RU2614115C1 - Рекомбинантный соматостатинсодержащий белок, способ его получения, инъекционный препарат для повышения мясной и молочной продуктивности сельскохозяйственных животных, а также способ использования препарата - Google Patents
Рекомбинантный соматостатинсодержащий белок, способ его получения, инъекционный препарат для повышения мясной и молочной продуктивности сельскохозяйственных животных, а также способ использования препарата Download PDFInfo
- Publication number
- RU2614115C1 RU2614115C1 RU2016131484A RU2016131484A RU2614115C1 RU 2614115 C1 RU2614115 C1 RU 2614115C1 RU 2016131484 A RU2016131484 A RU 2016131484A RU 2016131484 A RU2016131484 A RU 2016131484A RU 2614115 C1 RU2614115 C1 RU 2614115C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- com
- protein
- somatostatin
- gsd
- glucan
- Prior art date
Links
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 title claims abstract description 59
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 title claims abstract description 55
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 title claims abstract description 48
- 108010056088 Somatostatin Proteins 0.000 title claims abstract description 43
- 102000005157 Somatostatin Human genes 0.000 title claims abstract description 41
- NHXLMOGPVYXJNR-ATOGVRKGSA-N somatostatin Chemical compound C([C@H]1C(=O)N[C@H](C(N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@@H](CC=2C3=CC=CC=C3NC=2)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@H](C(=O)N1)[C@@H](C)O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](C)N)C(O)=O)=O)[C@H](O)C)C1=CC=CC=C1 NHXLMOGPVYXJNR-ATOGVRKGSA-N 0.000 title claims abstract description 41
- 229960000553 somatostatin Drugs 0.000 title claims abstract description 36
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 24
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims abstract description 9
- 239000003814 drug Substances 0.000 title abstract description 16
- 229940079593 drug Drugs 0.000 title abstract description 15
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 title abstract description 5
- 235000013365 dairy product Nutrition 0.000 title 1
- 229920001503 Glucan Polymers 0.000 claims abstract description 17
- 238000002347 injection Methods 0.000 claims abstract description 16
- 239000007924 injection Substances 0.000 claims abstract description 16
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 claims abstract description 15
- 239000008267 milk Substances 0.000 claims abstract description 15
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 claims abstract description 15
- 239000002594 sorbent Substances 0.000 claims abstract description 14
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims abstract description 12
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 claims abstract description 10
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 claims abstract description 8
- 108010077805 Bacterial Proteins Proteins 0.000 claims abstract description 4
- 238000005406 washing Methods 0.000 claims abstract description 3
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 claims description 15
- 229920000310 Alpha glucan Polymers 0.000 claims description 12
- 230000037396 body weight Effects 0.000 claims description 8
- 108090001082 glucan-binding proteins Proteins 0.000 claims description 7
- 241001596967 Escherichia coli M15 Species 0.000 claims description 5
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 4
- 238000010255 intramuscular injection Methods 0.000 claims description 3
- 239000007927 intramuscular injection Substances 0.000 claims description 3
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 claims description 3
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 claims description 3
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 claims description 2
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 claims description 2
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 claims description 2
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 abstract description 9
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 abstract description 8
- 230000001195 anabolic effect Effects 0.000 abstract description 6
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 abstract description 6
- 230000008569 process Effects 0.000 abstract description 5
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 4
- 230000009471 action Effects 0.000 abstract description 2
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 abstract description 2
- 230000003993 interaction Effects 0.000 abstract description 2
- 238000002955 isolation Methods 0.000 abstract description 2
- 230000014616 translation Effects 0.000 abstract description 2
- TWNIBLMWSKIRAT-VFUOTHLCSA-N levoglucosan Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]2CO[C@@H]1O2 TWNIBLMWSKIRAT-VFUOTHLCSA-N 0.000 abstract 3
- 230000006698 induction Effects 0.000 abstract 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 abstract 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 abstract 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- 102000007056 Recombinant Fusion Proteins Human genes 0.000 description 29
- 108010008281 Recombinant Fusion Proteins Proteins 0.000 description 29
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 9
- 102000018997 Growth Hormone Human genes 0.000 description 9
- 108010051696 Growth Hormone Proteins 0.000 description 9
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 9
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 9
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 8
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 7
- 239000000122 growth hormone Substances 0.000 description 7
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 6
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 5
- WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K aluminium hydroxide Chemical compound [OH-].[OH-].[OH-].[Al+3] WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 4
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 4
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 description 4
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 description 4
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 4
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 4
- 239000012053 oil suspension Substances 0.000 description 4
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 3
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 3
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 3
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 3
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 3
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 3
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 3
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 3
- BPHPUYQFMNQIOC-NXRLNHOXSA-N isopropyl beta-D-thiogalactopyranoside Chemical compound CC(C)S[C@@H]1O[C@H](CO)[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O BPHPUYQFMNQIOC-NXRLNHOXSA-N 0.000 description 3
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 3
- 230000035764 nutrition Effects 0.000 description 3
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 3
- 239000000047 product Substances 0.000 description 3
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 3
- 108010078791 Carrier Proteins Proteins 0.000 description 2
- 102000014914 Carrier Proteins Human genes 0.000 description 2
- 241000194019 Streptococcus mutans Species 0.000 description 2
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 2
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 2
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 2
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 2
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 2
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 2
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 2
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical compound N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000006651 lactation Effects 0.000 description 2
- 210000000496 pancreas Anatomy 0.000 description 2
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 2
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 2
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 2
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 2
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 2
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 2
- 238000012552 review Methods 0.000 description 2
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 2
- 241000251468 Actinopterygii Species 0.000 description 1
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- 125000001433 C-terminal amino-acid group Chemical group 0.000 description 1
- 108010035563 Chloramphenicol O-acetyltransferase Proteins 0.000 description 1
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 241000283086 Equidae Species 0.000 description 1
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102400000921 Gastrin Human genes 0.000 description 1
- 108010052343 Gastrins Proteins 0.000 description 1
- 102400000321 Glucagon Human genes 0.000 description 1
- 108060003199 Glucagon Proteins 0.000 description 1
- 229920002527 Glycogen Polymers 0.000 description 1
- 101000829153 Homo sapiens Somatostatin receptor type 5 Proteins 0.000 description 1
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 description 1
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N L-Proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 102000016943 Muramidase Human genes 0.000 description 1
- 108010014251 Muramidase Proteins 0.000 description 1
- 108010062010 N-Acetylmuramoyl-L-alanine Amidase Proteins 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 102000057297 Pepsin A Human genes 0.000 description 1
- 108090000284 Pepsin A Proteins 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920001218 Pullulan Polymers 0.000 description 1
- 239000004373 Pullulan Substances 0.000 description 1
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical class [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 102100029329 Somatostatin receptor type 1 Human genes 0.000 description 1
- 102100023806 Somatostatin receptor type 5 Human genes 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 1
- 102000011923 Thyrotropin Human genes 0.000 description 1
- 108010061174 Thyrotropin Proteins 0.000 description 1
- 101710120037 Toxin CcdB Proteins 0.000 description 1
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003044 adaptive effect Effects 0.000 description 1
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 1
- AVKUERGKIZMTKX-NJBDSQKTSA-N ampicillin Chemical compound C1([C@@H](N)C(=O)N[C@H]2[C@H]3SC([C@@H](N3C2=O)C(O)=O)(C)C)=CC=CC=C1 AVKUERGKIZMTKX-NJBDSQKTSA-N 0.000 description 1
- 229960000723 ampicillin Drugs 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 description 1
- 210000004198 anterior pituitary gland Anatomy 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 230000001588 bifunctional effect Effects 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 210000003169 central nervous system Anatomy 0.000 description 1
- 230000003196 chaotropic effect Effects 0.000 description 1
- AOXOCDRNSPFDPE-UKEONUMOSA-N chembl413654 Chemical compound C([C@H](C(=O)NCC(=O)N[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@H](CCSC)C(=O)N[C@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@H](CC=1C=CC=CC=1)C(N)=O)NC(=O)[C@@H](C)NC(=O)[C@@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1 AOXOCDRNSPFDPE-UKEONUMOSA-N 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 1
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 1
- 101150090908 com gene Proteins 0.000 description 1
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 description 1
- 238000013461 design Methods 0.000 description 1
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 description 1
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 description 1
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 1
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 1
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 description 1
- 229960004666 glucagon Drugs 0.000 description 1
- MASNOZXLGMXCHN-ZLPAWPGGSA-N glucagon Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O)C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](N)CC=1NC=NC=1)[C@@H](C)O)[C@@H](C)O)C1=CC=CC=C1 MASNOZXLGMXCHN-ZLPAWPGGSA-N 0.000 description 1
- 229940096919 glycogen Drugs 0.000 description 1
- 244000144993 groups of animals Species 0.000 description 1
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 1
- PJJJBBJSCAKJQF-UHFFFAOYSA-N guanidinium chloride Chemical compound [Cl-].NC(N)=[NH2+] PJJJBBJSCAKJQF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000003016 hypothalamus Anatomy 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 description 1
- 229920006008 lipopolysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 230000004807 localization Effects 0.000 description 1
- 229960000274 lysozyme Drugs 0.000 description 1
- 239000004325 lysozyme Substances 0.000 description 1
- 235000010335 lysozyme Nutrition 0.000 description 1
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 1
- 230000000873 masking effect Effects 0.000 description 1
- 230000010534 mechanism of action Effects 0.000 description 1
- 102000006240 membrane receptors Human genes 0.000 description 1
- 108020004084 membrane receptors Proteins 0.000 description 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 1
- 230000004899 motility Effects 0.000 description 1
- 230000037257 muscle growth Effects 0.000 description 1
- 229930014626 natural product Natural products 0.000 description 1
- 230000024717 negative regulation of secretion Effects 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 229940111202 pepsin Drugs 0.000 description 1
- 230000001817 pituitary effect Effects 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 1
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 1
- 238000001742 protein purification Methods 0.000 description 1
- 238000001243 protein synthesis Methods 0.000 description 1
- 235000019423 pullulan Nutrition 0.000 description 1
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 1
- QEVHRUUCFGRFIF-MDEJGZGSSA-N reserpine Chemical compound O([C@H]1[C@@H]([C@H]([C@H]2C[C@@H]3C4=C(C5=CC=C(OC)C=C5N4)CCN3C[C@H]2C1)C(=O)OC)OC)C(=O)C1=CC(OC)=C(OC)C(OC)=C1 QEVHRUUCFGRFIF-MDEJGZGSSA-N 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 239000013049 sediment Substances 0.000 description 1
- 230000035807 sensation Effects 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 210000000813 small intestine Anatomy 0.000 description 1
- 108010082379 somatostatin receptor type 1 Proteins 0.000 description 1
- 210000001764 somatotrope Anatomy 0.000 description 1
- 125000006850 spacer group Chemical group 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 1
- 230000009897 systematic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 238000002604 ultrasonography Methods 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/575—Hormones
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K19/00—Hybrid peptides, i.e. peptides covalently bound to nucleic acids, or non-covalently bound protein-protein complexes
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Biophysics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Zoology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Изобретение относится к генной инженерии, биотехнологии и ветеринарии. Описан рекомбинантный иммуногенный белок, содержащий соматостатин и глюкансвязывающий домен. Представлен способ получения описанного белка на глюкане, который включает связывание белка с глюкансодержащим сорбентом за счет аффинного взаимодействия, последующую отмывку от несвязавшихся бактериальных белков и выделение целевого продукта. Также описан инъекционный препарат на основе указанного белка. Описан способ повышения мышечной массы и увеличение молочной продуктивности сельскохозяйственных животных, включающий двукратное проведение подкожных или внутримышечных инъекций препарата. Изобретение позволяет получать рекомбинантный иммунологически активный соматостатинсодержащий белок, легко поддающийся очистке и обладающий достаточной иммуногенностью в отношении соматостатина. Изобретение может быть использовано для повышения мясной и молочной продуктивности сельскохозяйственных животных (крупный рогатый скот, свиньи, кролики) за счет индукции синтеза специфических аутоантител к соматостатину, блокирования его действия и, как следствие, усиления анаболических процессов в организме животных. 4 н.п. ф-лы, 3 табл.
Description
Область применения
Изобретение относится к генной инженерии, биотехнологии и ветеринарии, а конкретно к рекомбинантному соматостатинсодержащему белку, способу его получения, иммуногенной композиции, содержащей в качестве антигена соматостатин, инъекционный препарат для повышения мясной и молочной продуктивности сельскохозяйственных животных, а также метод использования указанного инъекционного препарата для увеличения мышечной массы животных.
Известный уровень
Соматостатин (СОМ) - биологически активный циклический тетрадекапептид, вырабатывающийся в гипоталамусе и желудочно-кишечном тракте млекопитающих и присутствующий в организме в двух формах: одна форма содержит 14 аминокислот, а вторая форма содержит 28 аминокислот. Биологическая активность данных двух форм СОМ схожа. Форма СОМ-14 преобладает в центральной нервной системе. Она ингибирует секрецию гормона роста соматотропными клетками переднего гипофиза. Форма СОМ-28 предпочтительно экспрессируется в желудке и поджелудочной железе. Биологическая активность СОМ вызывается посредством ряда мембранных рецепторов, соединенных с белком G, среди которых описаны 5 подтипов, а именно подтипы с SSTR1 по SSTR5 (Reubi J.C., Cancer Res., 47, 551-558; Resine Т. et al. Endocr. Review, 16, 427-442; Lamberts S.W. et al. Endocr. Review, 12, 450-482).
Изучение аминокислотного состава соматостатина у различных представителей животного царства показало высокую степень гомологии пептидов, синтезируемых живыми организмами, находящимися на различных ступенях эволюционного развития. Аминокислотная последовательность СОМ-14 идентична у живых организмов - от рыб до млекопитающих и человека.
COM-14 оказывает сильное ингибирующее действие на ряд гормонов (соматотропин, тиреотропный гормон, инсулин, глюкагон, гастрин, пепсин), инициирует угнетение секреции желудочных ферментов, поджелудочной железы, тонкого отдела кишечника, замедление моторики желудочно-кишечного тракта и эвакуации его содержимого. Снижение концентрации соматостатина приводит к ускоренному росту животных, лучшему усвоению пищи. Добиться этого стало возможно с использованием аналогов-антагонистов соматостатина, препятствующих связыванию гормона с рецепторами. Однако данная технология имеет целый ряд ограничений к применению, поскольку требует систематического многомесячного применения дорогостоящих производных соматостатина. Снизить концентрацию соматостатина в крови животных и уменьшить связывание с рецепторами гипофиза можно не только при помощи аналогов-анагонистов, но и при помощи технологии соматостатиновой иммунокоррекции.
Снижение концентрации соматостатина-14 с помощью аутоантител оказывает анаболическое воздействие на организм животных - ускоренный рост и лучшее усвоение пищи с/х животными. Технологическое решение данной идеи было реализовано в патентах RU 2031121 С1, МПК C12N 15/12, 1995 и RU 2034457 С1, МПК A01K 67/02, 1995.
Метод соматостатиновой иммунокоррекции лишен многих недостатков, возникающих при использовании рекомбинантного соматотропина. Механизм действия основан на временном связывании эндогенного соматостатина-14 специфическими антисоматостатиновыми антителами и возрастании концентрации эндогенного соматотропного гормона и других ростовых факторов, синтез которых он ингибирует, в физиологических пределах. Однако широкое применение метода активной иммунизации животных против эндогенного соматостатина-14 длительное время было невозможно вследствие его высокой стоимости, поскольку основным путем получения пептида являлся химический синтез, что экономически не позволяло реализовать данный подход на практике. Поскольку небольшие размеры соматостатина-14 не позволяют осуществить его прямой микробный синтез с помощью технологии рекомбинантной ДНК, описано несколько способов его синтеза в форме химерных белков с последующим выделением целевого продукта, не давших удовлетворительных результатов. Основным недостатком упомянутых методов является крайне низкая иммуногенность полученных препаратов в отношении соматостатина, обусловленная его маскированием в молекуле химерного белка, вследствие чего данные методы получения химерных белков не нашли широкого практического использования (Itakura R. et al., 1977. Expression in E. coli of a chemically synthesized gene of hormone somatostatin. Science, 1986, 1056-1063; Шишкина А.А. и др. Синтез фрагмента генов соматостатина. Химия природных соединений, 1988, №6, с. 614-615).
Известен способ конструирования химерных соматостатинсодержащих белков с применением аминокислотного спейсера, содержащего аргинин и пролин, обусловливающего локализацию соматостатина на поверхности белка-носителя и тем самым высокую иммуногенность препарата (RU 2031121 С1, МПК C12N 15/12, 1995). Конструкция состоит из водонерастворимого белка-носителя (фрагмент бактериальной хлорамфениколацетилтрансферазы без 10 C-концевых аминокислот), тетрамерного спейсера и C-концевого соматостатина-14. Молекулярный вес химерного белка (белок CAT-СОМ) составляет 28 кДа. Метод антисоматостатиновой иммунизации животных с использованием указанного химерного соматостатинсодержащего белка используется в промышленном животноводстве (RU 2034457 С1, МПК A01K 67/02, 1995). Однако технология очистки этого соматостатинсодержащего белка, основанная на растворении телец-включения белка CAT-СОМ в хаотропном агенте (гуанидин-хлорид) и последующий диализ, не позволяет полностью освободиться от значительного количества бактериальных белков, содержит высокие концентрации высокотоксичного липополисахарида, что не соответствует современным биотехнологическим стандартам качества иммунобиологического препарата. Нерастворимость в воде затрудняет очистку белка CAT-СОМ с помощью стандартных методов колоночной хроматографии. Белок CAT-СОМ характеризуется низкой иммуногенностью, что требует больших количеств белка для иммунизации животных. Этих недостатков лишен рекомбинантный белок, содержащий повышенное количество копий соматостатина (две) и аффинно-связывающийся с полисахаридными сорбентами. Это позволяет проводить простую и эффективную очистку белка до необходимой гомогенности и обеспечивает высокую иммуногенность за счет увеличенного количества копий соматостатина и иммобилизации на полисахаридном сорбенте в форме полиантигена.
Сущность изобретения
Цель изобретения заключается в стимуляции мясной и молочной продуктивности животных иммуногенной соматостатинсодержащей композицией за счет увеличения активности гормона роста в сыворотке крови и индукции комплексных перестроек адаптивного генеза, выражающихся в усилении активности анаболических процессов у сельскохозяйственных животных, приводящих к росту мышечной массы, увеличению молочной продуктивности при использовании препарата для инъекций с низкой реактогенностью адъюванта, позволяющего осуществлять инъекции без болезненных ощущений.
Задача изобретения заключается в создании рекомбинантного иммунологически активного соматостатинсодержащего белка, легко поддающегося очистке и обладающего достаточной иммуногенностью в отношении соматостатина как антигена, который может быть использован для повышения анаболических процессов в организме, роста мышечной массы, увеличения молочной продуктивности у сельскохозяйственных животных (крупный рогатый скот, свиньи, лошади, кролики) за счет индукции синтеза специфических аутоантител к соматостатину, блокирования его действия и, как следствие, увеличения содержания в организме животных эндогенного гормона роста.
Другая задача изобретения заключается в реализации препарата на основе указанного белка и в создании способа использования этого препарата, решающего проблему повышения анаболических процессов с помощью индукции аутоантител к соматостатину, приводящей к повышению концентрации гормона роста и усилению активности анаболических процессов у сельскохозяйственных животных при условии несистематического применения препарата.
Следует отметить, что аминокислотная последовательность соматостатина идентична как у человека, так и у всех сельскохозяйственных животных. Вследствие этого разработанный препарат является универсальным средством для увеличения концентрации гормона роста и как следствие повышения мышечной массы тела и увеличения молочной продуктивности у сельскохозяйственных животных.
Решение первой поставленной задачи обеспечивается следующими объектами изобретения.
Рекомбинантный белок, состоящий из соматостатина Гли-Сер спейсер, глюкансвязывающего домена и соматостатина (СОМ-ГСД-СОМ) с молекулярной массой 25,9 кДа, соматостатин с двух концов белка, Гли-Сер спейсер, альфа-глюкансвязывающий домен из Streptococcus mutans, имеющий аминокислотную последовательность SEQ ID NO 1 и кодируемый последовательностью нуклеотидов SEQ ID NO 1.
Способ получения рекомбинантного белка СОМ-ГСД-СОМ на глюкане включает:
- выращивание клеток штамма Е. coli, экспрессирующих ген СОМ-ГСД-СОМ;
- связывание белка СОМ-ГСД-СОМ в составе клеточных экстрактов штамма Е. coli M15 с глюкансодержащем сорбентом за счет аффинного взаимодействия при процедуре инкубации;
- последующую отмывку от несвязавшихся бактериальных белков и выделение целевого продукта.
Рекомбинантный белок СОМ-ГСД-СОМ включает в себя белковую последовательность глюкансвязывающего домена, определяющего способность данного белка связываться с глюкансодержащем сорбентом, что позволяет проводить в одну стадию концентрирование, очистку и иммобилизацию белкового продукта на глюкане. Иммобилизацию на глюкане обеспечивает входящий в структуру рекомбинантного белка глюкансвязывающий домен из альфа-глюкансвязывающего домена гена из Streptococcus mutans, который обладает высоким сродством к альфа-глюканам (пуллулан, гликоген, декстран, крахмал) и обеспечивает необратимое связывание с носителем в широком диапазоне значений pH 6,0-9,0 и концентраций соли NaCl 0-3 М.
Поскольку в клетках Е. coli отсутствуют белки, связывающиеся с альфа-глюканом, то синтезируемый в клетках Е. coli рекомбинантный белок СОМ-ГСД-СОМ является единственным белком клеток штамма-продуцента, прочно связывающимся с альфа-глюканом. Это обеспечивает возможность одностадийного получения высокоочищенного препарата рекомбинантного белка, иммобилизованного на глюкансодержащем сорбенте.
Решение второй поставленной задачи обеспечивается следующими объектами изобретения.
Инъекционный препарат для повышения мышечной массы тела и увеличения молочной продуктивности у сельскохозяйственных животных содержит рекомбинантный белок СОМ-ГСД-СОМ, охарактеризованный выше, суспендированный в среде из глюкансодержащего сорбента в приемлемом для инъекционного использования жидком носителе. Метод повышения мышечной массы тела и увеличения молочной продуктивности у сельскохозяйственных животных включает двукратное с интервалом в 14 суток проведение подкожных или внутримышечных инъекций препарата, содержащего рекомбинантный белок СОМ-ГСД-СОМ, суспендированный в среде из глюкансодержащего сорбента в приемлемом для инъекционного использования жидком носителе, в дозе 50-200 мкг указанного белка на 1 кг живой массы тела.
Таким образом, создан бифункциональный рекомбинантный белок СОМ-ГСД-СОМ, обладающий способностью самопроизвольно связываться с глюкансодержащим сорбентом, формируя высокоиммуногенную композицию в форме полиантигена, индуцировать синтез специфических аутоантител к соматостатину при введении животным и, как следствие, стимулировать повышение мышечной массы тела и увеличение молочной продуктивности у сельскохозяйственных животных.
Получение рекомбинантного слитного белка СОМ-ГСД-СОМ
На первом этапе осуществляют получение гена соматостатина (далее по тексту СОМ) с последующим его клонированием. Ген СОМ получали химико-ферментативным методом. Был спланирован олигонуклеотидный дуплекс, кодирующий соответствующий ген, оптимизированный для экспрессии в E.coli. Затем осуществляли получение плазмиды рСОМ-ГСД-СОМ, содержащей последовательности, кодирующие соматостатин, Гли-Сер спейсер и глюкансвязывающий домен (ГСД).
Получение штамма Е. coli - продуцента рекомбинантного белка соматостатина, соединенного с глюкансвязывающим доменом
Для получения штамма Е. coli - продуцента рекомбинантного белка СОМ-ГСД-СОМ клетки Е. coli M15 трансформировали плазмидой рСОМ-ГСД-СОМ. В культуру добавляли 3 мкл 0,1 М раствора изопропил-бета-D-тиогалактопиранозида (ИПТГ) и выращивали в течение 3 ч при температуре 37°C. При сравнении спектра белков, синтезированных клетками штамма Е. coli M15 [рСОМ-ГСД-СОМ] обнаруживали появление дополнительной белковой полосы. Молекулярная масса дополнительной полосы соответствовала ожидаемой для рекомбинантного белка СОМ-ГСД-СОМ массой в 25,9 кДа. Уровень синтеза белков в E.coli определяли, сравнивая интенсивность окрашивания полосы рекомбинантного белка с полосой соответствующего белка-стандарта молекулярной массы. Было показано, что рекомбинантный белок СОМ-ГСД-СОМ синтезируется в клетках E.coli в нерастворимой форме в виде телец-включения.
Получение рекомбинантного белка СОМ-ГСД-СОМ, иммобилизированного на альфа-глюкане
Для получения рекомбинантного белка клеточную культуру штамма E. coli M15 [СОМ-ГСД-СОМ] выращивали в 1000 мл среды LB с ампициллином (100 мкг/мл) при 37°C до оптической плотности, соответствующей 1 ед. поглощения при длине волны 550 нм. В среду добавляли 15 мкл 0,1 М раствора ИПТГ и выращивали в течение 3 ч. Клетки осаждали центрифугированием при 5500g в течение 15 мин.
Осадок ресуспендировали в фосфатном буфере с лизоцимом. Дополнительно суспензию обрабатывали ультразвуком. После центрифугирования при 6000g нерастворимый белок СОМ-ГСД-СОМ оставался в осадке. Осадок суспендировали в 8М мочевине, центрифугировали при 12000g 30 мин и отбирали надосадочную жидкость. Для иммобилизации рекомбинантного белка СОМ-ГСД-СОМ на сорбенте супернатант разводили фосфатным буфером в четыре раза, добавляли 1/10 объема суспензии альфа-глюкана, инкубировали при 25°С в течение 2 ч. Центрифугировали при частоте оборотов, равной 8000 об/мин, осадок ресуспендировали в фосфатном буфере; отмывку альфа-глюкана повторяли 3 раза. Иммобилизованный на альфа-глюкане антиген СОМ-ГСД-СОМ представляет собой суспензию сорбента с адсорбированными на нем белком. Степень чистоты препарата составляла не менее 95-97%. Консервацию препарата проводили, добавляя бензиновый спирт до конечной концентрации 0,1%.
Биологическое действие рекомбинантного белков СОМ-ГСД-СОМ
В предпочтительном варианте осуществления изобретения препарат содержит рекомбинантный белок СОМ-ГСД-СОМ, суспендированный в растворе глюкана (90% по массе), водно-масляной суспензии (10% по массе) или гидроокиси алюминия (равный объем), используется путем подкожных или внутримышечных инъекций препарата дважды с межинъекционным интервалом 14 суток в дозе 10-50 мкг рекомбинантного белка на 1 кг массы тела животного.
Эффективность применения рекомбинантного белка СОМ-ГСД-СОМ для повышения молочной продуктивности у коров
На первом этапе работы проведены исследования по определению оптимальной 'дозы рекомбинантного белка СОМ-ГСД-СОМ, обеспечивающей стабильное повышение молочной продуктивности у коров.
С этой целью на базе животноводческого хозяйства были сформированы по принципу аналогов (порода, возраст, продуктивность, продолжительность сервис-периода, клиническое состояние животных) четыре группы животных по 20 голов в каждой. Живая масса коров была 500-570 кг, молочная продуктивность животных за предыдущую лактацию находилась в пределах 23,5-24,7 кг в сутки. Рекомбинантный белок СОМ-ГСД-СОМ, суспендированный в растворе глюкана (90% по массе), водно-масляной суспензии (10% по массе) или гидроокиси алюминия (равный объем), при помощи индивидуального шприц-тюбика вводили подкожно в подлопаточную область тела животных: 1 группе - в дозе 10 мкг рекомбинантного белка/кг, 2 группе - в дозе 50 мкг белка/кг, 3 группе - в дозе 250 мкг белка/кг, 4 группа животных являлась контрольной, препарат животным этой группы не применяли. На протяжении опыта все животные находились в одинаковых условиях содержания и кормления. Рационы были сбалансированы по энергетической и питательной ценности в соответствии с рекомендациями профильных специалистов.
Учитывая динамику изменения лактационной кривой, первую инъекцию рекомбинантного белка СОМ-ГСД-СОМ проводили на 70 сутки после отела животных, вторую инъекцию - через 14 суток после первой инъекции. Результаты исследований молочной продуктивности животных опытных и контрольных групп представлены в таблице 1.
Анализ результатов исследования показал, что оптимальными дозами рекомбинантного белка СОМ-ГСД-СОМ для повышения молочной продуктивности у коров является доза 50 мкг белка/кг массы тела. Это количество соматостатинсодержащего белка в достаточной степени индуцирует синтез специфических антисоматостатиновых антител, что приводит к повышению концентрации эндогенного соматотропина и поддержанию его на высоком физиологическом уровне.
Эффективность применения рекомбинантного белка СОМ-ГСД-СОМ при откорме крупного рогатого скота
На основании предварительных исследований была предложена схема применения рекомбинантного белка СОМ-ГСД-СОМ при откорме крупного рогатого скота. Препарат применяли через 3-4 дня после постановки животных на откорм в дозе 10-250 мкг белка/кг массы тела дважды подкожно в область лопатки с межиньекционным интервалом, равным 14 суткам.
Рекомбинантный белок СОМ-ГСД-СОМ, суспендированный в растворе глюкана (90% по массе), водно-масляной суспензии (10% по массе) или гидроокиси алюминия (равный объем), при помощи индивидуального шприц-тюбика вводили подкожно в подлопаточную область тела животных: 1 группе - в дозе 10 мкг рекомбинантного белка/кг, 2 группе - в дозе 50 мкг белка/кг, 3 группе - в дозе 250 мкг белка/кг, 4 группа животных являлась контрольной, препарат животным этой группы не применяли. На протяжении опыта все животные находились в одинаковых условиях содержания и кормления. Рационы были сбалансированы по энергетической и питательной ценности в соответствии с рекомендациями профильных специалистов. Результаты опыта представлены в таблице 2.
В экспериментах установлена эффективность применения рекомбинантного белка СОМ-ГСД-СОМ при откорме молодняка крупного рогатого скота. Наиболее оптимальными дозами белка являются дозы 10-50 мкг белка на 1 кг живой массы тела.
Эффективность применения рекомбинантного белка СОМ-ГСД-СОМ при откорме поросят
Разработана и апробирована в производственных условиях схема применения рекомбинантного белка СОМ-ГСД-СОМ для повышения мясной продуктивности свиней. Препарат применяли в дозе 10-250 мкг белка/кг массы тела дважды подкожно в область лопатки с межинъекционным интервалом, равным 14 суткам.
Рекомбинантный белок СОМ-ГСД-СОМ, суспендированный в растворе глюкана (90% по массе), водно-масляной суспензии (10% по массе) или гидроокиси алюминия (равный объем), при помощи индивидуального шприц-тюбика вводили подкожно в подлопаточную область тела животных: 1 группе - в дозе 10 мкг рекомбинантного белка/кг, 2 группе - в дозе 50 мкг белка/кг, 3 группе - в дозе 250 мкг белка/кг, 4 группа животных являлась контрольной, препарат животным этой группы не применяли. На протяжении опыта все животные находились в одинаковых условиях содержания и кормления. Рационы были сбалансированы по энергетической и питательной ценности в соответствии с рекомендациями профильных специалистов. Результаты опыта представлены в таблице 3.
В экспериментах установлена эффективность применения рекомбинантного белка СОМ-ГСД-СОМ при откорме поросят. Наиболее оптимальными дозами белка являются дозы в диапазоне 10-50 мкг белка на 1 кг живой массы тела.
Claims (4)
1. Рекомбинантный иммуногенный белок, состоящий из соматостатина, Гли-Сер спейсера и глюкансвязывающего домена (СОМ-ГСД-СОМ) с молекулярной массой 25,9 кДа, имеющий аминокислотную последовательность SEQ ID NO 1 и кодируемый нуклеотидной последовательностью SEQ ID NO 1.
2. Способ получения рекомбинантного иммуногенного белка СОМ-ГСД-СОМ по п. 1 на глюкане, включающий связывание белка СОМ-ГСД-СОМ в составе клеточных экстрактов штамма Е. coli M15 [СОМ-ГСД-СОМ] с альфа-глюкансодержащим сорбентом при процедуре инкубации, последующую отмывку от несвязавшихся бактериальных белков и выделение целевого продукта.
3. Инъекционный препарат для повышения мышечной массы сельскохозяйственных животных, содержащий рекомбинантный иммуногенный белок СОМ-ГСД-СОМ по п. 1, суспендированный в среде с альфа-глюкансодержащим сорбентом в приемлемом для инъекционного использования жидком носителе.
4. Способ повышения мышечной массы и увеличения молочной продуктивности сельскохозяйственных животных, включающий двукратное с интервалом в 14 суток проведение подкожных или внутримышечных инъекций препарата, содержащего рекомбинантный иммуногенный белок СОМ-ГСД-СОМ по п. 1, суспендированный в среде с альфа-глюкановым сорбентом в приемлемом для инъекционного использования жидком носителе, в дозе 10-50 мкг/кг массы тела животного.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2016131484A RU2614115C1 (ru) | 2016-08-01 | 2016-08-01 | Рекомбинантный соматостатинсодержащий белок, способ его получения, инъекционный препарат для повышения мясной и молочной продуктивности сельскохозяйственных животных, а также способ использования препарата |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2016131484A RU2614115C1 (ru) | 2016-08-01 | 2016-08-01 | Рекомбинантный соматостатинсодержащий белок, способ его получения, инъекционный препарат для повышения мясной и молочной продуктивности сельскохозяйственных животных, а также способ использования препарата |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2614115C1 true RU2614115C1 (ru) | 2017-03-22 |
Family
ID=58453049
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2016131484A RU2614115C1 (ru) | 2016-08-01 | 2016-08-01 | Рекомбинантный соматостатинсодержащий белок, способ его получения, инъекционный препарат для повышения мясной и молочной продуктивности сельскохозяйственных животных, а также способ использования препарата |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2614115C1 (ru) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP3985018A4 (en) * | 2019-12-25 | 2023-01-18 | Urspharm | GBD-SSTAD-SSTAD RECOMBINANT PROTEIN, METHOD OF PRODUCTION AND USE |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2031121C1 (ru) * | 1993-06-22 | 1995-03-20 | Товарищество с ограниченной ответственностью "Ветек" | СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ РЕКОМБИНАНТНЫХ ПЛАЗМИДНЫХ pC(Sp)n , КОДИРУЮЩИХ ХИМЕРНЫЙ БЕЛОК С ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЬЮ СОМАТОСТАТИНА-14;РЕКОМБИНАНТНАЯ ПЛАЗМИДНАЯ ДНК pC(Sp)4 , КОДИРУЮЩАЯ ЧАСТЬ ГЕНА ХЛОРАМФЕНИКОЛАЦЕТИЛТРАНСФЕРАЗЫ, ТЕТРАМЕРНЫЙ СПЕЙСЕР И СОМАТОСТАТИН-14;ШТАММ БАКТЕРИЙ ESCHERICHIA COLI - ПРОДУЦЕНТ ХИМЕРНОГО БЕЛКА С ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЬЮ СОМАТОСТАТИНА-14;ПОЛИПЕПТИД |
| RU2034457C1 (ru) * | 1993-06-22 | 1995-05-10 | Товарищество с ограниченной ответственностью "Ветек" | Способ повышения продуктивности сельскохозяйственных животных и препарат для его осуществления |
-
2016
- 2016-08-01 RU RU2016131484A patent/RU2614115C1/ru active
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2031121C1 (ru) * | 1993-06-22 | 1995-03-20 | Товарищество с ограниченной ответственностью "Ветек" | СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ РЕКОМБИНАНТНЫХ ПЛАЗМИДНЫХ pC(Sp)n , КОДИРУЮЩИХ ХИМЕРНЫЙ БЕЛОК С ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЬЮ СОМАТОСТАТИНА-14;РЕКОМБИНАНТНАЯ ПЛАЗМИДНАЯ ДНК pC(Sp)4 , КОДИРУЮЩАЯ ЧАСТЬ ГЕНА ХЛОРАМФЕНИКОЛАЦЕТИЛТРАНСФЕРАЗЫ, ТЕТРАМЕРНЫЙ СПЕЙСЕР И СОМАТОСТАТИН-14;ШТАММ БАКТЕРИЙ ESCHERICHIA COLI - ПРОДУЦЕНТ ХИМЕРНОГО БЕЛКА С ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЬЮ СОМАТОСТАТИНА-14;ПОЛИПЕПТИД |
| RU2034457C1 (ru) * | 1993-06-22 | 1995-05-10 | Товарищество с ограниченной ответственностью "Ветек" | Способ повышения продуктивности сельскохозяйственных животных и препарат для его осуществления |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP3985018A4 (en) * | 2019-12-25 | 2023-01-18 | Urspharm | GBD-SSTAD-SSTAD RECOMBINANT PROTEIN, METHOD OF PRODUCTION AND USE |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| DK201100184Y4 (da) | Antistoffer fra immuniserede fugle | |
| CN108066755B (zh) | 一种抗羊包虫病感染的基因工程亚单位疫苗及其制备方法和应用 | |
| RU2501565C2 (ru) | Слитый белок дефектная хлорамфеникол ацетилтрансфераза (сат)-соматостатин и его применения | |
| CN108904788B (zh) | GnRH-防御素重组去势疫苗及其制备 | |
| RU2170100C2 (ru) | Способ увеличения продуктивности птиц, слитый гетерологичный белок и способ его получения | |
| CN1187200A (zh) | 一种改良肽,免疫原性组合物和疫苗或医用制剂,一种针对激素lhrh免疫动物的方法,lhrh串联重复肽类似物及其作为疫苗的用途 | |
| RU2613420C1 (ru) | Рекомбинантный белок Мио-ГСД, способ его получения, инъекционный препарат для повышения мышечной массы сельскохозяйственных животных, птицы и животных семейства псовых, а также способ использования препарата | |
| RU2614115C1 (ru) | Рекомбинантный соматостатинсодержащий белок, способ его получения, инъекционный препарат для повышения мясной и молочной продуктивности сельскохозяйственных животных, а также способ использования препарата | |
| EA024936B1 (ru) | Препарат для повышения спермопродукции у производителей сельскохозяйственных животных и петухов и способ его применения | |
| CN115003690B (zh) | 重组生长分化因子11(gdf11) | |
| EP0645454A2 (en) | Chimeric somatostatin containing protein and coding DNA, immunogenic compositions and method for increasing farm animal productivity | |
| RU2034457C1 (ru) | Способ повышения продуктивности сельскохозяйственных животных и препарат для его осуществления | |
| CN1087953C (zh) | 疫苗的设计和生产 | |
| CN113940993A (zh) | 一种鲈鱼弹状病毒g2-2m亚单位疫苗及其制备方法 | |
| CN1745098A (zh) | 用含自身c5氨基酸区段和非自身氨基酸区段的多肽治疗炎性疾病的方法和材料 | |
| RU2526571C1 (ru) | Инъекционный препарат для повышения спермопродукции человека и способ его применения | |
| CN111939248A (zh) | 一种b型鸡传染性鼻炎亚单位疫苗及其制备方法和应用 | |
| RU2722849C1 (ru) | Рекомбинантный белок GBD-SSTad-SSTad, способ его получения и применения | |
| RU2792817C1 (ru) | Рекомбинантный белок GBO-ActRIIB для увеличения мышечной массы сельскохозяйственных животных и птицы | |
| Bennell et al. | Study of immunisation regimes for the stimulation of local immunity in the pig intestine | |
| CN114196691B (zh) | 一种制备防治牛、羊棘球蚴病多表位重组疫苗的基因、蛋白质、疫苗和应用 | |
| CN1321189A (zh) | 细胞性免疫的诱导方法以及被诱导了细胞免疫的细胞 | |
| WO2024014989A1 (ru) | Рекомбинантный белок gbd-actriib для увеличения мышечной массы сельскохозяйственных животных и птицы | |
| CN118754963A (zh) | 花鲈Phoenixin-20蛋白及其编码cDNA和用途 | |
| CN104096228A (zh) | 一种增强流行性嗜血杆菌b型多糖蛋白结合物免疫原性的方法 |