeneic t-cell precursors
DK2279253T3 (en) * 2008-04-09 2017-02-13 Maxcyte Inc Construction and application of therapeutic compositions of freshly isolated cells
PL3006459T3 (pl) 2008-08-26 2022-01-17 City Of Hope Sposób i kompozycje dla wzmocnionego działania efektorowego komórek t przeciw guzowi nowotworowemu
CN101348525B (zh) * 2008-08-28 2011-11-16 南京医科大学 抗血吸虫单克隆抗体np11-4单链抗体及其制备方法、应用
EP2389443B1 (en) * 2009-01-23 2018-11-14 Roger Williams Hospital Retroviral vectors encoding multiple highly homologous non-viral polypeptides and the use of same
US8465743B2 (en) 2009-10-01 2013-06-18 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Anti-vascular endothelial growth factor receptor-2 chimeric antigen receptors and use of same for the treatment of cancer
US9181527B2 (en) 2009-10-29 2015-11-10 The Trustees Of Dartmouth College T cell receptor-deficient T cell compositions
US9493740B2 (en) 2010-09-08 2016-11-15 Baylor College Of Medicine Immunotherapy of cancer using genetically engineered GD2-specific T cells
CN108424462A (zh) 2010-10-27 2018-08-21 贝勒医学院 使t细胞重定向针对cd70阳性恶性肿瘤的嵌合cd27受体
SG10201510092QA (en) * 2010-12-09 2016-01-28 Univ Pennsylvania Use of chimeric antigen receptor-modified t cells to treat cancer
US9233125B2 (en) 2010-12-14 2016-01-12 University Of Maryland, Baltimore Universal anti-tag chimeric antigen receptor-expressing T cells and methods of treating cancer
WO2012127464A2 (en) 2011-03-23 2012-09-27 Gavish-Galilee Bio Applications Ltd Constitutively activated t cells for use in adoptive cell therapy
MX2013011363A (es) 2011-04-01 2014-04-25 Sloan Kettering Inst Cancer Anticuerpos para peptidos citosolicos.
DK2694640T3 (da) 2011-04-08 2017-11-20 Baylor College Medicine Reversion af effekterne af tumormikromiljø ved anvendelse af kimæriske cytokinreceptorer
US20130071414A1 (en) 2011-04-27 2013-03-21 Gianpietro Dotti Engineered cd19-specific t lymphocytes that coexpress il-15 and an inducible caspase-9 based suicide gene for the treatment of b-cell malignancies
WO2013033626A2 (en) 2011-08-31 2013-03-07 Trustees Of Dartmouth College Nkp30 receptor targeted therapeutics
US20140255363A1 (en) 2011-09-16 2014-09-11 Baylor College Of Medicine Targeting the tumor microenvironment using manipulated nkt cells
ES2654060T3 (es) 2011-10-20 2018-02-12 The U.S.A. As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Receptores de antígenos quiméricos anti-CD22

Also Published As

Publication number Publication date
US20140106449A1 (en) 2014-04-17
WO2012079000A4 (en) 2012-08-23
AU2017203087A1 (en) 2017-06-08
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HUS1900007I1 (hu) 2019-04-29
US9540445B2 (en) 2017-01-10
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CN107699585A (zh) 2018-02-16
US20170283775A1 (en) 2017-10-05
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CN106220739A (zh) 2016-12-14
US9499629B2 (en) 2016-11-22
CY2019007I1 (el) 2019-11-27
MX347078B (es) 2017-04-10
US20150099299A1 (en) 2015-04-09
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CY2019007I2 (el) 2019-11-27
US8916381B1 (en) 2014-12-23
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TR201820015T4 (tr) 2019-01-21
BR112013014265A2 (pt) 2017-12-19
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US20130287748A1 (en) 2013-10-31
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US20140370017A1 (en) 2014-12-18
DK3214091T3 (en) 2019-01-07
US8911993B2 (en) 2014-12-16
US20160130355A1 (en) 2016-05-12
KR102417796B1 (ko) 2022-07-07
ES2641870T3 (es) 2017-11-14
AP2013006918A0 (en) 2013-06-30
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BR112013014265B1 (pt) 2023-05-16
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FR19C1006I1 (ko) 2019-04-05
PE20140178A1 (es) 2014-02-20
EA201790175A1 (ru) 2017-09-29
GT201300150A (es) 2014-06-10
US9481728B2 (en) 2016-11-01
LUC00104I1 (ko) 2019-02-21
AU2011338200A1 (en) 2013-07-04
EP3305798A1 (en) 2018-04-11
MY169644A (en) 2019-04-24
JP2018029595A (ja) 2018-03-01
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JP2022002516A (ja) 2022-01-11
JP6943933B2 (ja) 2021-10-06
RS56453B1 (sr) 2018-01-31
HK1253052A1 (zh) 2019-06-06
CR20130269A (es) 2013-09-03
JP6293194B2 (ja) 2018-03-14
EP3214091A1 (en) 2017-09-06
AU2017203087B2 (en) 2019-06-20
CL2013001645A1 (es) 2014-02-14
CA2820681C (en) 2018-10-23
HK1243082B (zh) 2019-09-13
KR102062407B1 (ko) 2020-01-03
US20130288368A1 (en) 2013-10-31
SG190997A1 (en) 2013-07-31
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