WO2013184024A1 - Препарат для повышения спермопродукции у производителей сельскохозяйственных животных и петухов и способ его применения - Google Patents

Препарат для повышения спермопродукции у производителей сельскохозяйственных животных и петухов и способ его применения Download PDF

Info

Publication number
WO2013184024A1
WO2013184024A1 PCT/RU2012/000912 RU2012000912W WO2013184024A1 WO 2013184024 A1 WO2013184024 A1 WO 2013184024A1 RU 2012000912 W RU2012000912 W RU 2012000912W WO 2013184024 A1 WO2013184024 A1 WO 2013184024A1
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
amino acid
roosters
sperm
somatostatin
drug
Prior art date
Application number
PCT/RU2012/000912
Other languages
English (en)
French (fr)
Inventor
Сергей Михайлович ЮДИН
Владимир Сергеевич ЮДИН
Станислав Васильевич СОВЕТКИН
Геннадий Владимирович ЕСКИН
Владимир Глебович ЛУНИН
Original Assignee
Yudin Sergej Mikhajlovich
Yudin Vladimir Sergeevich
Sovetkin Stanislav Vasil Evich
Eskin Gennadij Vladimirovich
Lunin Vladimir Glebovich
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Yudin Sergej Mikhajlovich, Yudin Vladimir Sergeevich, Sovetkin Stanislav Vasil Evich, Eskin Gennadij Vladimirovich, Lunin Vladimir Glebovich filed Critical Yudin Sergej Mikhajlovich
Priority to EA201400370A priority Critical patent/EA024936B1/ru
Publication of WO2013184024A1 publication Critical patent/WO2013184024A1/ru

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/22—Hormones
    • A61K38/31—Somatostatins
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
    • A61P15/08—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives for gonadal disorders or for enhancing fertility, e.g. inducers of ovulation or of spermatogenesis

Definitions

  • the invention relates to veterinary medicine, and in particular to a preparation for increasing sperm production in producers of farm animals and roosters and a method for its use.
  • the invention is intended to increase the reproductive ability of producers of farm animals and roosters with a view to their more efficient use by increasing the volume of ejaculate with a significant decrease in sperm marriage by biological indicators (sperm motility, number of living sperm and their morphological usefulness), which ultimately increases the profitability of artificial insemination animals.
  • biological indicators sperm motility, number of living sperm and their morphological usefulness
  • Modern veterinary science solves the problem of increasing the reproductive abilities of producers of farm animals and poultry by using biologically active preparations - vitamins, macro-micronutrients, herbal preparations, and also using physiological methods - dosed direct contact of male producers with sexually mature female animals in a hunting state.
  • Rhodiola rosea extracts Chemicals are expensive and do not always guarantee a positive effect. From the literature data, the stimulating and adaptogenic effect of Rhodiola rosea extracts is known. When feeding to the boar-producers for 60 days a preparation from the dried roots of Rhodiola rosea, the authors (A.G. Narizhny, A.Ch. Dzhamaldinov, Veterinary Medicine, N ° 10, 2003) found an increase in the volume of ejaculate by 7.9-13.8% , while maintaining at a control level the concentration of sperm. At the end of feeding, the biological indicators of sperm returned to their original level.
  • the stimulating effect on sperm production of bulls is provided by the preparation based on inactivated biomass of halobacteria Halobacterium halobium containing amino acids, lipids, water and fat-soluble vitamins (G.V. Eskin, N.A. Kombarova, R.L. Kornilin, Problems of biology of productive animals N ° 4, 201 1).
  • the authors noted a decrease in the number of ejaculate rejected, an improvement in the quality of the native seed, and an increase in the survival of cryopreserved sperm after thawing for 5 hours outside the body at a temperature of 37 ° C. The effect persisted for 30 days after the end of feeding the drug; subsequently, the sperm production indices returned to the level of the preliminary period.
  • Another method of increasing sperm production of producers of farm animals and poultry is based on increasing the concentration of endogenous growth hormone in the body due to the induction of the synthesis of autosomatostatin antibodies. This leads to a decrease in the concentration of endogenous somatostatin and an increase in the somatotropin content, which, in turn, has a stimulating effect on the growth and proliferation of animal sex gland cells.
  • Somatostatin is a biologically active tetradeapeptide produced in the hypothalamus and gastrointestinal tract of animals.
  • a substance subsequently defined as somatostatin, was discovered in 1968 by Kryulik.
  • a substance was introduced from the hypothalamus of animals, which is a low molecular weight peptide with the ability to regulate the concentration of growth hormone in animals.
  • Somatostatin-14 has a strong inhibitory effect on a number of hormones (somatotropin, thyroid-stimulating hormone (TSH), insulin, glucagon, gastrin, pepsin), initiates inhibition of the secretion of gastric enzymes, pancreas, small intestine, slows down the motility of the gastrointestinal tract and its evacuation content.
  • hormones somatotropin, thyroid-stimulating hormone (TSH), insulin, glucagon, gastrin, pepsin
  • the somatostatin immunocorrection method is devoid of many of the disadvantages that arise when using anabolic hormones or recombinant somatotropin.
  • the mechanism of action is based on the temporary binding of endogenous somatostatin-14 to specific antibodies and an increase in the concentration of endogenous somatotropic hormone within physiological limits.
  • widespread use of the method of active immunization of animals against endogenous somatostatin-14 for a long time was impossible, due to its high cost, since the main way to obtain the peptide was chemical synthesis, which economically did not allow to implement this approach in practice.
  • the design consists of a water-insoluble carrier protein (a fragment of a bacterial chloramphenicolacetyltransferase without 10 C-terminal amino acids), a tetrameric spacer and a C-terminal somatostatin-14.
  • the molecular weight of the chimeric protein is 28 kDa.
  • This chimeric protein is expressed by Escherichia coli strain B-6519 transformed with pC (Sp) 4 S plasmid. The strain was deposited in the All-Russian Collection of Industrial Microorganisms (VKPM) under the number B-6519.
  • a chimeric protein with exposed somatostatin is a water-insoluble enzymatically inactive chloramphenicol acetyl transferase without 10 C-terminal amino acid residues, to which the somatostatin-14 amino acid sequence is attached via a spacer sequence.
  • the method of antisomatostatin immunization of animals using the specified chimeric somatostatin-containing protein is used in industrial animal husbandry (RU 2034457 C1, IPC A01K 67 / 02.1995).
  • the objective of the invention is the use of a chimeric somatostatin-containing protein to increase sperm production in manufacturers of farm animals and cocks in the form of an injectable preparation with low reactivity of the adjuvant, allowing injections without painful sensations to farm animals and cocks.
  • Sp amino acid spacer
  • the mechanism of action of the drug is based on the temporary blocking of the activity of endogenous somatostatin farm animals and roosters, increasing the concentration of growth hormone and enhancing spermatogenesis activity.
  • beeswax in the final formulation of the drug is justified by the need to achieve uniform distribution of the chimeric protein in the oil volume, to reduce the sedimentation rate of the chimeric protein, which is especially important when injecting animals with automatic syringes.
  • the protein preparation obtained and purified from impurities is dissolved in a buffer of 0.2 M Tris-HCL pH 8.0, containing 6 M guanidine chloride and 2 M MEDTA.
  • a 50-fold molar excess of ⁇ -mercaptoethaiol in based on the number of SS groups of the chimeric protein and the solution is quickly diluted with a 10-fold buffer volume without guanidine chloride.
  • the resulting hybrid protein precipitate is separated by centrifugation for 15 minutes at 12000 g and a temperature of 4 ° C and freeze-dried for subsequent storage or preparation of an oil suspension.
  • boars producing large white and Duroc breeds were injected twice with an interval of 14 days at the rate of 50-200 micrograms of recombinant protein per 1 kg of live body weight.
  • boars-producers before and after the use of the preparation, semen was taken in accordance with the established procedure and the volume of ejaculate, the concentration of sperm in the ejaculate and the number of sperm doses were determined.
  • the indicators of sperm production of boars when using the drug at a dose of 50 ⁇ g per 1 kg of live body weight are shown in table 1.
  • the drug had a positive effect on sperm production of boars.
  • the boar ejaculate volume increased by 5.8-13.8%, 30-60 days after the second injection, the ejaculate volume increased by 23.6-25.4%, the concentration of sperm in the ejaculate also increased by 12.1-14.1%, which affected the increase in the number of sperm doses received by 38.3-42.6%. Close indicators of sperm production were found with the use of the drug and in boars of the Duroc breed.
  • the drug at a dose of 100 ⁇ g per 1 kg of live body weight also had a positive effect on sperm production of boars.
  • 30-60 days after the second injection of the drug the volume of boar ejaculate increased by 18.9-16.6%, the concentration of sperm in the ejaculate increased by 12.2-13.8%, which influenced the increase in the number of received sperm doses by 34, 8-38.6%.
  • Close indicators of sperm production when using the drug were also found in boars of the Duroc breed.
  • the drug at a dose of 200 ⁇ g per 1 kg of live body weight also had a positive effect on sperm production of boars.
  • 30-60 days after the second injection of the drug the volume of boar ejaculate increased by 16.5-15.9%, the concentration of sperm in the ejaculate also increased by 1.1-1.9%, which affected the increase in the number of sperm doses received 29 , 1-37.1%. Close indicators of sperm production when using the drug were also found in boars of the Duroc breed. Table 3
  • semen was taken from the manufacturing bulls and the volume of ejaculate, the concentration of spermatozoa in the ejaculate, the number of sperm doses received and the percentage of sperm rejects were determined by biological indicators of sperm quality (number of sperm with rectilinear movement, survival).
  • Indicators of sperm production of bulls-producers when using the drug in doses of 50, 100 and 200 ⁇ g per 1 kg of live body weight are given in tables 4 - 6.
  • the experimental results indicate the stimulation of sperm production in bulls as a result of the use of the drug.
  • the qualitative indicators of the taken sperm improved (sperm activity, their survival after 5 hours).
  • the result of the use of the drug in manufacturing bulls at a dose of 50 ⁇ g per 1 kg of live body weight is an increase in the number of sperm doses received - by 23.4-34.7% and a decrease in the percentage of sperm rejects according to biological indicators.
  • the qualitative indicators of the taken sperm improved (sperm activity, their survival after 5 hours).
  • the result of the use of the drug in bulls at a dose of 100 ⁇ g per 1 kg of live body weight is an increase in the number of sperm doses received - by 22.1-34.5% and a decrease in the percentage of sperm rejects according to biological indicators.
  • the qualitative indicators of the taken sperm improved (sperm activity, their survival after 5 hours).
  • the result of the use of a drug at a dose of 200 ⁇ g per 1 kg of body weight on bulls is an increase in the number of sperm doses received - by 20.5–34.6% and a decrease in the percentage of sperm rejects according to biological indicators.
  • An oil suspension of the drug was administered to animals subcutaneously at a dose of 50-200 ⁇ g of protein per 1 kg of body weight twice with an interval of 14 days between injections (tables 7, 8, 9).
  • results of the experiments presented in table 7 indicate the stimulation of sperm production in ram-producers as a result of the use of the drug. So the volume of ejaculate taken from rams 90 days after the first injection increased by 18.0%. During of the controlled period, the qualitative indicators of the taken sperm (motility, sperm survival) improved.
  • the result of the use of the drug in producing sheep is an increase in the number of sperm doses received from one animal by 28.1% and a decrease in the percentage of sperm rejects according to biological indicators.
  • Table 8 shows the indicators of sperm production of ram-producers when using the drug at a dose of 100 ⁇ g per 1 kg of live body weight.
  • results of the experiments presented in table 8 indicate the stimulation of sperm production in rams as a result of the use of the drug at a dose of 100 ⁇ g per 1 kg of live body weight. So the volume of ejaculate taken from rams 90 days after the first injection increased by 13.3%. During the controlled period, the qualitative indicators of the taken sperm (motility, sperm survival) improved.
  • the result of the use of the drug in sheep-producers is an increase of 90 days after the first injection of the drug the number of sperm doses received from one animal by 26.6% and a decrease in the percentage of sperm rejects according to biological indicators.
  • Table 9 shows the indicators of sperm production of ram-producers when using the drug at a dose of 200 ⁇ g per 1 kg of live body weight.
  • results of the experiments presented in table 9 indicate the stimulation of sperm production in rams as a result of the use of the drug at a dose of 100 ⁇ g per 1 kg of live body weight. So the volume of ejaculate taken from rams 90 days after the first injection increased by 12.1%. During the controlled period, the qualitative indicators of the taken sperm (motility, sperm survival) improved.
  • the result of the use of the drug in sheep-producers is an increase in 90 days after the first injection of the drug the number of sperm doses received from one animal by 25.8% and a decrease in the percentage of sperm rejects according to biological indicators.
  • a study of the effect of the drug on the productive qualities of roosters - producers was carried out at poultry enterprises.
  • the suspension of the drug was administered to the birds subcutaneously at a dose of 50-200 ⁇ g of protein per 1 kg of body weight twice with an interval of 14 days between injections.
  • Indicators of sperm production in roosters when using the drug at a dose of 50 ⁇ g per 1 kg of live body weight are shown in table 10.
  • the experimental results indicate the stimulation of sperm production in roosters - producers as a result of application the drug. So the volume of ejaculate taken from roosters 90 days after the first injection increased by 42.3%. During the controlled period, the qualitative indicators of sperm taken (sperm survival) improved.
  • the result of the use of the drug on roosters is an increase in the number of sperm doses received by 41.6% and a decrease in the percentage of sperm rejects according to biological indicators.
  • Indicators of sperm production in roosters when using the drug at a dose of 100 ⁇ g per 1 kg of live body weight are shown in table 1 1.
  • the experimental results indicate the stimulation of sperm production in roosters - producers as a result of the use of the drug. So the volume of ejaculate taken from roosters 90 days after the first injection increased by 44.9%. During the controlled period, the qualitative indicators of sperm taken (sperm survival) improved.
  • the result of the use of the drug on roosters manufacturers is an increase in the number of received sperm doses of NAZ, 3% and a decrease in the percentage of sperm rejects on biological indicators.
  • the experimental results indicate the stimulation of sperm production in roosters - producers as a result of the use of the drug. So, the volume of ejaculate taken from the males 90 days after the first injection increased by 35.3%. During the controlled period, the qualitative indicators of the taken sperm (sperm survival) improved.
  • the result of the use of the drug on roosters is an increase in the number of sperm doses received by 25.0% and a decrease in the percentage of sperm rejects on biological indicators.

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Reproductive Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Gynecology & Obstetrics (AREA)
  • Pregnancy & Childbirth (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Abstract

Изобретение относится к ветеринарии. Задача изобретения заключается в использовании химерного соматостатинсодержащего белка для повышения спермопродукции у производителей сельскохозяйственных животных и петухов в виде препарата для инъекций с низкой реактогенн остью адъюванта, позволяющего осуществлять инъекции без болезненных ощущений производителям сельскохозяйственных животных и петухам. Препарат для повышения спермопродукции у производителей сельскохозяйственных животных и петухов в виде суспензии химерного белка с водонерастворимой ферментативно неактивной хлорамфениколацетилтраснсферазой без 10 С-терминальных аминокислот, аминокислотным спейсером (Sp)n, где n=1, 2, 4, 8 и соматостатином-14 с последовательностью аминокислот AGCFWKTFTSC в рафинированном растительном масле с добавлением пчелиного воска. Способ повышения спермопродукции у производителей сельскохозяйственных животных и петухов предусматривает двукратную подкожную инъекцию с интервалом в 14 суток препарата в виде суспензии химерного белка с водонерастворимой ферментативно неактивной хлорамфениколацетилтраснсферазой без 10 С-терминальных аминокислот, аминокислотным спейсером (Sp)n, где n=1, 2, 4, 8 и соматостатином-14 с последовательностью аминокислот AGCFWKTFTSC в рафинированном растительном масле с добавлением пчелиного воска петухам или сельскохозяйственным животным по достижении физиологической зрелости из расчета 50-200 мкг белка на 1 кг массы тела.

Description

Препарат для повышения спермопродукции
у производителей сельскохозяйственных животных
и петухов и способ его применения
Область применения
Изобретение относится к ветеринарии, а конкретно к препарату для повышения спермопродукции у производителей сельскохозяйственных животных и петухов и способу его применения. Изобретение предназначено для повышения репродуктивной способности производителей сельскохозяйственных животных и петухов с целью их более эффективного использования за счет повышения объем эякулята при значительном снижении брака спермы по биологическим показателям (подвижность сперматозоидов, количество живых сперматозоидов и их морфологическая полноценность), что в итоге повышает рентабельность искусственного осеменения животных. Известный уровень
Современная ветеринарная наука решает проблему повышения репродуктивных способностей производителей сельскохозяйственных животных и птицы, применяя биологически активные препараты - витамины, макро-микроэлементы, растительные препараты, а также используя физиологические методы - дозированный прямой контакт самцов- производителей с половозрелыми самками животных в состоянии охоты.
Химические препараты дорогостоящие и не всегда гарантируют положительный эффект. Из данных литературы известен стимулирующий и адаптогенный эффект экстрактов родиолы розовой. При скармливании хрякам-производителям в течение 60 дней препарата из высушенных корней родиолы розовой авторы (А.Г. Нарижный, А.Ч.Джамалдинов, Ветеринария, N°10, 2003) обнаружили повышение объема эякулята на 7,9-13,8%, с сохранением на контрольном уровне концентрации сперматозоидов. По окончании подкормки биологические показатели спермы возвращались к первоначальному уровню. Стимулирующим эффектом на спермопродукцию быков- производителей оказывает препарат на основе инактивированной биомассы галобактерий Halobacterium halobium, содержащий аминокислоты, липиды, водо- и жирорастворимые витамины (Г.В. Ескин, Н.А. Комбарова, Р.Л.Корнилин, Проблемы биологии продуктивных животных N°4, 201 1). При скармливании быкам-производителям препарата на основе галобактерий («Баксин - вет») авторы отмечали сокращение количества выбракованных эякулятов, улучшение качества нативного семени, повышение выживаемости криоконсервированной спермы после оттаивания в течение 5 часов вне организма при температуре 37°С. Эффект сохранялся в течение 30 суток после окончания скармливания препарата, в последующем показатели спермопродукции возвращались на уровень предварительного периода.
В исследованиях С.Околышева, Н.Карпова, Р.Корнилина показано стимулирующее влияние препарата «Баксин-вет» на продуктивные характеристики хряков-производителей. Ежедневное применение хрякам- производителям препарата «Баксин-вет» в течение трех недель в дозе 5 и 10 мг на 1 кг живой массы при содержании хряков даже на хозяйственном рационе приводило к увеличению объема эякулята и количества сперматозоидов в сперме. (С.Околышев, Н.Карпова, Р.Корнилин. «Влияние препарата «Баксин-вет» на спермопродукцию хряков и многоплодие свиноматок в условиях интенсивного производства свинины», «Свиноводство» >, 2009).
В работе З.П.Комовой «Повышение воспроизводительной функции хряков с использованием биологически активных веществ» (диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук, ВНИИЖ, Дубровицы, 2001г.) показано, что подкормка хряков - производителей биологически активными препаратами «СГОЛ» и «Стимульгин» оказывает положительное влияние на проявление рефлексов совокупления и эрекции у производителей, повышает объем эякулята и содержание спермиев в эякуляте. В исследованиях С.А.Холева установлено положительное влияние селеносодержащего препарата «Деполен» для коррекции воспроизводительной функции быков - производителей («Применение селеносодержащего препарата «Деполен» для коррекции воспроизводительной функции быков - производителей», Воронеж, 2000).
В исследованиях, представленных в международной заявке WO 03/064619 (WO 03/064619 А2, МПК А61К 38/00, 20036), повышение сперматогенеза обеспечивается за счет активации фактора VEGF, индуцирующего увеличение васкуляризации ткани половых желез.
Иной метод увеличение спермопродукции производителей сельскохозяйственных животных и птицы основан на повышении концентрации в организме эндогенного соматотропина за счет индукции синтеза аутосоматостатиновых антител. Это приводит к снижению концентрации эндогенного соматостатина и повышению содержания соматотропина, что, в свою очередь, оказывает стимулирующее влияние на рост и пролиферацию клеток половых желез животных.
Соматостатин - биологически активный тетрадекапептид, вырабатывающийся в гипоталамусе и желудочно-кишечном тракте животных. Впервые биологическая активность вещества, впоследствии определенная как соматостатиновая, была обнаружена в 1968 году Крюликом. В последующем, из гипоталамуса животных было вьщелено вещество, представляющее собой низкомолекулярный пептид, обладающий способностью регулировать концентрацию гормона роста в организме животных.
Соматостатин- 14 оказывает сильное ингибирующее действие на ряд гормонов (соматотропин, тиреотропный гормон (ТТГ), инсулин, глюкагон, гастрин, пепсин), инициирует угнетение секреции желудочных ферментов, поджелудочной железы, тонкого отдела кишечника, замедление моторики желудочно-кишечного тракта и эвакуации его содержимого.
Изучение аминокислотного состава соматостатина у различных представителей животного царства показало достаточную степень гомологии пептидов, синтезируемых живыми организмами, находящимися на различных ступенях эволюционного развития. Аминокислотная последовательность соматостатина-14 идентична у живых организмов - от рыб до млекопитающих.
Широкий спектр физиологического действия соматостатина-14 и отсутствие, в отличие от гормона роста, видовой специфичности для млекопитающих явились основанием для изучения возможности его использования с целью оптимизации выращивания и откорма, повышения молочной продуктивности животных.
В США, Канаде, Великобритании более тридцати лет назад были выполнены отдельные работы по активной иммунизации животных (крупный рогатый скот, овцы, свиньи) против соматостатина-14 (Spenser et all). Авторы исследований отмечают, что по динамике увеличения массы тела в одинаковых условиях содержания иммунизированные животные превосходили контрольных особей на 20-30%, при этом в крови обнаруживалось повышенное содержание эндогенного соматотропного гормона. В процессе исследований было обнаружено сокращение сроков откорма, повышение надоев молока и, как следствие этого, снижение непроизводительных расходов на единицу получаемой животноводческой продукции. В дальнейшем были проведены эксперименты с разными видами животных. Изучали влияние пассивной и активной иммунизации на уровень гормонов, динамику увеличения массы тела животных и другие параметры. Введение антисоматостатиновой сыворотки крысам приводило к повышению концентрации эндогенного гормона роста, пассивная антисоматостатиновая иммунизация овец обусловливала увеличение времени нахождения пищи в желудочно-кишечном тракте, повышение активности желудочных ферментов. Активная иммунизация животных белками, полученными в результате химического связывания синтетического соматостатина с белками-носителями, приводила к повышению уровней концентрации гормона роста, инсулинового ростового фактора, гастрина и других функционально связанных с соматостатином биологически активных соединений. Результатом активной антисоматостатиновой иммунизации являлось увеличение массы тела животных на 8-17%.
Метод соматостатиновой иммунокоррекции лишен многих недостатков, возникающих при использовании анаболических гормонов или рекомбинантного соматотропина. Механизм действия основан на временном связывании эндогенного соматостатина-14 специфическими антителами и возрастании концентрации эндогенного соматотропного гормона в физиологических пределах. Однако широкое применение метода активной иммунизации животных против эндогенного соматостатина-14 длительное время было невозможно, вследствие его высокой стоимости, поскольку основным путем получения пептида являлся химический синтез, что экономически не позволяло реализовать данный подход на практике. Поскольку небольшие размеры соматостатина-14 не позволяют его прямой микробный синтез с помощью технологии рекомбинантной ДНК, описано несколько способов его синтеза в форме химерных белков с последующим выделением целевого продукта, не давших удовлетворительных результатов. Основным недостатком упомянутых методов является крайне низкая иммуногенность полученных препаратов в отношении соматостатина, обусловленная его маскированием в молекуле химерного белка, вследствие чего данные методы получения химерных белков не нашли широкого практического использования (Itakura R. Et al., 1977 Expression in E. Coli of a chemically synthesized gene of hormone somatostatin, Science, 1986, 1056-1063; Шишкина A.A. и др. Синтез фрагмента генов соматостатина. Химия природных соединений, 1988, -Ч«6, с.614-615).
Известен способ конструирования химерных соматостатинсодержащих белков с применением аминокислотного спейсера, содержащего аргинин и пролин, обусловливающего локализацию соматостатина на поверхности белка-носителя и, тем самым, высокую иммуногенность препарата (RU 2031 121 С1, МПК C12N 15/12, 1995). Конструкция состоит из водонерастворимого белка - носителя (фрагмента бактериальной хлорамфениколацетилтрансферазы без 10 С-концевых аминокислот), тетрамерного спейсера и С-концевого соматостатина-14. Молекулярный вес химерного белка составляет 28 кДа. Данный химерный белок экспрессируется штаммом кишечной палочки В-6519, трансформированным плазмидой pC(Sp)4 S. Штамм депонирован во Всероссийской коллекции промышленных микроорганизмов (ВКПМ) под номером В-6519. Химерный белок с экспонированным соматостатином представляет собой водонерастворимую ферментативно неактивную хлорамфениколацетилтрансферазу без 10 С-концевых аминокислотных остатков, к которой через спейсерную последовательность присоединена аминокислотная последовательность соматостатина-14. Метод антисоматостатиновой иммунизации животных с использованием указанного химерного соматостатинсодержащего белка используется в промышленном животноводстве (RU 2034457 С1, МПК А01К 67/02,1995).
Известно, когда для приготовления готовой лекарственной формы препарата для повышения продуктивности сельскохозяйственных животных, содержащего эффективное количество химерного белка с водонерастворимой ферментативно неактивной хлорамфениколацетилтраснсферазой без 10 С-терминальных аминокислот, аминокислотным спейсером (Sp)n, где п= 1,2,4,8 и последовательностью соматостатина-14 с последовательностью аминокислот AGCFWKTFTSC использовали в качестве адъюванта неполный адьювант Фрейнда (RU 2034457 С1, МПК А01К 67/02, 1995). Однако высокая реактогенность адъюванта, наличие болезненных ощущений у животных при его введении привели к необходимости поиска других адъювантных систем.
Известно использование препарата, содержащего эффективное количество химерного белка с водонерастворимой ферментативно неактивной хлорамфениколацетилтраснсферазой без 10 С-терминальных аминокислот, аминокислотным спейсером (Sp)n, где п= 1 ,2,4,8 и последовательностью соматостатина-14 с последовательностью аминокислот AGCFWKTFTSC в липосомалыюй форме (RU 2337708 С1, МПК А61К 39/385, 2006) в данном случае неприемлемо вследствие незначительной концентрации действующего вещества в удельном объеме С< 1 * 10" г/мл). Для животного массой тела более 500 кг потребовалось бы введение около двадцати миллилитров препарата, что является на практике весьма проблематичным обстоятельством.
Сущность изобретения
Задача изобретения заключается в использовании химерного соматостатинсодержащего белка для повышения спермопродукции у производителей сельскохозяйственных животных и петухов в виде препарата для инъекций с низкой реактогенностью адъюванта, позволяющего осуществлять инъекции без болезненных ощущений производителям сельскохозяйственных животных и петухам.
Решение этой задачи обеспечивает препарат для повышения спермопродукции у производителей сельскохозяйственных животных и петухов в виде суспензии химерного белка с водонерастворимой ферментативно неактивной хлорамфениколацетилтраснсферазой без 10 С- терминальных аминокислот, аминокислотным спейсером (Sp)n, где п= 1,2,4,8 и соматостатином-14 с последовательностью аминокислот AGCFWKTFTSC в рафинированном растительном масле с добавлением пчелиного воска.
В предпочтительном варианте осуществления изобретения препарат содержит химерный белок с водонерастворимой ферментативно неактивной хлорамфениколацетилтраснсферазой без 10 С-терминальных аминокислот, аминокислотным спейсером (Sp)n, где п= 1,2,4,8 и соматостатином-14 с последовательностью аминокислот AGCFWKTFTSC из расчета 250-1000 мг указанного химерного белка на 100 мл рафинированного растительного масла, включающего 0,9-1,1 мас.% пчелиного воска.
Использование в качестве адъюванта для такого рода препарата растительного масла, полностью метаболизирующегося в организме животного, позволяет в значительной степени снизить уровень реактогенности адъюванта и создает необходимые условия для постепенного поступления действующего вещества в организм животного («депо» препарата). Могут использоваться подсолнечное, хлопковое и арахисовое масла. Механизм действия препарата основан на временном блокировании активности эндогенного соматостатина сельскохозяйственных животных и петухов, повышении концентрации соматотропного гормона и усилении активности сперматогенеза. Наличие пчелиного воска в конечной прописи препарата обосновано необходимостью достижения равномерности распределения химерного белка в объеме масла, снижения скорости седиментации химерного белка, что особенно важно при проведении инъекций животным с помощью шприцев-автоматов.
Способ повышения спермопродукции у производителей сельскохозяйственных животных и петухов предусматривает двукратную подкожную инъекцию с интервалом в 14 суток препарата в виде суспензии химерного белка с водонерастворимой ферментативно неактивной хлорамфениколацетилтраснсферазой без 10 С-терминальных аминокислот, аминокислотным спейсером (Sp)n, где п= 1,2,4,8 и соматостатином-14 с последовательностью аминокислот AGCFWKTFTSC в рафинированном растительном масле с добавлением пчелиного воска петухам или сельскохозяйственным животным по достижении физиологической зрелости из расчета 50-200 мкг белка на 1 кг живой массы тела.
В предпочтительном варианте осуществления используют препарат в виде суспензии химерного белка с водонерастворимой ферментативно неактивной хлорамфениколацетилтраснсферазой без 10 С-терминальных аминокислот, аминокислотным спейсером (Sp)n, где п= 1,2,4,8 и соматостатином-14 с последовательностью аминокислот AGCFWKTFTSC в количестве из расчета 250-1000 мг указанного химерного белка на 100 мл рафинированного растительного масла, включающего 0,9-1,1 мас.% пчелиного воска.
Осуществление изобретения и эффективность препарата
Возможность осуществления изобретения поясняется примером получения препарата для повышения сперматогенеза у производителей сельскохозяйственных животных и петухов.
Полученный и очищенный от примесей препарат белка растворяют в буфере 0,2 М трис- HCL рН 8,0, содержащем 6М гуанидинхлорид и 2М МЭДТА. Добавляют 50-кратный молярный избыток β-меркаптоэтаиола в расчете на количество S-S групп химерного белка и раствор быстро разбавляют 10-кратным объемом буфера без гуанидинхлорида. Образовавшийся преципитат гибридного белка отделяют центрифугированием в течение 15 минут при 12000 g и температуре 4 °С и лиофильно высушивают для последующего хранения или приготовления масляной суспензии.
Для приготовления готовой формы препарата используют рафинированное растительное масло и пчелиный воск. В растительное масло добавляют пчелиный воск из расчета 0,9%. Масло нагревают до температуры 45-50 °С, перемешивая, достигают полного растворения воска. Затем масло с воском охлаждают до температуры 35-37 °С и добавляют навеску сухого белка из расчета 250 мг на 100 мл адъюванта. Суспензию гомогенизируют в течение 1-2 минут и передают на разливочное оборудование. Готовую эмульсию препарата расфасовывают в тару (флаконы стеклянные и шприцы одноразовые). При иной концентрации компонентов препарат приготавливается аналогично. Предпочтительными являются следующие содержания компонентов на 100 мл рафинированного растительного масла: 250 мг. химерного белка - 0,9 мас.% пчелиного воска; 500 мг. химерного белка - 1,0 мас.% пчелиного воска; 1000 мг. химерного белка—1,1 мас.% пчелиного воска.
Эффективность применения препарата для повышения сперматогенеза у производителей сельскохозяйственных животных и петухов, находящихся в стадии физиологической зрелости, иллюстрируется следующими примерами.
В условиях промышленного свиноводческого комплекса хрякам- производителям крупной белой породы и породы дюрок был введен препарата двукратно с интервалом 14 суток из расчета 50-200 мкг рекомбинантного белка на 1 кг живой массы тела.
У хряков-производителей до и после применения препарата установленным порядком осуществляли взятие спермы и определяли объём эякулята, концентрацию сперматозоидов в эякуляте и количество спермодоз. Показатели спермопродукции хряков при применении препарата в дозе 50 мкг на 1 кг живой массы тела приведены в таблице 1.
Таблица 1
Figure imgf000012_0001
Препарат оказал положительное влияние на спермопродукцию хряков. После первой инъекции препарата животным крупной белой породы объём эякулята хряков увеличился на 5,8-13,8%, через 30 -60 дней после второй инъекции объем эякулята вырос на 23,6-25,4%, так же повысилась концентрация сперматозоидов в эякуляте на 12,1-14,1%, что повлияло на увеличение количества полученных спермодоз на 38,3-42,6%. Близкие показатели спермопродукции были обнаружены при применении препарата и у хряков породы дюрок.
Показатели спермопродукции хряков при применении препарата в дозе 100 мкг на 1 кг живой массы тела приведены в таблице 2.
Таблица 2
Figure imgf000013_0001
Продолжение Таблицы 2
Figure imgf000014_0001
Препарат в дозе 100 мкг на 1 кг живой массы тела также оказал положительное влияние на спермопродукцию хряков. Через 30-60 дней после второй инъекции препарата объём эякулята хряков увеличился на 18,9-16,6%, так же повысилась концентрация сперматозоидов в эякуляте на 12,2-13,8%, что повлияло на увеличение количества полученных спермодоз на 34,8-38,6%. Близкие показатели спермопродукции при применении препарата были обнаружены и у хряков породы дюрок.
Показатели спермопродукции хряков при применении препарата в дозе 200 мкг на 1 кг живой массы тела приведены в таблице 3.
Препарат в дозе 200 мкг на 1 кг живой массы тела также оказал положительное влияние на спермопродукцию хряков. Через 30-60 дней после второй инъекции препарата объём эякулята хряков увеличился на 16,5-15,9%, так же повысилась концентрация сперматозоидов в эякуляте на 1 1,1-12,9%, что повлияло на увеличение количества полученных спермодоз па 29,1-37,1%. Близкие показатели спермопродукции при применении препарата были обнаружены и у хряков породы дюрок. Таблица 3
Figure imgf000015_0001
одного животного
Изучение влияния препарата на спермопродукцию быков - производителей проводили в организациях по искусственному осеменению сельскохозяйственных животных. Масляную суспензию препарата животным вводили подкожно в дозе 50-200 мкг белка на 1 кг массы тела двукратно с интервалом 14 суток между инъекциями.
У быков-производителей до и после применения препарата установленным порядком осуществляли взятие спермы и определяли объём эякулята, концентрацию сперматозоидов в эякуляте, количество полученных спермодоз и процент брака спермы по биологическим показателям качества спермы (количество сперматозоидов с прямолинейно-поступательным движением, выживаемость).
Показатели спермопродукции быков - производителей при применении препарата в дозах 50, 100 и 200 мкг на 1 кг живой массы тела приведены в таблицах 4 - 6.
Результаты экспериментов свидетельствуют о стимуляции спермопродукции у быков-производителей в результате применения препарата.
Так объем эякулята, взятый у быков голштинской породы через 90 суток после первой инъекции препарата в дозе 50 мкг на 1 кг живой массы тела (таблица 4) увеличился на 28,7%, у производителей айрширской породы этот показатель возрос на 22,2%.
В течение контролируемого периода улучшились качественные показатели взятой спермы (активность сперматозоидов, их выживаемость через 5 часов).
Итогом применения препарата на быках-производителях в дозе 50 мкг на 1 кг живой массы тела является увеличение количества полученных спермодоз - на 23,4- 34,7% и снижение процента брака спермы по биологическим показателям.
Анализ показателей спермопродукции быков-производителей после применения препарата в дозе 100 мкг на 1 кг живой массы тела (таблица 5) свидетельствует о положительном влиянии препарата на контролируемые показатели. Так объем эякулята, взятый у быков голштинской породы через 90 суток после первой инъекции препарата в дозе 100 мкг на 1 кг живой массы тела увеличился на 27,8%, у производителей айрширской породы этот показатель возрос на 20,7%. Таблица 4
Figure imgf000017_0001
Продолжение Таблицы 4
Figure imgf000018_0001
В течение контролируемого периода улучшились качественные показатели взятой спермы (активность сперматозоидов, их выживаемость через 5 часов).
Итогом применения на быках-производителях препарата в дозе 100 мкг на 1 кг живой массы тела является увеличение количества полученных спермодоз - на 22,1- 34,5% и снижение процента брака спермы по биологическим показателям.
Анализ показателей спермопродукции быков-производителей после применения препарата в дозе 200 мкг на 1 кг живой массы тела (таблица 6) свидетельствует о положительном влиянии препарата на контролируемые показатели. Так объем эякулята, взятый у быков голштинской породы через 90 суток после первой инъекции препарата в дозе 200 мкг на 1 кг живой массы тела увеличился на 24,5%, у производителей айрширской породы этот показатель возрос на 19,6%. Таблица 5
Figure imgf000019_0001
Продолжение Таблицы 5
Figure imgf000020_0001
В течение контролируемого периода улучшились качественные показатели взятой спермы (активность сперматозоидов, их выживаемость через 5 часов).
Итогом применения на быках-производителях препарата в дозе 200 мкг на 1 кг живой массы тела является увеличение количества полученных спермодоз - на 20,5- 34,6 % и снижение процента брака спермы по биологическим показателям.
Таблица 6
Figure imgf000020_0002
Продолжение Таблицы 6
Figure imgf000021_0001
Аналогичные эксперименты были проведены на баранах вятской (нолинской) породы.
Масляную суспензию препарата животным вводили подкожно в дозе 50-200 мкг белка на 1 кг массы тела двукратно с интервалом 14 суток между инъекциями (таблицы 7, 8, 9).
У баранов - производителей до и после применения препарата установленным порядком осуществляли взятие спермы и определяли объём эякулята, концентрацию сперматозоидов в эякуляте и количество полученных спермодоз.
Показатели спермопродукции баранов - производителей при применении препарата в дозе 50 мкг на 1 кг живой массы показаны в таблице 7.
Таблица 7
Figure imgf000022_0001
Результаты представленных в таблице 7 экспериментов свидетельствуют о стимуляции спермопродукции у баранов-производителей в результате применения препарата. Так объем эякулята, взятый у баранов через 90 суток после первой инъекции увеличился на 18,0%. В течение контролируемого периода улучшились качественные показатели взятой спермы (подвижность, выживаемость сперматозоидов). Итогом применения препарата на баранах-производителях является увеличение количества полученных спермодоз от одного животного на 28,1% и снижение процента брака спермы по биологическим показателям.
В Таблице 8 приведены показатели спермопрдукции баранов- производителей при применении препарата в дозе 100 мкг на 1 кг живой массы тела.
Таблица 8
Figure imgf000023_0001
Результаты представленных в таблице 8 экспериментов свидетельствуют о стимуляции спермопродукции у баранов-производителей в результате применения препарата в дозе 100 мкг на 1 кг живой массы тела. Так объем эякулята, взятый у баранов через 90 суток после первой инъекции увеличился на 13,3%. В течение контролируемого периода улучшились качественные показатели взятой спермы (подвижность, выживаемость сперматозоидов). Итогом применения препарата на баранах-производителях является увеличение через 90 дней после первой инъекции препарата количества полученных спермодоз от одного животного на 26,6% и снижение процента брака спермы по биологическим показателям.
В таблице 9 приведены показатели спермопрдукции баранов- производителей при применении препарата в дозе 200 мкг на 1 кг живой массы тела.
Таблица 9
Figure imgf000024_0001
Результаты представленных в таблице 9 экспериментов свидетельствуют о стимуляции спермопродукции у баранов-производителей в результате применения препарата в дозе 100 мкг на 1 кг живой массы тела. Так объем эякулята, взятый у баранов через 90 суток после первой инъекции увеличился на 12,1%. В течение контролируемого периода улучшились качественные показатели взятой спермы (подвижность, выживаемость сперматозоидов). Итогом применения препарата на баранах-производителях является увеличение через 90 дней после первой инъекции препарата количества полученных спермодоз от одного животного на 25,8% и снижение процента брака спермы по биологическим показателям. Изучение влияния препарата на продуктивные качества петухов - производителей (двухлинейный гибрид плимутрок и корниш) проводили на птицеводческих предприятиях.
Суспензию препарата птице вводили подкожно в дозе 50-200мкг белка на 1 кг массы тела двукратно с интервалом 14 суток между инъекциями.
У петухов - производителей до и после применения препарата установленным порядком осуществляли взятие образцов спермы и определяли объём эякулята, концентрацию сперматозоидов в эякуляте и количество полученных спермодоз.
Показатели спермопродукции у петухов при применении препарата в дозе 50 мкг на 1 кг живой массы тела приведены в таблице 10.
Таблица 10
Figure imgf000025_0001
Результаты экспериментов свидетельствуют о стимуляции спермопродукции у петухов - производителей в результате применения препарата. Так объем эякулята, взятый у петухов через 90 суток после первой инъекции увеличился на42,3%. В течение контролируемого периода улучшились качественные показатели взятой спермы (выживаемость сперматозоидов). Итогом применения препарата на петухах производителях является увеличение количества полученных спермодоз на 41,6% и снижение процента брака спермы по биологическим показателям.
Показатели спермопродукции у петухов при применении препарата в дозе 100 мкг на 1 кг живой массы тела приведены в таблице 1 1.
Таблица 1 1
Figure imgf000026_0001
Результаты экспериментов свидетельствуют о стимуляции спермопродукции у петухов - производителей в результате применения препарата. Так объем эякулята, взятый у петухов через 90 суток после первой инъекции увеличился на 44,9%. В течение контролируемого периода улучшились качественные показатели взятой спермы (выживаемость сперматозоидов). Итогом применения препарата на петухах производителях является увеличение количества полученных спермодоз наЗЗ,3% и снижение процента брака спермы по биологическим показателям.
Показатели спермопродукции у петухов при применении препарата в дозе 200 мкг на 1 кг живой массы тела приведены в таблице 12.
Таблица 12
Figure imgf000027_0001
Результаты экспериментов свидетельствуют о стимуляции спермопродукции у петухов - производителей в результате применения препарата. Так объем эякулята, взятый у петухов через 90 суток после первой инъекции увеличился на 35,3%· В течение контролируемого периода улучшились качественные показатели взятой спермы (выживаемость сперматозоидов). Итогом применения препарата на петухах производителях является увеличение количества полученных спермодоз на 25,0% и снижение процента брака спермы по биологическим показателям.

Claims

Формула изобретения
1. Препарат для повышения спермопродукции у производителей сельскохозяйственных животных и петухов в виде суспензии химерного белка с водонерастворимой ферментативно неактивной хлорамфениколацетилтраснсферазой без 10 С-терминальных аминокислот, аминокислотным спейсером (Sp)n, где п= 1,2,4,8 и соматостатином-14 с последовательностью аминокислот AGCFWKTFTSC в рафинированном растительном масле с добавлением пчелиного воска.
2. Препарат по п.1, отличающийся тем, что он содержит химерный белок с водонерастворимой ферментативно неактивной хлорамфениколацетилтраснсферазой без 10 С-терминальных аминокислот, аминокислотным спейсером (Sp)n, где п= 1,2,4,8 и соматостатином-14 с последовательностью аминокислот AGCFWKTFTSC из расчета 250-1000 мг указанного химерного белка на 100 мл рафинированного растительного масла, включающего 0,9-1,1 мас.% пчелиного воска.
3. Способ повышения спермопродукции у производителей сельскохозяйственных животных и петухов, включающий двукратную подкожную инъекцию с интервалом в 14 суток препарата в виде суспензии химерного белка с водонерастворимой ферментативно неактивной хлорамфениколацетилтраснсферазой без 10 С-терминальных аминокислот, аминокислотным спейсером (Sp)n, где п= 1,2,4,8 и соматостатином-14 с последовательностью аминокислот AGCFWKTFTSC в рафинированном растительном масле с добавлением пчелиного воска петухам или сельскохозяйственным животным по достижении физиологической зрелости из расчета 50-200 мкг белка на 1 кг живой массы тела.
4. Способ по п.З, отличающийся тем, что используют препарат в виде суспензии химерного белка с водонерастворимой ферментативно неактивной хлорамфениколацетилтраснсферазой без 10 С-терминальных аминокислот, аминокислотным спейсером (Sp)n, где п= 1,2,4,8 и соматостатином-14 с последовательностью аминокислот AGCFWKTFTSC в количестве из расчета 250-1000 мг указанного химерного белка на 100 мл рафинированного растительного масла, включающего 0,9-1,1 мас.% пчелиного воска.
PCT/RU2012/000912 2012-06-07 2012-11-08 Препарат для повышения спермопродукции у производителей сельскохозяйственных животных и петухов и способ его применения WO2013184024A1 (ru)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EA201400370A EA024936B1 (ru) 2012-06-07 2012-11-08 Препарат для повышения спермопродукции у производителей сельскохозяйственных животных и петухов и способ его применения

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2012123606/10A RU2493873C1 (ru) 2012-06-07 2012-06-07 Инъекционный препарат для повышения спермопродукции у производителей сельскохозяйственных животных и петухов и способ его применения
RU2012123606 2012-06-07

Publications (1)

Publication Number Publication Date
WO2013184024A1 true WO2013184024A1 (ru) 2013-12-12

Family

ID=49253935

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PCT/RU2012/000912 WO2013184024A1 (ru) 2012-06-07 2012-11-08 Препарат для повышения спермопродукции у производителей сельскохозяйственных животных и петухов и способ его применения

Country Status (3)

Country Link
EA (1) EA024936B1 (ru)
RU (1) RU2493873C1 (ru)
WO (1) WO2013184024A1 (ru)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN112293411A (zh) * 2020-11-27 2021-02-02 大连海洋大学 中间球海胆精子的低温保存液及保存方法

Families Citing this family (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2561467C1 (ru) * 2014-04-24 2015-08-27 Сергей Михайлович Юдин Способ получения препарата для повышения мясной и молочной продуктивности сельскохозяйственных животных (варианты) и препарат, полученный на его основе
RU2615019C1 (ru) * 2016-02-25 2017-04-03 Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Государственный аграрный университет Северного Зауралья" (ФГБОУ ВО ГАУ Северного Зауралья) Способ повышения потенции и качества спермы самцов-производителей
RU2629871C1 (ru) * 2016-03-22 2017-09-04 Сергей Михайлович Юдин Препарат для стимуляции фолликулогенеза и способ его применения
RU2722849C1 (ru) 2019-12-25 2020-06-04 Владимир Глебович Лунин Рекомбинантный белок GBD-SSTad-SSTad, способ его получения и применения

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2034457C1 (ru) * 1993-06-22 1995-05-10 Товарищество с ограниченной ответственностью "Ветек" Способ повышения продуктивности сельскохозяйственных животных и препарат для его осуществления
RU2192281C2 (ru) * 1996-10-11 2002-11-10 Бристол-Маерс Сквибб Компани Способы и композиции для иммуномодуляции

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2034457C1 (ru) * 1993-06-22 1995-05-10 Товарищество с ограниченной ответственностью "Ветек" Способ повышения продуктивности сельскохозяйственных животных и препарат для его осуществления
RU2192281C2 (ru) * 1996-10-11 2002-11-10 Бристол-Маерс Сквибб Компани Способы и композиции для иммуномодуляции

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
"Meditsina", TEKHNOLOGIIA LEKARSTVENNYKH FORM, M., vol. 1, 1991, pages 42 *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN112293411A (zh) * 2020-11-27 2021-02-02 大连海洋大学 中间球海胆精子的低温保存液及保存方法

Also Published As

Publication number Publication date
EA201400370A1 (ru) 2014-06-30
RU2493873C1 (ru) 2013-09-27
EA024936B1 (ru) 2016-11-30

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Kucharska-Gaca et al. Feeding–Technology of the Future–A Review
NZ203042A (en) Increasing milk production in cows by administering synthetic bovine growth hormone
RU2493873C1 (ru) Инъекционный препарат для повышения спермопродукции у производителей сельскохозяйственных животных и петухов и способ его применения
DE60122672T2 (de) Zusammensetzung zur intestinalen verabreichung
JP2000512130A (ja) ホルモンまたはそのレセプターの活性の調節方法、ペプチド、抗体、ワクチンおよびこれらの使用
SU1519522A3 (ru) Способ получени пригодных дл оплодотворени половых продуктов у половозрелых рыб в любое врем года
RU2033178C1 (ru) Способ стимулирования роста паренхиматозной ткани молочной железы животного
JPH03503530A (ja) ヒト腫瘍治療薬およびその製造方法
Linhart et al. Spermiation of common tench (Tinca tinca L.) stimulated with injection or implantation of GnRH analogues and injection of carp pituitary extract
RU2526571C1 (ru) Инъекционный препарат для повышения спермопродукции человека и способ его применения
US20020169116A1 (en) Modulating the activity of hormones or their receptors - peptides, antibodies, vaccines and uses thereof
KR20060101554A (ko) 면역원성 ｌｈｒｈ 조성물 및 이와 관련한 방법
RU2416430C1 (ru) Средство для профилактики гепатоза у свиней
JP4195865B2 (ja) 水生生物の成長促進および病気に対する抵抗力の向上のための方法
RU2614115C1 (ru) Рекомбинантный соматостатинсодержащий белок, способ его получения, инъекционный препарат для повышения мясной и молочной продуктивности сельскохозяйственных животных, а также способ использования препарата
RU2337708C1 (ru) Способ повышения мясной продуктивности бройлеров и препарат для его осуществления
CN86105840A (zh) 一种从哺乳动物获得适于自然或人工受精性产物的方法
KR100270835B1 (ko) 가축의 번식능력 및 지방 조정유 수율을 증가시키기 위한 소마토트로핀의 투여방법
RU2629871C1 (ru) Препарат для стимуляции фолликулогенеза и способ его применения
WO2015076666A2 (en) Combination of ghrelin and kisspeptin analogs (gpr54 agonists) for growth of aquatic animals
RU2546252C2 (ru) Способ получения белкового гидролизата из мясного или мясокостного сырья тушек норок для парентерального питания
RU2714716C1 (ru) Способ повышения репродуктивной функции и естественной резистентности свиноматок
Cizmeci et al. Effects of FSH administered in different ways on superovulation response and blood FSH levels in cows
RU2657765C1 (ru) Способ получения препарата фолликулостимулирующего гормона из гипофизов животных
WO2005115166A1 (en) Method of enhancing growth and immunity of shrimp larvae using recombinant bovine growth hormone

Legal Events

Date Code Title Description
121 Ep: the epo has been informed by wipo that ep was designated in this application

Ref document number: 12878467

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A1

WWE Wipo information: entry into national phase

Ref document number: 201400370

Country of ref document: EA

NENP Non-entry into the national phase

Ref country code: DE

122 Ep: pct application non-entry in european phase

Ref document number: 12878467

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A1