BR112019013940A2 - Método de tratar um câncer com uma população de linfócitos infiltrantes de tumor, processo para preparação de uma população de linfócitos infiltrantes de tumor, população de linfócitos infiltrantes de tumor, e, composição farmacêutica. - Google Patents
Método de tratar um câncer com uma população de linfócitos infiltrantes de tumor, processo para preparação de uma população de linfócitos infiltrantes de tumor, população de linfócitos infiltrantes de tumor, e, composição farmacêutica. Download PDFInfo
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Abstract
métodos de expandir linfócitos infiltrantes de tumor (tils) usando um agonista da superfamília do receptor de necrose de tumor (tnfrsf), tal como um agonista de 4-ibb, um agonista de cd27, um agonista relacionado com o receptor de tnf induzido por glicocorticoide, um agonista de ox40, um agonista de hvem, ou um agonista de cd95, e usos de tais tils expandidos no tratamento de doenças tais como câncer são aqui divulgados. além disso, em algumas modalidades, combinações terapêuticas de tils e agonistas de tnfrsf úteis no tratamento de doenças tais como câncer, incluindo composições, usos, e regimes de dosagem dos mesmos, são aqui divulgados.
Description
MÉTODO DE TRATAR UM CÂNCER COM UMA POPULAÇÃO DE LINFÓCITOS INFILTRANTES DE TUMOR, PROCESSO PARA PREPARAÇÃO DE UMA POPULAÇÃO DE LINFÓCITOS INFILTRANTES DE TUMOR, POPULAÇÃO DE LINFÓCITOS INFILTRANTES DE TUMOR, E, COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA REFERÊNCIA CRUZADA AOS PEDIDOS RELACIONADOS [001] Este pedido internacional reivindica o benefício de prioridade para o Pedido Provisório U.S. No. 62/443.556, depositado em 6 de janeiro 2017, Pedido Provisório U.S. No. 62/460.477, depositado em 17 de fevereiro de 2017, Pedido Provisório U.S. No. 62/532.807, depositado em 14 de Julho de 2017, e Pedido Provisório No. 62/567.151, depositado em 2 de outubro de 2017, a totalidade das quais é aqui incorporada por referência.
CAMPO DA INVENÇÃO [002] Métodos de expandir linfócitos infiltrantes de tumor (TILs) usando um agonista da superfamília de receptor do fator de necrose de tumor (TNFRSF), tal como um agonista de 4-1BB, um agonista de CD27, um agonista relacionado com o receptor de TNF induzido por glicocorticoide, um agonista de 0X40, um agonista de HVEM, ou um agonista de CD95, e usos de TILs expandidos no tratamento de doenças tais como câncer são aqui divulgados. Além disso, combinações terapêuticas de TILs e agonistas de TNFRSF, incluindo composições e usos dos mesmos no tratamento de doenças tais como câncer são aqui divulgadas.
FUNDAMENTOS DA INVENÇÃO [003] O tratamento de cânceres volumosos, refratários usando transferência autóloga adotiva de linfócitos infiltrantes de tumor (TILs) representa um método poderoso para terapia para pacientes com prognóstico insuficiente. Gattinoni, et al., Nat. Rev. Immunol. 2006, 6, 383-393. TILs são dominados pelas células T, e a expansão de TIL com base na IL-2 seguida por um “processo de expansão rápida” (REP) tem se tomado um método
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2/497 preferido para a expansão de TIL por causa da sua velocidade e eficiência. Dudley, et al., Science 2002, 298, 850-54; Dudley, et al., I Clin. Oncol. 2005, 23, 2346-57; Dudley, et al., Clin. Oncol. 2008, 26, 5233-39; Riddell, et al., Science 1992, 257, 238-41; Dudley, et al., Immunother. 2003, 26, 332-42. Vários métodos para melhorar respostas clínicas à terapia de TIL em melanoma e expandir a terapia de TIL para outros tipos de tumor foram explorados com sucesso limitado, e o campo permanece desafiador. Goff, et al., J Clin. Oncol. 2016, 34, 2389- 97; Dudley, et al., J Clin. Oncol. 2008, 26, 5233-39; Rosenberg, et al., Clin. Cancer Res. 2011, 17, 4550-57. Muito foco foi colocado sobre a seleção de TILs durante a expansão para selecionar subconjuntos particulares (tais como células T CD8+) ou alvejar mutações condutoras tais como um epitopo de ERBB2IP mutado ou mutações condutoras no oncogene KRAS. Tran, et al., N. Engl. J Med. 2016,375, 225562; Tran, et al., Science 2014, 344, 641-45. Entretanto, tais métodos de seleção, mesmo se eles pudessem ser desenvolvidos para mostrar eficácia em testes clínicos maiores, acrescentariam significantemente à duração, complexidade, e custo de realizar a terapia de TIL e limitariam o potencial para use difundido da terapia de TIL em diferentes tipos de cânceres.
[004] 4-1BB (também conhecido como CD 137 e TNFRSF9), que foi primeiro identificada como um receptor coestimulatório indutível expresso sobre as células T ativadas, é um membro da glicoproteína que transpõem membrana do TNFRSF. Watts, Annu. Rev. Immunol. 2005, 23, 23-68. 4-1BB é a glicoproteína de transmembrana tipo 2 que é expressa nos linfócitos T ativados, e a um grau maior nas células T CD8+ do que CD4+. 4-1BB é também expressa nas células dendríticas, células dendríticas foliculares, células exterminadoras naturais (NK), granulócitos, células de paredes de vasos sanguíneos nos sítios de inflamação, vasculatura de tumor, e endotélio aterosclerótico. O ligante que estimula 4-1BB (4-1BBL) é expresso nas células que apresentam antígeno ativadas (APCs), células progenitoras
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3/497 mieloides e células tronco hematopoiéticas. 4-1BB é uma molécula coestimulatória de célula T induzida na ativação. A sinalização através de ΤΙ BB suprarregula os genes sobreviventes, realça a divisão celular, induz a produção de citocina, e impede a morte de sell induzida pela ativação em células T. O entendimento corrente de 4-1BB indica que a expressão é geralmente dependente da ativação e abrange um amplo subconjunto de células imunes incluindo células NK ativadas e NK T (células NKT); células T reguladoras; células dendríticas (DC) incluindo DCs foliculares; mastoides estimulados, células mieloides de diferenciação, monócitos, neutrófilos, eosinófilos, e células B ativadas. 4-1BB fortemente realça a proliferação e função efetora de células T CD8+. A reticulação de 4-1BB realça a proliferação de célula T, sobrevivência da secreção de IL-2 e atividade citolítica. Adicionalmente, os anticorpos monoclonais anti-4-ΙΒΒ possuem propriedades antitumor fortes, que por sua vez são o resultado de sua poderosa ativação de célula T CD8+, produção de IFN-g, e capacidades indutoras de marcador citolítico. Vinay e Kwon, Mol. Cancer Therapeutics 2012,11, 1062-70; Lee, et al., PLoS One, 2013, 8, e69677, 1-11.
[005] A interação de 4-1 BB nas células B humanas normais ativadas com seu ligante no momento do engajamento do receptor de célula B estimula a proliferação e realça a sobrevivência. O impacto potencial do engajamento de 4-1BB em linfoma de célula B foi investigado em pelo menos dois estudos publicados. A avaliação de diversos tipos de amostras de NHL primários humanos indicou que 4-1BB foi expressa predominantemente nas células T infiltrantes ao invés de nas células de linfoma. Houot, et al., Blood, 2009,114, 3431-38. A adição de agonistas de 4-1BB às culturas in vitro de células B de linfoma com, rituximab e células NK resultou na morte de linfoma aumentada. Kohrt, et al., Blood, 2011, 117, 2423-32. Além disso, a imunofenotipagem de célula B foi realizada em dois experimentos usando PF05082566 em macacos cinomolgos com doses de 0,001 a 100 mg/kg; nestes
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4/497 experimentos os números de célula B de sangue periférico foram inalterados ou diminuídos, como descrito na Publicação do Pedido de Patente Internacional No. WO 2015/119923.
[006] 4-1BB é indetectável na superfície de células T ingênuas mas a expressão aumenta na ativação. Na ativação de 4-1BB, dois membros prósobrevivência da família do fator associado com TNFR (TRAF), TRAF1 e TRAF2, são recrutados para a cauda citoplásmica de 4-1 BB, resultando na ativação a jusante de NFkB e a cascata de cinase da Proteína Ativada por Mitógeno (MAP) incluindo Erk, Jnk, e p38 MAP cinases. A ativação de NFkB leva à suprarregulagem de Bfl-1 e Bel-XL, membros de prósobrevivência da família Be 1-2. A proteína pró-apoptótica Bim é infrarregulada em uma maneira dependente de TRAF1 e Erk. Sabbagh, et al., J Immunol. 2008, 180, 8093-8101. Relatos têm mostrado que anticorpos monoclonais (mAbs) agonistas de 4-1BB aumentam a expressão da molécula coestimulatória e acentuadamente realçam as respostas de linfócito T citolítico, resultando na eficácia antitumor em vários modelos. Os mAbs agonistas de 4-1 BB têm demonstrado eficácia em cenários profiláticos e terapêuticos e em modelos de tumor tanto na monoterapia quanto na terapia de combinação e estabeleceram respostas de memória de célula T protetiva antitumor duráveis. Lynch, et al., Immunol Rev., 2008, 222, 277-286. Os agonistas de 4-1 BB também inibem as reações autoimunes em uma variedade de modelos de autoimunidade. Vinay, et al., J. Mol. Med. 2006, 84, 726-36.
[007] O receptor de 0X40 (0X40) (também conhecido como TNFRSF4, CD 134, ACT-4, e ACT35) é um membro da família do receptor de TNF que é expresso nas células T CD4+ ativadas (ver a WO 95/12673). A deflagração deste receptor por intermédio do ligante de 0X40, chamado de OX4OL, gp34 ou ligante ACT-4, que está presente nas células B e células dendríticas ativadas, realça a proliferação de células T CD4+ durante uma resposta imune e influencia a formação de células T de memória CD4+. Além
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5/497 disso, o sistema OX40-0X4OL medeia a adesão de células T ativadas às células endoteliais, direcionando assim as células T CD4+ ativadas para o sítio de inflamação.
[008] Foi mostrado que as células T OX40+ estão presentes dentro das lesões tumorais contendo linfócitos infiltrantes de tumor e nos linfônodos de drenagem positivos em célula de tumor. Weinberg, et al., J. Immunol., 2000, 164, 2160-2169. Foi mostrado em diversos modelos de tumor em camundongos que o engajamento do receptor de 0X40 in vivo durante a imprimação de tumor significantemente retardou e preveniu o aparecimento de tumores quando comparado aos camundongos tratados com controle. Weinberg, et al., Immunol., 2000, 164, 2160-2169. Consequentemente, foi considerado realçar a resposta imune de um mamífero para um antígeno pelo engajamento do receptor de 0X40 pela administração de um agente de ligação do receptor de 0X40 (Publicação do Pedido de Patente Internacional No. WO 1999/042585; Weinberg, et al., J. Immunol., 2000,164, 2160-2169). Estudos pré-clínicos demonstraram que o tratamento de hospedeiros carregando tumor com agonistas de 0X40, incluindo tanto os anticorpos monoclonais anti-OX40 e proteínas de fusão de OX40L-Fc, resultou na regressão de tumor em diversos modelos pré-clínicos. Linch, et al., Front. Oncol. 2015, 34, 1-14.
[009] CD27, também conhecido como TNFRSF7, tem atividade de sobreposição com outros membros de TNFRSF incluindo CD40, 4-1 BB, e 0X40. CD27 desempenha um papel crítico na sobrevivência, ativação, e função efetora de célula T, e também desempenha um papel na atividade proliferativa e citotóxica de células NK. CD27 é constitutivamente expressa na maioria das células T, incluindo células T ingênuas. O ligante para CD27 é CD70, que é encontrado nas células T, células B, e células dendríticas. Oshima, et al., Int. Immunol. 1998, 10, 517-26. CD27 dirige a expansão de células T CD4+ e CD8+, atuando depois de CD28 para sustentar a
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6/497 sobrevivência de célula efetora T, e influencia respostas secundárias mais do que respostas primárias. Entretanto, a ativação de CD27 também foi associada com o crescimento de tumor através do realce dos efeitos imunossupressivos das células T reguladoras. Claus, et al., Cancer Res. 2012, 72, 3664-76. Outros dados tem indicado que os efeitos imunomodulatórios de CD27 podem sobrepujar este efeito promotor de tumor. Aulwurm, et al., Int. ’ Cancer 2006, 118, 1728-35. Em modelos de camundongo, um anticorpo monoclonal CD27 agonístico mostrou eficácia antitumor e indução de imunidade tumoral. He, et al., J. Immunol. 2013,191, 4174-83.
[0010] A proteína relacionada com TNFR induzida por glicocorticoide (GITR) é uma molécula de ponto de checagem coestimulatória que também é conhecida como o membro 18 da superfamília do receptor de necrose de tumor (TNFRSF18), receptor da família de TNFR indutível por ativação (AITR), e CD357. GITR é expresso em diversos tipos de célula, incluindo células T reguladoras (Tregs) e células T efetoras, as células B, células NK, e células que apresentam antígeno. Nocentini e Riccardi, Eur. J. Immunol. 2005, 35, 1016-1022. GITR é ativado pelo seu ligante GITR conjugado (GITRL). GITR desempenha um papel na estimulação de uma resposta imune, e as proteínas de ligação a antígeno para GITR têm utilidade no tratamento de uma variedade de doenças ou distúrbios relacionados com GITR em que é desejável aumentar uma resposta imune. Ko, et al., J. Exp. Med. 2005, 202, 885-91; Shimizu, et al., Nature Immunology 2002, 3, 135-142; Cohen, et al., Cancer Res. 2006, 66, 4904-12; Azuma, Crit. Rev. Immunol. 2010, 30, 547-57. Por exemplo, a estimulação de célula T através de GITR atenua a supressão mediada por Treg e realça ο extermínio do tumor pelas células T CD4+ e CD8+. GITR é constitutivamente expresso em níveis altos em Tregs (tais como células CD4+CD25+ ou CD8+CD25+) e é adicionalmente suprarregulado na ativação destas células. Nocentini e Riccardi, Eur. J. Immunol. 2005, 35, 1016-1022. GITR é um sinal
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7/497 de coativação de células T ingênuas tanto para CD4+ quanto para CD8+, e induz e realça a proliferação e função efetora, particularmente em situações onde a estimulação do receptor de célula T (TCR) é subótima. Schaer, et al., Curr. Opin. Immunol. 2012, 24, 217-224. A resposta imune realçada causada pelas proteínas GITR que ligam antígeno, tais como proteínas de fusão e anticorpos anti-GITR (incluindo anticorpos agonísticos), é de interesse em uma variedade de aplicações na imunoterapia, tais como o tratamento de cânceres, doenças autoimunes, doenças inflamatórias, ou infecções.
[0011] O mediador de entrada do vírus do herpes (HVEM), também conhecido como TNFRSF14 e CD270, foi primeiro isolado como um receptor para o vírus simples do herpes 1 (HSV-1). Montgomery, et al., Cell 1996, 87, 427-36. HVEM liga-se aos ligantes da família TNF LIGHT e homotrímeros da linfotoxina alfa (Lta3). Mauri, et al., Immunity 1998, 8, 21-30. A ativação de célula T pode ocorrer através da interação de HVEM-LIGHT, e a interação provê um sinal coestimulatório para as células T que são independentes da sinalização de CD28 e podem ser observadas na presença de níveis subótimos de anticorpo CD3 (OKT-3). Tamada, et al., J. Immunol. 2000,165, 4397-404; Harrop, et al., J. Biol. Chem. 1998, 273, 27548-56; Tamada, et al., Nat. Med. 2000, 6, 283-89; Yu, et al., Nat. Immunol. 2004, 5, 141-49. HVEM compreende quatro domínios ricos em cisteína (CRDs). dei Rio, et al., Leukoc. Biol. 2010, 87, 223-35. CRD2 e CRD3 são requeridos para a trimerização de HVEM com o ligante de TNFRSF LIGHT, que emite um sinal coestimulatório para as células T através de HVEM. Ao contrário, CRD1 e CRD2 ligam-se ao receptor do atenuador de linfócito B e T coinibidor (BTLA) e CD 160 em uma maneira monomérica, provendo um sinal inibidor para as células T. Estudos da interação HVEM-LIGHT sugerem que ela primariamente tem um efeito coestimulatório independente de CD28 sobre as células T CD8+, mas também afeta as células T CD4+. Liu, et al., Int. Immunol. 2003, 15, 861-70; Scheu, et al., J. Exp. Med. 2002, 195, 1613Petição 870190062710, de 04/07/2019, pág. 20/590
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24.
[0012] CD95, também conhecido como Fas, APO-1, e TNFRSF6, é uma proteína de transmembrana tipo I de 45 kDa que, diferente de 4-1 BB, 0X40, GITR, CD27, e HVEM, contém um domínio de morte.
[0013] Kischkel, et al., EMBO J 1995,14, 5579-88; Krammer, Nature 2000, 407, 789-95. A ligação do ligante de CD95 indutível (CD95L) para CD95 sobre as células T ativadas leva à morte das células apoptóticas, e assim não é normalmente associada com a mesma função coestimulatória como 41BB, 0X40, GITR, CD27, e HVEM. Strauss, et al., J. Exp. Med. 2009, 206, 1379-93. Entretanto, CD95 também se comporta como um receptor de função dupla que provê os efeitos antiapoptóticos e coestimulatórios sobre as células T sob algumas condições. Paulsen, et al., Cell Death Differ. 2011,18, 619-31. O engajamento de CD95 modula o início do sinal induzido por TCR em uma maneira dependente da dose, em que altas doses de agonistas de CD95 ou CD95L celular silenciam as células T, enquanto doses mais baixas destes agonistas fortemente realçam a ativação e proliferação de célula T induzidas por.
[0014] A presente invenção provê a descoberta inesperada de que os agonistas de TNFRSF, tais como um agonista de 4-1 BB, um agonista de CD27, um agonista de GITR, um agonista de 0X40, um agonista de HVEM, ou um agonista de CD95, são úteis na expansão de TILs a partir de tumores a partir dos quais é conhecido ser difícil obter TILs e tratar os tumores com TIL, e são úteis ainda no tratamento de pacientes em combinação com a terapia de TIL.
SUMÁRIO DA INVENÇÃO
Em uma modalidade, a invenção provê um método de tratar um câncer com uma população de linfócitos infiltrantes de tumor (TILs) compreendendo as etapas de:
(a) excisar um tumor de um paciente;
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9/497 (b) obter uma primeira população de TILs do tumor;
(c) realizar uma expansão inicial da primeira população de TILs em um primeiro meio de cultura de célula para se obter uma segunda população de TILs, em que a segunda população de TILs é pelo menos 5 vezes maior em número do que a primeira população de TILs, em que o primeiro meio de cultura de célula compreende IL-2 e um agonista da superfarmlia do receptor de necrose de tumor (TNFRSF), e em que a expansão inicial é realizada em um período de 21 dias ou menos;
(d) realizar uma expansão rápida da segunda população de TILs em um segundo meio de cultura de célula para se obter uma terceira população de TILs, em que a terceira população de TILs é pelo menos 50 vezes maior em número do que a segunda população de TILs depois de 7 dias do início da expansão rápida; em que o segundo meio de cultura de célula compreende IL-2, OKT-3 (anticorpo anti-CD3), células mononucleares de sangue periférico (PBMCs), e opcionalmente o agonista de TNFRSF, e em que a expansão rápida é realizada em um período de 14 dias ou menos;
(e) colher a terceira população de TILs; e (f) administrar uma porção terapeuticamente eficaz da terceira população de TILs a um paciente com o câncer.
[0015] Em uma modalidade, a invenção provê um método de tratar um câncer com uma população de linfócitos infiltrantes de tumor (TILs) compreendendo as etapas de:
(a) excisar um tumor de um paciente;
(b) obter uma primeira população de TILs do tumor;
(c) realizar uma expansão inicial da primeira população de TILs em um primeiro meio de cultura de célula para se obter uma segunda população de TILs, em que a segunda população de TILs é pelo menos 5 vezes maior em número do que a primeira população de TILs, em que o primeiro meio de cultura de célula compreende IL-2 e um agonista da
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(d) realizar uma expansão rápida da segunda população de TILs em um segundo meio de cultura de célula para se obter uma terceira população de TILs, em que a terceira população de TILs é pelo menos 50 vezes maior em número do que a segunda população de TILs depois de 7 dias do início da expansão rápida; em que o segundo meio de cultura de célula compreende IL-2, OKT-3 (anticorpo anti-CD3), células mononucleares de sangue periférico (PBMCs), e opcionalmente o agonista de TNFRSF, e em que a expansão rápida é realizada em um período de 14 dias ou menos;
(e) colher a terceira população de TILs; e (f) administrar uma porção terapeuticamente eficaz da terceira população de TILs a um paciente com o câncer, em que o agonista de TNFRSF é selecionado a partir do grupo que consiste em um agonista de 41BB, um agonista de 0X40, um agonista de CD27, um agonista de GITR, um agonista de HVEM, um agonista de CD95, e combinações dos mesmos. [0016] Em uma modalidade, a invenção provê um método de tratar um câncer com uma população de linfócitos infiltrantes de tumor (TILs) compreendendo as etapas de:
(a) excisar um tumor de um paciente;
(b) obter uma primeira população de TILs do tumor;
(c) realizar uma expansão inicial da primeira população de TILs em um primeiro meio de cultura de célula para se obter uma segunda população de TILs, em que a segunda população de TILs é pelo menos 5 vezes maior em número do que a primeira população de TILs, em que o primeiro meio de cultura de célula compreende IL-2 e um agonista da superfamília do receptor de necrose de tumor (TNFRSF), e em que a expansão inicial é realizada em um período de 21 dias ou menos;
(d) realizar uma expansão rápida da segunda população de
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TILs em um segundo meio de cultura de célula para se obter uma terceira população de TILs, em que a terceira população de TILs é pelo menos 50 vezes maior em número do que a segunda população de TILs depois de 7 dias do início da expansão rápida; em que o segundo meio de cultura de célula compreende IL-2, OKT-3 (anticorpo anti-CD3), células mononucleares de sangue periférico (PBMCs), e opcionalmente o agonista de TNFRSF, e em que a expansão rápida é realizada em um período de 14 dias ou menos;
(e) colher a terceira população de TILs; e (f) administrar uma porção terapeuticamente eficaz da terceira população de TILs a um paciente com o câncer, em que o agonista de TNFRSF é um agonista de 4-1 BB, e o agonista de 4-1 BB é selecionado a partir do grupo que consiste em urelumab, utomilumab, EU-101 e fragmentos, derivados, variantes, biossimilares, e combinações dos mesmos.
[0017] Em uma modalidade, a invenção provê um método de tratar um câncer com uma população de linfócitos infiltrantes de tumor (TILs) compreendendo as etapas de:
(a) excisar um tumor de um paciente;
(b) obter uma primeira população de TILs do tumor;
(c) realizar uma expansão inicial da primeira população de TILs em um primeiro meio de cultura de célula para se obter uma segunda população de TILs, em que a segunda população de TILs é pelo menos 5 vezes maior em número do que a primeira população de TILs, em que o primeiro meio de cultura de célula compreende IL-2 e um agonista da superfamília do receptor de necrose de tumor (TNFRSF), e em que a expansão inicial é realizada em um período de 21 dias ou menos;
(d) realizar uma expansão rápida da segunda população de TILs em um segundo meio de cultura de célula para se obter uma terceira população de TILs, em que a terceira população de TILs é pelo menos 50 vezes maior em número do que a segunda população de TILs depois de 7 dias
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12/497 do início da expansão rápida; em que o segundo meio de cultura de célula compreende IL-2, OKT-3 (anticorpo anti-CD3), células mononucleares de sangue periférico (PBMCs), e opcionalmente o agonista de TNFRSF, e em que a expansão rápida é realizada em um período de 14 dias ou menos;
colher a terceira população de TILs; e (f) administrar uma porção terapeuticamente eficaz da terceira população de TILs a um paciente com o câncer, em que o agonista de TNFRSF é um agonista de 4-1 BB, e o agonista de 4-1 BB é um agonista da proteína de fusão 4-1 BB.
[0018] Em uma modalidade, a invenção provê um método de tratar um câncer com uma população de linfócitos infiltrantes de tumor (TILs) compreendendo as etapas de:
(a) excisar um tumor de um paciente;
(b) obter uma primeira população de TILs do tumor;
(c) realizar uma expansão inicial da primeira população de TILs em um primeiro meio de cultura de célula para se obter uma segunda população de TILs, em que a segunda população de TILs é pelo menos 5 vezes maior em número do que a primeira população de TILs, em que o primeiro meio de cultura de célula compreende IL-2 e um agonista da superfamília do receptor de necrose de tumor (TNFRSF), e em que a expansão inicial é realizada em um período de 21 dias ou menos;
(d) realizar uma expansão rápida da segunda população de TILs em um segundo meio de cultura de célula para se obter uma terceira população de TILs, em que a terceira população de TILs é pelo menos 50 vezes maior em número do que a segunda população de TILs depois de 7 dias do início da expansão rápida; em que o segundo meio de cultura de célula compreende IL-2, OKT-3 (anticorpo anti-CD3), células mononucleares de sangue periférico (PBMCs), e opcionalmente o agonista de TNFRSF, e em que a expansão rápida é realizada em um período de 14 dias ou menos;
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13/497 (e) colher a terceira população de TILs; e (f) administrar uma porção terapeuticamente eficaz da terceira população de TILs a um paciente com o câncer, em que o agonista de TNFRSF é um agonista da proteína de fusão 4-1 BB, e o agonista da proteína de fusão 4-1 BB compreende (i) um primeiro domínio de ligação de 4-1 BB solúvel, (ii) um primeiro ligante peptídico, (iii) um segundo domínio de ligação de 4-1 BB solúvel, (iv) um segundo ligante peptídico, e (v) um terceiro domínio de ligação de 4-1 BB solúvel, compreendendo adicionalmente um domínio adicional na extremidade do terminal N e/ou terminal C, e em que o domínio adicional compreende um domínio de fragmento Fc e domínio de dobradiça, e em que a proteína de fusão é uma estrutura dimérica de acordo com a estrutura I-A ou estrutura I-B.
[0019] Em uma modalidade, a invenção provê um método de tratar um câncer com uma população de linfócitos infiltrantes de tumor (TILs) compreendendo as etapas de:
(a) excisar um tumor de um paciente;
(b) obter uma primeira população de TILs do tumor;
(c) realizar uma expansão inicial da primeira população de TILs em um primeiro meio de cultura de célula para se obter uma segunda população de TILs, em que a segunda população de TILs é pelo menos 5 vezes maior em número do que a primeira população de TILs, em que o primeiro meio de cultura de célula compreende IL-2 e um agonista da superfamília do receptor de necrose de tumor (TNFRSF), e em que a expansão inicial é realizada em um período de 21 dias ou menos;
(d) realizar uma expansão rápida da segunda população de TILs em um segundo meio de cultura de célula para se obter uma terceira população de TILs, em que a terceira população de TILs é pelo menos 50 vezes maior em número do que a segunda população de TILs depois de 7 dias do início da expansão rápida; em que o segundo meio de cultura de célula
Petição 870190062710, de 04/07/2019, pág. 26/590 / 497 compreende IL-2, OKT-3 (anticorpo anti-CD3), células mononucleares de sangue periférico (PBMCs), e opcionalmente o agonista de TNFRSF, e em que a expansão rápida é realizada em um período de 14 dias ou menos;
(e) colher a terceira população de TILs; e (f) administrar uma porção terapeuticamente eficaz da terceira população de TILs a um paciente com o câncer, em que o agonista de TNFRSF é um agonista de 0X40, e o agonista de 0X40 é selecionado a partir do grupo que consiste em tavolixizumab, GSK3174998, MEDI6469, MEDI6383, MOXR0916, PF-04518600, MOM-18455 da Creative Biolabs, e fragmentos, derivados, variantes, biossimilares, e combinações dos mesmos. [0020] Em uma modalidade, a invenção provê um método de tratar um câncer com uma população de linfócitos infiltrantes de tumor (TILs) compreendendo as etapas de:
(a) excisar um tumor de um paciente;
(b) obter uma primeira população de TILs do tumor;
(c) realizar uma expansão inicial da primeira população de TILs em um primeiro meio de cultura de célula para se obter uma segunda população de TILs, em que a segunda população de TILs é pelo menos 5 vezes maior em número do que a primeira população de TILs, em que o primeiro meio de cultura de célula compreende IL-2 e um agonista da superfamília do receptor de necrose de tumor (TNFRSF), e em que a expansão inicial é realizada em um período de 21 dias ou menos;
(d) realizar uma expansão rápida da segunda população de TILs em um segundo meio de cultura de célula para se obter uma terceira população de TILs, em que a terceira população de TILs é pelo menos 50 vezes maior em número do que a segunda população de TILs depois de 7 dias do início da expansão rápida; em que o segundo meio de cultura de célula compreende IL-2, OKT-3 (anticorpo anti-CD3), células mononucleares de sangue periférico (PBMCs), e opcionalmente o agonista de TNFRSF, e em
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15/497 que a expansão rápida é realizada em um período de 14 dias ou menos;
(e) colher a terceira população de TILs; e (f) administrar uma porção terapeuticamente eficaz da terceira população de TILs a um paciente com o câncer, em que o agonista de TNIFRSF é um agonista de 0X40, e o agonista de 0X40 é um agonista da proteína de fusão de 0X40.
[0021] Em uma modalidade, a invenção provê um método de tratar um câncer com uma população de linfócitos infiltrantes de tumor (TILs) compreendendo as etapas de:
(a) excisar um tumor de um paciente;
(b) obter uma primeira população de TILs do tumor;
(c) realizar uma expansão inicial da primeira população de TILs em um primeiro meio de cultura de célula para se obter uma segunda população de TILs, em que a segunda população de TILs é pelo menos 5 vezes maior em número do que a primeira população de TILs, em que o primeiro meio de cultura de célula compreende IL-2 e um agonista da superfamília do receptor de necrose de tumor (TNFRSF), e em que a expansão inicial é realizada em um período de 21 dias ou menos;
(d) realizar uma expansão rápida da segunda população de TILs em um segundo meio de cultura de célula para se obter uma terceira população de TILs, em que a terceira população de TILs é pelo menos 50 vezes maior em número do que a segunda população de TILs depois de 7 dias do início da expansão rápida; em que o segundo meio de cultura de célula compreende IL-2, OKT-3 (anticorpo anti-CD3), células mononucleares de sangue periférico (PBMCs), e opcionalmente o agonista de TNFRSF, e em que a expansão rápida é realizada em um período de 14 dias ou menos;
(e) colher a terceira população de TILs; e 11 (f) administrar uma porção terapeuticamente eficaz da terceira população de TILs a um paciente com o câncer, em que o agonista de
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TNFRSF é um agonista da proteína de fusão de 0X40, e o agonista da proteína de fusão de 0X40 compreende (i) um primeiro domínio de ligação de 0X40 solúvel, (ii) um primeiro ligante peptídico, (iii) um segundo domínio de ligação de 0X40 solúvel, (iv) um segundo ligante peptídico, e (v) um terceiro domínio de ligação de 0X40 solúvel, compreendendo adicionalmente um domínio adicional na extremidade do terminal N e/ou terminal C, e em que o domínio adicional compreende um domínio de fragmento Fc e domínio de dobradiça, e em que a proteína de fusão é uma estrutura dimérica de acordo com a estrutura I-A ou estrutura I-B.
[0022] Em uma modalidade, a invenção provê um método de tratar um câncer com uma população de linfócitos infiltrantes de tumor (TILs) compreendendo as etapas de:
(a) excisar um tumor de um paciente;
(b) obter uma primeira população de TILs do tumor;
(c) realizar uma expansão inicial da primeira população de TILs em um primeiro meio de cultura de célula para se obter uma segunda população de TILs, em que a segunda população de TILs é pelo menos 5 vezes maior em número do que a primeira população de TILs, em que o primeiro meio de cultura de célula compreende IL-2 e um agonista da superfamília do receptor de necrose de tumor (TNFRSF), e em que a expansão inicial é realizada em um período de 21 dias ou menos;
(d) realizar uma expansão rápida da segunda população de TILs em um segundo meio de cultura de célula para se obter uma terceira população de TILs, em que a terceira população de TILs é pelo menos 50 vezes maior em número do que a segunda população de TILs depois de 7 dias do início da expansão rápida; em que o segundo meio de cultura de célula compreende IL-2, OKT-3 (anticorpo anti-CD3), células mononucleares de sangue periférico (PBMCs), e opcionalmente o agonista de TNFRSF, e em que a expansão rápida é realizada em um período de 14 dias ou menos;
Petição 870190062710, de 04/07/2019, pág. 29/590 / 497 (e) colher a terceira população de TILs; e (f) administrar uma porção terapeuticamente eficaz da terceira população de TILs a um paciente com o câncer, em que o agonista de TNFRSF é um agonista de CD27, e o agonista de CD27 é varlilumab, ou um fragmento, derivado, variante, ou biossimilar dos mesmos [0023] Em uma modalidade, a invenção provê um método de tratar um câncer com uma população de linfócitos infiltrantes de tumor (TILs) compreendendo as etapas de:
(a) excisar um tumor de um paciente;
(b) obter uma primeira população de TILs do tumor;
(c) realizar uma expansão inicial da primeira população de TILs em um primeiro meio de cultura de célula para se obter uma segunda população de TILs, em que a segunda população de TILs é pelo menos 5 vezes maior em número do que a primeira população de TILs, em que o primeiro meio de cultura de célula compreende IL-2 e um agonista da superfamrlia do receptor de necrose de tumor (TNFRSF), e em que a expansão inicial é realizada em um período de 21 dias ou menos;
(d) realizar uma expansão rápida da segunda população de TILs em um segundo meio de cultura de célula para se obter uma terceira população de TILs, em que a terceira população de TILs é pelo menos 50 vezes maior em número do que a segunda população de TILs depois de 7 dias do início da expansão rápida; em que o segundo meio de cultura de célula compreende IL-2, OKT-3 (anticorpo anti-CD3), células mononucleares de sangue periférico (PBMCs), e opcionalmente o agonista de TNFRSF, e em que a expansão rápida é realizada em um período de 14 dias ou menos;
(e) colher a terceira população de TILs; e (f) administrar uma porção terapeuticamente eficaz da terceira população de TILs a um paciente com o câncer, em que o agonista de TNFRSF é um agonista de CD27, e em que o agonista de CD27 é um agonista
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18/497 da proteína de fusão de CD27.
[0024] Em uma modalidade, a invenção provê um método de tratar um câncer com uma população de linfócitos infiltrantes de tumor (TILs) compreendendo as etapas de:
(a) excisar um tumor de um paciente;
(b) obter uma primeira população de TILs do tumor;
(c) realizar uma expansão inicial da primeira população de TILs em um primeiro meio de cultura de célula para se obter uma segunda população de TILs, em que a segunda população de TILs é pelo menos 5 vezes maior em número do que a primeira população de TILs, em que o primeiro meio de cultura de célula compreende IL-2 e um agonista da superfamília do receptor de necrose de tumor (TNFRSF), e em que a expansão inicial é realizada em um período de 21 dias ou menos;
(d) realizar uma expansão rápida da segunda população de TILs em um segundo meio de cultura de célula para se obter uma terceira população de TILs, em que a terceira população de TILs é pelo menos 50 vezes maior em número do que a segunda população de TILs depois de 7 dias do início da expansão rápida; em que o segundo meio de cultura de célula compreende IL-2, OKT-3 (anticorpo anti-CD3), células mononucleares de sangue periférico (PBMCs), e opcionalmente o agonista de TNFRSF, e em que a expansão rápida é realizada em um período de 14 dias ou menos;
(e) colher a terceira população de TILs; e (f) administrar uma porção terapeuticamente eficaz da terceira população de TILs a um paciente com o câncer, em que o agonista de TNFRSF é um agonista de CD27, e o agonista da proteína de fusão de CD27 compreende (i) um primeiro domínio de ligação de CD27 solúvel, (ii) um primeiro ligante peptídico, (iii) um segundo domínio de ligação de CD27 solúvel, (iv) um segundo ligante peptídico, e (v) um terceiro domínio de ligação de CD27 solúvel, compreendendo adicionalmente um domínio
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19/497 adicional na extremidade do terminal N e/ou terminal C, e em que o domínio adicional compreende um domínio de fragmento Fc e domínio de dobradiça, e em que a proteína de fusão é uma estrutura dimérica de acordo com a estrutura I-A ou estrutura I-B.
[0025] Em uma modalidade, a invenção provê um método de tratar um câncer com uma população de linfócitos infiltrantes de tumor (TILs) compreendendo as etapas de:
(a) excisar um tumor de um paciente;
(b) obter uma primeira população de TILs do tumor;
(c) realizar uma expansão inicial da primeira população de TILs em um primeiro meio de cultura de célula para se obter uma segunda população de TILs, em que a segunda população de TILs é pelo menos 5 vezes maior em número do que a primeira população de TILs, em que o primeiro meio de cultura de célula compreende IL-2 e um agonista da superfamília do receptor de necrose de tumor (TNFRSF), e em que a expansão inicial é realizada em um período de 21 dias ou menos;
(d) realizar uma expansão rápida da segunda população de TILs em um segundo meio de cultura de célula para se obter uma terceira população de TILs, em que a terceira população de TILs é pelo menos 50 vezes maior em número do que a segunda população de TILs depois de 7 dias do início da expansão rápida; em que o segundo meio de cultura de célula compreende IL-2, OKT-3 (anticorpo anti-CD3), células mononucleares de sangue periférico (PBMCs), e opcionalmente o agonista de TNFRSF, e em que a expansão rápida é realizada em um período de 14 dias ou menos;
(e) colher a terceira população de TILs; e (f) administrar uma porção terapeuticamente eficaz da terceira população de TILs a um paciente com o câncer, em que o agonista de TNFRSF é um agonista de GITR, e o agonista de GITR é selecionado a partir do grupo que consiste em TRX518, 6C8, 36E5, 3D6, 61G6, 6H6, 61F6, 1D8,
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17F10, 35D8, 49A1, 9E5, 31H6, 2155, 698, 706, 827, 1649, 1718, 1D7, 33C9, 33F6, 34G4, 35B10, 41E11, 41G5, 42A11, 44C1, 45A8, 46E11, 48H12, 48H7, 49D9, 49E2, 48A9, 5H7, 7A10, 9H6, e fragmentos, derivados, variantes, biossimilares, e combinações dos mesmos.
[0026] Em uma modalidade, a invenção provê um método de tratar um câncer com uma população de linfócitos infiltrantes de tumor (TILs) compreendendo as etapas de:
(a) excisar um tumor de um paciente;
(b) obter uma primeira população de TILs do tumor;
(c) realizar uma expansão inicial da primeira população de TILs em um primeiro meio de cultura de célula para se obter uma segunda população de TILs, em que a segunda população de TILs é pelo menos 5 vezes maior em número do que a primeira população de TILs, em que o primeiro meio de cultura de célula compreende IL-2 e um agonista da superfamrlia do receptor de necrose de tumor (TNFRSF), e em que a expansão inicial é realizada em um período de 21 dias ou menos;
(d) realizar uma expansão rápida da segunda população de TILs em um segundo meio de cultura de célula para se obter uma terceira população de TILs, em que a terceira população de TILs é pelo menos 50 vezes maior em número do que a segunda população de TILs depois de 7 dias do início da expansão rápida; em que o segundo meio de cultura de célula compreende IL-2, OKT-3 (anticorpo anti-CD3), células mononucleares de sangue periférico (PBMCs), e opcionalmente o agonista de TNFRSF, e em que a expansão rápida é realizada em um período de 14 dias ou menos;
(e) colher a terceira população de TILs; e (f) administrar uma porção terapeuticamente eficaz da terceira população de TILs a um paciente com o câncer, em que o agonista de TNFRSF é um agonista de GITR, e o agonista de GITR é uma proteína de fusão de agonista de GITR.
Petição 870190062710, de 04/07/2019, pág. 33/590
21/497 [0027] Em uma modalidade, a invenção provê um método de tratar um câncer com uma população de linfócitos infiltrantes de tumor (TILs) compreendendo as etapas de:
(a) excisar um tumor de um paciente;
(b) obter uma primeira população de TILs do tumor;
(c) realizar uma expansão inicial da primeira população de TILs em um primeiro meio de cultura de célula para se obter uma segunda população de TILs, em que a segunda população de TILs é pelo menos 5 vezes maior em número do que a primeira população de TILs, em que o primeiro meio de cultura de célula compreende IL-2 e um agonista da superfarmlia do receptor de necrose de tumor (TNFRSF), e em que a expansão inicial é realizada em um período de 21 dias ou menos;
(d) realizar uma expansão rápida da segunda população de TILs em um segundo meio de cultura de célula para se obter uma terceira população de TILs, em que a terceira população de TILs é pelo menos 50 vezes maior em número do que a segunda população de TILs depois de 7 dias do início da expansão rápida; em que o segundo meio de cultura de célula compreende IL-2, OKT-3 (anticorpo anti-CD3), células mononucleares de sangue periférico (PBMCs), e opcionalmente o agonista de TNFRSF, e em que a expansão rápida é realizada em um período de 14 dias ou menos;
(e) colher a terceira população de TILs; e (f) administrar uma porção terapeuticamente eficaz da terceira população de TILs a um paciente com o câncer, em que o agonista de TNFRSF é uma proteína de fusão de agonista de GITR, e a uma proteína de fusão agonista de GITR compreende (i) um primeiro domínio de ligação de GITR solúvel, (ii) um primeiro ligante peptídico, (iii) um segundo domínio de ligação de GITR solúvel, (iv) um segundo ligante peptídico, e (v) um terceiro domínio de ligação de GITR solúvel, compreendendo adicionalmente um domínio adicional na extremidade do terminal N e/ou terminal C, e em que o
Petição 870190062710, de 04/07/2019, pág. 34/590 / 497 domínio adicional compreende um domínio de fragmento Fc e domínio de dobradiça, e em que a proteína de fusão é uma estrutura dimérica de acordo com a estrutura I-A ou estrutura I-B.
[0028] Em uma modalidade, a invenção provê um método de tratar um câncer com uma população de linfócitos infiltrantes de tumor (TILs) compreendendo as etapas de:
(a) excisar um tumor de um paciente;
(b) obter uma primeira população de TILs do tumor;
(c) realizar uma expansão inicial da primeira população de TILs em um primeiro meio de cultura de célula para se obter uma segunda população de TILs, em que a segunda população de TILs é pelo menos 5 vezes maior em número do que a primeira população de TILs, em que o primeiro meio de cultura de célula compreende IL-2 e um agonista da superfamília do receptor de necrose de tumor (TNFRSF), e em que a expansão inicial é realizada em um período de 21 dias ou menos;
(d) realizar uma expansão rápida da segunda população de TILs em um segundo meio de cultura de célula para se obter uma terceira população de TILs, em que a terceira população de TILs é pelo menos 50 vezes maior em número do que a segunda população de TILs depois de 7 dias do início da expansão rápida; em que o segundo meio de cultura de célula compreende IL-2, OKT-3 (anticorpo anti-CD3), células mononucleares de sangue periférico (PBMCs), e opcionalmente o agonista de TNFRSF, e em que a expansão rápida é realizada em um período de 14 dias ou menos;
(e) colher a terceira população de TILs; e (f) administrar uma porção terapeuticamente eficaz da terceira população de TILs a um paciente com o câncer, em que o agonista de TNFRSF é um agonista de HVEM.
[0029] Em uma modalidade, a invenção provê um método de tratar um câncer com uma população de linfócitos infiltrantes de tumor (TILs)
Petição 870190062710, de 04/07/2019, pág. 35/590 / 497 compreendendo as etapas de:
(a) excisar um tumor de um paciente;
(b) obter uma primeira população de TILs do tumor;
(c) realizar uma expansão inicial da primeira população de TILs em um primeiro meio de cultura de célula para se obter uma segunda população de TILs, em que a segunda população de TILs é pelo menos 5 vezes maior em número do que a primeira população de TILs, em que o primeiro meio de cultura de célula compreende IL-2 e um agonista da superfarmlia do receptor de necrose de tumor (TNFRSF), e em que a expansão inicial é realizada em um período de 21 dias ou menos;
(d) realizar uma expansão rápida da segunda população de TILs em um segundo meio de cultura de célula para se obter uma terceira população de TILs, em que a terceira população de TILs é pelo menos 50 vezes maior em número do que a segunda população de TILs depois de 7 dias do início da expansão rápida; em que o segundo meio de cultura de célula compreende IL-2, OKT-3 (anticorpo anti-CD3), células mononucleares de sangue periférico (PBMCs), e opcionalmente o agonista de TNFRSF, e em que a expansão rápida é realizada em um período de 14 dias ou menos;
(e) colher a terceira população de TILs; e (f) administrar uma porção terapeuticamente eficaz da terceira população de TILs a um paciente com o câncer, em que o agonista de TNFRSF é um agonista de HVEM, e o agonista de HVEM é um agonista da proteína de fusão de HVEM.
[0030] Em uma modalidade, a invenção provê um método de tratar um câncer com uma população de linfócitos infiltrantes de tumor (TILs) compreendendo as etapas de:
(a) excisar um tumor de um paciente;
(b) obter uma primeira população de TILs do tumor;
(c) realizar uma expansão inicial da primeira população de
Petição 870190062710, de 04/07/2019, pág. 36/590 / 497
TILs em um primeiro meio de cultura de célula para se obter uma segunda população de TILs, em que a segunda população de TILs é pelo menos 5 vezes maior em número do que a primeira população de TILs, em que o primeiro meio de cultura de célula compreende IL-2 e um agonista da superfamrlia do receptor de necrose de tumor (TNFRSF), e em que a expansão inicial é realizada em um período de 21 dias ou menos;
(d) realizar uma expansão rápida da segunda população de TILs em um segundo meio de cultura de célula para se obter uma terceira população de TILs, em que a terceira população de TILs é pelo menos 50 vezes maior em número do que a segunda população de TILs depois de 7 dias do início da expansão rápida; em que o segundo meio de cultura de célula compreende IL-2, OKT-3 (anticorpo anti-CD3), células mononucleares de sangue periférico (PBMCs), e opcionalmente o agonista de TNFRSF, e em que a expansão rápida é realizada em um período de 14 dias ou menos;
(e) colher a terceira população de TILs; e (f) administrar uma porção terapeuticamente eficaz da terceira população de TILs a um paciente com o câncer, em que o agonista de TNFRSF é um agonista da proteína de fusão de HVEM, e em que o agonista da proteína de fusão de HVEM compreende (i) um primeiro domínio de ligação de HVEM solúvel, (ii) um primeiro ligante peptídico, (iii) um segundo domínio de ligação de HVEM solúvel, (iv) um segundo ligante peptídico, e (v) um terceiro domínio de ligação de HVEM solúvel, compreendendo adicionalmente um domínio adicional na extremidade do terminal N e/ou terminal C, e em que o domínio adicional compreende um domínio de fragmento Fe e domínio de dobradiça, e em que a proteína de fusão é uma estrutura dimérica de acordo com a estrutura I-A ou estrutura I-B. [0031] Em uma modalidade, a invenção provê um método de tratar um câncer com uma população de linfócitos infiltrantes de tumor (TILs) compreendendo as etapas de:
Petição 870190062710, de 04/07/2019, pág. 37/590 / 497 (a) excisar um tumor de um paciente;
(b) obter uma primeira população de TILs do tumor;
(c) realizar uma expansão inicial da primeira população de TILs em um primeiro meio de cultura de célula para se obter uma segunda população de TILs, em que a segunda população de TILs é pelo menos 5 vezes maior em número do que a primeira população de TILs, em que o primeiro meio de cultura de célula compreende IL-2 e um agonista da superfamrlia do receptor de necrose de tumor (TNFRSF), e em que a expansão inicial é realizada em um período de 21 dias ou menos;
(d) realizar uma expansão rápida da segunda população de TILs em um segundo meio de cultura de célula para se obter uma terceira população de TILs, em que a terceira população de TILs é pelo menos 50 vezes maior em número do que a segunda população de TILs depois de 7 dias do início da expansão rápida; em que o segundo meio de cultura de célula compreende IL-2, OKT-3 (anticorpo anti-CD3), células mononucleares de sangue periférico (PBMCs), e opcionalmente o agonista de TNFRSF, e em que a expansão rápida é realizada em um período de 14 dias ou menos;
(e) colher a terceira população de TILs; e (f) administrar uma porção terapeuticamente eficaz da terceira população de TILs a um paciente com o câncer, compreendendo adicionalmente a etapa de tratar o paciente com o agonista de TNFRSF começando no dia depois da administração da terceira população de TILs ao paciente, em que o agonista de TNFRSF é administrado intravenosamente em uma dose dentre 0,1 mg/kg e 50 mg/kg a cada quatro semanas por até oito ciclos.
[0032] Em uma modalidade, a invenção provê um método de tratar um câncer com uma população de linfócitos infiltrantes de tumor (TILs) compreendendo as etapas de:
(a) excisar um tumor de um paciente;
Petição 870190062710, de 04/07/2019, pág. 38/590 / 497 (b) obter uma primeira população de TILs do tumor;
(c) realizar uma expansão inicial da primeira população de TILs em um primeiro meio de cultura de célula para se obter uma segunda população de TILs, em que a segunda população de TILs é pelo menos 5 vezes maior em número do que a primeira população de TILs, em que o primeiro meio de cultura de célula compreende IL-2 e um agonista da superfamília do receptor de necrose de tumor (TNFRSF), e em que a expansão inicial é realizada em um período de 21 dias ou menos;
(d) realizar uma expansão rápida da segunda população de TILs em um segundo meio de cultura de célula para se obter uma terceira população de TILs, em que a terceira população de TILs é pelo menos 50 vezes maior em número do que a segunda população de TILs depois de 7 dias do início da expansão rápida; em que o segundo meio de cultura de célula compreende IL-2, OKT-3 (anticorpo anti-CD3), células mononucleares de sangue periférico (PBMCs), e opcionalmente o agonista de TNFRSF, e em que a expansão rápida é realizada em um período de 14 dias ou menos;
(e) colher a terceira população de TILs; e (f) administrar uma porção terapeuticamente eficaz da terceira população de TILs a um paciente com o câncer, compreendendo adicionalmente a etapa de tratar o paciente com o agonista de TNFRSF antes da etapa de excisão de um tumor do paciente, em que o agonista de TNFRSF é administrado intravenosamente em uma dose dentre 0,1 mg/kg e 50 mg/kg a cada quatro semanas por até oito ciclos.
[0033] Em uma modalidade, a invenção provê um método de tratar um câncer com uma população de linfócitos infiltrantes de tumor (TILs) compreendendo as etapas de:
(a) excisar um tumor de um paciente;
(b) obter uma primeira população de TILs do tumor;
(c) realizar uma expansão inicial da primeira população de
Petição 870190062710, de 04/07/2019, pág. 39/590 / 497
TILs em um primeiro meio de cultura de célula para se obter uma segunda população de TILs, em que a segunda população de TILs é pelo menos 5 vezes maior em número do que a primeira população de TILs, em que o primeiro meio de cultura de célula compreende IL-2 e um agonista da superfamrlia do receptor de necrose de tumor (TNFRSF), e em que a expansão inicial é realizada em um período de 21 dias ou menos;
(d) realizar uma expansão rápida da segunda população de TILs em um segundo meio de cultura de célula para se obter uma terceira população de TILs, em que a terceira população de TILs é pelo menos 50 vezes maior em número do que a segunda população de TILs depois de 7 dias do início da expansão rápida; em que o segundo meio de cultura de célula compreende IL-2, OKT-3 (anticorpo anti-CD3), células mononucleares de sangue periférico (PBMCs), e opcionalmente o agonista de TNFRSF, e em que a expansão rápida é realizada em um período de 14 dias ou menos;
(e) colher a terceira população de TILs; e (f) administrar uma porção terapeuticamente eficaz da terceira população de TILs a um paciente com o câncer, em que o agonista de TNFRSF é selecionado a partir do grupo que consiste em urelumab, utomilumab, EU-101, tavolixizumab, MOM-18455 da Creative Biolabs, e fragmentos, derivados, variantes, biossimilares, e combinações dos mesmos. [0034] Em uma modalidade, a invenção provê um método de tratar um câncer com uma população de linfócitos infiltrantes de tumor (TILs) compreendendo as etapas de:
(a) excisar um tumor de um paciente;
(b) obter uma primeira população de TILs do tumor;
(c) realizar uma expansão inicial da primeira população de TILs em um primeiro meio de cultura de célula para se obter uma segunda população de TILs, em que a segunda população de TILs é pelo menos 5 vezes maior em número do que a primeira população de TILs, em que o
Petição 870190062710, de 04/07/2019, pág. 40/590 / 497 primeiro meio de cultura de célula compreende IL-2 e um agonista da superfamília do receptor de necrose de tumor (TNFRSF), e em que a expansão inicial é realizada em um período de 21 dias ou menos;
(d) realizar uma expansão rápida da segunda população de TILs em um segundo meio de cultura de célula para se obter uma terceira população de TILs, em que a terceira população de TILs é pelo menos 50 vezes maior em número do que a segunda população de TILs depois de 7 dias do início da expansão rápida; em que o segundo meio de cultura de célula compreende IL-2, OKT-3 (anticorpo anti-CD3), células mononucleares de sangue periférico (PBMCs), e opcionalmente o agonista de TNFRSF, e em que a expansão rápida é realizada em um período de 14 dias ou menos;
(e) colher a terceira população de TILs; e (f) administrar uma porção terapeuticamente eficaz da terceira população de TILs a um paciente com o câncer, em que o primeiro meio de cultura de célula compreende um segundo agonista de TNFRSF.
[0035] Em uma modalidade, a invenção provê um método de tratar um câncer com uma população de linfócitos infiltrantes de tumor (TILs) compreendendo as etapas de:
(a) excisar um tumor de um paciente;
(b) obter uma primeira população de TILs do tumor;
(c) realizar uma expansão inicial da primeira população de TILs em um primeiro meio de cultura de célula para se obter uma segunda população de TILs, em que a segunda população de TILs é pelo menos 5 vezes maior em número do que a primeira população de TILs, em que o primeiro meio de cultura de célula compreende IL-2 e um agonista da superfamília do receptor de necrose de tumor (TNFRSF), e em que a expansão inicial é realizada em um período de 21 dias ou menos;
(d) realizar uma expansão rápida da segunda população de TILs em um segundo meio de cultura de célula para se obter uma terceira
Petição 870190062710, de 04/07/2019, pág. 41/590 / 497 população de TILs, em que a terceira população de TILs é pelo menos 50 vezes maior em número do que a segunda população de TILs depois de 7 dias do início da expansão rápida; em que o segundo meio de cultura de célula compreende IL-2, OKT-3 (anticorpo anti-CD3), células mononucleares de sangue periférico (PBMCs), e opcionalmente o agonista de TNFRSF, e em que a expansão rápida é realizada em um período de 14 dias ou menos;
(e) colher a terceira população de TILs; e (f) administrar uma porção terapeuticamente eficaz da terceira população de TILs a um paciente com o câncer, em que o agonista de TNFRSF é adicionado ao primeiro meio de cultura de célula durante a expansão inicial em um intervalo selecionado a partir do grupo que consiste em todo dia, a cada dois dias, a cada três dias, a cada quatro dias, a cada cinco dias, a cada seis dias, a cada sete dias, e a cada duas semanas.
[0036] Em uma modalidade, a invenção provê um método de tratar um câncer com uma população de linfócitos infiltrantes de tumor (TILs) compreendendo as etapas de:
(a) excisar um tumor de um paciente;
(b) obter uma primeira população de TILs do tumor;
(c) realizar uma expansão inicial da primeira população de TILs em um primeiro meio de cultura de célula para se obter uma segunda população de TILs, em que a segunda população de TILs é pelo menos 5 vezes maior em número do que a primeira população de TILs, em que o primeiro meio de cultura de célula compreende IL-2 e um agonista da superfamília do receptor de necrose de tumor (TNFRSF), e em que a expansão inicial é realizada em um período de 21 dias ou menos;
(d) realizar uma expansão rápida da segunda população de TILs em um segundo meio de cultura de célula para se obter uma terceira população de TILs, em que a terceira população de TILs é pelo menos 50 vezes maior em número do que a segunda população de TILs depois de 7 dias
Petição 870190062710, de 04/07/2019, pág. 42/590
30/497 do início da expansão rápida; em que o segundo meio de cultura de célula compreende IL-2, OKT-3 (anticorpo anti-CD3), células mononucleares de sangue periférico (PBMCs), e opcionalmente o agonista de TNFRSF, e em que a expansão rápida é realizada em um período de 14 dias ou menos;
(e) colher a terceira população de TILs; e 22 (f) administrar uma porção terapeuticamente eficaz da terceira população de TILs a um paciente com o câncer, em que o agonista de TNFRSF é adicionado ao segundo meio de cultura de célula durante a expansão rápida em um intervalo selecionado a partir do grupo que consiste em todo dia, a cada dois dias, a cada três dias, a cada quatro dias, a cada cinco dias, a cada seis dias, a cada sete dias, e a cada duas semanas.
[0037] Em uma modalidade, a invenção provê um método de tratar um câncer com uma população de linfócitos infiltrantes de tumor (TILs) compreendendo as etapas de:
(a) excisar um tumor de um paciente;
(b) obter uma primeira população de TILs do tumor;
(c) realizar uma expansão inicial da primeira população de TILs em um primeiro meio de cultura de célula para se obter uma segunda população de TILs, em que a segunda população de TILs é pelo menos 5 vezes maior em número do que a primeira população de TILs, em que o primeiro meio de cultura de célula compreende IL-2 e um agonista da superfamília do receptor de necrose de tumor (TNFRSF), e em que a expansão inicial é realizada em um período de 21 dias ou menos;
(d) realizar uma expansão rápida da segunda população de TILs em um segundo meio de cultura de célula para se obter uma terceira população de TILs, em que a terceira população de TILs é pelo menos 50 vezes maior em número do que a segunda população de TILs depois de 7 dias do início da expansão rápida; em que o segundo meio de cultura de célula compreende IL-2, OKT-3 (anticorpo anti-CD3), células mononucleares de
Petição 870190062710, de 04/07/2019, pág. 43/590
31/497 sangue periférico (PBMCs), e opcionalmente o agonista de TNFRSF, e em que a expansão rápida é realizada em um período de 14 dias ou menos;
(e) colher a terceira população de TILs; e (f) administrar uma porção terapeuticamente eficaz da terceira população de TILs a um paciente com o câncer, em que o agonista de TNFRSF é adicionado em uma concentração suficiente para se obter uma concentração no meio de cultura de célula dentre 0,1 pg/mL e 100 pg/mL. [0038] Em uma modalidade, a invenção provê um método de tratar um câncer com uma população de linfócitos infiltrantes de tumor (TILs) compreendendo as etapas de:
(a) excisar um tumor de um paciente;
(b) obter uma primeira população de TILs do tumor;
(c) realizar uma expansão inicial da primeira população de TILs em um primeiro meio de cultura de célula para se obter uma segunda população de TILs, em que a segunda população de TILs é pelo menos 5 vezes maior em número do que a primeira população de TILs, em que o primeiro meio de cultura de célula compreende IL-2 e um agonista da superfamília do receptor de necrose de tumor (TNFRSF), e em que a expansão inicial é realizada em um período de 21 dias ou menos;
(d) realizar uma expansão rápida da segunda população de TILs em um segundo meio de cultura de célula para se obter uma terceira população de TILs, em que a terceira população de TILs é pelo menos 50 vezes maior em número do que a segunda população de TILs depois de 7 dias do início da expansão rápida; em que o segundo meio de cultura de célula compreende IL-2, OKT-3 (anticorpo anti-CD3), células mononucleares de sangue periférico (PBMCs), e opcionalmente o agonista de TNFRSF, e em que a expansão rápida é realizada em um período de 14 dias ou menos;
(e) colher a terceira população de TILs; e (f) administrar uma porção terapeuticamente eficaz da terceira
Petição 870190062710, de 04/07/2019, pág. 44/590 / 497 população de TILs a um paciente com o câncer, em que o agonista de TNFRSF é adicionado em uma concentração suficiente para se obter uma concentração no meio de cultura de célula dentre 20 pg/mL e 40 pg/mL. [0039] Em uma modalidade, a invenção provê um método de tratar um câncer com uma população de linfócitos infiltrantes de tumor (TILs) compreendendo as etapas de:
(a) excisar um tumor de um paciente;
(b) obter uma primeira população de TILs do tumor;
(c) realizar uma expansão inicial da primeira população de TILs em um primeiro meio de cultura de célula para se obter uma segunda população de TILs, em que a segunda população de TILs é pelo menos 5 vezes maior em número do que a primeira população de TILs, em que o primeiro meio de cultura de célula compreende IL-2 e um agonista da superfarmlia do receptor de necrose de tumor (TNFRSF), e em que a expansão inicial é realizada em um período de 21 dias ou menos;
(d) realizar uma expansão rápida da segunda população de TILs em um segundo meio de cultura de célula para se obter uma terceira população de TILs, em que a terceira população de TILs é pelo menos 50 vezes maior em número do que a segunda população de TILs depois de 7 dias do início da expansão rápida; em que o segundo meio de cultura de célula compreende IL-2, OKT-3 (anticorpo anti-CD3), células mononucleares de sangue periférico (PBMCs), e opcionalmente o agonista de TNFRSF, e em que a expansão rápida é realizada em um período de 14 dias ou menos;
(e) colher a terceira população de TILs; e (f) administrar uma porção terapeuticamente eficaz da terceira população de TILs a um paciente com o câncer, em que IL-2 está presente em uma concentração inicial de cerca de 10 a cerca de 6000 lU/mL no primeiro meio de cultura de célula.
[0040] Em uma modalidade, a invenção provê um método de tratar
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33/497 um câncer com uma população de linfócitos infiltrantes de tumor (TILs) compreendendo as etapas de:
(a) excisar um tumor de um paciente;
(b) obter uma primeira população de TILs do tumor;
(c) realizar uma expansão inicial da primeira população de TILs em um primeiro meio de cultura de célula para se obter uma segunda população de TILs, em que a segunda população de TILs é pelo menos 5 vezes maior em número do que a primeira população de TILs, em que o primeiro meio de cultura de célula compreende IL-2 e um agonista da superfamrlia do receptor de necrose de tumor (TNFRSF), e em que a expansão inicial é realizada em um período de 21 dias ou menos;
(d) realizar uma expansão rápida da segunda população de TILs em um segundo meio de cultura de célula para se obter uma terceira população de TILs, em que a terceira população de TILs é pelo menos 50 vezes maior em número do que a segunda população de TILs depois de 7 dias do início da expansão rápida; em que o segundo meio de cultura de célula compreende IL-2, OKT-3 (anticorpo anti-CD3), células mononucleares de sangue periférico (PBMCs), e opcionalmente o agonista de TNFRSF, e em que a expansão rápida é realizada em um período de 14 dias ou menos;
(e) colher a terceira população de TILs; e (f) administrar uma porção terapeuticamente eficaz da terceira população de TILs a um paciente com o câncer, em que IL-2 está presente em uma concentração inicial de cerca de 3000 lU/mL no primeiro meio de cultura de célula.
[0041] Em uma modalidade, a invenção provê um método de tratar um câncer com uma população de linfócitos infiltrantes de tumor (TILs) compreendendo as etapas de:
(a) excisar um tumor de um paciente;
(b) obter uma primeira população de TILs do tumor;
Petição 870190062710, de 04/07/2019, pág. 46/590 / 497 (c) realizar uma expansão inicial da primeira população de TILs em um primeiro meio de cultura de célula para se obter uma segunda população de TILs, em que a segunda população de TILs é pelo menos 5 vezes maior em número do que a primeira população de TILs, em que o primeiro meio de cultura de célula compreende IL-2 e um agonista da superfamrlia do receptor de necrose de tumor (TNFRSF), e em que a expansão inicial é realizada em um período de 21 dias ou menos;
(d) realizar uma expansão rápida da segunda população de TILs em um segundo meio de cultura de célula para se obter uma terceira população de TILs, em que a terceira população de TILs é pelo menos 50 vezes maior em número do que a segunda população de TILs depois de 7 dias do início da expansão rápida; em que o segundo meio de cultura de célula compreende IL-2, OKT-3 (anticorpo anti-CD3), células mononucleares de sangue periférico (PBMCs), e opcionalmente o agonista de TNFRSF, e em que a expansão rápida é realizada em um período de 14 dias ou menos;
(e) colher a terceira população de TILs; e (f) administrar uma porção terapeuticamente eficaz da terceira população de TILs a um paciente com o câncer, O método de acordo com a reivindicação 31, em que IL-2 está presente em uma concentração inicial de cerca de 800 a cerca de 1100 lU/mL no primeiro meio de cultura de célula. [0042] Em uma modalidade, a invenção provê um método de tratar um câncer com uma população de linfócitos infiltrantes de tumor (TILs) compreendendo as etapas de:
(a) excisar um tumor de um paciente;
(b) obter uma primeira população de TILs do tumor;
(c) realizar uma expansão inicial da primeira população de TILs em um primeiro meio de cultura de célula para se obter uma segunda população de TILs, em que a segunda população de TILs é pelo menos 5 vezes maior em número do que a primeira população de TILs, em que o
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35/497 primeiro meio de cultura de célula compreende IL-2 e um agonista da superfarmlia do receptor de necrose de tumor (TNFRSF), e em que a expansão inicial é realizada em um período de 21 dias ou menos;
(d) realizar uma expansão rápida da segunda população de TILs em um segundo meio de cultura de célula para se obter uma terceira população de TILs, em que a terceira população de TILs é pelo menos 50 vezes maior em número do que a segunda população de TILs depois de 7 dias do início da expansão rápida; em que o segundo meio de cultura de célula compreende IL-2, OKT-3 (anticorpo anti-CD3), células mononucleares de sangue periférico (PBMCs), e opcionalmente o agonista de TNFRSF, e em que a expansão rápida é realizada em um período de 14 dias ou menos;
(e) colher a terceira população de TILs; e (f) administrar uma porção terapeuticamente eficaz da terceira população de TILs a um paciente com o câncer, em que IL-2 está presente em uma concentração inicial de cerca de 1000 lU/mL no primeiro meio de cultura de célula.
[0043] Em uma modalidade, a invenção provê um método de tratar um câncer com uma população de linfócitos infiltrantes de tumor (TILs) compreendendo as etapas de:
(a) excisar um tumor de um paciente;
(b) obter uma primeira população de TILs do tumor;
(c) realizar uma expansão inicial da primeira população de TILs em um primeiro meio de cultura de célula para se obter uma segunda população de TILs, em que a segunda população de TILs é pelo menos 5 vezes maior em número do que a primeira população de TILs, em que o primeiro meio de cultura de célula compreende IL-2 e um agonista da superfarmlia do receptor de necrose de tumor (TNFRSF), e em que a expansão inicial é realizada em um período de 21 dias ou menos;
(d) realizar uma expansão rápida da segunda população de
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TILs em um segundo meio de cultura de célula para se obter uma terceira população de TILs, em que a terceira população de TILs é pelo menos 50 vezes maior em número do que a segunda população de TILs depois de 7 dias do início da expansão rápida; em que o segundo meio de cultura de célula compreende IL-2, OKT-3 (anticorpo anti-CD3), células mononucleares de sangue periférico (PBMCs), e opcionalmente o agonista de TNFRSF, e em que a expansão rápida é realizada em um período de 14 dias ou menos;
(e) colher a terceira população de TILs; e (f) administrar uma porção terapeuticamente eficaz da terceira população de TILs a um paciente com o câncer, em que IL-2 está presente em uma concentração inicial de cerca de 10 a cerca de 6000 lU/mL no segundo meio de cultura de célula.
[0044] Em uma modalidade, a invenção provê um método de tratar um câncer com uma população de linfócitos infiltrantes de tumor (TILs) compreendendo as etapas de:
(a) excisar um tumor de um paciente;
(b) obter uma primeira população de TILs do tumor;
(c) realizar uma expansão inicial da primeira população de TILs em um primeiro meio de cultura de célula para se obter uma segunda população de TILs, em que a segunda população de TILs é pelo menos 5 vezes maior em número do que a primeira população de TILs, em que o primeiro meio de cultura de célula compreende IL-2 e um agonista da superfamília do receptor de necrose de tumor (TNFRSF), e em que a expansão inicial é realizada em um período de 21 dias ou menos;
(d) realizar uma expansão rápida da segunda população de TILs em um segundo meio de cultura de célula para se obter uma terceira população de TILs, em que a terceira população de TILs é pelo menos 50 vezes maior em número do que a segunda população de TILs depois de 7 dias do início da expansão rápida; em que o segundo meio de cultura de célula
Petição 870190062710, de 04/07/2019, pág. 49/590 / 497 compreende IL-2, OKT-3 (anticorpo anti-CD3), células mononucleares de sangue periférico (PBMCs), e opcionalmente o agonista de TNFRSF, e em que a expansão rápida é realizada em um período de 14 dias ou menos;
(e) colher a terceira população de TILs; e (f) administrar uma porção terapeuticamente eficaz da terceira população de TILs a um paciente com o câncer, em que IL-2 está presente em uma concentração inicial de cerca de 3000 lU/mL no segundo meio de cultura de célula.
[0045] Em uma modalidade, a invenção provê um método de tratar um câncer com uma população de linfócitos infiltrantes de tumor (TILs) compreendendo as etapas de:
(a) excisar um tumor de um paciente;
(b) obter uma primeira população de TILs do tumor;
(c) realizar uma expansão inicial da primeira população de TILs em um primeiro meio de cultura de célula para se obter uma segunda população de TILs, em que a segunda população de TILs é pelo menos 5 vezes maior em número do que a primeira população de TILs, em que o primeiro meio de cultura de célula compreende IL-2 e um agonista da superfamília do receptor de necrose de tumor (TNFRSF), e em que a expansão inicial é realizada em um período de 21 dias ou menos;
(d) realizar uma expansão rápida da segunda população de TILs em um segundo meio de cultura de célula para se obter uma terceira população de TILs, em que a terceira população de TILs é pelo menos 50 vezes maior em número do que a segunda população de TILs depois de 7 dias do início da expansão rápida; em que o segundo meio de cultura de célula compreende IL-2, OKT-3 (anticorpo anti-CD3), células mononucleares de sangue periférico (PBMCs), e opcionalmente o agonista de TNFRSF, e em que a expansão rápida é realizada em um período de 14 dias ou menos;
(e) colher a terceira população de TILs; e
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38/497 (f) administrar uma porção terapeuticamente eficaz da terceira população de TILs a um paciente com o câncer, em que IL-2 está presente em uma concentração inicial de cerca de 800 a cerca de 1100 lU/mL no segundo meio de cultura de célula.
[0046] Em uma modalidade, a invenção provê um método de tratar um câncer com uma população de linfócitos infiltrantes de tumor (TILs) compreendendo as etapas de:
(a) excisar um tumor de um paciente;
(b) obter uma primeira população de TILs do tumor;
(c) realizar uma expansão inicial da primeira população de TILs em um primeiro meio de cultura de célula para se obter uma segunda população de TILs, em que a segunda população de TILs é pelo menos 5 vezes maior em número do que a primeira população de TILs, em que o primeiro meio de cultura de célula compreende IL-2 e um agonista da superfarmlia do receptor de necrose de tumor (TNFRSF), e em que a expansão inicial é realizada em um período de 21 dias ou menos;
(d) realizar uma expansão rápida da segunda população de TILs em um segundo meio de cultura de célula para se obter uma terceira população de TILs, em que a terceira população de TILs é pelo menos 50 vezes maior em número do que a segunda população de TILs depois de 7 dias do início da expansão rápida; em que o segundo meio de cultura de célula compreende IL-2, OKT-3 (anticorpo anti-CD3), células mononucleares de sangue periférico (PBMCs), e opcionalmente o agonista de TNFRSF, e em que a expansão rápida é realizada em um período de 14 dias ou menos;
(e) colher a terceira população de TILs; e (f) administrar uma porção terapeuticamente eficaz da terceira população de TILs a um paciente com o câncer, em que IL-2 está presente em uma concentração inicial de cerca de 1000 lU/mL no segundo meio de cultura de célula.
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39/497 [0047] Em uma modalidade, a invenção provê um método de tratar um câncer com uma população de linfócitos infiltrantes de tumor (TILs) compreendendo as etapas de:
(a) excisar um tumor de um paciente;
(b) obter uma primeira população de TILs do tumor;
(c) realizar uma expansão inicial da primeira população de TILs em um primeiro meio de cultura de célula para se obter uma segunda população de TILs, em que a segunda população de TILs é pelo menos 5 vezes maior em número do que a primeira população de TILs, em que o primeiro meio de cultura de célula compreende IL-2 e um agonista da superfamrlia do receptor de necrose de tumor (TNFRSF), e em que a expansão inicial é realizada em um período de 21 dias ou menos;
(d) realizar uma expansão rápida da segunda população de TILs em um segundo meio de cultura de célula para se obter uma terceira população de TILs, em que a terceira população de TILs é pelo menos 50 vezes maior em número do que a segunda população de TILs depois de 7 dias do início da expansão rápida; em que o segundo meio de cultura de célula compreende IL-2, OKT-3 (anticorpo anti-CD3), células mononucleares de sangue periférico (PBMCs), e opcionalmente o agonista de TNFRSF, e em que a expansão rápida é realizada em um período de 14 dias ou menos;
(e) colher a terceira população de TILs; e (f) administrar uma porção terapeuticamente eficaz da terceira população de TILs a um paciente com o câncer, em que IL-15 está presente no primeiro meio de cultura de célula.
[0048] Em uma modalidade, a invenção provê um método de tratar um câncer com uma população de linfócitos infiltrantes de tumor (TILs) compreendendo as etapas de:
(a) excisar um tumor de um paciente;
(b) obter uma primeira população de TILs do tumor;
Petição 870190062710, de 04/07/2019, pág. 52/590 / 497 (c) realizar uma expansão inicial da primeira população de TILs em um primeiro meio de cultura de célula para se obter uma segunda população de TILs, em que a segunda população de TILs é pelo menos 5 vezes maior em número do que a primeira população de TILs, em que o primeiro meio de cultura de célula compreende IL-2 e um agonista da superfarmlia do receptor de necrose de tumor (TNFRSF), e em que a expansão inicial é realizada em um período de 21 dias ou menos;
(d) realizar uma expansão rápida da segunda população de TILs em um segundo meio de cultura de célula para se obter uma terceira população de TILs, em que a terceira população de TILs é pelo menos 50 vezes maior em número do que a segunda população de TILs depois de 7 dias do início da expansão rápida; em que o segundo meio de cultura de célula compreende IL-2, OKT-3 (anticorpo anti-CD3), células mononucleares de sangue periférico (PBMCs), e opcionalmente o agonista de TNFRSF, e em que a expansão rápida é realizada em um período de 14 dias ou menos;
(e) colher a terceira população de TILs; e (f) administrar uma porção terapeuticamente eficaz da terceira população de TILs a um paciente com o câncer, em que IL-15 está presente em uma concentração inicial de cerca de 5 ng/mL a cerca de 20 ng/mL no primeiro meio de cultura de célula.
[0049] Em uma modalidade, a invenção provê um método de tratar um câncer com uma população de linfócitos infiltrantes de tumor (TILs) compreendendo as etapas de:
(a) excisar um tumor de um paciente;
(b) obter uma primeira população de TILs do tumor;
(c) realizar uma expansão inicial da primeira população de TILs em um primeiro meio de cultura de célula para se obter uma segunda população de TILs, em que a segunda população de TILs é pelo menos 5 vezes maior em número do que a primeira população de TILs, em que o
Petição 870190062710, de 04/07/2019, pág. 53/590
41/497 primeiro meio de cultura de célula compreende IL-2 e um agonista da superfamília do receptor de necrose de tumor (TNFRSF), e em que a expansão inicial é realizada em um período de 21 dias ou menos;
(d) realizar uma expansão rápida da segunda população de TILs em um segundo meio de cultura de célula para se obter uma terceira população de TILs, em que a terceira população de TILs é pelo menos 50 vezes maior em número do que a segunda população de TILs depois de 7 dias do início da expansão rápida; em que o segundo meio de cultura de célula compreende IL-2, OKT-3 (anticorpo anti-CD3), células mononucleares de sangue periférico (PBMCs), e opcionalmente o agonista de TNFRSF, e em que a expansão rápida é realizada em um período de 14 dias ou menos;
(e) colher a terceira população de TILs; e (f) administrar uma porção terapeuticamente eficaz da terceira população de TILs a um paciente com o câncer, em que IL-15 está presente no segundo meio de cultura de célula.
[0050] Em uma modalidade, a invenção provê um método de tratar um câncer com uma população de linfócitos infiltrantes de tumor (TILs) compreendendo as etapas de:
(a) excisar um tumor de um paciente;
(b) obter uma primeira população de TILs do tumor;
(c) realizar uma expansão inicial da primeira população de TILs em um primeiro meio de cultura de célula para se obter uma segunda população de TILs, em que a segunda população de TILs é pelo menos 5 vezes maior em número do que a primeira população de TILs, em que o primeiro meio de cultura de célula compreende IL-2 e um agonista da superfamília do receptor de necrose de tumor (TNFRSF), e em que a expansão inicial é realizada em um período de 21 dias ou menos;
(d) realizar uma expansão rápida da segunda população de TILs em um segundo meio de cultura de célula para se obter uma terceira
Petição 870190062710, de 04/07/2019, pág. 54/590 / 497 população de TILs, em que a terceira população de TILs é pelo menos 50 vezes maior em número do que a segunda população de TILs depois de 7 dias do início da expansão rápida; em que o segundo meio de cultura de célula compreende IL-2, OKT-3 (anticorpo anti-CD3), células mononucleares de sangue periférico (PBMCs), e opcionalmente o agonista de TNFRSF, e em que a expansão rápida é realizada em um período de 14 dias ou menos;
(e) colher a terceira população de TILs; e (f) administrar uma porção terapeuticamente eficaz da terceira população de TILs a um paciente com o câncer, em que IL-15 está presente em uma concentração inicial de cerca de 5 ng/mL a cerca de 20 ng/mL no segundo meio de cultura de célula.
[0051] Em uma modalidade, a invenção provê um método de tratar um câncer com uma população de linfócitos infiltrantes de tumor (TILs) compreendendo as etapas de:
(a) excisar um tumor de um paciente;
(b) obter uma primeira população de TILs do tumor;
(c) realizar uma expansão inicial da primeira população de TILs em um primeiro meio de cultura de célula para se obter uma segunda população de TILs, em que a segunda população de TILs é pelo menos 5 vezes maior em número do que a primeira população de TILs, em que o primeiro meio de cultura de célula compreende IL-2 e um agonista da superfamília do receptor de necrose de tumor (TNFRSF), e em que a expansão inicial é realizada em um período de 21 dias ou menos;
(d) realizar uma expansão rápida da segunda população de TILs em um segundo meio de cultura de célula para se obter uma terceira população de TILs, em que a terceira população de TILs é pelo menos 50 vezes maior em número do que a segunda população de TILs depois de 7 dias do início da expansão rápida; em que o segundo meio de cultura de célula compreende IL-2, OKT-3 (anticorpo anti-CD3), células mononucleares de
Petição 870190062710, de 04/07/2019, pág. 55/590 / 497 sangue periférico (PBMCs), e opcionalmente o agonista de TNFRSF, e em que a expansão rápida é realizada em um período de 14 dias ou menos;
(e) colher a terceira população de TILs; e 32 (f) administrar uma porção terapeuticamente eficaz da terceira população de TILs a um paciente com o câncer, em que IL-21 está presente no primeiro meio de cultura de célula.
[0052] Em uma modalidade, a invenção provê um método de tratar um câncer com uma população de linfócitos infiltrantes de tumor (TILs) compreendendo as etapas de:
(a) excisar um tumor de um paciente;
(b) obter uma primeira população de TILs do tumor;
(c) realizar uma expansão inicial da primeira população de TILs em um primeiro meio de cultura de célula para se obter uma segunda população de TILs, em que a segunda população de TILs é pelo menos 5 vezes maior em número do que a primeira população de TILs, em que o primeiro meio de cultura de célula compreende IL-2 e um agonista da superfamília do receptor de necrose de tumor (TNFRSF), e em que a expansão inicial é realizada em um período de 21 dias ou menos;
(d) realizar uma expansão rápida da segunda população de TILs em um segundo meio de cultura de célula para se obter uma terceira população de TILs, em que a terceira população de TILs é pelo menos 50 vezes maior em número do que a segunda população de TILs depois de 7 dias do início da expansão rápida; em que o segundo meio de cultura de célula compreende IL-2, OKT-3 (anticorpo anti-CD3), células mononucleares de sangue periférico (PBMCs), e opcionalmente o agonista de TNFRSF, e em que a expansão rápida é realizada em um período de 14 dias ou menos;
(e) colher a terceira população de TILs; e (f) administrar uma porção terapeuticamente eficaz da terceira população de TILs a um paciente com o câncer, em que IL-21 está presente
Petição 870190062710, de 04/07/2019, pág. 56/590 / 497 em uma concentração inicial de cerca de 5 ng/mL a cerca de 20 ng/mL no primeiro meio de cultura de célula.
[0053] Em uma modalidade, a invenção provê um método de tratar um câncer com uma população de linfócitos infiltrantes de tumor (TILs) compreendendo as etapas de:
(a) excisar um tumor de um paciente;
(b) obter uma primeira população de TILs do tumor;
(c) realizar uma expansão inicial da primeira população de TILs em um primeiro meio de cultura de célula para se obter uma segunda população de TILs, em que a segunda população de TILs é pelo menos 5 vezes maior em número do que a primeira população de TILs, em que o primeiro meio de cultura de célula compreende IL-2 e um agonista da superfamrlia do receptor de necrose de tumor (TNFRSF), e em que a expansão inicial é realizada em um período de 21 dias ou menos;
(d) realizar uma expansão rápida da segunda população de TILs em um segundo meio de cultura de célula para se obter uma terceira população de TILs, em que a terceira população de TILs é pelo menos 50 vezes maior em número do que a segunda população de TILs depois de 7 dias do início da expansão rápida; em que o segundo meio de cultura de célula compreende IL-2, OKT-3 (anticorpo anti-CD3), células mononucleares de sangue periférico (PBMCs), e opcionalmente o agonista de TNFRSF, e em que a expansão rápida é realizada em um período de 14 dias ou menos;
(e) colher a terceira população de TILs; e (f) administrar uma porção terapeuticamente eficaz da terceira população de TILs a um paciente com o câncer, em que IL-21 está presente no segundo meio de cultura de célula.
[0054] Em uma modalidade, a invenção provê um método de tratar um câncer com uma população de linfócitos infiltrantes de tumor (TILs) compreendendo as etapas de:
Petição 870190062710, de 04/07/2019, pág. 57/590 / 497 (a) excisar um tumor de um paciente;
(b) obter uma primeira população de TILs do tumor;
(c) realizar uma expansão inicial da primeira população de TILs em um primeiro meio de cultura de célula para se obter uma segunda população de TILs, em que a segunda população de TILs é pelo menos 5 vezes maior em número do que a primeira população de TILs, em que o primeiro meio de cultura de célula compreende IL-2 e um agonista da superfamrlia do receptor de necrose de tumor (TNFRSF), e em que a expansão inicial é realizada em um período de 21 dias ou menos;
(d) realizar uma expansão rápida da segunda população de TILs em um segundo meio de cultura de célula para se obter uma terceira população de TILs, em que a terceira população de TILs é pelo menos 50 vezes maior em número do que a segunda população de TILs depois de 7 dias do início da expansão rápida; em que o segundo meio de cultura de célula compreende IL-2, OKT-3 (anticorpo anti-CD3), células mononucleares de sangue periférico (PBMCs), e opcionalmente o agonista de TNFRSF, e em que a expansão rápida é realizada em um período de 14 dias ou menos;
(e) colher a terceira população de TILs; e (f) administrar uma porção terapeuticamente eficaz da terceira população de TILs a um paciente com o câncer, em que IL-21 está presente em uma concentração inicial de cerca de 5 ng/mL a cerca de 20 ng/mL no segundo meio de cultura de célula.
[0055] Em uma modalidade, a invenção provê um método de tratar um câncer com uma população de linfócitos infiltrantes de tumor (TILs) compreendendo as etapas de:
(a) excisar um tumor de um paciente;
(b) obter uma primeira população de TILs do tumor;
(c) realizar uma expansão inicial da primeira população de TILs em um primeiro meio de cultura de célula para se obter uma segunda
Petição 870190062710, de 04/07/2019, pág. 58/590 / 497 população de TILs, em que a segunda população de TILs é pelo menos 5 vezes maior em número do que a primeira população de TILs, em que o primeiro meio de cultura de célula compreende IL-2 e um agonista da superfamília do receptor de necrose de tumor (TNFRSF), e em que a expansão inicial é realizada em um período de 21 dias ou menos;
(d) realizar uma expansão rápida da segunda população de TILs em um segundo meio de cultura de célula para se obter uma terceira população de TILs, em que a terceira população de TILs é pelo menos 50 vezes maior em número do que a segunda população de TILs depois de 7 dias do início da expansão rápida; em que o segundo meio de cultura de célula compreende IL-2, OKT-3 (anticorpo anti-CD3), células mononucleares de sangue periférico (PBMCs), e opcionalmente o agonista de TNFRSF, e em que a expansão rápida é realizada em um período de 14 dias ou menos;
(e) colher a terceira população de TILs; e (f) administrar uma porção terapeuticamente eficaz da terceira população de TILs a um paciente com o câncer, em que anticorpo OKT-3 está presente em uma concentração inicial de cerca de 10 ng/mL a cerca de 60 ng/mL no segundo meio de cultura de célula.
[0056] Em uma modalidade, a invenção provê um método de tratar um câncer com uma população de linfócitos infiltrantes de tumor (TILs) compreendendo as etapas de:
(a) excisar um tumor de um paciente;
(b) obter uma primeira população de TILs do tumor;
(c) realizar uma expansão inicial da primeira população de TILs em um primeiro meio de cultura de célula para se obter uma segunda população de TILs, em que a segunda população de TILs é pelo menos 5 vezes maior em número do que a primeira população de TILs, em que o primeiro meio de cultura de célula compreende IL-2 e um agonista da superfamília do receptor de necrose de tumor (TNFRSF), e em que a
Petição 870190062710, de 04/07/2019, pág. 59/590 / 497 expansão inicial é realizada em um período de 21 dias ou menos;
(d) realizar uma expansão rápida da segunda população de TILs em um segundo meio de cultura de célula para se obter uma terceira população de TILs, em que a terceira população de TILs é pelo menos 50 vezes maior em número do que a segunda população de TILs depois de 7 dias do início da expansão rápida; em que o segundo meio de cultura de célula compreende IL-2, OKT-3 (anticorpo anti-CD3), células mononucleares de sangue periférico (PBMCs), e opcionalmente o agonista de TNFRSF, e em que a expansão rápida é realizada em um período de 14 dias ou menos;
(e) colher a terceira população de TILs; e (f) administrar uma porção terapeuticamente eficaz da terceira população de TILs a um paciente com o câncer, em que anticorpo OKT-3 está presente em uma concentração inicial de cerca de 30 ng/mL no segundo meio de cultura de célula.
[0057] Em uma modalidade, a invenção provê um método de tratar um câncer com uma população de linfócitos infiltrantes de tumor (TILs) compreendendo as etapas de:
(a) excisar um tumor de um paciente;
(b) obter uma primeira população de TILs do tumor;
(c) realizar uma expansão inicial da primeira população de TILs em um primeiro meio de cultura de célula para se obter uma segunda população de TILs, em que a segunda população de TILs é pelo menos 5 vezes maior em número do que a primeira população de TILs, em que o primeiro meio de cultura de célula compreende IL-2 e um agonista da superfamília do receptor de necrose de tumor (TNFRSF), e em que a expansão inicial é realizada em um período de 21 dias ou menos;
(d) realizar uma expansão rápida da segunda população de TILs em um segundo meio de cultura de célula para se obter uma terceira população de TILs, em que a terceira população de TILs é pelo menos 50
Petição 870190062710, de 04/07/2019, pág. 60/590 / 497 vezes maior em número do que a segunda população de TILs depois de 7 dias do início da expansão rápida; em que o segundo meio de cultura de célula compreende IL-2, OKT-3 (anticorpo anti-CD3), células mononucleares de sangue periférico (PBMCs), e opcionalmente o agonista de TNFRSF, e em que a expansão rápida é realizada em um período de 14 dias ou menos;
(e) colher a terceira população de TILs; e (f) administrar uma porção terapeuticamente eficaz da terceira população de TILs a um paciente com o câncer, em que a expansão inicial é realizada usando um recipiente permeável a gás.
[0058] Em uma modalidade, a invenção provê um método de tratar um câncer com uma população de linfócitos infiltrantes de tumor (TILs) compreendendo as etapas de:
(a) excisar um tumor de um paciente;
(b) obter uma primeira população de TILs do tumor;
(c) realizar uma expansão inicial da primeira população de TILs em um primeiro meio de cultura de célula para se obter uma segunda população de TILs, em que a segunda população de TILs é pelo menos 5 vezes maior em número do que a primeira população de TILs, em que o primeiro meio de cultura de célula compreende IL-2 e um agonista da superfamília do receptor de necrose de tumor (TNFRSF), e em que a expansão inicial é realizada em um período de 21 dias ou menos;
(d) realizar uma expansão rápida da segunda população de TILs em um segundo meio de cultura de célula para se obter uma terceira população de TILs, em que a terceira população de TILs é pelo menos 50 vezes maior em número do que a segunda população de TILs depois de 7 dias do início da expansão rápida; em que o segundo meio de cultura de célula compreende IL-2, OKT-3 (anticorpo anti-CD3), células mononucleares de sangue periférico (PBMCs), e opcionalmente o agonista de TNFRSF, e em que a expansão rápida é realizada em um período de 14 dias ou menos;
Petição 870190062710, de 04/07/2019, pág. 61/590 / 497 (e) colher a terceira população de TILs; e (f) administrar uma porção terapeuticamente eficaz da terceira população de TILs a um paciente com o câncer, em que a expansão rápida é realizada usando um recipiente permeável a gás.
[0059] Em uma modalidade, a invenção provê um método de tratar um câncer com uma população de linfócitos infiltrantes de tumor (TILs) compreendendo as etapas de:
(a) excisar um tumor de um paciente;
(b) obter uma primeira população de TILs do tumor;
(c) realizar uma expansão inicial da primeira população de TILs em um primeiro meio de cultura de célula para se obter uma segunda população de TILs, em que a segunda população de TILs é pelo menos 5 vezes maior em número do que a primeira população de TILs, em que o primeiro meio de cultura de célula compreende IL-2 e um agonista da superfamrlia do receptor de necrose de tumor (TNFRSF), e em que a expansão inicial é realizada em um período de 21 dias ou menos;
(d) realizar uma expansão rápida da segunda população de TILs em um segundo meio de cultura de célula para se obter uma terceira população de TILs, em que a terceira população de TILs é pelo menos 50 vezes maior em número do que a segunda população de TILs depois de 7 dias do início da expansão rápida; em que o segundo meio de cultura de célula compreende IL-2, OKT-3 (anticorpo anti-CD3), células mononucleares de sangue periférico (PBMCs), e opcionalmente o agonista de TNFRSF, e em que a expansão rápida é realizada em um período de 14 dias ou menos;
(e) colher a terceira população de TILs; e (f) administrar uma porção terapeuticamente eficaz da terceira população de TILs a um paciente com o câncer, compreendendo adicionalmente a etapa de tratar o paciente com um regime de linfodepleção não mieloablativa antes de administrar a terceira população de TILs ao
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50/497 paciente.
[0060] Em uma modalidade, a invenção provê um método de tratar um câncer com uma população de linfócitos infiltrantes de tumor (TILs) compreendendo as etapas de:
(a) excisar um tumor de um paciente;
(b) obter uma primeira população de TILs do tumor;
(c) realizar uma expansão inicial da primeira população de TILs em um primeiro meio de cultura de célula para se obter uma segunda população de TILs, em que a segunda população de TILs é pelo menos 5 vezes maior em número do que a primeira população de TILs, em que o primeiro meio de cultura de célula compreende IL-2 e um agonista da superfarmlia do receptor de necrose de tumor (TNFRSF), e em que a expansão inicial é realizada em um período de 21 dias ou menos;
(d) realizar uma expansão rápida da segunda população de TILs em um segundo meio de cultura de célula para se obter uma terceira população de TILs, em que a terceira população de TILs é pelo menos 50 vezes maior em número do que a segunda população de TILs depois de 7 dias do início da expansão rápida; em que o segundo meio de cultura de célula compreende IL-2, OKT-3 (anticorpo anti-CD3), células mononucleares de sangue periférico (PBMCs), e opcionalmente o agonista de TNFRSF, e em que a expansão rápida é realizada em um período de 14 dias ou menos;
(e) colher a terceira população de TILs; e (f) administrar uma porção terapeuticamente eficaz da terceira população de TILs a um paciente com o câncer, compreendendo adicionalmente a etapa de tratar o paciente com um regime de linfodepleção não mieloablativa antes de administrar a terceira população de TILs ao paciente, em que o regime de linfodepleção não mieloablativa compreende as etapas de administração de ciclofosfamida em uma dose de 60 mg/m2/dia durante dois dias seguidos pela administração de fludarabina em uma dose de
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51/497 mg/m2/dia durante cinco dias.
[0061] Em uma modalidade, a invenção provê um método de tratar um câncer com uma população de linfócitos infiltrantes de tumor (TILs) compreendendo as etapas de:
(a) excisar um tumor de um paciente;
(b) obter uma primeira população de TILs do tumor;
(c) realizar uma expansão inicial da primeira população de TILs em um primeiro meio de cultura de célula para se obter uma segunda população de TILs, em que a segunda população de TILs é pelo menos 5 vezes maior em número do que a primeira população de TILs, em que o primeiro meio de cultura de célula compreende IL-2 e um agonista da superfamrlia do receptor de necrose de tumor (TNFRSF), e em que a expansão inicial é realizada em um período de 21 dias ou menos;
(d) realizar uma expansão rápida da segunda população de TILs em um segundo meio de cultura de célula para se obter uma terceira população de TILs, em que a terceira população de TILs é pelo menos 50 vezes maior em número do que a segunda população de TILs depois de 7 dias do início da expansão rápida; em que o segundo meio de cultura de célula compreende IL-2, OKT-3 (anticorpo anti-CD3), células mononucleares de sangue periférico (PBMCs), e opcionalmente o agonista de TNFRSF, e em que a expansão rápida é realizada em um período de 14 dias ou menos;
(e) colher a terceira população de TILs; e (f) administrar uma porção terapeuticamente eficaz da terceira população de TILs a um paciente com o câncer, compreendendo adicionalmente a etapa de tratar o paciente com um regime decrescente de IL2 começando no dia depois da administração da terceira população de TILs ao paciente, em que o regime decrescente de IL-2 compreende aldesleucina administrado intravenosamente em uma dose de 18.000.000 IU/m2 no dia 1, 9.000.000 IU/m2 no dia 2, e 4,500.000 IU/m2 no dias 3 e 4.
Petição 870190062710, de 04/07/2019, pág. 64/590 / 497 [0062] Em uma modalidade, a invenção provê um método de tratar um câncer com uma população de linfócitos infiltrantes de tumor (TILs) compreendendo as etapas de:
(a) excisar um tumor de um paciente;
(b) obter uma primeira população de TILs do tumor;
(c) realizar uma expansão inicial da primeira população de TILs em um primeiro meio de cultura de célula para se obter uma segunda população de TILs, em que a segunda população de TILs é pelo menos 5 vezes maior em número do que a primeira população de TILs, em que o primeiro meio de cultura de célula compreende IL-2 e um agonista da superfarmlia do receptor de necrose de tumor (TNFRSF), e em que a expansão inicial é realizada em um período de 21 dias ou menos;
(d) realizar uma expansão rápida da segunda população de TILs em um segundo meio de cultura de célula para se obter uma terceira população de TILs, em que a terceira população de TILs é pelo menos 50 vezes maior em número do que a segunda população de TILs depois de 7 dias do início da expansão rápida; em que o segundo meio de cultura de célula compreende IL-2, OKT-3 (anticorpo anti-CD3), células mononucleares de sangue periférico (PBMCs), e opcionalmente o agonista de TNFRSF, e em que a expansão rápida é realizada em um período de 14 dias ou menos;
(e) colher a terceira população de TILs; e (f) administrar uma porção terapeuticamente eficaz da terceira população de TILs a um paciente com o câncer, compreendendo adicionalmente a etapa de tratar o paciente com IL-2 peguilado depois da administração da terceira população de TILs ao paciente em uma dose de 0,10 mg/dia a 50 mg/dia.
[0063] Em uma modalidade, a invenção provê um método de tratar um câncer com uma população de linfócitos infiltrantes de tumor (TILs) compreendendo as etapas de:
Petição 870190062710, de 04/07/2019, pág. 65/590
53/497 (a) excisar um tumor de um paciente;
(b) obter uma primeira população de TILs do tumor;
(c) realizar uma expansão inicial da primeira população de TILs em um primeiro meio de cultura de célula para se obter uma segunda população de TILs, em que a segunda população de TILs é pelo menos 5 vezes maior em número do que a primeira população de TILs, em que o primeiro meio de cultura de célula compreende IL-2 e um agonista da superfarmlia do receptor de necrose de tumor (TNFRSF), e em que a expansão inicial é realizada em um período de 21 dias ou menos;
(d) realizar uma expansão rápida da segunda população de TILs em um segundo meio de cultura de célula para se obter uma terceira população de TILs, em que a terceira população de TILs é pelo menos 50 vezes maior em número do que a segunda população de TILs depois de 7 dias do início da expansão rápida; em que o segundo meio de cultura de célula compreende IL-2, OKT-3 (anticorpo anti-CD3), células mononucleares de sangue periférico (PBMCs), e opcionalmente o agonista de TNFRSF, e em que a expansão rápida é realizada em um período de 14 dias ou menos;
(e) colher a terceira população de TILs; e (f) administrar uma porção terapeuticamente eficaz da terceira população de TILs a um paciente com o câncer, compreendendo adicionalmente a etapa de tratar o paciente com um regime de IL-2 de alta dose começando no dia depois da administração da terceira população de TILs ao paciente.
[0064] Em uma modalidade, a invenção provê um método de tratar um câncer com uma população de linfócitos infiltrantes de tumor (TILs) compreendendo as etapas de:
(a) excisar um tumor de um paciente;
(b) obter uma primeira população de TILs do tumor;
(c) realizar uma expansão inicial da primeira população de
Petição 870190062710, de 04/07/2019, pág. 66/590 / 497
TILs em um primeiro meio de cultura de célula para se obter uma segunda população de TILs, em que a segunda população de TILs é pelo menos 5 vezes maior em número do que a primeira população de TILs, em que o primeiro meio de cultura de célula compreende IL-2 e um agonista da superfamrlia do receptor de necrose de tumor (TNFRSF), e em que a expansão inicial é realizada em um período de 21 dias ou menos;
(d) realizar uma expansão rápida da segunda população de TILs em um segundo meio de cultura de célula para se obter uma terceira população de TILs, em que a terceira população de TILs é pelo menos 50 vezes maior em número do que a segunda população de TILs depois de 7 dias do início da expansão rápida; em que o segundo meio de cultura de célula compreende IL-2, OKT-3 (anticorpo anti-CD3), células mononucleares de sangue periférico (PBMCs), e opcionalmente o agonista de TNFRSF, e em que a expansão rápida é realizada em um período de 14 dias ou menos;
(e) colher a terceira população de TILs; e (f) administrar uma porção terapeuticamente eficaz da terceira população de TILs a um paciente com o câncer, compreendendo adicionalmente a etapa de tratar o paciente com um regime de IL-2 de alta dose começando no dia depois da administração da terceira população de TILs ao paciente, em que regime de IL-2 de alta dose compreende 600.000 ou 720.000 lU/kg de aldesleucina, ou um biossimilar ou variante da mesma, administrado como uma infusão intravenosa de bolo de 15 minutos a cada oito horas até tolerância.
[0065] Em uma modalidade, a invenção provê um método de tratar um câncer com uma população de linfócitos infiltrantes de tumor (TILs) compreendendo as etapas de:
(a) excisar um tumor de um paciente;
(b) obter uma primeira população de TILs do tumor;
(c) realizar uma expansão inicial da primeira população de
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55/497
TILs em um primeiro meio de cultura de célula para se obter uma segunda população de TILs, em que a segunda população de TILs é pelo menos 5 vezes maior em número do que a primeira população de TILs, em que o primeiro meio de cultura de célula compreende IL-2 e um agonista da superfamília do receptor de necrose de tumor (TNFRSF), e em que a expansão inicial é realizada em um período de 21 dias ou menos;
(d) realizar uma expansão rápida da segunda população de TILs em um segundo meio de cultura de célula para se obter uma terceira população de TILs, em que a terceira população de TILs é pelo menos 50 vezes maior em número do que a segunda população de TILs depois de 7 dias do início da expansão rápida; em que o segundo meio de cultura de célula compreende IL-2, OKT-3 (anticorpo anti-CD3), células mononucleares de sangue periférico (PBMCs), e opcionalmente o agonista de TNFRSF, e em que a expansão rápida é realizada em um período de 14 dias ou menos;
(e) colher a terceira população de TILs; e (f) administrar uma porção terapeuticamente eficaz da terceira população de TILs a um paciente com o câncer, em que o câncer é selecionado a partir do grupo que consiste em melanoma, câncer ovariano, câncer cervical, câncer pulmonar, câncer vesical, câncer mamário, câncer da cabeça e pescoço, carcinoma de célula renal, leucemia mieloide aguda, câncer colorretal, colangiocarcinoma, e sarcoma.
[0066] Em uma modalidade, a invenção provê um método de tratar um câncer com uma população de linfócitos infiltrantes de tumor (TILs) compreendendo as etapas de:
(a) excisar um tumor de um paciente;
(b) obter uma primeira população de TILs do tumor;
(c) realizar uma expansão inicial da primeira população de TILs em um primeiro meio de cultura de célula para se obter uma segunda população de TILs, em que a segunda população de TILs é pelo menos 5
Petição 870190062710, de 04/07/2019, pág. 68/590
56/497 vezes maior em número do que a primeira população de TILs, em que o primeiro meio de cultura de célula compreende IL-2 e um agonista da superfamrlia do receptor de necrose de tumor (TNFRSF), e em que a expansão inicial é realizada em um período de 21 dias ou menos;
(d) realizar uma expansão rápida da segunda população de TILs em um segundo meio de cultura de célula para se obter uma terceira população de TILs, em que a terceira população de TILs é pelo menos 50 vezes maior em número do que a segunda população de TILs depois de 7 dias do início da expansão rápida; em que o segundo meio de cultura de célula compreende IL-2, OKT-3 (anticorpo anti-CD3), células mononucleares de sangue periférico (PBMCs), e opcionalmente o agonista de TNFRSF, e em que a expansão rápida é realizada em um período de 14 dias ou menos;
(e) colher a terceira população de TILs; e (f) administrar uma porção terapeuticamente eficaz da terceira população de TILs a um paciente com o câncer, em que o câncer é selecionado a partir do grupo que consiste em câncer pulmonar de célula não pequena (NSCLC), câncer mamário negativo triplo, melanoma refratário duplo, e melanoma uveal (ocular).
[0067] Em uma modalidade, a invenção provê um método de tratar um câncer com uma população de linfócitos infiltrantes de tumor (TILs) compreendendo as etapas de:
(a) excisar um tumor de um paciente;
(b) obter uma primeira população de TILs do tumor;
(c) realizar uma expansão inicial da primeira população de TILs em um primeiro meio de cultura de célula para se obter uma segunda população de TILs, em que a segunda população de TILs é pelo menos 5 vezes maior em número do que a primeira população de TILs, em que o primeiro meio de cultura de célula compreende IL-2 e um agonista da superfamrlia do receptor de necrose de tumor (TNFRSF), e em que a
Petição 870190062710, de 04/07/2019, pág. 69/590 / 497 expansão inicial é realizada em um período de 21 dias ou menos;
(d) realizar uma expansão rápida da segunda população de TILs em um segundo meio de cultura de célula para se obter uma terceira população de TILs, em que a terceira população de TILs é pelo menos 50 vezes maior em número do que a segunda população de TILs depois de 7 dias do início da expansão rápida; em que o segundo meio de cultura de célula compreende IL-2, OKT-3 (anticorpo anti-CD3), células mononucleares de sangue periférico (PBMCs), e opcionalmente o agonista de TNFRSF, e em que a expansão rápida é realizada em um período de 14 dias ou menos;
(e) colher a terceira população de TILs; e (f) administrar uma porção terapeuticamente eficaz da terceira população de TILs a um paciente com o câncer, compreendendo adicionalmente a etapa de tratar o paciente com um inibidor de PD-1 ou inibidor de PD-Li antes de excisar o tumor do paciente.
[0068] Em uma modalidade, a invenção provê um método de tratar um câncer com uma população de linfócitos infiltrantes de tumor (TILs) compreendendo as etapas de:
(a) excisar um tumor de um paciente;
(b) obter uma primeira população de TILs do tumor;
(c) realizar uma expansão inicial da primeira população de TILs em um primeiro meio de cultura de célula para se obter uma segunda população de TILs, em que a segunda população de TILs é pelo menos 5 vezes maior em número do que a primeira população de TILs, em que o primeiro meio de cultura de célula compreende IL-2 e um agonista da superfamília do receptor de necrose de tumor (TNFRSF), e em que a expansão inicial é realizada em um período de 21 dias ou menos;
(d) realizar uma expansão rápida da segunda população de TILs em um segundo meio de cultura de célula para se obter uma terceira população de TILs, em que a terceira população de TILs é pelo menos 50
Petição 870190062710, de 04/07/2019, pág. 70/590
58/497 vezes maior em número do que a segunda população de TILs depois de 7 dias do início da expansão rápida; em que o segundo meio de cultura de célula compreende IL-2, OKT-3 (anticorpo anti-CD3), células mononucleares de sangue periférico (PBMCs), e opcionalmente o agonista de TNFRSF, e em que a expansão rápida é realizada em um período de 14 dias ou menos;
(e) colher a terceira população de TILs; e (f) administrar uma porção terapeuticamente eficaz da terceira população de TILs a um paciente com o câncer, compreendendo adicionalmente a etapa de tratar o paciente com um inibidor de PD-1 ou inibidor de PD-Li antes de excisar o tumor do paciente, em que o inibidor de PD-1 ou inibidor de PD-Li são selecionados do grupo que consiste em nivolumab, pembrolizumab, durvalumab, atezolizumab, avelumab, e fragmentos, derivados, variantes, biossimilares, e combinações dos mesmos. [0069] Em uma modalidade, a invenção provê um método de tratar um câncer com uma população de linfócitos infiltrantes de tumor (TILs) compreendendo as etapas de:
(a) excisar um tumor de um paciente;
(b) obter uma primeira população de TILs do tumor;
(c) realizar uma expansão inicial da primeira população de TILs em um primeiro meio de cultura de célula para se obter uma segunda população de TILs, em que a segunda população de TILs é pelo menos 5 vezes maior em número do que a primeira população de TILs, em que o primeiro meio de cultura de célula compreende IL-2 e um agonista da superfamília do receptor de necrose de tumor (TNFRSF), e em que a expansão inicial é realizada em um período de 21 dias ou menos;
(d) realizar uma expansão rápida da segunda população de TILs em um segundo meio de cultura de célula para se obter uma terceira população de TILs, em que a terceira população de TILs é pelo menos 50 vezes maior em número do que a segunda população de TILs depois de 7 dias
Petição 870190062710, de 04/07/2019, pág. 71/590
59/497 do início da expansão rápida; em que o segundo meio de cultura de célula compreende IL-2, OKT-3 (anticorpo anti-CD3), células mononucleares de sangue periférico (PBMCs), e opcionalmente o agonista de TNFRSF, e em que a expansão rápida é realizada em um período de 14 dias ou menos;
(e) colher a terceira população de TILs; e (f) administrar uma porção terapeuticamente eficaz da terceira população de TILs a um paciente com o câncer, compreendendo adicionalmente a etapa de tratar o paciente com um inibidor de PD-1 ou inibidor de PD-Li depois de excisar o tumor do paciente.
[0070] Em uma modalidade, a invenção provê um método de tratar um câncer com uma população de linfócitos infiltrantes de tumor (TILs) compreendendo as etapas de:
(a) excisar um tumor de um paciente;
(b) obter uma primeira população de TILs do tumor;
(c) realizar uma expansão inicial da primeira população de TILs em um primeiro meio de cultura de célula para se obter uma segunda população de TILs, em que a segunda população de TILs é pelo menos 5 vezes maior em número do que a primeira população de TILs, em que o primeiro meio de cultura de célula compreende IL-2 e um agonista da superfamília do receptor de necrose de tumor (TNFRSF), e em que a expansão inicial é realizada em um período de 21 dias ou menos;
(d) realizar uma expansão rápida da segunda população de TILs em um segundo meio de cultura de célula para se obter uma terceira população de TILs, em que a terceira população de TILs é pelo menos 50 vezes maior em número do que a segunda população de TILs depois de 7 dias do início da expansão rápida; em que o segundo meio de cultura de célula compreende IL-2, OKT-3 (anticorpo anti-CD3), células mononucleares de sangue periférico (PBMCs), e opcionalmente o agonista de TNFRSF, e em que a expansão rápida é realizada em um período de 14 dias ou menos;
Petição 870190062710, de 04/07/2019, pág. 72/590
60/497 (e) colher a terceira população de TILs; e (f) administrar uma porção terapeuticamente eficaz da terceira população de TILs a um paciente com o câncer, compreendendo adicionalmente a etapa de tratar o paciente com um inibidor de PD-1 ou inibidor de PD-Li depois de excisar o tumor do paciente, em que o inibidor de PD-1 ou inibidor de PD-Li são selecionados do grupo que consiste em nivolumab, pembrolizumab, durvalumab, atezolizumab, avelumab, e fragmentos, derivados, variantes, biossimilares, e combinações dos mesmos. [0071] Em uma modalidade, a invenção provê um método de tratar um câncer com uma população de linfócitos infiltrantes de tumor (TILs) compreendendo as etapas de:
(a) excisar um tumor de um paciente;
(b) obter uma primeira população de TILs do tumor;
(c) realizar uma expansão inicial da primeira população de TILs em um primeiro meio de cultura de célula para se obter uma segunda população de TILs, em que a segunda população de TILs é pelo menos 5 vezes maior em número do que a primeira população de TILs, em que o primeiro meio de cultura de célula compreende IL-2 e um agonista da superfamília do receptor de necrose de tumor (TNFRSF), e em que a expansão inicial é realizada em um período de 21 dias ou menos;
(d) realizar uma expansão rápida da segunda população de TILs em um segundo meio de cultura de célula para se obter uma terceira população de TILs, em que a terceira população de TILs é pelo menos 50 vezes maior em número do que a segunda população de TILs depois de 7 dias do início da expansão rápida; em que o segundo meio de cultura de célula compreende IL-2, OKT-3 (anticorpo anti-CD3), células mononucleares de sangue periférico (PBMCs), e opcionalmente o agonista de TNFRSF, e em que a expansão rápida é realizada em um período de 14 dias ou menos;
(e) colher a terceira população de TILs; e
Petição 870190062710, de 04/07/2019, pág. 73/590
61/497 (f) administrar uma porção terapeuticamente eficaz da terceira população de TILs a um paciente com o câncer, compreendendo adicionalmente a etapa de tratar o paciente com um inibidor de PD-1 ou inibidor de PD-Li depois de administrar a terceira população de TILs ao paciente.
[0072] Em uma modalidade, a invenção provê um método de tratar um câncer com uma população de linfócitos infiltrantes de tumor (TILs) compreendendo as etapas de:
(a) excisar um tumor de um paciente;
(b) obter uma primeira população de TILs do tumor;
(c) realizar uma expansão inicial da primeira população de TILs em um primeiro meio de cultura de célula para se obter uma segunda população de TILs, em que a segunda população de TILs é pelo menos 5 vezes maior em número do que a primeira população de TILs, em que o primeiro meio de cultura de célula compreende IL-2 e um agonista da superfarmlia do receptor de necrose de tumor (TNFRSF), e em que a expansão inicial é realizada em um período de 21 dias ou menos;
(d) realizar uma expansão rápida da segunda população de TILs em um segundo meio de cultura de célula para se obter uma terceira população de TILs, em que a terceira população de TILs é pelo menos 50 vezes maior em número do que a segunda população de TILs depois de 7 dias do início da expansão rápida; em que o segundo meio de cultura de célula compreende IL-2, OKT-3 (anticorpo anti-CD3), células mononucleares de sangue periférico (PBMCs), e opcionalmente o agonista de TNFRSF, e em que a expansão rápida é realizada em um período de 14 dias ou menos;
(e) colher a terceira população de TILs; e (f) administrar uma porção terapeuticamente eficaz da terceira população de TILs a um paciente com o câncer, compreendendo adicionalmente a etapa de tratar o paciente com um inibidor de PD-1 ou
Petição 870190062710, de 04/07/2019, pág. 74/590 / 497 inibidor de PD-Li depois de administrar a terceira população de TILs ao paciente, em que o inibidor de PD-1 ou inibidor de PD-Li são selecionados do grupo que consiste em nivolumab, pembrolizumab, durvalumab, atezolizumab, avelumab, e fragmentos, derivados, variantes, biossimilares, e combinações dos mesmos.
[0073] Em uma modalidade, a invenção provê um processo para a preparação de uma população de linfócitos infiltrantes de tumor (TILs) compreendendo as etapas de:
(b) obter uma primeira população de TILs;
(c) realizar uma expansão inicial da primeira população de TILs em um primeiro meio de cultura de célula para se obter uma segunda população de TILs, em que a segunda população de TILs é pelo menos 5 vezes maior em número do que a primeira população de TILs, em que o primeiro meio de cultura de célula compreende IL-2 e um agonista da superfamrlia do receptor de necrose de tumor (TNFRSF), e em que a expansão inicial é realizada em um período de 21 dias ou menos;
(d) realizar uma expansão rápida da segunda população de TILs em um segundo meio de cultura de célula para se obter uma terceira população de TILs, em que a terceira população de TILs é pelo menos 50 vezes maior em número do que a segunda população de TILs depois de 7 dias do início da expansão rápida; em que o segundo meio de cultura de célula compreende IL-2, OKT-3 (anticorpo anti-CD3), células mononucleares de sangue periférico (PBMCs), e opcionalmente o agonista de TNFRSF, e em que a expansão rápida é realizada em um período de 14 dias ou menos; e (e) colher a terceira população de TILs.
[0074] Em uma modalidade, a invenção provê uma população de linfócitos infiltrantes de tumor (TILs) obtenível de um processo compreendendo as etapas de:
(b) obter uma primeira população de TILs;
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63/497 (c) realizar uma expansão inicial da primeira população de TILs em um primeiro meio de cultura de célula para se obter uma segunda população de TILs, em que a segunda população de TILs é pelo menos 5 vezes maior em número do que a primeira população de TILs, em que o primeiro meio de cultura de célula compreende IL-2 e um agonista da superfamrlia do receptor de necrose de tumor (TNFRSF), e em que a expansão inicial é realizada em um período de 21 dias ou menos;
(d) realizar uma expansão rápida da segunda população de TILs em um segundo meio de cultura de célula para se obter uma terceira população de TILs, em que a terceira população de TILs é pelo menos 50 vezes maior em número do que a segunda população de TILs depois de 7 dias do início da expansão rápida; em que o segundo meio de cultura de célula compreende IL-2, OKT-3 (anticorpo anti-CD3), células mononucleares de sangue periférico (PBMCs), e opcionalmente o agonista de TNFRSF, e em que a expansão rápida é realizada em um período de 14 dias ou menos; e (e) colher a terceira população de TILs.
[0075] Em uma modalidade, a invenção provê uma população de TILs que é para o uso no tratamento de câncer. Em uma modalidade, a invenção provê uma composição farmacêutica compreendendo uma população de linfócitos infiltrantes de tumor (TILs) para o uso no tratamento de um câncer em que a população de linfócitos infiltrantes de tumor (TILs) é obtenível por um processo compreendendo as etapas de:
(b) obter uma primeira população de TILs;
(c) realizar uma expansão inicial da primeira população de TILs em um primeiro meio de cultura de célula para se obter uma segunda população de TILs, em que a segunda população de TILs é pelo menos 5 vezes maior em número do que a primeira população de TILs, em que o primeiro meio de cultura de célula compreende IL-2 e um agonista da superfamrlia do receptor de necrose de tumor (TNFRSF), e em que a
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(d) realizar uma expansão rápida da segunda população de TILs em um segundo meio de cultura de célula para se obter uma terceira população de TILs, em que a terceira população de TILs é pelo menos 50 vezes maior em número do que a segunda população de TILs depois de 7 dias do início da expansão rápida; em que o segundo meio de cultura de célula compreende IL-2, OKT-3 (anticorpo anti-CD3), células mononucleares de sangue periférico (PBMCs), e opcionalmente o agonista de TNFRSF, e em que a expansão rápida é realizada em um período de 14 dias ou menos; e (e) colher a terceira população de TILs.
[0076] Em uma modalidade, a primeira população de TILs é obtida de um tumor. Em uma modalidade, o tumor é primeiramente excisado de um paciente. Em uma modalidade, a primeira população de TILs é obtida do tumor que foi excisado de um paciente. Em uma modalidade, a população de TILs é para a administração em uma quantidade terapeuticamente eficaz a um paciente com câncer.
[0077] Em uma modalidade, a invenção provê um método de expandir uma população de linfócitos infiltrantes de tumor (TILs) compreendendo as etapas de:
excisar um tumor de um paciente;
(b) obter uma primeira população de TILs do tumor;
(c) realizar uma expansão inicial da primeira população de TILs em um primeiro meio de cultura de célula para se obter uma segunda população de TILs, em que a segunda população de TILs é pelo menos 5 vezes maior em número do que a primeira população de TILs, em que o primeiro meio de cultura de célula compreende IL-2, e em que a expansão inicial é realizada em um período de 11 dias ou menos;
(d) realizar uma expansão rápida da segunda população de TILs em um segundo meio de cultura de célula para se obter uma terceira
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65/497 população de TILs, em que a terceira população de TILs é pelo menos 50 vezes maior em número do que a segunda população de TILs depois de 7 dias do início da expansão rápida; em que o segundo meio de cultura de célula compreende IL-2, anticorpo OKT-3 (anti-CD3), células mononucleares de sangue periférico (PBMCs), e um agonista de TNFRSF, e em que a expansão rápida é realizada em um período de 11 dias ou menos;
(e) colher a terceira população de TILs; e (f) opcionalmente criopreservar a terceira população de TILs em um meio com base em sulfóxido de dimetila.
[0078] Em uma modalidade, a invenção provê um método de tratar um câncer com uma população de linfócitos infiltrantes de tumor (TILs) compreendendo as etapas de:
(a) excisar um tumor de um paciente;
(b) obter uma primeira população de TILs do tumor;
(c) realizar uma expansão inicial da primeira população de TILs em um primeiro meio de cultura de célula para se obter uma segunda população de TILs, em que a segunda população de TILs é pelo menos 5 vezes maior em número do que a primeira população de TILs, em que o primeiro meio de cultura de célula compreende IL-2, e em que a expansão inicial é realizada em um período de 11 dias ou menos;
(d) realizar uma expansão rápida da segunda população de TILs em um segundo meio de cultura de célula para se obter uma terceira população de TILs, em que a terceira população de TILs é pelo menos 50 vezes maior em número do que a segunda população de TILs depois de 7 dias do início da expansão rápida; em que o segundo meio de cultura de célula compreende IL-2, anticorpo OKT-3 (anti-CD3), células mononucleares de sangue periférico (PBMCs), e um agonista de TNFRSF, e em que a expansão rápida é realizada em um período de 11 dias ou menos;
(e) colher a terceira população de TILs; e
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66/497 (f) administrar uma porção terapeuticamente eficaz da terceira população de TILs ao paciente.
[0079] Em uma modalidade, a invenção provê um método de tratar um câncer com uma população de linfócitos infiltrantes de tumor (TILs) compreendendo as etapas de:
(a) excisar um tumor de um paciente;
(b) obter uma primeira população de TILs do tumor;
(c) realizar uma expansão inicial da primeira população de TILs em um primeiro meio de cultura de célula para se obter uma segunda população de TILs, em que a segunda população de TILs é pelo menos 5 vezes maior em número do que a primeira população de TILs, em que o primeiro meio de cultura de célula compreende IL-2, e em que a expansão inicial é realizada em um período de 11 dias ou menos;
(d) realizar uma expansão rápida da segunda população de TILs em um segundo meio de cultura de célula para se obter uma terceira população de TILs, em que a terceira população de TILs é pelo menos 50 vezes maior em número do que a segunda população de TILs depois de 7 dias do início da expansão rápida; em que o segundo meio de cultura de célula compreende IL-2, anticorpo OKT-3 (anti-CD3), células mononucleares de sangue periférico (PBMCs), e um agonista de TNFRSF, e em que a expansão rápida é realizada em um período de 11 dias ou menos;
(e) colher a terceira população de TILs; e (f) administrar uma porção terapeuticamente eficaz da terceira população de TILs ao paciente, em que o agonista de TNFRSF é selecionado a partir do grupo que consiste em um agonista de 4-1 BB, um agonista de 0X40, e uma combinação dos mesmos.
[0080] Em uma modalidade, a invenção provê um método de tratar um câncer com uma população de linfócitos infiltrantes de tumor (TILs)
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(a) excisar um tumor de um paciente;
(b) obter uma primeira população de TILs do tumor;
(c) realizar uma expansão inicial da primeira população de TILs em um primeiro meio de cultura de célula para se obter uma segunda população de TILs, em que a segunda população de TILs é pelo menos 5 vezes maior em número do que a primeira população de TILs, em que o primeiro meio de cultura de célula compreende IL-2, e em que a expansão inicial é realizada em um período de 11 dias ou menos;
(d) realizar uma expansão rápida da segunda população de TILs em um segundo meio de cultura de célula para se obter uma terceira população de TILs, em que a terceira população de TILs é pelo menos 50 vezes maior em número do que a segunda população de TILs depois de 7 dias do início da expansão rápida; em que o segundo meio de cultura de célula compreende IL-2, anticorpo OKT-3 (anti-CD3), células mononucleares de sangue periférico (PBMCs), e um agonista de TNFRSF, e em que a expansão rápida é realizada em um período de 11 dias ou menos;
(e) colher a terceira população de TILs; e (f) administrar uma porção terapeuticamente eficaz da terceira população de TILs ao paciente, em que o agonista de TNFRSF é selecionado a partir do grupo que consiste em um agonista de 4-1 BB, um agonista de 0X40, e uma combinação dos mesmos, e em que o agonista de TNFRSF é um agonista de 4-1 BB, e o agonista de 4-1BB é selecionado a partir do grupo que consiste em urelumab, utomilumab, EU-101, uma proteína de fusão, e fragmentos, derivados, variantes, biossimilares, e combinações dos mesmos.
[0081] Em uma modalidade, a invenção provê um método de tratar um câncer com uma população de linfócitos infiltrantes de tumor (TILs)
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68/497 compreendendo as etapas de:
(a) excisar um tumor de um paciente;
(b) obter uma primeira população de TILs do tumor;
(c) realizar uma expansão inicial da primeira população de TILs em um primeiro meio de cultura de célula para se obter uma segunda população de TILs, em que a segunda população de TILs é pelo menos 5 vezes maior em número do que a primeira população de TILs, em que o primeiro meio de cultura de célula compreende IL-2, e em que a expansão inicial é realizada em um período de 11 dias ou menos;
(d) realizar uma expansão rápida da segunda população de TILs em um segundo meio de cultura de célula para se obter uma terceira população de TILs, em que a terceira população de TILs é pelo menos 50 vezes maior em número do que a segunda população de TILs depois de 7 dias do início da expansão rápida; em que o segundo meio de cultura de célula compreende IL-2, anticorpo OKT-3 (anti-CD3), células mononucleares de sangue periférico (PBMCs), e um agonista de TNFRSF, e em que a expansão rápida é realizada em um período de 11 dias ou menos;
colher a terceira população de TILs; e (f) administrar uma porção terapeuticamente eficaz da terceira população de TILs ao paciente, em que o agonista de TNFRSF é selecionado a partir do grupo que consiste em um agonista de 4-1 BB, um agonista de 0X40, e uma combinação dos mesmos, e em que o agonista de TNFRSF é um agonista de 0X40, e o agonista de 0X40 é selecionado a partir do grupo que consiste em tavolixizumab, GSK3174998, MEDI6469, MEDI6383, MOXR0916, PF04518600, MOM-18455 da Creative Biolabs, e fragmentos, derivados, variantes, biossimilares, e combinações dos mesmos.
[0082] em que o agonista de OX4 está presente no início da etapa (d)
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69/497 em uma concentração entre 1 pg/mL e 30 pg/mL.
[0083] Em uma modalidade, a invenção provê um método de qualquer uma das modalidades precedentes, em que o agonista de TNFRSF está presente no início da etapa (d) em uma concentração entre 5 pg/mL e 20 pg/mL.
[0084] Em uma modalidade, a invenção provê um método de qualquer uma das modalidades precedentes, em que o agonista de TNFRSF está presente no início da etapa (d) em uma concentração de cerca de 10 pg/mL.
[0085] Em uma modalidade, a invenção provê um método de qualquer uma das modalidades precedentes, em que o agonista de TNFRSF é mantido por toda a etapa (d) em uma concentração entre 1 pg/mL e 30 pg/mL.
[0086] Em uma modalidade, a invenção provê um método de qualquer uma das modalidades precedentes, em que o agonista de TNFRSF é mantido por toda a etapa (d) em uma concentração entre 5 pg/mL e 20 pg/mL.
[0087] Em uma modalidade, a invenção provê um método de qualquer uma das modalidades precedentes, em que o agonista de TNFRSF é mantido por toda a etapa (d) em uma concentração de cerca de 10 pg/mL.
[0088] Em uma modalidade, a invenção provê um método de qualquer uma das modalidades precedentes, em que a terceira população de TILs exibe uma razão aumentada de TILs CD8+ para TILs CD4+ em comparação com a razão de referência de TILs CD8+ para TILs CD4+ na segunda população de TILs. Em uma modalidade, a razão aumentada é selecionada do grupo que consiste em pelo menos 1 % maior do que a razão de referência, pelo menos 2% maior do que a razão de referência, pelo menos 5% maior do que a razão de referência, pelo menos 10% maior do que a razão de referência, pelo menos 15% maior do que a razão de referência, pelo
Petição 870190062710, de 04/07/2019, pág. 82/590 / 497 menos 20% maior do que a razão de referência, pelo menos 25% maior do que a razão de referência, pelo menos 30% maior do que a razão de referência, pelo menos 35% maior do que a razão de referência, pelo menos 40% maior do que a razão de referência, pelo menos 45% maior do que a razão de referência, e pelo menos 50% maior do que a razão de referência. Em uma modalidade, a razão aumentada está entre 5% e 80% maior do que a razão de referência. Em uma modalidade, a razão aumentada está entre 10% e 70% maior do que a razão de referência. Em uma modalidade, a razão aumentada está entre 15% e 60% maior do que a razão de referência. Em uma das modalidades precedentes, a razão de referência é obtida de uma terceira população de TIL que é um respondendor para o agonista de TNFRSF.
[0089] Em uma modalidade, a invenção provê um método de qualquer uma das modalidades precedentes, em que o câncer é selecionado a partir do grupo que consiste em melanoma, melanoma uveal (ocular), câncer ovariano, câncer cervical, câncer pulmonar, câncer vesical, câncer mamário, câncer da cabeça e pescoço (câncer de célula escamosa da cabeça e pescoço), carcinoma de célula renal, carcinoma colorretal, câncer pancreático, glioblastoma, colangiocarcinoma, e sarcoma. Em uma modalidade, a invenção provê um método de qualquer uma das modalidades precedentes, em que o câncer é selecionado a partir do grupo que consiste em melanoma cutâneo, melanoma uveal (ocular), câncer ovariano resistente à platina, adenocarcinoma ductal pancreático, osteossarcoma, câncer mamário triplonegativo, e câncer pulmonar de célula não pequena.
[0090] Em uma modalidade, qualquer uma das modalidades precedentes pode ser combinada com qualquer uma das modalidades que seguem.
[0091] Em uma modalidade, o processo é um processo in vitro ou um ex vivo.
[0092] Em uma modalidade, o agonista de TNFRSF é selecionado a
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71/497 partir do grupo que consiste em um agonista de 4-1 BB, um agonista de 0X40, um agonista de CD27, um agonista de GITR, um agonista de HVEM, um agonista de CD95, e combinações dos mesmos.
[0093] Em uma modalidade, o agonista de TNFRSF é um agonista de 4-1BB.
[0094] Em uma modalidade, o agonista de TNFRSF é um agonista de 4-1 BB, e o agonista de 4-1 BB é selecionado a partir do grupo que consiste em urelumab, utomilumab, EU-101 e fragmentos, derivados, variantes, biossimilares, e combinações dos mesmos.
[0095] Em uma modalidade, o agonista de TNFRSF é um agonista de 4-1 BB, e o agonista de 4-1 BB é uma proteína de fusão agonista de 4-1 BB.
[0096] Em uma modalidade, o agonista de TNFRSF é uma proteína de fusão agonista de 4-1BB, e a uma proteína de fusão agonista de 4-1BB compreende (i) um primeiro domínio de ligação de 4-1 BB solúvel, (ii) um primeiro ligante peptídico, (iii) um segundo domínio de ligação de 4-1 BB solúvel, (iv) um segundo ligante peptídico, e (v) um terceiro domínio de ligação de 4-1 BB solúvel, compreendendo adicionalmente um domínio adicional na extremidade de terminal N e/ou terminal C, e em que o domínio adicional compreende um domínio do fragmento Fc e domínio de dobradiça, e em que a proteína de fusão é uma estrutura dimérica de acordo com a estrutura I-A ou estrutura I-B.
[0097] Em uma modalidade, o agonista de TNFRSF é um agonista de 0X40.
[0098] Em uma modalidade, o agonista de TNFRSF é um agonista de 0X40, e o agonista de 0X40 é selecionado a partir do grupo que consiste em tavolixizumab, GSK3174998, MEDI6469, MEDI6383, MOXR0916, PF04518600, MOM-18455 da Creative Biolabs, e fragmentos, derivados, variantes, biossimilares, e combinações dos mesmos.
[0099] Em uma modalidade, o agonista de TNFRSF é um agonista de
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0X40, e o agonista de 0X40 é uma proteína de fusão agonista de 0X40. [00100] Em uma modalidade, o agonista de TNFRSF é uma proteína de fusão agonista de 0X40, e a uma proteína de fusão agonista de 0X40 compreende (i) um primeiro domínio de ligação de 0X40 solúvel, (ii) um primeiro ligante peptídico, (iii) um segundo domínio de ligação de 0X40 solúvel, (iv) um segundo ligante peptídico, e (v) um terceiro domínio de ligação de 0X40 solúvel, compreendendo adicionalmente um domínio adicional na extremidade de terminal N e/ou terminal C, e em que o domínio adicional compreende um domínio do fragmento Fc e domínio de dobradiça, e em que a proteína de fusão é uma estrutura dimérica de acordo com a estrutura I-A ou estrutura I-B.
[00101] Em uma modalidade, o agonista de TNFRSF é um agonista de CD27.
[00102] Em uma modalidade, o agonista de TNFRSF é um agonista de CD27, e o agonista de CD27 é varlilumab, ou um fragmento, derivado, variante, ou biossimilar dos mesmos.
[00103] Em uma modalidade, o agonista de TNFRSF é um agonista de CD27, e em que o agonista de CD27 é uma proteína de fusão agonista de CD27.
[00104] Em uma modalidade, o agonista de TNFRSF é um agonista de CD27, e a uma proteína de fusão agonista de CD27 compreende (i) um primeiro domínio de ligação de CD27 solúvel, (ii) um primeiro ligante peptídico, (iii) um segundo domínio de ligação de CD27 solúvel, (iv) um segundo ligante peptídico, e (v) um terceiro domínio de ligação de CD27 solúvel, compreendendo adicionalmente um domínio adicional na extremidade de terminal N e/ou terminal C, e em que o domínio adicional compreende um domínio do fragmento Fc e domínio de dobradiça, e em que a proteína de fusão é uma estrutura dimérica de acordo com a estrutura I-A ou estrutura I-B.
Petição 870190062710, de 04/07/2019, pág. 85/590 / 497 [00105] Em uma modalidade, o agonista de TNFRSF é um agonista de GITR.
[00106] Em uma modalidade, o agonista de TNFRSF é um agonista de GITR, e o agonista de GITR é selecionado a partir do grupo que consiste em TRX518, 6C8, 36E5, 3D6, 61G6, 6H6, 61F6, 1D8, 17F10, 35D8, 49A1, 9E5, 31H6, 2155, 698, 706, 827, 1649, 1718, 1D7, 33C9, 33F6, 34G4, 35B10, 41E11, 41G5, 42A11, 44C1, 45A8, 46E11, 48H12, 48H7, 49D9, 49E2, 48A9, 5H7, 7A10, 9H6, e fragmentos, derivados, variantes, biossimilares, e combinações dos mesmos.
[00107] Em uma modalidade, o agonista de TNFRSF é um agonista de GITR, e o agonista de GITR é uma proteína de fusão agonista de GITR .
[00108] Em uma modalidade, o agonista de TNFRSF é uma proteína de fusão agonista de GITR, e a proteína de fusão agonista de GITR compreende (i) um primeiro domínio de ligação de GITR solúvel, (ii) um primeiro ligante peptídico, (iii) um segundo domínio de ligação de GITR solúvel, (iv) um segundo ligante peptídico, e (v) um terceiro domínio de ligação de GITR solúvel, compreendendo adicionalmente um domínio adicional na extremidade de terminal N e/ou terminal C, e em que o domínio adicional compreende um domínio do fragmento Fc e domínio de dobradiça, e em que a proteína de fusão é uma estrutura dimérica de acordo com a estrutura I-A ou estrutura I-B.
[00109] Em uma modalidade, o agonista de TNFRSF é um agonista de HVEM.
[00110] Em uma modalidade, o agonista de TNFRSF é um agonista de HVEM, e o agonista de HVEM é proteína de fusão agonista de HVEM.
[00111] Em uma modalidade, o agonista de TNFRSF é uma proteína de fusão agonista de HVEM, e em que a proteína de fusão agonista de HVEM compreende (i) um primeiro domínio de ligação de HVEM solúvel, (ii) um primeiro ligante peptídico, (iii) um segundo domínio de ligação de HVEM
Petição 870190062710, de 04/07/2019, pág. 86/590 / 497 solúvel, (iv) um segundo ligante peptídico, e (v) um terceiro domínio de ligação de HVEM solúvel, compreendendo adicionalmente um domínio adicional na extremidade de terminal N e/ou terminal C, e em que o domínio adicional compreende um domínio do fragmento Fc e domínio de dobradiça, e em que a proteína de fusão é uma estrutura dimérica de acordo com a estrutura I-A ou estrutura I-B.
[00112] Em uma modalidade, o agonista de TNFRSF é selecionado a partir do grupo que consiste em urelumab, utomilumab, EU-101, tavolixizumab, MOM-18455 da Creative Biolabs, e fragmentos, derivados, variantes, biossimilares, e combinações dos mesmos.
[00113] Em uma modalidade, o primeiro meio de cultura de célula compreende um segundo agonista de TNFRSF.
[00114] Em uma modalidade, o agonista de TNFRSF é adicionado ao primeiro meio de cultura de célula durante a expansão inicial em um intervalo selecionado a partir do grupo que consiste em todo dia, a cada dois a cada dois dias, a cada três, a cada quatro dias, a cada cinco dias, a cada seis dias, a cada sete dias, e a cada duas semanas.
[00115] Em uma modalidade, o agonista de TNFRSF é adicionado ao segundo meio de cultura de célula durante a expansão rápida em um intervalo selecionado a partir do grupo que consiste em todo dia, a cada dois dias, a cada três, a cada quatro dias, a cada cinco dias, a cada seis dias, a cada sete dias, e a cada duas semanas.
[00116] Em uma modalidade, o agonista de TNFRSF é adicionado em uma concentração suficiente para se obter uma concentração no meio de cultura de célula dentre 0,1 pg/mL e 100 pg/mL.
[00117] Em uma modalidade, o agonista de TNFRSF é adicionado em uma concentração suficiente para se obter uma concentração no meio de cultura de célula dentre 20 pg/mL e 40 pg/mL.
[00118] Mais detalhes dos agonistas de TNFRSF são aqui providos.
Petição 870190062710, de 04/07/2019, pág. 87/590 / 497 [00119] Em uma modalidade, IL-2 está presente em uma concentração inicial de cerca de 10 a cerca de 6000 lU/mL no primeiro meio de cultura de célula.
[00120] Em uma modalidade, IL-2 está presente em uma concentração inicial de cerca de 3000 lU/mL no primeiro meio de cultura de célula.
[00121] Em uma modalidade, IL-2 está presente em uma concentração inicial de cerca de 800 a cerca de 1100 lU/mL no primeiro meio de cultura de célula.
[00122] Em uma modalidade, IL-2 está presente em uma concentração inicial de cerca de 1000 lU/mL no primeiro meio de cultura de célula.
[00123] Em uma modalidade, IL-2 está presente em uma concentração inicial de cerca de 10 a cerca de 6000 lU/mL no segundo meio de cultura de célula.
[00124] Em uma modalidade, IL-2 está presente em uma concentração inicial de cerca de 3000 lU/mL no segundo meio de cultura de célula.
[00125] Em uma modalidade, IL-2 está presente em uma concentração inicial de cerca de 800 a cerca de 1100 lU/mL no segundo meio de cultura de célula.
[00126] Em uma modalidade, IL-2 está presente em uma concentração inicial de cerca de 1000 lU/mL no segundo meio de cultura de célula.
[00127] Em uma modalidade, IL-15 está presente no primeiro meio de cultura de célula.
[00128] Em uma modalidade, IL-15 está presente em uma concentração inicial de cerca de 5 ng/mL a cerca de 20 ng/mL no primeiro meio de cultura de célula.
[00129] Em uma modalidade, IL-15 está presente no segundo meio de cultura de célula.
[00130] Em uma modalidade, IL-15 está presente em uma concentração inicial de cerca de 5 ng/mL a cerca de 20 ng/mL no segundo
Petição 870190062710, de 04/07/2019, pág. 88/590 / 497 meio de cultura de célula.
[00131] Em uma modalidade, IL-21 está presente no primeiro meio de cultura de célula.
[00132] Em uma modalidade, IL-21 está presente em uma concentração inicial de cerca de 5 ng/mL a cerca de 20 ng/mL no primeiro meio de cultura de célula.
[00133] Em uma modalidade, IL-21 está presente no segundo meio de cultura de célula.
[00134] Em uma modalidade, IL-21 está presente em uma concentração inicial de cerca de 5 ng/mL a cerca de 20 ng/mL no segundo meio de cultura de célula.
[00135] Em uma modalidade, o anticorpo OKT-3 está presente em uma concentração inicial de cerca de 10 ng/mL a cerca de 60 ng/mL no segundo meio de cultura de célula.
[00136] Em uma modalidade, o anticorpo OKT-3 está presente em uma concentração inicial de cerca de 30 ng/mL no segundo meio de cultura de célula.
[00137] Em uma modalidade, a expansão inicial é realizada usando um recipiente permeável a gás.
[00138] Em uma modalidade, a expansão rápida é realizada usando um recipiente permeável a gás.
[00139] Em uma modalidade, a invenção provê uma população de linfócitos infiltrantes de tumor (TILs) para o uso no tratamento de um câncer em que a população de linfócitos infiltrantes de tumor (TILs) é obtenível por um processo da invenção como aqui descrito.
[00140] Em uma modalidade, a invenção provê uma composição farmacêutica compreendendo uma população de linfócitos infiltrantes de tumor (TILs) para o uso em um método de tratar um câncer em que a população de linfócitos infiltrantes de tumor (TILs) é obtenível por um
Petição 870190062710, de 04/07/2019, pág. 89/590 / 497 processo da invenção como aqui descrito.
[00141] Em uma modalidade, a população de TILs e/ou a composição farmacêutica são para o uso no tratamento de câncer em combinação com um TNFRSF.
[00142] Em uma modalidade, a invenção provê uma combinação de uma população de TILs obtenível por um processo da invenção como aqui descrito e um TNFRSF para o uso no tratamento de câncer.
[00143] Em uma modalidade, a população de TILs e/ou a composição farmacêutica são para o uso no tratamento de câncer em combinação com um agonista de TNFRSF em que o agonista de TNFRSF é para a administração no dia depois da administração da terceira população de TILs ao paciente, e em que o agonista de TNFRSF é administrado intravenosamente em uma dose dentre 0,1 mg/kg e 50 mg/kg a cada quatro semanas durante até oito ciclos.
[00144] Em uma modalidade, a população de TILs e/ou a composição farmacêutica são para o uso no tratamento de câncer em combinação com um agonista de TNFRSF em que o agonista de TNFRSF é para a administração antes da etapa de excisão de um tumor do paciente, e em que o agonista de TNFRSF para a administração intravenosamente em uma dose dentre 0,1 mg/kg e 50 mg/kg a cada quatro semanas durante até oito ciclos.
[00145] Em uma modalidade, a população de TILs e/ou a composição farmacêutica são para o uso no tratamento de câncer em combinação com um regime de linfodepleção não mieloablativa.
[00146] Em uma modalidade, a população de TILs e/ou a composição farmacêutica são para o uso no tratamento de câncer em combinação com um regime de linfodepleção não mieloablativa antes da administração da terceira população de TILs e/ou uma composição farmacêutica compreendendo a terceira população de TILs ao paciente.
[00147] Em uma modalidade, a população de TILs e/ou a composição farmacêutica são para o uso no tratamento de câncer em combinação com um
Petição 870190062710, de 04/07/2019, pág. 90/590 / 497 regime de linfodepleção não mieloablativa antes da administração da terceira população de TILs e/ou uma composição farmacêutica compreendendo a terceira população de TILs ao paciente, em que o regime de linfodepleção não mieloablativa compreende as etapas de administração de ciclofosfamida em uma dose de 60 mg/m2/dia durante dois dias seguida pela administração de fludarabina em uma dose de 25 mg/m2/dia durante cinco dias. Mais detalhes do regime de linfodepleção não mieloablativa são aqui providos, por exemplo, sob o título “Non-Myeloablative Lymphodepletion with Chemotherapy”.
[00148] Em uma modalidade, a população de TILs e/ou a composição farmacêutica são para o uso no tratamento de câncer em combinação com um regime de IL-2.
[00149] Em uma modalidade, o regime de IL-2 é um regime descendente de IL-2.
[00150] Em uma modalidade, a população de TILs e/ou a composição farmacêutica são para o uso no tratamento de câncer em combinação com um regime descendente de IL-2 começando no dia depois da administração da terceira população de TILs e/ou uma composição farmacêutica compreendendo a terceira população de TILs ao paciente, em que o regime descendente de IL-2 compreende aldesleucina administrada intravenosamente em uma dose de 18.000.000 IU/m2no dia 1, 9.000.000 IU/m2no dia 2, e 4.500.000 IU/m2 nos dias 3 e 4.
[00151] Em uma modalidade, a população de TILs e/ou a composição farmacêutica são para o uso no tratamento de câncer em combinação com IL2 peguilada.
[00152] Em uma modalidade, a população de TILs e/ou a composição farmacêutica são para o uso em um método de tratar câncer em combinação com IL-2 peguilada administrada depois da administração da terceira população de TILs e/ou uma composição farmacêutica compreendendo a terceira população de TILs ao paciente em uma dose de 0,10 mg/dia a 50
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[00153] Em uma modalidade, a população de TILs e/ou a composição farmacêutica são para o uso em um método de tratar câncer em combinação com um regime de alta dose de IL-2.
[00154] Em uma modalidade, a população de TILs e/ou a composição farmacêutica são para o uso em um método de tratar câncer em combinação com um regime de alta dose de IL-2 começando no dia depois da administração da terceira população de TILs e/ou uma composição farmacêutica compreendendo a terceira população de TILs ao paciente.
[00155] Em uma modalidade, a população de TILs e/ou a composição farmacêutica são para o uso no tratamento de câncer em combinação com um regime de alta dose de IL-2 começando no dia depois da administração da terceira população de TILs e/ou uma composição farmacêutica compreendendo a terceira população de TILs ao paciente, em que o regime de alta dose de IL-2 compreende 600.000 ou 720.000 lU/kg de aldesleucina, ou um biossimilar ou variante dos mesmos, administrados como uma infusão intravenosa de bolo de 15 minutos a cada oito horas até a tolerância.
[00156] Em uma modalidade, a população de TILs e/ou a composição farmacêutica são para o uso no tratamento de câncer, em que o câncer é selecionado a partir do grupo que consiste em melanoma, câncer ovariano, câncer cervical, câncer pulmonar, câncer vesical, câncer mamário, câncer da cabeça e pescoço, carcinoma de célula renal, leucemia mieloide aguda, carcinoma colorretal, colangiocarcinoma, e sarcoma.
[00157] Em uma modalidade, a população de TILs e/ou a composição farmacêutica são para o uso no tratamento de câncer, em que o câncer é selecionado a partir do grupo que consiste em câncer pulmonar de célula não pequena (NSCLC), câncer mamário triplo negativo, melanoma refratário duplo, e melanoma uveal (ocular).
[00158] Em uma modalidade, a população de TILs e/ou a composição
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80/497 farmacêutica são para o uso no tratamento de câncer em combinação com um inibidor de PD-1 ou inibidor de PD-L1.
[00159] Em uma modalidade, a população de TILs e/ou a composição farmacêutica são para o uso no tratamento de câncer em combinação com um inibidor de PD-1 ou inibidor de PD-L1, em que o inibidor de PD-1 ou inibidor de PD-L1 são selecionados do grupo que consiste em nivolumab, pembrolizumab, durvalumab, atezolizumab, avelumab, e fragmentos, derivados, variantes, biossimilares, e combinações dos mesmos.
[00160] Em uma modalidade, a população de TILs e/ou a composição farmacêutica são para o uso no tratamento de câncer em combinação com um inibidor de PD-1 ou inibidor de PD-L1, em que o inibidor de PD-1 ou inibidor de PD-L1 é para a administração antes de excisar o tumor do paciente.
[00161] Em uma modalidade, a população de TILs e/ou a composição farmacêutica são para o uso no tratamento de câncer em combinação com um inibidor de PD-1 ou inibidor de PD-L1 antes de excisar o tumor do paciente, em que o inibidor de PD-1 ou inibidor de PD-L1 são selecionados do grupo que consiste em nivolumab, pembrolizumab, durvalumab, atezolizumab, avelumab, e fragmentos, derivados, variantes, biossimilares, e combinações dos mesmos.
[00162] Em uma modalidade, a população de TILs e/ou a composição farmacêutica são para o uso no método de tratar câncer em combinação com um inibidor de PD-1 ou inibidor de PD-L1.
[00163] Em uma modalidade, a população de TILs e/ou a composição farmacêutica são para o uso no tratamento de câncer em combinação com um inibidor de PD-1 ou inibidor de PD-L1, em que o inibidor de PD-1 ou inibidor de PD-L1 são selecionados do grupo que consiste em nivolumab, pembrolizumab, durvalumab, atezolizumab, avelumab, e fragmentos, derivados, variantes, biossimilares, e combinações dos mesmos.
[00164] Em uma modalidade, a população de TILs e/ou a composição
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81/497 farmacêutica são para o uso em um método de tratar câncer em combinação com um inibidor de PD-1 ou inibidor de PD-LI depois excisar o tumor do paciente.
[00165] Em uma modalidade, a população de TILs e/ou a composição farmacêutica são para o uso no tratamento de câncer em combinação com um inibidor de PD-1 ou inibidor de PD-LI depois de excisar o tumor do paciente, em que o inibidor de PD-1 ou inibidor de PD-LI são selecionados do grupo que consiste em nivolumab, pembrolizumab, durvalumab, atezolizumab, avelumab, e fragmentos, derivados, variantes, biossimilares, e combinações dos mesmos.
[00166] Em uma modalidade, a população de TILs e/ou a composição farmacêutica são para o uso no tratamento de câncer em combinação com um inibidor de PD-1 ou inibidor de PD-LI, em que os inibidores de PD-1 ou de PD-LI são para a administração depois de administrar a terceira população de TILs e/ou uma composição farmacêutica compreendendo a terceira população de TILs ao paciente.
[00167] Em uma modalidade, a população de TILs e/ou a composição farmacêutica são para o uso no tratamento de câncer em combinação com um inibidor de PD-1 ou inibidor de PD-LI que é para a administração depois de administrar a terceira população de TILs ao paciente, em que o inibidor de PD-1 ou inibidor de PD-LI são selecionados do grupo que consiste em nivolumab, pembrolizumab, durvalumab, atezolizumab, avelumab, e fragmentos, derivados, variantes, biossimilares, e combinações dos mesmos. Mais detalhes do inibidor de PD-1 e do inibidor de PD-LI são aqui descritos por exemplo sob o título “Combinations with PD-1 e PD-LI Inhibitors”. Em algumas modalidades, a população de TILs e/ ou a composição farmacêutica compreendendo uma população de TILs compreendem ainda um ou mais traços como aqui descritos, por exemplo, sob os títulos “Pharmaceutical Compositions, Dosages, and Dosing Regimens for TILs” e “Pharmaceutical
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Compositions, Dosages, and Dosing Regimens for TNFRSF Agonists”.
BREVE DESCRIÇÃO DOS DESENHOS [00168] O sumário precedente, assim como a seguinte descrição detalhada da invenção, serão melhor entendidos quando lidos em conjunção com os desenhos anexos.
[00169] A FIG. 1 ilustra uma expansão e processo de tratamento de TIL. Os agonistas de TNFRSF da presente divulgação podem ser usados tanto no estágio pré-REP (metade de topo da figura) ou estágio de REP (metade de fundo da figura) e podem ser adicionados quando IL-2 é adicionado a cada cultura de célula. A Etapa 1 refere-se à adição de 4 fragmentos de tumor dentro de 10 frascos G-Rex 10. Na etapa 2, aproximadamente 40 x 106 TILs ou maior são obtidos. Na etapa 3, uma cisão ocorre dentro de 36 frascos GRex 100 para REP. Os TILs são colhidos pela centrifugação na etapa 4. O produto de TIL fresco é obtido na etapa 5 depois de um tempo de processo total de aproximadamente 43 dias, ponto no qual os TILs podem ser infundido dentro de um paciente.
[00170] A FIG. 2 ilustra um protocolo de tratamento para o uso com TILs expandidos com agonistas de TNFRSF da presente divulgação. A cirurgia (e excisão de tumor) ocorre no início, e a quimio linfodepleção refere-se à linfodepleção não mieloablativa com quimioterapia como aqui descrito em outro lugar. Os agonistas de TNFRSF da presente divulgação também podem ser usados durante terapia como aqui descrito depois da administração de TILs.
[00171] A FIG. 3 ilustra os resultados de um ensaio para determinar se o hibridoma de 4-lBB-Fc 4B5 ativa a sinalização de 4-1BB nas células Jurkat expressando NF-kB usando um repórter de proteína fluorescente verde (GFP) em uma maneira dependente da dose. “Secundário” refere-se à ativação de um anticorpo secundário.
[00172] A FIG. 4 ilustra os resultados de um ensaio para determinar se
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83/497 o hibridoma de 4-lBB-Fc 1C4 ativa a sinalização de 4-1BB nas células Jurkat expressando NF-kB usando um repórter de GFP em uma maneira dependente da dose. “Secundário” refere-se à ativação de um anticorpo secundário.
[00173] A FIG. 5 ilustra os resultados de um ensaio para determinar se o hibridoma de 4-lBB-Fc 9B4 ativa a sinalização de 4-1BB nas células Jurkat expressando NF-kB usando um repórter de GFP em uma maneira dependente da dose. “Secundário” refere-se à ativação de um anticorpo secundário.
[00174] A FIG. 6 ilustra os resultados de um ensaio para determinar se o hibridoma de 4-lBB-Fc 1D7 ativa a sinalização de 4-1BB nas células Jurkat expressando NF-kB usando um repórter de GFP em uma maneira dependente da dose. “Secundário” refere-se à ativação de um anticorpo secundário.
[00175] A FIG. 7 ilustra os resultados de um ensaio para determinar se o hibridoma de 4-lBB-Fc 1D10 ativa a sinalização de 4-1BB nas células Jurkat expressando NF-kB usando um repórter de GFP em uma maneira dependente da dose. “Secundário” refere-se à ativação de um anticorpo secundário.
[00176] A FIG. 8 ilustra os resultados de um ensaio para determinar se o hibridoma de 4-lBB-Fc 3C2 ativa a sinalização de 4-1BB nas células Jurkat expressando NF-kB usando um repórter de GFP em uma maneira dependente da dose. “Secundário” refere-se à ativação de um anticorpo secundário.
[00177] A FIG. 9 ilustra os resultados de um ensaio para determinar se o hibridoma de 4-lBB-Fc 10D12 ativa a sinalização de 4-1BB nas células Jurkat expressando NF-kB usando um repórter de GFP em uma maneira dependente da dose. “Secundário” refere-se à ativação de um anticorpo secundário.
[00178] A FIG. 10 ilustra os resultados de um ensaio para determinar se o hibridoma de 4-lBB-Fc 8D2 ativa a sinalização de 4-1BB nas células Jurkat expressando NF-kB usando um repórter de GFP em uma maneira dependente da dose. “Secundário” refere-se à ativação de um anticorpo
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[00179] A FIG. 11 ilustra os resultados de um ensaio para determinar se o hibridoma de 4-lBB-Fc 4G6 ativa a sinalização de 4-1BB nas células Jurkat expressando NF-kB usando um repórter de GFP em uma maneira dependente da dose. “Secundário” refere-se à ativação de um anticorpo secundário.
[00180] A FIG. 12 ilustra os resultados de um ensaio para determinar se o hibridoma de 4-lBB-Fc 8E3 ativa a sinalização de 4-1BB nas células Jurkat expressando NF-kB usando um repórter de GFP em uma maneira dependente da dose. “Secundário” refere-se à ativação de um anticorpo secundário.
[00181] A FIG. 13 ilustra um protocolo de expansão e fabricação de TIL exemplar (Processo 2A).
[00182] A FIG. 14 ilustra etapas de método exemplares empreendidas no Processo 2A.
[00183] A FIG. 15 ilustra um protocolo de expansão de TIL exemplar.
[00184] A FIG. 16 ilustra a afinidade de ligação para os agonistas Creative Biolabs (CB) e BPS Biosciences (BPS) de anticorpos 4-IBB como avaliada pela porcentagem de células 4-1BB+ pela citometria de fluxo. O agonista CB de 4-1BB exibiu a afinidade de ligação mais alta.
[00185] A FIG. 17 ilustra a afinidade de ligação para os agonistas Creative Biolabs (CB) e BPS Biosciences (BPS) de anticorpos 4-IBB como avaliado pela intensidade de fluorescência média (MFI). O agonista CB de 41BB exibiu a afinidade de ligação mais alta.
[00186] A FIG. 18 ilustra os resultados de uma avaliação da ativação do caminho de NF-κΒ de anticorpos agonísticos anti-4-ΙΒΒ.
[00187] A FIG. 19 ilustra afinidade de ligação for Creative Biolabs agonista do anticorpo de 0X40 como avaliado pela porcentagem de células OX40+ pela citometria de fluxo.
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85/497 [00188] A FIG. 20 ilustra afinidade de ligação para os anticorpos agonistas de 0X40 Creative Biolabs como avaliado pela intensidade de fluorescência média (MFI).
[00189] A FIG. 21 ilustra afinidade de ligação comparável entre anticorpo agonista anti-OX40 Creative Biolabs (nas cinco concentrações mostradas) e um agonista anti-OX40 comercial (clone Ber-ACT35). a primeira letra de cada designação de tumor indica histologia: C = cervical; H = cabeça e pescoço (carcinoma de célula escamosa da cabeça e pescoço); L = pulmão; e M = melanoma.
[00190] A FIG. 22 ilustra os resultados de uma avaliação de ativação do caminho de NF-κΒ de anticorpo agonista anti-OX40. As células repórter 0X40 foram tratadas com anti-OX40 sozinho ou controle de isótipo nas concentrações de 1, 2, 4, 8, e 16 pg/mL com ou sem células alimentadoras PBMC durante 24 horas. As células foram lisadas usando reagente de Luciferase de Uma Etapa, e a atividade de luciferase foi medida pelo luminômetro.
[00191] A FIG. 23 ilustra o projeto experimental para 4-1BB e experimentos de agonista de 0X40 durante pré-REP.
[00192] A FIG. 24 ilustra as histologias de tumor usadas no projeto experimental da FIG. 23.
[00193] A FIG. 25 ilustra a estratégia de análise de dados usada para avaliar o impacto de 4-1 BB e agonistas anti-OX40 usados durante a pré-REP sobre o desempenho e propriedades do TIL.
[00194] A FIG. 26 ilustra resultados da contagem de célula total para a expansão de célula usando o agonista CB de 4-1BB (N = 3). NT = não testado (controle). O valor p foi > 0,99.
[00195] A FIG. 27 ilustra resultados da contagem de célula total para a expansão de célula usando o agonista CB de 0X40 (N = 5). NT = não testado (controle). O valor p foi 0,06.
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86/497 [00196] A FIG. 28 ilustra resultados da contagem de célula total para a expansão de célula usando o agonista CB e o agonista OX-40 de 4-IBB (N = 2). NT = não testado (controle).
[00197] A FIG. 29 ilustra resultados da contagem de célula CD8+ total para a expansão de célula usando o agonista CB de 4-1BB (N = 3). O valor p foi 0,5.
[00198] A FIG. 30 ilustra resultados da contagem de célula CD8+ total para a expansão de célula usando o agonista CB de 0X40 (N = 5). O valor p foi 0,03.
[00199] A FIG. 31 ilustra resultados da contagem de célula CD8+ total para a expansão de célula usando o agonista CB e agonista OX-40 de 4-IBB (N = 2). NT = não testado (controle).
[00200] A FIG. 32 ilustra resultados da razão da contagem de célula CD8+/CD4+ total para a expansão de célula usando o agonista CB de 4-IBB (N = 3). O valor p foi 0,2.
[00201] A FIG. 33 ilustra resultados da razão da contagem de célula CD8+/CD4+ total para a expansão de célula usando o agonista CB de 0X40 (N = 5). O valor p foi 0,12.
[00202] A FIG. 34 ilustra resultados da razão da contagem de célula CD8+/CD4+ total para a expansão de célula usando o agonista CB e agonista OX-40 de 4-1BB (N = 2). NT = não testado (controle).
[00203] A FIG. 35 ilustra o esquema experimental para a propagação de REP de TILs pré-REP expandidos na presença de 4-1BB ou agonistas de 0X40.
[00204] A FIG. 36 ilustra a expansão multiplicativa de TILs expandidos no REP de TILs pré-REP expandidos na presença do agonista CB de 4-1BB versus TILs não tratados no pré-REP (NT).
[00205] A FIG. 37 ilustra a expansão multiplicativa de TILs expandidos no REP de TILs pré-REP expandidos na presença do agonista CB
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[00206] A FIG. 38 ilustra a expansão multiplicativa de TILs expandidos no REP de TILs pré-REP expandidos na presença do agonista CB de 4-1 BB e do agonista CB de 0X40 versus TILs não tratados no pré-REP (NT).
[00207] A FIG. 39 ilustra as histologias de vinte e uma linhagens de TIL usadas para a avaliação do agonista CB de 0X40 durante a fase REP.
[00208] A FIG. 40 ilustra o esquema experimental para a avaliação do agonista CB de 0X40 durante a fase REP.
[00209] A FIG. 41 ilustra que a presença de um anticorpo agonístico de 0X40 preferencialmente expande TIL CD8+ durante o REP (mostrado como uma porcentagem de células CD3+CD4+).
[00210] A FIG. 42 ilustra que a presença de um anticorpo agonístico de 0X40 preferencialmente expande TIL CD8+ durante o REP (mostrado como uma porcentagem de células CD3+CD8+).
[00211] A FIG. 43 ilustra que nas linhagens de TIL não respondendor, a infra-regulagem de 0X40 não foi observada no subconjunto de CD4+ a seguir do tratamento anti-OX40.
[00212] A FIG. 44 ilustra detalhes experimentais para a titulação de dose do agonista CB de 0X40 em linhagens de TIL não respondendor e respondendor.
[00213] A FIG. 45 ilustra os resultados da titulação de dose do agonista CB de 0X40 nas linhagens de TIL respondendor.
[00214] A FIG. 46 ilustra os resultados da titulação de dose do agonista CB de 0X40 nas linhagens de TIL não respondendor.
[00215] A FIG. 47 ilustra perfis do repertório de TCRvb comparáveis para L4005 respondendor.
[00216] A FIG. 48 ilustra perfis do repertório de TCRvb comparáveis para H3005 respondendor.
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88/497 [00217] A FIG. 49 ilustra perfis do repertório de TCRvb comparáveis para Ml022 respondendor.
BREVE DESCRIÇÃO DA LISTAGEM DE SEQUÊNCIAS [00218] A SEQ ID NO: 1 é a sequência de aminoácido da cadeia pesada de muromonabe.
[00219] A SEQ ID NO: 2 é a sequência de aminoácido da cadeia leve de muromonabe.
[00220] A SEQ ID NO: 3 é a sequência de aminoácido de uma proteína IL-2 humana recombinante.
[00221] A SEQ ID NO: 4 é a sequência de aminoácido de aldesleucina.
[00222] A SEQ ID NO: 5 é a sequência de aminoácido de uma proteína
IL-4 humana recombinante.
[00223] A SEQ ID NO: 6 é a sequência de aminoácido de uma proteína IL-7 humana recombinante.
[00224] A SEQ ID NO: 7 é a sequência de aminoácido de uma proteína IL-15 humana recombinante.
[00225] A SEQ ID NO: 8 é a sequência de aminoácido de uma proteína IL-21 humana recombinante.
[00226] A SEQ ID NO: 9 é a sequência de aminoácido de 4-1BB humano.
[00227] A SEQ ID NO: 10 é a sequência de aminoácido de 4-1BB de murino.
[00228] A SEQ ID NO: 11 é a cadeia pesada para o anticorpo monoclonal agonista de 4-IBB utomilumab (PF-05082566).
[00229] A SEQ ID NO: 12 é a cadeia leve para o anticorpo monoclonal agonista de 4-IBB utomilumab (PF-05082566).
[00230] A SEQ ID NO: 13 é a região variável da cadeia pesada (Vh) para o anticorpo monoclonal agonista de 4-IBB utomilumab (PF-05082566).
[00231] A SEQ ID NO: 14 é a região variável da cadeia leve (Vl) para
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89/497 o anticorpo monoclonal agonista de 4-IBB utomilumab (PF-05082566). [00232] A SEQ ID NO: 15 é a CDR1 da cadeia pesada para o anticorpo monoclonal agonista de 4-IBB utomilumab (PF-05082566).
[00233] A SEQ ID NO: 16 é a CDR2 da cadeia pesada para o anticorpo monoclonal agonista de 4-IBB utomilumab (PF-05082566).
[00234] A SEQ ID NO: 17 é a CDR3 da cadeia pesada para o anticorpo monoclonal agonista de 4-IBB utomilumab (PF-05082566).
[00235] A SEQ ID NO: 18 é a CDR1 da cadeia leve para o anticorpo monoclonal agonista de 4-IBB utomilumab (PF-05082566).
[00236] A SEQ ID NO: 19 é a CDR2 da cadeia leve para o anticorpo monoclonal agonista de 4-IBB utomilumab (PF-05082566).
[00237] A SEQ ID NO: 20 é a CDR3 da cadeia leve para o anticorpo monoclonal agonista de 4-IBB utomilumab (PF-05082566).
[00238] A SEQ ID NO: 21 é a cadeia pesada para o anticorpo monoclonal agonista de 4-IBB urelumab (BMS-663513).
[00239] A SEQ ID NO: 22 é a cadeia leve para o anticorpo monoclonal agonista de 4-IBB urelumab (BMS-663513).
[00240] A SEQ ID NO: 23 é a região variável da cadeia pesada (Vh) para o anticorpo monoclonal agonista de 4-1BB urelumab (BMS-663513).
[00241] A SEQ ID NO: 24 é a região variável da cadeia leve (Vl) para o anticorpo monoclonal agonista de 4-IBB urelumab (BMS-663513).
[00242] A SEQ ID NO: 25 é a CDR1 da cadeia pesada para o anticorpo monoclonal agonista de 4-IBB urelumab (BMS-663513).
[00243] A SEQ ID NO: 26 é a CDR2 da cadeia pesada para o anticorpo monoclonal agonista de 4-IBB urelumab (BMS-663513).
[00244] A SEQ ID NO: 27 é a CDR3 da cadeia pesada para o anticorpo monoclonal agonista de 4-IBB urelumab (BMS-663513).
[00245] A SEQ ID NO: 28 é a CDR1 da cadeia leve para o anticorpo monoclonal agonista de 4-IBB urelumab (BMS-663513).
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90/497 [00246] A SEQ ID NO: 29 é a CDR2 da cadeia leve para o anticorpo monoclonal agonista de 4-IBB urelumab (BMS-663513).
[00247] A SEQ ID NO: 30 é a CDR3 da cadeia leve para o anticorpo monoclonal agonista de 4-IBB urelumab (BMS-663513).
[00248] A SEQ ID NO: 31 é um domínio Fc para uma proteína de fusão agonista de TNFRSF.
[00249] A SEQ ID NO: 32 é um ligante para uma proteína de fusão agonista de TNFRSF.
[00250] A SEQ ID NO: 33 é um ligante para uma proteína de fusão agonista de TNFRSF.
[00251] A SEQ ID NO: 34 é um ligante para uma proteína de fusão agonista de TNFRSF.
[00252] A SEQ ID NO: 35 é um ligante para uma proteína de fusão agonista de TNFRSF.
[00253] A SEQ ID NO: 36 é um ligante para uma proteína de fusão agonista de TNFRSF.
[00254] A SEQ ID NO: 37 é um ligante para uma proteína de fusão agonista de TNFRSF.
[00255] A SEQ ID NO: 38 é um ligante para uma proteína de fusão agonista de TNFRSF.
[00256] A SEQ ID NO: 39 é um ligante para uma proteína de fusão agonista de TNFRSF.
[00257] A SEQ ID NO: 40 é um ligante para uma proteína de fusão agonista de TNFRSF.
[00258] A SEQ ID NO: 41 é um ligante para uma proteína de fusão agonista de TNFRSF.
[00259] A SEQ ID NO: 42 é um domínio Fc para uma proteína de fusão agonista de TNFRSF.
[00260] A SEQ ID NO: 43 é um ligante para uma proteína de fusão
Petição 870190062710, de 04/07/2019, pág. 103/590
91/497 agonista de TNFRSF.
[00261] A SEQ ID NO: 44 é um ligante para uma proteína de fusão agonista de TNFRSF.
[00262] A SEQ ID NO: 45 é um ligante para uma proteína de fusão agonista de TNFRSF.
[00263] A SEQ ID NO: 46 é uma sequência de aminoácido ligante de 4-1BB (4-1BBL).
[00264] A SEQ ID NO: 47 é uma porção solúvel de polipeptídeo de 41BBL.
[00265] A SEQ ID NO: 48 é uma região variável da cadeia pesada (Vh) para o anticorpo agonista de 4-IBB 4B4 a 1 a 1 versão 1.
[00266] A SEQ ID NO: 49 é uma região variável da cadeia leve (Vl) para o anticorpo agonista de 4-IBB 4B4 a 1 a 1 versão 1.
[00267] A SEQ ID NO: 50 é uma região variável da cadeia pesada (Vh) para o anticorpo agonista de 4-IBB 4B4 a 1 a 1 versão 2.
[00268] A SEQ ID NO: 51 é uma região variável da cadeia leve (Vl) para o anticorpo agonista de 4-IBB 4B4 a 1 a 1 versão 2.
[00269] A SEQ ID NO: 52 é uma região variável da cadeia pesada (Vh) para o anticorpo agonista de 4-IBB H39E3-2.
[00270] A SEQ ID NO: 53 é uma região variável da cadeia leve (Vl) para o anticorpo agonista de 4-IBB H39E3-2.
[00271] A SEQ ID NO: 54 é a sequência de aminoácido de 0X40 humano.
[00272] A SEQ ID NO: 55 é a sequência de aminoácido de 0X40 de murino.
[00273] A SEQ ID NO: 56 é a cadeia pesada para o anticorpo monoclonal agonista de 0X40 tavolixizumab (MEDI-0562).
[00274] A SEQ ID NO: 57 é a cadeia leve para o anticorpo monoclonal agonista de 0X40 tavolixizumab (MEDI-0562).
Petição 870190062710, de 04/07/2019, pág. 104/590 / 497 [00275] A SEQ ID NO: 58 é a região variável da cadeia pesada (Vh) para o anticorpo monoclonal agonista de 0X40 tavolixizumab (MEDI-0562).
[00276] A SEQ ID NO: 59 é a região variável da cadeia leve (Vl) para o anticorpo monoclonal agonista de 0X40 tavolixizumab (MEDI-0562).
[00277] A SEQ ID NO: 60 é a CDR1 da cadeia pesada para o anticorpo monoclonal agonista de 0X40 tavolixizumab (MEDI-0562).
[00278] A SEQ ID NO: 61 é a CDR2 da cadeia pesada para o anticorpo monoclonal agonista de 0X40 tavolixizumab (MEDI-0562).
[00279] A SEQ ID NO: 62 é a CDR3 da cadeia pesada para o anticorpo monoclonal agonista de 0X40 tavolixizumab (MEDI-0562).
[00280] A SEQ ID NO: 63 é a CDR1 da cadeia leve para o anticorpo monoclonal agonista de 0X40 tavolixizumab (MEDI-0562).
[00281] A SEQ ID NO: 64 é a CDR2 da cadeia leve para o anticorpo monoclonal agonista de 0X40 tavolixizumab (MEDI-0562).
[00282] A SEQ ID NO: 65 é a CDR3 da cadeia leve para o anticorpo monoclonal agonista de 0X40 tavolixizumab (MEDI-0562).
[00283] A SEQ ID NO: 66 é a cadeia pesada para o anticorpo monoclonal agonista de 0X40 11D4.
[00284] A SEQ ID NO: 67 é a cadeia leve para o anticorpo monoclonal agonista de 0X40 11D4.
[00285] A SEQ ID NO: 68 é a região variável da cadeia pesada (Vh) para o anticorpo monoclonal agonista de 0X40 11D4.
[00286] A SEQ ID NO: 69 é a região variável da cadeia leve (Vl) para o anticorpo monoclonal agonista de 0X40 11D4.
[00287] A SEQ ID NO: 70 é a CDR1 da cadeia pesada para o anticorpo monoclonal agonista de 0X40 11D4.
[00288] A SEQ ID NO: 71 é a CDR2 da cadeia pesada para o anticorpo monoclonal agonista de 0X40 11D4.
[00289] A SEQ ID NO: 72 é a CDR3 da cadeia pesada para o anticorpo
Petição 870190062710, de 04/07/2019, pág. 105/590
93/497 monoclonal agonista de 0X40 11D4.
[00290] A SEQ ID NO: 73 é a CDR1 da cadeia leve para o anticorpo monoclonal agonista de 0X40 11D4.
[00291] A SEQ ID NO: 74 é a CDR2 da cadeia leve para o anticorpo monoclonal agonista de 0X40 11D4.
[00292] A SEQ ID NO: 75 é a CDR3 da cadeia leve para o anticorpo monoclonal agonista de 0X40 11D4.
[00293] A SEQ ID NO: 76 é a cadeia pesada para o anticorpo monoclonal agonista de 0X40 18D8.
[00294] A SEQ ID NO: 77 é a cadeia leve para o anticorpo monoclonal agonista de 0X40 18D8.
[00295] A SEQ ID NO: 78 é a região variável da cadeia pesada (Vh) para o anticorpo monoclonal agonista de 0X40 18D8.
[00296] A SEQ ID NO: 79 é a região variável da cadeia leve (Vl) para o anticorpo monoclonal agonista de 0X40 18D8.
[00297] A SEQ ID NO: 80 é a CDR1 da cadeia pesada para o anticorpo monoclonal agonista de 0X40 18D8.
[00298] A SEQ ID NO: 81 é a CDR2 da cadeia pesada para o anticorpo monoclonal agonista de 0X40 18D8.
[00299] A SEQ ID NO: 82 é a CDR3 da cadeia pesada para o anticorpo monoclonal agonista de 0X40 18D8.
[00300] A SEQ ID NO: 83 é a CDR1 da cadeia leve para o anticorpo monoclonal agonista de 0X40 18D8.
[00301] A SEQ ID NO: 84 é a CDR2 da cadeia leve para o anticorpo monoclonal agonista de 0X40 18D8.
[00302] A SEQ ID NO: 85 é a CDR3 da cadeia leve para o anticorpo monoclonal agonista de 0X40 18D8.
[00303] A SEQ ID NO: 86 é a região variável da cadeia pesada (Vh) para o anticorpo monoclonal agonista de 0X40 Hui 19-122.
Petição 870190062710, de 04/07/2019, pág. 106/590 / 497 [00304] A SEQ ID NO: 87 é a região variável da cadeia leve (Vl) para o anticorpo monoclonal agonista de 0X40 Hui 19-122.
[00305] A SEQ ID NO: 88 é a CDR1 da cadeia pesada para o anticorpo monoclonal agonista de 0X40 Hui 19-122.
[00306] A SEQ ID NO: 89 é a CDR2 da cadeia pesada para o anticorpo monoclonal agonista de 0X40 Hui 19-122.
[00307] A SEQ ID NO: 90 é a CDR3 da cadeia pesada para o anticorpo monoclonal agonista de 0X40 Hui 19-122.
[00308] A SEQ ID NO: 91 é a CDR1 da cadeia leve para o anticorpo monoclonal agonista de 0X40 Hui 19-122.
[00309] A SEQ ID NO: 92 é a CDR2 da cadeia leve para o anticorpo monoclonal agonista de 0X40 Hui 19-122.
[00310] A SEQ ID NO: 93 é a CDR3 da cadeia leve para o anticorpo monoclonal agonista de 0X40 Hui 19-122.
[00311] A SEQ ID NO: 94 é a região variável da cadeia pesada (Vh) para o anticorpo monoclonal agonista de 0X40 Hu 106-222.
[00312] A SEQ ID NO: 95 é a região variável da cadeia leve (Vl) para o anticorpo monoclonal agonista de 0X40 Hu 106-222.
[00313] A SEQ ID NO: 96 é a CDR1 da cadeia pesada para o anticorpo monoclonal agonista de 0X40 Hu 106-222.
[00314] A SEQ ID NO: 97 é a CDR2 da cadeia pesada para o anticorpo monoclonal agonista de 0X40 Hu 106-222.
[00315] A SEQ ID NO: 98 é a CDR3 da cadeia pesada para o anticorpo monoclonal agonista de 0X40 Hu 106-222.
[00316] A SEQ ID NO: 99 é a CDR1 da cadeia leve para o anticorpo monoclonal agonista de 0X40 Hu 106-222.
[00317] A SEQ ID NO: 100 é a CDR2 da cadeia leve para o anticorpo monoclonal agonista de 0X40 Hu 106-222.
[00318] A SEQ ID NO: 101 é a CDR3 da cadeia leve para o anticorpo
Petição 870190062710, de 04/07/2019, pág. 107/590
95/497 monoclonal agonista de 0X40 Hu 106-222.
[00319] A SEQ ID NO: 102 é uma sequência de aminoácido do ligante de 0X40 (OX40L).
[00320] A SEQ ID NO: 103 é uma porção solúvel do polipeptídeo de OX40L.
[00321] A SEQ ID NO: 104 é uma porção solúvel alternativa do polipeptídeo de OX40L.
[00322] A SEQ ID NO: 105 é a região variável da cadeia pesada (Vh) para o anticorpo monoclonal agonista de 0X40 008.
[00323] A SEQ ID NO: 106 é a região variável da cadeia leve (Vl) para o anticorpo monoclonal agonista de 0X40 008.
[00324] A SEQ ID NO: 107 é a região variável da cadeia pesada (Vh) para o anticorpo monoclonal agonista de 0X40 011.
[00325] A SEQ ID NO: 108 é a região variável da cadeia leve (Vl) para o anticorpo monoclonal agonista de 0X40 011.
[00326] A SEQ ID NO: 109 é a região variável da cadeia pesada (Vh) para o anticorpo monoclonal agonista de 0X40 021.
[00327] A SEQ ID NO: 110 é a região variável da cadeia leve (Vl) para o anticorpo monoclonal agonista de 0X40 021.
[00328] A SEQ ID NO: 111 é a região variável da cadeia pesada (Vh) para o anticorpo monoclonal agonista de 0X40 023.
[00329] A SEQ ID NO: 112 é a região variável da cadeia leve (Vl) para o anticorpo monoclonal agonista de 0X40 023.
[00330] A SEQ ID NO: 113 é a região variável da cadeia pesada (Vh) para um anticorpo monoclonal agonista de 0X40.
[00331] A SEQ ID NO: 114 é a região variável da cadeia leve (Vl) para um anticorpo monoclonal agonista de 0X40.
[00332] A SEQ ID NO: 115 é a região variável da cadeia pesada (Vh) para um anticorpo monoclonal agonista de 0X40.
Petição 870190062710, de 04/07/2019, pág. 108/590
96/497 [00333] A SEQ ID NO: 116 é a região variável da cadeia leve (Vl) para um anticorpo monoclonal agonista de 0X40.
[00334] A SEQ ID NO: 117 é a região variável da cadeia pesada (Vh) para um anticorpo monoclonal agonista de 0X40 humanizado.
[00335] A SEQ ID NO: 118 é a região variável da cadeia pesada (Vh) para um anticorpo monoclonal agonista de 0X40 humanizado.
[00336] A SEQ ID NO: 119 é a região variável da cadeia leve (Vl) para um anticorpo monoclonal agonista de 0X40 humanizado.
[00337] A SEQ ID NO: 120 é a região variável da cadeia leve (Vl) para um anticorpo monoclonal agonista de 0X40 humanizado.
[00338] A SEQ ID NO: 121 é a região variável da cadeia pesada (Vh) para um anticorpo monoclonal agonista de 0X40 humanizado.
[00339] A SEQ ID NO: 122 é a região variável da cadeia pesada (Vh) para um anticorpo monoclonal agonista de 0X40 humanizado.
[00340] A SEQ ID NO: 123 é a região variável da cadeia leve (Vl) para um anticorpo monoclonal agonista de 0X40 humanizado.
[00341] A SEQ ID NO: 124 é a região variável da cadeia leve (Vl) para um anticorpo monoclonal agonista de 0X40 humanizado.
[00342] A SEQ ID NO: 125 é a região variável da cadeia pesada (Vh) para um anticorpo monoclonal agonista de 0X40.
[00343] A SEQ ID NO: 126 é a região variável da cadeia leve (Vl) para um anticorpo monoclonal agonista de 0X40.
[00344] A SEQ ID NO: 127 é a sequência de aminoácido da CD27 humana.
[00345] A SEQ ID NO: 128 é a sequência de aminoácido da CD27 de macaco.
[00346] A SEQ ID NO: 129 é a cadeia pesada para o anticorpo monoclonal agonista de CD27 varlilumab (CDX-1127).
[00347] A SEQ ID NO: 130 é a cadeia leve para o anticorpo
Petição 870190062710, de 04/07/2019, pág. 109/590 / 497 monoclonal agonista de CD27 varlilumab (CDX-1127).
[00348] A SEQ ID NO: 131 é a região variável da cadeia pesada (Vh) para o anticorpo monoclonal agonista de CD27 varlilumab (CDX-1127).
[00349] A SEQ ID NO: 132 é a região variável da cadeia leve (Vl) para o anticorpo monoclonal agonista de CD27 varlilumab (CDX-1127).
[00350] A SEQ ID NO: 133 é a CDR1 da cadeia pesada para o anticorpo monoclonal agonista de CD27 varlilumab (CDX-1127).
[00351] A SEQ ID NO: 134 é a CDR2 da cadeia pesada para o anticorpo monoclonal agonista de CD27 varlilumab (CDX-1127).
[00352] A SEQ ID NO: 135 é a CDR3 da cadeia pesada para o anticorpo monoclonal agonista de CD27 varlilumab (CDX-1127).
[00353] A SEQ ID NO: 136 é a CDR1 da cadeia leve para o anticorpo monoclonal agonista de CD27 varlilumab (CDX-1127).
[00354] A SEQ ID NO: 137 é a CDR2 da cadeia leve para o anticorpo monoclonal agonista de CD27 varlilumab (CDX-1127).
[00355] A SEQ ID NO: 138 é a CDR3 da cadeia leve para o anticorpo monoclonal agonista de CD27 varlilumab (CDX-1127).
[00356] A SEQ ID NO: 139 é uma sequência de aminoácido do ligante de CD27 (CD70).
[00357] A SEQ ID NO: 140 é uma porção solúvel do polipeptídeo de CD70.
[00358] A SEQ ID NO: 141 é uma porção solúvel alternativa do polipeptídeo de CD70.
[00359] A SEQ ID NO: 142 é a sequência de aminoácido de GITR humano (proteína do membro 18 da superfamília do receptor do fator de necrose de tumor (TNFRSF18) de ser humano).
[00360] A SEQ ID NO: 143 é a sequência de aminoácido de GITR de murino (proteína do membro 18 da superfamília do receptor do fator de necrose de tumor (TNFRSF18) de murino).
Petição 870190062710, de 04/07/2019, pág. 110/590
98/497 [00361] A SEQ ID NO: 144 é a sequência de aminoácido da variante de cadeia pesada HuN6C8 (glicosilada) do anticorpo monoclonal agonista de GITR humanizado 6C8, com um N (asparagina) na CDR2, correspondendo à SEQ ID NO: 60 na Patente U.S. No. 7.812.135.
[00362] A SEQ ID NO: 145 é a sequência de aminoácido da variante de cadeia pesada HuN6C8 (aglicosilada) do anticorpo monoclonal agonista de GITR humanizado 6C8, com um N (asparagina) na CDR2, correspondendo à SEQ ID NO: 61 na Patente U.S. No. 7.812.135.
[00363] A SEQ ID NO: 146 é a sequência de aminoácido da variante de cadeia pesada HuQ6C8 (glicosilada) do anticorpo monoclonal agonista de GITR humanizado 6C8, com um Q (glutamina) na CDR2, correspondendo à SEQ ID NO: 62 na Patente U.S. No. 7.812.135.
[00364] A SEQ ID NO: 147 é a sequência de aminoácido da variante de cadeia pesada HuQ6C8 (aglicosilada) do anticorpo monoclonal agonista de GITR humanizado 6C8, com um Q (glutamina) na CDR2, correspondendo à SEQ ID NO: 63 na Patente U.S. No. 7.812.135.
[00365] A SEQ ID NO: 148 é a sequência de aminoácido da cadeia leve do anticorpo monoclonal agonista de GITR humanizado 6C8, correspondendo à SEQ ID NO: 58 na Patente U.S. No. 7.812.135.
[00366] A SEQ ID NO: 149 é a sequência de aminoácido da sequência líder que pode ser opcionalmente incluída com as sequências de aminoácidos da SEQ ID NO: 144, SEQ ID NO: 145, SEQ ID NO: 146, ou SEQ ID NO: 147 nos anticorpos monoclonais agonistas de GITR.
[00367] A SEQ ID NO: 150 é a sequência de aminoácido da sequência líder que pode ser opcionalmente incluída com a sequência de aminoácido da SEQ ID NO: 148 nos anticorpos monoclonais agonistas de GITR.
[00368] A SEQ ID NO: 151 é a sequência de aminoácido da região variável da cadeia pesada do anticorpo monoclonal agonista de GITR humanizado 6C8, correspondendo à SEQ ID NO: 1 na Patente U.S. No.
Petição 870190062710, de 04/07/2019, pág. 111/590
99/497
7.812.135.
[00369] A SEQ ID NO: 152 é a sequência de aminoácido da região variável da cadeia pesada do anticorpo monoclonal agonista de GITR humanizado 6C8, correspondendo à SEQ ID NO: 66 na Patente U.S. No.
7.812.135.
[00370] A SEQ ID NO: 153 é a sequência de aminoácido da região variável da cadeia leve do anticorpo monoclonal agonista de GITR humanizado 6C8, correspondendo à SEQ ID NO: 2 na Patente U.S. No.
7.812.135.
[00371] A SEQ ID NO: 154 é a sequência de aminoácido da região CDR1 da cadeia pesada do anticorpo monoclonal agonista de GITR humanizado 6C8, correspondendo à SEQ ID NO: 3 na Patente U.S. No.
7.812.135.
[00372] A SEQ ID NO: 155 é a sequência de aminoácido da região CDR2 da cadeia pesada do anticorpo monoclonal agonista de GITR humanizado 6C8, correspondendo à SEQ ID NO: 4 na Patente U.S. No.
7.812.135.
[00373] A SEQ ID NO: 156 é a sequência de aminoácido da região CDR2 da cadeia pesada do anticorpo monoclonal agonista de GITR humanizado 6C8, correspondendo à SEQ ID NO: 19 na Patente U.S. No.
7.812.135.
[00374] A SEQ ID NO: 157 é a sequência de aminoácido da região CDR3 da cadeia pesada do anticorpo monoclonal agonista de GITR humanizado 6C8, correspondendo à SEQ ID NO: 5 na Patente U.S. No.
7.812.135.
[00375] A SEQ ID NO: 158 é a sequência de aminoácido da região CDR1 da cadeia pesada do anticorpo monoclonal agonista de GITR humanizado 6C8, correspondendo à SEQ ID NO: 6 na Patente U.S. No.
7.812.135.
Petição 870190062710, de 04/07/2019, pág. 112/590
100/497 [00376] A SEQ ID NO: 159 é a sequência de aminoácido da região CDR2 da cadeia pesada do anticorpo monoclonal agonista de GITR humanizado 6C8, correspondendo à SEQ ID NO: 7 na Patente U.S. No.
7.812.135.
[00377] A SEQ ID NO: 160 é a sequência de aminoácido da região CDR3 da cadeia pesada do anticorpo monoclonal agonista de GITR humanizado 6C8, correspondendo à SEQ ID NO: 8 na Patente U.S. No.
7.812.135.
[00378] A SEQ ID NO: 161 é a sequência de aminoácido da variante de cadeia pesada HuN6C8 (glicosilada) do anticorpo monoclonal agonista de GITR quimérico 6C8, com um N (asparagina) na CDR2, correspondendo à SEQ ID NO: 23 na Patente U.S. No. 7.812.135.
[00379] A SEQ ID NO: 162 é a sequência de aminoácido da variante de cadeia pesada HuQ6C8 (aglicosilada) do anticorpo monoclonal agonista de GITR quimérico 6C8, com um Q (glutamina) na CDR2, correspondendo à SEQ ID NO: 24 na Patente U.S. No. 7.812.135.
[00380] A SEQ ID NO: 163 é a sequência de aminoácido da cadeia leve do anticorpo monoclonal agonista de GITR quimérico 6C8, correspondendo à SEQ ID NO: 22 na Patente U.S. No. 7.812.135.
[00381] A SEQ ID NO: 164 é a sequência de aminoácido da região variável da cadeia pesada do agonista de GITR 36E5 da Patente U.S. No.
8.709.424.
[00382] A SEQ ID NO: 165 é a sequência de aminoácido da região variável da cadeia leve do agonista de GITR 36E5 da Patente U.S. No.
8.709.424.
[00383] A SEQ ID NO: 166 é a sequência de aminoácido da região variável da cadeia pesada do agonista de GITR 3D6 da Patente U.S. No.
8.709.424.
[00384] A SEQ ID NO: 167 é a sequência de aminoácido da região
Petição 870190062710, de 04/07/2019, pág. 113/590
101/497 variável da cadeia leve do agonista de GITR 3D6 da Patente U.S. No.
8.709.424.
[00385] A SEQ ID NO: 168 é a sequência de aminoácido da região variável da cadeia pesada do agonista de GITR 61G6 da Patente U.S. No.
8.709.424.
[00386] A SEQ ID NO: 169 é a sequência de aminoácido da região variável da cadeia leve do agonista de GITR 61G6 da Patente U.S. No.
8.709.424.
[00387] A SEQ ID NO: 170 é a sequência de aminoácido da região variável da cadeia pesada do agonista de GITR 6H6 da Patente U.S. No.
8.709.424.
[00388] A SEQ ID NO: 171 é a sequência de aminoácido da região variável da cadeia leve do agonista de GITR 6H6 da Patente U.S. No.
8.709.424.
[00389] A SEQ ID NO: 172 é a sequência de aminoácido da região variável da cadeia pesada do agonista de GITR 61F6 da Patente U.S. No.
8.709.424.
[00390] A SEQ ID NO: 173 é a sequência de aminoácido da região variável da cadeia leve do agonista de GITR 61F6 da Patente U.S. No.
8.709.424.
[00391] A SEQ ID NO: 174 é a sequência de aminoácido da região variável da cadeia pesada do agonista de GITR 1D8 da Patente U.S. No.
8.709.424.
[00392] A SEQ ID NO: 175 é a sequência de aminoácido da região variável da cadeia leve do agonista de GITR 1D8 da Patente U.S. No.
8.709.424.
[00393] A SEQ ID NO: 176 é a sequência de aminoácido da região variável da cadeia pesada do agonista de GITR 17F10 da Patente U.S. No.
8.709.424.
Petição 870190062710, de 04/07/2019, pág. 114/590
102 / 497 [00394] A SEQ ID NO: 177 é a sequência de aminoácido da região variável da cadeia leve do agonista de GITR 17F10 da Patente U.S. No.
8.709.424.
[00395] A SEQ ID NO: 178 é a sequência de aminoácido da região variável da cadeia pesada do agonista de GITR 35D8 da Patente U.S. No.
8.709.424.
[00396] A SEQ ID NO: 179 é a sequência de aminoácido da região variável da cadeia leve do agonista de GITR 35D8 da Patente U.S. No.
8.709.424.
[00397] A SEQ ID NO: 180 é a sequência de aminoácido da região variável da cadeia pesada do agonista de GITR 49A1 da Patente U.S. No.
8.709.424.
[00398] A SEQ ID NO: 181 é a sequência de aminoácido da região variável da cadeia leve do agonista de GITR 49A1 da Patente U.S. No.
8.709.424.
[00399] A SEQ ID NO: 182 é a sequência de aminoácido da região variável da cadeia pesada do agonista de GITR 9E5 da Patente U.S. No.
8.709.424.
[00400] A SEQ ID NO: 183 é a sequência de aminoácido da região variável da cadeia leve do agonista de GITR 9E5 da Patente U.S. No.
8.709.424.
[00401] A SEQ ID NO: 184 é a sequência de aminoácido da região variável da cadeia pesada do agonista de GITR 31H6 da Patente U.S. No.
8.709.424.
[00402] A SEQ ID NO: 185 é a sequência de aminoácido da região variável da cadeia leve do agonista de GITR 31H6 da Patente U.S. No.
8.709.424.
[00403] A SEQ ID NO: 186 é a sequência de aminoácido da região variável da cadeia pesada do agonista de GITR 36E5 humanizado da Patente
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103/497
U.S. No. 8.709.424.
[00404] A SEQ ID NO: 187 é a sequência de aminoácido da região variável da cadeia leve do agonista de GITR 36E5 humanizado da Patente U.S. No. 8.709.424.
[00405] A SEQ ID NO: 188 é a sequência de aminoácido da região variável da cadeia pesada do agonista de GITR 3D6 humanizado da Patente U.S. No. 8.709.424.
[00406] A SEQ ID NO: 189 é a sequência de aminoácido da região variável da cadeia leve do agonista de GITR 3D6 humanizado da Patente U.S. No. 8.709.424.
[00407] A SEQ ID NO: 190 é a sequência de aminoácido da região variável da cadeia pesada do agonista de GITR 61G6 humanizado da Patente U.S. No. 8.709.424.
[00408] A SEQ ID NO: 191 é a sequência de aminoácido da região variável da cadeia leve do agonista de GITR 61G6 humanizado da Patente U.S. No. 8.709.424.
[00409] A SEQ ID NO: 192 é a sequência de aminoácido da região variável da cadeia pesada do agonista de GITR 6H6 humanizado da Patente U.S. No. 8.709.424.
[00410] A SEQ ID NO: 193 é a sequência de aminoácido da região variável da cadeia leve do agonista de GITR 6H6 humanizado da Patente U.S. No. 8.709.424.
[00411] A SEQ ID NO: 194 é a sequência de aminoácido da região variável da cadeia pesada do agonista de GITR 61F6 humanizado da Patente U.S. No. 8.709.424.
[00412] A SEQ ID NO: 195 é a sequência de aminoácido da região variável da cadeia leve do agonista de GITR 61F6 humanizado da Patente U.S. No. 8.709.424.
[00413] A SEQ ID NO: 196 é a sequência de aminoácido da região
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104 / 497 variável da cadeia pesada do agonista de GITR 1D8 humanizado da Patente U.S. No. 8.709.424.
[00414] A SEQ ID NO: 197 é a sequência de aminoácido da região variável da cadeia leve do agonista de GITR 1D8 humanizado da Patente U.S. No. 8.709.424.
[00415] A SEQ ID NO: 198 é a sequência de aminoácido da região variável da cadeia pesada do agonista de GITR 17F10 humanizado da Patente U.S. No. 8.709.424.
[00416] A SEQ ID NO: 199 é a sequência de aminoácido da região variável da cadeia leve do agonista de GITR 17F10 humanizado da Patente U.S. No. 8.709.424.
[00417] A SEQ ID NO: 200 é a sequência de aminoácido da região variável da cadeia pesada do agonista de GITR 35D8 humanizado da Patente U.S. No. 8.709.424.
[00418] A SEQ ID NO: 201 é a sequência de aminoácido da região variável da cadeia leve do agonista de GITR 35D8 humanizado da Patente U.S. No. 8.709.424.
[00419] A SEQ ID NO: 202 é a sequência de aminoácido da região variável da cadeia pesada do agonista de GITR 49Al humanizado da Patente U.S. No. 8.709.424.
[00420] A SEQ ID NO: 203 é a sequência de aminoácido da região variável da cadeia leve do agonista de GITR 49Al humanizado da Patente U.S. No. 8.709.424.
[00421] A SEQ ID NO: 204 é a sequência de aminoácido da região variável da cadeia pesada do agonista de GITR 9E5 humanizado da Patente U.S. No. 8.709.424.
[00422] A SEQ ID NO: 205 é a sequência de aminoácido da região variável da cadeia leve do agonista de GITR 9E5 humanizado da Patente U.S. No. 8.709.424.
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105/497 [00423] A SEQ ID NO: 206 é a sequência de aminoácido da região variável da cadeia pesada do agonista humanizado de GITR 31H6 da Patente U.S. No. 8.709.424.
[00424] A SEQ ID NO: 207 é a sequência de aminoácido da região variável da cadeia leve do agonista de GITR 31H6 humanizado da Patente U.S. No. 8.709.424.
[00425] A SEQ ID NO: 208 é a sequência de aminoácido da cadeia pesada variável do agonista de GITR 2155 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2013/0108641 Al.
[00426] A SEQ ID NO: 209 é a sequência de aminoácido da cadeia leve variável do agonista de GITR 2155 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2013/0108641 Al.
[00427] A SEQ ID NO: 210 é a sequência de aminoácido do agonista de GITR 2155 da cadeia pesada humanizada (HC1) da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2013/0108641 Al.
[00428] A SEQ ID NO: 211 é a sequência de aminoácido da cadeia pesada humanizada (HC2) do agonista de GITR 2155 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2013/0108641 Al.
[00429] A SEQ ID NO: 212 é a sequência de aminoácido da cadeia pesada humanizada (HC3a) do agonista de GITR 2155 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2013/0108641 Al.
[00430] A SEQ ID NO: 213 é a sequência de aminoácido da cadeia pesada humanizada (HC3b) do agonista de GITR da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2013/0108641 Al.
[00431] A SEQ ID NO: 214 é a sequência de aminoácido da cadeia pesada humanizada (HC4) do agonista de GITR da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2013/0108641 Al.
[00432] A SEQ ID NO: 215 é a sequência de aminoácido da cadeia leve 2155 humanizada (LC1) do agonista de GITR da Publicação do Pedido
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106/497 de Patente U.S. No. US 2013/0108641 Al.
[00433] A SEQ ID NO: 216 é a sequência de aminoácido da cadeia leve 2155 humanizada (LC2a) do agonista de GITR da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2013/0108641 Al.
[00434] A SEQ ID NO: 217 é a sequência de aminoácido da cadeia leve 2155 humanizada (LC2b) do agonista de GITR da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2013/0108641 Al.
[00435] A SEQ ID NO: 218 é a sequência de aminoácido da cadeia leve 2155 humanizada (LC3) do agonista de GITR da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2013/0108641 Al.
[00436] A SEQ ID NO: 219 é a sequência de aminoácido da cadeia pesada variável do agonista de GITR 698 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2013/0108641 Al.
[00437] A SEQ ID NO: 220 é a sequência de aminoácido da cadeia leve variável do agonista de GITR 698 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2013/0108641 Al.
[00438] A SEQ ID NO: 221 é a sequência de aminoácido da cadeia pesada variável do agonista de GITR 706 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2013/0108641 Al.
[00439] A SEQ ID NO: 222 é a sequência de aminoácido da cadeia leve variável do agonista de GITR 706 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2013/0108641 Al.
[00440] A SEQ ID NO: 223 é a sequência de aminoácido da cadeia pesada variável do agonista de GITR 827 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2013/0108641 Al.
[00441] A SEQ ID NO: 224 é a sequência de aminoácido da cadeia leve variável do agonista de GITR 827 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2013/0108641 Al.
[00442] A SEQ ID NO: 225 é a sequência de aminoácido da cadeia
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107 / 497 pesada variável do agonista de GITR 1718 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2013/0108641 Al.
[00443] A SEQ ID NO: 226 é a sequência de aminoácido da cadeia leve variável do agonista de GITR 1718 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2013/0108641 Al.
[00444] A SEQ ID NO: 227 é a sequência de aminoácido da CDR3 da cadeia pesada do agonista de GITR 2155 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2013/0108641 Al.
[00445] A SEQ ID NO: 228 é a sequência de aminoácido da CDR2 da cadeia pesada do agonista de GITR 2155 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2013/0108641 Al.
[00446] A SEQ ID NO: 229 é a sequência de aminoácido da CDR1 da cadeia pesada do agonista de GITR 2155 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2013/0108641 Al.
[00447] A SEQ ID NO: 230 é a sequência de aminoácido da CDR3 da cadeia leve do agonista de GITR 2155 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2013/0108641 Al.
[00448] A SEQ ID NO: 231 é a sequência de aminoácido da CDR2 da cadeia leve do agonista de GITR 2155 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2013/0108641 Al.
[00449] A SEQ ID NO: 232 é a sequência de aminoácido da CDR1 da cadeia leve do agonista de GITR 2155 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2013/0108641 Al.
[00450] A SEQ ID NO: 233 é a sequência de aminoácido da CDR3 da cadeia pesada dos agonistas de GITR 698 e 706 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2013/0108641 Al.
[00451] A SEQ ID NO: 234 é a sequência de aminoácido CDR2 da cadeia pesada dos agonistas de GITR 698 e 706 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2013/0108641 Al.
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108/497 [00452] A SEQ ID NO: 235 é a sequência de aminoácido CDR1da cadeia pesada dos agonistas de GITR 698 e 706 da Publicação do Pedidode
Patente U.S. No. US 2013/0108641 Al.
[00453] A SEQ ID NO: 236 é a sequência de aminoácido CDR3da cadeia leve do agonista de GITR 698 da Publicação do Pedido de Patente U.S.
No. US 2013/0108641 Al.
[00454] A SEQ ID NO: 237 é a sequência de aminoácido da CDR2 da cadeia leve dos agonistas de GITR 698, 706, 827, e 1649 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2013/0108641 Al.
[00455] A SEQ ID NO: 238 é a sequência de aminoácido da CDR1 da cadeia leve dos agonistas de GITR 698, 706, 827, e 1649 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2013/0108641 Al.
[00456] A SEQ ID NO: 239 é a sequência de aminoácido da CDR3 da cadeia leve dos agonistas de GITR 706, 827, e 1649 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2013/0108641 Al.
[00457] A SEQ ID NO: 240 é a sequência de aminoácido da CDR3 da cadeia pesada dos agonistas de GITR 827 e 1649 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2013/0108641 Al.
[00458] A SEQ ID NO: 241 é a sequência de aminoácido CDR2 da cadeia pesada do agonista de GITR 827 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2013/0108641 Al.
[00459] A SEQ ID NO: 242 é a sequência de aminoácido da CDR2 da cadeia pesada do agonista de GITR 1649 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2013/0108641 Al.
[00460] A SEQ ID NO: 243 é a sequência de aminoácido da CDR3 da cadeia pesada do agonista de GITR 1718 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2013/0108641 Al.
[00461] A SEQ ID NO: 244 é a sequência de aminoácido da CDR2 da cadeia pesada do agonista de GITR 1718 da Publicação do Pedido de Patente
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U.S. No. US 2013/0108641 Al.
[00462] A SEQ ID NO: 245 é a sequência de aminoácido da CDR1 da cadeia pesada do agonista de GITR 1718 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2013/0108641 Al.
[00463] A SEQ ID NO: 246 é a sequência de aminoácido da CDR3 da cadeia leve do agonista de GITR 1718 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2013/0108641 Al.
[00464] A SEQ ID NO: 247 é a sequência de aminoácido da CDR2 da cadeia leve do agonista de GITR 1718 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2013/0108641 Al.
[00465] A SEQ ID NO: 248 é a sequência de aminoácido da CDR1 da cadeia leve do agonista de GITR 1718 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2013/0108641 Al.
[00466] A SEQ ID NO: 249 é a sequência de aminoácido da CDR1 da cadeia pesada dos agonistas de GITR 827 e 1649 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2013/0108641 Al.
[00467] A SEQ ID NO: 250 é a sequência de aminoácido da cadeia pesada do agonista de GITR 1D7 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00468] A SEQ ID NO: 251 é a sequência de aminoácido da cadeia leve do agonista de GITR 1D7 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00469] A SEQ ID NO: 252 é a sequência de aminoácido da cadeia pesada variável do agonista de GITR 1D7 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00470] A SEQ ID NO: 253 é a sequência de aminoácido da cadeia leve variável do agonista de GITR 1D7 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00471] A SEQ ID NO: 254 é a sequência de aminoácido da CDR1 da
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110/497 cadeia pesada do agonista de GITR 1D7 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00472] A SEQ ID NO: 255 é a sequência de aminoácido da CDR2 da cadeia pesada do agonista de GITR 1D7 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00473] A SEQ ID NO: 256 é a sequência de aminoácido da CDR3 da cadeia pesada do agonista de GITR 1D7 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00474] A SEQ ID NO: 257 é a sequência de aminoácido da CDR1 da cadeia leve do agonista de GITR 1D7 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00475] A SEQ ID NO: 258 é a sequência de aminoácido da CDR2 da cadeia leve do agonista de GITR 1D7 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00476] A SEQ ID NO: 259 é a sequência de aminoácido da CDR3 da cadeia leve do agonista de GITR 1D7 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00477] A SEQ ID NO: 260 é a sequência de aminoácido da cadeia pesada do agonista de GITR 33C9 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00478] A SEQ ID NO: 261 é a sequência de aminoácido da cadeia leve do agonista de GITR 33C9 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00479] A SEQ ID NO: 262 é a sequência de aminoácido da cadeia pesada variável do agonista de GITR 33C9 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00480] A SEQ ID NO: 263 é a sequência de aminoácido da cadeia leve variável do agonista de GITR 33C9 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
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111/497 [00481] A SEQ ID NO: 264 é a sequência de aminoácido da CDR1 da cadeia pesada do agonista de GITR 33C9 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00482] A SEQ ID NO: 265 é a sequência de aminoácido da CDR2 da cadeia pesada do agonista de GITR 33C9 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00483] A SEQ ID NO: 266 é a sequência de aminoácido da CDR3 da cadeia pesada do agonista de GITR 33C9 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00484] A SEQ ID NO: 267 é a sequência de aminoácido da CDR1 da cadeia leve do agonista de GITR 33C9 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00485] A SEQ ID NO: 268 é a sequência de aminoácido da CDR2 da cadeia leve do agonista de GITR 33C9 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00486] A SEQ ID NO: 269 é a sequência de aminoácido da CDR3 da cadeia leve do agonista de GITR 33C9 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00487] A SEQ ID NO: 270 é a sequência de aminoácido da cadeia pesada do agonista de GITR 33F6 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00488] A SEQ ID NO: 271 é a sequência de aminoácido da cadeia leve do agonista de GITR 33F6 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00489] A SEQ ID NO: 272 é a sequência de aminoácido da cadeia pesada variável do agonista de GITR 33F6 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00490] A SEQ ID NO: 273 é a sequência de aminoácido da cadeia leve variável do agonista de GITR 33F6 da Publicação do Pedido de Patente
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U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00491] A SEQ ID NO: 274 é a sequência de aminoácido da CDR1 da cadeia pesada do agonista de GITR 33F6 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00492] A SEQ ID NO: 275 é a sequência de aminoácido da CDR2 da cadeia pesada do agonista de GITR 33F6 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00493] A SEQ ID NO: 276 é a sequência de aminoácido da CDR3 da cadeia pesada do agonista de GITR 33F6 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00494] A SEQ ID NO: 277 é a sequência de aminoácido da CDR1 da cadeia leve do agonista de GITR 33F6 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00495] A SEQ ID NO: 278 é a sequência de aminoácido da CDR2 da cadeia leve do agonista de GITR 33F6 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00496] A SEQ ID NO: 279 é a sequência de aminoácido da CDR3 da cadeia leve do agonista de GITR 33F6 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00497] A SEQ ID NO: 280 é a sequência de aminoácido da cadeia pesada do agonista de GITR 34G4 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00498] A SEQ ID NO: 281 é a sequência de aminoácido da cadeia leve do agonista de GITR 34G4 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00499] A SEQ ID NO: 282 é a sequência de aminoácido da cadeia pesada variável do agonista de GITR 34G4 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00500] A SEQ ID NO: 283 é a sequência de aminoácido da cadeia
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113/497 leve variável do agonista de GITR 34G4 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00501] A SEQ ID NO: 284 é a sequência de aminoácido da CDR1 da cadeia pesada do agonista de GITR 34G4 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00502] A SEQ ID NO: 285 é a sequência de aminoácido da CDR2 da cadeia pesada do agonista de GITR 34G4 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00503] A SEQ ID NO: 286 é a sequência de aminoácido da CDR3 da cadeia pesada do agonista de GITR 34G4 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00504] A SEQ ID NO: 287 é a sequência de aminoácido da CDR1 da cadeia leve do agonista de GITR 34G4 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00505] A SEQ ID NO: 288 é a sequência de aminoácido da CDR2 da cadeia leve do agonista de GITR 34G4 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00506] A SEQ ID NO: 289 é a sequência de aminoácido da CDR3 da cadeia leve do agonista de GITR 34G4 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00507] A SEQ ID NO: 290 é a sequência de aminoácido da cadeia pesada do agonista de GITR 35B10 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00508] A SEQ ID NO: 291 é a sequência de aminoácido da cadeia leve do agonista de GITR 35B10 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00509] A SEQ ID NO: 292 é a sequência de aminoácido da cadeia pesada variável do agonista de GITR 35B10 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
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114/497 [00510] A SEQ ID NO: 293 é a sequência de aminoácido da cadeia leve variável do agonista de GITR 35B10 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00511] A SEQ ID NO: 294 é a sequência de aminoácido da CDR1 da cadeia pesada do agonista de GITR 35B10 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00512] A SEQ ID NO: 295 é a sequência de aminoácido da CDR2 da cadeia pesada do agonista de GITR 35B10 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00513] A SEQ ID NO: 296 é a sequência de aminoácido da CDR3 da cadeia pesada do agonista de GITR 35B10 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00514] A SEQ ID NO: 297 é a sequência de aminoácido da CDR1 da cadeia leve do agonista de GITR 35B10 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00515] A SEQ ID NO: 298 é a sequência de aminoácido da CDR2 da cadeia leve do agonista de GITR 35B10 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00516] A SEQ ID NO: 299 é a sequência de aminoácido da CDR3 da cadeia leve do agonista de GITR 35B10 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00517] A SEQ ID NO: 300 é a sequência de aminoácido da cadeia pesada do agonista de GITR 41E11 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00518] A SEQ ID NO: 301 é a sequência de aminoácido da cadeia leve do agonista de GITR 41E11 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00519] A SEQ ID NO: 302 é a sequência de aminoácido da cadeia pesada variável do agonista de GITR 41 Ell da Publicação do Pedido de
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115/497
Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00520] A SEQ ID NO: 303 é a sequência de aminoácido da cadeia leve variável do agonista de GITR 41 El 1 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00521] A SEQ ID NO: 304 é a sequência de aminoácido da CDR1 da cadeia pesada do agonista de GITR 41E11 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00522] A SEQ ID NO: 305 é a sequência de aminoácido do agonista da CDR2 da cadeia pesada de GITR 41 Ell da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00523] A SEQ ID NO: 306 é a sequência de aminoácido da CDR3 da cadeia pesada do agonista de GITR 41E11 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00524] A SEQ ID NO: 307 é a sequência de aminoácido da CDR1 da cadeia leve do agonista de GITR 41E11 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00525] A SEQ ID NO: 308 é a sequência de aminoácido da CDR2 da cadeia leve do agonista de GITR 41E11 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00526] A SEQ ID NO: 309 é a sequência de aminoácido da CDR3 da cadeia leve do agonista de GITR 41E11 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00527] A SEQ ID NO: 310 é a sequência de aminoácido da cadeia pesada do agonista de GITR 41G5 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00528] A SEQ ID NO: 311 é a sequência de aminoácido da cadeia leve do agonista de GITR 41G5 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00529] A SEQ ID NO: 312 é a sequência de aminoácido da cadeia
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116/497 pesada variável do agonista de GITR 41G5 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00530] A SEQ ID NO: 313 é a sequência de aminoácido da cadeia leve variável do agonista de GITR 41G5 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00531] A SEQ ID NO: 314éa sequência de aminoácido da CDR1 da cadeia pesada do agonista de GITR 41G5 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00532] A SEQ ID NO: 315 éa sequência de aminoácido da CDR2 da cadeia pesada do agonista de GITR 41G5 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00533] A SEQ ID NO: 316éa sequência de aminoácido da CDR3 da cadeia pesada do agonista de GITR 41G5 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00534] A SEQ ID NO: 317 éa sequência de aminoácido da CDR1 da cadeia leve do agonista de GITR 41G5 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00535] A SEQ ID NO: 318 éa sequência de aminoácido da CDR2 da cadeia leve do agonista de GITR 41G5 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00536] A SEQ ID NO: 319éa sequência de aminoácido da CDR3 da cadeia leve do agonista de GITR 41G5 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00537] A SEQ ID NO: 320 é a sequência de aminoácido da cadeia pesada do agonista de GITR 42A11 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00538] A SEQ ID NO: 321 é a sequência de aminoácido da cadeia leve do agonista de GITR 42A11 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
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117/497 [00539] A SEQ ID NO: 322 é a sequência de aminoácido da cadeia pesada variável do agonista de GITR 42A11 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00540] A SEQ ID NO: 323 é a sequência de aminoácido da cadeia leve variável do agonista de GITR 42Al 1 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00541] A SEQ ID NO: 324 é a sequência de aminoácido da CDR1 da cadeia pesada da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00542] A SEQ ID NO: 325 é a sequência de aminoácido da CDR2 da cadeia pesada do agonista de GITR 42A11 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00543] A SEQ ID NO: 326 é a sequência de aminoácido da CDR3 da cadeia pesada da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00544] A SEQ ID NO: 327 é a sequência de aminoácido da CDR1 da cadeia leve do agonista de GITR 42A11 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00545] A SEQ ID NO: 328 é a sequência de aminoácido da CDR2 da cadeia leve do agonista de GITR 42A11 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00546] A SEQ ID NO: 329 é a sequência de aminoácido da CDR3 da cadeia leve do agonista de GITR 42A11 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00547] A SEQ ID NO: 330 é a sequência de aminoácido da cadeia pesada do agonista de GITR 44C1 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00548] A SEQ ID NO: 331 é a sequência de aminoácido da cadeia leve do agonista de GITR 44C1 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No.
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US 2015/0064204 Al.
[00549] A SEQ ID NO: 332 é a sequência de aminoácido da cadeia pesada variável do agonista de GITR 44C1 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00550] A SEQ ID NO: 333 é a sequência de aminoácido da cadeia leve variável do agonista de GITR 44C1 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00551] A SEQ ID NO: 334 é a sequência de aminoácido da cadeia pesada do agonista de GITR 44C1 CDR1 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00552] A SEQ ID NO: 335 éa sequência de aminoácido da CDR2 da cadeia pesada do agonista de GITR 44C1 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00553] A SEQ ID NO: 336éa sequência de aminoácido da CDR3 da cadeia pesada do agonista de GITR 44C1 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00554] A SEQ ID NO: 337 é a sequência de aminoácido da CDR1 da cadeia leve do agonista de GITR 44C1 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00555] A SEQ ID NO: 338 éa sequência de aminoácido da CDR2 da cadeia leve do agonista de GITR 44C1 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00556] A SEQ ID NO: 339éa sequência de aminoácido da CDR3 da cadeia leve do agonista de GITR 44C1 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00557] A SEQ ID NO: 340 é a sequência de aminoácido da cadeia pesada do agonista de GITR 45A8 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00558] A SEQ ID NO: 341 é a sequência de aminoácido da cadeia
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119/497 leve do agonista de GITR 45A8 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00559] A SEQ ID NO: 342 é a sequência de aminoácido da cadeia pesada variável do agonista de GITR 45A8 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00560] A SEQ ID NO: 343 é a sequência de aminoácido da cadeia leve variável do agonista de GITR 45A8 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00561] A SEQ ID NO: 344 é a sequência de aminoácido da CDR1 da cadeia pesada do agonista de GITR 45 A8 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00562] A SEQ ID NO: 345 é a sequência de aminoácido da CDR2 da cadeia pesada do agonista de GITR 45 A8 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00563] A SEQ ID NO: 346 é a sequência de aminoácido da CDR3 da cadeia pesada do agonista de GITR 45 A8 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00564] A SEQ ID NO: 347 é a sequência de aminoácido da CDR1 da cadeia leve do agonista de GITR 45 A8 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00565] A SEQ ID NO: 348 é a sequência de aminoácido da CDR2 da cadeia leve do agonista de GITR 45 A8 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00566] A SEQ ID NO: 349 é a sequência de aminoácido da CDR3 da cadeia leve do agonista de GITR 45 A8 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00567] A SEQ ID NO: 350 é a sequência de aminoácido da cadeia pesada do agonista de GITR 46E11 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
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120/497 [00568] A SEQ ID NO: 351 é a sequência de aminoácido da cadeia leve do agonista de GITR 46E11 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00569] A SEQ ID NO: 352 é a sequência de aminoácido da cadeia pesada variável do agonista de GITR 46E11 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00570] A SEQ ID NO: 353 é a sequência de aminoácido da cadeia leve variável do agonista de GITR 46E11 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00571] A SEQ ID NO: 354 é a sequência de aminoácido da CDR1 da cadeia pesada do agonista de GITR 46E11 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00572] A SEQ ID NO: 355 é a sequência de aminoácido da CDR2 da cadeia pesada do agonista de GITR 46E11 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00573] A SEQ ID NO: 356 é a sequência de aminoácido da CDR3 da cadeia pesada do agonista de GITR 46E11 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00574] A SEQ ID NO: 357 é a sequência de aminoácido da CDR1 da cadeia leve do agonista de GITR 46E11 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00575] A SEQ ID NO: 358 é a sequência de aminoácido da CDR2 da cadeia leve do agonista de GITR 46E11 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00576] A SEQ ID NO: 359 é a sequência de aminoácido da CDR3 da cadeia leve do agonista de GITR 46E11 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00577] A SEQ ID NO: 360 é a sequência de aminoácido da cadeia pesada do agonista de GITR 48H12 da Publicação do Pedido de Patente U.S.
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No. US 2015/0064204 Al.
[00578] A SEQ ID NO: 361 é a sequência de aminoácido da cadeia leve do agonista de GITR 48H12 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00579] A SEQ ID NO: 362 é a sequência de aminoácido da cadeia pesada variável do agonista de GITR 48H12 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00580] A SEQ ID NO: 363 é a sequência de aminoácido da cadeia leve variável do agonista de GITR 48H12 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00581] A SEQ ID NO: 364 é a sequência de aminoácido da CDR1 da cadeia pesada do agonista de GITR 48H12 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00582] A SEQ ID NO: 365 é a sequência de aminoácido da CDR2 da cadeia pesada do agonista de GITR 48H12 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00583] A SEQ ID NO: 366 é a sequência de aminoácido da CDR3 da cadeia pesada do agonista de GITR 48H12 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00584] A SEQ ID NO: 367 é a sequência de aminoácido da CDR1 da cadeia leve do agonista de GITR 48H12 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00585] A SEQ ID NO: 368 é a sequência de aminoácido da CDR2 da cadeia leve do agonista de GITR 48H12 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00586] A SEQ ID NO: 369 é a sequência de aminoácido da CDR3 da cadeia leve do agonista de GITR 48H12 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00587] A SEQ ID NO: 370 é a sequência de aminoácido da cadeia
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122/497 pesada do agonista de GITR 48H7 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00588] A SEQ ID NO: 371 é a sequência de aminoácido da cadeia leve do agonista de GITR 48H7 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00589] A SEQ ID NO: 372 é a sequência de aminoácido da cadeia pesada variável do agonista de GITR 48H7 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00590] A SEQ ID NO: 373 é a sequência de aminoácido da cadeia leve variável do agonista de GITR 48H7 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00591] A SEQ ID NO: 374 é a sequência de aminoácido da CDR1 da cadeia pesada do agonista de GITR 48H7 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00592] A SEQ ID NO: 375 é a sequência de aminoácido da CDR2 da cadeia pesada do agonista de GITR 48H7 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00593] A SEQ ID NO: 376 é a sequência de aminoácido da CDR3 da do agonista de GITR 48H7 cadeia pesada da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00594] A SEQ ID NO: 377 é a sequência de aminoácido da CDR1 da cadeia leve do agonista de GITR 48H7 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00595] A SEQ ID NO: 378 é a sequência de aminoácido da CDR2 da cadeia leve do agonista de GITR 48H7 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00596] A SEQ ID NO: 379 é a sequência de aminoácido da CDR3 da cadeia leve do agonista de GITR 48H7 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
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123/497 [00597] A SEQ ID NO: 380 é a sequência de aminoácido da cadeia pesada do agonista de GITR 49D9 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00598] A SEQ ID NO: 381 é a sequência de aminoácido da cadeia leve do agonista de GITR 49D9 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00599] A SEQ ID NO: 382 é a sequência de aminoácido da cadeia pesada variável do agonista de GITR 49D9 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00600] A SEQ ID NO: 383 é a sequência de aminoácido da cadeia leve variável do agonista de GITR 49D9 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00601] A SEQ ID NO: 384 é a sequência de aminoácido da CDR1 da cadeia pesada do agonista de GITR 49D9 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00602] A SEQ ID NO: 385 é a sequência de aminoácido da CDR2 da cadeia pesada do agonista de GITR 49D9 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00603] A SEQ ID NO: 386 é a sequência de aminoácido da CDR3 da cadeia pesada do agonista de GITR 49D9 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00604] A SEQ ID NO: 387 é a sequência de aminoácido da CDR1 da cadeia leve do agonista de GITR 49D9 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00605] A SEQ ID NO: 388 éa sequência de aminoácido da CDR2 da cadeia leve do agonista de GITR 49D9 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00606] A SEQ ID NO: 389 é a sequência de aminoácido da CDR3 da cadeia leve do agonista de GITR 49D9 da Publicação do Pedido de Patente
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U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00607] A SEQ ID NO: 390 é a sequência de aminoácido da cadeia pesada da Publicação do agonista de GITR 49E2 do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00608] A SEQ ID NO: 391 é a sequência de aminoácido da cadeia leve do agonista de GITR 49E2 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00609] A SEQ ID NO: 392 é a sequência de aminoácido da cadeia pesada variável do agonista de GITR 49E2 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00610] A SEQ ID NO: 393 é a sequência de aminoácido da cadeia leve variável do agonista de GITR 49E2 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00611] A SEQ ID NO: 394 é a sequência de aminoácido da CDR1 da cadeia pesada do agonista de GITR 49E2 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00612] A SEQ ID NO: 395 é a sequência de aminoácido da CDR2 da cadeia pesada do agonista de GITR 49E2 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00613] A SEQ ID NO: 396 é a sequência de aminoácido da CDR3 da cadeia pesada do agonista de GITR 49E2 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00614] A SEQ ID NO: 397 é a sequência de aminoácido da CDR1 da cadeia leve do agonista de GITR 49E2 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00615] A SEQ ID NO: 398 é a sequência de aminoácido da CDR2 da cadeia leve do agonista de GITR 49E2 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00616] A SEQ ID NO: 399 é a sequência de aminoácido da CDR3 da
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125/497 cadeia leve do agonista de GITR 49E2 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00617] A SEQ ID NO: 400 é a sequência de aminoácido da cadeia pesada do agonista de GITR 48A9 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00618] A SEQ ID NO: 401 é a sequência de aminoácido da cadeia leve do agonista de GITR 48A9 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00619] A SEQ ID NO: 402 é a sequência de aminoácido da cadeia pesada variável do agonista de GITR 48A9 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00620] A SEQ ID NO: 403 é a sequência de aminoácido da cadeia leve variável do agonista de GITR 48A9 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00621] A SEQ ID NO: 404 é a sequência de aminoácido da CDR1 da cadeia pesada do agonista de GITR 48A9 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00622] A SEQ ID NO: 405 é a sequência de aminoácido CDR2 da cadeia pesada do agonista de GITR 48A9 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00623] A SEQ ID NO: 406 é a sequência de aminoácido da CDR3 da cadeia pesada do agonista de GITR 48A9 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00624] A SEQ ID NO: 407 é a sequência de aminoácido da CDR1 da cadeia leve do agonista de GITR 48A9 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00625] A SEQ ID NO: 408 é a sequência de aminoácido da CDR2 da cadeia leve do agonista de GITR 48A9 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
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126/497 [00626] A SEQ ID NO: 409 é a sequência de aminoácido da CDR3 da cadeia leve do agonista de GITR 48A9 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00627] A SEQ ID NO: 410 é a sequência de aminoácido da cadeia pesada do agonista de GITR 5H7 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00628] A SEQ ID NO: 411 é a sequência de aminoácido da cadeia leve do agonista de GITR 5H7 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00629] A SEQ ID NO: 412 é a sequência de aminoácido da cadeia pesada variável do agonista de GITR 5H7 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00630] A SEQ ID NO: 413 é a sequência de aminoácido da cadeia leve variável do agonista de GITR 5H7 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00631] A SEQ ID NO: 414 é a sequência de aminoácido da CDR1 da cadeia pesada do agonista de GITR 5H7 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00632] A SEQ ID NO: 415 é a sequência de aminoácido da CDR2 da cadeia pesada do agonista de GITR 5H7 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00633] A SEQ ID NO: 416 é a sequência de aminoácido da CDR3 da cadeia pesada do agonista de GITR 5H7 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00634] A SEQ ID NO: 417 é a sequência de aminoácido da CDR1 da cadeia leve do agonista de GITR 5H7 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00635] A SEQ ID NO: 418 é a sequência de aminoácido da CDR2 da cadeia leve do agonista de GITR 5H7 da Publicação do Pedido de Patente
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127/497
U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00636] A SEQ ID NO: 419 é a sequência de aminoácido da CDR3 da cadeia leve do agonista de GITR 5H7 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00637] A SEQ ID NO: 420 é a sequência de aminoácido da cadeia pesada do agonista de GITR 7A10 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00638] A SEQ ID NO: 421 é a sequência de aminoácido da cadeia leve do agonista de GITR 7A10 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00639] A SEQ ID NO: 422 é a sequência de aminoácido da cadeia pesada variável do agonista de GITR 7A10 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00640] A SEQ ID NO: 423 é a sequência de aminoácido da cadeia leve variável do agonista de GITR 7A10 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00641] A SEQ ID NO: 424 é a sequência de aminoácido da CDR1 da cadeia pesada do agonista de GITR 7A10 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00642] A SEQ ID NO: 425 é a sequência de aminoácido da CDR2 da cadeia pesada do agonista de GITR 7A10 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00643] A SEQ ID NO: 426 é a sequência de aminoácido da CDR3 da cadeia pesada do agonista de GITR 7A10 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00644] A SEQ ID NO: 427 é a sequência de aminoácido da CDR1 da cadeia leve do agonista de GITR 7A10 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00645] A SEQ ID NO: 428 é a sequência de aminoácido da CDR2 da
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128/497 cadeia leve do agonista de GITR 7A10 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00646] A SEQ ID NO: 429 é a sequência de aminoácido da CDR3 da cadeia leve do agonista de GITR 7A10 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00647] A SEQ ID NO: 430 é a sequência de aminoácido da cadeia pesada do agonista de GITR 9H6 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00648] A SEQ ID NO: 431 é a sequência de aminoácido da cadeia leve do agonista de GITR 9H6 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00649] A SEQ ID NO: 432 é a sequência de aminoácido da cadeia pesada variável do agonista de GITR 9H6 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00650] A SEQ ID NO: 433 é a sequência de aminoácido da cadeia leve variável do agonista de GITR 9H6 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00651] A SEQ ID NO: 434 é a sequência de aminoácido da CDR1 da cadeia pesada do agonista de GITR 9H6 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00652] A SEQ ID NO: 435 é a sequência de aminoácido da CDR2 da cadeia pesada do agonista de GITR 9H6 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00653] A SEQ ID NO: 436 é a sequência de aminoácido da CDR3 da cadeia pesada do agonista de GITR 9H6 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00654] A SEQ ID NO: 437 é a sequência de aminoácido da CDR1 da cadeia leve do agonista de GITR 9H6 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
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129/497 [00655] A SEQ ID NO: 438 é a sequência de aminoácido da CDR2 da cadeia leve do agonista de GITR 9H6 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00656] A SEQ ID NO: 439 é a sequência de aminoácido da CDR3 da cadeia leve do agonista de GITR 9H6 da Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al.
[00657] A SEQ ID NO: 440 é uma sequência de aminoácido do ligante de GITR (GITRL).
[00658] A SEQ ID NO: 441 é uma porção solúvel do polipeptídeo de GITRL.
[00659] A SEQ ID NO: 442 é a sequência de aminoácido de HVEM humano (CD270).
[00660] A SEQ ID NO: 443 é uma sequência de aminoácido do ligante de HVEM (LIGHT).
[00661] A SEQ ID NO: 444 é uma porção solúvel do polipeptídeo de LIGHT.
[00662] A SEQ ID NO: 445 é uma porção solúvel alternativa do polipeptídeo de LIGHT.
[00663] A SEQ ID NO: 446 é uma porção solúvel alternativa do polipeptídeo de LIGHT.
[00664] A SEQ ID NO: 447 é a sequência de aminoácido da isoforma de CD95 humano.
[00665] A SEQ ID NO: 448 é a sequência de aminoácido da isoforma de CD95 humano.
[00666] A SEQ ID NO: 449 é a sequência de aminoácido da isoforma de CD95 humano.
[00667] A SEQ ID NO: 450 é a sequência de aminoácido da isoforma de CD95 humano.
[00668] A SEQ ID NO: 451 é a região variável da cadeia pesada (Vh)
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130/497 para o anticorpo monoclonal de E09 agonista de CD95.
[00669] A SEQ ID NO: 452 é a região variável da cadeia leve (Vl) para o anticorpo monoclonal E09 agonista de CD95.
[00670] A SEQ ID NO: 453 é a CDR1 da cadeia pesada para o anticorpo monoclonal E09 agonista de CD95.
[00671] A SEQ ID NO: 454 é a CDR2 da cadeia pesada para o anticorpo monoclonal E09 agonista de CD95.
[00672] A SEQ ID NO: 455 é a CDR3 da cadeia pesada para o anticorpo monoclonal E09 agonista de CD95.
[00673] A SEQ ID NO: 456 é a CDR1 da cadeia leve para o anticorpo monoclonal E09 agonista de CD95.
[00674] A SEQ ID NO: 457 é a CDR2 da cadeia leve para o anticorpo monoclonal E09 agonista de CD95.
[00675] A SEQ ID NO: 458 é a CDR3 da cadeia leve para o anticorpo monoclonal E09 agonista de CD95.
[00676] A SEQ ID NO: 459 é uma sequência de aminoácido do ligante de CD95 (CD95L).
[00677] A SEQ ID NO: 460 é uma porção solúvel do polipeptídeo de CD95L.
[00678] A SEQ ID NO: 461 é uma porção solúvel alternativa do polipeptídeo de CD95L.
[00679] A SEQ ID NO: 462 é uma porção solúvel alternativa do polipeptídeo de CD95L.
[00680] A SEQ ID NO: 463 é a sequência de aminoácido da cadeia pesada do inibidor de PD-1 nivolumab.
[00681] A SEQ ID NO: 464 é a sequência de aminoácido da cadeia leve do inibidor de PD-1 nivolumab.
[00682] A SEQ ID NO: 465 é a sequência de aminoácido da região variável da cadeia pesada (VH) do inibidor de PD-1 nivolumab.
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131/497 [00683] A SEQ ID NO: 466 é a sequência de aminoácido da região variável da cadeia leve (VL) do inibidor de PD-1 nivolumab.
[00684] A SEQ ID NO: 467 é a sequência de aminoácido da CDR1 da cadeia pesada do inibidor de PD-1 nivolumab.
[00685] A SEQ ID NO: 468 é a sequência de aminoácido da CDR2 da cadeia pesada do inibidor de PD-1 nivolumab.
[00686] A SEQ ID NO: 469 é a sequência de aminoácido da CDR3 da cadeia pesada do inibidor de PD-1 nivolumab.
[00687] A SEQ ID NO: 470 é a sequência de aminoácido da CDR1 da cadeia leve do inibidor de PD-1 nivolumab.
[00688] A SEQ ID NO: 471 é a sequência de aminoácido da CDR2 da cadeia leve do inibidor de PD-1 nivolumab.
[00689] A SEQ ID NO: 472 é a sequência de aminoácido da CDR3 da cadeia leve do inibidor de PD-1 nivolumab.
[00690] A SEQ ID NO: 473 é a sequência de aminoácido da cadeia pesada do inibidor de PD-1 pembrolizumab.
[00691] A SEQ ID NO: 474 é a sequência de aminoácido da cadeia leve do inibidor de PD-1 pembrolizumab.
[00692] A SEQ ID NO: 475 é a sequência de aminoácido da região variável da cadeia pesada (VH) do inibidor de PD-1 pembrolizumab.
[00693] A SEQ ID NO: 476 é a sequência de aminoácido da região variável da cadeia leve (VL) do inibidor de PD-1 pembrolizumab.
[00694] A SEQ ID NO: 477 é a sequência de aminoácido da CDR1 da cadeia pesada do inibidor de PD-1 pembrolizumab.
[00695] A SEQ ID NO: 478 é a sequência de aminoácido da CDR2 da cadeia pesada do inibidor de PD-1 pembrolizumab.
[00696] A SEQ ID NO: 479 é a sequência de aminoácido da CDR3 da cadeia pesada do inibidor de PD-1 pembrolizumab.
[00697] A SEQ ID NO: 480 é a sequência de aminoácido da CDR1 da
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132/497 cadeia leve do inibidor de PD-1 pembrolizumab.
[00698] A SEQ ID NO: 481 é a sequência de aminoácido da CDR2 da cadeia leve do inibidor de PD-1 pembrolizumab.
[00699] A SEQ ID NO: 482 é a sequência de aminoácido da CDR3 da cadeia leve do inibidor de PD-1 pembrolizumab.
[00700] A SEQ ID NO: 483 é a sequência de aminoácido da cadeia pesada do inibidor de PD-L1 durvalumab.
[00701] A SEQ ID NO: 484 é a sequência de aminoácido da cadeia leve do inibidor de PD-L1 durvalumab.
[00702] A SEQ ID NO: 485 é a sequência de aminoácido da região variável da cadeia pesada (VH) do inibidor de PD-L1 durvalumab.
[00703] A SEQ ID NO: 486 é a sequência de aminoácido da região variável da cadeia leve (VL) do inibidor de PD-L1 durvalumab.
[00704] A SEQ ID NO: 487 é a sequência de aminoácido da CDR1 da cadeia pesada do inibidor de PD-L1 durvalumab.
[00705] A SEQ ID NO: 488 é a sequência de aminoácido da CDR2 da cadeia pesada do inibidor de PD-L1 durvalumab.
[00706] A SEQ ID NO: 489 é a sequência de aminoácido da CDR3 da cadeia pesada do inibidor de PD-L1 durvalumab.
[00707] A SEQ ID NO: 490 é a sequência de aminoácido da CDR1 da cadeia leve do inibidor de PD-L1 durvalumab.
[00708] A SEQ ID NO: 491 é a sequência de aminoácido da CDR2 da cadeia leve do inibidor de PD-L1 durvalumab.
[00709] A SEQ ID NO: 492 é a sequência de aminoácido da CDR3 da cadeia leve do inibidor de PD-L1 durvalumab.
[00710] A SEQ ID NO: 493 é a sequência de aminoácido da cadeia pesada do inibidor de PD-L1 avelumab.
[00711] A SEQ ID NO: 494 é a sequência de aminoácido da cadeia leve do inibidor de PD-L1 avelumab.
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133/497 [00712] A SEQ ID NO: 495 é a sequência de aminoácido da região variável da cadeia pesada (VH) do inibidor de PD-L1 avelumab.
[00713] A SEQ ID NO: 496 é a sequência de aminoácido da região variável da cadeia leve (VL) do inibidor de PD-L1 avelumab.
[00714] A SEQ ID NO: 497 é a sequência de aminoácido da CDR1 da cadeia pesada do inibidor de PD-L1 avelumab.
[00715] A SEQ ID NO: 498 é a sequência de aminoácido da CDR2 da cadeia pesada do inibidor de PD-L1 avelumab.
[00716] A SEQ ID NO: 499 é a sequência de aminoácido da CDR3 da cadeia pesada do inibidor de PD-L1 avelumab.
[00717] A SEQ ID NO: 500 é a sequência de aminoácido da CDR1 da cadeia leve do inibidor de PD-L1 avelumab.
[00718] A SEQ ID NO: 501 é a sequência de aminoácido da CDR2 da cadeia leve do inibidor de PD-L1 avelumab.
[00719] A SEQ ID NO: 502 é a sequência de aminoácido da CDR3 da cadeia leve do inibidor de PD-L1 avelumab.
[00720] A SEQ ID NO: 503 é a sequência de aminoácido da cadeia pesada do inibidor de PD-L1 atezolizumab.
[00721] A SEQ ID NO: 504 é a sequência de aminoácido da cadeia leve do inibidor de PD-L1 atezolizumab.
[00722] A SEQ ID NO: 505 é a sequência de aminoácido da região variável da cadeia pesada (VH) do inibidor de PD-L1 atezolizumab.
[00723] A SEQ ID NO: 506 é a sequência de aminoácido da região variável da cadeia leve (VL) do inibidor de PD-L1 atezolizumab.
[00724] A SEQ ID NO: 507 é a sequência de aminoácido da CDR1 da cadeia pesada do inibidor de PD-L1 atezolizumab.
[00725] A SEQ ID NO: 508 é a sequência de aminoácido da CDR2 da cadeia pesada do inibidor de PD-L1 atezolizumab.
[00726] A SEQ ID NO: 509 é a sequência de aminoácido da CDR3 da
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134/497 cadeia pesada do inibidor de PD-L1 atezolizumab.
[00727] A SEQ ID NO: 510 é a sequência de aminoácido da CDR1 da cadeia leve do inibidor de PD-L1 atezolizumab.
[00728] A SEQ ID NO: 511 é a sequência de aminoácido da CDR2 da cadeia leve do inibidor de PD-L1 atezolizumab.
[00729] A SEQ ID NO: 512éa sequência de aminoácido da CDR3 da cadeia leve do inibidor de PD-L1 atezolizumab.
DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO [00730] A menos que de outro modo definido, todos os termos técnicos e científicos aqui usados têm o mesmo significado como é habitualmente entendido por uma pessoa de habilidade na técnica à qual esta invenção pertence. Todas as patentes e publicações aqui aludidas são incorporadas por referência em suas totalidades.
Definições [00731] Os termos “coadministração,” “coadministrar,” “administrado em combinação com,” “administrar em combinação com,” “simultâneo,” e “concorrente,” como aqui usados, abrangem a administração de dois ou mais ingredientes farmacêuticos ativos (em uma modalidade preferida da presente invenção, por exemplo, pelo menos um agonista de TNFRSF e uma pluralidade de TILs) a um sujeito de modo que ambos os ingredientes farmacêuticos ativos e/ou seus metabólitos estejam presentes no sujeito ao mesmo tempo. A coadministração inclui a administração simultânea em composições separadas, a administração em tempos diferentes em composições separadas, ou administração em uma composição em que dois ou mais ingredientes farmacêuticos ativos estejam presentes. A administração simultânea em composições separadas e a administração em uma composição em que ambos os agentes estão presentes são preferidas.
[00732] O termo “expansão rápida” significa um aumento no número de TILs específicos de antígeno de pelo menos cerca de 3 vezes (ou 4, 5, 6, 7,
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8, ou 9 vezes) em um período de uma semana, mais preferivelmente pelo menos cerca de 10 vezes (ou 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, ou 90 vezes) em um período de uma semana, ou o mais preferivelmente pelo menos cerca de 100 vezes em um período de uma semana. Vários protocolos de expansão rápida são aqui descritos.
[00733] Por “linfócitos infiltrantes de tumor” ou “TILs” aqui é intencionada uma população de células originalmente obtidas como células sanguíneas brancas que deixaram a corrente sanguínea de um sujeito e migraram para dentro de um tumor. TILs incluem, mas não são limitados a, células T CD8+ citotóxicas (linfócitos), células T CD4+ Thl e Thl7, células matadoras naturais, células dendríticas e macrófagos Ml. TILs incluem tanto TILs primários quanto secundários. “TILs primários” são aqueles que são obtidos de amostras de tecido do paciente como esboçado aqui (algumas vezes aludidos como “recém colhidos”), e “TILs secundários” são quaisquer populações de célula de TIL que tenham sido expandidas ou proliferadas como aqui debatido, incluindo, mas não limitados a TILs volumosos e TILs expandidos (“TILs REP” ou “TILs pós-REP”).
[00734] Por “população de células” (incluindo TILs) aqui é intencionado várias células que compartilham traços comuns. No geral, as populações geralmente variam de 1 X 106 a 1 X 1010 em número, com populações de TIL diferentes compreendendo números diferentes. Por exemplo, o crescimento inicial de TILs primários na presença de IL-2 resulta em uma população de TILs volumosos de aproximadamente 1 x 108 células. A expansão de REP é geralmente deita para prover populações de 1,5 x 109 a
1,5 x 1010 células para infusão.
[00735] O termo “célula T de memória central” refere-se a um subconjunto de células T que no ser humano são CD45R0+ e constitutivamente expressam CCR7 (CCR7hl) e CD62L (CD62hl). O fenótipo superficial das células T de memória central também inclui TCR, CD3,
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CD 127 (IL-7R), e IL-15R. Os fatores de transcrição para as células T de memória central incluem BCL-6, BCL-6B, MBD2, e BMI1. As células T de memória central primariamente secretam IL-2 e CD40L como moléculas efetoras depois da deflagração de TCR. As células T de memória central são predominantes nos compartimentos CD4 no sangue, e no ser humano são proporcionalmente enriquecidas em linfônodos e amígdalas.
[00736] O termo “anticorpo anti-CD3” refere-se a um anticorpo ou variante dos mesmos, por exemplo, um anticorpo monoclonal e incluindo anticorpos humanos, humanizados, quiméricos ou murinos que são direcionados contra o receptor de CD3 no receptor antigênico de célula T de células T maduras. Os anticorpos anti-CD3 incluem OKT-3, também conhecido como muromonabe. Os anticorpos anti-CD3 também incluem o clone UHCT1, também conhecido como T3 e CD3e. Outros anticorpos antiCD3 incluem, por exemplo, otelixizumab, teplizumab, e visilizumab.
[00737] O termo “OKT-3” (também aqui aludido como “OKT3”) refere-se a um anticorpo monoclonal ou biossimilar ou variante do mesmo, incluindo anticorpos humanos, humanizado, quiméricos, ou murinos, direcionados contra o receptor de CD3 no receptor antigênico de célula T de células T maduras, e incluem formas comercialmente disponíveis tais como OKT-3 (30 ng/mL, MACS GMP CD3 puro, Miltenyi Biotech, Inc., San Diego, CA, USA) e muromonabe ou variantes, substituições de aminoácido conservativas, glicoformas, ou biossimilares dos mesmos. As sequências de aminoácidos das cadeias pesada e leve de muromonabe são dadas na Tabela 1 (SEQ ID NO: 1 e SEQ ID NO: 2).
TABELA L Sequências de aminoácidos de muromonabe.________________ | Identificador | Sequência (Símbolos de Aminoácido de Uma Letra)
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| SEQ ID NO: 1 cadeia pesada de Muromonabe | QVQLQQSGAE LARPGASVKM SCKASGYTFT RYTMHWVKQR PGQGLEWIGY INPSRGYTNY 60 NQKFKDKATL TTDKSSSTAY MQLSSLTSED SAVYYCARYY DDHYCLDYWG QGTTLTVSSA 120 KTTAPSVYPL APVCGGTTGS SVTLGCLVKG YFPEPVTLTW NSGSLSSGVH TFPAVLQSDL 180 YTLSSSVTVT SSTWPSQSIT CNVAHPASST KVDKKIEPRP KSCDKTHTCP PCPAPELLGG 240 PSVFLFPPKP KDTLMISRTP EVTCVVVDVS HEDPEVKFNW YVDGVEVHNA KTKPREEQYN 300 STYRVVSVLT VLHQDWLNGK EYKCKVSNKA LPAPIEKTIS KAKGQPREPQ VYTLPPSRDE 360 LTKNQVSLTC LVKGFYPSDI AVEWESNGQP ENNYKTTPPV LDSDGSFFLY SKLTVDKSRW 420 QQGNVFSCSV MHEALHNHYT QKSLSLSPGK 450 |
| SEQ ID NO: 2 cadeia leve de Muromonabe | QIVLTQSPAI MSASPGEKVT MTCSASSSVS YMNWYQQKSG TSPKRWIYDT SKLASGVPAH 60 FRGSGSGTSY SLTISGMEAE DAATYYCQQW SSNPFTFGSG TKLEINRADT APTVSIFPPS 120 SEQLTSGGAS VVCFLNNFYP KDINVKWKID GSERQNGVLN SWTDQDSKDS TYSMSSTLTL 180 TKDEYERHNS YTCEATHKTS TSPIVKSFNR NEC 213 |
[00738] O termo “IL-2” (também aqui aludido como “IL2”) refere-se ao fator de crescimento de célula T conhecido como interleucina-2, e inclui todas as formas de IL-2 incluindo as formas humanas e de mamífero, substituições de aminoácido conservativas, glicoformas, biossimilares, e variantes dos mesmos. A IL-2 está descrita, por exemplo, em Nelson, J. Immunol. 2004, 172, 3983-88 e Malek, Annu. Rev. Immunol. 2008, 26, 45379, as divulgações das quais são aqui incorporadas por referência. A sequência de aminoácidos de IL-2 humana recombinante adequada para o uso na invenção é dada na Tabela 2 (SEQ ID NO: 3). Por exemplo, o termo IL-2 abrange as formas humana, recombinante de IL-2 tais como aldesleucina (PROLEUCINA, comercialmente disponível de múltiplos fornecedores em 22 milhões de IU por frasco de uso único), assim como a forma de IL-2 recombinante comercialmente suprida pela CellGenix, Inc., Portsmouth, NH, USA (CELLGRO GMP) ou ProSpec-Tany TechnoGene Ltd., East Brunswick, NJ, USA (Cat. No. CYT-209-b) e outros equivalentes comerciais de outros vendedores. A aldesleucina (des-alanil-1, serina-125 IL-2 humana) é uma forma recombinante humana não glicosilada de IL-2 com um peso molecular de aproximadamente 15 kDa. A sequência de aminoácidos de
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138/497 aldesleucina adequada para o uso na invenção é dada na Tabela 2 (SEQ ID NO: 4). O termo IL-2 também abrange formas peguiladas de IL-2, como aqui descritas, incluindo o pró-fármaco de IL2 peguilada NKTR-214, disponível da Nektar Therapeutics, South San Francisco, CA, USA. NKTR-214 e IL-2 peguilada adequados para o uso na invenção são descritos na Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2014/0328791 Al e Publicação do Pedido de Patente Internacional No. WO 2012/065086 Al, as divulgações das quais são aqui incorporadas por referência. As formas alternativas de IL-2 conjugada adequadas para o uso na invenção são descritas nas Patentes U.S. Nos. 4.766.106, 5.206.344, 5.089.261 e 4902.502, as divulgações das quais são aqui incorporadas por referência. As formulações de IL-2 adequadas para o uso na invenção são descritas na Patente U.S. No. 6.706.289, a divulgação das quais são aqui incorporadas por referência.
TABELA 2. Sequências de aminoácidos de interleucinas.
| Identificador | Sequência (Símbolos de Aminoácido de Uma Letra) |
| SEQ ID NO: 3 IL-2 recombinante humana (rhIL-2) | MAPTSSSTKK TQLQLEHLLL DLQMILNGIN NYKNPKLTRM LTFKFYMPKK ATELKHLQCL 60 EEELKPLEEV LNLAQSKNFH LRPRDLISNI NVIVLELKGS ETTFMCEYAD ETATIVEFLN 120 RWITFCQSII STLT 134 |
| SEQ ID NO: 4 Aldesleucina | PTSSSTKKTQ LQLEHLLLDL QMILNGINNY KNPKLTRMLT FKFYMPKKAT ELKHLQCLEE 60 ELKPLEEVLN LAQSKNFHLR PRDLISNINV IVLELKGSET TFMCEYADET ATIVEFLNRW 120 ITFSQSIIST LT 132 |
| SEQ ID NO: 5 IL-4 recombinante humana (rhIL-4) | MHKCDITLQE IIKTLNSLTE QKTLCTELTV TDIFAASKNT TEKETFCRAA TVLRQFYSHH 60 EKDTRCLGAT AQQFHRHKQLIRFLKRLDRN LWGLAGLNSC PVKEANQSTL ENFLERLKTI 120 MREKYSKCSS 130 |
| SEQ ID NO: 6 IL-7 recombinante humana (rhIL-7) | MDCDIEGKDG KQYESVLMVS IDQLLDSMKE IGSNCLNNEF NFFKRHICDA NKEGMFLFRA 60 ARKLRQFLKM NSTGDFDLHL LKVSEGTTIL LNCTGQVKGR KPAALGEAQP TKSLEENKSL 120 KEQKKLNDLC FLKRLLQEIK TCWNKILMGT KEH 153 |
| SEQ ID NO: 7 IL-15 recombinante humana (rhIL-15) | MNWVNVISDL KKIEDLIQSM HIDATLYTES DVHPSCKVTA MKCFLLELQV ISLESGDASI 60 HDTVENLIIL ANNSLSSNGN VTESGCKECE ELEEKNIKEF LQSFVHIVQM FINTS 115 |
| SEQ ID NO: 8 IL-21 recombinante humana (rhIL-21) | MQDRHMIRMR QLIDIVDQLK NYVNDLVPEF LPAPEDVETN CEWSAFSCFQ KAQLKSANTG 60 NNERIINVSI KKLKRKPPST NAGRRQKHRL TCPSCDSYEK KPPKEFLERF KSLLQKMIHQ 120 HLSSRTHGSEDS 132 |
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139/497 [00739] O termo “IL-4” (também aqui aludido como “IL4”) refere-se à citocina conhecida como interleucina 4, que é produzida pelas células T Th2 e pelos eosinófilos, basófilos, e mastoides. A IL-4 regula a diferenciação de células T auxiliares ingênuas (células ThO) para células T Th2. Steinke e Borish, Respir. Res. 2001, 2, 66-70. Na ativação pela IL-4, as células T Th2 subsequentemente produzem IL-4 adicional em uma alça de retroalimentação positiva. A IL-4 também estimula a proliferação de célula B e a expressão de MHC classe II, e induz a comutação de classe para a expressão de IgE e IgGi a partir das células B. a IL-4 recombinante humana adequada para o uso na invenção está comercialmente disponível de múltiplos fornecedores, incluindo ProSpec-Tany TechnoGene Ltd., East Brunswick, NJ, USA (Cat. No. CYT211) e ThermoFisher Scientific, Inc., Waltham, MA, USA (proteína recombinante de IL-15 humana, Cat. No. Gibco CTP0043). A sequência de aminoácidos de IL-4 humana recombinante adequada para o uso na invenção é dada na Tabela 2 (SEQ ID NO: 5).
[00740] O termo “IL-7” (também aqui aludido como “IL7”) refere-se a uma citocina derivada de tecido glicosilada conhecida como interleucina 7, que pode ser obtida a partir de células estrômicas e epiteliais, assim como a partir de células dendríticas. Fry e Mackall, Blood 2002, 99, 3892-904. A IL-7 pode estimular o desenvolvimento de células T. a IL-7 liga-se ao receptor de IL-7, um heterodímero consistindo do receptor alfa de IIL-7 e receptor de cadeia gama comum, que em uma série de sinais importantes para o desenvolvimento de célula T dentro do timo e sobrevivência dentro da periferia. A IL-7 humana recombinante adequada para o uso na invenção está comercialmente disponível de múltiplos fornecedores, incluindo ProSpecTany TechnoGene Ltd., East Brunswick, NJ, USA (Cat. No. CYT-254) e ThermoFisher Scientific, Inc., Waltham, MA, USA (proteína recombinante IL-7 humana, Cat. No. Gibco PHC0071). A sequência de aminoácidos de IL7 recombinante humana adequada para o uso na invenção é dada na Tabela 2
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[00741] O termo “IL-15” (também aqui aludido como “IL15”) referese ao fator de crescimento de célula T conhecido como interleucina-15, e inclui todas as formas de IL-15 incluindo as formas humanas e de mamífero, substituições de aminoácido conservativas, glicoformas, biossimilares, e variantes das mesmas. IL-15 está descrita, por exemplo, em Fehniger e Caligiuri, Blood 2001, 97, 14-32, a divulgação da qual é aqui incorporada por referência. IL-15 compartilha as subunidades do receptor de sinalização β e γ com IL-2. A IL-15 recombinante humana é uma cadeia de polipeptídeo única, não glicosilada contendo 114 aminoácidos (e uma metionina no terminal N) com uma massa molecular de 12,8 kDa. A IL-15 recombinante humana está comercialmente disponível de múltiplos fornecedores, incluindo ProSpecTany TechnoGene Ltd., East Brunswick, NJ, USA (Cat. No. CYT-230-b) e ThermoFisher Scientific, Inc., Waltham, MA, USA (proteína recombinante de IL-15 humana, Cat. No. 34-8159-82). A sequência de aminoácidos da IL-15 recombinante humana adequada para o uso na invenção é dada na Tabela 2 (SEQ ID NO: 7).
[00742] O termo “IL-21” (também aqui aludido como “IL21”) referese à proteína de citocina pleiotrópica conhecida como interleucina-21, e inclui todas as formas de IL-21 incluindo as formas humanas e de mamífero, substituições de aminoácido conservativas, glicoformas, biossimilares, e variantes da mesma. A IL-21 está descrita, por exemplo, em Spolski e Leonard, Nat. Rev. Drug. Disc. 2014,13, 379-95, a divulgação da qual é aqui incorporada por referência. A IL-21 é primariamente produzida pelas células matadoras naturais e células T CD4+ humanas ativadas. A IL-21 recombinante humana é uma cadeia de polipeptídeo única, não glicosilada contendo 132 aminoácidos com uma massa molecular de 15,4 kDa. A IL-21 recombinante humana está comercialmente disponível de múltiplos fornecedores, incluindo ProSpec-Tany TechnoGene Ltd., East Brunswick, NJ, USA (Cat. No. CYT
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408-b) e ThermoFisher Scientific, Inc., Waltham, MA, USA (proteína recombinante de IL-21 humana, Cat. No. 14-8219-80). A sequência de aminoácidos da IL-21 recombinante humana adequada para o uso na invenção é dada na Tabela 2 (SEQ ID NO: 8).
[00743] O termo “m vivo” refere-se a um evento que ocorre em um corpo do sujeito mamífero.
[00744] O termo “ex vivo” refere-se a um evento que ocorre fora de um corpo do sujeito mamífero, em um ambiente artificial.
[00745] O termo “m vitro” refere-se a um evento que ocorre em um sistema de teste. Os ensaios in vitro abrangem ensaios com base em célula em que células vivas ou mortas podem ser são utilizadas e também podem abranger um ensaio livre de célula em que nenhuma célula intacta é utilizada.
[00746] O termo “quantidade eficaz” ou “quantidade terapeuticamente eficaz” refere-se àquela quantidade de um composto ou combinação de compostos como aqui descritos que seja suficiente para efetuar a aplicação pretendida incluindo, mas não limitada a, tratamento de doença. Uma quantidade terapeuticamente eficaz pode variar dependendo da aplicação pretendida (m vitro ou in vivo), ou do sujeito e condição de doença sendo tratada (por exemplo, o peso, idade e gênero do sujeito), da severidade da condição de doença, ou da maneira de administração. O termo também aplicase a uma dose que induzirá uma resposta particular em células alvo (por exemplo, a redução de adesão de plaqueta e/ou migração celular). A dose específica variará dependendo dos compostos particulares escolhidos, do regime de dosagem a ser seguida, se o composto é administrado em combinação com outros compostos, cronometragem da administração, do tecido ao qual o mesmo é administrado, e do sistema de distribuição física no qual o composto é transmitido.
[00747] Um “efeito terapêutico” como este termo é aqui usado, abrange um benefício terapêutico e/ou um benefício profilático. Um efeito
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142 / 497 profilático inclui retardar ou eliminar o aparecimento de uma doença ou condição, retardar ou eliminar o início de sintomas de uma doença ou condição, diminuir a velocidade, parar, ou reverter a progressão de uma doença ou condição, ou qualquer combinação dos mesmos.
[00748] Os termos “QD,” “qd,” ou “q.d.” significam quaque die, uma vez por dia, ou uma vez ao dia. Os termos “BID,” “bid,” ou “b.i.d.” significam bis in die, duas vezes por dia, ou duas vezes ao dia. Os termos “TID,” “tid,” ou “t.i.d.” significam ter in die, três vezes por dia, ou três vezes ao dia. Os termos “QID,” “qid,” ou “q.i.d.” significa quater in die, quatro vezes por dia, ou quatro vezes ao dia.
[00749] O termo “sal farmaceuticamente aceitável” refere-se ao sais derivados de uma variedade de contraíons orgânicos e inorgânicos conhecidos na técnica. Os sais de adição de ácido farmaceuticamente aceitáveis podem ser formado com ácidos inorgânicos e ácidos orgânicos. Os ácidos inorgânicos preferidos a partir dos quais sais podem ser derivados incluem, por exemplo, ácido clorídrico, ácido bromídrico, ácido sulfúrico, ácido nítrico e ácido fosfórico. Os ácidos orgânicos preferidos a partir dos quais sais podem ser derivados incluem, por exemplo, ácido acético, ácido propiônico, ácido glicólico, ácido pirúvico, ácido oxálico, ácido maléico, ácido malônico, ácido succínico, ácido fumárico, ácido tartárico, ácido cítrico, ácido benzóico, ácido cinâmico, ácido mandélico, ácido metanossulfônico, ácido etanossulfônico, ácido p-toluenossulfônico e ácido salicílico. Os sais de adição de base farmaceuticamente aceitável podem ser formadas com bases inorgânicas e orgânicas. As bases inorgânicas a partir das quais sais podem ser derivados incluem, por exemplo, sódio, potássio, lítio, amônio, cálcio, magnésio, ferro, zinco, cobre, manganês e alumínio. As bases orgânicas a partir das quais sais podem ser derivados incluem, por exemplo, aminas primárias, secundárias, e terciárias, aminas substituídas incluindo aminas substituídas que ocorrem naturalmente, aminas cíclicas e resinas de troca
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143 / 497 iônica básicas. Os exemplos específicos incluem isopropilamina, trimetilamina, dietilamina, trietilamina, tripropilamina, e etanolamina. Em algumas modalidades, o sal de adição de base farmaceuticamente aceitável é escolhido de sais de amônio, potássio, sódio, cálcio, e magnésio. O termo “cocristal” refere-se a um complexo molecular derivado de vários formadores de cocristal conhecidos na técnica. Diferente de um sal, um cocristal tipicamente não envolve a transferência de hidrogênio entre o cocristal e o fármaco, e ao invés envolve interações intermoleculares, tais como ligação de hidrogênio, empilhamento de anel aromático, ou forças dispersivas, entre o formador de cocristal e o fármaco na estrutura cristalina.
[00750] Os termos “carreador farmaceuticamente aceitável” ou “excipiente farmaceuticamente aceitável” são intencionados a incluir qualquer um e todos os solventes, meios de dispersão, revestimentos, agentes antibacterianos e antifúngicos, agentes isotônicos e retardantes de absorção, e ingredientes inertes. O uso de tais carreadores farmaceuticamente aceitáveis ou excipientes farmaceuticamente aceitáveis para ingredientes farmacêuticos ativos é bem conhecido na técnica. Exceto na medida em que qualquer carreador farmaceuticamente aceitável ou excipiente farmaceuticamente aceitável convencionais sejam incompatíveis com o ingrediente farmacêutico ativo, o seu uso nas composições terapêuticas da invenção é considerado. Ingredientes farmacêuticos ativos adicionais, tais como outros fármacos, também podem ser incorporados nas composições, processos e métodos descritos.
[00751] O termo “antígeno” refere-se a uma substância que induz uma resposta imune. Em algumas modalidades, um antígeno é uma molécula capaz de ser ligada por um anticorpo ou um receptor de célula T (TCR) se apresentado pelas moléculas do complexo de histouniformidade maior (MHC). O termo “antígeno”, como aqui usado, também abrange epítopos de célula T. Um antígeno é adicionalmente capaz de ser reconhecido pelo
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144 / 497 sistema imune. Em algumas modalidades, um antígeno é capaz de induzir uma resposta imune humoral ou uma resposta imune celular levando à ativação d linfócitos B e/ou linfócitos T. Em alguns casos, isto pode requerer que o antígeno contenha ou esteja ligado a um epítopo de célula Th. Um antígeno também pode ter um ou mais epítopos (por exemplo, epítopos B e T). Em algumas modalidades, um antígeno preferivelmente reagirá, tipicamente em uma maneira altamente específica e seletiva, com o seu anticorpo ou TCR correspondentes e não com a multidão de outros anticorpos ou TCRs que podem ser induzidos pelo seus antígenos.
[00752] Os termos “anticorpo” e a sua forma plural “anticorpos” referem-se às imunoglobulinas inteiras e qualquer fragmento de ligação a antígeno (“porção de ligação a antígeno”) ou cadeias únicas dos mesmos. Um “anticorpo” refere-se ainda a uma glicoproteína compreendendo pelo menos duas cadeias pesadas (H) e duas cadeias leves (L) interconectadas pelas ligações de dissulfeto, ou uma porção de ligação a antígeno das mesmas. Cada cadeia pesada é compreendida de uma região variável da cadeia pesada (abreviada aqui como Vh) e uma região constante de cadeia pesada. A região constante de cadeia pesada é compreendida de três domínios, CHI, CH2 e CH3. Cada cadeia leve é compreendida de uma região variável da cadeia leve (abreviada aqui como Vl) e uma região constante de cadeia leve. A região constante de cadeia leve é compreendida de um domínio, Cl. As regiões Vh e Vl de um anticorpo podem ser subdivididas ainda nas regiões de hipervariabilidade, que são aludidas como regiões determinantes de complementaridade (CDR) ou regiões hipervariáveis (HVR), e que podem ser intercaladas com regiões que sejam mais conservadas, denominadas de regiões de armação (FR). Cada Vh e Vl é composta de três CDRs e quatro FRs, dispostas do terminal amino para terminal carbóxi na seguinte ordem: FR1, CDR1, FR2, CDR2, FR3, CDR3, FR4. As regiões variáveis das cadeias pesada e leve contêm um domínio de ligação que interaja com um epítopo ou
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145 / 497 epítopos de antígeno. As regiões constantes dos anticorpos podem mediar a ligação da imunoglobulina aos tecidos ou fatores hospedeiros, incluindo várias células do sistema imune (por exemplo, células efetoras) e o primeiro componente (Clq) do sistema de complemento clássico.
[00753] Os termos “anticorpo monoclonal,” “mab,” “composição de anticorpo monoclonal,” ou suas formas plurais referem-se a uma preparação de moléculas de anticorpo de composição molecular única. Uma composição de anticorpo monoclonal demonstra uma especificidade e afinidade de ligação únicas para um epitopo particular. Anticorpos monoclonais específicos para receptores de TNFRSF podem ser fabricados usando o conhecimento e habilidade na técnica de injetar sujeitos de teste com o antígeno adequado e depois isolar hibridomas expressando anticorpos tendo a sequência ou características funcionais desejadas. O DNA codificando os anticorpos monoclonais é prontamente isolado e sequenciado usando procedimentos convencionais (por exemplo, usando-se sondas de oligonucleotídeo que são capazes de ligar especificamente aos genes codificando as cadeias pesadas e leves dos anticorpos monoclonais). As células de hibridoma servem como uma fonte preferida de tal DNA. Uma vez isolado, o DNA pode ser colocado dentro de vetores de expressão, que são depois transfectados em células hospedeiras tais como células de E. coli, células COS símias, células do ovário do hamster chinês (CHO), ou células de mieloma que de outro modo não produzem proteína de imunoglobulina, para obter a síntese de anticorpos monoclonais nas células hospedeiras recombinantes. A produção de anticorpos recombinantes será descrita em mais detalhes abaixo.
[00754] Os termos “porção de ligação a antígeno” ou “fragmento de ligação a antígeno” de um anticorpo (ou simplesmente a “porção de anticorpo” ou “fragmento”), como aqui usado, refere-se a um ou mais fragmentos de um anticorpo que retêm a capacidade para ligar especificamente a um antígeno. Foi mostrado que a função de ligação a
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146 / 497 antígeno de um anticorpo pode ser realizada pelos fragmentos de um anticorpo de tamanho natural. Os exemplos de fragmentos de ligação abrangidos dentro do termo “porção de ligação a antígeno” de um anticorpo incluem (i) um fragmento Fab, um fragmento monovalente consistindo dos domínios Vl, Vh, Cl e CHI; (ii) um fragmento F(ab’)2, um fragmento bivalente compreendendo dois fragmentos Fab ligados por uma ponte de dissulfeto na região de dobradiça; (iii) um fragmento Fd consistindo dos domínios Vh e CHI; (iv) um fragmento Fv consistindo dos domínios Vl e Vh de um braço único de um anticorpo, (v) um fragmento de anticorpo de domínio (dAb) (Ward, et al., Nature, 1989, 341, 544-546), que pode consistir de um domínio Vh ou um Vl; e (vi) uma região determinante de complementaridade isolada (CDR). Além disso, embora os dois domínios do fragmento Fv, Vl e Vh, são codificados pelos genes separados, eles podem ser juntados, usando métodos recombinantes, por um ligante sintético que os possibilitam ser fabricado como uma cadeia de proteína única em que o par de regiões Vl e Vh emparelham para formar moléculas monovalentes conhecidas como Fv de cadeia única (scFv); ver, por exemplo, Bird, et al., Science 1988, 242, 423-426; e Huston, et al., Proc. Natl. Acad. Sei. USA 1988, 85, 58795883). Tais anticorpos scFv também são intencionados ser abrangidos dentro dos termos “porção de ligação a antígeno” ou “fragmento de ligação a antígeno” de um anticorpo. Estes fragmentos de anticorpo são obtidos usando técnicas convencionais conhecidas por aqueles versados na técnica, e os fragmentos são triados quanto a utilidade da mesma maneira como o são os anticorpos intactos.
[00755] O termo “anticorpo humano,” como aqui usado, é intencionado incluir anticorpos tendo regiões variáveis em que tanto a armação quanto as regiões de CDR são derivadas de sequências da imunoglobulina da linha germinativa humana. Além disso, se o anticorpo contém uma região constante, a região constante também é derivada das
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147 / 497 sequências de imunoglobulina da linha germinativa humana. Os anticorpos humanos da invenção podem incluir resíduos de aminoácido não codificados pelas sequências de imunoglobulina da linha germinativa humana (por exemplo, mutações introduzidas pela mutagênese aleatória ou loco-específica in vitro ou pela mutação somática in vivo). O termo “anticorpo humano”, como aqui usado, não é intencionado a incluir anticorpos em que as sequências de CDR derivadas da linha germinativa de uma outra espécie mamífera, tal como um camundongo, foram enxertadas nas sequências da armação humana.
[00756] O termo “anticorpo monoclonal humano” refere-se aos anticorpos demonstrando uma especificidade de ligação única que têm regiões variáveis em que as regiões tanto de armação quanto de CDR são derivadas de sequências de imunoglobulina da linha germinativa humana. Em uma modalidade, os anticorpos monoclonais humanos são produzidos por um hibridoma que inclui uma célula B obtida de um animal não humano transgênico, por exemplo, um camundongo transgênico, tendo um genoma compreendendo um transgene de cadeia pesada humana e um transgene de cadeia leve fundido a uma célula imortalizada.
[00757] O termo “anticorpo recombinante humano”, como aqui usado, inclui todos os anticorpos humanos que são preparados, expressos, criados ou isolados pelos meios recombinantes, tais como (a) anticorpos isolados de um animal (tal como um camundongo) que seja transgênico ou transcromossômico para genes da imunoglobulina humana ou um hibridoma preparado a partir destes (descritos mais abaixo), (b) anticorpos isolados de uma célula hospedeira transformada para expressar o anticorpo humano, por exemplo, de um transfectoma, (c) anticorpos isolados de uma biblioteca de anticorpo humano recombinante, combinatório, e (d) anticorpos preparados, expressos, criados ou isolados por qualquer outro meio que envolva a junção de sequências de gene da imunoglobulina humana a outras sequências de
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DNA. Tais anticorpos humanos recombinantes têm regiões variáveis em que a armação e regiões de CDR são derivadas de sequências de imunoglobulina da linha germinativa humana. Em certas modalidades, entretanto, tais anticorpos humanos recombinantes podem ser submetidos à mutagênese in vitro (ou, quando um animal transgênico para as sequências da Ig humana é usado, mutagênese somática in vivo) e assim as sequências de aminoácidos das regiões Vh e Vl dos anticorpos recombinantes são sequências que, embora derivadas das e relacionadas com as sequências VH e VL da linha germinativa humana, podem não existir naturalmente dentro do repertório da linha germinativa de anticorpo humano in vivo.
[00758] Como aqui usado, “isotipo” refere-se à classe de anticorpo (por exemplo, IgM ou IgGl) que é codificado pelos genes da região constante de cadeia pesada.
[00759] As frases “um anticorpo que reconhece um antígeno” e “um anticorpo específico para um antígeno” são usados intercambiavelmente aqui com o termo “um anticorpo que se liga especificamente a um antígeno.” [00760] O termo “derivados de anticorpo humano” refere-se a qualquer forma modificada do anticorpo humano, incluindo um conjugado do anticorpo e um outro ingrediente ou anticorpo farmaceuticamente ativos. Os termos “conjugado,” “conjugado de anticorpo-fármaco”, “ADC,” ou “imunoconjugado” referem-se a um anticorpo, ou um fragmento do mesmo, conjugado a uma outra porção terapêutica, que pode ser conjugada aos anticorpos aqui descritos usando métodos disponíveis na técnica.
[00761] Os termos “anticorpo humanizado,” “anticorpos humanizados,” e “humanizados” são intencionados a se referir aos anticorpos em que as sequências de CDR derivadas da linha germinativa de uma outra espécie de mamífero, tais como um camundongo, foi enxertado nas sequências da armação humana. As modificações da região de armação adicionais podem ser feitas dentro das sequências da armação humana. As
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149 / 497 formas humanizadas de anticorpos não humanos (por exemplo, de murino) são anticorpos quiméricos que contêm sequência mínima derivada de imunoglobulina não humana. Na sua maioria, os anticorpos humanizados são imunoglobulinas humanas (anticorpo receptor) em que os resíduos de uma região hipervariável do receptor são substituídos pelos resíduos de uma região hypervariável 15 de uma espécie não humana (anticorpo doador) tal como camundongo, rato, coelho ou primata não humano tendo a especificidade, afinidade, e capacidade desejadas. Em alguns casos, os resíduos da região de armação Fv (FR) da imunoglobulina humana são substituídos pelos resíduos não humanos correspondentes. Além disso, anticorpos humanizados podem compreender resíduos que não são encontrados no anticorpo receptor ou no anticorpo doador. Estas modificações são feitas para refinar ainda mais o desempenho do anticorpo. No geral, o anticorpo humanizado compreenderá substancialmente todos de pelo menos um, e tipicamente dois, domínios variáveis, em que todas ou substancialmente todas das alças hipervariáveis correspondem àquelas de uma imunoglobulina não humana e todas ou substancialmente todas das regiões FR são aquelas de uma sequência de imunoglobulina humana. O anticorpo humanizado opcionalmente também compreenderá pelo menos uma porção de uma região constante da imunoglobulina (Fc), tipicamente aquela de uma imunoglobulina humana. Para mais detalhes, ver Jones, et al., Nature 1986, 321, 522-525; Riechmann, et al., Nature 1988, 332, 323-329; e Presta, Curr. Op. Struct. Biol. 1992, 2, 593-596. Os agonistas de TNFRSF aqui descritos também podem ser modificados para utilizar qualquer variante Fc que é conhecida comunicar uma melhora (por exemplo, redução) na função efetora e/ou ligação FcR. As variantes Fc podem incluir, por exemplo, qualquer uma das substituições de aminoácido divulgadas nas Publicações de Pedido de Patente Internacional Nos. WO 1988/07089 Al, WO 1996/14339 Al, WO 1998/05787 Al, WO 1998/23289 Al, WO 1999/51642 Al, WO 99/58572 Al, WO 2000/09560
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| A2, WO 2000/32767 Al, WO 2000/42072 A2, WO 2002/44215 A2, | WO WO | |||||||
| 2002/060919 | A2, | WO | 2003/074569 | A2, WO | 2004/016750 | A2, | ||
| 2004/029207 | A2, | WO | 2004/035752 | A2, | WO | 2004/063351 | A2, | WO |
| 2004/074455 | A2, | WO | 2004/099249 | A2, | WO | 2005/040217 | A2, | WO |
| 2005/070963 | Al, | WO | 2005/077981 | A2, | WO | 2005/092925 | A2, | WO |
| 2005/123780 | A2, | WO | 2006/019447 | Al, | WO 2006/047350 A2, e | WO |
2006/085967 A2; e Patentes U.S. Nos. 5.648.260, 5.739.277, 5.834.250, 5.869.046, 6.096.871, 6.121.022, 6.194.551, 6.242.195, 6.277.375, 6.528.624, 6.538.124, 6.737.056, 6.821.505, 6.998.253, e 7.083.784, as divulgações das quais são aqui incorporadas por referência.
[00762] O termo “anticorpo quimérico” é intencionado a referir-se aos anticorpos nos quais as sequências da região variável são derivadas de uma espécie e as sequências da região constante são derivadas de uma outra espécie, tal como um anticorpo no qual as sequências da região variável são derivadas de um anticorpo de camundongo e as sequências da região constante são derivadas de um anticorpo humano.
[00763] Um “diacorpo” é um fragmento de anticorpo pequeno com dois sítios de ligação a antígeno. Os fragmentos compreendem um domínio variável de cadeia pesada (Vh) conectado a um domínio variável de cadeia leve (Vl) na mesma cadeia polipeptídica (Vh-Vl ou Vl-Vh). Usando-se um ligante que é muito curto para permitir emparelhamento entre os dois domínios na mesma cadeia, os domínios são forçados a emparelhar com os domínios complementares de uma outra cadeia e criar dois sítios de ligação a antígeno. Os diacorpos são descritos mais completamente, por exemplo, na Patente Européia No. EP 404.097, Publicação de Patente Internacional No. WO 93/11161; e Bolliger, et al., Proc. Natl. Acad. Sei. USA 1993, 90, 64446448.
[00764] O termo “glicosilação” refere-se a um derivado modificado de um anticorpo. Um anticorpo aglicosilado carece da glicosilação. A
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151/497 glicosilação pode ser alterada, por exemplo, para aumentar a afinidade do anticorpo para o antígeno. tais modificações de carboidrato podem ser realizadas, por exemplo, alterando-se um ou mais sítios de glicosilação dentro da sequência de anticorpo. Por exemplo, uma ou mais substituições de aminoácido podem ser feitas que resultam na eliminação de um ou mais sítios de glicosilação da armação da região variável para eliminar deste modo a glicosilação neste sítio. A aglicosilação pode aumentar a afinidade do anticorpo para o antígeno, como descrito nas Patentes U.S. Nos. 5.714.350 e 6.350.861. Adicional ou alternativamente, um anticorpo pode ser fabricado que tem um tipo alterado de glicosilação, tal como um anticorpo hipofucosilado tendo quantidades reduzidas de resíduos de fucosila ou um anticorpo tendo estruturas GlcNac divididas em duas partes aumentadas. Tais padrões de glicosilação alterada foram demonstrados aumentar a capacidade dos anticorpos. Tais modificações de carboidrato podem ser realizadas, por exemplo, expressando-se o anticorpo em uma célula hospedeira com mecanismo de glicosilação alterado. As células com mecanismo de glicosilação alterado foram descritas na técnica e podem ser usadas como células hospedeiras nas quais expressar anticorpos recombinantes da invenção para deste modo produzir um anticorpo com glicosilação alterada. Por exemplo, as linhagens de célula Ms704, Ms705, e Ms709 carecem do gene da fucosiltransferase, FUT8 (alfa (1.6) fucosiltransferase), tal que anticorpos expressos nas linhagens de célula Ms704, Ms705, e Ms709 carecem de fucose nos seus carboidratos. As linhagens de célula FUT8-/- Ms704, Ms705, e Ms709 foram criadas pelo rompimento alvejado do gene FUT8 nas células CHO/DG44 usando dois vetores de substituição (ver por exemplo a Publicação de Patente U.S. No. 2004/0110704 ou Yamane-Ohnuki, et al., Biotechnol. Bioeng., 2004, 87, 614-622). Como um outro exemplo, a Patente Européia No. EP 1.176.195 descreve uma linhagem de célula com um gene FUT8 funcionalmente rompido, que codifica uma fucosil transferase, tal que
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152/497 os anticorpos expressos em uma tal linhagem de célula exibem hipofucosilação pela redução ou eliminação da enzima relacionada com a ligação alfa 1,6, e também descreve linhagens celulares que têm uma atividade de enzima baixa para adicionar fucose à N-acetilglicosamina que se liga à região Fc do anticorpo ou não tem a atividade enzimática, por exemplo a linhagem de célula de mieloma de rato YB2/0 (ATCC CRL 1662). A publicação de Patente Internacional WO 03/035835 descreve uma linhagem de célula CHO variante, células Lec 13, com capacidade reduzida para fixar fucose aos carboidratos ligados a Asn(297), também resultando na hipofucosilação de anticorpos expressos nesta célula hospedeira (ver também Shields, et al., J. Biol. Chem. 2002, 277, 26733-26740. A publicação de Patente Internacional WO 99/54342 descreve linhagens celulares engenheiradas para expressar glicosil transferases modificadoras de glicoproteína (por exemplo, beta(l,4)-N-acetilglicosaminiltransferase III (GnTIII)) tal que os anticorpos expressos nas linhagens celulares engenheiradas exibam estruturas de GlcNac divididas aumentadas que resulta na atividade de ADCC aumentada dos anticorpos (ver também Umana, et al., Nat. Biotech. 1999,17, 176-180). Altemativamente, os resíduos de fucose do anticorpo podem ser separados por clivagem usando uma enzima da fucosidase. Por exemplo, a fucosidase alfa-L-fucosidase remove os resíduos de fucosila dos anticorpos como descrito em Tarentino, et al., Biochem. 1975, 14, 5516-5523.
[00765] “Peguilação” refere-se a um anticorpo ou proteína de fusão modificados, ou um fragmento dos mesmos, que tipicamente é reagido com polietileno glicol (PEG), tal como um derivado reativo de éster ou aldeído de PEG, sob condições em que um ou mais grupos PEG tomam-se fixados ao anticorpo ou fragmento de anticorpo. A peguilação pode, por exemplo, aumentar a meia vida biológica (por exemplo, soro) do anticorpo. Preferivelmente, a peguilação é realizada por intermédio de uma reação de
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153/497 acilação ou uma reação de alquilação com uma molécula de PEG reativa (ou um polímero solúvel em água reativo análogo). Como aqui usado, o termo “polietileno glicol” é intencionado a abranger qualquer uma das formas de PEG que fossem usadas para derivatizar outras proteínas, tais como mono alcóxi (C1-C10) - ou arilóxi-polietileno glicol ou polietileno glicol-maleimida. A proteína ou anticorpo a ser peguilada pode ser uma proteína ou anticorpo aglicosilados. Métodos para peguilação são conhecidos na técnica e podem ser aplicados aos anticorpos da invenção, como descrito por exemplo nas Patentes Européias Nos. EP 0154316 e EP 0401384 e Patente U.S. No. 5.824.778, as divulgações de cada uma das quais são aqui incorporadas por referência.
[00766] Os termos “proteína de fusão” ou “polipeptídeo de fusão” referem-se às proteínas que combinam as propriedades de duas ou mais proteínas individuais. Tais proteínas têm pelo menos dois polipeptídeos heterólogos covalentemente ligados diretamente ou por intermédio de um ligante de aminoácido. Os polipeptídeos formando a proteína de fusão são tipicamente ligados do terminal C ao terminal N, embora eles também possam estar ligados do terminal C ao terminal C, terminal N ao terminal N, ou terminal N ao terminal C. Os polipeptídeos da proteína de fusão podem estar em qualquer ordem e podem incluir mais do que um de cada um ou ambos dos polipeptídeos constituintes. O termo abrange variantes conservativamente modificadas, variantes polimórficas, alelos, mutantes, subsequências, homólogos interespécies, e fragmentos imunogênicos dos antígenos que compõem a proteína de fusão. As proteínas de fusão da divulgação também podem compreender cópias adicionais de um antígeno componente ou fragmento imunogênico dos mesmos. A proteína de fusão pode conter um ou mais domínios de ligação ligados juntos e ligados ainda a um domínio Fe, tal como um domínio Fe de IgG. As proteínas de fusão podem ser ligadas ainda juntas para imitar um anticorpo monoclonal e prover seis ou mais domínios de
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154/497 ligação. As proteínas de fusão podem ser produzidas pelos métodos recombinantes como são conhecidos na técnica. A preparação de proteínas de fusão é conhecida na técnica e está descrita, por exemplo, nas Publicações de Pedido de Patente Internacional Nos. WO 1995/027735 Al, WO 2005/103077 Al, WO 2008/025516 Al, WO 2009/007120 Al, WO 2010/003766 Al, WO 2010/010051 Al, WO 2010/078966 Al, Publicação dos Pedidos de Patente U.S. Nos. US 2015/0125419 Al e US 2016/0272695 Al, e Patente U.S. No. 8.921.519, as divulgações de cada uma das quais são aqui incorporadas por referência.
[00767] O termo “heterólogo” quando usado com referência às porções de um ácido nucléico ou proteína indica que o ácido nucléico ou proteína compreende duas ou mais subsequências que não são encontradas na mesma relação uma com a outra na natureza. Por exemplo, o ácido nucléico é de modo típico recombinantemente produzido, tendo duas ou mais sequências de genes não relacionadas dispostas para compor um novo ácido nucléico funcional, por exemplo, um promotor de uma fonte e uma região codificadora de uma outra fonte, ou regiões codificadoras de fontes diferentes. Similarmente, uma proteína heteróloga indica que a proteína compreende duas ou mais subsequências que não são encontradas na mesma relação uma com a outra na natureza (por exemplo, uma proteína de fusão).
[00768] O termo “substituições de aminoácido conservativas” significa modificações de sequência de aminoácidos que não anulam a ligação de um anticorpo ou proteína de fusão ao antígeno. Substituições de aminoácido conservativas incluem a substituição de um aminoácido em uma classe por um aminoácido da mesma classe, onde uma classe é definida pelas propriedades de cadeia lateral de aminoácido físico-químicas comuns e altas frequências de substituição em proteínas homólogos encontradas na natureza, como determinado, por exemplo, por uma matriz de troca de frequência de Dayhoff padrão ou matriz BLOSUM. Seis classes gerais de cadeias laterais de
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155/497 aminoácido foram categorizadas e incluem: Classe I (Cys); Classe II (Ser, Thr, Pro, Ala, Gly); Classe III (Asn, Asp, Gin, Glu); Classe IV (His, Arg, Lys); Classe V (He, Leu, Vai, Met); e Classe VI (Phe, Tyr, Trp). Por exemplo, a substituição de um Asp no lugar de um outro resíduo de classe III tal como Asn, Gin, ou Glu, é uma substituição conservativa. Assim, um resíduo de aminoácido prognosticado não essencial em um anticorpo é preferivelmente substituído com um outro resíduo de aminoácido da mesma classe. Os métodos de identificar substituições conservativas de aminoácido que não eliminam a ligação ao antígeno são bem conhecidos na técnica (ver, por exemplo, Brummell, et al., Biochemistry 1993, 32, 1180-1187; Kobayashi, et al., Protein Eng. 1999, 12, 879-884 (1999); e Burks, et al., Proc. Natl. Acad. Sei. USA 1997, 94, 412-417.
[00769] Os termos “identidade de sequência,” “identidade percentual,” e “identidade percentual de sequência” (ou sinônimos dos mesmos, por exemplo, “99% idênticos”) no contexto de dois ou mais ácidos nucléicos ou polipeptídeos, referência a duas ou mais sequências ou subsequências que são as mesmas ou têm uma porcentagem especificada de nucleotídeos ou resíduos de aminoácido que são os mesmos, quando comparados e alinhados (introduzindo intervalos, se necessário) para correspondência máxima, não considerando nenhuma das substituições de aminoácido conservativas como parte da identidade de sequência. A identidade percentual pode ser medida usando software ou algoritmos de comparação de sequência ou pela inspeção visual. Vários algoritmos e software são conhecidos na técnica que podem ser usados para se obter alinhamentos de sequências de aminoácidos ou nucleotídeos. Os programas adequados para determinar a identidade de sequência percentual incluem por exemplo o pacote BLAST de programas disponível do U.S. Government’s National Center for Biotechnology Information BLAST web site. As comparações entre duas sequências podem ser realizadas usando o algoritmo BLASTN ou BLASTP. BLASTN é usado
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156/497 para comparar sequências de ácido nucléico, enquanto BLASTP é usado para comparar sequências de aminoácidos. ALIGN, ALIGN-2 (Genentech, South San Francisco, Califórnia) ou MegAlign, disponível da DNASTAR, são programas de software adicionais publicamente disponíveis que podem ser usados para alinhar sequências. Uma pessoa versada na técnica pode determinar parâmetros apropriados para alinhamento máximo pelo software de alinhamento particular. Em certas modalidades, os parâmetros de default do software de alinhamento são usados.
[00770] Certas modalidades da presente invenção compreendem uma variante de um anticorpo ou proteína de fusão. Como aqui usado, o termo “variante” abrange mas não é limitado aos anticorpos ou proteínas de fusão que compreendem uma sequência de aminoácidos que difere da sequência de aminoácidos de um anticorpo de referência por intermédio de uma ou mais substituições, deleções e/ou adições em certas posições dentro ou adjacente à sequência de aminoácidos do anticorpo de referência. A variante pode compreender uma ou mais substituições conservativas na sua sequência de aminoácidos quando comparada com a sequência de aminoácidos de um anticorpo de referência. As substituições conservativas podem envolver, por exemplo, a substituição de aminoácidos similarmente carregados ou não carregados. A variante retêm a capacidade para especificamente se ligar ao antígeno do anticorpo de referência.
[00771] As sequências de ácido nucléico implicitamente abrange variantes conservativamente modificadas das mesmas (por exemplo, substituições de códon degenerado) e sequências complementares, assim como a sequência explicitamente indicada. Especificamente, as substituições de códon degeneradas podem ser obtidas pela geração de sequências em que a terceira posição de um ou mais códons selecionados (ou todos) é substituída com resíduos de base mista e/ou desoxiinosina. Batzer, et al., Nucleic Acid Res. 1991, 19, 5081; Ohtsuka, et al., J. Biol. Chem. 1985, 260, 2605-2608;
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Rossolini, et al., Mol. Cell. Probes 1994, 8, 91-98. O termo ácido nucléico é usado intercambiavelmente com cDNA, mRNA, oligonucleotídeo, e polinucleotídeo.
[00772] O termo “biossimilar” significa um produto biológico, incluindo um anticorpo monoclonal ou proteína de fusão, que é altamente similar a um produto biológico de referência não obstante diferenças menores nos componentes clinicamente inativos, e para os quais não há nenhuma diferença clinicamente significativa entre o produto biológico e o produto de referência em termos da segurança, pureza, e potência do produto. Além disso, um remédio biológico similar ou “biossimilar” é um remédio biológico que é similar a um outro remédio biológico que já foi autorizado para o uso pela European Medicines Agency. O termo “biossimilar” também é usado sinonimamente por outras agências reguladoras nacional e regional. Os produtos biológicos ou remédios biológicos são remédios que são fabricados por ou derivados de uma fonte biológica, tal como uma bactéria ou levedura. Eles podem consistir de moléculas relativamente pequenas tais como insulina humana ou eritropoietina, ou moléculas complexas tais como anticorpos monoclonais. Por exemplo, se o anticorpo monoclonal de referência for rituximab, um anticorpo monoclonal biossimilar aprovado pelas autoridades reguladoras de fármaco com referência ao rituximab é um “biossimilar para” rituximab ou é um “biossimilar dos mesmos” de rituximab. Na Europa, um remédio similar biológico ou “biossimilar” é um remédio biológico que é similar a um outro remédio biológico que já foi autorizado para o uso pela European Medicines Agency (EMA). A base legal relevante para aplicações biológicas similares na Europa é o Artigo 6 da Regulamentação (EC) No 726/2004 e Artigo 10(4) da Diretiva 2001/83/EC, como emendada e portanto na Europa, o biossimilar pode ser autorizado, aprovado para autorização ou objeto de um pedido para autorização sob o Artigo 6 da Regulamentação (EC) No 726/2004 e Artigo 10(4) da Diretiva 2001/83/EC. O produto medicinal
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158/497 biológico original já autorizado pode ser aludido como um “produto medicinal de referência” na Europa. Algumas das exigências para um produto ser considerado um biossimilar são esboçados no CHMP Guideline on Similar Biologic Medicinal Products. Além disso, as diretrizes específicas de produto, incluindo diretrizes com respeito aos biossimilares de anticorpo monoclonal, são providos em uma base de produto por produto pela EMA e publicados no seu website. Um biossimilar como aqui descrito pode ser similar ao produto medicinal de referência por intermédio de características de qualidade, atividade biológica, mecanismo de ação, perfis de segurança e/ou eficácia. Além disso, o biossimilar pode ser usado ou ser pretendido para o uso para tratar as mesmas condições como o produto medicinal de referência. Assim, um biossimilar como aqui descrito pode ser julgado ter características de qualidade similares ou altamente similares a um produto medicinal de referência. Altemativamente, ou além disso, um biossimilar como aqui descrito pode ser julgado ter atividade biológica similar ou altamente similar a um produto medicinal de referência. Altemativamente, ou além disso, um biossimilar como aqui descrito pode ser julgado ter um perfil de segurança similar ou altamente similar a um produto medicinal de referência. Altemativamente, ou além disso, um biossimilar como aqui descrito pode ser julgado ter eficácia similar ou altamente similar a um produto medicinal de referência. Como aqui descrito, um biossimilar na Europa é comparado a um produto medicinal de referência que foi autorizado pelo EMA. Entretanto, em alguns casos, o biossimilar pode ser comparado a um produto medicinal biológico que tenha sido autorizado fora da Área Econômica Européia (um “comparador” não autorizado na EEA) em certos estudos. Tais estudos incluem por exemplo certos estudos clínicos e não clínicos in vivo. Como aqui usado, o termo “biossimilar” também refere-se a um produto medicinal biológico que foi ou pode ser comparado a um comparador não autorizado na EEA. Certos biossimilares são proteínas tais como anticorpos, fragmentos de
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159/497 anticorpo (por exemplo, porções de ligação a antígeno) e proteínas de fusão. Uma proteína biossimilar pode ter uma sequência de aminoácidos que tenha modificações menores na estrutura de aminoácido (incluindo por exemplo deleções, adições, e/ou substituições de aminoácidos) que não afetam significantemente a função do polipeptídeo. O biossimilar pode compreender uma sequência de aminoácidos tendo uma identidade de sequência de 97 % ou maior com a sequência de aminoácidos do seu produto medicinal de referência, por exemplo, 97%, 98%, 99% ou 100%. O biossimilar pode compreender uma ou mais modificações pós-traducionais, por exemplo, embora não limitado a, glicosilação, oxidação, desamidação, e/ou truncagem que é/são diferentes das modificações pós-traducionais do produto medicinal de referência, contanto que as diferenças não resultem em uma mudança na segurança e/ou eficácia do produto medicinal. O biossimilar pode ter um padrão de glicosilação idêntico ou diferente ao produto medicinal de referência. Particularmente, embora não exclusivamente, o biossimilar pode ter um padrão de glicosilação diferente se as diferenças tratam ou são intencionadas para tratar problemas de segurança associados com o produto medicinal de referência. Adicionalmente, o biossimilar pode desviar do produto medicinal de referência por exemplo na sua concentração, forma farmacêutica, formulação, excipientes e/ou apresentação, provendo segurança e a eficácia do produto medicinal não é comprometida. Em algumas modalidades, um biossimilar é provido como uma composição que compreende adicionalmente um ou mais excipientes, em que o um ou mais excipientes são os mesmos ou diferentes aos excipientes compreendidos em um produto medicinal de referência ou produto biológico de referência. O biossimilar pode compreender diferenças por exemplo nos perfis farmacocinéticos (PK) e/ou farmacodinâmicos (PD) quando comparado com o produto medicinal de referência mas ainda é julgado suficientemente similar ao produto medicinal de referência como para ser autorizado ou considerado
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160/497 adequado para autorização. Em certas circunstâncias, o biossimilar exibe características de ligação diferentes quando comparado com o produto medicinal de referência, em que as características de ligação diferentes são consideradas por uma Autoridade Reguladora tal como o EMA não ser uma barreira para autorização como um produto biológico similar. O termo “biossimilar” é também usado sinonimamente por outras agências reguladoras nacionais e regionais.
[00773] Como aqui usado, o termo “agonista de 4-1BB” pode referir-se a qualquer anticorpo ou proteína que especificamente se liga ao antígeno de 41BB (CD 137). Por “especificamente se liga” é intencionado que as moléculas de ligação exibam essencialmente ligação de fundo para moléculas não 41BB. O agonista de 4-1 BB pode ser qualquer agonista de 4-1 BB conhecido na técnica. Em particular, o mesmo é um dos agonistas de 4-1BB aqui descritos em mais detalhes. Uma molécula de ligação isolada que especificamente se liga 4-1 BB pode, entretanto, ter reatividade cruzada para as moléculas de 41BB de outra espécie, anticorpos e proteínas agonistas de 4-lBBic também podem especificamente se ligar-se por exemplo, ao 4-1BB humano (h4-lBB ou hCD137) nas células T.
[00774] Como aqui usado, o termo “agonista de 0X40” pode referir-se a qualquer anticorpo ou proteína que especificamente se ligue ao antígeno 0X40 (CD 134). Por “especificamente se liga” é intencionado que as moléculas de ligação exibam essencialmente ligação de fundo para moléculas não 0X40. O agonista de 0X40 pode ser qualquer agonista de 0X40 conhecido na técnica. Em particular, o mesmo é um dos agonistas de 0X40 aqui descritos em mais detalhes. Uma molécula de ligação isolada que especificamente se liga 0X40 pode, entretanto, ter reatividade cruzada para as moléculas 0X40 de outra espécie. Os anticorpos e proteínas agonísticos de 0X40 também podem especificamente se ligar-se por exemplo, ao 0X40 humano (hOX40 ou hCD134) nas células T.
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161/497 [00775] Como aqui usado, o termo “agonista de CD27” pode referir-se a qualquer anticorpo ou proteína que especificamente se liga ao antígeno de CD27. Por “especificamente se liga” é intencionado que as moléculas de ligação exibam ligação essencialmente de fundo para moléculas não CD27. O agonista de CD27 pode ser qualquer agonista de CD27 conhecido na técnica. Em particular, o mesmo é um dos agonistas de CD27 aqui descritos em mais detalhes. Uma molécula de ligação isolada que especificamente se liga CD27 pode, entretanto, ter reatividade cruzada com as moléculas CD27 de outra espécie. Os anticorpos e proteínas agonísticos de CD27 também podem especificamente se ligar-se a por exemplo, CD27 humana (hCD27) nas células T.
[00776] Como aqui usado, o termo “agonista de GITR” inclui moléculas que contém pelo menos um sítio de ligação a antígeno que especificamente se liga a GITR (CD357). Por “especificamente se liga” é intencionado que as moléculas de ligação exibem essencialmente ligação de fundo para as moléculas não GITR. O agonista de GITR pode ser qualquer agonista de GITR conhecido na técnica. Em particular, o mesmo é um dos agonistas de GITR aqui descritos em mais detalhes. Uma molécula de ligação isolada que especificamente se liga GITR pode, entretanto, ter reatividade cruzada com as moléculas de GITR de outra espécie, anticorpos e proteínas agonísticos de GITR também podem especificamente se ligar-se por exemplo, ao GITR humano (hGITR) nas células T e células dendríticas.
[00777] Como aqui usado, o termo “agonista de HVEM” inclui moléculas que contêm pelo menos um sítio de ligação a antígeno que especificamente se liga ao HVEM (CD270). Por “especificamente se liga” é intencionado que as moléculas de ligação exibam essencialmente ligação de fundo para as moléculas não HVEM. O agonista de HVEM pode ser qualquer agonista de HVEM conhecido na técnica. Em particular, o mesmo é um dos agonistas de HVEM aqui descritos em mais detalhes. Uma molécula de
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162/497 ligação isolada que especificamente liga HVEM pode, entretanto, ter reatividade cruzada com as moléculas de HVEM de outra espécie. Os anticorpos e proteínas agonísticos de HVEM também podem especificamente ligar-se por exemplo, ao HVEM humano (hHVEM) nas células T.
[00778] O termo “malignidade hematológica” refere-se a cânceres e tumores mamíferos dos tecidos hematopoiéticos e linfoides, incluindo mas não limitados a tecidos do sangue, medula óssea, linfônodos, e sistema linfático. Malignidades hematológicas também são aludidos como “tumores líquidos.” As malignidades hematológicas incluem, mas não são limitados a, leucemia linfoblástica aguda (ALL), linfoma linfocítico crônico (CLL), linfoma linfocítico pequeno (SLL), leucemia mielógena aguda (AML), leucemia mielógena crônica (CML), leucemia monocítica aguda (AMoL), linfoma de Hodgkin, e linfomas de não Hodgkin. O termo “malignidade hematológica de célula B” refere-se às malignidades hematológicas que afetam as células B.
[00779] O termo “tumor sólido” refere-se a uma massa anormal de tecido que usualmente não contém cistos ou áreas líquidas. Os tumores sólidos podem ser benignos ou malignos. O termo “câncer de tumor sólido” refere-se aos tumores sólidos malignos, neoplásticos, ou cancerosos. Os cânceres de tumor sólido incluem, mas não são limitados a, sarcomas, carcinomas, e linfomas, tais como cânceres do pulmão, mama, próstata, cólon, reto, e bexiga. A estrutura tecidual de tumores sólidos inclui compartimentos de tecido interdependentes incluindo a parênquima (células cancerosas) e as células estrômicas sustentantes em que as células cancerosas são dispersas e que podem prover um microambiente sustentante.
[00780] O termo “microambiente,” como aqui usado, pode referir-se ao microambiente do tumor sólido ou hematológico como um todo ou a um subconjunto individual de células dentro do microambiente. O microambiente do tumor, como aqui usado, refere-se a uma mistura complexa de “células,
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163/497 fatores solúveis, moléculas de sinalização, matrizes extracelulares, e estímulos mecânicos que promovem a transformação neoplástica, sustentam o crescimento e invasão tumoral, protegem o tumor da imunidade do hospedeiro, reforça a resistência terapêutica, e provê nichos para metástases dominantes prosperarem,” como descrito em Swartz, et al., Cancer Res., 2012, 72, 2473. Embora os tumores expressem antígenos que devam ser reconhecidos pelas células T, a depuração do tumor pelo sistema imune é rara por causa da supressão imune pelo microambiente.
[00781] Para se evitar dúvidas, é pretendido aqui que traços particulares (por exemplo números inteiros, características, valores, usos, doenças, fórmulas, compostos ou grupos) descritos em conjunção com um aspecto particular, modalidade ou exemplo da invenção devem ser entendidos como aplicáveis a qualquer outro aspecto, modalidade ou exemplo aqui descritos a menos que incompatível com o mesmo. Assim tais traços podem ser usados onde apropriado em conjunção com qualquer uma das definições, reivindicações ou modalidades aqui definidas. Todos os traços divulgados neste relatório descritivo (incluindo quaisquer reivindicações, resumo e desenhos anexos), e/ou todas das etapas de qualquer método ou processo assim divulgado, podem ser combinados em qualquer combinação, exceto combinações onde pelo menos alguns dos traços e/ou etapas sejam mutualmente exclusivas. A invenção não é restringida a nenhum dos detalhes de quaisquer modalidades divulgadas. A invenção estende-se a qualquer coisa nova ou nova combinação, dos traços divulgados neste relatório descritivo (incluindo quaisquer reivindicações, resumo e desenhos anexos), ou a qualquer coisa nova, ou qualquer nova combinação, das etapas de qualquer método ou processo assim divulgados.
[00782] Os termos “cerca de” e “aproximadamente” significam dentro de uma faixa estatisticamente significativa de um valor. Uma tal faixa pode estar dentro de uma ordem de magnitude, preferivelmente dentro de 50%,
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164/497 mais preferivelmente dentro de 20%, mais preferivelmente ainda dentro de 10%, e ainda mais preferivelmente dentro de 5% de um dado valor ou faixa. A variação permissível abrangida pelos termos “cerca de” ou “aproximadamente” depende do sistema particular sob estudo, e pode ser facilmente avaliado por uma pessoa de habilidade comum na técnica, além disso, como aqui usado, os termos “cerca de” e “aproximadamente” significam que dimensões, tamanhos, formulações, parâmetros, formatos e outras quantidades e características não são e não precisam ser exatas, mas podem ser aproximadas e/ou maior ou menor, como desejado, refletindo tolerâncias, fatores de conversão, arredondamento, erro de medição e os similares, e outros fatores conhecidos por aqueles versados na técnica. No geral, uma dimensão, tamanho, formulação, parâmetro, formato ou outra quantidade ou característica é “de cerca de” ou “aproximada” seja ou não expressamente estabelecido serem tais. E mencionado que as modalidades de tamanhos, formatos e dimensões muito diferentes podem ser utilizadas para os arranjos descritos.
[00783] Os termos transicionais “compreendendo,” “consistindo essencialmente de,” e “consistindo em,” quando usados nas reivindicações anexas, nas formas original e emendada, definem o escopo da reivindicação com respeito a quais elementos ou etapas de reivindicação adicionais não citadas, se alguma, são excluídas o escopo da(s) reivindicação(ões). O termo “compreendendo” é intencionado a ser inclusive ou de extremidade aberta e não exclui nenhum elemento, método, etapa ou material adicional, não citado. O termo “consistindo em” exclui qualquer elemento, etapa ou material outro que não aqueles especificados na reivindicação e, no último caso, impurezas ordinárias associadas com o(s) material(is) especificado(s). O termo “consistindo essencialmente de” limita o escopo de uma reivindicação aos elementos, etapas ou material(is) especificados e àqueles que não afetem materialmente a(s) característica(s) básica(s) e nova(s) da invenção
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165/497 reivindicada. Todas as composições, métodos, e kits aqui descritos que incorpora a presente invenção pode, em modalidades alternativas, ser mais especificamente definidos por qualquer um dos termos transicionais “compreendendo,” “consistindo essencialmente de,” e “consistindo em”. [00784] Agonistas de 4-1 BB (CD 137) [00785] Em uma modalidade, o agonista de TNFRSF é um agonista de 4-1BB (CD137). O agonista de 4-1BB pode ser qualquer molécula de ligação de 4-1 BB conhecida na técnica. A molécula de ligação de 4-1 BB pode ser um anticorpo monoclonal ou proteína de fusão capazes de ligação ao 4-1 BB humano ou de mamífero. Os agonistas de 4-1BB ou moléculas de ligação de 4-1BB podem compreender uma cadeia pesada de imunoglobulina de qualquer isotipo (por exemplo, IgG, IgE, IgM, IgD, IgA, e IgY), classe (por exemplo, IgGl, IgG2, IgG3, IgG4, IgAl e IgA2) ou subclasse de molécula de imunoglobulina. O agonista de 4-1 BB ou molécula de ligação de 4-1 BB podem ter tanto uma cadeia pesada quanto uma leve. Como aqui usado, o termo molécula de ligação também inclui anticorpos (incluindo anticorpos de tamanho natural), anticorpos monoclonais (incluindo anticorpos monoclonais de tamanho natural), anticorpos policlonais, anticorpos multiespecíficos (por exemplo, anticorpos biespecíficos), anticorpos humanos, humanizados ou quiméricos, e fragmentos de anticorpo, por exemplo, fragmentos Fab, fragmentos F(ab’), fragmentos produzidos por uma biblioteca de expressão de Fab, fragmentos de ligação de epítopo de qualquer um dos acima, e formas engenheiradas de anticorpos, por exemplo, moléculas scFv, que se ligam ao 41BB. Em uma modalidade, o agonista de 4-1 BB é uma proteína de ligação a antígeno que é um anticorpo totalmente humano. Em uma modalidade, o agonista de 4-1 BB é uma proteína de ligação a antígeno que é um anticorpo humanizado. Em algumas modalidades, os agonistas de 4-1 BB para o uso nos métodos e composições presentemente divulgados incluem anticorpos anti-41BB, anticorpos anti-4-ΙΒΒ humanos, anticorpos anti-4-ΙΒΒ de camundongo,
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166/497 anticorpos anti-4-IBB de mamífero, anticorpos monoclonais anti-4-IBB, anticorpos policlonais anti-4-IBB, anticorpos quiméricos anti-4-IBB, adnectinas anti-4-IBB, anticorpos de domínio anti-4-IBB, fragmentos anti-41BB de cadeia única, fragmentos anti-4-IBB de cadeia pesada, fragmentos anti-4-ΙΒΒ de cadeia leve, proteínas de fusão anti-4-ΙΒΒ, e fragmentos, derivados, conjugados, variantes, ou biossimilares dos mesmos. Anticorpos anti-4-ΙΒΒ agonísticos são conhecidos induzir respostas imunes fortes. Lee, et al., PLOS Um 2013, 8, e69677. Em uma modalidade preferida, o agonista de 4-1 BB é um anticorpo agonístico, anti-4-ΙΒΒ humanizado ou monoclonal totalmente humano (isto é, um anticorpo derivado de uma única linhagem de célula). Em uma modalidade, o agonista de 4-1 BB é EU-101 (Eutilex Co. Ltd.), utomilumab, ou urelumab, ou um fragmento, derivado, conjugado, variante, ou biossimilar dos mesmos. Em uma modalidade preferida, o agonista de 4-1 BB é utomilumab ou urelumab, ou um fragmento, derivado, conjugado, variante, ou biossimilar dos mesmos.
[00786] Em uma modalidade preferida, o agonista de 4-1BB ou molécula de ligação de 4-1BB também podem ser uma proteína de fusão. Em uma modalidade preferida, um agonista de 4-1 BB multimérico, tal como um agonista de 4-1BB trimérico ou hexamérico (com três ou seis domínios de ligação do ligante), pode induzir agrupamento de receptor (4-1BBL) e formação do complexo de sinalização celular interna superiores comparado a um anticorpo monoclonal agonístico, que tipicamente possui dois domínios de ligação do ligante. As proteínas de fusão triméricas (trivalentes) ou hexaméricas (ou hexavalentes) ou maior compreendendo três domínios de ligação de TNFRSF e IgGl-Fc e opcionalmente ainda ligando duas ou mais destas proteínas de fusão são descritos, por exemplo, em Gieffers, et al., Mol. Cancer Therapeutics 2013,12, 2735-47.
[00787] Os anticorpos 4-1 BB agonísticos e proteínas de fusão são conhecidos induzir respostas imunes fortes. Em uma modalidade preferida, o
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167/497 agonista de 4-IBB é um anticorpo monoclonal ou proteína de fusão que se liga especificamente ao antígeno de 4-1 BB em uma maneira suficiente para reduzir a toxicidade. Em algumas modalidades, o agonista de 4-1BB é um anticorpo 4-1BB monoclonal agonístico ou proteína de fusão que anula a toxicidade celular dependente de anticorpo (ADCC), por exemplo a citotoxicidade de célula NK. Em algumas modalidades, o agonista de 4-1 BB é um anticorpo 4-1BB monoclonal agonístico ou proteína de fusão que anula a fagocitose celular dependente de anticorpo (ADCP). Em algumas modalidades, o agonista de 4-1 BB é um anticorpo 4-1 BB monoclonal agonístico ou proteína de fusão que anula citotoxicidade dependente de complemento (CDC). Em algumas modalidades, o agonista de 4-1BB é um anticorpo 4-1BB monoclonal agonístico ou proteína de fusão que anula a funcionalidade da região Fe.
[00788] Em algumas modalidades, os agonistas de 4-1BB são distinguidos pela ligação ao 4-1BB humano (SEQ ID NO: 9) com alta afinidade e atividade agonística. Em uma modalidade, o agonista de 4-1BB é uma molécula de ligação que se liga ao 4-1BB humano (SEQ ID NO: 9). Em uma modalidade, o agonista de 4-1BB é uma molécula de ligação que se liga ao 4-1 BB de murino (SEQ ID NO: 10). As sequências de aminoácido de antígeno de 4-1 BB às quais um agonista de 4-1 BB ou molécula de ligação se ligam estão resumidas na Tabela 3.
TABELA 3. Sequências de aminoácidos de antígenos de 4-1BB.
| Identificador | Sequência (Símbolos de Aminoácido de Uma Letra) |
| SEQ ID NO: 9 41BB humano, Superfamília do receptor do fator de necrose de tumor, membro 9 (Homo sapiens) | MGNSCYNIVA TLLLVLNFER TRSLQDPCSN CPAGTFCDNN RNQICSPCPP NSFSSAGGQR 60 TCDICRQCKG VFRTRKECSS TSNAECDCTP GFHCLGAGCS MCEQDCKQGQ ELTKKGCKDC 120 CFGTFNDQKR GICRPWTNCS LDGKSVLVNG TKERDVVCGP SPADLSPGAS SVTPPAPARE 180 PGHSPQIISF FLALTSTALL FLLFFLTLRF SVVKRGRKKL LYIFKQPFMR PVQTTQEEDG 240 CSCRFPEEEE GGCEL 255 |
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| SEQ ID NO: 10 4-1 BB de murino, Superfamília do receptor do fator de necrose de tumor, membro 9 (Mus musculus) | MGNNCYNVVV IVLLLVGCEK VGAVQNSCDN CQPGTFCRKY NPVCKSCPPS TFSSIGGQPN 60 CNICRVCAGY FRFKKFCSST HNAECECIEG FHCLGPQCTR CEKDCRPGQE LTKQGCKTCS 120 LGTFNDQNGT GVCRPWTNCS LDGRSVLKTG TTEKDVVCGP PVVSFSPSTT ISVTPEGGPG 180 GHSLQVLTLF LALTSALLLA LIFITLLFSV LKWIRKKFPH IFKQPFKKTT GAAQEEDACS 240 CRCPQEEEGG GGGYEL 256 |
[00789] Em algumas modalidades, as composições, processos e métodos descritos incluem um agonista de 4-1BB que liga 4-1BB humano ou murino com um KD de cerca de 100 pM ou mais baixo, liga 4-1 BB humano ou murino com um KD de cerca de 90 pM ou mais baixo, liga 4-1 BB humano ou murino com um KD de cerca de 80 pM ou mais baixo, liga 4-1 BB humano ou murino com um KD de cerca de 70 pM ou mais baixo, liga 4-1 BB humano ou murino com um KD de cerca de 60 pM ou mais baixo, liga 4-1 BB humano ou murino com um KD de cerca de 50 pM ou mais baixo, liga 4-1 BB humano ou murino com um KD de cerca de 40 pM ou mais baixo, ou liga 4-1BB humano ou murino com um KD de cerca de 30 pM ou mais baixo.
[00790] Em algumas modalidades, as composições, processos e métodos descritos incluem um agonista de 4-1 BB que se liga ao 4-1 BB humano ou murino com um kassoc de cerca de 7,5 x 105 1/M-s ou mais rápido, se liga ao 4-1BB humano ou murino com um kassoc de cerca de 7,5 x 105 1/M-s ou mais rápido, se liga ao 4-1 BB humano ou murino com um kassOc de cerca de 8 x 105 1/M-s ou mais rápido, se liga ao 4-1 BB humano ou murino com um kassoc de cerca de 8,5 x 105 1/M-s ou mais rápido, se liga ao 4-1BB humano ou murino com um kassoc de cerca de 9 x 105 1/M-s ou mais rápido, se liga ao 4-1BB humano ou murino com um kassoc de cerca de 9,5 x 105 1/M-s ou mais rápido, ou liga ao 4-1 BB humano ou murino com um kassoc de cerca de 1 x 106 1/M-s ou mais rápido.
[00791] Em algumas modalidades, as composições, processos e métodos descritos incluem um agonista de 4-1 BB que se liga ao 4-1 BB humano ou murino com um kdissoc de cerca de 2 x 10'5 1/s ou mais lento, se
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169/497 liga ao 4-1BB humano ou murino com um kdissoc de cerca de 2,1 x IO'5 1/s ou mais lento, se liga ao 4-1BB humano ou murino com um kdissoc de cerca de 2,2 x IO'5 1/s ou mais lento, se liga ao 4-1 BB humano ou murino com um kdissoc de cerca de 2,3 x IO'5 1/s ou mais lento, se liga ao 4-1 BB humano ou murino com um kdissoc de cerca de 2,4 x IO'5 1/s ou mais lento, se liga ao 4-1 BB humano ou murino com um kdissoc de cerca de 2,5 x IO'5 1/s ou mais lento, se liga ao 4-1BB humano ou murino com um kdissoc de cerca de 2,5 x IO'5 1/s ou mais lento ou liga ao 4-1BB humano ou murino com um kdissoc de cerca de 2,7 x IO'5 1/s ou mais lento, se liga ao 4-1 BB humano ou murino com um kdissoc de cerca de 2,8 x IO'5 1/s ou mais lento, se liga ao 4-1 BB humano ou murino com um kdissoc de cerca de 2,9 x IO'5 1/s ou mais lento, ou liga ao 4-1BB humano ou murino com um kdissoc de cerca de 3 x IO'5 1/s ou mais lento.
[00792] Em algumas modalidades, as composições, processos e métodos descritos incluem um agonista de 4-1 BB que se liga ao 4-1 BB humano ou murino com um IC50 de cerca de 10 nM ou mais baixo, se liga ao 4-1BB humano ou murino com um IC50 de cerca de 9 nM ou mais baixo, se liga ao 4-1 BB humano ou murino com um IC50 de cerca de 8 nM ou mais baixo, se liga ao 4-1BB humano ou murino com um IC50 de cerca de 7 nM ou mais baixo, se liga ao 4-1 BB humano ou murino com um IC50 de cerca de 6 nM ou mais baixo, se liga ao 4-1BB humano ou murino com um IC50 de cerca de 5 nM ou mais baixo, se liga ao 4-1 BB humano ou murino com um IC50 de cerca de 4 nM ou mais baixo, se liga ao 4-1BB humano ou murino com um IC50 de cerca de 3 nM ou mais baixo, se liga ao 4-1BB humano ou murino com um IC50 de cerca de 2 nM ou mais baixo, ou liga ao 4-1BB humano ou murino com um IC50 de cerca de 1 nM ou mais baixo.
[00793] Em uma modalidade preferida, o agonista de 4-1BB é utomilumab, também conhecido como PF-05082566 ou MOR-7480, ou um fragmento, derivado, variante, ou biossimilar do mesmo. Utomilumab está disponível da Pfizer, Inc. Utomilumab é uma imunoglobina G2-lambda, anti
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170 / 497 [TNFRSF9 de Homo sapiens (membro 9 da superfamilia do receptor do fator de necrose de tumor (TNFR), 4-1BB, antígeno de célula T ILA, CD137)], anticorpo monoclonal de Homo sapiens (totalmente humano). As sequências de aminoácido de utomilumab são apresentadas na Tabela 4. Utomilumab compreende sítios de glicosilação em Asn59 e Asn292; pontes de dissulfeto intracadeia da cadeia pesada nas posições 22 a 96 (Vh-Vl), 143 a 199 (ChICl), 256 a 316 (Ch2) e 362 a 420 (Ch3); pontes de dissulfeto intracadeia da cadeia leve nas posições 22’ a 87’ (Vh-Vl) e 136’ a 195’ (ChI-Cl); pontes de dissulfeto de cadeia pesada-cadeia pesada intercadeia nas posições da isoforma IgG2A 218 a 218, 219 a219, 222 a 222, e 225 a 225, nas posições de isoforma IgG2A/B 218 a 130, 219 a 219, 222 a 222, e 225 a 225, e nas posições de isoforma IgG2B 219 a 130 (2), 222 a 222, e 225 a 225; e pontes de dissulfeto de cadeia pesada-cadeia leve intercadeia nas posições de isoforma de IgG2A 130 a 213’ (2), posições de isoforma de IgG2A/B 218 a 213’ e 130 a 213’, e nas posições de isoforma de IgG2B 218 a 213’ (2). A preparação e propriedades de utomilumab e suas variantes e fragmentos são descritos nas Patentes U.S. Nos. 8.821.867, 8.337.850 e 9.468.678, e Publicação do Pedido de Patente Internacional No. WO 2012/032433 Al, as divulgações de cada um dos quais são aqui incorporadas por referência. As características pré-clínicas de utomilumab são descritas em Fisher, et al., Cancer Immunolog. & Immunother. 2012, 61, 1721-33. Os testes clínicos correntes de utomilumab em uma variedade de indicações hematológicas e de tumor sólido incluem os identificadores NCT02444793, NCT01307267, NCT02315066, e NCT02554812 do U.S. National Institutes of Health clinicaltrials.gov.
[00794] Em uma modalidade, um agonista de 4-IBB compreende uma cadeia pesada dada pela SEQ ID NO: lie uma cadeia leve dada pela SEQ ID NO: 12. Em uma modalidade, um agonista de 4-1BB compreende cadeias pesadas e leves tendo as sequências mostradas na SEQ ID NO: lie SEQ ID
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NO: 12, respectivamente, ou fragmentos de ligação a antígeno, fragmentos Fab, fragmentos variáveis de cadeia única (scFv), variantes, ou conjugados dos mesmos. Em uma modalidade, um agonista de 4-1BB compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 99% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: lie SEQ ID NO: 12, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de 4-1BB compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 98% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: lie SEQ ID NO: 12, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de 4-1BB compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 97% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: lie SEQ ID NO: 12, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de 4-1BB compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 96% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: lie SEQ ID NO: 12, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de 4-1 BB compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 95% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: lie SEQ ID NO: 12, respectivamente. [00795] Em uma modalidade, o agonista de 4-1BB compreende as CDRs ou regiões variáveis (VRs) de cadeia pesada e leve de utomilumab. Em uma modalidade, a região variável da cadeia pesada (VH) do agonista de 41BB compreende a sequência mostrada na SEQ ID NO: 13, e a região variável da cadeia leve (VL) do agonista de 4-1 BB compreende a sequência mostrada na SEQ ID NO: 14, e substituições de aminoácido conservativas dos mesmos. Em uma modalidade, um agonista de 4-1BB compreende as regiões Vh e Vl que são cada uma pelo menos 99% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 13 e SEQ ID NO: 14, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de 4-1BB compreende as regiões Vh e Vl que são cada uma pelo menos 98% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 13 e SEQ ID NO: 14, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de 4-1 BB compreende as regiões Vh e Vl que são cada uma pelo menos 97% idênticas
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172/497 às sequências mostradas na SEQ ID NO: 13 e SEQ ID NO: 14, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de 4-1 BB compreende as regiões Vh e Vl que são cada uma pelo menos 96% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 13 e SEQ ID NO: 14, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de 4-1BB compreende as regiões Vh e Vl que são cada uma pelo menos 95% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 13 e SEQ ID NO: 14, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de 4-1BB compreende um scFv anticorpo compreendendo as regiões Vh e Vl que são cada uma pelo menos 99% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 13 e SEQ ID NO: 14.
[00796] Em uma modalidade, um agonista de 4-1 BB compreende os domínios CDR1, CDR2 e CDR3 da cadeia pesada tendo as sequências apresentadas na SEQ ID NO: 15, SEQ ID NO: 16, e SEQ ID NO: 17, respectivamente, e substituições de aminoácido conservativas dos mesmos, e os domínios CDR1, CDR2 e CDR3 da cadeia leve tendo as sequências apresentadas na SEQ ID NO: 18, SEQ ID NO: 19, e SEQ ID NO: 20, respectivamente, e substituições de aminoácido conservativas dos mesmos.
[00797] Em uma modalidade, o agonista de 4-1BB é um anticorpo monoclonal biossimilar agonista de 4-1BB aprovado pelas autoridades reguladoras de fármaco com referência ao utomilumab. Em uma modalidade, o anticorpo monoclonal biossimilar compreende um anticorpo 4-1 BB compreendendo uma sequência de aminoácidos que tenha pelo menos 97 % de identidade de sequência, por exemplo, 97%, 98%, 99% ou 100% de identidade de sequência, com a sequência de aminoácidos do produto medicinal de referência ou produto biológico de referência e que compreende uma ou mais modificações pós-traducionais quando comparado com o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é utomilumab. Em algumas modalidades, a uma ou mais modificações pós
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173/497 traducionais são selecionadas de uma ou mais de: glicosilação, oxidação, desamidação, e truncagem. Em algumas modalidades, o biossimilar é um agonista de anticorpo 4-1 BB autorizado ou submetido para autorização, em que o agonista de anticorpo 4-1 BB é provido em uma formulação que difere das formulações do produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é utomilumab. O agonista de anticorpo 4-1BB pode ser autorizado por uma autoridade reguladora de fármaco tal como o FDA dos Estados Unidos e/ou o EMA da União Européia. Em algumas modalidades, o biossimilar é provido como uma composição que compreende adicionalmente um ou mais excipientes, em que o um ou mais excipientes são os mesmos ou diferentes aos excipientes compreendidos no produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é utomilumab. Em algumas modalidades, o biossimilar é provido como uma composição que compreende adicionalmente um ou mais excipientes, em que o um ou mais excipientes são os mesmos ou diferentes aos excipientes compreendidos no produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é utomilumab.
TABELA 4. As sequências de aminoácidos para os agonistas de anticorpo 41BB relacionados com utomilumab.
| Identificador | Sequência (Símbolos de aminoácido de uma letra) |
| SEQ ID NO: 11 cadeia pesada para utomilumab | EVQLVQSGAE VKKPGESLRI SCKGSGYSFS TYWISWVRQM PGKGLEWMGK IYPGDSYTNY 60 SPSFQGQVTI SADKSISTAY LQWSSLKASD TAMYYCARGY GIFDYWGQGT LVTVSSASTK 120 GPSVFPLAPC SRSTSESTAA LGCLVKDYFP EPVTVSWNSG ALTSGVhTFP AVlQSSGLYS 180 LSSVVTVPSS NFGTQTYTCN VDHKPSNTKV DKTVERKCCV ECPPCPAPPV AGPSVFLFPP 240 KPKDTLMISR TPEVTCVVVD VSHEDPEVQF NWYVDGVEVh NAKTKPREEQ FNSTFRVVSV 300 LTVVhQDWLN gkeykckvsn kglpapiekt isktkgqpre pqvytlppsr EEMTKNQVSL 360 TCLVKGFYPS DIAVEWESNG QPENNYKTTP PMLDSDGSFF LYSKLTVDKS RWQQGNVFSC 420 SVMHEALHNH YTQKSLSLSP G 441 |
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| SEQ ID NO: 12 cadeia leve para utomilumab | SYELTQPPSV SVSPGQTASI TCSGDNIGDQ YAHWYQQKPG QSPVlVIYQD KNRPSGIPER 60 FSGSNSGNTA TLTISGTQAM DEADYYCATY TGFGSLAVFG GGTKLTVlGQ PKAAPSVTLF 120 PPSSEELQAN KATLVCLISD FYPGAVTVAW KADSSPVKAG VETTTPSKQS NNKYAASSYL 180 SLTPEQWKSH RS YSCQVTHE GSTVEKTVAP TECS 214 |
| SEQ ID NO: 13 região variável da cadeia pesada para utomilumab | EVQLVQSGAE VKKPGESLRI SCKGSGYSFS TYWISWVRQM PGKGLEWMG KIYPGDSYTN 60 YSPSFQGQVT ISADKSISTA YLQWSSLKAS DTAMYYCARG YGIFDYWGQ GTLVTVSS 118 |
| SEQ ID NO: 14 região variável da cadeia leve para utomilumab | SYELTQPPSV SVSPGQTASI TCSGDNIGDQ YAHWYQQKPG QSPVlVIYQD KNRPSGIPER 60 FSGSNSGNTA TLTISGTQAM DEADYYCATY TGFGSLAVFG GGTKLTVl 108 |
| SEQ ID NO: 15 CDR1 da cadeia pesada para utomilumab | STYWIS 6 |
| SEQ ID NO: 16 CDR2 da cadeia pesada para utomilumab | KIYPGDSYTN YSPSFQG 17 |
| SEQ ID NO: 17 CDR3 da cadeia pesada para utomilumab | RGYGIFDY 8 |
| SEQ ID NO: 18 CDR1 da cadeia leve para utomilumab | SGDNIGDQYA Η 11 |
| SEQ ID NO: 19 CDR2 da cadeia leve para utomilumab | QDKNRPS 7 |
| SEQ ID NO: 20 CDR3 da cadeia leve para utomilumab | ATYTGFGSLA V 11 |
[00798] Em uma modalidade preferida, o agonista de 4-1BB é o anticorpo monoclonal urelumab, também conhecido como BMS-663513 e 20H4.9.h4a, ou um fragmento, derivado, variante, ou biossimilar do mesmo. Urelumab está disponível da Bristol-Myers Squibb, Inc., e Creative Biolabs, Inc. Urelumab é uma imunoglobina G4-capa, anti-[TNFRSF9 (superfamília do receptor do fator de necrose de tumor membro 9, 4-1BB, antígeno de célula T ILA, CD 137) de Homo sapiens], anticorpo monoclonal de Homo sapiens (totalmente humano). As sequências de aminoácido de urelumab são apresentadas na Tabela 5. Urelumab compreende sítios de glicosilação N na posição 298 (e 298”); pontes de dissulfeto intracadeia da cadeia pesada nas
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175/497 posições 22 a 95 (VH-VL), 148 a 204 (CH1-CL), 262 a 322 (CH2) e 368 a 426 (Ch3) (e nas posições 22” a 95”, 148” a 204”, 262” a 322”, e 368” a 426”); pontes de dissulfeto intracadeia da cadeia leve nas posições 23’ a 88’ (Vh-Vl) e 136’ a 196’ (Ch1-Cl) (e nas posições 23’” a 88’” e 136’” a 196’”); pontes de dissulfeto de cadeia pesada-cadeia pesada intercadeia nas posições 227 a 227” e 230-230”; e pontes de dissulfeto de cadeia pesadacadeia leve intercadeia em 135 a 216’ e 135” a 216’”. A preparação e propriedades de urelumab e suas variantes e fragmentos são descritos nas Patentes U.S. Nos. 7.288.638 e 8.962.804, as divulgações das quais são aqui incorporadas por referência. As características pré-clínicas e clínicas de urelumab são descritas em Segai, et al., Clin. Cancer Res. 2016, disponível em http:Zdx.doi.org/ 10.1158/1078-0432.CCR-16-1272. Os testes clínicos correntes de urelumab em uma variedade de indicações hematológicas e de tumor sólido incluem os identificadores NCT01775631, NCT02110082, NCT02253992, e NCT01471210 do U.S. National Institutes of Health clinicaltrials.gov.
[00799] Em uma modalidade, um agonista de 4-IBB compreende uma cadeia pesada dada pela SEQ ID NO: 21 e uma cadeia leve dada pela SEQ ID NO: 22. Em uma modalidade, um agonista de 4-1BB compreende cadeias pesadas e leves tendo as sequências mostradas na SEQ ID NO: 21 e SEQ ID NO: 22, respectivamente, ou fragmentos de ligação a antígeno, fragmentos Fab, fragmentos variáveis de cadeia única (scFv), variantes, ou conjugados dos mesmos. Em uma modalidade, um agonista de 4-1BB compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 99% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 21 e SEQ ID NO: 22, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de 4-1BB compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 98% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 21 e SEQ ID NO: 22, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de 4-1BB compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma
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176/497 pelo menos 97% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 21 e SEQ ID NO: 22, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de 4-1BB compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 96% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 21 e SEQ ID NO: 22, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de 4-1 BB compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 95% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 21 e SEQ ID NO: 22, respectivamente. [00800] Em uma modalidade, o agonista de 4-1BB compreende as CDRs ou regiões variáveis (VRs) de cadeia pesada e leve de urelumab. Em uma modalidade, a região variável da cadeia pesada (Vh) do agonista de 41BB compreende a sequência mostrada na SEQ ID NO: 23, e a região variável da cadeia leve (Vl) do agonista de 4-1 BB compreende a sequência mostrada na SEQ ID NO: 24, e substituições de aminoácido conservativas dos mesmos. Em uma modalidade, um agonista de 4-1BB compreende as regiões Vh e Vl que são cada uma pelo menos 99% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 23 e SEQ ID NO: 24, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de 4-1BB compreende as regiões Vh e Vl que são cada uma pelo menos 98% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 23 e SEQ ID NO: 24, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de 4-1 BB compreende as regiões Vh e Vl que são cada uma pelo menos 97% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 23 e SEQ ID NO: 24, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de 4-1 BB compreende as regiões Vh e Vl que são cada uma pelo menos 96% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 23 e SEQ ID NO: 24, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de 4-1BB compreende as regiões Vh e Vl que são cada uma pelo menos 95% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 23 e SEQ ID NO: 24, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de 4-1BB compreende um scFv anticorpo compreendendo as regiões Vh e Vl que são cada uma pelo menos 99% idênticas às sequências mostradas na SEQ
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ID NO: 23 e SEQ ID NO: 24.
[00801] Em uma modalidade, um agonista de 4-IBB compreende os domínios CDR1, CDR2 e CDR3 da cadeia pesada tendo as sequências apresentadas na SEQ ID NO: 25, SEQ ID NO: 26, e SEQ ID NO: 27, respectivamente, e substituições de aminoácido conservativas dos mesmos, e os domínios CDR1, CDR2 e CDR3 da cadeia leve tendo as sequências apresentadas na SEQ ID NO: 28, SEQ ID NO: 29, e SEQ ID NO: 30, respectivamente, e substituições de aminoácido conservativas dos mesmos.
[00802] Em uma modalidade, o agonista de 4-1BB é um anticorpo monoclonal biossimilar agonista de 4-1BB aprovado pelas autoridades reguladoras de fármaco com referência ao urelumab. Em uma modalidade, o anticorpo monoclonal biossimilar compreende um anticorpo 4-1BB compreendendo uma sequência de aminoácidos que tenha pelo menos 97 % de identidade de sequência, por exemplo, 97%, 98%, 99% ou 100% de identidade de sequência, com a sequência de aminoácidos do produto medicinal de referência ou produto biológico de referência e que compreende uma ou mais modificações pós-traducionais quando comparado com o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é urelumab. Em algumas modalidades, o uma ou mais modificações póstraducionais são selecionada de uma ou mais de: glicosilação, oxidação, desamidação, e truncagem. Em algumas modalidades, o biossimilar é um agonista de anticorpo 4-1 BB autorizado ou submetido para autorização, em que o agonista de anticorpo 4-1 BB é provido em uma formulação que difere das formulações do produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é urelumab. O agonista de anticorpo 4-1 BB pode ser autorizado por uma autoridade reguladora de fármaco tal como o FDA dos Estados Unidos e/ou o EMA da União Européia. Em algumas modalidades, o biossimilar é
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178/497 provido como uma composição que compreende adicionalmente um ou mais excipientes, em que o um ou mais excipientes são os mesmos ou diferentes dos excipientes compreendidos no produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é urelumab. Em algumas modalidades, o biossimilar é provido como uma composição que compreende adicionalmente um ou mais excipientes, em que o um ou mais excipientes são os mesmos ou diferentes dos excipientes compreendidos no produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é urelumab.
TABELA 5. As sequências de aminoácidos para agonistas de anticorpo 4
1BB relacionados com o urelumab.
| Identificador | Sequência (Símbolos de aminoácido de uma letra) |
| SEQ ID NO: 21 cadeia pesada para urelumab | QVQLQQWGAG LLKPSETLSL TCAVYGGSFS GYYWSWIRQS PEKGLEWIGE INHGGYVTYN 60 PSLESRVTIS VDTSKNQFSL KLSSVTAADT AVYYCARDYG PGNYDWYFDL WGRGTLVTVS 120 SASTKGPSVF PLAPCSRSTS ESTAALGCLV KDYFPEPVTV SWNSGALTSG VhTFPAVlQS 180 SGLYSLSSVV TVPSSSLGTK TYTCNVDHKP SNTKVDKRVE SKYGPPCPPC PAPEFLGGPS 240 VFLFPPKPKD TLMISRTPEV TCVVVDVSQE DPEVQFNWYV DGVEVhNAKT KPREEQFNST 300 YRVVSVlTVl hqdwlngkey kckvsnkglp ssiektiska kgqprepqvy TLPPSQEEMT 360 KNQVSLTCLV KGFYPSDIAV EWESNGQPEN NYKTTPPVlD SDGSFFLYSR LTVDKSRWQE 420 GNVFSCSVMH EALHNHYTQK SLSLSLGK 448 |
| SEQ ID NO: 22 cadeia leve para urelumab | EIVlTQSPAT lslspgerat lscrasqsvs sylawyqqkp gqaprlliyd ASNRATGIPA 60 RFSGSGSGTD FTLTISSLEP EDFAVYYCQQ RSNWPPALTF CGGTKVEIKR TVAAPSVFIF 120 PPSDEQLKSG TASVVCLLNN FYPREAKVQW KVDNALQSGN SQESVTEQDS KDSTYSLSST 180 LTLSKADYEK HKVYACEVTH QGLSSPVTKS FNRGEC 216 |
| SEQ ID NO: 23 da cadeia pesada variável para urelumab | MKHLWFFLLL VAAPRWVlSQ VQLQQWGAGL LKPSETLSLT CAVYGGSFSG YYWSWIRQSP 60 EKGLEWIGEI NHGGYVTYNP SLESRVTISV DTSKNQFSLK LSSVTAADTA VYYCARDYGP 120 |
| SEQ ID NO: 24 da cadeia leve variável para urelumab | MEAPAQLLFL LLLWLPDTTG EIVlTQSPAT LSLSPGERAT LSCRASQSVS SYLAWYQQKP 60 GQAPRLLIYD ASNRATGIPA RFSGSGSGTD FTLTISSLEP EDFAVYYCQQ 110 |
| SEQ ID NO: 25 CDR1 da cadeia pesada para urelumab | GYYWS 5 |
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| SEQ ID NO: 26 CDR2 da cadeia pesada para urelumab | EINHGGYVTY NPSLES | 16 |
| SEQ ID NO: 27 CDR3 da cadeia pesada para urelumab | DYGPGNYDWY FDL | 13 |
| SEQ ID NO: 28 CDR1 da cadeia leve para urelumab | RASQSVSSYL UM | 11 |
| SEQ ID NO: 29 CDR2 da cadeia leve para urelumab | DASNRAT 7 | |
| SEQ ID NO: 30 CDR3 da cadeia leve para urelumab | QQRSDWPPAL T | 11 |
[00803] Em uma modalidade, o agonista de 4-1BB é selecionado a partir do grupo que consiste em 1D8, 3Elor, 4B4 (BioLegend 309809), H41BB-M127 (BD Pharmingen 552532), BBK2 (Thermo Fisher MS621PABX), 145501 (Leinco Technologies B591), o anticorpo produzido pela linhagem de célula depositada como ATCC No. HB-11248 e divulgada na Patente U.S. No. 6.974.863, 5F4 (BioLegend 31 1503), C65-485 (BD Pharmingen 559446), anticorpos divulgados na Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2005/0095244, anticorpos divulgados na Patente U.S. No. 7.288.638 (tais como 20H4,9-IgGl (BMS-663031)), anticorpos divulgados na Patente U.S. No. 6.887.673 (tais como 4E9 ou BMS-554271), anticorpos divulgados na Patente U.S. No. 7.214.493, anticorpos divulgados na Patente U.S. No. 6.303.121, anticorpos divulgados na Patente U.S. No. 6.569.997, anticorpos divulgados na Patente U.S. No. 6.905.685 (tais como 4E9 ou BMS-554271), anticorpos divulgados na Patente U.S. No. 6.362.325 (tais como 1D8 ou BMS-469492; 3H3 ou BMS-469497; ou 3E1), anticorpos divulgados na Patente U.S. No. 6.974.863 (tais como 53A2); anticorpos divulgados na Patente U.S. No. 6.210.669 (tais como 1D8, 3B8, ou 3E1), anticorpos descritos na Patente U.S. No. 5.928.893, anticorpos divulgados na Patente U.S. No. 6.303.121, anticorpos divulgados na Patente U.S. No. 6.569.997, anticorpos divulgados nas Publicações dos Pedidos de Patente Internacionais
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Nos. WO 2012/177788, WO 2015/119923, e WO 2010/042433, e fragmentos, derivados, conjugados, variantes, ou biossimilares dos mesmos, em que a divulgação de cada uma das patentes ou publicações dos pedidos de patente é aqui incorporada por referência.
[00804] Em uma modalidade, o agonista de 4-1 BB é uma proteína de fusão agonista de 4-lBBic descrita nas Publicações dos Pedidos de Patente Internacionais Nos. WO 2008/025516 Al, WO 2009/007120 Al, WO 2010/003766 Al, WO 2010/010051 Al, e WO 2010/078966 Al; Publicações dos Pedidos de Patente U.S. Nos. US 2011/0027218 Al, US 2015/0126709 Al, US 2011/0111494 Al, US 2015/0110734 Al, e US 2015/0126710 Al; e Patentes U.S. Nos. 9.359.420, 9.340.599, 8.921.519, e 8.450.460, as divulgações das quais são aqui incorporadas por referência.
[00805] Em uma modalidade, o agonista de 4-1 BB é uma proteína de fusão agonista de 4-lBBic como representada na Estrutura I-A (proteína de fusão de fragmento de anticorpo Fc de terminal C) ou Estrutura I-B (Proteína de fusão de fragmento de anticorpo Fc de terminal N), ou um fragmento, derivado, conjugado, variante, ou biossimilar da mesma:
(I-A) (I-B)
[00806] Nas estruturas I-A e I-B, os cilindros referem-se aos domínios de ligação de polipeptídeo individual. As estruturas I-A e I-B compreendem
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181/497 três domínios de ligação de TNFRSF linearmente ligados derivados por exemplo, de 4-1BBL ou um anticorpo que liga 4-1 BB, que dobra para formar uma proteína trivalente, que é depois ligado a uma segunda proteína trivalente através de IgGl-Fc (incluindo os domínios Ch3 e Ch2) é depois usado para ligar duas das proteínas trivalentes juntas através de ligações de dissulfeto (ovais alongados pequenos), estabilizando a estrutura e provendo um agonista capaz de juntar os domínios de sinalização intracelular dos seis receptores e proteínas de sinalização para formar um complexo de sinalização. Os domínios de ligação TNFRSF simbolizados como cilindros podem ser domínios scFv compreendendo, por exemplo, uma cadeia Vh e uma Vl conectadas por um ligante que pode compreender resíduos hidrofílicos e sequências Gly e Ser para flexibilidade, assim como Glu e Lys para solubilidade. Qualquer projeto de domínio scFv pode ser usado, tal como aqueles descritos em de Marco, Microbial Cell Factories, 2011, 10, 44; Ahmad, et al., Clin. & Dev. Immunol. 2012, 980250; Monnier, et al., Antibodies, 2013, 2, 193-208; ou em referências aqui incorporadas em outro lugar. As estruturas de proteína de fusão desta forma são descritas nas Patentes U.S. Nos. 9.359.420, 9.340.599, 8.921.519, e 8.450.460, as divulgações das quais são aqui incorporadas por referência.
[00807] As sequências de aminoácidos para os outros domínios de polipeptídeo de estrutura I-A são dadas na Tabela 6. O domínio Fc preferivelmente compreende um domínio constante completo (aminoácidos 17 a 230 da SEQ ID NO: 31), o domínio de dobradiça completo (aminoácidos 1 a 16 da SEQ ID NO: 31) ou uma porção do domínio de dobradiça (por exemplo, aminoácidos 4 a 16 da SEQ ID NO: 31). Os ligantees preferidos para conectar um anticorpo Fc de terminal C podem ser selecionados das modalidades dadas na SEQ ID NO: 32 até a SEQ ID NO: 41, incluindo ligantees adequados para a fusão de polipeptídeos adicionais.
[00808] TABELA 6. As sequências de aminoácidos para proteínas de
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182/497 fusão TNFRSF, incluindo proteínas de fusão 4-1BB, com projeto de proteína de fusão de fragmento de anticorpo Fe de terminal C (estrutura I-A).
| Identificador | Sequência (Símbolos de aminoácido de uma letra) |
| SEQ ID NO: 31 domínio Fc | KSCDKTHTCP PCPAPELLGG PSVFLFPPKP KDTLMISRTP EVTCVVVDVS HEDPEVKFNW 60 YVDGVEVHNA KTKPREEQYN STYRVVSVLT VLHQDWLNGK EYKCKVSNKA LPAPIEKTIS 120 KAKGQPREPQ VYTLPPSREE MTKNQVSLTC LVKGFYPSDI AVEWESNGQP ENNYKTTPPV 180 LDSDGSFFLY SKLTVDKSRW QQGNVFSCSV MHEALHNHYT QKSLSLSPGK 230 |
| SEQ ID NO: 32 ligante | GGPGSSKSCD KTHTCPPCPA PE 22 |
| SEQ ID NO: 33 ligante | GGSGSSKSCD KTHTCPPCPA PE 22 |
| SEQ ID NO: 34 ligante | GGPGSSSSSS SKSCDKTHTC PPCPAPE 27 |
| SEQ ID NO: 35 ligante | GGSGSSSSSS SKSCDKTHTC PPCPAPE 27 |
| SEQ ID NO: 36 ligante | GGPGSSSSSS SSSKSCDKTH TCPPCPAPE 29 |
| SEQ ID NO: 37 ligante | GGSGSSSSSS SSSKSCDKTH TCPPCPAPE 29 |
| SEQ ID NO: 38 ligante | GGPGSSGSGS SDKTHTCPPC PAPE 24 |
| SEQ ID NO: 39 ligante | GGPGSSGSGS DKTHTCPPCP APE 23 |
| SEQ ID NO: 40 ligante | GGPSSSGSDK THTCPPCPAP E 21 |
| SEQ ID NO: 41 ligante | GGSSSSSSSS GSDKTHTCPP CPAPE 25 |
[00809] As sequências de aminoácidos para os outros domínios de polipeptídeo de estrutura I-B são dadas na Tabela 7. Se um fragmento de anticorpo Fe é fundido ao terminal N de uma proteína de fusão de TNRFSF como na estrutura I-B, a sequência do módulo Fe é preferivelmente aquela mostrada na SEQ ID NO: 42, e as sequências liganteas são preferivelmente selecionadas daquelas modalidades apresentadas na SED ID NO: 43 até a SEQ ID NO: 45.
[00810] TABELA 7. As sequências de aminoácidos para proteínas de fusão de TNFRSF, incluindo proteínas de fusão 4-1BB, com projeto de proteína de fusão de fragmento de anticorpo Fe de terminal N (estrutura I-B).
| Identificador | Sequência (Símbolos de aminoácido de uma letra) |
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| SEQ ID NO: 42 domínio Fc | METDTLLLWV LLLWVPAGNG DKTHTCPPCP APELLGGPSV FLFPPKPKDT LMISRTPEVT 60 CVVVDVSHED PEVKFNWYVD GVEVhNAKTK PREEQYNSTY RVVSVlTVlH QDWLNGKEYK 120 CKVSNKALPA PIEKTISKAK GQPREPQVYT LPPSREEMTK NQVSLTCLVK GFYPSDIAVE 180 WESNGQPENN YKTTPPVlDS DGSFFLYSKL TVDKSRWQQG NVFSCSVMHE ALHNHYTQKS 240 LSLSPG 246 |
| SEQ ID NO: 43 ligante | SGSGSGSGSGS 11 |
| SEQ ID NO: 44 ligante | SSSSSSGSGS GS 12 |
| SEQ ID NO: 45 ligante | SSSSSSGSGS GSGSGS 16 |
[00811] Em uma modalidade, uma proteína de fusão agonista de 41BB de acordo com a estruturas I-A ou I-B compreende um ou mais domínios de ligação de 4-1BB selecionados do grupo que consiste em uma de cadeia pesada variável e cadeia leve variável de utomilumab, uma de cadeia pesada variável e cadeia leve variável de urelumab, uma de cadeia pesada variável e cadeia leve variável de utomilumab, uma de cadeia pesada variável e cadeia leve variável selecionada das cadeias pesadas variáveis e das cadeias leves variáveis descritas na Tabela 8, qualquer combinação de uma de cadeia pesada variável e cadeia leve variável dos precedentes, e fragmentos, derivados, conjugados, variantes, e biossimilares dos mesmos.
[00812] Em uma modalidade, uma proteína de fusão agonista de 41BB de acordo com as estruturas I-A ou I-B compreendem um ou mais domínios de ligação de 4-1 BB compreendendo uma sequência de 4-1BBL. Em uma modalidade, uma proteína de fusão agonista de 4-1BB de acordo com as estruturas I-A ou I-B compreende um ou mais domínios de ligação de 4-1BB compreendendo uma sequência de acordo com a SEQ ID NO: 46. Em uma modalidade, uma proteína de fusão agonista de 4-1BB de acordo com as estruturas I-A ou I-B compreende um ou mais domínios de ligação de 4-1BB compreendendo uma sequência 4-1BBL solúvel. Em uma modalidade, uma proteína de fusão agonista de 4-1BB de acordo com as estruturas I-A ou I-B compreende um ou mais domínios de ligação de 4-1 BB compreendendo uma sequência de acordo com a SEQ ID NO: 47.
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184/497 [00813] Em uma modalidade, uma proteína de fusão agonista de 41BB de acordo com as estruturas I-A ou I-B compreende um ou mais domínios de ligação de 4-1BB que é um domínio scFv compreendendo as regiões Vh e Vl que são cada uma pelo menos 95% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 13 e SEQ ID NO: 14, respectivamente, em que os domínios Vh e Vl são conectados por um ligante. Em uma modalidade, uma proteína de fusão agonista de 4-1BB de acordo com as estruturas I-A ou I-B compreende um ou mais domínios de ligação de 4-1 BB que é um domínio scFv compreendendo as regiões Vh e Vl que são cada uma pelo menos 95% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 23 e SEQ ID NO: 24, respectivamente, em que os domínios Vh e Vl são conectados por um ligante. Em uma modalidade, uma proteína de fusão agonista de 4-1BB de acordo com as estruturas I-A ou I-B compreende um ou mais domínios de ligação de 4-1BB que é um domínio scFv compreendendo as regiões Vh e Vl que são cada uma pelo menos 95% idênticas às sequências VH e VL dadas na Tabela 8, em que os domínios Vne Vl são conectados por um ligante.
[00814] TABELA 8. Domínios de polipeptídeo adicionais úteis como domínios de ligação de 4-1 BB nas proteínas de fusão ou como anticorpos agonistas de scFv 4-1 BB.
| Identificador | Sequência (Símbolos de aminoácido de uma letra) |
| SEQ ID NO: 46 4-1BBL | MEYASDASLD PEAPWPPAPR ARACRVlPWA LVAGLLLLLL LAAACAVFLA CPWAVSGARA 60 SPGSAASPRL REGPELSPDD PAGLLDLRQG MFAQLVAQNV LLIDGPLSWY SDPGLAGVSL 120 TGGLSYKEDT KELVVAKAGV YYVFFQLELR RVVAGEGSGS VSLALHLQPL RSAAGAAALA 180 LTVDLPPASS EARNSAFGFQ GRLLHLSAGQ RLGVHLHTEA RARHAWQLTQ GATVLGLFRV 240 TPEIPAGLPS PRSE 254 |
| SEQ ID NO: 47 domínio solúvel DE 4-1BBL | LRQGMFAQLV AQNVLLIDGP LSWYSDPGLA GVSLTGGLSY KEDTKELVVA KAGVYYVFFQ 60 LELRRVVAGE GSGSVSLALH LQPLRSAAGA AALALTVDLP PASSEARNSA FGFQGRLLHL 120 SAGQRLGVHL HTEARARHAW QLTQGATVLG LFRVTPEIPA GLPSPRSE 168 |
| SEQ ID NO: 48 cadeia pesada variável para 4B4 a 1 a 1 versão 1 | QVQLQQPGAE LVKPGASVKL SCKASGYTFS SYWMHWVKQR PGQVLEWIGE INPGNGHTNY 60 NEKFKSKATL TVDKSSSTAY MQLSSLTSED SAVYYCARSF TTARGFAYWG QGTLVTVS 118 |
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| SEQ ID NO: 49 cadeia leve variável para 4B4 a 1 a 1 versão 1 | DIVMTQSPAT QSVTPGDRVS LSCRASQTIS DYLHWYQQKS HESPRLLIKY ASQSISGIPS 60 RFSGSGSGSD FTLSINSVEP EDVGVYYCQD GHSFPPTFGG GTKLEIK 107 |
| SEQ ID NO: 50 cadeia pesada variável para 4B4 a 1 a 1 versão 2 | QVQLQQPGAE LVKPGASVKL SCKASGYTFS SYWMHWVKQR PGQVLEWIGE INPGNGHTNY 60 NEKFKSKATL TVDKSSSTAY MQLSSLTSED SAVYYCARSF TTARGFAYWG QGTLVTVSA 119 |
| SEQ ID NO: 51 cadeia leve variável para 4B4 a 1 a 1 versão 2 | DIVMTQSPAT QSVTPGDRVS LSCRASQTIS DYLHWYQQKS HESPRLLIKY ASQSISGIPS 60 RFSGSGSGSD FTLSINSVEP EDVGVYYCQD GHSFPPTFGG GTKLEIKR 108 |
| SEQ ID NO: 52 cadeia pesada variável para H39E3-2 | MDWTWRILFL VAAATGAHSE VQLVESGGGL VQPGGSLRLS CAASGFTFSD YWMSWVRQAP 60 GKGLEWVADI KNDGSYTNYA PSLTNRFTIS RDNAKNSLYL QMNSLRAEDT AVYYCARELT 120 |
| SEQ ID NO: 53 cadeia leve variável para H39E3-2 | MEAPAQLLFL LLLWLPDTTG DIVMTQSPDS LAVSLGERAT INCKSSQSLL SSGNQKNYL 60 WYQQKPGQPP KLLIYYASTR QSGVPDRFSG SGSGTDFTLT ISSLQAEDVA 110 |
[00815] Em uma modalidade, o agonista de 4-1BB é um polipeptídeo de fusão de cadeia única agonista de 4-lBBic compreendendo (i) um primeiro domínio de ligação de 4-1BB solúvel, (ii) um primeiro ligante peptídico, (iii) um segundo domínio de ligação de 4-1 BB solúvel, (iv) um segundo ligante peptídico, e (v) um terceiro domínio de ligação de 4-1 BB solúvel, compreendendo adicionalmente um domínio adicional na extremidade de terminal N e/ou terminal C, e em que o domínio adicional é um Fab ou domínio do fragmento Fe. Em uma modalidade, o agonista de 4-1BB é um polipeptídeo de fusão de cadeia única agonista de 4-lBBic compreendendo (i) um primeiro domínio de ligação de 4-1 BB solúvel, (ii) um primeiro ligante peptídico, (iii) um segundo domínio de ligação de 4-1BB solúvel, (iv) um segundo ligante peptídico, e (v) um terceiro domínio de ligação de 4-1 BB solúvel, compreendendo adicionalmente um domínio adicional na extremidade de terminal N e/ou terminal C, em que o domínio adicional é um Fab ou domínio do fragmento Fe, em que cada um dos domínios de 4-1 BB solúveis carecem de um região de haste (que contribui para a trimerização e provê uma certa distância para a membrana celular, mas não é parte do domínio de ligação de 4-1BB) e o primeiro e o segundo ligantees peptídicos independentemente têm um comprimento de 3 a 8 aminoácidos.
[00816] Em uma modalidade, o agonista de 4-1BB é um polipeptídeo
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186/497 de fusão de cadeia única agonista de 4-lBBic compreendendo (i) um primeiro domínio de citocina da superfamília do fator de necrose de tumor (TNF) solúvel, (ii) um primeiro ligante peptídico, (iii) um segundo domínio de citocina da superfamília do TNF solúvel, (iv) um segundo ligante peptídico, e (v) um terceiro domínio de citocina da superfamília do TNF solúvel, em que cada um dos domínios de citocina da superfamília do TNF solúvel carece de uma região de haste e o primeiro e o segundo ligantees peptídicos independentemente têm um comprimento de 3 a 8 aminoácidos, e em que cada domínio de citocina da superfamília do TNF é um domínio de ligação de 4-1BB.
[00817] Em uma modalidade, o agonista de 4-1 BB é um anticorpo de scFv agonista de 4-lBBic compreendendo qualquer um dos domínios VH precedentes ligados a qualquer um dos domínios VL precedentes.
[00818] Em uma modalidade, o agonista de 4-1BB é o agonista de anticorpo 4-1 BB da BPS Bioscience catálogo no. 79097 a 2, comercialmente disponível da BPS Bioscience, San Diego, CA, USA. Em uma modalidade, o agonista de 4-1BB é o agonista de anticorpo 4-1BB da Creative Biolabs catálogo no. MOM-18179, comercialmente disponível da Creative Biolabs, Shirley, NY, USA.
[00819] Agonistas 0X40 (CD 134) [00820] Em uma modalidade, o agonista de TNFRSF é um agonista de 0X40 (CD 134). O agonista de 0X40 pode ser qualquer molécula de ligação de 0X40 conhecida na técnica, a molécula de ligação de 0X40 pode ser um anticorpo monoclonal ou proteína de fusão capazes de ligação ao 0X40 humano ou de mamífero. Os agonistas de 0X40 ou moléculas de ligação de 0X40 podem compreender uma cadeia pesada de imunoglobulina de qualquer isotipo (por exemplo, IgG, IgE, IgM, IgD, IgA, e IgY), classe (por exemplo, IgGl, IgG2, IgG3, IgG4, IgAl e IgA2) ou subclasse de molécula de imunoglobulina. O agonista de 0X40 ou molécula de ligação de 0X40 pode
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187/497 ter tanto uma cadeia pesada quanto uma leve. Como aqui usado, o termo molécula de ligação também inclui anticorpos (incluindo anticorpos de tamanho natural), anticorpos monoclonais (incluindo anticorpos monoclonais de tamanho natural), anticorpos policlonais, anticorpos multiespecíficos (por exemplo, anticorpos biespecíficos), anticorpos humanos, humanizados ou quiméricos, e fragmentos de anticorpo, por exemplo, fragmentos Fab, fragmentos F(ab’), fragmentos produzido por uma biblioteca de expressão de Fab, fragmentos de ligação de epitopo de qualquer um dos acima, e formas engenheiradas de anticorpos, por exemplo, moléculas scFv, que se ligam ao 0X40. Em uma modalidade, o agonista de 0X40 é uma proteína de ligação a antígeno que é um anticorpo totalmente humano. Em uma modalidade, o agonista de 0X40 é uma proteína de ligação a antígeno que é um anticorpo humanizado. Em algumas modalidades, os agonistas de 0X40 para o uso nos métodos e composições presentemente divulgados incluem anticorpos anti0X40, anticorpos anti-OX40 humanos, anticorpos anti-OX40 de camundongo, anticorpos anti-OX40 de mamífero, anticorpos anti-OX40 monoclonais, anticorpos anti-OX40 policlonais, anticorpos anti-OX40 quiméricos, adnectinas anti-OX40, anticorpos de domínio anti-OX40, fragmentos anti-OX40 de cadeia única, fragmentos anti-OX40 de cadeia pesada, fragmentos anti-OX40 de cadeia leve, proteínas de fusão anti-OX40, e fragmentos, derivados, conjugados, variantes, ou biossimilares dos mesmos. Em uma modalidade preferida, o agonista de 0X40 é um anticorpo monoclonal agonístico, anti-OX40 humanizado ou totalmente humano (isto é, um anticorpo derivado de uma única linhagem de célula).
[00821] Em uma modalidade preferida, o agonista de 0X40 ou molécula de ligação de 0X40 também podem ser uma proteína de fusão. As proteínas de fusão de 0X40 compreendendo um domínio Fc fundido ao OX40L são descritas, por exemplo, em Sadun, et al., J. Immunother. 2009, 182, 1481-89. Em uma modalidade preferida, um agonista de 0X40
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188/497 multimérico, tal como um agonista de 0X40 trimérico ou hexamérico (com três ou seis domínios de ligação do ligante), pode induzir agrupamento de receptor (OX40L) e formação do complexo de sinalização celular interna superiores comparado a um anticorpo monoclonal agonístico, que tipicamente possui dois domínios de ligação do ligante. Proteínas de fusão triméricas (trivalentes) ou hexaméricas (ou hexavalentes) ou maior compreendendo três domínios de ligação de TNFRSF e IgGl-Fc e opcionalmente ainda ligando duas ou mais destas proteínas de fusão são descritas, por exemplo, em Gieffers, et al., Mol. Cancer Therapeutics 2013,12, 2735-47.
[00822] Os anticorpos 0X40 agonísticos e as proteínas de fusão são conhecidos induzir respostas imunes fortes. Curti, et al., Cancer Res. 2013, 73, 7189-98. Em uma modalidade preferida, o agonista de 0X40 é um anticorpo monoclonal ou proteína de fusão que se liga especificamente ao antígeno de 0X40 em uma maneira suficiente para reduzir toxicidade. Em algumas modalidades, o agonista de 0X40 é um anticorpo monoclonal de 0X40 agonístico ou proteína de fusão que anula a toxicidade celular dependente de anticorpo (ADCC), por exemplo, a citotoxicidade de célula NK. Em algumas modalidades, o agonista de 0X40 é um anticorpo monoclonal de 0X40 agonístico ou proteína de fusão que anula a fagocitose celular dependente de anticorpo (ADCP). Em algumas modalidades, o agonista de 0X40 é um anticorpo monoclonal de 0X40 agonístico ou proteína de fusão que anula citotoxicidade dependente de complemento (CDC). Em algumas modalidades, o agonista de 0X40 é um anticorpo monoclonal de 0X40 agonístico ou proteína de fusão que anula a funcionalidade da região Fc.
[00823] Em algumas modalidades, os agonistas de 0X40 são distinguidos pela ligação ao 0X40 humano (SEQ ID NO: 54) com alta afinidade e atividade agonística. Em uma modalidade, o agonista de 0X40 é uma molécula de ligação que se liga ao 0X40 humano (SEQ ID NO: 54). Em
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189/497 uma modalidade, o agonista de 0X40 é uma molécula de ligação que se liga ao 0X40 de murino (SEQ ID NO: 55). As sequências de aminoácido do antígeno de 0X40 ao qual um agonista de 0X40 ou molécula de ligação se ligam estão resumidas na Tabela 9.
TABELA 9. As sequências de aminoácidos de antígenos de 0X40.
| Identificador | Sequência (Símbolos de aminoácido de uma letra) |
| SEQ ID NO: 54 0X40 humano (Homo sapiens) | MCVGARRLGR GPCAALLLLG LGLSTVTGLH CVGDTYPSND RCCHECRPGN GMVSRCSRSQ 60 NTVCRPCGPG FYNDVVSSKP CKPCTWCNLR SGSERKQLCT ATQDTVCRCR AGTQPLDSYK 120 PGVDCAPCPP GHFSPGDNQA CKPWTNCTLA GKHTLQPASN SSDAICEDRD PPATQPQETQ 180 GPPARPITVQ PTEAWPRTSQ GPSTRPVEVP GGRAVAAILG LGLVLGLLGP LAILLALYLL 240 RRDQRLPPDA HKPPGGGSFR TPIQEEQADA HSTLAKI 277 |
| SEQ ID NO: 55 0X40 murino (Mus musculus) | MYVWVQQPTA LLLLGLTLGV TARRLNCVKH TYPSGHKCCR ECQPGHGMVS RCDHTRDTLC 60 HPCETGFYNE AVNYDTCKQC TQCNHRSGSE LKQNCTPTQD TVCRCRPGTQ PRQDSGYKLG 120 VDCVPCPPGH FSPGNNQACK PWTNCTLSGK QTRHPASDSL DAVCEDRSLL ATLLWETQRP 180 TFRPTTVQST TVWPRTSELP SPPTLVTPEG PAFAVLLGLG LGLLAPLTVL LALYLLRKAW 240 RLPNTPKPCW GNSFRTPIQE EHTDAHFTLA Kl 272 |
[00824] Em algumas modalidades, as composições, processos e métodos descritos incluem um agonista de 0X40 que liga 0X40 humano ou murino com um Kd de cerca de 100 pM ou mais baixo, liga 0X40 humano ou murino com um Kd de cerca de 90 pM ou mais baixo, liga 0X40 humano ou murino com um Kd de cerca de 80 pM ou mais baixo, liga 0X40 humano ou murino com um Kd de cerca de 70 pM ou mais baixo, liga 0X40 humano ou murino com um Kd de cerca de 60 pM ou mais baixo, liga 0X40 humano ou murino com um Kd de cerca de 50 pM ou mais baixo, liga 0X40 humano ou murino com um Kd de cerca de 40 pM ou mais baixo, ou liga 0X40 humano ou murino com um Kd de cerca de 30 pM ou mais baixo.
[00825] Em algumas modalidades, as composições, processos e métodos descritos incluem um agonista de 0X40 que se liga ao 0X40 humano ou murino com um kassoc de cerca de 7,5 x 105 1/M-s ou mais rápido, se liga ao 0X40 humano ou murino com um kassoc de cerca de 7,5 x 105 1/M· s ou mais rápido, se liga ao 0X40 humano ou murino com um kassoc de cerca de
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190/497 χ 105 1/M-s ou mais rápido, se liga ao 0X40 humano ou murino com um kassoc de cerca de 8,5 χ 105 1/M-s ou mais rápido, se liga ao 0X40 humano ou murino com um kassoc de cerca de 9 χ 105 1/M-s ou mais rápido, se liga ao 0X40 humano ou murino com um kassoc de cerca de 9,5 χ 105 1/M-s ou mais rápido, ou liga ao 0X40 humano ou murino com um kassoc de cerca de 1 χ 106 1/M-s ou mais rápido.
[00826] Em algumas modalidades, as composições, processos e métodos descritos incluem um agonista de 0X40 que se liga ao 0X40 humano ou murino com um kdissoc de cerca de 2 x IO'5 1/s ou mais lento, se liga ao 0X40 humano ou murino com um kdissoc de cerca de 2,1 x IO'5 1/s ou mais lento, se liga ao 0X40 humano ou murino com um kdissoc de cerca de 2,2 x IO'5 1/s ou mais lento, se liga ao 0X40 humano ou murino com um kdissoc de cerca de 2,3 x IO'5 1/s ou mais lento, se liga ao 0X40 humano ou murino com um kdissoc de cerca de 2,4 x IO'5 1/s ou mais lento, se liga ao 0X40 humano ou murino com um kdissoc de cerca de 2,5 x IO'5 1/s ou mais lento, se liga ao 0X40 humano ou murino com um kdissoc de cerca de 2,5 x IO'5 1/s ou mais lento ou liga ao 0X40 humano ou murino com um kdissoc de cerca de 2,7 x 10’ 5 1/s ou mais lento, se liga ao 0X40 humano ou murino com um kdissoc de cerca de 2,8 x IO'5 1/s ou mais lento, se liga ao 0X40 humano ou murino com um kdissoc de cerca de 2,9 x IO'5 1/s ou mais lento, ou liga ao 0X40 humano ou murino com um kdissoc de cerca de 3 x IO'5 1/s ou mais lento.
[00827] Em algumas modalidades, as composições, processos e métodos descritos incluem agonista de 0X40 que se liga ao 0X40 humano ou murino com um IC50 de cerca de 10 nM ou mais baixo, se liga ao 0X40 humano ou murino com um IC50 de cerca de 9 nM ou mais baixo, se liga ao 0X40 humano ou murino com um IC50 de cerca de 8 nM ou mais baixo, se liga ao 0X40 humano ou murino com um IC50 de cerca de 7 nM ou mais baixo, se liga ao 0X40 humano ou murino com um IC50 de cerca de 6 nM ou mais baixo, se liga ao 0X40 humano ou murino com um IC50 de cerca de 5
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191/497 nM ou mais baixo, se liga ao 0X40 humano ou murino com um IC50 de cerca de 4 nM ou mais baixo, se liga ao 0X40 humano ou murino com um IC50 de cerca de 3 nM ou mais baixo, se liga ao 0X40 humano ou murino com um IC50 de cerca de 2 nM ou mais baixo, ou liga ao 0X40 humano ou murino com um IC50 de cerca de 1 nM ou mais baixo.
[00828] Em algumas modalidades, o agonista de 0X40 é tavolixizumab, também conhecido como MEDI0562 ou MEDI-0562. Tavolixizumab está disponível da Medlmmune subsidiária da AstraZeneca, Inc. Tavolixizumab é anticorpo de imunoglobina Gl-capa monoclonal humanizado e quimérico, anti-[TNFRSF4 (membro 4 da superfamília do receptor do fator de necrose de tumor (TNFR), 0X40, CD 134) de Homo sapiens]. As sequências de aminoácido de tavolixizumab são apresentadas na Tabela 10. Tavolixizumab compreende sítios de N-glicosilação nas posições 301 e 301”, com glicanos tipo CHO biantenário complexo fucosilado; pontes de dissulfeto intracadeia da cadeia pesada nas posições 22 a 95 (VH-VL), 148 a 204 (Ch1-Cl), 265 a 325 (Ch2) e 371 a 429 (Ch3) (e nas posições 22” a 95”, 148” a 204”, 265” a 325”, e 371” a 429”); pontes de dissulfeto intracadeia da cadeia leve nas posições 23’ a 88’ (VH-VL) e 134’ a 194’ (ChI-Cl) (e nas posições 23’” a 88’” e 134’” a 194’”); pontes de dissulfeto de cadeia pesada-cadeia pesada intercadeia nas posições 230 a 230” e 233 a 233”; e pontes de dissulfeto de cadeia pesada a cadeia leve intercadeia em 224 a 214’ e 224” a 214”’. Os testes clínicos correntes de tavolixizumab em uma variedade de indicações de tumor sólido incluem os identificadores NCT02318394 e NCT02705482 da U.S. National Institutes of Health clinicaltrials.gov.
[00829] Em uma modalidade, um agonista de 0X40 compreende uma cadeia pesada dada pela SEQ ID NO: 56 e uma cadeia leve dada pela SEQ ID NO: 57. Em uma modalidade, um agonista de 0X40 compreende cadeias pesadas e leves tendo as sequências mostradas na SEQ ID NO: 56 e SEQ ID
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NO: 57, respectivamente, ou fragmentos de ligação a antígeno, fragmentos Fab, fragmentos variáveis de cadeia única (scFv), variantes, ou conjugados dos mesmos. Em uma modalidade, um agonista de 0X40 compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 99% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 56 e SEQ ID NO: 57, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de 0X40 compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 98% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 56 e SEQ ID NO: 57, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de 0X40 compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 97% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 56 e SEQ ID NO: 57, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de 0X40 compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 96% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 56 e SEQ ID NO: 57, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de 0X40 compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 95% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 56 e SEQ ID NO: 57, respectivamente. [00830] Em uma modalidade, o agonista de 0X40 compreende as CDRs ou regiões variáveis (VRs) de cadeia pesada e leve de tavolixizumab. Em uma modalidade, o agonista de 0X40 da região variável de cadeia pesada (VH) compreende a sequência mostrada na SEQ ID NO: 58, e o agonista de 0X40 da região variável de cadeia leve (VL) compreende a sequência mostrada na SEQ ID NO: 59, e substituições de aminoácido conservativas dos mesmos. Em uma modalidade, um agonista de 0X40 compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 99% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 58 e SEQ ID NO: 59, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de 0X40 compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 98% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 58 e SEQ ID NO: 59, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de 0X40 compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 97%
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193/497 idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 58 e SEQ ID NO: 59, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de 0X40 compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 96% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 58 e SEQ ID NO: 59, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de 0X40 compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 95% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 58 e SEQ ID NO: 59, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de 0X40 compreende um scFv anticorpo compreendendo as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 99% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 58 e SEQ ID NO: 59.
[00831] Em uma modalidade, um agonista de 0X40 compreende os domínios CDR1, CDR2 e CDR3 da cadeia pesada tendo as sequências apresentadas na SEQ ID NO: 60, SEQ ID NO: 61, e SEQ ID NO: 62, respectivamente, e substituições de aminoácido conservativas dos mesmos, e os domínios CDR1, CDR2 e CDR3 da cadeia leve tendo as sequências apresentadas na SEQ ID NO: 63, SEQ ID NO: 64, e SEQ ID NO: 65, respectivamente, e substituições de aminoácido conservativas dos mesmos.
[00832] Em uma modalidade, o agonista de 0X40 é um agonista de 0X40 biossimilar anticorpo monoclonal aprovado pelas autoridades reguladoras de fármaco com referência ao tavolixizumab. Em uma modalidade, o anticorpo monoclonal biossimilar compreende um 0X40 anticorpo compreendendo uma sequência de aminoácidos que tenha pelo menos 97% de identidade de sequência, por exemplo, 97%, 98%, 99% ou 100% de identidade de sequência, com a sequência de aminoácidos do produto medicinal de referência ou produto biológico de referência e que compreende uma ou mais modificações pós-traducionais quando comparado com o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é tavolixizumab. Em algumas modalidades, o uma ou mais modificações pós
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194/497 traducionais são selecionada de uma ou mais de: glicosilação, oxidação, desamidação, e truncagem. Em algumas modalidades, o biossimilar é um anticorpo agonista de 0X40 autorizado ou submetido para autorização, em que o anticorpo agonista de 0X40 é provido em uma formulação que difere das formulações do produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é tavolixizumab. O anticorpo agonista de 0X40 pode ser autorizado por uma autoridade reguladora de fármaco tal como o FDA dos Estados Unidos e/ou o EMA da União Européia. Em algumas modalidades, o biossimilar é provido como uma composição que compreende adicionalmente um ou mais excipientes, em que o um ou mais excipientes são os mesmos ou diferentes dos excipientes compreendidos no produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é tavolixizumab. Em algumas modalidades, o biossimilar é provido como uma composição que compreende adicionalmente um ou mais excipientes, em que o um ou mais excipientes são os mesmos ou diferentes dos excipientes compreendidos no produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é tavolixizumab.
TABELA 10. As sequências de aminoácidos para agonistas de anticorpo de
0X40 relacionados com o tavolixizumab.
| Identificador | Sequência (Símbolos de aminoácido de uma letra) |
| SEQ ID NO: 56 cadeia pesada for tavolixizumab | QVQLQESGPG LVKPSQTLSL TCAVYGGSFS SGYWNWIRKH PGKGLEYIGY ISYNGITYHN 60 PSLKSRITIN RDTSKNQYSL QLNSVTPEDT AVYYCARYKY DYDGGHAMDY WGQGTLVTVS 120 SASTKGPSVF PLAPSSKSTS GGTAALGCLV KDYFPEPVTV SWNSGALTSG VHTFPAVLQS 180 SGLYSLSSVV TVPSSSLGTQ TYICNVNHKP SNTKVDKRVE PKSCDKTHTC PPCPAPELLG 240 GPSVFLFPPK PKDTLMISRT PEVTCVVVDV SHEDPEVKFN WYVDGVEVHN AKTKPREEQY 300 NSTYRVVSVL TVLHQDWLNG KEYKCKVSNK ALPAPIEKTI SKAKGQPREP QVYTLPPSRE 360 EMTKNQVSLT CLVKGFYPSD IAVEWESNGQ PENNYKTTPP VLDSDGSFFL YSKLTVDKSR 420 WQQGNVFSCS VMHEALHNHY TQKSLSLSPG K 451 |
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| SEQ ID NO: 57 cadeia leve for tavolixizumab | DIQMTQSPSS LSASVGDRVT ITCRASQDIS NILNWYQQKP GKAPKLLIYY TSKLHSGVPS 60 RFSGSGSGTD YTLTISSLQP EDFATYYCQQ GSALPWTFGQ GTKVEIKRTV AAPSVFIFPP 120 SDEQLKSGTA SVVCLLNNFY PREAKVQWKV DNALQSGNSQ ESVTEQDSKD STYSLSSTLT 180 LSKADYEKHK VYACEVTHQG LSSPVTKSFN RGEC 214 |
| SEQ ID NO: 58 região variável da cadeia pesada for tavolixizumab | QVQLQESGPG LVKPSQTLSL TCAVYGGSFS SGYWNWIRKH PGKGLEYIGY ISYNGITYHN 60 PSLKSRITIN RDTSKNQYSL QLNSVTPEDT AVYYCARYKY DYDGGHAMDY WGQGTLVT 118 |
| SEQ ID NO: 59 região variável da cadeia leve for tavolixizumab | DIQMTQSPSS LSASVGDRVT ITCRASQDIS NILNWYQQKP GKAPKLLIYY TSKLHSGVPS 60 RFSGSGSGTD YTLTISSLQP EDFATYYCQQ GSALPWTFGQ GTKVEIKR 108 |
| SEQ ID NO: 60 CDR1 da cadeia pesada for tavolixizumab | GSFSSGYWN 9 |
| SEQ ID NO: 61 CDR2 da cadeia pesada for tavolixizumab | YIGYISYNGI TYH 13 |
| SEQ ID NO: 62 CDR3 da cadeia pesada for tavolixizumab | RYKYDYDGGH AMDY 14 |
| SEQ ID NO: 63 CDR1 da cadeia leve for tavolixizumab | QDISNILN 8 |
| SEQ ID NO: 64 CDR2 da cadeia leve for tavolixizumab | LLIYYTSKLH S 11 |
| SEQ ID NO: 65 CDR3 da cadeia leve for tavolixizumab | QQGSALPW 8 |
[00833] Em algumas modalidades, o agonista de 0X40 é 11D4, que é um anticorpo totalmente humano disponível da Pfizer, Inc. A preparação e propriedades de 11D4 são descritas nas Patentes U.S. Nos. 7.960.515; 8.236.930; e 9.028.824, as divulgações das quais são aqui incorporadas por referência. As sequências de aminoácido de 11D4 são apresentadas na Tabela
11.
[00834] Em uma modalidade, um agonista de 0X40 compreende uma cadeia pesada dada pela SEQ ID NO: 66 e uma cadeia leve dada pela SEQ ID NO: 67. Em uma modalidade, um agonista de 0X40 compreende cadeias pesadas e leves tendo as sequências mostradas na SEQ ID NO: 66 e SEQ ID
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NO: 67, respectivamente, ou fragmentos de ligação a antígeno, fragmentos Fab, fragmentos variáveis de cadeia única (scFv), variantes, ou conjugados dos mesmos. Em uma modalidade, um agonista de 0X40 compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 99% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 66 e SEQ ID NO: 67, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de 0X40 compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 98% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 66 e SEQ ID NO: 67, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de 0X40 compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 97% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 66 e SEQ ID NO: 67, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de 0X40 compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 96% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 66 e SEQ ID NO: 67, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de 0X40 compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 95% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 66 e SEQ ID NO: 67, respectivamente. [00835] Em uma modalidade, o agonista de 0X40 compreende as CDRs ou regiões variáveis (VRs) de cadeia pesada e leve de 11D4. Em uma modalidade, o agonista de 0X40 da região variável de cadeia pesada (VH) compreende a sequência mostrada na SEQ ID NO: 68, e o agonista de 0X40 da região variável de cadeia leve (VL) compreende a sequência mostrada na SEQ ID NO: 69, e substituições de aminoácido conservativas dos mesmos. Em uma modalidade, um agonista de 0X40 compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 99% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 68 e SEQ ID NO: 69, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de 0X40 compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 98% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 68 e SEQ ID NO: 69, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de 0X40 compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 97% idênticas
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197/497 às sequências mostradas na SEQ ID NO: 68 e SEQ ID NO: 69, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de 0X40 compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 96% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 68 e SEQ ID NO: 69, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de 0X40 compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 95% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 68 e SEQ ID NO: 69, respectivamente.
[00836] Em uma modalidade, um agonista de 0X40 compreende os domínios CDR1, CDR2 e CDR3 da cadeia pesada tendo as sequências apresentadas na SEQ ID NO: 70, SEQ ID NO: 71, e SEQ ID NO: 72, respectivamente, e substituições de aminoácido conservativas dos mesmos, e os domínios CDR1, CDR2 e CDR3 da cadeia leve tendo as sequências apresentadas na SEQ ID NO: 73, SEQ ID NO: 74, e SEQ ID NO: 75, respectivamente, e substituições de aminoácido conservativas dos mesmos.
[00837] Em uma modalidade, o agonista de 0X40 é um agonista de 0X40 bios similar anticorpo monoclonal aprovado pelas autoridades reguladoras de fármaco com referência ao 11D4. Em uma modalidade, o anticorpo monoclonal biossimilar compreende um 0X40 anticorpo compreendendo uma sequência de aminoácidos que tenha pelo menos 97 % de identidade de sequência, por exemplo, 97%, 98%, 99% ou 100% de identidade de sequência, com a sequência de aminoácidos do produto medicinal de referência ou produto biológico de referência e que compreende uma ou mais modificações pós-traducionais quando comparado com o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é 11D4. Em algumas modalidades, o uma ou mais modificações pós-traducionais são selecionada de uma ou mais de: glicosilação, oxidação, desamidação, e truncagem. Em algumas modalidades, o biossimilar é um anticorpo agonista de 0X40 autorizado ou submetido para autorização, em que o anticorpo
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198/497 agonista de 0X40 é provido em uma formulação que difere das formulações do produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é 11D4. O anticorpo agonista de 0X40 pode ser autorizado por uma autoridade reguladora de fármaco tal como o FDA dos Estados Unidos e/ou o EMA da União Européia. Em algumas modalidades, o biossimilar é provido como uma composição que compreende adicionalmente um ou mais excipientes, em que o um ou mais excipientes são os mesmos ou diferentes dos excipientes compreendidos no produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é 11D4. Em algumas modalidades, o biossimilar é provido como uma composição que compreende adicionalmente um ou mais excipientes, em que o um ou mais excipientes são os mesmos ou diferentes dos excipientes compreendidos no produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é 11D4.
TABELA 11. As sequências de aminoácidos para agonistas de anticorpo de
0X40 relacionados com o 11D4.
| Identificador | Sequência (Símbolos de aminoácido de uma letra) |
| SEQ ID NO: 66 | EVQLVESGGG LVQPGGSLRL SCAASGFTFS SYSMNWVRQA PGKGLEWVSY |
| cadeia pesada for | ISSSSSTIDY 60 |
| 11D4 | ADSVKGRFTI SRDNAKNSLY LQMNSLRDED TAVYYCARES GWILFDYWGQ GTLVTVSSAS 120 TKGPSVFPLA PCSRSTSEST AALGCLVKDY FPEPVTVSWN SGALTSGVHT FPAVLQSSGL 180 YSLSSVVTVP SSNFGTQTYT CNVDHKPSNT KVDKTVERKC CVECPPCPAP PVAGPSVFLF 240 PPKPKDTLMI SRTPEVTCVV VDVSHEDPEV QFNWYVDGVE VHNAKTKPRE EQFNSTFRVV 300 SVLTVVHQDW LNGKEYKCKV SNKGLPAPIE KTISKTKGQP REPQVYTLPP SREEMTKNQV 360 SLTCLVKGFY PSDIAVEWES NGQPENNYKT TPPMLDSDGS FFLYSKLTVD KSRWQQGNVF 420 SCSVMHEALH NHYTQKSLSL SPGK 444 |
| SEQ ID NO: 67 | DIQMTQSPSS LSASVGDRVT ITCRASQGIS SWLAWYQQKP EKAPKSLIYA |
| cadeia leve for | ASSLQSGVPS 60 |
| 11D4 | RFSGSGSGTD FTLTISSLQP EDFATYYCQQ YNSYPPTFGG GTKVEIKRTV AAPSVFIFPP 120 SDEQLKSGTA SVVCLLNNFY PREAKVQWKV DNALQSGNSQ ESVTEQDSKD STYSLSSTLT 180 LSKADYEKHK VYACEVTHQG LSSPVTKSFN RGEC 214 |
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| SEQ ID NO: 68 região variável da cadeia pesada for 11D4 | EVQLVESGGG LVQPGGSLRL SCAASGFTFS SYSMNWVRQA PGKGLEWVSY ISSSSSTIDY 60 ADSVKGRFTI SRDNAKNSLY LQMNSLRDED TAVYYCARES GWILFDYWGQ GTLVTVSS 118 |
| SEQ ID NO: 69 região variável da cadeia leve for 11D4 | DIQMTQSPSS LSASVGDRVT ITCRASQGIS SWLAWYQQKP EKAPKSLIYA ASSLQSGVPS 60 RFSGSGSGTD FTLTISSLQP EDFATYYCQQ YNSYPPTFGG GTKVEIK 107 |
| SEQ ID NO: 70 CDR1 da cadeia pesada for 11D4 | SYSMN 5 |
| SEQ ID NO: 71 CDR2 da cadeia pesada for 11D4 | YISSSSSTID YADSVKG 17 |
| SEQ ID NO: 72 CDR3 da cadeia pesada for 11D4 | ESGWILFDY 9 |
| SEQ ID NO: 73 CDR1 da cadeia leve for 11D4 | RASQGISSWL UM 11 |
| SEQ ID NO: 74 CDR2 da cadeia leve for 11D4 | AASSLQS 7 |
| SEQ ID NO: 75 CDR3 da cadeia leve for 11D4 | QQYNSYPPT 9 |
[00838] Em algumas modalidades, o agonista de 0X40 é 18D8, que é um anticorpo totalmente humano disponível da Pfizer, Inc. A preparação e propriedades de 18D8 são descrito nas Patentes U.S. Nos. 7.960.515; 8.236.930; e 9.028.824, as divulgações das quais são aqui incorporadas por referência. As sequências de aminoácido de 18D8 são apresentadas na Tabela
12.
[00839] Em uma modalidade, um agonista de 0X40 compreende uma cadeia pesada dada pela SEQ ID NO: 76 e uma cadeia leve dada pela SEQ ID NO: 77. Em uma modalidade, um agonista de 0X40 compreende cadeias pesadas e leves tendo as sequências mostradas na SEQ ID NO: 76 e SEQ ID NO: 77, respectivamente, ou fragmentos de ligação a antígeno, fragmentos Fab, fragmentos variáveis de cadeia única (scFv), variantes, ou conjugados dos mesmos. Em uma modalidade, um agonista de 0X40 compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 99% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 76 e SEQ ID NO: 77, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de 0X40 compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 98% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID
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NO: 76 e SEQ ID NO: 77, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de 0X40 compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 97% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 76 e SEQ ID NO: 77, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de 0X40 compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 96% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 76 e SEQ ID NO: 77, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de 0X40 compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 95% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 76 e SEQ ID NO: 77, respectivamente. [00840] Em uma modalidade, o agonista de 0X40 compreende as CDRs ou regiões variáveis (VRs) de cadeia pesada e leve de 18D8. Em uma modalidade, o agonista de 0X40 da região variável de cadeia pesada (VH) compreende a sequência mostrada na SEQ ID NO: 78, e o agonista de 0X40 da região variável de cadeia leve (VL) compreende a sequência mostrada na SEQ ID NO: 79, e substituições de aminoácido conservativas dos mesmos. Em uma modalidade, um agonista de 0X40 compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 99% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 78 e SEQ ID NO: 79, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de 0X40 compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 98% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 78 e SEQ ID NO: 79, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de 0X40 compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 97% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 78 e SEQ ID NO: 79, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de 0X40 compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 96% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 78 e SEQ ID NO: 79, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de 0X40 compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 95% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 78 e SEQ ID NO: 79, respectivamente.
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201 /497 [00841] Em uma modalidade, um agonista de 0X40 compreende os domínios CDR1, CDR2 e CDR3 da cadeia pesada tendo as sequências apresentadas na SEQ ID NO: 80, SEQ ID NO: 81, e SEQ ID NO: 82, respectivamente, e substituições de aminoácido conservativas dos mesmos, e os domínios CDR1, CDR2 e CDR3 da cadeia leve tendo as sequências apresentadas na SEQ ID NO: 83, SEQ ID NO: 84, e SEQ ID NO: 85, respectivamente, e substituições de aminoácido conservativas dos mesmos.
[00842] Em uma modalidade, o agonista de 0X40 é um agonista de 0X40 bios similar anticorpo monoclonal aprovado pelas autoridades reguladoras de fármaco com referência ao 18D8. Em uma modalidade, o anticorpo monoclonal biossimilar compreende um 0X40 anticorpo compreendendo uma sequência de aminoácidos que tenha pelo menos 97 % de identidade de sequência, por exemplo, 97%, 98%, 99% ou 100% de identidade de sequência, com a sequência de aminoácidos do produto medicinal de referência ou produto biológico de referência e que compreende uma ou mais modificações pós-traducionais quando comparado com o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é 18D8. Em algumas modalidades, o uma ou mais modificações pós-traducionais são selecionada de uma ou mais de: glicosilação, oxidação, desamidação, e truncagem. Em algumas modalidades, o biossimilar é um anticorpo agonista de 0X40 autorizado ou submetido para autorização, em que o anticorpo agonista de 0X40 é provido em uma formulação que difere das formulações do produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é 18D8. O anticorpo agonista de 0X40 pode ser autorizado por uma autoridade reguladora de fármaco tal como o FDA dos Estados Unidos e/ou o EMA da União Européia. Em algumas modalidades, o biossimilar é provido como uma composição que compreende adicionalmente um ou mais excipientes, em que
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202 / 497 o um ou mais excipientes são os mesmos ou diferentes dos excipientes compreendidos no produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é 18D8. Em algumas modalidades, o biossimilar é provido como uma composição que compreende adicionalmente um ou mais excipientes, em que o um ou mais excipientes são os mesmos ou diferentes dos excipientes compreendidos no produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é 18D8.
TABELA 12. As sequências de aminoácidos para agonistas de anticorpo de
0X40 relacionados com o 18D8.
| Identificador | Sequência (Símbolos de aminoácido de uma letra) |
| SEQ ID NO: 76 cadeia pesada for 18D8 | EVQLVESGGG LVQPGRSLRL SCAASGFTFD DYAMHWVRQA PGKGLEWVSG ISWNSGSIGY 60 ADSVKGRFTI SRDNAKNSLY LQMNSLRAED TALYYCAKDQ STADYYFYYG MDVWGQGTTV 120 TVSSASTKGP SVFPLAPCSR STSESTAALG CLVKDYFPEP VTVSWNSGAL TSGVHTFPAV 180 LQSSGLYSLS SVVTVPSSNF GTQTYTCNVD HKPSNTKVDK TVERKCCVEC PPCPAPPVAG 240 PSVFLFPPKP KDTLMISRTP EVTCVVVDVS HEDPEVQFNW YVDGVEVHNA KTKPREEQFN 300 STFRVVSVLT VVHQDWLNGK EYKCKVSNKG LPAPIEKTIS KTKGQPREPQ VYTLPPSREE 360 MTKNQVSLTC LVKGFYPSDI AVEWESNGQP ENNYKTTPPM LDSDGSFFLY SKLTVDKSRW 420 QQGNVFSCSV MHEALHNHYT QKSLSLSPGK 450 |
| SEQ ID NO: 77 cadeia leve for 18D8 | EIVVTQSPAT LSLSPGERAT LSCRASQSVS SILAWYQQKP GQAPRLLIYD ASNRATGIPA 60 RFSGSGSGTD FTLTISSLEP EDFAVYYCQQ RSNWPTFGQG TKVEIKRTVA APSVFIFPPS 120 DEQLKSGTAS VVCLLNNFYP REAKVQWKVD NALQSGNSQE SVTEQDSKDS TYSLSSTLTL 180 SKADYEKHKV YACEVTHQGL SSPVTKSFNR GEC 213 |
| SEQ ID NO: 78 região variável da cadeia pesada for 18D8 | EVQLVESGGG LVQPGRSLRL SCAASGFTFD DYAMHWVRQA PGKGLEWVSG ISWNSGSIGY 60 ADSVKGRFTI SRDNAKNSLY LQMNSLRAED TALYYCAKDQ STADYYFYYG MDVWGQGTTV 120 TVSS 124 |
| SEQ ID NO: 79 região variável da cadeia leve for 18D8 | EIVVTQSPAT LSLSPGERAT LSCRASQSVS SILAWYQQKP GQAPRLLIYD ASNRATGIPA 60 RFSGSGSGTD FTLTISSLEP EDFAVYYCQQ RSNWPTFGQG TKVEIK 106 |
| SEQ ID NO: 80 CDR1 da cadeia pesada for 18D8 | DYAMH 5 |
| SEQ ID NO: 81 CDR2 da cadeia pesada for 18D8 | GISWNSGSIG YADSVKG 17 |
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| SEQ ID NO: 82 CDR3 da cadeia pesada for 18D8 | DQSTADYYFY YGMDV 15 |
| SEQ ID NO: 83 CDR1 da cadeia leve for 18D8 | RASQSVSSIL UM 11 |
| SEQ ID NO: 84 CDR2 da cadeia leve for 18D8 | DASNRAT 7 |
| SEQ ID NO: 85 CDR3 da cadeia leve for 18D8 | QQRSNWPT 8 |
[00843] Em algumas modalidades, o agonista de 0X40 é Hui 19-122, que é um anticorpo humanizado disponível da GlaxoSmithKline plc. A preparação e propriedades de Hui 19-122 são descrito nas Patentes U.S. Nos. 9.006.399 e 9.163.085, e na Publicação de Patente Internacional No. WO 2012/027328, as divulgações das quais são aqui incorporadas por referência. As sequências de aminoácido de Hui 19-122 são apresentadas na Tabela 13.
[00844] Em uma modalidade, o agonista de 0X40 compreende as CDRs ou regiões variáveis (VRs) de cadeia pesada e leve de Hui 19-122. Em uma modalidade, o agonista de 0X40 da região variável de cadeia pesada (VH) compreende a sequência mostrada na SEQ ID NO: 86, e o agonista de 0X40 da região variável de cadeia leve (VL) compreende a sequência mostrada na SEQ ID NO: 87, e substituições de aminoácido conservativas dos mesmos. Em uma modalidade, um agonista de 0X40 compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 99% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 86 e SEQ ID NO: 87, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de 0X40 compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 98% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 86 e SEQ ID NO: 87, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de 0X40 compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 97% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 86 e SEQ ID NO: 87, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de 0X40 compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 96% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 86 e SEQ ID NO: 87, respectivamente. Em uma
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204 / 497 modalidade, um agonista de 0X40 compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 95% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 86 e SEQ ID NO: 87, respectivamente.
[00845] Em uma modalidade, um agonista de 0X40 compreende os domínios CDR1, CDR2 e CDR3 da cadeia pesada tendo as sequências apresentadas na SEQ ID NO: 88, SEQ ID NO: 89, e SEQ ID NO: 90, respectivamente, e substituições de aminoácido conservativas dos mesmos, e os domínios CDR1, CDR2 e CDR3 da cadeia leve tendo as sequências apresentadas na SEQ ID NO: 91, SEQ ID NO: 92, e SEQ ID NO: 93, respectivamente, e substituições de aminoácido conservativas dos mesmos.
[00846] Em uma modalidade, o agonista de 0X40 é um agonista de 0X40 bios similar anticorpo monoclonal aprovado pelas autoridades reguladoras de fármaco com referência ao Hui 19-122. Em uma modalidade, o anticorpo monoclonal biossimilar compreende um 0X40 anticorpo compreendendo uma sequência de aminoácidos que tenha pelo menos 97 % de identidade de sequência, por exemplo, 97%, 98%, 99% ou 100% de identidade de sequência, com a sequência de aminoácidos do produto medicinal de referência ou produto biológico de referência e que compreende uma ou mais modificações pós-traducionais quando comparado com o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é Hui 19122. Em algumas modalidades, o uma ou mais modificações pós-traducionais são selecionada de uma ou mais de: glicosilação, oxidação, desamidação, e truncagem. Em algumas modalidades, o biossimilar é um anticorpo agonista de 0X40 autorizado ou submetido para autorização, em que o anticorpo agonista de 0X40 é provido em uma formulação que difere das formulações do produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é Hui 19-122. O anticorpo agonista de 0X40 pode ser autorizado por uma
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205/497 autoridade reguladora de fármaco tal como o FDA dos Estados Unidos e/ou o EMA da União Européia. Em algumas modalidades, o biossimilar é provido como uma composição que compreende adicionalmente um ou mais excipientes, em que o um ou mais excipientes são os mesmos ou diferentes dos excipientes compreendidos no produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é Hui 19-122. Em algumas modalidades, o biossimilar é provido como uma composição que compreende adicionalmente um ou mais excipientes, em que o um ou mais excipientes são os mesmos ou diferentes dos excipientes compreendidos no produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é Hui 19-122.
TABELA 13. As sequências de aminoácidos para agonistas de anticorpo de
0X40 relacionados com o Hui 19-122.
| Identificador | Sequência (Símbolos de aminoácido de uma letra) |
| SEQ ID NO: 86 região variável da cadeia pesada for Hui 19-122 | EVQLVESGGG LVQPGGSLRL SCAASEYEFP SHDMSWVRQA PGKGLELVAA INSDGGSTYY 60 PDTMERRFTI SRDNAKNSLY LQMNSLRAED TAVYYCARHY DDYYAWFAYW GQGTMVTVSS 120 |
| SEQ ID NO: 87 região variável da cadeia leve for Hui 19-122 | EIVLTQSPAT LSLSPGERAT LSCRASKSVS TSGYSYMHWY QQKPGQAPRL LIILASNLES 60 GVPARFSGSG SGTDFTLTIS SLEPEDFAVY YCQHSRELPL TFGGGTKVEI K 111 |
| SEQ ID NO: 88 CDR1 da cadeia pesada for Hui 19122 | SHDMS 5 |
| SEQ ID NO: 89 CDR2 da cadeia pesada for Hui 19122 | AINSDGGSTY YPDTMER 17 |
| SEQ ID NO: 90 CDR3 da cadeia pesada for Hui 19122 | HYDDYYAWFA Y 11 |
| SEQ ID NO: 91 CDR1 da cadeia leve for Hui 19- 122 | RASKSVSTSG YSYMH 15 |
| SEQ ID NO: 92 CDR2 da cadeia leve for Hui 19- 122 | LASNLES 7 |
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| SEQ ID NO: 93 CDR3 da cadeia leve for Hui 19- 122 | QHSRELPLT 9 |
[00847] Em algumas modalidades, o agonista de 0X40 é Hul06-222, que é um anticorpo humanizado disponível da GlaxoSmithKline plc. A preparação e propriedades de Hul06-222 são descrito nas Patentes U.S. Nos. 9.006.399 e 9.163.085, e na Publicação de Patente Internacional No. WO 2012/027328, as divulgações das quais são aqui incorporadas por referência. As sequências de aminoácido de Hu 106-222 são apresentadas na Tabela 14.
[00848] Em uma modalidade, o agonista de 0X40 compreende as CDRs ou regiões variáveis (VRs) de cadeia pesada e leve de Hul06-222. Em uma modalidade, o agonista de 0X40 da região variável de cadeia pesada (VH) compreende a sequência mostrada na SEQ ID NO: 94, e o agonista de 0X40 da região variável de cadeia leve (VL) compreende a sequência mostrada na SEQ ID NO: 95, e substituições de aminoácido conservativas dos mesmos. Em uma modalidade, um agonista de 0X40 compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 99% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 94 e SEQ ID NO: 95, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de 0X40 compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 98% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 94 e SEQ ID NO: 95, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de 0X40 compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 97% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 94 e SEQ ID NO: 95, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de 0X40 compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 96% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 94 e SEQ ID NO: 95, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de 0X40 compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 95% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 94 e SEQ ID NO: 95, respectivamente.
[00849] Em uma modalidade, um agonista de 0X40 compreende os
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207 / 497 domínios CDR1, CDR2 e CDR3 da cadeia pesada tendo as sequências apresentadas na SEQ ID NO: 96, SEQ ID NO: 97, e SEQ ID NO: 98, respectivamente, e substituições de aminoácido conservativas dos mesmos, e os domínios CDR1, CDR2 e CDR3 da cadeia leve tendo as sequências apresentadas na SEQ ID NO: 99, SEQ ID NO: 100, e SEQ ID NO: 101, respectivamente, e substituições de aminoácido conservativas dos mesmos. [00850] Em uma modalidade, o agonista de 0X40 é um agonista de 0X40 bios similar anticorpo monoclonal aprovado pelas autoridades reguladoras de fármaco com referência ao Hu 106-222. Em uma modalidade, o anticorpo monoclonal biossimilar compreende um 0X40 anticorpo compreendendo uma sequência de aminoácidos que tenha pelo menos 97 % de identidade de sequência, por exemplo, 97%, 98%, 99% ou 100% de identidade de sequência, com a sequência de aminoácidos do produto medicinal de referência ou produto biológico de referência e que compreende uma ou mais modificações pós-traducionais quando comparado com o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é Hui 06222. Em algumas modalidades, o uma ou mais modificações pós-traducionais são selecionada de uma ou mais de: glicosilação, oxidação, desamidação, e truncagem. Em algumas modalidades, o biossimilar é um anticorpo agonista de 0X40 autorizado ou submetido para autorização, em que o anticorpo agonista de 0X40 é provido em uma formulação que difere das formulações do produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é Hu 106-222. O anticorpo agonista de 0X40 pode ser autorizado por uma autoridade reguladora de fármaco tal como o FDA dos Estados Unidos e/ou o EMA da União Européia. Em algumas modalidades, o biossimilar é provido como uma composição que compreende adicionalmente um ou mais excipientes, em que o um ou mais excipientes são os mesmos ou diferentes
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208 / 497 dos excipientes compreendidos no produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é Hui06-222. Em algumas modalidades, o biossimilar é provido como uma composição que compreende adicionalmente um ou mais excipientes, em que o um ou mais excipientes são os mesmos ou diferentes dos excipientes compreendidos no produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é Hui06-222.
TABELA 14. As sequências de aminoácidos para agonistas de anticorpo de
0X40 relacionados com o Hu 106-222.
| Identificador | Sequência (Símbolos de aminoácido de uma letra) |
| SEQ ID NO: 94 região variável da cadeia pesada for Hul06-222 | QVQLVQSGSE LKKPGASVKV SCKASGYTFT DYSMHWVRQA PGQGLKWMGW INTETGEPTY 60 ADDFKGRFVF SLDTSVSTAY LQISSLKAED TAVYYCANPY YDYVSYYAMD YWGQGTTVTV 120 SS 122 |
| SEQ ID NO: 95 região variável da cadeia leve for Hul06-222 | DIQMTQSPSS LSASVGDRVT ITCKASQDVS TAVAWYQQKP GKAPKLLIYS ASILYTGVPS 60 RFSGSGSGTD FTFTISSLQP EDIATYYCQQ HYSTPRTFGQ GTKLEIK 107 |
| SEQ ID NO: 96 CDR1 da cadeia pesada for Hul06222 | DYSMH 5 |
| SEQ ID NO: 97 CDR2 da cadeia pesada for Hul06222 | WINTETGEPT YADDFKG 17 |
| SEQ ID NO: 98 CDR3 da cadeia pesada for Hul06222 | PYYDYVSYYA MDY 13 |
| SEQ ID NO: 99 CDR1 da cadeia leve for Hui 06- 222 | KASQDVSTAV UM 11 |
| SEQ ID NO: 100 CDR2 da cadeia leve for Hui 06222 | SASILYT 7 |
| SEQ ID NO: 101 CDR3 da cadeia leve for Hui 06222 | QQHYSTPRT 9 |
[00851] Em algumas modalidades, o anticorpo agonista de 0X40 é
MEDI6469 (também aludido como 9B12). MEDI6469 é um anticorpo monoclonal de murino. Weinberg, et al., J. Immunother. 2006, 29, 575-585.
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Em algumas modalidades o agonista de 0X40 é um anticorpo produzido pelo hibridoma de 9B12, depositado com a Biovest Inc. (Malvem, MA, USA), como descrito em Weinberg, et al., J. Immunother. 2006, 29, 575-585, a divulgação da qual é incorporada a este por referência em sua totalidade. Em algumas modalidades, o anticorpo compreende as sequências de CDR de MEDI6469. Em algumas modalidades, o anticorpo compreende uma sequência de região variável de cadeia pesada e/ou uma sequência de região variável de cadeia leve de MEDI6469.
[00852] Em uma modalidade, o agonista de 0X40 é LI06 BD (Pharmingen Product #340420). Em algumas modalidades, o agonista de 0X40 compreende as CDRs do anticorpo LI06 (BD Pharmingen Product #340420). Em algumas modalidades, o agonista de 0X40 compreende uma sequência de região variável de cadeia pesada e/ou uma sequência de região variável de cadeia leve de anticorpo LI06 (BD Pharmingen Product #340420). Em uma modalidade, o agonista de 0X40 é ACT35 (Santa Cruz Biotechnology, Catálogo #20073). Em algumas modalidades, o agonista de 0X40 compreende as CDRs do anticorpo ACT35 (Santa Cruz Biotechnology, Catálogo #20073). Em algumas modalidades, o agonista de 0X40 compreende uma sequência de região variável de cadeia pesada e/ou uma sequência de região variável de cadeia leve de anticorpo ACT35 (Santa Cruz Biotechnology, Catálogo #20073). Em uma modalidade, o agonista de 0X40 é o anticorpo monoclonal de murino anti-mCD134/mOX40 (clone 0X86), comercialmente disponível da InVivoMab, BioXcell Inc, West Lebanon, NH.
[00853] Em uma modalidade, o agonista de 0X40 é selecionado dos agonistas de 0X40 descritos nas Publicações de Pedido de Patente Internacional Nos. WO 95/12673, WO 95/21925, WO 2006/121810, WO 2012/027328, WO 2013/028231, WO 2013/038191, e WO 2014/148895; Pedido de Patente Europeu EP 0672141; Publicações dos Pedidos de Patente U.S. Nos. US 2010/136030, US 2014/377284, US 2015/190506, e US
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2015/132288 (incluindo clones 20E5 e 12H3); e Patentes U.S. Nos. 7.504.101, 7.550.140, 7.622.444, 7.696.175, 7.960.515, 7.961.515, 8.133.983, 9.006.399, e 9.163.085, a divulgação de cada um dos quais é aqui incorporada por referência em sua totalidade.
[00854] Em uma modalidade, o agonista de 0X40 é um agonista de OX40ic proteína de fusão como representada na Estrutura I-A (proteína de fusão de fragmento de anticorpo Fc de terminal C) ou Estrutura I-B (Proteína de fusão de fragmento de anticorpo Fc de terminal N), ou um fragmento, derivado, conjugado, variante, ou biossimilar dos mesmos. The propriedades de estruturas I-A e I-B são descrito acima e nas Patentes U.S. Nos. 9.359.420, 9.340.599, 8.921.519, e 8.450.460, as divulgações das quais são aqui incorporadas por referência. As sequências de aminoácidos para os domínios de polipeptídeo de estrutura I-A são dadas na Tabela 6. O domínio Fc preferivelmente compreende um domínio constante completo (aminoácidos 17 a 230 da SEQ ID NO: 31) o domínio de dobradiça completo (aminoácidos 1 a 16 da SEQ ID NO: 31) ou uma porção do domínio de dobradiça (por exemplo, aminoácidos 4 a 16 da SEQ ID NO: 31). Os ligantees preferidos para conectar um anticorpo Fc de terminal C podem ser selecionados das modalidades dadas na SEQ ID NO: 32 até a SEQ ID NO: 41, incluindo ligantees adequados para a fusão de polipeptídeos adicionais. Igualmente, as sequências de aminoácidos para os domínios de polipeptídeo de estrutura I-B são dadas na Tabela 7. Se um fragmento de anticorpo Fc é fundido ao terminal N de uma proteína de fusão de TNRFSF como na estrutura I-B, a sequência do módulo Fc é preferivelmente aquela mostrada na SEQ ID NO: 42, e as sequências liganteas são preferivelmente selecionadas daquelas modalidades apresentadas na SED ID NO: 43 com a SEQ ID NO: 45.
[00855] Em uma modalidade, uma proteína de fusão agonista de 0X40 de acordo com as estruturas I-A ou I-B compreende um ou mais domínios de ligação de 0X40 selecionados do grupo que consiste em uma de cadeia
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211/497 pesada variável e cadeia leve variável de tavolixizumab, uma de cadeia pesada variável e cadeia leve variável de 11D4, uma de cadeia pesada variável e cadeia leve variável de 18D8, uma de cadeia pesada variável e cadeia leve variável de Hui 19-122, uma de cadeia pesada variável e cadeia leve variável de Hui06-222, uma de cadeia pesada variável e cadeia leve variável selecionada das cadeias pesadas variáveis e das cadeias leves variáveis descrito na Tabela 15, qualquer combinação de uma de cadeia pesada variável e cadeia leve variável do precedente, e fragmentos, derivados, conjugados, variantes, e biossimilares dos mesmos.
[00856] Em uma modalidade, uma proteína de fusão agonista de 0X40 de acordo com as estruturas I-A ou I-B compreende um ou mais domínios de ligação de 0X40 compreendendo um OX40L sequência. Em uma modalidade, uma proteína de fusão agonista de 0X40 de acordo com as estruturas I-A ou I-B compreende um ou mais domínios de ligação de 0X40 compreendendo uma sequência de acordo com a SEQ ID NO: 102. Em uma modalidade, uma proteína de fusão agonista de 0X40 de acordo com as estruturas I-A ou I-B compreende um ou mais domínios de ligação de 0X40 compreendendo um solúvel OX40L sequência. Em uma modalidade, uma proteína de fusão agonista de 0X40 de acordo com as estruturas I-A ou I-B compreende um ou mais domínios de ligação de 0X40 compreendendo uma sequência de acordo com a SEQ ID NO: 103. Em uma modalidade, uma proteína de fusão agonista de 0X40 de acordo com as estruturas I-A ou I-B compreende um ou mais domínios de ligação de 0X40 compreendendo uma sequência de acordo com a SEQ ID NO: 104.
[00857] Em uma modalidade, uma proteína de fusão agonista de 0X40 de acordo com as estruturas I-A ou I-B compreende um ou mais domínios de ligação de 0X40 que é um domínio scFv compreendendo as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 95% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 58 e SEQ ID NO: 59, respectivamente, em que os domínios VH e VL
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212/497 são conectados por um ligante. Em uma modalidade, uma proteína de fusão agonista de 0X40 de acordo com as estruturas I-A ou I-B compreende um ou mais domínios de ligação de 0X40 que é um domínio scFv compreendendo as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 95% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 68 e SEQ ID NO: 69, respectivamente, em que os domínios VH e VL são conectados por um ligante. Em uma modalidade, uma proteína de fusão agonista de 0X40 de acordo com as estruturas I-A ou I-B compreende um ou mais domínios de ligação de 0X40 que é um domínio scFv compreendendo as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 95% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 78 e SEQ ID NO: 79, respectivamente, em que os domínios VH e VL são conectados por um ligante. Em uma modalidade, uma proteína de fusão agonista de 0X40 de acordo com as estruturas I-A ou I-B compreende um ou mais domínios de ligação de 0X40 que é um domínio scFv compreendendo as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 95% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 86 e SEQ ID NO: 87, respectivamente, em que os domínios VH e VL são conectados por um ligante. Em uma modalidade, uma proteína de fusão agonista de 0X40 de acordo com as estruturas I-A ou I-B compreende um ou mais domínios de ligação de 0X40 que é um domínio scFv compreendendo as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 95% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 94 e SEQ ID NO: 95, respectivamente, em que os domínios VH e VL são conectados por um ligante. Em uma modalidade, uma proteína de fusão agonista de 0X40 de acordo com as estruturas I-A ou I-B compreende um ou mais domínios de ligação de 0X40 que é um domínio scFv compreendendo as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 95% idênticas com as sequências VH e VL dadas na Tabela 15, em que os domínios VH e VL são conectados por um ligante.
TABELA 15. Domínios de polipeptídeo adicionais úteis como domínios de
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213/497 ligação de 0X40 em proteínas de fusão (por exemplo, estruturas I-A e I-B) ou como agonistas de anticorpo de scFv de 0X40.
| Identificador | Sequência (Símbolos de aminoácido de uma letra) |
| SEQ ID NO: 102 OX40L | MERVQPLEEN VGNAARPRFE RNKLLLVASV IQGLGLLLCF TYICLHFSAL QVSHRYPRIQ 60 SIKVQFTEYK KEKGFILTSQ KEDEIMKVQN NSVIINCDGFILISLKGYFS QEVNISLHYQ 120 KDEEPLFQLK KVRSVNSLMV ASLTYKDKVY LNVTTDNTSL DDFHVNGGEL ILIHQNPGEF 180 CVL 183 |
| SEQ ID NO: 103 domínio solúvel de OX40L | SHRYPRIQSI KVQFTEYKKE KGFILTSQKE DEIMKVQNNS VIINCDGFIL ISLKGYFSQE 60 VNISLHYQKD EEPLFQLKKV RSVNSLMVAS LTYKDKVILN VTTDNTSLDD FHVNGGELIL 120 IHQNPGEFCV L 131 |
| SEQ ID NO: 104 domínio solúvel de OX40L (alternativo) | YPRIQSIKVQ FTEYKKEKGF ILTSQKEDEI MKVQNNSVII NCDGFILISL KGYFSQEVNI 60 SLHYQKDEEP LFQLKKVRSV NSLMVASLTY KDKVILNVTT DNTSLDDFHV NGGELILIHQ 120 NPGEFCVL 128 |
| SEQ ID NO: 105 cadeia pesada variável para 008 | EVQLVESGGG LVQPGGSLRL SCAASGFTFS NYTMNWVRQA PGKGLEWVSA ISGSGGSTYY 60 ADSVKGRFTI SRDNSKNTLY LQMNSLRAED TAVYYCAKDR YSQVHYALDY WGQGTLVTVS 120 |
| SEQ ID NO: 106 cadeia leve variável para 008 | DIVMTQSPDS LPVTPGEPAS ISCRSSQSLL HSNGYNILDW ILQKAGQSPQ LLIILGSNRA 60 SGVPDRFSGS GSGTDFTLKI SRVEAEDVGV YYCQQYYNHP TTFGQGTK 108 |
| SEQ ID NO: 107 cadeia pesada variável para 011 | EVQLVESGGG VVQPGRSLRL SCAASGFTFS DYTMNWVRQA PGKGLEWVSS ISGGSTYYAD 60 SRKGRFTISR DNSKNTLILQ MNNLRAEDTA VYYCARDRYF RQQNAFDYWG QGTLVTVSSA 120 |
| SEQ ID NO: 108 cadeia leve variável para 011 | DIVMTQSPDS LPVTPGEPAS ISCRSSQSLL HSNGYNILDW ILQKAGQSPQ LLIILGSNRA 60 SGVPDRFSGS GSGTDFTLKI SRVEAEDVGV YYCQQYYNHP TTFGQGTK 108 |
| SEQ ID NO: 109 cadeia pesada variável para 021 | EVQLVESGGG LVQPRGSLRL SCAASGFTFS SYAMNWVRQA PGKGLEWVAV ISYDGSNKYY 60 ADSVKGRFTI SRDNSKNTLY LQMNSLRAED TAVYYCAKDR YITLPNALDY WGQGTLVTVS 120 |
| SEQ ID NO: 110 cadeia leve variável para 021 | DIQMTQSPVS LPVTPGEPAS ISCRSSQSLL HSNGYNILDW ILQKPGQSPQ LLIILGSNRA 60 SGVPDRFSGS GSGTDFTLKI SRVEAEDVGV YYCQQYKSNP PTFGQGTK 108 |
| SEQ ID NO: 111 cadeia pesada variável para 023 | EVQLVESGGG LVHPGGSLRL SCAGSGFTFS SYAMHWVRQA PGKGLEWVSA IGTGGGTYYA 60 DSVMGRFTIS RDNSKNTLIL QMNSLRAEDT AVYYCARYDN VMGLYWFDYW GQGTLVTVSS 120 |
| SEQ ID NO: 112 cadeia leve variável para 023 | EIVLTQSPAT LSLSPGERAT LSCRASQSVS SILAWYQQKP GQAPRLLIYD ASNRATGIPA 60 RFSGSGSGTD FTLTISSLEP EDFAVYYCQQ RSNWPPAFGG GTKVEIKR 108 |
| SEQ ID NO: 113 região variável da cadeia pesada | EVQLQQSGPE LVKPGASVKM SCKASGYTFT SYVMHWVKQK PGQGLEWIGY INPYNDGTKY 60 NEKFKGKATL TSDKSSSTAY MELSSLTSED SAVYYCANYY GSSLSMDYWG QGTSVTVSS 119 |
| SEQ ID NO: 114 região variável da cadeia leve | DIQMTQTTSS LSASLGDRVT ISCRASQDIS NILNWYQQKP DGTVKLLIYY TSRLHSGVPS 60 RFSGSGSGTD YSLTISNLEQ EDIATYFCQQ GNTLPWTFGG GTKLEIKR 108 |
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| SEQ ID NO: 115 região variável da cadeia pesada | EVQLQQSGPE LVKPGASVKI SCKTSGYTFK DYTMHWVKQS HGKSLEWIGG IYPNNGGSTY 60 NQNFKDKATL TVDKSSSTAY MEFRSLTSED SAVYYCARMG YHGPHLDFDV WGAGTTVTVS 120 P 121 |
| SEQ ID NO: 116 região variável da cadeia leve | DIVMTQSHKF MSTSLGDRVS ITCKASQDVG AAVAWYQQKP GQSPKLLIYW ASTRHTGVPD 60 RFTGGGSGTD FTLTISNVQS EDLTDYFCQQ YINYPLTFGG GTKLEIKR 108 |
| SEQ ID NO: 117 região variável da cadeia pesada de anticorpo humanizado | QIQLVQSGPE LKKPGETVKI SCKASGYTFT DYSMHWVKQA PGKGLKWMGW INTETGEPTY 60 ADDFKGRFAF SLETSASTAY LQINNLKNED TATYFCANPY YDYVSYYAMD YWGHGTSVTV 120 SS 122 |
| SEQ ID NO: 118 região variável da cadeia pesada de anticorpo humanizado | QVQLVQSGSE LKKPGASVKV SCKASGYTFT DYSMHWVRQA PGQGLKWMGW INTETGEPTY 60 ADDFKGRFVF SLDTSVSTAY LQISSLKAED TAVYYCANPY YDYVSYYAMD YWGQGTTVTV 120 SS 122 |
| SEQ ID NO: 119 região variável da cadeia leve de anticorpo humanizado | DIVMTQSHKF MSTSVRDRVS ITCKASQDVS TAVAWYQQKP GQSPKLLIYS ASILYTGVPD 60 RFTGSGSGTD FTFTISSVQA EDLAVYYCQQ HYSTPRTFGG GTKLEIK 107 |
| SEQ ID NO: 120 região variável da cadeia leve de anticorpo humanizado | DIVMTQSHKF MSTSVRDRVS ITCKASQDVS TAVAWYQQKP GQSPKLLIYS ASILYTGVPD 60 RFTGSGSGTD FTFTISSVQA EDLAVYYCQQ HYSTPRTFGG GTKLEIK 107 |
| SEQ ID NO: 121 região variável da cadeia pesada de anticorpo humanizado | EVQLVESGGG LVQPGESLKL SCESNEYEFP SHDMSWVRKT PEKRLELVAA INSDGGSTYY 60 PDTMERRFII SRDNTKKTLY LQMSSLRSED TALYYCARHY DDYYAWFAYW GQGTLVTVSA 120 |
| SEQ ID NO: 122 região variável da cadeia pesada de anticorpo humanizado | EVQLVESGGG LVQPGGSLRL SCAASEYEFP SHDMSWVRQA PGKGLELVAA INSDGGSTYY 60 PDTMERRFTI SRDNAKNSLY LQMNSLRAED TAVYYCARHY DDYYAWFAYW GQGTMVTVSS 120 |
| SEQ ID NO: 123 região variável da cadeia leve de anticorpo humanizado | DIVLTQSPAS LAVSLGQRAT ISCRASKSVS TSGYSYMHWY QQKPGQPPKL LIILASNLES 60 GVPARFSGSG SGTDFTLNIH PVEEEDAATY YCQHSRELPL TFGAGTKLEL K 111 |
| SEQ ID NO: 124 região variável da cadeia leve de anticorpo humanizado | EIVLTQSPAT LSLSPGERAT LSCRASKSVS TSGYSYMHWY QQKPGQAPRL LIILASNLES 60 GVPARFSGSG SGTDFTLTIS SLEPEDFAVY YCQHSRELPL TFGGGTKVEI K 111 |
| SEQ ID NO: 125 região variável da cadeia pesada | MILGLNYVFI VFLLNGVQSE VKLEESGGGL VQPGGSMKLS CAASGFTFSD AWMDWVRQSP 60 EKGLEWVAEI RSKANNHATY YAESVNGRFT ISRDDSKSSV ILQMNSLRAE DTGIYYCTWG 120 EVFYFDYWGQ GTTLTVSS 138 |
| SEQ ID NO: 126 região variável da cadeia leve | MRPSIQFLGL LLFWLHGAQC DIQMTQSPSS LSASLGGKVT ITCKSSQDIN KYIAWYQHKP 60 GKGPRLLIHY TSTLQPGIPS RFSGSGSGRD YSFSISNLEP EDIATYYCLQ YDNLLTFGAG 120 TKLELK 126 |
[00858] Em uma modalidade, o agonista de 0X40 é um polipeptídeo
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215/497 de fusão de cadeia única agonístico de 0X40 compreendendo (i) um primeiro domínio de ligação de 0X40 solúvel, (ii) um primeiro ligante peptídico, (iii) um segundo domínio de ligação de 0X40 solúvel, (iv) um segundo ligante peptídico, e (v) um terceiro domínio de ligação de 0X40 solúvel, compreendendo adicionalmente um domínio adicional na extremidade de terminal N e/ou terminal C, e em que o domínio adicional é um Fab ou domínio do fragmento Fc. Em uma modalidade, o agonista de 0X40 é um polipeptídeo de fusão de cadeia única agonístico de 0X40 compreendendo (i) um primeiro domínio de ligação de 0X40 solúvel, (ii) um primeiro ligante peptídico, (iii) um segundo domínio de ligação de 0X40 solúvel, (iv) um segundo ligante peptídico, e (v) um terceiro domínio de ligação de 0X40 solúvel, compreendendo adicionalmente um domínio adicional na extremidade de terminal N e/ou terminal C, em que o domínio adicional é um Fab ou domínio do fragmento Fc em que cada um dos domínios de ligação de 0X40 solúveis carece de uma região de haste (que contribui para a trimerização e provê uma certa distância para a membrana celular, mas não é parte do domínio de ligação de 0X40) e o primeiro e o segundo ligantees peptídicos independentemente têm um comprimento de 3 a 8 aminoácidos.
[00859] Em uma modalidade, o agonista de 0X40 é um polipeptídeo de fusão de cadeia única agonístico de 0X40 compreendendo (i) um primeiro domínio de citocina da superfamília do fator de necrose de tumor (TNF) solúvel, (ii) um primeiro ligante peptídico, (iii) um segundo domínio de citocina da superfamília do TNF solúvel, (iv) um segundo ligante peptídico, e (v) um terceiro domínio de citocina da superfamília do TNF solúvel, em que cada um dos domínios de citocina da superfamília do TNF solúvel carece de uma região de haste e o primeiro e o segundo ligantees peptídicos independentemente têm um comprimento de 3 a 8 aminoácidos, e em que o domínio de TNF de citocina da superfamília é um domínio de ligação de 0X40.
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216/497 [00860] Em algumas modalidades, o agonista de 0X40 é MEDI6383. MEDI6383 é uma proteína de fusão agonística de 0X40 e pode ser preparada como descrito na Patente U.S. No. 6.312.700, a divulgação da qual é aqui incorporada por referência.
[00861] Em uma modalidade, o agonista de 0X40 é um anticorpo scFv agonístico de 0X40 compreendendo qualquer um dos domínios VH precedentes ligados a qualquer um dos domínios VL precedentes.
[00862] Em uma modalidade, o agonista de 0X40 é anticorpo agonista de 0X40 monoclonal MOM-18455 da Creative Biolabs, comercialmente disponível da Creative Biolabs, Inc., Shirley, NY, USA.
[00863] Em uma modalidade, o agonista de 0X40 é clone Ber-ACT35 do anticorpo agonístico de 0X40 comercialmente disponível da BioLegend, Inc., San Diego, CA, USA.
[00864] Agonistas CD27 [00865] Em uma modalidade, o agonista de TNFRSF é um agonista de CD27. O agonista de CD27 pode ser qualquer molécula de ligação de CD27 conhecida na técnica. A molécula de ligação de CD27 pode ser um anticorpo monoclonal ou proteína de fusão capazes de ligação ao CD27 humana ou mamífera. Os agonistas de CD27 ou moléculas de ligação de CD27 podem compreender uma cadeia pesada de imunoglobulina de qualquer isótipo (por exemplo, IgG, IgE, IgM, IgD, IgA, e IgY), classe (por exemplo, IgGl, IgG2, IgG3, IgG4, IgAl e IgA2) ou subclasse de molécula de imunoglobulina. O agonista de CD27 ou molécula de ligação de CD27 pode ter tanto uma cadeia pesada quanto uma leve. Como aqui usado, o termo molécula de ligação também inclui anticorpos (incluindo anticorpos de tamanho natural), anticorpos monoclonais (incluindo anticorpos monoclonais de tamanho natural), anticorpos policlonais, anticorpos multiespecíficos (por exemplo, anticorpos biespecíficos), anticorpos humanos, humanizados ou quiméricos, e fragmentos de anticorpo, por exemplo, fragmentos Fab, fragmentos F(ab’),
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217/497 fragmentos produzidos por uma biblioteca de expressão de Fab, fragmentos de ligação de epítopo de qualquer um dos acima, e formas engenheiradas de anticorpos, por exemplo, moléculas scFv, que se ligam ao CD27. Em uma modalidade, o agonista de CD27 é uma proteína de ligação a antígeno que é um anticorpo totalmente humano. Em uma modalidade, o agonista de CD27 é uma proteína de ligação a antígeno que é um anticorpo humanizado. Em algumas modalidades, agonistas de CD27 para o uso nos métodos e composições presentemente divulgados incluem anticorpos anti-CD27, anticorpos anti-CD27 humanos, anticorpos anti-CD27 de camundongo, anticorpos anti-CD27 de mamífero, anticorpos anti-CD27monoclonais, anticorpos anti-CD27 policlonais, anticorpos anti-CD27 quiméricos, adnectinas anti-CD27, anticorpos de domínio anti-CD27, fragmentos de cadeia única anti-CD27, fragmentos anti-CD27 de cadeia pesada, fragmentos anti-CD27 de cadeia leve, proteínas de fusão anti-CD27, e fragmentos, derivados, conjugados, variantes, ou biossimilares dos mesmos. Em uma modalidade preferida, o agonista de CD27 é um anticorpo agonístico, antiCD27 humanizado ou totalmente humano monoclonal (isto é, um anticorpo derivado de uma única linhagem de célula). Em uma modalidade preferida, o agonista de CD27 é varlilumab, ou um fragmento, derivado, conjugado, variante, ou biossimilar do mesmo.
[00866] Em uma modalidade preferida, o agonista de CD27 ou molécula de ligação de CD27 também podem ser uma proteína de fusão. Em uma modalidade preferida, um agonista de CD27 multimérico, tal como um agonista de CD27 trimérico ou hexamérico (com três ou seis domínios de ligação de ligante), pode induzir agrupamento de receptor (CD27L) superior e formação do complexo de sinalização celular interna comparado a um anticorpo monoclonal agonístico, que tipicamente possui dois domínios de ligação de ligante. Trimérico (trivalente) ou hexamérico (ou hexavalente) ou proteínas de fusão maiores compreendendo três domínios de ligação de
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TNFRSF e IgGl-Fc e opcionalmente ainda ligando duas ou mais destas proteínas de fusão são descritos, por exemplo, em Gieffers, et al., Mol. Cancer Therapeutics 2013,12, 2735-47.
[00867] Anticorpos e proteínas de fusão agonísticos de CD27 são conhecidos induzir respostas imunes fortes. Em uma modalidade preferida, o agonista de CD27 é um anticorpo monoclonal ou proteína de fusão que se ligam especificamente ao antígeno de CD27 em uma maneira suficiente para reduzir a toxicidade. Em algumas modalidades, o agonista de CD27 é um anticorpo monoclonal ou proteína de fusão agonístico de CD27 que anula a toxicidade celular dependente de anticorpo (ADCC), por exemplo a citotoxicidade de célula NK. Em algumas modalidades, o agonista de CD27 é um anticorpo monoclonal ou proteína de fusão agonístico de CD27 que anula a fagocitose celular dependente de anticorpo (ADCP). Em algumas modalidades, o agonista de CD27 é um anticorpo monoclonal ou proteína de fusão agonístico de CD27 que anula a citotoxicidade dependente de complemento (CDC). Em algumas modalidades, o agonista de CD27 é um anticorpo monoclonal ou proteína de fusão agonístico de CD27 que anula a funcionalidade da região Fc.
[00868] Em algumas modalidades, os agonistas de CD27 são distinguidos pela ligação ao CD27 humana (SEQ ID NO: 127) com alta afinidade e atividade agonística. Em uma modalidade, o agonista de CD27 é uma molécula de ligação que se liga ao CD27 humana (SEQ ID NO: 127). Em algumas modalidades, os agonistas de CD27 são distinguidos pela ligação ao CD27 de macaco (SEQ ID NO: 128) com alta afinidade e atividade agonística. Em uma modalidade, o agonista de CD27 é uma molécula de ligação que se liga ao CD27 de macaco (SEQ ID NO: 128). As sequências de aminoácidos de antígenos de CD27 aos quais um agonista de CD27 ou molécula de ligação se ligam estão resumidos na Tabela 16.
TABELA 16. As sequências de aminoácidos de antígenos de CD27.
| Identificador | Sequência (Símbolos de aminoácido de uma letra) |
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| SEQ ID NO: 127 CD27 humana, Superfamília do receptor do fator de necrose de tumor, membro 7 (Homo sapiens) | MARPHPWWLC VLGTLVGLSA TPAPKSCPER HYWAQGKLCC QMCEPGTFLV KDCDQHRKAA 60 QCDPCIPGVS FSPDHHTRPH CESCRHCNSG LLVRNCTITA NAECACRNGW QCRDKECTEC 120 DPLPNPSLTA RSSQALSPHP QPTHLPYVSE MLEARTAGHM QTLADFRQLP ARTLSTHWPP 180 QRSLCSSDFI RILVIFSGMF LVFTLAGALF LHQRRKYRSN KGESPVEPAE PCRYSCPREE 240 EGSTIPIQED YRKPEPACSP 260 |
| SEQ ID NO: 128 CD27 humana, Superfamília do receptor do fator de necrose de tumor, membro 7 (Macaca nemestrina) | MARPHPWWLC FLGTLVGLSA TPAPKSCPER HYWAQGKLCC QMCEPGTFLV KDCDQHRKAA 60 QCHPCIPGVS FSPDHHTRPH CESCRHCNSG LLIRNCTITA NAVCACRNGW QCRDKECTEC 120 DPPPNPSLTT WPSQALGPHP QPTHLPYVNE MLEARTAGHM QTLADFRHLP ARTLSTHWPP 180 QRSLCSSDFI RILVIFSGMF LVFTLAGTLF LHQQRKYRSN KGESPMEPAE PCPYSCPREE 240 EGSTIPIQED YRKPEPASSP 260 |
[00869] Em algumas modalidades, as composições, processos e métodos descritos incluem um agonista de CD27 que se liga ao CD27 humana ou de murino com um KD de cerca de 100 pM ou mais baixo, liga-se ao CD27 humana ou de murino com um KD de cerca de 90 pM ou mais baixo, liga-se ao CD27 humana ou de murino com um KD de cerca de 80 pM ou mais baixo, liga-se ao CD27 humana ou de murino com um KD de cerca de 70 pM ou mais baixo, liga-se ao CD27 humana ou de murino com um KD de cerca de 60 pM ou mais baixo, liga-se ao CD27 humana ou de murino com um KD de cerca de 50 pM ou mais baixo, liga-se ao CD27 humana ou de murino com um KD de cerca de 40 pM ou mais baixo, ou liga-se ao CD27 humana ou de murino com um KD de cerca de 30 pM ou mais baixo.
[00870] Em algumas modalidades, as composições, processos e métodos descritos incluem um agonista de CD27 que se liga ao CD27 humana ou de murino com um kassoc de cerca de 7,5 x 105 1/M-s ou mais rápido, se liga ao CD27 humana ou de murino com um kassoc de cerca de 7,5 x 105 1/M-s ou mais rápido, se liga ao CD27 humana ou de murino com um kassOc de cerca
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220 / 497 de 8 x 1051/M-s ou mais rápido, se liga ao CD27 humana ou de murino com um kassoc de cerca de 8,5 x 105 1/M-s ou mais rápido, se liga ao CD27 humana ou de murino com um kassoc de cerca de 9 x 105 1/M-s ou mais rápido, se liga ao CD27 humana ou de murino com um kassoc de cerca de 9,5 x 105 1/M-s ou mais rápido, ou liga ao ao CD27 humana ou de murino com um kassoc de cerca de 1 x 106 1/M-s ou mais rápido.
[00871] Em algumas modalidades, as composições, processos e métodos descritos incluem um agonista de CD27 que se liga ao CD27 humana ou de murino com um kdissoc de cerca de 2 x 10'5 1/s ou mais lento, se liga ao CD27 humana ou de murino com um kdissoc de cerca de 2,1 x 10'5 1/s ou mais lento, se liga ao CD27 humana ou de murino com um kdissoc de cerca de 2,2 x 10'5 1/s ou mais lento, se liga ao CD27 humana ou de murino com um kdissoc de cerca de 2,3 x 10'5 1/s ou mais lento, se liga ao CD27 humana ou de murino com um kdissoc de cerca de 2,4 x 10'5 1/s ou mais lento, se liga ao CD27 humana ou de murino com um kdissoc de cerca de 2,5 x 10'5 1/s ou mais lento, se liga ao CD27 humana ou de murino com um kdissoc de cerca de 2,5 x 10'5 1/s ou mais lento ou liga ao ao CD27 humana ou de murino com um kdissoc de cerca de 2,7 x 10'5 1/s ou mais lento, se liga ao CD27 humana ou de murino com um kdissoc de cerca de 2,8 x 10'5 1/s ou mais lento, se liga ao CD27 humana ou de murino com um kdissoc de cerca de 2,9 x 10'5 1/s ou mais lento, ou liga ao ao CD27 humana ou de murino com um kdissoc de cerca de 3 x 10'5 1/s ou mais lento.
[00872] Em algumas modalidades, as composições, processos e métodos descritos incluem um agonista de CD27 que se liga ao CD27 humana ou de murino com um IC50 de cerca de 10 nM ou mais baixo, se liga ao CD27 humana ou de murino com um IC50 de cerca de 9 nM ou mais baixo, se liga ao CD27 humana ou de murino com um IC50 de cerca de 8 nM ou mais baixo, se liga ao CD27 humana ou de murino com um IC50 de cerca de 7 nM ou mais baixo, se liga ao CD27 humana ou de murino com um IC50 de cerca de 6 nM
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221 /497 ou mais baixo, se liga ao CD27 humana ou de murino com um IC50 de cerca de 5 nM ou mais baixo, se liga ao CD27 humana ou de murino com um IC50 de cerca de 4 nM ou mais baixo, se liga ao CD27 humana ou de murino com um IC50 de cerca de 3 nM ou mais baixo, se liga ao CD27 humana ou de murino com um IC50 de cerca de 2 nM ou mais baixo, ou liga ao ao CD27 humana ou de murino com um IC50 de cerca de 1 nM ou mais baixo.
[00873] Em uma modalidade preferida, o agonista de CD27 é o anticorpo monoclonal varlilumab, também conhecido como CDX-1127 ou 1F5, ou um fragmento, derivado, variante, ou biossimilar dos mesmos. Varlilumab está disponível da Celldex Therapeutics, Inc. Varlilumab é uma imunoglobina Gl-capa, an\i-[Homo sapiens anti-CD27 (TNFRSF7, superfamília do receptor do fator de necrose de tumor membro 7)], anticorpo monoclonal de Homo sapiens. As sequências de aminoácido de varlilumab são apresentadas na Tabela 17. Varlilumab compreende sítios de glicosilação N nas posições 299 e 299”; pontes de dissulfeto intracadeia da cadeia pesada nas posições 22 a 96 (VH-VL), 146 a 202 (CH1-CL), 263 a 323 (CH2) e 369 a 427 (Ch3) (e nas posições 22” a 96”, 146” a 202”, 263” a 323”, e 369” a 427”); pontes de dissulfeto intracadeia da cadeia leve nas posições 23’ a 88’ (VH-VL) e 134’ a 194’ (Ch1-Cl) (e nas posições 23’” a 88’” e 134’” a 194’”); pontes de dissulfeto de cadeia pesada-cadeia pesada intercadeia nas posições 228 a 228” e 231 a 231”; e pontes de dissulfeto de cadeia pesadacadeia leve intercadeia em 222 a 214’ e 222” a 214’”. A preparação e propriedades de varlilumab são descritas na Publicação do Pedido de Patente Internacional No. WO 2016/145085 A2 e Publicações dos Pedidos de Patente U.S. Nos. US 2011/0274685 Al e US 2012/0213771 Al, as divulgações das quais são aqui incorporadas por referência, estudos clínicos e pré-clínicos usando varlilumab são conhecidos na técnica e são descrito, por exemplo, em Thomas, et al., Oncolmmunology 2014, 3, e27255; Vitale, et al., Clin. Cancer Res. 2012, 18, 3812 a 21; e He, et al., J. Immunol. 2013, 191, 4174-83. Os
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222 / 497 testes clínicos correntes de varlilumab em uma variedade de indicações hematológicas e de tumor sólido incluem U.S. National Institutes of Health clinicaltrials.gov identificadores NCT01460134, NCT02543645,
NCT02413827, NCT02386111, e NCT02335918.
[00874] Em uma modalidade, um agonista de CD27 compreende uma cadeia pesada dada pela SEQ ID NO: 129 e uma cadeia leve dada pela SEQ ID NO: 130. Em uma modalidade, um agonista de CD27 compreende cadeias pesadas e leves tendo as sequências mostradas na SEQ ID NO: 129 e SEQ ID NO: 130, respectivamente, ou fragmentos de ligação a antígeno, fragmentos Fab, fragmentos variáveis de cadeia única (scFv), variantes, ou conjugados dos mesmos. Em uma modalidade, um agonista de CD27 compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 99% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 129 e SEQ ID NO: 130, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de CD27 compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 98% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 129 e SEQ ID NO: 130, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de CD27 compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 97% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 129 e SEQ ID NO: 130, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de CD27 compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 96% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 129 e SEQ ID NO: 130, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de CD27 compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 95% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 129 e SEQ ID NO: 130, respectivamente.
[00875] Em uma modalidade, o agonista de CD27 compreende as CDRs ou regiões variáveis (VRs) de cadeia pesada e leve de varlilumab. Em uma modalidade, o agonista de CD27 região variável da cadeia pesada (VH) compreende a sequência mostrada na SEQ ID NO: 131, e o agonista de CD27
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223 / 497 região variável da cadeia leve (VL) compreende a sequência mostrada na SEQ ID NO: 132, e substituições de aminoácido conservativas dos mesmos. Em uma modalidade, um agonista de CD27 compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 99% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 131 e SEQ ID NO: 132, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de CD27 compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 98% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 131 e SEQ ID NO: 132, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de CD27 compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 97% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 131 e SEQ ID NO: 132, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de CD27 compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 96% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 131 e SEQ ID NO: 132, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de CD27 compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 95% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 131 e SEQ ID NO: 132, respectivamente.
[00876] Em uma modalidade, um agonista de CD27 compreende os domínios CDR1, CDR2 e CDR3 da cadeia pesada tendo as sequências apresentadas na SEQ ID NO: 133, SEQ ID NO: 134, e SEQ ID NO: 135, respectivamente, e substituições de aminoácido conservativas dos mesmos, e os domínios CDR1, CDR2 e CDR3 da cadeia leve tendo as sequências apresentadas na SEQ ID NO: 136, SEQ ID NO: 137, e SEQ ID NO: 138, respectivamente, e substituições de aminoácido conservativas dos mesmos.
[00877] Em uma modalidade, o agonista de CD27 é um anticorpo monoclonal biossimilar agonista de CD27 aprovado pelas autoridades reguladoras de fármaco com referência ao varlilumab. Em uma modalidade, o anticorpo monoclonal biossimilar compreende um anticorpo de CD27 compreendendo uma sequência de aminoácidos que tenha pelo menos 97 % de identidade de sequência, por exemplo, 97%, 98%, 99% ou 100% de
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224 / 497 identidade de sequência, com a sequência de aminoácidos do produto medicinal de referência ou produto biológico de referência e que compreende uma ou mais modificações pós-traducionais quando comparado com o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é varlilumab. Em algumas modalidades, o uma ou mais modificações póstraducionais são selecionadas de uma ou mais de: glicosilação, oxidação, desamidação, e truncagem. Em algumas modalidades, o biossimilar é um agonista de anticorpo de CD27 autorizado ou submetido para autorização, em que o agonista de anticorpo de CD27 é provido em uma formulação que difere das formulações do produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é varlilumab. O agonista de anticorpo de CD27 pode ser autorizado por uma autoridade reguladora de fármaco tal como o FDA dos Estados Unidos e/ou o EMA da União Européia. Em algumas modalidades, o biossimilar é provido como uma composição que compreende adicionalmente um ou mais excipientes, em que o um ou mais excipientes são os mesmos ou diferentes dos excipientes compreendidos no produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é varlilumab. Em algumas modalidades, o biossimilar é provido como uma composição que compreende adicionalmente um ou mais excipientes, em que o um ou mais excipientes são os mesmos ou diferentes dos excipientes compreendidos no produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é varlilumab.
TABELA 17. As sequências de aminoácidos para agonistas de anticorpo de CD27 relacionados com o varlilumab.___________________________________ | Identificador | Sequência (Símbolos de aminoácido de uma letra) |
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| SEQ ID NO: 129 cadeia pesada para varlilumab | QVQLVESGGG VVQPGRSLRL SCAASGFTFS SYDMHWVRQA PGKGLEWVAV IWYDGSNKYY 60 ADSVKGRFTI SRDNSKNTLY LQMNSLRAED TAVYYCARGS GNWGFFDYWG QGTLVTVSSA 120 STKGPSVFPL APSSKSTSGG TAALGCLVKD YFPEPVTVSW NSGALTSGVH TFPAVLQSSG 180 LYSLSSVVTV PSSSLGTQTY ICNVNHKPSN TKVDKKVEPK SCDKTHTCPP CPAPELLGGP 240 SVFLFPPKPK DTLMISRTPE VTCVVVDVSH EDPEVKFNWY VDGVEVHNAK TKPREEQYNS 300 TYRVVSVLTV LHQDWLNGKE YKCKVSNKAL PAPIEKTISK AKGQPREPQV YTLPPSRDEL 360 TKNQVSLTCL VKGFYPSDIA VEWESNGQPE NNYKTTPPVL DSDGSFFLYS KLTVDKSRWQ 420 QGNVFSCSVM HEALHNHYTQ KSLSLSPGKG SS 452 |
| SEQ ID NO: 130 cadeia leve para varlilumab | DIQMTQSPSS LSASVGDRVT ITCRASQGIS RWLAWYQQKP EKAPKSLIYA ASSLQSGVPS 60 RFSGSGSGTD FTLTISSLQP EDFATYYCQQ YNTYPRTFGQ GTKVEIKRTV AAPSVFIFPP 120 SDEQLKSGTA SVVCLLNNFY PREAKVQWKV DNALQSGNSQ ESVTEQDSKD STYSLSSTLT 180 LSKADYEKHK VYACEVTHQG LSSPVTKSFN RGEC 214 |
| SEQ ID NO: 131 região variável da cadeia pesada para varlilumab | QVQLVESGGG VVQPGRSLRL SCAASGFTFS SYDMHWVRQA PGKGLEWVAV IWYDGSNKYY 60 ADSVKGRFTI SRDNSKNTLY LQMNSLRAED TAVYYCARGS GNWGFFDYWG QGTLVTVSS 119 |
| SEQ ID NO: 132 região variável da cadeia leve para varlilumab | DIQMTQSPSS LSASVGDRVT ITCRASQGIS RWLAWYQQKP EKAPKSLIYA ASSLQSGVPS 60 RFSGSGSGTD FTLTISSLQP EDFATYYCQQ YNTYPRTFGQ GTKVEIK 107 |
| SEQ ID NO: 133 CDR1 da cadeia pesada para varlilumab | GFTFSSYD 8 |
| SEQ ID NO: 134 CDR2 da cadeia pesada para varlilumab | IWYDGSNK 8 |
| SEQ ID NO: 135 CDR3 da cadeia pesada para varlilumab | ARGSGNWGFFDY 12 |
| SEQ ID NO: 136 CDR1 da cadeia leve para varlilumab | QGISRW 6 |
| SEQ ID NO: 137 CDR2 da cadeia leve para varlilumab | AASG 4 |
| SEQ ID NO: 138 CDR3 da cadeia leve para varlilumab | QQYNTYPRT 9 |
[00878] Em uma modalidade, o agonista de CD27 é uma proteína de fusão agonística de CD27 como representada na Estrutura I-A (proteína de fusão de fragmento de anticorpo Fc de terminal C) ou Estrutura I-B (Proteína
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226 / 497 de fusão de fragmento de anticorpo Fe de terminal N), ou um fragmento, derivado, conjugado, variante, ou biossimilar das mesmas. As propriedades das estruturas I-A e I-B são descritas acima e nas Patentes U.S. Nos.
9.359.420, 9.340.599, 8.921.519, e 8.450.460, as divulgações das quais são aqui incorporadas por referência. As sequências de aminoácidos para os domínios de polipeptídeo da estrutura I-A são dadas na Tabela 6. O domínio Fe preferivelmente compreende um domínio constante completo (aminoácidos 17 a 230 da SEQ ID NO: 31) o domínio de dobradiça completo (aminoácidos 1 a 16 da SEQ ID NO: 31) ou uma porção do domínio de dobradiça (por exemplo, aminoácidos 4 a 16 da SEQ ID NO: 31). Os ligantees preferidos para conectar um anticorpo Fe de terminal C podem ser selecionados das modalidades dadas na SEQ ID NO: 32 até a SEQ ID NO: 41, incluindo ligantees adequados para a fusão de polipeptídeos adicionais. Igualmente, sequências de aminoácidos para os domínios de polipeptídeo da estrutura I-B são dadas na Tabela 7. Se um fragmento de anticorpo Fe é fundido ao terminal N de uma proteína de fusão de TNRFSF como na estrutura I-B, a sequência do módulo Fe é preferivelmente aquela mostrada na SEQ ID NO: 42, e as sequências liganteas são preferivelmente selecionadas daquelas modalidades apresentadas na SED ID NO: 43 com a SEQ ID NO: 45.
[00879] Em uma modalidade, uma proteína de fusão agonista de CD27 de acordo com as estruturas I-A ou I-B compreende um ou mais domínios de ligação de CD27 selecionados do grupo que consiste em um de cadeia pesada variável e cadeia leve variável de varlilumab, e fragmentos, derivados, conjugados, variantes, e biossimilares dos mesmos.
[00880] Em uma modalidade, uma proteína de fusão agonista de CD27 de acordo com as estruturas I-A ou I-B compreende um ou mais domínios de ligação de CD27 compreendendo uma sequência de CD70 (CD27L) (Tabela 18). Em uma modalidade, uma proteína de fusão agonista de CD27 de acordo
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227 / 497 com as estruturas I-A ou I-B compreende um ou mais domínios de ligação de CD27 compreendendo uma sequência de acordo com a SEQ ID NO: 139. Em uma modalidade, uma proteína de fusão agonista de CD27 de acordo com as estruturas I-A ou I-B compreende um ou mais domínios de ligação de CD27 compreendendo uma sequência de CD70 solúvel. Em uma modalidade, uma proteína de fusão agonista de CD27 de acordo com as estruturas I-A ou I-B compreende um ou mais domínios de ligação de CD27 compreendendo uma sequência de acordo com a SEQ ID NO: 140. Em uma modalidade, uma proteína de fusão agonista de CD27 de acordo com as estruturas I-A ou I-B compreende um ou mais domínios de ligação de CD27 compreendendo uma sequência de acordo com a SEQ ID NO: 141.
[00881] Em uma modalidade, uma proteína de fusão agonista de CD27 de acordo com as estruturas I-A ou I-B compreende um ou mais domínios de ligação de CD27 que é um domínio scFv compreendendo as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 95% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 131 e SEQ ID NO: 132, respectivamente, em que os domínios VH e VL são conectados por um ligante.
TABELA 18. Domínios de polipeptídeo adicionais úteis como domínios de ligação de CD27 em proteínas de fusão (por exemplo, estruturas I-A e I-B).
| Identificador | Sequência (Símbolos de aminoácido de uma letra) |
| SEQ ID NO: 139 CD70 (CD27L) | MPEEGSGCSV RRRPYGCVLR AALVPLVAGL VICLVVCIQR FAQAQQQLPL ESLGWDVAEL 60 QLNHTGPQQD PRLYWQGGPA LGRSFLHGPE LDKGQLRIHR DGIYMVHIQV TLAICSSTTA 120 SRHHPTTLAV GICSPASRSI SLLRLSFHQG CTIASQRLTP LARGDTLCTN LTGTLLPSRN 180 TDETFFGVQW VRP 193 |
| SEQ ID NO: 140 domínio de CD70 solúvel | SLGWDVAELQ LNHTGPQQDP RLYWQGGPAL GRSFLHGPEL DKGQLRIHRD GIYMVHIQVT 60 LAICSSTTAS RHHPTTLAVG ICSPASRSIS LLRLSFHQGC TIASQRLTPL ARGDTLCTNL 120 TGTLLPSRNT DETFFGVQWV RP 142 |
| SEQ ID NO: 141 domínio de CD70 solúvel (alternativo) | VAELQLNHTG PQQDPRLYWQ GGPALGRSFL HGPELDKGQL RIHRDGIYMV HIQVTLAICS 60 STTASRHHPT TLAVGICSPA SRSISLLRLS FHQGCTIASQ RLTPLARGDT LCTNLTGTLL 120 PSRNTDETFF GVQWVRP 137 |
[00882] Em uma modalidade, o agonista de CD27 é um polipeptídeo de fusão de cadeia única agonístico de CD27 compreendendo (i) um primeiro
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228 / 497 domínio de ligação de CD27 solúvel, (ii) um primeiro ligante peptídico, (iii) um segundo domínio de ligação de CD27 solúvel, (iv) um segundo ligante peptídico, e (v) um terceiro domínio de ligação de CD27 solúvel, compreendendo adicionalmente um domínio adicional na extremidade de terminal N e/ou terminal C, e em que o domínio adicional é um Fab ou domínio do fragmento Fe. Em uma modalidade, o agonista de CD27 é um polipeptídeo de fusão de cadeia única agonístico de CD27 compreendendo (i) um primeiro domínio de ligação de CD27 solúvel, (ii) um primeiro ligante peptídico, (iii) um segundo domínio de ligação de CD27 solúvel, (iv) um segundo ligante peptídico, e (v) um terceiro domínio de ligação de CD27 solúvel, compreendendo adicionalmente um domínio adicional na extremidade de terminal N e/ou terminal C, em que o domínio adicional é um Fab ou domínio do fragmento Fe em que cada um dos domínios de ligação de CD27 solúveis carecem de uma região de haste (o que contribui para a trimerização e provê uma certa distância para a membrana celular, mas não é parte do domínio de ligação de CD27) e o primeiro e o segundo ligantees peptídicos independentemente têm um comprimento de 3 a 8 aminoácidos.
[00883] Em uma modalidade, o agonista de CD27 é um polipeptídeo de fusão de cadeia única agonístico de CD27 compreendendo (i) um primeiro domínio de citocina da superfamília do fator de necrose de tumor (TNF) solúvel, (ii) um primeiro ligante peptídico, (iii) um segundo domínio de citocina da superfamília do TNF solúvel, (iv) um segundo ligante peptídico, e (v) um terceiro domínio de citocina da superfamília do TNF solúvel, em que cada um dos domínios de citocina da superfamília do TNF solúvel carece de uma região de haste e o primeiro e o segundo ligantees peptídicos independentemente têm um comprimento de 3 a 8 aminoácidos, e em que o domínio de TNF de citocina da superfamília é um domínio de ligação de CD27.
[00884] Em uma modalidade, o agonista de CD27 é um agonista de
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CD27 descrito na Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2014/0112942 Al, US 2011/0274685 Al, ou US 2012/0213771 Al, ou Publicação do Pedido de Patente Internacional No. WO 2012/004367 Al, as divulgações das quais são aqui incorporadas por referência.
[00885] Em uma modalidade, o agonista de CD27 é um anticorpo scFv agonístico de CD27 compreendendo qualquer um dos domínios VH precedentes ligados a qualquer um dos domínios VL precedentes.
[00886] Agonistas de GITR (CD357) [00887] Em uma modalidade, o agonista de TNFRSF é um agonista de GITR. O agonista de GITR pode ser qualquer molécula de ligação de GITR conhecida na técnica. A molécula de ligação de GITR pode ser um anticorpo monoclonal ou proteína de fusão capazes de ligação ao GITR humano ou mamífero, os agonistas de GITR ou moléculas de ligação de GITR podem compreender uma cadeia pesada de imunoglobulina de qualquer isótipo (por exemplo, IgG, IgE, IgM, IgD, IgA, e IgY), classe (por exemplo, IgGl, IgG2, IgG3, IgG4, IgAl e IgA2) ou subclasse de molécula de imunoglobulina. O agonista de GITR ou molécula de ligação de GITR pode ter tanto uma cadeia pesada quanto uma leve. Como aqui usado, o termo molécula de ligação também inclui anticorpos (incluindo anticorpos de tamanho natural), anticorpos monoclonais (incluindo anticorpos monoclonais de tamanho natural), anticorpos policlonais, anticorpos multiespecíficos (por exemplo, anticorpos biespecíficos), anticorpos humanos, humanizados ou quiméricos, e fragmentos de anticorpo, por exemplo, fragmentos Fab, fragmentos F(ab’), fragmentos produzidos por uma biblioteca de expressão de Fab, fragmentos de ligação de epítopo de qualquer um dos acima, e formas engenheiradas de anticorpos, por exemplo, moléculas scFv, que se ligam ao 0X40. Em uma modalidade, o agonista de GITR é uma proteína de ligação a antígeno que é um anticorpo totalmente humano. Em uma modalidade, o agonista de GITR é uma proteína de ligação a antígeno que é um anticorpo humanizado. Em
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230 / 497 algumas modalidades, agonistas de GITR para o uso nos métodos e composições presentemente divulgados incluem anticorpos anti-GITR, anticorpos anti-GITR humanos, anticorpos anti-OX40 de camundongo, anticorpos anti-GITR de mamífero, anticorpos anti-OX40 monoclonais, anticorpos anti-OX40 policlonais, anticorpos anti-OX40 quiméricos, adnectinas anti-OX40, anticorpos de domínio anti-OX40, fragmentos de cadeia única anti-OX40, fragmentos de cadeia pesada anti-OX40, fragmentos de cadeia leve anti-OX40, proteínas de fusão anti-OX40, e fragmentos, derivados, conjugados, variantes, ou biossimilares dos mesmos. Em uma modalidade preferida, o agonista de 0X40 é um anticorpo agonístico, anti0X40 humanizado ou totalmente humano monoclonal (isto é, um anticorpo derivado de uma única linhagem de célula).
[00888] Em uma modalidade preferida, o agonista de GITR ou molécula de ligação de GITR também podem ser uma proteína de fusão. Em uma modalidade preferida, um agonista de GITR multimérico, tal como um agonista de GITR trimérico ou hexamérico (com três ou seis domínios de ligação de ligante), pode induzir agrupamento de receptor de GITR e formação do complexo de sinalização celular interna superiores comparado a um anticorpo monoclonal agonístico, que tipicamente possui dois domínios de ligação de ligante. As proteínas de fusão triméricas (trivalentes) ou hexaméricas (ou hexavalentes) ou maiores compreendendo três domínios de ligação de TNFRSF e IgGl-Fc e opcionalmente ainda ligando duas ou mais destas proteínas de fusão são descritas, por exemplo, em Gieffers, et al., Mol. Cancer Therapeutics 2013,12, 2735-47.
[00889] Em algumas modalidades, os anticorpos anti-GITR são distinguidos pela ligação ao hGITR (SEQ ID NO: 142) com alta afinidade, na presença de um agente estimulante, por exemplo, anticorpo CD3 (muromonabe ou OKT3), e são agonísticos, e anulam a supressão de células T efetoras pelas células Treg. Em uma modalidade, a molécula de ligação de
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GITR liga-se ao GITR humano (SEQ ID NO: 142). Em uma modalidade, a molécula de ligação de GITR liga-se ao GITR murino (SEQ ID NO: 143). As sequências de aminoácido de antigenos de GITR aos quais uma molécula de ligação de GITR liga-se estão resumidas na Tabela 19.
TABELA 19. As sequências de aminoácidos de antigenos de GITR.
| Identificador | Sequência (Símbolos de aminoácido de uma letra) |
| SEQ ID NO: 142 GITR humano, superfamília do receptor do fator de necrose de tumor membro 18 (Homo sapiens) | MAQHGAMGAF RALCGLALLC ALSLGQRPTG GPGCGPGRLL LGTGTDARCC RVHTTRCCRD 60 YPGEECCSEW DCMCVQPEFH CGDPCCTTCR HHPCPPGQGV QSQGKFSFGF QCIDCASGTF 120 SGGHEGHCKP WTDCTQFGFL TVFPGNKTHN AVCVPGSPPA EPLGWLTVVL LAVAACVLLL 180 TSAQLGLHIW QLRSQCMWPR ETQLLLEVPP STEDARSCQF PEEERGERSA EEKGRLGDLW 240 V 241 |
| SEQ ID NO: 143 GITR murino, superfamília do receptor do fator de necrose de tumor membro 18 (Mus musculus) | MGAWAMLYGV SMLCVLDLGQ PSVVEEPGCG PGKVQNGSGN NTRCCSLYAP GKEDCPKERC 60 ICVTPEYHCG DPQCKICKHY PCQPGQRVES QGDIVFGFRC VACAMGTFSA GRDGHCRLWT 120 NCSQFGFLTM FPGNKTHNAV CIPEPLPTEQ YGHLTVIFLV MAACIFFLTT VQLGLHIWQL 180 RRQHMCPRET QPFAEVQLSA EDACSFQFPE EERGEQTEEK CHLGGRWP 228 |
[00890] Em uma modalidade, o agonista de GITR é uma proteína de ligação a antígeno que é um anticorpo totalmente humano. Em uma modalidade, o agonista de GITR é uma proteína de ligação a antígeno que é um anticorpo humanizado. Em uma modalidade, o agonista de GITR é uma proteína de ligação a antígeno que agoniza a atividade de GITR humano. Em uma modalidade, a molécula de ligação de GITR é uma proteína de ligação a antígeno que é um anticorpo IgGl totalmente humano. Em uma modalidade, o agonista de GITR é uma proteína de ligação a antígeno que é capaz de ligar o receptor de Fcgama (FcyR). Em uma modalidade, o agonista de GITR é uma proteína de ligação a antígeno que é capaz de ligar o receptor de Fcgama (FcyR) tal que um grupo de proteínas de ligação a antígeno seja formado.
[00891] Em algumas modalidades, as composições, processos e métodos descritos incluem um agonista de GITR que liga GITR humano ou murino com um Kd de cerca de 100 pM ou mais baixo, liga GITR humano ou murino com um Kd de cerca de 90 pM ou mais baixo, liga GITR humano ou murino com um Kd de cerca de 80 pM ou mais baixo, liga GITR humano ou
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232 / 497 murino com um Kd de cerca de 70 pM ou mais baixo, liga GITR humano ou murino com um Kd de cerca de 60 pM ou mais baixo, liga GITR humano ou murino com um Kd de cerca de 50 pM ou mais baixo, liga GITR humano ou murino com um Kd de cerca de 40 pM ou mais baixo, ou liga GITR humano ou murino com um Kd de cerca de 30 pM ou mais baixo.
[00892] Em algumas modalidades, as composições, processos e métodos descritos incluem um agonista de GITR que se liga ao GITR humano ou murino com um kassoc de cerca de 7,5 x 105 1/M-s ou mais rápido, se liga ao GITR humano ou murino com um kassoc de cerca de 7,5 x 105 1/M-s ou mais rápido, se liga ao GITR humano ou murino com um kassoc de cerca de 8 x
105 1/M-s ou mais rápido, se liga ao GITR humano ou murino com um kassoc de cerca de 8,5 x 105 1/M-s ou mais rápido, se liga ao GITR humano ou murino com um kassoc de cerca de 9 x 105 1/M-s ou mais rápido, se liga ao GITR humano ou murino com um kassoc de cerca de 9,5 x 105 1/M-s ou mais rápido, ou se liga ao GITR humano ou murino com um kassoc de cerca de 1 x
106 1/M-s ou mais rápido.
[00893] Em algumas modalidades, as composições, processos e métodos descritos incluem um agonista de GITR que se liga ao GITR humano ou murino com um kdissoc de cerca de 2 x 10'5 1/s ou mais lento, se liga ao GITR humano ou murino com um kdissoc de cerca de 2,1 x 10'5 1/s ou mais lento, se liga ao GITR humano ou murino com um kdissoc de cerca de 2,2 x 10’ 5 1/s ou mais lento, se liga ao GITR humano ou murino com um kdissoc de cerca de 2,3 x 10'5 1/s ou mais lento, se liga ao GITR humano ou murino com um kdissoc de cerca de 2,4 x 10'5 1/s ou mais lento, se liga ao GITR humano ou murino com um kdissoc de cerca de 2,5 x 10'5 1/s ou mais lento, se liga ao GITR humano ou murino com um kdissoc de cerca de 2,5 x 10'5 1/s ou mais lento ou liga ao GITR humano ou murino com um kdissoc de cerca de 2,7 x 10'5 1/s ou mais lento, se liga ao GITR humano ou murino com um kdissoc de cerca de 2,8 x 10'5 1/s ou mais lento, se liga ao GITR humano ou murino com um
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233 / 497 kdissoc de cerca de 2,9 x IO'5 1/s ou mais lento, ou liga ao GITR humano ou murino com um kdissoc de cerca de 3 x IO'5 1/s ou mais lento.
[00894] Em algumas modalidades, as composições, processos e métodos descritos incluem um agonista de GITR que se liga ao GITR humano ou murino com um IC50 de cerca de 10 nM ou mais baixo, se liga ao GITR humano ou murino com um IC50 de cerca de 9 nM ou mais baixo, se liga ao GITR humano ou murino com um IC50 de cerca de 8 nM ou mais baixo, se liga ao GITR humano ou murino com um IC50 de cerca de 7 nM ou mais baixo, se liga ao GITR humano ou murino com um IC50 de cerca de 6 nM ou mais baixo, se liga ao GITR humano ou murino com um IC50 de cerca de 5 nM ou mais baixo, se liga ao GITR humano ou murino com um IC50 de cerca de 4 nM ou mais baixo, se liga ao GITR humano ou murino com um IC50 de cerca de 3 nM ou mais baixo, se liga ao GITR humano ou murino com um IC50 de cerca de 2 nM ou mais baixo, ou liga ao GITR humano ou murino com um IC50 de cerca de 1 nM ou mais baixo.
[00895] Em uma modalidade preferida, o agonista de GITR é um anticorpo monoclonal agonístico, anti-GITR (isto é, um anticorpo derivado de uma única linhagem de célula). Os anticorpos agonistas anti-GITR são conhecidos induzir respostas imunes fortes. Cohen, et al., Cancer Res. 2006, 66, 4904 a 12; Schaer, et al., Curr. Opin. Investig. Drugs 2010, 11, 13781386. Em uma modalidade preferida, o agonista de GITR é um anticorpo monoclonal que se liga especificamente ao antígeno de GITR. Em uma modalidade, o agonista de GITR é um bloqueador do receptor de GITR. Em algumas modalidades, o agonista de GITR é um anticorpo monoclonal agonístico, anti-GITR que anula a toxicidade celular dependente de anticorpo (ADCC), por exemplo a citotoxicidade de célula NK. Em algumas modalidades, o agonista de GITR é um anticorpo monoclonal agonístico, antiGITR que anula a fagocitose celular dependente de anticorpo (ADCP). Em algumas modalidades, o agonista de GITR é um anticorpo monoclonal
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234 / 497 agonístico, anti-GITR que anula citotoxicidade dependente de complemento (CDC).
[00896] Em uma modalidade, o agonista de GITR é o anticorpo monoclonal agonístico, anti-GITR TRX518 (TolerRx, Inc.), também conhecido como 6C8 e Ch-6C8-Agly. TRX518 é um anticorpo monoclonal humano anti-GITR de IgGl totalmente humanizada em que a asparagina 297 da cadeia pesada é substituída com alanina para eliminar a glicosilação ligada em N, que anula a funcionalidade da região Fc, incluindo ADCC e CDC. Rosenzweig, et al., J. Clin. Oncol. 2010, 28 (suplemento; resumo el3028); Jung, et al., Cur. Opin. Biotechnology 2011, 22,858-867. As sequências de aminoácido de TRX518 são apresentadas na Tabela 20. Em algumas modalidades, a molécula de ligação de GITR é o anticorpo monoclonal antiGITR humano 6C8, ou uma variante do mesmo. O anticorpo 6C8 é um anticorpo anti-GITR que se liga ao GITR humano nas células imunes, por exemplo, células T humanas e células dendríticas, com alta afinidade. Preferivelmente, tais moléculas de ligação anulam a supressão de células T efetoras pelas células Treg e são agonísticos para células imunes parcialmente ativadas in vitro na presença de um agente estimulante, tal como CD3. Em algumas modalidades, a molécula de ligação de GITR é o anticorpo monoclonal anti-GITR murino 2F8, ou uma variante dos mesmos. A preparação, propriedades, e usos dos anticorpos 6C8 e 2F8, e suas variantes, são descritos nas Patentes U.S. Nos. 7.812.135; 8.388.967; e 9.028.823; as divulgações das quais são aqui incorporadas por referência.
[00897] Em uma modalidade, o anticorpo monoclonal agonístico antiGITR compreende uma cadeia pesada selecionada do grupo que consiste da SEQ ID NO: 144, SEQ ID NO: 145, SEQ ID NO: 146, e SEQ ID NO: 147, e uma cadeia leve compreendendo a SEQ ID NO: 148. Em uma modalidade, o anticorpo monoclonal agonístico anti-GITR compreende uma cadeia pesada com uma identidade de sequência de mais do que 99% para uma sequência
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235/497 selecionada do grupo que consiste da SEQ ID NO: 144, SEQ ID NO: 145, SEQ ID NO: 146, e SEQ ID NO: 147, e uma cadeia leve com uma identidade de sequência de mais do que 99% para a SEQ ID NO: 148. Em uma modalidade, o anticorpo monoclonal agonístico anti-GITR compreende uma cadeia pesada com uma identidade de sequência de mais do que 98% para uma sequência selecionada do grupo que consiste da SEQ ID NO: 144, SEQ ID NO: 145, SEQ ID NO: 146, e SEQ ID NO: 147, e uma cadeia leve com uma identidade de sequência de mais do que 98% com a SEQ ID NO: 148. Em uma modalidade, o anticorpo monoclonal agonístico anti-GITR compreende uma cadeia pesada com uma identidade de sequência de mais do que 95% para uma sequência selecionada do grupo que consiste da SEQ ID NO: 144, SEQ ID NO: 145, SEQ ID NO: 146, e SEQ ID NO: 147, e uma cadeia leve com uma identidade de sequência de mais do que 95% com a SEQ ID NO: 148. Em uma modalidade, o anticorpo monoclonal agonístico antiGITR compreende uma cadeia pesada com uma identidade de sequência de mais do que 90% para uma sequência selecionada do grupo que consiste da SEQ ID NO: 144, SEQ ID NO: 145, SEQ ID NO: 146, e SEQ ID NO: 147, e uma cadeia leve com uma identidade de sequência de mais do que 90% com a SEQ ID NO: 148.
[00898] Em uma modalidade, o anticorpo monoclonal agonístico antiGITR compreende uma cadeia pesada que compreende a sequência líder da SEQ ID NO: 149 e compreende adicionalmente uma sequência selecionada do grupo que consiste da SEQ ID NO: 144, SEQ ID NO: 145, SEQ ID NO: 146 e SEQ ID NO: 147. Em uma modalidade, o anticorpo monoclonal agonístico anti-GITR compreende uma cadeia leve que compreende a sequência líder da SEQ ID NO: 148 e compreende adicionalmente uma sequência compreendendo a SEQ ID NO: 150.
[00899] Em uma modalidade, o anticorpo monoclonal agonístico antiGITR (tal como TRX518) compreende uma região variável de cadeia pesada
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236/497 (VH) selecionada do grupo que consiste da SEQ ID NO: 151 e SEQ ID NO: 152, e uma região variável da cadeia leve (VL) compreendendo a SEQ ID NO: 153. Em uma modalidade, o anticorpo monoclonal agonístico anti-GITR compreende uma região variável de cadeia pesada selecionada do grupo que consiste dos resíduos de aminoácido 20 a 138 da SEQ ID NO: 151 e os resíduos de aminoácido 20 a 138 da SEQ ID NO: 152, e uma região variável da cadeia leve compreendendo os resíduos de aminoácido 20 a 138 da SEQ ID NO: 153. Em uma modalidade, o anticorpo monoclonal agonístico antiGITR compreende uma região variável de cadeia pesada com uma identidade de sequência de mais do que 99% para uma sequência selecionada do grupo que consiste dos resíduos de aminoácido 20 a 138 da SEQ ID NO: 151 e os resíduos de aminoácido 20 a 138 da SEQ ID NO: 152, e uma região variável da cadeia leve com uma identidade de sequência de mais do que 99% para uma sequência compreendendo os resíduos de aminoácido 20 a 138 da SEQ ID NO: 153. Em uma modalidade, o anticorpo monoclonal agonístico antiGITR compreende uma região variável de cadeia pesada com uma identidade de sequência de mais do que 98% para uma sequência selecionada do grupo que consiste dos resíduos de aminoácido 20 a 138 da SEQ ID NO: 151 e os resíduos de aminoácido 20 a 138 da SEQ ID NO: 152, e uma região variável da cadeia leve com uma identidade de sequência de mais do que 98% para uma sequência compreendendo os resíduos de aminoácido 20 a 138 da SEQ ID NO: 153. Em uma modalidade, o anticorpo monoclonal agonístico antiGITR compreende uma região variável de cadeia pesada com uma identidade de sequência de mais do que 95% para uma sequência selecionada do grupo que consiste dos resíduos de aminoácido 20 a 138 da SEQ ID NO: 151 e os resíduos de aminoácido 20 a 138 da SEQ ID NO: 152, e uma região variável da cadeia leve com uma identidade de sequência de mais do que 95% para uma sequência compreendendo os resíduos de aminoácido 20 a 138 da SEQ ID NO: 153. Em uma modalidade, o anticorpo monoclonal agonístico anti
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GITR compreende uma região variável de cadeia pesada com uma identidade de sequência de mais do que 90% para uma sequência selecionada do grupo que consiste dos resíduos de aminoácido 20 a 138 da SEQ ID NO: 151 e os resíduos de aminoácido 20 a 138 da SEQ ID NO: 152, e uma região variável da cadeia leve com uma identidade de sequência de mais do que 90% para uma sequência compreendendo os resíduos de aminoácido 20 a 138 da SEQ ID NO: 153.
[00900] Em uma modalidade, o anticorpo monoclonal agonístico antiGITR compreende uma região VH compreendendo pelo menos uma região CDR1 compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID NO: 154; pelo menos uma região CDR2 compreendendo uma sequência de aminoácidos selecionada do grupo que consiste da SEQ ID NO: 155 e SEQ ID NO: 156; e pelo menos uma região de CDR3 compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID NO: 157; e uma região de VL compreendendo pelo menos uma região CDR1 compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID NO: 158; pelo menos uma região CDR2 compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID NO: 159; e pelo menos uma região de CDR3 compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID NO: 160. Em uma modalidade, a invenção provê moléculas de ácido nucléico isoladas codificando uma sequência de polipeptídeo compreendendo uma CDR 6C8, por exemplo, compreendendo uma sequência de aminoácidos selecionada do grupo que consiste da: SEQ ID NO: 154, SEQ ID NO: 155, SEQ ID NO: 156, SEQ ID NO: 157, SEQ ID NO: 158, SEQ ID NO: 159, e SEQ ID NO: 160. Em uma modalidade, o anticorpo monoclonal agonístico anti-GITR compreende as seis CDRs representadas pelas sequências de aminoácido da SEQ ID NO: 154, SEQ ID NO: 156, SEQ ID NO: 157, SEQ ID NO: 158, SEQ ID NO: 159, e SEQ ID NO: 160. Em uma modalidade, a molécula de ligação de GITR que especificamente se liga ao GITR compreende as seis CDRs representadas pelas sequências de aminoácido da SEQ ID NO: 154,
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SEQ ID NO: 155, SEQ ID NO: 157, SEQ ID NO: 158, SEQ ID NO: 159, e SEQ ID NO: 160. Em uma modalidade, o anticorpo monoclonal agonistico anti-GITR compreende uma VL tendo pelo menos um domínio CDR compreendendo uma sequência de aminoácidos selecionada do grupo que consiste da SEQ ID NO: 158, SEQ ID NO: 159, e SEQ ID NO: 160. Em uma modalidade, o anticorpo monoclonal agonistico anti-GITR compreende uma VL tendo pelo menos dois domínios CDR compreendendo uma sequência de aminoácidos selecionada do grupo que consiste da SEQ ID NO: 158, SEQ ID NO: 159, e SEQ ID NO: 160. Em uma modalidade, o anticorpo monoclonal agonistico anti-GITR compreende uma VL tendo domínios CDR compreendendo as sequências de aminoácido da SEQ ID NO: 158, SEQ ID NO: 159, e SEQ ID NO: 160. Em uma modalidade, o anticorpo monoclonal agonistico anti-GITR compreende uma VL tendo pelo menos um domínio CDR compreendendo uma sequência de aminoácidos selecionada do grupo que consiste da SEQ ID NO: 154, SEQ ID NO: 155, e SEQ ID NO: 157. Em uma modalidade, o anticorpo monoclonal agonistico anti-GITR compreende uma VL tendo pelo menos dois domínios CDR compreendendo uma sequência de aminoácidos selecionada do grupo que consiste da SEQ ID NO: 154, SEQ ID NO: 155, e SEQ ID NO: 157. Em uma modalidade, o anticorpo monoclonal agonistico anti-GITR compreende uma VL tendo domínios CDR compreendendo as sequências de aminoácido da SEQ ID NO: 154, SEQ ID NO: 155, e SEQ ID NO: 157. Em uma modalidade, o anticorpo monoclonal agonistico anti-GITR compreende uma VL tendo pelo menos um domínio CDR compreendendo uma sequência de aminoácidos selecionada do grupo que consiste da SEQ ID NO: 154, SEQ ID NO: 156, e SEQ ID NO: 157. Em uma modalidade, o anticorpo monoclonal agonistico anti-GITR compreende uma VL tendo pelo menos dois domínios CDR compreendendo uma sequência de aminoácidos selecionada do grupo que consiste da SEQ ID NO: 154, SEQ ID NO: 156, e SEQ ID NO: 157. Em uma modalidade, o anticorpo
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239 / 497 monoclonal agonístico anti-GITR compreende uma VL tendo domínios CDR compreendendo as sequências de aminoácido da SEQ ID NO: 154, SEQ ID NO: 156, e SEQ ID NO: 157. Em uma modalidade, o anticorpo monoclonal agonístico anti-GITR compreende um VH domínio compreendendo um CDR apresentadas na SEQ ID NO: 154 (CDR1). Em uma modalidade, o anticorpo monoclonal agonístico anti-GITR compreende um VH domínio compreendendo um CDR apresentadas na SEQ ID NO: 155 (CDR2, variante “N”). Em uma modalidade, o anticorpo monoclonal agonístico anti-GITR compreende um VH domínio compreendendo uma CDR apresentada na SEQ ID NO: 156 (CDR3, variante “Q”). Em uma modalidade, o anticorpo monoclonal agonístico anti-GITR compreende um domínio VH compreendendo uma CDR apresentada na SEQ ID NO: 157 (CDR3). Em uma modalidade, o anticorpo monoclonal agonístico anti-GITR compreende um domínio VL compreendendo uma CDR apresentada na SEQ ID NO: 158 (CDR1). Em uma modalidade, o anticorpo monoclonal agonístico anti-GITR compreende um domínio VL compreendendo uma CDR apresentadas na SEQ ID NO: 159 (CDR2). Em uma modalidade, o anticorpo monoclonal agonístico anti-GITR compreende um domínio VL compreendendo uma CDR apresentada na SEQ ID NO: 160 (CDR3).
[00901] Em uma modalidade, o anticorpo monoclonal agonístico antiGITR é um anticorpo monoclonal 6C8 quimérico, ou um fragmento de ligação a antígeno, derivado, conjugado, ou variante do mesmo. Em uma modalidade, o anticorpo monoclonal agonístico anti-GITR compreende uma cadeia pesada selecionada do grupo que consiste da SEQ ID NO: 162 e SEQ ID NO: 163, e uma cadeia leve compreendendo a SEQ ID NO: 161. Em uma modalidade, o anticorpo monoclonal agonístico anti-GITR compreende uma cadeia pesada com uma identidade de sequência de mais do que 99% para uma sequência selecionada do grupo que consiste da SEQ ID NO: 162 e SEQ ID NO: 163, e uma cadeia leve com uma identidade de sequência de mais do
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240 / 497 que 99% com a SEQ ID NO: 161. Em uma modalidade, o anticorpo monoclonal agonístico anti-GITR compreende uma cadeia pesada com uma identidade de sequência de mais do que 98% para uma sequência selecionada do grupo que consiste da SEQ ID NO: 162 e SEQ ID NO: 163, e uma cadeia leve com uma identidade de sequência de mais do que 98% com a SEQ ID NO: 161. Em uma modalidade, o anticorpo monoclonal agonístico anti-GITR compreende uma cadeia pesada com uma identidade de sequência de mais do que 95% para uma sequência selecionada do grupo que consiste da SEQ ID NO: 162 e SEQ ID NO: 163, e uma cadeia leve com uma identidade de sequência de mais do que 95% com a SEQ ID NO: 161. Em uma modalidade, o anticorpo monoclonal agonístico anti-GITR compreende uma cadeia pesada com uma identidade de sequência de mais do que 90% para uma sequência selecionada do grupo que consiste da SEQ ID NO: 162 e SEQ ID NO: 163, e uma cadeia leve com uma identidade de sequência de mais do que 90% com a SEQ ID NO: 161.
[00902] Em uma modalidade, o agonista de GITR é um anticorpo monoclonal agonista de GITR biossimilar aprovado pelas autoridades reguladoras de fármaco com referência ao TRX518 ou 6C8. Em uma modalidade, o anticorpo monoclonal biossimilar compreende um anticorpo GITR compreendendo uma sequência de aminoácidos que tenha pelo menos 97% de identidade de sequência, por exemplo, 97%, 98%, 99% ou 100% de identidade de sequência, com a sequência de aminoácidos do produto medicinal de referência ou produto biológico de referência e que compreende uma ou mais modificações pós-traducionais quando comparado com o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é TRX518 ou 6C8. Em algumas modalidades, a uma ou mais modificações póstraducionais são selecionadas de uma ou mais de: glicosilação, oxidação, desamidação, e truncagem. Em algumas modalidades, o biossimilar é um
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241 /497 agonista de anticorpo GITR autorizado ou submetido para autorização, em que o agonista de anticorpo GITR é provido em uma formulação que difere das formulações do produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é TRX518 ou 6C8. O agonista de anticorpo GITR pode ser autorizado por uma autoridade reguladora de fármaco tal como o FDA dos Estados Unidos e/ou o EMA da União Européia. Em algumas modalidades, o biossimilar é provido como uma composição que compreende adicionalmente um ou mais excipientes, em que o um ou mais excipientes são os mesmos ou diferentes dos excipientes compreendidos no produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é TRX518 ou 6C8. Em algumas modalidades, o biossimilar é provido como uma composição que compreende adicionalmente um ou mais excipientes, em que o um ou mais excipientes são os mesmos ou diferentes dos excipientes compreendidos no produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é TRX518 ou 6C8. TABELA 20. As sequências de aminoácidos para anticorpos agonistas de
GITR relacionados com o TRX518 e 6C8.
| Identificador | Sequência (Símbolos de aminoácido de uma letra) |
| SEQ ID NO: 144 variante da cadeia pesada de 6C8 humanizado | QVTLRESGPA LVKPTQTLTL TCTFSGFSLS TSGMGVGWIR QPPGKALEWL AHIWWDDDKY 60 YNPSLKSRLT ISKDTSKNQV VLTMTNMDPV DTATYYCART RRYFPFAYWG QGTLVTVSSA 120 STKGPSVFPL APSSKSTSGG TAALGCLVKD YFPEPVTVSW NSGALTSGVH TFPAVLQSSG 180 LYSLSSVVTV PSSSLGTQTY ICNVNHKPSN TKVDKKVEPK SCDKTHTCPP CPAPELLGGP 240 SVFLFPPKPK DTLMISRTPE VTCVVVDVSH EDPEVKFNWY VDGVEVHNAK TKPREEQYNS 300 TYRVVSVLTV LHQDWLNGKE YKCKVSNKAL PAPIEKTISK AKGQPREPQV YTLPPSRDEL 360 TKNQVSLTCL VKGFYPSDIA VEWESNGQPE NNYKTTPPVL DSDGSFFLYS KLTVDKSRWQ 420 QGNVFSCSVM HEALHNHYTQ KSLSLSPGK 449 |
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| Identificador | Sequência (Símbolos de aminoácido de uma letra) |
| SEQ ID NO: 145 variante da cadeia pesada de 6C8 humanizado | QVTLRESGPA LVKPTQTLTL TCTFSGFSLS TSGMGVGWIR QPPGKALEWL AHIWWDDDKY 60 YNPSLKSRLT ISKDTSKNQV VLTMTNMDPV DTATYYCART RRYFPFAYWG QGTLVTVSSA 120 STKGPSVFPL APSSKSTSGG TAALGCLVKD YFPEPVTVSW NSGALTSGVH TFPAVLQSSG 180 LYSLSSVVTV PSSSLGTQTY ICNVNHKPSN TKVDKKVEPK SCDKTHTCPP CPAPELLGGP 240 SVFLFPPKPK DTLMISRTPE VTCVVVDVSH EDPEVKFNWY VDGVEVHNAK TKPREEQYAS 300 TYRVVSVLTV LHQDWLNGKE YKCKVSNKAL PAPIEKTISK AKGQPREPQV YTLPPSRDEL 360 TKNQVSLTCL VKGFYPSDIA VEWESNGQPE NNYKTTPPVL DSDGSFFLYS KLTVDKSRWQ 420 QGNVFSCSVM HEALHNHYTQ KSLSLSPGK 449 |
| SEQ ID NO: 146 variante da cadeia pesada de 6C8 humanizado | QVTLRESGPA LVKPTQTLTL TCTFSGFSLS TSGMGVGWIR QPPGKALEWL AHIWWDDDKY 60 YQPSLKSRLT ISKDTSKNQV VLTMTNMDPV DTATYYCART RRYFPFAYWG QGTLVTVSSA 120 STKGPSVFPL APSSKSTSGG TAALGCLVKD YFPEPVTVSW NSGALTSGVH TFPAVLQSSG 180 LYSLSSVVTV PSSSLGTQTY ICNVNHKPSN TKVDKKVEPK SCDKTHTCPP CPAPELLGGP 240 SVFLFPPKPK DTLMISRTPE VTCVVVDVSH EDPEVKFNWY VDGVEVHNAK TKPREEQYNS 300 TYRVVSVLTV LHQDWLNGKE YKCKVSNKAL PAPIEKTISK AKGQPREPQV YTLPPSRDEL 360 TKNQVSLTCL VKGFYPSDIA VEWESNGQPE NNYKTTPPVL DSDGSFFLYS KLTVDKSRWQ 420 QGNVFSCSVM HEALHNHYTQ KSLSLSPGK 449 |
| SEQ ID NO: 147 variante da cadeia pesada de 6C8 humanizado | QVTLRESGPA LVKPTQTLTL TCTFSGFSLS TSGMGVGWIR QPPGKALEWL AHIWWDDDKY 60 YQPSLKSRLT ISKDTSKNQV VLTMTNMDPV DTATYYCART RRYFPFAYWG QGTLVTVSSA 120 STKGPSVFPL APSSKSTSGG TAALGCLVKD YFPEPVTVSW NSGALTSGVH TFPAVLQSSG 180 LYSLSSVVTV PSSSLGTQTY ICNVNHKPSN TKVDKKVEPK SCDKTHTCPP CPAPELLGGP 240 SVFLFPPKPK DTLMISRTPE VTCVVVDVSH EDPEVKFNWY VDGVEVHNAK TKPREEQYAS 300 TYRVVSVLTV LHQDWLNGKE YKCKVSNKAL PAPIEKTISK AKGQPREPQV YTLPPSRDEL 360 TKNQVSLTCL VKGFYPSDIA VEWESNGQPE NNYKTTPPVL DSDGSFFLYS KLTVDKSRWQ 420 QGNVFSCSVM HEALHNHYTQ KSLSLSPGK 449 |
| SEQ ID NO: 148 cadeia leve de 6C8 humanizado | EIVMTQSPAT LSVSPGERAT LSCKASQNVG TNVAWYQQKP GQAPRLLIYS ASYRYSGIPA 60 RFSGSGSGTE FTLTISSLQS EDFAVYYCQQ YNTDPLTFGG GTKVEIKRTV AAPSVFIFPP 120 SDEQLKSGTA SVVCLLNNFY PREAKVQWKV DNALQSGNSQ ESVTEQDSKD STYSLSSTLT 180 LSKADYEKHK VYACEVTHQG LSSPVTKSFN RGEC 214 |
| SEQ ID NO: 149 líder da cadeia pesada de 6C8 | MDRLTFSFLL LIVPAYVLS 19 |
| SEQ ID NO: 150 líder da cadeia leve de6C8 | METQSQVFVY MLLWLSGVDG 20 |
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| Identificador | Sequência (Símbolos de aminoácido de uma letra) |
| SEQ ID NO: 151 região variável da variante da cadeia pesada de 6C8 humanizado | MDRLTFSFLL LIVPAYVLSQ VTLKESGPGI LKPSQTLSLT CSFSGFSLST SGMGVGWIRQ 60 PSGKGLEWLA HIWWDDDKYY NPSLKSQLTI SKDTSRNQVF LKITSVDTAD AATYYCARTR 120 RYFPFAYWGQ GTLVTVSS 138 |
| SEQ ID NO: 152 região variável da variante da cadeia pesada de 6C8 humanizado | MDRLTFSFLL LIVPAYVLSQ VTLKESGPGI LKPSQTLSLT CSFSGFSLST SGMGVGWIRQ 60 PSGKGLEWLA HIWWDDDKYY QPSLKSQLTI SKDTSRNQVF LKITSVDTAD AATYYCARTR 120 RYFPFAYWGQ GTLVTVSS 138 |
| SEQ ID NO: 153 região variável da cadeia leve de 6C8 humanizado | METQSQVFVY MLLWLSGVDG DIVMTQSQKF MSTSVGDRVS VTCKASQNVG TNVAWYQQKP 60 GQSPKALIYS ASYRYSGVPD RFTGSGSGTD FTLTINNVHS EDLAEYFCQQ YNTDPLTFGA 120 GTKLEIK 127 |
| SEQ ID NO: 154 CDR1 da cadeia pesada 6C8 | GFSLSTSGMG VG 12 |
| SEQ ID NO: 155 6C8 CDR2 da variante de cadeia pesada | HIWWDDDKYY NPSLKS 16 |
| SEQ ID NO: 156 6C8 CDR2 da variante de cadeia pesada | HIWWDDDKYY QPSLKS 16 |
| SEQ ID NO: 157 6C8 CDR3 da cadeia pesada | TRRYFPFAY 9 |
| SEQ ID NO: 158 6C8 CDR1 da cadeia leve | KASQNVGTNVA 11 |
| SEQ ID NO: 159 6C8 CDR2 da cadeia leve | SASYRYS 7 |
| SEQ ID NO: 160 6C8 CDR3 da cadeia leve | QQYNTDPLT 9 |
| SEQ ID NO: 161 quimérico 6C8 cadeia pesada variante | QVTLKESGPG ILKPSQTLSL TCSFSGFSLS TSGMGVGWIR QPSGKGLEWL AHIWWDDDKY 60 YNPSLKSQLT ISKDTSRNQV FLKITSVDTA DAATYYCART RRYFPFAYWG QGTLVTVSSA 120 STKGPSVFPL APSSKSTSGG TAALGCLVKD YFPEPVTVSW NSGALTSGVH TFPAVLQSSG 180 LYSLSSVVTV PSSSLGTQTY ICNVNHKPSN TKVDKKVEPK SCDKTHTCPP CPAPELLGGP 240 SVFLFPPKPK DTLMISRTPE VTCVVVDVSH EDPEVKFNWY VDGVEVHNAK TKPREEQYNS 300 TYRVVSVLTV LHQDWLNGKE YKCKVSNKAL PAPIEKTISK AKGQPREPQV YTLPPSRDEL 360 TKNQVSLTCL VKGFYPSDIA VEWESNGQPE NNYKTTPPVL DSDGSFFLYS KLTVDKSRWQ 420 QGNVFSCSVM HEALHNHYTQ KSLSLSPGK 449 |
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| Identificador | Sequência (Símbolos de aminoácido de uma letra) |
| SEQ ID NO: 162 | QVTLKESGPG ILKPSQTLSL TCSFSGFSLS TSGMGVGWIR QPSGKGLEWL |
| quimérico 6C8 | AHIWWDDDKY 60 |
| cadeia pesada | YNPSLKSQLT ISKDTSRNQV FLKITSVDTA DAATYYCART RRYFPFAYWG |
| variante | QGTLVTVSSA 120 STKGPSVFPL APSSKSTSGG TAALGCLVKD YFPEPVTVSW NSGALTSGVH TFPAVLQSSG 180 LYSLSSVVTV PSSSLGTQTY ICNVNHKPSN TKVDKKVEPK SCDKTHTCPP CPAPELLGGP 240 SVFLFPPKPK DTLMISRTPE VTCVVVDVSH EDPEVKFNWY VDGVEVHNAK TKPREEQYAS 300 TYRVVSVLTV LHQDWLNGKE YKCKVSNKAL PAPIEKTISK AKGQPREPQV YTLPPSRDEL 360 TKNQVSLTCL VKGFYPSDIA VEWESNGQPE NNYKTTPPVL DSDGSFFLYS KLTVDKSRWQ 420 QGNVFSCSVM HEALHNHYTQ KSLSLSPGK 449 |
| SEQ ID NO: 163 | DIVMTQSQKF MSTSVGDRVS VTCKASQNVG TNVAWYQQKP GQSPKALIYS |
| quimérico 6C8 | ASYRYSGVPD 60 |
| cadeia leve variante | RFTGSGSGTD FTLTINNVHS EDLAEYFCQQ YNTDPLTFGA GTKLEIKRTV AAPSVFIFPP 120 SDEQLKSGTA SVVCLLNNFY PREAKVQWKV DNALQSGNSQ ESVTEQDSKD STYSLSSTLT 180 LSKADYEKHK VYACEVTHQG LSSPVTKSFN RGEC 214 |
[00903] Em uma modalidade, o agonista de GITR é um anticorpo agonístico anti-GITR monoclonal com descrito na Patente U.S. No. 8.709.424; Publicações dos Pedidos de Patente U.S. Nos. US 2012/0189639 Al e US 2014/0348841 Al, e Publicação do Pedido de Patente Internacional No. WO 2011/028683 Al (Merck Sharp & Dohme Corp.), as divulgações das quais são aqui incorporadas por referência. Em uma modalidade, o agonista de GITR é um anticorpo monoclonal agonístico, anti-GITR selecionado a partir do grupo que consiste em 36E5, 3D6, 61G6, 6H6, 61F6, 1D8, 17F10, 35D8, 49A1, 9E5, e 31H6, e fragmentos, variantes, derivados, ou biossimilares dos mesmos. A estrutura, propriedades, e preparação destes anticorpos estão descritas na Patente U.S. No. 8.709.424; Publicações dos Pedidos de Patente U.S. Nos. US 2012/0189639 Al e US 2014/0348841 Al, as divulgações das quais são aqui incorporadas por referência.
[00904] Em algumas modalidades, o anticorpo monoclonal agonístico, anti-GITR compreende um domínio variável de cadeia pesada (VH) humanizado compreendendo uma sequência selecionada do grupo que consiste da SEQ ID NO: 164, SEQ ID NO: 166, SEQ ID NO: 168, SEQ ID NO: 170, SEQ ID NO: 172, SEQ ID NO: 174, SEQ ID NO: 176, SEQ ID
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NO: 178, SEQ ID NO: 180, SEQ ID NO: 182, SEQ ID NO: 184, SEQ ID
NO: 186, SEQ ID NO: 188, SEQ ID NO: 190, SEQ ID NO: 192, SEQ ID
NO: 194, SEQ ID NO: 196, SEQ ID NO: 198, SEQ ID NO: 200, SEQ ID
NO: 202, SEQ ID NO: 204, SEQ ID NO: 206, ou uma variante, fragmento, ou biossimilar das mesmas, e um domínio variável de cadeia pesada (VH) humanizado compreendendo uma sequência selecionada do grupo que consiste da SEQ ID NO: 165, SEQ ID NO: 167, SEQ ID NO: 169, SEQ ID NO: 171, SEQ ID NO: 173, SEQ ID NO: 175, SEQ ID NO: 177, SEQ ID
NO: 179, SEQ ID NO: 181, SEQ ID NO: 183, SEQ ID NO: 185, SEQ ID
NO: 187, SEQ ID NO: 189, SEQ ID NO: 191, SEQ ID NO: 193, SEQ ID
NO: 195, SEQ ID NO: 197, SEQ ID NO: 199, SEQ ID NO: 201, SEQ ID
NO: 203, SEQ ID NO: 205, SEQ ID NO: 207, ou uma variante, fragmento, ou biossimilar das mesmas (Tabela 21). Em algumas modalidades, o anticorpo monoclonal agonístico, anti-GITR compreende adicionalmente uma região constante de cadeia pesada, em que a região constante de cadeia pesada compreende uma região constante de cadeia pesada humana γΐ, γ2, γ3, ou γ4 ou uma variante das mesmas. Em algumas modalidades, a região constante de cadeia leve compreende uma região constante de cadeia leve humana lambda ou uma capa.
[00905] Em uma modalidade, o agonista de GITR é um anticorpo monoclonal agonista de GITR biossimilar aprovado pelas autoridades reguladoras de fármaco com referência ao 36E5, 3D6, 61G6, 6H6, 61F6, 1D8, 17F10, 35D8, 49A1, 9E5, e 31H6. Em uma modalidade, o anticorpo monoclonal biossimilar compreende um anticorpo GITR compreendendo uma sequência de aminoácidos que tenha pelo menos 97% de identidade de sequência, por exemplo, 97%, 98%, 99% ou 100% de identidade de sequência, com a sequência de aminoácidos do produto medicinal de referência ou produto biológico de referência e que compreende uma ou mais modificações pós-traducionais quando comparada com o produto medicinal
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246 / 497 de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é 36E5, 3D6, 61G6, 6H6, 61F6, 1D8, 17F10, 35D8, 49A1, 9E5, e 31H6. Em algumas modalidades, a uma ou mais modificações pós-traducionais são selecionadas de uma ou mais de: glicosilação, oxidação, desamidação, e truncagem. Em algumas modalidades, o biossimilar é um agonista de anticorpo GITR autorizado ou submetido para autorização, em que o agonista de anticorpo GITR é provido em uma formulação que difere das formulações do produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é 36E5, 3D6, 61G6, 6H6, 61F6, 1D8, 17F10, 35D8, 49A1, 9E5, e 31H6. O agonista de anticorpo GITR pode ser autorizado por uma autoridade reguladora de fármaco tal como o FDA dos Estados Unidos e/ou o EMA da União Européia. Em algumas modalidades, o biossimilar é provido como uma composição que compreende adicionalmente um ou mais excipientes, em que o um ou mais excipientes são os mesmos ou diferentes dos excipientes compreendidos no produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é 36E5, 3D6, 61G6, 6H6, 61F6, 1D8, 17F10, 35D8, 49A1, 9E5, e 31H6. Em algumas modalidades, o biossimilar é provido como uma composição que compreende adicionalmente um ou mais excipientes, em que o um ou mais excipientes são os mesmos ou diferentes dos excipientes compreendidos no produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é 36E5, 3D6, 61G6, 6H6, 61F6, 1D8, 17F10, 35D8, 49A1, 9E5, e 31H6.
TABELA 21. As sequências de aminoácidos para anticorpos agonistas de GITR relacionados com os agonistas de GITR descritos na Publicação do Pedido de Patente Internacional No. WO 2011/028683 AL | Identificador | Sequência (Símbolos de aminoácido de uma letra) ]
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| Identificador | Sequência (Símbolos de aminoácido de uma letra) |
| SEQ ID NO: 164 região variável da cadeia pesada de 36E5 | EVNLVESGGG LVKPGGSLKV SCAASGFTFS SYAMSWVRQT PEKRLEWVAS ISSGGTTYYP 60 DSVKGRFTIS RDNARNILYL QMSSLRSEDT AMYYCARVGG YYDSMDYWGQ GISVTDSS 118 |
| SEQ ID NO: 165 região variável da cadeia leve de 36E5 | DIVLTQSPAS LAVSLGQRAT ISCRASESVD NYGVSFMNWF QQKPGQPPKL LIYAASNQGS 60 GVPARFSGSG SGTDFSLNIH PMEEDDTAMY FCQQTKEVTW TFGGGTKLEI KRA 113 |
| SEQ ID NO: 166 região variável da cadeia pesada de 3D6 | EVQLVESGGG LVQPGRSLKL SCAASGFTFS DYYMAWVRQA PTKGLEWVAY IHANGGSTYY 60 RDSVRGRFSI SRDNGKSTLY LQMDSLRSED TATYYCTTGS FMYAADYYIM DAWGQGASVT 120 VSS 123 |
| SEQ ID NO: 167 região variável da cadeia leve de 3D6 | DVVMTQTPVS LSVSLGNQAS ISCRSSQSLL HSDGNTFLSW YFQKPGQSPQ LLIYLASNRF 60 SGVSNRFSGS GSGTDFTLKI SRVEPEDLGV YYCFQHTHLP LTFGSGTKLE IKR 113 |
| SEQ ID NO: 168 região variável da cadeia pesada de 61G6 | DVQLQESGPG LVKPSQSLSL TCTVTGYSIT SDYAWNWIRQ FPGNKLEWMG YISYSGSTRY 60 NPSLKSRISI TRDTSKNQFF LQLNSVTSED TATYYCARQL GLRFFDYWGQ GTTLTVSS 118 |
| SEQ ID NO: 169 região variável da cadeia leve de 61G6 | QIVLTQSPAL MSASPGEKVT MTCSANSTVN YMYWYQQKPR SSPKPCIYLT SNLASGVPAR 60 FSGSGSGTSY SLTISSMEAE DAATYYCQQW NSNPPTFGAG TKLELRRA 108 |
| SEQ ID NO: 170 região variável da cadeia pesada de 6H6 | QVQLQQSGAE LMKPGASVKI SCKATGYTFS RYWIEWIKQR PGHGLEWIGE ILPGSGSSNY 60 NEKFKDKATF TADTSSNTAY MQFSSLTSED SAVYYCARKV YYYAMDFWGQ GTSVTVSS 118 |
| SEQ ID NO: 171 região variável da cadeia leve de 6H6 | QIVLTQSPAI MSVSLGERVT VTCTASSSVS SSYFHWYQQK PGSSPKLWIY STSNLASGVP 60 ARFSGSGSGT SYSLTISTME AEDAATYYCH QYHRSPRTFG GGTKLEIKRA 110 |
| SEQ ID NO: 172 região variável da cadeia pesada de 61F6 | QVQLQQSGAE LARPGASVKM SCKASGYTFT SYTMHWVKQR PGQGLEWIGY INPRSVYTNY 60 NQKFKDKATL TADKSSSTAY MQLSSLTSED SAVYYCARLG GYYDTMDYWG QGTSVTVSS 119 |
| SEQ ID NO: 173 região variável da cadeia leve de 61F6 | DIVVTQSPAS LAVSLGQRAT ISCRASESVD NYGISFMNWF QQKPGQPPKL LIYAASNQGS 60 GVPARFSGSG SGTDFSLNIH PMEEDDTAVY FCQQSKEVPF TFGSGTKLEI KRA 113 |
| SEQ ID NO: 174 região variável da cadeia pesada de 1D8 | QVTLKESGPG ILKPSQTLSL TCSFSGFSLS TSGMGVGWIR QPSGKGLEWL AHIWWDDDKY 60 YSPSLKSQLT ISKDTSRNQV FLKITSLDTA DTATYYCVRS YYYGSSGAMD YWGQGTSVTV 120 SS 122 |
| SEQ ID NO: 175 região variável da cadeia leve de 1D8 | DIVMTQTPLS LPVSLGDQAS ISCRSSQSLV HSDGNTYLHW YLQKPGQSPK LLIYKVSKRF 60 SGVPDRFSGS GSGTDFTLKI SRVEAEDLGV YFCSQSTHVP PTFGGGTKLE IKRADAAP 118 |
| SEQ ID NO: 176 região variável da cadeia pesada de 17F10 | EVKLVESGGG FVKPGGSLKL SCAASGFTVR NYAMSWVRQT PEKRLEWVAS ISTGDRSYLP 60 DSMKGRFTIS RDNARNILYL QMSSLRSEDT AIYYCQRYFD FDSFAFWGQG TLVTVSA 117 |
| SEQ ID NO: 177 região variável da cadeia leve de 17F10 | DIQMTQTPSS LSASLGDRVT ISCRASQDIN NFLNWYQQKP DGSLKLLIYY TSKLHSGVPS 60 RFSGSGSGTD FSLTISNLDQ EDVATYFCQQ GHTLPPTFGG GTKLEVKRAD AAP 113 |
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| Identificador | Sequência (Símbolos de aminoácido de uma letra) |
| SEQ ID NO: 178 região variável da cadeia pesada de 35D8 | EVQLQESGPS LVKPSQTLSL TCSVTGDSIT SGYWNWIRKF PGNKLEYMGY ISYSGSTYYN 60 PSLRGRISIT RDTSKSQYYL QLSSVTTEDT ATYYCSRRHL GSGYGWFAYW GQGTLVTVSA 120 |
| SEQ ID NO: 179 região variável da cadeia leve de 35D8 | DIVMTQSHKF MSTSVGDRVS ITCKASQDVN TAVAWYQQKP GQSPKLLIYW ASTRHTGVPD 60 RFTGSGSGTD YALTINSVQA EDLALYYCQQ HSYTPPWTFG GGTKLEIRRA D A AP 114 |
| SEQ ID NO: 180 região variável da cadeia pesada de 49 Al | EVQLQESGPS LVKPSQTLSL TCSVTGDSIT SGYWNWIRKF PGNKFEYMGF ISYSGNTYYN 60 PSLRSRISIT RDTSKNQYFL HLNSVTTEDT ATYYCSRRHL ISGYGWFAYW GQGTLVTVSA 120 |
| SEQ ID NO: 181 região variável da cadeia leve de 49 Al | VIVMTQSHKF MSTSIGDRVN ITCKASQDVI SAVAWYQQKP GQSPKLLIYW ASTRHTGVPD 60 RFTGSGSGTD FTLTINSVQA EDRALYYCQQ HSYTPPWTFG GGTNLEIKRA D A AP 114 |
| SEQ ID NO: 182 região variável da cadeia pesada de 9E5 | QVTLKESGPG ILQPSQTLSL TCTFSGFSLS TYGVGVGWIR QPSGKGLEWL ANIWWDDDNY 60 YNPSLIHRLT VSKDTSNNQA FLKITNVDTA ETATYYCAQI KEPRDWFFEF WGPGTMVSVS 120 S 121 |
| SEQ ID NO: 183 região variável da cadeia leve de 9E5 | DIQMTQTPSS MPASLGERVT IFCRASQGVN NFLTWYQQKP DGTIKPLIFY TSNLQSGVPS 60 RFSGSGSGTD YSLSISSLEP EDFAMYYCQQ YHGFPNTFGA GTKLELKRAD AAP 113 |
| SEQ ID NO: 184 região variável da cadeia pesada de 31H6 | QVTLKESGPG ILQPSQTLSL TCTFSGFSLS TYGVGVGWIR QPSGKGLEWL ANIWWDDDKY 60 YNPSLKNRLT ISKDTSNNQA FLKITNVDTA ETATYYCAQI KEPRDWFFEF WGPGTMVSVS 120 S 121 |
| SEQ ID NO: 185 região variável da cadeia leve de 31H6 | DIQMTQTPSS MPASLGERVT IFCRASQGVN NYLTWYQQKP DGTIKPLIFY TSNLQSGVPS 60 RFSGSGSGTD YSLSISSLEP EDFAMYYCQQ YHGFPNTFGA GTKLELKRAD AAP 113 |
| SEQ ID NO: 186 região variável da cadeia pesada de 36E5 humanizada | QVQLVESGGG VVQPGRSLRL SCAASGFTFS SYAMSWVRQA PGKGLEWVAS ISSGGTTYYP 60 DSVKGRFTIS RDNSKNTLYL QMNSLRAEDT AVYYCARVGG YYDSMDYWGQ GTLVTVSS 118 |
| SEQ ID NO: 187 região variável da cadeia leve de 36E5 humanizada | EIVLTQSPGT LSLSPGERAT LSCRASESVD XYGVSFMNWY QQKPGQAPRL LIYAASXQGS 60 GIPDRFSGSG SGTDFTLTIS RLEPEDFAVY YCQQTKEVTW TFGQGTKVEI KR 112 |
| SEQ ID NO: 188 região variável da cadeia pesada de 3D6 humanizada | QVQLVESGGG VVQPGRSLRL SCAASGFTFS DYYMAWVRQA PGKGLEWVAY IHANGGSTYY 60 RDSVRGRFTI SRDNSKNTLY LQMNSLRAED TAVYYCXXGS FMYAADYYIM DAWGQGTLVT 120 VSS 123 |
| SEQ ID NO: 189 região variável da cadeia leve de 3D6 humanizada | DIVMTQSPLS LPVTPGEPAS ISCRSSQSLL HSDGNTFLSW YLQKPGQSPQ LLIYLASNRF 60 SGVPDRFSGS GSGTDFTLKI SRVEAEDVGV YYCFQHTHLP LTFGQGTKVE IKR 113 |
| SEQ ID NO: 190 61G6 região variável da cadeia pesada humanizada | QVQLQESGPG LVKPSETLSL TCTVSGYSIT SDYAWNWIRQ PPGKGLEWXG YISYSGSTRY 60 NPSLKSRXTI SXDTSKNQFS LKLSSVTAAD TAVYYCARQL GLRFFDYWGQ GTLVTVSS 118 |
| SEQ ID NO: 191 região variável da cadeia leve de 61G6 humanizada | EIVLTQSPGT LSLSPGERAT LSCSANSTVN YMYWYQQKPG QAPRXXIYLT SNLASGIPDR 60 FSGSGSGTDF TLTISRLEPE DFAVYYCQQW NSNPPTFGQG TKVEIKR 107 |
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| Identificador | Sequência (Símbolos de aminoácido de uma letra) |
| SEQ ID NO: 192 região variável da cadeia pesada de 6H6 humanizada | QVQLVQSGAE VKKPGASVKV SCKASGYTFS RYWIEWVRQA PGQGLEWXGE ILPGSGSSNY 60 NEKFKDRXTX TXDTSTSTAY MELRSLRSDD TAVYYCARKV YYYAMDFWGQ GTLVTVSS 118 |
| SEQ ID NO: 193 região variável da cadeia leve de 6H6 humanizada | EIVLTQSPGT LSLSPGERAT LSCTASSSVS SSYFHWYQQK PGQAPRLXIY STSNLASGIP 60 DRFSGSGSGT DXTLTISRLE PEDFAVYYCH QYHRSPRTFG QGTKVEIKR 109 |
| SEQ ID NO: 194 região variável da cadeia pesada de 61F6 humanizada | QVQLVQSGAE VKKPGASVKV SCKASGYTFT SYTMHWVRQA PGQGLEWXGY INPRSVYTNY 60 NQKFKDRXTX TXDXSTSTAY MELRSLRSDD TAVYYCARLG GYYDTMDYWG QGTLVTVSS 119 |
| SEQ ID NO: 195 região variável da cadeia leve de 61F6 humanizada | DIQMTQSPSS LSASVGDRVT ITCRASESVD NYGISFMNWY QQKPGKAPKL LIYAASNQGS 60 GVPSRFSGSG SGTDFTLTIS SLQPEDFATY YCQQSKEVPF TFGQGTKVEI KR 112 |
| SEQ ID NO: 196 região variável da cadeia pesada de 1D8 humanizada | QVQLVESGGG VVQPGRSLRL SCAXSGFSLS TSGMGVGWVR QAPGKGLEWV AHIWWDDDKY 60 YSPSLKSRXT ISXDXSKNTX YLQMNSLRAE DTAVYYCXRS YYYGSSGAMD YWGQGTLVTV 120 SS 122 |
| SEQ ID NO: 197 região variável da cadeia leve de 1D8 humanizada | DIVMTQSPLS LPVTPGEPAS ISCRSSQSLV HSDGNTYLHW YLQKPGQSPQ LLIYKVSKRF 60 SGVPDRFSGS GSGTDFTLKI SRVEAEDVGV YYCSQSTHVP PTFGQGTKVE IKR 113 |
| SEQ ID NO: 198 região variável da cadeia pesada de 17F10 humanizada | QVQLVESGGG VVQPGRSLRL SCAASGFTVR NYAMSWVRQA PGKGLEWVAS ISTGDRSYLP 60 DSMKGRFTIS RDNSKNTLYL QMNSLRAEDT AVYYCXRYFD FDSFAFWGQG TLVTVSS 117 |
| SEQ ID NO: 199 região variável da cadeia leve de 17F10 humanizada | DIQMTQSPSS LSASVGDRVT ITCRASQDIN NFLNWYQQKP GKAPKLLIYY TSKLHSGVPS 60 RFSGSGSGTD FTLTISSLQP EDFATYYCQQ GHTLPPTFGQ GTKVEIKR 108 |
| SEQ ID NO: 200 região variável da cadeia pesada de 35D8 humanizada | QVQLQESGPG LVKPSETLSL TCTVSGDSIT SGYWNWIRQP PGKGLEXXGY ISYSGSTYYN 60 PSLRGRVTIS XDTSKNQFSL KLSSVTAADT AVYYCXRRHL GSGYGWFAYW GQGTLVTVSS 120 |
| SEQ ID NO: 201 região variável da cadeia leve de 35D8 humanizada | DIVMTQSPDS LAVSLGERAT INCKASQDVN TAVAWYQQKP GQPPKLLIYW ASTRHTGVPD 60 RFSGSGSGTD XTLTISSLQA EDVAVYYCQQ HSYTPPWTFG QGTKVEIKR 109 |
| SEQ ID NO: 202 região variável da cadeia pesada de 49Al humanizada | QVQLQESGPG LVKPSETLSL TCTVSGDSIT SGYWNWIRQP PGKGLEXXGF ISYSGNTYYN 60 PSLRSRXTIS XDTSKNQXSL KLSSVTAADT AVYYCXRRHL ISGYGWFAYW GQGTLVTVSS 120 |
| SEQ ID NO: 203 região variável da cadeia leve de 49Al humanizada | XIVMTQSPDS LAVSLGERAT INCKASQDVI SAVAWYQQKP GQPPKLLIYW ASTRHTGVPD 60 RFSGSGSGTD FTLTISSLQA EDVAVYYCQQ HSYTPPWTFG QGTKVEIKR 109 |
| SEQ ID NO: 204 região variável da cadeia pesada de 9E5 humanizada | QVQLQESGPG LVKPSETLSL TCTXSGFSLS TYGVGVGWIR QPPGKGLEWX XNIWWDDDNY 60 YNPSLIHRXT XSXDTSKNQX SLKLSSVTAA DTAVYYCAXI KEPRDWFFEF WGQGTLVTVS 120 S 121 |
| SEQ ID NO: 205 região variável da cadeia leve de 9E5 humanizada | DIQMTQSPSS LSASVGDRVT ITCRASQGVN NFLTWYQQKP GKAPKXLIXY TSNLQSGVPS 60 RFSGSGSGTD XTLTISSLQP EDFATYYCQQ YHGFPNTFGQ GTKVEIKR 108 |
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| Identificador | Sequência (Símbolos de aminoácido de uma letra) |
| SEQ ID NO: 206 região variável da cadeia pesada de 31H6 humanizada | QVQLQESGPG LVKPSETLSL TCTXSGFSLS TYGVGVGWIR QPPGKGLEWX XNIWWDDDKY 60 YNPSLKNRXT ISXDTSKNQX SLKLSSVTAA DTAVYYCAXI KEPRDWFFEF WGQGTLVTVS 120 S 121 |
| SEQ ID NO: 207 região variável da cadeia leve 31H6 humanizada | DIQMTQSPSS LSASVGDRVT ITCRASQGVN NYLTWYQQKP GKAPKXLIXY TSNLQSGVPS 60 RFSGSGSGTD XTLTISSLQP EDFATYYCQQ YHGFPNTFGQ GTKVEIKR 108 |
[00906] Em uma modalidade, o agonista de GITR é um anticorpo monoclonal agonístico, anti-GITR descrito na Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2013/0108641 Al (Sanofi SA) e Publicação do Pedido de Patente Internacional No. WO 2011/028683 Al (Sanofi SA), as divulgações das quais são aqui incorporadas por referência. Em uma modalidade, uma molécula de ligação de GITR inclui anticorpos monoclonais e variantes e fragmentos dos mesmos, incluindo anticorpos recombinantes humanizados e quiméricos, que ligam GITR humano, compreendendo um domínio variável de cadeia pesada (VH) selecionado a partir do grupo que consiste da SEQ ID NO: 208, SEQ ID NO: 210, SEQ ID NO: 211, SEQ ID NO: 212, SEQ ID NO: 213, SEQ ID NO: 214, SEQ ID NO: 219, SEQ ID NO: 221, SEQ ID NO: 223, e SEQ ID NO: 225, e um domínio variável de cadeia leve (VL) selecionado a partir do grupo que consiste da SEQ ID NO: 209, SEQ ID NO: 215, SEQ ID NO: 216, SEQ ID NO: 217, SEQ ID NO: 218, SEQ ID NO: 220, SEQ ID NO: 222, SEQ ID NO: 224, e SEQ ID NO: 226 (Tabela 22). Em uma modalidade, a molécula de ligação de GITR é um anticorpo monoclonal agonístico, anti-GITR compreendendo (uma) uma, duas, ou três CDRs de cadeia pesada selecionadas do grupo que consiste da
SEQ ID NO: 227, SEQ ID NO: 228, SEQ ID NO: 229, SEQ ID NO:233,
SEQ ID NO: 234, SEQ ID NO: 235, SEQ ID NO: 240, SEQ ID NO:241,
SEQ ID NO: 242, SEQ ID NO: 243, SEQ ID NO: 244, SEQ ID NO:245,
SEQ ID NO: 249, e substituições de aminoácido conservativas das mesmas, e (b) uma, duas, ou três CDRs de cadeia leve selecionadas do grupo que consiste da SEQ ID NO: 230, SEQ ID NO: 231, SEQ ID NO: 232, SEQ ID
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NO: 236, SEQ ID NO: 237, SEQ ID NO: 238, SEQ ID NO: 239, SEQ ID NO: 246, SEQ ID NO: 247, SEQ ID NO: 248, e substituições de aminoácido conservativas das mesmas (Tabela 22). Em uma modalidade, o agonista de GITR é um anticorpo monoclonal agonístico, anti-GITR selecionado a partir do grupo que consiste em 2155, 698, 706, 827, 1649, e 1718, e fragmentos, derivados, variantes, biossimilares, e combinações dos mesmos.
[00907] Em uma modalidade, o agonista de GITR é um anticorpo monoclonal agonista de GITR biossimilar aprovado pelas autoridades reguladoras de fármaco com referência ao 2155, 698, 706, 827, 1649, e 1718. Em uma modalidade, o anticorpo monoclonal biossimilar compreende um anticorpo GITR compreendendo uma sequência de aminoácidos que tenha pelo menos 97% de identidade de sequência, por exemplo, 97%, 98%, 99% ou 100% de identidade de sequência, com a sequência de aminoácidos do produto medicinal de referência ou produto biológico de referência e que compreende uma ou mais modificações pós-traducionais quando comparado com o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é 2155, 698, 706, 827, 1649, e 1718. Em algumas modalidades, a uma ou mais modificações pós-traducionais são selecionadas de uma ou mais de: glicosilação, oxidação, desamidação, e truncagem. Em algumas modalidades, o biossimilar é um agonista de anticorpo GITR autorizado ou submetido para autorização, em que o agonista de anticorpo GITR é provido em uma formulação que difere das formulações do produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é 2155, 698, 706, 827, 1649, e 1718. O agonista de anticorpo GITR pode ser autorizado por uma autoridade reguladora de fármaco tal como o FDA dos Estados Unidos e/ou o EMA da União Européia. Em algumas modalidades, o biossimilar é provido como uma composição que compreende adicionalmente um ou mais excipientes, em que
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252 / 497 o um ou mais excipientes são os mesmos ou diferentes dos excipientes compreendidos no produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é 2155, 698, 706, 827, 1649, e 1718. Em algumas modalidades, o biossimilar é provido como uma composição que compreende adicionalmente um ou mais excipientes, em que o um ou mais excipientes são os mesmos ou diferentes dos excipientes compreendidos no produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é 2155, 698, 706, 827, 1649, e 1718.
TABELA 22. As sequências de aminoácidos para anticorpos agonistas de GITR relacionados com os agonistas de GITR descritos na Publicação do
Pedido de Patente Internacional No. WO 2011/028683 AL
| Identificador | Sequência (Símbolos de aminoácido de uma letra) |
| SEQ ID NO: 208 cadeia pesada variável de 2155 | EVKLVESGGG LVKPGGSLKL SCGASGFTIS SYAMSWVRQS PEKRLEWVAI ISTGGSTYYP 60 DSVRGRFTIS RDNARNSLYL QMSSLRSEDT AMYYCARVGG YYDSMDHWGQ GTSVTVSS 118 |
| SEQ ID NO: 209 cadeia leve variável de 2155 | DIVLTQSPAS LAVSLGQRAT ISCRASETVD NYGISFMNWF QQKPGQSPKL LIYAASNQGS 60 GVPARFSGSG SGTDFSLNIH PMEEDDTAMY FCQQSKEVPW TFGGGTKLEI K 111 |
| SEQ ID NO: 210 cadeia pesada humanizada de 2155 (HC1) | QVTLVESGGG LVKPGGSLTL SCGASGFTIS SYAMSWVRQS PGKALEWVAI ISTGGSTYYP 60 DSVRGRFTIS RDNAKNSLYL TMSSLDSVDT AMYYCARVGG YYDSMDHWGQ GTSVT 115 |
| SEQ ID NO: 211 cadeia pesada humanizada de 2155 (HC2) | QVTLVESGGG LVKPGGSLTL SCGASGFTIS SYAMSWVRQS PGKALEWVAI ISTGGSTYYP 60 DSVRGRFTIS RDNAKNSLYL TMSSLDSVDT ATYYCARVGG YYDSMDHWGQ GTSVT 115 |
| SEQ ID NO: 212 cadeia pesada humanizada de 2155 (HC3a) | QVTLVESGGG LVKPGGSLTL SCGASGFTIS SYAMSWVRQS PGKALEWVAI ISTGGSTYYP 60 DKFRGRFTIS RDNAKNSLYL TMSSLRSEDT ATYYCARVGG YYDSMDHWGQ GTSVT 115 |
| SEQ ID NO: 213 cadeia pesada humanizada (HC3b) | QVTLKESGGG LVKPGGSLTL SCGASGFTIS SYAMSWVRQS PGKALEWVAI ISTGGSTYYP 60 DKFRGRFTIS RDNAKNSLYL TMSSLRSEDT ATYYCARVGG YYDSMDHWGQ GTSVT 115 |
| SEQ ID NO: 214 cadeia pesada humanizada (HC4) | EVQLVESGGG LIQPGGSLKL SCAASGFTIS SYAMSWVRQA PGKGLEWVAI ISTGGSTYYA 60 DSVKGRFTIS RDNSKNTLYL QMNSLRAEDT AVYYCARVGG YYDSMDHWGQ GTSVT 115 |
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| Identificador | Sequência (Símbolos de aminoácido de uma letra) |
| SEQ ID NO: | DIVLTQSPAS LAASVGDRAT ISCRASETVD NYGISFMNWF QQKPGKSPKL |
| 215 | LIYAASNQGS 60 |
| cadeia leve (LCl)de2155 humanizada | GVPARFSGSG SGTDFSLNIH PMQPDDTATY FCQQSKEVPW TFGGGTKLE 109 |
| SEQ ID NO: | DIVLTQSPAS LSASVGDRAT ISCRASETVD NYGISFMNWF QQKPGQSPKL |
| 216 cadeia leve | LIYAASNQGS 60 |
| (LC2a) de 2155 humanizada | GVPARFSGSG SGTDFSLTIS PMQPDDTATY YCQQSKEVPW TFGGGTKLE 109 |
| SEQ ID NO: | DIVLTQSPAS LSASVGDRAT ISCRASETVD NYGISYMNWF QQKPGQSPKL |
| 217 cadeia leve | LIYAASNQGS 60 |
| (LC2b) de 2155 humanizada | GVPARFSGSG SGTDFSLTIS PMQPDDTATY YCQQSKEVPW TFGGGTKLE 109 |
| SEQ ID NO: | DIVLTQSPAS LAVSPGQRAT ITCRASETVD NYGISFMNWF QQKPGQPPKL |
| 218 cadeia leve | LIYAASNQGS 60 |
| (LC3) de 2155 humanizada | GVPARFSGSG SGTDFTLTIN PVEADDTANY YCQQSKEVPW TFGQGTKVE 109 |
| SEQ ID NO: | EVQLQQSGTV LARPGASVKM SCEASGYSFT TYWMHWIKQR PGQGLEWIGA |
| 219 cadeia | IYPGNSDTGY 60 |
| pesada variável | NQKFKGKAKL TAVTSATTAY MELSSLTDED SAVYYCTRTS TYPHFDYWGQ |
| de 698 | GTTLTVSS 118 |
| SEQ ID NO: | DILLTQSPAI LSVSPGERVS FSCRASQSIG TSIHWYQQRT NGSPRLLIKY |
| 220 cadeia leve | ASESISGIPS 60 |
| variável de 698 | RFSGSGSGTD FTLNINSVES EDIADYYCQQ SNNWPLTFGA GTKLELK 107 |
| SEQ ID NO: | EVQLQQSGTV LARPGASVKM SCEASGYSFT TYWMHWIKQR PGQGLEWIGA |
| 221 cadeia | IYPGNSDTGY 60 |
| pesada variável | NQKFKGKAKL TAVTSASTAY MELSSLTNED SAVYYCTRTS TYPHFDYWGQ |
| de 706 | GTTLTVSS 118 |
| SEQ ID NO: | DILLTQSPAI LSVSPGERVS FSCRASQSIG TSIHWYQQRT NGSPRLLIKY |
| 222 cadeia leve | ASESISGIPS 60 |
| variável de 706 | RFSGSGSGTD FTLNINSVES EDIADYYCQQ TNNWPLTFGA GTKLELK 107 |
| SEQ ID NO: | EVQLQQSGTV LARPGASVKM SCETSGYSFT TYWIHWIKQR PGQGLEWIAT |
| 223 cadeia | IYPGNSDAGY 60 |
| pesada variável | NQKFRGKAKL TAVTSASTAY MELSSLTNED SAVYYCTRSS TYPHFDYWGQ |
| de 827 | GTTLTVSS 118 |
| SEQ ID NO: | DILLTQSPAI LSVSPGERVS FSCRASQSIG TSIHWYQQRT NDSPRLLIKY |
| 224 cadeia leve | ASESISGIPS 60 |
| variável de 827 | RFSGSGSGTD FTLNINSVES EDIADYYCQQ TNNWPLTFGA GTKLELK 107 |
| SEQ ID NO: | QVQVQQSGPE LVKPGASVRI SCKASDYTFT NYYIHWVRQR PGQGLEWLGW |
| 225 da cadeia | IYPGKGYTNY 60 |
| pesada variável | NEKFKGKATL TADKSSSTAY MQFSSLTSED SAVYFCASGY GNYYFPYWGQ |
| de 1718 | GTLVTVSA 118 |
| SEQ ID NO: | IQMTQSSSYL SVSLGGRVTI TCKASDHIKN WLAWYQQKPG NVPRLLMSAA |
| 226 cadeia leve | TSLETGFPSR 60 |
| variável de 1718 | FSGSGSGKDF TLTITSLQTE DVATYYCQQY WSTPWTFGGG TKLEIK 106 |
| SEQ ID NO: 227 CDR3 da cadeia pesada de 2155 | VGGYYDSMDH 10 |
| SEQ ID NO: 228 CDR2 da cadeia pesada de 2155 | IISTGGSTY 9 |
| SEQ ID NO: 229 CDR1 da cadeia pesada de 2155 | GFTISSYAMS 10 |
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| Identificador | Sequência (Símbolos de aminoácido de uma letra) |
| SEQ ID NO: 230 CDR3 da cadeia leve de 2155 | QQSKEVPWT 9 |
| SEQ ID NO: 231 CDR2 da cadeia leve de 2155 | AASNQGS 7 |
| SEQ ID NO: 232 CDR1 da cadeia leve de 2155 | RASETVDNYG ISFMN 15 |
| SEQ ID NO: 233 CDR3 da cadeia pesada de 698 e 706 | TSTYPHFDY 9 |
| SEQ ID NO: 234 CDR2 da cadeia pesada de 698 e 706 | AIYPGNSDTG 10 |
| SEQ ID NO: 235 CDR1 da cadeia pesada de 698 e 706 | GYSFTTYWMH 10 |
| SEQ ID NO: 236 CDR3 da cadeia leve de 698 | QQSNNWPLT 9 |
| SEQ ID NO: 237 CDR2 da cadeia leve de 698, 706, 827, e 1649 | KYASESIS 8 |
| SEQ ID NO: 238 CDR1 da cadeia leve de 698, 706, 827, e 1649 | RASQSIGTSIH 11 |
| SEQ ID NO: 239 CDR3 da cadeia leve de 706, 827, e 1649 | QQTNNWPLT 9 |
| SEQ ID NO: 240 CDR3 da cadeia pesada de 827 e 1649 | SSTYPHFDY 9 |
| SEQ ID NO: 241 CDR2 da cadeia pesada de 827 | TIYPGNSDAG 10 |
| SEQ ID NO: 242 CDR2 da cadeia pesada de 1649 | AIYPGNSDAG 10 |
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| Identificador | Sequência (Símbolos de aminoácido de uma letra) |
| SEQ ID NO: 243 CDR3 da cadeia pesada de 1718 | GYGNYYFPY 9 |
| SEQ ID NO: 244 CDR2 da cadeia pesada de 1718 | WIYPGKGYTN 10 |
| SEQ ID NO: 245 CDR1 da cadeia pesada de 1718 | DYTFTNYYI 9 |
| SEQ ID NO: 246 CDR3 da cadeia leve de 1718 | QQTWSTPWT 9 |
| SEQ ID NO: 247 CDR2 da cadeia leve de 1718 | AATSLET 7 |
| SEQ ID NO: 248 CDR1 da cadeia leve de 1718 | KASDHIKNWLUM 11 |
| SEQ ID NO: 249 CDR1 da cadeia pesada de 827 e 1649 | GYSFTTYWIH 10 |
[00908] Em uma modalidade preferida, o agonista de GITR é o anticorpo monoclonal 1D7, ou um fragmento, derivado, variante, ou biossimilar dos mesmos. 1D7 está disponível da Amgen, Inc. A preparação e propriedades de 1D7 estão descritas na Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al, as divulgações das quais são aqui incorporadas por referência. As sequências de aminoácido de 1D7 são apresentadas na Tabela
23.
[00909] Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende uma cadeia pesada dada pela SEQ ID NO: 250 e uma cadeia leve dada pela SEQ ID NO: 251. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende cadeias pesadas e leves tendo as sequências mostradas na SEQ ID NO: 250 e SEQ ID NO: 251, respectivamente, ou fragmentos de ligação a antígeno, fragmentos Fab, fragmentos variáveis de cadeia única (scFv), variantes, ou conjugados dos mesmos. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 99% idênticas às sequências
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256/497 mostradas na SEQ ID NO: 250 e SEQ ID NO: 251, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 98% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 250 e SEQ ID NO: 251, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 97% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 250 e SEQ ID NO: 251, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 96% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 250 e SEQ ID NO: 251, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 95% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 250 e SEQ ID NO: 251, respectivamente.
[00910] Em uma modalidade, o agonista de GITR compreende as CDRs ou regiões variáveis (VRs) de cadeia pesada e leve de 1D7. Em uma modalidade, a região variável da cadeia pesada (VH) do agonista de GITR compreende a sequência mostrada na SEQ ID NO: 252, e a região variável da cadeia leve (VL) do agonista de GITR compreende a sequência mostrada na SEQ ID NO: 253, e substituições de aminoácido conservativas das mesmas. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 99% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 252 e SEQ ID NO: 253, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 98% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 252 e SEQ ID NO: 253, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 97% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 252 e SEQ ID NO: 253, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 96% idênticas às sequências
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257 / 497 mostradas na SEQ ID NO: 252 e SEQ ID NO: 253, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 95% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 252 e SEQ ID NO: 253, respectivamente.
[00911] Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende os domínios CDR1, CDR2 e CDR3 da cadeia pesada tendo as sequências apresentadas na SEQ ID NO: 254, SEQ ID NO: 255, e SEQ ID NO: 256, respectivamente, e substituições de aminoácido conservativas das mesmas, e os domínios CDR1, CDR2 e CDR3 da cadeia leve tendo as sequências apresentadas na SEQ ID NO: 257, SEQ ID NO: 258, e SEQ ID NO: 259, respectivamente, e substituições de aminoácido conservativas das mesmas.
[00912] Em uma modalidade, o agonista de GITR é um anticorpo monoclonal agonista de GITR biossimilar aprovado pelas autoridades reguladoras de fármaco com referência ao 1D7. Em uma modalidade, o anticorpo monoclonal biossimilar compreende um anticorpo GITR compreendendo uma sequência de aminoácidos que tenha pelo menos 97 % de identidade de sequência, por exemplo, 97%, 98%, 99% ou 100% de identidade de sequência, com a sequência de aminoácidos do produto medicinal de referência ou produto biológico de referência e que compreende uma ou mais modificações pós-traducionais quando comparado com o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é 1D7. Em algumas modalidades, a uma ou mais modificações pós-traducionais são selecionadas de uma ou mais de: glicosilação, oxidação, desamidação, e truncagem. Em algumas modalidades, o biossimilar é um agonista de anticorpo GITR autorizado ou submetido para autorização, em que o agonista de anticorpo GITR é provido em uma formulação que difere das formulações do produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é
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1D7. 0 agonista de anticorpo GITR pode ser autorizado por uma autoridade reguladora de fármaco tal como o FDA dos Estados Unidos e/ou o EMA da União Européia. Em algumas modalidades, o biossimilar é provido como uma composição que compreende adicionalmente um ou mais excipientes, em que o um ou mais excipientes são os mesmos ou diferentes dos excipientes compreendidos no produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é 1D7. Em algumas modalidades, o biossimilar é provido como uma composição que compreende adicionalmente um ou mais excipientes, em que o um ou mais excipientes são os mesmos ou diferentes dos excipientes compreendidos no produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é 1D7.
TABELA 23. As sequências de aminoácidos para anticorpos agonistas de
GITR relacionados com o 1D7.
| Identificador | Sequência (Símbolos de aminoácido de uma letra) |
| SEQ ID NO: 250 | QVQLVESGGG VVQPGRSLRL SCAASGFTFS SYGMHWVRQA PGKGLEWVTV |
| cadeia pesada de | IWYEGSNKYY 60 |
| 1D7 | ADSVKGRFTI SRDNSKNTLY LQMNSLRAED TAVYYCARGG QLGKYYYYGM DVWGQGTTVT 120 VSSASTKGPS VFPLAPSSKS TSGGTAALGC LVKDYFPEPV TVSWNSGALT SGVHTFPAVL 180 QSSGLYSLSS VVTVPSSSLG TQTYICNVNH KPSNTKVDKR VEPKSCDKTH TCPPCPAPEL 240 LGGPSVFLFP PKPKDTLMIS RTPEVTCVVV DVSHEDPEVK FNWYVDGVEV HNAKTKPREE 300 QYNSTYRVVS VLTVLHQDWL NGKEYKCKVS NKALPAPIEK TISKAKGQPR EPQVYTLPPS 360 REEMTKNQVS LTCLVKGFYP SDIAVEWESN GQPENNYKTT PPVLDSDGSF FLYSKLTVDK 420 SRWQQGNVFS CSVMHEALHN HYTQKSLSLS PGK 453 |
| SEQ ID NO: 251 | DIQMTQSPSS LSASVGDRVT ITCRASQGIR NDLGWYQQKP GKAPKRLIYD |
| cadeia leve de | ASSLQSGVPS 60 |
| 1D7 | RFSGSGSGTE FTLTISSLQP EDFATYYCLQ HNNYPWTFGQ GTKVEIKRTV AAPSVFIFPP 120 SDEQLKSGTA SVVCLLNNFY PREAKVQWKV DNALQSGNSQ ESVTEQDSKD STYSLSSTLT 180 LSKADYEKHK VYACEVTHQG LSSPVTKSFN RGEC 214 |
| SEQ ID NO: 252 | QVQLVESGGG VVQPGRSLRL SCAASGFTFS SYGMHWVRQA PGKGLEWVTV |
| cadeia pesada | IWYEGSNKYY 60 |
| variável de 1D7 | ADSVKGRFTI SRDNSKNTLY LQMNSLRAED TAVYYCARGG QLGKYYYYGM DVWGQGTTVT 120 VSS 123 |
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| Identificador | Sequência (Símbolos de aminoácido de uma letra) |
| SEQ ID NO: 253 cadeia leve variável de 1D7 | DIQMTQSPSS LSASVGDRVT ITCRASQGIR NDLGWYQQKP GKAPKRLIYD ASSLQSGVPS 60 RFSGSGSGTE FTLTISSLQP EDFATYYCLQ HNNYPWTFGQ GTKVEIKR 108 |
| SEQ ID NO: 254 CDR1 da cadeia pesada de 1D7 | SYGMH 5 |
| SEQ ID NO: 255 CDR2 da cadeia pesada de 1D7 | VIWYEGSNKY YADSVKG 17 |
| SEQ ID NO: 256 CDR3 da cadeia pesada de 1D7 | GGQLGKYYYY GMDV 14 |
| SEQ ID NO: 257 CDR1 da cadeia leve de 1D7 | RASQGIRNDLG 11 |
| SEQ ID NO: 258 CDR2 da cadeia leve de 1D7 | DASSLQS 7 |
| SEQ ID NO: 259 CDR3 da cadeia leve de 1D7 | LQHNNYPWT 9 |
[00913] Em uma modalidade preferida, o agonista de GITR é o anticorpo monoclonal 33C9, ou um fragmento, derivado, variante, ou biossimilar dos mesmos. 33C9 está disponível da Amgen, Inc. A preparação e propriedades de 33C9 estão descritas na Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al, as divulgações da qual são aqui incorporadas por referência. As sequências de aminoácido de 33C9 são apresentadas na Tabela
24.
[00914] Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende uma cadeia pesada dada pela SEQ ID NO: 260 e uma cadeia leve dada pela SEQ ID NO: 261. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende cadeias pesadas e leves tendo as sequências mostradas na SEQ ID NO: 260 e SEQ ID NO: 261, respectivamente, ou fragmentos de ligação a antígeno, fragmentos Fab, fragmentos variáveis de cadeia única (scFv), variantes, ou conjugados dos mesmos. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 99% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 260 e SEQ ID NO: 261, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 98% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 260 e SEQ ID NO: 261, respectivamente. Em uma modalidade, um
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260/497 agonista de GITR compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 97% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 260 e SEQ ID NO: 261, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 96% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 260 e SEQ ID NO: 261, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 95% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 260 e SEQ ID NO: 261, respectivamente.
[00915] Em uma modalidade, o agonista de GITR compreende as CDRs ou regiões variáveis (VRs) de cadeia pesada e leve de 1D7. Em uma modalidade, a região variável da cadeia pesada (VH) do agonista de GITR compreende a sequência mostrada na SEQ ID NO: 262, e a região variável da cadeia leve (VL) do agonista de GITR compreende a sequência mostrada na SEQ ID NO: 263, e substituições de aminoácido conservativas das mesmas. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 99% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 262 e SEQ ID NO: 263, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 98% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 262 e SEQ ID NO: 263, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 97% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 262 e SEQ ID NO: 263, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 96% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 262 e SEQ ID NO: 263, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 95% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 262 e SEQ ID NO: 263, respectivamente.
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261 /497 [00916] Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende os domínios CDR1, CDR2 e CDR3 da cadeia pesada tendo as sequências apresentadas na SEQ ID NO: 264, SEQ ID NO: 265, e SEQ ID NO: 266, respectivamente, e substituições de aminoácido conservativas das mesmas, e os domínios CDR1, CDR2 e CDR3 da cadeia leve tendo as sequências apresentadas na SEQ ID NO: 267, SEQ ID NO: 268, e SEQ ID NO: 269, respectivamente, e substituições de aminoácido conservativas das mesmas.
[00917] Em uma modalidade, o agonista de GITR é um anticorpo monoclonal agonista de GITR biossimilar aprovado pelas autoridades reguladoras de fármaco com referência ao 33C9. Em uma modalidade, o anticorpo monoclonal biossimilar compreende um anticorpo GITR compreendendo uma sequência de aminoácidos que tenha pelo menos 97 % de identidade de sequência, por exemplo, 97%, 98%, 99% ou 100% de identidade de sequência, com a sequência de aminoácidos do produto medicinal de referência ou produto biológico de referência e que compreende uma ou mais modificações pós-traducionais quando comparado com o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é 33C9. Em algumas modalidades, a uma ou mais modificações pós-traducionais são selecionadas de uma ou mais de: glicosilação, oxidação, desamidação, e truncagem. Em algumas modalidades, o biossimilar é um agonista de anticorpo GITR autorizado ou submetido para autorização, em que o agonista de anticorpo GITR é provido em uma formulação que difere das formulações do produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é 33C9. O agonista de anticorpo GITR pode ser autorizado por uma autoridade reguladora de fármaco tal como o FDA dos Estados Unidos e/ou o EMA da União Européia. Em algumas modalidades, o biossimilar é provido como uma composição que compreende adicionalmente um ou mais excipientes, em que
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262 / 497 o um ou mais excipientes são os mesmos ou diferentes dos excipientes compreendidos no produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é 33C9. Em algumas modalidades, o biossimilar é provido como uma composição que compreende adicionalmente um ou mais excipientes, em que o um ou mais excipientes são os mesmos ou diferentes dos excipientes compreendidos no produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é 33C9.
[00918] TABELA 24. As sequências de aminoácidos para anticorpos agonistas de GITR relacionados com o 33C9.
| Identificador | Sequência (Símbolos de aminoácido de uma letra) |
| SEQ ID NO: 260 cadeia pesada de 33C9 | QVQVVESGGG VVQPGRSLRL SCAASGFTFS SYGMHWVRQA PGKGLEWVSV IWYEGSNKYY 60 ADSVKGRFTI SRDNSKNTLY LQMNSLRAED TAVYYCARGG LLGYYYYYGM DVWGQGTTVT 120 VSSASTKGPS VFPLAPSSKS TSGGTAALGC LVKDYFPEPV TVSWNSGALT SGVHTFPAVL 180 QSSGLYSLSS VVTVPSSSLG TQTYICNVNH KPSNTKVDKK VEPKSCDKTH TCPPCPAPEL 240 LGGPSVFLFP PKPKDTLMIS RTPEVTCVVV DVSHEDPEVK FNWYVDGVEV HNAKTKPREE 300 QYNSTYRVVS VLTVLHQDWL NGKEYKCKVS NKALPAPIEK TISKAKGQPR EPQVYTLPPS 360 REEMTKNQVS LTCLVKGFYP SDIAVEWESN GQPENNYKTT PPVLDSDGSF FLYSKLTVDK 420 SRWQQGNVFS CSVMHEALHN HYTQKSLSLS PGK 453 |
| SEQ ID NO: 261 cadeia leve de 33C9 | DIQMTQSPSS LSASVGDRVT ITCRASQGIR NDLGWYQQKP GKAPKRLIYD ASSLQSGVPS 60 RFSGSGSGTE FTLTISSLQP EDFATYYCLQ HHSYPWTFGQ GTKVEIKRTV AAPSVFIFPP 120 SDEQLKSGTA SVVCLLNNFY PREAKVQWKV DNALQSGNSQ ESVTEQDSKD STYSLSSTLT 180 LSKADYEKHK VYACEVTHQG LSSPVTKSFN RGEC 214 |
| SEQ ID NO: 262 cadeia pesada variável de 33C9 | QVQVVESGGG VVQPGRSLRL SCAASGFTFS SYGMHWVRQA PGKGLEWVSV IWYEGSNKYY 60 ADSVKGRFTI SRDNSKNTLY LQMNSLRAED TAVYYCARGG LLGYYYYYGM DVWGQGTTVT 120 VSS 123 |
| SEQ ID NO: 263 cadeia leve variável de 33C9 | DIQMTQSPSS LSASVGDRVT ITCRASQGIR NDLGWYQQKP GKAPKRLIYD ASSLQSGVPS 60 RFSGSGSGTE FTLTISSLQP EDFATYYCLQ HHSYPWTFGQ GTKVEIKR 108 |
| SEQ ID NO: 264 CDR1 da cadeia pesada de 33C9 | SYGMH 5 |
| SEQ ID NO: 265 CDR2 da cadeia pesada de 33C9 | VIWYEGSNKY YADSVKG 17 |
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| Identificador | Sequência (Símbolos de aminoácido de uma letra) |
| SEQ ID NO: 266 CDR3 da cadeia pesada de 33C9 | GGLLGYYYYY GMDV 14 |
| SEQ ID NO: 267 CDR1 da cadeia leve de 33C9 | RASQGIRNDLG 11 |
| SEQ ID NO: 268 CDR2 da cadeia leve de 33C9 | DASSLQS 7 |
| SEQ ID NO: 269 CDR3 da cadeia leve de 33C9 | LQHHSYPWT 9 |
[00919] Em uma modalidade preferida, o agonista de GITR é o anticorpo monoclonal 33F6, ou um fragmento, derivado, variante, ou biossimilar dos mesmos. 33F6 está disponível da Amgen, Inc. A preparação e propriedades de 33F6 são descritas na Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al, as divulgações das quais são aqui incorporadas por referência. As sequências de aminoácido de 33F6 são apresentadas na Tabela
25.
[00920] Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende uma cadeia pesada dada pela SEQ ID NO: 270 e uma cadeia leve dada pela SEQ ID NO: 271. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende cadeias pesadas e leves tendo as sequências mostradas na SEQ ID NO: 270 e SEQ ID NO: 271, respectivamente, ou fragmentos de ligação a antígeno, fragmentos Fab, fragmentos variáveis de cadeia única (scFv), variantes, ou conjugados dos mesmos. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 99% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 270 e SEQ ID NO: 271, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 98% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 270 e SEQ ID NO: 271, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 97% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 270 e SEQ ID NO: 271, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 96%
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264 / 497 idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 270 e SEQ ID NO: 271, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 95% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 270 e SEQ ID NO: 271, respectivamente.
[00921] Em uma modalidade, o agonista de GITR compreende as CDRs ou regiões variáveis (VRs) de cadeia pesada e leve de 33F6. Em uma modalidade, a região variável da cadeia pesada (VH) do agonista de GITR compreende a sequência mostrada na SEQ ID NO: 272, e a região variável da cadeia leve (VL) do agonista de GITR compreende a sequência mostrada na SEQ ID NO: 273, e substituições de aminoácido conservativas das mesmas. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 99% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 272 e SEQ ID NO: 273, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 98% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 272 e SEQ ID NO: 273, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 97% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 272 e SEQ ID NO: 273, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 96% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 272 e SEQ ID NO: 273, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 95% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 272 e SEQ ID NO: 273, respectivamente.
[00922] Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende os domínios CDR1, CDR2 e CDR3 da cadeia pesada tendo as sequências apresentadas na SEQ ID NO: 274, SEQ ID NO: 275, e SEQ ID NO: 276, respectivamente, e substituições de aminoácido conservativas das mesmas, e
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265/497 os domínios CDR1, CDR2 e CDR3 da cadeia leve tendo as sequências apresentadas na SEQ ID NO: 277, SEQ ID NO: 278, e SEQ ID NO: 279, respectivamente, e substituições de aminoácido conservativas das mesmas. [00923] Em uma modalidade, o agonista de GITR é um anticorpo monoclonal agonista de GITR biossimilar aprovado pelas autoridades reguladoras de fármaco com referência ao 33F6. Em uma modalidade, o anticorpo monoclonal biossimilar compreende um anticorpo GITR compreendendo uma sequência de aminoácidos que tenha pelo menos 97 % de identidade de sequência, por exemplo, 97%, 98%, 99% ou 100% de identidade de sequência, com a sequência de aminoácidos do produto medicinal de referência ou produto biológico de referência e que compreende uma ou mais modificações pós-traducionais quando comparado com o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é 33F6. Em algumas modalidades, a uma ou mais modificações pós-traducionais são selecionada de uma ou mais de: glicosilação, oxidação, desamidação, e truncagem. Em algumas modalidades, o biossimilar é um agonista de anticorpo GITR autorizado ou submetido para autorização, em que o agonista de anticorpo GITR é provido em uma formulação que difere das formulações do produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é 33F6. O agonista de anticorpo GITR pode ser autorizado por uma autoridade reguladora de fármaco tal como o FDA dos Estados Unidos e/ou o EMA da União Européia. Em algumas modalidades, o biossimilar é provido como uma composição que compreende adicionalmente um ou mais excipientes, em que o um ou mais excipientes são os mesmos ou diferentes dos excipientes compreendidos no produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é 33F6. Em algumas modalidades, o biossimilar é provido como
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266/497 uma composição que compreende adicionalmente um ou mais excipientes, em que o um ou mais excipientes são os mesmos ou diferentes dos excipientes compreendidos no produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é 33F6.
TABELA 25. As sequências de aminoácidos para anticorpos agonistas de
GITR relacionados com o 33F6.
| Identificador | Sequência (Símbolos de aminoácido de uma letra) |
| SEQ ID NO: 270 cadeia pesada de 33F6 | QVQLVESGGG VVQPGRSLRL SCAASGFTFS NYGMHWVRQA PGKGLEWVAV IWYVGSNKYY 60 ADSVKGRFTI SRDNSKNTLY LQMNSLRAED TAVYYCARGG ELRLYYYYGM DVWGQGTTVT 120 VSSASTKGPS VFPLAPSSKS TSGGTAALGC LVKDYFPEPV TVSWNSGALT SGVHTFPAVL 180 QSSGLYSLSS VVTVPSSSLG TQTYICNVNH KPSNTKVDKK VEPKSCDKTH TCPPCPAPEL 240 LGGPSVFLFP PKPKDTLMIS RTPEVTCVVV DVSHEDPEVK FNWYVDGVEV HNAKTKPREE 300 QYNSTYRVVS VLTVLHQDWL NGKEYKCKVS NKALPAPIEK TISKAKGQPR EPQVYTLPPS 360 REEMTKNQVS LTCLVKGFYP SDIAVEWESN GQPENNYKTT PPVLDSDGSF FLYSKLTVDK 420 SRWQQGNVFS CSVMHEALHN HYTQKSLSLS PGK 453 |
| SEQ ID NO: 271 cadeia leve de 33F6 | DIQMTQSPSS LSASVGDRVT ITCRASQGIR NDLGWYQQKP GKAPKRLIYA ASSLQSGVPS 60 RFSGSGSGTE FTLTVSSLQP EDFATYYCLQ LNSYPWTFGQ GTKVEIKRTV AAPSVFIFPP 120 SDEQLKSGTA SVVCLLNNFY PREAKVQWKV DNALQSGNSQ ESVTEQDSKD STYSLSSTLT 180 LSKADYEKHK VYACEVTHQG LSSPVTKSFN RGEC 214 |
| SEQ ID NO: 272 cadeia pesada variável de 33F6 | QVQLVESGGG VVQPGRSLRL SCAASGFTFS NYGMHWVRQA PGKGLEWVAV IWYVGSNKYY 60 ADSVKGRFTI SRDNSKNTLY LQMNSLRAED TAVYYCARGG ELRLYYYYGM DVWGQGTTVT 120 VSS 123 |
| SEQ ID NO: 273 cadeia leve variável de 33F6 | DIQMTQSPSS LSASVGDRVT ITCRASQGIR NDLGWYQQKP GKAPKRLIYA ASSLQSGVPS 60 RFSGSGSGTE FTLTVSSLQP EDFATYYCLQ LNSYPWTFGQ GTKVEIKR 108 |
| SEQ ID NO: 274 CDR1 da cadeia pesada de 33F6 | NYGMH 5 |
| SEQ ID NO: 275 CDR2 da cadeia pesada de 33F6 | VIWYVGSNKY YADSVKG 17 |
| SEQ ID NO: 276 CDR3 da cadeia pesada de 33F6 | GGELRLYYYY GMDV 14 |
| SEQ ID NO: 277 CDR1 da cadeia leve de 33F6 | RASQGIRNDL G 11 |
| SEQ ID NO: 278 CDR2 da cadeia leve de 33F6 | AASSLQS 7 |
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| Identificador | Sequência (Símbolos de aminoácido de uma letra) |
| SEQ ID NO: 279 CDR3 da cadeia leve de 33F6 | LQLNSYPWT 9 |
[00924] Em uma modalidade preferida, o agonista de GITR é o anticorpo monoclonal 34G4, ou um fragmento, derivado, variante, ou biossimilar dos mesmos. 34G4 está disponível da Amgen, Inc. A preparação e propriedades de 34G4 estão descritas na Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al, as divulgações das quais são aqui incorporadas por referência. As sequências de aminoácido de 34G4 são apresentadas na Tabela 26.
[00925] Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende uma cadeia pesada dada pela SEQ ID NO: 280 e uma cadeia leve dada pela SEQ ID NO: 281. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende cadeias pesadas e leves tendo as sequências mostradas na SEQ ID NO: 280 e SEQ ID NO: 281, respectivamente, ou fragmentos de ligação a antígeno, fragmentos Fab, fragmentos variáveis de cadeia única (scFv), variantes, ou conjugados dos mesmos. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 99% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 280 e SEQ ID NO: 281, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 98% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 280 e SEQ ID NO: 281, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 97% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 280 e SEQ ID NO: 281, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 96% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 280 e SEQ ID NO: 281, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 95% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 280 e SEQ ID NO: 281,
Petição 870190062710, de 04/07/2019, pág. 280/590
268/497 respectivamente.
[00926] Em uma modalidade, o agonista de GITR compreende as CDRs ou regiões variáveis (VRs) de cadeia pesada e leve de 34G4. Em uma modalidade, a região variável da cadeia pesada (VH) do agonista de GITR compreende a sequência mostrada na SEQ ID NO: 282, e a região variável da cadeia leve (VL) do agonista de GITR compreende a sequência mostrada na SEQ ID NO: 283, e substituições de aminoácido conservativas das mesmas. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 99% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 282 e SEQ ID NO: 283, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 98% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 282 e SEQ ID NO: 283, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 97% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 282 e SEQ ID NO: 283, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 96% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 282 e SEQ ID NO: 283, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 95% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 282 e SEQ ID NO: 283, respectivamente.
[00927] Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende os domínios CDR1, CDR2 e CDR3 da cadeia pesada tendo as sequências apresentadas na SEQ ID NO: 284, SEQ ID NO: 285, e SEQ ID NO: 286, respectivamente, e substituições de aminoácido conservativas das mesmas, e os domínios CDR1, CDR2 e CDR3 da cadeia leve tendo as sequências apresentadas na SEQ ID NO: 287, SEQ ID NO: 288, e SEQ ID NO: 289, respectivamente, e substituições de aminoácido conservativas das mesmas.
[00928] Em uma modalidade, o agonista de GITR é um anticorpo
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269/497 monoclonal agonista de GITR biossimilar aprovado pelas autoridades reguladoras de fármaco com referência ao 34G4. Em uma modalidade, o anticorpo monoclonal biossimilar compreende um anticorpo GITR compreendendo uma sequência de aminoácidos que tenha pelo menos 97 % de identidade de sequência, por exemplo, 97%, 98%, 99% ou 100% de identidade de sequência, com a sequência de aminoácidos do produto medicinal de referência ou produto biológico de referência e que compreende uma ou mais modificações pós-traducionais quando comparado com o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é 34G4. Em algumas modalidades, a uma ou mais modificações pós-traducionais são selecionada de uma ou mais de: glicosilação, oxidação, desamidação, e truncagem. Em algumas modalidades, o biossimilar é um agonista de anticorpo GITR autorizado ou submetido para autorização, em que o agonista de anticorpo GITR é provido em uma formulação que difere das formulações do produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é 34G4. O agonista de anticorpo GITR pode ser autorizado por uma autoridade reguladora de fármaco tal como o FDA dos Estados Unidos e/ou o EMA da União Européia. Em algumas modalidades, o biossimilar é provido como uma composição que compreende adicionalmente um ou mais excipientes, em que o um ou mais excipientes são os mesmos ou diferentes dos excipientes compreendidos no produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é 34G4. Em algumas modalidades, o biossimilar é provido como uma composição que compreende adicionalmente um ou mais excipientes, em que o um ou mais excipientes são os mesmos ou diferentes dos excipientes compreendidos no produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de
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270 / 497 referência é 34G4.
TABELA 26. As sequências de aminoácidos para anticorpos agonistas de
GITR relacionados com o 34G4.
| Identificador | Sequência (Símbolos de aminoácido de uma letra) |
| SEQ ID NO: 280 cadeia pesada de 34G4 | QVQLVESGGG VVQPGRSLRL SCAASGFTFS SYGMHWVRQA PGKGLEWVAV IWYEGSNKYY 60 ADSVKGRFTI SRDNSKNTLY LQMNSLRAED TAVYYCARGG QLGYYYYYGM DVWGQGTTVT 120 VSSASTKGPS VFPLAPSSKS TSGGTAALGC LVKDYFPEPV TVSWNSGALT SGVHTFPAVL 180 QSSGLYSLSS VVTVPSSSLG TQTYICNVNH KPSNTKVDKK VEPKSCDKTH TCPPCPAPEL 240 LGGPSVFLFP PKPKDTLMIS RTPEVTCVVV DVSHEDPEVK FNWYVDGVEV HNAKTKPREE 300 QYNSTYRVVS VLTVLHQDWL NGKEYKCKVS NKALPAPIEK TISKAKGQPR EPQVYTLPPS 360 REEMTKNQVS LTCLVKGFYP SDIAVEWESN GQPENNYKTT PPVLDSDGSF FLYSKLTVDK 420 SRWQQGNVFS CSVMHEALHN HYTQKSLSLS PGK 453 |
| SEQ ID NO: 281 cadeia leve de 34G4 | DIQMTQSPSS LSASVGDRVT ITCRASQGIR NDLGWYQQKP GKAPKRLIYD ASSLQSGVPS 60 RFSGSGSGTD FTLTISSLQP EDFATYYCLQ LNSYPWTFGQ GTKVEIKRTV AAPSVFIFPP 120 SDEQLKSGTA SVVCLLNNFY PREAKVQWKV DNALQSGNSQ ESVTEQDSKD STYSLSSTLT 180 LSKADYEKHK VYACEVTHQG LSSPVTKSFN RGEC 214 |
| SEQ ID NO: 282 cadeia pesada variável de 34G4 | QVQLVESGGG VVQPGRSLRL SCAASGFTFS SYGMHWVRQA PGKGLEWVAV IWYEGSNKYY 60 ADSVKGRFTI SRDNSKNTLY LQMNSLRAED TAVYYCARGG QLGYYYYYGM DVWGQGTTVT 120 VSS 123 |
| SEQ ID NO: 283 cadeia leve variável de 34G4 | DIQMTQSPSS LSASVGDRVT ITCRASQGIR NDLGWYQQKP GKAPKRLIYD ASSLQSGVPS 60 RFSGSGSGTD FTLTISSLQP EDFATYYCLQ LNSYPWTFGQ GTKVEIKR 108 |
| SEQ ID NO: 284 CDR1 da cadeia pesada de 34G4 | SYGMH 5 |
| SEQ ID NO: 285 CDR2 da cadeia pesada de 34G4 | VIWYEGSNKY YADSVKG 17 |
| SEQ ID NO: 286 CDR3 da cadeia pesada de 34G4 | GGQLGYYYYY GMDV 14 |
| SEQ ID NO: 287 CDR1 da cadeia leve de 34G4 | RASQGIRNDL G 11 |
| SEQ ID NO: 288 CDR2 da cadeia leve de 34G4 | DASSLQS 7 |
| SEQ ID NO: 289 CDR3 da cadeia leve de 34G4 | LQLNSYPWT 9 |
[00929] Em uma modalidade preferida, o agonista de GITR é o anticorpo monoclonal 35B10, ou um fragmento, derivado, variante, ou biossimilar dos mesmos. 35B10 está disponível da Amgen, Inc. A preparação
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271 /497 e propriedades de 35B10 estão descritas na Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al, as divulgações das quais são aqui incorporadas por referência. As sequências de aminoácido de 35B10 são apresentadas na Tabela 27.
[00930] Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende uma cadeia pesada dada pela SEQ ID NO: 290 e uma cadeia leve dada pela SEQ ID NO: 291. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende cadeias pesadas e leves tendo as sequências mostradas na SEQ ID NO: 290 e SEQ ID NO: 291, respectivamente, ou fragmentos de ligação a antígeno, fragmentos Fab, fragmentos variáveis de cadeia única (scFv), variantes, ou conjugados dos mesmos. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 99% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 290 e SEQ ID NO: 291, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 98% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 290 e SEQ ID NO: 291, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 97% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 290 e SEQ ID NO: 291, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 96% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 290 e SEQ ID NO: 291, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 95% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 290 e SEQ ID NO: 291, respectivamente.
[00931] Em uma modalidade, o agonista de GITR compreende as CDRs ou regiões variáveis (VRs) de cadeia pesada e leve de 35B10. Em uma modalidade, a região variável da cadeia pesada (VH) do agonista de GITR compreende a sequência mostrada na SEQ ID NO: 292, e a região variável da
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272 / 497 cadeia leve (VL) do agonista de GITR compreende a sequência mostrada na SEQ ID NO: 293, e substituições de aminoácido conservativas das mesmas. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 99% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 292 e SEQ ID NO: 293, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 98% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 292 e SEQ ID NO: 293, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 97% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 292 e SEQ ID NO: 293, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 96% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 292 e SEQ ID NO: 293, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 95% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 292 e SEQ ID NO: 293, respectivamente.
[00932] Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende os domínios CDR1, CDR2 e CDR3 da cadeia pesada tendo as sequências apresentadas na SEQ ID NO: 294, SEQ ID NO: 295, e SEQ ID NO: 296, respectivamente, e substituições de aminoácido conservativas das mesmas, e os domínios CDR1, CDR2 e CDR3 da cadeia leve tendo as sequências apresentadas na SEQ ID NO: 297, SEQ ID NO: 298, e SEQ ID NO: 299, respectivamente, e substituições de aminoácido conservativas das mesmas.
[00933] Em uma modalidade, o agonista de GITR é um anticorpo monoclonal agonista de GITR bios similar aprovado pelas autoridades reguladoras de fármaco com referência ao 35B10. Em uma modalidade, o anticorpo monoclonal biossimilar compreende um anticorpo GITR compreendendo uma sequência de aminoácidos que tenha pelo menos 97 % de identidade de sequência, por exemplo, 97%, 98%, 99% ou 100% de
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273 / 497 identidade de sequência, com a sequência de aminoácidos do produto medicinal de referência ou produto biológico de referência e que compreende uma ou mais modificações pós-traducionais quando comparado com o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é 35B10. Em algumas modalidades, a uma ou mais modificações pós-traducionais são selecionada de uma ou mais de: glicosilação, oxidação, desamidação, e truncagem. Em algumas modalidades, o biossimilar é um agonista de anticorpo GITR autorizado ou submetido para autorização, em que o agonista de anticorpo GITR é provido em uma formulação que difere das formulações do produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é 35B10. O agonista de anticorpo GITR pode ser autorizado por uma autoridade reguladora de fármaco tal como o FDA dos Estados Unidos e/ou o EMA da União Européia. Em algumas modalidades, o biossimilar é provido como uma composição que compreende adicionalmente um ou mais excipientes, em que o um ou mais excipientes são os mesmos ou diferentes dos excipientes compreendidos no produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é 35B10. Em algumas modalidades, o biossimilar é provido como uma composição que compreende adicionalmente um ou mais excipientes, em que o um ou mais excipientes são os mesmos ou diferentes dos excipientes compreendidos no produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é 35B10.
TABELA 27. As sequências de aminoácidos para anticorpos agonistas de GITR relacionados com ο 35B10._____________________________________ | Identificador | Sequência (Símbolos de aminoácido de uma letra) |
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274 / 497
| Identificador | Sequência (Símbolos de aminoácido de uma letra) |
| SEQ ID NO: 290 cadeia pesada de 35B10 | QVQLVESGGG VVQPGRSLRL SCAASGFTFS SYGMHWVRQA PGKGLEWVAV IWYAGSNKYY 60 ADSVKGRFTI SRDNSKNTLY LQMNSLRAED TAVYYCARGG ELSFYYYYGM DVWGQGTTVT 120 VSSASTKGPS VFPLAPSSKS TSGGTAALGC LVKDYFPEPV TVSWNSGALT SGVHTFPAVL 180 QSSGLYSLSS VVTVPSSSLG TQTYICNVNH KPSNTKVDKK VEPKSCDKTH TCPPCPAPEL 240 LGGPSVFLFP PKPKDTLMIS RTPEVTCVVV DVSHEDPEVK FNWYVDGVEV HNAKTKPREE 300 QYNSTYRVVS VLTVLHQDWL NGKEYKCKVS NKALPAPIEK TISKAKGQPR EPQVYTLPPS 360 REEMTKNQVS LTCLVKGFYP SDIAVEWESN GQPENNYKTT PPVLDSDGSF FLYSKLTVDK 420 SRWQQGNVFS CSVMHEALHN HYTQKSLSLS PGK 453 |
| SEQ ID NO: 291 cadeia leve de 35B10 | DIQMTQSPSS LSASVGDRVT ITCRASQGIR NDLGWYQQKP GKAPKRLIYA ASTLQSGVPS 60 RFSGSGSGTE FTLTISSLQP EDFATYYCLQ HNNYPWTFGQ GTKVEIKRTV AAPSVFIFPP 120 SDEQLKSGTA SVVCLLNNFY PREAKVQWKV DNALQSGNSQ ESVTEQDSKD STYSLSSTLT 180 LSKADYEKHK VYACEVTHQG LSSPVTKSFN RGEC 214 |
| SEQ ID NO: 292 cadeia pesada variável de 35B10 | QVQLVESGGG VVQPGRSLRL SCAASGFTFS SYGMHWVRQA PGKGLEWVAV IWYAGSNKYY 60 ADSVKGRFTI SRDNSKNTLY LQMNSLRAED TAVYYCARGG ELSFYYYYGM DVWGQGTTVT 120 VSS 123 |
| SEQ ID NO: 293 cadeia leve variável de 35B10 | DIQMTQSPSS LSASVGDRVT ITCRASQGIR NDLGWYQQKP GKAPKRLIYA ASTLQSGVPS 60 RFSGSGSGTE FTLTISSLQP EDFATYYCLQ HNNYPWTFGQ GTKVEIKR 108 |
| SEQ ID NO: 294 CDR1 da cadeia pesada de 35B10 | SYGMH 5 |
| SEQ ID NO: 295 CDR2 da cadeia pesada de 35B10 | VIWYAGSNKY YADSVKG 17 |
| SEQ ID NO: 296 CDR3 da cadeia pesada de 35B10 | GGELSFYYYY GMDV 14 |
| SEQ ID NO: 297 CDR1 da cadeia leve de 35B10 | RASQGIRNDL G 11 |
| SEQ ID NO: 298 CDR2 da cadeia leve de 35B10 | AASTLQS 7 |
| SEQ ID NO: 299 CDR3 da cadeia leve de 35B10 | LQHNNYPWT 9 |
[00934] Em uma modalidade preferida, o agonista de GITR é o anticorpo monoclonal 41E11, ou um fragmento, derivado, variante, ou biossimilar dos mesmos. 41E11 está disponível da Amgen, Inc. A preparação e propriedades de 41E11 estão descritas na Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al, as divulgações das quais são aqui incorporadas por referência. As sequências de aminoácido de 41E11 são
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275 / 497 apresentadas na Tabela 28.
[00935] Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende uma cadeia pesada dada pela SEQ ID NO: 300 e uma cadeia leve dada pela SEQ ID NO: 301. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende cadeias pesadas e leves tendo as sequências mostradas na SEQ ID NO: 300 e SEQ ID NO: 301, respectivamente, ou fragmentos de ligação a antígeno, fragmentos Fab, fragmentos variáveis de cadeia única (scFv), variantes, ou conjugados dos mesmos. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 99% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 300 e SEQ ID NO: 301, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 98% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 300 e SEQ ID NO: 301, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 97% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 300 e SEQ ID NO: 301, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 96% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 300 e SEQ ID NO: 301, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 95% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 300 e SEQ ID NO: 301, respectivamente.
[00936] Em uma modalidade, o agonista de GITR compreende as CDRs ou regiões variáveis (VRs) de cadeia pesada e leve de 41E11. Em uma modalidade, a região variável da cadeia pesada (VH) do agonista de GITR compreende a sequência mostrada na SEQ ID NO: 302, e a região variável da cadeia leve (VL) do agonista de GITR compreende a sequência mostrada na SEQ ID NO: 303, e substituições de aminoácido conservativas das mesmas. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende as regiões VH e VL
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276 / 497 que são cada uma pelo menos 99% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 302 e SEQ ID NO: 303, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 98% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 302 e SEQ ID NO: 303, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 97% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 302 e SEQ ID NO: 303, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 96% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 302 e SEQ ID NO: 303, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 95% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 302 e SEQ ID NO: 303, respectivamente.
[00937] Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende os domínios CDR1, CDR2 e CDR3 da cadeia pesada tendo as sequências apresentadas na SEQ ID NO: 304, SEQ ID NO: 305, e SEQ ID NO: 306, respectivamente, e substituições de aminoácido conservativas das mesmas, e os domínios CDR1, CDR2 e CDR3 da cadeia leve tendo as sequências apresentadas na SEQ ID NO: 307, SEQ ID NO: 308, e SEQ ID NO: 309, respectivamente, e substituições de aminoácido conservativas das mesmas.
[00938] Em uma modalidade, o agonista de GITR é um anticorpo monoclonal agonista de GITR biossimilar aprovado pelas autoridades reguladoras de fármaco com referência ao 41E11. Em uma modalidade, o anticorpo monoclonal biossimilar compreende um anticorpo GITR compreendendo uma sequência de aminoácidos que tenha pelo menos 97 % de identidade de sequência, por exemplo, 97%, 98%, 99% ou 100% de identidade de sequência, com a sequência de aminoácidos do produto medicinal de referência ou produto biológico de referência e que compreende uma ou mais modificações pós-traducionais quando comparado com o
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2ΊΊ / 497 produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é 41E11. Em algumas modalidades, a uma ou mais modificações pós-traducionais são selecionada de uma ou mais de: glicosilação, oxidação, desamidação, e truncagem. Em algumas modalidades, o biossimilar é um agonista de anticorpo GITR autorizado ou submetido para autorização, em que o agonista de anticorpo GITR é provido em uma formulação que difere das formulações do produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é 41E11. O agonista de anticorpo GITR pode ser autorizado por uma autoridade reguladora de fármaco tal como o FDA dos Estados Unidos e/ou o EMA da União Européia. Em algumas modalidades, o biossimilar é provido como uma composição que compreende adicionalmente um ou mais excipientes, em que o um ou mais excipientes são os mesmos ou diferentes dos excipientes compreendidos no produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é 41E11. Em algumas modalidades, o biossimilar é provido como uma composição que compreende adicionalmente um ou mais excipientes, em que o um ou mais excipientes são os mesmos ou diferentes dos excipientes compreendidos no produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é 41E11.
TABELA 28. As sequências de aminoácidos para anticorpos agonistas de GITR relacionados com o 41 El L____________________________________ | Identificador | Sequência (Símbolos de aminoácido de uma letra) |
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| SEQ ID NO: 300 cadeia pesada de 41E11 | QVQVVESGGG VVQPGRSLRL SCAASGFTFS SYGMYWVRQA PGKGLEWVAV IWYEGSNKYY 60 ADSVRGRFTI SRDNSKNTLY LQMNSLRAED TALYYCARGG QLGKDYYSGM DVWGQGTTVT 120 VSSASTKGPS VFPLAPSSKS TSGGTAALGC LVKDYFPEPV TVSWNSGALT SGVHTFPAVL 180 QSSGLYSLSS VVTVPSSSLG TQTYICNVNH KPSNTKVDKK VEPKSCDKTH TCPPCPAPEL 240 LGGPSVFLFP PKPKDTLMIS RTPEVTCVVV DVSHEDPEVK FNWYVDGVEV HNAKTKPREE 300 QYNSTYRVVS VLTVLHQDWL NGKEYKCKVS NKALPAPIEK TISKAKGQPR EPQVYTLPPS 360 REEMTKNQVS LTCLVKGFYP SDIAVEWESN GQPENNYKTT PPVLDSDGSF FLYSKLTVDK 420 SRWQQGNVFS CSVMHEALHN HYTQKSLSLS PGK 453 |
| SEQ ID NO: 301 cadeia leve de 41E11 | DIQMTQSPSS LSASVGDRVT ITCRASQVIR NDLGWYQQKP GKAPKRLIYA ASSLQSGVPS 60 RFSGSGSGTE FTLTISSLQP EDFATYYCLQ HNSYPLTFGG GTKVEIKRTV AAPSVFIFPP 120 SDEQLKSGTA SVVCLLNNFY PREAKVQWKV DNALQSGNSQ ESVTEQDSKD STYSLSSTLT 180 LSKADYEKHK VYACEVTHQG LSSPVTKSFN RGEC 214 |
| SEQ ID NO: 302 cadeia pesada variável de 41E11 | QVQVVESGGG VVQPGRSLRL SCAASGFTFS SYGMYWVRQA PGKGLEWVAV IWYEGSNKYY 60 ADSVRGRFTI SRDNSKNTLY LQMNSLRAED TALYYCARGG QLGKDYYSGM DVWGQGTTVT 120 VSS 123 |
| SEQ ID NO: 303 cadeia leve variável de 41E11 | DIQMTQSPSS LSASVGDRVT ITCRASQVIR NDLGWYQQKP GKAPKRLIYA ASSLQSGVPS 60 RFSGSGSGTE FTLTISSLQP EDFATYYCLQ HNSYPLTFGG GTKVEIKR 108 |
| SEQ ID NO: 304 CDR1 da cadeia pesada de 41E11 | SYGMY 5 |
| SEQ ID NO: 305 CDR2 da cadeia pesada de 41E11 | VIWYEGSNKY YADSVRG 17 |
| SEQ ID NO: 306 CDR3 da cadeia pesada de 41E11 | GGQLGKDYYS GMDV 14 |
| SEQ ID NO: 307 CDR1 da cadeia leve de 41E11 | RASQVIRNDL G 11 |
| SEQ ID NO: 308 CDR2 da cadeia leve de 41E11 | AASSLQS 7 |
| SEQ ID NO: 309 CDR3 da cadeia leve de 41E11 | LQHNSYPLT 9 |
[00939] Em uma modalidade preferida, o agonista de GITR é o anticorpo monoclonal 41G5, ou um fragmento, derivado, variante, ou biossimilar dos mesmos. 41G5 está disponível da Amgen, Inc. A preparação e propriedades de 41G5 estão descritas na Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al, as divulgações das quais são aqui incorporadas por referência. As sequências de aminoácido de 41G5 são
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279 / 497 apresentadas na Tabela 29.
[00940] Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende uma cadeia pesada dada pela SEQ ID NO: 310 e uma cadeia leve dada pela SEQ ID NO: 311. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende cadeias pesadas e leves tendo as sequências mostradas na SEQ ID NO: 310 e SEQ ID NO: 311, respectivamente, ou fragmentos de ligação a antígeno, fragmentos Fab, fragmentos variáveis de cadeia única (scFv), variantes, ou conjugados dos mesmos. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 99% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 310 e SEQ ID NO: 311, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 98% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 310 e SEQ ID NO: 311, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 97% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 310 e SEQ ID NO: 311, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 96% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 310 e SEQ ID NO: 311, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 95% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 310 e SEQ ID NO: 311, respectivamente.
[00941] Em uma modalidade, o agonista de GITR compreende as CDRs ou regiões variáveis (VRs) de cadeia pesada e leve de 41G5. Em uma modalidade, a região variável da cadeia pesada (VH) do agonista de GITR compreende a sequência mostrada na SEQ ID NO: 312, e a região variável da cadeia leve (VL) do agonista de GITR compreende a sequência mostrada na SEQ ID NO: 313, e substituições de aminoácido conservativas das mesmas. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende as regiões VH e VL
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280 / 497 que são cada uma pelo menos 99% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 312 e SEQ ID NO: 313, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 98% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 312 e SEQ ID NO: 313, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 97% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 312 e SEQ ID NO: 313, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 96% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 312 e SEQ ID NO: 313, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 95% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 312 e SEQ ID NO: 313, respectivamente.
[00942] Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende os domínios CDR1, CDR2 e CDR3 da cadeia pesada tendo as sequências apresentadas na SEQ ID NO: 314, SEQ ID NO: 315, e SEQ ID NO: 316, respectivamente, e substituições de aminoácido conservativas das mesmas, e os domínios CDR1, CDR2 e CDR3 da cadeia leve tendo as sequências apresentadas na SEQ ID NO: 317, SEQ ID NO: 318, e SEQ ID NO: 319, respectivamente, e substituições de aminoácido conservativas das mesmas.
[00943] Em uma modalidade, o agonista de GITR é um anticorpo monoclonal agonista de GITR biossimilar aprovado pelas autoridades reguladoras de fármaco com referência ao 41G5. Em uma modalidade, o anticorpo monoclonal biossimilar compreende um anticorpo GITR compreendendo uma sequência de aminoácidos que tenha pelo menos 97 % de identidade de sequência, por exemplo, 97%, 98%, 99% ou 100% de identidade de sequência, com a sequência de aminoácidos do produto medicinal de referência ou produto biológico de referência e que compreende uma ou mais modificações pós-traducionais quando comparado com o
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281 /497 produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é 41G5. Em algumas modalidades, a uma ou mais modificações pós-traducionais são selecionada de uma ou mais de: glicosilação, oxidação, desamidação, e truncagem. Em algumas modalidades, o biossimilar é um agonista de anticorpo GITR autorizado ou submetido para autorização, em que o agonista de anticorpo GITR é provido em uma formulação que difere das formulações do produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é 41G5. O agonista de anticorpo GITR pode ser autorizado por uma autoridade reguladora de fármaco tal como o FDA dos Estados Unidos e/ou o EMA da União Européia. Em algumas modalidades, o biossimilar é provido como uma composição que compreende adicionalmente um ou mais excipientes, em que o um ou mais excipientes são os mesmos ou diferentes dos excipientes compreendidos no produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é 41G5. Em algumas modalidades, o biossimilar é provido como uma composição que compreende adicionalmente um ou mais excipientes, em que o um ou mais excipientes são os mesmos ou diferentes dos excipientes compreendidos no produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é 41G5.
TABELA 29. As sequências de aminoácidos para anticorpos agonistas de GITR relacionados com o 41G5._____________________________________ | Identificador | Sequência (Símbolos de aminoácido de uma letra) |
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| SEQ ID NO: 310 cadeia pesada de 41G5 | QVQLVESGGG VVQPGRSLRL SCAASGFTFS SYGMHWVRQA PGKGLEWVAV IWYPGSNKYY 60 ADSVKGRFTI SRDNSKNTLY LQMNSLRAED TAVYYCARGG ELGRYYYYGM DVWGQGTTVT 120 VSSASTKGPS VFPLAPSSKS TSGGTAALGC LVKDYFPEPV TVSWNSGALT SGVHTFPAVL 180 QSSGLYSLSS VVTVPSSSLG TQTYICNVNH KPSNTKVDKK VEPKSCDKTH TCPPCPAPEL 240 LGGPSVFLFP PKPKDTLMIS RTPEVTCVVV DVSHEDPEVK FNWYVDGVEV HNAKTKPREE 300 QYNSTYRVVS VLTVLHQDWL NGKEYKCKVS NKALPAPIEK TISKAKGQPR EPQVYTLPPS 360 REEMTKNQVS LTCLVKGFYP SDIAVEWESN GQPENNYKTT PPVLDSDGSF FLYSKLTVDK 420 SRWQQGNVFS CSVMHEALHN HYTQKSLSLS PGK 453 |
| SEQ ID NO: 311 cadeia leve de 41G5 | DIQMTQSPSS LSASVGDRVT VTCRASQGIR NDLGWYQQKP GKAPKRLIYA ASSLQSGVPS 60 RFSGSGSGTE FTLTISSLQP EDFATYYCLQ HNNYPWTFGQ GTKVDIKRTV AAPSVFIFPP 120 SDEQLKSGTA SVVCLLNNFY PREAKVQWKV DNALQSGNSQ ESVTEQDSKD STYSLSSTLT 180 LSKADYEKHK VYACEVTHQG LSSPVTKSFN RGEC 214 |
| SEQ ID NO: 312 cadeia pesada variável de 41G5 | QVQLVESGGG VVQPGRSLRL SCAASGFTFS SYGMHWVRQA PGKGLEWVAV IWYPGSNKYY 60 ADSVKGRFTI SRDNSKNTLY LQMNSLRAED TAVYYCARGG ELGRYYYYGM DVWGQGTTVT 120 VSS 123 |
| SEQ ID NO: 313 cadeia leve variável de 41G5 | DIQMTQSPSS LSASVGDRVT VTCRASQGIR NDLGWYQQKP GKAPKRLIYA ASSLQSGVPS 60 RFSGSGSGTE FTLTISSLQP EDFATYYCLQ HNNYPWTFGQ GTKVDIKR 108 |
| SEQ ID NO: 314 CDR1 da cadeia pesada de 41G5 | SYGMH 5 |
| SEQ ID NO: 315 CDR2 da cadeia pesada de 41G5 | VIWYPGSNKY YADSVKG 17 |
| SEQ ID NO: 316 CDR3 da cadeia pesada de 41G5 | GGELGRYYYY GMDV 14 |
| SEQ ID NO: 317 CDR1 da cadeia leve de 41G5 | RASQGIRNDL G 11 |
| SEQ ID NO: 318 CDR2 da cadeia leve de 41G5 | AASSLQS 7 |
| SEQ ID NO: 319 CDR3 da cadeia leve de 41G5 | LQHNNYPWT 9 |
[00944] Em uma modalidade preferida, o agonista de GITR é o anticorpo monoclonal 42A11, ou um fragmento, derivado, variante, ou biossimilar dos mesmos. 42A11 está disponível da Amgen, Inc. A preparação e propriedades de 42A11 estão descritas na Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al, as divulgações das quais são aqui incorporadas por referência. As sequências de aminoácido de 42A11 são
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283 / 497 apresentadas na Tabela 30.
[00945] Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende uma cadeia pesada dada pela SEQ ID NO: 320 e uma cadeia leve dada pela SEQ ID NO: 321. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende cadeias pesadas e leves tendo as sequências mostradas na SEQ ID NO: 320 e SEQ ID NO: 321, respectivamente, ou fragmentos de ligação a antígeno, fragmentos Fab, fragmentos variáveis de cadeia única (scFv), variantes, ou conjugados dos mesmos. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 99% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 320 e SEQ ID NO: 321, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 98% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 320 e SEQ ID NO: 321, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 97% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 320 e SEQ ID NO: 321, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 96% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 320 e SEQ ID NO: 321, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 95% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 320 e SEQ ID NO: 321, respectivamente.
[00946] Em uma modalidade, o agonista de GITR compreende as CDRs ou regiões variáveis (VRs) de cadeia pesada e leve de 42A11. Em uma modalidade, a região variável da cadeia pesada (VH) do agonista de GITR compreende a sequência mostrada na SEQ ID NO: 322, e a região variável da cadeia leve (VL) do agonista de GITR compreende a sequência mostrada na SEQ ID NO: 323, e substituições de aminoácido conservativas das mesmas. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende as regiões VH e VL
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284 / 497 que são cada uma pelo menos 99% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 322 e SEQ ID NO: 323, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 98% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 322 e SEQ ID NO: 323, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 97% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 322 e SEQ ID NO: 323, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 96% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 322 e SEQ ID NO: 323, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 95% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 322 e SEQ ID NO: 323, respectivamente.
[00947] Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende os domínios CDR1, CDR2 e CDR3 da cadeia pesada tendo as sequências apresentadas na SEQ ID NO: 324, SEQ ID NO: 325, e SEQ ID NO: 326, respectivamente, e substituições de aminoácido conservativas das mesmas, e os domínios CDR1, CDR2 e CDR3 da cadeia leve tendo as sequências apresentadas na SEQ ID NO: 327, SEQ ID NO: 328, e SEQ ID NO: 329, respectivamente, e substituições de aminoácido conservativas das mesmas.
[00948] Em uma modalidade, o agonista de GITR é um anticorpo monoclonal agonista de GITR bios similar aprovado pelas autoridades reguladoras de fármaco com referência ao 42A11. Em uma modalidade, o anticorpo monoclonal biossimilar compreende um anticorpo GITR compreendendo uma sequência de aminoácidos que tenha pelo menos 97 % de identidade de sequência, por exemplo, 97%, 98%, 99% ou 100% de identidade de sequência, com a sequência de aminoácidos do produto medicinal de referência ou produto biológico de referência e que compreende uma ou mais modificações pós-traducionais quando comparado com o
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285/497 produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é 42A11. Em algumas modalidades, a uma ou mais modificações pós-traducionais são selecionada de uma ou mais de: glicosilação, oxidação, desamidação, e truncagem. Em algumas modalidades, o biossimilar é um agonista de anticorpo GITR autorizado ou submetido para autorização, em que o agonista de anticorpo GITR é provido em uma formulação que difere das formulações do produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é 42A11. O agonista de anticorpo GITR pode ser autorizado por uma autoridade reguladora de fármaco tal como o FDA dos Estados Unidos e/ou o EMA da União Européia. Em algumas modalidades, o biossimilar é provido como uma composição que compreende adicionalmente um ou mais excipientes, em que o um ou mais excipientes são os mesmos ou diferentes dos excipientes compreendidos no produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é 42A11. Em algumas modalidades, o biossimilar é provido como uma composição que compreende adicionalmente um ou mais excipientes, em que o um ou mais excipientes são os mesmos ou diferentes dos excipientes compreendidos no produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é 42A11.
TABELA 30. As sequências de aminoácidos para anticorpos agonistas de GITR relacionados com o 42Al L____________________________________ | Identificador | Sequência (Símbolos de aminoácido de uma letra) |
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| SEQ ID NO: 320 cadeia pesada de 42A11 | QVQLVESGGG VVQPGRSLRL SCAASGFTFS SYGMHWVRQA PGKGLEWVAV IWYEGSNKYY 60 ADSVKGRFTI SRDNSKNTLY LQMNSLRAED TAVYYCARGG QLGYYYYSGM DVWGQGTTVT 120 VSSASTKGPS VFPLAPSSKS TSGGTAALGC LVKDYFPEPV TVSWNSGALT SGVHTFPAVL 180 QSSGLYSLSS VVTVPSSSLG TQTYICNVNH KPSNTKVDKK VEPKSCDKTH TCPPCPAPEL 240 LGGPSVFLFP PKPKDTLMIS RTPEVTCVVV DVSHEDPEVK FNWYVDGVEV HNAKTKPREE 300 QYNSTYRVVS VLTVLHQDWL NGKEYKCKVS NKALPAPIEK TISKAKGQPR EPQVYTLPPS 360 REEMTKNQVS LTCLVKGFYP SDIAVEWESN GQPENNYKTT PPVLDSDGSF FLYSKLTVDK 420 SRWQQGNVFS CSVMHEALHN HYTQKSLSLS PGK 453 |
| SEQ ID NO: 321 cadeia leve de 42A11 | DIQMTQSPSS LSASVGDRVT ITCRASQGIR NDLGWYQQKP GKAPKRLIYD ASSLQSGVPS 60 RFSGSGSGTD FTLTISSLQP EEFATYYCLQ HNNYPWTFGQ GTKVEIKRTV AAPSVFIFPP 120 SDEQLKSGTA SVVCLLNNFY PREAKVQWKV DNALQSGNSQ ESVTEQDSKD STYSLSSTLT 180 LSKADYEKHK VYACEVTHQG LSSPVTKSFN RGEC 214 |
| SEQ ID NO: 322 cadeia pesada variável de 42Al 1 | QVQLVESGGG VVQPGRSLRL SCAASGFTFS SYGMHWVRQA PGKGLEWVAV IWYEGSNKYY 60 ADSVKGRFTI SRDNSKNTLY LQMNSLRAED TAVYYCARGG QLGYYYYSGM DVWGQGTTVT 120 VSS 123 |
| SEQ ID NO: 323 cadeia leve variável de 42Al 1 | DIQMTQSPSS LSASVGDRVT ITCRASQGIR NDLGWYQQKP GKAPKRLIYD ASSLQSGVPS 60 RFSGSGSGTD FTLTISSLQP EEFATYYCLQ HNNYPWTFGQ GTKVEIKR 108 |
| SEQ ID NO: 324 CDR1 da cadeia pesada de 42A11 | SYGMH 5 |
| SEQ ID NO: 325 CDR2 da cadeia pesada de 42A11 | VIWYEGSNKY YADSVKG 17 |
| SEQ ID NO: 326 CDR3 da cadeia pesada de 42A11 | GGQLGYYYYS GMDV 14 |
| SEQ ID NO: 327 CDR1 da cadeia leve de 42A11 | RASQGIRNDL G 11 |
| SEQ ID NO: 328 CDR2 da cadeia leve de 42A11 | DASSLQS 7 |
| SEQ ID NO: 329 CDR3 da cadeia leve de 42A11 | LQHNNYPWT 9 |
[00949] Em uma modalidade preferida, o agonista de GITR é o anticorpo monoclonal 44C1, ou um fragmento, derivado, variante, ou biossimilar dos mesmos. 44C1 está disponível da Amgen, Inc. A preparação e propriedades de 44C1 estão descritas na Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al, as divulgações das quais são aqui incorporadas por referência. As sequências de aminoácido de 44C1 são apresentadas na Tabela
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31.
[00950] Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende uma cadeia pesada dada pela SEQ ID NO: 330 e uma cadeia leve dada pela SEQ ID NO: 331. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende cadeias pesadas e leves tendo as sequências mostradas na SEQ ID NO: 330 e SEQ ID NO: 331, respectivamente, ou fragmentos de ligação a antígeno, fragmentos Fab, fragmentos variáveis de cadeia única (scFv), variantes, ou conjugados dos mesmos. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 99% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 330 e SEQ ID NO: 331, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 98% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 330 e SEQ ID NO: 331, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 97% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 330 e SEQ ID NO: 331, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 96% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 330 e SEQ ID NO: 331, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 95% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 330 e SEQ ID NO: 331, respectivamente.
[00951] Em uma modalidade, o agonista de GITR compreende as CDRs ou regiões variáveis (VRs) de cadeia pesada e leve de 44C1. Em uma modalidade, a região variável da cadeia pesada (VH) do agonista de GITR compreende a sequência mostrada na SEQ ID NO: 332, e a região variável da cadeia leve (VL) do agonista de GITR compreende a sequência mostrada na SEQ ID NO: 333, e substituições de aminoácido conservativas das mesmas. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende as regiões VH e VL
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288 / 497 que são cada uma pelo menos 99% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 332 e SEQ ID NO: 333, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 98% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 332 e SEQ ID NO: 333, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 97% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 332 e SEQ ID NO: 333, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 96% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 332 e SEQ ID NO: 333, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 95% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 332 e SEQ ID NO: 333, respectivamente.
[00952] Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende os domínios CDR1, CDR2 e CDR3 da cadeia pesada tendo as sequências apresentadas na SEQ ID NO: 334, SEQ ID NO: 335, e SEQ ID NO: 336, respectivamente, e substituições de aminoácido conservativas das mesmas, e os domínios CDR1, CDR2 e CDR3 da cadeia leve tendo as sequências apresentadas na SEQ ID NO: 337, SEQ ID NO: 338, e SEQ ID NO: 339, respectivamente, e substituições de aminoácido conservativas das mesmas.
[00953] Em uma modalidade, o agonista de GITR é um anticorpo monoclonal agonista de GITR biossimilar aprovado pelas autoridades reguladoras de fármaco com referência ao 44C1. Em uma modalidade, o anticorpo monoclonal biossimilar compreende um anticorpo GITR compreendendo uma sequência de aminoácidos que tenha pelo menos 97 % de identidade de sequência, por exemplo, 97%, 98%, 99% ou 100% de identidade de sequência, com a sequência de aminoácidos do produto medicinal de referência ou produto biológico de referência e que compreende uma ou mais modificações pós-traducionais quando comparado com o
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289 / 497 produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é 44C1. Em algumas modalidades, a uma ou mais modificações pós-traducionais são selecionada de uma ou mais de: glicosilação, oxidação, desamidação, e truncagem. Em algumas modalidades, o biossimilar é um agonista de anticorpo GITR autorizado ou submetido para autorização, em que o agonista de anticorpo GITR é provido em uma formulação que difere das formulações do produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é 44C1. O agonista de anticorpo GITR pode ser autorizado por uma autoridade reguladora de fármaco tal como o FDA dos Estados Unidos e/ou o EMA da União Européia. Em algumas modalidades, o biossimilar é provido como uma composição que compreende adicionalmente um ou mais excipientes, em que o um ou mais excipientes são os mesmos ou diferentes dos excipientes compreendidos no produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é 44C1. Em algumas modalidades, o biossimilar é provido como uma composição que compreende adicionalmente um ou mais excipientes, em que o um ou mais excipientes são os mesmos ou diferentes dos excipientes compreendidos no produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é 44C1.
TABELA 31. As sequências de aminoácidos para anticorpos agonistas de GITR relacionados com o 44CL____________________________________ | Identificador | Sequência (Símbolos de aminoácido de uma letra) |
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| SEQ ID NO: 330 cadeia pesada de 44C1 | QVQLVESGGG VVQPGRSLRL SCAASGFTLS SYGMHWVRQA PGKGLEWVAV IWYDGSNKYY 60 ADSVKGRFTI SRDNSKNTLY LQMNSLRAED TAVYYCARRG TVTTPDFDYW GQGTLVTVSS 120 ASTKGPSVFP LAPSSKSTSG GTAALGCLVK DYFPEPVTVS WNSGALTSGV HTFPAVLQSS 180 GLYSLSSVVT VPSSSLGTQT YICNVNHKPS NTKVDKKVEP KSCDKTHTCP PCPAPELLGG 240 PSVFLFPPKP KDTLMISRTP EVTCVVVDVS HEDPEVKFNW YVDGVEVHNA KTKPREEQYN 300 STYRVVSVLT VLHQDWLNGK EYKCKVSNKA LPAPIEKTIS KAKGQPREPQ VYTLPPSREE 360 MTKNQVSLTC LVKGFYPSDI AVEWESNGQP ENNYKTTPPV LDSDGSFFLY SKLTVDKSRW 420 QQGNVFSCSV MHEALHNHYT QKSLSLSPGK 450 |
| SEQ ID NO: 331 cadeia leve de 44C1 | QSALTQPASV SGSPGQSITI SCTGTSSDVG TYNLVSWYQQ HPGKAPKLMI YEVSKRPSGV 60 SNRFSGSKSG NTASLTISGL QAEDEADYYC CSYAGFSTWV FGGGTKLTVL GQPKAAPSVT 120 LFPPSSEELQ ANKATLVCLI SDFYPGAVTV AWKADSSPVK AGVETTTPSK QSNNKYAASS 180 ILSLTPEQWK SHRSYSCQVT HEGSTVEKTV APTECS 216 |
| SEQ ID NO: 332 cadeia pesada variável de 44C1 | QVQLVESGGG VVQPGRSLRL SCAASGFTLS SYGMHWVRQA PGKGLEWVAV IWYDGSNKYY 60 ADSVKGRFTI SRDNSKNTLY LQMNSLRAED TAVYYCARRG TVTTPDFDYW GQGTLVTVSS 120 |
| SEQ ID NO: 333 cadeia leve variável de 44C1 | QSALTQPASV SGSPGQSITI SCTGTSSDVG TYNLVSWYQQ HPGKAPKLMI YEVSKRPSGV 60 SNRFSGSKSG NTASLTISGL QAEDEADYYC CSYAGFSTWV FGGGTKLTVL G 111 |
| SEQ ID NO: 334 CDR1 da cadeia pesada de 44C1 | SYGMH 5 |
| SEQ ID NO: 335 CDR2 da cadeia pesada de 44C1 | VIWYDGSNKY YADSVKG 17 |
| SEQ ID NO: 336 CDR3 da cadeia pesada de 44C1 | RGTVTTPDFD Y 11 |
| SEQ ID NO: 337 CDR1 da cadeia leve de 44C1 | TGTSSDVGTY NLVS 14 |
| SEQ ID NO: 338 CDR2 da cadeia leve de 44C1 | EVSKRPS 7 |
| SEQ ID NO: 339 CDR3 da cadeia leve de 44C1 | CSYAGFSTWV 10 |
[00954] Em uma modalidade preferida, o agonista de GITR é o anticorpo monoclonal 45 A8, ou um fragmento, derivado, variante, ou biossimilar dos mesmos. 45A8 está disponível da Amgen, Inc. A preparação e propriedades de 45A8 estão descritas na Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al, as divulgações das quais são aqui incorporadas por referência. As sequências de aminoácido de 45A8 são
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291 /497 apresentadas na Tabela 32.
[00955] Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende uma cadeia pesada dada pela SEQ ID NO: 340 e uma cadeia leve dada pela SEQ ID NO: 341. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende cadeias pesadas e leves tendo as sequências mostradas na SEQ ID NO: 340 e SEQ ID NO: 341, respectivamente, ou fragmentos de ligação a antígeno, fragmentos Fab, fragmentos variáveis de cadeia única (scFv), variantes, ou conjugados dos mesmos. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 99% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 340 e SEQ ID NO: 341, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 98% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 340 e SEQ ID NO: 341, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 97% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 340 e SEQ ID NO: 341, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 96% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 340 e SEQ ID NO: 341, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 95% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 340 e SEQ ID NO: 341, respectivamente.
[00956] Em uma modalidade, o agonista de GITR compreende as CDRs ou regiões variáveis (VRs) de cadeia pesada e leve de 45A8. Em uma modalidade, a região variável da cadeia pesada (VH) do agonista de GITR compreende a sequência mostrada na SEQ ID NO: 342, e a região variável da cadeia leve (VL) do agonista de GITR compreende a sequência mostrada na SEQ ID NO: 343, e substituições de aminoácido conservativas das mesmas. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende as regiões VH e VL
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292 / 497 que são cada uma pelo menos 99% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 342 e SEQ ID NO: 343, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 98% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 342 e SEQ ID NO: 343, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 97% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 342 e SEQ ID NO: 343, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 96% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 342 e SEQ ID NO: 343, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 95% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 342 e SEQ ID NO: 343, respectivamente.
[00957] Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende os domínios CDR1, CDR2 e CDR3 da cadeia pesada tendo as sequências apresentadas na SEQ ID NO: 344, SEQ ID NO: 345, e SEQ ID NO: 346, respectivamente, e substituições de aminoácido conservativas das mesmas, e os domínios CDR1, CDR2 e CDR3 da cadeia leve tendo as sequências apresentadas na SEQ ID NO: 347, SEQ ID NO: 348, e SEQ ID NO: 349, respectivamente, e substituições de aminoácido conservativas das mesmas.
[00958] Em uma modalidade, o agonista de GITR é um anticorpo monoclonal agonista de GITR biossimilar aprovado pelas autoridades reguladoras de fármaco com referência ao 45 A8. Em uma modalidade, o anticorpo monoclonal biossimilar compreende um anticorpo GITR compreendendo uma sequência de aminoácidos que tenha pelo menos 97 % de identidade de sequência, por exemplo, 97%, 98%, 99% ou 100% de identidade de sequência, com a sequência de aminoácidos do produto medicinal de referência ou produto biológico de referência e que compreende uma ou mais modificações pós-traducionais quando comparado com o
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293 / 497 produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é 45 A8. Em algumas modalidades, a uma ou mais modificações pós-traducionais são selecionada de uma ou mais de: glicosilação, oxidação, desamidação, e truncagem. Em algumas modalidades, o biossimilar é um agonista de anticorpo GITR autorizado ou submetido para autorização, em que o agonista de anticorpo GITR é provido em uma formulação que difere das formulações do produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é 45A8. O agonista de anticorpo GITR pode ser autorizado por uma autoridade reguladora de fármaco tal como o FDA dos Estados Unidos e/ou o EMA da União Européia. Em algumas modalidades, o biossimilar é provido como uma composição que compreende adicionalmente um ou mais excipientes, em que o um ou mais excipientes são os mesmos ou diferentes dos excipientes compreendidos no produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é 45A8. Em algumas modalidades, o biossimilar é provido como uma composição que compreende adicionalmente um ou mais excipientes, em que o um ou mais excipientes são os mesmos ou diferentes dos excipientes compreendidos no produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é 45 A8.
TABELA 32. As sequências de aminoácidos para anticorpos agonistas de GITR relacionados com ο 45A8._____________________________________ | Identificador | Sequência (Símbolos de aminoácido de uma letra) |
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| SEQ ID NO: 340 cadeia pesada de 45A8 | QVQLVESGGG VVQPGRSLRL SCAASGFTFS SYGMHWVRQA PGKGLEWVAV IWHDGSNKYY 60 ADSVKGRFTI SKDNSKNTLY LQMNSLRAED TAVYYCAREY GGNFDYWGQG TLVTVSSAST 120 KGPSVFPLAP SSKSTSGGTA ALGCLVKDYF PEPVTVSWNS GALTSGVHTF PAVLQSSGLY 180 SLSSVVTVPS SSLGTQTYIC NVNHKPSNTK VDKKVEPKSC DKTHTCPPCP APELLGGPSV 240 FLFPPKPKDT LMISRTPEVT CVVVDVSHED PEVKFNWYVD GVEVHNAKTK PREEQYNSTY 300 RVVSVLTVLH QDWLNGKEYK CKVSNKALPA PIEKTISKAK GQPREPQVYT LPPSREEMTK 360 NQVSLTCLVK GFYPSDIAVE WESNGQPENN YKTTPPVLDS DGSFFLYSKL TVDKSRWQQG 420 NVFSCSVMHE ALHNHYTQKS LSLSPGK 447 |
| SEQ ID NO: 341 cadeia leve de 45A8 | QSALTQPASV SGSPGQSITI SCTGTSSDVG TYNLVSWYQQ HPGKAPKLMI YEVSKRPSGI 60 SNRFSGSKSG NTASLTISGL QAEDEADYYC CSYAGYSTWV FGGGTKLTVL RQPKAAPSVT 120 LFPPSSEELQ ANKATLVCLI SDFYPGAVTV AWKADSSPVK AGVETTTPSK QSNNKYAASS 180 ILSLTPEQWK SHRSYSCQVT HEGSTVEKTV APTECS 216 |
| SEQ ID NO: 342 cadeia pesada variável de 45 A8 | QVQLVESGGG VVQPGRSLRL SCAASGFTFS SYGMHWVRQA PGKGLEWVAV IWHDGSNKYY 60 ADSVKGRFTI SKDNSKNTLY LQMNSLRAED TAVYYCAREY GGNFDYWGQG TLVTVSS 117 |
| SEQ ID NO: 343 cadeia leve variável de 45 A8 | QSALTQPASV SGSPGQSITI SCTGTSSDVG TYNLVSWYQQ HPGKAPKLMI YEVSKRPSGI 60 SNRFSGSKSG NTASLTISGL QAEDEADYYC CSYAGYSTWV FGGGTKLTVL R 111 |
| SEQ ID NO: 344 CDR1 da cadeia pesada de 45 A8 | SYGMH 5 |
| SEQ ID NO: 345 CDR2 da cadeia pesada de 45 A8 | VIWHDGSNKY YADSVKG 17 |
| SEQ ID NO: 346 CDR3 da cadeia pesada de 45 A8 | EYGGNFDY 8 |
| SEQ ID NO: 347 CDR1 da cadeia leve de 45 A8 | TGTSSDVGTY NLVS 14 |
| SEQ ID NO: 348 CDR2 da cadeia leve de 45 A8 | EVSKRPS 7 |
| SEQ ID NO: 349 CDR3 da cadeia leve de 45 A8 | CSYAGYSTWV 10 |
[00959] Em uma modalidade preferida, o agonista de GITR é o anticorpo monoclonal 46E11, ou um fragmento, derivado, variante, ou biossimilar dos mesmos. 46E11 está disponível da Amgen, Inc. A preparação e propriedades de 46E11 estão descritas na Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al, as divulgações das quais são aqui incorporadas por referência. As sequências de aminoácido de 46E11 são
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295/497 apresentadas na Tabela 33.
[00960] Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende uma cadeia pesada dada pela SEQ ID NO: 350 e uma cadeia leve dada pela SEQ ID NO: 351. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende cadeias pesadas e leves tendo as sequências mostradas na SEQ ID NO: 350 e SEQ ID NO: 351, respectivamente, ou fragmentos de ligação a antígeno, fragmentos Fab, fragmentos variáveis de cadeia única (scFv), variantes, ou conjugados dos mesmos. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 99% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 350 e SEQ ID NO: 351, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 98% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 350 e SEQ ID NO: 351, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 97% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 350 e SEQ ID NO: 351, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 96% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 350 e SEQ ID NO: 351, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 95% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 350 e SEQ ID NO: 351, respectivamente.
[00961] Em uma modalidade, o agonista de GITR compreende as CDRs ou regiões variáveis (VRs) de cadeia pesada e leve de 46E11. Em uma modalidade, a região variável da cadeia pesada (VH) do agonista de GITR compreende a sequência mostrada na SEQ ID NO: 352, e a região variável da cadeia leve (VL) do agonista de GITR compreende a sequência mostrada na SEQ ID NO: 353, e substituições de aminoácido conservativas das mesmas. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende as regiões VH e VL
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296/497 que são cada uma pelo menos 99% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 352 e SEQ ID NO: 353, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 98% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 352 e SEQ ID NO: 353, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 97% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 352 e SEQ ID NO: 353, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 96% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 352 e SEQ ID NO: 353, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 95% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 352 e SEQ ID NO: 353, respectivamente.
[00962] Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende os domínios CDR1, CDR2 e CDR3 da cadeia pesada tendo as sequências apresentadas na SEQ ID NO: 354, SEQ ID NO: 355, e SEQ ID NO: 356, respectivamente, e substituições de aminoácido conservativas das mesmas, e os domínios CDR1, CDR2 e CDR3 da cadeia leve tendo as sequências apresentadas na SEQ ID NO: 357, SEQ ID NO: 358, e SEQ ID NO: 359, respectivamente, e substituições de aminoácido conservativas das mesmas.
[00963] Em uma modalidade, o agonista de GITR é um anticorpo monoclonal agonista de GITR biossimilar aprovado pelas autoridades reguladoras de fármaco com referência ao 46E11. Em uma modalidade, o anticorpo monoclonal biossimilar compreende um anticorpo GITR compreendendo uma sequência de aminoácidos que tenha pelo menos 97 % de identidade de sequência, por exemplo, 97%, 98%, 99% ou 100% de identidade de sequência, com a sequência de aminoácidos do produto medicinal de referência ou produto biológico de referência e que compreende uma ou mais modificações pós-traducionais quando comparado com o
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297 / 497 produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é 46E11. Em algumas modalidades, a uma ou mais modificações pós-traducionais são selecionada de uma ou mais de: glicosilação, oxidação, desamidação, e truncagem. Em algumas modalidades, o biossimilar é um agonista de anticorpo GITR autorizado ou submetido para autorização, em que o agonista de anticorpo GITR é provido em uma formulação que difere das formulações do produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é 46E11. O agonista de anticorpo GITR pode ser autorizado por uma autoridade reguladora de fármaco tal como o FDA dos Estados Unidos e/ou o EMA da União Européia. Em algumas modalidades, o biossimilar é provido como uma composição que compreende adicionalmente um ou mais excipientes, em que o um ou mais excipientes são os mesmos ou diferentes dos excipientes compreendidos no produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é 46E11. Em algumas modalidades, o biossimilar é provido como uma composição que compreende adicionalmente um ou mais excipientes, em que o um ou mais excipientes são os mesmos ou diferentes dos excipientes compreendidos no produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é 46E11.
TABELA 33. As sequências de aminoácidos para anticorpos agonistas de GITR relacionados com ο 46E11._____________________________________ | Identificador | Sequência (Símbolos de aminoácido de uma letra) |
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| SEQ ID NO: 350 cadeia pesada de 46E11 | QVQLVESGGG VVQPGRSLRL SCAASGFTFS SYGMHWVRQA PGKGLEWVAV IWYAGSNKYY 60 ADSVKGRFTI SRDNSKNTLY LQMNSLRAED TAVYYCARGD ILTGYSLYYG MDVWGQGTTV 120 TVSSASTKGP SVFPLAPSSK STSGGTAALG CLVKDYFPEP VTVSWNSGAL TSGVHTFPAV 180 LQSSGLYSLS SVVTVPSSSL GTQTYICNVN HKPSNTKVDK KVEPKSCDKT HTCPPCPAPE 240 LLGGPSVFLF PPKPKDTLMI SRTPEVTCVV VDVSHEDPEV KFNWYVDGVE VHNAKTKPRE 300 EQYNSTYRVV SVLTVLHQDW LNGKEYKCKV SNKALPAPIE KTISKAKGQP REPQVYTLPP 360 SREEMTKNQV SLTCLVKGFY PSDIAVEWES NGQPENNYKT TPPVLDSDGS FFLYSKLTVD 420 KSRWQQGNVF SCSVMHEALH NHYTQKSLSL SPGK 454 |
| SEQ ID NO: 351 cadeia leve de 46E11 | DIQMTQSPSS LSASVGDRVT ITCRASQGIR NDLGWYQQKP GKAPKRLIYA ASSLQSGVPS 60 RFSGSGSGAE FTLTISSLQP EDFATYYCLQ HNSYPWTFGQ GTKVEIKRTV AAPSVFIFPP 120 SDEQLKSGTA SVVCLLNNFY PREAKVQWKV DNALQSGNSQ ESVTEQDSKD STYSLSSTLT 180 LSKADYEKHK VYACEVTHQG LSSPVTKSFN RGEC 214 |
| SEQ ID NO: 352 cadeia pesada variável de 46E11 | QVQLVESGGG VVQPGRSLRL SCAASGFTFS SYGMHWVRQA PGKGLEWVAV IWYAGSNKYY 60 ADSVKGRFTI SRDNSKNTLY LQMNSLRAED TAVYYCARGD ILTGYSLYYG MDVWGQGTTV 120 TVSS 124 |
| SEQ ID NO: 353 cadeia leve variável de 46E11 | DIQMTQSPSS LSASVGDRVT ITCRASQGIR NDLGWYQQKP GKAPKRLIYA ASSLQSGVPS 60 RFSGSGSGAE FTLTISSLQP EDFATYYCLQ HNSYPWTFGQ GTKVEIKR 108 |
| SEQ ID NO: 354 CDR1 da cadeia pesada de 46E11 | SYGMH 5 |
| SEQ ID NO: 355 CDR2 da cadeia pesada de 46E11 | VIWYAGSNKY YADSVKG 17 |
| SEQ ID NO: 356 CDR3 da cadeia pesada de 46E11 | GDILTGYSLY YGMDV 15 |
| SEQ ID NO: 357 CDR1 da cadeia leve de 46E11 | RASQGIRNDL G 11 |
| SEQ ID NO: 358 CDR2 da cadeia leve de 46E11 | AASSLQS 7 |
| SEQ ID NO: 359 CDR3 da cadeia leve de 46E11 | LQHNSYPWT 9 |
[00964] Em uma modalidade preferida, o agonista de GITR é o anticorpo monoclonal 48H12, ou um fragmento, derivado, variante, ou biossimilar dos mesmos. 48H12 está disponível da Amgen, Inc. A preparação e propriedades de 48H12 estão descritas na Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al, as divulgações das quais são aqui incorporadas por referência. As sequências de aminoácido de 48H12 são
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299 / 497 apresentadas na Tabela 34.
[00965] Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende uma cadeia pesada dada pela SEQ ID NO: 360 e uma cadeia leve dada pela SEQ ID NO: 361. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende cadeias pesadas e leves tendo as sequências mostradas na SEQ ID NO: 360 e SEQ ID NO: 361, respectivamente, ou fragmentos de ligação a antígeno, fragmentos Fab, fragmentos variáveis de cadeia única (scFv), variantes, ou conjugados dos mesmos. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 99% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 360 e SEQ ID NO: 361, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 98% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 360 e SEQ ID NO: 361, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 97% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 360 e SEQ ID NO: 361, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 96% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 360 e SEQ ID NO: 361, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 95% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 360 e SEQ ID NO: 361, respectivamente.
[00966] Em uma modalidade, o agonista de GITR compreende as CDRs ou regiões variáveis (VRs) de cadeia pesada e leve de 48H12. Em uma modalidade, a região variável da cadeia pesada (VH) do agonista de GITR compreende a sequência mostrada na SEQ ID NO: 362, e a região variável da cadeia leve (VL) do agonista de GITR compreende a sequência mostrada na SEQ ID NO: 363, e substituições de aminoácido conservativas das mesmas. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende as regiões VH e VL
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300/497 que são cada uma pelo menos 99% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 362 e SEQ ID NO: 363, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 98% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 362 e SEQ ID NO: 363, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 97% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 362 e SEQ ID NO: 363, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 96% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 362 e SEQ ID NO: 363, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 95% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 362 e SEQ ID NO: 363, respectivamente.
[00967] Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende os domínios CDR1, CDR2 e CDR3 da cadeia pesada tendo as sequências apresentadas na SEQ ID NO: 364, SEQ ID NO: 365, e SEQ ID NO: 366, respectivamente, e substituições de aminoácido conservativas das mesmas, e os domínios CDR1, CDR2 e CDR3 da cadeia leve tendo as sequências apresentadas na SEQ ID NO: 367, SEQ ID NO: 368, e SEQ ID NO: 369, respectivamente, e substituições de aminoácido conservativas das mesmas.
[00968] Em uma modalidade, o agonista de GITR é um anticorpo monoclonal agonista de GITR biossimilar aprovado pelas autoridades reguladoras de fármaco com referência ao 48H12. Em uma modalidade, o anticorpo monoclonal biossimilar compreende um anticorpo GITR compreendendo uma sequência de aminoácidos que tenha pelo menos 97 % de identidade de sequência, por exemplo, 97%, 98%, 99% ou 100% de identidade de sequência, com a sequência de aminoácidos do produto medicinal de referência ou produto biológico de referência e que compreende uma ou mais modificações pós-traducionais quando comparado com o
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301 /497 produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é 48H12. Em algumas modalidades, a uma ou mais modificações pós-traducionais são selecionada de uma ou mais de: glicosilação, oxidação, desamidação, e truncagem. Em algumas modalidades, o biossimilar é um agonista de anticorpo GITR autorizado ou submetido para autorização, em que o agonista de anticorpo GITR é provido em uma formulação que difere das formulações do produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é 48H12. O agonista de anticorpo GITR pode ser autorizado por uma autoridade reguladora de fármaco tal como o FDA dos Estados Unidos e/ou o EMA da União Européia. Em algumas modalidades, o biossimilar é provido como uma composição que compreende adicionalmente um ou mais excipientes, em que o um ou mais excipientes são os mesmos ou diferentes dos excipientes compreendidos no produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é 48H12. Em algumas modalidades, o biossimilar é provido como uma composição que compreende adicionalmente um ou mais excipientes, em que o um ou mais excipientes são os mesmos ou diferentes dos excipientes compreendidos no produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é 48H12.
TABELA 34. As sequências de aminoácidos para anticorpos agonistas de GITR relacionados com ο 48H12.
| Identificador | Sequência (Símbolos de aminoácido de uma letra) |
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| SEQ ID NO: 360 48H12 cadeia pesada | QVQLVESGGG VVQPGRSLRL SCAASGFTFS SYGMHWVRQA PGKGLEWVAV IWYAGSNKYY 60 ADSVKGRFTI SRDNSKNTVY LQMNSLRAED TAVYYCARGG QLALYYYYGM DVWGQGTTVT 120 VSSASTKGPS VFPLAPSSKS TSGGTAALGC LVKDYFPEPV TVSWNSGALT SGVHTFPAVL 180 QSSGLYSLSS VVTVPSSSLG TQTYICNVNH KPSNTKVDKK VEPKSCDKTH TCPPCPAPEL 240 LGGPSVFLFP PKPKDTLMIS RTPEVTCVVV DVSHEDPEVK FNWYVDGVEV HNAKTKPREE 300 QYNSTYRVVS VLTVLHQDWL NGKEYKCKVS NKALPAPIEK TISKAKGQPR EPQVYTLPPS 360 REEMTKNQVS LTCLVKGFYP SDIAVEWESN GQPENNYKTT PPVLDSDGSF FLYSKLTVDK 420 SRWQQGNVFS CSVMHEALHN HYTQKSLSLS PGK 453 |
| SEQ ID NO: 361 48H12 cadeia leve | DIQMTQSPSS LSASVGDRVT ITCRASQGIR NDLGWYQQKP GKAPKRLIYA ASSLQSGVPS 60 RFSGSGSGTE FTLTISSLQP EDFATYYCLQ HNNYPWTFGQ GTKVEIKRTV AAPSVFIFPP 120 SDEQLKSGTA SVVCLLNNFY PREAKVQWKV DNALQSGNSQ ESVTEQDSKD STYSLSSTLT 180 LSKADYEKHK VYACEVTHQG LSSPVTKSFN RGEC 214 |
| SEQ ID NO: 362 48H12 da cadeia pesada variável | QVQLVESGGG VVQPGRSLRL SCAASGFTFS SYGMHWVRQA PGKGLEWVAV IWYAGSNKYY 60 ADSVKGRFTI SRDNSKNTVY LQMNSLRAED TAVYYCARGG QLALYYYYGM DVWGQGTTVT 120 VSS 123 |
| SEQ ID NO: 363 48H12 da cadeia leve variável | DIQMTQSPSS LSASVGDRVT ITCRASQGIR NDLGWYQQKP GKAPKRLIYA ASSLQSGVPS 60 RFSGSGSGTE FTLTISSLQP EDFATYYCLQ HNNYPWTFGQ GTKVEIKR 108 |
| SEQ ID NO: 364 48H12CDR1 da cadeia pesada | SYGMH 5 |
| SEQ ID NO: 365 48H12 CDR2 da cadeia pesada | VIWYAGSNKY YADSVKG 17 |
| SEQ ID NO: 366 48H12 CDR3 da cadeia pesada | GGQLALYYYY GMDV 14 |
| SEQ ID NO: 367 48H12CDR1 da cadeia leve | RASQGIRNDL G 11 |
| SEQ ID NO: 368 48H12 CDR2 da cadeia leve | AASSLQS 7 |
| SEQ ID NO: 369 48H12 CDR3 da cadeia leve | LQHNNYPWT 9 |
[00969] Em uma modalidade preferida, o agonista de GITR é o anticorpo monoclonal 48H7, ou um fragmento, derivado, variante, ou biossimilar dos mesmos. 48H7 está disponível da Amgen, Inc. A preparação e propriedades de 48H7 estão descritas na Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al, as divulgações das quais são aqui incorporadas por referência. As sequências de aminoácido de 48H7 são
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303/497 apresentadas na Tabela 35.
[00970] Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende uma cadeia pesada dada pela SEQ ID NO: 370 e uma cadeia leve dada pela SEQ ID NO: 371. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende cadeias pesadas e leves tendo as sequências mostradas na SEQ ID NO: 370 e SEQ ID NO: 371, respectivamente, ou fragmentos de ligação a antígeno, fragmentos Fab, fragmentos variáveis de cadeia única (scFv), variantes, ou conjugados dos mesmos. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 99% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 370 e SEQ ID NO: 371, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 98% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 370 e SEQ ID NO: 371, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 97% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 370 e SEQ ID NO: 371, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 96% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 370 e SEQ ID NO: 371, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 95% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 370 e SEQ ID NO: 371, respectivamente.
[00971] Em uma modalidade, o agonista de GITR compreende as CDRs ou regiões variáveis (VRs) de cadeia pesada e leve de 48H7. Em uma modalidade, a região variável da cadeia pesada (VH) do agonista de GITR compreende a sequência mostrada na SEQ ID NO: 372, e a região variável da cadeia leve (VL) do agonista de GITR compreende a sequência mostrada na SEQ ID NO: 373, e substituições de aminoácido conservativas das mesmas. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende as regiões VH e VL
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304 / 497 que são cada uma pelo menos 99% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 372 e SEQ ID NO: 373, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 98% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 372 e SEQ ID NO: 373, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 97% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 372 e SEQ ID NO: 373, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 96% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 372 e SEQ ID NO: 373, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 95% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 372 e SEQ ID NO: 373, respectivamente.
[00972] Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende os domínios CDR1, CDR2 e CDR3 da cadeia pesada tendo as sequências apresentadas na SEQ ID NO: 374, SEQ ID NO: 375, e SEQ ID NO: 376, respectivamente, e substituições de aminoácido conservativas das mesmas, e os domínios CDR1, CDR2 e CDR3 da cadeia leve tendo as sequências apresentadas na SEQ ID NO: 377, SEQ ID NO: 378, e SEQ ID NO: 379, respectivamente, e substituições de aminoácido conservativas das mesmas.
[00973] Em uma modalidade, o agonista de GITR é um anticorpo monoclonal agonista de GITR biossimilar aprovado pelas autoridades reguladoras de fármaco com referência ao 48H7. Em uma modalidade, o anticorpo monoclonal biossimilar compreende um anticorpo GITR compreendendo uma sequência de aminoácidos que tenha pelo menos 97 % de identidade de sequência, por exemplo, 97%, 98%, 99% ou 100% de identidade de sequência, com a sequência de aminoácidos do produto medicinal de referência ou produto biológico de referência e que compreende uma ou mais modificações pós-traducionais quando comparado com o
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305/497 produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é 48H7. Em algumas modalidades, a uma ou mais modificações pós-traducionais são selecionada de uma ou mais de: glicosilação, oxidação, desamidação, e truncagem. Em algumas modalidades, o biossimilar é um agonista de anticorpo GITR autorizado ou submetido para autorização, em que o agonista de anticorpo GITR é provido em uma formulação que difere das formulações do produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é 48H7. O agonista de anticorpo GITR pode ser autorizado por uma autoridade reguladora de fármaco tal como o FDA dos Estados Unidos e/ou o EMA da União Européia. Em algumas modalidades, o biossimilar é provido como uma composição que compreende adicionalmente um ou mais excipientes, em que o um ou mais excipientes são os mesmos ou diferentes dos excipientes compreendidos no produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é 48H7. Em algumas modalidades, o biossimilar é provido como uma composição que compreende adicionalmente um ou mais excipientes, em que o um ou mais excipientes são os mesmos ou diferentes dos excipientes compreendidos no produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é 48H7.
TABELA 35. As sequências de aminoácidos para anticorpos agonistas de GITR relacionados com ο 48H7._____________________________________ | Identificador | Sequência (Símbolos de aminoácido de uma letra) |
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| SEQ ID NO: 370 cadeia pesada de 48H7 | QVQLVESGGG VVQPGRSLRL SCAASGFTFS SYGMYWVRQA PGKGLEWVAV IWYEGSNKYY 60 ADSVKGRFTI SRDNSKNTLY LQMNSLRAED TAVYFCARGG ELGRDYYSGM DVWGQGTTVT 120 VSSASTKGPS VFPLAPSSKS TSGGTAALGC LVKDYFPEPV TVSWNSGALT SGVHTFPAVL 180 QSSGLYSLSS VVTVPSSSLG TQTYICNVNH KPSNTKVDKK VEPKSCDKTH TCPPCPAPEL 240 LGGPSVFLFP PKPKDTLMIS RTPEVTCVVV DVSHEDPEVK FNWYVDGVEV HNAKTKPREE 300 QYNSTYRVVS VLTVLHQDWL NGKEYKCKVS NKALPAPIEK TISKAKGQPR EPQVYTLPPS 360 REEMTKNQVS LTCLVKGFYP SDIAVEWESN GQPENNYKTT PPVLDSDGSF FLYSKLTVDK 420 SRWQQGNVFS CSVMHEALHN HYTQKSLSLS PGK 453 |
| SEQ ID NO: 371 cadeia leve de 48H7 | DIQMTQSPSS LSASVGDRVT ITCRASQVIR NDLGWYQQKP GKAPKRLIYA ASSLQSGVPS 60 RFSGSGSGTE FTLTISSLQP EDFATYYCLQ HNSYPITFGG GTKVEIKRTV AAPSVFIFPP 120 SDEQLKSGTA SVVCLLNNFY PREAKVQWKV DNALQSGNSQ ESVTEQDSKD STYSLSSTLT 180 LSKADYEKHK VYACEVTHQG LSSPVTKSFN RGEC 214 |
| SEQ ID NO: 372 cadeia pesada variável de 48H7 | QVQLVESGGG VVQPGRSLRL SCAASGFTFS SYGMYWVRQA PGKGLEWVAV IWYEGSNKYY 60 ADSVKGRFTI SRDNSKNTLY LQMNSLRAED TAVYFCARGG ELGRDYYSGM DVWGQGTTVT 120 VSS 123 |
| SEQ ID NO: 373 cadeia leve variável de 48H7 | DIQMTQSPSS LSASVGDRVT ITCRASQVIR NDLGWYQQKP GKAPKRLIYA ASSLQSGVPS 60 RFSGSGSGTE FTLTISSLQP EDFATYYCLQ HNSYPITFGG GTKVEIKR 108 |
| SEQ ID NO: 374 CDR1 da cadeia pesada de 48H7 | SYGMY 5 |
| SEQ ID NO: 375 CDR2 da cadeia pesada de 48H7 | VIWYEGSNKY YADSVKG 17 |
| SEQ ID NO: 376 CDR3 da cadeia pesada de 48H7 | GGELGRDYYS GMDV 14 |
| SEQ ID NO: 377 CDR1 da cadeia leve de 48H7 | RASQVIRNDL G 11 |
| SEQ ID NO: 378 CDR2 da cadeia leve de 48H7 | AASSLQS 7 |
| SEQ ID NO: 379 CDR3 da cadeia leve de 48H7 | LQHNSYPIT 9 |
[00974] Em uma modalidade preferida, o agonista de GITR é o anticorpo monoclonal 49D9, ou um fragmento, derivado, variante, ou biossimilar dos mesmos. 49D9 está disponível da Amgen, Inc. A preparação e propriedades de 49D9 estão descritas na Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al, as divulgações das quais são aqui incorporadas por referência. As sequências de aminoácido de 49D9 são
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307 / 497 apresentadas na Tabela 36.
[00975] Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende uma cadeia pesada dada pela SEQ ID NO: 380 e uma cadeia leve dada pela SEQ ID NO: 381. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende cadeias pesadas e leves tendo as sequências mostradas na SEQ ID NO: 380 e SEQ ID NO: 381, respectivamente, ou fragmentos de ligação a antígeno, fragmentos Fab, fragmentos variáveis de cadeia única (scFv), variantes, ou conjugados dos mesmos. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 99% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 380 e SEQ ID NO: 381, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 98% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 380 e SEQ ID NO: 381, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 97% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 380 e SEQ ID NO: 381, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 96% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 380 e SEQ ID NO: 381, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 95% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 380 e SEQ ID NO: 381, respectivamente.
[00976] Em uma modalidade, o agonista de GITR compreende as CDRs ou regiões variáveis (VRs) de cadeia pesada e leve de 49D9. Em uma modalidade, a região variável da cadeia pesada (VH) do agonista de GITR compreende a sequência mostrada na SEQ ID NO: 382, e a região variável da cadeia leve (VL) do agonista de GITR compreende a sequência mostrada na SEQ ID NO: 383, e substituições de aminoácido conservativas das mesmas. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende as regiões VH e VL
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308/497 que são cada uma pelo menos 99% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 382 e SEQ ID NO: 383, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 98% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 382 e SEQ ID NO: 383, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 97% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 382 e SEQ ID NO: 383, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 96% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 382 e SEQ ID NO: 383, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 95% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 382 e SEQ ID NO: 383, respectivamente.
[00977] Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende os domínios CDR1, CDR2 e CDR3 da cadeia pesada tendo as sequências apresentadas na SEQ ID NO: 384, SEQ ID NO: 385, e SEQ ID NO: 386, respectivamente, e substituições de aminoácido conservativas das mesmas, e os domínios CDR1, CDR2 e CDR3 da cadeia leve tendo as sequências apresentadas na SEQ ID NO: 387, SEQ ID NO: 388, e SEQ ID NO: 389, respectivamente, e substituições de aminoácido conservativas das mesmas.
[00978] Em uma modalidade, o agonista de GITR é um anticorpo monoclonal agonista de GITR bios similar aprovado pelas autoridades reguladoras de fármaco com referência ao 49D9. Em uma modalidade, o anticorpo monoclonal biossimilar compreende um anticorpo GITR compreendendo uma sequência de aminoácidos que tenha pelo menos 97 % de identidade de sequência, por exemplo, 97%, 98%, 99% ou 100% de identidade de sequência, com a sequência de aminoácidos do produto medicinal de referência ou produto biológico de referência e que compreende uma ou mais modificações pós-traducionais quando comparado com o
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309/497 produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é 49D9. Em algumas modalidades, a uma ou mais modificações pós-traducionais são selecionada de uma ou mais de: glicosilação, oxidação, desamidação, e truncagem. Em algumas modalidades, o biossimilar é um agonista de anticorpo GITR autorizado ou submetido para autorização, em que o agonista de anticorpo GITR é provido em uma formulação que difere das formulações do produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é 49D9. O agonista de anticorpo GITR pode ser autorizado por uma autoridade reguladora de fármaco tal como o FDA dos Estados Unidos e/ou o EMA da União Européia. Em algumas modalidades, o biossimilar é provido como uma composição que compreende adicionalmente um ou mais excipientes, em que o um ou mais excipientes são os mesmos ou diferentes dos excipientes compreendidos no produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é 49D9. Em algumas modalidades, o biossimilar é provido como uma composição que compreende adicionalmente um ou mais excipientes, em que o um ou mais excipientes são os mesmos ou diferentes dos excipientes compreendidos no produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é 49D9.
TABELA 36. As sequências de aminoácidos para anticorpos agonistas de GITR relacionados com o 49D9._____________________________________ | Identificador | Sequência (Símbolos de aminoácido de uma letra) |
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| SEQ ID NO: 380 cadeia pesada de 49D9 | QMQLVESGGG VVQPGRSLRL SCAASGFTFS SYGMHWVRQA PGKGLEWVAV IWYAGSNKYY 60 ADSVKGRFTI SRDNSKNTLY LQMNSLRAED TAVYYCARGG RLGFYYYYGM DVWGQGTTVT 120 VSSASTKGPS VFPLAPSSKS TSGGTAALGC LVKDYFPEPV TVSWNSGALT SGVHTFPAVL 180 QSSGLYSLSS VVTVPSSSLG TQTYICNVNH KPSNTKVDKK VEPKSCDKTH TCPPCPAPEL 240 LGGPSVFLFP PKPKDTLMIS RTPEVTCVVV DVSHEDPEVK FNWYVDGVEV HNAKTKPREE 300 QYNSTYRVVS VLTVLHQDWL NGKEYKCKVS NKALPAPIEK TISKAKGQPR EPQVYTLPPS 360 REEMTKNQVS LTCLVKGFYP SDIAVEWESN GQPENNYKTT PPVLDSDGSF FLYSKLTVDK 420 SRWQQGNVFS CSVMHEALHN HYTQKSLSLS PGK 453 |
| SEQ ID NO: 381 cadeia leve de 49D9 | DIQMTQSPSS LSASVGDRVT ITCRASQGIR NDLGWYQQKP GKAPKRLIYA ASSLQSGVPS 60 RFSGSGSGTE FTLTISSLQP EDFATYYCLQ LNSYPWTFGQ GTKVEIKRTV AAPSVFIFPP 120 SDEQLKSGTA SVVCLLNNFY PREAKVQWKV DNALQSGNSQ ESVTEQDSKD STYSLSSTLT 180 LSKADYEKHK VYACEVTHQG LSSPVTKSFN RGEC 214 |
| SEQ ID NO: 382 cadeia pesada variável de 49D9 | QMQLVESGGG VVQPGRSLRL SCAASGFTFS SYGMHWVRQA PGKGLEWVAV IWYAGSNKYY 60 ADSVKGRFTI SRDNSKNTLY LQMNSLRAED TAVYYCARGG RLGFYYYYGM DVWGQGTTVT 120 VSS 123 |
| SEQ ID NO: 383 cadeia leve variável de 49D9 | DIQMTQSPSS LSASVGDRVT ITCRASQGIR NDLGWYQQKP GKAPKRLIYA ASSLQSGVPS 60 RFSGSGSGTE FTLTISSLQP EDFATYYCLQ LNSYPWTFGQ GTKVEIKR 108 |
| SEQ ID NO: 384 CDR1 da cadeia pesada de 49D9 | SYGMH 5 |
| SEQ ID NO: 385 CDR2 da cadeia pesada de 49D9 | VIWYAGSNKY YADSVKG 17 |
| SEQ ID NO: 386 CDR3 da cadeia pesada de 49D9 | GGRLGFYYYY GMDV 14 |
| SEQ ID NO: 387 CDR1 da cadeia leve de 49D9 | RASQGIRNDL G 11 |
| SEQ ID NO: 388 CDR2 da cadeia leve de 49D9 | AASSLQS 7 |
| SEQ ID NO: 389 CDR3 da cadeia leve de 49D9 | LQLNSYPWT 9 |
[00979] Em uma modalidade preferida, o agonista de GITR é o anticorpo monoclonal 49E2, ou um fragmento, derivado, variante, ou biossimilar dos mesmos. 49E2 está disponível da Amgen, Inc. A preparação e propriedades de 49E2 estão descritas na Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al, as divulgações das quais são aqui incorporadas por referência. As sequências de aminoácido de 49E2 são apresentadas na Tabela
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37.
[00980] Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende uma cadeia pesada dada pela SEQ ID NO: 390 e uma cadeia leve dada pela SEQ ID NO: 391. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende cadeias pesadas e leves tendo as sequências mostradas na SEQ ID NO: 390 e SEQ ID NO: 391, respectivamente, ou fragmentos de ligação a antígeno, fragmentos Fab, fragmentos variáveis de cadeia única (scFv), variantes, ou conjugados dos mesmos. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 99% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 390 e SEQ ID NO: 391, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 98% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 390 e SEQ ID NO: 391, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 97% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 390 e SEQ ID NO: 391, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 96% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 390 e SEQ ID NO: 391, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 95% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 390 e SEQ ID NO: 391, respectivamente.
[00981] Em uma modalidade, o agonista de GITR compreende as CDRs ou regiões variáveis (VRs) de cadeia pesada e leve de 49E2. Em uma modalidade, a região variável da cadeia pesada (VH) do agonista de GITR compreende a sequência mostrada na SEQ ID NO: 392, e a região variável da cadeia leve (VL) do agonista de GITR compreende a sequência mostrada na SEQ ID NO: 393, e substituições de aminoácido conservativas das mesmas. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende as regiões VH e VL
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312/497 que são cada uma pelo menos 99% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 392 e SEQ ID NO: 393, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 98% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 392 e SEQ ID NO: 393, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 97% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 392 e SEQ ID NO: 393, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 96% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 392 e SEQ ID NO: 393, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 95% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 392 e SEQ ID NO: 393, respectivamente.
[00982] Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende os domínios CDR1, CDR2 e CDR3 da cadeia pesada tendo as sequências apresentadas na SEQ ID NO: 394, SEQ ID NO: 395, e SEQ ID NO: 396, respectivamente, e substituições de aminoácido conservativas das mesmas, e os domínios CDR1, CDR2 e CDR3 da cadeia leve tendo as sequências apresentadas na SEQ ID NO: 397, SEQ ID NO: 398, e SEQ ID NO: 399, respectivamente, e substituições de aminoácido conservativas das mesmas.
[00983] Em uma modalidade, o agonista de GITR é um anticorpo monoclonal agonista de GITR biossimilar aprovado pelas autoridades reguladoras de fármaco com referência ao 49E2. Em uma modalidade, o anticorpo monoclonal biossimilar compreende um anticorpo GITR compreendendo uma sequência de aminoácidos que tenha pelo menos 97 % de identidade de sequência, por exemplo, 97%, 98%, 99% ou 100% de identidade de sequência, com a sequência de aminoácidos do produto medicinal de referência ou produto biológico de referência e que compreende uma ou mais modificações pós-traducionais quando comparado com o
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313/497 produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é 49E2. Em algumas modalidades, a uma ou mais modificações pós-traducionais são selecionada de uma ou mais de: glicosilação, oxidação, desamidação, e truncagem. Em algumas modalidades, o biossimilar é um agonista de anticorpo GITR autorizado ou submetido para autorização, em que o agonista de anticorpo GITR é provido em uma formulação que difere das formulações do produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é 49E2. O agonista de anticorpo GITR pode ser autorizado por uma autoridade reguladora de fármaco tal como o FDA dos Estados Unidos e/ou o EMA da União Européia. Em algumas modalidades, o biossimilar é provido como uma composição que compreende adicionalmente um ou mais excipientes, em que o um ou mais excipientes são os mesmos ou diferentes dos excipientes compreendidos no produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é 49E2. Em algumas modalidades, o biossimilar é provido como uma composição que compreende adicionalmente um ou mais excipientes, em que o um ou mais excipientes são os mesmos ou diferentes dos excipientes compreendidos no produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é 49E2.
TABELA 37. As sequências de aminoácidos para anticorpos agonistas de GITR relacionados com ο 49E2.______________________________________ | Identificador | Sequência (Símbolos de aminoácido de uma letra) |
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| SEQ ID NO: 390 cadeia pesada de 49E2 | QVQLVESGGG VVQPGRSLRL SCAASGFTFS SYGMHWVRQA PGKGLEWVAV IWSDGNNKYY 60 EDSVKGRFTI SRDSSKNTLF LQMNSLRAED TAVYYCARDT ATPFDYWGQG TLVTVSSAST 120 KGPSVFPLAP SSKSTSGGTA ALGCLVKDYF PEPVTVSWNS GALTSGVHTF PAVLQSSGLY 180 SLSSVVTVPS SSLGTQTYIC NVNHKPSNTK VDKKVEPKSC DKTHTCPPCP APELLGGPSV 240 FLFPPKPKDT LMISRTPEVT CVVVDVSHED PEVKFNWYVD GVEVHNAKTK PREEQYNSTY 300 RVVSVLTVLH QDWLNGKEYK CKVSNKALPA PIEKTISKAK GQPREPQVYT LPPSREEMTK 360 NQVSLTCLVK GFYPSDIAVE WESNGQPENN YKTTPPVLDS DGSFFLYSKL TVDKSRWQQG 420 NVFSCSVMHE ALHNHYTQKS LSLSPGK 447 |
| SEQ ID NO: 391 cadeia leve de 49E2 | QSALTQPASV SGSPGQSITI SCTGTSSDVG IYNLVSWYQQ HPGKAPKLMI HEVSKRPSGV 60 SNRFSGSKSG NTASLTISGL QAEDEADYYC CSYAGISTWV FGGGTKLTVL GQPKAAPSVT 120 LFPPSSEELQ ANKATLVCLI SDFYPGAVTV AWKADSSPVK AGVETTTPSK QSNNKYAASS 180 ILSLTPEQWK SHRSYSCQVT HEGSTVEKTV APTECS 216 |
| SEQ ID NO: 392 cadeia pesada variável de 49E2 | QVQLVESGGG VVQPGRSLRL SCAASGFTFS SYGMHWVRQA PGKGLEWVAV IWSDGNNKYY 60 EDSVKGRFTI SRDSSKNTLF LQMNSLRAED TAVYYCARDT ATPFDYWGQG TLVTVSS 117 |
| SEQ ID NO: 393 cadeia leve variável de 49E2 | QSALTQPASV SGSPGQSITI SCTGTSSDVG IYNLVSWYQQ HPGKAPKLMI HEVSKRPSGV 60 SNRFSGSKSG NTASLTISGL QAEDEADYYC CSYAGISTWV FGGGTKLTVL G 111 |
| SEQ ID NO: 394 CDR1 da cadeia pesada de 49E2 | SYGMH 5 |
| SEQ ID NO: 395 CDR2 da cadeia pesada de 49E2 | VIWSDGNNKY YEDSVKG 17 |
| SEQ ID NO: 396 CDR3 da cadeia pesada de 49E2 | DTATPFDY 8 |
| SEQ ID NO: 397 CDR1 da cadeia leve de 49E2 | TGTSSDVGIY NLVS 14 |
| SEQ ID NO: 398 CDR2 da cadeia leve de 49E2 | EVSKRPS 7 |
| SEQ ID NO: 399 CDR3 da cadeia leve de 49E2 | CSYAGISTWV 10 |
[00984] Em uma modalidade preferida, o agonista de GITR é o anticorpo monoclonal 48A9, ou um fragmento, derivado, variante, ou biossimilar dos mesmos. 48A9 está disponível da Amgen, Inc. A preparação e propriedades de 48A9 estão descritas na Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al, as divulgações das quais são aqui incorporadas por referência. As sequências de aminoácido de 48A9 são
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315/497 apresentadas na Tabela 38.
[00985] Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende uma cadeia pesada dada pela SEQ ID NO: 400 e uma cadeia leve dada pela SEQ ID NO: 401. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende cadeias pesadas e leves tendo as sequências mostradas na SEQ ID NO: 400 e SEQ ID NO: 401, respectivamente, ou fragmentos de ligação a antígeno, fragmentos Fab, fragmentos variáveis de cadeia única (scFv), variantes, ou conjugados dos mesmos. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 99% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 400 e SEQ ID NO: 401, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 98% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 400 e SEQ ID NO: 401, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 97% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 400 e SEQ ID NO: 401, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 96% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 400 e SEQ ID NO: 401, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 95% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 400 e SEQ ID NO: 401, respectivamente.
[00986] Em uma modalidade, o agonista de GITR compreende as CDRs ou regiões variáveis (VRs) de cadeia pesada e leve de 48A9. Em uma modalidade, a região variável da cadeia pesada (VH) do agonista de GITR compreende a sequência mostrada na SEQ ID NO: 402, e a região variável da cadeia leve (VL) do agonista de GITR compreende a sequência mostrada na SEQ ID NO: 403, e substituições de aminoácido conservativas das mesmas. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende as regiões VH e VL
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316/497 que são cada uma pelo menos 99% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 402 e SEQ ID NO: 403, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 98% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 402 e SEQ ID NO: 403, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 97% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 402 e SEQ ID NO: 403, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 96% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 402 e SEQ ID NO: 403, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 95% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 402 e SEQ ID NO: 403, respectivamente.
[00987] Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende os domínios CDR1, CDR2 e CDR3 da cadeia pesada tendo as sequências apresentadas na SEQ ID NO: 404, SEQ ID NO: 405, e SEQ ID NO: 406, respectivamente, e substituições de aminoácido conservativas das mesmas, e os domínios CDR1, CDR2 e CDR3 da cadeia leve tendo as sequências apresentadas na SEQ ID NO: 407, SEQ ID NO: 408, e SEQ ID NO: 409, respectivamente, e substituições de aminoácido conservativas das mesmas.
[00988] Em uma modalidade, o agonista de GITR é um anticorpo monoclonal agonista de GITR biossimilar aprovado pelas autoridades reguladoras de fármaco com referência ao 48A9. Em uma modalidade, o anticorpo monoclonal biossimilar compreende um anticorpo GITR compreendendo uma sequência de aminoácidos que tenha pelo menos 97 % de identidade de sequência, por exemplo, 97%, 98%, 99% ou 100% de identidade de sequência, com a sequência de aminoácidos do produto medicinal de referência ou produto biológico de referência e que compreende uma ou mais modificações pós-traducionais quando comparado com o
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317/497 produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é 48A9. Em algumas modalidades, a uma ou mais modificações pós-traducionais são selecionada de uma ou mais de: glicosilação, oxidação, desamidação, e truncagem. Em algumas modalidades, o biossimilar é um agonista de anticorpo GITR autorizado ou submetido para autorização, em que o agonista de anticorpo GITR é provido em uma formulação que difere das formulações do produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é 48A9. O agonista de anticorpo GITR pode ser autorizado por uma autoridade reguladora de fármaco tal como o FDA dos Estados Unidos e/ou o EMA da União Européia. Em algumas modalidades, o biossimilar é provido como uma composição que compreende adicionalmente um ou mais excipientes, em que o um ou mais excipientes são os mesmos ou diferentes dos excipientes compreendidos no produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é 48A9. Em algumas modalidades, o biossimilar é provido como uma composição que compreende adicionalmente um ou mais excipientes, em que o um ou mais excipientes são os mesmos ou diferentes dos excipientes compreendidos no produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é 48A9.
TABELA 38. As sequências de aminoácidos para anticorpos agonistas de GITR relacionados com o 48 A9._______________________________________ | Identificador | Sequência (Símbolos de aminoácido de uma letra) |
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| SEQ ID NO: 400 cadeia pesada de 48 A9 | QVQLVESGGG VVQPGRSLRL SCAASGFTFS SCGMHWVRQA PGKGLEWVAV ISYDGSNKYY 60 ADSVKGRFTI SRDNSKNTLY LQMNSLRAED TAVYYCARDL RYNWNDGGVD YWGQGTLVTV 120 SSASTKGPSV FPLAPSSKST SGGTAALGCL VKDYFPEPVT VSWNSGALTS GVHTFPAVLQ 180 SSGLYSLSSV VTVPSSSLGT QTYICNVNHK PSNTKVDKKV EPKSCDKTHT CPPCPAPELL 240 GGPSVFLFPP KPKDTLMISR TPEVTCVVVD VSHEDPEVKF NWYVDGVEVH NAKTKPREEQ 300 YNSTYRVVSV LTVLHQDWLN GKEYKCKVSN KALPAPIEKT ISKAKGQPRE PQVYTLPPSR 360 EEMTKNQVSL TCLVKGFYPS DIAVEWESNG QPENNYKTTP PVLDSDGSFF LYSKLTVDKS 420 RWQQGNVFSC SVMHEALHNH YTQKSLSLSP GK 452 |
| SEQ ID NO: 401 cadeia leve de 48 A9 | DIQMTQSPSS LSASVGDRVIITCRASQSIS SILHWYKQKP GKAPKLLIYG ASRLQSGVPS 60 RFSGSGSGTD FTLTISSLQP EDFATYYCQQ SSSTPLTFGG GTKVEIKRTV AAPSVFIFPP 120 SDEQLKSGTA SVVCLLNNFY PREAKVQWKV DNALQSGNSQ ESVTEQDSKD STYSLSSTLT 180 LSKADYEKHK VYACEVTHQG LSSPVTKSFN RGEC 214 |
| SEQ ID NO: 402 cadeia pesada variável de 48A9 | QVQLVESGGG VVQPGRSLRL SCAASGFTFS SCGMHWVRQA PGKGLEWVAV ISYDGSNKYY 60 ADSVKGRFTI SRDNSKNTLY LQMNSLRAED TAVYYCARDL RYNWNDGGVD YWGQGTLVTV 120 SS 122 |
| SEQ ID NO: 403 cadeia leve variável de 48A9 | DIQMTQSPSS LSASVGDRVI ITCRASQSIS SILHWYKQKP GKAPKLLIYG ASRLQSGVPS 60 RFSGSGSGTD FTLTISSLQP EDFATYYCQQ SSSTPLTFGG GTKVEIKR 108 |
| SEQ ID NO: 404 CDR1 da cadeia pesada de 48A9 | SCGMH 5 |
| SEQ ID NO: 405 CDR2 da cadeia pesada de 48A9 | VISYDGSNKY YADSVKG 17 |
| SEQ ID NO: 406 CDR3 da cadeia pesada de 48A9 | DLRYNWNDGG VDY 13 |
| SEQ ID NO: 407 CDR1 da cadeia leve de 48 A9 | RASQSISSILH 11 |
| SEQ ID NO: 408 CDR2 da cadeia leve de 48 A9 | GASRLQS 7 |
| SEQ ID NO: 409 CDR3 da cadeia leve de 48 A9 | QQSSSTPLT 9 |
[00989] Em uma modalidade preferida, o agonista de GITR é o anticorpo monoclonal 5H7, ou um fragmento, derivado, variante, ou biossimilar dos mesmos. 5H7 está disponível da Amgen, Inc. A preparação e propriedades de 5H7 estão descritas na Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al, as divulgações das quais são aqui incorporadas por referência. As sequências de aminoácido de 5H7 são apresentadas na Tabela
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39.
[00990] Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende uma cadeia pesada dada pela SEQ ID NO: 410 e uma cadeia leve dada pela SEQ ID NO: 411. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende cadeias pesadas e leves tendo as sequências mostradas na SEQ ID NO: 410 e SEQ ID NO: 411, respectivamente, ou fragmentos de ligação a antígeno, fragmentos Fab, fragmentos variáveis de cadeia única (scFv), variantes, ou conjugados dos mesmos. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 99% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 410 e SEQ ID NO: 411, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 98% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 410 e SEQ ID NO: 411, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 97% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 410 e SEQ ID NO: 411, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 96% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 410 e SEQ ID NO: 411, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 95% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 410 e SEQ ID NO: 411, respectivamente.
[00991] Em uma modalidade, o agonista de GITR compreende as CDRs ou regiões variáveis (VRs) de cadeia pesada e leve de 5H7. Em uma modalidade, a região variável da cadeia pesada (VH) do agonista de GITR compreende a sequência mostrada na SEQ ID NO: 412, e a região variável da cadeia leve (VL) do agonista de GITR compreende a sequência mostrada na SEQ ID NO: 413, e substituições de aminoácido conservativas das mesmas. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende as regiões VH e VL
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320 / 497 que são cada uma pelo menos 99% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 412 e SEQ ID NO: 413, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 98% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 412 e SEQ ID NO: 413, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 97% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 412 e SEQ ID NO: 413, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 96% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 412 e SEQ ID NO: 413, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 95% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 412 e SEQ ID NO: 413, respectivamente.
[00992] Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende os domínios CDR1, CDR2 e CDR3 da cadeia pesada tendo as sequências apresentadas na SEQ ID NO: 414, SEQ ID NO: 415, e SEQ ID NO: 416, respectivamente, e substituições de aminoácido conservativas das mesmas, e os domínios CDR1, CDR2 e CDR3 da cadeia leve tendo as sequências apresentadas na SEQ ID NO: 417, SEQ ID NO: 418, e SEQ ID NO: 419, respectivamente, e substituições de aminoácido conservativas das mesmas.
[00993] Em uma modalidade, o agonista de GITR é um anticorpo monoclonal agonista de GITR biossimilar aprovado pelas autoridades reguladoras de fármaco com referência ao 5H7. Em uma modalidade, o anticorpo monoclonal biossimilar compreende um anticorpo GITR compreendendo uma sequência de aminoácidos que tenha pelo menos 97 % de identidade de sequência, por exemplo, 97%, 98%, 99% ou 100% de identidade de sequência, com a sequência de aminoácidos do produto medicinal de referência ou produto biológico de referência e que compreende uma ou mais modificações pós-traducionais quando comparado com o
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321/497 produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é 5H7. Em algumas modalidades, a uma ou mais modificações pós-traducionais são selecionada de uma ou mais de: glicosilação, oxidação, desamidação, e truncagem. Em algumas modalidades, o biossimilar é um agonista de anticorpo GITR autorizado ou submetido para autorização, em que o agonista de anticorpo GITR é provido em uma formulação que difere das formulações do produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é 5H7. O agonista de anticorpo GITR pode ser autorizado por uma autoridade reguladora de fármaco tal como o FDA dos Estados Unidos e/ou o EMA da União Européia. Em algumas modalidades, o biossimilar é provido como uma composição que compreende adicionalmente um ou mais excipientes, em que o um ou mais excipientes são os mesmos ou diferentes dos excipientes compreendidos no produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é 5H7. Em algumas modalidades, o biossimilar é provido como uma composição que compreende adicionalmente um ou mais excipientes, em que o um ou mais excipientes são os mesmos ou diferentes dos excipientes compreendidos no produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é 5H7.
TABELA 39. As sequências de aminoácidos para anticorpos agonistas de GITR relacionados com ο 5H7.______________________________________ | Identificador | Sequência (Símbolos de aminoácido de uma letra) |
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322 / 497
| SEQ ID NO: 410 cadeia pesada de 5H7 | QVQLQESGPG LVKPSQTLSL TCTVSGGSIS SGGYFWSWIR QHPGKGLEWI GYIYYSGTTY 60 YNPSLKSRVT ISIDTSKNHF SLKLSSVTAA DTAVYYCARD LFYYDSSGPR GFDPWGQGTL 120 VTVSSASTKG PSVFPLAPSS KSTSGGTAAL GCLVKDYFPE PVTVSWNSGA LTSGVHTFPA 180 VLQSSGLYSL SSVVTVPSSS LGTQTYICNV NHKPSNTKVD KRVEPKSCDK THTCPPCPAP 240 ELLGGPSVFL FPPKPKDTLM ISRTPEVTCV VVDVSHEDPE VKFNWYVDGV EVHNAKTKPR 300 EEQYNSTYRV VSVLTVLHQD WLNGKEYKCK VSNKALPAPI EKTISKAKGQ PREPQVYTLP 360 PSREEMTKNQ VSLTCLVKGF YPSDIAVEWE SNGQPENNYK TTPPVLDSDG SFFLYSKLTV 420 DKSRWQQGNV FSCSVMHEAL HNHYTQKSLS LSPGK 455 |
| SEQ ID NO: 411 cadeia leve de 5H7 | EIVLTQSPGT LSLSPGERAT LSCRASQTVS SNILAWYQQK PGQAPRLLIY GSSTRATGIP 60 DRFSGSGSGT DFTLTISRLE PEDFAVYYCQ QYDSSPWTFG QGTKVEIKRT VAAPSVFIFP 120 PSDEQLKSGT ASVVCLLNNF YPREAKVQWK VDNALQSGNS QESVTEQDSK DSTYSLSSTL 180 TLSKADYEKH KVYACEVTHQ GLSSPVTKSF NRGEC 215 |
| SEQ ID NO: 412 cadeia pesada variável de 5H7 | QVQLQESGPG LVKPSQTLSL TCTVSGGSIS SGGYFWSWIR QHPGKGLEWI GYIYYSGTTY 60 YNPSLKSRVT ISIDTSKNHF SLKLSSVTAA DTAVYYCARD LFYYDSSGPR GFDPWGQGTL 120 VTVSS 125 |
| SEQ ID NO: 413 cadeia leve variável de 5H7 | EIVLTQSPGT LSLSPGERAT LSCRASQTVS SNILAWYQQK PGQAPRLLIY GSSTRATGIP 60 DRFSGSGSGT DFTLTISRLE PEDFAVYYCQ QYDSSPWTFG QGTKVEIKR 109 |
| SEQ ID NO: 414 CDR1 da cadeia pesada de 5H7 | SGGYFWS 7 |
| SEQ ID NO: 415 CDR2 da cadeia pesada de 5H7 | YIYYSGTTYY NPSLKS 16 |
| SEQ ID NO: 416 CDR3 da cadeia pesada de 5H7 | DLFYYDSSGP RGFDP 15 |
| SEQ ID NO: 417 CDR1 da cadeia leve de 5H7 | RASQTVSSNY LA 12 |
| SEQ ID NO: 418 CDR2 da cadeia leve de 5H7 | GSSTRAT 7 |
| SEQ ID NO: 419 CDR3 da cadeia leve de 5H7 | QQYDSSPWT 9 |
[00994] Em uma modalidade preferida, o agonista de GITR é o anticorpo monoclonal 7A10, ou um fragmento, derivado, variante, ou biossimilar dos mesmos. 7A10 está disponível da Amgen, Inc. A preparação e propriedades de 7A10 estão descritas na Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al, as divulgações das quais são aqui incorporadas por referência. As sequências de aminoácido de 7A10 são
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323 / 497 apresentadas na Tabela 40.
[00995] Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende uma cadeia pesada dada pela SEQ ID NO: 420 e uma cadeia leve dada pela SEQ ID NO: 421. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende cadeias pesadas e leves tendo as sequências mostradas na SEQ ID NO: 420 e SEQ ID NO: 421, respectivamente, ou fragmentos de ligação a antígeno, fragmentos Fab, fragmentos variáveis de cadeia única (scFv), variantes, ou conjugados dos mesmos. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 99% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 420 e SEQ ID NO: 421, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 98% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 420 e SEQ ID NO: 421, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 97% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 420 e SEQ ID NO: 421, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 96% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 420 e SEQ ID NO: 421, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 95% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 420 e SEQ ID NO: 421, respectivamente.
[00996] Em uma modalidade, o agonista de GITR compreende as CDRs ou regiões variáveis (VRs) de cadeia pesada e leve de 7A10. Em uma modalidade, a região variável da cadeia pesada (VH) do agonista de GITR compreende a sequência mostrada na SEQ ID NO: 422, e a região variável da cadeia leve (VL) do agonista de GITR compreende a sequência mostrada na SEQ ID NO: 423, e substituições de aminoácido conservativas das mesmas. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende as regiões VH e VL
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324 / 497 que são cada uma pelo menos 99% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 422 e SEQ ID NO: 423, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 98% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 422 e SEQ ID NO: 423, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 97% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 422 e SEQ ID NO: 423, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 96% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 422 e SEQ ID NO: 423, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 95% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 422 e SEQ ID NO: 423, respectivamente.
[00997] Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende os domínios CDR1, CDR2 e CDR3 da cadeia pesada tendo as sequências apresentadas na SEQ ID NO: 424, SEQ ID NO: 425, e SEQ ID NO: 426, respectivamente, e substituições de aminoácido conservativas das mesmas, e os domínios CDR1, CDR2 e CDR3 da cadeia leve tendo as sequências apresentadas na SEQ ID NO: 427, SEQ ID NO: 428, e SEQ ID NO: 429, respectivamente, e substituições de aminoácido conservativas das mesmas.
[00998] Em uma modalidade, o agonista de GITR é um anticorpo monoclonal agonista de GITR biossimilar aprovado pelas autoridades reguladoras de fármaco com referência ao 7A10. Em uma modalidade, o anticorpo monoclonal biossimilar compreende um anticorpo GITR compreendendo uma sequência de aminoácidos que tenha pelo menos 97 % de identidade de sequência, por exemplo, 97%, 98%, 99% ou 100% de identidade de sequência, com a sequência de aminoácidos do produto medicinal de referência ou produto biológico de referência e que compreende uma ou mais modificações pós-traducionais quando comparado com o
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325/497 produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é 7A10. Em algumas modalidades, a uma ou mais modificações pós-traducionais são selecionada de uma ou mais de: glicosilação, oxidação, desamidação, e truncagem. Em algumas modalidades, o biossimilar é um agonista de anticorpo GITR autorizado ou submetido para autorização, em que o agonista de anticorpo GITR é provido em uma formulação que difere das formulações do produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é 7A10. O agonista de anticorpo GITR pode ser autorizado por uma autoridade reguladora de fármaco tal como o FDA dos Estados Unidos e/ou o EMA da União Européia. Em algumas modalidades, o biossimilar é provido como uma composição que compreende adicionalmente um ou mais excipientes, em que o um ou mais excipientes são os mesmos ou diferentes dos excipientes compreendidos no produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é 7A10. Em algumas modalidades, o biossimilar é provido como uma composição que compreende adicionalmente um ou mais excipientes, em que o um ou mais excipientes são os mesmos ou diferentes dos excipientes compreendidos no produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é 7A10.
TABELA 40. As sequências de aminoácidos para anticorpos agonistas de GITR relacionados com ο 7A10._____________________________________ | Identificador | Sequência (Símbolos de aminoácido de uma letra) |
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| SEQ ID NO: 420 cadeia pesada de 7A10 | QVQLVESGGG VVQPGRSLRL SCAASGFTFS SYGMHWVRQA PGKGLEWMAV IWYVGSNKYY 60 ADSVKGRFTI SRDNSKNTLY LQMNSLSAED TAVYYCARGG ELGRDYYSGM DVWGQGTTVT 120 VSSASTKGPS VFPLAPSSKS TSGGTAALGC LVKDYFPEPV TVSWNSGALT SGVHTFPAVL 180 QSSGLYSLSS VVTVPSSSLG TQTYICNVNH KPSNTKVDKR VEPKSCDKTH TCPPCPAPEL 240 LGGPSVFLFP PKPKDTLMIS RTPEVTCVVV DVSHEDPEVK FNWYVDGVEV HNAKTKPREE 300 QYNSTYRVVS VLTVLHQDWL NGKEYKCKVS NKALPAPIEK TISKAKGQPR EPQVYTLPPS 360 REEMTKNQVS LTCLVKGFYP SDIAVEWESN GQPENNYKTT PPVLDSDGSF FLYSKLTVDK 420 SRWQQGNVFS CSVMHEALHN HYTQKSLSLS PGK 453 |
| SEQ ID NO: 421 cadeia leve de 7A10 | DIQMTQSPSS LSASVGDRVT ITCRASQGIR NDLGWYQQKP GKAPKRLIYA ASSLQSGVPS 60 RFSGSGSGTE FTLTISSLQP EDFATYYCQQ HNSYPWTFGQ GTKVEIKRTV AAPSVFIFPP 120 SDEQLKSGTA SVVCLLNNFY PREAKVQWKV DNALQSGNSQ ESVTEQDSKD STYSLSSTLT 180 LSKADYEKHK VYACEVTHQG LSSPVTKSFN RGEC 214 |
| SEQ ID NO: 422 cadeia pesada variável de 7Al0 | QVQLVESGGG VVQPGRSLRL SCAASGFTFS SYGMHWVRQA PGKGLEWMAV IWYVGSNKYY 60 ADSVKGRFTI SRDNSKNTLY LQMNSLSAED TAVYYCARGG ELGRDYYSGM DVWGQGTTVT 120 VSS 123 |
| SEQ ID NO: 423 cadeia leve variável de 7A10 | DIQMTQSPSS LSASVGDRVT ITCRASQGIR NDLGWYQQKP GKAPKRLIYA ASSLQSGVPS 60 RFSGSGSGTE FTLTISSLQP EDFATYYCQQ HNSYPWTFGQ GTKVEIKR 108 |
| SEQ ID NO: 424 CDR1 da cadeia pesada de 7A10 | SYGMH 5 |
| SEQ ID NO: 425 CDR2 da cadeia pesada de 7A10 | VIWYVGSNKY YADSVKG 17 |
| SEQ ID NO: 426 CDR3 da cadeia pesada de 7A10 | GGELGRDYYS GMDV 14 |
| SEQ ID NO: 427 CDR1 da cadeia leve de 7A10 | RASQGIRNDL G 11 |
| SEQ ID NO: 428 CDR2 da cadeia leve de 7A10 | AASSLQS 7 |
| SEQ ID NO: 429 CDR3 da cadeia leve de 7A10 | QQHNSYPWT 9 |
[00999] Em uma modalidade preferida, o agonista de GITR é o anticorpo monoclonal 9H6, ou um fragmento, derivado, variante, ou biossimilar dos mesmos. 9H6 está disponível da Amgen, Inc. A preparação e propriedades de 9H6 estão descritas na Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0064204 Al, as divulgações das quais são aqui incorporadas por referência. As sequências de aminoácido de 9H6 são apresentadas na Tabela
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41.
[001000] Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende uma cadeia pesada dada pela SEQ ID NO: 430 e uma cadeia leve dada pela SEQ ID NO: 431. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende cadeias pesadas e leves tendo as sequências mostradas na SEQ ID NO: 430 e SEQ ID NO: 431, respectivamente, ou fragmentos de ligação a antígeno, fragmentos Fab, fragmentos variáveis de cadeia única (scFv), variantes, ou conjugados dos mesmos. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 99% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 430 e SEQ ID NO: 431, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 98% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 430 e SEQ ID NO: 431, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 97% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 430 e SEQ ID NO: 431, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 96% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 430 e SEQ ID NO: 431, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 95% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 430 e SEQ ID NO: 431, respectivamente.
[001001] Em uma modalidade, o agonista de GITR compreende as CDRs ou regiões variáveis (VRs) de cadeia pesada e leve de 9H6. Em uma modalidade, a região variável da cadeia pesada (VH) do agonista de GITR compreende a sequência mostrada na SEQ ID NO: 432, e a região variável da cadeia leve (VL) do agonista de GITR compreende a sequência mostrada na SEQ ID NO: 433, e substituições de aminoácido conservativas das mesmas. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende as regiões VH e VL
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328 / 497 que são cada uma pelo menos 99% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 432 e SEQ ID NO: 433, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 98% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 432 e SEQ ID NO: 433, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 97% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 432 e SEQ ID NO: 433, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 96% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 432 e SEQ ID NO: 433, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 95% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 432 e SEQ ID NO: 433, respectivamente.
[001002] Em uma modalidade, um agonista de GITR compreende os domínios CDR1, CDR2 e CDR3 da cadeia pesada tendo as sequências apresentadas na SEQ ID NO: 434, SEQ ID NO: 435, e SEQ ID NO: 436, respectivamente, e substituições de aminoácido conservativas das mesmas, e os domínios CDR1, CDR2 e CDR3 da cadeia leve tendo as sequências apresentadas na SEQ ID NO: 437, SEQ ID NO: 438, e SEQ ID NO: 439, respectivamente, e substituições de aminoácido conservativas das mesmas.
[001003] Em uma modalidade, o agonista de GITR é um anticorpo monoclonal agonista de GITR bios similar aprovado pelas autoridades reguladoras de fármaco com referência ao 9H6. Em uma modalidade, o anticorpo monoclonal biossimilar compreende um anticorpo GITR compreendendo uma sequência de aminoácidos que tenha pelo menos 97 % de identidade de sequência, por exemplo, 97%, 98%, 99% ou 100% de identidade de sequência, com a sequência de aminoácidos do produto medicinal de referência ou produto biológico de referência e que compreende uma ou mais modificações pós-traducionais quando comparado com o
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329 / 497 produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é 9H6. Em algumas modalidades, a uma ou mais modificações pós-traducionais são selecionada de uma ou mais de: glicosilação, oxidação, desamidação, e truncagem. Em algumas modalidades, o biossimilar é um agonista de anticorpo GITR autorizado ou submetido para autorização, em que o agonista de anticorpo GITR é provido em uma formulação que difere das formulações do produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é 9H6. O agonista de anticorpo GITR pode ser autorizado por uma autoridade reguladora de fármaco tal como o FDA dos Estados Unidos e/ou o EMA da União Européia. Em algumas modalidades, o biossimilar é provido como uma composição que compreende adicionalmente um ou mais excipientes, em que o um ou mais excipientes são os mesmos ou diferentes dos excipientes compreendidos no produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é 9H6. Em algumas modalidades, o biossimilar é provido como uma composição que compreende adicionalmente um ou mais excipientes, em que o um ou mais excipientes são os mesmos ou diferentes dos excipientes compreendidos no produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é 9H6.
TABELA 41. As sequências de aminoácidos para anticorpos agonistas de GITR relacionados com ο 9H6.______________________________________ | Identificador | Sequência (Símbolos de aminoácido de uma letra) |
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| SEQ ID NO: 430 cadeia pesada de 9H6 | QVQLVESGGG VVQPGRSLRL SCVASGFTFS SYGMHWIRQA PGKGLEWVAV IWYEGSNKYY 60 ADSVKGRFTI SRDNSKNTLY LQMNSLRAED TAVYYCARGG RLGKDYYSGM DVWGQGTTVT 120 VSSASTKGPS VFPLAPSSKS TSGGTAALGC LVKDYFPEPV TVSWNSGALT SGVHTFPAVL 180 QSSGLYSLSS VVTVPSSSLG TQTYICNVNH KPSNTKVDKR VEPKSCDKTH TCPPCPAPEL 240 LGGPSVFLFP PKPKDTLMIS RTPEVTCVVV DVSHEDPEVK FNWYVDGVEV HNAKTKPREE 300 QYNSTYRVVS VLTVLHQDWL NGKEYKCKVS NKALPAPIEK TISKAKGQPR EPQVYTLPPS 360 REEMTKNQVS LTCLVKGFYP SDIAVEWESN GQPENNYKTT PPVLDSDGSF FLYSKLTVDK 420 SRWQQGNVFS CSVMHEALHN HYTQKSLSLS PGK 453 |
| SEQ ID NO: 431 cadeia leve de 9H6 | DIQMTQSPSS LSASVGDRVT ITCRASQGIR NDLGWYQQKP GKAPNRLIYA TSSLQSGVPS 60 RFSGSGSGTE FTLTISSLQP EDFATYYCLQ HNTYPWTFGQ GTKVEIKRTV AAPSVFIFPP 120 SDEQLKSGTA SVVCLLNNFY PREAKVQWKV DNALQSGNSQ ESVTEQDSKD STYSLSSTLT 180 LSKADYEKHK VYACEVTHQG LSSPVTKSFN RGEC 214 |
| SEQ ID NO: 432 cadeia pesada variável de 9H6 | QVQLVESGGG VVQPGRSLRL SCVASGFTFS SYGMHWIRQA PGKGLEWVAV IWYEGSNKYY 60 ADSVKGRFTI SRDNSKNTLY LQMNSLRAED TAVYYCARGG RLGKDYYSGM DVWGQGTTVT 120 VSS 123 |
| SEQ ID NO: 433 cadeia leve variável de 9H6 | DIQMTQSPSS LSASVGDRVT ITCRASQGIR NDLGWYQQKP GKAPNRLIYA TSSLQSGVPS 60 RFSGSGSGTE FTLTISSLQP EDFATYYCLQ HNTYPWTFGQ GTKVEIKR 108 |
| SEQ ID NO: 434 CDR1 da cadeia pesada de 9H6 | SYGMH 5 |
| SEQ ID NO: 435 CDR2 da cadeia pesada de 9H6 | VIWYEGSNKY YADSVKG 17 |
| SEQ ID NO: 436 CDR3 da cadeia pesada de 9H6 | GGRLGKDYYS GMDV 14 |
| SEQ ID NO: 437 CDR1 da cadeia leve de 9H6 | RASQGIRNDL G 11 |
| SEQ ID NO: 438 CDR2 da cadeia leve de 9H6 | ATSSLQS 7 |
| SEQ ID NO: 439 CDR3 da cadeia leve de 9H6 | LQHNTYPWT 9 |
[001004] Em uma modalidade, o agonista de GITR é um agonista de GITR descrito nas Publicações de Pedido de Patente Internacional Nos. WO 2013/039954 Al e WO 2011/028683 Al; Publicações dos Pedidos de Patente U.S. Nos. US 2013/0108641 Al, US 2012/0189639 Al, e US 2014/0348841 Al; e Patentes U.S. Nos. 7.812.135; 8,388,967; e 9.028.823, as divulgações das quais são aqui incorporadas por referência. Em uma modalidade, o
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331/497 agonista de GITR é um anticorpo monoclonal agonístico, anti-GITR com uma estrutura e preparação descrito na Publicação do Pedido de Patente US No. US 2015/0064204 e Publicação do Pedido de Patente Internacional No. WO 2015/031667 Al (Amgen, Inc.), as divulgações das quais são aqui incorporadas por referência. Em uma modalidade, o agonista de GITR é um anticorpo monoclonal agonístico totalmente humano, anti-GITR selecionado a partir do grupo que consiste em 1D7, 33C9, 33F6, 34G4, 35B10, 41E11, 41G5, 42A11, 44C1, 45A8, 46E11, 48H12, 48H7, 49D9, 49E2, 48A9, 5H7, 7A10, e 9H6. Em uma modalidade, o agonista de GITR é um anticorpo monoclonal agonístico totalmente humano, anti-GITR com uma identidade de sequência de aminoácidos de mais do que 99% com a sequência de um anticorpo selecionado a partir do grupo que consiste em 1D7, 33C9, 33F6, 34G4, 35B10, 41E11, 41G5, 42A11, 44C1, 45A8, 46E11, 48H12, 48H7, 49D9, 49E2, 48A9, 5H7, 7A10, e 9H6. Em uma modalidade, o agonista de GITR é um anticorpo monoclonal agonístico totalmente humano, anti-GITR com uma identidade de sequência de aminoácidos de mais do que 98% com a sequência de um anticorpo selecionado a partir do grupo que consiste em 1D7, 33C9, 33F6, 34G4, 35B10, 41E11, 41G5, 42A11, 44C1, 45A8, 46E11, 48H12, 48H7, 49D9, 49E2, 48A9, 5H7, 7A10, e 9H6. Em uma modalidade, o agonista de GITR é um anticorpo monoclonal agonístico totalmente humano, anti-GITR selecionado a partir do grupo que consiste em 9H6v3, 5H7v2, 33C9v2, 41G5v2, e 7A10vl, como descrito na Publicação do Pedido de Patente US No. US 2015/0064204 Al, a divulgação da qual é aqui incorporada por referência. Em uma modalidade, o agonista de GITR é um anticorpo monoclonal agonístico totalmente humano, anti-GITR selecionado a partir do grupo que consiste em 44Clvl, 45A8vl, 49D9vl, 49E2vl, 48A9vl, 5H7vl, 5H7v2, 5H7v3, 5H7v5, 5H7v7, 5H7v9, 5H7vlO, 5H7vll, 5H7vl3, 5H7vl4, 5H7vl7, 5H7vl8, 5H7vl9, 5H7v22, 7A10vl, 7A10v2, 7A10v3, 7A10v4, 7A10v5, 9H6vl, 9H6v2, 9H6v3, 9H6v4, 9H6v5, 9H6v6, 33C9vl,
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33C9v2, 33C9v3, 33C9v4, 33C9v5, 41G5vl, 41G5v2, 41G5v3, 41G5v4, e 41G5v5, como descrito na Publicação do Pedido de Patente US No. US 2015/0064204 Al, a divulgação da qual é aqui incorporada por referência.
[001005] Em uma modalidade, o agonista de GITR é uma proteína de fusão agonística de GITR como representada na Estrutura I-A (proteína de fusão de fragmento de anticorpo Fc de terminal C) ou Estrutura I-B (proteína de fusão de fragmento de anticorpo Fc de terminal N), ou um fragmento, derivado, conjugado, variante, ou biossimilar dos mesmos. As propriedades das estruturas I-A e I-B são descritas acima e nas Patentes U.S. Nos.
9.359.420, 9.340.599, 8.921.519, e 8.450.460, as divulgações das quais são aqui incorporadas por referência. As sequências de aminoácidos para os domínios de polipeptídeo da estrutura I-A são dadas na Tabela 6. O domínio Fc preferivelmente compreende um domínio constante completo (aminoácidos 17 a 230 da SEQ ID NO: 31), o domínio de dobradiça completo (aminoácidos 1 a 16 da SEQ ID NO: 31) ou uma porção do domínio de dobradiça (por exemplo, aminoácidos 4 a 16 da SEQ ID NO: 31). Os ligantees preferidos para conectar um anticorpo Fc de terminal C podem ser selecionados das modalidades dadas na SEQ ID NO: 32 até a SEQ ID NO: 41, incluindo ligantees adequados para a fusão de polipeptídeos adicionais. Igualmente, as sequências de aminoácidos para os domínios de polipeptídeo da estrutura I-B são dadas na Tabela 7. Se um fragmento de anticorpo Fc é fundido ao terminal N de uma proteína de fusão de TNRFSF como na estrutura I-B, a sequência do módulo Fc é preferivelmente aquela mostrada na SEQ ID NO: 42, e as sequências liganteas são preferivelmente selecionadas daquelas modalidades apresentadas na SED ID NO: 43 com a SEQ ID NO: 45.
[001006] Em uma modalidade, uma proteína de fusão agonista de GITR de acordo com as estruturas I-A ou I-B compreende um ou mais domínios de ligação de GITR selecionados do grupo que consiste em um da cadeia pesada
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333/497 variável e cadeia leve variável de TRX518, 6C8, 36E5, 3D6, 61G6, 6H6, 61F6, 1D8, 17F10, 35D8, 49A1, 9E5, 31H6, 2155, 698, 706, 827, 1649, 1718, 1D7, 33C9, 33F6, 34G4, 35B10, 41E11, 41G5, 42A11, 44C1, 45A8, 46E11, 48H12, 48H7, 49D9, 49E2, 48A9, 5H7, 7A10, 9H6, e fragmentos, derivados, conjugados, variantes, e biossimilares dos mesmos.
[001007] Em uma modalidade, uma proteína de fusão agonista de GITR de acordo com as estruturas I-A ou I-B compreende um ou mais domínios de ligação de GITR compreendendo uma sequência de GITRL (Tabela 42). Em uma modalidade, uma proteína de fusão agonista de GITR de acordo com as estruturas I-A ou I-B compreende um ou mais domínios de ligação de GITR compreendendo uma sequência de acordo com a SEQ ID NO: 440. Em uma modalidade, uma proteína de fusão agonista de GITR de acordo com as estruturas I-A ou I-B compreende um ou mais domínios de ligação de GITR compreendendo uma sequência de GITRL solúvel. Em uma modalidade, uma proteína de fusão agonista de GITR de acordo com as estruturas I-A ou I-B compreende um ou mais domínios de ligação de GITR compreendendo uma sequência de acordo com a SEQ ID NO: 441.
[001008] Em uma modalidade, uma proteína de fusão agonista de GITR de acordo com as estruturas I-A ou I-B compreende um ou mais domínios de ligação de GITR que é um domínio scFv compreendendo as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 95% idênticas com as VH e VL GITR sequências mostrado acima na Tabelas 18 a 39, em que os domínios VH e VL são conectados por um ligante.
TABELA 42. Domínios de polipeptídeo adicionais úteis como domínios de ligação de GITR nas proteínas de fusão (por exemplo, estruturas I-A e I-B).
| Identificador | Sequência (Símbolos de aminoácido de uma letra) |
| SEQ ID NO: 440 GITRL | MCLSHLENMP LSHSRTQGAQ RSSWKLWLFC SIVMLLFLCS FSWLIFIFLQ LETAKEPCMA 60 KFGPLPSKWQ MASSEPPCVN KVSDWKLEIL QNGLILIYGQ VAPNANYNDV APFEVRLYKN 120 KDMIQTLTNK SKIQNVGGTY ELHVGDTIDLIFNSEHQVLK NNTYWGIILL ANPQFIS 177 |
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| SEQ ID NO: 441 domínio de GITRL solúvel | TAKEPCMAKF GPLPSKWQMA SSEPPCVNKV SDWKLEILQN GLILIYGQVA PNANYNDVAP 60 FEVRLYKNKD MIQTLTNKSK IQNVGGTYEL HVGDTIDLIF NSEHQVLKNN TYWGIILLAN 120 PQFIS 125 |
[001009] Em uma modalidade, o agonista de GITR é um polipeptídeo de fusão de cadeia única agonístico de GITR compreendendo (i) um primeiro domínio de ligação de GITR solúvel, (ii) um primeiro ligante peptídico, (iii) um segundo domínio de ligação de GITR solúvel, (iv) um segundo ligante peptídico, e (v) um terceiro domínio de ligação de GITR solúvel, compreendendo adicionalmente um domínio adicional na extremidade de terminal N e/ou terminal C, e em que o domínio adicional é um Fab ou domínio do fragmento Fc. Em uma modalidade, o agonista de GITR é um polipeptídeo de fusão de cadeia única agonístico de GITR compreendendo (i) um primeiro domínio de ligação de GITR solúvel, (ii) um primeiro ligante peptídico, (iii) um segundo domínio de ligação de GITR solúvel, (iv) um segundo ligante peptídico, e (v) um terceiro domínio de ligação de GITR solúvel, compreendendo adicionalmente um domínio adicional na extremidade de terminal N e/ou terminal C, em que o domínio adicional é um Fab ou domínio do fragmento Fc em que cada um dos domínios de ligação de GITR solúveis carece de uma região de haste (o que contribui para a trimerização e provê uma certa distância para a membrana celular, mas não é parte do domínio de ligação de GITR) e o primeiro e o segundo ligantees peptídicos independentemente têm um comprimento de 3 a 8 aminoácidos.
[001010] Em uma modalidade, o agonista de GITR é um polipeptídeo de fusão de cadeia única agonístico de GITR compreendendo (i) um primeiro domínio de citocina da superfamília do fator de necrose de tumor (TNF) solúvel, (ii) um primeiro ligante peptídico, (iii) um segundo domínio de citocina da superfamília do TNF solúvel, (iv) um segundo ligante peptídico, e (v) um terceiro domínio de citocina da superfamília do TNF solúvel, em que cada um dos domínios de citocina da superfamília do TNF solúvel carece de
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335/497 uma região de haste e o primeiro e o segundo ligantees peptídicos independentemente têm um comprimento de 3 a 8 aminoácidos, e em que o domínio de TNF de citocina da superfamília é um domínio de ligação de GITR.
[001011] Em uma modalidade, o agonista de GITR é um anticorpo scFv agonístico de GITR compreendendo qualquer um dos domínios VH precedentes ligados a qualquer um dos domínios VL precedentes.
[001012] Agonistas de HVEM (CD270) [001013] Em uma modalidade, o agonista de TNFRSF é um agonista de HVEM. HVEM é também conhecido como CD270 e TNFRSF14. Qualquer agonista de HVEM conhecido na técnica pode ser usado. A molécula de ligação de HVEM pode ser um anticorpo monoclonal ou proteína de fusão capazes de ligação ao HVEM humano ou mamífero. Os agonistas de HVEM ou moléculas de ligação de HVEM podem compreender uma cadeia pesada de imunoglobulina de qualquer isótipo (por exemplo, IgG, IgE, IgM, IgD, IgA, e IgY), classe (por exemplo, IgGl, IgG2, IgG3, IgG4, IgAl e IgA2) ou subclasse de molécula de imunoglobulina. O agonista de HVEM ou molécula de ligação de HVEM podem ter tanto uma cadeia pesada quanto uma leve. Como aqui usado, o termo molécula de ligação também inclui anticorpos (incluindo anticorpos de tamanho natural), anticorpos monoclonais (incluindo anticorpos monoclonais de tamanho natural), anticorpos policlonais, anticorpos multiespecíficos (por exemplo, anticorpos biespecíficos), anticorpos humanos, humanizados ou quiméricos, e fragmentos de anticorpo, por exemplo, fragmentos Fab, fragmentos F(ab’), fragmentos produzidos por uma biblioteca de expressão de Fab, fragmentos de ligação de epítopo de qualquer um dos acima, e formas engenheiradas de anticorpos, por exemplo, moléculas scFv, que se ligam ao HVEM. Em uma modalidade, o agonista de HVEM é uma proteína de ligação a antígeno que é um anticorpo totalmente humano. Em uma modalidade, o agonista de HVEM é uma proteína de
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336/497 ligação a antígeno que é um anticorpo humanizado. Em algumas modalidades, os agonistas de HVEM para o uso nos métodos e composições presentemente divulgados incluem anticorpos anti-HVEM, anticorpos anti-HVEM humanos, anticorpos anti-HVEM de camundongo, anticorpos anti-HVEM de mamífero, anticorpos anti-HVEM monoclonais, anticorpos anti-HVEM policlonais, anticorpos anti-HVEM quiméricos, adnectinas anti-HVEM, anticorpos de domínio anti-HVEM, fragmentos anti-HVEM de cadeia única, fragmentos anti-HVEM de cadeia pesada, fragmentos anti-HVEM de cadeia leve, proteínas de fusão anti-HVEM, e fragmentos, derivados, conjugados, variantes, ou biossimilares dos mesmos. Em uma modalidade preferida, o agonista de HVEM é um anticorpo agonístico, anti-HVEM humanizado ou totalmente humano monoclonal (isto é, um anticorpo derivado de uma única linhagem de célula).
[001014] Em uma modalidade preferida, o agonista de HVEM ou molécula de ligação de HVEM também podem ser uma proteína de fusão. Em uma modalidade preferida, um agonista de HVEM multimérico, tal como um agonista de HVEM trimérico ou hexamérico (com três ou seis domínios de ligação de ligante), pode induzir agrupamento de receptor (HVEML) superior e formação do complexo de sinalização celular interna comparado a um anticorpo monoclonal agonístico, que tipicamente possui dois domínios de ligação de ligante. As proteínas de fusão triméricas (trivalentes) ou hexaméricas (ou hexavalentes) ou maiores compreendendo três domínios de ligação de TNFRSF e IgG 1-Fe e opcionalmente ainda ligando duas ou mais destas proteínas de fusão são descritas, por exemplo, em Gieffers, et al., Mol. Cancer Therapeutics 2013,12, 2735-47.
[001015] Anticorpos e proteínas de fusão agonísticos de HVEM são conhecidos induzir respostas imunes fortes. Em uma modalidade preferida, o agonista de HVEM é um anticorpo monoclonal ou proteína de fusão que se liga especificamente ao antígeno de HVEM em uma maneira suficiente para
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337/497 reduzir a toxicidade. Em algumas modalidades, o agonista de HVEM é um anticorpo monoclonal ou proteína de fusão agonísticos de HVEM que anulam a toxicidade celular dependente de anticorpo (ADCC), por exemplo a citotoxicidade de célula NK. Em algumas modalidades, o agonista de HVEM é um anticorpo monoclonal ou proteína de fusão agonísticos de HVEM que anulam a fagocitose celular dependente de anticorpo (ADCP). Em algumas modalidades, o agonista de HVEM é um anticorpo monoclonal ou proteína de fusão agonísticos de HVEM que anulam a citotoxicidade dependente de complemento (CDC). Em algumas modalidades, o agonista de HVEM é um anticorpo monoclonal ou proteína de fusão agonísticos de HVEM que anulam a funcionalidade da região Fe.
[001016] Em algumas modalidades, os agonistas de HVEM são distinguidos pela ligação ao HVEM humano (SEQ ID NO: 442) com alta afinidade e atividade agonística. Em uma modalidade, o agonista de HVEM é uma molécula de ligação que se liga ao HVEM humano (SEQ ID NO: 442). A sequência de aminoácidos do antígeno de HVEM à qual um agonista ou molécula de ligação de HVEM podem se ligar está resumida na Tabela 43.
TABELA 43. Sequência de aminoácidos de antígeno de HVEM (CD270).
| Identificador | Sequência (Símbolos de aminoácido de uma letra) |
| SEQ ID NO: 442 CD270 humano, Superfamília do receptor do fator de necrose de tumor, membro 14 (Homo sapiens) | MEPPGDWGPP PWRSTPRTDV LRLVLILTFL GAPCYAPALP SCKEDEYPVG SECCPKCSPG 60 YRVKEACGEL TGTVCEPCPP GTYIAHLNGL SKCLQCQMCD PAMGLRASRN CSRTENAVCG 120 CSPGHFCIVQ DGDHCAACRA YATSSPGQRV QKGGTESQDT LCQNCPPGTF SPNGTLEECQ 180 HQTKCSWLVT KAGAGTSSSH WVWWFLSGSL VIVIVCSTVG LIICVKRRKP RGDVVKVIVS 240 VQRKRQEAEG EATVIEALQA PPDVTTVAVE ETIPSFTGRS PNH 283 |
[001017] Em algumas modalidades, as composições, processos e métodos descritos incluem um agonista de HVEM que se liga ao HVEM humano ou de murino com um Kd de cerca de 100 pM ou mais baixo, liga HVEM humano ou de murino com um Kd de cerca de 90 pM ou mais baixo, liga HVEM humano ou de murino com um Kd de cerca de 80 pM ou mais baixo, liga HVEM humano ou de murino com um Kd de cerca de 70 pM ou
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338/497 mais baixo, liga HVEM humano ou de murino com um Kd de cerca de 60 pM ou mais baixo, liga HVEM humano ou de murino com um Kd de cerca de 50 pM ou mais baixo, liga HVEM humano ou de murino com um Kd de cerca de 40 pM ou mais baixo, ou liga HVEM humano ou de murino com um Kd de cerca de 30 pM ou mais baixo.
[001018] Em algumas modalidades, as composições, processos e métodos descritos incluem um agonista de HVEM que se liga ao HVEM humano ou de murino com um kassoc de cerca de 7,5 x 105 1/M-s ou mais rápido, se liga ao HVEM humano ou de murino com um kassoc de cerca de 7,5 x 105 1/M-s ou mais rápido, se liga ao HVEM humano ou de murino com um kassoc de cerca de 8 x 1051/M-s ou mais rápido, se liga ao HVEM humano ou de murino com um kassoc de cerca de 8,5 x 105 1/M-s ou mais rápido, se liga ao HVEM humano ou de murino com um kassoc de cerca de 9 x 105 1/M-s ou mais rápido, se liga ao HVEM humano ou de murino com um kassoc de cerca de 9,5 x 105 1/M-s ou mais rápido, ou liga ao HVEM humano ou de murino com um kassoc de cerca de 1 x 106 1/M-s ou mais rápido.
[001019] Em algumas modalidades, as composições, processos e métodos descritos incluem um agonista de HVEM que se liga ao HVEM humano ou de murino com um kdissoc de cerca de 2 x 10'5 1/s ou mais lento, se liga ao HVEM humano ou de murino com um kdissoc de cerca de 2,1 x 10'5 1/s ou mais lento, se liga ao HVEM humano ou de murino com um kdissoc de cerca de 2,2 x 10'5 1/s ou mais lento, se liga ao HVEM humano ou de murino com um kdissoc de cerca de 2,3 x 10'5 1/s ou mais lento, se liga ao HVEM humano ou de murino com um kdissoc de cerca de 2,4 x 10'5 1/s ou mais lento, se liga ao HVEM humano ou de murino com um kdissoc de cerca de 2,5 x 10'5 1/s ou mais lento, se liga ao HVEM humano ou de murino com um kdissoc de cerca de
2,5 x 10'5 1/s ou mais lento ou liga ao HVEM humano ou de murino com um kdissoc de cerca de 2,7 x 10'5 1/s ou mais lento, se liga ao HVEM humano ou de murino com um kdissoc de cerca de 2,8 x 10'5 1/s ou mais lento, se liga ao
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HVEM humano ou de murino com um kdissoc de cerca de 2,9 x IO'5 1/s ou mais lento, ou liga ao HVEM humano ou de murino com um kdissoc de cerca de 3 x IO'5 1/s ou mais lento.
[001020] Em algumas modalidades, as composições, processos e métodos descritos incluem um agonista de HVEM que se liga ao HVEM humano ou de murino com um IC50 de cerca de 10 nM ou mais baixo, se liga ao HVEM humano ou de murino com um IC50 de cerca de 9 nM ou mais baixo, se liga ao HVEM humano ou de murino com um IC50 de cerca de 8 nM ou mais baixo, se liga ao HVEM humano ou de murino com um IC50 de cerca de 7 nM ou mais baixo, se liga ao HVEM humano ou de murino com um IC50 de cerca de 6 nM ou mais baixo, se liga ao HVEM humano ou de murino com um IC50 de cerca de 5 nM ou mais baixo, se liga ao HVEM humano ou de murino com um IC50 de cerca de 4 nM ou mais baixo, se liga ao HVEM humano ou de murino com um IC50 de cerca de 3 nM ou mais baixo, se liga ao HVEM humano ou de murino com um IC50 de cerca de 2 nM ou mais baixo, ou liga ao HVEM humano ou de murino com um IC50 de cerca de 1 nM ou mais baixo.
[001021] Em uma modalidade, o agonista de HVEM é um agonista de HVEM descrito na Publicação do Pedido de Patente Internacional No. WO 2009/007120 A2 e Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2016/0176941 Al, a divulgação de cada uma das quais é aqui incorporada por referência.
[001022] Em uma modalidade, o agonista de HVEM é o agonista de HVEM clone REA247, que está comercialmente disponível da Miltenyi Biotech, Inc. (San Diego, CA 92121).
[001023] Em uma modalidade, o agonista de HVEM é uma proteína de fusão agonística de HVEM como representada na Estrutura I-A (proteína de fusão de fragmento de anticorpo Fc de terminal C) ou Estrutura I-B (Proteína de fusão de fragmento de anticorpo Fc de terminal N), ou um fragmento,
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340 / 497 derivado, conjugado, variante, ou biossimilar dos mesmos. As propriedades das estruturas I-A e I-B são descritas acima e nas Patentes U.S. Nos.
9.359.420, 9.340.599, 8.921.519, e 8.450.460, as divulgações das quais são aqui incorporadas por referência. As sequências de aminoácidos para os domínios de polipeptídeo da estrutura I-A são dadas na Tabela 6. O domínio Fc preferivelmente compreende um domínio constante completo (aminoácidos 17 a 230 da SEQ ID NO: 31), o domínio de dobradiça completo (aminoácidos 1 a 16 da SEQ ID NO: 31) ou uma porção do domínio de dobradiça (por exemplo, aminoácidos 4 a 16 da SEQ ID NO: 31). Os ligantees preferidos para conectar um anticorpo Fc de terminal C podem ser selecionados das modalidades dadas na SEQ ID NO: 32 até a SEQ ID NO: 41, incluindo ligantees adequados para a fusão de polipeptídeos adicionais. Igualmente, as sequências de aminoácidos para os domínios de polipeptídeo da estrutura I-B são dadas na Tabela 7. Se um fragmento de anticorpo Fc é fundido ao terminal N de uma proteína de fusão de TNRFSF como na estrutura I-B, a sequência do módulo Fc é preferivelmente aquela mostrada na SEQ ID NO: 42, e as sequências liganteas são preferivelmente selecionadas daquelas modalidades apresentadas na SED ID NO: 43 com a SEQ ID NO: 45.
[001024] Em uma modalidade, uma proteína de fusão agonista de HVEM de acordo com as estruturas I-A ou I-B compreende um ou mais domínios de ligação de HVEM compreendendo uma sequência LIGHT (ligante de HVEM) (Tabela 44). Em uma modalidade, uma proteína de fusão agonista de HVEM de acordo com as estruturas I-A ou I-B compreende um ou mais domínios de ligação de HVEM compreendendo uma sequência de acordo com a SEQ ID NO: 443. Em uma modalidade, uma proteína de fusão agonista de HVEM de acordo com as estruturas I-A ou I-B compreende um ou mais domínios de ligação de HVEM compreendendo uma sequência LIGHT solúvel. Em uma modalidade, uma proteína de fusão agonista de
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HVEM de acordo com as estruturas I-A ou I-B compreende um ou mais domínios de ligação de HVEM compreendendo uma sequência de acordo com a SEQ ID NO: 444. Em uma modalidade, uma proteína de fusão agonista de HVEM de acordo com as estruturas I-A ou I-B compreende um ou mais domínios de ligação de HVEM compreendendo uma sequência de acordo com a SEQ ID NO: 445. Em uma modalidade, uma proteína de fusão agonista de HVEM de acordo com as estruturas I-A ou I-B compreende um ou mais domínios de ligação de HVEM compreendendo uma sequência de acordo com a SEQ ID NO: 446.
[001025] Em uma modalidade, uma proteína de fusão agonista de HVEM de acordo com as estruturas I-A ou I-B compreende um ou mais domínios de ligação de HVEM que é um domínio scFv compreendendo as regiões VH e VL, em que os domínios VH e VL são conectados por um ligante.
TABELA 44. Domínios de polipeptídeo adicionais úteis como domínios de ligação de HVEM em proteínas de fusão (por exemplo, estruturas I-A e I-B).
| Identificador | Sequência (Símbolos de aminoácido de uma letra) |
| SEQ ID NO: 443 LIGHT (ligante de HVEM) | MEESVVRPSV FVVDGQTDIP FTRLGRSHRR QSCSVARVGL GLLLLLMGAG LAVQGWFLLQ 60 LHWRLGEMVT RLPDGPAGSW EQLIQERRSH EVNPAAHLTG ANSSLTGSGG PLLWETQLGL 120 AFLRGLSYHD GALVVTKAGY YYIYSKVQLG GVGCPLGLAS TITHGLYKRT PRYPEELELL 180 VSQQSPCGRA TSSSRVWWDS SFLGGVVHLE AGEKVVVRVL DERLVRLRDG TRSYFGAFMV 240 |
| SEQ ID NO: 444 domínio de LIGHT solúvel | PAAHLTGANS SLTGSGGPLL WETQLGLAFL RGLSYHDGAL VVTKAGYYYI YSKVQLGGVG 60 CPLGLASTIT HGLYKRTPRY PEELELLVSQ QSPCGRATSS SRVWWDSSFL GGVVHLEAGE 120 KVVVRVLDER LVRLRDGTRS YFGAFMV 147 |
| SEQ ID NO: 445 domínio de LIGHT solúvel (alternativo) | AAHLTGANSS LTGSGGPLLW ETQLGLAFLR GLSYHDGALV VTKAGYYYIY SKVQLGGVGC 60 PLGLASTITH GLYKRTPRYP EELELLVSQQ SPCGRATSSS RVWWDSSFLG GVVHLEAGEK 120 VVVRVLDERL VRLRDGTRSY FGAFMV 146 |
| SEQ ID NO: 446 domínio de LIGHT solúvel (alternativo) | AHLTGANSSL TGSGGPLLWE TQLGLAFLRG LSYHDGALVV TKAGYYYIYS KVQLGGVGCP 60 LGLASTITHG LYKRTPRYPE ELELLVSQQS PCGRATSSSR VWWDSSFLGG VVHLEAGEKV 120 VVRVLDERLV RLRDGTRSYF GAFMV 145 |
[001026] Em uma modalidade, o agonista de HVEM é um polipeptídeo de fusão de cadeia única agonístico de HVEM compreendendo (i) um
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342 / 497 primeiro domínio de ligação de HVEM solúvel, (ii) um primeiro ligante peptídico, (iii) um segundo domínio de ligação de HVEM solúvel, (iv) um segundo ligante peptídico, e (v) um terceiro domínio de ligação de HVEM solúvel, compreendendo adicionalmente um domínio adicional na extremidade de terminal N e/ou terminal C, e em que o domínio adicional é um Fab ou domínio do fragmento Fc. Em uma modalidade, o agonista de HVEM é um polipeptídeo de fusão de cadeia única agonístico de HVEM compreendendo (i) um primeiro domínio de ligação de HVEM solúvel, (ii) um primeiro ligante peptídico, (iii) um segundo domínio de ligação de HVEM solúvel, (iv) um segundo ligante peptídico, e (v) um terceiro domínio de ligação de HVEM solúvel, compreendendo adicionalmente um domínio adicional na extremidade de terminal N e/ou terminal C, em que o domínio adicional é um Fab ou domínio do fragmento Fc em que cada um dos domínios de ligação de HVEM solúvel carece de uma região de haste (o que contribui para a trimerização e provê uma certa distância para a membrana celular, mas não é parte do domínio de ligação de HVEM) e o primeiro e o segundo ligantees peptídicos independentemente têm um comprimento de 3 a 8 aminoácidos.
[001027] Em uma modalidade, o agonista de HVEM é um polipeptídeo de fusão de cadeia única agonístico de HVEM compreendendo (i) um primeiro domínio de citocina da superfamília do fator de necrose de tumor (TNF) solúvel, (ii) um primeiro ligante peptídico, (iii) um segundo domínio de citocina da superfamília do TNF solúvel, (iv) um segundo ligante peptídico, e (v) um terceiro domínio de citocina da superfamília do TNF solúvel, em que cada um dos domínios de citocina da superfamília do TNF solúvel carece de uma região de haste e o primeiro e o segundo ligantees peptídicos independentemente têm um comprimento de 3 a 8 aminoácidos, e em que o domínio de TNF de citocina da superfamília é um domínio de ligação de HVEM.
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343 / 497 [001028] Em uma modalidade, o agonista de HVEM é um agonista de HVEM descrito na Patente U.S. No. 7.118.742, a divulgação da qual é aqui incorporada por referência.
[001029] Agonistas de CD95 [001030] Em uma modalidade, o agonista de TNFRSF é um agonista de CD95 ou molécula de ligação de CD95. O CD95 também é conhecido como TNFRSF6, receptor de Fas (FasR), e APO-1. Qualquer agonista de CD95 ou molécula de ligação conhecidos na técnica podem ser usados. A molécula de ligação de CD95 pode ser um anticorpo monoclonal ou proteína de fusão capazes de ligação ao CD95 humano ou de mamífero, e pode ser usada em uma concentração apropriada para a atividade agonística de célula T ao invés da atividade apoptótica de célula T, como aqui descrito em outro lugar. Os agonistas de CD95 ou moléculas de ligação de CD95 podem compreender uma cadeia pesada de imunoglobulina de qualquer isotipo (por exemplo, IgG, IgE, IgM, IgD, IgA, e IgY), classe (por exemplo, IgGl, IgG2, IgG3, IgG4, IgAl e IgA2) ou subclasse de molécula de imunoglobulina. O agonista de CD95 ou molécula de ligação de CD95 podem ter tanto uma cadeia pesada quanto uma leve. Como aqui usado, o termo molécula de ligação também inclui anticorpos (incluindo anticorpos de tamanho natural), anticorpos monoclonais (incluindo anticorpos monoclonais de tamanho natural), anticorpos policlonais, anticorpos multiespecíficos (por exemplo, anticorpos biespecíficos), anticorpos humanos, humanizados ou quiméricos, e fragmentos de anticorpo, por exemplo, fragmentos Fab, fragmentos F(ab’), fragmentos produzidos por uma biblioteca de expressão de Fab, fragmentos de ligação de epítopo de qualquer um dos acima, e formas engenheiradas de anticorpos, por exemplo, moléculas scFv, que se ligam ao CD95. Em uma modalidade, o agonista de CD95 é uma proteína de ligação a antígeno que é um anticorpo totalmente humano. Em uma modalidade, o agonista de CD95 é uma proteína de ligação a antígeno que é um anticorpo humanizado. Em
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344 / 497 algumas modalidades, os agonistas de CD95 para o uso nos métodos e composições presentemente divulgados incluem anticorpos anti-CD95, anticorpos anti-CD95 humanos, anticorpos anti-CD95 de camundongo, anticorpos anti-CD95 de mamífero, anticorpos anti-CD95 monoclonais, anticorpos anti-CD95 policlonais, anticorpos anti-CD95 quiméricos, adnectinas anti-CD95, anticorpos de domínio anti-CD95, fragmentos antiCD95 de cadeia única, fragmentos anti-CD95 de cadeia pesada, fragmentos anti-CD95 de cadeia leve, proteínas de fusão anti-CD95, e fragmentos, derivados, conjugados, variantes, ou biossimilares dos mesmos. Em uma modalidade preferida, o agonista de CD95 é um anticorpo agonístico, antiCD95 humanizado ou totalmente humano monoclonal (isto é, um anticorpo derivado de uma única linhagem de célula).
[001031] Em uma modalidade preferida, o agonista de CD95 ou molécula de ligação de CD95 também podem ser uma proteína de fusão. Em uma modalidade preferida, um agonista de CD95 multimérico, tal como um agonista de CD95 trimérico ou hexamérico (com três ou seis domínios de ligação de ligante), pode induzir agrupamento de receptor (CD95L) superior e formação do complexo de sinalização celular interna comparado com um anticorpo monoclonal agonístico, que tipicamente possui dois domínios de ligação de ligante. As proteínas de fusão triméricas (trivalentes) ou hexaméricas (ou hexavalentes) ou maiores compreendendo três domínios de ligação de TNFRSF e IgGl-Fc e opcionalmente ainda ligando duas ou mais destas proteínas de fusão são descritas, por exemplo, em Gieffers, et al., Mol. Cancer Therapeutics 2013,12, 2735-47.
[001032] Anticorpos e proteínas de fusão de CD95 agonisticos são conhecidos induzir respostas imunes fortes. Em uma modalidade preferida, o agonista de CD95 é um anticorpo monoclonal ou proteína de fusão que se liga especificamente ao antígeno de CD95 em uma maneira suficiente para reduzir toxicidade. Em algumas modalidades, o agonista de CD95 é um anticorpo
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345/497 monoclonal ou proteína de fusão de CD95 agonísticos que anulam a toxicidade celular dependente de anticorpo (ADCC), por exemplo a citotoxicidade de célula NK. Em algumas modalidades, o agonista de CD95 é um anticorpo monoclonal ou proteína de fusão de CD95 agonísticos que anulam a fagocitose celular dependente de anticorpo (ADCP). Em algumas modalidades, o agonista de CD95 é um anticorpo monoclonal ou proteína de fusão de CD95 agonísticos que anulam a citotoxicidade dependente de complemento (CDC). Em algumas modalidades, o agonista de CD95 é um anticorpo monoclonal ou proteína de fusão de CD95 agonísticos que anulam a funcionalidade da região Fc.
[001033] Em algumas modalidades, os agonistas de CD95 são distinguidos pela ligação ao CD95 humano (SEQ ID NO: 447) com alta afinidade e atividade agonística. Em uma modalidade, o agonista de CD95 é uma molécula de ligação que se liga ao CD95 humano (SEQ ID NO: 447). Em uma modalidade, o agonista de CD95 é uma molécula de ligação que se liga ao CD95 humano (SEQ ID NO: 448). Em uma modalidade, o agonista de CD95 é uma molécula de ligação que se liga ao CD95 humano (SEQ ID NO: 449). Em uma modalidade, o agonista de CD95 é uma molécula de ligação que se liga ao CD95 humano (SEQ ID NO: 450). A sequência de aminoácidos de antígenos de CD95 aos quais um agonista de CD95 ou molécula de ligação pode se ligar está resumida na Tabela 45.
TABELA 45. Sequência de aminoácidos de antígenos de CD95.
| Identificador | Sequência (Símbolos de aminoácido de uma letra) |
| SEQ ID NO: 447 CD95 humano, Superfamília do receptor do fator de necrose de tumor, membro 6 (Homo sapiens), isoforma 1 | MLGIWTLLPL VLTSVARLSS KSVNAQVTDI NSKGLELRKT VTTVETQNLE GLHHDGQFCH 60 KPCPPGERKA RDCTVNGDEP DCVPCQEGKE YTDKAHFSSK CRRCRLCDEG HGLEVEINCT 120 RTQNTKCRCK PNFFCNSTVC EHCDPCTKCE HGIIKECTLT SNTKCKEEGS RSNLGWLCLL 180 LLPIPLIVWV KRKEVQKTCR KHRKENQGSH ESPTLNPETV AINLSDVDLS KYITTIAGVM 240 TLSQVKGFVR KNGVNEAKID EIKNDNVQDT AEQKVQLLRN WHQLHGKKEA YDTLIKDLKK 300 ANLCTLAEKI QTIILKDITS DSENSNFRNE IQSLV 335 |
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| SEQ ID NO: 448 CD95 humano, Superfamília do receptor do fator de necrose de tumor, membro 6 (Homo sapiens), isoforma 2 | MLGIWTLLPL VLTSVARLSS KSVNAQVTDI NSKGLELRKT VTTVETQNLE GLHHDGQFCH 60 KPCPPGERKA RDCTVNGDEP DCVPCQEGKE YTDKAHFSSK CRRCRLCDEG HGLEVEINCT 120 RTQNTKCRCK PNFFCNSTVC EHCDPCTKCE HGIIKECTLT SNTKCKEEVK RKEVQKTCRK 180 HRKENQGSHE SPTLNPETVA INLSDVDLSK YITTIAGVMT LSQVKGFVRK NGVNEAKIDE 240 IKNDNVQDTA EQKVQLLRNW HQLHGKKEAY DTLIKDLKKA NLCTLAEKIQ TIILKDITSD 300 SENSNFRNEI QSLV 314 |
| SEQ ID NO: 449 CD95 humano, Superfamília do receptor do fator de necrose de tumor, membro 6 (Homo sapiens), isoforma 3 | MLGIWTLLPL VLTSVARLSS KSVNAQVTDI NSKGLELRKT VTTVETQNLE GLHHDGQFCH 60 KPCPPGERKA RDCTVNGDEP DCVPCQEGKE YTDKAHFSSK CRRCRLCDEG HGLEVEINCT 120 RTQNTKCRCK PNFFCNSTVC EHCDPCTKCE HGIIKECTLT SNTKCKEEGS RSNLGWLCLL 180 LLPIPLIVWV KRKEVQKTCR KHRKENQGSH ESPTLNPMLT 220 |
| SEQ ID NO: 450 CD95 humano, Superfamília do receptor do fator de necrose de tumor, membro 6 (Homo sapiens), isoforma 4 | MLGIWTLLPL VLTSVARLSS KSVNAQVTDI NSKGLELRKT VTTVETQNLE GLHHDGQFCH 60 KPCPPGERKA RDCTVNGDEP DCVPCQEGKE YTDKAHFSSK CRRCRLCDEG HGLEVEINCT 120 RTQNTKCRCK PNFFCNSTVC EHCDPCTKCE HGIIKECTLT SNTKCKEEGS RSNLGWLCLL 180 LLPIPLIVWG NSGNKFI 197 |
[001034] Em algumas modalidades, as composições, processos e métodos descritos incluem um agonista de CD95 que liga CD95 humano ou de murino com um Kd de cerca de 100 pM ou mais baixo, liga CD95 humano ou de murino com um Kd de cerca de 90 pM ou mais baixo, liga CD95 humano ou de murino com um Kd de cerca de 80 pM ou mais baixo, liga CD95 humano ou de murino com um Kd de cerca de 70 pM ou mais baixo, liga CD95 humano ou de murino com um Kd de cerca de 60 pM ou mais baixo, liga CD95 humano ou de murino com um Kd de cerca de 50 pM ou mais baixo, liga CD95 humano ou de murino com um Kd de cerca de 40 pM ou mais baixo, ou liga CD95 humano ou de murino com um Kd de cerca de 30 pM ou mais baixo.
[001035] Em algumas modalidades, as composições, processos e métodos descritos incluem um agonista de CD95 que se liga ao CD95 humano ou de murino com um kassoc de cerca de 7,5 x 105 1/M-s ou mais rápido, se liga ao CD95 humano ou de murino com um kassoc de cerca de 7,5 x 105 1/M-s ou mais rápido, se liga ao CD95 humano ou de murino com um
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347 / 497 kassoc de cerca de 8 x 1051/M-s ou mais rápido, se liga ao CD95 humano ou de murino com um kassoc de cerca de 8,5 x 105 1/M-s ou mais rápido, se liga ao CD95 humano ou de murino com um kassoc de cerca de 9 x 105 1/M-s ou mais rápido, se liga ao CD95 humano ou de murino com um kassoc de cerca de 9,5 x 105 1/M-s ou mais rápido, ou liga ao CD95 humano ou de murino com um kassoc de cerca de 1 x 106 1/M-s ou mais rápido.
[001036] Em algumas modalidades, as composições, processos e métodos descritos incluem um agonista de CD95 que se liga ao CD95 humano ou de murino com um kdissoc de cerca de 2 x 10'5 1/s ou mais lento, se liga ao CD95 humano ou de murino com um kdissoc de cerca de 2,1 x 10'5 1/s ou mais lento, se liga ao CD95 humano ou de murino com um kdissoc de cerca de 2,2 x 10'5 1/s ou mais lento, se liga ao CD95 humano ou de murino com um kdissoc de cerca de 2,3 x 10'5 1/s ou mais lento, se liga ao CD95 humano ou de murino com um kdissoc de cerca de 2,4 x 10'5 1/s ou mais lento, se liga ao CD95 humano ou de murino com um kdissoc de cerca de 2,5 x 10'5 1/s ou mais lento, se liga ao CD95 humano ou de murino com um kdissoc de cerca de 2,5 x 10'5 1/s ou mais lento ou liga ao CD95 humano ou de murino com um kdissoc de cerca de 2,7 x 10'5 1/s ou mais lento, se liga ao CD95 humano ou de murino com um kdissoc de cerca de 2,8 x 10'5 1/s ou mais lento, se liga ao CD95 humano ou de murino com um kdissoc de cerca de 2,9 x 10'5 1/s ou mais lento, ou liga ao CD95 humano ou de murino com um kdissoc de cerca de 3 x 10'5 1/s ou mais lento.
[001037] Em algumas modalidades, as composições, processos e métodos descritos incluem um agonista de CD95 que se liga ao CD95 humano ou de murino com um IC50 de cerca de 10 nM ou mais baixo, se liga ao CD95 humano ou de murino com um IC50 de cerca de 9 nM ou mais baixo, se liga ao CD95 humano ou de murino com um IC50 de cerca de 8 nM ou mais baixo, se liga ao CD95 humano ou de murino com um IC50 de cerca de 7 nM ou mais baixo, se liga ao CD95 humano ou de murino com um IC50 de
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348 / 497 cerca de 6 nM ou mais baixo, se liga ao CD95 humano ou de murino com um IC50 de cerca de 5 nM ou mais baixo, se liga ao CD95 humano ou de murino com um IC50 de cerca de 4 nM ou mais baixo, se liga ao CD95 humano ou de murino com um IC50 de cerca de 3 nM ou mais baixo, se liga ao CD95 humano ou de murino com um IC50 de cerca de 2 nM ou mais baixo, ou liga ao CD95 humano ou de murino com um IC50 de cerca de 1 nM ou mais baixo. [001038] Em uma modalidade preferida, o agonista de CD95 é o anticorpo monoclonal E09, ou um fragmento, derivado, variante, ou biossimilar dos mesmos. A preparação e propriedades de E09 são descritas em Chodorge, et al., Cell Death & Differ. 2012, 19, 1187-95. As sequências de aminoácido de E09 são apresentadas na Tabela 46.
[001039] Em uma modalidade, o agonista de CD95 compreende as CDRs ou regiões variáveis (VRs) de cadeia pesada e leve de E09. Em uma modalidade, a região variável da cadeia pesada (VH) do agonista de CD95 compreende a sequência mostrada na SEQ ID NO: 451, e a região variável da cadeia leve (VL) do agonista de CD95 compreende a sequência mostrada na SEQ ID NO: 452, e substituições de aminoácido conservativas das mesmas. Em uma modalidade, um agonista de CD95 compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 99% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 451 e SEQ ID NO: 452, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de CD95 compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 98% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 451 e SEQ ID NO: 452, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de CD95 compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 97% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 451 e SEQ ID NO: 452, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de CD95 compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 96% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 451 e SEQ ID NO: 452, respectivamente. Em uma modalidade, um agonista de CD95 compreende as regiões VH e VL que são
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349 / 497 cada uma pelo menos 95% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 451 e SEQ ID NO: 452, respectivamente.
[001040] Em uma modalidade, um agonista de CD95 compreende os domínios CDR1, CDR2 e CDR3 da cadeia pesada tendo as sequências apresentadas na SEQ ID NO: 453, SEQ ID NO: 454, e SEQ ID NO: 455, respectivamente, e substituições de aminoácido conservativas das mesmas, e os domínios CDR1, CDR2 e CDR3 da cadeia leve tendo as sequências apresentadas na SEQ ID NO: 456, SEQ ID NO: 457, e SEQ ID NO: 458, respectivamente, e substituições de aminoácido conservativas das mesmas.
[001041] Em uma modalidade, o agonista de CD95 é um anticorpo monoclonal biossimilar agonista de CD95 aprovado pelas autoridades reguladoras de fármaco com referência ao E09. Em uma modalidade, o anticorpo monoclonal biossimilar compreende um anticorpo de CD95 compreendendo uma sequência de aminoácidos que tenha pelo menos 97 % de identidade de sequência, por exemplo, 97%, 98%, 99% ou 100% de identidade de sequência, com a sequência de aminoácidos do produto medicinal de referência ou produto biológico de referência e que compreende uma ou mais modificações pós-traducionais quando comparado com o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é E09. Em algumas modalidades, a uma ou mais modificações pós-traducionais são selecionada de uma ou mais de: glicosilação, oxidação, desamidação, e truncagem. Em algumas modalidades, o biossimilar é um agonista de anticorpo de CD95 autorizado ou submetido para autorização, em que o agonista de anticorpo de CD95 é provido em uma formulação que difere das formulações do produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é E09. O agonista de anticorpo de CD95 pode ser autorizado por uma autoridade reguladora de fármaco tal como o FDA dos Estados Unidos
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350/497 e/ou o EMA da União Européia. Em algumas modalidades, o biossimilar é provido como uma composição que compreende adicionalmente um ou mais excipientes, em que o um ou mais excipientes são os mesmos ou diferentes dos excipientes compreendidos no produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é E09. Em algumas modalidades, o biossimilar é provido como uma composição que compreende adicionalmente um ou mais excipientes, em que o um ou mais excipientes são os mesmos ou diferentes dos excipientes compreendidos no produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é E09.
TABELA 46. As sequências de aminoácidos para agonista de anticorpo de
CD95 E09.
| Identificador | Sequência (Símbolos de aminoácido de uma letra) |
| SEQ ID NO: 451 região variável da cadeia pesada para E09 | QLQLQESGPG LVKPSETLSL TCTVSGASIS ANSYYGVWVR QSPGKGLEWV GSIAYRGNSN 60 SGSTYYNPSL KSRATVSVDT SKNQVSLRLT SVTAADTALY YCARRQLLDD GTGYQWAAFD 120 VWGQGTMVTV SS 132 |
| SEQ ID NO: 452 região variável da cadeia leve para E09 | QSVLTQPPSV SEAPRQTVTI SCSGNSFNIG RYPVNWYQQL PGKAPKLLIY YNNLRFSGVS 60 DRFSGSKSGT SASLAIRDLL SEDEADYYCS TWDDTLKGWV FGGGTKVTVL 110 |
| SEQ ID NO: 453 CDR1 da cadeia pesada para E09 | ANSYYGV 7 |
| SEQ ID NO: 454 CDR2 da cadeia pesada para E09 | GSIAYRGNSN SGSTYYNPSL KS 22 |
| SEQ ID NO: 455 CDR3 da cadeia pesada para E09 | RQLLDDGTGY QWAAFDV 17 |
| SEQ ID NO: 456 CDR1 da cadeia leve para E09 | SGNSFNIGRY PVN 13 |
| SEQ ID NO: 457 CDR2 da cadeia leve para E09 | YNNLRFS 7 |
| SEQ ID NO: 458 CDR3 da cadeia leve para E09 | STWDDTLKGW V 11 |
[001042] Em uma modalidade, o agonista de CD95 é um agonista de
CD95 descrito na Publicação de Pedido de Patente Internacional No. WO
2009/007120 A2 e Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US
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2016/0176941 Al, a divulgação de cada uma das quais é aqui incorporada por referência.
[001043] Em uma modalidade, o agonista de CD95 é uma proteína de fusão agonística de CD95 como representada na Estrutura I-A (proteína de fusão de fragmento de anticorpo Fc de terminal C) ou Estrutura I-B (Proteína de fusão de fragmento de anticorpo Fc de terminal N), ou um fragmento, derivado, conjugado, variante, ou biossimilar dos mesmos. As propriedades da estruturas I-A e I-B são descritas acima e nas Patentes U.S. Nos.
9.359.420, 9.340.599, 8.921.519, e 8.450.460, as divulgações das quais são aqui incorporadas por referência. As sequências de aminoácidos para os domínios de polipeptídeo da estrutura I-A são dadas na Tabela 6. O domínio Fc preferivelmente compreende um domínio constante completo (aminoácidos 17 a 230 da SEQ ID NO: 31) o domínio de dobradiça completo (aminoácidos 1 a 16 da SEQ ID NO: 31) ou uma porção do domínio de dobradiça (por exemplo, aminoácidos 4 a 16 da SEQ ID NO: 31). Os ligantees preferidos para conectar um anticorpo Fc de terminal C podem ser selecionados das modalidades dadas na SEQ ID NO: 33 com a SEQ ID NO: 41, incluindo ligantees adequados para a fusão de polipeptídeos adicionais. Igualmente, sequências de aminoácidos para os domínios de polipeptídeo da estrutura I-B são dadas na Tabela 7. Se um fragmento de anticorpo Fc é fundido ao terminal N de uma proteína de fusão de TNRFSF como na estrutura I-B, a sequência do módulo Fc é preferivelmente aquela mostrada na SEQ ID NO: 42, e as sequências liganteas são preferivelmente selecionadas daquelas modalidades apresentadas na SED ID NO: 43 com a SEQ ID NO: 45.
[001044] Em uma modalidade, uma proteína de fusão agonista de CD95 de acordo com as estruturas I-A ou I-B compreende um ou mais domínios de ligação de CD95 compreendendo uma sequência ligante de CD95 (Tabela 47). Em uma modalidade, uma proteína de fusão agonista de CD95 de acordo
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352/497 com as estruturas I-A ou I-B compreende um ou mais domínios de ligação de CD95 compreendendo uma sequência de acordo com a SEQ ID NO: 459. Em uma modalidade, uma proteína de fusão agonista de CD95 de acordo com as estruturas I-A ou I-B compreende um ou mais domínios de ligação de CD95 compreendendo uma sequência LIGHT solúvel. Em uma modalidade, uma proteína de fusão agonista de CD95 de acordo com as estruturas I-A ou I-B compreende um ou mais domínios de ligação de CD95 compreendendo uma sequência de acordo com a SEQ ID NO: 460. Em uma modalidade, uma proteína de fusão agonista de CD95 de acordo com as estruturas I-A ou I-B compreende um ou mais domínios de ligação de CD95 compreendendo uma sequência de acordo com a SEQ ID NO: 461. Em uma modalidade, uma proteína de fusão agonista de CD95 de acordo com as estruturas I-A ou I-B compreende um ou mais domínios de ligação de CD95 compreendendo uma sequência de acordo com a SEQ ID NO: 462.
[001045] Em uma modalidade, uma proteína de fusão agonista de CD95 de acordo com as estruturas I-A ou I-B compreende um ou mais domínios de ligação de CD95 que é um domínio scFv compreendendo as regiões VH e VL, em que os domínios VH e VL são conectados por um ligante.
TABELA 47. Domínios de polipeptídeo adicionais úteis como domínios de ligação de CD95 in proteínas de fusão (por exemplo, estruturas I-A e I-B).
| Identificador | Sequência (Símbolos de aminoácido de uma letra) |
| SEQ ID NO: 459 CD95L (ligante de CD95) | MQQPFNYPYP QIYWVDSSAS SPWAPPGTVL PCPTSVPRRP GQRRPPPPPP PPPLPPPPPP 60 PPLPPLPLPP LKKRGNHSTG LCLLVMFFMV LVALVGLGLG MFQLFHLQKE LAELRESTSQ 120 MHTASSLEKQ IGHPSPPPEK KELRKVAHLT GKSNSRSMPL EWEDTYGIVL LSGVKYKKGG 180 LVINETGLYF VYSKVYFRGQ SCNNLPLSHK VYMRNSKYPQ DLVMMEGKMM SYCTTGQMWA 240 RSSILGAVFN LTSADHLYVN VSELSLVNFE ESQTFFGLYK L 281 |
| SEQ ID NO: 460 domínio solúvel de CD95L | VAHLTGKSNS RSMPLEWEDT YGIVLLSGVK YKKGGLVINE TGLYFVYSKV YFRGQSCNNL 60 PLSHKVYMRN SKYPQDLVMM EGKMMSYCTT GQMWARSSIL GAVFNLTSAD HLYVNVSELS 120 LVNFEESQTF FGLYKL 136 |
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| SEQ ID NO: 461 domínio solúvel de CD95L (alternativo) | AHLTGKSNSR SMPLEWEDTY GIVLLSGVKY KKGGLVINET GLYFVYSKVY FRGQSCNNLP 60 LSHKVYMRNS KYPQDLVMME GKMMSYCTTG QMWARSSILG AVFNLTSADH LYVNVSELSL 120 VNFEESQTFF GLYKL 135 |
| SEQ ID NO: 462 domínio solúvel de CD95L (alternativo) | HLTGKSNSRS MPLEWEDTYG IVLLSGVKYK KGGLVINETG LYFVYSKVYF RGQSCNNLPL 60 SHKVYMRNSK YPQDLVMMEG KMMSYCTTGQ MWARSSILGA VFNLTSADHL YVNVSELSLV 120 NFEESQTFFG LYKL 134 |
[001046] Em uma modalidade, o agonista de CD95 é um polipeptídeo de fusão de cadeia única agonístico de CD95 compreendendo (i) um primeiro domínio de ligação de CD95 solúvel, (ii) um primeiro ligante peptídico, (iii) um segundo domínio de ligação de CD95 solúvel, (iv) um segundo ligante peptídico, e (v) um terceiro domínio de ligação de CD95 solúvel, compreendendo adicionalmente um domínio adicional na extremidade de terminal N e/ou terminal C, e em que o domínio adicional é um Fab ou domínio do fragmento Fc. Em uma modalidade, o agonista de CD95 é um polipeptídeo de fusão de cadeia única agonístico de CD95 compreendendo (i) um primeiro domínio de ligação de CD95 solúvel, (ii) um primeiro ligante peptídico, (iii) um segundo domínio de ligação de CD95 solúvel, (iv) um segundo ligante peptídico, e (v) um terceiro domínio de ligação de CD95 solúvel, compreendendo adicionalmente um domínio adicional na extremidade de terminal N e/ou terminal C, em que o domínio adicional é um Fab ou domínio do fragmento Fc em que cada um dos domínios de ligação de CD95 solúveis carece de uma região de haste (o que contribui para a trimerização e provê uma certa distância para a membrana celular, mas não é parte do domínio de ligação de CD95) e o primeiro e o segundo ligantees peptídicos independentemente têm um comprimento de 3 a 8 aminoácidos.
[001047] Em uma modalidade, o agonista de CD95 é um polipeptídeo de fusão de cadeia única agonístico de CD95 compreendendo (i) um primeiro domínio de citocina da superfamília do fator de necrose de tumor (TNF) solúvel, (ii) um primeiro ligante peptídico, (iii) um segundo domínio de citocina da superfamília do TNF solúvel, (iv) um segundo ligante peptídico, e
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354/497 (v) um terceiro domínio de citocina da superfamrlia do TNF solúvel, em que cada um dos domínios de citocina da superfamrlia do TNF solúvel carece de uma região de haste e o primeiro e o segundo ligantees peptídicos independentemente têm um comprimento de 3 a 8 aminoácidos, e em que o domínio de TNF de citocina da superfamrlia é um CD95 domínio de ligação.
[001048] Em uma modalidade, o agonista de CD95 é um anticorpo scFv agonístico de CD95 compreendendo qualquer um dos domínios VH precedentes ligados a qualquer um dos domínios VL precedentes.
Métodos de Expandir linfócitos infiltrantes de tumor [001049] Em uma modalidade, a invenção provê um método de expandir uma população de TILs usando qualquer um dos agonistas de TNFRSF da presente divulgação, o método compreendendo as etapas como descritas em Jin, et al., J. Immunotherapy 2012, 35, 283-292, a divulgação da qual é aqui incorporada por referência. Por exemplo, o tumor pode ser colocado no meio enzimático e mecanicamente dissociado durante aproximadamente 1 minuto. A mistura pode ser depois incubada durante 30 minutos a 37°C em 5% de CO2 e depois mecanicamente rompida mais uma vez durante aproximadamente 1 minuto. Depois da incubação durante 30 minutos a 37°C em 5% de CO2, o tumor pode ser mecanicamente rompido uma terceira vez durante aproximadamente 1 minuto. Se depois do terceiro rompimento mecânico, pedaços grandes de tecido estiverem presentes, 1 ou 2 dissociações mecânicas adicionais podem ser aplicadas à amostra, com ou sem 30 minutos adicionais de incubação a 37°C em 5% de CO2. No término da incubação final, se a suspensão celular contém um grande número de células sanguíneas vermelhas ou células mortas, uma separação de gradiente de densidade usando Ficoll pode ser realizada para remover estas células. As culturas de TIL foram iniciados em placas de 24 poços (grupo de cultura de célula de 24 poços de fundo chato Costar; Coming Incorporated, Coming, NY), cada poço pode ser semeado com IxIO6 células de tumor digeridas ou
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355/497 um fragmento de tumor de aproximadamente 1 a 8 mm3 no tamanho em 2 mL de meio completo (CM) com IL-2 (6000 lU/mL; Chiron Corp., Emeryville, CA). CM compreende o tampão 1640 da Roswell Park Memorial Institute (RPMI) com GlutaMAX, suplementado com 10% de soro AB humano, 25 mM de Hepes, e 10 mg/mL de gentamicina. As culturas podem ser iniciadas em frascos permeáveis a gás com uma capacidade de 40 mL e um fundo de silício de 10 cm2 permeável a gás (G-Rex 10; Wilson Wolf Manufacturing, New Brighton), cada frasco pode ser carregado com 10 a 40x106 células de tumor viáveis digeridas ou 5 a 30 fragmentos de tumor em 10 a 40 mL de CM com IL-2. G-Rex 10 e placas de 24 poços podem ser incubados em um incubador umidificado a 37°C em 5% de CO2 e 5 dias depois do início da cultura, metade do meio pode ser removido e substituído por CM fresco e IL2 e depois do dia 5, metade do meio pode ser mudado a cada 2 a 3 dias. O protocolo de expansão rápida (REP) de TILs pode ser realizado usando frascos T-175 e bolsas permeáveis a gás ou frascos G-Rex permeáveis a gás, como aqui descritos em outro lugar, usando os agonistas de TNFRSF da presente divulgação. Para REP em frascos T-175, IxlO6 TILs podem ser colocados em suspensão em 150 mL de meio em cada frasco. O TIL pode ser cultivado com agonistas de TNFRSF da presente divulgação em uma razão aqui descrita, em uma mistura 1 para 1 de meio CM e AIM-V (meio 50/50), suplementado com 3000 lU/mL de IL-2 e 30 ng/mL de anticorpo anti-CD3 (OKT-3). Os frascos T-175 podem ser incubados a 37°C em 5% de CO2. Metade do meio pode ser mudado no dia 5 usando meio 50/50 com 3000 lU/mL de IL-2. No dia 7, as células de 2 frascos T-175 podem ser combinadas em uma bolsa de 3 L e 300 mL de AIM-V com 5% de soro AB humano e 3000 lU/mL de IL-2 pode ser adicionado aos 300 mL de suspensão de TIL. O número de células em cada bolsa pode ser contado a cada dia ou dois dias, e meio fresco pode ser adicionado para manter a contagem de célula entre 0,5 e 2,0xl06 células/mL. Para REP em frascos com 500 mL de capacidade com
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356/497 frascos de silício permeáveis a gás de 100 cm2 (por exemplo, G-Rex 100, Wilson Wolf Manufacturing, como aqui descrito em outro lugar), 5xl06 ou 10x106 TILs podem ser cultivados com agonistas de TNFRSF em um razão aqui descrita (por exemplo, 1 para 100) em 400 mL de meio 50/50, suplementado com 3000 lU/mL de IL-2 e 30 ng/mL de anticorpo anti-CD3 (OKT-3). Os frascos G-Rexl00 podem ser incubados a 37°C em 5% de CO2. No dia cinco, 250 mL de sobrenadante podem ser removidos e colocados em garrafas de centrífuga e centrifugados a 1500 rpm (491 g) durante 10 minutos. As pelotas de TIL obtidas podem ser recolocadas em suspensão com 150 mL de meio 50/50 fresco com 3000 lU/mL de IL-2 e adicionadas de volta aos frascos G-Rex 100. Quando TILs são expandidos em série em frascos G-Rex 100, no dia sete os TILs em cada G-Rex 100 são colocados em suspensão no 300 mL de meios presentes em cada frasco e a suspensão celular pode ser dividida em três alíquotas de 100 mL que podem ser usadas para semear 3 frascos G-Rexl00. Cerca de 150 mL de AIM-V com 5% de soro AB humano e 3000 lU/mL de IL-2 podem ser depois adicionados a cada frasco. Os frascos G-Rexl00 podem ser depois incubados a 37°C em 5% de CO2, e depois de quatro dias, 150 mL de AIM-V com 3000 lU/mL de IL-2 pode ser adicionado a cada frasco G-Rexl00. Depois disto, o REP pode ser completado colhendose as células no dia 14 da cultura.
[001050] Em uma modalidade, um método ou processo de expandir ou tratar um câncer inclui um etapa em que TILs são obtidos de uma amostra de tumor de paciente. Uma amostra de tumor de paciente pode ser obtida usando métodos conhecidos na técnica. Por exemplo, TILs podem ser cultivados a partir de digestões enzimáticas de tumor e fragmentos de tumor (cerca de 1 a cerca de 8 mm3 no tamanho) de dissecação pronunciada. Tais digestões de tumor podem ser produzidas pela incubação em meio enzimático (por exemplo, tampão 1640 do Roswell Park Memorial Institute (RPMI), 2 mM de glutamato, 10 mg/mL de gentamicina, 30 unidades/mL de DNase e 1,0
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357/497 mg/mL de colagenase) seguida pela dissociação mecânica (por exemplo, usando um dissociador de tecido). As digestões de tumor podem ser produzidas colocando-se o tumor em meios enzimáticos e mecanicamente dissociando o tumor durante aproximadamente 1 minuto, seguida pela incubação durante 30 minutos a 37°C em 5% de CO2, seguida pelos ciclos repetidos de dissociação mecânica e incubação sob as condições precedentes até que apenas pedaços de tecido pequenos estejam presentes. No final deste processo, se a suspensão celular contém um grande número de células sanguíneas vermelhas ou células mortas, uma separação de gradiente de densidade usando o polissacarídeo hidrofílico ramificado FICOLL pode ser realizada para remover estas células. Métodos alternativos conhecidos na técnica podem ser usados, tais como aqueles descritos na Publicação do Pedido de Patente U.S. No. 2012/0244133 Al, a divulgação da qual é aqui incorporada por referência. Qualquer um dos métodos precedentes pode ser usado em qualquer uma das modalidades aqui descritas para os métodos ou processos de expandir TILs ou métodos de tratar um câncer.
[001051] Em uma modalidade, um processo de expansão rápida para TILs pode ser realizado usando frascos T-175 e bolsas permeáveis a gás como anteriormente descrito (Tran, et al., J. Immunother. 2008, 31, 742-51; Dudley, et al., J. Immunother. 2003, 26, 332-42) ou vidraria de cultura permeáveis a gás (frascos G-Rex, comercialmente disponíveis da Wilson Wolf Manufacturing Corporation, New Brighton, MN, USA). Para a expansão rápida de TIL em frascos T-175, 1 x 106 TILs colocados em suspensão em 150 mL de meio podem ser adicionados a cada frasco T-175. Os TILs podem ser cultivados com agonistas de TNFRSF em uma razão de 1 TIL para 100 agonistas de TNFRSF e as células foram cultivadas em uma mistura 1 para 1 de meio CM e AIM-V, suplementado com 3000 IU (unidades internacionais) por mL de IL-2 e 30 ng por ml de anticorpo anti-CD3 (por exemplo, OKT-3). Os frascos T-175 podem ser incubados a 37°C em 5% de CO2. metade dos
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358/497 meios pode ser trocada no dia 5 usando meio 50/50 com 3000 IU por mL de IL-2. No dia 7 as células de dois frascos T-175 podem ser combinadas em uma bolsa de 3 L e 300 mL de AIM V com 5% de soro AB humano e 3000 IU por mL de IL-2 foram adicionados aos 300 ml de suspensão de TIL. O número de células em cada bolsa foi contado a cada dia ou dois e meio fresco foi adicionado para manter a contagem de célula entre 0,5 e 2,0 x 106 células/mL.
[001052] Em uma modalidade, para as expansões rápidas de TIL em frascos permeáveis a gás com capacidade de 500 mL com fundos de silício de 100 cm2 permeáveis a gás (G-Rex 100, comercialmente disponível da Wilson Wolf Manufacturing Corporation, New Brighton, MN, USA), 5 x 106 ou 10 x 106 TILs podem ser cultivados com agonistas de TNFRSF em 400 mL de meio 50/50, suplementado com 5% de soro AB humano, 3000 IU por mL de IL-2 e 30 ng por mL de anti-CD3 (OKT-3). Os frascos G-Rex 100 podem ser incubados a 37°C em 5% de CO2. No dia 5, 250 mL de sobrenadante podem ser removidos e colocados em garrafas de centrífuga e centrifugadas a 1500 rpm (revoluções por minuto; 491 x g) durante 10 minutos. Os grânulos de TIL podem ser recolocados em suspensão com 150 mL de meio fresco com 5% de soro AB humano, 3000 IU por mL de IL-2, e adicionados de volta para os frascos G-Rex 100 originais. Quando TILs são expandidos em série em frascos G-Rex 100, no dia 7 o TIL em cada G-Rex 100 pode ser colocado em suspensão nos 300 mL de meio presente em cada frasco e a suspensão celular pode ser dividida em 3 alíquotas de 100 mL que podem ser usadas para semear 3 frascos G-Rex 100. Depois 150 mL de AIM-V com 5% de soro AB humano e 3000 IU por mL de IL-2 podem ser adicionados a cada frasco. Os frascos G-Rex 100 podem ser incubados a 37°C em 5% de CO2 e depois de 4 dias 150 mL de AIM-V com 3000 IU por mL de IL-2 podem ser adicionados a cada frasco G-Rex 100. As células podem ser colhidas no dia 14 da cultura.
[001053] Em uma modalidade, TILs podem ser preparados como segue.
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359/497 fragmentos de tumor de 2 mm3 são cultivados em meios completos (CM) compreendidos de meio AIM-V (Invitrogen Life Technologies, Carlsbad, CA) suplementado com 2 mM de glutamina (Mediatech, Inc. Manassas, VA), 100 U/mL de penicilina (Invitrogen Life Technologies), 100 pg/mL de estreptomicina (Invitrogen Life Technologies), 5% de soro AB humano inativado por calor (Valley Biomedical, Inc. Winchester, VA) e 600 IU/mL de rhIL-2 (Chiron, Emeryville, CA). Para a digestão enzimática de tumores sólidos, os espécimes de tumor são cortados em cubos em RPMI-1640, lavados e centrifugados a 800 rpm durante 5 minutos de 15 a 22°C, e recolocados em suspensão em tampão de digestão enzimática (0,2 mg/mL Colagenase e 30 unidades/ml de DNase em RPMI-1640) seguido pela rotação durante a noite na temperatura ambiente. Os TILs estabelecidos de fragmentos podem ser cultivados durante 3 a 4 semanas em CM e expandidos frescos ou criopreservados em soro HAB inativado por calor com 10% de sulfóxido de dimetila (DMSO) e armazenado a -180°C até o momento do estudo. Os linfócitos associados com tumor (TAL) obtidos a partir de acúmulos de ascites foram semeados a 3 x 106 células/poço de uma placa de 24 poços em CM. O crescimento de TIL foi inspecionado dia sim dia não usando um microscópio invertido de baixa ampliação.
[001054] Em uma modalidade, a invenção inclui um método de expandir linfócitos infiltrantes de tumor (TILs), o método compreendendo contatar uma população de TILs compreendendo pelo menos um TIL com um agonista de TNFRSF aqui descrito, em que o dito agonista de TNFRSF compreende pelo menos um ligante coestimulatório que especificamente se liga com uma molécula coestimulatória expressa na superfície celular dos TILs, em que a ligação da dita molécula coestimulatória com o dito ligante coestimulatório induz a proliferação dos TILs, deste modo especificamente expandindo os TILs.
[001055] Em uma modalidade, a invenção provê um método de
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360/497 expandir uma população de linfócitos infiltrantes de tumor (TILs), o método compreendendo as etapas de contatar a população de TILs com um ou mais agonistas de TNFRSF em um meio de cultura de célula.
[001056] Em uma modalidade, a invenção provê um método de expandir uma população de linfócitos infiltrantes de tumor (TILs), o método compreendendo as etapas de contatar a população de TILs com um ou mais agonistas de TNFRSF em um meio de cultura de célula, em que as concentrações do um ou mais agonistas de TNFRSF no meio de cultura de célula são independentemente selecionadas do grupo que consiste em 50 ng/mL, 100 ng/mL, 500 ng/mL, 1 pg/mL, 5 pg/mL, 10 pg/mL, 20 pg/mL, 30 pg/mL, 40 pg/mL, 50 pg/mL, 60 pg/mL, 70 pg/mL, 80 pg/mL, 90 pg/mL, e 100 pg/mL.
[001057] Em uma modalidade, a invenção provê um método de expandir uma população de linfócitos infiltrantes de tumor (TILs), o método compreendendo as etapas de contatar a população de TILs com um ou mais agonistas de TNFRSF em um meio de cultura de célula, em que o meio de cultura de célula compreende adicionalmente IL-2 em uma concentração inicial de cerca de 3000 lU/mL e o anticorpo OKT-3 em uma concentração inicial de cerca de 30 ng/mL.
[001058] Em uma modalidade, a invenção provê um método de expandir uma população de linfócitos infiltrantes de tumor (TILs), o método compreendendo as etapas de contatar a população de TILs com um ou mais agonistas de TNFRSF em um meio de cultura de célula, em que o meio de cultura de célula compreende adicionalmente IL-2 em uma concentração inicial de cerca de 3000 lU/mL e o anticorpo OKT-3 em uma concentração inicial de cerca de 30 ng/mL, e em que o um ou mais agonistas de TNFRSF compreendem um agonista de 4-1BB.
[001059] Em uma modalidade, a invenção provê um método de expandir uma população de linfócitos infiltrantes de tumor (TILs), o método
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361 /497 compreendendo as etapas de contatar a população de TILs com um ou mais agonistas de TNFRSF em um meio de cultura de célula, em que o meio de cultura de célula compreende adicionalmente IL-2 em uma concentração inicial de cerca de 3000 IU/mL e o anticorpo OKT-3 em uma concentração inicial de cerca de 30 ng/mL, e em que o um ou mais agonistas de TNFRSF compreendem um agonista de 0X40.
[001060] Em uma modalidade, a invenção provê um método de expandir uma população de linfócitos infiltrantes de tumor (TILs), o método compreendendo as etapas de contatar a população de TILs com um ou mais agonistas de TNFRSF em um meio de cultura de célula, em que o meio de cultura de célula compreende adicionalmente IL-2 em uma concentração inicial de cerca de 3000 IU/mL e o anticorpo OKT-3 em uma concentração inicial de cerca de 30 ng/mL, e em que o um ou mais agonistas de TNFRSF compreendem um 4-1BB e um agonista de 0X40.
[001061] Em uma modalidade, a invenção provê um método de expandir uma população de linfócitos infiltrantes de tumor (TILs), o método compreendendo as etapas de contatar a população de TILs com um ou mais agonistas de TNFRSF em um meio de cultura de célula, em que o meio de cultura de célula compreende adicionalmente IL-2 em uma concentração inicial de cerca de 3000 IU/mL e o anticorpo OKT-3 em uma concentração inicial de cerca de 30 ng/mL, e em que o um ou mais agonistas de TNFRSF compreendem um agonista de CD27.
[001062] Em uma modalidade, a invenção provê um método de expandir uma população de linfócitos infiltrantes de tumor (TILs), o método compreendendo as etapas de contatar a população de TILs com um ou mais agonistas de TNFRSF em um meio de cultura de célula, em que o meio de cultura de célula compreende adicionalmente IL-2 em uma concentração inicial de cerca de 3000 IU/mL e o anticorpo OKT-3 em uma concentração inicial de cerca de 30 ng/mL, e em que o um ou mais agonistas de TNFRSF
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362/497 compreendem um agonista de GITR.
[001063] Em uma modalidade, a invenção provê um método de expandir uma população de linfócitos infiltrantes de tumor (TILs), o método compreendendo as etapas de contatar a população de TILs com um ou mais agonistas de TNFRSF em um meio de cultura de célula, em que o meio de cultura de célula compreende adicionalmente IL-2 em uma concentração inicial de cerca de 3000 lU/mL e o anticorpo OKT-3 em uma concentração inicial de cerca de 30 ng/mL, e em que o um ou mais agonistas de TNFRSF compreendem um agonista de HVEM.
[001064] Em uma modalidade, a invenção provê um método de expandir uma população de linfócitos infiltrantes de tumor (TILs), o método compreendendo as etapas de contatar a população de TILs com um ou mais agonistas de TNFRSF em um meio de cultura de célula, em que o meio de cultura de célula compreende adicionalmente IL-2 em uma concentração inicial de cerca de 3000 lU/mL e o anticorpo OKT-3 em uma concentração inicial de cerca de 30 ng/mL, e em que o um ou mais agonistas de TNFRSF compreendem um agonista de CD95.
[001065] Em uma modalidade, a invenção provê um método de expandir uma população de linfócitos infiltrantes de tumor (TILs), o método compreendendo as etapas de contatar a população de TILs com um ou mais agonistas de TNFRSF em um meio de cultura de célula, em que a população de TILs em pelo menos 50 vezes em um período de 7 dias no meio de cultura de célula.
[001066] Em uma modalidade, a invenção provê um método de expandir uma população de linfócitos infiltrantes de tumor (TILs), o método compreendendo as etapas de contatar a população de TILs com um ou mais agonistas de TNFRSF em um meio de cultura de célula, em que a população de TILs em pelo menos 50 vezes em um período de 7 dias no meio de cultura de célula, e em que a expansão é realizada usando um recipiente permeável a
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363/497 gás.
[001067] Em uma modalidade, REP pode ser realizado em um recipiente permeável a gás usando os agonistas de TNFRSF da presente divulgação por qualquer método adequado. Por exemplo, TILs podem ser rapidamente expandidos usando a estimulação de receptor de célula T não específico na presença de interleucina-2 (IL-2) ou interleucina-15 (IL-15). O estímulo do receptor de célula T não específico pode incluir, por exemplo, um anticorpo anti-CD3, tal como cerca de 30 ng/mL de OKT-3, um anticorpo monoclonal anti-CD3 (comercialmente disponível da Ortho-McNeil, Raritan, NJ ou Miltenyi Biotech, Auburn, CA) ou UHCT-1 (comercialmente disponível da BioLegend, San Diego, CA, USA). TILs podem ser rapidamente expandidos pela estimulação adicional dos TILs in vitro com um ou mais antígenos, incluindo porções antigênicas dos mesmos, tais como epítopo(s) de câncer, que podem ser opcionalmente expressos a partir de um vetor, tal como um peptídeo de ligação a antígeno leucocitário humano A2 (HLA-A2), por exemplo, 0,3 μΜ de MART-1:26-35 (27 L) ou gpl 00:209217 (210M), opcionalmente na presença de um fator de crescimento de célula T, tal como 300 lU/mL de IL-2 ou IL-15. Outros antígenos adequados podem incluir, por exemplo, NY-ESO-1, TRP-1, TRP-2, antígeno canceroso da tirosinase , MAGE-A3, SSX-2, e VEGFR2, ou porções antigênicas dos mesmos. TIL também pode ser rapidamente expandido pela reestimulação com o(s) mesmo(s) antígeno(s) do câncer pulsado(s) sobre células que apresentam antígeno expressando HLA-A2. Altemativamente, os TILs podem ser reestimulados ainda com, por exemplo, linfócitos irradiados, autólogos ou com linfócitos halogênicos HLA-A2+ irradiados e IL-2.
[001068] Em uma modalidade, um método para expandir TILs pode inclui o uso de cerca de 5000 mL a cerca de 25000 mL de meio de cultura de célula, cerca de 5000 mL a cerca de 10000 mL de meio de cultura de célula, ou cerca de 5800 mL a cerca de 8700 mL de meio de cultura de célula. Em
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364/497 uma modalidade, um método para expandir TILs pode incluir o uso de cerca de 1000 mL a cerca de 2000 mL de meio de célula, cerca de 2000 mL a cerca de 3000 mL de meio de cultura de célula, cerca de 3000 mL a cerca de 4000 mL de meio de cultura de célula, cerca de 4000 mL a cerca de 5000 mL de meio de cultura de célula, cerca de 5000 mL a cerca de 6000 mL de meio de cultura de célula, cerca de 6000 mL a cerca de 7000 mL de meio de cultura de célula, cerca de 7000 mL a cerca de 8000 mL de meio de cultura de célula, cerca de 8000 mL a cerca de 9000 mL de meio de cultura de célula, cerca de 9000 mL a cerca de 10000 mL de meio de cultura de célula, cerca de 10000 mL a cerca de 15000 mL de meio de cultura de célula, cerca de 15000 mL a cerca de 20000 mL de meio de cultura de célula, ou cerca de 20000 mL a cerca de 25000 mL de meio de cultura de célula. Em uma modalidade, expandir o número de TILs não usa mais do que um tipo de meio de cultura de célula. Qualquer meio de cultura de célula adequado pode ser usado, por exemplo, meio de célula AIM-V (L-glutamina, 50 μΜ de sulfato de estreptomicina, e 10 μΜ de sulfato de gentamicina) meio de cultura de célula (Invitrogen, Carlsbad CA). A este respeito, os métodos inventivos vantajosamente reduzem a quantidade de meio e o número de tipos de meio requeridos para expandir o número de TIL. Em uma modalidade, expandir o número de TIL podem compreender alimentar as células não mais frequentemente do que a cada terceiro ou quarto dia. Expandir o número de células em um recipiente permeável a gás simplifica os procedimentos necessários para expandir o número de células pela redução da frequência de alimentação necessária para expandir as células.
[001069] Em uma modalidade, a expansão rápida é realizada usando um recipiente permeável a gás. Tais modalidades permitem que as populações de célula expandam de cerca de 5 x 105 células/cm2 até entre 10 x 106 e 30 x 106 células/cm2. Em uma modalidade, esta expansão ocorre sem alimentação. Em uma modalidade, esta expansão ocorre sem alimentação contanto que o meio
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365/497 resida em uma altura de cerca de 10 cm em um frasco permeável a gás. Em uma modalidade isto é sem alimentação mas com a adição de uma ou mais citocinas. Em uma modalidade, a citocina pode ser adicionada como um bolo sem nenhuma necessidade para misturar a citocina com o meio. Tais recipientes, dispositivos, e métodos são conhecidos na técnica e foram usados para expandir TILs, e incluem aqueles descritos na Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2014/0377739 Al, Publicação de Pedido de Patente Internacional No. WO 2014/210036 Al, Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2013/0115617 Al, Publicação Internacional No. WO 2013/188427 Al, Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2011/0136228 Al, Patentes U.S. No. 8.809.050, Publicação de Pedido de Patente Internacional No. WO 2011/072088 A2, Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2016/0208216 Al, Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2012/0244133 Al, Publicação de Pedido de Patente Internacional No. WO 2012/129201 Al, Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2013/0102075 Al, Patentes U.S. No. 8.956.860, Publicação de Pedido de Patente Internacional No. WO 2013/173835 Al, e Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0175966 Al, as divulgações das quais são aqui incorporadas por referência. Tais processos também são descritos em Jin, et al., J. Immunotherapy 2012, 35, 283-292, a divulgação da qual é aqui incorporada por referência.
[001070] Em uma modalidade, o recipiente permeável a gás é um frasco G-Rex 10 (Wilson Wolf Manufacturing Corporation, New Brighton, MN, USA). Em uma modalidade, o recipiente permeável a gás inclui uma superfície de cultura permeável a gás de 10 cm2. Em uma modalidade, o recipiente permeável a gás inclui uma capacidade de 40 mL de meio de cultura de célula. Em uma modalidade, o recipiente permeável a gás provê 100 a 300 milhões de TILs depois de 2 trocas de meio.
[001071] Em uma modalidade, o recipiente permeável a gás é um frasco
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G-Rex 100 (Wilson Wolf Manufacturing Corporation, New Brighton, MN, USA). Em uma modalidade, o recipiente permeável a gás inclui uma superfície de cultura permeável a gás de 100 cm2. Em uma modalidade, o recipiente permeável a gás inclui uma capacidade de meio de cultura de célula de 450 mL. Em uma modalidade, o recipiente permeável a gás provê 1 a 3 bilhões de TILs depois de 2 trocas de meio.
[001072] Em uma modalidade, o recipiente permeável a gás é um frasco G-Rex de 100M (Wilson Wolf Manufacturing Corporation, New Brighton, MN, USA). Em uma modalidade, o recipiente permeável a gás inclui uma superfície de cultura permeável a gás de 100 cm2. Em uma modalidade, o recipiente permeável a gás inclui uma capacidade de meio de cultura de célula de 1000 mL. Em uma modalidade, o recipiente permeável a gás provê 1 a 3 bilhões de TILs sem troca de meio.
[001073] Em uma modalidade, o recipiente permeável a gás é um Frasco G-Rex 100L (Wilson Wolf Manufacturing Corporation, New Brighton, MN, USA). Em uma modalidade, o recipiente permeável a gás inclui uma superfície de cultura permeável a gás de 100 cm2. Em uma modalidade, o recipiente permeável a gás inclui uma capacidade de meio de cultura de célula de 2000 mL. Em uma modalidade, o recipiente permeável a gás provê 1 a 3 bilhões de TILs sem troca de meio.
[001074] Em uma modalidade, o recipiente permeável a gás é uma placa de 24 poços G-Rex (Wilson Wolf Manufacturing Corporation, New Brighton, MN, USA). Em uma modalidade, o recipiente permeável a gás inclui uma placa com poços, em que cada poço inclui uma superfície de cultura permeável a gás de 2 cm2. Em uma modalidade, o recipiente permeável a gás inclui uma placa com poços, em que cada poço inclui uma capacidade de meio de cultura de célula de 8 mL. Em uma modalidade, o recipiente permeável a gás provê 20 a 60 milhões de células por poço depois de 2 trocas de meio.
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367/497 [001075] Em uma modalidade, o recipiente permeável a gás é uma placa de 6 poços G-Rex (Wilson Wolf Manufacturing Corporation, New Brighton, MN, USA). Em uma modalidade, o recipiente permeável a gás inclui uma placa com poços, em que cada poço inclui uma superfície de cultura permeável a gás de 10 cm2. Em uma modalidade, o recipiente permeável a gás inclui uma placa com poços, em que cada poço inclui uma capacidade de meio de cultura de célula de 40 mL. Em uma modalidade, o recipiente permeável a gás provê 100 a 300 milhões de células por poço depois de 2 trocas de meio.
[001076] Em uma modalidade, o meio de célula no primeiro e/ou segundo recipientes permeáveis a gás não é filtrado. O uso de meio de célula não filtrado pode simplificar os procedimentos necessários para expandir o número de células. Em uma modalidade, o meio de célula no primeiro e/ou segundo recipientes permeáveis a gás carece de beta-mercaptoetanol (BME).
[001077] Em uma modalidade, a duração do método compreendendo a obtenção de uma amostra de tecido de tumor do mamífero; cultivar a amostra de tecido de tumor em um primeiro recipiente permeável a gás contendo meio de célula nele; obter TILs da amostra de tecido de tumor; expandir o número de TILs em um segundo recipiente permeável a gás contendo meio de célula nele usando agonistas de TNFRSF por uma duração de cerca de 14 a cerca de 42 dias, por exemplo, cerca de 28 dias.
[001078] Em uma modalidade, a razão de TILs para os agonistas de TNFRSF (células para moles) na expansão rápida é de cerca de 1 a 25, cerca de 1 a 50, cerca de 1 a 100, cerca de 1 a 125, cerca de 1 a 150, cerca de 1 a 175, cerca de 1 a 200, cerca de 1 a 225, cerca de 1 a 250, cerca de 1 a 275, cerca de 1 a 300, cerca de 1 a 325, cerca de 1 a 350, cerca de 1 a 500, cerca de 1 a 1000, ou cerca de 1 a 10000. Em uma modalidade, a razão de TILs para os agonistas de TNFRSF na expansão rápida está entre 1 e 50 e 1 e 300. Em uma modalidade, a razão de TILs para os agonistas de TNFRSF na expansão
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368/497 rápida está entre 1 e 100 e 1 e 200.
[001079] Em uma modalidade, a razão de TILs para agonista de TNFRSF (TIL: agonista de TNFRSF, células para moles) é selecionada do grupo que consiste em 1:5, 1:10, 1:15, 1:20, 1:25, 1:30, 1:35, 1:40, 1:45, 1:50, 1:55, 1:60, 1:65, 1:70, 1:75, 1:80, 1:85, 1:90, 1:95, 1:100, 1:105, 1:110, 1:115, 1:120, 1:125, 1:130, 1:135, 1:140, 1:145, 1:150, 1:155, 1:160, 1:165, 1:170, 1:175, 1:180, 1:185, 1:190, 1:195, 1:200, 1:225, 1:250, 1:275, 1:300, 1:350, 1:400, 1:450, 1:500, 1:1000, 1:5000, 1:10000, e 1:50000.
[001080] Em uma modalidade, TILs são expandidos em recipientes permeáveis a gás. Os recipientes permeáveis a gás foram usados para expandir TILs usando PBMCs usando métodos, composições, e dispositivos conhecidos na técnica, incluindo aqueles descritos na Publicação do Pedido de Patente U.S. No. 2005/0106717 Al, as divulgações da qual é aqui incorporada por referência. Em uma modalidade, TILs são expandidos em bolsas permeáveis a gás. Em uma modalidade, TILs são expandidos usando um sistema de expansão de célula que expande TILs em bolsas permeáveis a gás, tais como o sistema de expansão de célula Xuri W25 (GE Healthcare). Em uma modalidade, TILs são expandidos usando um sistema de expansão de célula que expande TILs em bolsas permeáveis a gás, tais como o WAVE Bioreactor System, também conhecido como o Sistema de expansão de célula Xuri W5 (GE Healthcare). Em uma modalidade, o sistema de expansão de célula inclui uma bolsa de célula permeável a gás com um volume selecionado a partir do grupo que consiste em cerca de 100 mL, cerca de 200 mL, cerca de 300 mL, cerca de 400 mL, cerca de 500 mL, cerca de 600 mL, cerca de 700 mL, cerca de 800 mL, cerca de 900 mL, cerca de 1 L, cerca de 2 L, cerca de 3 L, cerca de 4 L, cerca de 5 L, cerca de 6 L, cerca de 7 L, cerca de 8 L, cerca de 9 L, cerca de 10 L, cerca de 11 L, cerca de 12 L, cerca de 13 L, cerca de 14 L, cerca de 15 L, cerca de 16 L, cerca de 17 L, cerca de 18 L, cerca de 19 L, cerca de 20 L, cerca de 25 L, e cerca de 30 L. Em uma
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369/497 modalidade, o sistema de expansão de célula inclui uma bolsa de célula permeável a gás com uma faixa de volume selecionada do grupo que consiste emntre 50 e 150 mL, entre 150 e 250 mL, entre 250 e 350 mL, entre 350 e 450 mL, entre 450 e 550 mL, entre 550 e 650 mL, entre 650 e 750 mL, entre 750 e 850 mL, entre 850 e 950 mL, e entre 950 e 1050 mL. Em uma modalidade, o sistema de expansão de célula inclui uma bolsa de célula permeável a gás com uma faixa de volume selecionada do grupo que consiste emntre 1 L e 2 L, entre 2 L e 3 L, entre 3 L e 4 L, entre 4 L e 5 L, entre 5 L e 6 L, entre 6 L e 7 L, entre 7 L e 8 L, entre 8 L e 9 L, entre 9 L e 10 L, entre 10 L e 11 L, entre 11 L e 12 L, entre 12 L e 13 L, entre 13 L e 14 L, entre 14 L e 15 L, entre 15 L e 16 L, entre 16 L e 17 L, entre 17 L e 18 L, entre 18 L e 19 L, e entre 19 L e 20 L. Em uma modalidade, o sistema de expansão de célula inclui uma bolsa de célula permeável a gás com uma faixa de volume selecionada do grupo que consiste emntre 0,5 L e 5 L, entre 5 L e 10 L, entre 10 L e 15 L, entre 15 L e 20 L, entre 20 L e 25 L, e entre 25 L e 30 L. Em uma modalidade, o sistema de expansão de célula utiliza um tempo de agitação de cerca de 30 minutos, cerca de 1 hora, cerca de 2 horas, cerca de 3 horas, cerca de 4 horas, cerca de 5 horas, cerca de 6 horas, cerca de 7 horas, cerca de 8 horas, cerca de 9 horas, cerca de 10 horas, cerca de 11 horas, cerca de 12 horas, cerca de 24 horas, cerca de 2 dias, cerca de 3 dias, cerca de 4 dias, cerca de 5 dias, cerca de 6 dias, cerca de 7 dias, cerca de 8 dias, cerca de 9 dias, cerca de 10 dias, cerca de 11 dias, cerca de 12 dias, cerca de 13 dias, cerca de 14 dias, cerca de 15 dias, cerca de 16 dias, cerca de 17 dias, cerca de 18 dias, cerca de 19 dias, cerca de 20 dias, cerca de 21 dias, cerca de 22 dias, cerca de 23 dias, cerca de 24 dias, cerca de 25 dias, cerca de 26 dias, cerca de 27 dias, e cerca de 28 dias. Em uma modalidade, o sistema de expansão de célula utiliza um tempo de agitação dentre 30 minutos e 1 hora, entre 1 hora e 12 horas, entre 12 horas e 1 dia, entre 1 dia e 7 dias, entre 7 dias e 14 dias, entre 14 dias e 21 dias, e entre 21 dias e 28 dias. Em uma modalidade, o
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370 / 497 sistema de expansão de célula utiliza uma taxa de agitação de cerca de 2 agitações/minuto, cerca de 5 agitações/minuto, cerca de 10 agitações/minuto, cerca de 20 agitações/minuto, cerca de 30 agitações/minuto, e cerca de 40 agitações/minuto. Em uma modalidade, o sistema de expansão de célula utiliza um taxa de agitação dentre 2 agitações/minuto e 5 agitações/minuto, 5 agitações/minuto e 10 agitações/minuto, 10 agitações/minuto e 20 agitações/minuto, 20 agitações/minuto e 30 agitações/minuto, e 30 agitações/minuto e 40 agitações/minuto. Em uma modalidade, o sistema de expansão de célula utiliza um ângulo de agitação de cerca de 2o, cerca de 3o, cerca de 4o, cerca de 5o, cerca de 6o, cerca de 7o, cerca de 8o, cerca de 9o, cerca de 10°, cerca de 11°, e cerca de 12°. Em uma modalidade, o sistema de expansão de célula utiliza um ângulo de agitação dentre 2o e 3o, entre 3o e 4o, entre 4o e 5o, entre 5o e 6o, entre 6o e 7o, entre 7o e 8o, entre 8o e 9o, entre 9o e 10°, entre 10° e 11°, e entre 11° e 12°.
[001081] Em uma modalidade, um método de expandir TILs usando agonistas de TNFRSF compreende adicionalmente um etapa em que TILs são selecionados quanto à reatividade de tumor superior. Qualquer método de seleção conhecido na técnica pode ser usado. Por exemplo, os métodos descritos na Publicação do Pedido de Patente U.S. No. 2016/0010058 Al, as divulgações das quais são aqui incorporadas por referência, podem ser usados para a seleção de TILs quanto à reatividade de tumor superior.
[001082] Em uma modalidade, o meio de cultura de célula compreende adicionalmente o anticorpo OKT-3. Em uma modalidade preferida, o meio de cultura de célula compreende cerca de 30 ng/mL do anticorpo OKT-3. Em uma modalidade, o meio de cultura de célula compreende cerca de 0,1 ng/mL, cerca de 0,5 ng/mL, cerca de 1 ng/mL, cerca de 2,5 ng/mL, cerca de 5 ng/mL, cerca de 7,5 ng/mL, cerca de 10 ng/mL, cerca de 15 ng/mL, cerca de 20 ng/mL, cerca de 25 ng/mL, cerca de 30 ng/mL, cerca de 35 ng/mL, cerca de 40 ng/mL, cerca de 50 ng/mL, cerca de 60 ng/mL, cerca de 70 ng/mL, cerca
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371 /497 de 80 ng/mL, cerca de 90 ng/mL, cerca de 100 ng/mL, cerca de 200 ng/mL, cerca de 500 ng/mL, e cerca de 1 pg/mL do anticorpo OKT-3. Em uma modalidade, o meio de cultura de célula compreende entre 0,1 ng/mL e 1 ng/mL, entre 1 ng/mL e 5 ng/mL, entre 5 ng/mL e 10 ng/mL, entre 10 ng/mL e 20 ng/mL, entre 20 ng/mL e 30 ng/mL, entre 30 ng/mL e 40 ng/mL, entre 40 ng/mL e 50 ng/mL, ou entre 50 ng/mL e 100 ng/mL do anticorpo OKT-3. Em uma modalidade, o meio de cultura de célula compreende entre 10 ng/mL e 60 ng/mL do anticorpo OKT-3.
[001083] Em uma modalidade, o meio de cultura de célula compreende adicionalmente IL-2. Em uma modalidade preferida, o meio de cultura de célula compreende cerca de 3000 lU/mL de IL-2. Em uma modalidade, o meio de cultura de célula compreende cerca de 500 lU/mL, cerca de 700 lU/mL, cerca de 800 lU/mL, cerca de 1000 lU/mL, cerca de 1100 lU/mL, cerca de 1200 lU/mL, cerca de 1500 lU/mL, cerca de 2000 lU/mL, cerca de 2500 lU/mL, cerca de 3000 lU/mL, cerca de 3500 lU/mL, cerca de 4000 lU/mL, cerca de 4500 lU/mL, cerca de 5000 lU/mL, cerca de 5500 lU/mL, cerca de 6000 lU/mL, cerca de 6500 lU/mL, cerca de 7000 lU/mL, cerca de 7500 lU/mL, ou cerca de 8000 lU/mL de IL-2. Em uma modalidade, o meio de cultura de célula compreende entre 500 e 1000 lU/mL, 800 e 1200 lU/mL, 1000 e 2000 lU/mL, entre 2000 e 3000 lU/mL, entre 3000 e 4000 lU/mL, entre 4000 e 5000 lU/mL, entre 5000 e 6000 lU/mL, entre 6000 e 7000 lU/mL, entre 7000 e 8000 lU/mL, ou entre 8000 lU/mL de IL-2. Em uma modalidade, o meio de cultura de célula compreende entre 10 e 6000 lU/mL de IL-2. Em uma modalidade, o meio de cultura de célula compreende entre 500 e 2000 lU/mL de IL-2. Em uma modalidade, o meio de cultura de célula compreende entre 800 e 1100 lU/mL de IL-2.
[001084] Em uma modalidade, o meio de cultura de célula compreende adicionalmente IL-15, como descrito, por exemplo, nas Publicações de Pedido de Patente Internacional Nos. WO 2015/189356 Al e WO 2015/189356 Al,
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372 / 497 as divulgações de cada uma das quais são aqui incorporadas por referência. Em uma modalidade, o meio de cultura de célula compreende cerca de 0,1 ng/mL, cerca de 0,5 ng/mL, cerca de 1 ng/mL, cerca de 2,5 ng/mL, cerca de 5 ng/mL, cerca de 7,5 ng/mL, cerca de 10 ng/mL, cerca de 15 ng/mL, cerca de 20 ng/mL, cerca de 25 ng/mL, cerca de 30 ng/mL, cerca de 35 ng/mL, cerca de 40 ng/mL, cerca de 50 ng/mL, cerca de 60 ng/mL, cerca de 70 ng/mL, cerca de 80 ng/mL, cerca de 90 ng/mL, cerca de 100 ng/mL, cerca de 200 ng/mL, cerca de 500 ng/mL, ou cerca de 1 pg/mL de IL-15. Em uma modalidade, o meio de cultura de célula compreende entre 0,1 ng/mL e 100 ng/mL, entre 2 ng/mL e 50 ng/mL, ou entre 5 ng/mL e 25 ng/mL de IL-15. Em uma modalidade, o meio de cultura de célula compreende entre 10 ng/mL e 20 ng/mL, entre 20 ng/mL e 30 ng/mL, entre 30 ng/mL e 40 ng/mL, entre 40 ng/mL e 50 ng/mL, entre 50 ng/mL e 60 ng/mL, entre 60 ng/mL e 70 ng/mL, entre 70 ng/mL e 80 ng/mL, entre 80 ng/mL e 90, ir entre 90 ng/mL e 100 ng/mL de IL-15.
[001085] Em uma modalidade, o meio de cultura de célula compreende adicionalmente IL-21, como descrito, por exemplo, nas Publicações de Pedido de Patente Internacional Nos. WO 2015/189356 Al e WO 2015/189356 Al, as divulgações de cada uma das quais são aqui incorporadas por referência. Em uma modalidade, o meio de cultura de célula compreende cerca de 0,1 ng/mL, cerca de 0,5 ng/mL, cerca de 1 ng/mL, cerca de 2,5 ng/mL, cerca de 5 ng/mL, cerca de 7,5 ng/mL, cerca de 10 ng/mL, cerca de 15 ng/mL, cerca de 20 ng/mL, cerca de 25 ng/mL, cerca de 30 ng/mL, cerca de 35 ng/mL, cerca de 40 ng/mL, cerca de 50 ng/mL, cerca de 60 ng/mL, cerca de 70 ng/mL, cerca de 80 ng/mL, cerca de 90 ng/mL, cerca de 100 ng/mL, cerca de 200 ng/mL, cerca de 500 ng/mL, ou cerca de 1 pg/mL de IL-21. Em uma modalidade, o meio de cultura de célula compreende entre 0,1 ng/mL e 100 ng/mL, entre 2 ng/mL e 50 ng/mL, ou entre 5 ng/mL e 25 ng/mL de IL-21. Em uma modalidade, o meio de cultura de célula compreende entre 10 ng/mL
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373 / 497 e 20 ng/mL, entre 20 ng/mL e 30 ng/mL, entre 30 ng/mL e 40 ng/mL, entre 40 ng/mL e 50 ng/mL, entre 50 ng/mL e 60 ng/mL, entre 60 ng/mL e 70 ng/mL, entre 70 ng/mL e 80 ng/mL, entre 80 ng/mL e 90, ir entre 90 ng/mL e 100 ng/mL de IL-21.
[001086] Em uma modalidade, o meio de cultura de célula compreende adicionalmente IL-4 e/ou IL-7.
[001087] Em uma modalidade, os agonistas de TNFRSF da presente invenção podem ser usados para expandir células T. Qualquer uma das modalidades precedentes da presente invenção descritas para a expansão de TILs também pode ser aplicada à expansão de células T. Em uma modalidade, os agonistas de TNFRSF da presente invenção podem ser usados para expandir células T CD8+. Em uma modalidade, os agonistas de TNFRSF da presente invenção podem ser usados para expandir células T CD4+. Em uma modalidade, os agonistas de TNFRSF da presente invenção podem ser usados para expandir células T transduzidas com um receptor de antígeno quimérico (CAR-T). Em uma modalidade, os agonistas de TNFRSF da presente invenção podem ser usados para expandir células T compreendendo um receptor de célula T (TCR) modificado. As células T CAR podem ser alvejadas contra qualquer antígeno adequado, incluindo CD 19, como descrito na técnica, por exemplo, nas Patentes U.S. Nos. 7.070.995, 7.446.190, 8.399.645, 8.916.381, e 9.328.156; as divulgações das quais são aqui incorporadas por referência. As células TCR modificadas podem ser alvejadas contra qualquer antígeno adequado, incluindo NY-ESO-1, TRP-1, TRP-2, antígeno canceroso da tirosinase, MAGE-A3, SSX-2, e VEGFR2, ou porções antigênicas dos mesmos, como descrito na técnica, por exemplo, nas Patentes U.S. Nos. 8.367.804 e 7.569.664, as divulgações das quais são aqui incorporadas por referência.
[001088] Em uma outra modalidade, um processo de fabricação/expansão de TIL exemplar conhecido como processo 2A é
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374 / 497 esquematicamente ilustrado na FIG. 13. Em certos aspectos, os presentes métodos produzem TILs que são capazes de ciclos de replicação aumentados na administração a um sujeito/paciente e como tal pode prover benefícios terapêuticos adicionais em relação aos TILs mais antigos (isto é, TILs que passaram ainda por mais rodadas de replicação antes da administração a um sujeito/paciente). Os traços de TILs mais jovens foram descritos na literatura, por exemplo Donia, et al., Scandinavian Journal of Immunology, 75: 157-167 (2012); Dudley et al., Clin Cancer Res, 16: 6122-6131 (2010); Huang et al., J Immunother, 28(3): 258-267 (2005); Besser et al., Clin Cancer Res, 19(17): OF1-OF9 (2013); Besser et al., J Immunother 32: 415-423 (2009); Robbins, et al., J Immunol 2004; 173: 7125-7130; Shen et al., J Immunother, 30: 123129 (2007); Zhou, et al., J Immunother, 28: 53-62 (2005); e Tran, et al., J Immunother, 31: 742-751 (2008), todas as quais são aqui incorporadas por referência em suas totalidades.
[001089] Como aqui debatido, a presente invenção pode incluir uma etapa que diz respeito à reestimulação de TILs criopreservados para aumentar a sua atividade metabólica e assim a saúde relativa antes do transplante em um paciente, e métodos de testar a dita saúde metabólica. Como geralmente aqui resumido, os TILs são geralmente recolhidos de uma amostra do paciente e manipulados para expandir o seu número antes do transplante em um paciente. Em algumas modalidades, os TILs podem ser opcionalmente geneticamente manipulados como debatido abaixo.
[001090] Em algumas modalidades, os TILs podem ser criopreservados. Uma vez descongelados, eles também podem ser reestimulados para aumentar o seu metabolismo antes da infusão em um paciente.
[001091] Em algumas modalidades, a primeira expansão (incluindo processos aludidos como o pré-REP) é encurtada em comparação com os métodos de expansão convencionais para 7 a 14 dias e a segunda expansão (incluindo processos aludidos como o REP) é encurtada para 7 a 14 dias,
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375/497 como debatido em detalhes abaixo assim como nos exemplos e figuras. [001092] A FIG. 14 ilustra um processo 2A exemplar. Como ilustrado na FIG. 14 e ainda explicado em detalhes abaixo, em algumas modalidades, a primeira expansão (Etapa B) é encurtada para 11 dias e a segunda expansão (Etapa D) é encurtada para 11 dias. Em algumas modalidades, a combinação da primeira e segunda expansões (Etapa B e Etapa D) é encurtada para 22 dias, como debatido em detalhes abaixo e nos exemplos e figuras. Como será avaliado, o processo ilustrado na FIG. 14 e descrito abaixo é exemplar e os métodos aqui descritos abrangem alterações e adições às etapas descritas assim como quaisquer combinações.
[001093] No geral, TILs são inicialmente obtidos de uma amostra de tumor de paciente (“TILs primários”) e depois expandidos em uma população maior para manipulação adicional como aqui descrita, opcionalmente criopreservados, reestimulados como resumido aqui e opcionalmente avaliados quanto ao fenótipo e parâmetros metabólicos como uma indicação de saúde do TIL.
[001094] Uma amostra de tumor de paciente pode ser obtida usando métodos conhecidos na técnica, geralmente por intermédio de excisão cirúrgica, biópsia de agulha ou outro meio para a obtenção de uma amostra que contenha uma mistura de tumor e células de TIL. No geral, a amostra de tumor pode ser de qualquer tumor sólido, incluindo tumores primários, tumores invasivos ou tumores metastáticos. A amostra de tumor também pode ser um tumor líquido, tal como um tumor obtido de uma malignidade hematológica. O tumor sólido pode ser de qualquer tipo de câncer, incluindo, mas não limitados a, mamário, pancreático, prostático, colorretal, pulmonar, cerebral, renal, estomacal, e dérmico (incluindo mas não limitados a carcinoma de célula escamosa, carcinoma de célula basal, e melanoma). Em algumas modalidades, TILs úteis são obtidos de tumores de melanoma malignos, visto que estes foram relatados ter níveis particularmente altos de
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TILs. Em algumas modalidades, o tumor é maior do que cerca de 1,5 cm porém menor do que cerca de 4 cm. Em algumas modalidades, o tumor é menor do que 4 cm.
[001095] Um vez obtida, a amostra de tumor é geralmente fragmentada usando dissecação pronunciada em pedaços pequenos dentre 1 a cerca de 8 mm3, com cerca de 2 a 3 mm3 sendo particularmente úteis. Os TILs são cultivados destes fragmentos usando digestões enzimáticas de tumor. Tais digestões de tumor podem ser produzidas pela incubação em meios enzimáticos (por exemplo, tampão 1640 do Roswell Park Memorial Institute (RPMI), 2 mM de glutamato, 10 mg/mL de gentamicina, 30 unidades/mL de DNase e 1,0 mg/mL de colagenase) seguidos pela dissociação mecânica (por exemplo, usando um dissociador de tecido). As digestões de tumor podem ser produzidas colocando-se o tumor em meio enzimático e dissociando mecanicamente o tumor durante aproximadamente 1 minuto, seguido pela incubação durante 30 minutos a 37°C em 5% de CO2, seguido pelos ciclos repetidos de dissociação mecânica e incubação sob as condições precedentes até que apenas pedaços de tecido pequenos estejam presentes. No final deste processo, se a suspensão celular contiver um grande número de células sanguíneas vermelhas ou células mortas, uma separação de gradiente de densidade usando polissacarídeo hidrofílico ramificado FICOLL pode ser realizada para remover estas células. Métodos alternativos conhecidos na técnica podem ser usados, tais como aqueles descritos na Publicação do Pedido de Patente U.S. No. 2012/0244133 Al, a divulgação da qual é aqui incorporada por referência. Qualquer um dos métodos precedentes pode ser usado em qualquer uma das modalidades aqui descritas para os métodos e processos de expandir TILs ou métodos de tratar um câncer.
[001096] No geral, a suspensão de célula colhida é chamada de uma “população de célula primária” ou uma população de célula “recém colhida”.
[001097] Em uma modalidade, TILs podem ser inicialmente cultivados
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377 / 497 a partir de digestões enzimáticas de tumor e fragmentos de tumor obtidos de pacientes.
[001098] Em algumas modalidades, os TILs, são obtidos de fragmentos de tumor. Em algumas modalidades, o fragmento de tumor é obtido de dissecação pronunciada. Em algumas modalidades, o fragmento de tumor está entre cerca de 1 mm3 e 10 mm3. Em algumas modalidades, o fragmento de tumor está entre cerca de 1 mm3 e 8 mm3. Em algumas modalidades, o fragmento de tumor é de cerca de 1 mm3. Em algumas modalidades, o fragmento de tumor é de cerca de 2 mm3. Em algumas modalidades,o fragmento de tumor é de cerca de 3 mm3. Em algumas modalidades,o fragmento de tumor é de cerca de 4 mm3. Em algumas modalidades,o fragmento de tumor é de cerca de 5 mm3. Em algumas modalidades,o fragmento de tumor é de cerca de 6 mm3. Em algumas modalidades,o fragmento de tumor é de cerca de 7 mm3. Em algumas modalidades,o fragmento de tumor é de cerca de 8 mm3. Em algumas modalidades,o fragmento de tumor é de cerca de 9 mm3. Em algumas modalidades,o fragmento de tumor é de cerca de 10 mm3. Em algumas modalidades,o fragmento de tumor é de cerca de 8 a 27 mm3. Em algumas modalidades, o fragmento de tumor é de cerca de 10 a 25 mm3. Em algumas modalidades, o fragmento de tumor é de cerca de 15 a 25 mm3. Em algumas modalidades, o fragmento de tumor é de cerca de 8 a 20 mm3. Em algumas modalidades, o fragmento de tumor é de cerca de 15 a 20 mm3. Em algumas modalidades, o fragmento de tumor é de cerca de 8 a 15 mm3. Em algumas modalidades, o fragmento de tumor é de cerca de 8 a 10 mm3.
[001099] Em algumas modalidades, o número de fragmentos de tumor é de cerca de 40 a cerca de 50 fragmentos de tumor. Em algumas modalidades, o número de fragmentos de tumor é de cerca de 40 fragmentos de tumor. Em algumas modalidades, o número de fragmentos de tumor é de cerca de 50 fragmentos de tumor. Em algumas modalidades, o tamanho do fragmento de
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378 / 497 tumor é de cerca de 8 a 27 mm3 e existem menos do que cerca de 50 fragmentos de tumor.
[001100] Em algumas modalidades, os TILs, são obtidos das digestões de tumor. Em algumas modalidades, as digestões de tumor foram geradas pela incubação no meio enzimático, por exemplo mas não limitados a RPMI 1640, 2 mM de GlutaMAX, 10 mg/mL de gentamicina, 30 U/mL de DNase, e 1,0 mg/mL de colagenase, seguida pela dissociação mecânica (GentleMACS, Miltenyi Biotec, Aubum, CA). Depois de colocar o tumor no meio enzimático, o tumor pode ser mecanicamente dissociado durante aproximadamente 1 minuto. A solução pode ser depois incubada durante 30 minutos a 37°C em 5% de CO2 e depois mecanicamente rompido mais uma vez durante aproximadamente 1 minuto. Depois de ser incubado mais uma vez durante 30 minutos a 37°C em 5% de CO2, o tumor pode ser mecanicamente rompido uma terceira vez durante aproximadamente 1 minuto. Em algumas modalidades, depois do terceiro rompimento mecânico se pedaços grandes de tecido foram presentes, 1 ou 2 dissociações mecânicas adicionais foram aplicadas à amostra, com ou sem 30 minutos adicionais de incubação a 37°C em 5% de CO2. Em algumas modalidades, no término da incubação final se a suspensão celular conteve um grande número de células sanguíneas vermelhas ou células mortas, uma separação de gradiente de densidade usando Ficoll pode ser realizada para remover estas células.
[001101] Depois da dissecação ou digestão de fragmentos de tumor na Etapa A, as células resultantes são cultivadas no soro contendo IL-2 sob condições que favoreçam o crescimento de TILs em relação ao tumor e outras células. Em algumas modalidades, as digestões de tumor são incubadas em poços de 2 mL em meios compreendendo soro AB humano inativado com 6000 lU/mL de IL-2. Esta população de célula primária é cultivada durante um período de dias, geralmente de 3 a 14 dias, resultando em uma população de TIL volumosa, geralmente de cerca de 1 x 108 células TIL volumosas. Em
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379 / 497 algumas modalidades, esta população de célula primária é cultivada durante um período de 7 a 14 dias, resultando em uma população de TIL volumosa, geralmente de cerca de 1 x 108 células TIL volumosas. Em algumas modalidades, esta população de célula primária é cultivada durante um período de 10 a 14 dias, resultando em uma população de TIL volumosa, geralmente de cerca de 1 x 108 células TIL volumosas. Em algumas modalidades, esta população de célula primária é cultivada durante um período de cerca de 11 dias, resultando em uma população de TIL volumosa, geralmente de cerca de 1 x 108 células TIL volumosas. Em algumas modalidades, esta população de célula primária é cultivada durante um período de cerca de 11 dias, resultando em uma população de TIL volumosa, geralmente de menos do que ou igual à cerca de 200 x 106 células TIL volumosas.
[001102] Em uma modalidade preferida, a expansão de TILs pode ser realizada usando uma etapa inicial de expansão de TIL volumosa (Etapa B como retratada na FIG. 14, que pode incluir processos aludidos como préREP) como descrita abaixo e aqui, seguida por uma segunda expansão (Etapa D, incluindo processos aludidos como etapas de protocolo de expansão rápida (REP)) como descritos abaixo sob a Etapa D e aqui, seguida pela criopreservação opcional, e seguida por uma segunda Etapa D (incluindo processos aludidos como etapas de reestimulação de REP) como descrito abaixo e aqui. Os TILs obtidos a partir deste processo podem ser opcionalmente distinguidos quanto às características fenotípicas e parâmetros metabólicos como aqui descritos.
[001103] Em modalidades onde as culturas de TIL são iniciadas em placas de 24 poços, por exemplo, usando grupo de cultura de célula de 24 poços de fundo chato Costar (Corning Incorporated, Coming, NY, cada poço pode ser semeado com 1 x 106 células de tumor digeridas ou um fragmento de tumor em 2 mL de meio completo (CM) com IL-2 (6000 lU/mL; Chiron
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Corp., Emeryville, CA). Em algumas modalidades, o fragmento de tumor está entre cerca de 1 mm3 e 10 mm3.
[001104] Em algumas modalidades, CM para a Etapa B consiste de RPMI 1640 com GlutaMAX, suplementado com 10% de soro AB humano, 25 mM de HEPES, e 10 mg/mL de gentamicina. Em modalidades onde as culturas são iniciadas em frascos permeáveis a gás com uma capacidade de 40 mL e um fundo de silício permeável a gás de 10 cm2 (por exemplo, G-Rex 10; Wilson Wolf Manufacturing, New Brighton, MN) (Fig. 1), cada frasco foi carregado com 10 a 40 x 106 células de tumor viáveis digeridas ou 5 a 30 fragmentos de tumor em 10 a 40 mL de CM com IL-2. Tanto o G-Rexl0 quanto as placas de 24 poços foram incubados em um incubador umidificado a 37°C em 5% de CO2 e 5 dias depois do início da cultura, metade dos meios foram removidos e recolocados com CM fresco e IL-2 e depois do dia 5, metade dos meios foram trocados a cada 2 a 3 dias.
[001105] Em uma modalidade, o meio de cultura de célula compreende adicionalmente IL-2. Em uma modalidade preferida, o meio de cultura de célula compreende cerca de 3000 lU/mL de IL-2. Em uma modalidade, o meio de cultura de célula compreende cerca de 1000 lU/mL, cerca de 1500 lU/mL, cerca de 2000 lU/mL, cerca de 2500 lU/mL, cerca de 3000 lU/mL, cerca de 3500 lU/mL, cerca de 4000 lU/mL, cerca de 4500 lU/mL, cerca de 5000 lU/mL, cerca de 5500 lU/mL, cerca de 6000 lU/mL, cerca de 6500 lU/mL, cerca de 7000 lU/mL, cerca de 7500 lU/mL, ou cerca de 8000 lU/mL de IL-2. Em uma modalidade, o meio de cultura de célula compreende entre 1000 e 2000 lU/mL, entre 2000 e 3000 lU/mL, entre 3000 e 4000 lU/mL, entre 4000 e 5000 lU/mL, entre 5000 e 6000 lU/mL, entre 6000 e 7000 lU/mL, entre 7000 e 8000 lU/mL, ou entre 8000 lU/mL de IL-2.
[001106] Em algumas modalidades, o processo da primeira expansão (incluindo processos aludidos como o pré-REP; Etapa B) é encurtado para 3 a 14 dias, como debatido nos exemplos e figuras. Em algumas modalidades, a
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381 /497 primeira expansão da Etapa B é encurtada para 7 a 14 dias, como debatido nos Exemplos e mostrado nas Figuras 4 e 5. Em algumas modalidades, a primeira expansão da Etapa B é encurtada para 10 a 14 dias, como debatido nos Exemplos e mostrado nas Figuras 4 e 5. Em algumas modalidades, a primeira expansão da Etapa B é encurtada para 11 dias, como debatido nos Exemplos e mostrado nas Figuras 4 e 5.
[001107] Em algumas modalidades, IL-2, IL-7, IL-15, e IL-21 assim como combinações das mesmas podem ser incluídas durante os processos da Etapa B como aqui descritos.
[001108] Em algumas modalidades, a Etapa B é realizada em um biorreator de sistema fechado. Em algumas modalidades, um sistema fechado é utilizado para a expansão de TIL, como aqui descrito. Em algumas modalidades, um único biorreator é utilizado. Em algumas modalidades, o único biorreator utilizado é por exemplo um GREX-10 ou um GREX-100.
[001109] Em algumas modalidades, a população de TIL volumosa da Etapa B pode ser criopreservada imediatamente, usando métodos conhecidos na técnica e aqui descritos. Altemativamente, a população de TIL volumosa pode ser submetida a uma segunda expansão (REP) e depois criopreservada como debatido abaixo.
[001110] Em algumas modalidades, os TILs da Etapa B não são armazenados e os TILs da Etapa B procedem diretamente da Etapa D. Em algumas modalidades, a transição ocorre em um sistema fechado, como ainda aqui descrito.
[001111] Em algumas modalidades, a população de célula TIL é expandido em número depois da colheita e processamento volumoso inicial (isto é, depois da Etapa A e Etapa B). Isto é aqui aludido como a segunda expansão, que pode incluir processos de expansão geralmente aludidos na técnica como um processo de expansão rápida (REP). A segunda expansão é geralmente realizada usando meios de cultura compreendendo vários
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382/497 componentes, incluindo células alimentadoras, uma fonte de citocina, e um anticorpo anti-CD3, em um recipiente permeável a gás. Em algumas modalidades, a segunda expansão pode incluir ampliar de modo a aumentar o número de TILs obtidos na segunda expansão.
[001112] Em uma modalidade, REP e/ou a segunda expansão pode ser realizada em um recipiente permeável a gás usando os métodos da presente divulgação. Por exemplo, TILs podem ser rapidamente expandidos usando estimulação de receptor de célula T não específico na presença de interleucina-2 (IL-2) ou interleucina-15 (IL-15). O estímulo de receptor de célula T não específico pode incluir, por exemplo, cerca de 30 ng/ml de OKT3, um anticorpo monoclonal anti-CD3 de camundongo (comercialmente disponível da Ortho-McNeil, Raritan, NJ ou Miltenyi Biotech, Auburn, CA). TILs podem ser rapidamente expandidos ainda mais na estimulação dos TILs in vitro com um ou mais antígenos, incluindo porções antigênicas dos mesmos, tal(is) como epítopo(s), do câncer, que pode(m) ser opcionalmente expressos a partir de um vetor, tal como um peptídeo de ligação a antígeno leucocitário humano A2 (HLA-A2), por exemplo, 0,3 μΜ de MART-1:26-35 (27 L) ou gpl 00:209-217 (210M), opcionalmente na presença de um fator de crescimento de célula T, tal como 300 lU/mL de IL-2 ou IL-15. Outros antígenos adequados podem incluir, por exemplo, NY-ESO-1, TRP-1, TRP-2, antígeno canceroso da tirosinase , MAGE-A3, SSX-2, e VEGFR2, ou porções antigênicas dos mesmos. TIL também pode ser rapidamente expandido pela reestimulação com o(s) mesmo(s) antígeno(s) do câncer pulsado sobre células que apresentam antígeno expressando HLA-A2. Altemativamente, os TILs podem ser reestimulados ainda com, por exemplo, linfócitos irradiados, autólogos ou com linfócitos alogênicos HLA-A2+ irradiados e IL-2.
[001113] Em uma modalidade, o meio de cultura de célula compreende adicionalmente IL-2. Em uma modalidade preferida, o meio de cultura de célula compreende cerca de 3000 lU/mL de IL-2. Em uma modalidade, o
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383/497 meio de cultura de célula compreende cerca de 1000 lU/mL, cerca de 1500 lU/mL, cerca de 2000 lU/mL, cerca de 2500 lU/mL, cerca de 3000 lU/mL, cerca de 3500 lU/mL, cerca de 4000 lU/mL, cerca de 4500 lU/mL, cerca de 5000 lU/mL, cerca de 5500 lU/mL, cerca de 6000 lU/mL, cerca de 6500 lU/mL, cerca de 7000 lU/mL, cerca de 7500 lU/mL, ou cerca de 8000 lU/mL de IL-2. Em uma modalidade, o meio de cultura de célula compreende entre 1000 e 2000 lU/mL, entre 2000 e 3000 lU/mL, entre 3000 e 4000 lU/mL, entre 4000 e 5000 lU/mL, entre 5000 e 6000 lU/mL, entre 6000 e 7000 lU/mL, entre 7000 e 8000 lU/mL, ou entre 8000 lU/mL de IL-2.
[001114] Em uma modalidade, o meio de cultura de célula compreende o anticorpo OKT3. Em uma modalidade preferida, o meio de cultura de célula compreende cerca de 30 ng/mL de anticorpo OKT3. Em uma modalidade, o meio de cultura de célula compreende cerca de 0,1 ng/mL, cerca de 0,5 ng/mL, cerca de 1 ng/mL, cerca de 2,5 ng/mL, cerca de 5 ng/mL, cerca de 7,5 ng/mL, cerca de 10 ng/mL, cerca de 15 ng/mL, cerca de 20 ng/mL, cerca de 25 ng/mL, cerca de 30 ng/mL, cerca de 35 ng/mL, cerca de 40 ng/mL, cerca de 50 ng/mL, cerca de 60 ng/mL, cerca de 70 ng/mL, cerca de 80 ng/mL, cerca de 90 ng/mL, cerca de 100 ng/mL, cerca de 200 ng/mL, cerca de 500 ng/mL, e cerca de 1 pg/mL of OKT3 anticorpo. Em uma modalidade, o meio de cultura de célula compreende entre 0,1 ng/mL e 1 ng/mL, entre 1 ng/mL e 5 ng/mL, entre 5 ng/mL e 10 ng/mL, entre 10 ng/mL e 20 ng/mL, entre 20 ng/mL e 30 ng/mL, entre 30 ng/mL e 40 ng/mL, entre 40 ng/mL e 50 ng/mL, e entre 50 ng/mL e 100 ng/mL de anticorpo OKT3.
[001115] Em algumas modalidades, IL-2, IL-7, IL-15, e IL-21 assim como combinações das mesmas podem ser incluídas durante a segunda expansão nos processos da Etapa D como aqui descritos.
[001116] Em algumas modalidades, a segunda expansão pode ser conduzida em um meio de cultura de célula suplementado compreendendo IL2, OKT-3, e células alimentadoras que apresentam antígeno.
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384 / 497 [001117] Em algumas modalidades as células alimentadoras que apresentam antígeno (APCs) são PBMCs. Em uma modalidade, a razão de TILs para PBMCs e/ou células que apresentam antígeno na expansão rápida e/ou na segunda expansão é de cerca de 1 para 25, cerca de 1 para 50, cerca de 1 para 100, cerca de 1 para 125, cerca de 1 para 150, cerca de 1 para 175, cerca de 1 para 200, cerca de 1 para 225, cerca de 1 para 250, cerca de 1 para 275, cerca de 1 para 300, cerca de 1 para 325, cerca de 1 para 350, cerca de 1 para 375, cerca de 1 para 400, ou cerca de 1 para 500. Em uma modalidade, a razão de TILs para PBMCs na expansão rápida e/ou na segunda expansão está entre 1 para 50 e 1 para 300. Em uma modalidade, a razão de TILs para PBMCs na expansão rápida e/ou na segunda expansão está entre 1 para 100 e 1 para 200.
[001118] Em uma modalidade, REP e/ou a segunda expansão são realizados em frascos com os TILs volumosos sendo misturados com um excesso de 100 ou 200 vezes de células alimentadoras inativadas, 30 mg/mL de anticorpo OKT3 anti-CD3 e 3000 lU/mL de IL-2 em 150 ml de meios. A substituição de meios é feita (geralmente substituição de 2/3 dos meios por intermédio de respiração com meios frescos) até que as células sejam transferidas para uma câmara de crescimento alternativa. As câmaras de crescimento alternativas incluem frascos GRex e recipientes permeáveis a gás como mais completamente debatido abaixo.
[001119] Em algumas modalidades, a segunda expansão (também aludida como o processo REP) é encurtada para 7 a 14 dias, como debatido nos Exemplos e figuras. Em algumas modalidades, a segunda expansão é encurtada para 11 dias.
[001120] Em uma modalidade, REP e/ou a segunda expansão podem ser realizados usando frascos T-175 e bolsas permeáveis a gás como previamente descrito (Tran, et al., J. Immunother. 2008, 31, 742-51; Dudley, et al., J. Immunother. 2003, 26, 332-42) ou vidraria de cultura permeáveis a gás
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385/497 (frascos G-Rex). Para a expansão rápida de TIL e/ou segunda expansão em frascos T-175, 1 x 106 TILs colocados em suspensão em 150 mL de meios podem ser adicionados a cada frasco T-175. Os TILs podem ser cultivados em uma mistura 1 para 1 de meio CM e AIM-V, suplementado com 3000 IU por mL de IL-2 e 30 ng por ml de anti-CD3. Os frascos T-175 podem ser incubados a 37°C em 5% de CO2. Metade dos meios pode ser trocada no dia 5 usando meio 50/50 com 3000 IU por mL de IL-2. No dia 7 as células de dois frascos T-175 podem ser combinadas em uma bolsa de 3 L e 300 mL de AIM V com 5% de soro AB humano e 3000 IU por mL de IL-2 foram adicionados aos 300 ml de suspensão de TIL. O número de células em cada bolsa foi contada a cada dia ou dois e meios frescos foram adicionados para manter a contagem de célula entre 0,5 e 2,0 x 106 células/mL.
[001121] Em uma modalidade, REP e/ou a segunda expansão pode ser realizada em frascos permeáveis a gás de capacidade de 500 ml com fundos de silício permeáveis a gás de 100 cm (G-Rex 100, comercialmente disponível da Wilson Wolf Manufacturing Corporation, New Brighton, MN, USA), 5 x 106 ou 10 x 106 TILs podem ser cultivados com PBMCs em 400 mL de meio 50/50, suplementado com 5% de soro AB humano, 3000 IU por mL de IL-2 e 30 ng por ml de anti-CD3 (OKT3). Os frascos G-Rex 100 podem ser incubados a 37°C em 5% de CO2. No dia 5, 250 mL de sobrenadante pode ser removido e colocado em garrafas de centrífuga e centrifugados a 1500 rpm (491 x g) durante 10 minutos. As pelotas de TIL podem ser recolocadas em suspensão com 150 mL de meio fresco com 5% de soro AB humano, 3000 IU por mL de IL-2, e adicionados de volta para os frascos G-Rex 100 originais. Quando TILs são expandidos em série em frascos G-Rex 100, no dia 7 os TILs em cada G-Rex 100 podem ser colocados em suspensão nos 300 mL de meios presentes em cada frasco e a suspensão celular pode ser dividida em 3 alíquotas de 100 mL que podem ser usadas para semear 3 frascos G-Rex 100. Depois 150 mL de AIM-V com 5%
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386/497 de soro AB humano e 3000 IU por mL de IL-2 podem ser adicionados a cada frasco. Os frascos G-Rex 100 podem ser incubados a 37°C em 5% de CO2 e depois de 4 dias 150 mL de AIM-V com 3000 IU por mL de IL-2 podem ser adicionados a cada frasco G-Rex 100. As células podem ser colhidas no dia 14 de cultura.
[001122] Em uma modalidade, REP e/ou a segunda expansão são realizados em frascos com os TILs volumosos sendo misturados com um excesso de 100 ou 200 vezes de células alimentadoras inativadas, 30 mg/mL de anticorpo de OKT3 anti-CD3 e 3000 lU/mL de IL-2 em 150 ml de meios. A substituição de meios é feita (geralmente substituição de 2/3 dos meios por intermédio de respiração com meios frescos) até que as células fossem transferidas para uma câmara de crescimento alternativa. As câmaras de crescimento alternativas incluem frascos GRex e recipientes permeáveis a gás como mais completamente debatido abaixo.
[001123] Em uma modalidade, REP e/ou a segunda expansão são realizadas e compreendem ainda uma etapa em que TILs são selecionados quanto à reatividade de tumor mais alta. Qualquer método de seleção conhecido na técnica pode ser usado. Por exemplo, os métodos descritos na Publicação do Pedido de Patente U.S. No. 2016/0010058 Al, as divulgações das quais são aqui incorporadas por referência, podem ser usados para a seleção de TILs quanto à reatividade de tumor mais alta.
[001124] REP e/ou a segunda expansão de TIL podem ser realizados usando frascos T-175 e bolsas permeáveis a gás como anteriormente descritos (Tran KQ, Zhou J, Durflinger KH, et al., 2008,./ Immunother., 31: 742-751, e Dudley ME, Wunderlich JR, Shelton TE, et al. 2003, JImmunother., 26: 332342) ou frascos G-Rex permeáveis a gás. Em algumas modalidades, REP e/ou a segunda expansão são realizados usando frascos. Em algumas modalidades, REP é realizado usando frascos G-Rex permeáveis a gás. Para TIL REP e/ou a segunda expansão em frascos T-175, cerca de 1 x 106 TIL são colocados em
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387 / 497 suspensão em cerca de 150 mL de meios e isto é adicionado a cada frasco ΤΙ 75. Os TILs são cultivados com PBMC alogênicas irradiadas (50 Gy) como células “alimentadoras” em uma razão de 1 para 100 e as células foram cultivadas em uma mistura 1 para 1 de meio CM e AIM-V (meio 50/50), suplementado com 3000 lU/mL de IL-2 e 30 ng/mL de anti-CD3. Os frascos T-175 são incubados a 37°C em 5% de CO2. Em algumas modalidades, metade dos meios é trocada no dia 5 usando meio 50/50 com 3000 lU/mL de IL-2. Em algumas modalidades, no dia 7, as células de 2 frascos T-175 são combinadas em uma bolsa de 3 L e 300 mL de AIM-V com 5% de soro AB humano e 3000 lU/mL de IL-2 são adicionados aos 300 mL de suspensão de TIL. O número de células em cada bolsa pode ser contado a cada dia ou dois e meios frescos podem ser adicionados para manter a contagem de célula entre cerca de 0,5 e cerca de 2,0 x 106 células/mL.
[001125] Para REP e/ou a segunda expansão de TIL em frascos com capacidade de 500 mL com fundos de silício permeáveis a gás de 100 cm2 (GRexlOO, Wilson Wolf) (Fig. 1), cerca de 5 x 106 ou lOx 106 TILs são cultivados com PBMC alogênica irradiada em uma razão de 1 para 100 em 400 mL de meio 50/50, suplementados com 3000 lU/mL de IL-2 e 30 ng/ mL de anti-CD3. Os frascos G-Rexl00 são incubados a 37°C em 5% de CO2. Em algumas modalidades, no dia 5, 250 mL de sobrenadante são removidos e colocados em garrafas de centrífuga e centrifugadas a 1500 rpm (49 Ig) durante 10 minutos. Os grânulos de TIL podem ser depois recolocados em suspensão com 150 mL de meio fresco 50/50 com 3000 IU/ mL de IL-2 e adicionados de volta para os frascos G-Rexl00 originais. Em modalidades onde TILs são expandidos em série nos frascos G-Rexl00, no dia 7 os TILs em cada G-Rexl00 são colocados em suspensão nos 300 mL de meios presentes em cada frasco e a suspensão celular foi dividida em três alíquotas de 100 mL que são usadas para semear 3 frascos G-Rexl00. Depois 150 mL de AIM-V com 5% de soro AB humano e 3000 lU/mL de IL-2 são
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388/497 adicionados a cada frasco. Os frascos G-RexlOO são incubados a 37°C em 5% de CO2 e depois de 4 dias 150 mL de AIM-V com 3000 lU/mL de IL-2 são adicionados a cada frasco G-Rexl00. As células são colhidas no dia 14 da cultura.
[001126] Em uma modalidade, os procedimentos da segunda expansão aqui descritos (Etapa D, incluindo REP) requerem um excesso de células alimentadoras durante a expansão REP e/ou durante a segunda expansão de TIL. Em muitas modalidades, as células alimentadoras são células mononucleares do sangue periférico (PBMCs) obtidas a partir de unidades de sangue integral padrão de doadores de sangue saudáveis. As PBMCs são obtidas usando métodos padrão tais como a separação de gradiente de FicollPaque.
[001127] No geral, as PBMCs alogênicas são inativadas, por intermédio de irradiação ou tratamento térmico, e usadas nos procedimentos REP, como descrito nos exemplos, em particular no exemplo 14, que provê um protocolo exemplar para avaliar a incompetência de replicação das PBMCs alogênicas irradiadas.
[001128] Em algumas modalidades, as PBMCs são consideradas incompetentes de replicação e aceitas para o uso nos procedimentos de expansão de TIL aqui descritos se o número total de células viáveis no dia 14 for menor do que o número de célula viável inicial colocado em cultura no dia 0 do REP e/ou dia 0 da segunda expansão (isto é, no dia de início da segunda expansão).
[001129] Em algumas modalidades, as PBMCs são consideradas incompetentes de replicação e aceitas para o uso nos procedimentos de expansão de TIL aqui descritos se o número total de células viáveis, cultivadas na presença de OKT3 e IL-2, no dia 7 e dia 14 não aumentaram do número de célula viável inicial colocado em cultura no dia 0 do REP e/ou dia 0 da segunda expansão (isto é, o dia de início da segunda expansão). Em
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389/497 algumas modalidades, as PBMCs são cultivadas na presença de 30 ng/ml de anticorpo de OKT3 e 3000 lU/ml de IL-2.
[001130] Em algumas modalidades, as PBMCs são consideradas incompetentes de replicação e aceitas para o uso nos procedimentos de expansão de TIL aqui descritos se o número total de células viáveis, cultivadas na presença de OKT3 e IL-2, no dia 7 e dia 14 não aumentaram do número de célula viável inicial colocado em cultura no dia 0 do REP e/ou dia 0 da segunda expansão (isto é, no dia de início da segunda expansão). Em algumas modalidades, as PBMCs são cultivadas na presença de 5 a 60 ng/ml de anticorpo de OKT3 e 1000 a 6000 lU/ml de IL-2. Em algumas modalidades, as PBMCs são cultivadas na presença de 10 a 50 ng/ml de anticorpo de OKT3 e 2000 a 5000 lU/ml de IL-2. Em algumas modalidades, as PBMCs são cultivadas na presença de 20 a 40 ng/ml de anticorpo de OKT3 e 2000 a 4000 lU/ml de IL-2. Em algumas modalidades, as PBMCs são cultivadas na presença de 25 a 35 ng/ml de anticorpo de OKT3 e 2500 a 3500 lU/ml de IL-2.
[001131] Em uma modalidade, as células artificiais que apresentam antígeno são usadas no estágio de REP como uma substituição no lugar, ou em combinação com, PBMCs.
[001132] Os métodos de expansão aqui descritos geralmente usam meios de cultura com altas doses de uma citocina, em particular IL-2, como é conhecido na técnica.
[001133] Altemativamente, usar combinações de citocinas para a expansão rápida e ou segunda expansão de TILs é adicionalmente possível, com combinações de duas ou mais de IL-2, IL-15 e IL-21 como é geralmente resumido na Publicação Internacional No. WO 2015/189356 e Publicação Internacional No. WO 2015/189357, que são expressamente incorporadas a este por referência em suas totalidades. Assim, as combinações possíveis incluem IL-2 e IL-15, IL-2 e IL-21, IL-15 e IL-21 e IL-2, IL-15 e IL-21, com
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390/497 o uso particular descoberto por último em muitas modalidades. O uso de combinações de citocinas especificamente favorece a geração de linfócitos, e em particular células T como aqui descrito.
[001134] Em algumas modalidades, os meios de cultura usados nos métodos de expansão aqui descritos (incluindo REP) também incluem um anticorpo anti-CD3. Um anticorpo anti-CD3 em combinação com IL-2 induz a ativação de célula Tea divisão de célula na população de TIL. Este efeito pode ser observado com anticorpos de tamanho natural assim como fragmentos Fab e F(ab’)2, com o primeiro sendo geralmente preferido; ver, por exemplo, Tsoukas et al., J. Immunol. 1985, 135, 1719, incorporada a este por referência em sua totalidade.
[001135] Como será avaliado por aqueles na técnica, existem vários anticorpos anti-CD3 humanos adequados que encontram uso na invenção, incluindo anticorpos policlonais e monoclonais anti-CD3 humano de vários mamíferos, incluindo, mas não limitados a, anticorpos de murino, ser humano, primatas, rato, e caninos. Em modalidades particulares, o anticorpo de OKT3 anti-CD3 é usado (comercialmente disponível da Ortho-McNeil, Raritan, NJ ou Miltenyi Biotech, Auburn, CA).
[001136] Depois da segunda etapa de expansão, as células podem ser colhidas. Em algumas modalidades os TILs são colhidos depois de um, dois, três, quatro ou mais segundas etapas de expansão.
[001137] Os TILs podem ser colhidos em qualquer maneira apropriada e estéril, incluindo por exemplo pela centrifugação. Os métodos para colheita de TIL são bem conhecidos na técnica e qualquer um de tais métodos pode ser utilizado com o presente processo. Em algumas modalidades, TILs são colhidos usando um sistema automatizado. Em algumas modalidades, TILs são colhidos usando um sistema semi-automatizado. Em algumas modalidades, os TILs da segunda expansão são colhidos usando uma máquina semi-automatizada. Em algumas modalidades, o sistema LOVO é utilizado
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391 /497 (comercialmente disponível da Benchmark Electronics, por exemplo). Em algumas modalidades, a etapa de colheita inclui lavar os TILs, formular os TILs, e/ou aliquotar os TILs. Em algumas modalidades, as células são opcionalmente congeladas depois de colher ou como parte da colheita.
[001138] Depois que as Etapas A até E são completas, as células são transferidas a um recipiente para o uso na administração a um paciente.
[001139] Em uma modalidade, TILs expandidos usando APCs da presente divulgação são administrados a um paciente como uma composição farmacêutica. Em uma modalidade, a composição farmacêutica é uma suspensão de TILs em um tampão estéril. TILs expandidos usando PBMCs da presente divulgação podem ser administrados por qualquer por intermédio de adequada como conhecido na técnica. Em algumas modalidades, as células T são administradas como uma única infusão intra-arterial ou intravenosa, que preferivelmente dura aproximadamente 30 a 60 minutos. Outras vias adequadas de administração incluem intraperitoneal, intratecal, e intralinfática.
[001140] Como será avaliado, qualquer uma das etapas A até F descritas acima pode ser repetida qualquer número de vezes e pode além disso ser conduzida em ordens diferentes do que descritas acima.
[001141] Em algumas modalidades, uma ou mais das etapas de expansão podem ser repetidas antes da Etapa F da Formulação Final. Tais etapas de expansão adicionais podem incluir os elementos da primeira e/ou segunda etapas de expansão descritas acima (por exemplo, incluem os componentes descritos no meio de cultura de célula). As etapas de expansão adicionais podem incluir ainda elementos adicionais, incluindo componentes adicionais no meio de cultura de célula que são suplementados no meio de cultura de célula antes e/ou durante as etapas de expansão adicionais.
[001142] Em outras modalidades, qualquer uma das etapas de expansão descritas na FIG. 14 e nos parágrafos acima pode ser precedida ou seguida por
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392 / 497 uma etapa de criopreservação em que as células produzidas durante uma etapa de expansão são preservadas usando métodos conhecidos na técnica para a armazenagem até necessário para as etapas remanescentes do processo de fabricação/expansão.
[001143] Em uma modalidade, a invenção inclui um kit para expandir TILs de acordo com qualquer um dos métodos precedentes.
Composições Farmacêuticas, Dosagens, e Regimes de Dosagem para TILs [001144] Em uma modalidade, TILs expandidos usando processos e métodos da presente divulgação são administrados a um paciente como uma composição farmacêutica. Em uma modalidade, a composição farmacêutica é uma suspensão de TILs em um tampão estéril. Os TILs expandidos usando processos e métodos da presente divulgação podem ser administrados por qualquer por intermédio de adequada como conhecido na técnica. Preferivelmente, os TILs são administrados como uma infusão única intraarterial ou intravenosa, que preferivelmente dura aproximadamente 30 a 60 minutos. Outras vias adequadas de administração incluem a administração intraperitoneal, intratecal, e intralinfática.
[001145] Qualquer dose adequada de TILs pode ser administrada. Preferivelmente, de cerca de 2,3xl010 a cerca de 13,7xl010 TILs são administrados, com uma média em tomo de 7,8xIO10 TILs, particularmente se o câncer é melanoma. Em uma modalidade, cerca de l,2xlO10 a cerca de 4,3xlO10 de TILs são administrados.
[001146] Em algumas modalidades, o número dos TILs provido nas composições farmacêuticas da invenção é de cerca de IxlO6, 2x106, 3x106, 4xl06, 5xl06, 6xl06, 7xl06, 8xl06, 9xl06, IxlO7, 2xl07, 3xl07, 4xl07,
5xl07, 6xl07, 7xl07, 8xl07, 9xl07, IxlO8, 2xl08, 3xl08, 4xl08, 5xl08,
6xl08, 7xl08, 8xl08, 9xl08, IxlO9, 2xl09, 3xl09, 4xl09, 5xl09, 6xl09,
7xl09, 8xl09, 9xl09, IxlO10, 2xlO10, 3xl010, 4xlO10, 5xl010, 6xlO10, 7xlO10,
8xl010, 9xlO10, IxlO11, 2xlOn, 3xl0n, 4xlOn, 5xl0n, 6xlOn, 7xlOn,
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8xlOn, 9xlOn, IxlO12, 2xl012, 3xl012, 4xl012, 5xl012, 6xl012, 7xl012, 8xl012, 9xl012, IxlO13, 2xlO13, 3xlO13, 4xl013, 5xlO13, 6xlO13, 7xlO13, 8xlO13, e 9xlO13. Em uma modalidade, o número dos TILs provido nas composições farmacêuticas da invenção está na faixa de IxlO6 a 5x106, 5xl06 a IxlO7, IxlO7 a 5xl07, 5xl07 a IxlO8, IxlO8 a 5xl08, 5xl08 a IxlO9, IxlO9 a 5xl09, 5xl09 a IxlO10, IxlO10 a 5xlO10, 5xlO10 a IxlO11, 5x10“ a IxlO12, IxlO12 a 5xl012, e 5xl012 a IxlO13.
[001147] Em algumas modalidades, a concentração dos TILs providos nas composições farmacêuticas da invenção é menor do que, por exemplo, 100%, 90%, 80%, 70%, 60%, 50%, 40%, 30%, 20%, 19%, 18%, 17%, 16%, 15%, 14%, 13%, 12%, 11%, 10%, 9%, 8%, 7%, 6%, 5%, 4%, 3%, 2%, 1%, 0,5%, 0,4%, 0,3%, 0,2%, 0,1%, 0,09%, 0,08%, 0,07%, 0,06%, 0,05%, 0,04%, 0,03%, 0,02%, 0,01%, 0,009%, 0,008%, 0,007%, 0,006%, 0,005%, 0,004%, 0,003%, 0,002%, 0,001%, 0,0009%, 0,0008%, 0,0007%, 0,0006%, 0,0005%, 0,0004%, 0,0003%, 0,0002% ou 0,0001% p/p, p/v ou v/v da composição farmacêutica.
[001148] Em algumas modalidades, a concentração dos TILs providos nas composições farmacêuticas da invenção é maior do que 90%, 80%, 70%, 60%, 50%, 40%, 30%, 20%, 19,75%, 19,50%, 19,25% 19%, 18,75%, 18,50%, 18,25% 18%, 17,75%, 17,50%, 17,25% 17%, 16,75%, 16,50%, 16,25% 16%, 15,75%, 15,50%, 15,25% 15%, 14,75%, 14,50%, 14,25% 14%, 13,75%, 13,50%, 13,25% 13%, 12,75%, 12,50%, 12,25% 12%, 11,75%, 11,50%, 11,25% 11%, 10,75%, 10,50%, 10,25% 10%, 9,75%, 9,50%, 9,25% 9%, 8,75%, 8,50%, 8,25% 8%, 7,75%, 7,50%, 7,25% 7%, 6,75%, 6,50%, 6,25% 6%, 5,75%, 5,50%, 5,25% 5%, 4,75%, 4,50%, 4,25%, 4%, 3,75%, 3,50%, 3,25%, 3%, 2,75%, 2,50%, 2,25%, 2%, 1,75%, 1,50%, 125%, 1%, 0,5%, 0,4%, 0,3%, 0,2%, 0,1%, 0,09%, 0,08%, 0,07%, 0,06%, 0,05%, 0,04%, 0,03%, 0,02%, 0,01%, 0,009%, 0,008%, 0,007%, 0,006%, 0,005%, 0,004%, 0,003%, 0,002%, 0,001%, 0,0009%, 0,0008%, 0,0007%, 0,0006%, 0,0005%,
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0,0004%, 0,0003%, 0,0002% ou 0,0001% p/p, p/v, ou v/v da composição farmacêutica.
[001149] Em algumas modalidades, a concentração dos TILs providos nas composições farmacêuticas da invenção está na faixa de cerca de 0,0001% a cerca de 50%, cerca de 0,001% a cerca de 40%, cerca de 0,01% a cerca de 30%, cerca de 0,02% a cerca de 29%, cerca de 0,03% a cerca de 28%, cerca de 0,04% a cerca de 27%, cerca de 0,05% a cerca de 26%, cerca de 0,06% a cerca de 25%, cerca de 0,07% a cerca de 24%, cerca de 0,08% a cerca de 23%, cerca de 0,09% a cerca de 22%, cerca de 0,1% a cerca de 21%, cerca de 0,2% a cerca de 20%, cerca de 0,3% a cerca de 19%, cerca de 0,4% a cerca de 18%, cerca de 0,5% a cerca de 17%, cerca de 0,5% a cerca de 16%, cerca de 0,7% a cerca de 15%, cerca de 0,8% a cerca de 14%, cerca de 0,9% a cerca de 12% ou cerca de 1% a cerca de 10% p/p, p/v ou v/v da composição farmacêutica.
[001150] Em algumas modalidades, a concentração dos TILs providos nas composições farmacêuticas da invenção está na faixa de cerca de 0,001% a cerca de 10%, cerca de 0,01% a cerca de 5%, cerca de 0,02% a cerca de 4,5%, cerca de 0,03% a cerca de 4%, cerca de 0,04% a cerca de 3,5%, cerca de 0,05% a cerca de 3%, cerca de 0,06% a cerca de 2,5%, cerca de 0,07% a cerca de 2%, cerca de 0,08% a cerca de 1,5%, cerca de 0,09% a cerca de 1%, cerca de 0,1% a cerca de 0,9% p/p, p/v ou v/v da composição farmacêutica.
[001151] Em algumas modalidades, a quantidade dos TILs providos nas composições farmacêuticas da invenção é igual a ou menor do que 10 g, 9,5 g, 9,0 g, 8,5 g, 8,0 g, 7,5 g, 7,0 g, 6,5 g, 6,0 g, 5,5 g, 5,0 g, 4,5 g, 4,0 g, 3,5 g, 3,0 g, 2,5 g, 2,0 g, 1,5 g, 1,0 g, 0,95 g, 0,9 g, 0,85 g, 0,8 g, 0,75 g, 0,7 g, 0,55 g, 0,5 g, 0,55 g, 0,5 g, 0,45 g, 0,4 g, 0,35 g, 0,3 g, 0,25 g, 0,2 g, 0,15 g, 0,1 g, 0,09 g, 0,08 g, 0,07 g, 0,06 g, 0,05 g, 0,04 g, 0,03 g, 0,02 g, 0,01 g, 0,009 g, 0,008 g, 0,007 g, 0,006 g, 0,005 g, 0,004 g, 0,003 g, 0,002 g, 0,001 g, 0,0009 g, 0,0008 g, 0,0007 g, 0,0006 g, 0,0005 g, 0,0004 g, 0,0003 g, 0,0002 g, ou
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0,0001 g.
[001152] Em algumas modalidades, a quantidade dos TILs providos nas composições farmacêuticas da invenção é maior do que 0,0001 g, 0,0002 g, 0,0003 g, 0,0004 g, 0,0005 g, 0,0006 g, 0,0007 g, 0,0008 g, 0,0009 g, 0,001 g, 0,0015 g, 0,002 g, 0,0025 g, 0,003 g, 0,0035 g, 0,004 g, 0,0045 g, 0,005 g, 0,0055 g, 0,006 g, 0,0065 g, 0,007 g, 0,0075 g, 0,008 g, 0,0085 g, 0,009 g, 0,0095 g, 0,01 g, 0,015 g, 0,02 g, 0,025 g, 0,03 g, 0,035 g, 0,04 g, 0,045 g, 0,05 g, 0,055 g, 0,06 g, 0,065 g, 0,07 g, 0,075 g, 0,08 g, 0,085 g, 0,09 g, 0,095 g, 0,1 g, 0,15 g, 0,2 g, 0,25 g, 0,3 g, 0,35 g, 0,4 g, 0,45 g, 0,5 g, 0,55 g, 0,5 g, 0,55 g, 0,7 g, 0,75 g, 0,8 g, 0,85 g, 0,9 g, 0,95 g, 1 g, 1,5 g, 2 g, 2,5, 3 g, 3,5, 4 g, 4,5 g, 5 g, 5,5 g, 6 g, 6,5 g, 7 g, 7,5 g, 8 g, 8,5 g, 9 g, 9,5 g, ou 10 g.
[001153] Os TILs providos nas composições farmacêuticas da invenção são eficazes em uma ampla faixa de dosagem. A dosagem exata dependerá da por intermédio de administração, da forma na qual o composto é administrado, do gênero e idade do sujeito a ser tratado, do peso corporal do sujeito a ser tratado, e da preferência e experiência do médico atendente. As dosagens clinicamente estabelecidas dos TILs também podem ser usadas se apropriado. As quantidades das composições farmacêuticas administradas usando os métodos aqui, tais como as dosagens de TILs, serão dependentes do ser humano ou mamífero que é tratado, da severidade do distúrbio ou condição, da taxa de administração, da disposição dos ingredientes farmacêuticos ativos e do julgamento do médico prescrevente.
[001154] Em algumas modalidades, os TILs podem ser administrados em uma dose única. Tal administração pode ser pela injeção, por exemplo, injeção intravenosa. Em algumas modalidades, os TILs podem ser administrados em doses múltiplas. A dosagem pode ser uma vez, duas vezes, três vezes, quatro vezes, cinco vezes, seis vezes, ou mais do que seis vezes por ano. A dosagem pode ser uma vez ao mês, uma vez a cada duas semanas, uma vez por semana, ou uma vez a cada segundo dia. A administração de
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TILs pode continuar enquanto necessários.
[001155] Em algumas modalidades, uma dosagem eficaz de TILs é de cerca de IxlO6, 2xl06, 3xl06, 4xl06, 5xl06, 6xl06, 7xl06, 8xl06, 9xl06,
IxlO7, 2xl07, 3xl07, 4xl07, 5xl07, 6xl07, 7xl07, 8xl07, 9xl07, IxlO8,
2xl08, 3xl08, 4xl08, 5xl08, 6xl08, 7xl08, 8xl08, 9xl08, IxlO9, 2xl09,
3xl09, 4xl09, 5xl09, 6xl09, 7xl09, 8xl09, 9xl09, IxlO10, 2xlO10, 3xlO10,
4xlO10, 5xlO10, 6xlO10, 7xlO10, 8xlO10, 9xlO10, IxlO11, 2xlOn, 3xlOn,
4xlOn, 5xlOn, 6xlOn, 7xlOn, 8xlOn, 9xlOn, IxlO12, 2xl012, 3xl012,
4xl012, 5xl012, 6xl012, 7xl012, 8xl012, 9xl012, IxlO13, 2xl013, 3xlO13,
4xl013, 5xl013, 6xl013, 7xl013, 8xl013, e 9xl013. Em algumas modalidades, uma dosagem eficaz de TILs está na faixa de IxlO6 a 5xl06, 5xl06 a IxlO7, IxlO7 a 5xl07, 5xl07 a IxlO8, IxlO8 a 5xl08, 5xl08 a IxlO9, IxlO9 a 5xl09,
5xl09 a IxlO10, IxlO10 a 5xlO10, 5xlO10 a IxlO11, 5x10“ a IxlO12, IxlO12 a
5xl012, e 5xl012 a IxlO13.
[001156] Em algumas modalidades, uma dosagem eficaz de TILs está na faixa de cerca de 0,01 mg/kg a cerca de 4,3 mg/kg, cerca de 0,15 mg/kg a cerca de 3,5 mg/kg, cerca de 0,3 mg/kg a cerca de 3,2 mg/kg, cerca de 0,35 mg/kg a cerca de 2,85 mg/kg, cerca de 0,15 mg/kg a cerca de 2,85 mg/kg, cerca de 0,3 mg a cerca de 2,15 mg/kg, cerca de 0,45 mg/kg a cerca de 1,7 mg/kg, cerca de 0,15 mg/kg a cerca de 1,3 mg/kg, cerca de 0,3 mg/kg a cerca de 1,15 mg/kg, cerca de 0,45 mg/kg a cerca de 1 mg/kg, cerca de 0,55 mg/kg a cerca de 0,85 mg/kg, cerca de 0,55 mg/kg a cerca de 0,8 mg/kg, cerca de 0,7 mg/kg a cerca de 0,75 mg/kg, cerca de 0,7 mg/kg a cerca de 2,15 mg/kg, cerca de 0,85 mg/kg a cerca de 2 mg/kg, cerca de 1 mg/kg a cerca de 1,85 mg/kg, cerca de 1,15 mg/kg a cerca de 1,7 mg/kg, cerca de 1,3 mg/kg mg a cerca de
1,5 mg/kg, cerca de 1,35 mg/kg a cerca de 1,5 mg/kg, cerca de 2,15 mg/kg a cerca de 3,5 mg/kg, cerca de 2,3 mg/kg a cerca de 3,4 mg/kg, cerca de 2,4 mg/kg a cerca de 3,3 mg/kg, cerca de 2,5 mg/kg a cerca de 3,15 mg/kg, cerca de 2,7 mg/kg a cerca de 3 mg/kg, cerca de 2,8 mg/kg a cerca de 3 mg/kg, ou
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397 / 497 cerca de 2,85 mg/kg a cerca de 2,95 mg/kg.
[001157] Em algumas modalidades, uma dosagem eficaz de TILs está na faixa de cerca de 1 mg a cerca de 500 mg, cerca de 10 mg a cerca de 300 mg, cerca de 20 mg a cerca de 250 mg, cerca de 25 mg a cerca de 200 mg, cerca de 1 mg a cerca de 50 mg, cerca de 5 mg a cerca de 45 mg, cerca de 10 mg a cerca de 40 mg, cerca de 15 mg a cerca de 35 mg, cerca de 20 mg a cerca de 30 mg, cerca de 23 mg a cerca de 28 mg, cerca de 50 mg a cerca de 150 mg, cerca de 60 mg a cerca de 140 mg, cerca de 70 mg a cerca de 130 mg, cerca de 80 mg a cerca de 120 mg, cerca de 90 mg a cerca de 110 mg, ou cerca de 95 mg a cerca de 105 mg, cerca de 98 mg a cerca de 102 mg, cerca de 150 mg a cerca de 250 mg, cerca de 160 mg a cerca de 240 mg, cerca de 170 mg a cerca de 230 mg, cerca de 180 mg a cerca de 220 mg, cerca de 190 mg a cerca de 210 mg, cerca de 195 mg a cerca de 205 mg, ou cerca de 198 a cerca de 207 mg.
[001158] Uma quantidade eficaz dos TILs pode ser administrada em doses únicas ou múltiplas por qualquer um dos modos aceitos de administração de agentes tendo utilidades similares, incluindo as vias intranasais e transdérmicas, pela injeção intra-arterial, intravenosamente, intraperitonealmente, parenteralmente, intramuscularmente, subcutaneamente, topicamente, pelo transplante ou injeção direta dentro do tumor, ou pela inalação.
Composições Farmacêuticas, Dosagens, e Regimes de Dosagem para Agonistas de TNFRSF [001159] Em uma modalidade, a invenção provê uma composição farmacêutica para o uso no tratamento das doenças e condições aqui descritas. Em uma modalidade preferida, a invenção provê composições farmacêuticas, incluindo aquelas descritas abaixo, para o uso no tratamento de uma doença hiperproliferativa. Em uma modalidade preferida, a invenção provê composições farmacêuticas, incluindo aquelas descritas abaixo, para o uso no
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398/497 tratamento de câncer.
[001160] Em algumas modalidades, uma formulação de anticorpo agonista de TNFRSF compreende um ou mais excipientes selecionados de tris-cloridreto, cloreto de sódio, manitol, ácido pentético, polissorbato 80, hidróxido de sódio, e ácido clorídrico.
[001161] Em uma modalidade, um agonista de TNFRSF é administrado a um sujeito pela infusão de uma dose selecionada do grupo que consiste em cerca de 5 mg, cerca de 8 mg, cerca de 10 mg, cerca de 20 mg, cerca de 25 mg, cerca de 50 mg, cerca de 75 mg, 100 mg, cerca de 200 mg, cerca de 300 mg, cerca de 400 mg, cerca de 500 mg, cerca de 600 mg, cerca de 700 mg, cerca de 800 mg, cerca de 900 mg, cerca de 1000 mg, cerca de 1100 mg, cerca de 1200 mg, cerca de 1300 mg, cerca de 1400 mg, cerca de 1500 mg, cerca de 1600 mg, cerca de 1700 mg, cerca de 1800 mg, cerca de 1900 mg, e cerca de 2000 mg. Em uma modalidade, um agonista de TNFRSF é administrado semanalmente. Em uma modalidade, um agonista de TNFRSF é administrado a cada duas semanas. Em uma modalidade, um agonista de TNFRSF é administrado a cada três semanas. Em uma modalidade, um agonista de TNFRSF é administrado mensalmente. Em uma modalidade, um agonista de TNFRSF é administrado intravenosamente em uma dose de 8 mg dada a cada três semanas por 4 doses em um período de 12 semanas. Em uma modalidade, um agonista de TNFRSF é administrado em uma dose inicial mais baixa, que é escalada quando administrada em intervalos subsequentes administrados mensalmente. Por exemplo, a primeira infusão pode dispensar 300 mg de um agonista de TNFRSF, e doses semanais subsequentes dispensariam 2.000 mg de um agonista de TNFRSF durante oito semanas, seguidos pelas doses mensais de 2.000 mg de um agonista de TNFRSF.
[001162] As quantidades de agonistas de TNFRSF administradas serão dependentes do ser humano ou mamífero que são tratados, da severidade do distúrbio ou condição, da taxa de administração, da disposição dos compostos
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399/497 e do discernimento do médico prescrevente. Entretanto, uma dosagem eficaz de cada um está na faixa de cerca de 0,001 a cerca de 100 mg por kg de peso corporal por dia, tal como cerca de 1 a cerca de 35 mg/kg/dia, em doses únicas ou divididas. Para um ser humano de 70 kg, isto importaria em cerca de 0,05 a 7 g/dia, tal como cerca de 0,05 a cerca de 2,5 g/dia. Em alguns casos, os níveis de dosagem abaixo do limite mais baixo da faixa anteriormente mencionada pode ser mais do que adequada, enquanto em outros casos doses ainda maiores podem ser utilizadas sem causar qualquer efeito colateral nocivo - por exemplo, dividindo-se tais doses maiores em diversas doses menores para a administração durante todo o dia. A dosagem do(s) agonista(s) de TNFRSF pode(m) ser provido em unidades de mg/kg de massa corporal ou em mg/m2 de área de superfície corporal. Em uma modalidade, um agonista de TNFRSF e um segundo agonista de TNFRSF são dispensados em mg/kg ou em mg/m2 em uma razão selecionada do grupo que consiste em cerca de 20:1, cerca de 19:1, cerca de 18:1, cerca de 17:1, cerca de 16:1, cerca de 15:1, cerca de 14:1, cerca de 13:1, cerca de 12:1, cerca de 11:1, cerca de 10:1, cerca de 9:1, cerca de 8:1, cerca de 7:1, cerca de 6:1, cerca de 5:1, cerca de 4:1, cerca de 3:1, cerca de 2:1, cerca de 1:1, cerca de 1:2, cerca de 1:3, cerca de 1:4, cerca de 1:5, cerca de 1:6, cerca de 1:7, cerca de 1:8, cerca de 1:9, cerca de 1:10, cerca de 1:11, cerca de 1:12, cerca de 1:13, cerca de 1:14, cerca de 1:15, cerca de 1:16, cerca de 1:17, cerca de 1:18, cerca de 1:19, e cerca de 1:20.
[001163] Em algumas modalidades, a combinação de TILs e um agonista de TNFRSF são administrados em uma única dose. Tal administração pode ser pela injeção, por exemplo, injeção intravenosa, de modo a introduzir o agonista de TNFRSF.
[001164] Em algumas modalidades, a combinação de TILs e agonistas de TNFRSF são administrados em doses múltiplas. Em uma modalidade preferida, a combinação de TILs e agonistas de TNFRSF são administrados
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400 / 497 em doses múltiplas. A dosagem dos agonistas de TNFRSF pode ser uma vez, duas vezes, três vezes, quatro vezes, cinco vezes, seis vezes, ou mais do que seis vezes ao dia. A dosagem de TILs e agonistas de TNFRSF podem ser uma vez ao mês, uma vez a cada duas semanas, uma vez por semana, ou uma vez a cada segundo dia.
[001165] Nas modalidades selecionadas, os agonistas de TNFRSF são administrados durante mais do que 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 14, 28 dias, 2 meses, 3 meses, 6 meses, 12 meses, ou 24 meses. Em alguns casos, a dosagem contínua é obtida e mantida enquanto necessária.
[001166] Em algumas modalidades, uma dosagem eficaz de um agonista de TNFRSF aqui divulgada está na faixa de cerca de 1 mg a cerca de 500 mg, cerca de 10 mg a cerca de 300 mg, cerca de 20 mg a cerca de 250 mg, cerca de 25 mg a cerca de 200 mg, cerca de 10 mg a cerca de 200 mg, cerca de 20 mg a cerca de 150 mg, cerca de 30 mg a cerca de 120 mg, cerca de 10 mg a cerca de 90 mg, cerca de 20 mg a cerca de 80 mg, cerca de 30 mg a cerca de 70 mg, cerca de 40 mg a cerca de 60 mg, cerca de 45 mg a cerca de 55 mg, cerca de 48 mg a cerca de 52 mg, cerca de 50 mg a cerca de 150 mg, cerca de 60 mg a cerca de 140 mg, cerca de 70 mg a cerca de 130 mg, cerca de 80 mg a cerca de 120 mg, cerca de 90 mg a cerca de 110 mg, cerca de 95 mg a cerca de 105 mg, cerca de 150 mg a cerca de 250 mg, cerca de 160 mg a cerca de 240 mg, cerca de 170 mg a cerca de 230 mg, cerca de 180 mg a cerca de 220 mg, cerca de 190 mg a cerca de 210 mg, cerca de 195 mg a cerca de 205 mg, ou cerca de 198 a cerca de 202 mg. Em algumas modalidades, uma dosagem eficaz de um agonista de TNFRSF aqui divulgada é de cerca de 25 mg, cerca de 50 mg, cerca de 75 mg, cerca de 100 mg, cerca de 125 mg, cerca de 150 mg, cerca de 175 mg, cerca de 200 mg, cerca de 225 mg, ou cerca de 250 mg.
[001167] Em algumas modalidades, uma dosagem eficaz de um agonista de TNFRSF aqui divulgada está na faixa de cerca de 0,01 mg/kg a cerca de
4,3 mg/kg, cerca de 0,15 mg/kg a cerca de 3,5 mg/kg, cerca de 0,3 mg/kg a
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401/497 cerca de 3,2 mg/kg, cerca de 0,35 mg/kg a cerca de 2,85 mg/kg, cerca de 0,15 mg/kg a cerca de 2,85 mg/kg, cerca de 0,3 mg a cerca de 2,15 mg/kg, cerca de 0,45 mg/kg a cerca de 1,7 mg/kg, cerca de 0,15 mg/kg a cerca de 1,3 mg/kg, cerca de 0,3 mg/kg a cerca de 1,15 mg/kg, cerca de 0,45 mg/kg a cerca de 1 mg/kg, cerca de 0,55 mg/kg a cerca de 0,85 mg/kg, cerca de 0,55 mg/kg a cerca de 0,8 mg/kg, cerca de 0,7 mg/kg a cerca de 0,75 mg/kg, cerca de 0,7 mg/kg a cerca de 2,15 mg/kg, cerca de 0,85 mg/kg a cerca de 2 mg/kg, cerca de 1 mg/kg a cerca de 1,85 mg/kg, cerca de 1,15 mg/kg a cerca de 1,7 mg/kg, cerca de 1,3 mg/kg mg a cerca de 1,5 mg/kg, cerca de 1,35 mg/kg a cerca de
1.5 mg/kg, cerca de 2,15 mg/kg a cerca de 3,5 mg/kg, cerca de 2,3 mg/kg a cerca de 3,4 mg/kg, cerca de 2,4 mg/kg a cerca de 3,3 mg/kg, cerca de 2,5 mg/kg a cerca de 3,15 mg/kg, cerca de 2,7 mg/kg a cerca de 3 mg/kg, cerca de 2,8 mg/kg a cerca de 3 mg/kg, ou cerca de 2,85 mg/kg a cerca de 2,95 mg/kg. Em algumas modalidades, uma dosagem eficaz de um agonista de TNFRSF aqui divulgada é de cerca de 0,35 mg/kg, cerca de 0,7 mg/kg, cerca de 1 mg/kg, cerca de 1,4 mg/kg, cerca de 1,8 mg/kg, cerca de 2,1 mg/kg, cerca de
2.5 mg/kg, cerca de 2,85 mg/kg, cerca de 3,2 mg/kg, ou cerca de 3,5 mg/kg.
[001168] Em algumas modalidades, uma dosagem eficaz de um agonista de TNFRSF aqui divulgada está na faixa de cerca de 1 mg a cerca de 500 mg, cerca de 10 mg a cerca de 300 mg, cerca de 20 mg a cerca de 250 mg, cerca de 25 mg a cerca de 200 mg, cerca de 1 mg a cerca de 50 mg, cerca de 5 mg a cerca de 45 mg, cerca de 10 mg a cerca de 40 mg, cerca de 15 mg a cerca de 35 mg, cerca de 20 mg a cerca de 30 mg, cerca de 23 mg a cerca de 28 mg, cerca de 50 mg a cerca de 150 mg, cerca de 60 mg a cerca de 140 mg, cerca de 70 mg a cerca de 130 mg, cerca de 80 mg a cerca de 120 mg, cerca de 90 mg a cerca de 110 mg, ou cerca de 95 mg a cerca de 105 mg, cerca de 98 mg a cerca de 102 mg, cerca de 150 mg a cerca de 250 mg, cerca de 160 mg a cerca de 240 mg, cerca de 170 mg a cerca de 230 mg, cerca de 180 mg a cerca de 220 mg, cerca de 190 mg a cerca de 210 mg, cerca de 195 mg a cerca de
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205 mg, ou cerca de 198 a cerca de 207 mg. Em algumas modalidades, uma dosagem eficaz de um agonista de TNFRSF aqui divulgada é de cerca de 25 mg, cerca de 50 mg, cerca de 75 mg, cerca de 100 mg, cerca de 125 mg, cerca de 150 mg, cerca de 175 mg, cerca de 200 mg, cerca de 225 mg, ou cerca de 250 mg.
[001169] Em algumas modalidades, uma dosagem eficaz de um agonista de TNFRSF aqui divulgada está na faixa de cerca de 0,01 mg/kg a cerca de
4,3 mg/kg, cerca de 0,15 mg/kg a cerca de 3,5 mg/kg, cerca de 0,3 mg/kg a cerca de 3,2 mg/kg, cerca de 0,35 mg/kg a cerca de 2,85 mg/kg, cerca de 0,01 mg/kg a cerca de 0,7 mg/kg, cerca de 0,07 mg/kg a cerca de 0,55 mg/kg, cerca de 0,15 mg/kg a cerca de 0,5 mg/kg, cerca de 0,2 mg/kg a cerca de 0,5 mg/kg, cerca de 0,3 mg/kg a cerca de 0,45 mg/kg, cerca de 0,3 mg/kg a cerca de 0,4 mg/kg, cerca de 0,7 mg/kg a cerca de 2,15 mg/kg, cerca de 0,85 mg/kg a cerca de 2 mg/kg, cerca de 1 mg/kg a cerca de 1,85 mg/kg, cerca de 1,15 mg/kg a cerca de 1,7 mg/kg, cerca de 1,3 mg/kg a cerca de 1,5 mg/kg, cerca de 1,35 mg/kg a cerca de 1,5 mg/kg, cerca de 1,4 mg/kg a cerca de 1,45 mg/kg, cerca de 2,15 mg/kg a cerca de 3,5 mg/kg, cerca de 2,3 mg/kg a cerca de 3,4 mg/kg, cerca de 2,4 mg/kg a cerca de 3,3 mg/kg, cerca de 2,5 mg/kg a cerca de 3,15 mg/kg, cerca de 2,7 mg/kg a cerca de 3 mg/kg, cerca de 2,8 mg/kg a cerca de 3 mg/kg, ou cerca de 2,85 mg/kg a cerca de 2,95 mg/kg. Em algumas modalidades, um agonista de TNFRSF aqui divulgada é de cerca de 0,4 mg/kg, cerca de 0,7 mg/kg, cerca de 1 mg/kg, cerca de 1,4 mg/kg, cerca de 1,8 mg/kg, cerca de 2,1 mg/kg, cerca de 2,5 mg/kg, cerca de 2,85 mg/kg, cerca de 3,2 mg/kg, ou cerca de 3,5 mg/kg.
[001170] Em algumas modalidades, um agonista de TNFRSF é administrado em uma dosagem de 10 a 1000 mg BID, incluindo 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 150, ou 200 mg BID.
[001171] Em algumas modalidades, a concentração dos agonistas de TNFRSF, e combinações dos mesmos provida nas composições farmacêuticas
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403 / 497 da invenção é independentemente menor do que, por exemplo, 100%, 90%, 80%, 70%, 60%, 50%, 40%, 30%, 20%, 19%, 18%, 17%, 16%, 15%, 14%, 13%, 12%, 11%, 10%, 9%, 8%, 7%, 6%, 5%, 4%, 3%, 2%, 1%, 0,5%, 0,4%, 0,3%, 0,2%, 0,1%, 0,09%, 0,08%, 0,07%, 0,06%, 0,05%, 0,04%, 0,03%, 0,02%, 0,01%, 0,009%, 0,008%, 0,007%, 0,006%, 0,005%, 0,004%, 0,003%, 0,002%, 0,001%, 0,0009%, 0,0008%, 0,0007%, 0,0006%, 0,0005%, 0,0004%, 0,0003%, 0,0002% ou 0,0001% p/p, p/v ou v/v da composição farmacêutica.
[001172] Em algumas modalidades, a concentração dos agonistas de TNFRSF, e combinações dos mesmos provida nas composições farmacêuticas da invenção é independentemente maior do que 90%, 80%, 70%, 60%, 50%, 40%, 30%, 20%, 19,75%, 19,50%, 19,25% 19%, 18,75%, 18,50%, 18,25% 18%, 17,75%, 17,50%, 17,25% 17%, 16,75%, 16,50%, 16,25% 16%, 15,75%, 15,50%, 15,25% 15%, 14,75%, 14,50%, 14,25% 14%, 13,75%, 13,50%, 13,25% 13%, 12,75%, 12,50%, 12,25% 12%, 11,75%, 11,50%, 11,25% 11%, 10,75%, 10,50%, 10,25% 10%, 9,75%, 9,50%, 9,25% 9%, 8,75%, 8,50%, 8,25% 8%, 7,75%, 7,50%, 7,25% 7%, 6,75%, 6,50%, 6,25% 6%, 5,75%, 5,50%, 5,25% 5%, 4,75%, 4,50%, 4,25%, 4%, 3,75%, 3,50%, 3,25%, 3%, 2,75%, 2,50%, 2,25%, 2%, 1,75%, 1,50%, 125%, 1%, 0,5%, 0,4%, 0,3%, 0,2%, 0,1%, 0,09%, 0,08%, 0,07%, 0,06%, 0,05%, 0,04%, 0,03%, 0,02%, 0,01%, 0,009%, 0,008%, 0,007%, 0,006%, 0,005%, 0,004%, 0,003%, 0,002%, 0,001%, 0,0009%, 0,0008%, 0,0007%, 0,0006%, 0,0005%, 0,0004%, 0,0003%, 0,0002% ou 0,0001% p/p, p/v, ou v/v da composição farmacêutica.
[001173] Em algumas modalidades, a concentração dos agonistas de TNFRSF nas composições farmacêuticas está independentemente na faixa de cerca de 0,0001% a cerca de 50%, cerca de 0,001% a cerca de 40%, cerca de 0,01% a cerca de 30%, cerca de 0,02% a cerca de 29%, cerca de 0,03% a cerca de 28%, cerca de 0,04% a cerca de 27%, cerca de 0,05% a cerca de
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26%, cerca de 0,06% a cerca de 25%, cerca de 0,07% a cerca de 24%, cerca de 0,08% a cerca de 23%, cerca de 0,09% a cerca de 22%, cerca de 0,1% a cerca de 21%, cerca de 0,2% a cerca de 20%, cerca de 0,3% a cerca de 19%, cerca de 0,4% a cerca de 18%, cerca de 0,5% a cerca de 17%, cerca de 0,5% a cerca de 16%, cerca de 0,7% a cerca de 15%, cerca de 0,8% a cerca de 14%, cerca de 0,9% a cerca de 12% ou cerca de 1% a cerca de 10% p/p, p/v ou v/v da composição farmacêutica.
[001174] Em algumas modalidades, a concentração dos agonistas de TNFRSF nas composições farmacêuticas está independentemente na faixa de cerca de 0,001% a cerca de 10%, cerca de 0,01% a cerca de 5%, cerca de 0,02% a cerca de 4,5%, cerca de 0,03% a cerca de 4%, cerca de 0,04% a cerca de 3,5%, cerca de 0,05% a cerca de 3%, cerca de 0,06% a cerca de 2,5%, cerca de 0,07% a cerca de 2%, cerca de 0,08% a cerca de 1,5%, cerca de 0,09% a cerca de 1%, cerca de 0,1% a cerca de 0,9% p/p, p/v ou v/v da composição farmacêutica.
[001175] Em algumas modalidades, a concentração dos agonistas de TNFRSF nas composições farmacêuticas é independentemente igual a ou menor do que 10 g, 9,5 g, 9,0 g, 8,5 g, 8,0 g, 7,5 g, 7,0 g, 6,5 g, 6,0 g, 5,5 g, 5,0 g, 4,5 g, 4,0 g, 3,5 g, 3,0 g, 2,5 g, 2,0 g, 1,5 g, 1,0 g, 0,95 g, 0,9 g, 0,85 g, 0,8 g, 0,75 g, 0,7 g, 0,55 g, 0,5 g, 0,55 g, 0,5 g, 0,45 g, 0,4 g, 0,35 g, 0,3 g, 0,25 g, 0,2 g, 0,15 g, 0,1 g, 0,09 g, 0,08 g, 0,07 g, 0,06 g, 0,05 g, 0,04 g, 0,03 g, 0,02 g, 0,01 g, 0,009 g, 0,008 g, 0,007 g, 0,006 g, 0,005 g, 0,004 g, 0,003 g, 0,002 g, 0,001 g, 0,0009 g, 0,0008 g, 0,0007 g, 0,0006 g, 0,0005 g, 0,0004 g, 0,0003 g, 0,0002 g, ou 0,0001 g.
[001176] Em algumas modalidades, a concentração dos agonistas de TNFRSF nas composições farmacêuticas é independentemente maior do que 0,0001 g, 0,0002 g, 0,0003 g, 0,0004 g, 0,0005 g, 0,0006 g, 0,0007 g, 0,0008 g, 0,0009 g, 0,001 g, 0,0015 g, 0,002 g, 0,0025 g, 0,003 g, 0,0035 g, 0,004 g, 0,0045 g, 0,005 g, 0,0055 g, 0,006 g, 0,0065 g, 0,007 g, 0,0075 g, 0,008 g,
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0,0085 g, 0,009 g, 0,0095 g, 0,01 g, 0,015 g, 0,02 g, 0,025 g, 0,03 g, 0,035 g, 0,04 g, 0,045 g, 0,05 g, 0,055 g, 0,06 g, 0,065 g, 0,07 g, 0,075 g, 0,08 g, 0,085 g, 0,09 g, 0,095 g, 0,1 g, 0,15 g, 0,2 g, 0,25 g, 0,3 g, 0,35 g, 0,4 g, 0,45 g, 0,5 g, 0,55 g, 0,5 g, 0,55 g, 0,7 g, 0,75 g, 0,8 g, 0,85 g, 0,9 g, 0,95 g, 1 g, 1,5 g, 2 g, 2,5, 3 g, 3,5 g, 4 g, 4,5 g, 5 g, 5,5 g, 6 g, 6,5 g, 7 g, 7,5 g, 8 g, 8,5 g, 9 g, 9,5 g, ou 10 g.
[001177] São descritos abaixo composições farmacêuticas e métodos não limitantes para preparar as mesmas.
Composições farmacêuticas para Injeção [001178] Em modalidades preferidas, a invenção provê uma composição farmacêutica para injeção contendo a combinação de um TIL e pelo menos um agonista de TNFRSF, e combinações dos mesmos, e um excipiente farmacêutico adequado para injeção, incluindo injeção intratumoral ou infusão intravenosa. Componentes e quantidades de agentes nas composições são como aqui descritas.
[001179] As formas em que as composições da presente invenção podem ser incorporadas para a administração por injeção incluem suspensões, ou emulsões aquosas ou oleosas, com óleo de gergelim, óleo de milho, óleo de algodão, ou óleo de amendoim, assim como elixires, manitol, dextrose, ou uma solução aquosa estéril, e veículos farmacêuticos similares.
[001180] As soluções aquosas em solução salina também são convencionalmente usadas para injeção. Etanol, glicerol, propileno glicol e polietileno glicol líquido (e misturas adequadas dos mesmos), derivados de ciclodextrina, e óleos vegetais também podem ser utilizados. A fluidez apropriada pode ser mantida, por exemplo, pelo uso de um revestimento, tal como lecitina, para a manutenção do tamanho de partícula requerido no caso de dispersão e pelo uso de tensoativos. A prevenção da ação de microorganismos pode ser realizada por vários agentes antibacterianos e antifúngicos, por exemplo, parabenos, clorobutanol, fenol, ácido sórbico e
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406/497 timerosal.
[001181] As soluções injetáveis estéreis são preparadas incorporando-se a combinação dos agonistas de TNFRSF e TILs nas quantidades requeridas nos meios apropriados com vários outros ingredientes como enumerado acima, como requerido, seguido pela esterilização filtrada. Geralmente, as dispersões são preparadas incorporando-se os vários ingredientes ativos esterilizados em um veículo estéril que contém o meio de dispersão básico e os outros ingredientes requeridos daqueles enumerados acima. No caso de pós estéreis para a preparação de soluções injetáveis estéreis, certos métodos desejáveis de preparação são as técnicas de secagem a vácuo e secagem por congelamento que produzem um pó do ingrediente ativo mais qualquer ingrediente desejado adicional a partir de uma solução anteriormente filtrada estéril dos mesmos.
Outras Composições Farmacêuticas [001182] As composições farmacêuticas também podem ser preparadas a partir das composições aqui descritas e um ou mais excipientes farmaceuticamente aceitáveis adequados para a administração sublingual, bucal, retal, intraóssea, intraocular, intranasal, epidural, ou intraespinhal. As preparações para tais composições farmacêuticas são bem conhecidas na técnica. Ver, por exemplo, Anderson, Philip O.; Knoben, James E.; Troutman, William G, eds., Handbook of Clinical Drug Data, Décima Edição, McGrawHill, 2002; e Pratt e Taylor, eds., Principles of Drug Action, Terceira Edição, Churchill Livingston, N.Y., 1990, cada uma das quais é aqui incorporada por referência em sua totalidade.
[001183] A administração de uma combinação de um TIL e um agonista de TNFRSF pode ser efetuada por qualquer método que possibilite a dispensa dos compostos ao sítio de ação. Estes métodos incluem vias orais, vias intraduodenais, injeção parenteral (incluindo intravenosa, intra-arterial, subcutânea, intramuscular, intravascular, intraperitoneal ou infusão), tópica
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407 / 497 (por exemplo, aplicação transdérmica), administração retal, por intermédio de dispensar local por cateter ou stent ou através de inalação. A combinação de compostos também pode ser administrada intra-adiposamente ou intratecalmente.
[001184] A invenção também provê kits. Os kits incluem uma combinação de TILs prontos para administrar e um agonista de TNFRSF, sozinho ou em combinação em embalagens adequadas, e material escrito que pode incluir instruções para o uso, debate de estudos clínicos e lista de efeitos colaterais. Tais kits também podem incluir informação, tal como referências de literatura científica, materiais de inserto de embalagem, resultados de testes clínicos, e/ou resumos destes e os similares, que indicam ou estabelecem as atividades e/ou vantagens da composição, e/ou que descrevem a dosagem, administração, efeitos colaterais, interações de fármaco, ou outras informações úteis para o provedor de cuidados de saúde. Tal informação pode estar fundamentada nos resultados de vários estudos, por exemplo, estudos usando animais experimentais envolvendo modelos in vivo e estudos com base nos testes clínicos humanos. O kit pode conter ainda um outro ingrediente farmacêutico ativo. Nas modalidades selecionadas, os agonistas de TNFRSF e TILs e um outro ingrediente farmacêutico ativo são providos como composições separadas em recipientes separados dentro do kit. Nas modalidades selecionadas, a molécula selecionada do grupo que consiste em um agonista de TNFRSF e os TILs são providos como uma única composição dentro de um recipiente no kit. Artigos de embalagem e adicionais adequados para o uso (por exemplo, copo de medição para preparações líquidas, enrolamento em folha metálica para minimizar a exposição ao ar, e os semelhantes) são conhecidos na técnica e podem ser incluídos no kit. Os kits aqui descritos podem ser providos, comercializados e/ou promovidos aos provedores de saúde, incluindo médicos, enfermeiras, farmacêuticos, responsáveis pelo formulário, e os semelhantes. Os kits também podem, nas
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408 / 497 modalidades selecionadas, ser comercializados diretamente para o consumidor.
[001185] Os kits descritos acima são preferivelmente para o uso no tratamento das doenças e condições aqui descritas. Em uma modalidade preferida, os kits são para o uso no tratamento de câncer. Nas modalidades preferidas, os kits são para o uso no tratamento de cânceres de tumor sólido, linfomas e leucemias.
[001186] Em uma modalidade preferida, os kits da presente invenção são para o uso no tratamento de câncer, incluindo qualquer um dos cânceres aqui descritos.
Métodos de Tratar Cânceres [001187] As composições e combinações de TILs e agonistas de TNFRSF aqui descritas podem ser usadas em um método para tratar distúrbios hiperproliferativos. Em uma modalidade preferida, elas são para o uso no tratamento de cânceres. Em uma modalidade preferida, a invenção provê um método de tratar um câncer e composições e combinações de TILs e agonistas de TNFRSF para tratar um câncer, em que o câncer é selecionado a partir do grupo que consiste em melanoma, câncer ovariano, câncer cervical, câncer pulmonar, câncer vesical, câncer mamário, câncer da cabeça e pescoço, carcinoma de célula renal, leucemia mieloide aguda, carcinoma colorretal, e sarcoma. Em uma modalidade preferida, a invenção provê um método de tratar um câncer e composições e combinações de TILs e agonistas de TNFRSF para tratar um câncer, em que o câncer é selecionado a partir do grupo que consiste em câncer pulmonar de célula não pequena (NSCLC) ou câncer mamário triplo negativo, melanoma refratário duplo, e melanoma uveal (ocular). Em uma modalidade preferida, a invenção provê um método de tratar um câncer em que o câncer é selecionado a partir do grupo que consiste em melanoma, câncer ovariano, câncer cervical, câncer pulmonar, câncer vesical, câncer mamário, câncer da cabeça e pescoço (câncer de célula
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409 / 497 escamosa da cabeça e pescoço), carcinoma de célula renal, leucemia mieloide aguda, carcinoma colorretal, colangiocarcinoma, e sarcoma com uma combinação de TILs e um agonista de TNFRSF. Em uma modalidade preferida, a invenção provê composições e combinações de TILs e agonistas de TNFRSF para tratar um câncer em que o câncer é selecionado a partir do grupo que consiste em melanoma, câncer ovariano, câncer cervical, câncer pulmonar, câncer vesical, câncer mamário, câncer da cabeça e pescoço, carcinoma de célula renal, leucemia mieloide aguda, carcinoma colorretal, colangiocarcinoma, e sarcoma. Em uma modalidade preferida, a invenção provê um método de tratar um câncer, em que o câncer é selecionado a partir do grupo que consiste em câncer pulmonar de célula não pequena (NSCLC) ou câncer mamário triplo negativo, melanoma refratário duplo, e melanoma uveal (ocular) com uma combinação de TILs e um agonista de TNFRSF. Em uma modalidade preferida, a invenção provê composições e combinações de TILs e agonistas de TNFRSF para tratar um câncer em que o câncer é selecionado a partir do grupo que consiste em câncer pulmonar de célula não pequena (NSCLC) ou câncer mamário triplo negativo, melanoma refratário duplo, e melanoma uveal (ocular). Em uma modalidade, os TILs são expandidos por um processo aqui descrito.
[001188] Em algumas modalidades, a invenção provê um método de tratar um câncer com uma população de linfócitos infiltrantes de tumor (TILs) compreendendo as etapas de:
(a) excisar um tumor de um paciente;
(b) obter uma primeira população de TILs do tumor;
(c) realizar uma expansão inicial da primeira população de TILs em um primeiro meio de cultura de célula para obter uma segunda população de TILs, em que a segunda população de TILs é pelo menos 5 vezes maior em número do que a primeira população de TILs, em que o primeiro meio de cultura de célula compreende IL-2 e um agonista da
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410/497 superfamília do receptor do fator de necrose de tumor (TNFRSF), e em que a expansão inicial é realizada em um período de 21 dias ou menos;
(d) realizar uma expansão rápida da segunda população de TILs em um segundo meio de cultura de célula para se obter uma terceira população de TILs, em que a terceira população de TILs é pelo menos 50 vezes maior em número do que a segunda população de TILs depois de 7 dias do início da expansão rápida; em que o segundo meio de cultura de célula compreende IL-2, OKT-3 (anticorpo anti-CD3), células mononucleares do sangue periférico (PBMCs), e opcionalmente o agonista de TNFRSF, e em que a expansão rápida é realizada em um período de 14 dias ou menos;
(e) colher a terceira população de TILs; e (f) administrar uma porção terapeuticamente eficaz da terceira população de TILs a um paciente com o câncer;
em que o câncer é selecionado a partir do grupo que consiste em melanoma, câncer ovariano, câncer cervical, câncer pulmonar, câncer vesical, câncer mamário, câncer da cabeça e pescoço, carcinoma de célula renal, leucemia mieloide aguda, carcinoma colorretal, colangiocarcinoma, sarcoma, câncer pulmonar de célula não pequena (NSCLC) ou câncer mamário triplo negativo, melanoma refratário duplo, e melanoma uveal (ocular).
[001189] Em algumas modalidades, a invenção provê um método de tratar um câncer com uma população de linfócitos infiltrantes de tumor (TILs) compreendendo as etapas de:
(a) excisar um tumor de um paciente;
(b) obter uma primeira população de TILs do tumor;
(c) realizar uma expansão inicial da primeira população de TILs em um primeiro meio de cultura de célula para obter uma segunda população de TILs, em que a segunda população de TILs é pelo menos 5 vezes maior em número do que a primeira população de TILs, em que o
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411/497 primeiro meio de cultura de célula compreende IL-2, e em que a expansão inicial é realizada em um período de 21 dias ou menos;
(d) realizar uma expansão rápida da segunda população de TILs em um segundo meio de cultura de célula para obter uma terceira população de TILs, em que a terceira população de TILs é pelo menos 50 vezes maior em número do que a segunda população de TILs depois de 7 dias do início da expansão rápida; em que o segundo meio de cultura de célula compreende IL-2, OKT-3 (anticorpo anti-CD3), células mononucleares do sangue periférico (PBMCs), e em que a expansão rápida é realizada em um período de 14 dias ou menos;
(e) colher a terceira população de TILs; e (f) administrar uma porção terapeuticamente eficaz da terceira população de TILs a um paciente com o câncer;
em que o câncer é selecionado a partir do grupo que consiste em melanoma, câncer ovariano, câncer cervical, câncer pulmonar, câncer vesical, câncer mamário, câncer da cabeça e pescoço, carcinoma de célula renal, leucemia mieloide aguda, carcinoma colorretal, colangiocarcinoma, sarcoma, câncer pulmonar de célula não pequena (NSCLC) ou câncer mamário triplo negativo, melanoma refratário duplo, e melanoma uveal (ocular).
[001190] Em algumas modalidades, a invenção provê um método de tratar um câncer com uma população de linfócitos infiltrantes de tumor (TILs) compreendendo as etapas de:
(a) excisar um tumor de um paciente;
(b) obter uma primeira população de TILs do tumor;
(c) realizar uma expansão inicial da primeira população de TILs em um primeiro meio de cultura de célula para obter uma segunda população de TILs, em que a segunda população de TILs é pelo menos 5 vezes maior em número do que a primeira população de TILs, em que o
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412/497 primeiro meio de cultura de célula compreende IL-2, e em que a expansão inicial é realizada em um período de 21 dias ou menos;
(d) realizar uma expansão rápida da segunda população de TILs em um segundo meio de cultura de célula para obter uma terceira população de TILs, em que a terceira população de TILs é pelo menos 50 vezes maior em número do que a segunda população de TILs depois de 7 dias do início da expansão rápida; em que o segundo meio de cultura de célula compreende IL-2, OKT-3 (anticorpo anti-CD3), células mononucleares do sangue periférico (PBMCs), e em que a expansão rápida é realizada em um período de 14 dias ou menos;
(e) colher a terceira população de TILs; e (f) administrar uma porção terapeuticamente eficaz da terceira população de TILs a um paciente com o câncer;
em que o câncer é melanoma uveal (ocular).
[001191] Em uma modalidade, a invenção inclui um kit para tratar um câncer com uma população de TILs de acordo com qualquer um dos métodos precedentes.
[001192] A eficácia dos métodos, compostos, e combinações de compostos aqui descritos no tratamento, prevenção e/ou controle das doenças ou distúrbios indicados pode ser testada usando vários modelos animais conhecidos na técnica. Os modelos para determinar a eficácia de tratamentos para câncer pancreático são descritos em Herreros-Villanueva, et al., World J. Gastroenterol. 2012, 18, 1286-1294. Os modelos para determinar a eficácia de tratamentos para câncer mamário são descritos, por exemplo, em Fantozzi, Breast Cancer Res. 2006, 8, 212. Os modelos para determinar a eficácia de tratamentos para câncer ovariano são descritos, por exemplo, em Mullany, et al., Endocrinology 2012, 153, 1585-92; e Fong, et al., J. Ovarian Res. 2009, 2, 12. Os modelos para determinar a eficácia de tratamentos para melanoma são descritos, por exemplo, em Damsky, et al., Pigment Cell & Melanoma
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Res. 2010, 23, 853-859. Os modelos para determinar a eficácia de tratamentos para câncer pulmonar são descritos, por exemplo, em Meuwissen, et al., Genes & Development, 2005,19, 643-664. Os modelos para determinar a eficácia de tratamentos para câncer pulmonar são descritos, por exemplo, em Kim, Clin. Exp. Otorhinolaryngol. 2009, 2, 55-60; e Sano, Head Neck Oncol. 2009,1, 32. Os modelos para determinar a eficácia de tratamentos para carcinoma colorretal, incluindo o modelo CT26, são descritos em Castle, et al., BMC Genomics, 2013,15, 190; Endo, et al., Cancer Gene Therapy, 2002, 9, 142-148; Roth, et al., Adv. Immunol. 1994, 57, 281-351; Fearon, et al., Cancer Res. WM,48, 2975-2980.
Co-Administração de IL-2 [001193] Em uma modalidade, a invenção provê um método para tratar um câncer com uma população de linfócitos infiltrantes de tumor (TILs) compreendendo as etapas de:
(a) excisar um tumor de um paciente;
(b) obter uma primeira população de TILs do tumor;
(c) realizar uma expansão inicial da primeira população de TILs em um primeiro meio de cultura de célula para obter uma segunda população de TILs, em que a segunda população de TILs é pelo menos 5 vezes maior em número do que a primeira população de TILs, em que o primeiro meio de cultura de célula compreende IL-2 e um agonista da superfamília do receptor do fator de necrose de tumor (TNFRSF), e em que a expansão inicial é realizada em um período de 21 dias ou menos;
(d) realizar uma expansão rápida da segunda população de TILs em um segundo meio de cultura de célula para obter uma terceira população de TILs, em que a terceira população de TILs é pelo menos 50 vezes maior em número do que a segunda população de TILs depois de 7 dias do início da expansão rápida; em que o segundo meio de cultura de célula compreende IL-2, OKT-3 (anticorpo anti-CD3), células mononucleares do
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414/497 sangue periférico (PBMCs), e opcionalmente o agonista de TNFRSF, e em que a expansão rápida é realizada em um período de 14 dias ou menos;
(e) colher a terceira população de TILs;
(f) administrar uma porção terapeuticamente eficaz da terceira população de TILs ao paciente com o câncer; e (g) administrar um regime de IL-2 ao paciente.
[001194] Em uma modalidade, o regime de IL-2 compreende um regime de alta dose de IL-2, em que o regime de alta dose de IL-2 compreende aldesleucina, ou um biossimilar ou variante dos mesmos, administrado intravenosamente começando no dia depois de administrar uma porção terapeuticamente eficaz da terceira população de TILs, em que a aldesleucina ou um biossimilar ou variante dos mesmos é administrada em uma dose de 600.000 ou 720.000 lU/kg (massa corporal do paciente) usando infusões intravenosas de bolo de 15 minutos a cada oito horas até a tolerância, por um máximo de 14 doses. Seguindo 9 dias de repouso, este programa pode ser repetido por mais 14 doses, por um máximo de 28 doses no total.
[001195] Em uma modalidade, o regime de IL-2 compreende um regime de alta dose de IL-2, em que o regime de alta dose de IL-2 compreende aldesleucina, ou um biossimilar ou variante da mesma, administrados intravenosamente começando no dia depois de administrar uma porção terapeuticamente eficaz da terceira população de TILs, em que a aldesleucina ou um biossimilar ou variante da mesma é administrada em uma dose de 0,037 mg/kg ou 0,044 mg/kg de lU/kg (massa corporal do paciente) usando infusões intravenosas de bolo de 15 minutos a cada oito horas até a tolerância, por um máximo de 14 doses. Seguindo 9 dias de repouso, este programa pode ser repetido por mais 14 doses, por um máximo de 28 doses no total.
[001196] Em uma modalidade, o regime de IL-2 compreende um regime decrescente de IL-2. Os regimes decrescentes de IL-2 foram descritos em 0’Dia, et al., J. Clin. Oncol. 1999, 17, 2752-61 e Eton, et al., Cancer 2000,
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88, 1703-9, as divulgações das quais são aqui incorporadas por referência. Em uma modalidade, um regime descendente de IL-2 compreende 18 x 106 IU/m2 administrado intravenosamente em 6 horas, seguido por 18 x 106 IU/m2 administrado intravenosamente em 12 horas, seguido por 18 x 106 IU/m2 administrados intravenosamente em 24 horas, seguidos por 4,5 x 106 IU/m2 administrados intravenosamente em 72 horas. Este ciclo de tratamento pode ser repetido a cada 28 dias por um máximo de quatro ciclos. Em uma modalidade, um regime descendente de IL-2 compreende 18.000.000 IU/m2 no dia 1, 9.000.000 IU/m2 no dia 2, e 4.500.000 IU/m2 nos dias 3 e 4.
[001197] Em uma modalidade, o regime de IL-2 compreende a administração de IL-2 peguilada a cada 1, 2, 4, 6, 7, 14 ou 21 dias em uma dose de 0,10 mg/dia a 50 mg/dia.
Linfodepleção Não Mieloablativa com Quimioterapia [001198] Em uma modalidade, a invenção inclui um método de tratar um câncer com uma população de TILs, em que um paciente é pré-tratado com quimioterapia não mieloablativa antes de uma infusão de TILs e antes de ou concorrente com tratamento com um agonista de TNFRSF de acordo com a presente divulgação. Em uma modalidade, a quimioterapia não mieloablativa é ciclofosfamida 60 mg/kg/d durante 2 dias (dias 27 e 26 antes da infusão de TIL) e fludarabina 25 mg/m2/d durante 5 dias (dias 27 a 23 antes da infusão de TIL). Em uma modalidade, depois da quimioterapia não mieloablativa e infusão de TIL (no dia 0) de acordo com a presente divulgação, o paciente recebe uma infusão intravenosa de IL-2 intravenosamente a 720.000 lU/kg a cada 8 horas até a tolerância fisiológica.
[001199] As descobertas experimentais indicam que a linfodepleção antes da transferência adotiva de linfócitos T específicos de tumor desempenha um papel chave no realce da eficácia do tratamento pela eliminação de células T reguladoras e elementos de competição do sistema imune (“depósitos de citocina”). Consequentemente, algumas modalidades da
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416/497 invenção utilizam uma etapa de linfodepleção (algumas vezes também aludida como “condicionamento imunossupressivo”) no paciente antes da introdução dos TILs reREP da invenção.
[001200] No geral, a linfodepleção é obtida usando a administração de fludarabina ou ciclofosfamida (a forma ativa sendo aludida como mafosfamida) e combinações das mesmas. Tais métodos são descritos em Gassner, et al., Cancer Immunol. Immunother. 2011, 60, 75-85, Muranski, et al., Nat. Clin. Pract. Oncol., 2006, 3, 668-681, Dudley, et al., J. Clin. Oncol. 2008, 26, 5233-5239, e Dudley, et al., J. Clin. Oncol. 2005, 23, 2346-2357, todas das quais são aqui incorporadas por referência em suas totalidades.
[001201] Em algumas modalidades, a fludarabina é administrada em uma concentração de 0,5 pg/ml a 10 pg/ml de fludarabina. Em algumas modalidades, a fludarabina é administrada em uma concentração de 1 pg/ml de fludarabina. Em algumas modalidades, o tratamento com fludarabina é administrado durante 1 dia, 2 dias, 3 dias, 4 dias, 5 dias, 6 dias, ou 7 dias ou mais. Em algumas modalidades, a fludarabina é administrada em uma dosagem de 10 mg/kg/dia, 15 mg/kg/dia, 20 mg/kg/dia, 25 mg/kg/dia, 30 mg/kg/dia, 35 mg/kg/dia, 40 mg/kg/dia, ou 45 mg/kg/dia. Em algumas modalidades, o tratamento com fludarabina é administrado durante 2 a 7 dias a 35 mg/kg/dia. Em algumas modalidades, o tratamento com fludarabina é administrado durante 4 a 5 dias a 35 mg/kg/dia. Em algumas modalidades, o tratamento com fludarabina é administrado durante 4 a 5 dias a 25 mg/kg/dia.
[001202] Em algumas modalidades, a mafosfamida, a forma ativa de ciclofosfamida, é obtida em uma concentração de 0,5 pg/mL a 10 pg/mL pela administração de ciclofosfamida. Em algumas modalidades, a mafosfamida, a forma ativa de ciclofosfamida, é obtida em uma concentração de 1 pg/mL pela administração de ciclofosfamida. Em algumas modalidades, o tratamento de ciclofosfamida é administrado durante 1 dia, 2 dias, 3 dias, 4 dias, 5 dias, 6 dias, ou 7 dias ou mais. Em algumas modalidades, a ciclofosfamida é
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417/497 administrado em uma dosagem de 100 mg/m2/dia, 150 mg/m2/dia, 175 mg/m2/dia4 200 mg/m2/dia, 225 mg/m2/dia, 250 mg/m2/dia, 275 mg/m2/dia, ou 300 mg/m2/dia. Em algumas modalidades, a ciclofosfamida é administrada intravenosamente (isto é, i.v.). Em algumas modalidades, o tratamento com ciclofosfamida é administrado durante 2 a 7 dias a 35 mg/kg/dia. Em algumas modalidades, o tratamento com ciclofosfamida é administrado durante 4 a 5 dias a 250 mg/m2/dia i.v. Em algumas modalidades, o tratamento com ciclofosfamida é administrado durante 4 dias a 250 mg/m2/dia i.v.
[001203] Em algumas modalidades, a linfodepleção é realizada administrando-se a fludarabina e a ciclofosfamida juntas a um paciente. Em algumas modalidades, a fludarabina é administrada a 25 mg/m2/dia i.v. e a ciclofosfamida é administrada a 250 mg/m2/dia i.v. em 4 dias.
[001204] Em uma modalidade, a linfodepleção é realizada pela administração de ciclofosfamida em uma dose de 60 mg/m2/dia durante dois dias seguida pela administração de fludarabina em uma dose de 25 mg/m2/dia durante cinco dias.
Combinações com Inibidores de PD-1 e PD-L1 [001205] A morte programada 1 (PD-1) é uma proteína do receptor do ponto de checagem de transmembrana de 288 aminoácidos expressa pelas células T, células B, células T exterminadoras naturais (NK), monócitos ativados, e células dendríticas. PD-1, que também é conhecido como CD279, pertence à família CD28, e nos seres humanos é codificada pelo gene Pdcdl no cromossoma 2. PD-1 consiste de um domínio da superfamília da imunoglobina (Ig), uma região de transmembrana, e um domínio intracelular contendo um motivo inibidor com base na tirosina imunorreceptora (ITIM) e um motivo de comutação com base na tirosina imunorreceptora (ITSM). PD-1 e seus ligantes (PD-L1 e PD-L2) são conhecidos desempenhar um papel chave na tolerância imune, como descrito em Keir, et al., Annu. Rev. Immunol. 2008, 26, 677-704. PD-1 provê sinais inibidores que regulam
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418/497 negativamente as respostas imunes de célula T. PD-L1 (também conhecido como B7-H1 ou CD274) e PD-L2 (também conhecido como B7-DC ou CD273) são expressos nas células de tumor e células estrômicas, que podem ser encontradas pelas células T ativadas expressando PD-1, levando à imunossupressão das células T. PD-L1 é uma proteína de transmembrana de 290 aminoácidos codificada pelo gene Cd274 no cromossoma 9 humano. Bloquear a interação entre PD-1 e seus ligantes PD-L1 e PD-L2 pelo uso de um inibidor de PD-1, um inibidor de PD-L1, e/ou um inibidor de PD-L2 pode superar a resistência imune, como demonstrado em estudos clínicos recentes, tais como aqueles descritos em Topalian, et al., N. Eng. J. Med. 2012, 366, 2443-54. O PD-L1 é expresso em muitas linhagens celulares de tumor, enquanto PD-L2 é expresso na maioria das vezes nas células dendríticas e umas poucas linhagens de tumor. Além das células T (que indutivelmente expressam PD-1 depois da ativação), PD-1 também é expresso nas células B, células matadoras naturais, macrófagos, monócitos ativados, e células dendríticas.
[001206] Os métodos, composições, e combinações de TILs e agonistas de TNFRSF aqui descritos também podem ser combinados ainda com anticorpos de ligação, antagonistas, ou inibidores (isto é, bloqueadores) de morte programada 1 (PD-1), ligante de morte programada 1 (PD-L1), e/ou ligante de morte programada 2 (PD-L2). Os inibidores de PD-1, PD-L1, e/ou PD-L2 podem ser usados em cultura de célula em conjunção com os agonistas de TNFRSF aqui descritos durante os estágios pré-REP ou REP de expansão de TIL. Os inibidores PD-1, PD-L1, e/ou PD-L2 também podem ser usados em conjunção com agonistas de TNFRSF antes da excisão cirúrgica de tumor, ou durante ou depois da infusão de TILs. Por exemplo, os métodos adequados de usar inibidores de PD-1/PD-L1 em conjunção com anticorpos GITR agonísticos e composições compreendendo antagonistas e agonistas de GITR PD-1/PD-L1 estão descritos na Publicação de Pedido de Patente Internacional
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No. WO 2015/026684 Al, as divulgações da qual é aqui incorporada por referência.
[001207] Em uma modalidade, o inibidor de PD-1 pode ser qualquer inibidor de PD-1 ou bloqueador de PD-1 conhecidos na técnica. Em particular, o mesmo é um dos inibidores ou bloqueadores de PD-1 descritos em mais detalhes nos seguintes parágrafos. Os termos “inibidor,” “antagonista,” e “bloqueador” são usados intercambiavelmente aqui em referência aos inibidores de PD-1. Para se evitar dúvidas, referências aqui a um inibidor de PD-1 que é um anticorpo pode referir-se a um composto ou fragmentos de ligação a antígeno, variantes, conjugados, ou biossimilares dos mesmos. Para se evitar dúvidas, referências aqui a um inibidor de PD-1 também podem referir-se a um composto de molécula pequena ou um sal, éster, solvato, hidrato, cocristal, ou profármaco dos mesmos farmaceuticamente aceitáveis.
[001208] Em algumas modalidades, as composições e métodos aqui descritos incluem um inibidor de PD-1. Em algumas modalidades, o inibidor de PD-1 é uma molécula pequena. Em uma modalidade preferida, o inibidor de PD-1 é um anticorpo (isto é, um anticorpo anti-PD-1), um fragmento dos mesmos, incluindo fragmentos Fab, ou um fragmento variável de cadeia única (scFv) dos mesmos. Em algumas modalidades o inibidor de PD-1 é um anticorpo policlonal. Em uma modalidade preferida, o inibidor de PD-1 é um anticorpo monoclonal. Em algumas modalidades, o inibidor de PD-1 compete quanto à ligação com PD-1, e/ou se liga a um epitopo em PD-1. Em uma modalidade, o anticorpo compete quanto à ligação com PD-1, e/ou se liga a um epitopo em PD-1.
[001209] Em algumas modalidades, as composições e métodos descritos incluem um inibidor de PD-1 que se liga ao PD-1 humano com um Kd de cerca de 100 pM ou mais baixo, se liga ao PD-1 humano com um Kd de cerca de 90 pM ou mais baixo, se liga ao PD-1 humano com um Kd de cerca de 80
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420 / 497 pM ou mais baixo, se liga ao PD-1 humano com um Kd de cerca de 70 pM ou mais baixo, se liga ao PD-1 humano com um Kd de cerca de 60 pM ou mais baixo, se liga ao PD-1 humano com um Kd de cerca de 50 pM ou mais baixo, se liga ao PD-1 humano com um Kd de cerca de 40 pM ou mais baixo, se liga ao PD-1 humano com um Kd de cerca de 30 pM ou mais baixo, se liga ao PD1 humano com um Kd de cerca de 20 pM ou mais baixo, se liga ao PD-1 humano com um Kd de cerca de 10 pM ou mais baixo, ou se liga ao PD-1 humano com um Kd de cerca de 1 pM ou mais baixo.
[001210] Em algumas modalidades, as composições e métodos descritos incluem um inibidor de PD-1 que se liga ao PD-1 humano com um kassoc de cerca de 7,5 x 105 1/M-s ou mais rápido, se liga ao PD-1 humano com um kassoc de cerca de 7,5 x 105 1/M-s ou mais rápido, se liga ao PD-1 humano com um kassoc de cerca de 8 x 105 1/M-s ou mais rápido, se liga ao PD-1 humano com um kassoc de cerca de 8,5 x 105 1/M-s ou mais rápido, se liga ao PD-1 humano com um kassoc de cerca de 9 x 105 1/M-s ou mais rápido, se liga ao PD-1 humano com um kassoc de cerca de 9,5 x 1051/M-s ou mais rápido, ou se liga ao PD-1 humano com um kassoc de cerca de 1 x 106 1/M-s ou mais rápido.
[001211] Em algumas modalidades, as composições e métodos descritos incluem um inibidor de PD-1 que se liga ao PD-1 humano com um kdissoc de cerca de 2 x 10'5 1/s ou mais lento, se liga ao PD-1 humano com um kdissoc de cerca de 2,1 x 10'5 1/s ou mais lento, se liga ao PD-1 humano com um kdissoc de cerca de 2,2 x 10'5 1/s ou mais lento, se liga ao PD-1 humano com um kdissoc de cerca de 2,3 x 10'5 1/s ou mais lento, se liga ao PD-1 humano com um kdissoc de cerca de 2,4 x 10'5 1/s ou mais lento, se liga ao PD-1 humano com um kdissoc de cerca de 2,5 x 10'5 1/s ou mais lento, se liga ao PD-1 humano com um kdissoc de cerca de 2,5 x 10'5 1/s ou mais lento ou liga ao PD1 humano com um kdissoc de cerca de 2,7 x 10'5 1/s ou mais lento, se liga ao PD-1 humano com um kdissoc de cerca de 2,8 x 10'5 1/s ou mais lento, se liga
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421 /497 ao PD-1 humano com um kdissoc de cerca de 2,9 x IO'5 1/s ou mais lento, ou liga ao PD-1 humano com um kdissoc de cerca de 3 x IO'5 1/s ou mais lento. [001212] Em algumas modalidades, as composições e métodos descritos incluem um inibidor de PD-1 que bloqueia ou inibe a ligação de PD-L1 humano ou PD-L2 humano ao PD-1 humano com um IC50 de cerca de 10 nM ou mais baixo, bloqueia ou inibe a ligação de PD-L1 humano ou PD-L2 humano ao PD-1 humano com um IC50 de cerca de 9 nM ou mais baixo, bloqueia ou inibe a ligação de PD-L1 humano ou PD-L2 humano ao PD-1 humano com um IC50 de cerca de 8 nM ou mais baixo, bloqueia ou inibe a ligação de PD-L1 humano ou PD-L2 humano ao PD-1 humano com um IC50 de cerca de 7 nM ou mais baixo, bloqueia ou inibe a ligação de PD-L1 humano ou PD-L2 humano ao PD-1 humano com um IC50 de cerca de 6 nM ou mais baixo, bloqueia ou inibe a ligação de PD-L1 humano ou PD-L2 humano ao PD-1 humano com um IC50 de cerca de 5 nM ou mais baixo, bloqueia ou inibe a ligação de PD-L1 humano ou PD-L2 humano ao PD-1 humano com um IC50 de cerca de 4 nM ou mais baixo, bloqueia ou inibe a ligação de PD-L1 humano ou PD-L2 humano ao PD-1 humano com um IC50 de cerca de 3 nM ou mais baixo, bloqueia ou inibe a ligação de PD-L1 humano ou PD-L2 humano ao PD-1 humano com um IC50 de cerca de 2 nM ou mais baixo, ou bloqueia ou inibe a ligação de PD-L1 humano ou PD-L2 humano ao PD-1 humano com um IC50 de cerca de 1 nM ou mais baixo.
[001213] Em uma modalidade, o inibidor de PD-1 é nivolumab (comercialmente disponível como OPDIVO da Bristol-Myers Squibb Co.), ou biossimilares, fragmentos de ligação a antígeno, conjugados, ou variantes dos mesmos. Nivolumab é um anticorpo de IgG4 totalmente humano que bloqueia o receptor de PD-1. Em uma modalidade, o anticorpo anti-PD-1 é um anticorpo de imunoglobina G4 capa, anti-(CD274 humana). Ao nivolumab é designado o número de registro no Chemical Abstracts Service (CAS) 946414-94-4 e também é conhecido como 5C4, BMS-936558, MDX-1106, e
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ONO-4538. A preparação e propriedades de nivolumab são descritas na Patente U.S. No. 8.008.449 e Publicação de Patente Internacional No. WO 2006/121168, as divulgações das quais são aqui incorporadas por referência. A segurança e eficácia clínicas de nivolumab em várias formas de câncer foram descritas em Wang, et al., Cancer Immunol Res. 2014, 2, 846-56; Page, et al., Ann. Rev. Med., 2014, 65, 185-202; e Weber, et al., J. Clin. Oncology, 2013, 31, 4311-4318, as divulgações das quais são aqui incorporadas por referência. As sequências de aminoácido de nivolumab são apresentadas na Tabela 48. Nivolumab tem ligações de dissulfeto intracadeia pesada em 22 a 96, 140 a 196, 254 a 314, 360 a 418, 22” a 96”, 140” a 196”, 254” a 314”, e 360” a 418”; ligações de dissulfeto intracadeia leve em 23’ a 88’, 134’ a 194’, 23’” a 88’”, e 134’” a 194’”; ligações de dissulfeto intercadeia pesada-leve em 127 a 214’, 127” a 214”‘, ligações de dissulfeto intercadeia pesada-pesada em 219 a 219” e 222 a 222”; e sítios de glicosilação N (H CH2 84,4) em 290, 290”.
[001214] Em uma modalidade, um inibidor de PD-1 compreende uma cadeia pesada dada pela SEQ ID NO: 463 e uma cadeia leve dada pela SEQ ID NO: 464. Em uma modalidade, um inibidor de PD-1 compreende cadeias pesadas e leves tendo as sequências mostradas na SEQ ID NO: 463 e SEQ ID NO: 464, respectivamente, ou fragmentos de ligação a antígeno, fragmentos Fab, fragmentos variáveis de cadeia única (scFv), variantes, ou conjugados dos mesmos. Em uma modalidade, um inibidor de PD-1 compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 99% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 463 e SEQ ID NO: 464, respectivamente. Em uma modalidade, um inibidor de PD-1 compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 98% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 463 e SEQ ID NO: 464, respectivamente. Em uma modalidade, um inibidor de PD-1 compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 97% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 463 e SEQ ID NO:
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464, respectivamente. Em uma modalidade, um inibidor de PD-1 compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 96% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 463 e SEQ ID NO: 464, respectivamente. Em uma modalidade, um inibidor de PD-1 compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 95% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 463 e SEQ ID NO: 464, respectivamente.
[001215] Em uma modalidade, o inibidor de PD-1 compreende as CDRs ou regiões variáveis (VRs) de cadeia pesada e leve de nivolumab. Em uma modalidade, a região variável da cadeia pesada (VH) do inibidor de PD-1 compreende a sequência mostrada na SEQ ID NO: 465, e a região variável da cadeia leve (VL) do inibidor de PD-1 compreende a sequência mostrada na SEQ ID NO: 466, e substituições de aminoácido conservativas das mesmas. Em uma modalidade, um inibidor de PD-1 compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 99% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 465 e SEQ ID NO: 466, respectivamente. Em uma modalidade, um inibidor de PD-1 compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 98% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 465 e SEQ ID NO: 466, respectivamente. Em uma modalidade, um inibidor de PD-1 compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 97% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 465 e SEQ ID NO: 466, respectivamente. Em uma modalidade, um inibidor de PD-1 compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 96% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 465 e SEQ ID NO: 466, respectivamente. Em uma modalidade, um inibidor de PD-1 compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 95% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 465 e SEQ ID NO: 466, respectivamente.
[001216] Em uma modalidade, um inibidor de PD-1 compreende os domínios CDR1, CDR2 e CDR3 da cadeia pesada tendo as sequências
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424 / 497 apresentadas na SEQ ID NO: 467, SEQ ID NO: 468, e SEQ ID NO: 469, respectivamente, e substituições de aminoácido conservativas das mesmas, e os domínios CDR1, CDR2 e CDR3 da cadeia leve tendo as sequências apresentadas na SEQ ID NO: 470, SEQ ID NO: 471, e SEQ ID NO: 472, respectivamente, e substituições de aminoácido conservativas das mesmas. Em uma modalidade, o anticorpo compete quanto à ligação com, e/ou se liga ao mesmo epítopo no PD-1 como qualquer um dos anticorpos anteriormente mencionados.
[001217] Em uma modalidade, o inibidor de PD-1 é um anticorpo monoclonal biossimilar anti-PD-1 aprovado pelas autoridades reguladoras de fármaco com referência ao nivolumab. Em uma modalidade, o biossimilar compreende um anticorpo anti-PD-1 compreendendo uma sequência de aminoácidos que tenha pelo menos 97% de identidade de sequência, por exemplo, 97%, 98%, 99% ou 100% de identidade de sequência, com a sequência de aminoácidos do produto medicinal de referência ou produto biológico de referência e que compreende uma ou mais modificações póstraducionais quando comparado com o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é nivolumab. Em algumas modalidades, a uma ou mais modificações pós-traducionais são selecionadas de uma ou mais de: glicosilação, oxidação, desamidação, e truncagem. Em algumas modalidades, o biossimilar é um anticorpo anti-PD-1 autorizado ou submetido para autorização, em que o anticorpo anti-PD-1 é provido em uma formulação que difere das formulações do produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é nivolumab. O anticorpo anti-PD-1 pode ser autorizado por uma autoridade reguladora de fármaco tal como o FDA dos Estados Unidos e/ou o EMA da União Européia. Em algumas modalidades, o biossimilar é provido como uma composição que compreende adicionalmente
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425 / 497 um ou mais excipientes, em que o um ou mais excipientes são os mesmos ou diferentes dos excipientes compreendidos no produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é nivolumab. Em algumas modalidades, o biossimilar é provido como uma composição que compreende adicionalmente um ou mais excipientes, em que o um ou mais excipientes são os mesmos ou diferentes dos excipientes compreendidos no produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é nivolumab.
TABELA 48. As sequências de aminoácidos para inibidores de PD-1 relacionados com o nivolumab.
| Identificador | Sequência (Símbolos de aminoácido de uma letra) |
| SEQ ID NO: 463 cadeia pesada de nivolumab | QVQLVESGGG VVQPGRSLRL DCKASGITFS NSGMHWVRQA PGKGLEWVAV IWYDGSKRYY 60 ADSVKGRFTI SRDNSKNTLF LQMNSLRAED TAVYYCATND DYWGQGTLVT VSSASTKGPS 120 VFPLAPCSRS TSESTAALGC LVKDYFPEPV TVSWNSGALT SGVHTFPAVL QSSGLYSLSS 180 VVTVPSSSLG TKTYTCNVDH KPSNTKVDKR VESKYGPPCP PCPAPEFLGG PSVFLFPPKP 240 KDTLMISRTP EVTCVVVDVS QEDPEVQFNW YVDGVEVHNA KTKPREEQFN STYRVVSVLT 300 VLHQDWLNGK EYKCKVSNKG LPSSIEKTIS KAKGQPREPQ VYTLPPSQEE MTKNQVSLTC 360 LVKGFYPSDI AVEWESNGQP ENNYKTTPPV LDSDGSFFLY SRLTVDKSRW QEGNVFSCSV 420 MHEALHNHYT QKSLSLSLGK 440 |
| SEQ ID NO: 464 cadeia leve de nivolumab | EIVLTQSPAT LSLSPGERAT LSCRASQSVS SILAWYQQKP GQAPRLLIYD ASNRATGIPA 60 RFSGSGSGTD FTLTISSLEP EDFAVYYCQQ SSNWPRTFGQ GTKVEIKRTV AAPSVFIFPP 120 SDEQLKSGTA SVVCLLNNFY PREAKVQWKV DNALQSGNSQ ESVTEQDSKD STYSLSSTLT 180 LSKADYEKHK VYACEVTHQG LSSPVTKSFN RGEC 214 |
| SEQ ID NO: 465 cadeia pesada variável de nivolumab | QVQLVESGGG VVQPGRSLRL DCKASGITFS NSGMHWVRQA PGKGLEWVAV IWYDGSKRYY 60 ADSVKGRFTI SRDNSKNTLF LQMNSLRAED TAVYYCATND DYWGQGTLVT VSS 113 |
| SEQ ID NO: 466 cadeia leve variável de nivolumab | EIVLTQSPAT LSLSPGERAT LSCRASQSVS SILAWYQQKP GQAPRLLIYD ASNRATGIPA 60 RFSGSGSGTD FTLTISSLEP EDFAVYYCQQ SSNWPRTFGQ GTKVEIK 107 |
| SEQ ID NO: 467 CDR1 da cadeia pesada de nivolumab | NSGMH 5 |
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| Identificador | Sequência (Símbolos de aminoácido de uma letra) |
| SEQ ID NO: 468 CDR2 da cadeia pesada de nivolumab | VIWYDGSKRY YADSVKG 17 |
| SEQ ID NO: 469 CDR3 da cadeia pesada de nivolumab | NDDY4 |
| SEQ ID NO: 470 CDR1 da cadeia leve de nivolumab | RASQSVSSIL UM 11 |
| SEQ ID NO: 471 CDR2 da cadeia leve de nivolumab | DASNRAT 7 |
| SEQ ID NO: 472 CDR3 da cadeia leve de nivolumab | QQSSNWPRT 9 |
[001218] Em uma outra modalidade, o inibidor de PD-1 compreende pembrolizumab (comercialmente disponível como KEYTRUDA da Merck & Co., Inc., Kenilworth, NJ, USA), ou fragmentos de ligação a antígeno, conjugados, ou variantes dos mesmos. Pembrolizumab é designado com o número de registro CAS 1374853-91-4 e também é conhecido como lambrolizumab, MK-3475, e SCH-900475. Pembrolizumab tem uma imunoglobina G4, anti-(proteína PDCD1 humana (morte de célula programada 1)) (cadeia pesada de Mus musculus monoclonal humano), dissulfeto com cadeia leve de Mus musculus monoclonal humana, estrutura dimérica. A estrutura de pembrolizumab também pode ser descrita como imunoglobina G4, anti-(morte de célula programada 1 humana); cadeia pesada monoclonal de camundongo humanizada [228-L-prolina(H10-S>P)]y4 (134-218’)-dissulfeto com dímero de cadeia leve κ monoclonal de camundongo humanizado (226 a 226”:229 a 229”)-bisdissulfeto. As propriedades, usos, e preparação de pembrolizumab estão descritos na Publicação de Patente Internacional No. WO 2008/156712 Al, Patente U.S. No. 8.354.509 e Publicações dos Pedidos de Patente U.S. Nos. US
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2010/0266617 Al, US 2013/0108651 Al, e US 2013/0109843 A2, as divulgações das quais são aqui incorporadas por referência. A segurança e eficácia clínicas de pembrolizumab nas várias formas de câncer estão descritas em Fuerst, Oncology Times, 2014, 36, 35-36; Robert, et al., Lancet, 2014, 384, 1109-17; e Thomas, et al., Exp. Opin. Biol. Ther., 2014,14, 1061 a 1064. As sequências de aminoácido de pembrolizumab são apresentadas na Tabela 49. Pembrolizumab inclui as seguintes pontes de dissulfeto: 22 a 96, 22” a 96”, 23’ a 92’, 23”‘ a 92”‘, 134 a 218’, 134” a 218”‘, 138’ a 198’, 138”‘ a 198”‘, 147 a 203, 147” a 203”, 226 a 226”, 229 a 229”, 261 a 321, 261” a 321”, 367 a 425, e 367” a 425”, e os seguintes sítios de glicosilação (N): Asn297 e Asn-297”. Pembrolizumab é um isótipo IgG4/capa com uma mutação S228P estabilizante na região Fc; inserção desta mutação na região de dobradiça IgG4 impede a formação de meias moléculas tipicamente observadas para anticorpos IgG4. Pembrolizumab é heterogeneamente glicosilada em Asn297 dentro do domínio Fc de cada cadeia pesada, produzindo um peso molecular de aproximadamente 149 kDa para o anticorpo intacto. A glicoforma dominante de pembrolizumab é a forma de glicano agalacto diantenária fucosilada (G0F).
[001219] Em uma modalidade, um inibidor de PD-1 compreende uma cadeia pesada dada pela SEQ ID NO: 473 e uma cadeia leve dada pela SEQ ID NO: 474. Em uma modalidade, um inibidor de PD-1 compreende cadeias pesadas e leves tendo as sequências mostradas na SEQ ID NO: 473 e SEQ ID NO: 474, respectivamente, ou fragmentos de ligação a antígeno, fragmentos Fab, fragmentos variáveis de cadeia única (scFv), variantes, ou conjugados dos mesmos. Em uma modalidade, um inibidor de PD-1 compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 99% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 473 e SEQ ID NO: 474, respectivamente. Em uma modalidade, um inibidor de PD-1 compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 98% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO:
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473 e SEQ ID NO: 474, respectivamente. Em uma modalidade, um inibidor de PD-1 compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 97% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 473 e SEQ ID NO: 474, respectivamente. Em uma modalidade, um inibidor de PD-1 compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 96% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 473 e SEQ ID NO: 474, respectivamente. Em uma modalidade, um inibidor de PD-1 compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 95% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 473 e SEQ ID NO: 474, respectivamente.
[001220] Em uma modalidade, o inibidor de PD-1 compreende as CDRs ou regiões variáveis (VRs) de cadeia pesada e leve de pembrolizumab. Em uma modalidade, a região variável da cadeia pesada (VH) do inibidor de PD-1 compreende a sequência mostrada na SEQ ID NO: 475, e a região variável da cadeia leve (VL) do inibidor de PD-1 compreende a sequência mostrada na SEQ ID NO: 476, e substituições de aminoácido conservativas das mesmas. Em uma modalidade, um inibidor de PD-1 compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 99% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 475 e SEQ ID NO: 476, respectivamente. Em uma modalidade, um inibidor de PD-1 compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 98% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 475 e SEQ ID NO: 476, respectivamente. Em uma modalidade, um inibidor de PD-1 compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 97% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 475 e SEQ ID NO: 476, respectivamente. Em uma modalidade, um inibidor de PD-1 compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 96% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 475 e SEQ ID NO: 476, respectivamente. Em uma modalidade, um inibidor de PD-1 compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 95% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO:
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475 e SEQ ID NO: 476, respectivamente.
[001221] Em uma modalidade, um inibidor de PD-1 compreende os domínios CDR1, CDR2 e CDR3 da cadeia pesada tendo as sequências apresentadas na SEQ ID NO: 477, SEQ ID NO: 478, e SEQ ID NO: 479, respectivamente, e substituições de aminoácido conservativas das mesmas, e os domínios CDR1, CDR2 e CDR3 da cadeia leve tendo as sequências apresentadas na SEQ ID NO: 480, SEQ ID NO: 481, e SEQ ID NO: 482, respectivamente, e substituições de aminoácido conservativas das mesmas. Em uma modalidade, o anticorpo compete quanto à ligação com, e/ou se liga ao mesmo epítopo no PD-1 como qualquer um dos anticorpos anteriormente mencionados.
[001222] Em uma modalidade, o inibidor de PD-1 é um anticorpo antiPD-1 monoclonal biossimilar aprovado pelas autoridades reguladoras de fármaco com referência ao pembrolizumab. Em uma modalidade, o biossimilar compreende um anticorpo anti-PD-1 compreendendo uma sequência de aminoácidos que tenha pelo menos 97% de identidade de sequência, por exemplo, 97%, 98%, 99% ou 100% de identidade de sequência, com a sequência de aminoácidos do produto medicinal de referência ou produto biológico de referência e que compreende uma ou mais modificações pós-traducionais quando comparado com o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é pembrolizumab. Em algumas modalidades, a uma ou mais modificações pós-traducionais são selecionada de uma ou mais de: glicosilação, oxidação, desamidação, e truncagem. Em algumas modalidades, o biossimilar é um anticorpo anti-PD-1 autorizado ou submetido para autorização, em que o anticorpo anti-PD-1 é provido em uma formulação que difere das formulações do produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é pembrolizumab. O
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430 / 497 anticorpo anti-PD-1 pode ser autorizado por uma autoridade reguladora de fármaco tal como o FDA dos Estados Unidos e/ou o EMA da União Européia. Em algumas modalidades, o biossimilar é provido como uma composição que compreende adicionalmente um ou mais excipientes, em que o um ou mais excipientes são os mesmos ou diferentes dos excipientes compreendidos no produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é pembrolizumab. Em algumas modalidades, o biossimilar é provido como uma composição que compreende adicionalmente um ou mais excipientes, em que o um ou mais excipientes são os mesmos ou diferentes dos excipientes compreendidos no produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é pembrolizumab.
TABELA 49. As sequências de aminoácidos para os inibidores de PD-1 relacionados com o pembrolizumab.
| Identificador | Sequência (Símbolos de aminoácido de uma letra) |
| SEQ ID NO: 473 cadeia pesada de pembrolizumab | QVQLVQSGVE VKKPGASVKV SCKASGYTFT NYYMYWVRQA PGQGLEWMGG INPSNGGTNF 60 NEKFKNRVTL TTDSSTTTAY MELKSLQFDD TAVYYCARRD YRFDMGFDYW GQGTTVTVSS 120 ASTKGPSVFP LAPCSRSTSE STAALGCLVK DYFPEPVTVS WNSGALTSGV HTFPAVLQSS 180 GLYSLSSVVT VPSSSLGTKT YTCNVDHKPS NTKVDKRVES KYGPPCPPCP APEFLGGPSV 240 FLFPPKPKDT LMISRTPEVT CVVVDVSQED PEVQFNWYVD GVEVHNAKTK PREEQFNSTY 300 RVVSVLTVLH QDWLNGKEYK CKVSNKGLPS SIEKTISKAK GQPREPQVYT LPPSQEEMTK 360 NQVSLTCLVK GFYPSDIAVE WESNGQPENN YKTTPPVLDS DGSFFLYSRL TVDKSRWQEG 420 NVFSCSVMHE ALHNHYTQKS LSLSLGK 447 |
| SEQ ID NO: 474 cadeia leve de pembrolizumab | EIVLTQSPAT LSLSPGERAT LSCRASKGVS TSGYSILHWY QQKPGQAPRL LIILASILES 60 GVPARFSGSG SGTDFTLTIS SLEPEDFAVY YCQHSRDLPL TFGGGTKVEI KRTVAAPSVF 120 IFPPSDEQLK SGTASVVCLL NNFYPREAKV QWKVDNALQS GNSQESVTEQ DSKDSTYSLS 180 STLTLSKADY EKHKVYACEV THQGLSSPVT KSFNRGEC 218 |
| SEQ ID NO: 475 cadeia pesada variável de pembrolizumab | QVQLVQSGVE VKKPGASVKV SCKASGYTFT NYYMYWVRQA PGQGLEWMGG INPSNGGTNF 60 NEKFKNRVTL TTDSSTTTAY MELKSLQFDD TAVYYCARRD YRFDMGFDYW GQGTTVTVSS 120 |
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| SEQ ID NO: 476 cadeia leve variável de pembrolizumab | EIVLTQSPAT LSLSPGERAT LSCRASKGVS TSGYSILHWY QQKPGQAPRL LIILASILES 60 GVPARFSGSG SGTDFTLTIS SLEPEDFAVY YCQHSRDLPL TFGGGTKVEI Kill |
| SEQ ID NO: 477 CDR1 da cadeia pesada de pembrolizumab | NYYMY 5 |
| SEQ ID NO: 478 CDR2 da cadeia pesada de pembrolizumab | GINPSNGGTN FNEKFK 16 |
| SEQ ID NO: 479 CDR3 da cadeia pesada de pembrolizumab | RDYRFDMGFD Y 11 |
| SEQ ID NO: 480 CDR1 da cadeia leve de pembrolizumab | RASKGVSTSG YSILH 15 |
| SEQ ID NO: 481 CDR2 da cadeia leve de pembrolizumab | LASILES 7 |
| SEQ ID NO: 482 CDR3 da cadeia leve de pembrolizumab | QHSRDLPLT 9 |
[001223] Em uma modalidade, o inibidor de PD-1 é um anticorpo antiPD-1 monoclonal comercialmente disponível, tal como clones J43 anti-m-PD1 (Cat # BE0033-2) e RMP1 a 14 (Cat # BE0146) (Bio X Cell, Inc., West
Lebanon, NH, USA). Vários anticorpos anti-PD-1 comercialmente disponíveis são conhecidos por uma pessoa de habilidade comum na técnica. [001224] Em uma modalidade, o inibidor de PD-1 é um anticorpo divulgado na Patente U.S. No. 8.354.509 ou Publicações dos Pedidos de Patente U.S. Nos. 2010/0266617 Al, 2013/0108651 Al, 2013/0109843 A2, as divulgações das quais são aqui incorporadas por referência. Em uma modalidade, o inibidor de PD-1 é um anticorpo anti-PD-1 descrito nas Patentes U.S. Nos. 8.287.856. 8.580.247. e 8.168.757 e Publicações dos Pedidos de Patente U.S. Nos. 2009/0028857 Al, 2010/0285013 Al,
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2013/0022600 Al, e 2011/0008369 Al, as divulgações das quais são incorporada a este por referência. Em uma outro modalidade, o inibidor de PD-1 é um anticorpo anti-PD-1 divulgado na Patente U.S. No. 8.735.553 Bl, a divulgação da qual é aqui incorporada por referência. Em uma modalidade, o inibidor de PD-1 é pidilizumab, também conhecido como CT-011, que está descrito na Patente U.S. No. 8.686.119, a divulgação da qual é aqui incorporada por referência.
[001225] Em uma modalidade, o inibidor de PD-1 pode ser uma molécula pequena ou um peptídeo, ou um derivado de peptídeo, tal como aqueles descritos nas Patentes U.S. Nos. 8.907.053, 9.096.642, e 9.044.442 e Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0087581; compostos de
1,2,4-oxadiazol e derivados tais como aqueles descritos na Publicação do Pedido de Patente U.S. No. 2015/0073024; compostos peptidomiméticos cíclicos e derivados tais como aqueles descritos na Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0073042; compostos cíclicos e derivados tais como aqueles descritos na Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2015/0125491; compostos de 1,3,4-oxadiazol e 1,3,4-tiadiazol e derivados tais como aqueles descritos na Publicação de Pedido de Patente Internacional No. WO 2015/033301; compostos com base em peptídeo e derivados tais como aqueles descritos nas Publicações de Pedido de Patente Internacional Nos. WO 2015/036927 e WO 2015/04490, ou um composto macrocíclico com base em peptídeo e derivados tais como aqueles descritos na Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2014/0294898; as divulgações de cada um dos quais são incorporada a este por referência em suas totalidades.
[001226] Em uma modalidade, o inibidor de PD-LI ou PD-L2 pode ser qualquer inibidor de PD-LI ou PD-L2, antagonista, ou bloqueador conhecido na técnica. Em particular, é um dos inibidores de PD-LI ou PD-L2, antagonista, ou bloqueadores descritos em mais detalhes nos parágrafos seguintes. Os termos “inibidor,” “antagonista,” e “bloqueador” são aqui
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433 / 497 usados intercambiavelmente em referência aos inibidores de PD-L1 e PD-L2. Para se evitar dúvidas, referências aqui a um inibidor de PD-L1 ou PD-L2 que é um anticorpo pode referir-se a um composto ou fragmentos de ligação a antígeno, variantes, conjugados, ou biossimilares dos mesmos. Para se evitar dúvidas, referências aqui a um inibidor de PD-L1 ou PD-L2 pode referir-se a um composto ou um sal, éster, solvato, hidrato, cocristal, ou profármaco dos mesmos farmaceuticamente aceitáveis.
[001227] Em algumas modalidades, as composições, processos e métodos aqui descritos incluem um inibidor de PD-L1 ou PD-L2. Em algumas modalidades, o inibidor de PD-L1 ou PD-L2 é uma molécula pequena. Em uma modalidade preferida, o inibidor de PD-L1 ou PD-L2 é um anticorpo (isto é, um anticorpo anti-PD-1), um fragmento dos mesmos, incluindo fragmentos Fab, ou um fragmento (scFv) dos mesmos. Em algumas modalidades o inibidor de PD-L1 ou PD-L2 é um anticorpo policlonal. Em uma modalidade preferida, o inibidor de PD-L1 ou PD-L2 é um anticorpo monoclonal. Em algumas modalidades, o inibidor de PD-L1 ou PD-L2 compete quanto à ligação com PD-L1 ou PD-L2, e/ou se liga a um epítopo no PD-L1 ou PD-L2. Em uma modalidade, o anticorpo compete quanto à ligação com PD-L1 ou PD-L2, e/ou se liga a um epítopo no PD-L1 ou PD-L2.
[001228] Em algumas modalidades, os inibidores de PD-L1 aqui providos são seletivos para PD-L1, em que os compostos ligam ou interagem com PD-L1 em concentrações substancialmente mais baixas do que eles se ligam ou interagem com outros receptores, incluindo o receptor de PD-L2. Em certas modalidades, os compostos se ligam ao receptor de PD-L1 em uma constante de ligação que está pelo menos em tomo de uma concentração 2 vezes mais alta, em tomo de uma concentração 3 vezes mais alta, em torno de uma concentração 5 vezes mais alta, em torno de uma concentração 10 vezes mais alta, em tomo de uma concentração 20 vezes mais alta, em tomo de uma concentração 30 vezes mais alta, em tomo de uma concentração 50 vezes
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434 / 497 mais alta, em tomo de uma concentração 100 vezes mais alta, em tomo de uma concentração 200 vezes mais alta, em tomo de uma concentração 300 vezes mais alta, ou em tomo de uma concentração 500 vezes mais alta do que para o receptor de PD-L2.
[001229] Em algumas modalidades, os inibidores de PD-L2 aqui providos são seletivos para PD-L2, em que os compostos se ligam ou interagem com PD-L2 em concentrações substancialmente mais baixas do que elas se ligam ou interagem com outros receptores, incluindo o receptor de PDLl. Em certas modalidades, os compostos se ligam ao receptor de PD-L2 em uma constante de ligação que está pelo menos em torno de uma concentração 2 vezes mais alta, em tomo de uma concentração 3 vezes mais alta, em tomo de uma concentração 5 vezes mais alta, em torno de uma concentração 10 vezes mais alta, em tomo de uma concentração 20 vezes mais alta, em tomo de uma concentração 30 vezes mais alta, em tomo de uma concentração 50 vezes mais alta, em tomo de uma concentração 100 vezes mais alta, em tomo de uma concentração 200 vezes mais alta, em tomo de uma concentração 300 vezes mais alta, ou em tomo de uma concentração 500 vezes mais alta do que para o receptor de PD-L1.
[001230] Sem estar ligado por qualquer teoria, acredita-se que as células de tumor expressam PD-L1, e que as células T expressam PD-1. Entretanto, a expressão de PD-L1 pelas células de tumor não é requerida para a eficácia de PD-1 ou inibidores de PD-L1 ou bloqueadores. Em uma modalidade, as células de tumor expressam PD-L1. Em uma outra modalidade, as células de tumor não expressam PD-L1. Em algumas modalidades, os métodos e composições aqui descritos incluem uma combinação de um anticorpo PD-1 e um PD-L1, tal como aqueles aqui descritos, em combinação com um TIL. A administração de uma combinação de um anticorpo de PD-1 e um PD-L1 e um TIL pode ser simultânea ou sequencial.
[001231] Em algumas modalidades, as composições e métodos descritos
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435/497 incluem um inibidor de PD-L1 e/ou PD-L2 que se liga ao PD-L1 e/ou PD-L2 humanos com um Kd de cerca de 100 pM ou mais baixo, se liga ao PD-L1 e/ou PD-L2 humanos com um Kd de cerca de 90 pM ou mais baixo, se liga ao PD-L1 e/ou PD-L2 humanos com um Kd de cerca de 80 pM ou mais baixo, se liga ao PD-L1 e/ou PD-L2 humanos com um Kd de cerca de 70 pM ou mais baixo, se liga ao PD-L1 e/ou PD-L2 humanos com um Kd de cerca de 60 pM ou mais baixo, um Kd de cerca de 50 pM ou mais baixo, se liga ao PD-L1 e/ou PD-L2 humanos com um Kd de cerca de 40 pM ou mais baixo, ou se liga ao PD-L1 e/ou PD-L2 humanos com um KD de cerca de 30 pM ou mais baixo.
[001232] Em algumas modalidades, as composições e métodos descritos incluem um inibidor de PD-L1 e/ou PD-L2 que se liga ao PD-L1 e/ou PD-L2 humanos com um kassoc de cerca de 7,5 x 105 1/M-s ou mais rápido, se liga ao PD-L1 e/ou PD-L2 humanos com um kassoc de cerca de 8 x 105 1/M-s ou mais rápido, se liga ao PD-L1 e/ ou PD-L2 humanos com um kassoc de cerca de 8,5 x 105 1/M-s ou mais rápido, se liga ao PD-L1 e/ou PD-L2 humanos com um kassoc de cerca de 9 x 105 1/M-s ou mais rápido, se liga ao PD-L1 e/ou PD-L2 humanos com um kassoc de cerca de 9,5 x 105 1/M-s e/ou mais rápido, ou se liga ao PD-L1 e/ou PD-L2 humanos com um kassoc de cerca de 1 x 106 1/M-s ou mais rápido.
[001233] Em algumas modalidades, as composições e métodos descritos incluem um inibidor de PD-L1 e/ou PD-L2 que se liga ao PD-L1 ou PD-L2 humano com um kdissoc de cerca de 2 x 10'5 1/s ou mais lento, se liga ao PD-1 humano com um kdissoc de cerca de 2,1 x 10'5 1/s ou mais lento, se liga ao PD1 humano com um kdissoc de cerca de 2,2 x 10'5 1/s ou mais lento, se liga ao PD-1 humano com um kdissoc de cerca de 2,3 x 10'5 1/s ou mais lento, se liga ao PD-1 humano com um kdissoc de cerca de 2,4 x 10'5 1/s ou mais lento, se liga ao PD-1 humano com um kdissoc de cerca de 2,5 x 10'5 1/s ou mais lento, se liga ao PD-1 humano com um kdissoc de cerca de 2,5 x 10'5 1/s ou mais
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436/497 lento, se liga ao PD-L1 ou PD-L2 humano com um kdissoc de cerca de 2,7 x 10’ 5 1/s ou mais lento, ou se liga ao PD-L1 ou PD-L2 humano com um kdissoc de cerca de 3 x 10'5 1/s ou mais lento.
[001234] Em algumas modalidades, as composições e métodos descritos incluem um inibidor de PD-L1 e/ou PD-L2 que bloqueie ou iniba a ligação de PD-L1 humano ou PD-L2 humano ao PD-1 humano com um IC50 de cerca de 10 nM ou mais baixo; bloqueie ou iniba a ligação de PD-L1 humano ou PDL2 humano ao PD-1 humano com um IC50 de cerca de 9 nM ou mais baixo; bloqueie ou iniba a ligação de PD-L1 humano ou PD-L2 humano ao PD-1 humano com um IC50 de cerca de 8 nM ou mais baixo; bloqueie ou iniba a ligação de PD-L1 humano ou PD-L2 humano ao PD-1 humano com um IC50 de cerca de 7 nM ou mais baixo; bloqueie ou iniba a ligação de PD-L1 humano ou PD-L2 humano ao PD-1 humano com um IC50 de cerca de 6 nM ou mais baixo; bloqueie ou iniba a ligação de PD-L1 humano ou PD-L2 humano ao PD-1 humano com um IC50 de cerca de 5 nM ou mais baixo; bloqueie ou iniba a ligação de PD-L1 humano ou PD-L2 humano ao PD-1 humano com um IC50 de cerca de 4 nM ou mais baixo; bloqueie ou iniba a ligação de PD-L1 humano ou PD-L2 humano ao PD-1 humano com um IC50 de cerca de 3 nM ou mais baixo; bloqueie ou iniba a ligação de PD-L1 humano ou PD-L2 humano ao PD-1 humano com um IC50 de cerca de 2 nM ou mais baixo; ou bloqueie PD-1 humano, ou bloqueie a ligação de PD-L1 humano ou PD-L2 humano ao PD-1 humano com um IC50 de cerca de 1 nM ou mais baixo.
[001235] Em uma modalidade, o inibidor de PD-L1 é durvalumab, também conhecido como MEDI4736 (que está comercialmente disponível da Medimmune, LLC, Gaithersburg, Mariland, uma subsidiária da AstraZeneca plc.), ou fragmentos de ligação a antígeno, conjugados, ou variantes dos mesmos. Em uma modalidade, o inibidor de PD-L1 é um anticorpo divulgado na Patente U.S. No. 8.779.108 ou Publicação do Pedido de Patente U.S. No.
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2013/0034559, as divulgações das quais são aqui incorporadas por referência. A eficácia clínica de durvalumab foi descrita em Page, et al., Ann. Rev. Med., 2014, 65, 185-202; Brahmer, et al., J. Clin. Oncol. 2014, 32, 5s (suplemento, resumo 8021); e McDermott, et al., Cancer Treatment Rev., 2014, 40, 105664. A preparação e propriedades de durvalumab são descritas na Patente U.S. No. 8.779.108, a divulgação da qual é aqui incorporada por referência. As sequências de aminoácido de durvalumab são apresentadas na Tabela 50. O anticorpo monoclonal durvalumab inclui ligações de dissulfeto em 22 a 96, 22” a 96”, 23’ a 89’, 23”‘ a 89”‘, 135’ a 195’, 135”‘ a 195”‘, 148 a 204, 148” a 204”, 215’ a 224, 215”‘ a 224”, 230 a 230”, 233 a 233”, 265 a 325, 265” a 325”, 371 a 429, e 371” a 429’; e sítios de glicosilação N em Asn-301 e Asn301”.
[001236] Em uma modalidade, um inibidor de PD-L1 compreende uma cadeia pesada dada pela SEQ ID NO: 483 e uma cadeia leve dada pela SEQ ID NO: 484. Em uma modalidade, um inibidor de PD-L1 compreende cadeias pesadas e leves tendo as sequências mostradas na SEQ ID NO: 483 e SEQ ID NO: 484, respectivamente, ou fragmentos de ligação a antígeno, fragmentos Fab, fragmentos variáveis de cadeia única (scFv), variantes, ou conjugados dos mesmos. Em uma modalidade, um inibidor de PD-L1 compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 99% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 483 e SEQ ID NO: 484, respectivamente. Em uma modalidade, um inibidor de PD-L1 compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 98% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 483 e SEQ ID NO: 484, respectivamente. Em uma modalidade, um inibidor de PD-L1 compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 97% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 483 e SEQ ID NO: 484, respectivamente. Em uma modalidade, um inibidor de PD-L1 compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 96% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 483 e SEQ ID NO: 484,
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438 / 497 respectivamente. Em uma modalidade, um inibidor de PD-L1 compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 95% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 483 e SEQ ID NO: 484, respectivamente.
[001237] Em uma modalidade, o inibidor de PD-L1 compreende as CDRs ou regiões variáveis (VRs) de cadeia pesada e leve de durvalumab. Em uma modalidade, a região variável da cadeia pesada (VH) do inibidor de PDL1 compreende a sequência mostrada na SEQ ID NO: 485, e a região variável da cadeia leve (VL) do inibidor de PD-L1 compreende a sequência mostrada na SEQ ID NO: 486, e substituições de aminoácido conservativas das mesmas. Em uma modalidade, um inibidor de PD-L1 compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 99% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 485 e SEQ ID NO: 486, respectivamente. Em uma modalidade, um inibidor de PD-L1 compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 98% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 485 e SEQ ID NO: 486, respectivamente. Em uma modalidade, um inibidor de PD-L1 compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 97% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 485 e SEQ ID NO: 486, respectivamente. Em uma modalidade, um inibidor de PD-L1 compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 96% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 485 e SEQ ID NO: 486, respectivamente. Em uma modalidade, um inibidor de PD-L1 compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 95% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 485 e SEQ ID NO: 486, respectivamente.
[001238] Em uma modalidade, um inibidor de PD-L1 compreende os domínios CDR1, CDR2 e CDR3 da cadeia pesada tendo as sequências apresentadas na SEQ ID NO: 487, SEQ ID NO: 488, e SEQ ID NO: 489, respectivamente, e substituições de aminoácido conservativas das mesmas, e os domínios CDR1, CDR2 e CDR3 da cadeia leve tendo as sequências
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439 / 497 apresentadas na SEQ ID NO: 490, SEQ ID NO: 491, e SEQ ID NO: 492, respectivamente, e substituições de aminoácido conservativas das mesmas. Em uma modalidade, o anticorpo compete quanto à ligação com, e/ou se liga ao mesmo epítopo no PD-L1 como qualquer um dos anticorpos anteriormente mencionados.
[001239] Em uma modalidade, o inibidor de PD-L1 é um anticorpo monoclonal biossimilar anti-PD-Ll aprovado pelas autoridades reguladoras de fármaco com referência ao durvalumab. Em uma modalidade, o biossimilar compreende um anticorpo anti-PD-Ll compreendendo uma sequência de aminoácidos que tenha pelo menos 97% de identidade de sequência, por exemplo, 97%, 98%, 99% ou 100% de identidade de sequência, com a sequência de aminoácidos do produto medicinal de referência ou produto biológico de referência e que compreende uma ou mais modificações póstraducionais quando comparado com o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é durvalumab. Em algumas modalidades, a uma ou mais modificações pós-traducionais são selecionada de uma ou mais de: glicosilação, oxidação, desamidação, e truncagem. Em algumas modalidades, o biossimilar é um anticorpo anti-PD-Ll autorizado ou submetido para autorização, em que o anticorpo anti-PD-Ll é provido em uma formulação que difere das formulações do produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é durvalumab. O anticorpo antiPD-Ll pode ser autorizado por uma autoridade reguladora de fármaco tal como o FDA dos Estados Unidos e/ou o EMA da União Européia. Em algumas modalidades, o biossimilar é provido como uma composição que compreende adicionalmente um ou mais excipientes, em que o um ou mais excipientes são os mesmos ou diferentes dos excipientes compreendidos no produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o
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440 / 497 produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é durvalumab. Em algumas modalidades, o biossimilar é provido como uma composição que compreende adicionalmente um ou mais excipientes, em que o um ou mais excipientes são os mesmos ou diferentes dos excipientes compreendidos no produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é durvalumab.
TABELA 50. As sequências de aminoácidos para inibidores de PD-L1 relacionados com o durvalumab.
| Identificador | Sequência (Símbolos de aminoácido de uma letra) |
| SEQ ID NO: | EVQLVESGGG LVQPGGSLRL SCAASGFTFS RYWMSWVRQA PGKGLEWVAN |
| 483 | IKQDGSEKYY 60 |
| cadeia pesada | VDSVKGRFTI SRDNAKNSLY LQMNSLRAED TAVYYCAREG GWFGELAFDY |
| de durvalumab | WGQGTLVTVS 120 SASTKGPSVF PLAPSSKSTS GGTAALGCLV KDYFPEPVTV SWNSGALTSG VHTFPAVLQS 180 SGLYSLSSVV TVPSSSLGTQ TYICNVNHKP SNTKVDKRVE PKSCDKTHTC PPCPAPEFEG 240 GPSVFLFPPK PKDTLMISRT PEVTCVVVDV SHEDPEVKFN WYVDGVEVHN AKTKPREEQY 300 NSTYRVVSVL TVLHQDWLNG KEYKCKVSNK ALPASIEKTI SKAKGQPREP QVYTLPPSRE 360 EMTKNQVSLT CLVKGFYPSD IAVEWESNGQ PENNYKTTPP VLDSDGSFFL YSKLTVDKSR 420 WQQGNVFSCS VMHEALHNHY TQKSLSLSPG K 451 |
| SEQ ID NO: | EVQLVESGGG LVQPGGSLRL SCAASGFTFS RYWMSWVRQA PGKGLEWVAN |
| 484 | EIVLTQSPGT 60 |
| cadeia leve de | LSLSPGERAT LSCRASQRVS SSILAWYQQK PGQAPRLLIY DASSRATGIP |
| durvalumab | DRFSGSGSGT 120 DFTLTISRLE PEDFAVYYCQ QYGSLPWTFG QGTKVEIKRT VAAPSVFIFP PSDEQLKSGT 180 ASVVCLLNNF YPREAKVQWK VDNALQSGNS QESVTEQDSK DSTYSLSSTL TLSKADYEKH 240 KVYACEVTHQ GLSSPVTKSF NRGEC 265 |
| SEQ ID NO: | EVQLVESGGG LVQPGGSLRL SCAASGFTFS RYWMSWVRQA PGKGLEWVAN |
| 485 | IKQDGSEKYY 60 |
| cadeia pesada | VDSVKGRFTI SRDNAKNSLY LQMNSLRAED TAVYYCAREG GWFGELAFDY |
| variável de | WGQGTLVTVS 120 |
| durvalumab | S 121 |
| SEQ ID NO: | EIVLTQSPGT LSLSPGERAT LSCRASQRVS SSILAWYQQK PGQAPRLLIY |
| 486 | DASSRATGIP 60 |
| cadeia leve variável de durvalumab | DRFSGSGSGT DFTLTISRLE PEDFAVYYCQ QYGSLPWTFG QGTKVEIK 108 |
| SEQ ID NO: 487 CDR1 da cadeia pesada de durvalumab | RYWMS 5 |
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| SEQ ID NO: 488 CDR2 da cadeia pesada de durvalumab | NIKQDGSEKY YVDSVKG 17 |
| SEQ ID NO: 489 CDR3 da cadeia pesada de durvalumab | EGGWFGELAF DY 12 |
| SEQ ID NO: 490 CDR1 da cadeia leve de durvalumab | RASQRVSSSY LA 12 |
| SEQ ID NO: 491 CDR2 da cadeia leve de durvalumab | DASSRAT 7 |
| SEQ ID NO: 492 CDR3 da cadeia leve de durvalumab | QQYGSLPWT 9 |
[001240] Em uma modalidade, o inibidor de PD-L1 é avelumab, também conhecido como MSB0010718C (comercialmente disponível da Merck KGaA/EMD Serono), ou fragmentos de ligação a antígeno, conjugados, ou variantes dos mesmos. A preparação e propriedades de avelumab estão descritas na Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2014/0341917 Al, a divulgação da qual é especificamente aqui incorporada por referência. As sequências de aminoácido de avelumab são apresentadas na Tabela 51. Avelumab tem ligações de dissulfeto intracadeia pesada (C23 a C104) em 22 a 96, 147 a 203, 264 a 324, 370 a 428, 22” a 96”, 147” a 203”, 264” a 324”, e 370” a 428”; ligações de dissulfeto intracadeia leve (C23 a C104) em 22’ a 90’, 138’ a 197’, 22”‘ a 90”‘, e 138”‘ a 197”‘; ligações de dissulfeto intracadeia pesada-leve (h 5-CL 126) em 223 a 215’ e 223” a 215”‘; ligações de dissulfeto intracadeia pesada-pesada (h 11, h 14) em 229 a 229” e 232 a 232”; sítios de glicosilação N (H CH2 N84,4) a 300, 300”; glicanos tipo CHO biantenário complexo fucosilado; e H CHS K2 Lisina de terminal C cortado em 450 e 450’.
[001241] Em uma modalidade, um inibidor de PD-L1 compreende uma
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442 / 497 cadeia pesada dada pela SEQ ID NO: 493 e uma cadeia leve dada pela SEQ ID NO: 494. Em uma modalidade, um inibidor de PD-L1 compreende cadeias pesadas e leves tendo as sequências mostradas na SEQ ID NO: 493 e SEQ ID NO: 494, respectivamente, ou fragmentos de ligação a antígeno, fragmentos Fab, fragmentos variáveis de cadeia única (scFv), variantes, ou conjugados dos mesmos. Em uma modalidade, um inibidor de PD-L1 compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 99% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 493 e SEQ ID NO: 494, respectivamente. Em uma modalidade, um inibidor de PD-L1 compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 98% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 493 e SEQ ID NO: 494, respectivamente. Em uma modalidade, um inibidor de PD-L1 compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 97% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 493 e SEQ ID NO: 494, respectivamente. Em uma modalidade, um inibidor de PD-L1 compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 96% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 493 e SEQ ID NO: 494, respectivamente. Em uma modalidade, um inibidor de PD-L1 compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 95% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 493 e SEQ ID NO: 494, respectivamente.
[001242] Em uma modalidade, o inibidor de PD-L1 compreende as CDRs ou regiões variáveis (VRs) de cadeia pesada e leve de avelumab. Em uma modalidade, a região variável da cadeia pesada (VH) do inibidor de PDL1 compreende a sequência mostrada na SEQ ID NO: 495, e a região variável da cadeia leve (VL) do inibidor de PD-L1 compreende a sequência mostrada na SEQ ID NO: 496, e substituições de aminoácido conservativas das mesmas. Em uma modalidade, um inibidor de PD-L1 compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 99% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 495 e SEQ ID NO: 496, respectivamente. Em uma
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443 / 497 modalidade, um inibidor de PD-LI compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 98% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 496 e SEQ ID NO: 496, respectivamente. Em uma modalidade, um inibidor de PD-LI compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 97% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 495 e SEQ ID NO: 496, respectivamente. Em uma modalidade, um inibidor de PD-LI compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 96% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 495 e SEQ ID NO: 496, respectivamente. Em uma modalidade, um inibidor de PD-LI compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 95% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 495 e SEQ ID NO: 496, respectivamente.
[001243] Em uma modalidade, um inibidor de PD-LI compreende os domínios CDR1, CDR2 e CDR3 da cadeia pesada tendo as sequências apresentadas na SEQ ID NO: 497, SEQ ID NO: 498, e SEQ ID NO: 499, respectivamente, e substituições de aminoácido conservativas das mesmas, e os domínios CDR1, CDR2 e CDR3 da cadeia leve tendo as sequências apresentadas na SEQ ID NO: 500, SEQ ID NO: 501, e SEQ ID NO: 502, respectivamente, e substituições de aminoácido conservativas das mesmas. Em uma modalidade, o anticorpo compete quanto à ligação com, e/ou se liga ao mesmo epítopo no PD-LI como qualquer um dos anticorpos anteriormente mencionados.
[001244] Em uma modalidade, o inibidor de PD-LI é um anticorpo monoclonal biossimilar anti-PD-Ll aprovado pelas autoridades reguladoras de fármaco com referência ao avelumab. Em uma modalidade, o biossimilar compreende um anticorpo anti-PD-Ll compreendendo uma sequência de aminoácidos que tenha pelo menos 97% de identidade de sequência, por exemplo, 97%, 98%, 99% ou 100% de identidade de sequência, com a sequência de aminoácidos do produto medicinal de referência ou produto biológico de referência e que compreende uma ou mais modificações pós
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444 / 497 traducionais quando comparado com o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é avelumab. Em algumas modalidades, a uma ou mais modificações pós-traducionais são selecionadas de uma ou mais de: glicosilação, oxidação, desamidação, e truncagem. Em algumas modalidades, o biossimilar é um anticorpo anti-PD-Ll autorizado ou submetido para autorização, em que o anticorpo anti-PD-Ll é provido em uma formulação que difere das formulações do produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é avelumab. O anticorpo anti-PD-Ll pode ser autorizado por uma autoridade reguladora de fármaco tal como o FDA dos Estados Unidos e/ou o EMA da União Européia. Em algumas modalidades, o biossimilar é provido como uma composição que compreende adicionalmente um ou mais excipientes, em que o um ou mais excipientes são os mesmos ou diferentes dos excipientes compreendidos no produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é avelumab. Em algumas modalidades, o biossimilar é provido como uma composição que compreende adicionalmente um ou mais excipientes, em que o um ou mais excipientes são os mesmos ou diferentes dos excipientes compreendidos no produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é avelumab.
TABELA 51. As sequências de aminoácidos para os inibidores de PD-L1 relacionados com o avelumab.__________________________________________ | Identificador | Sequência (Símbolos de aminoácido de uma letra) |
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| SEQ ID NO: 493 cadeia pesada de avelumab | EVQLLESGGG LVQPGGSLRL SCAASGFTFS SYIMMWVRQA PGKGLEWVSS IYPSGGITFY 60 ADTVKGRFTI SRDNSKNTLY LQMNSLRAED TAVYYCARIK LGTVTTVDYW GQGTLVTVSS 120 ASTKGPSVFP LAPSSKSTSG GTAALGCLVK DYFPEPVTVS WNSGALTSGV HTFPAVLQSS 180 GLYSLSSVVT VPSSSLGTQT YICNVNHKPS NTKVDKKVEP KSCDKTHTCP PCPAPELLGG 240 PSVFLFPPKP KDTLMISRTP EVTCVVVDVS HEDPEVKFNW YVDGVEVHNA KTKPREEQYN 300 STYRVVSVLT VLHQDWLNGK EYKCKVSNKA LPAPIEKTIS KAKGQPREPQ VYTLPPSRDE 360 LTKNQVSLTC LVKGFYPSDI AVEWESNGQP ENNYKTTPPV LDSDGSFFLY SKLTVDKSRW 420 QQGNVFSCSV MHEALHNHYT QKSLSLSPGK 450 |
| SEQ ID NO: 494 cadeia leve de avelumab | QSALTQPASV SGSPGQSITI SCTGTSSDVG GYNYVSWYQQ HPGKAPKLMI YDVSNRPSGV 60 SNRFSGSKSG NTASLTISGL QAEDEADYYC SSYTSSSTRV FGTGTKVTVL GQPKANPTVT 120 LFPPSSEELQ ANKATLVCLI SDFYPGAVTV AWKADGSPVK AGVETTKPSK QSNNKYAASS 180 ILSLTPEQWK SHORASYSCQVT HEGSTVEKTV APTECS 216 |
| SEQ ID NO: 495 cadeia pesada variável de avelumab | EVQLLESGGG LVQPGGSLRL SCAASGFTFS SYIMMWVRQA PGKGLEWVSS IYPSGGITFY 60 ADTVKGRFTI SRDNSKNTLY LQMNSLRAED TAVYYCARIK LGTVTTVDYW GQGTLVTVSS 120 |
| SEQ ID NO: 496 cadeia leve variável de avelumab | QSALTQPASV SGSPGQSITI SCTGTSSDVG GYNYVSWYQQ HPGKAPKLMI YDVSNRPSGV 60 SNRFSGSKSG NTASLTISGL QAEDEADYYC SSYTSSSTRV FGTGTKVTVL 110 |
| SEQ ID NO: 497 CDR1 da cadeia pesada de avelumab | SYIMM 5 |
| SEQ ID NO: 498 CDR2 da cadeia pesada de avelumab | SIYPSGGITF YADTVKG 17 |
| SEQ ID NO: 499 CDR3 da cadeia pesada de avelumab | IKLGTVTTVD Y 11 |
| SEQ ID NO: 500 CDR1 da cadeia leve de avelumab | TGTSSDVGGY NYVS 14 |
| SEQ ID NO: 501 CDR2 da cadeia leve de avelumab | DVSNRPS 7 |
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| SEQ ID NO: 502 CDR3 da cadeia leve de avelumab | SSYTSSSTRV 10 |
[001245] Em uma modalidade, o inibidor de PD-L1 é atezolizumab, também conhecido como MPDL3280A ou RG7446 (comercialmente disponível como TECENTRIQ da Genentech, Inc., uma subsidiária da Roche Holding AG, Basel, Suíça), ou fragmentos de ligação a antígeno, conjugados, ou variantes dos mesmos. Em uma modalidade, o inibidor de PD-L1 é um anticorpo divulgado na Patente U.S. No. 8.217.149, a divulgação da qual é especificamente aqui incorporada por referência. Em uma modalidade, o inibidor de PD-L1 é um anticorpo divulgado nas Publicações de Pedido de Patente U.S. Nos. 2010/0203056 Al, 2013/0045200 Al, 2013/0045201 Al, 2013/0045202 Al, ou 2014/0065135 Al, as divulgações das quais são especificamente aqui incorporadas por referência. A preparação e propriedades de atezolizumab são descritas na Patente U.S. No. 8,217,149, a divulgação da qual é aqui incorporada por referência. As sequências de aminoácido de atezolizumab são apresentadas na Tabela 52. Atezolizumab tem ligações de dissulfeto intracadeia pesada (C23 a C104) em 22 a 96, 145 a 201, 262 a 322, 368 a 426, 22” a 96”, 145” a 201”, 262” a 322”, e 368” a 426”; ligações de dissulfeto intracadeia leve (C23 a C104) em 23’ a 88’, 134’ a 194’, 23’” a 88’”, e 134’” a 194’”; ligações de dissulfeto intracadeia pesadaleve (h 5-CL 126) em 221 a 214’ e 221” a 214”‘; ligações de dissulfeto intracadeia pesada-pesada (h 11, h 14) em 227 a 227” e 230 a 230”; e sítios de glicosilação N (H CH2 N84,4>A) em 298 e 298’.
[001246] Em uma modalidade, um inibidor de PD-L1 compreende uma cadeia pesada dada pela SEQ ID NO: 503 e uma cadeia leve dada pela SEQ ID NO: 504. Em uma modalidade, um inibidor de PD-L1 compreende cadeias pesadas e leves tendo as sequências mostradas na SEQ ID NO: 503 e SEQ ID NO: 504, respectivamente, ou fragmentos de ligação a antígeno, fragmentos Fab, fragmentos variáveis de cadeia única (scFv), variantes, ou conjugados
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447 / 497 dos mesmos. Em uma modalidade, um inibidor de PD-LI compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 99% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 503 e SEQ ID NO: 504, respectivamente. Em uma modalidade, um inibidor de PD-LI compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 98% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 503 e SEQ ID NO: 504, respectivamente. Em uma modalidade, um inibidor de PD-LI compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 97% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 503 e SEQ ID NO: 504, respectivamente. Em uma modalidade, um inibidor de PD-LI compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 96% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 503 e SEQ ID NO: 504, respectivamente. Em uma modalidade, um inibidor de PD-LI compreende cadeias pesadas e leves que são cada uma pelo menos 95% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 503 e SEQ ID NO: 504, respectivamente.
[001247] Em uma modalidade, o inibidor de PD-LI compreende as CDRs ou regiões variáveis (VRs) de cadeia pesada e leve de atezolizumab. Em uma modalidade, a região variável da cadeia pesada (VH) do inibidor de PD-LI compreende a sequência mostrada na SEQ ID NO: 505, e a região variável da cadeia leve (VL) do inibidor de PD-LI compreende a sequência mostrada na SEQ ID NO: 506, e substituições de aminoácido conservativas das mesmas. Em uma modalidade, um inibidor de PD-LI compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 99% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 505 e SEQ ID NO: 506, respectivamente. Em uma modalidade, um inibidor de PD-LI compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 98% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 505 e SEQ ID NO: 506, respectivamente. Em uma modalidade, um inibidor de PD-LI compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 97% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 505 e SEQ ID NO: 506,
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448 / 497 respectivamente. Em uma modalidade, um inibidor de PD-L1 compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 96% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 505 e SEQ ID NO: 506, respectivamente. Em uma modalidade, um inibidor de PD-L1 compreende as regiões VH e VL que são cada uma pelo menos 95% idênticas às sequências mostradas na SEQ ID NO: 505 e SEQ ID NO: 506, respectivamente.
[001248] Em uma modalidade, um inibidor de PD-L1 compreende os domínios CDR1, CDR2 e CDR3 da cadeia pesada tendo as sequências apresentadas na SEQ ID NO: 507, SEQ ID NO: 508, e SEQ ID NO: 509, respectivamente, e substituições de aminoácido conservativas das mesmas, e os domínios CDR1, CDR2 e CDR3 da cadeia leve tendo as sequências apresentadas na SEQ ID NO: 510, SEQ ID NO: 511, e SEQ ID NO: 512, respectivamente, e substituições de aminoácido conservativas das mesmas. Em uma modalidade, o anticorpo compete quanto à ligação com, e/ou se liga ao mesmo epitopo no PD-L1 como qualquer um dos anticorpos anteriormente mencionados.
[001249] Em uma modalidade, o anticorpo anti-PD-Ll é um anticorpo monoclonal biossimilar anti-PD-Ll aprovado pelas autoridades reguladoras de fármaco com referência ao atezolizumab. Em uma modalidade, o biossimilar compreende um anticorpo anti-PD-Ll compreendendo uma sequência de aminoácidos que tenha pelo menos 97% de identidade de sequência, por exemplo, 97%, 98%, 99% ou 100% de identidade de sequência, com a sequência de aminoácidos do produto medicinal de referência ou produto biológico de referência e que compreende uma ou mais modificações pós-traducionais quando comparado com o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é atezolizumab. Em algumas modalidades, a uma ou mais modificações pós-traducionais são selecionada de uma ou mais de: glicosilação, oxidação, desamidação, e truncagem. Em
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449 / 497 algumas modalidades, o biossimilar é um anticorpo anti-PD-Ll autorizado ou submetido para autorização, em que o anticorpo anti-PD-Ll é provido em uma formulação que difere das formulações do produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é atezolizumab. O anticorpo anti-PD-Ll pode ser autorizado por uma autoridade reguladora de fármaco tal como o FDA dos Estados Unidos e/ou o EMA da União Européia. Em algumas modalidades, o biossimilar é provido como uma composição que compreende adicionalmente um ou mais excipientes, em que o um ou mais excipientes são os mesmos ou diferentes dos excipientes compreendidos no produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é atezolizumab. Em algumas modalidades, o biossimilar é provido como uma composição que compreende adicionalmente um ou mais excipientes, em que o um ou mais excipientes são os mesmos ou diferentes dos excipientes compreendidos no produto medicinal de referência ou produto biológico de referência, em que o produto medicinal de referência ou produto biológico de referência é atezolizumab.
TABELA 52. As sequências de aminoácidos para os inibidores de PD-L1 relacionados com o atezolizumab.
| Identificador | Sequência (Símbolos de aminoácido de uma letra) |
| SEQ ID NO: 503 cadeia pesada de atezolizumab | EVQLVESGGG LVQPGGSLRL SCAASGFTFS DSWIHWVRQA PGKGLEWVAW ISPYGGSTYY 60 ADSVKGRFTI SADTSKNTAY LQMNSLRAED TAVYYCARRH WPGGFDYWGQ GTLVTVSSAS 120 TKGPSVFPLA PSSKSTSGGT AALGCLVKDY FPEPVTVSWN SGALTSGVHT FPAVLQSSGL 180 YSLSSVVTVP SSSLGTQTYI CNVNHKPSNT KVDKKVEPKS CDKTHTCPPC PAPELLGGPS 240 VFLFPPKPKD TLMISRTPEV TCVVVDVSHE DPEVKFNWYV DGVEVHNAKT KPREEQYAST 300 YRVVSVLTVL HQDWLNGKEY KCKVSNKALP APIEKTISKA KGQPREPQVY TLPPSREEMT 360 KNQVSLTCLV KGFYPSDIAV EWESNGQPEN NYKTTPPVLD SDGSFFLYSK LTVDKSRWQQ 420 GNVFSCSVMH EALHNHYTQK SLSLSPGK 448 |
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| SEQ ID NO: 504 cadeia leve de atezolizumab | DIQMTQSPSS LSASVGDRVT ITCRASQDVS TAVAWYQQKP GKAPKLLIYS ASFLYSGVPS 60 RFSGSGSGTD FTLTISSLQP EDFATYYCQQ ILYHPATFGQ GTKVEIKRTV AAPSVFIFPP 120 SDEQLKSGTA SVVCLLNNFY PREAKVQWKV DNALQSGNSQ ESVTEQDSKD STYSLSSTLT 180 LSKADYEKHK VYACEVTHQG LSSPVTKSFN RGEC 214 |
| SEQ ID NO: 505 cadeia pesada variável de atezolizumab | EVQLVESGGG LVQPGGSLRL SCAASGFTFS DSWIHWVRQA PGKGLEWVAW ISPYGGSTYY 60 ADSVKGRFTI SADTSKNTAY LQMNSLRAED TAVYYCARRH WPGGFDYWGQ GTLVTVSA 118 |
| SEQ ID NO: 506 cadeia leve variável de atezolizumab | DIQMTQSPSS LSASVGDRVT ITCRASQDVS TAVAWYQQKP GKAPKLLIYS ASFLYSGVPS 60 RFSGSGSGTD FTLTISSLQP EDFATYYCQQ ILYHPATFGQ GTKVEIKR 108 |
| SEQ ID NO: 507 CDR1 da cadeia pesada de atezolizumab | GFTFSDSWIH 10 |
| SEQ ID NO: 508 CDR2 da cadeia pesada de atezolizumab | AWISPYGGST YYADSVKG 18 |
| SEQ ID NO: 509 CDR3 da cadeia pesada de atezolizumab | RHWPGGFDY 9 |
| SEQ ID NO: 510 CDR1 da cadeia leve de atezolizumab | RASQDVSTAV UM 11 |
| SEQ ID NO: 511 CDR2 da cadeia leve de atezolizumab | SASFLYS 7 |
| SEQ ID NO: 512 CDR3 da cadeia leve de atezolizumab | QQILYHPAT 9 |
[001250] Em uma modalidade, os inibidores de PD-L1 incluem aqueles anticorpos descritos na Publicação do Pedido de Patente U.S. No. US 2014/0341917 Al, a divulgação da qual é aqui incorporada por referência. Em uma outra modalidade, anticorpos que competem com qualquer um desse anticorpos quanto à ligação ao PD-L1 também são incluídos. Em uma modalidade, o anticorpo anti-PD-Ll é MDX-1105, também conhecido como BMS-935559, que é divulgado na Patente U.S. No. US 7.943.743, as
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451 /497 divulgações das quais são aqui incorporadas por referência. Em uma modalidade, o anticorpo anti-PD-Ll é selecionado dos anticorpos anti-PD-Ll divulgados na Patente U.S. No. US 7.943.743, que são aqui incorporadas por referência.
[001251] Em uma modalidade, o inibidor de PD-LI é um anticorpo monoclonal comercialmente disponível, tal como INVIVOMAB anti-m-PDL1 clone 10F.9G2 (Catálogo # BE0101, Bio X Cell, Inc., West Lebanon, NH, USA). Em uma modalidade, o anticorpo anti-PD-Ll é um anticorpo monoclonal comercialmente disponível, tal como AFFYMETRIX EBIOSCIENCE (MIH1). Vários anticorpos anti-PD-Ll comercialmente disponíveis são conhecidos por uma pessoa de habilidade comum na técnica.
[001252] Em uma modalidade, o inibidor de PD-L2 é um anticorpo monoclonal comercialmente disponível, tal como BIOLEGEND 24F.10C12 Camundongo IgG2a, isotipo κ (catálogo # 329602 Biolegend, Inc., San Diego, CA), SIGMA anticorpo anti-PD-L2 (catálogo # SAB3500395, SigmaAldrich Co., St. Louis, MO), ou outros anticorpos anti-PD-L2 comercialmente disponíveis conhecidos por uma pessoa de habilidade na técnica.
[001253] Embora as modalidades preferidas da invenção sejam mostradas e aqui descritas, tais modalidades são providas apenas por intermédio de exemplo e não são intencionadas a limitar de outro modo o escopo da invenção. Várias alternativas para as modalidades descritas da invenção podem ser utilizadas na prática da invenção.
EXEMPLOS [001254] As modalidades aqui abrangidas são agora descritas com referência aos seguintes exemplos. Estes exemplos são providos apenas para o propósito de ilustração e a divulgação aqui abrangida não deve ser de nenhum modo interpretado como sendo limitada a estes exemplos, mas ao invés deve ser interpretada abranger quaisquer e todas as variações que se tomem evidentes como um resultado das divulgações aqui providas.
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Exemplo 1 - Métodos de expandir TILs e Tratar Câncer com TILs Expandida [001255] TILs podem ser expandidos usando métodos conhecidos na técnica e qualquer método aqui descrito. Por exemplo, métodos para expandir TILs são representados na FIG. 1. Um agonista de TNFRSF pode ser adicionado ao método de FIG. 1 como aqui descrito. O agonista de TNFRSF pode ser, por exemplo, um 4-1 BB ou um agonista de 0X40, e pode ser adicionado durante o pré-REP ou a fase REPs, ou durante ambas as fases, em concentrações suficientes para realçar o crescimento de TIL. A expansão de TILs pode ser ainda combinada com qualquer método de tratar câncer em combinação com um agonista de TNFRSF em um paciente aqui descrito. Os métodos para expandir TILs e tratar um paciente com câncer com TILs expandidos são mostrados na FIG. 2.
Exemplo 2 - Métodos de expandir TILs Usando Agonistas de 4-1BB [001256] Os hibridomas de 4-lBB-Fc foram produzidos e triados quanto à sua capacidade para ativar o caminho da sinalização de 4-1 BB pela ligação cruzada com o anticorpo secundário. Os sobrenadantes de hibridoma foram avaliados quanto à sua capacidade para ativar a sinalização de 4-1BB nas células Jurkat expressando NF-kB usando um repórter de proteína fluorescente verde (GFP) em uma maneira dependente da dose. Os sobrenadantes foram incubados com células Jurkat durante 20 minutos na temperatura ambiente seguida pela ligação cruzada com anticorpo secundário anti-camundongo de cabra (1 mg/mL) durante a noite a 37°C. Os resultados são mostrados na FIG. 3 até a FIG. 12 para dez clones identificados que se ligaram a 4-1 BB nas células Jurkat.
[001257] As células foram analisadas no Intellicyte para a ativação do Caminho de NKkB revelado pela expressão do repórter de GFP. Os resultados indicam que os anticorpos ativam o caminho de 4-1 BB nas células Jurkat sem ligação cruzada com o anticorpo secundário.
Exemplo 3 - Métodos de Expandir TILs de Fragmentos Sólidos de Tumor
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Cultivado Ex Vivo (Histologias Múltiplas) Usando Utomilumab ou Urelumab e 11D4/18D8 e Efeito da Ativação com Anticorpos para 4-1BB e/ou 0X40 na Expansão e Função de TILs [001258] TILs são células T primariamente experienciadas em antígeno (não ingênuas) encontradas em graus variáveis em todos os tumores adultos associados com microambientes imunossupressivos em que o acúmulo local de moléculas de padrão molecular associadas ao dano (DAMPs) assim como receptores do ponto de checagem induzido incluindo CTLA-4 e PD-1 frequentemente foram engajados. Chacon, et al., Clin. Cancer Res. 2015, 21, 611 a 21; Joseph, et al., Clin. Cancer Res. 2011, 17, 4882 a 91. Estes marcadores, assim como TIM3, LAG3, e TIGIT, definem um fenótipo exaurido. Como tal, os receptores coestimulatórios expressos em TIL modificam o destino e a expansão de TIL. A ativação de 4-1 BB e ou 0X40 nos TILs possibilita a expansão de TILs de fragmentos de tumor além daqueles obteníveis apenas com IL-2. A ativação de outros receptores coestimulatórios e/ou antagonismo de receptores do ponto de checagem realçará ainda mais a função de TIL (sobrevivência, evasão da imunossupressão do tumor), emigração de fragmentos de tumor, e promoverá a expansão in vitro. Além disso, estes estudos in vitro podem predizer a responsividade para a aplicação in vivo destes anticorpos sozinhos ou em combinação com a transferência adotiva de TILs. Os mAbs específicos imunomoduladores para estas duas moléculas coestimuladoras de ativação (por exemplo, 0X40, 11D4 ou 18D8, e 4-1BB, utomilumab ou urelumab) podem ser testados quanto a tal capacidade. E levantada a hipótese de que a ativação dos receptores coestimuladores, 4-1 BB e 0X40, dentro dos fragmentos de tumor realça a emigração de TIL de fragmentos de tumor, proliferação, promoção de um fenótipo de memória e citotoxicidade de células T emergentes. A meta principal deste estudo é determinar se mAbs específicos para (a) 4-1 BB e 0X40 em combinação ou (b) anti-4-ΙΒΒ e (c)
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454 / 497 anti-OX40 sozinhos aumentam o desdobramento dos fenótipos citotóxico e de memória de TIL de fragmentos de tumor.
[001259] 15 mg de cada mAb purificado específico para (a) 0X40 e (b)
4-1BB é usado. Tumores de várias histologias podem ser obtidos de fontes comerciais. No total, 20 tumores de paciente independente serão obtidos. Os tumores serão enviados em HBSS estéril ou um outro meio apropriado. Os tumores serão manuseados apenas em uma cabina de fluxo laminar para manter as condições estéreis. Quando possível (se tumor > 0,5 cm no diâmetro), uma porção do tumor será processado quanto ao FFPE e/ou criopreservado para IHC e/ou isolação de DNA/RNA a jusante. A análise de biomarcadores por intermédio de IHC incluirá CD3, CD 11c, e PD1 e PD-LL Sempre que possível, as amostras de sangue autólogas (até 20 mL) serão adquiridas e PBMCs serão criopreservadas. Se sequenciamento de exoma inteiro for realizado nos tumores, as sequências de exoma de PBMCs autólogas depositadas serão definidas como normal (isto é, nenhuma mutação). Altemativamente, as suspensões de célula única de tumor podem ser utilizadas. Os tumores serão lavados depois de recebidos e divididos em fragmentos 2 a 3 mm e colocados em cultura de célula em placas de 24 poços (1 fragmento por poço) ou placas de 6 poços (4 fragmentos por poço) apenas com meio de cultura suplementado com 6.000 lU/mL de IL-2 (recombinante), agonista de 0X40, anti-agonista de 4-1BB, e uma combinação de 0X40 e agonistas de 4-1 BB em triplicatas. Em alguns experimentos onde tumor suficiente está disponível, as titulações de IL-2 (6.000; 600; 60; e 0 IU de IL2) serão testadas. Um controle excipiente para a IL-2 será usada. A concentração final de cada mAb será de 30 pg/mL. A seguir de 24 a 48 horas de cultura, 250 pL de sobrenadante serão coletados de cada condição e armazenados a -20°C para análise subsequente de concentrações de citocina e quimiocina (pg/106 células/24 horas). TILs serão coletados de cada condição no dia 11, dia 21 e/ou dia do ‘pré-REP’ (pelo menos 500.000 células por
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455/497 amostra). Duas alíquotas de TILs serão pelotizados e recolocados em suspensão em <10 pL de PBS e serão congelados a -80°C. Se menos do que <106 células são coletadas, apenas arranjos de expressão de gene serão realizados. As culturas serão alimentadas no dia 7 pela remoção parcial de meio “gasto” e adição de um volume igual de meio de cultura mais 6000 lU/mL de IL-2. O meio gasto será armazenado a -20°C para análise subsequente de citocina/quimiocina usando um ensaio multiplex (por exemplo, sistema Luminex 100). Adicionalmente mAb será adicionado à cultura no dia 7 se fragmentos de tumor suficientes estiverem disponíveis para o início de mais do que 1 replica de condições experimentais. As culturas de TIL serão mantidas por um adicional de 14 dias. No dia 21, I rendimento, viabilidade, superfície celular e imunofenótipo intracelular de célula total será determinado usando citometria de fluxo. Os seguintes marcadores serão incluídos: CD45RA, CCR7, CD3, TCR-alfa/beta, CD4, CD8, CXCR3, CD56, CD27, CD28, PD-1, PD-L1, BTLA, KLRG1, CD137, CD134, CD33, CD57, CD25, CD127, TIM-3, LAG-3, TIGIT, RAGE, e Ki67. Outros biomarcadores incluindo CD 107a, NKG2D, KIRS, receptores da morte de quimiocina (Fas, DR4) e proteínas anti-apoptóticas/pro-autofágicas (BCL-2, BCL-XL, Bim, CD200, e LC3/HMGB1) também serão avaliados se células suficientes estiverem disponíveis. Os marcadores intracelulares de citotoxicidade e células T reguladoras, Granzima B, pSTAT3, pSTATl, e FOXP3, respectivamente serão avaliados. A potência lítica de TILs será determinada usando um ensaio de lise. Em casos onde material de tumor adicional está disponível e (a) uma suspensão de célula de tumor gerada a seguir da digestão enzimática, (b) uma linhagem de tumor autólogo gerado a partir do tumor acima mencionado e/ou (c) linhagem de célula homóloga (se disponível) serão cocultivados com a liberação de TIL e IFN-γ colhidos medida. Se células em excesso são obtidas, estas serão criopreservadas para isolar RNA e DNA para a análise de expressão de gene (incluindo a análise de
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456/497 clonotipagem de TCR Υβ) que pode ser realizada em um tempo posterior usando um orçamento estendido. Se eficácia (definida abaixo) é observada com anti PDL-1 e anti-CTLA-4 ou a combinação dos mesmos, a possibilidade de reduzir a concentração de mAb(s) indicados nas culturas de fragmento de tumor ou realizar uma avaliação de dose resposta mais detalhada será explorada. Se fragmentos de tumor são visíveis em cultura no dia 7, eles serão colhidos e se células suficientes estiverem disponíveis depois da geração de uma suspensão de célula única, elas serão submetidas à análise genética e análise fenotípica citométrica de fluxo (nesta prioridade; a ser negociada). A análise citométrica de fluxo focalizará no fenótipo de células T, células dendríticas, macrófagos, células B, e células NK depois de tingir usando painéis de mAb fluorescente apropriado. Os marcadores incluirão: CDllc, CD1 lb, HLA classe II, CD80, CD86, CD83, CD56, CD16, CD19, e CD20.
[001260] Os critérios usados para avaliar a eficácia da adição de agonista de 4-1 BB, agonista de 0X40, e a combinação dos mesmos às culturas de fragmento de tumor estão resumidas como segue:
• Número aumentado de TIL a seguir da expansão (CD4 e/ou CD8) • Número diminuído de Treg a seguir da expansão • Mudanças nos marcadores da proliferação de célula T (Ki67) em efetor e Tregs • Mudanças em efetor/memória/fenótipo diferenciado, CD27, CD28, CD57, CD45RA, HLA-DR, CCR7, 0X40, ICOS, CD45RA; comprimento da telomerase)) • Números de célula NK aumentados (CD37CD56+), situação de proliferação e ativação • Mudanças exploratórias na proteína de sinalização intracelular ou níveis de fosfoproteína (por exemplo, AKT vs ERK) em células T
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457 / 497 • Atividade de CTL/capacidade lítica aumentadas como medidas pela lise redirecionada • Produção de IFN-y/HMGBI aumentada em lisado de coculturas de TIL/tumor, TIL/tumor autólogo e/ou TIL/tumor homólogo. [001261] Os experimentos adicionais a serem realizados incluem (1) sequenciamento de exoma inteiro e RNASeq no FFPE ou material de tumor fresco-congelado para identificar genes mutados e possíveis neo-epítopos, (2) análise de citocina e quimiocina de sobrenadantes da cultura coletados 24 a 48 horas a seguir do início das culturas de fragmento de tumor, (3) análise da expressão de gene de fragmentos de tumor removidos da cultura inicial no dia 7, (4) análise de clonotipo de TCR do TIL isolado usando sequenciamento de alto rendimento da região TCR Υβ CDR3, (5) impacto de mAbs sobre TILs depositados quanto à função efetora de TIL na presença de IFN-γ induziu a suprarregulagem de PD-L1 sobre tumores autólogos/homólogos (resumido abaixo) e análise de fragmentos remanescentes para células T residuais pela PCR/IHC/digestão.
[001262] As diferenças nos parâmetros de ensaio serão testadas quanto à significância usando testes T emparelhados e não emparelhados (Testes da soma de postos e de postos assinalados de Wilcoxon). A comparação de parâmetros múltiplos usará análises de ANOVA de uma por intermédio de e duas vias. A análise de regressão de Spearman será usada quando aplicável para avaliar correlações entre medições contínuas. Todos os dados podem ser arranjados em tabela e analisados.
Exemplo 4 - Expansão de TILs Usando Ligantes Hexaméricos para 4-1BB, 0X40, e Outros Membros do TNFRSF [001263] O efeito da ativação com proteínas de fusão hexaméricas das estruturas I-A com domínios de ligação para 4-1BB, 0X40, CD27, e outros membros do TNFRSF, na expansão e função de linfócitos infiltrantes de tumor (TIL) de fragmentos de tumor sólido cultivados ex vivo (histologias
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458/497 múltiplas) é estudado neste exemplo. 100 mg de cada proteína de fusão hexamérica (por exemplo, 4-1 BB, 0X40, e CD27) seria usada com tumores obtidos das seguintes indicações: sarcoma, carcinoma colorretal, leucemia mieloide aguda, câncer ovariano, câncer mamário triplo negativo, pancreático (expressando Ras), câncer renal, e câncer vesical. Tumores de várias histologias serão obtidos a partir de fontes comerciais. Aproximadamente 20 tumores de paciente independente serão obtidos (2 a 3 tumores por indicação como listado acima). Os tumores serão enviados para Lion em HBSS estéril ou um outro meio apropriado. Os tumores serão manuseados apenas em uma cabina de fluxo laminar para manter condições estéreis. Altemativamente, as suspensões de tumor de célula única podem ser utilizadas. Os tumores serão lavados depois de recebidos e divididos em fragmentos de 2 a 3 mm (comprimento x largura x altura) e colocados em cultura de célula em placas de 24 poços (1 fragmento por poço) ou placas de 6 poços (4 fragmentos por poço) com meio de cultura suplementado apenas com 6.000 lU/mL de IL2 (recombinante), combinação de 4-1 BB HERA sozinho em triplicatas servirão como controle e três condições experimentais utilizadas respectivamente. Um controle de excipiente para o IL-2 será usado. A concentração final de HERA será de 30 pg/mL. Seguindo 24 a 48 horas de cultura, 250 pL de sobrenadante serão coletados de cada condição e armazenados a -20°C para análise subsequente de concentrações de citocina e quimiocina (pg/106 célula/24 horas). TILs serão coletados a partir de cada condição no dia 11, dia 21 e/ou dia do ‘pré-REP’ (pelo menos 500.000 células por amostra). Duas alíquotas de TILs serão granuladas e recolocadas em suspensão em <10 pL de PBS e serão congeladas. Se menos do que <106 células são coletadas, apenas arranjos de expressão de gene serão realizados. As culturas serão alimentadas no dia 7 pela remoção parcial de meio “gasto” e adição de um volume igual de meio de cultura mais 6000 lU/mL de IL-2. Os meios gastos serão armazenados a -20°C para a análise de citocina/quimiocina subsequente
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459/497 usando um ensaio multiplex (por exemplo, sistema Luminex 100). Ligantes adicionais serão adicionados à cultura no dia 7 se fragmentos de tumor suficientes são disponíveis para o início de mais do que 1 réplica de condições experimentais. As culturas de TIL serão mantidas por um adicional de 14 dias.
[001264] No dia 21, o rendimento, viabilidade, superfície celular e imunofenótipo intracelular de célula total serão determinados usando citometria de fluxo. Os seguintes marcadores serão incluídos: CD45RA, CCR7, CD3, TCR-alfa/beta, CD4, CD8, CXCR3, CD56, CD27, CD28, PD-1, PD-L1, BTLA, KLRG1, CD137, CD134, CD33, CD57, CD25, CD127, TIM3, LAG-3, TIGIT, RAGE, e Ki67. Outros biomarcadores incluindo CD107a, NKG2D, KIRS, receptores de morte de quimiocina (Fas, DR4) e proteínas anti-apoptóticas/pro-autofágica (BCL-2, BCL-XL, Bim, CD200, e LC3/HMGB1) também será avaliado se células suficientes são disponíveis. Os marcadores intracelulares de citotoxicidade e células T reguladoras, Granzima B, pSTAT3, pSTATl, e FOXP3, respectivamente serão avaliados. A potência lítica de TILs será determinada usando um ensaio de lise. Em casos onde material de tumor adicional está disponível e (a) uma suspensão de célula de tumor gerada a seguir da digestão enzimática, (b) uma linha de tumor autóloga gerada de tumor anteriormente mencionada e/ou (c) linhagem de célula homóloga (se disponíveis) será cocultivada com liberação de TIL e IFN-γ colhidos medidos. Se células em excesso são obtidas, estas serão criopreservadas para isolar RNA e DNA para a análise de expressão de gene pelo Painel de Imunologia Humana de Nanocadeia (incluindo a análise de clonotipagem TCR Υβ). Se fragmentos de tumor são visíveis em cultura no dia 7, eles serão colhidos e se células suficientes são disponíveis depois da geração de uma suspensão de célula única, eles serão submetidos à análise genética e análise fenotípica citométrica de fluxo. A análise citométrica de fluxo focalizará no fenótipo de células T, células dendríticas, macrófagos,
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460/497 células B, e células NK depois tingimento usando painéis mAb fluorescente apropriado. Os marcadores incluirão: CDllc, CDllb, HLA classe II, CD80, CD86, CD83, CD56, CD16, CD19, e CD20.
[001265] Os critérios usados para avaliar a eficácia da adição de proteínas de fusão hexaméricas ás culturas de fragmento de tumor são resumidas acima no Exemplo 3, e outros critérios opcionais são descritos na Tabela 53.
TABELA 53. Critérios adicionais para o desempenho experimental para agonista de proteínas de fusão de TNFRSF em processos de expansão de T
| Limiar de sucesso | Contage m de célula | Viabilidad e | Potência pelo IFNy | Fenotipagem | (Tregs a seguir da expansão | Aumentos na Memória Central de Célula T (CCR7+, CD45RA-) |
| Bom | >le6 | >75% | >500pg/106 células/24 horas | >40% CD8s | <10% | >1% |
| Muito Bom | >3e6 | >80% | >1000/106 células/24 horas | >50% CD8s | <3% | >3% |
| Excelente | >10e6 | >85% | >2000/106 células/24 horas | >75% CD8s | <1% | >10% |
| Extraordinário | >30e6 | >90% | >4000/106 células/24 horas | >90% CD8s | não detectado | >30% |
[001266] Experimentos adicionais incluem: (1) sequenciamento de exoma inteiro e RNASeq no FFPE ou material de tumor fresco-congelado para identificar genes mutados e possíveis neo-epítopos, (2) a análise de citocina e quimiocina de sobrenadantes de cultura coletados 24 a 48 horas a seguir da iniciação de culturas de fragmentos de tumor, (3) análise de expressão de gene de fragmentos de tumor removidos de cultura inicial no dia 7, (4) a análise de clonotipo TCR do TIL isolado usando sequenciamento de alto rendimento da região TCR Υβ CDR3, (5) impacto de proteínas de fusão hexaméricas nos TILs depositado em Lion para a função de efetor de TIL na presença de IFN-γ induziu a suprarregulagem de PD-LI sobre os tumores autólogos/homólogos e análise de fragmentos remanescentes para as células T residuais pela PCR/IHC/digestão.
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461 /497 [001267] As diferenças nos parâmetros de ensaio serão testados quanto à significância usando testes T emparelhado e não emparelhado (testes da soma de pontos e pontos assinalados de Wilcoxon). A comparação de parâmetros múltiplos usarão análise de ANOVA de uma por intermédio de e duas vias. As A análise de regressão de Spearman serão usados quando aplicável para avaliar correlações entre medições contínuas.
Exemplo 5 - Avaliação do Impacto de Anticorpos Agonísticos 4-1BB e anti0X40 sobre a Expansão de TIL e Função Efetora [001268] O objetivo deste trabalho é avaliar o impacto de 4-1BB (urelumab) e anticorpos agonísticos anti-OX40 sobre a expansão de TIL e função efetora e para obter informação sobre a expressão de ICOS e GITR durante a expansão.
[001269] A avaliação in vitro de anti-4-IBB e anticorpos agonísticos anti-OX40 sobre a expansão de TIL e fenótipo é realizada como segue. A titulação de anticorpo é conduzida com fragmentos e aspirados de tumor para determinar a concentração adequada para o uso com expansão de TIL. O impacto de agonistas anti-4-ΙΒΒ e anti-OX40 sobre a expansão de TIL tanto na pré-REP quanto na REP (nestas condições específicas) é avaliado para (1) apenas IL-2 + anti-4-ΙΒΒ, (2) apenas IL-2 anti-OX40, (3) IL-2 + anti-41BB + anti-OX40, e (4) apenas IL-2 (controle). A expansão e fenótipo de TIL serão avaliados pela (1) expansão do subconjunto CD3+, subconjunto CD3+CD8+, e CD3+CD4+ tanto na porcentagem quanto na contagem absoluta e viabilidade de células, e (2) avaliação da situação de diferenciação e ativação pela citometria de fluxo usando 18 fluxo de cor; incluindo tingimento para ICOS e GITR, Ki67, e marcadores de apoptose.
[001270] A avaliação in vitro da formação de perfil de repertório e expressão de TCR de TILs expandidos com anti-4-ΙΒΒ e anticorpos agonísticos anti-OX40 é realizada como segue. O repertório de TCR em TILs expandidos apenas com IL-2 em comparação com as condições de tratamento
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462 / 497 é mostrado tingindo-se com anticorpos anti-TRBV específicos e usando ensaios do repertório de TCR comercialmente disponíveis da iRepertoire, Inc. A formação do perfil de expressão sobre TILs individuais é realizada usando o Painel de Imunidade Adaptativa nCounter Vantage® RNA com a análise de Nanocadeia [001271] A avaliação in vitro de reatividade e função efetora de tumor é realizada como segue. Uma suspensão de célula de tumor autóloga ou linhagem de célula de tumor é gerada (como possível). A reatividade de tumor no ensaio de lise de tumor é avaliada cocultivando-se células de tumor autólogas/suspensão de célula de tumor autóloga classificada com TILs expandidos autólogos apenas com IL-2 em comparação com as condições de tratamento descritas acima. No caso de suspensão de células de tumor autólogas/linhagens de célula de tumor não estarem disponíveis, o ensaio de ativação de célula T pelo anti-CD3/CD28/CD137 será conduzido para avaliar as funções efetoras medindo-se ao invés a produção de IFN-gama/expressão de CD 107a.
Exemplo 6 - Avaliação Adicional de Anticorpos 4-1BB e 0X40 sobre a Expansão Ex Vivo de TIL e a sua Atividade de Função Efetora [001272] 0X40 e 4-1BB foram descobertos ser expressos pelo subconjunto de antígenos específicos CD4+ e CD8+, respectivamente. A ativação de moléculas coestimulatórias (4-1BB e 0X40) nas células T realçam a função efetora, a sobrevivência celular, e a expansão celular. A ativação dos receptores de 0X40 e 4-1 BB foi mostrada melhorar a expansão de TIL e a função antitumor em modelos de murino. O anticorpo anti-4-ΙΒ agonístico foi mostrado aumentar o rendimento de TIL de melanoma obtido da expansão in vitro, de acordo com o seguinte protocolo, o efeito de anticorpos agonísticos contra 4-1BB e 0X40, sozinhos e em combinação, na expansão ex vivo de TIL e a sua atividade de função efetora pode ser estudada.
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463/497 [001273] A FIG. 13 descreve o protocolo de expansão de TIL usado neste estudo. Como ilustrado na FIG. 15, o tecido de tumor foi recuperado do paciente, fragmentado e submetido a um processo de pré-REP na presença de IL-2, como aqui descrito. Os tecidos foram depois submetidos a um processo de REP na presença dos anticorpos IL-2 e anti-CD3 com PBMCs irradiadas (FIG. 13).
[001274] As seguintes condições experimentais foram implementadas neste estudo:
| Nenhum tratamento | Anti-4-lBB | Anti-OX40 | Combinação | Isotipo | |
| pré-REP | 10 pg/rnl | 0,5 -10 pg/rnl | 0,5-10 pg/rnl | 10 pg/rnl | |
| REP | 10 pg/rnl | 0,5 -10 pg/rnl | 0,5-10 pg/rnl | 10 pg/rnl |
| Fase | Agente | Pré-REP | REP |
| I | anti-4-ΙΒΒ | 3 tumores | N/A |
| anti-ΘΧ40 | 3 a 5 tumores | ||
| II | combo | 3 a 5 tumores |
[001275] A ativação, proliferação, e exaustão de célula T podem ser monitoradas pela citometria de fluxo de acordo com a seguinte lista, onde o Painel 1 ilustra a linhagem de célula imune, subconjunto de célula T, e diferenciação de célula T, e o Painel 2 ilustra a ativação e exaustão de célula T:
| Painel 1 | Painel 2 |
| CD3 | CD3 |
| L/D Azul | L/D Azul |
| CD19 | CD25 |
| CD56 | CD95 |
| CD62L | PD-1 |
| CD57 | 2B4/CD244 |
| CD 11b | CD4 |
| CD 123 | TIM-3 |
| CD14 | CD 183 |
| CD8 | CD 103 |
| CD28 | CD8 |
| CD45 | TIGIT |
| CD4 | CD 127 |
| CCR7 | CD272 |
| CD27 | KLRG1 |
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| TCRg/d | CD 194 |
| CD45RA | CD69 |
| CD16 | LAG-3 |
[001276] Sem estar limitado a qualquer teoria da invenção, é esperado que a combinação de agonistas anti-4-ΙΒΒ e anti-OX40, sozinhos ou em combinação com o processo 2A, pode melhorar a expansão de TILs pré-REP, particularmente no subconjunto de TIL CD3+CD8+; melhorar a taxa de sucesso de certos tumores; duração encurtada da expansão pré-REP de TIL; e/ou realçar as multifuncionalidades de TIL incluindo a função efetora e a sobrevivência de célula a seguir da re-estimulação de antígeno.
Exemplo 7 - Estudo Clínico para Avaliar a Eficácia e Segurança de TIL Autóloga [001277] Este exemplo descreve um estudo clínico de Fase 1/2 para avaliar a eficácia de TIL autólogo através de tipos múltiplos de tumor. Os objetivos desta investigação são avaliar a eficácia usando taxa de resposta objetiva (ORR) de acordo com RECIST vl.l em sujeitos com câncer ovariano e osteossarcoma. O objetivo primário para um grupo de adenocarcinoma ductal pancreático (PDAC) é avaliar a eficácia como medida pela taxa de sobrevivência de 6 meses.
[001278] Os objetivos secundários podem incluir: (1) avaliar ORR usando RECIST v.1.1 em PDAC; (2) determinar a taxa de controle de doença (DCR) dentro e através dos grupos; (3) determinar a duração de resposta (DOR); (4) determinar a sobrevivência livre de progressão (PFS) e sobrevivência global (OS); e (5) caracterizando ainda o perfil de segurança de terapia de célula adotiva com TIL através dos tipos múltiplos de tumor.
Definições/Abreviações
| ACT | Terapia de Célula Adotiva |
| AE | Evento Adverso |
| ALT | Alanina Transaminase |
| ANC | Contagem Neutrofílica Absoluta |
| AST | Aspartato Transaminase |
| ASMR | Taxa de Mortalidade padronizada pela Idade |
| aPTT | Tempo de Tromboplastina Parcial Ativada |
| BID | Duas Vezes ao Dia |
| BSA | Área De Superfície Corporal |
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465/497
| CBC | Contagem de Sangue Completa |
| CD4+T | Células T CD4+ |
| CD8+T | Células T CD8+ |
| CFR | Código de Regulamentações Federais |
| Cl | Intervalo de Confiança |
| CLS | Síndrome de Vazamento Capilar |
| CMO | Organização de Fabricação de Contrato |
| COPD | Doença Pulmonar Obstrutiva Crônica |
| CR | Resposta Completa |
| CrCl | Depuração de Creatinina |
| CT | Tomografia Computadorizada |
| CTCAE v4,03 | Critérios de Terminologia Comum para eventos Adversos Versão 4.03 |
| D5W | Dextrose 5% em peso |
| DCR | Taxa de controle de doença |
| DOR | Duração de Resposta |
| EBV | Vírus de Epstein-Barr |
| ECHO | Ecocardiograma |
| EKG | Eletrocardiograma |
| EOC | Câncer Ovariano Epitelial |
| EORTC QLQ-C30 | Organização Européia para Pesquisa e Tratamento de Câncer Questionário de Qualidade de Vida - instrumento Núcleo 30 |
| EWV | Visita de Retirada Precoce |
| FDA | Food and Drug Administration |
| FEV | Volume Expiratório Forçado |
| FVC | Capacidade Vital Forçada |
| GCP | Boa Prática Clínica |
| Hgb | Hemoglobina |
| HIV | Vírus da Imunodeficiência Humana |
| HRQoL | Qualidade de Vida Relacionada com a Saúde |
| ICH | Conferência Internacional sobre Harmonização |
| IL | Interleucina |
| IND | Novo Fármaco Investigacional (Aplicação) |
| irRECIST | Critérios de Avaliação de Resposta Imunorrelacionada em Tumores Sólidos |
| IRB | Junta de Revisão Institucional |
| IUD | Dispositivo Intrauterino |
| IV | Intravenoso |
| IVPB | Piggyback Intravenoso |
| LVEF | Fração de Ejeção Ventricular Esquerda |
| Ml | Macrófagos HLA-DR+CD68+ Ml |
| M2 | Macrófagos CD 163+ ou CD204+ M2 |
| MRI | Imageamento de Ressonância Magnética |
| MUGA | Varredura de Aquisição de Ativação Múltipla |
| NCI | National Cancer Institute |
| Neu | CD66b+ Neutrófilos |
| NMA | Não mieloablativo |
| NS | Solução Salina Normal |
| oc | Câncer Ovariano |
| ORR | Taxa de resposta Objetiva |
| OS | Sobrevivência Global |
| PBMC | Célula Mononuclear de Sangue Periférico |
| PCR | Reação da Cadeia da Polimerase |
| PD | Doença Progressiva |
| PDAC | Adenocarcinoma ductal pancreático |
| PE | Exame Físico |
| PET | Tomografia de Emissão de Positron |
| PFS | Sobrevivência livre de Progressão |
| PHI | Informação de Saúde Pessoal |
| PI | Investigador Principal |
| PJP | Pneumonia de Pneumonitis Jiroveci |
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466/497
| PO | Per Os (pela boca) |
| PR | Resposta Parcial |
| PS | Situação de Desempenho |
| PT | Tempo de Protrombina |
| QTc | Intervalo QT Corrigido |
| RECIST | Critérios de Avaliação de Resposta em Tumores Sólidos |
| REP | Protocolo de Expansão Rápida |
| SAE | Evento Adverso Sério |
| SAP | Plano de Análise Estatística |
| SD | Doença Estável |
| SGOT | Transaminase Sérica Glutâmica-oxaloacética |
| SGPT | Transaminase Sérica Glutâmica-pirúvica |
| SMX | Sulfametoxazol |
| STS | Sarcoma de Tecido Mole |
| TCR | Receptor de Célula T |
| TIL | Linfócito Infiltrante de Tumor |
| TMA | Micro arranjo Tecidual |
| TMP | Trimetoprim |
| Treg | Células T Reguladoras de FOXP3+ |
| TSH | Hormônio Estimulador da Tireoide |
| ULN | Limite Superior de Normal |
[001279] Projeto de Estudo e Pontos Finais: Este estudo está voltado para a avaliação da eficácia de TIL em sujeitos com: a) osteossarcomas recidivos ou refratários à terapia convencional, b) câncer ovariano resistente à platina, e c) PDAC que progrediu na, ou recebeu benefício máximo da, terapia de linha de frente. Cada grupo começa com dez sujeitos no primeiro estágio, e a expansão para o segundo estágio é guiada por um projeto de dois estágios de Simon modificado.
[001280] O ponto final primário é ORR pelo RECIST vl.l para câncer ovariano e osteossarcoma, e a taxa de sobrevivência de 6 meses em PDAC. O ponto final primário para o grupo PDAC é a taxa de sobrevivência de 6 meses.
[001281] Os pontos finais de eficácia secundários incluem ORR (para PDAC) CRR, DCR, DOR, PFS usando RECIST vl.l, e OS. DCR inclui resposta completa (CR), resposta parcial (PR), e doença estável (SD). Os pontos finais de segurança podem incluir a avaliação global de AEs incluindo grau 3 ou maior, toxicidades não hematológicas, SAEs e AEs emergente do tratamento pelo grau e relação com o tratamento de estudo. O ponto final secundário para o grupo PDAC é ORR usando RECIST vl.l.
[001282] Os pontos finais exploratórios podem incluir: (1) duração de
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467 / 497 persistência TIL como determinado pelo sequenciamento de receptor de célula T (TCR) de células T infundidas isoladas em série a seguir da infusão de TIL, ou alternativamente avaliação da iRepertoire de mRNA para TCRs;
(2) resposta como determinada pelos critérios de resposta imuno-relacionada;
(3) Fenótipo imunológico de TIL no momento da infusão pela citometria de fluxo de canal múltiplo; (4) avaliação de tumor na linha de base e após o tratamento por intermédio de IHC, sequencialmente TCR, e análise transcricional; e (5) HRQOL como avaliado pelo questionário EORTC QLQC30.
[001283] Critérios de Inclusão de Participante. Os sujeitos podem estar entre 18 e 70 (sujeitos de idade de 16 a70 podem ser alistados dentro do grupo de osteossarcoma). Os sujeitos devem estar dispostos e capazes de fornecer consentimento informado. Para os pacientes <18 anos de idade, seus pais ou gardiões legais devem assinar um consentimento informado por escrito. Assentimento, quando apropriado, pode ser obtido de acordo com as diretrizes institucionais. A situação de desempenho clínico de ECOG 0 ou 1 no alistamento e dentro de 7 dias de iniciada a quimioterapia linfodepletiva. Os sujeitos devem ter uma área de tumor passível de biópsia excisional para a geração de TIL separado de, e além de, uma lesão alvo a ser usada para a avaliação de resposta. Qualquer terapia anterior direcionada para o tumor maligno, incluindo terapia de radiação, quimioterapia, e agentes biológicos/alvejados deve ser descontinuada pelo menos 28 dias antes da excisão de tumor para preparar a terapia de TIL.
[001284] Dentro de 7 a 14 (por exemplo, 7 dias) dias do alistamento e dentro de 12 h a 48 h (por exemplo, 24 h) do início da quimioterapia de linfodepleção os sujeitos podem atingir um ou mais dos seguintes critérios de laboratório: (1) contagem neutrofílica absoluta (ANC) > 1000/mm3; (2) hemoglobina > 8,0 g/dL (transfusão permitida); (3) contagem de plaquetas > 100.000/mm3; (4) ALT/SGPT e AST/SGOT < 2,5 x o limite superior de
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468/497 normal (ULN) (pacientes com metástases hepáticas podem ter LFT < 5,0 x ULN); (5) depuração de creatinina calculada (Cockcroft-Gault) > 40,0 mL/min; (6) bilirrubina total < 1,5 X ULN; (7) tempo de protombina (PT) & Tempo de Tromboplastina Parcial Ativada (aPTT) <1,5 X ULN (correção com vitamina K permitida) a menos que o sujeito estivesse recebendo terapia anticoagulante (que deve ser controlada de acordo com as normas institucionais antes e depois da biópsia excisional); e (8) teste sérico de gravidez negativo (sujeitos do sexo feminino com potencial para gravidez).
[001285] Além disso, os sujeitos não devem ter uma infecção pelo vírus da imunodeficiência humana (HIV) confirmada. Os sujeitos devem ter um eletrocardiograma de 12 derivações (EKG) não apresentando nenhuma isquemia ativa e intervalo QT corrigido (QTc) menor do que 480 ms. Sujeitos com 40 anos de idade e mais velhos também devem ter um teste cardíaco no esforço negativo (isto é teste de EKG no esforço, ecocardiograma de tálio, dobutamina no esforço ou outro teste de esforço que possa tirar de qualquer possibilidade a isquemia cardíaca). O teste de esforço pode ser requerido de sujeitos menores do que 40 anos de idade se justificado pelo histórico familiar ou fatores de risco pelo investigador do tratamento. Os sujeitos de potencial para gravidez devem estar dispostos a praticar um método altamente eficaz aprovado de controle de natalidade começando no momento do consentimento informado e durante 1 ano depois da conclusão do regime de linfodepleção. Os sujeitos devem ser capazes de aderir ao programa de visitas de estudo e outras exigências do protocolo. Finalmente, os testes de função pulmonar (espirometria) demonstrando o valor expiratório forçado (FEV) 1 maior do que 65% do prognosticado ou capacidade vital forçada (FVC) maior do que 65% do prognosticado.
[001286] Além de atingir os critérios de inclusão geral acima, os sujeitos também devem atingir critérios específicos do grupo.
[001287] Para câncer ovariano, os sujeitos podem ter alto grau de
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469/497 histologia sem muco (carcinossarcomas são permitidos). Além disso, os sujeitos podem ter falhado em pelo menos duas linhas anteriores de quimioterapia (isto é quimioterapia adjuvante de linha de frente mais uma linha adicional para doença progressiva recorrente).
[001288] Para osteossarcoma, os sujeitos podem ter recaído ou se tomado refratários à terapia convencional e ter recebido um regime incluindo alguma combinação de metotrexato de alta dose, doxorrubicina, cisplatina, e/ou ifosfamida.
[001289] Para os sujeitos com adenocarcinoma pancreático, os sujeitos podem ter diagnóstico histologicamente ou citologicamente documentado de PDAC com doença oligo-metastática. Os sujeitos podem ter progredido no, ou recebido benefício máximo da, terapia de linha de frente. Os pacientes podem ter recebido linhas ilimitadas de padrão anterior de terapia de cuidado. Pacientes com ascite ou carcinomatose não são elegíveis para o estudo. Os pacientes podem atingir uma albumina de > 3,0 mg/dL dentro de 7 dias do alistamento.
[001290] Critérios de Exclusão do Participante. Vários critérios podem resultar em exclusão de um participante do estudo:
[001291] a. Infecções sistêmicas agudas requerendo antibióticos intravenosos, distúrbios de coagulação ou outra enfermidade médica maior dos sistemas cardiovascular, respiratório ou imune. PI ou seu/sua representante devem fazer a determinação final com respeito à apropriabilidade do alistamento.
[001292] b. Pacientes com hepatite viral ativa.
[001293] c. Pacientes que tenham uma fração de ejeção ventricular esquerda (LVEF) < 45% na Triagem.
[001294] d. Pacientes com um histórico de terapias de célula adotiva anteriores.
[001295] e. Persistente relacionado com a terapia anterior com oxicities
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470 / 497 maiores do que Gru 2 de acordo com os Critérios de Toxicidade Comum para Eventos Adversos (CTCAE) v4.03, exceto para a neuropatia periférica, alopecia, ou vitiligo antes do alistamento.
[001296] f. Imunodeficiência primária.
[001297] g. Histórico de transplante de órgão ou célula tronco hematopoiética.
[001298] h. Terapia esteroide crônica, entretanto prednisona ou seu equivalente é permitido a < 10 mg/dia.
[001299] i. Pacientes que estejam grávidos ou amamentando.
[001300] j. Presença de uma doença psiquiátrica significante, que na opinião do investigador principal ou seu/sua representante, impediría o consentimento informado adequado.
[001301] k. Histórico de doença autoimune clinicamente significante incluindo doença autoimune ativa, conhecida, ou suspeita. Sujeitos com efeitos colaterais resolvidos de terapia inibidora do ponto de checagem anterior, vitiligo, psoríase, diabete tipo 1 ou asma/atopia infantil seriam uma exceção a esta regra. Sujeitos que requerem uso intermitente de broncodilatadores ou injeções locais de estereoide não seriam excluídos. Sujeitos com hipotireoidismo estável na reposição hormonal ou síndrome de Sjorgen podem não ser excluídos.
[001302] 1. Histórico de doença pulmonar obstrutiva crônica (COPD) clinicamente significante, asma, ou outra doença pulmonar crônica.
[001303] m. Histórico de uma segunda malignidade (diagnosticada nos últimos 5 anos). As exceções incluem carcinoma de célula basal da pele, carcinoma de célula escamosa da pele, ou câncer cervical in situ que passou por terapia curativa potencial.
[001304] n. Histórico conhecido de metástase do sistema nervoso central ativa e/ou meningite carcinomatosa. Sujeitos com metástases cerebrais anteriormente tratadas pode participar contanto que sejam estáveis (sem
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471 /497 evidência de progressão pelo imageamento durante pelo menos quatro semanas antes da primeira dose de tratamento de teste e qualquer sintoma neurológico que tenha retomado para a linha de base), não tenha nenhuma evidência de novas metástases cerebrais aumentando, e não estejam usando esteroides durante pelo menos 7 dias antes do início da linfodepleção.
[001305] o. Tenha recebido uma vacina viva dentro de 30 dias antes do início da linfodepleção.
[001306] p. Qualquer outra condição que no julgamento do investigador aumentaria significantemente os riscos de participação.
[001307] Conclusão ou Descontinuação de Tratamento. O conclusão do tratamento pode ser definido como tendo recebido qualquer volume de infusão de TIL seguido por pelo menos 1 dose de IL-2 adjuvante.
[001308] Este estudo inclui um regime de tratamento de uma vez consistindo em quimioterapia de linfodepleção, infusão de TIL, e IL-2 adjuvante (até 6 doses). A descontinuação do tratamento de estudo deve ser considerado se nenhum dos seguintes critérios forem atingidos. Entretanto, a menos que o paciente também atinja os critérios para descontinuação da participação no estudo, todo esforço pode ser feito para continuar o acompanhamento e avaliação de todos os pacientes, incluindo aqueles que não completam o curso inteiro da terapia, como especificado no Programa de Eventos.
[001309] Os critérios para a descontinuação precoce do tratamento são:
a. Autoimunidade de Grau 3 ou maior que envolva órgãos vitais (coração, rins, cérebro, olho, fígado, cólon, glândula adrenal, pulmões) com sintomas emergindo a seguir da infusão de TIL;
b. Reação alérgica de Grau 3 ou maior incluindo broncoespasmo ou urticária generalizada que não resolve depois do controle médico na opinião do Investigador;
c. Toxicidade Grau 3 ou maior devido à IL-2 que não diminui
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472 / 497 para Grau 2 ou menos dentro de 96 horas de controle;
d. Determinação pelo Investigador que o tratamento continuado não está no melhor interesse do paciente;
e. Retirada pelo paciente. O paciente (ou pais/guardião legal para pacientes < 18 anos de idade) podem retirar o consentimento para tratamento mas continuam a consentir quanto às avaliações de acompanhamento e/ou situação de sobrevivência;
f. Gravidez;
g. O paciente atinge os critérios para a descontinuação precoce do estudo; e
h. O paciente tornou-se inelegível para o estudo depois da remoção do tumor e antes da administração de TIL ou IL-2.
[001310] Os critérios para a descontinuação precoce do estudo são:
a. Retirada pelo paciente. O paciente (ou pais/guardião legal para pacientes <18 anos de idade) podem retirar o consentimento. Todos os esforços devem ser feitos para continuar o consentimento para o acompanhamento da situação de sobrevivência;
b. O paciente tomou-se inelegível para estudo depois da coleta do tumor ou não recebeu nenhum tratamento de estudo;
c. Têm qualquer complicação ou demora de cicatrização do procedimento excisional que na opinião do investigador aumentaria os riscos de linfodepleção, terapia TIL adotiva e IL-2 adjuvante;
d. têm um declínio na situação de desempenho para ECOG > 1 (dentro de sete dias antes do início da linfodepleção);
e. Morte; e
f. Perda de acompanhamento depois de 3 tentativas documentadas para contatar o paciente.
[001311] Alguns sujeitos podem passar pela coleta de tumor e fabricação de TIL mas não pode receber a infusão de produto investigacional.
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Se TIL não for administrado ao paciente por qualquer razão, mesmo se depois da linfodepleção quimioterapia, então o paciente deve permanecer no estudo, mas a coleta de dados pode ser reduzida para a situação de sobrevivência e início de qualquer nova terapia anticâncer durante 3 anos. Tais sujeitos podem ser considerados não estimáveis pela análise estatística de eficácia e podem ser recolocados.
[001312] Se um paciente inicia a terapia anticâncer ou exibe progressão de doença depois da infusão de TIL eles podem permanecer no estudo, mas a coleta de dados pode ser reduzida para a situação de resposta, situação de sobrevivência e outra terapia anticâncer durante 3 anos.
[001313] Agentes de Estudo. O regime de linfodepleção é programado para começar no Dia -7, depois da notificação de que a produção de TIL é esperada ser bem-sucedida para o paciente. Os pacientes podem receber a quimioterapia de linfodepleção como paciente internado ou paciente externo no critério do investigador. A modificação do regime de linfodepleção é permitida como clinicamente indicada e deve ser guiada pelos parâmetros hematológicos diários como descrito abaixo quanto à fludarabina em pacientes pesadamente pré-tratados ou sujeitos com um histórico de recuperação mieloide prolongada. O regime compreende 2 doses diárias de ciclofosfamida (com mesna) seguidas por 5 doses diárias de fludarabina e devem ser administradas como para protocolo/padrões institucionais para quimioterapia não mieloablativa. As diretrizes para a preparação e administração são descritos abaixo. Sujeitos devem ser dosados usando o peso corporal real mas não excedendo 140% do Peso Corporal Ideal como definido abaixo:
[001314] Peso Corporal Ideal para Homens = 50 kg + 2,3 x (número de polegadas acima de 60 polegadas na altura). Exemplo: peso corporal ideal de um sujeito do sexo masculino com 5’10” 50 + 2,3 x 10 = 73 kg
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474 / 497 [001315] Peso Corporal Ideal para Mulheres = 45,5 kg + 2,3 (número de polegadas acima de 60 polegadas na altura). Exemplo: peso corporal ideal de um sujeito do sexo feminino com 5’3”
45,5 + 2,3 x 3 = 52,4 kg [001316] Os fármacos requeridos para a linfodepleção incluem ciclofosfamida, fludarabina, e/ou mesna.
[001317] As variações da linfodepleção (por exemplo tempos de infusão; programa de tratamentos, etc.) antes do dia 0 podem ser documentadas no registro médico mas podem não ser consideradas violações/desvios de protocolo.
[001318] A ciclofosfamida pode ser administrada de 20 a 80 mg/kg/dia (por exemplo, 60 mg/kg/dia) IV em 250 mL de solução salina normal (NS) em aproximadamente 2 horas nos Dias -7 e -6. Mesna 60 mg/kg com dextrose 5% em peso (D5W) ou NS infundido intravenosamente em 24 h nos Dias -7 e -6. Como mencionado acima a dose pode estar fundamentada no peso corporal real do paciente, mas para prevenir a toxicidade indevida, a mesma pode não exceder a dose fundamentada em 140% do peso corporal ideal máximo (definido acima). Pode haver ajustes de dose para a ciclofosfamida.
[001319] Fludarabina será depois infundida com piggyback IV de 15 a 50 mg/m2 (por exemplo, 25 mg/m2) (PB) diariamente durante aproximadamente 15 a 30 minutos nos Dias -5 a -1. Para prevenir toxicidade indevida com fludarabina, a dose pode estar fundamentada na área de superfície corporal (BSA), mas pode não exceder uma dose calculada nas áreas superficiais com base nos pesos corporais maiores do que 140% do peso corporal ideal máximo. Os parâmetros hematológicos (contagem sanguínea completa [CBC] e diferencial) devem ser revisadas diariamente durante a linfodepleção. Se depois de 3 ou 4 doses de fludarabina, a contagem de linfócito absoluta cai abaixo de 100 células/mm3 a(s) dose(s) remanescente(s) de fludarabina podem ser omitidas a seguir do debate com o PL A dose de
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475 / 497 fludarabina pode ser ajustada de acordo com a depuração estimada de creatinina (CrCÍ) como segue: (1) CrCÍ 50 a 79 mL/min: Reduzir a dose para 20 mg/m2; e/ou (2) CrCÍ 40 a 49 mL/min: Reduzir a dose para 15 mg/m2.
[001320] O produto de TIL que pode ser usado neste protocolo é um produto investigacional celular compreendendo uma suspensão de célula viva de TIL autólogo derivado de tumor do próprio paciente. Cada dose pode conter até 150 x 109 linfócitos viáveis totais. O volume total a ser infundido pode ser de até 600 mL dependente da dose celular total.
[001321] Se ainda não hospitalizado para a quimioterapia de linfodepleção, o paciente pode ser admitido 1 a 2 dias antes da administração de TIL planejada e preparado com hidratação intravenosa durante a noite antes da administração de TIL. Os pacientes podem permanecer hospitalizados até a conclusão da terapia com IL-2, como pelos padrões institucionais.
[001322] A infusão de IL-2 pode começar 3 a 24 h depois da conclusão da infusão de TIL. A IL-2 pode ser administrada em uma dose de 200.000 a 1.000.000 lU/kg (por exemplo, 600.000 lU/kg) (com base no peso corporal total) e pode ser administrado pela infusão IV em uma frequência de a cada 8 a 12 horas como para o padrão institucional de cuidado e continuado durante até um máximo de seis doses ou como tolerado. As doses de IL-2 podem ser puladas se o paciente experiencia uma toxicidade de Grau 3 ou 4 devido à IL2 exceto para as toxicidades Grau 3 reversível comum à IL-2 tal como diarréia, náusea, vômito, hipotensão, mudanças de pele, anorexia, mucosite, disfagia, ou sintomas constitucionais e mudanças laboratoriais. O gerenciamento da IL-2 é detalhado na Tabela 54. Se estas toxicidades podem ser facilmente revertidas dentro de 24 horas pelas medidas suportivas, então doses adicionais podem ser dadas. Se mais do que 2 doses de IL-2 são puladas, a administração de IL-2 pode ser interrompida. Além disso, a discreção pode ser usada para manter ou interromper a dosagem.
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TABELA 54. Gerenciamento das Toxicidades Potenciais da Aldesleucina.
| Toxicidade esperada | Grau esperado | Medidas de suporte | Interrupção do Tratamento* |
| Calafrios | 3 | Meperidina IV 25 a 50 mg, IV qlh, prn | Não |
| Febre | 3 | Acetaminofeno 650 mg, po, q4h; Indometicina 50 a 75 mg, po, q8h | Não |
| Prurido | 3 | Hidroxizina HCL 10 a 20 mg po q6h, prn; Difenhidramina HCL 25 a 50 mg, po, q4h, prn | Não |
| Náusea/ Vômito/ Anorexia | 3 | Ondansetron 10 mg, IV, q8h, prn; Granisetron 0,01 mg/kg IV diariamente prn; Droperidol 1 mg, IV q46h, prn; Proclorperazina 25 mg q4h p.r., prn ou 10 mg IV q6h prn | Não |
| Diarréia | 3 | Loperamida 2 mg, po, q3h, prn; Difenoxilato HC1 2,5 mg e sulfato de atropina 25 mg, po, q3h, prn; sulfato de codeína 30 a 60 mg, po, q4h, prn | Se não controlada depois de 24 horas a despeito de todas as medidas de suporte |
| Mal-estar | 3 ou 4 | Bedrest intercalado com atividade | Se outras toxicidades ocorrem simultaneamente |
| Hiperbilirrubinemia | 3 ou 4 | Observação | Se outras toxicidades ocorrem simultaneamente |
| Anemia | 3 ou 4 | Transfusão com PRBCs | Se descontrolada a despeito de todas as medidas de suporte |
| Trombocitopenia | 3 ou 4 | Transfusão com plaquetas | Se descontrolada a despeito de todas as medidas de suporte |
| Neutropenia | 4 | Observação | Não |
| Edema/Ganho de peso | 3 | Diuréticos prn | Não |
| Hipotensão | 3 | Ressucitação fluídica; Suporte vasopressor | Se descontrolada a despeito de todas as medidas de suporte |
| Dispnéia | 3 ou 4 | Oxigênio ou suporte com ventilador | Se requerer suporte com ventilador |
| Oliguria | 3 ou 4 | Bolos de fluido ou dopamina em doses renais | Se descontrolada a despeito de todas as medidas de suporte |
| Creatinina aumentada | 3 ou 4 | Observação | Sim (grau 4) |
| Insuficiência renal | 3 ou 4 | Diálise | Sim |
| Efusão pleural | 3 | Toracentese | Se descontrolada a despeito de todas as medidas de suporte |
| Perfuração intestinal | 3 | Intervenção cirúrgica | Sim |
| Confusão | 3 | Observação | Sim |
| Sonolência | 3 ou 4 | Intubação para proteção das vias aéreas | Sim |
| Arritmia | 3 | Correção de fluido e desequilíbrios de eletrólito; terapia de conversão química ou elétrica | Se descontrolada a despeito de todas as medidas de suporte |
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ΑΊΊ / 497
| Níveis de Troponina elevados | 3 ou 4 | Observação | Sim |
| Infartação Miocárdica | 4 | Cuidado de suporte | Sim |
| Transaminases elevadas | 3 ou 4 | Observação | Para Grau 4 sem metástases hepáticas |
| Desequilíbrios de eletrólito | 3 ou 4 | Reposição de eletrólito | Se descontrolada a despeito de todas as medidas de suporte |
* A menos que a toxicidade não seja revertida dentro de 12 horas.
[001323] Procedimentos e Programa de Estudo. Os seguintes procedimentos podem ser usados neste estudo.
[001324] Os sujeitos potenciais podem ser informados a cerca do estudo pelo investigador. Os riscos, benefícios, e alternativos podem ser debatidos e o Documento de Consentimento Informado pode ser assinado antes que quaisquer avaliações relacionadas com o estudo sejam realizadas.
[001325] Os sujeitos devem atingir a maior parte, ou preferivelmente todos, dos critérios de inclusão e preferivelmente não ter nenhuma das condições especificadas nos critérios de exclusão. A confirmação de critérios gerais, de grupo, específicos, e de inclusão/exclusão no tratamento deve ser documentado dentro de sete dias do começo da quimioterapia de linfodepleção.
[001326] Os dados demográficos podem incluir data de nascimento (como permitido pelas regulamentações locais), idade, gênero, e raça/origem étnica.
[001327] O histórico médico/cirúrgico relevante e significante e as enfermidades concorrentes podem ser coletadas para todos os pacientes na Triagem (Visita 1) e atualizados como aplicável. Qualquer piora das condições pré-existentes devem ser relatadas como AEs. O tratamento anticâncer anterior do paciente também podem ser coletado.
[001328] A documentação de diagnóstico específica de grupo de câncer pode ser feita e confirmada histologicamente.
[001329] Todas as medicações e terapias (prescrição, e não prescrição, incluindo suplementos herbáceos) tomadas pelo paciente até 28 dias antes da Triagem (Visita 1) podem ser coletadas na base de dados, incluindo as datas
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478 / 497 de interrupção para medicações proibidas no estudo, no momento do consentimento. Todas as medicações e terapias sendo tomadas pelos pacientes, ou mudanças das mesmas, em qualquer momento durante o estudo, podem ser registradas no registro médico.
[001330] Todas as linhas de base de grau 2 e toxicidades mais altas podem ser avaliadas como pelo CTCAE v4.03. Quaisquer eventos ocorridos depois da triagem, mas antes do alistamento/excisão de tumor, podem ser registrados como Histórico Médico na base de dados, a menos que os eventos estejam relacionados com os procedimentos exigidos pelo protocolo. Quaisquer eventos ocorrendo depois do alistamento/excisão de tumor podem ser capturados como AEs na base de dados até a visita do Mês 6, o sujeito é retirado do estudo, ou começa outra terapia contra o câncer.
[001331] Os sinais vitais devem incluir altura, peso, pulso, respirações, pressão sanguínea e temperatura. A altura pode ser medida apenas na Triagem (Visita 1). Todos os outros sinais vitais podem ser medidos em pontos de tempo aplicáveis. No Dia 0 (Visita 11/infusão de TIL), os sinais vitais podem ser monitorados durante até aproximadamente 24 horas após a infusão de TIL. [001332] Uma situação de desempenho de ECOG pode ser avaliada na Triagem (Visita 1) e outros pontos de tempo indicados no programa de eventos.
[001333] A examinação física pode ser conduzida para todas as visitas exceto para a Excisão de Tumor e deve incluir os sinais vitais e peso, cabeça e pescoço, cardiovascular, pulmonar, extremidades, e outra avaliação relevante. Os exames conduzidos durante o acompanhamento podem ser direcionados aos sintomas. As mudanças clinicamente significantes nas descobertas do exame podem ser registradas como eventos adversos como indicado.
[001334] Os testes de segurança de sangue e urina podem ser coletados e analisados localmente em cada visita como indicado no Programa de Eventos.
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479 / 497 [001335] A coleta de amostra para a tipagem de HLA Classe I de alta resolução pode ser conduzida na Triagem (Visita 1).
[001336] A sorologia para as seguintes doenças pode ser completada na Triagem (Visita 1) a ser analisada localmente pelo padrão institucional: HIV, Vírus da Hepatite B, Vírus da Hepatite C, Citomegalovírus (CMV), Vírus do Herpes Simples; vírus de Epstein-Barr (EBV) (pode estar dentro 3 meses anteriores à Excisão do Tumor/Visita 2), Doença de Chagas, Vírus Linfotrópico de Célula T Humana, e Vírus do Nilo Ocidental. Doença de Célula Falciforme também podem ser triados. O teste adicional deve ser feito como clinicamente indicado.
[001337] A depuração de creatinina pode ser calculada pelo sítio usando a fórmula de Cockcroft-Gault apenas na Triagem.
[001338] Todos os sujeitos podem ter um ECG de 12 derivações na linha de base e avaliação da função ventricular pelo ecocardiograma ou MUGA. Além disso, sujeitos com idade de 40 ou mais velhos e aqueles mais jovens do que 40 com um histórico de doença cardiovascular ou dor no peito podem ter um teste de esforço documentando a ausência de isquemia. Pacientes com um MUGA ou ecocardiograma anormais podem atingir as exigências de fração de ejeção e obter autorização da cardiologia antes do alistamento.
[001339] A avaliação pulmonar pode ser completada dentro de 28 dias da Triagem (Visita 1). As avaliações anteriores completadas dentro de 6 meses antes da Triagem (Visita 1) podem ser aceitas. Um FEV1 maior do que 65% do prognosticado ou FVC maior do que 65% do prognosticado são requeridos. Pacientes que são incapazes de conduzir as medições de espirometria PFT confiáveis devido à anatomia anormal das vias aéreas superiores (por exemplo traqueostomia) podem passar por um teste de caminhada de 6 minutos para ser avaliada a função pulmonar. Estes pacientes devem, e preferivelmente podem, caminhar uma distância de pelo menos 80%
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480 / 497 da prognosticada para a idade e sexo assim como manter a saturação de oxigênio maior do que 90% do começo ao fim.
[001340] A colonoscopia é apenas requerida para pacientes que tiveram uma diarréia Grau 2 documentada ou maior ou oolite devido à imunoterapia anterior dentro de seis meses da Triagem. Os pacientes que foram as sintomáticos durante pelo menos 6 meses da Triagem ou tiveram uma colonoscopia normal após o tratamento com anti-PD-l/anti-PD-Ll, com mucosa não inflamada pela avaliação visual podem não precisar repetir a colonoscopia.
[001341] Um questionário sobre a qualidade de vida relacionada com a saúde (HRQOL) pode ser conduzido em pessoas no Dia -21 da linha de base (Visita 3) e ser realizado como o primeiro procedimento nas visitas subsequentes. Ver o Programa de Eventos para pontos de tempo específicos. Falha para completar qualquer um dos questionários pode não ser considerada um desvio que requeira relatar.
[001342] As avaliações radiográficas pelas varreduras de tomografia computadorizada (CT) com contraste do peito, abdômen e pelve são requeridas para todos os pacientes para avaliações de tumor. As varreduras de CT são realizadas como indicado no Programa de Eventos até doença progressiva pelo RECIST vl.l modificado ser observada (ou se o paciente retirar o consentimento completo). As avaliações de resposta devem ser avaliadas e documentadas por um radiologista qualificado participando no teste. O Imageamento de Ressonância Magnética (MRI) ou varredura pela tomografia de emissão de positron (PET) do peito, abdômen e pelve no lugar das varreduras de CT podem ser permitidas para pacientes que tenham uma intolerabilidade aos meios de contraste. O mesmo método de avaliação (CT ou MRI) e a mesma técnica para a aquisição de dados deve ser usada compativelmente por todo o estudo para caracterizar cada lesão identificada e relatada. As avaliações radiográficas iniciais podem ser feitas em 6, 12, 18 e
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481 /497 semanas após a infusão de TIL. Depois disso, os pacientes podem ser avaliados quanto à resposta aproximadamente a cada 12 semanas. As avaliações radiológicas adicionais podem ser realizadas como clinicamente indicadas.
[001343] Antes da biopsia cirúrgica, a eligibilidade do sujeito pode ser confirmada, e o PI ou representante pode prover aprovação para o alistamento do paciente no teste clínico e excisão de tumor subsequente. Os sujeitos podem passar por uma consulta pré-processual e um consentimento informado separado pelo time que realiza a biópsia cirúrgica pelos padrões institucionais. Idealmente, o tumor alvejado não deve ter sido anteriormente irradiado. Se o tumor foi anteriormente irradiado um período mínimo de 1 a 6 meses (por exemplo, 3 meses) pode ter decorrido entre a irradiação e a excisão, tempo durante o qual o crescimento adicional do tumor alvo pode ter sido demonstrado. Se alistado, a excisão de tumor é esperada ocorrer em aproximadamente 1 a 12 semanas (por exemplo, 6 semanas) antes da infusão de TIL prevista (Dia 0). TIL é um produto de investigação autólogo que é obtido e dispensado por meios que tenham mais em comum com dispensários de produto do sangue autólogo do que aqueles de produção de fármaco tradicional. E imperativo que apenas o tratamento de estudo (TIL) do próprio paciente (autólogo) seja administrado ao mesmo paciente individual. Por estas razões, o espécime do paciente pode ser obtido e manuseado por um protocolo estrito para garantir qualidade ideal do espécime e tempo mínimo de transporte para e da instalação de laboratório de processamento, assim como para garantir a identificação apropriada do produto de estudo em todos os momentos incluindo a infusão de volta no paciente.
[001344] Em casos onde o tecido de tumor adicional ou em excesso pode ser obtido com segurança no momento da biopsia excisional inicial para a coleta de TIL, o excesso do tecido de tumor para pesquisa pode ser obtido. A provisão de quantidade adequada do tecido de tumor para a fabricação de
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TIL é prioridade em relação à coleta de tecido de tumor adicional que é enviado para pesquisa. Todo esforço deve ser feito para a obtenção de tecido de tumor adequado tanto para a fabricação de TIL quanto para análise adicional, além disso, uma biópsia no estudo obrigatória pode ser usada para averiguar as mudanças moleculares e imunológicas a seguir do tratamento e assim como para documentar a presença de células T infundidas no tumor. A análise do tecido de tumor pode incluir: 1) imunohistoquímica para identificar populações de célula imune individuais; e/ou 2) análise de DNA e RNA, incluindo avaliação exploratória genômica e transcriptômica possível e sequenciamento de TCR para avaliar o retomo do TIL infundido para o tumor (na biópsia após o tratamento). A provisão de quantidade adequada do tecido de tumor para a fabricação de TIL é prioridade em relação à coleta do tecido de tumor adicional para pesquisa. Todo esforço deve ser feito para a obtenção de tecido de tumor adequado tanto para a fabricação de TIL quanto para a análise adicional.
[001345] Até 500 x 106 TILs do produto de infusão (e material genético extraído destas amostras) podem ser armazenados para pesquisa. A análise de citometria de fluxo do TIL infundido pode ser realizada, e DNA do produto de infusão pode ser enviado para o sequenciamento de TCR. As amostras nestes estudos de pesquisa podem ser usadas para a obtenção de mais informação a cerca da doença e das características do TIL antes e depois da infusão. O sangue periférico pode ser coletado dos pacientes para o monitoramento imune e localização de célula T usando o sequenciamento de TCR. O Sangue Para o Monitoramento Imune pode ser retirado na Excisão do Tumor (Visita 2) e coletas subsequentes podem ser retiradas em pontos de tempo aplicáveis (Ver as Tabelas 55 e 56).
TABELA 55. Programa Exemplar de Eventos - Fases de Pré-Tratamento e Tratamento.
| Fase de Pré-Tratamento | Fase de Tratamento | |||||||||||
| Número da Visita | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6, 7, 8, 9, 10 | 11 | 12, 13, 14, 15 | 16 | 17 | 18 | 19 |
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| Nome da Visita | Triagem | Biópsia | Linha de Base(Dia -14 a-21) | Dia -7 | Dia -6 | Dias - 5, -4, -3, -2, -1 | DiaO (Infus. de TIL) | Dias 1, 2, 3,4 | Dia 14 | Dia 28 | Dia 42 (sema na6) | Dia 84 (sema na 12) |
| Janela de Visita | <28 dias | N/A | N/A | N/A | N/A | N/A | N/A | N/A | (±7 dias) | (±7 dias) | (±7 dias) | (±7 dias) |
| Consentimento Informado por Escrito | X | |||||||||||
| Histórico Médico | X | |||||||||||
| Documentação de diagnóstico | x | |||||||||||
| Exame Físico | x | X | X | X | X | X | X | X | X | X | X | |
| Sinais Vitaisa | x | X | X | X | X | xb | X | X | X | X | X | X |
| Situação de desempenho de ECOG | x | X | x | x | x | x | x | x | ||||
| CBC, Painel Químico, e testes de urinac | x | x | x | x | x | x | x | x | x | x | x | x |
| β-HCG Teste de Gravidez no Soro | x | x | x | |||||||||
| Teste de Infecção | x | |||||||||||
| Tip agem de HLA | x | |||||||||||
| Avaliações Cardíacas | x | |||||||||||
| Testes de Função Pulmonar | x | |||||||||||
| Colonoscopia | x | |||||||||||
| Avaliação Tumoral (CT/MRI) | x | x | x | x | ||||||||
| Avaliações de Resposta | x | x | x | |||||||||
| Medicamentos Concomitantes | x | x | x | x | x | x | x | x | x | x | x | x |
| Eventos adversos | x | x | x | x | x | x | x | x | x | x | x | x |
| Biópsia Tumoral | x | x | ||||||||||
| NMA linfodepleçãod | x | x | x | |||||||||
| Infusão de TILe | x | |||||||||||
| IL-2f | x | |||||||||||
| Monitoramento Imune | x | x | x | x | x | x | ||||||
| HRQOL Questionário | x | x | ||||||||||
| Medicações Profiláticas | ||||||||||||
| PJP | x | x | x | x | x | x | x | x | x | |||
| Filgrastim | x | |||||||||||
| Profilaxia Fúngica | x | x | x | x | x | x |
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| Profilaxia do Vírus do Herpes | X | X | X | X | X | X |
[001346] a Os sinais vitais podem incluir altura, peso, frequência cardíaca, frequência respiratória, pressão sanguínea, e temperatura. A altura pode ser medida apenas na Triagem. BS A e BMI podem ser Calculados apenas no Dia -7 (Visita 4).
[001347] b No Dia 0 (infusão de TIL), os sinais vitais podem ser monitorados a cada 30 minutos durante a infusão depois de hora em hora (+/15 minutos) durante quatro horas e depois rotineiramente (a cada quatro a seis horas), a menos que de outro modo clinicamente indicado, durante até aproximadamente 24 horas após a infusão de TIL.
[001348] c Química: sódio, potássio, cloreto, CO2 total, ou bicarbonato, creatinina, glicose, BUN, albumina, cálcio, magnésio, fósforo, fosfatase alcalina, ALT/SGPT, AST/SGOT, bilirrubina total, bilirrubina direta, LDH, proteína total, CK total, ácido úrico, e creatinina sérica. O painel da tireoide (para incluir TSH e T4 livre) deve ser feito nas Visitas 1 e 19 e como clinicamente indicado. Coagulações: PT, PTT, e INR. Hematologia: CBC com diferencial; Urinálise: Bilirrubina, Sangue, Glicose, Cetonas, pH, Proteína, Densidade específica, Cor e Aspecto.
[001349] dCiclofosfamida com mesna durante 2 dias no Dia -7 e Dia -6 (Visitas 4 a 5) seguidos por 5 dias de fludarabina no Dia -5 até Dia -1 (Visitas 6 a 10).
[001350] e A infusão de TIL deve ser feita 1 a 2 dias depois da última dose de agente no regime de linfodepleção NMA.
[001351] f Iniciar IL-2 a 600.000 lU/kg dentro de aproximadamente 3 a 24 horas depois da infusão de TIL e continuar a cada 8 a 12 horas durante até seis doses.
TABELA 56. Programa Exemplar de Eventos: Pós-Tratamento e Acompanhamento de Longa Duração.
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| Acompanhamento Após Tratamento | Acompanhamento de Longa Duração | |||||||
| Número da Visita | 20 | 21 | 22 | 23 | 24 | 25 | EWV | |
| Nome da Visita | Dia 126 (Mês4,5/ Semana 18) | Dia 168 (Mês 6) | Dia 252 (Mês9) | Dia 336 (Mês 12) | Dia 504 (Mês 18) | Dia 672 (Mês 24) | Visita de Retirad a Precoce | Contato Trimestral |
| Janela de Visita | (± 14 dias) | (± 14 dias) | (± 14 dias) | (± 14 dias) | (±21 dias) | (±21 dias) | (±21 dias) | |
| Exame Físicoa | X | X | X | X | X | X | X | |
| Sinais Vitaisb | X | X | X | X | X | |||
| Situação de desempenho de ECOG | x | x | x | x | X | X | x | |
| CBC, Painel Químico, e testes de urina 6 | x | x | x | |||||
| Avaliações de Tumor (CT/MRI)d | x | x | x | x | x | x | x | |
| Avaliações de Resposta | x | x | x | x | x | x | x | |
| Medicações Concomitantes | x | x | x | x | x | |||
| Eventos Adversos6 | x | x | x | |||||
| Monitoramento Imunef | x | x | x | x | ||||
| Questionário HRQOL | x | x | x | |||||
| Acompanhamento de Sobrevivência | X | |||||||
| Medicações Profiláticas | ||||||||
| PJP | x | x | ||||||
| Profilaxia do Vírus do Herpes | x | x |
[001352] aPE pode incluir gastrointestinal (abdômen, fígado), cardiovascular, extremidades, cabeça, olhos, ouvidos, nariz, e garganta, sistema respiratório, pele, psiquiátrico (situação mental), nutrição geral. PE conduzido durante o acompanhamento pode ser direcionado pelo sintoma.
[001353] b Os sinais vitais podem incluir peso, frequência cardíaca, frequência respiratória, pressão sanguínea, e temperatura.
[001354] c Química: sódio, potássio, cloreto, CO2 total, ou bicarbonato, creatinina, glicose, BUN, albumina, cálcio, magnésio, fósforo, fosfatase alcalina, ALT/SGPT, AST/SGOT, bilirrubina total, bilirrubina direta, LDH, proteína total, CK total, ácido úrico, e creatinina sérica. No painel da tireoide (para incluir TSH e T4 Livre) deve ser feito como clinicamente indicado. Coagulações: PT/PTT/INR. Hematologia: CBC com diferencial; Urinálise: Bilirrubina, Sangue, Glicose, Cetonas, pH, Proteína, Densidade Específica, Cor e Aspecto.
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486/497 [001355] d As varreduras de CT do peito, abdômen e pelve, são requeridas nos pontos de tempo indicados. Avaliações radiológicas adicionais podem ser realizadas pelo discernimento do Investigador. MRI pode ser usado se os pacientes forem intoleráveis aos meios de contraste.
[001356] e Quaisquer AEs ocorridos depois da triagem, mas antes do alistamento/excisão de tumor, podem ser registrados como Histórico Médico na base de dados. Quaisquer AEs ocorridos depois do alistamento/excisão de tumor podem ser capturados como AEs até o Dia 168 (Visita 21/Mês 6) e como clinicamente indicado, ou até a primeira dose da terapia anticâncer subsequente, qualquer que ocorra primeiro. Todos os AEs atribuídos aos procedimentos requeridos no protocolo ou tratamento podem ser coletados até o Dia 672 (Visita 25/Mês 24).
[001357] f A coleta de sangue para o Monitoramento Imune deve ser coletado nas visitas entre Dia 168 (Visita 21/Mês 6) até o Dia 336 (Visita 23/Mês 12) e ETV.
[001358] Medicações, Tratamentos, e Procedimentos Concomitantes. As medicações para problemas médicos outros que não os agentes antineoplásticos são permitidas. Aqueles com condições que requeiram fármacos anti-inflamatórios para condições crônicas que afetem potencialmente a administração de TIL podem ser considerados apenas com aprovação do PL A terapia de radiação paliativa é permitida entre a excisão de tumor e a linfodepleção enquanto a mesma não afetar as lesões alvo e não alvo. O uso de terapia esteroidal sistêmica < 10 mg/dia de prednisona ou equivalente é permitido. O uso de > 10 mg/dia de prednisona ou equivalente é permitido em casos de exacerbação de doença conhecida ou para o tratamento de novos sintomas no estudo pelo discernimento do Investigador. Quaisquer mudanças nas medicações concomitantes podem ser registradas apenas no registro médico do paciente por todo o teste. Para sujeito que têm alergia ao contraste CT IV, a avaliação radiológica usando MRI ou PET-CT (sem
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487 / 497 contraste intravenoso é a conduta preferida. Todas tentativas devem ser feitas para manter uniformidade na modalidade de imageamento para cada paciente. [001359] Todos os outros fármacos antineoplásticos e radiação são proibidos. Os sujeitos também são desencorajados de usar suplementos comprados sem receita e produtos homeopáticos, especialmente aqueles com supostas propriedades anti-inflamatórias, tais como boswelia.
[001360] Os pacientes tratados com linfodepleção estão sujeitos às infecções oportunísticas e a profilaxia apropriada de agente infeccioso é requerida. Os regimes e a duração da profilaxia listados abaixo podem ser modificados como clinicamente indicado na consulta com um especialista de Doenças Infecciosas.
[001361] Os pacientes podem receber levofloxacina de 100 a 1000 mg (por exemplo, 500 mg) diariamente (ou um antibiótico equivalente) até que ANC recupere para mais do que 500/mm3.
[001362] Os pacientes podem receber a combinação fixada de trimetoprim (TMP) e sulfametoxazol (SMX) como tabletes de concentração dupla (DS) [tabs DS = TMP 160 mg/tab e SMX 800 mg/tab] PO BID duas vezes por semana. TMP/SMX-DS pode ser tomado pelos pacientes começando no Dia -7 e continuando durante um mínimo de 6 meses depois da linfodepleção. Para os pacientes com alergias à sulfa, Pentamidina pode ser dado (uma vez liberado do hospital) 300 mg IV a cada 21 dias durante 6 meses depois da linfodepleção. Se a Pentamidina IV não é possível depois da liberação, a profilaxia de PCP pode ser substituída com antimicrobianos orais tais como Atovaquona como pelo padrão de cuidado durante 6 meses depois da linfodepleção. Os pacientes podem ser administrados com antibióticos profiláticos intravenosamente durante a terapia com alta dose de IL-2.
[001363] Começando no dia da infusão de TIL os sujeitos podem ser administrados com valacilcovir 100 a 1000 mg (por exemplo, 500 mg) PO diariamente se o paciente é capaz de tomar medicações orais ou aciclovir 5
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488 / 497 mg/kg IVPB a cada 8 horas se o paciente precisa de medicações intravenosas, que é continuada durante 6 meses (ou no critério do médico tratador). A insuficiência renal reversível foi relatada com aciclovir administrado IV mas não com aciclovir oral. A toxicidade neurológica incluindo delírio, tremores, coma, perturbações psiquiátricas agudas, e eletroencefalogramas anormais foi relatada com doses mais altas de aciclovir. Se sintomas ocorrem, um ajuste de dosagem pode ser feito ou o fármaco descontinuado. Aciclovir não pode ser usado concomitantemente com outros análogos nucleosídicos (por exemplo ganciclovir), o que interfere com a síntese de DNA. Em pacientes com doença renal, a dose é ajustada como pelo marcador do produto.
[001364] Os pacientes pode começar com Fluconazol 50 a 500 mg (por exemplo, 200 mg) PO diariamente com a infusão de célula T (Dia 0) e continuar durante 6 meses (ou no critério do médico tratador).
[001365] Para reduzir a duração de neutropenia a seguir da quimioterapia de linfodepleção NMA, filgrastim (G-CSF) pode ser dado de 1 a 10 pg/kg/dia (por exemplo, 5 pg/kg/dia) diariamente subcutaneamente até ANC > 500/mm3 durante pelo menos 2 dias consecutivos. A dosagem aproximada para corresponder às formas de dosagem de 300 mg ou 480 mg é permitida.
[001366] Ondansetron pode ser usado para controlar a náusea e vômito durante o regime preparativo da quimioterapia. O mesmo pode causar dores de cabeça, tonturas, mialgias, sonolência, mal-estar, e fraqueza. Os efeitos colaterais menos comuns incluem dor no peito, hipotensão, prurido, constipação e retenção urinária. Consultar o inserto da embalagem para uma lista completa de efeitos colaterais e instruções específicas de dose.
[001367] Furosemida pode ser usada para realçar o débito urinário durante o regime preparativo da quimioterapia com ciclofosfamida. Os efeitos adversos incluem tontura, vertigem, parestesias, fraqueza, hipotensão ortostática, fotossensibilidade, brotoeja e prurido. Consultar o inserto da
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489 / 497 embalagem para uma lista completa de efeitos colaterais e instruções específicas de dose.
[001368] Os pacientes podem começar com antibióticos de amplo espectro, uma cefalosporina de 3 a ou 4a geração com cobertura de pseudomonas adequadas como pelo antibiograma local ou uma quinolona para temperatura > 38,5°C com um ANC menor do que 500/mm3. Aminoglicosídeos devem ser evitados se possível. A consulta de doença infecciosa pode ser obtida de todos os pacientes com febre não explicada ou quaisquer complicações infecciosas.
[001369] Usando os valores diários de CBC como um guia, o paciente também pode receber plaquetas e células sanguíneas vermelhas empacotadas como necessário. Tentativas podem ser feitas para manter Hgb > 8,0 g/dL, e plaquetas > 20.000/mL guiadas pelo cenário clínico. Os filtros leucocitários podem ser utilizados para todas as transfusões de sangue e plaqueta para diminuir a sensibilização para WBC’s transfundidas e diminuir o risco de infecção pelo CMV. Sangue e produtos do sangue irradiados devem ser usados.
[001370] Descrição de Métodos Estatísticos. O ponto final primário para os grupos de câncer ovariano e osteossarcoma é o ORR como avaliado pelos investigadores usando os critérios RECIST 1.1. O ORR é derivado como a soma do número de pacientes com um CR confirmado ou resposta parcial (PR) dividido pelo número de pacientes no conjunto de análise Todos Tratados x 100%. O ponto final primário para o grupo de PD AC é a percentagem de pacientes que sobrevivem durante 183 dias. A taxa de sobrevivência limite de 6 meses pode ser calculada com base no método de Kaplan Meier.
[001371] PFS é definido como o tempo (em meses) da data de início da linfodepleção até PD ou morte devido a qualquer causa, qualquer evento que seja antes. Pacientes que não experienciaram PD ou morte no tempo de corte
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490 / 497 de dados ou final do estudo (isto é, bloqueio da base de dados) pode ter seus tempos de evento checados na última avaliação de tumor adequada. DOR é medida a partir da primeira vez que os critérios de medição são atingidos para um CR ou PR, qualquer resposta que seja observada primeiro, até a primeira data que a doença progressiva (PD) ou morte ocorrer. Os pacientes que não experienciam PD ou morte antes do tempo do corte dos dados ou final do estudo pode ter seus tempos de evento censurados na última avaliação de tumor adequada. A análise de DOR está fundamentada apenas nos respondendores como avaliado pelos investigadores pelo RECIST vl.l. A DCR é derivada como a soma do número de pacientes que alcançaram PR/CR ou SD pelo RECIST vl.l dividido pelo número de pacientes no conjunto de análise Todos Tratados x 100%. A OS é definida como o tempo (em meses) da data de início da linfodepleção até a morte devido a qualquer causa. Os pacientes que não expiraram no tempo de corte dos dados ou final do estudo podem ter seus tempos de evento checados na última data de sua situação de sobrevivência conhecida.
[001372] Todas as análises exploratórias podem ser descritivas e realizadas em grupo. Alguns resultados de análise podem ser relatados separados do relato de estudo clínico final. A análise do repertório de célula T pode ser usada para determinar a persistência de TIL. Traços moleculares e imunológicos de tumores antes e depois da terapia com TIL podem ser determinados usando sequenciamento de exoma e análises de imunohistoquímica/imunofluorescência. As análises de sensibilidade na ORR, DCR, DOR, e PFS como medidas pelos investigadores usando os critérios irRECIST podem ser realizadas. O coeficiente de correlação de Pearson e a regressão linear, quando apropriado, pode ser usado para quantificar a relação entre os atributos fenotípicos (CD8 %, expressão de CD27 e CD28, etc.) e resposta do tumor à terapia. CA 19-9 de linha de base de pacientes com PD AC e CA-125 de linha de base de pacientes com câncer ovariano podem ser
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491 /497 avaliados quanto às correlações potenciais com o resultado de eficácia.
[001373] AEs Grau 3 ou superior emergentes do tratamento e suas taxas de incidência podem ser comparados descritivamente com os dados históricos de TIL em outros tipos de doença cancerosa. As taxas de incidência de AE podem ser estimadas com 95% de CIs por grupo e todos os grupos combinados. Os AEs emergentes do tratamento começam a partir da primeira dose de ciclofosfamida e até 6 meses da última dose de IL-2.
[001374] Um sumário da disposição do estudo pode demonstrar o número e porcentagens de pacientes que saíram do estudo cedo perlas razões primárias em 2 partes: (1) Depois da coleta do tumor antes da linfodepleção; e (2) Na ou depois da primeira dose de ciclofosfamida. Os pacientes que são tratados e sendo seguidos quanto à situação de sobrevivência no momento do término do estudo (isto é, completadores) não são uma parte deste sumário. Pacientes que não receberam doses de tratamento de estudo completas planejadas também podem ser resumidos pela sua razão primária.
[001375] O sumário de dados de resposta de tumor por grupo pode estar fundamentado na melhor resposta global como avaliado pelos investigadores pelo RECIST 1.1. O sumário pode demonstrar porcentagens com 80% de intervalos de confidência (CIs) para a ORR e 95% de CIs para DCR pelo método da contagem de Wilcoxon entre pacientes no conjunto de análise Todos Tratados. O tempo para evento médio e a taxa de limite também podem ser medidos com 80% de CIs para a taxa de sobrevivência de 6 meses e 95% de CIs para DOR, PFS, OS, e outras taxas de limite pelo método KM.
[001376] Todas as análises exploratórias podem ser descritivas e realizadas por grupo. A análise pode ser definida separadamente do plano de análise estatística para este estudo e relatado independentemente fora do relato de estudo clínico (CSR). HRQOL pode ser avaliada usando o instrumento EORTC QLQ-C30 e analisada pelo manual de avaliação publicado.
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492 / 497 [001377] Tamanho de Amostra. Para câncer ovariano e osteossarcoma, o projeto minimax de dois estágios de Simon pode ser usado para monitorar a eficácia de cada grupo independentemente. A hipótese nula que a taxa de resposta histórica de 5% a ser testada contra a taxa de resposta de grupo experimental estimada de 20%. No primeiro estágio, 10 pacientes podem ser tratados por grupo. Se não houver resposta confirmada nestes 10 pacientes, desde que o paciente seja avaliável, o grupo pode ser terminado. Outras estimativas de eficácia incluindo % de reduções máximas na soma da lesão alvo de diâmetros e/ou tempo para PD/morte pode ser considerado para terminação. Una resposta confirmada deve ser determinada pelos critérios RECIST 1.1 com a primeira avaliação em 6 semanas e segunda varredura confirmatória em 12 semanas. Se o estudo se move adiante para o Estágio II, um adicional de 8 pacientes pode ser tratado levando a um total de 18 pacientes para este grupo. Três ou mais respondendores dos 18 pacientes tratados para o grupo pode ser considerado clinicamente relevante para justificar investigação adicional. O poder deste projeto é > 70% sob a taxa de erro tipo I de 1 lado de 10%.
[001378] Para PD AC, o projeto de dois estágios minimax de Simon também pode ser usado para monitorar a taxa de sobrevivência de 6 meses. A hipótese nula que a taxa de sobrevivência histórica de 6 meses de 35% a ser testada contra a taxa de sobrevivência do grupo experimental estimado de 50% (ASCO Jan 2016). No primeiro estágio, 11 pacientes podem ser tratados e seguidos durante > 6 meses sem incluir alistamento adicional. Se houverem 8 ou mais mortes entre os primeiros 11 pacientes dentro de 183 dias contando a partir da primeira administração do fármaco de estudo, este grupo pode ser considerado término.
[001379] De outro modo, mais 11 pacientes podem ser tratados para um total de 22. O resultado final para o grupo pode ser clinicamente significativo se >10 pacientes sobrevivem pelo menos durante 183 dias. O poder deste
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493 / 497 projeto é de aproximadamente 70% sob a taxa de erro tipo I de 1 lado de 10%. Exemplo 8 - Métodos de Expandir TILs Usando Agonistas de TNFRSF Durante Pré-REP e Etapas de REP [001380] Os anticorpos usados neste Exemplo são aqui descritos em outro lugar e são descrito ainda na Tabela 57.
TABELA 57. Anticorpos agonísticos monoclonais 4-1BB e 0X40.
| 4-1BB | 0X40 | ||
| Nome abreviado | CB 4-1BB | BPS 4-1BB | CB ΟΧ40 |
| Fonte | Creative Biolabs (Shirley, NY, USA) | BPS Biosciences (San Diego, CA, USA) | Creative Biolabs (Shirley, NY, USA) |
| Informação de Clone e Produto | Urelumab; Catálogo no. TAB-179 | Desconhecido; Catálogo no. 79097 a 2, Lote no. 170718 | Desconhecido; Catálogo no. MOM-18455 |
| Isotipo | IgG4 | IgGl | IgG |
| Formulação | PBS | PBS e 20% de glicerol | PBS |
| Pureza | >95% | Desconhecida | >98% |
| Sequência e epítopo | Disponíveis | Desconhecidos | Desconhecidos |
| Publicação | N/A | Wilcox, R.A., et al., J. Clin. Invest. 2002; Foell, J. et al., J. Clin. Invest. 2003. | N/A |
[001381] Além dos anticorpos monoclonais descritos acima, o anticorpo agonístico de 0X40 clone Ber-ACT35 (BioLegend, San Diego, CA, USA) foi também usado em experimentos selecionados aqui descritos.
[001382] A estratégia experimental global incluiu as seguintes etapas: aquisição e validação de reagente; projeto de expansão experimental ex vivo; adicionar anti-4-ΙΒΒ ou anti-OX40 no dia 0 de experimentos pré-REP, usando melanoma fresco, pulmão, amostras de tumor cervical; avaliar o anti0X40 em 21 mini-REP realizado em amostras descongeladas de câncer de cabeça & pescoço, pulmão, melanoma, mamário triplo-negativo, e câncer mamário pré-REP TIL; e avaliação da produção de TIL e fenótipo da linhagem de célula (CD4: CD8), subconjuntos de célula T/fenótipo estendido, e ensaios funcionais.
[001383] A comparabilidade da afinidade de ligação anti-4-ΙΒΒ para dois agonistas de 4-1 BB foi avaliada. As células repórter 4-1 BB foram tingidas com anticorpo anti-4-ΙΒΒ (Creative Biolabs) ou anti-4-ΙΒΒ (BPS
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Biosciences) nas concentrações de 0,01, 0,03, 0,1, 0,3, 1, e 3 pg/ml juntos com IgG de camundongo anti-ser humano conjugado a FITC e analisados pela citometria de fluxo. Os resultados são mostrados na FIG. 16 e FIG. 17 (para a % de células 4-lBB+ e a intensidade de fluorescência de meios (MFI) de células 4-lBB+, respectivamente) e indicam que o anticorpo 4-1 BB urelumab da Creative Biolabs (CB) tem a afinidade de ligação mais alta.
[001384] Uma avaliação de ativação do caminho de NF-κΒ dos anticorpos 4-1BB agonísticos também foi realizada. As células repórter de 41BB foram tratadas com anti-4-ΙΒΒ (anticorpos CB ou BPS) em uma concentração de 1, 2, 4, e 8 pg/mL durante 24 horas. As células foram lisadas usando reagente da Luciferase de Uma Etapa, e a atividade de luciferase foi medida por um luminômetro. Os resultados são mostrados na FIG. 18. O Log EC50 para o anticorpo CB foi determinado ser 3,9 pg/mL e para o anticorpo BPS foi determinado ser 2,13 pg/mL. Tanto o agonista CB quanto o BPS anti4-1BB tiveram valores de Log EC50 similares embora o anticorpo BPS exibisse maior ativação da sinalização de NF-kB.
[001385] A afinidade de ligação do agonista CB de 0X40 também foi avaliada. As células repórter de 0X40 foram tingidas com agonista anti0X40 Creative Biolabs (CB) nas concentrações de 0,01, 0,03, 0,1, 0,3, 1, e 3 pg/ml juntos com IgG de camundongo anti-ser humano conjugado a FITC e avaliadas pela citometria de fluxo. Os resultados são mostrados na FIG. 19 e FIG. 20 quanto à % de células OX40+ e MFI de células OX40+, respectivamente, e indicam que o CB 0X40 tem uma alta afinidade de ligação.
[001386] A comparabilidade da afinidade de ligação de 0X40 para dois agonistas de 0X40, o agonista CB de 0X40 e o anticorpo agonístico de 0X40 clone Ber-ACT35 (BioLegend, San Diego, CA, USA), foi avaliada. Cinco linhagens de YIL histológicas diferentes (incluindo cervical, cabeça e pescoço, pulmão, e melanoma) foram tingidas com anticorpo agonístico anti
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0X40 na concentração de 0,1, 0,3, 1, 3, 10 (pg/mL) junto com anticorpo secundário de IgG anti-ser humano ou apenas anti-OX40 (clone Ber-ACT35). Os resultados são mostrados na FIG. 21, e indicam afinidade de ligação comparável para os dois agonistas.
[001387] Uma avaliação da ativação do caminho de NF-kB do anticorpo agonista CB de 0X40 também foi realizada, com resultados mostrados na FIG. 22. As células repórter de 0X40 foram tratadas apenas com anti-OX40 ou controle de isótipo nas concentrações de 1, 2, 4, 8, e 16 pg/mL com ou sem células alimentadoras durante 24 horas. As células foram lisadas usando reagente de Luciferase de Uma Etapa, e a atividade de luciferase foi medida pelo luminômetro. O uso de alimentadoras PBMC iniciou a ativação de NFkB usando a linhagem de célula repórter 0X40, sugerindo que o agrupamento estivesse envolvido na ativação.
[001388] O projeto experimental para o uso de 4-1 BB e agonistas de 0X40 durante a etapa pré-REP é mostrado na FIG. 23. As histologias de tumor exploradas são mostradas na FIG. 24. A estratégia da análise de dados é mostrada na FIG. 25. Nenhum tratamento (apenas IL-2), anti-4-ΙΒΒ, e anti0X40 foram analisados na maneira aos pares emparelhados. Usando este método, as amostras foram designadas em três grupos diferentes incluindo: Grupo 1, Nenhum tratamento e anti-4-ΙΒΒ (n=3); Grupo 2, Nenhum tratamento e anti-OX40 (n=5); e Grupo 3, Nenhum tratamento e anti-4-ΙΒΒ e anti-OX40 (n=2). Os resultados da contagem de célula total de expansões são mostrados na FIG. 26 (Agonista CB de 4-1 BB versus não testado, N = 3); FIG. 27 (Agonista CB de 0X40 versus não testado, N = 5); e FIG. 28 (Agonista CB e agonista OX-40 de 4-1BB, N = 2). Os resultados da contagem de célula CD8+ para a expansão de célula são mostrados na FIG. 29 (Agonista CB de 4-1 BB versus não testado, N = 3); FIG. 30 (Agonista CB de 0X40 versus não testado, N = 5); e FIG. 31 (Agonista CB e agonista OX-40 de 41BB, N = 2). Os resultados da razão da contagem de célula CD8+/CD4+ total
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496/497 para a expansão de células são mostrados na FIG. 32 (Agonista CB de 4-1BB versus não testado, N = 3); FIG. 33 (Agonista CB de 0X40 versus não testado, N = 5); e FIG. 34 (Agonista CB e agonista OX-40 de 4-1BB, N = 2). [001389] A propagação por REP de TILs pré-REP expandidos na presença de 4-1 BB ou agonistas de 0X40 também foi explorada usando o esquema mostrado na FIG. 35. Os TILs pré-REP que foram expandidos com o agonista CB de 4-1 BB ou o agonista CB de 0X40 foram propagados ainda em um protocolo REP na presença de PBMCs irradiadas, anticorpo anti-CD3 (30 ng/mL), e IL-2 (3000 lU/mL) durante 11 dias. TILs foram colhidos e contados, e a expansão multiplicativa determinada. Os resultados são mostrados na FIG. 36, FIG. 37, e FIG. 38.
[001390] A avaliação de 0X40 durante a fase REP também foi testada. Vinte e uma linhagens de TIL de histologias diferentes (FIG. 39) foram propagadas com REP com a adição do agonista CB de 0X40 ou anticorpo de controle de isótipo na concentração de 5 pg/mL. O esquema experimental é mostrado na FIG. 40. Os resultados são mostrados na FIG. 41, FIG. 42, e FIG. 43. Surpreendentemente, o agonista de 0X40 preferencialmente expande TILs CD8+ durante o REP. TILs tratados com agonista de 0X40 foram classificados como respondendores ou não respondendores.
[001391] A titulação de dose anti-OX40 em linhagens de TIL não respondendor e respondendor foi realizada para estudar ainda mais este efeito e para definir a concentração ideal de agonista de 0X40 em respondendores e não respondendores. As linhagens de TIL foram categorizadas em dois grupos (respondendor e não respondendor) com base na obliquidade de CD8+ realçada a seguir do tratamento anti-OX40. Três não respondendores (L4005, H3005, e M1022) e respondendores (T6001, T6003, e L4002) foram propagados com REP na presença de agonista de 0X40 ou anticorpo de controle de isótipo a seguir das condições mostradas na FIG. 44. A FIG. 45 e FIG. 46 ilustram que a maneira dependente da dose da obliquidade de CD8+ a
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497 / 497 seguir do tratamento anti-OX40 foi observada nos respondendores, com concentrações na faixa de 1 a 10 pg/mL promovendo a obliquidade. Os não respondendores não exibiram a obliquidade de CD8+ a seguir do tratamento anti-OX40 mesmo em alta concentração (30 pg/mL).
[001392] O impacto do agonista de 0X40 sobre o repertório TCRvb nos respondendores também foi investigado. Para determinar se anti-OX40, anteriormente mostrado inclinar população CD8+, preferencialmente expande certos repertórios TCR vb. Linhagens de TIL respondendor foram propagadas com REP em placas de 24 poços apenas com IL-2 ou IL-2 com anticorpo CD agonista de 0X40 monoclonal (5 pg/mL). No dia 11, TILs foram colhidos e tingidos com anticorpos do repertório anti-CD3, anti-CD8, anti-CD4, e TCRvb, e analisados pela citometria de fluxo. Os resultados são mostrados para três respondendores com três histologias na FIG. 47, FIG. 48, e FIG. 49. Mudanças mínimas no repertório TCRvb foram observadas, indicando que o alto grau de policlonalidade exibido pelo processo encurtado de 22 dias em uma modalidade da FIG. 1 ou FIG. 2 é surpreendentemente preservado em conjunção com o uso de agonistas de 0X40 durante o REP.
[001393] Em conclusão, o uso de anticorpo anti-OX40 CB significantemente realçou a expansão pré-REP CD8+ de TIL, enquanto que o uso de anticorpo anti-4-ΙΒΒ CB também demonstrou uma tendência promissora. A expansão multiplicativa de REP foi comparável independente da condição de pré-tratamento. Surpreendentemente, o anticorpo agonístico de 0X40 aumentou a razão CD8+/CD4+ em TIL REP anteriormente cultivado apenas com IL-2. Nos TILs não respondedores, a infra-regulagem de OX-40 não foi observada no subconjunto de CD4+ a seguir do tratamento anti-OX40. A maneira dependente da dose de obliquidade de CD8+ a seguir do tratamento anti-OX40 foi observada nos respondendores. A mudança no repertório TCRvb foi muito sutil embora obliquidade de CD8+ significante fosse observada.
Claims (158)
- REIVINDICAÇÕES1. Método de tratar um câncer com uma população de linfócitos infiltrantes de tumor (TILs), caracterizado pelo fato de que compreende as etapas de:(a) excisar um tumor de um paciente;(b) obter uma primeira população de TILs do tumor;(c) realizar uma expansão inicial da primeira população de TILs em um primeiro meio de cultura de célula para se obter uma segunda população de TILs, em que a segunda população de TILs é pelo menos 5 vezes maior em número do que a primeira população de TILs, em que o primeiro meio de cultura de célula compreende IL-2 e um agonista da superfamília do receptor de necrose de tumor (TNFRSF), e em que a expansão inicial é realizada em um período de 21 dias ou menos;(d) realizar uma expansão rápida da segunda população de TILs em um segundo meio de cultura de célula para se obter uma terceira população de TILs, em que a terceira população de TILs é pelo menos 50 vezes maior em número do que a segunda população de TILs depois de 7 dias do início da expansão rápida; em que o segundo meio de cultura de célula compreende IL-2, anticorpo OKT-3 (anti-CD3), células mononucleares de sangue periférico (PBMCs), e opcionalmente o agonista de TNFRSF e um segundo agonista de TNFRSF, e em que a expansão rápida é realizada em um período de 14 dias ou menos;(e) colher a terceira população de TILs; e (f) administrar uma porção terapeuticamente eficaz da terceira população de TILs ao paciente.
- 2. Método de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que o agonista de TNFRSF é selecionado a partir do grupo que consiste em um agonista de 4-1BB, um agonista de 0X40, um agonista de CD27, um agonista de GITR, um agonista de HVEM, um agonista de CD95,Petição 870190062710, de 04/07/2019, pág. 511/5902/28 e combinações dos mesmos.
- 3. Método de acordo com a reivindicação 1 ou 2, caracterizado pelo fato de que o agonista de TNFRSF é um agonista de 4-1 BB, e o agonista de 4-1BB é selecionado a partir do grupo que consiste em urelumab, utomilumab, EU101, uma proteína de fusão, e fragmentos, derivados, variantes, biossimilares, e combinações dos mesmos.
- 4. Método de acordo com a reivindicação 1 ou 2, caracterizado pelo fato de que o agonista de TNFRSF é um agonista de 0X40, ou fragmentos, derivados, variantes, biossimilares, e combinações dos mesmos.
- 5. Método de acordo com a reivindicação 4, caracterizado pelo fato de que o agonista da proteína de fusão 4-1 BB compreende (i) um primeiro domínio de ligação de 4-1 BB solúvel, (ii) um primeiro ligante peptídico, (iii) um segundo domínio de ligação de 4-1BB solúvel, (iv) um segundo ligante peptídico, e (v) um terceiro domínio de ligação de 4-1 BB solúvel, compreendendo adicionalmente um domínio adicional na extremidade do terminal N e/ou terminal C, e em que o domínio adicional compreende um domínio de fragmento Fe e domínio de dobradiça, e em que a proteína de fusão é uma estrutura dimérica de acordo com a estrutura I-A ou estrutura I-B.
- 6. Método de acordo com a reivindicação 1 ou 2, caracterizado pelo fato de que o agonista de TNFRSF é um agonista de 0X40, e o agonista de 0X40 é selecionado a partir do grupo que consiste em tavolixizumab, GSK3174998, MEDI6469, MEDI6383, MOXR0916, PF-04518600, MOM18455 da Creative Biolabs, e fragmentos, derivados, variantes, biossimilares, e combinações dos mesmos.
- 7. Método de acordo com a reivindicação 1 ou 2, caracterizado pelo fato de que o agonista de TNFRSF é um agonista de 0X40, e o agonista de 0X40 é um agonista da proteína de fusão de 0X40.
- 8. Método de acordo com a reivindicação 7, caracterizado peloPetição 870190062710, de 04/07/2019, pág. 512/5903/28 fato de que o agonista da proteína de fusão de 0X40 compreende (i) um primeiro domínio de ligação de 0X40 solúvel, (ii) um primeiro ligante peptídico, (iii) um segundo domínio de ligação de 0X40 solúvel, (iv) um segundo ligante peptídico, e (v) um terceiro domínio de ligação de 0X40 solúvel, compreendendo adicionalmente um domínio adicional na extremidade do terminal N e/ou terminal C, e em que o domínio adicional compreende um domínio de fragmento Fc e domínio de dobradiça, e em que a proteína de fusão é uma estrutura dimérica de acordo com a estrutura I-A ou estrutura I-B.
- 9. Método de acordo com a reivindicação 1 ou 2, caracterizado pelo fato de que o agonista de TNFRSF é um agonista de CD27, e o agonista de CD27 é varlilumab, ou um fragmento, derivado, variante, ou biossimilar dos mesmos.
- 10. Método de acordo com a reivindicação 1 ou 2, caracterizado pelo fato de que o agonista de TNFRSF é um agonista de CD27, e em que o agonista de CD27 é um agonista da proteína de fusão de CD27.
- 11. Método de acordo com a reivindicação 10, caracterizado pelo fato de que o agonista da proteína de fusão de CD27 compreende (i) um primeiro domínio de ligação de CD27 solúvel, (ii) um primeiro ligante peptídico, (iii) um segundo domínio de ligação de CD27 solúvel, (iv) um segundo ligante peptídico, e (v) um terceiro domínio de ligação de CD27 solúvel, compreendendo adicionalmente um domínio adicional na extremidade do terminal N e/ou terminal C, e em que o domínio adicional compreende um domínio de fragmento Fc e domínio de dobradiça, e em que a proteína de fusão é uma estrutura dimérica de acordo com a estrutura I-A ou estrutura I-B.
- 12. Método de acordo com a reivindicação 1 ou 2, caracterizado pelo fato de que o agonista de TNFRSF é um agonista de GITR, e o agonista de GITR é selecionado a partir do grupo que consiste emPetição 870190062710, de 04/07/2019, pág. 513/5904/28TRX518, 6C8, 36E5, 3D6, 61G6, 6H6, 61F6, 1D8, 17F10, 35D8, 49A1, 9E5, 31H6, 2155, 698, 706, 827, 1649, 1718, 1D7, 33C9, 33F6, 34G4, 35B10, 41E11, 41G5, 42A11, 44C1, 45A8, 46E11, 48H12, 48H7, 49D9, 49E2, 48A9, 5H7, 7A10, 9H6, e fragmentos, derivados, variantes, bios similares, e combinações dos mesmos.
- 13. Método de acordo com a reivindicação 1 ou 2, caracterizado pelo fato de que o agonista de TNFRSF é um agonista de GITR, e o agonista de GITR é uma proteína de fusão de agonista de GITR.
- 14. Método de acordo com a reivindicação 13, caracterizado pelo fato de que a uma proteína de fusão agonista de GITR compreende (i) um primeiro domínio de ligação de GITR solúvel, (ii) um primeiro ligante peptídico, (iii) um segundo domínio de ligação de GITR solúvel, (iv) um segundo ligante peptídico, e (v) um terceiro domínio de ligação de GITR solúvel, compreendendo adicionalmente um domínio adicional na extremidade do terminal N e/ou terminal C, e em que o domínio adicional compreende um domínio de fragmento Fe e domínio de dobradiça, e em que a proteína de fusão é uma estrutura dimérica de acordo com a estrutura I-A ou estrutura I-B.
- 15. Método de acordo com a reivindicação 1 ou 2, caracterizado pelo fato de que o agonista de TNFRSF é um agonista de HVEM.
- 16. Método de acordo com a reivindicação 15, caracterizado pelo fato de que o agonista de HVEM é um agonista da proteína de fusão de HVEM.
- 17. Método de acordo com a reivindicação 16, caracterizado pelo fato de que o agonista da proteína de fusão de HVEM compreende (i) um primeiro domínio de ligação de HVEM solúvel, (ii) um primeiro ligante peptídico, (iii) um segundo domínio de ligação de HVEM solúvel, (iv) um segundo ligante peptídico, e (v) um terceiro domínio de ligação de HVEMPetição 870190062710, de 04/07/2019, pág. 514/5905/28 solúvel, compreendendo adicionalmente um domínio adicional na extremidade do terminal N e/ou terminal C, e em que o domínio adicional compreende um domínio de fragmento Fc e domínio de dobradiça, e em que a proteína de fusão é uma estrutura dimérica de acordo com a estrutura I-A ou estrutura I-B.
- 18. Método de acordo com a reivindicação 1 ou 2, caracterizado pelo fato de que o agonista de TNFRSF é um agonista de CD95.
- 19. Método de acordo com a reivindicação 1 ou 2, caracterizado pelo fato de que o agonista de TNFRSF é um agonista de CD95, e o agonista de CD95 é um agonista da proteína de fusão de CD95.
- 20. Método de acordo com a reivindicação 19, caracterizado pelo fato de que o agonista de CD95 é uma proteína de fusão compreendendo (i) um primeiro domínio de ligação de CD95 solúvel, (ii) um primeiro ligante peptídico, (iii) um segundo domínio de ligação de CD95 solúvel, (iv) um segundo ligante peptídico, e (v) um terceiro domínio de ligação de CD95 solúvel, compreendendo adicionalmente um domínio adicional na extremidade do terminal N e/ou terminal C, e em que o domínio adicional compreende um domínio de fragmento Fc e domínio de dobradiça, e em que a proteína de fusão é uma estrutura dimérica de acordo com a estrutura I-A ou estrutura I-B.
- 21. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 20, caracterizado pelo fato de que compreende adicionalmente a etapa de tratar o paciente com o agonista de TNFRSF começando no dia depois da administração da terceira população de TILs ao paciente, em que o agonista de TNFRSF é administrado intravenosamente em uma dose dentre 0,1 mg/kg e 50 mg/kg a cada quatro semanas por até oito ciclos.
- 22. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 21, caracterizado pelo fato de que compreende adicionalmente a etapa de tratar o paciente com o agonista de TNFRSF antes da etapa de excisão de umPetição 870190062710, de 04/07/2019, pág. 515/5906/28 tumor do paciente, em que o agonista de TNFRSF é administrado intravenosamente em uma dose dentre 0,1 mg/kg e 50 mg/kg a cada quatro semanas por até oito ciclos.
- 23. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 22, caracterizado pelo fato de que o agonista de TNFRSF é selecionado a partir do grupo que consiste em urelumab, utomilumab, EU-101, tavolixizumab, MOM-18455 da Creative Biolabs, e fragmentos, derivados, variantes, biossimilares, e combinações dos mesmos.
- 24. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 23, caracterizado pelo fato de que o primeiro meio de cultura de célula compreende um segundo agonista de TNFRSF.
- 25. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 23, caracterizado pelo fato de que o agonista de TNFRSF é um agonista de 4-1BB, e o segundo agonista de TNFRSF é um agonista de 0X40.
- 26. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 25, caracterizado pelo fato de que o agonista de TNFRSF é adicionado ao primeiro meio de cultura de célula durante a expansão inicial em um intervalo selecionado a partir do grupo que consiste em todo dia, a cada dois dias, a cada três dias, a cada quatro dias, a cada cinco dias, a cada seis dias, a cada sete dias, e a cada duas semanas.
- 27. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 26, caracterizado pelo fato de que o agonista de TNFRSF é adicionado ao segundo meio de cultura de célula durante a expansão rápida em um intervalo selecionado a partir do grupo que consiste em todo dia, a cada dois dias, a cada três dias, a cada quatro dias, a cada cinco dias, a cada seis dias, a cada sete dias, e a cada duas semanas.
- 28. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 24 a 27, caracterizado pelo fato de que o agonista de TNFRSF é adicionado em uma concentração suficiente para se obter uma concentração no meio dePetição 870190062710, de 04/07/2019, pág. 516/5907/28 cultura de célula dentre 0,1 pg/mL e 100 pg/mL.
- 29. Método de acordo com a reivindicação 28, caracterizado pelo fato de que o agonista de TNFRSF é adicionado em uma concentração suficiente para se obter uma concentração no meio de cultura de célula dentre 20 pg/mL e 40 pg/mL.
- 30. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 30, caracterizado pelo fato de que IL-2 está presente em uma concentração inicial de cerca de 10 a cerca de 6000 lU/mL no primeiro meio de cultura de célula.
- 31. Método de acordo com a reivindicação 31, caracterizado pelo fato de que IL-2 está presente em uma concentração inicial de cerca de 3000 lU/mL no primeiro meio de cultura de célula.
- 32. Método de acordo com a reivindicação 31, caracterizado pelo fato de que IL-2 está presente em uma concentração inicial de cerca de 800 a cerca de 1100 lU/mL no primeiro meio de cultura de célula.
- 33. Método de acordo com a reivindicação 33, caracterizado pelo fato de que IL-2 está presente em uma concentração inicial de cerca de 1000 lU/mL no primeiro meio de cultura de célula.
- 34. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 30, caracterizado pelo fato de que IL-2 está presente em uma concentração inicial de cerca de 10 a cerca de 6000 lU/mL no segundo meio de cultura de célula.
- 35. Método de acordo com a reivindicação 35, caracterizado pelo fato de que IL-2 está presente em uma concentração inicial de cerca de 3000 lU/mL no segundo meio de cultura de célula.
- 36. Método de acordo com a reivindicação 35, caracterizado pelo fato de que IL-2 está presente em uma concentração inicial de cerca de 800 a cerca de 1100 lU/mL no segundo meio de cultura de célula.
- 37. Método de acordo com a reivindicação 35, caracterizadoPetição 870190062710, de 04/07/2019, pág. 517/5908/28 pelo fato de que IL-2 está presente em uma concentração inicial de cerca de 1000 lU/mL no segundo meio de cultura de célula.
- 38. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 37, caracterizado pelo fato de que IL-15 está presente no primeiro meio de cultura de célula.
- 39. Método de acordo com a reivindicação 38, caracterizado pelo fato de que IL-15 está presente em uma concentração inicial de cerca de 5 ng/mL a cerca de 20 ng/mL no primeiro meio de cultura de célula.
- 40. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 39, caracterizado pelo fato de que IL-15 está presente no segundo meio de cultura de célula.
- 41. Método de acordo com a reivindicação 40, caracterizado pelo fato de que IL-15 está presente em uma concentração inicial de cerca de 5 ng/mL a cerca de 20 ng/mL no segundo meio de cultura de célula.
- 42. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 41, caracterizado pelo fato de que IL-21 está presente no primeiro meio de cultura de célula.
- 43. Método de acordo com a reivindicação 42, caracterizado pelo fato de que IL-21 está presente em uma concentração inicial de cerca de 5 ng/mL a cerca de 20 ng/mL no primeiro meio de cultura de célula.
- 44. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 43, caracterizado pelo fato de que IL-21 está presente no segundo meio de cultura de célula.
- 45. Método de acordo com a reivindicação 44, caracterizado pelo fato de que IL-21 está presente em uma concentração inicial de cerca de 5 ng/mL a cerca de 20 ng/mL no segundo meio de cultura de célula.
- 46. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 45, caracterizado pelo fato de que o anticorpo OKT-3 está presente em uma concentração inicial de cerca de 10 ng/mL a cerca de 60 ng/mL no segundoPetição 870190062710, de 04/07/2019, pág. 518/5909/28 meio de cultura de célula.
- 47. Método de acordo com a reivindicação 46, caracterizado pelo fato de que o anticorpo OKT-3 está presente em uma concentração inicial de cerca de 30 ng/mL no segundo meio de cultura de célula.
- 48. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 47, caracterizado pelo fato de que a expansão inicial é realizada usando um recipiente permeável a gás.
- 49. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 48, caracterizado pelo fato de que a expansão rápida é realizada usando um recipiente permeável a gás.
- 50. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 49, caracterizado pelo fato de que compreende adicionalmente a etapa de tratar o paciente com um regime de linfodepleção não mieloablativa antes de administrar a terceira população de TILs ao paciente.
- 51. Método de acordo com a reivindicação 50, caracterizado pelo fato de que o regime de linfodepleção não mieloablativa compreende as etapas de administração de ciclofosfamida em uma dose de 60 mg/m2/dia durante dois dias seguidos pela administração de fludarabina em uma dose de 25 mg/m2/dia durante cinco dias.
- 52. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 51, caracterizado pelo fato de que compreende adicionalmente a etapa de tratar o paciente com um regime decrescente de IL-2 começando no dia depois da administração da terceira população de TILs ao paciente, em que o regime decrescente de IL-2 compreende aldesleucina administrada intravenosamente em uma dose de 18.000.000 IU/m2 no dia 1, 9.000.000 IU/m2 no dia 2, e 4.500.000 IU/m2 nos dias 3 e 4.
- 53. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 51, caracterizado pelo fato de que compreende adicionalmente a etapa de tratar o paciente com IL-2 peguilado depois da administração da terceiraPetição 870190062710, de 04/07/2019, pág. 519/59010/28 população de TILs ao paciente em uma dose de 0,10 mg/dia a 50 mg/dia.
- 54. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 51, caracterizado pelo fato de que compreende adicionalmente a etapa de tratar o paciente com um regime de IL-2 de alta dose começando no dia depois da administração da terceira população de TILs ao paciente.
- 55. Método de acordo com a reivindicação 54, caracterizado pelo fato de que regime de IL-2 de alta dose compreende 600.000 ou 720.000 lU/kg de aldesleucina, ou um biossimilar ou variante da mesma, administradas como uma infusão intravenosa de bolo de 15 minutos a cada oito horas até tolerância.
- 56. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 55, caracterizado pelo fato de que o câncer é selecionado a partir do grupo que consiste em melanoma, câncer ovariano, câncer cervical, câncer pulmonar, câncer vesical, câncer mamário, câncer da cabeça e pescoço, carcinoma de célula renal, leucemia mieloide aguda, câncer colorretal, colangiocarcinoma, e sarcoma.
- 57. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 56, caracterizado pelo fato de que o câncer é selecionado a partir do grupo que consiste em câncer pulmonar de célula não pequena (NSCLC), câncer mamário negativo triplo, melanoma refratário duplo, e melanoma uveal (ocular).
- 58. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 57, caracterizado pelo fato de que compreende adicionalmente a etapa de tratar o paciente com um inibidor de PD-1 ou inibidor de PD-Li antes de excisar o tumor do paciente.
- 59. Método de acordo com a reivindicação 58, caracterizado pelo fato de que o inibidor de PD-1 ou inibidor de PD-Li são selecionados do grupo que consiste em nivolumab, pembrolizumab, durvalumab, atezolizumab, avelumab, e fragmentos, derivados, variantes, biossimilares, ePetição 870190062710, de 04/07/2019, pág. 520/59011/28 combinações dos mesmos.
- 60. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 59, caracterizado pelo fato de que compreende adicionalmente a etapa de tratar o paciente com um inibidor de PD-1 ou inibidor de PD-Li depois de excisar o tumor do paciente.
- 61. Método de acordo com a reivindicação 60, caracterizado pelo fato de que o inibidor de PD-1 ou inibidor de PD-Li são selecionados do grupo que consiste em nivolumab, pembrolizumab, durvalumab, atezolizumab, avelumab, e fragmentos, derivados, variantes, biossimilares, e combinações dos mesmos.
- 62. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 61, caracterizado pelo fato de que compreende adicionalmente a etapa de tratar o paciente com um inibidor de PD-1 ou inibidor de PD-Li depois de administrar a terceira população de TILs ao paciente.
- 63. Método de acordo com a reivindicação 62, caracterizado pelo fato de que o inibidor de PD-1 ou inibidor de PD-Li são selecionados do grupo que consiste em nivolumab, pembrolizumab, durvalumab, atezolizumab, avelumab, e fragmentos, derivados, variantes, biossimilares, e combinações dos mesmos.
- 64. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 63, caracterizado pelo fato de que o primeiro meio de cultura de célula compreende adicionalmente IL-4, IL-7, ou uma combinação dos mesmos.
- 65. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 64, caracterizado pelo fato de que o segundo meio de cultura de célula compreende adicionalmente IL-4, IL-7, ou uma combinação dos mesmos.
- 66. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 65, caracterizado pelo fato de que a expansão inicial é realizada em um período de 11 dias ou menos.
- 67. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 1Petição 870190062710, de 04/07/2019, pág. 521/59012/28 a 65, caracterizado pelo fato de que a expansão rápida é realizada em um período de 11 dias ou menos.
- 68. Processo para preparação de uma população de linfócitos infiltrantes de tumor (TILs), caracterizado pelo fato de que compreende as etapas de:(b) obter uma primeira população de TILs;(c) realizar uma expansão inicial da primeira população de TILs em um primeiro meio de cultura de célula para se obter uma segunda população de TILs, em que a segunda população de TILs é pelo menos 5 vezes maior em número do que a primeira população de TILs, em que o primeiro meio de cultura de célula compreende IL-2 e um agonista da superfamília do receptor de necrose de tumor (TNFRSF), e em que a expansão inicial é realizada em um período de 21 dias ou menos;(d) realizar uma expansão rápida da segunda população de TILs em um segundo meio de cultura de célula para se obter uma terceira população de TILs, em que a terceira população de TILs é pelo menos 50 vezes maior em número do que a segunda população de TILs depois de 7 dias do início da expansão rápida; em que o segundo meio de cultura de célula compreende IL-2, OKT-3 (anticorpo anti-CD3), células mononucleares de sangue periférico (PBMCs), e opcionalmente o agonista de TNFRSF, e em que a expansão rápida é realizada em um período de 14 dias ou menos; e (e) colher a terceira população de TILs.
- 69. Processo de acordo com a reivindicação 68, caracterizado pelo fato de que a primeira população de TILs é obtida de um tumor este que foi excisado de um paciente.
- 70. Processo de acordo com a reivindicação 68 ou 69, caracterizado pelo fato de que o agonista de TNFRSF é selecionado a partir do grupo que consiste em um agonista de 4-1BB, um agonista de 0X40, um agonista de CD27, um agonista de GITR, um agonista de HVEM, umPetição 870190062710, de 04/07/2019, pág. 522/59013/28 agonista de CD95, e combinações dos mesmos.
- 71. Processo de acordo com qualquer uma das reivindicações 68 a 70, caracterizado pelo fato de que o agonista de TNFRSF é um agonista de 4- IBB.
- 72. Processo de acordo com qualquer uma das reivindicações 68 a 71, caracterizado pelo fato de que o agonista de TNFRSF é um agonista de 4-IBB, e o agonista de 4-IBB é selecionado a partir do grupo que consiste em urelumab, utomilumab, EU-101, e fragmentos, derivados, variantes, biossimilares, e combinações dos mesmos.
- 73. Processo de acordo com qualquer uma das reivindicações 68 a 72, caracterizado pelo fato de que o agonista de TNFRSF é um agonista de 4-1 BB, e o agonista de 4-1 BB é um agonista da proteína de fusão 4-1 BB.
- 74. Processo de acordo com qualquer uma das reivindicações 68 a 73, caracterizado pelo fato de que o agonista de TNFRSF é um agonista da proteína de fusão de 4-1BB, e o agonista da proteína de fusão 4-1BB compreende (i) um primeiro domínio de ligação de 4-1 BB solúvel, (ii) um primeiro ligante peptídico, (iii) um segundo domínio de ligação de 4-1 BB solúvel, (iv) um segundo ligante peptídico, e (v) um terceiro domínio de ligação de 4-1 BB solúvel, compreendendo adicionalmente um domínio adicional na extremidade do terminal N e/ou terminal C, e em que o domínio adicional compreende um domínio de fragmento Fc e domínio de dobradiça, e em que a proteína de fusão é uma estrutura dimérica de acordo com a estrutura I-A ou estrutura I-B.
- 75. Processo de acordo com qualquer uma das reivindicações 68 a 74, caracterizado pelo fato de que o agonista de TNFRSF é um agonista de 0X40.
- 76. Processo de acordo com qualquer uma das reivindicações 68 a 75, caracterizado pelo fato de que o agonista de TNFRSF é um agonista de 0X40, e o agonista de 0X40 é selecionado a partir do grupo que consistePetição 870190062710, de 04/07/2019, pág. 523/59014/28 em tavolixizumab, GSK3174998, MEDI6469, MEDI6383, MOXR0916, PF04518600, MOM-18455 da Creative Biolabs, e fragmentos, derivados, variantes, biossimilares, e combinações dos mesmos.
- 77. Processo de acordo com qualquer uma das reivindicações 68 a 76, caracterizado pelo fato de que o agonista de TNFRSF é um agonista de 0X40, e o agonista de 0X40 é um agonista da proteína de fusão de 0X40.
- 78. Processo de acordo com qualquer uma das reivindicações 68 a 77, caracterizado pelo fato de que o agonista de TNFRSF é um agonista da proteína de fusão de 0X40, e o agonista da proteína de fusão de 0X40 compreende (i) um primeiro domínio de ligação de 0X40 solúvel, (ii) um primeiro ligante peptídico, (iii) um segundo domínio de ligação de 0X40 solúvel, (iv) um segundo ligante peptídico, e (v) um terceiro domínio de ligação de 0X40 solúvel, compreendendo adicionalmente um domínio adicional na extremidade do terminal N e/ou terminal C, e em que o domínio adicional compreende um domínio de fragmento Fc e domínio de dobradiça, e em que a proteína de fusão é uma estrutura dimérica de acordo com a estrutura I-A ou estrutura I-B.
- 79. Processo de acordo com qualquer uma das reivindicações 68 a 78, caracterizado pelo fato de que o agonista de TNFRSF é um agonista de CD27.
- 80. Processo de acordo com qualquer uma das reivindicações 68 a 79, caracterizado pelo fato de que o agonista de TNFRSF é um agonista de CD27, e o agonista de CD27 é varlilumab, ou um fragmento, derivado, variante, ou biossimilar dos mesmos.
- 81. Processo de acordo com qualquer uma das reivindicações 68 a 80, caracterizado pelo fato de que o agonista de TNFRSF é um agonista de CD27, e em que o agonista de CD27 é um agonista da proteína de fusão de CD27.
- 82. Processo de acordo com qualquer uma das reivindicaçõesPetição 870190062710, de 04/07/2019, pág. 524/59015/2868 a 81, caracterizado pelo fato de que o agonista de TNFRSF é um agonista de CD27, e o agonista da proteína de fusão de CD27 compreende (i) um primeiro domínio de ligação de CD27 solúvel, (ii) um primeiro ligante peptídico, (iii) um segundo domínio de ligação de CD27 solúvel, (iv) um segundo ligante peptídico, e (v) um terceiro domínio de ligação de CD27 solúvel, compreendendo adicionalmente um domínio adicional na extremidade do terminal N e/ou terminal C, e em que o domínio adicional compreende um domínio de fragmento Fe e domínio de dobradiça, e em que a proteína de fusão é uma estrutura dimérica de acordo com a estrutura I-A ou estrutura I-B.
- 83. Processo de acordo com qualquer uma das reivindicações 68 a 82, caracterizado pelo fato de que o agonista de TNFRSF é um agonista de GITR.
- 84. Processo de acordo com qualquer uma das reivindicações 68 a 83, caracterizado pelo fato de que o agonista de TNFRSF é um agonista de GITR, e o agonista de GITR é selecionado a partir do grupo que consiste em TRX518, 6C8, 36E5, 3D6, 61G6, 6H6, 61F6, 1D8, 17F10, 35D8, 49A1, 9E5, 31H6, 2155, 698, 706, 827, 1649, 1718, 1D7, 33C9, 33F6, 34G4, 35B10, 41E11, 41G5, 42A11, 44C1, 45A8, 46E11, 48H12, 48H7, 49D9, 49E2, 48A9, 5H7, 7A10, 9H6, e fragmentos, derivados, variantes, biossimilares, e combinações dos mesmos.
- 85. Processo de acordo com qualquer uma das reivindicações 68 a 84, caracterizado pelo fato de que o agonista de TNFRSF é um agonista de GITR e o agonista de GITR é uma proteína de fusão de agonista de GITR.
- 86. Processo de acordo com qualquer uma das reivindicações 68 a 85, caracterizado pelo fato de que o agonista de TNFRSF é uma proteína de fusão de agonista de GITR, e a uma proteína de fusão agonista de GITR compreende (i) um primeiro domínio de ligação de GITR solúvel, (ii) um primeiro ligante peptídico, (iii) um segundo domínio de ligação de GITRPetição 870190062710, de 04/07/2019, pág. 525/59016/28 solúvel, (iv) um segundo ligante peptídico, e (v) um terceiro domínio de ligação de GITR solúvel, compreendendo adicionalmente um domínio adicional na extremidade do terminal N e/ou terminal C, e em que o domínio adicional compreende um domínio de fragmento Fc e domínio de dobradiça, e em que a proteína de fusão é uma estrutura dimérica de acordo com a estrutura I-A ou estrutura I-B.
- 87. Processo de acordo com qualquer uma das reivindicações 68 a 86, caracterizado pelo fato de que o agonista de TNFRSF é um agonista de HVEM.
- 88. Processo de acordo com qualquer uma das reivindicações 68 a 87, caracterizado pelo fato de que o agonista de TNFRSF é um agonista de HVEM, e o agonista de HVEM é um agonista da proteína de fusão de HVEM.
- 89. Processo de acordo com qualquer uma das reivindicações 68 a 88, caracterizado pelo fato de que o agonista de TNFRSF é um agonista da proteína de fusão de HVEM, e em que o agonista da proteína de fusão de HVEM compreende (i) um primeiro domínio de ligação de HVEM solúvel, (ii) um primeiro ligante peptídico, (iii) um segundo domínio de ligação de HVEM solúvel, (iv) um segundo ligante peptídico, e (v) um terceiro domínio de ligação de HVEM solúvel, compreendendo adicionalmente um domínio adicional na extremidade do terminal N e/ou terminal C, e em que o domínio adicional compreende um domínio de fragmento Fc e domínio de dobradiça, e em que a proteína de fusão é uma estrutura dimérica de acordo com a estrutura I-A ou estrutura I-B.
- 90. Processo de acordo com qualquer uma das reivindicações 68 a 89, caracterizado pelo fato de que o agonista de TNFRSF é selecionado a partir do grupo que consiste em urelumab, utomilumab, EU-101, tavolixizumab, MOM-18455 da Creative Biolabs, e fragmentos, derivados, variantes, biossimilares, e combinações dos mesmos.Petição 870190062710, de 04/07/2019, pág. 526/59017/28
- 91. Processo de acordo com qualquer uma das reivindicações 68 a 90, caracterizado pelo fato de que o primeiro meio de cultura de célula compreende um segundo agonista de TNFRSF.
- 92. Processo de acordo com qualquer uma das reivindicações 68 a 91, caracterizado pelo fato de que o agonista de TNFRSF é adicionado ao primeiro meio de cultura de célula durante a expansão inicial em um intervalo selecionado a partir do grupo que consiste em todo dia, a cada dois dias, a cada três dias, a cada quatro dias, a cada cinco dias, a cada seis dias, a cada sete dias, e a cada duas semanas.
- 93. Processo de acordo com qualquer uma das reivindicações 68 a 92, caracterizado pelo fato de que o agonista de TNFRSF é adicionado ao segundo meio de cultura de célula durante a expansão rápida em um intervalo selecionado a partir do grupo que consiste em todo dia, a cada dois dias, a cada três dias, a cada quatro dias, a cada cinco dias, a cada seis dias, a cada sete dias, e a cada duas semanas.
- 94. Processo de acordo com qualquer uma das reivindicações 68 a 93, caracterizado pelo fato de que o agonista de TNFRSF é adicionado em uma concentração suficiente para se obter uma concentração no meio de cultura de célula dentre 0,1 pg/mL e 100 pg/mL.
- 95. Processo de acordo com qualquer uma das reivindicações 68 a 94, caracterizado pelo fato de que o agonista de TNFRSF é adicionado em uma concentração suficiente para se obter uma concentração no meio de cultura de célula dentre 20 pg/mL e 40 pg/mL.
- 96. Processo de acordo com qualquer uma das reivindicações 68 a 95, caracterizado pelo fato de que IL-2 está presente em uma concentração inicial de cerca de 10 a cerca de 6000 lU/mL no primeiro meio de cultura de célula.
- 97. Processo de acordo com qualquer uma das reivindicações 68 a 96, caracterizado pelo fato de que IL-2 está presente em umaPetição 870190062710, de 04/07/2019, pág. 527/59018/28 concentração inicial de cerca de 3000 IU/mL no primeiro meio de cultura de célula.
- 98. Processo de acordo com qualquer uma das reivindicações 68 a 97, caracterizado pelo fato de que IL-2 está presente em uma concentração inicial de cerca de 800 a cerca de 1100 IU/mL no primeiro meio de cultura de célula.
- 99. Processo de acordo com qualquer uma das reivindicações 68 a 98, caracterizado pelo fato de que IL-2 está presente em uma concentração inicial de cerca de 1000 IU/mL no primeiro meio de cultura de célula.
- 100. Processo de acordo com qualquer uma das reivindicações 68 a 99, caracterizado pelo fato de que IL-2 está presente em uma concentração inicial de cerca de 10 a cerca de 6000 IU/mL no segundo meio de cultura de célula.
- 101. Processo de acordo com qualquer uma das reivindicações 68 a 100, caracterizado pelo fato de que IL-2 está presente em uma concentração inicial de cerca de 3000 IU/mL no segundo meio de cultura de célula.
- 102. Processo de acordo com qualquer uma das reivindicações 68 a 101, caracterizado pelo fato de que IL-2 está presente em uma concentração inicial de cerca de 800 a cerca de 1100 IU/mL no segundo meio de cultura de célula.
- 103. Processo de acordo com qualquer uma das reivindicações 68 a 102, caracterizado pelo fato de que IL-2 está presente em uma concentração inicial de cerca de 1000 IU/mL no segundo meio de cultura de célula.
- 104. Processo de acordo com qualquer uma das reivindicações 68 a 103, caracterizado pelo fato de que IL-15 está presente no primeiro meio de cultura de célula.Petição 870190062710, de 04/07/2019, pág. 528/59019/28
- 105. Processo de acordo com qualquer uma das reivindicações 68 a 104, caracterizado pelo fato de que IL-15 está presente em uma concentração inicial de cerca de 5 ng/mL a cerca de 20 ng/mL no primeiro meio de cultura de célula.
- 106. Processo de acordo com qualquer uma das reivindicações 68 a 105, caracterizado pelo fato de que IL-15 está presente no segundo meio de cultura de célula.
- 107. Processo de acordo com qualquer uma das reivindicações 68 a 106, caracterizado pelo fato de que IL-15 está presente em uma concentração inicial de cerca de 5 ng/mL a cerca de 20 ng/mL no segundo meio de cultura de célula.
- 108. Processo de acordo com qualquer uma das reivindicações 68 a 107, caracterizado pelo fato de que IL-21 está presente no primeiro meio de cultura de célula.
- 109. Processo de acordo com qualquer uma das reivindicações 68 a 108, caracterizado pelo fato de que IL-21 está presente em uma concentração inicial de cerca de 5 ng/mL a cerca de 20 ng/mL no primeiro meio de cultura de célula.
- 110. Processo de acordo com qualquer uma das reivindicações 68 a 109, caracterizado pelo fato de que IL-21 está presente no segundo meio de cultura de célula.
- 111. Processo de acordo com qualquer uma das reivindicações 68 a 110, caracterizado pelo fato de que IL-21 está presente em uma concentração inicial de cerca de 5 ng/mL a cerca de 20 ng/mL no segundo meio de cultura de célula.
- 112. Processo de acordo com qualquer uma das reivindicações 68 a 111, caracterizado pelo fato de que o anticorpo OKT-3 está presente em uma concentração inicial de cerca de 10 ng/mL a cerca de 60 ng/mL no segundo meio de cultura de célula.Petição 870190062710, de 04/07/2019, pág. 529/59020/28
- 113. Processo de acordo com qualquer uma das reivindicações 68 a 112, caracterizado pelo fato de que o anticorpo OKT-3 está presente em uma concentração inicial de cerca de 30 ng/mL no segundo meio de cultura de célula.
- 114. Processo de acordo com qualquer uma das reivindicações 68 a 113, caracterizado pelo fato de que a expansão inicial é realizada usando um recipiente permeável a gás.
- 115. Processo de acordo com qualquer uma das reivindicações 68 a 114, caracterizado pelo fato de que a expansão rápida é realizada usando um recipiente permeável a gás.
- 116. População de linfócitos infiltrantes de tumor (TILs), caracterizada pelo fato de ser obtenível de um processo como definido em qualquer uma das reivindicações 68 a 115.
- 117. Composição farmacêutica, caracterizada pelo fato de que compreende uma população de linfócitos infiltrantes de tumor (TILs) para o uso no tratamento de um câncer em que a população de linfócitos infiltrantes de tumor (TILs) é obtenível por um processo como definido em qualquer uma das reivindicações 68 a 115, em que opcionalmente a composição farmacêutica compreende a terceira população de TILs.
- 118. Composição farmacêutica para o uso no tratamento de um câncer de acordo com a reivindicação 117, caracterizada pelo fato de que a composição farmacêutica é para o uso em combinação com um agonista de TNFRSF.
- 119. Composição farmacêutica para o uso no tratamento de um câncer de acordo com a reivindicação 117, caracterizada pelo fato de que a composição farmacêutica é para o uso em combinação com um agonista de TNFRSF em que o agonista de TNFRSF é para administração no dia depois da administração da terceira população de TILs ao paciente, e em que o agonista de TNFRSF é administrado intravenosamente em uma dose dentrePetição 870190062710, de 04/07/2019, pág. 530/59021/280,1 mg/kg e 50 mg/kg a cada quatro semanas por até oito ciclos.
- 120. Composição farmacêutica para o uso no tratamento de um câncer de acordo com a reivindicação 117, caracterizada pelo fato de que a composição farmacêutica é para o uso em combinação com um agonista de TNFRSF em que o agonista de TNFRSF é para administração antes da etapa de excisão de um tumor do paciente, e em que o agonista de TNFRSF é para administração intravenosamente em uma dose dentre 0,1 mg/kg e 50 mg/kg a cada quatro semanas por até oito ciclos.
- 121. Composição farmacêutica para o uso no tratamento de um câncer de acordo com a reivindicação 117, caracterizada pelo fato de ser para o uso em combinação com um regime de linfodepleção não mieloablativa.
- 122. Composição farmacêutica para o uso no tratamento de um câncer de acordo com a reivindicação 117, caracterizada pelo fato de que a composição farmacêutica é para o uso em combinação com um regime de linfodepleção mieloablativa antes de administrar a terceira população de TILs ao paciente.
- 123. Composição farmacêutica para o uso no tratamento de um câncer de acordo com a reivindicação 117, caracterizada pelo fato de que a composição farmacêutica é para o uso em combinação com um regime de linfodepleção mieloablativa em que o regime de linfodepleção não mieloablativa é para administração antes de administrar a terceira população de TILs ao paciente, e em que o regime de linfodepleção não mieloablativa compreende as etapas de administração de ciclofosfamida em uma dose de 60 mg/m2/dia durante dois dias seguidos pela administração de fludarabina em uma dose de 25 mg/m2/dia durante cinco dias.
- 124. Composição farmacêutica para o uso no tratamento de um câncer de acordo com a reivindicação 117, caracterizada pelo fato de que a composição farmacêutica é para o uso em combinação com um regime decrescente de IL-2.Petição 870190062710, de 04/07/2019, pág. 531/59022/28
- 125. Composição farmacêutica para o uso no tratamento de um câncer de acordo com a reivindicação 117, caracterizada pelo fato de que a composição farmacêutica é para o uso em combinação com um regime decrescente de IL-2 começando no dia depois da administração da terceira população de TILs ao paciente, em que o regime decrescente de IL-2 compreende aldesleucina administrado intravenosamente em uma dose de 18.000.000 IU/m2 no dia 1, 9.000.000 IU/m2 no dia 2, e 4.500.000 IU/m2 nos dias 3 e 4.
- 126. Composição farmacêutica para o uso no tratamento de um câncer de acordo com a reivindicação 117, caracterizada pelo fato de que a composição farmacêutica é para o uso em combinação com IL-2 peguilado.
- 127. Composição farmacêutica para o uso no tratamento de um câncer de acordo com a reivindicação 117, caracterizada pelo fato de que a composição farmacêutica é para o uso em combinação com IL-2 peguilado administrado depois da administração da terceira população de TILs ao paciente em uma dose de 0,10 mg/dia a 50 mg/dia.
- 128. Composição farmacêutica para o uso no tratamento de um câncer de acordo com a reivindicação 117, caracterizada pelo fato de que a composição farmacêutica é para o uso em combinação com um regime de IL2 de alta dose.
- 129. Composição farmacêutica para o uso no tratamento de um câncer de acordo com a reivindicação 117, caracterizada pelo fato de que a composição farmacêutica é para o uso em combinação com um regime de IL2 de alta dose começando no dia depois da administração da terceira população de TILs ao paciente.
- 130. Composição farmacêutica para o uso no tratamento de um câncer de acordo com a reivindicação 117, caracterizada pelo fato de que a composição farmacêutica é para o uso em combinação com um regime de IL2 de alta dose começando no dia depois da administração da terceiraPetição 870190062710, de 04/07/2019, pág. 532/59023/28 população de TILs ao paciente, em que o regime de IL-2 de alta dose compreende 600.000 ou 720.000 lU/kg de aldesleucina, ou um biossimilar ou variante da mesma, administrados como uma infusão intravenosa de bolo de 15 minutos a cada oito horas até a tolerância.
- 131. Composição farmacêutica para o uso no tratamento de um câncer de acordo com a reivindicação 117, caracterizada pelo fato de que a composição farmacêutica é para o uso em combinação com um inibidor de PD-1 ou inibidor de PD-Li.
- 132. Composição farmacêutica para o uso no tratamento de um câncer de acordo com a reivindicação 117, caracterizada pelo fato de que a composição farmacêutica é para o uso em combinação com um inibidor de PD-1 ou inibidor de PD-Li, em que o inibidor de PD-1 ou inibidor de PD-Li são selecionados do grupo que consiste em nivolumab, pembrolizumab, durvalumab, atezolizumab, avelumab, e fragmentos, derivados, variantes, biossimilares, e combinações dos mesmos.
- 133. Composição farmacêutica para o uso no tratamento de um câncer de acordo com a reivindicação 117, caracterizada pelo fato de que a composição farmacêutica é para o uso em combinação com um inibidor de PD-1 ou inibidor de PD-Li, em que o inibidor de PD-1 ou inibidor de PD-Li é administrado antes da excisão do tumor do paciente.
- 134. Composição farmacêutica para o uso no tratamento de um câncer de acordo com a reivindicação 117, caracterizada pelo fato de que a composição farmacêutica é para o uso em combinação com um inibidor de PD-1 ou inibidor de PD-Li antes da excisão do tumor do paciente, em que o inibidor de PD-1 ou inibidor de PD-Li são selecionados do grupo que consiste em nivolumab, pembrolizumab, durvalumab, atezolizumab, avelumab, e fragmentos, derivados, variantes, biossimilares, e combinações dos mesmos.
- 135. Composição farmacêutica para o uso no tratamento de um câncer de acordo com a reivindicação 117, caracterizada pelo fato de que aPetição 870190062710, de 04/07/2019, pág. 533/59024/28 composição farmacêutica é para o uso em combinação com um inibidor de PD-1 ou inibidor de PD-Li depois da excisão de um tumor do paciente.
- 136. Composição farmacêutica para o uso no tratamento de um câncer de acordo com a reivindicação 117, caracterizada pelo fato de que a composição farmacêutica é para o uso em combinação com um inibidor de PD-1 ou inibidor de PD-Li depois da excisão do tumor do paciente, em que o inibidor de PD-1 ou inibidor de PD-Li são selecionados do grupo que consiste em nivolumab, pembrolizumab, durvalumab, atezolizumab, avelumab, e fragmentos, derivados, variantes, biossimilares, e combinações dos mesmos.
- 137. Composição farmacêutica para o uso no tratamento de um câncer de acordo com a reivindicação 117, caracterizada pelo fato de que a composição farmacêutica é para o uso em combinação com um inibidor de PD-1 ou inibidor de PD-Li que é para administração depois de administrar a terceira população de TILs ao paciente.
- 138. Composição farmacêutica para o uso no tratamento de um câncer de acordo com a reivindicação 117, caracterizada pelo fato de que a composição farmacêutica é para o uso em combinação com um inibidor de PD-1 ou inibidor de PD-Li que é para administração depois de administrar a terceira população de TILs ao paciente, em que o inibidor de PD-1 ou inibidor de PD-Li são selecionados do grupo que consiste em nivolumab, pembrolizumab, durvalumab, atezolizumab, avelumab, e fragmentos, derivados, variantes, biossimilares, e combinações dos mesmos.
- 139. Composição farmacêutica para o uso no tratamento de um câncer de acordo com qualquer uma das reivindicações 117 a 138, caracterizada pelo fato de que o câncer é selecionado a partir do grupo que consiste em melanoma, câncer ovariano, câncer cervical, câncer pulmonar, câncer vesical, câncer mamário, câncer da cabeça e pescoço, carcinoma de célula renal, leucemia mieloide aguda, câncer colorretal, colangiocarcinoma, e sarcoma.Petição 870190062710, de 04/07/2019, pág. 534/59025/28
- 140. Composição farmacêutica para o uso no tratamento de um câncer de acordo com qualquer uma das reivindicações 117 a 138, caracterizada pelo fato de que o câncer é selecionado a partir do grupo que consiste em câncer pulmonar de célula não pequena (NSCLC), câncer mamário negativo triplo, melanoma refratário duplo, e melanoma uveal (ocular).
- 141. Método de tratar um câncer com uma população de linfócitos infiltrantes de tumor (TILs), caracterizado pelo fato de que compreende as etapas de:(a) excisar um tumor de um paciente;(b) obter uma primeira população de TILs do tumor;(c) realizar uma expansão inicial da primeira população de TILs em um primeiro meio de cultura de célula para se obter uma segunda população de TILs, em que a segunda população de TILs é pelo menos 5 vezes maior em número do que a primeira população de TILs, em que o primeiro meio de cultura de célula compreende IL-2, e em que a expansão inicial é realizada em um período de 11 dias ou menos;(d) realizar uma expansão rápida da segunda população de TILs em um segundo meio de cultura de célula para se obter uma terceira população de TILs, em que a terceira população de TILs é pelo menos 50 vezes maior em número do que a segunda população de TILs depois de 7 dias do início da expansão rápida; em que o segundo meio de cultura de célula compreende IL-2, anticorpo OKT-3 (anti-CD3), células mononucleares de sangue periférico (PBMCs), e um agonista de TNFRSF, e em que a expansão rápida é realizada em um período de 11 dias ou menos;(e) colher a terceira população de TILs; e (f) administrar uma porção terapeuticamente eficaz da terceira população de TILs ao paciente.
- 142. Método de acordo com a reivindicação 141, caracterizadoPetição 870190062710, de 04/07/2019, pág. 535/59026/28 pelo fato de que o agonista de TNFRSF é selecionado a partir do grupo que consiste em um agonista de 4-1 BB, um agonista de 0X40, e uma combinação dos mesmos
- 143. Método de acordo com a reivindicação 142, caracterizado pelo fato de que o agonista de TNFRSF é um agonista de 4-1 BB, e o agonista de 4-1BB é selecionado a partir do grupo que consiste em urelumab, utomilumab, EU-101, uma proteína de fusão, e fragmentos, derivados, variantes, biossimilares, e combinações dos mesmos.
- 144. Método de acordo com a reivindicação 142, caracterizado pelo fato de que o agonista de TNFRSF é um agonista de 0X40, e o agonista de 0X40 é selecionado a partir do grupo que consiste em tavolixizumab, GSK3174998, MEDI6469, MEDI6383, MOXR0916, PF-04518600, MOM18455 da Creative Biolabs, e fragmentos, derivados, variantes, biossimilares, e combinações dos mesmos.
- 145. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 141 a 144, caracterizado pelo fato de que o agonista de TNFRSF está presente no início da etapa (d) em uma concentração entre 1 pg/mL e 30 pg/mL.
- 146. Método de acordo com a reivindicação 145, caracterizado pelo fato de que o agonista de TNFRSF está presente no início da etapa (d) em uma concentração entre 5 pg/mL e 20 pg/mL.
- 147. Método de acordo com a reivindicação 146, caracterizado pelo fato de que o agonista de TNFRSF está presente no início da etapa (d) em uma concentração de cerca de 10 pg/mL.
- 148. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 141 a 144, caracterizado pelo fato de que o agonista de TNFRSF é mantido por toda a etapa (d) em uma concentração entre 1 pg/mL e 30 pg/mL.
- 149. Método de acordo com a reivindicação 145, caracterizado pelo fato de que o agonista de TNFRSF é mantido por toda a etapa (d) em uma concentração entre 5 pg/mL e 20 pg/mL.Petição 870190062710, de 04/07/2019, pág. 536/59027/28
- 150. Método de acordo com a reivindicação 146, caracterizado pelo fato de que o agonista de TNFRSF é mantido por toda a etapa (d) em uma concentração de cerca de 10 pg/mL.
- 151. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 141 a 150, caracterizado pelo fato de que a terceira população de TILs exibe uma razão aumentada de TILs CD8+ para TILs CD4+ em comparação com a razão de referência de TILs CD8+ para TILs CD4+ na segunda população de TILs.
- 152. Método de acordo com a reivindicação 151, caracterizado pelo fato de que a razão aumentada é pelo menos 5% maior do que a razão de referência.
- 153. Método de acordo com a reivindicação 152, caracterizado pelo fato de que a razão aumentada é pelo menos 10% maior do que a razão de referência.
- 154. Método de acordo com a reivindicação 153, caracterizado pelo fato de que a razão aumentada é pelo menos 20% maior do que a razão de referência.
- 155. Método de acordo com a reivindicação 154, caracterizado pelo fato de que a razão aumentada é pelo menos 35% maior do que a razão de referência.
- 156. Método de acordo com a reivindicação 155, caracterizado pelo fato de que a razão aumentada é pelo menos 50% maior do que a razão de referência.
- 157. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 141 a 156, caracterizado pelo fato de que o câncer é selecionado a partir do grupo que consiste em melanoma, melanoma uveal (ocular), câncer ovariano, câncer cervical, câncer pulmonar, câncer vesical, câncer mamário, câncer da cabeça e pescoço (câncer de células escamosa da cabeça e pescoço), carcinoma de célula renal, câncer colorretal, câncer pancreático, glioblastoma,Petição 870190062710, de 04/07/2019, pág. 537/59028/28 colangiocarcinoma, e sarcoma.
- 158. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 141 a 156, caracterizado pelo fato de que o câncer é selecionado a partir do grupo que consiste em melanoma cutâneo, melanoma uveal (ocular), câncer ovariano resistente à platina, adenocarcinoma ductal pancreático, osteossarcoma, câncer mamário negativo triplo, e câncer pulmonar de célula não pequena.
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|---|---|---|---|---|
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| EP3481867A1 (en) | 2016-07-07 | 2019-05-15 | Iovance Biotherapeutics, Inc. | Programmed death 1 ligand 1 (pd-l1) binding proteins and methods of use thereof |
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| GB201700621D0 (en) | 2017-01-13 | 2017-03-01 | Guest Ryan Dominic | Method,device and kit for the aseptic isolation,enrichment and stabilsation of cells from mammalian solid tissue |
| CA3056630A1 (en) | 2017-03-15 | 2018-09-20 | Pandion Therapeutics, Inc. | Targeted immunotolerance |
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| JOP20190224A1 (ar) | 2017-03-29 | 2019-09-26 | Iovance Biotherapeutics Inc | عمليات من أجل إنتاج الخلايا اللمفاوية المرتشحة للأورام واستخداماتها في العلاج المناعي |
| CN111010866A (zh) | 2017-05-24 | 2020-04-14 | 潘迪恩治疗公司 | 靶向免疫耐受性 |
| JP2020522516A (ja) | 2017-06-05 | 2020-07-30 | アイオバンス バイオセラピューティクス，インコーポレイテッド | 二重抵抗性黒色腫において腫瘍浸潤リンパ球を使用する方法 |
| US10174091B1 (en) | 2017-12-06 | 2019-01-08 | Pandion Therapeutics, Inc. | IL-2 muteins |
| US10946068B2 (en) | 2017-12-06 | 2021-03-16 | Pandion Operations, Inc. | IL-2 muteins and uses thereof |
| US11713446B2 (en) | 2018-01-08 | 2023-08-01 | Iovance Biotherapeutics, Inc. | Processes for generating TIL products enriched for tumor antigen-specific T-cells |
| WO2019136459A1 (en) * | 2018-01-08 | 2019-07-11 | Iovance Biotherapeutics, Inc. | Processes for generating til products enriched for tumor antigen-specific t-cells |
| BR112020013848A2 (pt) * | 2018-01-08 | 2020-12-01 | Iovance Biotherapeutics, Inc. | métodos para expandir linfócitos infiltrantes de tumor e para tratar um indivíduo com câncer, população de linfócitos infiltrantes de tumor, e, método para avaliar fatores de transcrição |
| BR112020018658A2 (pt) | 2018-03-15 | 2020-12-29 | KSQ Therapeutics, Inc. | Composições de regulação gênica e métodos para imu-noterapia aprimorada |
| US20210198374A1 (en) | 2018-04-17 | 2021-07-01 | Celldex Therapeutics, Inc. | Anti-cd27 and anti-pd-l1 antibodies and bispecific constructs |
| CN112368003A (zh) | 2018-04-27 | 2021-02-12 | 艾欧凡斯生物治疗公司 | 肿瘤浸润淋巴细胞的基因编辑及其在免疫治疗中的用途 |
| WO2020025706A1 (en) * | 2018-07-31 | 2020-02-06 | Polybiocept Gmbh | Production and selection of tumor uber reactive immune cells (turics) |
| WO2020123444A1 (en) * | 2018-12-11 | 2020-06-18 | Celldex Therapeutics, Inc. | Methods of using cd27 antibodies as conditioning treatment for adoptive cell therapy |
| US20220193131A1 (en) * | 2018-12-19 | 2022-06-23 | Iovance Biotherapeutics, Inc. | Methods of Expanding Tumor Infiltrating Lymphocytes Using Engineered Cytokine Receptor Pairs and Uses Thereof |
| KR20200092155A (ko) * | 2019-01-24 | 2020-08-03 | 울산대학교 산학협력단 | 종양침윤림프구를 유효성분으로 포함하는 삼중음성 유방암 예방 또는 치료용 조성물 |
| WO2020222235A1 (en) * | 2019-04-29 | 2020-11-05 | 4C Biomed Inc. | Anti-hvem antibodies and use thereof |
| AU2020279240A1 (en) | 2019-05-20 | 2021-12-23 | Pandion Operations, Inc. | MAdCAM targeted immunotolerance |
| EP3997125A1 (en) * | 2019-07-08 | 2022-05-18 | New York University | Tumor immunotherapy using sindbis viral vectors and agonist monoclonal antibodies |
| GB201911066D0 (en) | 2019-08-02 | 2019-09-18 | Achilles Therapeutics Ltd | T cell therapy |
| KR20220119439A (ko) | 2019-12-20 | 2022-08-29 | 인스틸 바이오 유케이 리미티드 | 종양 침윤 림프구를 분리하기 위한 장치 및 방법 및 그것의 용도 |
| US11981715B2 (en) | 2020-02-21 | 2024-05-14 | Pandion Operations, Inc. | Tissue targeted immunotolerance with a CD39 effector |
| CN116096865A (zh) * | 2020-02-28 | 2023-05-09 | Ksq治疗公司 | 用于激活和扩增肿瘤浸润淋巴细胞的方法 |
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| US20230226111A1 (en) * | 2020-05-29 | 2023-07-20 | Shanghai Juncell Therapeutics Co., Ltd. | Seed cell medium of tumor-infiltrating lymphocyte and application thereof |
| US20230372397A1 (en) | 2020-10-06 | 2023-11-23 | Iovance Biotherapeutics, Inc. | Treatment of nsclc patients with tumor infiltrating lymphocyte therapies |
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| KR20230124913A (ko) | 2020-11-23 | 2023-08-28 | 라이엘 이뮤노파마, 인크. | 면역 세포를 배양하기 위한 방법 |
| WO2022133149A1 (en) | 2020-12-17 | 2022-06-23 | Iovance Biotherapeutics, Inc. | Treatment of cancers with tumor infiltrating lymphocytes |
| EP4262811A1 (en) | 2020-12-17 | 2023-10-25 | Iovance Biotherapeutics, Inc. | Treatment with tumor infiltrating lymphocyte therapies in combination with ctla-4 and pd-1 inhibitors |
| EP4284919A1 (en) | 2021-01-29 | 2023-12-06 | Iovance Biotherapeutics, Inc. | Methods of making modified tumor infiltrating lymphocytes and their use in adoptive cell therapy |
| CN115315509B (zh) * | 2021-02-08 | 2024-05-07 | 苏州沙砾生物科技有限公司 | 肿瘤浸润淋巴细胞的制备方法及其用途 |
| WO2022182915A1 (en) | 2021-02-25 | 2022-09-01 | Lyell Immunopharma, Inc. | Methods for culturing cells |
| IL307407A (en) * | 2021-04-01 | 2023-12-01 | 4C Biomed Ltd | Improved anti-HVEM antibodies and their use |
| GB202109886D0 (en) | 2021-07-08 | 2021-08-25 | Achilles Therapeutics Uk Ltd | Assay |
| EP4320435A1 (en) | 2021-04-09 | 2024-02-14 | Achilles Therapeutics UK Limited | Batch release assay for pharmaceutical products relating to t cell therapies |
| AU2022263418A1 (en) | 2021-04-19 | 2023-10-26 | Iovance Biotherapeutics, Inc. | Chimeric costimulatory receptors, chemokine receptors, and the use of same in cellular immunotherapies |
| EP4340850A1 (en) | 2021-05-17 | 2024-03-27 | Iovance Biotherapeutics, Inc. | Pd-1 gene-edited tumor infiltrating lymphocytes and uses of same in immunotherapy |
| DE102021002748A1 (de) | 2021-05-27 | 2022-12-01 | Zellwerk Gmbh | Verfahren zur Herstellung von Tumor-infiltrierten T-Lymphozyten (TIL) und deren Verwendung als Zell-Therapeutika für die Behandlung humaner Tumoren |
| CA3223074A1 (en) | 2021-06-22 | 2022-12-29 | Achilles Therapeutics Uk Limited | A method for producing antigen specific t cells |
| CN116406421A (zh) * | 2021-07-13 | 2023-07-07 | 苏州沙砾生物科技有限公司 | 一种免疫细胞的培养方法及其用途 |
| EP4373270A2 (en) | 2021-07-22 | 2024-05-29 | Iovance Biotherapeutics, Inc. | Method for cryopreservation of solid tumor fragments |
| CA3226942A1 (en) | 2021-07-28 | 2023-02-02 | Iovance Biotherapeutics, Inc. | Treatment of cancer patients with tumor infiltrating lymphocyte therapies in combination with kras inhibitors |
| EP4398915A1 (en) | 2021-09-09 | 2024-07-17 | Iovance Biotherapeutics, Inc. | Processes for generating til products using pd-1 talen knockdown |
| AR127482A1 (es) | 2021-10-27 | 2024-01-31 | Iovance Biotherapeutics Inc | Sistemas y métodos para coordinar la fabricación de células para inmunoterapia específica de paciente |
| KR20240099331A (ko) | 2021-10-28 | 2024-06-28 | 라이엘 이뮤노파마, 인크. | 면역 세포를 배양하기 위한 방법 |
| WO2023086803A1 (en) | 2021-11-10 | 2023-05-19 | Iovance Biotherapeutics, Inc. | Methods of expansion treatment utilizing cd8 tumor infiltrating lymphocytes |
| WO2023147488A1 (en) | 2022-01-28 | 2023-08-03 | Iovance Biotherapeutics, Inc. | Cytokine associated tumor infiltrating lymphocytes compositions and methods |
| WO2023196877A1 (en) | 2022-04-06 | 2023-10-12 | Iovance Biotherapeutics, Inc. | Treatment of nsclc patients with tumor infiltrating lymphocyte therapies |
| WO2023201369A1 (en) | 2022-04-15 | 2023-10-19 | Iovance Biotherapeutics, Inc. | Til expansion processes using specific cytokine combinations and/or akti treatment |
| WO2023220608A1 (en) | 2022-05-10 | 2023-11-16 | Iovance Biotherapeutics, Inc. | Treatment of cancer patients with tumor infiltrating lymphocyte therapies in combination with an il-15r agonist |
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| WO2024098027A1 (en) | 2022-11-04 | 2024-05-10 | Iovance Biotherapeutics, Inc. | Methods for tumor infiltrating lymphocyte (til) expansion related to cd39/cd103 selection |
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| WO2024112711A2 (en) | 2022-11-21 | 2024-05-30 | Iovance Biotherapeutics, Inc. | Methods for assessing proliferation potency of gene-edited t cells |
| WO2024118836A1 (en) | 2022-11-30 | 2024-06-06 | Iovance Biotherapeutics, Inc. | Processes for production of tumor infiltrating lymphocytes with shortened rep step |
| CN117025530B (zh) * | 2023-10-10 | 2023-12-12 | 再少年(北京)生物科技有限公司 | 用肿瘤坏死因子受体超家族激动剂扩增肿瘤浸润淋巴细胞（til）的方法 |
Family Cites Families (117)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0154316B1 (en) | 1984-03-06 | 1989-09-13 | Takeda Chemical Industries, Ltd. | Chemically modified lymphokine and production thereof |
| US5206344A (en) | 1985-06-26 | 1993-04-27 | Cetus Oncology Corporation | Interleukin-2 muteins and polymer conjugation thereof |
| US4766106A (en) | 1985-06-26 | 1988-08-23 | Cetus Corporation | Solubilization of proteins for pharmaceutical compositions using polymer conjugation |
| WO1988007089A1 (en) | 1987-03-18 | 1988-09-22 | Medical Research Council | Altered antibodies |
| US6780613B1 (en) | 1988-10-28 | 2004-08-24 | Genentech, Inc. | Growth hormone variants |
| US6362325B1 (en) | 1988-11-07 | 2002-03-26 | Advanced Research And Technology Institute, Inc. | Murine 4-1BB gene |
| US6303121B1 (en) | 1992-07-30 | 2001-10-16 | Advanced Research And Technology | Method of using human receptor protein 4-1BB |
| CA2006596C (en) | 1988-12-22 | 2000-09-05 | Rika Ishikawa | Chemically-modified g-csf |
| US4902502A (en) | 1989-01-23 | 1990-02-20 | Cetus Corporation | Preparation of a polymer/interleukin-2 conjugate |
| US5089261A (en) | 1989-01-23 | 1992-02-18 | Cetus Corporation | Preparation of a polymer/interleukin-2 conjugate |
| DE3920358A1 (de) | 1989-06-22 | 1991-01-17 | Behringwerke Ag | Bispezifische und oligospezifische, mono- und oligovalente antikoerperkonstrukte, ihre herstellung und verwendung |
| DK1136556T3 (da) | 1991-11-25 | 2005-10-03 | Enzon Inc | Fremgangsmåde til fremstilling af multivalente antigen-bindende proteiner |
| US5714350A (en) | 1992-03-09 | 1998-02-03 | Protein Design Labs, Inc. | Increasing antibody affinity by altering glycosylation in the immunoglobulin variable region |
| ES2198414T3 (es) | 1992-10-23 | 2004-02-01 | Immunex Corporation | Procedimientos para preparar proteinas oligomericas solubles. |
| US5821332A (en) | 1993-11-03 | 1998-10-13 | The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University | Receptor on the surface of activated CD4+ T-cells: ACT-4 |
| US5691188A (en) | 1994-02-14 | 1997-11-25 | American Cyanamid Company | Transformed yeast cells expressing heterologous G-protein coupled receptor |
| DE4447484C2 (de) | 1994-04-08 | 1997-07-17 | Deutsches Krebsforsch | Mittel zur Hemmung von Apoptose |
| GB9422383D0 (en) | 1994-11-05 | 1995-01-04 | Wellcome Found | Antibodies |
| JP2911056B2 (ja) | 1995-04-08 | 1999-06-23 | 株式会社エルジ化学 | ヒト４−１ｂｂに特異的なモノクローナル抗体およびこれを産生する細胞株 |
| US6096871A (en) | 1995-04-14 | 2000-08-01 | Genentech, Inc. | Polypeptides altered to contain an epitope from the Fc region of an IgG molecule for increased half-life |
| US6121022A (en) | 1995-04-14 | 2000-09-19 | Genentech, Inc. | Altered polypeptides with increased half-life |
| US5739277A (en) | 1995-04-14 | 1998-04-14 | Genentech Inc. | Altered polypeptides with increased half-life |
| US5869046A (en) | 1995-04-14 | 1999-02-09 | Genentech, Inc. | Altered polypeptides with increased half-life |
| EP0918872B1 (en) | 1996-08-02 | 2008-02-20 | Bristol-Myers Squibb Company | A method for inhibiting immunoglobulin-induced toxicity resulting from the use of immunoglobulins in therapy and in vivo diagnosis |
| NZ334691A (en) | 1996-10-11 | 2000-12-22 | Bristol Myers Squibb Co | Compositions of anti-4-1BB antibody effective for immunomodulation and treatment of T-cell autoimmune disease |
| WO1998023289A1 (en) | 1996-11-27 | 1998-06-04 | The General Hospital Corporation | MODULATION OF IgG BINDING TO FcRn |
| US6277375B1 (en) | 1997-03-03 | 2001-08-21 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Immunoglobulin-like domains with increased half-lives |
| US7118742B2 (en) | 1997-07-07 | 2006-10-10 | La Jolla Institute For Allergy And Immunology | Ligand for herpes simplex virus entry mediator and methods of use |
| ATE408011T1 (de) | 1998-02-24 | 2008-09-15 | Sisters Of Providence In Orego | Zusammensetzungen, die entweder ein ox-40- rezeptor-bindemittel oder eine für ein solches bindemittel kodierende nukleicsäuresequenz enthalten, und verfahren zur verbesserung der antigenspezifischen immunantwort |
| US6312700B1 (en) | 1998-02-24 | 2001-11-06 | Andrew D. Weinberg | Method for enhancing an antigen specific immune response with OX-40L |
| US6194551B1 (en) | 1998-04-02 | 2001-02-27 | Genentech, Inc. | Polypeptide variants |
| US6528624B1 (en) | 1998-04-02 | 2003-03-04 | Genentech, Inc. | Polypeptide variants |
| US6242195B1 (en) | 1998-04-02 | 2001-06-05 | Genentech, Inc. | Methods for determining binding of an analyte to a receptor |
| JP2002510481A (ja) | 1998-04-02 | 2002-04-09 | ジェネンテック・インコーポレーテッド | 抗体変異体及びその断片 |
| ATE458007T1 (de) | 1998-04-20 | 2010-03-15 | Glycart Biotechnology Ag | Glykosylierungs-engineering von antikörpern zur verbesserung der antikörperabhängigen zellvermittelten zytotoxizität |
| GB9809951D0 (en) | 1998-05-08 | 1998-07-08 | Univ Cambridge Tech | Binding molecules |
| CA2341029A1 (en) | 1998-08-17 | 2000-02-24 | Abgenix, Inc. | Generation of modified molecules with increased serum half-lives |
| EP1006183A1 (en) | 1998-12-03 | 2000-06-07 | Max-Planck-Gesellschaft zur Förderung der Wissenschaften e.V. | Recombinant soluble Fc receptors |
| US6737056B1 (en) | 1999-01-15 | 2004-05-18 | Genentech, Inc. | Polypeptide variants with altered effector function |
| ES2694002T3 (es) | 1999-01-15 | 2018-12-17 | Genentech, Inc. | Polipéptido que comprende una región Fc de IgG1 humana variante |
| CA2704600C (en) | 1999-04-09 | 2016-10-25 | Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd. | A method for producing antibodies with increased adcc activity |
| EP2316490A3 (en) | 2000-10-31 | 2012-02-01 | PR Pharmaceuticals, Inc. | Methods and compositions for enhanced delivery of bioactive molecules |
| GB0029407D0 (en) | 2000-12-01 | 2001-01-17 | Affitech As | Product |
| DK1355919T3 (da) | 2000-12-12 | 2011-03-14 | Medimmune Llc | Molekyler med længere halveringstider, sammensætninger og anvendelser deraf |
| US7070995B2 (en) | 2001-04-11 | 2006-07-04 | City Of Hope | CE7-specific redirected immune cells |
| HUP0600342A3 (en) | 2001-10-25 | 2011-03-28 | Genentech Inc | Glycoprotein compositions |
| US20040002587A1 (en) | 2002-02-20 | 2004-01-01 | Watkins Jeffry D. | Fc region variants |
| US20040132101A1 (en) | 2002-09-27 | 2004-07-08 | Xencor | Optimized Fc variants and methods for their generation |
| AU2003209446B2 (en) | 2002-03-01 | 2008-09-25 | Immunomedics, Inc. | Bispecific antibody point mutations for enhancing rate of clearance |
| BR0309145A (pt) | 2002-04-09 | 2005-02-01 | Kyowa Hakko Kogyo Kk | Células das quais o genoma é modificado |
| US7446190B2 (en) | 2002-05-28 | 2008-11-04 | Sloan-Kettering Institute For Cancer Research | Nucleic acids encoding chimeric T cell receptors |
| CA2489004C (en) | 2002-06-13 | 2013-01-08 | Crucell Holland B.V. | Agonistic binding molecules to the human ox40 receptor |
| PL375144A1 (en) | 2002-07-30 | 2005-11-28 | Bristol-Myers Squibb Company | Humanized antibodies against human 4-1bb |
| ATE536188T1 (de) | 2002-08-14 | 2011-12-15 | Macrogenics Inc | Fcgammariib-spezifische antikörper und verfahren zur verwendung davon |
| DK2345671T3 (en) | 2002-09-27 | 2016-02-15 | Xencor Inc | Optimized Fc variants and methods for their formation |
| US7569664B2 (en) | 2002-10-09 | 2009-08-04 | Immunocore Limited | Single chain recombinant T cell receptors |
| AU2003286467B2 (en) | 2002-10-15 | 2009-10-01 | Abbvie Biotherapeutics Inc. | Alteration of FcRn binding affinities or serum half-lives of antibodies by mutagenesis |
| WO2004063351A2 (en) | 2003-01-09 | 2004-07-29 | Macrogenics, Inc. | IDENTIFICATION AND ENGINEERING OF ANTIBODIES WITH VARIANT Fc REGIONS AND METHODS OF USING SAME |
| CN103173354B (zh) | 2003-10-08 | 2017-07-14 | 威尔森沃尔夫制造公司 | 利用透气性材料进行细胞培养的方法及装置 |
| US7288638B2 (en) | 2003-10-10 | 2007-10-30 | Bristol-Myers Squibb Company | Fully human antibodies against human 4-1BB |
| GB0324368D0 (en) | 2003-10-17 | 2003-11-19 | Univ Cambridge Tech | Polypeptides including modified constant regions |
| US7435596B2 (en) | 2004-11-04 | 2008-10-14 | St. Jude Children's Research Hospital, Inc. | Modified cell line and method for expansion of NK cell |
| WO2005077981A2 (en) | 2003-12-22 | 2005-08-25 | Xencor, Inc. | Fc POLYPEPTIDES WITH NOVEL Fc LIGAND BINDING SITES |
| BRPI0506771A (pt) | 2004-01-12 | 2007-05-22 | Applied Molecular Evolution | anticorpo, e, composição farmacêutica |
| WO2005092925A2 (en) | 2004-03-24 | 2005-10-06 | Xencor, Inc. | Immunoglobulin variants outside the fc region |
| DE102004014983A1 (de) | 2004-03-26 | 2005-10-20 | Univ Stuttgart | Rekombinante Polypeptide der Mitglieder der TNF Ligandenfamilie und deren Verwendung |
| WO2005123780A2 (en) | 2004-04-09 | 2005-12-29 | Protein Design Labs, Inc. | Alteration of fcrn binding affinities or serum half-lives of antibodies by mutagenesis |
| CA2566363C (en) | 2004-05-19 | 2014-12-16 | Avidex Ltd | High affinity ny-eso t cell receptor |
| JP5070045B2 (ja) * | 2004-05-27 | 2012-11-07 | ザ・トラステイーズ・オブ・ザ・ユニバーシテイ・オブ・ペンシルベニア | 新規人工抗原提示細胞およびそれらの用途 |
| WO2006085967A2 (en) | 2004-07-09 | 2006-08-17 | Xencor, Inc. | OPTIMIZED ANTI-CD20 MONOCONAL ANTIBODIES HAVING Fc VARIANTS |
| CN101987870B (zh) | 2004-07-15 | 2013-07-03 | 赞科股份有限公司 | 优化的Fc变体 |
| WO2006047350A2 (en) | 2004-10-21 | 2006-05-04 | Xencor, Inc. | IgG IMMUNOGLOBULIN VARIANTS WITH OPTIMIZED EFFECTOR FUNCTION |
| EP1814568A4 (en) | 2004-10-29 | 2009-08-12 | Univ Southern California | ANTI-CANCER POLYIMMUNOTHERAPY IN WHICH CO-STIMULATING MOLECULES ARE USED |
| PT1866339E (pt) | 2005-03-25 | 2013-09-03 | Gitr Inc | Moléculas de ligação a gitr e suas utilizações |
| ES2605380T3 (es) | 2005-05-06 | 2017-03-14 | Providence Health & Services - Oregon | Proteina de fusión OX40-inmunoglobulina trimérica y métodos de uso |
| TWI466269B (zh) | 2006-07-14 | 2014-12-21 | Semiconductor Energy Lab | 非揮發性記憶體 |
| EP1894940A1 (en) | 2006-08-28 | 2008-03-05 | Apogenix GmbH | TNF superfamily fusion proteins |
| US20100136030A1 (en) | 2007-02-27 | 2010-06-03 | Lamhamedi-Cherradi Salah-Eddine | Antagonist ox40 antibodies and their use in the treatment of inflammatory and autoimmune diseases |
| ES2567704T3 (es) | 2007-07-10 | 2016-04-26 | Apogenix Gmbh | Proteínas de fusión de colectina de la superfamilia de TNF |
| EP2851374B1 (en) | 2007-12-14 | 2017-05-03 | Bristol-Myers Squibb Company | Binding molecules to the human OX40 receptor |
| EP2540740B1 (en) | 2008-06-17 | 2014-09-10 | Apogenix GmbH | Multimeric TNF receptors |
| PL2310509T3 (pl) | 2008-07-21 | 2015-08-31 | Apogenix Ag | Jednołańcuchowe cząsteczki TNFSF |
| US8475790B2 (en) | 2008-10-06 | 2013-07-02 | Bristol-Myers Squibb Company | Combination of CD137 antibody and CTLA-4 antibody for the treatment of proliferative diseases |
| EP2829550B1 (en) | 2009-01-09 | 2016-11-16 | Apogenix AG | Fusion proteins forming trimers |
| WO2011028683A1 (en) | 2009-09-03 | 2011-03-10 | Schering Corporation | Anti-gitr antibodies |
| US8956860B2 (en) | 2009-12-08 | 2015-02-17 | Juan F. Vera | Methods of cell culture for adoptive cell therapy |
| US20130115617A1 (en) | 2009-12-08 | 2013-05-09 | John R. Wilson | Methods of cell culture for adoptive cell therapy |
| CA2783550A1 (en) | 2009-12-08 | 2011-06-16 | Wilson Wolf Manufacturing Corporation | Improved methods of cell culture for adoptive cell therapy |
| WO2011130434A2 (en) | 2010-04-13 | 2011-10-20 | Celldex Therapeutics Inc. | Antibodies that bind human cd27 and uses thereof |
| US20120213771A1 (en) | 2010-04-13 | 2012-08-23 | Celldex Therapeutics Inc. | Antibodies that bind human cd27 and uses thereof |
| AU2011275749C1 (en) | 2010-07-09 | 2015-09-17 | Aduro Biotech Holdings, Europe B.V. | Agonistic antibody to CD27 |
| DK2609118T3 (en) | 2010-08-23 | 2017-04-03 | Univ Texas | Anti-OX40 antibodies and methods for their use |
| NZ729044A (en) | 2010-09-09 | 2020-07-31 | Pfizer | 4-1bb binding molecules |
| US8962804B2 (en) | 2010-10-08 | 2015-02-24 | City Of Hope | Meditopes and meditope-binding antibodies and uses thereof |
| HUE054318T2 (hu) | 2010-11-12 | 2021-08-30 | Nektar Therapeutics | IL-2 molekularész konjugátumai és polimer |
| BR122021026169B1 (pt) | 2010-12-09 | 2023-12-12 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Uso de uma célula |
| WO2012129201A1 (en) | 2011-03-22 | 2012-09-27 | The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services | Methods of growing tumor infiltrating lymphocytes in gas-permeable containers |
| WO2012177788A1 (en) | 2011-06-20 | 2012-12-27 | La Jolla Institute For Allergy And Immunology | Modulators of 4-1bb and immune responses |
| CN103946238B (zh) | 2011-08-23 | 2016-10-12 | 德克萨斯州立大学董事会 | 抗ox40抗体及使用其的方法 |
| US20130108641A1 (en) | 2011-09-14 | 2013-05-02 | Sanofi | Anti-gitr antibodies |
| GB201116092D0 (en) | 2011-09-16 | 2011-11-02 | Bioceros B V | Antibodies and uses thereof |
| SG10202111564SA (en) | 2012-05-18 | 2021-12-30 | Wilson Wolf Mfg Corporation | Improved methods of cell culture for adoptive cell therapy |
| SG11201407819UA (en) | 2012-06-11 | 2014-12-30 | Wolf Wilson Mfg Corp | Improved methods of cell culture for adoptive cell therapy |
| EP2951199A4 (en) * | 2013-01-31 | 2016-07-20 | Univ Jefferson | Fusion proteins for the modulation of regulatory and effector T cells |
| RU2671897C2 (ru) | 2013-03-01 | 2018-11-07 | Дзе Юнайтед Стейтс Оф Америка, Эз Репрезентед Бай Дзе Секретари, Департмент Оф Хелс Энд Хьюман Сёрвисез | Способы получения из опухоли обогащенных популяций реактивных в отношении опухоли т-клеток |
| PT2976361T (pt) | 2013-03-18 | 2018-10-19 | Janssen Pharmaceuticals Inc | Anticorpos anti-cd134 (ox40) humanizados e utilizações dos mesmos |
| US9840692B2 (en) | 2013-06-24 | 2017-12-12 | Wilson Wolf Manufacturing | Closed system device and methods for gas permeable cell culture process |
| TW201605896A (zh) | 2013-08-30 | 2016-02-16 | 安美基股份有限公司 | Gitr抗原結合蛋白 |
| EP3527587A1 (en) | 2013-12-17 | 2019-08-21 | F. Hoffmann-La Roche AG | Combination therapy comprising ox40 binding agonists and pd-l1 binding antagonists |
| US10899840B2 (en) | 2014-02-04 | 2021-01-26 | Pfizer Inc. | Combination of a PD-1 antagonist and a 4-1BB agonist for treating cancer |
| US20170044496A1 (en) * | 2014-04-10 | 2017-02-16 | H. Lee Moffitt Cancer Center And Research Institute, Inc. | Enhanced Expansion of Tumor-Infiltrating Lymphocytes for Adoptive Cell Therapy |
| JP7413639B2 (ja) | 2014-06-11 | 2024-01-16 | ポリバイオセプト ゲーエムベーハー | 能動的細胞免疫療法のためのサイトカイン組成物を用いたリンパ球の増殖 |
| JO3663B1 (ar) * | 2014-08-19 | 2020-08-27 | Merck Sharp & Dohme | الأجسام المضادة لمضاد lag3 وأجزاء ربط الأنتيجين |
| WO2016100241A2 (en) * | 2014-12-15 | 2016-06-23 | Bellicum Pharmaceuticals, Inc. | Methods for controlled activation or elimination of therapeutic cells |
| WO2016100236A2 (en) * | 2014-12-15 | 2016-06-23 | Bellicum Pharmaceuticals, Inc. | Methods for controlled elimination of therapeutic cells |
| EP3268037B1 (en) | 2015-03-09 | 2022-08-31 | Celldex Therapeutics, Inc. | Cd27 agonists |
| MX2017012805A (es) * | 2015-04-07 | 2018-04-11 | Genentech Inc | Complejo de unión a antígenos con actividad agonista y métodos de uso. |
-
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