KR20190104048A - 종양 괴사 인자 수용체 슈퍼패밀리 (tnfrsf) 효능제를 사용한 종양 침윤 림프구 (til)의 확장 및 til과 tnfrsf 효능제의 치료 조합물 - Google Patents
종양 괴사 인자 수용체 슈퍼패밀리 (tnfrsf) 효능제를 사용한 종양 침윤 림프구 (til)의 확장 및 til과 tnfrsf 효능제의 치료 조합물 Download PDFInfo
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Abstract
종양 괴사 인자 수용체 슈퍼패밀리 (TNFRSF) 효능제, 예컨대 4-1BB 효능제, CD27 효능제, 글루코코르티코이드-유도된 TNF 수용체-관련 효능제, OX40 효능제, HVEM 효능제 또는 CD95 효능제를 사용하여 종양 침윤 림프구 (TIL)를 확장시키는 방법, 및 질환, 예컨대 암의 치료에 있어서의 이러한 확장된 TIL의 용도가 본원에 개시된다. 추가로, 일부 실시양태에서, 질환, 예컨대 암의 치료에 유용한 TIL과 TNFRSF 효능제의 치료 조합물, 그의 조성물, 용도 및 투여 요법이 본원에 개시된다.
Description
관련 출원에 대한 상호 참조
본 국제 출원은 2017년 1월 6일에 출원된 미국 가출원 번호 62/443,556, 2017년 2월 17일에 출원된 미국 가출원 번호 62/460,477, 2017년 7월 14일에 출원된 미국 가출원 번호 62/532,807 및 2017년 10월 2일에 출원된 미국 가출원 번호 62/567,151을 우선권 주장하며, 이들 전문은 본원에 참조로 포함된다.
발명의 분야
종양 괴사 인자 수용체 슈퍼패밀리 (TNFRSF) 효능제, 예컨대 4-1BB 효능제, CD27 효능제, 글루코코르티코이드-유도된 TNF 수용체-관련 효능제, OX40 효능제, HVEM 효능제 또는 CD95 효능제를 사용하여 종양 침윤 림프구 (TIL)를 확장시키는 방법, 및 질환, 예컨대 암의 치료에 있어서의 확장된 TIL의 용도가 본원에 개시된다. 추가로, 질환, 예컨대 암의 치료에 있어서의 TIL과 TNFRSF 효능제의 치료 조합물, 그의 조성물 및 용도가 본원에 개시된다.
종양 침윤 림프구 (TIL)의 입양 자가 전달을 사용하여 거대 불응성 암을 치료하는 것은 불량한 예후를 갖는 환자를 위한 요법에 대한 강력한 접근법을 나타낸다. 문헌 [Gattinoni, et al., Nat. Rev. Immunol. 2006, 6, 383-393]. TIL은 T 세포가 우세하며, IL-2-기반 TIL 확장에 이은 "급속 확장 방법" (REP)은 그의 속도 및 효율로 인해 TIL 확장을 위한 바람직한 방법이 되었다. 문헌 [Dudley, et al., Science 2002, 298, 850-54; Dudley, et al., J. Clin. Oncol. 2005, 23, 2346-57; Dudley, et al., J. Clin. Oncol. 2008, 26, 5233-39; Riddell, et al., Science 1992, 257, 238-41; Dudley, et al., J. Immunother. 2003, 26, 332-42]. 흑색종에서 TIL 요법에 대한 임상 반응을 개선시키고 TIL 요법을 다른 종양 유형으로 확대시키기 위한 다수의 접근법이 제한적인 성공 하에 탐구되었으며, 그 분야는 도전과제로 남아있다. 문헌 [Goff, et al., J. Clin. Oncol. 2016, 34, 2389-97; Dudley, et al., J. Clin. Oncol. 2008, 26, 5233-39; Rosenberg, et al., Clin. Cancer Res. 2011, 17, 4550-57]. 특정한 하위세트 (예컨대 CD8+ T 세포)를 선택하거나 또는 드라이버 돌연변이, 예컨대 돌연변이된 ERBB2IP 에피토프 또는 KRAS 종양유전자에서의 드라이버 돌연변이를 표적화하기 위해 확장 동안 TIL의 선택에 많은 초점이 맞추어져 왔다. 문헌 [Tran, et al., N. Engl. J. Med. 2016, 375, 2255-62; Tran, et al., Science 2014, 344, 641-45]. 그러나, 이러한 선택 접근법은, 이들이 보다 많은 임상 시험에서 효능을 나타내기 위해 개발될 수 있을 지라도, TIL 요법 수행의 지속기간, 복잡성 및 비용이 유의하게 부가되고, 상이한 유형의 암에서 TIL 요법을 광범위하게 사용하기 위한 잠재력을 제한한다.
활성화된 T 세포 상에서 발현된 유도성 공동자극 수용체로서 최초로 확인된 4-1BB (또한 CD137 및 TNFRSF9로도 공지됨)는 TNFRSF의 막 관통 당단백질 구성원이다. 문헌 [Watts, Annu. Rev. Immunol. 2005, 23, 23-68]. 4-1BB는 활성화된 T 림프구에 상에서, CD4+ T 세포보다 CD8+ T 세포 상에서 더 큰 정도로 발현되는 유형 2 막횡단 당단백질이다. 4-1BB는 또한 수지상 세포, 여포성 수지상 세포, 자연 킬러 (NK) 세포, 과립구, 염증 부위에서의 혈관 벽 세포, 종양 혈관계 및 아테롬성동맥경화성 내피 상에서 발현된다. 4-1BB를 자극시키는 리간드 (4-1BBL)는 활성화된 항원-제시 세포 (APC), 골수 전구 세포 및 조혈 줄기 세포 상에서 발현된다. 4-1BB는 활성화-유도된 T-세포 공동자극 분자이다. 4-1BB를 통한 신호전달은 생존 유전자를 상향조절하고, 세포 분열을 증진시키고, 시토카인 생산을 유도하고, T 세포에서 활성화-유도된 세포 사멸을 방지한다. 4-1BB에 대한 현행 이해는 발현이 일반적으로 활성화 의존성이고, 활성화된 NK 및 NK T 세포 (NKT 세포); 조절 T 세포; 여포성 수지상 세포 (DC)를 포함한 DC; 자극된 비만 세포, 분화 골수성 세포, 단핵구, 호중구, 호산구 및 활성화된 B 세포를 포함한, 면역 세포의 광범위한 하위세트를 포괄한다는 것을 나타낸다. 4-1BB는 CD8+ T 세포의 증식 및 이펙터 기능을 강하게 증진시킨다. 4-1BB의 가교는 T 세포 증식, IL-2 분비 생존 및 세포용해 활성을 증진시킨다. 추가적으로, 항-4-1BB 모노클로날 항체는 결국 강력한 CD8+ T-세포 활성화, IFN-g 생산 및 세포용해 마커-유도 능력의 결과인 강한 항종양 특성을 소유한다. 문헌 [Vinay and Kwon, Mol. Cancer Therapeutics 2012, 11, 1062-70; Lee, et al., PLoS One, 2013, 8, e69677, 1-11].
B 세포 수용체 결속 시에 활성화된 정상 인간 B 세포 상의 4-1BB와 그의 리간드와의 상호작용은 증식을 자극시키고 생존을 증진시킨다. B 세포 림프종에서 4-1BB 결속이 미치는 잠재적인 영향이 적어도 2개의 공개된 연구에서 조사되었다. 여러 유형의 인간 원발성 NHL 샘플의 평가는 4-1BB가 림프종 세포보다는 침윤 T 세포 상에서 우세하게 발현된다는 것을 나타냈다. 문헌 [Houot, et al., Blood, 2009, 114, 3431-38]. 리툭시맙 및 NK 세포와 함께 B 림프종 세포의 시험관내 배양물에 4-1BB 효능제를 첨가하는 것은 증가된 림프종 사멸을 유발하였다. 문헌 [Kohrt, et al., Blood, 2011, 117, 2423-32]. 추가로, 국제 특허 출원 공개 번호 WO 2015/119923에 기재된 바와 같이, 시노몰구스 원숭이에서 PF-05082566을 0.001-100 mg/kg의 용량으로 사용하여 2개의 실험에서 B 세포 면역 표현형결정을 수행하였으며; 이들 실험에서 말초 혈액 B 세포 수는 변함이 없거나 또는 감소하였다.
4-1BB는 나이브 T 세포의 표면 상에서는 검출불가능하지만, 활성화시 발현이 증가한다. 4-1BB 활성화시, TNFR-연관 인자 (TRAF) 패밀리의 2종의 생존촉진 구성원인 TRAF1 및 TRAF2는 4-1BB 세포질 테일로 동원되어, NFkB, 및 Erk, Jnk 및 p38 MAP 키나제를 포함한 미토겐 활성화된 단백질 (MAP) 키나제 캐스캐이드의 하류 활성화를 유발한다. NFkB 활성화는 Bcl-2 패밀리의 생존촉진 구성원인 Bfl-1 및 Bel-XL의 상향조절을 유도한다. 아폽토시스촉진 단백질인 Bim은 TRAF1 및 Erk 의존성 방식으로 하향조절된다. 문헌 [Sabbagh, et al., J. Immunol. 2008, 180, 8093-8101]. 보고에 따르면 4-1BB 효능제 모노클로날 항체 (mAb)는 다양한 모델에서 공동자극 분자 발현을 증가시키고 세포용해 T 림프구 반응을 현저히 증진시킴으로써 항종양 효능을 일으키는 것으로 밝혀졌다. 4-1BB 효능제 mAb는 예방적 및 치료적 환경, 및 단독요법 및 조합 요법 종양 모델 둘 다에서 효능을 나타냈고, 지속적인 항-종양 보호 T 세포 기억 반응을 확립하였다. 문헌 [Lynch, et al., Immunol Rev., 2008, 222, 277-286]. 4-1BB 효능제는 또한 다양한 자가면역 모델에서 자가면역 반응을 억제한다. 문헌 [Vinay, et al., J. Mol. Med. 2006, 84, 726-36].
OX40 수용체 (OX40) (또한 TNFRSF4, CD134, ACT-4 및 ACT35로도 공지됨)는 활성화된 CD4+ T 세포 상에서 발현되는 TNF 수용체 패밀리의 구성원이다 (WO 95/12673 참조). 활성화된 B-세포 및 수지상 세포 상에 존재하는 OX40 리간드 (OX40L, gp34 또는 ACT-4-리간드로 명명됨)를 통한 이러한 수용체의 촉발은 면역 반응 동안 CD4+ T 세포의 증식을 증진시키고, CD4+ 기억 T-세포의 형성에 영향을 미친다. 게다가, OX40-OX40L 시스템은 활성화된 T 세포의 내피 세포에의 부착을 매개하고, 따라서 활성화된 CD4+ T 세포를 염증 부위로 향하게 한다.
OX40+ T 세포가 종양 침윤 림프구를 함유하는 종양 병변 내에 및 종양 세포 양성 배액 림프절에 존재하는 것으로 밝혀졌다. 문헌 [Weinberg, et al., J. Immunol., 2000, 164, 2160-2169]. 마우스 내 여러 종양 모델에서 종양 프라이밍 동안 생체내 OX40 수용체의 결속이 대조군 처리 마우스와 비교하여 종양의 출현을 유의하게 지연시키고 방지하는 것으로 밝혀졌다. 문헌 [Weinberg, et al., J. Immunol., 2000, 164, 2160-2169]. 따라서, OX40-수용체 결합제를 투여하여 OX40-수용체에 결속함으로써 항원에 대한 포유동물의 면역 반응을 증진시키는 것이 고려되었다 (국제 특허 출원 공개 번호 WO 1999/042585; 문헌 [Weinberg, et al., J. Immunol., 2000, 164, 2160-2169]). 전임상 연구는 항-OX40 모노클로날 항체 및 OX40L-Fc 융합 단백질 둘 다를 포함한 OX40 효능제를 사용하여 종양 보유 숙주를 치료하는 것이 여러 전임상 모델에서 종양 퇴행을 유발하였다는 것을 입증하였다. 문헌 [Linch, et al., Front. Oncol. 2015, 34, 1-14].
TNFRSF7로도 또한 공지된 CD27은 CD40, 4-1BB 및 OX40을 포함한 다른 TNFRSF 구성원과 중첩되는 활성을 갖는다. CD27은 T 세포 생존, 활성화 및 이펙터 기능에서 중요한 역할을 하고, 또한 NK 세포의 증식성 및 세포독성 활성에서 소정 역할을 한다. CD27은 나이브 T 세포를 포함한 대다수의 T 세포 상에서 구성적으로 발현된다. CD27에 대한 리간드는 CD70이며, 이는 T 세포, B 세포 및 수지상 세포 상에서 발견된다. 문헌 [Oshima, et al., Int. Immunol. 1998, 10, 517-26]. CD27은 T 이펙터 세포 생존을 지속시키기 위해 CD28 후에 작용하면서 CD4+ 및 CD8+ T 세포의 확장을 구동하고, 1차 반응보다 2차 반응에 더 많이 영향을 미친다. 그러나, CD27 활성화는 또한 조절 T 세포의 면역억제 효과의 증진을 통한 종양 성장과 연관되어 왔다. 문헌 [Claus, et al., Cancer Res. 2012, 72, 3664-76]. 다른 데이터는 CD27의 면역자극 효과가 이러한 종양 촉진 효과를 능가할 수도 있다는 것을 나타냈다. 문헌 [Aulwurm, et al., Int. J. Cancer 2006, 118, 1728-35]. 마우스 모델에서, 효능작용 CD27 모노클로날 항체는 항종양 효능 및 종양 면역의 유도를 나타냈다. 문헌 [He, et al., J. Immunol. 2013, 191, 4174-83].
글루코코르티코이드-유도된 TNFR-관련 단백질 (GITR)은 종양 괴사 인자 수용체 슈퍼패밀리 구성원 18 (TNFRSF18), 활성화-유도성 TNFR 패밀리 수용체 (AITR) 및 CD357로도 또한 공지된 공동자극 체크포인트 분자이다. GITR은 조절 T 세포 (Treg) 및 이펙터 T 세포, B 세포, NK 세포 및 항원-제시 세포를 포함한 여러 세포 유형 상에서 발현된다. 문헌 [Nocentini and Riccardi, Eur. J. Immunol. 2005, 35, 1016-1022]. GITR은 그의 접합체 GITR 리간드 (GITRL)에 의해 활성화된다. GITR은 면역 반응을 자극시키는데 소정 역할을 하고, GITR에 대한 항원 결합 단백질은 면역 반응을 증가시키는 것이 바람직한 다양한 GITR-관련 질환 또는 장애를 치료하는데 유용성을 갖는다. 문헌 [Ko, et al., J. Exp. Med. 2005, 202, 885-91; Shimizu, et al., Nature Immunology 2002, 3, 135-142; Cohen, et al., Cancer Res. 2006, 66, 4904-12; Azuma, Crit. Rev. Immunol. 2010, 30, 547-57]. 예를 들어, GITR을 통한 T 세포 자극은 Treg-매개 억제를 감쇠시키고, CD4+ 및 CD8+ T 세포에 의한 종양-사멸을 증진시킨다. GITR은 Treg (예컨대 CD4+CD25+ 또는 CD8+CD25+ 세포)에서 높은 수준으로 구성적으로 발현되고, 추가적으로 이들 세포의 활성화시 상향조절된다. 문헌 [Nocentini and Riccardi, Eur. J. Immunol. 2005, 35, 1016-1022]. GITR은 CD4+ 및 CD8+ 나이브 T 세포 둘 다에 대한 공동-활성화 신호이고, 특히 T 세포 수용체 (TCR) 자극이 준최적인 상황에서 증식 및 이펙터 기능을 증진시킨다. 문헌 [Schaer, et al., Curr. Opin. Immunol. 2012, 24, 217-224]. 항원 결합 GITR 단백질, 예컨대 융합 단백질 및 항-GITR 항체 (효능작용 항체 포함)에 의해 유발된 증진된 면역 반응은 다양한 면역요법 적용, 예컨대 암, 자가면역 질환, 염증성 질환 또는 감염의 치료에서 관심대상이다.
TNFRSF14 및 CD270으로도 또한 공지된 헤르페스바이러스 진입 매개체 (HVEM)는 단순 포진 바이러스-1 (HSV-1)에 대한 수용체로서 최초로 단리되었다. 문헌 [Montgomery, et al., Cell 1996, 87, 427-36]. HVEM은 TNF 패밀리 리간드 LIGHT 및 림프독소 알파 동종삼량체 (Ltα3)에 결합한다. 문헌 [Mauri, et al., Immunity 1998, 8, 21-30]. T 세포 활성화는 HVEM-LIGHT 상호작용을 통해 일어날 수 있고, 그 상호작용은, CD28 신호전달에 비의존성의며 준최적 수준의 CD3 항체 (OKT-3)의 존재 하에 관찰될 수 있는 T 세포에 공동자극 신호를 제공한다. 문헌 [Tamada, et al., J. Immunol. 2000, 165, 4397-404; Harrop, et al., J. Biol. Chem. 1998, 273, 27548-56; Tamada, et al., Nat. Med. 2000, 6, 283-89; Yu, et al., Nat. Immunol. 2004, 5, 141-49]. HVEM은 4개의 시스테인-풍부 도메인 (CRD)을 포함한다. 문헌 [del Rio, et al., J. Leukoc. Biol. 2010, 87, 223-35]. CRD2 및 CRD3은 HVEM을 통해 T 세포에 공동-자극 신호를 전달하는 TNFRSF 리간드 LIGHT와의 HVEM 삼량체화에 필요하다. 대조적으로, CRD1 및 CRD2는 T 세포에 억제 신호를 제공하는 공동-억제 B 및 T 림프구 감쇠자 (BTLA) 수용체 및 CD160에 단량체 방식으로 결합한다. HVEM-LIGHT 상호작용의 연구는 그것이 주로 CD8+ T 세포에 대한 CD28-비의존성 공동자극 효과를 갖지만 또한 CD4+ T 세포에도 영향을 미친다는 것을 시사한다. 문헌 [Liu, et al., Int. Immunol. 2003, 15, 861-70; Scheu, et al., J. Exp. Med. 2002, 195, 1613-24].
Fas, APO-1 및 TNFRSF6으로도 또한 공지된 CD95는, 4-1BB, OX40, GITR, CD27 및 HVEM과는 달리, 사멸 도메인을 함유하는 45 kDa 유형-I 막횡단 단백질이다. 문헌 [Kischkel, et al., EMBO J. 1995, 14, 5579-88; Krammer, Nature 2000, 407, 789-95]. 활성화된 T 세포 상의 CD95에 대한 유도성 CD95 리간드 (CD95L)의 결합은 아폽토시스 세포 사멸을 유도하고, 따라서 4-1BB, OX40, GITR, CD27 및 HVEM과 동일한 공동자극 기능과 정상적으로 연관되지 않는다. 문헌 [Strauss, et al., J. Exp. Med. 2009, 206, 1379-93]. 그러나, CD95는 또한 일부 조건 하에서 T 세포에 대해 항아폽토시스 및 공동자극 효과를 제공하는 이중 기능 수용체로서 거동한다. 문헌 [Paulsen, et al., Cell Death Differ. 2011, 18, 619-31]. CD95 결속은 TCR-구동된 신호 개시를 용량-의존성 방식으로 조정하며, 여기서 고용량의 CD95 효능제 또는 세포 CD95L은 T 세포를 침묵시키고, 반면 더 낮은 용량의 이들 효능제는 TCR-구동된 T 세포 활성화 및 증식을 강하게 증진시킨다.
본 발명은, TNFRSF 효능제, 예컨대 4-1BB 효능제, CD27 효능제, GITR 효능제, OX40 효능제, HVEM 효능제 또는 CD95 효능제가 TIL의 수득 및 TIL을 사용한 종양의 치료가 어려운 것으로 공지된 종양으로부터의 TIL의 확장에 유용하고, 추가로 TIL 요법과 조합하여 환자의 치료에 유용하다는 예상외의 발견을 제공한다.
한 실시양태에서, 본 발명은
(a) 환자로부터 종양을 절제하는 단계;
(b) 종양으로부터 제1 종양 침윤 림프구 (TIL) 집단을 수득하는 단계;
(c) 제1 세포 배양 배지에서 제1 TIL 집단의 초기 확장을 수행하여 제2 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제2 TIL 집단은 제1 TIL 집단보다 수가 적어도 5배 더 많고, 제1 세포 배양 배지는 IL-2 및 종양 괴사 인자 수용체 슈퍼패밀리 (TNFRSF) 효능제를 포함하고, 초기 확장은 21일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(d) 제2 세포 배양 배지에서 제2 TIL 집단의 급속 확장을 수행하여 제3 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제3 TIL 집단은 급속 확장의 시작으로부터 7일 후 제2 TIL 집단보다 수가 적어도 50배 더 많고, 제2 세포 배양 배지는 IL-2, OKT-3 (항-CD3 항체), 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC) 및 임의로 TNFRSF 효능제를 포함하고, 급속 확장은 14일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(e) 제3 TIL 집단을 수거하는 단계; 및
(f) 암을 갖는 환자에게 치료 유효 분량의 제3 TIL 집단을 투여하는 단계
를 포함하는, 종양 침윤 림프구 (TIL) 집단으로 암을 치료하는 방법을 제공한다.
한 실시양태에서, 본 발명은
(a) 환자로부터 종양을 절제하는 단계;
(b) 종양으로부터 제1 종양 침윤 림프구 (TIL) 집단을 수득하는 단계;
(c) 제1 세포 배양 배지에서 제1 TIL 집단의 초기 확장을 수행하여 제2 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제2 TIL 집단은 제1 TIL 집단보다 수가 적어도 5배 더 많고, 제1 세포 배양 배지는 IL-2 및 종양 괴사 인자 수용체 슈퍼패밀리 (TNFRSF) 효능제를 포함하고, 초기 확장은 21일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(d) 제2 세포 배양 배지에서 제2 TIL 집단의 급속 확장을 수행하여 제3 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제3 TIL 집단은 급속 확장의 시작으로부터 7일 후 제2 TIL 집단보다 수가 적어도 50배 더 많고, 제2 세포 배양 배지는 IL-2, OKT-3 (항-CD3 항체), 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC) 및 임의로 TNFRSF 효능제를 포함하고, 급속 확장은 14일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(e) 제3 TIL 집단을 수거하는 단계; 및
(f) 암을 갖는 환자에게 치료 유효 분량의 제3 TIL 집단을 투여하는 단계
를 포함하며, 여기서 TNFRSF 효능제는 4-1BB 효능제, OX40 효능제, CD27 효능제, GITR 효능제, HVEM 효능제, CD95 효능제 및 그의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인,
종양 침윤 림프구 (TIL) 집단으로 암을 치료하는 방법을 제공한다.
한 실시양태에서, 본 발명은
(a) 환자로부터 종양을 절제하는 단계;
(b) 종양으로부터 제1 종양 침윤 림프구 (TIL) 집단을 수득하는 단계;
(c) 제1 세포 배양 배지에서 제1 TIL 집단의 초기 확장을 수행하여 제2 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제2 TIL 집단은 제1 TIL 집단보다 수가 적어도 5배 더 많고, 제1 세포 배양 배지는 IL-2 및 종양 괴사 인자 수용체 슈퍼패밀리 (TNFRSF) 효능제를 포함하고, 초기 확장은 21일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(d) 제2 세포 배양 배지에서 제2 TIL 집단의 급속 확장을 수행하여 제3 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제3 TIL 집단은 급속 확장의 시작으로부터 7일 후 제2 TIL 집단보다 수가 적어도 50배 더 많고, 제2 세포 배양 배지는 IL-2, OKT-3 (항-CD3 항체), 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC) 및 임의로 TNFRSF 효능제를 포함하고, 급속 확장은 14일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(e) 제3 TIL 집단을 수거하는 단계; 및
(f) 암을 갖는 환자에게 치료 유효 분량의 제3 TIL 집단을 투여하는 단계
를 포함하며, 여기서 TNFRSF 효능제는 4-1BB 효능제이고, 4-1BB 효능제는 우렐루맙, 우토밀루맙, EU-101 및 그의 단편, 유도체, 변이체, 바이오시밀러 및 그의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인,
종양 침윤 림프구 (TIL) 집단으로 암을 치료하는 방법을 제공한다.
한 실시양태에서, 본 발명은
(a) 환자로부터 종양을 절제하는 단계;
(b) 종양으로부터 제1 종양 침윤 림프구 (TIL) 집단을 수득하는 단계;
(c) 제1 세포 배양 배지에서 제1 TIL 집단의 초기 확장을 수행하여 제2 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제2 TIL 집단은 제1 TIL 집단보다 수가 적어도 5배 더 많고, 제1 세포 배양 배지는 IL-2 및 종양 괴사 인자 수용체 슈퍼패밀리 (TNFRSF) 효능제를 포함하고, 초기 확장은 21일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(d) 제2 세포 배양 배지에서 제2 TIL 집단의 급속 확장을 수행하여 제3 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제3 TIL 집단은 급속 확장의 시작으로부터 7일 후 제2 TIL 집단보다 수가 적어도 50배 더 많고, 제2 세포 배양 배지는 IL-2, OKT-3 (항-CD3 항체), 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC) 및 임의로 TNFRSF 효능제를 포함하고, 급속 확장은 14일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(e) 제3 TIL 집단을 수거하는 단계; 및
(f) 암을 갖는 환자에게 치료 유효 분량의 제3 TIL 집단을 투여하는 단계
를 포함하며, 여기서 TNFRSF 효능제는 4-1BB 효능제이고, 4-1BB 효능제는 4-1BB 효능제 융합 단백질인,
종양 침윤 림프구 (TIL) 집단으로 암을 치료하는 방법을 제공한다.
한 실시양태에서, 본 발명은
(a) 환자로부터 종양을 절제하는 단계;
(b) 종양으로부터 제1 종양 침윤 림프구 (TIL) 집단을 수득하는 단계;
(c) 제1 세포 배양 배지에서 제1 TIL 집단의 초기 확장을 수행하여 제2 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제2 TIL 집단은 제1 TIL 집단보다 수가 적어도 5배 더 많고, 제1 세포 배양 배지는 IL-2 및 종양 괴사 인자 수용체 슈퍼패밀리 (TNFRSF) 효능제를 포함하고, 초기 확장은 21일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(d) 제2 세포 배양 배지에서 제2 TIL 집단의 급속 확장을 수행하여 제3 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제3 TIL 집단은 급속 확장의 시작으로부터 7일 후 제2 TIL 집단보다 수가 적어도 50배 더 많고, 제2 세포 배양 배지는 IL-2, OKT-3 (항-CD3 항체), 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC) 및 임의로 TNFRSF 효능제를 포함하고, 급속 확장은 14일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(e) 제3 TIL 집단을 수거하는 단계; 및
(f) 암을 갖는 환자에게 치료 유효 분량의 제3 TIL 집단을 투여하는 단계
를 포함하며, 여기서 TNFRSF 효능제는 4-1BB 효능제 융합 단백질이고, 4-1BB 효능제 융합 단백질은 (i) 제1 가용성 4-1BB 결합 도메인, (ii) 제1 펩티드 링커, (iii) 제2 가용성 4-1BB 결합 도메인, (iv) 제2 펩티드 링커 및 (v) 제3 가용성 4-1BB 결합 도메인을 포함하고, N-말단 및/또는 C-말단 단부에 추가의 도메인을 추가로 포함하고, 추가의 도메인은 Fc 단편 도메인 및 힌지 도메인을 포함하고, 융합 단백질은 구조 I-A 또는 구조 I-B에 따른 이량체 구조인,
종양 침윤 림프구 (TIL) 집단으로 암을 치료하는 방법을 제공한다.
한 실시양태에서, 본 발명은
(a) 환자로부터 종양을 절제하는 단계;
(b) 종양으로부터 제1 종양 침윤 림프구 (TIL) 집단을 수득하는 단계;
(c) 제1 세포 배양 배지에서 제1 TIL 집단의 초기 확장을 수행하여 제2 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제2 TIL 집단은 제1 TIL 집단보다 수가 적어도 5배 더 많고, 제1 세포 배양 배지는 IL-2 및 종양 괴사 인자 수용체 슈퍼패밀리 (TNFRSF) 효능제를 포함하고, 초기 확장은 21일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(d) 제2 세포 배양 배지에서 제2 TIL 집단의 급속 확장을 수행하여 제3 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제3 TIL 집단은 급속 확장의 시작으로부터 7일 후 제2 TIL 집단보다 수가 적어도 50배 더 많고, 제2 세포 배양 배지는 IL-2, OKT-3 (항-CD3 항체), 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC) 및 임의로 TNFRSF 효능제를 포함하고, 급속 확장은 14일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(e) 제3 TIL 집단을 수거하는 단계; 및
(f) 암을 갖는 환자에게 치료 유효 분량의 제3 TIL 집단을 투여하는 단계
를 포함하며, 여기서 TNFRSF 효능제는 OX40 효능제이고, OX40 효능제는 타볼릭시주맙, GSK3174998, MEDI6469, MEDI6383, MOXR0916, PF-04518600, 크리에이티브 바이오랩스(Creative Biolabs) MOM-18455 및 그의 단편, 유도체, 변이체, 바이오시밀러 및 그의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인,
종양 침윤 림프구 (TIL) 집단으로 암을 치료하는 방법을 제공한다.
한 실시양태에서, 본 발명은
(a) 환자로부터 종양을 절제하는 단계;
(b) 종양으로부터 제1 종양 침윤 림프구 (TIL) 집단을 수득하는 단계;
(c) 제1 세포 배양 배지에서 제1 TIL 집단의 초기 확장을 수행하여 제2 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제2 TIL 집단은 제1 TIL 집단보다 수가 적어도 5배 더 많고, 제1 세포 배양 배지는 IL-2 및 종양 괴사 인자 수용체 슈퍼패밀리 (TNFRSF) 효능제를 포함하고, 초기 확장은 21일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(d) 제2 세포 배양 배지에서 제2 TIL 집단의 급속 확장을 수행하여 제3 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제3 TIL 집단은 급속 확장의 시작으로부터 7일 후 제2 TIL 집단보다 수가 적어도 50배 더 많고, 제2 세포 배양 배지는 IL-2, OKT-3 (항-CD3 항체), 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC) 및 임의로 TNFRSF 효능제를 포함하고, 급속 확장은 14일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(e) 제3 TIL 집단을 수거하는 단계; 및
(f) 암을 갖는 환자에게 치료 유효 분량의 제3 TIL 집단을 투여하는 단계
를 포함하며, 여기서 TNFRSF 효능제는 OX40 효능제이고, OX40 효능제는 OX40 효능제 융합 단백질인,
종양 침윤 림프구 (TIL) 집단으로 암을 치료하는 방법을 제공한다.
한 실시양태에서, 본 발명은
(a) 환자로부터 종양을 절제하는 단계;
(b) 종양으로부터 제1 종양 침윤 림프구 (TIL) 집단을 수득하는 단계;
(c) 제1 세포 배양 배지에서 제1 TIL 집단의 초기 확장을 수행하여 제2 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제2 TIL 집단은 제1 TIL 집단보다 수가 적어도 5배 더 많고, 제1 세포 배양 배지는 IL-2 및 종양 괴사 인자 수용체 슈퍼패밀리 (TNFRSF) 효능제를 포함하고, 초기 확장은 21일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(d) 제2 세포 배양 배지에서 제2 TIL 집단의 급속 확장을 수행하여 제3 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제3 TIL 집단은 급속 확장의 시작으로부터 7일 후 제2 TIL 집단보다 수가 적어도 50배 더 많고, 제2 세포 배양 배지는 IL-2, OKT-3 (항-CD3 항체), 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC) 및 임의로 TNFRSF 효능제를 포함하고, 급속 확장은 14일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(e) 제3 TIL 집단을 수거하는 단계; 및
(f) 암을 갖는 환자에게 치료 유효 분량의 제3 TIL 집단을 투여하는 단계
를 포함하며, 여기서 TNFRSF 효능제는 OX40 효능제 융합 단백질이고, OX40 효능제 융합 단백질은 (i) 제1 가용성 OX40 결합 도메인, (ii) 제1 펩티드 링커, (iii) 제2 가용성 OX40 결합 도메인, (iv) 제2 펩티드 링커 및 (v) 제3 가용성 OX40 결합 도메인을 포함하고, N-말단 및/또는 C-말단 단부에 추가의 도메인을 추가로 포함하고, 추가의 도메인은 Fc 단편 도메인 및 힌지 도메인을 포함하고, 융합 단백질은 구조 I-A 또는 구조 I-B에 따른 이량체 구조인,
종양 침윤 림프구 (TIL) 집단으로 암을 치료하는 방법을 제공한다.
한 실시양태에서, 본 발명은
(a) 환자로부터 종양을 절제하는 단계;
(b) 종양으로부터 제1 종양 침윤 림프구 (TIL) 집단을 수득하는 단계;
(c) 제1 세포 배양 배지에서 제1 TIL 집단의 초기 확장을 수행하여 제2 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제2 TIL 집단은 제1 TIL 집단보다 수가 적어도 5배 더 많고, 제1 세포 배양 배지는 IL-2 및 종양 괴사 인자 수용체 슈퍼패밀리 (TNFRSF) 효능제를 포함하고, 초기 확장은 21일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(d) 제2 세포 배양 배지에서 제2 TIL 집단의 급속 확장을 수행하여 제3 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제3 TIL 집단은 급속 확장의 시작으로부터 7일 후 제2 TIL 집단보다 수가 적어도 50배 더 많고, 제2 세포 배양 배지는 IL-2, OKT-3 (항-CD3 항체), 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC) 및 임의로 TNFRSF 효능제를 포함하고, 급속 확장은 14일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(e) 제3 TIL 집단을 수거하는 단계; 및
(f) 암을 갖는 환자에게 치료 유효 분량의 제3 TIL 집단을 투여하는 단계
를 포함하며, 여기서 TNFRSF 효능제는 CD27 효능제이고, CD27 효능제는 바를리루맙 또는 그의 단편, 유도체, 변이체 또는 바이오시밀러인,
종양 침윤 림프구 (TIL) 집단으로 암을 치료하는 방법을 제공한다.
한 실시양태에서, 본 발명은
(a) 환자로부터 종양을 절제하는 단계;
(b) 종양으로부터 제1 종양 침윤 림프구 (TIL) 집단을 수득하는 단계;
(c) 제1 세포 배양 배지에서 제1 TIL 집단의 초기 확장을 수행하여 제2 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제2 TIL 집단은 제1 TIL 집단보다 수가 적어도 5배 더 많고, 제1 세포 배양 배지는 IL-2 및 종양 괴사 인자 수용체 슈퍼패밀리 (TNFRSF) 효능제를 포함하고, 초기 확장은 21일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(d) 제2 세포 배양 배지에서 제2 TIL 집단의 급속 확장을 수행하여 제3 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제3 TIL 집단은 급속 확장의 시작으로부터 7일 후 제2 TIL 집단보다 수가 적어도 50배 더 많고, 제2 세포 배양 배지는 IL-2, OKT-3 (항-CD3 항체), 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC) 및 임의로 TNFRSF 효능제를 포함하고, 급속 확장은 14일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(e) 제3 TIL 집단을 수거하는 단계; 및
(f) 암을 갖는 환자에게 치료 유효 분량의 제3 TIL 집단을 투여하는 단계
를 포함하며, 여기서 TNFRSF 효능제는 CD27 효능제이고, CD27 효능제는 CD27 효능제 융합 단백질인,
종양 침윤 림프구 (TIL) 집단으로 암을 치료하는 방법을 제공한다.
한 실시양태에서, 본 발명은
(a) 환자로부터 종양을 절제하는 단계;
(b) 종양으로부터 제1 종양 침윤 림프구 (TIL) 집단을 수득하는 단계;
(c) 제1 세포 배양 배지에서 제1 TIL 집단의 초기 확장을 수행하여 제2 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제2 TIL 집단은 제1 TIL 집단보다 수가 적어도 5배 더 많고, 제1 세포 배양 배지는 IL-2 및 종양 괴사 인자 수용체 슈퍼패밀리 (TNFRSF) 효능제를 포함하고, 초기 확장은 21일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(d) 제2 세포 배양 배지에서 제2 TIL 집단의 급속 확장을 수행하여 제3 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제3 TIL 집단은 급속 확장의 시작으로부터 7일 후 제2 TIL 집단보다 수가 적어도 50배 더 많고, 제2 세포 배양 배지는 IL-2, OKT-3 (항-CD3 항체), 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC) 및 임의로 TNFRSF 효능제를 포함하고, 급속 확장은 14일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(e) 제3 TIL 집단을 수거하는 단계; 및
(f) 암을 갖는 환자에게 치료 유효 분량의 제3 TIL 집단을 투여하는 단계
를 포함하며, 여기서 TNFRSF 효능제는 CD27 효능제이고, CD27 효능제 융합 단백질은 (i) 제1 가용성 CD27 결합 도메인, (ii) 제1 펩티드 링커, (iii) 제2 가용성 CD27 결합 도메인, (iv) 제2 펩티드 링커 및 (v) 제3 가용성 CD27 결합 도메인을 포함하고, N-말단 및/또는 C-말단 단부에 추가의 도메인을 추가로 포함하고, 추가의 도메인은 Fc 단편 도메인 및 힌지 도메인을 포함하고, 융합 단백질은 구조 I-A 또는 구조 I-B에 따른 이량체 구조인,
종양 침윤 림프구 (TIL) 집단으로 암을 치료하는 방법을 제공한다.
한 실시양태에서, 본 발명은
(a) 환자로부터 종양을 절제하는 단계;
(b) 종양으로부터 제1 종양 침윤 림프구 (TIL) 집단을 수득하는 단계;
(c) 제1 세포 배양 배지에서 제1 TIL 집단의 초기 확장을 수행하여 제2 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제2 TIL 집단은 제1 TIL 집단보다 수가 적어도 5배 더 많고, 제1 세포 배양 배지는 IL-2 및 종양 괴사 인자 수용체 슈퍼패밀리 (TNFRSF) 효능제를 포함하고, 초기 확장은 21일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(d) 제2 세포 배양 배지에서 제2 TIL 집단의 급속 확장을 수행하여 제3 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제3 TIL 집단은 급속 확장의 시작으로부터 7일 후 제2 TIL 집단보다 수가 적어도 50배 더 많고, 제2 세포 배양 배지는 IL-2, OKT-3 (항-CD3 항체), 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC) 및 임의로 TNFRSF 효능제를 포함하고, 급속 확장은 14일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(e) 제3 TIL 집단을 수거하는 단계; 및
(f) 암을 갖는 환자에게 치료 유효 분량의 제3 TIL 집단을 투여하는 단계
를 포함하며, 여기서 TNFRSF 효능제는 GITR 효능제이고, GITR 효능제는 TRX518, 6C8, 36E5, 3D6, 61G6, 6H6, 61F6, 1D8, 17F10, 35D8, 49A1, 9E5, 31H6, 2155, 698, 706, 827, 1649, 1718, 1D7, 33C9, 33F6, 34G4, 35B10, 41E11, 41G5, 42A11, 44C1, 45A8, 46E11, 48H12, 48H7, 49D9, 49E2, 48A9, 5H7, 7A10, 9H6 및 그의 단편, 유도체, 변이체, 바이오시밀러 및 그의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인,
종양 침윤 림프구 (TIL) 집단으로 암을 치료하는 방법을 제공한다.
한 실시양태에서, 본 발명은
(a) 환자로부터 종양을 절제하는 단계;
(b) 종양으로부터 제1 종양 침윤 림프구 (TIL) 집단을 수득하는 단계;
(c) 제1 세포 배양 배지에서 제1 TIL 집단의 초기 확장을 수행하여 제2 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제2 TIL 집단은 제1 TIL 집단보다 수가 적어도 5배 더 많고, 제1 세포 배양 배지는 IL-2 및 종양 괴사 인자 수용체 슈퍼패밀리 (TNFRSF) 효능제를 포함하고, 초기 확장은 21일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(d) 제2 세포 배양 배지에서 제2 TIL 집단의 급속 확장을 수행하여 제3 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제3 TIL 집단은 급속 확장의 시작으로부터 7일 후 제2 TIL 집단보다 수가 적어도 50배 더 많고, 제2 세포 배양 배지는 IL-2, OKT-3 (항-CD3 항체), 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC) 및 임의로 TNFRSF 효능제를 포함하고, 급속 확장은 14일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(e) 제3 TIL 집단을 수거하는 단계; 및
(f) 암을 갖는 환자에게 치료 유효 분량의 제3 TIL 집단을 투여하는 단계
를 포함하며, 여기서 TNFRSF 효능제는 GITR 효능제이고, GITR 효능제는 GITR 효능제 융합 단백질인,
종양 침윤 림프구 (TIL) 집단으로 암을 치료하는 방법을 제공한다.
한 실시양태에서, 본 발명은
(a) 환자로부터 종양을 절제하는 단계;
(b) 종양으로부터 제1 종양 침윤 림프구 (TIL) 집단을 수득하는 단계;
(c) 제1 세포 배양 배지에서 제1 TIL 집단의 초기 확장을 수행하여 제2 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제2 TIL 집단은 제1 TIL 집단보다 수가 적어도 5배 더 많고, 제1 세포 배양 배지는 IL-2 및 종양 괴사 인자 수용체 슈퍼패밀리 (TNFRSF) 효능제를 포함하고, 초기 확장은 21일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(d) 제2 세포 배양 배지에서 제2 TIL 집단의 급속 확장을 수행하여 제3 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제3 TIL 집단은 급속 확장의 시작으로부터 7일 후 제2 TIL 집단보다 수가 적어도 50배 더 많고, 제2 세포 배양 배지는 IL-2, OKT-3 (항-CD3 항체), 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC) 및 임의로 TNFRSF 효능제를 포함하고, 급속 확장은 14일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(e) 제3 TIL 집단을 수거하는 단계; 및
(f) 암을 갖는 환자에게 치료 유효 분량의 제3 TIL 집단을 투여하는 단계
를 포함하며, 여기서 TNFRSF 효능제는 GITR 효능제 융합 단백질이고, GITR 효능제 융합 단백질은 (i) 제1 가용성 GITR 결합 도메인, (ii) 제1 펩티드 링커, (iii) 제2 가용성 GITR 결합 도메인, (iv) 제2 펩티드 링커 및 (v) 제3 가용성 GITR 결합 도메인을 포함하고, N-말단 및/또는 C-말단 단부에 추가의 도메인을 추가로 포함하고, 추가의 도메인은 Fc 단편 도메인 및 힌지 도메인을 포함하고, 융합 단백질은 구조 I-A 또는 구조 I-B에 따른 이량체 구조인,
종양 침윤 림프구 (TIL) 집단으로 암을 치료하는 방법을 제공한다.
한 실시양태에서, 본 발명은
(a) 환자로부터 종양을 절제하는 단계;
(b) 종양으로부터 제1 종양 침윤 림프구 (TIL) 집단을 수득하는 단계;
(c) 제1 세포 배양 배지에서 제1 TIL 집단의 초기 확장을 수행하여 제2 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제2 TIL 집단은 제1 TIL 집단보다 수가 적어도 5배 더 많고, 제1 세포 배양 배지는 IL-2 및 종양 괴사 인자 수용체 슈퍼패밀리 (TNFRSF) 효능제를 포함하고, 초기 확장은 21일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(d) 제2 세포 배양 배지에서 제2 TIL 집단의 급속 확장을 수행하여 제3 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제3 TIL 집단은 급속 확장의 시작으로부터 7일 후 제2 TIL 집단보다 수가 적어도 50배 더 많고, 제2 세포 배양 배지는 IL-2, OKT-3 (항-CD3 항체), 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC) 및 임의로 TNFRSF 효능제를 포함하고, 급속 확장은 14일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(e) 제3 TIL 집단을 수거하는 단계; 및
(f) 암을 갖는 환자에게 치료 유효 분량의 제3 TIL 집단을 투여하는 단계
를 포함하며, 여기서 TNFRSF 효능제는 HVEM 효능제인,
종양 침윤 림프구 (TIL) 집단으로 암을 치료하는 방법을 제공한다.
한 실시양태에서, 본 발명은
(a) 환자로부터 종양을 절제하는 단계;
(b) 종양으로부터 제1 종양 침윤 림프구 (TIL) 집단을 수득하는 단계;
(c) 제1 세포 배양 배지에서 제1 TIL 집단의 초기 확장을 수행하여 제2 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제2 TIL 집단은 제1 TIL 집단보다 수가 적어도 5배 더 많고, 제1 세포 배양 배지는 IL-2 및 종양 괴사 인자 수용체 슈퍼패밀리 (TNFRSF) 효능제를 포함하고, 초기 확장은 21일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(d) 제2 세포 배양 배지에서 제2 TIL 집단의 급속 확장을 수행하여 제3 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제3 TIL 집단은 급속 확장의 시작으로부터 7일 후 제2 TIL 집단보다 수가 적어도 50배 더 많고, 제2 세포 배양 배지는 IL-2, OKT-3 (항-CD3 항체), 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC) 및 임의로 TNFRSF 효능제를 포함하고, 급속 확장은 14일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(e) 제3 TIL 집단을 수거하는 단계; 및
(f) 암을 갖는 환자에게 치료 유효 분량의 제3 TIL 집단을 투여하는 단계
를 포함하며, 여기서 TNFRSF 효능제는 HVEM 효능제이고, HVEM 효능제는 HVEM 효능제 융합 단백질인,
종양 침윤 림프구 (TIL) 집단으로 암을 치료하는 방법을 제공한다.
한 실시양태에서, 본 발명은
(a) 환자로부터 종양을 절제하는 단계;
(b) 종양으로부터 제1 종양 침윤 림프구 (TIL) 집단을 수득하는 단계;
(c) 제1 세포 배양 배지에서 제1 TIL 집단의 초기 확장을 수행하여 제2 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제2 TIL 집단은 제1 TIL 집단보다 수가 적어도 5배 더 많고, 제1 세포 배양 배지는 IL-2 및 종양 괴사 인자 수용체 슈퍼패밀리 (TNFRSF) 효능제를 포함하고, 초기 확장은 21일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(d) 제2 세포 배양 배지에서 제2 TIL 집단의 급속 확장을 수행하여 제3 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제3 TIL 집단은 급속 확장의 시작으로부터 7일 후 제2 TIL 집단보다 수가 적어도 50배 더 많고, 제2 세포 배양 배지는 IL-2, OKT-3 (항-CD3 항체), 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC) 및 임의로 TNFRSF 효능제를 포함하고, 급속 확장은 14일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(e) 제3 TIL 집단을 수거하는 단계; 및
(f) 암을 갖는 환자에게 치료 유효 분량의 제3 TIL 집단을 투여하는 단계
를 포함하며, 여기서 TNFRSF 효능제는 HVEM 효능제 융합 단백질이고, HVEM 효능제 융합 단백질은 (i) 제1 가용성 HVEM 결합 도메인, (ii) 제1 펩티드 링커, (iii) 제2 가용성 HVEM 결합 도메인, (iv) 제2 펩티드 링커 및 (v) 제3 가용성 HVEM 결합 도메인을 포함하고, N-말단 및/또는 C-말단 단부에 추가의 도메인을 추가로 포함하고, 추가의 도메인은 Fc 단편 도메인 및 힌지 도메인을 포함하고, 융합 단백질은 구조 I-A 또는 구조 I-B에 따른 이량체 구조인,
종양 침윤 림프구 (TIL) 집단으로 암을 치료하는 방법을 제공한다.
한 실시양태에서, 본 발명은
(a) 환자로부터 종양을 절제하는 단계;
(b) 종양으로부터 제1 종양 침윤 림프구 (TIL) 집단을 수득하는 단계;
(c) 제1 세포 배양 배지에서 제1 TIL 집단의 초기 확장을 수행하여 제2 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제2 TIL 집단은 제1 TIL 집단보다 수가 적어도 5배 더 많고, 제1 세포 배양 배지는 IL-2 및 종양 괴사 인자 수용체 슈퍼패밀리 (TNFRSF) 효능제를 포함하고, 초기 확장은 21일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(d) 제2 세포 배양 배지에서 제2 TIL 집단의 급속 확장을 수행하여 제3 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제3 TIL 집단은 급속 확장의 시작으로부터 7일 후 제2 TIL 집단보다 수가 적어도 50배 더 많고, 제2 세포 배양 배지는 IL-2, OKT-3 (항-CD3 항체), 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC) 및 임의로 TNFRSF 효능제를 포함하고, 급속 확장은 14일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(e) 제3 TIL 집단을 수거하는 단계; 및
(f) 암을 갖는 환자에게 치료 유효 분량의 제3 TIL 집단을 투여하는 단계
를 포함하고, 환자에게 제3 TIL 집단을 투여한 다음 날에 시작하여 환자를 TNFRSF 효능제로 치료하는 단계를 추가로 포함하며, 여기서 TNFRSF 효능제는 최대 8주기 동안 4주마다 0.1 mg/kg 내지 50 mg/kg의 용량으로 정맥내로 투여되는 것인,
종양 침윤 림프구 (TIL) 집단으로 암을 치료하는 방법을 제공한다.
한 실시양태에서, 본 발명은
(a) 환자로부터 종양을 절제하는 단계;
(b) 종양으로부터 제1 종양 침윤 림프구 (TIL) 집단을 수득하는 단계;
(c) 제1 세포 배양 배지에서 제1 TIL 집단의 초기 확장을 수행하여 제2 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제2 TIL 집단은 제1 TIL 집단보다 수가 적어도 5배 더 많고, 제1 세포 배양 배지는 IL-2 및 종양 괴사 인자 수용체 슈퍼패밀리 (TNFRSF) 효능제를 포함하고, 초기 확장은 21일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(d) 제2 세포 배양 배지에서 제2 TIL 집단의 급속 확장을 수행하여 제3 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제3 TIL 집단은 급속 확장의 시작으로부터 7일 후 제2 TIL 집단보다 수가 적어도 50배 더 많고, 제2 세포 배양 배지는 IL-2, OKT-3 (항-CD3 항체), 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC) 및 임의로 TNFRSF 효능제를 포함하고, 급속 확장은 14일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(e) 제3 TIL 집단을 수거하는 단계; 및
(f) 암을 갖는 환자에게 치료 유효 분량의 제3 TIL 집단을 투여하는 단계
를 포함하고, 환자로부터 종양을 절제하는 단계 전에 환자를 TNFRSF 효능제로 치료하는 단계를 추가로 포함하며, 여기서 TNFRSF 효능제는 최대 8주기 동안 4주마다 0.1 mg/kg 내지 50 mg/kg의 용량으로 정맥내로 투여되는 것인,
종양 침윤 림프구 (TIL) 집단으로 암을 치료하는 방법을 제공한다.
한 실시양태에서, 본 발명은
(a) 환자로부터 종양을 절제하는 단계;
(b) 종양으로부터 제1 종양 침윤 림프구 (TIL) 집단을 수득하는 단계;
(c) 제1 세포 배양 배지에서 제1 TIL 집단의 초기 확장을 수행하여 제2 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제2 TIL 집단은 제1 TIL 집단보다 수가 적어도 5배 더 많고, 제1 세포 배양 배지는 IL-2 및 종양 괴사 인자 수용체 슈퍼패밀리 (TNFRSF) 효능제를 포함하고, 초기 확장은 21일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(d) 제2 세포 배양 배지에서 제2 TIL 집단의 급속 확장을 수행하여 제3 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제3 TIL 집단은 급속 확장의 시작으로부터 7일 후 제2 TIL 집단보다 수가 적어도 50배 더 많고, 제2 세포 배양 배지는 IL-2, OKT-3 (항-CD3 항체), 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC) 및 임의로 TNFRSF 효능제를 포함하고, 급속 확장은 14일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(e) 제3 TIL 집단을 수거하는 단계; 및
(f) 암을 갖는 환자에게 치료 유효 분량의 제3 TIL 집단을 투여하는 단계
를 포함하며, 여기서 TNFRSF 효능제는 우렐루맙, 우토밀루맙, EU-101, 타볼릭시주맙, 크리에이티브 바이오랩스 MOM-18455 및 그의 단편, 유도체, 변이체, 바이오시밀러 및 그의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인,
종양 침윤 림프구 (TIL) 집단으로 암을 치료하는 방법을 제공한다.
한 실시양태에서, 본 발명은
(a) 환자로부터 종양을 절제하는 단계;
(b) 종양으로부터 제1 종양 침윤 림프구 (TIL) 집단을 수득하는 단계;
(c) 제1 세포 배양 배지에서 제1 TIL 집단의 초기 확장을 수행하여 제2 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제2 TIL 집단은 제1 TIL 집단보다 수가 적어도 5배 더 많고, 제1 세포 배양 배지는 IL-2 및 종양 괴사 인자 수용체 슈퍼패밀리 (TNFRSF) 효능제를 포함하고, 초기 확장은 21일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(d) 제2 세포 배양 배지에서 제2 TIL 집단의 급속 확장을 수행하여 제3 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제3 TIL 집단은 급속 확장의 시작으로부터 7일 후 제2 TIL 집단보다 수가 적어도 50배 더 많고, 제2 세포 배양 배지는 IL-2, OKT-3 (항-CD3 항체), 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC) 및 임의로 TNFRSF 효능제를 포함하고, 급속 확장은 14일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(e) 제3 TIL 집단을 수거하는 단계; 및
(f) 암을 갖는 환자에게 치료 유효 분량의 제3 TIL 집단을 투여하는 단계
를 포함하며, 여기서 제1 세포 배양 배지는 제2 TNFRSF 효능제를 포함하는 것인,
종양 침윤 림프구 (TIL) 집단으로 암을 치료하는 방법을 제공한다.
한 실시양태에서, 본 발명은
(a) 환자로부터 종양을 절제하는 단계;
(b) 종양으로부터 제1 종양 침윤 림프구 (TIL) 집단을 수득하는 단계;
(c) 제1 세포 배양 배지에서 제1 TIL 집단의 초기 확장을 수행하여 제2 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제2 TIL 집단은 제1 TIL 집단보다 수가 적어도 5배 더 많고, 제1 세포 배양 배지는 IL-2 및 종양 괴사 인자 수용체 슈퍼패밀리 (TNFRSF) 효능제를 포함하고, 초기 확장은 21일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(d) 제2 세포 배양 배지에서 제2 TIL 집단의 급속 확장을 수행하여 제3 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제3 TIL 집단은 급속 확장의 시작으로부터 7일 후 제2 TIL 집단보다 수가 적어도 50배 더 많고, 제2 세포 배양 배지는 IL-2, OKT-3 (항-CD3 항체), 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC) 및 임의로 TNFRSF 효능제를 포함하고, 급속 확장은 14일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(e) 제3 TIL 집단을 수거하는 단계; 및
(f) 암을 갖는 환자에게 치료 유효 분량의 제3 TIL 집단을 투여하는 단계
를 포함하며, 여기서 TNFRSF 효능제는 초기 확장 동안 매일, 2일마다, 3일마다, 4일마다, 5일마다, 6일마다, 7일마다 및 2주마다로 이루어진 군으로부터 선택된 간격으로 제1 세포 배양 배지에 첨가되는 것인,
종양 침윤 림프구 (TIL) 집단으로 암을 치료하는 방법을 제공한다.
한 실시양태에서, 본 발명은
(a) 환자로부터 종양을 절제하는 단계;
(b) 종양으로부터 제1 종양 침윤 림프구 (TIL) 집단을 수득하는 단계;
(c) 제1 세포 배양 배지에서 제1 TIL 집단의 초기 확장을 수행하여 제2 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제2 TIL 집단은 제1 TIL 집단보다 수가 적어도 5배 더 많고, 제1 세포 배양 배지는 IL-2 및 종양 괴사 인자 수용체 슈퍼패밀리 (TNFRSF) 효능제를 포함하고, 초기 확장은 21일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(d) 제2 세포 배양 배지에서 제2 TIL 집단의 급속 확장을 수행하여 제3 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제3 TIL 집단은 급속 확장의 시작으로부터 7일 후 제2 TIL 집단보다 수가 적어도 50배 더 많고, 제2 세포 배양 배지는 IL-2, OKT-3 (항-CD3 항체), 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC) 및 임의로 TNFRSF 효능제를 포함하고, 급속 확장은 14일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(e) 제3 TIL 집단을 수거하는 단계; 및
(f) 암을 갖는 환자에게 치료 유효 분량의 제3 TIL 집단을 투여하는 단계
를 포함하며, 여기서 TNFRSF 효능제는 급속 확장 동안 매일, 2일마다, 3일마다, 4일마다, 5일마다, 6일마다, 7일마다 및 2주마다로 이루어진 군으로부터 선택된 간격으로 제2 세포 배양 배지에 첨가되는 것인,
종양 침윤 림프구 (TIL) 집단으로 암을 치료하는 방법을 제공한다.
한 실시양태에서, 본 발명은
(a) 환자로부터 종양을 절제하는 단계;
(b) 종양으로부터 제1 종양 침윤 림프구 (TIL) 집단을 수득하는 단계;
(c) 제1 세포 배양 배지에서 제1 TIL 집단의 초기 확장을 수행하여 제2 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제2 TIL 집단은 제1 TIL 집단보다 수가 적어도 5배 더 많고, 제1 세포 배양 배지는 IL-2 및 종양 괴사 인자 수용체 슈퍼패밀리 (TNFRSF) 효능제를 포함하고, 초기 확장은 21일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(d) 제2 세포 배양 배지에서 제2 TIL 집단의 급속 확장을 수행하여 제3 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제3 TIL 집단은 급속 확장의 시작으로부터 7일 후 제2 TIL 집단보다 수가 적어도 50배 더 많고, 제2 세포 배양 배지는 IL-2, OKT-3 (항-CD3 항체), 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC) 및 임의로 TNFRSF 효능제를 포함하고, 급속 확장은 14일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(e) 제3 TIL 집단을 수거하는 단계; 및
(f) 암을 갖는 환자에게 치료 유효 분량의 제3 TIL 집단을 투여하는 단계
를 포함하며, 여기서 TNFRSF 효능제는 세포 배양 배지 중 0.1 μg/mL 내지 100 μg/mL의 농도를 달성하기에 충분한 농도로 첨가되는 것인,
종양 침윤 림프구 (TIL) 집단으로 암을 치료하는 방법을 제공한다.
한 실시양태에서, 본 발명은
(a) 환자로부터 종양을 절제하는 단계;
(b) 종양으로부터 제1 종양 침윤 림프구 (TIL) 집단을 수득하는 단계;
(c) 제1 세포 배양 배지에서 제1 TIL 집단의 초기 확장을 수행하여 제2 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제2 TIL 집단은 제1 TIL 집단보다 수가 적어도 5배 더 많고, 제1 세포 배양 배지는 IL-2 및 종양 괴사 인자 수용체 슈퍼패밀리 (TNFRSF) 효능제를 포함하고, 초기 확장은 21일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(d) 제2 세포 배양 배지에서 제2 TIL 집단의 급속 확장을 수행하여 제3 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제3 TIL 집단은 급속 확장의 시작으로부터 7일 후 제2 TIL 집단보다 수가 적어도 50배 더 많고, 제2 세포 배양 배지는 IL-2, OKT-3 (항-CD3 항체), 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC) 및 임의로 TNFRSF 효능제를 포함하고, 급속 확장은 14일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(e) 제3 TIL 집단을 수거하는 단계; 및
(f) 암을 갖는 환자에게 치료 유효 분량의 제3 TIL 집단을 투여하는 단계
를 포함하며, 여기서 TNFRSF 효능제는 세포 배양 배지 중 20 μg/mL 내지 40 μg/mL의 농도를 달성하기에 충분한 농도로 첨가되는 것인,
종양 침윤 림프구 (TIL) 집단으로 암을 치료하는 방법을 제공한다.
한 실시양태에서, 본 발명은
(a) 환자로부터 종양을 절제하는 단계;
(b) 종양으로부터 제1 종양 침윤 림프구 (TIL) 집단을 수득하는 단계;
(c) 제1 세포 배양 배지에서 제1 TIL 집단의 초기 확장을 수행하여 제2 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제2 TIL 집단은 제1 TIL 집단보다 수가 적어도 5배 더 많고, 제1 세포 배양 배지는 IL-2 및 종양 괴사 인자 수용체 슈퍼패밀리 (TNFRSF) 효능제를 포함하고, 초기 확장은 21일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(d) 제2 세포 배양 배지에서 제2 TIL 집단의 급속 확장을 수행하여 제3 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제3 TIL 집단은 급속 확장의 시작으로부터 7일 후 제2 TIL 집단보다 수가 적어도 50배 더 많고, 제2 세포 배양 배지는 IL-2, OKT-3 (항-CD3 항체), 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC) 및 임의로 TNFRSF 효능제를 포함하고, 급속 확장은 14일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(e) 제3 TIL 집단을 수거하는 단계; 및
(f) 암을 갖는 환자에게 치료 유효 분량의 제3 TIL 집단을 투여하는 단계
를 포함하며, 여기서 IL-2는 제1 세포 배양 배지에 약 10 내지 약 6000 IU/mL의 초기 농도로 존재하는 것인,
종양 침윤 림프구 (TIL) 집단으로 암을 치료하는 방법을 제공한다.
한 실시양태에서, 본 발명은
(a) 환자로부터 종양을 절제하는 단계;
(b) 종양으로부터 제1 종양 침윤 림프구 (TIL) 집단을 수득하는 단계;
(c) 제1 세포 배양 배지에서 제1 TIL 집단의 초기 확장을 수행하여 제2 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제2 TIL 집단은 제1 TIL 집단보다 수가 적어도 5배 더 많고, 제1 세포 배양 배지는 IL-2 및 종양 괴사 인자 수용체 슈퍼패밀리 (TNFRSF) 효능제를 포함하고, 초기 확장은 21일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(d) 제2 세포 배양 배지에서 제2 TIL 집단의 급속 확장을 수행하여 제3 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제3 TIL 집단은 급속 확장의 시작으로부터 7일 후 제2 TIL 집단보다 수가 적어도 50배 더 많고, 제2 세포 배양 배지는 IL-2, OKT-3 (항-CD3 항체), 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC) 및 임의로 TNFRSF 효능제를 포함하고, 급속 확장은 14일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(e) 제3 TIL 집단을 수거하는 단계; 및
(f) 암을 갖는 환자에게 치료 유효 분량의 제3 TIL 집단을 투여하는 단계
를 포함하며, 여기서 IL-2 는 제1 세포 배양 배지에 약 3000 IU/mL의 초기 농도로 존재하는 것인,
종양 침윤 림프구 (TIL) 집단으로 암을 치료하는 방법을 제공한다.
한 실시양태에서, 본 발명은
(a) 환자로부터 종양을 절제하는 단계;
(b) 종양으로부터 제1 종양 침윤 림프구 (TIL) 집단을 수득하는 단계;
(c) 제1 세포 배양 배지에서 제1 TIL 집단의 초기 확장을 수행하여 제2 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제2 TIL 집단은 제1 TIL 집단보다 수가 적어도 5배 더 많고, 제1 세포 배양 배지는 IL-2 및 종양 괴사 인자 수용체 슈퍼패밀리 (TNFRSF) 효능제를 포함하고, 초기 확장은 21일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(d) 제2 세포 배양 배지에서 제2 TIL 집단의 급속 확장을 수행하여 제3 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제3 TIL 집단은 급속 확장의 시작으로부터 7일 후 제2 TIL 집단보다 수가 적어도 50배 더 많고, 제2 세포 배양 배지는 IL-2, OKT-3 (항-CD3 항체), 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC) 및 임의로 TNFRSF 효능제를 포함하고, 급속 확장은 14일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(e) 제3 TIL 집단을 수거하는 단계; 및
(f) 암을 갖는 환자에게 치료 유효 분량의 제3 TIL 집단을 투여하는 단계
를 포함하며, 여기서 IL-2는 제1 세포 배양 배지에 약 800 내지 약 1100 IU/mL의 초기 농도로 존재하는 것인,
종양 침윤 림프구 (TIL) 집단으로 암을 치료하는 방법을 제공한다.
한 실시양태에서, 본 발명은
(a) 환자로부터 종양을 절제하는 단계;
(b) 종양으로부터 제1 종양 침윤 림프구 (TIL) 집단을 수득하는 단계;
(c) 제1 세포 배양 배지에서 제1 TIL 집단의 초기 확장을 수행하여 제2 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제2 TIL 집단은 제1 TIL 집단보다 수가 적어도 5배 더 많고, 제1 세포 배양 배지는 IL-2 및 종양 괴사 인자 수용체 슈퍼패밀리 (TNFRSF) 효능제를 포함하고, 초기 확장은 21일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(d) 제2 세포 배양 배지에서 제2 TIL 집단의 급속 확장을 수행하여 제3 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제3 TIL 집단은 급속 확장의 시작으로부터 7일 후 제2 TIL 집단보다 수가 적어도 50배 더 많고, 제2 세포 배양 배지는 IL-2, OKT-3 (항-CD3 항체), 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC) 및 임의로 TNFRSF 효능제를 포함하고, 급속 확장은 14일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(e) 제3 TIL 집단을 수거하는 단계; 및
(f) 암을 갖는 환자에게 치료 유효 분량의 제3 TIL 집단을 투여하는 단계
를 포함하며, 여기서 IL-2는 제1 세포 배양 배지에 약 1000 IU/mL의 초기 농도로 존재하는 것인,
종양 침윤 림프구 (TIL) 집단으로 암을 치료하는 방법을 제공한다.
한 실시양태에서, 본 발명은
(a) 환자로부터 종양을 절제하는 단계;
(b) 종양으로부터 제1 종양 침윤 림프구 (TIL) 집단을 수득하는 단계;
(c) 제1 세포 배양 배지에서 제1 TIL 집단의 초기 확장을 수행하여 제2 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제2 TIL 집단은 제1 TIL 집단보다 수가 적어도 5배 더 많고, 제1 세포 배양 배지는 IL-2 및 종양 괴사 인자 수용체 슈퍼패밀리 (TNFRSF) 효능제를 포함하고, 초기 확장은 21일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(d) 제2 세포 배양 배지에서 제2 TIL 집단의 급속 확장을 수행하여 제3 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제3 TIL 집단은 급속 확장의 시작으로부터 7일 후 제2 TIL 집단보다 수가 적어도 50배 더 많고, 제2 세포 배양 배지는 IL-2, OKT-3 (항-CD3 항체), 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC) 및 임의로 TNFRSF 효능제를 포함하고, 급속 확장은 14일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(e) 제3 TIL 집단을 수거하는 단계; 및
(f) 암을 갖는 환자에게 치료 유효 분량의 제3 TIL 집단을 투여하는 단계
를 포함하며, 여기서 IL-2는 제2 세포 배양 배지에 약 10 내지 약 6000 IU/mL의 초기 농도로 존재하는 것인,
종양 침윤 림프구 (TIL) 집단으로 암을 치료하는 방법을 제공한다.
한 실시양태에서, 본 발명은
(a) 환자로부터 종양을 절제하는 단계;
(b) 종양으로부터 제1 종양 침윤 림프구 (TIL) 집단을 수득하는 단계;
(c) 제1 세포 배양 배지에서 제1 TIL 집단의 초기 확장을 수행하여 제2 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제2 TIL 집단은 제1 TIL 집단보다 수가 적어도 5배 더 많고, 제1 세포 배양 배지는 IL-2 및 종양 괴사 인자 수용체 슈퍼패밀리 (TNFRSF) 효능제를 포함하고, 초기 확장은 21일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(d) 제2 세포 배양 배지에서 제2 TIL 집단의 급속 확장을 수행하여 제3 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제3 TIL 집단은 급속 확장의 시작으로부터 7일 후 제2 TIL 집단보다 수가 적어도 50배 더 많고, 제2 세포 배양 배지는 IL-2, OKT-3 (항-CD3 항체), 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC) 및 임의로 TNFRSF 효능제를 포함하고, 급속 확장은 14일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(e) 제3 TIL 집단을 수거하는 단계; 및
(f) 암을 갖는 환자에게 치료 유효 분량의 제3 TIL 집단을 투여하는 단계
를 포함하며, 여기서 IL-2는 제2 세포 배양 배지에 약 3000 IU/mL의 초기 농도로 존재하는 것인,
종양 침윤 림프구 (TIL) 집단으로 암을 치료하는 방법을 제공한다.
한 실시양태에서, 본 발명은
(a) 환자로부터 종양을 절제하는 단계;
(b) 종양으로부터 제1 종양 침윤 림프구 (TIL) 집단을 수득하는 단계;
(c) 제1 세포 배양 배지에서 제1 TIL 집단의 초기 확장을 수행하여 제2 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제2 TIL 집단은 제1 TIL 집단보다 수가 적어도 5배 더 많고, 제1 세포 배양 배지는 IL-2 및 종양 괴사 인자 수용체 슈퍼패밀리 (TNFRSF) 효능제를 포함하고, 초기 확장은 21일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(d) 제2 세포 배양 배지에서 제2 TIL 집단의 급속 확장을 수행하여 제3 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제3 TIL 집단은 급속 확장의 시작으로부터 7일 후 제2 TIL 집단보다 수가 적어도 50배 더 많고, 제2 세포 배양 배지는 IL-2, OKT-3 (항-CD3 항체), 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC) 및 임의로 TNFRSF 효능제를 포함하고, 급속 확장은 14일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(e) 제3 TIL 집단을 수거하는 단계; 및
(f) 암을 갖는 환자에게 치료 유효 분량의 제3 TIL 집단을 투여하는 단계
를 포함하며, 여기서 IL-2는 제2 세포 배양 배지에 약 800 내지 약 1100 IU/mL의 초기 농도로 존재하는 것인,
종양 침윤 림프구 (TIL) 집단으로 암을 치료하는 방법을 제공한다.
한 실시양태에서, 본 발명은
(a) 환자로부터 종양을 절제하는 단계;
(b) 종양으로부터 제1 종양 침윤 림프구 (TIL) 집단을 수득하는 단계;
(c) 제1 세포 배양 배지에서 제1 TIL 집단의 초기 확장을 수행하여 제2 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제2 TIL 집단은 제1 TIL 집단보다 수가 적어도 5배 더 많고, 제1 세포 배양 배지는 IL-2 및 종양 괴사 인자 수용체 슈퍼패밀리 (TNFRSF) 효능제를 포함하고, 초기 확장은 21일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(d) 제2 세포 배양 배지에서 제2 TIL 집단의 급속 확장을 수행하여 제3 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제3 TIL 집단은 급속 확장의 시작으로부터 7일 후 제2 TIL 집단보다 수가 적어도 50배 더 많고, 제2 세포 배양 배지는 IL-2, OKT-3 (항-CD3 항체), 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC) 및 임의로 TNFRSF 효능제를 포함하고, 급속 확장은 14일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(e) 제3 TIL 집단을 수거하는 단계; 및
(f) 암을 갖는 환자에게 치료 유효 분량의 제3 TIL 집단을 투여하는 단계
를 포함하며, 여기서 IL-2는 제2 세포 배양 배지에 약 1000 IU/mL의 초기 농도로 존재하는 것인,
종양 침윤 림프구 (TIL) 집단으로 암을 치료하는 방법을 제공한다.
한 실시양태에서, 본 발명은
(a) 환자로부터 종양을 절제하는 단계;
(b) 종양으로부터 제1 종양 침윤 림프구 (TIL) 집단을 수득하는 단계;
(c) 제1 세포 배양 배지에서 제1 TIL 집단의 초기 확장을 수행하여 제2 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제2 TIL 집단은 제1 TIL 집단보다 수가 적어도 5배 더 많고, 제1 세포 배양 배지는 IL-2 및 종양 괴사 인자 수용체 슈퍼패밀리 (TNFRSF) 효능제를 포함하고, 초기 확장은 21일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(d) 제2 세포 배양 배지에서 제2 TIL 집단의 급속 확장을 수행하여 제3 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제3 TIL 집단은 급속 확장의 시작으로부터 7일 후 제2 TIL 집단보다 수가 적어도 50배 더 많고, 제2 세포 배양 배지는 IL-2, OKT-3 (항-CD3 항체), 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC) 및 임의로 TNFRSF 효능제를 포함하고, 급속 확장은 14일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(e) 제3 TIL 집단을 수거하는 단계; 및
(f) 암을 갖는 환자에게 치료 유효 분량의 제3 TIL 집단을 투여하는 단계
를 포함하며, 여기서 IL-15가 제1 세포 배양 배지에 존재하는 것인,
종양 침윤 림프구 (TIL) 집단으로 암을 치료하는 방법을 제공한다.
한 실시양태에서, 본 발명은
(a) 환자로부터 종양을 절제하는 단계;
(b) 종양으로부터 제1 종양 침윤 림프구 (TIL) 집단을 수득하는 단계;
(c) 제1 세포 배양 배지에서 제1 TIL 집단의 초기 확장을 수행하여 제2 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제2 TIL 집단은 제1 TIL 집단보다 수가 적어도 5배 더 많고, 제1 세포 배양 배지는 IL-2 및 종양 괴사 인자 수용체 슈퍼패밀리 (TNFRSF) 효능제를 포함하고, 초기 확장은 21일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(d) 제2 세포 배양 배지에서 제2 TIL 집단의 급속 확장을 수행하여 제3 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제3 TIL 집단은 급속 확장의 시작으로부터 7일 후 제2 TIL 집단보다 수가 적어도 50배 더 많고, 제2 세포 배양 배지는 IL-2, OKT-3 (항-CD3 항체), 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC) 및 임의로 TNFRSF 효능제를 포함하고, 급속 확장은 14일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(e) 제3 TIL 집단을 수거하는 단계; 및
(f) 암을 갖는 환자에게 치료 유효 분량의 제3 TIL 집단을 투여하는 단계
를 포함하며, 여기서 IL-15가 제1 세포 배양 배지에 약 5 ng/mL 내지 약 20 ng/mL의 초기 농도로 존재하는 것인,
종양 침윤 림프구 (TIL) 집단으로 암을 치료하는 방법을 제공한다.
한 실시양태에서, 본 발명은
(a) 환자로부터 종양을 절제하는 단계;
(b) 종양으로부터 제1 종양 침윤 림프구 (TIL) 집단을 수득하는 단계;
(c) 제1 세포 배양 배지에서 제1 TIL 집단의 초기 확장을 수행하여 제2 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제2 TIL 집단은 제1 TIL 집단보다 수가 적어도 5배 더 많고, 제1 세포 배양 배지는 IL-2 및 종양 괴사 인자 수용체 슈퍼패밀리 (TNFRSF) 효능제를 포함하고, 초기 확장은 21일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(d) 제2 세포 배양 배지에서 제2 TIL 집단의 급속 확장을 수행하여 제3 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제3 TIL 집단은 급속 확장의 시작으로부터 7일 후 제2 TIL 집단보다 수가 적어도 50배 더 많고, 제2 세포 배양 배지는 IL-2, OKT-3 (항-CD3 항체), 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC) 및 임의로 TNFRSF 효능제를 포함하고, 급속 확장은 14일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(e) 제3 TIL 집단을 수거하는 단계; 및
(f) 암을 갖는 환자에게 치료 유효 분량의 제3 TIL 집단을 투여하는 단계
를 포함하며, 여기서 IL-15가 제2 세포 배양 배지에 존재하는 것인,
종양 침윤 림프구 (TIL) 집단으로 암을 치료하는 방법을 제공한다.
한 실시양태에서, 본 발명은
(a) 환자로부터 종양을 절제하는 단계;
(b) 종양으로부터 제1 종양 침윤 림프구 (TIL) 집단을 수득하는 단계;
(c) 제1 세포 배양 배지에서 제1 TIL 집단의 초기 확장을 수행하여 제2 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제2 TIL 집단은 제1 TIL 집단보다 수가 적어도 5배 더 많고, 제1 세포 배양 배지는 IL-2 및 종양 괴사 인자 수용체 슈퍼패밀리 (TNFRSF) 효능제를 포함하고, 초기 확장은 21일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(d) 제2 세포 배양 배지에서 제2 TIL 집단의 급속 확장을 수행하여 제3 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제3 TIL 집단은 급속 확장의 시작으로부터 7일 후 제2 TIL 집단보다 수가 적어도 50배 더 많고, 제2 세포 배양 배지는 IL-2, OKT-3 (항-CD3 항체), 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC) 및 임의로 TNFRSF 효능제를 포함하고, 급속 확장은 14일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(e) 제3 TIL 집단을 수거하는 단계; 및
(f) 암을 갖는 환자에게 치료 유효 분량의 제3 TIL 집단을 투여하는 단계
를 포함하며, 여기서 IL-15가 제2 세포 배양 배지에 약 5 ng/mL 내지 약 20 ng/mL의 초기 농도로 존재하는 것인,
종양 침윤 림프구 (TIL) 집단으로 암을 치료하는 방법을 제공한다.
한 실시양태에서, 본 발명은
(a) 환자로부터 종양을 절제하는 단계;
(b) 종양으로부터 제1 종양 침윤 림프구 (TIL) 집단을 수득하는 단계;
(c) 제1 세포 배양 배지에서 제1 TIL 집단의 초기 확장을 수행하여 제2 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제2 TIL 집단은 제1 TIL 집단보다 수가 적어도 5배 더 많고, 제1 세포 배양 배지는 IL-2 및 종양 괴사 인자 수용체 슈퍼패밀리 (TNFRSF) 효능제를 포함하고, 초기 확장은 21일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(d) 제2 세포 배양 배지에서 제2 TIL 집단의 급속 확장을 수행하여 제3 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제3 TIL 집단은 급속 확장의 시작으로부터 7일 후 제2 TIL 집단보다 수가 적어도 50배 더 많고, 제2 세포 배양 배지는 IL-2, OKT-3 (항-CD3 항체), 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC) 및 임의로 TNFRSF 효능제를 포함하고, 급속 확장은 14일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(e) 제3 TIL 집단을 수거하는 단계; 및
(f) 암을 갖는 환자에게 치료 유효 분량의 제3 TIL 집단을 투여하는 단계
를 포함하며, 여기서 IL-21이 제1 세포 배양 배지에 존재하는 것인,
종양 침윤 림프구 (TIL) 집단으로 암을 치료하는 방법을 제공한다.
한 실시양태에서, 본 발명은
(a) 환자로부터 종양을 절제하는 단계;
(b) 종양으로부터 제1 종양 침윤 림프구 (TIL) 집단을 수득하는 단계;
(c) 제1 세포 배양 배지에서 제1 TIL 집단의 초기 확장을 수행하여 제2 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제2 TIL 집단은 제1 TIL 집단보다 수가 적어도 5배 더 많고, 제1 세포 배양 배지는 IL-2 및 종양 괴사 인자 수용체 슈퍼패밀리 (TNFRSF) 효능제를 포함하고, 초기 확장은 21일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(d) 제2 세포 배양 배지에서 제2 TIL 집단의 급속 확장을 수행하여 제3 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제3 TIL 집단은 급속 확장의 시작으로부터 7일 후 제2 TIL 집단보다 수가 적어도 50배 더 많고, 제2 세포 배양 배지는 IL-2, OKT-3 (항-CD3 항체), 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC) 및 임의로 TNFRSF 효능제를 포함하고, 급속 확장은 14일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(e) 제3 TIL 집단을 수거하는 단계; 및
(f) 암을 갖는 환자에게 치료 유효 분량의 제3 TIL 집단을 투여하는 단계
를 포함하며, 여기서 IL-21이 제1 세포 배양 배지에 약 5 ng/mL 내지 약 20 ng/mL의 초기 농도로 존재하는 것인,
종양 침윤 림프구 (TIL) 집단으로 암을 치료하는 방법을 제공한다.
한 실시양태에서, 본 발명은
(a) 환자로부터 종양을 절제하는 단계;
(b) 종양으로부터 제1 종양 침윤 림프구 (TIL) 집단을 수득하는 단계;
(c) 제1 세포 배양 배지에서 제1 TIL 집단의 초기 확장을 수행하여 제2 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제2 TIL 집단은 제1 TIL 집단보다 수가 적어도 5배 더 많고, 제1 세포 배양 배지는 IL-2 및 종양 괴사 인자 수용체 슈퍼패밀리 (TNFRSF) 효능제를 포함하고, 초기 확장은 21일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(d) 제2 세포 배양 배지에서 제2 TIL 집단의 급속 확장을 수행하여 제3 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제3 TIL 집단은 급속 확장의 시작으로부터 7일 후 제2 TIL 집단보다 수가 적어도 50배 더 많고, 제2 세포 배양 배지는 IL-2, OKT-3 (항-CD3 항체), 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC) 및 임의로 TNFRSF 효능제를 포함하고, 급속 확장은 14일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(e) 제3 TIL 집단을 수거하는 단계; 및
(f) 암을 갖는 환자에게 치료 유효 분량의 제3 TIL 집단을 투여하는 단계
를 포함하며, 여기서 IL-21이 제2 세포 배양 배지에 존재하는 것인,
종양 침윤 림프구 (TIL) 집단으로 암을 치료하는 방법을 제공한다.
한 실시양태에서, 본 발명은
(a) 환자로부터 종양을 절제하는 단계;
(b) 종양으로부터 제1 종양 침윤 림프구 (TIL) 집단을 수득하는 단계;
(c) 제1 세포 배양 배지에서 제1 TIL 집단의 초기 확장을 수행하여 제2 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제2 TIL 집단은 제1 TIL 집단보다 수가 적어도 5배 더 많고, 제1 세포 배양 배지는 IL-2 및 종양 괴사 인자 수용체 슈퍼패밀리 (TNFRSF) 효능제를 포함하고, 초기 확장은 21일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(d) 제2 세포 배양 배지에서 제2 TIL 집단의 급속 확장을 수행하여 제3 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제3 TIL 집단은 급속 확장의 시작으로부터 7일 후 제2 TIL 집단보다 수가 적어도 50배 더 많고, 제2 세포 배양 배지는 IL-2, OKT-3 (항-CD3 항체), 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC) 및 임의로 TNFRSF 효능제를 포함하고, 급속 확장은 14일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(e) 제3 TIL 집단을 수거하는 단계; 및
(f) 암을 갖는 환자에게 치료 유효 분량의 제3 TIL 집단을 투여하는 단계
를 포함하며, 여기서 IL-21이 제2 세포 배양 배지에 약 5 ng/mL 내지 약 20 ng/mL의 초기 농도로 존재하는 것인,
종양 침윤 림프구 (TIL) 집단으로 암을 치료하는 방법을 제공한다.
한 실시양태에서, 본 발명은
(a) 환자로부터 종양을 절제하는 단계;
(b) 종양으로부터 제1 종양 침윤 림프구 (TIL) 집단을 수득하는 단계;
(c) 제1 세포 배양 배지에서 제1 TIL 집단의 초기 확장을 수행하여 제2 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제2 TIL 집단은 제1 TIL 집단보다 수가 적어도 5배 더 많고, 제1 세포 배양 배지는 IL-2 및 종양 괴사 인자 수용체 슈퍼패밀리 (TNFRSF) 효능제를 포함하고, 초기 확장은 21일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(d) 제2 세포 배양 배지에서 제2 TIL 집단의 급속 확장을 수행하여 제3 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제3 TIL 집단은 급속 확장의 시작으로부터 7일 후 제2 TIL 집단보다 수가 적어도 50배 더 많고, 제2 세포 배양 배지는 IL-2, OKT-3 (항-CD3 항체), 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC) 및 임의로 TNFRSF 효능제를 포함하고, 급속 확장은 14일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(e) 제3 TIL 집단을 수거하는 단계; 및
(f) 암을 갖는 환자에게 치료 유효 분량의 제3 TIL 집단을 투여하는 단계
를 포함하며, 여기서 OKT-3 항체는 제2 세포 배양 배지에 약 10 ng/mL 내지 약 60 ng/mL의 초기 농도로 존재하는 것인,
종양 침윤 림프구 (TIL) 집단으로 암을 치료하는 방법을 제공한다.
한 실시양태에서, 본 발명은
(a) 환자로부터 종양을 절제하는 단계;
(b) 종양으로부터 제1 종양 침윤 림프구 (TIL) 집단을 수득하는 단계;
(c) 제1 세포 배양 배지에서 제1 TIL 집단의 초기 확장을 수행하여 제2 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제2 TIL 집단은 제1 TIL 집단보다 수가 적어도 5배 더 많고, 제1 세포 배양 배지는 IL-2 및 종양 괴사 인자 수용체 슈퍼패밀리 (TNFRSF) 효능제를 포함하고, 초기 확장은 21일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(d) 제2 세포 배양 배지에서 제2 TIL 집단의 급속 확장을 수행하여 제3 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제3 TIL 집단은 급속 확장의 시작으로부터 7일 후 제2 TIL 집단보다 수가 적어도 50배 더 많고, 제2 세포 배양 배지는 IL-2, OKT-3 (항-CD3 항체), 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC) 및 임의로 TNFRSF 효능제를 포함하고, 급속 확장은 14일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(e) 제3 TIL 집단을 수거하는 단계; 및
(f) 암을 갖는 환자에게 치료 유효 분량의 제3 TIL 집단을 투여하는 단계
를 포함하며, 여기서 OKT-3 항체는 제2 세포 배양 배지에 약 30 ng/mL의 초기 농도로 존재하는 것인,
종양 침윤 림프구 (TIL) 집단으로 암을 치료하는 방법을 제공한다.
한 실시양태에서, 본 발명은
(a) 환자로부터 종양을 절제하는 단계;
(b) 종양으로부터 제1 종양 침윤 림프구 (TIL) 집단을 수득하는 단계;
(c) 제1 세포 배양 배지에서 제1 TIL 집단의 초기 확장을 수행하여 제2 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제2 TIL 집단은 제1 TIL 집단보다 수가 적어도 5배 더 많고, 제1 세포 배양 배지는 IL-2 및 종양 괴사 인자 수용체 슈퍼패밀리 (TNFRSF) 효능제를 포함하고, 초기 확장은 21일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(d) 제2 세포 배양 배지에서 제2 TIL 집단의 급속 확장을 수행하여 제3 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제3 TIL 집단은 급속 확장의 시작으로부터 7일 후 제2 TIL 집단보다 수가 적어도 50배 더 많고, 제2 세포 배양 배지는 IL-2, OKT-3 (항-CD3 항체), 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC) 및 임의로 TNFRSF 효능제를 포함하고, 급속 확장은 14일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(e) 제3 TIL 집단을 수거하는 단계; 및
(f) 암을 갖는 환자에게 치료 유효 분량의 제3 TIL 집단을 투여하는 단계
를 포함하며, 여기서 초기 확장은 기체 투과성 용기를 사용하여 수행되는 것인,
종양 침윤 림프구 (TIL) 집단으로 암을 치료하는 방법을 제공한다.
한 실시양태에서, 본 발명은
(a) 환자로부터 종양을 절제하는 단계;
(b) 종양으로부터 제1 종양 침윤 림프구 (TIL) 집단을 수득하는 단계;
(c) 제1 세포 배양 배지에서 제1 TIL 집단의 초기 확장을 수행하여 제2 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제2 TIL 집단은 제1 TIL 집단보다 수가 적어도 5배 더 많고, 제1 세포 배양 배지는 IL-2 및 종양 괴사 인자 수용체 슈퍼패밀리 (TNFRSF) 효능제를 포함하고, 초기 확장은 21일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(d) 제2 세포 배양 배지에서 제2 TIL 집단의 급속 확장을 수행하여 제3 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제3 TIL 집단은 급속 확장의 시작으로부터 7일 후 제2 TIL 집단보다 수가 적어도 50배 더 많고, 제2 세포 배양 배지는 IL-2, OKT-3 (항-CD3 항체), 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC) 및 임의로 TNFRSF 효능제를 포함하고, 급속 확장은 14일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(e) 제3 TIL 집단을 수거하는 단계; 및
(f) 암을 갖는 환자에게 치료 유효 분량의 제3 TIL 집단을 투여하는 단계
를 포함하며, 여기서 급속 확장은 기체 투과성 용기를 사용하여 수행되는 것인,
종양 침윤 림프구 (TIL) 집단으로 암을 치료하는 방법을 제공한다.
한 실시양태에서, 본 발명은
(a) 환자로부터 종양을 절제하는 단계;
(b) 종양으로부터 제1 종양 침윤 림프구 (TIL) 집단을 수득하는 단계;
(c) 제1 세포 배양 배지에서 제1 TIL 집단의 초기 확장을 수행하여 제2 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제2 TIL 집단은 제1 TIL 집단보다 수가 적어도 5배 더 많고, 제1 세포 배양 배지는 IL-2 및 종양 괴사 인자 수용체 슈퍼패밀리 (TNFRSF) 효능제를 포함하고, 초기 확장은 21일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(d) 제2 세포 배양 배지에서 제2 TIL 집단의 급속 확장을 수행하여 제3 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제3 TIL 집단은 급속 확장의 시작으로부터 7일 후 제2 TIL 집단보다 수가 적어도 50배 더 많고, 제2 세포 배양 배지는 IL-2, OKT-3 (항-CD3 항체), 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC) 및 임의로 TNFRSF 효능제를 포함하고, 급속 확장은 14일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(e) 제3 TIL 집단을 수거하는 단계; 및
(f) 암을 갖는 환자에게 치료 유효 분량의 제3 TIL 집단을 투여하는 단계
를 포함하고, 환자에게 제3 TIL 집단을 투여하기 전에 환자를 비-골수절제 림프구고갈 요법으로 치료하는 단계를 추가로 포함하는,
종양 침윤 림프구 (TIL) 집단으로 암을 치료하는 방법을 제공한다.
한 실시양태에서, 본 발명은
(a) 환자로부터 종양을 절제하는 단계;
(b) 종양으로부터 제1 종양 침윤 림프구 (TIL) 집단을 수득하는 단계;
(c) 제1 세포 배양 배지에서 제1 TIL 집단의 초기 확장을 수행하여 제2 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제2 TIL 집단은 제1 TIL 집단보다 수가 적어도 5배 더 많고, 제1 세포 배양 배지는 IL-2 및 종양 괴사 인자 수용체 슈퍼패밀리 (TNFRSF) 효능제를 포함하고, 초기 확장은 21일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(d) 제2 세포 배양 배지에서 제2 TIL 집단의 급속 확장을 수행하여 제3 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제3 TIL 집단은 급속 확장의 시작으로부터 7일 후 제2 TIL 집단보다 수가 적어도 50배 더 많고, 제2 세포 배양 배지는 IL-2, OKT-3 (항-CD3 항체), 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC) 및 임의로 TNFRSF 효능제를 포함하고, 급속 확장은 14일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(e) 제3 TIL 집단을 수거하는 단계; 및
(f) 암을 갖는 환자에게 치료 유효 분량의 제3 TIL 집단을 투여하는 단계
를 포함하고, 환자에게 제3 TIL 집단을 투여하기 전에 환자를 비-골수절제 림프구고갈 요법으로 치료하는 단계를 추가로 포함하며, 여기서 비-골수절제 림프구고갈 요법은 2일 동안 60 mg/m2/일의 용량의 시클로포스파미드의 투여에 이어서 5일 동안 25 mg/m2/일의 용량의 플루다라빈의 투여 단계를 포함하는 것인,
종양 침윤 림프구 (TIL) 집단으로 암을 치료하는 방법을 제공한다.
한 실시양태에서, 본 발명은
(a) 환자로부터 종양을 절제하는 단계;
(b) 종양으로부터 제1 종양 침윤 림프구 (TIL) 집단을 수득하는 단계;
(c) 제1 세포 배양 배지에서 제1 TIL 집단의 초기 확장을 수행하여 제2 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제2 TIL 집단은 제1 TIL 집단보다 수가 적어도 5배 더 많고, 제1 세포 배양 배지는 IL-2 및 종양 괴사 인자 수용체 슈퍼패밀리 (TNFRSF) 효능제를 포함하고, 초기 확장은 21일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(d) 제2 세포 배양 배지에서 제2 TIL 집단의 급속 확장을 수행하여 제3 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제3 TIL 집단은 급속 확장의 시작으로부터 7일 후 제2 TIL 집단보다 수가 적어도 50배 더 많고, 제2 세포 배양 배지는 IL-2, OKT-3 (항-CD3 항체), 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC) 및 임의로 TNFRSF 효능제를 포함하고, 급속 확장은 14일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(e) 제3 TIL 집단을 수거하는 단계; 및
(f) 암을 갖는 환자에게 치료 유효 분량의 제3 TIL 집단을 투여하는 단계
를 포함하고, 환자에게 제3 TIL 집단을 투여한 다음 날에 시작하여 환자를 점강 IL-2 요법으로 치료하는 단계를 추가로 포함하며, 여기서 점강 IL-2 요법은 제1일에 18,000,000 IU/m2, 제2일에 9,000,000 IU/m2, 및 제3일 및 제4일에 4,500,000 IU/m2의 용량으로 정맥내로 투여되는 알데스류킨을 포함하는 것인,
종양 침윤 림프구 (TIL) 집단으로 암을 치료하는 방법을 제공한다.
한 실시양태에서, 본 발명은
(a) 환자로부터 종양을 절제하는 단계;
(b) 종양으로부터 제1 종양 침윤 림프구 (TIL) 집단을 수득하는 단계;
(c) 제1 세포 배양 배지에서 제1 TIL 집단의 초기 확장을 수행하여 제2 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제2 TIL 집단은 제1 TIL 집단보다 수가 적어도 5배 더 많고, 제1 세포 배양 배지는 IL-2 및 종양 괴사 인자 수용체 슈퍼패밀리 (TNFRSF) 효능제를 포함하고, 초기 확장은 21일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(d) 제2 세포 배양 배지에서 제2 TIL 집단의 급속 확장을 수행하여 제3 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제3 TIL 집단은 급속 확장의 시작으로부터 7일 후 제2 TIL 집단보다 수가 적어도 50배 더 많고, 제2 세포 배양 배지는 IL-2, OKT-3 (항-CD3 항체), 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC) 및 임의로 TNFRSF 효능제를 포함하고, 급속 확장은 14일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(e) 제3 TIL 집단을 수거하는 단계; 및
(f) 암을 갖는 환자에게 치료 유효 분량의 제3 TIL 집단을 투여하는 단계
를 포함하고, 환자에게 제3 TIL 집단을 투여한 후에 환자를 0.10 mg/일 내지 50 mg/일의 용량의 PEG화 IL-2로 치료하는 단계를 추가로 포함하는,
종양 침윤 림프구 (TIL) 집단으로 암을 치료하는 방법을 제공한다.
한 실시양태에서, 본 발명은
(a) 환자로부터 종양을 절제하는 단계;
(b) 종양으로부터 제1 종양 침윤 림프구 (TIL) 집단을 수득하는 단계;
(c) 제1 세포 배양 배지에서 제1 TIL 집단의 초기 확장을 수행하여 제2 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제2 TIL 집단은 제1 TIL 집단보다 수가 적어도 5배 더 많고, 제1 세포 배양 배지는 IL-2 및 종양 괴사 인자 수용체 슈퍼패밀리 (TNFRSF) 효능제를 포함하고, 초기 확장은 21일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(d) 제2 세포 배양 배지에서 제2 TIL 집단의 급속 확장을 수행하여 제3 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제3 TIL 집단은 급속 확장의 시작으로부터 7일 후 제2 TIL 집단보다 수가 적어도 50배 더 많고, 제2 세포 배양 배지는 IL-2, OKT-3 (항-CD3 항체), 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC) 및 임의로 TNFRSF 효능제를 포함하고, 급속 확장은 14일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(e) 제3 TIL 집단을 수거하는 단계; 및
(f) 암을 갖는 환자에게 치료 유효 분량의 제3 TIL 집단을 투여하는 단계
를 포함하고, 환자에게 제3 TIL 집단을 투여한 다음 날에 시작하여 환자를 고용량 IL-2 요법으로 치료하는 단계를 추가로 포함하는,
종양 침윤 림프구 (TIL) 집단으로 암을 치료하는 방법을 제공한다.
한 실시양태에서, 본 발명은
(a) 환자로부터 종양을 절제하는 단계;
(b) 종양으로부터 제1 종양 침윤 림프구 (TIL) 집단을 수득하는 단계;
(c) 제1 세포 배양 배지에서 제1 TIL 집단의 초기 확장을 수행하여 제2 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제2 TIL 집단은 제1 TIL 집단보다 수가 적어도 5배 더 많고, 제1 세포 배양 배지는 IL-2 및 종양 괴사 인자 수용체 슈퍼패밀리 (TNFRSF) 효능제를 포함하고, 초기 확장은 21일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(d) 제2 세포 배양 배지에서 제2 TIL 집단의 급속 확장을 수행하여 제3 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제3 TIL 집단은 급속 확장의 시작으로부터 7일 후 제2 TIL 집단보다 수가 적어도 50배 더 많고, 제2 세포 배양 배지는 IL-2, OKT-3 (항-CD3 항체), 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC) 및 임의로 TNFRSF 효능제를 포함하고, 급속 확장은 14일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(e) 제3 TIL 집단을 수거하는 단계; 및
(f) 암을 갖는 환자에게 치료 유효 분량의 제3 TIL 집단을 투여하는 단계
를 포함하고, 환자에게 제3 TIL 집단을 투여한 다음 날에 시작하여 환자를 고용량 IL-2 요법으로 치료하는 단계를 추가로 포함하며, 여기서 고용량 IL-2 요법은 내성(tolerance)까지 8시간마다 15분 볼루스 정맥내 주입으로서 투여되는 600,000 또는 720,000 IU/kg의 알데스류킨 또는 그의 바이오시밀러 또는 변이체를 포함하는 것인,
종양 침윤 림프구 (TIL) 집단으로 암을 치료하는 방법을 제공한다.
한 실시양태에서, 본 발명은
(a) 환자로부터 종양을 절제하는 단계;
(b) 종양으로부터 제1 종양 침윤 림프구 (TIL) 집단을 수득하는 단계;
(c) 제1 세포 배양 배지에서 제1 TIL 집단의 초기 확장을 수행하여 제2 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제2 TIL 집단은 제1 TIL 집단보다 수가 적어도 5배 더 많고, 제1 세포 배양 배지는 IL-2 및 종양 괴사 인자 수용체 슈퍼패밀리 (TNFRSF) 효능제를 포함하고, 초기 확장은 21일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(d) 제2 세포 배양 배지에서 제2 TIL 집단의 급속 확장을 수행하여 제3 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제3 TIL 집단은 급속 확장의 시작으로부터 7일 후 제2 TIL 집단보다 수가 적어도 50배 더 많고, 제2 세포 배양 배지는 IL-2, OKT-3 (항-CD3 항체), 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC) 및 임의로 TNFRSF 효능제를 포함하고, 급속 확장은 14일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(e) 제3 TIL 집단을 수거하는 단계; 및
(f) 암을 갖는 환자에게 치료 유효 분량의 제3 TIL 집단을 투여하는 단계
를 포함하며, 여기서 암은 흑색종, 난소암, 자궁경부암, 폐암, 방광암, 유방암, 두경부암, 신세포 암종, 급성 골수성 백혈병, 결장직장암, 담관암종 및 육종으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인,
종양 침윤 림프구 (TIL) 집단으로 암을 치료하는 방법을 제공한다.
한 실시양태에서, 본 발명은
(a) 환자로부터 종양을 절제하는 단계;
(b) 종양으로부터 제1 종양 침윤 림프구 (TIL) 집단을 수득하는 단계;
(c) 제1 세포 배양 배지에서 제1 TIL 집단의 초기 확장을 수행하여 제2 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제2 TIL 집단은 제1 TIL 집단보다 수가 적어도 5배 더 많고, 제1 세포 배양 배지는 IL-2 및 종양 괴사 인자 수용체 슈퍼패밀리 (TNFRSF) 효능제를 포함하고, 초기 확장은 21일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(d) 제2 세포 배양 배지에서 제2 TIL 집단의 급속 확장을 수행하여 제3 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제3 TIL 집단은 급속 확장의 시작으로부터 7일 후 제2 TIL 집단보다 수가 적어도 50배 더 많고, 제2 세포 배양 배지는 IL-2, OKT-3 (항-CD3 항체), 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC) 및 임의로 TNFRSF 효능제를 포함하고, 급속 확장은 14일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(e) 제3 TIL 집단을 수거하는 단계; 및
(f) 암을 갖는 환자에게 치료 유효 분량의 제3 TIL 집단을 투여하는 단계
를 포함하며, 여기서 암은 비소세포 폐암 (NSCLC), 삼중 음성 유방암, 이중-불응성 흑색종 및 포도막 (안구) 흑색종으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인,
종양 침윤 림프구 (TIL) 집단으로 암을 치료하는 방법을 제공한다.
한 실시양태에서, 본 발명은
(a) 환자로부터 종양을 절제하는 단계;
(b) 종양으로부터 제1 종양 침윤 림프구 (TIL) 집단을 수득하는 단계;
(c) 제1 세포 배양 배지에서 제1 TIL 집단의 초기 확장을 수행하여 제2 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제2 TIL 집단은 제1 TIL 집단보다 수가 적어도 5배 더 많고, 제1 세포 배양 배지는 IL-2 및 종양 괴사 인자 수용체 슈퍼패밀리 (TNFRSF) 효능제를 포함하고, 초기 확장은 21일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(d) 제2 세포 배양 배지에서 제2 TIL 집단의 급속 확장을 수행하여 제3 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제3 TIL 집단은 급속 확장의 시작으로부터 7일 후 제2 TIL 집단보다 수가 적어도 50배 더 많고, 제2 세포 배양 배지는 IL-2, OKT-3 (항-CD3 항체), 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC) 및 임의로 TNFRSF 효능제를 포함하고, 급속 확장은 14일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(e) 제3 TIL 집단을 수거하는 단계; 및
(f) 암을 갖는 환자에게 치료 유효 분량의 제3 TIL 집단을 투여하는 단계
를 포함하고, 환자로부터 종양을 절제하기 전에 환자를 PD-1 억제제 또는 PD-L1 억제제로 치료하는 단계를 추가로 포함하는,
종양 침윤 림프구 (TIL) 집단으로 암을 치료하는 방법을 제공한다.
한 실시양태에서, 본 발명은
(a) 환자로부터 종양을 절제하는 단계;
(b) 종양으로부터 제1 종양 침윤 림프구 (TIL) 집단을 수득하는 단계;
(c) 제1 세포 배양 배지에서 제1 TIL 집단의 초기 확장을 수행하여 제2 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제2 TIL 집단은 제1 TIL 집단보다 수가 적어도 5배 더 많고, 제1 세포 배양 배지는 IL-2 및 종양 괴사 인자 수용체 슈퍼패밀리 (TNFRSF) 효능제를 포함하고, 초기 확장은 21일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(d) 제2 세포 배양 배지에서 제2 TIL 집단의 급속 확장을 수행하여 제3 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제3 TIL 집단은 급속 확장의 시작으로부터 7일 후 제2 TIL 집단보다 수가 적어도 50배 더 많고, 제2 세포 배양 배지는 IL-2, OKT-3 (항-CD3 항체), 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC) 및 임의로 TNFRSF 효능제를 포함하고, 급속 확장은 14일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(e) 제3 TIL 집단을 수거하는 단계; 및
(f) 암을 갖는 환자에게 치료 유효 분량의 제3 TIL 집단을 투여하는 단계
를 포함하고, 환자로부터 종양을 절제하기 전에 환자를 PD-1 억제제 또는 PD-L1 억제제로 치료하는 단계를 추가로 포함하며, 여기서 PD-1 억제제 또는 PD-L1 억제제는 니볼루맙, 펨브롤리주맙, 두르발루맙, 아테졸리주맙, 아벨루맙 및 그의 단편, 유도체, 변이체, 바이오시밀러 및 그의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인,
종양 침윤 림프구 (TIL) 집단으로 암을 치료하는 방법을 제공한다.
한 실시양태에서, 본 발명은
(a) 환자로부터 종양을 절제하는 단계;
(b) 종양으로부터 제1 종양 침윤 림프구 (TIL) 집단을 수득하는 단계;
(c) 제1 세포 배양 배지에서 제1 TIL 집단의 초기 확장을 수행하여 제2 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제2 TIL 집단은 제1 TIL 집단보다 수가 적어도 5배 더 많고, 제1 세포 배양 배지는 IL-2 및 종양 괴사 인자 수용체 슈퍼패밀리 (TNFRSF) 효능제를 포함하고, 초기 확장은 21일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(d) 제2 세포 배양 배지에서 제2 TIL 집단의 급속 확장을 수행하여 제3 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제3 TIL 집단은 급속 확장의 시작으로부터 7일 후 제2 TIL 집단보다 수가 적어도 50배 더 많고, 제2 세포 배양 배지는 IL-2, OKT-3 (항-CD3 항체), 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC) 및 임의로 TNFRSF 효능제를 포함하고, 급속 확장은 14일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(e) 제3 TIL 집단을 수거하는 단계; 및
(f) 암을 갖는 환자에게 치료 유효 분량의 제3 TIL 집단을 투여하는 단계
를 포함하고, 환자로부터 종양을 절제한 후에 환자를 PD-1 억제제 또는 PD-L1 억제제로 치료하는 단계를 추가로 포함하는,
종양 침윤 림프구 (TIL) 집단으로 암을 치료하는 방법을 제공한다.
한 실시양태에서, 본 발명은
(a) 환자로부터 종양을 절제하는 단계;
(b) 종양으로부터 제1 종양 침윤 림프구 (TIL) 집단을 수득하는 단계;
(c) 제1 세포 배양 배지에서 제1 TIL 집단의 초기 확장을 수행하여 제2 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제2 TIL 집단은 제1 TIL 집단보다 수가 적어도 5배 더 많고, 제1 세포 배양 배지는 IL-2 및 종양 괴사 인자 수용체 슈퍼패밀리 (TNFRSF) 효능제를 포함하고, 초기 확장은 21일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(d) 제2 세포 배양 배지에서 제2 TIL 집단의 급속 확장을 수행하여 제3 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제3 TIL 집단은 급속 확장의 시작으로부터 7일 후 제2 TIL 집단보다 수가 적어도 50배 더 많고, 제2 세포 배양 배지는 IL-2, OKT-3 (항-CD3 항체), 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC) 및 임의로 TNFRSF 효능제를 포함하고, 급속 확장은 14일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(e) 제3 TIL 집단을 수거하는 단계; 및
(f) 암을 갖는 환자에게 치료 유효 분량의 제3 TIL 집단을 투여하는 단계
를 포함하고, 환자로부터 종양을 절제한 후에 환자를 PD-1 억제제 또는 PD-L1 억제제로 치료하는 단계를 추가로 포함하며, 여기서 PD-1 억제제 또는 PD-L1 억제제는 니볼루맙, 펨브롤리주맙, 두르발루맙, 아테졸리주맙, 아벨루맙 및 그의 단편, 유도체, 변이체, 바이오시밀러 및 그의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인,
종양 침윤 림프구 (TIL) 집단으로 암을 치료하는 방법을 제공한다.
한 실시양태에서, 본 발명은
(a) 환자로부터 종양을 절제하는 단계;
(b) 종양으로부터 제1 종양 침윤 림프구 (TIL) 집단을 수득하는 단계;
(c) 제1 세포 배양 배지에서 제1 TIL 집단의 초기 확장을 수행하여 제2 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제2 TIL 집단은 제1 TIL 집단보다 수가 적어도 5배 더 많고, 제1 세포 배양 배지는 IL-2 및 종양 괴사 인자 수용체 슈퍼패밀리 (TNFRSF) 효능제를 포함하고, 초기 확장은 21일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(d) 제2 세포 배양 배지에서 제2 TIL 집단의 급속 확장을 수행하여 제3 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제3 TIL 집단은 급속 확장의 시작으로부터 7일 후 제2 TIL 집단보다 수가 적어도 50배 더 많고, 제2 세포 배양 배지는 IL-2, OKT-3 (항-CD3 항체), 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC) 및 임의로 TNFRSF 효능제를 포함하고, 급속 확장은 14일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(e) 제3 TIL 집단을 수거하는 단계; 및
(f) 암을 갖는 환자에게 치료 유효 분량의 제3 TIL 집단을 투여하는 단계
를 포함하고, 환자에게 제3 TIL 집단을 투여한 후에 환자를 PD-1 억제제 또는 PD-L1 억제제로 치료하는 단계를 추가로 포함하는,
종양 침윤 림프구 (TIL) 집단으로 암을 치료하는 방법을 제공한다.
한 실시양태에서, 본 발명은
(a) 환자로부터 종양을 절제하는 단계;
(b) 종양으로부터 제1 종양 침윤 림프구 (TIL) 집단을 수득하는 단계;
(c) 제1 세포 배양 배지에서 제1 TIL 집단의 초기 확장을 수행하여 제2 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제2 TIL 집단은 제1 TIL 집단보다 수가 적어도 5배 더 많고, 제1 세포 배양 배지는 IL-2 및 종양 괴사 인자 수용체 슈퍼패밀리 (TNFRSF) 효능제를 포함하고, 초기 확장은 21일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(d) 제2 세포 배양 배지에서 제2 TIL 집단의 급속 확장을 수행하여 제3 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제3 TIL 집단은 급속 확장의 시작으로부터 7일 후 제2 TIL 집단보다 수가 적어도 50배 더 많고, 제2 세포 배양 배지는 IL-2, OKT-3 (항-CD3 항체), 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC) 및 임의로 TNFRSF 효능제를 포함하고, 급속 확장은 14일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(e) 제3 TIL 집단을 수거하는 단계; 및
(f) 암을 갖는 환자에게 치료 유효 분량의 제3 TIL 집단을 투여하는 단계
를 포함하고, 환자에게 제3 TIL 집단을 투여한 후에 환자를 PD-1 억제제 또는 PD-L1 억제제로 치료하는 단계를 추가로 포함하며, 여기서 PD-1 억제제 또는 PD-L1 억제제는 니볼루맙, 펨브롤리주맙, 두르발루맙, 아테졸리주맙, 아벨루맙 및 그의 단편, 유도체, 변이체, 바이오시밀러 및 그의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인,
종양 침윤 림프구 (TIL) 집단으로 암을 치료하는 방법을 제공한다.
한 실시양태에서, 본 발명은
(b) 제1 종양 침윤 림프구 (TIL) 집단을 수득하는 단계;
(c) 제1 세포 배양 배지에서 제1 TIL 집단의 초기 확장을 수행하여 제2 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제2 TIL 집단은 제1 TIL 집단보다 수가 적어도 5배 더 많고, 제1 세포 배양 배지는 IL-2 및 종양 괴사 인자 수용체 슈퍼패밀리 (TNFRSF) 효능제를 포함하고, 초기 확장은 21일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(d) 제2 세포 배양 배지에서 제2 TIL 집단의 급속 확장을 수행하여 제3 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제3 TIL 집단은 급속 확장의 시작으로부터 7일 후 제2 TIL 집단보다 수가 적어도 50배 더 많고, 제2 세포 배양 배지는 IL-2, OKT-3 (항-CD3 항체), 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC) 및 임의로 TNFRSF 효능제를 포함하고, 급속 확장은 14일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계; 및
(e) 제3 TIL 집단을 수거하는 단계
를 포함하는, 종양 침윤 림프구 (TIL) 집단의 제조 방법을 제공한다.
한 실시양태에서, 본 발명은
(b) 제1 종양 침윤 림프구 (TIL) 집단을 수득하는 단계;
(c) 제1 세포 배양 배지에서 제1 TIL 집단의 초기 확장을 수행하여 제2 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제2 TIL 집단은 제1 TIL 집단보다 수가 적어도 5배 더 많고, 제1 세포 배양 배지는 IL-2 및 종양 괴사 인자 수용체 슈퍼패밀리 (TNFRSF) 효능제를 포함하고, 초기 확장은 21일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(d) 제2 세포 배양 배지에서 제2 TIL 집단의 급속 확장을 수행하여 제3 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제3 TIL 집단은 급속 확장의 시작으로부터 7일 후 제2 TIL 집단보다 수가 적어도 50배 더 많고, 제2 세포 배양 배지는 IL-2, OKT-3 (항-CD3 항체), 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC) 및 임의로 TNFRSF 효능제를 포함하고, 급속 확장은 14일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계; 및
(e) 제3 TIL 집단을 수거하는 단계
를 포함하는 방법에 의해 수득가능한 종양 침윤 림프구 (TIL) 집단을 제공한다.
한 실시양태에서, 본 발명은 암의 치료에 사용하기 위한 TIL 집단을 제공한다. 한 실시양태에서, 본 발명은 암을 치료하는데 사용하기 위한 종양 침윤 림프구 (TIL) 집단을 포함하는 제약 조성물을 제공하며, 여기서 종양 침윤 림프구 (TIL) 집단은
(b) 제1 종양 침윤 림프구 (TIL) 집단을 수득하는 단계;
(c) 제1 세포 배양 배지에서 제1 TIL 집단의 초기 확장을 수행하여 제2 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제2 TIL 집단은 제1 TIL 집단보다 수가 적어도 5배 더 많고, 제1 세포 배양 배지는 IL-2 및 종양 괴사 인자 수용체 슈퍼패밀리 (TNFRSF) 효능제를 포함하고, 초기 확장은 21일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(d) 제2 세포 배양 배지에서 제2 TIL 집단의 급속 확장을 수행하여 제3 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제3 TIL 집단은 급속 확장의 시작으로부터 7일 후 제2 TIL 집단보다 수가 적어도 50배 더 많고, 제2 세포 배양 배지는 IL-2, OKT-3 (항-CD3 항체), 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC) 및 임의로 TNFRSF 효능제를 포함하고, 급속 확장은 14일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계; 및
(e) 제3 TIL 집단을 수거하는 단계
를 포함하는 방법에 의해 수득가능하다.
한 실시양태에서, 제1 TIL 집단은 종양으로부터 수득된다. 한 실시양태에서, 종양은 먼저 환자로부터 절제된다. 한 실시양태에서, 제1 TIL 집단은 환자로부터 절제된 종양으로부터 수득된다. 한 실시양태에서, TIL 집단은 암을 갖는 환자에게 치료 유효량으로 투여되기 위한 것이다.
한 실시양태에서, 본 발명은
(a) 환자로부터 종양을 절제하는 단계;
(b) 종양으로부터 제1 종양 침윤 림프구 (TIL) 집단을 수득하는 단계;
(c) 제1 세포 배양 배지에서 제1 TIL 집단의 초기 확장을 수행하여 제2 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제2 TIL 집단은 제1 TIL 집단보다 수가 적어도 5배 더 많고, 제1 세포 배양 배지는 IL-2를 포함하고, 초기 확장은 11일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(d) 제2 세포 배양 배지에서 제2 TIL 집단의 급속 확장을 수행하여 제3 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제3 TIL 집단은 급속 확장의 시작으로부터 7일 후 제2 TIL 집단보다 수가 적어도 50배 더 많고, 제2 세포 배양 배지는 IL-2, OKT-3 (항-CD3) 항체, 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC) 및 TNFRSF 효능제를 포함하고, 급속 확장은 11일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(e) 제3 TIL 집단을 수거하는 단계; 및
(f) 임의로 제3 TIL 집단을 디메틸술폭시드-기재 배지에서 동결보존하는 단계
를 포함하는, 종양 침윤 림프구 (TIL) 집단을 확장시키는 방법을 제공한다.
한 실시양태에서, 본 발명은
(a) 환자로부터 종양을 절제하는 단계;
(b) 종양으로부터 제1 종양 침윤 림프구 (TIL) 집단을 수득하는 단계;
(c) 제1 세포 배양 배지에서 제1 TIL 집단의 초기 확장을 수행하여 제2 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제2 TIL 집단은 제1 TIL 집단보다 수가 적어도 5배 더 많고, 제1 세포 배양 배지는 IL-2를 포함하고, 초기 확장은 11일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(d) 제2 세포 배양 배지에서 제2 TIL 집단의 급속 확장을 수행하여 제3 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제3 TIL 집단은 급속 확장의 시작으로부터 7일 후 제2 TIL 집단보다 수가 적어도 50배 더 많고, 제2 세포 배양 배지는 IL-2, OKT-3 (항-CD3 항체), 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC) 및 TNFRSF 효능제를 포함하고, 급속 확장을 11일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(e) 제3 TIL 집단을 수거하는 단계; 및
(f) 환자에게 치료 유효 분량의 제3 TIL 집단을 투여하는 단계
를 포함하는, 종양 침윤 림프구 (TIL) 집단으로 암을 치료하는 방법을 제공한다.
한 실시양태에서, 본 발명은
(a) 환자로부터 종양을 절제하는 단계;
(b) 종양으로부터 제1 종양 침윤 림프구 (TIL) 집단을 수득하는 단계;
(c) 제1 세포 배양 배지에서 제1 TIL 집단의 초기 확장을 수행하여 제2 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제2 TIL 집단은 제1 TIL 집단보다 수가 적어도 5배 더 많고, 제1 세포 배양 배지는 IL-2를 포함하고, 초기 확장은 11일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(d) 제2 세포 배양 배지에서 제2 TIL 집단의 급속 확장을 수행하여 제3 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제3 TIL 집단은 급속 확장의 시작으로부터 7일 후 제2 TIL 집단보다 수가 적어도 50배 더 많고, 제2 세포 배양 배지는 IL-2, OKT-3 (항-CD3) 항체, 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC) 및 TNFRSF 효능제를 포함하고, 급속 확장은 11일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(e) 제3 TIL 집단을 수거하는 단계; 및
(f) 환자에게 치료 유효 분량의 제3 TIL 집단을 투여하는 단계
를 포함하며, 여기서 TNFRSF 효능제는 4-1BB 효능제, OX40 효능제 및 그의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인,
종양 침윤 림프구 (TIL) 집단으로 암을 치료하는 방법을 제공한다.
한 실시양태에서, 본 발명은
(a) 환자로부터 종양을 절제하는 단계;
(b) 종양으로부터 제1 종양 침윤 림프구 (TIL) 집단을 수득하는 단계;
(c) 제1 세포 배양 배지에서 제1 TIL 집단의 초기 확장을 수행하여 제2 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제2 TIL 집단은 제1 TIL 집단보다 수가 적어도 5배 더 많고, 제1 세포 배양 배지는 IL-2를 포함하고, 초기 확장은 11일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(d) 제2 세포 배양 배지에서 제2 TIL 집단의 급속 확장을 수행하여 제3 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제3 TIL 집단은 급속 확장의 시작으로부터 7일 후 제2 TIL 집단보다 수가 적어도 50배 더 많고, 제2 세포 배양 배지는 IL-2, OKT-3 (항-CD3) 항체, 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC) 및 TNFRSF 효능제를 포함하고, 급속 확장은 11일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(e) 제3 TIL 집단을 수거하는 단계; 및
(f) 환자에게 치료 유효 분량의 제3 TIL 집단을 투여하는 단계
를 포함하며, 여기서 TNFRSF 효능제는 4-1BB 효능제, OX40 효능제 및 그의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택되고,
여기서 TNFRSF 효능제는 4-1BB 효능제이고, 4-1BB 효능제는 우렐루맙, 우토밀루맙, EU-101, 융합 단백질 및 그의 단편, 유도체, 변이체, 바이오시밀러 및 그의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인,
종양 침윤 림프구 (TIL) 집단으로 암을 치료하는 방법을 제공한다.
한 실시양태에서, 본 발명은
(a) 환자로부터 종양을 절제하는 단계;
(b) 종양으로부터 제1 종양 침윤 림프구 (TIL) 집단을 수득하는 단계;
(c) 제1 세포 배양 배지에서 제1 TIL 집단의 초기 확장을 수행하여 제2 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제2 TIL 집단은 제1 TIL 집단보다 수가 적어도 5배 더 많고, 제1 세포 배양 배지는 IL-2를 포함하고, 초기 확장은 11일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(d) 제2 세포 배양 배지에서 제2 TIL 집단의 급속 확장을 수행하여 제3 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제3 TIL 집단은 급속 확장의 시작으로부터 7일 후 제2 TIL 집단보다 수가 적어도 50배 더 많고, 제2 세포 배양 배지는 IL-2, OKT-3 (항-CD3) 항체, 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC) 및 TNFRSF 효능제를 포함하고, 급속 확장은 11일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(e) 제3 TIL 집단을 수거하는 단계; 및
(f) 환자에게 치료 유효 분량의 제3 TIL 집단을 투여하는 단계
를 포함하며, 여기서 TNFRSF 효능제는 4-1BB 효능제, OX40 효능제 및 그의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택되고,
여기서 TNFRSF 효능제는 OX40 효능제이고, OX40 효능제는 타볼릭시주맙, GSK3174998, MEDI6469, MEDI6383, MOXR0916, PF-04518600, 크리에이티브 바이오랩스 MOM-18455 및 그의 단편, 유도체, 변이체, 바이오시밀러 및 그의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택되고,
여기서 OX40 효능제는 단계 (d)의 시작시에 1 μg/mL 내지 30 μg/mL의 농도로 존재하는 것인,
종양 침윤 림프구 (TIL) 집단으로 암을 치료하는 방법을 제공한다.
한 실시양태에서, 본 발명은 TNFRSF 효능제가 단계 (d)의 시작시에 5 μg/mL 내지 20 μg/mL의 농도로 존재하는 것인 상기 실시양태 중 어느 것의 방법을 제공한다.
한 실시양태에서, 본 발명은 TNFRSF 효능제가 단계 (d)의 시작시에 약 10 μg/mL의 농도로 존재하는 것인 상기 실시양태 중 어느 것의 방법을 제공한다.
한 실시양태에서, 본 발명은 TNFRSF 효능제가 단계 (d) 전반에 걸쳐 1 μg/mL 내지 30 μg/mL의 농도로 유지되는 것인 상기 실시양태 중 어느 것의 방법을 제공한다.
한 실시양태에서, 본 발명은 TNFRSF 효능제가 단계 (d) 전반에 걸쳐 5 μg/mL 내지 20 μg/mL의 농도로 유지되는 것인 상기 실시양태 중 어느 것의 방법을 제공한다.
한 실시양태에서, 본 발명은 TNFRSF 효능제가 단계 (d) 전반에 걸쳐 약 10 μg/mL의 농도로 유지되는 것인 상기 실시양태 중 어느 것의 방법을 제공한다.
한 실시양태에서, 본 발명은 제3 TIL 집단이 제2 TIL 집단에서의 CD8+ TIL 대 CD4+ TIL의 참조 비와 비교하여 CD8+ TIL 대 CD4+ TIL의 증가된 비를 나타내는 것인 상기 실시양태 중 어느 것의 방법을 제공한다. 한 실시양태에서, 증가된 비는 참조 비보다 적어도 1% 더 크고, 참조 비보다 적어도 2% 더 크고, 참조 비보다 적어도 5% 더 크고, 참조 비보다 적어도 10% 더 크고, 참조 비보다 적어도 15% 더 크고, 참조 비보다 적어도 20% 더 크고, 참조 비보다 적어도 25% 더 크고, 참조 비보다 적어도 30% 더 크고, 참조 비보다 적어도 35% 더 크고, 참조 비보다 적어도 40% 더 크고, 참조 비보다 적어도 45% 더 크고, 참조 비보다 적어도 50% 더 큰 것으로 이루어진 군으로부터 선택된다. 한 실시양태에서, 증가된 비는 참조 비보다 5% 내지 80% 더 크다. 한 실시양태에서, 증가된 비는 참조 비보다 10% 내지 70% 더 크다. 한 실시양태에서, 증가된 비는 참조 비보다 15% 내지 60% 더 크다. 상기 실시양태에서, 참조 비는 TNFRSF 효능제에 대한 반응자인 제3 TIL 집단으로부터 수득된다.
한 실시양태에서, 본 발명은 암이 흑색종, 포도막 (안구) 흑색종, 난소암, 자궁경부암, 폐암, 방광암, 유방암, 두경부암 (두경부 편평 세포암), 신세포 암종, 결장직장암, 췌장암, 교모세포종, 담관암종 및 육종으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인 상기 실시양태 중 어느 것의 방법을 제공한다. 한 실시양태에서, 본 발명은 암이 피부 흑색종, 포도막 (안구) 흑색종, 백금-저항성 난소암, 췌장관 선암종, 골육종, 삼중-음성 유방암 및 비소세포 폐암으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인 상기 실시양태 중 어느 것의 방법을 제공한다.
한 실시양태에서, 임의의 상기 실시양태는 임의의 하기 실시양태와 조합될 수 있다.
한 실시양태에서, 방법은 시험관내 또는 생체외 방법이다.
한 실시양태에서, TNFRSF 효능제는 4-1BB 효능제, OX40 효능제, CD27 효능제, GITR 효능제, HVEM 효능제, CD95 효능제 및 그의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택된다.
한 실시양태에서, TNFRSF 효능제는 4-1BB 효능제이다.
한 실시양태에서, TNFRSF 효능제는 4-1BB 효능제이고, 4-1BB 효능제는 우렐루맙, 우토밀루맙, EU-101 및 그의 단편, 유도체, 변이체, 바이오시밀러 및 그의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택된다.
한 실시양태에서, TNFRSF 효능제는 4-1BB 효능제이고, 4-1BB 효능제는 4-1BB 효능제 융합 단백질이다.
한 실시양태에서, TNFRSF 효능제는 4-1BB 효능제 융합 단백질이고, 4-1BB 효능제 융합 단백질은 (i) 제1 가용성 4-1BB 결합 도메인, (ii) 제1 펩티드 링커, (iii) 제2 가용성 4-1BB 결합 도메인, (iv) 제2 펩티드 링커 및 (v) 제3 가용성 4-1BB 결합 도메인을 포함하고, N-말단 및/또는 C-말단 단부에 추가의 도메인을 추가로 포함하고, 추가의 도메인은 Fc 단편 도메인 및 힌지 도메인을 포함하고, 융합 단백질은 구조 I-A 또는 구조 I-B에 따른 이량체 구조이다.
한 실시양태에서, TNFRSF 효능제는 OX40 효능제이다.
한 실시양태에서, TNFRSF 효능제는 OX40 효능제이고, OX40 효능제는 타볼릭시주맙, GSK3174998, MEDI6469, MEDI6383, MOXR0916, PF-04518600, 크리에이티브 바이오랩스 MOM-18455 및 그의 단편, 유도체, 변이체, 바이오시밀러 및 그의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택된다.
한 실시양태에서, TNFRSF 효능제는 OX40 효능제이고, OX40 효능제는 OX40 효능제 융합 단백질이다.
한 실시양태에서, TNFRSF 효능제는 OX40 효능제 융합 단백질이고, OX40 효능제 융합 단백질은 (i) 제1 가용성 OX40 결합 도메인, (ii) 제1 펩티드 링커, (iii) 제2 가용성 OX40 결합 도메인, (iv) 제2 펩티드 링커 및 (v) 제3 가용성 OX40 결합 도메인을 포함하고, N-말단 및/또는 C-말단 단부에 추가의 도메인을 추가로 포함하고, 추가의 도메인은 Fc 단편 도메인 및 힌지 도메인을 포함하고, 융합 단백질은 구조 I-A 또는 구조 I-B에 따른 이량체 구조이다.
한 실시양태에서, TNFRSF 효능제는 CD27 효능제이다.
한 실시양태에서, TNFRSF 효능제는 CD27 효능제이고, CD27 효능제는 바를리루맙 또는 그의 단편, 유도체, 변이체 또는 바이오시밀러이다.
한 실시양태에서, TNFRSF 효능제는 CD27 효능제이고, CD27 효능제는 CD27 효능제 융합 단백질이다.
한 실시양태에서, TNFRSF 효능제는 CD27 효능제이고, CD27 효능제 융합 단백질은 (i) 제1 가용성 CD27 결합 도메인, (ii) 제1 펩티드 링커, (iii) 제2 가용성 CD27 결합 도메인, (iv) 제2 펩티드 링커 및 (v) 제3 가용성 CD27 결합 도메인을 포함하고, N-말단 및/또는 C-말단 단부에 추가의 도메인을 추가로 포함하고, 추가의 도메인은 Fc 단편 도메인 및 힌지 도메인을 포함하고, 융합 단백질은 구조 I-A 또는 구조 I-B에 따른 이량체 구조이다.
한 실시양태에서, TNFRSF 효능제는 GITR 효능제이다.
한 실시양태에서, TNFRSF 효능제는 GITR 효능제이고, GITR 효능제는 TRX518, 6C8, 36E5, 3D6, 61G6, 6H6, 61F6, 1D8, 17F10, 35D8, 49A1, 9E5, 31H6, 2155, 698, 706, 827, 1649, 1718, 1D7, 33C9, 33F6, 34G4, 35B10, 41E11, 41G5, 42A11, 44C1, 45A8, 46E11, 48H12, 48H7, 49D9, 49E2, 48A9, 5H7, 7A10, 9H6 및 그의 단편, 유도체, 변이체, 바이오시밀러 및 그의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택된다.
한 실시양태에서, TNFRSF 효능제는 GITR 효능제이고, GITR 효능제는 GITR 효능제 융합 단백질이다.
한 실시양태에서, TNFRSF 효능제는 GITR 효능제 융합 단백질이고, GITR 효능제 융합 단백질은 (i) 제1 가용성 GITR 결합 도메인, (ii) 제1 펩티드 링커, (iii) 제2 가용성 GITR 결합 도메인, (iv) 제2 펩티드 링커 및 (v) 제3 가용성 GITR 결합 도메인을 포함하고, N-말단 및/또는 C-말단 단부에 추가의 도메인을 추가로 포함하고, 추가의 도메인은 Fc 단편 도메인 및 힌지 도메인을 포함하고, 융합 단백질은 구조 I-A 또는 구조 I-B에 따른 이량체 구조이다.
한 실시양태에서, TNFRSF 효능제는 HVEM 효능제이다.
한 실시양태에서, TNFRSF 효능제는 HVEM 효능제이고, HVEM 효능제는 HVEM 효능제 융합 단백질이다.
한 실시양태에서, TNFRSF 효능제는 HVEM 효능제 융합 단백질이고, HVEM 효능제 융합 단백질은 (i) 제1 가용성 HVEM 결합 도메인, (ii) 제1 펩티드 링커, (iii) 제2 가용성 HVEM 결합 도메인, (iv) 제2 펩티드 링커 및 (v) 제3 가용성 HVEM 결합 도메인을 포함하고, N-말단 및/또는 C-말단 단부에 추가의 도메인을 추가로 포함하고, 추가의 도메인은 Fc 단편 도메인 및 힌지 도메인을 포함하고, 융합 단백질은 구조 I-A 또는 구조 I-B에 따른 이량체 구조이다.
한 실시양태에서, TNFRSF 효능제는 우렐루맙, 우토밀루맙, EU-101, 타볼릭시주맙, 크리에이티브 바이오랩스 MOM-18455 및 그의 단편, 유도체, 변이체, 바이오시밀러 및 그의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택된다.
한 실시양태에서, 제1 세포 배양 배지는 제2 TNFRSF 효능제를 포함한다.
한 실시양태에서, TNFRSF 효능제는 초기 확장 동안 매일, 2일마다, 3일마다, 4일마다, 5일마다, 6일마다, 7일마다 및 2주마다로 이루어진 군으로부터 선택된 간격으로 제1 세포 배양 배지에 첨가된다.
한 실시양태에서, TNFRSF 효능제는 급속 확장 동안 매일, 2일마다, 3일마다, 4일마다, 5일마다, 6일마다, 7일마다 및 2주마다로 이루어진 군으로부터 선택된 간격으로 제2 세포 배양 배지에 첨가된다.
한 실시양태에서, TNFRSF 효능제는 세포 배양 배지 중 0.1 μg/mL 내지 100 μg/mL의 농도를 달성하기에 충분한 농도로 첨가된다.
한 실시양태에서, TNFRSF 효능제는 세포 배양 배지 중 20 μg/mL 내지 40 μg/mL의 농도를 달성하기에 충분한 농도로 첨가된다.
TNFRSF 효능제에 대한 추가의 세부사항이 본원에 제공된다.
한 실시양태에서, IL-2는 제1 세포 배양 배지에 약 10 내지 약 6000 IU/mL의 초기 농도로 존재한다.
한 실시양태에서, IL-2는 제1 세포 배양 배지에 약 3000 IU/mL의 초기 농도로 존재한다.
한 실시양태에서, IL-2는 제1 세포 배양 배지에 약 800 내지 약 1100 IU/mL의 초기 농도로 존재한다.
한 실시양태에서, IL-2는 제1 세포 배양 배지에 약 1000 IU/mL의 초기 농도로 존재한다.
한 실시양태에서, IL-2는 제2 세포 배양 배지에 약 10 내지 약 6000 IU/mL의 초기 농도로 존재한다.
한 실시양태에서, IL-2는 제2 세포 배양 배지에 약 3000 IU/mL의 초기 농도로 존재한다.
한 실시양태에서, IL-2는 제2 세포 배양 배지에 약 800 내지 약 1100 IU/mL의 초기 농도로 존재한다.
한 실시양태에서, IL-2는 제2 세포 배양 배지에 약 1000 IU/mL의 초기 농도로 존재한다.
한 실시양태에서, IL-15가 제1 세포 배양 배지에 존재한다.
한 실시양태에서, IL-15는 제1 세포 배양 배지에 약 5 ng/mL 내지 약 20 ng/mL의 초기 농도로 존재한다.
한 실시양태에서, IL-15가 제2 세포 배양 배지에 존재한다.
한 실시양태에서, IL-15는 제2 세포 배양 배지에 약 5 ng/mL 내지 약 20 ng/mL의 초기 농도로 존재한다.
한 실시양태에서, IL-21이 제1 세포 배양 배지에 존재한다.
한 실시양태에서, IL-21은 제1 세포 배양 배지에 약 5 ng/mL 내지 약 20 ng/mL의 초기 농도로 존재한다.
한 실시양태에서, IL-21이 제2 세포 배양 배지에 존재한다.
한 실시양태에서, IL-21은 제2 세포 배양 배지에 약 5 ng/mL 내지 약 20 ng/mL의 초기 농도로 존재한다.
한 실시양태에서, OKT-3 항체는 제2 세포 배양 배지에 약 10 ng/mL 내지 약 60 ng/mL의 초기 농도로 존재한다.
한 실시양태에서, OKT-3 항체는 제2 세포 배양 배지에 약 30 ng/mL의 초기 농도로 존재한다.
한 실시양태에서, 초기 확장은 기체 투과성 용기를 사용하여 수행된다.
한 실시양태에서, 급속 확장은 기체 투과성 용기를 사용하여 수행된다.
한 실시양태에서, 본 발명은 종양 침윤 림프구 (TIL) 집단이 본원에 기재된 바와 같은 본 발명의 방법에 의해 수득가능한 것인, 암을 치료하는데 사용하기 위한 종양 침윤 림프구 (TIL) 집단을 제공한다.
한 실시양태에서, 본 발명은 종양 침윤 림프구 (TIL) 집단이 본원에 기재된 바와 같은 본 발명의 방법에 의해 수득가능한 것인, 암을 치료하는 방법에 사용하기 위한 종양 침윤 림프구 (TIL) 집단을 포함하는 제약 조성물을 제공한다.
한 실시양태에서, TIL 집단 및/또는 제약 조성물은 TNFRSF와 조합하여 암을 치료하는데 사용하기 위한 것이다.
한 실시양태에서, 본 발명은 암의 치료에 사용하기 위한 본원에 기재된 바와 같은 본 발명의 방법에 의해 수득가능한 TIL 집단과 TNFRSF의 조합물을 제공한다.
한 실시양태에서, TIL 집단 및/또는 제약 조성물은 TNFRSF 효능제와 조합하여 암을 치료하는데 사용하기 위한 것이며, 여기서 TNFRSF 효능제는 환자에게 제3 TIL 집단을 투여한 다음 날에 투여하기 위한 것이고, TNFRSF 효능제는 최대 8주기 동안 4주마다 0.1 mg/kg 내지 50 mg/kg의 용량으로 정맥내로 투여된다.
한 실시양태에서, TIL 집단 및/또는 제약 조성물은 TNFRSF 효능제와 조합하여 암을 치료하는데 사용하기 위한 것이며, 여기서 TNFRSF 효능제는 환자로부터 종양을 절제하는 단계 전에 투여하기 위한 것이고, TNFRSF 효능제는 최대 8주기 동안 4주마다 0.1 mg/kg 내지 50 mg/kg의 용량으로 정맥내로 투여된다.
한 실시양태에서, TIL 집단 및/또는 제약 조성물은 비-골수절제 림프구고갈 요법과 조합하여 암을 치료하는데 사용하기 위한 것이다.
한 실시양태에서, TIL 집단 및/또는 제약 조성물은 환자에게 제3 TIL 집단 및/또는 제3 TIL 집단을 포함하는 제약 조성물을 투여하기 전에 비-골수절제 림프구고갈 요법과 조합하여 암을 치료하는데 사용하기 위한 것이다.
한 실시양태에서, TIL 집단 및/또는 제약 조성물은 환자에게 제3 TIL 집단 및/또는 제3 TIL 집단을 포함하는 제약 조성물을 투여하기 전에 비-골수절제 림프구고갈 요법과 조합하여 암을 치료하는데 사용하기 위한 것이며, 여기서 비-골수절제 림프구고갈 요법은 2일 동안 60 mg/m2/일의 용량의 시클로포스파미드의 투여에 이어서 5일 동안 25 mg/m2/일의 용량의 플루다라빈의 투여 단계를 포함한다. 비-골수절제 림프구고갈 요법의 추가의 세부사항은 본원에, 예를 들어 표제 "화학요법을 사용한 비-골수절제 림프구고갈" 하에 제공된다.
한 실시양태에서, TIL 집단 및/또는 제약 조성물은 IL-2 요법과 조합하여 암을 치료하는데 사용하기 위한 것이다.
한 실시양태에서, IL-2 요법은 점강 IL-2 요법이다.
한 실시양태에서, TIL 집단 및/또는 제약 조성물은 환자에게 제3 TIL 집단 및/또는 제3 TIL 집단을 포함하는 제약 조성물을 투여한 다음 날에 시작하여 점강 IL-2 요법과 조합하여 암을 치료하는데 사용하기 위한 것이며, 여기서 점강 IL-2 요법은 제1일에 18,000,000 IU/m2, 제2일에 9,000,000 IU/m2, 및 제3일 및 제4일에 4,500,000 IU/m2의 용량으로 정맥내로 투여되는 알데스류킨을 포함한다.
한 실시양태에서, TIL 집단 및/또는 제약 조성물은 PEG화 IL-2와 조합하여 암을 치료하는데 사용하기 위한 것이다.
한 실시양태에서, TIL 집단 및/또는 제약 조성물은 환자에게 제3 TIL 집단 및/또는 제3 TIL 집단을 포함하는 제약 조성물을 투여한 후에 0.10 mg/일 내지 50 mg/일의 용량으로 투여되는 PEG화 IL-2과 조합하여 암을 치료하는 방법에 사용하기 위한 것이다.
한 실시양태에서, TIL 집단 및/또는 제약 조성물은 고용량 IL-2 요법과 조합하여 암을 치료하는 방법에 사용하기 위한 것이다.
한 실시양태에서, TIL 집단 및/또는 제약 조성물은 환자에게 제3 TIL 집단 및/또는 제3 TIL 집단을 포함하는 제약 조성물을 투여한 다음 날에 시작하여 고용량 IL-2 요법과 조합하여 암을 치료하는 방법에 사용하기 위한 것이다.
한 실시양태에서, TIL 집단 및/또는 제약 조성물은 환자에게 제3 TIL 집단 및/또는 제3 TIL 집단을 포함하는 제약 조성물을 투여한 다음 날에 시작하여 고용량 IL-2 요법과 조합하여 암을 치료하는데 사용하기 위한 것이며, 여기서 고용량 IL-2 요법은 내성까지 8시간마다 15분 볼루스 정맥내 주입으로서 투여되는 600,000 또는 720,000 IU/kg의 알데스류킨 또는 그의 바이오시밀러 또는 변이체를 포함한다.
한 실시양태에서, TIL 집단 및/또는 제약 조성물은 흑색종, 난소암, 자궁경부암, 폐암, 방광암, 유방암, 두경부암, 신세포 암종, 급성 골수성 백혈병, 결장직장암, 담관암종 및 육종으로 이루어진 군으로부터 선택된 암을 치료하는데 사용하기 위한 것이다.
한 실시양태에서, TIL 집단 및/또는 제약 조성물은 비소세포 폐암 (NSCLC), 삼중 음성 유방암, 이중-불응성 흑색종 및 포도막 (안구) 흑색종으로 이루어진 군으로부터 선택된 암을 치료하는데 사용하기 위한 것이다.
한 실시양태에서, TIL 집단 및/또는 제약 조성물은 PD-1 억제제 또는 PD-L1 억제제와 조합하여 암을 치료하는데 사용하기 위한 것이다.
한 실시양태에서, TIL 집단 및/또는 제약 조성물은 PD-1 억제제 또는 PD-L1 억제제와 조합하여 암을 치료하는데 사용하기 위한 것이며, 여기서 PD-1 억제제 또는 PD-L1 억제제는 니볼루맙, 펨브롤리주맙, 두르발루맙, 아테졸리주맙, 아벨루맙 및 그의 단편, 유도체, 변이체, 바이오시밀러 및 그의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택된다.
한 실시양태에서, TIL 집단 및/또는 제약 조성물은 PD-1 억제제 또는 PD-L1 억제제와 조합하여 암을 치료하는데 사용하기 위한 것이며, 여기서 PD-1 억제제 또는 PD-L1 억제제는 환자로부터 종양을 절제하기 전에 투여하기 위한 것이다.
한 실시양태에서, TIL 집단 및/또는 제약 조성물은 환자로부터 종양을 절제하기 전에 PD-1 억제제 또는 PD-L1 억제제와 조합하여 암을 치료하는데 사용하기 위한 것이며, 여기서 PD-1 억제제 또는 PD-L1 억제제는 니볼루맙, 펨브롤리주맙, 두르발루맙, 아테졸리주맙, 아벨루맙 및 그의 단편, 유도체, 변이체, 바이오시밀러 및 그의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택된다.
한 실시양태에서, TIL 집단 및/또는 제약 조성물은 PD-1 억제제 또는 PD-L1 억제제와 조합하여 암을 치료하는 방법에 사용하기 위한 것이다.
한 실시양태에서, TIL 집단 및/또는 제약 조성물은 PD-1 억제제 또는 PD-L1 억제제와 조합하여 암을 치료하는데 사용하기 위한 것이며, 여기서 PD-1 억제제 또는 PD-L1 억제제는 니볼루맙, 펨브롤리주맙, 두르발루맙, 아테졸리주맙, 아벨루맙 및 그의 단편, 유도체, 변이체, 바이오시밀러 및 그의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택된다.
한 실시양태에서, TIL 집단 및/또는 제약 조성물은 환자로부터 종양을 절제한 후에 PD-1 억제제 또는 PD-L1 억제제와 조합하여 암을 치료하는 방법에 사용하기 위한 것이다.
한 실시양태에서, TIL 집단 및/또는 제약 조성물은 환자로부터 종양을 절제한 후에 PD-1 억제제 또는 PD-L1 억제제와 조합하여 암을 치료하는데 사용하기 위한 것이며, 여기서 PD-1 억제제 또는 PD-L1 억제제는 니볼루맙, 펨브롤리주맙, 두르발루맙, 아테졸리주맙, 아벨루맙 및 그의 단편, 유도체, 변이체, 바이오시밀러 및 그의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택된다.
한 실시양태에서, TIL 집단 및/또는 제약 조성물은 PD-1 억제제 또는 PD-L1 억제제와 조합하여 암을 치료하는데 사용하기 위한 것이며, 여기서 PD-1 또는 PD-L1 억제제는 환자에게 제3 TIL 집단 및/또는 제3 TIL 집단을 포함하는 제약 조성물을 투여한 후에 투여하기 위한 것이다.
한 실시양태에서, TIL 집단 및/또는 제약 조성물은 환자에게 제3 TIL 집단을 투여한 후에 투여하기 위한 PD-1 억제제 또는 PD-L1 억제제와 조합하여 암을 치료하는데 사용하기 위한 것이며, 여기서 PD-1 억제제 또는 PD-L1 억제제는 니볼루맙, 펨브롤리주맙, 두르발루맙, 아테졸리주맙, 아벨루맙 및 그의 단편, 유도체, 변이체, 바이오시밀러 및 그의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택된다. PD-1 억제제 및 PD-L1 억제제의 추가의 세부사항은 본원에, 예를 들어 표제 "PD-1 및 PD-L1 억제제와의 조합물" 하에 기재된다. 일부 실시양태에서, TIL 집단 및/또는 TIL 집단을 포함하는 제약 조성물은, 예를 들어 표제 "TIL에 대한 제약 조성물, 투여량 및 투여 요법" 및 "TNFRSF 효능제에 대한 제약 조성물, 투여량 및 투여 요법" 하에 본원에 기재된 바와 같은 하나 이상의 특색을 추가로 포함한다.
상기 개요 뿐만 아니라 하기 본 발명의 상세한 설명은 첨부된 도면과 함께 읽을 때 더 잘 이해될 것이다.
도 1은 TIL 확장 및 처리 과정을 도시한다. 본 개시내용의 TNFRSF 효능제는 사전-REP 단계 (도면의 상단 절반) 또는 REP 단계 (도면의 하단 절반) 둘 다에서 사용될 수 있고, IL-2가 각각의 세포 배양물에 첨가될 때 첨가될 수 있다. 단계 1은 4개의 종양 단편을 10개의 지-렉스(G-Rex) 10 플라스크 내로 첨가한 것을 나타낸다. 단계 2에서, 대략 40 x 106개 이상의 TIL이 수득된다. 단계 3에서, REP를 위해 36개의 지-렉스 100 플라스크 내로 분할이 이루어진다. 단계 4에서 원심분리에 의해 TIL이 수거된다. 새로운 TIL 생성물은 대략 43일의 총 과정 시간 후 단계 5에서 수득되고, 이 시점에서 TIL이 환자 내로 주입될 수 있다.
도 2는 본 개시내용의 TNFRSF 효능제로 확장된 TIL로 사용하기 위한 치료 프로토콜을 도시한다. 수술 (및 종양 절제)은 시작시에 이루어지고, 림프구고갈 화학요법은 본원 다른 곳에 기재된 바와 같은 화학요법을 사용한 비-골수절제 림프구고갈을 지칭한다. 본 개시내용의 TNFRSF 효능제는 또한 TIL의 투여 후 본원에 기재된 바와 같은 요법 동안 사용될 수 있다.
도 3은 용량 의존성 방식으로 녹색 형광 단백질 (GFP) 리포터를 사용하여, 4-1BB-Fc 하이브리도마 4B5가 NF-kB를 발현하는 Jurkat 세포 상에서 4-1BB 신호전달을 활성화시키는지를 결정하는 검정의 결과를 도시한다. "2차"는 2차 항체의 활성화를 지칭한다.
도 4는 용량 의존성 방식으로 GFP 리포터를 사용하여, 4-1BB-Fc 하이브리도마 1C4가 NF-kB를 발현하는 Jurkat 세포 상에서 4-1BB 신호전달을 활성화시키는지를 결정하는 검정의 결과를 도시한다. "2차"는 2차 항체의 활성화를 지칭한다.
도 5는 용량 의존성 방식으로 GFP 리포터를 사용하여, 4-1BB-Fc 하이브리도마 9B4가 NF-kB를 발현하는 Jurkat 세포 상에서 4-1BB 신호전달을 활성화시키는지를 결정하는 검정의 결과를 도시한다. "2차"는 2차 항체의 활성화를 지칭한다.
도 6은 용량 의존성 방식으로 GFP 리포터를 사용하여, 4-1BB-Fc 하이브리도마 1D7이 NF-kB를 발현하는 Jurkat 세포 상에서 4-1BB 신호전달을 활성화시키는지를 결정하는 검정의 결과를 도시한다. "2차"는 2차 항체의 활성화를 지칭한다.
도 7은 용량 의존성 방식으로 GFP 리포터를 사용하여, 4-1BB-Fc 하이브리도마 1D10이 NF-kB를 발현하는 Jurkat 세포 상에서 4-1BB 신호전달을 활성화시키는지를 결정하는 검정의 결과를 도시한다. "2차"는 2차 항체의 활성화를 지칭한다.
도 8은 용량 의존성 방식으로 GFP 리포터를 사용하여, 4-1BB-Fc 하이브리도마 3C2가 NF-kB를 발현하는 Jurkat 세포 상에서 4-1BB 신호전달을 활성화시키는지를 결정하는 검정의 결과를 도시한다. "2차"는 2차 항체의 활성화를 지칭한다.
도 9는 용량 의존성 방식으로 GFP 리포터를 사용하여, 4-1BB-Fc 하이브리도마 10D12가 NF-kB를 발현하는 Jurkat 세포 상에서 4-1BB 신호전달을 활성화시키는지를 결정하는 검정의 결과를 도시한다. "2차"는 2차 항체의 활성화를 지칭한다.
도 10은 용량 의존성 방식으로 GFP 리포터를 사용하여, 4-1BB-Fc 하이브리도마 8D2가 NF-kB를 발현하는 Jurkat 세포 상에서 4-1BB 신호전달을 활성화시키는지를 결정하는 검정의 결과를 도시한다. "2차"는 2차 항체의 활성화를 지칭한다.
도 11은 용량 의존성 방식으로 GFP 리포터를 사용하여, 4-1BB-Fc 하이브리도마 4G6이 NF-kB를 발현하는 Jurkat 세포 상에서 4-1BB 신호전달을 활성화시키는지를 결정하는 검정의 결과를 도시한다. "2차"는 2차 항체의 활성화를 지칭한다.
도 12는 용량 의존성 방식으로 GFP 리포터를 사용하여, 4-1BB-Fc 하이브리도마 8E3이 NF-kB를 발현하는 Jurkat 세포 상에서 4-1BB 신호전달을 활성화시키는지를 결정하는 검정의 결과를 도시한다. "2차"는 2차 항체의 활성화를 지칭한다.
도 13은 예시적인 TIL 확장 및 제조 프로토콜을 도시한다 (과정 2A).
도 14는 과정 2A에서 수행되는 예시적인 방법 단계를 도시한다.
도 15는 예시적인 TIL 확장 프로토콜을 도시한다.
도 16은 유동 세포측정법에 의한 4-1BB+ 세포의 백분율에 의해 평가된 바와 같은 크리에이티브 바이오랩스 (CB) 및 BPS 바이오사이언시스(BPS Biosciences) (BPS) 4-1BB 효능제 항체에 대한 결합 친화도를 도시한다. CB 4-1BB 효능제가 가장 높은 결합 친화도를 나타냈다.
도 17은 평균 형광 강도 (MFI)에 의해 평가된 바와 같은 크리에이티브 바이오랩스 (CB) 및 BPS 바이오사이언시스 (BPS) 4-1BB 효능제 항체에 대한 결합 친화도를 도시한다. CB 4-1BB 효능제가 가장 높은 결합 친화도를 나타냈다.
도 18은 항-4-1BB 효능작용 항체의 NF-κB 경로 활성화의 평가 결과를 도시한다.
도 19는 유동 세포측정법에 의한 OX40+ 세포의 백분율에 의해 평가된 바와 같은 크리에이티브 바이오랩스 OX40 효능제 항체에 대한 결합 친화도를 도시한다.
도 20은 평균 형광 강도 (MFI)에 의해 평가된 바와 같은 크리에이티브 바이오랩스 OX40 효능제 항체에 대한 결합 친화도를 도시한다.
도 21은 크리에이티브 바이오랩스 항-OX40 효능제 항체 (제시된 5가지 농도)와 상업용 항-OX40 (클론 Ber-ACT35) 효능제 사이의 대등한 결합 친화도를 도시한다. 각각의 종양 명칭의 제1 문자는 조직학을 나타낸다: C = 자궁경부; H = 두경부 (두경부 편평 세포 암종); L = 폐; 및 M = 흑색종.
도 22는 항-OX40 효능제 항체의 NF-κB 경로 활성화의 평가 결과를 도시한다. OX40 리포터 세포를 24시간 동안 PBMC 피더 세포의 존재 또는 부재 하에 1, 2, 4, 8 및 16 μg/mL의 농도의 항-OX40 단독 또는 이소형 대조군으로 처리하였다. 세포를 1-단계 루시페라제 시약을 사용하여 용해시키고, 루시페라제 활성을 발광측정기에 의해 측정하였다.
도 23은 사전-REP 동안 4-1BB 및 OX40 효능제 실험에 대한 실험 설계를 도시한다.
도 24는 도 23의 실험 설계에 사용된 종양 조직학을 도시한다.
도 25는 사전-REP 동안 사용된 4-1BB 및 항-OX40 효능제의 TIL 성능 및 특성에 대한 영향을 평가하는데 사용된 데이터 분석 전략을 도시한다.
도 26은 CB 4-1BB 효능제를 사용한 세포 확장에 대한 총 세포 수 결과를 도시한다 (N = 3). NT = 시험되지 않음 (대조군). p 값은 > 0.99였다.
도 27은 CB OX40 효능제를 사용한 세포 확장에 대한 총 세포 수 결과를 도시한다 (N = 5). NT = 시험되지 않음 (대조군). p 값은 0.06이었다.
도 28은 CB 4-1BB 효능제 및 OX-40 효능제를 사용한 세포 확장에 대한 총 세포 수 결과를 도시한다 (N = 2). NT = 시험되지 않음 (대조군).
도 29는 CB 4-1BB 효능제를 사용한 세포 확장에 대한 총 CD8+ 세포 수 결과를 도시한다 (N = 3). p 값은 0.5였다.
도 30은 CB OX40 효능제를 사용한 세포 확장에 대한 총 CD8+ 세포 수 결과를 도시한다 (N = 5). p 값은 0.03이었다.
도 31은 CB 4-1BB 효능제 및 OX-40 효능제를 사용한 세포 확장에 대한 총 CD8+ 세포 수 결과를 도시한다 (N = 2). NT = 시험되지 않음 (대조군).
도 32는 CB 4-1BB 효능제를 사용한 세포 확장에 대한 총 CD8+/CD4+ 세포 수 비 결과를 도시한다 (N = 3). p 값은 0.2였다.
도 33은 CB OX40 효능제를 사용한 세포 확장에 대한 총 CD8+/CD4+ 세포 수 비 결과를 도시한다 (N = 5). p 값은 0.12였다.
도 34는 CB 4-1BB 효능제 및 OX-40 효능제를 사용한 세포 확장에 대한 총 CD8+/CD4+ 세포 수 비 결과를 도시한다 (N = 2). NT = 시험되지 않음 (대조군).
도 35는 4-1BB 또는 OX40 효능제의 존재 하에 확장된 사전-REP TIL의 REP 증식에 대한 실험 계획을 도시한다.
도 36은 사전-REP에서 처리되지 않은 TIL의 경우 (NT) 대비 CB 4-1BB 효능제의 존재 하에 확장된 사전-REP TIL로부터의 REP에서 확장된 TIL의 배수 확장을 도시한다.
도 37은 사전-REP에서 처리되지 않은 TIL의 경우 (NT) 대비 CB OX40 효능제의 존재 하에 확장된 사전-REP TIL로부터의 REP에서 확장된 TIL의 배수 확장을 도시한다.
도 38은 사전-REP에서 처리되지 않은 TIL의 경우 (NT) 대비 CB 4-1BB 효능제 및 CB OX40 효능제의 존재 하에 확장된 사전-REP TIL로부터의 REP에서 확장된 TIL의 배수 확장을 도시한다.
도 39는 REP 단계 동안 CB OX40 효능제의 평가에 사용된 21종의 TIL 세포주의 조직학을 도시한다.
도 40은 REP 단계 동안 CB OX40 효능제의 평가를 위한 실험 계획을 도시한다.
도 41은 OX40 효능작용 항체의 존재가 REP 동안 CD8+ TIL을 우선적으로 확장시킨다는 것을 도시한다 (CD3+CD4+ 세포의 백분율로서 제시됨).
도 42는 OX40 효능작용 항체의 존재가 REP 동안 CD8+ TIL을 우선적으로 확장시킨다는 것을 도시한다 (CD3+CD8+ 세포의 백분율로서 제시됨).
도 43은 비-반응자 TIL 세포주에서 항-OX40 처리 후 CD4+ 하위세트에서 OX40의 하향조절이 관찰되지 않았다는 것을 도시한다.
도 44는 비-반응자 및 반응자 TIL 세포주에서 CB OX40 효능제 용량 적정에 대한 실험 세부사항을 도시한다.
도 45는 반응자 TIL 세포주에서 CB OX40 효능제 용량 적정의 결과를 도시한다.
도 46은 비-반응자 TIL 세포주에서 CB OX40 효능제 용량 적정의 결과를 도시한다.
도 47은 반응자 L4005에 대한 대등한 TCRvb 레퍼토리 프로파일을 도시한다.
도 48은 반응자 H3005에 대한 대등한 TCRvb 레퍼토리 프로파일을 도시한다.
도 49는 반응자 M1022에 대한 대등한 TCRvb 레퍼토리 프로파일을 도시한다.
[서열 목록의 간단한 설명]
서열식별번호(SEQ ID NO): 1은 무로모납의 중쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 2는 무로모납의 경쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 3은 재조합 인간 IL-2 단백질의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 4는 알데스류킨의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 5는 재조합 인간 IL-4 단백질의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 6은 재조합 인간 IL-7 단백질의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 7은 재조합 인간 IL-15 단백질의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 8은 재조합 인간 IL-21 단백질의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 9는 인간 4-1BB의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 10은 뮤린 4-1BB의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 11은 4-1BB 효능제 모노클로날 항체 우토밀루맙 (PF-05082566)에 대한 중쇄이다.
서열식별번호: 12는 4-1BB 효능제 모노클로날 항체 우토밀루맙 (PF-05082566)에 대한 경쇄이다.
서열식별번호: 13은 4-1BB 효능제 모노클로날 항체 우토밀루맙 (PF-05082566)에 대한 중쇄 가변 영역 (VH)이다.
서열식별번호: 14는 4-1BB 효능제 모노클로날 항체 우토밀루맙 (PF-05082566)에 대한 경쇄 가변 영역 (VL)이다.
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서열식별번호: 16은 4-1BB 효능제 모노클로날 항체 우토밀루맙 (PF-05082566)에 대한 중쇄 CDR2이다.
서열식별번호: 17은 4-1BB 효능제 모노클로날 항체 우토밀루맙 (PF-05082566)에 대한 중쇄 CDR3이다.
서열식별번호: 18은 4-1BB 효능제 모노클로날 항체 우토밀루맙 (PF-05082566)에 대한 경쇄 CDR1이다.
서열식별번호: 19는 4-1BB 효능제 모노클로날 항체 우토밀루맙 (PF-05082566)에 대한 경쇄 CDR2이다.
서열식별번호: 20은 4-1BB 효능제 모노클로날 항체 우토밀루맙 (PF-05082566)에 대한 경쇄 CDR3이다.
서열식별번호: 21은 4-1BB 효능제 모노클로날 항체 우렐루맙 (BMS-663513)에 대한 중쇄이다.
서열식별번호: 22는 4-1BB 효능제 모노클로날 항체 우렐루맙 (BMS-663513)에 대한 경쇄이다.
서열식별번호: 23은 4-1BB 효능제 모노클로날 항체 우렐루맙 (BMS-663513)에 대한 중쇄 가변 영역 (VH)이다.
서열식별번호: 24는 4-1BB 효능제 모노클로날 항체 우렐루맙 (BMS-663513)에 대한 경쇄 가변 영역 (VL)이다.
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서열식별번호: 28은 4-1BB 효능제 모노클로날 항체 우렐루맙 (BMS-663513)에 대한 경쇄 CDR1이다.
서열식별번호: 29는 4-1BB 효능제 모노클로날 항체 우렐루맙 (BMS-663513)에 대한 경쇄 CDR2이다.
서열식별번호: 30은 4-1BB 효능제 모노클로날 항체 우렐루맙 (BMS-663513)에 대한 경쇄 CDR3이다.
서열식별번호: 31은 TNFRSF 효능제 융합 단백질에 대한 Fc 도메인이다.
서열식별번호: 32는 TNFRSF 효능제 융합 단백질에 대한 링커이다.
서열식별번호: 33은 TNFRSF 효능제 융합 단백질에 대한 링커이다.
서열식별번호: 34는 TNFRSF 효능제 융합 단백질에 대한 링커이다.
서열식별번호: 35는 TNFRSF 효능제 융합 단백질에 대한 링커이다.
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서열식별번호: 41은 TNFRSF 효능제 융합 단백질에 대한 링커이다.
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서열식별번호: 44는 TNFRSF 효능제 융합 단백질에 대한 링커이다.
서열식별번호: 45는 TNFRSF 효능제 융합 단백질에 대한 링커이다.
서열식별번호: 46은 4-1BB 리간드 (4-1BBL) 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 47은 4-1BBL 폴리펩티드의 가용성 부분이다.
서열식별번호: 48은 4-1BB 효능제 항체 4B4-1-1 버전 1에 대한 중쇄 가변 영역 (VH)이다.
서열식별번호: 49는 4-1BB 효능제 항체 4B4-1-1 버전 1에 대한 경쇄 가변 영역 (VL)이다.
서열식별번호: 50은 4-1BB 효능제 항체 4B4-1-1 버전 2에 대한 중쇄 가변 영역 (VH)이다.
서열식별번호: 51은 4-1BB 효능제 항체 4B4-1-1 버전 2에 대한 경쇄 가변 영역 (VL)이다.
서열식별번호: 52는 4-1BB 효능제 항체 H39E3-2에 대한 중쇄 가변 영역 (VH)이다.
서열식별번호: 53은 4-1BB 효능제 항체 H39E3-2에 대한 경쇄 가변 영역 (VL)이다.
서열식별번호: 54는 인간 OX40의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 55는 뮤린 OX40의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 56은 OX40 효능제 모노클로날 항체 타볼릭시주맙 (MEDI-0562)에 대한 중쇄이다.
서열식별번호: 57은 OX40 효능제 모노클로날 항체 타볼릭시주맙 (MEDI-0562)에 대한 경쇄이다.
서열식별번호: 58은 OX40 효능제 모노클로날 항체 타볼릭시주맙 (MEDI-0562)에 대한 중쇄 가변 영역 (VH)이다.
서열식별번호: 59는 OX40 효능제 모노클로날 항체 타볼릭시주맙 (MEDI-0562)에 대한 경쇄 가변 영역 (VL)이다.
서열식별번호: 60은 OX40 효능제 모노클로날 항체 타볼릭시주맙 (MEDI-0562)에 대한 중쇄 CDR1이다.
서열식별번호: 61은 OX40 효능제 모노클로날 항체 타볼릭시주맙 (MEDI-0562)에 대한 중쇄 CDR2이다.
서열식별번호: 62는 OX40 효능제 모노클로날 항체 타볼릭시주맙 (MEDI-0562)에 대한 중쇄 CDR3이다.
서열식별번호: 63은 OX40 효능제 모노클로날 항체 타볼릭시주맙 (MEDI-0562)에 대한 경쇄 CDR1이다.
서열식별번호: 64는 OX40 효능제 모노클로날 항체 타볼릭시주맙 (MEDI-0562)에 대한 경쇄 CDR2이다.
서열식별번호: 65는 OX40 효능제 모노클로날 항체 타볼릭시주맙 (MEDI-0562)에 대한 경쇄 CDR3이다.
서열식별번호: 66은 OX40 효능제 모노클로날 항체 11D4에 대한 중쇄이다.
서열식별번호: 67은 OX40 효능제 모노클로날 항체 11D4에 대한 경쇄이다.
서열식별번호: 68은 OX40 효능제 모노클로날 항체 11D4에 대한 중쇄 가변 영역 (VH)이다.
서열식별번호: 69는 OX40 효능제 모노클로날 항체 11D4에 대한 경쇄 가변 영역 (VL)이다.
서열식별번호: 70은 OX40 효능제 모노클로날 항체 11D4에 대한 중쇄 CDR1이다.
서열식별번호: 71은 OX40 효능제 모노클로날 항체 11D4에 대한 중쇄 CDR2이다.
서열식별번호: 72는 OX40 효능제 모노클로날 항체 11D4에 대한 중쇄 CDR3이다.
서열식별번호: 73은 OX40 효능제 모노클로날 항체 11D4에 대한 경쇄 CDR1이다.
서열식별번호: 74는 OX40 효능제 모노클로날 항체 11D4에 대한 경쇄 CDR2이다.
서열식별번호: 75는 OX40 효능제 모노클로날 항체 11D4에 대한 경쇄 CDR3이다.
서열식별번호: 76은 OX40 효능제 모노클로날 항체 18D8에 대한 중쇄이다.
서열식별번호: 77은 OX40 효능제 모노클로날 항체 18D8에 대한 경쇄이다.
서열식별번호: 78은 OX40 효능제 모노클로날 항체 18D8에 대한 중쇄 가변 영역 (VH)이다.
서열식별번호: 79는 OX40 효능제 모노클로날 항체 18D8에 대한 경쇄 가변 영역 (VL)이다.
서열식별번호: 80은 OX40 효능제 모노클로날 항체 18D8에 대한 중쇄 CDR1이다.
서열식별번호: 81은 OX40 효능제 모노클로날 항체 18D8에 대한 중쇄 CDR2이다.
서열식별번호: 82는 OX40 효능제 모노클로날 항체 18D8에 대한 중쇄 CDR3이다.
서열식별번호: 83은 OX40 효능제 모노클로날 항체 18D8에 대한 경쇄 CDR1이다.
서열식별번호: 84는 OX40 효능제 모노클로날 항체 18D8에 대한 경쇄 CDR2이다.
서열식별번호: 85는 OX40 효능제 모노클로날 항체 18D8에 대한 경쇄 CDR3이다.
서열식별번호: 86은 OX40 효능제 모노클로날 항체 Hu119-122에 대한 중쇄 가변 영역 (VH)이다.
서열식별번호: 87은 OX40 효능제 모노클로날 항체 Hu119-122에 대한 경쇄 가변 영역 (VL)이다.
서열식별번호: 88은 OX40 효능제 모노클로날 항체 Hu119-122에 대한 중쇄 CDR1이다.
서열식별번호: 89는 OX40 효능제 모노클로날 항체 Hu119-122에 대한 중쇄 CDR2이다.
서열식별번호: 90은 OX40 효능제 모노클로날 항체 Hu119-122에 대한 중쇄 CDR3이다.
서열식별번호: 91은 OX40 효능제 모노클로날 항체 Hu119-122에 대한 경쇄 CDR1이다.
서열식별번호: 92는 OX40 효능제 모노클로날 항체 Hu119-122에 대한 경쇄 CDR2이다.
서열식별번호: 93은 OX40 효능제 모노클로날 항체 Hu119-122에 대한 경쇄 CDR3이다.
서열식별번호: 94는 OX40 효능제 모노클로날 항체 Hu106-222에 대한 중쇄 가변 영역 (VH)이다.
서열식별번호: 95는 OX40 효능제 모노클로날 항체 Hu106-222에 대한 경쇄 가변 영역 (VL)이다.
서열식별번호: 96은 OX40 효능제 모노클로날 항체 Hu106-222에 대한 중쇄 CDR1이다.
서열식별번호: 97은 OX40 효능제 모노클로날 항체 Hu106-222에 대한 중쇄 CDR2이다.
서열식별번호: 98은 OX40 효능제 모노클로날 항체 Hu106-222에 대한 중쇄 CDR3이다.
서열식별번호: 99는 OX40 효능제 모노클로날 항체 Hu106-222에 대한 경쇄 CDR1이다.
서열식별번호: 100은 OX40 효능제 모노클로날 항체 Hu106-222에 대한 경쇄 CDR2이다.
서열식별번호: 101은 OX40 효능제 모노클로날 항체 Hu106-222에 대한 경쇄 CDR3이다.
서열식별번호: 102는 OX40 리간드 (OX40L) 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 103은 OX40L 폴리펩티드의 가용성 부분이다.
서열식별번호: 104는 OX40L 폴리펩티드의 대안적 가용성 부분이다.
서열식별번호: 105는 OX40 효능제 모노클로날 항체 008에 대한 중쇄 가변 영역 (VH)이다.
서열식별번호: 106은 OX40 효능제 모노클로날 항체 008에 대한 경쇄 가변 영역 (VL)이다.
서열식별번호: 107은 OX40 효능제 모노클로날 항체 011에 대한 중쇄 가변 영역 (VH)이다.
서열식별번호: 108은 OX40 효능제 모노클로날 항체 011에 대한 경쇄 가변 영역 (VL)이다.
서열식별번호: 109는 OX40 효능제 모노클로날 항체 021에 대한 중쇄 가변 영역 (VH)이다.
서열식별번호: 110은 OX40 효능제 모노클로날 항체 021에 대한 경쇄 가변 영역 (VL)이다.
서열식별번호: 111은 OX40 효능제 모노클로날 항체 023에 대한 중쇄 가변 영역 (VH)이다.
서열식별번호: 112는 OX40 효능제 모노클로날 항체 023에 대한 경쇄 가변 영역 (VL)이다.
서열식별번호: 113은 OX40 효능제 모노클로날 항체에 대한 중쇄 가변 영역 (VH)이다.
서열식별번호: 114는 OX40 효능제 모노클로날 항체에 대한 경쇄 가변 영역 (VL)이다.
서열식별번호: 115는 OX40 효능제 모노클로날 항체에 대한 중쇄 가변 영역 (VH)이다.
서열식별번호: 116은 OX40 효능제 모노클로날 항체에 대한 경쇄 가변 영역 (VL)이다.
서열식별번호: 117은 인간화 OX40 효능제 모노클로날 항체에 대한 중쇄 가변 영역 (VH)이다.
서열식별번호: 118은 인간화 OX40 효능제 모노클로날 항체에 대한 중쇄 가변 영역 (VH)이다.
서열식별번호: 119는 인간화 OX40 효능제 모노클로날 항체에 대한 경쇄 가변 영역 (VL)이다.
서열식별번호: 120은 인간화 OX40 효능제 모노클로날 항체에 대한 경쇄 가변 영역 (VL)이다.
서열식별번호: 121은 인간화 OX40 효능제 모노클로날 항체에 대한 중쇄 가변 영역 (VH)이다.
서열식별번호: 122는 인간화 OX40 효능제 모노클로날 항체에 대한 중쇄 가변 영역 (VH)이다.
서열식별번호: 123은 인간화 OX40 효능제 모노클로날 항체에 대한 경쇄 가변 영역 (VL)이다.
서열식별번호: 124는 인간화 OX40 효능제 모노클로날 항체에 대한 경쇄 가변 영역 (VL)이다.
서열식별번호: 125는 OX40 효능제 모노클로날 항체에 대한 중쇄 가변 영역 (VH)이다.
서열식별번호: 126은 OX40 효능제 모노클로날 항체에 대한 경쇄 가변 영역 (VL)이다.
서열식별번호: 127은 인간 CD27의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 128은 마카크 CD27의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 129는 CD27 효능제 모노클로날 항체 바를리루맙 (CDX-1127)에 대한 중쇄이다.
서열식별번호: 130은 CD27 효능제 모노클로날 항체 바를리루맙 (CDX-1127)에 대한 경쇄이다.
서열식별번호: 131은 CD27 효능제 모노클로날 항체 바를리루맙 (CDX-1127)에 대한 중쇄 가변 영역 (VH)이다.
서열식별번호: 132는 CD27 효능제 모노클로날 항체 바를리루맙 (CDX-1127)에 대한 경쇄 가변 영역 (VL)이다.
서열식별번호: 133은 CD27 효능제 모노클로날 항체 바를리루맙 (CDX-1127)에 대한 중쇄 CDR1이다.
서열식별번호: 134는 CD27 효능제 모노클로날 항체 바를리루맙 (CDX-1127)에 대한 중쇄 CDR2이다.
서열식별번호: 135는 CD27 효능제 모노클로날 항체 바를리루맙 (CDX-1127)에 대한 중쇄 CDR3이다.
서열식별번호: 136은 CD27 효능제 모노클로날 항체 바를리루맙 (CDX-1127)에 대한 경쇄 CDR1이다.
서열식별번호: 137은 CD27 효능제 모노클로날 항체 바를리루맙 (CDX-1127)에 대한 경쇄 CDR2이다.
서열식별번호: 138은 CD27 효능제 모노클로날 항체 바를리루맙 (CDX-1127)에 대한 경쇄 CDR3이다.
서열식별번호: 139는 CD27 리간드 (CD70) 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 140은 CD70 폴리펩티드의 가용성 부분이다.
서열식별번호: 141은 CD70 폴리펩티드의 대안적 가용성 부분이다.
서열식별번호: 142는 인간 GITR (인간 종양 괴사 인자 수용체 슈퍼패밀리 구성원 18 (TNFRSF18) 단백질)의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 143은 뮤린 GITR (뮤린 종양 괴사 인자 수용체 슈퍼패밀리 구성원 18 (TNFRSF18) 단백질)의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 144는 CDR2에 N (아스파라긴)을 갖는, 6C8 인간화 GITR 효능제 모노클로날 항체의 중쇄 변이체 HuN6C8 (글리코실화)의 아미노산 서열이고, 이는 미국 특허 번호 7,812,135에서의 서열식별번호: 60에 상응한다.
서열식별번호: 145는 CDR2에 N (아스파라긴)을 갖는, 6C8 인간화 GITR 효능제 모노클로날 항체의 중쇄 변이체 HuN6C8 (비-글리코실화)의 아미노산 서열이고, 이는 미국 특허 번호 7,812,135에서의 서열식별번호: 61에 상응한다.
서열식별번호: 146은 CDR2에 Q (글루타민)를 갖는, 6C8 인간화 GITR 효능제 모노클로날 항체의 중쇄 변이체 HuQ6C8 (글리코실화)의 아미노산 서열이고, 이는 미국 특허 번호 7,812,135에서의 서열식별번호: 62에 상응한다.
서열식별번호: 147은 CDR2에 Q (글루타민)를 갖는, 6C8 인간화 GITR 효능제 모노클로날 항체의 중쇄 변이체 HuQ6C8 (비-글리코실화)의 아미노산 서열이고, 이는 미국 특허 번호 7,812,135에서의 서열식별번호: 63에 상응한다.
서열식별번호: 148은 6C8 인간화 GITR 효능제 모노클로날 항체의 경쇄의 아미노산 서열이고, 이는 미국 특허 번호 7,812,135에서의 서열식별번호: 58에 상응한다.
서열식별번호: 149는 GITR 효능제 모노클로날 항체에서 서열식별번호: 144, 서열식별번호: 145, 서열식별번호: 146 또는 서열식별번호: 147의 아미노산 서열에 임의로 포함될 수 있는 리더 서열의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 150은 GITR 효능제 모노클로날 항체에서 서열식별번호: 148의 아미노산 서열에 임의로 포함될 수 있는 리더 서열의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 151은 6C8 인간화 GITR 효능제 모노클로날 항체의 중쇄 가변 영역의 아미노산 서열이고, 이는 미국 특허 번호 7,812,135에서의 서열식별번호: 1에 상응한다.
서열식별번호: 152는 6C8 인간화 GITR 효능제 모노클로날 항체의 중쇄 가변 영역의 아미노산 서열이고, 이는 미국 특허 번호 7,812,135에서의 서열식별번호: 66에 상응한다.
서열식별번호: 153은 6C8 인간화 GITR 효능제 모노클로날 항체의 경쇄 가변 영역의 아미노산 서열이고, 이는 미국 특허 번호 7,812,135에서의 서열식별번호: 2에 상응한다.
서열식별번호: 154는 6C8 인간화 GITR 효능제 모노클로날 항체의 중쇄 CDR1 영역의 아미노산 서열이고, 이는 미국 특허 번호 7,812,135에서의 서열식별번호: 3에 상응한다.
서열식별번호: 155는 6C8 인간화 GITR 효능제 모노클로날 항체의 중쇄 CDR2 영역의 아미노산 서열이고, 이는 미국 특허 번호 7,812,135에서의 서열식별번호: 4에 상응한다.
서열식별번호: 156은 6C8 인간화 GITR 효능제 모노클로날 항체의 중쇄 CDR2 영역의 아미노산 서열이고, 이는 미국 특허 번호 7,812,135에서의 서열식별번호: 19에 상응한다.
서열식별번호: 157은 6C8 인간화 GITR 효능제 모노클로날 항체의 중쇄 CDR3 영역의 아미노산 서열이고, 이는 미국 특허 번호 7,812,135에서의 서열식별번호: 5에 상응한다.
서열식별번호: 158은 6C8 인간화 GITR 효능제 모노클로날 항체의 중쇄 CDR1 영역의 아미노산 서열이고, 이는 미국 특허 번호 7,812,135에서의 서열식별번호: 6에 상응한다.
서열식별번호: 159는 6C8 인간화 GITR 효능제 모노클로날 항체의 중쇄 CDR2 영역의 아미노산 서열이고, 이는 미국 특허 번호 7,812,135에서의 서열식별번호: 7에 상응한다.
서열식별번호: 160은 6C8 인간화 GITR 효능제 모노클로날 항체의 중쇄 CDR3 영역의 아미노산 서열이고, 이는 미국 특허 번호 7,812,135에서의 서열식별번호: 8에 상응한다.
서열식별번호: 161은 CDR2에 N (아스파라긴)을 갖는, 6C8 키메라 GITR 효능제 모노클로날 항체의 중쇄 변이체 HuN6C8 (글리코실화)의 아미노산 서열이고, 이는 미국 특허 번호 7,812,135에서의 서열식별번호: 23에 상응한다.
서열식별번호: 162는 CDR2에 Q (글루타민)을 갖는, 6C8 키메라 GITR 효능제 모노클로날 항체의 중쇄 변이체 HuQ6C8 (비-글리코실화)의 아미노산 서열이고, 이는 미국 특허 번호 7,812,135에서의 서열식별번호: 24에 상응한다.
서열식별번호: 163은 6C8 키메라 GITR 효능제 모노클로날 항체의 경쇄의 아미노산 서열이고, 이는 미국 특허 번호 7,812,135에서의 서열식별번호: 22에 상응한다.
서열식별번호: 164는 미국 특허 번호 8,709,424로부터의 GITR 효능제 36E5 중쇄 가변 영역의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 165는 미국 특허 번호 8,709,424로부터의 GITR 효능제 36E5 경쇄 가변 영역의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 166은 미국 특허 번호 8,709,424로부터의 GITR 효능제 3D6 중쇄 가변 영역의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 167은 미국 특허 번호 8,709,424로부터의 GITR 효능제 3D6 경쇄 가변 영역의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 168은 미국 특허 번호 8,709,424로부터의 GITR 효능제 61G6 중쇄 가변 영역의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 169는 미국 특허 번호 8,709,424로부터의 GITR 효능제 61G6 경쇄 가변 영역의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 170은 미국 특허 번호 8,709,424로부터의 GITR 효능제 6H6 중쇄 가변 영역의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 171은 미국 특허 번호 8,709,424로부터의 GITR 효능제 6H6 경쇄 가변 영역의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 172는 미국 특허 번호 8,709,424로부터의 GITR 효능제 61F6 중쇄 가변 영역의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 173은 미국 특허 번호 8,709,424로부터의 GITR 효능제 61F6 경쇄 가변 영역의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 174는 미국 특허 번호 8,709,424로부터의 GITR 효능제 1D8 중쇄 가변 영역의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 175는 미국 특허 번호 8,709,424로부터의 GITR 효능제 1D8 경쇄 가변 영역의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 176은 미국 특허 번호 8,709,424로부터의 GITR 효능제 17F10 중쇄 가변 영역의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 177은 미국 특허 번호 8,709,424로부터의 GITR 효능제 17F10 경쇄 가변 영역의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 178은 미국 특허 번호 8,709,424로부터의 GITR 효능제 35D8 중쇄 가변 영역의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 179는 미국 특허 번호 8,709,424로부터의 GITR 효능제 35D8 경쇄 가변 영역의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 180은 미국 특허 번호 8,709,424로부터의 GITR 효능제 49A1 중쇄 가변 영역의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 181은 미국 특허 번호 8,709,424로부터의 GITR 효능제 49A1 경쇄 가변 영역의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 182는 미국 특허 번호 8,709,424로부터의 GITR 효능제 9E5 중쇄 가변 영역의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 183은 미국 특허 번호 8,709,424로부터의 GITR 효능제 9E5 경쇄 가변 영역의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 184는 미국 특허 번호 8,709,424로부터의 GITR 효능제 31H6 중쇄 가변 영역의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 185는 미국 특허 번호 8,709,424로부터의 GITR 효능제 31H6 경쇄 가변 영역의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 186은 미국 특허 번호 8,709,424로부터의 인간화 GITR 효능제 36E5 중쇄 가변 영역의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 187은 미국 특허 번호 8,709,424로부터의 인간화 GITR 효능제 36E5 경쇄 가변 영역의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 188은 미국 특허 번호 8,709,424로부터의 인간화 GITR 효능제 3D6 중쇄 가변 영역의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 189는 미국 특허 번호 8,709,424로부터의 인간화 GITR 효능제 3D6 경쇄 가변 영역의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 190은 미국 특허 번호 8,709,424로부터의 인간화 GITR 효능제 61G6 중쇄 가변 영역의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 191은 미국 특허 번호 8,709,424로부터의 인간화 GITR 효능제 61G6 경쇄 가변 영역의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 192는 미국 특허 번호 8,709,424로부터의 인간화 GITR 효능제 6H6 중쇄 가변 영역의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 193은 미국 특허 번호 8,709,424로부터의 인간화 GITR 효능제 6H6 경쇄 가변 영역의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 194는 미국 특허 번호 8,709,424로부터의 인간화 GITR 효능제 61F6 중쇄 가변 영역의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 195는 미국 특허 번호 8,709,424로부터의 인간화 GITR 효능제 61F6 경쇄 가변 영역의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 196은 미국 특허 번호 8,709,424로부터의 인간화 GITR 효능제 1D8 중쇄 가변 영역의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 197은 미국 특허 번호 8,709,424로부터의 인간화 GITR 효능제 1D8 경쇄 가변 영역의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 198은 미국 특허 번호 8,709,424로부터의 인간화 GITR 효능제 17F10 중쇄 가변 영역의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 199는 미국 특허 번호 8,709,424로부터의 인간화 GITR 효능제 17F10 경쇄 가변 영역의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 200은 미국 특허 번호 8,709,424로부터의 인간화 GITR 효능제 35D8 중쇄 가변 영역의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 201은 미국 특허 번호 8,709,424로부터의 인간화 GITR 효능제 35D8 경쇄 가변 영역의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 202는 미국 특허 번호 8,709,424로부터의 인간화 GITR 효능제 49A1 중쇄 가변 영역의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 203은 미국 특허 번호 8,709,424로부터의 인간화 GITR 효능제 49A1 경쇄 가변 영역의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 204는 미국 특허 번호 8,709,424로부터의 인간화 GITR 효능제 9E5 중쇄 가변 영역의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 205는 미국 특허 번호 8,709,424로부터의 인간화 GITR 효능제 9E5 경쇄 가변 영역의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 206은 미국 특허 번호 8,709,424로부터의 인간화 GITR 효능제 31H6 중쇄 가변 영역의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 207은 미국 특허 번호 8,709,424로부터의 인간화 GITR 효능제 31H6 경쇄 가변 영역의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 208은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2013/0108641 A1로부터의 GITR 효능제 2155 가변 중쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 209는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2013/0108641 A1로부터의 GITR 효능제 2155 가변 경쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 210은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2013/0108641 A1로부터의 GITR 효능제 2155 인간화 (HC1) 중쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 211은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2013/0108641 A1로부터의 GITR 효능제 2155 인간화 (HC2) 중쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 212는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2013/0108641 A1로부터의 GITR 효능제 2155 인간화 (HC3a) 중쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 213은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2013/0108641 A1로부터의 인간화 (HC3b) GITR 효능제 중쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 214는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2013/0108641 A1로부터의 인간화 (HC4) GITR 효능제 중쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 215는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2013/0108641 A1로부터의 2155 인간화 (LC1) GITR 효능제 경쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 216은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2013/0108641 A1로부터의 2155 인간화 (LC2a) GITR 효능제 경쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 217은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2013/0108641 A1로부터의 2155 인간화 (LC2b) GITR 효능제 경쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 218은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2013/0108641 A1로부터의 2155 인간화 (LC3) GITR 효능제 경쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 219는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2013/0108641 A1로부터의 GITR 효능제 698 가변 중쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 220은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2013/0108641 A1로부터의 GITR 효능제 698 가변 경쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 221은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2013/0108641 A1로부터의 GITR 효능제 706 가변 중쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 222는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2013/0108641 A1로부터의 GITR 효능제 706 가변 경쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 223은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2013/0108641 A1로부터의 GITR 효능제 827 가변 중쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 224는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2013/0108641 A1로부터의 GITR 효능제 827 가변 경쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 225는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2013/0108641 A1로부터의 GITR 효능제 1718 가변 중쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 226은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2013/0108641 A1로부터의 GITR 효능제 1718 가변 경쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 227은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2013/0108641 A1로부터의 GITR 효능제 2155 중쇄 CDR3의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 228은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2013/0108641 A1로부터의 GITR 효능제 2155 중쇄 CDR2의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 229는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2013/0108641 A1로부터의 GITR 효능제 2155 중쇄 CDR1의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 230은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2013/0108641 A1로부터의 GITR 효능제 2155 경쇄 CDR3의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 231은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2013/0108641 A1로부터의 GITR 효능제 2155 경쇄 CDR2의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 232는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2013/0108641 A1로부터의 GITR 효능제 2155 경쇄 CDR1의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 233은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2013/0108641 A1로부터의 GITR 효능제 698 및 706 중쇄 CDR3의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 234는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2013/0108641 A1로부터의 GITR 효능제 698 및 706 중쇄 CDR2의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 235는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2013/0108641 A1로부터의 GITR 효능제 698 및 706 중쇄 CDR1의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 236은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2013/0108641 A1로부터의 GITR 효능제 698 경쇄 CDR3의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 237은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2013/0108641 A1로부터의 GITR 효능제 698, 706, 827 및 1649 경쇄 CDR2의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 238은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2013/0108641 A1로부터의 GITR 효능제 698, 706, 827 및 1649 경쇄 CDR1의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 239는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2013/0108641 A1로부터의 GITR 효능제 706, 827 및 1649 경쇄 CDR3의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 240은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2013/0108641 A1로부터의 GITR 효능제 827 및 1649 중쇄 CDR3의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 241은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2013/0108641 A1로부터의 GITR 효능제 827 중쇄 CDR2의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 242는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2013/0108641 A1로부터의 GITR 효능제 1649 중쇄 CDR2의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 243은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2013/0108641 A1로부터의 GITR 효능제 1718 중쇄 CDR3의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 244는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2013/0108641 A1로부터의 GITR 효능제 1718 중쇄 CDR2의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 245는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2013/0108641 A1로부터의 GITR 효능제 1718 중쇄 CDR1의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 246은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2013/0108641 A1로부터의 GITR 효능제 1718 경쇄 CDR3의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 247은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2013/0108641 A1로부터의 GITR 효능제 1718 경쇄 CDR2의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 248은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2013/0108641 A1로부터의 GITR 효능제 1718 경쇄 CDR1의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 249는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2013/0108641 A1로부터의 GITR 효능제 827 및 1649 중쇄 CDR1의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 250은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 1D7 중쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 251은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 1D7 경쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 252는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 1D7 가변 중쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 253은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 1D7 가변 경쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 254는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 1D7 중쇄 CDR1의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 255는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 1D7 중쇄 CDR2의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 256은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 1D7 중쇄 CDR3의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 257은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 1D7 경쇄 CDR1의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 258은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 1D7 경쇄 CDR2의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 259는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 1D7 경쇄 CDR3의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 260은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 33C9 중쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 261은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 33C9 경쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 262는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 33C9 가변 중쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 263은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 33C9 가변 경쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 264는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 33C9 중쇄 CDR1의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 265는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 33C9 중쇄 CDR2의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 266은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 33C9 중쇄 CDR3의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 267은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 33C9 경쇄 CDR1의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 268은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 33C9 경쇄 CDR2의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 269는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 33C9 경쇄 CDR3의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 270은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 33F6 중쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 271은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 33F6 경쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 272는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 33F6 가변 중쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 273은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 33F6 가변 경쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 274는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 33F6 중쇄 CDR1의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 275는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 33F6 중쇄 CDR2의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 276은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 33F6 중쇄 CDR3의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 277은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 33F6 경쇄 CDR1의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 278은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 33F6 경쇄 CDR2의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 279는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 33F6 경쇄 CDR3의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 280은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 34G4 중쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 281은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 34G4 경쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 282는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 34G4 가변 중쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 283은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 34G4 가변 경쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 284는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 34G4 중쇄 CDR1의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 285는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 34G4 중쇄 CDR2의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 286은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 34G4 중쇄 CDR3의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 287은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 34G4 경쇄 CDR1의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 288은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 34G4 경쇄 CDR2의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 289는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 34G4 경쇄 CDR3의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 290은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 35B10 중쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 291은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 35B10 경쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 292는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 35B10 가변 중쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 293은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 35B10 가변 경쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 294는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 35B10 중쇄 CDR1의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 295는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 35B10 중쇄 CDR2의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 296은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 35B10 중쇄 CDR3의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 297은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 35B10 경쇄 CDR1의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 298은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 35B10 경쇄 CDR2의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 299는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 35B10 경쇄 CDR3의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 300은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 41E11 중쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 301은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 41E11 경쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 302는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 41E11 가변 중쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 303은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 41E11 가변 경쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 304는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 41E11 중쇄 CDR1의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 305는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 41E11 중쇄 CDR2의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 306은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 41E11 중쇄 CDR3의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 307은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 41E11 경쇄 CDR1의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 308은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 41E11 경쇄 CDR2의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 309는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 41E11 경쇄 CDR3의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 310은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 41G5 중쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 311은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 41G5 경쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 312는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 41G5 가변 중쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 313은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 41G5 가변 경쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 314는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 41G5 중쇄 CDR1의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 315는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 41G5 중쇄 CDR2의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 316은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 41G5 중쇄 CDR3의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 317은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 41G5 경쇄 CDR1의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 318은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 41G5 경쇄 CDR2의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 319는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 41G5 경쇄 CDR3의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 320은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 42A11 중쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 321은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 42A11 경쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 322는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 42A11 가변 중쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 323은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 42A11 가변 경쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 324는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 42A11 중쇄 CDR1의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 325는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 42A11 중쇄 CDR2의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 326은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 42A11 중쇄 CDR3의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 327은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 42A11 경쇄 CDR1의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 328은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 42A11 경쇄 CDR2의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 329는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 42A11 경쇄 CDR3의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 330은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 44C1 중쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 331은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 44C1 경쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 332는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 44C1 가변 중쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 333은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 44C1 가변 경쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 334는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 44C1 중쇄 CDR1의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 335는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 44C1 중쇄 CDR2의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 336은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 44C1 중쇄 CDR3의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 337은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 44C1 경쇄 CDR1의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 338은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 44C1 경쇄 CDR2의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 339는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 44C1 경쇄 CDR3의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 340은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 45A8 중쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 341은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 45A8 경쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 342는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 45A8 가변 중쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 343은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 45A8 가변 경쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 344는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 45A8 중쇄 CDR1의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 345는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 45A8 중쇄 CDR2의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 346은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 45A8 중쇄 CDR3의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 347은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 45A8 경쇄 CDR1의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 348은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 45A8 경쇄 CDR2의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 349는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 45A8 경쇄 CDR3의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 350은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 46E11 중쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 351은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 46E11 경쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 352는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 46E11 가변 중쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 353은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 46E11 가변 경쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 354는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 46E11 중쇄 CDR1의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 355는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 46E11 중쇄 CDR2의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 356은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 46E11 중쇄 CDR3의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 357은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 46E11 경쇄 CDR1의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 358은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 46E11 경쇄 CDR2의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 359는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 46E11 경쇄 CDR3의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 360은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 48H12 중쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 361은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 48H12 경쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 362는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 48H12 가변 중쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 363은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 48H12 가변 경쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 364는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 48H12 중쇄 CDR1의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 365는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 48H12 중쇄 CDR2의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 366은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 48H12 중쇄 CDR3의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 367은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 48H12 경쇄 CDR1의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 368은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 48H12 경쇄 CDR2의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 369는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 48H12 경쇄 CDR3의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 370은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 48H7 중쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 371은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 48H7 경쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 372는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 48H7 가변 중쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 373은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 48H7 가변 경쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 374는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 48H7 중쇄 CDR1의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 375는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 48H7 중쇄 CDR2의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 376은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 48H7 중쇄 CDR3의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 377은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 48H7 경쇄 CDR1의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 378은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 48H7 경쇄 CDR2의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 379는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 48H7 경쇄 CDR3의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 380은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 49D9 중쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 381은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 49D9 경쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 382는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 49D9 가변 중쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 383은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 49D9 가변 경쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 384는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 49D9 중쇄 CDR1의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 385는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 49D9 중쇄 CDR2의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 386은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 49D9 중쇄 CDR3의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 387은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 49D9 경쇄 CDR1의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 388은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 49D9 경쇄 CDR2의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 389는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 49D9 경쇄 CDR3의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 390은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 49E2 중쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 391은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 49E2 경쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 392는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 49E2 가변 중쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 393은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 49E2 가변 경쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 394는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 49E2 중쇄 CDR1의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 395는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 49E2 중쇄 CDR2의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 396은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 49E2 중쇄 CDR3의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 397은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 49E2 경쇄 CDR1의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 398은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 49E2 경쇄 CDR2의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 399는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 49E2 경쇄 CDR3의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 400은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 48A9 중쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 401은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 48A9 경쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 402는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 48A9 가변 중쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 403은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 48A9 가변 경쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 404는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 48A9 중쇄 CDR1의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 405는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 48A9 중쇄 CDR2의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 406은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 48A9 중쇄 CDR3의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 407은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 48A9 경쇄 CDR1의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 408은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 48A9 경쇄 CDR2의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 409는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 48A9 경쇄 CDR3의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 410은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 5H7 중쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 411은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 5H7 경쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 412는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 5H7 가변 중쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 413은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 5H7 가변 경쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 414는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 5H7 중쇄 CDR1의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 415는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 5H7 중쇄 CDR2의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 416은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 5H7 중쇄 CDR3의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 417은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 5H7 경쇄 CDR1의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 418은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 5H7 경쇄 CDR2의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 419는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 5H7 경쇄 CDR3의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 420은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 7A10 중쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 421은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 7A10 경쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 422는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 7A10 가변 중쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 423은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 7A10 가변 경쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 424는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 7A10 중쇄 CDR1의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 425는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 7A10 중쇄 CDR2의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 426은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 7A10 중쇄 CDR3의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 427은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 7A10 경쇄 CDR1의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 428은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 7A10 경쇄 CDR2의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 429는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 7A10 경쇄 CDR3의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 430은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 9H6 중쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 431은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 9H6 경쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 432는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 9H6 가변 중쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 433은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 9H6 가변 경쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 434는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 9H6 중쇄 CDR1의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 435는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 9H6 중쇄 CDR2의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 436은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 9H6 중쇄 CDR3의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 437은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 9H6 경쇄 CDR1의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 438은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 9H6 경쇄 CDR2의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 439는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 9H6 경쇄 CDR3의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 440은 GITR 리간드 (GITRL) 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 441은 GITRL 폴리펩티드의 가용성 부분이다.
서열식별번호: 442는 인간 HVEM (CD270)의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 443은 HVEM 리간드 (LIGHT) 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 444는 LIGHT 폴리펩티드의 가용성 부분이다.
서열식별번호: 445는 LIGHT 폴리펩티드의 대안적 가용성 부분이다.
서열식별번호: 446은 LIGHT 폴리펩티드의 대안적 가용성 부분이다.
서열식별번호: 447은 인간 CD95 이소형 1의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 448은 인간 CD95 이소형 2의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 449는 인간 CD95 이소형 3의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 450은 인간 CD95 이소형 4의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 451은 CD95 효능제 모노클로날 항체 E09에 대한 중쇄 가변 영역 (VH)이다.
서열식별번호: 452는 CD95 효능제 모노클로날 항체 E09에 대한 경쇄 가변 영역 (VL)이다.
서열식별번호: 453은 CD95 효능제 모노클로날 항체 E09에 대한 중쇄 CDR1이다.
서열식별번호: 454는 CD95 효능제 모노클로날 항체 E09에 대한 중쇄 CDR2이다.
서열식별번호: 455는 CD95 효능제 모노클로날 항체 E09에 대한 중쇄 CDR3이다.
서열식별번호: 456은 CD95 효능제 모노클로날 항체 E09에 대한 경쇄 CDR1이다.
서열식별번호: 457은 CD95 효능제 모노클로날 항체 E09에 대한 경쇄 CDR2이다.
서열식별번호: 458은 CD95 효능제 모노클로날 항체 E09에 대한 경쇄 CDR3이다.
서열식별번호: 459는 CD95 리간드 (CD95L) 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 460은 CD95L 폴리펩티드의 가용성 부분이다.
서열식별번호: 461은 CD95L 폴리펩티드의 대안적 가용성 부분이다.
서열식별번호: 462는 CD95L 폴리펩티드의 대안적 가용성 부분이다.
서열식별번호: 463은 PD-1 억제제 니볼루맙의 중쇄 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 464는 PD-1 억제제 니볼루맙의 경쇄 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 465는 PD-1 억제제 니볼루맙의 중쇄 가변 영역 (VH) 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 466은 PD-1 억제제 니볼루맙의 경쇄 가변 영역 (VL) 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 467은 PD-1 억제제 니볼루맙의 중쇄 CDR1 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 468은 PD-1 억제제 니볼루맙의 중쇄 CDR2 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 469는 PD-1 억제제 니볼루맙의 중쇄 CDR3 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 470은 PD-1 억제제 니볼루맙의 경쇄 CDR1 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 471은 PD-1 억제제 니볼루맙의 경쇄 CDR2 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 472는 PD-1 억제제 니볼루맙의 경쇄 CDR3 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 473은 PD-1 억제제 펨브롤리주맙의 중쇄 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 474는 PD-1 억제제 펨브롤리주맙의 경쇄 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 475는 PD-1 억제제 펨브롤리주맙의 중쇄 가변 영역 (VH) 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 476은 PD-1 억제제 펨브롤리주맙의 경쇄 가변 영역 (VL) 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 477은 PD-1 억제제 펨브롤리주맙의 중쇄 CDR1 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 478은 PD-1 억제제 펨브롤리주맙의 중쇄 CDR2 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 479는 PD-1 억제제 펨브롤리주맙의 중쇄 CDR3 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 480은 PD-1 억제제 펨브롤리주맙의 경쇄 CDR1 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 481은 PD-1 억제제 펨브롤리주맙의 경쇄 CDR2 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 482는 PD-1 억제제 펨브롤리주맙의 경쇄 CDR3 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 483은 PD-L1 억제제 두르발루맙의 중쇄 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 484는 PD-L1 억제제 두르발루맙의 경쇄 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 485는 PD-L1 억제제 두르발루맙의 중쇄 가변 영역 (VH) 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 486은 PD-L1 억제제 두르발루맙의 경쇄 가변 영역 (VL) 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 487은 PD-L1 억제제 두르발루맙의 중쇄 CDR1 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 488은 PD-L1 억제제 두르발루맙의 중쇄 CDR2 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 489는 PD-L1 억제제 두르발루맙의 중쇄 CDR3 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 490은 PD-L1 억제제 두르발루맙의 경쇄 CDR1 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 491은 PD-L1 억제제 두르발루맙의 경쇄 CDR2 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 492는 PD-L1 억제제 두르발루맙의 경쇄 CDR3 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 493은 PD-L1 억제제 아벨루맙의 중쇄 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 494는 PD-L1 억제제 아벨루맙의 경쇄 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 495는 PD-L1 억제제 아벨루맙의 중쇄 가변 영역 (VH) 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 496은 PD-L1 억제제 아벨루맙의 경쇄 가변 영역 (VL) 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 497은 PD-L1 억제제 아벨루맙의 중쇄 CDR1 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 498은 PD-L1 억제제 아벨루맙의 중쇄 CDR2 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 499는 PD-L1 억제제 아벨루맙의 중쇄 CDR3 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 500은 PD-L1 억제제 아벨루맙의 경쇄 CDR1 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 501은 PD-L1 억제제 아벨루맙의 경쇄 CDR2 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 502는 PD-L1 억제제 아벨루맙의 경쇄 CDR3 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 503은 PD-L1 억제제 아테졸리주맙의 중쇄 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 504는 PD-L1 억제제 아테졸리주맙의 경쇄 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 505는 PD-L1 억제제 아테졸리주맙의 중쇄 가변 영역 (VH) 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 506은 PD-L1 억제제 아테졸리주맙의 경쇄 가변 영역 (VL) 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 507은 PD-L1 억제제 아테졸리주맙의 중쇄 CDR1 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 508은 PD-L1 억제제 아테졸리주맙의 중쇄 CDR2 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 509는 PD-L1 억제제 아테졸리주맙의 중쇄 CDR3 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 510은 PD-L1 억제제 아테졸리주맙의 경쇄 CDR1 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 511은 PD-L1 억제제 아테졸리주맙의 경쇄 CDR2 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 512는 PD-L1 억제제 아테졸리주맙의 경쇄 CDR3 아미노산 서열이다.
도 1은 TIL 확장 및 처리 과정을 도시한다. 본 개시내용의 TNFRSF 효능제는 사전-REP 단계 (도면의 상단 절반) 또는 REP 단계 (도면의 하단 절반) 둘 다에서 사용될 수 있고, IL-2가 각각의 세포 배양물에 첨가될 때 첨가될 수 있다. 단계 1은 4개의 종양 단편을 10개의 지-렉스(G-Rex) 10 플라스크 내로 첨가한 것을 나타낸다. 단계 2에서, 대략 40 x 106개 이상의 TIL이 수득된다. 단계 3에서, REP를 위해 36개의 지-렉스 100 플라스크 내로 분할이 이루어진다. 단계 4에서 원심분리에 의해 TIL이 수거된다. 새로운 TIL 생성물은 대략 43일의 총 과정 시간 후 단계 5에서 수득되고, 이 시점에서 TIL이 환자 내로 주입될 수 있다.
도 2는 본 개시내용의 TNFRSF 효능제로 확장된 TIL로 사용하기 위한 치료 프로토콜을 도시한다. 수술 (및 종양 절제)은 시작시에 이루어지고, 림프구고갈 화학요법은 본원 다른 곳에 기재된 바와 같은 화학요법을 사용한 비-골수절제 림프구고갈을 지칭한다. 본 개시내용의 TNFRSF 효능제는 또한 TIL의 투여 후 본원에 기재된 바와 같은 요법 동안 사용될 수 있다.
도 3은 용량 의존성 방식으로 녹색 형광 단백질 (GFP) 리포터를 사용하여, 4-1BB-Fc 하이브리도마 4B5가 NF-kB를 발현하는 Jurkat 세포 상에서 4-1BB 신호전달을 활성화시키는지를 결정하는 검정의 결과를 도시한다. "2차"는 2차 항체의 활성화를 지칭한다.
도 4는 용량 의존성 방식으로 GFP 리포터를 사용하여, 4-1BB-Fc 하이브리도마 1C4가 NF-kB를 발현하는 Jurkat 세포 상에서 4-1BB 신호전달을 활성화시키는지를 결정하는 검정의 결과를 도시한다. "2차"는 2차 항체의 활성화를 지칭한다.
도 5는 용량 의존성 방식으로 GFP 리포터를 사용하여, 4-1BB-Fc 하이브리도마 9B4가 NF-kB를 발현하는 Jurkat 세포 상에서 4-1BB 신호전달을 활성화시키는지를 결정하는 검정의 결과를 도시한다. "2차"는 2차 항체의 활성화를 지칭한다.
도 6은 용량 의존성 방식으로 GFP 리포터를 사용하여, 4-1BB-Fc 하이브리도마 1D7이 NF-kB를 발현하는 Jurkat 세포 상에서 4-1BB 신호전달을 활성화시키는지를 결정하는 검정의 결과를 도시한다. "2차"는 2차 항체의 활성화를 지칭한다.
도 7은 용량 의존성 방식으로 GFP 리포터를 사용하여, 4-1BB-Fc 하이브리도마 1D10이 NF-kB를 발현하는 Jurkat 세포 상에서 4-1BB 신호전달을 활성화시키는지를 결정하는 검정의 결과를 도시한다. "2차"는 2차 항체의 활성화를 지칭한다.
도 8은 용량 의존성 방식으로 GFP 리포터를 사용하여, 4-1BB-Fc 하이브리도마 3C2가 NF-kB를 발현하는 Jurkat 세포 상에서 4-1BB 신호전달을 활성화시키는지를 결정하는 검정의 결과를 도시한다. "2차"는 2차 항체의 활성화를 지칭한다.
도 9는 용량 의존성 방식으로 GFP 리포터를 사용하여, 4-1BB-Fc 하이브리도마 10D12가 NF-kB를 발현하는 Jurkat 세포 상에서 4-1BB 신호전달을 활성화시키는지를 결정하는 검정의 결과를 도시한다. "2차"는 2차 항체의 활성화를 지칭한다.
도 10은 용량 의존성 방식으로 GFP 리포터를 사용하여, 4-1BB-Fc 하이브리도마 8D2가 NF-kB를 발현하는 Jurkat 세포 상에서 4-1BB 신호전달을 활성화시키는지를 결정하는 검정의 결과를 도시한다. "2차"는 2차 항체의 활성화를 지칭한다.
도 11은 용량 의존성 방식으로 GFP 리포터를 사용하여, 4-1BB-Fc 하이브리도마 4G6이 NF-kB를 발현하는 Jurkat 세포 상에서 4-1BB 신호전달을 활성화시키는지를 결정하는 검정의 결과를 도시한다. "2차"는 2차 항체의 활성화를 지칭한다.
도 12는 용량 의존성 방식으로 GFP 리포터를 사용하여, 4-1BB-Fc 하이브리도마 8E3이 NF-kB를 발현하는 Jurkat 세포 상에서 4-1BB 신호전달을 활성화시키는지를 결정하는 검정의 결과를 도시한다. "2차"는 2차 항체의 활성화를 지칭한다.
도 13은 예시적인 TIL 확장 및 제조 프로토콜을 도시한다 (과정 2A).
도 14는 과정 2A에서 수행되는 예시적인 방법 단계를 도시한다.
도 15는 예시적인 TIL 확장 프로토콜을 도시한다.
도 16은 유동 세포측정법에 의한 4-1BB+ 세포의 백분율에 의해 평가된 바와 같은 크리에이티브 바이오랩스 (CB) 및 BPS 바이오사이언시스(BPS Biosciences) (BPS) 4-1BB 효능제 항체에 대한 결합 친화도를 도시한다. CB 4-1BB 효능제가 가장 높은 결합 친화도를 나타냈다.
도 17은 평균 형광 강도 (MFI)에 의해 평가된 바와 같은 크리에이티브 바이오랩스 (CB) 및 BPS 바이오사이언시스 (BPS) 4-1BB 효능제 항체에 대한 결합 친화도를 도시한다. CB 4-1BB 효능제가 가장 높은 결합 친화도를 나타냈다.
도 18은 항-4-1BB 효능작용 항체의 NF-κB 경로 활성화의 평가 결과를 도시한다.
도 19는 유동 세포측정법에 의한 OX40+ 세포의 백분율에 의해 평가된 바와 같은 크리에이티브 바이오랩스 OX40 효능제 항체에 대한 결합 친화도를 도시한다.
도 20은 평균 형광 강도 (MFI)에 의해 평가된 바와 같은 크리에이티브 바이오랩스 OX40 효능제 항체에 대한 결합 친화도를 도시한다.
도 21은 크리에이티브 바이오랩스 항-OX40 효능제 항체 (제시된 5가지 농도)와 상업용 항-OX40 (클론 Ber-ACT35) 효능제 사이의 대등한 결합 친화도를 도시한다. 각각의 종양 명칭의 제1 문자는 조직학을 나타낸다: C = 자궁경부; H = 두경부 (두경부 편평 세포 암종); L = 폐; 및 M = 흑색종.
도 22는 항-OX40 효능제 항체의 NF-κB 경로 활성화의 평가 결과를 도시한다. OX40 리포터 세포를 24시간 동안 PBMC 피더 세포의 존재 또는 부재 하에 1, 2, 4, 8 및 16 μg/mL의 농도의 항-OX40 단독 또는 이소형 대조군으로 처리하였다. 세포를 1-단계 루시페라제 시약을 사용하여 용해시키고, 루시페라제 활성을 발광측정기에 의해 측정하였다.
도 23은 사전-REP 동안 4-1BB 및 OX40 효능제 실험에 대한 실험 설계를 도시한다.
도 24는 도 23의 실험 설계에 사용된 종양 조직학을 도시한다.
도 25는 사전-REP 동안 사용된 4-1BB 및 항-OX40 효능제의 TIL 성능 및 특성에 대한 영향을 평가하는데 사용된 데이터 분석 전략을 도시한다.
도 26은 CB 4-1BB 효능제를 사용한 세포 확장에 대한 총 세포 수 결과를 도시한다 (N = 3). NT = 시험되지 않음 (대조군). p 값은 > 0.99였다.
도 27은 CB OX40 효능제를 사용한 세포 확장에 대한 총 세포 수 결과를 도시한다 (N = 5). NT = 시험되지 않음 (대조군). p 값은 0.06이었다.
도 28은 CB 4-1BB 효능제 및 OX-40 효능제를 사용한 세포 확장에 대한 총 세포 수 결과를 도시한다 (N = 2). NT = 시험되지 않음 (대조군).
도 29는 CB 4-1BB 효능제를 사용한 세포 확장에 대한 총 CD8+ 세포 수 결과를 도시한다 (N = 3). p 값은 0.5였다.
도 30은 CB OX40 효능제를 사용한 세포 확장에 대한 총 CD8+ 세포 수 결과를 도시한다 (N = 5). p 값은 0.03이었다.
도 31은 CB 4-1BB 효능제 및 OX-40 효능제를 사용한 세포 확장에 대한 총 CD8+ 세포 수 결과를 도시한다 (N = 2). NT = 시험되지 않음 (대조군).
도 32는 CB 4-1BB 효능제를 사용한 세포 확장에 대한 총 CD8+/CD4+ 세포 수 비 결과를 도시한다 (N = 3). p 값은 0.2였다.
도 33은 CB OX40 효능제를 사용한 세포 확장에 대한 총 CD8+/CD4+ 세포 수 비 결과를 도시한다 (N = 5). p 값은 0.12였다.
도 34는 CB 4-1BB 효능제 및 OX-40 효능제를 사용한 세포 확장에 대한 총 CD8+/CD4+ 세포 수 비 결과를 도시한다 (N = 2). NT = 시험되지 않음 (대조군).
도 35는 4-1BB 또는 OX40 효능제의 존재 하에 확장된 사전-REP TIL의 REP 증식에 대한 실험 계획을 도시한다.
도 36은 사전-REP에서 처리되지 않은 TIL의 경우 (NT) 대비 CB 4-1BB 효능제의 존재 하에 확장된 사전-REP TIL로부터의 REP에서 확장된 TIL의 배수 확장을 도시한다.
도 37은 사전-REP에서 처리되지 않은 TIL의 경우 (NT) 대비 CB OX40 효능제의 존재 하에 확장된 사전-REP TIL로부터의 REP에서 확장된 TIL의 배수 확장을 도시한다.
도 38은 사전-REP에서 처리되지 않은 TIL의 경우 (NT) 대비 CB 4-1BB 효능제 및 CB OX40 효능제의 존재 하에 확장된 사전-REP TIL로부터의 REP에서 확장된 TIL의 배수 확장을 도시한다.
도 39는 REP 단계 동안 CB OX40 효능제의 평가에 사용된 21종의 TIL 세포주의 조직학을 도시한다.
도 40은 REP 단계 동안 CB OX40 효능제의 평가를 위한 실험 계획을 도시한다.
도 41은 OX40 효능작용 항체의 존재가 REP 동안 CD8+ TIL을 우선적으로 확장시킨다는 것을 도시한다 (CD3+CD4+ 세포의 백분율로서 제시됨).
도 42는 OX40 효능작용 항체의 존재가 REP 동안 CD8+ TIL을 우선적으로 확장시킨다는 것을 도시한다 (CD3+CD8+ 세포의 백분율로서 제시됨).
도 43은 비-반응자 TIL 세포주에서 항-OX40 처리 후 CD4+ 하위세트에서 OX40의 하향조절이 관찰되지 않았다는 것을 도시한다.
도 44는 비-반응자 및 반응자 TIL 세포주에서 CB OX40 효능제 용량 적정에 대한 실험 세부사항을 도시한다.
도 45는 반응자 TIL 세포주에서 CB OX40 효능제 용량 적정의 결과를 도시한다.
도 46은 비-반응자 TIL 세포주에서 CB OX40 효능제 용량 적정의 결과를 도시한다.
도 47은 반응자 L4005에 대한 대등한 TCRvb 레퍼토리 프로파일을 도시한다.
도 48은 반응자 H3005에 대한 대등한 TCRvb 레퍼토리 프로파일을 도시한다.
도 49는 반응자 M1022에 대한 대등한 TCRvb 레퍼토리 프로파일을 도시한다.
[서열 목록의 간단한 설명]
서열식별번호(SEQ ID NO): 1은 무로모납의 중쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 2는 무로모납의 경쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 3은 재조합 인간 IL-2 단백질의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 4는 알데스류킨의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 5는 재조합 인간 IL-4 단백질의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 6은 재조합 인간 IL-7 단백질의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 7은 재조합 인간 IL-15 단백질의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 8은 재조합 인간 IL-21 단백질의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 9는 인간 4-1BB의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 10은 뮤린 4-1BB의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 11은 4-1BB 효능제 모노클로날 항체 우토밀루맙 (PF-05082566)에 대한 중쇄이다.
서열식별번호: 12는 4-1BB 효능제 모노클로날 항체 우토밀루맙 (PF-05082566)에 대한 경쇄이다.
서열식별번호: 13은 4-1BB 효능제 모노클로날 항체 우토밀루맙 (PF-05082566)에 대한 중쇄 가변 영역 (VH)이다.
서열식별번호: 14는 4-1BB 효능제 모노클로날 항체 우토밀루맙 (PF-05082566)에 대한 경쇄 가변 영역 (VL)이다.
서열식별번호: 15는 4-1BB 효능제 모노클로날 항체 우토밀루맙 (PF-05082566)에 대한 중쇄 CDR1이다.
서열식별번호: 16은 4-1BB 효능제 모노클로날 항체 우토밀루맙 (PF-05082566)에 대한 중쇄 CDR2이다.
서열식별번호: 17은 4-1BB 효능제 모노클로날 항체 우토밀루맙 (PF-05082566)에 대한 중쇄 CDR3이다.
서열식별번호: 18은 4-1BB 효능제 모노클로날 항체 우토밀루맙 (PF-05082566)에 대한 경쇄 CDR1이다.
서열식별번호: 19는 4-1BB 효능제 모노클로날 항체 우토밀루맙 (PF-05082566)에 대한 경쇄 CDR2이다.
서열식별번호: 20은 4-1BB 효능제 모노클로날 항체 우토밀루맙 (PF-05082566)에 대한 경쇄 CDR3이다.
서열식별번호: 21은 4-1BB 효능제 모노클로날 항체 우렐루맙 (BMS-663513)에 대한 중쇄이다.
서열식별번호: 22는 4-1BB 효능제 모노클로날 항체 우렐루맙 (BMS-663513)에 대한 경쇄이다.
서열식별번호: 23은 4-1BB 효능제 모노클로날 항체 우렐루맙 (BMS-663513)에 대한 중쇄 가변 영역 (VH)이다.
서열식별번호: 24는 4-1BB 효능제 모노클로날 항체 우렐루맙 (BMS-663513)에 대한 경쇄 가변 영역 (VL)이다.
서열식별번호: 25는 4-1BB 효능제 모노클로날 항체 우렐루맙 (BMS-663513)에 대한 중쇄 CDR1이다.
서열식별번호: 26은 4-1BB 효능제 모노클로날 항체 우렐루맙 (BMS-663513)에 대한 중쇄 CDR2이다.
서열식별번호: 27은 4-1BB 효능제 모노클로날 항체 우렐루맙 (BMS-663513)에 대한 중쇄 CDR3이다.
서열식별번호: 28은 4-1BB 효능제 모노클로날 항체 우렐루맙 (BMS-663513)에 대한 경쇄 CDR1이다.
서열식별번호: 29는 4-1BB 효능제 모노클로날 항체 우렐루맙 (BMS-663513)에 대한 경쇄 CDR2이다.
서열식별번호: 30은 4-1BB 효능제 모노클로날 항체 우렐루맙 (BMS-663513)에 대한 경쇄 CDR3이다.
서열식별번호: 31은 TNFRSF 효능제 융합 단백질에 대한 Fc 도메인이다.
서열식별번호: 32는 TNFRSF 효능제 융합 단백질에 대한 링커이다.
서열식별번호: 33은 TNFRSF 효능제 융합 단백질에 대한 링커이다.
서열식별번호: 34는 TNFRSF 효능제 융합 단백질에 대한 링커이다.
서열식별번호: 35는 TNFRSF 효능제 융합 단백질에 대한 링커이다.
서열식별번호: 36은 TNFRSF 효능제 융합 단백질에 대한 링커이다.
서열식별번호: 37은 TNFRSF 효능제 융합 단백질에 대한 링커이다.
서열식별번호: 38은 TNFRSF 효능제 융합 단백질에 대한 링커이다.
서열식별번호: 39는 TNFRSF 효능제 융합 단백질에 대한 링커이다.
서열식별번호: 40은 TNFRSF 효능제 융합 단백질에 대한 링커이다.
서열식별번호: 41은 TNFRSF 효능제 융합 단백질에 대한 링커이다.
서열식별번호: 42는 TNFRSF 효능제 융합 단백질에 대한 Fc 도메인이다.
서열식별번호: 43은 TNFRSF 효능제 융합 단백질에 대한 링커이다.
서열식별번호: 44는 TNFRSF 효능제 융합 단백질에 대한 링커이다.
서열식별번호: 45는 TNFRSF 효능제 융합 단백질에 대한 링커이다.
서열식별번호: 46은 4-1BB 리간드 (4-1BBL) 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 47은 4-1BBL 폴리펩티드의 가용성 부분이다.
서열식별번호: 48은 4-1BB 효능제 항체 4B4-1-1 버전 1에 대한 중쇄 가변 영역 (VH)이다.
서열식별번호: 49는 4-1BB 효능제 항체 4B4-1-1 버전 1에 대한 경쇄 가변 영역 (VL)이다.
서열식별번호: 50은 4-1BB 효능제 항체 4B4-1-1 버전 2에 대한 중쇄 가변 영역 (VH)이다.
서열식별번호: 51은 4-1BB 효능제 항체 4B4-1-1 버전 2에 대한 경쇄 가변 영역 (VL)이다.
서열식별번호: 52는 4-1BB 효능제 항체 H39E3-2에 대한 중쇄 가변 영역 (VH)이다.
서열식별번호: 53은 4-1BB 효능제 항체 H39E3-2에 대한 경쇄 가변 영역 (VL)이다.
서열식별번호: 54는 인간 OX40의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 55는 뮤린 OX40의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 56은 OX40 효능제 모노클로날 항체 타볼릭시주맙 (MEDI-0562)에 대한 중쇄이다.
서열식별번호: 57은 OX40 효능제 모노클로날 항체 타볼릭시주맙 (MEDI-0562)에 대한 경쇄이다.
서열식별번호: 58은 OX40 효능제 모노클로날 항체 타볼릭시주맙 (MEDI-0562)에 대한 중쇄 가변 영역 (VH)이다.
서열식별번호: 59는 OX40 효능제 모노클로날 항체 타볼릭시주맙 (MEDI-0562)에 대한 경쇄 가변 영역 (VL)이다.
서열식별번호: 60은 OX40 효능제 모노클로날 항체 타볼릭시주맙 (MEDI-0562)에 대한 중쇄 CDR1이다.
서열식별번호: 61은 OX40 효능제 모노클로날 항체 타볼릭시주맙 (MEDI-0562)에 대한 중쇄 CDR2이다.
서열식별번호: 62는 OX40 효능제 모노클로날 항체 타볼릭시주맙 (MEDI-0562)에 대한 중쇄 CDR3이다.
서열식별번호: 63은 OX40 효능제 모노클로날 항체 타볼릭시주맙 (MEDI-0562)에 대한 경쇄 CDR1이다.
서열식별번호: 64는 OX40 효능제 모노클로날 항체 타볼릭시주맙 (MEDI-0562)에 대한 경쇄 CDR2이다.
서열식별번호: 65는 OX40 효능제 모노클로날 항체 타볼릭시주맙 (MEDI-0562)에 대한 경쇄 CDR3이다.
서열식별번호: 66은 OX40 효능제 모노클로날 항체 11D4에 대한 중쇄이다.
서열식별번호: 67은 OX40 효능제 모노클로날 항체 11D4에 대한 경쇄이다.
서열식별번호: 68은 OX40 효능제 모노클로날 항체 11D4에 대한 중쇄 가변 영역 (VH)이다.
서열식별번호: 69는 OX40 효능제 모노클로날 항체 11D4에 대한 경쇄 가변 영역 (VL)이다.
서열식별번호: 70은 OX40 효능제 모노클로날 항체 11D4에 대한 중쇄 CDR1이다.
서열식별번호: 71은 OX40 효능제 모노클로날 항체 11D4에 대한 중쇄 CDR2이다.
서열식별번호: 72는 OX40 효능제 모노클로날 항체 11D4에 대한 중쇄 CDR3이다.
서열식별번호: 73은 OX40 효능제 모노클로날 항체 11D4에 대한 경쇄 CDR1이다.
서열식별번호: 74는 OX40 효능제 모노클로날 항체 11D4에 대한 경쇄 CDR2이다.
서열식별번호: 75는 OX40 효능제 모노클로날 항체 11D4에 대한 경쇄 CDR3이다.
서열식별번호: 76은 OX40 효능제 모노클로날 항체 18D8에 대한 중쇄이다.
서열식별번호: 77은 OX40 효능제 모노클로날 항체 18D8에 대한 경쇄이다.
서열식별번호: 78은 OX40 효능제 모노클로날 항체 18D8에 대한 중쇄 가변 영역 (VH)이다.
서열식별번호: 79는 OX40 효능제 모노클로날 항체 18D8에 대한 경쇄 가변 영역 (VL)이다.
서열식별번호: 80은 OX40 효능제 모노클로날 항체 18D8에 대한 중쇄 CDR1이다.
서열식별번호: 81은 OX40 효능제 모노클로날 항체 18D8에 대한 중쇄 CDR2이다.
서열식별번호: 82는 OX40 효능제 모노클로날 항체 18D8에 대한 중쇄 CDR3이다.
서열식별번호: 83은 OX40 효능제 모노클로날 항체 18D8에 대한 경쇄 CDR1이다.
서열식별번호: 84는 OX40 효능제 모노클로날 항체 18D8에 대한 경쇄 CDR2이다.
서열식별번호: 85는 OX40 효능제 모노클로날 항체 18D8에 대한 경쇄 CDR3이다.
서열식별번호: 86은 OX40 효능제 모노클로날 항체 Hu119-122에 대한 중쇄 가변 영역 (VH)이다.
서열식별번호: 87은 OX40 효능제 모노클로날 항체 Hu119-122에 대한 경쇄 가변 영역 (VL)이다.
서열식별번호: 88은 OX40 효능제 모노클로날 항체 Hu119-122에 대한 중쇄 CDR1이다.
서열식별번호: 89는 OX40 효능제 모노클로날 항체 Hu119-122에 대한 중쇄 CDR2이다.
서열식별번호: 90은 OX40 효능제 모노클로날 항체 Hu119-122에 대한 중쇄 CDR3이다.
서열식별번호: 91은 OX40 효능제 모노클로날 항체 Hu119-122에 대한 경쇄 CDR1이다.
서열식별번호: 92는 OX40 효능제 모노클로날 항체 Hu119-122에 대한 경쇄 CDR2이다.
서열식별번호: 93은 OX40 효능제 모노클로날 항체 Hu119-122에 대한 경쇄 CDR3이다.
서열식별번호: 94는 OX40 효능제 모노클로날 항체 Hu106-222에 대한 중쇄 가변 영역 (VH)이다.
서열식별번호: 95는 OX40 효능제 모노클로날 항체 Hu106-222에 대한 경쇄 가변 영역 (VL)이다.
서열식별번호: 96은 OX40 효능제 모노클로날 항체 Hu106-222에 대한 중쇄 CDR1이다.
서열식별번호: 97은 OX40 효능제 모노클로날 항체 Hu106-222에 대한 중쇄 CDR2이다.
서열식별번호: 98은 OX40 효능제 모노클로날 항체 Hu106-222에 대한 중쇄 CDR3이다.
서열식별번호: 99는 OX40 효능제 모노클로날 항체 Hu106-222에 대한 경쇄 CDR1이다.
서열식별번호: 100은 OX40 효능제 모노클로날 항체 Hu106-222에 대한 경쇄 CDR2이다.
서열식별번호: 101은 OX40 효능제 모노클로날 항체 Hu106-222에 대한 경쇄 CDR3이다.
서열식별번호: 102는 OX40 리간드 (OX40L) 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 103은 OX40L 폴리펩티드의 가용성 부분이다.
서열식별번호: 104는 OX40L 폴리펩티드의 대안적 가용성 부분이다.
서열식별번호: 105는 OX40 효능제 모노클로날 항체 008에 대한 중쇄 가변 영역 (VH)이다.
서열식별번호: 106은 OX40 효능제 모노클로날 항체 008에 대한 경쇄 가변 영역 (VL)이다.
서열식별번호: 107은 OX40 효능제 모노클로날 항체 011에 대한 중쇄 가변 영역 (VH)이다.
서열식별번호: 108은 OX40 효능제 모노클로날 항체 011에 대한 경쇄 가변 영역 (VL)이다.
서열식별번호: 109는 OX40 효능제 모노클로날 항체 021에 대한 중쇄 가변 영역 (VH)이다.
서열식별번호: 110은 OX40 효능제 모노클로날 항체 021에 대한 경쇄 가변 영역 (VL)이다.
서열식별번호: 111은 OX40 효능제 모노클로날 항체 023에 대한 중쇄 가변 영역 (VH)이다.
서열식별번호: 112는 OX40 효능제 모노클로날 항체 023에 대한 경쇄 가변 영역 (VL)이다.
서열식별번호: 113은 OX40 효능제 모노클로날 항체에 대한 중쇄 가변 영역 (VH)이다.
서열식별번호: 114는 OX40 효능제 모노클로날 항체에 대한 경쇄 가변 영역 (VL)이다.
서열식별번호: 115는 OX40 효능제 모노클로날 항체에 대한 중쇄 가변 영역 (VH)이다.
서열식별번호: 116은 OX40 효능제 모노클로날 항체에 대한 경쇄 가변 영역 (VL)이다.
서열식별번호: 117은 인간화 OX40 효능제 모노클로날 항체에 대한 중쇄 가변 영역 (VH)이다.
서열식별번호: 118은 인간화 OX40 효능제 모노클로날 항체에 대한 중쇄 가변 영역 (VH)이다.
서열식별번호: 119는 인간화 OX40 효능제 모노클로날 항체에 대한 경쇄 가변 영역 (VL)이다.
서열식별번호: 120은 인간화 OX40 효능제 모노클로날 항체에 대한 경쇄 가변 영역 (VL)이다.
서열식별번호: 121은 인간화 OX40 효능제 모노클로날 항체에 대한 중쇄 가변 영역 (VH)이다.
서열식별번호: 122는 인간화 OX40 효능제 모노클로날 항체에 대한 중쇄 가변 영역 (VH)이다.
서열식별번호: 123은 인간화 OX40 효능제 모노클로날 항체에 대한 경쇄 가변 영역 (VL)이다.
서열식별번호: 124는 인간화 OX40 효능제 모노클로날 항체에 대한 경쇄 가변 영역 (VL)이다.
서열식별번호: 125는 OX40 효능제 모노클로날 항체에 대한 중쇄 가변 영역 (VH)이다.
서열식별번호: 126은 OX40 효능제 모노클로날 항체에 대한 경쇄 가변 영역 (VL)이다.
서열식별번호: 127은 인간 CD27의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 128은 마카크 CD27의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 129는 CD27 효능제 모노클로날 항체 바를리루맙 (CDX-1127)에 대한 중쇄이다.
서열식별번호: 130은 CD27 효능제 모노클로날 항체 바를리루맙 (CDX-1127)에 대한 경쇄이다.
서열식별번호: 131은 CD27 효능제 모노클로날 항체 바를리루맙 (CDX-1127)에 대한 중쇄 가변 영역 (VH)이다.
서열식별번호: 132는 CD27 효능제 모노클로날 항체 바를리루맙 (CDX-1127)에 대한 경쇄 가변 영역 (VL)이다.
서열식별번호: 133은 CD27 효능제 모노클로날 항체 바를리루맙 (CDX-1127)에 대한 중쇄 CDR1이다.
서열식별번호: 134는 CD27 효능제 모노클로날 항체 바를리루맙 (CDX-1127)에 대한 중쇄 CDR2이다.
서열식별번호: 135는 CD27 효능제 모노클로날 항체 바를리루맙 (CDX-1127)에 대한 중쇄 CDR3이다.
서열식별번호: 136은 CD27 효능제 모노클로날 항체 바를리루맙 (CDX-1127)에 대한 경쇄 CDR1이다.
서열식별번호: 137은 CD27 효능제 모노클로날 항체 바를리루맙 (CDX-1127)에 대한 경쇄 CDR2이다.
서열식별번호: 138은 CD27 효능제 모노클로날 항체 바를리루맙 (CDX-1127)에 대한 경쇄 CDR3이다.
서열식별번호: 139는 CD27 리간드 (CD70) 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 140은 CD70 폴리펩티드의 가용성 부분이다.
서열식별번호: 141은 CD70 폴리펩티드의 대안적 가용성 부분이다.
서열식별번호: 142는 인간 GITR (인간 종양 괴사 인자 수용체 슈퍼패밀리 구성원 18 (TNFRSF18) 단백질)의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 143은 뮤린 GITR (뮤린 종양 괴사 인자 수용체 슈퍼패밀리 구성원 18 (TNFRSF18) 단백질)의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 144는 CDR2에 N (아스파라긴)을 갖는, 6C8 인간화 GITR 효능제 모노클로날 항체의 중쇄 변이체 HuN6C8 (글리코실화)의 아미노산 서열이고, 이는 미국 특허 번호 7,812,135에서의 서열식별번호: 60에 상응한다.
서열식별번호: 145는 CDR2에 N (아스파라긴)을 갖는, 6C8 인간화 GITR 효능제 모노클로날 항체의 중쇄 변이체 HuN6C8 (비-글리코실화)의 아미노산 서열이고, 이는 미국 특허 번호 7,812,135에서의 서열식별번호: 61에 상응한다.
서열식별번호: 146은 CDR2에 Q (글루타민)를 갖는, 6C8 인간화 GITR 효능제 모노클로날 항체의 중쇄 변이체 HuQ6C8 (글리코실화)의 아미노산 서열이고, 이는 미국 특허 번호 7,812,135에서의 서열식별번호: 62에 상응한다.
서열식별번호: 147은 CDR2에 Q (글루타민)를 갖는, 6C8 인간화 GITR 효능제 모노클로날 항체의 중쇄 변이체 HuQ6C8 (비-글리코실화)의 아미노산 서열이고, 이는 미국 특허 번호 7,812,135에서의 서열식별번호: 63에 상응한다.
서열식별번호: 148은 6C8 인간화 GITR 효능제 모노클로날 항체의 경쇄의 아미노산 서열이고, 이는 미국 특허 번호 7,812,135에서의 서열식별번호: 58에 상응한다.
서열식별번호: 149는 GITR 효능제 모노클로날 항체에서 서열식별번호: 144, 서열식별번호: 145, 서열식별번호: 146 또는 서열식별번호: 147의 아미노산 서열에 임의로 포함될 수 있는 리더 서열의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 150은 GITR 효능제 모노클로날 항체에서 서열식별번호: 148의 아미노산 서열에 임의로 포함될 수 있는 리더 서열의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 151은 6C8 인간화 GITR 효능제 모노클로날 항체의 중쇄 가변 영역의 아미노산 서열이고, 이는 미국 특허 번호 7,812,135에서의 서열식별번호: 1에 상응한다.
서열식별번호: 152는 6C8 인간화 GITR 효능제 모노클로날 항체의 중쇄 가변 영역의 아미노산 서열이고, 이는 미국 특허 번호 7,812,135에서의 서열식별번호: 66에 상응한다.
서열식별번호: 153은 6C8 인간화 GITR 효능제 모노클로날 항체의 경쇄 가변 영역의 아미노산 서열이고, 이는 미국 특허 번호 7,812,135에서의 서열식별번호: 2에 상응한다.
서열식별번호: 154는 6C8 인간화 GITR 효능제 모노클로날 항체의 중쇄 CDR1 영역의 아미노산 서열이고, 이는 미국 특허 번호 7,812,135에서의 서열식별번호: 3에 상응한다.
서열식별번호: 155는 6C8 인간화 GITR 효능제 모노클로날 항체의 중쇄 CDR2 영역의 아미노산 서열이고, 이는 미국 특허 번호 7,812,135에서의 서열식별번호: 4에 상응한다.
서열식별번호: 156은 6C8 인간화 GITR 효능제 모노클로날 항체의 중쇄 CDR2 영역의 아미노산 서열이고, 이는 미국 특허 번호 7,812,135에서의 서열식별번호: 19에 상응한다.
서열식별번호: 157은 6C8 인간화 GITR 효능제 모노클로날 항체의 중쇄 CDR3 영역의 아미노산 서열이고, 이는 미국 특허 번호 7,812,135에서의 서열식별번호: 5에 상응한다.
서열식별번호: 158은 6C8 인간화 GITR 효능제 모노클로날 항체의 중쇄 CDR1 영역의 아미노산 서열이고, 이는 미국 특허 번호 7,812,135에서의 서열식별번호: 6에 상응한다.
서열식별번호: 159는 6C8 인간화 GITR 효능제 모노클로날 항체의 중쇄 CDR2 영역의 아미노산 서열이고, 이는 미국 특허 번호 7,812,135에서의 서열식별번호: 7에 상응한다.
서열식별번호: 160은 6C8 인간화 GITR 효능제 모노클로날 항체의 중쇄 CDR3 영역의 아미노산 서열이고, 이는 미국 특허 번호 7,812,135에서의 서열식별번호: 8에 상응한다.
서열식별번호: 161은 CDR2에 N (아스파라긴)을 갖는, 6C8 키메라 GITR 효능제 모노클로날 항체의 중쇄 변이체 HuN6C8 (글리코실화)의 아미노산 서열이고, 이는 미국 특허 번호 7,812,135에서의 서열식별번호: 23에 상응한다.
서열식별번호: 162는 CDR2에 Q (글루타민)을 갖는, 6C8 키메라 GITR 효능제 모노클로날 항체의 중쇄 변이체 HuQ6C8 (비-글리코실화)의 아미노산 서열이고, 이는 미국 특허 번호 7,812,135에서의 서열식별번호: 24에 상응한다.
서열식별번호: 163은 6C8 키메라 GITR 효능제 모노클로날 항체의 경쇄의 아미노산 서열이고, 이는 미국 특허 번호 7,812,135에서의 서열식별번호: 22에 상응한다.
서열식별번호: 164는 미국 특허 번호 8,709,424로부터의 GITR 효능제 36E5 중쇄 가변 영역의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 165는 미국 특허 번호 8,709,424로부터의 GITR 효능제 36E5 경쇄 가변 영역의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 166은 미국 특허 번호 8,709,424로부터의 GITR 효능제 3D6 중쇄 가변 영역의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 167은 미국 특허 번호 8,709,424로부터의 GITR 효능제 3D6 경쇄 가변 영역의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 168은 미국 특허 번호 8,709,424로부터의 GITR 효능제 61G6 중쇄 가변 영역의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 169는 미국 특허 번호 8,709,424로부터의 GITR 효능제 61G6 경쇄 가변 영역의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 170은 미국 특허 번호 8,709,424로부터의 GITR 효능제 6H6 중쇄 가변 영역의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 171은 미국 특허 번호 8,709,424로부터의 GITR 효능제 6H6 경쇄 가변 영역의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 172는 미국 특허 번호 8,709,424로부터의 GITR 효능제 61F6 중쇄 가변 영역의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 173은 미국 특허 번호 8,709,424로부터의 GITR 효능제 61F6 경쇄 가변 영역의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 174는 미국 특허 번호 8,709,424로부터의 GITR 효능제 1D8 중쇄 가변 영역의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 175는 미국 특허 번호 8,709,424로부터의 GITR 효능제 1D8 경쇄 가변 영역의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 176은 미국 특허 번호 8,709,424로부터의 GITR 효능제 17F10 중쇄 가변 영역의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 177은 미국 특허 번호 8,709,424로부터의 GITR 효능제 17F10 경쇄 가변 영역의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 178은 미국 특허 번호 8,709,424로부터의 GITR 효능제 35D8 중쇄 가변 영역의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 179는 미국 특허 번호 8,709,424로부터의 GITR 효능제 35D8 경쇄 가변 영역의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 180은 미국 특허 번호 8,709,424로부터의 GITR 효능제 49A1 중쇄 가변 영역의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 181은 미국 특허 번호 8,709,424로부터의 GITR 효능제 49A1 경쇄 가변 영역의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 182는 미국 특허 번호 8,709,424로부터의 GITR 효능제 9E5 중쇄 가변 영역의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 183은 미국 특허 번호 8,709,424로부터의 GITR 효능제 9E5 경쇄 가변 영역의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 184는 미국 특허 번호 8,709,424로부터의 GITR 효능제 31H6 중쇄 가변 영역의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 185는 미국 특허 번호 8,709,424로부터의 GITR 효능제 31H6 경쇄 가변 영역의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 186은 미국 특허 번호 8,709,424로부터의 인간화 GITR 효능제 36E5 중쇄 가변 영역의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 187은 미국 특허 번호 8,709,424로부터의 인간화 GITR 효능제 36E5 경쇄 가변 영역의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 188은 미국 특허 번호 8,709,424로부터의 인간화 GITR 효능제 3D6 중쇄 가변 영역의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 189는 미국 특허 번호 8,709,424로부터의 인간화 GITR 효능제 3D6 경쇄 가변 영역의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 190은 미국 특허 번호 8,709,424로부터의 인간화 GITR 효능제 61G6 중쇄 가변 영역의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 191은 미국 특허 번호 8,709,424로부터의 인간화 GITR 효능제 61G6 경쇄 가변 영역의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 192는 미국 특허 번호 8,709,424로부터의 인간화 GITR 효능제 6H6 중쇄 가변 영역의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 193은 미국 특허 번호 8,709,424로부터의 인간화 GITR 효능제 6H6 경쇄 가변 영역의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 194는 미국 특허 번호 8,709,424로부터의 인간화 GITR 효능제 61F6 중쇄 가변 영역의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 195는 미국 특허 번호 8,709,424로부터의 인간화 GITR 효능제 61F6 경쇄 가변 영역의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 196은 미국 특허 번호 8,709,424로부터의 인간화 GITR 효능제 1D8 중쇄 가변 영역의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 197은 미국 특허 번호 8,709,424로부터의 인간화 GITR 효능제 1D8 경쇄 가변 영역의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 198은 미국 특허 번호 8,709,424로부터의 인간화 GITR 효능제 17F10 중쇄 가변 영역의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 199는 미국 특허 번호 8,709,424로부터의 인간화 GITR 효능제 17F10 경쇄 가변 영역의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 200은 미국 특허 번호 8,709,424로부터의 인간화 GITR 효능제 35D8 중쇄 가변 영역의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 201은 미국 특허 번호 8,709,424로부터의 인간화 GITR 효능제 35D8 경쇄 가변 영역의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 202는 미국 특허 번호 8,709,424로부터의 인간화 GITR 효능제 49A1 중쇄 가변 영역의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 203은 미국 특허 번호 8,709,424로부터의 인간화 GITR 효능제 49A1 경쇄 가변 영역의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 204는 미국 특허 번호 8,709,424로부터의 인간화 GITR 효능제 9E5 중쇄 가변 영역의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 205는 미국 특허 번호 8,709,424로부터의 인간화 GITR 효능제 9E5 경쇄 가변 영역의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 206은 미국 특허 번호 8,709,424로부터의 인간화 GITR 효능제 31H6 중쇄 가변 영역의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 207은 미국 특허 번호 8,709,424로부터의 인간화 GITR 효능제 31H6 경쇄 가변 영역의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 208은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2013/0108641 A1로부터의 GITR 효능제 2155 가변 중쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 209는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2013/0108641 A1로부터의 GITR 효능제 2155 가변 경쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 210은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2013/0108641 A1로부터의 GITR 효능제 2155 인간화 (HC1) 중쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 211은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2013/0108641 A1로부터의 GITR 효능제 2155 인간화 (HC2) 중쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 212는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2013/0108641 A1로부터의 GITR 효능제 2155 인간화 (HC3a) 중쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 213은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2013/0108641 A1로부터의 인간화 (HC3b) GITR 효능제 중쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 214는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2013/0108641 A1로부터의 인간화 (HC4) GITR 효능제 중쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 215는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2013/0108641 A1로부터의 2155 인간화 (LC1) GITR 효능제 경쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 216은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2013/0108641 A1로부터의 2155 인간화 (LC2a) GITR 효능제 경쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 217은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2013/0108641 A1로부터의 2155 인간화 (LC2b) GITR 효능제 경쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 218은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2013/0108641 A1로부터의 2155 인간화 (LC3) GITR 효능제 경쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 219는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2013/0108641 A1로부터의 GITR 효능제 698 가변 중쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 220은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2013/0108641 A1로부터의 GITR 효능제 698 가변 경쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 221은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2013/0108641 A1로부터의 GITR 효능제 706 가변 중쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 222는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2013/0108641 A1로부터의 GITR 효능제 706 가변 경쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 223은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2013/0108641 A1로부터의 GITR 효능제 827 가변 중쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 224는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2013/0108641 A1로부터의 GITR 효능제 827 가변 경쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 225는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2013/0108641 A1로부터의 GITR 효능제 1718 가변 중쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 226은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2013/0108641 A1로부터의 GITR 효능제 1718 가변 경쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 227은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2013/0108641 A1로부터의 GITR 효능제 2155 중쇄 CDR3의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 228은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2013/0108641 A1로부터의 GITR 효능제 2155 중쇄 CDR2의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 229는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2013/0108641 A1로부터의 GITR 효능제 2155 중쇄 CDR1의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 230은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2013/0108641 A1로부터의 GITR 효능제 2155 경쇄 CDR3의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 231은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2013/0108641 A1로부터의 GITR 효능제 2155 경쇄 CDR2의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 232는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2013/0108641 A1로부터의 GITR 효능제 2155 경쇄 CDR1의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 233은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2013/0108641 A1로부터의 GITR 효능제 698 및 706 중쇄 CDR3의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 234는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2013/0108641 A1로부터의 GITR 효능제 698 및 706 중쇄 CDR2의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 235는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2013/0108641 A1로부터의 GITR 효능제 698 및 706 중쇄 CDR1의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 236은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2013/0108641 A1로부터의 GITR 효능제 698 경쇄 CDR3의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 237은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2013/0108641 A1로부터의 GITR 효능제 698, 706, 827 및 1649 경쇄 CDR2의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 238은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2013/0108641 A1로부터의 GITR 효능제 698, 706, 827 및 1649 경쇄 CDR1의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 239는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2013/0108641 A1로부터의 GITR 효능제 706, 827 및 1649 경쇄 CDR3의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 240은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2013/0108641 A1로부터의 GITR 효능제 827 및 1649 중쇄 CDR3의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 241은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2013/0108641 A1로부터의 GITR 효능제 827 중쇄 CDR2의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 242는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2013/0108641 A1로부터의 GITR 효능제 1649 중쇄 CDR2의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 243은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2013/0108641 A1로부터의 GITR 효능제 1718 중쇄 CDR3의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 244는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2013/0108641 A1로부터의 GITR 효능제 1718 중쇄 CDR2의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 245는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2013/0108641 A1로부터의 GITR 효능제 1718 중쇄 CDR1의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 246은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2013/0108641 A1로부터의 GITR 효능제 1718 경쇄 CDR3의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 247은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2013/0108641 A1로부터의 GITR 효능제 1718 경쇄 CDR2의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 248은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2013/0108641 A1로부터의 GITR 효능제 1718 경쇄 CDR1의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 249는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2013/0108641 A1로부터의 GITR 효능제 827 및 1649 중쇄 CDR1의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 250은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 1D7 중쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 251은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 1D7 경쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 252는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 1D7 가변 중쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 253은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 1D7 가변 경쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 254는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 1D7 중쇄 CDR1의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 255는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 1D7 중쇄 CDR2의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 256은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 1D7 중쇄 CDR3의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 257은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 1D7 경쇄 CDR1의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 258은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 1D7 경쇄 CDR2의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 259는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 1D7 경쇄 CDR3의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 260은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 33C9 중쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 261은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 33C9 경쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 262는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 33C9 가변 중쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 263은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 33C9 가변 경쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 264는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 33C9 중쇄 CDR1의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 265는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 33C9 중쇄 CDR2의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 266은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 33C9 중쇄 CDR3의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 267은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 33C9 경쇄 CDR1의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 268은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 33C9 경쇄 CDR2의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 269는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 33C9 경쇄 CDR3의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 270은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 33F6 중쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 271은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 33F6 경쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 272는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 33F6 가변 중쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 273은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 33F6 가변 경쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 274는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 33F6 중쇄 CDR1의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 275는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 33F6 중쇄 CDR2의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 276은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 33F6 중쇄 CDR3의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 277은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 33F6 경쇄 CDR1의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 278은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 33F6 경쇄 CDR2의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 279는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 33F6 경쇄 CDR3의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 280은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 34G4 중쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 281은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 34G4 경쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 282는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 34G4 가변 중쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 283은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 34G4 가변 경쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 284는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 34G4 중쇄 CDR1의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 285는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 34G4 중쇄 CDR2의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 286은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 34G4 중쇄 CDR3의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 287은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 34G4 경쇄 CDR1의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 288은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 34G4 경쇄 CDR2의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 289는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 34G4 경쇄 CDR3의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 290은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 35B10 중쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 291은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 35B10 경쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 292는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 35B10 가변 중쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 293은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 35B10 가변 경쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 294는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 35B10 중쇄 CDR1의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 295는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 35B10 중쇄 CDR2의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 296은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 35B10 중쇄 CDR3의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 297은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 35B10 경쇄 CDR1의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 298은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 35B10 경쇄 CDR2의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 299는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 35B10 경쇄 CDR3의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 300은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 41E11 중쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 301은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 41E11 경쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 302는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 41E11 가변 중쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 303은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 41E11 가변 경쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 304는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 41E11 중쇄 CDR1의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 305는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 41E11 중쇄 CDR2의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 306은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 41E11 중쇄 CDR3의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 307은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 41E11 경쇄 CDR1의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 308은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 41E11 경쇄 CDR2의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 309는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 41E11 경쇄 CDR3의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 310은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 41G5 중쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 311은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 41G5 경쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 312는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 41G5 가변 중쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 313은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 41G5 가변 경쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 314는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 41G5 중쇄 CDR1의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 315는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 41G5 중쇄 CDR2의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 316은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 41G5 중쇄 CDR3의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 317은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 41G5 경쇄 CDR1의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 318은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 41G5 경쇄 CDR2의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 319는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 41G5 경쇄 CDR3의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 320은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 42A11 중쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 321은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 42A11 경쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 322는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 42A11 가변 중쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 323은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 42A11 가변 경쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 324는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 42A11 중쇄 CDR1의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 325는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 42A11 중쇄 CDR2의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 326은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 42A11 중쇄 CDR3의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 327은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 42A11 경쇄 CDR1의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 328은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 42A11 경쇄 CDR2의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 329는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 42A11 경쇄 CDR3의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 330은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 44C1 중쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 331은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 44C1 경쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 332는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 44C1 가변 중쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 333은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 44C1 가변 경쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 334는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 44C1 중쇄 CDR1의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 335는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 44C1 중쇄 CDR2의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 336은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 44C1 중쇄 CDR3의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 337은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 44C1 경쇄 CDR1의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 338은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 44C1 경쇄 CDR2의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 339는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 44C1 경쇄 CDR3의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 340은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 45A8 중쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 341은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 45A8 경쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 342는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 45A8 가변 중쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 343은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 45A8 가변 경쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 344는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 45A8 중쇄 CDR1의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 345는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 45A8 중쇄 CDR2의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 346은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 45A8 중쇄 CDR3의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 347은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 45A8 경쇄 CDR1의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 348은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 45A8 경쇄 CDR2의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 349는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 45A8 경쇄 CDR3의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 350은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 46E11 중쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 351은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 46E11 경쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 352는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 46E11 가변 중쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 353은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 46E11 가변 경쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 354는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 46E11 중쇄 CDR1의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 355는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 46E11 중쇄 CDR2의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 356은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 46E11 중쇄 CDR3의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 357은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 46E11 경쇄 CDR1의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 358은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 46E11 경쇄 CDR2의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 359는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 46E11 경쇄 CDR3의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 360은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 48H12 중쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 361은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 48H12 경쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 362는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 48H12 가변 중쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 363은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 48H12 가변 경쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 364는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 48H12 중쇄 CDR1의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 365는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 48H12 중쇄 CDR2의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 366은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 48H12 중쇄 CDR3의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 367은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 48H12 경쇄 CDR1의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 368은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 48H12 경쇄 CDR2의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 369는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 48H12 경쇄 CDR3의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 370은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 48H7 중쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 371은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 48H7 경쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 372는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 48H7 가변 중쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 373은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 48H7 가변 경쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 374는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 48H7 중쇄 CDR1의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 375는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 48H7 중쇄 CDR2의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 376은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 48H7 중쇄 CDR3의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 377은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 48H7 경쇄 CDR1의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 378은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 48H7 경쇄 CDR2의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 379는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 48H7 경쇄 CDR3의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 380은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 49D9 중쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 381은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 49D9 경쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 382는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 49D9 가변 중쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 383은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 49D9 가변 경쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 384는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 49D9 중쇄 CDR1의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 385는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 49D9 중쇄 CDR2의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 386은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 49D9 중쇄 CDR3의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 387은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 49D9 경쇄 CDR1의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 388은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 49D9 경쇄 CDR2의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 389는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 49D9 경쇄 CDR3의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 390은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 49E2 중쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 391은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 49E2 경쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 392는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 49E2 가변 중쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 393은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 49E2 가변 경쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 394는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 49E2 중쇄 CDR1의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 395는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 49E2 중쇄 CDR2의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 396은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 49E2 중쇄 CDR3의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 397은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 49E2 경쇄 CDR1의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 398은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 49E2 경쇄 CDR2의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 399는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 49E2 경쇄 CDR3의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 400은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 48A9 중쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 401은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 48A9 경쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 402는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 48A9 가변 중쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 403은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 48A9 가변 경쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 404는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 48A9 중쇄 CDR1의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 405는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 48A9 중쇄 CDR2의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 406은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 48A9 중쇄 CDR3의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 407은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 48A9 경쇄 CDR1의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 408은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 48A9 경쇄 CDR2의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 409는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 48A9 경쇄 CDR3의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 410은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 5H7 중쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 411은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 5H7 경쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 412는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 5H7 가변 중쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 413은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 5H7 가변 경쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 414는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 5H7 중쇄 CDR1의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 415는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 5H7 중쇄 CDR2의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 416은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 5H7 중쇄 CDR3의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 417은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 5H7 경쇄 CDR1의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 418은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 5H7 경쇄 CDR2의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 419는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 5H7 경쇄 CDR3의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 420은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 7A10 중쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 421은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 7A10 경쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 422는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 7A10 가변 중쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 423은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 7A10 가변 경쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 424는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 7A10 중쇄 CDR1의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 425는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 7A10 중쇄 CDR2의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 426은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 7A10 중쇄 CDR3의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 427은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 7A10 경쇄 CDR1의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 428은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 7A10 경쇄 CDR2의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 429는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 7A10 경쇄 CDR3의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 430은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 9H6 중쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 431은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 9H6 경쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 432는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 9H6 가변 중쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 433은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 9H6 가변 경쇄의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 434는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 9H6 중쇄 CDR1의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 435는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 9H6 중쇄 CDR2의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 436은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 9H6 중쇄 CDR3의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 437은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 9H6 경쇄 CDR1의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 438은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 9H6 경쇄 CDR2의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 439는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1로부터의 GITR 효능제 9H6 경쇄 CDR3의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 440은 GITR 리간드 (GITRL) 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 441은 GITRL 폴리펩티드의 가용성 부분이다.
서열식별번호: 442는 인간 HVEM (CD270)의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 443은 HVEM 리간드 (LIGHT) 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 444는 LIGHT 폴리펩티드의 가용성 부분이다.
서열식별번호: 445는 LIGHT 폴리펩티드의 대안적 가용성 부분이다.
서열식별번호: 446은 LIGHT 폴리펩티드의 대안적 가용성 부분이다.
서열식별번호: 447은 인간 CD95 이소형 1의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 448은 인간 CD95 이소형 2의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 449는 인간 CD95 이소형 3의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 450은 인간 CD95 이소형 4의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 451은 CD95 효능제 모노클로날 항체 E09에 대한 중쇄 가변 영역 (VH)이다.
서열식별번호: 452는 CD95 효능제 모노클로날 항체 E09에 대한 경쇄 가변 영역 (VL)이다.
서열식별번호: 453은 CD95 효능제 모노클로날 항체 E09에 대한 중쇄 CDR1이다.
서열식별번호: 454는 CD95 효능제 모노클로날 항체 E09에 대한 중쇄 CDR2이다.
서열식별번호: 455는 CD95 효능제 모노클로날 항체 E09에 대한 중쇄 CDR3이다.
서열식별번호: 456은 CD95 효능제 모노클로날 항체 E09에 대한 경쇄 CDR1이다.
서열식별번호: 457은 CD95 효능제 모노클로날 항체 E09에 대한 경쇄 CDR2이다.
서열식별번호: 458은 CD95 효능제 모노클로날 항체 E09에 대한 경쇄 CDR3이다.
서열식별번호: 459는 CD95 리간드 (CD95L) 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 460은 CD95L 폴리펩티드의 가용성 부분이다.
서열식별번호: 461은 CD95L 폴리펩티드의 대안적 가용성 부분이다.
서열식별번호: 462는 CD95L 폴리펩티드의 대안적 가용성 부분이다.
서열식별번호: 463은 PD-1 억제제 니볼루맙의 중쇄 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 464는 PD-1 억제제 니볼루맙의 경쇄 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 465는 PD-1 억제제 니볼루맙의 중쇄 가변 영역 (VH) 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 466은 PD-1 억제제 니볼루맙의 경쇄 가변 영역 (VL) 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 467은 PD-1 억제제 니볼루맙의 중쇄 CDR1 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 468은 PD-1 억제제 니볼루맙의 중쇄 CDR2 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 469는 PD-1 억제제 니볼루맙의 중쇄 CDR3 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 470은 PD-1 억제제 니볼루맙의 경쇄 CDR1 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 471은 PD-1 억제제 니볼루맙의 경쇄 CDR2 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 472는 PD-1 억제제 니볼루맙의 경쇄 CDR3 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 473은 PD-1 억제제 펨브롤리주맙의 중쇄 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 474는 PD-1 억제제 펨브롤리주맙의 경쇄 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 475는 PD-1 억제제 펨브롤리주맙의 중쇄 가변 영역 (VH) 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 476은 PD-1 억제제 펨브롤리주맙의 경쇄 가변 영역 (VL) 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 477은 PD-1 억제제 펨브롤리주맙의 중쇄 CDR1 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 478은 PD-1 억제제 펨브롤리주맙의 중쇄 CDR2 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 479는 PD-1 억제제 펨브롤리주맙의 중쇄 CDR3 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 480은 PD-1 억제제 펨브롤리주맙의 경쇄 CDR1 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 481은 PD-1 억제제 펨브롤리주맙의 경쇄 CDR2 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 482는 PD-1 억제제 펨브롤리주맙의 경쇄 CDR3 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 483은 PD-L1 억제제 두르발루맙의 중쇄 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 484는 PD-L1 억제제 두르발루맙의 경쇄 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 485는 PD-L1 억제제 두르발루맙의 중쇄 가변 영역 (VH) 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 486은 PD-L1 억제제 두르발루맙의 경쇄 가변 영역 (VL) 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 487은 PD-L1 억제제 두르발루맙의 중쇄 CDR1 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 488은 PD-L1 억제제 두르발루맙의 중쇄 CDR2 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 489는 PD-L1 억제제 두르발루맙의 중쇄 CDR3 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 490은 PD-L1 억제제 두르발루맙의 경쇄 CDR1 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 491은 PD-L1 억제제 두르발루맙의 경쇄 CDR2 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 492는 PD-L1 억제제 두르발루맙의 경쇄 CDR3 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 493은 PD-L1 억제제 아벨루맙의 중쇄 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 494는 PD-L1 억제제 아벨루맙의 경쇄 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 495는 PD-L1 억제제 아벨루맙의 중쇄 가변 영역 (VH) 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 496은 PD-L1 억제제 아벨루맙의 경쇄 가변 영역 (VL) 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 497은 PD-L1 억제제 아벨루맙의 중쇄 CDR1 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 498은 PD-L1 억제제 아벨루맙의 중쇄 CDR2 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 499는 PD-L1 억제제 아벨루맙의 중쇄 CDR3 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 500은 PD-L1 억제제 아벨루맙의 경쇄 CDR1 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 501은 PD-L1 억제제 아벨루맙의 경쇄 CDR2 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 502는 PD-L1 억제제 아벨루맙의 경쇄 CDR3 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 503은 PD-L1 억제제 아테졸리주맙의 중쇄 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 504는 PD-L1 억제제 아테졸리주맙의 경쇄 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 505는 PD-L1 억제제 아테졸리주맙의 중쇄 가변 영역 (VH) 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 506은 PD-L1 억제제 아테졸리주맙의 경쇄 가변 영역 (VL) 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 507은 PD-L1 억제제 아테졸리주맙의 중쇄 CDR1 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 508은 PD-L1 억제제 아테졸리주맙의 중쇄 CDR2 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 509는 PD-L1 억제제 아테졸리주맙의 중쇄 CDR3 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 510은 PD-L1 억제제 아테졸리주맙의 경쇄 CDR1 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 511은 PD-L1 억제제 아테졸리주맙의 경쇄 CDR2 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 512는 PD-L1 억제제 아테졸리주맙의 경쇄 CDR3 아미노산 서열이다.
달리 정의되지 않는 한, 본원에 사용된 모든 기술 과학 용어는 본 발명이 속하는 관련 기술분야의 통상의 기술자에 의해 통상적으로 이해되는 바와 동일한 의미를 갖는다. 본원에 언급된 모든 특허, 및 공개는 그 전문이 참조로 포함된다.
정의
용어 "공-투여", "공-투여하는", "와 조합되어 투여되는", "와 조합하여 투여하는", "동시" 및 "공동"은 대상체에 두 활성 제약 성분 및/또는 그의 대사물이 동시에 존재하도록 대상체에 대한 2종 이상의 활성 제약 성분 (본 발명의 바람직한 실시양태에서, 예를 들어 적어도 1종의 TNFRSF 효능제 및 복수의 TIL)의 투여를 포괄한다. 공-투여는 개별 조성물로의 동시 투여, 개별 조성물로의 상이한 시간에서의 투여, 또는 2종 이상의 활성 제약 성분이 존재하는 조성물로의 투여를 포함한다. 개별 조성물로의 동시 투여 및 2종의 작용제가 존재하는 조성물로의 투여가 바람직하다.
용어 "급속 확장"은 1주의 기간에 걸쳐 적어도 약 3배 (또는 4-, 5-, 6-, 7-, 8-, 또는 9배), 보다 바람직하게는 1주의 기간에 걸쳐 적어도 약 10배 (또는 20-, 30-, 40-, 50-, 60-, 70-, 80-, 또는 90배), 또는 보다 바람직하게는 1주의 기간에 걸쳐 적어도 약 100배의 항원-특이적 TIL의 수의 증가를 의미한다. 다수의 급속 확장 프로토콜이 본원에 기재되어 있다.
본원에서의 "종양 침윤 림프구" 또는 "TIL"은 원래 대상체의 혈류를 떠나 종양으로 이동한 백혈구로서 수득되는 세포의 집단을 의미한다. TIL은 CD8+ 세포독성 T 세포 (림프구), Th1 및 Th17 CD4+ T 세포, 자연 킬러 세포, 수지상 세포 및 M1 대식세포를 포함하나 이에 제한되지는 않는다. TIL은 1차 및 2차 TIL 둘 다를 포함한다. "1차 TIL"은 본원에 약술된 바와 같은 환자 조직 샘플로부터 수득된 것 (때때로 "새로 수거된" 것으로 지칭됨)이고, "2차 TIL"은 벌크 TIL 및 확장된 TIL ("REP TIL" 또는 "REP-후 TIL")을 포함하나 이에 제한되지는 않는, 본원에 논의된 바와 같이 확장 또는 증식된 임의의 TIL 세포 집단이다.
본원에서의 "세포의 집단" (TIL 포함)은 공통 특성을 공유하는 다수의 세포를 의미한다. 일반적으로, 집단은 수가 1 X 106 내지 1 X 1010개의 범위이고, 상이한 TIL 집단은 상이한 수를 포함한다. 예를 들어, IL-2의 존재 하의 1차 TIL의 초기 성장은 대략 1 x 108개 세포의 벌크 TIL의 집단을 생성한다. REP 확장은 일반적으로 주입을 위해 1.5 x 109 내지 1.5 x 1010개 세포의 집단을 제공하도록 수행된다.
용어 "중심 기억 T 세포"는 인간에서 CD45R0+이고 CCR7 (CCR7hi) 및 CD62L (CD62hi)을 구성적으로 발현하는 T 세포의 하위세트를 지칭한다. 중심 기억 T 세포의 표면 표현형은 또한 TCR, CD3, CD127 (IL-7R) 및 IL-15R을 포함한다. 중심 기억 T 세포에 대한 전사 인자는 BCL-6, BCL-6B, MBD2 및 BMI1을 포함한다. 중심 기억 T 세포는 주로 TCR 촉발 후에 이펙터 분자로서 IL-2 및 CD40L을 분비한다. 중심 기억 T 세포는 혈액에서 CD4 구획에 우세하며, 인간에서 림프절 및 편도에 비례적으로 풍부하다.
용어 "항-CD3 항체"는 성숙 T 세포의 T 세포 항원 수용체에서 CD3 수용체에 대해 지시되는 항체 또는 그의 변이체, 예를 들어 모노클로날 항체를 지칭하며, 인간, 인간화, 키메라 또는 뮤린 항체를 포함한다. 항-CD3 항체는 무로모납으로도 또한 공지된 OKT-3을 포함한다. 항-CD3 항체는 또한 T3 및 CD3ε으로도 또한 공지된 UHCT1 클론을 포함한다. 다른 항-CD3 항체는, 예를 들어 오텔릭시주맙, 테플리주맙 및 비실리주맙을 포함한다.
용어 "OKT-3" (또한 본원에서 "OKT3"으로도 지칭됨)은 성숙 T 세포의 T 세포 항원 수용체에서 CD3 수용체에 대해 지시되는, 인간, 인간화, 키메라 또는 뮤린 항체를 포함한 모노클로날 항체 또는 그의 바이오시밀러 또는 변이체를 지칭하고, 상업적으로 입수가능한 형태, 예컨대 OKT-3 (30 ng/mL, MACS GMP CD3 퓨어, 밀테니 바이오테크, 인크.(Miltenyi Biotech, Inc.), 미국 캘리포니아주 샌디에고) 및 무로모납 또는 그의 변이체, 보존적 아미노산 치환, 당형태 또는 바이오시밀러를 포함한다. 무로모납의 중쇄 및 경쇄의 아미노산 서열은 표 1에 제공된다 (서열식별번호: 1 및 서열식별번호: 2).
표 1. 무로모납의 아미노산 서열.
용어 "IL-2" (또한 본원에서 "IL2"로도 지칭됨)는 인터류킨-2로 공지된 T 세포 성장 인자를 지칭하고, 인간 및 포유동물 형태, 그의 보존적 아미노산 치환, 당형태, 바이오시밀러 및 변이체를 포함한 IL-2의 모든 형태를 포함한다. IL-2는, 예를 들어 문헌 [Nelson, J. Immunol. 2004, 172, 3983-88 및 Malek, Annu. Rev. Immunol. 2008, 26, 453-79] (이들의 개시내용은 본원에 참조로 포함됨)에 기재되어 있다. 본 발명에서 사용하기에 적합한 재조합 인간 IL-2의 아미노산 서열은 표 2에 제공된다 (서열식별번호: 3). 예를 들어, 용어 IL-2는 IL-2의 인간, 재조합 형태, 예컨대 알데스류킨 (프로류킨(PROLEUKIN), 단일 사용 바이알당 2천2백만 IU로 다수의 공급업체로부터 상업적으로 입수가능함), 뿐만 아니라 미국 뉴햄프셔주 포츠머스 소재 셀게닉스, 인크.(CellGenix, Inc.) (셀그로(CELLGRO) GMP) 또는 미국 뉴저지주 이스트 브런즈윅 소재 프로스펙-타니 테크노진 리미티드(ProSpec-Tany TechnoGene Ltd.) (카탈로그 번호 CYT-209-b)에 의해 상업적으로 공급되는 재조합 IL-2의 형태 및 다른 판매업체로부터의 다른 상업적 등가물을 포괄한다. 알데스류킨 (데스-알라닐-1, 세린-125 인간 IL-2)은 대략 15 kDa의 분자량을 갖는 IL-2의 비글리코실화 인간 재조합 형태이다. 본 발명에서 사용하기에 적합한 알데스류킨의 아미노산 서열은 표 2에 제공된다 (서열식별번호: 4). 용어 IL-2는 또한 미국 캘리포니아주 사우스 샌프란시스코 소재 넥타 테라퓨틱스(Nektar Therapeutics)로부터 입수가능한 PEG화 IL2 전구약물 NKTR-214를 포함한, 본원에 기재된 바와 같은 IL-2의 PEG화 형태를 포괄한다. NKTR-214 및 본 발명에서 사용하에 적합한 PEG화 IL-2는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2014/0328791 A1 및 국제 특허 출원 공개 번호 WO 2012/065086 A1 (이들의 개시내용은 본원에 참조로 포함됨)에 기재되어 있다. 본 발명에서 사용하기에 적합한 접합된 IL-2의 대안적 형태는 미국 특허 번호 4,766,106, 5,206,344, 5,089,261 및 4902,502 (이들의 개시내용은 본원에 참조로 포함됨)에 기재되어 있다. 본 발명에서 사용하기에 적합한 IL-2의 제제는 미국 특허 번호 6,706,289 (이의 개시내용은 본원에 참조로 포함됨)에 기재되어 있다.
표 2. 인터류킨의 아미노산 서열.
용어 "IL-4" (또한 본원에서 "IL4"로도 지칭됨)는 Th2 T 세포에 의해 및 호산구, 호염기구 및 비만 세포에 의해 생산되는, 인터류킨 4로 공지된 시토카인을 지칭한다. IL-4는 나이브 헬퍼 T 세포 (Th0 세포)의 Th2 T 세포로의 분화를 조절한다. 문헌 [Steinke and Borish, Respir. Res. 2001, 2, 66-70]. IL-4에 의한 활성화시, Th2 T 세포는 후속적으로 양성 피드백 루프에서 추가의 IL-4를 생산한다. IL-4는 또한 B 세포 증식 및 부류 II MHC 발현을 자극시키고, IgE로의 부류 전환 및 B 세포로부터의 IgG1 발현을 유도한다. 본 발명에서 사용하기에 적합한 재조합 인간 IL-4는 미국 뉴저지주 이스트 브런즈윅 소재 프로스펙-타니 테크노진 리미티드 (카탈로그 번호 CYT-211) 및 미국 매사추세츠주 월섬 소재 써모피셔 사이언티픽, 인크.(ThermoFisher Scientific, Inc.) (인간 IL-15 재조합 단백질, 카탈로그 번호 깁코(Gibco) CTP0043)를 포함한 다수의 공급업체로부터 상업적으로 입수가능하다. 본 발명에서 사용하기에 적합한 재조합 인간 IL-4의 아미노산 서열은 표 2에 제공된다 (서열식별번호: 5).
용어 "IL-7" (또한 본원에서 "IL7"로도 지칭됨)은 기질 및 상피 세포로부터, 뿐만 아니라 수지상 세포로부터 수득될 수 있는, 인터류킨 7로 공지된 글리코실화 조직-유래 시토카인을 지칭한다. 문헌 [Fry and Mackall, Blood 2002, 99, 3892-904]. IL-7은 T 세포의 발생을 자극시킬 수 있다. IL-7은 IIL-7 수용체 알파 및 공통 감마 쇄 수용체로 이루어진 이종이량체인 IL-7 수용체에 결합하며, 이는 일련의 신호에서 흉선 내에서의 T 세포 발생 및 말초 내에서의 생존에 중요하다. 본 발명에서 사용하기에 적합한 재조합 인간 IL-7은 미국 뉴저지주 이스트 브런즈윅 소재 프로스펙-타니 테크노진 리미티드 (카탈로그 번호 CYT-254) 및 미국 매사추세츠주 월섬 소재 써모피셔 사이언티픽, 인크. (인간 IL-7 재조합 단백질, 카탈로그 번호 깁코 PHC0071)를 포함한 다수의 공급업체로부터 상업적으로 입수가능하다. 본 발명에서 사용하기에 적합한 재조합 인간 IL-7의 아미노산 서열은 표 2에 제공된다 (서열식별번호: 6).
용어 "IL-15" (또한 본원에서 "IL15"로도 지칭됨)는 인터류킨-15로 공지된 T 세포 성장 인자를 지칭하고, 인간 및 포유동물 형태, 그의 보존적 아미노산 치환, 당형태, 바이오시밀러 및 변이체를 포함한 IL-15의 모든 형태를 포함한다. IL-15는, 예를 들어 문헌 [Fehniger and Caligiuri, Blood 2001, 97, 14-32] (이의 개시내용은 본원에 참조로 포함됨)에 기재되어 있다. IL-15는 IL-2와 β 및 γ 신호전달 수용체 서브유닛을 공유한다. 재조합 인간 IL-15는 12.8 kDa의 분자 질량을 갖는, 114개의 아미노산 (및 N-말단 메티오닌)을 함유하는 단일 비-글리코실화 폴리펩티드 쇄이다. 재조합 인간 IL-15는 미국 뉴저지주 이스트 브런즈윅 소재 프로스펙-타니 테크노진 리미티드 (카탈로그 번호 CYT-230-b) 및 미국 매사추세츠주 월섬 소재 써모피셔 사이언티픽, 인크. (인간 IL-15 재조합 단백질, 카탈로그 번호 34-8159-82)를 포함한 다수의 공급업체로부터 상업적으로 입수가능하다. 본 발명에서 사용하기에 적합한 재조합 인간 IL-15의 아미노산 서열은 표 2에 제공된다 (서열식별번호: 7).
용어 "IL-21" (또한 본원에서 "IL21"로도 지칭됨)은 인터류킨-21로 공지된 다면발현성 시토카인 단백질을 지칭하고, 인간 및 포유동물 형태, 그의 보존적 아미노산 치환, 당형태, 바이오시밀러 및 변이체를 포함한 IL-21의 모든 형태를 포함한다. IL-21은, 예를 들어 문헌 [Spolski and Leonard, Nat. Rev. Drug. Disc. 2014, 13, 379-95] (이의 개시내용은 본원에 참조로 포함됨)에 기재되어 있다. IL-21은 주로 자연 킬러 T 세포 및 활성화된 인간 CD4+ T 세포에 의해 생산된다. 재조합 인간 IL-21은 15.4 kDa의 분자 질량을 갖는, 132개의 아미노산을 함유하는 단일 비-글리코실화 폴리펩티드 쇄이다. 재조합 인간 IL-21은 미국 뉴저지주 이스트 브런즈윅 소재 프로스펙-타니 테크노진 리미티드 (카탈로그 번호 CYT-408-b) 및 미국 매사추세츠주 월섬 소재 써모피셔 사이언티픽, 인크. (인간 IL-21 재조합 단백질, 카탈로그 번호 14-8219-80)를 포함한 다수의 공급업체로부터 상업적으로 입수가능하다. 본 발명에서 사용하기에 적합한 재조합 인간 IL-21의 아미노산 서열은 표 2에 제공된다 (서열식별번호: 8).
용어 "생체내"는 포유동물 대상체의 신체에서 일어나는 사건을 지칭한다.
용어 "생체외"는 인공 환경에서 포유동물 대상체의 신체 밖에서 일어나는 사건을 지칭한다.
용어 "시험관내"는 시험 시스템에서 일어나는 사건을 지칭한다. 시험관내 검정은 살아있는 또는 사멸한 세포가 사용될 수 있는 세포-기반 검정을 포괄하고, 또한 어떠한 무손상 세포도 사용되지 않는 무세포 검정을 포괄할 수 있다.
용어 "유효량" 또는 "치료 유효량"은 질환 치료를 포함하나 이제 제한되지는 않는 의도된 적용을 실시하기에 충분한 본원에 기재된 바와 같은 화합물 또는 화합물의 조합물의 양을 지칭한다. 치료 유효량은 의도된 적용 (시험관내 또는 생체내), 또는 치료될 대상체 및 질환 상태 (예를 들어, 대상체의 체중, 연령 및 성별), 질환 상태의 중증도, 또는 투여 방식에 따라 달라질 수 있다. 상기 용어는 또한 표적 세포에서의 특정한 반응 (예를 들어, 혈소판 부착 및/또는 세포 이동의 감소)을 유도할 용량에 적용된다. 구체적 용량은 선택된 특정한 화합물, 이어질 투여 요법, 화합물이 다른 화합물과 조합되어 투여되는지의 여부, 투여 시기, 투여될 조직 및 화합물을 운반하는 물리적 전달 시스템에 따라 달라질 것이다.
본원에 사용된 용어 "치료 효과"는 치료적 이익 및/또는 예방적 이익을 포괄한다. 예방적 효과는 질환 또는 상태 출현의 지연 또는 제거, 질환 또는 상태의 증상 발병의 지연 또는 제거, 질환 또는 상태 진행의 저속화, 중지 또는 역전, 또는 그의 임의의 조합을 포함한다.
용어 "QD", "qd" 또는 "q.d."는 매일(quaque die), 1일 1회 또는 매일 1회를 의미한다. 용어 "BID," "bid" 또는 "b.i.d."는 하루 두번(bis in die), 1일 2회 또는 매일 2회를 의미한다. 용어 "TID," "tid" 또는 "t.i.d."는 하루 세번(ter in die), 1일 3회 또는 매일 3회를 의미한다. 용어 "QID," "qid" 또는 "q.i.d."는 하루 네번(quater in die), 1일 4회 또는 매일 4회를 의미한다.
용어 "제약상 허용되는 염"은 관련 기술분야에 널리 공지된 다양한 유기 및 무기 반대 이온으로부터 유도된 염을 지칭한다. 제약상 허용되는 산 부가염은 무기 산 및 유기 산으로 형성될 수 있다. 염을 유도할 수 있는 바람직한 무기 산은, 예를 들어 염산, 브로민화수소산, 황산, 질산 및 인산을 포함한다. 염을 유도할 수 있는 바람직한 유기 산은, 예를 들어 아세트산, 프로피온산, 글리콜산, 피루브산, 옥살산, 말레산, 말론산, 숙신산, 푸마르산, 타르타르산, 시트르산, 벤조산, 신남산, 만델산, 메탄술폰산, 에탄술폰산, p-톨루엔술폰산, 및 살리실산을 포함한다. 제약상 허용되는 염기 부가염은 무기 및 유기 염기로 형성될 수 있다. 염을 유도할 수 있는 무기 염기는, 예를 들어 나트륨, 칼륨, 리튬, 암모늄, 칼슘, 마그네슘, 철, 아연, 구리, 망가니즈 및 알루미늄을 포함한다. 염을 유도할 수 있는 유기 염기는, 예를 들어 1급, 2급 및 3급 아민, 자연 발생의 치환된 아민을 포함한 치환된 아민, 시클릭 아민 및 염기성 이온 교환 수지를 포함한다. 구체적 예는 이소프로필아민, 트리메틸아민, 디에틸아민, 트리에틸아민, 트리프로필아민 및 에탄올아민을 포함한다. 일부 실시양태에서, 제약상 허용되는 염기 부가염은 암모늄, 칼륨, 나트륨, 칼슘 및 마그네슘 염으로부터 선택된다. 용어 "공결정"은 관련 기술분야에 공지된 다수의 공결정 형성제로부터 유래된 분자 복합체를 지칭한다. 염과 달리, 공결정은 전형적으로 공결정과 약물 사이의 수소 전달을 수반하지 않고, 대신에 공결정 형성제와 결정 구조 내의 약물 사이의 분자간 상호작용, 예컨대 수소 결합, 방향족 고리 스택킹 또는 분산력을 수반한다.
용어 "제약상 허용되는 담체" 또는 "제약상 허용되는 부형제"는 임의의 및 모든 용매, 분산 매질, 코팅, 항박테리아제 및 항진균제, 등장화제 및 흡수 지연제, 및 불활성 성분을 포함하는 것으로 의도된다. 활성 제약 성분을 위한 이러한 제약상 허용되는 담체 또는 제약상 허용되는 부형제의 사용은 관련 기술분야에 널리 공지되어 있다. 임의의 통상적인 제약상 허용되는 담체 또는 제약상 허용되는 부형제가 활성 제약 성분과 비상용성인 경우를 제외하고는, 본 발명의 치료 조성물에서 그의 사용이 고려된다. 추가의 활성 제약 성분, 예컨대 다른 약물이 또한 기재된 조성물, 과정 및 방법에 포함될 수 있다.
용어 "항원"은 면역 반응을 유도하는 물질을 지칭한다. 일부 실시양태에서, 항원은 주요 조직적합성 복합체 (MHC) 분자에 의해 제시되는 경우 항체 또는 T 세포 수용체 (TCR)에 의해 결합될 수 있는 분자이다. 본원에 사용된 용어 "항원"은 또한 T 세포 에피토프를 포괄한다. 항원은 추가적으로 면역계에 의해 인식될 수 있다. 일부 실시양태에서, 항원은 체액성 면역 반응 또는 세포성 면역 반응을 유도하여 B 림프구 및/또는 T 림프구의 활성화를 일으킬 수 있다. 일부 경우에, 이것은 항원이 Th 세포 에피토프를 함유하거나 이에 연결될 것을 필요로 할 수 있다. 항원은 또한 1개 이상의 에피토프 (예를 들어, B- 및/또는 T-에피토프)를 가질 수 있다. 일부 실시양태에서, 항원은 바람직하게는, 전형적으로 고도 특이적 및 선택적 방식으로 그의 상응하는 항체 또는 TCR과 반응할 것이고, 다른 항원에 의해 유도될 수 있는 다수의 다른 항체 또는 TCR과는 그렇지 않을 것이다.
본원에 지칭된 용어 "항체" 및 그의 복수 형태 "항체들"은 전체 이뮤노글로불린 및 임의의 항원-결합 단편 ("항원-결합 부분") 또는 그의 단일 쇄를 지칭한다. "항체"는 디술피드 결합에 의해 상호-연결된 적어도 2개의 중쇄 (H)와 2개의 경쇄 (L)를 포함하는 당단백질, 또는 그의 항원-결합 부분을 지칭한다. 각각의 중쇄는 중쇄 가변 영역 (본원에서 VH로 약기됨) 및 중쇄 불변 영역으로 구성된다. 중쇄 불변 영역은 3개의 도메인, CH1, CH2 및 CH3으로 구성된다. 각각의 경쇄는 경쇄 가변 영역 (본원에서 VL로 약기됨) 및 경쇄 불변 영역으로 구성된다. 경쇄 불변 영역은 1개의 도메인, CL로 구성된다. 항체의 VH 및 VL 영역은, 상보성 결정 영역 (CDR) 또는 초가변 영역 (HVR)으로 지칭되고 프레임워크 영역 (FR)으로 불리는 보다 보존된 영역이 산재되어 있을 수 있는 초가변성의 영역으로 추가로 세분될 수 있다. 각각의 VH 및 VL은 아미노-말단으로부터 카르복시-말단으로 하기 순서로 배열된 3개의 CDR 및 4개의 FR로 구성된다: FR1, CDR1, FR2, CDR2, FR3, CDR3, FR4. 중쇄 및 경쇄의 가변 영역은 항원 에피토프 또는 에피토프들과 상호작용하는 결합 도메인을 함유한다. 항체의 불변 영역은 면역계의 다양한 세포 (예를 들어, 이펙터 세포) 및 전형적 보체계의 제1 성분 (Clq)을 포함한 숙주 조직 또는 인자에 대한 이뮤노글로불린의 결합을 매개할 수 있다.
용어 "모노클로날 항체", "mAb", "모노클로날 항체 조성물" 또는 그의 복수 형태는 단일 분자 조성의 항체 분자의 제제를 지칭한다. 모노클로날 항체 조성물은 특정한 에피토프에 대한 단일 결합 특이성 및 친화도를 나타낸다. TNFRSF 수용체에 특이적인 모노클로날 항체는 적합한 항원을 시험 대상체에 주사한 다음 목적하는 서열 또는 기능적 특징을 갖는 항체를 발현하는 하이브리도마를 단리하는 관련 기술분야의 지식 및 기술을 사용하여 제조될 수 있다. 모노클로날 항체를 코딩하는 DNA는 통상적인 절차를 사용하여 (예를 들어, 모노클로날 항체의 중쇄 및 경쇄를 코딩하는 유전자에 특이적으로 결합할 수 있는 올리고뉴클레오티드 프로브를 사용하여) 용이하게 단리 및 서열분석된다. 하이브리도마 세포는 이러한 DNA의 바람직한 공급원으로서의 역할을 한다. 단리되면, DNA를 발현 벡터 내로 배치할 수 있고, 이어서 이를 달리 이뮤노글로불린 단백질을 생산하지 않는 숙주 세포, 예컨대 이. 콜라이 세포, 원숭이 COS 세포, 차이니즈 햄스터 난소 (CHO) 세포 또는 골수종 세포 내로 형질감염시켜, 재조합 숙주 세포에서 모노클로날 항체의 합성을 수득한다. 항체의 재조합 생산은 하기에 보다 상세하게 기재될 것이다.
본원에 사용된 용어 항체의 "항원-결합 부분" 또는 "항원-결합 단편" (또는 간단히 "항체 부분" 또는 "단편")은 항원에 특이적으로 결합하는 능력을 보유하고 있는 항체의 1개 이상의 단편을 지칭한다. 항체의 항원-결합 기능은 전장 항체의 단편에 의해 수행될 수 있는 것으로 밝혀졌다. 용어 항체의 "항원-결합 부분" 내에 포괄되는 결합 단편의 예는 (i) VL, VH, CL 및 CH1 도메인으로 이루어진 1가 단편인 Fab 단편; (ii) 힌지 영역에서 디술피드 가교에 의해 연결된 2개의 Fab 단편을 포함하는 2가 단편인 F(ab')2 단편; (iii) VH 및 CH1 도메인으로 이루어진 Fd 단편; (iv) 항체의 단일 아암의 VL 및 VH 도메인으로 이루어진 Fv 단편, (v) VH 또는 VL 도메인으로 이루어질 수 있는 도메인 항체 (dAb) 단편 (Ward et al., Nature, 1989, 341, 544-546); 및 (vi) 단리된 상보성 결정 영역 (CDR)을 포함한다. Fv 단편의 2개의 도메인, VL 및 VH가 별개의 유전자에 의해 코딩되지만, 이들은 이들을 VL 및 VH 영역이 쌍을 이루어 단일쇄 Fv (scFv)로 공지된 1가 분자를 형성하는 단일 단백질 쇄로 만들 수 있게 하는 합성 링커에 의해 재조합 방법을 사용하여 연결될 수 있다; 예를 들어, 문헌 [Bird et al., Science 1988, 242, 423-426]; 및 [Huston et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 1988, 85, 5879-5883] 참조). 이러한 scFv 항체는 또한 용어 항체의 "항원-결합 부분" 또는 "항원-결합 단편" 내에 포괄되는 것으로 의도된다. 이들 항체 단편은 관련 기술분야의 통상의 기술자에게 공지된 통상적인 기술을 사용하여 수득되고, 단편은 무손상 항체와 동일한 방식으로 유용성에 대해 스크리닝된다.
본원에 사용된 용어 "인간 항체"는 프레임워크 및 CDR 영역 둘 다가 인간 배선 이뮤노글로불린 서열로부터 유래된 것인 가변 영역을 갖는 항체를 포함하는 것으로 의도된다. 추가로, 항체가 불변 영역을 함유하는 경우에, 불변 영역은 또한 인간 배선 이뮤노글로불린 서열로부터 유래된다. 본 발명의 인간 항체는 인간 배선 이뮤노글로불린 서열에 의해 코딩되지 않는 아미노산 잔기 (예를 들어, 시험관내 무작위 또는 부위-특이적 돌연변이유발에 의해 또는 생체내 체세포 돌연변이에 의해 도입된 돌연변이)를 포함할 수 있다. 본원에 사용된 용어 "인간 항체"는 또 다른 포유동물 종, 예컨대 마우스의 배선으로부터 유래된 CDR 서열이 인간 프레임워크 서열 상에 그라프팅된 항체는 포함하지 않는 것으로 의도된다.
용어 "인간 모노클로날 항체"는 프레임워크 및 CDR 영역 둘 다가 인간 배선 이뮤노글로불린 서열로부터 유래된 것인 가변 영역을 갖는 단일 결합 특이성을 보이는 항체를 지칭한다. 한 실시양태에서, 인간 모노클로날 항체는 불멸화 세포에 융합된 인간 중쇄 트랜스진 및 경쇄 트랜스진을 포함하는 게놈을 갖는 트랜스제닉 비인간 동물, 예를 들어 트랜스제닉 마우스로부터 수득된 B 세포를 포함하는 하이브리도마에 의해 생산된다.
본원에 사용된 용어 "재조합 인간 항체"는 재조합 수단에 의해 제조, 발현, 생성 또는 단리되는 모든 인간 항체, 예컨대 (a) 인간 이뮤노글로불린 유전자에 대해 트랜스제닉 또는 트랜스크로모소말인 동물 (예컨대 마우스) 또는 그로부터 제조된 하이브리도마 (하기에 추가로 기재됨)로부터 단리된 항체, (b) 인간 항체를 발현하도록 형질전환된 숙주 세포, 예를 들어 트랜스펙토마로부터 단리된 항체, (c) 재조합된 조합 인간 항체 라이브러리로부터 단리된 항체, 및 (d) 인간 이뮤노글로불린 유전자 서열을 다른 DNA 서열로 스플라이싱하는 것을 수반하는 임의의 다른 수단에 의해 제조, 발현, 생성 또는 단리된 항체를 포함한다. 이러한 재조합 인간 항체는 프레임워크 및 CDR 영역이 인간 배선 이뮤노글로불린 서열로부터 유래된 것인 가변 영역을 갖는다. 그러나, 특정 실시양태에서, 이러한 재조합 인간 항체는 시험관내 돌연변이유발 (또는, 인간 Ig 서열에 대해 트랜스제닉인 동물이 사용되는 경우에, 생체내 체세포 돌연변이유발)에 적용될 수 있고, 따라서 재조합 항체의 VH 및 VL 영역의 아미노산 서열은, 인간 배선 VH 및 VL 서열로부터 유래되고 그와 관련되지만, 생체내 인간 항체 배선 레퍼토리 내에 자연적으로 존재하지 않을 수 있는 서열이다.
본원에 사용된 "이소형"은 중쇄 불변 영역 유전자에 의해 코딩되는 항체 부류 (예를 들어, IgM 또는 IgG1)를 지칭한다.
어구 "항원을 인식하는 항체" 및 "항원에 특이적인 항체"는 본원에서 용어 "항원에 특이적으로 결합하는 항체"와 상호교환가능하게 사용된다.
용어 "인간 항체 유도체"는 인간 항체의 임의의 변형된 형태, 예를 들어 항체와 또 다른 활성 제약 성분 또는 항체의 접합체를 지칭한다. 용어 "접합체", "항체-약물 접합체", "ADC" 또는 "면역접합체"는 관련 기술분야에서 이용가능한 방법을 사용하여 본원에 기재된 항체에 접합될 수 있는, 또 다른 치료 모이어티에 접합된 항체 또는 그의 단편을 지칭한다.
용어 "인간화 항체", "인간화 항체들" 및 "인간화"는 또 다른 포유동물 종, 예컨대 마우스의 배선으로부터 유래된 CDR 서열이 인간 프레임워크 서열 상에 그라프팅된 것인 항체를 지칭하는 것으로 의도된다. 인간 프레임워크 서열 내에서 추가의 프레임워크 영역 변형이 이루어질 수 있다. 비-인간 (예를 들어, 뮤린) 항체의 "인간화" 형태는 비-인간 이뮤노글로불린으로부터 유래된 최소 서열을 함유하는 키메라 항체이다. 대부분의 경우에, 인간화 항체는 인간 이뮤노글로불린 (수용자 항체)이며, 여기서 수용자의 초가변 영역으로부터의 잔기는 목적하는 특이성, 친화도 및 능력을 갖는 비-인간 종 (공여자 항체), 예컨대 마우스, 래트, 토끼 또는 비인간 영장류의 초가변 영역으로부터의 잔기에 의해 대체된다. 일부 경우에, 인간 이뮤노글로불린의 Fv 프레임워크 영역 (FR) 잔기는 상응하는 비-인간 잔기에 의해 대체된다. 추가로, 인간화 항체는 수용자 항체 또는 공여자 항체에서 발견되지 않는 잔기를 포함할 수 있다. 이들 변형은 항체 성능을 추가로 정밀화하기 위해 이루어진다. 일반적으로, 인간화 항체는 적어도 1개, 전형적으로는 2개의 가변 도메인을 실질적으로 모두 포함할 것이고, 여기서 모든 또는 실질적으로 모든 초가변 루프는 비-인간 이뮤노글로불린의 것에 상응하고, 모든 또는 실질적으로 모든 FR 영역은 인간 이뮤노글로불린 서열의 것이다. 인간화 항체는 또한 임의로 이뮤노글로불린 불변 영역 (Fc), 전형적으로 인간 이뮤노글로불린의 불변 영역의 적어도 한 부분을 포함할 것이다. 추가의 세부사항에 대해서는, 문헌 [Jones, et al., Nature 1986, 321, 522-525; Riechmann, et al., Nature 1988, 332, 323-329; 및 Presta, Curr. Op. Struct. Biol. 1992, 2, 593-596]을 참조한다. 본원에 기재된 TNFRSF 효능제는 또한 이펙터 기능 및/또는 FcR 결합의 개선 (예를 들어, 감소)을 부여하는 것으로 공지된 임의의 Fc 변이체를 사용하도록 변형될 수 있다. Fc 변이체는, 예를 들어 국제 특허 출원 공개 번호 WO 1988/07089 A1, WO 1996/14339 A1, WO 1998/05787 A1, WO 1998/23289 A1, WO 1999/51642 A1, WO 99/58572 A1, WO 2000/09560 A2, WO 2000/32767 A1, WO 2000/42072 A2, WO 2002/44215 A2, WO 2002/060919 A2, WO 2003/074569 A2, WO 2004/016750 A2, WO 2004/029207 A2, WO 2004/035752 A2, WO 2004/063351 A2, WO 2004/074455 A2, WO 2004/099249 A2, WO 2005/040217 A2, WO 2005/070963 A1, WO 2005/077981 A2, WO 2005/092925 A2, WO 2005/123780 A2, WO 2006/019447 A1, WO 2006/047350 A2 및 WO 2006/085967 A2; 및 미국 특허 번호 5,648,260; 5,739,277; 5,834,250; 5,869,046; 6,096,871; 6,121,022; 6,194,551; 6,242,195; 6,277,375; 6,528,624; 6,538,124; 6,737,056; 6,821,505; 6,998,253; 및 7,083,784 (이들의 개시내용은 본원에 참조로 포함됨)에 개시된 아미노산 치환 중 어느 하나를 포함할 수 있다.
용어 "키메라 항체"는 가변 영역 서열이 하나의 종으로부터 유래되고 불변 영역 서열이 또 다른 종으로부터 유래된 것인 항체, 예컨대 가변 영역 서열이 마우스 항체로부터 유래되고 불변 영역 서열이 인간 항체로부터 유래된 것인 항체를 지칭하는 것으로 의도된다.
"디아바디"는 2개의 항원-결합 부위를 갖는 소형 항체 단편이다. 이러한 단편은 동일한 폴리펩티드 쇄 내의 경쇄 가변 도메인 (VL)에 연결된 중쇄 가변 도메인 (VH)을 포함한다 (VH-VL 또는 VL-VH). 동일한 쇄 상의 2개의 도메인 사이의 쌍형성을 허용하기에는 짧은 링커를 사용함으로써, 도메인은 또 다른 쇄의 상보적 도메인과 쌍형성하도록 강제되고 2개의 항원-결합 부위를 생성한다. 디아바디는, 예를 들어 유럽 특허 번호 EP 404,097, 국제 특허 공개 번호 WO 93/11161; 및 문헌 [Bolliger, et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 1993, 90, 6444-6448]에 보다 상세하게 기재되어 있다.
용어 "글리코실화"는 항체의 변형된 유도체를 지칭한다. 비-글리코실화 항체는 글리코실화가 결여되어 있다. 글리코실화를 변경하여, 예를 들어 항원에 대한 항체의 친화도를 증가시킬 수 있다. 이러한 탄수화물 변형은, 예를 들어 항체 서열 내의 1개 이상의 글리코실화 부위를 변경시킴으로써 달성될 수 있다. 예를 들어, 1개 이상의 가변 영역 프레임워크 글리코실화 부위의 제거를 일으키는 1개 이상의 아미노산 치환이 이루어짐으로써 그 부위에서의 글리코실화가 제거될 수 있다. 비-글리코실화는 미국 특허 번호 5,714,350 및 6,350,861에 기재된 바와 같이, 항원에 대한 항체의 친화도를 증가시킬 수 있다. 대안적으로 또는 추가적으로, 변경된 유형의 글리코실화를 갖는 항체, 예컨대 푸코실 잔기의 양이 감소된 저푸코실화 항체 또는 이등분 GlcNac 구조가 증가된 항체를 만들 수 있다. 이러한 변경된 글리코실화 패턴은 항체의 능력을 증가시키는 것으로 입증되었다. 이러한 탄수화물 변형은, 예를 들어 변경된 글리코실화 기구를 갖는 숙주 세포에서 항체를 발현시킴으로써 달성될 수 있다. 변경된 글리코실화 기구를 갖는 세포는 관련 기술분야에 기재되어 있고, 본 발명의 재조합 항체를 발현함으로써 변경된 글리코실화를 갖는 항체를 생산하는 숙주 세포로서 사용될 수 있다. 예를 들어, 세포주 Ms704, Ms705 및 Ms709는 푸코실트랜스퍼라제 유전자인 FUT8 (알파 (1,6) 푸코실트랜스퍼라제)이 결여되어 있어서, Ms704, Ms705 및 Ms709 세포주에서 발현된 항체는 그의 탄수화물에 푸코스가 결여되어 있다. Ms704, Ms705 및 Ms709 FUT8-/- 세포주는 2개의 대체 벡터를 사용한 CHO/DG44 세포 내의 FUT8 유전자의 표적화된 파괴에 의해 생성되었다 (미국 특허 공개 번호 2004/0110704 및 문헌 [Yamane-Ohnuki et al., Biotechnol. Bioeng., 2004, 87, 614-622] 참조). 또 다른 예로서, 유럽 특허 번호 EP 1,176,195는 푸코실 트랜스퍼라제를 코딩하는 FUT8 유전자가 기능적으로 파괴된 세포주이며, 이러한 세포주에서 발현된 항체는 알파 1,6 결합-관련 효소의 감소 또는 제거에 의해 저푸코실화를 나타낸다는 것을 기재하고 있으며, 또한 항체의 Fc 영역에 결합하는 N-아세틸글루코사민에 푸코스를 부가하는 효소 활성이 낮거나 또는 그러한 효소 활성을 갖지 않는 세포주, 예를 들어 래트 골수종 세포주 YB2/0 (ATCC CRL 1662)를 기재하고 있다. 국제 특허 공개 WO 03/035835는 Asn(297)-연결된 탄수화물에 푸코스를 부착시키는 능력이 감소된 변이체 CHO 세포주인 Lec 13 세포이며, 또한 이러한 숙주 세포에서 발현된 항체는 저푸코실화를 나타낸다는 것을 기재하고 있다 (또한 문헌 [Shields, et al., J. Biol. Chem. 2002, 277, 26733-26740] 참조). 국제 특허 공개 WO 99/54342는 당단백질-변형 글리코실 트랜스퍼라제 (예를 들어, 베타(1,4)-N-아세틸글루코사미닐트랜스퍼라제 III (GnTIII))를 발현하도록 조작된 세포주이며, 이러한 조작된 세포주에서 발현된 항체는 증가된 이등분 GlcNac 구조를 나타내어 항체의 증가된 ADCC 활성을 생성한다는 것을 기재하고 있다 (또한 문헌 [Umana, et al., Nat. Biotech. 1999, 17, 176-180] 참조). 대안적으로, 항체의 푸코스 잔기는 푸코시다제 효소를 사용하여 절단되어질 수 있다. 예를 들어, 푸코시다제 알파-L-푸코시다제는 문헌 [Tarentino, et al., Biochem. 1975, 14, 5516-5523]에 기재된 바와 같이 항체로부터 푸코실 잔기를 제거한다.
"PEG화"는 1개 이상의 폴리에틸렌 글리콜 (PEG) 기가 항체 또는 항체 단편에 부착되는 조건 하에, 전형적으로 PEG, 예컨대 PEG의 반응성 에스테르 또는 알데히드 유도체와 반응하는 변형된 항체 또는 융합 단백질 또는 그의 단편을 지칭한다. PEG화는, 예를 들어 항체의 생물학적 (예를 들어, 혈청) 반감기를 증가시킬 수 있다. 바람직하게는, PEG화는 반응성 PEG 분자 (또는 유사한 반응성 수용성 중합체)와의 아실화 반응 또는 알킬화 반응을 통해 수행된다. 본원에 사용된 용어 "폴리에틸렌 글리콜"은 다른 단백질을 유도체화하는데 사용된 임의의 형태의 PEG, 예컨대 모노 (C1-C10) 알콕시- 또는 아릴옥시-폴리에틸렌 글리콜 또는 폴리에틸렌 글리콜-말레이미드를 포괄하는 것으로 의도된다. PEG화될 단백질 또는 항체는 비-글리코실화 단백질 또는 항체일 수 있다. PEG화 방법은 관련 기술분야에 공지되어 있고, 예를 들어 유럽 특허 번호 EP 0154316 및 EP 0401384 및 미국 특허 번호 5,824,778 (이들 각각의 개시내용은 본원에 참조로 포함됨)에 기재된 바와 같이, 본 발명의 항체에 적용될 수 있다.
용어 "융합 단백질" 또는 "융합 폴리펩티드"는 2종 이상의 개별 단백질의 특성을 조합한 단백질을 지칭한다. 이러한 단백질은 직접적으로 또는 아미노산 링커를 통해 공유 연결된 적어도 2종의 이종 폴리펩티드를 갖는다. 융합 단백질을 형성하는 폴리펩티드들은 전형적으로 C-말단 대 N-말단으로 연결되지만, C-말단 대 C-말단, N-말단 대 N-말단, 또는 N-말단 대 C-말단으로 연결될 수도 있다. 융합 단백질의 폴리펩티드는 임의의 순서로 존재할 수 있고, 구성성분 폴리펩티드 중 어느 하나 또는 둘 다 중 하나 초과를 포함할 수 있다. 이러한 용어는 보존적으로 변형된 변이체, 다형성 변이체, 대립유전자, 돌연변이체, 하위서열, 종간 상동체, 및 융합 단백질을 구성하는 항원의 면역원성 단편을 또한 지칭한다. 본 개시내용의 융합 단백질은 또한 성분 항원 또는 그의 면역원성 단편의 추가의 카피를 포함할 수 있다. 융합 단백질은 함께 연결되고 추가로 Fc 도메인, 예컨대 IgG Fc 도메인에 연결된 1개 이상의 결합 도메인을 함유할 수 있다. 융합 단백질은 추가로 모노클로날 항체를 모방하고 6개 이상의 결합 도메인을 제공하기 위해 함께 연결될 수 있다. 융합 단백질은 관련 기술분야에 공지된 바와 같은 재조합 방법에 의해 생산될 수 있다. 융합 단백질의 제조는 관련 기술분야에 공지되어 있고, 예를 들어 국제 특허 출원 공개 번호 WO 1995/027735 A1, WO 2005/103077 A1, WO 2008/025516 A1, WO 2009/007120 A1, WO 2010/003766 A1, WO 2010/010051 A1, WO 2010/078966 A1, 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0125419 A1 및 US 2016/0272695 A1, 및 미국 특허 번호 8,921,519 (이들 각각의 개시내용은 본원에 참조로 포함됨)에 기재되어 있다.
핵산 또는 단백질의 부분에 관해 사용되는 경우 용어 "이종"은 핵산 또는 단백질이 자연에서 서로에 대해 동일한 관계로 발견되지 않는 2개 이상의 하위서열을 포함한다는 것을 나타낸다. 예를 들어, 핵산은 전형적으로 새로운 기능적 핵산이 제조되도록 배열된 비관련 유전자들로부터의 2개 이상의 서열, 예를 들어 한 공급원으로부터의 프로모터 및 또 다른 공급원으로부터의 코딩 영역을 갖도록 재조합적으로 생산된다. 유사하게, 이종 단백질은 단백질이 자연에서 서로에 대해 동일한 관계로 발견되지 않는 2개 이상의 하위서열을 포함한다는 것을 나타낸다 (예를 들어, 융합 단백질).
용어 "보존적 아미노산 치환"은 항원에 대한 항체 또는 융합 단백질의 결합을 제거하지 않는 아미노산 서열 변형을 의미한다. 보존적 아미노산 치환은 한 부류의 아미노산을 동일한 부류의 아미노산에 의해 치환하는 것을 포함하며, 여기서 부류는 공통 물리화학적 아미노산 측쇄 특성, 및 예를 들어 표준 데이호프(Dayhoff) 빈도 교환 매트릭스 또는 BLOSUM 매트릭스에 의해 결정된 바와 같은, 자연에서 발견되는 동종 단백질에서의 높은 치환 빈도에 의해 정의된다. 아미노산 측쇄의 6가지 일반적 부류가 카테고리화되었고, 다음을 포함한다: 부류 I (Cys); 부류 II (Ser, Thr, Pro, Ala, Gly); 부류 III (Asn, Asp, Gln, Glu); 부류 IV (His, Arg, Lys); 부류 V (Ile, Leu, Val, Met); 및 부류 VI (Phe, Tyr, Trp). 예를 들어, Asp를 또 다른 부류 III 잔기, 예컨대 Asn, Gln 또는 Glu로 치환하는 것이 보존적 치환이다. 따라서, 항체 내의 예측되는 비필수 아미노산 잔기는 바람직하게는 동일한 부류의 또 다른 아미노산 잔기로 대체된다. 항원 결합을 제거하지 않는 아미노산 보존적 치환을 확인하는 방법은 관련 기술분야에 널리 공지되어 있다 (예를 들어, 문헌 [Brummell, et al., Biochemistry 1993, 32, 1180-1187; Kobayashi, et al., Protein Eng. 1999, 12, 879-884 (1999); 및 Burks, et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 1997, 94, 412-417] 참조).
2개 이상의 핵산 또는 폴리펩티드와 관련하여 용어 "서열 동일성", "퍼센트 동일성" 및 "서열 퍼센트 동일성" (또는 그의 동의어, 예를 들어 "99% 동일한")은 최대 상응성을 위해 비교 및 정렬되었을 때 (필요하다면 갭이 도입됨) 동일하거나, 또는 명시된 백분율의 동일한 뉴클레오티드 또는 아미노산 잔기를 갖는 2개 이상의 서열 또는 하위서열을 지칭하고, 이때 임의의 보존적 아미노산 치환은 서열 동일성의 일부로 간주되지 않는다. 퍼센트 동일성은 서열 비교 소프트웨어 또는 알고리즘을 사용하여 또는 육안 검사에 의해 측정될 수 있다. 아미노산 또는 뉴클레오티드 서열의 정렬을 수득하는데 사용될 수 있는 다양한 알고리즘 및 소프트웨어는 관련 기술분야에 공지되어 있다. 퍼센트 서열 동일성을 결정하기 위한 적합한 프로그램은, 예를 들어 미국 정부의 국립 생물 정보 센터 BLAST 웹 사이트로부터 이용가능한 BLAST 프로그램 모음을 포함한다. 2개의 서열 사이의 비교는 BLASTN 또는 BLASTP 알고리즘을 사용하여 수행될 수 있다. BLASTN은 핵산 서열을 비교하는데 사용되고, 반면에 BLASTP는 아미노산 서열을 비교하는데 사용된다. ALIGN, ALIGN-2 (제넨테크(Genentech), 캘리포니아주 사우스 샌프란시스코), 또는 DNASTAR로부터 이용가능한 메그얼라인(MegAlign)은 서열을 정렬하는데 사용될 수 있는 추가의 공중 이용가능한 소프트웨어 프로그램이다. 관련 기술분야의 통상의 기술자는 특정한 정렬 소프트웨어에 의한 최대 정렬을 위해 적절한 파라미터를 결정할 수 있다. 특정 실시양태에서, 정렬 소프트웨어의 디폴트 파라미터가 사용된다.
본 발명의 특정 실시양태는 항체 또는 융합 단백질의 변이체를 포함한다. 본원에 사용된 용어 "변이체"는 참조 항체의 아미노산 서열 내 또는 그에 인접한 특정 위치에서의 1개 이상의 치환, 결실 및/또는 부가에 의해 참조 항체의 아미노산 서열과 상이한 아미노산 서열을 포함하는 항체 또는 융합 단백질을 포괄하나 이에 제한되지는 않는다. 변이체는 참조 항체의 아미노산 서열과 비교하여 그의 아미노산 서열에 1개 이상의 보존적 치환을 포함할 수 있다. 보존적 치환은, 예를 들어 유사하게 하전된 또는 비하전된 아미노산의 치환을 수반할 수 있다. 변이체는 참조 항체의 항원에 특이적으로 결합하는 능력을 유지한다.
핵산 서열은 그의 보존적으로 변형된 변이체 (예를 들어, 축중성 코돈 치환) 및 상보적 서열, 뿐만 아니라 명시적으로 나타낸 서열을 암시적으로 포괄한다. 구체적으로, 축중성 코돈 치환은 1개 이상의 선택된 (또는 모든) 코돈의 제3 위치가 혼합된-염기 및/또는 데옥시이노신 잔기로 치환된 것인 서열을 생성함으로써 달성될 수 있다. 문헌 [Batzer, et al., Nucleic Acid Res. 1991, 19, 5081; Ohtsuka, et al., J. Biol. Chem. 1985, 260, 2605-2608; Rossolini, et al., Mol. Cell. Probes 1994, 8, 91-98]. 용어 핵산은 cDNA, mRNA, 올리고뉴클레오티드 및 폴리뉴클레오티드와 상호교환가능하게 사용된다.
용어 "바이오시밀러"는 미국에서 허가된 참조 생물학적 제품과 임상 불활성 성분에서의 부차적 차이에도 불구하고 고도로 유사한, 모노클로날 항체 또는 융합 단백질을 포함한 생물학적 제품을 의미하며, 제품의 안전성, 순도 및 효력의 관점에서 생물학적 제품과 참조 제품 사이에 임상적으로 의미있는 차이가 존재하지 않는 것이다. 추가로, 유사한 생물학적 또는 "바이오시밀러" 의약은 이미 유럽 의약품청에 의해 사용에 대해 인가된 또 다른 생물학적 의약과 유사한 생물학적 의약이다. 용어 "바이오시밀러"는 또한 다른 국가 및 지역 규제 기관에 의해 동의어로 사용된다. 생물학적 제품 또는 생물학적 의약은 박테리아 또는 효모와 같은 생물학적 공급원에 의해 제조되거나 그로부터 유래된 의약이다. 이들은 비교적 작은 분자, 예컨대 인간 인슐린 또는 에리트로포이에틴, 또는 복잡한 분자, 예컨대 모노클로날 항체로 이루어질 수 있다. 예를 들어, 참조 모노클로날 항체가 리툭시맙인 경우에, 리툭시맙과 관련하여 약물 규제 기관에 의해 승인된 바이오시밀러 모노클로날 항체는 리툭시맙에 대한 "바이오시밀러"이거나 또는 리툭시맙의 "바이오시밀러"이다. 유럽에서, 유사한 생물학적 또는 "바이오시밀러" 의약은 이미 유럽 의약품청 (EMA)에 의해 사용에 대해 인가된 또 다른 생물학적 의약과 유사한 생물학적 의약이다. 유럽에서의 유사한 생물학적 용도에 대한 관련 법적 기준은 개정된 규정 (EC) 번호 726/2004의 조항 6 및 명령 2001/83/EC의 조항 10(4)이고, 따라서 유럽에서, 바이오시밀러는 규정 (EC) 번호 726/2004의 조항 6 및 명령 2001/83/EC의 조항 10(4) 하에 인가되거나, 인가를 위해 승인되거나 또는 인가를 위한 용도의 대상일 수 있다. 이미 인가된 원래의 생물학적 의약품은 유럽에서 "참조 의약품"으로 지칭될 수 있다. 바이오시밀러로 간주되기 위한 제품에 대한 일부 요건은 유사 생물학적 의약품에 대한 CHMP 가이드라인에 약술되어 있다. 추가로, 모노클로날 항체 바이오시밀러와 관련된 가이드라인을 포함한 제품 특이적 가이드라인은 EMA에 의해 제품별로 제공되고 그의 웹사이트에 공개되어 있다. 본원에 기재된 바와 같은 바이오시밀러는 품질 특징, 생물학적 활성, 작용 메카니즘, 안전성 프로파일 및/또는 효능에 있어서 참조 의약품과 유사할 수 있다. 추가로, 바이오시밀러는 참조 의약품과 동일한 상태를 치료하기 위해 사용될 수 있거나 사용을 위해 의도될 수 있다. 따라서, 본원에 기재된 바와 같은 바이오시밀러는 참조 의약품과 유사하거나 고도로 유사한 품질 특징을 갖는 것으로 생각될 수 있다. 대안적으로 또는 추가로, 본원에 기재된 바와 같은 바이오시밀러는 참조 의약품과 유사하거나 고도로 유사한 생물학적 활성을 갖는 것으로 생각될 수 있다. 대안적으로 또는 추가로, 본원에 기재된 바와 같은 바이오시밀러는 참조 의약품과 유사하거나 고도로 유사한 안전성 프로파일을 갖는 것으로 생각될 수 있다. 대안적으로 또는 추가로, 본원에 기재된 바와 같은 바이오시밀러는 참조 의약품과 유사하거나 고도로 유사한 효능을 갖는 것으로 생각될 수 있다. 본원에 기재된 바와 같이, 유럽에서의 바이오시밀러는 EMA에 의해 인가된 참조 의약품과 비교된다. 그러나, 일부 경우에, 바이오시밀러는 특정 연구에서 유럽 경제 지역 밖에서 인가된 생물학적 의약품 (비-EEA 인가된 "비교자")과 비교될 수 있다. 이러한 연구는, 예를 들어 특정 임상 및 생체내 비-임상 연구를 포함한다. 본원에 사용된 용어 "바이오시밀러"는 또한 비-EEA 인가된 비교자와 비교되었거나 비교될 수 있는 생물학적 의약품에 관한 것이다. 특정 바이오시밀러는 단백질, 예컨대 항체, 항체 단편 (예를 들어, 항원 결합 부분) 및 융합 단백질이다. 단백질 바이오시밀러는 폴리펩티드의 기능에 유의하게 영향을 미치지 않는 아미노산 구조에서의 부차적 변형 (예를 들어 아미노산의 결실, 부가 및/또는 치환을 포함함)을 갖는 아미노산 서열을 가질 수 있다. 바이오시밀러는 그의 참조 의약품의 아미노산 서열에 대해 97% 이상, 예를 들어 97%, 98%, 99% 또는 100%의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함할 수 있다. 바이오시밀러는 참조 의약품의 번역후 변형과 상이한 1개 이상의 번역후 변형, 예를 들어 이에 제한되지는 않을지라도, 글리코실화, 산화, 탈아미드화 및/또는 말단절단을 포함할 수 있으며, 단 이러한 상이함이 의약품의 안전성 및/또는 효능에 변화를 일으키지 않는다. 바이오시밀러는 참조 의약품과 동일하거나 상이한 글리코실화 패턴을 가질 수 있다. 특히, 배타적인 것은 아닐지라도, 바이오시밀러는 상이한 글리코실화 패턴을 가질 수 있으며, 단 이러한 상이함이 참조 의약품과 연관된 안전성 우려를 해결하거나 해결하도록 의도된 경우에 그러한 패턴을 가질 수 있다. 추가적으로, 바이오시밀러는, 예를 들어 그의 강도, 제약 형태, 제제, 부형제 및/또는 제시에 있어서 참조 의약품을 벗어날 수 있으며, 단 의약품의 안전성 및 효능은 손상되지 않는다. 일부 실시양태에서, 바이오시밀러는 1종 이상의 부형제를 추가로 포함하는 조성물로서 제공되며, 여기서 1종 이상의 부형제는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품에 포함된 부형제와 동일하거나 상이하다. 바이오시밀러는 참조 의약품과 비교하여, 예를 들어 약동학 (PK) 및/또는 약역학 (PD) 프로파일에 있어서의 차이를 포함할 수 있으나, 인가되거나 인가에 적합한 것으로 간주되도록 여전히 참조 의약품과 충분히 유사한 것으로 생각된다. 특정 상황에서, 바이오시밀러는 참조 의약품과 비교하여 상이한 결합 특징을 나타내며, 여기서 상이한 결합 특징은 유사한 생물학적 제품으로서의 인가를 위한 장벽이 되지 않는 것으로 EMA와 같은 규제 기관에 의해 간주된다. 용어 "바이오시밀러"는 또한 다른 국가 및 지역 규제 기관에 의해 동의어로 사용된다.
본원에 사용된 바와 같이, 용어 "4-1BB 효능제"는 4-1BB (CD137) 항원에 특이적으로 결합하는 임의의 항체 또는 단백질을 지칭할 수 있다. "특이적으로 결합하는"은 결합 분자가 본질적으로 비-4-1BB 분자에 대한 배경 결합을 나타내는 것을 의미한다. 4-1BB 효능제는 관련 기술분야에 공지된 임의의 4-1BB 효능제일 수 있다. 특히, 이는 본원에 보다 상세하게 기재된 4-1BB 효능제 중 하나이다. 그러나 4-1BB에 특이적으로 결합하는 단리된 결합 분자는 다른 종으로부터의 4-1BB 분자에 대한 교차-반응성을 가질 수 있다. 4-1BB 효능작용 항체 및 단백질은 또한, 예를 들어 T 세포 상의 인간 4-1BB (h4-1BB 또는 hCD137)에 특이적으로 결합할 수 있다.
본원에 사용된 용어 "OX40 효능제"는 OX40 (CD134) 항원에 특이적으로 결합하는 임의의 항체 또는 단백질을 지칭할 수 있다. "특이적으로 결합하는"은 결합 분자가 본질적으로 비-OX40 분자에 대한 배경 결합을 나타내는 것을 의미한다. OX40 효능제는 관련 기술분야에 공지된 임의의 OX40 효능제일 수 있다. 특히, 이는 본원에 보다 상세하게 기재된 OX40 효능제 중 하나이다. 그러나 OX40에 특이적으로 결합하는 단리된 결합 분자는 다른 종으로부터의 OX40 분자에 대한 교차-반응성을 가질 수 있다. OX40 효능작용 항체 및 단백질은 또한, 예를 들어 T 세포 상의 인간 OX40 (hOX40 또는 hCD134)에 특이적으로 결합할 수 있다.
본원에 사용된 용어 "CD27 효능제"는 CD27 항원에 특이적으로 결합하는 임의의 항체 또는 단백질을 지칭할 수 있다. "특이적으로 결합하는"은 결합 분자가 본질적으로 비-CD27 분자에 대한 배경 결합을 나타내는 것을 의미한다. CD27 효능제는 관련 기술분야에 공지된 임의의 CD27 효능제일 수 있다. 특히, 이는 본원에 보다 상세하게 기재된 CD27 효능제 중 하나이다. 그러나 CD27에 특이적으로 결합하는 단리된 결합 분자는 다른 종으로부터의 CD27 분자에 대한 교차-반응성을 가질 수 있다. CD27 효능작용 항체 및 단백질은 또한, 예를 들어 T 세포 상의 인간 CD27 (hCD27)에 특이적으로 결합할 수 있다.
본원에 사용된 용어 "GITR 효능제"는 GITR (CD357)에 특이적으로 결합하는 적어도 1개의 항원 결합 부위를 함유하는 분자를 포함한다. "특이적으로 결합하는"은 결합 분자가 본질적으로 비-GITR 분자에 대한 배경 결합을 나타내는 것을 의미한다. GITR 효능제는 관련 기술분야에 공지된 임의의 GITR 효능제일 수 있다. 특히, 이는 본원에 보다 상세하게 기재된 GITR 효능제 중 하나이다. 그러나 GITR에 특이적으로 결합하는 단리된 결합 분자는 다른 종으로부터의 GITR 분자에 대한 교차-반응성을 가질 수 있다. GITR 효능작용 항체 및 단백질은 또한, 예를 들어 T 세포 및 수지 세포 상의 인간 GITR (hGITR)에 특이적으로 결합할 수 있다.
본원에 사용된 용어 "HVEM 효능제"는 HVEM (CD270)에 특이적으로 결합하는 적어도 1개의 항원 결합 부위를 함유하는 분자를 포함한다. "특이적으로 결합하는"은 결합 분자가 본질적으로 비-HVEM 분자에 대한 배경 결합을 나타내는 것을 의미한다. HVEM 효능제는 관련 기술분야에 공지된 임의의 HVEM 효능제일 수 있다. 특히, 이는 본원에 보다 상세하게 기재된 HVEM 효능제 중 하나이다. 그러나 HVEM에 특이적으로 결합하는 단리된 결합 분자는 다른 종으로부터의 HVEM 분자에 대한 교차-반응성을 가질 수 있다. HVEM 효능작용 항체 및 단백질은 또한, 예를 들어 T 세포 상의 인간 HVEM (hHVEM)에 특이적으로 결합할 수 있다.
용어 "혈액 악성종양"은 혈액, 골수, 림프절 및 림프계의 조직을 포함하나 이에 제한되지는 않는, 조혈 및 림프 조직의 포유동물 암 및 종양을 지칭한다. 혈액 악성종양은 또한 "액상 종양"으로도 지칭된다. 혈액 악성종양은 급성 림프모구성 백혈병 (ALL), 만성 림프구성 림프종 (CLL), 소림프구성 림프종 (SLL), 급성 골수성 백혈병 (AML), 만성 골수성 백혈병 (CML), 급성 단핵구성 백혈병 (AMoL), 호지킨 림프종 및 비-호지킨 림프종을 포함하나 이에 제한되지는 않는다. 용어 "B 세포 혈액 악성종양"은 B 세포에 영향을 미치는 혈액 악성종양을 지칭한다.
용어 "고형 종양"은 통상적으로 낭 또는 액상 영역을 함유하지 않는 비정상적 조직 덩어리를 지칭한다. 고형 종양은 양성 또는 악성일 수 있다. 용어 "고형 종양 암"은 악성, 신생물성 또는 암성 고형 종양을 지칭한다. 고형 종양 암은 육종, 암종 및 림프종, 예컨대 폐, 유방, 전립선, 결장, 직장 및 방광의 암을 포함하나 이에 제한되지는 않는다. 고형 종양의 조직 구조는 실질 (암 세포), 및 암 세포가 분산되어 있으며 지지성 미세환경을 제공할 수 있는 지지성 기질 세포를 포함한 상호의존성 조직 구획을 포함한다.
본원에 사용된 용어 "미세환경"은 전체로서의 고형 또는 혈액 종양 미세환경 또는 미세환경 내의 세포의 개별 하위세트를 지칭할 수 있다. 본원에 사용된 종양 미세환경은 문헌 [Swartz, et al., Cancer Res., 2012, 72, 2473]에 기재된 바와 같이, "신생물 형질전환을 촉진하고, 종양 성장 및 침습을 지지하고, 종양을 숙주 면역으로부터 보호하고, 치료 저항성을 조성하고, 우세한 전이가 번성하도록 틈을 제공하는 세포, 가용성 인자, 신호전달 분자, 세포외 매트릭스 및 기계적 신호"의 복합 혼합물을 지칭한다. 종양이 T 세포에 의해 인식될 항원을 발현하지만, 미세환경에 의한 면역 억제 때문에 면역계에 의한 종양 클리어런스는 드물다.
의심을 피하기 위해, 본 발명의 특정한 측면, 실시양태 또는 실시예와 관련하여 기재된 특정한 특색 (예를 들어 정수, 특징, 값, 용도, 질환, 화학식, 화합물 또는 군)은 본원에 기재된 임의의 다른 측면, 실시양태 또는 실시예와 비상용성이지 않은 한 그에 적용가능한 것으로 이해될 것으로 의도된다. 따라서 이러한 특색은 적절한 경우에 본원에 정의된 임의의 정의, 청구범위 또는 실시양태와 관련하여 사용될 수 있다. 본 명세서에 개시된 모든 특색 (임의의 첨부 청구범위, 요약서 및 도면 포함) 및/또는 그와 같이 개시된 임의의 방법 또는 과정의 모든 단계는, 이러한 특색 및/또는 단계 중 적어도 일부가 상호 배타적인 경우의 조합을 제외하고는, 임의의 조합으로 조합될 수 있다. 본 발명은 임의의 개시된 실시양태의 임의의 세부사항에 한정되지 않는다. 본 발명은 본 명세서 (임의의 첨부 청구범위, 요약서 및 도면 포함)에서 개시된 특색의 임의의 신규한 것 또는 신규한 조합, 또는 그와 같이 개시된 임의의 방법 또는 과정의 단계의 임의의 신규한 것 또는 임의의 신규한 조합으로 확대된다.
용어 "약" 및 "대략"은 값의 통계적으로 의미있는 범위 내에 있다는 것을 의미한다. 이러한 범위는 주어진 값 또는 범위의 한 자릿수 이내, 바람직하게는 50% 이내, 보다 바람직하게는 20% 이내, 보다 더 바람직하게는 10% 이내, 및 보다 더 바람직하게는 5% 이내에 있을 수 있다. 용어 "약" 또는 "대략"에 의해 포괄되는 허용가능한 변동은 연구 하의 특정한 시스템에 좌우되고, 관련 기술분야의 통상의 기술자에 의해 용이하게 인지될 수 있다. 더욱이, 본원에 사용된 용어 "약" 및 "대략"은 치수, 크기, 제제, 파라미터, 형상 및 다른 양 및 특징이 정확하지 않고 정확할 필요는 없지만, 목적하는 바에 따라, 허용오차, 전환 인자, 반올림, 측정 오차 등 및 관련 기술분야의 통상의 기술자에게 공지된 다른 인자를 반영하면서, 대략적이고/거나 더 크거나 더 작을 수 있다는 것을 의미한다. 일반적으로, 치수, 크기, 제제, 파라미터, 형상 또는 다른 양 또는 특징은 그러하다고 명백히 언급되어 있든지 아니든지 간에 "약" 또는 "근사"이다. 매우 상이한 크기, 형상 및 치수의 실시양태가 기재된 배열을 사용할 수 있다는 것이 주목된다.
원래 및 보정된 형태로 첨부된 청구범위에 사용될 때 과도적 용어 "포함하는", "본질적으로 이루어진" 및 "이루어진"은 언급되지 않은 추가의 청구항 요소 또는 단계가 (존재하는 경우) 청구범위의 범주로부터 배제되는 것과 관련하여 청구항 범주를 규정한다. 용어 "포함하는"은 포함적 또는 개방적인 것으로 의도되고, 임의의 추가의 언급되지 않은 요소, 방법, 단계 또는 물질을 배제하지 않는다. 용어 "이루어진"은 청구항에 명시된 것 이외의 임의의 요소, 단계 또는 물질을 배제하고, 후자의 경우에, 명시된 물질(들)과 통상적으로 연관된 불순물을 배제한다. 용어 "본질적으로 이루어진"은 청구항의 범주를 명시된 요소, 단계 또는 물질(들) 및 청구된 발명의 기초적이며 신규한 특징(들)에 실질적으로 영향을 미치지 않는 것으로 제한한다. 본 발명을 구현하는 본원에 기재된 모든 조성물, 방법 및 키트는, 대안적 실시양태에서, 과도적 용어 "포함하는", "본질적으로 이루어진" 및 "이루어진" 중 어느 것에 의해 보다 구체적으로 정의될 수 있다.
4-1BB (CD137) 효능제
한 실시양태에서, TNFRSF 효능제는 4-1BB (CD137) 효능제이다. 4-1BB 효능제는 관련 기술분야에 공지된 임의의 4-1BB 결합 분자일 수 있다. 4-1BB 결합 분자는 인간 또는 포유동물 4-1BB에 결합할 수 있는 모노클로날 항체 또는 융합 단백질일 수 있다. 4-1BB 효능제 또는 4-1BB 결합 분자는 이뮤노글로불린 분자의 임의의 이소형 (예를 들어, IgG, IgE, IgM, IgD, IgA 및 IgY), 부류 (예를 들어, IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgA1 및 IgA2) 또는 하위부류의 이뮤노글로불린 중쇄를 포함할 수 있다. 4-1BB 효능제 또는 4-1BB 결합 분자는 중쇄 및 경쇄 둘 다를 가질 수 있다. 본원에 사용된 용어 결합 분자는 또한 4-1BB에 결합하는 항체 (전장 항체 포함), 모노클로날 항체 (전장 모노클로날 항체 포함), 폴리클로날 항체, 다중특이적 항체 (예를 들어, 이중특이적 항체), 인간, 인간화 또는 키메라 항체, 및 항체 단편, 예를 들어 Fab 단편, F(ab') 단편, Fab 발현 라이브러리에 의해 생산된 단편, 상기 중 임의의 것의 에피토프-결합 단편, 및 항체의 조작된 형태, 예를 들어 scFv 분자를 포함한다. 한 실시양태에서, 4-1BB 효능제는 완전 인간 항체인 항원 결합 단백질이다. 한 실시양태에서, 4-1BB 효능제는 인간화 항체인 항원 결합 단백질이다. 일부 실시양태에서, 본원에 개시된 방법 및 조성물에 사용하기 위한 4-1BB 효능제는 항-4-1BB 항체, 인간 항-4-1BB 항체, 마우스 항-4-1BB 항체, 포유동물 항-4-1BB 항체, 모노클로날 항-4-1BB 항체, 폴리클로날 항-4-1BB 항체, 키메라 항-4-1BB 항체, 항-4-1BB 애드넥틴, 항-4-1BB 도메인 항체, 단일 쇄 항-4-1BB 단편, 중쇄 항-4-1BB 단편, 경쇄 항-4-1BB 단편, 항-4-1BB 융합 단백질 및 그의 단편, 유도체, 접합체, 변이체 또는 바이오시밀러이다. 효능작용 항-4-1BB 항체는 강한 면역 반응을 유도하는 것으로 공지되어 있다. 문헌 [Lee, et al., PLOS One 2013, 8, e69677]. 바람직한 실시양태에서, 4-1BB 효능제는 효능작용 항-4-1BB 인간화 또는 완전 인간 모노클로날 항체 (즉, 단일 세포주로부터 유래된 항체)이다. 한 실시양태에서, 4-1BB 효능제는 EU-101 (유틸렉스 캄파니 리미티드(Eutilex Co. Ltd.)), 우토밀루맙 또는 우렐루맙 또는 그의 단편, 유도체, 접합체, 변이체 또는 바이오시밀러이다. 바람직한 실시양태에서, 4-1BB 효능제는 우토밀루맙 또는 우렐루맙 또는 그의 단편, 유도체, 접합체, 변이체 또는 바이오시밀러이다.
바람직한 실시양태에서, 4-1BB 효능제 또는 4-1BB 결합 분자는 또한 융합 단백질일 수 있다. 바람직한 실시양태에서, 다량체 4-1BB 효능제, 예컨대 삼량체 또는 육량체 4-1BB 효능제 (3개 또는 6개의 리간드 결합 도메인을 가짐)는, 전형적으로 2개의 리간드 결합 도메인을 보유하는 효능작용 모노클로날 항체와 비교하여 우수한 수용체 (4-1BBL) 클러스터링 및 내부 세포 신호전달 복합체 형성을 유도할 수 있다. 3개의 TNFRSF 결합 도메인 및 IgG1-Fc를 포함하고 임의로 이들 융합 단백질 중 2개 이상을 추가로 연결하는 삼량체 (3가) 또는 육량체 (또는 6가) 또는 그보다 더 큰 융합 단백질이, 예를 들어 문헌 [Gieffers, et al., Mol. Cancer Therapeutics 2013, 12, 2735-47]에 기재되어 있다.
효능작용 4-1BB 항체 및 융합 단백질은 강한 면역 반응을 유도하는 것으로 공지되어 있다. 바람직한 실시양태에서, 4-1BB 효능제는 독성을 감소시키기에 충분한 방식으로 4-1BB 항원에 특이적으로 결합하는 모노클로날 항체 또는 융합 단백질이다. 일부 실시양태에서, 4-1BB 효능제는 항체-의존성 세포 독성 (ADCC), 예를 들어 NK 세포 세포독성을 제거하는 효능작용 4-1BB 모노클로날 항체 또는 융합 단백질이다. 일부 실시양태에서, 4-1BB 효능제는 항체-의존성 세포 식세포작용 (ADCP)을 제거하는 효능작용 4-1BB 모노클로날 항체 또는 융합 단백질이다. 일부 실시양태에서, 4-1BB 효능제는 보체-의존성 세포독성 (CDC)을 제거하는 효능작용 4-1BB 모노클로날 항체 또는 융합 단백질이다. 일부 실시양태에서, 4-1BB 효능제는 Fc 영역 기능성을 제거하는 효능작용 4-1BB 모노클로날 항체 또는 융합 단백질이다.
일부 실시양태에서, 4-1BB 효능제는 인간 4-1BB (서열식별번호: 9)에 높은 친화도 및 효능작용 활성으로 결합하는 것을 특징으로 한다. 한 실시양태에서, 4-1BB 효능제는 인간 4-1BB (서열식별번호: 9)에 결합하는 결합 분자이다. 한 실시양태에서, 4-1BB 효능제는 뮤린 4-1BB (서열식별번호: 10)에 결합하는 결합 분자이다. 4-1BB 효능제 또는 결합 분자가 결합하는 4-1BB 항원의 아미노산 서열은 표 3에 요약되어 있다.
표 3. 4-1BB 항원의 아미노산 서열
일부 실시양태에서, 기재된 조성물, 과정 및 방법은 약 100 pM 이하의 KD로 인간 또는 뮤린 4-1BB에 결합하거나, 약 90 pM 이하의 KD로 인간 또는 뮤린 4-1BB에 결합하거나, 약 80 pM 이하의 KD로 인간 또는 뮤린 4-1BB에 결합하거나, 약 70 pM 이하의 KD로 인간 또는 뮤린 4-1BB에 결합하거나, 약 60 pM 이하의 KD로 인간 또는 뮤린 4-1BB에 결합하거나, 약 50 pM 이하의 KD로 인간 또는 뮤린 4-1BB에 결합하거나, 약 40 pM 이하의 KD로 인간 또는 뮤린 4-1BB에 결합하거나, 또는 약 30 pM 이하의 KD로 인간 또는 뮤린 4-1BB에 결합하는 4-1BB 효능제를 포함한다.
일부 실시양태에서, 기재된 조성물, 과정 및 방법은 약 7.5 x 105 l/M·s 또는 더 빠른 kassoc로 인간 또는 뮤린 4-1BB에 결합하거나, 약 7.5 x 105 l/M·s 또는 더 빠른 kassoc로 인간 또는 뮤린 4-1BB에 결합하거나, 약 8 x 105 l/M·s 또는 더 빠른 kassoc로 인간 또는 뮤린 4-1BB에 결합하거나, 약 8.5 x 105 l/M·s 또는 더 빠른 kassoc로 인간 또는 뮤린 4-1BB에 결합하거나, 약 9 x 105 l/M·s 또는 더 빠른 kassoc로 인간 또는 뮤린 4-1BB에 결합하거나, 약 9.5 x 105 l/M·s 또는 더 빠른 kassoc로 인간 또는 뮤린 4-1BB에 결합하거나, 또는 약 1 x 106 l/M·s 또는 더 빠른 kassoc로 인간 또는 뮤린 4-1BB에 결합하는 4-1BB 효능제를 포함한다.
일부 실시양태에서, 기재된 조성물, 과정 및 방법은 약 2 x 10-5 l/s 또는 더 느린 kdissoc로 인간 또는 뮤린 4-1BB에 결합하거나, 약 2.1 x 10-5 l/s 또는 더 느린 kdissoc로 인간 또는 뮤린 4-1BB에 결합하거나, 약 2.2 x 10-5 l/s 또는 더 느린 kdissoc로 인간 또는 뮤린 4-1BB에 결합하거나, 약 2.3 x 10-5 l/s 또는 더 느린 kdissoc로 인간 또는 뮤린 4-1BB에 결합하거나, 약 2.4 x 10-5 l/s 또는 더 느린 kdissoc로 인간 또는 뮤린 4-1BB에 결합하거나, 약 2.5 x 10-5 l/s 또는 더 느린 kdissoc로 인간 또는 뮤린 4-1BB에 결합하거나, 약 2.6 x 10-5 l/s 또는 더 느린 kdissoc로 인간 또는 뮤린 4-1BB에 결합하거나, 약 2.7 x 10-5 l/s 또는 더 느린 kdissoc로 인간 또는 뮤린 4-1BB에 결합하거나, 약 2.8 x 10-5 l/s 또는 더 느린 kdissoc로 인간 또는 뮤린 4-1BB에 결합하거나, 약 2.9 x 10-5 l/s 또는 더 느린 kdissoc로 인간 또는 뮤린 4-1BB에 결합하거나, 또는 약 3 x 10-5 l/s 또는 더 느린 kdissoc로 인간 또는 뮤린 4-1BB에 결합하는 4-1BB 효능제를 포함한다.
일부 실시양태에서, 기재된 조성물, 과정 및 방법은 약 10 nM 이하의 IC50으로 인간 또는 뮤린 4-1BB에 결합하거나, 약 9 nM 이하의 IC50으로 인간 또는 뮤린 4-1BB에 결합하거나, 약 8 nM 이하의 IC50으로 인간 또는 뮤린 4-1BB에 결합하거나, 약 7 nM 이하의 IC50으로 인간 또는 뮤린 4-1BB에 결합하거나, 약 6 nM 이하의 IC50으로 인간 또는 뮤린 4-1BB에 결합하거나, 약 5 nM 이하의 IC50으로 인간 또는 뮤린 4-1BB에 결합하거나, 약 4 nM 이하의 IC50으로 인간 또는 뮤린 4-1BB에 결합하거나, 약 3 nM 이하의 IC50으로 인간 또는 뮤린 4-1BB에 결합하거나, 약 2 nM 이하의 IC50으로 인간 또는 뮤린 4-1BB에 결합하거나, 또는 약 1 nM 이하의 IC50으로 인간 또는 뮤린 4-1BB에 결합하는 4-1BB 효능제를 포함한다.
바람직한 실시양태에서, 4-1BB 효능제는 PF-05082566 또는 MOR-7480으로도 또한 공지된 우토밀루맙 또는 그의 단편, 유도체, 변이체 또는 바이오시밀러이다. 우토밀루맙은 화이자, 인크.(Pfizer, Inc.)로부터 입수가능하다. 우토밀루맙은 이뮤노글로불린 G2-람다, 항-[호모 사피엔스 TNFRSF9 (종양 괴사 인자 수용체 (TNFR) 슈퍼패밀리 구성원 9, 4-1BB, T 세포 항원 ILA, CD137)], 호모 사피엔스 (완전 인간) 모노클로날 항체이다. 우토밀루맙의 아미노산 서열은 표 4에 제시된다. 우토밀루맙은 Asn59 및 Asn292에서의 글리코실화 부위; 위치 22-96 (VH-VL), 143-199 (CH1-CL), 256-316 (CH2) 및 362-420 (CH3)에서의 중쇄 쇄내 디술피드 가교; 위치 22'-87' (VH-VL) 및 136'-195' (CH1-CL)에서의 경쇄 쇄내 디술피드 가교; IgG2A 이소형 위치 218-218, 219-219, 222-222 및 225-225, IgG2A/B 이소형 위치 218-130, 219-219, 222-222 및 225-225, 및 IgG2B 이소형 위치 219-130 (2), 222-222 및 225-225에서의 쇄간 중쇄-중쇄 디술피드 가교; 및 IgG2A 이소형 위치 130-213' (2), IgG2A/B 이소형 위치 218-213' 및 130-213', 및 IgG2B 이소형 위치 218-213' (2)에서의 쇄간 중쇄-경쇄 디술피드 가교를 포함한다. 우토밀루맙 및 그의 변이체 및 단편의 제조 및 특성은 미국 특허 번호 8,821,867; 8,337,850; 및 9,468,678, 및 국제 특허 출원 공개 번호 WO 2012/032433 A1 (이들 각각의 개시내용은 본원에 참조로 포함됨)에 기재되어 있다. 우토밀루맙의 전임상 특징은 문헌 [Fisher, et al., Cancer Immunolog. & Immunother. 2012, 61, 1721-33]에 기재되어 있다. 다양한 혈액 및 고형 종양 적응증에서의 우토밀루맙의 현행 임상 시험은 미국 국립 보건원 clinicaltrials.gov 식별자 NCT02444793, NCT01307267, NCT02315066 및 NCT02554812를 포함한다.
한 실시양태에서, 4-1BB 효능제는 서열식별번호: 11에 의해 제공된 중쇄 및 서열식별번호: 12에 의해 제공된 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, 4-1BB 효능제는 각각 서열식별번호: 11 및 서열식별번호: 12에 제시된 서열을 갖는 중쇄 및 경쇄, 또는 그의 항원 결합 단편, Fab 단편, 단일-쇄 가변 단편 (scFv), 변이체 또는 접합체를 포함한다. 한 실시양태에서, 4-1BB 효능제는 각각 서열식별번호: 11 및 서열식별번호: 12에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 99% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, 4-1BB 효능제는 각각 서열식별번호: 11 및 서열식별번호: 12에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 98% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, 4-1BB 효능제는 각각 서열식별번호: 11 및 서열식별번호: 12에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 97% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, 4-1BB 효능제는 각각 서열식별번호: 11 및 서열식별번호: 12에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 96% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, 4-1BB 효능제는 각각 서열식별번호: 11 및 서열식별번호: 12에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 95% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다.
한 실시양태에서, 4-1BB 효능제는 우토밀루맙의 중쇄 및 경쇄 CDR 또는 가변 영역 (VR)을 포함한다. 한 실시양태에서, 4-1BB 효능제 중쇄 가변 영역 (VH)은 서열식별번호: 13에 제시된 서열을 포함하고, 4-1BB 효능제 경쇄 가변 영역 (VL)은 서열식별번호: 14에 제시된 서열 및 그의 보존적 아미노산 치환을 포함한다. 한 실시양태에서, 4-1BB 효능제는 각각 서열식별번호: 13 및 서열식별번호: 14에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 99% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, 4-1BB 효능제는 각각 서열식별번호: 13 및 서열식별번호: 14에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 98% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, 4-1BB 효능제는 각각 서열식별번호: 13 및 서열식별번호: 14에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 97% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, 4-1BB 효능제는 각각 서열식별번호: 13 및 서열식별번호: 14에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 96% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, 4-1BB 효능제는 각각 서열식별번호: 13 및 서열식별번호: 14에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 95% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, 4-1BB 효능제는 서열식별번호: 13 및 서열식별번호: 14에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 99% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함하는 scFv 항체를 포함한다.
한 실시양태에서, 4-1BB 효능제는 각각 서열식별번호: 15, 서열식별번호: 16 및 서열식별번호: 17에 제시된 서열 및 그의 보존적 아미노산 치환을 갖는 중쇄 CDR1, CDR2 및 CDR3 도메인, 및 각각 서열식별번호: 18, 서열식별번호: 19 및 서열식별번호: 20에 제시된 서열 및 그의 보존적 아미노산 치환을 갖는 경쇄 CDR1, CDR2 및 CDR3 도메인을 포함한다.
한 실시양태에서, 4-1BB 효능제는 우토밀루맙에 관하여 약물 규제 기관에 의해 승인된 4-1BB 효능제 바이오시밀러 모노클로날 항체이다. 한 실시양태에서, 바이오시밀러 모노클로날 항체는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품의 아미노산 서열에 대해 적어도 97% 서열 동일성, 예를 들어 97%, 98%, 99% 또는 100% 서열 동일성을 갖고 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품과 비교하여 1개 이상의 번역후 변형을 포함하는 아미노산 서열을 포함하는 4-1BB 항체를 포함하며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 우토밀루맙이다. 일부 실시양태에서, 1개 이상의 번역후 변형은 다음 중 하나 이상으로부터 선택된다: 글리코실화, 산화, 탈아미드화 및 말단절단. 일부 실시양태에서, 바이오시밀러는 인가된 또는 인가를 위해 제출된 4-1BB 효능제 항체이며, 여기서 4-1BB 효능제 항체는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품의 제제와 상이한 제제로 제공되며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 우토밀루맙이다. 4-1BB 효능제 항체는 약물 규제 기관, 예컨대 미국 FDA 및/또는 유럽 연합 EMA에 의해 인가될 수 있다. 일부 실시양태에서, 바이오시밀러는 1종 이상의 부형제를 추가로 포함하는 조성물로서 제공되며, 여기서 1종 이상의 부형제는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품에 포함된 부형제와 동일하거나 상이하며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 우토밀루맙이다. 일부 실시양태에서, 바이오시밀러는 1종 이상의 부형제를 추가로 포함하는 조성물로서 제공되며, 여기서 1종 이상의 부형제는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품에 포함된 부형제와 동일하거나 상이하며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 우토밀루맙이다.
표 4. 우토밀루맙에 관한 4-1BB 효능제 항체에 대한 아미노산 서열.
바람직한 실시양태에서, 4-1BB 효능제는 BMS-663513 및 20H4.9.h4a로도 또한 공지된 모노클로날 항체 우렐루맙 또는 그의 단편, 유도체, 변이체 또는 바이오시밀러이다. 우렐루맙은 브리스톨-마이어스 스큅, 인크.(Bristol-Myers Squibb, Inc.) 및 크리에이티브 바이오랩스, 인크.로부터 입수가능하다. 우렐루맙은 이뮤노글로불린 G4-카파, 항-[호모 사피엔스 TNFRSF9 (종양 괴사 인자 수용체 슈퍼패밀리 구성원 9, 4-1BB, T 세포 항원 ILA, CD137)], 호모 사피엔스 (완전 인간) 모노클로날 항체이다. 우렐루맙의 아미노산 서열은 표 5에 제시된다. 우렐루맙은 위치 298 (및 298")에서의 N-글리코실화 부위; 위치 22-95 (VH-VL), 148-204 (CH1-CL), 262-322 (CH2) 및 368-426 (CH3) (및 위치 22"-95", 148"-204", 262"-322" 및 368"-426")에서의 중쇄 쇄내 디술피드 가교; 위치 23'-88' (VH-VL) 및 136'-196' (CH1-CL) (및 위치 23"'-88"' 및 136"'-196"')에서의 경쇄 쇄내 디술피드 가교; 위치 227-227" 및 230-230"에서의 쇄간 중쇄-중쇄 디술피드 가교; 및 135-216' 및 135"-216"'에서의 쇄간 중쇄-경쇄 디술피드 가교를 포함한다. 우렐루맙 및 그의 변이체 및 단편의 제조 및 특성은 미국 특허 번호 7,288,638 및 8,962,804 (이들의 개시내용은 본원에 참조로 포함됨)에 기재되어 있다. 우렐루맙의 전임상 및 임상 특징은 http:/dx.doi.org/10.1158/1078-0432.CCR-16-1272로부터 이용가능한 문헌 [Segal, et al., Clin. Cancer Res. 2016]에 기재되어 있다. 다양한 혈액 및 고형 종양 적응증에서의 우렐루맙의 현행 임상 시험은 미국 국립 보건원 clinicaltrials.gov 식별자 NCT01775631, NCT02110082, NCT02253992 및 NCT01471210을 포함한다.
한 실시양태에서, 4-1BB 효능제는 서열식별번호: 21에 의해 제공된 중쇄 및 서열식별번호: 22에 의해 제공된 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, 4-1BB 효능제는 각각 서열식별번호: 21 및 서열식별번호: 22에 제시된 서열을 갖는 중쇄 및 경쇄, 또는 그의 항원 결합 단편, Fab 단편, 단일-쇄 가변 단편 (scFv), 변이체 또는 접합체를 포함한다. 한 실시양태에서, 4-1BB 효능제는 각각 서열식별번호: 21 및 서열식별번호: 22에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 99% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, 4-1BB 효능제는 각각 서열식별번호: 21 및 서열식별번호: 22에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 98% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, 4-1BB 효능제는 각각 서열식별번호: 21 및 서열식별번호: 22에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 97% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, 4-1BB 효능제는 각각 서열식별번호: 21 및 서열식별번호: 22에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 96% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, 4-1BB 효능제는 각각 서열식별번호: 21 및 서열식별번호: 22에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 95% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다.
한 실시양태에서, 4-1BB 효능제는 우렐루맙의 중쇄 및 경쇄 CDR 또는 가변 영역 (VR)을 포함한다. 한 실시양태에서, 4-1BB 효능제 중쇄 가변 영역 (VH)은 서열식별번호: 23에 제시된 서열을 포함하고, 4-1BB 효능제 경쇄 가변 영역 (VL)은 서열식별번호: 24에 제시된 서열 및 그의 보존적 아미노산 치환을 포함한다. 한 실시양태에서, 4-1BB 효능제는 각각 서열식별번호: 23 및 서열식별번호: 24에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 99% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, 4-1BB 효능제는 각각 서열식별번호: 23 및 서열식별번호: 24에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 98% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, 4-1BB 효능제는 각각 서열식별번호: 23 및 서열식별번호: 24에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 97% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, 4-1BB 효능제는 각각 서열식별번호: 23 및 서열식별번호: 24에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 96% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, 4-1BB 효능제는 각각 서열식별번호: 23 및 서열식별번호: 24에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 95% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, 4-1BB 효능제는 서열식별번호: 23 및 서열식별번호: 24에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 99% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함하는 scFv 항체를 포함한다.
한 실시양태에서, 4-1BB 효능제는 각각 서열식별번호: 25, 서열식별번호: 26 및 서열식별번호: 27에 제시된 서열 및 그의 보존적 아미노산 치환을 갖는 중쇄 CDR1, CDR2 및 CDR3 도메인, 및 각각 서열식별번호: 28, 서열식별번호: 29 및 서열식별번호: 30에 제시된 서열 및 그의 보존적 아미노산 치환을 갖는 경쇄 CDR1, CDR2 및 CDR3 도메인을 포함한다.
한 실시양태에서, 4-1BB 효능제는 우렐루맙에 관하여 약물 규제 기관에 의해 승인된 4-1BB 효능제 바이오시밀러 모노클로날 항체이다. 한 실시양태에서, 바이오시밀러 모노클로날 항체는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품의 아미노산 서열에 대해 적어도 97% 서열 동일성, 예를 들어 97%, 98%, 99% 또는 100% 서열 동일성을 갖고 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품과 비교하여 1개 이상의 번역후 변형을 포함하는 아미노산 서열을 포함하는 4-1BB 항체를 포함하며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 우렐루맙이다. 일부 실시양태에서, 1개 이상의 번역후 변형은 다음 중 하나 이상으로부터 선택된다: 글리코실화, 산화, 탈아미드화 및 말단절단. 일부 실시양태에서, 바이오시밀러는 인가된 또는 인가를 위해 제출된 4-1BB 효능제 항체이며, 여기서 4-1BB 효능제 항체는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품의 제제와 상이한 제제로 제공되며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 우렐루맙이다. 4-1BB 효능제 항체는 약물 규제 기관, 예컨대 미국 FDA 및/또는 유럽 연합 EMA에 의해 인가될 수 있다. 일부 실시양태에서, 바이오시밀러는 1종 이상의 부형제를 추가로 포함하는 조성물로서 제공되며, 여기서 1종 이상의 부형제는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품에 포함된 부형제와 동일하거나 상이하며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 우렐루맙이다. 일부 실시양태에서, 바이오시밀러는 1종 이상의 부형제를 추가로 포함하는 조성물로서 제공되며, 여기서 1종 이상의 부형제는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품에 포함된 부형제와 동일하거나 상이하며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 우렐루맙이다.
표 5. 우렐루맙에 관한 4-1BB 효능제 항체에 대한 아미노산 서열.
한 실시양태에서, 4-1BB 효능제는 1D8, 3E1, 4B4 (바이오레전드(BioLegend) 309809), H4-1BB-M127 (비디 파밍겐(BD Pharmingen) 552532), BBK2 (써모 피셔(Thermo Fisher) MS621PABX), 145501 (레인코 테크놀로지스(Leinco Technologies) B591), ATCC 번호 HB-11248로 기탁되고 미국 특허 번호 6,974,863에 개시된 세포주에 의해 생산된 항체, 5F4 (바이오레전드 311503), C65-485 (비디 파밍겐 559446), 미국 특허 출원 공개 번호 US 2005/0095244에 개시된 항체, 미국 특허 번호 7,288,638에 개시된 항체 (예컨대 20H4.9-IgG1 (BMS-663031)), 미국 특허 번호 6,887,673에 개시된 항체 (예컨대 4E9 또는 BMS-554271), 미국 특허 번호 7,214,493에 개시된 항체, 미국 특허 번호 6,303,121에 개시된 항체, 미국 특허 번호 6,569,997에 개시된 항체, 미국 특허 번호 6,905,685에 개시된 항체 (예컨대 4E9 또는 BMS-554271), 미국 특허 번호 6,362,325에 개시된 항체 (예컨대 1D8 또는 BMS-469492; 3H3 또는 BMS-469497; 또는 3E1), 미국 특허 번호 6,974,863에 개시된 항체 (예컨대 53A2); 미국 특허 번호 6,210,669에 개시된 항체 (예컨대 1D8, 3B8, 또는 3E1), 미국 특허 번호 5,928,893에 기재된 항체, 미국 특허 번호 6,303,121에 개시된 항체, 미국 특허 번호 6,569,997에 개시된 항체, 국제 특허 출원 공개 번호 WO 2012/177788, WO 2015/119923 및 WO 2010/042433에 개시된 항체 및 그의 단편, 유도체, 접합체, 변이체 또는 바이오시밀러로 이루어진 군으로부터 선택되며, 여기서 상기 특허 또는 특허 출원 공개 각각의 개시내용은 본원에 참조로 포함된다.
한 실시양태에서, 4-1BB 효능제는 국제 특허 출원 공개 번호 WO 2008/025516 A1, WO 2009/007120 A1, WO 2010/003766 A1, WO 2010/010051 A1 및 WO 2010/078966 A1; 미국 특허 출원 공개 번호 US 2011/0027218 A1, US 2015/0126709 A1, US 2011/0111494 A1, US 2015/0110734 A1 및 US 2015/0126710 A1; 및 미국 특허 번호 9,359,420, 9,340,599, 8,921,519 및 8,450,460 (이들의 개시내용은 본원에 참조로 포함됨)에 기재된 4-1BB 효능작용 융합 단백질이다.
한 실시양태에서, 4-1BB 효능제는 구조 I-A (C-말단 Fc-항체 단편 융합 단백질) 또는 구조 I-B (N-말단 Fc-항체 단편 융합 단백질)에 도시된 바와 같은 4-1BB 효능작용 융합 단백질 또는 그의 단편, 유도체, 접합체, 변이체 또는 바이오시밀러이다:
구조 I-A 및 I-B에서, 원통형은 개별 폴리펩티드 결합 도메인을 지칭한다. 구조 I-A 및 I-B는, 예를 들어 4-1BBL 또는 4-1BB에 결합하는 항체로부터 유도된 3개의 선형으로-연결된 TNFRSF 결합 도메인을 포함하며, 이들은 폴딩되어 3가 단백질을 형성하고, 이는 이어서 IgG1-Fc (CH3 및 CH2 도메인 포함)를 통해 제2의 3가 단백질에 연결되며, 이는 이어서 디술피드 결합을 통해 2개의 3가 단백질을 함께 연결하는데 사용되어 (소형의 신장된 타원형), 구조를 안정화시키고 6개의 수용체의 세포내 신호전달 도메인 및 신호전달 단백질을 함께 합쳐 신호절달 복합체를 제공할 수 있는 효능제를 제공한다. 원통형으로서 표시된 TNFRSF 결합 도메인은, 예를 들어 친수성 잔기 및 가요성을 위한 Gly 및 Ser 서열, 뿐만 아니라 용해도를 위한 Glu 및 Lys을 포함할 수 있는 링커에 의해 연결된 VH 및 VL 쇄를 포함하는 scFv 도메인일 수 있다. 임의의 scFv 도메인 설계, 예컨대 문헌 [de Marco, Microbial Cell Factories, 2011, 10, 44; Ahmad, et al., Clin. & Dev. Immunol. 2012, 980250; Monnier, et al., Antibodies, 2013, 2, 193-208]; 또는 본원 다른 곳에 포함된 참고문헌에 기재된 것들이 사용될 수 있다. 이러한 형태의 융합 단백질 구조는 미국 특허 번호 9,359,420, 9,340,599, 8,921,519 및 8,450,460 (이들의 개시내용은 본원에 참조로 포함됨)에 기재되어 있다.
구조 I-A의 다른 폴리펩티드 도메인에 대한 아미노산 서열은 표 6에 제공된다. Fc 도메인은 바람직하게는 완전 불변 도메인 (서열식별번호: 31의 아미노산 17-230) 및 완전 힌지 도메인 (서열식별번호: 31의 아미노산 1-16) 또는 힌지 도메인의 한 부분 (예를 들어, 서열식별번호: 31의 아미노산 4-16)을 포함한다. C-말단 Fc-항체를 연결시키기 위한 바람직한 링커는 추가의 폴리펩티드의 융합에 적합한 링커를 포함한, 서열식별번호: 32 내지 서열식별번호: 41에 제공된 실시양태로부터 선택될 수 있다.
표 6. C-말단 Fc-항체 단편 융합 단백질 설계 (구조 I-A)를 갖는, 4-1BB 융합 단백질을 포함한 TNFRSF 융합 단백질에 대한 아미노산 서열.
구조 I-B의 다른 폴리펩티드 도메인에 대한 아미노산 서열은 표 7에 제공된다. Fc 항체 단편이 구조 I-B에서와 같이 TNRFSF 융합 단백질의 N-말단에 융합되는 경우에, Fc 모듈의 서열은 바람직하게는 서열식별번호: 42에 제시된 것이고, 링커 서열은 바람직하게는 서열식별번호: 43 내지 서열식별번호: 45에 제시된 실시양태로부터 선택된다.
표 7. N-말단 Fc-항체 단편 융합 단백질 설계 (구조 I-B)를 갖는, 4-1BB 융합 단백질을 포함한 TNFRSF 융합 단백질에 대한 아미노산 서열.
한 실시양태에서, 구조 I-A 또는 I-B에 따른 4-1BB 효능제 융합 단백질은 우토밀루맙의 가변 중쇄 및 가변 경쇄, 우렐루맙의 가변 중쇄 및 가변 경쇄, 우토밀루맙의 가변 중쇄 및 가변 경쇄, 표 8에 기재된 가변 중쇄 및 가변 경쇄로부터 선택된 가변 중쇄 및 가변 경쇄, 상기의 가변 중쇄 및 가변 경쇄의 임의의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 4-1BB 결합 도메인 및 그의 단편, 유도체, 접합체, 변이체 및 바이오시밀러를 포함한다.
한 실시양태에서, 구조 I-A 또는 I-B에 따른 4-1BB 효능제 융합 단백질은 4-1BBL 서열을 포함하는 1개 이상의 4-1BB 결합 도메인을 포함한다. 한 실시양태에서, 구조 I-A 또는 I-B에 따른 4-1BB 효능제 융합 단백질은 서열식별번호: 46에 따른 서열을 포함하는 1개 이상의 4-1BB 결합 도메인을 포함한다. 한 실시양태에서, 구조 I-A 또는 I-B에 따른 4-1BB 효능제 융합 단백질은 가용성 4-1BBL 서열을 포함하는 1개 이상의 4-1BB 결합 도메인을 포함한다. 한 실시양태에서, 구조 I-A 또는 I-B에 따른 4-1BB 효능제 융합 단백질은 서열식별번호: 47에 따른 서열을 포함하는 1개 이상의 4-1BB 결합 도메인을 포함한다.
한 실시양태에서, 구조 I-A 또는 I-B에 따른 4-1BB 효능제 융합 단백질은 각각 서열식별번호: 13 및 서열식별번호: 14에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 95% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함하는 scFv 도메인이며, 여기서 VH 및 VL 도메인은 링커로 연결되는 것인 1개 이상의 4-1BB 결합 도메인을 포함한다. 한 실시양태에서, 구조 I-A 또는 I-B에 따른 4-1BB 효능제 융합 단백질은 각각 서열식별번호: 23 및 서열식별번호: 24에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 95% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함하는 scFv 도메인이며, 여기서 VH 및 VL 도메인은 링커로 연결되는 것인 1개 이상의 4-1BB 결합 도메인을 포함한다. 한 실시양태에서, 구조 I-A 또는 I-B에 따른 4-1BB 효능제 융합 단백질은 표 8에 제공된 VH 및 VL 서열에 대해 각각 적어도 95% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함하는 scFv 도메인이며, 여기서 VH 및 VL 도메인은 링커로 연결되는 것인 1개 이상의 4-1BB 결합 도메인을 포함한다.
표 8. 융합 단백질 내의 4-1BB 결합 도메인으로서 또는 scFv 4-1BB 효능제 항체로서 유용한 추가의 폴리펩티드 도메인.
한 실시양태에서, 4-1BB 효능제는 (i) 제1 가용성 4-1BB 결합 도메인; (ii) 제1 펩티드 링커; (iii) 제2 가용성 4-1BB 결합 도메인; (iv) 제2 펩티드 링커 및 (v) 제3 가용성 4-1BB 결합 도메인을 포함하고, N-말단 및/또는 C-말단 단부에 추가의 도메인을 추가로 포함하며, 여기서 추가의 도메인은 Fab 또는 Fc 단편 도메인인, 4-1BB 효능작용 단일-쇄 융합 폴리펩티드이다. 한 실시양태에서, 4-1BB 효능제는 (i) 제1 가용성 4-1BB 결합 도메인; (ii) 제1 펩티드 링커; (iii) 제2 가용성 4-1BB 결합 도메인; (iv) 제2 펩티드 링커 및 (v) 제3 가용성 4-1BB 결합 도메인을 포함하고, N-말단 및/또는 C-말단 단부에 추가의 도메인을 추가로 포함하며, 여기서 추가의 도메인은 Fab 또는 Fc 단편 도메인이고, 각각의 가용성 4-1BB 도메인에는 줄기 영역 (이는 삼량체화에 기여하고, 세포 막까지의 특정 거리를 제공하지만, 4-1BB 결합 도메인의 부분은 아님)이 결여되어 있고, 제1 및 제2 펩티드 링커는 독립적으로 3-8개 아미노산의 길이를 갖는 것인, 4-1BB 효능작용 단일-쇄 융합 폴리펩티드이다.
한 실시양태에서, 4-1BB 효능제는 (i) 제1 가용성 종양 괴사 인자 (TNF) 슈퍼패밀리 시토카인 도메인; (ii) 제1 펩티드 링커; (iii) 제2 가용성 TNF 슈퍼패밀리 시토카인 도메인; (iv) 제2 펩티드 링커 및 (v) 제3 가용성 TNF 슈퍼패밀리 시토카인 도메인을 포함하며, 여기서 각각의 가용성 TNF 슈퍼패밀리 시토카인 도메인에는 줄기 영역이 결여되어 있고, 제1 및 제2 펩티드 링커는 독립적으로 3-8개 아미노산의 길이를 갖고, 각각의 TNF 슈퍼패밀리 시토카인 도메인은 4-1BB 결합 도메인인 4-1BB 효능작용 단일-쇄 융합 폴리펩티드이다.
한 실시양태에서, 4-1BB 효능제는 임의의 상기 VL 도메인에 연결된 임의의 상기 VH 도메인을 포함하는 4-1BB 효능작용 scFv 항체이다.
한 실시양태에서, 4-1BB 효능제는 미국 캘리포니아주 샌디에고 소재 BPS 바이오사이언스로부터 상업적으로 입수가능한 BPS 바이오사이언스 4-1BB 효능제 항체 카탈로그 번호 79097-2이다. 한 실시양태에서, 4-1BB 효능제는 미국 뉴욕주 셜리 소재 크리에이티브 바이오랩스로부터 상업적으로 입수가능한 크리에이티브 바이오랩스 4-1BB 효능제 항체 카탈로그 번호 MOM-18179이다.
OX40 (CD134) 효능제
한 실시양태에서, TNFRSF 효능제는 OX40 (CD134) 효능제이다. OX40 효능제는 관련 기술분야에 공지된 임의의 OX40 결합 분자일 수 있다. OX40 결합 분자는 인간 또는 포유동물 OX40에 결합할 수 있는 모노클로날 항체 또는 융합 단백질일 수 있다. OX40 효능제 또는 OX40 결합 분자는 이뮤노글로불린 분자의 임의의 이소형 (예를 들어, IgG, IgE, IgM, IgD, IgA 및 IgY), 부류 (예를 들어, IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgA1 및 IgA2) 또는 하위부류의 이뮤노글로불린 중쇄를 포함할 수 있다. OX40 효능제 또는 OX40 결합 분자는 중쇄 및 경쇄를 둘 다 가질 수 있다. 본원에 사용된 용어 결합 분자는 또한 OX40에 결합하는 항체 (전장 항체 포함), 모노클로날 항체 (전장 모노클로날 항체 포함), 폴리클로날 항체, 다중특이적 항체 (예를 들어, 이중특이적 항체), 인간, 인간화 또는 키메라 항체, 및 항체 단편, 예를 들어, Fab 단편, F(ab') 단편, Fab 발현 라이브러리에 의해 생산된 단편, 상기 중 임의의 것의 에피토프-결합 단편, 및 항체의 조작된 형태, 예를 들어 scFv 분자를 포함한다. 한 실시양태에서, OX40 효능제는 완전 인간 항체인 항원 결합 단백질이다. 한 실시양태에서, OX40 효능제는 인간화 항체인 항원 결합 단백질이다. 일부 실시양태에서, 본원에 개시된 방법 및 조성물에 사용하기 위한 OX40 효능제는 항-OX40 항체, 인간 항-OX40 항체, 마우스 항-OX40 항체, 포유동물 항-OX40 항체, 모노클로날 항-OX40 항체, 폴리클로날 항-OX40 항체, 키메라 항-OX40 항체, 항-OX40 애드넥틴, 항-OX40 도메인 항체, 단일 쇄 항-OX40 단편, 중쇄 항-OX40 단편, 경쇄 항-OX40 단편, 항-OX40 융합 단백질 및 그의 단편, 유도체, 접합체, 변이체 또는 바이오시밀러를 포함한다. 바람직한 실시양태에서, OX40 효능제는 효능작용 항-OX40 인간화 또는 완전 인간 모노클로날 항체 (즉, 단세포주로부터 유래된 항체)이다.
바람직한 실시양태에서, OX40 효능제 또는 OX40 결합 분자는 또한 융합 단백질일 수 있다. OX40L에 융합된 Fc 도메인을 포함하는 OX40 융합 단백질은, 예를 들어 문헌 [Sadun, et al., J. Immunother. 2009, 182, 1481-89]에 기재되어 있다. 바람직한 실시양태에서, 다량체 OX40 효능제, 예컨대 삼량체 또는 육량체 OX40 효능제 (3개 또는 6개의 리간드 결합 도메인을 가짐)는, 전형적으로 2개의 리간드 결합 도메인을 보유하는 효능작용 모노클로날 항체와 비교하여 우수한 수용체 (OX40L) 클러스터링 및 내부 세포 신호전달 복합체 형성을 유도할 수 있다. 3개의 TNFRSF 결합 도메인 및 IgG1-Fc를 포함하고 임의로 이들 융합 단백질 중 2개 이상을 추가로 연결하는 삼량체 (3가) 또는 육량체 (또는 6가) 또는 그보다 더 큰 융합 단백질이, 예를 들어 문헌 [Gieffers, et al., Mol. Cancer Therapeutics 2013, 12, 2735-47]에 기재되어 있다.
효능작용 OX40 항체 및 융합 단백질은 강한 면역 반응을 유도하는 것으로 공지되어 있다. 문헌 [Curti, et al., Cancer Res. 2013, 73, 7189-98]. 바람직한 실시양태에서, OX40 효능제는 독성을 감소시키기에 충분한 방식으로 OX40 항원에 특이적으로 결합하는 모노클로날 항체 또는 융합 단백질이다. 일부 실시양태에서, OX40 효능제는 항체-의존성 세포 독성 (ADCC), 예를 들어 NK 세포 세포독성을 제거하는 효능작용 OX40 모노클로날 항체 또는 융합 단백질이다. 일부 실시양태에서, OX40 효능제는 항체-의존성 세포 식세포작용 (ADCP)을 제거하는 효능작용 OX40 모노클로날 항체 또는 융합 단백질이다. 일부 실시양태에서, OX40 효능제는 보체-의존성 세포독성 (CDC)을 제거하는 효능작용 OX40 모노클로날 항체 또는 융합 단백질이다. 일부 실시양태에서, OX40 효능제는 Fc 영역 기능성을 제거하는 효능작용 OX40 모노클로날 항체 또는 융합 단백질이다.
일부 실시양태에서, OX40 효능제는 높은 친화도 및 효능작용 활성으로 인간 OX40 (서열식별번호: 54)에 결합하는 것을 특징으로 한다. 한 실시양태에서, OX40 효능제는 인간 OX40 (서열식별번호: 54)에 결합하는 결합 분자이다. 한 실시양태에서, OX40 효능제는 뮤린 OX40 (서열식별번호: 55)에 결합하는 결합 분자이다. OX40 효능제 또는 결합 분자가 결합하는 OX40 항원의 아미노산 서열은 표 9에 요약되어 있다.
표 9. OX40 항원의 아미노산 서열.
일부 실시양태에서, 기재된 조성물, 과정 및 방법은 약 100 pM 이하의 KD로 인간 또는 뮤린 OX40에 결합하거나, 약 90 pM 이하의 KD로 인간 또는 뮤린 OX40에 결합하거나, 약 80 pM 이하의 KD로 인간 또는 뮤린 OX40에 결합하거나, 약 70 pM 이하의 KD로 인간 또는 뮤린 OX40에 결합하거나, 약 60 pM 이하의 KD로 인간 또는 뮤린 OX40에 결합하거나, 약 50 pM 이하의 KD로 인간 또는 뮤린 OX40에 결합하거나, 약 40 pM 이하의 KD로 인간 또는 뮤린 OX40에 결합하거나, 또는 약 30 pM 이하의 KD로 인간 또는 뮤린 OX40에 결합하는 OX40 효능제를 포함한다.
일부 실시양태에서, 기재된 조성물, 과정 및 방법은 약 7.5 x 105 l/M·s 또는 더 빠른 kassoc로 인간 또는 뮤린 OX40에 결합하거나, 약 7.5 x 105 l/M·s 또는 더 빠른 kassoc로 인간 또는 뮤린 OX40에 결합하거나, 약 8 x 105 l/M·s 또는 더 빠른 kassoc로 인간 또는 뮤린 OX40에 결합하거나, 약 8.5 x 105 l/M·s 또는 더 빠른 kassoc로 인간 또는 뮤린 OX40에 결합하거나, 약 9 x 105 l/M·s 또는 더 빠른 kassoc로 인간 또는 뮤린 OX40에 결합하거나, 약 9.5 x 105 l/M·s 또는 더 빠른 kassoc로 인간 또는 뮤린 OX40에 결합하거나, 또는 약 1 x 106 l/M·s 또는 더 빠른 kassoc로 인간 또는 뮤린 OX40에 결합하는 OX40 효능제를 포함한다.
일부 실시양태에서, 기재된 조성물, 과정 및 방법은 약 2 x 10-5 l/s 또는 더 느린 kdissoc로 인간 또는 뮤린 OX40에 결합하거나, 약 2.1 x 10-5 l/s 또는 더 느린 kdissoc로 인간 또는 뮤린 OX40에 결합하거나, 약 2.2 x 10-5 l/s 또는 더 느린 kdissoc로 인간 또는 뮤린 OX40에 결합하거나, 약 2.3 x 10-5 l/s 또는 더 느린 kdissoc로 인간 또는 뮤린 OX40에 결합하거나, 약 2.4 x 10-5 l/s 또는 더 느린 kdissoc로 인간 또는 뮤린 OX40에 결합하거나, 약 2.5 x 10-5 l/s 또는 더 느린 kdissoc로 인간 또는 뮤린 OX40에 결합하거나, 약 2.6 x 10-5 l/s 또는 더 느린 kdissoc로 인간 또는 뮤린 OX40에 결합하거나, 약 2.7 x 10-5 l/s 또는 더 느린 kdissoc로 인간 또는 뮤린 OX40에 결합하거나, 약 2.8 x 10-5 l/s 또는 더 느린 kdissoc로 인간 또는 뮤린 OX40에 결합하거나, 약 2.9 x 10-5 l/s 또는 더 느린 kdissoc로 인간 또는 뮤린 OX40에 결합하거나, 또는 약 3 x 10-5 l/s 또는 더 느린 kdissoc로 인간 또는 뮤린 OX40에 결합하는 OX40 효능제를 포함한다.
일부 실시양태에서, 기재된 조성물, 과정 및 방법은 약 10 nM 이하의 IC50으로 인간 또는 뮤린 OX40에 결합하거나, 약 9 nM 이하의 IC50으로 인간 또는 뮤린 OX40에 결합하거나, 약 8 nM 이하의 IC50으로 인간 또는 뮤린 OX40에 결합하거나, 약 7 nM 이하의 IC50으로 인간 또는 뮤린 OX40에 결합하거나, 약 6 nM 이하의 IC50으로 인간 또는 뮤린 OX40에 결합하거나, 약 5 nM 이하의 IC50으로 인간 또는 뮤린 OX40에 결합하거나, 약 4 nM 이하의 IC50으로 인간 또는 뮤린 OX40에 결합하거나, 약 3 nM 이하의 IC50으로 인간 또는 뮤린 OX40에 결합하거나, 약 2 nM 이하의 IC50으로 인간 또는 뮤린 OX40에 결합하거나, 또는 약 1 nM 이하의 IC50으로 인간 또는 뮤린 OX40에 결합하는 OX40 효능제를 포함한다.
일부 실시양태에서, OX40 효능제는 MEDI0562 또는 MEDI-0562로도 또한 공지된 타볼릭시주맙이다. 타볼릭시주맙은 아스트라제네카, 인크.(AstraZeneca, Inc.)의 자회사인 메드이뮨(MedImmune)으로부터 입수가능하다. 타볼릭시주맙은 이뮤노글로불린 G1-카파, 항-[호모 사피엔스 TNFRSF4 (종양 괴사 인자 수용체 (TNFR) 슈퍼패밀리 구성원 4, OX40, CD134)], 인간화 및 키메라 모노클로날 항체이다. 타볼릭시주맙의 아미노산 서열은 표 10에 제시된다. 타볼릭시주맙은 푸코실화 복합체 이중-안테나 CHO-유형 글리칸을 갖는, 위치 301 및 301"에서의 N-글리코실화 부위; 위치 22-95 (VH-VL), 148-204 (CH1-CL), 265-325 (CH2) 및 371-429 (CH3) (및 위치 22"-95", 148"-204", 265"-325" 및 371"-429")에서의 중쇄 쇄내 디술피드 가교; 위치 23'-88' (VH-VL) 및 134'-194' (CH1-CL) (및 위치 23"'-88"' 및 134"'-194"')에서의 경쇄 쇄내 디술피드 가교; 위치 230-230" 및 233-233"에서의 쇄간 중쇄-중쇄 디술피드 가교; 및 224-214' 및 224"-214"'에서의 쇄간 중쇄-경쇄 디술피드 가교를 포함한다. 다양한 고형 종양 적응증에서의 타볼릭시주맙의 현행 임상 시험은 미국 국립 보건원 clinicaltrials.gov 식별자 NCT02318394 및 NCT02705482를 포함한다.
한 실시양태에서, OX40 효능제는 서열식별번호: 56에 의해 제공된 중쇄 및 서열식별번호: 57에 의해 제공된 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, OX40 효능제는 각각 서열식별번호: 56 및 서열식별번호: 57에 제시된 서열을 갖는 중쇄 및 경쇄, 또는 그의 항원 결합 단편, Fab 단편, 단일-쇄 가변 단편 (scFv), 변이체 또는 접합체를 포함한다. 한 실시양태에서, OX40 효능제는 각각 서열식별번호: 56 및 서열식별번호: 57에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 99% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, OX40 효능제는 각각 서열식별번호: 56 및 서열식별번호: 57에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 98% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, OX40 효능제는 각각 서열식별번호: 56 및 서열식별번호: 57에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 97% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, OX40 효능제는 각각 서열식별번호: 56 및 서열식별번호: 57에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 96% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, OX40 효능제는 각각 서열식별번호: 56 및 서열식별번호: 57에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 95% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다.
한 실시양태에서, OX40 효능제는 타볼릭시주맙의 중쇄 및 경쇄 CDR 또는 가변 영역 (VR)을 포함한다. 한 실시양태에서, OX40 효능제 중쇄 가변 영역 (VH)은 서열식별번호: 58에 제시된 서열을 포함하고, OX40 효능제 경쇄 가변 영역 (VL)은 서열식별번호: 59에 제시된 서열 및 그의 보존적 아미노산 치환을 포함한다. 한 실시양태에서, OX40 효능제는 각각 서열식별번호: 58 및 서열식별번호: 59에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 99% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, OX40 효능제는 각각 서열식별번호: 58 및 서열식별번호: 59에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 98% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, OX40 효능제는 각각 서열식별번호: 58 및 서열식별번호: 59에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 97% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, OX40 효능제는 각각 서열식별번호: 58 및 서열식별번호: 59에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 96% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, OX40 효능제는 각각 서열식별번호: 58 및 서열식별번호: 59에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 95% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, OX40 효능제는 서열식별번호: 58 및 서열식별번호: 59에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 99% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함하는 scFv 항체를 포함한다.
한 실시양태에서, OX40 효능제는 각각 서열식별번호: 60, 서열식별번호: 61 및 서열식별번호: 62에 제시된 서열 및 그의 보존적 아미노산 치환을 갖는 중쇄 CDR1, CDR2 및 CDR3 도메인, 및 각각 서열식별번호: 63, 서열식별번호: 64 및 서열식별번호: 65에 제시된 서열 및 그의 보존적 아미노산 치환을 갖는 경쇄 CDR1, CDR2 및 CDR3 도메인을 포함한다.
한 실시양태에서, OX40 효능제는 타볼릭시주맙에 관하여 약물 규제 기관에 의해 승인된 OX40 효능제 바이오시밀러 모노클로날 항체이다. 한 실시양태에서, 바이오시밀러 모노클로날 항체는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품의 아미노산 서열에 대해 적어도 97% 서열 동일성, 예를 들어 97%, 98%, 99% 또는 100% 서열 동일성을 갖고 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품과 비교하여 1개 이상의 번역후 변형을 포함하는 아미노산 서열을 포함하는 OX40 항체를 포함하며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 타볼릭시주맙이다. 일부 실시양태에서, 1개 이상의 번역후 변형은 다음 중 하나 이상으로부터 선택된다: 글리코실화, 산화, 탈아미드화 및 말단절단. 일부 실시양태에서, 바이오시밀러는 인가된 또는 인가를 위해 제출된 OX40 효능제 항체이며, 여기서 OX40 효능제 항체는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품의 제제와 상이한 제제로 제공되며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 타볼릭시주맙이다. OX40 효능제 항체는 약물 규제 기관, 예컨대 미국 FDA 및/또는 유럽 연합 EMA에 의해 인가될 수 있다. 일부 실시양태에서, 바이오시밀러는 1종 이상의 부형제를 추가로 포함하는 조성물로서 제공되며, 여기서 1종 이상의 부형제는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품에 포함된 부형제와 동일하거나 상이하며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 타볼릭시주맙이다. 일부 실시양태에서, 바이오시밀러는 1종 이상의 부형제를 추가로 포함하는 조성물로서 제공되며, 여기서 1종 이상의 부형제는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품에 포함된 부형제와 동일하거나 상이하며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 타볼릭시주맙이다.
표 10. 타볼릭시주맙에 관한 OX40 효능제 항체에 대한 아미노산 서열.
일부 실시양태에서, OX40 효능제는 화이자, 인크.로붙 입수가능한 완전 인간 항체인 11D4이다. 11D4의 제조 및 특성은 미국 특허 번호 7,960,515; 8,236,930; 및 9,028,824 (이들의 개시내용은 본원에 참조로 포함됨)에 기재되어 있다. 11D4의 아미노산 서열은 표 11에 제시된다.
한 실시양태에서, OX40 효능제는 서열식별번호: 66에 의해 제공된 중쇄 및 서열식별번호: 67에 의해 제공된 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, OX40 효능제는 각각 서열식별번호: 66 및 서열식별번호: 67에 제시된 서열을 갖는 중쇄 및 경쇄, 또는 그의 항원 결합 단편, Fab 단편, 단일-쇄 가변 단편 (scFv), 변이체 또는 접합체를 포함한다. 한 실시양태에서, OX40 효능제는 각각 서열식별번호: 66 및 서열식별번호: 67에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 99% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, OX40 효능제는 각각 서열식별번호: 66 및 서열식별번호: 67에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 98% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, OX40 효능제는 각각 서열식별번호: 66 및 서열식별번호: 67에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 97% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, OX40 효능제는 각각 서열식별번호: 66 및 서열식별번호: 67에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 96% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, OX40 효능제는 각각 서열식별번호: 66 및 서열식별번호: 67에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 95% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다.
한 실시양태에서, OX40 효능제는 11D4의 중쇄 및 경쇄 CDR 또는 가변 영역 (VR)을 포함한다. 한 실시양태에서, OX40 효능제 중쇄 가변 영역 (VH)은 서열식별번호: 68에 제시된 서열을 포함하고, OX40 효능제 경쇄 가변 영역 (VL)은 서열식별번호: 69에 제시된 서열 및 그의 보존적 아미노산 치환을 포함한다. 한 실시양태에서, OX40 효능제는 각각 서열식별번호: 68 및 서열식별번호: 69에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 99% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, OX40 효능제는 각각 서열식별번호: 68 및 서열식별번호: 69에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 98% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, OX40 효능제는 각각 서열식별번호: 68 및 서열식별번호: 69에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 97% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, OX40 효능제는 각각 서열식별번호: 68 및 서열식별번호: 69에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 96% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, OX40 효능제는 각각 서열식별번호: 68 및 서열식별번호: 69에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 95% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다.
한 실시양태에서, OX40 효능제는 각각 서열식별번호: 70, 서열식별번호: 71 및 서열식별번호: 72에 제시된 서열 및 그의 보존적 치환을 갖는 중쇄 CDR1, CDR2 및 CDR3 도메인, 및 각각 서열식별번호: 73, 서열식별번호: 74 및 서열식별번호: 75에 제시된 서열 및 그의 보존적 아미노산 치환을 갖는 경쇄 CDR1, CDR2 및 CDR3 도메인을 포함한다.
한 실시양태에서, OX40 효능제는 11D4에 관하여 약물 규제 기관에 의해 승인된 OX40 효능제 바이오시밀러 모노클로날 항체이다. 한 실시양태에서, 바이오시밀러 모노클로날 항체는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품의 아미노산 서열에 대해 적어도 97% 서열 동일성, 예를 들어 97%, 98%, 99% 또는 100% 서열 동일성을 갖고 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품과 비교하여 1개 이상의 번역후 변형을 포함하는 아미노산 서열을 포함하는 OX40 항체를 포함하며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 11D4이다. 일부 실시양태에서, 1개 이상의 번역후 변형은 다음 중 하나 이상으로부터 선택된다: 글리코실화, 산화, 탈아미드화 및 말단절단. 일부 실시양태에서, 바이오시밀러는 인가된 또는 인가를 위해 제출된 OX40 효능제 항체이며, 여기서 OX40 효능제 항체는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품의 제제와 상이한 제제로 제공되며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 11D4이다. OX40 효능제 항체는 약물 규제 기관, 예컨대 미국 FDA 및/또는 유럽 연합 EMA에 의해 인가될 수 있다. 일부 실시양태에서, 바이오시밀러는 1종 이상의 부형제를 추가로 포함하는 조성물로서 제공되며, 여기서 1종 이상의 부형제는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품에 포함된 부형제와 동일하거나 상이하며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 11D4이다. 일부 실시양태에서, 바이오시밀러는 1종 이상의 부형제를 추가로 포함하는 조성물로서 제공되며, 여기서 1종 이상의 부형제는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품에 포함된 부형제와 동일하거나 상이하며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 11D4이다.
표 11. 11D4에 관한 OX40 효능제 항체에 대한 아미노산 서열.
일부 실시양태에서, OX40 효능제는 화이자, 인크.로부터 입수가능한 완전 인간 항체인 18D8이다. 18D8의 제조 및 특성은 미국 특허 번호 7,960,515; 8,236,930; 및 9,028,824 (이들의 개시내용은 본원에 참조로 포함됨)에 기재되어 있다. 18D8의 아미노산 서열은 표 12에 제시된다.
한 실시양태에서, OX40 효능제는 서열식별번호: 76에 의해 제공된 중쇄 및 서열식별번호: 77에 의해 제공된 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, OX40 효능제는 각각 서열식별번호: 76 및 서열식별번호: 77에 제시된 서열을 갖는 중쇄 및 경쇄, 또는 그의 항원 결합 단편, Fab 단편, 단일-쇄 가변 단편 (scFv), 변이체 또는 접합체를 포함한다. 한 실시양태에서, OX40 효능제는 각각 서열식별번호: 76 및 서열식별번호: 77에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 99% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, OX40 효능제는 각각 서열식별번호: 76 및 서열식별번호: 77에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 98% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, OX40 효능제는 각각 서열식별번호: 76 및 서열식별번호: 77에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 97% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, OX40 효능제는 각각 서열식별번호: 76 및 서열식별번호: 77에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 96% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, OX40 효능제는 각각 서열식별번호: 76 및 서열식별번호: 77에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 95% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다.
한 실시양태에서, OX40 효능제는 18D8의 중쇄 및 경쇄 CDR 또는 가변 영역 (VR)을 포함한다. 한 실시양태에서, OX40 효능제 중쇄 가변 영역 (VH)은 서열식별번호: 78에 제시된 서열을 포함하고, OX40 효능제 경쇄 가변 영역 (VL)은 서열식별번호: 79에 제시된 서열 및 그의 보존적 아미노산 치환을 포함한다. 한 실시양태에서, OX40 효능제는 각각 서열식별번호: 78 및 서열식별번호: 79에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 99% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, OX40 효능제는 각각 서열식별번호: 78 및 서열식별번호: 79에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 98% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, OX40 효능제는 각각 서열식별번호: 78 및 서열식별번호: 79에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 97% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, OX40 효능제는 각각 서열식별번호: 78 및 서열식별번호: 79에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 96% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, OX40 효능제는 각각 서열식별번호: 78 및 서열식별번호: 79에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 95% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다.
한 실시양태에서, OX40 효능제는 각각 서열식별번호: 80, 서열식별번호: 81 및 서열식별번호: 82에 제시된 서열 및 그의 보존적 아미노산 치환을 갖는 중쇄 CDR1, CDR2 및 CDR3 도메인, 및 각각 서열식별번호: 83, 서열식별번호: 84 및 서열식별번호: 85에 제시된 서열 및 그의 보존적 아미노산 치환을 갖는 경쇄 CDR1, CDR2 및 CDR3 도메인을 포함한다.
한 실시양태에서, OX40 효능제는 18D8에 관하여 약물 규제 기관에 의해 승인된 OX40 효능제 바이오시밀러 모노클로날 항체이다. 한 실시양태에서, 바이오시밀러 모노클로날 항체는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품의 아미노산 서열에 대해 적어도 97% 서열 동일성, 예를 들어 97%, 98%, 99% 또는 100% 서열 동일성을 갖고 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품과 비교하여 1개 이상의 번역후 변형을 포함하는 아미노산 서열을 포함하는 OX40 항체를 포함하며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 18D8이다. 일부 실시양태에서, 1개 이상의 번역후 변형은 다음 중 하나 이상으로부터 선택된다: 글리코실화, 산화, 탈아미드화 및 말단절단. 일부 실시양태에서, 바이오시밀러는 인가된 또는 인가를 위해 제출된 OX40 효능제 항체이며, 여기서 OX40 효능제 항체는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품의 제제와 상이한 제제로 제공되며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 18D8이다. OX40 효능제 항체는 약물 규제 기관, 예컨대 미국 FDA 및/또는 유럽 연합 EMA에 의해 인가될 수 있다. 일부 실시양태에서, 바이오시밀러는 1종 이상의 부형제를 추가로 포함하는 조성물로서 제공되며, 여기서 1종 이상의 부형제는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품에 포함된 부형제와 동일하거나 상이하며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 18D8이다. 일부 실시양태에서, 바이오시밀러는 1종 이상의 부형제를 추가로 포함하는 조성물로서 제공되며, 여기서 1종 이상의 부형제는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품에 포함된 부형제와 동일하거나 상이하며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 18D8이다.
표 12. 18D8에 관한 OX40 효능제 항체에 대한 아미노산 서열.
일부 실시양태에서, OX40 효능제는 글락소스미스클라인 피엘씨(GlaxoSmithKline plc)로부터 입수가능한 인간화 항체인 Hu119-122이다. Hu119-122의 제조 및 특성은 미국 특허 번호 9,006,399 및 9,163,085 및 국제 특허 공개 번호 WO 2012/027328 (이들의 개시내용은 본원에 참조로 포함됨)에 기재되어 있다. Hu119-122의 아미노산 서열은 표 13에 제시된다.
한 실시양태에서, OX40 효능제는 Hu119-122의 중쇄 및 경쇄 CDR 또는 가변 영역 (VR)을 포함한다. 한 실시양태에서, OX40 효능제 중쇄 가변 영역 (VH)은 서열식별번호: 86에 제시된 서열을 포함하고, OX40 효능제 경쇄 가변 영역 (VL)은 서열식별번호: 87에 제시된 서열 및 그의 보존적 아미노산 치환을 포함한다. 한 실시양태에서, OX40 효능제는 각각 서열식별번호: 86 및 서열식별번호: 87에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 99% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, OX40 효능제는 각각 서열식별번호: 86 및 서열식별번호: 87에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 98% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, OX40 효능제는 각각 서열식별번호: 86 및 서열식별번호: 87에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 97% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, OX40 효능제는 각각 서열식별번호: 86 및 서열식별번호: 87에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 96% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, OX40 효능제는 각각 서열식별번호: 86 및 서열식별번호: 87에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 95% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다.
한 실시양태에서, OX40 효능제는 각각 서열식별번호: 88, 서열식별번호: 89 및 서열식별번호: 90에 제시된 서열 및 그의 보존적 아미노산 치환을 갖는 중쇄 CDR1, CDR2 및 CDR3 도메인, 및 각각 서열식별번호: 91, 서열식별번호: 92 및 서열식별번호: 93에 제시된 서열 및 그의 보존적 아미노산 치환을 갖는 경쇄 CDR1, CDR2 및 CDR3 도메인을 포함한다.
한 실시양태에서, OX40 효능제는 Hu119-122에 관하여 약물 규제 기관에 의해 승인된 OX40 효능제 바이오시밀러 모노클로날 항체이다. 한 실시양태에서, 바이오시밀러 모노클로날 항체는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품의 아미노산 서열에 대해 적어도 97% 서열 동일성, 예를 들어 97%, 98%, 99% 또는 100% 서열 동일성을 갖고 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품과 비교하여 1개 이상의 번역후 변형을 포함하는 아미노산 서열을 포함하는 OX40 항체를 포함하며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 Hu119-122이다. 일부 실시양태에서, 1개 이상의 번역후 변형은 다음 중 하나 이상으로부터 선택된다: 글리코실화, 산화, 탈아미드화 및 말단절단. 일부 실시양태에서, 바이오시밀러는 인가된 또는 인가를 위해 제출된 OX40 효능제 항체이며, 여기서 OX40 효능제 항체는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품의 제제와 상이한 제제로 제공되며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 Hu119-122이다. OX40 효능제 항체는 약물 규제 기관, 예컨대 미국 FDA 및/또는 유럽 연합 EMA에 의해 인가될 수 있다. 일부 실시양태에서, 바이오시밀러는 1종 이상의 부형제를 추가로 포함하는 조성물로서 제공되며, 여기서 1종 이상의 부형제는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품에 포함된 부형제와 동일하거나 상이하며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 Hu119-122이다. 일부 실시양태에서, 바이오시밀러는 1종 이상의 부형제를 추가로 포함하는 조성물로서 제공되며, 여기서 1종 이상의 부형제는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품에 포함된 부형제와 동일하거나 상이하며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 Hu119-122이다.
표 13. Hu119-122에 관한 OX40 효능제 항체에 대한 아미노산 서열.
일부 실시양태에서, OX40 효능제는 글락소스미스클라인 피엘씨로부터 입수가능한 인간화 항체인 Hu106-222이다. Hu106-222의 제조 및 특성은 미국 특허 번호 9,006,399 및 9,163,085 및 국제 특허 공개 번호 WO 2012/027328 (이들의 개시내용은 본원에 참조로 포함됨)에 기재되어 있다. Hu106-222의 아미노산 서열은 표 14에 제시된다.
한 실시양태에서, OX40 효능제는 Hu106-222의 중쇄 및 경쇄 CDR 또는 가변 영역 (VR)을 포함한다. 한 실시양태에서, OX40 효능제 중쇄 가변 영역 (VH)은 서열식별번호: 94에 제시된 서열을 포함하고, OX40 효능제 경쇄 가변 영역 (VL)은 서열식별번호: 95에 제시된 서열 및 그의 보존적 아미노산 치환을 포함한다. 한 실시양태에서, OX40 효능제는 각각 서열식별번호: 94 및 서열식별번호: 95에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 99% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, OX40 효능제는 각각 서열식별번호: 94 및 서열식별번호: 95에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 98% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, OX40 효능제는 각각 서열식별번호: 94 및 서열식별번호: 95에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 97% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, OX40 효능제는 각각 서열식별번호: 94 및 서열식별번호: 95에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 96% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, OX40 효능제는 각각 서열식별번호: 94 및 서열식별번호: 95에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 95% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다.
한 실시양태에서, OX40 효능제는 각각 서열식별번호: 96, 서열식별번호: 97 및 서열식별번호: 98에 제시된 서열 및 그의 보존적 아미노산 치환을 갖는 중쇄 CDR1, CDR2 및 CDR3 도메인, 및 각각 서열식별번호: 99, 서열식별번호: 100 및 서열식별번호: 101에 제시된 서열 및 그의 보존적 아미노산 치환을 갖는 경쇄 CDR1, CDR2 및 CDR3 도메인을 포함한다.
한 실시양태에서, OX40 효능제는 Hu106-222에 관하여 약물 규제 기관에 의해 승인된 OX40 효능제 바이오시밀러 모노클로날 항체이다. 한 실시양태에서, 바이오시밀러 모노클로날 항체는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품의 아미노산 서열에 대해 적어도 97% 서열 동일성, 예를 들어 97%, 98%, 99% 또는 100% 서열 동일성을 갖고 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품과 비교하여 1개 이상의 번역후 변형을 포함하는 아미노산 서열을 포함하는 OX40 항체를 포함하며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 Hu106-222이다. 일부 실시양태에서, 1개 이상의 번역후 변형은 다음 중 하나 이상으로부터 선택된다: 글리코실화, 산화, 탈아미드화 및 말단절단. 일부 실시양태에서, 바이오시밀러는 인가된 또는 인가를 위해 제출된 OX40 효능제 항체이며, 여기서 OX40 효능제 항체는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품의 제제와 상이한 제제로 제공되며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 Hu106-222이다. OX40 효능제 항체는 약물 규제 기관, 예컨대 미국 FDA 및/또는 유럽 연합 EMA에 의해 인가될 수 있다. 일부 실시양태에서, 바이오시밀러는 1종 이상의 부형제를 추가로 포함하는 조성물로서 제공되며, 여기서 1종 이상의 부형제는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품에 포함된 부형제와 동일하거나 상이하며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 Hu106-222이다. 일부 실시양태에서, 바이오시밀러는 1종 이상의 부형제를 추가로 포함하는 조성물로서 제공되며, 여기서 1종 이상의 부형제는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품에 포함된 부형제와 동일하거나 상이하며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 Hu106-222이다.
표 14. Hu106-222에 관한 OX40 효능제 항체에 대한 아미노산 서열.
일부 실시양태에서, OX40 효능제 항체는 MEDI6469 (또한 9B12로도 지칭됨)이다. MEDI6469는 뮤린 모노클로날 항체이다. 문헌 [Weinberg, et al., J. Immunother. 2006, 29, 575-585]. 일부 실시양태에서 OX40 효능제는 문헌 [Weinberg, et al., J. Immunother. 2006, 29, 575-585] (이의 개시내용은 그 전문이 본원에 참조로 포함됨)에 기재된 바와 같이, 바이오베스트 인크.(Biovest Inc.) (미국 매사추세츠주 말번)에 의해 기탁된 9B12 하이브리도마에 의해 생산된 항체이다. 일부 실시양태에서, 항체는 MEDI6469의 CDR 서열을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체는 MEDI6469의 중쇄 가변 영역 서열 및/또는 경쇄 가변 영역 서열을 포함한다.
한 실시양태에서, OX40 효능제는 L106 (비디 파밍겐 제품 #340420)이다. 일부 실시양태에서, OX40 효능제는 항체 L106 (비디 파밍겐 제품 #340420)의 CDR을 포함한다. 일부 실시양태에서, OX40 효능제는 항체 L106 (비디 파밍겐 제품 #340420)의 중쇄 가변 영역 서열 및/또는 경쇄 가변 영역 서열을 포함한다. 한 실시양태에서, OX40 효능제는 ACT35 (산타 크루즈 바이오테크놀로지(Santa Cruz Biotechnology), 카탈로그 #20073)이다. 일부 실시양태에서, OX40 효능제는 항체 ACT35 (산타 크루즈 바이오테크놀로지, 카탈로그 #20073)의 CDR을 포함한다. 일부 실시양태에서, OX40 효능제는 항체 ACT35 (산타 크루즈 바이오테크놀로지, 카탈로그 #20073)의 중쇄 가변 영역 서열 및/또는 경쇄 가변 영역 서열을 포함한다. 한 실시양태에서, OX40 효능제는 뉴햄프셔주 웨스트 레바논 소재 바이오엑셀 인크(BioXcell Inc)의 인비보맙(InVivoMAb)으로부터 상업적으로 입수가능한 뮤린 모노클로날 항체 항-mCD134/mOX40 (클론 OX86)이다.
한 실시양태에서, OX40 효능제는 국제 특허 출원 공개 번호 WO 95/12673, WO 95/21925, WO 2006/121810, WO 2012/027328, WO 2013/028231, WO 2013/038191 및 WO 2014/148895; 유럽 특허 출원 EP 0672141; 미국 특허 출원 공개 번호 US 2010/136030, US 2014/377284, US 2015/190506 및 US 2015/132288 (클론 20E5 및 12H3 포함); 및 미국 특허 번호 7,504,101, 7,550,140, 7,622,444, 7,696,175, 7,960,515, 7,961,515, 8,133,983, 9,006,399 및 9,163,085 (이들 각각의 개시내용은 그 전문이 본원에 참조로 포함됨)에 기재된 OX40 효능제로부터 선택된다.
한 실시양태에서, OX40 효능제는 구조 I-A (C-말단 Fc-항체 단편 융합 단백질) 또는 구조 I-B (N-말단 Fc-항체 단편 융합 단백질)에 도시된 바와 같은 OX40 효능작용 융합 단백질 또는 그의 단편, 유도체, 접합체, 변이체 또는 바이오시밀러이다. 구조 I-A 및 I-B의 특성은 상기 및 미국 특허 번호 9,359,420, 9,340,599, 8,921,519 및 8,450,460 (이들의 개시내용은 본원에 참조로 포함됨)에 기재되어 있다. 구조 I-A의 폴리펩티드 도메인에 대한 아미노산 서열은 표 6에 제공된다. Fc 도메인은 바람직하게는 완전 불변 도메인 (서열식별번호: 31의 아미노산 17-230) 및 완전 힌지 도메인 (서열식별번호: 31의 아미노산 1-16) 또는 힌지 도메인의 한 부분 (예를 들어, 서열식별번호: 31의 아미노산 4-16)을 포함한다. C-말단 Fc-항체를 연결시키기 위한 바람직한 링커는 추가의 폴리펩티드의 융합에 적합한 링커를 포함한, 서열식별번호: 32 내지 서열식별번호: 41에 제공된 실시양태로부터 선택될 수 있다. 마찬가지로, 구조 I-B의 폴리펩티드 도메인에 대한 아미노산 서열은 표 7에 제공된다. Fc 항체 단편이 구조 I-B에서와 같이 TNRFSF 융합 단백질의 N-말단에 융합되는 경우에, Fc 모듈의 서열은 바람직하게는 서열식별번호: 42에 제시된 것이고, 링커 서열은 바람직하게는 서열식별번호: 43 내지 서열식별번호: 45에 제시된 실시양태로부터 선택된다.
한 실시양태에서, 구조 I-A 또는 I-B에 따른 OX40 효능제 융합 단백질은 타볼릭시주맙의 가변 중쇄 및 가변 경쇄, 11D4의 가변 중쇄 및 가변 경쇄, 18D8의 가변 중쇄 및 가변 경쇄, Hu119-122의 가변 중쇄 및 가변 경쇄, Hu106-222의 가변 중쇄 및 가변 경쇄, 표 15에 기재된 가변 중쇄 및 가변 경쇄로부터 선택된 가변 중쇄 및 가변 경쇄, 상기의 가변 중쇄 및 가변 경쇄의 임의의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 OX40 결합 도메인 및 그의 단편, 유도체, 접합체, 변이체 및 바이오시밀러를 포함한다.
한 실시양태에서, 구조 I-A 또는 I-B에 따른 OX40 효능제 융합 단백질은 OX40L 서열을 포함하는 1개 이상의 OX40 결합 도메인을 포함한다. 한 실시양태에서, 구조 I-A 또는 I-B에 따른 OX40 효능제 융합 단백질은 서열식별번호: 102에 따른 서열을 포함하는 1개 이상의 OX40 결합 도메인을 포함한다. 한 실시양태에서, 구조 I-A 또는 I-B에 따른 OX40 효능제 융합 단백질은 가용성 OX40L 서열을 포함하는 1개 이상의 OX40 결합 도메인을 포함한다. 한 실시양태에서, 구조 I-A 또는 I-B에 따른 OX40 효능제 융합 단백질은 서열식별번호: 103에 따른 서열을 포함하는 1개 이상의 OX40 결합 도메인을 포함한다. 한 실시양태에서, 구조 I-A 또는 I-B에 따른 OX40 효능제 융합 단백질은 서열식별번호: 104에 따른 서열을 포함하는 1개 이상의 OX40 결합 도메인을 포함한다.
한 실시양태에서, 구조 I-A 또는 I-B에 따른 OX40 효능제 융합 단백질은 각각 서열식별번호: 58 및 서열식별번호: 59에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 95% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함하는 scFv 도메인이며, 여기서 VH 및 VL 도메인은 링커로 연결되는 것인 1개 이상의 OX40 결합 도메인을 포함한다. 한 실시양태에서, 구조 I-A 또는 I-B에 따른 OX40 효능제 융합 단백질은 각각 서열식별번호: 68 및 서열식별번호: 69에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 95% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함하는 scFv 도메인이며, 여기서 VH 및 VL 도메인은 링커로 연결되는 것인 1개 이상의 OX40 결합 도메인을 포함한다. 한 실시양태에서, 구조 I-A 또는 I-B에 따른 OX40 효능제 융합 단백질은 각각 서열식별번호: 78 및 서열식별번호: 79에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 95% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함하는 scFv 도메인이며, 여기서 VH 및 VL 도메인은 링커로 연결되는 것인 1개 이상의 OX40 결합 도메인을 포함한다. 한 실시양태에서, 구조 I-A 또는 I-B에 따른 OX40 효능제 융합 단백질은 각각 서열식별번호: 86 및 서열식별번호: 87에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 95% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함하는 scFv 도메인이며, 여기서 VH 및 VL 도메인은 링커로 연결되는 것인 1개 이상의 OX40 결합 도메인을 포함한다. 한 실시양태에서, 구조 I-A 또는 I-B에 따른 OX40 효능제 융합 단백질은 각각 서열식별번호: 94 및 서열식별번호: 95에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 95% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함하는 scFv 도메인이며, 여기서 VH 및 VL 도메인은 링커로 연결되는 것인 1개 이상의 OX40 결합 도메인을 포함한다. 한 실시양태에서, 구조 I-A 또는 I-B에 따른 OX40 효능제 융합 단백질은 표 15에 제공된 VH 및 VL 서열에 대해 각각 적어도 95% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함하는 scFv 도메인이며, 여기서 VH 및 VL 도메인은 링커로 연결되는 것인 1개 이상의 OX40 결합 도메인을 포함한다.
표 15. 융합 단백질 (예를 들어, 구조 I-A 및 I-B) 내의 OX40 결합 도메인으로서 또는 scFv OX40 효능제 항체로서 유용한 추가의 폴리펩티드 도메인.
한 실시양태에서, OX40 효능제는 (i) 제1 가용성 OX40 결합 도메인; (ii) 제1 펩티드 링커; (iii) 제2 가용성 OX40 결합 도메인; (iv) 제2 펩티드 링커 및 (v) 제3 가용성 OX40 결합 도메인을 포함하고, N-말단 및/또는 C-말단 단부에 추가의 도메인을 추가로 포함하며, 여기서 추가의 도메인은 Fab 또는 Fc 단편 도메인인, OX40 효능작용 단일-쇄 융합 폴리펩티드이다. 한 실시양태에서, OX40 효능제는 (i) 제1 가용성 OX40 결합 도메인; (ii) 제1 펩티드 링커; (iii) 제2 가용성 OX40 결합 도메인; (iv) 제2 펩티드 링커 및 (v) 제3 가용성 OX40 결합 도메인을 포함하고, N-말단 및/또는 C-말단 단부에 추가의 도메인을 추가로 포함하며, 여기서 추가의 도메인은 Fab 또는 Fc 단편 도메인이고, 각각의 가용성 OX40 결합 도메인에는 줄기 영역 (이는 삼량체화에 기여하고, 세포 막까지의 특정 거리를 제공하지만, OX40 결합 도메인의 부분은 아님)이 결여되어 있고, 제1 및 제2 펩티드 링커는 독립적으로 3-8개 아미노산의 길이를 갖는 것인, OX40 효능작용 단일-쇄 융합 폴리펩티드이다.
한 실시양태에서, OX40 효능제는 (i) 제1 가용성 종양 괴사 인자 (TNF) 슈퍼패밀리 시토카인 도메인; (ii) 제1 펩티드 링커; (iii) 제2 가용성 TNF 슈퍼패밀리 시토카인 도메인; (iv) 제2 펩티드 링커 및 (v) 제3 가용성 TNF 슈퍼패밀리 시토카인 도메인을 포함하며, 여기서 각각의 가용성 TNF 슈퍼패밀리 시토카인 도메인에는 줄기 영역이 결여되어 있고, 제1 및 제2 펩티드 링커는 독립적으로 3-8개 아미노산의 길이를 갖고, TNF 슈퍼패밀리 시토카인 도메인은 OX40 결합 도메인인, OX40 효능작용 단일-쇄 융합 폴리펩티드이다.
일부 실시양태에서, OX40 효능제는 MEDI6383이다. MEDI6383은 OX40 효능작용 융합 단백질이고, 미국 특허 번호 6,312,700 (이의 개시내용은 본원에 참조로 포함됨)에 기재된 바와 같이 제조될 수 있다.
한 실시양태에서, OX40 효능제는 임의의 상기 VL 도메인에 연결된 임의의 상기 VH 도메인을 포함하는 OX40 효능작용 scFv 항체이다.
한 실시양태에서, OX40 효능제는 미국 뉴욕주 셜리 소재 크리에이티브 바이오랩스, 인크.로부터 상업적으로 입수가능한 크리에이티브 바이오랩스 OX40 효능제 모노클로날 항체 MOM-18455이다.
한 실시양태에서, OX40 효능제는 미국 캘리포니아주 샌디에고 소재 바이오레전드, 인크.로부터 상업적으로 입수가능한 OX40 효능작용 항체 클론 Ber-ACT35이다.
CD27 효능제
한 실시양태에서, TNFRSF 효능제는 CD27 효능제이다. CD27 효능제는 관련 기술분야에 공지된 임의의 CD27 결합 분자일 수 있다. CD27 결합 분자는 인간 또는 포유동물 CD27에 결합할 수 있는 모노클로날 항체 또는 융합 단백질일 수 있다. CD27 효능제 또는 CD27 결합 분자는 이뮤노글로불린 분자의 임의의 이소형 (예를 들어, IgG, IgE, IgM, IgD, IgA 및 IgY), 부류 (예를 들어, IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgA1 및 IgA2) 또는 하위부류의 이뮤노글로불린 중쇄를 포함할 수 있다. CD27 효능제 또는 CD27 결합 분자는 중쇄 및 경쇄를 둘 다 가질 수 있다. 본원에 사용된 용어 결합 분자는 또한 CD27에 결합하는 항체 (전장 항체 포함), 모노클로날 항체 (전장 모노클로날 항체 포함), 폴리클로날 항체, 다중특이적 항체 (예를 들어, 이중특이적 항체), 인간, 인간화 또는 키메라 항체, 및 항체 단편, 예를 들어, Fab 단편, F(ab') 단편, Fab 발현 라이브러리에 의해 생산된 단편, 상기 중 임의의 것의 에피토프-결합 단편, 및 항체의 조작된 형태, 예를 들어 scFv 분자를 포함한다. 한 실시양태에서, CD27 효능제는 완전 인간 항체인 항원 결합 단백질이다. 한 실시양태에서, CD27 효능제는 인간화 항체인 항원 결합 단백질이다. 일부 실시양태에서, 본원에 개시된 방법 및 조성물에 사용하기 위한 CD27 효능제는 항-CD27 항체, 인간 항-CD27 항체, 마우스 항-CD27 항체, 포유동물 항-CD27 항체, 모노클로날 항-CD27 항체, 폴리클로날 항-CD27 항체, 키메라 항-CD27 항체, 항-CD27 애드넥틴, 항-CD27 도메인 항체, 단일 쇄 항-CD27 단편, 중쇄 항-CD27 단편, 경쇄 항-CD27 단편, 항-CD27 융합 단백질 및 그의 단편, 유도체, 접합체, 변이체 또는 바이오시밀러를 포함한다. 바람직한 실시양태에서, CD27 효능제는 효능작용 항-CD27 인간화 또는 완전 인간 모노클로날 항체 (즉, 단세포주로부터 유래된 항체)이다. 바람직한 실시양태에서, CD27 효능제는 바를리루맙 또는 그의 단편, 유도체, 접합체, 변이체 또는 바이오시밀러이다.
바람직한 실시양태에서, CD27 효능제 또는 CD27 결합 분자는 또한 융합 단백질일 수 있다. 바람직한 실시양태에서, 다량체 CD27 효능제, 예컨대 삼량체 또는 육량체 CD27 효능제 (3개 또는 6개의 리간드 결합 도메인을 가짐)는, 전형적으로 2개의 리간드 결합 도메인을 보유하는 효능작용 모노클로날 항체와 비교하여 우수한 수용체 (CD27L) 클러스터링 및 내부 세포 신호전달 복합체 형성을 유도할 수 있다. 3개의 TNFRSF 결합 도메인 및 IgG1-Fc를 포함하고 임의로 이들 융합 단백질 중 2개 이상을 추가로 연결하는 삼량체 (3가) 또는 육량체 (또는 6가) 또는 그보다 더 큰 융합 단백질이, 예를 들어 문헌 [Gieffers, et al., Mol. Cancer Therapeutics 2013, 12, 2735-47]에 기재되어 있다.
효능작용 CD27 항체 및 융합 단백질은 강한 면역 반응을 유도하는 것으로 공지되어 있다. 바람직한 실시양태에서, CD27 효능제는 독성을 감소시키기에 충분한 방식으로 CD27 항원에 특이적으로 결합하는 모노클로날 항체 또는 융합 단백질이다. 일부 실시양태에서, CD27 효능제는 항체-의존성 세포 독성 (ADCC), 예를 들어 NK 세포 세포독성을 제거하는 효능작용 CD27 모노클로날 항체 또는 융합 단백질이다. 일부 실시양태에서, CD27 효능제는 항체-의존성 세포 식세포작용 (ADCP)을 제거하는 효능작용 CD27 모노클로날 항체 또는 융합 단백질이다. 일부 실시양태에서, CD27 효능제는 보체-의존성 세포독성 (CDC)을 제거하는 효능작용 CD27 모노클로날 항체 또는 융합 단백질이다. 일부 실시양태에서, CD27 효능제는 Fc 영역 기능성을 제거하는 효능작용 CD27 모노클로날 항체 또는 융합 단백질이다.
일부 실시양태에서, CD27 효능제는 높은 친화도 및 효능작용 활성으로 인간 CD27 (서열식별번호: 127)에 결합하는 것을 특징으로 한다. 한 실시양태에서, CD27 효능제는 인간 CD27 (서열식별번호: 127)에 결합하는 결합 분자이다. 일부 실시양태에서, CD27 효능제는 높은 친화도 및 효능작용 활성으로 마카크 CD27 (서열식별번호: 128)에 결합하는 것을 특징으로 한다. 한 실시양태에서, CD27 효능제는 마카크 CD27 (서열식별번호: 128)에 결합하는 결합 분자이다. CD27 효능제 또는 결합 분자가 결합하는 CD27 항원의 아미노산 서열은 표 16에 요약되어 있다.
표 16. CD27 항원의 아미노산 서열.
일부 실시양태에서, 기재된 조성물, 과정 및 방법은 약 100 pM 이하의 KD로 인간 또는 뮤린 CD27에 결합하거나, 약 90 pM 이하의 KD로 인간 또는 뮤린 CD27에 결합하거나, 약 80 pM 이하의 KD로 인간 또는 뮤린 CD27에 결합하거나, 약 70 pM 이하의 KD로 인간 또는 뮤린 CD27에 결합하거나, 약 60 pM 이하의 KD로 인간 또는 뮤린 CD27에 결합하거나, 약 50 pM 이하의 KD로 인간 또는 뮤린 CD27에 결합하거나, 약 40 pM 이하의 KD로 인간 또는 뮤린 CD27에 결합하거나, 또는 약 30 pM 이하의 KD로 인간 또는 뮤린 CD27에 결합하는 CD27 효능제를 포함한다.
일부 실시양태에서, 기재된 조성물, 과정 및 방법은 약 7.5 x 105 l/M·s 또는 더 빠른 kassoc로 인간 또는 뮤린 CD27에 결합하거나, 약 7.5 x 105 l/M·s 또는 더 빠른 kassoc로 인간 또는 뮤린 CD27에 결합하거나, 약 8 x 105 l/M·s 또는 더 빠른 kassoc로 인간 또는 뮤린 CD27에 결합하거나, 약 8.5 x 105 l/M·s 또는 더 빠른 kassoc로 인간 또는 뮤린 CD27에 결합하거나, 약 9 x 105 l/M·s 또는 더 빠른 kassoc로 인간 또는 뮤린 CD27에 결합하거나, 약 9.5 x 105 l/M·s 또는 더 빠른 kassoc로 인간 또는 뮤린 CD27에 결합하거나, 또는 약 1 x 106 l/M·s 또는 더 빠른 kassoc로 인간 또는 뮤린 CD27에 결합하는 CD27 효능제를 포함한다.
일부 실시양태에서, 기재된 조성물, 과정 및 방법은 약 2 x 10-5 l/s 또는 더 느린 kdissoc로 인간 또는 뮤린 CD27에 결합하거나, 약 2.1 x 10-5 l/s 또는 더 느린 kdissoc로 인간 또는 뮤린 CD27에 결합하거나, 약 2.2 x 10-5 l/s 또는 더 느린 kdissoc로 인간 또는 뮤린 CD27에 결합하거나, 약 2.3 x 10-5 l/s 또는 더 느린 kdissoc로 인간 또는 뮤린 CD27에 결합하거나, 약 2.4 x 10-5 l/s 또는 더 느린 kdissoc로 인간 또는 뮤린 CD27에 결합하거나, 약 2.5 x 10-5 l/s 또는 더 느린 kdissoc로 인간 또는 뮤린 CD27에 결합하거나, 약 2.6 x 10-5 l/s 또는 더 느린 kdissoc로 인간 또는 뮤린 CD27에 결합하거나, 약 2.7 x 10-5 l/s 또는 더 느린 kdissoc로 인간 또는 뮤린 CD27에 결합하거나, 약 2.8 x 10-5 l/s 또는 더 느린 kdissoc로 인간 또는 뮤린 CD27에 결합하거나, 약 2.9 x 10-5 l/s 또는 더 느린 kdissoc로 인간 또는 뮤린 CD27에 결합하거나, 또는 약 3 x 10-5 l/s 또는 더 느린 kdissoc로 인간 또는 뮤린 CD27에 결합하는 CD27 효능제를 포함한다.
일부 실시양태에서, 기재된 조성물, 과정 및 방법은 약 10 nM 이하의 IC50으로 인간 또는 뮤린 CD27에 결합하거나, 약 9 nM 이하의 IC50으로 인간 또는 뮤린 CD27에 결합하거나, 약 8 nM 이하의 IC50으로 인간 또는 뮤린 CD27에 결합하거나, 약 7 nM 이하의 IC50으로 인간 또는 뮤린 CD27에 결합하거나, 약 6 nM 이하의 IC50으로 인간 또는 뮤린 CD27에 결합하거나, 약 5 nM 이하의 IC50으로 인간 또는 뮤린 CD27에 결합하거나, 약 4 nM 이하의 IC50으로 인간 또는 뮤린 CD27에 결합하거나, 약 3 nM 이하의 IC50으로 인간 또는 뮤린 CD27에 결합하거나, 약 2 nM 이하의 IC50으로 인간 또는 뮤린 CD27에 결합하거나, 또는 약 1 nM 이하의 IC50으로 인간 또는 뮤린 CD27에 결합하는 CD27 효능제를 포함한다.
바람직한 실시양태에서, CD27 효능제는 CDX-1127 또는 1F5로도 또한 공지된 모노클로날 항체 바를리루맙 또는 그의 단편, 유도체, 변이체 또는 바이오시밀러이다. 바를리루맙은 셀덱스 테라퓨틱스, 인크.(Celldex Therapeutics, Inc.)로부터 입수가능하다. 바를리루맙은 이뮤노글로불린 G1-카파, 항-[호모 사피엔스 항-CD27 (TNFRSF7, 종양 괴사 인자 수용체 슈퍼패밀리 구성원 7)], 호모 사피엔스 모노클로날 항체이다. 바를리루맙의 아미노산 서열은 표 17에 제시된다. 바를리루맙은 위치 299 및 299"에서의 N-글리코실화 부위; 위치 22-96 (VH-VL), 146-202 (CH1-CL), 263-323 (CH2) 및 369-427 (CH3) (및 위치 22"-96", 146"-202", 263"-323", 및 369"-427")에서의 중쇄 쇄내 디술피드 가교; 위치 23'-88' (VH-VL) 및 134'-194' (CH1-CL) (및 위치 23"'-88"'및 134"'-194"')에서의 경쇄 쇄내 디술피드 가교; 위치 228-228" 및 231-231"에서의 쇄간 중쇄-중쇄 디술피드 가교; 및 222-214' 및 222"-214"'에서의 쇄간 중쇄-경쇄 디술피드 가교를 포함한다. 바를리루맙의 제조 및 특성은 국제 특허 출원 공개 번호 WO 2016/145085 A2 및 미국 특허 출원 공개 번호 US 2011/0274685 A1 및 US 2012/0213771 A1 (이들의 개시내용은 본원에 참조로 포함됨)에 기재되어 있다. 바를리루맙을 사용하는 임상 및 전임상 연구는 관련 기술분야에 공지되어 있고, 예를 들어 문헌 [Thomas, et al., OncoImmunology 2014, 3, e27255; Vitale, et al., Clin. Cancer Res. 2012, 18, 3812-21; 및 He, et al., J. Immunol. 2013, 191, 4174-83]에 기재되어 있다. 다양한 혈액 및 고형 종양 적응증에서의 바를리루맙의 현행 임상 시험은 미국 국립 보건원 clinicaltrials.gov 식별자 NCT01460134, NCT02543645, NCT02413827, NCT02386111 및 NCT02335918을 포함한다.
한 실시양태에서, CD27 효능제는 서열식별번호: 129에 의해 제공된 중쇄 및 서열식별번호: 130에 의해 제공된 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, CD27 효능제는 각각 서열식별번호: 129 및 서열식별번호: 130에 제시된 서열을 갖는 중쇄 및 경쇄, 또는 그의 항원 결합 단편, Fab 단편, 단일-쇄 가변 단편 (scFv), 변이체 또는 접합체를 포함한다. 한 실시양태에서, CD27 효능제는 각각 서열식별번호: 129 및 서열식별번호: 130에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 99% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, CD27 효능제는 각각 서열식별번호: 129 및 서열식별번호: 130에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 98% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, CD27 효능제는 각각 서열식별번호: 129 및 서열식별번호: 130에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 97% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, CD27 효능제는 각각 서열식별번호: 129 및 서열식별번호: 130에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 96% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, CD27 효능제는 각각 서열식별번호: 129 및 서열식별번호: 130에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 95% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다.
한 실시양태에서, CD27 효능제는 바를리루맙의 중쇄 및 경쇄 CDR 또는 가변 영역 (VR)을 포함한다. 한 실시양태에서, CD27 효능제 중쇄 가변 영역 (VH)은 서열식별번호: 131에 제시된 서열을 포함하고, CD27 효능제 경쇄 가변 영역 (VL)은 서열식별번호: 132에 제시된 서열 및 그의 보존적 아미노산 치환을 포함한다. 한 실시양태에서, CD27 효능제는 각각 서열식별번호: 131 및 서열식별번호: 132에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 99% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, CD27 효능제는 각각 서열식별번호: 131 및 서열식별번호: 132에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 98% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, CD27 효능제는 각각 서열식별번호: 131 및 서열식별번호: 132에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 97% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, CD27 효능제는 각각 서열식별번호: 131 및 서열식별번호: 132에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 96% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, CD27 효능제는 각각 서열식별번호: 131 및 서열식별번호: 132에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 95% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다.
한 실시양태에서, CD27 효능제는 각각 서열식별번호: 133, 서열식별번호: 134 및 서열식별번호: 135에 제시된 서열 및 그의 보존적 아미노산 치환을 갖는 중쇄 CDR1, CDR2 및 CDR3 도메인, 및 각각 서열식별번호: 136, 서열식별번호: 137 및 서열식별번호: 138에 제시된 서열 및 그의 보존적 아미노산 치환을 갖는 경쇄 CDR1, CDR2 및 CDR3 도메인을 포함한다.
한 실시양태에서, CD27 효능제는 바를리루맙에 관하여 약물 규제 기관에 의해 승인된 CD27 효능제 바이오시밀러 모노클로날 항체이다. 한 실시양태에서, 바이오시밀러 모노클로날 항체는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품의 아미노산 서열에 대해 적어도 97% 서열 동일성, 예를 들어 97%, 98%, 99% 또는 100% 서열 동일성을 갖고 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품과 비교하여 1개 이상의 번역후 변형을 포함하는 아미노산 서열을 포함하는 CD27 항체를 포함하며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 바를리루맙이다. 일부 실시양태에서, 1개 이상의 번역후 변형은 다음 중 하나 이상으로부터 선택된다: 글리코실화, 산화, 탈아미드화 및 말단절단. 일부 실시양태에서, 바이오시밀러는 인가된 또는 인가를 위해 제출된 CD27 효능제 항체이며, 여기서 CD27 효능제 항체는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품의 제제와 상이한 제제로 제공되며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 바를리루맙이다. CD27 효능제 항체는 약물 규제 기관, 예컨대 미국 FDA 및/또는 유럽 연합 EMA에 의해 인가될 수 있다. 일부 실시양태에서, 바이오시밀러는 1종 이상의 부형제를 추가로 포함하는 조성물로서 제공되며, 여기서 1종 이상의 부형제는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품에 포함된 부형제와 동일하거나 상이하며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 바를리루맙이다. 일부 실시양태에서, 바이오시밀러는 1종 이상의 부형제를 추가로 포함하는 조성물로서 제공되며, 여기서 1종 이상의 부형제는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품에 포함된 부형제와 동일하거나 상이하며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 바를리루맙이다.
표 17. 바를리루맙에 관한 CD27 효능제 항체에 대한 아미노산 서열.
한 실시양태에서, CD27 효능제는 구조 I-A (C-말단 Fc-항체 단편 융합 단백질) 또는 구조 I-B (N-말단 Fc-항체 단편 융합 단백질)에 도시된 바와 같은 CD27 효능작용 융합 단백질 또는 그의 단편, 유도체, 접합체, 변이체 또는 바이오시밀러이다. 구조 I-A 및 I-B의 특성은 상기 및 미국 특허 번호 9,359,420, 9,340,599, 8,921,519 및 8,450,460 (이들의 개시내용은 본원에 참조로 포함됨)에 기재되어 있다. 구조 I-A의 폴리펩티드 도메인에 대한 아미노산 서열은 표 6에 제공된다. Fc 도메인은 바람직하게는 완전 불변 도메인 (서열식별번호: 31의 아미노산 17-230) 및 완전 힌지 도메인 (서열식별번호: 31의 아미노산 1-16) 또는 힌지 도메인의 한 부분 (예를 들어, 서열식별번호: 31의 아미노산 4-16)을 포함한다. C-말단 Fc-항체를 연결시키기 위한 바람직한 링커는 추가의 폴리펩티드의 융합에 적합한 링커를 포함한, 서열식별번호: 32 내지 서열식별번호: 41에 제공된 실시양태로부터 선택될 수 있다. 마찬가지로, 구조 I-B의 폴리펩티드 도메인에 대한 아미노산 서열은 표 7에 제공된다. Fc 항체 단편이 구조 I-B에서와 같이 TNRFSF 융합 단백질의 N-말단에 융합되는 경우에, Fc 모듈의 서열은 바람직하게는 서열식별번호: 42에 제시된 것이고, 링커 서열은 바람직하게는 서열식별번호: 43 내지 서열식별번호: 45에 제시된 실시양태로부터 선택된다.
한 실시양태에서, 구조 I-A 또는 I-B에 따른 CD27 효능제 융합 단백질은 바를리루맙의 가변 중쇄 및 가변 경쇄로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 CD27 결합 도메인 및 그의 단편, 유도체, 접합체, 변이체 및 바이오시밀러를 포함한다.
한 실시양태에서, 구조 I-A 또는 I-B에 따른 CD27 효능제 융합 단백질은 CD70 (CD27L) 서열을 포함하는 1개 이상의 CD27 결합 도메인을 포함한다 (표 18). 한 실시양태에서, 구조 I-A 또는 I-B에 따른 CD27 효능제 융합 단백질은 서열식별번호: 139에 따른 서열을 포함하는 1개 이상의 CD27 결합 도메인을 포함한다. 한 실시양태에서, 구조 I-A 또는 I-B에 따른 CD27 효능제 융합 단백질은 가용성 CD70 서열을 포함하는 1개 이상의 CD27 결합 도메인을 포함한다. 한 실시양태에서, 구조 I-A 또는 I-B에 따른 CD27 효능제 융합 단백질은 서열식별번호: 140에 따른 서열을 포함하는 1개 이상의 CD27 결합 도메인을 포함한다. 한 실시양태에서, 구조 I-A 또는 I-B에 따른 CD27 효능제 융합 단백질은 서열식별번호: 141에 따른 서열을 포함하는 1개 이상의 CD27 결합 도메인을 포함한다.
한 실시양태에서, 구조 I-A 또는 I-B에 따른 CD27 효능제 융합 단백질은 각각 서열식별번호: 131 및 서열식별번호: 132에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 95% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함하는 scFv 도메인이며, 여기서 VH 및 VL 도메인은 링커로 연결되는 것인 1개 이상의 CD27 결합 도메인을 포함한다.
표 18. 융합 단백질 (예를 들어, 구조 I-A 및 I-B) 내의 CD27 결합 도메인으로서 유용한 추가의 폴리펩티드 도메인.
한 실시양태에서, CD27 효능제는 (i) 제1 가용성 CD27 결합 도메인; (ii) 제1 펩티드 링커; (iii) 제2 가용성 CD27 결합 도메인; (iv) 제2 펩티드 링커 및 (v) 제3 가용성 CD27 결합 도메인을 포함하고, N-말단 및/또는 C-말단 단부에 추가의 도메인을 추가로 포함하며, 여기서 추가의 도메인은 Fab 또는 Fc 단편 도메인인, CD27 효능작용 단일-쇄 융합 폴리펩티드이다. 한 실시양태에서, CD27 효능제는 (i) 제1 가용성 CD27 결합 도메인; (ii) 제1 펩티드 링커; (iii) 제2 가용성 CD27 결합 도메인; (iv) 제2 펩티드 링커 및 (v) 제3 가용성 CD27 결합 도메인을 포함하고, N-말단 및/또는 C-말단 단부에 추가의 도메인을 추가로 포함하며, 여기서 추가의 도메인은 Fab 또는 Fc 단편 도메인이고, 각각의 가용성 CD27 결합 도메인에는 줄기 영역 (이는 삼량체화에 기여하고, 세포 막까지의 특정 거리를 제공하지만, CD27 결합 도메인의 부분은 아님)이 결여되어 있고, 제1 및 제2 펩티드 링커는 독립적으로 3-8개 아미노산의 길이를 갖는 것인, CD27 효능작용 단일-쇄 융합 폴리펩티드이다.
한 실시양태에서, CD27 효능제는 (i) 제1 가용성 종양 괴사 인자 (TNF) 슈퍼패밀리 시토카인 도메인; (ii) 제1 펩티드 링커; (iii) 제2 가용성 TNF 슈퍼패밀리 시토카인 도메인; (iv) 제2 펩티드 링커 및 (v) 제3 가용성 TNF 슈퍼패밀리 시토카인 도메인을 포함하며, 여기서 각각의 가용성 TNF 슈퍼패밀리 시토카인 도메인에는 줄기 영역이 결여되어 있고, 제1 및 제2 펩티드 링커는 독립적으로 3-8개 아미노산의 길이를 갖고, TNF 슈퍼패밀리 시토카인 도메인은 CD27 결합 도메인인, CD27 효능작용 단일-쇄 융합 폴리펩티드이다.
한 실시양태에서, CD27 효능제는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2014/0112942 A1, US 2011/0274685 A1 또는 US 2012/0213771 A1 또는 국제 특허 출원 공개 번호 WO 2012/004367 A1 (이들의 개시내용은 본원에 참조로 포함됨)에 기재된 CD27 효능제이다.
한 실시양태에서, CD27 효능제는 임의의 상기 VL 도메인에 연결된 임의의 상기 VH 도메인을 포함하는 CD27 효능작용 scFv 항체이다.
GITR (CD357) 효능제
한 실시양태에서, TNFRSF 효능제는 GITR 효능제이다. GITR 효능제는 관련 기술분야에 공지된 임의의 GITR 결합 분자일 수 있다. GITR 결합 분자는 인간 또는 포유동물 GITR에 결합할 수 있는 모노클로날 항체 또는 융합 단백질일 수 있다. GITR 효능제 또는 GITR 결합 분자는 이뮤노글로불린 분자의 임의의 이소형 (예를 들어, IgG, IgE, IgM, IgD, IgA 및 IgY), 부류 (예를 들어, IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgA1 및 IgA2) 또는 하위부류의 이뮤노글로불린 중쇄를 포함할 수 있다. GITR 효능제 또는 GITR 결합 분자는 중쇄 및 경쇄를 둘 다 가질 수 있다. 본원에 사용된 용어 결합 분자는 또한 OX40에 결합하는 항체 (전장 항체 포함), 모노클로날 항체 (전장 모노클로날 항체 포함), 폴리클로날 항체, 다중특이적 항체 (예를 들어, 이중특이적 항체), 인간, 인간화 또는 키메라 항체, 및 항체 단편, 예를 들어, Fab 단편, F(ab') 단편, Fab 발현 라이브러리에 의해 생산된 단편, 상기 중 임의의 것의 에피토프-결합 단편, 및 항체의 조작된 형태, 예를 들어 scFv 분자를 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 완전 인간 항체인 항원 결합 단백질이다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 인간화 항체인 항원 결합 단백질이다. 일부 실시양태에서, 본원에 개시된 방법 및 조성물에 사용하기 위한 GITR 효능제는 항-GITR 항체, 인간 항-GITR 항체, 마우스 항-OX40 항체, 포유동물 항-GITR 항체, 모노클로날 항-OX40 항체, 폴리클로날 항-OX40 항체, 키메라 항-OX40 항체, 항-OX40 애드넥틴, 항-OX40 도메인 항체, 단일 쇄 항-OX40 단편, 중쇄 항-OX40 단편, 경쇄 항-OX40 단편, 항-OX40 융합 단백질 및 그의 단편, 유도체, 접합체, 변이체 또는 바이오시밀러를 포함한다. 바람직한 실시양태에서, OX40 효능제는 효능작용 항-OX40 인간화 또는 완전 인간 모노클로날 항체 (즉, 단세포주로부터 유래된 항체)이다.
바람직한 실시양태에서, GITR 효능제 또는 GITR 결합 분자는 또한 융합 단백질일 수 있다. 바람직한 실시양태에서, 다량체 GITR 효능제, 예컨대 삼량체 또는 육량체 GITR 효능제 (3개 또는 6개의 리간드 결합 도메인을 가짐)는, 전형적으로 2개의 리간드 결합 도메인을 보유하는 효능작용 모노클로날 항체와 비교하여 우수한 GITR 수용체 클러스터링 및 내부 세포 신호전달 복합체 형성을 유도할 수 있다. 3개의 TNFRSF 결합 도메인 및 IgG1-Fc를 포함하고 임의로 이들 융합 단백질 중 2개 이상을 추가로 연결하는 삼량체 (3가) 또는 육량체 (또는 6가) 또는 그보다 더 큰 융합 단백질이, 예를 들어 문헌 [Gieffers, et al., Mol. Cancer Therapeutics 2013, 12, 2735-47]에 기재되어 있다.
일부 실시양태에서, 항-GITR 항체는 자극제, 예를 들어 CD3 항체 (무로모납 또는 OKT3)의 존재 하에 고친화도로 hGITR (서열식별번호: 142)에 결합하는 것을 특징으로 하고, 효능작용성이며, Treg 세포에 의한 T 이펙터 세포의 억제를 제거한다. 한 실시양태에서, GITR 결합 분자는 인간 GITR (서열식별번호: 142)에 결합한다. 한 실시양태에서, GITR 결합 분자는 뮤린 GITR (서열식별번호: 143)에 결합한다. GITR 결합 분자가 결합하는 GITR 항원의 아미노산 서열은 표 19에 요약되어 있다.
표 19. GITR 항원의 아미노산 서열
한 실시양태에서, GITR 효능제는 완전 인간 항체인 항원 결합 단백질이다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 인간화 항체인 항원 결합 단백질이다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 인간 GITR의 활성에 대해 효능작용하는 항원 결합 단백질이다. 한 실시양태에서, GITR 결합 분자는 완전 인간 IgG1 항체인 항원 결합 단백질이다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 Fc감마 수용체 (FcγR)에 결합할 수 있는 항원 결합 단백질이다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 항원 결합 단백질의 클러스터가 형성되도록 Fc감마 수용체 (FcγR)에 결합할 수 있는 항원 결합 단백질이다.
일부 실시양태에서, 기재된 조성물, 과정 및 방법은 약 100 pM 이하의 KD로 인간 또는 뮤린 GITR에 결합하거나, 약 90 pM 이하의 KD로 인간 또는 뮤린 GITR에 결합하거나, 약 80 pM 이하의 KD로 인간 또는 뮤린 GITR에 결합하거나, 약 70 pM 이하의 KD로 인간 또는 뮤린 GITR에 결합하거나, 약 60 pM 이하의 KD로 인간 또는 뮤린 GITR에 결합하거나, 약 50 pM 이하의 KD로 인간 또는 뮤린 GITR에 결합하거나, 약 40 pM 이하의 KD로 인간 또는 뮤린 GITR에 결합하거나, 또는 약 30 pM 이하의 KD로 인간 또는 뮤린 GITR에 결합하는 GITR 효능제를 포함한다.
일부 실시양태에서, 기재된 조성물, 과정 및 방법은 약 7.5 x 105 l/M·s 또는 더 빠른 kassoc로 인간 또는 뮤린 GITR에 결합하거나, 약 7.5 x 105 l/M·s 또는 더 빠른 kassoc로 인간 또는 뮤린 GITR에 결합하거나, 약 8 x 105 l/M·s 또는 더 빠른 kassoc로 인간 또는 뮤린 GITR에 결합하거나, 약 8.5 x 105 l/M·s 또는 더 빠른 kassoc로 인간 또는 뮤린 GITR에 결합하거나, 약 9 x 105 l/M·s 또는 더 빠른 kassoc로 인간 또는 뮤린 GITR에 결합하거나, 약 9.5 x 105 l/M·s 또는 더 빠른 kassoc로 인간 또는 뮤린 GITR에 결합하거나, 또는 약 1 x 106 l/M·s 또는 더 빠른 kassoc로 인간 또는 뮤린 GITR에 결합하는 GITR 효능제를 포함한다.
일부 실시양태에서, 기재된 조성물, 과정 및 방법은 약 2 x 10-5 l/s 또는 더 느린 kdissoc로 인간 또는 뮤린 GITR에 결합하거나, 약 2.1 x 10-5 l/s 또는 더 느린 kdissoc로 인간 또는 뮤린 GITR에 결합하거나, 약 2.2 x 10-5 l/s 또는 더 느린 kdissoc로 인간 또는 뮤린 GITR에 결합하거나, 약 2.3 x 10-5 l/s 또는 더 느린 kdissoc로 인간 또는 뮤린 GITR에 결합하거나, 약 2.4 x 10-5 l/s 또는 더 느린 kdissoc로 인간 또는 뮤린 GITR에 결합하거나, 약 2.5 x 10-5 l/s 또는 더 느린 kdissoc로 인간 또는 뮤린 GITR에 결합하거나, 약 2.6 x 10-5 l/s 또는 더 느린 kdissoc로 인간 또는 뮤린 GITR에 결합하거나, 약 2.7 x 10-5 l/s 또는 더 느린 kdissoc로 인간 또는 뮤린 GITR에 결합하거나, 약 2.8 x 10-5 l/s 또는 더 느린 kdissoc로 인간 또는 뮤린 GITR에 결합하거나, 약 2.9 x 10-5 l/s 또는 더 느린 kdissoc로 인간 또는 뮤린 GITR에 결합하거나, 또는 약 3 x 10-5 l/s 또는 더 느린 kdissoc로 인간 또는 뮤린 GITR에 결합하는 GITR 효능제를 포함한다.
일부 실시양태에서, 기재된 조성물, 과정 및 방법은 약 10 nM 이하의 IC50으로 인간 또는 뮤린 GITR에 결합하거나, 약 9 nM 이하의 IC50으로 인간 또는 뮤린 GITR에 결합하거나, 약 8 nM 이하의 IC50으로 인간 또는 뮤린 GITR에 결합하거나, 약 7 nM 이하의 IC50으로 인간 또는 뮤린 GITR에 결합하거나, 약 6 nM 이하의 IC50으로 인간 또는 뮤린 GITR에 결합하거나, 약 5 nM 이하의 IC50으로 인간 또는 뮤린 GITR에 결합하거나, 약 4 nM 이하의 IC50으로 인간 또는 뮤린 GITR에 결합하거나, 약 3 nM 이하의 IC50으로 인간 또는 뮤린 GITR에 결합하거나, 약 2 nM 이하의 IC50으로 인간 또는 뮤린 GITR에 결합하거나, 또는 약 1 nM 이하의 IC50으로 인간 또는 뮤린 GITR에 결합하는 GITR 효능제를 포함한다.
바람직한 실시양태에서, GITR 효능제는 효능작용 항-GITR 모노클로날 항체 (즉, 단세포주로부터 유도된 항체)이다. 효능제 항-GITR 항체는 강한 면역 반응을 유도하는 것으로 공지되어 있다. 문헌 [Cohen, et al., Cancer Res. 2006, 66, 4904-12; Schaer, et al., Curr. Opin. Investig. Drugs 2010, 11, 1378-1386]. 바람직한 실시양태에서, GITR 효능제는 GITR 항원에 특이적으로 결합하는 모노클로날 항체이다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 GITR 수용체 차단제이다. 일부 실시양태에서, GITR 효능제는 효능작용 항체-의존성 세포 독성 (ADCC)을 제거하는 항-GITR 모노클로날 항체, 예를 들어 NK 세포 세포독성이다. 일부 실시양태에서, GITR 효능제는 항체-의존성 세포 식세포작용 (ADCP)을 제거하는 효능작용 항-GITR 모노클로날 항체이다. 일부 실시양태에서, GITR 효능제는 보체-의존성 세포독성 (CDC)을 제거하는 효능작용 항-GITR 모노클로날 항체이다.
한 실시양태에서, GITR 효능제는 6C8 및 Ch-6C8-Agly로도 또한 공지된 효능작용 항-GITR 모노클로날 항체 TRX518 (톨럭스, 인크.(TolerRx, Inc.))이다. TRX518은 중쇄 아스파라긴 297이 알라닌으로 치환되어 N-연결된 글리코실화를 제거함으로써 ADCC 및 CDC를 포함한 Fc 영역 기능성을 제거하는, 완전-인간화 IgG1 항-인간 GITR 모노클로날 항체이다. 문헌 [Rosenzweig, et al., J. Clin. Oncol. 2010, 28 (supplement; abstract e13028); Jung, et al., Cur. Opin. Biotechnology 2011, 22,858-867]. TRX518의 아미노산 서열은 표 20에 제시된다. 일부 실시양태에서, GITR 결합 분자는 항-인간-GITR 모노클로날 항체 6C8 또는 그의 변이체이다. 6C8 항체는 고친화도로 면역 세포, 예를 들어 인간 T 세포 및 수지상 세포 상의 인간 GITR에 결합하는 항-GITR 항체이다. 바람직하게는, 이러한 결합 분자는 Treg 세포에 의한 T 이펙터 세포의 억제를 제거하고, 시험관내에서 자극제, 예컨대 CD3의 존재 하에 부분 활성화 면역 세포에 대해 효능작용성이다. 일부 실시양태에서, GITR 결합 분자는 항-뮤린 GITR 모노클로날 항체 2F8 또는 그의 변이체이다. 6C8 및 2F8의 항체 및 그의 변이체의 제조, 특성 및 용도는 미국 특허 번호 7,812,135; 8,388,967; 및 9,028,823 (이들의 개시내용은 본원에 참조로 포함됨)에 기재되어 있다.
한 실시양태에서, 효능작용 항-GITR 모노클로날 항체는 서열식별번호: 144, 서열식별번호: 145, 서열식별번호: 146 및 서열식별번호: 147로 이루어진 군으로부터 선택된 중쇄 및 서열식별번호: 148을 포함하는 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, 효능작용 항-GITR 모노클로날 항체는 서열식별번호: 144, 서열식별번호: 145, 서열식별번호: 146 및 서열식별번호: 147로 이루어진 군으로부터 선택된 서열에 대해 99% 초과의 서열 동일성을 갖는 중쇄 및 서열식별번호: 148에 대해 99% 초과의 서열 동일성을 갖는 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, 효능작용 항-GITR 모노클로날 항체는 서열식별번호: 144, 서열식별번호: 145, 서열식별번호: 146 및 서열식별번호: 147로 이루어진 군으로부터 선택된 서열에 대해 98% 초과의 서열 동일성을 갖는 중쇄 및 서열식별번호: 148에 대해 98% 초과의 서열 동일성을 갖는 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, 효능작용 항-GITR 모노클로날 항체는 서열식별번호: 144, 서열식별번호: 145, 서열식별번호: 146 및 서열식별번호: 147로 이루어진 군으로부터 선택된 서열에 대해 95% 초과의 서열 동일성을 갖는 중쇄 및 서열식별번호: 148에 대해 95% 초과의 서열 동일성을 갖는 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, 효능작용 항-GITR 모노클로날 항체는 서열식별번호: 144, 서열식별번호: 145, 서열식별번호: 146 및 서열식별번호: 147로 이루어진 군으로부터 선택된 서열에 대해 90% 초과의 서열 동일성을 갖는 중쇄 및 서열식별번호: 148에 대해 90% 초과의 서열 동일성을 갖는 경쇄를 포함한다.
한 실시양태에서, 효능작용 항-GITR 모노클로날 항체는 서열식별번호: 149의 리더 서열을 포함하고 서열식별번호: 144, 서열식별번호: 145, 서열식별번호: 146 및 서열식별번호: 147로 이루어진 군으로부터 선택된 서열을 추가로 포함하는 중쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, 효능작용 항-GITR 모노클로날 항체는 서열식별번호: 148의 리더 서열을 포함하고 서열식별번호: 150을 포함하는 서열을 추가로 포함하는 경쇄를 포함한다.
한 실시양태에서, 효능작용 항-GITR 모노클로날 항체 (예컨대 TRX518)는 서열식별번호: 151 및 서열식별번호: 152로 이루어진 군으로부터 선택된 가변 중쇄 영역 (VH) 및 서열식별번호: 153을 포함하는 가변 경쇄 영역 (VL)을 포함한다. 한 실시양태에서, 효능작용 항-GITR 모노클로날 항체는 서열식별번호: 151의 아미노산 잔기 20-138 및 서열식별번호: 152의 아미노산 잔기 20-138로 이루어진 군으로부터 선택된 가변 중쇄 영역 및 서열식별번호: 153의 아미노산 잔기 20-138을 포함하는 가변 경쇄 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, 효능작용 항-GITR 모노클로날 항체는 서열식별번호: 151의 아미노산 잔기 20-138 및 서열식별번호: 152의 아미노산 잔기 20-138로 이루어진 군으로부터 선택된 서열에 대해 99% 초과의 서열 동일성을 갖는 가변 중쇄 영역 및 서열식별번호: 153의 아미노산 잔기 20-138을 포함하는 서열에 대해 99% 초과의 서열 동일성을 갖는 가변 경쇄 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, 효능작용 항-GITR 모노클로날 항체는 서열식별번호: 151의 아미노산 잔기 20-138 및 서열식별번호: 152의 아미노산 잔기 20-138로 이루어진 군으로부터 선택된 서열에 대해 98% 초과의 서열 동일성을 갖는 가변 중쇄 영역 및 서열식별번호: 153의 아미노산 잔기 20-138을 포함하는 서열에 대해 98% 초과의 서열 동일성을 갖는 가변 경쇄 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, 효능작용 항-GITR 모노클로날 항체는 서열식별번호: 151의 아미노산 잔기 20-138 및 서열식별번호: 152의 아미노산 잔기 20-138로 이루어진 군으로부터 선택된 서열에 대해 95% 초과의 서열 동일성을 갖는 가변 중쇄 영역 및 서열식별번호: 153의 아미노산 잔기 20-138을 포함하는 서열에 대해 95% 초과의 서열 동일성을 갖는 가변 경쇄 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, 효능작용 항-GITR 모노클로날 항체는 서열식별번호: 151의 아미노산 잔기 20-138 및 서열식별번호: 152의 아미노산 잔기 20-138로 이루어진 군으로부터 선택된 서열에 대해 90% 초과의 서열 동일성을 갖는 가변 중쇄 영역 및 서열식별번호: 153의 아미노산 잔기 20-138을 포함하는 서열에 대해 90% 초과의 서열 동일성을 갖는 가변 경쇄 영역을 포함한다.
한 실시양태에서, 효능작용 항-GITR 모노클로날 항체는 서열식별번호: 154의 아미노산 서열을 포함하는 적어도 1개의 CDR1 영역; 서열식별번호: 155 및 서열식별번호: 156으로 이루어진 군으로부터 선택된 아미노산 서열을 포함하는 적어도 1개의 CDR2 영역; 및 서열식별번호: 157의 아미노산 서열을 포함하는 적어도 1개의 CDR3 영역을 포함하는 VH 영역; 및 서열식별번호: 158의 아미노산 서열을 포함하는 적어도 1개의 CDR1 영역; 서열식별번호: 159의 아미노산 서열을 포함하는 적어도 1개의 CDR2 영역; 및 서열식별번호: 160의 아미노산 서열을 포함하는 적어도 1개의 CDR3 영역을 포함하는 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, 본 발명은, 예를 들어 서열식별번호: 154, 서열식별번호: 155, 서열식별번호: 156, 서열식별번호: 157, 서열식별번호: 158, 서열식별번호: 159 및 서열식별번호: 160으로 이루어진 군으로부터 선택된 아미노산 서열을 포함하는 6C8 CDR을 포함하는 폴리펩티드 서열을 코딩하는 단리된 핵산 분자를 제공한다. 한 실시양태에서, 효능작용 항-GITR 모노클로날 항체는 서열식별번호: 154, 서열식별번호: 156, 서열식별번호: 157, 서열식별번호: 158, 서열식별번호: 159 및 서열식별번호: 160의 아미노산 서열에 의해 나타내어지는 6개의 CDR을 포함한다. 한 실시양태에서, GITR에 특이적으로 결합하는 GITR 결합 분자는 서열식별번호: 154, 서열식별번호: 155, 서열식별번호: 157, 서열식별번호: 158, 서열식별번호: 159 및 서열식별번호: 160의 아미노산 서열에 의해 나타내어지는 6개의 CDR을 포함한다. 한 실시양태에서, 효능작용 항-GITR 모노클로날 항체는 서열식별번호: 158, 서열식별번호: 159 및 서열식별번호: 160으로 이루어진 군으로부터 선택된 아미노산 서열을 포함하는 적어도 1개의 CDR 도메인을 갖는 VL을 포함한다. 한 실시양태에서, 효능작용 항-GITR 모노클로날 항체는 서열식별번호: 158, 서열식별번호: 159 및 서열식별번호: 160으로 이루어진 군으로부터 선택된 아미노산 서열을 포함하는 적어도 2개의 CDR 도메인을 갖는 VL을 포함한다. 한 실시양태에서, 효능작용 항-GITR 모노클로날 항체는 서열식별번호: 158, 서열식별번호: 159 및 서열식별번호: 160의 아미노산 서열을 포함하는 CDR 도메인을 갖는 VL을 포함한다. 한 실시양태에서, 효능작용 항-GITR 모노클로날 항체는 서열식별번호: 154, 서열식별번호: 155 및 서열식별번호: 157로 이루어진 군으로부터 선택된 아미노산 서열을 포함하는 적어도 1개의 CDR 도메인을 갖는 VL을 포함한다. 한 실시양태에서, 효능작용 항-GITR 모노클로날 항체는 서열식별번호: 154, 서열식별번호: 155 및 서열식별번호: 157로 이루어진 군으로부터 선택된 아미노산 서열을 포함하는 적어도 2개의 CDR 도메인을 갖는 VL을 포함한다. 한 실시양태에서, 효능작용 항-GITR 모노클로날 항체는 서열식별번호: 154, 서열식별번호: 155 및 서열식별번호: 157의 아미노산 서열을 포함하는 CDR 도메인을 갖는 VL을 포함한다. 한 실시양태에서, 효능작용 항-GITR 모노클로날 항체는 서열식별번호: 154, 서열식별번호: 156 및 서열식별번호: 157로 이루어진 군으로부터 선택된 아미노산 서열을 포함하는 적어도 1개의 CDR 도메인을 갖는 VL을 포함한다. 한 실시양태에서, 효능작용 항-GITR 모노클로날 항체는 서열식별번호: 154, 서열식별번호: 156 및 서열식별번호: 157로 이루어진 군으로부터 선택된 아미노산 서열을 포함하는 적어도 2개의 CDR 도메인을 갖는 VL을 포함한다. 한 실시양태에서, 효능작용 항-GITR 모노클로날 항체는 서열식별번호: 154, 서열식별번호: 156 및 서열식별번호: 157의 아미노산 서열을 포함하는 CDR 도메인을 갖는 VL을 포함한다. 한 실시양태에서, 효능작용 항-GITR 모노클로날 항체는 서열식별번호: 154에 제시된 CDR (CDR1)을 포함하는 VH 도메인을 포함한다. 한 실시양태에서, 효능작용 항-GITR 모노클로날 항체는 서열식별번호: 155에 제시된 CDR (CDR2, "N" 변이체)을 포함하는 VH 도메인을 포함한다. 한 실시양태에서, 효능작용 항-GITR 모노클로날 항체는 서열식별번호: 156에 제시된 CDR (CDR3, "Q" 변이체)을 포함하는 VH 도메인을 포함한다. 한 실시양태에서, 효능작용 항-GITR 모노클로날 항체는 서열식별번호: 157에 제시된 CDR (CDR3)을 포함하는 VH 도메인을 포함한다. 한 실시양태에서, 효능작용 항-GITR 모노클로날 항체는 서열식별번호: 158에 제시된 CDR (CDR1)을 포함하는 VL 도메인을 포함한다. 한 실시양태에서, 효능작용 항-GITR 모노클로날 항체는 서열식별번호: 159에 제시된 CDR (CDR2)을 포함하는 VL 도메인을 포함한다. 한 실시양태에서, 효능작용 항-GITR 모노클로날 항체는 서열식별번호: 160에 제시된 CDR (CDR3)을 포함하는 VL 도메인을 포함한다.
한 실시양태에서, 효능작용 항-GITR 모노클로날 항체는 키메라 6C8 모노클로날 항체, 또는 그의 항원-결합 단편, 유도체, 접합체 또는 변이체이다. 한 실시양태에서, 효능작용 항-GITR 모노클로날 항체는 서열식별번호: 162 및 서열식별번호: 163으로 이루어진 군으로부터 선택된 중쇄 및 서열식별번호: 161을 포함하는 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, 효능작용 항-GITR 모노클로날 항체는 서열식별번호: 162 및 서열식별번호: 163으로 이루어진 군으로부터 선택된 서열에 대해 99% 초과의 서열 동일성을 갖는 중쇄 및 서열식별번호: 161에 대해 99% 초과의 서열 동일성을 갖는 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, 효능작용 항-GITR 모노클로날 항체는 서열식별번호: 162 및 서열식별번호: 163으로 이루어진 군으로부터 선택된 서열에 대해 98% 초과의 서열 동일성을 갖는 중쇄 및 서열식별번호: 161에 대해 98% 초과의 서열 동일성을 갖는 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, 효능작용 항-GITR 모노클로날 항체는 서열식별번호: 162 및 서열식별번호: 163으로 이루어진 군으로부터 선택된 서열에 대해 95% 초과의 서열 동일성을 갖는 중쇄 및 서열식별번호: 161에 대해 95% 초과의 서열 동일성을 갖는 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, 효능작용 항-GITR 모노클로날 항체는 서열식별번호: 162 및 서열식별번호: 163으로 이루어진 군으로부터 선택된 서열에 대해 90% 초과의 서열 동일성을 갖는 중쇄 및 서열식별번호: 161에 대해 90% 초과의 서열 동일성을 갖는 경쇄를 포함한다.
한 실시양태에서, GITR 효능제는 TRX518 또는 6C8에 관하여 약물 규제 기관에 의해 승인된 GITR 효능제 바이오시밀러 모노클로날 항체이다. 한 실시양태에서, 바이오시밀러 모노클로날 항체는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품의 아미노산 서열에 대해 적어도 97% 서열 동일성, 예를 들어 97%, 98%, 99% 또는 100% 서열 동일성을 갖고 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품과 비교하여 1개 이상의 번역후 변형을 포함하는 아미노산 서열을 포함하는 GITR 항체를 포함하며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 TRX518 또는 6C8이다. 일부 실시양태에서, 1개 이상의 번역후 변형은 다음 중 하나 이상으로부터 선택된다: 글리코실화, 산화, 탈아미드화 및 말단절단. 일부 실시양태에서, 바이오시밀러는 인가된 또는 인가를 위해 제출된 GITR 효능제 항체이며, 여기서 GITR 효능제 항체는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품의 제제와 상이한 제제로 제공되며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 TRX518 또는 6C8이다. GITR 효능제 항체는 약물 규제 기관, 예컨대 미국 FDA 및/또는 유럽 연합 EMA에 의해 인가될 수 있다. 일부 실시양태에서, 바이오시밀러는 1종 이상의 부형제를 추가로 포함하는 조성물로서 제공되며, 여기서 1종 이상의 부형제는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품에 포함된 부형제와 동일하거나 상이하며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 TRX518 또는 6C8이다. 일부 실시양태에서, 바이오시밀러는 1종 이상의 부형제를 추가로 포함하는 조성물로서 제공되며, 여기서 1종 이상의 부형제는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품에 포함된 부형제와 동일하거나 상이하며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 TRX518 또는 6C8이다.
표 20. TRX518 및 6C8에 관한 GITR 효능제 항체에 대한 아미노산 서열.
한 실시양태에서, GITR 효능제는 미국 특허 번호 8,709,424; 미국 특허 출원 공개 번호 US 2012/0189639 A1 및 US 2014/0348841 A1 및 국제 특허 출원 공개 번호 WO 2011/028683 A1 (머크 샤프 앤 돔 코포레이션(Merck Sharp & Dohme Corp.)) (이들의 개시내용은 본원에 참조로 포함됨)에 기재된 것을 갖는 효능작용 항-GITR 모노클로날 항체이다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 36E5, 3D6, 61G6, 6H6, 61F6, 1D8, 17F10, 35D8, 49A1, 9E5 및 31H6으로 이루어진 군으로부터 선택된 효능작용 항-GITR 모노클로날 항체 및 그의 단편, 변이체, 유도체 또는 바이오시밀러이다. 이들 항체의 구조, 특성 및 제조는 미국 특허 번호 8,709,424; 미국 특허 출원 공개 번호 US 2012/0189639 A1 및 US 2014/0348841 A1 (이들의 개시내용은 본원에 참조로 포함됨)에 기재되어 있다.
일부 실시양태에서, 효능작용 항-GITR 모노클로날 항체는 서열식별번호: 164, 서열식별번호: 166, 서열식별번호: 168, 서열식별번호: 170, 서열식별번호: 172, 서열식별번호: 174, 서열식별번호: 176, 서열식별번호: 178, 서열식별번호: 180, 서열식별번호: 182, 서열식별번호: 184, 서열식별번호: 186, 서열식별번호: 188, 서열식별번호: 190, 서열식별번호: 192, 서열식별번호: 194, 서열식별번호: 196, 서열식별번호: 198, 서열식별번호: 200, 서열식별번호: 202, 서열식별번호: 204, 서열식별번호: 206으로 이루어진 군으로부터 선택된 서열을 포함하는 인간화 중쇄 가변 도메인 (VH) 또는 그의 변이체, 단편 또는 바이오시밀러, 및 서열식별번호: 165, 서열식별번호: 167, 서열식별번호: 169, 서열식별번호: 171, 서열식별번호: 173, 서열식별번호: 175, 서열식별번호: 177, 서열식별번호: 179, 서열식별번호: 181, 서열식별번호: 183, 서열식별번호: 185, 서열식별번호: 187, 서열식별번호: 189, 서열식별번호: 191, 서열식별번호: 193, 서열식별번호: 195, 서열식별번호: 197, 서열식별번호: 199, 서열식별번호: 201, 서열식별번호: 203, 서열식별번호: 205, 서열식별번호: 207로 이루어진 군으로부터 선택된 서열을 포함하는 인간화 중쇄 가변 도메인 (VH) 또는 그의 변이체, 단편 또는 바이오시밀러를 포함한다 (표 21). 일부 실시양태에서, 효능작용 항-GITR 모노클로날 항체는 중쇄 불변 영역을 추가로 포함하며, 여기서 중쇄 불변 영역은 γ1, γ2, γ3 또는 γ4 인간 중쇄 불변 영역 또는 그의 변이체를 포함한다. 일부 실시양태에서, 경쇄 불변 영역은 람다 또는 카파 인간 경쇄 불변 영역을 포함한다.
한 실시양태에서, GITR 효능제는 36E5, 3D6, 61G6, 6H6, 61F6, 1D8, 17F10, 35D8, 49A1, 9E5 및 31H6에 관하여 약물 규제 기관에 의해 승인된 GITR 효능제 바이오시밀러 모노클로날 항체이다. 한 실시양태에서, 바이오시밀러 모노클로날 항체는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품의 아미노산 서열에 대해 적어도 97% 서열 동일성, 예를 들어 97%, 98%, 99% 또는 100% 서열 동일성을 갖고 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품과 비교하여 1개 이상의 번역후 변형을 포함하는 아미노산 서열을 포함하는 GITR 항체를 포함하며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 36E5, 3D6, 61G6, 6H6, 61F6, 1D8, 17F10, 35D8, 49A1, 9E5 및 31H6이다. 일부 실시양태에서, 1개 이상의 번역후 변형은 다음 중 하나 이상으로부터 선택된다: 글리코실화, 산화, 탈아미드화 및 말단절단. 일부 실시양태에서, 바이오시밀러는 인가된 또는 인가를 위해 제출된 GITR 효능제 항체이며, 여기서 GITR 효능제 항체는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품의 제제와 상이한 제제로 제공되며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 36E5, 3D6, 61G6, 6H6, 61F6, 1D8, 17F10, 35D8, 49A1, 9E5 및 31H6이다. GITR 효능제 항체는 약물 규제 기관, 예컨대 미국 FDA 및/또는 유럽 연합 EMA에 의해 인가될 수 있다. 일부 실시양태에서, 바이오시밀러는 1종 이상의 부형제를 추가로 포함하는 조성물로서 제공되며, 여기서 1종 이상의 부형제는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품에 포함된 부형제와 동일하거나 상이하며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 36E5, 3D6, 61G6, 6H6, 61F6, 1D8, 17F10, 35D8, 49A1, 9E5 및 31H6이다. 일부 실시양태에서, 바이오시밀러는 1종 이상의 부형제를 추가로 포함하는 조성물로서 제공되며, 여기서 1종 이상의 부형제는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품에 포함된 부형제와 동일하거나 상이하며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 36E5, 3D6, 61G6, 6H6, 61F6, 1D8, 17F10, 35D8, 49A1, 9E5 및 31H6이다.
표 21. 국제 특허 출원 공개 번호 WO 2011/028683 A1에 기재된 GITR 효능제에 관한 GITR 효능제 항체에 대한 아미노산 서열.
한 실시양태에서, GITR 효능제는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2013/0108641 A1 (사노피 에스에이(Sanofi SA)) 및 국제 특허 출원 공개 번호 WO 2011/028683 A1 (사노피 에스에이) (이들의 개시내용은 본원에 참조로 포함됨)에 기재된 효능작용 항-GITR 모노클로날 항체이다. 한 실시양태에서, GITR 결합 분자는 서열식별번호: 208, 서열식별번호: 210, 서열식별번호: 211, 서열식별번호: 212, 서열식별번호: 213, 서열식별번호: 214, 서열식별번호: 219, 서열식별번호: 221, 서열식별번호: 223 및 서열식별번호: 225로 이루어진 군으로부터 선택된 중쇄 가변 도메인 (VH), 및 서열식별번호: 209, 서열식별번호: 215, 서열식별번호: 216, 서열식별번호: 217, 서열식별번호: 218, 서열식별번호: 220, 서열식별번호: 222, 서열식별번호: 224 및 서열식별번호: 226으로 이루어진 군으로부터 선택된 경쇄 가변 도메인 (VL)을 포함하는, 인간 GITR에 결합하는 인간화 및 키메라 재조합 항체를 포함한 모노클로날 항체 및 그의 변이체 및 단편을 포함한다 (표 22). 한 실시양태에서, GITR 결합 분자는 (a) 서열식별번호: 227, 서열식별번호: 228, 서열식별번호: 229, 서열식별번호: 233, 서열식별번호: 234, 서열식별번호: 235, 서열식별번호: 240, 서열식별번호: 241, 서열식별번호: 242, 서열식별번호: 243, 서열식별번호: 244, 서열식별번호: 245, 서열식별번호: 249 및 그의 보존적 아미노산 치환으로 이루어진 군으로부터 선택된 1, 2 또는 3개의 중쇄 CDR 및 (b) 서열식별번호: 230, 서열식별번호: 231, 서열식별번호: 232, 서열식별번호: 236, 서열식별번호: 237, 서열식별번호: 238, 서열식별번호: 239, 서열식별번호: 246, 서열식별번호: 247, 서열식별번호: 248 및 그의 보존적 아미노산 치환으로 이루어진 군으로부터 선택된 1, 2 또는 3개의 경쇄 CDR을 포함하는 효능작용 항-GITR 모노클로날 항체이다 (표 22). 한 실시양태에서, GITR 효능제는 2155, 698, 706, 827, 1649 및 1718로 이루어진 군으로부터 선택된 효능작용 항-GITR 모노클로날 항체 및 그의 단편, 유도체, 변이체, 바이오시밀러 및 그의 조합이다.
한 실시양태에서, GITR 효능제는 2155, 698, 706, 827, 1649 및 1718에 관하여 약물 규제 기관에 의해 승인된 GITR 효능제 바이오시밀러 모노클로날 항체이다. 한 실시양태에서, 바이오시밀러 모노클로날 항체는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품의 아미노산 서열에 대해 적어도 97% 서열 동일성, 예를 들어, 97%, 98%, 99% 또는 100% 서열 동일성을 갖고 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품과 비교하여 1개 이상의 번역후 변형을 포함하는 아미노산 서열을 포함하는 GITR 항체를 포함하며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 2155, 698, 706, 827, 1649 및 1718이다. 일부 실시양태에서, 1개 이상의 번역후 변형은 다음 중 하나 이상으로부터 선택된다: 글리코실화, 산화, 탈아미드화 및 말단절단. 일부 실시양태에서, 바이오시밀러는 인가된 또는 인가를 위해 제출된 GITR 효능제 항체이며, 여기서 GITR 효능제 항체는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품의 제제와 상이한 제제로 제공되며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 2155, 698, 706, 827, 1649 및 1718이다. GITR 효능제 항체는 약물 규제 기관, 예컨대 미국 FDA 및/또는 유럽 연합 EMA에 의해 인가될 수 있다. 일부 실시양태에서, 바이오시밀러는 1종 이상의 부형제를 추가로 포함하는 조성물로서 제공되며, 여기서 1종 이상의 부형제는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품에 포함된 부형제와 동일하거나 상이하며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 2155, 698, 706, 827, 1649 및 1718이다. 일부 실시양태에서, 바이오시밀러는 1종 이상의 부형제를 추가로 포함하는 조성물로서 제공되며, 여기서 1종 이상의 부형제는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품에 포함된 부형제와 동일하거나 상이하며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 2155, 698, 706, 827, 1649 및 1718이다.
표 22. 국제 특허 출원 공개 번호 WO 2011/028683 A1에 기재된 GITR 효능제에 관한 GITR 효능제 항체에 대한 아미노산 서열.
바람직한 실시양태에서, GITR 효능제는 모노클로날 항체 1D7 또는 그의 단편, 유도체, 변이체 또는 바이오시밀러이다. 1D7은 암젠, 인크.(Amgen, Inc.)로부터 입수가능하다. 1D7의 제조 및 특성은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1 (이의 개시내용은 본원에 참조로 포함됨)에 기재되어 있다. 1D7의 아미노산 서열은 표 23에 제시된다.
한 실시양태에서, GITR 효능제는 서열식별번호: 250에 의해 제공된 중쇄 및 서열식별번호: 251에 의해 제공된 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 250 및 서열식별번호: 251에 제시된 서열을 갖는 중쇄 및 경쇄, 또는 그의 항원 결합 단편, Fab 단편, 단일-쇄 가변 단편 (scFv), 변이체 또는 접합체를 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 250 및 서열식별번호: 251에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 99% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 250 및 서열식별번호: 251에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 98% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 250 및 서열식별번호: 251에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 97% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 250 및 서열식별번호: 251에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 96% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 250 및 서열식별번호: 251에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 95% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다.
한 실시양태에서, GITR 효능제는 1D7의 중쇄 및 경쇄 CDR 또는 가변 영역 (VR)을 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제 중쇄 가변 영역 (VH)은 서열식별번호: 252에 제시된 서열을 포함하고, GITR 효능제 경쇄 가변 영역 (VL)은 서열식별번호: 253에 제시된 서열 및 그의 보존적 아미노산 치환을 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 252 및 서열식별번호: 253에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 99% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 252 및 서열식별번호: 253에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 98% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 252 및 서열식별번호: 253에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 97% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 252 및 서열식별번호: 253에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 96% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 252 및 서열식별번호: 253에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 95% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다.
한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 254, 서열식별번호: 255 및 서열식별번호: 256에 제시된 서열 및 그의 보존적 아미노산 치환을 갖는 중쇄 CDR1, CDR2 및 CDR3 도메인, 및 각각 서열식별번호: 257, 서열식별번호: 258 및 서열식별번호: 259에 제시된 서열 및 그의 보존적 아미노산 치환을 갖는 경쇄 CDR1, CDR2 및 CDR3 도메인을 포함한다.
한 실시양태에서, GITR 효능제는 1D7에 관하여 약물 규제 기관에 의해 승인된 GITR 효능제 바이오시밀러 모노클로날 항체이다. 한 실시양태에서, 바이오시밀러 모노클로날 항체는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품의 아미노산 서열에 대해 적어도 97% 서열 동일성, 예를 들어 97%, 98%, 99% 또는 100% 서열 동일성을 갖고 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품과 비교하여 1개 이상의 번역후 변형을 포함하는 아미노산 서열을 포함하는 GITR 항체를 포함하며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 1D7이다. 일부 실시양태에서, 1개 이상의 번역후 변형은 다음 중 하나 이상으로부터 선택된다: 글리코실화, 산화, 탈아미드화 및 말단절단. 일부 실시양태에서, 바이오시밀러는 인가된 또는 인가를 위해 제출된 GITR 효능제 항체이며, 여기서 GITR 효능제 항체는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품의 제제와 상이한 제제로 제공되며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 1D7이다. GITR 효능제 항체는 약물 규제 기관, 예컨대 미국 FDA 및/또는 유럽 연합 EMA에 의해 인가될 수 있다. 일부 실시양태에서, 바이오시밀러는 1종 이상의 부형제를 추가로 포함하는 조성물로서 제공되며, 여기서 1종 이상의 부형제는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품에 포함된 부형제와 동일하거나 상이하며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 1D7이다. 일부 실시양태에서, 바이오시밀러는 1종 이상의 부형제를 추가로 포함하는 조성물로서 제공되며, 여기서 1종 이상의 부형제는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품에 포함된 부형제와 동일하거나 상이하며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 1D7이다.
표 23. 1D7에 관한 GITR 효능제 항체에 대한 아미노산 서열.
바람직한 실시양태에서, GITR 효능제는 모노클로날 항체 33C9 또는 그의 단편, 유도체, 변이체 또는 바이오시밀러이다. 33C9는 암젠, 인크.로부터 입수가능하다. 33C9의 제조 및 특성은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1 (이의 개시내용은 본원에 참조로 포함됨)에 기재되어 있다. 33C9의 아미노산 서열은 표 24에 제시된다.
한 실시양태에서, GITR 효능제는 서열식별번호: 260에 의해 제공된 중쇄 및 서열식별번호: 261에 의해 제공된 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 260 및 서열식별번호: 261에 제시된 서열을 갖는 중쇄 및 경쇄, 또는 그의 항원 결합 단편, Fab 단편, 단일-쇄 가변 단편 (scFv), 변이체 또는 접합체를 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 260 및 서열식별번호: 261에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 99% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 260 및 서열식별번호: 261에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 98% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 260 및 서열식별번호: 261에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 97% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 260 및 서열식별번호: 261에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 96% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 260 및 서열식별번호: 261에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 95% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다.
한 실시양태에서, GITR 효능제는 1D7의 중쇄 및 경쇄 CDR 또는 가변 영역 (VR)을 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제 중쇄 가변 영역 (VH)은 서열식별번호: 262에 제시된 서열을 포함하고, GITR 효능제 경쇄 가변 영역 (VL)은 서열식별번호: 263에 제시된 서열 및 그의 보존적 아미노산 치환을 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 262 및 서열식별번호: 263에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 99% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 262 및 서열식별번호: 263에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 98% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 262 및 서열식별번호: 263에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 97% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 262 및 서열식별번호: 263에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 96% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 262 및 서열식별번호: 263에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 95% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다.
한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 264, 서열식별번호: 265 및 서열식별번호: 266에 제시된 서열 및 그의 보존적 아미노산 치환을 갖는 중쇄 CDR1, CDR2 및 CDR3 도메인, 및 각각 서열식별번호: 267, 서열식별번호: 268 및 서열식별번호: 269에 제시된 서열 및 그의 보존적 아미노산 치환을 갖는 경쇄 CDR1, CDR2 및 CDR3 도메인을 포함한다.
한 실시양태에서, GITR 효능제는 33C9에 관하여 약물 규제 기관에 의해 승인된 GITR 효능제 바이오시밀러 모노클로날 항체이다. 한 실시양태에서, 바이오시밀러 모노클로날 항체는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품의 아미노산 서열에 대해 적어도 97% 서열 동일성, 예를 들어 97%, 98%, 99% 또는 100% 서열 동일성을 갖고 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품과 비교하여 1개 이상의 번역후 변형을 포함하는 아미노산 서열을 포함하는 GITR 항체를 포함하며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 33C9이다. 일부 실시양태에서, 1개 이상의 번역후 변형은 다음 중 하나 이상으로부터 선택된다: 글리코실화, 산화, 탈아미드화 및 말단절단. 일부 실시양태에서, 바이오시밀러는 인가된 또는 인가를 위해 제출된 GITR 효능제 항체이며, 여기서 GITR 효능제 항체는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품의 제제와 상이한 제제로 제공되며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 33C9이다. GITR 효능제 항체는 약물 규제 기관, 예컨대 미국 FDA 및/또는 유럽 연합 EMA에 의해 인가될 수 있다. 일부 실시양태에서, 바이오시밀러는 1종 이상의 부형제를 추가로 포함하는 조성물로서 제공되며, 여기서 1종 이상의 부형제는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품에 포함된 부형제와 동일하거나 상이하며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 33C9이다. 일부 실시양태에서, 바이오시밀러는 1종 이상의 부형제를 추가로 포함하는 조성물로서 제공되며, 여기서 1종 이상의 부형제는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품에 포함된 부형제와 동일하거나 상이하며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 33C9이다.
표 24. 33C9에 관한 GITR 효능제 항체에 대한 아미노산 서열.
바람직한 실시양태에서, GITR 효능제는 모노클로날 항체 33F6 또는 그의 단편, 유도체, 변이체 또는 바이오시밀러이다. 33F6은 암젠, 인크.로부터 입수가능하다. 33F6의 제조 및 특성은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1 (이의 개시내용은 본원에 참조로 포함됨)에 기재되어 있다. 33F6의 아미노산 서열은 표 25에 제시된다.
한 실시양태에서, GITR 효능제는 서열식별번호: 270에 의해 제공된 중쇄 및 서열식별번호: 271에 의해 제공된 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 270 및 서열식별번호: 271에 제시된 서열을 갖는 중쇄 및 경쇄, 또는 그의 항원 결합 단편, Fab 단편, 단일-쇄 가변 단편 (scFv), 변이체 또는 접합체를 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 270 및 서열식별번호: 271에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 99% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 270 및 서열식별번호: 271에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 98% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 270 및 서열식별번호: 271에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 97% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 270 및 서열식별번호: 271에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 96% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 270 및 서열식별번호: 271에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 95% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다.
한 실시양태에서, GITR 효능제는 33F6의 중쇄 및 경쇄 CDR 또는 가변 영역 (VR)을 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제 중쇄 가변 영역 (VH)은 서열식별번호: 272에 제시된 서열을 포함하고, GITR 효능제 경쇄 가변 영역 (VL)은 서열식별번호: 273에 제시된 서열 및 그의 보존적 아미노산 치환을 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 272 및 서열식별번호: 273에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 99% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 272 및 서열식별번호: 273에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 98% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 272 및 서열식별번호: 273에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 97% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 272 및 서열식별번호: 273에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 96% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 272 및 서열식별번호: 273에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 95% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다.
한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 274, 서열식별번호: 275 및 서열식별번호: 276에 제시된 서열 및 그의 보존적 아미노산 치환을 갖는 중쇄 CDR1, CDR2 및 CDR3 도메인, 및 각각 서열식별번호: 277, 서열식별번호: 278 및 서열식별번호: 279에 제시된 서열 및 그의 보존적 아미노산 치환을 갖는 경쇄 CDR1, CDR2 및 CDR3 도메인을 포함한다.
한 실시양태에서, GITR 효능제는 33F6에 관하여 약물 규제 기관에 의해 승인된 GITR 효능제 바이오시밀러 모노클로날 항체이다. 한 실시양태에서, 바이오시밀러 모노클로날 항체는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품의 아미노산 서열에 대해 적어도 97% 서열 동일성, 예를 들어 97%, 98%, 99% 또는 100% 서열 동일성을 갖고 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품과 비교하여 1개 이상의 번역후 변형을 포함하는 아미노산 서열을 포함하는 GITR 항체를 포함하며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 33F6이다. 일부 실시양태에서, 1개 이상의 번역후 변형은 다음 중 하나 이상으로부터 선택된다: 글리코실화, 산화, 탈아미드화 및 말단절단. 일부 실시양태에서, 바이오시밀러는 인가된 또는 인가를 위해 제출된 GITR 효능제 항체이며, 여기서 GITR 효능제 항체는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품의 제제와 상이한 제제로 제공되며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 33F6이다. GITR 효능제 항체는 약물 규제 기관, 예컨대 미국 FDA 및/또는 유럽 연합 EMA에 의해 인가될 수 있다. 일부 실시양태에서, 바이오시밀러는 1종 이상의 부형제를 추가로 포함하는 조성물로서 제공되며, 여기서 1종 이상의 부형제는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품에 포함된 부형제와 동일하거나 상이하며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 33F6이다. 일부 실시양태에서, 바이오시밀러는 1종 이상의 부형제를 추가로 포함하는 조성물로서 제공되며, 여기서 1종 이상의 부형제는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품에 포함된 부형제와 동일하거나 상이하며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 33F6이다.
표 25. 33F6에 관한 GITR 효능제 항체에 대한 아미노산 서열.
바람직한 실시양태에서, GITR 효능제는 모노클로날 항체 34G4 또는 그의 단편, 유도체, 변이체 또는 바이오시밀러이다. 34G4는 암젠, 인크.로부터 입수가능하다. 34G4의 제조 및 특성은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1 (이의 개시내용은 본원에 참조로 포함됨)에 기재되어 있다. 34G4의 아미노산 서열은 표 26에 제시된다.
한 실시양태에서, GITR 효능제는 서열식별번호: 280에 의해 제공된 중쇄 및 서열식별번호: 281에 의해 제공된 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 280 및 서열식별번호: 281에 제시된 서열을 갖는 중쇄 및 경쇄, 또는 그의 항원 결합 단편, Fab 단편, 단일-쇄 가변 단편 (scFv), 변이체 또는 접합체를 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 280 및 서열식별번호: 281에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 99% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 280 및 서열식별번호: 281에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 98% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 280 및 서열식별번호: 281에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 97% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 280 및 서열식별번호: 281에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 96% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 280 및 서열식별번호: 281에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 95% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다.
한 실시양태에서, GITR 효능제는 34G4의 중쇄 및 경쇄 CDR 또는 가변 영역 (VR)을 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제 중쇄 가변 영역 (VH)은 서열식별번호: 282에 제시된 서열을 포함하고, GITR 효능제 경쇄 가변 영역 (VL)은 서열식별번호: 283에 제시된 서열 및 그의 보존적 아미노산 치환을 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 282 및 서열식별번호: 283에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 99% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 282 및 서열식별번호: 283에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 98% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 282 및 서열식별번호: 283에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 97% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 282 및 서열식별번호: 283에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 96% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 282 및 서열식별번호: 283에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 95% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다.
한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 284, 서열식별번호: 285 및 서열식별번호: 286에 제시된 서열 및 그의 보존적 아미노산 치환을 갖는 중쇄 CDR1, CDR2 및 CDR3 도메인, 및 각각 서열식별번호: 287, 서열식별번호: 288 및 서열식별번호: 289에 제시된 서열 및 그의 보존적 아미노산 치환을 갖는 경쇄 CDR1, CDR2 및 CDR3 도메인을 포함한다.
한 실시양태에서, GITR 효능제는 34G4에 관하여 약물 규제 기관에 의해 승인된 GITR 효능제 바이오시밀러 모노클로날 항체이다. 한 실시양태에서, 바이오시밀러 모노클로날 항체는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품의 아미노산 서열에 대해 적어도 97% 서열 동일성, 예를 들어 97%, 98%, 99% 또는 100% 서열 동일성을 갖고 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품과 비교하여 1개 이상의 번역후 변형을 포함하는 아미노산 서열을 포함하는 GITR 항체를 포함하며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 34G4이다. 일부 실시양태에서, 1개 이상의 번역후 변형은 다음 중 하나 이상으로부터 선택된다: 글리코실화, 산화, 탈아미드화 및 말단절단. 일부 실시양태에서, 바이오시밀러는 인가된 또는 인가를 위해 제출된 GITR 효능제 항체이며, 여기서 GITR 효능제 항체는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품의 제제와 상이한 제제로 제공되며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 34G4이다. GITR 효능제 항체는 약물 규제 기관, 예컨대 미국 FDA 및/또는 유럽 연합 EMA에 의해 인가될 수 있다. 일부 실시양태에서, 바이오시밀러는 1종 이상의 부형제를 추가로 포함하는 조성물로서 제공되며, 여기서 1종 이상의 부형제는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품에 포함된 부형제와 동일하거나 상이하며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 34G4이다. 일부 실시양태에서, 바이오시밀러는 1종 이상의 부형제를 추가로 포함하는 조성물로서 제공되며, 여기서 1종 이상의 부형제는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품에 포함된 부형제와 동일하거나 상이하며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 34G4이다.
표 26. 34G4에 관한 GITR 효능제 항체에 대한 아미노산 서열.
바람직한 실시양태에서, GITR 효능제는 모노클로날 항체 35B10 또는 그의 단편, 유도체, 변이체 또는 바이오시밀러이다. 35B10은 암젠, 인크.로부터 입수가능하다. 35B10의 제조 및 특성은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1 (이의 개시내용은 본원에 참조로 포함됨)에 기재되어 있다. 35B10의 아미노산 서열은 표 27에 제시된다.
한 실시양태에서, GITR 효능제는 서열식별번호: 290에 의해 제공된 중쇄 및 서열식별번호: 291에 의해 제공된 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 290 및 서열식별번호: 291에 제시된 서열을 갖는 중쇄 및 경쇄, 또는 그의 항원 결합 단편, Fab 단편, 단일-쇄 가변 단편 (scFv), 변이체 또는 접합체를 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 290 및 서열식별번호: 291에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 99% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 290 및 서열식별번호: 291에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 98% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 290 및 서열식별번호: 291에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 97% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 290 및 서열식별번호: 291에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 96% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 290 및 서열식별번호: 291에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 95% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다.
한 실시양태에서, GITR 효능제는 35B10의 중쇄 및 경쇄 CDR 또는 가변 영역 (VR)을 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제 중쇄 가변 영역 (VH)은 서열식별번호: 292에 제시된 서열을 포함하고, GITR 효능제 경쇄 가변 영역 (VL)은 서열식별번호: 293에 제시된 서열 및 그의 보존적 아미노산 치환을 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 292 및 서열식별번호: 293에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 99% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 292 및 서열식별번호: 293에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 98% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 292 및 서열식별번호: 293에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 97% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 292 및 서열식별번호: 293에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 96% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 292 및 서열식별번호: 293에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 95% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다.
한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 294, 서열식별번호: 295 및 서열식별번호: 296에 제시된 서열 및 그의 보존적 아미노산 치환을 갖는 중쇄 CDR1, CDR2 및 CDR3 도메인, 및 각각 서열식별번호: 297, 서열식별번호: 298 및 서열식별번호: 299에 제시된 서열 및 그의 보존적 아미노산 치환을 갖는 경쇄 CDR1, CDR2 및 CDR3 도메인을 포함한다.
한 실시양태에서, GITR 효능제는 35B10에 관하여 약물 규제 기관에 의해 승인된 GITR 효능제 바이오시밀러 모노클로날 항체이다. 한 실시양태에서, 바이오시밀러 모노클로날 항체는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품의 아미노산 서열에 대해 적어도 97% 서열 동일성, 예를 들어 97%, 98%, 99% 또는 100% 서열 동일성을 갖고 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품과 비교하여 1개 이상의 번역후 변형을 포함하는 아미노산 서열을 포함하는 GITR 항체를 포함하며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 35B10이다. 일부 실시양태에서, 1개 이상의 번역후 변형은 다음 중 하나 이상으로부터 선택된다: 글리코실화, 산화, 탈아미드화 및 말단절단. 일부 실시양태에서, 바이오시밀러는 인가된 또는 인가를 위해 제출된 GITR 효능제 항체이며, 여기서 GITR 효능제 항체는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품의 제제와 상이한 제제로 제공되며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 35B10이다. GITR 효능제 항체는 약물 규제 기관, 예컨대 미국 FDA 및/또는 유럽 연합 EMA에 의해 인가될 수 있다. 일부 실시양태에서, 바이오시밀러는 1종 이상의 부형제를 추가로 포함하는 조성물로서 제공되며, 여기서 1종 이상의 부형제는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품에 포함된 부형제와 동일하거나 상이하며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 35B10이다. 일부 실시양태에서, 바이오시밀러는 1종 이상의 부형제를 추가로 포함하는 조성물로서 제공되며, 여기서 1종 이상의 부형제는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품에 포함된 부형제와 동일하거나 상이하며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 35B10이다.
표 27. 35B10에 관한 GITR 효능제 항체에 대한 아미노산 서열.
바람직한 실시양태에서, GITR 효능제는 모노클로날 항체 41E11 또는 그의 단편, 유도체, 변이체 또는 바이오시밀러이다. 41E11은 암젠, 인크.로부터 입수가능하다. 41E11의 제조 및 특성은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1 (이의 개시내용은 본원에 참조로 포함됨)에 기재되어 있다. 41E11의 아미노산 서열은 표 28에 제시된다.
한 실시양태에서, GITR 효능제는 서열식별번호: 300에 의해 제공된 중쇄 및 서열식별번호: 301에 의해 제공된 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 300 및 서열식별번호: 301에 제시된 서열을 갖는 중쇄 및 경쇄, 또는 그의 항원 결합 단편, Fab 단편, 단일-쇄 가변 단편 (scFv), 변이체 또는 접합체를 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 300 및 서열식별번호: 301에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 99% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 300 및 서열식별번호: 301에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 98% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 300 및 서열식별번호: 301에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 97% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 300 및 서열식별번호: 301에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 96% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 300 및 서열식별번호: 301에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 95% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다.
한 실시양태에서, GITR 효능제는 41E11의 중쇄 및 경쇄 CDR 또는 가변 영역 (VR)을 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제 중쇄 가변 영역 (VH)은 서열식별번호: 302에 제시된 서열을 포함하고, GITR 효능제 경쇄 가변 영역 (VL)은 서열식별번호: 303에 제시된 서열 및 그의 보존적 아미노산 치환을 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 302 및 서열식별번호: 303에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 99% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 302 및 서열식별번호: 303에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 98% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 302 및 서열식별번호: 303에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 97% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 302 및 서열식별번호: 303에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 96% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 302 및 서열식별번호: 303에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 95% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다.
한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 304, 서열식별번호: 305 및 서열식별번호: 306에 제시된 서열 및 그의 보존적 아미노산 치환을 갖는 중쇄 CDR1, CDR2 및 CDR3 도메인, 및 각각 서열식별번호: 307, 서열식별번호: 308 및 서열식별번호: 309에 제시된 서열 및 그의 보존적 아미노산 치환을 갖는 경쇄 CDR1, CDR2 및 CDR3 도메인을 포함한다.
한 실시양태에서, GITR 효능제는 41E11에 관하여 약물 규제 기관에 의해 승인된 GITR 효능제 바이오시밀러 모노클로날 항체이다. 한 실시양태에서, 바이오시밀러 모노클로날 항체는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품의 아미노산 서열에 대해 적어도 97% 서열 동일성, 예를 들어 97%, 98%, 99% 또는 100% 서열 동일성을 갖고 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품과 비교하여 1개 이상의 번역후 변형을 포함하는 아미노산 서열을 포함하는 GITR 항체를 포함하며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 41E11이다. 일부 실시양태에서, 1개 이상의 번역후 변형은 다음 중 하나 이상으로부터 선택된다: 글리코실화, 산화, 탈아미드화 및 말단절단. 일부 실시양태에서, 바이오시밀러는 인가된 또는 인가를 위해 제출된 GITR 효능제 항체이며, 여기서 GITR 효능제 항체는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품의 제제와 상이한 제제로 제공되며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 41E11이다. GITR 효능제 항체는 약물 규제 기관, 예컨대 미국 FDA 및/또는 유럽 연합 EMA에 의해 인가될 수 있다. 일부 실시양태에서, 바이오시밀러는 1종 이상의 부형제를 추가로 포함하는 조성물로서 제공되며, 여기서 1종 이상의 부형제는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품에 포함된 부형제와 동일하거나 상이하며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 41E11이다. 일부 실시양태에서, 바이오시밀러는 1종 이상의 부형제를 추가로 포함하는 조성물로서 제공되며, 여기서 1종 이상의 부형제는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품에 포함된 부형제와 동일하거나 상이하며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 41E11이다.
표 28. 41E11에 관한 GITR 효능제 항체에 대한 아미노산 서열.
바람직한 실시양태에서, GITR 효능제는 모노클로날 항체 41G5 또는 그의 단편, 유도체, 변이체 또는 바이오시밀러이다. 41G5는 암젠, 인크.로부터 입수가능하다. 41G5의 제조 및 특성은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1 (이의 개시내용은 본원에 참조로 포함됨)에 기재되어 있다. 41G5의 아미노산 서열은 표 29에 제시된다.
한 실시양태에서, GITR 효능제는 서열식별번호: 310에 의해 제공된 중쇄 및 서열식별번호: 311에 의해 제공된 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 310 및 서열식별번호: 311에 제시된 서열을 갖는 중쇄 및 경쇄, 또는 그의 항원 결합 단편, Fab 단편, 단일-쇄 가변 단편 (scFv), 변이체 또는 접합체를 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 310 및 서열식별번호: 311에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 99% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 310 및 서열식별번호: 311에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 98% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 310 및 서열식별번호: 311에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 97% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 310 및 서열식별번호: 311에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 96% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 310 및 서열식별번호: 311에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 95% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다.
한 실시양태에서, GITR 효능제는 41G5의 중쇄 및 경쇄 CDR 또는 가변 영역 (VR)을 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제 중쇄 가변 영역 (VH)은 서열식별번호: 312에 제시된 서열을 포함하고, GITR 효능제 경쇄 가변 영역 (VL)은 서열식별번호: 313에 제시된 서열 및 그의 보존적 아미노산 치환을 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 312 및 서열식별번호: 313에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 99% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 312 및 서열식별번호: 313에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 98% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 312 및 서열식별번호: 313에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 97% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 312 및 서열식별번호: 313에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 96% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 312 및 서열식별번호: 313에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 95% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다.
한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 314, 서열식별번호: 315 및 서열식별번호: 316에 제시된 서열 및 그의 보존적 아미노산 치환을 갖는 중쇄 CDR1, CDR2 및 CDR3 도메인, 및 각각 서열식별번호: 317, 서열식별번호: 318 및 서열식별번호: 319에 제시된 서열 및 그의 보존적 아미노산 치환을 갖는 경쇄 CDR1, CDR2 및 CDR3 도메인을 포함한다.
한 실시양태에서, GITR 효능제는 41G5에 관하여 약물 규제 기관에 의해 승인된 GITR 효능제 바이오시밀러 모노클로날 항체이다. 한 실시양태에서, 바이오시밀러 모노클로날 항체는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품의 아미노산 서열에 대해 적어도 97% 서열 동일성, 예를 들어 97%, 98%, 99% 또는 100% 서열 동일성을 갖고 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품과 비교하여 1개 이상의 번역후 변형을 포함하는 아미노산 서열을 포함하는 GITR 항체를 포함하며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 41G5이다. 일부 실시양태에서, 1개 이상의 번역후 변형은 다음 중 하나 이상으로부터 선택된다: 글리코실화, 산화, 탈아미드화 및 말단절단. 일부 실시양태에서, 바이오시밀러는 인가된 또는 인가를 위해 제출된 GITR 효능제 항체이며, 여기서 GITR 효능제 항체는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품의 제제와 상이한 제제로 제공되며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 41G5이다. GITR 효능제 항체는 약물 규제 기관, 예컨대 미국 FDA 및/또는 유럽 연합 EMA에 의해 인가될 수 있다. 일부 실시양태에서, 바이오시밀러는 1종 이상의 부형제를 추가로 포함하는 조성물로서 제공되며, 여기서 1종 이상의 부형제는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품에 포함된 부형제와 동일하거나 상이하며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 41G5이다. 일부 실시양태에서, 바이오시밀러는 1종 이상의 부형제를 추가로 포함하는 조성물로서 제공되며, 여기서 1종 이상의 부형제는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품에 포함된 부형제와 동일하거나 상이하며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 41G5이다.
표 29. 41G5에 관한 GITR 효능제 항체에 대한 아미노산 서열.
바람직한 실시양태에서, GITR 효능제는 모노클로날 항체 42A11 또는 그의 단편, 유도체, 변이체 또는 바이오시밀러이다. 42A11은 암젠, 인크.로부터 입수가능하다. 42A11의 제조 및 특성은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1 (이의 개시내용은 본원에 참조로 포함됨)에 기재되어 있다. 42A11의 아미노산 서열은 표 30에 제시된다.
한 실시양태에서, GITR 효능제는 서열식별번호: 320에 의해 제공된 중쇄 및 서열식별번호: 321에 의해 제공된 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 320 및 서열식별번호: 321에 제시된 서열을 갖는 중쇄 및 경쇄, 또는 그의 항원 결합 단편, Fab 단편, 단일-쇄 가변 단편 (scFv), 변이체 또는 접합체를 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 320 및 서열식별번호: 321에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 99% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 320 및 서열식별번호: 321에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 98% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 320 및 서열식별번호: 321에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 97% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 320 및 서열식별번호: 321에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 96% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 320 및 서열식별번호: 321에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 95% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다.
한 실시양태에서, GITR 효능제는 42A11의 중쇄 및 경쇄 CDR 또는 가변 영역 (VR)을 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제 중쇄 가변 영역 (VH)은 서열식별번호: 322에 제시된 서열을 포함하고, GITR 효능제 경쇄 가변 영역 (VL)은 서열식별번호: 323에 제시된 서열 및 그의 보존적 아미노산 치환을 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 322 및 서열식별번호: 323에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 99% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 322 및 서열식별번호: 323에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 98% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 322 및 서열식별번호: 323에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 97% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 322 및 서열식별번호: 323에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 96% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 322 및 서열식별번호: 323에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 95% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다.
한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 324, 서열식별번호: 325 및 서열식별번호: 326에 제시된 서열 및 그의 보존적 아미노산 치환을 갖는 중쇄 CDR1, CDR2 및 CDR3 도메인, 및 각각 서열식별번호: 327, 서열식별번호: 328 및 서열식별번호: 329에 제시된 서열 및 그의 보존적 아미노산 치환을 갖는 경쇄 CDR1, CDR2 및 CDR3 도메인을 포함한다.
한 실시양태에서, GITR 효능제는 42A11에 관하여 약물 규제 기관에 의해 승인된 GITR 효능제 바이오시밀러 모노클로날 항체이다. 한 실시양태에서, 바이오시밀러 모노클로날 항체는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품의 아미노산 서열에 대해 적어도 97% 서열 동일성, 예를 들어 97%, 98%, 99% 또는 100% 서열 동일성을 갖고 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품과 비교하여 1개 이상의 번역후 변형을 포함하는 아미노산 서열을 포함하는 GITR 항체를 포함하며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 42A11이다. 일부 실시양태에서, 1개 이상의 번역후 변형은 다음 중 하나 이상으로부터 선택된다: 글리코실화, 산화, 탈아미드화 및 말단절단. 일부 실시양태에서, 바이오시밀러는 인가된 또는 인가를 위해 제출된 GITR 효능제 항체이며, 여기서 GITR 효능제 항체는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품의 제제와 상이한 제제로 제공되며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 42A11이다. GITR 효능제 항체는 약물 규제 기관, 예컨대 미국 FDA 및/또는 유럽 연합 EMA에 의해 인가될 수 있다. 일부 실시양태에서, 바이오시밀러는 1종 이상의 부형제를 추가로 포함하는 조성물로서 제공되며, 여기서 1종 이상의 부형제는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품에 포함된 부형제와 동일하거나 상이하며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 42A11이다. 일부 실시양태에서, 바이오시밀러는 1종 이상의 부형제를 추가로 포함하는 조성물로서 제공되며, 여기서 1종 이상의 부형제는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품에 포함된 부형제와 동일하거나 상이하며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 42A11이다.
표 30. 42A11에 관한 GITR 효능제 항체에 대한 아미노산 서열.
바람직한 실시양태에서, GITR 효능제는 모노클로날 항체 44C1 또는 그의 단편, 유도체, 변이체 또는 바이오시밀러이다. 44C1은 암젠, 인크.로부터 입수가능하다. 44C1의 제조 및 특성은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1 (이의 개시내용은 본원에 참조로 포함됨)에 기재되어 있다. 44C1의 아미노산 서열은 표 31에 제시된다.
한 실시양태에서, GITR 효능제는 서열식별번호: 330에 의해 제공된 중쇄 및 서열식별번호: 331에 의해 제공된 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 330 및 서열식별번호: 331에 제시된 서열을 갖는 중쇄 및 경쇄, 또는 그의 항원 결합 단편, Fab 단편, 단일-쇄 가변 단편 (scFv), 변이체 또는 접합체를 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 330 및 서열식별번호: 331에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 99% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 330 및 서열식별번호: 331에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 98% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 330 및 서열식별번호: 331에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 97% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 330 및 서열식별번호: 331에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 96% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 330 및 서열식별번호: 331에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 95% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다.
한 실시양태에서, GITR 효능제는 44C1의 중쇄 및 경쇄 CDR 또는 가변 영역 (VR)을 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제 중쇄 가변 영역 (VH)은 서열식별번호: 332에 제시된 서열을 포함하고, GITR 효능제 경쇄 가변 영역 (VL)은 서열식별번호: 333에 제시된 서열 및 그의 보존적 아미노산 치환을 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 332 및 서열식별번호: 333에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 99% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 332 및 서열식별번호: 333에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 98% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 332 및 서열식별번호: 333에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 97% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 332 및 서열식별번호: 333에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 96% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 332 및 서열식별번호: 333에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 95% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다.
한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 334, 서열식별번호: 335 및 서열식별번호: 336에 제시된 서열 및 그의 보존적 아미노산 치환을 갖는 중쇄 CDR1, CDR2 및 CDR3 도메인, 및 각각 서열식별번호: 337, 서열식별번호: 338 및 서열식별번호: 339에 제시된 서열 및 그의 보존적 아미노산 치환을 갖는 경쇄 CDR1, CDR2 및 CDR3 도메인을 포함한다.
한 실시양태에서, GITR 효능제는 44C1에 관하여 약물 규제 기관에 의해 승인된 GITR 효능제 바이오시밀러 모노클로날 항체이다. 한 실시양태에서, 바이오시밀러 모노클로날 항체는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품의 아미노산 서열에 대해 적어도 97% 서열 동일성, 예를 들어 97%, 98%, 99% 또는 100% 서열 동일성을 갖고 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품과 비교하여 1개 이상의 번역후 변형을 포함하는 아미노산 서열을 포함하는 GITR 항체를 포함하며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 44C1이다. 일부 실시양태에서, 1개 이상의 번역후 변형은 다음 중 하나 이상으로부터 선택된다: 글리코실화, 산화, 탈아미드화 및 말단절단. 일부 실시양태에서, 바이오시밀러는 인가된 또는 인가를 위해 제출된 GITR 효능제 항체이며, 여기서 GITR 효능제 항체는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품의 제제와 상이한 제제로 제공되며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 44C1이다. GITR 효능제 항체는 약물 규제 기관, 예컨대 미국 FDA 및/또는 유럽 연합 EMA에 의해 인가될 수 있다. 일부 실시양태에서, 바이오시밀러는 1종 이상의 부형제를 추가로 포함하는 조성물로서 제공되며, 여기서 1종 이상의 부형제는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품에 포함된 부형제와 동일하거나 상이하며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 44C1이다. 일부 실시양태에서, 바이오시밀러는 1종 이상의 부형제를 추가로 포함하는 조성물로서 제공되며, 여기서 1종 이상의 부형제는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품에 포함된 부형제와 동일하거나 상이하며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 44C1이다.
표 31. 44C1에 관한 GITR 효능제 항체에 대한 아미노산 서열.
바람직한 실시양태에서, GITR 효능제는 모노클로날 항체 45A8 또는 그의 단편, 유도체, 변이체 또는 바이오시밀러이다. 45A8은 암젠, 인크.로부터 입수가능하다. 45A8의 제조 및 특성은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1 (이의 개시내용은 본원에 참조로 포함됨)에 기재되어 있다. 45A8의 아미노산 서열은 표 32에 제시된다.
한 실시양태에서, GITR 효능제는 서열식별번호: 340에 의해 제공된 중쇄 및 서열식별번호: 341에 의해 제공된 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 340 및 서열식별번호: 341에 제시된 서열을 갖는 중쇄 및 경쇄, 또는 그의 항원 결합 단편, Fab 단편, 단일-쇄 가변 단편 (scFv), 변이체 또는 접합체를 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 340 및 서열식별번호: 341에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 99% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 340 및 서열식별번호: 341에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 98% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 340 및 서열식별번호: 341에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 97% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 340 및 서열식별번호: 341에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 96% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 340 및 서열식별번호: 341에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 95% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다.
한 실시양태에서, GITR 효능제는 45A8의 중쇄 및 경쇄 CDR 또는 가변 영역 (VR)을 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제 중쇄 가변 영역 (VH)은 서열식별번호: 342에 제시된 서열을 포함하고, GITR 효능제 경쇄 가변 영역 (VL)은 서열식별번호: 343에 제시된 서열 및 그의 보존적 아미노산 치환을 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 342 및 서열식별번호: 343에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 99% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 342 및 서열식별번호: 343에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 98% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 342 및 서열식별번호: 343에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 97% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 342 및 서열식별번호: 343에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 96% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 342 및 서열식별번호: 343에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 95% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다.
한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 344, 서열식별번호: 345 및 서열식별번호: 346에 제시된 서열 및 그의 보존적 아미노산 치환을 갖는 중쇄 CDR1, CDR2 및 CDR3 도메인, 및 각각 서열식별번호: 347, 서열식별번호: 348 및 서열식별번호: 349에 제시된 서열 및 그의 보존적 아미노산 치환을 갖는 경쇄 CDR1, CDR2 및 CDR3 도메인을 포함한다.
한 실시양태에서, GITR 효능제는 45A8에 관하여 약물 규제 기관에 의해 승인된 GITR 효능제 바이오시밀러 모노클로날 항체이다. 한 실시양태에서, 바이오시밀러 모노클로날 항체는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품의 아미노산 서열에 대해 적어도 97% 서열 동일성, 예를 들어 97%, 98%, 99% 또는 100% 서열 동일성을 갖고 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품과 비교하여 1개 이상의 번역후 변형을 포함하는 아미노산 서열을 포함하는 GITR 항체를 포함하며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 45A8이다. 일부 실시양태에서, 1개 이상의 번역후 변형은 다음 중 하나 이상으로부터 선택된다: 글리코실화, 산화, 탈아미드화 및 말단절단. 일부 실시양태에서, 바이오시밀러는 인가된 또는 인가를 위해 제출된 GITR 효능제 항체이며, 여기서 GITR 효능제 항체는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품의 제제와 상이한 제제로 제공되며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 45A8이다. GITR 효능제 항체는 약물 규제 기관, 예컨대 미국 FDA 및/또는 유럽 연합 EMA에 의해 인가될 수 있다. 일부 실시양태에서, 바이오시밀러는 1종 이상의 부형제를 추가로 포함하는 조성물로서 제공되며, 여기서 1종 이상의 부형제는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품에 포함된 부형제와 동일하거나 상이하며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 45A8이다. 일부 실시양태에서, 바이오시밀러는 1종 이상의 부형제를 추가로 포함하는 조성물로서 제공되며, 여기서 1종 이상의 부형제는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품에 포함된 부형제와 동일하거나 상이하며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 45A8이다.
표 32. 45A8에 관한 GITR 효능제 항체에 대한 아미노산 서열.
바람직한 실시양태에서, GITR 효능제는 모노클로날 항체 46E11 또는 그의 단편, 유도체, 변이체 또는 바이오시밀러이다. 46E11은 암젠, 인크.로부터 입수가능하다. 46E11의 제조 및 특성은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1 (이의 개시내용은 본원에 참조로 포함됨)에 기재되어 있다. 46E11의 아미노산 서열은 표 33에 제시된다.
한 실시양태에서, GITR 효능제는 서열식별번호: 350에 의해 제공된 중쇄 및 서열식별번호: 351에 의해 제공된 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 350 및 서열식별번호: 351에 제시된 서열을 갖는 중쇄 및 경쇄, 또는 그의 항원 결합 단편, Fab 단편, 단일-쇄 가변 단편 (scFv), 변이체 또는 접합체를 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 350 및 서열식별번호: 351에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 99% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 350 및 서열식별번호: 351에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 98% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 350 및 서열식별번호: 351에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 97% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 350 및 서열식별번호: 351에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 96% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 350 및 서열식별번호: 351에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 95% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다.
한 실시양태에서, GITR 효능제는 46E11의 중쇄 및 경쇄 CDR 또는 가변 영역 (VR)을 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제 중쇄 가변 영역 (VH)은 서열식별번호: 352에 제시된 서열을 포함하고, GITR 효능제 경쇄 가변 영역 (VL)은 서열식별번호: 353에 제시된 서열 및 그의 보존적 아미노산 치환을 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 352 및 서열식별번호: 353에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 99% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 352 및 서열식별번호: 353에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 98% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 352 및 서열식별번호: 353에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 97% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 352 및 서열식별번호: 353에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 96% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 352 및 서열식별번호: 353에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 95% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다.
한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 354, 서열식별번호: 355 및 서열식별번호: 356에 제시된 서열 및 그의 보존적 아미노산 치환을 갖는 중쇄 CDR1, CDR2 및 CDR3 도메인, 및 각각 서열식별번호: 357, 서열식별번호: 358 및 서열식별번호: 359에 제시된 서열 및 그의 보존적 아미노산 치환을 갖는 경쇄 CDR1, CDR2 및 CDR3 도메인을 포함한다.
한 실시양태에서, GITR 효능제는 46E11에 관하여 약물 규제 기관에 의해 승인된 GITR 효능제 바이오시밀러 모노클로날 항체이다. 한 실시양태에서, 바이오시밀러 모노클로날 항체는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품의 아미노산 서열에 대해 적어도 97% 서열 동일성, 예를 들어 97%, 98%, 99% 또는 100% 서열 동일성을 갖고 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품과 비교하여 1개 이상의 번역후 변형을 포함하는 아미노산 서열을 포함하는 GITR 항체를 포함하며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 46E11이다. 일부 실시양태에서, 1개 이상의 번역후 변형은 다음 중 하나 이상으로부터 선택된다: 글리코실화, 산화, 탈아미드화 및 말단절단. 일부 실시양태에서, 바이오시밀러는 인가된 또는 인가를 위해 제출된 GITR 효능제 항체이며, 여기서 GITR 효능제 항체는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품의 제제와 상이한 제제로 제공되며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 46E11이다. GITR 효능제 항체는 약물 규제 기관, 예컨대 미국 FDA 및/또는 유럽 연합 EMA에 의해 인가될 수 있다. 일부 실시양태에서, 바이오시밀러는 1종 이상의 부형제를 추가로 포함하는 조성물로서 제공되며, 여기서 1종 이상의 부형제는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품에 포함된 부형제와 동일하거나 상이하며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 46E11이다. 일부 실시양태에서, 바이오시밀러는 1종 이상의 부형제를 추가로 포함하는 조성물로서 제공되며, 여기서 1종 이상의 부형제는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품에 포함된 부형제와 동일하거나 상이하며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 46E11이다.
표 33. 46E11에 관한 GITR 효능제 항체에 대한 아미노산 서열.
바람직한 실시양태에서, GITR 효능제는 모노클로날 항체 48H12 또는 그의 단편, 유도체, 변이체 또는 바이오시밀러이다. 48H12는 암젠, 인크.로부터 입수가능하다. 48H12의 제조 및 특성은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1 (이의 개시내용은 본원에 참조로 포함됨)에 기재되어 있다. 48H12의 아미노산 서열은 표 34에 제시된다.
한 실시양태에서, GITR 효능제는 서열식별번호: 360에 의해 제공된 중쇄 및 서열식별번호: 361에 의해 제공된 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 360 및 서열식별번호: 361에 제시된 서열을 갖는 중쇄 및 경쇄, 또는 그의 항원 결합 단편, Fab 단편, 단일-쇄 가변 단편 (scFv), 변이체 또는 접합체를 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 360 및 서열식별번호: 361에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 99% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 360 및 서열식별번호: 361에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 98% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 360 및 서열식별번호: 361에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 97% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 360 및 서열식별번호: 361에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 96% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 360 및 서열식별번호: 361에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 95% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다.
한 실시양태에서, GITR 효능제는 48H12의 중쇄 및 경쇄 CDR 또는 가변 영역 (VR)을 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제 중쇄 가변 영역 (VH)은 서열식별번호: 362에 제시된 서열을 포함하고, GITR 효능제 경쇄 가변 영역 (VL)은 서열식별번호: 363에 제시된 서열 및 그의 보존적 아미노산 치환을 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 362 및 서열식별번호: 363에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 99% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 362 및 서열식별번호: 363에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 98% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 362 및 서열식별번호: 363에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 97% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 362 및 서열식별번호: 363에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 96% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 362 및 서열식별번호: 363에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 95% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다.
한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 364, 서열식별번호: 365 및 서열식별번호: 366에 제시된 서열 및 그의 보존적 아미노산 치환을 갖는 중쇄 CDR1, CDR2 및 CDR3 도메인, 및 각각 서열식별번호: 367, 서열식별번호: 368 및 서열식별번호: 369에 제시된 서열 및 그의 보존적 아미노산 치환을 갖는 경쇄 CDR1, CDR2 및 CDR3 도메인을 포함한다.
한 실시양태에서, GITR 효능제는 48H12에 관하여 약물 규제 기관에 의해 승인된 GITR 효능제 바이오시밀러 모노클로날 항체이다. 한 실시양태에서, 바이오시밀러 모노클로날 항체는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품의 아미노산 서열에 대해 적어도 97% 서열 동일성, 예를 들어 97%, 98%, 99% 또는 100% 서열 동일성을 갖고 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품과 비교하여 1개 이상의 번역후 변형을 포함하는 아미노산 서열을 포함하는 GITR 항체를 포함하며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 48H12이다. 일부 실시양태에서, 1개 이상의 번역후 변형은 다음 중 하나 이상으로부터 선택된다: 글리코실화, 산화, 탈아미드화 및 말단절단. 일부 실시양태에서, 바이오시밀러는 인가된 또는 인가를 위해 제출된 GITR 효능제 항체이며, 여기서 GITR 효능제 항체는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품의 제제와 상이한 제제로 제공되며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 48H12이다. GITR 효능제 항체는 약물 규제 기관, 예컨대 미국 FDA 및/또는 유럽 연합 EMA에 의해 인가될 수 있다. 일부 실시양태에서, 바이오시밀러는 1종 이상의 부형제를 추가로 포함하는 조성물로서 제공되며, 여기서 1종 이상의 부형제는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품에 포함된 부형제와 동일하거나 상이하며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 48H12이다. 일부 실시양태에서, 바이오시밀러는 1종 이상의 부형제를 추가로 포함하는 조성물로서 제공되며, 여기서 1종 이상의 부형제는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품에 포함된 부형제와 동일하거나 상이하며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 48H12이다.
표 34. 48H12에 관한 GITR 효능제 항체에 대한 아미노산 서열.
바람직한 실시양태에서, GITR 효능제는 모노클로날 항체 48H7 또는 그의 단편, 유도체, 변이체 또는 바이오시밀러이다. 48H7은 암젠, 인크.로부터 입수가능하다. 48H7의 제조 및 특성은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1 (이의 개시내용은 본원에 참조로 포함됨)에 기재되어 있다. 48H7의 아미노산 서열은 표 35에 제시된다.
한 실시양태에서, GITR 효능제는 서열식별번호: 370에 의해 제공된 중쇄 및 서열식별번호: 371에 의해 제공된 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 370 및 서열식별번호: 371에 제시된 서열을 갖는 중쇄 및 경쇄, 또는 그의 항원 결합 단편, Fab 단편, 단일-쇄 가변 단편 (scFv), 변이체 또는 접합체를 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 370 및 서열식별번호: 371에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 99% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 370 및 서열식별번호: 371에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 98% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 370 및 서열식별번호: 371에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 97% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 370 및 서열식별번호: 371에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 96% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 370 및 서열식별번호: 371에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 95% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다.
한 실시양태에서, GITR 효능제는 48H7의 중쇄 및 경쇄 CDR 또는 가변 영역 (VR)을 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제 중쇄 가변 영역 (VH)은 서열식별번호: 372에 제시된 서열을 포함하고, GITR 효능제 경쇄 가변 영역 (VL)은 서열식별번호: 373에 제시된 서열 및 그의 보존적 아미노산 치환을 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 372 및 서열식별번호: 373에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 99% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 372 및 서열식별번호: 373에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 98% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 372 및 서열식별번호: 373에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 97% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 372 및 서열식별번호: 373에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 96% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 372 및 서열식별번호: 373에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 95% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다.
한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 374, 서열식별번호: 375 및 서열식별번호: 376에 제시된 서열 및 그의 보존적 아미노산 치환을 갖는 중쇄 CDR1, CDR2 및 CDR3 도메인, 및 각각 서열식별번호: 377, 서열식별번호: 378 및 서열식별번호: 379에 제시된 서열 및 그의 보존적 아미노산 치환을 갖는 경쇄 CDR1, CDR2 및 CDR3 도메인을 포함한다.
한 실시양태에서, GITR 효능제는 48H7에 관하여 약물 규제 기관에 의해 승인된 GITR 효능제 바이오시밀러 모노클로날 항체이다. 한 실시양태에서, 바이오시밀러 모노클로날 항체는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품의 아미노산 서열에 대해 적어도 97% 서열 동일성, 예를 들어 97%, 98%, 99% 또는 100% 서열 동일성을 갖고 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품과 비교하여 1개 이상의 번역후 변형을 포함하는 아미노산 서열을 포함하는 GITR 항체를 포함하며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 48H7이다. 일부 실시양태에서, 1개 이상의 번역후 변형은 다음 중 하나 이상으로부터 선택된다: 글리코실화, 산화, 탈아미드화 및 말단절단. 일부 실시양태에서, 바이오시밀러는 인가된 또는 인가를 위해 제출된 GITR 효능제 항체이며, 여기서 GITR 효능제 항체는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품의 제제와 상이한 제제로 제공되며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 48H7이다. GITR 효능제 항체는 약물 규제 기관, 예컨대 미국 FDA 및/또는 유럽 연합 EMA에 의해 인가될 수 있다. 일부 실시양태에서, 바이오시밀러는 1종 이상의 부형제를 추가로 포함하는 조성물로서 제공되며, 여기서 1종 이상의 부형제는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품에 포함된 부형제와 동일하거나 상이하며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 48H7이다. 일부 실시양태에서, 바이오시밀러는 1종 이상의 부형제를 추가로 포함하는 조성물로서 제공되며, 여기서 1종 이상의 부형제는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품에 포함된 부형제와 동일하거나 상이하며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 48H7이다.
표 35. 48H7에 관한 GITR 효능제 항체에 대한 아미노산 서열.
바람직한 실시양태에서, GITR 효능제는 모노클로날 항체 49D9 또는 그의 단편, 유도체, 변이체 또는 바이오시밀러이다. 49D9는 암젠, 인크.로부터 입수가능하다. 49D9의 제조 및 특성은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1 (이의 개시내용은 본원에 참조로 포함됨)에 기재되어 있다. 49D9의 아미노산 서열은 표 36에 제시된다.
한 실시양태에서, GITR 효능제는 서열식별번호: 380에 의해 제공된 중쇄 및 서열식별번호: 381에 의해 제공된 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 380 및 서열식별번호: 381에 제시된 서열을 갖는 중쇄 및 경쇄, 또는 그의 항원 결합 단편, Fab 단편, 단일-쇄 가변 단편 (scFv), 변이체 또는 접합체를 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 380 및 서열식별번호: 381에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 99% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 380 및 서열식별번호: 381에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 98% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 380 및 서열식별번호: 381에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 97% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 380 및 서열식별번호: 381에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 96% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 380 및 서열식별번호: 381에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 95% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다.
한 실시양태에서, GITR 효능제는 49D9의 중쇄 및 경쇄 CDR 또는 가변 영역 (VR)을 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제 중쇄 가변 영역 (VH)은 서열식별번호: 382에 제시된 서열을 포함하고, GITR 효능제 경쇄 가변 영역 (VL)은 서열식별번호: 383에 제시된 서열 및 그의 보존적 아미노산 치환을 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 382 및 서열식별번호: 383에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 99% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 382 및 서열식별번호: 383에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 98% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 382 및 서열식별번호: 383에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 97% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 382 및 서열식별번호: 383에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 96% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 382 및 서열식별번호: 383에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 95% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다.
한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 384, 서열식별번호: 385 및 서열식별번호: 386에 제시된 서열 및 그의 보존적 아미노산 치환을 갖는 중쇄 CDR1, CDR2 및 CDR3 도메인, 및 각각 서열식별번호: 387, 서열식별번호: 388 및 서열식별번호: 389에 제시된 서열 및 그의 보존적 아미노산 치환을 갖는 경쇄 CDR1, CDR2 및 CDR3 도메인을 포함한다.
한 실시양태에서, GITR 효능제는 49D9에 관하여 약물 규제 기관에 의해 승인된 GITR 효능제 바이오시밀러 모노클로날 항체이다. 한 실시양태에서, 바이오시밀러 모노클로날 항체는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품의 아미노산 서열에 대해 적어도 97% 서열 동일성, 예를 들어 97%, 98%, 99% 또는 100% 서열 동일성을 갖고 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품과 비교하여 1개 이상의 번역후 변형을 포함하는 아미노산 서열을 포함하는 GITR 항체를 포함하며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 49D9이다. 일부 실시양태에서, 1개 이상의 번역후 변형은 다음 중 하나 이상으로부터 선택된다: 글리코실화, 산화, 탈아미드화 및 말단절단. 일부 실시양태에서, 바이오시밀러는 인가된 또는 인가를 위해 제출된 GITR 효능제 항체이며, 여기서 GITR 효능제 항체는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품의 제제와 상이한 제제로 제공되며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 49D9이다. GITR 효능제 항체는 약물 규제 기관, 예컨대 미국 FDA 및/또는 유럽 연합 EMA에 의해 인가될 수 있다. 일부 실시양태에서, 바이오시밀러는 1종 이상의 부형제를 추가로 포함하는 조성물로서 제공되며, 여기서 1종 이상의 부형제는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품에 포함된 부형제와 동일하거나 상이하며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 49D9이다. 일부 실시양태에서, 바이오시밀러는 1종 이상의 부형제를 추가로 포함하는 조성물로서 제공되며, 여기서 1종 이상의 부형제는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품에 포함된 부형제와 동일하거나 상이하며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 49D9이다.
표 36. 49D9에 관한 GITR 효능제 항체에 대한 아미노산 서열.
바람직한 실시양태에서, GITR 효능제는 모노클로날 항체 49E2 또는 그의 단편, 유도체, 변이체 또는 바이오시밀러이다. 49E2는 암젠, 인크.로부터 입수가능하다. 49E2의 제조 및 특성은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1 (이의 개시내용은 본원에 참조로 포함됨)에 기재되어 있다. 49E2의 아미노산 서열은 표 37에 제시된다.
한 실시양태에서, GITR 효능제는 서열식별번호: 390에 의해 제공된 중쇄 및 서열식별번호: 391에 의해 제공된 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 390 및 서열식별번호: 391에 제시된 서열을 갖는 중쇄 및 경쇄, 또는 그의 항원 결합 단편, Fab 단편, 단일-쇄 가변 단편 (scFv), 변이체 또는 접합체를 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 390 및 서열식별번호: 391에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 99% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 390 및 서열식별번호: 391에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 98% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 390 및 서열식별번호: 391에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 97% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 390 및 서열식별번호: 391에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 96% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 390 및 서열식별번호: 391에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 95% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다.
한 실시양태에서, GITR 효능제는 49E2의 중쇄 및 경쇄 CDR 또는 가변 영역 (VR)을 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제 중쇄 가변 영역 (VH)은 서열식별번호: 392에 제시된 서열을 포함하고, GITR 효능제 경쇄 가변 영역 (VL)은 서열식별번호: 393에 제시된 서열 및 그의 보존적 아미노산 치환을 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 392 및 서열식별번호: 393에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 99% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 392 및 서열식별번호: 393에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 98% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 392 및 서열식별번호: 393에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 97% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 392 및 서열식별번호: 393에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 96% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 392 및 서열식별번호: 393에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 95% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다.
한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 394, 서열식별번호: 395 및 서열식별번호: 396에 제시된 서열 및 그의 보존적 아미노산 치환을 갖는 중쇄 CDR1, CDR2 및 CDR3 도메인, 및 각각 서열식별번호: 397, 서열식별번호: 398 및 서열식별번호: 399에 제시된 서열 및 그의 보존적 아미노산 치환을 갖는 경쇄 CDR1, CDR2 및 CDR3 도메인을 포함한다.
한 실시양태에서, GITR 효능제는 49E2에 관하여 약물 규제 기관에 의해 승인된 GITR 효능제 바이오시밀러 모노클로날 항체이다. 한 실시양태에서, 바이오시밀러 모노클로날 항체는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품의 아미노산 서열에 대해 적어도 97% 서열 동일성, 예를 들어 97%, 98%, 99% 또는 100% 서열 동일성을 갖고 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품과 비교하여 1개 이상의 번역후 변형을 포함하는 아미노산 서열을 포함하는 GITR 항체를 포함하며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 49E2이다. 일부 실시양태에서, 1개 이상의 번역후 변형은 다음 중 하나 이상으로부터 선택된다: 글리코실화, 산화, 탈아미드화 및 말단절단. 일부 실시양태에서, 바이오시밀러는 인가된 또는 인가를 위해 제출된 GITR 효능제 항체이며, 여기서 GITR 효능제 항체는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품의 제제와 상이한 제제로 제공되며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 49E2이다. GITR 효능제 항체는 약물 규제 기관, 예컨대 미국 FDA 및/또는 유럽 연합 EMA에 의해 인가될 수 있다. 일부 실시양태에서, 바이오시밀러는 1종 이상의 부형제를 추가로 포함하는 조성물로서 제공되며, 여기서 1종 이상의 부형제는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품에 포함된 부형제와 동일하거나 상이하며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 49E2이다. 일부 실시양태에서, 바이오시밀러는 1종 이상의 부형제를 추가로 포함하는 조성물로서 제공되며, 여기서 1종 이상의 부형제는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품에 포함된 부형제와 동일하거나 상이하며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 49E2이다.
표 37. 49E2에 관한 GITR 효능제 항체에 대한 아미노산 서열.
바람직한 실시양태에서, GITR 효능제는 모노클로날 항체 48A9 또는 그의 단편, 유도체, 변이체 또는 바이오시밀러이다. 48A9는 암젠, 인크.로부터 입수가능하다. 48A9의 제조 및 특성은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1 (이의 개시내용은 본원에 참조로 포함됨)에 기재되어 있다. 48A9의 아미노산 서열은 표 38에 제시된다.
한 실시양태에서, GITR 효능제는 서열식별번호: 400에 의해 제공된 중쇄 및 서열식별번호: 401에 의해 제공된 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 400 및 서열식별번호: 401에 제시된 서열을 갖는 중쇄 및 경쇄, 또는 그의 항원 결합 단편, Fab 단편, 단일-쇄 가변 단편 (scFv), 변이체 또는 접합체를 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 400 및 서열식별번호: 401에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 99% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 400 및 서열식별번호: 401에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 98% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 400 및 서열식별번호: 401에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 97% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 400 및 서열식별번호: 401에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 96% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 400 및 서열식별번호: 401에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 95% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다.
한 실시양태에서, GITR 효능제는 48A9의 중쇄 및 경쇄 CDR 또는 가변 영역 (VR)을 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제 중쇄 가변 영역 (VH)은 서열식별번호: 402에 제시된 서열을 포함하고, GITR 효능제 경쇄 가변 영역 (VL)은 서열식별번호: 403에 제시된 서열 및 그의 보존적 아미노산 치환을 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 402 및 서열식별번호: 403에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 99% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 402 및 서열식별번호: 403에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 98% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 402 및 서열식별번호: 403에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 97% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 402 및 서열식별번호: 403에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 96% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 402 및 서열식별번호: 403에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 95% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다.
한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 404, 서열식별번호: 405 및 서열식별번호: 406에 제시된 서열 및 그의 보존적 아미노산 치환을 갖는 중쇄 CDR1, CDR2 및 CDR3 도메인, 및 각각 서열식별번호: 407, 서열식별번호: 408 및 서열식별번호: 409에 제시된 서열 및 그의 보존적 아미노산 치환을 갖는 경쇄 CDR1, CDR2 및 CDR3 도메인을 포함한다.
한 실시양태에서, GITR 효능제는 48A9에 관하여 약물 규제 기관에 의해 승인된 GITR 효능제 바이오시밀러 모노클로날 항체이다. 한 실시양태에서, 바이오시밀러 모노클로날 항체는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품의 아미노산 서열에 대해 적어도 97% 서열 동일성, 예를 들어 97%, 98%, 99% 또는 100% 서열 동일성을 갖고 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품과 비교하여 1개 이상의 번역후 변형을 포함하는 아미노산 서열을 포함하는 GITR 항체를 포함하며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 48A9이다. 일부 실시양태에서, 1개 이상의 번역후 변형은 다음 중 하나 이상으로부터 선택된다: 글리코실화, 산화, 탈아미드화 및 말단절단. 일부 실시양태에서, 바이오시밀러는 인가된 또는 인가를 위해 제출된 GITR 효능제 항체이며, 여기서 GITR 효능제 항체는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품의 제제와 상이한 제제로 제공되며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 48A9이다. GITR 효능제 항체는 약물 규제 기관, 예컨대 미국 FDA 및/또는 유럽 연합 EMA에 의해 인가될 수 있다. 일부 실시양태에서, 바이오시밀러는 1종 이상의 부형제를 추가로 포함하는 조성물로서 제공되며, 여기서 1종 이상의 부형제는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품에 포함된 부형제와 동일하거나 상이하며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 48A9이다. 일부 실시양태에서, 바이오시밀러는 1종 이상의 부형제를 추가로 포함하는 조성물로서 제공되며, 여기서 1종 이상의 부형제는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품에 포함된 부형제와 동일하거나 상이하며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 48A9이다.
표 38. 48A9에 관한 GITR 효능제 항체에 대한 아미노산 서열.
바람직한 실시양태에서, GITR 효능제는 모노클로날 항체 5H7 또는 그의 단편, 유도체, 변이체 또는 바이오시밀러이다. 5H7은 암젠, 인크.로부터 입수가능하다. 5H7의 제조 및 특성은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1 (이의 개시내용은 본원에 참조로 포함됨)에 기재되어 있다. 5H7의 아미노산 서열은 표 39에 제시된다.
한 실시양태에서, GITR 효능제는 서열식별번호: 410에 의해 제공된 중쇄 및 서열식별번호: 411에 의해 제공된 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 410 및 서열식별번호: 411에 제시된 서열을 갖는 중쇄 및 경쇄, 또는 그의 항원 결합 단편, Fab 단편, 단일-쇄 가변 단편 (scFv), 변이체 또는 접합체를 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 410 및 서열식별번호: 411에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 99% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 410 및 서열식별번호: 411에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 98% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 410 및 서열식별번호: 411에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 97% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 410 및 서열식별번호: 411에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 96% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 410 및 서열식별번호: 411에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 95% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다.
한 실시양태에서, GITR 효능제는 5H7의 중쇄 및 경쇄 CDR 또는 가변 영역 (VR)을 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제 중쇄 가변 영역 (VH)은 서열식별번호: 412에 제시된 서열을 포함하고, GITR 효능제 경쇄 가변 영역 (VL)은 서열식별번호: 413에 제시된 서열 및 그의 보존적 아미노산 치환을 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 412 및 서열식별번호: 413에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 99% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 412 및 서열식별번호: 413에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 98% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 412 및 서열식별번호: 413에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 97% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 412 및 서열식별번호: 413에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 96% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 412 및 서열식별번호: 413에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 95% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다.
한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 414, 서열식별번호: 415 및 서열식별번호: 416에 제시된 서열 및 그의 보존적 아미노산 치환을 갖는 중쇄 CDR1, CDR2 및 CDR3 도메인, 및 각각 서열식별번호: 417, 서열식별번호: 418 및 서열식별번호: 419에 제시된 서열 및 그의 보존적 아미노산 치환을 갖는 경쇄 CDR1, CDR2 및 CDR3 도메인을 포함한다.
한 실시양태에서, GITR 효능제는 5H7에 관하여 약물 규제 기관에 의해 승인된 GITR 효능제 바이오시밀러 모노클로날 항체이다. 한 실시양태에서, 바이오시밀러 모노클로날 항체는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품의 아미노산 서열에 대해 적어도 97% 서열 동일성, 예를 들어 97%, 98%, 99% 또는 100% 서열 동일성을 갖고 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품과 비교하여 1개 이상의 번역후 변형을 포함하는 아미노산 서열을 포함하는 GITR 항체를 포함하며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 5H7이다. 일부 실시양태에서, 1개 이상의 번역후 변형은 다음 중 하나 이상으로부터 선택된다: 글리코실화, 산화, 탈아미드화 및 말단절단. 일부 실시양태에서, 바이오시밀러는 인가된 또는 인가를 위해 제출된 GITR 효능제 항체이며, 여기서 GITR 효능제 항체는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품의 제제와 상이한 제제로 제공되며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 5H7이다. GITR 효능제 항체는 약물 규제 기관, 예컨대 미국 FDA 및/또는 유럽 연합 EMA에 의해 인가될 수 있다. 일부 실시양태에서, 바이오시밀러는 1종 이상의 부형제를 추가로 포함하는 조성물로서 제공되며, 여기서 1종 이상의 부형제는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품에 포함된 부형제와 동일하거나 상이하며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 5H7이다. 일부 실시양태에서, 바이오시밀러는 1종 이상의 부형제를 추가로 포함하는 조성물로서 제공되며, 여기서 1종 이상의 부형제는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품에 포함된 부형제와 동일하거나 상이하며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 5H7이다.
표 39. 5H7에 관한 GITR 효능제 항체에 대한 아미노산 서열.
바람직한 실시양태에서, GITR 효능제는 모노클로날 항체 7A10 또는 그의 단편, 유도체, 변이체 또는 바이오시밀러이다. 7A10은 암젠, 인크.로부터 입수가능하다. 7A10의 제조 및 특성은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1 (이의 개시내용은 본원에 참조로 포함됨)에 기재되어 있다. 7A10의 아미노산 서열은 표 40에 제시된다.
한 실시양태에서, GITR 효능제는 서열식별번호: 420에 의해 제공된 중쇄 및 서열식별번호: 421에 의해 제공된 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 420 및 서열식별번호: 421에 제시된 서열을 갖는 중쇄 및 경쇄, 또는 그의 항원 결합 단편, Fab 단편, 단일-쇄 가변 단편 (scFv), 변이체 또는 접합체를 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 420 및 서열식별번호: 421에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 99% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 420 및 서열식별번호: 421에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 98% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 420 및 서열식별번호: 421에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 97% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 420 및 서열식별번호: 421에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 96% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 420 및 서열식별번호: 421에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 95% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다.
한 실시양태에서, GITR 효능제는 7A10의 중쇄 및 경쇄 CDR 또는 가변 영역 (VR)을 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제 중쇄 가변 영역 (VH)은 서열식별번호: 422에 제시된 서열을 포함하고, GITR 효능제 경쇄 가변 영역 (VL)은 서열식별번호: 423에 제시된 서열 및 그의 보존적 아미노산 치환을 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 422 및 서열식별번호: 423에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 99% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 422 및 서열식별번호: 423에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 98% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 422 및 서열식별번호: 423에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 97% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 422 및 서열식별번호: 423에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 96% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 422 및 서열식별번호: 423에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 95% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다.
한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 424, 서열식별번호: 425 및 서열식별번호: 426에 제시된 서열 및 그의 보존적 아미노산 치환을 갖는 중쇄 CDR1, CDR2 및 CDR3 도메인, 및 각각 서열식별번호: 427, 서열식별번호: 428 및 서열식별번호: 429에 제시된 서열 및 그의 보존적 아미노산 치환을 갖는 경쇄 CDR1, CDR2 및 CDR3 도메인을 포함한다.
한 실시양태에서, GITR 효능제는 7A10에 관하여 약물 규제 기관에 의해 승인된 GITR 효능제 바이오시밀러 모노클로날 항체이다. 한 실시양태에서, 바이오시밀러 모노클로날 항체는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품의 아미노산 서열에 대해 적어도 97% 서열 동일성, 예를 들어 97%, 98%, 99% 또는 100% 서열 동일성을 갖고 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품과 비교하여 1개 이상의 번역후 변형을 포함하는 아미노산 서열을 포함하는 GITR 항체를 포함하며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 7A10이다. 일부 실시양태에서, 1개 이상의 번역후 변형은 다음 중 하나 이상으로부터 선택된다: 글리코실화, 산화, 탈아미드화 및 말단절단. 일부 실시양태에서, 바이오시밀러는 인가된 또는 인가를 위해 제출된 GITR 효능제 항체이며, 여기서 GITR 효능제 항체는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품의 제제와 상이한 제제로 제공되며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 7A10이다. GITR 효능제 항체는 약물 규제 기관, 예컨대 미국 FDA 및/또는 유럽 연합 EMA에 의해 인가될 수 있다. 일부 실시양태에서, 바이오시밀러는 1종 이상의 부형제를 추가로 포함하는 조성물로서 제공되며, 여기서 1종 이상의 부형제는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품에 포함된 부형제와 동일하거나 상이하며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 7A10이다. 일부 실시양태에서, 바이오시밀러는 1종 이상의 부형제를 추가로 포함하는 조성물로서 제공되며, 여기서 1종 이상의 부형제는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품에 포함된 부형제와 동일하거나 상이하며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 7A10이다.
표 40. 7A10에 관한 GITR 효능제 항체에 대한 아미노산 서열.
바람직한 실시양태에서, GITR 효능제는 모노클로날 항체 9H6 또는 그의 단편, 유도체, 변이체 또는 바이오시밀러이다. 9H6은 암젠, 인크.로부터 입수가능하다. 9H6의 제조 및 특성은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1 (이의 개시내용은 본원에 참조로 포함됨)에 기재되어 있다. 9H6의 아미노산 서열은 표 41에 제시된다.
한 실시양태에서, GITR 효능제는 서열식별번호: 430에 의해 제공된 중쇄 및 서열식별번호: 431에 의해 제공된 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 430 및 서열식별번호: 431에 제시된 서열을 갖는 중쇄 및 경쇄, 또는 그의 항원 결합 단편, Fab 단편, 단일-쇄 가변 단편 (scFv), 변이체 또는 접합체를 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 430 및 서열식별번호: 431에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 99% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 430 및 서열식별번호: 431에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 98% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 430 및 서열식별번호: 431에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 97% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 430 및 서열식별번호: 431에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 96% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 430 및 서열식별번호: 431에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 95% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다.
한 실시양태에서, GITR 효능제는 9H6의 중쇄 및 경쇄 CDR 또는 가변 영역 (VR)을 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제 중쇄 가변 영역 (VH)은 서열식별번호: 432에 제시된 서열을 포함하고, GITR 효능제 경쇄 가변 영역 (VL)은 서열식별번호: 433에 제시된 서열 및 그의 보존적 아미노산 치환을 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 432 및 서열식별번호: 433에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 99% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 432 및 서열식별번호: 433에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 98% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 432 및 서열식별번호: 433에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 97% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 432 및 서열식별번호: 433에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 96% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 432 및 서열식별번호: 433에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 95% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다.
한 실시양태에서, GITR 효능제는 각각 서열식별번호: 434, 서열식별번호: 435 및 서열식별번호: 436에 제시된 서열 및 그의 보존적 아미노산 치환을 갖는 중쇄 CDR1, CDR2 및 CDR3 도메인, 및 각각 서열식별번호: 437, 서열식별번호: 438 및 서열식별번호: 439에 제시된 서열 및 그의 보존적 아미노산 치환을 갖는 경쇄 CDR1, CDR2 및 CDR3 도메인을 포함한다.
한 실시양태에서, GITR 효능제는 9H6에 관하여 약물 규제 기관에 의해 승인된 GITR 효능제 바이오시밀러 모노클로날 항체이다. 한 실시양태에서, 바이오시밀러 모노클로날 항체는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품의 아미노산 서열에 대해 적어도 97% 서열 동일성, 예를 들어 97%, 98%, 99% 또는 100% 서열 동일성을 갖고 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품과 비교하여 1개 이상의 번역후 변형을 포함하는 아미노산 서열을 포함하는 GITR 항체를 포함하며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 9H6이다. 일부 실시양태에서, 1개 이상의 번역후 변형은 다음 중 하나 이상으로부터 선택된다: 글리코실화, 산화, 탈아미드화 및 말단절단. 일부 실시양태에서, 바이오시밀러는 인가된 또는 인가를 위해 제출된 GITR 효능제 항체이며, 여기서 GITR 효능제 항체는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품의 제제와 상이한 제제로 제공되며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 9H6이다. GITR 효능제 항체는 약물 규제 기관, 예컨대 미국 FDA 및/또는 유럽 연합 EMA에 의해 인가될 수 있다. 일부 실시양태에서, 바이오시밀러는 1종 이상의 부형제를 추가로 포함하는 조성물로서 제공되며, 여기서 1종 이상의 부형제는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품에 포함된 부형제와 동일하거나 상이하며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 9H6이다. 일부 실시양태에서, 바이오시밀러는 1종 이상의 부형제를 추가로 포함하는 조성물로서 제공되며, 여기서 1종 이상의 부형제는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품에 포함된 부형제와 동일하거나 상이하며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 9H6이다.
표 41. 9H6에 관한 GITR 효능제 항체에 대한 아미노산 서열.
한 실시양태에서, GITR 효능제는 국제 특허 출원 공개 번호 WO 2013/039954 A1 및 WO 2011/028683 A1; 미국 특허 출원 공개 번호 US 2013/0108641 A1, US 2012/0189639 A1 및 US 2014/0348841 A1; 및 미국 특허 번호 7,812,135; 8,388,967; 및 9,028,823 (이들의 개시내용은 본원에 참조로 포함됨)에 기재된 GITR 효능제이다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 및 국제 특허 출원 공개 번호 WO 2015/031667 A1 (암젠, 인크.) (이들의 개시내용은 본원에 참조로 포함됨)에 기재된 구조 및 제제를 갖는 효능작용 항-GITR 모노클로날 항체이다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 1D7, 33C9, 33F6, 34G4, 35B10, 41E11, 41G5, 42A11, 44C1, 45A8, 46E11, 48H12, 48H7, 49D9, 49E2, 48A9, 5H7, 7A10 및 9H6으로 이루어진 군으로부터 선택된 완전-인간, 효능작용, 항-GITR 모노클로날 항체이다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 1D7, 33C9, 33F6, 34G4, 35B10, 41E11, 41G5, 42A11, 44C1, 45A8, 46E11, 48H12, 48H7, 49D9, 49E2, 48A9, 5H7, 7A10 및 9H6으로 이루어진 군으로부터 선택된 항체의 서열에 대해 99% 초과의 아미노산 서열 동일성을 갖는 완전-인간, 효능작용 항-GITR 모노클로날 항체이다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 1D7, 33C9, 33F6, 34G4, 35B10, 41E11, 41G5, 42A11, 44C1, 45A8, 46E11, 48H12, 48H7, 49D9, 49E2, 48A9, 5H7, 7A10 및 9H6으로 이루어진 군으로부터 선택된 항체의 서열에 대해 98% 초과의 아미노산 서열 동일성을 갖는 완전-인간, 효능작용 항-GITR 모노클로날 항체이다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1 (이의 개시내용은 본원에 참조로 포함됨)에 기재된 바와 같이, 9H6v3, 5H7v2, 33C9v2, 41G5v2 및 7A10v1로 이루어진 군으로부터 선택된 완전-인간, 효능작용 항-GITR 모노클로날 항체이다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0064204 A1 (이의 개시내용은 본원에 참조로 포함됨)에 기재된 바와 같이, 44C1v1, 45A8v1, 49D9v1, 49E2v1, 48A9v1, 5H7v1, 5H7v2, 5H7v3, 5H7v5, 5H7v7, 5H7v9, 5H7v10, 5H7v11, 5H7v13, 5H7v14, 5H7v17, 5H7v18, 5H7v19, 5H7v22, 7A10v1, 7A10v2, 7A10v3, 7A10v4, 7A10v5, 9H6v1, 9H6v2, 9H6v3, 9H6v4, 9H6v5, 9H6v6, 33C9v1, 33C9v2, 33C9v3, 33C9v4, 33C9v5, 41G5v1, 41G5v2, 41G5v3, 41G5v4 및 41G5v5로 이루어진 군으로부터 선택된 완전-인간, 효능작용 항-GITR 모노클로날 항체이다.
한 실시양태에서, GITR 효능제는 구조 I-A (C-말단 Fc-항체 단편 융합 단백질) 또는 구조 I-B (N-말단 Fc-항체 단편 융합 단백질)에 도시된 바와 같은 GITR 효능작용 융합 단백질 또는 그의 단편, 유도체, 접합체, 변이체 또는 바이오시밀러이다. 구조 I-A 및 I-B의 특성은 상기 및 미국 특허 번호 9,359,420, 9,340,599, 8,921,519 및 8,450,460 (이들의 개시내용은 본원에 참조로 포함됨)에 기재되어 있다. 구조 I-A의 폴리펩티드 도메인에 대한 아미노산 서열은 표 6에 제공된다. Fc 도메인은 바람직하게는 완전 불변 도메인 (서열식별번호: 31의 아미노산 17-230) 및 완전 힌지 도메인 (서열식별번호: 31의 아미노산 1-16) 또는 힌지 도메인의 한 부분 (예를 들어, 서열식별번호: 31의 아미노산 4-16)을 포함한다. C-말단 Fc-항체를 연결시키기 위한 바람직한 링커는 추가의 폴리펩티드의 융합에 적합한 링커를 포함한, 서열식별번호: 32 내지 서열식별번호: 41에 제공된 실시양태로부터 선택될 수 있다. 마찬가지로, 구조 I-B의 폴리펩티드 도메인에 대한 아미노산 서열은 표 7에 제공된다. Fc 항체 단편이 구조 I-B에서와 같이 TNRFSF 융합 단백질의 N-말단에 융합되는 경우에, Fc 모듈의 서열은 바람직하게는 서열식별번호: 42에 제시된 것이고, 링커 서열은 바람직하게는 서열식별번호: 43 내지 서열식별번호: 45에 제시된 실시양태로부터 선택된다.
한 실시양태에서, 구조 I-A 또는 I-B에 따른 GITR 효능제 융합 단백질은 TRX518, 6C8, 36E5, 3D6, 61G6, 6H6, 61F6, 1D8, 17F10, 35D8, 49A1, 9E5, 31H6, 2155, 698, 706, 827, 1649, 1718, 1D7, 33C9, 33F6, 34G4, 35B10, 41E11, 41G5, 42A11, 44C1, 45A8, 46E11, 48H12, 48H7, 49D9, 49E2, 48A9, 5H7, 7A10, 9H6의 가변 중쇄 및 가변 경쇄로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 GITR 결합 도메인 및 그의 단편, 유도체, 접합체, 변이체 및 바이오시밀러를 포함한다.
한 실시양태에서, 구조 I-A 또는 I-B에 따른 GITR 효능제 융합 단백질은 GITRL 서열을 포함하는 1개 이상의 GITR 결합 도메인 (표 42)을 포함한다. 한 실시양태에서, 구조 I-A 또는 I-B에 따른 GITR 효능제 융합 단백질은 서열식별번호: 440에 따른 서열을 포함하는 1개 이상의 GITR 결합 도메인을 포함한다. 한 실시양태에서, 구조 I-A 또는 I-B에 따른 GITR 효능제 융합 단백질은 가용성 GITRL 서열을 포함하는 1개 이상의 GITR 결합 도메인을 포함한다. 한 실시양태에서, 구조 I-A 또는 I-B에 따른 GITR 효능제 융합 단백질은 서열식별번호: 441에 따른 서열을 포함하는 1개 이상의 GITR 결합 도메인을 포함한다.
한 실시양태에서, 구조 I-A 또는 I-B에 따른 GITR 효능제 융합 단백질은 상기 표 18 내지 39에 제시된 VH 및 VL GITR 서열에 대해 각각 적어도 95% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함하는 scFv 도메인이며, 여기서 VH 및 VL 도메인은 링커로 연결되는 것인 1개 이상의 GITR 결합 도메인을 포함한다.
표 42. 융합 단백질 (예를 들어, 구조 I-A 및 I-B) 내의 GITR 결합 도메인으로서 유용한 추가의 폴리펩티드 도메인.
한 실시양태에서, GITR 효능제는 (i) 제1 가용성 GITR 결합 도메인; (ii) 제1 펩티드 링커; (iii) 제2 가용성 GITR 결합 도메인; (iv) 제2 펩티드 링커 및 (v) 제3 가용성 GITR 결합 도메인을 포함하고, N-말단 및/또는 C-말단 단부에 추가의 도메인을 추가로 포함하며, 여기서 추가의 도메인은 Fab 또는 Fc 단편 도메인인, GITR 효능작용 단일-쇄 융합 폴리펩티드이다. 한 실시양태에서, GITR 효능제는 (i) 제1 가용성 GITR 결합 도메인; (ii) 제1 펩티드 링커; (iii) 제2 가용성 GITR 결합 도메인; (iv) 제2 펩티드 링커 및 (v) 제3 가용성 GITR 결합 도메인을 포함하고, N-말단 및/또는 C-말단 단부에 추가의 도메인을 추가로 포함하며, 여기서 추가의 도메인은 Fab 또는 Fc 단편 도메인이고, 각각의 가용성 GITR 결합 도메인에는 줄기 영역 (이는 삼량체화에 기여하고, 세포 막까지의 특정 거리를 제공하지만, GITR 결합 도메인의 부분은 아님)이 결여되어 있고, 제1 및 제2 펩티드 링커는 독립적으로 3-8개 아미노산의 길이를 갖는 것인, GITR 효능작용 단일-쇄 융합 폴리펩티드이다.
한 실시양태에서, GITR 효능제는 (i) 제1 가용성 종양 괴사 인자 (TNF) 슈퍼패밀리 시토카인 도메인; (ii) 제1 펩티드 링커; (iii) 제2 가용성 TNF 슈퍼패밀리 시토카인 도메인; (iv) 제2 펩티드 링커 및 (v) 제3 가용성 TNF 슈퍼패밀리 시토카인 도메인을 포함하며, 여기서 각각의 가용성 TNF 슈퍼패밀리 시토카인 도메인에는 줄기 영역이 결여되어 있고, 제1 및 제2 펩티드 링커는 독립적으로 3-8개 아미노산의 길이를 갖고, TNF 슈퍼패밀리 시토카인 도메인은 GITR 결합 도메인인, GITR 효능작용 단일-쇄 융합 폴리펩티드이다.
한 실시양태에서, GITR 효능제는 임의의 상기 VL 도메인에 연결된 임의의 상기 VH 도메인을 포함하는 GITR 효능작용 scFv 항체이다.
HVEM (CD270) 효능제
한 실시양태에서, TNFRSF 효능제는 HVEM 효능제이다. HVEM은 또한 CD270 및 TNFRSF14로도 공지되어 있다. 관련 기술분야에 공지된 임의의 HVEM 효능제가 사용될 수 있다. HVEM 결합 분자는 인간 또는 포유동물 HVEM에 결합할 수 있는 모노클로날 항체 또는 융합 단백질일 수 있다. HVEM 효능제 또는 HVEM 결합 분자는 이뮤노글로불린 분자의 임의의 이소형 (예를 들어, IgG, IgE, IgM, IgD, IgA 및 IgY), 부류 (예를 들어, IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgA1 및 IgA2) 또는 하위부류의 이뮤노글로불린 중쇄를 포함할 수 있다. HVEM 효능제 또는 HVEM 결합 분자는 중쇄 및 경쇄를 둘 다 가질 수 있다. 본원에 사용된 용어 결합 분자는 또한 HVEM에 결합하는 항체 (전장 항체 포함), 모노클로날 항체 (전장 모노클로날 항체 포함), 폴리클로날 항체, 다중특이적 항체 (예를 들어, 이중특이적 항체), 인간, 인간화 또는 키메라 항체, 및 항체 단편, 예를 들어, Fab 단편, F(ab') 단편, Fab 발현 라이브러리에 의해 생산된 단편, 상기 중 임의의 것의 에피토프-결합 단편, 및 항체의 조작된 형태, 예를 들어 scFv 분자를 포함한다. 한 실시양태에서, HVEM 효능제는 완전 인간 항체인 항원 결합 단백질이다. 한 실시양태에서, HVEM 효능제는 인간화 항체인 항원 결합 단백질이다. 일부 실시양태에서, 본원에 개시된 방법 및 조성물에 사용하기 위한 HVEM 효능제는 항-HVEM 항체, 인간 항-HVEM 항체, 마우스 항-HVEM 항체, 포유동물 항-HVEM 항체, 모노클로날 항-HVEM 항체, 폴리클로날 항-HVEM 항체, 키메라 항-HVEM 항체, 항-HVEM 애드넥틴, 항-HVEM 도메인 항체, 단일 쇄 항-HVEM 단편, 중쇄 항-HVEM 단편, 경쇄 항-HVEM 단편, 항-HVEM 융합 단백질 및 그의 단편, 유도체, 접합체, 변이체 또는 바이오시밀러를 포함한다. 바람직한 실시양태에서, HVEM 효능제는 효능작용 항-HVEM 인간화 또는 완전 인간 모노클로날 항체 (즉, 단세포주로부터 유래된 항체)이다.
바람직한 실시양태에서, HVEM 효능제 또는 HVEM 결합 분자는 또한 융합 단백질일 수 있다. 바람직한 실시양태에서, 다량체 HVEM 효능제, 예컨대 삼량체 또는 육량체 HVEM 효능제 (3개 또는 6개의 리간드 결합 도메인을 가짐)는, 전형적으로 2개의 리간드 결합 도메인을 보유하는 효능작용 모노클로날 항체와 비교하여 우수한 수용체 (HVEML) 클러스터링 및 내부 세포 신호전달 복합체 형성을 유도할 수 있다. 3개의 TNFRSF 결합 도메인 및 IgG1-Fc를 포함하고 임의로 이들 융합 단백질 중 2개 이상을 추가로 연결하는 삼량체 (3가) 또는 육량체 (또는 6가) 또는 그보다 더 큰 융합 단백질이, 예를 들어 문헌 [Gieffers, et al., Mol. Cancer Therapeutics 2013, 12, 2735-47]에 기재되어 있다.
효능작용 HVEM 항체 및 융합 단백질은 강한 면역 반응을 유도하는 것으로 공지되어 있다. 바람직한 실시양태에서, HVEM 효능제는 독성을 감소시키기에 충분한 방식으로 HVEM 항원에 특이적으로 결합하는 모노클로날 항체 또는 융합 단백질이다. 일부 실시양태에서, HVEM 효능제는 항체-의존성 세포 독성 (ADCC), 예를 들어 NK 세포 세포독성을 제거하는 효능작용 HVEM 모노클로날 항체 또는 융합 단백질이다. 일부 실시양태에서, HVEM 효능제는 항체-의존성 세포 식세포작용 (ADCP)을 제거하는 효능작용 HVEM 모노클로날 항체 또는 융합 단백질이다. 일부 실시양태에서, HVEM 효능제는 보체-의존성 세포독성 (CDC)을 제거하는 효능작용 HVEM 모노클로날 항체 또는 융합 단백질이다. 일부 실시양태에서, HVEM 효능제는 Fc 영역 기능성을 제거하는 효능작용 HVEM 모노클로날 항체 또는 융합 단백질이다.
일부 실시양태에서, HVEM 효능제는 높은 친화도 및 효능작용 활성으로 인간 HVEM (서열식별번호: 442)에 결합하는 것을 특징으로 한다. 한 실시양태에서, HVEM 효능제는 인간 HVEM (서열식별번호: 442)에 결합하는 결합 분자이다. HVEM 효능제 또는 결합 분자가 결합할 수 있는 HVEM 항원의 아미노산 서열은 표 43에 요약되어 있다.
표 43. HVEM (CD270) 항원의 아미노산 서열.
일부 실시양태에서, 기재된 조성물, 과정 및 방법은 약 100 pM 이하의 KD로 인간 또는 뮤린 HVEM에 결합하거나, 약 90 pM 이하의 KD로 인간 또는 뮤린 HVEM에 결합하거나, 약 80 pM 이하의 KD로 인간 또는 뮤린 HVEM에 결합하거나, 약 70 pM 이하의 KD로 인간 또는 뮤린 HVEM에 결합하거나, 약 60 pM 이하의 KD로 인간 또는 뮤린 HVEM에 결합하거나, 약 50 pM 이하의 KD로 인간 또는 뮤린 HVEM에 결합하거나, 약 40 pM 이하의 KD로 인간 또는 뮤린 HVEM에 결합하거나, 또는 약 30 pM 이하의 KD로 인간 또는 뮤린 HVEM에 결합하는 HVEM 효능제를 포함한다.
일부 실시양태에서, 기재된 조성물, 과정 및 방법은 약 7.5 x 105 l/M·s 또는 더 빠른 kassoc로 인간 또는 뮤린 HVEM에 결합하거나, 약 7.5 x 105 l/M·s 또는 더 빠른 kassoc로 인간 또는 뮤린 HVEM에 결합하거나, 약 8 x 105 l/M·s 또는 더 빠른 kassoc로 인간 또는 뮤린 HVEM에 결합하거나, 약 8.5 x 105 l/M·s 또는 더 빠른 kassoc로 인간 또는 뮤린 HVEM에 결합하거나, 약 9 x 105 l/M·s 또는 더 빠른 kassoc로 인간 또는 뮤린 HVEM에 결합하거나, 약 9.5 x 105 l/M·s 또는 더 빠른 kassoc로 인간 또는 뮤린 HVEM에 결합하거나, 또는 약 1 x 106 l/M·s 또는 더 빠른 kassoc로 인간 또는 뮤린 HVEM에 결합하는 HVEM 효능제를 포함한다.
일부 실시양태에서, 기재된 조성물, 과정 및 방법은 약 2 x 10-5 l/s 또는 더 느린 kdissoc로 인간 또는 뮤린 HVEM에 결합하거나, 약 2.1 x 10-5 l/s 또는 더 느린 kdissoc로 인간 또는 뮤린 HVEM에 결합하거나, 약 2.2 x 10-5 l/s 또는 더 느린 kdissoc로 인간 또는 뮤린 HVEM에 결합하거나, 약 2.3 x 10-5 l/s 또는 더 느린 kdissoc로 인간 또는 뮤린 HVEM에 결합하거나, 약 2.4 x 10-5 l/s 또는 더 느린 kdissoc로 인간 또는 뮤린 HVEM에 결합하거나, 약 2.5 x 10-5 l/s 또는 더 느린 kdissoc로 인간 또는 뮤린 HVEM에 결합하거나, 약 2.6 x 10-5 l/s 또는 더 느린 kdissoc로 인간 또는 뮤린 HVEM에 결합하거나, 약 2.7 x 10-5 l/s 또는 더 느린 kdissoc로 인간 또는 뮤린 HVEM에 결합하거나, 약 2.8 x 10-5 l/s 또는 더 느린 kdissoc로 인간 또는 뮤린 HVEM에 결합하거나, 약 2.9 x 10-5 l/s 또는 더 느린 kdissoc로 인간 또는 뮤린 HVEM에 결합하거나, 또는 약 3 x 10-5 l/s 또는 더 느린 kdissoc로 인간 또는 뮤린 HVEM에 결합하는 HVEM 효능제를 포함한다.
일부 실시양태에서, 기재된 조성물, 과정 및 방법은 약 10 nM 이하의 IC50으로 인간 또는 뮤린 HVEM에 결합하거나, 약 9 nM 이하의 IC50으로 인간 또는 뮤린 HVEM에 결합하거나, 약 8 nM 이하의 IC50으로 인간 또는 뮤린 HVEM에 결합하거나, 약 7 nM 이하의 IC50으로 인간 또는 뮤린 HVEM에 결합하거나, 약 6 nM 이하의 IC50으로 인간 또는 뮤린 HVEM에 결합하거나, 약 5 nM 이하의 IC50으로 인간 또는 뮤린 HVEM에 결합하거나, 약 4 nM 이하의 IC50으로 인간 또는 뮤린 HVEM에 결합하거나, 약 3 nM 이하의 IC50으로 인간 또는 뮤린 HVEM에 결합하거나, 약 2 nM 이하의 IC50으로 인간 또는 뮤린 HVEM에 결합하거나, 또는 약 1 nM 이하의 IC50으로 인간 또는 뮤린 HVEM에 결합하는 HVEM 효능제를 포함한다.
한 실시양태에서, HVEM 효능제는 국제 특허 출원 공개 번호 WO 2009/007120 A2 및 미국 특허 출원 공개 번호 US 2016/0176941 A1 (이들 각각의 개시내용은 본원에 참조로 포함됨)에 기재된 HVEM 효능제이다.
한 실시양태에서, HVEM 효능제는 밀테니 바이오테크, 인크. (92121 캘리포니아주 샌디에고)로부터 상업적으로 입수가능한 HVEM 효능제 클론 REA247이다.
한 실시양태에서, HVEM 효능제는 구조 I-A (C-말단 Fc-항체 단편 융합 단백질) 또는 구조 I-B (N-말단 Fc-항체 단편 융합 단백질)에 도시된 바와 같은 HVEM 효능작용 융합 단백질 또는 그의 단편, 유도체, 접합체, 변이체 또는 바이오시밀러이다. 구조 I-A 및 I-B의 특성은 상기 및 미국 특허 번호 9,359,420, 9,340,599, 8,921,519 및 8,450,460 (이들의 개시내용은 본원에 참조로 포함됨)에 기재되어 있다. 구조 I-A의 폴리펩티드 도메인에 대한 아미노산 서열은 표 6에 제공된다. Fc 도메인은 바람직하게는 완전 불변 도메인 (서열식별번호: 31의 아미노산 17-230) 및 완전 힌지 도메인 (서열식별번호: 31의 아미노산 1-16) 또는 힌지 도메인의 한 부분 (예를 들어, 서열식별번호: 31의 아미노산 4-16)을 포함한다. C-말단 Fc-항체를 연결시키기 위한 바람직한 링커는 추가의 폴리펩티드의 융합에 적합한 링커를 포함한, 서열식별번호: 32 내지 서열식별번호: 41에 제공된 실시양태로부터 선택될 수 있다. 마찬가지로, 구조 I-B의 폴리펩티드 도메인에 대한 아미노산 서열은 표 7에 제공된다. Fc 항체 단편이 구조 I-B에서와 같이 TNRFSF 융합 단백질의 N-말단에 융합되는 경우에, Fc 모듈의 서열은 바람직하게는 서열식별번호: 42에 제시된 것이고, 링커 서열은 바람직하게는 서열식별번호: 43 내지 서열식별번호: 45에 제시된 실시양태로부터 선택된다.
한 실시양태에서, 구조 I-A 또는 I-B에 따른 HVEM 효능제 융합 단백질은 LIGHT (HVEM 리간드) 서열을 포함하는 1개 이상의 HVEM 결합 도메인 (표 44)을 포함한다. 한 실시양태에서, 구조 I-A 또는 I-B에 따른 HVEM 효능제 융합 단백질은 서열식별번호: 443에 따른 서열을 포함하는 1개 이상의 HVEM 결합 도메인을 포함한다. 한 실시양태에서, 구조 I-A 또는 I-B에 따른 HVEM 효능제 융합 단백질은 가용성 LIGHT 서열을 포함하는 1개 이상의 HVEM 결합 도메인을 포함한다. 한 실시양태에서, 구조 I-A 또는 I-B에 따른 HVEM 효능제 융합 단백질은 서열식별번호: 444에 따른 서열을 포함하는 1개 이상의 HVEM 결합 도메인을 포함한다. 한 실시양태에서, 구조 I-A 또는 I-B에 따른 HVEM 효능제 융합 단백질은 서열식별번호: 445에 따른 서열을 포함하는 1개 이상의 HVEM 결합 도메인을 포함한다. 한 실시양태에서, 구조 I-A 또는 I-B에 따른 HVEM 효능제 융합 단백질은 서열식별번호: 446에 따른 서열을 포함하는 1개 이상의 HVEM 결합 도메인을 포함한다.
한 실시양태에서, 구조 I-A 또는 I-B에 따른 HVEM 효능제 융합 단백질은 VH 및 VL 영역을 포함하는 scFv 도메인이며, 여기서 VH 및 VL 도메인은 링커로 연결되는 것인 1개 이상의 HVEM 결합 도메인을 포함한다.
표 44. 융합 단백질 (예를 들어, 구조 I-A 및 I-B) 내의 HVEM 결합 도메인으로서 유용한 추가의 폴리펩티드 도메인.
한 실시양태에서, HVEM 효능제는 (i) 제1 가용성 HVEM 결합 도메인; (ii) 제1 펩티드 링커; (iii) 제2 가용성 HVEM 결합 도메인; (iv) 제2 펩티드 링커 및 (v) 제3 가용성 HVEM 결합 도메인을 포함하고, N-말단 및/또는 C-말단 단부에 추가의 도메인을 추가로 포함하며, 여기서 추가의 도메인은 Fab 또는 Fc 단편 도메인인, HVEM 효능작용 단일-쇄 융합 폴리펩티드이다. 한 실시양태에서, HVEM 효능제는 (i) 제1 가용성 HVEM 결합 도메인; (ii) 제1 펩티드 링커; (iii) 제2 가용성 HVEM 결합 도메인; (iv) 제2 펩티드 링커 및 (v) 제3 가용성 HVEM 결합 도메인을 포함하고, N-말단 및/또는 C-말단 단부에 추가의 도메인을 추가로 포함하며, 여기서 추가의 도메인은 Fab 또는 Fc 단편 도메인이고, 각각의 가용성 HVEM 결합 도메인에는 줄기 영역 (이는 삼량체화에 기여하고, 세포 막까지의 특정 거리를 제공하지만, HVEM 결합 도메인의 부분은 아님)이 결여되어 있고, 제1 및 제2 펩티드 링커는 독립적으로 3-8개 아미노산의 길이를 갖는 것인, HVEM 효능작용 단일-쇄 융합 폴리펩티드이다.
한 실시양태에서, HVEM 효능제는 (i) 제1 가용성 종양 괴사 인자 (TNF) 슈퍼패밀리 시토카인 도메인; (ii) 제1 펩티드 링커; (iii) 제2 가용성 TNF 슈퍼패밀리 시토카인 도메인; (iv) 제2 펩티드 링커 및 (v) 제3 가용성 TNF 슈퍼패밀리 시토카인 도메인을 포함하며, 여기서 각각의 가용성 TNF 슈퍼패밀리 시토카인 도메인에는 줄기 영역이 결여되어 있고, 제1 및 제2 펩티드 링커는 독립적으로 3-8개 아미노산의 길이를 갖고, TNF 슈퍼패밀리 시토카인 도메인은 HVEM 결합 도메인인, HVEM 효능작용 단일-쇄 융합 폴리펩티드이다.
한 실시양태에서, HVEM 효능제는 미국 특허 번호 7,118,742 (이의 개시내용은 본원에 참조로 포함됨)에 기재된 HVEM 효능제이다.
CD95 효능제
한 실시양태에서, TNFRSF 효능제는 CD95 효능제 또는 CD95 결합 분자이다. CD95는 또한 TNFRSF6, Fas 수용체 (FasR) 및 APO-1로도 공지되어 있다. 관련 기술분야에 공지된 임의의 CD95 효능제 또는 결합 분자가 사용될 수 있다. CD95 결합 분자는 인간 또는 포유동물 CD95에 결합할 수 있는 모노클로날 항체 또는 융합 단백질일 수 있고, 본원 다른 곳에 기재된 바와 같이, T 세포 아폽토시스 활성보다는 T 세포 효능작용 활성에 적절한 농도로 사용될 수 있다. CD95 효능제 또는 CD95 결합 분자는 이뮤노글로불린 분자의 임의의 이소형 (예를 들어, IgG, IgE, IgM, IgD, IgA 및 IgY), 부류 (예를 들어, IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgA1 및 IgA2) 또는 하위부류의 이뮤노글로불린 중쇄를 포함할 수 있다. CD95 효능제 또는 CD95 결합 분자는 중쇄 및 경쇄를 둘 다 가질 수 있다. 본원에 사용된 용어 결합 분자는 또한 CD95에 결합하는 항체 (전장 항체 포함), 모노클로날 항체 (전장 모노클로날 항체 포함), 폴리클로날 항체, 다중특이적 항체 (예를 들어, 이중특이적 항체), 인간, 인간화 또는 키메라 항체, 및 항체 단편, 예를 들어, Fab 단편, F(ab') 단편, Fab 발현 라이브러리에 의해 생산된 단편, 상기 중 임의의 것의 에피토프-결합 단편, 및 항체의 조작된 형태, 예를 들어 scFv 분자를 포함한다. 한 실시양태에서, CD95 효능제는 완전 인간 항체인 항원 결합 단백질이다. 한 실시양태에서, CD95 효능제는 인간화 항체인 항원 결합 단백질이다. 일부 실시양태에서, 본원에 개시된 방법 및 조성물에 사용하기 위한 CD95 효능제는 항-CD95 항체, 인간 항-CD95 항체, 마우스 항-CD95 항체, 포유동물 항-CD95 항체, 모노클로날 항-CD95 항체, 폴리클로날 항-CD95 항체, 키메라 항-CD95 항체, 항-CD95 애드넥틴, 항-CD95 도메인 항체, 단일 쇄 항-CD95 단편, 중쇄 항-CD95 단편, 경쇄 항-CD95 단편, 항-CD95 융합 단백질 및 그의 단편, 유도체, 접합체, 변이체 또는 바이오시밀러를 포함한다. 바람직한 실시양태에서, CD95 효능제는 효능작용 항-CD95 인간화 또는 완전 인간 모노클로날 항체 (즉, 단세포주로부터 유래된 항체)이다.
바람직한 실시양태에서, CD95 효능제 또는 CD95 결합 분자는 또한 융합 단백질일 수 있다. 바람직한 실시양태에서, 다량체 CD95 효능제, 예컨대 삼량체 또는 육량체 CD95 효능제 (3개 또는 6개의 리간드 결합 도메인을 가짐)는, 전형적으로 2개의 리간드 결합 도메인을 보유하는 효능작용 모노클로날 항체와 비교하여 우수한 수용체 (CD95L) 클러스터링 및 내부 세포 신호전달 복합체 형성을 유도할 수 있다. 3개의 TNFRSF 결합 도메인 및 IgG1-Fc를 포함하고 임의로 이들 융합 단백질 중 2개 이상을 추가로 연결하는 삼량체 (3가) 또는 육량체 (또는 6가) 또는 그보다 더 큰 융합 단백질이, 예를 들어 문헌 [Gieffers, et al., Mol. Cancer Therapeutics 2013, 12, 2735-47]에 기재되어 있다.
효능작용 CD95 항체 및 융합 단백질은 강한 면역 반응을 유도하는 것으로 공지되어 있다. 바람직한 실시양태에서, CD95 효능제는 독성을 감소시키기에 충분한 방식으로 CD95 항원에 특이적으로 결합하는 모노클로날 항체 또는 융합 단백질이다. 일부 실시양태에서, CD95 효능제는 항체-의존성 세포 독성 (ADCC), 예를 들어 NK 세포 세포독성을 제거하는 효능작용 CD95 모노클로날 항체 또는 융합 단백질이다. 일부 실시양태에서, CD95 효능제는 항체-의존성 세포 식세포작용 (ADCP)을 제거하는 효능작용 CD95 모노클로날 항체 또는 융합 단백질이다. 일부 실시양태에서, CD95 효능제는 보체-의존성 세포독성 (CDC)을 제거하는 효능작용 CD95 모노클로날 항체 또는 융합 단백질이다. 일부 실시양태에서, CD95 효능제는 Fc 영역 기능성을 제거하는 효능작용 CD95 모노클로날 항체 또는 융합 단백질이다.
일부 실시양태에서, CD95 효능제는 높은 친화도 및 효능작용 활성으로 인간 CD95 (서열식별번호: 447)에 결합하는 것을 특징으로 한다. 한 실시양태에서, CD95 효능제는 인간 CD95 (서열식별번호: 447)에 결합하는 결합 분자이다. 한 실시양태에서, CD95 효능제는 인간 CD95 (서열식별번호: 448)에 결합하는 결합 분자이다. 한 실시양태에서, CD95 효능제는 인간 CD95 (서열식별번호: 449)에 결합하는 결합 분자이다. 한 실시양태에서, CD95 효능제는 인간 CD95 (서열식별번호: 450)에 결합하는 결합 분자이다. CD95 효능제 또는 결합 분자가 결합할 수 있는 CD95 항원의 아미노산 서열은 표 45에 요약되어 있다.
표 45. CD95 항원의 아미노산 서열.
일부 실시양태에서, 기재된 조성물, 과정 및 방법은 약 100 pM 이하의 KD로 인간 또는 뮤린 CD95에 결합하거나, 약 90 pM 이하의 KD로 인간 또는 뮤린 CD95에 결합하거나, 약 80 pM 이하의 KD로 인간 또는 뮤린 CD95에 결합하거나, 약 70 pM 이하의 KD로 인간 또는 뮤린 CD95에 결합하거나, 약 60 pM 이하의 KD로 인간 또는 뮤린 CD95에 결합하거나, 약 50 pM 이하의 KD로 인간 또는 뮤린 CD95에 결합하거나, 약 40 pM 이하의 KD로 인간 또는 뮤린 CD95에 결합하거나, 또는 약 30 pM 이하의 KD로 인간 또는 뮤린 CD95에 결합하는 CD95 효능제를 포함한다.
일부 실시양태에서, 기재된 조성물, 과정 및 방법은 약 7.5 x 105 l/M·s 또는 더 빠른 kassoc로 인간 또는 뮤린 CD95에 결합하거나, 약 7.5 x 105 l/M·s 또는 더 빠른 kassoc로 인간 또는 뮤린 CD95에 결합하거나, 약 8 x 105 l/M·s 또는 더 빠른 kassoc로 인간 또는 뮤린 CD95에 결합하거나, 약 8.5 x 105 l/M·s 또는 더 빠른 kassoc로 인간 또는 뮤린 CD95에 결합하거나, 약 9 x 105 l/M·s 또는 더 빠른 kassoc로 인간 또는 뮤린 CD95에 결합하거나, 약 9.5 x 105 l/M·s 또는 더 빠른 kassoc로 인간 또는 뮤린 CD95에 결합하거나, 또는 약 1 x 106 l/M·s 또는 더 빠른 kassoc로 인간 또는 뮤린 CD95에 결합하는 CD95 효능제를 포함한다.
일부 실시양태에서, 기재된 조성물, 과정 및 방법은 약 2 x 10-5 l/s 또는 더 느린 kdissoc로 인간 또는 뮤린 CD95에 결합하거나, 약 2.1 x 10-5 l/s 또는 더 느린 kdissoc로 인간 또는 뮤린 CD95에 결합하거나, 약 2.2 x 10-5 l/s 또는 더 느린 kdissoc로 인간 또는 뮤린 CD95에 결합하거나, 약 2.3 x 10-5 l/s 또는 더 느린 kdissoc로 인간 또는 뮤린 CD95에 결합하거나, 약 2.4 x 10-5 l/s 또는 더 느린 kdissoc로 인간 또는 뮤린 CD95에 결합하거나, 약 2.5 x 10-5 l/s 또는 더 느린 kdissoc로 인간 또는 뮤린 CD95에 결합하거나, 약 2.6 x 10-5 l/s 또는 더 느린 kdissoc로 인간 또는 뮤린 CD95에 결합하거나, 약 2.7 x 10-5 l/s 또는 더 느린 kdissoc로 인간 또는 뮤린 CD95에 결합하거나, 약 2.8 x 10-5 l/s 또는 더 느린 kdissoc로 인간 또는 뮤린 CD95에 결합하거나, 약 2.9 x 10-5 l/s 또는 더 느린 kdissoc로 인간 또는 뮤린 CD95에 결합하거나, 또는 약 3 x 10-5 l/s 또는 더 느린 kdissoc로 인간 또는 뮤린 CD95에 결합하는 CD95 효능제를 포함한다.
일부 실시양태에서, 기재된 조성물, 과정 및 방법은 약 10 nM 이하의 IC50으로 인간 또는 뮤린 CD95에 결합하거나, 약 9 nM 이하의 IC50으로 인간 또는 뮤린 CD95에 결합하거나, 약 8 nM 이하의 IC50으로 인간 또는 뮤린 CD95에 결합하거나, 약 7 nM 이하의 IC50으로 인간 또는 뮤린 CD95에 결합하거나, 약 6 nM 이하의 IC50으로 인간 또는 뮤린 CD95에 결합하거나, 약 5 nM 이하의 IC50으로 인간 또는 뮤린 CD95에 결합하거나, 약 4 nM 이하의 IC50으로 인간 또는 뮤린 CD95에 결합하거나, 약 3 nM 이하의 IC50으로 인간 또는 뮤린 CD95에 결합하거나, 약 2 nM 이하의 IC50으로 인간 또는 뮤린 CD95에 결합하거나, 또는 약 1 nM 이하의 IC50으로 인간 또는 뮤린 CD95에 결합하는 CD95 효능제를 포함한다.
바람직한 실시양태에서, CD95 효능제는 모노클로날 항체 E09 또는 그의 단편, 유도체, 변이체 또는 바이오시밀러이다. E09의 제조 및 특성은 문헌 [Chodorge, et al., Cell Death & Differ. 2012, 19, 1187-95]에 기재되어 있다. E09의 아미노산 서열은 표 46에 제시된다.
한 실시양태에서, CD95 효능제는 E09의 중쇄 및 경쇄 CDR 또는 가변 영역 (VR)을 포함한다. 한 실시양태에서, CD95 효능제 중쇄 가변 영역 (VH)은 서열식별번호: 451에 제시된 서열을 포함하고, CD95 효능제 경쇄 가변 영역 (VL)은 서열식별번호: 452에 제시된 서열 및 그의 보존적 아미노산 치환을 포함한다. 한 실시양태에서, CD95 효능제는 각각 서열식별번호: 451 및 서열식별번호: 452에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 99% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, CD95 효능제는 각각 서열식별번호: 451 및 서열식별번호: 452에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 98% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, CD95 효능제는 각각 서열식별번호: 451 및 서열식별번호: 452에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 97% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, CD95 효능제는 각각 서열식별번호: 451 및 서열식별번호: 452에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 96% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, CD95 효능제는 각각 서열식별번호: 451 및 서열식별번호: 452에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 95% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다.
한 실시양태에서, CD95 효능제는 각각 서열식별번호: 453, 서열식별번호: 454 및 서열식별번호: 455에 제시된 서열 및 그의 보존적 아미노산 치환을 갖는 중쇄 CDR1, CDR2 및 CDR3 도메인, 및 각각 서열식별번호: 456, 서열식별번호: 457 및 서열식별번호: 458에 제시된 서열 및 그의 보존적 아미노산 치환을 갖는 경쇄 CDR1, CDR2 및 CDR3 도메인을 포함한다.
한 실시양태에서, CD95 효능제는 E09에 관하여 약물 규제 기관에 의해 승인된 CD95 효능제 바이오시밀러 모노클로날 항체이다. 한 실시양태에서, 바이오시밀러 모노클로날 항체는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품의 아미노산 서열에 대해 적어도 97% 서열 동일성, 예를 들어 97%, 98%, 99% 또는 100% 서열 동일성을 갖고 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품과 비교하여 1개 이상의 번역후 변형을 포함하는 아미노산 서열을 포함하는 CD95 항체를 포함하며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 E09이다. 일부 실시양태에서, 1개 이상의 번역후 변형은 다음 중 하나 이상으로부터 선택된다: 글리코실화, 산화, 탈아미드화 및 말단절단. 일부 실시양태에서, 바이오시밀러는 인가된 또는 인가를 위해 제출된 CD95 효능제 항체이며, 여기서 CD95 효능제 항체는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품의 제제와 상이한 제제로 제공되며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 E09이다. CD95 효능제 항체는 약물 규제 기관, 예컨대 미국 FDA 및/또는 유럽 연합 EMA에 의해 인가될 수 있다. 일부 실시양태에서, 바이오시밀러는 1종 이상의 부형제를 추가로 포함하는 조성물로서 제공되며, 여기서 1종 이상의 부형제는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품에 포함된 부형제와 동일하거나 상이하며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 E09이다. 일부 실시양태에서, 바이오시밀러는 1종 이상의 부형제를 추가로 포함하는 조성물로서 제공되며, 여기서 1종 이상의 부형제는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품에 포함된 부형제와 동일하거나 상이하며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 E09이다.
표 46. CD95 효능제 항체 E09에 대한 아미노산 서열.
한 실시양태에서, CD95 효능제는 국제 특허 출원 공개 번호 WO 2009/007120 A2 및 미국 특허 출원 공개 번호 US 2016/0176941 A1 (이들 각각의 개시내용은 본원에 참조로 포함됨)에 기재된 CD95 효능제이다.
한 실시양태에서, CD95 효능제는 구조 I-A (C-말단 Fc-항체 단편 융합 단백질) 또는 구조 I-B (N-말단 Fc-항체 단편 융합 단백질)에 도시된 바와 같은 CD95 효능작용 융합 단백질 또는 그의 단편, 유도체, 접합체, 변이체 또는 바이오시밀러이다. 구조 I-A 및 I-B의 특성은 상기 및 미국 특허 번호 9,359,420, 9,340,599, 8,921,519 및 8,450,460 (이들의 개시내용은 본원에 참조로 포함됨)에 기재되어 있다. 구조 I-A의 폴리펩티드 도메인에 대한 아미노산 서열은 표 6에 제공된다. Fc 도메인은 바람직하게는 완전 불변 도메인 (서열식별번호: 31의 아미노산 17-230) 및 완전 힌지 도메인 (서열식별번호: 31의 아미노산 1-16) 또는 힌지 도메인의 한 부분 (예를 들어, 서열식별번호: 31의 아미노산 4-16)을 포함한다. C-말단 Fc-항체를 연결시키기 위한 바람직한 링커는 추가의 폴리펩티드의 융합에 적합한 링커를 포함한, 서열식별번호: 33 내지 서열식별번호: 41에 제공된 실시양태로부터 선택될 수 있다. 마찬가지로, 구조 I-B의 폴리펩티드 도메인에 대한 아미노산 서열은 표 7에 제공된다. Fc 항체 단편이 구조 I-B에서와 같이 TNRFSF 융합 단백질의 N-말단에 융합되는 경우에, Fc 모듈의 서열은 바람직하게는 서열식별번호: 42에 제시된 것이고, 링커 서열은 바람직하게는 서열식별번호: 43 내지 서열식별번호: 45에 제시된 실시양태로부터 선택된다.
한 실시양태에서, 구조 I-A 또는 I-B에 따른 CD95 효능제 융합 단백질은 CD95 리간드 서열을 포함하는 1개 이상의 CD95 결합 도메인 (표 47)을 포함한다. 한 실시양태에서, 구조 I-A 또는 I-B에 따른 CD95 효능제 융합 단백질은 서열식별번호: 459에 따른 서열을 포함하는 1개 이상의 CD95 결합 도메인을 포함한다. 한 실시양태에서, 구조 I-A 또는 I-B에 따른 CD95 효능제 융합 단백질은 가용성 LIGHT 서열을 포함하는 1개 이상의 CD95 결합 도메인을 포함한다. 한 실시양태에서, 구조 I-A 또는 I-B에 따른 CD95 효능제 융합 단백질은 서열식별번호: 460에 따른 서열을 포함하는 1개 이상의 CD95 결합 도메인을 포함한다. 한 실시양태에서, 구조 I-A 또는 I-B에 따른 CD95 효능제 융합 단백질은 서열식별번호: 461에 따른 서열을 포함하는 1개 이상의 CD95 결합 도메인을 포함한다. 한 실시양태에서, 구조 I-A 또는 I-B에 따른 CD95 효능제 융합 단백질은 서열식별번호: 462에 따른 서열을 포함하는 1개 이상의 CD95 결합 도메인을 포함한다.
한 실시양태에서, 구조 I-A 또는 I-B에 따른 CD95 효능제 융합 단백질은 VH 및 VL 영역을 포함하는 scFv 도메인이며, 여기서 VH 및 VL 도메인은 링커로 연결되는 것인 1개 이상의 CD95 결합 도메인을 포함한다.
표 47. 융합 단백질 (예를 들어, 구조 I-A 및 I-B) 내의 CD95 결합 도메인으로서 유용한 추가의 폴리펩티드 도메인.
한 실시양태에서, CD95 효능제는 (i) 제1 가용성 CD95 결합 도메인; (ii) 제1 펩티드 링커; (iii) 제2 가용성 CD95 결합 도메인; (iv) 제2 펩티드 링커 및 (v) 제3 가용성 CD95 결합 도메인을 포함하고, N-말단 및/또는 C-말단 단부에 추가의 도메인을 추가로 포함하며, 여기서 추가의 도메인은 Fab 또는 Fc 단편 도메인인, CD95 효능작용 단일-쇄 융합 폴리펩티드이다. 한 실시양태에서, CD95 효능제는 (i) 제1 가용성 CD95 결합 도메인; (ii) 제1 펩티드 링커; (iii) 제2 가용성 CD95 결합 도메인; (iv) 제2 펩티드 링커 및 (v) 제3 가용성 CD95 결합 도메인을 포함하고, N-말단 및/또는 C-말단 단부에 추가의 도메인을 추가로 포함하며, 여기서 추가의 도메인은 Fab 또는 Fc 단편 도메인이고, 각각의 가용성 CD95 결합 도메인에는 줄기 영역 (이는 삼량체화에 기여하고, 세포 막까지의 특정 거리를 제공하지만, CD95 결합 도메인의 부분은 아님)이 결여되어 있고, 제1 및 제2 펩티드 링커는 독립적으로 3-8개 아미노산의 길이를 갖는 것인, CD95 효능작용 단일-쇄 융합 폴리펩티드이다.
한 실시양태에서, CD95 효능제는 (i) 제1 가용성 종양 괴사 인자 (TNF) 슈퍼패밀리 시토카인 도메인; (ii) 제1 펩티드 링커; (iii) 제2 가용성 TNF 슈퍼패밀리 시토카인 도메인; (iv) 제2 펩티드 링커 및 (v) 제3 가용성 TNF 슈퍼패밀리 시토카인 도메인을 포함하며, 여기서 각각의 가용성 TNF 슈퍼패밀리 시토카인 도메인에는 줄기 영역이 결여되어 있고, 제1 및 제2 펩티드 링커는 독립적으로 3-8개 아미노산의 길이를 갖고, TNF 슈퍼패밀리 시토카인 도메인은 CD95 결합 도메인인, CD95 효능작용 단일-쇄 융합 폴리펩티드이다.
한 실시양태에서, CD95 효능제는 임의의 상기 VL 도메인에 연결된 임의의 상기 VH 도메인을 포함하는 CD95 효능작용 scFv 항체이다.
종양 침윤 림프구를 확장시키는 방법
한 실시양태에서, 본 발명은 문헌 [Jin, et al., J. Immunotherapy 2012, 35, 283-292] (이의 개시내용은 본원에 참조로 포함됨)에 기재된 바와 같은 단계를 포함하는, 본 개시내용의 임의의 TNFRSF 효능제를 사용하여 TIL 집단을 확장시키는 방법을 제공한다. 예를 들어, 종양을 효소 배지에 배치하고, 대략 1분 동안 기계적으로 해리시킬 수 있다. 이어서, 혼합물을 5% CO2 하에 37℃에서 30분 동안 인큐베이션한 다음, 대략 1분 동안 다시 기계적으로 파괴시킬 수 있다. 5% CO2 하에 37℃에서 30분 동안 인큐베이션한 후, 종양을 대략 1분 동안 3번째로 기계적으로 파괴시킬 수 있다. 3번째 기계적 파괴 후에, 큰 조직 조각이 존재하는 경우, 5% CO2 하에 37℃에서 30분 추가의 인큐베이션을 수행하거나 또는 수행하지 않으면서, 1 또는 2회의 추가의 기계적 해리를 샘플에 적용할 수 있다. 최종 인큐베이션의 종료 후에, 세포 현탁액이 다수의 적혈구 또는 사멸 세포를 함유하는 경우, 피콜을 사용하는 밀도 구배 분리를 수행하여 이들 세포를 제거할 수 있다. TIL 배양을 24-웰 플레이트 (코스타(Costar) 24-웰 세포 배양 클러스터, 편평 바닥; 코닝 인코포레이티드(Corning Incorporated), 뉴욕주 코닝)에서 개시하였으며, 각각의 웰을 IL-2 (6000 IU/mL; 키론 코포레이션(Chiron Corp.), 캘리포니아주 에머리빌)를 갖는 2 mL의 완전 배지 (CM) 중에 1x106개의 종양 소화 세포 또는 대략 1 내지 8 mm3 크기의 1개의 종양 단편으로 시딩할 수 있다. CM은 10% 인간 AB 혈청, 25mM Hepes 및 10 mg/mL 겐타미신으로 보충된, 글루타맥스(GlutaMAX)를 갖는 로스웰 파크 메모리얼 인스티튜트(Roswell Park Memorial Institute, RPMI) 1640 완충제를 포함한다. 40 mL 용량 및 10 cm2 기체-투과성 규소 바닥을 갖는 기체-투과성 플라스크 (지-렉스 10; 윌슨 울프 매뉴팩처링(Wilson Wolf Manufacturing), 뉴 브라이톤)에서 배양을 개시할 수 있고, 각각의 플라스크에 IL-2를 갖는 10-40 mL의 CM 중 10-40x106개 생존 종양 소화 세포 또는 5-30개 종양 단편을 로딩할 수 있다. 지-렉스 10 및 24-웰 플레이트를 5% CO2 하에 37℃에서 가습 인큐베이터 내에서 인큐베이션할 수 있고, 배양 개시 5일 후에, 배지의 절반을 제거하고 신선한 CM 및 IL-2로 대체할 수 있고, 제5일 후 배지의 절반을 2-3일마다 교체할 수 있다. TIL의 급속 확장 프로토콜 (REP)은 본 개시내용의 TNFRSF 효능제를 사용하여, 본원 다른 곳에 기재된 바와 같이, T-175 플라스크 및 기체-투과성 백 또는 기체-투과성 지-렉스 플라스크를 사용하여 수행될 수 있다. T-175 플라스크에서의 REP를 위해, 1x106개의 TIL을 각각의 플라스크에서 150 mL의 배지에 현탁시킬 수 있다. TIL을 본 개시내용의 TNFRSF 효능제와 함께 본원에 기재된 비로, 3000 IU/mL의 IL-2 및 30 ng/mL의 항-CD3 항체 (OKT-3)로 보충된 CM 및 AIM-V 배지의 1 대 1 혼합물 (50/50 배지)에서 배양할 수 있다. T-175 플라스크를 5% CO2 하에 37℃에서 인큐베이션할 수 있다. 배지의 절반을 제5일에 3000 IU/mL의 IL-2를 갖는 50/50 배지를 사용하여 교체할 수 있다. 제7일에, 2개의 T-175 플라스크로부터의 세포를 3L 백에서 합하고, 5% 인간 AB 혈청 및 3000 IU/mL의 IL-2를 갖는 300 mL의 AIM-V를 300 mL의 TIL 현탁액에 첨가할 수 있다. 각각의 백 내 세포의 수를 매일 또는 2일마다 계수할 수 있고, 신선한 배지를 첨가하여 세포 수가 0.5 내지 2.0x106개 세포/mL를 유지하도록 할 수 있다. 100 cm2 기체-투과성 규소 바닥을 갖는 500 mL 용량 플라스크 (예를 들어, 본원 다른 곳에 기재된 바와 같은 지-렉스 100, 윌슨 울프 매뉴팩처링)에서의 REP를 위해, 5x106 또는 10x106개의 TIL을 TNFRSF 효능제와 함께 본원에 기재된 비 (예를 들어, 1 대 100)로, 3000 IU/mL의 IL-2 및 30 ng/mL의 항-CD3 항체 (OKT-3)로 보충된 400 mL의 50/50 배지에서 배양할 수 있다. 지-렉스100 플라스크를 5% CO2 하에 37℃에서 인큐베이션할 수 있다. 제5일에, 250 mL의 상청액을 분리해내고, 원심분리 병에 넣고, 10분 동안 1500 rpm (491 g)으로 원심분리할 수 있다. 수득한 TIL 펠릿을 3000 IU/mL의 IL-2를 갖는 150 mL의 신선한 50/50 배지에 재현탁시키고, 다시 지-렉스 100 플라스크에 첨가할 수 있다. TIL이 지-렉스 100 플라스크에서 연속적으로 확장될 때, 제7일에 각각의 지-렉스100에서의 TIL을 각각의 플라스크에 존재하는 300 mL의 배지 중에 현탁시키고, 세포 현탁액을 3개의 100 mL 분취물로 분할할 수 있고, 이를 사용하여 3개의 지-렉스100 플라스크에 시딩할 수 있다. 이어서, 5% 인간 AB 혈청 및 3000 IU/mL의 IL-2를 갖는 약 150 mL의 AIM-V를 각각의 플라스크에 첨가할 수 있다. 이어서, 지-렉스 100 플라스크를 5% CO2 하에 37℃에서 인큐베이션할 수 있고, 4일 후에 3000 IU/mL의 IL-2를 갖는 150 mL의 AIM-V를 각각의 지-렉스100 플라스크에 첨가할 수 있다. 이 후에, 배양 제14일에 세포를 수거함으로써 REP를 완료할 수 있다.
한 실시양태에서, 확장 방법 또는 과정 또는 암 치료 방법은 환자 종양 샘플로부터 TIL을 수득하는 단계를 포함한다. 환자 종양 샘플은 관련 기술분야에 공지된 방법을 사용하여 수득할 수 있다. 예를 들어, TIL을 효소적 종양 소화물 및 예적박리에 의한 종양 단편 (약 1 내지 약 8 mm3 크기)으로부터 배양할 수 있다. 이러한 종양 소화물은 효소 배지 (예를 들어, 로스웰 파크 메모리얼 인스티튜트 (RPMI) 1640 완충제, 2 mM 글루타메이트, 10 mcg/mL 겐타미신, 30 단위/mL의 DNase 및 1.0 mg/mL의 콜라게나제)에서의 인큐베이션, 이어서 기계적 해리 (예를 들어, 조직 해리기를 사용하여)에 의해 생성될 수 있다. 종양 소화물은 종양을 효소 배지에 배치하고, 종양을 대략 1분 동안 기계적으로 해리시키고, 이어서 5% CO2 하에 37℃에서 30분 동안 인큐베이션하고, 이어서 단지 작은 조직 조각이 존재할 때까지 상기 조건 하에서 기계적 해리 및 인큐베이션의 반복된 주기를 수행하여 생성될 수 있다. 이 과정의 종료시에, 세포 현탁액이 다수의 적혈구 또는 사멸 세포를 함유하는 경우, 피콜 분지형 친수성 폴리사카라이드를 사용하는 밀도 구배 분리를 수행하여 이들 세포를 분리해낼 수 있다. 관련 기술분야에 공지된 대안적 방법, 예컨대 미국 특허 출원 공개 번호 2012/0244133 A1 (이의 개시내용은 본원에 참조로 포함됨)에 기재된 것이 사용될 수 있다. TIL을 확장시키는 방법 또는 과정 또는 암을 치료하는 방법에 대한 본원에 기재된 임의의 실시양태에서 임의의 상기 방법을 사용할 수 있다.
한 실시양태에서, TIL에 대한 급속 확장 방법은 이전에 기재된 바와 같은 T-175 플라스크 및 기체 투과성 백 (Tran, et al., J. Immunother. 2008, 31, 742-51; Dudley, et al., J. Immunother. 2003, 26, 332-42) 또는 기체 투과성 배양용기 (미국 미네소타주 뉴 브라이톤 소재 윌슨 울프 매뉴팩처링 코포레이션으로부터 상업적으로 입수가능한 지-렉스 플라스크)를 사용하여 수행될 수 있다. T-175 플라스크에서의 TIL 급속 확장을 위해, 150 mL의 배지 중에 현탁된 1 x 106개 TIL을 각각의 T-175 플라스크에 첨가할 수 있다. TIL을 TNFRSF 효능제와 함께 1 TIL 대 100 TNFRSF 효능제의 비로 배양할 수 있으며, 세포를 mL당 3000 IU (국제 단위)의 IL-2 및 ml당 30 ng의 항-CD3 항체 (예를 들어, OKT-3)로 보충된 CM 및 AIM-V 배지의 1 대 1 혼합물에서 배양할 수 있다. T-175 플라스크를 5% CO2 하에 37℃에서 인큐베이션할 수 있다. 배지의 절반을 제5일에 mL당 3000 IU의 IL-2를 갖는 50/50 배지를 사용하여 교체할 수 있다. 제7일에, 2개의 T-175 플라스크로부터의 세포를 3 L 백에서 합할 수 있고, 5% 인간 AB 혈청 및 mL당 3000 IU의 IL-2를 갖는 300 mL의 AIM V를 300 ml의 TIL 현탁액에 첨가하였다. 각각의 백 내 세포의 수를 매일 또는 2일마다 계수하였고, 신선한 배지를 첨가하여 세포 수가 0.5 내지 2.0 x 106개 세포/mL를 유지하도록 하였다.
한 실시양태에서, 100 cm2 기체-투과성 규소 바닥을 갖는 500 mL 용량 기체 투과성 플라스크 (미국 미네소타주 뉴 브라이톤 소재 윌슨 울프 매뉴팩처링으로부터 상업적으로 입수가능한 지-렉스 100)에서의 TIL 급속 확장을 위해, 5 x 106 또는 10 x 106개 TIL을, 5% 인간 AB 혈청, mL당 3000 IU의 IL-2 및 mL당 30 ng의 항-CD3 (OKT-3)으로 보충된 400 mL의 50/50 배지에서 TNFRSF 효능제와 함께 배양할 수 있다. 지-렉스 100 플라스크를 5% CO2 하에 37℃에서 인큐베이션할 수 있다. 제5일에, 250 mL의 상청액을 분리해내고, 원심분리 병에 넣고, 10분 동안 1500 rpm (분당 회전수; 491 x g)으로 원심분리할 수 있다. TIL 펠릿을 5% 인간 AB 혈청, mL당 3000 IU의 IL-2를 갖는 150 mL의 신선한 배지에 재현탁시키고, 다시 원래 지-렉스 100 플라스크에 첨가할 수 있다. TIL이 지-렉스 100 플라스크에서 연속적으로 확장될 때, 제7일에 각각의 지-렉스 100에서의 TIL을 각각의 플라스크에 존재하는 300 mL의 배지 중에 현탁시킬 수 있고, 세포 현탁액을 3개의 100 mL 분취물로 분할할 수 있고, 이를 사용하여 3개의 지-렉스 100 플라스크에 시딩할 수 있다. 이어서, 5% 인간 AB 혈청 및 mL당 3000 IU의 IL-2를 갖는 150 mL의 AIM-V를 각각의 플라스크에 첨가할 수 있다. 지-렉스 100 플라스크를 5% CO2 하에 37℃에서 인큐베이션할 수 있고, 4일 후에 mL당 3000 IU의 IL-2를 갖는 150 mL의 AIM-V를 각각의 지-렉스 100 플라스크에 첨가할 수 있다. 배양 제14일에 세포를 수거할 수 있다.
한 실시양태에서, TIL은 하기와 같이 제조될 수 있다. 2 mM 글루타민 (미디어테크, 인크.(Mediatech, Inc.), 버지니아주 마나사스), 100 U/mL 페니실린 (인비트로젠 라이프 테크놀로지스(Invitrogen Life Technologies)), 100 μg/mL 스트렙토마이신 (인비트로젠 라이프 테크놀로지스), 5% 열-불활성화 인간 AB 혈청 (밸리 바이오메디칼, 인크.(Valley Biomedical, Inc.), 버지니아주 윈체스터) 및 600 IU/mL rhIL-2 (키론, 캘리포니아주 에머리빌)로 보충된 AIM-V 배지 (인비트로젠 라이프 테크놀로지스, 캘리포니아주 칼스배드)로 구성된 완전 배지 (CM) 중에서 2 mm3 종양 단편을 배양한다. 고형 종양의 효소적 소화를 위해, 종양 시편을 RPMI-1640 내로 다이싱하고, 세척하고, 15-22℃에서 5분 동안 800 rpm으로 원심분리하고, 효소적 소화 완충제 (RPMI-1640 중 0.2 mg/mL 콜라게나제 및 30 단위/ml의 DNase) 중에 재현탁시키고, 이어서 실온에서 밤새 회전시켰다. 단편으로부터 확립된 TIL을 CM 중에서 3-4주 동안 성장시키고 새로 확장시킬 수 있거나 또는 10% 디메틸술폭시드 (DMSO)를 갖는 열-불활성화 HAB 혈청 중에 동결보존시키고 연구 시까지 -180℃에서 저장할 수 있다. 복수 수집물로부터 수득한 종양 연관 림프구 (TAL)를 CM 중에 24 웰 플레이트의 웰당 3 x 106개 세포/웰로 시딩하였다. TIL 성장을 저전력 도립 현미경을 사용하여 약 격일로 검사하였다.
한 실시양태에서, 본 발명은 적어도 1종의 종양 침윤 림프구 (TIL)를 포함하는 TIL의 집단을 본원에 기재된 TNFRSF 효능제와 접촉시키는 것을 포함하며, 여기서 상기 TNFRSF 효능제는 TIL의 세포 표면 상에서 발현되는 공동-자극 분자와 특이적으로 결합하는 적어도 1종의 공동-자극 리간드를 포함하고, 상기 공동-자극 분자와 상기 공동-자극 리간드의 결합이 TIL의 증식을 유도함으로써 TIL을 특이적으로 확장시키는 것인, TIL을 확장시키는 방법을 포함한다.
한 실시양태에서, 본 발명은 세포 배양 배지에서 종양 침윤 림프구 (TIL) 집단을 1종 이상의 TNFRSF 효능제와 접촉시키는 단계를 포함하는, TIL 집단을 확장시키는 방법을 제공한다.
한 실시양태에서, 본 발명은 세포 배양 배지에서 종양 침윤 림프구 (TIL) 집단을 1종 이상의 TNFRSF 효능제와 접촉시키는 단계를 포함하며, 여기서 세포 배양 배지 중 1종 이상의 TNFRSF 효능제의 농도는 독립적으로 50 ng/mL, 100 ng/mL, 500 ng/mL, 1 μg/mL, 5 μg/mL, 10 μg/mL, 20 μg/mL, 30 μg/mL, 40 μg/mL, 50 μg/mL, 60 μg/mL, 70 μg/mL, 80 μg/mL, 90 μg/mL 및 100 μg/mL로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인, TIL 집단을 확장시키는 방법을 제공한다.
한 실시양태에서, 본 발명은 세포 배양 배지에서 종양 침윤 림프구 (TIL) 집단을 1종 이상의 TNFRSF 효능제와 접촉시키는 단계를 포함하며, 여기서 세포 배양 배지는 약 3000 IU/mL의 초기 농도의 IL-2 및 약 30 ng/mL의 초기 농도의 OKT-3 항체를 추가로 포함하는 것인, TIL 집단을 확장시키는 방법을 제공한다.
한 실시양태에서, 본 발명은 세포 배양 배지에서 종양 침윤 림프구 (TIL) 집단을 1종 이상의 TNFRSF 효능제와 접촉시키는 단계를 포함하며, 여기서 세포 배양 배지는 약 3000 IU/mL의 초기 농도의 IL-2 및 약 30 ng/mL의 초기 농도의 OKT-3 항체를 추가로 포함하고, 1종 이상의 TNFRSF 효능제는 4-1BB 효능제를 포함하는 것인, TIL 집단을 확장시키는 방법을 제공한다.
한 실시양태에서, 본 발명은 세포 배양 배지에서 종양 침윤 림프구 (TIL) 집단을 1종 이상의 TNFRSF 효능제와 접촉시키는 단계를 포함하며, 여기서 세포 배양 배지는 약 3000 IU/mL의 초기 농도의 IL-2 및 약 30 ng/mL의 초기 농도의 OKT-3 항체를 추가로 포함하고, 1종 이상의 TNFRSF 효능제는 OX40 효능제를 포함하는 것인, TIL 집단을 확장시키는 방법을 제공한다.
한 실시양태에서, 본 발명은 세포 배양 배지에서 종양 침윤 림프구 (TIL) 집단을 1종 이상의 TNFRSF 효능제와 접촉시키는 단계를 포함하며, 여기서 세포 배양 배지는 약 3000 IU/mL의 초기 농도의 IL-2 및 약 30 ng/mL의 초기 농도의 OKT-3 항체를 추가로 포함하고, 1종 이상의 TNFRSF 효능제는 4-1BB 및 OX40 효능제를 포함하는 것인, TIL 집단을 확장시키는 방법을 제공한다.
한 실시양태에서, 본 발명은 세포 배양 배지에서 종양 침윤 림프구 (TIL) 집단을 1종 이상의 TNFRSF 효능제와 접촉시키는 단계를 포함하며, 여기서 세포 배양 배지는 약 3000 IU/mL의 초기 농도의 IL-2 및 약 30 ng/mL의 초기 농도의 OKT-3 항체를 추가로 포함하고, 1종 이상의 TNFRSF 효능제는 CD27 효능제를 포함하는 것인, TIL 집단을 확장시키는 방법을 제공한다.
한 실시양태에서, 본 발명은 세포 배양 배지에서 종양 침윤 림프구 (TIL) 집단을 1종 이상의 TNFRSF 효능제와 접촉시키는 단계를 포함하며, 여기서 세포 배양 배지는 약 3000 IU/mL의 초기 농도의 IL-2 및 약 30 ng/mL의 초기 농도의 OKT-3 항체를 추가로 포함하고, 1종 이상의 TNFRSF 효능제는 GITR 효능제를 포함하는 것인, TIL 집단을 확장시키는 방법을 제공한다.
한 실시양태에서, 본 발명은 세포 배양 배지에서 종양 침윤 림프구 (TIL) 집단을 1종 이상의 TNFRSF 효능제와 접촉시키는 단계를 포함하며, 여기서 세포 배양 배지는 약 3000 IU/mL의 초기 농도의 IL-2 및 약 30 ng/mL의 초기 농도의 OKT-3 항체를 추가로 포함하고, 1종 이상의 TNFRSF 효능제는 HVEM 효능제를 포함하는 것인, TIL 집단을 확장시키는 방법을 제공한다.
한 실시양태에서, 본 발명은 세포 배양 배지에서 종양 침윤 림프구 (TIL) 집단을 1종 이상의 TNFRSF 효능제와 접촉시키는 단계를 포함하며, 여기서 세포 배양 배지는 약 3000 IU/mL의 초기 농도의 IL-2 및 약 30 ng/mL의 초기 농도의 OKT-3 항체를 추가로 포함하고, 1종 이상의 TNFRSF 효능제는 CD95 효능제를 포함하는 것인, TIL 집단을 확장시키는 방법을 제공한다.
한 실시양태에서, 본 발명은 세포 배양 배지에서 종양 침윤 림프구 (TIL) 집단을 1종 이상의 TNFRSF 효능제와 접촉시키는 단계를 포함하며, 여기서 TIL 집단은 세포 배양 배지에서 7일의 기간에 걸쳐 적어도 50배 증가되는 것인, TIL 집단을 확장시키는 방법을 제공한다.
한 실시양태에서, 본 발명은 세포 배양 배지에서 종양 침윤 림프구 (TIL) 집단을 1종 이상의 TNFRSF 효능제와 접촉시키는 단계를 포함하며, 여기서 TIL 집단은 세포 배양 배지에서 7일의 기간에 걸쳐 적어도 50배 증가되고, 확장은 기체 투과성 용기를 사용하여 수행되는 것인, TIL 집단을 확장시키는 방법을 제공한다.
한 실시양태에서, REP는 임의의 적합한 방법에 의해 본 개시내용의 TNFRSF 효능제를 사용하여 기체 투과성 용기에서 수행될 수 있다. 예를 들어, TIL은 인터류킨-2 (IL-2) 또는 인터류킨-15 (IL-15)의 존재 하에 비-특이적 T 세포 수용체 자극을 사용하여 급속하게 확장될 수 있다. 비-특이적 T 세포 수용체 자극은, 예를 들어 항-CD3 항체, 예컨대 약 30 ng/mL의 모노클로날 항-CD3 항체인 OKT-3 (뉴저지주 라리탄 소재 오르토-맥네일(Ortho-McNeil) 또는 캘리포니아주 오번 소재 밀테니 바이오테크로부터 상업적으로 입수가능함) 또는 UHCT-1 (캘리포니아주 샌디에고 소재 바이오레전드로부터 상업적으로 입수가능함)을 포함할 수 있다. 임의로 T 세포 성장 인자, 예컨대 300 IU/mL IL-2 또는 IL-15의 존재 하에, 임의로 벡터로부터 발현될 수 있는 암의 1종 이상의 항원 (그의 항원 부분, 예컨대 에피토프(들) 포함), 예컨대 인간 백혈구 항원 A2 (HLA-A2) 결합 펩티드, 예를 들어 0.3 μM MART-1 :26-35 (27 L) 또는 gpl 00:209-217 (210M)에 의한 시험관내 TIL의 추가 자극에 의해 TIL을 급속히 확장시킬 수 있다. 다른 적합한 항원은, 예를 들어 NY-ESO-1, TRP-1, TRP-2, 티로시나제 암 항원, MAGE-A3, SSX-2 및 VEGFR2, 또는 그의 항원 부분을 포함할 수 있다. 또한, HLA-A2-발현 항원-제시 세포 상으로 펄스된 암의 동일한 항원(들)에 의한 재자극에 의해 TIL을 급속히 확장시킬 수 있다. 대안적으로, 예를 들어 조사된 자가 림프구 또는 조사된 HLA-A2+ 동종 림프구 및 IL-2에 의해 TIL을 추가로 재자극시킬 수 있다.
한 실시양태에서, TIL을 확장시키는 방법은 약 5000 mL 내지 약 25000 mL의 세포 배양 배지, 약 5000 mL 내지 약 10000 mL의 세포 배양 배지 또는 약 5800 mL 내지 약 8700 mL의 세포 배양 배지를 사용하는 것을 포함할 수 있다. 한 실시양태에서, TIL을 확장시키는 방법은 약 1000 mL 내지 약 2000 mL의 세포 배지, 약 2000 mL 내지 약 3000 mL의 세포 배양 배지, 약 3000 mL 내지 약 4000 mL의 세포 배양 배지, 약 4000 mL 내지 약 5000 mL의 세포 배양 배지, 약 5000 mL 내지 약 6000 mL의 세포 배양 배지, 약 6000 mL 내지 약 7000 mL의 세포 배양 배지, 약 7000 mL 내지 약 8000 mL의 세포 배양 배지, 약 8000 mL 내지 약 9000 mL의 세포 배양 배지, 약 9000 mL 내지 약 10000 mL의 세포 배양 배지, 약 10000 mL 내지 약 15000 mL의 세포 배양 배지, 약 15000 mL 내지 약 20000 mL의 세포 배양 배지 또는 약 20000 mL 내지 약 25000 mL의 세포 배양 배지를 사용하는 것을 포함할 수 있다. 한 실시양태에서, TIL의 수를 확장시키는 것은 1종 이하 유형의 세포 배양 배지를 사용한다. 임의의 적합한 세포 배양 배지, 예를 들어 AIM-V 세포 배지 (L-글루타민, 50 μM 스트렙토마이신 술페이트 및 10 μM 겐타미신 술페이트) 세포 배양 배지 (인비트로젠, 캘리포니아주 칼스배드)가 사용될 수 있다. 이와 관련하여, 본 발명의 방법은 유리하게는 TIL의 수를 확장시키는데 필요한 배지의 양 및 배지의 유형의 수를 감소시킨다. 한 실시양태에서, TIL의 수를 확장시키는 것은 3일마다 또는 4일마다보다 더 빈번하지 않게 세포를 공급하는 것을 포함할 수 있다. 기체 투과성 용기에서 세포의 수를 확장시키는 것은 세포를 확장시키는데 필요한 공급 빈도를 감소시킴으로써 세포의 수를 확장시키는데 필요한 절차를 단순화시킨다.
한 실시양태에서, 급속 확장은 기체 투과성 용기를 사용하여 수행된다. 이러한 실시양태는 세포 집단이 약 5 x 105개 세포/cm2에서 10 x 106 내지 30 x 106개 세포/cm2로 확장되게 한다. 한 실시양태에서, 이러한 확장은 공급 없이 일어난다. 한 실시양태에서, 이러한 확장은 배지가 기체-투과성 플라스크 내 약 10 cm의 높이에 있는 한 공급 없이도 일어난다. 한 실시양태에서 이것은 공급은 없으나 1종 이상의 시토카인의 첨가가 있다. 한 실시양태에서, 시토카인은 시토카인과 배지를 혼합할 어떠한 필요성도 없이 볼루스로 첨가될 수 있다. 이러한 용기, 장치 및 방법은 관련 기술분야에 공지되어 있고, TIL을 확장시키는데 사용되었으며, 미국 특허 출원 공개 번호 US 2014/0377739 A1, 국제 특허 출원 공개 번호 WO 2014/210036 A1, 미국 특허 출원 공개 번호 US 2013/0115617 A1, 국제 공개 번호 WO 2013/188427 A1, 미국 특허 출원 공개 번호 US 2011/0136228 A1, 미국 특허 번호 8,809,050, 국제 특허 출원 공개 번호 WO 2011/072088 A2, 미국 특허 출원 공개 번호 US 2016/0208216 A1, 미국 특허 출원 공개 번호 US 2012/0244133 A1, 국제 특허 출원 공개 번호 WO 2012/129201 A1, 미국 특허 출원 공개 번호 US 2013/0102075 A1, 미국 특허 번호 8,956,860, 국제 특허 출원 공개 번호 WO 2013/173835 A1 및 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0175966 A1 (이들의 개시내용은 본원에 참조로 포함됨)에 기재된 것을 포함한다. 이러한 방법은 또한 문헌 [Jin, et al., J. Immunotherapy 2012, 35, 283-292] (이의 개시내용은 본원에 참조로 포함됨)에 기재되어 있다.
한 실시양태에서, 기체 투과성 용기는 지-렉스 10 플라스크 (윌슨 울프 매뉴팩처링 코포레이션, 미국 미네소타주 뉴 브라이톤)이다. 한 실시양태에서, 기체 투과성 용기는 10 cm2 기체 투과성 배양 표면을 포함한다. 한 실시양태에서, 기체 투과성 용기는 40 mL 세포 배양 배지 용량을 포함한다. 한 실시양태에서, 기체 투과성 용기는 2회의 배지 교체 후에 1 내지 3억개의 TIL을 제공한다.
한 실시양태에서, 기체 투과성 용기는 지-렉스 100 플라스크 (윌슨 울프 매뉴팩처링 코포레이션, 미국 미네소타주 뉴 브라이톤)이다. 한 실시양태에서, 기체 투과성 용기는 100 cm2 기체 투과성 배양 표면을 포함한다. 한 실시양태에서, 기체 투과성 용기는 450 mL 세포 배양 배지 용량을 포함한다. 한 실시양태에서, 기체 투과성 용기는 2회의 배지 교체 후에 10 내지 30억개의 TIL을 제공한다.
한 실시양태에서, 기체 투과성 용기는 지-렉스 100M 플라스크 (윌슨 울프 매뉴팩처링 코포레이션, 미국 미네소타주 뉴 브라이톤)이다. 한 실시양태에서, 기체 투과성 용기는 100 cm2 기체 투과성 배양 표면을 포함한다. 한 실시양태에서, 기체 투과성 용기는 1000 mL 세포 배양 배지 용량을 포함한다. 한 실시양태에서, 기체 투과성 용기는 배지 교체 없이 10 내지 30억개의 TIL을 제공한다.
한 실시양태에서, 기체 투과성 용기는 지-렉스 100L 플라스크 (윌슨 울프 매뉴팩처링 코포레이션, 미국 미네소타주 뉴 브라이톤)이다. 한 실시양태에서, 기체 투과성 용기는 100 cm2 기체 투과성 배양 표면을 포함한다. 한 실시양태에서, 기체 투과성 용기는 2000 mL 세포 배양 배지 용량을 포함한다. 한 실시양태에서, 기체 투과성 용기는 배지 교체 없이 10 내지 30억개의 TIL을 제공한다.
한 실시양태에서, 기체 투과성 용기는 지-렉스 24 웰 플레이트 (윌슨 울프 매뉴팩처링 코포레이션, 미국 미네소타주 뉴 브라이톤)이다. 한 실시양태에서, 기체 투과성 용기는 웰을 갖는 플레이트를 포함하며, 여기서 각각의 웰은 2 cm2 기체 투과성 배양 표면을 포함한다. 한 실시양태에서, 기체 투과성 용기는 웰을 갖는 플레이트를 포함하며, 여기서 각각의 웰은 8 mL 세포 배양 배지 용량을 포함한다. 한 실시양태에서, 기체 투과성 용기는 2회의 배지 교체 후에 웰당 2 내지 6천만개의 세포를 제공한다.
한 실시양태에서, 기체 투과성 용기는 지-렉스 6 웰 플레이트 (윌슨 울프 매뉴팩처링 코포레이션, 미국 미네소타주 뉴 브라이톤)이다. 한 실시양태에서, 기체 투과성 용기는 웰을 갖는 플레이트를 포함하며, 여기서 각각의 웰은 10 cm2 기체 투과성 배양 표면을 포함한다. 한 실시양태에서, 기체 투과성 용기는 웰을 갖는 플레이트를 포함하며, 여기서 각각의 웰은 40 mL 세포 배양 배지 용량을 포함한다. 한 실시양태에서, 기체 투과성 용기는 2회의 배지 교체 후에 웰당 1 내지 3억개의 세포를 제공한다.
한 실시양태에서, 제1 및/또는 제2 기체 투과성 용기 내 세포 배지는 비여과된다. 비여과 세포 배지의 사용은 세포의 수를 확장시키는데 필요한 절차를 단순화시킬 수 있다. 일부 실시양태에서, 제1 및/또는 제2 기체 투과성 용기 내 세포 배지는 베타-메르캅토에탄올 (BME)이 결여되어 있다.
한 실시양태에서, 포유동물로부터 종양 조직 샘플을 수득하는 단계; 안에 세포 배지를 함유하는 제1 기체 투과성 용기에서 종양 조직 샘플을 배양하는 단계; 종양 조직 샘플로부터 TIL을 수득하는 단계; 안에 세포 배지를 함유하는 제2 기체 투과성 용기에서 TNFRSF 효능제를 사용하여 TIL의 수를 확장시키는 단계를 포함하는 방법의 지속기간은 약 14 내지 약 42일, 예를 들어 약 28일의 지속기간이다.
한 실시양태에서, 급속 확장에서 TIL 대 TNFRSF 효능제의 비 (세포 대 mol)는 약 1 대 25, 약 1 대 50, 약 1 대 100, 약 1 대 125, 약 1 대 150, 약 1 대 175, 약 1 대 200, 약 1 대 225, 약 1 대 250, 약 1 대 275, 약 1 대 300, 약 1 대 325, 약 1 대 350, 약 1 대 500, 약 1 대 1000, 또는 약 1 대 10000이다. 한 실시양태에서, 급속 확장에서 TIL 대 TNFRSF 효능제의 비는 1 대 50 내지 1 대 300이다. 한 실시양태에서, 급속 확장에서 TIL 대 TNFRSF 효능제의 비는 1 대 100 내지 1 대 200이다.
한 실시양태에서, TIL 대 TNFRSF 효능제의 비 (TIL: TNFRSF 효능제, 세포 대 mol)는 1:5, 1:10, 1:15, 1:20, 1:25, 1:30, 1:35, 1:40, 1:45, 1:50, 1:55, 1:60, 1:65, 1:70, 1:75, 1:80, 1:85, 1:90, 1:95, 1:100, 1:105, 1:110, 1:115, 1:120, 1:125, 1:130, 1:135, 1:140, 1:145, 1:150, 1:155, 1:160, 1:165, 1:170, 1:175, 1:180, 1:185, 1:190, 1:195, 1:200, 1:225, 1:250, 1:275, 1:300, 1:350, 1:400, 1:450, 1:500, 1:1000, 1:5000, 1:10000 및 1:50000으로 이루어진 군으로부터 선택된다.
한 실시양태에서, TIL은 기체-투과성 용기에서 확장된다. 기체-투과성 용기는 미국 특허 출원 공개 번호 2005/0106717 A1 (이들의 개시내용은 본원에 참조로 포함됨)에 기재된 것을 포함한, 관련 기술분야에 공지된 방법, 조성물 및 장치를 사용하여 PBMC를 사용하여 TIL을 확장시키는데 사용되었다. 한 실시양태에서, TIL은 기체-투과성 백에서 확장된다. 한 실시양태에서, TIL은 기체 투과성 백에서 TIL을 확장시키는 세포 확장 시스템, 예컨대 수리(Xuri) 세포 확장 시스템 W25 (지이 헬스케어(GE Healthcare))를 사용하여 확장된다. 한 실시양태에서, TIL은 기체 투과성 백에서 TIL을 확장시키는 세포 확장 시스템, 예컨대 수리 세포 확장 시스템 W5 (지이 헬스케어)로도 또한 공지되어 있는 웨이브(WAVE) 바이오리액터 시스템을 사용하여 확장된다. 한 실시양태에서, 세포 확장 시스템은 약 100 mL, 약 200 mL, 약 300 mL, 약 400 mL, 약 500 mL, 약 600 mL, 약 700 mL, 약 800 mL, 약 900 mL, 약 1 L, 약 2 L, 약 3 L, 약 4 L, 약 5 L, 약 6 L, 약 7 L, 약 8 L, 약 9 L, 약 10 L, 약 11 L, 약 12 L, 약 13 L, 약 14 L, 약 15 L, 약 16 L, 약 17 L, 약 18 L, 약 19 L, 약 20 L, 약 25 L, 및 약 30 L로 이루어진 군으로부터 선택된 부피를 갖는 기체 투과성 세포 백을 포함한다. 한 실시양태에서, 세포 확장 시스템은 50 내지 150 mL, 150 내지 250 mL, 250 내지 350 mL, 350 내지 450 mL, 450 내지 550 mL, 550 내지 650 mL, 650 내지 750 mL, 750 내지 850 mL, 850 내지 950 mL, 및 950 내지 1050 mL로 이루어진 군으로부터 선택된 부피 범위를 갖는 기체 투과성 세포 백을 포함한다. 한 실시양태에서, 세포 확장 시스템은 1 L 내지 2 L, 2 L 내지 3 L, 3 L 내지 4 L, 4 L 내지 5 L, 5 L 내지 6 L, 6 L 내지 7 L, 7 L 내지 8 L, 8 L 내지 9 L, 9 L 내지 10 L, 10 L 내지 11 L, 11 L 내지 12 L, 12 L 내지 13 L, 13 L 내지 14 L, 14 L 내지 15 L, 15 L 내지 16 L, 16 L 내지 17 L, 17 L 내지 18 L, 18 L 내지 19 L, 및 19 L 내지 20 L로 이루어진 군으로부터 선택된 부피 범위를 갖는 기체 투과성 세포 백을 포함한다. 한 실시양태에서, 세포 확장 시스템은 0.5 L 내지 5 L, 5 L 내지 10 L, 10 L 내지 15 L, 15 L 내지 20 L, 20 L 내지 25 L, 및 25 L 내지 30 L로 이루어진 군으로부터 선택된 부피 범위를 갖는 기체 투과성 세포 백을 포함한다. 한 실시양태에서, 세포 확장 시스템은 약 30분, 약 1시간, 약 2시간, 약 3시간, 약 4시간, 약 5시간, 약 6시간, 약 7시간, 약 8시간, 약 9시간, 약 10시간, 약 11시간, 약 12시간, 약 24시간, 약 2일, 약 3일, 약 4일, 약 5일, 약 6일, 약 7일, 약 8일, 약 9일, 약 10일, 약 11일, 약 12일, 약 13일, 약 14일, 약 15일, 약 16일, 약 17일, 약 18일, 약 19일, 약 20일, 약 21일, 약 22일, 약 23일, 약 24일, 약 25일, 약 26일, 약 27일, 및 약 28일의 요동 시간을 이용한다. 한 실시양태에서, 세포 확장 시스템은 30분 내지 1시간, 1시간 내지 12시간, 12시간 내지 1일, 1일 내지 7일, 7일 내지 14일, 14일 내지 21일, 및 21일 내지 28일의 요동 시간을 이용한다. 한 실시양태에서, 세포 확장 시스템은 약 2회 요동/분, 약 5회 요동/분, 약 10회 요동/분, 약 20회 요동/분, 약 30회 요동/분, 및 약 40회 요동/분의 요동 속도를 이용한다. 한 실시양태에서, 세포 확장 시스템은 2회 요동/분 내지 5회 요동/분, 5회 요동/분 내지 10회 요동/분, 10회 요동/분 내지 20회 요동/분, 20회 요동/분 내지 30회 요동/분, 및 30회 요동/분 내지 40회 요동/분의 요동 속도를 이용한다. 한 실시양태에서, 세포 확장 시스템은 약 2°, 약 3°, 약 4°, 약 5°, 약 6°, 약 7°, 약 8°, 약 9°, 약 10°, 약 11°, 및 약 12°의 요동 각도를 이용한다. 한 실시양태에서, 세포 확장 시스템은 2° 내지 3°, 3° 내지 4°, 4° 내지 5°, 5° 내지 6°, 6° 내지 7°, 7° 내지 8°, 8° 내지 9°, 9° 내지 10°, 10° 내지 11°, 및 11° 내지 12°의 요동 각도를 이용한다.
한 실시양태에서, TNFRSF 효능제를 사용하여 TIL을 확장시키는 방법은 TIL이 우수한 종양 반응성을 위해 선택되는 단계를 추가로 포함한다. 관련 기술분야에 공지된 임의의 선택 방법이 사용될 수 있다. 예를 들어, 미국 특허 출원 공개 번호 2016/0010058 A1 (이의 개시내용은 본원에 참조로 포함됨)에 기재된 방법이 우수한 종양 반응성을 위한 TIL의 선택에 사용될 수 있다.
한 실시양태에서, 세포 배양 배지는 OKT-3 항체를 추가로 포함한다. 바람직한 실시양태에서, 세포 배양 배지는 약 30 ng/mL의 OKT-3 항체를 포함한다. 한 실시양태에서, 세포 배양 배지는 약 0.1 ng/mL, 약 0.5 ng/mL, 약 1 ng/mL, 약 2.5 ng/mL, 약 5 ng/mL, 약 7.5 ng/mL, 약 10 ng/mL, 약 15 ng/mL, 약 20 ng/mL, 약 25 ng/mL, 약 30 ng/mL, 약 35 ng/mL, 약 40 ng/mL, 약 50 ng/mL, 약 60 ng/mL, 약 70 ng/mL, 약 80 ng/mL, 약 90 ng/mL, 약 100 ng/mL, 약 200 ng/mL, 약 500 ng/mL, 및 약 1 μg/mL의 OKT-3 항체를 포함한다. 한 실시양태에서, 세포 배양 배지는 0.1 ng/mL 내지 1 ng/mL, 1 ng/mL 내지 5 ng/mL, 5 ng/mL 내지 10 ng/mL, 10 ng/mL 내지 20 ng/mL, 20 ng/mL 내지 30 ng/mL, 30 ng/mL 내지 40 ng/mL, 40 ng/mL 내지 50 ng/mL, 및 50 ng/mL 내지 100 ng/mL의 OKT-3 항체를 포함한다. 바람직한 실시양태에서, 세포 배양 배지는 10 ng/mL 내지 60 ng/mL 의 OKT-3 항체를 포함한다.
한 실시양태에서, 세포 배양 배지는 IL-2를 추가로 포함한다. 바람직한 실시양태에서, 세포 배양 배지는 약 3000 IU/mL의 IL-2를 포함한다. 한 실시양태에서, 세포 배양 배지는 약 500 IU/mL, 약 700 IU/mL, 약 800 IU/mL, 약 1000 IU/mL, 약 1100 IU/mL, 약 1200 IU/mL, 약 1500 IU/mL, 약 2000 IU/mL, 약 2500 IU/mL, 약 3000 IU/mL, 약 3500 IU/mL, 약 4000 IU/mL, 약 4500 IU/mL, 약 5000 IU/mL, 약 5500 IU/mL, 약 6000 IU/mL, 약 6500 IU/mL, 약 7000 IU/mL, 약 7500 IU/mL, 또는 약 8000 IU/mL의 IL-2를 포함한다. 한 실시양태에서, 세포 배양 배지는 500 내지 1000 IU/mL, 800 내지 1200 IU/mL, 1000 내지 2000 IU/mL, 2000 내지 3000 IU/mL, 3000 내지 4000 IU/mL, 4000 내지 5000 IU/mL, 5000 내지 6000 IU/mL, 6000 내지 7000 IU/mL, 7000 내지 8000 IU/mL, 또는 8000 IU/mL의 IL-2를 포함한다. 한 실시양태에서, 세포 배양 배지는 10 내지 6000 IU/mL의 IL-2를 포함한다. 한 실시양태에서, 세포 배양 배지는 500 내지 2000 IU/mL의 IL-2를 포함한다. 한 실시양태에서, 세포 배양 배지는 800 내지 1100 IU/mL의 IL-2를 포함한다.
한 실시양태에서, 세포 배양 배지는, 예를 들어 국제 특허 출원 공개 번호 WO 2015/189356 A1 및 WO 2015/189356 A1 (이들 각각의 개시내용은 본원에 참조로 포함됨)에 기재된 바와 같은 IL-15를 추가로 포함한다. 한 실시양태에서, 세포 배양 배지는 약 0.1 ng/mL, 약 0.5 ng/mL, 약 1 ng/mL, 약 2.5 ng/mL, 약 5 ng/mL, 약 7.5 ng/mL, 약 10 ng/mL, 약 15 ng/mL, 약 20 ng/mL, 약 25 ng/mL, 약 30 ng/mL, 약 35 ng/mL, 약 40 ng/mL, 약 50 ng/mL, 약 60 ng/mL, 약 70 ng/mL, 약 80 ng/mL, 약 90 ng/mL, 약 100 ng/mL, 약 200 ng/mL, 약 500 ng/mL, 또는 약 1 μg/mL의 IL-15를 포함한다. 한 실시양태에서, 세포 배양 배지는 0.1 ng/mL 내지 100 ng/mL, 2 ng/mL 내지 50 ng/mL 또는 5 ng/mL 내지 25 ng/mL의 IL-15를 포함한다. 한 실시양태에서, 세포 배양 배지는 10 ng/mL 내지 20 ng/mL, 20 ng/mL 내지 30 ng/mL, 30 ng/mL 내지 40 ng/mL, 40 ng/mL 내지 50 ng/mL, 50 ng/mL 내지 60 ng/mL, 60 ng/mL 내지 70 ng/mL, 70 ng/mL 내지 80 ng/mL, 80 ng/mL 내지 90 ng/mL, 또는 90 ng/mL 내지 100 ng/mL의 IL-15를 포함한다.
한 실시양태에서, 세포 배양 배지는, 예를 들어 국제 특허 출원 공개 번호 WO 2015/189356 A1 및 WO 2015/189356 A1 (이들 각각의 개시내용은 본원에 참조로 포함됨)에 기재된 바와 같은 IL-21을 추가로 포함한다. 한 실시양태에서, 세포 배양 배지는 약 0.1 ng/mL, 약 0.5 ng/mL, 약 1 ng/mL, 약 2.5 ng/mL, 약 5 ng/mL, 약 7.5 ng/mL, 약 10 ng/mL, 약 15 ng/mL, 약 20 ng/mL, 약 25 ng/mL, 약 30 ng/mL, 약 35 ng/mL, 약 40 ng/mL, 약 50 ng/mL, 약 60 ng/mL, 약 70 ng/mL, 약 80 ng/mL, 약 90 ng/mL, 약 100 ng/mL, 약 200 ng/mL, 약 500 ng/mL, 또는 약 1 μg/mL의 IL-21을 포함한다. 한 실시양태에서, 세포 배양 배지는 0.1 ng/mL 내지 100 ng/mL, 2 ng/mL 내지 50 ng/mL 또는 5 ng/mL 내지 25 ng/mL의 IL-21을 포함한다. 한 실시양태에서, 세포 배양 배지 10 ng/mL 내지 20 ng/mL, 20 ng/mL 내지 30 ng/mL, 30 ng/mL 내지 40 ng/mL, 40 ng/mL 내지 50 ng/mL, 50 ng/mL 내지 60 ng/mL, 60 ng/mL 내지 70 ng/mL, 70 ng/mL 내지 80 ng/mL, 80 ng/mL 내지 90 ng/mL, 또는 90 ng/mL 내지 100 ng/mL의 IL-21을 포함한다.
한 실시양태에서, 세포 배양 배지는 IL-4 및/또는 IL-7을 추가로 포함한다.
한 실시양태에서, 본 발명의 TNFRSF 효능제는 T 세포를 확장시키는데 사용될 수 있다. TIL의 확장에 대해 기재된 본 발명의 상기 실시양태 중 임의의 것은 또한 T 세포의 확장에 적용될 수 있다. 한 실시양태에서, 본 발명의 TNFRSF 효능제는 CD8+ T 세포를 확장시키는데 사용될 수 있다. 한 실시양태에서, 본 발명의 TNFRSF 효능제는 CD4+ T 세포를 확장시키는데 사용될 수 있다. 한 실시양태에서, 본 발명의 TNFRSF 효능제는 키메라 항원 수용체 (CAR-T)로 형질도입된 T 세포를 확장시키는데 사용될 수 있다. 한 실시양태에서, 본 발명의 TNFRSF 효능제는 변형된 T 세포 수용체 (TCR)를 포함하는 T 세포를 확장시키는데 사용될 수 있다. CAR-T 세포는 관련 기술분야에, 예를 들어 미국 특허 번호 7,070,995; 7,446,190; 8,399,645; 8,916,381; 및 9,328,156 (이들의 개시내용은 본원에 참조로 포함됨)에 기재된 바와 같이, CD19를 포함한 임의의 적합한 항원에 대해 표적화될 수 있다. 변형된 TCR 세포는 관련 기술분야에, 예를 들어 미국 특허 번호 8,367,804 및 7,569,664 (이들의 개시내용은 본원에 참조로 포함됨)에 기재된 바와 같이, NY-ESO-1, TRP-1, TRP-2, 티로시나제 암 항원, MAGE-A3, SSX-2 및 VEGFR2 또는 그의 항원 부분을 포함한 임의의 적합한 항원에 대해 표적화될 수 있다.
또 다른 실시양태에서, 과정 2A로 공지된 예시적인 TIL 제조/확장 과정은 도 13에 개략적으로 예시되어 있다. 특정 측면에서, 본 방법은 대상체/환자에 대한 투여시 복제 주기가 증가될 수 있는 TIL을 생산하고 이에 따라 더 오래된 TIL (즉, 대상체/환자에 대한 투여 전 더 많은 회차의 복제를 추가로 겪은 TIL)에 비해 추가의 치료 이익을 제공할 수 있다. 더 어린 TIL의 특색은 문헌, 예를 들어 [Donia, et al., Scandinavian Journal of Immunology, 75: 157-167 (2012); Dudley et al., Clin Cancer Res, 16:6122-6131 (2010); Huang et al., J Immunother, 28(3):258-267 (2005); Besser et al., Clin Cancer Res, 19(17):OF1-OF9 (2013); Besser et al., J Immunother 32:415-423 (2009); Robbins, et al., J Immunol 2004; 173:7125-7130; Shen et al., J Immunother, 30: 123-129 (2007); Zhou, et al., J Immunother, 28:53-62 (2005); 및 Tran, et al., J Immunother, 31:742-751 (2008)] (이들 모두는 그 전문이 본원에 참조로 포함됨)에 기재되었다.
본원에 논의된 바와 같이, 본 발명은 동결보존된 TIL을 재자극시켜 그의 대사 활성 및 이에 따른 상대 건강을 증가시킨 후 환자 내로 이식하는 것과 관련된 단계, 및 상기 대사 건강을 시험하는 방법을 포함할 수 있다. 일반적으로 본원에 약술된 바와 같이, 일반적으로 TIL을 환자 샘플로부터 취하고 그의 수를 확장시키도록 조작한 후에 환자 내로 이식한다. 일부 실시양태에서, TIL은 임의로 하기 논의된 바와 같이 유전자 조작될 수 있다.
일부 실시양태에서, TIL은 동결보존될 수 있다. 해동되었을 때, 이들을 또한 재자극시켜 그의 대사를 증가시킨 후에 환자 내로 주입할 수 있다.
일부 실시양태에서, 하기 세부사항 뿐만 아니라 실시예 및 도면에 논의된 바와 같이, 제1 확장 (사전REP로 지칭되는 과정 포함)은 통상적인 확장 방법과 비교하여 7-14일로 단축되고, 제2 확장 (REP로 지칭되는 과정 포함)은 7-14일로 단축된다.
도 14는 예시적인 2A 과정을 예시한다. 도 14에 예시되고 하기 세부사항에 추가로 설명된 바와 같이, 일부 실시양태에서, 제1 확장 (단계 B)은 11일로 단축되고, 제2 확장 (단계 D)은 11일로 단축된다. 일부 실시양태에서, 하기 세부사항 및 실시예 및 도면에 논의된 바와 같이, 제1 및 제2 확장 (단계 B 및 단계 D)의 조합은 22일로 단축된다. 인지되는 바와 같이, 도 14에 예시되고 하기에 기재된 방법은 예시적이고, 본원에 기재된 방법은 기재된 단계에 대한 변경 및 추가 뿐만 아니라 임의의 조합을 포괄한다.
일반적으로, TIL은 초기에 환자 종양 샘플로부터 수득되고 ("1차 TIL"), 이어서 본원에 기재된 바와 같이 추가의 조작을 위해 보다 큰 집단으로 확장되고, 임의로 동결보존되고, 본원에 약술된 바와 같이 재자극되고, 임의로 TIL 건강의 지표로서 표현형 및 대사 파라미터에 대해 평가된다.
환자 종양 샘플은 관련 기술분야에 공지된 방법을 사용하여, 일반적으로 외과적 절제, 바늘 생검 또는 종양과 TIL 세포의 혼합물을 함유하는 샘플을 수득하기 위한 다른 수단을 통해 수득될 수 있다. 일반적으로, 종양 샘플은 원발성 종양, 침습성 종양 또는 전이성 종양을 포함한 임의의 고형 종양으로부터의 것일 수 있다. 종양 샘플은 또한 액상 종양, 예컨대 혈액 악성종양으로부터 수득된 종양일 수 있다. 고형 종양은 유방암, 췌장암, 전립선암, 결장직장암, 폐암, 뇌암, 신장암, 위암 및 피부암을 포함하나 이에 제한되지는 않는 임의의 암 유형 (편평 세포 암종, 기저 세포 암종 및 흑색종을 포함하나 이에 제한되지는 않음)일 수 있다. 일부 실시양태에서, 유용한 TIL은 악성 흑색종 종양으로부터 수득되며, 이들이 특히 높은 수준의 TIL을 갖는 것으로 공지된 바 있다. 일부 실시양태에서, 종양은 약 1.5 cm 초과 약 4 cm 미만이다. 일부 실시양태에서, 종양은 4 cm 미만이다.
수득되었을 때, 종양 샘플은 일반적으로 예적박리를 사용하여 1 내지 약 8 mm3의 작은 조각으로 단편화되며, 약 2-3 mm3이 특히 유용하다. TIL은 효소적 종양 소화물을 사용하여 이들 단편으로부터 배양된다. 이러한 종양 소화물은 효소 배지 (예를 들어, 로스웰 파크 메모리얼 인스티튜트 (RPMI) 1640 완충제, 2 mM 글루타메이트, 10 mcg/mL 겐타미신, 30 단위/mL의 DNase 및 1.0 mg/mL의 콜라게나제)에서의 인큐베이션, 이어서 기계적 해리 (예를 들어, 조직 해리기를 사용하여)에 의해 생성될 수 있다. 종양 소화물은 종양을 효소 배지에 배치하고, 종양을 대략 1분 동안 기계적으로 해리시키고, 이어서 5% CO2 하에 37℃에서 30분 동안 인큐베이션하고, 이어서 단지 작은 조직 조각이 존재할 때까지 상기 조건 하에서 기계적 해리 및 인큐베이션의 반복된 주기를 수행하여 생성될 수 있다. 이 과정의 종료시에, 세포 현탁액이 다수의 적혈구 또는 사멸 세포를 함유하는 경우, 피콜 분지형 친수성 폴리사카라이드를 사용하는 밀도 구배 분리를 수행하여 이들 세포를 분리해낼 수 있다. 관련 기술분야에 공지된 대안적 방법, 예컨대 미국 특허 출원 공개 번호 2012/0244133 A1 (이의 개시내용은 본원에 참조로 포함됨)에 기재된 것이 사용될 수 있다. TIL을 확장시키는 방법 및 과정 또는 암을 치료하는 방법에 대한 본원에 기재된 임의의 실시양태에서 임의의 상기 방법을 사용할 수 있다.
일반적으로, 수거된 세포 현탁액은 "1차 세포 집단" 또는 "새로 수거된" 세포 집단으로 불린다.
한 실시양태에서, TIL은 초기에 환자로부터 수득된 효소적 종양 소화물 및 종양 단편으로부터 배양될 수 있다.
일부 실시양태에서, TIL은 종양 단편으로부터 수득된다. 일부 실시양태에서, 종양 단편은 예적박리로부터 수득된다. 일부 실시양태에서, 종양 단편은 약 1 mm3 내지 10 mm3이다. 일부 실시양태에서, 종양 단편은 약 1 mm3 내지 8 mm3 이다. 일부 실시양태에서, 종양 단편은 약 1 mm3이다. 일부 실시양태에서, 종양 단편은 약 2 mm3이다. 일부 실시양태에서, 종양 단편은 약 3 mm3이다. 일부 실시양태에서, 종양 단편은 약 4 mm3이다. 일부 실시양태에서, 종양 단편은 약 5 mm3이다. 일부 실시양태에서, 종양 단편은 약 6 mm3이다. 일부 실시양태에서, 종양 단편은 약 7 mm3이다. 일부 실시양태에서, 종양 단편은 약 8 mm3이다. 일부 실시양태에서, 종양 단편은 약 9 mm3이다. 일부 실시양태에서, 종양 단편은 약 10 mm3이다. 일부 실시양태에서, 종양 단편은 약 8-27 mm3이다. 일부 실시양태에서, 종양 단편은 약 10-25 mm3이다. 일부 실시양태에서, 종양 단편은 약 15-25 mm3이다. 일부 실시양태에서, 종양 단편은 약 8-20 mm3이다. 일부 실시양태에서, 종양 단편은 약 15-20 mm3이다. 일부 실시양태에서, 종양 단편은 약 8-15 mm3이다. 일부 실시양태에서, 종양 단편은 약 8-10 mm3이다.
일부 실시양태에서, 종양 단편의 수는 약 40 내지 약 50개의 종양 단편이다. 일부 실시양태에서, 종양 단편의 수는 약 40개의 종양 단편이다. 일부 실시양태에서, 종양 단편의 수는 약 50개의 종양 단편이다. 일부 실시양태에서, 종양 단편 크기는 약 8-27 mm3이고, 약 50개 미만의 종양 단편이 존재한다.
일부 실시양태에서, TIL은 종양 소화물로부터 수득된다. 일부 실시양태에서, 종양 소화물을 효소 배지, 예를 들어 이에 제한되지는 않지만 RPMI 1640, 2mM 글루타맥스, 10 mg/mL 겐타미신, 30 U/mL DNase 및 1.0 mg/mL 콜라게나제에서의 인큐베이션, 이어서 기계적 해리 (젠틀맥스(GentleMACS), 캘리포니아주 오번 소재 밀테니 바이오텍)에 의해 생성하였다. 종양을 효소 배지에 배치한 후, 종양을 대략 1분 동안 기계적으로 해리시킬 수 있다. 이어서 용액을 5% CO2 하에 37℃에서 30분 동안 인큐베이션한 다음, 대략 1분 동안 다시 기계적으로 파괴시켰다. 5% CO2 하에 37℃에서 30분 동안 인큐베이션한 후, 종양을 대략 1분 동안 3번째로 기계적으로 파괴시킬 수 있다. 일부 실시양태에서, 3번째 기계적 파괴 후에, 큰 조직 조각이 존재하는 경우, 5% CO2 하에 37℃에서 30분 추가의 인큐베이션을 수행하거나 또는 수행하지 않으면서, 1 또는 2회의 추가의 기계적 해리를 샘플에 적용할 수 있다. 일부 실시양태에서, 최종 인큐베이션의 종료 시에, 세포 현탁액이 다수의 적혈구 또는 사멸 세포를 함유하는 경우, 피콜을 사용하는 밀도 구배 분리를 수행하여 이들 세포를 제거할 수 있다.
단계 A에서의 종양 단편의 박리 또는 소화 후에, 생성된 세포를 종양 및 다른 세포에 비해 TIL의 성장을 유리하게 하는 조건 하에 IL-2를 함유하는 혈청 중에서 배양한다. 일부 실시양태에서, 종양 소화물을 2 mL 웰 내 6000 IU/mL의 IL-2를 갖는 불활성화된 인간 AB 혈청을 포함하는 배지에서 인큐베이션한다. 상기 1차 세포 집단을 소정 기간의 일수 동안, 일반적으로 3 내지 14일 동안 배양하여 벌크 TIL 집단, 일반적으로 약 1 x 108개의 벌크 TIL 세포를 생성시킨다. 일부 실시양태에서, 이러한 1차 세포 집단을 7 내지 14일의 기간 동안 배양하여, 벌크 TIL 집단, 일반적으로 약 1 x 108개의 벌크 TIL 세포를 생성시킨다. 일부 실시양태에서, 이러한 1차 세포 집단을 10 내지 14일의 기간 동안 배양하여, 벌크 TIL 집단, 일반적으로 약 1 x 108개의 벌크 TIL 세포를 생성시킨다. 일부 실시양태에서, 이러한 1차 세포 집단을 약 11일의 기간 동안 배양하여, 벌크 TIL 집단, 일반적으로 약 1 x 108개의 벌크 TIL 세포를 생성시킨다. 일부 실시양태에서, 이러한 1차 세포 집단을 약 11일의 기간 동안 배양하여, 벌크 TIL 집단, 일반적으로 약 200x106개의 벌크 TIL 집단을 생성시킨다.
바람직한 실시양태에서, TIL의 확장은 하기 및 본원에 기재된 바와 같은 초기 벌크 TIL 확장 단계 (사전-REP로서 지칭되는 과정을 포함할 수 있는, 도 14에 도시된 바와 같은 단계 B), 이어서 하기 단계 D 하 및 본원에 기재된 바와 같은 제2 확장 단계 (급속 확장 프로토콜 (REP) 단계로 지칭되는 과정을 포함하는 단계 D), 이어서 임의적인 동결보존, 및 이어서 하기 및 본원에 기재된 바와 같은 제2 단계 D (재자극 REP 단계로 지칭되는 과정을 포함함)를 사용하여 수행될 수 있다. 이러한 과정으로부터 수득된 TIL은 본원에 기재된 바와 같은 표현형 특징 및 대사 파라미터에 대해 임의로 특징화될 수 있다.
24-웰 플레이트에서, 예를 들어 코스타 24-웰 세포 배양 클러스터, 편평 바닥 (코닝 인코포레이티드, 뉴욕주 코닝)을 사용하여 TIL 배양을 개시하는 실시양태에서, 각각의 웰에 IL-2 (6000 IU/mL; 키론 코포레이션, 캘리포니아주 에머리빌)를 갖는 2mL의 완전 배지 (CM) 중 1 x 106개의 종양 소화 세포 또는 1개의 종양 단편을 시딩할 수 있다. 일부 실시양태에서, 종양 단편은 약 1 mm3 내지 10 mm3이다.
일부 실시양태에서, 단계 B에 대한 CM은 10% 인간 AB 혈청, 25mM HEPES 및 10 mg/mL 겐타미신으로 보충된 글루타맥스를 갖는 RPMI 1640으로 이루어진다. 40 mL 용량 및 10 cm2 기체-투과성 규소 바닥을 갖는 기체-투과성 플라스크 (예를 들어, 지-렉스10; 윌슨 울프 매뉴팩처링, 미네소타주 뉴 브라이톤)에서 배양을 개시하는 실시양태에서 (도 1), 각각의 플라스크에 IL-2를 갖는 10-40 mL의 CM 중 10-40 x 106개의 생존 종양 소화 세포 또는 5-30개의 종양 단편을 로딩할 수 있다. 지-렉스10 및 24-웰 플레이트 둘 다를 5% CO2 하에 37℃에서 가습 인큐베이터 내에서 인큐베이션할 수 있고, 배양 개시 5일 후에, 배지의 절반을 제거하고 신선한 CM 및 IL-2로 대체할 수 있고, 제5일 후 배지의 절반을 2-3일마다 교체할 수 있다.
한 실시양태에서, 세포 배양 배지는 IL-2를 추가로 포함한다. 바람직한 실시양태에서, 세포 배양 배지는 약 3000 IU/mL의 IL-2를 포함한다. 한 실시양태에서, 세포 배양 배지는 약 1000 IU/mL, 약 1500 IU/mL, 약 2000 IU/mL, 약 2500 IU/mL, 약 3000 IU/mL, 약 3500 IU/mL, 약 4000 IU/mL, 약 4500 IU/mL, 약 5000 IU/mL, 약 5500 IU/mL, 약 6000 IU/mL, 약 6500 IU/mL, 약 7000 IU/mL, 약 7500 IU/mL, 또는 약 8000 IU/mL의 IL-2를 포함한다. 한 실시양태에서, 세포 배양 배지는 1000 내지 2000 IU/mL, 2000 내지 3000 IU/mL, 3000 내지 4000 IU/mL, 4000 내지 5000 IU/mL, 5000 내지 6000 IU/mL, 6000 내지 7000 IU/mL, 7000 내지 8000 IU/mL, 또는 8000 IU/mL의 IL-2를 포함한다.
일부 실시양태에서, 실시예 및 도면에 논의된 바와 같이, 제1 확장 과정 (사전-REP로 지칭되는 과정 포함; 단계 B)은 3-14일로 단축된다. 일부 실시양태에서, 실시예에 논의되고 도 4 및 5에 제시된 바와 같이, 단계 B의 제1 확장은 7-14일로 단축된다. 일부 실시양태에서, 실시예에 논의되고 도 4 및 5에 제시된 바와 같이, 단계 B의 제1 확장은 10-14일로 단축된다. 일부 실시양태에서, 실시예에 논의되고 도 4 및 5에 제시된 바와 같이, 단계 B의 제1 확장은 11일로 단축된다.
일부 실시양태에서, IL-2, IL-7, IL-15 및 IL-21 뿐만 아니라 그의 조합은 본원에 기재된 바와 같은 단계 B 과정 동안 포함될 수 있다.
일부 실시양태에서, 단계 B는 폐쇄 시스템 생물반응기에서 수행된다. 일부 실시양태에서, 폐쇄 시스템이 본원에 기재된 바와 같은 TIL 확장을 위해 사용된다. 일부 실시양태에서, 단일 생물반응기가 사용된다. 일부 실시양태에서, 사용된 단일 생물반응기는, 예를 들어 지렉스-10 또는 지렉스-100이다.
일부 실시양태에서, 단계 B로부터의 벌크 TIL 집단은 관련 기술분야에 공지되고 본원에 기재된 방법을 사용하여 즉시 동결보존될 수 있다. 대안적으로, 벌크 TIL 집단은 제2 확장 (REP)에 적용된 다음, 하기 논의된 바와 같이 동결보존될 수 있다.
일부 실시양태에서, 단계 B TIL은 저장되지 않고, 단계 B TIL은 바로 단계 D로 진행된다. 일부 실시양태에서, 본원에 추가로 기재된 바와 같이 이행은 폐쇄 시스템에서 발생한다.
일부 실시양태에서, TIL 세포 집단은 수거 및 초기 벌크 프로세싱 후에 (즉, 단계 A 및 단계 B 후에) 수가 확장된다. 이는 제2 확장으로 본원에서 지칭되며, 이는 일반적으로 관련 기술분야에서 급속 확장 과정 (REP)으로 지칭되는 확장 과정을 포함할 수 있다. 제2 확장은 일반적으로 기체-투과성 용기에서 피더 세포, 시토카인 공급원 및 항-CD3 항체를 포함한 다수의 성분을 포함하는 배양 배지를 사용하여 달성된다. 일부 실시양태에서, 제2 확장은 제2 확장에서 수득된 TIL의 수를 증가시키기 위해 규모-확대를 포함할 수 있다.
한 실시양태에서, REP 및/또는 제2 확장은 본 개시내용의 방법을 사용하여 기체 투과성 용기에서 수행될 수 있다. 예를 들어, TIL은 인터류킨-2 (IL-2) 또는 인터류킨-15 (IL-15)의 존재 하에 비-특이적 T 세포 수용체 자극을 사용하여 급속하게 확장될 수 있다. 비-특이적 T 세포 수용체 자극은, 예를 들어 약 30 ng/ml의 마우스 모노클로날 항-CD3 항체인 OKT3 (뉴저지주 라리탄 소재 오르토-맥네일 또는 캘리포니아주 오번 소재 밀테니 바이오테크로부터 상업적으로 입수가능함)을 포함할 수 있다. 임의로 T 세포 성장 인자, 예컨대 300 IU/mL IL-2 또는 IL-15의 존재 하에, 임의로 벡터로부터 발현될 수 있는 암의 1종 이상의 항원 (그의 항원 부분, 예컨대 에피토프(들) 포함), 예컨대 인간 백혈구 항원 A2 (HLA-A2) 결합 펩티드, 예를 들어 0.3 μM MART-1 :26-35 (27 L) 또는 gpl 00:209-217 (210M)에 의한 시험관내 TIL의 추가 자극에 의해 TIL을 급속히 확장시킬 수 있다. 다른 적합한 항원은, 예를 들어 NY-ESO-1, TRP-1, TRP-2, 티로시나제 암 항원, MAGE-A3, SSX-2 및 VEGFR2, 또는 그의 항원 부분을 포함할 수 있다. 또한, HLA-A2-발현 항원-제시 세포 상으로 펄스된 암의 동일한 항원(들)에 의한 재자극에 의해 TIL을 급속히 확장시킬 수 있다. 대안적으로, 예를 들어 조사된 자가 림프구 또는 조사된 HLA-A2+ 동종 림프구 및 IL-2에 의해 TIL을 추가로 재자극시킬 수 있다.
한 실시양태에서, 세포 배양 배지는 IL-2를 추가로 포함한다. 바람직한 실시양태에서, 세포 배양 배지는 약 3000 IU/mL의 IL-2를 포함한다. 한 실시양태에서, 세포 배양 배지는 약 1000 IU/mL, 약 1500 IU/mL, 약 2000 IU/mL, 약 2500 IU/mL, 약 3000 IU/mL, 약 3500 IU/mL, 약 4000 IU/mL, 약 4500 IU/mL, 약 5000 IU/mL, 약 5500 IU/mL, 약 6000 IU/mL, 약 6500 IU/mL, 약 7000 IU/mL, 약 7500 IU/mL, 또는 약 8000 IU/mL의 IL-2를 포함한다. 한 실시양태에서, 세포 배양 배지는 1000 내지 2000 IU/mL, 2000 내지 3000 IU/mL, 3000 내지 4000 IU/mL, 4000 내지 5000 IU/mL, 5000 내지 6000 IU/mL, 6000 내지 7000 IU/mL, 7000 내지 8000 IU/mL, 또는 8000 IU/mL의 IL-2를 포함한다.
한 실시양태에서, 세포 배양 배지는 OKT3 항체를 포함한다. 바람직한 실시양태에서, 세포 배양 배지는 약 30 ng/mL의 OKT3 항체를 포함한다. 한 실시양태에서, 세포 배양 배지는 약 0.1 ng/mL, 약 0.5 ng/mL, 약 1 ng/mL, 약 2.5 ng/mL, 약 5 ng/mL, 약 7.5 ng/mL, 약 10 ng/mL, 약 15 ng/mL, 약 20 ng/mL, 약 25 ng/mL, 약 30 ng/mL, 약 35 ng/mL, 약 40 ng/mL, 약 50 ng/mL, 약 60 ng/mL, 약 70 ng/mL, 약 80 ng/mL, 약 90 ng/mL, 약 100 ng/mL, 약 200 ng/mL, 약 500 ng/mL, 및 약 1 μg/mL의 OKT3 항체를 포함한다. 한 실시양태에서, 세포 배양 배지는 0.1 ng/mL 내지 1 ng/mL, 1 ng/mL 내지 5 ng/mL, 5 ng/mL 내지 10 ng/mL, 10 ng/mL 내지 20 ng/mL, 20 ng/mL 내지 30 ng/mL, 30 ng/mL 내지 40 ng/mL, 40 ng/mL 내지 50 ng/mL, 및 50 ng/mL 내지 100 ng/mL의 OKT3 항체를 포함한다.
일부 실시양태에서, IL-2, IL-7, IL-15 및 IL-21 뿐만 아니라 그의 조합은 본원에 기재된 바와 같은 단계 D 과정에서의 제2 확장 동안 포함될 수 있다.
일부 실시양태에서, 제2 확장은 IL-2, OKT-3 및 항원-제시 피더 세포를 포함하는 보충된 세포 배양 배지에서 수행될 수 있다.
일부 실시양태에서 항원-제시 피더 세포 (APC)는 PBMC이다. 한 실시양태에서, 급속 확장 및/또는 제2 확장에서의 TIL 대 PBMC 및/또는 항원-제시 세포의 비는 약 1 대 25, 약 1 대 50, 약 1 대 100, 약 1 대 125, 약 1 대 150, 약 1 대 175, 약 1 대 200, 약 1 대 225, 약 1 대 250, 약 1 대 275, 약 1 대 300, 약 1 대 325, 약 1 대 350, 약 1 대 375, 약 1 대 400, 또는 약 1 대 500이다. 한 실시양태에서, 급속 확장 및/또는 제2 확장에서의 TIL 대 PBMC의 비는 1 대 50 내지 1 대 300이다. 한 실시양태에서, 급속 확장 및/또는 제2 확장에서의 TIL 대 PBMC의 비는 1 대 100 내지 1 대 200이다.
한 실시양태에서, REP 및/또는 제2 확장은 150 ml 배지 중 벌크 TIL이 100- 또는 200-배 과량의 불활성화 피더 세포, 30 mg/mL OKT3 항-CD3 항체 및 3000 IU/mL IL-2와 혼합되어 있는 플라스크에서 수행된다. 배지 교체는 세포가 대안적 성장 챔버로 옮겨질 때까지 수행된다 (일반적으로 신선한 배지로 호흡을 통해 2/3 배지 교체). 대안적 성장 챔버는 하기에 보다 상세히 논의된 바와 같은 지렉스 플라스크 및 기체 투과성 용기를 포함한다.
일부 실시양태에서, 실시예 및 도면에 논의된 바와 같이, 제2 확장 (또한 REP 과정으로도 지칭됨)은 7-14일로 단축된다. 일부 실시양태에서, 제2 확장은 11일로 단축된다.
한 실시양태에서, REP 및/또는 제2 확장은 이전에 기재된 바와 같은 T-175 플라스크 및 기체 투과성 백 (Tran, et al., J. Immunother. 2008, 31, 742-51; Dudley, et al., J. Immunother. 2003, 26, 332-42) 또는 기체 투과성 배양용기 (지-렉스 플라스크)를 사용하여 수행될 수 있다. T-175 플라스크에서의 TIL 급속 확장 및/또는 제2 확장을 위해, 150 mL의 배지 중에 현탁된 1 x 106개 TIL을 각각의 T-175 플라스크에 첨가할 수 있다. TIL을 mL당 3000 IU의 IL-2 및 ml당 30 ng의 항-CD3 항체로 보충된 CM 및 AIM-V 배지의 1 대 1 혼합물에서 배양할 수 있다. T-175 플라스크를 5% CO2 하에 37℃에서 인큐베이션할 수 있다. 배지의 절반을 제5일에 mL당 3000 IU의 IL-2를 갖는 50/50 배지를 사용하여 교체할 수 있다. 제7일에, 2개의 T-175 플라스크로부터의 세포를 3 L 백에서 합할 수 있고, 5% 인간 AB 혈청 및 mL당 3000 IU의 IL-2를 갖는 300 mL의 AIM V를 300 ml의 TIL 현탁액에 첨가하였다. 각각의 백 내 세포의 수를 매일 또는 2일마다 계수하였고, 신선한 배지를 첨가하여 세포 수가 0.5 내지 2.0 x 106개 세포/mL를 유지하도록 하였다.
한 실시양태에서, 100 cm2 기체-투과성 규소 바닥을 갖는 500 mL 용량 기체 투과성 플라스크 (미국 미네소타주 뉴 브라이톤 소재 윌슨 울프 매뉴팩처링 코포레이션으로부터 상업적으로 입수가능한 지-렉스 100)에서의 REP 및/또는 제2 확장을 수행할 수 있다. 5 x 106 또는 10 x 106개 TIL을, 5% 인간 AB 혈청, mL당 3000 IU의 IL-2 및 ml당 30 ng의 항-CD3 (OKT3)으로 보충된 400 mL의 50/50 배지에서 PBMC와 함께 배양할 수 있다. 지-렉스 100 플라스크를 5% CO2 하에 37℃에서 인큐베이션할 수 있다. 제5일에, 250 mL의 상청액을 분리해내고, 원심분리 병에 넣고, 10분 동안 1500 rpm (491 x g)으로 원심분리할 수 있다. TIL 펠릿을 5% 인간 AB 혈청, mL당 3000 IU의 IL-2를 갖는 150 mL의 신선한 배지에 재현탁시키고, 다시 원래 지-렉스 100 플라스크에 첨가할 수 있다. TIL이 지-렉스 100 플라스크에서 연속적으로 확장될 때, 제7일에 각각의 지-렉스 100에서의 TIL을 각각의 플라스크에 존재하는 300 mL의 배지 중에 현탁시킬 수 있고, 세포 현탁액을 3개의 100 mL 분취물로 분할할 수 있고, 이를 사용하여 3개의 지-렉스 100 플라스크에 시딩할 수 있다. 이어서, 5% 인간 AB 혈청 및 mL당 3000 IU의 IL-2를 갖는 150 mL의 AIM-V를 각각의 플라스크에 첨가할 수 있다. 지-렉스 100 플라스크를 5% CO2 하에 37℃에서 인큐베이션할 수 있고, 4일 후에 mL당 3000 IU의 IL-2를 갖는 150 mL의 AIM-V를 각각의 지-렉스 100 플라스크에 첨가할 수 있다. 배양 제14일에 세포를 수거할 수 있다.
한 실시양태에서, REP 및/또는 제2 확장은 150 ml 배지 중 벌크 TIL이 100- 또는 200배 과량의 불활성화 피더 세포, 30 mg/mL OKT3 항-CD3 항체 및 3000 IU/mL IL-2와 혼합되어 있는 플라스크에서 수행된다. 배지 교체는 세포가 대안적 성장 챔버로 옮겨질 때까지 수행된다 (일반적으로 신선한 배지로 호흡을 통해 2/3 배지 교체). 대안적 성장 챔버는 하기에 보다 상세히 논의된 바와 같은 지렉스 플라스크 및 기체 투과성 용기를 포함한다.
한 실시양태에서, REP 및/또는 제2 확장이 수행되며, 이는 TIL이 우수한 종양 반응성을 위해 선택되는 단계를 추가로 포함한다. 관련 기술분야에 공지된 임의의 선택 방법이 사용될 수 있다. 예를 들어, 미국 특허 출원 공개 번호 2016/0010058 A1 (이의 개시내용은 본원에 참조로 포함됨)에 기재된 방법이 우수한 종양 반응성을 위한 TIL의 선택에 사용될 수 있다.
TIL의 REP 및/또는 제2 확장은 이전에 기재된 바와 같은 T-175 플라스크 및 기체 투과성 백 (Tran KQ, Zhou J, Durflinger KH, et al., 2008, J Immunother., 31:742-751, 및 Dudley ME, Wunderlich JR, Shelton TE, et al. 2003, J Immunother., 26:332-342) 또는 기체 투과성 지-렉스 플라스크를 사용하여 수행될 수 있다. 일부 실시양태에서, REP 및/또는 제2 확장은 플라스크를 사용하여 수행된다. 일부 실시양태에서, REP는 기체-투과성 지-렉스 플라스크를 사용하여 수행된다. T-175 플라스크에서의 TIL REP 및/또는 제2 확장을 위해, 약 1 x 106개 TIL을 약 150 mL의 배지 중에 현탁시키고, 이를 각각의 T-175 플라스크에 첨가한다. TIL을 "피더" 세포로서 조사된 (50 Gy) 동종 PBMC와 함께 1 대 100의 비로 배양하고, 세포를 3000 IU/mL의 IL-2 및 30 ng/mL의 항-CD3으로 보충된, CM 및 AIM-V 배지의 1 내지 1 혼합물 (50/50 배지)에서 배양하였다. T-175 플라스크를 5% CO2 하에 37℃에서 인큐베이션한다. 일부 실시양태에서, 배지의 절반을 제5일에 3000 IU/mL의 IL-2를 갖는 50/50 배지를 사용하여 교체한다. 일부 실시양태에서, 제7일에, 2개의 T-175 플라스크로부터의 세포를 3L 백에서 합하고, 5% 인간 AB 혈청 및 3000 IU/mL의 IL-2를 갖는 300 mL의 AIM-V를 300 mL의 TIL 현탁액에 첨가한다. 각각의 백 내 세포의 수를 매일 또는 2일마다 계수할 수 있고, 신선한 배지를 첨가하여 세포 수가 약 0.5 내지 약 2.0 x 106개 세포/mL를 유지하도록 할 수 있다.
100 cm2 기체-투과성 규소 바닥을 갖는 500 mL 용량 플라스크 (지-렉스100, 윌슨 울프)에서의 TIL REP 및/또는 제2 확장을 위해 (도 1), 약 5 x 106 또는 10 x 106개 TIL을 3000 IU/mL의 IL-2 및 30 ng/mL의 항-CD3으로 보충된 400 mL의 50/50 배지에서, 조사된 동종 PBMC와 함께 1 대 100의 비로 배양한다. 지-렉스100 플라스크를 5% CO2 하에 37℃에서 인큐베이션한다. 일부 실시양태에서, 제5일에, 250mL의 상청액을 분리해내고, 원심분리 병에 넣고, 10분 동안 1500 rpm (491g)으로 원심분리한다. 이어서 TIL 펠릿을 3000 IU/mL의 IL-2를 갖는 150 mL의 신선한 50/50 배지에 재현탁시키고, 다시 원래 지-렉스100 플라스크에 첨가할 수 있다. TIL이 지-렉스 100 플라스크에서 연속적으로 확장되는 실시양태에서, 제7일에 각각의 지-렉스100에서의 TIL을 각각의 플라스크에 존재하는 300mL의 배지 중에 현탁시키고, 세포 현탁액을 3개의 100mL 분취물로 분할하고, 이를 사용하여 3개의 지-렉스100 플라스크에 시딩한다. 이어서, 5% 인간 AB 혈청 및 3000 IU/mL의 IL-2를 갖는 150 mL의 AIM-V를 각각의 플라스크에 첨가한다. 지-렉스100 플라스크를 5% CO2 하에 37℃에서 인큐베이션하고, 4일 후에 3000 IU/mL의 IL-2를 갖는 150 mL의 AIM-V를 각각의 지-렉스100 플라스크에 첨가한다. 배양 제14일에 세포를 수거한다.
한 실시양태에서, 본원에 기재된 제2 확장 절차 (REP를 포함하는 단계 D)는 REP TIL 확장 동안 및/또는 제2 확장 동안 과량의 피더 세포를 요구한다. 많은 실시양태에서, 피더 세포는 건강한 혈액 공여자로부터의 표준 전혈 단위로부터 수득된 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC)이다. PBMC는 표준 방법, 예컨대 피콜-파크 구배 분리를 사용하여 수득된다.
일반적으로, 동종 PBMC는 또한 조사 또는 열 처리를 통해 불활성화되고, 실시예, 특히 조사된 동종 PBMC의 복제 비적격을 평가하기 위한 예시적인 프로토콜을 제공하는 실시예 14에 기재된 바와 같이, REP 절차에 사용된다.
일부 실시양태에서, PBMC는 제14일에서의 총 생존 세포 수가 REP의 제0일 및/또는 제2 확장의 제0일 (즉, 제2 확장의 시작 일)에서 배양에 투입된 초기 생존 세포 수보다 더 적은 경우에 복제 비적격으로 간주되고 본원에 기재된 TIL 확장 절차에 사용하기 위한 것으로 허용된다.
일부 실시양태에서, PBMC는 제7일 및 제14일에서 OKT3 및 IL-2의 존재 하에 배양된 총 생존 세포 수가 REP의 제0일 및/또는 제2 확장의 제0일 (즉, 제2 확장의 시작 일)에서 배양에 투입된 초기 생존 세포 수로부터 증가되지 않은 경우에 복제 비적격으로 간주되고 본원에 기재된 TIL 확장 절차에 사용하기 위한 것으로 허용된다. 일부 실시양태에서, PBMC는 30ng/ml OKT3 항체 및 3000 IU/ml IL-2의 존재 하에 배양된다.
일부 실시양태에서, PBMC는 제7일 및 제14일에서 OKT3 및 IL-2의 존재 하에 배양된 총 생존 세포 수가 REP의 제0일 및/또는 제2 확장의 제0일 (즉, 제2 확장의 시작 일)에서 배양에 투입된 초기 생존 세포 수로부터 증가되지 않은 경우에 복제 비적격으로 간주되고 본원에 기재된 TIL 확장 절차에 사용하기 위한 것으로 허용된다. 일부 실시양태에서, PBMC는 5-60 ng/ml OKT3 항체 및 1000-6000 IU/mL IL-2의 존재 하에 배양된다. 일부 실시양태에서, PBMC는 10-50 ng/ml OKT3 항체 및 2000-5000 IU/ml IL-2의 존재 하에 배양된다. 일부 실시양태에서, PBMC는 20-40 ng/ml OKT3 항체 및 2000-4000 IU/ml IL-2의 존재 하에 배양된다. 일부 실시양태에서, PBMC는 25-35 ng/ml OKT3 항체 및 2500-3500 IU/ml IL-2의 존재 하에 배양된다.
한 실시양태에서, 인공 항원 제시 세포는 PBMC에 대한 대체물로서 또는 그와의 조합으로 REP 단계에 사용된다.
본원에 기재된 확장 방법은 일반적으로 관련 기술분야에 공지된 바와 같이 고용량의 시토카인, 특히 IL-2를 갖는 배양 배지를 사용한다.
대안적으로, TIL의 급속 확장 및/또는 제2 확장을 위해 시토카인의 조합을 사용하는 것이 추가적으로 가능하며, 국제 공개 번호 WO 2015/189356 및 국제 공개 번호 WO 2015/189357 (그 전문이 본원에 명백히 참조로 포함됨)에 일반적으로 약술된 바와 같이 IL-2, IL-15 및 IL-21 중 2종 이상의 조합을 사용한다. 따라서, 가능한 조합은 IL-2와 IL-15, IL-2와 IL-21, IL-15와 IL-21, 및 IL-2, IL-15와 IL-21을 포함하며, 마지막 경우 많은 실시양태에서 특정한 용도가 발견된다. 시토카인의 조합의 사용은 구체적으로 림프구 및 특히 본원에 기재된 바와 같은 T-세포의 생성을 유리하게 한다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 확장 방법 (REP 포함)에 사용된 배양 배지는 또한 항-CD3 항체를 포함한다. IL-2와 조합된 항-CD3 항체는 TIL 집단에서 T 세포 활성화 및 세포 분열을 유도한다. 이러한 효과는 전장 항체 뿐만 아니라 Fab 및 F(ab')2 단편에서도 관찰될 수 있으며, 전자가 일반적으로 바람직하다; 예를 들어 문헌 [Tsoukas et al., J. Immunol. 1985, 135, 1719] (그 전문이 본원에 참조로 포함됨)을 참조한다.
관련 기술분야의 통상의 기술자에 의해 인지되는 바와 같이, 뮤린, 인간, 영장류, 래트 및 개 항체를 포함하나 이에 제한되지는 않는 다양한 포유동물로부터의 항-인간 CD3 폴리클로날 및 모노클로날 항체를 비롯한, 본 발명에서 용도가 발견되는 다수의 적합한 항-인간 CD3 항체가 존재한다. 특정한 실시양태에서, OKT3 항-CD3 항체가 사용된다 (뉴저지 라리탄 소재 오르토-맥네일 또는 캘리포니아주 오번 소재 밀테니 바이오테크로부터 상업적으로 입수가능함).
제2 확장 단계 후에, 세포가 수거될 수 있다. 일부 실시양태에서 TIL은 1, 2, 3, 4개 또는 그 초과의 제2 확장 단계 후에 수거된다.
TIL은, 예를 들어 원심분리에 의한 것을 포함한, 임의의 적절한 멸균 방식으로 수거될 수 있다. TIL 수거 방법은 관련 기술분야에 널리 공지되어 있고, 임의의 이러한 공지된 방법이 본 발명의 방법에 사용될 수 있다. 일부 실시양태에서, TIL은 자동화 시스템을 사용하여 수거된다. 일부 실시양태에서, TIL은 반-자동화 시스템을 사용하여 수거된다. 일부 실시양태에서, 제2 확장으로부터의 TIL은 반-자동화 기계를 사용하여 수거된다. 일부 실시양태에서, LOVO 시스템이 사용된다 (예를 들어, 벤치마크 일레트로닉스(Benchmark Electronics)로부터 상업적으로 입수가능함). 일부 실시양태에서, 수거 단계는 TIL을 세척하는 것, TIL을 제제화하는 것 및/또는 TIL을 분취하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 세포는 수거 후 또는 수거의 일부로 임의로 동결된다.
단계 A에서 E가 완료된 후, 세포는 환자에 대한 투여에 사용하기 위해 용기로 옮겨진다.
한 실시양태에서, 본 개시내용의 APC를 사용하여 확장된 TIL은 제약 조성물로서 환자에게 투여된다. 한 실시양태에서, 제약 조성물은 멸균 완충제 중 TIL의 현탁액이다. 본 개시내용의 PBMC를 사용하여 확장된 TIL은 관련 기술분야에 공지된 바와 같은 임의의 적합한 경로에 의해 투여될 수 있다. 일부 실시양태에서, T-세포는 단일 동맥내 또는 정맥내 주입으로서 투여되며, 이는 바람직하게는 대략 30 내지 60분 지속된다. 다른 적합한 투여 경로는 복강내, 척수강내 및 림프내를 포함한다.
인지되는 바와 같이, 상기 기재된 단계 A 내지 F 중 임의의 단계는 임의의 횟수로 반복될 수 있고, 추가로 상기에 기재된 것과 상이한 순서로 수행될 수 있다.
일부 실시양태에서, 확장 단계 중 1개 이상은 최종 제제화 단계 F 전에 반복될 수 있다. 이러한 추가의 확장 단계는 상기 기재된 제1 및/또는 제2 확장 단계의 요소를 포함할 수 있다 (예를 들어, 기재된 성분을 세포 배양 배지에 포함함). 추가의 확장 단계는 추가의 확장 단계 전 및/또는 그 동안 세포 배양 배지 내로 보충된 세포 배양 배지 내의 추가의 성분을 포함한 추가의 요소를 추가로 포함할 수 있다.
추가 실시양태에서, 도 14 및 상기 단락에 기재된 확장 단계 중 임의의 단계에 선행하여 또는 후속하여, 확장 단계 동안 생산된 세포가 제조/확장 과정의 나머지 단계에 필요할 때까지 저장되도록 관련 기술분야에 공지된 방법을 사용하여 보존되는 동결보존 단계가 존재할 수 있다.
한 실시양태에서, 본 발명은 임의의 상기 방법에 따라 TIL을 확장시키기 위한 키트를 포함한다.
TIL에 대한 제약 조성물, 투여량 및 투여 요법
한 실시양태에서, 본 개시내용의 과정 및 방법을 사용하여 확장된 TIL은 제약 조성물로서 환자에게 투여된다. 한 실시양태에서, 제약 조성물은 멸균 완충제 중 TIL의 현탁액이다. 본 개시내용의 과정 및 방법을 사용하여 확장된 TIL은 관련 기술분야에 공지된 바와 같은 임의의 적합한 경로에 의해 투여될 수 있다. 바람직하게는, TIL은 단일 동맥내 또는 정맥내 주입으로서 투여되며, 이는 바람직하게는 대략 30 내지 60분 지속된다. 다른 적합한 투여 경로는 복강내, 척수강내 및 림프내 투여를 포함한다.
TIL의 임의의 적합한 용량이 투여될 수 있다. 바람직하게는, 특히 암이 흑색종인 경우, 약 2.3x1010 내지 약 13.7x1010개의 TIL, 평균 약 7.8x1010개의 TIL이 투여된다. 한 실시양태에서, 약 1.2x1010 내지 약 4.3x1010개의 TIL이 투여된다.
일부 실시양태에서, 본 발명의 제약 조성물에 제공된 TIL의 수는 약 1x106, 2x106, 3x106, 4x106, 5x106, 6x106, 7x106, 8x106, 9x106, 1x107, 2x107, 3x107, 4x107, 5x107, 6x107, 7x107, 8x107, 9x107, 1x108, 2x108, 3x108, 4x108, 5x108, 6x108, 7x108, 8x108, 9x108, 1x109, 2x109, 3x109, 4x109, 5x109, 6x109, 7x109, 8x109, 9x109, 1x1010, 2x1010, 3x1010, 4x1010, 5x1010, 6x1010, 7x1010, 8x1010, 9x1010, 1x1011, 2x1011, 3x1011, 4x1011, 5x1011, 6x1011, 7x1011, 8x1011, 9x1011, 1x1012, 2x1012, 3x1012, 4x1012, 5x1012, 6x1012, 7x1012, 8x1012, 9x1012, 1x1013, 2x1013, 3x1013, 4x1013, 5x1013, 6x1013, 7x1013, 8x1013, 및 9x1013개이다. 한 실시양태에서, 본 발명의 제약 조성물에 제공된 TIL의 수는 1x106 내지 5x106, 5x106 내지 1x107, 1x107 내지 5x107, 5x107 내지 1x108, 1x108 내지 5x108, 5x108 내지 1x109, 1x109 내지 5x109, 5x109 내지 1x1010, 1x1010 내지 5x1010, 5x1010 내지 1x1011, 5x1011 내지 1x1012, 1x1012 내지 5x1012, 및 5x1012 내지 1x1013개의 범위이다.
일부 실시양태에서, 본 발명의 제약 조성물에 제공된 TIL의 농도는, 예를 들어 제약 조성물의 100%, 90%, 80%, 70%, 60%, 50%, 40%, 30%, 20%, 19%, 18%, 17%, 16%, 15%, 14%, 13%, 12%, 11%, 10%, 9%, 8%, 7%, 6%, 5%, 4%, 3%, 2%, 1%, 0.5%, 0.4%, 0.3%, 0.2%, 0.1%, 0.09%, 0.08%, 0.07%, 0.06%, 0.05%, 0.04%, 0.03%, 0.02%, 0.01%, 0.009%, 0.008%, 0.007%, 0.006%, 0.005%, 0.004%, 0.003%, 0.002%, 0.001%, 0.0009%, 0.0008%, 0.0007%, 0.0006%, 0.0005%, 0.0004%, 0.0003%, 0.0002% 또는 0.0001% w/w, w/v 또는 v/v 미만이다.
일부 실시양태에서, 본 발명의 제약 조성물에 제공된 TIL의 농도는 제약 조성물의 90%, 80%, 70%, 60%, 50%, 40%, 30%, 20%, 19.75%, 19.50%, 19.25% 19%, 18.75%, 18.50%, 18.25% 18%, 17.75%, 17.50%, 17.25% 17%, 16.75%, 16.50%, 16.25% 16%, 15.75%, 15.50%, 15.25% 15%, 14.75%, 14.50%, 14.25% 14%, 13.75%, 13.50%, 13.25% 13%, 12.75%, 12.50%, 12.25% 12%, 11.75%, 11.50%, 11.25% 11%, 10.75%, 10.50%, 10.25% 10%, 9.75%, 9.50%, 9.25% 9%, 8.75%, 8.50%, 8.25% 8%, 7.75%, 7.50%, 7.25% 7%, 6.75%, 6.50%, 6.25% 6%, 5.75%, 5.50%, 5.25% 5%, 4.75%, 4.50%, 4.25%, 4%, 3.75%, 3.50%, 3.25%, 3%, 2.75%, 2.50%, 2.25%, 2%, 1.75%, 1.50%, 125%, 1%, 0.5%, 0.4%, 0.3%, 0.2%, 0.1%, 0.09%, 0.08%, 0.07%, 0.06%, 0.05%, 0.04%, 0.03%, 0.02%, 0.01%, 0.009%, 0.008%, 0.007%, 0.006%, 0.005%, 0.004%, 0.003%, 0.002%, 0.001%, 0.0009%, 0.0008%, 0.0007%, 0.0006%, 0.0005%, 0.0004%, 0.0003%, 0.0002% 또는 0.0001% w/w, w/v 또는 v/v 초과이다.
일부 실시양태에서, 본 발명의 제약 조성물에 제공된 TIL의 농도는 제약 조성물의 약 0.0001% 내지 약 50%, 약 0.001% 내지 약 40%, 약 0.01% 내지 약 30%, 약 0.02% 내지 약 29%, 약 0.03% 내지 약 28%, 약 0.04% 내지 약 27%, 약 0.05% 내지 약 26%, 약 0.06% 내지 약 25%, 약 0.07% 내지 약 24%, 약 0.08% 내지 약 23%, 약 0.09% 내지 약 22%, 약 0.1% 내지 약 21%, 약 0.2% 내지 약 20%, 약 0.3% 내지 약 19%, 약 0.4% 내지 약 18%, 약 0.5% 내지 약 17%, 약 0.6% 내지 약 16%, 약 0.7% 내지 약 15%, 약 0.8% 내지 약 14%, 약 0.9% 내지 약 12% 또는 약 1% 내지 약 10% w/w, w/v 또는 v/v의 범위이다.
일부 실시양태에서, 본 발명의 제약 조성물에 제공된 TIL의 농도는 제약 조성물의 약 0.001% 내지 약 10%, 약 0.01% 내지 약 5%, 약 0.02% 내지 약 4.5%, 약 0.03% 내지 약 4%, 약 0.04% 내지 약 3.5%, 약 0.05% 내지 약 3%, 약 0.06% 내지 약 2.5%, 약 0.07% 내지 약 2%, 약 0.08% 내지 약 1.5%, 약 0.09% 내지 약 1%, 약 0.1% 내지 약 0.9% w/w, w/v 또는 v/v의 범위이다.
일부 실시양태에서, 본 발명의 제약 조성물에 제공된 TIL의 양은 10 g, 9.5 g, 9.0 g, 8.5 g, 8.0 g, 7.5 g, 7.0 g, 6.5 g, 6.0 g, 5.5 g, 5.0 g, 4.5 g, 4.0 g, 3.5 g, 3.0 g, 2.5 g, 2.0 g, 1.5 g, 1.0 g, 0.95 g, 0.9 g, 0.85 g, 0.8 g, 0.75 g, 0.7 g, 0.65 g, 0.6 g, 0.55 g, 0.5 g, 0.45 g, 0.4 g, 0.35 g, 0.3 g, 0.25 g, 0.2 g, 0.15 g, 0.1 g, 0.09 g, 0.08 g, 0.07 g, 0.06 g, 0.05 g, 0.04 g, 0.03 g, 0.02 g, 0.01 g, 0.009 g, 0.008 g, 0.007 g, 0.006 g, 0.005 g, 0.004 g, 0.003 g, 0.002 g, 0.001 g, 0.0009 g, 0.0008 g, 0.0007 g, 0.0006 g, 0.0005 g, 0.0004 g, 0.0003 g, 0.0002 g, 또는 0.0001 g 이하이다.
일부 실시양태에서, 본 발명의 제약 조성물에 제공된 TIL의 양은 0.0001 g, 0.0002 g, 0.0003 g, 0.0004 g, 0.0005 g, 0.0006 g, 0.0007 g, 0.0008 g, 0.0009 g, 0.001 g, 0.0015 g, 0.002 g, 0.0025 g, 0.003 g, 0.0035 g, 0.004 g, 0.0045 g, 0.005 g, 0.0055 g, 0.006 g, 0.0065 g, 0.007 g, 0.0075 g, 0.008 g, 0.0085 g, 0.009 g, 0.0095 g, 0.01 g, 0.015 g, 0.02 g, 0.025 g, 0.03 g, 0.035 g, 0.04 g, 0.045 g, 0.05 g, 0.055 g, 0.06 g, 0.065 g, 0.07 g, 0.075 g, 0.08 g, 0.085 g, 0.09 g, 0.095 g, 0.1 g, 0.15 g, 0.2 g, 0.25 g, 0.3 g, 0.35 g, 0.4 g, 0.45 g, 0.5 g, 0.55 g, 0.6 g, 0.65 g, 0.7 g, 0.75 g, 0.8 g, 0.85 g, 0.9 g, 0.95 g, 1 g, 1.5 g, 2 g, 2.5, 3 g, 3.5, 4 g, 4.5 g, 5 g, 5.5 g, 6 g, 6.5 g, 7 g, 7.5 g, 8 g, 8.5 g, 9 g, 9.5 g, 또는 10 g 초과이다.
본 발명의 제약 조성물에 제공된 TIL은 폭넓은 투여량 범위에 걸쳐 효과적이다. 정확한 투여량은 투여 경로, 화합물이 투여되는 형태, 치료될 대상체의 성별 및 연령, 치료될 대상체의 체중, 및 담당 의사의 선호도 및 경험에 좌우될 것이다. 또한 적절한 경우 TIL의 임상적으로-확립된 투여량이 사용될 수 있다. 본원의 방법을 사용하여 투여된 제약 조성물의 양, 예컨대 TIL의 투여량은 치료될 인간 또는 포유동물, 장애 또는 상태의 중증도, 투여의 경로, 활성 제약 성분의 배치 및 처방 의사의 판단에 의존할 것이다.
일부 실시양태에서, TIL은 단일 용량으로 투여될 수 있다. 이러한 투여는 주사, 예를 들어 정맥내 주사에 의할 수 있다. 일부 실시양태에서, TIL은 다중 용량으로 투여될 수 있다. 투여는 1년에 1회, 2회, 3회, 4회, 5회, 6회, 또는 6회 초과일 수 있다. 투여는 1개월 1회, 2주마다 1회, 1주 1회, 또는 격일 1회일 수 있다. TIL의 투여는 필요한 만큼 길게 계속될 수 있다.
일부 실시양태에서, TIL의 유효 투여량은 약 1x106, 2x106, 3x106, 4x106, 5x106, 6x106, 7x106, 8x106, 9x106, 1x107, 2x107, 3x107, 4x107, 5x107, 6x107, 7x107, 8x107, 9x107, 1x108, 2x108, 3x108, 4x108, 5x108, 6x108, 7x108, 8x108, 9x108, 1x109, 2x109, 3x109, 4x109, 5x109, 6x109, 7x109, 8x109, 9x109, 1x1010, 2x1010, 3x1010, 4x1010, 5x1010, 6x1010, 7x1010, 8x1010, 9x1010, 1x1011, 2x1011, 3x1011, 4x1011, 5x1011, 6x1011, 7x1011, 8x1011, 9x1011, 1x1012, 2x1012, 3x1012, 4x1012, 5x1012, 6x1012, 7x1012, 8x1012, 9x1012, 1x1013, 2x1013, 3x1013, 4x1013, 5x1013, 6x1013, 7x1013, 8x1013, 및 9x1013개이다. 일부 실시양태에서, TIL의 유효 투여량은 1x106 내지 5x106, 5x106 내지 1x107, 1x107 내지 5x107, 5x107 내지 1x108, 1x108 내지 5x108, 5x108 내지 1x109, 1x109 내지 5x109, 5x109 내지 1x1010, 1x1010 내지 5x1010, 5x1010 내지 1x1011, 5x1011 내지 1x1012, 1x1012 내지 5x1012, 및 5x1012 내지 1x1013개의 범위이다.
일부 실시양태에서, TIL의 유효 투여량은 약 0.01 mg/kg 내지 약 4.3 mg/kg, 약 0.15 mg/kg 내지 약 3.6 mg/kg, 약 0.3 mg/kg 내지 약 3.2 mg/kg, 약 0.35 mg/kg 내지 약 2.85 mg/kg, 약 0.15 mg/kg 내지 약 2.85 mg/kg, 약 0.3 mg 내지 약 2.15 mg/kg, 약 0.45 mg/kg 내지 약 1.7 mg/kg, 약 0.15 mg/kg 내지 약 1.3 mg/kg, 약 0.3 mg/kg 내지 약 1.15 mg/kg, 약 0.45 mg/kg 내지 약 1 mg/kg, 약 0.55 mg/kg 내지 약 0.85 mg/kg, 약 0.65 mg/kg 내지 약 0.8 mg/kg, 약 0.7 mg/kg 내지 약 0.75 mg/kg, 약 0.7 mg/kg 내지 약 2.15 mg/kg, 약 0.85 mg/kg 내지 약 2 mg/kg, 약 1 mg/kg 내지 약 1.85 mg/kg, 약 1.15 mg/kg 내지 약 1.7 mg/kg, 약 1.3 mg/kg mg 내지 약 1.6 mg/kg, 약 1.35 mg/kg 내지 약 1.5 mg/kg, 약 2.15 mg/kg 내지 약 3.6 mg/kg, 약 2.3 mg/kg 내지 약 3.4 mg/kg, 약 2.4 mg/kg 내지 약 3.3 mg/kg, 약 2.6 mg/kg 내지 약 3.15 mg/kg, 약 2.7 mg/kg 내지 약 3 mg/kg, 약 2.8 mg/kg 내지 약 3 mg/kg, 또는 약 2.85 mg/kg 내지 약 2.95 mg/kg의 범위이다.
일부 실시양태에서, TIL의 유효 투여량은 약 1 mg 내지 약 500 mg, 약 10 mg 내지 약 300 mg, 약 20 mg 내지 약 250 mg, 약 25 mg 내지 약 200 mg, 약 1 mg 내지 약 50 mg, 약 5 mg 내지 약 45 mg, 약 10 mg 내지 약 40 mg, 약 15 mg 내지 약 35 mg, 약 20 mg 내지 약 30 mg, 약 23 mg 내지 약 28 mg, 약 50 mg 내지 약 150 mg, 약 60 mg 내지 약 140 mg, 약 70 mg 내지 약 130 mg, 약 80 mg 내지 약 120 mg, 약 90 mg 내지 약 110 mg, 또는 약 95 mg 내지 약 105 mg, 약 98 mg 내지 약 102 mg, 약 150 mg 내지 약 250 mg, 약 160 mg 내지 약 240 mg, 약 170 mg 내지 약 230 mg, 약 180 mg 내지 약 220 mg, 약 190 mg 내지 약 210 mg, 약 195 mg 내지 약 205 mg, 또는 약 198 내지 약 207 mg의 범위이다.
TIL의 유효량은 단일 또는 다중 용량으로, 비내 및 경피 경로, 동맥내 주사에 의해, 정맥내로, 복강내로, 비경구로, 근육내로, 피하로, 국소적으로, 종양 내로의 이식 또는 직접 주사에 의해 또는 흡입에 의해를 비롯한, 유사한 유용성을 갖는 작용제의 허용되는 투여 방식 중 임의의 방식에 의해 투여될 수 있다.
TNFRSF 효능제에 대한 제약 조성물, 투여량 및 투여 요법
한 실시양태에서, 본 발명은 본원에 기재된 질환 및 상태의 치료에 사용하기 위한 제약 조성물을 제공한다. 바람직한 실시양태에서, 본 발명은 과다증식성 질환의 치료에 사용하기 위한 하기 기재된 것을 포함한 제약 조성물을 제공한다. 바람직한 실시양태에서, 본 발명은 암의 치료에 사용하기 위한 하기 기재된 것을 포함한 제약 조성물을 제공한다.
일부 실시양태에서, TNFRSF 효능제 항체 제제는 트리스-히드로클로라이드, 염화나트륨, 만니톨, 펜테트산, 폴리소르베이트 80, 수산화나트륨 및 염산으로부터 선택된 1종 이상의 부형제를 포함한다.
한 실시양태에서, TNFRSF 효능제는 약 5 mg, 약 8 mg, 약 10 mg, 약 20 mg, 약 25 mg, 약 50 mg, 약 75 mg, 100 mg, 약 200 mg, 약 300 mg, 약 400 mg, 약 500 mg, 약 600 mg, 약 700 mg, 약 800 mg, 약 900 mg, 약 1000 mg, 약 1100 mg, 약 1200 mg, 약 1300 mg, 약 1400 mg, 약 1500 mg, 약 1600 mg, 약 1700 mg, 약 1800 mg, 약 1900 mg 및 약 2000 mg으로 이루어진 군으로부터 선택된 용량을 주입함으로써 대상체에게 투여된다. 한 실시양태에서, TNFRSF 효능제는 매주 투여된다. 한 실시양태에서, TNFRSF 효능제는 2주마다 투여된다. 한 실시양태에서, TNFRSF 효능제는 3주마다 투여된다. 한 실시양태에서, TNFRSF 효능제는 매월 투여된다. 한 실시양태에서, TNFRSF 효능제는 12-주 기간에 걸쳐 4회 용량에 대해 3주마다 제공되는 8 mg의 용량으로 정맥내로 투여된다. 한 실시양태에서, TNFRSF 효능제는 더 낮은 초기 용량으로 투여되며, 이는 매월 투여되는 후속 간격에서 투여될 때 상승된다. 예를 들어, 제1 주입은 300 mg의 TNFRSF 효능제를 전달할 수 있고, 후속 매주 용량은 8주 동안 2,000 mg의 TNFRSF 효능제를 전달할 수 있고, 이어서 매월 2,000 mg 용량의 TNFRSF 효능제를 전달할 수 있다.
투여되는 TNFRSF 효능제의 양은 치료될 인간 또는 포유동물, 장애 또는 상태의 중증도, 투여율, 화합물의 배치 및 처방 의사의 판단에 따라 좌우될 것이다. 그러나, 각각의 유효 투여량은 단일 또는 분할 용량으로 1일에 kg 체중당 약 0.001 내지 약 100 mg, 예컨대 약 1 내지 약 35 mg/kg/일 범위이다. 70 kg 인간의 경우에, 이것은 약 0.05 내지 7 g/일, 예컨대 약 0.05 내지 약 2.5 g/일의 양이 될 것이다. 일부 경우에, 상기 언급된 범위의 하한치 미만의 투여량 수준이 충분할 수 있으나, 다른 경우에는 훨씬 더 많은 용량이, 예를 들어 이러한 보다 더 많은 용량을 개별 작은 용량으로 나누어 하루에 걸쳐 투여함으로써 임의의 유해한 부작용 없이 사용될 수 있다. TNFRSF 효능제(들)의 투여량은 mg/kg 체질량 또는 mg/m2 체표면적의 단위로 제공될 수 있다. 한 실시양태에서, TNFRSF 효능제 및 제2 TNFRSF 효능제는 약 20:1, 약 19:1, 약 18:1, 약 17:1, 약 16:1, 약 15:1, 약 14:1, 약 13:1, 약 12:1, 약 11:1, 약 10:1, 약 9:1, 약 8:1, 약 7:1, 약 6:1, 약 5:1, 약 4:1, 약 3:1, 약 2:1, 약 1:1, 약 1:2, 약 1:3, 약 1:4, 약 1:5, 약 1:6, 약 1:7, 약 1:8, 약 1:9, 약 1:10, 약 1:11, 약 1:12, 약 1:13, 약 1:14, 약 1:15, 약 1:16, 약 1:17, 약 1:18, 약 1:19, 및 약 1:20으로 이루어진 군으로부터 선택된 비로 mg/kg 또는 mg/m2으로 전달된다.
일부 실시양태에서, TIL 및 TNFRSF 효능제의 조합물은 단일 용량으로 투여된다. 이러한 투여는 TNFRSF 효능제를 도입하기 위해 주사, 예를 들어 정맥내 주사에 의할 수 있다.
일부 실시양태에서, TIL 및 TNFRSF 효능제의 조합물은 다중 용량으로 투여된다. 바람직한 실시양태에서, TIL 및 TNFRSF 효능제의 조합물은 다중 용량으로 투여된다. TNFRSF 효능제의 투여는 1일에 1회, 2회, 3회, 4회, 5회, 6회, 또는 6회 초과일 수 있다. TIL 및 TNFRSF 효능제의 투여는 1개월 1회, 2주마다 1회, 1주 1회, 또는 격일 1회일 수 있다.
선택된 실시양태에서, TNFRSF 효능제는 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 14, 28일, 2개월, 3개월, 6개월, 12개월 또는 24개월 초과 동안 투여된다. 일부 경우에, 연속 투여는 필요한 만큼 길게 달성되고 유지된다.
일부 실시양태에서, 본원에 개시된 TNFRSF 효능제의 유효 투여량은 약 1 mg 내지 약 500 mg, 약 10 mg 내지 약 300 mg, 약 20 mg 내지 약 250 mg, 약 25 mg 내지 약 200 mg, 약 10 mg 내지 약 200 mg, 약 20 mg 내지 약 150 mg, 약 30 mg 내지 약 120 mg, 약 10 mg 내지 약 90 mg, 약 20 mg 내지 약 80 mg, 약 30 mg 내지 약 70 mg, 약 40 mg 내지 약 60 mg, 약 45 mg 내지 약 55 mg, 약 48 mg 내지 약 52 mg, 약 50 mg 내지 약 150 mg, 약 60 mg 내지 약 140 mg, 약 70 mg 내지 약 130 mg, 약 80 mg 내지 약 120 mg, 약 90 mg 내지 약 110 mg, 약 95 mg 내지 약 105 mg, 약 150 mg 내지 약 250 mg, 약 160 mg 내지 약 240 mg, 약 170 mg 내지 약 230 mg, 약 180 mg 내지 약 220 mg, 약 190 mg 내지 약 210 mg, 약 195 mg 내지 약 205 mg, 또는 약 198 내지 약 202 mg의 범위이다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 TNFRSF 효능제의 유효 투여량은 약 25 mg, 약 50 mg, 약 75 mg, 약 100 mg, 약 125 mg, 약 150 mg, 약 175 mg, 약 200 mg, 약 225 mg 또는 약 250 mg이다.
일부 실시양태에서, 본원에 개시된 TNFRSF 효능제의 유효 투여량은 약 0.01 mg/kg 내지 약 4.3 mg/kg, 약 0.15 mg/kg 내지 약 3.6 mg/kg, 약 0.3 mg/kg 내지 약 3.2 mg/kg, 약 0.35 mg/kg 내지 약 2.85 mg/kg, 약 0.15 mg/kg 내지 약 2.85 mg/kg, 약 0.3 mg 내지 약 2.15 mg/kg, 약 0.45 mg/kg 내지 약 1.7 mg/kg, 약 0.15 mg/kg 내지 약 1.3 mg/kg, 약 0.3 mg/kg 내지 약 1.15 mg/kg, 약 0.45 mg/kg 내지 약 1 mg/kg, 약 0.55 mg/kg 내지 약 0.85 mg/kg, 약 0.65 mg/kg 내지 약 0.8 mg/kg, 약 0.7 mg/kg 내지 약 0.75 mg/kg, 약 0.7 mg/kg 내지 약 2.15 mg/kg, 약 0.85 mg/kg 내지 약 2 mg/kg, 약 1 mg/kg 내지 약 1.85 mg/kg, 약 1.15 mg/kg 내지 약 1.7 mg/kg, 약 1.3 mg/kg mg 내지 약 1.6 mg/kg, 약 1.35 mg/kg 내지 약 1.5 mg/kg, 약 2.15 mg/kg 내지 약 3.6 mg/kg, 약 2.3 mg/kg 내지 약 3.4 mg/kg, 약 2.4 mg/kg 내지 약 3.3 mg/kg, 약 2.6 mg/kg 내지 약 3.15 mg/kg, 약 2.7 mg/kg 내지 약 3 mg/kg, 약 2.8 mg/kg 내지 약 3 mg/kg, 또는 약 2.85 mg/kg 내지 약 2.95 mg/kg의 범위이다. 일부 실시양태에서, 본원에 개시된 TNFRSF 효능제의 유효 투여량은 약 0.35 mg/kg, 약 0.7 mg/kg, 약 1 mg/kg, 약 1.4 mg/kg, 약 1.8 mg/kg, 약 2.1 mg/kg, 약 2.5 mg/kg, 약 2.85 mg/kg, 약 3.2 mg/kg, 또는 약 3.6 mg/kg이다.
일부 실시양태에서, 본원에 개시된 TNFRSF 효능제의 유효 투여량은 약 1 mg 내지 약 500 mg, 약 10 mg 내지 약 300 mg, 약 20 mg 내지 약 250 mg, 약 25 mg 내지 약 200 mg, 약 1 mg 내지 약 50 mg, 약 5 mg 내지 약 45 mg, 약 10 mg 내지 약 40 mg, 약 15 mg 내지 약 35 mg, 약 20 mg 내지 약 30 mg, 약 23 mg 내지 약 28 mg, 약 50 mg 내지 약 150 mg, 약 60 mg 내지 약 140 mg, 약 70 mg 내지 약 130 mg, 약 80 mg 내지 약 120 mg, 약 90 mg 내지 약 110 mg, 또는 약 95 mg 내지 약 105 mg, 약 98 mg 내지 약 102 mg, 약 150 mg 내지 약 250 mg, 약 160 mg 내지 약 240 mg, 약 170 mg 내지 약 230 mg, 약 180 mg 내지 약 220 mg, 약 190 mg 내지 약 210 mg, 약 195 mg 내지 약 205 mg, 또는 약 198 내지 약 207 mg의 범위이다. 일부 실시양태에서, 본원에 개시된 TNFRSF 효능제의 유효 투여량은 약 25 mg, 약 50 mg, 약 75 mg, 약 100 mg, 약 125 mg, 약 150 mg, 약 175 mg, 약 200 mg, 약 225 mg, 또는 약 250 mg이다.
일부 실시양태에서, 본원에 개시된 TNFRSF 효능제의 유효 투여량은 약 0.01 mg/kg 내지 약 4.3 mg/kg, 약 0.15 mg/kg 내지 약 3.6 mg/kg, 약 0.3 mg/kg 내지 약 3.2 mg/kg, 약 0.35 mg/kg 내지 약 2.85 mg/kg, 약 0.01 mg/kg 내지 약 0.7 mg/kg, 약 0.07 mg/kg 내지 약 0.65 mg/kg, 약 0.15 mg/kg 내지 약 0.6 mg/kg, 약 0.2 mg/kg 내지 약 0.5 mg/kg, 약 0.3 mg/kg 내지 약 0.45 mg/kg, 약 0.3 mg/kg 내지 약 0.4 mg/kg, 약 0.7 mg/kg 내지 약 2.15 mg/kg, 약 0.85 mg/kg 내지 약 2 mg/kg, 약 1 mg/kg 내지 약 1.85 mg/kg, 약 1.15 mg/kg 내지 약 1.7 mg/kg, 약 1.3 mg/kg 내지 약 1.6 mg/kg, 약 1.35 mg/kg 내지 약 1.5 mg/kg, 약 1.4 mg/kg 내지 약 1.45 mg/kg, 약 2.15 mg/kg 내지 약 3.6 mg/kg, 약 2.3 mg/kg 내지 약 3.4 mg/kg, 약 2.4 mg/kg 내지 약 3.3 mg/kg, 약 2.6 mg/kg 내지 약 3.15 mg/kg, 약 2.7 mg/kg 내지 약 3 mg/kg, 약 2.8 mg/kg 내지 약 3 mg/kg, 또는 약 2.85 mg/kg 내지 약 2.95 mg/kg의 범위이다. 일부 실시양태에서, 본원에 개시된 TNFRSF 효능제는 약 0.4 mg/kg, 약 0.7 mg/kg, 약 1 mg/kg, 약 1.4 mg/kg, 약 1.8 mg/kg, 약 2.1 mg/kg, 약 2.5 mg/kg, 약 2.85 mg/kg, 약 3.2 mg/kg, 또는 약 3.6 mg/kg이다.
일부 실시양태에서, TNFRSF 효능제는 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 150, 또는 200 mg BID를 포함한, 10 내지 1000 mg BID의 투여량으로 투여된다.
일부 실시양태에서, 본 발명의 제약 조성물에 제공된 TNFRSF 효능제 및 그의 조합물의 농도는 독립적으로, 예를 들어 제약 조성물의 100%, 90%, 80%, 70%, 60%, 50%, 40%, 30%, 20%, 19%, 18%, 17%, 16%, 15%, 14%, 13%, 12%, 11%, 10%, 9%, 8%, 7%, 6%, 5%, 4%, 3%, 2%, 1%, 0.5%, 0.4%, 0.3%, 0.2%, 0.1%, 0.09%, 0.08%, 0.07%, 0.06%, 0.05%, 0.04%, 0.03%, 0.02%, 0.01%, 0.009%, 0.008%, 0.007%, 0.006%, 0.005%, 0.004%, 0.003%, 0.002%, 0.001%, 0.0009%, 0.0008%, 0.0007%, 0.0006%, 0.0005%, 0.0004%, 0.0003%, 0.0002% 또는 0.0001% w/w, w/v 또는 v/v 미만이다.
일부 실시양태에서, 본 발명의 제약 조성물에 제공된 TNFRSF 효능제 및 그의 조합물의 농도는 독립적으로 제약 조성물의 90%, 80%, 70%, 60%, 50%, 40%, 30%, 20%, 19.75%, 19.50%, 19.25% 19%, 18.75%, 18.50%, 18.25% 18%, 17.75%, 17.50%, 17.25% 17%, 16.75%, 16.50%, 16.25% 16%, 15.75%, 15.50%, 15.25% 15%, 14.75%, 14.50%, 14.25% 14%, 13.75%, 13.50%, 13.25% 13%, 12.75%, 12.50%, 12.25% 12%, 11.75%, 11.50%, 11.25% 11%, 10.75%, 10.50%, 10.25% 10%, 9.75%, 9.50%, 9.25% 9%, 8.75%, 8.50%, 8.25% 8%, 7.75%, 7.50%, 7.25% 7%, 6.75%, 6.50%, 6.25% 6%, 5.75%, 5.50%, 5.25% 5%, 4.75%, 4.50%, 4.25%, 4%, 3.75%, 3.50%, 3.25%, 3%, 2.75%, 2.50%, 2.25%, 2%, 1.75%, 1.50%, 125%, 1%, 0.5%, 0.4%, 0.3%, 0.2%, 0.1%, 0.09%, 0.08%, 0.07%, 0.06%, 0.05%, 0.04%, 0.03%, 0.02%, 0.01%, 0.009%, 0.008%, 0.007%, 0.006%, 0.005%, 0.004%, 0.003%, 0.002%, 0.001%, 0.0009%, 0.0008%, 0.0007%, 0.0006%, 0.0005%, 0.0004%, 0.0003%, 0.0002% 또는 0.0001% w/w, w/v, 또는 v/v 초과이다.
일부 실시양태에서, 제약 조성물 중 TNFRSF 효능제의 농도는 독립적으로 제약 조성물의 약 0.0001% 내지 약 50%, 약 0.001% 내지 약 40%, 약 0.01% 내지 약 30%, 약 0.02% 내지 약 29%, 약 0.03% 내지 약 28%, 약 0.04% 내지 약 27%, 약 0.05% 내지 약 26%, 약 0.06% 내지 약 25%, 약 0.07% 내지 약 24%, 약 0.08% 내지 약 23%, 약 0.09% 내지 약 22%, 약 0.1% 내지 약 21%, 약 0.2% 내지 약 20%, 약 0.3% 내지 약 19%, 약 0.4% 내지 약 18%, 약 0.5% 내지 약 17%, 약 0.6% 내지 약 16%, 약 0.7% 내지 약 15%, 약 0.8% 내지 약 14%, 약 0.9% 내지 약 12% 또는 약 1% 내지 약 10% w/w, w/v 또는 v/v의 범위이다.
일부 실시양태에서, 제약 조성물 중 TNFRSF 효능제의 농도는 독립적으로 제약 조성물의 약 0.001% 내지 약 10%, 약 0.01% 내지 약 5%, 약 0.02% 내지 약 4.5%, 약 0.03% 내지 약 4%, 약 0.04% 내지 약 3.5%, 약 0.05% 내지 약 3%, 약 0.06% 내지 약 2.5%, 약 0.07% 내지 약 2%, 약 0.08% 내지 약 1.5%, 약 0.09% 내지 약 1%, 약 0.1% 내지 약 0.9% w/w, w/v 또는 v/v의 범위이다.
일부 실시양태에서, 제약 조성물 중 TNFRSF 효능제의 농도는 독립적으로 10 g, 9.5 g, 9.0 g, 8.5 g, 8.0 g, 7.5 g, 7.0 g, 6.5 g, 6.0 g, 5.5 g, 5.0 g, 4.5 g, 4.0 g, 3.5 g, 3.0 g, 2.5 g, 2.0 g, 1.5 g, 1.0 g, 0.95 g, 0.9 g, 0.85 g, 0.8 g, 0.75 g, 0.7 g, 0.65 g, 0.6 g, 0.55 g, 0.5 g, 0.45 g, 0.4 g, 0.35 g, 0.3 g, 0.25 g, 0.2 g, 0.15 g, 0.1 g, 0.09 g, 0.08 g, 0.07 g, 0.06 g, 0.05 g, 0.04 g, 0.03 g, 0.02 g, 0.01 g, 0.009 g, 0.008 g, 0.007 g, 0.006 g, 0.005 g, 0.004 g, 0.003 g, 0.002 g, 0.001 g, 0.0009 g, 0.0008 g, 0.0007 g, 0.0006 g, 0.0005 g, 0.0004 g, 0.0003 g, 0.0002 g, 또는 0.0001 g 이하이다.
일부 실시양태에서, 제약 조성물 중 TNFRSF 효능제의 농도는 독립적으로 0.0001 g, 0.0002 g, 0.0003 g, 0.0004 g, 0.0005 g, 0.0006 g, 0.0007 g, 0.0008 g, 0.0009 g, 0.001 g, 0.0015 g, 0.002 g, 0.0025 g, 0.003 g, 0.0035 g, 0.004 g, 0.0045 g, 0.005 g, 0.0055 g, 0.006 g, 0.0065 g, 0.007 g, 0.0075 g, 0.008 g, 0.0085 g, 0.009 g, 0.0095 g, 0.01 g, 0.015 g, 0.02 g, 0.025 g, 0.03 g, 0.035 g, 0.04 g, 0.045 g, 0.05 g, 0.055 g, 0.06 g, 0.065 g, 0.07 g, 0.075 g, 0.08 g, 0.085 g, 0.09 g, 0.095 g, 0.1 g, 0.15 g, 0.2 g, 0.25 g, 0.3 g, 0.35 g, 0.4 g, 0.45 g, 0.5 g, 0.55 g, 0.6 g, 0.65 g, 0.7 g, 0.75 g, 0.8 g, 0.85 g, 0.9 g, 0.95 g, 1 g, 1.5 g, 2 g, 2.5, 3 g, 3.5 g, 4 g, 4.5 g, 5 g, 5.5 g, 6 g, 6.5 g, 7 g, 7.5 g, 8 g, 8.5 g, 9 g, 9.5 g, 또는 10 g 초과이다.
비제한적 제약 조성물 및 그의 제조 방법이 하기 기재되어 있다.
주사를 위한 제약 조성물
바람직한 실시양태에서, 본 발명은 TIL 및 적어도 1종의 TNFRSF 효능제의 조합물 및 그의 조합물들 및 종양내 주사 또는 정맥내 주입을 포함한 주사에 적합한 제약 부형제를 함유하는 주사용 제약 조성물을 제공한다. 상기 조성물 중 작용제의 성분 및 양은 본원에 기재된 바와 같다.
본 발명의 조성물이 주사에 의한 투여를 위해 혼입될 수 있는 형태는 참깨 오일, 옥수수 오일, 목화씨 오일 또는 땅콩 오일, 뿐만 아니라 엘릭시르, 만니톨, 덱스트로스 또는 멸균 수용액 및 유사한 제약상 비히클을 함유하는, 수성 또는 오일 현탁액, 또는 에멀젼을 포함한다.
염수 중의 수용액이 또한 주사에 통상적으로 사용된다. 에탄올, 글리세롤, 프로필렌 글리콜 및 액체 폴리에틸렌 글리콜 (및 그의 적합한 혼합물), 시클로덱스트린 유도체 및 식물성 오일이 또한 사용될 수 있다. 예를 들어, 코팅, 예컨대 레시틴을 사용함으로써, 분산액의 경우에 요구되는 입자 크기를 유지함으로써, 및 계면활성제를 사용함으로써, 적절한 유동성을 유지할 수 있다. 미생물 작용의 방지는 다양한 항박테리아제 및 항진균제, 예를 들어 파라벤, 클로로부탄올, 페놀, 소르브산, 티메로살 등에 의해 이루어질 수 있다.
멸균 주사가능한 용액은 필요한 양의 TNFRSF 효능제 및 TIL의 조합물을 상기 열거된 바와 같은 다른 다양한 성분을 함유한 적절한 배지 중에 혼입시킨 후, 필요에 따라 여과 멸균하여 제조한다. 일반적으로, 분산액은 다양한 멸균된 활성 성분을, 염기성 분산 매질 및 상기 열거된 것으로부터의 필요한 다른 성분을 함유하는 멸균 비히클 내에 혼입시켜 제조한다. 멸균 주사가능한 용액의 제조를 위한 멸균 분말의 경우에, 특정 바람직한 제조 방법은 이전에 멸균-여과된 용액으로부터 활성 성분 플러스 임의의 추가의 목적하는 성분의 분말을 생성하는 진공-건조 및 동결-건조 기술이다.
다른 제약 조성물
제약 조성물은 또한 본원에 기재된 조성물 및 설하, 협측, 직장, 골내, 안내, 비강내, 경막외 또는 척수내 투여에 적합한 1종 이상의 제약상 허용되는 부형제로부터 제조될 수 있다. 이러한 제약 조성물의 제조는 관련 기술분야에 널리 공지되어 있다. 예를 들어, 문헌 [Anderson, Philip O.; Knoben, James E.; Troutman, William G, eds., Handbook of Clinical Drug Data, Tenth Edition, McGraw-Hill, 2002; 및 Pratt and Taylor, eds., Principles of Drug Action, Third Edition, Churchill Livingston, N.Y., 1990] (이들 각각은 그 전문이 본원에 참조로 포함됨)을 참조한다.
TIL 및 TNFRSF 효능제의 조합물의 투여는 작용 부위로 화합물의 전달을 가능하게 하는 임의의 방법에 의해 수행될 수 있다. 이들 방법은 경구 경로, 십이지장내 경로, 비경구 주사 (정맥내, 동맥내, 피하, 근육내, 혈관내, 복강내 또는 주입 포함), 국소 (예를 들어, 경피 적용), 직장 투여, 카테터 또는 스텐트에 의한 국부 전달을 통한 것 또는 흡입을 통한 것을 포함한다. 화합물의 조합물이 또한 지방내로 또는 척수강내로 투여될 수 있다.
본 발명은 또한 키트를 제공한다. 키트는 적합한 포장에 TIL 및 TNFRSF 효능제를 단독으로 또는 조합으로 즉시 투여하기 위한 조합물, 및 사용에 대한 지침서, 임상 연구의 논의 및 부작용의 목록을 포함할 수 있는 서면 물질을 포함한다. 이러한 키트는 또한 정보, 예컨대 과학 참고문헌, 패키지 삽입 물질, 임상 시험 결과 및/또는 이들의 요약서 등을 포함할 수 있으며, 이는 조성물의 활성 및/또는 이점을 나타내거나 수립하고/거나 용량, 투여, 부작용, 약물 상호작용, 또는 건강 관리 제공자에게 유용한 다른 정보를 기재한다. 이러한 정보는 다양한 연구, 예를 들어 생체내 모델을 수반하는 실험 동물을 사용한 연구 및 인간 임상 실험을 바탕으로 하는 연구의 결과를 기초로 할 수 있다. 키트는 또 다른 활성 제약 성분을 추가로 포함할 수 있다. 선택된 실시양태에서, TNFRSF 효능제 및 TIL 및 또 다른 활성 제약 성분은 키트 내 개별 용기에 개별 조성물로서 제공된다. 선택된 실시양태에서, TNFRSF 효능제 및 TIL로 이루어진 군으로부터 선택된 분자는 키트 내 용기에 단일 조성물로서 제공된다. 적합한 포장 및 사용을 위한 추가의 물품 (예를 들어, 액체 제제를 위한 측정 컵, 공기에의 노출을 최소화하기 위한 호일 래핑 등)은 관련 기술분야에 공지되어 있고 키트에 포함될 수 있다. 본원에 기재된 키트는 전문의, 간호사, 약사, 처방전 취급인 등을 비롯한 건강 관리 제공자에게 제공, 판매 및/또는 홍보될 수 있다. 키트는 또한, 선택된 실시양태에서, 소비자에게 직접 판매될 수 있다.
상기 기재된 키트는 바람직하게는 본원에 기재된 질환 및 상태의 치료에 사용하기 위한 것이다. 바람직한 실시양태에서, 키트는 암의 치료에 사용하기 위한 것이다. 바람직한 실시양태에서, 키트는 고형 종양 암, 림프종 및 백혈병을 치료하는데 사용하기 위한 것이다.
바람직한 실시양태에서, 본 발명의 키트는 본원에 기재된 임의의 암을 포함한 암의 치료에 사용하기 위한 것이다.
암을 치료하는 방법
본원에 기재된 TIL 및 TNFRSF 효능제의 조성물 및 조합물은 과다증식성 장애를 치료하는 방법에 사용될 수 있다. 바람직한 실시양태에서, 이들은 암을 치료하는데 사용하기 위한 것이다. 바람직한 실시양태에서, 본 발명은 암을 치료하는 방법 및 암을 치료하기 위한 TIL 및 TNFRSF 효능제의 조성물 및 조합물을 제공하며, 여기서 암은 흑색종, 난소암, 자궁경부암, 폐암, 방광암, 유방암, 두경부암, 신세포 암종, 급성 골수성 백혈병, 결장직장암 및 육종으로 이루어진 군으로부터 선택된다. 바람직한 실시양태에서, 본 발명은 암을 치료하는 방법 및 암을 치료하기 위한 TIL 및 TNFRSF 효능제의 조성물 및 조합물을 제공하며, 여기서 암은 비소세포 폐암 (NSCLC) 또는 삼중 음성 유방암, 이중-불응성 흑색종 및 포도막 (안구) 흑색종으로 이루어진 군으로부터 선택된다. 바람직한 실시양태에서, 본 발명은 TIL 및 TNFRSF 효능제의 조합물을 사용하여 암을 치료하는 방법을 제공하며, 여기서 암은 흑색종, 난소암, 자궁경부암, 폐암, 방광암, 유방암, 두경부암 (두경부 편평 세포암), 신세포 암종, 급성 골수성 백혈병, 결장직장암, 담관암종 및 육종으로 이루어진 군으로부터 선택된다. 바람직한 실시양태에서, 본 발명은 암을 치료하기 위한 TIL 및 TNFRSF 효능제의 조성물 및 조합물을 제공하며, 여기서 암은 흑색종, 난소암, 자궁경부암, 폐암, 방광암, 유방암, 두경부암, 신세포 암종, 급성 골수성 백혈병, 결장직장암, 담관암종 및 육종으로 이루어진 군으로부터 선택된다. 바람직한 실시양태에서, 본 발명은 TIL 및 TNFRSF 효능제의 조합물을 사용하여 암을 치료하는 방법을 제공하며, 여기서 암은 비소세포 폐암 (NSCLC) 또는 삼중 음성 유방암, 이중-불응성 흑색종 및 포도막 (안구) 흑색종으로 이루어진 군으로부터 선택된다. 바람직한 실시양태에서, 본 발명은 암을 치료하기 위한 TIL 및 TNFRSF 효능제의 조성물 및 조합물을 제공하며, 여기서 암은 비소세포 폐암 (NSCLC) 또는 삼중 음성 유방암, 이중-불응성 흑색종 및 포도막 (안구) 흑색종으로 이루어진 군으로부터 선택된다. 한 실시양태에서, TIL은 본원에 기재된 방법에 의해 확장된다.
일부 실시양태에서, 본 발명은
(a) 환자로부터 종양을 절제하는 단계;
(b) 종양으로부터 제1 종양 침윤 림프구 (TIL) 집단을 수득하는 단계;
(c) 제1 세포 배양 배지에서 제1 TIL 집단의 초기 확장을 수행하여 제2 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제2 TIL 집단은 제1 TIL 집단보다 수가 적어도 5배 더 많고, 제1 세포 배양 배지는 IL-2 및 종양 괴사 인자 수용체 슈퍼패밀리 (TNFRSF) 효능제를 포함하고, 초기 확장은 21일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(d) 제2 세포 배양 배지에서 제2 TIL 집단의 급속 확장을 수행하여 제3 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제3 TIL 집단은 급속 확장의 시작으로부터 7일 후 제2 TIL 집단보다 수가 적어도 50배 더 많고, 제2 세포 배양 배지는 IL-2, OKT-3 (항-CD3 항체), 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC) 및 임의로 TNFRSF 효능제를 포함하고, 급속 확장은 14일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(e) 제3 TIL 집단을 수거하는 단계; 및
(f) 암을 갖는 환자에게 치료 유효 분량의 제3 TIL 집단을 투여하는 단계
를 포함하며, 여기서 암은 흑색종, 난소암, 자궁경부암, 폐암, 방광암, 유방암, 두경부암, 신세포 암종, 급성 골수성 백혈병, 결장직장암, 담관암종, 육종, 비소세포 폐암 (NSCLC) 또는 삼중 음성 유방암, 이중-불응성 흑색종 및 포도막 (안구) 흑색종으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인,
종양 침윤 림프구 (TIL) 집단으로 암을 치료하는 방법을 제공한다.
일부 실시양태에서, 본 발명은
(a) 환자로부터 종양을 절제하는 단계;
(b) 종양으로부터 제1 종양 침윤 림프구 (TIL) 집단을 수득하는 단계;
(c) 제1 세포 배양 배지에서 제1 TIL 집단의 초기 확장을 수행하여 제2 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제2 TIL 집단은 제1 TIL 집단보다 수가 적어도 5배 더 많고, 제1 세포 배양 배지는 IL-2를 포함하고, 초기 확장은 21일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(d) 제2 세포 배양 배지에서 제2 TIL 집단의 급속 확장을 수행하여 제3 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제3 TIL 집단은 급속 확장의 시작으로부터 7일 후 제2 TIL 집단보다 수가 적어도 50배 더 많고, 제2 세포 배양 배지는 IL-2, OKT-3 (항-CD3 항체), 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC)를 포함하고, 급속 확장은 14일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(e) 제3 TIL 집단을 수거하는 단계; 및
(f) 암을 갖는 환자에게 치료 유효 분량의 제3 TIL 집단을 투여하는 단계
를 포함하며, 여기서 암은 흑색종, 난소암, 자궁경부암, 폐암, 방광암, 유방암, 두경부암, 신세포 암종, 급성 골수성 백혈병, 결장직장암, 담관암종, 육종, 비소세포 폐암 (NSCLC) 또는 삼중 음성 유방암, 이중-불응성 흑색종 및 포도막 (안구) 흑색종으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인,
종양 침윤 림프구 (TIL) 집단으로 암을 치료하는 방법을 제공한다.
일부 실시양태에서, 본 발명은
(a) 환자로부터 종양을 절제하는 단계;
(b) 종양으로부터 제1 종양 침윤 림프구 (TIL) 집단을 수득하는 단계;
(c) 제1 세포 배양 배지에서 제1 TIL 집단의 초기 확장을 수행하여 제2 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제2 TIL 집단은 제1 TIL 집단보다 수가 적어도 5배 더 많고, 제1 세포 배양 배지는 IL-2를 포함하고, 초기 확장은 21일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(d) 제2 세포 배양 배지에서 제2 TIL 집단의 급속 확장을 수행하여 제3 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제3 TIL 집단은 급속 확장의 시작으로부터 7일 후 제2 TIL 집단보다 수가 적어도 50배 더 많고, 제2 세포 배양 배지는 IL-2, OKT-3 (항-CD3 항체), 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC)를 포함하고, 급속 확장은 14일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(e) 제3 TIL 집단을 수거하는 단계; 및
(f) 암을 갖는 환자에게 치료 유효 분량의 제3 TIL 집단을 투여하는 단계
를 포함하며, 여기서 암은 포도막 (안구) 흑색종인,
종양 침윤 림프구 (TIL) 집단으로 암을 치료하는 방법을 제공한다.
한 실시양태에서, 본 발명은 임의의 상기 방법에 따른 TIL의 집단으로 암을 치료하기 위한 키트를 포함한다.
나타낸 질환 또는 장애를 치료, 예방 및/또는 관리하는데 있어서 본원에 기재된 방법, 화합물 및 화합물의 조합물의 효능은 관련 기술분야에 공지된 다양한 모델을 사용하여 시험될 수 있다. 췌장암에 대한 치료 효능을 결정하기 위한 모델은 문헌 [Herreros-Villanueva, et al., World J. Gastroenterol. 2012, 18, 1286-1294]에 기재되어 있다. 유방암에 대한 치료 효능을 결정하기 위한 모델은, 예를 들어 문헌 [Fantozzi, Breast Cancer Res. 2006, 8, 212]에 기재되어 있다. 난소암에 대한 치료 효능을 결정하기 위한 모델은, 예를 들어 문헌 [Mullany, et al., Endocrinology 2012, 153, 1585-92; 및 Fong, et al., J. Ovarian Res. 2009, 2, 12]에 기재되어 있다. 흑색종에 대한 치료 효능을 결정하기 위한 모델은, 예를 들어 문헌 [Damsky, et al., Pigment Cell & Melanoma Res. 2010, 23, 853-859]에 기재되어 있다. 폐암에 대한 치료 효능을 결정하기 위한 모델은, 예를 들어 문헌 [Meuwissen, et al., Genes & Development, 2005, 19, 643-664]에 기재되어 있다. 폐암에 대한 치료 효능을 결정하기 위한 모델은, 예를 들어 문헌 [Kim, Clin. Exp. Otorhinolaryngol. 2009, 2, 55-60; 및 Sano, Head Neck Oncol. 2009, 1, 32]에 기재되어 있다. CT26 모델을 포함한, 결장직장암에 대한 치료 효능을 결정하기 위한 모델은, 문헌 [Castle, et al., BMC Genomics, 2013, 15, 190; Endo, et al., Cancer Gene Therapy, 2002, 9, 142-148; Roth, et al., Adv. Immunol. 1994, 57, 281-351; Fearon, et al., Cancer Res. 1988, 48, 2975-2980]에 기재되어 있다.
IL-2의 공-투여
한 실시양태에서, 본 발명은
(a) 환자로부터 종양을 절제하는 단계;
(b) 종양으로부터 제1 종양 침윤 림프구 (TIL) 집단을 수득하는 단계;
(c) 제1 세포 배양 배지에서 제1 TIL 집단의 초기 확장을 수행하여 제2 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제2 TIL 집단은 제1 TIL 집단보다 수가 적어도 5배 더 많고, 제1 세포 배양 배지는 IL-2 및 종양 괴사 인자 수용체 슈퍼패밀리 (TNFRSF) 효능제를 포함하고, 초기 확장은 21일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(d) 제2 세포 배양 배지에서 제2 TIL 집단의 급속 확장을 수행하여 제3 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제3 TIL 집단은 급속 확장의 시작으로부터 7일 후 제2 TIL 집단보다 수가 적어도 50배 더 많고, 제2 세포 배양 배지는 IL-2, OKT-3 (항-CD3 항체), 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC) 및 임의로 TNFRSF 효능제를 포함하고, 급속 확장은 14일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(e) 제3 TIL 집단을 수거하는 단계;
(f) 암을 갖는 환자에게 치료 유효 분량의 제3 TIL 집단을 투여하는 단계; 및
(g) 환자에게 IL-2 요법을 투여하는 단계
를 포함하는, 종양 침윤 림프구 (TIL) 집단으로 암을 치료하는 방법을 제공한다.
한 실시양태에서, IL-2 요법은 고용량 IL-2 요법을 포함하며, 여기서 고용량 IL-2 요법은 치료 유효 분량의 제3 TIL 집단을 투여한 다음 날에 시작하여 정맥내로 투여되는 알데스류킨 또는 그의 바이오시밀러 또는 변이체를 포함하며, 여기서 알데스류킨 또는 그의 바이오시밀러 또는 변이체는 최대 14회 용량에 대해, 내성까지 8시간마다 15분 볼루스 정맥내 주입을 사용하여 600,000 또는 720,000 IU/kg (환자 체질량)의 용량으로 투여된다. 9일의 휴약 후, 이러한 스케줄은 총 최대 28회 용량을 위해, 또 다른 14회 용량에 대해 반복될 수 있다.
한 실시양태에서, IL-2 요법은 고용량 IL-2 요법을 포함하며, 여기서 고용량 IL-2 요법은 치료 유효 분량의 제3 TIL 집단을 투여한 다음 날에 시작하여 정맥내로 투여되는 알데스류킨 또는 그의 바이오시밀러 또는 변이체를 포함하며, 여기서 알데스류킨 또는 그의 바이오시밀러 또는 변이체는 최대 14회 용량에 대해, 내성까지 8시간마다 15분 볼루스 정맥내 주입을 사용하여 0.037 mg/kg 또는 0.044 mg/kg (환자 체질량)의 용량으로 투여된다. 9일의 휴약 후, 이러한 스케줄은 총 최대 28회 용량을 위해, 또 다른 14회 용량에 대해 반복될 수 있다.
한 실시양태에서, IL-2 요법은 점강 IL-2 요법을 포함한다. 점강 IL-2 요법은 문헌 [O'Day, et al., J. Clin. Oncol. 1999, 17, 2752-61 및 Eton, et al., Cancer 2000, 88, 1703-9] (이들의 개시내용은 본원에 참조로 포함됨)에 기재되었다. 한 실시양태에서, 점강 IL-2 요법은 6시간에 걸쳐 정맥내로 투여되는 18 x 106 IU/m2, 이어서 12시간에 걸쳐 정맥내로 투여되는 18 x 106 IU/m2, 이어서 24시간에 걸쳐 정맥내로 투여되는 18 x 106 IU/m2, 이어서 72시간에 걸쳐 정맥내로 투여되는 4.5 x 106 IU/m2를 포함한다. 이러한 치료 주기는 최대 4주기 동안 28일마다 반복될 수 있다. 한 실시양태에서, 점강 IL-2 요법은 제1일에 18,000,000 IU/m2, 제2일에 9,000,000 IU/m2, 및 제3일 및 제4일에 4,500,000 IU/m2를 포함한다.
한 실시양태에서, IL-2 요법은 1, 2, 4, 6, 7, 14 또는 21일마다 0.10 mg/일 내지 50 mg/일의 용량으로의 PEG화 IL-2의 투여를 포함한다.
화학요법에 의한 비-골수절제 림프구고갈
한 실시양태에서, 본 발명은 환자가 TIL의 주입 전 및 본 개시내용에 따른 TNFRSF 효능제를 사용한 치료 전 또는 그와 병행하여 비-골수절제 화학요법으로 사전-치료되는 것인, TIL의 집단으로 암을 치료하는 방법을 포함한다. 한 실시양태에서, 비-골수절제 화학요법은 2일 동안 (TIL 주입 전 제27일 및 제26일) 시클로포스파미드 60 mg/kg/일 및 5일 동안 (TIL 주입 전 제27일 내지 제23일) 플루다라빈 25 mg/m2/일이다. 한 실시양태에서, 비-골수절제 화학요법 및 본 개시내용에 따른 TIL 주입 (제0일에) 후에, 환자는 생리적 내성까지 8시간마다 720,000 IU/kg으로 정맥내로 IL-2의 정맥내 주입을 받는다.
실험적 소견은 종양-특이적 T 림프구의 입양 전달 전 림프구고갈이 조절 T 세포 및 면역계의 경쟁 요소의 제거 ("시토카인 싱크")에 의해 치료 효능을 증진시키는데 주요 역할을 하는 것으로 나타낸다.
따라서, 본 발명의 일부 실시양태는 본 발명의 사전REP TIL의 도입 전에 환자에 대한 림프구고갈 단계 (때때로 "면역억제 컨디셔닝"으로도 또한 지칭됨)를 이용한다.
일반적으로, 림프구고갈은 플루다라빈 또는 시클로포스파미드 (활성 형태는 마포스파미드로 지칭됨) 및 그의 조합물의 투여를 사용하여 달성된다. 이러한 방법은 문헌 [Gassner, et al., Cancer Immunol. Immunother. 2011, 60, 75-85, Muranski, et al., Nat. Clin. Pract. Oncol., 2006, 3, 668-681, Dudley, et al., J. Clin. Oncol. 2008, 26, 5233-5239, 및 Dudley, et al., J. Clin. Oncol. 2005, 23, 2346-2357] (이들 모두는 그 전문이 본원에 참조로 포함됨)에 기재되어 있다.
일부 실시양태에서, 플루다라빈은 0.5 μg/mL -10 μg/mL 플루다라빈의 농도로 투여된다. 일부 실시양태에서, 플루다라빈은 1μg/mL 플루다라빈의 농도로 투여된다. 일부 실시양태에서, 플루다라빈 치료는 1일, 2일, 3일, 4일, 5일, 6일 또는 7일 또는 그 초과 동안 투여된다. 일부 실시양태에서, 플루다라빈은 10 mg/kg/일, 15 mg/kg/일, 20 mg/kg/일¸ 25 mg/kg/일, 30 mg/kg/일, 35 mg/kg/일, 40 mg/kg/일, 또는 45 mg/kg/일의 투여량으로 투여된다. 일부 실시양태에서, 플루다라빈 치료는 35 mg/kg/일로 2-7일 동안 투여된다. 일부 실시양태에서, 플루다라빈 치료는 35 mg/kg/일로 4-5일 동안 투여된다. 일부 실시양태에서, 플루다라빈 치료는 25 mg/kg/일로 4-5일 동안 투여된다.
일부 실시양태에서, 시클로포스파미드의 활성 형태인 마포스파미드는 시클로포스파미드의 투여에 의해 0.5 μg/mL -10 μg/mL의 농도로 수득된다. 일부 실시양태에서, 시클로포스파미드의 활성 형태인 마포스파미드는 시클로포스파미드의 투여에 의해 1 μg/mL의 농도로 수득된다. 일부 실시양태에서, 시클로포스파미드 치료는 1일, 2일, 3일, 4일, 5일, 6일 또는 7일 또는 그 초과 동안 투여된다. 일부 실시양태에서, 시클로포스파미드는 100 mg/m2/일, 150 mg/m2/일, 175 mg/m2/일¸ 200 mg/m2/일, 225 mg/m2/일, 250 mg/m2/일, 275 mg/m2/일, 또는 300 mg/m2/일의 투여량으로 투여된다. 일부 실시양태에서, 시클로포스파미드는 정맥내로 (즉, i.v.) 투여된다. 일부 실시양태에서, 시클로포스파미드 치료는 35 mg/kg/일로 2-7일 동안 투여된다. 일부 실시양태에서, 시클로포스파미드 치료는 250 mg/m2/일 i.v.로 4-5일 동안 투여된다. 일부 실시양태에서, 시클로포스파미드 치료는 250 mg/m2/일 i.v.로 4일 동안 투여된다.
일부 실시양태에서, 림프구고갈은 환자에게 플루다라빈 및 시클로포스파미드를 함께 투여함으로써 수행된다. 일부 실시양태에서, 4일에 걸쳐 플루다라빈은 25 mg/m2/일 i.v.로 투여되고 시클로포스파미드는 250 mg/m2/일 i.v.로 투여된다.
한 실시양태에서, 림프구고갈은 2일 동안 60 mg/m2/일의 용량으로의 시클로포스파미드의 투여에 이어서 5일 동안 25 mg/m2/일의 용량으로의 플루다라빈의 투여에 의해 수행된다.
PD-1 및 PD-L1 억제제와의 조합물
프로그램화된 사멸 1 (PD-1)은 T 세포, B 세포, 자연 킬러 (NK) T 세포, 활성화된 단핵구 및 수지상 세포에 의해 발현된 288개-아미노산 막횡단 면역체크포인트 수용체 단백질이다. CD279로도 또한 공지된 PD-1은 CD28 패밀리에 속하고, 인간에서 염색체 2 상의 Pdcd1 유전자에 의해 코딩된다. PD-1은 하나의 이뮤노글로불린 (Ig) 슈퍼패밀리 도메인, 막횡단 영역 및 면역수용체 티로신-기반 억제 모티프 (ITIM) 및 면역수용체 티로신-기반 스위치 모티프 (ITSM)를 함유하는 세포내 도메인으로 이루어진다. PD-1 및 그의 리간드 (PD-L1 및 PD-L2)는 문헌 [Keir, et al., Annu. Rev. Immunol. 2008, 26, 677-704]에 기재된 바와 같이 면역 내성에서 주요 역할을 하는 것으로 공지되어 있다. PD-1은 T 세포 면역 반응을 음성 조절하는 억제 신호를 제공한다. PD-L1 (B7-H1 또는 CD274로도 또한 공지됨) 및 PD-L2 (B7-DC 또는 CD273으로도 또한 공지됨)는 종양 세포 및 기질 세포 상에서 발현되며, 이는 PD-1을 발현하는 활성화된 T 세포에 의해 마주칠 수 있어서, T 세포의 면역억제를 유도한다. PD-L1은 인간 염색체 9 상의 Cd274 유전자에 의해 코딩되는 290개 아미노산 막횡단 단백질이다. PD-1 억제제, PD-L1 억제제 및/또는 PD-L2 억제제를 사용하여 PD-1과 그의 리간드 PD-L1 및 PD-L2 사이의 상호작용을 차단하는 것은 최근 임상 연구, 예컨대 문헌 [Topalian, et al., N. Eng. J. Med. 2012, 366, 2443-54]에 기재된 것에 의해 입증된 바와 같이, 면역 저항성을 극복할 수 있다. PD-L1은 많은 종양 세포주 상에서 발현되고, 반면 PD-L2는 대부분 수지상 세포 및 몇몇 종양 세포주 상에서 발현된다. T 세포 (활성화 후 PD-1을 유도적으로 발현함) 이외에, PD-1은 또한 B 세포, 자연 킬러 세포, 대식세포, 활성화된 단핵구 및 수지상 세포 상에서도 발현된다.
본원에 기재된 TIL 및 TNFRSF 효능제의 방법, 조성물 및 조합물은 또한 프로그램화된 사멸-1 (PD-1), 프로그램화된 사멸 리간드 1 (PD-L1) 및/또는 프로그램화된 사멸 리간드 2 (PD-L2) 결합 항체, 길항제 또는 억제제 (즉, 차단제)와 추가로 조합될 수 있다. PD-1, PD-L1 및/또는 PD-L2 억제제는 TIL 확장의 사전-REP 또는 REP 단계 동안 본원에 기재된 TNFRSF 효능제와 함께 세포 배양물 중에서 사용될 수 있다. PD-1, PD-L1 및/또는 PD-L2 억제제는 또한 종양의 외과적 절제 전에, 또는 TIL의 주입 동안 또는 후에 TNFRSF 효능제와 함께 사용될 수 있다. 예를 들어, PD-1/PD-L1 억제제를 효능작용 GITR 항체와 함께 사용하는 적합한 방법 및 PD-1/PD-L1 길항제 및 GITR 효능제를 포함하는 조성물은 국제 특허 출원 공개 번호 WO 2015/026684 A1 (이의 개시내용은 본원에 참조로 포함됨)에 기재되어 있다.
한 실시양태에서, PD-1 억제제는 관련 기술분야에 공지된 임의의 PD-1 억제제 또는 PD-1 차단제일 수 있다. 특히, 이는 하기 단락에 보다 상세히 기재된 PD-1 억제제 또는 차단제 중 하나이다. 용어 "억제제", "길항제" 및 "차단제"는 PD-1 억제제와 관련하여 본원에서 상호교환가능하게 사용된다. 의심을 피하기 위해, 본원에서 항체인 PD-1 억제제에 대한 언급은 화합물 또는 그의 항원-결합 단편, 변이체, 접합체 또는 바이오시밀러를 지칭할 수 있다. 의심을 피하기 위해, 본원에서 PD-1 억제제에 대한 언급은 또한 소분자 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 에스테르, 용매화물, 수화물, 공결정 또는 전구약물을 지칭할 수 있다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 조성물 및 방법은 PD-1 억제제를 포함한다. 일부 실시양태에서, PD-1 억제제는 소분자이다. 바람직한 실시양태에서, PD-1 억제제는 항체 (즉, 항-PD-1 항체), Fab 단편을 포함한 그의 단편, 또는 그의 단일-쇄 가변 단편 (scFv)이다. 일부 실시양태에서, PD-1 억제제는 폴리클로날 항체이다. 바람직한 실시양태에서, PD-1 억제제는 모노클로날 항체이다. 일부 실시양태에서, PD-1 억제제는 PD-1과의 결합에 대해 경쟁하고/거나 PD-1 상의 에피토프에 결합한다. 한 실시양태에서, 항체는 PD-1과의 결합에 대해 경쟁하고/거나 PD-1 상의 에피토프에 결합한다.
일부 실시양태에서, 기재된 조성물 및 방법은 약 100 pM 이하의 KD로 인간 PD-1에 결합하거나, 약 90 pM 이하의 KD로 인간 PD-1에 결합하거나, 약 80 pM 이하의 KD로 인간 PD-1에 결합하거나, 약 70 pM 이하의 KD로 인간 PD-1에 결합하거나, 약 60 pM 이하의 KD로 인간 PD-1에 결합하거나, 약 50 pM 이하의 KD로 인간 PD-1에 결합하거나, 약 40 pM 이하의 KD로 인간 PD-1에 결합하거나, 약 30 pM 이하의 KD로 인간 PD-1에 결합하거나, 약 20 pM 이하의 KD로 인간 PD-1에 결합하거나, 약 10 pM 이하의 KD로 인간 PD-1에 결합하거나, 또는 약 1 pM 이하의 KD로 인간 PD-1에 결합하는 PD-1 억제제를 포함한다.
일부 실시양태에서, 기재된 조성물 및 방법은 약 7.5 x 105 l/M·s 또는 더 빠른 kassoc로 인간 PD-1에 결합하거나, 약 7.5 x 105 l/M·s 또는 더 빠른 kassoc로 인간 PD-1에 결합하거나, 약 8 x 105 l/M·s 또는 더 빠른 kassoc로 인간 PD-1에 결합하거나, 약 8.5 x 105 l/M·s 또는 더 빠른 kassoc로 인간 PD-1에 결합하거나, 약 9 x 105 l/M·s 또는 더 빠른 kassoc로 인간 PD-1에 결합하거나, 약 9.5 x 105 l/M·s 또는 더 빠른 kassoc로 인간 PD-1에 결합하거나, 또는 약 1 x 106 l/M·s 또는 더 빠른 kassoc로 인간 PD-1에 결합하는 PD-1 억제제를 포함한다.
일부 실시양태에서, 기재된 조성물 및 방법은 약 2 x 10-5 l/s 또는 더 느린 kdissoc로 인간 PD-1에 결합하거나, 약 2.1 x 10-5 l/s 또는 더 느린 kdissoc로 인간 PD-1에 결합하거나, 약 2.2 x 10-5 l/s 또는 더 느린 kdissoc로 인간 PD-1에 결합하거나, 약 2.3 x 10-5 l/s 또는 더 느린 kdissoc로 인간 PD-1에 결합하거나, 약 2.4 x 10-5 l/s 또는 더 느린 kdissoc로 인간 PD-1에 결합하거나, 약 2.5 x 10-5 l/s 또는 더 느린 kdissoc로 인간 PD-1에 결합하거나, 약 2.6 x 10-5 l/s 또는 더 느린 kdissoc로 인간 PD-1에 결합하거나, 약 2.7 x 10-5 l/s 또는 더 느린 kdissoc로 인간 PD-1에 결합하거나, 약 2.8 x 10-5 l/s 또는 더 느린 kdissoc로 인간 PD-1에 결합하거나, 약 2.9 x 10-5 l/s 또는 더 느린 kdissoc로 인간 PD-1에 결합하거나, 또는 약 3 x 10-5 l/s 또는 더 느린 kdissoc로 인간 PD-1에 결합하는 PD-1 억제제를 포함한다.
일부 실시양태에서, 기재된 조성물 및 방법은 약 10 nM 이하의 IC50으로 인간 PD-1에 대한 인간 PD-L1 또는 인간 PD-L2의 결합을 차단 또는 억제하거나, 약 9 nM 이하의 IC50으로 인간 PD-1에 대한 인간 PD-L1 또는 인간 PD-L2의 결합을 차단 또는 억제하거나, 약 8 nM 이하의 IC50으로 인간 PD-1에 대한 인간 PD-L1 또는 인간 PD-L2의 결합을 차단 또는 억제하거나, 약 7 nM 이하의 IC50으로 인간 PD-1에 대한 인간 PD-L1 또는 인간 PD-L2의 결합을 차단 또는 억제하거나, 약 6 nM 이하의 IC50으로 인간 PD-1에 대한 인간 PD-L1 또는 인간 PD-L2의 결합을 차단 또는 억제하거나, 약 5 nM 이하의 IC50으로 인간 PD-1에 대한 인간 PD-L1 또는 인간 PD-L2의 결합을 차단 또는 억제하거나, 약 4 nM 이하의 IC50으로 인간 PD-1에 대한 인간 PD-L1 또는 인간 PD-L2의 결합을 차단 또는 억제하거나, 약 3 nM 이하의 IC50으로 인간 PD-1에 대한 인간 PD-L1 또는 인간 PD-L2의 결합을 차단 또는 억제하거나, 약 2 nM 이하의 IC50으로 인간 PD-1에 대한 인간 PD-L1 또는 인간 PD-L2의 결합을 차단 또는 억제하거나, 또는 약 1 nM 이하의 IC50으로 인간 PD-1에 대한 인간 PD-L1 또는 인간 PD-L2의 결합을 차단 또는 억제하는 PD-1 억제제를 포함한다.
한 실시양태에서, PD-1 억제제는 니볼루맙 (브리스톨-마이어스 스큅 캄파니로부터 옵디보(OPDIVO)로서 상업적으로 입수가능함) 또는 그의 바이오시밀러, 항원-결합 단편, 접합체 또는 변이체이다. 니볼루맙은 PD-1 수용체를 차단하는 완전 인간 IgG4 항체이다. 한 실시양태에서, 항-PD-1 항체는 이뮤노글로불린 G4 카파, 항-(인간 CD274) 항체이다. 니볼루맙은 화학 초록 서비스 (CAS) 등록 번호 946414-94-4로 배정되어 있고, 또한 5C4, BMS-936558, MDX-1106 및 ONO-4538로도 공지되어 있다. 니볼루맙의 제조 및 특성은 미국 특허 번호 8,008,449 및 국제 특허 공개 번호 WO 2006/121168 (이들의 개시내용은 본원에 참조로 포함됨)에 기재되어 있다. 다양한 형태의 암에서의 니볼루맙의 임상 안전성 및 효능은 문헌 [Wang, et al., Cancer Immunol Res. 2014, 2, 846-56; Page, et al., Ann. Rev. Med., 2014, 65, 185-202; 및 Weber, et al., J. Clin. Oncology, 2013, 31, 4311-4318] (이들의 개시내용은 본원에 참조로 포함됨)에 기재되었다. 니볼루맙의 아미노산 서열은 표 48에 제시된다. 니볼루맙은 22-96,140-196, 254-314, 360-418, 22"-96", 140"-196", 254"-314" 및 360"-418"에서의 중쇄내 디술피드 연결; 23'-88', 134'-194', 23"'-88"' 및 134"'-194"'에서의 경쇄내 디술피드 연결; 127-214', 127"-214"'에서의 중쇄-경쇄간 디술피드 연결, 219-219" 및 222-222"에서의 중쇄-중쇄간 디술피드 연결; 및 290, 290"에서의 N-글리코실화 부위 (H CH2 84.4)를 갖는다.
한 실시양태에서, PD-1 억제제는 서열식별번호: 463에 의해 제공된 중쇄 및 서열식별번호: 464에 의해 제공된 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, PD-1 억제제는 각각 서열식별번호: 463 및 서열식별번호: 464에 제시된 서열을 갖는 중쇄 및 경쇄, 또는 그의 항원 결합 단편, Fab 단편, 단일-쇄 가변 단편 (scFv), 변이체 또는 접합체를 포함한다. 한 실시양태에서, PD-1 억제제는 각각 서열식별번호: 463 및 서열식별번호: 464에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 99% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, PD-1 억제제는 각각 서열식별번호: 463 및 서열식별번호: 464에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 98% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, PD-1 억제제는 각각 서열식별번호: 463 및 서열식별번호: 464에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 97% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, PD-1 억제제는 각각 서열식별번호: 463 및 서열식별번호: 464에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 96% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, PD-1 억제제는 각각 서열식별번호: 463 및 서열식별번호: 464에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 95% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다.
한 실시양태에서, PD-1 억제제는 니볼루맙의 중쇄 및 경쇄 CDR 또는 가변 영역 (VR)을 포함한다. 한 실시양태에서, PD-1 억제제 중쇄 가변 영역 (VH)은 서열식별번호: 465에 제시된 서열을 포함하고, PD-1 억제제 경쇄 가변 영역 (VL)은 서열식별번호: 466에 제시된 서열 및 그의 보존적 아미노산 치환을 포함한다. 한 실시양태에서, PD-1 억제제는 각각 서열식별번호: 465 및 서열식별번호: 466에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 99% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, PD-1 억제제는 각각 서열식별번호: 465 및 서열식별번호: 466에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 98% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, PD-1 억제제는 각각 서열식별번호: 465 및 서열식별번호: 466에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 97% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, PD-1 억제제는 각각 서열식별번호: 465 및 서열식별번호: 466에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 96% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, PD-1 억제제는 각각 서열식별번호: 465 및 서열식별번호: 466에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 95% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다.
한 실시양태에서, PD-1 억제제는 각각 서열식별번호: 467, 서열식별번호: 468 및 서열식별번호: 469에 제시된 서열 및 그의 보존적 아미노산 치환을 갖는 중쇄 CDR1, CDR2 및 CDR3 도메인, 및 각각 서열식별번호: 470, 서열식별번호: 471 및 서열식별번호: 472에 제시된 서열 및 그의 보존적 아미노산 치환을 갖는 경쇄 CDR1, CDR2 및 CDR3 도메인을 포함한다. 한 실시양태에서, 항체는 상기 언급된 항체와 결합에 대해 경쟁하고/거나 PD-1 상의 동일한 에피토프에 결합한다.
한 실시양태에서, PD-1 억제제는 니볼루맙에 관하여 약물 규제 기관에 의해 승인된 항-PD-1 바이오시밀러 모노클로날 항체이다. 한 실시양태에서, 바이오시밀러는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품의 아미노산 서열에 대해 적어도 97% 서열 동일성, 예를 들어 97%, 98%, 99% 또는 100% 서열 동일성을 갖고 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품과 비교하여 1개 이상의 번역후 변형을 포함하는 아미노산 서열을 포함하는 항-PD-1 항체를 포함하며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 니볼루맙이다. 일부 실시양태에서, 1개 이상의 번역후 변형은 다음 중 하나 이상으로부터 선택된다: 글리코실화, 산화, 탈아미드화 및 말단절단. 일부 실시양태에서, 바이오시밀러는 인가된 또는 인가를 위해 제출된 항-PD-1 항체이며, 여기서 항-PD-1 항체는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품의 제제와 상이한 제제로 제공되며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 니볼루맙이다. 항-PD-1 항체는 약물 규제 기관, 예컨대 미국 FDA 및/또는 유럽 연합 EMA에 의해 인가될 수 있다. 일부 실시양태에서, 바이오시밀러는 1종 이상의 부형제를 추가로 포함하는 조성물로서 제공되며, 여기서 1종 이상의 부형제는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품에 포함된 부형제와 동일하거나 상이하며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 니볼루맙이다. 일부 실시양태에서, 바이오시밀러는 1종 이상의 부형제를 추가로 포함하는 조성물로서 제공되며, 여기서 1종 이상의 부형제는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품에 포함된 부형제와 동일하거나 상이하며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 니볼루맙이다.
표 48. 니볼루맙에 관한 PD-1 억제제에 대한 아미노산 서열.
또 다른 실시양태에서, PD-1 억제제는 펨브롤리주맙 (미국 뉴저지주 케닐워스 소재 머크 앤 캄파니, 인크.(Merck & Co., Inc.)로부터 키트루다(KEYTRUDA)로서 상업적으로 입수가능함) 또는 그의 항원-결합 단편, 접합체 또는 변이체를 포함한다. 펨브롤리주맙은 CAS 등록 번호 1374853-91-4로 배정되어 있고, 또한 람브롤리주맙, MK-3475 및 SCH-900475로도 공지되어 있다. 펨브롤리주맙은 이뮤노글로불린 G4, 항-(인간 단백질 PDCD1 (프로그램화된 세포 사멸 1)) (인간-무스 무스쿨루스 모노클로날 중쇄), 디술피드와 인간-무스 무스쿨루스 모노클로날 경쇄, 이량체 구조를 갖는다. 펨브롤리주맙의 구조는 또한 이뮤노글로불린 G4, 항-(인간 프로그램화된 세포 사멸 1); 인간화 마우스 모노클로날 [228-L-프롤린(H10-S>P)]γ4 중쇄 (134-218')-디술피드와 인간화 마우스 모노클로날 κ 경쇄 이량체 (226-226":229-229")-비스디술피드로 기재될 수 있다. 펨브롤리주맙의 특성, 용도 및 제조는 국제 특허 공개 번호 WO 2008/156712 A1, 미국 특허 번호 8,354,509 및 미국 특허 출원 공개 번호 US 2010/0266617 A1, US 2013/0108651 A1 및 US 2013/0109843 A2 (이들의 개시내용은 본원에 참조로 포함됨)에 기재되어 있다. 다양한 형태의 암에서 펨브롤리주맙의 임상 안전성 및 효능은 문헌 [Fuerst, Oncology Times, 2014, 36, 35-36; Robert, et al., Lancet, 2014, 384, 1109-17; 및 Thomas, et al., Exp. Opin. Biol. Ther., 2014, 14, 1061-1064]에 기재되어 있다. 펨브롤리주맙의 아미노산 서열은 표 49에 제시된다. 펨브롤리주맙은 하기 디술피드 가교: 22-96, 22"-96", 23'-92', 23"'-92"', 134-218', 134"-218"', 138'-198', 138"'-198"', 147-203, 147"-203", 226-226", 229-229", 261-321, 261"-321", 367-425, 및 367"-425", 및 하기 글리코실화 부위 (N): Asn-297 및 Asn-297"를 포함한다. 펨브롤리주맙은 Fc 영역에 안정화 S228P 돌연변이를 갖는 IgG4/카파 이소형이며; IgG4 힌지 영역에의 이러한 돌연변이의 삽입은 IgG4 항체에 대해 전형적으로 관찰되는 분자의 절반의 형성을 방지한다. 펨브롤리주맙은 각각의 중쇄의 Fc 도메인 내 Asn297에서 불균일하게 글리코실화되어, 무손상 항체에 대해 대략 149 kDa의 분자량을 생성한다. 펨브롤리주맙의 우세한 당형태는 푸코실화 비-갈락토 이중안테나 글리칸 형태 (G0F)이다.
한 실시양태에서, PD-1 억제제는 서열식별번호: 473에 의해 제공된 중쇄 및 서열식별번호: 474에 의해 제공된 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, PD-1 억제제는 각각 서열식별번호: 473 및 서열식별번호: 474에 제시된 서열을 갖는 중쇄 및 경쇄, 또는 그의 항원 결합 단편, Fab 단편, 단일-쇄 가변 단편 (scFv), 변이체 또는 접합체를 포함한다. 한 실시양태에서, PD-1 억제제는 각각 서열식별번호: 473 및 서열식별번호: 474에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 99% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, PD-1 억제제는 각각 서열식별번호: 473 및 서열식별번호: 474에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 98% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, PD-1 억제제는 각각 서열식별번호: 473 및 서열식별번호: 474에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 97% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, PD-1 억제제는 각각 서열식별번호: 473 및 서열식별번호: 474에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 96% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, PD-1 억제제는 각각 서열식별번호: 473 및 서열식별번호: 474에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 95% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다.
한 실시양태에서, PD-1 억제제는 펨브롤리주맙의 중쇄 및 경쇄 CDR 또는 가변 영역 (VR)을 포함한다. 한 실시양태에서, PD-1 억제제 중쇄 가변 영역 (VH)은 서열식별번호: 475에 제시된 서열을 포함하고, PD-1 억제제 경쇄 가변 영역 (VL)은 서열식별번호: 476에 제시된 서열 및 그의 보존적 아미노산 치환을 포함한다. 한 실시양태에서, PD-1 억제제는 각각 서열식별번호: 475 및 서열식별번호: 476에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 99% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, PD-1 억제제는 각각 서열식별번호: 475 및 서열식별번호: 476에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 98% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, PD-1 억제제는 각각 서열식별번호: 475 및 서열식별번호: 476에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 97% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, PD-1 억제제는 각각 서열식별번호: 475 및 서열식별번호: 476에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 96% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, PD-1 억제제는 각각 서열식별번호: 475 및 서열식별번호: 476에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 95% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다.
한 실시양태에서, PD-1 억제제는 각각 서열식별번호: 477, 서열식별번호: 478 및 서열식별번호: 479에 제시된 서열 및 그의 보존적 아미노산 치환을 갖는 중쇄 CDR1, CDR2 및 CDR3 도메인, 및 각각 서열식별번호: 480, 서열식별번호: 481 및 서열식별번호: 482에 제시된 서열 및 그의 보존적 아미노산 치환을 갖는 경쇄 CDR1, CDR2 및 CDR3 도메인을 포함한다. 한 실시양태에서, 항체는 상기 언급된 항체와 결합에 대해 경쟁하고/거나 PD-1 상의 동일한 에피토프에 결합한다.
한 실시양태에서, PD-1 억제제는 펨브롤리주맙에 관하여 약물 규제 기관에 의해 승인된 항-PD-1 바이오시밀러 모노클로날 항체이다. 한 실시양태에서, 바이오시밀러는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품의 아미노산 서열에 대해 적어도 97% 서열 동일성, 예를 들어 97%, 98%, 99% 또는 100% 서열 동일성을 갖고 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품과 비교하여 1개 이상의 번역후 변형을 포함하는 아미노산 서열을 포함하는 항-PD-1 항체를 포함하며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 펨브롤리주맙이다. 일부 실시양태에서, 1개 이상의 번역후 변형은 다음 중 하나 이상으로부터 선택된다: 글리코실화, 산화, 탈아미드화 및 말단절단. 일부 실시양태에서, 바이오시밀러는 인가된 또는 인가를 위해 제출된 항-PD-1 항체이며, 여기서 항-PD-1 항체는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품의 제제와 상이한 제제로 제공되며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 펨브롤리주맙이다. 항-PD-1 항체는 약물 규제 기관, 예컨대 미국 FDA 및/또는 유럽 연합 EMA에 의해 인가될 수 있다. 일부 실시양태에서, 바이오시밀러는 1종 이상의 부형제를 추가로 포함하는 조성물로서 제공되며, 여기서 1종 이상의 부형제는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품에 포함된 부형제와 동일하거나 상이하며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 펨브롤리주맙이다. 일부 실시양태에서, 바이오시밀러는 1종 이상의 부형제를 추가로 포함하는 조성물로서 제공되며, 여기서 1종 이상의 부형제는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품에 포함된 부형제와 동일하거나 상이하며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 펨브롤리주맙이다.
표 49. 펨브롤리주맙에 관한 PD-1 억제제에 대한 아미노산 서열.
한 실시양태에서, PD-1 억제제는 상업적으로-입수가능한 항-PD-1 모노클로날 항체, 예컨대 항-m-PD-1 클론 J43 (카탈로그 번호 BE0033-2) 및 RMP1-14 (카탈로그 번호 BE0146) (미국 뉴햄프셔주 웨스트 레바논 소재 바이오 엑스 셀, 인크.(Bio X Cell, Inc.))이다. 다수의 상업적으로-입수가능한 항-PD-1 항체가 관련 기술분야의 통상의 기술자에게 공지되어 있다.
한 실시양태에서, PD-1 억제제는 미국 특허 번호 8,354,509 또는 미국 특허 출원 공개 번호 2010/0266617 A1, 2013/0108651 A1, 2013/0109843 A2 (이들의 개시내용은 본원에 참조로 포함됨)에 개시된 항체이다. 한 실시양태에서, PD-1 억제제는 미국 특허 번호 8,287,856, 8,580,247 및 8,168,757, 및 미국 특허 출원 공개 번호 2009/0028857 A1, 2010/0285013 A1, 2013/0022600 A1 및 2011/0008369 A1 (이들의 교시는 본원에 참조로 포함됨)에 기재된 항-PD-1 항체이다. 또 다른 실시양태에서, PD-1 억제제는 미국 특허 번호 8,735,553 B1 (이의 개시내용은 본원에 참조로 포함됨)에 개시된 항-PD-1 항체이다. 한 실시양태에서, PD-1 억제제는 CT-011로도 또한 공지된 피딜리주맙이며, 이는 미국 특허 번호 8,686,119 (이의 개시내용은 본원에 참조로 포함됨)에 기재되어 있다.
한 실시양태에서, PD-1 억제제는 소분자 또는 펩티드, 또는 펩티드 유도체, 예컨대 미국 특허 번호 8,907,053; 9,096,642; 및 9,044,442; 및 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0087581에 기재된 것; 1,2, 4-옥사디아졸 화합물 및 유도체, 예컨대 미국 특허 출원 공개 번호 2015/0073024에 기재된 것; 시클릭 펩티드모방체 화합물 및 유도체, 예컨대 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0073042에 기재된 것; 시클릭 화합물 및 유도체, 예컨대 미국 특허 출원 공개 번호 US 2015/0125491에 기재된 것; 1,3,4-옥사디아졸 및 1,3,4-티아디아졸 화합물 및 유도체, 예컨대 국제 특허 출원 공개 번호 WO 2015/033301에 기재된 것; 펩티드-기재 화합물 및 유도체, 예컨대 국제 특허 출원 공개 번호 WO 2015/036927 및 WO 2015/04490에 기재된 것, 또는 마크로시클릭 펩티드-기재 화합물 및 유도체, 예컨대 미국 특허 출원 공개 번호 US 2014/0294898에 기재된 것일 수 있으며, 상기 문헌 각각의 개시내용은 그 전문이 본원에 참조로 포함된다.
한 실시양태에서, PD-L1 또는 PD-L2 억제제는 관련 기술분야에 공지된 임의의 PD-L1 또는 PD-L2 억제제, 길항제 또는 차단제일 수 있다. 특히, 이는 하기 단락에 보다 상세히 기재된 PD-L1 또는 PD-L2 억제제, 길항제 또는 차단제 중 하나이다. 용어 "억제제", "길항제" 및 "차단제"는 PD-L1 및 PD-L2 억제제와 관련하여 본원에서 상호교환가능하게 사용된다. 의심을 피하기 위해, 본원에서 항체인 PD-L1 또는 PD-L2 억제제에 대한 언급은 화합물 또는 그의 항원-결합 단편, 변이체, 접합체 또는 바이오시밀러를 지칭할 수 있다. 의심을 피하기 위해, 본원에서 PD-L1 또는 PD-L2 억제제에 대한 언급은 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 에스테르, 용매화물, 수화물, 공결정 또는 전구약물을 지칭할 수 있다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 조성물, 과정 및 방법은 PD-L1 또는 PD-L2 억제제를 포함한다. 일부 실시양태에서, PD-L1 또는 PD-L2 억제제는 소분자이다. 바람직한 실시양태에서, PD-L1 또는 PD-L2 억제제는 항체 (즉, 항-PD-1 항체), Fab 단편을 포함한 그의 단편, 또는 그의 단일-쇄 가변 단편 (scFv)이다. 일부 실시양태에서, PD-L1 또는 PD-L2 억제제는 폴리클로날 항체이다. 바람직한 실시양태에서, PD-L1 또는 PD-L2 억제제는 모노클로날 항체이다. 일부 실시양태에서, PD-L1 또는 PD-L2 억제제는 PD-L1 또는 PD-L2와의 결합에 대해 경쟁하고/거나, PD-L1 또는 PD-L2 상의 에피토프에 결합한다. 한 실시양태에서, 항체는 PD-L1 또는 PD-L2와의 결합에 대해 경쟁하고/거나 PD-L1 또는 PD-L2 상의 에피토프에 결합한다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 PD-L1 억제제는, 화합물이 PD-L2 수용체를 포함한 다른 수용체와 결합하거나 상호작용하는 경우보다 실질적으로 더 낮은 농도에서 PD-L1과 결합하거나 상호작용한다는 점에서 PD-L1에 대해 선택적이다. 특정 실시양태에서, 화합물은 PD-L2 수용체에 대해서보다 적어도 약 2배 더 높은 농도, 약 3배 더 높은 농도, 약 5배 더 높은 농도, 약 10배 더 높은 농도, 약 20배 더 높은 농도, 약 30배 더 높은 농도, 약 50배 더 높은 농도, 약 100배 더 높은 농도, 약 200배 더 높은 농도, 약 300배 더 높은 농도, 또는 약 500배 더 높은 농도로 PD-L1 수용체에 결합한다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 PD-L2 억제제는, 화합물이 PD-L1 수용체를 포함한 다른 수용체와 결합하거나 상호작용하는 경우보다 실질적으로 더 낮은 농도에서 PD-L2와 결합하거나 상호작용한다는 점에서 PD-L2에 대해 선택적이다. 특정 실시양태에서, 화합물은 PD-L1 수용체에 대해서보다 적어도 약 2배 더 높은 농도, 약 3배 더 높은 농도, 약 5배 더 높은 농도, 약 10배 더 높은 농도, 약 20배 더 높은 농도, 약 30배 더 높은 농도, 약 50배 더 높은 농도, 약 100배 더 높은 농도, 약 200배 더 높은 농도, 약 300배 더 높은 농도, 또는 약 500배 더 높은 농도로 PD-L2 수용체에 결합한다.
임의의 이론에 얽매이지 않으면서, 종양 세포는 PD-L1을 발현하고 T 세포는 PD-1을 발현하는 것으로 여겨진다. 그러나, 종양 세포에 의한 PD-L1 발현은 PD-1 또는 PD-L1 억제제 또는 차단제의 효능에 요구되지 않는다. 한 실시양태에서, 종양 세포는 PD-L1을 발현한다. 또 다른 실시양태에서, 종양 세포는 PD-L1을 발현하지 않는다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법 및 조성물은 PD-1 및 PD-L1 항체, 예컨대 본원에 기재된 것의 조합물을 TIL과 조합하여 포함한다. PD-1 및 PD-L1 항체 및 TIL의 조합물의 투여는 동시 또는 순차적일 수 있다.
일부 실시양태에서, 기재된 조성물 및 방법은 약 100 pM 이하의 KD로 인간 PD-L1 및/또는 PD-L2에 결합하거나, 약 90 pM 이하의 KD로 인간 PD-L1 및/또는 PD-L2에 결합하거나, 약 80 pM 이하의 KD로 인간 PD-L1 및/또는 PD-L2에 결합하거나, 약 70 pM 이하의 KD로 인간 PD-L1 및/또는 PD-L2에 결합하거나, 약 60 pM 이하의 KD, 약 50 pM 이하의 KD로 인간 PD-L1 및/또는 PD-L2에 결합하거나, 약 40 pM 이하의 KD로 인간 PD-L1 및/또는 PD-L2에 결합하거나, 또는 약 30 pM 이하의 KD로 인간 PD-L1 및/또는 PD-L2에 결합하는 PD-L1 및/또는 PD-L2 억제제를 포함한다.
일부 실시양태에서, 기재된 조성물 및 방법은 약 7.5 x 105 l/M·s 또는 더 빠른 kassoc로 인간 PD-L1 및/또는 PD-L2에 결합하거나, 약 8 x 105 l/M·s 또는 더 빠른 kassoc로 인간 PD-L1 및/또는 PD-L2에 결합하거나, 약 8.5 x 105 l/M·s 또는 더 빠른 kassoc로 인간 PD-L1 및/또는 PD-L2에 결합하거나, 약 9 x 105 l/M·s 또는 더 빠른 kassoc로 인간 PD-L1 및/또는 PD-L2에 결합하거나, 약 9.5 x 105 l/M·s 또는 더 빠른 kassoc로 인간 PD-L1 및/또는 PD-L2에 결합하거나, 또는 약 1 x 106 l/M·s 또는 더 빠른 kassoc로 인간 PD-L1 및/또는 PD-L2에 결합하는 PD-L1 및/또는 PD-L2 억제제를 포함한다.
일부 실시양태에서, 기재된 조성물 및 방법은 약 2 x 10-5 l/s 또는 더 느린 kdissoc로 인간 PD-L1 또는 PD-L2에 결합하거나, 약 2.1 x 10-5 l/s 또는 더 느린 kdissoc로 인간 PD-1에 결합하거나, 약 2.2 x 10-5 l/s 또는 더 느린 kdissoc로 인간 PD-1에 결합하거나, 약 2.3 x 10-5 l/s 또는 더 느린 kdissoc로 인간 PD-1에 결합하거나, 약 2.4 x 10-5 l/s 또는 더 느린 kdissoc로 인간 PD-1에 결합하거나, 약 2.5 x 10-5 l/s 또는 더 느린 kdissoc로 인간 PD-1에 결합하거나, 약 2.6 x 10-5 l/s 또는 더 느린 kdissoc로 인간 PD-1에 결합하거나, 약 2.7 x 10-5 l/s 또는 더 느린 kdissoc로 인간 PD-L1 또는 PD-L2에 결합하거나, 또는 약 3 x 10-5 l/s 또는 더 느린 kdissoc로 인간 PD-L1 또는 PD-L2에 결합하는 PD-L1 및/또는 PD-L2 억제제를 포함한다.
일부 실시양태에서, 기재된 조성물 및 방법은 약 10 nM 이하의 IC50으로 인간 PD-1에 대한 인간 PD-L1 또는 인간 PD-L2의 결합을 차단 또는 억제하거나, 약 9 nM 이하의 IC50으로 인간 PD-1에 대한 인간 PD-L1 또는 인간 PD-L2의 결합을 차단 또는 억제하거나, 약 8 nM 이하의 IC50으로 인간 PD-1에 대한 인간 PD-L1 또는 인간 PD-L2의 결합을 차단 또는 억제하거나, 약 7 nM 이하의 IC50으로 인간 PD-1에 대한 인간 PD-L1 또는 인간 PD-L2의 결합을 차단 또는 억제하거나, 약 6 nM 이하의 IC50으로 인간 PD-1에 대한 인간 PD-L1 또는 인간 PD-L2의 결합을 차단 또는 억제하거나, 약 5 nM 이하의 IC50으로 인간 PD-1에 대한 인간 PD-L1 또는 인간 PD-L2의 결합을 차단 또는 억제하거나, 약 4 nM 이하의 IC50으로 인간 PD-1에 대한 인간 PD-L1 또는 인간 PD-L2의 결합을 차단 또는 억제하거나, 약 3 nM 이하의 IC50으로 인간 PD-1에 대한 인간 PD-L1 또는 인간 PD-L2의 결합을 차단 또는 억제하거나, 약 2 nM 이하의 IC50으로 인간 PD-1에 대한 인간 PD-L1 또는 인간 PD-L2의 결합을 차단 또는 억제하거나, 또는 약 1 nM 이하의 IC50으로 인간 PD-1을 차단하거나 또는 인간 PD-1에 대한 인간 PD-L1 또는 인간 PD-L2의 결합을 차단 또는 억제하는 PD-L1 및/또는 PD-L2 억제제를 포함한다.
한 실시양태에서, PD-L1 억제제는 MEDI4736 (아스트라제네카 피엘씨의 자회사인, 메릴랜드주 게이더스버그 소재 메드이뮨, 엘엘씨로부터 상업적으로 입수가능함)로도 또한 공지된 두르발루맙 또는 그의 항원-결합 단편, 접합체 또는 변이체이다. 한 실시양태에서, PD-L1 억제제는 미국 특허 번호 8,779,108 또는 미국 특허 출원 공개 번호 2013/0034559 (이들의 개시내용은 본원에 참조로 포함됨)에 개시된 항체이다. 두르발루맙의 임상 효능은 문헌 [Page, et al., Ann. Rev. Med., 2014, 65, 185-202; Brahmer, et al., J. Clin. Oncol. 2014, 32, 5s (보충, 요약서 8021); 및 McDermott, et al., Cancer Treatment Rev., 2014, 40, 1056-64]에 기재되어 있다. 두르발루맙의 제조 및 특성은 미국 특허 번호 8,779,108 (이의 개시내용은 본원에 참조로 포함됨)에 기재되어 있다. 두르발루맙의 아미노산 서열은 표 50에 제시된다. 두르발루맙 모노클로날 항체는 22-96, 22"-96", 23'-89', 23"'-89"', 135'-195', 135"'-195"', 148-204, 148"-204", 215'-224, 215"'-224", 230-230", 233-233", 265-325, 265"-325", 371-429, 및 371"-429'에서의 디술피드 연결; 및 Asn-301 및 Asn-301"에서의 N-글리코실화 부위를 포함한다.
한 실시양태에서, PD-L1 억제제는 서열식별번호: 483에 의해 제공된 중쇄 및 서열식별번호: 484에 의해 제공된 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, PD-L1 억제제는 각각 서열식별번호: 483 및 서열식별번호: 484에 제시된 서열을 갖는 중쇄 및 경쇄, 또는 그의 항원 결합 단편, Fab 단편, 단일-쇄 가변 단편 (scFv), 변이체 또는 접합체를 포함한다. 한 실시양태에서, PD-L1 억제제는 각각 서열식별번호: 483 및 서열식별번호: 484에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 99% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, PD-L1 억제제는 각각 서열식별번호: 483 및 서열식별번호: 484에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 98% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, PD-L1 억제제는 각각 서열식별번호: 483 및 서열식별번호: 484에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 97% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, PD-L1 억제제는 각각 서열식별번호: 483 및 서열식별번호: 484에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 96% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, PD-L1 억제제는 각각 서열식별번호: 483 및 서열식별번호: 484에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 95% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다.
한 실시양태에서, PD-L1 억제제는 두르발루맙의 중쇄 및 경쇄 CDR 또는 가변 영역 (VR)을 포함한다. 한 실시양태에서, PD-L1 억제제 중쇄 가변 영역 (VH)은 서열식별번호: 485에 제시된 서열을 포함하고, PD-L1 억제제 경쇄 가변 영역 (VL)은 서열식별번호: 486에 제시된 서열 및 그의 보존적 아미노산 치환을 포함한다. 한 실시양태에서, PD-L1 억제제는 각각 서열식별번호: 485 및 서열식별번호: 486에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 99% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, PD-L1 억제제는 각각 서열식별번호: 485 및 서열식별번호: 486에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 98% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, PD-L1 억제제는 각각 서열식별번호: 485 및 서열식별번호: 486에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 97% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, PD-L1 억제제는 각각 서열식별번호: 485 및 서열식별번호: 486에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 96% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, PD-L1 억제제는 각각 서열식별번호: 485 및 서열식별번호: 486에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 95% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다.
한 실시양태에서, PD-L1 억제제는 각각 서열식별번호: 487, 서열식별번호: 488 및 서열식별번호: 489에 제시된 서열 및 그의 보존적 아미노산 치환을 갖는 중쇄 CDR1, CDR2 및 CDR3 도메인, 및 각각 서열식별번호: 490, 서열식별번호: 491 및 서열식별번호: 492에 제시된 서열 및 그의 보존적 아미노산 치환을 갖는 경쇄 CDR1, CDR2 및 CDR3 도메인을 포함한다. 한 실시양태에서, 항체는 상기 언급된 항체와 결합에 대해 경쟁하고/거나 PD-L1 상의 동일한 에피토프에 결합한다.
한 실시양태에서, PD-L1 억제제는 두르발루맙에 관하여 약물 규제 기관에 의해 승인된 항-PD-L1 바이오시밀러 모노클로날 항체이다. 한 실시양태에서, 바이오시밀러는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품의 아미노산 서열에 대해 적어도 97% 서열 동일성, 예를 들어 97%, 98%, 99% 또는 100% 서열 동일성을 갖고 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품과 비교하여 1개 이상의 번역후 변형을 포함하는 아미노산 서열을 포함하는 항-PD-L1 항체를 포함하며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 두르발루맙이다. 일부 실시양태에서, 1개 이상의 번역후 변형은 다음 중 하나 이상으로부터 선택된다: 글리코실화, 산화, 탈아미드화 및 말단절단. 일부 실시양태에서, 바이오시밀러는 인가된 또는 인가를 위해 제출된 항-PD-L1 항체이며, 여기서 항-PD-L1 항체는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품의 제제와 상이한 제제로 제공되며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 두르발루맙이다. 항-PD-L1 항체는 약물 규제 기관, 예컨대 미국 FDA 및/또는 유럽 연합 EMA에 의해 인가될 수 있다. 일부 실시양태에서, 바이오시밀러는 1종 이상의 부형제를 추가로 포함하는 조성물로서 제공되며, 여기서 1종 이상의 부형제는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품에 포함된 부형제와 동일하거나 상이하며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 두르발루맙이다. 일부 실시양태에서, 바이오시밀러는 1종 이상의 부형제를 추가로 포함하는 조성물로서 제공되며, 여기서 1종 이상의 부형제는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품에 포함된 부형제와 동일하거나 상이하며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 두르발루맙이다.
표 50. 두르발루맙에 관한 PD-L1 억제제에 대한 아미노산 서열.
한 실시양태에서, PD-L1 억제제는 MSB0010718C (머크 카게아아(Merck KGaA)/EMD 세로노(EMD Serono)로부터 상업적으로 입수가능함)로도 또한 공지된 아벨루맙, 또는 그의 항원 결합 단편, 접합체 또는 변이체이다. 아벨루맙의 제조 및 특성은 미국 특허 출원 공개 번호 US 2014/0341917 A1 (이의 개시내용은 구체적으로 본원에 참조로 포함됨)에 기재되어 있다. 아벨루맙의 아미노산 서열은 표 51에 제시된다. 아벨루맙은 22-96, 147-203, 264-324, 370-428, 22"-96", 147"-203", 264"-324", 및 370"-428"에서의 중쇄내 디술피드 연결 (C23-C104); 22'-90', 138'-197', 22"'-90"', 및 138"'-197"'에서의 경쇄내 디술피드 연결 (C23-C104); 223-215' 및 223"-215"'에서의 중쇄내-경쇄 디술피드 연결 (h 5-CL 126); 229-229" 및 232-232"에서의 중쇄내-중쇄 디술피드 연결 (h 11, h 14); 300, 300"에서의 N-글리코실화 부위 (H CH2 N84.4); 푸코실화 복합체 이중-안테나 CHO-유형 글리칸; 및 450 및 450'에서의 H CHS K2 C-말단 리신 클리핑을 갖는다.
한 실시양태에서, PD-L1 억제제는 서열식별번호: 493에 의해 제공된 중쇄 및 서열식별번호: 494에 의해 제공된 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, PD-L1 억제제는 각각 서열식별번호: 493 및 서열식별번호: 494에 제시된 서열을 갖는 중쇄 및 경쇄, 또는 그의 항원 결합 단편, Fab 단편, 단일-쇄 가변 단편 (scFv), 변이체 또는 접합체를 포함한다. 한 실시양태에서, PD-L1 억제제는 각각 서열식별번호: 493 및 서열식별번호: 494에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 99% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, PD-L1 억제제는 각각 서열식별번호: 493 및 서열식별번호: 494에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 98% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, PD-L1 억제제는 각각 서열식별번호: 493 및 서열식별번호: 494에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 97% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, PD-L1 억제제는 각각 서열식별번호: 493 및 서열식별번호: 494에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 96% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, PD-L1 억제제는 각각 서열식별번호: 493 및 서열식별번호: 494에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 95% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다.
한 실시양태에서, PD-L1 억제제는 아벨루맙의 중쇄 및 경쇄 CDR 또는 가변 영역 (VR)을 포함한다. 한 실시양태에서, PD-L1 억제제 중쇄 가변 영역 (VH)은 서열식별번호: 495에 제시된 서열을 포함하고, PD-L1 억제제 경쇄 가변 영역 (VL)은 서열식별번호: 496에 제시된 서열 및 그의 보존적 아미노산 치환을 포함한다. 한 실시양태에서, PD-L1 억제제는 각각 서열식별번호: 495 및 서열식별번호: 496에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 99% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, PD-L1 억제제는 각각 서열식별번호: 496 및 서열식별번호: 496에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 98% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, PD-L1 억제제는 각각 서열식별번호: 495 및 서열식별번호: 496에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 97% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, PD-L1 억제제는 각각 서열식별번호: 495 및 서열식별번호: 496에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 96% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, PD-L1 억제제는 각각 서열식별번호: 495 및 서열식별번호: 496에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 95% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다.
한 실시양태에서, PD-L1 억제제는 각각 서열식별번호: 497, 서열식별번호: 498 및 서열식별번호: 499에 제시된 서열 및 그의 보존적 아미노산 치환을 갖는 중쇄 CDR1, CDR2 및 CDR3 도메인, 및 각각 서열식별번호: 500, 서열식별번호: 501 및 서열식별번호: 502에 제시된 서열 및 그의 보존적 아미노산 치환을 갖는 경쇄 CDR1, CDR2 및 CDR3 도메인을 포함한다. 한 실시양태에서, 항체는 상기 언급된 항체와 결합에 대해 경쟁하고/거나 PD-L1 상의 동일한 에피토프에 결합한다.
한 실시양태에서, PD-L1 억제제는 아벨루맙에 관하여 약물 규제 기관에 의해 승인된 항-PD-L1 바이오시밀러 모노클로날 항체이다. 한 실시양태에서, 바이오시밀러는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품의 아미노산 서열에 대해 적어도 97% 서열 동일성, 예를 들어 97%, 98%, 99% 또는 100% 서열 동일성을 갖고 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품과 비교하여 1개 이상의 번역후 변형을 포함하는 아미노산 서열을 포함하는 항-PD-L1 항체를 포함하며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 아벨루맙이다. 일부 실시양태에서, 1개 이상의 번역후 변형은 다음 중 하나 이상으로부터 선택된다: 글리코실화, 산화, 탈아미드화 및 말단절단. 일부 실시양태에서, 바이오시밀러는 인가된 또는 인가를 위해 제출된 항-PD-L1 항체이며, 여기서 항-PD-L1 항체는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품의 제제와 상이한 제제로 제공되며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 아벨루맙이다. 항-PD-L1 항체는 약물 규제 기관, 예컨대 미국 FDA 및/또는 유럽 연합 EMA에 의해 인가될 수 있다. 일부 실시양태에서, 바이오시밀러는 1종 이상의 부형제를 추가로 포함하는 조성물로서 제공되며, 여기서 1종 이상의 부형제는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품에 포함된 부형제와 동일하거나 상이하며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 아벨루맙이다. 일부 실시양태에서, 바이오시밀러는 1종 이상의 부형제를 추가로 포함하는 조성물로서 제공되며, 여기서 1종 이상의 부형제는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품에 포함된 부형제와 동일하거나 상이하며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 아벨루맙이다.
표 51. 아벨루맙에 관한 PD-L1 억제제에 대한 아미노산 서열.
한 실시양태에서, PD-L1 억제제는 MPDL3280A 또는 RG7446 (스위스 바젤 소재 로슈 홀딩 아게(Roche Holding AG)의 자회사인 제넨테크, 인크.로부터 상업적으로 입수가능한 테센트릭(TECENTRIQ))로도 또한 공지된 아테졸리주맙 또는 그의 항원-결합 단편, 접합체 또는 변이체이다. 한 실시양태에서, PD-L1 억제제는 미국 특허 번호 8,217,149 (이의 개시내용은 구체적으로 본원에 참조로 포함됨)에 개시된 항체이다. 한 실시양태에서, PD-L1 억제제는 미국 특허 출원 공개 번호 2010/0203056 A1, 2013/0045200 A1, 2013/0045201 A1, 2013/0045202 A1, 또는 2014/0065135 A1 (이들의 개시내용은 구체적으로 본원에 참조로 포함됨)에 개시된 항체이다. 아테졸리주맙의 제조 및 특성은 미국 특허 번호 8,217,149 (이의 개시내용은 본원에 참조로 포함됨)에 기재되어 있다. 아테졸리주맙의 아미노산 서열은 표 52에 제시된다. 아테졸리주맙은 22-96, 145-201, 262-322, 368-426, 22"-96", 145"-201", 262"-322", 및 368"-426"에서의 중쇄내 디술피드 연결 (C23-C104); 23'-88', 134'-194', 23"'-88"', 및 134"'-194"'에서의 경쇄내 디술피드 연결 (C23-C104); 221-214' 및 221"-214"'에서의 중쇄내-경쇄 디술피드 연결 (h 5-CL 126); 227-227" 및 230-230"에서의 중쇄내-중쇄 디술피드 연결 (h 11, h 14); 및 298 및 298'에서의 N-글리코실화 부위 (H CH2 N84.4>A)를 갖는다.
한 실시양태에서, PD-L1 억제제는 서열식별번호: 503에 의해 제공된 중쇄 및 서열식별번호: 504에 의해 제공된 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, PD-L1 억제제는 각각 서열식별번호: 503 및 서열식별번호: 504에 제시된 서열을 갖는 중쇄 및 경쇄, 또는 그의 항원 결합 단편, Fab 단편, 단일-쇄 가변 단편 (scFv), 변이체 또는 접합체를 포함한다. 한 실시양태에서, PD-L1 억제제는 각각 서열식별번호: 503 및 서열식별번호: 504에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 99% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, PD-L1 억제제는 각각 서열식별번호: 503 및 서열식별번호: 504에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 98% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, PD-L1 억제제는 각각 서열식별번호: 503 및 서열식별번호: 504에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 97% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, PD-L1 억제제는 각각 서열식별번호: 503 및 서열식별번호: 504에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 96% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, PD-L1 억제제는 각각 서열식별번호: 503 및 서열식별번호: 504에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 95% 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함한다.
한 실시양태에서, PD-L1 억제제는 아테졸리주맙의 중쇄 및 경쇄 CDR 또는 가변 영역 (VR)을 포함한다. 한 실시양태에서, PD-L1 억제제 중쇄 가변 영역 (VH)은 서열식별번호: 505에 제시된 서열을 포함하고, PD-L1 억제제 경쇄 가변 영역 (VL)은 서열식별번호: 506에 제시된 서열 및 그의 보존적 아미노산 치환을 포함한다. 한 실시양태에서, PD-L1 억제제는 각각 서열식별번호: 505 및 서열식별번호: 506에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 99% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, PD-L1 억제제는 각각 서열식별번호: 505 및 서열식별번호: 506에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 98% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, PD-L1 억제제는 각각 서열식별번호: 505 및 서열식별번호: 506에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 97% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, PD-L1 억제제는 각각 서열식별번호: 505 및 서열식별번호: 506에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 96% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다. 한 실시양태에서, PD-L1 억제제는 각각 서열식별번호: 505 및 서열식별번호: 506에 제시된 서열에 대해 각각 적어도 95% 동일한 VH 및 VL 영역을 포함한다.
한 실시양태에서, PD-L1 억제제는 각각 서열식별번호: 507, 서열식별번호: 508 및 서열식별번호: 509에 제시된 서열 및 그의 보존적 아미노산 치환을 갖는 중쇄 CDR1, CDR2 및 CDR3 도메인, 및 각각 서열식별번호: 510, 서열식별번호: 511 및 서열식별번호: 512에 제시된 서열 및 그의 보존적 아미노산 치환을 갖는 경쇄 CDR1, CDR2 및 CDR3 도메인을 포함한다. 한 실시양태에서, 항체는 상기 언급된 항체와 결합에 대해 경쟁하고/거나 PD-L1 상의 동일한 에피토프에 결합한다.
한 실시양태에서, 항-PD-L1 항체는 아테졸리주맙에 관하여 약물 규제 기관에 의해 승인된 항-PD-L1 바이오시밀러 모노클로날 항체이다. 한 실시양태에서, 바이오시밀러는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품의 아미노산 서열에 대해 적어도 97% 서열 동일성, 예를 들어 97%, 98%, 99% 또는 100% 서열 동일성을 갖고 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품과 비교하여 1개 이상의 번역후 변형을 포함하는 아미노산 서열을 포함하는 항-PD-L1 항체를 포함하며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 아테졸리주맙이다. 일부 실시양태에서, 1개 이상의 번역후 변형은 다음 중 하나 이상으로부터 선택된다: 글리코실화, 산화, 탈아미드화 및 말단절단. 일부 실시양태에서, 바이오시밀러는 인가된 또는 인가를 위해 제출된 항-PD-L1 항체이며, 여기서 항-PD-L1 항체는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품의 제제와 상이한 제제로 제공되며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 아테졸리주맙이다. 항-PD-L1 항체는 약물 규제 기관, 예컨대 미국 FDA 및/또는 유럽 연합 EMA에 의해 인가될 수 있다. 일부 실시양태에서, 바이오시밀러는 1종 이상의 부형제를 추가로 포함하는 조성물로서 제공되며, 여기서 1종 이상의 부형제는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품에 포함된 부형제와 동일하거나 상이하며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 아테졸리주맙이다. 일부 실시양태에서, 바이오시밀러는 1종 이상의 부형제를 추가로 포함하는 조성물로서 제공되며, 여기서 1종 이상의 부형제는 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품에 포함된 부형제와 동일하거나 상이하며, 여기서 참조 의약 제품 또는 참조 생물학적 제품은 아테졸리주맙이다.
표 52. 아테졸리주맙에 관한 PD-L1 억제제에 대한 아미노산 서열.
한 실시양태에서, PD-L1 억제제는 미국 특허 출원 공개 번호 US 2014/0341917 A1 (이의 개시내용은 본원에 참조로 포함됨)에 기재된 항체를 포함한다. 또 다른 실시양태에서, PD-L1에의 결합에 대해 이들 중 임의의 항체와 경쟁하는 항체가 또한 포함된다. 한 실시양태에서, 항-PD-L1 항체는 BMS-935559로도 또한 공지된 MDX-1105이며, 이는 미국 특허 번호 US 7,943,743 (이의 개시내용은 본원에 참조로 포함됨)에 개시되어 있다. 한 실시양태에서, 항-PD-L1 항체는 미국 특허 번호 US 7,943,743 (이는 본원에 참조로 포함됨)에 개시된 항-PD-L1 항체로부터 선택된다.
한 실시양태에서, PD-L1 억제제는 상업적으로 입수가능한 모노클로날 항체, 예컨대 인비보맙(INVIVOMAB) 항-m-PD-L1 클론 10F.9G2 (카탈로그 번호 BE0101, 미국 뉴햄프셔주 웨스트 레바논 소재 바이오 엑스 셀, 인크.)이다. 한 실시양태에서, 항-PD-L1 항체는 상업적으로 입수가능한 모노클로날 항체, 예컨대 아피메트릭스 이바이오사이언스(AFFYMETRIX EBIOSCIENCE) (MIH1)이다. 다수의 상업적으로 입수가능한 항-PD-L1 항체는 관련 기술분야의 통상의 기술자에게 공지되어 있다.
한 실시양태에서, PD-L2 억제제는 상업적으로 입수가능한 모노클로날 항체, 예컨대 바이오레전드 24F.10C12 마우스 IgG2a, κ 이소형 (카탈로그 번호 329602, 캘리포니아주 샌디에고 소재 바이오레전드, 인크.), 시그마 항-PD-L2 항체 (카탈로그 번호 SAB3500395, 미주리주 세인트 루이스 소재 시그마-알드리치 캄파니(Sigma-Aldrich Co.)), 또는 관련 기술분야의 통상의 기술자에게 공지된 다른 상업적으로 입수가능한 항-PD-L2 항체이다.
본 발명의 바람직한 실시양태가 본원에 제시되고 기재되지만, 이러한 실시양태는 단지 예로서 제공되고, 달리 본 발명의 범주를 제한하는 것으로 의도되지 않는다. 본 발명의 기재된 실시양태에 대한 다양한 대안이 본 발명을 실시하는데 사용될 수 있다.
실시예
본원에 포괄된 실시양태는 하기 실시예를 참조하여 이제 기재된다. 이들 실시예는 단지 예시의 목적으로만 제공되고, 본원에 포괄된 개시내용은 결코 이들 실시예에 제한되는 것으로 해석되어서는 안되며, 오히려 본원에 제공된 교시의 결과로서 명백해지는 임의의 및 모든 변형을 포괄하는 것으로 해석되어야 한다.
실시예 1 - TIL을 확장시키고, 확장된 TIL을 사용하여 암을 치료하는 방법
TIL은 관련 기술분야에 공지된 방법 및 본원에 기재된 임의의 방법을 사용하여 확장될 수 있다. 예를 들어, TIL을 확장시키는 방법이 도 1에 도시되어 있다. TNFRSF 효능제가 본원에 기재된 바와 같은 도 1의 방법에 첨가될 수 있다. TNFRSF 효능제는, 예를 들어 4-1BB 또는 OX40 효능제일 수 있고, 사전-REP 또는 REP 단계 동안 또는 두 단계 동안, TIL 성장을 증진시키기에 충분한 농도로 첨가될 수 있다. TIL의 확장은 본원에 기재된 환자에서 TNFRSF 효능제와 조합하여 암을 치료하는 임의의 방법과 추가로 조합될 수 있다. TIL을 확장시키고, 확장된 TIL을 사용하여 암 환자를 치료하는 방법이 도 2에 도시되어 있다.
실시예 2 - 4-1BB 효능제를 사용하여 TIL을 확장시키는 방법
4-1BB-Fc 하이브리도마를 제조하고, 2차 항체와의 가교에 의해 그의 4-1BB 신호전달 경로를 활성화시키는 능력에 대해 스크리닝하였다. 용량 의존성 방식으로 녹색 형광 단백질 (GFP) 리포터를 사용하여, 하이브리도마 상청액이 NF-kB를 발현하는 Jurkat 세포 상에서 4-1BB 신호전달을 활성화시키는 능력에 대해 평가하였다. 상청액을 Jurkat 세포와 함께 실온에서 20분 동안 인큐베이션하고, 이어서 염소 항-마우스 2차 항체 (1 mg/mL)와 함께 37℃에서 밤새 가교시켰다. Jurkat 세포 상에서 4-1BB에 결합되는 것으로 확인된 10종의 클론에 대한 결과가 도 3 내지 도 12에 제시되어 있다.
인텔리사이트(Intellicyte) 상에서 세포를 GFP 리포터 발현에 의해 밝혀진 NKkB 경로 활성화에 대해 분석하였다. 결과는 항체가 2차 항체 가교 부재 하에 Jurkat 세포 상에서 4-1BB 경로를 활성화시킨다는 것을 나타낸다.
실시예 3 - 우토밀루맙 또는 우렐루맙 및 11D4/18D8을 사용하여 생체외 배양된 고형 종양 단편 (다중 조직학)으로부터 TIL을 확장시키는 방법, 및 TIL의 확장 및 기능에 대한 4-1BB 및/또는 OX40의 항체를 사용한 활성화의 효과
TIL은, 손상 연관 분자 패턴 분자들 (DAMP)의 국부 축적 뿐만 아니라 CTLA-4 및 PD-1을 포함한 유도된 체크포인트 수용체가 종종 연루된 면역억제 미세환경과 연관된 모든 성인 종양에서 다양한 정도로 발견되는, 주로 항원 경험이 있는 (비-나이브) T 세포이다. 문헌 [Chacon, et al., Clin. Cancer Res. 2015, 21, 611-21; Joseph, et al., Clin. Cancer Res. 2011, 17, 4882-91]. 이들 마커, 뿐만 아니라 TIM3, LAG3 및 TIGIT는 소진된 표현형을 규정한다. 이에 따라, TIL-발현된 공동-자극 수용체는 TIL 운명 및 확장을 변형시킨다. TIL 상의 4-1BB 및/또는 OX40의 활성화는 IL-2 단독으로 달성가능한 경우를 넘어서는 종양 단편으로부터의 TIL의 확장을 가능하게 한다. 다른 공동-자극 수용체의 활성화 및/또는 체크포인트 수용체의 길항작용은 TIL 기능 (생존, 종양 면역억제의 우회), 종양 단편으로부터의 이주를 추가로 증진시킬 것이고, 시험관내 확장을 촉진할 것이다. 또한, 이들 시험관내 연구는 이들 항체를 단독으로 또는 TIL의 입양 전달과 조합하여 생체내 적용한 경우에 대한 반응성을 예측할 수 있다. 이들 2종의 활성화 공동-자극제 분자 (예를 들어, OX40, 11D4 또는 18D8, 및 4-1BB, 우토밀루맙 또는 우렐루맙)에 특이적인 면역조정 mAb가 이러한 능력에 대해 시험될 수 있다. 종양 단편 내에서 공동자극 수용체인 4-1BB 및 OX40의 활성화는 종양의 단편으로부터의 TIL 이주, 증식, 기억 표현형의 촉진 및 출현 T 세포의 세포독성을 증진시키는 것으로 가정된다. 본 연구의 주요 목적은 (a) 4-1BB 및 OX40 조합에 특이적인 mAb 또는 (b) 항-4-1BB 및 (c) 항-OX40 단독이 종양 단편으로부터의 TIL의 세포독성 및 기억 표현형의 결과물을 증대시키는지 여부를 결정하는 것이다.
(a) OX40 및 (b) 4-1BB에 특이적인 각각의 정제된 mAb 15 mg을 사용한다. 다양한 조직학의 종양을 상업적 공급원으로부터 수득할 수 있다. 총 20개의 독립적인 환자 종양을 수득할 것이다. 종양을 멸균 HBSS 또는 또 다른 적절한 배지 중에 넣어 수송할 것이다. 종양은 멸균 상태를 유지하기 위해 단지 층류 후드에서만 취급할 것이다. 가능한 경우 (종양 > 0.5 cm 직경인 경우), 종양의 한 부분을 FFPE를 위해 가공하고/거나 하류 IHC 및/또는 DNA/RNA 단리를 위해 동결보존할 것이다. IHC를 통한 바이오마커 분석은 CD3, CD11c, 및 PD1 및 PD-L1을 포함할 것이다. 가능할 때마다, 자가 혈액 샘플 (최대 20 mL)을 획득할 것이고, PBMC를 동결보존할 것이다. 종양에 대해 전체 엑솜 서열분석을 수행하는 경우, 보관된 자가 PBMC로부터의 엑솜 서열을 정규인 것 (즉, 돌연변이 부재)으로 규정할 것이다. 대안적으로, 종양 단세포 현탁액을 이용할 수 있다. 종양을 수령 후 세척하고, 2-3 mm 단편으로 분할하고, 삼중으로, 6,000 IU/mL IL-2 (재조합) 단독, OX40 효능제, 항-4-1BB 효능제, 및 OX40 및 4-1BB 효능제의 조합물로 보충된 배양 배지를 갖는 24-웰 플레이트 (웰당 1개의 단편) 또는 6-웰 플레이트 (웰당 4개의 단편) 내의 세포 배양물에 넣을 것이다. 충분한 종양이 이용가능한 일부 실험에서, IL-2의 적정물 (6,000; 600; 60; 및 0 IU의 IL-2)을 시험할 것이다. IL-2에 대한 부형제 대조군을 사용할 것이다. 각각의 mAb의 최종 농도는 30 μg/mL일 것이다. 24-48시간의 배양 후, 각각의 조건으로부터 250 μL의 상청액을 수집하고, 시토카인 및 케모카인 농도 (pg/106개 세포/24시간)의 후속 분석을 위해 -20℃에서 저장할 것이다. 각각의 조건으로부터 제11일, 제21일 및/또는 '사전-REP' 일에 TIL을 수집할 것이다 (샘플당 적어도 500,000개 세포). TIL의 2개 분취물을 펠릿화하고, <10 μL의 PBS 중에 재현탁시키고, -80℃에서 동결시킬 것이다. <106개 미만의 세포가 수집되는 경우, 단지 유전자 발현 어레이만을 수행할 것이다. 배양물을 제7일에 "소모된" 배지의 부분 제거 및 동일 부피의 배양 배지 플러스 6000 IU/mL IL-2의 첨가에 의해 공급할 것이다. 소모된 배지를 멀티플렉스 검정 (예를 들어, 루미넥스 100 시스템)을 사용하는 후속 시토카인/케모카인 분석을 위해 -20℃에서 저장할 것이다. 실험 조건의 1회 초과 반복의 개시에 충분한 종양 단편이 이용가능한 경우 제7일에 추가의 mAb를 배양물에 첨가할 것이다. TIL 배양물을 추가의 14일 동안 유지할 것이다. 제21일에, 유동 세포측정법을 사용하여 총 세포 수율, 생존율, 세포 표면 및 세포내 면역표현형을 결정할 것이다. 하기 마커가 포함될 것이다: CD45RA, CCR7, CD3, TCR-알파/베타, CD4, CD8, CXCR3, CD56, CD27, CD28, PD-1, PD-L1, BTLA, KLRG1, CD137, CD134, CD33, CD57, CD25, CD127, TIM-3, LAG-3, TIGIT, RAGE, 및 Ki67. 충분한 세포가 이용가능한 경우, CD107a, NKG2D, KIRS, 케모카인 사멸 수용체 (Fas, DR4) 및 항-아폽토시스/자가포식촉진 단백질 (BCL-2, BCL-XL, Bim, CD200 및 LC3/HMGB1)을 포함한 다른 바이오마커를 또한 평가할 것이다. 세포독성 및 조절 T 세포의 세포내 마커, 그랜자임 B, pSTAT3, pSTAT1, 및 FOXP3을 각각 평가할 것이다. 용해 검정을 사용하여 TIL의 용해 효력을 결정할 것이다. 추가의 종양 물질이 이용가능한 경우, (a) 효소적 소화 후 생성된 종양 세포 현탁액, (b) 상기 언급된 종양으로부터 생성된 자가 종양 세포주 및/또는 (c) 상동 세포주 (이용가능한 경우)를 수거된 TIL과 함께 공동-배양하고, IFN-γ 방출을 측정할 것이다. 과량의 세포가 수득되는 경우, 이들은 확대된 예산을 사용하여 이후 시점에 수행될 수 있는 유전자 발현 분석 (TCR Vβ 클론형결정 분석 포함)을 위한 RNA 및 DNA를 단리하기 위해 동결보존할 것이다. 효능 (하기 정의됨)이 항-PD-L1 및 항-CTLA-4 또는 그의 조합으로 관찰되는 경우, 종양 단편 배양물에서 지시된 mAb(들)의 농도를 낮추거나 보다 상세한 용량 반응 평가를 수행할 가능성을 탐구할 것이다. 종양 단편이 제7일에 배양물에서 가시적인 경우, 이들을 수거할 것이고, 단세포 현탁액의 생성 후에 충분한 세포가 이용가능한 경우, 이들을 유전자 분석 및 유동 세포측정 표현형 분석 (그러한 우선순위로; 협의될 것임)에 적용할 것이다. 유동 세포측정 분석은 적절한 형광 mAb 패널을 사용한 염색 후 T 세포, 수지상 세포, 대식세포, B 세포 및 NK 세포의 표현형에 초점을 맞출 것이다. 마커는 다음을 포함할 것이다: CD11c, CD11b, HLA 부류 II, CD80, CD86, CD83, CD56, CD16, CD19, 및 CD20.
종양 단편 배양물에 대한 4-1BB 효능제, OX40 효능제 및 그의 조합물의 첨가의 효능을 평가하기 위해 사용된 기준은 하기와 같이 요약된다:
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확장 후 TIL (CD4 및/또는 CD8)의 증가된 수
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확장 후 Treg의 감소된 수
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이펙터 및 Treg에서의 T-세포 증식 마커 (Ki67)에서의 변화
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이펙터/기억/분화된 표현형, CD27, CD28, CD57, CD45RA, HLA-DR, CCR7, OX40, ICOS, CD45RA; 텔로머라제 길이에서의 변화
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증가된 NK 세포 (CD3-/CD56+) 수, 증식 및 활성화 상태
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T 세포에서 세포내 신호전달 단백질 또는 인단백질 수준 (예를 들어, AKT vs ERK)에서의 탐색적 변화
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재지시된 용해에 의해 측정된 바와 같은 증가된 CTL 활성/용해 능력
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TIL/종양 용해물, TIL/자가 종양 및/또는 TIL/상동 종양 공동-배양물에서의 증가된 IFN-γ/HMGB1 생산.
수행될 추가의 실험은 (1) 돌연변이된 유전자 및 가능한 네오-에피토프를 확인하기 위해 FFPE 또는 새로-동결된 종양 물질에 대한 전체 엑솜 서열분석 및 RNASeq, (2) 종양 단편 배양의 개시 24-48시간 후에 수집된 배양 상청액의 시토카인 및 케모카인 분석, (3) 제7일에 초기 배양물로부터 제거된 종양 단편의 유전자 발현 분석, (4) 고-처리량 TCR Vβ CDR3 영역 서열분석을 사용하는 단리된 TIL의 TCR 클론형 분석, (5) 자가/상동 종양 상의 PD-L1의 IFN-γ 유도된 상향조절의 존재 하의 TIL 이펙터 기능에 관한 보관된 TIL에 대한 mAb의 영향 (하기 약술됨) 및 PCR/IHC/소화에 의한 잔류 T-세포에 대한 남아있는 단편의 분석을 포함한다.
검정 파라미터에서의 차이는 대응표본 및 독립표본 T-검정 (윌콕슨 순위-합계 및 서명 순위 검정)을 사용하여 유의성에 대해 시험할 것이다. 다수의 파라미터의 비교는 일원 및 이원 ANOVA 분석을 사용할 것이다. 연속 측정치 사이의 상관관계를 평가하기 위해 적용가능한 경우, 스피어만 회귀 분석을 사용할 것이다. 모든 데이터를 표로 작성하고 분석할 수 있다.
실시예 4 - 4-1BB, OX40 및 다른 TNFRSF 구성원에 대한 육량체 리간드를 사용하는 TIL의 확장
생체외 배양된 고형 종양 단편 (다중 조직학)으로부터의 종양 침윤 림프구 (TIL)의 확장 및 기능에 대한, 4-1BB, OX40, CD27 및 다른 TNFRSF 구성원에 대한 결합 도메인을 갖는 구조 I-A의 육량체 융합 단백질을 사용한 활성화의 효과를 본 실시예에서 연구한다. 100 mg의 각각의 육량체 융합 단백질 (예를 들어, 4-1BB, OX40 및 CD27)을, 하기 적응증: 육종, 결장직장암, 급성 골수성 백혈병, 난소암, 삼중 음성 유방암, 췌장암 (Ras 발현), 신장암 및 방광암으로부터 수득된 종양과 함께 사용할 것이다. 다양한 조직학의 종양을 상업적 공급원으로부터 입수할 것이다. 대략 20개의 독립적인 환자 종양을 수득할 것이다 (상기 열거된 바와 같은 적응증당 2-3개의 종양). 종양을 멸균 HBSS 또는 또 다른 적절한 배지 중에 넣어 리온(Lion)으로 수송할 것이다. 종양은 멸균 상태를 유지하기 위해 단지 층류 후드에서만 취급할 것이다. 대안적으로, 종양 단세포 현탁액을 이용할 수 있다. 종양을 수령 후 세척하고, 2-3 mm (길이 x 폭 x 높이) 단편으로 분할하고, 삼중으로, 6,000 IU/mL IL2 (재조합) 단독, 4-1BB HERA의 조합물 단독으로 보충된 배양 배지를 갖는 24-웰 플레이트 (웰당 1개의 단편) 또는 6-웰 플레이트 (웰당 4개의 단편) 내의 세포 배양물에 넣을 것이고, 대조군으로서의 역할을 할 것이고, 각각 3개의 실험 조건을 이용할 것이다. IL-2에 대한 부형제 대조군을 사용할 것이다. HERA의 최종 농도는 30 μg/mL일 것이다. 24-48시간의 배양 후, 각각의 조건으로부터 250 μL의 상청액을 수집하고, 시토카인 및 케모카인 농도 (pg/106개 세포/24시간)의 후속 분석을 위해 -20℃에서 저장할 것이다. 각각의 조건으로부터 제11일, 제21일 및/또는 '사전-REP' 일에 TIL을 수집할 것이다 (샘플당 적어도 500,000개 세포). TIL의 2개 분취물을 펠릿화하고, <10 μL의 PBS 중에 재현탁시키고, 동결시킬 것이다. <106개 미만의 세포가 수집되는 경우, 단지 유전자 발현 어레이만을 수행할 것이다. 배양물을 제7일에 "소모된" 배지의 부분 제거 및 동일 부피의 배양 배지 플러스 6000 IU/mL IL-2의 첨가에 의해 공급할 것이다. 소모된 배지를 멀티플렉스 검정 (예를 들어, 루미넥스 100 시스템)을 사용하는 후속 시토카인/케모카인 분석을 위해 -20℃에서 저장할 것이다. 실험 조건의 1회 초과 반복의 개시에 충분한 종양 단편이 이용가능한 경우 제7일에 추가의 리간드를 배양물에 첨가할 것이다. TIL 배양물을 추가의 14일 동안 유지할 것이다.
제21일에, 유동 세포측정법을 사용하여 총 세포 수율, 생존율, 세포 표면 및 세포내 면역표현형을 결정할 것이다. 하기 마커가 포함될 것이다: CD45RA, CCR7, CD3, TCR-알파/베타, CD4, CD8, CXCR3, CD56, CD27, CD28, PD-1, PD-L1, BTLA, KLRG1, CD137, CD134, CD33, CD57, CD25, CD127, TIM-3, LAG-3, TIGIT, RAGE, 및 Ki67. 충분한 세포가 이용가능한 경우, CD107a, NKG2D, KIRS, 케모카인 사멸 수용체 (Fas, DR4) 및 항-아폽토시스/자가포식촉진 단백질 (BCL-2, BCL-XL, Bim, CD200 및 LC3/HMGB1)을 포함한 다른 바이오마커를 또한 평가할 것이다. 세포독성 및 조절 T 세포의 세포내 마커, 그랜자임 B, pSTAT3, pSTAT1, 및 FOXP3을 각각 평가할 것이다. 용해 검정을 사용하여 TIL의 용해 효력을 결정할 것이다. 추가의 종양 물질이 이용가능한 경우, (a) 효소적 소화 후 생성된 종양 세포 현탁액, (b) 상기 언급된 종양으로부터 생성된 자가 종양 세포주 및/또는 (c) 상동 세포주 (이용가능한 경우)를 수거된 TIL과 함께 공동-배양하고, IFN-γ 방출을 측정할 것이다. 과량의 세포가 수득되는 경우, 이들은 나노스트링 인간 면역학 패널 (TCR Vβ 클론형결정 분석 포함)에 의한 유전자 발현 분석을 위한 RNA 및 DNA를 단리하기 위해 동결보존할 것이다. 종양 단편이 제7일에 배양물에서 가시적인 경우, 이들을 수거할 것이고, 단세포 현탁액의 생성 후에 충분한 세포가 이용가능한 경우, 이들을 유전자 분석 및 유동 세포측정 표현형 분석에 적용할 것이다. 유동 세포측정 분석은 적절한 형광 mAb 패널을 사용한 염색 후 T 세포, 수지상 세포, 대식세포, B 세포 및 NK 세포의 표현형에 초점을 맞출 것이다. 마커는 다음을 포함할 것이다: CD11c, CD11b, HLA 부류 II, CD80, CD86, CD83, CD56, CD16, CD19, 및 CD20.
종양 단편 배양물에 육량체 융합 단백질의 첨가의 효능을 평가하는데 사용된 기준은 상기 실시예 3에 요약되어 있고, 추가의 임의적인 기준은 표 53에 기재되어 있다.
표 53. TIL 확장 과정에서의 TNFRSF 효능제 융합 단백질에 대한 실험 성능에 대한 추가의 기준.
추가의 실험은 (1) 돌연변이된 유전자 및 가능한 네오-에피토프를 확인하기 위해 FFPE 또는 새로-동결된 종양 물질에 대한 전체 엑솜 서열분석 및 RNASeq, (2) 종양 단편 배양의 개시 24-48시간 후에 수집된 배양 상청액의 시토카인 및 케모카인 분석, (3) 제7일에 초기 배양물로부터 제거된 종양 단편의 유전자 발현 분석, (4) 고-처리량 TCR Vβ CDR3 영역 서열분석을 사용하는 단리된 TIL의 TCR 클론형 분석, (5) 자가/상동 종양 상의 PD-L1의 IFN-γ 유도된 상향조절의 존재 하의 TIL 이펙터 기능에 관한 리온 보관된 TIL에 대한 육량체 융합 단백질의 영향 및 PCR/IHC/소화에 의한 잔류 T-세포에 대한 남아있는 단편의 분석을 포함한다.
검정 파라미터에서의 차이는 대응표본 및 독립표본 T-검정 (윌콕슨 순위-합계 및 서명 순위 검정)을 사용하여 유의성에 대해 시험할 것이다. 다수의 파라미터의 비교는 일원 및 이원 ANOVA 분석을 사용할 것이다. 연속 측정치 사이의 상관관계를 평가하기 위해 적용가능한 경우, 스피어만 회귀 분석을 사용할 것이다.
실시예 5 - TIL 확장 및 이펙터 기능에 대한 4-1BB 및 항-OX40 효능작용 항체의 영향의 평가
본 연구의 목적은 TIL 확장 및 이펙터 기능에 대한 4-1BB (우렐루맙) 및 항-OX40 효능작용 항체의 영향을 평가하고 확장 동안 ICOS 및 GITR 발현에 대한 정보를 수득하는 것이다.
TIL 확장 및 표현형에 대한 항-4-1BB 및 항-OX40 효능작용 항체의 시험관내 평가를 하기와 같이 수행한다. 종양 단편 및 흡인물을 사용하여 항체 적정을 수행함으로써 TIL 확장과 함께 사용하기에 적합한 농도를 결정한다. 사전-REP 및 REP 둘 다에서 (이들 특정 조건에서) TIL 확장에 대한 항-4-1BB 및 항-OX40 효능제의 영향을 (1) IL-2 + 항-4-1BB 단독, (2) IL-2 + 항-OX40 단독, (3) IL-2 + 항-41BB + 항-OX40, 및 (4) IL-2 단독 (대조군)에 대해 평가한다. TIL 확장 및 표현형은 (1) 백분율 및 절대 세포 수 및 생존율 둘 다에서의 CD3+ 하위세트, CD3+CD8+ 하위세트 및 CD3+CD4+의 확장, 및 (2) 18 색 유동을 사용한 유동 세포측정법에 의한 분화 및 활성화 상태 (ICOS 및 GITR에 대한 염색, Ki67 및 아폽토시스 마커 포함)의 평가에 의해 평가할 것이다.
항-4-1BB 및 항-OX40 효능작용 항체를 사용하여 확장된 TIL의 TCR 레퍼토리 및 발현 프로파일링의 시험관내 평가를 하기와 같이 수행한다. 처리 조건들과 비교하여 IL-2 단독으로 확장된 TIL에서의 TCR 레퍼토리는 특이적 항-TRBV 항체를 사용한 염색 및 이레퍼토리, 인크.(iRepertoire, Inc.)로부터 상업적으로 입수가능한 TCR 레퍼토리 검정을 사용하여 제시된다. 나노스트링 분석과 함께 엔카운터 밴티지(nCounter Vantage)™ RNA 적응 면역 패널을 사용하여 개별 TIL에 대한 발현 프로파일링을 수행한다.
종양 반응성 및 이펙터 기능의 시험관내 평가를 하기와 같이 수행한다. 자가 종양 세포 현탁액 또는 종양 세포주를 생성한다 (가능한 한). 자가 종양 세포/분류된 자가 종양 세포 현탁액을, 상기 기재된 처리 조건들과 비교하여 IL-2 단독으로 확장된 자가 TIL과 함께 공동-배양함으로써, 종양 용해 검정에서의 종양 반응성을 평가한다. 자가 종양 세포 현탁액/종양 세포주가 이용가능하지 않은 경우, 항-CD3/CD28/CD137에 의한 T 세포 활성화 검정은 이펙터 기능을 평가하기 위해 대신 IFN-감마 생산/CD107a 발현을 측정함으로써 수행할 것이다.
실시예 6 - TIL의 생체외 확장 및 그의 이펙터 기능 활성에 대한 4-1BB 및 OX40 항체의 추가의 평가
OX40 및 4-1BB는 각각 항원 특이적 CD4+ 및 CD8+ 하위세트에 의해 발현되는 것으로 밝혀졌다. T-세포 상에서의 공동-자극 분자 (4-1BB 및 OX40)의 활성화는 이펙터 기능, 세포 생존 및 세포 확장을 증진시킨다. OX40 및 4-1BB 수용체의 활성화는 뮤린 모델에서 TIL 확장 및 항-종양 기능을 개선시키는 것으로 나타났다. 항-4-1BB 효능작용 항체는 시험관내 확장으로부터 수득된 흑색종 TIL의 수율을 증가시키는 것으로 나타났다. 하기 프로토콜에 따르면, TIL의 생체외 확장 및 그의 이펙터 기능 활성에 대한, 4-1BB 및 OX40에 대한 효능작용 항체 단독 및 조합의 효과를 연구할 수 있다.
도 13은 본 연구에 사용된 TIL 확장 프로토콜을 기재한다. 도 15에 예시된 바와 같이, 종양 조직을 환자로부터 회수하고, 단편화하고, 본원에 기재된 바와 같이 IL-2의 존재 하에 사전-REP 과정에 적용하였다. 이어서, 조직을 조사된 PBMC와 함께 IL-2 및 항-CD3 항체의 존재 하에 REP 과정에 적용하였다 (도 13).
하기 실험 조건을 본 연구에서 수행하였다:
T-세포 활성화, 증식 및 소진은 하기 목록에 따른 유동 세포측정법에 의해 모니터링할 수 있으며, 여기서 패널 1은 면역 세포 계통, T-세포 하위세트 및 T-세포 분화를 예시하고, 패널 2는 T-세포 활성화 및 소진을 예시한다:
본 발명의 임의의 하나의 이론에 제한되지 않으면서, 항-4-1BB 및 항-OX40 효능제의 조합물은 단독으로 또는 과정 2A와 조합되어, 특히 CD3+CD8+ TIL 하위세트에서 사전-REP TIL의 확장을 개선시키고/거나; 특정 종양의 성공률을 개선시키고/거나; 사전-REP TIL 확장의 지속기간을 단축시키고/거나; 항원 재자극 후 이펙터 기능 및 세포 생존을 포함한 TIL의 다중-기능성을 증진시킬 수 있는 것으로 예상된다.
실시예 7 - 자가 TIL의 효능 및 안전성을 평가하기 위한 임상 연구
본 실시예는 다중 종양 유형에 걸쳐 자가 TIL의 효능을 평가하기 위한 1/2상 임상 연구를 기재한다. 본 연구의 목적은 난소암 및 골육종을 갖는 대상체에서 RECIST v1.1에 따른 객관적 반응률 (ORR)을 사용하여 효능을 평가하는 것이다. 췌장관 선암종 (PDAC) 코호트에 대한 1차 목적은 6개월 생존율에 의해 측정된 바와 같은 효능을 평가하는 것이다.
2차 목적은 포함할 수 있다: (1) PDAC에서 RECIST v.1.1을 사용하여 ORR을 평가하는 것; (2) 코호트 내에서 및 코호트에 걸쳐 질환 제어율 (DCR)을 결정하는 것; (3) 반응 지속기간 (DOR)을 결정하는 것; (4) 무진행 생존 (PFS) 및 전체 생존 (OS)을 결정하는 것; 및 (5) 다중 종양 유형에 걸쳐 TIL을 사용한 입양 세포 요법의 안전성 프로파일을 추가로 특징화하는 것.
정의/약어
연구 설계 및 종점: 본 연구는 a) 통상적인 요법에 재발성 또는 불응성인 골육종, b) 백금-저항성 난소암, 및 c) 제1차 요법에서 진행되었거나 그로부터 최대 이익을 받은 PDAC를 갖는 대상체에서 TIL의 효능을 평가하는 것을 목표로 한다. 각각의 코호트는 제1 단계에서 10명의 대상체로 시작하고, 제2 단계로의 확장은 변형된 시몬 2 단계 설계에 의해 안내된다.
1차 종점은 난소암 및 골육종에 대한 RECIST v1.1에 의한 ORR, 및 PDAC에서의 6개월 생존율이다. PDAC 코호트에 대한 1차 종점은 6개월 생존율이다.
2차 효능 종점은 RECIST v1.1을 사용하는 ORR (PDAC의 경우), CRR, DCR, DOR, PFS, 및 OS를 포함한다. DCR은 완전 반응 (CR), 부분 반응 (PR) 및 안정 질환 (SD)을 포함한다. 안전성 종점은 등급별 및 연구 치료에 대한 관계별로, 등급 3 이상의 비-혈액학적 독성, SAE 및 치료-발현성 AE를 포함한 AE의 전체적 평가를 포함할 수 있다. PDAC 코호트에 대한 2차 종점은 RECIST v1.1을 사용하는 ORR이다.
탐색적 종점은 다음을 포함할 수 있다: (1) TIL 주입 후 연속적으로 단리된 주입 T 세포의 T 세포 수용체 (TCR) 서열분석 또는 대안적으로 TCR에 대한 mRNA의 i레퍼토리 평가에 의해 결정된 바와 같은 TIL 지속성의 지속기간; (2) 면역-관련 반응 기준에 의해 결정된 바와 같은 반응; (3) 다중채널 유동 세포측정법에 의한 주입 시점에서의 TIL의 면역학적 표현형; (4) IHC, TCR 서열분석 및 전사 분석을 통한 기준선 및 치료후 종양 평가; 및 (5) EORTC QLQ-C30 설문지에 따라 평가된 바와 같은 HRQOL.
참가자 포함 기준. 대상체는 18 내지 70세일 수 있다 (16-70세 대상체는 골육종 코호트에 등록될 수 있음). 대상체는 사전 동의를 기꺼이 제공해야 하고 제공할 수 있어야 한다. < 18세 환자의 경우, 그의 부모 또는 법적 보호자가 서면 사전 동의에 서명하여야 한다. 적절한 경우, 임상시험 가이드라인에 따라 승인을 얻을 수 있다. 등록시 및 림프구고갈 화학요법 개시 7일 이내 ECOG 0 또는 1의 임상 수행 상태. 대상체는 반응 평가에 사용될 표적 병변과 별개의 또는 그 외의 TIL의 생성을 위한 절제 생검에 적용가능한 종양 면적을 가져야 한다. 방사선 요법, 화학요법 및 생물학적/표적화 작용제를 포함한, 악성 종양에 지시된 임의의 선행 요법은, TIL 요법을 준비하기 위한 종양 절제로부터 적어도 28일 전에 중단되어야 한다.
등록 7-14일 (예를 들어, 7일) 이내 및 림프구고갈 화학요법 시작 12시간 내지 48시간 (예를 들어, 24시간) 이내에 대상체는 하기 실험실 기준 중 하나 이상을 충족할 수 있다: (1) 절대 호중구 수 (ANC) > 1000개/mm3; (2) 헤모글로빈 > 8.0 g/dL (수혈 허용); (3) 혈소판 수 > 100,000개/mm3; (4) ALT/SGPT 및 AST/SGOT < 2.5 x 정상 상한치 (ULN) (간 전이가 있는 환자는 LFT ≤ 5.0 x ULN을 가질 수 있음); (5) 계산된 크레아티닌 클리어런스 (콕크로프트-가울트) ≥ 40.0 mL/분; (6) 총 빌리루빈 ≤ 1.5 X ULN; (7) 프로트롬빈 시간 (PT) 및 활성화된 부분 트롬보플라스틴 시간 (aPTT) ≤ 1.5 X ULN (비타민 K에 의한 보정 허용), 대상체가 항응고제 요법을 받고 있지 않는 한 (이는 절제 생검 전 및 후에 임상시험 표준에 따라 관리되어야 함); 및 (8) 음성 혈청 임신 검사 (가임 여성 대상체).
또한, 대상체는 확인된 인간 면역결핍 바이러스 (HIV) 감염을 갖지 않아야 한다. 대상체는 활성 허혈 및 480 ms 미만의 보정된 QT 간격 (QTc)을 나타내지 않는 12-리드 심전도 (EKG)를 가져야 한다. 40세 이상의 대상체는 또한 스트레스 심장 검사 (즉 EKG 스트레스 검사, 스트레스 탈륨, 도부타민 심장초음파 또는 심장 허혈을 배제할 수 있는 다른 스트레스 검사)에서 음성이어야 한다. 치료 연구자가 가족력 또는 위험 인자에 의해 타당한 것으로 여기는 경우 40세 미만의 대상체에 스트레스 검사가 요구될 수 있다. 가임 대상체는 사전 동의 시점에 시작하여 림프구고갈 요법 완료 후 1년 동안 승인된 고도로 효과적인 산아 제한 방법을 기꺼이 실시하여야 한다. 대상체는 연구 방문 스케줄 및 다른 프로토콜 요건을 고수할 수 있어야 한다. 마지막으로, 강제 호기량 값 (FEV) 1이 예측치의 65% 초과이거나 또는 강제 폐활량 (FVC)이 예측치의 65% 초과를 나타내는 폐 기능 검사 (폐활량측정법).
상기 일반적 포함 기준을 충족시키는 것 이외에, 대상체는 또한 코호트 특이적 기준을 충족시켜야 한다.
난소암의 경우, 대상체는 고등급 비-점액성 조직학을 가질 수 있다 (암육종이 허용됨). 또한, 대상체는 적어도 2차의 선행 화학요법 (즉, 제1차 보조 화학요법 플러스 재발성/진행성 질환에 대한 추가의 1차 요법)에 실패하였을 수 있다.
골육종의 경우, 대상체는 통상적인 요법에 재발성이거나 또는 불응성이 되었을 수 있고, 고용량 메토트렉세이트, 독소루비신, 시스플라틴 및/또는 이포스파미드의 일부 조합물을 포함한 요법을 받았을 수 있다.
췌장 선암종의 경우, 대상체는 소수-전이성 질환을 동반한 PDAC의 조직학적으로 또는 세포학적으로 기록된 진단을 가질 수 있다. 대상체는 제1차 요법에서 진행되었거나 그로부터 최대 이익을 받았을 수 있다. 환자는 비제한적 차수의 선행 표준 관리 요법을 받았을 수 있다. 복수 또는 암종증을 갖는 환자는 연구에 적격이 아니다. 환자는 등록 7일 내에 ≥ 3.0 mg/dL의 알부민을 필요로 할 수 있다.
참가자 배제 기준. 다음 다수의 기준이 연구로부터 참가자를 배제시킬 수 있다:
a.
정맥내 항생제를 필요로 하는 활성 전신 감염, 응고 장애 또는 심혈관계, 호흡기계 또는 면역계의 다른 주요 의학적 질병. PI 또는 그/그녀의 피지명자는 등록의 적절성과 관련하여 최종 결정을 내릴 것이다.
b.
활성 바이러스 간염을 갖는 환자.
c.
스크리닝시 좌심실 박출 계수 (LVEF) < 45%를 갖는 환자.
d.
선행 입양 세포 요법의 이력을 갖는 환자.
e.
등록 전 말초 신경병증, 탈모증 또는 백반증을 제외한, 유해 사건에 대한 일반 독성 기준 (CTCAE) v4.03에 따른 등급 2 초과의 지속적인 선행 요법-관련 독성.
f.
1차 면역결핍.
g.
기관 또는 조혈 줄기 세포 이식의 이력.
h.
만성 스테로이드 요법, 그러나 프레드니손 또는 그의 등가물은 <10 mg/일로 허용된다.
i.
임신 또는 수유 중인 환자.
j.
책임 연구자 또는 그/그녀의 피지명자의 견해에서 적절한 사전 동의를 막게 될 유의한 정신 질환의 존재.
k.
활성, 알려진 또는 의심되는 자가면역 질환을 포함한 임상적으로 유의한 자가면역 질환의 병력. 해소된 선행 체크포인트 억제제 요법의 부작용, 백반증, 건선, 제1형 당뇨병 또는 해소된 소아기 천식/아토피를 갖는 대상체는 이러한 규칙에 대한 예외일 것이다. 기관지확장제 또는 국부 스테로이드 주사의 간헐적 사용을 필요로 하는 대상체는 배제되지 않을 것이다. 호르몬 대체요법에서 안정한 갑상선기능저하증 또는 쇼그렌 증후군을 갖는 대상체는 배제되지 않을 수 있다.
l.
임상적으로 유의한 만성 폐쇄성 폐 질환 (COPD), 천식 또는 다른 만성 폐 질환의 병력.
m.
제2 악성종양의 병력 (최근 5년 내에 진단됨). 예외는 잠재적 치유 요법을 받은 피부의 기저 세포 암종, 피부의 편평 세포 암종 또는 상피내 자궁경부암을 포함한다.
n.
공지된 활성 중추 신경계 전이 및/또는 암종성 수막염의 병력. 이전에 치료된 뇌 전이를 갖는 대상체는, 이들이 안정하고 (시험 치료의 최초 투여 전 적어도 4주 동안 영상화에 의한 진행의 증거가 없고 임의의 신경계 증상이 기준선으로 복귀하였음), 새로운 또는 확대된 뇌 전이의 증거를 갖지 않고, 림프구고갈의 개시 전 적어도 7일 동안 스테로이드를 사용하지 않는 경우에 참가할 수 있다.
o.
림프구고갈의 개시 전 30일 이내에 생 백신을 받았다.
p.
연구자의 판단에서 참가 위험을 유의하게 증가시킬 임의의 다른 상태.
치료의 완료 또는 중단. 치료의 완료는 임의의 부피의 TIL 주입에 이어서 적어도 1회 용량의 아주반트 IL-2를 받은 것으로 정의될 수 있다.
본 연구는 림프구고갈 화학요법, TIL 주입 및 아주반트 IL-2 (최대 6회 용량)로 이루어진 1-회 치료 요법을 포함한다. 연구 치료로부터의 중단은 하기 기준 중 어느 것이 충족되는 경우 고려되어야 한다. 그러나, 환자가 또한 연구 참가로부터의 중단에 대한 기준을 충족시키지 않는 한, 사건 스케줄에 명시된 바와 같이, 요법의 전체 과정을 완료하지 않는 환자를 포함한 모든 환자의 추적 및 평가를 계속하기 위해 모든 노력이 이루어질 수 있다.
치료로부터 조기 중단에 대한 기준은 다음과 같다:
a.
TIL 주입 후 출현하는 증상을 동반한, 생명유지 기관 (심장, 신장, 뇌, 눈, 간, 결장, 부신, 폐)을 침범하는 등급 3 이상의 자가면역;
b.
연구자의 견해에서 의학적 관리 후 해소되지 않는 기관지연축 또는 전신 두드러기를 포함한 등급 3 이상의 알레르기 반응;
c.
관리 96시간 이내에 등급 2 이하로 감소하지 않는, IL-2로 인한 등급 3 이상의 독성;
d.
계속된 치료가 환자를 위한 것이 아니라는 연구자에 의한 결정;
e.
환자에 의한 철회. 환자 (또는 < 18세 환자의 경우 부모/법적 보호자)는 치료에 대한 동의를 철회할 수 있지만, 추적 평가 및/또는 생존 상태에 대해 계속 동의할 수 있다;
f.
임신;
g.
환자는 연구로부터의 조기 중단에 대한 기준을 충족시킨다; 및
h.
환자는 종양 수거 후 및 TIL 또는 IL-2 투여 전 연구에 대해 부적격이 되었다.
연구로부터의 조기 중단에 대한 기준은 다음과 같다:
a.
환자에 의한 철회. 환자 (또는 < 18세 환자의 경우 부모/법적 보호자)는 동의를 철회할 수 있다. 생존 상태 추적에 대해 계속 동의하도록 모든 노력이 이루어져야 한다;
b.
환자는 종양 수거 후 연구에 대해 부적격이 되었거나 또는 어떠한 연구 치료도 받지 않았다;
c.
연구자의 견해에서 림프구고갈, 입양 TIL 요법 및 아주반트 IL-2의 위험을 증가시킬, 절제 절차로부터의 임의의 합병증 또는 지연된 치유를 갖는다;
d.
수행 상태가 ECOG > 1 (림프구고갈 시작 전 7일 이내)로 감소한다;
e.
사망; 및
f.
환자와 접촉하려는 3회의 기록된 시도 후 추적 소실.
일부 대상체는 종양 수거 및 TIL 제조를 겪을 수 있으며, 임상시험용 제품의 주입을 받지 않을 수 있다. TIL이 림프구고갈 화학요법 후일지라도, 이유가 뭐든 환자에게 투여되지 않는 경우, 환자는 연구에 남아있어야 하며, 데이터 수집은 3년 동안의 생존 상태 및 임의의 새로운 항암 요법의 시작으로 축소될 수 있다. 이러한 대상체는 효능의 통계적 분석에 대해 평가불가능한 것으로 간주될 수 있고, 대체될 수 있다.
환자가 항암 요법을 개시하거나 또는 TIL 주입 후 질환 진행을 나타내는 경우, 이들은 연구에서 남아있을 수 있으며, 데이터 수집은 3년 동안의 반응 상태, 생존 상태 및 다른 항암 요법으로 축소될 수 있다.
연구 작용제. 림프구고갈 요법은 TIL 제조가 환자에 대해 성공적일 것으로 예상된다는 통지 후, 제-7일에 시작하도록 스케줄링되어 있다. 환자는 연구자의 판단으로 입원환자 또는 외래환자로서 림프구고갈 화학요법을 받을 수 있다. 림프구고갈 요법의 변형은 임상적으로 지시된 바와 같이 허용되고, 심하게 사전-치료된 환자 또는 장기간 골수 회복의 이력을 갖는 대상체에서 플루다라빈에 대해 하기 기재된 바와 같은 1일 혈액학적 파라미터에 의해 안내되어야 한다. 이러한 요법은 2회의 1일 용량의 시클로포스파미드 (메스나와 함께)에 이어서 5회의 1일 용량의 플루다라빈을 포함하고, 비골수절제 화학요법에 대한 임상시험 프로토콜/표준에 따라 투여되어야 한다. 제조 및 투여에 대한 가이드라인은 하기에 기재된다. 대상체는 실제 체중을 사용하여 투여되어야 하며, 하기에 정의된 바와 같은 이상적 체중의 140%를 초과하지 않아야 한다:
a.
남성에 대한 이상적 체중 = 50 kg + 2.3 x (키 60 인치 초과의 인치 수).
예: 5'10" 남성 대상체의 이상적 체중
50 + 2.3 x 10 = 73 kg
b.
여성에 대한 이상적 체중 = 45.5 kg + 2.3 (키 60 인치 초과의 인치 수).
예: 5'3" 여성 대상체의 이상적 체중
45.5 + 2.3 x 3 = 52.4 kg
림프구고갈에 필요한 약물은 시클로포스파미드, 플루다라빈 및/또는 메스나를 포함한다.
제0일 전 림프구고갈로부터의 변동 (예를 들어 주입 시간; 치료 스케줄 등)은 의료 기록에 기록될 수 있지만, 프로토콜 위반/일탈로 간주되지 않을 수 있다.
시클로포스파미드는 제-7일 및 제-6일에 대략 2시간에 걸쳐 250 mL 생리 염수 (NS) 중 20 내지 80 mg/kg/일 (예를 들어, 60 mg/kg/일) IV로 투여될 수 있다. 덱스트로스 5 중량% (D5W) 또는 NS 중 메스나 60 mg/kg이 제-7일 및 제-6일에 24시간에 걸쳐 정맥내로 주입될 수 있다. 상기 언급된 바와 같이 용량은 환자의 실제 체중을 기준으로 할 수 있지만, 과도한 독성을 방지하기 위해, 최대 이상적 체중 (상기 정의됨)의 140%를 기준으로 한 용량을 초과하지 않을 수 있다. 시클로포스파미드에 대한 용량 조정이 있을 수 있다.
이어서, 플루다라빈은 제-5일 내지 제-1일에 매일 대략 15-30분에 걸쳐 15 내지 50 mg/m2 (예를 들어, 25 mg/m2) IV 피기백 (PB)으로 주입될 것이다. 플루다라빈에 의한 과도한 독성을 방지하기 위해, 용량은 체표면적 (BSA)을 기준으로 할 수 있지만, 최대 이상적 체중의 140%를 초과하는 체중을 기준으로 표면적에 대해 계산된 용량을 초과하지 않을 수 있다. 혈액학적 파라미터 (완전 혈구 수 [CBC] 및 감별)는 림프구고갈 동안 매일 검토되어야 한다. 3 또는 4회 용량의 플루다라빈 후, 절대 림프구 수가 100개 세포/mm3 미만으로 하락하는 경우, PI와의 논의 후에 나머지 용량(들)의 플루다라빈을 생략할 수 있다. 플루다라빈 용량은 추정된 크레아티닌 클리어런스 (CrCl)에 따라 하기와 같이 조정될 수 있다: (1) CrCl 50-79 mL/분: 20 mg/m2로의 용량 감소; 및/또는 (2) CrCl 40-49 mL/분: 15 mg/m2로의 용량 감소.
이러한 프로토콜에서 사용될 수 있는 TIL 제품은 환자 자신의 종양으로부터 유래된 자가 TIL의 살아있는 세포 현탁액을 포함하는 세포성 임상시험용 제품이다. 각각의 용량은 최대 150 x 109개의 총 생존 림프구를 함유할 수 있다. 주입될 총 부피는 총 세포 용량에 따라 최대 600 mL일 수 있다.
림프구고갈 화학요법을 위해 아직 입원하지 않은 경우, 환자는 계획된 TIL 투여 1-2일 전에 입원하여 TIL 투여 전 밤새 정맥내 수화에 의해 준비될 수 있다. 환자는 IL-2 요법의 완료시까지 임상시험 표준에 따라 입원을 유지할 수 있다.
IL-2 주입은 TIL 주입의 완료 3-24시간 후에 시작할 수 있다. IL-2는 200,000 내지 1,000,000 IU/kg (예를 들어, 600,000 IU/kg)의 용량 (총 체중 기준)으로 투여될 수 있고, 임상시험 표준 관리에 따라 8-12시간마다의 빈도로 IV 주입에 의해 투여되고 최대 6회까지의 용량 또는 허용시까지 계속될 수 있다. 환자가 IL-2에 통상적인 가역적 등급 3 독성, 예컨대 설사, 오심, 구토, 저혈압, 피부 변화, 식욕부진, 점막염, 연하곤란 또는 체질 증상 및 실험실 변화를 제외한, IL-2에 기인한 등급 3 또는 4 독성을 경험하는 경우, IL-2 용량이 생략될 수 있다. IL-2의 관리는 표 54에 상세설명되어 있다. 이들 독성이 지지적 조치에 의해 24시간 이내에 용이하게 반전될 수 있다면, 추가의 용량이 제공될 수 있다. 2회 용량 초과의 IL-2가 생략되는 경우, IL-2 투여가 중지될 수 있다. 추가로, 투여를 유지할 지 또는 중지할 지 판단할 수 있다.
표 54. 잠재적 알데스류킨 독성의 관리
*독성이 12시간 이내에 반전되지 않는 한.
연구 절차 및 스케줄. 하기 절차가 본 연구에 사용될 수 있다.
잠재적 대상체는 연구자에 의해 연구에 관하여 공지받을 수 있다. 임의의 연구 관련 평가를 수행하기 전에 위험, 이익 및 대안을 논의할 수 있고 사전 동의 문서에 서명할 수 있다.
대상체는 대부분 또는 바람직하게는 모든 포함 기준을 충족시켜야 하고, 바람직하게는 배제 기준에 명시된 조건들 중 어느 것도 갖지 않는다. 일반적, 코호트, 특이적 및 치료 포함/배제 기준의 확인은 림프구고갈 화학요법 시작 7일 이내에 기록되어야 한다.
인구통계 데이터는 출생 날짜 (지역 규정에 따라 허용되는 바에 따름), 연령, 성별 및 인종/민족 기원을 포함할 수 있다.
관련 및 유의한 의료/외과적 병력 및 동시 질병은 스크리닝 (방문 1)에서 모든 환자에 대해 수집될 수 있고, 적용가능한 경우 업데이트될 수 있다. 기존 상태의 임의의 악화는 AE로서 보고되어야 한다. 환자의 선행 항암 치료가 또한 수집될 수 있다.
암의 코호트-특이적 진단 기록이 이루어지고 조직학적으로 확인될 수 있다.
스크리닝 (방문 1) 전 28일까지 환자에 의해 취해진 모든 의약 및 요법 (처방, 및 허브 보충물을 포함한 비-처방)은 동의 시점에 연구에서 금지된 의약을 중지한 날짜를 비롯하여 데이터베이스에 수집될 수 있다. 연구 동안 임의의 시점에서 환자에 의해 취해진 모든 의약 및 요법 또는 그의 변화가 의료 기록에 기록될 수 있다.
모든 기준선 등급 2 및 더 높은 독성은 CTCAE v4.03에 따라 평가될 수 있다. 스크리닝 후, 그러나 등록/종양 절제 전에 발생한 임의의 사건은, 이러한 사건이 프로토콜에 규정된 절차에 관련되지 않는 한, 데이터베이스에 의료 병력으로서 기록될 수 있다. 등록/종양 절제 후에 발생하는 임의의 사건은 6개월 방문, 대상체가 연구를 중단하거나 또는 다른 암 요법을 시작할 때까지 데이터베이스에 AE로서 포착될 수 있다.
활력 징후는 키, 체중, 맥박, 호흡, 혈압 및 체온을 포함할 것이다. 키는 단지 스크리닝 (방문 1)에서만 측정될 수 있다. 모든 다른 활력 징후는 적용가능한 시점에서 측정될 수 있다. 제0일 (방문 11/TIL 주입)에, TIL 주입 후 최대 대략 24시간 동안 활력 징후가 모니터링될 수 있다.
ECOG 수행 상태는 스크리닝 (방문 1) 및 사건 스케줄 상에 지시된 다른 시점에서 평가될 수 있다.
신체 검사는 종양 절제를 제외한 모든 방문에 대해 수행될 수 있고, 활력 징후 및 체중, 두경부, 심혈관, 폐, 사지 및 다른 관련 평가를 포함할 것이다. 추적 동안 수행되는 검사는 증상 지시될 수 있다. 검사 소견에서의 임상적으로 유의한 변화는 지시된 바와 같이 유해 사건으로서 기록될 수 있다.
안전한 혈액 및 소변 검사는 사건 스케줄에 지시된 바와 같이 모든 방문에서 지역에서 수집 및 분석될 수 있다.
고해상도 HLA 부류 I 유형결정을 위한 샘플 수집은 스크리닝 (방문 1)에서 수행될 수 있다.
하기 질환에 대한 혈청학은 임상시험 표준에 따라 지역에서 분석되도록 스크리닝 (방문 1)에서 완료될 수 있다: HIV, B형 간염 바이러스, C형 간염 바이러스, 시토메갈로바이러스 (CMV), 단순 포진 바이러스; 엡스타인-바르 바이러스 (EBV) (종양 절제/방문 2의 이전 3개월 이내에 있을 수 있음), 샤가스병, 인간 T 세포 림프향성 바이러스 및 웨스트 나일 바이러스. 겸상 적혈구 질환이 또한 스크리닝될 수 있다. 추가의 시험이 임상적으로 지시된 바와 같이 수행될 것이다.
크레아티닌 클리어런스는 단지 스크리닝에서만 콕크로프트-가울트 식을 사용하여 부위별로 계산될 수 있다.
모든 대상체는 기준선 12-리드 ECG 및 심장초음파 또는 MUGA에 의한 심실 기능의 평가를 가질 수 있다. 추가로, 40세 이상의 대상체 및 심혈관 질환 또는 흉통의 병력을 갖는 40세 미만의 대상체는 스트레스 검사에서 허혈 부재로 기록될 수 있다. 비정상적 MUGA 또는 심장초음파를 갖는 환자는 박출 계수 요건을 충족시킬 수 있고 등록 전 심장학 클리어런스를 얻을 수 있다.
스크리닝 (방문 1)으로부터 28일 이내에 폐 평가가 완료될 수 있다. 스크리닝 (방문 1) 전 6개월 이내에 완료된 선행 평가는 허용될 수 있다. 예측치의 65% 초과의 FEV1 또는 예측치의 65% 초과의 FVC가 요구된다. 비정상적 상부 기도 해부학 (예를 들어 기관절개술)으로 인해 신뢰할 수 있는 PFT 폐활량 측정을 수행할 수 없는 환자는 폐 기능을 평가하기 위해 6-분 보행 검사를 받을 수 있다. 이들 환자는 연령 및 성별에 대한 예측치의 적어도 80%의 거리를 보행하여야 하고 바람직하게는 보행할 수 있을 뿐만 아니라 전반에 걸쳐 90% 초과의 산소 포화도를 유지하여야 하고 바람직하게는 유지할 수 있다.
결장내시경검사는 단지 스크리닝 6개월 이내에 이전 면역요법으로 인한 등급 2 이상의 설사 또는 결장염이 기록된 환자에 대해서만 요구된다. 시각적 평가에 의해 비염증발생 점막을 갖는, 스크리닝으로부터 적어도 6개월 동안 무증상이거나 항-PD-1/항-PD-L1 치료 후 결장내시경검사가 정상인 환자는 결장내시경검사를 반복할 필요가 없을 수 있다.
건강 관련 삶의 질 (HRQOL) 설문지는 기준선 제-21일 (방문 3)에서 개인적으로 수행될 수 있고, 후속 방문에 대한 제1 절차로서 수행될 수 있다. 구체적 시점에 대해 사건 스케줄을 참조한다. 임의의 설문지를 완성하지 못한 것은 보고를 요구하는 일탈로 간주되지 않을 수 있다.
흉부, 복부 및 골반의 콘트라스트를 갖는 컴퓨터 단층촬영 (CT) 스캔에 의한 방사선촬영 평가는 종양 평가를 위해 모든 환자에 대해 요구된다. CT 스캔은 변형된 RECIST v1.1에 의한 진행성 질환이 주목될 때까지 (또는 환자가 전체 동의를 철회하는 경우) 사건 스케줄에 지시된 바와 같이 수행된다. 반응 평가는 시험에 참가하는 자격있는 방사선과의사에 의해 평가되고 기록되어야 한다. 조영제를 견딜 수 없는 환자에 대해서는 CT 스캔 대신 흉부, 복부 및 골반의 자기 공명 영상화 (MRI) 또는 양전자 방출 단층촬영 (PET) 스캔이 허용될 수 있다. 동일한 평가 방법 (CT 또는 MRI) 및 동일한 데이터 획득 기술은 각각의 확인 및 보고된 병변을 특징화하기 위해 연구 전반에 걸쳐 일관되게 사용되어야 한다. 초기 방사선촬영 평가는 TIL 주입후 6, 12, 18 및 24주에 이루어질 수 있다. 그 후, 환자는 대략 12주마다 반응에 대해 평가될 수 있다. 추가의 방사선학적 평가가 임상적으로 지시된 바와 같이 수행될 수 있다.
외과적 생검 전에, 대상체 적격성이 확인될 수 있고, PI 또는 피지명자는 임상 시험에의 환자 등록 및 후속 종양 절제에 대한 승인을 제공할 수 있다. 대상체는 임상시험 표준에 따라 외과적 생검을 수행하는 팀에 의해 사전-절차 상담 및 별도의 사전 동의를 받을 수 있다. 이상적으로는, 표적화된 종양은 이전에 조사되지 않았어야 한다. 종양이 이전에 조사된 경우, 조사와 절제 사이에 최소 1 내지 6개월 (예를 들어, 3개월)의 기간이 경과하였을 수 있으며, 이 시간 동안 추가의 표적-종양 성장이 나타났을 수 있다. 등록되는 경우, 종양 절제는 예상된 TIL 주입 (제0일) 전 대략 1 내지 12주 (예를 들어, 제6주)에 이루어질 것으로 예상된다. TIL은 전통적인 약물 제조의 경우보다 자가 혈액 제품 전달과 더 많은 공통점을 갖는 수단에 의해 조달 및 전달되는 자가 임상시험용 제품이다. 단지 환자 자신의 (자가) 연구 치료 (TIL)만이 동일한 개별 환자에게 투여되어야 한다는 것이 필수적이다. 이들 이유로, 환자 시편은 시편의 최적 품질을 보장하고 가공 실험실 시설로의 및 그로부터의 최소 수송 시간을 보장할 뿐만 아니라, 환자에게 다시 주입하는 것을 포함하여 항상 연구 제품의 적절한 확인을 보장하기 위해 엄격한 프로토콜에 따라 조달 및 취급될 수 있다.
추가의 또는 과량의 종양 조직이 TIL 수거를 위한 초기 절제 생검 시점에 안전하게 조달될 수 있는 경우, 연구를 위해 과량의 종양 조직이 조달될 수 있다. TIL 제조를 위한 적절한 양의 종양 조직의 제공은 연구를 위해 보내지는 추가의 종양 조직의 수집보다 우선한다. TIL 제조 및 추가의 분석 둘 다를 위한 적절한 종양 조직을 수득하기 위해 모든 노력이 이루어져야 한다. 추가로, 의무적인 연구-중 생검을 사용하여, 치료 후 분자 및 면역학적 변화를 확인하고, 뿐만 아니라 종양 내 주입된 T 세포의 존재를 기록할 수 있다. 종양 조직 분석은 다음을 포함할 수 있다: 1) 개별 면역 세포 집단을 확인하기 위한 면역조직화학; 및/또는 2) (치료후 생검에서) 종양으로 귀소하는 주입 TIL을 평가하기 위한 가능한 탐색적 게놈 및 전사체 평가 및 TCR 서열분석을 포함한, DNA 및 RNA 분석. TIL 제조를 위한 적절한 양의 종양 조직의 제공은 연구를 위한 추가의 종양 조직의 수집보다 우선한다. TIL 제조 및 추가의 분석 둘 다를 위한 적절한 종양 조직을 수득하기 위해 모든 노력이 이루어져야 한다.
주입 제품 (및 이들 샘플로부터 추출된 유전 물질)로부터 최대 500 x 106개 TIL이 연구를 위해 저장될 수 있다. 주입된 TIL의 유동 세포측정 분석이 수행될 수 있고, 주입 제품으로부터의 DNA가 TCR 서열분석을 위해 보내질 수 있다. 이들 조사 연구에서의 샘플을 사용하여 주입 전 및 후의 질환 및 TIL 특징에 관한 추가의 정보를 얻을 수 있다. 면역 모니터링 및 TCR 서열분석을 사용하는 T 세포 추적을 위해 환자로부터 말초 혈액이 수집될 수 있다. 면역 모니터링을 위한 혈액은 종양 절제 (방문 2)에서 채취될 수 있고, 후속 수집은 적용가능한 시점에 채취될 수 있다 (표 55 및 56 참조).
표 55. 예시적인 사건 스케줄 - 치료전 및 치료 단계.
a활력 징후는 키, 체중, 심박수, 호흡률, 혈압 및 체온을 포함할 수 있다. 키는 단지 스크리닝에서만 측정될 수 있다. BSA 및 BMI는 단지 제-7일 (방문 4)에서만 계산될 수 있다.
b제0일 (TIL 주입)에, 활력 징후는 주입 동안 30분마다, 이어서 4시간 동안 시간마다 (+/-15분), 이어서 달리 임상적으로 지시되지 않는 한 TIL 주입 후 최대 대략 24시간 동안 일상적으로 (4시간마다 내지 6시간마다) 모니터링될 수 있다.
c화학: 나트륨, 칼륨, 클로라이드, 총 CO2, 또는 비카르보네이트, 크레아티닌, 글루코스, BUN, 알부민, 칼슘, 마그네슘, 인, 알칼리성 포스파타제, ALT/SGPT, AST/SGOT, 총 빌리루빈, 직접 빌리루빈, LDH, 총 단백질, 총 CK, 요산, 및 혈청 크레아티닌. 갑상선 패널 (TSH 및 유리 T4를 포함함)은 방문 1 및 19에서 및 임상적으로 지시된 바와 같이 수행될 것이다. 응고: PT, PTT 및 INR. 혈액학: 감별 CBC; 요분석: 빌리루빈, 혈액, 글루코스, 케톤, pH, 단백질, 비중, 색상 및 외관.
d제-7일 및 제-6일 (방문 4 내지 5)에 2일 동안 시클로포스파미드와 메스나, 이어서 제-5일 내지 제-1일 (방문 6 내지 10)에 5일간 플루다라빈.
eTIL 주입은 NMA 림프구고갈 요법에서의 작용제의 마지막 투여 1 내지 2일 후에 수행될 것이다.
fTIL 주입 후 대략 3 내지 24시간 이내에 600,000 IU/kg의 IL-2를 개시하고 최대 6회 용량에 대해 8-12시간마다 계속한다.
표 56. 예시적인 사건 스케줄: 치료후 및 장기간 추적.
aPE는 위장관 (복부, 간), 심혈관, 사지, 머리, 눈, 귀, 코 및 인후, 호흡기계, 피부, 정신 (정신 상태), 일반 영양을 포함할 수 있다. 추적 동안 수행된 PE는 증상 지시될 수 있다.
b활력 징후는 체중, 심박수, 호흡률, 혈압 및 체온을 포함할 수 있다.
c화학: 나트륨, 칼륨, 클로라이드, 총 CO2, 또는 비카르보네이트, 크레아티닌, 글루코스, BUN, 알부민, 칼슘, 마그네슘, 인, 알칼리성 포스파타제, ALT/SGPT, AST/SGOT, 총 빌리루빈, 직접 빌리루빈, LDH, 총 단백질, 총 CK, 요산, 및 혈청 크레아티닌. 갑상선 패널 (TSH 및 유리 T4를 포함함)은 임상적으로 지시된 바와 같이 수행될 것이다. 응고: PT/PTT/INR. 혈액학: 감별 CBC; 요분석: 빌리루빈, 혈액, 글루코스, 케톤, pH, 단백질, 비중, 색상 및 외관.
d지시된 시점에서 흉부, 복부 및 골반의 CT 스캔이 요구된다. 연구자의 판단에 따라 추가의 방사선학적 평가가 수행될 수 있다. 환자가 조영제을 견딜 수 없는 경우 MRI가 사용될 수 있다.
e스크리닝 후, 그러나 등록/종양 절제 전 발생한 임의의 AE는 데이터베이스에 의료 병력으로서 기록될 수 있다. 등록/종양 절제 후 발생한 임의의 AE는 임상적으로 지시된 바와 같이 제168일 (방문 21/제6개월)까지 또는 후속 항암 요법의 최초 투여까지 중 어느 것이든 먼저 발생하는 때에 AE로서 포착될 수 있다. 프로토콜-요구 절차 또는 치료에 기인한 모든 AE는 제672일 (방문 25/제24개월)까지 수집될 수 있다.
f면역 모니터링을 위한 혈액 채취는 제168일 (방문 21/제6개월) 내지 제336일 (방문 23/제12개월)에서 ETV 사이의 방문에서 수집될 것이다.
병용 의약, 치료 및 절차. 항신생물제 이외의 다른 의학적 문제를 위한 의약이 허용된다. TIL 투여에 잠재적으로 영향을 미치는 만성 상태에 대해 항염증성 약물을 필요로 하는 상태를 갖는 자는 단지 PI의 승인 하에서만 고려될 수 있다. 표적 및 비-표적 병변에 영향을 미치지 않는 한, 종양 절제와 림프구고갈 사이에 완화적 방사선 요법이 허용된다. ≤ 10 mg/일의 프레드니손 또는 등가물의 전신 스테로이드 요법의 사용이 허용된다. > 10 mg/일의 프레드니손 또는 등가물의 사용은 알려진 질환의 악화의 경우에 또는 연구자의 판단에 따라 연구에서의 새로운 증상의 치료를 위해 허용된다. 병용 의약에서의 임의의 변화는 시험 전반에 걸쳐 단지 환자의 의료 기록에만 기록될 수 있다. CT IV 조영제 알레르기를 갖는 대상체의 경우, MRI 또는 PET-CT (정맥내 조영제 부재)를 사용하는 방사선학적 평가가 바람직한 관리이다. 각각의 환자에 대한 영상화 양식에서의 일관성을 유지하기 위해 모든 시도가 이루어져야 한다.
모든 다른 항신생물 약물 및 방사선은 금지된다. 대상체는 또한 일반의약품 보충물 및 항상성 제품, 특히 항염증 특성을 갖는 것으로 알려진 것, 예컨대 보스웰리아를 사용하지 못하게 된다.
림프구고갈로 치료된 환자는 기회 감염에 적용되고, 적절한 감염제 예방이 요구된다. 하기 열거된 예방 요법 및 지속기간은 감염성 질환 전문가와의 상담에서 임상적으로 지시된 바와 같이 변형될 수 있다.
환자는 ANC가 500개/mm3 초과로 회복될 때까지, 매일 100 내지 1000 mg (예를 들어, 500 mg)의 레보플록사신 (또는 동등한 항생제)를 받을 수 있다.
환자는 이중 강도 (DS) 정제로서의 트리메토프림 (TMP) 및 술파메톡사졸 (SMX)의 고정 조합물 [DS 정제 = TMP 160 mg/정제 및 SMX 800 mg/정제]을 1주 2회 PO BID로 받을 수 있다. TMP/SMX-DS는 제-7일에 시작하여 림프구고갈 후 최소 6개월 동안 계속되면서 환자에 의해 취해질 수 있다. 술파 알레르기를 갖는 환자의 경우, 펜타미딘이 림프구고갈 후 6개월 동안 21일마다 300 mg IV로 제공될 수 있다 (병원에서 퇴원하였을 때). IV 펜타미딘이 퇴원 후 실행가능하지 않은 경우, PCP 예방제는 림프구고갈 후 6개월 동안 표준 관리에 따라 아토바쿠온과 같은 경구 항미생물제로 대체될 수 있다. 환자는 고용량 IL-2 요법 동안 예방적 항생제를 정맥내로 제공받을 수 있다.
TIL 주입일에 시작하여 대상체는, 환자가 경구 의약을 취할 수 있는 경우 매일 발라시클로비르 100 내지 1000 mg (예를 들어, 500 mg)을 PO 투여받을 수 있거나, 또는 환자가 정맥내 의약을 필요로 하는 경우 8시간마다 아시클로비르 5 mg/kg을 IVPB 투여받을 수 있으며, 이는 6개월 동안 (또는 치료 의사의 판단으로) 계속된다. 가역적 신기능부전은 IV 투여된 아시클로비르에서 보고되었지만 경구 아시클로비르에서는 보고되지 않았다. 섬망, 진전, 혼수, 급성 정신 장애 및 비정상적 뇌파도를 포함한 신경학적 독성은 보다 고용량의 아시클로비르에서 보고되었다. 증상이 발생하는 경우, 투여량 조정이 이루어질 수 있거나 약물이 중단될 수 있다. 아시클로비르는 DNA 합성을 방해하는 다른 뉴클레오시드 유사체 (예를 들어, 간시클로비르)와 함께 병용으로 사용되지 않을 수 있다. 신장 질환을 갖는 환자에서, 용량은 제품 라벨링에 따라 조정된다.
환자는 T 세포 주입으로 (제0일) 매일 플루코나졸 50 내지 500 mg (예를 들어, 200 mg)을 PO로 시작할 수 있고 6개월 동안 (또는 치료 의사의 판단으로) 계속할 수 있다.
NMA 림프구고갈 화학요법 후 호중구감소증의 지속기간을 감소시키기 위해, 필그라스팀 (G-CSF)이 적어도 연속 2일 동안 ANC > 500개/mm3까지 매일 1 내지 10 μg/kg/일 (예를 들어, 5 μg/kg/일)로 피하로 제공될 수 있다. 300 mcg 또는 480 mcg 투여 형태에 상응하는 대략적인 투여가 허용된다.
온단세트론은 화학요법 준비 요법 동안 오심 및 구토를 제어하는데 사용될 수 있다. 이는 두통, 어지럼증, 근육통, 졸음, 권태감 및 쇠약을 야기할 수 있다. 보다 덜 흔한 부작용은 흉통, 저혈압, 소양증, 변비 및 요폐를 포함한다. 부작용 및 구체적 용량 지침의 전체 목록에 대해 포장 삽입물을 참조한다.
푸로세미드는 시클로포스파미드를 사용한 화학요법 준비 요법 동안 소변 배출량을 증대시키는데 사용될 수 있다. 유해 효과는 어지럼증, 현기증, 감각이상, 쇠약, 기립성 저혈압, 감광성, 발진 및 소양증을 포함한다. 부작용 및 구체적 용량 지침의 전체 목록에 대해 포장 삽입물을 참조한다.
환자는 지역 안티바이오그램에 따라 적절한 슈도모나스 커버리지를 갖는 제3 또는 제4 세대 세팔로스포린 또는 500개/mm3 미만의 ANC를 갖는 온도 ≥ 38.5℃에 대한 퀴놀론인 광범위-스펙트럼 항생제를 시작할 수 있다. 아미노글리코시드는 가능한 경우 피해야 한다. 감염성 질환 상담은 설명되지 않는 열 또는 임의의 감염성 합병증을 갖는 모든 환자로부터 얻어질 수 있다.
가이드로서 1일 CBC 값을 사용하여, 환자는 또한 필요에 따라 혈소판 및 농축 적혈구를 받을 수 있다. 임상 시나리오에 의해 안내되는 Hgb > 8.0 g/dL 및 혈소판 > 20,000개/mL를 유지하기 위한 시도가 이루어질 수 있다. 백혈구 필터는 수혈된 WBC에 대한 감작화를 감소시키고 CMV 감염의 위험을 감소시키기 위해 모든 혈액 및 혈소판 수혈에 이용될 수 있다. 조사된 혈액 및 혈액 제품이 사용되어야 한다.
통계적 방법의 설명. 난소암 및 골육종 코호트에 대한 1차 종점은 RECIST 1.1 기준을 사용하여 연구자에 의해 평가된 바와 같은 ORR이다. ORR은 확인된 CR 또는 부분 반응 (PR)을 갖는 환자의 수의 합계를 모든-치료군 분석 세트에서의 환자의 수로 나눈 것 x 100%로서 유도된다. PDAC의 코호트에 대한 1차 종점은 183일 동안 생존한 환자의 백분율이다. 6-개월 랜드마크 생존율은 카플란 마이어 방법에 기초하여 계산될 수 있다.
PFS는 림프구고갈의 시작일로부터 PD 또는 임의의 원인으로 인한 사망 중 먼저 일어난 사건까지의 시간 (개월)으로서 정의된다. 데이터 컷 또는 연구 종료 (즉, 데이터베이스 잠금) 시점에서 PD 또는 사망을 경험하지 않은 환자는 마지막 적절한 종양 평가시에 그의 사건 시간이 중도절단될 수 있다. DOR은 CR 또는 PR 중 먼저 관찰된 반응에 대해 충족되는 제1 시점 측정 기준으로부터 진행성 질환 (PD) 또는 사망이 발생하는 제1 날짜까지로 측정된다. 데이터 컷 또는 연구 종료 시점 전에 PD 또는 사망을 경험하지 않은 환자는 마지막 적절한 종양 평가시에 그의 사건 시간이 중도절단될 수 있다. DOR의 분석은 RECIST v1.1에 따라 연구자에 의해 평가된 바와 같이 단지 반응자에만 기초한다. DCR은 RECIST v1.1에 따라 PR/CR 또는 SD를 달성한 환자의 수의 합계를 모든-치료군 분석 세트에서의 환자의 수로 나눈 것 x 100%로서 유도된다. OS는 림프구고갈의 시작일로부터 임의의 원인으로 인한 사망까지의 시간 (개월)으로서 정의된다. 데이터 컷 또는 연구 종료 시점에 만료되지 않은 환자는 그의 알려진 생존 상태의 마지막 날에 그의 사건 시간이 중도절단될 수 있다.
모든 탐색적 분석은 서술적일 수 있고, 코호트별로 수행될 수 있다. 일부 분석 결과는 최종 임상 연구 보고로부터 분리되어 보고될 수 있다. T-세포 레퍼토리 분석이 TIL 지속성을 결정하는데 사용될 수 있다. TIL 요법 전 및 후 종양의 분자 및 면역학적 특색은 엑솜 서열분석 및 면역조직화학/면역형광 분석을 사용하여 결정될 수 있다. irRECIST 기준을 사용하여 연구자에 의해 측정된 바와 같은 ORR, DCR, DOR 및 PFS에 대한 감수성 분석이 수행될 수 있다. 적절한 경우, 피어슨 상관 계수 및 선형 회귀가 표현형 속성 (CD8 %, CD27 및 CD28 발현 등)과 요법에 대한 종양 반응 사이의 관계를 정량하기 위해 사용될 수 있다. PDAC 환자의 기준선 CA19-9 및 난소암 환자의 기준선 CA-125가 효능 결과와의 잠재적 상관관계에 대해 평가될 수 있다.
등급 3 이상의 치료-발현성 AE 및 그의 발생률은 다른 암 질환 유형에서의 TIL의 이력 데이터와 서술적으로 비교될 수 있다. AE 발생률은 코호트당 95% CI 및 조합된 모든 코호트로 추정될 수 있다. 치료-발현성 AE는 시클로포스파미드의 최초 투여로부터 시작하여 IL-2의 마지막 투여로부터 6개월까지이다.
연구 배치 요약은 1차 이유로 조기에 연구를 나온 환자의 수 및 백분율을 다음 2 부분에서 나타낼 수 있다: (1) 종양 수거 후 림프구고갈 전; 및 (2) 시클로포스파미드의 최초 투여 시 또는 그 후. 연구 종결 시점에 치료되고 생존 상태에 추적되고 있는 환자 (즉, 완료자)는 이러한 요약의 부분이 아니다. 계획된 전체 연구 치료 용량을 받지 않은 환자는 또한 그의 1차 이유에 의해 요약될 수 있다.
코호트당 종양 반응 데이터의 요약은 RECIST 1.1에 따라 연구자에 의해 평가된 바와 같은 최상의 전체 반응을 기초로 할 수 있다. 요약은 모든-처리군 분석 세트에서의 환자 사이에서 윌콕슨 점수 방법에 의해 ORR에 대한 80% 신뢰 구간 (CI) 및 DCR에 대한 95% CI로 백분율을 나타낼 수 있다. 사건까지의 중앙 시간 및 랜드마크 비율은 또한 KM 방법에 의해 6개월 생존율에 대해 80% CI 및 DOR, PFS, OS 및 다른 랜드마크 비율에 대해 95% CI로 측정될 수 있다.
모든 탐색적 분석은 서술적일 수 있고, 코호트별로 수행될 수 있다. 분석은 본 연구에 대한 통계적 분석 계획과 별도로 규정될 수 있고, 임상 연구 보고 (CSR) 외부에서 독립적으로 보고될 수 있다. HRQOL은 EORTC QLQ-C30 도구를 사용하여 평가될 수 있고, 공개된 평가 매뉴얼에 따라 분석될 수 있다.
샘플 크기. 난소암 및 골육종의 경우, 시몬 2 단계 미니맥스 설계가 각각의 코호트의 효능을 독립적으로 모니터링하는데 사용될 수 있다. 귀무 가설에 의해 5%의 이력 반응률이 20%의 추정 실험 코호트 반응률에 대해 시험된다. 제1 단계에서, 코호트당 10명의 환자가 치료될 수 있다. 이들 10명의 환자에서 확인된 반응이 존재하지 않는 경우, 환자가 평가가능한 한, 코호트는 종결될 수 있다. 표적 병변 직경 합계의 최대 % 감소 및/또는 PD/사망까지의 시간을 포함한 다른 효능 추정치가 종결에 대해 고려될 수 있다. 확인된 반응은 제6주에서의 제1 평가 및 제12주에서의 제2 확인 스캔을 사용하여 RECIST 1,1 기준에 의해 결정될 것이다. 연구가 단계 II로 나아가는 경우, 추가의 8명의 환자가 치료될 수 있어 그 코호트에 대해 총 18명의 환자가 존재할 수 있다. 코호트에 대한 18명의 치료된 환자 중 3명 이상의 반응자는 임상적으로 관련된 것으로 간주되어 추가의 조사를 정당화할 수 있다. 이러한 설계의 검정력은 10%의 단측 유형 I 오류율 하에서 >=70%이다.
PDAC의 경우, 시몬 미니맥스 2-단계 설계가 또한 6개월 생존율을 모니터링하는데 사용될 수 있다. 귀무 가설에 의해 35%의 이력 6개월 생존율이 50%의 추정 실험 코호트 생존율에 대해 시험된다 (ASCO Jan 2016). 제1 단계에서, 11명의 환자가 추가 등록을 유지하지 않으면서 ≥ 6개월 동안 치료되고 추적될 수 있다. 최초 연구 약물 투여로부터 계수하여 183일 이내에 최초 11명의 환자 중 8명 이상의 사망이 존재하는 경우, 이러한 코호트는 종결로 간주될 수 있다.
그렇지 않으면, 추가의 11명의 환자를 포함하여 총 22명이 치료될 수 있다. 코호트에 대한 최종 결과는 ≥ 10명의 환자가 적어도 183일 동안 생존하는 경우 임상적으로 의미있을 수 있다. 이러한 설계의 검정력은 10%의 단측 유형 I 오류율 하에서 대략 70%이다.
실시예 8 - 사전-REP 및 REP 단계 동안 TNFRSF 효능제를 사용하여 TIL을 확장시키는 방법
본 실시예에서 사용된 항체는 본원 다른 곳에 기재되어 있고, 표 57에 추가로 기재되어 있다.
표 57. 4-1BB 및 OX40 효능작용 모노클로날 항체.
상기 기재된 모노클로날 항체 이외에, OX40 효능작용 항체 클론 Ber-ACT35 (바이오레전드, 미국 캘리포니아주 샌디에고)를 또한 본원에 기재된 선택된 실험에서 사용하였다.
전체 실험 전략은 하기 단계를 포함하였다: 시약 조달 및 검증; 생체외 확장 실험 설계; 신선한 흑색종, 폐, 자궁경부 종양 샘플을 사용하는 사전-REP 실험의 제0일에 항-4-1BB 또는 항-OX40 첨가; 해동된 두경부, 폐, 흑색종, 삼중-음성 유방암 및 유방암 사전-REP TIL 샘플에 대해 수행된 21개의 미니-REP에서 항-OX40 평가; 및 TIL 수율 및 세포 계통 표현형 (CD4:CD8), T-세포 하위세트/확대된 표현형, 및 기능적 검정의 평가.
2종의 4-1BB 효능제에 대한 항-4-1BB 결합 친화도의 비교성을 평가하였다. 4-1BB 리포터 세포를 FITC-접합된 마우스 항-인간 IgG와 함께 0.01, 0.03, 0.1, 0.3, 1 및 3 μg/ml의 농도의 항-4-1BB 항체 (크리에이티브 바이오랩스) 또는 항-4-1BB (BPS 바이오사이언시스)로 염색하고, 유동 세포측정법에 의해 분석하였다. 결과는 도 16 및 도 17 (각각 4-1BB+ 세포의 % 및 4-1BB+ 세포의 평균 형광 강도 (MFI))에 제시되어 있으며, 이는 크리에이티브 바이오랩스 (CB) 4-1BB 우렐루맙 항체가 최고 결합 친화도를 갖는다는 것을 나타낸다.
4-1BB 효능작용 항체의 NF-κB 경로 활성화의 평가를 또한 수행하였다. 4-1BB 리포터 세포를 24시간 동안 1, 2, 4 및 8 μg/mL의 농도의 항-4-1BB (CB 또는 BPS 항체)로 처리하였다. 세포를 1-단계 루시페라제 시약을 사용하여 용해시키고, 루시페라제 활성을 발광측정기에 의해 측정하였다. 결과가 도 18에 제시되어 있다. CB 항체에 대한 Log EC50은 3.9 μg/mL인 것으로 결정되었고, BPS 항체의 경우 2.13 μg/mL인 것으로 결정되었다. CB 및 BPS 항-4-1BB 효능제 둘 다는 BPS 항체가 보다 큰 NF-kB 신호전달 활성화를 나타내긴 하였지만 유사한 Log EC50 값을 가졌다.
CB OX40 효능제의 결합 친화도를 또한 평가하였다. OX40 리포터 세포를 FITC-접합된 마우스 항-인간 IgG와 함께 0.01, 0.03, 0.1, 0.3, 1 및 3 μg/ml의 농도의 항-OX40 크리에이티브 바이오랩스 (CB) 효능제로 염색하고, 유동 세포측정법에 의해 분석하였다. 결과는 각각 OX40+ 세포의 % 및 OX40+ 세포의 MFI에 대해 도 19 및 도 20에 제시되어 있으며, 이는 CB OX40이 높은 결합 친화도를 갖는다는 것을 나타낸다.
2종의 OX40 효능제인 CB OX40 효능제 및 OX40 효능작용 항체 클론 Ber-ACT35 (바이오레전드, 미국 캘리포니아주 샌디에고)에 대한 OX40 결합 친화도의 비교성을 평가하였다. 5종의 상이한 조직학적 TIL 세포주 (자궁경부, 두부 및 경부, 폐 및 흑색종 포함)을 항-인간 IgG 2차 항체와 함께 0.1, 0.3, 1, 3, 10 (μg/mL)의 농도의 항-OX40 효능작용 항체로 또는 항-OX40 (클론 Ber-ACT35) 단독으로 염색하였다. 결과는 도 21에 제시되어 있으며, 이는 2종의 효능제에 대한 대등한 결합 친화도를 나타낸다.
CB OX40 효능제 항체의 NF-kB 경로 활성화의 평가를 또한 수행하였으며, 결과는 도 22에 제시되어 있다. OX40 리포터 세포를 24시간 동안 피더 세포의 존재 또는 부재 하에 1, 2, 4, 8 및 16 μg/mL의 농도의 항-OX40 단독으로 또는 이소형 대조군으로 처리하였다. 세포를 1-단계 루시페라제 시약을 사용하여 용해시키고, 루시페라제 활성을 발광측정기에 의해 측정하였다. PBMC 피더의 사용은 OX40 리포터 세포주를 사용하여 NF-κB 활성화를 개시하였으며, 이는 클러스터링이 활성화에 관여한다는 것을 시사한다.
사전-REP 단계 동안 4-1BB 및 OX40 효능제를 사용하기 위한 실험 설계가 도 23에 제시되어 있다. 탐구된 종양 조직학은 도 24에 제시되어 있다. 데이터 분석 전략은 도 25에 제시되어 있다. 비처리 (IL-2 단독), 항-4-1BB 및 항-OX40을 매칭-쌍 방식으로 분석하였다. 이러한 접근법을 사용하여, 샘플을 다음을 포함한 3개의 상이한 군에 배정하였다: 군 1, 비처리 및 항-4-1BB (n=3); 군 2, 비처리 및 항-OX40 (n=5); 및 군 3, 비처리 및 항-4-1BB 및 항-OX40 (n=2). 확장으로부터의 총 세포 수 결과가 도 26 (CB 4-1BB 효능제 대 비시험, N = 3); 도 27 (CB OX40 효능제 대 비시험, N = 5); 및 도 28 (CB 4-1BB 효능제 및 OX-40 효능제, N = 2)에 제시되어 있다. 세포 확장에 대한 CD8+ 세포 수 결과가 도 29 (CB 4-1BB 효능제 대 비시험, N = 3); 도 30 (CB OX40 효능제 대 비시험, N = 5); 및 도 31 (CB 4-1BB 효능제 및 OX-40 효능제, N = 2)에 제시되어 있다. 세포 확장에 대한 총 CD8+/CD4+ 세포 수 비 결과가 도 32 (CB 4-1BB 효능제 대 비시험, N = 3); 도 33 (CB OX40 효능제 대 비시험, N = 5); 및 도 34 (CB 4-1BB 효능제 및 OX-40 효능제, N = 2)에 제시되어 있다.
4-1BB 또는 OX40 효능제의 존재 하에 확장된 사전-REP TIL의 REP 증식을 또한 도 35에 제시된 계획을 사용하여 탐구하였다. 사전-REP TIL을 CB 4-1BB 효능제 또는 CB OX40 효능제를 사용하여 확장시키고, 조사된 PBMC, 항-CD3 항체 (30 ng/mL) 및 IL-2 (3000 IU/mL)의 존재 하에 11일 동안 REP 프로토콜에서 추가로 증식시켰다. TIL을 수거하고, 계수하고, 배수 확장을 결정하였다. 결과는 도 36, 도 37 및 도 38에 제시되어 있다.
REP 단계 동안 OX40의 평가를 또한 시험하였다. 상이한 조직학으로부터의 21종의 TIL 세포주 (도 39)를 5 μg/mL의 농도의 CB OX40 효능제 또는 이소형 대조군 항체의 첨가 하에 REP로 증식시켰다. 실험 계획은 도 40에 제시되어 있다. 결과는 도 41, 도 42 및 도 43에 제시되어 있다. 놀랍게도, OX40 효능제는 REP 동안 CD8+ TIL을 우선적으로 확장시킨다. OX40 효능제로 처리된 TIL을 반응자 또는 비-반응자로서 분류하였다.
비-반응자 및 반응자 TIL 세포주에서의 항-OX40 용량 적정을 수행하여 이러한 효과를 추가로 연구하고 반응자 및 비-반응자에서 OX40 효능제의 최적 농도를 규정하였다. 항-OX40 처리 후 증진된 CD8+ 편향에 기초하여 TIL 세포주를 2개의 군 (반응자 및 비-반응자)으로 카테고리화하였다. 3종의 비-반응자 (L4005, H3005 및 M1022) 및 반응자 (T6001, T6003 및 L4002)를 도 44에 제시된 조건에 따라 OX40 효능제 또는 이소형 대조군 항체의 존재 하에 REP로 증식시켰다. 도 45 및 도 46은 항-OX40 처리 후 CD8+ 편향의 용량-의존성 방식이 반응자에서 관찰되었으며, 여기서 1 내지 10 μg/mL 범위의 농도가 편향을 촉진한다는 것을 예시한다. 비-반응자는 심지어 고농도 (30 μg/mL)에서도 항-OX40 처리 후 CD8+ 편향을 나타내지 않았다.
반응자에서 TCRvb 레퍼토리에 대한 OX40 효능제의 영향을 또한 조사하였다. CD8+ 집단을 편향시키는 것으로 이전에 제시된 항-OX40이 특정 TCR vb 레퍼토리를 우선적으로 확장시키는지 여부를 결정하기 위해서이다. 반응자 TIL 세포주를 IL-2 단독 또는 IL-2 및 CD OX40 효능제 모노클로날 항체 (5 μg/mL)와 함께 24-웰 플레이트에서 REP로 증식시켰다. 제11일에, TIL을 수거하고, 항-CD3, 항-CD8, 항-CD4 및 TCRvb 레퍼토리 항체로 염색하고, 유동 세포측정법에 의해 분석하였다. 결과는 도 47, 도 48 및 도 49에서 3종의 조직학을 갖는 3종의 반응자에 대해 제시되어 있다. TCRvb 레퍼토리에서의 최소 변화가 관찰되었으며, 이는 도 1 또는 도 2의 실시양태에서 단축된 22일 과정에 의해 나타난 높은 정도의 폴리클로날성이 놀랍게도 REP 동안 OX40 효능제의 사용과 함께 보존됨을 나타낸다.
결론적으로, CB 항-OX40 항체의 사용은 사전-REP CD8+ TIL 확장을 유의하게 증진시켰으며, 한편 CB 항-4-1BB 항체의 사용도 또한 유망한 경향을 입증하였다. REP-배수 확장은 전처리 조건과 무관하게 대등하였다. 놀랍게도, OX40 효능작용 항체는 이전에 IL-2 단독으로 성장시킨 REP TIL에서의 CD8+/CD4+ 비를 증가시켰다. 비-반응자 TIL에서, 항-OX40 처리 후 CD4+ 하위세트에서 OX-40의 하향조절은 관찰되지 않았다. 항-OX40 처리 후 CD8+ 편향의 용량-의존성 방식이 반응자에서 관찰되었다. 유의한 CD8+ 편향이 관찰되긴 하였지만 TCRvb 레퍼토리에서의 변화는 매우 미묘하였다.
SEQUENCE LISTING
<110> Iovance Biotherapeutics, Inc.
<120> Expansion of Tumor Infiltrating Lymphocytes (TILS) With Tumor
Necrosis Factor Receptor Superfamily (TNFRSF) Agonists and
Therapeutic Combinations of TILS and TNFRSF Agonists
<130> 116983-5008-WO
<160> 512
<170> PatentIn version 3.5
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Ser Asn Cys Leu Asn Asn Glu Phe Asn Phe Phe Lys Arg His Ile Cys
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85 90 95
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225 230 235 240
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<213> Artificial Sequence
<220>
<223> heavy chain for utomilumab
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Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser
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Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Asn Phe
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Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
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165 170 175
Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys Ser His Arg Ser
180 185 190
Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val Glu Lys Thr Val
195 200 205
Ala Pro Thr Glu Cys Ser
210
<210> 13
<211> 116
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> heavy chain variable region for utomilumab
<400> 13
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Glu
1 5 10 15
Ser Leu Arg Ile Ser Cys Lys Gly Ser Gly Tyr Ser Phe Ser Thr Tyr
20 25 30
Trp Ile Ser Trp Val Arg Gln Met Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Lys Ile Tyr Pro Gly Asp Ser Tyr Thr Asn Tyr Ser Pro Ser Phe
50 55 60
Gln Gly Gln Val Thr Ile Ser Ala Asp Lys Ser Ile Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Trp Ser Ser Leu Lys Ala Ser Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Gly Tyr Gly Ile Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val
100 105 110
Thr Val Ser Ser
115
<210> 14
<211> 108
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> light chain variable region for utomilumab
<400> 14
Ser Tyr Glu Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Val Ser Pro Gly Gln
1 5 10 15
Thr Ala Ser Ile Thr Cys Ser Gly Asp Asn Ile Gly Asp Gln Tyr Ala
20 25 30
His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro Val Leu Val Ile Tyr
35 40 45
Gln Asp Lys Asn Arg Pro Ser Gly Ile Pro Glu Arg Phe Ser Gly Ser
50 55 60
Asn Ser Gly Asn Thr Ala Thr Leu Thr Ile Ser Gly Thr Gln Ala Met
65 70 75 80
Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ala Thr Tyr Thr Gly Phe Gly Ser Leu
85 90 95
Ala Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu
100 105
<210> 15
<211> 6
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> heavy chain CDR1 for utomilumab
<400> 15
Ser Thr Tyr Trp Ile Ser
1 5
<210> 16
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> heavy chain CDR2 for utomilumab
<400> 16
Lys Ile Tyr Pro Gly Asp Ser Tyr Thr Asn Tyr Ser Pro Ser Phe Gln
1 5 10 15
Gly
<210> 17
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> heavy chain CDR3 for utomilumab
<400> 17
Arg Gly Tyr Gly Ile Phe Asp Tyr
1 5
<210> 18
<211> 11
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> light chain CDR1 for utomilumab
<400> 18
Ser Gly Asp Asn Ile Gly Asp Gln Tyr Ala His
1 5 10
<210> 19
<211> 7
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> light chain CDR2 for utomilumab
<400> 19
Gln Asp Lys Asn Arg Pro Ser
1 5
<210> 20
<211> 11
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> light chain CDR3 for utomilumab
<400> 20
Ala Thr Tyr Thr Gly Phe Gly Ser Leu Ala Val
1 5 10
<210> 21
<211> 448
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> heavy chain for urelumab
<400> 21
Gln Val Gln Leu Gln Gln Trp Gly Ala Gly Leu Leu Lys Pro Ser Glu
1 5 10 15
Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ala Val Tyr Gly Gly Ser Phe Ser Gly Tyr
20 25 30
Tyr Trp Ser Trp Ile Arg Gln Ser Pro Glu Lys Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Glu Ile Asn His Gly Gly Tyr Val Thr Tyr Asn Pro Ser Leu Glu
50 55 60
Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu
65 70 75 80
Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
85 90 95
Arg Asp Tyr Gly Pro Gly Asn Tyr Asp Trp Tyr Phe Asp Leu Trp Gly
100 105 110
Arg Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser
115 120 125
Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala
130 135 140
Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val
145 150 155 160
Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala
165 170 175
Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val
180 185 190
Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His
195 200 205
Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly
210 215 220
Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser
225 230 235 240
Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg
245 250 255
Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro
260 265 270
Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala
275 280 285
Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val
290 295 300
Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr
305 310 315 320
Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr
325 330 335
Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu
340 345 350
Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys
355 360 365
Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser
370 375 380
Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp
385 390 395 400
Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser
405 410 415
Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala
420 425 430
Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys
435 440 445
<210> 22
<211> 216
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> light chain for urelumab
<400> 22
Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly
1 5 10 15
Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Tyr
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Asp Ala Ser Asn Arg Ala Thr Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Arg Ser Asn Trp Pro Pro
85 90 95
Ala Leu Thr Phe Cys Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val
100 105 110
Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys
115 120 125
Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg
130 135 140
Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn
145 150 155 160
Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser
165 170 175
Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys
180 185 190
Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr
195 200 205
Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
210 215
<210> 23
<211> 120
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> variable heavy chain for urelumab
<400> 23
Met Lys His Leu Trp Phe Phe Leu Leu Leu Val Ala Ala Pro Arg Trp
1 5 10 15
Val Leu Ser Gln Val Gln Leu Gln Gln Trp Gly Ala Gly Leu Leu Lys
20 25 30
Pro Ser Glu Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ala Val Tyr Gly Gly Ser Phe
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Ser Gly Tyr Tyr Trp Ser Trp Ile Arg Gln Ser Pro Glu Lys Gly Leu
50 55 60
Glu Trp Ile Gly Glu Ile Asn His Gly Gly Tyr Val Thr Tyr Asn Pro
65 70 75 80
Ser Leu Glu Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln
85 90 95
Phe Ser Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr
100 105 110
Tyr Cys Ala Arg Asp Tyr Gly Pro
115 120
<210> 24
<211> 110
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> variable light chain for urelumab
<400> 24
Met Glu Ala Pro Ala Gln Leu Leu Phe Leu Leu Leu Leu Trp Leu Pro
1 5 10 15
Asp Thr Thr Gly Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser
20 25 30
Leu Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser
35 40 45
Val Ser Ser Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro
50 55 60
Arg Leu Leu Ile Tyr Asp Ala Ser Asn Arg Ala Thr Gly Ile Pro Ala
65 70 75 80
Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser
85 90 95
Ser Leu Glu Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln
100 105 110
<210> 25
<211> 5
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> heavy chain CDR1 for urelumab
<400> 25
Gly Tyr Tyr Trp Ser
1 5
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<211> 16
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> heavy chain CDR2 for urelumab
<400> 26
Glu Ile Asn His Gly Gly Tyr Val Thr Tyr Asn Pro Ser Leu Glu Ser
1 5 10 15
<210> 27
<211> 13
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> heavy chain CDR3 for urelumab
<400> 27
Asp Tyr Gly Pro Gly Asn Tyr Asp Trp Tyr Phe Asp Leu
1 5 10
<210> 28
<211> 11
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> light chain CDR1 for urelumab
<400> 28
Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Tyr Leu Ala
1 5 10
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<211> 7
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> light chain CDR2 for urelumab
<400> 29
Asp Ala Ser Asn Arg Ala Thr
1 5
<210> 30
<211> 11
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> light chain CDR3 for urelumab
<400> 30
Gln Gln Arg Ser Asp Trp Pro Pro Ala Leu Thr
1 5 10
<210> 31
<211> 230
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Fc domain
<400> 31
Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu
1 5 10 15
Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
20 25 30
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
35 40 45
Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
50 55 60
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
65 70 75 80
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
85 90 95
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
100 105 110
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
115 120 125
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn
130 135 140
Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
145 150 155 160
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
165 170 175
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
180 185 190
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
195 200 205
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
210 215 220
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
225 230
<210> 32
<211> 22
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> linker
<400> 32
Gly Gly Pro Gly Ser Ser Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro
1 5 10 15
Pro Cys Pro Ala Pro Glu
20
<210> 33
<211> 22
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> linker
<400> 33
Gly Gly Ser Gly Ser Ser Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro
1 5 10 15
Pro Cys Pro Ala Pro Glu
20
<210> 34
<211> 27
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> linker
<400> 34
Gly Gly Pro Gly Ser Ser Ser Ser Ser Ser Ser Lys Ser Cys Asp Lys
1 5 10 15
Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu
20 25
<210> 35
<211> 27
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> linker
<400> 35
Gly Gly Ser Gly Ser Ser Ser Ser Ser Ser Ser Lys Ser Cys Asp Lys
1 5 10 15
Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu
20 25
<210> 36
<211> 29
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> linker
<400> 36
Gly Gly Pro Gly Ser Ser Ser Ser Ser Ser Ser Ser Ser Lys Ser Cys
1 5 10 15
Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu
20 25
<210> 37
<211> 29
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> linker
<400> 37
Gly Gly Ser Gly Ser Ser Ser Ser Ser Ser Ser Ser Ser Lys Ser Cys
1 5 10 15
Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu
20 25
<210> 38
<211> 24
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> linker
<400> 38
Gly Gly Pro Gly Ser Ser Gly Ser Gly Ser Ser Asp Lys Thr His Thr
1 5 10 15
Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu
20
<210> 39
<211> 23
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> linker
<400> 39
Gly Gly Pro Gly Ser Ser Gly Ser Gly Ser Asp Lys Thr His Thr Cys
1 5 10 15
Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu
20
<210> 40
<211> 21
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> linker
<400> 40
Gly Gly Pro Ser Ser Ser Gly Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro
1 5 10 15
Cys Pro Ala Pro Glu
20
<210> 41
<211> 25
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> linker
<400> 41
Gly Gly Ser Ser Ser Ser Ser Ser Ser Ser Gly Ser Asp Lys Thr His
1 5 10 15
Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu
20 25
<210> 42
<211> 246
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Fc domain
<400> 42
Met Glu Thr Asp Thr Leu Leu Leu Trp Val Leu Leu Leu Trp Val Pro
1 5 10 15
Ala Gly Asn Gly Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
20 25 30
Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys
35 40 45
Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val
50 55 60
Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp
65 70 75 80
Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr
85 90 95
Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp
100 105 110
Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu
115 120 125
Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg
130 135 140
Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys
145 150 155 160
Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp
165 170 175
Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys
180 185 190
Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser
195 200 205
Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser
210 215 220
Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser
225 230 235 240
Leu Ser Leu Ser Pro Gly
245
<210> 43
<211> 11
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> linker
<400> 43
Ser Gly Ser Gly Ser Gly Ser Gly Ser Gly Ser
1 5 10
<210> 44
<211> 12
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> linker
<400> 44
Ser Ser Ser Ser Ser Ser Gly Ser Gly Ser Gly Ser
1 5 10
<210> 45
<211> 16
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> linker
<400> 45
Ser Ser Ser Ser Ser Ser Gly Ser Gly Ser Gly Ser Gly Ser Gly Ser
1 5 10 15
<210> 46
<211> 254
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> 4-1BBL
<400> 46
Met Glu Tyr Ala Ser Asp Ala Ser Leu Asp Pro Glu Ala Pro Trp Pro
1 5 10 15
Pro Ala Pro Arg Ala Arg Ala Cys Arg Val Leu Pro Trp Ala Leu Val
20 25 30
Ala Gly Leu Leu Leu Leu Leu Leu Leu Ala Ala Ala Cys Ala Val Phe
35 40 45
Leu Ala Cys Pro Trp Ala Val Ser Gly Ala Arg Ala Ser Pro Gly Ser
50 55 60
Ala Ala Ser Pro Arg Leu Arg Glu Gly Pro Glu Leu Ser Pro Asp Asp
65 70 75 80
Pro Ala Gly Leu Leu Asp Leu Arg Gln Gly Met Phe Ala Gln Leu Val
85 90 95
Ala Gln Asn Val Leu Leu Ile Asp Gly Pro Leu Ser Trp Tyr Ser Asp
100 105 110
Pro Gly Leu Ala Gly Val Ser Leu Thr Gly Gly Leu Ser Tyr Lys Glu
115 120 125
Asp Thr Lys Glu Leu Val Val Ala Lys Ala Gly Val Tyr Tyr Val Phe
130 135 140
Phe Gln Leu Glu Leu Arg Arg Val Val Ala Gly Glu Gly Ser Gly Ser
145 150 155 160
Val Ser Leu Ala Leu His Leu Gln Pro Leu Arg Ser Ala Ala Gly Ala
165 170 175
Ala Ala Leu Ala Leu Thr Val Asp Leu Pro Pro Ala Ser Ser Glu Ala
180 185 190
Arg Asn Ser Ala Phe Gly Phe Gln Gly Arg Leu Leu His Leu Ser Ala
195 200 205
Gly Gln Arg Leu Gly Val His Leu His Thr Glu Ala Arg Ala Arg His
210 215 220
Ala Trp Gln Leu Thr Gln Gly Ala Thr Val Leu Gly Leu Phe Arg Val
225 230 235 240
Thr Pro Glu Ile Pro Ala Gly Leu Pro Ser Pro Arg Ser Glu
245 250
<210> 47
<211> 168
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> 4-1BBL soluble domain
<400> 47
Leu Arg Gln Gly Met Phe Ala Gln Leu Val Ala Gln Asn Val Leu Leu
1 5 10 15
Ile Asp Gly Pro Leu Ser Trp Tyr Ser Asp Pro Gly Leu Ala Gly Val
20 25 30
Ser Leu Thr Gly Gly Leu Ser Tyr Lys Glu Asp Thr Lys Glu Leu Val
35 40 45
Val Ala Lys Ala Gly Val Tyr Tyr Val Phe Phe Gln Leu Glu Leu Arg
50 55 60
Arg Val Val Ala Gly Glu Gly Ser Gly Ser Val Ser Leu Ala Leu His
65 70 75 80
Leu Gln Pro Leu Arg Ser Ala Ala Gly Ala Ala Ala Leu Ala Leu Thr
85 90 95
Val Asp Leu Pro Pro Ala Ser Ser Glu Ala Arg Asn Ser Ala Phe Gly
100 105 110
Phe Gln Gly Arg Leu Leu His Leu Ser Ala Gly Gln Arg Leu Gly Val
115 120 125
His Leu His Thr Glu Ala Arg Ala Arg His Ala Trp Gln Leu Thr Gln
130 135 140
Gly Ala Thr Val Leu Gly Leu Phe Arg Val Thr Pro Glu Ile Pro Ala
145 150 155 160
Gly Leu Pro Ser Pro Arg Ser Glu
165
<210> 48
<211> 118
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> variable heavy chain for 4B4-1-1 version 1
<400> 48
Gln Val Gln Leu Gln Gln Pro Gly Ala Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Trp Met His Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly Gln Val Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Glu Ile Asn Pro Gly Asn Gly His Thr Asn Tyr Asn Glu Lys Phe
50 55 60
Lys Ser Lys Ala Thr Leu Thr Val Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Ser Phe Thr Thr Ala Arg Gly Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly
100 105 110
Thr Leu Val Thr Val Ser
115
<210> 49
<211> 107
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> variable light chain for 4B4-1-1 version 1
<400> 49
Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Gln Ser Val Thr Pro Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Ser Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Thr Ile Ser Asp Tyr
20 25 30
Leu His Trp Tyr Gln Gln Lys Ser His Glu Ser Pro Arg Leu Leu Ile
35 40 45
Lys Tyr Ala Ser Gln Ser Ile Ser Gly Ile Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Ser Asp Phe Thr Leu Ser Ile Asn Ser Val Glu Pro
65 70 75 80
Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Gln Asp Gly His Ser Phe Pro Pro
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105
<210> 50
<211> 119
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> variable heavy chain for 4B4-1-1 version 2
<400> 50
Gln Val Gln Leu Gln Gln Pro Gly Ala Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Trp Met His Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly Gln Val Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Glu Ile Asn Pro Gly Asn Gly His Thr Asn Tyr Asn Glu Lys Phe
50 55 60
Lys Ser Lys Ala Thr Leu Thr Val Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Ser Phe Thr Thr Ala Arg Gly Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly
100 105 110
Thr Leu Val Thr Val Ser Ala
115
<210> 51
<211> 108
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> variable light chain for 4B4-1-1 version 2
<400> 51
Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Gln Ser Val Thr Pro Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Ser Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Thr Ile Ser Asp Tyr
20 25 30
Leu His Trp Tyr Gln Gln Lys Ser His Glu Ser Pro Arg Leu Leu Ile
35 40 45
Lys Tyr Ala Ser Gln Ser Ile Ser Gly Ile Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Ser Asp Phe Thr Leu Ser Ile Asn Ser Val Glu Pro
65 70 75 80
Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Gln Asp Gly His Ser Phe Pro Pro
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg
100 105
<210> 52
<211> 120
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> variable heavy chain for H39E3-2
<400> 52
Met Asp Trp Thr Trp Arg Ile Leu Phe Leu Val Ala Ala Ala Thr Gly
1 5 10 15
Ala His Ser Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln
20 25 30
Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe
35 40 45
Ser Asp Tyr Trp Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu
50 55 60
Glu Trp Val Ala Asp Ile Lys Asn Asp Gly Ser Tyr Thr Asn Tyr Ala
65 70 75 80
Pro Ser Leu Thr Asn Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn
85 90 95
Ser Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val
100 105 110
Tyr Tyr Cys Ala Arg Glu Leu Thr
115 120
<210> 53
<211> 109
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> variable light chain for H39E3-2
<400> 53
Met Glu Ala Pro Ala Gln Leu Leu Phe Leu Leu Leu Leu Trp Leu Pro
1 5 10 15
Asp Thr Thr Gly Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Asp Ser Leu Ala
20 25 30
Val Ser Leu Gly Glu Arg Ala Thr Ile Asn Cys Lys Ser Ser Gln Ser
35 40 45
Leu Leu Ser Ser Gly Asn Gln Lys Asn Tyr Leu Trp Tyr Gln Gln Lys
50 55 60
Pro Gly Gln Pro Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Tyr Ala Ser Thr Arg Gln
65 70 75 80
Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe
85 90 95
Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Ala Glu Asp Val Ala
100 105
<210> 54
<211> 277
<212> PRT
<213> Homo Sapiens
<400> 54
Met Cys Val Gly Ala Arg Arg Leu Gly Arg Gly Pro Cys Ala Ala Leu
1 5 10 15
Leu Leu Leu Gly Leu Gly Leu Ser Thr Val Thr Gly Leu His Cys Val
20 25 30
Gly Asp Thr Tyr Pro Ser Asn Asp Arg Cys Cys His Glu Cys Arg Pro
35 40 45
Gly Asn Gly Met Val Ser Arg Cys Ser Arg Ser Gln Asn Thr Val Cys
50 55 60
Arg Pro Cys Gly Pro Gly Phe Tyr Asn Asp Val Val Ser Ser Lys Pro
65 70 75 80
Cys Lys Pro Cys Thr Trp Cys Asn Leu Arg Ser Gly Ser Glu Arg Lys
85 90 95
Gln Leu Cys Thr Ala Thr Gln Asp Thr Val Cys Arg Cys Arg Ala Gly
100 105 110
Thr Gln Pro Leu Asp Ser Tyr Lys Pro Gly Val Asp Cys Ala Pro Cys
115 120 125
Pro Pro Gly His Phe Ser Pro Gly Asp Asn Gln Ala Cys Lys Pro Trp
130 135 140
Thr Asn Cys Thr Leu Ala Gly Lys His Thr Leu Gln Pro Ala Ser Asn
145 150 155 160
Ser Ser Asp Ala Ile Cys Glu Asp Arg Asp Pro Pro Ala Thr Gln Pro
165 170 175
Gln Glu Thr Gln Gly Pro Pro Ala Arg Pro Ile Thr Val Gln Pro Thr
180 185 190
Glu Ala Trp Pro Arg Thr Ser Gln Gly Pro Ser Thr Arg Pro Val Glu
195 200 205
Val Pro Gly Gly Arg Ala Val Ala Ala Ile Leu Gly Leu Gly Leu Val
210 215 220
Leu Gly Leu Leu Gly Pro Leu Ala Ile Leu Leu Ala Leu Tyr Leu Leu
225 230 235 240
Arg Arg Asp Gln Arg Leu Pro Pro Asp Ala His Lys Pro Pro Gly Gly
245 250 255
Gly Ser Phe Arg Thr Pro Ile Gln Glu Glu Gln Ala Asp Ala His Ser
260 265 270
Thr Leu Ala Lys Ile
275
<210> 55
<211> 272
<212> PRT
<213> Mus Musculus
<400> 55
Met Tyr Val Trp Val Gln Gln Pro Thr Ala Leu Leu Leu Leu Gly Leu
1 5 10 15
Thr Leu Gly Val Thr Ala Arg Arg Leu Asn Cys Val Lys His Thr Tyr
20 25 30
Pro Ser Gly His Lys Cys Cys Arg Glu Cys Gln Pro Gly His Gly Met
35 40 45
Val Ser Arg Cys Asp His Thr Arg Asp Thr Leu Cys His Pro Cys Glu
50 55 60
Thr Gly Phe Tyr Asn Glu Ala Val Asn Tyr Asp Thr Cys Lys Gln Cys
65 70 75 80
Thr Gln Cys Asn His Arg Ser Gly Ser Glu Leu Lys Gln Asn Cys Thr
85 90 95
Pro Thr Gln Asp Thr Val Cys Arg Cys Arg Pro Gly Thr Gln Pro Arg
100 105 110
Gln Asp Ser Gly Tyr Lys Leu Gly Val Asp Cys Val Pro Cys Pro Pro
115 120 125
Gly His Phe Ser Pro Gly Asn Asn Gln Ala Cys Lys Pro Trp Thr Asn
130 135 140
Cys Thr Leu Ser Gly Lys Gln Thr Arg His Pro Ala Ser Asp Ser Leu
145 150 155 160
Asp Ala Val Cys Glu Asp Arg Ser Leu Leu Ala Thr Leu Leu Trp Glu
165 170 175
Thr Gln Arg Pro Thr Phe Arg Pro Thr Thr Val Gln Ser Thr Thr Val
180 185 190
Trp Pro Arg Thr Ser Glu Leu Pro Ser Pro Pro Thr Leu Val Thr Pro
195 200 205
Glu Gly Pro Ala Phe Ala Val Leu Leu Gly Leu Gly Leu Gly Leu Leu
210 215 220
Ala Pro Leu Thr Val Leu Leu Ala Leu Tyr Leu Leu Arg Lys Ala Trp
225 230 235 240
Arg Leu Pro Asn Thr Pro Lys Pro Cys Trp Gly Asn Ser Phe Arg Thr
245 250 255
Pro Ile Gln Glu Glu His Thr Asp Ala His Phe Thr Leu Ala Lys Ile
260 265 270
<210> 56
<211> 451
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> heavy chain for tavolixizumab
<400> 56
Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln
1 5 10 15
Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ala Val Tyr Gly Gly Ser Phe Ser Ser Gly
20 25 30
Tyr Trp Asn Trp Ile Arg Lys His Pro Gly Lys Gly Leu Glu Tyr Ile
35 40 45
Gly Tyr Ile Ser Tyr Asn Gly Ile Thr Tyr His Asn Pro Ser Leu Lys
50 55 60
Ser Arg Ile Thr Ile Asn Arg Asp Thr Ser Lys Asn Gln Tyr Ser Leu
65 70 75 80
Gln Leu Asn Ser Val Thr Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
85 90 95
Arg Tyr Lys Tyr Asp Tyr Asp Gly Gly His Ala Met Asp Tyr Trp Gly
100 105 110
Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser
115 120 125
Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala
130 135 140
Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val
145 150 155 160
Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala
165 170 175
Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val
180 185 190
Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His
195 200 205
Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Pro Lys Ser Cys
210 215 220
Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly
225 230 235 240
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
245 250 255
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His
260 265 270
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
275 280 285
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr
290 295 300
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
305 310 315 320
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
325 330 335
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
340 345 350
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser
355 360 365
Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
370 375 380
Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
385 390 395 400
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
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Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met
420 425 430
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
435 440 445
Pro Gly Lys
450
<210> 57
<211> 214
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> light chain for tavolixizumab
<400> 57
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Asn Tyr
20 25 30
Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Tyr Thr Ser Lys Leu His Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Gly Ser Ala Leu Pro Trp
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala
100 105 110
Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly
115 120 125
Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala
130 135 140
Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln
145 150 155 160
Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser
165 170 175
Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr
180 185 190
Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser
195 200 205
Phe Asn Arg Gly Glu Cys
210
<210> 58
<211> 118
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> heavy chain variable region for tavolixizumab
<400> 58
Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln
1 5 10 15
Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ala Val Tyr Gly Gly Ser Phe Ser Ser Gly
20 25 30
Tyr Trp Asn Trp Ile Arg Lys His Pro Gly Lys Gly Leu Glu Tyr Ile
35 40 45
Gly Tyr Ile Ser Tyr Asn Gly Ile Thr Tyr His Asn Pro Ser Leu Lys
50 55 60
Ser Arg Ile Thr Ile Asn Arg Asp Thr Ser Lys Asn Gln Tyr Ser Leu
65 70 75 80
Gln Leu Asn Ser Val Thr Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
85 90 95
Arg Tyr Lys Tyr Asp Tyr Asp Gly Gly His Ala Met Asp Tyr Trp Gly
100 105 110
Gln Gly Thr Leu Val Thr
115
<210> 59
<211> 108
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> light chain variable region for tavolixizumab
<400> 59
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Asn Tyr
20 25 30
Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Tyr Thr Ser Lys Leu His Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Gly Ser Ala Leu Pro Trp
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg
100 105
<210> 60
<211> 9
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> heavy chain CDR1 for tavolixizumab
<400> 60
Gly Ser Phe Ser Ser Gly Tyr Trp Asn
1 5
<210> 61
<211> 13
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> heavy chain CDR2 for tavolixizumab
<400> 61
Tyr Ile Gly Tyr Ile Ser Tyr Asn Gly Ile Thr Tyr His
1 5 10
<210> 62
<211> 14
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> heavy chain CDR3 for tavolixizumab
<400> 62
Arg Tyr Lys Tyr Asp Tyr Asp Gly Gly His Ala Met Asp Tyr
1 5 10
<210> 63
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> light chain CDR1 for tavolixizumab
<400> 63
Gln Asp Ile Ser Asn Tyr Leu Asn
1 5
<210> 64
<211> 11
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> light chain CDR2 for tavolixizumab
<400> 64
Leu Leu Ile Tyr Tyr Thr Ser Lys Leu His Ser
1 5 10
<210> 65
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> light chain CDR3 for tavolixizumab
<400> 65
Gln Gln Gly Ser Ala Leu Pro Trp
1 5
<210> 66
<211> 444
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> heavy chain for 11D4
<400> 66
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Ser Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser Tyr Ile Ser Ser Ser Ser Ser Thr Ile Asp Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Asp Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Glu Ser Gly Trp Tyr Leu Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr
100 105 110
Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro
115 120 125
Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly
130 135 140
Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn
145 150 155 160
Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln
165 170 175
Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser
180 185 190
Asn Phe Gly Thr Gln Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser
195 200 205
Asn Thr Lys Val Asp Lys Thr Val Glu Arg Lys Cys Cys Val Glu Cys
210 215 220
Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe
225 230 235 240
Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val
245 250 255
Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe
260 265 270
Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro
275 280 285
Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Phe Arg Val Val Ser Val Leu Thr
290 295 300
Val Val His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val
305 310 315 320
Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Thr
325 330 335
Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg
340 345 350
Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly
355 360 365
Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro
370 375 380
Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Met Leu Asp Ser Asp Gly Ser
385 390 395 400
Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln
405 410 415
Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His
420 425 430
Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435 440
<210> 67
<211> 214
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> light chain for 11D4
<400> 67
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Ser Ser Trp
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Glu Lys Ala Pro Lys Ser Leu Ile
35 40 45
Tyr Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Asn Ser Tyr Pro Pro
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala
100 105 110
Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly
115 120 125
Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala
130 135 140
Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln
145 150 155 160
Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser
165 170 175
Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr
180 185 190
Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser
195 200 205
Phe Asn Arg Gly Glu Cys
210
<210> 68
<211> 118
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> heavy chain variable region for 11D4
<400> 68
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Ser Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser Tyr Ile Ser Ser Ser Ser Ser Thr Ile Asp Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Asp Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Glu Ser Gly Trp Tyr Leu Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr
100 105 110
Leu Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 69
<211> 107
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> light chain variable region for 11D4
<400> 69
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Ser Ser Trp
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Glu Lys Ala Pro Lys Ser Leu Ile
35 40 45
Tyr Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Asn Ser Tyr Pro Pro
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105
<210> 70
<211> 5
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> heavy chain CDR1 for 11D4
<400> 70
Ser Tyr Ser Met Asn
1 5
<210> 71
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> heavy chain CDR2 for 11D4
<400> 71
Tyr Ile Ser Ser Ser Ser Ser Thr Ile Asp Tyr Ala Asp Ser Val Lys
1 5 10 15
Gly
<210> 72
<211> 9
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> heavy chain CDR3 for 11D4
<400> 72
Glu Ser Gly Trp Tyr Leu Phe Asp Tyr
1 5
<210> 73
<211> 11
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> light chain CDR1 for 11D4
<400> 73
Arg Ala Ser Gln Gly Ile Ser Ser Trp Leu Ala
1 5 10
<210> 74
<211> 7
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> light chain CDR2 for 11D4
<400> 74
Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser
1 5
<210> 75
<211> 9
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> light chain CDR3 for 11D4
<400> 75
Gln Gln Tyr Asn Ser Tyr Pro Pro Thr
1 5
<210> 76
<211> 450
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> heavy chain for 18D8
<400> 76
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Arg
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Asp Asp Tyr
20 25 30
Ala Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser Gly Ile Ser Trp Asn Ser Gly Ser Ile Gly Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Leu Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Lys Asp Gln Ser Thr Ala Asp Tyr Tyr Phe Tyr Tyr Gly Met Asp
100 105 110
Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys
115 120 125
Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu
130 135 140
Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro
145 150 155 160
Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr
165 170 175
Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val
180 185 190
Val Thr Val Pro Ser Ser Asn Phe Gly Thr Gln Thr Tyr Thr Cys Asn
195 200 205
Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Thr Val Glu Arg
210 215 220
Lys Cys Cys Val Glu Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala Gly
225 230 235 240
Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile
245 250 255
Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu
260 265 270
Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His
275 280 285
Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Phe Arg
290 295 300
Val Val Ser Val Leu Thr Val Val His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys
305 310 315 320
Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ala Pro Ile Glu
325 330 335
Lys Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr
340 345 350
Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu
355 360 365
Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp
370 375 380
Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Met
385 390 395 400
Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp
405 410 415
Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His
420 425 430
Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro
435 440 445
Gly Lys
450
<210> 77
<211> 213
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> light chain for 18D8
<400> 77
Glu Ile Val Val Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly
1 5 10 15
Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Tyr
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Asp Ala Ser Asn Arg Ala Thr Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Arg Ser Asn Trp Pro Thr
85 90 95
Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro
100 105 110
Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr
115 120 125
Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys
130 135 140
Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu
145 150 155 160
Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser
165 170 175
Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala
180 185 190
Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe
195 200 205
Asn Arg Gly Glu Cys
210
<210> 78
<211> 124
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> heavy chain variable region for 18D8
<400> 78
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Arg
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Asp Asp Tyr
20 25 30
Ala Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser Gly Ile Ser Trp Asn Ser Gly Ser Ile Gly Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Leu Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Lys Asp Gln Ser Thr Ala Asp Tyr Tyr Phe Tyr Tyr Gly Met Asp
100 105 110
Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 79
<211> 106
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> light chain variable region for 18D8
<400> 79
Glu Ile Val Val Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly
1 5 10 15
Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Tyr
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Asp Ala Ser Asn Arg Ala Thr Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Arg Ser Asn Trp Pro Thr
85 90 95
Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105
<210> 80
<211> 5
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> heavy chain CDR1 for 18D8
<400> 80
Asp Tyr Ala Met His
1 5
<210> 81
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> heavy chain CDR2 for 18D8
<400> 81
Gly Ile Ser Trp Asn Ser Gly Ser Ile Gly Tyr Ala Asp Ser Val Lys
1 5 10 15
Gly
<210> 82
<211> 15
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> heavy chain CDR3 for 18D8
<400> 82
Asp Gln Ser Thr Ala Asp Tyr Tyr Phe Tyr Tyr Gly Met Asp Val
1 5 10 15
<210> 83
<211> 11
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> light chain CDR1 for 18D8
<400> 83
Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Tyr Leu Ala
1 5 10
<210> 84
<211> 7
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> light chain CDR2 for 18D8
<400> 84
Asp Ala Ser Asn Arg Ala Thr
1 5
<210> 85
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> light chain CDR3 for 18D8
<400> 85
Gln Gln Arg Ser Asn Trp Pro Thr
1 5
<210> 86
<211> 120
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> heavy chain variable region for Hu119-122
<400> 86
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Glu Tyr Glu Phe Pro Ser His
20 25 30
Asp Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Leu Val
35 40 45
Ala Ala Ile Asn Ser Asp Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Pro Asp Thr Met
50 55 60
Glu Arg Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg His Tyr Asp Asp Tyr Tyr Ala Trp Phe Ala Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Met Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 87
<211> 111
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> light chain variable region for Hu119-122
<400> 87
Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly
1 5 10 15
Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Lys Ser Val Ser Thr Ser
20 25 30
Gly Tyr Ser Tyr Met His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro
35 40 45
Arg Leu Leu Ile Tyr Leu Ala Ser Asn Leu Glu Ser Gly Val Pro Ala
50 55 60
Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser
65 70 75 80
Ser Leu Glu Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln His Ser Arg
85 90 95
Glu Leu Pro Leu Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105 110
<210> 88
<211> 5
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> heavy chain CDRl for Hu119-122
<400> 88
Ser His Asp Met Ser
1 5
<210> 89
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> heavy chain CDR2 for Hu119-122
<400> 89
Ala Ile Asn Ser Asp Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Pro Asp Thr Met Glu
1 5 10 15
Arg
<210> 90
<211> 11
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> heavy chain CDR3 for Hu119-122
<400> 90
His Tyr Asp Asp Tyr Tyr Ala Trp Phe Ala Tyr
1 5 10
<210> 91
<211> 15
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> light chain CDR1 for Hu119-122
<400> 91
Arg Ala Ser Lys Ser Val Ser Thr Ser Gly Tyr Ser Tyr Met His
1 5 10 15
<210> 92
<211> 7
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> light chain CDR2 for Hu119-122
<400> 92
Leu Ala Ser Asn Leu Glu Ser
1 5
<210> 93
<211> 9
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> light chain CDR3 for Hu119-122
<400> 93
Gln His Ser Arg Glu Leu Pro Leu Thr
1 5
<210> 94
<211> 122
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> heavy chain variable region for Hu106-222
<400> 94
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ser Glu Leu Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr
20 25 30
Ser Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Lys Trp Met
35 40 45
Gly Trp Ile Asn Thr Glu Thr Gly Glu Pro Thr Tyr Ala Asp Asp Phe
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Val Phe Ser Leu Asp Thr Ser Val Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Ile Ser Ser Leu Lys Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Asn Pro Tyr Tyr Asp Tyr Val Ser Tyr Tyr Ala Met Asp Tyr Trp
100 105 110
Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 95
<211> 107
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> light chain variable region for Hu106-222
<400> 95
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asp Val Ser Thr Ala
20 25 30
Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Ser Ala Ser Tyr Leu Tyr Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Phe Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln His Tyr Ser Thr Pro Arg
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105
<210> 96
<211> 5
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> heavy chain CDR1 for Hu106-222
<400> 96
Asp Tyr Ser Met His
1 5
<210> 97
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> heavy chain CDR2 for Hu106-222
<400> 97
Trp Ile Asn Thr Glu Thr Gly Glu Pro Thr Tyr Ala Asp Asp Phe Lys
1 5 10 15
Gly
<210> 98
<211> 13
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> heavy chain CDR3 for Hu106-222
<400> 98
Pro Tyr Tyr Asp Tyr Val Ser Tyr Tyr Ala Met Asp Tyr
1 5 10
<210> 99
<211> 11
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> light chain CDR1 for Hu106-222
<400> 99
Lys Ala Ser Gln Asp Val Ser Thr Ala Val Ala
1 5 10
<210> 100
<211> 7
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> light chain CDR2 for Hu106-222
<400> 100
Ser Ala Ser Tyr Leu Tyr Thr
1 5
<210> 101
<211> 9
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> light chain CDR3 for Hu106-222
<400> 101
Gln Gln His Tyr Ser Thr Pro Arg Thr
1 5
<210> 102
<211> 183
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> OX40L
<400> 102
Met Glu Arg Val Gln Pro Leu Glu Glu Asn Val Gly Asn Ala Ala Arg
1 5 10 15
Pro Arg Phe Glu Arg Asn Lys Leu Leu Leu Val Ala Ser Val Ile Gln
20 25 30
Gly Leu Gly Leu Leu Leu Cys Phe Thr Tyr Ile Cys Leu His Phe Ser
35 40 45
Ala Leu Gln Val Ser His Arg Tyr Pro Arg Ile Gln Ser Ile Lys Val
50 55 60
Gln Phe Thr Glu Tyr Lys Lys Glu Lys Gly Phe Ile Leu Thr Ser Gln
65 70 75 80
Lys Glu Asp Glu Ile Met Lys Val Gln Asn Asn Ser Val Ile Ile Asn
85 90 95
Cys Asp Gly Phe Tyr Leu Ile Ser Leu Lys Gly Tyr Phe Ser Gln Glu
100 105 110
Val Asn Ile Ser Leu His Tyr Gln Lys Asp Glu Glu Pro Leu Phe Gln
115 120 125
Leu Lys Lys Val Arg Ser Val Asn Ser Leu Met Val Ala Ser Leu Thr
130 135 140
Tyr Lys Asp Lys Val Tyr Leu Asn Val Thr Thr Asp Asn Thr Ser Leu
145 150 155 160
Asp Asp Phe His Val Asn Gly Gly Glu Leu Ile Leu Ile His Gln Asn
165 170 175
Pro Gly Glu Phe Cys Val Leu
180
<210> 103
<211> 131
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> OX40L soluble domain
<400> 103
Ser His Arg Tyr Pro Arg Ile Gln Ser Ile Lys Val Gln Phe Thr Glu
1 5 10 15
Tyr Lys Lys Glu Lys Gly Phe Ile Leu Thr Ser Gln Lys Glu Asp Glu
20 25 30
Ile Met Lys Val Gln Asn Asn Ser Val Ile Ile Asn Cys Asp Gly Phe
35 40 45
Tyr Leu Ile Ser Leu Lys Gly Tyr Phe Ser Gln Glu Val Asn Ile Ser
50 55 60
Leu His Tyr Gln Lys Asp Glu Glu Pro Leu Phe Gln Leu Lys Lys Val
65 70 75 80
Arg Ser Val Asn Ser Leu Met Val Ala Ser Leu Thr Tyr Lys Asp Lys
85 90 95
Val Tyr Leu Asn Val Thr Thr Asp Asn Thr Ser Leu Asp Asp Phe His
100 105 110
Val Asn Gly Gly Glu Leu Ile Leu Ile His Gln Asn Pro Gly Glu Phe
115 120 125
Cys Val Leu
130
<210> 104
<211> 128
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> OX40L soluble domain (alternative)
<400> 104
Tyr Pro Arg Ile Gln Ser Ile Lys Val Gln Phe Thr Glu Tyr Lys Lys
1 5 10 15
Glu Lys Gly Phe Ile Leu Thr Ser Gln Lys Glu Asp Glu Ile Met Lys
20 25 30
Val Gln Asn Asn Ser Val Ile Ile Asn Cys Asp Gly Phe Tyr Leu Ile
35 40 45
Ser Leu Lys Gly Tyr Phe Ser Gln Glu Val Asn Ile Ser Leu His Tyr
50 55 60
Gln Lys Asp Glu Glu Pro Leu Phe Gln Leu Lys Lys Val Arg Ser Val
65 70 75 80
Asn Ser Leu Met Val Ala Ser Leu Thr Tyr Lys Asp Lys Val Tyr Leu
85 90 95
Asn Val Thr Thr Asp Asn Thr Ser Leu Asp Asp Phe His Val Asn Gly
100 105 110
Gly Glu Leu Ile Leu Ile His Gln Asn Pro Gly Glu Phe Cys Val Leu
115 120 125
<210> 105
<211> 120
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> variable heavy chain for 008
<400> 105
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr
20 25 30
Thr Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser Ala Ile Ser Gly Ser Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Lys Asp Arg Tyr Ser Gln Val His Tyr Ala Leu Asp Tyr Trp Gly
100 105 110
Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser
115 120
<210> 106
<211> 108
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> variable light chain for 008
<400> 106
Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Asp Ser Leu Pro Val Thr Pro Gly
1 5 10 15
Glu Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Leu Leu His Ser
20 25 30
Asn Gly Tyr Asn Tyr Leu Asp Trp Tyr Leu Gln Lys Ala Gly Gln Ser
35 40 45
Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Leu Gly Ser Asn Arg Ala Ser Gly Val Pro
50 55 60
Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile
65 70 75 80
Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr
85 90 95
Tyr Asn His Pro Thr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys
100 105
<210> 107
<211> 120
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> variable heavy chain for 011
<400> 107
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr
20 25 30
Thr Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser Ser Ile Ser Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Arg Lys Gly
50 55 60
Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gln
65 70 75 80
Met Asn Asn Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg
85 90 95
Asp Arg Tyr Phe Arg Gln Gln Asn Ala Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly
100 105 110
Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala
115 120
<210> 108
<211> 108
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> variable light chain for 011
<400> 108
Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Asp Ser Leu Pro Val Thr Pro Gly
1 5 10 15
Glu Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Leu Leu His Ser
20 25 30
Asn Gly Tyr Asn Tyr Leu Asp Trp Tyr Leu Gln Lys Ala Gly Gln Ser
35 40 45
Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Leu Gly Ser Asn Arg Ala Ser Gly Val Pro
50 55 60
Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile
65 70 75 80
Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr
85 90 95
Tyr Asn His Pro Thr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys
100 105
<210> 109
<211> 120
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> variable heavy chain for 021
<400> 109
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Arg Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Ala Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Val Ile Ser Tyr Asp Gly Ser Asn Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Lys Asp Arg Tyr Ile Thr Leu Pro Asn Ala Leu Asp Tyr Trp Gly
100 105 110
Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser
115 120
<210> 110
<211> 108
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> variable light chain for 021
<400> 110
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Val Ser Leu Pro Val Thr Pro Gly
1 5 10 15
Glu Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Leu Leu His Ser
20 25 30
Asn Gly Tyr Asn Tyr Leu Asp Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser
35 40 45
Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Leu Gly Ser Asn Arg Ala Ser Gly Val Pro
50 55 60
Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile
65 70 75 80
Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr
85 90 95
Lys Ser Asn Pro Pro Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys
100 105
<210> 111
<211> 120
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> variable heavy chain for 023
<400> 111
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val His Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Gly Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Ala Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser Ala Ile Gly Thr Gly Gly Gly Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Met
50 55 60
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu
65 70 75 80
Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
85 90 95
Arg Tyr Asp Asn Val Met Gly Leu Tyr Trp Phe Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 112
<211> 108
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> variable light chain for 023
<400> 112
Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly
1 5 10 15
Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Tyr
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Asp Ala Ser Asn Arg Ala Thr Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Arg Ser Asn Trp Pro Pro
85 90 95
Ala Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg
100 105
<210> 113
<211> 119
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> heavy chain variable region
<400> 113
Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Met Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Val Met His Trp Val Lys Gln Lys Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Tyr Ile Asn Pro Tyr Asn Asp Gly Thr Lys Tyr Asn Glu Lys Phe
50 55 60
Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Ser Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Asn Tyr Tyr Gly Ser Ser Leu Ser Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly
100 105 110
Thr Ser Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 114
<211> 108
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> light chain variable region
<400> 114
Asp Ile Gln Met Thr Gln Thr Thr Ser Ser Leu Ser Ala Ser Leu Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Ser Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Asn Tyr
20 25 30
Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Asp Gly Thr Val Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Tyr Thr Ser Arg Leu His Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Ser Leu Thr Ile Ser Asn Leu Glu Gln
65 70 75 80
Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Phe Cys Gln Gln Gly Asn Thr Leu Pro Trp
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg
100 105
<210> 115
<211> 121
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> heavy chain variable region
<400> 115
Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Ile Ser Cys Lys Thr Ser Gly Tyr Thr Phe Lys Asp Tyr
20 25 30
Thr Met His Trp Val Lys Gln Ser His Gly Lys Ser Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Gly Ile Tyr Pro Asn Asn Gly Gly Ser Thr Tyr Asn Gln Asn Phe
50 55 60
Lys Asp Lys Ala Thr Leu Thr Val Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Phe Arg Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Met Gly Tyr His Gly Pro His Leu Asp Phe Asp Val Trp Gly
100 105 110
Ala Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Pro
115 120
<210> 116
<211> 108
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> light chain variable region
<400> 116
Asp Ile Val Met Thr Gln Ser His Lys Phe Met Ser Thr Ser Leu Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Ser Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asp Val Gly Ala Ala
20 25 30
Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Trp Ala Ser Thr Arg His Thr Gly Val Pro Asp Arg Phe Thr Gly
50 55 60
Gly Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Asn Val Gln Ser
65 70 75 80
Glu Asp Leu Thr Asp Tyr Phe Cys Gln Gln Tyr Ile Asn Tyr Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg
100 105
<210> 117
<211> 122
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> heavy chain variable region of humanized antibody
<400> 117
Gln Ile Gln Leu Val Gln Ser Gly Pro Glu Leu Lys Lys Pro Gly Glu
1 5 10 15
Thr Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr
20 25 30
Ser Met His Trp Val Lys Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Lys Trp Met
35 40 45
Gly Trp Ile Asn Thr Glu Thr Gly Glu Pro Thr Tyr Ala Asp Asp Phe
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Ala Phe Ser Leu Glu Thr Ser Ala Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Ile Asn Asn Leu Lys Asn Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Phe Cys
85 90 95
Ala Asn Pro Tyr Tyr Asp Tyr Val Ser Tyr Tyr Ala Met Asp Tyr Trp
100 105 110
Gly His Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 118
<211> 122
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> heavy chain variable region of humanized antibody
<400> 118
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ser Glu Leu Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr
20 25 30
Ser Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Lys Trp Met
35 40 45
Gly Trp Ile Asn Thr Glu Thr Gly Glu Pro Thr Tyr Ala Asp Asp Phe
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Val Phe Ser Leu Asp Thr Ser Val Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Ile Ser Ser Leu Lys Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Asn Pro Tyr Tyr Asp Tyr Val Ser Tyr Tyr Ala Met Asp Tyr Trp
100 105 110
Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 119
<211> 107
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> light chain variable region of humanized antibody
<400> 119
Asp Ile Val Met Thr Gln Ser His Lys Phe Met Ser Thr Ser Val Arg
1 5 10 15
Asp Arg Val Ser Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asp Val Ser Thr Ala
20 25 30
Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Ser Ala Ser Tyr Leu Tyr Thr Gly Val Pro Asp Arg Phe Thr Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Phe Thr Ile Ser Ser Val Gln Ala
65 70 75 80
Glu Asp Leu Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln His Tyr Ser Thr Pro Arg
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105
<210> 120
<211> 107
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> light chain variable region of humanized antibody
<400> 120
Asp Ile Val Met Thr Gln Ser His Lys Phe Met Ser Thr Ser Val Arg
1 5 10 15
Asp Arg Val Ser Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asp Val Ser Thr Ala
20 25 30
Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Ser Ala Ser Tyr Leu Tyr Thr Gly Val Pro Asp Arg Phe Thr Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Phe Thr Ile Ser Ser Val Gln Ala
65 70 75 80
Glu Asp Leu Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln His Tyr Ser Thr Pro Arg
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105
<210> 121
<211> 120
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> heavy chain variable region of humanized antibody
<400> 121
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Glu
1 5 10 15
Ser Leu Lys Leu Ser Cys Glu Ser Asn Glu Tyr Glu Phe Pro Ser His
20 25 30
Asp Met Ser Trp Val Arg Lys Thr Pro Glu Lys Arg Leu Glu Leu Val
35 40 45
Ala Ala Ile Asn Ser Asp Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Pro Asp Thr Met
50 55 60
Glu Arg Arg Phe Ile Ile Ser Arg Asp Asn Thr Lys Lys Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Leu Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg His Tyr Asp Asp Tyr Tyr Ala Trp Phe Ala Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ala
115 120
<210> 122
<211> 120
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> heavy chain variable region of humanized antibody
<400> 122
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Glu Tyr Glu Phe Pro Ser His
20 25 30
Asp Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Leu Val
35 40 45
Ala Ala Ile Asn Ser Asp Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Pro Asp Thr Met
50 55 60
Glu Arg Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg His Tyr Asp Asp Tyr Tyr Ala Trp Phe Ala Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Met Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 123
<211> 111
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> light chain variable region of humanized antibody
<400> 123
Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly
1 5 10 15
Gln Arg Ala Thr Ile Ser Cys Arg Ala Ser Lys Ser Val Ser Thr Ser
20 25 30
Gly Tyr Ser Tyr Met His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro
35 40 45
Lys Leu Leu Ile Tyr Leu Ala Ser Asn Leu Glu Ser Gly Val Pro Ala
50 55 60
Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Asn Ile His
65 70 75 80
Pro Val Glu Glu Glu Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln His Ser Arg
85 90 95
Glu Leu Pro Leu Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys
100 105 110
<210> 124
<211> 111
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> light chain variable region of humanized antibody
<400> 124
Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly
1 5 10 15
Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Lys Ser Val Ser Thr Ser
20 25 30
Gly Tyr Ser Tyr Met His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro
35 40 45
Arg Leu Leu Ile Tyr Leu Ala Ser Asn Leu Glu Ser Gly Val Pro Ala
50 55 60
Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser
65 70 75 80
Ser Leu Glu Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln His Ser Arg
85 90 95
Glu Leu Pro Leu Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105 110
<210> 125
<211> 138
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> heavy chain variable region
<400> 125
Met Tyr Leu Gly Leu Asn Tyr Val Phe Ile Val Phe Leu Leu Asn Gly
1 5 10 15
Val Gln Ser Glu Val Lys Leu Glu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln
20 25 30
Pro Gly Gly Ser Met Lys Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe
35 40 45
Ser Asp Ala Trp Met Asp Trp Val Arg Gln Ser Pro Glu Lys Gly Leu
50 55 60
Glu Trp Val Ala Glu Ile Arg Ser Lys Ala Asn Asn His Ala Thr Tyr
65 70 75 80
Tyr Ala Glu Ser Val Asn Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asp Ser
85 90 95
Lys Ser Ser Val Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr
100 105 110
Gly Ile Tyr Tyr Cys Thr Trp Gly Glu Val Phe Tyr Phe Asp Tyr Trp
115 120 125
Gly Gln Gly Thr Thr Leu Thr Val Ser Ser
130 135
<210> 126
<211> 126
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> light chain variable region
<400> 126
Met Arg Pro Ser Ile Gln Phe Leu Gly Leu Leu Leu Phe Trp Leu His
1 5 10 15
Gly Ala Gln Cys Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser
20 25 30
Ala Ser Leu Gly Gly Lys Val Thr Ile Thr Cys Lys Ser Ser Gln Asp
35 40 45
Ile Asn Lys Tyr Ile Ala Trp Tyr Gln His Lys Pro Gly Lys Gly Pro
50 55 60
Arg Leu Leu Ile His Tyr Thr Ser Thr Leu Gln Pro Gly Ile Pro Ser
65 70 75 80
Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Arg Asp Tyr Ser Phe Ser Ile Ser
85 90 95
Asn Leu Glu Pro Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gln Tyr Asp
100 105 110
Asn Leu Leu Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys
115 120 125
<210> 127
<211> 260
<212> PRT
<213> Homo Sapiens
<400> 127
Met Ala Arg Pro His Pro Trp Trp Leu Cys Val Leu Gly Thr Leu Val
1 5 10 15
Gly Leu Ser Ala Thr Pro Ala Pro Lys Ser Cys Pro Glu Arg His Tyr
20 25 30
Trp Ala Gln Gly Lys Leu Cys Cys Gln Met Cys Glu Pro Gly Thr Phe
35 40 45
Leu Val Lys Asp Cys Asp Gln His Arg Lys Ala Ala Gln Cys Asp Pro
50 55 60
Cys Ile Pro Gly Val Ser Phe Ser Pro Asp His His Thr Arg Pro His
65 70 75 80
Cys Glu Ser Cys Arg His Cys Asn Ser Gly Leu Leu Val Arg Asn Cys
85 90 95
Thr Ile Thr Ala Asn Ala Glu Cys Ala Cys Arg Asn Gly Trp Gln Cys
100 105 110
Arg Asp Lys Glu Cys Thr Glu Cys Asp Pro Leu Pro Asn Pro Ser Leu
115 120 125
Thr Ala Arg Ser Ser Gln Ala Leu Ser Pro His Pro Gln Pro Thr His
130 135 140
Leu Pro Tyr Val Ser Glu Met Leu Glu Ala Arg Thr Ala Gly His Met
145 150 155 160
Gln Thr Leu Ala Asp Phe Arg Gln Leu Pro Ala Arg Thr Leu Ser Thr
165 170 175
His Trp Pro Pro Gln Arg Ser Leu Cys Ser Ser Asp Phe Ile Arg Ile
180 185 190
Leu Val Ile Phe Ser Gly Met Phe Leu Val Phe Thr Leu Ala Gly Ala
195 200 205
Leu Phe Leu His Gln Arg Arg Lys Tyr Arg Ser Asn Lys Gly Glu Ser
210 215 220
Pro Val Glu Pro Ala Glu Pro Cys Arg Tyr Ser Cys Pro Arg Glu Glu
225 230 235 240
Glu Gly Ser Thr Ile Pro Ile Gln Glu Asp Tyr Arg Lys Pro Glu Pro
245 250 255
Ala Cys Ser Pro
260
<210> 128
<211> 260
<212> PRT
<213> Macaca Nemestrina
<400> 128
Met Ala Arg Pro His Pro Trp Trp Leu Cys Phe Leu Gly Thr Leu Val
1 5 10 15
Gly Leu Ser Ala Thr Pro Ala Pro Lys Ser Cys Pro Glu Arg His Tyr
20 25 30
Trp Ala Gln Gly Lys Leu Cys Cys Gln Met Cys Glu Pro Gly Thr Phe
35 40 45
Leu Val Lys Asp Cys Asp Gln His Arg Lys Ala Ala Gln Cys His Pro
50 55 60
Cys Ile Pro Gly Val Ser Phe Ser Pro Asp His His Thr Arg Pro His
65 70 75 80
Cys Glu Ser Cys Arg His Cys Asn Ser Gly Leu Leu Ile Arg Asn Cys
85 90 95
Thr Ile Thr Ala Asn Ala Val Cys Ala Cys Arg Asn Gly Trp Gln Cys
100 105 110
Arg Asp Lys Glu Cys Thr Glu Cys Asp Pro Pro Pro Asn Pro Ser Leu
115 120 125
Thr Thr Trp Pro Ser Gln Ala Leu Gly Pro His Pro Gln Pro Thr His
130 135 140
Leu Pro Tyr Val Asn Glu Met Leu Glu Ala Arg Thr Ala Gly His Met
145 150 155 160
Gln Thr Leu Ala Asp Phe Arg His Leu Pro Ala Arg Thr Leu Ser Thr
165 170 175
His Trp Pro Pro Gln Arg Ser Leu Cys Ser Ser Asp Phe Ile Arg Ile
180 185 190
Leu Val Ile Phe Ser Gly Met Phe Leu Val Phe Thr Leu Ala Gly Thr
195 200 205
Leu Phe Leu His Gln Gln Arg Lys Tyr Arg Ser Asn Lys Gly Glu Ser
210 215 220
Pro Met Glu Pro Ala Glu Pro Cys Pro Tyr Ser Cys Pro Arg Glu Glu
225 230 235 240
Glu Gly Ser Thr Ile Pro Ile Gln Glu Asp Tyr Arg Lys Pro Glu Pro
245 250 255
Ala Ser Ser Pro
260
<210> 129
<211> 452
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> heavy chain for varlilumab
<400> 129
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Asp Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Val Ile Trp Tyr Asp Gly Ser Asn Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Gly Ser Gly Asn Trp Gly Phe Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly
100 105 110
Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe
115 120 125
Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu
130 135 140
Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp
145 150 155 160
Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu
165 170 175
Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser
180 185 190
Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro
195 200 205
Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys
210 215 220
Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro
225 230 235 240
Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser
245 250 255
Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp
260 265 270
Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn
275 280 285
Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val
290 295 300
Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu
305 310 315 320
Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys
325 330 335
Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr
340 345 350
Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr
355 360 365
Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu
370 375 380
Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu
385 390 395 400
Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys
405 410 415
Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu
420 425 430
Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly
435 440 445
Lys Gly Ser Ser
450
<210> 130
<211> 214
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> light chain for varlilumab
<400> 130
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Ser Arg Trp
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Glu Lys Ala Pro Lys Ser Leu Ile
35 40 45
Tyr Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Asn Thr Tyr Pro Arg
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala
100 105 110
Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly
115 120 125
Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala
130 135 140
Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln
145 150 155 160
Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser
165 170 175
Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr
180 185 190
Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser
195 200 205
Phe Asn Arg Gly Glu Cys
210
<210> 131
<211> 119
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> heavy chain variable region for varlilumab
<400> 131
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Asp Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Val Ile Trp Tyr Asp Gly Ser Asn Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Gly Ser Gly Asn Trp Gly Phe Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly
100 105 110
Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 132
<211> 107
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> light chain variable region for varlilumab
<400> 132
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Ser Arg Trp
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Glu Lys Ala Pro Lys Ser Leu Ile
35 40 45
Tyr Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Asn Thr Tyr Pro Arg
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105
<210> 133
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> heavy chain CDR1 for varlilumab
<400> 133
Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr Asp
1 5
<210> 134
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> heavy chain CDR2 for varlilumab
<400> 134
Ile Trp Tyr Asp Gly Ser Asn Lys
1 5
<210> 135
<211> 12
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> heavy chain CDR3 for varlilumab
<400> 135
Ala Arg Gly Ser Gly Asn Trp Gly Phe Phe Asp Tyr
1 5 10
<210> 136
<211> 6
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> light chain CDR1 for varlilumab
<400> 136
Gln Gly Ile Ser Arg Trp
1 5
<210> 137
<211> 4
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> light chain CDR2 for varlilumab
<400> 137
Ala Ala Ser Gly
1
<210> 138
<211> 9
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> light chain CDR3 for varlilumab
<400> 138
Gln Gln Tyr Asn Thr Tyr Pro Arg Thr
1 5
<210> 139
<211> 193
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> CD70 (CD27L)
<400> 139
Met Pro Glu Glu Gly Ser Gly Cys Ser Val Arg Arg Arg Pro Tyr Gly
1 5 10 15
Cys Val Leu Arg Ala Ala Leu Val Pro Leu Val Ala Gly Leu Val Ile
20 25 30
Cys Leu Val Val Cys Ile Gln Arg Phe Ala Gln Ala Gln Gln Gln Leu
35 40 45
Pro Leu Glu Ser Leu Gly Trp Asp Val Ala Glu Leu Gln Leu Asn His
50 55 60
Thr Gly Pro Gln Gln Asp Pro Arg Leu Tyr Trp Gln Gly Gly Pro Ala
65 70 75 80
Leu Gly Arg Ser Phe Leu His Gly Pro Glu Leu Asp Lys Gly Gln Leu
85 90 95
Arg Ile His Arg Asp Gly Ile Tyr Met Val His Ile Gln Val Thr Leu
100 105 110
Ala Ile Cys Ser Ser Thr Thr Ala Ser Arg His His Pro Thr Thr Leu
115 120 125
Ala Val Gly Ile Cys Ser Pro Ala Ser Arg Ser Ile Ser Leu Leu Arg
130 135 140
Leu Ser Phe His Gln Gly Cys Thr Ile Ala Ser Gln Arg Leu Thr Pro
145 150 155 160
Leu Ala Arg Gly Asp Thr Leu Cys Thr Asn Leu Thr Gly Thr Leu Leu
165 170 175
Pro Ser Arg Asn Thr Asp Glu Thr Phe Phe Gly Val Gln Trp Val Arg
180 185 190
Pro
<210> 140
<211> 142
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> CD70 soluble domain
<400> 140
Ser Leu Gly Trp Asp Val Ala Glu Leu Gln Leu Asn His Thr Gly Pro
1 5 10 15
Gln Gln Asp Pro Arg Leu Tyr Trp Gln Gly Gly Pro Ala Leu Gly Arg
20 25 30
Ser Phe Leu His Gly Pro Glu Leu Asp Lys Gly Gln Leu Arg Ile His
35 40 45
Arg Asp Gly Ile Tyr Met Val His Ile Gln Val Thr Leu Ala Ile Cys
50 55 60
Ser Ser Thr Thr Ala Ser Arg His His Pro Thr Thr Leu Ala Val Gly
65 70 75 80
Ile Cys Ser Pro Ala Ser Arg Ser Ile Ser Leu Leu Arg Leu Ser Phe
85 90 95
His Gln Gly Cys Thr Ile Ala Ser Gln Arg Leu Thr Pro Leu Ala Arg
100 105 110
Gly Asp Thr Leu Cys Thr Asn Leu Thr Gly Thr Leu Leu Pro Ser Arg
115 120 125
Asn Thr Asp Glu Thr Phe Phe Gly Val Gln Trp Val Arg Pro
130 135 140
<210> 141
<211> 137
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> CD70 soluble domain (alternative)
<400> 141
Val Ala Glu Leu Gln Leu Asn His Thr Gly Pro Gln Gln Asp Pro Arg
1 5 10 15
Leu Tyr Trp Gln Gly Gly Pro Ala Leu Gly Arg Ser Phe Leu His Gly
20 25 30
Pro Glu Leu Asp Lys Gly Gln Leu Arg Ile His Arg Asp Gly Ile Tyr
35 40 45
Met Val His Ile Gln Val Thr Leu Ala Ile Cys Ser Ser Thr Thr Ala
50 55 60
Ser Arg His His Pro Thr Thr Leu Ala Val Gly Ile Cys Ser Pro Ala
65 70 75 80
Ser Arg Ser Ile Ser Leu Leu Arg Leu Ser Phe His Gln Gly Cys Thr
85 90 95
Ile Ala Ser Gln Arg Leu Thr Pro Leu Ala Arg Gly Asp Thr Leu Cys
100 105 110
Thr Asn Leu Thr Gly Thr Leu Leu Pro Ser Arg Asn Thr Asp Glu Thr
115 120 125
Phe Phe Gly Val Gln Trp Val Arg Pro
130 135
<210> 142
<211> 241
<212> PRT
<213> Homo Sapiens
<400> 142
Met Ala Gln His Gly Ala Met Gly Ala Phe Arg Ala Leu Cys Gly Leu
1 5 10 15
Ala Leu Leu Cys Ala Leu Ser Leu Gly Gln Arg Pro Thr Gly Gly Pro
20 25 30
Gly Cys Gly Pro Gly Arg Leu Leu Leu Gly Thr Gly Thr Asp Ala Arg
35 40 45
Cys Cys Arg Val His Thr Thr Arg Cys Cys Arg Asp Tyr Pro Gly Glu
50 55 60
Glu Cys Cys Ser Glu Trp Asp Cys Met Cys Val Gln Pro Glu Phe His
65 70 75 80
Cys Gly Asp Pro Cys Cys Thr Thr Cys Arg His His Pro Cys Pro Pro
85 90 95
Gly Gln Gly Val Gln Ser Gln Gly Lys Phe Ser Phe Gly Phe Gln Cys
100 105 110
Ile Asp Cys Ala Ser Gly Thr Phe Ser Gly Gly His Glu Gly His Cys
115 120 125
Lys Pro Trp Thr Asp Cys Thr Gln Phe Gly Phe Leu Thr Val Phe Pro
130 135 140
Gly Asn Lys Thr His Asn Ala Val Cys Val Pro Gly Ser Pro Pro Ala
145 150 155 160
Glu Pro Leu Gly Trp Leu Thr Val Val Leu Leu Ala Val Ala Ala Cys
165 170 175
Val Leu Leu Leu Thr Ser Ala Gln Leu Gly Leu His Ile Trp Gln Leu
180 185 190
Arg Ser Gln Cys Met Trp Pro Arg Glu Thr Gln Leu Leu Leu Glu Val
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Pro Pro Ser Thr Glu Asp Ala Arg Ser Cys Gln Phe Pro Glu Glu Glu
210 215 220
Arg Gly Glu Arg Ser Ala Glu Glu Lys Gly Arg Leu Gly Asp Leu Trp
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Val
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<213> Mus Musculus
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20 25 30
Lys Val Gln Asn Gly Ser Gly Asn Asn Thr Arg Cys Cys Ser Leu Tyr
35 40 45
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50 55 60
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65 70 75 80
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85 90 95
Gly Phe Arg Cys Val Ala Cys Ala Met Gly Thr Phe Ser Ala Gly Arg
100 105 110
Asp Gly His Cys Arg Leu Trp Thr Asn Cys Ser Gln Phe Gly Phe Leu
115 120 125
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145 150 155 160
Met Ala Ala Cys Ile Phe Phe Leu Thr Thr Val Gln Leu Gly Leu His
165 170 175
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Phe Ala Glu Val Gln Leu Ser Ala Glu Asp Ala Cys Ser Phe Gln Phe
195 200 205
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210 215 220
Gly Arg Trp Pro
225
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<213> Artificial Sequence
<220>
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<400> 144
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435 440 445
Lys
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<211> 449
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35 40 45
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Lys
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Gly Met Gly Val Gly Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Ala Leu Glu
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Trp Leu Ala His Ile Trp Trp Asp Asp Asp Lys Tyr Tyr Gln Pro Ser
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100 105 110
Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe
115 120 125
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Lys
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<211> 449
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> humanized 6C8 heavy chain variant
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Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser
245 250 255
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260 265 270
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275 280 285
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<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> 6C8 light chain leader
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1 5 10 15
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20
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<213> Artificial Sequence
<220>
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<400> 152
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<213> Artificial Sequence
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<400> 153
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<213> Artificial Sequence
<220>
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<212> PRT
<213> Artificial Sequence
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<223> 6C8 heavy chain CDR2 variant
<400> 156
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<211> 9
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<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> 6C8 light chain CDR1
<400> 158
Lys Ala Ser Gln Asn Val Gly Thr Asn Val Ala
1 5 10
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<211> 7
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> 6C8 light chain CDR2
<400> 159
Ser Ala Ser Tyr Arg Tyr Ser
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<210> 160
<211> 9
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> 6C8 light chain CDR3
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Gln Gln Tyr Asn Thr Asp Pro Leu Thr
1 5
<210> 161
<211> 449
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> chimeric 6C8 heavy chain variant
<400> 161
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65 70 75 80
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100 105 110
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Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu
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Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp
145 150 155 160
Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu
165 170 175
Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser
180 185 190
Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro
195 200 205
Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys
210 215 220
Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro
225 230 235 240
Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser
245 250 255
Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp
260 265 270
Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn
275 280 285
Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val
290 295 300
Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu
305 310 315 320
Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys
325 330 335
Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr
340 345 350
Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr
355 360 365
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Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu
420 425 430
Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly
435 440 445
Lys
<210> 162
<211> 449
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> chimeric 6C8 heavy chain variant
<400> 162
Gln Val Thr Leu Lys Glu Ser Gly Pro Gly Ile Leu Lys Pro Ser Gln
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20 25 30
Gly Met Gly Val Gly Trp Ile Arg Gln Pro Ser Gly Lys Gly Leu Glu
35 40 45
Trp Leu Ala His Ile Trp Trp Asp Asp Asp Lys Tyr Tyr Asn Pro Ser
50 55 60
Leu Lys Ser Gln Leu Thr Ile Ser Lys Asp Thr Ser Arg Asn Gln Val
65 70 75 80
Phe Leu Lys Ile Thr Ser Val Asp Thr Ala Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr
85 90 95
Cys Ala Arg Thr Arg Arg Tyr Phe Pro Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly
100 105 110
Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe
115 120 125
Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu
130 135 140
Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp
145 150 155 160
Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu
165 170 175
Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser
180 185 190
Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro
195 200 205
Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys
210 215 220
Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro
225 230 235 240
Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser
245 250 255
Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp
260 265 270
Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn
275 280 285
Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Ala Ser Thr Tyr Arg Val
290 295 300
Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu
305 310 315 320
Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys
325 330 335
Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr
340 345 350
Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr
355 360 365
Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu
370 375 380
Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu
385 390 395 400
Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys
405 410 415
Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu
420 425 430
Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly
435 440 445
Lys
<210> 163
<211> 214
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> chimeric 6C8 light chain variant
<400> 163
Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Gln Lys Phe Met Ser Thr Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Ser Val Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asn Val Gly Thr Asn
20 25 30
Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro Lys Ala Leu Ile
35 40 45
Tyr Ser Ala Ser Tyr Arg Tyr Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Thr Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Asn Asn Val His Ser
65 70 75 80
Glu Asp Leu Ala Glu Tyr Phe Cys Gln Gln Tyr Asn Thr Asp Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala
100 105 110
Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly
115 120 125
Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala
130 135 140
Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln
145 150 155 160
Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser
165 170 175
Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr
180 185 190
Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser
195 200 205
Phe Asn Arg Gly Glu Cys
210
<210> 164
<211> 118
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> 36E5 heavy chain variable region
<400> 164
Glu Val Asn Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Lys Val Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Thr Pro Glu Lys Arg Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Ser Ile Ser Ser Gly Gly Thr Thr Tyr Tyr Pro Asp Ser Val Lys
50 55 60
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Arg Asn Ile Leu Tyr Leu
65 70 75 80
Gln Met Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys Ala
85 90 95
Arg Val Gly Gly Tyr Tyr Asp Ser Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Ile
100 105 110
Ser Val Thr Asp Ser Ser
115
<210> 165
<211> 113
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> 36E5 light chain variable region
<400> 165
Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly
1 5 10 15
Gln Arg Ala Thr Ile Ser Cys Arg Ala Ser Glu Ser Val Asp Asn Tyr
20 25 30
Gly Val Ser Phe Met Asn Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro
35 40 45
Lys Leu Leu Ile Tyr Ala Ala Ser Asn Gln Gly Ser Gly Val Pro Ala
50 55 60
Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Ser Leu Asn Ile His
65 70 75 80
Pro Met Glu Glu Asp Asp Thr Ala Met Tyr Phe Cys Gln Gln Thr Lys
85 90 95
Glu Val Thr Trp Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg
100 105 110
Ala
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<211> 123
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> 3D6 heavy chain variable region
<400> 166
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Arg
1 5 10 15
Ser Leu Lys Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr
20 25 30
Tyr Met Ala Trp Val Arg Gln Ala Pro Thr Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Tyr Ile His Ala Asn Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Arg Asp Ser Val
50 55 60
Arg Gly Arg Phe Ser Ile Ser Arg Asp Asn Gly Lys Ser Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asp Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys
85 90 95
Thr Thr Gly Ser Phe Met Tyr Ala Ala Asp Tyr Tyr Ile Met Asp Ala
100 105 110
Trp Gly Gln Gly Ala Ser Val Thr Val Ser Ser
115 120
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<211> 113
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> 3D6 light chain variable region
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1 5 10 15
Asn Gln Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Leu Leu His Ser
20 25 30
Asp Gly Asn Thr Phe Leu Ser Trp Tyr Phe Gln Lys Pro Gly Gln Ser
35 40 45
Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Leu Ala Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Ser
50 55 60
Asn Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile
65 70 75 80
Ser Arg Val Glu Pro Glu Asp Leu Gly Val Tyr Tyr Cys Phe Gln His
85 90 95
Thr His Leu Pro Leu Thr Phe Gly Ser Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105 110
Arg
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<211> 118
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
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<400> 168
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1 5 10 15
Ser Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Thr Gly Tyr Ser Ile Thr Ser Asp
20 25 30
Tyr Ala Trp Asn Trp Ile Arg Gln Phe Pro Gly Asn Lys Leu Glu Trp
35 40 45
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50 55 60
Lys Ser Arg Ile Ser Ile Thr Arg Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Phe
65 70 75 80
Leu Gln Leu Asn Ser Val Thr Ser Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Gln Leu Gly Leu Arg Phe Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr
100 105 110
Thr Leu Thr Val Ser Ser
115
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<213> Artificial Sequence
<220>
<223> 61G6 light chain variable region
<400> 169
Gln Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Leu Met Ser Ala Ser Pro Gly
1 5 10 15
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20 25 30
Tyr Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Arg Ser Ser Pro Lys Pro Cys Ile Tyr
35 40 45
Leu Thr Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser
50 55 60
Gly Ser Gly Thr Ser Tyr Ser Leu Thr Ile Ser Ser Met Glu Ala Glu
65 70 75 80
Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Trp Asn Ser Asn Pro Pro Thr
85 90 95
Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Leu Arg Arg Ala
100 105
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<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
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<400> 170
Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Met Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Thr Gly Tyr Thr Phe Ser Arg Tyr
20 25 30
Trp Ile Glu Trp Ile Lys Gln Arg Pro Gly His Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Glu Ile Leu Pro Gly Ser Gly Ser Ser Asn Tyr Asn Glu Lys Phe
50 55 60
Lys Asp Lys Ala Thr Phe Thr Ala Asp Thr Ser Ser Asn Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Gln Phe Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Lys Val Tyr Tyr Tyr Ala Met Asp Phe Trp Gly Gln Gly Thr
100 105 110
Ser Val Thr Val Ser Ser
115
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<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> 6H6 light chain variable region
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Gln Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Ile Met Ser Val Ser Leu Gly
1 5 10 15
Glu Arg Val Thr Val Thr Cys Thr Ala Ser Ser Ser Val Ser Ser Ser
20 25 30
Tyr Phe His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Ser Ser Pro Lys Leu Trp
35 40 45
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50 55 60
Gly Ser Gly Ser Gly Thr Ser Tyr Ser Leu Thr Ile Ser Thr Met Glu
65 70 75 80
Ala Glu Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys His Gln Tyr His Arg Ser Pro
85 90 95
Arg Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg Ala
100 105 110
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<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
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<400> 172
Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Ala Arg Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Met Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Thr Met His Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Tyr Ile Asn Pro Arg Ser Val Tyr Thr Asn Tyr Asn Gln Lys Phe
50 55 60
Lys Asp Lys Ala Thr Leu Thr Ala Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Leu Gly Gly Tyr Tyr Asp Thr Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly
100 105 110
Thr Ser Val Thr Val Ser Ser
115
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<211> 113
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> 61F6 light chain variable region
<400> 173
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1 5 10 15
Gln Arg Ala Thr Ile Ser Cys Arg Ala Ser Glu Ser Val Asp Asn Tyr
20 25 30
Gly Ile Ser Phe Met Asn Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro
35 40 45
Lys Leu Leu Ile Tyr Ala Ala Ser Asn Gln Gly Ser Gly Val Pro Ala
50 55 60
Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Ser Leu Asn Ile His
65 70 75 80
Pro Met Glu Glu Asp Asp Thr Ala Val Tyr Phe Cys Gln Gln Ser Lys
85 90 95
Glu Val Pro Phe Thr Phe Gly Ser Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg
100 105 110
Ala
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<220>
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1 5 10 15
Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ser Phe Ser Gly Phe Ser Leu Ser Thr Ser
20 25 30
Gly Met Gly Val Gly Trp Ile Arg Gln Pro Ser Gly Lys Gly Leu Glu
35 40 45
Trp Leu Ala His Ile Trp Trp Asp Asp Asp Lys Tyr Tyr Ser Pro Ser
50 55 60
Leu Lys Ser Gln Leu Thr Ile Ser Lys Asp Thr Ser Arg Asn Gln Val
65 70 75 80
Phe Leu Lys Ile Thr Ser Leu Asp Thr Ala Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr
85 90 95
Cys Val Arg Ser Tyr Tyr Tyr Gly Ser Ser Gly Ala Met Asp Tyr Trp
100 105 110
Gly Gln Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser
115 120
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<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> 1D8 light chain variable region
<400> 175
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1 5 10 15
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20 25 30
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35 40 45
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50 55 60
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65 70 75 80
Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Val Tyr Phe Cys Ser Gln Ser
85 90 95
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100 105 110
Arg Ala Asp Ala Ala Pro
115
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<213> Artificial Sequence
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1 5 10 15
Ser Leu Lys Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Val Arg Asn Tyr
20 25 30
Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Thr Pro Glu Lys Arg Leu Glu Trp Val
35 40 45
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50 55 60
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Arg Asn Ile Leu Tyr Leu
65 70 75 80
Gln Met Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys Gln
85 90 95
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100 105 110
Val Thr Val Ser Ala
115
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<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
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1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Ser Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Asn Asn Phe
20 25 30
Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Asp Gly Ser Leu Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Tyr Thr Ser Lys Leu His Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Ser Leu Thr Ile Ser Asn Leu Asp Gln
65 70 75 80
Glu Asp Val Ala Thr Tyr Phe Cys Gln Gln Gly His Thr Leu Pro Pro
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Val Lys Arg Ala Asp Ala Ala
100 105 110
Pro
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<213> Artificial Sequence
<220>
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<400> 178
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1 5 10 15
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20 25 30
Tyr Trp Asn Trp Ile Arg Lys Phe Pro Gly Asn Lys Leu Glu Tyr Met
35 40 45
Gly Tyr Ile Ser Tyr Ser Gly Ser Thr Tyr Tyr Asn Pro Ser Leu Arg
50 55 60
Gly Arg Ile Ser Ile Thr Arg Asp Thr Ser Lys Ser Gln Tyr Tyr Leu
65 70 75 80
Gln Leu Ser Ser Val Thr Thr Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys Ser
85 90 95
Arg Arg His Leu Gly Ser Gly Tyr Gly Trp Phe Ala Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ala
115 120
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<213> Artificial Sequence
<220>
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<400> 179
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1 5 10 15
Asp Arg Val Ser Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asp Val Asn Thr Ala
20 25 30
Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Trp Ala Ser Thr Arg His Thr Gly Val Pro Asp Arg Phe Thr Gly
50 55 60
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65 70 75 80
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100 105 110
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<220>
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20 25 30
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35 40 45
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50 55 60
Ser Arg Ile Ser Ile Thr Arg Asp Thr Ser Lys Asn Gln Tyr Phe Leu
65 70 75 80
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85 90 95
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100 105 110
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ala
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<211> 114
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<213> Artificial Sequence
<220>
<223> 49A1 light chain variable region
<400> 181
Val Ile Val Met Thr Gln Ser His Lys Phe Met Ser Thr Ser Ile Gly
1 5 10 15
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50 55 60
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65 70 75 80
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85 90 95
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100 105 110
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<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
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<400> 182
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20 25 30
Gly Val Gly Val Gly Trp Ile Arg Gln Pro Ser Gly Lys Gly Leu Glu
35 40 45
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50 55 60
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65 70 75 80
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85 90 95
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100 105 110
Pro Gly Thr Met Val Ser Val Ser Ser
115 120
<210> 183
<211> 113
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> 9E5 light chain variable region
<400> 183
Asp Ile Gln Met Thr Gln Thr Pro Ser Ser Met Pro Ala Ser Leu Gly
1 5 10 15
Glu Arg Val Thr Ile Phe Cys Arg Ala Ser Gln Gly Val Asn Asn Phe
20 25 30
Leu Thr Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Asp Gly Thr Ile Lys Pro Leu Ile
35 40 45
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50 55 60
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65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Met Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr His Gly Phe Pro Asn
85 90 95
Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys Arg Ala Asp Ala Ala
100 105 110
Pro
<210> 184
<211> 121
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> 31H6 heavy chain variable region
<400> 184
Gln Val Thr Leu Lys Glu Ser Gly Pro Gly Ile Leu Gln Pro Ser Gln
1 5 10 15
Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Phe Ser Gly Phe Ser Leu Ser Thr Tyr
20 25 30
Gly Val Gly Val Gly Trp Ile Arg Gln Pro Ser Gly Lys Gly Leu Glu
35 40 45
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50 55 60
Leu Lys Asn Arg Leu Thr Ile Ser Lys Asp Thr Ser Asn Asn Gln Ala
65 70 75 80
Phe Leu Lys Ile Thr Asn Val Asp Thr Ala Glu Thr Ala Thr Tyr Tyr
85 90 95
Cys Ala Gln Ile Lys Glu Pro Arg Asp Trp Phe Phe Glu Phe Trp Gly
100 105 110
Pro Gly Thr Met Val Ser Val Ser Ser
115 120
<210> 185
<211> 113
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> 31H6 light chain variable region
<400> 185
Asp Ile Gln Met Thr Gln Thr Pro Ser Ser Met Pro Ala Ser Leu Gly
1 5 10 15
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20 25 30
Leu Thr Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Asp Gly Thr Ile Lys Pro Leu Ile
35 40 45
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50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Ser Leu Ser Ile Ser Ser Leu Glu Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Met Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr His Gly Phe Pro Asn
85 90 95
Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys Arg Ala Asp Ala Ala
100 105 110
Pro
<210> 186
<211> 118
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> humanized 36E5 heavy chain variable region
<400> 186
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Ser Ile Ser Ser Gly Gly Thr Thr Tyr Tyr Pro Asp Ser Val Lys
50 55 60
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu
65 70 75 80
Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
85 90 95
Arg Val Gly Gly Tyr Tyr Asp Ser Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr
100 105 110
Leu Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 187
<211> 112
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> humanized 36E5 light chain variable region
<220>
<221> misc_feature
<222> (31)..(31)
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
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Ser Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr
85 90 95
Cys Ala Xaa Ile Lys Glu Pro Arg Asp Trp Phe Phe Glu Phe Trp Gly
100 105 110
Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 207
<211> 108
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> humanized 31H6 light chain variable region
<220>
<221> misc_feature
<222> (46)..(46)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
<222> (49)..(49)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
<222> (71)..(71)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<400> 207
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Val Asn Asn Tyr
20 25 30
Leu Thr Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Xaa Leu Ile
35 40 45
Xaa Tyr Thr Ser Asn Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Xaa Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr His Gly Phe Pro Asn
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<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
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<400> 208
Glu Val Lys Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Lys Leu Ser Cys Gly Ala Ser Gly Phe Thr Ile Ser Ser Tyr
20 25 30
Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ser Pro Glu Lys Arg Leu Glu Trp Val
35 40 45
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50 55 60
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65 70 75 80
Gln Met Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys Ala
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100 105 110
Ser Val Thr Val Ser Ser
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<213> Artificial Sequence
<220>
<223> 2155 variable light chain
<400> 209
Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly
1 5 10 15
Gln Arg Ala Thr Ile Ser Cys Arg Ala Ser Glu Thr Val Asp Asn Tyr
20 25 30
Gly Ile Ser Phe Met Asn Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro
35 40 45
Lys Leu Leu Ile Tyr Ala Ala Ser Asn Gln Gly Ser Gly Val Pro Ala
50 55 60
Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Ser Leu Asn Ile His
65 70 75 80
Pro Met Glu Glu Asp Asp Thr Ala Met Tyr Phe Cys Gln Gln Ser Lys
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<212> PRT
<213> Artificial Sequence
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1 5 10 15
Ser Leu Thr Leu Ser Cys Gly Ala Ser Gly Phe Thr Ile Ser Ser Tyr
20 25 30
Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ser Pro Gly Lys Ala Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Ile Ile Ser Thr Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Pro Asp Ser Val Arg
50 55 60
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu
65 70 75 80
Thr Met Ser Ser Leu Asp Ser Val Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys Ala
85 90 95
Arg Val Gly Gly Tyr Tyr Asp Ser Met Asp His Trp Gly Gln Gly Thr
100 105 110
Ser Val Thr
115
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<211> 115
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
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1 5 10 15
Ser Leu Thr Leu Ser Cys Gly Ala Ser Gly Phe Thr Ile Ser Ser Tyr
20 25 30
Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ser Pro Gly Lys Ala Leu Glu Trp Val
35 40 45
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Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu
65 70 75 80
Thr Met Ser Ser Leu Asp Ser Val Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys Ala
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100 105 110
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<212> PRT
<213> Artificial Sequence
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Ser Leu Thr Leu Ser Cys Gly Ala Ser Gly Phe Thr Ile Ser Ser Tyr
20 25 30
Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ser Pro Gly Lys Ala Leu Glu Trp Val
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100 105 110
Ser Val Thr
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<213> Artificial Sequence
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Ser Leu Thr Leu Ser Cys Gly Ala Ser Gly Phe Thr Ile Ser Ser Tyr
20 25 30
Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ser Pro Gly Lys Ala Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Ile Ile Ser Thr Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Pro Asp Lys Phe Arg
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<213> Artificial Sequence
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Ser Leu Lys Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Ile Ser Ser Tyr
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100 105 110
Ser Val Thr
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<213> Artificial Sequence
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<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
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20 25 30
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100 105 110
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<213> Artificial Sequence
<220>
<223> 827 variable light chain
<400> 224
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20 25 30
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Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Asn Ile Asn Ser Val Glu Ser
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<220>
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<400> 225
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Ser Val Arg Ile Ser Cys Lys Ala Ser Asp Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr
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<220>
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<400> 226
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<213> Artificial Sequence
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<213> Artificial Sequence
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Asp Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr Tyr Ile
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<220>
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<213> Artificial Sequence
<220>
<223> 1D7 heavy chain
<400> 250
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Thr Val Ile Trp Tyr Glu Gly Ser Asn Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Gly Gly Gln Leu Gly Lys Tyr Tyr Tyr Tyr Gly Met Asp Val
100 105 110
Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly
115 120 125
Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly
130 135 140
Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val
145 150 155 160
Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe
165 170 175
Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val
180 185 190
Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val
195 200 205
Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Pro Lys
210 215 220
Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu
225 230 235 240
Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr
245 250 255
Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val
260 265 270
Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val
275 280 285
Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser
290 295 300
Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu
305 310 315 320
Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala
325 330 335
Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro
340 345 350
Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln
355 360 365
Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala
370 375 380
Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr
385 390 395 400
Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu
405 410 415
Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser
420 425 430
Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser
435 440 445
Leu Ser Pro Gly Lys
450
<210> 251
<211> 214
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> 1D7 light chain
<400> 251
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Arg Asn Asp
20 25 30
Leu Gly Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Arg Leu Ile
35 40 45
Tyr Asp Ala Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gln His Asn Asn Tyr Pro Trp
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala
100 105 110
Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly
115 120 125
Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala
130 135 140
Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln
145 150 155 160
Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser
165 170 175
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180 185 190
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195 200 205
Phe Asn Arg Gly Glu Cys
210
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<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> 1D7 variable heavy chain
<400> 252
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
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50 55 60
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65 70 75 80
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85 90 95
Ala Arg Gly Gly Gln Leu Gly Lys Tyr Tyr Tyr Tyr Gly Met Asp Val
100 105 110
Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser
115 120
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<211> 108
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> 1D7 variable light chain
<400> 253
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Arg Asn Asp
20 25 30
Leu Gly Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Arg Leu Ile
35 40 45
Tyr Asp Ala Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
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85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg
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<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
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Ser Tyr Gly Met His
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<213> Artificial Sequence
<220>
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Val Ile Trp Tyr Glu Gly Ser Asn Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys
1 5 10 15
Gly
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<213> Artificial Sequence
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Gly Gly Gln Leu Gly Lys Tyr Tyr Tyr Tyr Gly Met Asp Val
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Arg Ala Ser Gln Gly Ile Arg Asn Asp Leu Gly
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<220>
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Asp Ala Ser Ser Leu Gln Ser
1 5
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<211> 9
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> 1D7 light chain CDR3
<400> 259
Leu Gln His Asn Asn Tyr Pro Trp Thr
1 5
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<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> 33C9 heavy chain
<400> 260
Gln Val Gln Val Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser Val Ile Trp Tyr Glu Gly Ser Asn Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Gly Gly Leu Leu Gly Tyr Tyr Tyr Tyr Tyr Gly Met Asp Val
100 105 110
Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly
115 120 125
Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly
130 135 140
Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val
145 150 155 160
Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe
165 170 175
Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val
180 185 190
Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val
195 200 205
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Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu
225 230 235 240
Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr
245 250 255
Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val
260 265 270
Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val
275 280 285
Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser
290 295 300
Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu
305 310 315 320
Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala
325 330 335
Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro
340 345 350
Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln
355 360 365
Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala
370 375 380
Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr
385 390 395 400
Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu
405 410 415
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420 425 430
Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser
435 440 445
Leu Ser Pro Gly Lys
450
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<211> 214
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> 33C9 light chain
<400> 261
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Arg Asn Asp
20 25 30
Leu Gly Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Arg Leu Ile
35 40 45
Tyr Asp Ala Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gln His His Ser Tyr Pro Trp
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala
100 105 110
Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly
115 120 125
Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala
130 135 140
Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln
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Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser
165 170 175
Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr
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195 200 205
Phe Asn Arg Gly Glu Cys
210
<210> 262
<211> 123
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> 33C9 variable heavy chain
<400> 262
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1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
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Ser Val Ile Trp Tyr Glu Gly Ser Asn Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
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100 105 110
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<211> 108
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> 33C9 variable light chain
<400> 263
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Arg Asn Asp
20 25 30
Leu Gly Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Arg Leu Ile
35 40 45
Tyr Asp Ala Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gln His His Ser Tyr Pro Trp
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg
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<211> 5
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
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1 5
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<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
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Val Ile Trp Tyr Glu Gly Ser Asn Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys
1 5 10 15
Gly
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<211> 14
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
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Gly Gly Leu Leu Gly Tyr Tyr Tyr Tyr Tyr Gly Met Asp Val
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<211> 11
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
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<400> 267
Arg Ala Ser Gln Gly Ile Arg Asn Asp Leu Gly
1 5 10
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<211> 7
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> 33C9 light chain CDR2
<400> 268
Asp Ala Ser Ser Leu Gln Ser
1 5
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<211> 9
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> 33C9 light chain CDR3
<400> 269
Leu Gln His His Ser Tyr Pro Trp Thr
1 5
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<211> 453
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> 33F6 heavy chain
<400> 270
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr
20 25 30
Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Val Ile Trp Tyr Val Gly Ser Asn Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Gly Gly Glu Leu Arg Leu Tyr Tyr Tyr Tyr Gly Met Asp Val
100 105 110
Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly
115 120 125
Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly
130 135 140
Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val
145 150 155 160
Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe
165 170 175
Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val
180 185 190
Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val
195 200 205
Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys
210 215 220
Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu
225 230 235 240
Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr
245 250 255
Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val
260 265 270
Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val
275 280 285
Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser
290 295 300
Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu
305 310 315 320
Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala
325 330 335
Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro
340 345 350
Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln
355 360 365
Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala
370 375 380
Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr
385 390 395 400
Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu
405 410 415
Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser
420 425 430
Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser
435 440 445
Leu Ser Pro Gly Lys
450
<210> 271
<211> 214
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> 33F6 light chain
<400> 271
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1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Arg Asn Asp
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Leu Gly Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Arg Leu Ile
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130 135 140
Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln
145 150 155 160
Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser
165 170 175
Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr
180 185 190
Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser
195 200 205
Phe Asn Arg Gly Glu Cys
210
<210> 272
<211> 123
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> 33F6 variable heavy chain
<400> 272
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg
1 5 10 15
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20 25 30
Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Val Ile Trp Tyr Val Gly Ser Asn Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Gly Gly Glu Leu Arg Leu Tyr Tyr Tyr Tyr Gly Met Asp Val
100 105 110
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115 120
<210> 273
<211> 108
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> 33F6 variable light chain
<400> 273
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Arg Asn Asp
20 25 30
Leu Gly Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Arg Leu Ile
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50 55 60
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65 70 75 80
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85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg
100 105
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<211> 5
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> 33F6 heavy chain CDR1
<400> 274
Asn Tyr Gly Met His
1 5
<210> 275
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> 33F6 heavy chain CDR2
<400> 275
Val Ile Trp Tyr Val Gly Ser Asn Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys
1 5 10 15
Gly
<210> 276
<211> 14
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> 33F6 heavy chain CDR3
<400> 276
Gly Gly Glu Leu Arg Leu Tyr Tyr Tyr Tyr Gly Met Asp Val
1 5 10
<210> 277
<211> 11
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> 33F6 light chain CDR1
<400> 277
Arg Ala Ser Gln Gly Ile Arg Asn Asp Leu Gly
1 5 10
<210> 278
<211> 7
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> 33F6 light chain CDR2
<400> 278
Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser
1 5
<210> 279
<211> 9
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> 33F6 light chain CDR3
<400> 279
Leu Gln Leu Asn Ser Tyr Pro Trp Thr
1 5
<210> 280
<211> 453
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> 34G4 heavy chain
<400> 280
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Val Ile Trp Tyr Glu Gly Ser Asn Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Gly Gly Gln Leu Gly Tyr Tyr Tyr Tyr Tyr Gly Met Asp Val
100 105 110
Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly
115 120 125
Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly
130 135 140
Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val
145 150 155 160
Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe
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Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys
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Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr
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Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val
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Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val
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Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser
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Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr
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Leu Gln His Asn Ser Tyr Pro Leu Thr
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Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg
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Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu
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Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser
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165 170 175
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195 200 205
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210 215 220
Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val
225 230 235 240
Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr
245 250 255
Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu
260 265 270
Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys
275 280 285
Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser
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<213> Artificial Sequence
<220>
<223> 45A8 light chain
<400> 341
Gln Ser Ala Leu Thr Gln Pro Ala Ser Val Ser Gly Ser Pro Gly Gln
1 5 10 15
Ser Ile Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Thr Tyr
20 25 30
Asn Leu Val Ser Trp Tyr Gln Gln His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu
35 40 45
Met Ile Tyr Glu Val Ser Lys Arg Pro Ser Gly Ile Ser Asn Arg Phe
50 55 60
Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu
65 70 75 80
Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Cys Ser Tyr Ala Gly Tyr
85 90 95
Ser Thr Trp Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Arg Gln
100 105 110
Pro Lys Ala Ala Pro Ser Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser Glu Glu
115 120 125
Leu Gln Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp Phe Tyr
130 135 140
Pro Gly Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Ser Ser Pro Val Lys
145 150 155 160
Ala Gly Val Glu Thr Thr Thr Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn Lys Tyr
165 170 175
Ala Ala Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys Ser His
180 185 190
Arg Ser Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val Glu Lys
195 200 205
Thr Val Ala Pro Thr Glu Cys Ser
210 215
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<213> Artificial Sequence
<220>
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<400> 342
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Val Ile Trp His Asp Gly Ser Asn Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Lys Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
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100 105 110
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<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> 45A8 variable light chain
<400> 343
Gln Ser Ala Leu Thr Gln Pro Ala Ser Val Ser Gly Ser Pro Gly Gln
1 5 10 15
Ser Ile Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Thr Tyr
20 25 30
Asn Leu Val Ser Trp Tyr Gln Gln His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu
35 40 45
Met Ile Tyr Glu Val Ser Lys Arg Pro Ser Gly Ile Ser Asn Arg Phe
50 55 60
Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu
65 70 75 80
Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Cys Ser Tyr Ala Gly Tyr
85 90 95
Ser Thr Trp Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Arg
100 105 110
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<213> Artificial Sequence
<220>
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Ser Tyr Gly Met His
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<212> PRT
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<220>
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Val Ile Trp His Asp Gly Ser Asn Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys
1 5 10 15
Gly
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Glu Val Ser Lys Arg Pro Ser
1 5
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<220>
<223> 45A8 light chain CDR3
<400> 349
Cys Ser Tyr Ala Gly Tyr Ser Thr Trp Val
1 5 10
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<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
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<400> 350
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
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50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
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85 90 95
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Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly
130 135 140
Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro
145 150 155 160
Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr
165 170 175
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180 185 190
Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn
195 200 205
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210 215 220
Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu
225 230 235 240
Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
245 250 255
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
260 265 270
Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
275 280 285
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
290 295 300
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
305 310 315 320
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
325 330 335
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
340 345 350
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn
355 360 365
Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
370 375 380
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
385 390 395 400
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
405 410 415
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
420 425 430
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
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Ser Leu Ser Pro Gly Lys
450
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<211> 214
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> 46E11 light chain
<400> 351
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Arg Asn Asp
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Leu Gly Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Arg Leu Ile
35 40 45
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Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala
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210
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<213> Artificial Sequence
<220>
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<400> 352
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg
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Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
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Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
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50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
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Ala Arg Gly Asp Ile Leu Thr Gly Tyr Ser Leu Tyr Tyr Gly Met Asp
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Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser
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<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> 46E11 variable light chain
<400> 353
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Arg Asn Asp
20 25 30
Leu Gly Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Arg Leu Ile
35 40 45
Tyr Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
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65 70 75 80
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85 90 95
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<212> PRT
<213> Artificial Sequence
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Ser Tyr Gly Met His
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<220>
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1 5 10 15
Gly
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Gly Asp Ile Leu Thr Gly Tyr Ser Leu Tyr Tyr Gly Met Asp Val
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Arg Ala Ser Gln Gly Ile Arg Asn Asp Leu Gly
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1 5
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<211> 9
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> 46E11 light chain CDR3
<400> 359
Leu Gln His Asn Ser Tyr Pro Trp Thr
1 5
<210> 360
<211> 453
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> 48H12 heavy chain
<400> 360
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Val Ile Trp Tyr Ala Gly Ser Asn Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Val Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Gly Gly Gln Leu Ala Leu Tyr Tyr Tyr Tyr Gly Met Asp Val
100 105 110
Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly
115 120 125
Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly
130 135 140
Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val
145 150 155 160
Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe
165 170 175
Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val
180 185 190
Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val
195 200 205
Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys
210 215 220
Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu
225 230 235 240
Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr
245 250 255
Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val
260 265 270
Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val
275 280 285
Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser
290 295 300
Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu
305 310 315 320
Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala
325 330 335
Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro
340 345 350
Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln
355 360 365
Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala
370 375 380
Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr
385 390 395 400
Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu
405 410 415
Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser
420 425 430
Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser
435 440 445
Leu Ser Pro Gly Lys
450
<210> 361
<211> 214
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> 48H12 light chain
<400> 361
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Arg Asn Asp
20 25 30
Leu Gly Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Arg Leu Ile
35 40 45
Tyr Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
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Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala
100 105 110
Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly
115 120 125
Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala
130 135 140
Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln
145 150 155 160
Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser
165 170 175
Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr
180 185 190
Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser
195 200 205
Phe Asn Arg Gly Glu Cys
210
<210> 362
<211> 123
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> 48H12 variable heavy chain
<400> 362
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
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Ala Val Ile Trp Tyr Ala Gly Ser Asn Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
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65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
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100 105 110
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<210> 363
<211> 108
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> 48H12 variable light chain
<400> 363
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Arg Asn Asp
20 25 30
Leu Gly Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Arg Leu Ile
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Tyr Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
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<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
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Ser Tyr Gly Met His
1 5
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<213> Artificial Sequence
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1 5 10 15
Gly
<210> 366
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<400> 366
Gly Gly Gln Leu Ala Leu Tyr Tyr Tyr Tyr Gly Met Asp Val
1 5 10
<210> 367
<211> 11
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> 48H12 light chain CDR1
<400> 367
Arg Ala Ser Gln Gly Ile Arg Asn Asp Leu Gly
1 5 10
<210> 368
<211> 7
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> 48H12 light chain CDR2
<400> 368
Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser
1 5
<210> 369
<211> 9
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> 48H12 light chain CDR3
<400> 369
Leu Gln His Asn Asn Tyr Pro Trp Thr
1 5
<210> 370
<211> 453
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> 48H7 heavy chain
<400> 370
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg
1 5 10 15
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85 90 95
Ala Arg Gly Gly Glu Leu Gly Arg Asp Tyr Tyr Ser Gly Met Asp Val
100 105 110
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115 120 125
Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly
130 135 140
Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val
145 150 155 160
Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe
165 170 175
Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val
180 185 190
Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val
195 200 205
Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys
210 215 220
Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu
225 230 235 240
Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr
245 250 255
Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val
260 265 270
Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val
275 280 285
Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser
290 295 300
Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu
305 310 315 320
Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala
325 330 335
Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro
340 345 350
Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln
355 360 365
Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala
370 375 380
Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr
385 390 395 400
Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu
405 410 415
Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser
420 425 430
Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser
435 440 445
Leu Ser Pro Gly Lys
450
<210> 371
<211> 214
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> 48H7 light chain
<400> 371
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Val Ile Arg Asn Asp
20 25 30
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65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gln His Asn Ser Tyr Pro Ile
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala
100 105 110
Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly
115 120 125
Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala
130 135 140
Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln
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65 70 75 80
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Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu
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225 230 235 240
Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu
245 250 255
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275 280 285
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<400> 401
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Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Asp Leu Arg Tyr Asn Trp Asn Asp Gly Gly Val Asp Tyr Trp
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Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
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<213> Artificial Sequence
<220>
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Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Ile Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Ser Tyr
20 25 30
Leu His Trp Tyr Lys Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Gly Ala Ser Arg Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Ser Ser Thr Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg
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Ser Cys Gly Met His
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Val Ile Ser Tyr Asp Gly Ser Asn Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys
1 5 10 15
Gly
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Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Ser Tyr Leu His
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Gly Ala Ser Arg Leu Gln Ser
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Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Gly Ser Ile Ser Ser Gly
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Gly Tyr Phe Trp Ser Trp Ile Arg Gln His Pro Gly Lys Gly Leu Glu
35 40 45
Trp Ile Gly Tyr Ile Tyr Tyr Ser Gly Thr Thr Tyr Tyr Asn Pro Ser
50 55 60
Leu Lys Ser Arg Val Thr Ile Ser Ile Asp Thr Ser Lys Asn His Phe
65 70 75 80
Ser Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr
85 90 95
Cys Ala Arg Asp Leu Phe Tyr Tyr Asp Ser Ser Gly Pro Arg Gly Phe
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Asp Pro Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr
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130 135 140
Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu
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Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His
165 170 175
Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser
180 185 190
Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys
195 200 205
Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu
210 215 220
Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
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Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys
245 250 255
Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val
260 265 270
Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp
275 280 285
Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr
290 295 300
Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp
305 310 315 320
Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu
325 330 335
Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg
340 345 350
Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys
355 360 365
Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp
370 375 380
Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys
385 390 395 400
Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser
405 410 415
Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser
420 425 430
Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser
435 440 445
Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
450 455
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<211> 215
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<213> Artificial Sequence
<220>
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Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly
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Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Thr Val Ser Ser Asn
20 25 30
Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu
35 40 45
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Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Gly Ser Ile Ser Ser Gly
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Gly Tyr Phe Trp Ser Trp Ile Arg Gln His Pro Gly Lys Gly Leu Glu
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Trp Ile Gly Tyr Ile Tyr Tyr Ser Gly Thr Thr Tyr Tyr Asn Pro Ser
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Ser Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr
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Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Thr Val Ser Ser Asn
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Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu
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Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Arg Leu Glu
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<213> Artificial Sequence
<220>
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Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
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Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Ala Val Ile Trp Tyr Val Gly Ser Asn Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Ser Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Gly Gly Glu Leu Gly Arg Asp Tyr Tyr Ser Gly Met Asp Val
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Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly
130 135 140
Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val
145 150 155 160
Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe
165 170 175
Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val
180 185 190
Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val
195 200 205
Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Pro Lys
210 215 220
Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu
225 230 235 240
Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr
245 250 255
Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val
260 265 270
Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val
275 280 285
Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser
290 295 300
Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu
305 310 315 320
Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala
325 330 335
Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro
340 345 350
Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln
355 360 365
Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala
370 375 380
Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr
385 390 395 400
Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu
405 410 415
Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser
420 425 430
Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser
435 440 445
Leu Ser Pro Gly Lys
450
<210> 421
<211> 214
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> 7A10 light chain
<400> 421
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Arg Asn Asp
20 25 30
Leu Gly Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Arg Leu Ile
35 40 45
Tyr Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
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Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly
115 120 125
Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala
130 135 140
Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln
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Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser
165 170 175
Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr
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Phe Asn Arg Gly Glu Cys
210
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<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
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<400> 422
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Ala Val Ile Trp Tyr Val Gly Ser Asn Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Ser Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Gly Gly Glu Leu Gly Arg Asp Tyr Tyr Ser Gly Met Asp Val
100 105 110
Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 423
<211> 108
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> 7A10 variable light chain
<400> 423
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Arg Asn Asp
20 25 30
Leu Gly Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Arg Leu Ile
35 40 45
Tyr Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
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85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg
100 105
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Ser Tyr Gly Met His
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Gly
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<212> PRT
<213> Artificial Sequence
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<400> 426
Gly Gly Glu Leu Gly Arg Asp Tyr Tyr Ser Gly Met Asp Val
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<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> 7A10 light chain CDR1
<400> 427
Arg Ala Ser Gln Gly Ile Arg Asn Asp Leu Gly
1 5 10
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<211> 9
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<220>
<223> 7A10 light chain CDR3
<400> 429
Gln Gln His Asn Ser Tyr Pro Trp Thr
1 5
<210> 430
<211> 453
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> 9H6 heavy chain
<400> 430
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Val Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Gly Met His Trp Ile Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Val Ile Trp Tyr Glu Gly Ser Asn Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Gly Gly Arg Leu Gly Lys Asp Tyr Tyr Ser Gly Met Asp Val
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Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly
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Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly
130 135 140
Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val
145 150 155 160
Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe
165 170 175
Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val
180 185 190
Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val
195 200 205
Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Pro Lys
210 215 220
Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu
225 230 235 240
Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr
245 250 255
Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val
260 265 270
Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val
275 280 285
Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser
290 295 300
Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu
305 310 315 320
Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala
325 330 335
Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro
340 345 350
Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln
355 360 365
Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala
370 375 380
Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr
385 390 395 400
Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu
405 410 415
Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser
420 425 430
Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser
435 440 445
Leu Ser Pro Gly Lys
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<213> Artificial Sequence
<220>
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<400> 431
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Arg Asn Asp
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100 105 110
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115 120 125
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130 135 140
Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln
145 150 155 160
Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser
165 170 175
Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr
180 185 190
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195 200 205
Phe Asn Arg Gly Glu Cys
210
<210> 432
<211> 123
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<213> Artificial Sequence
<220>
<223> 9H6 variable heavy chain
<400> 432
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Val Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
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Gly Met His Trp Ile Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
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<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> 9H6 variable light chain
<400> 433
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Arg Asn Asp
20 25 30
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Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gln His Asn Thr Tyr Pro Trp
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg
100 105
<210> 434
<211> 5
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> 9H6 heavy chain CDR1
<400> 434
Ser Tyr Gly Met His
1 5
<210> 435
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> 9H6 heavy chain CDR2
<400> 435
Val Ile Trp Tyr Glu Gly Ser Asn Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys
1 5 10 15
Gly
<210> 436
<211> 14
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> 9H6 heavy chain CDR3
<400> 436
Gly Gly Arg Leu Gly Lys Asp Tyr Tyr Ser Gly Met Asp Val
1 5 10
<210> 437
<211> 11
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> 9H6 light chain CDR1
<400> 437
Arg Ala Ser Gln Gly Ile Arg Asn Asp Leu Gly
1 5 10
<210> 438
<211> 7
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> 9H6 light chain CDR2
<400> 438
Ala Thr Ser Ser Leu Gln Ser
1 5
<210> 439
<211> 9
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> 9H6 light chain CDR3
<400> 439
Leu Gln His Asn Thr Tyr Pro Trp Thr
1 5
<210> 440
<211> 177
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> GITRL
<400> 440
Met Cys Leu Ser His Leu Glu Asn Met Pro Leu Ser His Ser Arg Thr
1 5 10 15
Gln Gly Ala Gln Arg Ser Ser Trp Lys Leu Trp Leu Phe Cys Ser Ile
20 25 30
Val Met Leu Leu Phe Leu Cys Ser Phe Ser Trp Leu Ile Phe Ile Phe
35 40 45
Leu Gln Leu Glu Thr Ala Lys Glu Pro Cys Met Ala Lys Phe Gly Pro
50 55 60
Leu Pro Ser Lys Trp Gln Met Ala Ser Ser Glu Pro Pro Cys Val Asn
65 70 75 80
Lys Val Ser Asp Trp Lys Leu Glu Ile Leu Gln Asn Gly Leu Tyr Leu
85 90 95
Ile Tyr Gly Gln Val Ala Pro Asn Ala Asn Tyr Asn Asp Val Ala Pro
100 105 110
Phe Glu Val Arg Leu Tyr Lys Asn Lys Asp Met Ile Gln Thr Leu Thr
115 120 125
Asn Lys Ser Lys Ile Gln Asn Val Gly Gly Thr Tyr Glu Leu His Val
130 135 140
Gly Asp Thr Ile Asp Leu Ile Phe Asn Ser Glu His Gln Val Leu Lys
145 150 155 160
Asn Asn Thr Tyr Trp Gly Ile Ile Leu Leu Ala Asn Pro Gln Phe Ile
165 170 175
Ser
<210> 441
<211> 125
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> GITRL soluble domain
<400> 441
Thr Ala Lys Glu Pro Cys Met Ala Lys Phe Gly Pro Leu Pro Ser Lys
1 5 10 15
Trp Gln Met Ala Ser Ser Glu Pro Pro Cys Val Asn Lys Val Ser Asp
20 25 30
Trp Lys Leu Glu Ile Leu Gln Asn Gly Leu Tyr Leu Ile Tyr Gly Gln
35 40 45
Val Ala Pro Asn Ala Asn Tyr Asn Asp Val Ala Pro Phe Glu Val Arg
50 55 60
Leu Tyr Lys Asn Lys Asp Met Ile Gln Thr Leu Thr Asn Lys Ser Lys
65 70 75 80
Ile Gln Asn Val Gly Gly Thr Tyr Glu Leu His Val Gly Asp Thr Ile
85 90 95
Asp Leu Ile Phe Asn Ser Glu His Gln Val Leu Lys Asn Asn Thr Tyr
100 105 110
Trp Gly Ile Ile Leu Leu Ala Asn Pro Gln Phe Ile Ser
115 120 125
<210> 442
<211> 283
<212> PRT
<213> Homo Sapiens
<400> 442
Met Glu Pro Pro Gly Asp Trp Gly Pro Pro Pro Trp Arg Ser Thr Pro
1 5 10 15
Arg Thr Asp Val Leu Arg Leu Val Leu Tyr Leu Thr Phe Leu Gly Ala
20 25 30
Pro Cys Tyr Ala Pro Ala Leu Pro Ser Cys Lys Glu Asp Glu Tyr Pro
35 40 45
Val Gly Ser Glu Cys Cys Pro Lys Cys Ser Pro Gly Tyr Arg Val Lys
50 55 60
Glu Ala Cys Gly Glu Leu Thr Gly Thr Val Cys Glu Pro Cys Pro Pro
65 70 75 80
Gly Thr Tyr Ile Ala His Leu Asn Gly Leu Ser Lys Cys Leu Gln Cys
85 90 95
Gln Met Cys Asp Pro Ala Met Gly Leu Arg Ala Ser Arg Asn Cys Ser
100 105 110
Arg Thr Glu Asn Ala Val Cys Gly Cys Ser Pro Gly His Phe Cys Ile
115 120 125
Val Gln Asp Gly Asp His Cys Ala Ala Cys Arg Ala Tyr Ala Thr Ser
130 135 140
Ser Pro Gly Gln Arg Val Gln Lys Gly Gly Thr Glu Ser Gln Asp Thr
145 150 155 160
Leu Cys Gln Asn Cys Pro Pro Gly Thr Phe Ser Pro Asn Gly Thr Leu
165 170 175
Glu Glu Cys Gln His Gln Thr Lys Cys Ser Trp Leu Val Thr Lys Ala
180 185 190
Gly Ala Gly Thr Ser Ser Ser His Trp Val Trp Trp Phe Leu Ser Gly
195 200 205
Ser Leu Val Ile Val Ile Val Cys Ser Thr Val Gly Leu Ile Ile Cys
210 215 220
Val Lys Arg Arg Lys Pro Arg Gly Asp Val Val Lys Val Ile Val Ser
225 230 235 240
Val Gln Arg Lys Arg Gln Glu Ala Glu Gly Glu Ala Thr Val Ile Glu
245 250 255
Ala Leu Gln Ala Pro Pro Asp Val Thr Thr Val Ala Val Glu Glu Thr
260 265 270
Ile Pro Ser Phe Thr Gly Arg Ser Pro Asn His
275 280
<210> 443
<211> 240
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> LIGHT (HVEM ligand)
<400> 443
Met Glu Glu Ser Val Val Arg Pro Ser Val Phe Val Val Asp Gly Gln
1 5 10 15
Thr Asp Ile Pro Phe Thr Arg Leu Gly Arg Ser His Arg Arg Gln Ser
20 25 30
Cys Ser Val Ala Arg Val Gly Leu Gly Leu Leu Leu Leu Leu Met Gly
35 40 45
Ala Gly Leu Ala Val Gln Gly Trp Phe Leu Leu Gln Leu His Trp Arg
50 55 60
Leu Gly Glu Met Val Thr Arg Leu Pro Asp Gly Pro Ala Gly Ser Trp
65 70 75 80
Glu Gln Leu Ile Gln Glu Arg Arg Ser His Glu Val Asn Pro Ala Ala
85 90 95
His Leu Thr Gly Ala Asn Ser Ser Leu Thr Gly Ser Gly Gly Pro Leu
100 105 110
Leu Trp Glu Thr Gln Leu Gly Leu Ala Phe Leu Arg Gly Leu Ser Tyr
115 120 125
His Asp Gly Ala Leu Val Val Thr Lys Ala Gly Tyr Tyr Tyr Ile Tyr
130 135 140
Ser Lys Val Gln Leu Gly Gly Val Gly Cys Pro Leu Gly Leu Ala Ser
145 150 155 160
Thr Ile Thr His Gly Leu Tyr Lys Arg Thr Pro Arg Tyr Pro Glu Glu
165 170 175
Leu Glu Leu Leu Val Ser Gln Gln Ser Pro Cys Gly Arg Ala Thr Ser
180 185 190
Ser Ser Arg Val Trp Trp Asp Ser Ser Phe Leu Gly Gly Val Val His
195 200 205
Leu Glu Ala Gly Glu Lys Val Val Val Arg Val Leu Asp Glu Arg Leu
210 215 220
Val Arg Leu Arg Asp Gly Thr Arg Ser Tyr Phe Gly Ala Phe Met Val
225 230 235 240
<210> 444
<211> 147
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> LIGHT soluble domain
<400> 444
Pro Ala Ala His Leu Thr Gly Ala Asn Ser Ser Leu Thr Gly Ser Gly
1 5 10 15
Gly Pro Leu Leu Trp Glu Thr Gln Leu Gly Leu Ala Phe Leu Arg Gly
20 25 30
Leu Ser Tyr His Asp Gly Ala Leu Val Val Thr Lys Ala Gly Tyr Tyr
35 40 45
Tyr Ile Tyr Ser Lys Val Gln Leu Gly Gly Val Gly Cys Pro Leu Gly
50 55 60
Leu Ala Ser Thr Ile Thr His Gly Leu Tyr Lys Arg Thr Pro Arg Tyr
65 70 75 80
Pro Glu Glu Leu Glu Leu Leu Val Ser Gln Gln Ser Pro Cys Gly Arg
85 90 95
Ala Thr Ser Ser Ser Arg Val Trp Trp Asp Ser Ser Phe Leu Gly Gly
100 105 110
Val Val His Leu Glu Ala Gly Glu Lys Val Val Val Arg Val Leu Asp
115 120 125
Glu Arg Leu Val Arg Leu Arg Asp Gly Thr Arg Ser Tyr Phe Gly Ala
130 135 140
Phe Met Val
145
<210> 445
<211> 146
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> LIGHT soluble domain (alternative)
<400> 445
Ala Ala His Leu Thr Gly Ala Asn Ser Ser Leu Thr Gly Ser Gly Gly
1 5 10 15
Pro Leu Leu Trp Glu Thr Gln Leu Gly Leu Ala Phe Leu Arg Gly Leu
20 25 30
Ser Tyr His Asp Gly Ala Leu Val Val Thr Lys Ala Gly Tyr Tyr Tyr
35 40 45
Ile Tyr Ser Lys Val Gln Leu Gly Gly Val Gly Cys Pro Leu Gly Leu
50 55 60
Ala Ser Thr Ile Thr His Gly Leu Tyr Lys Arg Thr Pro Arg Tyr Pro
65 70 75 80
Glu Glu Leu Glu Leu Leu Val Ser Gln Gln Ser Pro Cys Gly Arg Ala
85 90 95
Thr Ser Ser Ser Arg Val Trp Trp Asp Ser Ser Phe Leu Gly Gly Val
100 105 110
Val His Leu Glu Ala Gly Glu Lys Val Val Val Arg Val Leu Asp Glu
115 120 125
Arg Leu Val Arg Leu Arg Asp Gly Thr Arg Ser Tyr Phe Gly Ala Phe
130 135 140
Met Val
145
<210> 446
<211> 145
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> LIGHT soluble domain (alternative)
<400> 446
Ala His Leu Thr Gly Ala Asn Ser Ser Leu Thr Gly Ser Gly Gly Pro
1 5 10 15
Leu Leu Trp Glu Thr Gln Leu Gly Leu Ala Phe Leu Arg Gly Leu Ser
20 25 30
Tyr His Asp Gly Ala Leu Val Val Thr Lys Ala Gly Tyr Tyr Tyr Ile
35 40 45
Tyr Ser Lys Val Gln Leu Gly Gly Val Gly Cys Pro Leu Gly Leu Ala
50 55 60
Ser Thr Ile Thr His Gly Leu Tyr Lys Arg Thr Pro Arg Tyr Pro Glu
65 70 75 80
Glu Leu Glu Leu Leu Val Ser Gln Gln Ser Pro Cys Gly Arg Ala Thr
85 90 95
Ser Ser Ser Arg Val Trp Trp Asp Ser Ser Phe Leu Gly Gly Val Val
100 105 110
His Leu Glu Ala Gly Glu Lys Val Val Val Arg Val Leu Asp Glu Arg
115 120 125
Leu Val Arg Leu Arg Asp Gly Thr Arg Ser Tyr Phe Gly Ala Phe Met
130 135 140
Val
145
<210> 447
<211> 335
<212> PRT
<213> Homo Sapiens
<400> 447
Met Leu Gly Ile Trp Thr Leu Leu Pro Leu Val Leu Thr Ser Val Ala
1 5 10 15
Arg Leu Ser Ser Lys Ser Val Asn Ala Gln Val Thr Asp Ile Asn Ser
20 25 30
Lys Gly Leu Glu Leu Arg Lys Thr Val Thr Thr Val Glu Thr Gln Asn
35 40 45
Leu Glu Gly Leu His His Asp Gly Gln Phe Cys His Lys Pro Cys Pro
50 55 60
Pro Gly Glu Arg Lys Ala Arg Asp Cys Thr Val Asn Gly Asp Glu Pro
65 70 75 80
Asp Cys Val Pro Cys Gln Glu Gly Lys Glu Tyr Thr Asp Lys Ala His
85 90 95
Phe Ser Ser Lys Cys Arg Arg Cys Arg Leu Cys Asp Glu Gly His Gly
100 105 110
Leu Glu Val Glu Ile Asn Cys Thr Arg Thr Gln Asn Thr Lys Cys Arg
115 120 125
Cys Lys Pro Asn Phe Phe Cys Asn Ser Thr Val Cys Glu His Cys Asp
130 135 140
Pro Cys Thr Lys Cys Glu His Gly Ile Ile Lys Glu Cys Thr Leu Thr
145 150 155 160
Ser Asn Thr Lys Cys Lys Glu Glu Gly Ser Arg Ser Asn Leu Gly Trp
165 170 175
Leu Cys Leu Leu Leu Leu Pro Ile Pro Leu Ile Val Trp Val Lys Arg
180 185 190
Lys Glu Val Gln Lys Thr Cys Arg Lys His Arg Lys Glu Asn Gln Gly
195 200 205
Ser His Glu Ser Pro Thr Leu Asn Pro Glu Thr Val Ala Ile Asn Leu
210 215 220
Ser Asp Val Asp Leu Ser Lys Tyr Ile Thr Thr Ile Ala Gly Val Met
225 230 235 240
Thr Leu Ser Gln Val Lys Gly Phe Val Arg Lys Asn Gly Val Asn Glu
245 250 255
Ala Lys Ile Asp Glu Ile Lys Asn Asp Asn Val Gln Asp Thr Ala Glu
260 265 270
Gln Lys Val Gln Leu Leu Arg Asn Trp His Gln Leu His Gly Lys Lys
275 280 285
Glu Ala Tyr Asp Thr Leu Ile Lys Asp Leu Lys Lys Ala Asn Leu Cys
290 295 300
Thr Leu Ala Glu Lys Ile Gln Thr Ile Ile Leu Lys Asp Ile Thr Ser
305 310 315 320
Asp Ser Glu Asn Ser Asn Phe Arg Asn Glu Ile Gln Ser Leu Val
325 330 335
<210> 448
<211> 314
<212> PRT
<213> Homo Sapiens
<400> 448
Met Leu Gly Ile Trp Thr Leu Leu Pro Leu Val Leu Thr Ser Val Ala
1 5 10 15
Arg Leu Ser Ser Lys Ser Val Asn Ala Gln Val Thr Asp Ile Asn Ser
20 25 30
Lys Gly Leu Glu Leu Arg Lys Thr Val Thr Thr Val Glu Thr Gln Asn
35 40 45
Leu Glu Gly Leu His His Asp Gly Gln Phe Cys His Lys Pro Cys Pro
50 55 60
Pro Gly Glu Arg Lys Ala Arg Asp Cys Thr Val Asn Gly Asp Glu Pro
65 70 75 80
Asp Cys Val Pro Cys Gln Glu Gly Lys Glu Tyr Thr Asp Lys Ala His
85 90 95
Phe Ser Ser Lys Cys Arg Arg Cys Arg Leu Cys Asp Glu Gly His Gly
100 105 110
Leu Glu Val Glu Ile Asn Cys Thr Arg Thr Gln Asn Thr Lys Cys Arg
115 120 125
Cys Lys Pro Asn Phe Phe Cys Asn Ser Thr Val Cys Glu His Cys Asp
130 135 140
Pro Cys Thr Lys Cys Glu His Gly Ile Ile Lys Glu Cys Thr Leu Thr
145 150 155 160
Ser Asn Thr Lys Cys Lys Glu Glu Val Lys Arg Lys Glu Val Gln Lys
165 170 175
Thr Cys Arg Lys His Arg Lys Glu Asn Gln Gly Ser His Glu Ser Pro
180 185 190
Thr Leu Asn Pro Glu Thr Val Ala Ile Asn Leu Ser Asp Val Asp Leu
195 200 205
Ser Lys Tyr Ile Thr Thr Ile Ala Gly Val Met Thr Leu Ser Gln Val
210 215 220
Lys Gly Phe Val Arg Lys Asn Gly Val Asn Glu Ala Lys Ile Asp Glu
225 230 235 240
Ile Lys Asn Asp Asn Val Gln Asp Thr Ala Glu Gln Lys Val Gln Leu
245 250 255
Leu Arg Asn Trp His Gln Leu His Gly Lys Lys Glu Ala Tyr Asp Thr
260 265 270
Leu Ile Lys Asp Leu Lys Lys Ala Asn Leu Cys Thr Leu Ala Glu Lys
275 280 285
Ile Gln Thr Ile Ile Leu Lys Asp Ile Thr Ser Asp Ser Glu Asn Ser
290 295 300
Asn Phe Arg Asn Glu Ile Gln Ser Leu Val
305 310
<210> 449
<211> 220
<212> PRT
<213> Homo Sapiens
<400> 449
Met Leu Gly Ile Trp Thr Leu Leu Pro Leu Val Leu Thr Ser Val Ala
1 5 10 15
Arg Leu Ser Ser Lys Ser Val Asn Ala Gln Val Thr Asp Ile Asn Ser
20 25 30
Lys Gly Leu Glu Leu Arg Lys Thr Val Thr Thr Val Glu Thr Gln Asn
35 40 45
Leu Glu Gly Leu His His Asp Gly Gln Phe Cys His Lys Pro Cys Pro
50 55 60
Pro Gly Glu Arg Lys Ala Arg Asp Cys Thr Val Asn Gly Asp Glu Pro
65 70 75 80
Asp Cys Val Pro Cys Gln Glu Gly Lys Glu Tyr Thr Asp Lys Ala His
85 90 95
Phe Ser Ser Lys Cys Arg Arg Cys Arg Leu Cys Asp Glu Gly His Gly
100 105 110
Leu Glu Val Glu Ile Asn Cys Thr Arg Thr Gln Asn Thr Lys Cys Arg
115 120 125
Cys Lys Pro Asn Phe Phe Cys Asn Ser Thr Val Cys Glu His Cys Asp
130 135 140
Pro Cys Thr Lys Cys Glu His Gly Ile Ile Lys Glu Cys Thr Leu Thr
145 150 155 160
Ser Asn Thr Lys Cys Lys Glu Glu Gly Ser Arg Ser Asn Leu Gly Trp
165 170 175
Leu Cys Leu Leu Leu Leu Pro Ile Pro Leu Ile Val Trp Val Lys Arg
180 185 190
Lys Glu Val Gln Lys Thr Cys Arg Lys His Arg Lys Glu Asn Gln Gly
195 200 205
Ser His Glu Ser Pro Thr Leu Asn Pro Met Leu Thr
210 215 220
<210> 450
<211> 197
<212> PRT
<213> Homo Sapiens
<400> 450
Met Leu Gly Ile Trp Thr Leu Leu Pro Leu Val Leu Thr Ser Val Ala
1 5 10 15
Arg Leu Ser Ser Lys Ser Val Asn Ala Gln Val Thr Asp Ile Asn Ser
20 25 30
Lys Gly Leu Glu Leu Arg Lys Thr Val Thr Thr Val Glu Thr Gln Asn
35 40 45
Leu Glu Gly Leu His His Asp Gly Gln Phe Cys His Lys Pro Cys Pro
50 55 60
Pro Gly Glu Arg Lys Ala Arg Asp Cys Thr Val Asn Gly Asp Glu Pro
65 70 75 80
Asp Cys Val Pro Cys Gln Glu Gly Lys Glu Tyr Thr Asp Lys Ala His
85 90 95
Phe Ser Ser Lys Cys Arg Arg Cys Arg Leu Cys Asp Glu Gly His Gly
100 105 110
Leu Glu Val Glu Ile Asn Cys Thr Arg Thr Gln Asn Thr Lys Cys Arg
115 120 125
Cys Lys Pro Asn Phe Phe Cys Asn Ser Thr Val Cys Glu His Cys Asp
130 135 140
Pro Cys Thr Lys Cys Glu His Gly Ile Ile Lys Glu Cys Thr Leu Thr
145 150 155 160
Ser Asn Thr Lys Cys Lys Glu Glu Gly Ser Arg Ser Asn Leu Gly Trp
165 170 175
Leu Cys Leu Leu Leu Leu Pro Ile Pro Leu Ile Val Trp Gly Asn Ser
180 185 190
Gly Asn Lys Phe Ile
195
<210> 451
<211> 132
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> heavy chain variable region for E09
<400> 451
Gln Leu Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu
1 5 10 15
Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Ala Ser Ile Ser Ala Asn
20 25 30
Ser Tyr Tyr Gly Val Trp Val Arg Gln Ser Pro Gly Lys Gly Leu Glu
35 40 45
Trp Val Gly Ser Ile Ala Tyr Arg Gly Asn Ser Asn Ser Gly Ser Thr
50 55 60
Tyr Tyr Asn Pro Ser Leu Lys Ser Arg Ala Thr Val Ser Val Asp Thr
65 70 75 80
Ser Lys Asn Gln Val Ser Leu Arg Leu Thr Ser Val Thr Ala Ala Asp
85 90 95
Thr Ala Leu Tyr Tyr Cys Ala Arg Arg Gln Leu Leu Asp Asp Gly Thr
100 105 110
Gly Tyr Gln Trp Ala Ala Phe Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Met Val
115 120 125
Thr Val Ser Ser
130
<210> 452
<211> 110
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> light chain variable region for E09
<400> 452
Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Glu Ala Pro Arg Gln
1 5 10 15
Thr Val Thr Ile Ser Cys Ser Gly Asn Ser Phe Asn Ile Gly Arg Tyr
20 25 30
Pro Val Asn Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu
35 40 45
Ile Tyr Tyr Asn Asn Leu Arg Phe Ser Gly Val Ser Asp Arg Phe Ser
50 55 60
Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Arg Asp Leu Leu
65 70 75 80
Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ser Thr Trp Asp Asp Thr Leu
85 90 95
Lys Gly Trp Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Thr Val Leu
100 105 110
<210> 453
<211> 7
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> heavy chain CDRl for E09
<400> 453
Ala Asn Ser Tyr Tyr Gly Val
1 5
<210> 454
<211> 22
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> heavy chain CDR2 for E09
<400> 454
Gly Ser Ile Ala Tyr Arg Gly Asn Ser Asn Ser Gly Ser Thr Tyr Tyr
1 5 10 15
Asn Pro Ser Leu Lys Ser
20
<210> 455
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> heavy chain CDR3 for E09
<400> 455
Arg Gln Leu Leu Asp Asp Gly Thr Gly Tyr Gln Trp Ala Ala Phe Asp
1 5 10 15
Val
<210> 456
<211> 13
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> light chain CDR1 for E09
<400> 456
Ser Gly Asn Ser Phe Asn Ile Gly Arg Tyr Pro Val Asn
1 5 10
<210> 457
<211> 7
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> light chain CDR2 for E09
<400> 457
Tyr Asn Asn Leu Arg Phe Ser
1 5
<210> 458
<211> 11
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> light chain CDR3 for E09
<400> 458
Ser Thr Trp Asp Asp Thr Leu Lys Gly Trp Val
1 5 10
<210> 459
<211> 281
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> CD95L (CD95 ligand)
<400> 459
Met Gln Gln Pro Phe Asn Tyr Pro Tyr Pro Gln Ile Tyr Trp Val Asp
1 5 10 15
Ser Ser Ala Ser Ser Pro Trp Ala Pro Pro Gly Thr Val Leu Pro Cys
20 25 30
Pro Thr Ser Val Pro Arg Arg Pro Gly Gln Arg Arg Pro Pro Pro Pro
35 40 45
Pro Pro Pro Pro Pro Leu Pro Pro Pro Pro Pro Pro Pro Pro Leu Pro
50 55 60
Pro Leu Pro Leu Pro Pro Leu Lys Lys Arg Gly Asn His Ser Thr Gly
65 70 75 80
Leu Cys Leu Leu Val Met Phe Phe Met Val Leu Val Ala Leu Val Gly
85 90 95
Leu Gly Leu Gly Met Phe Gln Leu Phe His Leu Gln Lys Glu Leu Ala
100 105 110
Glu Leu Arg Glu Ser Thr Ser Gln Met His Thr Ala Ser Ser Leu Glu
115 120 125
Lys Gln Ile Gly His Pro Ser Pro Pro Pro Glu Lys Lys Glu Leu Arg
130 135 140
Lys Val Ala His Leu Thr Gly Lys Ser Asn Ser Arg Ser Met Pro Leu
145 150 155 160
Glu Trp Glu Asp Thr Tyr Gly Ile Val Leu Leu Ser Gly Val Lys Tyr
165 170 175
Lys Lys Gly Gly Leu Val Ile Asn Glu Thr Gly Leu Tyr Phe Val Tyr
180 185 190
Ser Lys Val Tyr Phe Arg Gly Gln Ser Cys Asn Asn Leu Pro Leu Ser
195 200 205
His Lys Val Tyr Met Arg Asn Ser Lys Tyr Pro Gln Asp Leu Val Met
210 215 220
Met Glu Gly Lys Met Met Ser Tyr Cys Thr Thr Gly Gln Met Trp Ala
225 230 235 240
Arg Ser Ser Tyr Leu Gly Ala Val Phe Asn Leu Thr Ser Ala Asp His
245 250 255
Leu Tyr Val Asn Val Ser Glu Leu Ser Leu Val Asn Phe Glu Glu Ser
260 265 270
Gln Thr Phe Phe Gly Leu Tyr Lys Leu
275 280
<210> 460
<211> 136
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> CD95L soluble domain
<400> 460
Val Ala His Leu Thr Gly Lys Ser Asn Ser Arg Ser Met Pro Leu Glu
1 5 10 15
Trp Glu Asp Thr Tyr Gly Ile Val Leu Leu Ser Gly Val Lys Tyr Lys
20 25 30
Lys Gly Gly Leu Val Ile Asn Glu Thr Gly Leu Tyr Phe Val Tyr Ser
35 40 45
Lys Val Tyr Phe Arg Gly Gln Ser Cys Asn Asn Leu Pro Leu Ser His
50 55 60
Lys Val Tyr Met Arg Asn Ser Lys Tyr Pro Gln Asp Leu Val Met Met
65 70 75 80
Glu Gly Lys Met Met Ser Tyr Cys Thr Thr Gly Gln Met Trp Ala Arg
85 90 95
Ser Ser Tyr Leu Gly Ala Val Phe Asn Leu Thr Ser Ala Asp His Leu
100 105 110
Tyr Val Asn Val Ser Glu Leu Ser Leu Val Asn Phe Glu Glu Ser Gln
115 120 125
Thr Phe Phe Gly Leu Tyr Lys Leu
130 135
<210> 461
<211> 135
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> CD95L soluble domain (alternative)
<400> 461
Ala His Leu Thr Gly Lys Ser Asn Ser Arg Ser Met Pro Leu Glu Trp
1 5 10 15
Glu Asp Thr Tyr Gly Ile Val Leu Leu Ser Gly Val Lys Tyr Lys Lys
20 25 30
Gly Gly Leu Val Ile Asn Glu Thr Gly Leu Tyr Phe Val Tyr Ser Lys
35 40 45
Val Tyr Phe Arg Gly Gln Ser Cys Asn Asn Leu Pro Leu Ser His Lys
50 55 60
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<213> Artificial Sequence
<220>
<223> durvalumab light chain CDR2
<400> 491
Asp Ala Ser Ser Arg Ala Thr
1 5
<210> 492
<211> 9
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> durvalumab light chain CDR3
<400> 492
Gln Gln Tyr Gly Ser Leu Pro Trp Thr
1 5
<210> 493
<211> 450
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> avelumab
heavy chain
<400> 493
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Ile Met Met Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser Ser Ile Tyr Pro Ser Gly Gly Ile Thr Phe Tyr Ala Asp Thr Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Ile Lys Leu Gly Thr Val Thr Thr Val Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val
115 120 125
Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala
130 135 140
Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser
145 150 155 160
Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val
165 170 175
Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro
180 185 190
Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys
195 200 205
Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp
210 215 220
Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly
225 230 235 240
Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile
245 250 255
Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu
260 265 270
Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His
275 280 285
Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg
290 295 300
Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys
305 310 315 320
Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu
325 330 335
Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr
340 345 350
Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu
355 360 365
Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp
370 375 380
Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val
385 390 395 400
Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp
405 410 415
Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His
420 425 430
Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro
435 440 445
Gly Lys
450
<210> 494
<211> 216
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> avelumab
light chain
<400> 494
Gln Ser Ala Leu Thr Gln Pro Ala Ser Val Ser Gly Ser Pro Gly Gln
1 5 10 15
Ser Ile Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr
20 25 30
Asn Tyr Val Ser Trp Tyr Gln Gln His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu
35 40 45
Met Ile Tyr Asp Val Ser Asn Arg Pro Ser Gly Val Ser Asn Arg Phe
50 55 60
Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu
65 70 75 80
Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ser Ser Tyr Thr Ser Ser
85 90 95
Ser Thr Arg Val Phe Gly Thr Gly Thr Lys Val Thr Val Leu Gly Gln
100 105 110
Pro Lys Ala Asn Pro Thr Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser Glu Glu
115 120 125
Leu Gln Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp Phe Tyr
130 135 140
Pro Gly Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Gly Ser Pro Val Lys
145 150 155 160
Ala Gly Val Glu Thr Thr Lys Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn Lys Tyr
165 170 175
Ala Ala Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys Ser His
180 185 190
Arg Ser Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val Glu Lys
195 200 205
Thr Val Ala Pro Thr Glu Cys Ser
210 215
<210> 495
<211> 120
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> avelumab
variable heavy chain
<400> 495
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Ile Met Met Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser Ser Ile Tyr Pro Ser Gly Gly Ile Thr Phe Tyr Ala Asp Thr Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Ile Lys Leu Gly Thr Val Thr Thr Val Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 496
<211> 110
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> avelumab
variable light chain
<400> 496
Gln Ser Ala Leu Thr Gln Pro Ala Ser Val Ser Gly Ser Pro Gly Gln
1 5 10 15
Ser Ile Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr
20 25 30
Asn Tyr Val Ser Trp Tyr Gln Gln His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu
35 40 45
Met Ile Tyr Asp Val Ser Asn Arg Pro Ser Gly Val Ser Asn Arg Phe
50 55 60
Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu
65 70 75 80
Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ser Ser Tyr Thr Ser Ser
85 90 95
Ser Thr Arg Val Phe Gly Thr Gly Thr Lys Val Thr Val Leu
100 105 110
<210> 497
<211> 5
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> avelumab
heavy chain CDR1
<400> 497
Ser Tyr Ile Met Met
1 5
<210> 498
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> avelumab
heavy chain CDR2
<400> 498
Ser Ile Tyr Pro Ser Gly Gly Ile Thr Phe Tyr Ala Asp Thr Val Lys
1 5 10 15
Gly
<210> 499
<211> 11
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> avelumab
heavy chain CDR3
<400> 499
Ile Lys Leu Gly Thr Val Thr Thr Val Asp Tyr
1 5 10
<210> 500
<211> 14
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> avelumab
light chain CDR1
<400> 500
Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr Asn Tyr Val Ser
1 5 10
<210> 501
<211> 7
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> avelumab
light chain CDR2
<400> 501
Asp Val Ser Asn Arg Pro Ser
1 5
<210> 502
<211> 10
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> avelumab
light chain CDR3
<400> 502
Ser Ser Tyr Thr Ser Ser Ser Thr Arg Val
1 5 10
<210> 503
<211> 448
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> atezolizumab
heavy chain
<400> 503
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Ser
20 25 30
Trp Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Trp Ile Ser Pro Tyr Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Ala Asp Thr Ser Lys Asn Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Arg His Trp Pro Gly Gly Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr
100 105 110
Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro
115 120 125
Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly
130 135 140
Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn
145 150 155 160
Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln
165 170 175
Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser
180 185 190
Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser
195 200 205
Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr
210 215 220
His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser
225 230 235 240
Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg
245 250 255
Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro
260 265 270
Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala
275 280 285
Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Ala Ser Thr Tyr Arg Val Val
290 295 300
Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr
305 310 315 320
Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr
325 330 335
Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu
340 345 350
Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys
355 360 365
Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser
370 375 380
Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp
385 390 395 400
Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser
405 410 415
Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala
420 425 430
Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435 440 445
<210> 504
<211> 214
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> atezolizumab
light chain
<400> 504
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp Val Ser Thr Ala
20 25 30
Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Ser Ala Ser Phe Leu Tyr Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Leu Tyr His Pro Ala
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala
100 105 110
Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly
115 120 125
Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala
130 135 140
Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln
145 150 155 160
Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser
165 170 175
Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr
180 185 190
Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser
195 200 205
Phe Asn Arg Gly Glu Cys
210
<210> 505
<211> 118
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> atezolizumab
variable heavy chain
<400> 505
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Ser
20 25 30
Trp Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Trp Ile Ser Pro Tyr Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Ala Asp Thr Ser Lys Asn Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Arg His Trp Pro Gly Gly Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr
100 105 110
Leu Val Thr Val Ser Ala
115
<210> 506
<211> 108
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> atezolizumab
variable light chain
<400> 506
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp Val Ser Thr Ala
20 25 30
Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Ser Ala Ser Phe Leu Tyr Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Leu Tyr His Pro Ala
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg
100 105
<210> 507
<211> 10
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> atezolizumab
heavy chain CDR1
<400> 507
Gly Phe Thr Phe Ser Asp Ser Trp Ile His
1 5 10
<210> 508
<211> 18
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> atezolizumab
heavy chain CDR2
<400> 508
Ala Trp Ile Ser Pro Tyr Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
1 5 10 15
Lys Gly
<210> 509
<211> 9
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> atezolizumab
heavy chain CDR3
<400> 509
Arg His Trp Pro Gly Gly Phe Asp Tyr
1 5
<210> 510
<211> 11
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> atezolizumab
light chain CDR1
<400> 510
Arg Ala Ser Gln Asp Val Ser Thr Ala Val Ala
1 5 10
<210> 511
<211> 7
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> atezolizumab
light chain CDR2
<400> 511
Ser Ala Ser Phe Leu Tyr Ser
1 5
<210> 512
<211> 9
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> atezolizumab
light chain CDR3
<400> 512
Gln Gln Tyr Leu Tyr His Pro Ala Thr
1 5
Claims (158)
- (a) 환자로부터 종양을 절제하는 단계;
(b) 종양으로부터 제1 종양 침윤 림프구 (TIL) 집단을 수득하는 단계;
(c) 제1 세포 배양 배지에서 제1 TIL 집단의 초기 확장을 수행하여 제2 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제2 TIL 집단은 제1 TIL 집단보다 수가 적어도 5배 더 많고, 제1 세포 배양 배지는 IL-2 및 종양 괴사 인자 수용체 슈퍼패밀리 (TNFRSF) 효능제를 포함하고, 초기 확장은 21일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(d) 제2 세포 배양 배지에서 제2 TIL 집단의 급속 확장을 수행하여 제3 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제3 TIL 집단은 급속 확장의 시작으로부터 7일 후에 제2 TIL 집단보다 수가 적어도 50배 더 많고, 제2 세포 배양 배지는 IL-2, OKT-3 (항-CD3) 항체, 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC) 및 임의로 TNFRSF 효능제 및 제2 TNFRSF 효능제를 포함하고, 급속 확장은 14일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(e) 제3 TIL 집단을 수거하는 단계; 및
(f) 환자에게 치료 유효 분량의 제3 TIL 집단을 투여하는 단계
를 포함하는, 종양 침윤 림프구 (TIL) 집단을 사용하여 암을 치료하는 방법. - 제1항에 있어서, TNFRSF 효능제가 4-1BB 효능제, OX40 효능제, CD27 효능제, GITR 효능제, HVEM 효능제, CD95 효능제 및 그의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인 방법.
- 제1항 또는 제2항에 있어서, TNFRSF 효능제가 4-1BB 효능제이고, 4-1BB 효능제가 우렐루맙, 우토밀루맙, EU-101, 융합 단백질 및 그의 단편, 유도체, 변이체, 바이오시밀러 및 그의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인 방법.
- 제1항 또는 제2항에 있어서, TNFRSF 효능제가 OX40 효능제 또는 그의 단편, 유도체, 변이체, 바이오시밀러 및 그의 조합인 방법.
- 제4항에 있어서, 4-1BB 효능제 융합 단백질이 (i) 제1 가용성 4-1BB 결합 도메인, (ii) 제1 펩티드 링커, (iii) 제2 가용성 4-1BB 결합 도메인, (iv) 제2 펩티드 링커 및 (v) 제3 가용성 4-1BB 결합 도메인을 포함하고, N-말단 및/또는 C-말단 단부에 추가의 도메인을 추가로 포함하고, 추가의 도메인이 Fc 단편 도메인 및 힌지 도메인을 포함하고, 융합 단백질이 구조 I-A 또는 구조 I-B에 따른 이량체 구조인 방법.
- 제1항 또는 제2항에 있어서, TNFRSF 효능제가 OX40 효능제이고, OX40 효능제가 타볼릭시주맙, GSK3174998, MEDI6469, MEDI6383, MOXR0916, PF-04518600, 크리에이티브 바이오랩스(Creative Biolabs) MOM-18455 및 그의 단편, 유도체, 변이체, 바이오시밀러 및 그의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인 방법.
- 제1항 또는 제2항에 있어서, TNFRSF 효능제가 OX40 효능제이고, OX40 효능제가 OX40 효능제 융합 단백질인 방법.
- 제7항에 있어서, OX40 효능제 융합 단백질이 (i) 제1 가용성 OX40 결합 도메인, (ii) 제1 펩티드 링커, (iii) 제2 가용성 OX40 결합 도메인, (iv) 제2 펩티드 링커 및 (v) 제3 가용성 OX40 결합 도메인을 포함하고, N-말단 및/또는 C-말단 단부에 추가의 도메인을 추가로 포함하고, 추가의 도메인이 Fc 단편 도메인 및 힌지 도메인을 포함하고, 융합 단백질이 구조 I-A 또는 구조 I-B에 따른 이량체 구조인 방법.
- 제1항 또는 제2항에 있어서, TNFRSF 효능제가 CD27 효능제이고, CD27 효능제가 바를리루맙 또는 그의 단편, 유도체, 변이체 또는 바이오시밀러인 방법.
- 제1항 또는 제2항에 있어서, TNFRSF 효능제가 CD27 효능제이고, CD27 효능제가 CD27 효능제 융합 단백질인 방법.
- 제10항에 있어서, CD27 효능제 융합 단백질이 (i) 제1 가용성 CD27 결합 도메인, (ii) 제1 펩티드 링커, (iii) 제2 가용성 CD27 결합 도메인, (iv) 제2 펩티드 링커 및 (v) 제3 가용성 CD27 결합 도메인을 포함하고, N-말단 및/또는 C-말단 단부에 추가의 도메인을 추가로 포함하고, 추가의 도메인이 Fc 단편 도메인 및 힌지 도메인을 포함하고, 융합 단백질이 구조 I-A 또는 구조 I-B에 따른 이량체 구조인 방법.
- 제1항 또는 제2항에 있어서, TNFRSF 효능제가 GITR 효능제이고, GITR 효능제가 TRX518, 6C8, 36E5, 3D6, 61G6, 6H6, 61F6, 1D8, 17F10, 35D8, 49A1, 9E5, 31H6, 2155, 698, 706, 827, 1649, 1718, 1D7, 33C9, 33F6, 34G4, 35B10, 41E11, 41G5, 42A11, 44C1, 45A8, 46E11, 48H12, 48H7, 49D9, 49E2, 48A9, 5H7, 7A10, 9H6 및 그의 단편, 유도체, 변이체, 바이오시밀러 및 그의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인 방법.
- 제1항 또는 제2항에 있어서, TNFRSF 효능제가 GITR 효능제이고, GITR 효능제가 GITR 효능제 융합 단백질인 방법.
- 제13항에 있어서, GITR 효능제 융합 단백질이 (i) 제1 가용성 GITR 결합 도메인, (ii) 제1 펩티드 링커, (iii) 제2 가용성 GITR 결합 도메인, (iv) 제2 펩티드 링커 및 (v) 제3 가용성 GITR 결합 도메인을 포함하고, N-말단 및/또는 C-말단 단부에 추가의 도메인을 추가로 포함하고, 추가의 도메인이 Fc 단편 도메인 및 힌지 도메인을 포함하고, 융합 단백질이 구조 I-A 또는 구조 I-B에 따른 이량체 구조인 방법.
- 제1항 또는 제2항에 있어서, TNFRSF 효능제가 HVEM 효능제인 방법.
- 제15항에 있어서, HVEM 효능제가 HVEM 효능제 융합 단백질인 방법.
- 제16항에 있어서, HVEM 효능제 융합 단백질이 (i) 제1 가용성 HVEM 결합 도메인, (ii) 제1 펩티드 링커, (iii) 제2 가용성 HVEM 결합 도메인, (iv) 제2 펩티드 링커 및 (v) 제3 가용성 HVEM 결합 도메인을 포함하고, N-말단 및/또는 C-말단 단부에 추가의 도메인을 추가로 포함하고, 추가의 도메인이 Fc 단편 도메인 및 힌지 도메인을 포함하고, 융합 단백질이 구조 I-A 또는 구조 I-B에 따른 이량체 구조인 방법.
- 제1항 또는 제2항에 있어서, TNFRSF 효능제가 CD95 효능제인 방법.
- 제1항 또는 제2항에 있어서, TNFRSF 효능제가 CD95 효능제이고, CD95 효능제가 CD95 효능제 융합 단백질인 방법.
- 제19항에 있어서, CD95 효능제가 (i) 제1 가용성 CD95 결합 도메인, (ii) 제1 펩티드 링커, (iii) 제2 가용성 CD95 결합 도메인, (iv) 제2 펩티드 링커 및 (v) 제3 가용성 CD95 결합 도메인을 포함하고, N-말단 및/또는 C-말단 단부에 추가의 도메인을 추가로 포함하고, 추가의 도메인이 Fc 단편 도메인 및 힌지 도메인을 포함하는 것인 융합 단백질이고, 융합 단백질이 구조 I-A 또는 구조 I-B에 따른 이량체 구조인 방법.
- 제1항 내지 제20항 중 어느 한 항에 있어서, 환자에게 제3 TIL 집단을 투여한 다음 날에 시작하여 환자를 TNFRSF 효능제로 치료하는 단계를 추가로 포함하며, 여기서 TNFRSF 효능제는 최대 8주기 동안 4주마다 0.1 mg/kg 내지 50 mg/kg의 용량으로 정맥내로 투여되는 것인 방법.
- 제1항 내지 제21항 중 어느 한 항에 있어서, 환자로부터 종양을 절제하는 단계 전에 환자를 TNFRSF 효능제로 치료하는 단계를 추가로 포함하며, 여기서 TNFRSF 효능제는 최대 8주기 동안 4주마다 0.1 mg/kg 내지 50 mg/kg의 용량으로 정맥내로 투여되는 것인 방법.
- 제1항 내지 제22항 중 어느 한 항에 있어서, TNFRSF 효능제가 우렐루맙, 우토밀루맙, EU-101, 타볼릭시주맙, 크리에이티브 바이오랩스 MOM-18455 및 그의 단편, 유도체, 변이체, 바이오시밀러 및 그의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인 방법.
- 제1항 내지 제23항 중 어느 한 항에 있어서, 제1 세포 배양 배지가 제2 TNFRSF 효능제를 포함하는 것인 방법.
- 제1항 내지 제23항 중 어느 한 항에 있어서, TNFRSF 효능제가 4-1BB 효능제이고, 제2 TNFRSF 효능제가 OX40 효능제인 방법.
- 제1항 내지 제25항 중 어느 한 항에 있어서, TNFRSF 효능제가 초기 확장 동안 매일, 2일마다, 3일마다, 4일마다, 5일마다, 6일마다, 7일마다 및 2주마다로 이루어진 군으로부터 선택된 간격으로 제1 세포 배양 배지에 첨가되는 것인 방법.
- 제1항 내지 제26항 중 어느 한 항에 있어서, TNFRSF 효능제가 급속 확장 동안 매일, 2일마다, 3일마다, 4일마다, 5일마다, 6일마다, 7일마다 및 2주마다로 이루어진 군으로부터 선택된 간격으로 제2 세포 배양 배지에 첨가되는 것인 방법.
- 제24항 내지 제27항 중 어느 한 항에 있어서, TNFRSF 효능제가 세포 배양 배지 중 0.1 μg/mL 내지 100 μg/mL의 농도를 달성하기에 충분한 농도로 첨가되는 것인 방법.
- 제28항에 있어서, TNFRSF 효능제가 세포 배양 배지 중 20 μg/mL 내지 40 μg/mL의 농도를 달성하기에 충분한 농도로 첨가되는 것인 방법.
- 제1항 내지 제30항 중 어느 한 항에 있어서, IL-2가 제1 세포 배양 배지에 약 10 내지 약 6000 IU/mL의 초기 농도로 존재하는 것인 방법.
- 제31항에 있어서, IL-2가 제1 세포 배양 배지에 약 3000 IU/mL의 초기 농도로 존재하는 것인 방법.
- 제31항에 있어서, IL-2가 제1 세포 배양 배지에 약 800 내지 약 1100 IU/mL의 초기 농도로 존재하는 것인 방법.
- 제33항에 있어서, IL-2가 제1 세포 배양 배지에 약 1000 IU/mL의 초기 농도로 존재하는 것인 방법.
- 제1항 내지 제30항 중 어느 한 항에 있어서, IL-2가 제2 세포 배양 배지에 약 10 내지 약 6000 IU/mL의 초기 농도로 존재하는 것인 방법.
- 제35항에 있어서, IL-2가 제2 세포 배양 배지에 약 3000 IU/mL의 초기 농도로 존재하는 것인 방법.
- 제35항에 있어서, IL-2가 제2 세포 배양 배지에 약 800 내지 약 1100 IU/mL의 초기 농도로 존재하는 것인 방법.
- 제35항에 있어서, IL-2가 제2 세포 배양 배지에 약 1000 IU/mL의 초기 농도로 존재하는 것인 방법.
- 제1항 내지 제37항 중 어느 한 항에 있어서, IL-15가 제1 세포 배양 배지에 존재하는 것인 방법.
- 제38항에 있어서, IL-15가 제1 세포 배양 배지에 약 5 ng/mL 내지 약 20 ng/mL의 초기 농도로 존재하는 것인 방법.
- 제1항 내지 제39항 중 어느 한 항에 있어서, IL-15가 제2 세포 배양 배지에 존재하는 것인 방법.
- 제40항에 있어서, IL-15가 제2 세포 배양 배지에 약 5 ng/mL 내지 약 20 ng/mL의 초기 농도로 존재하는 것인 방법.
- 제1항 내지 제41항 중 어느 한 항에 있어서, IL-21이 제1 세포 배양 배지에 존재하는 것인 방법.
- 제42항에 있어서, IL-21이 제1 세포 배양 배지에 약 5 ng/mL 내지 약 20 ng/mL의 초기 농도로 존재하는 것인 방법.
- 제1항 내지 제43항 중 어느 한 항에 있어서, IL-21이 제2 세포 배양 배지에 존재하는 것인 방법.
- 제44항에 있어서, IL-21이 제2 세포 배양 배지에 약 5 ng/mL 내지 약 20 ng/mL의 초기 농도로 존재하는 것인 방법.
- 제1항 내지 제45항 중 어느 한 항에 있어서, OKT-3 항체가 제2 세포 배양 배지에 약 10 ng/mL 내지 약 60 ng/mL의 초기 농도로 존재하는 것인 방법.
- 제46항에 있어서, OKT-3 항체가 제2 세포 배양 배지에 약 30 ng/mL의 초기 농도로 존재하는 것인 방법.
- 제1항 내지 제47항 중 어느 한 항에 있어서, 초기 확장이 기체 투과성 용기를 사용하여 수행되는 것인 방법.
- 제1항 내지 제48항 중 어느 한 항에 있어서, 급속 확장이 기체 투과성 용기를 사용하여 수행되는 것인 방법.
- 제1항 내지 제49항 중 어느 한 항에 있어서, 환자에게 제3 TIL 집단을 투여하기 전에 환자를 비-골수절제 림프구고갈 요법으로 치료하는 단계를 추가로 포함하는 방법.
- 제50항에 있어서, 비-골수절제 림프구고갈 요법이 2일 동안 60 mg/m2/일의 용량의 시클로포스파미드의 투여에 이어서 5일 동안 25 mg/m2/일의 용량의 플루다라빈의 투여 단계를 포함하는 것인 방법.
- 제1항 내지 제51항 중 어느 한 항에 있어서, 환자에게 제3 TIL 집단을 투여한 다음 날에 시작하여 환자를 점강 IL-2 요법으로 치료하는 단계를 추가로 포함하며, 여기서 점강 IL-2 요법은 제1일에 18,000,000 IU/m2, 제2일에 9,000,000 IU/m2, 및 제3일 및 제4일에 4,500,000 IU/m2의 용량으로 정맥내로 투여되는 알데스류킨을 포함하는 것인 방법.
- 제1항 내지 제51항 중 어느 한 항에 있어서, 환자에게 제3 TIL 집단을 투여한 후에 환자를 0.10 mg/일 내지 50 mg/일의 용량의 PEG화 IL-2로 치료하는 단계를 추가로 포함하는 방법.
- 제1항 내지 제51항 중 어느 한 항에 있어서, 환자에게 제3 TIL 집단을 투여 한 다음 날에 시작하여 환자를 고용량 IL-2 요법으로 치료하는 단계를 추가로 포함하는 방법.
- 제54항에 있어서, 고용량 IL-2 요법이 내성(tolerance)까지 8시간마다 15분 볼루스 정맥내 주입으로서 투여되는 600,000 또는 720,000 IU/kg의 알데스류킨 또는 그의 바이오시밀러 또는 변이체를 포함하는 것인 방법.
- 제1항 내지 제55항 중 어느 한 항에 있어서, 암이 흑색종, 난소암, 자궁경부암, 폐암, 방광암, 유방암, 두경부암, 신세포 암종, 급성 골수성 백혈병, 결장직장암, 담관암종 및 육종으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인 방법.
- 제1항 내지 제56항 중 어느 한 항에 있어서, 암이 비소세포 폐암 (NSCLC), 삼중 음성 유방암, 이중-불응성 흑색종 및 포도막 (안구) 흑색종으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인 방법.
- 제1항 내지 제57항 중 어느 한 항에 있어서, 환자로부터 종양을 절제하기 전에 환자를 PD-1 억제제 또는 PD-L1 억제제로 치료하는 단계를 추가로 포함하는 방법.
- 제58항에 있어서, PD-1 억제제 또는 PD-L1 억제제가 니볼루맙, 펨브롤리주맙, 두르발루맙, 아테졸리주맙, 아벨루맙 및 그의 단편, 유도체, 변이체, 바이오시밀러 및 그의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인 방법.
- 제1항 내지 제59항 중 어느 한 항에 있어서, 환자로부터 종양을 절제한 후에 환자를 PD-1 억제제 또는 PD-L1 억제제로 치료하는 단계를 추가로 포함하는 방법.
- 제60항에 있어서, PD-1 억제제 또는 PD-L1 억제제가 니볼루맙, 펨브롤리주맙, 두르발루맙, 아테졸리주맙, 아벨루맙 및 그의 단편, 유도체, 변이체, 바이오시밀러 및 그의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인 방법.
- 제1항 내지 제61항 중 어느 한 항에 있어서, 환자에게 제3 TIL 집단을 투여한 후에 환자를 PD-1 억제제 또는 PD-L1 억제제로 치료하는 단계를 추가로 포함하는 방법.
- 제62항에 있어서, PD-1 억제제 또는 PD-L1 억제제가 니볼루맙, 펨브롤리주맙, 두르발루맙, 아테졸리주맙, 아벨루맙 및 그의 단편, 유도체, 변이체, 바이오시밀러 및 그의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인 방법.
- 제1항 내지 제63항 중 어느 한 항에 있어서, 제1 세포 배양 배지가 IL-4, IL-7 또는 그의 조합을 추가로 포함하는 것인 방법.
- 제1항 내지 제64항 중 어느 한 항에 있어서, 제2 세포 배양 배지가 IL-4, IL-7 또는 그의 조합을 추가로 포함하는 것인 방법.
- 제1항 내지 제65항 중 어느 한 항에 있어서, 초기 확장이 11일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 방법.
- 제1항 내지 제65항 중 어느 한 항에 있어서, 급속 확장이 11일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 방법.
- (b) 제1 종양 침윤 림프구 (TIL) 집단을 수득하는 단계;
(c) 제1 세포 배양 배지에서 제1 TIL 집단의 초기 확장을 수행하여 제2 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제2 TIL 집단은 제1 TIL 집단보다 수가 적어도 5배 더 많고, 제1 세포 배양 배지는 IL-2 및 종양 괴사 인자 수용체 슈퍼패밀리 (TNFRSF) 효능제를 포함하고, 초기 확장은 21일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(d) 제2 세포 배양 배지에서 제2 TIL 집단의 급속 확장을 수행하여 제3 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제3 TIL 집단은 급속 확장의 시작으로부터 7일 후 제2 TIL 집단보다 수가 적어도 50배 더 많고, 제2 세포 배양 배지는 IL-2, OKT-3 (항-CD3 항체), 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC) 및 임의로 TNFRSF 효능제를 포함하고, 급속 확장은 14일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계; 및
(e) 제3 TIL 집단을 수거하는 단계
를 포함하는, 종양 침윤 림프구 (TIL) 집단의 제조 방법. - 제68항에 있어서, 제1 TIL 집단이 환자로부터 절제된 종양으로부터 수득되는 것인 방법.
- 제68항 또는 제69항에 있어서, TNFRSF 효능제가 4-1BB 효능제, OX40 효능제, CD27 효능제, GITR 효능제, HVEM 효능제, CD95 효능제 및 그의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인 방법.
- 제68항 내지 제70항 중 어느 한 항에 있어서, TNFRSF 효능제가 4-1BB 효능제인 방법.
- 제68항 내지 제71항 중 어느 한 항에 있어서, TNFRSF 효능제가 4-1BB 효능제이고, 4-1BB 효능제가 우렐루맙, 우토밀루맙, EU-101 및 그의 단편, 유도체, 변이체, 바이오시밀러 및 그의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인 방법.
- 제68항 내지 제72항 중 어느 한 항에 있어서, TNFRSF 효능제가 4-1BB 효능제이고, 4-1BB 효능제가 4-1BB 효능제 융합 단백질인 방법.
- 제68항 내지 제73항 중 어느 한 항에 있어서, TNFRSF 효능제가 4-1BB 효능제 융합 단백질이고, 4-1BB 효능제 융합 단백질이 (i) 제1 가용성 4-1BB 결합 도메인, (ii) 제1 펩티드 링커, (iii) 제2 가용성 4-1BB 결합 도메인, (iv) 제2 펩티드 링커 및 (v) 제3 가용성 4-1BB 결합 도메인을 포함하고, N-말단 및/또는 C-말단 단부에 추가의 도메인을 추가로 포함하고, 추가의 도메인이 Fc 단편 도메인 및 힌지 도메인을 포함하고, 융합 단백질이 구조 I-A 또는 구조 I-B에 따른 이량체 구조인 방법.
- 제68항 내지 제74항 중 어느 한 항에 있어서, TNFRSF 효능제가 OX40 효능제인 방법.
- 제68항 내지 제75항 중 어느 한 항에 있어서, TNFRSF 효능제가 OX40 효능제이고, OX40 효능제가 타볼릭시주맙, GSK3174998, MEDI6469, MEDI6383, MOXR0916, PF-04518600, 크리에이티브 바이오랩스 MOM-18455 및 그의 단편, 유도체, 변이체, 바이오시밀러 및 그의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인 방법.
- 제68항 내지 제76항 중 어느 한 항에 있어서, TNFRSF 효능제가 OX40 효능제이고, OX40 효능제가 OX40 효능제 융합 단백질인 방법.
- 제68항 내지 제77항 중 어느 한 항에 있어서, TNFRSF 효능제가 OX40 효능제 융합 단백질이고, OX40 효능제 융합 단백질이 (i) 제1 가용성 OX40 결합 도메인, (ii) 제1 펩티드 링커, (iii) 제2 가용성 OX40 결합 도메인, (iv) 제2 펩티드 링커 및 (v) 제3 가용성 OX40 결합 도메인을 포함하고, N-말단 및/또는 C-말단 단부에 추가의 도메인을 추가로 포함하고, 추가의 도메인이 Fc 단편 도메인 및 힌지 도메인을 포함하고, 융합 단백질이 구조 I-A 또는 구조 I-B에 따른 이량체 구조인 방법.
- 제68항 내지 제78항 중 어느 한 항에 있어서, TNFRSF 효능제가 CD27 효능제인 방법.
- 제68항 내지 제79항 중 어느 한 항에 있어서, TNFRSF 효능제가 CD27 효능제이고, CD27 효능제가 바를리루맙 또는 그의 단편, 유도체, 변이체 또는 바이오시밀러인 방법.
- 제68항 내지 제80항 중 어느 한 항에 있어서, TNFRSF 효능제가 CD27 효능제이고, CD27 효능제가 CD27 효능제 융합 단백질인 방법.
- 제68항 내지 제81항 중 어느 한 항에 있어서, TNFRSF 효능제가 CD27 효능제이고, CD27 효능제 융합 단백질이 (i) 제1 가용성 CD27 결합 도메인, (ii) 제1 펩티드 링커, (iii) 제2 가용성 CD27 결합 도메인, (iv) 제2 펩티드 링커 및 (v) 제3 가용성 CD27 결합 도메인을 포함하고, N-말단 및/또는 C-말단 단부에 추가의 도메인을 추가로 포함하고, 추가의 도메인이 Fc 단편 도메인 및 힌지 도메인을 포함하고, 융합 단백질이 구조 I-A 또는 구조 I-B에 따른 이량체 구조인 방법.
- 제68항 내지 제82항 중 어느 한 항에 있어서, TNFRSF 효능제가 GITR 효능제인 방법.
- 제68항 내지 제83항 중 어느 한 항에 있어서, TNFRSF 효능제가 GITR 효능제이고, GITR 효능제가 TRX518, 6C8, 36E5, 3D6, 61G6, 6H6, 61F6, 1D8, 17F10, 35D8, 49A1, 9E5, 31H6, 2155, 698, 706, 827, 1649, 1718, 1D7, 33C9, 33F6, 34G4, 35B10, 41E11, 41G5, 42A11, 44C1, 45A8, 46E11, 48H12, 48H7, 49D9, 49E2, 48A9, 5H7, 7A10, 9H6 및 그의 단편, 유도체, 변이체, 바이오시밀러 및 그의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인 방법.
- 제68항 내지 제84항 중 어느 한 항에 있어서, TNFRSF 효능제가 GITR 효능제이고, GITR 효능제가 GITR 효능제 융합 단백질인 방법.
- 제68항 내지 제85항 중 어느 한 항에 있어서, TNFRSF 효능제가 GITR 효능제 융합 단백질이고, GITR 효능제 융합 단백질이 (i) 제1 가용성 GITR 결합 도메인, (ii) 제1 펩티드 링커, (iii) 제2 가용성 GITR 결합 도메인, (iv) 제2 펩티드 링커 및 (v) 제3 가용성 GITR 결합 도메인을 포함하고, N-말단 및/또는 C-말단 단부에 추가의 도메인을 추가로 포함하고, 추가의 도메인이 Fc 단편 도메인 및 힌지 도메인을 포함하고, 융합 단백질이 구조 I-A 또는 구조 I-B에 따른 이량체 구조인 방법.
- 제68항 내지 제86항 중 어느 한 항에 있어서, TNFRSF 효능제가 HVEM 효능제인 방법.
- 제68항 내지 제87항 중 어느 한 항에 있어서, TNFRSF 효능제가 HVEM 효능제이고, HVEM 효능제가 HVEM 효능제 융합 단백질인 방법.
- 제68항 내지 제88항 중 어느 한 항에 있어서, TNFRSF 효능제가 HVEM 효능제 융합 단백질이고, HVEM 효능제 융합 단백질이 (i) 제1 가용성 HVEM 결합 도메인, (ii) 제1 펩티드 링커, (iii) 제2 가용성 HVEM 결합 도메인, (iv) 제2 펩티드 링커 및 (v) 제3 가용성 HVEM 결합 도메인을 포함하고, N-말단 및/또는 C-말단 단부에 추가의 도메인을 추가로 포함하고, 추가의 도메인이 Fc 단편 도메인 및 힌지 도메인을 포함하고, 융합 단백질이 구조 I-A 또는 구조 I-B에 따른 이량체 구조인 방법.
- 제68항 내지 제89항 중 어느 한 항에 있어서, TNFRSF 효능제가 우렐루맙, 우토밀루맙, EU-101, 타볼릭시주맙, 크리에이티브 바이오랩스 MOM-18455 및 그의 단편, 유도체, 변이체, 바이오시밀러 및 그의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인 방법.
- 제68항 내지 제90항 중 어느 한 항에 있어서, 제1 세포 배양 배지가 제2 TNFRSF 효능제를 포함하는 것인 방법.
- 제68항 내지 제91항 중 어느 한 항에 있어서, TNFRSF 효능제가 초기 확장 동안 매일, 2일마다, 3일마다, 4일마다, 5일마다, 6일마다, 7일마다 및 2주마다로 이루어진 군으로부터 선택된 간격으로 제1 세포 배양 배지에 첨가되는 것인 방법.
- 제68항 내지 제92항 중 어느 한 항에 있어서, TNFRSF 효능제가 급속 확장 동안 매일, 2일마다, 3일마다, 4일마다, 5일마다, 6일마다, 7일마다 및 2주마다로 이루어진 군으로부터 선택된 간격으로 제2 세포 배양 배지에 첨가되는 것인 방법.
- 제68항 내지 제93항 중 어느 한 항에 있어서, TNFRSF 효능제가 세포 배양 배지 중 0.1 μg/mL 내지 100 μg/mL의 농도를 달성하기에 충분한 농도로 첨가되는 것인 방법.
- 제68항 내지 제94항 중 어느 한 항에 있어서, TNFRSF 효능제가 세포 배양 배지 중 20 μg/mL 내지 40 μg/mL의 농도를 달성하기에 충분한 농도로 첨가되는 것인 방법.
- 제68항 내지 제95항 중 어느 한 항에 있어서, IL-2가 제1 세포 배양 배지에 약 10 내지 약 6000 IU/mL의 초기 농도로 존재하는 것인 방법.
- 제68항 내지 제96항 중 어느 한 항에 있어서, IL-2가 제1 세포 배양 배지에 약 3000 IU/mL의 초기 농도로 존재하는 것인 방법.
- 제68항 내지 제97항 중 어느 한 항에 있어서, IL-2가 제1 세포 배양 배지에 약 800 내지 약 1100 IU/mL의 초기 농도로 존재하는 것인 방법.
- 제68항 내지 제98항 중 어느 한 항에 있어서, IL-2가 제1 세포 배양 배지에 약 1000 IU/mL의 초기 농도로 존재하는 것인 방법.
- 제68항 내지 제99항 중 어느 한 항에 있어서, IL-2가 제2 세포 배양 배지에 약 10 내지 약 6000 IU/mL의 초기 농도로 존재하는 것인 방법.
- 제68항 내지 제100항 중 어느 한 항에 있어서, IL-2가 제2 세포 배양 배지에 약 3000 IU/mL의 초기 농도로 존재하는 것인 방법.
- 제68항 내지 제101항 중 어느 한 항에 있어서, IL-2가 제2 세포 배양 배지에 약 800 내지 약 1100 IU/mL의 초기 농도로 존재하는 것인 방법.
- 제68항 내지 제102항 중 어느 한 항에 있어서, IL-2가 제2 세포 배양 배지에 약 1000 IU/mL의 초기 농도로 존재하는 것인 방법.
- 제68항 내지 제103항 중 어느 한 항에 있어서, IL-15가 제1 세포 배양 배지에 존재하는 것인 방법.
- 제68항 내지 제104항 중 어느 한 항에 있어서, IL-15가 제1 세포 배양 배지에 약 5 ng/mL 내지 약 20 ng/mL의 초기 농도로 존재하는 것인 방법.
- 제68항 내지 제105항 중 어느 한 항에 있어서, IL-15가 제2 세포 배양 배지에 존재하는 것인 방법.
- 제68항 내지 제106항 중 어느 한 항에 있어서, IL-15가 제2 세포 배양 배지에 약 5 ng/mL 내지 약 20 ng/mL의 초기 농도로 존재하는 것인 방법.
- 제68항 내지 제107항 중 어느 한 항에 있어서, IL-21이 제1 세포 배양 배지에 존재하는 것인 방법.
- 제68항 내지 제108항 중 어느 한 항에 있어서, IL-21이 제1 세포 배양 배지에 약 5 ng/mL 내지 약 20 ng/mL의 초기 농도로 존재하는 것인 방법.
- 제68항 내지 제109항 중 어느 한 항에 있어서, IL-21이 제2 세포 배양 배지에 존재하는 것인 방법.
- 제68항 내지 제110항 중 어느 한 항에 있어서, IL-21이 제2 세포 배양 배지에 약 5 ng/mL 내지 약 20 ng/mL의 초기 농도로 존재하는 것인 방법.
- 제68항 내지 제111항 중 어느 한 항에 있어서, OKT-3 항체가 제2 세포 배양 배지에 약 10 ng/mL 내지 약 60 ng/mL의 초기 농도로 존재하는 것인 방법.
- 제68항 내지 제112항 중 어느 한 항에 있어서, OKT-3 항체가 제2 세포 배양 배지에 약 30 ng/mL의 초기 농도로 존재하는 것인 방법.
- 제68항 내지 제113항 중 어느 한 항에 있어서, 초기 확장이 기체 투과성 용기를 사용하여 수행되는 것인 방법.
- 제68항 내지 제114항 중 어느 한 항에 있어서, 급속 확장이 기체 투과성 용기를 사용하여 수행되는 것인 방법.
- 제68항 내지 제115항 중 어느 한 항에 따른 방법으로부터 수득가능한 종양 침윤 림프구 (TIL) 집단.
- 제68항 내지 제115항 중 어느 한 항에 따른 방법에 의해 수득가능한 종양 침윤 림프구 (TIL) 집단을 포함하고, 임의로 제3 TIL 집단을 포함하는, 암의 치료에 사용하기 위한 제약 조성물.
- 제117항에 있어서, TNFRSF 효능제와 조합하여 사용하기 위한, 암의 치료에 사용하기 위한 제약 조성물.
- 제117항에 있어서, 제약 조성물이 TNFRSF 효능제와 조합하여 사용하기 위한 것이며, 여기서 TNFRSF 효능제는 환자에게 제3 TIL 집단을 투여한 다음 날에 투여하기 위한 것이고, TNFRSF 효능제는 최대 8주기 동안 4주마다 0.1 mg/kg 내지 50 mg/kg의 용량으로 정맥내로 투여되는 것인, 암의 치료에 사용하기 위한 제약 조성물.
- 제117항에 있어서, 제약 조성물이 TNFRSF 효능제와 조합하여 사용하기 위한 것이며, 여기서 TNFRSF 효능제는 환자로부터 종양을 절제하는 단계 전에 투여하기 위한 것이고, TNFRSF 효능제는 최대 8주기 동안 4주마다 0.1 mg/kg 내지 50 mg/kg의 용량으로 정맥내로 투여되는 것인, 암의 치료에 사용하기 위한 제약 조성물.
- 제117항에 있어서, 비-골수절제 림프구고갈 요법과 조합하여 사용하기 위한, 암의 치료에 사용하기 위한 제약 조성물.
- 제117항에 있어서, 환자에게 제3 TIL 집단을 투여하기 전에 골수절제 림프구고갈 요법과 조합하여 사용하기 위한, 암의 치료에 사용하기 위한 제약 조성물.
- 제117항에 있어서, 제약 조성물이 골수절제 림프구고갈 요법과 조합하여 사용하기 위한 것이며, 여기서 비-골수절제 림프구고갈 요법은 환자에게 제3 TIL 집단을 투여하기 전에 투여하기 위한 것이고, 비-골수절제 림프구고갈 요법은 2일 동안 60 mg/m2/일의 용량의 시클로포스파미드의 투여에 이어서 5일 동안 25 mg/m2/일의 용량의 플루다라빈의 투여 단계를 포함하는 것인, 암의 치료에 사용하기 위한 제약 조성물.
- 제117항에 있어서, 점강 IL-2 요법과 조합하여 사용하기 위한, 암의 치료에 사용하기 위한 제약 조성물.
- 제117항에 있어서, 제약 조성물이 환자에게 제3 TIL 집단을 투여한 다음 날에 시작하여 점강 IL-2 요법과 조합하여 사용하기 위한 것이며, 여기서 점강 IL-2 요법은 제1일에 18,000,000 IU/m2, 제2일에 9,000,000 IU/m2, 및 제3일 및 제4일에 4,500,000 IU/m2의 용량으로 정맥내로 투여되는 알데스류킨을 포함하는 것인, 암의 치료에 사용하기 위한 제약 조성물.
- 제117항에 있어서, PEG화 IL-2와 조합하여 사용하기 위한, 암의 치료에 사용하기 위한 제약 조성물.
- 제117항에 있어서, 환자에게 제3 TIL 집단을 투여한 후에 0.10 mg/일 내지 50 mg/일의 용량으로 투여되는 PEG화 IL-2와 조합하여 사용하기 위한, 암의 치료에 사용하기 위한 제약 조성물.
- 제117항에 있어서, 고용량 IL-2 요법과 조합하여 사용하기 위한, 암의 치료에 사용하기 위한 제약 조성물.
- 제117항에 있어서, 환자에게 제3 TIL 집단을 투여한 다음 날에 시작하여 고용량 IL-2 요법과 조합하여 사용하기 위한, 암의 치료에 사용하기 위한 제약 조성물.
- 제117항에 있어서, 제약 조성물이 환자에게 제3 TIL 집단을 투여한 다음 날에 시작하여 고용량 IL-2 요법과 조합하여 사용하기 위한 것이며, 여기서 고용량 IL-2 요법은 내성까지 8시간마다 15분 볼루스 정맥내 주입으로서 투여되는 600,000 또는 720,000 IU/kg의 알데스류킨 또는 그의 바이오시밀러 또는 변이체를 포함하는 것인, 암의 치료에서 사용하기 위한 제약 조성물.
- 제117항에 있어서, PD-1 억제제 또는 PD-L1 억제제와 조합하여 사용하기 위한, 암의 치료에 사용하기 위한 제약 조성물.
- 제117항에 있어서, 제약 조성물이 PD-1 억제제 또는 PD-L1 억제제와 조합하여 사용하기 위한 것이며, 여기서 PD-1 억제제 또는 PD-L1 억제제는 니볼루맙, 펨브롤리주맙, 두르발루맙, 아테졸리주맙, 아벨루맙 및 그의 단편, 유도체, 변이체, 바이오시밀러 및 그의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인, 암의 치료에 사용하기 위한 제약 조성물.
- 제117항에 있어서, 제약 조성물이 PD-1 억제제 또는 PD-L1 억제제와 조합하여 사용하기 위한 것이며, 여기서 PD-1 억제제 또는 PD-L1 억제제는 환자로부터의 종양의 절제 전에 투여되는 것인, 암의 치료에 사용하기 위한 제약 조성물.
- 제117항에 있어서, 제약 조성물이 환자로부터의 종양의 절제 전에 PD-1 억제제 또는 PD-L1 억제제와 조합하여 사용하기 위한 것이며, 여기서 PD-1 억제제 또는 PD-L1 억제제는 니볼루맙, 펨브롤리주맙, 두르발루맙, 아테졸리주맙, 아벨루맙 및 그의 단편, 유도체, 변이체, 바이오시밀러 및 그의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인, 암의 치료에 사용하기 위한 제약 조성물.
- 제117항에 있어서, 환자로부터의 종양의 절제 후에 PD-1 억제제 또는 PD-L1 억제제와 조합하여 사용하기 위한, 암의 치료에 사용하기 위한 제약 조성물.
- 제117항에 있어서, 제약 조성물이 환자로부터의 종양의 절제 후에 PD-1 억제제 또는 PD-L1 억제제와 조합하여 사용하기 위한 것이며, 여기서 PD-1 억제제 또는 PD-L1 억제제는 니볼루맙, 펨브롤리주맙, 두르발루맙, 아테졸리주맙, 아벨루맙 및 그의 단편, 유도체, 변이체, 바이오시밀러 및 그의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인, 암의 치료에 사용하기 위한 제약 조성물.
- 제117항에 있어서, 환자에게 제3 TIL 집단을 투여한 후에 투여하기 위한 PD-1 억제제 또는 PD-L1 억제제와 조합하여 사용하기 위한, 암의 치료에 사용하기 위한 제약 조성물.
- 제117항에 있어서, 제약 조성물이 환자에게 제3 TIL 집단을 투여한 후에 투여하기 위한 PD-1 억제제 또는 PD-L1 억제제와 조합하여 사용하기 위한 것이며, 여기서 PD-1 억제제 또는 PD-L1 억제제는 니볼루맙, 펨브롤리주맙, 두르발루맙, 아테졸리주맙, 아벨루맙 및 그의 단편, 유도체, 변이체, 바이오시밀러 및 그의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인, 암의 치료에 사용하기 위한 제약 조성물.
- 제117항 내지 제138항 중 어느 한 항에 있어서, 암이 흑색종, 난소암, 자궁경부암, 폐암, 방광암, 유방암, 두경부암, 신세포 암종, 급성 골수성 백혈병, 결장직장암, 담관암 및 육종으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인, 암의 치료에 사용하기 위한 제약 조성물.
- 제117항 내지 제138항 중 어느 한 항에 있어서, 암이 비소세포 폐암 (NSCLC), 삼중 음성 유방암, 이중-불응성 흑색종 및 포도막 (안구) 흑색종으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인, 암의 치료에 사용하기 위한 제약 조성물.
- (a) 환자로부터 종양을 절제하는 단계;
(b) 종양으로부터 제1 종양 침윤 림프구 (TIL) 집단을 수득하는 단계;
(c) 제1 세포 배양 배지에서 제1 TIL 집단의 초기 확장을 수행하여 제2 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제2 TIL 집단은 제1 TIL 집단보다 수가 적어도 5배 더 많고, 제1 세포 배양 배지는 IL-2를 포함하고, 초기 확장은 11일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(d) 제2 세포 배양 배지에서 제2 TIL 집단의 급속 확장을 수행하여 제3 TIL 집단을 수득하며, 여기서 제3 TIL 집단은 급속 확장의 시작으로부터 7일 후 제2 TIL 집단보다 수가 적어도 50배 더 많고, 제2 세포 배양 배지는 IL-2, OKT-3 (항-CD3) 항체, 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC) 및 TNFRSF 효능제를 포함하고, 급속 확장은 11일 이하의 기간에 걸쳐 수행되는 것인 단계;
(e) 제3 TIL 집단을 수거하는 단계; 및
(f) 환자에게 치료 유효 분량의 제3 TIL 집단을 투여하는 단계
를 포함하는, 종양 침윤 림프구 (TIL) 집단을 사용하여 암을 치료하는 방법. - 제141항에 있어서, TNFRSF 효능제가 4-1BB 효능제, OX40 효능제 및 그의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인 방법.
- 제142항에 있어서, TNFRSF 효능제가 4-1BB 효능제이고, 4-1BB 효능제가 우렐루맙, 우토밀루맙, EU-101, 융합 단백질 및 그의 단편, 유도체, 변이체, 바이오시밀러 및 그의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인 방법.
- 제142항에 있어서, TNFRSF 효능제가 OX40 효능제이고, OX40 효능제가 타볼릭시주맙, GSK3174998, MEDI6469, MEDI6383, MOXR0916, PF-04518600, 크리에이티브 바이오랩스 MOM-18455 및 그의 단편, 유도체, 변이체, 바이오시밀러 및 그의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인 방법.
- 제141항 내지 제144항 중 어느 한 항에 있어서, TNFRSF 효능제가 단계 (d)의 시작시에 1 μg/mL 내지 30 μg/mL의 농도로 존재하는 것인 방법.
- 제145항에 있어서, TNFRSF 효능제가 단계 (d)의 시작에 5 μg/mL 내지 20 μg/mL의 농도로 존재하는 것인 방법.
- 제146항에 있어서, TNFRSF 효능제가 단계 (d)의 시작시에 약 10 μg/mL의 농도로 존재하는 것인 방법.
- 제141항 내지 제144항 중 어느 한 항에 있어서, TNFRSF 효능제가 단계 (d) 전반에 걸쳐 1 μg/mL 내지 30 μg/mL의 농도로 유지되는 것인 방법.
- 제145항에 있어서, TNFRSF 효능제가 단계 (d) 전반에 걸쳐 5 μg/mL 내지 20 μg/mL의 농도로 유지되는 것인 방법.
- 제146항에 있어서, TNFRSF 효능제가 단계 (d) 전반에 걸쳐 약 10 μg/mL의 농도로 유지되는 것인 방법.
- 제141항 내지 제150항 중 어느 한 항에 있어서, 제3 TIL 집단이 제2 TIL 집단에서의 CD8+ TIL 대 CD4+ TIL의 참조 비와 비교하여 CD8+ TIL 대 CD4+ TIL의 증가된 비를 나타내는 것인 방법.
- 제151항에 있어서, 증가된 비가 참조 비보다 적어도 5% 더 큰 것인 방법.
- 제152항에 있어서, 증가된 비가 참조 비보다 적어도 10% 더 큰 것인 방법.
- 제153항에 있어서, 증가된 비가 참조 비보다 적어도 20% 더 큰 것인 방법.
- 제154항에 있어서, 증가된 비가 참조 비보다 적어도 35% 더 큰 것인 방법.
- 제155항에 있어서, 증가된 비가 참조 비보다 적어도 50% 더 큰 것인 방법.
- 제141항 내지 제156항 중 어느 한 항에 있어서, 암이 흑색종, 포도막 (안구) 흑색종, 난소암, 자궁경부암, 폐암, 방광암, 유방암, 두경부암 (두경부 편평 세포암), 신세포 암종, 결장직장암, 췌장암, 교모세포종, 담관암종 및 육종으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인 방법.
- 제141항 내지 제156항 중 어느 한 항에 있어서, 암이 피부 흑색종, 포도막 (안구) 흑색종, 백금-저항성 난소암, 췌장관 선암종, 골육종, 삼중-음성 유방암 및 비소세포 폐암으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인 방법.
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