RU2192281C2 - Способы и композиции для иммуномодуляции - Google Patents

Способы и композиции для иммуномодуляции Download PDF

Info

Publication number
RU2192281C2
RU2192281C2 RU99109594/14A RU99109594A RU2192281C2 RU 2192281 C2 RU2192281 C2 RU 2192281C2 RU 99109594/14 A RU99109594/14 A RU 99109594/14A RU 99109594 A RU99109594 A RU 99109594A RU 2192281 C2 RU2192281 C2 RU 2192281C2
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
cells
host
antibody
antibodies
monoclonal antibody
Prior art date
Application number
RU99109594/14A
Other languages
English (en)
Other versions
RU99109594A (ru
Inventor
Алехандро А. АРУФФО
Н. Джэн ЧЭЛАПНИ
Липинг Чен
Роберт С. МИТТЛЕР
Уолтер В. ШАФОРД
Энтони В. СИЭДАК
Original Assignee
Бристол-Маерс Сквибб Компани
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Бристол-Маерс Сквибб Компани filed Critical Бристол-Маерс Сквибб Компани
Publication of RU99109594A publication Critical patent/RU99109594A/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2192281C2 publication Critical patent/RU2192281C2/ru

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2878—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the NGF-receptor/TNF-receptor superfamily, e.g. CD27, CD30, CD40, CD95
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

Изобретение относится к медицине и касается способов и композиций для иммуномодуляции. Сущность изобретения заключается в том, что включает моноклональные антитела против поверхностного белка 4-1ВВ мышиных клеток, введение которых хозяину вызывает супрессию первичного и вторичного гуморального ответа. Изобретение включает два моноклональных антитела. Преимущество изобретения заключается в разработке нового подхода к иммуносупрессии при терапии рака. 9 с. и 11 з.п.ф-лы, 16 ил.

Description

4-1ВВ является индуцибельным Т-клеточным рецептором, который принадлежит к суперсемейству рецепторов нервных факторов роста. Этот новый антиген экспрессируется на поверхности активированных селезеночных Т-клеток и тимоцитов. Внеклеточный домен этого трансмембранного белка типа I гомологичен членам суперсемейства рецепторов нервных факторов роста. Цитоплазматический домен содержит последовательность, гомологичную сайту связывания специфичной для Т-клеток тирозинкиназы р561ck.
Роль 4-1ВВ in vivo остается неясной, хотя имеются данные в пользу того, что он является сигнальной молекулой при активации Т-клеток. Например, сшивание 4-1ВВ с моноклональным антителом 53А2 на анти-СD-3-стимулированных Т-клетках приводит к усилению пролиферации Т-клеток в 2-10 раз (Pollok et al., J. Immunol. 151:1255 (1993)). Кроме того, Zhou et al., Immunol. Letters 41: 177-184 (1994) показали, что 4-1ВВ экспрессирован на активированных внутриэпителиальных Т-лимфоцитах кишечника (IELS) и что активированные IELS, стимулированные анти-4-lBB моноклональным антителом, могут повышать уровень цитотоксичности по отношению к анти-CD-4-секретирующим гибридомным клеткам. Сшивание анти-4-lBB антитела также усиливает пролиферацию IELS.
Были идентифицированы по меньшей мере два возможных кандидата на роль лиганда 4-1ВВ. Chalupny et al. (Proc. Natl. Cad.Sci.USA 89:10360-10364 (1992)) применили растворимый слитой белок 4-1ВВ с иммуноглобулином, чтобы показать, что 4-1ВВ связывается с белком внеклеточного матрикса (ЕМС). Goodwin et al. (Eur. J. Immunol. 23:2631 (1993)) сообщили о выделении кДНК лиганда мушиного 4-1ВВ (4-1-BB-L), который является членом семейства лигандов с С-терминальной амнокислотной гомологией, к которым относятся ФНО, лимфотоксин альфа и бета, CD40-L, Cd27-L, CD30-L и Fas-L.
Были клонированы человеческий аналог (hu4-lBB) мышиного 4-1ВВ и человеческий аналог (hu4-1-BB-L) мышиного 4-1-BB-L (Alderson et al., Eur. J. Immunol. 24: 2219-2227 (1994)). Как моноклональное антитело к hu4-1BB, так и клетки, трансфицированные hu4-1-BB-L, индуцировали сильный пролиферативный ответ в первичных Т-клетках, костимулированных митогеном.
Таким образом, существует потребность в разработке и получении антагонистов 4-1ВВ. Именно это явилось задачей настоящего изобретения.
Краткое описание изобретения
Одной из задач изобретения является подавление первичного и вторичного гуморального ответа на антиген у хозяина, включающий введение хозяину эффективной дозы анти-4-1-BB антитела.
Другой задачей изобретения является получение композиций, содержащих моноклональные антитела 1D8, 3В8 или 3Е1.
Другой задачей изобретения является получение композиции, содержащей анти-4-1-BB антитело при том, что данное антитело подавляет антительный ответ на эритроциты барана in vivo.
Еще одной задачей изобретения является блокирование зависимого от Т-клеток иммунного ответа у хозяина, включающий введение хозяину эффективной дозы анти-4-1-BB антитела.
Другой задачей изобретения является усиление цитотоксической активности лимфоцитов в отношении опухолевых клеток у хозяина, включающий введение хозяину эффективной дозы анти-4-1-BB антитела.
Еще одной задачей изобретения является усиление развития цитотоксических Т-клеток у хозяина, включающий введение хозяину эффективной дозы анти-4-1-BB антитела.
Еще одной задачей изобретения является лечение хозяина, страдающего от обусловленного Т-клетками аутоиммунного заболевания, включающий введение хозяину эффективной дозы анти-4-1-BB антитела.
Краткое описание фигур
На фиг.1 представлен график, отражающий связывание мышиного 4-1ВВ лиганда с иммобилизованным 4-1RB.
На фиг. 2 представлен график, отражающий блокирование анти-4-1BB моноклональными антителами (МКА) связывания 4-1ВВ с лигандом.
На фиг.3 представлен график, отражающий экспрессию 4-1ВВ активированными Т-клетками как функцию времени, прошедшего после стимуляции. Кружками представлено количество мРНК 4-1 ВВ. Квадратами представлено количество рецептора 4-1ВВ на поверхности активированных клеток Т-клеточной линии DO.11.10.
На фиг.4 представлен график, отражающий костимуляцию активации Т-клеток субоптимальными дозами анти-CD3 моноклональными антителами 145.2С11 и анти-4-1BB моноклональными антителами.
На фиг. 5 представлен график, отражающий фармакокинетику анти-4-1BB моноклональных антител 1D8. Каждый символ относится к отдельной мыши.
На фиг.6 представлен график, отражающий подавление анти-4-1BB антителами первичного и вторичного ответа на эритроциты барана.
На фиг. 7 представлен график, отражающий подавление образования цитотоксических Т-клеток.
На фиг.8 представлен график, отражающий регрессию опухоли Р815 после лечения МКА к 4-1ВВ.
На фиг.9 представлен график, отражающий долговременное выживание мышей с асцитами Р815 после лечения анти-4-1BB МКА.
На фиг. 10 представлен график, отражающий эффект истощения CD4 и CD8 в 1D8-индуцированном отторжении опухолевых клеток Р815.
На фиг. 11 представлен график, отражающий лечение мышей, которым внутривенно вводили саркомные клетки AG104.
На фиг. 12А-12С представлено: на фиг.12А - подавление in vivo цитотоксического ответа при реакции "трансплантат против хозяина" (GvHD); на фиг. 12В - ускорение обусловленной цитотоксическими клетками гибели спленоцитов BDF1 под действием анти-4-1BB МКА; и на фиг.12С - повышение процента CD8+ клеток у мышей с реакцией "трансплантат против хозяина".
На фиг.13 представлен график, отражающий "убийство" активированных мышиных Т-клеток иммунотоксином анти-4-1ВВ-РЕ40.
На фиг.14 представлен график, отражающий способность анти-4-1BB антител блокировать развитие эксперментального аутоиммунного энцефаломиелита.
Описание конкретных вариантов осуществления изобретения
Иммуносупрессивная терапия обычно используется для контроля воспаления, лечения рака и при пересадке органов. Применение традиционных способов лечения, таких как использование адренокортикоидных гормонов и их индуктора адренокортикотропного гормона, химиотерапевтических агентов и радиотерапии, может приводить к неспецифической иммуносупрессии и иммунодефицитам. Таким образом, существует настоятельная потребность в разработке альтернативных путей иммуносупрессии. Заявленные в настоящем изобретении антитела дают возможность предпочтительно нацеливаться на конкретные полипептиды, в частности 4-1ВВ, экспрессируемые на Т-клетках.
Используемый в настоящем описании термин "4-1ВВ" обозначает поверхностный белок 4-1ВВ мышиных клеток и гомологи данного белка, присутствующие у других видов, включая человека. Хотя определенная гомология по аминокислотной последовательности ожидается для гомологов различных видов, степень этой гомологии может быть низкой и достигать 50%. Таким образом, гомологи 4-1ВВ можно определить как трансмембранные белки, экспрессируемые на активированных Т-клетках и имеющие по меньшей мере 50%-ную гомологию по аминокислотной последовательности с мышиным 4-1ВВ. Кроме того, это определение 4-1ВВ также включает аллели 4-1ВВ и гомологов, 4-1ВВ и гомологи с консервативными заменами аминокислот, а также растворимые формы 4-1ВВ и гомологов.
Используемый в настоящем описании термин "гуморальный ответ" обозначает иммунную реакцию, которая может быть передана сывороткой и которая обычно обусловлена наличием специфического антитела. Термины "первичный" и "вторичный" иммунный ответ обозначают соответственно первый контакт хозяина с антигеном и последующие контакты. Обычно при гуморальном иммунном ответе главным классом антител при раннем первичном ответе (т.е. в первую неделю) являются IgM, тогда как IgG являются главным классом антител при вторичном ответе.
Моноклональные антитела согласно настоящему изобретению могут принадлежать к любому классу, но предпочтительно являются IgG или IgM.
Для введения человеку, т. е. как компонент композиций для лечения in vivo, моноклональные антитела согласно настоящему изобретению являются антителами преимущественно человеческого происхождения с тем, чтобы снизить иммуногенность, и используются в по существу очищенном виде. Термин "преимущественно человеческого происхождения" означает, что иммуноглобулиновая часть композиции обычно содержит не менее чем около 70% последовательности антитела человека, предпочтительно не менее чем около 80% последовательности антитела человека и наиболее предпочтительно - не менее чем около 90% или более последовательности антитела человека. Когда упоминается "антитело", подразумевается, что в молекуле могут дополнительно присутствовать неиммуноглобулиновые последовательности при том, что молекула сохраняет способность связывать 4-1ВВ.
При необходимости можно соединить антигенсвязывающие районы (например F(ab')2, вариабельные или гипервариабельные (определяющие комплементарность) районы) моноклональных антител нечеловеческого происхождения, таких как мышиные моноклональные антитела, полученные против человеческого гомолога 4-1ВВ, с константными областями (Fc) или со скелетными районами с использованием методов рекомбинантных ДНК, получая тем самым молекулы, в которых преобладает человеческий компонент. Эти методы известны из уровня техники и описаны, например, в патенте США N 4816397, публикациях ЕР 173494 и 239400. Альтернативно можно выделить последовательность ДНК, которая кодирует человеческое моноклональное антитело или его часть, которое специфически связывает 4-1ВВ путем скрининга библиотеки ДНК из В-клеток человека согласно общей методике, описанной Huse et al., Science 246:1275-1281 (1989) и в патенте WO 90/14430, с последующим клонированием и амплификацией последовательности, которая кодирует антитело (или связывающий фрагмент) нужной специфичности. В качестве другого варианта осуществления можно получить одноцепочечные связывающие полипептиды, которые связывают 4-1ВВ. Эти одноцепочечные полипептиды можно получить клонированном и соединением вариабельных областей тяжелых и легких цепей моноклональных антител, связывающих 4-1ВВ. Способы получения одноцепочечных связывающих полипептидов подробно описаны, например, в патенте США N 4946778.
В контексте настоящего изобретения термины "лечение" или "обработка" подразумевают: (1) предотвращение нежелательных симптомов или патологических состояний у субъекта, предрасположенного к данным нежелательным симптомам или патологическим состояниям, но у которого они еще не диагностированы; (2) подавление нежелательных симптомов или патологических состояний, т.е. остановка их развития; или (3) облегчение или ослабление нежелательных симптомов или патологических состояний, т.е. регрессию нежелательных симптомов или патологических состояний. Количество композиции, полученной согласно настоящему изобретению, которое достаточно для достижения любой из перечисленных целей, обозначается как "эффективное количество" и предусматривает как профилактическое, так и терапевтическое применение композиций.
Антитела, полученные согласно настоящему изобретению, применимы для профилактики или лечения заболеваний или патологических состояний, при которых показана иммуносупрессивная терапия и к которым относятся (без ограничений перечисленными) воспалительные заболевания кишечника, рассеянный склероз, аутоиммунный диабет, ревматоидный артрит, заболевание "трансплантат против хозяина", системная красная волчанка, другие Т-клеточные аутоиммунные заболевания и рак.
Моноклональные антитела и другие соединения, полученные согласно настоящему изобретению, могут вводиться в качестве компонентов в фармацевтические композиции, содержащие терапевтическое или профилактическое количество по меньшей мере одного моноклонального антитела или его связывающего фрагмента в сочетании с фармацевтически эффективным носителем.
Для приготовления фармацевтических композиций, применимых при осуществлении данных способов, должен быть использован фармацевтический носитель, который может быть любым совместимым, нетоксическим веществом, приемлемым для доставки больному антител или их связывающих фрагментов, или терапевтических соединений, определяемых в соответствии со способами, изложенными в настоящем изобретении. Стерильная вода, спирт, жиры, воски, инертные твердые вещества и даже липосомы можно использовать в качестве носителей. В состав фармацевтических композиций могут входить фармацевтически приемлемые адъюванты (буферные агенты, диспергирующие агенты). Антитела и их фармацевтические композиции особенно удобны для парентерального введения, например внутривенного, внутриартериального, внутримышечного или подкожного. Однако применимы также интраназальные или другие аэрозольные варианты. Концентрация такого соединения, как антитело, в составе для введения может варьировать в широких пределах, например, от менее чем 0,5%, обычно около 1%, до 15% или 20% и более по весу. Концентрацию выбирают на основе таких критериев, как объем жидкости, вязкость и т.д., которые предпочтительны для конкретного способа введения. Практические способы получения композиций для введения известны или очевидны квалифицированному специалисту и описаны более подробно, например, в Remington's Pharmaceutical Science. 17th Ed., Mack Publishing Co., Easton PA (1985).
Соединения, применяемые согласно настоящему изобретению для подавления иммунного ответа на антиген или антигены, можно вводить с профилактической или лечебной целью. При профилактических назначениях композиции вводят больному, для которого высока вероятность контакта с определенным антигеном или антигенами, таким как больным, подвергшимся пересадкам органов и тканей (включая переливания крови или сыворотки) или лечению такими иммуногенными соединениями, как антибиотики. Введение соединений согласно настоящему изобретению может осуществляться до контакта с антигеном или антигенами или же одновременно с таким контактом. Для предотвращения возобновляющихся заболеваний и их последствий композиции можно вводить ежедневно, еженедельно или согласно другим графикам поддерживающей терапии. Расписание введений также зависит от дозировок и их эффективности, цели терапии и общего состояния здоровья пациента. Лечащий врач, дантист или другой специалист здравоохранения выберет дозировку и характер введения, т.е. способ введения и будет ли оно единичным или многократным.
Для терапевтических применений соединения, полученные согласно настоящему изобретению, вводят больному, уже страдающему от нежелательных симптомов или патологии в таких количествах, которые достаточны для того, чтобы хотя бы частично подавить иммунный ответ на антиген(ы). Количество, достаточное для достижения этой цели, определяют как "терапевтически эффективную дозу". Эффективные для такого использования количества будут зависеть от того, какое соединение используется, от способа введения, от остроты нежелательных симптомов или патологических состояний и от общего состояния здоровья пациента. Определение эффективного количества соединения, подавляющего иммунный ответ на антиген, может быть осуществлено способами, известными из уровня техники. Например, при помощи хорошо известных диагностических методов in vitro можно определить снижение количества антиген-специфического иммуноглобулина и тем самым судить об эффективности исследуемых композиций.
Антиген (или антигены), в контакт с которыми вступает человек-хозяин, являются преимущественно зависимыми от Т-клеток. Большинство антигенов являются зависимыми от Т-клеток, т.е. для развития иммунного ответа на них необходимо участие Т-клеток. Т-независимые антигены обычно представляют собой большие полимерные молекулы с множественными, повторяющимися антигенными детерминантами. Часто Т-независимые антигены обладают митогенными свойствами.
В качестве одного из вариантов осуществления изобретения, полученные согласно настоящему изобретению анти-4-1BB антитела можно использовать в аффинной хроматографии для очистки 4-1ВВ полипептидов, таких как внеклеточная область 4-1ВВ, растворимые формы 4-1ВВ и слитые белки 4-1ВВ с другими молекулами, такими как иммуноглобулины. Анти-4-1ВВ-антитела, полученные согласно настоящему изобретению, могут быть помечены путем присоединения репортерной молекулы, такой как флуоресцеин, щелочная фосфатаза и им подобные, и использованы для визуализации 4-1ВВ на клеточной поверхности. Антитела, помеченные радиоактивной меткой, можно использовать для количественной оценки 4-1ВВ на клетках. В качестве других вариантов осуществления изобретения можно назвать использование анти-4-1BB-антител в конкурентных тестах с лигандами 4-1ВВ.
Следующие примеры приведены только для целей иллюстрации и не ограничивают объем изобретения.
ПРИМЕРЫ
I. Иммунизация и способы отбора
Для иммунизации и скрининга был сконструирован слитый белок, состоящий из внеклеточной части молекулы мышиного 4-1ВВ и константного района Ig человека (патент ЕР 0595659). Слитый белок 4-1BBIg содержал сайт разрезания тромбиновой протеазой между 4-1ВВ и Ig частями молекулы. Для иммунизации слитый белок разрезали тромбиновой протеазой и пропускали через колонку с белком А, чтобы удалить неразрезанный белок и фрагменты Ig. Несвязавшийся материал, полученный в результате данной процедуры и представленный несколькими полосами при анализе SDS-PAGE, использовали для иммунизации.
Гибридомы "крыса-мышь" были получены и скринированы с применением стандартных методов. В качестве партнеров для слияния использовали иммунные клетки селезенки и мышиную миелому AG8 (Kearney et al., J. Immunol. 123: 1548-1550 (1974). Атитела были получены в результате двух независимых слияний. МКА 3В8 и 1D8 были получены в результате слияния, которому предшествовала имунизация по следующей схеме: две инъекции 20 мкг белка в адъюванте RIBI (RIBI Immunochemical) в подушечки лап в дни 0 и 3; третья инъекция 20 мкг белка в PBS в подушечки лап в день 10; и на 13-й день дренировали подколенный лимфатический узел и проводили слияние. Другие МКА были получены в результате второго слияния клеток селезенки после 4-х внутрибрюшинных инъекций 20 мкг белка в адъюванте RIBI в течение 5 месяцев. Внутривенные инъекции в дозе 30 мкг проводили за 17 и 3 дня до слияния.
II. Характеристика анти-4-1BB антител
Первоначально антитела идентифицировали по специфическому связыванию слитого белка 4-1BBIg в стардартной ELISA. Специфичность антител определяли согласно дополнительным критериям: (1) по связыванию с клетками COS, экспрессирующими полноразмерную молекулу 4-1ВВ, но не с мнимотрансфицированными клетками COS; (2) по связыванию с клетками гибридомы D0-11-10, активированными к экспрессии 4-1ВВ (активация в течение 12 часов 10 нг/мл РМА и 0,5 мкг/мл иономицина). По изотипу антитело 3В8 относилось к крысиным IgM, тогда как все другие антитела имели изотип IgG2a, как определено с помощью изотип-специфических пероксидазных реагентов (Zymed) в ELIZA с белком 4-1BBIg.
III. Очистка антител
Моноклональные антитела (МКА) 3В8 (IgM) очищали аффинно на колонке с анти-каппа цепью (mAb RG7 (АТСС Т1В 172). МКА элюировали буфером для элюции Immunopure Ig (Pierce), а затем диализовали против фосфатного буферного раствора (PBS). Материал, очищенный на RG7, содержал некоторое количество свободных легких цепей, которые очищались вместе с интактными антителами. Все другие антитела очищали на белке G (Gammabind Plus, Pharmacia). Для элюции антител использовали буфер для элюции Immunopure Ig. Перед использованием антитела диализовали против PBS.
IV. Подавление моноклональными антителами связывания лиганда
Для изучения подавления связывания лиганда молекулой 4-1ВВ в качестве суррогатной молекулы использовали растворимый слитый белок, состоящий из внеклеточной части лиганда 4-1ВВ с карбоксиконца и внеклеточной части мышиного CD8 с аминоконца. ДНК, кодирующая внеклеточную часть мышиного лиганда 4-1ВВ (остатки 104-309), была получена полимеразной цепной реакцией с использованием "верхнего" праймера, содержащего сайт BamHI (5'-GCGGCGGATCCCCGCACCGAGCCTCGGCCAGCG-3') и "нижнего" праймера, содержащего сайт XbaI (5'-CGCTCTAGAGGATAGTTCTCATTCCCATGG-3'). Фрагмент ДНК мышиного лиганда 4-1ВВ был клонирован в рамку в вектор CDM7(B-), содержащий внеклеточный домен CD8, за которым следовал сайт BamHI. Эта молекула была обозначена как лиганд 4-1ВВ (4-1-BBL). Способность анти-4-1BB МКА блокировать связывание лиганда с молекулой 4-1ВВ оценивали при помощи ELISA и клеточных тест-систем. 4-1-BBL был очищен на аффинной колонке с анти-CD8 моноклональными антителами 53,6 (АТСС TIB 105) с элюцией 40% пропиленгликолем/60% Tris (pH 7,0)/ 1,25 М (NH4)2SO4 и диализован против фосфатного буферного раствора (PBS). Очищенный материал в условиях восстанавливающего SDS-PAGE мигрировал в виде преобладающей широкой полосы с приблизительным молекулярным весом 55000. При HPLC гель-фильтрации материал элюировался в виде трех пиков. Преобладающий пик имел приблизительный молекулярный вес 300000.
Тесты ELISA на подавление связывания 4-1-BBL проводили следующим образом. Белок 4-1-BBL сорбировали на ячейках плат для ELISA в концентрации 0,1 мкг/мл в PBS в течение ночи при 4oС, блокировали растворителем для образцов (Genetic Systems) и инкубировали с очищенным антителом 1 час. Затем добавляли лиганд и смесь МКА и лиганда инкубировали еще 1 час. Платы отмывали и инкубировали с биотинилированными МКА 56,3 (анти-CD8), а затем - с конъюгатом стрептавидин-пероксидаза хрена (HRPO). На подавление связывания указывало уменьшение сигнала в ELISA. Титрование связывания лиганда с 4-1BBIg показано на фиг. 1. Контрольный слитый мышиный белок pg39-CD8 не связывал 4-1ВВ, тогда как лиганд 4-1ВВ специфически связывал 4-1ВВ дозозависимым образом. Фиг. 2 иллюстирирует способность МКА блокировать связывание лиганда с 4-1BBIg в аналогично поставленной ELISA.
V. Активация клеток D0-11-10 к продукции белка 4-1ВВ
Клетки Т-клеточной гибридомы D0-11-10 активировали к экспрессии молекулы 4-1ВВ обработкой РМА (10 нг/мл) и иономицином (0,5 мкг/мл) в течение различных интервалов времени, после чего определяли мРНК 4-1ВВ или экспрессию 4-1ВВ на поверхности клеток при помощи Нозерн-анализа и проточной цитофлуориметрии соответственно (фиг. 3). Необработанные клетки не связывали белок 4-1ВВ. Активированные клетки связывали белок 4-1ВВ, но не аналогичный слитый белковый конструкт gp39 и Lyta2a (Hollenbaugh et al., EMBO J. 11(12):4313-4321 (1992)). Анти-4-1BB антитела 1D8 и 3В8 связывались с клетками D0-11-10 только тогда, когда клетки были активированы. Преинкубация этих МКА с клетками D0-11-10 могла блокировать последующее связывание 4-1-BBL. Связывание 4-1-BBL клетками оценивали при помощи антисывороток, конъюгированных с анти-CD8 МКА (53,6) (Biosource).
В последующих экспериментах исследовали способность анти-4-1BB антител костимулировать активацию Т-клеток. Стимуляция покоящихся Т-клеток субоптимальными дозами анти-CD-3 МКА 145.2С11 в сочетании с 10 мкг/мл анти-4-1BB антител повышала пролиферацию клеток в 2,5-8 раз по сравнению с эффектом одних МКА 145.2С11 (фиг. 4). Имелась незначительная корреляция между аффинностью связывания или способностью блокировать связывание лиганда и способностью МКА костимулировать Т-клетки.
VI. Подавление развития анти-SRBC антительного ответа анти-4-1BB моноклональными антителами 1D8 и 3В8
Исследовали фармакокинетику анти-4-1BB МКА 1D8 при внутривенном введении в дозе 250 мг/мышь. Образцы сывороток собирали начиная с 8-го дня и по 42-й день, после чего их анализировали на присутствие анти-4-1BB МКА. Приведенные на фиг. 5 результаты показывают, что срок полужизни МКА 1D8 составляет 7 дней. Эти результаты также свидетельствуют о том, что у этих животных не образовывалось антикрысиных IgG (анти-1DS). Срок полужизни МКА 3В8, крысиных IgM антител, составлял 6,5 часов (данные не приведены).
Группе из пяти мышей вводили внутривенно зависимый от Т-клеток антиген - эритроциты барана (SRBC) и 250 мг антител 1D8 или 3В8. Дальнейшие инъекции антител проводили через день до 6-го дня. У каждой мыши на протяжении 7-ми недель периодически брали образцы сыворотки и определяли титр анти-SRBC антител. На 7-й неделе эксперимента мышам вводили вторую порцию SRBC, анти-4-1BB МКА более не вводили. На протяжении двух недель собирали образцы сывороток для определения анти-SRBC антител. Как 1D8, так и 3В8 блокировали первичный и вторичный ответ на SRBC (фиг.6). Эти эксперименты, в особенности результаты с 3В8, указывают на тот факт, что подобного рода обработка приводит к долговременному отсутствию ответа.
VII. Подавление образования цитотоксических Т-клеток
Для того чтобы определить важна ли экспрессия 4-1ВВ для других эффекторных функций Т-клеток определяли способность МКА 1D8 и нескольких других МКА, полученных в результате второго слияния, влиять на образование цитотоксических Т-клеток при острой реакции "трансплантат против хозяина". Селезеночные Т-клетки брали у мышей BDF1 (Н-2db) через 10 дней после внутривенного введения 107 селезеночных Т-клеток C57BL/6 (Н-b2). После 5 дней выращивания в культуре в присутствии рекомбинантного мышиного ИЛ-2 (R & D Systems) в концентрации 2-10 нг/мл, жизнеспособные Т-клетки проверяли на цитотоксичность против мишеней Iad (P815) или Iаb (EL4), меченных 51Сr. Приведенные на фиг.7 результаты показывают, что селезеночные Т-клетки мышей, которым вводили контрольные МКА или PBS, эффективно убивали мишени, несущие соответствующий гаплотип МНС класса II в соотношениях столь низких, как 3:1. Напротив, селезеночные Т-клетки мышей, которым вводили МКА 1D8, не были способны к цитотоксичности, пока отношение Е:Т не достигало 50:1, и даже тогда их "убивающая" способность была снижена до 75%. Аналогичные результаты были получены с МКА 22В6. При том, что МКА 3Е1 были весьма эффективны в подавлении, МКА 21Е5 были менее эффективны в подавлении образования/выживания ЦТК. Не обнаружено цитотоксичности в отношении мишеней EL-4(Iab) (данные не приведены). Подобные наблюдения не могут объясняться присутствием анти-4-1ВВ МКА в культурах, поскольку добавление таких антител в тесты на ЦТК не блокировало убийство ЦТК. Микроскопическое обследование культивируемых Т-клеток перед их добавлением к мишеням выявило полное отсутствие активированных клеток, большое количество мелких покоящихся клеток и много апоптозных или мертвых клеток, которые отсутствовали в контрольных культурах.
VIII. Усиление образования цитотоксических Т-клеток при реакции "трансплантат против хозяина" in vivo.
Как следует из описанных выше экспериментов, клетки мышей с реакцией "трансплантат против хозяина", обработанных анти-4-1BB МКА, оказались не способны проявить цитотоксическую активность по отношению к соответствующей мишени после 5 дней культивирования in vitro в присутствии ИЛ-2 или без него (данные не приведены), тогда как клетки контрольных мышей проявляли выраженный цитотоксических эффект в культуре в присутствии ИЛ-2. Это наблюдение оказалось неожиданным, поскольку постоянно отмечалась 1D8-индуцированная цитотоксичность на независимых опухолевых моделях in vivo с использованием как метастазирующих, так и неметастазирующих опухолей (фиг.8, 9, 10 и 11). Кроме того, селезенки, взятые у мышей с реакцией "трансплантат против хозяина", обработанных анти-41-ВВ антителами, были увеличены в 2-3 раза по сравнению с нормальными селезенками контрольных мышей, которым вводили другие антитела. Для изучения этого парадоксального явления были повторены эксперименты "трансплантат против хозяина" с той разницей, что в данном случае активность цитотоксических клеток оценивали немедленно после хирургического удаления селезенок с исключением наращивания цитотоксических Т-клеток in vitro в присутствии ИЛ-2. Результаты данного эксперимента существенно отличались от результатов, приведенных выше. На фиг. 12А можно увидеть, что анти-4-1BB МКА, 1D8 и 22В6, каждое из которых связывается с различными областями молекулы 4-1ВВ, повышали активность цитотоксических клеток почти в четыре раза по сравнению с контрольными животными с реакцией "трансплантат против хозяина". Напротив, МКА 21Е5 не оказывало явного эффекта на образование цитотоксических клеток, тогда как МКА 3Е1, один из наиболее сильных блокаторов связывания лиганда, полностью подавляло развитие цитотоксических клеток. Выраженный эффект МКА 1D8 и 22В6, выражающийся в усилении активности цитотоксических клеток, показан на фиг.12В, из которого видно значительное снижение общего числа жизнеспособных спленоцитов, которых удавалось извлечь из мышей, обработанных двумя данными МКА. Кроме того, фенотипический анализ спленоцитов показал, что у мышей, обработанных МКА 1D8, процент CD8+ Т-клеток повысился до 30% от общего числа клеток (фиг.12С), тогда как у мышей с реакцией "трансплантат против хозяина", которым вводили МКА 6Е9 (несвязывающие контрольные МКА того же изотипа) или которым совсем не вводили антител, количество CD8+ Т-клеток составляло от 5 до 8%. Исследования по картированию эпитопов анти-4-1BB МКА с использованием слитых белков 4-1ВВ, в которых были произведены замены доменов, показали, что МКА 1D8 уникально в том смысле, что оно связывается с мембранным проксимальным районом внеклеточного домена молекулы 4-1-ВВ, не участвующим в связывании 4-1BBL (данные не приведены).
IX. Ускорение развития цитотоксических Т-клеток
В данных экспериментах анти-4-1BB моноклональные антитела использовали для ускорение развития цитотоксических Т-клеток, которые затем убивали слабо иммуногенные или неиммуногенные, но сильно метастазирующие, опухоли.
На фиг.8 представлены результаты эксперимента, в котором группе из пяти мышей Ba1b/C в день 0 вводили подкожно 105 клеток мастоцитомы 10 5 Р815. Контрольным мышам вводили МКА 10.2. к человеческому CD5. Однако у мышей, которым вводили МКА 1D8 или 3Е1 (анти-4-1BB), опухоли быстро отторгались. Инъекции антител проводили внутрибрюшинно в дни 3 и 6 в дозе 400 мг/мышь.
Фиг.9 отражает долговременное выживание мышей с привитой опухолью Р815 и обработанных МКА 1D8.
Приведенные на фиг.10 данные показывают, что удаление Т-клеток CD4+ или CD8+ у мышей с привитой опухолью Р815 и обработанных МКА 1D8 делает их неспособными к отторжению опухоли. Эти результаты дают основания считать, что клетки CD4+ и CD8+ необходимы для эффективности МКА 1D8.
Результаты, представленные на фиг.11, демонстрируют, что клетки неиммуногенной саркомы AG104 могут быть убиты цитотоксическими лимфоцитами, индуцированными посредством стимуляции МКА 1D9. В этом опыте группе из 10 мышей Balb/c вводили подкожно 105 опухолевых клеток АG104. Моноклональные антитела вводили подкожно в дни 3 и 6, как описано выше. К 60-му дню 70% мышей выжили. Данный результат особенно примечателен, поскольку использованные опухолевые клетки особенно агрессивны.
X. Убийство активированных мышиных Т-клеток
В этом опыте был получен анти-4-1ВВ-РЕ40 иммунотоксин, для чего были клонированы вариабельные области МКА 1D8, из которых была взята единственная цепь Fv. Эта Sfv была затем использована для получения SFv-PE40 иммунотоксина (Siegall et al., Drug Dev. Res., 34:210-219 (1995). Проточной цитофлуориметрией показано, что данный иммунотоксин связывается только с 4-1BB+ активированными клетками. Приведенные на фиг.13 результаты показывают, что данный иммунотоксин специфически убивает активированные 4-1BB+ клетки дозозависимым способом, тогда как контрольный иммунотоксин такой активностью не обладает.
XI. Подавление развития ЕАЕ
В следующих экспериментах использована модель Т-клеточного аутоиммунного заболевания на мышах, т.е. развитие экспериментального аутоиммунного (или аллергического) энцефаломиелита (ЕАЕ) (см., например, Alvord, G.C. Jr., ed. Experimental Allergic Encephalomyelitis: A Useful Model for Multiple Sclerosis, Liss, NY (1984)).
Самкам мышей РЕ X SJE/F1 внутрикожно в день 0 вводили 100 мкл основного белка миелина из мозга кролика в концентрации 1 мг/мл в полном адъюванте Фрейнда. Внутривенно вводили 200 мкл коклюшного токсина в концентрации 1 мкг/мл в PBS.
Группе из восьми мышей вводили внутривенно в дни 0, 2 и 4 (200 мкг в концентрации 1 мг/мл) PBS, содержащий какие-либо одни из следующих моноклональных антител (все антитела крысиного происхождения, изотипа IgG2А): (а) контрольные МКА 6Е9 (крысиный античеловеческий gp39 MKA); (б) анти-4-l-BB МКА 3Е1; (в) анти-4-1-BB МКА 3Н3. О развитии ЕАЕ судили по параличу хвоста, за которым следовал паралич задних конечностей (в этот момент животных забивали по гуманным соображениям).
Представленные на фиг. 14 результаты свидетельствуют о способности анти-4-1-BB антител блокировать развитие ЕАЕ.
При том что настоящее изобретение подробно описано в примерах и иллюстрациях для облегчения понимания, очевидно, возможны определенные изменения и модификации, которые не выходят за рамки нижеследующей формулы изобретения.

Claims (20)

1. Способ супрессии первичного и вторичного гуморального ответа на антиген у хозяина, включающий введение хозяину эффективной дозы анти-4-1ВВ моноклонального антитела.
2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что доза вводится до экспозиции с антигеном.
3. Способ по п. 1, отличающийся тем, что доза вводится одновременно с экспозицией с антигеном.
4. Способ по п. 1, отличающийся тем, что доза вводится после экспозиции с антигеном.
5. Способ по п. 1, отличающийся тем, что хозяином является человек.
6. Способ по п. 1, отличающийся тем, что антиген является зависимым от Т-клеток.
7. Способ по п. 1, отличающийся тем, что 4-1ВВ является гомологом 4-1ВВ хозяина.
8. Способ по п. 1, отличающийся тем, что антитело является по существу антителом человека.
9. Способ блокирования обусловленных Т-клетками иммунных реакций у хозяина, включающий введение хозяину эффективной дозы анти-4-1ВВ моноклонального антитела.
10. Способ по п. 9, отличающийся тем, что хозяином является человек.
11. Способ по п. 9, отличающийся тем, что антитело является по существу антителом человека.
12. Способ по п. 9, отличающийся тем, что 4-1ВВ является гомологом 4-1ВВ хозяина.
13. Способ усиления лимфоцитарной цитотоксичности по отношению к опухолевым клеткам у хозяина, включающий введение хозяину эффективной дозы анти-4-1ВВ моноклонального антитела.
14. Способ усиления развития цитотоксических Т-клеток у хозяина, включающий введение хозяину эффективной дозы анти-4-1ВВ моноклонального антитела.
15. Способ лечения хозяина, страдающего Т-клеточным аутоиммунным заболеванием, включающий введение хозяину эффективной дозы анти-4-1ВВ моноклонального антитела.
16. Композиция для осуществления способа по любому из пп. 1,9,13-15, содержащая моноклональное антитело 1D8.
17. Композиция по п. 16, отличающаяся тем, что антитело подавляет связывание лиганда с 4-1ВВ in vitro.
18. Композиция для осуществления способа по любому из пп. 1,9,13,14 и 15, содержащая моноклональное антитело 3Е1.
19. Композиция для осуществления способа по любому из пп. 1,9,13,14 и 15, содержащая моноклональное антитело 3Н3.
20. Композиция для осуществления способа по любому из пп. 1,9,13,14 и 15, содержащая анти 4-1ВВ антитело, при том, что антитело подавляет антительный ответ на эритроциты барана in vivo.
RU99109594/14A 1996-10-11 1997-10-03 Способы и композиции для иммуномодуляции RU2192281C2 (ru)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US2827096P 1996-10-11 1996-10-11
US60/028,270 1996-10-11

Publications (2)

Publication Number Publication Date
RU99109594A RU99109594A (ru) 2001-02-20
RU2192281C2 true RU2192281C2 (ru) 2002-11-10

Family

ID=21842492

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU99109594/14A RU2192281C2 (ru) 1996-10-11 1997-10-03 Способы и композиции для иммуномодуляции

Country Status (15)

Country Link
US (1) US6210669B1 (ru)
EP (1) EP0948353A1 (ru)
JP (1) JP2001502325A (ru)
KR (1) KR100520339B1 (ru)
CN (1) CN1232402A (ru)
AU (1) AU738981B2 (ru)
BR (1) BR9712278A (ru)
CA (1) CA2268340A1 (ru)
HU (1) HUP9904697A3 (ru)
IL (1) IL129138A0 (ru)
NO (1) NO991676L (ru)
NZ (1) NZ334691A (ru)
PL (1) PL188749B1 (ru)
RU (1) RU2192281C2 (ru)
WO (1) WO1998016249A1 (ru)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2493873C1 (ru) * 2012-06-07 2013-09-27 Сергей Михайлович Юдин Инъекционный препарат для повышения спермопродукции у производителей сельскохозяйственных животных и петухов и способ его применения

Families Citing this family (125)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6312700B1 (en) * 1998-02-24 2001-11-06 Andrew D. Weinberg Method for enhancing an antigen specific immune response with OX-40L
KR20000034847A (ko) * 1998-11-17 2000-06-26 성재갑 인간 4-1비비 분자에 대한 인간화 항체 및 이를 포함하는 약학조성물
WO2001039722A2 (en) 1999-11-30 2001-06-07 Mayo Foundation For Medical Education And Research B7-h1, a novel immunoregulatory molecule
US7541184B2 (en) * 2000-02-24 2009-06-02 Invitrogen Corporation Activation and expansion of cells
KR100468321B1 (ko) * 2001-02-08 2005-01-27 학교법인 울산공업학원 종양 및 에이즈치료용 폴리펩타이드
ES2328025T3 (es) 2001-10-09 2009-11-06 Mayo Foundation For Medical Education And Research Mejoramiento de las respuestas inmunitarias por anticuerpos agonistas 4-1 bb.
KR100452954B1 (ko) * 2002-02-26 2004-10-14 주식회사 엘지생명과학 가변영역 아미노산 치환을 통한 인간 4-1비비분자에 대한결합 특이성이 증가된 변형 인간화 항체의 제조방법
US20050084967A1 (en) * 2002-06-28 2005-04-21 Xcyte Therapies, Inc. Compositions and methods for eliminating undesired subpopulations of T cells in patients with immunological defects related to autoimmunity and organ or hematopoietic stem cell transplantation
US20040175373A1 (en) * 2002-06-28 2004-09-09 Xcyte Therapies, Inc. Compositions and methods for eliminating undesired subpopulations of T cells in patients with immunological defects related to autoimmunity and organ or hematopoietic stem cell transplantation
JP2006506987A (ja) * 2002-06-28 2006-03-02 エクサイト セラピーズ インコーポレーティッド 自己免疫および臓器または造血幹細胞移植に関連する免疫学的欠損を有する患者における免疫レパートリー回復のための組成物および方法
CA2492561A1 (en) * 2002-07-15 2004-01-22 Mayo Foundation For Medical Education And Research Treatment and prophylaxis with 4-1bb-binding agents
PL375144A1 (en) * 2002-07-30 2005-11-28 Bristol-Myers Squibb Company Humanized antibodies against human 4-1bb
AU2003290059A1 (en) * 2002-12-16 2004-07-09 Herbert Schwarz Use of cd137 antagonists for the treatment of tumors
US20040197312A1 (en) 2003-04-02 2004-10-07 Marina Moskalenko Cytokine-expressing cellular vaccine combinations
AR046094A1 (es) * 2003-10-10 2005-11-23 Bristol Myers Squibb Co Anticuerpos completamente humanos contra 4-1bb humano
US7288638B2 (en) 2003-10-10 2007-10-30 Bristol-Myers Squibb Company Fully human antibodies against human 4-1BB
EP1756162A1 (en) 2004-03-23 2007-02-28 Biogen Idec MA Inc. Receptor coupling agents and therapeutic uses thereof
US20070253961A1 (en) * 2004-06-09 2007-11-01 Ulsan Industrial Education Foundation Pharmaceutical Composition Comprising the Anti-4-1Bb Antibody for Treating or Preventing Rheumatoid Arthritis
WO2006029220A2 (en) * 2004-09-08 2006-03-16 Ohio State University Research Foundation Combination therapy with anti-ctla4 and anti-4-1bb antibodies
EP3428191A1 (en) 2004-10-06 2019-01-16 Mayo Foundation for Medical Education and Research B7-h1 and pd-1 in treatment of renal cell carcinoma
ES2408256T3 (es) * 2004-12-02 2013-06-19 Bac Ip B.V. Método para la purificación por afinidad
US20060182744A1 (en) * 2005-02-15 2006-08-17 Strome Scott E Anti-CD137 antibody as an agent in the treatment of cancer and glycosylation variants thereof
US20080019905A9 (en) * 2005-02-18 2008-01-24 Strome Scott E Method of using an anti-CD137 antibody as an agent for radioimmunotherapy or radioimmunodetection
WO2006088447A1 (en) * 2005-02-15 2006-08-24 Gtc Biotherapeutics, Inc. An anti-cd137 antibody as an agent in the treatement of cancer and glycosylation variants thereof
JP5328019B2 (ja) * 2005-10-21 2013-10-30 レヴォ バイオロジクス インコーポレイテッド 抗体依存性細胞障害活性を増強させた抗体、その調製法および使用法
WO2007082154A2 (en) * 2006-01-05 2007-07-19 Mayo Foundation For Medical Education And Research B7-h1 and b7-h4 in cancer
US20100015642A1 (en) * 2006-01-05 2010-01-21 Kwon Eugene D B7-h1 and survivin in cancer
WO2007124361A2 (en) * 2006-04-20 2007-11-01 Mayo Foundation For Medical Education And Research Soluble b7-h1
US20110020325A1 (en) * 2008-02-29 2011-01-27 Kwon Eugene D Methods for reducing granulomatous inflammation
WO2010042433A1 (en) 2008-10-06 2010-04-15 Bristol-Myers Squibb Company Combination of cd137 antibody and ctla-4 antibody for the treatment of proliferative diseases
US20120076722A1 (en) * 2009-05-14 2012-03-29 University Of Maryland, Baltimore Methods for treating cancers and diseases associated with 4-1bb (cd137) expression
ES2377785B2 (es) 2010-09-08 2012-09-26 Universidad Miguel Hernández De Elche Composición farmacéutica para el tratamiento del ojo seco.
RU2710717C2 (ru) 2010-09-09 2020-01-10 Пфайзер Инк. Молекулы, связывающиеся с 4-1ВВ
DK2699598T3 (en) * 2011-04-19 2019-04-23 Pfizer COMBINATIONS OF ANTI-4-1BB ANTIBODIES AND ADCC-INducing ANTIBODIES FOR TREATMENT OF CANCER
WO2012177788A1 (en) * 2011-06-20 2012-12-27 La Jolla Institute For Allergy And Immunology Modulators of 4-1bb and immune responses
US9302005B2 (en) 2013-03-14 2016-04-05 Mayo Foundation For Medical Education And Research Methods and materials for treating cancer
EP3470081A1 (en) 2013-10-01 2019-04-17 Mayo Foundation for Medical Education and Research Methods for treating cancer in patients with elevated levels of bim
EA201690746A1 (ru) 2013-10-25 2016-12-30 Фармасайкликс Элэлси Лечение с применением ингибиторов тирозинкиназы брутона и иммунотерапии
EP3066127A1 (en) 2013-11-06 2016-09-14 Bristol-Myers Squibb Company Immunotherapeutic dosing regimens and combinations thereof
ES2783026T3 (es) 2014-02-04 2020-09-16 Pfizer Combinación de un antagonista de PD-1 y un agonista de 4-1BB para el tratamiento de cáncer
US10302653B2 (en) 2014-05-22 2019-05-28 Mayo Foundation For Medical Education And Research Distinguishing antagonistic and agonistic anti B7-H1 antibodies
EP3171896A4 (en) 2014-07-23 2018-03-21 Mayo Foundation for Medical Education and Research Targeting dna-pkcs and b7-h1 to treat cancer
CA2964155A1 (en) 2014-10-10 2016-04-14 Idera Pharmaceuticals, Inc. Treatment of cancer using tlr9 agonist with checkpoint inhibitors
KR20170138477A (ko) 2015-04-17 2017-12-15 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 항-pd-1 항체 및 또 다른 항체의 조합물을 포함하는 조성물
WO2017009842A2 (en) 2015-07-16 2017-01-19 Biokine Therapeutics Ltd. Compositions and methods for treating cancer
US20180230431A1 (en) 2015-08-07 2018-08-16 Glaxosmithkline Intellectual Property Development Limited Combination Therapy
WO2017046746A1 (en) 2015-09-15 2017-03-23 Acerta Pharma B.V. Therapeutic combinations of a btk inhibitor and a gitr binding molecule, a 4-1bb agonist, or an ox40 agonist
US10875923B2 (en) 2015-10-30 2020-12-29 Mayo Foundation For Medical Education And Research Antibodies to B7-H1
KR102413037B1 (ko) 2016-03-15 2022-06-23 메르사나 테라퓨틱스, 인코포레이티드 Napi2b 표적화된 항체-약물 접합체 및 이의 사용 방법
US11623958B2 (en) 2016-05-20 2023-04-11 Harpoon Therapeutics, Inc. Single chain variable fragment CD3 binding proteins
JP7169195B2 (ja) 2016-05-20 2022-11-10 バイオヘイブン・ファーマシューティカル・ホールディング・カンパニー・リミテッド 癌を処置するためのリルゾール、リルゾールプロドラッグまたはリルゾール類似体と免疫療法との併用
SG11201811290VA (en) 2016-06-17 2019-01-30 Magenta Therapeutics Inc Compositions and methods for the depletion of cd117+cells
TWI788307B (zh) 2016-10-31 2023-01-01 美商艾歐凡斯生物治療公司 用於擴增腫瘤浸潤性淋巴細胞之工程化人造抗原呈現細胞
US11135307B2 (en) 2016-11-23 2021-10-05 Mersana Therapeutics, Inc. Peptide-containing linkers for antibody-drug conjugates
US10780080B2 (en) 2016-11-23 2020-09-22 Translational Drug Development, Llc Benzamide and active compound compositions and methods of use
US11512134B2 (en) 2017-08-01 2022-11-29 Eli Lilly And Company Anti-CD137 antibodies
US20200121719A1 (en) 2017-01-06 2020-04-23 Iovance Biotherapeutics, Inc. Expansion of tumor infiltrating lymphocytes (tils) with tumor necrosis factor receptor superfamily (tnfrsf) agonists and therapeutic combinations of tils and tnfrsf agonists
SG10202102897PA (en) 2017-01-20 2021-04-29 Magenta Therapeutics Inc Compositions and methods for the depletion of cd137+ cells
TW201834697A (zh) 2017-02-28 2018-10-01 美商梅爾莎納醫療公司 Her2標靶抗體－藥物結合物之組合療法
WO2018183928A1 (en) 2017-03-31 2018-10-04 Bristol-Myers Squibb Company Methods of treating tumor
KR102629972B1 (ko) 2017-04-13 2024-01-29 아게누스 인코포레이티드 항-cd137 항체 및 이의 사용 방법
US10543271B2 (en) 2017-05-12 2020-01-28 Harpoon Therapeutics, Inc. Mesothelin binding proteins
EP3635097A1 (en) 2017-06-05 2020-04-15 Iovance Biotherapeutics, Inc. Methods of using tumor infiltrating lymphocytes in double-refractory melanoma
KR20200035966A (ko) 2017-07-11 2020-04-06 콤파스 테라퓨틱스 엘엘씨 인간 cd137에 결합하는 작동자 항체 및 이의 용도
US10927180B2 (en) 2017-10-13 2021-02-23 Harpoon Therapeutics, Inc. B cell maturation antigen binding proteins
US20200239577A1 (en) 2017-10-15 2020-07-30 Bristol-Myers Squibb Company Methods of treating tumor
WO2019089753A2 (en) 2017-10-31 2019-05-09 Compass Therapeutics Llc Cd137 antibodies and pd-1 antagonists and uses thereof
CR20200251A (es) 2017-11-17 2020-07-17 Iovance Biotherapeutics Inc Expansión de til de aspirados con aguja fina y biopsias por punción
EP3713961A2 (en) 2017-11-20 2020-09-30 Compass Therapeutics LLC Cd137 antibodies and tumor antigen-targeting antibodies and uses thereof
US11638760B2 (en) 2017-11-27 2023-05-02 Mersana Therapeutics, Inc. Pyrrolobenzodiazepine antibody conjugates
CN111757757A (zh) 2017-12-21 2020-10-09 梅尔莎纳医疗公司 吡咯并苯并二氮呯抗体共轭物
SG11202006541UA (en) 2018-01-08 2020-08-28 Iovance Biotherapeutics Inc Processes for generating til products enriched for tumor antigen-specific t-cells
US11713446B2 (en) 2018-01-08 2023-08-01 Iovance Biotherapeutics, Inc. Processes for generating TIL products enriched for tumor antigen-specific T-cells
WO2019136459A1 (en) 2018-01-08 2019-07-11 Iovance Biotherapeutics, Inc. Processes for generating til products enriched for tumor antigen-specific t-cells
TW201932491A (zh) * 2018-01-22 2019-08-16 大陸商江蘇恆瑞醫藥股份有限公司 抗４－１ｂｂ抗體、其抗原結合片段及其醫藥用途
WO2019160829A1 (en) 2018-02-13 2019-08-22 Iovance Biotherapeutics, Inc. Expansion of tumor infiltrating lymphocytes (tils) with adenosine a2a receptor antagonists and therapeutic combinations of tils and adenosine a2a receptor antagonists
TW202003565A (zh) 2018-03-23 2020-01-16 美商必治妥美雅史谷比公司 抗mica及/或micb抗體及其用途
MX2020010264A (es) 2018-03-29 2020-11-06 Iovance Biotherapeutics Inc Procesos para la produccion de linfocitos infiltrantes en tumor y usos de los mismos en inmunoterapia.
CN111971306A (zh) 2018-03-30 2020-11-20 百时美施贵宝公司 治疗肿瘤的方法
KR20210005138A (ko) 2018-04-27 2021-01-13 이오반스 바이오테라퓨틱스, 인크. 종양 침윤 림프구의 확장 및 유전자 편집을 위한 폐쇄 방법 및 면역요법에서의 그의 용도
WO2019217753A1 (en) 2018-05-10 2019-11-14 Iovance Biotherapeutics, Inc. Processes for production of tumor infiltrating lymphocytes and uses of same in immunotherapy
TW202031273A (zh) 2018-08-31 2020-09-01 美商艾歐凡斯生物治療公司 抗ｐｄ－１抗體難治療性之非小細胞肺癌（ｎｓｃｌｃ）病患的治療
JP2022501038A (ja) 2018-09-20 2022-01-06 アイオバンス バイオセラピューティクス，インコーポレイテッド 凍結保存腫瘍サンプルからのｔｉｌの拡大培養
IL297931A (en) 2018-09-25 2023-01-01 Harpoon Therapeutics Inc dll3 binding proteins and methods of use
CA3117050A1 (en) 2018-10-29 2020-05-07 Mersana Therapeutics, Inc. Cysteine engineered antibody-drug conjugates with peptide-containing linkers
AU2019377422A1 (en) 2018-11-05 2021-05-27 Iovance Biotherapeutics, Inc. Treatment of NSCLC patients refractory for anti-PD-1 antibody
EP3877511A1 (en) 2018-11-05 2021-09-15 Iovance Biotherapeutics, Inc. Expansion of tils utilizing akt pathway inhibitors
JP2022506586A (ja) 2018-11-05 2022-01-17 アイオバンス バイオセラピューティクス，インコーポレイテッド 腫瘍浸潤リンパ球の産生のためのプロセスおよび免疫療法におけるその使用
SG11202104630PA (en) 2018-11-05 2021-06-29 Iovance Biotherapeutics Inc Selection of improved tumor reactive t-cells
JP2022514023A (ja) 2018-12-19 2022-02-09 アイオバンス バイオセラピューティクス，インコーポレイテッド 操作されたサイトカイン受容体対を使用して腫瘍浸潤リンパ球を拡大培養する方法及びその使用
MX2021011608A (es) 2019-03-29 2021-12-10 Myst Therapeutics Llc Metodos ex vivo para producir celulas t terapeuticas y composiciones y metodos afines.
US20220249559A1 (en) 2019-05-13 2022-08-11 Iovance Biotherapeutics, Inc. Methods and compositions for selecting tumor infiltrating lymphocytes and uses of the same in immunotherapy
KR20220016157A (ko) 2019-05-30 2022-02-08 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 세포 국재화 시그너쳐 및 조합 요법
CN114174538A (zh) 2019-05-30 2022-03-11 百时美施贵宝公司 适合于免疫肿瘤学疗法的多肿瘤基因特征
WO2020243568A1 (en) 2019-05-30 2020-12-03 Bristol-Myers Squibb Company Methods of identifying a subject suitable for an immuno-oncology (i-o) therapy
JP2022553389A (ja) 2019-10-25 2022-12-22 アイオバンス バイオセラピューティクス，インコーポレイテッド 腫瘍浸潤リンパ球の遺伝子編集及び免疫療法におけるその使用
CN115023270A (zh) 2019-11-27 2022-09-06 迈斯特治疗公司 使用调节剂产生肿瘤反应性t细胞组合物的方法
US20230220341A1 (en) 2019-12-11 2023-07-13 lovance Biotherapeutics, Inc. Processes for the production of tumor infiltrating lymphocytes (tils) and methods of using the same
CA3168337A1 (en) 2020-02-17 2021-08-26 Marie-Andree Forget Methods for expansion of tumor infiltrating lymphocytes and use thereof
CN115427438A (zh) 2020-02-27 2022-12-02 迈斯特治疗公司 肿瘤反应性t细胞的离体富集和扩增的方法及其相关组合物
JP2023524108A (ja) 2020-05-04 2023-06-08 アイオバンス バイオセラピューティクス，インコーポレイテッド 改良された腫瘍反応性ｔ細胞の選択
EP4146794A1 (en) 2020-05-04 2023-03-15 Iovance Biotherapeutics, Inc. Processes for production of tumor infiltrating lymphocytes and uses of the same in immunotherapy
US20230303700A1 (en) 2020-08-31 2023-09-28 Bristol-Myers Squibb Company Cell localization signature and immunotherapy
WO2022076606A1 (en) 2020-10-06 2022-04-14 Iovance Biotherapeutics, Inc. Treatment of nsclc patients with tumor infiltrating lymphocyte therapies
US20230372397A1 (en) 2020-10-06 2023-11-23 Iovance Biotherapeutics, Inc. Treatment of nsclc patients with tumor infiltrating lymphocyte therapies
WO2022120179A1 (en) 2020-12-03 2022-06-09 Bristol-Myers Squibb Company Multi-tumor gene signatures and uses thereof
TW202241468A (zh) 2020-12-11 2022-11-01 美商艾歐凡斯生物治療公司 用腫瘤浸潤性淋巴球療法與ｂｒａｆ抑制劑及／或ｍｅｋ抑制劑組合治療癌症患者
JP2023554395A (ja) 2020-12-17 2023-12-27 アイオバンス バイオセラピューティクス，インコーポレイテッド Ｃｔｌａ－４及びｐｄ－１阻害剤と併用した腫瘍浸潤リンパ球療法による治療
EP4262827A1 (en) 2020-12-17 2023-10-25 Iovance Biotherapeutics, Inc. Treatment of cancers with tumor infiltrating lymphocytes
EP4267172A1 (en) 2020-12-28 2023-11-01 Bristol-Myers Squibb Company Subcutaneous administration of pd1/pd-l1 antibodies
EP4267105A1 (en) 2020-12-28 2023-11-01 Bristol-Myers Squibb Company Antibody compositions and methods of use thereof
WO2022170219A1 (en) 2021-02-05 2022-08-11 Iovance Biotherapeutics, Inc. Adjuvant therapy for cancer
CN117279506A (zh) 2021-03-05 2023-12-22 艾欧凡斯生物治疗公司 肿瘤储存及细胞培养组合物
EP4314068A1 (en) 2021-04-02 2024-02-07 The Regents Of The University Of California Antibodies against cleaved cdcp1 and uses thereof
BR112023021665A2 (pt) 2021-04-19 2023-12-19 Iovance Biotherapeutics Inc Método para tratar um câncer, e, composição
CA3219148A1 (en) 2021-05-17 2022-11-24 Frederick G. Vogt Pd-1 gene-edited tumor infiltrating lymphocytes and uses of same in immunotherapy
TW202327631A (zh) 2021-07-28 2023-07-16 美商艾歐凡斯生物治療公司 利用腫瘤浸潤性淋巴球療法與ｋｒａｓ抑制劑組合治療癌症患者
CA3232700A1 (en) 2021-09-24 2023-03-30 Rafael CUBAS Expansion processes and agents for tumor infiltrating lymphocytes
CA3235824A1 (en) 2021-10-27 2023-05-04 Frederick G. Vogt Systems and methods for coordinating manufacturing of cells for patient-specific immunotherapy
AU2022388729A1 (en) 2021-11-10 2024-05-16 Iovance Biotherapeutics, Inc. Methods of expansion treatment utilizing cd8 tumor infiltrating lymphocytes
WO2023147486A1 (en) 2022-01-28 2023-08-03 Iovance Biotherapeutics, Inc. Tumor infiltrating lymphocytes engineered to express payloads
WO2023178329A1 (en) 2022-03-18 2023-09-21 Bristol-Myers Squibb Company Methods of isolating polypeptides
WO2023201369A1 (en) 2022-04-15 2023-10-19 Iovance Biotherapeutics, Inc. Til expansion processes using specific cytokine combinations and/or akti treatment
WO2023235847A1 (en) 2022-06-02 2023-12-07 Bristol-Myers Squibb Company Antibody compositions and methods of use thereof
WO2024030758A1 (en) 2022-08-01 2024-02-08 Iovance Biotherapeutics, Inc. Chimeric costimulatory receptors, chemokine receptors, and the use of same in cellular immunotherapies

Family Cites Families (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE3815472A1 (de) * 1988-05-06 1989-11-16 Centre Regional De Transfusion Monoklonaler antikoerper und seine verwendung
CA2109398A1 (en) 1992-10-30 1994-05-01 Alejandro A. Aruffo Extracellular matrix receptor ligands that modulate leukocyte function
CA2172165C (en) * 1993-09-16 2003-12-02 Byoung S. Kwon Human receptor h4-1bb
WO1996029348A1 (en) * 1995-03-23 1996-09-26 Indiana University Foundation Monoclonal antibody against human receptor protein 4-1bb and methods of its use for treatment of diseases
WO1996032495A1 (en) * 1995-04-08 1996-10-17 Lg Chemicals Ltd. Monoclonal antibody specific for human 4-1bb and cell line producing same
KR960035080U (ko) * 1995-04-25 1996-11-21 보일러용 연소 버너

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
ALDERSON M.R. et al., Molecular and Biological characterization of human 4-1BB and its Ligand, EUR. J. Immunol, 1994, 24(9), p.2219-2227. *

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2493873C1 (ru) * 2012-06-07 2013-09-27 Сергей Михайлович Юдин Инъекционный препарат для повышения спермопродукции у производителей сельскохозяйственных животных и петухов и способ его применения
WO2013184024A1 (ru) * 2012-06-07 2013-12-12 Yudin Sergej Mikhajlovich Препарат для повышения спермопродукции у производителей сельскохозяйственных животных и петухов и способ его применения
EA024936B1 (ru) * 2012-06-07 2016-11-30 Сергей Михайлович ЮДИН Препарат для повышения спермопродукции у производителей сельскохозяйственных животных и петухов и способ его применения

Also Published As

Publication number Publication date
KR100520339B1 (ko) 2005-10-12
KR20000049045A (ko) 2000-07-25
NO991676D0 (no) 1999-04-09
WO1998016249A1 (en) 1998-04-23
PL188749B1 (pl) 2005-04-29
BR9712278A (pt) 1999-08-31
CN1232402A (zh) 1999-10-20
CA2268340A1 (en) 1998-04-23
JP2001502325A (ja) 2001-02-20
NO991676L (no) 1999-04-09
AU738981B2 (en) 2001-10-04
IL129138A0 (en) 2000-02-17
EP0948353A1 (en) 1999-10-13
HUP9904697A3 (en) 2001-06-28
NZ334691A (en) 2000-12-22
HUP9904697A2 (hu) 2000-08-28
AU4747097A (en) 1998-05-11
US6210669B1 (en) 2001-04-03
PL332699A1 (en) 1999-09-27
EP0948353A4 (ru) 1999-10-13

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RU2192281C2 (ru) Способы и композиции для иммуномодуляции
KR100912994B1 (ko) Ｎｋｇ２ｄ의 조절
EP0724456B1 (en) Antibodies to cd40
JP5394916B2 (ja) Ｎｋｇ２ｄの調節方法
KR20040036684A (ko) 치료용 결합 분자
EP1664122B1 (en) Therapeutic humanised antibodies against cd45 isoforms
EP0742721B1 (en) Methods of prolonged suppression of humoral immunity
CA2128151A1 (en) Receptors of interleukin-12 and antibodies
KR100204733B1 (ko) 인체 4-1비비 분자에 특이성이 있고 면역억제 효과를 갖는 모노클로날 항체
WO2008014035A2 (en) Modulation of nkg2d and method for treating or preventing solid organ allograft rejection
US20020071839A1 (en) Use of a combination of agents that modulate B7 activity in inhibiting intestinal allograft rejection
MXPA99003283A (en) Methods and compositions for immunomodulation
CZ124699A3 (cs) Protilátka antí-4-ΙΒΒ