JP2018164458A - 末端修飾rna - Google Patents
末端修飾rna Download PDFInfo
- Publication number
- JP2018164458A JP2018164458A JP2018138949A JP2018138949A JP2018164458A JP 2018164458 A JP2018164458 A JP 2018164458A JP 2018138949 A JP2018138949 A JP 2018138949A JP 2018138949 A JP2018138949 A JP 2018138949A JP 2018164458 A JP2018164458 A JP 2018164458A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- mir
- modified
- region
- utr
- mrna
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 claims abstract description 270
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims abstract description 176
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims abstract description 156
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 claims abstract description 128
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 72
- 239000002777 nucleoside Substances 0.000 claims abstract description 71
- 150000003833 nucleoside derivatives Chemical class 0.000 claims abstract description 52
- 108700028146 Genetic Enhancer Elements Proteins 0.000 claims abstract description 11
- 108700011259 MicroRNAs Proteins 0.000 claims description 219
- 239000002679 microRNA Substances 0.000 claims description 190
- 230000027455 binding Effects 0.000 claims description 127
- 108020003589 5' Untranslated Regions Proteins 0.000 claims description 82
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims description 47
- 108020004705 Codon Proteins 0.000 claims description 45
- -1 3′-deoxycytosine Chemical compound 0.000 claims description 42
- 108091051828 miR-122 stem-loop Proteins 0.000 claims description 35
- 108091007780 MiR-122 Proteins 0.000 claims description 32
- 210000002865 immune cell Anatomy 0.000 claims description 26
- 108091079658 miR-142-1 stem-loop Proteins 0.000 claims description 23
- 108091071830 miR-142-2 stem-loop Proteins 0.000 claims description 23
- 230000028993 immune response Effects 0.000 claims description 20
- 230000014621 translational initiation Effects 0.000 claims description 20
- 108091026898 Leader sequence (mRNA) Proteins 0.000 claims description 19
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims description 18
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims description 18
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims description 18
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 claims description 14
- 125000003835 nucleoside group Chemical group 0.000 claims description 13
- NYHBQMYGNKIUIF-UUOKFMHZSA-N Guanosine Chemical compound C1=NC=2C(=O)NC(N)=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H]1O NYHBQMYGNKIUIF-UUOKFMHZSA-N 0.000 claims description 11
- 229940029575 guanosine Drugs 0.000 claims description 9
- 108091024530 miR-146a stem-loop Proteins 0.000 claims description 8
- PTJWIQPHWPFNBW-GBNDHIKLSA-N pseudouridine Chemical class O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1C1=CNC(=O)NC1=O PTJWIQPHWPFNBW-GBNDHIKLSA-N 0.000 claims description 8
- QOXJRLADYHZRGC-SHYZEUOFSA-N 1-[(2r,3r,5s)-3-hydroxy-5-(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]pyrimidine-2,4-dione Chemical compound O1[C@H](CO)C[C@@H](O)[C@@H]1N1C(=O)NC(=O)C=C1 QOXJRLADYHZRGC-SHYZEUOFSA-N 0.000 claims description 6
- UVBYMVOUBXYSFV-XUTVFYLZSA-N 1-methylpseudouridine Chemical compound O=C1NC(=O)N(C)C=C1[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 UVBYMVOUBXYSFV-XUTVFYLZSA-N 0.000 claims description 6
- UVBYMVOUBXYSFV-UHFFFAOYSA-N 1-methylpseudouridine Natural products O=C1NC(=O)N(C)C=C1C1C(O)C(O)C(CO)O1 UVBYMVOUBXYSFV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- WVXRAFOPTSTNLL-NKWVEPMBSA-N 2',3'-dideoxyadenosine Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@H]1CC[C@@H](CO)O1 WVXRAFOPTSTNLL-NKWVEPMBSA-N 0.000 claims description 6
- BTOTXLJHDSNXMW-POYBYMJQSA-N 2,3-dideoxyuridine Chemical compound O1[C@H](CO)CC[C@@H]1N1C(=O)NC(=O)C=C1 BTOTXLJHDSNXMW-POYBYMJQSA-N 0.000 claims description 6
- OCLZPNCLRLDXJC-NTSWFWBYSA-N 2-amino-9-[(2r,5s)-5-(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]-3h-purin-6-one Chemical compound C1=2NC(N)=NC(=O)C=2N=CN1[C@H]1CC[C@@H](CO)O1 OCLZPNCLRLDXJC-NTSWFWBYSA-N 0.000 claims description 6
- OROIAVZITJBGSM-OBXARNEKSA-N 3'-deoxyguanosine Chemical compound C1=2NC(N)=NC(=O)C=2N=CN1[C@@H]1O[C@H](CO)C[C@H]1O OROIAVZITJBGSM-OBXARNEKSA-N 0.000 claims description 6
- OFEZSBMBBKLLBJ-BAJZRUMYSA-N cordycepin Chemical group C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](CO)C[C@H]1O OFEZSBMBBKLLBJ-BAJZRUMYSA-N 0.000 claims description 6
- OFEZSBMBBKLLBJ-UHFFFAOYSA-N cordycepine Natural products C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1C1OC(CO)CC1O OFEZSBMBBKLLBJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- UTAIYTHAJQNQDW-KQYNXXCUSA-N 1-methylguanosine Chemical compound C1=NC=2C(=O)N(C)C(N)=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H]1O UTAIYTHAJQNQDW-KQYNXXCUSA-N 0.000 claims description 5
- JRYMOPZHXMVHTA-DAGMQNCNSA-N 2-amino-7-[(2r,3r,4s,5r)-3,4-dihydroxy-5-(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]-1h-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-one Chemical compound C1=CC=2C(=O)NC(N)=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H]1O JRYMOPZHXMVHTA-DAGMQNCNSA-N 0.000 claims description 5
- BGTXMQUSDNMLDW-AEHJODJJSA-N 2-amino-9-[(2r,3s,4r,5r)-3-fluoro-3,4-dihydroxy-5-(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]-3h-purin-6-one Chemical compound C1=2NC(N)=NC(=O)C=2N=CN1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@]1(O)F BGTXMQUSDNMLDW-AEHJODJJSA-N 0.000 claims description 5
- ZAYHVCMSTBRABG-UHFFFAOYSA-N 5-Methylcytidine Natural products O=C1N=C(N)C(C)=CN1C1C(O)C(O)C(CO)O1 ZAYHVCMSTBRABG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- ZAYHVCMSTBRABG-JXOAFFINSA-N 5-methylcytidine Chemical compound O=C1N=C(N)C(C)=CN1[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 ZAYHVCMSTBRABG-JXOAFFINSA-N 0.000 claims description 5
- HCAJQHYUCKICQH-VPENINKCSA-N 8-Oxo-7,8-dihydro-2'-deoxyguanosine Chemical compound C1=2NC(N)=NC(=O)C=2NC(=O)N1[C@H]1C[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HCAJQHYUCKICQH-VPENINKCSA-N 0.000 claims description 5
- 101150077194 CAP1 gene Proteins 0.000 claims description 5
- MIKUYHXYGGJMLM-GIMIYPNGSA-N Crotonoside Natural products C1=NC2=C(N)NC(=O)N=C2N1[C@H]1O[C@@H](CO)[C@H](O)[C@@H]1O MIKUYHXYGGJMLM-GIMIYPNGSA-N 0.000 claims description 5
- NYHBQMYGNKIUIF-UHFFFAOYSA-N D-guanosine Natural products C1=2NC(N)=NC(=O)C=2N=CN1C1OC(CO)C(O)C1O NYHBQMYGNKIUIF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- UGQMRVRMYYASKQ-KQYNXXCUSA-N Inosine Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C2=NC=NC(O)=C2N=C1 UGQMRVRMYYASKQ-KQYNXXCUSA-N 0.000 claims description 5
- 229930010555 Inosine Natural products 0.000 claims description 5
- 101100245221 Mus musculus Prss8 gene Proteins 0.000 claims description 5
- 229960003786 inosine Drugs 0.000 claims description 5
- 108091032320 miR-146 stem-loop Proteins 0.000 claims description 5
- 108091043612 miR-146b stem-loop Proteins 0.000 claims description 5
- 101150014715 CAP2 gene Proteins 0.000 claims description 4
- 101710180456 CD-NTase-associated protein 4 Proteins 0.000 claims description 4
- 101100260872 Mus musculus Tmprss4 gene Proteins 0.000 claims description 4
- 241000180579 Arca Species 0.000 claims 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 abstract description 163
- 238000013519 translation Methods 0.000 abstract description 52
- 239000000203 mixture Substances 0.000 abstract description 11
- 238000005457 optimization Methods 0.000 abstract description 10
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 description 272
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 description 272
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 description 270
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 269
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 261
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 261
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 206
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 185
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 163
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 161
- 239000002773 nucleotide Chemical class 0.000 description 160
- 229920002477 rna polymer Polymers 0.000 description 125
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 106
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 79
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 76
- 230000014616 translation Effects 0.000 description 72
- 108020005345 3' Untranslated Regions Proteins 0.000 description 61
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 58
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 57
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 56
- 108091023045 Untranslated Region Proteins 0.000 description 49
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 45
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 45
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 description 44
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 37
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 36
- 239000002585 base Substances 0.000 description 35
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 35
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 34
- 108091070501 miRNA Proteins 0.000 description 34
- 108091081024 Start codon Proteins 0.000 description 30
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 26
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 24
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 20
- 210000000612 antigen-presenting cell Anatomy 0.000 description 19
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 18
- 102000040650 (ribonucleotides)n+m Human genes 0.000 description 18
- 102000053602 DNA Human genes 0.000 description 18
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 18
- 230000006870 function Effects 0.000 description 18
- 238000011144 upstream manufacturing Methods 0.000 description 18
- 108700026244 Open Reading Frames Proteins 0.000 description 17
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 17
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 17
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 17
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 17
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 17
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 17
- IVSXFFJGASXYCL-UHFFFAOYSA-N guanine Chemical compound O=C1NC(N)=NC2=NC=N[C]21 IVSXFFJGASXYCL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 16
- 241000894007 species Species 0.000 description 16
- 108020005176 AU Rich Elements Proteins 0.000 description 15
- 108091026890 Coding region Proteins 0.000 description 15
- 108010033040 Histones Proteins 0.000 description 15
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 description 14
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 14
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 14
- 102000028499 poly(A) binding Human genes 0.000 description 14
- 108091023021 poly(A) binding Proteins 0.000 description 14
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 14
- GFFGJBXGBJISGV-UHFFFAOYSA-N Adenine Chemical compound NC1=NC=NC2=C1N=CN2 GFFGJBXGBJISGV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 13
- 108090000626 DNA-directed RNA polymerases Proteins 0.000 description 13
- 102000004163 DNA-directed RNA polymerases Human genes 0.000 description 13
- 102000044126 RNA-Binding Proteins Human genes 0.000 description 13
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 13
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 13
- UYTPUPDQBNUYGX-UHFFFAOYSA-N Guanine Natural products O=C1NC(N)=NC2=C1N=CN2 UYTPUPDQBNUYGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 108010052285 Membrane Proteins Proteins 0.000 description 12
- 238000007792 addition Methods 0.000 description 12
- 230000004075 alteration Effects 0.000 description 12
- OPTASPLRGRRNAP-UHFFFAOYSA-N cytosine Chemical compound NC=1C=CNC(=O)N=1 OPTASPLRGRRNAP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 210000004292 cytoskeleton Anatomy 0.000 description 12
- 230000001086 cytosolic effect Effects 0.000 description 12
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 12
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 12
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 12
- 125000006850 spacer group Chemical group 0.000 description 12
- 238000013175 transesophageal echocardiography Methods 0.000 description 12
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 12
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 11
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 11
- 108091007767 MALAT1 Proteins 0.000 description 11
- 108010076504 Protein Sorting Signals Proteins 0.000 description 11
- 229960000074 biopharmaceutical Drugs 0.000 description 11
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 11
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 11
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 11
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 11
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 11
- RWQNBRDOKXIBIV-UHFFFAOYSA-N thymine Chemical group CC1=CNC(=O)NC1=O RWQNBRDOKXIBIV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 238000001890 transfection Methods 0.000 description 11
- 229930024421 Adenine Natural products 0.000 description 10
- 102000007999 Nuclear Proteins Human genes 0.000 description 10
- 108010089610 Nuclear Proteins Proteins 0.000 description 10
- 108700009124 Transcription Initiation Site Proteins 0.000 description 10
- 229960000643 adenine Drugs 0.000 description 10
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 10
- 230000008859 change Effects 0.000 description 10
- 210000004020 intracellular membrane Anatomy 0.000 description 10
- 230000007026 protein scission Effects 0.000 description 10
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 10
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 10
- 239000001226 triphosphate Substances 0.000 description 10
- 238000007385 chemical modification Methods 0.000 description 9
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 9
- 210000002889 endothelial cell Anatomy 0.000 description 9
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 9
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 9
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 9
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 9
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 9
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 9
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 9
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 9
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 8
- 108700020471 RNA-Binding Proteins Proteins 0.000 description 8
- 230000001588 bifunctional effect Effects 0.000 description 8
- 238000013461 design Methods 0.000 description 8
- 210000002919 epithelial cell Anatomy 0.000 description 8
- 235000018977 lysine Nutrition 0.000 description 8
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 8
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 8
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 8
- 230000008488 polyadenylation Effects 0.000 description 8
- 238000004007 reversed phase HPLC Methods 0.000 description 8
- 235000011178 triphosphate Nutrition 0.000 description 8
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 7
- 238000005571 anion exchange chromatography Methods 0.000 description 7
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 7
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 7
- 239000003623 enhancer Substances 0.000 description 7
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 7
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 7
- 108091061917 miR-221 stem-loop Proteins 0.000 description 7
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 7
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 description 7
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 6
- 108010077850 Nuclear Localization Signals Proteins 0.000 description 6
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 6
- 108091036066 Three prime untranslated region Proteins 0.000 description 6
- 206010046865 Vaccinia virus infection Diseases 0.000 description 6
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 6
- 229940104302 cytosine Drugs 0.000 description 6
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 6
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 6
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 6
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 6
- 108091040751 miR-130a stem-loop Proteins 0.000 description 6
- 108091036689 miR-296 stem-loop Proteins 0.000 description 6
- 108091007420 miR‐142 Proteins 0.000 description 6
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 6
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 6
- 230000008569 process Effects 0.000 description 6
- 239000004055 small Interfering RNA Substances 0.000 description 6
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 6
- 230000032258 transport Effects 0.000 description 6
- 238000012384 transportation and delivery Methods 0.000 description 6
- 208000007089 vaccinia Diseases 0.000 description 6
- 101710159080 Aconitate hydratase A Proteins 0.000 description 5
- 101710159078 Aconitate hydratase B Proteins 0.000 description 5
- 108090000994 Catalytic RNA Proteins 0.000 description 5
- 102000053642 Catalytic RNA Human genes 0.000 description 5
- 102100034235 ELAV-like protein 1 Human genes 0.000 description 5
- 108091093082 MiR-146 Proteins 0.000 description 5
- 230000004570 RNA-binding Effects 0.000 description 5
- 101710105008 RNA-binding protein Proteins 0.000 description 5
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 5
- JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N [3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-hydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methyl [5-(6-aminopurin-9-yl)-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] hydrogen phosphate Polymers Cc1cn(C2CC(OP(O)(=O)OCC3OC(CC3OP(O)(=O)OCC3OC(CC3O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)C(COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3CO)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)O2)c(=O)[nH]c1=O JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 5
- 230000030741 antigen processing and presentation Effects 0.000 description 5
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 5
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 description 5
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 5
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 5
- 210000001671 embryonic stem cell Anatomy 0.000 description 5
- 210000001808 exosome Anatomy 0.000 description 5
- 210000002216 heart Anatomy 0.000 description 5
- 210000003494 hepatocyte Anatomy 0.000 description 5
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 5
- 230000004807 localization Effects 0.000 description 5
- 108091047577 miR-149 stem-loop Proteins 0.000 description 5
- 108091062762 miR-21 stem-loop Proteins 0.000 description 5
- 108091047979 miR-23a-2 stem-loop Proteins 0.000 description 5
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 5
- 210000000653 nervous system Anatomy 0.000 description 5
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 5
- 238000003752 polymerase chain reaction Methods 0.000 description 5
- 230000004481 post-translational protein modification Effects 0.000 description 5
- 108091092562 ribozyme Proteins 0.000 description 5
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 5
- 229940113082 thymine Drugs 0.000 description 5
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 4
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- XKMLYUALXHKNFT-UUOKFMHZSA-N Guanosine-5'-triphosphate Chemical compound C1=2NC(N)=NC(=O)C=2N=CN1[C@@H]1O[C@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)[C@@H](O)[C@H]1O XKMLYUALXHKNFT-UUOKFMHZSA-N 0.000 description 4
- 101000578258 Homo sapiens Homeobox protein Nkx-6.2 Proteins 0.000 description 4
- 108091028066 Mir-126 Proteins 0.000 description 4
- 108091062170 Mir-22 Proteins 0.000 description 4
- 108091028049 Mir-221 microRNA Proteins 0.000 description 4
- 208000002193 Pain Diseases 0.000 description 4
- 108020004459 Small interfering RNA Proteins 0.000 description 4
- 101710137500 T7 RNA polymerase Proteins 0.000 description 4
- 108020004566 Transfer RNA Proteins 0.000 description 4
- DRTQHJPVMGBUCF-XVFCMESISA-N Uridine Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C=C1 DRTQHJPVMGBUCF-XVFCMESISA-N 0.000 description 4
- OIRDTQYFTABQOQ-KQYNXXCUSA-N adenosine Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H]1O OIRDTQYFTABQOQ-KQYNXXCUSA-N 0.000 description 4
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 4
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 4
- UORVGPXVDQYIDP-UHFFFAOYSA-N borane Chemical compound B UORVGPXVDQYIDP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000004422 calculation algorithm Methods 0.000 description 4
- 239000000460 chlorine Substances 0.000 description 4
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 4
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 4
- 239000002537 cosmetic Substances 0.000 description 4
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 4
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 4
- 238000011161 development Methods 0.000 description 4
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 4
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 4
- 108091047626 let-7a-2 stem-loop Proteins 0.000 description 4
- 108091050724 let-7b stem-loop Proteins 0.000 description 4
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 4
- 125000000325 methylidene group Chemical group [H]C([H])=* 0.000 description 4
- 108091084619 miR-125b-1 stem-loop Proteins 0.000 description 4
- 108091063409 miR-125b-2 stem-loop Proteins 0.000 description 4
- 108091023084 miR-126 stem-loop Proteins 0.000 description 4
- 108091065272 miR-126-1 stem-loop Proteins 0.000 description 4
- 108091081187 miR-126-2 stem-loop Proteins 0.000 description 4
- 108091030790 miR-126-3 stem-loop Proteins 0.000 description 4
- 108091092317 miR-126-4 stem-loop Proteins 0.000 description 4
- 108091052728 miR-132 stem-loop Proteins 0.000 description 4
- 108091027019 miR-132-1 stem-loop Proteins 0.000 description 4
- 108091079012 miR-133a Proteins 0.000 description 4
- 108091024038 miR-133a stem-loop Proteins 0.000 description 4
- 108091079016 miR-133b Proteins 0.000 description 4
- 108091043162 miR-133b stem-loop Proteins 0.000 description 4
- 108091073532 miR-143 stem-loop Proteins 0.000 description 4
- 108091057317 miR-151a stem-loop Proteins 0.000 description 4
- 108091091751 miR-17 stem-loop Proteins 0.000 description 4
- 108091062221 miR-18a stem-loop Proteins 0.000 description 4
- 108091086416 miR-192 stem-loop Proteins 0.000 description 4
- 108091074450 miR-200c stem-loop Proteins 0.000 description 4
- 108091049679 miR-20a stem-loop Proteins 0.000 description 4
- 108091026331 miR-214 stem-loop Proteins 0.000 description 4
- 108091048888 miR-214-1 stem-loop Proteins 0.000 description 4
- 108091078347 miR-214-2 stem-loop Proteins 0.000 description 4
- 108091035552 miR-214-3 stem-loop Proteins 0.000 description 4
- 108091086642 miR-216a stem-loop Proteins 0.000 description 4
- 108091063489 miR-221-1 stem-loop Proteins 0.000 description 4
- 108091055391 miR-221-2 stem-loop Proteins 0.000 description 4
- 108091031076 miR-221-3 stem-loop Proteins 0.000 description 4
- 108091048857 miR-24-1 stem-loop Proteins 0.000 description 4
- 108091047483 miR-24-2 stem-loop Proteins 0.000 description 4
- 108091043187 miR-30a stem-loop Proteins 0.000 description 4
- 108091029750 miR-30a-1 stem-loop Proteins 0.000 description 4
- 108091030035 miR-30a-2 stem-loop Proteins 0.000 description 4
- 108091063344 miR-30b stem-loop Proteins 0.000 description 4
- 108091072917 miR-30c-1 stem-loop Proteins 0.000 description 4
- 108091066131 miR-30c-2 stem-loop Proteins 0.000 description 4
- 108091039521 miR-363 stem-loop Proteins 0.000 description 4
- 108091053306 miR-493 stem-loop Proteins 0.000 description 4
- 108091038507 miR-92b stem-loop Proteins 0.000 description 4
- 108091053257 miR-99b stem-loop Proteins 0.000 description 4
- 230000003278 mimic effect Effects 0.000 description 4
- 230000036407 pain Effects 0.000 description 4
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 4
- 239000000047 product Substances 0.000 description 4
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 4
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 4
- 125000002264 triphosphate group Chemical group [H]OP(=O)(O[H])OP(=O)(O[H])OP(=O)(O[H])O* 0.000 description 4
- OTDJAMXESTUWLO-UUOKFMHZSA-N 2-amino-9-[(2R,3R,4S,5R)-3,4-dihydroxy-5-(hydroxymethyl)-2-oxolanyl]-3H-purine-6-thione Chemical class C12=NC(N)=NC(S)=C2N=CN1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H]1O OTDJAMXESTUWLO-UUOKFMHZSA-N 0.000 description 3
- 108091023037 Aptamer Proteins 0.000 description 3
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 3
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 3
- 241000710198 Foot-and-mouth disease virus Species 0.000 description 3
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 description 3
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 3
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 3
- 108010066154 Nuclear Export Signals Proteins 0.000 description 3
- 102000002508 Peptide Elongation Factors Human genes 0.000 description 3
- 108010068204 Peptide Elongation Factors Proteins 0.000 description 3
- 102000006437 Proprotein Convertases Human genes 0.000 description 3
- 108010044159 Proprotein Convertases Proteins 0.000 description 3
- KDCGOANMDULRCW-UHFFFAOYSA-N Purine Natural products N1=CNC2=NC=NC2=C1 KDCGOANMDULRCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108091000106 RNA cap binding Proteins 0.000 description 3
- 102000028391 RNA cap binding Human genes 0.000 description 3
- 108091030071 RNAI Proteins 0.000 description 3
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 3
- 230000009471 action Effects 0.000 description 3
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 3
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 3
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 235000009697 arginine Nutrition 0.000 description 3
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 3
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 3
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 3
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 3
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 3
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 3
- 230000030833 cell death Effects 0.000 description 3
- 230000001120 cytoprotective effect Effects 0.000 description 3
- 230000034994 death Effects 0.000 description 3
- 210000004443 dendritic cell Anatomy 0.000 description 3
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 3
- 210000002472 endoplasmic reticulum Anatomy 0.000 description 3
- 230000009368 gene silencing by RNA Effects 0.000 description 3
- 210000003958 hematopoietic stem cell Anatomy 0.000 description 3
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 3
- 230000015788 innate immune response Effects 0.000 description 3
- 108091045440 let-7a-1 stem-loop Proteins 0.000 description 3
- 108091047557 let-7a-3 stem-loop Proteins 0.000 description 3
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 3
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 3
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 3
- 238000007069 methylation reaction Methods 0.000 description 3
- 108091066112 miR-122-1 stem-loop Proteins 0.000 description 3
- 108091057488 miR-122-2 stem-loop Proteins 0.000 description 3
- 108091041344 miR-130a-1 stem-loop Proteins 0.000 description 3
- 108091091365 miR-130a-2 stem-loop Proteins 0.000 description 3
- 108091041017 miR-132-2 stem-loop Proteins 0.000 description 3
- 108091045692 miR-132-3 stem-loop Proteins 0.000 description 3
- 108091073227 miR-132-4 stem-loop Proteins 0.000 description 3
- 108091053592 miR-145-1 stem-loop Proteins 0.000 description 3
- 108091056559 miR-145-2 stem-loop Proteins 0.000 description 3
- 108091040069 miR-146a-1 stem-loop Proteins 0.000 description 3
- 108091081537 miR-146a-2 stem-loop Proteins 0.000 description 3
- 108091044046 miR-17-1 stem-loop Proteins 0.000 description 3
- 108091065423 miR-17-3 stem-loop Proteins 0.000 description 3
- 108091089177 miR-194-2 stem-loop Proteins 0.000 description 3
- 108091031479 miR-204 stem-loop Proteins 0.000 description 3
- 108091048308 miR-210 stem-loop Proteins 0.000 description 3
- 108091092825 miR-24 stem-loop Proteins 0.000 description 3
- 108091055059 miR-30c stem-loop Proteins 0.000 description 3
- 108091023108 miR-30e stem-loop Proteins 0.000 description 3
- 108091027549 miR-30e-1 stem-loop Proteins 0.000 description 3
- 108091029213 miR-30e-2 stem-loop Proteins 0.000 description 3
- 108091085488 miR-30e-3 stem-loop Proteins 0.000 description 3
- 108091029119 miR-34a stem-loop Proteins 0.000 description 3
- 108091025212 miR-380 stem-loop Proteins 0.000 description 3
- 108091030520 miR-7-2 stem-loop Proteins 0.000 description 3
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 3
- 210000000496 pancreas Anatomy 0.000 description 3
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 3
- 125000002467 phosphate group Chemical group [H]OP(=O)(O[H])O[*] 0.000 description 3
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 3
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 3
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 3
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 3
- 230000002103 transcriptional effect Effects 0.000 description 3
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 3
- GVJHHUAWPYXKBD-UHFFFAOYSA-N (±)-α-Tocopherol Chemical compound OC1=C(C)C(C)=C2OC(CCCC(C)CCCC(C)CCCC(C)C)(C)CCC2=C1C GVJHHUAWPYXKBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 101800001779 2'-O-methyltransferase Proteins 0.000 description 2
- VTGBLFNEDHVUQA-XUTVFYLZSA-N 4-Thio-1-methyl-pseudouridine Chemical compound S=C1NC(=O)N(C)C=C1[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 VTGBLFNEDHVUQA-XUTVFYLZSA-N 0.000 description 2
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 description 2
- MBVFRSJFKMJRHA-UHFFFAOYSA-N 4-fluoro-1-benzofuran-7-carbaldehyde Chemical compound FC1=CC=C(C=O)C2=C1C=CO2 MBVFRSJFKMJRHA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 7553-56-2 Chemical compound [I] ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102100031786 Adiponectin Human genes 0.000 description 2
- 108010076365 Adiponectin Proteins 0.000 description 2
- 108020005544 Antisense RNA Proteins 0.000 description 2
- 206010003445 Ascites Diseases 0.000 description 2
- WKBOTKDWSSQWDR-UHFFFAOYSA-N Bromine atom Chemical compound [Br] WKBOTKDWSSQWDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002126 C01EB10 - Adenosine Substances 0.000 description 2
- 102000049320 CD36 Human genes 0.000 description 2
- 108010045374 CD36 Antigens Proteins 0.000 description 2
- 108010017954 Calcium-Transporting ATPases Proteins 0.000 description 2
- 102000014914 Carrier Proteins Human genes 0.000 description 2
- ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N Chlorine atom Chemical compound [Cl] ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000710127 Cricket paralysis virus Species 0.000 description 2
- HMFHBZSHGGEWLO-SOOFDHNKSA-N D-ribofuranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H]1O HMFHBZSHGGEWLO-SOOFDHNKSA-N 0.000 description 2
- 108010008532 Deoxyribonuclease I Proteins 0.000 description 2
- 102100030012 Deoxyribonuclease-1 Human genes 0.000 description 2
- 108010016626 Dipeptides Proteins 0.000 description 2
- 238000008157 ELISA kit Methods 0.000 description 2
- 241000710188 Encephalomyocarditis virus Species 0.000 description 2
- 108010042407 Endonucleases Proteins 0.000 description 2
- 241000991587 Enterovirus C Species 0.000 description 2
- 102100022462 Eukaryotic initiation factor 4A-II Human genes 0.000 description 2
- PXGOKWXKJXAPGV-UHFFFAOYSA-N Fluorine Chemical compound FF PXGOKWXKJXAPGV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108090001126 Furin Proteins 0.000 description 2
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108091093094 Glycol nucleic acid Proteins 0.000 description 2
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 2
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 2
- 108010017080 Granulocyte Colony-Stimulating Factor Proteins 0.000 description 2
- 102100039619 Granulocyte colony-stimulating factor Human genes 0.000 description 2
- 108010017213 Granulocyte-Macrophage Colony-Stimulating Factor Proteins 0.000 description 2
- 102100039620 Granulocyte-macrophage colony-stimulating factor Human genes 0.000 description 2
- 108091027874 Group I catalytic intron Proteins 0.000 description 2
- 241000711549 Hepacivirus C Species 0.000 description 2
- 101001044475 Homo sapiens Eukaryotic initiation factor 4A-II Proteins 0.000 description 2
- 101001008919 Homo sapiens Kallikrein-10 Proteins 0.000 description 2
- 101001017332 Homo sapiens Membrane-bound transcription factor site-1 protease Proteins 0.000 description 2
- 101001120822 Homo sapiens Putative microRNA 17 host gene protein Proteins 0.000 description 2
- 108091070508 Homo sapiens let-7e stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091070510 Homo sapiens let-7f-1 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091069046 Homo sapiens let-7g stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091069047 Homo sapiens let-7i stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 2
- 102000014150 Interferons Human genes 0.000 description 2
- 108010050904 Interferons Proteins 0.000 description 2
- 102100027613 Kallikrein-10 Human genes 0.000 description 2
- ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N L-Proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 2
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 2
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 2
- KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N L-valine Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108091064450 Ligase ribozyme Proteins 0.000 description 2
- 102100034028 Membrane-bound transcription factor site-1 protease Human genes 0.000 description 2
- 108091060568 Mir-133 microRNA precursor family Proteins 0.000 description 2
- 241000714177 Murine leukemia virus Species 0.000 description 2
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 2
- 102100032970 Myogenin Human genes 0.000 description 2
- 108010056785 Myogenin Proteins 0.000 description 2
- NWIBSHFKIJFRCO-WUDYKRTCSA-N Mytomycin Chemical compound C1N2C(C(C(C)=C(N)C3=O)=O)=C3[C@@H](COC(N)=O)[C@@]2(OC)[C@@H]2[C@H]1N2 NWIBSHFKIJFRCO-WUDYKRTCSA-N 0.000 description 2
- 102100032132 Neuroendocrine convertase 1 Human genes 0.000 description 2
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 2
- 108091093037 Peptide nucleic acid Proteins 0.000 description 2
- 241000709664 Picornaviridae Species 0.000 description 2
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108090000544 Proprotein convertase 1 Proteins 0.000 description 2
- 102100038946 Proprotein convertase subtilisin/kexin type 6 Human genes 0.000 description 2
- 101710180552 Proprotein convertase subtilisin/kexin type 6 Proteins 0.000 description 2
- 102100026055 Putative microRNA 17 host gene protein Human genes 0.000 description 2
- 101710086015 RNA ligase Proteins 0.000 description 2
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 2
- PYMYPHUHKUWMLA-LMVFSUKVSA-N Ribose Natural products OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-LMVFSUKVSA-N 0.000 description 2
- MEFKEPWMEQBLKI-AIRLBKTGSA-N S-adenosyl-L-methioninate Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](C[S+](CC[C@H](N)C([O-])=O)C)O[C@H]1N1C2=NC=NC(N)=C2N=C1 MEFKEPWMEQBLKI-AIRLBKTGSA-N 0.000 description 2
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 2
- 238000012300 Sequence Analysis Methods 0.000 description 2
- 241000713311 Simian immunodeficiency virus Species 0.000 description 2
- 108091027967 Small hairpin RNA Proteins 0.000 description 2
- NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N Sulfur Chemical compound [S] NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- 108700026226 TATA Box Proteins 0.000 description 2
- 108091046869 Telomeric non-coding RNA Proteins 0.000 description 2
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 2
- 108091046915 Threose nucleic acid Proteins 0.000 description 2
- 101001023030 Toxoplasma gondii Myosin-D Proteins 0.000 description 2
- 241000219793 Trifolium Species 0.000 description 2
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Natural products CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010047700 Vomiting Diseases 0.000 description 2
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 2
- DZBUGLKDJFMEHC-UHFFFAOYSA-N acridine Chemical compound C1=CC=CC2=CC3=CC=CC=C3N=C21 DZBUGLKDJFMEHC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 2
- 229960001570 ademetionine Drugs 0.000 description 2
- 229960005305 adenosine Drugs 0.000 description 2
- 238000001261 affinity purification Methods 0.000 description 2
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 2
- 125000000304 alkynyl group Chemical group 0.000 description 2
- HMFHBZSHGGEWLO-UHFFFAOYSA-N alpha-D-Furanose-Ribose Natural products OCC1OC(O)C(O)C1O HMFHBZSHGGEWLO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000001450 anions Chemical class 0.000 description 2
- 230000001028 anti-proliverative effect Effects 0.000 description 2
- 230000000692 anti-sense effect Effects 0.000 description 2
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 2
- DRTQHJPVMGBUCF-PSQAKQOGSA-N beta-L-uridine Natural products O[C@H]1[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@@H]1N1C(=O)NC(=O)C=C1 DRTQHJPVMGBUCF-PSQAKQOGSA-N 0.000 description 2
- 108091008324 binding proteins Proteins 0.000 description 2
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 2
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 2
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 description 2
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 2
- 210000001124 body fluid Anatomy 0.000 description 2
- 239000010839 body fluid Substances 0.000 description 2
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 2
- 210000002798 bone marrow cell Anatomy 0.000 description 2
- 229910000085 borane Inorganic materials 0.000 description 2
- GDTBXPJZTBHREO-UHFFFAOYSA-N bromine Substances BrBr GDTBXPJZTBHREO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910052794 bromium Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 2
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 2
- 238000005251 capillar electrophoresis Methods 0.000 description 2
- 238000001818 capillary gel electrophoresis Methods 0.000 description 2
- 230000000747 cardiac effect Effects 0.000 description 2
- 210000001175 cerebrospinal fluid Anatomy 0.000 description 2
- 229910052801 chlorine Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000011260 co-administration Methods 0.000 description 2
- 239000003184 complementary RNA Substances 0.000 description 2
- 238000010668 complexation reaction Methods 0.000 description 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 2
- 238000004590 computer program Methods 0.000 description 2
- 239000000356 contaminant Substances 0.000 description 2
- 210000000805 cytoplasm Anatomy 0.000 description 2
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 2
- 238000000432 density-gradient centrifugation Methods 0.000 description 2
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 2
- 238000010494 dissociation reaction Methods 0.000 description 2
- 230000005593 dissociations Effects 0.000 description 2
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 2
- 206010016256 fatigue Diseases 0.000 description 2
- 239000011737 fluorine Substances 0.000 description 2
- 229910052731 fluorine Inorganic materials 0.000 description 2
- OVBPIULPVIDEAO-LBPRGKRZSA-N folic acid Chemical compound C=1N=C2NC(N)=NC(=O)C2=NC=1CNC1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 OVBPIULPVIDEAO-LBPRGKRZSA-N 0.000 description 2
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 2
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 2
- 229960002989 glutamic acid Drugs 0.000 description 2
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 2
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000004554 glutamine Nutrition 0.000 description 2
- RQFCJASXJCIDSX-UUOKFMHZSA-N guanosine 5'-monophosphate Chemical class C1=2NC(N)=NC(=O)C=2N=CN1[C@@H]1O[C@H](COP(O)(O)=O)[C@@H](O)[C@H]1O RQFCJASXJCIDSX-UUOKFMHZSA-N 0.000 description 2
- 210000000777 hematopoietic system Anatomy 0.000 description 2
- 238000009396 hybridization Methods 0.000 description 2
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 2
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 2
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 2
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 2
- 230000001976 improved effect Effects 0.000 description 2
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 2
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 2
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 2
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 2
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical compound N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940079322 interferon Drugs 0.000 description 2
- 229910052740 iodine Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000011630 iodine Substances 0.000 description 2
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 2
- 229960000310 isoleucine Drugs 0.000 description 2
- AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N isoleucine Natural products CCC(C)C(N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108091023663 let-7 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091063478 let-7-1 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091049777 let-7-2 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091033753 let-7d stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091079176 let-7d-1 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091036331 let-7d-2 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091043994 let-7g stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 description 2
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 2
- 238000004895 liquid chromatography mass spectrometry Methods 0.000 description 2
- 125000000956 methoxy group Chemical group [H]C([H])([H])O* 0.000 description 2
- 125000004184 methoxymethyl group Chemical group [H]C([H])([H])OC([H])([H])* 0.000 description 2
- 230000011987 methylation Effects 0.000 description 2
- 125000004092 methylthiomethyl group Chemical group [H]C([H])([H])SC([H])([H])* 0.000 description 2
- 108091028606 miR-1 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091092072 miR-100 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091024975 miR-100-1 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091053561 miR-101-1 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091059450 miR-105-1 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091024075 miR-105-2 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091045790 miR-106b stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091035155 miR-10a stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091084882 miR-10a-1 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091038228 miR-1228 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091040341 miR-1236 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091043184 miR-1246 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091044988 miR-125a stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091050014 miR-125b-3 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091091207 miR-127 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091047499 miR-1271 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091028466 miR-130b stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091026034 miR-130b-1 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091023685 miR-133 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091026523 miR-135a stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091026375 miR-135b stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091047498 miR-138-1 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091031925 miR-138-2 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091029379 miR-139 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091046685 miR-139-1 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091032392 miR-146a-3 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091027034 miR-148a stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091026495 miR-148b stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091090860 miR-150 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091059964 miR-154 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091083308 miR-155 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091091301 miR-155-1 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091041686 miR-155-2 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091037340 miR-15a stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091069947 miR-15a-1 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091031326 miR-15b stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091027943 miR-16 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091074057 miR-16-1 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091056204 miR-16-2 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091049641 miR-181-1 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091053227 miR-181a-1 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091092591 miR-181a-2 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091064825 miR-181c stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091023796 miR-182 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091084881 miR-182-1 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091029500 miR-183 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091058866 miR-183-1 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091045731 miR-183-2 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091043778 miR-183-3 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091047641 miR-186 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091028751 miR-188 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091038080 miR-18a-1 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091046933 miR-18b stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091054642 miR-194 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091080253 miR-194-1 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091088515 miR-197 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091025686 miR-199a stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091083769 miR-199a-1 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091047470 miR-199a-2 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091048350 miR-199a-3 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091056793 miR-199a-4 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091092012 miR-199b stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091050874 miR-19a stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091028067 miR-19b-1 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091091434 miR-19b-2 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091059199 miR-200a stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091089775 miR-200b stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091056309 miR-200b-1 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091026985 miR-200b-2 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091063796 miR-206 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091071651 miR-208 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091084446 miR-208a stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091062547 miR-208a-1 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091055375 miR-208a-2 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091047268 miR-208b stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091030817 miR-20a-1 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091086627 miR-20a-2 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091069790 miR-20a-3 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091053935 miR-212 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091080321 miR-222 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091091392 miR-222-1 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091071617 miR-222-2 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091086421 miR-223 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091035591 miR-23a stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091045911 miR-23a-1 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091032054 miR-23a-3 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091029166 miR-23a-4 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091092722 miR-23b stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091085564 miR-25 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091052996 miR-26a-1 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091023402 miR-26a-2 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091083275 miR-26b stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091079021 miR-27a stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091043371 miR-27a-1 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091070404 miR-27b stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091027986 miR-27b-1 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091032408 miR-27b-2 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091039812 miR-28 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091088477 miR-29a stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091047189 miR-29c stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091079151 miR-29c-1 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091029203 miR-301 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091026505 miR-301a stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091024480 miR-301a-1 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091084454 miR-302a stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091050195 miR-302b stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091056763 miR-302c stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091043104 miR-3065 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091091870 miR-30a-3 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091067477 miR-30a-4 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091057431 miR-30d stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091090925 miR-30d-1 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091024082 miR-32 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091062587 miR-32-1 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091083037 miR-323a stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091046551 miR-324 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091090692 miR-337 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091070038 miR-338 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091065159 miR-339 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091023791 miR-339-1 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091049902 miR-33a stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091082645 miR-33a-1 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091048082 miR-33a-2 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091088856 miR-345 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091051052 miR-345-1 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091049311 miR-345-2 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091068963 miR-361 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091062637 miR-367 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091057188 miR-369 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091055954 miR-377 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091050135 miR-382 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091037240 miR-423 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091030938 miR-424 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091090987 miR-425 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091082652 miR-425-1 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091056281 miR-449b stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091032770 miR-451 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091030646 miR-451a stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091083237 miR-451b stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091044133 miR-454 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091048941 miR-499a stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091051011 miR-499b stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091063342 miR-499b-1 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091049413 miR-499b-2 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091057916 miR-499b-3 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091034304 miR-548b stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091029118 miR-548c stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091054834 miR-548g stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091062423 miR-548i stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091063105 miR-548i-1 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091052473 miR-548i-2 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091058402 miR-548i-3 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091028345 miR-548i-4 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091089916 miR-548i-5 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091024672 miR-548n stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091085840 miR-548n-1 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091063358 miR-548n-2 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091080660 miR-548o-2 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091081872 miR-664 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091032198 miR-664a-1 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091037014 miR-7-1 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091084078 miR-744 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091045794 miR-766 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091029509 miR-802 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091053417 miR-885 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091089992 miR-9-1 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091071572 miR-9-2 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091076838 miR-9-3 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091060187 miR-9-5 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091058972 miR-9-6 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091028159 miR-92a-1 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091025616 miR-92a-2 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091081014 miR-92b-1 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091032846 miR-92b-2 stem loop Proteins 0.000 description 2
- 108091032902 miR-93 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091062136 miR-939 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091086713 miR-96 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091028482 miR-96-1 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091090007 miR-96-2 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 230000005012 migration Effects 0.000 description 2
- 238000013508 migration Methods 0.000 description 2
- 239000007758 minimum essential medium Substances 0.000 description 2
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 2
- 210000004940 nucleus Anatomy 0.000 description 2
- 238000002515 oligonucleotide synthesis Methods 0.000 description 2
- 235000021317 phosphate Nutrition 0.000 description 2
- 229960002429 proline Drugs 0.000 description 2
- 210000002307 prostate Anatomy 0.000 description 2
- 108020001580 protein domains Proteins 0.000 description 2
- 238000001243 protein synthesis Methods 0.000 description 2
- ZCCUUQDIBDJBTK-UHFFFAOYSA-N psoralen Chemical compound C1=C2OC(=O)C=CC2=CC2=C1OC=C2 ZCCUUQDIBDJBTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000000275 quality assurance Methods 0.000 description 2
- 238000003908 quality control method Methods 0.000 description 2
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 210000001908 sarcoplasmic reticulum Anatomy 0.000 description 2
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 2
- JRPHGDYSKGJTKZ-UHFFFAOYSA-N selenophosphoric acid Chemical class OP(O)([SeH])=O JRPHGDYSKGJTKZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000009758 senescence Effects 0.000 description 2
- 238000001542 size-exclusion chromatography Methods 0.000 description 2
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 2
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 description 2
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 2
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 2
- 125000000446 sulfanediyl group Chemical group *S* 0.000 description 2
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000011593 sulfur Substances 0.000 description 2
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 2
- 230000002194 synthesizing effect Effects 0.000 description 2
- 238000005287 template synthesis Methods 0.000 description 2
- 230000002123 temporal effect Effects 0.000 description 2
- RYYWUUFWQRZTIU-UHFFFAOYSA-K thiophosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=S RYYWUUFWQRZTIU-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- 125000000341 threoninyl group Chemical group [H]OC([H])(C([H])([H])[H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 2
- UNXRWKVEANCORM-UHFFFAOYSA-N triphosphoric acid Chemical compound OP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O UNXRWKVEANCORM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000007306 turnover Effects 0.000 description 2
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 description 2
- DRTQHJPVMGBUCF-UHFFFAOYSA-N uracil arabinoside Natural products OC1C(O)C(CO)OC1N1C(=O)NC(=O)C=C1 DRTQHJPVMGBUCF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940045145 uridine Drugs 0.000 description 2
- 210000003932 urinary bladder Anatomy 0.000 description 2
- 239000004474 valine Substances 0.000 description 2
- 230000008673 vomiting Effects 0.000 description 2
- ZIZMDHZLHJBNSQ-UHFFFAOYSA-N 1,2-dihydrophenazine Chemical compound C1=CC=C2N=C(C=CCC3)C3=NC2=C1 ZIZMDHZLHJBNSQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OYTVCAGSWWRUII-DWJKKKFUSA-N 1-Methyl-1-deazapseudouridine Chemical compound CC1C=C(C(=O)NC1=O)[C@H]2[C@@H]([C@@H]([C@H](O2)CO)O)O OYTVCAGSWWRUII-DWJKKKFUSA-N 0.000 description 1
- RQFCJASXJCIDSX-UHFFFAOYSA-N 14C-Guanosin-5'-monophosphat Natural products C1=2NC(N)=NC(=O)C=2N=CN1C1OC(COP(O)(O)=O)C(O)C1O RQFCJASXJCIDSX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000003287 1H-imidazol-4-ylmethyl group Chemical group [H]N1C([H])=NC(C([H])([H])[*])=C1[H] 0.000 description 1
- VEPOHXYIFQMVHW-XOZOLZJESA-N 2,3-dihydroxybutanedioic acid (2S,3S)-3,4-dimethyl-2-phenylmorpholine Chemical compound OC(C(O)C(O)=O)C(O)=O.C[C@H]1[C@@H](OCCN1C)c1ccccc1 VEPOHXYIFQMVHW-XOZOLZJESA-N 0.000 description 1
- JCNGYIGHEUKAHK-DWJKKKFUSA-N 2-Thio-1-methyl-1-deazapseudouridine Chemical compound CC1C=C(C(=O)NC1=S)[C@H]2[C@@H]([C@@H]([C@H](O2)CO)O)O JCNGYIGHEUKAHK-DWJKKKFUSA-N 0.000 description 1
- BVLGKOVALHRKNM-XUTVFYLZSA-N 2-Thio-1-methylpseudouridine Chemical compound CN1C=C(C(=O)NC1=S)[C@H]2[C@@H]([C@@H]([C@H](O2)CO)O)O BVLGKOVALHRKNM-XUTVFYLZSA-N 0.000 description 1
- LRFJOIPOPUJUMI-KWXKLSQISA-N 2-[2,2-bis[(9z,12z)-octadeca-9,12-dienyl]-1,3-dioxolan-4-yl]-n,n-dimethylethanamine Chemical compound CCCCC\C=C/C\C=C/CCCCCCCCC1(CCCCCCCC\C=C/C\C=C/CCCCC)OCC(CCN(C)C)O1 LRFJOIPOPUJUMI-KWXKLSQISA-N 0.000 description 1
- NUBJGTNGKODGGX-YYNOVJQHSA-N 2-[5-[(2s,3r,4s,5r)-3,4-dihydroxy-5-(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]-2,4-dioxopyrimidin-1-yl]acetic acid Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1C1=CN(CC(O)=O)C(=O)NC1=O NUBJGTNGKODGGX-YYNOVJQHSA-N 0.000 description 1
- LCKIHCRZXREOJU-KYXWUPHJSA-N 2-[[5-[(2S,3R,4S,5R)-3,4-dihydroxy-5-(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]-2,4-dioxopyrimidin-1-yl]methylamino]ethanesulfonic acid Chemical compound C(NCCS(=O)(=O)O)N1C=C([C@H]2[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)C(NC1=O)=O LCKIHCRZXREOJU-KYXWUPHJSA-N 0.000 description 1
- QZWIMRRDHYIPGN-KYXWUPHJSA-N 2-[[5-[(2S,3R,4S,5R)-3,4-dihydroxy-5-(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]-2-oxo-4-sulfanylidenepyrimidin-1-yl]methylamino]ethanesulfonic acid Chemical compound C(NCCS(=O)(=O)O)N1C=C([C@H]2[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)C(NC1=O)=S QZWIMRRDHYIPGN-KYXWUPHJSA-N 0.000 description 1
- CTPQMQZKRWLMRA-LYTXVXJPSA-N 2-amino-4-[5-[(2s,3r,4s,5r)-3,4-dihydroxy-5-(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]-3-methyl-2,6-dioxopyrimidin-1-yl]butanoic acid Chemical compound O=C1N(CCC(N)C(O)=O)C(=O)N(C)C=C1[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CTPQMQZKRWLMRA-LYTXVXJPSA-N 0.000 description 1
- RLZMYTZDQAVNIN-ZOQUXTDFSA-N 2-methoxy-4-thio-uridine Chemical compound COC1=NC(=S)C=CN1[C@H]2[C@@H]([C@@H]([C@H](O2)CO)O)O RLZMYTZDQAVNIN-ZOQUXTDFSA-N 0.000 description 1
- WBVPJIKOWUQTSD-ZOQUXTDFSA-N 2-methoxyuridine Chemical compound COC1=NC(=O)C=CN1[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 WBVPJIKOWUQTSD-ZOQUXTDFSA-N 0.000 description 1
- DXEJZRDJXRVUPN-XUTVFYLZSA-N 3-Methylpseudouridine Chemical compound O=C1N(C)C(=O)NC=C1[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 DXEJZRDJXRVUPN-XUTVFYLZSA-N 0.000 description 1
- VXGRJERITKFWPL-UHFFFAOYSA-N 4',5'-Dihydropsoralen Natural products C1=C2OC(=O)C=CC2=CC2=C1OCC2 VXGRJERITKFWPL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FGFVODMBKZRMMW-XUTVFYLZSA-N 4-Methoxy-2-thiopseudouridine Chemical compound COC1=C(C=NC(=S)N1)[C@H]2[C@@H]([C@@H]([C@H](O2)CO)O)O FGFVODMBKZRMMW-XUTVFYLZSA-N 0.000 description 1
- HOCJTJWYMOSXMU-XUTVFYLZSA-N 4-Methoxypseudouridine Chemical compound COC1=C(C=NC(=O)N1)[C@H]2[C@@H]([C@@H]([C@H](O2)CO)O)O HOCJTJWYMOSXMU-XUTVFYLZSA-N 0.000 description 1
- ITGWEVGJUSMCEA-KYXWUPHJSA-N 5-[(2s,3r,4s,5r)-3,4-dihydroxy-5-(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]-1-prop-1-ynylpyrimidine-2,4-dione Chemical compound O=C1NC(=O)N(C#CC)C=C1[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 ITGWEVGJUSMCEA-KYXWUPHJSA-N 0.000 description 1
- IHLOTZVBEUFDMD-UUOKFMHZSA-N 7-[(2r,3r,4s,5r)-3,4-dihydroxy-5-(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]-2,2-dioxo-1h-imidazo[4,5-c][1,2,6]thiadiazin-4-one Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(NS(=O)(=O)NC2=O)=C2N=C1 IHLOTZVBEUFDMD-UUOKFMHZSA-N 0.000 description 1
- MSSXOMSJDRHRMC-UHFFFAOYSA-N 9H-purine-2,6-diamine Chemical compound NC1=NC(N)=C2NC=NC2=N1 MSSXOMSJDRHRMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100034540 Adenomatous polyposis coli protein Human genes 0.000 description 1
- ZKHQWZAMYRWXGA-UHFFFAOYSA-N Adenosine triphosphate Natural products C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1C1OC(COP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)C(O)C1O ZKHQWZAMYRWXGA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZKHQWZAMYRWXGA-KQYNXXCUSA-N Adenosine triphosphate Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)[C@@H](O)[C@H]1O ZKHQWZAMYRWXGA-KQYNXXCUSA-N 0.000 description 1
- 201000004384 Alopecia Diseases 0.000 description 1
- 108010085443 Anserine Proteins 0.000 description 1
- 108010071619 Apolipoproteins Proteins 0.000 description 1
- 102000007592 Apolipoproteins Human genes 0.000 description 1
- 101000719121 Arabidopsis thaliana Protein MEI2-like 1 Proteins 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N Asparagine Natural products OC(=O)C(N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BSYNRYMUTXBXSQ-UHFFFAOYSA-N Aspirin Chemical compound CC(=O)OC1=CC=CC=C1C(O)=O BSYNRYMUTXBXSQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000709750 Barley yellow dwarf virus-PAV Species 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- 101000741065 Bos taurus Beta-casein Proteins 0.000 description 1
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 125000001433 C-terminal amino-acid group Chemical group 0.000 description 1
- PCDQPRRSZKQHHS-XVFCMESISA-N CTP Chemical compound O=C1N=C(N)C=CN1[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)O1 PCDQPRRSZKQHHS-XVFCMESISA-N 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BHPQYMZQTOCNFJ-UHFFFAOYSA-N Calcium cation Chemical compound [Ca+2] BHPQYMZQTOCNFJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101000841393 Candida albicans Probable NADPH dehydrogenase Proteins 0.000 description 1
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 1
- 101000936929 Canis lupus familiaris Sarcoplasmic/endoplasmic reticulum calcium ATPase 2 Proteins 0.000 description 1
- QRYRORQUOLYVBU-VBKZILBWSA-N Carnosic acid Natural products CC([C@@H]1CC2)(C)CCC[C@]1(C(O)=O)C1=C2C=C(C(C)C)C(O)=C1O QRYRORQUOLYVBU-VBKZILBWSA-N 0.000 description 1
- 108010087806 Carnosine Proteins 0.000 description 1
- 108010076119 Caseins Proteins 0.000 description 1
- 206010050337 Cerumen impaction Diseases 0.000 description 1
- 208000027104 Chemotherapy-Related Cognitive Impairment Diseases 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 206010008631 Cholera Diseases 0.000 description 1
- 208000006545 Chronic Obstructive Pulmonary Disease Diseases 0.000 description 1
- 102100034229 Citramalyl-CoA lyase, mitochondrial Human genes 0.000 description 1
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000001333 Colorectal Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 108091035707 Consensus sequence Proteins 0.000 description 1
- RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N Copper Chemical compound [Cu] RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010011224 Cough Diseases 0.000 description 1
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 1
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 1
- 102000010831 Cytoskeletal Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010037414 Cytoskeletal Proteins Proteins 0.000 description 1
- 108010008286 DNA nucleotidylexotransferase Proteins 0.000 description 1
- 102100029764 DNA-directed DNA/RNA polymerase mu Human genes 0.000 description 1
- 101100481404 Danio rerio tie1 gene Proteins 0.000 description 1
- 208000019505 Deglutition disease Diseases 0.000 description 1
- 102220577240 Density-regulated protein_K93Y_mutation Human genes 0.000 description 1
- 108091027757 Deoxyribozyme Proteins 0.000 description 1
- YKWUPFSEFXSGRT-JWMKEVCDSA-N Dihydropseudouridine Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1C1C(=O)NC(=O)NC1 YKWUPFSEFXSGRT-JWMKEVCDSA-N 0.000 description 1
- 241000255581 Drosophila <fruit fly, genus> Species 0.000 description 1
- 101100361074 Drosophila melanogaster RNaseZ gene Proteins 0.000 description 1
- 101100408379 Drosophila melanogaster piwi gene Proteins 0.000 description 1
- 206010013952 Dysphonia Diseases 0.000 description 1
- 208000000059 Dyspnea Diseases 0.000 description 1
- 206010013975 Dyspnoeas Diseases 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000016662 ELAV Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010053101 ELAV Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102100031780 Endonuclease Human genes 0.000 description 1
- 102000004533 Endonucleases Human genes 0.000 description 1
- 206010015150 Erythema Diseases 0.000 description 1
- 102000003951 Erythropoietin Human genes 0.000 description 1
- 108090000394 Erythropoietin Proteins 0.000 description 1
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 1
- 101710091918 Eukaryotic translation initiation factor 4E Proteins 0.000 description 1
- 102100027304 Eukaryotic translation initiation factor 4E Human genes 0.000 description 1
- 101710126428 Eukaryotic translation initiation factor 4E-2 Proteins 0.000 description 1
- 101710126416 Eukaryotic translation initiation factor 4E-3 Proteins 0.000 description 1
- 101710126432 Eukaryotic translation initiation factor 4E1 Proteins 0.000 description 1
- 101710091919 Eukaryotic translation initiation factor 4G Proteins 0.000 description 1
- 101710133325 Eukaryotic translation initiation factor NCBP Proteins 0.000 description 1
- 101710190212 Eukaryotic translation initiation factor isoform 4E Proteins 0.000 description 1
- 101710124729 Eukaryotic translation initiation factor isoform 4E-2 Proteins 0.000 description 1
- 108060002716 Exonuclease Proteins 0.000 description 1
- 108010054218 Factor VIII Proteins 0.000 description 1
- 102000001690 Factor VIII Human genes 0.000 description 1
- 108010074860 Factor Xa Proteins 0.000 description 1
- 206010016717 Fistula Diseases 0.000 description 1
- 102000004961 Furin Human genes 0.000 description 1
- 102000058061 Glucose Transporter Type 4 Human genes 0.000 description 1
- BCCRXDTUTZHDEU-VKHMYHEASA-N Gly-Ser Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O BCCRXDTUTZHDEU-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- 206010019233 Headaches Diseases 0.000 description 1
- 102100021519 Hemoglobin subunit beta Human genes 0.000 description 1
- 108091005904 Hemoglobin subunit beta Proteins 0.000 description 1
- 208000032843 Hemorrhage Diseases 0.000 description 1
- 241000724709 Hepatitis delta virus Species 0.000 description 1
- JNPRQUIWDVDHIT-GYIPPJPDSA-N Herculin Chemical compound CCC\C=C\CCCC\C=C\C(=O)NCC(C)C JNPRQUIWDVDHIT-GYIPPJPDSA-N 0.000 description 1
- JNPRQUIWDVDHIT-UHFFFAOYSA-N Herculin Natural products CCCC=CCCCCC=CC(=O)NCC(C)C JNPRQUIWDVDHIT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000005646 Heterogeneous-Nuclear Ribonucleoprotein K Human genes 0.000 description 1
- 108010084680 Heterogeneous-Nuclear Ribonucleoprotein K Proteins 0.000 description 1
- 206010020112 Hirsutism Diseases 0.000 description 1
- 208000010473 Hoarseness Diseases 0.000 description 1
- 108010048671 Homeodomain Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000009331 Homeodomain Proteins Human genes 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 101000866618 Homo sapiens 3-beta-hydroxysteroid-Delta(8),Delta(7)-isomerase Proteins 0.000 description 1
- 101000924577 Homo sapiens Adenomatous polyposis coli protein Proteins 0.000 description 1
- 101000765010 Homo sapiens Beta-galactosidase Proteins 0.000 description 1
- 101001046686 Homo sapiens Integrin alpha-M Proteins 0.000 description 1
- 101000935040 Homo sapiens Integrin beta-2 Proteins 0.000 description 1
- 101000738771 Homo sapiens Receptor-type tyrosine-protein phosphatase C Proteins 0.000 description 1
- 101000857677 Homo sapiens Runt-related transcription factor 1 Proteins 0.000 description 1
- 101000616556 Homo sapiens SH3 domain-containing protein 19 Proteins 0.000 description 1
- 101000936922 Homo sapiens Sarcoplasmic/endoplasmic reticulum calcium ATPase 2 Proteins 0.000 description 1
- 101000650134 Homo sapiens WAS/WASL-interacting protein family member 2 Proteins 0.000 description 1
- 108091070521 Homo sapiens let-7a-1 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091070522 Homo sapiens let-7a-2 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091070513 Homo sapiens let-7a-3 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091070511 Homo sapiens let-7c stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091070526 Homo sapiens let-7f-2 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 240000005979 Hordeum vulgare Species 0.000 description 1
- 235000007340 Hordeum vulgare Nutrition 0.000 description 1
- 102100022875 Hypoxia-inducible factor 1-alpha Human genes 0.000 description 1
- 108050009527 Hypoxia-inducible factor-1 alpha Proteins 0.000 description 1
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 description 1
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 description 1
- 102100022338 Integrin alpha-M Human genes 0.000 description 1
- 102100025390 Integrin beta-2 Human genes 0.000 description 1
- 108020004684 Internal Ribosome Entry Sites Proteins 0.000 description 1
- 108091092195 Intron Proteins 0.000 description 1
- 108020003285 Isocitrate lyase Proteins 0.000 description 1
- 206010023126 Jaundice Diseases 0.000 description 1
- 101710172072 Kexin Proteins 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N L-Cysteine Chemical compound SC[C@H](N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- SLRNWACWRVGMKD-UHFFFAOYSA-N L-anserine Natural products CN1C=NC(CC(NC(=O)CCN)C(O)=O)=C1 SLRNWACWRVGMKD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- 102000004856 Lectins Human genes 0.000 description 1
- 108090001090 Lectins Proteins 0.000 description 1
- 108020005198 Long Noncoding RNA Proteins 0.000 description 1
- 108091007460 Long intergenic noncoding RNA Proteins 0.000 description 1
- 206010058467 Lung neoplasm malignant Diseases 0.000 description 1
- 206010025282 Lymphoedema Diseases 0.000 description 1
- 206010025323 Lymphomas Diseases 0.000 description 1
- 108091007774 MIR107 Proteins 0.000 description 1
- 108091007772 MIRLET7C Proteins 0.000 description 1
- JLVVSXFLKOJNIY-UHFFFAOYSA-N Magnesium ion Chemical compound [Mg+2] JLVVSXFLKOJNIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108020004687 Malate Synthase Proteins 0.000 description 1
- 206010027145 Melanocytic naevus Diseases 0.000 description 1
- 108091028080 MiR-132 Proteins 0.000 description 1
- 108091093073 MiR-134 Proteins 0.000 description 1
- 108091007421 MiR-142-3p Proteins 0.000 description 1
- 108091092539 MiR-208 Proteins 0.000 description 1
- 108091007419 MiR-27 Proteins 0.000 description 1
- 108091027966 Mir-137 Proteins 0.000 description 1
- 108091028232 Mir-184 Proteins 0.000 description 1
- 108091062140 Mir-223 Proteins 0.000 description 1
- 108091060302 Mir-320 Proteins 0.000 description 1
- 108091093189 Mir-375 Proteins 0.000 description 1
- 101000947121 Mus musculus Beta-casein Proteins 0.000 description 1
- 101000936923 Mus musculus Sarcoplasmic/endoplasmic reticulum calcium ATPase 2 Proteins 0.000 description 1
- 101100481406 Mus musculus Tie1 gene Proteins 0.000 description 1
- 102000008934 Muscle Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010074084 Muscle Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102100038379 Myogenic factor 6 Human genes 0.000 description 1
- 102100030856 Myoglobin Human genes 0.000 description 1
- 108010062374 Myoglobin Proteins 0.000 description 1
- 102000003505 Myosin Human genes 0.000 description 1
- 108060008487 Myosin Proteins 0.000 description 1
- OVBPIULPVIDEAO-UHFFFAOYSA-N N-Pteroyl-L-glutaminsaeure Natural products C=1N=C2NC(N)=NC(=O)C2=NC=1CNC1=CC=C(C(=O)NC(CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 OVBPIULPVIDEAO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CQOVPNPJLQNMDC-UHFFFAOYSA-N N-beta-alanyl-L-histidine Natural products NCCC(=O)NC(C(O)=O)CC1=CN=CN1 CQOVPNPJLQNMDC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000729 N-terminal amino-acid group Chemical group 0.000 description 1
- 208000002454 Nasopharyngeal Carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 206010061306 Nasopharyngeal cancer Diseases 0.000 description 1
- 206010028813 Nausea Diseases 0.000 description 1
- 108091092724 Noncoding DNA Proteins 0.000 description 1
- 108091005461 Nucleic proteins Chemical group 0.000 description 1
- 235000007164 Oryza sativa Nutrition 0.000 description 1
- 240000007594 Oryza sativa Species 0.000 description 1
- 206010033128 Ovarian cancer Diseases 0.000 description 1
- 206010061535 Ovarian neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 101000947110 Ovis aries Beta-casein Proteins 0.000 description 1
- 238000009004 PCR Kit Methods 0.000 description 1
- 208000016222 Pancreatic disease Diseases 0.000 description 1
- 206010061902 Pancreatic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 1
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 1
- 108010044843 Peptide Initiation Factors Proteins 0.000 description 1
- 102000005877 Peptide Initiation Factors Human genes 0.000 description 1
- 208000005228 Pericardial Effusion Diseases 0.000 description 1
- PCNDJXKNXGMECE-UHFFFAOYSA-N Phenazine Natural products C1=CC=CC2=NC3=CC=CC=C3N=C21 PCNDJXKNXGMECE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000009097 Phosphorylases Human genes 0.000 description 1
- 108010073135 Phosphorylases Proteins 0.000 description 1
- 206010035148 Plague Diseases 0.000 description 1
- 241000210053 Potentilla elegans Species 0.000 description 1
- 206010036790 Productive cough Diseases 0.000 description 1
- 206010060862 Prostate cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000000236 Prostatic Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 108010029485 Protein Isoforms Proteins 0.000 description 1
- 102000001708 Protein Isoforms Human genes 0.000 description 1
- 208000003251 Pruritus Diseases 0.000 description 1
- 102000007615 Pulmonary Surfactant-Associated Protein A Human genes 0.000 description 1
- 108010007100 Pulmonary Surfactant-Associated Protein A Proteins 0.000 description 1
- 206010037660 Pyrexia Diseases 0.000 description 1
- 102000015097 RNA Splicing Factors Human genes 0.000 description 1
- 108010039259 RNA Splicing Factors Proteins 0.000 description 1
- 230000026279 RNA modification Effects 0.000 description 1
- 238000011529 RT qPCR Methods 0.000 description 1
- 101000947125 Rattus norvegicus Beta-casein Proteins 0.000 description 1
- 102100037422 Receptor-type tyrosine-protein phosphatase C Human genes 0.000 description 1
- 102000004389 Ribonucleoproteins Human genes 0.000 description 1
- 108010081734 Ribonucleoproteins Proteins 0.000 description 1
- 108091028664 Ribonucleotide Proteins 0.000 description 1
- 102000002278 Ribosomal Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010000605 Ribosomal Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102100038043 Roquin-1 Human genes 0.000 description 1
- 101710168637 Roquin-1 Proteins 0.000 description 1
- 102100025373 Runt-related transcription factor 1 Human genes 0.000 description 1
- 102100021782 SH3 domain-containing protein 19 Human genes 0.000 description 1
- 108091006300 SLC2A4 Proteins 0.000 description 1
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000012479 Serine Proteases Human genes 0.000 description 1
- 108010022999 Serine Proteases Proteins 0.000 description 1
- 108010071390 Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 102000007562 Serum Albumin Human genes 0.000 description 1
- 102000054727 Serum Amyloid A Human genes 0.000 description 1
- 108700028909 Serum Amyloid A Proteins 0.000 description 1
- 208000013738 Sleep Initiation and Maintenance disease Diseases 0.000 description 1
- 102000039471 Small Nuclear RNA Human genes 0.000 description 1
- 108020003224 Small Nucleolar RNA Proteins 0.000 description 1
- 102000042773 Small Nucleolar RNA Human genes 0.000 description 1
- 241000519995 Stachys sylvatica Species 0.000 description 1
- 101710135785 Subtilisin-like protease Proteins 0.000 description 1
- 241000282898 Sus scrofa Species 0.000 description 1
- 208000031673 T-Cell Cutaneous Lymphoma Diseases 0.000 description 1
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108090000190 Thrombin Proteins 0.000 description 1
- 208000024770 Thyroid neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 108091023040 Transcription factor Proteins 0.000 description 1
- 102000040945 Transcription factor Human genes 0.000 description 1
- 102000004338 Transferrin Human genes 0.000 description 1
- 108090000901 Transferrin Proteins 0.000 description 1
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 1
- 102100040247 Tumor necrosis factor Human genes 0.000 description 1
- PGAVKCOVUIYSFO-XVFCMESISA-N UTP Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C=C1 PGAVKCOVUIYSFO-XVFCMESISA-N 0.000 description 1
- 229930003427 Vitamin E Natural products 0.000 description 1
- 206010047642 Vitiligo Diseases 0.000 description 1
- 102100027540 WAS/WASL-interacting protein family member 2 Human genes 0.000 description 1
- 208000000260 Warts Diseases 0.000 description 1
- 241000607479 Yersinia pestis Species 0.000 description 1
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 1
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 1
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 1
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 1
- 229960001138 acetylsalicylic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 238000005903 acid hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 210000001789 adipocyte Anatomy 0.000 description 1
- 210000000577 adipose tissue Anatomy 0.000 description 1
- 238000000246 agarose gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 1
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 1
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 1
- 229940100198 alkylating agent Drugs 0.000 description 1
- 239000002168 alkylating agent Substances 0.000 description 1
- 230000002009 allergenic effect Effects 0.000 description 1
- 102000013529 alpha-Fetoproteins Human genes 0.000 description 1
- 108010026331 alpha-Fetoproteins Proteins 0.000 description 1
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 1
- 210000004381 amniotic fluid Anatomy 0.000 description 1
- 208000007502 anemia Diseases 0.000 description 1
- 230000033115 angiogenesis Effects 0.000 description 1
- MYYIAHXIVFADCU-QMMMGPOBSA-N anserine Chemical compound CN1C=NC=C1C[C@H](NC(=O)CC[NH3+])C([O-])=O MYYIAHXIVFADCU-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- 230000003466 anti-cipated effect Effects 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 210000001742 aqueous humor Anatomy 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 238000003491 array Methods 0.000 description 1
- 210000004507 artificial chromosome Anatomy 0.000 description 1
- 235000009582 asparagine Nutrition 0.000 description 1
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 description 1
- 125000000613 asparagine group Chemical group N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)* 0.000 description 1
- 229960005261 aspartic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 1
- 208000006673 asthma Diseases 0.000 description 1
- 230000001363 autoimmune Effects 0.000 description 1
- 230000005784 autoimmunity Effects 0.000 description 1
- 150000001540 azides Chemical class 0.000 description 1
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 108010028263 bacteriophage T3 RNA polymerase Proteins 0.000 description 1
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000000941 bile Anatomy 0.000 description 1
- 238000004166 bioassay Methods 0.000 description 1
- 230000000035 biogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000008827 biological function Effects 0.000 description 1
- 230000005540 biological transmission Effects 0.000 description 1
- 239000000090 biomarker Substances 0.000 description 1
- 230000006287 biotinylation Effects 0.000 description 1
- 238000007413 biotinylation Methods 0.000 description 1
- 210000002459 blastocyst Anatomy 0.000 description 1
- 230000000740 bleeding effect Effects 0.000 description 1
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 1
- 230000023555 blood coagulation Effects 0.000 description 1
- 238000004820 blood count Methods 0.000 description 1
- 230000036760 body temperature Effects 0.000 description 1
- 210000002449 bone cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 1
- 210000000481 breast Anatomy 0.000 description 1
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 1
- 102220366036 c.196G>T Human genes 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 229960005069 calcium Drugs 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910001424 calcium ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 1
- 229940044199 carnosine Drugs 0.000 description 1
- CQOVPNPJLQNMDC-ZETCQYMHSA-N carnosine Chemical compound [NH3+]CCC(=O)N[C@H](C([O-])=O)CC1=CNC=N1 CQOVPNPJLQNMDC-ZETCQYMHSA-N 0.000 description 1
- 230000003197 catalytic effect Effects 0.000 description 1
- 125000002091 cationic group Chemical group 0.000 description 1
- 150000001768 cations Chemical class 0.000 description 1
- 230000025084 cell cycle arrest Effects 0.000 description 1
- 230000011712 cell development Effects 0.000 description 1
- 230000024245 cell differentiation Effects 0.000 description 1
- 230000003915 cell function Effects 0.000 description 1
- 210000003169 central nervous system Anatomy 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 210000002939 cerumen Anatomy 0.000 description 1
- 210000003756 cervix mucus Anatomy 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 230000002759 chromosomal effect Effects 0.000 description 1
- 210000000349 chromosome Anatomy 0.000 description 1
- 210000000215 ciliated epithelial cell Anatomy 0.000 description 1
- DQLATGHUWYMOKM-UHFFFAOYSA-L cisplatin Chemical compound N[Pt](N)(Cl)Cl DQLATGHUWYMOKM-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 1
- 210000001072 colon Anatomy 0.000 description 1
- 230000009918 complex formation Effects 0.000 description 1
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 description 1
- 229910052802 copper Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010949 copper Substances 0.000 description 1
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 1
- 239000003431 cross linking reagent Substances 0.000 description 1
- LXWYCLOUQZZDBD-LIYNQYRNSA-N csfv Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)[C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1 LXWYCLOUQZZDBD-LIYNQYRNSA-N 0.000 description 1
- 201000007241 cutaneous T cell lymphoma Diseases 0.000 description 1
- 238000005520 cutting process Methods 0.000 description 1
- 210000002726 cyst fluid Anatomy 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 1
- 230000016396 cytokine production Effects 0.000 description 1
- 238000004163 cytometry Methods 0.000 description 1
- 108091092330 cytoplasmic RNA Proteins 0.000 description 1
- 230000003412 degenerative effect Effects 0.000 description 1
- 238000004925 denaturation Methods 0.000 description 1
- 230000036425 denaturation Effects 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 238000001085 differential centrifugation Methods 0.000 description 1
- 238000009792 diffusion process Methods 0.000 description 1
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 1
- 239000000539 dimer Substances 0.000 description 1
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 1
- 208000002173 dizziness Diseases 0.000 description 1
- 230000003828 downregulation Effects 0.000 description 1
- 239000003596 drug target Substances 0.000 description 1
- 230000009977 dual effect Effects 0.000 description 1
- 239000000975 dye Substances 0.000 description 1
- 201000006549 dyspepsia Diseases 0.000 description 1
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 210000003038 endothelium Anatomy 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 1
- 230000007071 enzymatic hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006047 enzymatic hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000009483 enzymatic pathway Effects 0.000 description 1
- 231100000321 erythema Toxicity 0.000 description 1
- 229940105423 erythropoietin Drugs 0.000 description 1
- 210000003238 esophagus Anatomy 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 230000029142 excretion Effects 0.000 description 1
- 102000013165 exonuclease Human genes 0.000 description 1
- 210000003722 extracellular fluid Anatomy 0.000 description 1
- 229960000301 factor viii Drugs 0.000 description 1
- 230000004129 fatty acid metabolism Effects 0.000 description 1
- 210000003608 fece Anatomy 0.000 description 1
- 230000004720 fertilization Effects 0.000 description 1
- 210000004700 fetal blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 1
- 230000003890 fistula Effects 0.000 description 1
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 1
- 235000019152 folic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011724 folic acid Substances 0.000 description 1
- 229960000304 folic acid Drugs 0.000 description 1
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 1
- WIGCFUFOHFEKBI-UHFFFAOYSA-N gamma-tocopherol Natural products CC(C)CCCC(C)CCCC(C)CCCC1CCC2C(C)C(O)C(C)C(C)C2O1 WIGCFUFOHFEKBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000001502 gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 238000001415 gene therapy Methods 0.000 description 1
- 210000004907 gland Anatomy 0.000 description 1
- 229940049906 glutamate Drugs 0.000 description 1
- 229930195712 glutamate Natural products 0.000 description 1
- 125000000291 glutamic acid group Chemical group N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)* 0.000 description 1
- 125000000404 glutamine group Chemical group N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)* 0.000 description 1
- 230000013595 glycosylation Effects 0.000 description 1
- 238000006206 glycosylation reaction Methods 0.000 description 1
- HHLFWLYXYJOTON-UHFFFAOYSA-N glyoxylic acid Chemical compound OC(=O)C=O HHLFWLYXYJOTON-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000003714 granulocyte Anatomy 0.000 description 1
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 1
- 235000013928 guanylic acid Nutrition 0.000 description 1
- 210000004209 hair Anatomy 0.000 description 1
- 208000024963 hair loss Diseases 0.000 description 1
- 230000003676 hair loss Effects 0.000 description 1
- 108090001052 hairpin ribozyme Proteins 0.000 description 1
- 230000009931 harmful effect Effects 0.000 description 1
- 231100000869 headache Toxicity 0.000 description 1
- 210000002064 heart cell Anatomy 0.000 description 1
- 206010073071 hepatocellular carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 231100000844 hepatocellular carcinoma Toxicity 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 108091008039 hormone receptors Proteins 0.000 description 1
- 235000020256 human milk Nutrition 0.000 description 1
- 210000004251 human milk Anatomy 0.000 description 1
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 1
- 230000033444 hydroxylation Effects 0.000 description 1
- 238000005805 hydroxylation reaction Methods 0.000 description 1
- 208000000069 hyperpigmentation Diseases 0.000 description 1
- 230000003810 hyperpigmentation Effects 0.000 description 1
- 230000005965 immune activity Effects 0.000 description 1
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 1
- 230000009851 immunogenic response Effects 0.000 description 1
- 238000012151 immunohistochemical method Methods 0.000 description 1
- 239000003547 immunosorbent Substances 0.000 description 1
- 230000003308 immunostimulating effect Effects 0.000 description 1
- 238000000099 in vitro assay Methods 0.000 description 1
- 238000005462 in vivo assay Methods 0.000 description 1
- 238000011065 in-situ storage Methods 0.000 description 1
- 230000000415 inactivating effect Effects 0.000 description 1
- 239000000411 inducer Substances 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 208000000509 infertility Diseases 0.000 description 1
- 230000036512 infertility Effects 0.000 description 1
- 231100000535 infertility Toxicity 0.000 description 1
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 206010022437 insomnia Diseases 0.000 description 1
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 description 1
- 239000000138 intercalating agent Substances 0.000 description 1
- 230000002452 interceptive effect Effects 0.000 description 1
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 description 1
- 210000001985 kidney epithelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000012177 large-scale sequencing Methods 0.000 description 1
- 239000002523 lectin Substances 0.000 description 1
- 108091053410 let-7 family Proteins 0.000 description 1
- 238000007169 ligase reaction Methods 0.000 description 1
- 125000005647 linker group Chemical group 0.000 description 1
- 201000005202 lung cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000020816 lung neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 210000004880 lymph fluid Anatomy 0.000 description 1
- 210000001165 lymph node Anatomy 0.000 description 1
- 208000002502 lymphedema Diseases 0.000 description 1
- 125000003588 lysine group Chemical group [H]N([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 1
- 150000002669 lysines Chemical class 0.000 description 1
- 108010059585 mRNA decapping enzymes Proteins 0.000 description 1
- 108010026228 mRNA guanylyltransferase Proteins 0.000 description 1
- 102100039604 mRNA guanylyltransferase Human genes 0.000 description 1
- 229910001425 magnesium ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000031852 maintenance of location in cell Effects 0.000 description 1
- 208000015486 malignant pancreatic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 238000013178 mathematical model Methods 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 210000004379 membrane Anatomy 0.000 description 1
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 1
- 108091041879 miR-100-2 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091068974 miR-101 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091093015 miR-101-2 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091088205 miR-10a-2 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091064410 miR-1184-1 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091043011 miR-1184-2 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091090941 miR-1184-3 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091056924 miR-124 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091092839 miR-124-1 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091045380 miR-124-2 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091048120 miR-124-3 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091034147 miR-124-5 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091057905 miR-1249 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091036056 miR-1249-1 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091092614 miR-1249-2 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091070774 miR-1250 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091046573 miR-1275 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091031034 miR-1279 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091070946 miR-128 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091029664 miR-1286 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091040501 miR-129 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091038720 miR-129-1 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091064138 miR-129-2 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091032604 miR-1303 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091025972 miR-130b-2 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091047111 miR-135a-1 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091047375 miR-135a-2 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091040005 miR-135a-3 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091059172 miR-135b-1 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091064811 miR-135b-3 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091037859 miR-138-3 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091029510 miR-138-4 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091049185 miR-139-2 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091060382 miR-140 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091030617 miR-140-1 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091023370 miR-140-2 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091027955 miR-147 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091073193 miR-147a stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091039164 miR-147b stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091035696 miR-149-1 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091031096 miR-149-2 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091064297 miR-151b stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091037426 miR-152 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091033783 miR-153 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091074118 miR-15a-2 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091085286 miR-181a-3 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091078636 miR-182-2 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091081505 miR-190 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091049762 miR-190a stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091065212 miR-190b stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091054189 miR-196a stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091092367 miR-196a-2 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091058987 miR-199b-1 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091090366 miR-199b-2 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091073659 miR-199b-3 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091068975 miR-19a-3 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091037787 miR-19b stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091027597 miR-1d stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091029956 miR-200a-1 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091088721 miR-200a-2 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091070312 miR-200a-3 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091032382 miR-204-1 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091085803 miR-204-2 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091089766 miR-204-3 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091073500 miR-204-4 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091053626 miR-204-5 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091041631 miR-21-1 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091044442 miR-21-2 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091035328 miR-217 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091039135 miR-217-1 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091029206 miR-217-2 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091063841 miR-219 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091090052 miR-219-1 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091073060 miR-219-2 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091079034 miR-219-3 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091054264 miR-219-4 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091053494 miR-22 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091032978 miR-24-3 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091064025 miR-24-4 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091073699 miR-25-3 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091061970 miR-26a stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091093042 miR-26a-3 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091046387 miR-26a-4 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091049563 miR-26a-5 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091064819 miR-26a-6 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091046123 miR-27a-2 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091031881 miR-290 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091033928 miR-2909 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091025088 miR-29b-2 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091082689 miR-302b-1 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091089412 miR-302b-2 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091053185 miR-302d stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091025923 miR-302e stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091047055 miR-30d-2 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091044918 miR-320b stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091026895 miR-320b-1 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091040992 miR-320b-2 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091058314 miR-320e stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091072797 miR-325 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091042879 miR-326 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091029997 miR-328 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091089005 miR-329 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091091696 miR-331 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091074070 miR-338-3 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091055145 miR-342 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091073301 miR-346 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091040342 miR-34a-1 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091035608 miR-34a-2 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091084018 miR-34b stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091090583 miR-34c stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091084066 miR-34c-2 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091031765 miR-3665 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091061759 miR-3666 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091036633 miR-370 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091040651 miR-371 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091062109 miR-372 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091043953 miR-373 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091041657 miR-381 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091048468 miR-383 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091029369 miR-410 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091047664 miR-421 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091048131 miR-425-2 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091059135 miR-429 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091037327 miR-449 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091040525 miR-449a stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091080309 miR-483 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091039994 miR-486 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091092564 miR-494 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091053329 miR-510 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091032623 miR-513a-1 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091080923 miR-513a-2 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091026498 miR-516a-1 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091086918 miR-516a-2 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091086222 miR-520c stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091091333 miR-542 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091068733 miR-548e stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091067485 miR-548f stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091080668 miR-548j stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091049014 miR-548k stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091051371 miR-548l stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091056908 miR-548m stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091089002 miR-548o stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091086597 miR-548p stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091071062 miR-557 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091086764 miR-571 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091075061 miR-571-1 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091051054 miR-571-2 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091055140 miR-574 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091056770 miR-581 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091072761 miR-598 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091086086 miR-657 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091023140 miR-664a-2 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091023818 miR-7 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091025113 miR-7-3 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091089851 miR-7-4 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091072577 miR-718 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091076478 miR-762 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091066925 miR-762-1 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091069941 miR-762-2 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091042292 miR-762-3 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091038446 miR-9-4 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091084642 miR-9-7 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091069965 miR-922 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091034121 miR-92a stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091049973 miR-92a-4 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091071148 miR-935 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091073613 miR-941-1 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091039878 miR-941-2 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091035558 miR-941-3 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091031187 miR-941-4 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091085604 miR-941-5 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091057102 miR-944 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091076732 miR-99a stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 238000002493 microarray Methods 0.000 description 1
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 1
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 1
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 1
- 230000002438 mitochondrial effect Effects 0.000 description 1
- 229960004857 mitomycin Drugs 0.000 description 1
- 210000005087 mononuclear cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000000214 mouth Anatomy 0.000 description 1
- 201000005962 mycosis fungoides Diseases 0.000 description 1
- 210000000107 myocyte Anatomy 0.000 description 1
- 108010084677 myogenic factor 6 Proteins 0.000 description 1
- OKPYIWASQZGASP-UHFFFAOYSA-N n-(2-hydroxypropyl)-2-methylprop-2-enamide Chemical compound CC(O)CNC(=O)C(C)=C OKPYIWASQZGASP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002105 nanoparticle Substances 0.000 description 1
- 201000011216 nasopharynx carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 210000000822 natural killer cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000008693 nausea Effects 0.000 description 1
- 210000003061 neural cell Anatomy 0.000 description 1
- 208000015122 neurodegenerative disease Diseases 0.000 description 1
- 210000004498 neuroglial cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000002569 neuron Anatomy 0.000 description 1
- 108091027963 non-coding RNA Proteins 0.000 description 1
- 102000042567 non-coding RNA Human genes 0.000 description 1
- 230000030147 nuclear export Effects 0.000 description 1
- 230000000269 nucleophilic effect Effects 0.000 description 1
- 230000009437 off-target effect Effects 0.000 description 1
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 1
- 230000008520 organization Effects 0.000 description 1
- 210000005009 osteogenic cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000001672 ovary Anatomy 0.000 description 1
- 208000024691 pancreas disease Diseases 0.000 description 1
- 201000002528 pancreatic cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000008443 pancreatic carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 210000001819 pancreatic juice Anatomy 0.000 description 1
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 210000004912 pericardial fluid Anatomy 0.000 description 1
- 210000005259 peripheral blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000011886 peripheral blood Substances 0.000 description 1
- 208000033808 peripheral neuropathy Diseases 0.000 description 1
- 230000002085 persistent effect Effects 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 230000026731 phosphorylation Effects 0.000 description 1
- 238000006366 phosphorylation reaction Methods 0.000 description 1
- 210000002826 placenta Anatomy 0.000 description 1
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 description 1
- 125000005575 polycyclic aromatic hydrocarbon group Chemical group 0.000 description 1
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 150000008442 polyphenolic compounds Chemical class 0.000 description 1
- 235000013824 polyphenols Nutrition 0.000 description 1
- 150000004032 porphyrins Chemical class 0.000 description 1
- 230000001124 posttranscriptional effect Effects 0.000 description 1
- 229910001414 potassium ion Inorganic materials 0.000 description 1
- OXCMYAYHXIHQOA-UHFFFAOYSA-N potassium;[2-butyl-5-chloro-3-[[4-[2-(1,2,4-triaza-3-azanidacyclopenta-1,4-dien-5-yl)phenyl]phenyl]methyl]imidazol-4-yl]methanol Chemical compound [K+].CCCCC1=NC(Cl)=C(CO)N1CC1=CC=C(C=2C(=CC=CC=2)C2=N[N-]N=N2)C=C1 OXCMYAYHXIHQOA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000004909 pre-ejaculatory fluid Anatomy 0.000 description 1
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 1
- 208000025638 primary cutaneous T-cell non-Hodgkin lymphoma Diseases 0.000 description 1
- 230000000770 proinflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 1
- 235000019833 protease Nutrition 0.000 description 1
- 230000006916 protein interaction Effects 0.000 description 1
- 230000002685 pulmonary effect Effects 0.000 description 1
- 150000003212 purines Chemical class 0.000 description 1
- 125000000561 purinyl group Chemical group N1=C(N=C2N=CNC2=C1)* 0.000 description 1
- 125000000714 pyrimidinyl group Chemical group 0.000 description 1
- 238000003753 real-time PCR Methods 0.000 description 1
- 230000008439 repair process Effects 0.000 description 1
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 1
- 230000000241 respiratory effect Effects 0.000 description 1
- 108091008146 restriction endonucleases Proteins 0.000 description 1
- 238000003757 reverse transcription PCR Methods 0.000 description 1
- 239000003161 ribonuclease inhibitor Substances 0.000 description 1
- 239000002336 ribonucleotide Substances 0.000 description 1
- 125000002652 ribonucleotide group Chemical group 0.000 description 1
- 210000003705 ribosome Anatomy 0.000 description 1
- 235000009566 rice Nutrition 0.000 description 1
- 238000007363 ring formation reaction Methods 0.000 description 1
- 102220198225 rs1057519923 Human genes 0.000 description 1
- 102220190200 rs139796716 Human genes 0.000 description 1
- 102200075811 rs587777233 Human genes 0.000 description 1
- 102220044582 rs587781412 Human genes 0.000 description 1
- 102220029418 rs62642053 Human genes 0.000 description 1
- 210000003296 saliva Anatomy 0.000 description 1
- 238000007423 screening assay Methods 0.000 description 1
- 210000002374 sebum Anatomy 0.000 description 1
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 1
- 230000008684 selective degradation Effects 0.000 description 1
- 210000000582 semen Anatomy 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 238000002864 sequence alignment Methods 0.000 description 1
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 1
- 230000009919 sequestration Effects 0.000 description 1
- 125000003607 serino group Chemical group [H]N([H])[C@]([H])(C(=O)[*])C(O[H])([H])[H] 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 230000036299 sexual function Effects 0.000 description 1
- 208000013220 shortness of breath Diseases 0.000 description 1
- 230000011664 signaling Effects 0.000 description 1
- 230000037432 silent mutation Effects 0.000 description 1
- 238000002741 site-directed mutagenesis Methods 0.000 description 1
- 210000004927 skin cell Anatomy 0.000 description 1
- 201000010153 skin papilloma Diseases 0.000 description 1
- 108091029842 small nuclear ribonucleic acid Proteins 0.000 description 1
- 229910001415 sodium ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 230000009870 specific binding Effects 0.000 description 1
- 230000007480 spreading Effects 0.000 description 1
- 238000003892 spreading Methods 0.000 description 1
- 210000003802 sputum Anatomy 0.000 description 1
- 208000024794 sputum Diseases 0.000 description 1
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 description 1
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 1
- 125000000547 substituted alkyl group Chemical group 0.000 description 1
- 210000004243 sweat Anatomy 0.000 description 1
- 210000001179 synovial fluid Anatomy 0.000 description 1
- 238000001308 synthesis method Methods 0.000 description 1
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 1
- 210000001138 tear Anatomy 0.000 description 1
- 238000011191 terminal modification Methods 0.000 description 1
- 210000001550 testis Anatomy 0.000 description 1
- 230000008719 thickening Effects 0.000 description 1
- 229960004072 thrombin Drugs 0.000 description 1
- 201000002510 thyroid cancer Diseases 0.000 description 1
- 230000005030 transcription termination Effects 0.000 description 1
- 108091008023 transcriptional regulators Proteins 0.000 description 1
- 238000010361 transduction Methods 0.000 description 1
- 230000026683 transduction Effects 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 239000012581 transferrin Substances 0.000 description 1
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 1
- 230000017105 transposition Effects 0.000 description 1
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 1
- 239000013638 trimer Substances 0.000 description 1
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000004614 tumor growth Effects 0.000 description 1
- 108010087967 type I signal peptidase Proteins 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000870 ultraviolet spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 229950010342 uridine triphosphate Drugs 0.000 description 1
- PGAVKCOVUIYSFO-UHFFFAOYSA-N uridine-triphosphate Natural products OC1C(O)C(COP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)OC1N1C(=O)NC(=O)C=C1 PGAVKCOVUIYSFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 1
- 108010027510 vaccinia virus capping enzyme Proteins 0.000 description 1
- 206010046901 vaginal discharge Diseases 0.000 description 1
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 1
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 1
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 1
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 1
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 1
- 235000019165 vitamin E Nutrition 0.000 description 1
- 239000011709 vitamin E Substances 0.000 description 1
- 229940046009 vitamin E Drugs 0.000 description 1
- 208000016261 weight loss Diseases 0.000 description 1
- 230000004580 weight loss Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
- C12N15/67—General methods for enhancing the expression
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Immunology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Transplantation (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
Abstract
Description
本出願は、2012年11月26日出願の米国仮特許出願第61/729,933号、表題「Terminially Optimized Modified RNAs」、2012年12月14日出願の米国仮特許出願第61/737,224号、表題「Terminally Optimized Modified RNAs」、2013年1月31日出願の米国仮特許出願第61/758,921号、表題「Differential Targeting Using RNA Constructs」、2013年3月14日出願の米国仮特許出願第61/781,139号、表題「Differential Targeting Using RNA Constructs」、2013年5月31日出願の米国仮特許出願第61/829,359号、表題「Differential Targeting Using RNA Constructs」、2013年6月27日出願の米国仮特許出願第61/839,903号、表題「Differential Targeting Using RNA Constructs」、2013年7月3日出願の米国仮特許出願第61/842,709号、表題「Differential Targeting Using RNA Constructs」、2013年7月23日出願の米国仮特許出願第61/857,436号、表題「Differential Targeting Using RNA Constructs」、2013年3月9日出願の米国仮特許出願第61/775,509号、表題「Heterologous Untranslated Regions for mRNA」、および2013年3月31日出願の米国仮特許出願第61/829,372号、表題「Heterologous Untranslated Regions for mRNA」に対する優先権を主張するものである。これら各々の内容は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
配列表の参照
本出願は、配列表と共に電子書式で出願されている。配列表は、2013年10月1日に作成され、3,262,934バイトの大きさであるM39PCT2.txtと題されたファイルとして提供される。この配列表の電子書式での情報は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
発明の分野
本発明は、修飾mRNAおよび/または最適化mRNAの製造および使用のための組成物および方法、ならびにRNA結合タンパク質をコードする1つ以上の修飾mRNAまたは野生型mRNAと組み合わせたそれらの使用に関する。
Vaccines」;2012年4月2日出願の米国仮特許出願第61/618,870号、表題「Modified Polunucleotides for the Production of Therapeutic Proteins and Peptides」;2012年8月10日出願の米国仮特許出願第61/681,649号、表題「Modified Polunucleotides for the Production of Therapeutic Proteins and Peptides」;2012年12月14日出願の米国仮特許出願第61/737,139号、表題「Modified Polunucleotides for the Production of Therapeutic Proteins and Peptides」;2012年4月2日出願の米国仮特許出願第61/618,873号、表題「Modified Polunucleotides for the Production of Secreted Proteins」;2012年8月10日出願の米国仮特許出願第61/681,650号、表題「Modified Polunucleotides for the Production of Secreted Proteins」;2012年12月14日出願の米国仮特許出願第61/737,147号、表題「Modified Polunucleotides for the Production of Secreted Proteins」;2012年4月2日出願の米国仮特許出願第61/618,878号、表題「Modified Polunucleotides for the Production of Plasma Membrane Proteins」;2012年8月10日出願の米国仮特許出願第61/681,654号、表題「Modified Polunucleotides for the Production of Plasma Membrane Proteins」;2012年12月14日出願の米国仮特許出願第61/737,152号、表題「Modified Polunucleotides for the Production of Plasma Membrane Proteins」;2012年4月2日出願の米国仮特許出願第61/618,885号、表題「Modified Polunucleotides for the Production of Cytoplasmic and Cytoskeletal Proteins」;2012年8月10日出願の米国仮特許出願第61/681,658号、表題「Modified Polunucleotides for the Production of Cytoplasmic and Cytoskeletal Proteins」;2012年12月14日出願の米国仮特許出願第61/737,155号、表題「Modified Polunucleotides for the Production of Cytoplasmic and Cytoskeletal Proteins」;2012年4月2日出願の米国仮特許出願第61/618,896号、表題「Modified Polunucleotides for the Production of Intracellular Membrane Bound Proteins」;2012年7月5日出願の米国仮特許出願第61/668,157号、表題「Modified Polunucleotides for the Production of Intracellular Membrane Bound Proteins」;2012年8月10日出願の米国仮特許出願第61/681,661号、表題「Modified Polunucleotides for the Production of Intracellular Membrane Bound Proteins」;2012年12月14日出願の米国仮特許出願第61/737,160号、表題「Modified Polunucleotides for the Production of Intracellular Membrane Bound
Proteins」;2012年4月2日出願の米国仮特許出願第61/618,911号、表題「Modified Polunucleotides for the Production of Nuclear Proteins」;2012年8月10日出願の米国仮特許出願第61/681,667号、表題「Modified Polunucleotides for the Production of Nuclear Proteins」;2012年12月14出願の米国仮特許出願第61/737,168号、表題「Modified Polunucleotides for the
Production of Nuclear Proteins」;2012年4月2日出願の米国仮特許出願第61/618,922号、表題「Modified Polunucleotides for the Production of Proteins」;2012年8月10日出願の米国仮特許出願第61/681,675号、表題「Modified Polunucleotides for the Production of Proteins」;2012年12月14日出願の米国仮特許出願第61/737,174号、表題「Modified Polunucleotides for the Production of Proteins」;2012年4月2日出願の米国仮特許出願第61/618,935号、表題「Modified Polunucleotides for the Production of Proteins Associated with Human Disease」;2012年8月10日出願の米国仮特許出願第61/681,687号、表題「Modified Polunucleotides for the Production of Proteins Associated with Human Disease」;2012年12月14日出願の米国仮特許出願第61/737,184号、表題「Modified Polunucleotides for the Production of
Proteins Associated with Human Disease」;2012年4月2日出願の米国仮特許出願第61/618,945号、表題「Modified Polunucleotides for the Production of Proteins Associated with Human Disease」;2012年8月10日出願の米国仮特許出願第61/681,696号、表題「Modified Polunucleotides for the Production of Proteins Associated with Human Disease」;2012年12月14日出願の米国仮特許出願第61/737,191号、表題「Modified Polunucleotides for the Production of Proteins Associated with Human
Disease」;2012年4月2日出願の米国仮特許出願第61/618,953号、表題「Modified Polunucleotides for the Production of Proteins Associated with Human Disease」;2012年8月10日出願の米国仮特許出願第61/681,704号、表題「Modified Polunucleotides for the
Production of Proteins Associated with Human Disease」;2012年12月14日出願の米国仮特許出願第61/737,203号、表題「Modified Polunucleotides for
the Production of Proteins Associated with Human Disease」;2012年8月10日出願の米国仮特許出願第61/681,720号、表題「Modified Polunucleotides for the Production of Cosmetic Proteins and Peptides」;2012年12月14日出願の米国仮特許出願第61/737,213号、表題「Modified Polunucleotides for the Production of Cosmetic Proteins and Peptides」;2012年8月10日出願の米国仮特許出願第61/681,742号、表題「Modified Polunucleotides for the Production of Oncology−Related Proteins and Peptides」;2013年3月9日出願の国際出願第PCT/US2013/030062号、表題「Modified Polunucleotides for
the Production of Biologics and Proteins Associated with Human Disease」;2013年3月9日出願の米国特許出願第13/791,922号、表題「Modified Polunucleotides for the Production of Biologics and Proteins Associated with Human Disease」;2013年3月9日出願の国際出願第PCT/US2013/03006
3号、表題「Modified Polunucleotides」;国際出願第PCT/US2013/030064号、表題「Modified Polunucleotides for the Production of Secreted Proteins」;2013年3月9日出願の米国特許出願第13/791,921号、表題「Modified Polunucleotides for the Production of Secreted Proteins」;2013年3月9日出願の国際出願第PCT/US2013/030059号、表題「Modified Polunucleotides for the Production of Membrane Proteins」;2013年3月9日出願の国際出願第PCT/US2013/030066号、表題「Modified Polunucleotides for the Production of Cytoplasmic and Cytoskeletal Proteins」;2013年3月9日出願の国際出願第PCT/US2013/030067号、表題「Modified Polunucleotides for the Production of Nuclear Proteins」;2013年3月9日出願の国際出願第PCT/US2013/030060号、表題「Modified Polunucleotides for the Production of Proteins」;2013年3月9日出願の国際出願第PCT/US2013/030061号、表題「Modified Polunucleotides for the Production of Proteins Associated
with Human Disease」;2013年3月9日出願の米国特許出願第13/791,910号、表題「Modified Polunucleotides for the Production of Proteins Associated with Human Disease」;2013年3月9日出願の国際出願第PCT/US2013/030068号、表題「Modified Polunucleotides for the Production of Cosmetic Proteins and Peptides」;および2013年3月9日出願の国際出願第PCT/US2013/030070号、表題「Modified Polunucleotides for the Production of Oncology−Related Proteins and Peptides」、2013年3月15日出願の国際特許公開第PCT/US2013/031821号、表題「In Vivo Production of Proteins」に開示されている。これら各々の内容は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
一実施形態において、生物体における抗原介在性免疫応答を、生物体と末端最適化mRNAを接触させることで減少させる方法が提供される。末端最適化mRNAは、第1の領域に対して5’側に位置する目的とするポリペプチドをコードする連結ヌクレオシドの第1の領域、第1の末端領域に対して3’側に位置する第2の末端領域、および3’尾部領域を含み得る。第2の末端領域は、少なくとも1つのマイクロRNA結合部位、シード配列、またはシード配列を有しないマイクロRNA結合部位を含み得る。一態様において、マイクロRNAは、mir−122、miR−142−3p、miR−142−5p、miR−146a、およびmiR−146b等の免疫細胞特異的マイクロRNAであるが、これらに限定されない。
Polynucleotides for the Production of Biologics」、2012年12月14日出願の米国仮特許出願第61/737,130号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Biologics」、2012年4月2日出願の米国仮特許出願第61/618,866号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Antibodies」、2012年8月10日出願の米国仮特許出願第61/681,647号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Antibodies」、2012年12月14日出願の米国仮特許出願第61/737,134号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Antibodies」、2012年4月2日出願の米国仮特許出願第61/618,868号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Vaccines」、2012年8月10日出願の米国仮特許出願第61/681,648号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Vaccines」、2012年12月14日出願の米国仮特許出願第61/737,135号、表題「Modified Polynucleotides for
the Production of Vaccines」、2012年4月2日出願の米国仮特許出願第61/618,870号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Therapeutic Proteins and Peptides」、2012年8月10日出願の米国仮特許出願第61/681,649号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Therapeutic
Proteins and Peptides」、2012年12月14日出願の米国仮特許出願第61/737,139号、「Modified Polynucleotides for the Production of Therapeutic Proteins and Peptides」、2012年4月2日出願の米国仮特許出願第61/618,873号、表題「Modified Polynucleotides
for the Production of Secreted Proteins」、2012年8月10日出願の米国仮特許出願第61/681,650号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Secreted Proteins」、2012年12月14日出願の米国仮特許出願第61/737,147号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Secreted Proteins」、2012年4月2日出願の米国仮特許出願第61/618,878号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Plasma Membrane Proteins」、2012年8月10日出願の米国仮特許出願第61/681,654号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Plasma Membrane Proteins」、2012年12月14日出願の米国仮特許出願第61/737,152号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Plasma Membrane Proteins」、2012年4月2日出願の米国仮特許出願第61/618,885号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Cytoplasmic and Cytoskeletal Proteins」、2012年8月10日出願の米国仮特許出願第61/681,658号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Cytoplasmic and Cytoskeletal Proteins」、2012年12月14日出願の米国仮特許出願第61/737,155号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Cytoplasmic and Cytoskeletal Proteins」、2012年4月2日出願の米国仮特許出願第61/618,896号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Intracellular Membrane Bound Proteins」、2012年7月5日出願の米国仮特許出願第61/668,157号、表題「Modified Polynucleotides
for the Production of Intracellular Membrane Bound Proteins」、2012年8月10日出願の米国仮特許出願第61/681,661号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Intracellular Membrane Bound Proteins」、2012年12月14日出願の米国仮特許出願第61/737,160号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Intracellular Membrane Bound Proteins」、2012年4月2日出願の米国仮特許出願第61/618,911号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Nuclear Proteins」、2012年8月10日出願の米国仮特許出願第61/681,667号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Nuclear Proteins」、2012年12月14日出願の米国仮特許出願第61/737,168号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Nuclear Proteins」、2012年4月2日出願の米国仮特許出願第61/618,922号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Proteins」、2012年8月10日出願の米国仮特許出願第61/681,675号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Proteins」、2012年12月14日出願の米国仮特許出願第61/737,174号、表題「Modified
Polynucleotides for the Production of Proteins」、2012年4月2日出願の米国仮特許出願第61/618,935号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Proteins Associated with Human Disease」、2012年8月10日出願の米国仮特許出願第61/681,687号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Proteins Associated with Human Disease」、2012年12月14日出願の米国仮特許出願第61/737,184号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Proteins Associated with Human Disease」、2012年4月2日出願の米国仮特許出願第61/618,945号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Proteins Associated with Human Disease」、2012年8月10日出願の米国仮特許出願第61/681,696号、表題「Modified Polynucleotides
for the Production of Proteins Associated with Human Disease」、2012年12月14日出願の米国仮特許出願第61/737,191号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Proteins Associated with Human Disease」、2012年4月2日出願の米国特許出願第61/618,953号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Proteins Associated with Human Disease」、2012年8月10日出願の米国特許出願第61/681,704号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Proteins Associated with Human Disease」、2012年12月14日出願の米国特許出願第61/737,203号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Proteins Associated with Human Disease」、2013年3月9日出願の国際出願第PCT/US2013/030062号、表題「Modified
Polynucleotides for the Production of Biologics and Proteins Associated with Human Disease」;2013年3月9日出願の国際出願第PCT/US2013/030063号、表題「Modified Polynucloetides」;国際出願第PCT/US2013/030064号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Secreted
Proteins」;2013年3月9日出願の国際出願第PCT/US2013/030059号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Membrane Proteins」;2013年3月9日出願の国際出願第PCT/US2013/030066号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Cytoplasmic and Cytoskeletal Proteins」;2013年3月9日出願の国際出願第PCT/US2013/030067号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Nuclear Proteins」;2013年3月9日出願の国際出願第PCT/US2013/030060号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Proteins」;
2013年3月9日出願の国際出願第PCT/US2013/030061号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Proteins Associated with Human Disease」;2013年3月9日出願の国際出願第PCT/US2013/030068号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Cosmetic Proteins and Peptides」;2013年3月9日出願の国際出願第PCT/US2013/030070号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Oncology−Related Proteins and Peptides」;および2013年3月15日出願の国際出願第PCT/US2013/031821号、表題「In Vivo Production of Proteins」、2013年1月17日出願の米国仮特許出願第US 61/753,661号、表題「Signal−Sensor Polynucleotides for the Alteration of Cellular Phenotypes and Microenvironments」、2013年1月18日出願の米国仮特許出願第US 61/754,159号、表題「Signal−Sensor Polynucleotides for the Alteration of Cellular Phenotypes and Microenvironments」、2013年3月14日出願の米国仮特許出願第US61/781,097号、表題「Signal−Sensor Polynucleotides for the Alteration of Cellular Phenotypes and Microenvironments」、2013年5月31日出願の米国仮特許出願第US 61/829,334号、表題「Signal−Sensor Polynucleotides for the Alteration of Cellular Phenotypes and
Microenvironments」、2012年11月26日出願の米国仮特許出願第61/729,933号、表題「Terminally Optimized Modified RNA」、2012年12月14日出願の米国仮特許出願第61/737,224号、表題「Terminally Optimized Modified RNA」、2013年1月31日出願の米国仮特許出願第US 61/758,921号、表題「Differential Targeting Using RNA Constructs」、2013年3月14日出願の米国仮特許出願第US 61/781,139号、表題「Differential Targeting Using RNA Constructs」、2013年5月31日に出願の米国仮出願第61/829,359号、表題「Differential Targeting Using RNA Constructs」に記載の目的とするポリペプチドといった、目的とするポリペプチドをコードする修飾核酸に用いることができ、これら各々の内容は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
本発明は、合成であってもよく、1つ以上の修飾ヌクレオシド(「修飾核酸」または「修飾核酸分子」と称される)およびポリヌクレオチド、一次構築物、および修飾mRNA(mmRNA)を含有し、mRNAが導入される細胞の自然免疫応答の著しい誘導の欠如を含む、有用な特徴を有する、mRNA等のRNAを含む拡散分子を提供する。これらの修飾核酸は、タンパク質産生の効率、核酸の細胞内貯蔵、および接触した細胞の生存率を増強し、減少した免疫原性を有するので、これらの特徴を有するこれらの核酸は、本明細書において「エンハンスド」核酸または修飾RNAと称される。
翻訳可能領域、および1つ、2つ、または3つ以上の異なるヌクレオシド修飾を含有する修飾核酸が提供される。いくつかの実施形態において、修飾核酸は、対応する無修飾核酸に対して、核酸が導入される細胞における分解の減少を示す。
いくつかの実施形態において、化学修飾はヌクレオチドのリン酸骨格に位置していてもよい。
ポリヌクレオチド、一次構築物、またはmmRNA構造
本発明のポリヌクレオチドは、本明細書で証明されるように核酸系治療薬を用いた効果的なポリペプチド産生の既存の問題の打開に役立つそれらの機能的および/または構造的設計特徴において野生型mRNAと区別される。
環状ポリヌクレオチド
本発明に従って、核酸、修飾RNA、または一次構築物は、環化またはコンカテマー化されて翻訳コンピテント分子を生成し、ポリA結合タンパク質と5’末端結合タンパク質との間の相互作用を補助し得る。環化またはコンカテマー化の機構は、少なくとも3つの異なる経路、すなわち1)化学的経路、2)酵素的経路、および3)リボザイム触媒経路を通って生じ得る。新たに形成された5’/3’連結は、分子内または分子間であり得る。
ポリヌクレオチド多量体
本発明に従って、複数のはっきりと異なる核酸、修飾RNA、または一次構築物は、3’末端で修飾されたヌクレオチドを用いて3’末端を介して結合され得る。化学的複合体形成を用いて、細胞への送達の化学量論を制御することができる。例えば、グリオキシル酸回路酵素、イソクエン酸リアーゼ、およびリンゴ酸シンターゼは、HepG2細胞に1:1の比率で供給されて細胞脂肪酸の代謝を変化させ得る。この比率は、一方の核酸または修飾RNA種に3’−アジド末端ヌクレオチドを用い、かつ反対側の核酸または修飾RNA種にC5−エチニルまたはアルキニル含有ヌクレオチドを用いて化学結合核酸または修飾RNAを化学結合させることによって制御され得る。この修飾されたヌクレオチドは、製造業者のプロトコルに従って末端トランスフェラーゼ(New England Biolabs、マサチューセッツ州イプスウィッチ)を用いて転写後に添加される。3’末端修飾ヌクレオチドの添加後、これら2個の核酸または修飾RNA種は、銅の存在下または不在下において水溶液中で合わせられて、文献内に記載のクリック化学機構を介して新たな共有結合を形成し得る。
修飾RNA複合体および組み合わせ
タンパク質産生をさらに亢進するために、本発明の核酸、修飾RNA、ポリヌクレオチド、または一次構築物は、他のポリヌクレオチド、染料、挿入剤(例えば、アクリジン)、架橋剤(例えば、プソラレン、マイトマイシンC)、ポルフィリン(TPPC4、テキサフィリン、サフィリン)、多環芳香族炭化水素(例えば、フェナジン、ジヒドロフェナジン)、人工エンドヌクレアーゼ(例えば、EDTA)、アルキル化剤、リン酸塩、アミノ、メルカプト、PEG(例えば、PEG−40K)、MPEG、[MPEG]2、ポリアミノ、アルキル、置換アルキル、放射標識マーカー、酵素、ハプテン(例えば、ビオチン)、輸送/吸収促進剤(例えば、アスピリン、ビタミンE、葉酸)、合成リボヌクレアーゼ、タンパク質、例えば、糖タンパク質、またはペプチド、例えば、コリガンドに特異的親和性を有する分子、または抗体、例えば、癌細胞、内皮細胞、または骨細胞等の特定の細胞型に結合する抗体、ホルモンおよびホルモン受容体、非ペプチド種、例えば、脂質、レクチン、炭水化物、ビタミン、共同因子、または薬物と複合体化されるように設計され得る。
二機能性ポリヌクレオチド
本発明の一実施形態は、二機能性ポリヌクレオチド(例えば、二機能性核酸、二機能性修飾RNA、または一次構築物)である。その名称が示すように、二機能性ポリヌクレオチドは、少なくとも2つの機能を有するか、または少なくとも2つの機能の能力があるポリヌクレオチドである。これらの分子は、慣例により、多機能性とも称され得る。
非コードポリヌクレオチド
本明細書に記載されるように、部分的または実質的に翻訳可能ではない配列、例えば、非コード領域を有する核酸、修飾RNA、ポリヌクレオチド、および一次構築物が提供される。そのような分子は、通常翻訳されないが、リボソームタンパク質または転移RNA(tRNA)等の1つ以上の翻訳機構成分への結合および隔離のうちの1つ以上によってタンパク質産生に影響を及ぼし、それによって、細胞におけるタンパク質発現を効果的に低下させるか、細胞における1つ以上の経路またはカスケードを調節し得、それが次いでタンパク質レベルを変化させる。核酸、ポリヌクレオチド、一次構築物、またはmRNAは、1個以上の長い非コードRNA(lncRNAもしくはlincRNA)もしくはその部分、低分子核RNA(sno−RNA)、マイクロRNA(miRNA)、低分子干渉RNA(siRNA)、またはPiwi干渉RNA(piRNA)を含有し得るか、あるいはこれらをコードし得る。
目的とするポリペプチド
本発明に従って、一次構築物は、1個以上の目的とするポリペプチドまたはその断片をコードするように設計される。目的とするポリペプチドは、全ポリペプチド、複数のポリペプチド、またはポリペプチドの断片を含み得るが、これらに限定されず、これらは、独立して、1個以上の核酸、複数の核酸、核酸の断片、または前述のうちのいずれかの変異形によってコードされ得る。本明細書で使用するとき、「目的とするポリペプチド」という用語は、選択されて本発明の一次構築物においてコードされる任意のポリペプチドを指す。本明細書で使用するとき、「ポリペプチド」とは、ほとんどの場合ペプチド結合によって結合されるアミノ酸残基(天然または非天然)のポリマーを意味する。この用語は、本明細書で使用するとき、任意の大きさ、構造、または機能を有するタンパク質、ポリペプチド、およびペプチドを指す。いくつかの例において、コードされたポリペプチドが約50個のアミノ酸よりも小さい場合、このポリペプチドは、ペプチドと称される。ポリペプチドがペプチドである場合、これは、少なくとも約2、3、4、または少なくとも5アミノ酸残基長である。したがって、ポリペプチドは、遺伝子産物、天然に存在するポリペプチド、合成ポリペプチド、相同体、オルソログ、パラログ、前述の断片および他の等価物、変異形、ならびに類似体を含む。ポリペプチドは、単一の分子であり得るか、または二量体、三量体、もしくは四量体等の多分子複合体であり得る。それらは、抗体またはインスリン等の一本鎖または多本鎖ポリペプチドも含み得、会合または結合され得る。ほとんどの場合、ジスルフィド結合が多本鎖ポリペプチドに見られる。「ポリペプチド」という用語は、1個以上のアミノ酸残基が対応する天然に存在するアミノ酸の人工化学的類似体であるアミノ酸ポリマーにも適用され得る。
「類似体」は、親または出発ポリペプチドの特性のうちの1つ以上を依然として維持する、1つ以上のアミノ酸改変、例えば、アミノ酸残基の置換、付加、または欠失によって異なるポリペプチド変異形を含むよう意図される。
本明細書で使用され、ポリペプチドについて言及するとき、「局所立体配座形状」という用語は、タンパク質の定義可能な空間内に位置するタンパク質のポリペプチド系構造の出現を意味する。
本発明の一次構築物、修飾核酸、またはmmRNAは、ペプチドおよびタンパク質などの目的とするポリペプチドをコードするように設計され得る。
Production of Biologics」、2012年8月10日出願の米国仮特許出願第61/681,645号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Biologics」、2012年12月14日出願の米国仮特許出願第61/737,130号、表題「Modified Polynucleotides for the Production
of Biologics」、2012年4月2日出願の米国仮特許出願第61/618,866号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Antibodies」、2012年8月10日出願の米国仮特許出願第61/681,647号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Antibodies」、2012年12月14日出願の米国仮特許出願第61/737,134号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Antibodies」、2012年4月2日出願の米国仮特許出願第61/618,868号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Vaccines」、2012年8月10日出願の米国仮特許出願第61/681,648号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Vaccines」、2012年12月14日出願の米国仮特許出願第61/737,135号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Vaccines」、2012年4月2日出願の米国仮特許出願第61/618,870号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Therapeutic Proteins and Peptides」、2012年8月10日出願の米国仮特許出願第61/681,649号、表題「Modified Polynucleotides for
the Production of Therapeutic Proteins and Peptides」、2012年12月14日出願の米国仮特許出願第61/737,139号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Therapeutic Proteins and Peptides」、2012年4月2日出願の米国仮特許出願第61/618,873号、表題「Modified Polynucleotides for the
Production of Secreted Proteins」、2012年8月10日出願の米国仮特許出願第61/681,650号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Secreted Proteins」、2012年12月14日出願の米国仮特許出願第61/737,147号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Secreted Proteins」、2012年4月2日出願の米国仮特許出願第61/618,878号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of
Plasma Membrane Proteins」、2012年8月10日出願の米国仮特許出願第61/681,654号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Plasma Membrane Proteins」、2012年12月14日出願の米国仮特許出願第61/737,152号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Plasma Membrane Proteins」、2012年4月2日出願の米国仮特許出願第61/618,885号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Cytoplasmic and Cytoskeletal Proteins」、2012年8月10日出願の米国仮特許出願第61/681,658号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Cytoplasmic and Cytoskeletal Proteins」、2012年12月14日出願の米国仮特許出願第61/737,155号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Cytoplasmic and Cytoskeletal Proteins」、2012年4月2日出願の米国仮特許出願第61/618,896号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Intracellular Membrane Bound Proteins」、2012年7月5日出願の米国仮特許出願第61/668,157号、表題「Modified Polynucleotides for the
Production of Intracellular Membrane Bound Proteins」、2012年8月10日出願の米国仮特許出願第61/681,661号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Intracellular Membrane Bound Proteins」、2012年12月14日出願の米国仮特許出願第61/737,160号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Intracellular Membrane Bound Proteins」、2012年4月2日出願の米国仮特許出願第61/618,911号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Nuclear Proteins」、2012年8月10日出願の米国仮特許出願第61/681,667号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Nuclear Proteins」、2012年12月14日出願の米国仮特許出願第61/737,168号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Nuclear Proteins」、2012年4月2日出願の米国仮特許出願第61/618,922号、表題「Modified Polynucleotides for the Production
of Proteins」、2012年8月10日出願の米国仮特許出願第61/681,675号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Proteins」、2012年12月14日出願の米国仮特許出願第61/737,174号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Proteins」、2012年4月2日出願の米国仮特許出願第61/618,935号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Proteins Associated with Human Disease」、2012年8月10日出願の米国仮特許出願第61/681,687号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Proteins Associated with Human Disease」、2012年12月14日出願の米国仮特許出願第61/737,184号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Proteins Associated with Human
Disease」、2012年4月2日出願の米国仮特許出願第61/618,945号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Proteins Associated with Human Disease」、2012年8月10日出願の米国仮特許出願第61/681,696号、表題「Modified Polynucleotides for the
Production of Proteins Associated with Human Disease」、2012年12月14日出願の米国仮特許出願第61/737,191号、表題「Modified Polynucleotides for
the Production of Proteins Associated with Human Disease」、2012年4月2日出願の米国特許出願第61/618,953号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Proteins Associated with Human Disease」、2012年8月10日出願の米国特許出願第61/681,704号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Proteins Associated with Human Disease」、2012年12月14日出願の米国特許出願第61/737,203号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Proteins Associated with Human Disease」、2013年3月9日出願の国際出願第PCT/US2013/030062号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Biologics
and Proteins Associated with Human Disease」;2013年3月9日出願の国際出願第PCT/US2013/030063号、表題「Modified Polynucloetides」;国際出願第PCT/US2013/030064号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Secreted Proteins」;2013年3月9日出願の国際出願第PCT/US2013/030059号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Membrane Proteins」;2013年3月9日出願の国際出願第PCT/US2013/030066号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Cytoplasmic and Cytoskeletal Proteins」;2013年3月9日出願の国際出願第PCT/US2013/030067号、表題「Modified
Polynucleotides for the Production of Nuclear Proteins」;2013年3月9日出願の国際出願第PCT/US2013/030060号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Proteins」;2013年3月9日出願の国際出願第PCT/US2013/030061号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Proteins Associated with Human Disease」;2013年3月9日出願の国際出願第PCT/US2013/030068号、表題「Modified Polynucleotides for the Production
of Cosmetic Proteins and Peptides」;2013年3月9日出願の国際出願第PCT/US2013/030070号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Oncology−Related Proteins and Peptides」;および2013年3月15日出願の国際出願第PCT/US2013/031821号、表題「In Vivo Production of Proteins」に列記されるタンパク質配列のうちのいずれかであり得、これら各々の内容は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
Heinje,G.,Academic Press,1987、Sequence Analysis Primer,Gribskov,M.and Devereux,J.,eds.,M.Stockton Press,New York,1991、およびCarillo et al.,SIAM J.Applied Math.48,1073(1988)に記載の方法が含まれるが、これらに限定されない。
F.Altschul,Thomas L.Madden,Alejandro A.Schaeffer,Jinghui Zhang,Zheng Zhang,Webb
Miller,and David J.Lipman(1997),“Gapped
BLAST and PSI−BLAST:a new generation of
protein databese search programs”,核酸 Res.25:3389−3402)。他のツールは、本明細書、具体的には、「同一性」の定義に記載される。
一実施形態において、ポリヌクレオチド、一次構築物、および/またはmmRNAを使用して、対象における少なくとも1つの癌の症状を減少および/または寛解させることができる。癌の症状として、限定されないが、衰弱、痛みおよび疼痛、発熱、疲労、体重減少、血液凝固、血中カルシウム濃度の増加、低白血球数、息切れ、眩暈、頭痛、色素沈着過剰、黄疸、紅斑(erthema)、そう痒症、多毛症、排便習慣の変化、膀胱機能の変化、持続性の痛み、口内の白斑、舌の白点、異常出血または分泌、身体の一部の肥厚または塊、消化不良、嚥下困難、疣贅または黒子の変化、新しい皮膚の変化、および持続性の咳または嗄声を挙げることができる。さらに、ポリヌクレオチド、一次構築物、修飾核酸、および/またはmmRNAは、ケモブレイン、末梢神経障害、疲労、うつ状態、吐き気、嘔吐、疼痛、貧血、リンパ浮腫、感染症、性機能への副作用、低受精率または不妊、オストミック(ostomics)、不眠、および脱毛等の、限定されないが、癌に関連する副作用を減少させることができる。
末端構造修飾:非翻訳領域(UTR)
遺伝子の非翻訳領域(UTR)は、転写されるが、翻訳されない。5’UTRが転写開始部位で始まり開始コドンに続くが、開始コドンを含まない一方で、3’UTRは、終止コドンの直後に始まり、転写終結シグナルまで続く。核酸分子および翻訳の安定性においてUTRが果たす制御的役割についての報告が相次いでいる。UTRの制御特徴は、本発明核酸または修飾RNAに組み込まれて、分子の安定性を高め得る。特定の特徴も組み込まれて、万が一それらが望ましくない器官部位に誤指向される場合には転写物の制御された発現低下を確保することができる。mRNAを産生することができるか、ならびに/または細胞、組織および/もしくは生物体に送達されて目的とするポリペプチドを産生することができるベクターシステムへ、非翻訳領域を組み込んでもよい。
5’UTRおよび翻訳開始
天然5’UTRは、翻訳開始に関与する特徴を有する。それらは、リボソームが多くの遺伝子の翻訳を開始するプロセスに関与することで一般に知られているコザック配列のような特徴を有する。コザック配列は、コンセンサスCCR(A/G)CCAUGGを有し、式中、Rは、開始コドン(AUG)の3塩基上流のプリン(アデニンまたはグアニン)であり、この後に別の「G」が続く。5’UTRは、伸長因子結合に関与する二次構造を形成することも知られている。
5’UTR、3’UTR、および翻訳エンハンサー要素(TEE)
一実施形態において、ポリヌクレオチド、一次構築物、修飾核酸、および/またはmmRNAの5’UTRは、少なくとも1つの翻訳エンハンサーポリヌクレオチド、翻訳エンハンサー要素(translation enhancer element)、翻訳エンハンサー要素(translational enhancer elements)(一括して「TEE」と称される)を含み得る。非限定的な例として、TEEは転写プロモーターと開始コドンとの間に位置し得る。5’UTRに少なくとも1つのTEEを有するポリヌクレオチド、一次構築物、修飾核酸、および/またはmmRNAは、5’UTRにキャップを含み得る。さらに、少なくとも1つのTEEは、キャップ依存的またはキャップ非依存的翻訳を起こすポリヌクレオチド、一次構築物、修飾核酸、および/またはmmRNAの5’UTRに位置していてもよい。
element)」という用語(本明細書では一括して「TEE」と称する)は、mRNAから産生されるポリペプチドまたはタンパク質の量を増加させる配列を指す。
非相同5’UTR
5’UTRは、本発明の修飾核酸(mRNA)、エンハンスド修飾RNA、またはリボ核酸に隣接する領域として提供され得る。5’UTRは、本発明の修飾核酸(mRNA)、エンハンスド修飾RNA、またはリボ核酸中に見出されるコード領域と、相同または非相同であり得る。複数の5’UTRが隣接する領域に含まれていてもよく、同じ配列または異なる配列であってもよい。何も含まない場合も含め、隣接する領域の任意の部分はコドン最適化されていてもよく、いずれも1つ以上の異なる構造的または化学的修飾を、コドン最適化の前および/または後に、独立して含有することができる。
本発明のポリヌクレオチド、一次構築物、またはmmRNAの1つ以上の性質を変化させるために、本発明の修飾核酸(mRNA)、エンハンスド修飾RNA、またはリボ核酸のコード領域に非相同である5’UTRを、本発明の化合物中に操作する。その後、修飾核酸(mRNA)、エンハンスド修飾RNA、またはリボ核酸を、細胞、組織、または生物体に投与し、タンパク質レベル、局在性、および/または半減期等の結果を測定して、非相同5’UTRが本発明の修飾核酸(mRNA)、エンハンスド修飾RNA、またはリボ核酸に有し得る有益な効果を評価する。A、T、C、またはGを含む1つ以上のヌクレオチドが終端に添加されるかまたは除去される、5’UTRの変異形が有用であり得る。5’UTRはまた、コドン最適化されていても、または本明細書に記載されるいずれかの方法で修飾されていてもよい。
マイクロRNA結合部位の組み込み
一実施形態において、本発明の修飾核酸(mRNA)、エンハンスド修飾RNA、またはリボ核酸はポリペプチドをコードするだけでなく、センサー配列もまたコードする。センサー配列として、例えば、マイクロRNA結合部位、転写因子結合部位、構造化mRNA配列、および/またはモチーフ、内因性核酸結合分子に対する偽性受容体として働くように操作された人工的な結合部位が挙げられる。少なくとも1つのセンサー配列を含むポリヌクレオチドの非限定的な例は、同時係属および共同所有の、2013年1月17日出願の米国仮特許出願第US 61/753,661号、表題「Signal−Sensor Polynucleotide for the Alteration of Cellular Phenotypes and Microenvironments」、2013年1月18日出願の米国仮特許出願第US 61/754,159号、表題「Signal−Sensor Polynucleotide for the Alteration of Cellular Phenotypes and Microenvironments、2013年3月14日出願の米国仮特許出願第US61/781,097号、表題「Signal−Sensor Polynucleotide
for the Alteration of Cellular Phenotypes and Microenvironments」、2013年5月31日出願の米国仮特許出願第US 61/829,334、表題「Signal−Sensor Polynucleotide for the Alteration of Cellular Phenotypes and Microenvironments」、2013年6月27日出願の米国仮特許出願第US 61/839,893号、表題「Signal−Sensor Polynucleotide for the Alteration of Cellular Phenotypes and Microenvironments」、2013年7月3日出願の米国仮特許出願第US 61/842,733号、表題「Signal−Sensor Polynucleotide for the Alteration of Cellular Phenotypes and Microenvironment」、および2013年7月23日出願の米国仮特許出願第US 61/857,304号、表題「Signla−Sensor Polynucleotide for the Alteration of Cellular Phenotypes and Microenvironment」に記載されており、これら各々の内容は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
マイクロRNA(またはmiRNA)は、核酸分子の3’UTRに結合し、かつ核酸分子安定性を低下させるか、または翻訳を阻害するかのいずれかによって遺伝子発現を下方制御する19〜25ヌクレオチド長の非コードRNAである。本発明の修飾核酸(mRNA)、エンハンスド修飾RNA、またはリボ核酸は、1つ以上のマイクロRNA標的配列、マイクロRNA配列、またはマイクロRNA種を含み得る。そのような配列は、米国特許公開第US2005/0261218号および米国特許公開第US2005/0059005号(これらの内容は、参照によりこれらの全体が本明細書に組み込まれる)に教示されるもの等の任意の既知のマイクロRNAに対応し得る。非限定的な実施形態として、ヒトゲノムにおける既知のマイクロRNA、それらの配列、およびシード配列を、以下の表11に列挙する。
Hematol 2011 18:171−176、Contreras and Rao Leukemia 2012 26:404−413(2011 Dec 20.doi:10.1038/leu.2011.356)、Bartel Cell 2009 136:215−233、Landgraf et al,Cell,2007 129:1401−1414、Gentner and Naldini,Tissue
Antigens.2012 80:393−403、ならびにこれらに記載の全ての参考文献)。
cl.D1[NT2/D1]、DMS 79、DMS 53、DMS 153、DMS
114、MSTO−211H、SW 1573[SW−1573、SW1573]、SW 1271[SW−1271、SW1271]、SHP−77、SNU−398、SNU−449、SNU−182、SNU−475、SNU−387、SNU−423、NL20、NL20−TA[NL20T−A]、THLE−2、HBE135−E6E7、HCC827、HCC4006、NCI−H23[H23]、NCI−H1299、NCI−H187[H187]、NCI−H358[H−358、H358]、NCI−H378[H378]、NCI−H522[H522]、NCI−H526[H526]、NCI−H727[H727]、NCI−H810[H810]、NCI−H889[H889]、NCI−H1155[H1155]、NCI−H1404[H1404]、NCI−N87[N87]、NCI−H196[H196]、NCI−H211[H211]、NCI−H220[H220]、NCI−H250[H250]、NCI−H524[H524]、NCI−H647[H647]、NCI−H650[H650]、NCI−H711[H711]、NCI−H719[H719]、NCI−H740[H740]、NCI−H748[H748]、NCI−H774[H774]、NCI−H838[H838]、NCI−H841[H841]、NCI−H847[H847]、NCI−H865[H865]、NCI−H920[H920]、NCI−H1048[H1048]、NCI−H1092[H1092]、NCI−H1105[H1105]、NCI−H1184[H1184]、NCI−H1238[H1238]、NCI−H1341[H1341]、NCI−H1385[H1385]、NCI−H1417[H1417]、NCI−H1435[H1435]、NCI−H1436[H1436]、NCI−H1437[H1437]、NCI−H1522[H1522]、NCI−H1563[H1563]、NCI−H1568[H1568]、NCI−H1573[H1573]、NCI−H1581[H1581]、NCI−H1618[H1618]、NCI−H1623[H1623]、NCI−H1650[H−1650、H1650]、NCI−H1651[H1651]、NCI−H1666[H−1666、H1666]、NCI−H1672[H1672]、NCI−H1693[H1693]、NCI−H1694[H1694]、NCI−H1703[H1703]、NCI−H1734[H−1734、H1734]、NCI−H1755[H1755]、NCI−H1755[H1755]、NCI−H1770[H1770]、NCI−H1793[H1793]、NCI−H1836[H1836]、NCI−H1838[H1838]、NCI−H1869[H1869]、NCI−H1876[H1876]、NCI−H1882[H1882]、NCI−H1915[H1915]、NCI−H1930[H1930]、NCI−H1944[H1944]、NCI−H1975[H−1975、H1975]、NCI−H1993[H1993]、NCI−H2023[H2023]、NCI−H2029[H2029]、NCI−H2030[H2030]、NCI−H2066[H2066]、NCI−H2073[H2073]、NCI−H2081[H2081]、NCI−H2085[H2085]、NCI−H2087[H2087]、NCI−H2106[H2106]、NCI−H2110[H2110]、NCI−H2135[H2135]、NCI−H2141[H2141]、NCI−H2171[H2171]、NCI−H2172[H2172]、NCI−H2195[H2195]、NCI−H2196[H2196]、NCI−H2198[H2198]、NCI−H2227[H2227]、NCI−H2228[H2228]、NCI−H2286[H2286]、NCI−H2291[H2291]、NCI−H2330[H2330]、NCI−H2342[H2342]、NCI−H2347[H2347]、NCI−H2405[H2405]、NCI−H2444[H2444]、UMC−11、NCI−H64[H64]、NCI−H735[H735]、NCI−H735[H735]、NCI−H1963[H1963]、NCI−H2107[H2107]、NCI−H2108[H2108]、NCI−H2122[H2122]、Hs 573.T、 Hs 573.Lu、PLC/PRF/5、BEAS−2B、Hep G2、Tera−1、Tera−2、NCI−H69[H69]、NCI−H128[H128]、ChaGo−K−1、NCI−H446[H446]、NCI−H209[H209]、NCI−H146[H146]、NCI−H441[H441]、NCI−H82[H82]、NCI−H460[H460]、NCI−H596[H596]、NCI−H676B[H676B]、NCI−H345[H345]、NCI−H820[H820]、NCI−H520[H520]、NCI−H661[H661]、NCI−H510A[H510A、NCI−H510]、SK−HEP−1、A−427、Calu−1、Calu−3、Calu−6、SK−LU−1、SK−MES−1、SW 900[SW−900、SW900]、Malme−3M、およびCapan−1を含む、ATCC(ヴァージニア州マナッサス)からの細胞株が挙げられる。
別の実施形態において、miRシード配列はステムループの輪に組み込まれていてもよく、miR結合部位はステムループの5’または3’側基部に組み込まれていてもよい。
et al.A Pumilio−induced RNA structure switch in p27−3’UTR controls miR−221 and miR−22 accessibility.Nature Cell Biology.2010を参照されたく、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる)。
et al.A Pumilio−induced RNA structure switch in p27−3’UTR controls miR−221 and miR−22 accessibility.Nature Cell Biology.2010を参照されたく、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる)。
別の実施形態において、5’UTRにおけるマイクロRNA配列を用いて、限定されないが、開始コドン等の翻訳開始の部位の接触性を減少させることができる。Matsudaら(PLoS One.2010 11(5):e15057;参照によりその全体が本明細書に組み込まれる)は、第1の開始コドン(AUG)への接触性を減少させるために、開始コドン(AUGコドンのAが+1である、−4〜+37)周辺のアンチセンスロックド核酸(LNA)オリゴヌクレオチド、およびエクソン−ジャンクション複合体(exon−junctino complexes)(EJC)を使用した。Matsudaは、LNAまたはEJCで開始コドン周辺の配列を変えることで、核酸またはmRNAの効率、長さ、および構造安定性が影響されることを示した。本発明の核酸またはmRNAは、Matsudaらによって記載されたLNAまたはEJC配列の代わりに、翻訳開始部位の接触性を減少させるため、翻訳開始部位の付近にマイクロRNA配列を含むことができる。翻訳開始部位は、マイクロRNA配列の前、後、またはその内側であり得る。非限定的な例として、翻訳開始部位はシード配列または結合部位等のマイクロRNA配列中に位置し得る。別の非限定的な例として、翻訳開始部位はシード配列またはmir−122結合部位等のmiR−122配列の内側に位置し得る。
RNA結合タンパク質(RBP)は、限定されないが、RNAスプライシング、局在化、翻訳、代謝回転、ポリアデニル化、キャッピング、修飾、排出、および局在化等の、同時および転写後遺伝子発現の多数の側面を調節することができる。RNA結合ドメイン(RBD)、例えば、限定されないが、RNA認識モチーフ(RR)、およびhnRNP K相同性(KH)ドメインは、典型的にRBPとそれらのRNA標的との配列会合を調節する(Ray et al.Nature 2013.499:172−177;配列会合)。一実施形態において、基準のRBDは短いRNA配列を結合することができる。別の実施形態において、基準のRBDは構造RNAを認識することができる。
一実施形態において、目的とするmRNAの安定性を増加させるために、HuRをコードするmRNAを目的とするmRNAと共に細胞または組織内に同時導入または同時注入することができる。これらのタンパク質はまた、目的のmRNAにインビトロで繋留し、その後細胞へ一緒に投与することができる。ポリA尾部結合タンパク質(PABP)は真核細胞翻訳開始因子eIF4Gと相互作用して、翻訳開始を刺激する。これらのRBPをコードするmRNAとmRNA薬剤との同時投与、ならびに/またはこれらのタンパク質とmRNA薬剤のインビトロでの繋留、およびタンパク質結合mRNAの細胞への投与は、mRNAの翻訳効率を増加させることができる。この同様の概念は、mRNAと、様々な翻訳因子をコードするmRNA、および促進剤、ならびにRNA安定性および/または翻訳効率に影響するタンパク質それら自身との同時投与にまで拡張することができる。
一実施形態において、RBDは、Ray et al.(Nature 2013.499:172−177;参照によりその全体が本明細書に組み込まれる)によって記載されたRBD、それらの断片、または変異形のいずれかであり得る。
一実施形態において、RNA結合タンパク質モチーフにおけるマイクロRNA配列を使用して、限定されないが、開始コドン等の翻訳開始部位の接触性を減少させることができる。本発明の核酸またはmRNAは、Matsudaらによって記載されたLNAまたはEJC配列の代わりに、翻訳開始部位の接触性を減少させるため、翻訳開始部位の付近にマイクロRNA配列を含むことができる。翻訳開始部位は、マイクロRNA配列の前、後、またはその内側であり得る。非限定的な例として、翻訳開始部位はシード配列または結合部位等のマイクロRNA配列中に位置し得る。別の非限定的な例として、翻訳開始部位はシード配列またはmir−122結合部位等のmiR−122配列の内側に位置し得る。
3’UTRにおけるその他の調節因子
マイクロRNA結合部位にくわえて、異なる組織と細胞でmRNA安定性および翻訳を調節する天然mRNAの3’−UTRにおけるその他の調節配列を除去するか、または修飾メッセンジャーRNAに組み込むことができる。そのようなcis−調節因子は、限定されないが、Cis−RNP(リボヌクレオタンパク質)/RBP(RNA結合タンパク質)調節因子、AU−リッチ領域(AUE)、構造化ステムループ、恒常的崩壊因子(CDE)、GC濃度、および他の構造化mRNAモチーフ(参照によりその全体が本明細書に組み込まれる、Parker BJ et al.,Genome Research,2011,21,1929−1943)を含み得る。例えば、CDEはそれらのロキン(Roquin)タンパク質との相互作用によってmRNA分解を媒介する、調節モチーフの分類である。特に、CDEは、発生および炎症の調節因子をコードしてマクロファージ中のサイトカイン産生を制限する多くのmRNAにおいて見出されている(Leppek K et al.,2013,Cell,153,869−881、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる)。
栄養要求性mRNA
一実施形態において、本発明の核酸またはmRNAは栄養要求性であり得る。本明細書で使用するとき、「栄養要求性」という用語は、タンパク質発現が実質的に妨げられるかまたは減少するように、空間的または時間的キューに応じてmRNAの引き金となる、mRNAを促進する、またはmRNAを誘導する少なくとも1つの特徴を含むmRNAを指す。そのような空間的または時間的キューは、特定の組織、もしくは臓器、または細胞環境等の翻訳されるmRNAの位置を含む。温度、pH、イオン強度、含水量といったものを含むキューもまた予想される。
3’UTRおよびAU豊富な要素
3’UTRは、それらに包理される一続きのアデノシン(アデノシン)およびウリジン(ウリジン)を有することで知られている。これらのAU豊富な特徴は、特に高代謝回転率を有する遺伝子においてよく見られる。それらの配列特徴および機能特性に基づいて、AU豊富な要素(ARE)は、3つのクラスに分類され得る(Chen et al,1995):クラスIのAREは、U豊富な領域内にAUUUAモチーフのいくつかの分散したコピーを含有する。C−MycおよびMyoDは、クラスIのAREを含有する。クラスIIのAREは、2個以上の重複したUUAUUUA(U/A)(U/A)九量体を有する。この種のAREを含有する分子は、GM−CSFおよびTNF−aを含む。クラスIIIのAREは、あまり明確にされていない。これらのU豊富な領域は、AUUUAモチーフを含有しない。C−Junおよびミオゲニンが、十分に研究されたこのクラスの例の2つである。AREに結合する大半のタンパク質がメッセンジャーを不安定にすることで知られているが、ELAVファミリーのメンバー、中でも注目すべきHuRがmRNAの安定性を向上させることが実証されている。HuRは、これら3つのクラスのAREに結合する。HuR特異的結合部位を操作して核酸分子の3’UTRに入れることで、HuR結合、ひいてはインビボでのメッセージの安定化につながる。
3’UTRおよび三重らせん
一実施形態において、本発明の核酸は、修飾核酸、エンハンスド修飾RNA、またはリボ核酸の3’末端に三重らせんを含み得る。本発明の核酸の3’末端は、三重らせん単独か、またはポリA尾部と組み合わせて含んでいてもよい。
2013;参照によりその全体が本明細書に組み込まれる)。
ステムループ
一実施形態において、本発明の核酸は、限定されないが、ヒストンステムループ等のステムループを含み得る。ステムループは、限定されないが、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる国際特許公開第WO2013103659号に記載の配列番号7〜17等の約25または約26ヌクレオチド長であるヌクレオチド配列であってもよい。ヒストンステムループはコード領域に対して3’側(例えば、コード領域の3’末端)に位置し得る。非限定的な例として、ステムループは本明細書に記載の核酸の3’末端に位置していてもよい。
一実施形態において、miR配列および/またはTEE配列の組み込みは、翻訳を増加および/または減少させ得るステムループ領域の形を変化させる。(例えば、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる、Kedde et al.A Pumilio−induced RNA structure switch in p27−3’UTR
controls miR−221 and miR−22 accessibility.Nature Cell Biology.2010を参照のこと)。
mRNAの5’キャップ構造は、核外輸送に関与し、mRNAの安定性を向上させ、mRNAキャップ結合タンパク質(CBP)に結合し、これは、CBPのポリ(A)結合タンパク質との会合を介して細胞におけるmRNA安定性および翻訳適格性に関与し、成熟環状mRNA種を形成する。このキャップはさらに、mRNAスプライシング中に5’近位のイントロンの除去を支援する。
et al.Bioorganic&Medicinal Chemistry 2013 21:4570−4574に記載の、様々なキャップ類似体およびキャップ類似体を合成する方法を参照のこと;これらの内容は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる)。別の実施形態において、本発明のキャップ類似体は4−クロロ/ブロモフェノキシエチル類似体である。
非限定的な例として、修飾5’キャップは、以下のキャップ依存翻訳に対して基質構造を有していてもよく、
表1
表2
表3
表4
別の実施形態において、5’キャップ修飾はCF2修飾三リン酸部分を含み得る。
3’UTRおよびウイルス配列
大麦縞萎縮ウイルス(BYDV−PAV)の翻訳エンハンサー配列等であるが、これに限定されないさらなるウイルス配列は、本発明の核酸またはmRNAの3’UTRに操作および挿入され得、インビトロおよびインビボで構築物の翻訳を刺激し得る。トランスフェクション実験を関連細胞株において行うことができ、ELISAによってタンパク質産生をトランスフェクション後12時間、24時間、48時間、72時間、および7日時点でアッセイすることができる。
IRES配列
さらに、内部リボソーム進入部位(IRES)を含有する核酸が提供される。最初に特徴的なピコルナウイルスRNAと特定されたIRESは、5’キャップ構造の不在下でタンパク質合成を開始するときに重要な役割を果たす。IRESは、mRNAの唯一のリボソーム結合部位として働き得るか、または複数のリボソーム結合部位のうちの1つの役割を果たし得る。2個以上の機能的リボソーム結合部位を含有する核酸またはmRNAは、リボソーム(「多シストロン性核酸分子」)によって独立して翻訳されるいくつかのペプチドまたはポリペプチドをコードし得る。核酸またはmRNAにIRESが提供されるとき、第2の翻訳可能な領域がさらに任意に提供される。本発明に従って用いられ得るIRES配列の例には、制限なく、ピコルナウイルス(例えば、FMDV)、ペストウイルス(CFFV)、ポリオウイルス(PV)、脳心筋炎ウイルス(ECMV)、口蹄疫ウイルス(FMDV)、C型肝炎ウイルス(HCV)、豚コレラウイルス(CSFV)、マウス白血病ウイルス(MLV)、サル免疫不全ウイルス(SIV)、またはコオロギ麻痺ウイルス(CrPV)由来のものが挙げられる。
末端構造修飾:ポリA尾部
RNA処理中、長いアデニンヌクレオチド鎖(ポリA尾部)は通常、分子の安定性を向上させるためにメッセンジャーRNA(mRNA)に付加される。転写直後、転写物の3’末端が切断されて3’ヒドロキシルを遊離させる。その後、ポリAポリメラーゼは、アデニンヌクレオチド鎖をRNAに付加する。ポリアデニル化と呼ばれるこのプロセスは、100〜250残基長であるポリA尾部を付加する。
概して、本発明のポリA尾部の長さは、30ヌクレオチド長を超える。別の実施形態において、ポリA尾部は、35ヌクレオチド長を超える。別の実施形態において、長さは少なくとも40ヌクレオチド長である。別の実施形態において、長さは少なくとも45ヌクレオチド長である。別の実施形態において、長さは少なくとも55ヌクレオチド長である。別の実施形態において、長さは少なくとも60ヌクレオチド長である。別の実施形態において、長さは少なくとも60ヌクレオチド長である。別の実施形態において、長さは少なくとも80ヌクレオチド長である。別の実施形態において、長さは少なくとも90ヌクレオチド長である。別の実施形態において、長さは少なくとも100ヌクレオチド長である。別の実施形態において、長さは少なくとも120ヌクレオチド長である。別の実施形態において、長さは少なくとも140ヌクレオチド長である。別の実施形態において、長さは少なくとも160ヌクレオチド長である。別の実施形態において、長さは少なくとも180ヌクレオチド長である。別の実施形態において、長さは少なくとも200ヌクレオチド長である。別の実施形態において、長さは少なくとも250ヌクレオチド長である。別の実施形態において、長さは少なくとも300ヌクレオチド長である。別の実施形態において、長さは少なくとも350ヌクレオチド長である。別の実施形態において、長さは少なくとも400ヌクレオチド長である。別の実施形態において、長さは少なくとも450ヌクレオチド長である。別の実施形態において、長さは少なくとも500ヌクレオチド長である。別の実施形態において、長さは少なくとも600ヌクレオチド長である。別の実施形態において、長さは少なくとも700ヌクレオチド長である。別の実施形態において、長さは少なくとも800ヌクレオチド長である。別の実施形態において、長さは少なくとも900ヌクレオチド長である。別の実施形態において、長さは少なくとも1000ヌクレオチド長である。別の実施形態において、長さは少なくとも1100ヌクレオチド長である。別の実施形態において、長さは少なくとも1200ヌクレオチド長である。別の実施形態において、長さは少なくとも1300ヌクレオチド長である。別の実施形態において、長さは少なくとも1400ヌクレオチド長である。別の実施形態において、長さは少なくとも1500ヌクレオチド長である。別の実施形態において、長さは少なくとも1600ヌクレオチド長である。別の実施形態において、長さは少なくとも1700ヌクレオチド長である。別の実施形態において、長さは少なくとも1800ヌクレオチド長である。別の実施形態において、長さは少なくとも1900ヌクレオチド長である。別の実施形態において、長さは少なくとも2000ヌクレオチド長である。別の実施形態において、長さは少なくとも2500ヌクレオチド長である。別の実施形態において、長さは少なくとも3000ヌクレオチド長である。
一実施形態において、本発明の核酸またはmRNAは、ポリA〜G四重項を含むように設計される。G四重項は、DNAおよびRNAの両方においてG豊富な配列によって形成され得る4個のグアニンヌクレオチドの環状水素結合アレイである。この実施形態において、G四重項は、ポリA尾部の終端に組み込まれる。結果として生じる核酸またはmRNAは、安定性、タンパク質産生、および様々な時点での半減期他のパラメータについてアッセイされ得る。ポリA〜G四重項が、120個のヌクレオチドのポリA尾部を単独で用いてもたらされるタンパク質産生の少なくとも75%に相当するタンパク質産生をもたらすことが見出されている。
A−G Quartet)を含み得る。ポリA−G4分子を有する核酸および/またはmRNAは5’キャップ構造をさらに含み得る。
定量化
一実施形態において、本発明のポリヌクレオチド、一次構築物、修飾核酸、またはmmRNAは、1つ以上の体液由来のエクソソームにおいて定量化され得る。本明細書で使用するとき、「体液」には、末梢血、血清、血漿、腹水、尿、脳脊髄液(CSF)、痰、唾液、骨髄、滑液、房水、羊水、耳垢、母乳、気管支肺胞洗浄液、精液、前立腺液、クーパー腺液または射精前液、汗、糞便、毛髪、涙液、嚢胞液、胸膜および腹水、心嚢液、リンパ液、粥状液、乳糜、胆汁、間質液、帯下、膿汁、皮脂、嘔吐物、膣分泌物、粘膜分泌物、水便、膵液、鼻腔からの洗浄液、気管支肺吸引物、胚盤胞腔液、および臍帯血が含まれる。あるいは、エクソソームは、肺、心臓、膵臓、胃、腸、膀胱、腎臓、卵巣、睾丸、皮膚、結腸、乳房、前立腺、脳、食道、肝臓、および胎盤からなる群から選択される器官から回収され得る。
II.ポリヌクレオチドの設計および合成
本発明に従って用いるポリヌクレオチド、一次構築物、修飾核酸、またはmmRNAは、化学合成、一般にインビトロ転写(IVT)と称される酵素合成、またはより長い前駆体の酵素的もしくは化学的切断等を含むが、これらに限定されない任意の利用可能な技法に従って調製され得る。RNAを合成する方法は、当技術分野において既知である(例えば、いずれも参照により本明細書に組み込まれる、Gait,M.J.(ed.)Oligonucleotide synthesis:a practical approach,Oxford[Oxfordshire],Washington,DC:IRL Press,1984、およびHerdewijn,P.(ed.)Oligonucleotide synthesis:methods and applications,Methods in Molecular Biology,v.288(Clifton,N.J.)Totowa,N.J.:Humana Press,2005を参照のこと)。
遺伝子構築
遺伝子構築ステップは、遺伝子合成、ベクター増幅、プラスミド精製、プラスミド線形化および浄化、ならびにcDNA鋳型合成および浄化を含み得るが、これらに限定されない。
遺伝子合成
目的とするポリペプチドまたは標的が産生のために選択された時点で、一次構築物が設計される。一次構築物内で、目的とするポリペプチドをコードする結合ヌクレオシドの第1の領域は、選択された核酸(DNAまたはRNA)転写物のオープンリーディングフレーム(ORF)を用いて構築され得る。ORFは、野生型ORF、アイソフォーム、変異形、またはその断片を含み得る。本明細書で使用するとき、「オープンリーディングフレーム」または「ORF」は、目的とするポリペプチドをコードすることができる核酸配列(DNAまたはRNA)を指すよう意図される。ORFは、多くの場合、開始コドンATGで始まり、ナンセンスまたは終止コドンもしくはシグナルで終わる。
表5.コドン選択肢
表6.5’非翻訳領域
表7.3’非翻訳領域
終止コドン
一実施形態において、本発明の一次構築物は、3’非翻訳領域(UTR)の前に少なくとも2つの終止コドンを含み得る。終止コドンは、TGA、TAA、およびTAGから選択され得る。一実施形態において、本発明の一次構築物は、終止コドンTGAおよびもう1つの終止コドンを含む。さらなる実施形態において、もう1つの終止コドンは、TAAであり得る。
ベクター増幅
一次構築物を含有するベクターは、その後、増幅され、Invitrogen PURELINK(商標)HiPure Maxiprepキット(カリフォルニア州カールスバッド)を用いたマキシプレップ等であるが、これらに限定されない当技術分野で既知の方法を用いてプラスミドが単離および精製される。
プラスミド線形化
プラスミドは、その後、制限酵素および緩衝液の使用等であるが、これらに限定されない当技術分野で既知の方法を用いて線形化され得る。線形化反応物は、例えば、InvitrogenのPURELINK(商標)PCRマイクロキット(カリフォルニア州カールスバッド)、ならびに強アニオン交換HPLC、弱アニオン交換HPLC、逆相HPLC(RP−HPLC)、および疎水性相互作用HPLC(HIC−HPLC)等であるが、これらに限定されないHPLCに基づく精製方法、ならびにInvitrogenの標準PURELINK(商標)PCRキット(カリフォルニア州カールスバッド)を含む方法を用いて精製され得る。精製方法は、もたらされた線形化反応物の大きさに応じて修正され得る。その後、線形化されたプラスミドを用いて、インビトロ転写(IVT)反応のためのcDNAを生成する。cDNA鋳型合成
cDNA鋳型は、線形化されたプラスミドにポリメラーゼ連鎖反応(PCR)を経させることによって合成され得る。表8は、本発明のPCR反応において有用であり得るプライマーおよびプローブの一覧である。この一覧が網羅的ではなく、任意の増幅のためのプライマー−プローブ設計が当技術分野の技術の範囲内であることを理解されたい。プローブは、標的分子に対する塩基対合忠実性および塩基対合強度を高めるように化学的に修飾された塩基も含有し得る。そのような修飾には、5−メチル−シチジン、2、6−ジ−アミノ−プリン、2’−フルオロ、ホスホロ−チオエート、またはロックド核酸が含まれ得る。
表8.プライマーおよびプローブ
一実施形態において、cDNAは、転写を経る前に配列決定分析のために提出され得る。
ポリヌクレオチド産生
ポリヌクレオチド産生のプロセスは、インビトロ転写、cDNA鋳型除去およびRNA浄化、ならびにキャッピングおよび/またはテーリング反応を含み得るが、これらに限定されない。
インビトロ転写
先のステップで産生されたcDNAは、インビトロ転写(IVT)系を用いて転写され得る。この系は、典型的には、転写緩衝液、ヌクレオチドトリホスフェート(NTP)、RNase阻害剤、およびポリメラーゼを含む。NTPは、自家で製造され得るか、供給業者から選択され得るか、または本明細書に記載されるように合成され得る。NTPは、天然および非天然(修飾された)NTPを含む本明細書に記載のNTPから選択され得るが、これらに限定されない。ポリメラーゼは、T7 RNAポリメラーゼ、T3 RNAポリメラーゼ、および修飾された核酸に組み込むことができるポリメラーゼ等であるが、これらに限定されない変異体ポリメラーゼから選択され得るが、これらに限定されない。RNAポリメラーゼ
任意の数のRNAポリメラーゼまたは変異形が本発明の一次構築物の設計において用いられ得る。
cDNA鋳型除去および浄化
cDNA鋳型は、デオキシリボヌクレアーゼI(DNase I)での処理等であるが、これに限定されない当技術分野で既知の方法を用いて除去され得る。RNA浄化は、Beckman Coulter(マサチューセッツ州ダンバース)のAGENCOURT(登録商標)CLEANSEQ(登録商標)システム;強アニオン交換HPLC、弱アニオン交換HPLC、逆相HPLC(RP−HPLC)、および疎水性相互作用HPLC(HIC−HPLC)等であるが、これらに限定されないHPLCに基づく精製方法等であるが、これらに限定されない精製方法も含み得る。
キャッピングおよび/またはテーリング反応
一次構築物またはmmRNAは、キャッピングおよび/またはテーリング反応も経り得る。キャッピング反応は、5’キャップを一次構築物の5’末端に付加する当技術分野で既知の方法を用いて行われ得る。キャッピングのための方法には、ワクシニアキャッピング酵素(New England Biolabs、マサチューセッツ州イプスウィッチ)の使用が含まれるが、これに限定されない。
精製
一次構築物またはmmRNA精製は、mRNAまたはmmRNA浄化、品質保証、および品質管理を含み得るが、これらに限定されない。mRNAまたはmmRNA浄化は、AGENCOURT(登録商標)ビーズ(Beckman Coulter Genomics、マサチューセッツ州ダンバース);ポリTビーズ;LNA(商標)オリゴT捕捉プローブ(EXIQON(登録商標)Inc、Vedbaek,Denmark);または強アニオン交換HPLC、弱アニオン交換HPLC、逆相HPLC(RP−HPLC)、および疎水性相互作用HPLC(HIC−HPLC)等であるが、これらに限定されないHPLCに基づく精製方法等であるが、これらに限定されない当技術分野で既知の方法を用いて行われ得る。「精製されたmRNAまたはmmRNA」等の「精製された」という用語は、ポリヌクレオチドとの関連で用いられるとき、少なくとも1つの混入物質から分離されるものを指す。本明細書で使用するとき、「混入物質」とは、別の物質を不適切、不純、または劣性にする任意の物質である。したがって、精製されたポリヌクレオチド(例えば、DNAおよびRNA)は、天然に見られる形態もしくは環境とは異なる形態もしくは環境、またはそれを処理もしくは精製方法に供する前に存在した形態もしくは環境とは異なる形態もしくは環境において存在する。
別の実施形態において、mRNAまたはmmRNAは、逆転写PCRを含むが、これに限定されない方法を用いて配列決定され得る。
一次構築物またはmmRNAは、ポリペプチドの治療関連部位への輸送を促進するさらなる特徴もコードし得る。タンパク質輸送を支援するそのような特徴の1つに、シグナルペプチド配列がある。本明細書で使用するとき、「シグナル配列」または「シグナルペプチド」とは、それぞれ、コーディング領域またはコードされたポリペプチドの5’(またはN末端)に組み込まれる、それぞれ、約9〜200ヌクレオチド長(3〜60アミノ酸長)のポリヌクレオチドまたはポリペプチドである。これらの配列の付加は、1つ以上の分泌経路を通るコードされたポリペプチドの小胞体への輸送をもたらす。いくつかのシグナルペプチドは、タンパク質が輸送された後にシグナルペプチダーゼによってタンパク質から切断される。
表9.シグナルペプチド
標的選択
本発明にしたがって、一次構築物は、少なくとも1つの目的とするポリペプチドをコードする連結ヌクレオシドの少なくとも第1の領域を含む。本発明の目的とするポリペプチドまたは「標的」またはタンパク質およびペプチドは、2012年4月2日出願の米国仮特許出願第61/618,862号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Biologics」;2012年8月10日出願の米国仮特許出願第61/681,645号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of
Biologics」;2012年12月14日出願の米国仮特許出願第61/737,130号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Biologics」;2012年4月2日出願の米国仮特許出願第61/618,866号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Antibodies」;2012年8月10日出願の米国仮特許出願第61/681,647号、表題「Modified Polynucleotides for the Production
of Antibodies」;2012年12月14日出願の米国仮特許出願第61/737,134号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Antibodies」;2012年4月2日出願の米国仮特許出願第61/618,868号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Vaccines」;2012年8月10日出願の米国仮特許出願第61/681,648号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Vaccines」;2012年12月14日出願の米国仮特許出願第61/737,135号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Vaccines」;2012年4月2日出願の米国仮特許出願第61/618,870号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Therapeutic Proteins and Peptides」;2012年8月10日出願の米国仮特許出願第61/681,649号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Therapeutic Proteins and Peptides」;2012年12月14日出願の米国仮特許出願第61/737,139号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Therapeutic Proteins and Peptides」;2012年4月2日出願の米国仮特許出願第61/618,873号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Secreted Proteins」;2012年8月10日出願の米国仮特許出願第61/681,650号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Secreted Proteins」;2012年12月14日出願の米国仮特許出願第61/737,147号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Secreted
Proteins」;2012年4月2日出願の米国仮特許出願第61/618,878号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Plasma Membrane Proteins」;2012年8月10日出願の米国仮特許出願第61/681,654号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Plasma Membrane Proteins」;2012年12月14日出願の米国仮特許出願第61/737,152号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Plasma Membrane Proteins」;2012年4月2日出願の米国仮特許出願第61/618,885号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Cytoplasmic and Cytoskeletal Proteins」;2012年8月10日出願の米国仮特許出願第61/681,658号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Cytoplasmic and Cytoskeletal Proteins」;2012年12月14日出願の米国仮特許出願第61/737,155号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Cytoplasmic and
Cytoskeletal Proteins」;2012年4月2日出願の米国仮特許出願第61/618,896号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Intracellular Membrane Bound Proteins」;2012年7月5日出願の米国仮特許出願第61/668,157号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Intracellular
Membrane Bound Proteins」;2012年8月10日出願の米国仮特許出願第61/681,661号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Intracellular Membrane Bound Proteins」;2012年12月14日出願の米国仮特許出願第61/737,160号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Intracellular Membrane Bound Proteins」;2012年4月2日出願の米国仮特許出願第61/618,911号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Nuclear
Proteins」;2012年8月10日出願の米国仮特許出願第61/681,667号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Nuclear Proteins」;2012年12月14日出願の米国仮特許出願第61/737,168号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Nuclear Proteins」;2012年4月2日出願の米国仮特許出願第61/618,922号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Proteins」;2012年8月10日出願の米国仮特許出願第61/681,675号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Proteins」;2012年12月14日出願の米国仮特許出願第61/737,174号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Proteins」;2012年4月2日出願の米国仮特許出願第61/618,935号、表題「Modified Polynucleotides for the
Production of Proteins Associated with Human Disease」;2012年8月10日出願の米国仮特許出願第61/681,687号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Proteins Associated with Human Disease」;2012年12月14日出願の米国仮特許出願第61/737,184号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Proteins Associated with Human Disease」;2012年4月2日出願の米国仮特許出願第61/618,945号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Proteins Associated with Human Disease」;2012年8月10日出願の米国仮特許出願第61/681,696号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Proteins Associated with Human Disease」;2012年12月14日出願の米国仮特許出願第61/737,191号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Proteins Associated with Human Disease」;2012年4月2日出願の米国仮特許出願第61/618,953号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Proteins Associated with Human Disease」;2012年8月10日出願の米国仮特許出願第61/681,704号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Proteins Associated with Human Disease」;2012年12月14日出願の米国仮特許出願第61/737,203号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Proteins Associated with Human Disease」、米国仮特許出願第61/753,661号、表題「Polynucleotides For The Alteration Of Cellular Phenotypes
And Microenvironments」;2013年3月9日出願の国際出願第PCT/US2013/030062号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Biologics and Proteins Associated with Human Disease」;2013年3月9日出願の国際出願第PCT/US2013/030063号、表題「Modified Polynucloetides」;国際出願第PCT/US2013/030064号、表題「Modified Polynucleotides
for the Production of Secreted Proteins」;2013年3月9日出願の国際出願第PCT/US2013/030059号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Membrane Proteins」;2013年3月9日出願の国際出願第PCT/US2013/030066号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Cytoplasmic and Cytoskeletal Proteins」;2013年3月9日
出願の国際出願第PCT/US2013/030067号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Nuclear Proteins」;2013年3月9日出願の国際出願第PCT/US2013/030060号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Proteins」;2013年3月9日出願の国際出願第PCT/US2013/030061号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Proteins Associated with Human Disease」;2013年3月9日出願の国際出願第PCT/US2013/030068号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of Cosmetic Proteins and Peptides」;2013年3月9日出願の国際出願第PCT/US2013/030070号、表題「Modified Polynucleotides for the Production of
Oncology−Related Proteins and Peptides」;および2013年3月15日出願の国際出願第PCT/US2013/031821号、表題「In Vivo Production of Proteins」に列挙され、これら各々の内容は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
タンパク質切断シグナルおよび部位
一実施形態において、本発明のポリペプチドは、少なくとも1個のタンパク質切断部位を含有する少なくとも1個のタンパク質切断シグナルを含み得る。タンパク質切断部位は、N末端とC末端の真ん中、N末端と中間点との間、中間点とC末端との間、およびこれらの組み合わせ等であるが、これらに限定されないN末端とC末端との間の任意の空間で、N末端、C末端に位置し得る。
表10.タンパク質切断部位配列
非限定的な例として、参照によりこれらの全体が本明細書に組み込まれる、米国特許第7,374,930号および米国特許公開第20090227660号は、フーリン切断部位を用いて、発現産物におけるGLP−1のN末端メチオニンをその細胞のゴルジ装置から切断する。一実施形態において、本発明のポリペプチドは、少なくとも1個のタンパク質切断シグナルおよび/または部位を含むが、但し、ポリペプチドがGLP−1ではないことを条件とする。
一実施形態において、本発明の一次構築物、修飾核酸、またはmmRNAは、少なくとも1個のコードされたタンパク質切断シグナルおよび/または部位を含むが、但し、一次構築物、修飾核酸、またはmmRNAがGLP−1をコードしないことを条件とする。
表11.Mirおよびmir結合部位
表12.mis、組織/細胞発現、および疾患
DD et al,Blood,2010,116:e118−e127;Vaz C
et al.,BMC Genomics,2010,11,288、これら各々の内容は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる)。表13において、「HCC」は肝細胞癌を表し、「ALL」は急性リンパ性白血病を表し、「CLL」は慢性リンパ性白血病を表す。
表13.免疫細胞におけるマイクロRNA
本明細書における、ヌクレオチド、ヌクレオシド、ポリヌクレオチド(例えば、修飾RNA、修飾核酸分子、修飾RNA(複数)、核酸、および修飾核酸といった、本発明の核酸等)において、「修飾」または必要に応じて「修飾された」という用語は、A、G、U、またはCリボヌクレオチドに対する修飾を指す。概して、本明細書において、これらの用語は、天然に存在する5’末端mRNAキャップ部分におけるリボヌクレオチド修飾を指すようには意図されていない。ポリペプチドにおいて、「修飾」という用語は、基準の組の20個のアミノ酸と比較した修飾を指す。
修飾mRNA分子
本発明のポリヌクレオチド、一次構築物、核酸、または修飾RNAは、目的とするポリペプチドをコードする結合ヌクレオシドの第1の領域、第1の領域の5’末端に位置する第1の隣接領域、および第1の領域の3’末端に位置する第2の隣接領域を含む。結合ヌクレオチドの第1の領域は、翻訳可能な領域であり得る。
いくつかの実施形態において、修飾核酸塩基は、修飾ウラシルである。修飾ウラシルを有する例示の核酸塩基およびヌクレオシドには、シュードウリジン(ψ)、ピリジン−4−オンリボヌクレオシド、5−アザ−ウリジン、6−アザ−ウリジン、2−チオ−5−アザ−ウリジン、2−チオウリジン(s2U)、4−チオ−ウリジン(s4U)、4−チオ−シュードウリジン、2−チオ−シュードウリジン、5−ヒドロキシウリジン(ho5U)、5−アミノアリル−ウリジン、5−ハロ−ウリジン(例えば、5−ヨード−ウリジンまたは5−ブロモ−ウリジン)、3−メチルウリジン(m3U)、5−メトキシ−ウリジン(mo5U)、ウリジン5−オキシ酢酸(cmo5U)、ウリジン5−オキシ酢酸メチルエステル(mcmo5U)、5−カルボキシメチル−ウリジン(cm5U)、1−カルボキシメチル−シュードウリジン、5−カルボキシヒドロキシメチル−ウリジン(chm5U)、5−カルボキシヒドロキシメチル−ウリジンメチルエステル(mchm5U)、5−メトキシカルボニルメチル−ウリジン(mcm5U)、5−メトキシカルボニルメチル−2−チオ−ウリジン(mcm5s2U)、5−アミノメチル−2−チオ−ウリジン(nm5s2U)、5−メチルアミノメチル−ウリジン(mnm5U)、5−メチルアミノメチル−2−チオ−ウリジン(mnm5s2U)、5−メチルアミノメチル−2−セレノ−ウリジン(mnm5se2U)、5−カルバモイルメチル−ウリジン(ncm5U)、5−カルボキシメチルアミノメチル−ウリジン(cmnm5U)、5−カルボキシメチルアミノメチル−2−チオ−ウリジン(cmnm5s2U)、5−プロピニル−ウリジン、1−プロピニル−シュードウリジン、5−タウリノメチルウリジン(τm5U)、1−タウリノメチル−シュードウリジン、5−タウリノメチル−2−チオ−ウリジン(τm5s2U)、1−タウリノメチル−4−チオ−シュードウリジン、5−メチル−ウリジン(m5U、すなわち、核酸塩基デオキシチミンを有するもの)、1−メチル−シュードウリジン(m1ψ)、5−メチル−2−チオ−ウリジン(m5s2U)、1−メチル−4−チオ−シュードウリジン(m1s4ψ)、4−チオ−1−メチル−シュードウリジン、3−メチル−シュードウリジン(m3ψ)、2−チオ−1−メチル−シュードウリジン、1−メチル−1−デアザ−シュードウリジン、2−チオ−1−メチル−1−デアザ−シュードウリジン、ジヒドロウリジン(D)、ジヒドロシュードウリジン、5,6−ジヒドロウリジン、5−メチル−ジヒドロウリジン(m5D)、2−チオ−ジヒドロウリジン、2−チオ−ジヒドロシュードウリジン、2−メトキシウリジン、2−メトキシ−4−チオ−ウリジン、4−メトキシ−シュードウリジン、4−メトキシ−2−チオ−シュードウリジン、N1−メチル−シュードウリジン、3−(3−アミノ−3−カルボキシプロピル)ウリジン(acp3U)、1−メチル−3−(3−アミノ−3−カルボキシプロピル)シュードウリジン(acp3ψ)、5−(イソペンテニルアミノメチル)ウリジン(inm5U)、5−(イソペンテニルアミノメチル)−2−チオ−ウリジン(inm5s2U)、α−チオ−ウリジン、2’−O−メチル−ウリジン(Um)、5,2’−O−ジメチル−ウリジン(m5Um)、2’−O−メチル−シュードウリジン(ψm)、2−チオ−2’−O−メチル−ウリジン(s2Um)、5−メトキシカルボニルメチル−2’−O−メチル−ウリジン(mcm5Um)、5−カルバモイルメチル−2’−O−メチル−ウリジン(ncm5Um)、5−カルボキシメチルアミノメチル−2’−O−メチル−ウリジン(cmnm5Um)、3,2’−O−ジメチル−ウリジン(m3Um)、および5−(イソペンテニルアミノメチル)−2’−O−メチル−ウリジン(inm5Um)、1−チオ−ウリジン、デオキシチミジン、2’−F−アラ−ウリジン、2’−F−ウリジン、2’−OH−アラ−ウリジン、5−(2−カルボメトキシビニル)ウリジン、および5−[3−(1−E−プロペニルアミノ)ウリジンが挙げられる。
ヌクレオシド間結合における修飾
核酸または修飾RNA分子に組み込まれ得る修飾ヌクレオチドは、ヌクレオシド間結合(例えば、リン酸骨格)において修飾され得る。本明細書において、ポリヌクレオチド、一次構築物、核酸、または修飾RNA骨格との関連で、「リン酸塩」および「ホスホジエステル」という表現は、同義に使用される。骨格リン酸基は、酸素原子のうちの1個以上を異なる置換基で置換することによって修飾され得る。さらに、修飾ヌクレオシドおよびヌクレオチドは、未修飾リン酸塩部分の別の本明細書に記載のヌクレオシド間結合との大規模な置換を含み得る。修飾リン酸基の例には、ホスホロチオエート、ホスホロセレナート、ボラノホスフェート、ボラノホスフェートエステル、水素ホスホネート、ホスホロラミデート、ホスホロジアミデート、アルキルまたはアリールホスホネート、およびホスホトリエステルが挙げられるが、これらに限定されない。ホスホロジチオエートは、硫黄で置換された両方の非結合酸素を有する。リン酸リンカーは、結合酸素の窒素(架橋ホスホロアミデート)、硫黄(架橋ホスホロチオエート)、および炭素(架橋メチレンホスホネート)での置換によっても修飾され得る。
修飾糖、核酸塩基、およびヌクレオシド間結合の組み合わせ
本発明の核酸または修飾RNAは、糖、核酸塩基、および/またはヌクレオシド間結合への修飾の組み合わせを含み得る。これらの組み合わせは、本明細書に記載のいずれか1つ以上の修飾を含み得る。例えば、式(Ia)、(Ia−1)〜(Ia−3)、(Ib)〜(If)、(IIa)〜(IIp)、(IIb−1)、(IIb−2)、(IIc−1)〜(IIc−2)、(IIn−1)、(IIn−2)、(IVa)〜(IVl)、および(IXa)〜(IXr)における本明細書に記載のヌクレオチドのうちのいずれかは、本明細書に記載の核酸塩基のうちのいずれ(例えば、式(b1)〜(b43)または本明細書に記載の任意の他のもの)とも組み合わせられ得る。
核酸または修飾RNA分子(修飾RNA)の合成
本発明に従った使用のための核酸は、化学合成、一般にインビトロ転写と称される酵素合成、より長い前駆体の酵素開裂または化学開裂等を含むが、これらに限定されない、本明細書に記載の任意の有用な技術、または任意の有用な技術に従って調製することができる。RNAを合成する方法は、当該技術分野において既知である(例えば、Gait,M.J.(ed.)Oligonucleotide synthesis:a practical approach,Oxford[Oxfordshire],Washington, DC:IRL Press,1984;and Herdewijn,P.(ed.)Oligonucleotide synthesis:methods and applications,Methods in Molecular Biology,v.288(Clifton,N.J.)Totowa,N.J.:Humana Press,2005を参照のこと;どちらの内容も参照により本明細書に組み込まれる)。
al.,J.Org.Chem.74:2585−2588(2009);Purmal et al.,Nucl.Acids Res.22(1):72−78,(1994);Fukuhara et al.,Biochemistry,1(4):563−568(1962);およびXu et al.,Tetrahedron,48(9):1729−1740(1992)に記載の合成方法に従って調製することができ、これら各々の内容は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
al.,J.Org.Chem.74:2585−2588(2009);Purmal et al.,Nucl.Acids Res.22(1):72−78,(1994);Fukuhara et al.,Biochemistry,1(4):563−568(1962);およびXu et al.,Tetrahedron,48(9):1729−1740(1992)に記載の合成方法に従って調製することができ、これら各々の内容は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
ヌクレオチドの組み合わせ
修飾ヌクレオチドと修飾ヌクレオチドの組み合わせのさらなる例が以下の表14に提供される。修飾ヌクレオチドのこれらの組み合わせを用いて、本発明の核酸または修飾RNAを形成することができる。別途述べられない限り、修飾ヌクレオチドは、本発明の核酸または修飾RNAの天然ヌクレオチドと完全に置換され得る。非限定的な例として、天然ヌクレオチドウリジンは、本明細書に記載の修飾ヌクレオシドで置換され得る。別の非限定的な例において、天然ヌクレオチドウリジンは、本明細書に開示の修飾ヌクレオシドのうちの少なくとも1つで部分的に置換され得る(例えば、約0.1%、1%、5%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、95%、または99.9%)。表14.化学修飾
Uses Thereof」、2011年10月3日出願の国際特許公開第WO2012045075号、表題「Modified Nucleosides,Nucleotides,And Nucleic Acids,and Uses Thereof」、2011年10月3日に出願の米国特許公開第US20120237975号、表題「Engineered Nucleic Acids and Method of Use Thereof」、および国際特許公開第WO2012045082号に記載されており、これらは参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
表15.化学修飾
リンカーおよびペイロードを含む修飾
ペイロード
本明細書に記載の方法および組成物は生物学的標的にペイロードを送達するのに有用である。ペイロードは、例えば、標識化(例えば、フルオロフォア等の検出可能な薬剤)に対して、または治療目的(例えば、細胞毒または他の治療薬)に対して使用することができる。
ペイロード:治療薬
いくつかの実施形態において、ペイロードは、細胞毒、放射性イオン、化学療法剤、または他の治療剤等の治療剤である。細胞毒または細胞傷害性薬剤には、細胞に有害であるいずれの薬剤も含まれる。例としては、タキソール、サイトカラシンB、グラミシジンD、臭化エチジウム、エメチン、マイトマイシン、エトポシド、テノポシド、ビンクリスチン、ビンブラスチン、コルヒチン、ドキソルビシン、ダウノルビシン、ジヒドロキシアントラセンジオン(dihydroxy anthracine dione)、ミトキサントロン、ミトラマイシン、アクチノマイシンD、1−デヒドロテストステロン、糖質コルチコイド、プロカイン、テトラカイン、リドカイン、プロプラノロール、ピューロマイシン、マイタンシノイド、例えば、マイタンシノール(米国特許第5,208,020号)、CC−1065(米国特許第5,475,092号、同第5,585,499号、同第5,846,545号を参照のこと)、ならびにこれらの類似体または相同体が挙げられる。放射性イオンには、ヨウ素(例えば、ヨウ素125またはヨウ素131)、ストロンチウム89、リン、パラジウム、セシウム、イリジウム、リン酸塩、コバルト、イットリウム90、サマリウム153、およびプラセオジミウムが含まれるが、これらに限定されない。他の治療剤には、代謝拮抗薬(例えば、メトトレキサート、6−メルカプトプリン、6−チオグアニン、シタラビン、5−フルオロウラシルダカルバジン(decarbazine))、アルキル化剤(例えば、メクロレタミン、チオテパクロラムブシル、CC−1065、メルファラン、カルムスチン(BSNU)、およびロムスチン(CCNU)、シクロホスファミド、ブスルファン、ジブロモマンニトール、ストレプトゾトシン、マイトマイシンC、およびcis−ジクロロジアミン白金(II)(DDP)シスプラチン)、アントラサイクリン(例えば、ダウノルビシン(かつてはダウノマイシン)およびdオキソルビシン)、抗生物質(例えば、ダクチノマイシン(かつてはアクチノマイシン)、ブレオマイシン、ミトラマイシン、およびアントラマイシン(AMC))、および抗有糸分裂剤(例えば、ビンクリスチン、ビンブラスチン、タキソール、およびマイタンシノイド)が含まれるが、これらに限定されない。
ペイロード:検出可能な薬剤
検出可能な物質の例として、種々の有機小分子、無機化合物、ナノ粒子、酵素もしくは酵素基質、蛍光物質、発光物質、生物発光物質、化学発光物質、放射性物質、および造影剤が挙げられる。そのような光検出可能な標識には、例えば、制限なく、4−アセトアミド−4’−イソチオシアン酸スチルベン−2,2’ジスルホン酸;アクリジンおよび誘導体:アクリジンおよびアクリジンイソチオシアネート;5−(2’−アミノエチル)アミノナフタレン−1−スルホン酸(EDANS);4−アミノ−N−[3−ビニルスルホニル)フェニル]ナフタルイミド−3,5ジスルホン酸塩;N−(4−アニリノ−1−ナフチル)マレイミド;アントラニルアミド;BODIPY;ブリリアントイエロー;クマリンおよび誘導体;クマリン、7−アミノ−4−メチルクマリン(AMC、クマリン120)、7−アミノ−4−トリフルオロメチルクマリン(クマリン151);シアニン色素;シアノシン;4’,6−ジアミジノ−2−フェニルインドール(DAPI);5’5”−ジブロモピロガロール−スルホナフタレン(naphthalein)(ブロモピロガロールレッド);7−ジエチルアミノ−3−(4’−イソチオシアン酸フェニル)−4−メチルクマリン;ジエチレントリアミン五酢酸塩;4,4’−ジイソチオシアン酸ジヒドロ−スチルベン−2,2’−ジスルホン酸;4,4’−ジイソチオシアン酸スチルベン−2,2’−ジスルホン酸;5−[ジメチルアミノ]−ナフタレン−1−スルホニルクロリド(DNS、ダンシルクロリド);4−ジメチルアミノフェニルアゾフェニル−4’−イソチオシアネート(DABITC);エオシンおよび誘導体;エオシンおよびエオシンイソチオシアネート;エリスロシンおよび誘導体;エリスロシンB、エリスロシン、イソチオシアネート;エチジウム;フルオロセインおよび誘導体;5−カルボキシフルオロセイン(FAM)、5−(4,6−ジクロロトリアジン−2−イル)アミノフルオロセイン(DTAF)、2’,7’−ジメトキシ−4’5’−ジクロロ−6−カルボキシフルオロセイン、フルオロセイン、フルオロセインイソチオシアネート、QFITC(XRITC)、;フルオレスカミン;IR144;IR1446;マラカイトグリーンイソチオシアネート;4−メチルウンベリフェロンオルトクレゾールフタレイン;ニトロチロシン;パラローザニリン;フェノールレッド;B−フィコエリトリン;o−フタルジアルデヒド;ピレンおよび誘導体:ピレン、酪酸ピレン、スクシンイミジル1−ピレン;酪酸塩量子ドット;リアクティブレッド4(Cibacron(商標)ブリリアントレッド3B−A);ローダミンおよび誘導体:6−カルボキシ−X−ローダミン(ROX)、6−カルボキシローダミン(R6G)、リサミンローダミンBスルホニルクロリドローダミン(rhodarnine)(Rhod)、ローダミンB、ローダミン123、ローダミンXイソチオシアネート、スルホローダミンB、スルホローダミン101、スルホローダミン101のスルホニルクロリド誘導体(テキサスレッド)、N,N,N’,N’テトラメチル−6−カルボキシローダミン(TAMRA);テトラメチルローダミン;テトラメチルローダミンイソチオシアネート(TRITC);リボフラビン;ロゾール酸;テルビウムキレート誘導体;シアニン−3(Cy3);シアニン−5(Cy5);シアニン−5.5(Cy5.5)、シアニン−7(Cy7);IRD 700;IRD 800;Alexa 647;La Jolta Blue;フタロシアニン;ならびにナフタロシアニンが含まれる。いくつかの実施形態において、検出可能な標識は、Cy5およびCy3等の蛍光色素である。
好適な放射性物質の例として、直接的もしくは間接的のいずれかで、18F、67Ga、81mKr、82Rb、111In、123I、133Xe、201Tl、125I、35S、14C、または3H、99mTc(例えば、過テクネチウム酸(テクネチウム酸塩(VII)、TcO4 −として)、または電波放射の直接計数によって、もしくはシンチレーション測定によって検出可能な他の放射性同位体が挙げられる。
ペイロード:細胞透過性ペイロード
いくつかの実施形態において、修飾ヌクレオチドおよび修飾核酸はまた、組成物の細胞内送達を促進する細胞透過性部分または薬剤を含み得るペイロードも含む。例えば、組成物は、細胞内空間への送達を容易にする細胞透過性ペプチド配列、例えば、HIV由来TATペプチド、ペネトラチン、トランスポータン、またはhCT由来細胞透過性ペプチドを含み得る(例えば、参照により全体が本明細書に組み込まれる、Caron et al.,Mol.Ther.3(3):310−8(2001)、Langel,Cell−Penetrating Peptides:Processes and Applications(CRC Press,Boca Raton FL,2002)、El−Andaloussi et al.,Curr.Pharm.Des.11(28):3597−611(2003)、およびDeshayes et al.,Cell.Mol.Life Sci.62(16):1839−49(2005)を参照のこと)。組成物は、組成物の細胞内空間への送達を向上させる細胞透過性薬剤、例えば、リポソームを含むように製剤化することもできる。
ペイロード:生物学的標的
本明細書に記載の修飾ヌクレオチドおよび修飾核酸を用いて、ペイロードを特定のリガンドが存在するか、または生成され得る任意の生物学的標的へ送達することができる。リガンドは生物学的標的へ共有結合的または非共有結合的のいずれかで結合することができる。
修飾ヌクレオチドの合成
本明細書に記載の修飾ヌクレオシドおよびヌクレオチドは、以下の一般的な方法および手順を用いて容易に入手可能な出発物質から調製することができる。典型的なまたは好適な作業条件(すなわち、反応温度、時間、反応物のモル比、溶媒、圧力等)が与えられる場合、他の作業条件もまた、別段に示されない限り使用することができることを理解されたい。最適な反応条件は特定の反応物または使用する溶媒に応じて変化し得るが、そのような条件は、当業者が通常の最適化手順によって決定することができる。
長さ
一般的に、本発明の修飾mRNAの長さは30ヌクレオチド長より長い。別の実施形態において、RNA分子は35ヌクレオチド長より長い。別の実施形態において、長さは少なくとも40ヌクレオチド長である。別の実施形態において、長さは少なくとも45ヌクレオチド長である。別の実施形態において、長さは少なくとも55ヌクレオチド長である。別の実施形態において、長さは少なくとも60ヌクレオチド長である。別の実施形態において、長さは少なくとも60ヌクレオチド長である。別の実施形態において、長さは少なくとも80ヌクレオチド長である。別の実施形態において、長さは少なくとも90ヌクレオチド長である。別の実施形態において、長さは少なくとも100ヌクレオチド長である。別の実施形態において、長さは少なくとも120ヌクレオチド長である。別の実施形態において、長さは少なくとも140ヌクレオチド長である。別の実施形態において、長さは少なくとも160ヌクレオチド長である。別の実施形態において、長さは少なくとも180ヌクレオチド長である。別の実施形態において、長さは少なくとも200ヌクレオチド長である。別の実施形態において、長さは少なくとも250ヌクレオチド長である。別の実施形態において、長さは少なくとも300ヌクレオチド長である。別の実施形態において、長さは少なくとも350ヌクレオチド長である。別の実施形態において、長さは少なくとも400ヌクレオチド長である。別の実施形態において、長さは少なくとも450ヌクレオチド長である。別の実施形態において、長さは少なくとも500ヌクレオチド長である。別の実施形態において、長さは少なくとも600ヌクレオチド長である。別の実施形態において、長さは少なくとも700ヌクレオチド長である。別の実施形態において、長さは少なくとも800ヌクレオチド長である。別の実施形態において、長さは少なくとも900ヌクレオチド長である。別の実施形態において、長さは少なくとも1000ヌクレオチド長である。別の実施形態において、長さは少なくとも1100ヌクレオチド長である。別の実施形態において、長さは少なくとも1200ヌクレオチド長である。別の実施形態において、長さは少なくとも1300ヌクレオチド長である。別の実施形態において、長さは少なくとも1400ヌクレオチド長である。別の実施形態において、長さは少なくとも1500ヌクレオチド長である。別の実施形態において、長さは少なくとも1600ヌクレオチド長である。別の実施形態において、長さは少なくとも1800ヌクレオチド長である。別の実施形態において、長さは少なくとも2000ヌクレオチド長である。別の実施形態において、長さは少なくとも2500ヌクレオチド長である。別の実施形態において、長さは少なくとも3000ヌクレオチド長である。別の実施形態において、長さは少なくとも4000ヌクレオチド長である。別の実施形態において、長さは少なくとも5000ヌクレオチド長超である。別の実施形態において、長さは少なくとも5000ヌクレオチド長、または6000ヌクレオチド長超である。別の実施形態において、長さは少なくとも7000ヌクレオチド長、または7000ヌクレオチド長超である。別の実施形態において、長さは少なくとも8000ヌクレオチド長、または8000ヌクレオチド長超である。別の実施形態において、長さは少なくとも9000ヌクレオチド長、または9000ヌクレオチド長超である。別の実施形態において、長さは少なくとも10,000ヌクレオチド長、または10,000ヌクレオチド長超である。
修飾RNAの使用
自然細胞免疫応答活性の予防または減少
「自然免疫応答」という用語は、一般的にはウイルス起源または細菌起源の外因性一本鎖核酸に対する細胞応答を含み、これは、サイトカイン、特にインターフェロンの発現および放出、ならびに細胞死の誘導を含む。タンパク質合成はまた、自然細胞免疫応答の際にも減少する。細胞における自然免疫応答を排除することは有利である一方で、本発明は、そのような応答を完全に除去せず、インターフェロンシグナル伝達を含む、実質的に免疫応答を減少させる修飾mRNAを提供する。いくつかの実施形態において、免疫応答は、対応する非修飾核酸に誘導される免疫応答と比較して10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、95%、99%、99.9%、または99.9%超低い。そのような低減は、1型インターフェロンの発現もしくは活性のレベル、またはトール様受容体(例えば、TLR7およびTLR8)等のインターフェロン制御遺伝子の発現により測定され得る。自然免疫応答の低減は、細胞集団への修飾RNAの1つ以上の投与に従って減少された細胞死を測定することによっても測定され得る。例えば、細胞死は、対応する非修飾核酸で観察された細胞死頻度よりも10%、25%、50%、75%、85%、90%、95%、または95%超少ない。さらに、細胞死は、修飾核酸と接触した細胞の50%、40%、30%、20%、10%、5%、1%、0.1%、0.01%、または0.01%未満に影響し得る。
主溝相互作用パートナー
本明細書に記載されるように、「主溝相互作用パートナー」という表現は、ヌクレオチドまたは核酸の主溝の面との相互作用、例えば結合を通して、RNAリガンドを検出し、それに応答するRNA認識受容体を指す。したがって、本明細書に記載の修飾RNA等の修飾ヌクレオチドまたは核酸を含むRNAリガンドは、主溝結合パートナーとの相互作用を減少させ、ゆえに、自然免疫応答を減少させる。
RNA結合タンパク質
本発明のいくつかの実施形態において、RNA結合タンパク質が提供される。RNA結合タンパク質はタンパク質および/またはそのようなタンパク質をコードする核酸として提供され得る。RNA結合タンパク質はRNA安定性およびタンパク質翻訳の調節において多数の役割を果たす。mRNAの3’UTRにおけるA/Uリッチ要素は、増加したまたは減少したmRNA安定性をもたらすA/Uリッチ結合タンパク質(AREBP)によって結合する二次構造の形成を引き起こす(Fan,X.C.et al.,Overexpression of HuR,a nuclear−cytoplasmic shuttling protein,increases the in vivo stability of ARE−containing mRNAs.EMBO J 1998 Jun 15;17(12):3448−60)。HuRは安定化AREBPである。目的とするmRNAの安定性を増加させるために、HuRをコードするmRNAは目的とするmRNAと共に細胞内または組織内へ同時導入され得るか、または同時注入され得る。これらのタンパク質はまた、目的とするmRNAにインビトロで繋留することができ、その後細胞へ共に投与することができる。ポリA尾部結合タンパク質(PABP)は真核細胞翻訳開始因子eIF4Gと相互作用して、翻訳開始を刺激する。これらのRBPをコードするmRNAとmRNA薬剤との同時投与、および/またはこれらのタンパク質とmRNA薬剤のインビトロでの繋留、ならびにタンパク質結合mRNAの細胞内への投与は、mRNAの翻訳効率を増加させる。同一のコンセプトは、RNA安定性および/または翻訳効率に影響する、様々な翻訳因子および促進因子をコードするmRNAとmRNAのと同時投与、ならびにタンパク質それら自身とmRNAとの同時投与にまで渡り得る。ポリペプチド変異形
参照ポリペプチド配列とある特定の同一性を有する様々なポリペプチドをコードする拡散が提供される。「同一性」という用語は、当該技術分野で既知であるように、2つ以上のペプチドの配列間の、配列を比較することで決定される関係を指す。当該技術分野において、「同一性」はまた、2つ以上のアミノ酸残基の紐間の一致数によって決定されるペプチド間の配列の関連性の程度を意味する。
Analysis Primer,Gribskov,M.and Devereux,J.,eds.,M.Stockton Press,New York,1991;およびCarillo et al.,SIAM J.Applied Math.48,1073(1988)に記載の方法が挙げられる。
ポリペプチドライブラリ
ヌクレオシド修飾を含有するポリヌクレオチドライブラリもまた提供され、ポリヌクレオチドは個々に、当該技術分野において既知である、抗体、タンパク質結合パートナー、裏打ちタンパク質、および他のポリペプチド等のポリペプチドをコードする第1の核酸配列を含有する。好ましくは、ポリヌクレオチドは、標的細胞宿主への直接導入に適した形態であるmRNAであり、その宿主細胞は、次いでコードされたポリペプチドを合成する。
ポリペプチド核酸複合体
好適なタンパク質翻訳は、mRNAと関連するいくつかのポリペプチドおよび核酸の物理的集合が関与する。mRNAと結合した1つ以上のヌクレオシド修飾(例えば、少なくとも2つの異なるヌクレオシド修飾)、および1つ以上のポリペプチドを含有する、タンパク質および核酸の抱合体を含有する複合体が本発明に提供される。一般的に、タンパク質は、複合体が導入される細胞の自然免疫応答を妨げるまたは減少させるのに効果的な量で提供される。
標的部分
本発明の実施形態において、インビボもしくはインビトロのいずれかで、細胞を特定の組織空間に標的化するか、または特定の部分と相互作用する働きをする細胞の表面上のタンパク質結合パートナーまたは受容体を発現するように、修飾核酸が提供される。好適なタンパク質結合パートナーには、抗体およびその機能的断片、足場タンパク質、またはペプチドが含まれる。さらに、修飾核酸を用いて、脂質、炭水化物、または他の生物学的部分の合成および細胞外局在化を指向することができる。
ワクチン
本明細書に記載されるように、実質的に翻訳可能ではない配列、有するmRNAが提供される。そのようなmRNAは、哺乳類対象に投与されたとき、ワクチンとして効果的である。
治療薬
本明細書に記載される、修飾核酸(修飾RNA)および修飾核酸から翻訳されるタンパク質は、治療剤または予防剤として使用することができる。例えば、本明細書に記載の修飾核酸は、対象に投与することができ、この修飾核酸は、インビボで翻訳されて、対象において治療的ペプチドを産生する。ヒトおよび他の哺乳動物における疾患または状態の治療または予防のための、組成物、方法、キット、および試薬が提供される。本発明の活性治療薬は、修飾核酸、修飾核酸またはこの修飾核酸から翻訳されるポリペプチドを含有する細胞、修飾核酸から翻訳されるポリペプチド、および修飾核酸またはこの修飾核酸から翻訳されるポリペプチドを含有する細胞と接触する細胞を含む。
治療学
欠損したタンパク質活性の置換または異常なタンパク質活性の克服によって、タンパク質活性の欠損または異常を特徴とする疾患の症状を、治療または予防する方法が提供される。ウイルスDNAベクターと比較して、修飾mRNAの導入に続いてタンパク質産生が速やかに開始するため、本発明の化合物は、敗血症、脳卒中、および心筋梗塞等の急性疾患の治療に特に有利である。さらに、本発明の修飾mRNAの転写制御の欠失はタンパク質産生が達成できる正確な用量設定のために有利である。
細胞運命の調節
標的哺乳類細胞における細胞運命の変化を誘導する方法が提供される。標的哺乳類細胞は前駆体細胞であってもよく、変化は分化を系譜内に推進すること、またはそのような分化を遮断することを含み得る。あるいは、標的哺乳類細胞は分化細胞であってもよく、細胞運命変化は、脱分化を多能性前駆体細胞内に推進すること、または癌幹細胞への癌細胞の脱分化等のそのような脱分化を遮断することを含む。細胞運命の変化が望まれる状況において、細胞運命誘導性ポリペプチドをコードする有効量のmRNAが、細胞運命の変化が誘導されるような条件下で標的細胞に導入される。いくつかの実施形態において、修飾mRNAは、第1の表現型から第2の表現型へ細胞の亜集団を再プログラムするのに有用である。そのような再プログラミングは、一時的または永久的であってもよい。
さらに、本発明の方法は、高い効率のトランスフェクション、細胞を再トランスフェクトする能力、および標的細胞内で産生される組換えポリペプチドの量の妥当性によって、人工多能性幹細胞(iPS細胞)を生成するのに特に有用である。さらに、本明細書に記載の方法を用いて生成されたiPS細胞の使用は、テラトーマ形成の低減された発生率を有することが予期される。
病原性生物の標的化;生物材料の精製
細胞増殖抑制性または細胞傷害性ポリペプチドをコードする修飾mRNAを用いて、細菌、酵母、原虫、蠕虫等の病原性微生物を標的とするための方法が本明細書に提供される。好ましくは、導入されるmRNAは、治療の見込まれるオフターゲット効果を低減させるために、標的病原性生物において排他的または優先的に翻訳された修飾ヌクレオシドまたは他の核酸配列修飾を含む。そのような方法は、血液、精液、卵子、ならびに胚、組織、および器官を含む移植材料を含む生体材料から病原性生物を除去するのに有用である。疾患細胞の標的化
細胞増殖抑制性または細胞傷害性ポリペプチドをコードする修飾mRNAを用いて、病原性細胞または疾患細胞、具体的には癌細胞を標的とするための方法が本明細書に提供される。好ましくは、導入されるmRNAは、治療の見込まれるオフターゲット効果を低減させるために、標的病原性生物において排他的または優先的に翻訳された修飾ヌクレオシドまたは他の核酸配列修飾を含む。あるいは、本発明は修飾mRNAを標的化して、標的病原性細胞に優先的に結合し、かつ進入することができる標的部分を提供する。
タンパク質産生
本明細書に提供される方法は、細胞培養プロセスにおけるタンパク質産物収率を向上させるのに有用であり得る。複数の宿主細胞を含有する細胞培養において、本明細書に記載の修飾mRNAの導入は、対応する未修飾核酸と比べて増加したタンパク質産生効率をもたらす。そのような増加したタンパク質産生効率は、例えば、増加した細胞トランスフェクション、核酸からの増加したタンパク質翻訳、減少した核酸分解、および/または低減された宿主細胞の自然免疫応答を示すことによって実証することができる。タンパク質産生はELISAによって測定することができ、タンパク質活性は当技術分野で既知の様々な機能的アッセイによって測定することができる。タンパク質産生は、連続的または流加(batch−fed)哺乳類プロセスにおいて生成され得る。
遺伝子サイレンシング
本明細書に記載の修飾mRNAは、細胞集団における1つ以上の標的遺伝子の発現を発現停止させる(すなわち、予防するか、または大幅に低減させる)ために有用である。配列特異的ヒストンH3メチル化を指示することができる目的とするポリペプチドをコードする修飾mRNAが、ポリペプチドが翻訳され、ヒストンH3メチル化および続いてヘテロクロマチン形成を介して標的遺伝子の遺伝子転写が低減されるような条件下の集団における細胞内に導入される。いくつかの実施形態において、サイレンシング機構は、哺乳類対象中に存在する細胞集団上で行われる。非限定的な例として、有用な標的遺伝子は、その中で哺乳類対象が、異常なキナーゼ活性の結果である骨髄増殖性疾患から被る変異体標的遺伝子を発現する、変異ヤヌスキナーゼ−2ファミリーメンバーである。
生体経路の調節
細胞内に導入される修飾mRNAの急速翻訳は、標的生体経路を調節する所望の機構を提供する。そのような調節には、所与の経路のアンタゴニズムまたはアゴニズムが含まれる。一実施形態において、核酸が細胞内に局在化され、組換えポリペプチドが、核酸から細胞内で翻訳されることができ、その組換えポリペプチドが、生体経路におけるポリペプチド機能の活性を阻害するような条件下で、細胞を、組換えポリペプチドをコードする核酸を含む有効量の組成物と接触させることによって、細胞内の生体経路を拮抗するための方法が、提供される。例示の生体経路は、多発性硬化症、関節リウマチ、乾癬、狼瘡エリテマトーデス、強直性脊椎炎、大腸炎、またはクローン病等の自己免疫または炎症性障害において欠損しているものである。特に、IL−12およびIL−23シグナル伝達経路のアンタゴニズムは、特に有用性がある(参照によりその全体が本明細書に組み込まれる、Kikly K,Liu L,Na S,Sedgwick JD(2006)Curr.Opin.Immunol.18(6):670−5)を参照のこと)。
細胞核酸送達
本発明の方法は、インビボ、エキソビボ、または培養内での細胞集団への核酸送達を促進する。例えば、複数の宿主細胞(例えば、酵母または哺乳類細胞等の真核細胞)を含有する細胞培養を、少なくとも1つのヌクレオシド修飾、および任意に翻訳可能領域を有するエンハンスド核酸を含有する組成物と接触させる。組成物はまた、一般的に、トランスフェクション試薬または宿主細胞へのエンハンスド核酸取り込みの効率を増加させる他の化合物を含有する。エンハンスド核酸は、対応する無修飾核酸と比べて細胞集団における強化された保持率を示す。エンハンスド核酸の保持率は無修飾核酸の保持率よりも大きい。いくつかの実施形態において、無修飾核酸の保持率よりも、少なくとも約50%、75%、90%、95%、100%、150%、200%、または200%以上大きい。そのような保持率の優位性は1回のエンハンスド核酸のトランスフェクションによって達成することができるか、または続くトランスフェクションの数回の繰り返しによって得ることができる。
IV.医薬組成物
製剤化、投与、送達、および投薬
本発明は、1つ以上の薬剤的に許容される賦形剤と組み合わせた修飾核酸、エンハンスド修飾RNA、およびリボ核酸RNAの組成物および複合体を提供する。医薬組成物は、任意に、1つ以上のさらなる活性物質、例えば、治療上および/または予防上活性物質を含んでもよい。医薬品の製剤および/または製造における一般の考慮事項は、例えば、参照により本明細書に組み込まれる、Remington:The Science and Practice of Pharmacy 21st ed.,Lippincott Williams&Wilkins,2005において見出され得る。
製剤化
本発明のポリヌクレオチド、修飾核酸、エンハンスド修飾RNA、およびリボ核酸は、:(1)安定性を増加させ、(2)細胞トランスフェクションを増加させ、(3)(例えば、修飾核酸、エンハンスド修飾RNA、またはリボ核酸のデポー製剤からの)持続放出もしくは遅延放出を可能にし、(4)生体分布を変化させ(例えば、修飾核酸、エンハンスド修飾RNA、またはリボ核酸の標的を特定の組織または細胞型に定める)、(5)コードされたタンパク質の翻訳をインビボで増加させ、かつ/または(6)コードされたタンパク質の放出プロファイルをインビボで変化させるために、1つ以上の賦形剤を用いて製剤化することができる。ありとあらゆる溶媒、分散媒体、希釈剤、または他の液体ビヒクル、分散もしくは懸濁助剤、界面活性剤、等張剤、増粘剤もしくは乳化剤、防腐剤等の伝統的な賦形剤に加えて、本発明の賦形剤は、制限なく、リピドイド、リポソーム、脂質ナノ粒子、ポリマー、リポプレックス、コア−シェルナノ粒子、ペプチド、タンパク質、ポリヌクレオチド、修飾核酸、エンハンスド修飾RNA、またはリボ核酸(例えば、対象への移植のために)でトランスフェクトされた細胞、ヒアルロニダーゼ、ナノ粒子模倣体、およびこれらの組み合わせを含むことができる。
薬学的製剤は、所望される特定の剤形に適している、本明細書で使用されるときにありとあらゆる溶媒、分散媒体、希釈剤、または他の液体ビヒクル、分散もしくは懸濁助剤、界面活性剤、等張剤、増粘剤もしくは乳化剤、防腐剤等を含むが、これらに限定されない、薬剤的に許容される賦形剤をさらに含んでもよい。医薬組成物を製剤化するための種々の賦形剤および組成物を調製するための技法は、当技術分野で知られている(参照により本明細書に組み込まれる、Remington:The Science and Practice of Pharmacy,21st Edition,A.R.Gennaro,Lippincott,Williams&Wilkins,Baltimore,MD,2006を参照のこと)。任意の従来の賦形剤媒体が任意の望ましくない生体影響を引き起こすか、またはさもなければ医薬組成物の任意の他の構成成分(複数可)と有害な様態で相互作用するといった、物質またはその誘導体と不適合性である場合を除いて、その使用が本開示の範囲内で企図され得る。
リピドイド
リピドイドの合成が詳細に記載されており、これらの化合物を含有する製剤は、ポリヌクレオチド、修飾核酸、エンハンスド修飾RNA、およびリボ核酸の送達に特に適している(これらすべてが参照によりそれらの全体が本明細書に組み込まれる、Mahon et al.,Bioconjug Chem.2010 21:1448−1454、Schroeder et al.,J Intern Med.2010 267:9−21、Akinc et al.,Nat Biotechnol.2008 26:561−569、Love et al.,Proc Natl Acad Sci USA.2010 107:1864−1869、Siegwart et al.,Proc Natl Acad Sci USA.2011108:12996−3001を参照のこと)。
Acad Sci USA.2010 107:1864−1869およびLiu and Huang,Molecular Therapy.2010 669−670によって開示されている。リピドイド製剤は、ポリヌクレオチド、修飾核酸、エンハンスド修飾RNA、およびリボ核酸に加えて、3つもしくは4つのいずれかまたはそれよりも多い構成成分を含む粒子を含むことができる。例として、ある特定のリピドイドを有する製剤は、98N12−5を含むが、これらに限定されず、42%リピドイド、48%コレステロール、および10%PEG(C14アルキル鎖長)を含有してもよい。別の例として、ある特定のリピドイドを有する製剤は、C12−200を含むが、これらに限定されず、50%リピドイド、10%ジステアロイルホスファチジル(disteroylphosphatidyl)コリン、38.5%コレステロール、および1.5%PEG−DMGを含有してもよい。
リポソーム、リポプレックス、および脂質ナノ粒子
本発明のポリヌクレオチド、修飾核酸、エンハンスド修飾RNA、またはリボ核酸は、1つ以上のリポソーム、リポプレックス、または脂質ナノ粒子を用いて製剤化することができる。一実施形態において、ポリヌクレオチド、修飾核酸、エンハンスド修飾RNA、またはリボ核酸の医薬組成物は、リポソームを含む。リポソームは、主に脂質二重層から構成され得、栄養素および薬学的製剤の投与のための送達ビヒクルとして使用され得る、人工的に調製された小胞である。リポソームは、直径数百ナノメートルであり得、かつ狭い水性の区画によって分離される一連の同心状二重層を含有し得る多層小胞(MLV)、直径50nmよりも小さい場合がある小さい単細胞小胞(SUV)、および直径50〜500nmであり得る大きい単層小胞(LUV)等であるが、これらに限定されない、異なるサイズのものであり得る。リポソーム設計は、不健康な組織へのリポソームの結合を改善するため、またはエンドサイトーシス等であるが、これらに限定されない事象を活性化するための、オプソニンまたはリガンドを含むが、これらに限定されない。リポソームは、薬学的製剤の送達を改善するために低pHまたは高pHを含有してもよい。
et al.Gene Therapy.1999 6:271−281、Zhang
et al.Gene Therapy.1999 6:1438−1447、Jeffs et al.Pharm Res.2005 22:362−372、Morrissey et al.,Nat Biotechnol.2005 2:1002−1007、Zimmermann et al.,Nature.2006 441:111−114、Heyes et al.J Contr Rel.2005 107:276−287、Semple et al.Nature Biotech.2010 28:172−176、Judge et al.J Clin Invest.2009 119:661−673、deFougerollesHum Gene Ther.2008 19:125−132を参照のこと)。Wheelerらによる元の製造方法は、洗浄剤透析法(detergent dialysis method)であり、それは後にJeffsらによって改善され、自発的小胞形成法(spontaneous
vesicle formation method)と称される。リポソーム製剤は、ポリヌクレオチド、修飾核酸、エンハンスド修飾RNA、またはリボ核酸に加えて、3〜4つの脂質構成成分から構成される。例としてリポソームは、Jeffsらによって記載されるように、55%のコレステロール、20%のジステアロイルホスファチジル(disteroylphosphatidyl)コリン(DSPC)、10%のPEG−S−DSG、および15%の1,2−ジオレイルオキシ−N,N−ジメチルアミノプロパン(DODMA)を含有することができるが、これらに限定されない。別の例として、ある特定のリポソーム製剤は、Heyesらによって記載されるように、48%のコレステロール、20%のDSPC、2%のPEG−c−DMA、および30%のカチオン性脂質を含有してもよいが、これらに限定されず、このカチオン性脂質は、1,2−ジステアリルオキシ(distearloxy)−N,N−ジメチルアミノプロパン(DSDMA)、DODMA、DLin−DMA、または1,2−ジリノレニルオキシ−3−ジメチルアミノプロパン(DLenDMA)であり得る。
一実施形態において、ポリヌクレオチド、修飾核酸、エンハンスド修飾RNA、またはリボ核酸は、脂質−ポリカチオン複合体中に製剤化されてもよい。脂質−ポリカチオン複合体の形成は、当技術分野で既知の方法によって、および/または参照により全体が本明細書に組み込まれる米国公開第20120178702号に記載されるように遂行されてもよい。非限定的な例として、ポリカチオンには、ポリリジン、ポリオルニチン、および/またはポリアルギニン等であるが、これらに限定されないカチオン性ペプチドまたはポリペプチドが含まれてもよい。別の実施形態において、ポリヌクレオチド、修飾核酸、エンハンスド修飾RNA、またはリボ核酸は、コレステロールまたはジオレオイルホスファチジルエタノールアミン(DOPE)等であるが、これらに限定されない中性脂質をさらに含み得る、脂質−ポリカチオン複合体中に製剤化されてもよい。
al.,Nonviral delivery of self−amplifying RNA vaccines,PNAS 2012;PMID:22908294を参照のこと)。
一実施形態において、免疫応答が、ナノ化学種、ポリマー、および免疫原を含み得る脂質ナノ粒子を送達することによって、誘発され得る。(各々が参照によりそれらの全体が本明細書に組み込まれる、米国公開第20120189700号および国際公開第WO2012099805号)。ポリマーは、ナノ化学種をカプセル封入しても、ナノ化学種を部分的にカプセル封入してもよい。免疫原は、本明細書に記載の組換えタンパク質、修飾RNAであってもよい。一実施形態において、脂質ナノ粒子は、病原体に対するもの等であるが、これらに限定されないワクチンにおいて使用するために製剤化されてもよい。
50:2597−2600)。
et al.Int J Clin Pharmacol Ther 2012 50:76−78、Santel et al.,Gene Ther 2006 13:1222−1234、Santel et al.,Gene Ther 2006 13:1360−1370、Gutbier et al.,Pulm Pharmacol.Ther.2010 23:334−344、Kaufmann et al.Microvasc Res 2010 80:286−293Weide et al.J Immunother.2009 32:498−507、Weide et al.J
Immunother.2008 31:180−188、Pascolo Expert Opin.Biol.Ther.4:1285−1294、Fotin−Mleczek et al.,2011 J.Immunother.34:1−15、Song et al.,Nature Biotechnol.2005,23:709−717、Peer et al.,Proc Natl Acad Sci USA.2007 6;104:4095−4100、deFougerollesHum Gene
Ther.2008 19:125−132)。
Biotechnol.2005 23:709−717、Judge et al.,J Clin Invest.2009 119:661−673、Kaufmann
et al.,Microvasc Res 2010 80:286−293、Santel et al.,Gene Ther 2006 13:1222−1234、Santel et al.,Gene Ther 2006 13:1360−1370、Gutbier et al.,Pulm Pharmacol.Ther.2010 23:334−344、Basha et al.,Mol.Ther.2011 19:2186−2200、Fenske and Cullis,Expert Opin Drug Deliv.2008 5:25−44、Peer et al.,Science.2008 319:627−630、Peer and Lieberman,Gene Ther.2011 18:1127−1133)。肝臓細胞に対する製剤の受動的な標的化の一例としては、DLin−DMA、DLin−KC2−DMA、およびMC3ベースの脂質ナノ粒子製剤が挙げられ、それらはアポリポタンパク質Eに結合し、インビボでこれらの製剤の結合および肝細胞中への取り込みを促進することが示されている(参照により全体が本明細書に組み込まれる、Akinc et al.Mol
Ther.2010 18:1357−1364)。製剤は、葉酸塩、トランスフェリン、N−アセチルガラクトサミン(GalNAc)、および抗体で標的を定めるアプローチにより例として示されるが、これらによって限定されない、それらの表面上の異なるリガンドの発現を介して選択的に標的を定めることもできる(すべてが参照により全体が本明細書に組み込まれる、Kolhatkar et al.,Curr Drug Discov Technol.2011 8:197−206、Musacchio and Torchilin,Front Biosci.2011 16:1388−1412、Yu et al.,Mol Membr Biol.2010 27:286−298、Patil et al.,Crit Rev Ther Drug Carrier Syst.2008 25:1−61、Benoit et al.,Biomacromolecules.2011 12:2708−2714、Zhao et al.,Expert Opin Drug Deliv.2008 5:309−319、Akinc et al.,Mol Ther.2010 18:1357−1364、Srinivasan et al.,Methods Mol Biol.2012 820:105−116、Ben−Arie et al.,Methods Mol Biol.2012 757:497−507、Peer 2010 J Control Release.20:63−68、Peer et al.,Proc Natl Acad Sci USA.2007 104:4095−4100、Kim et al.,Methods Mol Biol.2011 721:339−353、Subramanya et al.,Mol Ther.2010 18:2028−2037、Song et al.,Nat Biotechnol.2005 23:709−717、Peer et al.,Science.2008 319:627−630、Peer and Lieberman,Gene Ther.2011 18:1127−1133)。
al.,ACS Nano,2008,2(8),pp 1696−1702を参照のこと)。
一実施形態において、治療的ナノ粒子は、ポリリジン、ポリエチレンイミン、ポリ(アミドアミン)デンドリマー、およびこれらの組み合わせ等であるが、これらに限定されない少なくとも1つのアミン含有ポリマーを含んでもよい。
一実施形態において、治療的ナノ粒子は、水溶液中で製剤化されてもよく、それを用いて癌を標的としてもよい(各々が参照によりそれらの全体が本明細書に組み込まれる、国際公開第WO2011084513号および米国公開第US20110294717号を参照のこと)。
ポリマー、生分解性ナノ粒子、およびコア−シェルナノ粒子
本発明のポリヌクレオチド、修飾核酸、エンハンスド修飾RNA、またはリボ核酸は、天然および/または合成ポリマーを用いて製剤化することができる。送達に使用され得るポリマーの非限定的な例としては、MIRUS(登録商標)Bio(ウィスコンシン州マディソン)およびRoche Madison(ウィスコンシン州マディソン)によるDynamic POLYCONJUGATETM製剤、制限なく、SMARTT POLYMER TECHNOLOGY(商標)(ワシントン州シアトル)等のPHASERX(商標)ポリマー製剤、DMRI/DOPE、ポロキサマー、Vical(カリフォルニア州サンディエゴ)によるVAXFECTIN(登録商標)アジュバント、キトサン、Calando Pharmaceuticals(カリフォルニア州パサデナ)によるシクロデキストリン、デンドリマーおよびポリ(乳酸−co−グリコール酸)(PLGA)ポリマー、RONDEL(商標)(RNAi/オリゴヌクレオチドナノ粒子送達)ポリマー(Arrowhead Research Corporation、カリフォルニア州パサデナ)、ならびにPHASERX(商標)(ワシントン州シアトル)等であるが、これらに限定されないpH応答性ブロックコポリマー(co−block polymers)が挙げられる。
al.,Biomaterials.2008 29:1526−1532、DeKoker et al.,Adv Drug Deliv Rev.2011 63:748−761、Endres et al.,Biomaterials.2011 32:7721−7731、Su et al.,Mol Pharm.2011 Jun 6;8(3):774−87)。
Ther.2012 20:609−615)。この送達系は、siRNAの送達を改善するために、標的を定めたナノ粒子と、エンドソームからの脱出を向上させるための構成成分リン酸カルシウムとの両方を組み合わせる。
50:7027−7031)。
ペプチドおよびタンパク質
本発明のポリヌクレオチド、修飾核酸、エンハンスド修飾RNA、またはリボ核酸は、修飾核酸、エンハンスド修飾RNA、またはリボ核酸による細胞のトランスフェクションを増加させるために、ペプチドおよび/またはタンパク質とともに製剤化することができる。一実施形態において、細胞透過性ペプチドならびに細胞内送達を可能にするタンパク質およびペプチド等であるが、これらに限定されないペプチドを用いて、薬学的製剤を送達してもよい。本発明の薬学的製剤とともに使用され得る細胞透過性ペプチドの非限定的な例としては、細胞内空間への送達を容易にする、ポリカチオンに結合した細胞透過性ペプチド配列、例えば、HIV由来TATペプチド、ペネトラチン、トランスポータン、またはhCT由来細胞透過性ペプチドである(例えば、参照により全体が本明細書に組み込まれる、Caron et al.,Mol.Ther.3(3):310−8(2001)、Langel,Cell−Penetrating Peptides:Processes and Applications(CRC Press,Boca Raton FL,2002)、El−Andaloussi et al.,Curr.Pharm.Des.11(28):3597−611(2003)、およびDeshayes et al.,Cell.Mol.Life Sci.62(16):1839−49(2005)を参照のこと)。組成物は、組成物の細胞内空間への送達を向上させる細胞透過性薬剤、例えば、リポソームを含むように製剤化することもできる。本発明の修飾核酸、エンハンスド修飾RNA、またはリボ核酸は、細胞内送達を可能にするために、Aileron Therapeutics(マサチューセッツ州ケンブリッジ)およびPermeon Biologics(マサチューセッツ州ケンブリッジ)によるペプチドおよび/またはタンパク質等であるが、これらに限定されない、ペプチドおよび/またはタンパク質に複合体形成されてもよい(すべてが参照により全体が本明細書に組み込まれる、Cronican et al.,ACS Chem.Biol.2010 5:747−752、McNaughton et al.,Proc.Natl.Acad.Sci.USA 2009 106:6111−6116、Sawyer,Chem Biol Drug Des.2009 73:3−6、Verdine and Hilinski,Methods Enzymol.2012;503:3−33)。
細胞
本発明のポリヌクレオチド、修飾核酸、エンハンスド修飾RNA、またはリボ核酸は、エクスビボで細胞中にトランスフェクトすることができ、それがその後、対象に移植される。非限定的な例として、医薬組成物は、修飾RNAを肝臓および骨髄細胞に送達するための赤血球、修飾RNAをウイルス様粒子(VLP)中で送達するためのビロソーム、ならびにMAXCYTE(登録商標)(メリーランド州ゲイザースバーグ)による細胞、およびERYTECH(登録商標)(フランス、リヨン)による細胞等であるが、これらに限定されない、修飾RNAを送達するためのエレクトロポレーション処理された細胞を含んでもよい。ポリヌクレオチド、修飾核酸、エンハンスド修飾RNA、またはリボ核酸以外のペイロードを送達するための赤血球、ウイルス粒子、およびエレクトロポレーション処理された細胞の使用例が、文書化されている(すべてが参照により全体が本明細書に組み込まれる、Godfrin et al.,Expert Opin Biol Ther.2012 12:127−133、Fang et al.,Expert Opin Biol Ther.2012 12:385−389、Hu et al.,Proc Natl Acad Sci USA.2011 108:10980−10985、Lund et al.,Pharm Res.2010 27:400−420、Huckriede et al.,J Liposome Res.2007;17:39−47、Cusi,Hum Vaccin.2006 2:1−7、de Jonge et al.,Gene Ther.2006 13:400−411)。修飾RNAは、各々が参照によりそれらの全体が本明細書に組み込まれる国際公開第WO2011085231号および米国公開第20110171248号に記載の方法によって合成される合成VLP中で送達されてもよい。
細胞内への導入
ウイルスおよび非ウイルス媒介性技法を含む、核酸の細胞内への導入に好適である多様な方法が当技術分野で知られている。典型的な非ウイルス媒介性技法の例としては、エレクトロポレーション、リン酸カルシウム媒介性移入、ヌクレオフェクション、ソノポレーション、熱ショック、マグネトフェクション、リポソーム媒介性移入、マイクロインジェクション、マイクロプロジェクタイル媒介性移入(ナノ粒子)、カチオン性ポリマー媒介性移入(DEAE−デキストラン、ポリエチレンイミン、ポリエチレングリコール(PEG)等)、または細胞融合が挙げられるが、これらに限定されない。
ヒアルロニダーゼ
本発明のポリヌクレオチド、修飾核酸、エンハンスド修飾RNA,またはリボ核酸の筋肉内または皮下局所注入は、ヒアルロナンの加水分解を触媒する、ヒアルロニダーゼを含むことができる。介在性の関門の構成物質であるヒアルロナンの加水分解を触媒することによって、ヒアルロニダーゼは、ヒアルロナンの粘度を低下させて、それによって組織透過性を増加させる(参照により全体が本明細書に組み込まれる、Frost,Expert Opin.Drug Deliv.(2007)4:427−440)。それらの分散およびトランスフェクトされた細胞によって産生されるコードされたタンパク質の全身への分布を加速することが有用である。あるいは、ヒアルロニダーゼを用いて、筋肉内にまたは皮下に投与された本発明のポリヌクレオチド、修飾核酸、エンハンスド修飾RNA、またはリボ核酸に曝露される細胞の数を増加させることができる。
ナノ粒子模倣体
本発明のポリヌクレオチド、修飾核酸、エンハンスド修飾RNA、またはリボ核酸は、ナノ粒子模倣体内にカプセル封入されかつ/またはそれに吸収され得る。ナノ粒子模倣体は、病原体、ウイルス、細菌、真菌、寄生虫、プリオン、および細胞等であるが、これらに限定されない、生物または粒子の送達機能を模倣することができる。非限定的な例として、本発明のポリヌクレオチド、修飾核酸、エンハンスド修飾RNA、またはリボ核酸は、ウイルスの送達機能を模倣することができる非バイロン(viron)粒子中にカプセル封入されてもよい(参照により全体が本明細書に組み込まれる、国際公開第WO2012006376号を参照のこと)。
ナノチューブ
本発明のポリヌクレオチド、修飾核酸、エンハンスド修飾RNA、またはリボ核酸は、ロゼットナノチューブ、リンカーを用いたツイン塩基(twin bases)を有するロゼットナノチューブ、カーボンナノチューブおよび/または単層カーボンナノチューブ等であるが、これらに限定されない、少なくとも1つのナノチューブに付着または結合され得る。ポリヌクレオチド、修飾核酸、エンハンスド修飾RNA、またはリボ核酸は、立体(steric)力、イオン力、共有結合力、および/または他の力等であるが、これらに限定されない力を介してナノチューブに結合され得る。
複合体
本発明のポリヌクレオチド、修飾核酸、エンハンスド修飾RNA、またはリボ核酸は、担体もしくは標的化基に共有結合された、または一緒に融合タンパク質を産生する2つのコード領域を含む(例えば、標的化基および治療的タンパク質またはペプチドを担持する)、修飾核酸、エンハンスド修飾RNA、またはリボ核酸等の複合体を含む。
MAPキナーゼの活性化因子であり得る。
Santarisによるもの等のロックト核酸(LNA)の調製を教示する、代表的な米国特許には、各々が参照によりその全体が本明細書に組み込まれる、米国特許第6,268,490号、同第6,670,461号、同第6,794,499号、同第6,998,484号、同第7,053,207号、同第7,084,125号、および同第7,399,845号が含まれるが、これらに限定されない。
自己集合性核酸ナノ粒子
自己集合性ナノ粒子は、核酸鎖が容易にリプログラミング可能であり得るように精密に制御され得る、明確に定義されたサイズを有する。例えば、20nm超の直径が、向上した透過性および保持効果により腎クリアランスを回避し、ある特定の腫瘍への送達を向上させるため、癌標的化ナノ送達担体のために最適な粒径は、20〜100nmである。自己集合性核酸ナノ粒子を用いて、向上した送達のために癌標的化リガンドの精密に制御された空間定位および密度を有する、サイズおよび形が均一な単一の集団。非限定的な例として、オリゴヌクレオチドナノ粒子が、短いDNA断片および治療的siRNAのプログラミング可能な自己集合を用いて調製された。これらのナノ粒子は、制御可能な粒径ならびに標的リガンド箇所および密度を有して、分子的に同一である。DNA断片およびsiRNAは、1ステップ反応へと自己集合して、標的を定めたインビボ送達のためにDNA/siRNA四面体ナノ粒子を生成した。(Lee et al.,Nature Nanotechnology 2012 7:389−393)。
賦形剤
薬学的製剤は、本明細書で使用されるとき、所望される特定の剤形に適している、ありとあらゆる溶媒、分散媒体、希釈剤、または他の液体ビヒクル、分散もしくは懸濁助剤、界面活性剤、等張剤、増粘剤もしくは乳化剤、防腐剤、固体結合剤、滑沢剤等を含む、薬剤的に許容される賦形剤をさらに含んでもよいが、これらに限定されない。医薬組成物を製剤化するための様々な賦形剤、およびその組成物を調製する技術は、当該技術分野において既知である(参照により本明細書に組み込まれる、Remington:The Science and Practice of Pharmacy,21st Edition,A.R.Gennaro,Lippincott,Williams & Wilkins,Baltimore,MD,2006を参照のこと)。従来の賦形剤媒体の使用は、任意の従来の賦形剤媒体が任意の望ましくない生体影響を引き起こし得るか、またはさもなければ医薬組成物の任意の他の構成成分(複数可)と有害な様態で相互作用するといった、物質またはその誘導体と不適合性である場合を除いて、本開示の範囲内で企図される。
monostearate)、ジステアリン酸エチレングリコール、モノステアリン酸グリセリル、およびモノステアリン酸プロピレングリコール、ポリビニルアルコール)、カルボマー(例えば、カルボキシポリメチレン、ポリアクリル酸、アクリル酸ポリマー、およびカルボキシビニルポリマー)、カラギーナン、セルロース誘導体(例えば、カルボキシメチルセルロースナトリウム、粉末化セルロース、ヒドロキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、メチルセルロース)、ソルビタン脂肪酸エステル(例えば、モノラウリル酸ポリオキシエチレンソルビタン[TWEEN(登録商標)20]、ポリオキシエチレンソルビタン[TWEEN(登録商標)60]、モノオレイン酸ポリオキシエチレンソルビタン[TWEEN(登録商標)80]、モノパルミチン酸ソルビタン[SPAN(登録商標)40]、モノステアリン酸ソルビタン[Span(登録商標)60]、トリステアリン酸ソルビタン[Span(登録商標)65]、モノオレイン酸グリセリル、モノオレイン酸ソルビタン[SPAN(登録商標)80])、ポリオキシエチレンエステル(例えば、モノステアリン酸ポリオキシエチレン[MYRJ(登録商標)45]、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油、ポリエトキシル化(polyethoxylated)ヒマシ油、ステアリン酸ポリオキシメチレン、およびSOLUTOL(登録商標))、ショ糖脂肪酸エステル、ポリエチレングリコール脂肪酸エステル(例えば、CREMOPHOR(登録商標))、ポリオキシエチレンエーテル、(例えば、ポリオキシエチレンラウリルエーテル[BRIJ(登録商標)30])、ポリ(ビニル−ピロリドン)、モノラウリル酸ジエチレングリコール、オレイン酸トリエタノールアミン、オレイン酸ナトリウム、オレイン酸カリウム、オレイン酸エチル、オレイン酸、ラウリル酸エチル、ラウリル硫酸ナトリウム、PLUORINC(登録商標)F 68、POLOXAMER(登録商標)188、臭化セトリモニウム、塩化セチルピリジニウム、塩化ベンザルコニウム、ドキュセートナトリウム等、ならびに/またはこれらの組み合わせが含まれるが、これらに限定されない。
送達
本開示は、薬物送達の科学進展の見込みを考慮した任意の適切な経路による、治療目的、薬学目的、診断目的、または撮像目的のうちのいずれのためのポリヌクレオチド、修飾核酸、エンハンスド修飾RNA、またはリボ核酸の送達をも包含する。送達は、ネイキッドであっても製剤化されてもよい。
ネイキッド送達
本発明のポリヌクレオチド、修飾核酸、エンハンスド修飾RNA、またはリボ核酸は、ネイキッドで細胞に送達されてもよい。本明細書で使用されるとき、「ネイキッド」とは、トランスフェクションをエンハンスドする薬剤を用いずにポリヌクレオチド、修飾核酸、エンハンスド修飾RNA、またはリボ核酸を送達することを指す。例えば、細胞に送達されるポリヌクレオチド、修飾核酸、エンハンスド修飾RNA、またはリボ核酸は、修飾を全く含有しない場合がある。ネイキッドポリヌクレオチド、修飾核酸、エンハンスド修飾RNA、またはリボ核酸は、細胞に、当技術分野で既知であり、かつ本明細書に記載の投与経路を用いて送達されてもよい。
製剤化された送達
本発明のポリヌクレオチド、修飾核酸、エンハンスド修飾RNA、またはリボ核酸は、本明細書に記載の方法を用いて製剤化されてもよい。製剤は、修飾されているかつ/または修飾されていない場合があるポリヌクレオチド、修飾核酸、エンハンスド修飾RNA、またはリボ核酸を含有してもよい。製剤は、細胞透過剤、薬剤的に許容される担体、送達剤、生崩壊性または生体適合性ポリマー、溶媒、および持続放出送達デポーをさらに含むことができるが、これらに限定されない。製剤化されたポリヌクレオチド、修飾核酸、またはエンハンスド修飾RNAは、細胞に、当技術分野で既知であり、かつ本明細書に記載の投与経路を用いて送達されてもよい。
投与
本発明のポリヌクレオチド、修飾核酸、エンハンスド修飾RNA、またはリボ核酸は、治療上有効成果をもたらす任意の経路によって投与されてもよい。これらには、経腸、経胃腸、硬膜外、経口、経皮、硬膜外(硬膜上)、脳内(大脳の中へ)、脳室内(脳室の中へ)、皮膚上(皮膚上への適用)、皮内、(皮膚自体の中へ)、皮下(皮膚の下)、経鼻投与(鼻を介して)、静脈内(静脈の中へ)、動脈内(動脈の中へ)、筋肉内(筋肉の中へ)、心臓内(心臓の中へ)、骨内輸注(骨髄の中へ)、髄腔内(脊柱管の中へ)、腹腔内(腹腔の中への輸注または注入)、膀胱内輸注、硝子体内(眼を介して)、空洞内注入(陰茎基部の中へ)、膣内投与、子宮内、羊膜外投与、経皮(全身への分布のための無傷の皮膚(intact skin)を介した拡散)、経粘膜(粘膜を介した拡散)、ガス注入(鼻からの吸引)、舌下、口唇下、浣腸、点眼(結膜上に)、または点耳におけるもの含まれるが、これらに限定されない。
非経口および注入による投与
経口投与および非経口投与のための液体剤形には、薬剤的に許容されるエマルション、マイクロエマルション、溶液、懸濁液、シロップ、および/またはエリキシルが含まれるが、これらに限定されない。活性成分に加えて、液体剤形は、例えば、水または他の溶媒、エチルアルコール、イソプロピルアルコール、炭酸エチル、酢酸エチル、ベンジルアルコール、ベンジル安息香酸塩、プロピレングリコール、1,3−ブチレングリコール、ジメチルホルムアミド、油(具体的には、綿実油、ラッカセイ油、トウモロコシ、胚芽油、オリーブ油、ヒマシ油、およびゴマ油)、グリセロール、テトラヒドロフルフリルアルコール、ソルビタンのポリエチレングリコールおよび脂肪酸エステル等の可溶化剤および乳化剤、ならびにこれらの混合物等の、当技術分野で一般的に使用される不活性希釈剤を含んでもよい。不活性希釈剤の他に、経口組成物は、湿潤剤、乳化剤および懸濁化剤、甘味剤、香味剤、および/または芳香剤等のアジュバントを含むことができる。非経口投与のためのある特定の実施形態において、組成物は、CREMOPHOR(登録商標)、アルコール、油、変性油、グリコール、ポリソルベート、シクロデキストリン、ポリマー、および/またはこれらの組み合わせ等の可溶化剤と混合される。
直腸および膣内投与
直腸または膣内投与のための組成物は、典型的に坐剤であり、それは組成物を、周囲温度では固体であるが、体温では液体であり、したがって直腸または膣腔で溶解して活性成分を放出する、ココアバター、ポリエチレングリコール、または坐剤ワックス等の好適な非刺激性賦形剤と混合することによって調製することができる。
経口投与
経口投与のための固体剤形には、カプセル、錠剤、丸薬、粉剤、および顆粒が含まれる。そのような固体剤形において、活性成分は、クエン酸ナトリウムもしくはリン酸二カルシウム等の少なくとも1つの不活性な薬剤的に許容される賦形剤、および/または充填剤もしくは増量剤(例えば、デンプン、ラクトース、ショ糖、グルコース、マンニトール、およびケイ酸)、結合剤(例えば、カルボキシメチルセルロース、アルギン酸塩、ゼラチン、ポリビニルピロリジノン、ショ糖、およびアカシア)、保水剤(例えば、グリセロール)、崩壊剤(例えば、寒天、炭酸カルシウム、ジャガイモまたはタピオカデンプン、アルギン酸、ある特定のケイ酸塩、および炭酸ナトリウム)、溶解遅延剤(solution retarding agents)(例えば、パラフィン)、吸収促進剤(例えば、第四級アンモニウム化合物)、湿潤剤(例えば、セチルアルコールおよびモノステアリン酸グリセロール)、吸収剤(例えば、カオリンおよびベントナイト粘土)、ならびに滑沢剤(例えば、タルク、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、固体ポリエチレングリコール、ラウリル硫酸ナトリウム)、ならびにこれらの混合物と混合される。カプセル、錠剤、および丸薬の場合、剤形は、緩衝剤も含んでもよい。
局所または経皮投与
本明細書に記載されるように、本発明のポリヌクレオチド、修飾核酸、エンハンスド修飾RNA、またはリボ核酸を含有する組成物は、局所的な投与のために製剤化されてもよい。皮膚は、それが容易に接触可能であるため、送達に理想的な標的であり得る。遺伝子発現は、皮膚に対してのみ制限され、非特異的な毒性を回避する可能性があるだけでなく、皮内の特定の層および細胞型にも制限され得る。
一実施形態において、局所および/または経皮投与の前に、皮膚等の少なくとも1つの組織の領域が、透過性を増加させ得るデバイスおよび/または溶液に供されてもよい。一実施形態において、組織は、皮膚の透過性を増加させるために、研磨デバイスに供されてもよい(参照により全体が本明細書に組み込まれる、米国特許公開第20080275468号を参照のこと)。別の実施形態において、組織は、超音波強化デバイスに供されてもよい。超音波強化デバイスには、各々が参照によりそれらの全体が本明細書に組み込まれる、米国公開第20040236268号ならびに米国特許第6,491,657号および同第6,234,990号に記載のデバイスが含まれてもよいが、これらに限定されない。組織の透過性を向上させる方法は、各々が参照によりそれらの全体が本明細書に組み込まれる、米国公開第20040171980号および同第20040236268号ならびに米国特許第6,190,315号に記載されている。
デポー投与
本明細書に記載されるように、いくつかの実施形態において、組成物は、持続放出のためのデポー中に製剤化される。一般に、具体的な器官または組織(「標的組織」)が、投与のための標的とされる。
肺投与
医薬組成物は、口腔を介した肺投与に好適な製剤中に調製され、パッケージ化され、かつ/または販売されてもよい。そのような製剤は、活性成分を含み、かつ約0.5nm〜約7nmまたは約1nm〜約6nmの範囲の直径を有する、乾燥粒子を含んでもよい。そのような組成物は、好適には、噴射剤の流れが粉末を分散するようにそこに向けられ得る乾燥粉末リザーバを含むデバイスを用い、かつ/または密封容器中の低沸点噴射剤中に溶解および/もしくは懸濁させた活性成分を含むデバイス等の自己噴射溶媒/粉末分与容器を用いた投与のために、乾燥粉末の形態にある。そのような粉末は、粒子の少なくとも98重量%が0.5nm超の直径を有し、粒子の少なくとも95%(数量)が7nm未満の直径を有する、粒子を含む。あるいは、粒子の少なくとも95重量%は、1nm超の直径を有し、粒子の少なくとも90%(数量)は、6nm未満の直径を有する。乾燥粉末組成物は、糖等の固体微粉末希釈剤を含んでもよく、それは単位用量形態で好都合に提供される。
鼻腔内、経鼻、および頬側投与
肺送達に有用であるとして本明細書に記載される製剤は、医薬組成物の鼻腔内送達に有用である。鼻腔内投与に好適な別の製剤は、活性成分を含み、約0.2μm〜500μmの平均粒子を有する、粗粉である。そのような製剤は、鼻からの吸入が行われる様態で、すなわち、鼻に近接して保持された粉末の容器からの鼻孔を通じた急速な吸入によって、投与される。
眼内投与
医薬組成物は、眼内投与に好適な製剤中に調製され、パッケージ化され、かつ/または販売されてもよい。そのような製剤は、例えば、水性または油性液体賦形剤中に、例えば、0.1/1.0w/w%の活性成分の溶液および/または懸濁液を含む、点眼の形態にあってもよい。そのような液滴は、緩衝剤、塩、および/または本明細書に記載の任意のさらなる成分のうちのもう1つ以上をさらに含んでもよい。有用である他の眼内投与可能な製剤には、微小結晶形態でおよび/またはリポソーム調製物中に活性成分を含むものが含まれる。点耳および/または点眼は、本発明の範囲内にあるものとして企図される。
ペイロード投与:検出可能な薬剤および治療剤
本明細書に記載のポリヌクレオチド、修飾核酸、エンハンスド修飾RNA、またはリボ核酸は、物質(「ペイロード」)の生体標的への送達、例えば、標的の検出のための検出可能な物質の送達、または治療剤の送達が所望される、いくつかの異なるシナリオにおいて使用することができる。検出方法には、インビトロ画像法およびインビボ画像法の両方、例えば、免疫組織化学、生物発光画像法(BLI)、磁気共鳴画像法(MRI)、ポジトロン放出断層撮影法(PET)、電子顕微鏡法、X線コンピュータ断層撮影法、ラマン画像法、光干渉断層撮影法、吸収画像法、熱画像法、蛍光反射画像法、蛍光顕微鏡法、蛍光分子トモグラフィー画像法、核磁気共鳴画像法、X線画像法、超音波画像法、光音響画像法、研究室アッセイ、またはタギング/染色/画像法が必要とされる任意の状況における方法が含まれ得るが、これらに限定されない。
修飾核酸、エンハンスド修飾RNA、またはリボ核酸は、1つ以上の他の治療剤、予防剤、診断剤、または撮像剤と組み合わせて使用されてもよい。「と組み合わせて」とは、薬剤が同時に投与されるかつ/または一緒に送達するために製剤化される必要があることを暗示するようには意図さないが、これらの送達方法は、本開示の範囲内にある。組成物は、1つ以上の他の所望の治療薬または医療処置と並行して、その前に、またはその後に投与することができる。一般に、各薬剤は、その薬剤のために決定された用量でおよび/または時間スケジュールに基づいて投与されるであろう。いくつかの実施形態において、本開示は、薬学的、予防的、診断的、または撮像組成物を、それらの生体利用能を改善し、それらの代謝を低減および/もしくは修飾し、それらの排泄を阻害し、かつ/またはそれらの体内分布を修飾し得る薬剤と組み合わせて、送達することを包含する。非限定的な例として、修飾核酸、エンハンスド修飾RNA、またはリボ核酸は、癌の治療のためまたは過剰増殖性細胞を制御するための医薬品と組み合わせて使用されてもよい。参照により全体が本明細書に組み込まれる米国特許第7,964,571号において、リポポリマーとともにインターロイキン−12をコードするDNAプラスミドを含む医薬組成物を使用し、また少なくとも1つの抗癌剤または化学療法剤を投与する、原発性または転移性固形腫瘍の治療のための併用療法が記載される。さらに、抗増殖性分子をコードする本発明の修飾核酸、エンハンスド修飾RNA、またはリボ核酸は、リポポリマーとともに医薬組成物中にあってもよい(例えば、抗増殖性分子をコードするDNAプラスミドおよびリポポリマーを含む医薬組成物を特許請求する、参照により全体が本明細書に組み込まれる、米国公開第20110218231号を参照のこと)、それは少なくとも1つの化学療法剤または抗癌剤とともに投与され得る。
ペイロード投与:細胞透過性ペイロード
いくつかの実施形態において、例えば、RNAまたはmRNAといった核酸中に組み込まれる、ポリヌクレオチド、修飾ヌクレオチド、および修飾核酸分子はまた、組成物の細胞内送達を促進する細胞透過性部分または薬剤であり得るペイロードも含む。例えば、組成物は、限定されないが、細胞内空間への送達を容易にする細胞透過性ペプチド配列、例えば、HIV由来TATペプチド、透過因子(penetratins)、輸送因子(transportans)、またはhCT由来細胞透過ペプチドを含むことができる。例えば、Caron et al.,(2001)Mol Ther.3(3):310−8;Langel,Cell−Penetrating Peptides:Processes and Applications(CRC Press, Boca Raton FL 2002);El−Andaloussi et al.,(2005)Curr Pharm Des.11(28):3597−611;およびDeshayes et al.,(2005)Cell Mol Life Sci. 62(16):1839−49を参照のこと;これら各々の内容は、参照により本明細書に組み込まれる。組成物はまた、細胞内空間への組成物の送達を促進する、例えばリポソーム等の細胞透過剤を含むように処方することができる。
ペイロード投与:生物学的標的
例えば、RNAまたはmRNAといった核酸に組み込まれる、本明細書に記載の修飾ヌクレオチドおよび修飾核酸分子を使用して、任意の生物学的標的へペイロードを送達することができ、これに対して特定のリガンドが存在するか、またはそれを作成することができる。リガンドは生物学的標的に共有結合または非共有結合のいずれかで結合することができる。
投薬
本発明は、本発明に従う修飾mRNAおよびそれらのコードされたタンパク質または複合体をそれを必要とする対象に投与することを含む方法を提供する。核酸、タンパク質、もしくは複合体、またはその薬学的、画像化、診断的、もしくは予防的組成物は、疾患、障害、および/または状態(例えば、記憶障害の取り組みに関連した疾患、障害、および/または状態)の予防、治療、診断、または画像化に有効な任意の量および任意の投与経路を用いて対象に投与することができる。必要とされる正確な量は、対象の種、年齢、および全身状態、疾患の重症度、特定の組成物、その投与方法、その活性方法等に応じて、対象によって異なる。本発明に従う組成物は、投与を容易にし、かつ投薬量を均一にするために、典型的には、単位剤形で製剤化される。しかしながら、本発明の組成物の総1日使用量は、適切な医学的判断の範囲内で担当医によって決定されてもよいことが理解される。任意の特定の患者の特定の治療上有効、予防上有効、または適切な画像化用量レベルは、治療される障害および障害の重症度;用いられる特定の化合物の活性;用いられる特定の組成物;患者の年齢、体重、全体的な健康状態、性別、および食生活;投与時間、投与経路、および用いられる特定の化合物の排泄速度;治療の持続期間;用いられる特定の化合物と組み合わせて、またはそれと同時に使用される薬物;医学分野で周知の要素等を含む様々な要素に依存する。
剤形
本明細書に記載の医薬組成物は、局所、鼻腔内、気管内、または注入用(例えば、静脈内、眼内、硝子体内、筋肉内、心臓内、腹腔内、皮下)等の本明細書に記載の剤形に製剤化され得る。
液体剤形
非経口投与用の液体剤形には、薬剤的に許容されるエマルション、マイクロエマルション、溶液、懸濁液、シロップ、および/またはエリキシルが含まれるが、これらに限定されない。活性成分に加えて、液体剤形は、水または他の溶媒、可溶化剤および乳化剤、例えば、エチルアルコール、イソプロピルアルコール、炭酸エチル、酢酸エチル、ベンジルアルコール、安息香酸ベンジル、プロピレングリコール、1,3−ブチレングリコール、ジメチルホルムアミド、油(具体的には、綿実油、ラッカセイ油、トウモロコシ、胚芽油、オリーブ油、ヒマシ油、およびゴマ油)、グリセロール、テトラヒドロフルフリルアルコール、ソルビタンポリエチレングリコールおよび脂肪酸エステル、ならびにこれらの混合物を含むが、これらに限定されない当技術分野で一般に使用される不活性希釈剤を含んでもよい。非経口投与についてのある特定の実施形態において、組成物は、可溶化剤、例えば、CREMOPHOR(登録商標)、アルコール、油、修飾油、グリコール、ポリソルベート、シクロデキストリン、ポリマー、および/またはこれらの組み合わせと混合されてもよい。
注入物
注入用調製物、例えば、滅菌注入用水性または油性懸濁液は、既知の技術に従って製剤化されてもよく、好適な分散化剤、湿潤剤、および/または懸濁化剤を含んでもよい。滅菌注入用調製物は、非毒性の非経口的に許容される希釈剤および/または溶媒、例えば、1,3−ブタンジオール溶液中の滅菌注入用溶液、懸濁液、および/またはエマルションであり得る。用いられ得る許容されるビヒクルおよび溶媒の中には、水、リンガー溶液、U.S.P.、および等張性塩化ナトリウム溶液が含まれるが、これらに限定されない。無刺激固定油が溶媒または懸濁化媒体として慣習的に用いられる。この目的のために、合成モノグリセリドまたはジグリセリドを含む任意の無刺激固定油が用いられ得る。オレイン酸等の脂肪酸が注入物の調製において使用され得る。
肺
肺送達に有用であるとして本明細書に記載される製剤は、医薬組成物の鼻腔内送達にも使用され得る。鼻腔内投与に好適な別の製剤は、活性成分を含み、約0.2μm〜500μmの平均粒子を有する粗粉であってもよい。そのような製剤は、鼻からの吸入が行われる様態で、すなわち鼻に近接して保持された粉末の容器からの鼻孔を通じた急速な吸入によって投与されてもよい。
コーティング剤またはシェル
錠剤、糖衣錠、カプセル、丸剤、および顆粒の固体剤形を、コーティング剤およびシェル、例えば、腸溶性コーティング剤および医薬品製剤化分野で周知の他のコーティング剤で調製することができる。それらは、任意に、乳白剤を含んでもよく、それらが、腸管のある特定の部分において、任意に、遅延様式で、活性成分(複数可)のみを放出するか、またはそれを優先的に放出する組成物であり得る。使用することができる包埋組成物の例としては、ポリマー物質およびワックスが挙げられる。同様の種類の固体組成物は、そのような賦形剤をラクトースまたは乳糖、ならびに高分子量ポリエチレングリコール等として使用した軟質および硬質充填ゼラチンカプセル中の充填剤として用いてもよい。
キット
本発明は、好都合におよび/または効果的に本発明の方法を行うための多様なキットを提供する。典型的には、キットは、使用者が対象の(複数可)複数の治療を実施する、および/または複数の実験を実施することを可能にするのに十分な量および/または数の構成成分を含む。
デバイス
本発明は、目的とするポリペプチドをコードする修飾核酸、エンハンスド修飾RNA、またはリボ核酸を組み込み得るデバイスを提供する。これらのデバイスは、安定した製剤中に、ヒト患者等のそれを必要とする対象に即時に送達されることができる製剤中に核酸を合成するための試薬を含有する。そのような目的とするポリペプチドの非限定的な例としては、創傷治癒のための成長因子および/または血管形成刺激因子、感染制御を容易にするためのペプチド抗細菌剤、ならびに新たに確認されたウイルスに対する免疫応答を急速に刺激するための抗原が挙げられる。
いくつかの実施形態において、デバイスは、ポンプであってもよく、または血液脳関門を横断する本発明の化合物または組成物の投与用のカテーテルを含む。そのようなデバイスには、加圧嗅覚送達デバイス、イオン泳動デバイス、多層微小流体デバイス等が挙げられるが、これらに限定されない。そのようなデバイスは、携帯型または固定型であってもよい。それらは、身体に埋め込み可能であるか、または身体に外的に係留されるか、またはそれらの組み合わせであってもよい。
治療剤を固体組織に送達するための方法は、Bahramiらによって説明されており、例えば、米国特許公開第20110230839号に教示され、この内容は、参照によりこれらの全体が本明細書に組み込まれる。Bahramiによると、一連の針はデバイス内に組み込まれ、各針の長さに沿ってその固体組織内の任意の箇所で実質的に同量の流体を送達する。
カテーテルおよび/またはルーメンを利用する方法およびデバイス
カテーテルおよびルーメンを使用する方法およびデバイスを用いて、単回、複数回、または分割された投薬スケジュールにおいて本発明の修飾核酸、エンハンスド修飾RNA、またはリボ核酸を投与することができる。そのような方法およびデバイスを、以下に記載する。
電流を利用する方法およびデバイス
本明細書に教示される単回、複数回、または分割された投薬レジメンに従って、電流を利用する方法およびデバイスを用いて、本発明の修飾核酸、エンハンスド修飾RNA、またはリボ核酸を送達することができる。そのような方法およびデバイスが、以下に記載される。
定義
本明細書中の種々の箇所で、本開示の化合物の置換基が、群においてまたは範囲において開示される。本開示は、そのような群および範囲のメンバーのありとあらゆる個々の部分的組み合わせを含むことが具体的に意図される。例えば、「C1−6アルキル」という用語は、メチル、エチル、C3アルキル、C4アルキル、C5アルキル、およびC6アルキルを個々に開示することが具体的に意図される。
動物:本明細書で使用されるとき、「動物」という用語は、動物界の任意のメンバーを指す。いくつかの実施形態において、「動物」は、任意の発達段階にあるヒトを指す。いくつかの実施形態において、「動物」は、任意の発達段階にある非ヒト動物を指す。ある特定の実施形態において、非ヒト動物は、哺乳動物(例えば、齧歯類、マウス、ラット、ウサギ、サル、イヌ、ネコ、ヒツジ、ウシ、霊長類、またはブタ)である。いくつかの実施形態において、動物には、哺乳動物、鳥類、爬虫類、両生類、サカナ、および蠕虫が含まれるが、これらに限定されない。いくつかの実施形態において、動物は、トランスジェニック動物、遺伝子操作動物、またはクローンである。
生物学的に活性:本明細書で使用されるとき、「生物学的に活性」という表現は、生体系および/または生物において活性を有する任意の物質の特徴を指す。例えば、生物に投与されるときに、その生物に対して生物学的効果を有する物質は、生物学的に活性であると見なされる。特定の実施形態において、本発明の核酸分子は、その核酸分子のほんの一部分でも、生物学的に活性であるか、生物学的に関連性があると見なされる活性を模倣する場合、生物学的に活性であると見なされ得る。
本明細書で使用されるとき、「アシル」という用語は、本明細書に定義されるカルボニル基を介して親分子基に結合される、本明細書に定義される水素またはアルキル基(例えば、ハロアルキル基)を表し、ホルミル(すなわち、カルボキシアルデヒド基)、アセチル、プロピオニル、ブタノイル等により例として示される。例示の非置換アシル基は、1〜7、1〜11、または1〜21個の炭素を含む。いくつかの実施形態において、アルキル基は、本明細書に記載の1、2、3、または4個の置換基でさらに置換される。
本明細書で使用されるとき、「アミノ」という用語は、−N(RN1)2を表し、式中、各RN1は、独立して、H、OH、NO2、N(RN2)2、SO2ORN2、SO2RN2、SORN2、N−保護基、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、アリール、アルカリール、シクロアルキル、アルクシクロアルキル、カルボキシアルキル、スルホアルキル、ヘテロシクリル(例えば、ヘテロアリール)、またはアルクヘテロシクリル(例えば、アルクヘテロアリール)であり、これらの列挙されるRN1基の各々は、各基について本明細書に定義されるように任意に置換され得るか、または2つのRN1が組み合わさって、ヘテロシクリルもしくはN保護基を形成し、各RN2は、独立して、H、アルキル、またはアリールである。本発明のアミノ基は、非置換アミノ(すなわち、−NH2)または置換アミノ(すなわち、−N(RN1)2)であり得る。好ましい実施形態において、アミノは、−NH2または−NHRN1であり、式中、RN1は、独立して、OH、NO2、NH2、NRN2 2、SO2ORN2、SO2RN2、SORN2、アルキル、カルボキシアルキル、スルホアルキル、またはアリールであり、各RN2は、H、C1−20アルキル(例えば、C1−6アルキル)、またはC6−10アリールであり得る。
本明細書で使用されるとき、「二環式」という用語は、芳香族でも非芳香族でもあり得る2つの環を有する構造を指す。二環式構造には、本明細書に定義されるスピロシクリル基、および1つ以上の架橋を共有する2つの環が含まれ、そのような架橋は、1個の原子、または2個、3個、もしくはそれよりも多い原子を含む鎖を含むことができる。例示の二環式基には、二環式カルボシクリル基(その第1および第2の環は、本明細書に定義されるカルボシクリル基である);二環式アリール基(その第1および第2の環は、本明細書に定義されるアリール基である);二環式ヘテロシクリル基(その第1の環は、ヘテロシクリル基であり、第2の環は、カルボシクリル(例えば、アリール)またはヘテロシクリル(例えば、ヘテロアリール)基である);および二環式ヘテロアリール基(その第1の環は、ヘテロアリール基であり、第2の環は、カルボシクリル(例えば、アリール)またはヘテロシクリル(例えば、ヘテロアリール)基である)が含まれる。いくつかの実施形態において、二環式基は、シクロアルキル、ヘテロシクリル、およびアリール基について本明細書に定義される1、2、3、または4個の置換基で置換され得る。
「カルボキシアルデヒド」という用語は、構造−CHOを有するアシル基を表す。
本明細書で使用されるとき、「カルボキシアルコキシ」という用語は、本明細書に定義されるカルボキシ基によって置換された、本明細書に定義されるアルコキシ基を表す。アルコキシ基は、アルキル基について本明細書に記載の1、2、3、または4個の置換基でさらに置換され得る。
「シクロアルコキシ」という用語は、式−ORの化学置換基を表し、式中、Rは、別途明記されない限り、本明細書に定義されるC3−8シクロアルキル基である。シクロアルキル基は、本明細書に記載の1、2、3、または4個の置換基でさらに置換され得る。例示の非置換シクロアルコキシ基は、3〜8個の炭素である。いくつかの実施形態において、シクロアルキル基は、本明細書に記載の1、2、3、または4個の置換基でさらに置換され得る。
本明細書で使用されるとき、本明細書で使用される薬剤の「有効量」は、有益なまたは所望の結果、例えば、臨床結果をもたらすのに十分な量であり、したがって、「有効量」は、それが適用されている前後関係に依存する。例えば、癌を治療する薬剤を投与することの前後関係において、有効量の薬剤は、例えば、薬剤の投与を伴わずに得られる反応と比較して、本明細書に定義される癌の治療を達成するのに十分な量である。
本明細書で使用されるとき、「ハロアルコキシ」という用語は、ハロゲン基(すなわち、F、Cl、Br、またはI)によって置換された、本明細書に定義されるアルコキシ基を表す。ハロアルコキシは、1、2、3個のハロゲンで、または2個以上の炭素のアルキル基の場合には4個のハロゲンで置換されてもよい。ハロアルコキシ基には、ペルフルオロアルコキシ(例えば、−OCF3)、−OCHF2、−OCH2F、−OCCl3、−OCH2CH2Br、−OCH2CH(CH2CH2Br)CH3、および−OCHICH3が含まれる。いくつかの実施形態において、ハロアルコキシ基は、アルキル基について本明細書に記載の1、2、3、または4個の置換基でさらに置換され得る。
E’は、−N−および−CH−からなる群から選択され、F’は、−N=CH−、−NH−CH2−、−NH−C(O)−、−NH−、−CH=N−、−CH2−NH−、−C(O)−NH−、−CH=CH−、−CH2−、−CH2CH2−、−CH2O−、−OCH2−、−O−、および−S−からなる群から選択され、G’は、−CH−および−N−からなる群から選択される。本明細書で言及されるヘテロシクリル基のうちのいずれかは、次のものからなる群から独立して選択される1、2、3、4、または5個の置換基で任意に置換されてもよい:(1)C1−7アシル(例えば、カルボキシアルデヒド);(2)C1−20アルキル(例えば、C1−6アルキル、C1−6アルコキシ−C1−6アルキル、C1−6アルキルスルフィニル−C1−6アルキル、アミノ−C1−6アルキル、アジド−C1−6アルキル、(カルボキシアルデヒド)−C1−6アルキル、ハロ−C1−6アルキル(例えば、ペルフルオロアルキル)、ヒドロキシ−C1−6アルキル、ニトロ−C1−6アルキル、またはC1−6チオアルコキシ−C1−6アルキル);(3)C1−20アルコキシ(例えば、ペルフルオロアルコキシ等のC1−6アルコキシ);(4)C1−6アルキルスルフィニル;(5)C6−10アリール;(6)アミノ;(7)C1−6アルク−C6−10アリール;(8)アジド;(9)C3−8シクロアルキル;(10)C1−6アルク−C3−8シクロアルキル;(11)ハロ;(12)C1−12ヘテロシクリル(例えば、C2−12ヘテロアリール);(13)(C1−12ヘテロシクリル)オキシ;(14)ヒドロキシ;(15)ニトロ;(16)C1−20チオアルコキシ(例えば、C1−6チオアルコキシ);(17)−(CH2)qCO2RA’(式中、qは、0〜4の整数であり、RA’は、(a)C1−6アルキル、(b)C6−10アリール、(c)水素、および(d)C1−6アルク−C6−10アリールからなる群から選択される);(18)−(CH2)qCONRB’RC’(式中、qは、0〜4の整数であり、RB’およびRC’は、(a)水素、(b)C1−6アルキル、(c)C6−10アリール、および(d)C1−6アルク−C6−10アリールからなる群から独立して選択される);(19)−(CH2)qSO2RD’(式中、qは、0〜4の整数であり、RD’は、(a)C1−6アルキル、(b)C6−10アリール、および(c)C1−6アルク−C6−10アリールからなる群から選択される);(20)−(CH2)qSO2NRE’RF’(式中、qは、0〜4の整数であり、RE’およびRF’の各々は、独立して、(a)水素、(b)C1−6アルキル、(c)C6−10アリール、および(d)C1−6アルク−C6−10アリールからなる群から選択される);(21)チオール;(22)C6−10アリールオキシ;(23)C3−8シクロアルコキシ;(24)アリールアルコキシ;(25)C1−6アルク−C1−12ヘテロシクリル(例えば、C1−6アルク−C1−12ヘテロアリール);(26)オキソ;(27)(C1−12ヘテロシクリル)イミノ;(28)C2−20アルケニル;ならびに(29)C2−20アルキニル。いくつかの実施形態において、これらの基の各々は、本明細書に記載されるようにさらに置換され得る。例えば、C1−アルカリールまたはC1−アルクヘテロシクリルのアルキレン基は、オキソ基でさらに置換されて、それぞれのアリーロイルおよび(ヘテロシクリル)オイル置換基をもたらすことができる。
本明細書で使用されるとき、「ヒドロキシ」という用語は、−OH基を表す。
本明細書で使用されるとき、「N保護基」という用語は、合成手順中に、望ましくない反応に対してアミノ基を保護するよう意図される基を表す。一般的に使用されるN保護基は、参照により本明細書に組み込まれる、Greene,“Protective Groups in Organic Synthesis,” 3rd Edition(John Wiley & Sons,New York,1999)に開示されている。N保護基には、ホルミル、アセチル、プロピオニル、ピバロイル、t−ブチルアセチル、2−クロロアセチル、2−ブロモアセチル、トリフルオロアセチル、トリクロロアセチル、フタリル、o−ニトロフェノキシアセチル、α−クロロブチリル、ベンゾイル、4−クロロベンゾイル、4−ブロモベンゾイル、4−ニトロベンゾイル等の、アシル、アリーロイル、またはカルバミル基、および保護されたまたは保護されいないD、L、またはD等のキラル助剤、アラニン、ロイシン、フェニルアラニン等のL−アミノ酸;ベンゼンスルホニル、p−トルエンスルホニル等のスルホニル含有基;ベンジルオキシカルボニル、p−クロロベンジルオキシカルボニル、p−メトキシベンジルオキシカルボニル、p−ニトロベンジルオキシカルボニル、2−ニトロベンジルオキシカルボニル、p−ブロモベンジルオキシカルボニル、3,4−ジメトキシベンジルオキシカルボニル、3,5−ジメトキシベンジルオキシカルボニル、2,4−ジメトキシベンジルオキシカルボニル、4−メトキシベンジルオキシカルボニル、2−ニトロ−4,5−ジメトキシベンジルオキシカルボニル、3,4,5−トリメトキシベンジルオキシカルボニル、1−(p−ビフェニルyl)−1−メチルエトキシカルボニル、α,α−ジメチル−3,5−ジメトキシベンジルオキシカルボニル、ベンズヒドリルオキシカルボニル、t−ブチルオキシカルボニル、ジイソプロピルメトキシカルボニル、イソプロピルオキシカルボニル、エトキシカルボニル、メトキシカルボニル、アリルオキシカルボニル、2,2,2,−トリクロロエトキシカルボニル、フェノキシカルボニル、4−ニトロフェノキシカルボニル、フルオレニル−9−メトキシカルボニル、シクロペンチルオキシカルボニル、アダマンチルオキシカルボニル、シクロヘキシルオキシカルボニル、フェニルチオカルボニル等のカルバメート形成基、ベンジル、トリフェニルメチル、ベンジルオキシメチル等のアルカリール基、ならびにトリメチルシリル等のシリル基が含まれる。好ましいN保護基は、ホルミル、アセチル、ベンゾイル、ピバロイル、t−ブチルアセチル、アラニル、フェニルスルホニル、ベンジル、t−ブチルオキシカルボニル(Boc)、およびベンジルオキシカルボニル(Cbz)である。
本明細書で使用されるとき、「オキソ」という用語、=Oを表す。
本明細書で使用されるとき、「ペルフルオロアルキル」という用語は、アルキル基に結合した各水素ラジカルがフッ化物ラジカルによって置き換えられた、本明細書に定義されるアルキル基を表す。ペルフルオロアルキル基は、トリフルオロメチル、ペンタフルオロエチル等により例として示される。
本明細書で使用されるとき、「チオアルカリール」という用語は、式−SRの化学置換基を表し、式中、Rは、アルカリール基である。いくつかの実施形態において、アルカリール基は、本明細書に記載の1、2、3、または4個の置換基でさらに置換され得る。
化合物:本明細書で使用されるとき、「化合物」という用語は、描写される構造のすべての立体異性体、幾何異性体、互変異性体、および同位体を含むことが意図される。
保存される:本明細書で使用されるとき、「保存される」という用語は、比較されている2つ以上の配列の同じ位置において変化することなく生じる残基である、それぞれ、ポリヌクレオチド配列またはポリペプチド配列のヌクレオチド残基またはアミノ酸残基を指す。比較的保存されているヌクレオチドまたはアミノ酸は、配列内の他の箇所に現れるヌクレオチドまたはアミノ酸よりも関連した配列の間で保存されているものである。
送達剤:本明細書で使用されるとき、「送達剤」は、標的とされる細胞への修飾核酸のインビボ送達を少なくとも部分的に容易にする、任意の物質を指す。
障害:本明細書で使用するとき、「障害」という用語は、身体の正常機能または確立されたシステムの混乱、またはそれらへの干渉を指す。
発現:本明細書で使用されるとき、核酸配列の「発現」は、次の事象のうちの1つ以上を指す:(1)DNA配列からのRNAテンプレートの生成(例えば、転写による)、(2)RNA転写のプロセシング(例えば、スプライシング、編集、5’キャップ形成、および/または3’末端プロセシングによる)、(3)RNAのポリペプチドまたはタンパク質への翻訳、および(4)ポリペプチドまたはタンパク質の翻訳後修飾。
製剤:本明細書で使用されるとき、「製剤」は、少なくとも修飾核酸と、送達剤とを含む。
非相同:本明細書で使用するとき、5’UTRまたは3’UTR等の非翻訳領域に関する「非相同」という用語は、同一のまたは本明細書のポリヌクレオチド、一次構築物、またはmmRNAのコード領域で自然にはみられない、核酸の領域、特に非翻訳核酸を意味する。例えば、相同UTRは、野生型UTR等のmRNAのコード領域と関連して自然に見られるUTRを表す。
Molecular Biology,Lesk,A.M.,ed.,Oxford University Press,New York,1988;Biocomputing:Informatics and Genome Projects,Smith,D.W.,ed.,Academic Press,New York,1993、Sequence Analysis in Molecular Biology,von Heinje,G.,Academic Press,1987、Computer Analysis of Sequence Data,Part I,Griffin,A.M.,and Griffin,H.G.,eds.,Humana Press,New Jersey,1994、およびSequence Analysis Primer,Gribskov,M.and Devereux,J.,eds.,M
Stockton Press,New York,1991に記載の方法の等を用いて決定することができる。例えば、2つのヌクレオチド配列間の同一性パーセントは、MeyersおよびMiller(CABIOS,1989,4:11−17)のアルゴリズムを用いて決定することができ、それはPAM120重量残基表、12のギャップ長ペナルティ、および4のギャップペナルティを用いてALIGNプログラム(第2.0版)に組み込まれている。2つのヌクレオチド配列間の同一性パーセントは、あるいは、NWSgapdna.CMPマトリックスを使用するGCGソフトウェアパッケージにおけるGAPプログラムを用いて決定することができる。配列間の同一性パーセントを決定するために一般的に用いられる方法には、参照により本明細書に組み込まれるCarillo,H.,and Lipman,D.,SIAM J Applied Math.,48:1073(1988)に開示の方法が含まれるが、これらに限定されない。同一性を決定するための技法は、公的に利用可能なコンピュータプログラムにおいて成文化されている。2つの配列間の相同性を決定するための例示のコンピュータソフトウェアには、GCGプログラムパッケージ、Devereux,J.,et al.,Nucleic Acids Research,12(1),387(1984))、BLASTP、BLASTN、およびFASTA、Atschul,S.F.et al.,J.Molec.Biol.、215、403(1990))が含まれるが、これらに限定されない。
単離された:本明細書で使用されるとき、「単離された」という用語は、それが会合された(自然にであるか、実験的設定であるかにかかわらず)構成成分のうちの少なくとも一部から分離された物質または実体を指す。単離された物質は、それが会合した物質に関して様々なレベルの純度を有し得る。単離された物質および/または実体は、それらが最初に会合されたその他の構成成分の少なくとも約10%、約20%、約30%、約40%、約50%、約60%、約70%、約80%、約90%、またはそれよりも多くから分離され得る。いくつかの実施形態において、単離された薬剤は、約80%超、約85%超、約90%超、約91%超、約92%超、約93%超、約94%超、約95%超、約96%超、約97%超、約98%超、約99%超、または約99%超純粋である。本明細書で使用されるとき、物質は、他の構成成分が実質的にない場合、「純粋」である。実質的に単離される:「実質的に単離される」とは、化合物が、それが形成されたまたは検出された環境から実質的に分離されることを意味する。部分的分離には、例えば、本開示の化合物を豊富に含んだ組成物が含まれ得る。実質的な分離には、少なくとも約50重量%、少なくとも約60重量%、少なくとも約70重量%、少なくとも約80重量%、少なくとも約90重量%、少なくとも約95重量%、少なくとも約97重量%、または少なくとも約99重量%の本開示の化合物、またはその塩を含有する組成物が含まれ得る。化合物およびそれらの塩を単離するための方法は、当技術分野で通例である。
オープンリーディングフレーム:本明細書で使用されるとき、「オープンリーディングフレーム」または「ORF」は、所与のリーディングフレーム内に終止コドンを含有しない配列を指す。
患者:本明細書で使用されるとき、「患者」は、治療を求め得るもしくは治療を必要とし得る、治療を要する、治療を受けている、治療を受けることになる、または特定の疾患もしくは状態のために訓練を受けた専門家の看護下にある、対象を指す。
薬剤的に許容される:「薬剤的に許容される」という表現は、本明細書で、健全な医療判断の範囲内で、過度の毒性、刺激、アレルギー反応、または他の問題もしくは合併症を伴わずにヒトおよび動物の組織と接触して使用するのに好適であり、妥当な便益/危険性比率に見合った、化合物、材料、組成物、および/または剤形を指すように用いられる。
予防する:本明細書で使用されるとき、「予防する」という用語は、感染、疾患、障害、および/もしくは状態の発症を部分的もしくは完全に遅延させること;特定の感染、疾患、障害、および/もしくは状態の1つ以上の症状、特長、もしくは臨床徴候の発症を部分的もしくは完全に遅延させること;特定の感染、疾患、障害、および/もしくは状態の1つ以上の症状、特長、もしくは徴候の発症を部分的もしくは完全に遅延させること;感染からの、特定の疾患、障害、および/もしくは状態の進行を部分的もしくは完全に遅延させること;ならびに/または感染、疾患、障害、および/もしくは状態に関連した病理を発症する危険性を減少さることを指す。
Association and Pergamon Press,1987で論じられている。
シュードウリジン:本明細書で使用されるとき、シュードウリジンは、ヌクレオシドウリジンのC−グリコシド異性体を指す。「シュードウリジン類似体」は、シュードウリジンの任意の修飾、変異形、アイソフォーム、または誘導体である。例えば、シュードウリジン類似体には、1−カルボキシメチル−シュードウリジン、1−プロピニル−シュードウリジン、1−タウリノメチル−シュードウリジン、1−タウリノメチル−4−チオ−シュードウリジン、1−メチル−シュードウリジン(m1ψ)、1−メチル−4−チオ−シュードウリジン(m1s4ψ)、4−チオ−1−メチル−シュードウリジン、3−メチル−シュードウリジン(m3ψ)、2−チオ−1−メチル−シュードウリジン、1−メチル−1−デアザ−シュードウリジン、2−チオ−1−メチル−1−デアザ−シュードウリジン、ジヒドロシュードウリジン、2−チオ−ジヒドロシュードウリジン、2−メトキシウリジン、2−メトキシ−4−チオ−ウリジン、4−メトキシ−シュードウリジン、4−メトキシ−2−チオ−シュードウリジン、N1−メチル−シュードウリジン、1−メチル−3−(3−アミノ−3−カルボキシプロピル)シュードウリジン(acp3ψ)、および2’−O−メチル−シュードウリジン(ψm)が含まれるが、これらに限定されない。
シグナルペプチド配列:本明細書で使用されるとき、「シグナルペプチド配列」という表現は、タンパク質の輸送または局在化を指示することができる配列を指す。
安定した:本明細書で使用されるとき、「安定した」は、反応混合物から有用な純度で単離後に残存するのに十分に強固であり、好ましくは効果的な治療剤へと製剤可能である、化合物を指す。
対象:本明細書で使用されるとき、「対象」または「患者」という用語は、本発明に従う組成物が、例えば、実験、診断、予防、および/または治療目的のために投与され得る、任意の生物を指す。典型的な対象には、動物(例えば、マウス、ラット、ウサギ、非ヒト霊長類、およびヒト等の哺乳動物)および/または植物が含まれる。
実質的に同時に:本明細書で使用され、かつそれが複数の用量に関するとき、この用語は、15秒以内を意味する。
治療剤:「治療剤」という用語は、対象に投与されたときに、治療、診断、および/もしくは予防効果を有し、かつ/または所望の生物学的および/もしくは薬理学的効果を誘発する、任意の薬剤を指す。
転写因子:本明細書で使用されるとき、「転写因子」という用語は、例えば、転写の活性化または抑制によって、DNAのRNAへの転写を調節する、DNA結合タンパク質を指す。いくつかの転写因子は、転写の調節を単独でもたらす一方で、他の転写因子は、他のタンパク質と協働して作用する。いくつかの転写因子は、ある特定の条件下で、転写の活性化および抑制の両方を行うことができる。一般に、転写因子は、標的遺伝子の調節領域内の特定のコンセンサス配列に非常に類似した、特定の標的配列(単数または複数)に結合する。転写因子は、標的遺伝子の転写を単独でまたは他の分子と複合して調節し得る。
均等物および範囲
当業者であれば、ほんの日常的な実験を用いて、本明細書に記載の本発明に従う具体的な実施形態に対する多くの均等物を認識するか、解明することができる。本発明の範囲は、上記の説明に限定されるようには意図されず、むしろ添付の特許請求の範囲に記載されるように限定されることが意図される。
範囲が与えられる場合、端点が含まれる。さらに、別途指定されるか、または文脈および当業者の理解から別途明白でない限り、範囲として表される値は、文脈上、そうでないとする明確な指示がない限り、本発明の異なる実施形態において定められる範囲内で、その範囲の下限の単位の10分の1までの任意の具体的な値または部分範囲をとることができることを理解されたい。
本発明に従う修飾mRNAは、標準的な実験室方法および材料を用いて作製する。
様々な上流または下流領域(β−グロビン、タグ等)を有するオープンリーディングフレームは、DNA2.0(カリフォルニア州メンローパーク)から購入することができ、XbaI認識を有する複数のクローニング部位も概して含有する。構築物を受容すると、それが再構築され、化学的にコンピテントな大腸菌に変換され得る。本発明には、NEB
DH5−αコンピテント大腸菌を使用する。典型的なクローンマップは図3に示す。変換は、NEBの指示に従って、100ngのプラスミドを用いて行う。プロトコルは次の通りである。
1. 氷上のNEB 5−αコンピテント大腸菌細胞の管を10分間解凍する。
2. 1pg〜100ngのプラスミドDNAを含有する1〜5μLを細胞混合物に添加する。管を慎重に4〜5回振り、細胞とDNAを混合する。ボルテックスしないこと。
3. 混合物を30分間氷上に置く。混ぜないこと。
4. 42℃で正確に30秒間熱ショックを与える。混ぜないこと。
5. 5分間氷上に置く。混ぜないこと。
6. 室温のSOCを950μLピペットで混合物に入れる。
7. 37℃で60分間置く。激しく振盪させる(250rpm)か、または回転させる。
8. 選択プレートを37℃に温める。
9. 管を振り、逆さにすることによって完全に細胞を混合する。
10. 50〜100μLの各希釈物を選択プレートに広げ、37℃で一晩インキュベートする。あるいは、30℃で24〜36時間または25℃で48時間インキュベートする。
表16.G−CSF配列
cDNAの調製のためのPCR手順を、Kapa Biosystems(Woburn,MA)による2×KAPA HiFi(商標)HotStart ReadyMixを用いて行う。このシステムには、2×KAPA ReadyMix12.5μL、順方向プライマー(10uM)0.75μL、逆方向プライマー(10uM)0.75μL、鋳型cDNA100ng、および25.0μLに希釈したdH20が含まれる。反応条件は、95℃で5分間、98℃で20秒間を25サイクル、その後58℃で15秒間、続いて72℃で45秒間、次いで72℃で5分間、次いで4℃で終了までである。
実施例3.インビトロ転写(IVT)
インビトロ転写反応により、修飾ヌクレオチドまたは修飾RNAを含有するmRNAを生成する。投入するヌクレオチドトリホスフェート(NTP)混合物は、天然および非天然のNTPを用いてで自家作製したものである。
1. 鋳型cDNA 1.0μg
2. 10倍転写緩衝液(400mM Tris−HCl pH8.0、190mM MgCl2、50mM DTT、10mMスペルミジン)2.0μL
3. カスタムNTP(25mMずつ)7.2μL
4. RNase阻害剤 20U
5. T7 RNAポリメラーゼ 3000U
6. dH20 最大20.0μL
7. 37℃で3時間〜5時間のインキュベーション。
実施例4.mRNAの酵素キャッピング
mRNAのキャッピングを、次のように行い、混合物には、IVT RNAが60μg〜180μgおよびdH20が最大72μL含まれる。混合物を、65℃で5分間インキュベートしてRNAを変性させ、その後すぐに氷上に移す。
実施例5.ポリAテーリング反応
cDNAにポリTがない場合、最終産物を浄化する前に、ポリAテーリング反応を行う必要がある。これは、キャップされたIVT RNA(100μL)、RNase阻害剤(20U)、10倍テーリング緩衝液(0.5M Tris−HCl(pH8.0)、2.5M NaCl、100mM MgCl2)(12.0μL)、20mM ATP(6.0μL)、ポリAポリメラーゼ(20U)、dH20最大123.5μLを混合し、37℃で30分間インキュベートすることによって行う。ポリA尾部が既に転写物中に存在する場合、テーリング反応を省略し、直接AmbionのMEGAclear(商標)kit(最大500μg)での浄化に進んでもよい。ポリAポリメラーゼは、好ましくは、酵母に発現される組み換え酵素である。
実施例6.天然の5’キャップおよび5’キャップ類似体
修飾RNAの5’キャッピングは、製造業者のプロトコルに従って、次の化学的RNAキャップ類似体を用いたインビトロ転写反応の際に付随して完了し得、5’グアノシンキャップ構造が生成される:3’−O−Me−m7G(5’)ppp(5’)G、G(5’)ppp(5’)A、G(5’)ppp(5’)G、m7G(5’)ppp(5’)A、m7G(5’)ppp(5’)G(New England BioLabs、マサチューセッツ州イプスウィッチ)。修飾RNAの5’キャッピングは、ワクシニアウイルスキャッピング酵素を用いて転写後に完了し、「キャップ0」構造:m7G(5’)ppp(5’)G(New England BioLabs、マサチューセッツ州イプスウィッチ)を生成し得る。キャップ1構造は、ワクシニアウイルスキャッピング酵素および2’−Oメチルト−ランスフェラーゼの両方を用いて生成され得、m7G(5’)ppp(5’)G−2’−O−メチルが得られる。キャップ2構造は、2’−Oメチル−トランスフェラーゼを用いて、5’末端から3番目のヌクレオチドの2’−O−メチル化の後に、キャップ1構造から生成され得る。キャップ3構造は、2’−Oメチル−トランスフェラーゼを用いて、5’末端から4番目のヌクレオチドの2’−O−メチル化の後に、キャップ2構造から生成され得る。酵素は、好ましくは組み換え源に由来する。
実施例7.化学的キャップ対酵素的に抽出されたキャップタンパク質発現アッセイ
ARCAを含有するヒトG−CSFをコードする合成mRNAを、等濃度でヒト初代ケラチノサイトにトランスフェクトすることができる。トランスフェクションの6、12、24、および36時間後に、培養培地に分泌されたG−CSFの量を、ELISAによってアッセイすることができる。培地中により高レベルのG−CSFを分泌する合成mRNAは、より高度は翻訳的にコンピテントなキャップ構造を有する合成mRNAに対応する。
実施例8.化学的キャップ対酵素的に抽出されたキャップ純度分析
ARCAキャップ類似体またはキャップ1構造の粗製合成産物を含有する、ヒトG−CSFをコードする合成mRNAを、変性アガロース−尿素ゲル電気泳動またはHPLC分析を用いて、純度について比較することができる。電気泳動により単一の集約された帯域を有する合成mRNAは、複数の帯域または筋状の帯域を有する合成mRNAと比較して、より高い純度の産物に対応する。単一のHPLCピークを有する合成mRNAもより高い純度の産物に対応する。より高効率のキャッピング反応により、より純粋なmRNA集団が得られる。
実施例9.化学的キャップ対酵素的に抽出されたキャップサイトカイン分析
ARCAキャップ類似体またはキャップ1構造を含有する、ヒトG−CSFをコードする合成mRNAを、複数の濃度でヒト初代ケラチノサイトにトランスフェクトすることができる。トランスフェクションの6、12、24、および36時間後に、培養培地に分泌されたTNF−αおよびIFN−β等の炎症促進性サイトカインの量を、ELISAによってアッセイすることができる。培地中により高レベルの炎症促進性サイトカインを分泌する合成mRNAは、免疫活性化キャップ構造を有する合成mRNAに対応する。
実施例10.化学的キャップ対酵素的に抽出されたキャップキャッピング反応効率
ARCAキャップ類似体またはキャップ1構造を含有する、ヒトG−CSFをコードする合成mRNAを、キャップされたmRNAのヌクレアーゼ処理の後に、LC−MSによってキャッピング反応効率について分析することができる。キャップされたmRNAのヌクレアーゼ処理により、LC−MSによって検出可能な遊離ヌクレオチドとキャップされた5’−5−トリホスフェートキャップ構造の混合物が得られる。LC−MSスペクトル上のキャップされた生成物の量は、反応からの全mRNAの割合(%)として表すことができ、キャッピング反応効率に対応するであろう。より高いキャッピング反応効率を有するキャップ構造は、LC−MSにより、より高い量のキャップされた生成物を有するであろう。
実施例11.修飾RNAまたはRT PCR産物のアガロースゲル電気泳動
個々の修飾RNA(20μL体積中200〜400ng)または逆転写されたPCR産物(200〜400ng)を、非変性1.2%アガロースE−ゲル(Invitrogen、カリフォルニア州カールスバッド)のウェルに充填し、製造業者のプロトコルに従って12〜15分間泳動させる。
実施例12.Nanodrop修飾RNAの定量化およびUVスペクトルデータ
TE緩衝液(1μL)中の修飾RNAを、Nanodrop UV吸光読み取りに使用して、インビトロ転写反応からの各RNAの収率を定量化する。
実施例13.変動するポリA尾部長さを含有する修飾RNAのインビトロ転写
修飾mRNAは、ヌクレオチド混合物が修飾ヌクレオチドを含有することを除いては、インビトロ転写のための標準の実験室方法および物質を用いて作成した。本実施例の修飾mRNAは5−メチシトシンおよびシュードウリジンを含んだ。目的とする遺伝子のオープンリーディングフレーム(ORF)は、アデノシン類似体を組み込まない修飾RNAに対するポリA尾部の鋳型付加のために、強力なコザック翻訳開始シグナルを含有する5’非翻訳領域(UTR)およびオリゴ(dT)配列で終結するα−グロビン3’UTRに隣接する。アデノシン含有修飾RNAを、転写後ポリ(A)ポリメラーゼポリ(A)尾部を可能にするようにオリゴ(dT)配列なしで合成される。0nts、80nts、120nts、160ntsのポリA尾部長さをヒトG−CSFに対して作成した。G−CSF配列は、cDNA配列(配列番号4257)、mRNA配列(配列番号4258)、およびタンパク質配列(配列番号4259)を含む。G−CSFの検出は、順方向プライマーTTG GAC CCT CGT ACA GAA GCT AAT ACG(配列番号4260)、鋳型ポリ(A)尾部T(120)CT TCC TAC TCA GGC TTT ATT CAA AGA CCA(配列番号4261)のための逆方向プライマー、および転写後ポリ(A)ポリメラーゼ尾部CTT CCT ACT CAG GCT
TTA TTC AAA GAC CA(配列番号4262)のための逆方向プライマーを含む、cDNAのためのプライマープローブセットによって実施してもよい。検出はまた、G−CSF修飾核酸分子逆転写酵素ポリメラーゼ連鎖反応(RT−PCR)順方向プライマーTGG CCG GTC CCG CGA CCC AA(配列番号4263)および逆方向プライマーGCT TCA CGG CTG CGC AAG AT(配列番号4264)によって実施してもよい。
実施例14.マイクロRNA結合部位を有する修飾核酸の発現
ヒト胎児由来腎臓上皮細胞(HEK293A)および一次ヒト肝細胞(Hepatocytes)を、1ウェルあたり200,000個の細胞密度にて500μlの細胞培地(Celsis(イリノイ州シカゴ)のInVitro GRO培地)中に播種した。α−グロビン3’UTRを有するG−CSF mRNA(G−CSF α)(cDNA配列は配列番号4265に示される;mRNA配列は配列番号4266に示される;配列に示されていないおよそ160ヌクレオチド長のポリA尾部;5’キャップ、キャップ1;5−メチルシチジンおよびシュードウリジンで完全修飾されている)、α−グロビン3’UTRおよびmiR−122結合部位を有するG−CSF mRNA(G−CSF miR−122)(cDNA配列は配列番号4267に示される;mRNA配列は配列番号4268に示される;配列に示されていないおよそ160ヌクレオチド長のポリA尾部;5’キャップ、キャップ1;5−メチルシチジンおよびシュードウリジンで完全修飾されている)、またはシード欠失した4つのmiR−122結合部位を伴うα−グロビン3’UTRを有するG−CSF mRNA(シードなしG−CSF)(cDNA配列は配列番号4269に示される;mRNA配列は配列番号4270に示される;配列に示されないおよそ160ヌクレオチド長のポリA尾部;5’キャップ、キャップ1;5−メチルシチジンおよびシュードウリジンで完全修飾されている)を、24ウェルプレートにて1ウェルにつき250ngの濃度で試験した。G−CSFの発現をELISAによって測定し、結果を表17に示す。
表17.miR−122結合部位
実施例15.シュードウリジンおよびN1−メチル−シュードウリジンの対象のSAR
ピリミジンヌクレオシドシュードウリジンへの最近の注目に伴い、一連の構造活性研究は、シュードウリジンまたはN1−メチル−シュードウリジン(pseudourdine)への修飾を含むmRNAを研究するように設計された。
表18.シュードウリジンおよびN1-メチルシュードウリジンSAR
天然および非天然ヌクレオシドを、目的とするポリペプチドをコードするmRNA内に組み込む。これらの例を表20および21に示す。ある特定の市販のヌクレオシドトリホスフェート(NTP)を本発明のポリヌクレオチド中で研究する。これらの選択肢を表20に示す。次いで、結果として得られるmRNAを、タンパク質を産生する、サイトカインを誘導する、および/または治療的成果を生じるその能力について検査する。
表20.天然および非天然ヌクレオシド
天然および非天然ヌクレオシドを、目的とするポリペプチドをコードするmRNA内に組み込む。核酸塩基および炭水化物(糖)の両方に対する修飾を有する市販のヌクレオシドおよびNTPを、mRNA内に組み込まれ、タンパク質を産生し、サイトカインを誘導し、かつ/または治療的成果を生み出すその能力について検査する。これらのヌクレオシドの例を表22および23に示す。
表22.組み合わせ修飾
実施例18.シグナル配列交換研究
ヒト顆粒球コロニー刺激因子(G−CSF)をコードするmmRNA(mRNA配列は配列番号4258に示される;約160ヌクレオチドのポリA尾部は配列内に示されない;5’キャップ、キャップ1)の複数の変異体を、修飾ヌクレオチドシュードウリジンおよび5−メチルシトシン(シュード−U/5mC)を用いて合成した。これらの変異体には、野生型N末端分泌シグナルペプチド配列(MAGPATQSPMKLMALQLLLWHSALWTVQEA;配列番号4271)、非分泌シグナルペプチド配列、または他のmRNAから得た分泌シグナルペプチド配列のいずれかをコードするG−CSF構築物が含まれた。これらは、野生型G−CSFシグナルペプチド配列がヒトα−1−抗トリプシン(AAT)(MMPSSVSWGILLLAGLCCLVPVSLA;配列番号4272)、ヒト第IX因子(FIX)(MQRVNMIMAESPSLITICLLGYLLSAECTVFLDHENANKILNRPKR;配列番号4273)、ヒトプロラクチン(Prolac)(MKGSLLLLLVSNLLLCQSVAP;配列番号4274)、またはヒトアルブミン(Alb)(MKWVTFISLLFLFSSAYSRGVFRR;配列番号4275)のいずれかのシグナルペプチド配列で置換された配列を含んでいた。
表24.シグナルペプチド交換
3’UTRを隣接する領域に提供し得る。複数の3’UTRが隣接する領域に含まれていてもよく、同じ配列または異なる配列であってもよい。何も含まない場合も含め、隣接する領域の任意の部分はコドン最適化されていてもよく、いずれも1つ以上の異なる構造的または化学的修飾を、コドン最適化の前および/または後に、独立して含有することができる。
実施例20.ポリヌクレオチド輸送の変化:NLSおよびNES
本発明のポリヌクレオチドに組み込まれ得る2つの核外輸送シグナル(NES)として、Muller,et al(Traffic,2009,10:514−527)に報告されるものが挙げられ、これらは遺伝子COMMD1を介するシグナル伝達と関連する。これらは、NES1、PVAIIELEL(配列番号4276)およびNES2、VNQILKTLSE(配列番号4277)である。
細胞株またはマウスに、コードされたNLSまたはNESを有する1つ以上のポリヌクレオチドを投与する。投与の際、ポリヌクレオチドは代替的な位置、例えば、NLSを用いる核内へ輸送される。NLSを有するポリペプチドは、生存シグナルまたは死のシグナルのいずれかを核の微小環境に送達するであろう核に送達されるであろう。核に局在化され得るポリペプチドは、細胞、組織、または生物体に対する治療上有益な方法で細胞の発現プロファイルを変化させるように機能し得るDNAのための、変化した結合特性を有するものを含む。
2009;10:514−527)およびvan de Sluis et al,(J Clin Invest.2010;120(6):2119−2130)に従ってCOMMD1 mut1/mut2+NLS(例えば、両方の分裂したNESシグナル+加えられたNLS)をコードする。シグナル配列はポリペプチドまたは翻訳不可能な組換え配列をコードし得る。コードされたシグナル配列はHIF1−αと相互作用して、癌細胞のトランスクリトーム(transcritome)を変化させるであろう。
一度特定されると、HIF1−α依存性ポリヌクレオチドを癌細胞株中で試験し、クローン生存またはアポトーシスのマーカーを測定し、対照または偽治療細胞と比較する。
実施例21.ポリヌクレオチドにおけるセンサー配列として有用なmiRNA結合部位(BS)
miRNA結合部位を、特異的細胞(正常細胞および/または癌細胞)に対する細胞傷害性または細胞保護的mRNA治療薬を目的とする、mRNA治療薬の3’UTRにおいて使用する。
次いで、インビボでの動物試験を本明細書に開示されたモデルのいずれか、または市販の正所性HCCモデルを用いて実施する。
実施例22.ポリヌクレオチドの研究のための細胞株
本発明のまたは国際出願第PCT/US2012/69610号(参照によりその全体が本明細書に組み込まれる)に記載のポリヌクレオチドを含む本発明のポリヌクレオチドおよび製剤が、多くの癌細胞株または正常細胞株において調査され得る。本発明において有用な細胞株はATCC(ヴァージニア州マナッサス)の細胞株を含み、表25に列挙される。
表25.細胞株
RNA結合タンパク質はタンパク質として、および/またはそのようなタンパク質をコードする核酸として提供され得る。RNA結合タンパク質は、RNA安定性およびタンパク質翻訳の調節において多数の役割を果たす。いくつかの実施形態において、RNA結合タンパク質は、本発明の要素を有するタンパク質および/または核酸形態で提供される。そのようなRNA結合タンパク質として、限定されないが、表26に列挙されるもの(ENSG数に加えて、対応遺伝子および1つ以上のENST数の同定、各々の転写性の変異形の特定)が挙げられる。
表26.RNA結合タンパク質
実施例24.マイクロRNA結合部位を有する修飾核酸の発現
ヒト胎児由来腎臓上皮細胞(HEK293A)、抗原提示細胞、または単球由来樹状細胞(MDDC)、もしくはPBMC等の高発現したmir−142/146を有する細胞株を、1ウェルあたり200,000の密度にて500μlの細胞培地(Celsis(イリノイ州シカゴ)のInVitro GRO培地)中に播種した。G−CSF mRNA(mRNA配列は配列番号4258に示される;配列に示されていない少なくとも140ヌクレオチド長のポリA尾部;5’キャップ、キャップ1)、miR−142−5p結合部位を有するG−CSF mRNA(G−CSF miR−142−5p)(cDNA配列は配列番号4985に示される;mRNA配列は配列番号4986に示され、配列にしめされていない少なくとも140ヌクレオチド長のポリA尾部;5’キャップ、キャップ1)、miR−142−5p結合部位由来のシード配列を有するG−CSF mRNA(G−CSF miR−142−5p−シード)(cDNA配列は配列番号4987に示される;mRNA配列は配列番号4988に示される;配列に示されていない少なくとも140ヌクレオチド長のポリA尾部;5’キャップ、キャップ1)、シード配列を有しないでmiR−142−5p結合部位を有するG−CSF mRNA(G−CSF miR−142−5p−シードレス)(cDNA配列は配列番号4989に示され、mRNA配列は配列番号4990に示される;配列に示されていない少なくとも140ヌクレオチド長のポリA尾部;5’キャップ、キャップ1)、miR−142−3p結合部位を有するG−CSF mRNA(G−CSF miR−142−3p)(cDNA配列は配列番号4991に示される;mRNA配列は配列番号4992に示される;配列に示されていない少なくとも140ヌクレオチド長のポリA尾部;5’キャップ、キャップ1)、miR−142−3p結合部位由来のシード配列を有するG−CSF mRNA(G−CSF miR−142−3p−シード)(cDNA配列は配列番号4993に示される;mRNA配列は配列番号4994に示される;配列に示されていない少なくとも140ヌクレオチド長のポリA尾部;5’キャップ、キャップ1)、シード配列を有しないが、miR−142−3p結合部位を有するG−CSF mRNA(G−CSF miR−142−3p−シードレス)(DNA配列は配列番号4995に示される;mRNA配列は配列番号4996に示される;配列に示されていない少なくとも140ヌクレオチド長のポリA尾部;5’キャップ、キャップ1)、miR−146a結合部位を有するG−CSF mRNA(G−CSF miR−146a)(cDNA配列は配列番号4997に示される;mRNA配列は配列番号4998に示される;配列に示されていない少なくとも140ヌクレオチド長のポリA尾部;5’キャップ、キャップ1)、miR−146a結合部位由来のシード配列を有するG−CSF mRNA(G−CSF miR−146a−シード)(cDNA配列は配列番号4999に示される;mRNA配列は配列番号5000に示される;配列に示されていない少なくとも140ヌクレオチド長のポリA尾部;5’キャップ、キャップ1)、またはシード配列を有しないが、miR−146a結合部位を有するG−CSF mRNA(G−CSF miR−146a−シードレス)(cDNA配列は配列番号5001に示される;mRNA配列は配列番号5002に示される;配列に示されていない少なくともヌクレオチド長のポリA尾部;5’キャップ、キャップ1)が、1ウェルあたり250ngの濃度にて24ウェルプレート中に播種される。mRNA配列を、5−メチルシチジンおよびシュードウリジンで完全修飾されているもの、5−メチルシチジンおよび1−メチルシュードウリジンで完全修飾されているもの、シュードウリジンで完全修飾されているもの、1−メチルシュードウリジンで完全修飾されているものを含む、本明細書に記載の、および/または当該技術分野において既知の様々な化学修飾で評価し、ここでウリジン残基の25%が2−チオウリジンで修飾され、シトシン残基の25%が5−メチルシチジンで修飾される。各試料におけるG−CSFの発現はELISAによって測定される。
表27.結合部位を有するG−CSF
実施例25.修飾核酸媒介免疫刺激を抑制するAPC特異的マイクロRNA結合部位
マイクロRNAに対する結合部位を、免疫細胞においてmRNA治療薬を選択的に分解するmRNA治療薬の3’UTRにおいて使用して、mRNA治療薬送達によって引き起こされる望まれない免疫原性応答を抑制する。
実施例26.miR結合部位を有するmRNAのインビトロ発現
ヒト胎児腎臓上皮細胞(HEK293A)、抗原提示細胞、または単球由来樹状細胞(MDDC)、もしくはPBMC等の高発現したmir−142/146を有する細胞株を、1ウェルあたり200,000個の密度にて500μlの細胞培地(Celsis(イリノイ州シカゴ)のInVitro GRO培地)中に播種する。培養された細胞を、実施例24に記載のようなマイクロRNA特徴を有するまたは有しないG−CSF mRNAでトランスフェクトする。細胞は、5日間連続でトランスフェクトする。トランスフェクション複合体を、各回のトランスフェクションの4時間に取り出す。
実施例27.自然免疫応答研究のインビボ検出
核酸またはmRNAタンパク質発現、およびインビボでの免疫応答を試験するため、メスのBALB/Cマウス(n=5)に、実施例24に記載のようなマイクロRNA特徴を有するまたは有しないG−CSF mRNAを筋肉内に注射する。血液を投与の8時間後に収集する。G−CSF、TNF−α、およびIFN−αのタンパク質レベルをELISAによって決定する。
実施例28.一次幹細胞におけるmiR−122の発現
ラットおよびヒト一次幹細胞における幹細胞特異的miR−122レベルを測定した。Hela細胞、ならびに一次ラットおよびヒト幹細胞を培養し、RNAを細胞可溶化物から抽出した。ラットおよびヒト一次幹細胞におけるmiR−122レベルを、Hela細胞におけるレベルと比較した。miR−122レベルは、Hela細胞におけるレベルと比較してそれぞれ、一次ヒト幹細胞において約6倍、一次ラット幹細胞において約12倍増加している。
実施例29.miR−122結合部位を有する修飾核酸の、肝細胞における発現
一次ラットおよびヒト肝細胞、ならびにHela細胞を、1ウェルあたり200,000個の細胞密度にて500μlの細胞培地(Celsis(イリノイ州シカゴ)のInVitro GRO培地)中に播種した。miR−1223’UTRにおいて結合部位を有するG−CSF mRNA(G−CSF miR−122−1X)(mRNA配列は配列番号4268に示される;配列に示されていないおよそ140ヌクレオチド長のポリA尾部;5’キャップ、キャップ1)、5−メチルシチジンおよびシュードウリジン(5mC/pU)で完全修飾されたもの、またはシュードウリジン(pU)もしくはシードを欠失した4つのmiR−122結合部位を有するG−CSF mRNAで完全修飾されたもの(シードなしG−CSF)(mRNA配列は配列番号4270に示される;配列に示されていないおよそ140ヌクレオチド長のポリA尾部;5’キャップ、キャップ1)、5−メチルシチジンおよびシュードウリジン(5mC/pU)で完全修飾されたもの、またはシュードウリジン(pU)で完全修飾されたものを、24ウェルプレートにて1ウェルにつき250ngの濃度で試験した。トランスフェクションの24時間後に、G−CSFの発現をELISAによって測定し、結果を表28に示す。
表28.G−CSF mir122発現
翻訳抑制および/または標的メッセンジャーRNAの分解によるマイクロRNA対照遺伝子発現。G−CSF mRNAを含有するMir−122結合部位を、肝臓細胞において翻訳的に調節した。
mRNA(G−CSF miR−122−1X)(mRNA配列は配列番号4268に示されない;配列に示されないおよそ140ヌクレオチド長のポリA尾部;5’キャップ、キャップ1)、または5−メチルシチジンおよびシュードウリジン(5mC/pU)で完全修飾された、欠失したシードを伴う4つのmiR−122結合部位を有するG−CSF mRNA(シードなしG−CSF)(mRNA配列は配列番号4270に示される;配列に示されないおよそ140ヌクレオチド長のポリA尾部;5’キャップ、キャップ1)を、24ウェルプレートにて1ウェルにつき250ngの濃度で試験した。トランスフェクションの24時間後に、G−CSFの発現をELISAによって測定した。G−CSF剤(mRNA)レベルおよびタンパク質レベルを表29に示す。
表29.G−CSF薬剤およびタンパク質濃度
コザックおよび/またはIRES配列を有するまたは有しないG−CSFをコードする修飾mRNA、ならびにそれらの対応するcDNA配列を、以下の表30に示す。表30において、各配列の開始コドンには下線を引いている。
表30.G−CSF配列
実施例32.α−グロビンUTRにおける修飾mRNA配列およびmiR−122配列
G−CSF、またはヒトもしくはマウスα−グロビン3’UTRにmir−122配列を有する第IX因子をコードする修飾mRNA、ならびにそれらの対応するcDNA配列を、以下表31に示す。表31において、各配列の開始コドンには下線を引いている。
表31.G−CSFおよびFIX配列
実施例33.微生理学的システム
本明細書に記載のポリヌクレオチド、一次構築物、および/またはmmRNAは、緩衝剤、脂質ナノ粒子、およびPLGA等の本明細書に記載の方法のうち1つを用いて処方される。その後、これらの製剤を、これら各々の内容は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる、国際公開第WO2013086502号、同第WO2013086486号、および同第WO2013086505号に記載される臓器チップから作成された微生理学的システムに投与するかまたはそれと接触させる。
実施例34.非翻訳領域における翻訳エンハンス要素(TEE)
本明細書に記載のポリヌクレオチド、一次構築物、および/またはmmRNAにおける5’および/または3’非翻訳領域(UTR)は、少なくとも1つの翻訳エンハンス要素(TEE)を含み得る。5’UTRおよび/または3’UTR中に含まれ得るそのようなTEEは、限定されないが、それらの部分および/または断片を有する表32に列挙されるTEEを含む。TEE配列は、表28に開示されるTEE配列の少なくとも5%、少なくとも10%、少なくとも15%、少なくとも20%、少なくとも25%、少なくとも30%、少なくとも35%、少なくとも40%、少なくとも45%、少なくとも50%、少なくとも55%、少なくとも60%、少なくとも65%、少なくとも70%、少なくとも75%、少なくとも80%、少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%、少なくとも99%、または99%以上を含んでいてもよく、および/またはTEE配列は、表32に開示されるTEE配列の5〜30ヌクレオチド長断片、5〜25ヌクレオチド長断片、5〜20ヌクレオチド長断片、5〜15ヌクレオチド長断片、5〜10ヌクレオチド長断片を含んでいてもよい。
表32.TEE配列
マイクロRNAは、翻訳抑制および/または標的メッセンジャーRNAの分解を介して、遺伝子発現を制御する。ヒトまたはマウスα−グロビン3’非翻訳領域(UTR)を有するG−CSF mRNAおよび第IX因子mRNAの発現を、3’UTRにてmiR−122配列を用いてヒト一次肝細胞内で下方制御した。
ヒトα−グロビン3’UTRを有するG−CSF mRNA(G−CSF Hs3’UTR;配列番号5716に示されるmRNA配列;配列に示されていないおよそ140ヌクレオチド長のポリA尾部;5’キャップ、キャップ1)、またはマウスα−グロビン3’UTR(G−CSF Mm3’UTR;配列番号5717に示されるmRNA配列;配列に示されていないおよそ140ヌクレオチド長のポリA尾部;5’キャップ、キャップ1)を、5−メチルシチジンおよび1−メチルシュードウリジンで完全修飾した。3’UTRにmiR−122配列を有するヒト3’UTRを含有するG−CSF mRNA(G−CSF Hs3’UTR miR−122;配列番号5018に示されるmRNA配列;配列に示されていないおよそ140ヌクレオチド長のポリA尾部;5’キャップ、キャップ1)、または3’UTRにおけるmiR−122シード配列(G−CSF Hs3’UTR miR−122シード;配列番号5020に示されるmRNA配列;配列に示されていないおよそ140ヌクレオチド長のポリA尾部;5’キャップ、キャップ1)、または3’UTRにシード配列を有しない(G−CSF Hs3’UTR miR−122シードレス;配列番号5022に示されるmRNA配列;配列に示されていないおよそ140ヌクレオチド長のポリA尾部;5’キャップ、キャップ1)を、5−メチルシチジンおよび1−メチルシュードウリジンで完全修飾した。3’UTRにmiR−122配列を有するマウス3’UTRを含有するG−CSF mRNA(G−CSF Mm3’UTR
miR−122;配列番号5024に示されるmRNA配列;配列に示されていないおよそ140ヌクレオチド長のポリA尾部;5’キャップ、キャップ1)、または3’UTRにおけるmiR−122シード配列(G−CSF Mm3’UTR miR−122シード;配列番号5026に示されるmRNA配列;配列に示されていないおよそ140ヌクレオチド長のポリA尾部;5’キャップ、キャップ1)、または3’UTRにシード配列を有しないmiR−122配列(G−CSF Mm3’UTR miR−122シードレス;配列番号5028に示されるmRNA配列;配列に示されていないおよそ140ヌクレオチド長のポリA尾部;5’キャップ、キャップ1)を、5−メチルシチジンおよび1−メチルシュードウリジンで完全修飾した。
miR−122;配列番号5036に示されるmRNA配列;配列に示されていないおよそ140ヌクレオチド長のポリA尾部;5’キャップ、キャップ1)、または3’UTRにおけるmiR−122シード配列(第IX因子Mm3’UTR miR−122シード;配列番号5038に示されるmRNA配列;配列に示されていないおよそ140ヌクレオチド長のポリA尾部;5’キャップ、キャップ1)、または3’UTRにシード配列を有しないmiR−122配列(第IX因子Mm3’UTR miR−122シードレス;配列番号5040に示されるmRNA配列;配列に示されていないおよそ140ヌクレオチド長のポリA尾部;5’キャップ、キャップ1)を、5−メチルシチジンおよび1−メチルシュードウリジンで完全修飾した。
表33.G−CSFタンパク質発現
HeLaおよびRAW264細胞を、それぞれ1ウェルあたり17000の密度、および1ウェルあたり80000の密度で100μlの細胞培地(DMEM+10%FBS)に播種した。
表35.G−CSF発現
HeLa細胞を1ウェルあたり17000個の細胞密度にて100μlの細胞培地(DMEM+10%FBS)に播種した。IRES配列およびコザック配列を有するG−CSF mRNA(G−CSF IRESコザック;配列番号5004に示されるmRNA配列;配列に示されていないおよそ140ヌクレオチド長のポリA尾部;5’キャップ、キャップ1)、IRES配列を有するがコザック配列を有しないG−CSF mRNA(G−CSF IRES;配列番号5006に示されるmRNA配列;配列に示されていないおよそ140ヌクレオチド長のポリA尾部;5’キャップ、キャップ1)、IRESまたはコザック配列を有しないG−CSF mRNA(コザックなしGCSF;配列番号5008に示されるmRNA配列;配列に示されていないおよそ140ヌクレオチド長のポリA尾部;5’キャップ、キャップ1)、またはコザック配列を有するG−CSF配列(G−CSFコザック;配列番号5720に示されるmRNA配列;配列に示されていないおよそ140ヌクレオチド長のポリA尾部;5’キャップ、キャップ1)を、5−メチルシチジンおよび1−メチルシュードウリジンで完全に修飾されたもので完全に修飾され、1ウェルあたり75ngの濃度で24ウェルプレートにて試験した。トランスフェクションの24時間後、G−CSFの発現をELISAによって測定し、結果を表36に示す。
表36.G−CSF発現
ヒトまたはマウスMALAT1配列、およびそれらの対応するcDNA配列を有するG−CSFまたはmCherryをコードする修飾mRNAを、以下の表37に示す。表37において、各配列の開始コドンには下線を引き、MALAT1配列は太字にしてある。表37.MALAT1構築物
実施例39.非相同5’UTRの利用
5’UTRが、本発明の核酸、修飾核酸、またはmmRNAに隣接する領域として提供され得る。5’UTRは、本発明の核酸、修飾核酸、またはmmRNA中に見出されるコード領域と、相同または非相同であり得る。複数の5’UTRが隣接する領域に含まれていてもよく、同じ配列または異なる配列であってもよい。何も含まない場合も含め、隣接する領域の任意の部分はコドン最適化されていてもよく、いずれも1つ以上の異なる構造的または化学的修飾を、コドン最適化の前および/または後に、独立して含有することができる。
実施例40.5’非翻訳領域のさらなる利用
5’UTRは、本発明の核酸、修飾核酸、またはmmRNAと隣接する領域として提供され得る。5’UTRは、本発明の核酸、修飾核酸、またはmmRNA中に見出されるコード領域と、相同または非相同であり得る。複数の5’UTRが隣接する領域に含まれていてもよく、同じ配列または異なる配列であってもよい。何も含まない場合も含め、隣接する領域の任意の部分はコドン最適化されていてもよく、いずれも1つ以上の異なる構造的または化学的修飾を、コドン最適化の前および/または後に、独立して含有することができる。
本発明の核酸、修飾核酸、またはmmRNAの1つ以上の性質を変化させるために、本発明の核酸、修飾核酸、またはmmRNAのコード領域に非相同である5’UTRを本発明の化合物内に操作する。その後、核酸、修飾核酸、またはmmRNAを、細胞、組織、または生物体に投与し、タンパク質レベル、局在性、および/または半減期等の結果を測定して、非相同5’UTRが本発明の核酸、修飾核酸、またはmmRNAに有し得る有益な効果を評価する。A、T、C、またはGを含む1つ以上のヌクレオチドが終端に添加されるかまたは除去される、5’UTRの変異形が使用され得る。5’UTRはまた、コドン最適化されていても、または本明細書に記載されるいずれかの方法で修飾されていてもよい。
表38.5′−非翻訳領域
トランスフェクションの前日、20,000個のHeLa細胞(ATCC番号CCL−2;ヴァージニア州マナッサス)を、Trypsin−EDTA溶液(LifeTechnologies、ニューヨーク州グランドアイランド)で処理することによって収集し、96ウェル細胞培養プレート(Corning、ヴァージニア州マナッサス)にて総体積1ウェルあたり100μlのEMEM培地(10%FCSおよび1×Glutamaxで補充)で播種した。細胞を37℃で5%のCO2雰囲気下において一晩育成した。翌日、37.5ng、75ng、または150ngの5UTR−001に対する核酸配列を含むG−CSF 修飾RNA(配列番号5に示されるmRNA配列;配列に示されていないおよそ140ヌクレオチド長のポリA尾部;5’キャップ、キャップ1;5−メチルシチジンおよび1−メチルシュードウリジンで完全修飾した)、5UTR−68515に対する核酸配列を含むG−CSF修飾RNA(配列番号5732に示されるmRNA配列;配列に示されていないおよそ140ヌクレオチド長のポリA尾部;5’キャップ、キャップ1;5−メチルシチジンおよび1−メチルシュードウリジンで完全修飾した)、5UTR−68516に対する核酸配列を含むG−CSF修飾RNA(配列番号5733に示されるmRNA配列;配列に示されていないおよそ140ヌクレオチド長のポリA尾部;5’キャップ、キャップ1;5−メチルシチジンおよび1−メチルシュードウリジンで完全修飾した)、5UTR−68521に対する核酸配列を含むG−CSF修飾RNA(配列番号5738に示されるmRNA配列;配列に示されていないおよそ140ヌクレオチド長のポリA尾部;5’キャップ、キャップ1;5−メチルシチジンおよび1−メチルシュードウリジンで完全修飾した)、または5UTR−68522に対する核酸配列を含むG−CSF修飾RNA(配列番号5739に示されるmRNA配列;配列に示されていないおよそ140ヌクレオチド長のポリA尾部;5’キャップ、キャップ1;5−メチルシチジンおよび1−メチルシュードウリジンで完全修飾した)を、10μlの最終体積のOPTI−MEM(LifeTechnologies、ニューヨーク州グランドアイランド)中に希釈した。Lipofectamine 2000(LifeTechnologies、ニューヨーク州グランドアイランド)をトランスフェクション試薬として使用し、0.2μlを10μlの最終用量のOPTI−MEM中に希釈した。室温でインキュベートした5分後、両方の溶液を合わせ、さらに15分間室温でインキュベートした。その後、20μlの合わせた溶液を、HeLa細胞を含有する100μlの細胞培地に添加し、室温でインキュベートした。
表39.非相同5’UTRからのG−CSFタンパク質産生
HeLa細胞を1ウェルあたり15,000個の細胞密度にて100μlの細胞培地(DMEM+10%FBS)に播種した。コザック配列を有するG−CSF mRNA(G−CSFコザック;配列番号5004に示されるmRNA配列;配列に示されていないおよそ140ヌクレオチド長のポリA尾部;5’キャップ、キャップ1;5−メチルシチジンおよび1−メチルシュードウリジンで完全修飾した)、またはコザック配列を有しないG−CSF mRNA(コザックなしG−CSF;配列番号5008に示されるmRNA配列;配列に示されていないおよそ140ヌクレオチド長のポリA尾部;5’キャップ、キャップ1;5−メチルシチジンおよび1−メチルシュードウリジンで完全修飾した)、1ウェルあたり75ngの濃度にて96ウェルプレートで三重でトランスフェクトした。トランスフェクションの24時間、48時間、および72時間後に、上澄みを回収し、G−CSFの発現をELISAによって測定し、結果を表40に示す。表40.G−CSF発現
目的とするポリペプチドをコードし、ポリA配列およびキャップを有するmRNAは、本明細書に記載の化学変化、および/または同時係属出願であり、この内容が参照によりその全体が本明細書に組み込まれる国際公開第WO2013052523号に記載の化学変化のうち少なくとも1つで完全修飾され、mRNAは表41の5’UTRを含む。HeLa細胞を細胞培地に播種し、mRNAによって所定の濃度(1ウェルあたりのng)でウェルプレートにおいてトランスフェクトする。トランスフェクション後、所定の間隔(例えば、2時間、4時間、6時間、8時間、10時間、12時間、14時間、16時間、18時間、20時間、22時間、24時間、36時間、48時間、60時間、および/または72時間)で、上澄みを回収し、タンパク質の発現をELISAによって測定する。表41.5’UTR
A.バイオアナライザー
20、40、80、100、120、140、もしくは160ヌクレオチド長のポリA尾部を有する、もしくはポリA尾部を有しない、修飾G−CSF mRNA(配列番号5745に示されるmRNA配列;5−メチルシチジンおよび1−メチルシュードウリジン(5mc/1mpU)で完全修飾した、または1−メチルシュードウリジン(1mpU)で完全修飾した5’キャップ、キャップ1)、修飾第IX因子(FIX)mRNA(配列番号5746に示されるmRNA配列;5−メチルシチジンおよび1−メチルシュードウリジン(5mc/1mpU)で完全修飾した、または1−メチルシュードウリジン(1mpU)で完全修飾した5’キャップ、キャップ1)、修飾エリスロポエチン(EPO)mRNA(配列番号5747に示されるmRNA配列;5−メチルシチジンおよび1−メチルシュードウリジン(5mc/1mpU)で完全修飾した、または1−メチルシュードウリジン(1mpU)で完全修飾した5’キャップ、キャップ1)、または修飾mCherry mRNA(配列番号5748に示されるmRNA配列;5−メチルシチジンおよび1−メチルシュードウリジン(5mc/1mpU)で完全修飾した、または1−メチルシュードウリジン(1mpU)で完全修飾した5’キャップ、キャップ1)を、バイオアナライザー(Agilent 2100バイオアナライザー)によって分析した。全ての試料は、バイオマーカーによって決定して、mRNAの完全性を維持した。
ヒト一次包皮線維芽細胞(BJ線維芽細胞)をAmerican Type Culture Collection(ATCC)(カタログ番号CRL−2522)から入手し、5%のCO2下において37℃で、10%のウシ胎仔血清を補充したイーグルMinimum Essential培地(ATCC、カタログ番号11095−114)中で育成した。BJ線維芽細胞を24ウェルプレートにおいて1ウェルあたり100,000個の細胞密度で、0.5mlの培地中に播種した。20、40、80、100、120、140、もしくは160ヌクレオチド長のポリA尾部を有する、もしくはポリA尾部を有しない、250ngの修飾G−CSF mRNA(配列番号5745に示されるmRNA配列;5−メチルシチジンおよび1−メチルシュードウリジン(5mc/1mpU)で完全修飾した、または1−メチルシュードウリジン(1mpU)で完全修飾した5’キャップ、キャップ1)、修飾第IX因子(FIX)mRNA(配列番号5746に示されるmRNA配列;5−メチルシチジンおよび1−メチルシュードウリジン(5mc/1mpU)で完全修飾した、または1−メチルシュードウリジン(1mpU)で完全修飾した5’キャップ、キャップ1)、修飾エリスロポエチン(EPO)mRNA(配列番号5747に示されるmRNA配列;5−メチルシチジンおよび1−メチルシュードウリジン(5mc/1mpU)で完全修飾した、または1−メチルシュードウリジン(1mpU)で完全修飾した5’キャップ、キャップ1)、または修飾mCherry mRNA(配列番号5748に示されるmRNA配列;5−メチルシチジンおよび1−メチルシュードウリジン(5mc/1mpU)で完全修飾した、または1−メチルシュードウリジン(1mpU)で完全修飾した5’キャップ、キャップ1)を、説明書に従ってLipofectamine 2000を用いてトランスフェクトした。FIX、G−CSF、およびEPOは、3重でトランスフェクトした。
表42.G−CSFタンパク質発現
A.HeLa細胞
HeLa細胞を1ウェルあたり15,000個の細胞密度にて100μlの細胞培地(DMEM+10%FBS)に播種した。3’UTRにmiR−122配列を有するG−CSF mRNA(G−CSF miR122;配列番号5024に示されるmRNA配列;配列に示されていないおよそ140ヌクレオチド長のポリA尾部;5’キャップ、キャップ1;5−メチルシチジンおよび1−メチルシュードウリジンで完全修飾した)、3’UTRにまたはシード配列を有しないが、miR−122配列を有するG−CSF mRNA(G−CSFシードレス;配列番号5028に示されるmRNA配列;配列に示されていないおよそ140ヌクレオチド長のポリA尾部;5’キャップ、キャップ1;5−メチルシチジンおよび1−メチルシュードウリジンで完全修飾した)を、1ウェルあたり0.3μlのLipofectamine 2000によって1ウェルあたり75ngの濃度のmRNAで96ウェルプレートにおいてトランスフェクトした。上澄みをトランスフェクションの16〜18時間後に回収し、G−CSFの発現をELISAによって測定し、結果を表46に示す。
表46.HeLaにおけるG−CSF発現
一次ヒトまたはラット肝細胞を、1ウェルあたり350,000個の細胞密度にて500μlの細胞培地(InvitroGRO CPおよびInVitroGRO HI Medium+2.2%Torpedo Antibiotic Mix)に播種した。3’UTRにmiR−122配列を有するG−CSF mRNA(G−CSF miR122;配列番号5024に示されるmRNA配列;配列に示されないおよそ140ヌクレオチド長のポリA尾部;5’キャップ、キャップ1;5−メチルシチジンおよび1−メチルシュードウリジンで完全修飾されている)、または3’UTRにシード配列を有しないが、miR−122配列を有するG−CSF mRNA(G−CSFシードレス;配列番号5028に示されるmRNA配列;配列に示されないおよそ140ヌクレオチド長のポリA尾部;5’キャップ、キャップ1;5−メチルシチジンおよび1−メチルシュードウリジンで完全修飾されている)を、一次ヒト肝細胞および一次ラット肝細胞について24ウェルプレートにて1ウェルあたり500ngのmRNA密度で、1ウェルあたり1μlのLipofectamine 2000を用いてトランスフェクトした。上澄みをトランスフェクションの16〜18時間後に回収し、G−CSFの発現をELISAによって測定し、結果を表47に示す。mRNAにおけるmir−122結合部位配列は、一次幹細胞でのG−CSF タンパク質発現を減衰させた。
表47.肝細胞におけるG−CSF発現
A.HeLa細胞
HeLa細胞を1ウェルあたり17,000個の細胞密度にて100μlの細胞培地(DMEM+10%FBS)に播種した。3’UTRにmiR−122配列を有しないG−CSF mRNA(G−CSF;配列番号5717に示されるマウス3’UTR mRNA配列;配列に示されていないおよそ140ヌクレオチド長のポリA尾部;5’キャップ、キャップ1;5−メチルシチジンおよび1−メチルシュードウリジンで完全修飾した;配列番号5716に示されるヒト3’UTR mRNA配列;配列に示されていないおよそ140ヌクレオチド長のポリA尾部;5’キャップ、キャップ1;5−メチルシチジンおよび1−メチルシュードウリジンで完全修飾した)、3’UTRにmiR−122配列を有する(G−CSF miR122;配列番号5024に示されるマウス3’UTR mRNA配列;配列に示されていないおよそ140ヌクレオチド長のポリA尾部;5’キャップ、キャップ1;5−メチルシチジンおよび1−メチルシュードウリジンで完全修飾した;配列番号5018に示されるヒト3’UTR mRNA配列;配列に示されていないおよそ140ヌクレオチド長のポリA尾部;5’キャップ、キャップ1;5−メチルシチジンおよび1−メチルシュードウリジンで完全修飾した)、3’UTRにmiR−122シード配列を有するG−CSF mRNA(G−CSFシード;配列番号5026に示されるマウス3’UTR mRNA配列;配列に示されていないおよそ140ヌクレオチド長のポリA尾部;5’キャップ、キャップ1;5−メチルシチジンおよび1−メチルシュードウリジンで完全修飾した;配列番号5020に示されるヒト3’UTR mRNA配列;配列に示されていないおよそ140ヌクレオチド長のポリA尾部;5’キャップ、キャップ1;5−メチルシチジンおよび1−メチルシュードウリジンで完全修飾した)、3’UTRにシード配列を有しないが、miR−122配列を有するG−CSF mRNA(G−CSFシードレス;配列番号5028に示されるマウス3’UTR mRNA配列;配列に示されていないおよそ140ヌクレオチド長のポリA尾部;5’キャップ、キャップ1;5−メチルシチジンおよび1−メチルシュードウリジンで完全修飾した;配列番号5022に示されるヒト3’UTR mRNA配列;配列に示されていないおよそ140ヌクレオチド長のポリA尾部;5’キャップ、キャップ1;5−メチルシチジンおよび1−メチルシュードウリジンで完全修飾した)、3’UTRにmiR−122配列を有しない第IX因子mRNA(FIX;配列番号5719に示されるマウス3’UTR mRNA配列;配列に示されていないおよそ140ヌクレオチド長のポリA尾部;5’キャップ、キャップ1;5−メチルシチジンおよび1−メチルシュードウリジンで完全修飾した;配列番号5718に示されるヒト3’UTR mRNA配列;配列に示されていないおよそ140ヌクレオチド長のポリA尾部;5’キャップ、キャップ1;5−メチルシチジンおよび1−メチルシュードウリジンで完全修飾した)、3’UTRにmiR−122配列を有する第IX因子mRNA(FIX miR122;配列番号5036に示されるマウス3’UTR mRNA配列;配列に示されていないおよそ140ヌクレオチド長のポリA尾部;5’キャップ、キャップ1;5−メチルシチジンおよび1−メチルシュードウリジンで完全修飾した;配列番号5030に示されるヒト3’UTR mRNA配列;配列に示されていないおよそ140ヌクレオチド長のポリA尾部;5’キャップ、キャップ1;5−メチルシチジンおよび1−メチルシュードウリジンで完全修飾した)、3’UTRにmiR−122シード配列を有する第IX因子mRNA(FIXシード;配列番号5038に示されるマウス3’UTR mRNA配列;配列に示されていないおよそ140ヌクレオチド長のポリA尾部;5’キャップ、キャップ1;5−メチルシチジンおよび1−メチルシュードウリジンで完全修飾した;配列番号5032に示されるヒト3’UTR mRNA配列;配列に示されていないおよそ140ヌクレオチド長のポリA尾部;5’キャップ、キャップ1;5−メチルシチジンおよび1−メチルシュードウリジンで完全修飾した)、または3’UTRにシード配列を有しないが、miR−122配列を有する第IX因子mRNA(FIXシードレス;配列番号5040に示されるマウス3’UTR
mRNA配列;配列に示されていないおよそ140ヌクレオチド長のポリA尾部;5’キャップ、キャップ1;5−メチルシチジンおよび1−メチルシュードウリジンで完全修飾した;配列番号5034に示されるヒト3’UTR mRNA配列;配列に示されていないおよそ140ヌクレオチド長のポリA尾部;5’キャップ、キャップ1;5−メチルシチジンおよび1−メチルシュードウリジンで完全修飾した)を、1ウェルあたり0.3μlのLipofectamine 2000によって1ウェルあたり75ngの濃度のmRNAで96ウェルプレートにおいてトランスフェクトした。上澄みをトランスフェクションの16〜18時間後に回収し、G−CSFの発現をELISAによって測定し、結果を表48に示す。
表48.HeLaにおける発現
一次ヒトまたはラット肝細胞を、1ウェルあたり350,000個の細胞密度にて500μlの細胞培地(InvitroGRO CPおよびInVitroGRO HI Medium+2.2%Torpedo Antibiotic Mix)に播種した。3’UTRにmiR−122配列を有しないG−CSF mRNA(G−CSF;配列番号5717に示されるマウス3’UTR mRNA配列;配列に示されないおよそ140ヌクレオチド長のポリA尾部;5’キャップ、キャップ1;5−メチルシチジンおよび1−メチルシュードウリジンで完全修飾されている;配列番号5716に示されるヒト3’UTR mRNA配列;配列に示されないおよそ140ヌクレオチド長のポリA尾部;5’キャップ、キャップ1;5−メチルシチジンおよび1−メチルシュードウリジンで完全修飾されている)、3’UTRにmiR−122配列を有するG−CSF mRNA(G−CSF miR122;配列番号5024に示されるマウス3’UTR mRNA配列;配列に示されないおよそ140ヌクレオチド長のポリA尾部;5’キャップ、キャップ1;5−メチルシチジンおよび1−メチルシュードウリジンで完全修飾されている;配列番号5018に示されるヒト3’UTR mRNA配列;配列に示されないおよそ140ヌクレオチド長のポリA尾部;5’キャップ、キャップ1;5−メチルシチジンおよび1−メチルシュードウリジンで完全修飾されている)、3’UTRにmiR−122シード配列を有するG−CSF mRNA(G−CSFシード;配列番号5026に示されるマウス3’UTR mRNA配列;配列に示されないおよそ140ヌクレオチド長のポリA尾部;5’キャップ、キャップ1;5−メチルシチジンおよび1−メチルシュードウリジンで完全修飾されている;配列番号5020に示されるヒト3’UTR mRNA配列;配列に示されないおよそ140ヌクレオチド長のポリA尾部;5’キャップ、キャップ1;5−メチルシチジンおよび1−メチルシュードウリジンで完全修飾されている)、3’UTRにシード配列を有しないが、miR−122配列を有するG−CSF mRNA(G−CSFシードレス;配列番号5028に示されるマウス3’UTR mRNA配列;配列に示されないおよそ140ヌクレオチド長のポリA尾部;5’キャップ、キャップ1;5−メチルシチジンおよび1−メチルシュードウリジンで完全修飾されている;配列番号5022に示されるヒト3’UTR mRNA配列;配列に示されないおよそ140ヌクレオチド長のポリA尾部;5’キャップ、キャップ1;5−メチルシチジンおよび1−メチルシュードウリジンで完全修飾されている)、3’UTRにmiR−122配列を有しない第IX因子mRNA(FIX;配列番号5719に示されるマウス3’UTR mRNA配列;配列に示されないおよそ140ヌクレオチド長のポリA尾部;5’キャップ、キャップ1;5−メチルシチジンおよび1−メチルシュードウリジンで完全修飾されている;配列番号5718に示されるヒト3’UTR mRNA配列;配列に示されないおよそ140ヌクレオチド長のポリA尾部;5’キャップ、キャップ1;5−メチルシチジンおよび1−メチルシュードウリジンで完全修飾されている)、3’UTRにmiR−122配列を有する第IX因子mRNA(FIX miR122;配列番号5036に示されるマウス3’UTR mRNA配列;配列に示されないおよそ140ヌクレオチド長のポリA尾部;5’キャップ、キャップ1;5−メチルシチジンおよび1−メチルシュードウリジンで完全修飾されている;配列番号5030に示されるヒト3’UTR mRNA配列;配列に示されないおよそ140ヌクレオチド長のポリA尾部;5’キャップ、キャップ1;5−メチルシチジンおよび1−メチルシュードウリジンで完全修飾されている)、3’UTRにmiR−122シード配列を有する第IX因子mRNA(FIXシード;配列番号5038に示されるマウス3’UTR mRNA配列;配列に示されないおよそ140ヌクレオチド長のポリA尾部;5’キャップ、キャップ1;5−メチルシチジンおよび1−メチルシュードウリジンで完全修飾されている;配列番号5032に示されるヒト3’UTR mRNA配列;配列に示されないおよそ140ヌクレオチド長のポリA尾部;5’キャップ、キャップ1;5−メチルシチジンおよび1−メチルシュードウリジンで完全修飾されている)、または3’UTRにシード配列を有しないが、miR−122配列を有する第IX因子mRNA(FIXシードレス;配列番号5040に示されるマウス3’UTR mRNA配列;配列に示されないおよそ140ヌクレオチド長のポリA尾部;5’キャップ、キャップ1;5−メチルシチジンおよび1−メチルシュードウリジンで完全修飾されている;配列番号5034に示されるヒト3’UTR mRNA配列;配列に示されないおよそ140ヌクレオチド長のポリA尾部;5’キャップ、キャップ1;5−メチルシチジンおよび1−メチルシュードウリジンで完全修飾されている)を、一次ヒト肝細胞および一次ラット肝細胞について24ウェルプレートにて1ウェルあたり500ngの濃度で、1ウェルあたり1μlのLipofectamine 2000を用いてトランスフェクトした。上澄みを、トランスフェクションの24時間、48時間、72時間後に回収し、G−CSFの発現および第IX因子をELISAによって測定し、結果を表49に示す。mRNAにおけるmir−122結合部位配列は、一次肝細胞におけるG−CSFおよび第IX因子タンパク質発現を減衰させた。
表49.肝細胞におけるG−CSF発現
A.miR−122の基準レベル
ヒト肝細胞、ラット肝細胞、ヒト肝細胞癌細胞(Hep3B)、およびHeLa細胞におけるmir−122の基準レベルを、TAQMAN(商標)分析によって説明書を用いて決定した。レベルをU6に正規化し、結果を表50に示す。
表50.様々な細胞型におけるmiR−122濃度
一次ヒト肝細胞を1ウェルあたり50,000個の細胞密度にて100μlの細胞培地(InvitroGRO CPおよびInVitroGRO HI Medium+2.2%Torpedo Antibiotic Mix)に播種し、Hep3B細胞を1ウェルあたり20,000個の細胞密度にて100μlの細胞培地(DMEM+10%FBS)に播種した。3’UTRにmiR−122配列を有しないG−CSF mRNA(G−CSF;配列番号5745に示されるmRNA配列;配列に示されないおよそ140ヌクレオチド長のポリA尾部;5’キャップ、キャップ1;5−メチルシチジンおよび1−メチルシュードウリジンで完全修飾されている)、3’UTRにmiR−122配列を有するG−CSF mRNA(G−CSF miR122;配列番号5018に示されるmRNA配列;配列に示されないおよそ140ヌクレオチド長のポリA尾部;5’キャップ、キャップ1;5−メチルシチジンおよび1−メチルシュードウリジンで完全修飾されている)、3’UTRにmiR−122シード配列を有するG−CSF mRNA(G−CSFシード;配列番号5020に示されるmRNA配列;配列に示されないおよそ140ヌクレオチド長のポリA尾部;5’キャップ、キャップ1;5−メチルシチジンおよび1−メチルシュードウリジンで完全修飾されている)、または3’UTRにシード配列を有しないが、miR−122配列を有するG−CSF mRNA(G−CSFシードレス;配列番号5022に示されるmRNA配列;配列に示されないおよそ140ヌクレオチド長のポリA尾部;5’キャップ、キャップ1;5−メチルシチジンおよび1−メチルシュードウリジンで完全修飾されている)を、1ウェルあたり0.3μlのLipofectamine 2000によって1ウェルあたり75ngの濃度のmRNAで96ウェルプレートにおいて、一次ヒト肝細胞およびHep3B細胞についてトランスフェクトした。上澄みを、トランスフェクションの24時間、48時間、72時間後に回収し、G−CSFの発現をELISAによって測定し、結果を表51に示す。mRNAにおけるmir−122結合部位配列は、一次ヒト肝細胞におけるG−CSFタンパク質発現を減衰させたが、Hep3B細胞におけるG−CSFタンパク質発現は減衰させなかった。
表51.G−CSF発現
A.miR−143 3pの基準レベル
RAW264.7細胞およびHeLa細胞におけるのmiR−142 3p基準レベルを、TAQMAN(商標)分析によって説明書を用いて決定した。レベルをU6に正規化し、結果を表52に示す。
表52.様々な細胞型におけるmiR−142 3p濃度
HeLa細胞を1ウェルあたり17,000個の細胞密度にて100μlの細胞培地(DMEM+10%FBS)に播種し、RAW264.71をウェルあたり20,000個の細胞密度にて100μlの細胞培地(DMEM+10%FBS)に播種した。3’UTRにmiR−142 3p配列を有しないG−CSF mRNA(G−CSF;配列番号5749に示されるmRNA配列;配列に示されないおよそ140ヌクレオチド長のポリA尾部;5’キャップ、キャップ1;5−メチルシチジンおよび1−メチルシュードウリジンで完全修飾されている)、3’UTRにmiR−142 3p配列を有するG−CSF mRNA(G−CSF miR142 3p;配列番号5750に示されるmRNA配列;配列に示されないおよそ140ヌクレオチド長のポリA尾部;5’キャップ、キャップ1;5−メチルシチジンおよび1−メチルシュードウリジンで完全修飾されている)、3’UTRにmiR−142 3pシード配列を有するG−CSF mRNA(G−CSFシード;配列番号5751に示されるmRNA配列;配列に示されないおよそ140ヌクレオチド長のポリA尾部;5’キャップ、キャップ1;5−メチルシチジンおよび1−メチルシュードウリジンで完全修飾されている)、または3’UTRにシード配列を有しないが、miR−142 3p配列を有する(G−CSFシードレス;配列番号5752に示されるmRNA配列;配列に示されないおよそ140ヌクレオチド長のポリA尾部;5’キャップ、キャップ1;5−メチルシチジンおよび1−メチルシュードウリジンで完全修飾されている)を、1ウェルあたり0.3μlのLipofectamine 2000によって1ウェルあたり75ngの濃度のmRNAで96ウェルプレートにおいて、RAW264.7細胞についてトランスフェクトした。上澄みをトランスフェクションの16〜18時間後に回収し、G−CSFの発現をELISAによって測定し、結果を表53に示す。G−CSFにおけるmiR−142 3p部位はRAW264.7細胞においてG−CSF発現を下方制御すると示された。
表53.発現
RAW264.7細胞を1ウェルあたり6,000個の細胞密度にて100μlの細胞培地(DMEM+10%FBS)に播種した。3’UTRにmiR−142 3p配列を有しないG−CSF mRNA(G−CSF;配列番号5749に示されるmRNA配列;配列に示されないおよそ140ヌクレオチド長のポリA尾部;5’キャップ、キャップ1;5−メチルシチジンおよび1−メチルシュードウリジンで完全修飾されている)、3’UTRにmiR−142 3p配列を有するG−CSF mRNA(G−CSF miR142 3p;配列番号5750に示されるmRNA配列;配列に示されないおよそ140ヌクレオチド長のポリA尾部;5’キャップ、キャップ1;5−メチルシチジンおよび1−メチルシュードウリジンで完全修飾されている)、3’UTRにmiR−142 3pシード配列を有するG−CSF mRNA(G−CSFシード;配列番号5751に示されるmRNA配列;配列に示されないおよそ140ヌクレオチド長のポリA尾部;5’キャップ、キャップ1;5−メチルシチジンおよび1−メチルシュードウリジンで完全修飾されている)、または3’UTRにシード配列を有しないが、miR−142 3p配列を有するG−CSF mRNA(G−CSFシードレス;配列番号5752に示されるmRNA配列;配列に示されないおよそ140ヌクレオチド長のポリA尾部;5’キャップ、キャップ1;5−メチルシチジンおよび1−メチルシュードウリジンで完全修飾されている)を、1ウェルあたり0.3μlのLipofectamine 2000によって1ウェルあたり75ngの濃度のmRNAで96ウェルプレートにおいてトランスフェクトした。上澄みを、トランスフェクションの24時間、48時間、72時間後に回収し、G−CSFの発現をELISAによって測定し、結果を表54に示す。mRNAにおけるmir−142 3p結合部位配列は、時間経過と共にRAW264.7細胞におけるG−CSF発現の強い抑制を示した。
表54.G−CSF発現
末梢血単核球(PBMC)を1ウェルあたり15,000個の細胞密度にて100μlの細胞培地(DMEM+10%FBS、トランスフェクション後に10%FBSを添加)に播種した。3’UTRにmiR−142 3p配列を有するG−CSF mRNA(G−CSF miR142 3p;配列番号5750に示されるmRNA配列;配列に示されていないおよそ140ヌクレオチド長のポリA尾部肝細胞;5’キャップ、キャップ1;5−メチルシチジンおよび1−メチルシュードウリジンで完全修飾した)、3’UTRにmiR−142 3pシード配列を有する(G−CSFシード;配列番号5751に示されるmRNA配列;配列に示されていないおよそ140ヌクレオチド長のポリA尾部肝細胞;5’キャップ、キャップ1;5−メチルシチジンおよび1−メチルシュードウリジンで完全修飾した)、または3’UTRにシード配列を有しないが、miR−142 3p配列を有するG−CSF mRNA(G−CSFシードレス;配列番号5752に示される配列;配列に示されていないおよそ140ヌクレオチド長のポリA尾部肝細胞;5’キャップ、キャップ1;5−メチルシチジンおよび1−メチルシュードウリジンで完全修飾した)を、1ウェルあたり0.4μlのLipofectamine 2000によって1ウェルあたり500ngの濃度のmRNAで96ウェルプレートにおいて、2人または3人のドナーについて3重にトランスフェクトした。上澄みをトランスフェクションの24時間後に回収し、G−CSFの発現をELISAによって測定した。2人のドナーについての結果を表55に示し、3人のドナーについての結果を表56に示す。mRNAにおけるmir−142 3p結合部位配列は、ヒトPBMCにおけるG−CSF発現の下方制御を示した。
表55.発現PBMC(2人のドナー)
A.BALB/Cヌードマウス
BALB/cヌードマウスに、miR−122結合部位(「非標的化mRNA」;配列番号5753に示されるmRNA配列;配列に示されていないおよそ140ヌクレオチド長のポリA尾部肝細胞;5’キャップ、キャップ1;5−メチルシチジンおよび1−メチルシュードウリジンで完全修飾されている)を有しない、表57に記載の脂質ナノ粒子中に処方された0.1mg/kgのルシフェラーゼ修飾mRNA、または表58に記載の脂質ナノ粒子中に処方された3’UTRにmiR−122結合部位を有するルシフェラーゼ修飾mRNA(「miR−122標的化mRNA」;配列番号5754に示されるmRNA配列;配列に示されていないおよそ140ヌクレオチド長のポリA尾部肝細胞;5’キャップ、キャップ1;5−メチルシチジンおよび1−メチルシュードウリジンで完全修飾されている)を静脈内に注射した。表57.非標的化mRNAに対する脂質ナノ粒子
表59.操作されたmiR122結合部位によって修飾された修飾mRNAのインビボ発現
BALB/cヌードマウスに2x106個の肝細胞癌Hep3B細胞を肝臓内に埋め込み、得られた正所性腫瘍を24日間成長させた。その後、腫瘍担持マウスに、表57または表58(上記)に記載の、miR−122結合部位(「非標的化mRNA」;配列番号5753に示されるmRNA配列;配列に示されていないおよそ140ヌクレオチド長のポリA尾部肝細胞;5’キャップ、キャップ1;5−メチルシチジンおよび1−メチルシュードウリジンで完全修飾されている)を有しない、表57に記載の脂質ナノ粒子中に処方された0.1mg/kgのルシフェラーゼ修飾mRNA、または表58に記載の脂質ナノ粒子中に処方された3’UTRにmiR−122結合部位を有するルシフェラーゼ修飾mRNA(「miR−122標的化mRNA」;配列番号5754に示されるmRNA配列;配列に示されていないおよそ140ヌクレオチド長のポリA尾部肝細胞;5’キャップ、キャップ1;5−メチルシチジンおよび1−メチルシュードウリジンで完全修飾されている)を静脈内に注射した。処置の24時間後、動物に麻酔をかけ、ルシフェラーゼ基質D−ルシフェリンを注射し、生きている動物からの生物発光画像(BLI)をIVISイメージャーにて20分後に評価した。隣接する正常肝臓と比較して所性腫瘍からのシグナルを定量し、脂質ナノ粒子によって全身へと送達されたmiR−122標的化mRNAは、正常な肝臓と比べて腫瘍内で2倍を超える濃縮を達成した。
実施例50.修飾核酸におけるコザック配列の影響
HeLa細胞を1ウェルあたり15,000個の細胞密度にて100μlの細胞培地(DMEM+10%FBS)に播種した。コザック配列を有するG−CSF mRNA(G−CSFコザック;配列番号5716に示されるmRNA配列;配列に示されていないおよそ140ヌクレオチド長のポリA尾部;5’キャップ、キャップ1;5−メチルシチジンおよび1−メチルシュードウリジンで完全修飾した)、コザック配列を有しないG−CSF mRNA(コザックなしG−CSF;配列番号5008に示されるmRNA配列;配列に示されていないおよそ140ヌクレオチド長のポリA尾部;5’キャップ、キャップ1;5−メチルシチジンおよび1−メチルシュードウリジンで完全修飾した)、開始コドン上流にある−3位のAがTに変換されたG−CSF mRNA(G−CSF 3t5’;配列番号5755(表60)に示されるmRNA配列;配列に示されていないおよそ140ヌクレオチド長のポリA尾部;5’キャップ、キャップ1;5−メチルシチジンおよび1−メチルシュードウリジンで完全修飾した)、開始コドンの上流にある−9位のAがTに変換されたG−CSF mRNA(G−CSF 9t5’;配列番号5756(表60)に示されるmRNA配列;配列に示されていないおよそ140ヌクレオチド長のポリA尾部;5’キャップ、キャップ1;5−メチルシチジンおよび1−メチルシュードウリジンで完全修飾した)、または開始コドン(AGAGCCACC)の9ヌクレオチド長上流が欠失したG−CSF mRNA(G−CSF 9del5’;配列番号5757(表60)に示されるmRNA配列;配列に示されていないおよそ140ヌクレオチド長のポリA尾部;5’キャップ、キャップ1;5−メチルシチジンおよび1−メチルシュードウリジンで完全修飾した)、および1ウェルあたり37.5ngの濃度で96ウェルプレートにおいて3重でトランスフェクトした。トランスフェクションの24時間、48時間、および72時間後に、上澄みを回収し、G−CSFの発現をELISAによって測定し、結果を表61に示す。表60において、各配列の開始コドンには下線を引いている。表60において、G−CSF 3t5’について、開始コドン上流にある−3位のAは太字にし下線を引いてあり、G−CSF 9t5’について、開始コドンの上流にある−9位のAは太字にし下線を引いてある。
表60.G−CSF配列
BJ線維芽細胞T細胞を、1ウェルあたり100,000個の細胞密度にて500μlの細胞培地(DMEM+10%FBS)に播種した。合成5’UTRを有するG−CSF
mRNA(G−CSF;配列番号5716に示されるmRNA配列;配列に示されていないおよそ140ヌクレオチド長のポリA尾部;5’キャップ、キャップ1;5−メチルシチジンおよび1−メチルシュードウリジンで完全修飾した)、またはGTX遺伝子のIRESから18ヌクレオチド長配列の5回の縦列反復を伴う5’UTRを含有するG−CSF mRNA(GTX G−CSF;配列番号5758(表62)に示されるmRNA配列;配列に示されていないおよそ140ヌクレオチド長のポリA尾部;5’キャップ、キャップ1;5−メチルシチジンおよび1−メチルシュードウリジンで完全修飾した)、および1ウェルあたり250ngの濃度で24ウェルプレートにおいて3重でトランスフェクトした。トランスフェクションの24時間、48時間、および72時間後に、上澄みを回収し、G−CSFの発現をELISAによって測定し、結果を表63に示す。表62において、各配列の開始コドンには下線を引いてあり、GTX遺伝子のIRESからの18ヌクレオチド長配列の5回の縦列反復は太字にしてあり、18ヌクレオチド長配列の1回目、3回目、および5回目の縦列反復にもまた下線を引いてある。
表62.GTX G−CSF配列
BJ線維芽細胞T細胞を1ウェルあたり100,000個の細胞密度にて500μlの細胞培地(DMEM+10%FBS)に播種した。合成5’UTRを有するG−CSF mRNA(G−CSF;配列番号5716に示されるmRNA配列;配列に示されていないおよそ140ヌクレオチド長のポリA尾部;5’キャップ、キャップ1;1−メチルシュードウリジンで完全修飾した)、またはGTX遺伝子のIRESから18ヌクレオチド長配列の5回の縦列反復を伴う5’UTRを含有するG−CSF mRNA(Gtx G−CSF;配列番号5758(表62)に示されるmRNA配列;配列に示されていないおよそ140ヌクレオチド長のポリA尾部;5’キャップ、キャップ1;1−メチルシュードウリジンで完全修飾した)、および1ウェルあたり250ngの濃度で24ウェルプレートにおいて3重でトランスフェクトした。トランスフェクションの24時間、48時間、および72時間後に、上澄みを回収し、G−CSFの発現をELISAによって測定し、結果を表64に示す。
表64.5’UTR
修飾核酸における5’UTRの修飾の影響を試験するために、メスのBalb/cマウス(n=3;12週齢;Harlan Laboratories(マサチューセッツ州サウスイーストン))をリポプレックス化mRNAで処置した。
表65.インビボでのG−CSFコザック発現
修飾核酸における5’UTRの修飾の影響を試験するために、メスのBalb/cマウス(n=3;12週齢;Harlan Laboratories(マサチューセッツ州サウスイーストン))をリポプレックス化mRNAで処置した。
表66.インビボでのGTX G−CSF発現
修飾核酸における5’UTRの修飾の影響を試験するために、メスのBalb/cマウス(n=3;12週齢;Harlan Laboratories(マサチューセッツ州サウスイーストン))をリポプレックス化mRNAで処置した。
SafetyGlideインスリンシリンジ)を備える無菌の1mlシリンジ(BD Falcon)に移した。2μgのリポプレックス化mRNAを含有する100μlの尾静脈内注射の前に、Balb/Cマウスを太陽灯の下に5分間置いた。注射の6時間後、マウスを麻酔にかけ、血清採集のために心穿刺によって出血させた。その後、血清試料にG−CSF ELISA(R&Dシステムズ、カタログ番号SCS50)を実施し、結果を表67に示す。GTX遺伝子のIRESから18ヌクレオチド長配列の5回の縦列反復を伴う5’UTRを含有するG−CSF mRNAは、合成UTRを有するG−CSFと比べてより高いG−CSF発現レベルを6時間の時点で有した。
表67.インビボでのGTX G−CSF発現
使用した単語は、限定ではなく説明のための単語であり、その広範な態様において本発明の真の範囲と精神から逸脱することなく、添付の特許請求の範囲内で変更が行われ得ることが理解される。
Claims (56)
- 合成単離末端最適化mRNAであって、
(a)目的とするポリペプチドをコードする、結合ヌクレオシドの第1の領域と、
(b)少なくとも1つの翻訳エンハンサー要素(TEE)を含む前記第1の領域に対して5’側に位置する、第1の末端領域と、
(c)前記第1の領域に対して3’側に位置する第2の末端領域と、
(d)結合ヌクレオシドの3’尾部と、
を含む、合成単離末端最適化mRNA。 - 前記領域(a)〜(d)のいずれかが少なくとも1つの修飾ヌクレオシドを含む、請求項1記載の合成単離末端最適化mRNA。
- 前記少なくとも1つの修飾ヌクレオシドがシュードウリジン類似体からなる群から選択される、請求項2記載の合成単離末端最適化mRNA。
- 前記シュードウリジン類似体が1−メチルシュードウリジンである、請求項3記載の合成単離末端最適化mRNA。
- 修飾ヌクレオシド5−メチルシチジンをさらに含む、請求項4記載の合成単離末端最適化mRNA。
- 前記合成単離末端最適化mRNAの少なくとも1つの領域がコドン最適化されている、請求項1記載の合成単離末端最適化mRNA。
- 連結ヌクレオシドの前記第1の領域がコドン最適化されている、請求項6記載の合成単離末端最適化mRNA。
- 前記第1の末端領域が5’非翻訳領域(UTR)を含む、請求項1記載の合成単離末端最適化mRNA。
- 前記5’UTRが、前記目的とするコードされたポリペプチドの天然5’UTRである、請求項8記載の合成単離末端最適化mRNA。
- 前記5’UTRが、コザック配列および配列内リボソーム侵入部位(IRES)からなる群から選択される翻訳開始配列を含む、請求項9記載の合成単離末端最適化mRNA。
- 前記5’UTRが構造化UTRである、請求項9記載の合成単離末端最適化mRNA。
- 前記第1の末端領域が少なくとも1つの5’キャップ構造を含む、請求項1記載の合成単離末端最適化mRNA。
- 前記少なくとも1つの5’キャップ構造が、Cap0、Cap1、ARCA、イノシン、N1−メチル−グアノシン、2’フルオロ−グアノシン、7−デアザ−グアノシン、8−オキソ−グアノシン、2−アミノ−グアノシン、LNA−グアノシン、2−アジド−グアノシン、Cap2、Cap4、およびCAP−003〜CAP−225からなる群から選択される、請求項12記載の合成単離末端最適化mRNA。
- 前記TEEがTEE−001〜TEE−705からなる群から選択される、請求項1記載の合成単離末端最適化mRNA。
- 前記第2の末端領域が、少なくとも1つのマイクロRNA結合部位または前記マイクロRNA結合部位のシードを含む、請求項1記載の合成単離末端最適化mRNA。
- 前記少なくとも1つのマイクロRNA結合部位または前記マイクロRNA結合部位のシードが、免疫細胞特異的マイクロRNAのためである、請求項15記載の合成単離末端最適化mRNA。
- 前記免疫細胞特異的マイクロRNAが、mir−122、miR−142−3p、miR−142−5p、miR−146a、およびmiR−146bからなる群から選択される、請求項16記載の合成単離末端最適化mRNA。
- 連結ヌクレオシドの前記3’尾部領域が鎖終結ヌクレオシドをさらに含む、請求項1記載の合成単離末端最適化mRNA。
- 前記鎖終結ヌクレオシドが、3’−デオキシアデノシン(コルジセピン)、3’−デオキシウリジン、3’−デオキシシトシン、3’−デオキシグアノシン、3’−デオキシチミン、2’,3’−ジデオキシヌクレオシド、2’,3’−ジデオキシアデノシン、2’,3’−ジデオキシウリジン、2’,3’−ジデオキシシトシン、2’,3’−ジデオキシグアノシン、2’,3’−ジデオキシチミン、2’−デオキシヌクレオシド、および−O−メチルヌクレオシドからなる群から選択される、請求項18記載の合成単離末端最適化mRNA。
- 前記3’尾部領域がステムループ配列を含む、請求項1記載の合成単離末端最適化mRNA。
- 合成単離末端最適化mRNAであって、
(a)目的とするポリペプチドをコードする連結ヌクレオシドの第1の領域と、
(b)前記第1の領域に対して5’側に位置する第1末端領域と、
(c)前記第1の領域に対して3’側に位置する第2末端領域と、
(d)連結ヌクレオシドの3’尾部領域と、
(e)前記合成単離末端最適化mRNAに対して3’側に位置する少なくとも1つの鎖終結ヌクレオシドと、
を含む、合成単離末端最適化mRNA。 - 前記領域(a)〜(e)のいずれかが少なくとも1つの修飾ヌクレオシドを含む、請求項21記載の合成単離末端最適化mRNA。
- 前記少なくとも1つの修飾ヌクレオシドがシュードウリジン類似体からなる群から選択される、請求項22記載の合成単離末端最適化mRNA。
- 前記シュードウリジン類似体が1−メチルシュードウリジンである、請求項23記載の合成単離末端最適化mRNA。
- 修飾ヌクレオシド5−メチルシチジンをさらに含む、請求項24記載の合成単離末端最適化mRNA。
- 前記合成単離末端最適化mRNAの少なくとも1つの領域がコドン最適化されている、請求項21記載の合成単離末端最適化mRNA。
- 連結ヌクレオシドの前記第1の領域がコドン最適化されている、請求項26記載の合成単離末端最適化mRNA。
- 前記第1の末端領域が5’非翻訳領域(UTR)を含む、請求項21記載の合成単離末端最適化mRNA。
- 前記5’UTRが、前記目的とするコードされたポリペプチドの前記天然5’UTRである、請求項28記載の合成単離末端最適化mRNA。
- 前記5’UTRが構造化UTRである、請求項28記載の合成単離末端最適化mRNA。
- 前記第1の末端領域が少なくとも1つの5’キャップ構造を含む、請求項21記載の合成単離末端最適化mRNA。
- 前記少なくとも1つの5’キャップ構造が、Cap0、Cap1、ARCA、イノシン、N1−メチル−グアノシン、2’フルオロ−グアノシン、7−デアザ−グアノシン、8−オキソ−グアノシン、2−アミノ−グアノシン、LNA−グアノシン、2−アジド−グアノシン、Cap2、Cap4、およびCAP−003〜CAP−225からなる群から選択される、請求項31記載の合成単離末端最適化mRNA。
- 前記5’UTRが、コザック配列および配列内リボソーム侵入部位(IRES)からなる群から選択される翻訳開始配列を含む、請求項21記載の合成単離末端最適化mRNA。
- 前記少なくとも1つの鎖終結ヌクレオシドが、3’−デオキシアデノシン(コルジセピン)、3’−デオキシウリジン、3’−デオキシシトシン、3’−デオキシグアノシン、3’−デオキシチミン、2’,3’−ジデオキシヌクレオシド、2’,3’−ジデオキシアデノシン、2’,3’−ジデオキシウリジン、2’,3’−ジデオキシシトシン、2’,3’−ジデオキシグアノシン、2’,3’−ジデオキシチミン、2’−デオキシヌクレオシド、および−O−メチルヌクレオシドからなる群から選択される、請求項21記載の合成単離末端最適化mRNA。
- 前記3’尾部領域がステムループ配列を含む、請求項21記載の合成単離末端最適化mRNA。
- 生物体中において抗原介在性免疫応答を減少させる方法であって、前記生物体と合成単離末端最適化mRNAとを接触させることを含み、前記合成単離末端最適化mRNAは、
(a)前記抗原をコードする連結ヌクレオシドの第1の領域と、
(b)前記第1の領域に対して5’側に位置する第1の末端領域と、
(c)少なくとも1つのマイクロRNA結合部位または前記マイクロRNA結合部位のシードを含む、前記第1の領域に対して3’側に位置する第2の末端領域と、
(d)連結ヌクレオシドの3’尾部領域と、
を含む、生物体中において抗原介在性免疫応答を減少させる方法。 - 前記領域(a)〜(d)のいずれかが少なくとも1つの修飾ヌクレオシドを含む、請求項36に記載の方法。
- 前記少なくとも1つの修飾ヌクレオシドがシュードウリジン類似体からなる群から選択される、請求項37記載の方法。
- 前記シュードウリジン類似体が1−メチルシュードウリジンである、請求項38記載の方法。
- 前記合成単離末端最適化mRNAが前記修飾ヌクレオシド5−メチルシチジンをさらに含む、請求項39記載の方法。
- 前記領域(a)〜(d)のいずれかがコドン最適化されている、請求項36記載の方法。
- 連結ヌクレオシドの前記第1の領域がコドン最適化されている、請求項41記載の方法。
- 前記第1の末端領域が5’非翻訳領域(UTR)を含む、請求項36記載の方法。
- 前記5’UTRが、前記コードされた抗原の天然5’UTRである、請求項42記載の方法。
- 前記5’UTRが構造化UTRである、請求項43記載の方法。
- 前記5’UTRが、コザック配列、配列内リボソーム侵入部位(IRES)、またはその断片からなる群から選択される少なくとも1つの翻訳開始配列を含む、請求項43記載の方法。
- 前記5’UTRが少なくとも1つのIRESの断片を含む、請求項46記載の方法。
- 前記5’UTRが5つのIRESの断片を含む、請求項47記載の方法。
- 前記第1の末端領域が少なくとも1つの5’キャップ構造を含む、請求項36記載の方法。
- 前記少なくとも1つの5’キャップ構造が、Cap0、Cap1、ARCA、イノシン、N1−メチル−グアノシン、2’フルオロ−グアノシン、7−デアザ−グアノシン、8−オキソ−グアノシン、2−アミノ−グアノシン、LNA−グアノシン、2−アジド−グアノシン、Cap2、Cap4、およびCAP−003〜CAP−225からなる群から選択される、請求項49記載の方法。
- 前記少なくとも1つのマイクロRNA結合部位または前記マイクロRNA結合部位のシードが、免疫細胞特異的マイクロRNAである、請求項36記載の方法。
- 前記免疫細胞特異的マイクロRNAが、mir−122、miR−142−3p、miR−142−5p、miR−146a、およびmiR−146bからなる群から選択される、請求項50記載の方法。
- 第1の末端領域が少なくとも1つの翻訳エンハンサー要素(TEE)配列を含む、請求項36記載の方法。
- 前記3’尾部領域が鎖終結ヌクレオシドを含む、請求項36記載の方法。
- 前期鎖終結ヌクレオシドが、3’−デオキシアデノシン(コルジセピン)、3’−デオキシウリジン、3’−デオキシシトシン、3’−デオキシグアノシン、3’−デオキシチミン、2’,3’−ジデオキシヌクレオシド、2’,3’−ジデオキシアデノシン、2’,3’−ジデオキシウリジン、2’,3’−ジデオキシシトシン、2’,3’−ジデオキシグアノシン、2’,3’−ジデオキシチミン、2’−デオキシヌクレオシド、および−O−メチルヌクレオシドからなる群から選択される、請求項54記載の方法。
- 前記3’尾部領域がステムループ配列を含む、請求項36記載の方法。
Applications Claiming Priority (20)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US201261729933P | 2012-11-26 | 2012-11-26 | |
US61/729,933 | 2012-11-26 | ||
US201261737224P | 2012-12-14 | 2012-12-14 | |
US61/737,224 | 2012-12-14 | ||
US201361758921P | 2013-01-31 | 2013-01-31 | |
US61/758,921 | 2013-01-31 | ||
US201361775509P | 2013-03-09 | 2013-03-09 | |
US61/775,509 | 2013-03-09 | ||
US201361781139P | 2013-03-14 | 2013-03-14 | |
US61/781,139 | 2013-03-14 | ||
US201361829359P | 2013-05-31 | 2013-05-31 | |
US201361829372P | 2013-05-31 | 2013-05-31 | |
US61/829,359 | 2013-05-31 | ||
US61/829,372 | 2013-05-31 | ||
US201361839903P | 2013-06-27 | 2013-06-27 | |
US61/839,903 | 2013-06-27 | ||
US201361842709P | 2013-07-03 | 2013-07-03 | |
US61/842,709 | 2013-07-03 | ||
US201361857436P | 2013-07-23 | 2013-07-23 | |
US61/857,436 | 2013-07-23 |
Related Parent Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2017093692A Division JP6377804B2 (ja) | 2012-11-26 | 2017-05-10 | 末端修飾rna |
Related Child Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2020026728A Division JP7047002B2 (ja) | 2012-11-26 | 2020-02-20 | 化学修飾mRNA |
Publications (3)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2018164458A true JP2018164458A (ja) | 2018-10-25 |
JP2018164458A5 JP2018164458A5 (ja) | 2019-03-22 |
JP6666391B2 JP6666391B2 (ja) | 2020-03-13 |
Family
ID=49447811
Family Applications (5)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2015544065A Active JP6144355B2 (ja) | 2012-11-26 | 2013-10-02 | 化学修飾mRNA |
JP2017093692A Active JP6377804B2 (ja) | 2012-11-26 | 2017-05-10 | 末端修飾rna |
JP2018138949A Active JP6666391B2 (ja) | 2012-11-26 | 2018-07-25 | 化学修飾mRNA |
JP2020026728A Active JP7047002B2 (ja) | 2012-11-26 | 2020-02-20 | 化学修飾mRNA |
JP2022046812A Pending JP2022093332A (ja) | 2012-11-26 | 2022-03-23 | 化学修飾mRNA |
Family Applications Before (2)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2015544065A Active JP6144355B2 (ja) | 2012-11-26 | 2013-10-02 | 化学修飾mRNA |
JP2017093692A Active JP6377804B2 (ja) | 2012-11-26 | 2017-05-10 | 末端修飾rna |
Family Applications After (2)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2020026728A Active JP7047002B2 (ja) | 2012-11-26 | 2020-02-20 | 化学修飾mRNA |
JP2022046812A Pending JP2022093332A (ja) | 2012-11-26 | 2022-03-23 | 化学修飾mRNA |
Country Status (15)
Country | Link |
---|---|
US (4) | US9597380B2 (ja) |
EP (2) | EP4074834A1 (ja) |
JP (5) | JP6144355B2 (ja) |
AU (3) | AU2017202228B2 (ja) |
CA (1) | CA2892529C (ja) |
DK (1) | DK2922554T3 (ja) |
ES (1) | ES2921623T3 (ja) |
HK (1) | HK1214515A1 (ja) |
HR (1) | HRP20220607T1 (ja) |
LT (1) | LT2922554T (ja) |
PL (1) | PL2922554T3 (ja) |
PT (1) | PT2922554T (ja) |
RS (1) | RS63237B1 (ja) |
SI (1) | SI2922554T1 (ja) |
WO (1) | WO2014081507A1 (ja) |
Families Citing this family (260)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
DE10347710B4 (de) | 2003-10-14 | 2006-03-30 | Johannes-Gutenberg-Universität Mainz | Rekombinante Impfstoffe und deren Verwendung |
DE102005046490A1 (de) | 2005-09-28 | 2007-03-29 | Johannes-Gutenberg-Universität Mainz | Modifikationen von RNA, die zu einer erhöhten Transkriptstabilität und Translationseffizienz führen |
NZ700688A (en) | 2009-12-01 | 2016-02-26 | Shire Human Genetic Therapies | Delivery of mrna for the augmentation of proteins and enzymes in human genetic diseases |
DK3243526T3 (da) | 2010-07-06 | 2020-02-17 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | Levering af rna til at udløse flere immunsignalveje |
EP2590626B1 (en) | 2010-07-06 | 2015-10-28 | GlaxoSmithKline Biologicals SA | Liposomes with lipids having an advantageous pka-value for rna delivery |
WO2012006369A2 (en) | 2010-07-06 | 2012-01-12 | Novartis Ag | Immunisation of large mammals with low doses of rna |
US8822663B2 (en) | 2010-08-06 | 2014-09-02 | Moderna Therapeutics, Inc. | Engineered nucleic acids and methods of use thereof |
WO2012019630A1 (en) | 2010-08-13 | 2012-02-16 | Curevac Gmbh | Nucleic acid comprising or coding for a histone stem-loop and a poly(a) sequence or a polyadenylation signal for increasing the expression of an encoded protein |
EP4119155A1 (en) | 2010-08-31 | 2023-01-18 | GlaxoSmithKline Biologicals S.A. | Pegylated liposomes for delivery of immunogen-encoding rna |
HUE058896T2 (hu) | 2010-10-01 | 2022-09-28 | Modernatx Inc | N1-metil-pszeudo-uracilt tartalmazó ribonukleinsavak és azok felhasználásai |
TR201903651T4 (tr) | 2010-10-11 | 2019-04-22 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | Antijen uygulama platformları. |
US8853377B2 (en) | 2010-11-30 | 2014-10-07 | Shire Human Genetic Therapies, Inc. | mRNA for use in treatment of human genetic diseases |
US8710200B2 (en) | 2011-03-31 | 2014-04-29 | Moderna Therapeutics, Inc. | Engineered nucleic acids encoding a modified erythropoietin and their expression |
SI3892295T1 (sl) | 2011-05-24 | 2023-09-29 | BioNTech SE | Individualizirana cepiva proti raku |
JP6184945B2 (ja) | 2011-06-08 | 2017-08-23 | シャイアー ヒューマン ジェネティック セラピーズ インコーポレイテッド | mRNA送達のための脂質ナノ粒子組成物および方法 |
CA2840989A1 (en) | 2011-07-06 | 2013-01-10 | Novartis Ag | Immunogenic combination compositions and uses thereof |
US9464124B2 (en) | 2011-09-12 | 2016-10-11 | Moderna Therapeutics, Inc. | Engineered nucleic acids and methods of use thereof |
RS62993B1 (sr) | 2011-10-03 | 2022-03-31 | Modernatx Inc | Modifikovani nukleozidi, nukleotidi, i nukleinske kiseline, i njihove upotrebe |
CN104114572A (zh) | 2011-12-16 | 2014-10-22 | 现代治疗公司 | 经修饰的核苷、核苷酸和核酸组合物 |
WO2013120497A1 (en) | 2012-02-15 | 2013-08-22 | Curevac Gmbh | Nucleic acid comprising or coding for a histone stem-loop and a poly(a) sequence or a polyadenylation signal for increasing the expression of an encoded therapeutic protein |
WO2013120498A1 (en) | 2012-02-15 | 2013-08-22 | Curevac Gmbh | Nucleic acid comprising or coding for a histone stem-loop and a poly(a) sequence or a polyadenylation signal for increasing the expression of an encoded allergenic antigen or an autoimmune self-antigen |
WO2013120500A1 (en) | 2012-02-15 | 2013-08-22 | Curevac Gmbh | Nucleic acid comprising or coding for a histone stem-loop and a poly(a) sequence or a polyadenylation signal for increasing the expression of an encoded tumour antigen |
WO2013120499A1 (en) | 2012-02-15 | 2013-08-22 | Curevac Gmbh | Nucleic acid comprising or coding for a histone stem-loop and a poly (a) sequence or a polyadenylation signal for increasing the expression of an encoded pathogenic antigen |
US9458450B2 (en) | 2012-03-15 | 2016-10-04 | Flodesign Sonics, Inc. | Acoustophoretic separation technology using multi-dimensional standing waves |
US9752113B2 (en) | 2012-03-15 | 2017-09-05 | Flodesign Sonics, Inc. | Acoustic perfusion devices |
US9950282B2 (en) | 2012-03-15 | 2018-04-24 | Flodesign Sonics, Inc. | Electronic configuration and control for acoustic standing wave generation |
US10322949B2 (en) | 2012-03-15 | 2019-06-18 | Flodesign Sonics, Inc. | Transducer and reflector configurations for an acoustophoretic device |
US9745548B2 (en) | 2012-03-15 | 2017-08-29 | Flodesign Sonics, Inc. | Acoustic perfusion devices |
US10704021B2 (en) | 2012-03-15 | 2020-07-07 | Flodesign Sonics, Inc. | Acoustic perfusion devices |
US10967298B2 (en) | 2012-03-15 | 2021-04-06 | Flodesign Sonics, Inc. | Driver and control for variable impedence load |
US10689609B2 (en) | 2012-03-15 | 2020-06-23 | Flodesign Sonics, Inc. | Acoustic bioreactor processes |
WO2013143555A1 (en) | 2012-03-26 | 2013-10-03 | Biontech Ag | Rna formulation for immunotherapy |
MX358706B (es) | 2012-03-27 | 2018-08-31 | Curevac Ag | Moleculas de acido nucleico artificiales que comprenden un top 5´utr. |
DK3578659T3 (da) | 2012-03-27 | 2024-02-05 | CureVac SE | Kunstige nukelinsyremolekyler til forbedret protein- eller peptidekspression |
DE18200782T1 (de) | 2012-04-02 | 2021-10-21 | Modernatx, Inc. | Modifizierte polynukleotide zur herstellung von proteinen im zusammenhang mit erkrankungen beim menschen |
US9283287B2 (en) | 2012-04-02 | 2016-03-15 | Moderna Therapeutics, Inc. | Modified polynucleotides for the production of nuclear proteins |
US9303079B2 (en) | 2012-04-02 | 2016-04-05 | Moderna Therapeutics, Inc. | Modified polynucleotides for the production of cytoplasmic and cytoskeletal proteins |
US9572897B2 (en) | 2012-04-02 | 2017-02-21 | Modernatx, Inc. | Modified polynucleotides for the production of cytoplasmic and cytoskeletal proteins |
US10737953B2 (en) | 2012-04-20 | 2020-08-11 | Flodesign Sonics, Inc. | Acoustophoretic method for use in bioreactors |
EA201492055A1 (ru) | 2012-06-08 | 2015-11-30 | Шир Хьюман Дженетик Терапис, Инк. | ИНГАЛЯЦИОННАЯ ДОСТАВКА мРНК В НЕЛЕГОЧНЫЕ КЛЕТКИ-МИШЕНИ |
EP3536787A1 (en) | 2012-06-08 | 2019-09-11 | Translate Bio, Inc. | Nuclease resistant polynucleotides and uses thereof |
WO2014028429A2 (en) | 2012-08-14 | 2014-02-20 | Moderna Therapeutics, Inc. | Enzymes and polymerases for the synthesis of rna |
EP4074834A1 (en) * | 2012-11-26 | 2022-10-19 | ModernaTX, Inc. | Terminally modified rna |
WO2014082729A1 (en) | 2012-11-28 | 2014-06-05 | Biontech Ag | Individualized vaccines for cancer |
JP2016504050A (ja) | 2013-01-17 | 2016-02-12 | モデルナ セラピューティクス インコーポレイテッドModerna Therapeutics,Inc. | 細胞表現型の改変のためのシグナルセンサーポリヌクレオチド |
EP2968391A1 (en) | 2013-03-13 | 2016-01-20 | Moderna Therapeutics, Inc. | Long-lived polynucleotide molecules |
HUE055044T2 (hu) | 2013-03-14 | 2021-10-28 | Translate Bio Inc | MRNS-kódolt ellenanyagok bejuttatására szolgáló eljárások és készítmények |
EP2970955B1 (en) | 2013-03-14 | 2018-11-14 | Translate Bio, Inc. | Methods for purification of messenger rna |
EP2971010B1 (en) | 2013-03-14 | 2020-06-10 | ModernaTX, Inc. | Formulation and delivery of modified nucleoside, nucleotide, and nucleic acid compositions |
EA037922B1 (ru) | 2013-03-14 | 2021-06-07 | Шир Хьюман Дженетик Терапис, Инк. | мРНК CFTR И КОМПОЗИЦИИ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ МУКОВИСЦИДОЗА У МЛЕКОПИТАЮЩЕГО |
ES2795249T3 (es) | 2013-03-15 | 2020-11-23 | Translate Bio Inc | Mejora sinérgica de la administración de ácidos nucleicos a través de formulaciones mezcladas |
WO2014152027A1 (en) | 2013-03-15 | 2014-09-25 | Moderna Therapeutics, Inc. | Manufacturing methods for production of rna transcripts |
EP2971165A4 (en) | 2013-03-15 | 2016-11-23 | Moderna Therapeutics Inc | DISSOLUTION OF DNA FRAGMENTS IN MRNA MANUFACTURING METHODS |
US8980864B2 (en) | 2013-03-15 | 2015-03-17 | Moderna Therapeutics, Inc. | Compositions and methods of altering cholesterol levels |
WO2014144767A1 (en) | 2013-03-15 | 2014-09-18 | Moderna Therapeutics, Inc. | Ion exchange purification of mrna |
US11377470B2 (en) | 2013-03-15 | 2022-07-05 | Modernatx, Inc. | Ribonucleic acid purification |
WO2014180490A1 (en) | 2013-05-10 | 2014-11-13 | Biontech Ag | Predicting immunogenicity of t cell epitopes |
EP3971287A1 (en) | 2013-07-11 | 2022-03-23 | ModernaTX, Inc. | Compositions comprising synthetic polynucleotides encoding crispr related proteins and synthetic sgrnas and methods of use |
CA3160394C (en) | 2013-07-30 | 2023-11-07 | Genevant Sciences Gmbh | Block copolymers and their conjugates or complexes with oligonucleotides |
EP3041938A1 (en) | 2013-09-03 | 2016-07-13 | Moderna Therapeutics, Inc. | Circular polynucleotides |
US9745569B2 (en) | 2013-09-13 | 2017-08-29 | Flodesign Sonics, Inc. | System for generating high concentration factors for low cell density suspensions |
EP3052106A4 (en) | 2013-09-30 | 2017-07-19 | ModernaTX, Inc. | Polynucleotides encoding immune modulating polypeptides |
US10385088B2 (en) | 2013-10-02 | 2019-08-20 | Modernatx, Inc. | Polynucleotide molecules and uses thereof |
MX2016004249A (es) | 2013-10-03 | 2016-11-08 | Moderna Therapeutics Inc | Polinulcleotidos que codifican el receptor de lipoproteina de baja densidad. |
ES2954366T3 (es) | 2013-10-22 | 2023-11-21 | Translate Bio Inc | Terapia de ácido ribonucleico mensajero para la deficiencia de argininosuccinato sintetasa |
EP4036241A1 (en) | 2013-10-22 | 2022-08-03 | Translate Bio, Inc. | Cns delivery of mrna and uses thereof |
CA2928186A1 (en) | 2013-10-22 | 2015-04-30 | Shire Human Genetic Therapies, Inc. | Mrna therapy for phenylketonuria |
EP3060257B1 (en) | 2013-10-22 | 2021-02-24 | Translate Bio, Inc. | Lipid formulations for delivery of messenger rna |
US11225658B2 (en) * | 2013-12-05 | 2022-01-18 | New England Biolabs, Inc. | Enrichment and sequencing of RNA species |
US10428368B2 (en) * | 2013-12-05 | 2019-10-01 | New England Biolabs, Inc. | Methods for enriching for a population of RNA molecules |
JP6584414B2 (ja) | 2013-12-30 | 2019-10-02 | キュアバック アーゲー | 人工核酸分子 |
US11254951B2 (en) | 2014-12-30 | 2022-02-22 | Curevac Ag | Artificial nucleic acid molecules |
KR102399799B1 (ko) | 2013-12-30 | 2022-05-18 | 큐어백 아게 | 인공 핵산 분자 |
CN105939767B (zh) | 2014-01-08 | 2018-04-06 | 弗洛设计声能学公司 | 具有双声电泳腔的声电泳装置 |
PT3134131T (pt) | 2014-04-23 | 2022-03-24 | Modernatx Inc | Vacinas de ácidos nucleicos |
ES2750661T3 (es) | 2014-04-25 | 2020-03-26 | Translate Bio Inc | Métodos para la purificación de ARN mensajero |
JP6557722B2 (ja) | 2014-05-30 | 2019-08-07 | シャイアー ヒューマン ジェネティック セラピーズ インコーポレイテッド | 核酸の送達のための生分解性脂質 |
KR102511711B1 (ko) | 2014-06-13 | 2023-03-20 | 국립연구개발법인 고쿠리츠간켄큐센터 | 유방암 검출 키트 또는 디바이스 및 검출 방법 |
EP3971299A3 (en) | 2014-06-13 | 2022-06-29 | Toray Industries, Inc. | Colorectal cancer detection kit or device, and detection method |
US20170175129A1 (en) * | 2014-06-19 | 2017-06-22 | Moderna Therapeutics, Inc. | Alternative nucleic acid molecules and uses thereof |
WO2015196128A2 (en) | 2014-06-19 | 2015-12-23 | Moderna Therapeutics, Inc. | Alternative nucleic acid molecules and uses thereof |
ES2964588T3 (es) | 2014-06-24 | 2024-04-08 | Translate Bio Inc | Composiciones enriquecidas estereoquímicamente para la administración de ácidos nucleicos |
JP6385732B2 (ja) * | 2014-06-27 | 2018-09-05 | 国立大学法人北海道大学 | 免疫応答制御剤 |
US9744483B2 (en) | 2014-07-02 | 2017-08-29 | Flodesign Sonics, Inc. | Large scale acoustic separation device |
CN114146063A (zh) | 2014-07-02 | 2022-03-08 | 川斯勒佰尔公司 | 信使rna的包封 |
WO2016011226A1 (en) * | 2014-07-16 | 2016-01-21 | Moderna Therapeutics, Inc. | Chimeric polynucleotides |
JP2017522028A (ja) | 2014-07-16 | 2017-08-10 | モデルナティエックス インコーポレイテッドModernaTX,Inc. | 環状ポリヌクレオチド |
US20170202979A1 (en) * | 2014-07-17 | 2017-07-20 | Modernatx, Inc. | Terminal modifications of polynucleotides |
WO2016014478A1 (en) * | 2014-07-21 | 2016-01-28 | Board Of Supervisors Of Louisiana State University And Agricultural And Mechanical College | USE OF AN miRNA TO REDUCE PROLIFERATION OF A CANCER CELL |
US20170210788A1 (en) | 2014-07-23 | 2017-07-27 | Modernatx, Inc. | Modified polynucleotides for the production of intrabodies |
WO2016023077A1 (en) * | 2014-08-15 | 2016-02-18 | Griffith University | Biological markers |
AU2015309684A1 (en) * | 2014-08-25 | 2017-03-23 | The Council Of The Queensland Institute Of Medical Research | Treatment and detection of melanoma |
WO2016045732A1 (en) | 2014-09-25 | 2016-03-31 | Biontech Rna Pharmaceuticals Gmbh | Stable formulations of lipids and liposomes |
EP3218508A4 (en) * | 2014-11-10 | 2018-04-18 | Modernatx, Inc. | Multiparametric nucleic acid optimization |
WO2016090262A1 (en) | 2014-12-05 | 2016-06-09 | Shire Human Genetic Therapies, Inc. | Messenger rna therapy for treatment of articular disease |
ES2791152T3 (es) * | 2014-12-12 | 2020-11-03 | Curevac Ag | Moléculas de ácido nucleico artificiales para una expresión proteica mejorada |
CN107530436B (zh) | 2015-01-21 | 2022-03-29 | 菲泽尔克斯公司 | 用于将治疗剂和诊断剂递送到细胞中的方法、组合物和系统 |
EP3247363A4 (en) * | 2015-01-21 | 2018-10-03 | Moderna Therapeutics, Inc. | Lipid nanoparticle compositions |
WO2016128060A1 (en) | 2015-02-12 | 2016-08-18 | Biontech Ag | Predicting t cell epitopes useful for vaccination |
WO2016149508A1 (en) | 2015-03-19 | 2016-09-22 | Shire Human Genetic Therapies, Inc. | Mrna therapy for pompe disease |
US11377651B2 (en) | 2016-10-19 | 2022-07-05 | Flodesign Sonics, Inc. | Cell therapy processes utilizing acoustophoresis |
US11708572B2 (en) | 2015-04-29 | 2023-07-25 | Flodesign Sonics, Inc. | Acoustic cell separation techniques and processes |
US11021699B2 (en) | 2015-04-29 | 2021-06-01 | FioDesign Sonics, Inc. | Separation using angled acoustic waves |
TW201718638A (zh) | 2015-07-21 | 2017-06-01 | 現代治療公司 | 傳染病疫苗 |
US11364292B2 (en) | 2015-07-21 | 2022-06-21 | Modernatx, Inc. | CHIKV RNA vaccines |
US11459540B2 (en) | 2015-07-28 | 2022-10-04 | Flodesign Sonics, Inc. | Expanded bed affinity selection |
US11474085B2 (en) | 2015-07-28 | 2022-10-18 | Flodesign Sonics, Inc. | Expanded bed affinity selection |
US11564893B2 (en) | 2015-08-17 | 2023-01-31 | Modernatx, Inc. | Methods for preparing particles and related compositions |
WO2017044650A1 (en) * | 2015-09-08 | 2017-03-16 | The Translational Genomics Research Institute | Biomarkers and methods of diagnosing and prognosing mild traumatic brain injuries |
PL3350333T3 (pl) | 2015-09-17 | 2022-03-07 | Modernatx, Inc. | Polinukleotydy zawierające region stabilizujący ogon |
WO2017049286A1 (en) | 2015-09-17 | 2017-03-23 | Moderna Therapeutics, Inc. | Polynucleotides containing a morpholino linker |
EP3359670B2 (en) | 2015-10-05 | 2024-02-14 | ModernaTX, Inc. | Methods for therapeutic administration of messenger ribonucleic acid drugs |
WO2017059902A1 (en) | 2015-10-07 | 2017-04-13 | Biontech Rna Pharmaceuticals Gmbh | 3' utr sequences for stabilization of rna |
WO2017066573A1 (en) | 2015-10-14 | 2017-04-20 | Shire Human Genetic Therapies, Inc. | Modification of rna-related enzymes for enhanced production |
US20190218546A1 (en) | 2015-10-16 | 2019-07-18 | Modernatx, Inc. | Mrna cap analogs with modified phosphate linkage |
US11866754B2 (en) | 2015-10-16 | 2024-01-09 | Modernatx, Inc. | Trinucleotide mRNA cap analogs |
EP3362460A1 (en) * | 2015-10-16 | 2018-08-22 | Modernatx, Inc. | Mrna cap analogs and methods of mrna capping |
CA3002922A1 (en) | 2015-10-22 | 2017-04-27 | Modernatx, Inc. | Human cytomegalovirus vaccine |
MD3718565T2 (ro) | 2015-10-22 | 2022-09-30 | Modernatx Inc | Vaccinuri împotriva virusului respirator |
KR20180094859A (ko) | 2015-10-22 | 2018-08-24 | 모더나티엑스, 인크. | 수두 대상포진 바이러스 (vzv)를 위한 핵산 백신 |
US20180289792A1 (en) | 2015-10-22 | 2018-10-11 | ModernaTX. Inc. | Sexually transmitted disease vaccines |
EP3364950A4 (en) | 2015-10-22 | 2019-10-23 | ModernaTX, Inc. | VACCINES AGAINST TROPICAL DISEASES |
WO2017100551A1 (en) * | 2015-12-09 | 2017-06-15 | Alexion Pharmaceuticals, Inc. | HETEROLOGOUS UTR SEQUENCES FOR ENHANCED mRNA EXPRESSION |
MA43415A (fr) | 2015-12-09 | 2018-10-17 | Modernatx Inc | Arnm modifié codant pour une uridine diphosphate glucuronosyltransférase et utilisations associées |
EP3964200A1 (en) | 2015-12-10 | 2022-03-09 | ModernaTX, Inc. | Compositions and methods for delivery of therapeutic agents |
KR101737706B1 (ko) * | 2015-12-15 | 2017-05-18 | 한국원자력의학원 | miR-5582-5p를 포함하는 항암제 |
US10465190B1 (en) | 2015-12-23 | 2019-11-05 | Modernatx, Inc. | In vitro transcription methods and constructs |
CN105483233B (zh) * | 2015-12-24 | 2018-07-20 | 北京大学第一医院 | 检测miR-3158-5p表达量的系统在预测阿司匹林对心血管疾病患者疗效中的应用 |
CN105663023B (zh) * | 2016-01-22 | 2018-08-10 | 江汉大学 | 一种光控药物释放的微针制备方法 |
EP3405579A1 (en) | 2016-01-22 | 2018-11-28 | Modernatx, Inc. | Messenger ribonucleic acids for the production of intracellular binding polypeptides and methods of use thereof |
WO2017160880A1 (en) * | 2016-03-14 | 2017-09-21 | Aelan Cell Technologies, Inc. | Compositions and methods for the quality control of stem cell preparations |
ES2844180T3 (es) | 2016-04-08 | 2021-07-21 | Translate Bio Inc | Acido nucleico codificante multimérico y usos del mismo |
US11214789B2 (en) | 2016-05-03 | 2022-01-04 | Flodesign Sonics, Inc. | Concentration and washing of particles with acoustics |
US11085035B2 (en) | 2016-05-03 | 2021-08-10 | Flodesign Sonics, Inc. | Therapeutic cell washing, concentration, and separation utilizing acoustophoresis |
KR102358280B1 (ko) * | 2016-05-05 | 2022-02-07 | 베니텍 바이오파마 리미티드 | B형 간염 바이러스(hbv) 감염 처리용 시약 및 그 용도 |
EP3458107B1 (en) * | 2016-05-18 | 2024-03-13 | ModernaTX, Inc. | Polynucleotides encoding jagged1 for the treatment of alagille syndrome |
MX2018013509A (es) | 2016-05-18 | 2019-03-28 | Modernatx Inc | Polinucleotidos que codifican interleucina-12 (il12) y sus usos de los mismos. |
SG11201810256XA (en) | 2016-05-18 | 2018-12-28 | Modernatx Inc | Polynucleotides encoding relaxin |
MA45053A (fr) * | 2016-05-18 | 2019-03-27 | Modernatx Inc | Polynucléotides codant pour un régulateur de conductance transmembranaire de fibrose kystique pour le traitement de la fibrose kystique |
JP2019520422A (ja) | 2016-05-27 | 2019-07-18 | トランスクリプティクス・インコーポレイテッド | 合成メッセンジャーrnaによる原発性繊毛機能不全症の治療 |
CN109312313A (zh) | 2016-06-13 | 2019-02-05 | 川斯勒佰尔公司 | 用于治疗鸟氨酸转氨甲酰酶缺乏症的信使rna疗法 |
MX2019000205A (es) | 2016-07-07 | 2019-09-23 | Rubius Therapeutics Inc | Composiciones y metodos relacionados con sistemas celulares terapeuticos que expresan arn exogeno. |
CN106139164B (zh) * | 2016-08-04 | 2020-02-21 | 北京信生元生物医学科技有限公司 | miR-5001在制备治疗白血病的药物中的应用 |
US12016884B2 (en) | 2016-08-30 | 2024-06-25 | University Of South Florida | Adipose derived stem cell exosomes and uses thereof |
ES2928475T3 (es) | 2016-09-14 | 2022-11-18 | Modernatx Inc | Composiciones de ARN de alta pureza y métodos para su preparación |
EP3529347A1 (en) | 2016-10-19 | 2019-08-28 | Flodesign Sonics, Inc. | Affinity cell extraction by acoustics |
MA46584A (fr) | 2016-10-21 | 2019-08-28 | Modernatx Inc | Vaccin contre le cytomégalovirus humain |
AU2017347837A1 (en) | 2016-10-26 | 2019-06-06 | Modernatx, Inc. | Messenger ribonucleic acids for enhancing immune responses and methods of use thereof |
WO2018089851A2 (en) | 2016-11-11 | 2018-05-17 | Modernatx, Inc. | Influenza vaccine |
US20190275071A1 (en) * | 2016-11-23 | 2019-09-12 | Mayo Foundation For Medical Education And Research | Particle-mediated delivery of biologics |
WO2018102317A1 (en) * | 2016-11-29 | 2018-06-07 | The Regents Of The University Of California | Modulation of p53 for the treatment of cancer |
MA50335A (fr) | 2016-12-08 | 2020-08-19 | Modernatx Inc | Vaccins à acide nucléique contre des virus respiratoires |
WO2018111967A1 (en) | 2016-12-13 | 2018-06-21 | Modernatx, Inc. | Rna affinity purification |
EP3562510A4 (en) | 2016-12-30 | 2021-01-06 | Genevant Sciences GmbH | BRANCHED PEG MOLECULES AND ASSOCIATED COMPOSITIONS AND PROCEDURES |
WO2018132572A1 (en) | 2017-01-11 | 2018-07-19 | The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University | R-spondin (rspo) surrogate molecules |
CN108310381A (zh) * | 2017-01-16 | 2018-07-24 | 昆山彭济凯丰生物科技有限公司 | 通过miR-6511b-3p进行抗癌的方法和药物及其应用 |
WO2018140821A1 (en) | 2017-01-26 | 2018-08-02 | Surrozen, Inc. | Tissue-specific wnt signal enhancing molecules and uses thereof |
CA3051252A1 (en) | 2017-02-01 | 2018-08-09 | Modernatx, Inc. | Immunomodulatory therapeutic mrna compositions encoding activating oncogene mutation peptides |
MA47515A (fr) | 2017-02-16 | 2019-12-25 | Modernatx Inc | Compositions immunogènes très puissantes |
CN106591487A (zh) * | 2017-02-22 | 2017-04-26 | 西北工业大学 | 老年骨质疏松性骨折的血清microRNA诊断标志物及其诊断试剂盒 |
MX2019010155A (es) | 2017-02-27 | 2020-12-10 | Translate Bio Inc | Arnm de cftr optimizado por codón novedoso. |
US11407800B2 (en) | 2017-02-28 | 2022-08-09 | Arcturus Therapeutics, Inc. | Translatable molecules and synthesis thereof |
US11752206B2 (en) | 2017-03-15 | 2023-09-12 | Modernatx, Inc. | Herpes simplex virus vaccine |
MA47787A (fr) | 2017-03-15 | 2020-01-22 | Modernatx Inc | Vaccin contre le virus respiratoire syncytial |
MA52262A (fr) | 2017-03-15 | 2020-02-19 | Modernatx Inc | Vaccin à large spectre contre le virus de la grippe |
WO2018170270A1 (en) | 2017-03-15 | 2018-09-20 | Modernatx, Inc. | Varicella zoster virus (vzv) vaccine |
US20200030432A1 (en) | 2017-03-17 | 2020-01-30 | Modernatx, Inc. | Zoonotic disease rna vaccines |
MA48047A (fr) * | 2017-04-05 | 2020-02-12 | Modernatx Inc | Réduction ou élimination de réponses immunitaires à des protéines thérapeutiques administrées par voie non intraveineuse, par exemple par voie sous-cutanée |
WO2018187673A1 (en) * | 2017-04-06 | 2018-10-11 | The University Of Vermont And State Agricultural College | Mirna signature expression in cancer |
JP2020517638A (ja) | 2017-04-20 | 2020-06-18 | エータイアー ファーマ, インコーポレイテッド | 肺の炎症を治療するための組成物および方法 |
US10975444B2 (en) * | 2017-04-28 | 2021-04-13 | Toray Industries, Inc. | Kit, device, and method for detecting ovarian tumor |
IL270631B2 (en) | 2017-05-16 | 2024-03-01 | Translate Bio Inc | Treatment of cystic fibrosis through the administration of mRNA with an optimal codon encoding ctfr |
ES2952779T3 (es) | 2017-05-18 | 2023-11-06 | Modernatx Inc | ARN mensajero modificado que comprende elementos de ARN funcionales |
US11786607B2 (en) | 2017-06-15 | 2023-10-17 | Modernatx, Inc. | RNA formulations |
US20210139895A1 (en) * | 2017-06-16 | 2021-05-13 | Prostemics Co., Ltd. | Pharmaceutical composition for preventing or treating cancer |
US20210079440A1 (en) * | 2017-07-12 | 2021-03-18 | Kyoto University | HIGH EXPRESSION mRNA SWITCH |
MA49634A (fr) | 2017-07-21 | 2020-05-27 | Modernatx Inc | Arnm modifié codant pour une propionyl-coa-carboxylase et utilisations associées |
US20200179494A1 (en) | 2017-07-24 | 2020-06-11 | Modernatx, Inc. | Modified mRNA Encoding a Glucose 6 Phosphatase and Uses Thereof |
MA49922A (fr) | 2017-08-18 | 2021-06-02 | Modernatx Inc | Procédés pour analyse par clhp |
EP3668971B8 (en) | 2017-08-18 | 2024-05-29 | ModernaTX, Inc. | Rna polymerase variants |
WO2019036683A1 (en) | 2017-08-18 | 2019-02-21 | Modernatx, Inc. | ANALYTICAL METHODS BY HPLC |
US11744801B2 (en) | 2017-08-31 | 2023-09-05 | Modernatx, Inc. | Methods of making lipid nanoparticles |
GB201714430D0 (en) * | 2017-09-07 | 2017-10-25 | Micol Romain | Compositions and processes for targeted delivery and expression and modulation of therapeutic components in tissue |
US10653767B2 (en) | 2017-09-14 | 2020-05-19 | Modernatx, Inc. | Zika virus MRNA vaccines |
IT201700105372A1 (it) * | 2017-09-20 | 2019-03-20 | Fondazione St Italiano Tecnologia | Molecola di acido nucleico funzionale e relativo uso |
CA3085784A1 (en) | 2017-12-14 | 2019-06-20 | Flodesign Sonics, Inc. | Acoustic transducer driver and controller |
EP3727428A1 (en) | 2017-12-20 | 2020-10-28 | Translate Bio, Inc. | Improved composition and methods for treatment of ornithine transcarbamylase deficiency |
MA54676A (fr) | 2018-01-29 | 2021-11-17 | Modernatx Inc | Vaccins à base d'arn contre le vrs |
CA3089117A1 (en) | 2018-01-30 | 2019-08-08 | Modernatx, Inc. | Compositions and methods for delivery of agents to immune cells |
KR102141124B1 (ko) * | 2018-01-30 | 2020-08-04 | (주)바이오니아 | 이중 가닥 miRNA를 포함하는 이중나선 올리고뉴클레오타이드 구조체 및 이의 용도 |
CN108531586B (zh) * | 2018-03-19 | 2022-03-29 | 朱伟 | 一种与乳腺癌辅助诊断相关的位于X染色体上的循环miRNA标志物及其应用 |
EP3773745A1 (en) | 2018-04-11 | 2021-02-17 | ModernaTX, Inc. | Messenger rna comprising functional rna elements |
CA3093715A1 (en) | 2018-04-19 | 2019-10-24 | Checkmate Pharmaceuticals, Inc. | Synthetic rig-i-like receptor agonists |
BR112021002321B1 (pt) * | 2018-08-08 | 2023-11-28 | Theramir Ltd | Terapia à base de microrna direcionada a cânceres positivos para lcp-1 |
CN112930396B (zh) | 2018-08-24 | 2024-05-24 | 川斯勒佰尔公司 | 用于纯化信使rna的方法 |
BR112021003897A2 (pt) | 2018-08-30 | 2021-05-25 | Tenaya Therapeutics, Inc. | reprogramação de células cardíacas com miocarina e asci1 |
AU2019338535A1 (en) | 2018-09-14 | 2021-04-15 | Modernatx, Inc. | Methods and compositions for treating cancer using mRNA therapeutics |
US20220001026A1 (en) | 2018-11-08 | 2022-01-06 | Modernatx, Inc. | Use of mrna encoding ox40l to treat cancer in human patients |
CN109402262B (zh) * | 2018-12-18 | 2022-01-25 | 上海交通大学医学院附属上海儿童医学中心 | 辅助诊断神经母细胞瘤的PCR检测试剂盒及检测miR-199a-3p表达水平的方法 |
US11351242B1 (en) | 2019-02-12 | 2022-06-07 | Modernatx, Inc. | HMPV/hPIV3 mRNA vaccine composition |
AU2020224103A1 (en) | 2019-02-20 | 2021-09-16 | Modernatx, Inc. | Rna polymerase variants for co-transcriptional capping |
US11851694B1 (en) | 2019-02-20 | 2023-12-26 | Modernatx, Inc. | High fidelity in vitro transcription |
WO2020204130A1 (ja) * | 2019-04-05 | 2020-10-08 | 国立大学法人京都大学 | Rnaのキャッピング方法、修飾rnaの製造方法、及び修飾rna |
US20230086537A1 (en) | 2019-05-07 | 2023-03-23 | Modernatx, Inc. | Differentially expressed immune cell micrornas for regulation of protein expression |
CA3139321A1 (en) | 2019-05-07 | 2020-11-12 | Modernatx, Inc. | Polynucleotides for disrupting immune cell activity and methods of use thereof |
EP3987027A1 (en) | 2019-06-24 | 2022-04-27 | ModernaTX, Inc. | Endonuclease-resistant messenger rna and uses thereof |
US20220387628A1 (en) | 2019-06-24 | 2022-12-08 | Modernatx, Inc. | Messenger rna comprising functional rna elements and uses thereof |
EP3997226A1 (en) | 2019-07-11 | 2022-05-18 | Tenaya Therapeutics, Inc. | Cardiac cell reprogramming with micrornas and other factors |
EP4027982A1 (en) | 2019-09-11 | 2022-07-20 | ModernaTX, Inc. | Lnp-formulated mrna therapeutics and use thereof for treating human subjects |
CA3150308A1 (en) * | 2019-09-18 | 2021-03-25 | Eric S. FISCHER | PROTEIN LABEL FOR INDUCING LIGAND-DEPENDENT DEGRADATION OF PROTEIN/PROTEIN FUSION |
CN110724688A (zh) * | 2019-10-09 | 2020-01-24 | 新乡医学院 | miRNA138及其在调节TERT基因表达中的应用 |
WO2021076645A1 (en) * | 2019-10-15 | 2021-04-22 | The Regents Of The University Of California | Treatment of airway conditions by modulation of mir200 family micrornas |
JP2022554175A (ja) | 2019-10-23 | 2022-12-28 | チェックメイト ファーマシューティカルズ, インコーポレイテッド | 合成rig-i様受容体アゴニスト |
CN111041025B (zh) | 2019-12-17 | 2021-06-18 | 深圳市瑞吉生物科技有限公司 | 基于结合N-乙酰半乳糖胺多肽的mRNA靶向分子及其制备方法 |
CN110938687B (zh) * | 2019-12-26 | 2023-06-27 | 广州医科大学附属第三医院(广州重症孕产妇救治中心、广州柔济医院) | 胎盘植入性疾病标志物 |
JP2023509964A (ja) * | 2020-01-11 | 2023-03-10 | シベック バイオテクノロジーズ エルエルシー | 真核生物翻訳可能mRNAの生成および真核生物への送達のための微生物システム |
CN113134010B (zh) * | 2020-01-20 | 2023-09-01 | 上海市生物医药技术研究院 | 一种靶向雌激素受体α的微小RNA及其抗肿瘤用途 |
IL295989A (en) | 2020-03-02 | 2022-10-01 | Tenaya Therapeutics Inc | Gene vector control using cardiomyocyte expression microRNA |
KR102462990B1 (ko) * | 2020-03-17 | 2022-11-07 | 에이비온 주식회사 | 인비트로 트랜스크립트 mRNA 및 이를 함유하는 약학조성물 |
CN113930505B (zh) * | 2020-03-30 | 2022-04-19 | 中国医学科学院肿瘤医院 | 用于肺癌诊断的试剂盒及装置 |
US11419847B2 (en) * | 2020-04-10 | 2022-08-23 | Matthias W. Rath | Pharmaceutical micronutrient composition and its use to simultaneously inhibit multiple cellular mechanisms of infectivity caused by coronavirus, its variants and mutants |
GB202307565D0 (en) | 2020-04-22 | 2023-07-05 | BioNTech SE | Coronavirus vaccine |
US20230233474A1 (en) | 2020-05-28 | 2023-07-27 | Modernatx, Inc. | Use of mrnas encoding ox40l, il-23 and il-36gamma for treating cancer |
CN111744019B (zh) | 2020-07-01 | 2023-08-04 | 深圳瑞吉生物科技有限公司 | 基于甘露糖的mRNA靶向递送系统及其应用 |
EP4185274A1 (en) | 2020-07-24 | 2023-05-31 | Strand Therapeutics Inc. | Lipidnanoparticle comprising modified nucleotides |
EP4192433A2 (en) | 2020-08-06 | 2023-06-14 | Modernatx, Inc. | Compositions for the delivery of payload molecules to airway epithelium |
US11406703B2 (en) | 2020-08-25 | 2022-08-09 | Modernatx, Inc. | Human cytomegalovirus vaccine |
CN111904974B (zh) * | 2020-08-28 | 2021-12-28 | 中国人民解放军北部战区总医院 | miR-574-5p在糖尿病及其相关疾病中的医药用途 |
JP2024503000A (ja) | 2021-01-08 | 2024-01-24 | ストランド セラピューティクス インコーポレイテッド | 発現構築物およびその使用 |
AU2022208435A1 (en) | 2021-01-18 | 2023-08-10 | Conserv Bioscience Limited | Coronavirus immunogenic compositions, methods and uses thereof |
CN112961914B (zh) * | 2021-02-07 | 2022-08-30 | 安徽省立医院(中国科学技术大学附属第一医院) | miR-3074-5p作为类风湿关节炎标志物的应用及其试剂盒 |
US11524023B2 (en) | 2021-02-19 | 2022-12-13 | Modernatx, Inc. | Lipid nanoparticle compositions and methods of formulating the same |
CN113249488A (zh) * | 2021-06-29 | 2021-08-13 | 中国人民解放军空军军医大学 | 基于外泌体miRNA-4433-5p表达水平的胃癌恶液质早期诊断试剂盒 |
EP4376815A1 (en) | 2021-07-26 | 2024-06-05 | ModernaTX, Inc. | Processes for preparing lipid nanoparticle compositions for the delivery of payload molecules to airway epithelium |
CN118019527A (zh) | 2021-07-26 | 2024-05-10 | 摩登纳特斯有限公司 | 用于制备脂质纳米颗粒组合物的方法 |
IL309505A (en) | 2021-09-03 | 2024-02-01 | CureVac SE | Lipid nanoparticles for nucleic acid delivery |
WO2023064469A1 (en) | 2021-10-13 | 2023-04-20 | Modernatx, Inc. | Compositions of mrna-encoded il15 fusion proteins and methods of use thereof |
WO2023073228A1 (en) | 2021-10-29 | 2023-05-04 | CureVac SE | Improved circular rna for expressing therapeutic proteins |
WO2023077156A1 (en) * | 2021-11-01 | 2023-05-04 | Shattuck Labs, Inc. | Modified mrna therapeutics |
WO2023086465A1 (en) | 2021-11-12 | 2023-05-19 | Modernatx, Inc. | Compositions for the delivery of payload molecules to airway epithelium |
CN114015769A (zh) * | 2021-12-14 | 2022-02-08 | 上海市生物医药技术研究院 | 银屑病关节炎的诊断标记物及其用途 |
WO2023144330A1 (en) | 2022-01-28 | 2023-08-03 | CureVac SE | Nucleic acid encoded transcription factor inhibitors |
TW202345863A (zh) | 2022-02-09 | 2023-12-01 | 美商現代公司 | 黏膜投與方法及調配物 |
KR20230141482A (ko) * | 2022-03-31 | 2023-10-10 | 한미정밀화학주식회사 | mRNA 캡 유사체 및 이의 용도 |
WO2023196988A1 (en) | 2022-04-07 | 2023-10-12 | Modernatx, Inc. | Methods of use of mrnas encoding il-12 |
WO2023199113A1 (en) | 2022-04-15 | 2023-10-19 | Smartcella Solutions Ab | COMPOSITIONS AND METHODS FOR EXOSOME-MEDIATED DELIVERY OF mRNA AGENTS |
CN114657182B (zh) * | 2022-04-18 | 2023-09-19 | 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所 | 一种miRNA及其特异性检测方法和应用 |
WO2023212618A1 (en) | 2022-04-26 | 2023-11-02 | Strand Therapeutics Inc. | Lipid nanoparticles comprising venezuelan equine encephalitis (vee) replicon and uses thereof |
WO2023215498A2 (en) | 2022-05-05 | 2023-11-09 | Modernatx, Inc. | Compositions and methods for cd28 antagonism |
WO2023219114A1 (ja) * | 2022-05-10 | 2023-11-16 | ヤマサ醤油株式会社 | mRNAキャップアナログ及びその製造方法、mRNAの製造方法、並びにキット |
WO2023227608A1 (en) | 2022-05-25 | 2023-11-30 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | Nucleic acid based vaccine encoding an escherichia coli fimh antigenic polypeptide |
WO2023230533A1 (en) * | 2022-05-25 | 2023-11-30 | Jasper Therapeutics, Inc. | Modified stem cell compositions and methods for use |
US11878055B1 (en) | 2022-06-26 | 2024-01-23 | BioNTech SE | Coronavirus vaccine |
WO2024026490A1 (en) | 2022-07-28 | 2024-02-01 | Sqz Biotechnologies Company | Polynucleotides encoding linked antigens and uses thereof |
CN115261482B (zh) * | 2022-10-08 | 2022-12-09 | 暨南大学 | miR-4256在胃癌治疗、诊断以及预后评估中的应用 |
WO2024089638A1 (en) | 2022-10-28 | 2024-05-02 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | Nucleic acid based vaccine |
WO2024097639A1 (en) | 2022-10-31 | 2024-05-10 | Modernatx, Inc. | Hsa-binding antibodies and binding proteins and uses thereof |
WO2024094876A1 (en) * | 2022-11-04 | 2024-05-10 | Sanofi | Methods for messenger rna tailing |
WO2024107827A1 (en) | 2022-11-16 | 2024-05-23 | The Broad Institute, Inc. | Therapeutic exploitation of sting channel activity |
WO2024118866A1 (en) | 2022-12-01 | 2024-06-06 | Modernatx, Inc. | Gpc3-specific antibodies, binding domains, and related proteins and uses thereof |
Citations (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2007024708A2 (en) * | 2005-08-23 | 2007-03-01 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Rna containing modified nucleosides and methods of use thereof |
WO2011012316A2 (de) * | 2009-07-31 | 2011-02-03 | Ludwig-Maximilians-Universität | Rna mit einer kombination aus unmodifizierten und modifizierten nucleotiden zur proteinexpression |
WO2012009644A2 (en) * | 2010-07-16 | 2012-01-19 | Arizona Board Of Regents | Methods to identify synthetic and natural rna elements that enhance protein translation |
WO2012135805A2 (en) * | 2011-03-31 | 2012-10-04 | modeRNA Therapeutics | Delivery and formulation of engineered nucleic acids |
WO2012138453A1 (en) * | 2011-04-03 | 2012-10-11 | The General Hospital Corporation | Efficient protein expression in vivo using modified rna (mod-rna) |
WO2013103659A1 (en) * | 2012-01-04 | 2013-07-11 | Board Of Supervisors Of Louisiana State University And Agricultural And Mechanical College | Stabilizing rna by incorporating chain-terminating nucleosides at the 3'-terminus |
JP6377804B2 (ja) * | 2012-11-26 | 2018-08-22 | モデルナティエックス インコーポレイテッドModernaTX,Inc. | 末端修飾rna |
Family Cites Families (1375)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US2008526A (en) | 1932-11-03 | 1935-07-16 | Wappler Frederick Charles | Method and means for treating living tissue |
US2588623A (en) | 1948-05-10 | 1952-03-11 | Eliscu Frank | Surgical instrument for intradermal injection of fluids |
US3467096A (en) | 1966-04-12 | 1969-09-16 | Ferrell S Horn | Multiple hypodermic syringe arrangement |
US3572336A (en) | 1968-04-30 | 1971-03-23 | Daniel R Hershberg | Syringe |
BE757653A (fr) | 1969-10-21 | 1971-04-16 | Ugine Kuhlmann | Nouveaux medicaments derives d'acides nucleiques et procedes pour leur preparation |
BE786542A (fr) | 1971-07-22 | 1973-01-22 | Dow Corning | Dispositif d'aspiration permettant d'obtenir des echantillons de cellules |
US3906092A (en) | 1971-11-26 | 1975-09-16 | Merck & Co Inc | Stimulation of antibody response |
US4270537A (en) | 1979-11-19 | 1981-06-02 | Romaine Richard A | Automatic hypodermic syringe |
US4399216A (en) | 1980-02-25 | 1983-08-16 | The Trustees Of Columbia University | Processes for inserting DNA into eucaryotic cells and for producing proteinaceous materials |
US5132418A (en) | 1980-02-29 | 1992-07-21 | University Patents, Inc. | Process for preparing polynucleotides |
US4500707A (en) | 1980-02-29 | 1985-02-19 | University Patents, Inc. | Nucleosides useful in the preparation of polynucleotides |
US4458066A (en) | 1980-02-29 | 1984-07-03 | University Patents, Inc. | Process for preparing polynucleotides |
US4411657A (en) | 1980-05-19 | 1983-10-25 | Anibal Galindo | Hypodermic needle |
US4973679A (en) | 1981-03-27 | 1990-11-27 | University Patents, Inc. | Process for oligonucleo tide synthesis using phosphormidite intermediates |
US4415732A (en) | 1981-03-27 | 1983-11-15 | University Patents, Inc. | Phosphoramidite compounds and processes |
US4668777A (en) | 1981-03-27 | 1987-05-26 | University Patents, Inc. | Phosphoramidite nucleoside compounds |
US4373071A (en) | 1981-04-30 | 1983-02-08 | City Of Hope Research Institute | Solid-phase synthesis of polynucleotides |
US4401796A (en) | 1981-04-30 | 1983-08-30 | City Of Hope Research Institute | Solid-phase synthesis of polynucleotides |
US4474569A (en) | 1982-06-28 | 1984-10-02 | Denver Surgical Developments, Inc. | Antenatal shunt |
JPS5927900A (ja) | 1982-08-09 | 1984-02-14 | Wakunaga Seiyaku Kk | 固定化オリゴヌクレオチド |
US4737462A (en) | 1982-10-19 | 1988-04-12 | Cetus Corporation | Structural genes, plasmids and transformed cells for producing cysteine depleted muteins of interferon-β |
US4588585A (en) | 1982-10-19 | 1986-05-13 | Cetus Corporation | Human recombinant cysteine depleted interferon-β muteins |
FR2540122B1 (fr) | 1983-01-27 | 1985-11-29 | Centre Nat Rech Scient | Nouveaux composes comportant une sequence d'oligonucleotide liee a un agent d'intercalation, leur procede de synthese et leur application |
US4605735A (en) | 1983-02-14 | 1986-08-12 | Wakunaga Seiyaku Kabushiki Kaisha | Oligonucleotide derivatives |
US4948882A (en) | 1983-02-22 | 1990-08-14 | Syngene, Inc. | Single-stranded labelled oligonucleotides, reactive monomers and methods of synthesis |
US4824941A (en) | 1983-03-10 | 1989-04-25 | Julian Gordon | Specific antibody to the native form of 2'5'-oligonucleotides, the method of preparation and the use as reagents in immunoassays or for binding 2'5'-oligonucleotides in biological systems |
US4816567A (en) | 1983-04-08 | 1989-03-28 | Genentech, Inc. | Recombinant immunoglobin preparations |
US4587044A (en) | 1983-09-01 | 1986-05-06 | The Johns Hopkins University | Linkage of proteins to nucleic acids |
US5118802A (en) | 1983-12-20 | 1992-06-02 | California Institute Of Technology | DNA-reporter conjugates linked via the 2' or 5'-primary amino group of the 5'-terminal nucleoside |
US5118800A (en) | 1983-12-20 | 1992-06-02 | California Institute Of Technology | Oligonucleotides possessing a primary amino group in the terminal nucleotide |
US4579849A (en) | 1984-04-06 | 1986-04-01 | Merck & Co., Inc. | N-alkylguanine acyclonucleosides as antiviral agents |
US4957735A (en) | 1984-06-12 | 1990-09-18 | The University Of Tennessee Research Corporation | Target-sensitive immunoliposomes- preparation and characterization |
FR2567892B1 (fr) | 1984-07-19 | 1989-02-17 | Centre Nat Rech Scient | Nouveaux oligonucleotides, leur procede de preparation et leurs applications comme mediateurs dans le developpement des effets des interferons |
US5430136A (en) | 1984-10-16 | 1995-07-04 | Chiron Corporation | Oligonucleotides having selectably cleavable and/or abasic sites |
US5258506A (en) | 1984-10-16 | 1993-11-02 | Chiron Corporation | Photolabile reagents for incorporation into oligonucleotide chains |
US4828979A (en) | 1984-11-08 | 1989-05-09 | Life Technologies, Inc. | Nucleotide analogs for nucleic acid labeling and detection |
US4959314A (en) | 1984-11-09 | 1990-09-25 | Cetus Corporation | Cysteine-depleted muteins of biologically active proteins |
US5036006A (en) | 1984-11-13 | 1991-07-30 | Cornell Research Foundation, Inc. | Method for transporting substances into living cells and tissues and apparatus therefor |
US5116943A (en) | 1985-01-18 | 1992-05-26 | Cetus Corporation | Oxidation-resistant muteins of Il-2 and other protein |
CA1288073C (en) | 1985-03-07 | 1991-08-27 | Paul G. Ahlquist | Rna transformation vector |
US5034506A (en) | 1985-03-15 | 1991-07-23 | Anti-Gene Development Group | Uncharged morpholino-based polymers having achiral intersubunit linkages |
US4596556A (en) | 1985-03-25 | 1986-06-24 | Bioject, Inc. | Hypodermic injection apparatus |
EP0204401A1 (en) | 1985-04-09 | 1986-12-10 | Biogen, Inc. | Method of improving the yield of polypeptides produced in a host cell by stabilizing mRNA |
US4762779A (en) | 1985-06-13 | 1988-08-09 | Amgen Inc. | Compositions and methods for functionalizing nucleic acids |
US5017691A (en) | 1986-07-03 | 1991-05-21 | Schering Corporation | Mammalian interleukin-4 |
US5317098A (en) | 1986-03-17 | 1994-05-31 | Hiroaki Shizuya | Non-radioisotope tagging of fragments |
US5153319A (en) | 1986-03-31 | 1992-10-06 | University Patents, Inc. | Process for preparing polynucleotides |
US4695273A (en) | 1986-04-08 | 1987-09-22 | I-Flow Corporation | Multiple needle holder and subcutaneous multiple channel infusion port |
US4879111A (en) | 1986-04-17 | 1989-11-07 | Cetus Corporation | Treatment of infections with lymphokines |
JPS638396A (ja) | 1986-06-30 | 1988-01-14 | Wakunaga Pharmaceut Co Ltd | ポリ標識化オリゴヌクレオチド誘導体 |
CA1283827C (en) | 1986-12-18 | 1991-05-07 | Giorgio Cirelli | Appliance for injection of liquid formulations |
GB8704027D0 (en) | 1987-02-20 | 1987-03-25 | Owen Mumford Ltd | Syringe needle combination |
US4904582A (en) | 1987-06-11 | 1990-02-27 | Synthetic Genetics | Novel amphiphilic nucleic acid conjugates |
US4790824A (en) | 1987-06-19 | 1988-12-13 | Bioject, Inc. | Non-invasive hypodermic injection device |
US4940460A (en) | 1987-06-19 | 1990-07-10 | Bioject, Inc. | Patient-fillable and non-invasive hypodermic injection device assembly |
US4941880A (en) | 1987-06-19 | 1990-07-17 | Bioject, Inc. | Pre-filled ampule and non-invasive hypodermic injection device assembly |
US6090591A (en) | 1987-07-31 | 2000-07-18 | The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University | Selective amplification of target polynucleotide sequences |
WO1989001050A1 (en) | 1987-07-31 | 1989-02-09 | The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University | Selective amplification of target polynucleotide sequences |
US5585481A (en) | 1987-09-21 | 1996-12-17 | Gen-Probe Incorporated | Linking reagents for nucleotide probes |
US5525465A (en) | 1987-10-28 | 1996-06-11 | Howard Florey Institute Of Experimental Physiology And Medicine | Oligonucleotide-polyamide conjugates and methods of production and applications of the same |
DE3738460A1 (de) | 1987-11-12 | 1989-05-24 | Max Planck Gesellschaft | Modifizierte oligonukleotide |
EP0359789B1 (en) | 1988-01-21 | 1993-08-04 | Genentech, Inc. | Amplification and detection of nucleic acid sequences |
CA1340807C (en) | 1988-02-24 | 1999-11-02 | Lawrence T. Malek | Nucleic acid amplification process |
JP2650159B2 (ja) | 1988-02-24 | 1997-09-03 | アクゾ・ノベル・エヌ・ベー | 核酸増幅方法 |
US5082830A (en) | 1988-02-26 | 1992-01-21 | Enzo Biochem, Inc. | End labeled nucleotide probe |
WO1989007947A1 (en) | 1988-03-04 | 1989-09-08 | Cancer Research Campaign Technology Limited | Improvements relating to antigens |
US5339163A (en) | 1988-03-16 | 1994-08-16 | Canon Kabushiki Kaisha | Automatic exposure control device using plural image plane detection areas |
AU631545B2 (en) | 1988-04-15 | 1992-12-03 | Protein Design Labs, Inc. | Il-2 receptor-specific chimeric antibodies |
US5109124A (en) | 1988-06-01 | 1992-04-28 | Biogen, Inc. | Nucleic acid probe linked to a label having a terminal cysteine |
US5021335A (en) | 1988-06-17 | 1991-06-04 | The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University | In situ transcription in cells and tissues |
US5168038A (en) | 1988-06-17 | 1992-12-01 | The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University | In situ transcription in cells and tissues |
US5130238A (en) | 1988-06-24 | 1992-07-14 | Cangene Corporation | Enhanced nucleic acid amplification process |
US5262536A (en) | 1988-09-15 | 1993-11-16 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | Reagents for the preparation of 5'-tagged oligonucleotides |
US5759802A (en) | 1988-10-26 | 1998-06-02 | Tonen Corporation | Production of human serum alubumin A |
FR2638359A1 (fr) | 1988-11-03 | 1990-05-04 | Tino Dalto | Guide de seringue avec reglage de la profondeur de penetration de l'aiguille dans la peau |
US5512439A (en) | 1988-11-21 | 1996-04-30 | Dynal As | Oligonucleotide-linked magnetic particles and uses thereof |
US5047524A (en) | 1988-12-21 | 1991-09-10 | Applied Biosystems, Inc. | Automated system for polynucleotide synthesis and purification |
US5262530A (en) | 1988-12-21 | 1993-11-16 | Applied Biosystems, Inc. | Automated system for polynucleotide synthesis and purification |
US5530101A (en) | 1988-12-28 | 1996-06-25 | Protein Design Labs, Inc. | Humanized immunoglobulins |
US5599923A (en) | 1989-03-06 | 1997-02-04 | Board Of Regents, University Of Tx | Texaphyrin metal complexes having improved functionalization |
US5457183A (en) | 1989-03-06 | 1995-10-10 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Hydroxylated texaphyrins |
US6867195B1 (en) | 1989-03-21 | 2005-03-15 | Vical Incorporated | Lipid-mediated polynucleotide administration to reduce likelihood of subject's becoming infected |
US5693622A (en) | 1989-03-21 | 1997-12-02 | Vical Incorporated | Expression of exogenous polynucleotide sequences cardiac muscle of a mammal |
US5703055A (en) | 1989-03-21 | 1997-12-30 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Generation of antibodies through lipid mediated DNA delivery |
US6673776B1 (en) | 1989-03-21 | 2004-01-06 | Vical Incorporated | Expression of exogenous polynucleotide sequences in a vertebrate, mammal, fish, bird or human |
US6214804B1 (en) | 1989-03-21 | 2001-04-10 | Vical Incorporated | Induction of a protective immune response in a mammal by injecting a DNA sequence |
DE69032284T2 (de) | 1989-03-21 | 1998-10-08 | Vical, Inc., San Diego, Calif. | Expression von exogenen polynukleotidsequenzen in wirbeltieren |
US5012818A (en) | 1989-05-04 | 1991-05-07 | Joishy Suresh K | Two in one bone marrow surgical needle |
IE66597B1 (en) | 1989-05-10 | 1996-01-24 | Akzo Nv | Method for the synthesis of ribonucleic acid (RNA) |
US5240855A (en) | 1989-05-12 | 1993-08-31 | Pioneer Hi-Bred International, Inc. | Particle gun |
US5332671A (en) | 1989-05-12 | 1994-07-26 | Genetech, Inc. | Production of vascular endothelial cell growth factor and DNA encoding same |
US5391723A (en) | 1989-05-31 | 1995-02-21 | Neorx Corporation | Oligonucleotide conjugates |
US4958013A (en) | 1989-06-06 | 1990-09-18 | Northwestern University | Cholesteryl modified oligonucleotides |
CA2020958C (en) | 1989-07-11 | 2005-01-11 | Daniel L. Kacian | Nucleic acid sequence amplification methods |
US5451463A (en) | 1989-08-28 | 1995-09-19 | Clontech Laboratories, Inc. | Non-nucleoside 1,3-diol reagents for labeling synthetic oligonucleotides |
US5254469A (en) | 1989-09-12 | 1993-10-19 | Eastman Kodak Company | Oligonucleotide-enzyme conjugate that can be used as a probe in hybridization assays and polymerase chain reaction procedures |
US5591722A (en) | 1989-09-15 | 1997-01-07 | Southern Research Institute | 2'-deoxy-4'-thioribonucleosides and their antiviral activity |
US5545522A (en) | 1989-09-22 | 1996-08-13 | Van Gelder; Russell N. | Process for amplifying a target polynucleotide sequence using a single primer-promoter complex |
DE69034150T2 (de) | 1989-10-24 | 2005-08-25 | Isis Pharmaceuticals, Inc., Carlsbad | 2'-Modifizierte Oligonukleotide |
US5208020A (en) | 1989-10-25 | 1993-05-04 | Immunogen Inc. | Cytotoxic agents comprising maytansinoids and their therapeutic use |
US5215899A (en) | 1989-11-09 | 1993-06-01 | Miles Inc. | Nucleic acid amplification employing ligatable hairpin probe and transcription |
NO904633L (no) | 1989-11-09 | 1991-05-10 | Molecular Diagnostics Inc | Amplifikasjon av nukleinsyrer ved transkriberbar haarnaalsprobe. |
US5312335A (en) | 1989-11-09 | 1994-05-17 | Bioject Inc. | Needleless hypodermic injection device |
US5064413A (en) | 1989-11-09 | 1991-11-12 | Bioject, Inc. | Needleless hypodermic injection device |
US5292873A (en) | 1989-11-29 | 1994-03-08 | The Research Foundation Of State University Of New York | Nucleic acids labeled with naphthoquinone probe |
US5633076A (en) | 1989-12-01 | 1997-05-27 | Pharming Bv | Method of producing a transgenic bovine or transgenic bovine embryo |
US5697901A (en) | 1989-12-14 | 1997-12-16 | Elof Eriksson | Gene delivery by microneedle injection |
US5486603A (en) | 1990-01-08 | 1996-01-23 | Gilead Sciences, Inc. | Oligonucleotide having enhanced binding affinity |
US5646265A (en) | 1990-01-11 | 1997-07-08 | Isis Pharmceuticals, Inc. | Process for the preparation of 2'-O-alkyl purine phosphoramidites |
US5578718A (en) | 1990-01-11 | 1996-11-26 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Thiol-derivatized nucleosides |
US7037646B1 (en) | 1990-01-11 | 2006-05-02 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Amine-derivatized nucleosides and oligonucleosides |
US6783931B1 (en) | 1990-01-11 | 2004-08-31 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Amine-derivatized nucleosides and oligonucleosides |
US5670633A (en) | 1990-01-11 | 1997-09-23 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Sugar modified oligonucleotides that detect and modulate gene expression |
AU7579991A (en) | 1990-02-20 | 1991-09-18 | Gilead Sciences, Inc. | Pseudonucleosides and pseudonucleotides and their polymers |
US5214136A (en) | 1990-02-20 | 1993-05-25 | Gilead Sciences, Inc. | Anthraquinone-derivatives oligonucleotides |
GB9009980D0 (en) | 1990-05-03 | 1990-06-27 | Amersham Int Plc | Phosphoramidite derivatives,their preparation and the use thereof in the incorporation of reporter groups on synthetic oligonucleotides |
EP0455905B1 (en) | 1990-05-11 | 1998-06-17 | Microprobe Corporation | Dipsticks for nucleic acid hybridization assays and methods for covalently immobilizing oligonucleotides |
US5194370A (en) | 1990-05-16 | 1993-03-16 | Life Technologies, Inc. | Promoter ligation activated transcription amplification of nucleic acid sequences |
EP0542874A4 (en) | 1990-07-25 | 1994-05-11 | Syngene Inc | Circular extension for generating multiple nucleic acid complements |
US5602240A (en) | 1990-07-27 | 1997-02-11 | Ciba Geigy Ag. | Backbone modified oligonucleotide analogs |
US5218105A (en) | 1990-07-27 | 1993-06-08 | Isis Pharmaceuticals | Polyamine conjugated oligonucleotides |
US5608046A (en) | 1990-07-27 | 1997-03-04 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Conjugated 4'-desmethyl nucleoside analog compounds |
US5489677A (en) | 1990-07-27 | 1996-02-06 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Oligonucleoside linkages containing adjacent oxygen and nitrogen atoms |
US5688941A (en) | 1990-07-27 | 1997-11-18 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Methods of making conjugated 4' desmethyl nucleoside analog compounds |
US5138045A (en) | 1990-07-27 | 1992-08-11 | Isis Pharmaceuticals | Polyamine conjugated oligonucleotides |
US5245022A (en) | 1990-08-03 | 1993-09-14 | Sterling Drug, Inc. | Exonuclease resistant terminally substituted oligonucleotides |
US5190521A (en) | 1990-08-22 | 1993-03-02 | Tecnol Medical Products, Inc. | Apparatus and method for raising a skin wheal and anesthetizing skin |
US5512667A (en) | 1990-08-28 | 1996-04-30 | Reed; Michael W. | Trifunctional intermediates for preparing 3'-tailed oligonucleotides |
US6140496A (en) | 1990-10-09 | 2000-10-31 | Benner; Steven Albert | Precursors for deoxyribonucleotides containing non-standard nucleosides |
KR930702373A (ko) | 1990-11-08 | 1993-09-08 | 안토니 제이. 페이네 | 합성 올리고누클레오티드에 대한 다중 리포터(Reporter)그룹의 첨합 |
US5527288A (en) | 1990-12-13 | 1996-06-18 | Elan Medical Technologies Limited | Intradermal drug delivery device and method for intradermal delivery of drugs |
US6100024A (en) | 1991-02-08 | 2000-08-08 | Promega Corporation | Methods and compositions for nucleic acid detection by target extension and probe amplification |
DK0610201T4 (da) | 1991-03-18 | 2008-02-04 | Centocor Inc | Monoklonale og kimære antistoffer, der er specifikke for human tumornekrosefaktor |
US5426180A (en) | 1991-03-27 | 1995-06-20 | Research Corporation Technologies, Inc. | Methods of making single-stranded circular oligonucleotides |
AU668349B2 (en) | 1991-04-25 | 1996-05-02 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Reconstituted human antibody against human interleukin 6 receptor |
US5719262A (en) | 1993-11-22 | 1998-02-17 | Buchardt, Deceased; Ole | Peptide nucleic acids having amino acid side chains |
US5539082A (en) | 1993-04-26 | 1996-07-23 | Nielsen; Peter E. | Peptide nucleic acids |
US5714331A (en) | 1991-05-24 | 1998-02-03 | Buchardt, Deceased; Ole | Peptide nucleic acids having enhanced binding affinity, sequence specificity and solubility |
US5169766A (en) | 1991-06-14 | 1992-12-08 | Life Technologies, Inc. | Amplification of nucleic acid molecules |
US5371241A (en) | 1991-07-19 | 1994-12-06 | Pharmacia P-L Biochemicals Inc. | Fluorescein labelled phosphoramidites |
US5199441A (en) | 1991-08-20 | 1993-04-06 | Hogle Hugh H | Fine needle aspiration biopsy apparatus and method |
GB9118204D0 (en) | 1991-08-23 | 1991-10-09 | Weston Terence E | Needle-less injector |
SE9102652D0 (sv) | 1991-09-13 | 1991-09-13 | Kabi Pharmacia Ab | Injection needle arrangement |
ES2103918T3 (es) | 1991-10-17 | 1997-10-01 | Ciba Geigy Ag | Nucleosidos biciclicos, oligonucleotidos, procedimiento para su obtencion y productos intermedios. |
US5298422A (en) | 1991-11-06 | 1994-03-29 | Baylor College Of Medicine | Myogenic vector systems |
US5359044A (en) | 1991-12-13 | 1994-10-25 | Isis Pharmaceuticals | Cyclobutyl oligonucleotide surrogates |
US5824307A (en) | 1991-12-23 | 1998-10-20 | Medimmune, Inc. | Human-murine chimeric antibodies against respiratory syncytial virus |
US5595726A (en) | 1992-01-21 | 1997-01-21 | Pharmacyclics, Inc. | Chromophore probe for detection of nucleic acid |
US5565552A (en) | 1992-01-21 | 1996-10-15 | Pharmacyclics, Inc. | Method of expanded porphyrin-oligonucleotide conjugate synthesis |
EP0625049A4 (en) | 1992-01-23 | 1995-07-12 | Vical Inc | EX VIVO GENTRANSFER. |
FR2687679B1 (fr) | 1992-02-05 | 1994-10-28 | Centre Nat Rech Scient | Oligothionucleotides. |
US5328483A (en) | 1992-02-27 | 1994-07-12 | Jacoby Richard M | Intradermal injection device with medication and needle guard |
JP3368603B2 (ja) | 1992-02-28 | 2003-01-20 | オリンパス光学工業株式会社 | 遺伝子治療用処置具 |
EP0563475B1 (en) | 1992-03-25 | 2000-05-31 | Immunogen Inc | Cell binding agent conjugates of derivatives of CC-1065 |
US6174666B1 (en) | 1992-03-27 | 2001-01-16 | The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services | Method of eliminating inhibitory/instability regions from mRNA |
US6132419A (en) | 1992-05-22 | 2000-10-17 | Genetronics, Inc. | Electroporetic gene and drug therapy |
US5514545A (en) | 1992-06-11 | 1996-05-07 | Trustees Of The University Of Pennsylvania | Method for characterizing single cells based on RNA amplification for diagnostics and therapeutics |
EP0577558A2 (de) | 1992-07-01 | 1994-01-05 | Ciba-Geigy Ag | Carbocyclische Nukleoside mit bicyclischen Ringen, Oligonukleotide daraus, Verfahren zu deren Herstellung, deren Verwendung und Zwischenproduckte |
US6670178B1 (en) | 1992-07-10 | 2003-12-30 | Transkaryotic Therapies, Inc. | In Vivo production and delivery of insulinotropin for gene therapy |
US5272250A (en) | 1992-07-10 | 1993-12-21 | Spielvogel Bernard F | Boronated phosphoramidate compounds |
US5383851A (en) | 1992-07-24 | 1995-01-24 | Bioject Inc. | Needleless hypodermic injection device |
CA2141450A1 (en) | 1992-07-31 | 1994-02-17 | Maureen Laney | Method for introducing defined sequences at the 3' end of polynucleotides |
US5273525A (en) | 1992-08-13 | 1993-12-28 | Btx Inc. | Injection and electroporation apparatus for drug and gene delivery |
US5240885A (en) | 1992-09-21 | 1993-08-31 | Corning Incorporated | Rare earth-doped, stabilized cadmium halide glasses |
US5569189A (en) | 1992-09-28 | 1996-10-29 | Equidyne Systems, Inc. | hypodermic jet injector |
US5334144A (en) | 1992-10-30 | 1994-08-02 | Becton, Dickinson And Company | Single use disposable needleless injector |
AU5665694A (en) | 1992-11-04 | 1994-05-24 | Denver Biomaterials Inc. | Apparatus for removal of pleural effusion fluid |
NZ258392A (en) | 1992-11-13 | 1997-09-22 | Idec Pharma Corp | Chimeric and radiolabelled antibodies to the b lymphocyte cellsurface antigen bp35 (cd-20) and their use in the treatment of b cell lymphona |
US5736137A (en) | 1992-11-13 | 1998-04-07 | Idec Pharmaceuticals Corporation | Therapeutic application of chimeric and radiolabeled antibodies to human B lymphocyte restricted differentiation antigen for treatment of B cell lymphoma |
US5574142A (en) | 1992-12-15 | 1996-11-12 | Microprobe Corporation | Peptide linkers for improved oligonucleotide delivery |
DE69419721T2 (de) | 1993-01-12 | 2000-04-27 | Biogen Inc | Rekombinante anti-vla4 antikörpermoleküle |
CA2159631A1 (en) | 1993-03-30 | 1994-10-13 | Sanofi | Acyclic nucleoside analogs and oligonucleotide sequences containing them |
FR2703253B1 (fr) | 1993-03-30 | 1995-06-23 | Centre Nat Rech Scient | Applicateur d'impulsions electriques pour traitement de tissus biologiques. |
DE4311944A1 (de) | 1993-04-10 | 1994-10-13 | Degussa | Umhüllte Natriumpercarbonatpartikel, Verfahren zu deren Herstellung und sie enthaltende Wasch-, Reinigungs- und Bleichmittelzusammensetzungen |
US7135312B2 (en) | 1993-04-15 | 2006-11-14 | University Of Rochester | Circular DNA vectors for synthesis of RNA and DNA |
US5773244A (en) | 1993-05-19 | 1998-06-30 | Regents Of The University Of California | Methods of making circular RNA |
US6541498B2 (en) | 1993-05-20 | 2003-04-01 | Texas Biotechnology | Benzenesulfonamides and the use thereof to modulate the activity of endothelin |
US5851829A (en) | 1993-07-16 | 1998-12-22 | Dana-Farber Cancer Institute | Method of intracellular binding of target molecules |
US6294664B1 (en) | 1993-07-29 | 2001-09-25 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Synthesis of oligonucleotides |
US5672491A (en) | 1993-09-20 | 1997-09-30 | The Leland Stanford Junior University | Recombinant production of novel polyketides |
US6432711B1 (en) | 1993-11-03 | 2002-08-13 | Diacrin, Inc. | Embryonic stem cells capable of differentiating into desired cell lines |
US6096503A (en) | 1993-11-12 | 2000-08-01 | The Scripps Research Institute | Method for simultaneous identification of differentially expresses mRNAs and measurement of relative concentrations |
US5446137B1 (en) | 1993-12-09 | 1998-10-06 | Behringwerke Ag | Oligonucleotides containing 4'-substituted nucleotides |
US5519134A (en) | 1994-01-11 | 1996-05-21 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Pyrrolidine-containing monomers and oligomers |
US7435802B2 (en) | 1994-01-25 | 2008-10-14 | Elan Pharaceuticals, Inc. | Humanized anti-VLA4 immunoglobulins |
US5840299A (en) | 1994-01-25 | 1998-11-24 | Athena Neurosciences, Inc. | Humanized antibodies against leukocyte adhesion molecule VLA-4 |
ES2224113T5 (es) | 1994-02-16 | 2009-05-01 | The Government Of The Usa, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services | Polipeptido antigenico asociado al melanoma, epitopos del mismo y vacunas contra melanoma. |
WO1995024176A1 (en) | 1994-03-07 | 1995-09-14 | Bioject, Inc. | Ampule filling device |
IL112820A0 (en) | 1994-03-07 | 1995-05-26 | Merck & Co Inc | Coordinate in vivo gene expression |
US5466220A (en) | 1994-03-08 | 1995-11-14 | Bioject, Inc. | Drug vial mixing and transfer device |
HUT76094A (en) | 1994-03-18 | 1997-06-30 | Lynx Therapeutics | Oligonucleotide n3'-p5' phosphoramidates: synthesis and compounds; hybridization and nuclease resistance properties |
US5457041A (en) | 1994-03-25 | 1995-10-10 | Science Applications International Corporation | Needle array and method of introducing biological substances into living cells using the needle array |
WO1995026204A1 (en) | 1994-03-25 | 1995-10-05 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Immune stimulation by phosphorothioate oligonucleotide analogs |
US5627053A (en) | 1994-03-29 | 1997-05-06 | Ribozyme Pharmaceuticals, Inc. | 2'deoxy-2'-alkylnucleotide containing nucleic acid |
US5464395A (en) | 1994-04-05 | 1995-11-07 | Faxon; David P. | Catheter for delivering therapeutic and/or diagnostic agents to the tissue surrounding a bodily passageway |
US6074642A (en) | 1994-05-02 | 2000-06-13 | Alexion Pharmaceuticals, Inc. | Use of antibodies specific to human complement component C5 for the treatment of glomerulonephritis |
DE69535543T2 (de) | 1994-05-18 | 2008-04-30 | Bayer Bioscience Gmbh | Für enzyme, die die fähigkeit besitzen lineare alpha 1,4-glucane in pflanzen, pilzen und mikroorganismen zu synthesieren, kodierende dna sequenzen |
AU2656295A (en) | 1994-06-02 | 1996-01-04 | Chiron Corporation | Nucleic acid immunization using a virus-based infection/transfection system |
GB9412230D0 (en) | 1994-06-17 | 1994-08-10 | Celltech Ltd | Interleukin-5 specific recombiant antibodies |
US6239116B1 (en) | 1994-07-15 | 2001-05-29 | University Of Iowa Research Foundation | Immunostimulatory nucleic acid molecules |
US5597696A (en) | 1994-07-18 | 1997-01-28 | Becton Dickinson And Company | Covalent cyanine dye oligonucleotide conjugates |
ATE306930T1 (de) | 1994-08-12 | 2005-11-15 | Immunomedics Inc | Für b-zell-lymphom und leukämiezellen spezifische immunkonjugate und humane antikörper |
US5580731A (en) | 1994-08-25 | 1996-12-03 | Chiron Corporation | N-4 modified pyrimidine deoxynucleotides and oligonucleotide probes synthesized therewith |
US5597909A (en) | 1994-08-25 | 1997-01-28 | Chiron Corporation | Polynucleotide reagents containing modified deoxyribose moieties, and associated methods of synthesis and use |
US5665545A (en) | 1994-11-28 | 1997-09-09 | Akzo Nobel N.V. | Terminal repeat amplification method |
US5641665A (en) | 1994-11-28 | 1997-06-24 | Vical Incorporated | Plasmids suitable for IL-2 expression |
US5588960A (en) | 1994-12-01 | 1996-12-31 | Vidamed, Inc. | Transurethral needle delivery device with cystoscope and method for treatment of urinary incontinence |
US5807718A (en) | 1994-12-02 | 1998-09-15 | The Scripps Research Institute | Enzymatic DNA molecules |
JP3840259B2 (ja) | 1995-01-06 | 2006-11-01 | プラント リサーチ インターナショナル ベスローテン フェンノートシャップ | 炭水化物ポリマー合成酵素をコードするdna配列及びトランスジェニック植物を製造するための方法 |
US5599302A (en) | 1995-01-09 | 1997-02-04 | Medi-Ject Corporation | Medical injection system and method, gas spring thereof and launching device using gas spring |
US5795587A (en) | 1995-01-23 | 1998-08-18 | University Of Pittsburgh | Stable lipid-comprising drug delivery complexes and methods for their production |
US5824497A (en) | 1995-02-10 | 1998-10-20 | Mcmaster University | High efficiency translation of mRNA molecules |
DE69629326D1 (de) | 1995-02-15 | 2003-09-11 | Joseph Eldor | Spinalnadel mit mehreren Löchern |
US5707807A (en) | 1995-03-28 | 1998-01-13 | Research Development Corporation Of Japan | Molecular indexing for expressed gene analysis |
US5869230A (en) | 1995-03-30 | 1999-02-09 | Beth Israel Hospital Association | Gene transfer into the kidney |
US5986054A (en) | 1995-04-28 | 1999-11-16 | The Hospital For Sick Children, Hsc Research And Development Limited Partnership | Genetic sequences and proteins related to alzheimer's disease |
FR2733762B1 (fr) | 1995-05-02 | 1997-08-01 | Genset Sa | Methode de couplage specifique de la coiffe de l'extremite 5' d'un fragment d'arnm et preparation d'arnm et d'adnc complet |
US5700642A (en) | 1995-05-22 | 1997-12-23 | Sri International | Oligonucleotide sizing using immobilized cleavable primers |
US5730723A (en) | 1995-10-10 | 1998-03-24 | Visionary Medical Products Corporation, Inc. | Gas pressured needle-less injection device and method |
US6111095A (en) | 1995-06-07 | 2000-08-29 | Merck & Co., Inc. | Capped synthetic RNA, analogs, and aptamers |
US6051429A (en) | 1995-06-07 | 2000-04-18 | Life Technologies, Inc. | Peptide-enhanced cationic lipid transfections |
US5889136A (en) | 1995-06-09 | 1999-03-30 | The Regents Of The University Of Colorado | Orthoester protecting groups in RNA synthesis |
US5713863A (en) | 1996-01-11 | 1998-02-03 | Interventional Technologies Inc. | Catheter with fluid medication injectors |
US5766903A (en) | 1995-08-23 | 1998-06-16 | University Technology Corporation | Circular RNA and uses thereof |
US6265389B1 (en) | 1995-08-31 | 2001-07-24 | Alkermes Controlled Therapeutics, Inc. | Microencapsulation and sustained release of oligonucleotides |
WO1997011085A1 (en) | 1995-09-19 | 1997-03-27 | University Of Massachusetts | Inhibited biological degradation of oligodeoxynucleotides |
US5830879A (en) | 1995-10-02 | 1998-11-03 | St. Elizabeth's Medical Center Of Boston, Inc. | Treatment of vascular injury using vascular endothelial growth factor |
US6265387B1 (en) | 1995-10-11 | 2001-07-24 | Mirus, Inc. | Process of delivering naked DNA into a hepatocyte via bile duct |
EP0771873A3 (en) | 1995-10-27 | 1998-03-04 | Takeda Chemical Industries, Ltd. | Neuronal cell-specific receptor protein |
CU22584A1 (es) | 1995-11-17 | 1999-11-03 | Centro Inmunologia Molecular | Composiciones farmacéuticas que contienen un anticuerpo monoclonal que reconoce el antígeno de diferenciación leucocitario humano cd6 y sus usos para el diagnóstico y tratamiento de la psoriasis |
US6090382A (en) | 1996-02-09 | 2000-07-18 | Basf Aktiengesellschaft | Human antibodies that bind human TNFα |
US5962271A (en) | 1996-01-03 | 1999-10-05 | Cloutech Laboratories, Inc. | Methods and compositions for generating full-length cDNA having arbitrary nucleotide sequence at the 3'-end |
US5893397A (en) | 1996-01-12 | 1999-04-13 | Bioject Inc. | Medication vial/syringe liquid-transfer apparatus |
US6395292B2 (en) | 1996-02-02 | 2002-05-28 | Alza Corporation | Sustained delivery of an active agent using an implantable system |
US6261584B1 (en) | 1996-02-02 | 2001-07-17 | Alza Corporation | Sustained delivery of an active agent using an implantable system |
WO1997030064A1 (en) | 1996-02-16 | 1997-08-21 | Stichting Rega Vzw | Hexitol containing oligonucleotides and their use in antisense strategies |
US6534312B1 (en) | 1996-02-22 | 2003-03-18 | Merck & Co., Inc. | Vaccines comprising synthetic genes |
US6090391A (en) | 1996-02-23 | 2000-07-18 | Aviron | Recombinant tryptophan mutants of influenza |
US6300487B1 (en) | 1996-03-19 | 2001-10-09 | Cell Therapuetics, Inc. | Mammalian lysophosphatidic acid acyltransferase |
TW517061B (en) | 1996-03-29 | 2003-01-11 | Pharmacia & Amp Upjohn Ab | Modified/chimeric superantigens and their use |
GB9607549D0 (en) | 1996-04-11 | 1996-06-12 | Weston Medical Ltd | Spring-powered dispensing device |
US20030073908A1 (en) | 1996-04-26 | 2003-04-17 | 2000 Injectx, Inc. | Method and apparatus for delivery of genes, enzymes and biological agents to tissue cells |
US5712127A (en) | 1996-04-29 | 1998-01-27 | Genescape Inc. | Subtractive amplification |
US5853719A (en) | 1996-04-30 | 1998-12-29 | Duke University | Methods for treating cancers and pathogen infections using antigen-presenting cells loaded with RNA |
DE69739524D1 (de) | 1996-06-05 | 2009-09-17 | Novartis Vaccines & Diagnostic | Dp-75 kodierende dna und verfahren zu ihrer verwendung |
US7329741B2 (en) | 1996-06-05 | 2008-02-12 | Chiron Corporation | Polynucleotides that hybridize to DP-75 and their use |
AU728422B2 (en) | 1996-06-21 | 2001-01-11 | Merck & Co., Inc. | Vaccines comprising synthetic genes |
JP2002515786A (ja) | 1996-06-28 | 2002-05-28 | ソントラ メディカル,エル.ピー. | 経皮輸送の超音波増強 |
US5677124A (en) | 1996-07-03 | 1997-10-14 | Ambion, Inc. | Ribonuclease resistant viral RNA standards |
US5939262A (en) | 1996-07-03 | 1999-08-17 | Ambion, Inc. | Ribonuclease resistant RNA preparation and utilization |
US7288266B2 (en) | 1996-08-19 | 2007-10-30 | United States Of America As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services | Liposome complexes for increased systemic delivery |
US5849546A (en) | 1996-09-13 | 1998-12-15 | Epicentre Technologies Corporation | Methods for using mutant RNA polymerases with reduced discrimination between non-canonical and canonical nucleoside triphosphates |
US6114148C1 (en) | 1996-09-20 | 2012-05-01 | Gen Hospital Corp | High level expression of proteins |
PT932678E (pt) | 1996-09-24 | 2006-07-31 | Tanox Inc | Familia de genes que codificam peptidos relacionados com apoptose, peptidos por eles codificados e metodos para sua utilizacao |
US6214966B1 (en) | 1996-09-26 | 2001-04-10 | Shearwater Corporation | Soluble, degradable poly(ethylene glycol) derivatives for controllable release of bound molecules into solution |
ATE292980T1 (de) | 1996-10-11 | 2005-04-15 | Univ California | Immunostimulierende oligonucleotidekonjugate |
EP0839912A1 (en) | 1996-10-30 | 1998-05-06 | Instituut Voor Dierhouderij En Diergezondheid (Id-Dlo) | Infectious clones of RNA viruses and vaccines and diagnostic assays derived thereof |
GB9623051D0 (en) | 1996-11-06 | 1997-01-08 | Schacht Etienne H | Delivery of DNA to target cells in biological systems |
US5980887A (en) | 1996-11-08 | 1999-11-09 | St. Elizabeth's Medical Center Of Boston | Methods for enhancing angiogenesis with endothelial progenitor cells |
US5759179A (en) | 1996-12-31 | 1998-06-02 | Johnson & Johnson Medical, Inc. | Needle and valve assembly for use with a catheter |
RU2233878C2 (ru) | 1997-01-21 | 2004-08-10 | Дзе Дженерал Хоспитал Корпорейшн | Способ отбора желательного белка и нуклеиновой кислоты, средства для его осуществления |
EP0855184A1 (en) | 1997-01-23 | 1998-07-29 | Grayson B. Dr. Lipford | Pharmaceutical composition comprising a polynucleotide and an antigen especially for vaccination |
IL131131A0 (en) | 1997-02-07 | 2001-01-28 | Merck & Co Inc | Synthetic hiv gag genes |
US6251665B1 (en) | 1997-02-07 | 2001-06-26 | Cem Cezayirli | Directed maturation of stem cells and production of programmable antigen presenting dentritic cells therefrom |
US6228640B1 (en) | 1997-02-07 | 2001-05-08 | Cem Cezayirli | Programmable antigen presenting cell of CD34 lineage |
US6696291B2 (en) | 1997-02-07 | 2004-02-24 | Merck & Co., Inc. | Synthetic HIV gag genes |
US6576752B1 (en) | 1997-02-14 | 2003-06-10 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Aminooxy functionalized oligomers |
JP3756313B2 (ja) | 1997-03-07 | 2006-03-15 | 武 今西 | 新規ビシクロヌクレオシド及びオリゴヌクレオチド類縁体 |
US6406705B1 (en) | 1997-03-10 | 2002-06-18 | University Of Iowa Research Foundation | Use of nucleic acids containing unmethylated CpG dinucleotide as an adjuvant |
US6306393B1 (en) | 1997-03-24 | 2001-10-23 | Immunomedics, Inc. | Immunotherapy of B-cell malignancies using anti-CD22 antibodies |
US6261281B1 (en) | 1997-04-03 | 2001-07-17 | Electrofect As | Method for genetic immunization and introduction of molecules into skeletal muscle and immune cells |
US5914269A (en) | 1997-04-04 | 1999-06-22 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Oligonucleotide inhibition of epidermal growth factor receptor expression |
AU6972798A (en) | 1997-04-18 | 1998-11-13 | University Of Medicine And Dentistry Of New Jersey | Inhibition of hiv-1 replication by a tat rna-binding domain peptide analog |
US5958688A (en) | 1997-04-28 | 1999-09-28 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Characterization of mRNA patterns in neurites and single cells for medical diagnosis and therapeutics |
US6235883B1 (en) | 1997-05-05 | 2001-05-22 | Abgenix, Inc. | Human monoclonal antibodies to epidermal growth factor receptor |
US5989911A (en) | 1997-05-09 | 1999-11-23 | University Of Massachusetts | Site-specific synthesis of pseudouridine in RNA |
US6761726B1 (en) | 1998-05-15 | 2004-07-13 | Pyng Medical Corp. | Method and apparatus for the intraosseous introduction of a device such as an infusion tube |
US5993412A (en) | 1997-05-19 | 1999-11-30 | Bioject, Inc. | Injection apparatus |
US6124091A (en) | 1997-05-30 | 2000-09-26 | Research Corporation Technologies, Inc. | Cell growth-controlling oligonucleotides |
CA2291483C (en) | 1997-06-06 | 2012-09-18 | Dynavax Technologies Corporation | Immunostimulatory oligonucleotides, compositions thereof and methods of use thereof |
US6589940B1 (en) | 1997-06-06 | 2003-07-08 | Dynavax Technologies Corporation | Immunostimulatory oligonucleotides, compositions thereof and methods of use thereof |
FI105309B (fi) | 1997-06-24 | 2000-07-14 | Nokia Mobile Phones Ltd | Matkaviestinjärjestelmät |
DE69834038D1 (de) | 1997-07-01 | 2006-05-18 | Isis Pharmaceutical Inc | Zusammensetzungen und verfahren zur verabreichung von oligonukleotiden über die speiseröhre |
US5994511A (en) | 1997-07-02 | 1999-11-30 | Genentech, Inc. | Anti-IgE antibodies and methods of improving polypeptides |
AU748097B2 (en) | 1997-07-21 | 2002-05-30 | Active Biotech Ab | Directed cytolysis of target cells, agents and compositions causing cytolysis, and compounds that can be used to produce the agents |
US20030073640A1 (en) | 1997-07-23 | 2003-04-17 | Ribozyme Pharmaceuticals, Inc. | Novel compositions for the delivery of negatively charged molecules |
CA2298811A1 (en) | 1997-07-31 | 1999-02-11 | St. Elizabeth's Medical Center Of Boston, Inc. | Method for the treatment of grafts |
US6794499B2 (en) | 1997-09-12 | 2004-09-21 | Exiqon A/S | Oligonucleotide analogues |
US7151172B1 (en) | 1997-09-18 | 2006-12-19 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Attenuated vif DNA immunization cassettes for genetic vaccines |
EP1021549A2 (en) | 1997-09-19 | 2000-07-26 | Sequitur, Inc. | SENSE mRNA THERAPY |
US6004573A (en) | 1997-10-03 | 1999-12-21 | Macromed, Inc. | Biodegradable low molecular weight triblock poly(lactide-co-glycolide) polyethylene glycol copolymers having reverse thermal gelation properties |
EP1021548A1 (en) | 1997-10-07 | 2000-07-26 | University Of Maryland Biotechnology Institute | Method for introducing and expressing rna in animal cells |
BR9812945A (pt) | 1997-10-20 | 2000-08-08 | Genzyme Transgenics Corp | Sequências de ácido nucléico modificadas e processos para aumentar os nìveis de mrna e expressão de sistemas celulares |
US6019747A (en) | 1997-10-21 | 2000-02-01 | I-Flow Corporation | Spring-actuated infusion syringe |
AU1275899A (en) | 1997-10-24 | 1999-05-17 | Megabios Corporation | Methods for preparing polynucleotide transfection complexes |
US6077251A (en) | 1997-10-30 | 2000-06-20 | Ting; Windsor | Medicinal agent administration system |
JP2001521759A (ja) | 1997-11-12 | 2001-11-13 | ザ ブリガム アンド ウィメンズ ホスピタル,インコーポレイテッド | ヒトアミロイド前駆体タンパク質遺伝子の翻訳エンハンサーエレメント |
US6548633B1 (en) | 1998-12-22 | 2003-04-15 | Genset, S.A. | Complementary DNA's encoding proteins with signal peptides |
EP1032428B1 (en) | 1997-11-20 | 2003-06-18 | Vical Incorporated | Treatment of cancer using cytokine-expressing polynucleotides and compositions therefor |
US7655777B2 (en) | 1997-11-24 | 2010-02-02 | Monsanto Technology Llc | Nucleic acid molecules associated with the tocopherol pathway |
US6517869B1 (en) | 1997-12-12 | 2003-02-11 | Expression Genetics, Inc. | Positively charged poly(alpha-(omega-aminoalkyl)lycolic acid) for the delivery of a bioactive agent via tissue and cellular uptake |
AU1819499A (en) | 1997-12-12 | 1999-06-28 | Samyang Corporation | Positively-charged poly{alpha-(omega-aminoalkyl)glycolic acid} for the delivery of a bioactive agent via tissue and cellular uptake |
WO1999033982A2 (en) | 1997-12-23 | 1999-07-08 | Chiron Corporation | Human genes and gene expression products i |
US6320017B1 (en) | 1997-12-23 | 2001-11-20 | Inex Pharmaceuticals Corp. | Polyamide oligomers |
US6383811B2 (en) | 1997-12-30 | 2002-05-07 | Mirus Corporation | Polyampholytes for delivering polyions to a cell |
CA2317549C (en) | 1998-01-05 | 2006-04-11 | University Of Washington | Composition for enhancing transport through lipid-containing membranes, and uses thereof |
AU740999B2 (en) | 1998-01-08 | 2001-11-22 | Sontra Medical, Inc. | Sonophoretic enhanced transdermal transport |
US8287483B2 (en) | 1998-01-08 | 2012-10-16 | Echo Therapeutics, Inc. | Method and apparatus for enhancement of transdermal transport |
IT1298087B1 (it) | 1998-01-08 | 1999-12-20 | Fiderm S R L | Dispositivo per il controllo della profondita' di penetrazione di un ago, in particolare applicabile ad una siringa per iniezioni |
US6365346B1 (en) | 1998-02-18 | 2002-04-02 | Dade Behring Inc. | Quantitative determination of nucleic acid amplification products |
US5955310A (en) | 1998-02-26 | 1999-09-21 | Novo Nordisk Biotech, Inc. | Methods for producing a polypeptide in a bacillus cell |
US6432925B1 (en) | 1998-04-16 | 2002-08-13 | John Wayne Cancer Institute | RNA cancer vaccine and methods for its use |
US6429301B1 (en) | 1998-04-17 | 2002-08-06 | Whitehead Institute For Biomedical Research | Use of a ribozyme to join nucleic acids and peptides |
GB9808327D0 (en) | 1998-04-20 | 1998-06-17 | Chiron Spa | Antidiotypic compounds |
EP2116600B1 (en) | 1998-04-23 | 2013-09-18 | Takara Bio Inc. | Method for synthesizing DNA |
US6395253B2 (en) | 1998-04-23 | 2002-05-28 | The Regents Of The University Of Michigan | Microspheres containing condensed polyanionic bioactive agents and methods for their production |
US20020064517A1 (en) | 1998-04-30 | 2002-05-30 | Stewart A. Cederholm-Williams | Fibrin sealant as a transfection/transformation vehicle for gene therapy |
US20090208418A1 (en) | 2005-04-29 | 2009-08-20 | Innexus Biotechnology Internaltional Ltd. | Superantibody synthesis and use in detection, prevention and treatment of disease |
BR9911062A (pt) | 1998-05-20 | 2001-02-06 | Expression Genetics Inc | Veìculo de gene polimérico de poli-l-lisina enxertado por polietileno glicol de direcionamento de hepatócito |
US6503231B1 (en) | 1998-06-10 | 2003-01-07 | Georgia Tech Research Corporation | Microneedle device for transport of molecules across tissue |
US7091192B1 (en) | 1998-07-01 | 2006-08-15 | California Institute Of Technology | Linear cyclodextrin copolymers |
JP2002520435A (ja) | 1998-07-13 | 2002-07-09 | エクスプレション・ジェネティックス・インコーポレーテッド | 可溶性、生物分解性な遺伝子輸送キャリアーとしてのポリ−l−リジンのポリエステル類似体 |
US6222030B1 (en) | 1998-08-03 | 2001-04-24 | Agilent Technologies, Inc. | Solid phase synthesis of oligonucleotides using carbonate protecting groups and alpha-effect nucleophile deprotection |
EA004107B1 (ru) | 1998-08-11 | 2003-12-25 | Айдек Фармацевтикалс Корпорэйшн | Комбинированная терапия в-клеточных лимфом, предусматривающая введение антитела против cd20 |
GB9817662D0 (en) | 1998-08-13 | 1998-10-07 | Crocker Peter J | Substance delivery |
US6924365B1 (en) | 1998-09-29 | 2005-08-02 | Transkaryotic Therapies, Inc. | Optimized messenger RNA |
US20090042283A1 (en) | 1998-09-29 | 2009-02-12 | Shire Human Genetic Therapies, Inc., A Delaware Corporation | Optimized messenger rna |
WO2000026226A1 (en) | 1998-11-03 | 2000-05-11 | Yale University | Multidomain polynucleotide molecular sensors |
WO2000027428A1 (en) | 1998-11-09 | 2000-05-18 | Idec Pharmaceuticals Corporation | Treatment of hematologic malignancies associated with circulating tumor cells using chimeric anti-cd20 antibody |
MY155913A (en) | 1998-11-09 | 2015-12-15 | Biogen Inc | Chimeric anti-cd20 antibody treatment of patients receiving bmt or pbsc transpants |
AU2023400A (en) | 1998-11-12 | 2000-05-29 | Children's Medical Center Corporation | Compositions and methods for inhibiting angiogenesis using trna and fragments thereof |
US6210931B1 (en) | 1998-11-30 | 2001-04-03 | The United States Of America As Represented By The Secretary Of Agriculture | Ribozyme-mediated synthesis of circular RNA |
US20040171980A1 (en) | 1998-12-18 | 2004-09-02 | Sontra Medical, Inc. | Method and apparatus for enhancement of transdermal transport |
JP2002533134A (ja) | 1998-12-23 | 2002-10-08 | ヒューマン ジノーム サイエンシーズ, インコーポレイテッド | ペプチドグリカン認識タンパク質 |
WO2000050586A2 (en) | 1999-02-22 | 2000-08-31 | European Molecular Biology Laboratory | In vitro translation system |
US6255476B1 (en) | 1999-02-22 | 2001-07-03 | Pe Corporation (Ny) | Methods and compositions for synthesis of labelled oligonucleotides and analogs on solid-supports |
US7629311B2 (en) | 1999-02-24 | 2009-12-08 | Edward Lewis Tobinick | Methods to facilitate transmission of large molecules across the blood-brain, blood-eye, and blood-nerve barriers |
CA2689696C (en) | 1999-02-26 | 2013-08-06 | Novartis Vaccines And Diagnostics, Inc. | Microemulsions with adsorbed macromolecules and microparticles |
DE60035861T2 (de) | 1999-03-01 | 2008-04-24 | Cytyc Corp., Marlborough | Geräte, methoden und kits für die gleichzeitige austragung von substanzen in mehrere milchkanäle der brust |
US7084125B2 (en) | 1999-03-18 | 2006-08-01 | Exiqon A/S | Xylo-LNA analogues |
AU778809B2 (en) | 1999-03-29 | 2004-12-23 | Statens Serum Institut | Method for producing a nucleotide sequence construct with optimised codons for an HIV genetic vaccine based on primary, early HIV isolate and synthetic envelope BX08 constructs |
EP1177231B1 (en) | 1999-04-09 | 2009-08-19 | Invitrogen Dynal AS | Process for the preparation of monodisperse polymer particles |
AU776362B2 (en) | 1999-05-04 | 2004-09-09 | Roche Innovation Center Copenhagen A/S | L-ribo-LNA analogues |
KR20020011985A (ko) | 1999-05-07 | 2002-02-09 | 파르마솔 게엠베하 | 액상 및 고체상 지질 혼합물에 기초한 지질입자들 및 그의제조방법 |
DK1176981T3 (da) | 1999-05-07 | 2006-04-10 | Genentech Inc | Behandling af autoimmune sygdomme med antagonister som binder til B celleoverflademarkörer |
US7171264B1 (en) | 1999-05-10 | 2007-01-30 | Genetronics, Inc. | Intradermal delivery of active agents by needle-free injection and electroporation |
US6346382B1 (en) | 1999-06-01 | 2002-02-12 | Vanderbilt University | Human carbamyl phosphate synthetase I polymorphism and diagnostic methods related thereto |
US6611707B1 (en) | 1999-06-04 | 2003-08-26 | Georgia Tech Research Corporation | Microneedle drug delivery device |
US6743211B1 (en) | 1999-11-23 | 2004-06-01 | Georgia Tech Research Corporation | Devices and methods for enhanced microneedle penetration of biological barriers |
WO2000075356A1 (en) | 1999-06-04 | 2000-12-14 | Lin Shi Lung | Rna polymerase chain reaction |
US6303573B1 (en) | 1999-06-07 | 2001-10-16 | The Burnham Institute | Heart homing peptides and methods of using same |
CA2376634A1 (en) | 1999-06-08 | 2000-12-14 | Aventis Pasteur | Immunostimulant oligonucleotide |
EP1194167B1 (en) | 1999-06-09 | 2009-08-19 | Immunomedics, Inc. | Immunotherapy of autoimmune disorders using antibodies which target b-cells |
US6949245B1 (en) | 1999-06-25 | 2005-09-27 | Genentech, Inc. | Humanized anti-ErbB2 antibodies and treatment with anti-ErbB2 antibodies |
IL147179A0 (en) | 1999-06-30 | 2002-08-14 | Advanced Cell Tech Inc | Cytoplasmic transfer to de-differentiate recipient cells |
US6514948B1 (en) | 1999-07-02 | 2003-02-04 | The Regents Of The University Of California | Method for enhancing an immune response |
CA2378653A1 (en) | 1999-07-09 | 2001-01-18 | American Home Products Corporation | Methods and compositions for preventing the formation of aberrant rna during transcription of a plasmid sequence |
CA2311201A1 (en) | 1999-08-05 | 2001-02-05 | Genset S.A. | Ests and encoded human proteins |
US8557244B1 (en) | 1999-08-11 | 2013-10-15 | Biogen Idec Inc. | Treatment of aggressive non-Hodgkins lymphoma with anti-CD20 antibody |
EP1792991A1 (en) | 1999-08-24 | 2007-06-06 | Medarex, Inc. | Human CTLA-4 antibodies and their uses |
US20050112141A1 (en) | 2000-08-30 | 2005-05-26 | Terman David S. | Compositions and methods for treatment of neoplastic disease |
US6551338B1 (en) | 1999-09-01 | 2003-04-22 | Mcgill University | Method and device for myogenesis and angiogenesis of the heart |
US20040106567A1 (en) | 1999-09-07 | 2004-06-03 | Hagstrom James E. | Intravascular delivery of non-viral nucleic acid |
DE69923840T2 (de) | 1999-09-09 | 2006-04-06 | Curevac Gmbh | Transfer von mRNAs unter Verwendung von polykationischen Verbindungen |
AU7398200A (en) | 1999-09-17 | 2001-04-24 | Aventis Pasteur Limited | Chlamydia antigens and corresponding dna fragments and uses thereof |
US6623457B1 (en) | 1999-09-22 | 2003-09-23 | Becton, Dickinson And Company | Method and apparatus for the transdermal administration of a substance |
WO2002064799A2 (en) | 1999-09-28 | 2002-08-22 | Transkaryotic Therapies, Inc. | Optimized messenger rna |
AU7863200A (en) | 1999-10-06 | 2001-05-10 | Quark Biotech, Inc. | Method for enrichment of natural antisense messenger rna |
US7060291B1 (en) | 1999-11-24 | 2006-06-13 | Transave, Inc. | Modular targeted liposomal delivery system |
US6613026B1 (en) | 1999-12-08 | 2003-09-02 | Scimed Life Systems, Inc. | Lateral needle-less injection apparatus and method |
US6277974B1 (en) | 1999-12-14 | 2001-08-21 | Cogent Neuroscience, Inc. | Compositions and methods for diagnosing and treating conditions, disorders, or diseases involving cell death |
US6245929B1 (en) | 1999-12-20 | 2001-06-12 | General Electric Company | Catalyst composition and method for producing diaryl carbonates, using bisphosphines |
ATE280188T1 (de) | 1999-12-22 | 2004-11-15 | Basell Poliolefine Spa | Alpha-olefin enthaltendes polymerisationskatalysatorsystem, das ein aromatisches silan enthält |
SE515932C2 (sv) | 1999-12-23 | 2001-10-29 | Prostalund Operations Ab | Sätt och anordning vid behandling av prostata |
US7737108B1 (en) | 2000-01-07 | 2010-06-15 | University Of Washington | Enhanced transport using membrane disruptive agents |
WO2001051661A2 (en) | 2000-01-13 | 2001-07-19 | Amsterdam Support Diagnostics B.V. | A universal nucleic acid amplification system for nucleic acids in a sample |
US7468275B2 (en) | 2000-01-28 | 2008-12-23 | The Scripps Research Institute | Synthetic internal ribosome entry sites and methods of identifying same |
US7183395B2 (en) | 2000-01-28 | 2007-02-27 | The Scripps Research Institute | Methods of identifying synthetic transcriptional and translational regulatory elements, and compositions relating to same |
CA2395811A1 (en) | 2000-01-31 | 2001-08-02 | Human Genome Sciences, Inc. | Nucleic acids, proteins, and antibodies |
EP1253947A4 (en) | 2000-01-31 | 2005-01-05 | Univ California | IMMUNOMODULATED POLYNUCLEOTIDES FOR THE TREATMENT OF INFECTIONS BY INTRA-CELLULAR DISEASES |
US7491805B2 (en) | 2001-05-18 | 2009-02-17 | Sirna Therapeutics, Inc. | Conjugates and compositions for cellular delivery |
US7833992B2 (en) | 2001-05-18 | 2010-11-16 | Merck Sharpe & Dohme | Conjugates and compositions for cellular delivery |
WO2001062827A2 (en) | 2000-02-22 | 2001-08-30 | Shearwater Corporation | N-maleimidyl polymer derivatives |
DK1481992T3 (en) | 2000-02-24 | 2017-01-30 | Washington Univ St Louis | Humanized antibodies which sequester amyloid beta peptide |
CA2401327C (en) | 2000-03-03 | 2014-05-06 | Valentis, Inc. | Nucleic acid formulations comprising poly-amino acids for gene delivery and methods of use |
US20020081597A1 (en) | 2000-03-31 | 2002-06-27 | Genentech, Inc. | Compositions and methods for detecting and quantifying gene expression |
CA2404365A1 (en) | 2000-03-31 | 2001-10-11 | Idec Pharmaceutical Corporation | Combined use of anti-cytokine antibodies or antagonists and anti-cd20 for the treatment of b cell lymphoma |
US6565572B2 (en) | 2000-04-10 | 2003-05-20 | Sdgi Holdings, Inc. | Fenestrated surgical screw and method |
US6368801B1 (en) | 2000-04-12 | 2002-04-09 | Molecular Staging, Inc. | Detection and amplification of RNA using target-mediated ligation of DNA by RNA ligase |
AU2001259063A1 (en) | 2000-04-12 | 2001-10-30 | Human Genome Sciences, Inc. | Albumin fusion proteins |
US20010046496A1 (en) | 2000-04-14 | 2001-11-29 | Brettman Lee R. | Method of administering an antibody |
US6468247B1 (en) | 2000-04-21 | 2002-10-22 | Mark Zamoyski | Perfusion device for localized drug delivery |
US6375972B1 (en) | 2000-04-26 | 2002-04-23 | Control Delivery Systems, Inc. | Sustained release drug delivery devices, methods of use, and methods of manufacturing thereof |
US7871598B1 (en) | 2000-05-10 | 2011-01-18 | Novartis Ag | Stable metal ion-lipid powdered pharmaceutical compositions for drug delivery and methods of use |
US20040229271A1 (en) | 2000-05-19 | 2004-11-18 | Williams Richard B. | Compositions and methods for the identification and selection of nucleic acids and polypeptides |
WO2001092523A2 (en) | 2000-05-30 | 2001-12-06 | Curagen Corporation | Human polynucleotides and polypeptides encoded thereby |
US6537242B1 (en) | 2000-06-06 | 2003-03-25 | Becton, Dickinson And Company | Method and apparatus for enhancing penetration of a member for the intradermal sampling or administration of a substance |
CA2412026A1 (en) | 2000-06-07 | 2001-12-13 | Biosynexus Incorporated | Immunostimulatory rna/dna hybrid molecules |
US6607513B1 (en) | 2000-06-08 | 2003-08-19 | Becton, Dickinson And Company | Device for withdrawing or administering a substance and method of manufacturing a device |
CN1298738C (zh) | 2000-06-23 | 2007-02-07 | 惠氏控股有限公司 | 修饰的麻疹病毒v蛋白 |
US20050181033A1 (en) | 2000-06-29 | 2005-08-18 | Dekker John P.Iii | Method for delivering interferons to the intradermal compartment |
AU2001276619A1 (en) | 2000-07-03 | 2002-01-14 | Chiron S.P.A. | Immunisation against chlamydia pneumoniae |
US6440096B1 (en) | 2000-07-14 | 2002-08-27 | Becton, Dickinson And Co. | Microdevice and method of manufacturing a microdevice |
DK1301614T3 (da) | 2000-07-21 | 2007-04-02 | Glaxo Group Ltd | Codon-optimerede papillomavirus-sekvenser |
US6902734B2 (en) | 2000-08-07 | 2005-06-07 | Centocor, Inc. | Anti-IL-12 antibodies and compositions thereof |
US20040142474A1 (en) | 2000-09-14 | 2004-07-22 | Expression Genetics, Inc. | Novel cationic lipopolymer as a biocompatible gene delivery agent |
US6696038B1 (en) | 2000-09-14 | 2004-02-24 | Expression Genetics, Inc. | Cationic lipopolymer as biocompatible gene delivery agent |
WO2002024873A1 (en) | 2000-09-20 | 2002-03-28 | Christopher Ralph Franks | Stem cell therapy |
JP2004510714A (ja) | 2000-10-04 | 2004-04-08 | ザ・トラスティーズ・オブ・ザ・ユニバーシティ・オブ・ペンシルベニア | フラビウイルス及びペスチウイルス由来のキャプシド蛋白質を使用する組成物及び方法 |
EP1334109B1 (en) | 2000-10-04 | 2006-05-10 | Santaris Pharma A/S | Improved synthesis of purine locked nucleic acid analogues |
US6998115B2 (en) | 2000-10-10 | 2006-02-14 | Massachusetts Institute Of Technology | Biodegradable poly(β-amino esters) and uses thereof |
US7202226B2 (en) | 2000-10-23 | 2007-04-10 | Detroit R & D | Augmentation of wound healing by elF-4E mRNA and EGF mRNA |
US20030077604A1 (en) | 2000-10-27 | 2003-04-24 | Yongming Sun | Compositions and methods relating to breast specific genes and proteins |
US20020132788A1 (en) | 2000-11-06 | 2002-09-19 | David Lewis | Inhibition of gene expression by delivery of small interfering RNA to post-embryonic animal cells in vivo |
WO2002040545A2 (en) | 2000-11-17 | 2002-05-23 | The Government Of The United States, As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services | Reduction of the nonspecific animal toxicity of immunotoxins by mutating the framework regions of the fv to lower the isoelectric point |
JP2004535765A (ja) | 2000-12-07 | 2004-12-02 | カイロン コーポレイション | 前立腺癌においてアップレギュレートされた内因性レトロウイルス |
US7708915B2 (en) | 2004-05-06 | 2010-05-04 | Castor Trevor P | Polymer microspheres/nanospheres and encapsulating therapeutic proteins therein |
US20020130430A1 (en) | 2000-12-29 | 2002-09-19 | Castor Trevor Percival | Methods for making polymer microspheres/nanospheres and encapsulating therapeutic proteins and other products |
US7628780B2 (en) | 2001-01-13 | 2009-12-08 | Medtronic, Inc. | Devices and methods for interstitial injection of biologic agents into tissue |
CN101921732A (zh) | 2001-01-19 | 2010-12-22 | 维洛诺瓦蒂夫公司 | 在易感哺乳动物中引起呼吸道疾病的病毒 |
EP1224943A1 (en) | 2001-01-19 | 2002-07-24 | Crucell Holland B.V. | Fibronectin as a tumor marker detected by phage antibodies |
US20040110191A1 (en) | 2001-01-31 | 2004-06-10 | Winkler Matthew M. | Comparative analysis of nucleic acids using population tagging |
WO2002065093A2 (en) | 2001-02-14 | 2002-08-22 | Baylor College Of Medicine | Methods and compositions of amplifying rna |
US6652886B2 (en) | 2001-02-16 | 2003-11-25 | Expression Genetics | Biodegradable cationic copolymers of poly (alkylenimine) and poly (ethylene glycol) for the delivery of bioactive agents |
DE10109897A1 (de) | 2001-02-21 | 2002-11-07 | Novosom Ag | Fakultativ kationische Liposomen und Verwendung dieser |
US7232425B2 (en) | 2001-03-02 | 2007-06-19 | Sorenson Development, Inc. | Apparatus and method for specific interstitial or subcutaneous diffusion and dispersion of medication |
KR100917939B1 (ko) | 2001-03-09 | 2009-09-21 | 진 스트림 피티와이 리미티드 | 신규한 발현 벡터 |
JP2002262882A (ja) | 2001-03-12 | 2002-09-17 | Nisshinbo Ind Inc | Rnaの増幅法 |
FR2822164B1 (fr) | 2001-03-19 | 2004-06-18 | Centre Nat Rech Scient | Polypeptides derives des arn polymerases, et leurs utilisations |
US6520949B2 (en) | 2001-04-02 | 2003-02-18 | Martin St. Germain | Method and apparatus for administering fluid to animals subcutaneously |
US6625486B2 (en) | 2001-04-11 | 2003-09-23 | Advanced Cardiovascular Systems, Inc. | Method and apparatus for intracellular delivery of an agent |
DE10119005A1 (de) | 2001-04-18 | 2002-10-24 | Roche Diagnostics Gmbh | Verfahren zur Proteinexpression ausgehend von stabilisierter linearer kurzer DNA in zellfreien in vitro-Transkription/Translations-Systemen mit Exonuklease-haltigen Lysaten oder in einem zellulären System enthaltend Exonukleasen |
US20030171253A1 (en) | 2001-04-19 | 2003-09-11 | Averil Ma | Methods and compositions relating to modulation of A20 |
DE50201240D1 (de) | 2001-04-23 | 2004-11-11 | Amaxa Gmbh | Pufferlössung für die elektroporation und verfahren umfassend die verwendung derselben |
US7560424B2 (en) | 2001-04-30 | 2009-07-14 | Zystor Therapeutics, Inc. | Targeted therapeutic proteins |
US6777187B2 (en) | 2001-05-02 | 2004-08-17 | Rubicon Genomics, Inc. | Genome walking by selective amplification of nick-translate DNA library and amplification from complex mixtures of templates |
US6527216B2 (en) | 2001-05-08 | 2003-03-04 | Magnatech International Llp | Electronic length control wire pay-off system and method |
US20050137155A1 (en) | 2001-05-18 | 2005-06-23 | Sirna Therapeutics, Inc. | RNA interference mediated treatment of Parkinson disease using short interfering nucleic acid (siNA) |
US8137911B2 (en) | 2001-05-22 | 2012-03-20 | Cellscript, Inc. | Preparation and use of single-stranded transcription substrates for synthesis of transcription products corresponding to target sequences |
EP1404860B8 (en) | 2001-05-30 | 2013-12-25 | The Scripps Research Institute | Delivery system for nucleic acids |
DE50214200D1 (de) | 2001-06-05 | 2010-03-25 | Curevac Gmbh | Stabilisierte Tumorantigen-mRNA mit erhöhtem G/C-Gehalt |
JP2005503135A (ja) | 2001-06-18 | 2005-02-03 | ノバルティス アクチエンゲゼルシャフト | 新規gタンパク質共役受容体およびそのdna配列 |
US7785610B2 (en) | 2001-06-21 | 2010-08-31 | Dynavax Technologies Corporation | Chimeric immunomodulatory compounds and methods of using the same—III |
US7547551B2 (en) | 2001-06-21 | 2009-06-16 | University Of Antwerp. | Transfection of eukaryontic cells with linear polynucleotides by electroporation |
EP1404716A2 (en) | 2001-06-26 | 2004-04-07 | Novartis AG | Novel g protein-coupled receptors and dna sequences thereof |
SE0102327D0 (sv) | 2001-06-28 | 2001-06-28 | Active Biotech Ab | A novel engineered superantigen for human therapy |
CN1253220C (zh) | 2001-06-29 | 2006-04-26 | 贝克顿迪肯森公司 | 通过微管在真皮内输入疫苗和基因治疗剂 |
US20040236092A1 (en) | 2001-07-13 | 2004-11-25 | Roman Dziarski | Peptidologlycan recognition protein encoding nucleic acids and methods of use thereof |
US6586524B2 (en) | 2001-07-19 | 2003-07-01 | Expression Genetics, Inc. | Cellular targeting poly(ethylene glycol)-grafted polymeric gene carrier |
AU2002312543A1 (en) | 2001-08-01 | 2003-02-17 | University Of Utah, Technology Transfer Office | Isoform-selective inhibitors and activators of pde3 cyclic |
EP1423519A2 (en) | 2001-08-27 | 2004-06-02 | Novartis AG | G-protein coupled receptor and dna sequences thereof |
US20040142325A1 (en) | 2001-09-14 | 2004-07-22 | Liat Mintz | Methods and systems for annotating biomolecular sequences |
EP2428568B1 (en) | 2001-09-28 | 2018-04-25 | Max-Planck-Gesellschaft zur Förderung der Wissenschaften e.V. | Microrna molecules |
AR045702A1 (es) | 2001-10-03 | 2005-11-09 | Chiron Corp | Composiciones de adyuvantes. |
DE10148886A1 (de) | 2001-10-04 | 2003-04-30 | Avontec Gmbh | Inhibition von STAT-1 |
US7276489B2 (en) | 2002-10-24 | 2007-10-02 | Idera Pharmaceuticals, Inc. | Modulation of immunostimulatory properties of oligonucleotide-based compounds by optimal presentation of 5′ ends |
US7429258B2 (en) | 2001-10-26 | 2008-09-30 | Massachusetts Institute Of Technology | Microneedle transport device |
WO2003042383A1 (fr) | 2001-11-14 | 2003-05-22 | Toyo Boseki Kabushiki Kaisha | Promoteurs de replication de l'adn, facteurs associes a l'adn polymerase et utilisation de ces derniers |
WO2003044482A2 (en) | 2001-11-16 | 2003-05-30 | The University Of Tennessee Research Corporation | Recombinant antibody fusion proteins and methods for detection of apoptotic cells |
WO2003046578A2 (en) | 2001-11-29 | 2003-06-05 | Novartis Ag | Method for the assessment and prognosis of sarcoidosis |
CA2409775C (en) | 2001-12-03 | 2010-07-13 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Reversibly modified thermostable enzymes for dna synthesis and amplification in vitro |
EP1521594B1 (en) | 2001-12-07 | 2013-10-02 | Novartis Vaccines and Diagnostics, Inc. | Endogenous retrovirus polypeptides linked to oncogenic transformation |
US20060275747A1 (en) | 2001-12-07 | 2006-12-07 | Hardy Stephen F | Endogenous retrovirus up-regulated in prostate cancer |
JP4646315B2 (ja) | 2001-12-07 | 2011-03-09 | ノバルティス バクシンズ アンド ダイアグノスティックス,インコーポレーテッド | 前立腺癌においてアップレギュレートされた内因性レトロウイルス |
JP2005520498A (ja) | 2001-12-17 | 2005-07-14 | ノバルティス アクチエンゲゼルシャフト | 新規gタンパク質共役受容体およびそのdna配列 |
DE10162480A1 (de) | 2001-12-19 | 2003-08-07 | Ingmar Hoerr | Die Applikation von mRNA für den Einsatz als Therapeutikum gegen Tumorerkrankungen |
PT1474109E (pt) | 2001-12-21 | 2010-10-25 | Alcon Inc | Utilização de nanopartículas inorgânicas sintéticas como veículos em medicamentos oftálmicos |
WO2003059381A2 (en) | 2002-01-18 | 2003-07-24 | Curevac Gmbh | Immunogenic preparations and vaccines on the basis of mrna |
WO2003066649A1 (en) | 2002-02-04 | 2003-08-14 | Biomira Inc. | Immunostimulatory, covalently lipidated oligonucleotides |
EP2048154B2 (en) | 2002-02-05 | 2015-06-03 | Genentech, Inc. | Protein purification |
FR2835749B1 (fr) | 2002-02-08 | 2006-04-14 | Inst Nat Sante Rech Med | Composition pharmaceutique ameliorant le transfert de gene in vivo |
DE10207178A1 (de) | 2002-02-19 | 2003-09-04 | Novosom Ag | Komponenten für die Herstellung amphoterer Liposomen |
AR038568A1 (es) | 2002-02-20 | 2005-01-19 | Hoffmann La Roche | Anticuerpos anti-a beta y su uso |
US20050222064A1 (en) | 2002-02-20 | 2005-10-06 | Sirna Therapeutics, Inc. | Polycationic compositions for cellular delivery of polynucleotides |
US7354742B2 (en) | 2002-02-22 | 2008-04-08 | Ortho-Mcneil Pharmaceutical, Inc. | Method for generating amplified RNA |
EP1572941A4 (en) | 2002-02-26 | 2009-03-18 | Maxygen Inc | NEW FLAVIVIRUS ANTIGENES |
EP1916001B1 (en) | 2002-03-04 | 2011-05-25 | Imclone LLC | Human antibodies specific to KDR and uses thereof |
AU2003221497A1 (en) | 2002-03-13 | 2003-09-22 | Novartis Ag | Pharmaceutical microparticles |
US7074596B2 (en) | 2002-03-25 | 2006-07-11 | Board Of Supervisors Of Louisiana State University And Agricultural And Mechanical College | Synthesis and use of anti-reverse mRNA cap analogues |
EP2368431A1 (en) | 2002-04-04 | 2011-09-28 | Coley Pharmaceutical GmbH | Immunostimulatory G,U-containing oligoribonucleotides |
WO2003087815A2 (en) | 2002-04-17 | 2003-10-23 | Novartis Ag | Method for the identification of inhibitors of the binding of are-containing mrn a and an hur protein |
GB0209539D0 (en) | 2002-04-26 | 2002-06-05 | Avecia Ltd | Monomer Polymer and process |
EP1361277A1 (en) | 2002-04-30 | 2003-11-12 | Centre National De La Recherche Scientifique (Cnrs) | Optimization of transgene expression in mammalian cells |
EP1507556B1 (en) | 2002-05-02 | 2016-07-27 | Wyeth Holdings LLC | Calicheamicin derivative-carrier conjugates |
AU2003230256B2 (en) | 2002-05-06 | 2009-06-04 | Becton, Dickinson And Company | Method and device for controlling drug pharmacokinetics |
WO2003094855A1 (en) | 2002-05-08 | 2003-11-20 | The Regents Of The University Of California | System and method for treating cardiac arrhythmias with fibroblast cells |
US7374930B2 (en) | 2002-05-21 | 2008-05-20 | Expression Genetics, Inc. | GLP-1 gene delivery for the treatment of type 2 diabetes |
US20040018525A1 (en) | 2002-05-21 | 2004-01-29 | Bayer Aktiengesellschaft | Methods and compositions for the prediction, diagnosis, prognosis, prevention and treatment of malignant neoplasma |
DE10224200C1 (de) | 2002-05-31 | 2003-08-21 | Artus Ges Fuer Molekularbiolog | Vermehrung von Ribonukleinsäuren |
AU2003237367A1 (en) | 2002-06-03 | 2003-12-19 | Chiron Corporation | Use of nrg4, or inhibitors thereof, in the treatment of colon and pancreatic cancer |
SE0201907D0 (sv) | 2002-06-19 | 2002-06-19 | Atos Medical Ab | Plaster for tracheostoma valves |
US7901708B2 (en) | 2002-06-28 | 2011-03-08 | Protiva Biotherapeutics, Inc. | Liposomal apparatus and manufacturing methods |
NZ537306A (en) | 2002-07-01 | 2008-11-28 | Kenneth S Warren Inst Inc | Compositions comprising mutein recombinant tissue protective cytokines having one or more amino acid substitutions facilitating transport of a molecule via transcytosis across an endothelial cell barrier |
DE10229872A1 (de) | 2002-07-03 | 2004-01-29 | Curevac Gmbh | Immunstimulation durch chemisch modifizierte RNA |
GB0215509D0 (en) | 2002-07-04 | 2002-08-14 | Novartis Ag | Marker genes |
US20040009180A1 (en) | 2002-07-11 | 2004-01-15 | Allergan, Inc. | Transdermal botulinum toxin compositions |
US7316925B2 (en) | 2002-07-16 | 2008-01-08 | Vgx Pharmaceuticals, Inc. | Codon optimized synthetic plasmids |
US7927791B2 (en) | 2002-07-24 | 2011-04-19 | Ptc Therapeutics, Inc. | Methods for identifying small molecules that modulate premature translation termination and nonsense mediated mRNA decay |
EP1393745A1 (en) | 2002-07-29 | 2004-03-03 | Hybridon, Inc. | Modulation of immunostimulatory properties of oligonucleotide-based compounds by optimal presentation of 5'ends |
EP1386925A1 (en) | 2002-07-31 | 2004-02-04 | Girindus AG | Method for preparing oligonucleotides |
US6653468B1 (en) | 2002-07-31 | 2003-11-25 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Universal support media for synthesis of oligomeric compounds |
AU2003266953A1 (en) | 2002-08-01 | 2004-02-23 | Abbott Laboratories Vascular Enterprises, Limited | Apparatus for sealing a puncture by causing a reduction in the circumference of the puncture |
EP1873180B1 (en) | 2002-08-14 | 2014-05-07 | Novartis AG | Ophthalmic device made from a radiation-curable prepolymer |
BR0313890A (pt) | 2002-08-30 | 2005-07-26 | Becton Dickinson Co | Método de controle da farmacocinética de compostos imunomoduladores |
MX367615B (es) | 2002-09-06 | 2019-08-28 | Cerulean Pharma Inc | Polimeros a base de ciclodextrina para el suministro de agentes terapeuticos. |
US7569214B2 (en) | 2002-09-09 | 2009-08-04 | Nektar Therapeutics Al, Corporation | Method for preparing water-soluble polymer derivatives bearing a terminal carboxylic acid |
US7534872B2 (en) | 2002-09-27 | 2009-05-19 | Syngen, Inc. | Compositions and methods for the use of FMOC derivatives in DNA/RNA synthesis |
EP3284753B1 (en) | 2002-10-17 | 2019-06-05 | Genmab A/S | Human monoclonal antibodies against cd20 for use in the treatment of multiple sclerosis |
CN100572535C (zh) | 2002-10-22 | 2009-12-23 | 卫材R&D管理有限公司 | 在分裂停止后的产多巴胺型神经元前体细胞中特异性表达的基因 |
US6896666B2 (en) | 2002-11-08 | 2005-05-24 | Kochamba Family Trust | Cutaneous injection delivery under suction |
CA2506805A1 (en) | 2002-11-21 | 2004-06-10 | Epicentre Technologies Corporation | Methods for using primers that encode one strand of a double-stranded promoter |
US7491234B2 (en) | 2002-12-03 | 2009-02-17 | Boston Scientific Scimed, Inc. | Medical devices for delivery of therapeutic agents |
CA2508831C (en) | 2002-12-13 | 2012-05-01 | Immunomedics, Inc. | Immunoconjugates with an intracellularly-cleavable linkage |
TWI335821B (en) | 2002-12-16 | 2011-01-11 | Genentech Inc | Immunoglobulin variants and uses thereof |
JP2006516099A (ja) | 2002-12-23 | 2006-06-22 | ダイナバックス テクノロジーズ コーポレイション | 分枝状の免疫調節化合物及び該化合物の使用方法 |
US7169892B2 (en) | 2003-01-10 | 2007-01-30 | Astellas Pharma Inc. | Lipid-peptide-polymer conjugates for long blood circulation and tumor specific drug delivery systems |
WO2004067728A2 (en) | 2003-01-17 | 2004-08-12 | Ptc Therapeutics | Methods and systems for the identification of rna regulatory sequences and compounds that modulate their function |
US8426194B2 (en) | 2003-01-21 | 2013-04-23 | Ptc Therapeutics, Inc. | Methods and agents for screening for compounds capable of modulating VEGF expression |
US9068234B2 (en) | 2003-01-21 | 2015-06-30 | Ptc Therapeutics, Inc. | Methods and agents for screening for compounds capable of modulating gene expression |
CA2514184C (en) | 2003-01-21 | 2016-04-12 | Ptc Therapeutics, Inc. | Methods for identifying compounds that modulate untranslated region-dependent gene expression and methods of using same |
US20040147027A1 (en) | 2003-01-28 | 2004-07-29 | Troy Carol M. | Complex for facilitating delivery of dsRNA into a cell and uses thereof |
EP1592791A2 (en) | 2003-02-10 | 2005-11-09 | National Institute of Advanced Industrial Science and Technology | Regulation of gene expression by dna interference |
JP4728948B2 (ja) | 2003-02-10 | 2011-07-20 | エラン ファーマシューティカルズ,インコーポレイテッド | 免疫グロブリン製剤およびその調製の方法 |
US20040167090A1 (en) | 2003-02-21 | 2004-08-26 | Monahan Sean D. | Covalent modification of RNA for in vitro and in vivo delivery |
CA2450289A1 (en) | 2003-03-20 | 2005-05-19 | Imclone Systems Incorporated | Method of producing an antibody to epidermal growth factor receptor |
US7320961B2 (en) | 2003-03-24 | 2008-01-22 | Abbott Laboratories | Method for treating a disease, disorder or adverse effect caused by an elevated serum concentration of an UGT1A1 substrate |
AU2004225520A1 (en) | 2003-03-25 | 2004-10-14 | Stratagene | DNA polymerase fusions and uses thereof |
US20040242502A1 (en) | 2003-04-08 | 2004-12-02 | Galenica Pharmaceuticals, Inc. | Semi-synthetic saponin analogs with carrier and immune stimulatory activities for DNA and RNA vaccines |
SI1613350T1 (sl) | 2003-04-09 | 2009-08-31 | Genentech Inc | Zdravljenje avtoimunske bolezni pri bolniku z neustreznim odzivom na inhibitor TNF-alfa |
ES2440654T3 (es) | 2003-05-05 | 2014-01-29 | Ben-Gurion University Of The Negev Research And Development Authority | Preparaciones poliméricas reticuladas inyectables y usos de las mismas |
US7348004B2 (en) | 2003-05-06 | 2008-03-25 | Syntonix Pharmaceuticals, Inc. | Immunoglobulin chimeric monomer-dimer hybrids |
TWI353991B (en) | 2003-05-06 | 2011-12-11 | Syntonix Pharmaceuticals Inc | Immunoglobulin chimeric monomer-dimer hybrids |
EP2298347B1 (en) | 2003-05-06 | 2015-09-30 | Biogen Hemophilia Inc. | Clotting factor chimeric proteins for treatment of a hemostatic disorder |
US20040226556A1 (en) | 2003-05-13 | 2004-11-18 | Deem Mark E. | Apparatus for treating asthma using neurotoxin |
US9567591B2 (en) | 2003-05-15 | 2017-02-14 | Mello Biotechnology, Inc. | Generation of human embryonic stem-like cells using intronic RNA |
GB0313132D0 (en) | 2003-06-06 | 2003-07-09 | Ich Productions Ltd | Peptide ligands |
EP1636385A4 (en) | 2003-06-24 | 2010-06-02 | Mirus Bio Corp | INHIBITION OF GENE FUNCTION BY IN VIVO DISTRIBUTION OF GENE EXPRESSION INHIBITORS BASED ON POLYNUCLEOTIDES IN MAMMALIAN CELLS |
GB0316089D0 (en) | 2003-07-09 | 2003-08-13 | Xo Bioscience Ltd | Differentiation method |
US8592197B2 (en) | 2003-07-11 | 2013-11-26 | Novavax, Inc. | Functional influenza virus-like particles (VLPs) |
US7575572B2 (en) | 2003-07-15 | 2009-08-18 | Spinal Generations, Llc | Method and device for delivering medicine to bone |
US20050013870A1 (en) | 2003-07-17 | 2005-01-20 | Toby Freyman | Decellularized extracellular matrix of conditioned body tissues and uses thereof |
CN103880955A (zh) | 2003-07-18 | 2014-06-25 | 安姆根有限公司 | 肝细胞生长因子的特异性结合物 |
EP1648914A4 (en) | 2003-07-31 | 2009-12-16 | Regulus Therapeutics Inc | OLIGOMERIC COMPOUNDS AND COMPOSITIONS USEFUL FOR MODULATING SMALL NON-CODING RNA |
DE10335833A1 (de) * | 2003-08-05 | 2005-03-03 | Curevac Gmbh | Transfektion von Blutzellen mit mRNA zur Immunstimulation und Gentherapie |
US8668926B1 (en) | 2003-09-15 | 2014-03-11 | Shaker A. Mousa | Nanoparticle and polymer formulations for thyroid hormone analogs, antagonists, and formulations thereof |
US7135010B2 (en) | 2003-09-30 | 2006-11-14 | Damage Control Surgical Technologies, Inc. | Method and apparatus for rapid deployment chest drainage |
EP1673473B1 (en) | 2003-10-06 | 2011-07-06 | Novartis AG | Use of genetic polymorphisms that associate with efficacy of treatment of inflammatory disease |
US20050130201A1 (en) | 2003-10-14 | 2005-06-16 | Dharmacon, Inc. | Splint-assisted enzymatic synthesis of polyribounucleotides |
DE10347710B4 (de) | 2003-10-14 | 2006-03-30 | Johannes-Gutenberg-Universität Mainz | Rekombinante Impfstoffe und deren Verwendung |
WO2005044859A2 (en) | 2003-11-05 | 2005-05-19 | Glycart Biotechnology Ag | Cd20 antibodies with increased fc receptor binding affinity and effector function |
WO2005047536A2 (en) | 2003-11-13 | 2005-05-26 | Novartis Ag | Detection of genomic amplification and deletion in cancer |
US7998119B2 (en) | 2003-11-18 | 2011-08-16 | Nano Pass Technologies Ltd. | System and method for delivering fluid into flexible biological barrier |
US20070054278A1 (en) | 2003-11-18 | 2007-03-08 | Applera Corporation | Polymorphisms in nucleic acid molecules encoding human enzyme proteins, methods of detection and uses thereof |
US7699852B2 (en) | 2003-11-19 | 2010-04-20 | Zimmer Spine, Inc. | Fenestrated bone tap and method |
US20050153333A1 (en) | 2003-12-02 | 2005-07-14 | Sooknanan Roy R. | Selective terminal tagging of nucleic acids |
US8529939B2 (en) | 2003-12-08 | 2013-09-10 | Gel-Del Technologies, Inc. | Mucoadhesive drug delivery devices and methods of making and using thereof |
US7674884B2 (en) | 2003-12-10 | 2010-03-09 | Novimmune S.A. | Neutralizing antibodies and methods of use thereof |
US8372966B2 (en) | 2003-12-19 | 2013-02-12 | University Of Cincinnati | Oligonucleotide decoys and methods of use |
EP1703893B1 (en) | 2003-12-23 | 2012-04-11 | Genentech, Inc. | Novel anti-il 13 antibodies and uses thereof |
US7150726B2 (en) | 2004-01-23 | 2006-12-19 | Norfolk Medical | Device for subcutaneous infusion of fluids |
EP1713514B1 (en) | 2004-01-28 | 2021-11-24 | Johns Hopkins University | Drugs and gene carrier particles that rapidly move through mucous barriers |
US20070224635A1 (en) | 2004-01-30 | 2007-09-27 | Maxygen Holdings, Ltd. | Regulated Stop Codon Readthrough |
US7309487B2 (en) | 2004-02-09 | 2007-12-18 | George Inana | Methods and compositions for detecting and treating retinal diseases |
JP4805848B2 (ja) | 2004-02-12 | 2011-11-02 | モルフォテック、インク. | 腫瘍抗原の生物活性を特異的に阻止するモノクローナル抗体 |
US20070265220A1 (en) | 2004-03-15 | 2007-11-15 | City Of Hope | Methods and compositions for the specific inhibition of gene expression by double-stranded RNA |
EP3736295A1 (en) | 2004-03-24 | 2020-11-11 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Subtypes of humanized antibody against interleukin-6 receptor |
WO2005098433A2 (en) | 2004-04-01 | 2005-10-20 | Novartis Ag | Diagnostic assays for alzheimer’s disease |
BRPI0509806A (pt) | 2004-04-12 | 2007-09-18 | Allergan Inc | sistema de injeção em múltiplos locais |
WO2005103081A2 (en) | 2004-04-20 | 2005-11-03 | Genmab A/S | Human monoclonal antibodies against cd20 |
ES2246694B1 (es) | 2004-04-29 | 2007-05-01 | Instituto Cientifico Y Tecnologico De Navarra, S.A. | Nanoparticulas pegiladas. |
US20080119645A1 (en) | 2004-05-05 | 2008-05-22 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Amidites and Methods of Rna Synthesis |
MXPA06012990A (es) | 2004-05-12 | 2007-02-12 | Baxter Int | Microesferas de acidos nucleicos, produccion y suministro de las mismas. |
US20080103053A1 (en) | 2005-11-22 | 2008-05-01 | Helicos Biosciences Corporation | Methods and compositions for sequencing a nucleic acid |
WO2005117557A2 (en) | 2004-06-01 | 2005-12-15 | San Diego State University Foundation | Expression system |
AU2005251403B2 (en) | 2004-06-07 | 2011-09-01 | Arbutus Biopharma Corporation | Cationic lipids and methods of use |
AU2005252273B2 (en) | 2004-06-07 | 2011-04-28 | Arbutus Biopharma Corporation | Lipid encapsulated interfering RNA |
CA2608862C (en) | 2004-06-11 | 2020-05-05 | Trustees Of Tufts College | Silk-based drug delivery system |
US8338648B2 (en) | 2004-06-12 | 2012-12-25 | Signum Biosciences, Inc. | Topical compositions and methods for epithelial-related conditions |
US7527947B2 (en) | 2004-06-14 | 2009-05-05 | Novozymes A/S | Signal peptide for producing a polypeptide |
WO2006046978A2 (en) | 2004-06-28 | 2006-05-04 | Argos Therapeutics, Inc. | Cationic peptide-mediated transformation |
WO2006005058A2 (en) | 2004-06-30 | 2006-01-12 | Nektar Therapeutics Al, Corporation | Polymer-factor ix moiety conjugates |
US20070292445A1 (en) | 2004-07-06 | 2007-12-20 | Transpharma Medical Ltd. | Delivery system for transdermal immunization |
DE102004035227A1 (de) | 2004-07-21 | 2006-02-16 | Curevac Gmbh | mRNA-Gemisch zur Vakzinierung gegen Tumorerkrankungen |
AU2005328382C1 (en) | 2004-07-21 | 2013-01-24 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Oligonucleotides comprising a modified or non-natural nucleobase |
US7603349B1 (en) | 2004-07-29 | 2009-10-13 | Yahoo! Inc. | User interfaces for search systems using in-line contextual queries |
GB0417487D0 (en) | 2004-08-05 | 2004-09-08 | Novartis Ag | Organic compound |
JP5192234B2 (ja) | 2004-08-10 | 2013-05-08 | アルナイラム ファーマシューティカルズ, インコーポレイテッド | 化学修飾オリゴヌクレオチド |
SE0402025D0 (sv) | 2004-08-13 | 2004-08-13 | Active Biotech Ab | Treatment of hyperproliferative disease with superantigens in combination with another anticancer agent |
CA2478458A1 (en) | 2004-08-20 | 2006-02-20 | Michael Panzara | Treatment of pediatric multiple sclerosis |
NZ553910A (en) | 2004-08-26 | 2009-05-31 | Engeneic Molecular Delivery Pty | Delivering functional nucleic acids to mammalian cells via bacterially derived, intact minicells |
DE102004042546A1 (de) | 2004-09-02 | 2006-03-09 | Curevac Gmbh | Kombinationstherapie zur Immunstimulation |
US7501486B2 (en) | 2004-09-07 | 2009-03-10 | Burnham Institute For Medical Research | Peptides that selectively home to heart vasculature and related conjugates and methods |
US8663599B1 (en) | 2004-10-05 | 2014-03-04 | Gp Medical, Inc. | Pharmaceutical composition of nanoparticles |
JPWO2006041088A1 (ja) | 2004-10-12 | 2008-05-15 | 株式会社ティッシュターゲティングジャパン | 脳移行性骨髄前駆細胞 |
EP1799659A1 (en) | 2004-10-13 | 2007-06-27 | PTC Therapeutics, Inc. | Compounds for nonsense suppression, and methods for their use |
US8057821B2 (en) | 2004-11-03 | 2011-11-15 | Egen, Inc. | Biodegradable cross-linked cationic multi-block copolymers for gene delivery and methods of making thereof |
US20080261905A1 (en) | 2004-11-08 | 2008-10-23 | K.U. Leuven Research And Development | Modified Nucleosides for Rna Interference |
EP1819379B1 (en) | 2004-11-18 | 2016-08-31 | Nanopass Technologies Ltd. | System for delivering fluid into flexible biological barrier |
CA2588607A1 (en) | 2004-11-23 | 2006-06-01 | Ptc Therapeutics, Inc. | Carbazole, carboline and indole derivatives useful in the inhibition of vegf production |
US7964571B2 (en) | 2004-12-09 | 2011-06-21 | Egen, Inc. | Combination of immuno gene therapy and chemotherapy for treatment of cancer and hyperproliferative diseases |
US8354476B2 (en) | 2004-12-10 | 2013-01-15 | Kala Pharmaceuticals, Inc. | Functionalized poly(ether-anhydride) block copolymers |
US9068969B2 (en) | 2004-12-28 | 2015-06-30 | Ptc Therapeutics, Inc. | Cell based methods and systems for the identification of RNA regulatory sequences and compounds that modulate their functions |
US8535702B2 (en) | 2005-02-01 | 2013-09-17 | Boston Scientific Scimed, Inc. | Medical devices having porous polymeric regions for controlled drug delivery and regulated biocompatibility |
US7404969B2 (en) | 2005-02-14 | 2008-07-29 | Sirna Therapeutics, Inc. | Lipid nanoparticle based compositions and methods for the delivery of biologically active molecules |
CA2597724A1 (en) | 2005-02-14 | 2007-08-02 | Sirna Therapeutics, Inc. | Cationic lipids and formulated molecular compositions containing them |
US20060263338A1 (en) | 2005-03-04 | 2006-11-23 | Jacoby Douglas B | Catheter-based delivery of Skeletal Myoblasts to the Myocardium of Damaged Hearts |
EP2290363B1 (en) | 2005-03-11 | 2014-01-08 | Firalis SAS | Biomarkers for cardiovascular side-effects induced by cox-2 inhibitory compounds |
JP4793806B2 (ja) | 2005-03-22 | 2011-10-12 | Tti・エルビュー株式会社 | イオントフォレーシス装置 |
US8415325B2 (en) | 2005-03-31 | 2013-04-09 | University Of Delaware | Cell-mediated delivery and targeted erosion of noncovalently crosslinked hydrogels |
WO2006110585A2 (en) | 2005-04-07 | 2006-10-19 | Novartis Vaccines And Diagnostics Inc. | Cancer-related genes (prlr) |
AU2006235276A1 (en) | 2005-04-07 | 2006-10-19 | Novartis Vaccines And Diagnostics Inc. | CACNA1E in cancer diagnosis, detection and treatment |
WO2006110776A2 (en) | 2005-04-12 | 2006-10-19 | Nektar Therapeutics Al, Corporation | Polyethylene glycol cojugates of antimicrobial agents |
CA2604807C (en) | 2005-04-19 | 2018-06-12 | Basf Plant Science Gmbh | Improved methods controlling gene expression |
US20060241076A1 (en) | 2005-04-26 | 2006-10-26 | Coley Pharmaceutical Gmbh | Modified oligoribonucleotide analogs with enhanced immunostimulatory activity |
US7850656B2 (en) | 2005-04-29 | 2010-12-14 | Warsaw Orthopedic, Inc. | Devices and methods for delivering medical agents |
CN101213297B (zh) | 2005-05-09 | 2013-02-13 | 小野药品工业株式会社 | 程序性死亡-1(pd-1)的人单克隆抗体及单独使用或与其它免疫治疗剂联合使用抗pd-1抗体来治疗癌症的方法 |
US20070072175A1 (en) | 2005-05-13 | 2007-03-29 | Biogen Idec Ma Inc. | Nucleotide array containing polynucleotide probes complementary to, or fragments of, cynomolgus monkey genes and the use thereof |
US20060265771A1 (en) | 2005-05-17 | 2006-11-23 | Lewis David L | Monitoring microrna expression and function |
DE102005023170A1 (de) | 2005-05-19 | 2006-11-23 | Curevac Gmbh | Optimierte Formulierung für mRNA |
KR20130114758A (ko) * | 2005-05-27 | 2013-10-17 | 오스페달레 산 라파엘 에스.알.엘. | Mi-rna를 포함하는 유전자 벡터 |
WO2006128245A1 (en) | 2005-06-03 | 2006-12-07 | Southern Adelaide Health Service-Flinders Medical Centre | Targeting cells with altered microrna expression |
JP2008541770A (ja) | 2005-06-03 | 2008-11-27 | ジェネンテック・インコーポレーテッド | 改変したフコシル化レベルを有する抗体の産生方法 |
US7550264B2 (en) | 2005-06-10 | 2009-06-23 | Datascope Investment Corporation | Methods and kits for sense RNA synthesis |
US7691086B2 (en) | 2005-06-14 | 2010-04-06 | Tengiz Tkebuchava | Catheter for introduction of medications to the tissues of a heart or other organ |
EP2279758B1 (en) | 2005-06-16 | 2015-02-25 | Nektar Therapeutics | Conjugates having a degradable linkage and polymeric reagents useful in preparing such conjugates |
US8202835B2 (en) | 2005-06-17 | 2012-06-19 | Yitzchak Hillman | Disease treatment via antimicrobial peptides or their inhibitors |
US20110182805A1 (en) | 2005-06-17 | 2011-07-28 | Desimone Joseph M | Nanoparticle fabrication methods, systems, and materials |
KR20080025181A (ko) | 2005-06-30 | 2008-03-19 | 아케믹스 코포레이션 | 완전 2'-변형된 핵산 전사체를 생성하기 위한 물질 및 방법 |
US8101385B2 (en) | 2005-06-30 | 2012-01-24 | Archemix Corp. | Materials and methods for the generation of transcripts comprising modified nucleotides |
US20080220471A1 (en) | 2005-07-27 | 2008-09-11 | Genentech, Inc. | Vectors and Methods Using Same |
US9012219B2 (en) | 2005-08-23 | 2015-04-21 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | RNA preparations comprising purified modified RNA for reprogramming cells |
US20070048741A1 (en) | 2005-08-24 | 2007-03-01 | Getts Robert C | Methods and kits for sense RNA synthesis |
WO2007025008A2 (en) | 2005-08-24 | 2007-03-01 | The Scripps Research Institute | Translation enhancer-element dependent vector systems |
JP5135220B2 (ja) | 2005-09-01 | 2013-02-06 | ノバルティス ヴァクシンズ アンド ダイアグノスティクス ゲーエムベーハー アンド カンパニー カーゲー | 血清群c髄膜炎菌を含む複数ワクチン接種 |
ATE499112T1 (de) | 2005-09-01 | 2011-03-15 | Celgene Corp | Immunologische verwendungen von immunmodulatorischen verbindungen für einen impfstoff und therapie gegen infektionskrankheiten |
US8420605B2 (en) | 2005-09-07 | 2013-04-16 | The University Of Strathclyde | Hydrogel compositions |
US20120021042A1 (en) | 2005-09-15 | 2012-01-26 | Steffen Panzner | Efficient Method For Loading Amphoteric Liposomes With Nucleic Acid Active Substances |
US20070185432A1 (en) | 2005-09-19 | 2007-08-09 | Transport Pharmaceuticals, Inc. | Electrokinetic system and method for delivering methotrexate |
DE102005046490A1 (de) | 2005-09-28 | 2007-03-29 | Johannes-Gutenberg-Universität Mainz | Modifikationen von RNA, die zu einer erhöhten Transkriptstabilität und Translationseffizienz führen |
US20070087437A1 (en) | 2005-10-14 | 2007-04-19 | Jifan Hu | Methods for rejuvenating cells in vitro and in vivo |
US8012096B2 (en) | 2005-10-17 | 2011-09-06 | Cardiogenesis Corporation | Surgical device and method for performing combination revascularization and therapeutic substance delivery to tissue |
NZ568211A (en) | 2005-11-04 | 2011-11-25 | Novartis Vaccines & Diagnostic | Influenza vaccines including combinations of particulate adjuvants and immunopotentiators |
US20070105124A1 (en) | 2005-11-08 | 2007-05-10 | Getts Robert C | Methods and kits for nucleic acid amplification |
WO2007057167A2 (en) | 2005-11-18 | 2007-05-24 | Bioline Limited | A method for enhancing enzymatic dna polymerase reactions |
KR20080090406A (ko) | 2005-11-28 | 2008-10-08 | 젠맵 에이/에스 | 재조합 1가 항체 및 그의 제조 방법 |
CA2639819C (en) | 2005-11-30 | 2012-10-23 | Epicentre Technologies Corporation | Selective terminal tagging of nucleic acids |
TWI389709B (zh) | 2005-12-01 | 2013-03-21 | Novartis Ag | 經皮治療系統 |
US8603457B2 (en) | 2005-12-02 | 2013-12-10 | University Of Rochester | Nonsense suppression and genetic codon alteration by targeted modification |
EP1954252B1 (en) | 2005-12-02 | 2016-02-03 | GlaxoSmithKline Biologicals SA | Nanoparticles for use in immunogenic compositions |
US7579318B2 (en) | 2005-12-06 | 2009-08-25 | Centre De La Recherche De La Scientifique | Cell penetrating peptides for intracellular delivery of molecules |
WO2007069090A2 (en) | 2005-12-06 | 2007-06-21 | Centre National De La Recherche Scientifique | Cell penetrating peptides for intracellular delivery of molecules |
US8158360B2 (en) | 2005-12-08 | 2012-04-17 | Novartis Ag | Effects of inhibitors of FGFR3 on gene transcription |
EP2206724A1 (en) | 2005-12-13 | 2010-07-14 | Kyoto University | Nuclear reprogramming factor |
AU2006325030B2 (en) | 2005-12-16 | 2012-07-26 | Cellectis | Cell penetrating peptide conjugates for delivering nucleic acids into cells |
EP2468890B1 (en) | 2006-01-05 | 2014-03-19 | The Ohio State University Research Foundation | MicroRNA-based methods and compositions for the diagnosis and treatment of solid cancers of the breast or lung |
EP2586455B1 (en) | 2006-01-05 | 2014-06-25 | The Ohio State University Research Foundation | MicroRNA expressions abnormalities in pancreatic endocrine and acinar tumors |
CA2636867C (en) | 2006-01-13 | 2015-12-01 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Vaccines and immunotherapeutics using codon optimized il-15 and methods for using the same |
CA2640171C (en) | 2006-01-27 | 2014-10-28 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | 6-modified bicyclic nucleic acid analogs |
US20070178103A1 (en) | 2006-01-30 | 2007-08-02 | Fey Georg H | CD19-specific immunotoxin and treatment method |
US9458444B2 (en) | 2006-02-03 | 2016-10-04 | Opko Biologics Ltd. | Long-acting coagulation factors and methods of producing same |
US8476234B2 (en) | 2006-02-03 | 2013-07-02 | Prolor Biotech Inc. | Long-acting coagulation factors and methods of producing same |
US8946155B2 (en) | 2006-02-03 | 2015-02-03 | Opko Biologics Ltd. | Long-acting polypeptides and methods of producing and administering same |
DE102006007433A1 (de) | 2006-02-17 | 2007-08-23 | Curevac Gmbh | Adjuvanz in Form einer Lipid-modifizierten Nukleinsäure |
WO2007097561A1 (en) | 2006-02-20 | 2007-08-30 | Ewha University - Industry Collaboration Foundation | Peptide having cell membrane penetrating activity |
CN103030801B (zh) | 2006-02-21 | 2015-07-22 | 尼克塔治疗公司 | 嵌段可降解聚合物及由其制备的轭合物 |
US20080038278A1 (en) | 2006-02-24 | 2008-02-14 | Jingsong Cao | GPAT3 encodes a mammalian, microsomal acyl-coa:glycerol 3- phosphate acyltransferase |
EP1991204A2 (en) | 2006-02-24 | 2008-11-19 | Novartis AG | Microparticles containing biodegradable polymer and cationic polysaccharide for use in immunogenic compositions |
EP4276469A3 (en) | 2006-02-28 | 2024-01-17 | Biogen MA Inc. | Methods of treating inflammatory and autoimmune diseases with natalizumab |
US7910152B2 (en) | 2006-02-28 | 2011-03-22 | Advanced Cardiovascular Systems, Inc. | Poly(ester amide)-based drug delivery systems with controlled release rate and morphology |
EP2522750A1 (en) | 2006-03-02 | 2012-11-14 | The Ohio State University | MicroRNA expression profile associated with pancreatic cancer |
GB0605217D0 (en) | 2006-03-15 | 2006-04-26 | Novartis Ag | Method and compositions for assessing acute rejection |
WO2007109244A2 (en) | 2006-03-21 | 2007-09-27 | Morehouse School Of Medicine | Novel nanoparticles for delivery of active agents |
EP2007435B1 (en) | 2006-03-31 | 2019-12-18 | Massachusetts Institute Of Technology | System for targeted delivery of therapeutic agents |
AU2007240986A1 (en) | 2006-04-04 | 2007-11-01 | Stc.Unm | Swellable particles for drug delivery |
CA2649325C (en) | 2006-04-14 | 2019-01-08 | Epicentre Technologies Corporation | Kits and methods for generating 5' capped rna |
EP1852127A1 (en) | 2006-05-02 | 2007-11-07 | Charité - Universitätsmedizin Berlin | Use of a B-cell-depleting antibody for treatment of polyoma virus infections |
CA2652280C (en) | 2006-05-15 | 2014-01-28 | Massachusetts Institute Of Technology | Polymers for functional particles |
KR20090019810A (ko) | 2006-05-24 | 2009-02-25 | 라보라뚜와르 세로노 에스. 에이. | 다발성 경화증 치료를 위한 클라드리빈 요법 |
CN104356230A (zh) | 2006-06-02 | 2015-02-18 | 哈佛大学校长及研究员协会 | 蛋白质表面重建 |
US20090018566A1 (en) | 2006-06-30 | 2009-01-15 | Artheromed, Inc. | Atherectomy devices, systems, and methods |
JP5605895B2 (ja) | 2006-07-04 | 2014-10-15 | ゲンマブ エー/エス | Copdを処置するためのcd20結合分子 |
ATE503469T1 (de) | 2006-07-07 | 2011-04-15 | Univ Aarhus | Nanoteilchen zur abgabe von nukleinsäure |
AU2007272558B2 (en) | 2006-07-12 | 2010-12-09 | Novartis Ag | Actinically crosslinkable copolymers for manufacturing contact lenses |
JP2009544287A (ja) | 2006-07-20 | 2009-12-17 | ノバルティス アーゲー | 癌を処置、診断、または検出するためのamigo−2インヒビター |
WO2008013785A2 (en) | 2006-07-24 | 2008-01-31 | Singh-Broemer And Company, Inc. | Solid nanoparticle formulation of water insoluble pharmaceutical substances with reduced ostwald ripening |
CA2659301A1 (en) | 2006-07-28 | 2008-02-07 | Applera Corporation | Dinucleotide mrna cap analogs |
JP2010507361A (ja) | 2006-07-31 | 2010-03-11 | キュアバック ゲーエムベーハー | 具体的には免疫刺激剤/アジュバントとしての、一般式(I):GlXmGn、または一般式(II):ClXmCnで表される核酸 |
DE102006035618A1 (de) | 2006-07-31 | 2008-02-07 | Curevac Gmbh | Nukleinsäure der Formel (I): GlXmGn, insbesondere als immunstimulierendes Adjuvanz |
AR062271A1 (es) | 2006-08-07 | 2008-10-29 | Genzyme Corp | Uso de una cantidad efectiva de al menos un inhibidor de cxcr4, al menos un agonista de cxcr2 y g-csf para movilizar las celulas progenitoras y/o celulas madre |
US20080076701A1 (en) | 2006-08-18 | 2008-03-27 | Nastech Pharmaceutical Company Inc. | Dicer substrate rna peptide conjugates and methods for rna therapeutics |
US8658211B2 (en) | 2006-08-18 | 2014-02-25 | Arrowhead Madison Inc. | Polyconjugates for in vivo delivery of polynucleotides |
AU2007292221B2 (en) | 2006-09-06 | 2013-08-29 | The Regents Of The University Of California | Selectively targeted antimicrobial peptides and the use thereof |
MY170607A (en) | 2006-09-07 | 2019-08-20 | Crucell Holland Bv | Human binding molecules capable of neutralizing influenza virus h5n1 and uses thereof |
ATE489048T1 (de) | 2006-09-08 | 2010-12-15 | Arbel Medical Ltd | Vorrichtung für kombinierte behandlung |
CA2663003C (en) | 2006-09-08 | 2018-02-13 | Justin Hanes | Compositions and methods for enhancing transport through mucus |
US8454948B2 (en) | 2006-09-14 | 2013-06-04 | Medgenics Medical Israel Ltd. | Long lasting drug formulations |
CA2664383C (en) | 2006-09-19 | 2017-08-22 | Asuragen, Inc. | Micrornas differentially expressed in pancreatic diseases and uses thereof |
GB0619182D0 (en) | 2006-09-29 | 2006-11-08 | Leuven K U Res & Dev | Oligonucleotide arrays |
MX2009003548A (es) | 2006-10-03 | 2009-04-15 | Alnylam Pharmaceuticals Inc | Formulaciones que contienen lipidos. |
BRPI0715299A2 (pt) | 2006-10-05 | 2013-07-23 | The Johns Hopkins University | mÉtodo para preparar nanoparticulas polimÉricas, mÉtodod para preparar uma coposiÇço micelar, micelas polimÉricas reconstituÍveis, composiÇço polimÉrica bioativa de nanopartÍculas, mÉtodo para proporcionar um medicamento a um paciente e processo para preparar composiÇÕes de nanoparticulas polimÉricas |
DE102006051516A1 (de) | 2006-10-31 | 2008-05-08 | Curevac Gmbh | (Basen-)modifizierte RNA zur Expressionssteigerung eines Proteins |
WO2008054828A2 (en) | 2006-11-01 | 2008-05-08 | The Ohio State University Research Foundation | Microrna expression signature for predicting survival and metastases in hepatocellular carcinoma |
US8414927B2 (en) | 2006-11-03 | 2013-04-09 | Boston Scientific Scimed, Inc. | Cross-linked polymer particles |
US7999087B2 (en) | 2006-11-15 | 2011-08-16 | Agilent Technologies, Inc. | 2′-silyl containing thiocarbonate protecting groups for RNA synthesis |
US8242258B2 (en) | 2006-12-03 | 2012-08-14 | Agilent Technologies, Inc. | Protecting groups for RNA synthesis |
US8399007B2 (en) | 2006-12-05 | 2013-03-19 | Landec Corporation | Method for formulating a controlled-release pharmaceutical formulation |
WO2008068631A2 (en) | 2006-12-06 | 2008-06-12 | Novartis Ag | Vaccines including antigen from four strains of influenza virus |
CN101622348A (zh) | 2006-12-08 | 2010-01-06 | 奥斯瑞根公司 | 作为治疗性干预靶标的miR-20调节的基因和途径 |
US9034348B2 (en) | 2006-12-11 | 2015-05-19 | Chi2Gel Ltd. | Injectable chitosan mixtures forming hydrogels |
BRPI0720476B1 (pt) | 2006-12-18 | 2022-05-31 | Acceleron Pharma Inc | Uso de um polipeptídeo de actrii para tratar anemia em um paciente humano |
CA2671925A1 (en) | 2006-12-21 | 2008-07-10 | Stryker Corporation | Sustained-release formulations comprising crystals, macromolecular gels, and particulate suspensions of biologic agents |
US8268586B2 (en) | 2006-12-21 | 2012-09-18 | Novozymes, Inc. | Modified messenger RNA stabilizing sequences for expressing genes in bacterial cells |
WO2008078180A2 (en) | 2006-12-22 | 2008-07-03 | Archemix Corp. | Materials and methods for the generation of transcripts comprising modified nucleotides |
DE102006061015A1 (de) | 2006-12-22 | 2008-06-26 | Curevac Gmbh | Verfahren zur Reinigung von RNA im präparativen Maßstab mittels HPLC |
US7699803B2 (en) | 2007-01-03 | 2010-04-20 | Medtronic Vascular, Inc. | Devices and methods for injection of multiple-component therapies |
US8338166B2 (en) | 2007-01-04 | 2012-12-25 | Lawrence Livermore National Security, Llc | Sorting, amplification, detection, and identification of nucleic acid subsequences in a complex mixture |
DE102007001370A1 (de) | 2007-01-09 | 2008-07-10 | Curevac Gmbh | RNA-kodierte Antikörper |
WO2008091799A2 (en) | 2007-01-22 | 2008-07-31 | The Trustees Of Columbia University In The City Of New York | Cell-based methods for identifying inhibitors of parkinson's disease-associated lrrk2 mutants |
EP2423220B1 (en) | 2007-01-30 | 2015-04-29 | Epivax, Inc. | Regulatory t cell epitopes, compositions and uses thereof |
TW201940502A (zh) | 2007-02-02 | 2019-10-16 | 美商艾瑟勒朗法瑪公司 | 衍生自ActRIIB的變體與其用途 |
US8859229B2 (en) | 2007-02-02 | 2014-10-14 | Yale University | Transient transfection with RNA |
WO2008096370A2 (en) | 2007-02-05 | 2008-08-14 | Natco Pharma Limited | An efficient and novel purification method of recombinant hg-csf |
US8333799B2 (en) | 2007-02-12 | 2012-12-18 | C. R. Bard, Inc. | Highly flexible stent and method of manufacture |
JP2010519203A (ja) | 2007-02-16 | 2010-06-03 | メルク・シャープ・エンド・ドーム・コーポレイション | 生物活性分子の活性を強化するための組成物及び方法 |
US8242087B2 (en) | 2007-02-27 | 2012-08-14 | K.U.Leuven Research & Development | Phosphate modified nucleosides useful as substrates for polymerases and as antiviral agents |
TWI419902B (zh) | 2007-03-02 | 2013-12-21 | 百靈佳殷格翰製藥公司 | 蛋白質產製之改良 |
EP1964922A1 (en) | 2007-03-02 | 2008-09-03 | Boehringer Ingelheim Pharma GmbH & Co. KG | Improvement of protein production |
JP5249248B2 (ja) | 2007-03-05 | 2013-07-31 | ワシントン ユニバーシティー | 膜組み込みペプチドのためのナノ粒子輸送システム |
US8029496B2 (en) | 2007-03-05 | 2011-10-04 | Ebrahim Versi | Method and device for delivering drug to the trigone of the bladder |
JP2010521966A (ja) | 2007-03-20 | 2010-07-01 | ミレニアム・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッド | α4β7インテグリンに結合するヒト化免疫グロブリンをコードする核酸 |
EP2136788B1 (en) | 2007-03-30 | 2011-10-26 | Bind Biosciences, Inc. | Cancer cell targeting using nanoparticles |
NZ580997A (en) | 2007-04-27 | 2011-08-26 | Echo Therapeutics Inc | Dermal abrasion device with feedback electrode to deliver data on skin thickness and removable abrasion heads |
PT2152290E (pt) | 2007-04-30 | 2014-09-03 | Glaxosmithkline Llc | Métodos para administrar anticorpos anti-il-5 |
WO2008135855A2 (en) | 2007-05-03 | 2008-11-13 | Pfizer Products Inc. | Nanoparticles comprising a cholesteryl ester transfer protein inhibitor and a nonionizable polymer |
DK2494993T3 (en) | 2007-05-04 | 2018-11-12 | Marina Biotech Inc | Amino acid lipids and uses thereof |
US7682789B2 (en) | 2007-05-04 | 2010-03-23 | Ventana Medical Systems, Inc. | Method for quantifying biomolecules conjugated to a nanoparticle |
WO2009023311A2 (en) | 2007-05-07 | 2009-02-19 | Alba Therapeutics Corporation | Transcutaneous delivery of therapeutic agents |
JP5296328B2 (ja) | 2007-05-09 | 2013-09-25 | 独立行政法人理化学研究所 | 1本鎖環状rnaおよびその製造方法 |
DK2476689T3 (en) | 2007-05-10 | 2016-01-18 | Agilent Technologies Inc | Thiocarbonbeskyttende groups for RNA synthesis |
NO3072525T3 (ja) | 2007-05-14 | 2018-06-30 | ||
WO2008144365A2 (en) | 2007-05-17 | 2008-11-27 | Novartis Ag | Method for making dry powder compositions containing ds-rna based on supercritical fluid technology |
BRPI0812384A2 (pt) | 2007-05-22 | 2014-12-02 | Novartis Ag | Métodos de tratamento, diagnóstico e detecção de distúrbios associados a fgf21 |
US8415096B2 (en) | 2007-05-23 | 2013-04-09 | University Of South Florida | Micro-RNAs modulating immunity and inflammation |
CA2688539A1 (en) | 2007-05-30 | 2008-12-11 | The General Hospital Corporation | Methods of generating pluripotent cells from somatic cells |
MX2009013046A (es) | 2007-05-30 | 2010-02-17 | Univ Northwestern | Nanoparticulas con grupo funcional de acido nucleico para aplicaciones terapeuticas. |
US20090099034A1 (en) | 2007-06-07 | 2009-04-16 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Reagents and Methods for miRNA Expression Analysis and Identification of Cancer Biomarkers |
CN104072561B (zh) | 2007-06-19 | 2017-12-22 | 路易斯安那州州立大学及农业机械学院管理委员会 | 信使rna帽的抗‑反向硫代磷酸类似物的合成和用途 |
WO2009006438A2 (en) | 2007-06-29 | 2009-01-08 | Epicentre Technologies Corporation | Copy dna and sense rna |
WO2009015071A1 (en) | 2007-07-23 | 2009-01-29 | Dharmacon, Inc. | Screening of micro-rna cluster inhibitor pools |
US9144546B2 (en) | 2007-08-06 | 2015-09-29 | Clsn Laboratories, Inc. | Nucleic acid-lipopolymer compositions |
US20090042825A1 (en) | 2007-08-06 | 2009-02-12 | Majed Matar | Composition, method of preparation & application of concentrated formulations of condensed nucleic acids with a cationic lipopolymer |
JP5588344B2 (ja) | 2007-08-14 | 2014-09-10 | フレッド ハッチンソン キャンサー リサーチ センター | 治療薬をデリバリーするための針アレイアセンブリ及び方法 |
WO2009024599A1 (en) | 2007-08-23 | 2009-02-26 | Novartis Ag | Methods for detecting oligonucleotides |
US20110243931A1 (en) | 2007-09-02 | 2011-10-06 | Thomas Friess | Combination therapy with type i and type ii anti-cd20 antibodies |
WO2009030254A1 (en) | 2007-09-04 | 2009-03-12 | Curevac Gmbh | Complexes of rna and cationic peptides for transfection and for immunostimulation |
US8506928B2 (en) | 2007-09-07 | 2013-08-13 | The Regents Of The University Of California | Methods and compounds for targeting tissues |
US20130108663A1 (en) | 2007-09-14 | 2013-05-02 | Vrije Universiteit Brussel | Enhancing the t-cell stimulatory capacity of human antigen presenting cells in vitro and in vivo and their use in vaccination |
WO2009039198A2 (en) | 2007-09-17 | 2009-03-26 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Generation of hyperstable mrnas |
CA2715078C (en) | 2007-09-26 | 2019-07-23 | Intrexon Corporation | Synthetic 5'utrs, expression vectors, and methods for increasing transgene expression |
US8394763B2 (en) | 2007-09-26 | 2013-03-12 | Oregon Health & Science University | Cyclic undecapeptides and derivatives as multiple sclerosis therapies |
EP2042193A1 (en) | 2007-09-28 | 2009-04-01 | Biomay AG | RNA Vaccines |
WO2009046388A1 (en) | 2007-10-03 | 2009-04-09 | United States Medical Research & Material Command | Cr-2 binding peptide p28 as molecular adjuvant for dna vaccines |
WO2009046739A1 (en) | 2007-10-09 | 2009-04-16 | Curevac Gmbh | Composition for treating prostate cancer (pca) |
WO2009046738A1 (en) | 2007-10-09 | 2009-04-16 | Curevac Gmbh | Composition for treating lung cancer, particularly of non-small lung cancers (nsclc) |
CN105770878A (zh) | 2007-10-12 | 2016-07-20 | 麻省理工学院 | 疫苗纳米技术 |
US20090098118A1 (en) | 2007-10-15 | 2009-04-16 | Thomas Friess | Combination therapy of a type ii anti-cd20 antibody with an anti-bcl-2 active agent |
EP2205277B1 (en) | 2007-10-22 | 2017-07-26 | Genmab A/S | Novel antibody therapies |
BRPI0818913A2 (pt) | 2007-11-01 | 2015-05-12 | Univ Rochester | Fator viii recombinante tendo elevada estabilidade |
RU2491095C2 (ru) | 2007-11-09 | 2013-08-27 | Новартис Аг | Применения анти-cd40-антител |
WO2009062348A1 (fr) | 2007-11-14 | 2009-05-22 | Institute Of Microbiology, Chinese Academy Of Sciences | Procédés d'inhibition d'une infection par le virus de la grippe et leurs médicaments |
US20090137945A1 (en) | 2007-11-28 | 2009-05-28 | Claire Marquez | Electro Collagen Induction Therapy Device |
KR101710472B1 (ko) | 2007-11-30 | 2017-02-27 | 글락소 그룹 리미티드 | 항원-결합 작제물 |
JP2011505143A (ja) | 2007-11-30 | 2011-02-24 | ジ・オハイオ・ステイト・ユニバーシティ・リサーチ・ファウンデイション | マイクロrna発現プロファイリング及び肺癌における末梢血ターゲティング |
CA2707042A1 (en) | 2007-12-10 | 2009-06-18 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Compositions and methods for inhibiting expression of factor vii gene |
SG10201408165WA (en) | 2007-12-11 | 2015-01-29 | Scripps Research Inst | Compositions and methods related to mrna translational enhancer elements |
EP2229459B1 (en) | 2007-12-13 | 2014-08-27 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Methods and compositions for prevention or treatment of RSV infection |
EP2072618A1 (en) | 2007-12-14 | 2009-06-24 | Johannes Gutenberg-Universität Mainz | Use of RNA for reprogramming somatic cells |
WO2009086072A2 (en) | 2007-12-21 | 2009-07-09 | Genentech, Inc. | Therapy of rituximab-refractory rheumatoid arthritis patients |
CN102348806A (zh) | 2008-01-23 | 2012-02-08 | 味之素株式会社 | L-氨基酸的生产方法 |
US20100297750A1 (en) | 2008-01-24 | 2010-11-25 | Toru Natsume | Polynucleotide or analogue thereof, and gene expression regulation method using the polynucleotide or the analogue thereof |
US9226959B2 (en) | 2008-01-31 | 2016-01-05 | Curevac Ag | Nucleic acids comprising formula (NuGlXmGnNv)a and derivatives thereof as immunostimulating agent/adjuvant |
WO2009100430A2 (en) | 2008-02-08 | 2009-08-13 | Asuragen, Inc | miRNAs DIFFERENTIALLY EXPRESSED IN LYMPH NODES FROM CANCER PATIENTS |
EP2250252A2 (en) | 2008-02-11 | 2010-11-17 | Cambridge Enterprise Limited | Improved reprogramming of mammalian cells, and the cells obtained |
CA2726861C (en) | 2008-02-13 | 2014-05-27 | Intarcia Therapeutics, Inc. | Devices, formulations, and methods for delivery of multiple beneficial agents |
DE102008009920A1 (de) | 2008-02-15 | 2009-08-20 | Aj Innuscreen Gmbh | Mobiles Gerät für die Nukleinsäureisolierung |
US8506966B2 (en) | 2008-02-22 | 2013-08-13 | Novartis Ag | Adjuvanted influenza vaccines for pediatric use |
US20120027813A1 (en) | 2008-02-22 | 2012-02-02 | Novartis Vaccines And Diagnostics Srl | Adjuvanted influenza vaccines for pediatric use |
US20110052502A1 (en) | 2008-02-28 | 2011-03-03 | The Ohio State University Research Foundation | MicroRNA Signatures Associated with Human Chronic Lymphocytic Leukemia (CCL) and Uses Thereof |
WO2009108891A2 (en) | 2008-02-29 | 2009-09-03 | Egen, Inc. | Modified poloxamers for gene expression and associated methods |
EP2265644A4 (en) | 2008-03-14 | 2011-04-27 | Biocon Ltd | MONOCLONAL ANTIBODY AND CORRESPONDING METHOD |
WO2009114854A1 (en) | 2008-03-14 | 2009-09-17 | Egen, Inc. | Biodegradable cross-linked branched poly (alkylene imines) |
AU2009228163B2 (en) | 2008-03-28 | 2012-08-30 | Glaxosmithkline Llc | Methods of treatment |
CN102119217B (zh) | 2008-04-15 | 2015-06-03 | 普洛体维生物治疗公司 | 用于核酸递送的新型制剂 |
WO2010005721A2 (en) | 2008-06-16 | 2010-01-14 | Bind Biosciences, Inc. | Drug loaded polymeric nanoparticles and methods of making and using same |
WO2009127230A1 (en) | 2008-04-16 | 2009-10-22 | Curevac Gmbh | MODIFIED (m)RNA FOR SUPPRESSING OR AVOIDING AN IMMUNOSTIMULATORY RESPONSE AND IMMUNOSUPPRESSIVE COMPOSITION |
EP2112235A1 (en) | 2008-04-24 | 2009-10-28 | Max-Planck-Gesellschaft zur Förderung der Wissenschaften e.V. | Compositions and methods for microRNA expression profiling of nasopharyngeal carcinoma |
JP5539962B2 (ja) | 2008-04-25 | 2014-07-02 | ノースウェスタン、ユニバーシティ | コレステロールを隔離するのに適したナノ構造体 |
WO2009134808A2 (en) | 2008-04-28 | 2009-11-05 | President And Fellows Of Harvard College | Supercharged proteins for cell penetration |
BRPI0913012B1 (pt) | 2008-04-30 | 2021-12-14 | The Government Of The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services, Centers For Disease Control And Prevention | Quimera de ácido nucleico, métodos para detectar um anticorpo do vírus da dengue em uma amostra de um paciente, e para produzir partículas virais que expressam proteínas prm e e do vírus da dengue, uso de vírus codificado pela quimera e flavivírus ou partícula viral quiméricos |
US9394538B2 (en) | 2008-05-07 | 2016-07-19 | Shi-Lung Lin | Development of universal cancer drugs and vaccines |
EP2323716B1 (en) | 2008-05-08 | 2015-03-04 | MiniPumps, LLC | Drug-delivery pumps |
US8697098B2 (en) | 2011-02-25 | 2014-04-15 | South Dakota State University | Polymer conjugated protein micelles |
EP2620161A1 (en) | 2008-05-13 | 2013-07-31 | University of Washington | Diblock copolymers and polynucleotide complexes thereof for delivery into cells |
JP5689413B2 (ja) | 2008-05-21 | 2015-03-25 | ライニッシュ フリードリッヒ−ウィルヘルムズ−ユニバーシタット ボン | 平滑末端を有する5’三リン酸オリゴヌクレオチドおよびその使用 |
JP2011520472A (ja) | 2008-05-29 | 2011-07-21 | ハナル バイオファーマ カンパニー リミテッド | 増加されたタンパク質分解酵素抵抗性を表す修飾型エリスロポエチン(epo)ポリペプチド及びその医薬組成物 |
FR2931824B1 (fr) | 2008-05-29 | 2014-11-28 | Centre Nat Rech Scient | Procede de synthese d'arn par voie chimique. |
WO2009148528A2 (en) | 2008-05-30 | 2009-12-10 | Millennium Pharmaceuticals, Inc. | Assessment of chromosomal alterations to predict clinical outcome of bortezomib treatment |
PL215513B1 (pl) | 2008-06-06 | 2013-12-31 | Univ Warszawski | Nowe boranofosforanowe analogi dinukleotydów, ich zastosowanie, czasteczka RNA, sposób otrzymywania RNA oraz sposób otrzymywania peptydów lub bialka |
EP2433664B1 (en) | 2008-06-06 | 2016-08-10 | Wockhardt Limited | A device for delivery of biological material |
TWI451876B (zh) | 2008-06-13 | 2014-09-11 | Lilly Co Eli | 聚乙二醇化之離脯胰島素化合物 |
ES2721850T3 (es) | 2008-06-16 | 2019-08-05 | Pfizer | Nanopartículas poliméricas terapéuticas que comprenden alcaloides vinca y procedimientos de fabricación y uso de las mismas |
US8613951B2 (en) | 2008-06-16 | 2013-12-24 | Bind Therapeutics, Inc. | Therapeutic polymeric nanoparticles with mTor inhibitors and methods of making and using same |
US20100104645A1 (en) | 2008-06-16 | 2010-04-29 | Bind Biosciences, Inc. | Methods for the preparation of targeting agent functionalized diblock copolymers for use in fabrication of therapeutic targeted nanoparticles |
US7799016B2 (en) | 2008-06-20 | 2010-09-21 | Pharmaco-Kinesis Corporation | Magnetic breather pump and a method for treating a brain tumor using the same |
CN102159205A (zh) | 2008-06-25 | 2011-08-17 | Fe3医学有限公司 | 用于经皮递送治疗有效量的铁的贴片和方法 |
US20100009424A1 (en) | 2008-07-14 | 2010-01-14 | Natasha Forde | Sonoporation systems and methods |
WO2010009277A2 (en) | 2008-07-15 | 2010-01-21 | Novartis Ag | Immunogenic amphipathic peptide compositions |
WO2010009065A2 (en) | 2008-07-15 | 2010-01-21 | Novartis Ag | Amphipathic peptide compositions |
WO2010018563A2 (en) | 2008-08-12 | 2010-02-18 | Rosetta Genomics Ltd. | Compositions and methods for the prognosis of lymphoma |
EP2326331A4 (en) | 2008-08-18 | 2013-05-15 | Merck Sharp & Dohme | NOVEL LIPID NANOPARTICLES AND NEW COMPONENTS FOR NUCLEIC ACID ADMINISTRATION |
EP2328650B1 (en) | 2008-08-26 | 2016-04-06 | Cook Medical Technologies LLC | Balloon catheters having a plurality of needles for the injection of one or more therapeutic agents |
AU2009290137A1 (en) | 2008-09-03 | 2010-03-11 | Xenome Ltd | Libraries of peptide conjugates and methods for making them |
US8309707B2 (en) | 2008-09-06 | 2012-11-13 | Chemgenes Corporation | RNA synthesis-phosphoramidites for synthetic RNA in the reverse direction, and application in convenient introduction of ligands, chromophores and modifications of synthetic RNA at the 3′-end |
WO2010027903A2 (en) | 2008-09-08 | 2010-03-11 | Fred Hutchinson Cancer Research Center | Lung cancer diagnosis |
US20100087337A1 (en) | 2008-09-10 | 2010-04-08 | Bind Biosciences, Inc. | High Throughput Fabrication of Nanoparticles |
AR073295A1 (es) | 2008-09-16 | 2010-10-28 | Genentech Inc | Metodos para tratar la esclerosis multiple progresiva. articulo de fabricacion. |
US20120021519A1 (en) | 2008-09-19 | 2012-01-26 | Presidents And Fellows Of Harvard College | Efficient induction of pluripotent stem cells using small molecule compounds |
WO2010037408A1 (en) | 2008-09-30 | 2010-04-08 | Curevac Gmbh | Composition comprising a complexed (m)rna and a naked mrna for providing or enhancing an immunostimulatory response in a mammal and uses thereof |
WO2010042490A1 (en) | 2008-10-06 | 2010-04-15 | Boston Medical Center Corporation | A single lentiviral vector system for induced pluripotent (ips) stem cells derivation |
CA2740000C (en) | 2008-10-09 | 2017-12-12 | Tekmira Pharmaceuticals Corporation | Improved amino lipids and methods for the delivery of nucleic acids |
CN105056336B (zh) | 2008-10-10 | 2019-09-13 | 医树专利有限公司 | 药物输注 |
US8535655B2 (en) | 2008-10-10 | 2013-09-17 | Polyactiva Pty Ltd. | Biodegradable polymer—bioactive moiety conjugates |
US8343498B2 (en) | 2008-10-12 | 2013-01-01 | Massachusetts Institute Of Technology | Adjuvant incorporation in immunonanotherapeutics |
ITVI20080239A1 (it) | 2008-10-14 | 2010-04-15 | Antoine Assaf | Apparato medicale per iniezioni multiple. |
WO2010047765A2 (en) | 2008-10-20 | 2010-04-29 | Massachussetts Institute Of Technology | Nanostructures for drug delivery |
AU2009307677C1 (en) | 2008-10-20 | 2022-09-22 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Compositions and methods for inhibiting expression of transthyretin |
WO2010047839A1 (en) | 2008-10-25 | 2010-04-29 | Aura Biosciences | Modified plant virus particles and uses therefor |
JP6087504B2 (ja) | 2008-11-07 | 2017-03-01 | マサチューセッツ インスティテュート オブ テクノロジー | アミノアルコールリピドイドおよびその使用 |
KR102344392B1 (ko) | 2008-11-10 | 2021-12-28 | 알닐람 파마슈티칼스 인코포레이티드 | 치료제 운반용 신규 지질 및 조성물 |
WO2010055413A1 (en) | 2008-11-12 | 2010-05-20 | Fondazione Centro San Raffaele Del Monte Tabor | Gene vector for inducing transgene-specific immune tolerance |
US9074206B2 (en) | 2008-11-13 | 2015-07-07 | Fudan University | Compositions and methods for micro-RNA expression profiling of colorectal cancer |
CA2780482A1 (en) | 2008-11-17 | 2010-05-10 | Anil K. Sood | Hdl particles for delivery of nucleic acids |
EP2191840A1 (en) | 2008-11-28 | 2010-06-02 | Sanofi-Aventis | Antitumor combinations containing antibodies recognizing specifically CD38 and melphalan |
WO2010066384A1 (en) | 2008-12-10 | 2010-06-17 | MAX-PLANCK-Gesellschaft zur Förderung der Wissenschaften e.V. | Compositions and methods for micro-rna expression profiling of cancer stem cells |
EP2196476A1 (en) | 2008-12-10 | 2010-06-16 | Novartis Ag | Antibody formulation |
WO2010068866A2 (en) | 2008-12-12 | 2010-06-17 | Bind Biosciences | Therapeutic particles suitable for parenteral administration and methods of making and using same |
US8512964B2 (en) | 2008-12-12 | 2013-08-20 | The Regents Of The University Of California | Targets for treatment of hypercholesterolemia |
ES2776126T3 (es) | 2008-12-15 | 2020-07-29 | Pfizer | Nanopartículas de circulación prolongada para la liberación sostenida de agentes terapéuticos |
WO2010080724A1 (en) | 2009-01-12 | 2010-07-15 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Novel lipid nanoparticles and novel components for delivery of nucleic acids |
SG172792A1 (en) | 2009-01-16 | 2011-08-29 | Glaxosmithkline Llc | Treatment of a cancer using a combination of bendamustine and an anti-cd20 antibody |
WO2010084371A1 (en) | 2009-01-26 | 2010-07-29 | Mitoprod | Novel circular interfering rna molecules |
AU2010208035B2 (en) | 2009-01-29 | 2016-06-23 | Arbutus Biopharma Corporation | Improved lipid formulation for the delivery of nucleic acids |
US8669085B2 (en) | 2009-02-05 | 2014-03-11 | Ut-Battelle, Llc | Transformation of gram positive bacteria by sonoporation |
WO2010088927A1 (en) | 2009-02-09 | 2010-08-12 | Curevac Gmbh | Use of pei for the improvement of endosomal release and expression of transfected nucleic acids, complexed with cationic or polycationic compounds |
US20140141089A1 (en) | 2009-02-11 | 2014-05-22 | Colorado School Of Mines | Nanoparticles, Compositions Thereof, and Methods of Use, and Methods of Making the Same |
WO2010098861A1 (en) | 2009-02-24 | 2010-09-02 | The Scripps Research Institute | Reengineering mrna primary structure for enhanced protein production |
WO2010141135A2 (en) | 2009-03-05 | 2010-12-09 | Trustees Of Boston University | Bacteriophages expressing antimicrobial peptides and uses thereof |
US8685458B2 (en) | 2009-03-05 | 2014-04-01 | Bend Research, Inc. | Pharmaceutical compositions of dextran polymer derivatives |
WO2010105277A1 (en) | 2009-03-13 | 2010-09-16 | Egen, Inc. | Compositions and methods for the delivery of biologically active rnas |
CN102438978B (zh) | 2009-03-20 | 2017-02-22 | Clsn实验室股份有限公司 | 聚胺衍生物 |
US20120095077A1 (en) | 2009-03-23 | 2012-04-19 | University Of Utah Research Foundation | Methods and compositions related to modified guanine bases for controlling off-target effects in rna interference |
JP5622254B2 (ja) | 2009-03-31 | 2014-11-12 | 国立大学法人東京大学 | 二本鎖リボ核酸ポリイオンコンプレックス |
PL2414387T3 (pl) | 2009-04-03 | 2016-06-30 | Univ Chicago | Kompozycje i sposoby związane z wariantami białka A (SpA) |
US9724404B2 (en) | 2009-04-13 | 2017-08-08 | INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) | HPV particles and uses thereof |
SG175166A1 (en) | 2009-04-17 | 2011-11-28 | Biogen Idec Inc | Compositions and methods to treat acute myelogenous leukemia |
EA201101530A1 (ru) | 2009-04-21 | 2012-03-30 | Селекта Байосайенсиз, Инк. | ИММУНОНАНОТЕРАПИЯ, ОБЕСПЕЧИВАЮЩАЯ Th1-СМЕЩЕННЫЙ ОТВЕТ |
US10837020B2 (en) * | 2009-04-22 | 2020-11-17 | Massachusetts Institute Of Technology | Innate immune suppression enables repeated delivery of long RNA molecules |
WO2010123501A1 (en) | 2009-04-22 | 2010-10-28 | Massachusetts Institute Of Technology | Innate immune suppression enables repeated delivery of long rna molecules |
NO2424895T3 (ja) | 2009-04-27 | 2018-02-03 | ||
US8715736B2 (en) | 2009-04-30 | 2014-05-06 | Florida Agricultural And Mechanical University | Nanoparticle formulations for skin delivery |
US8287910B2 (en) | 2009-04-30 | 2012-10-16 | Intezyne Technologies, Inc. | Polymeric micelles for polynucleotide encapsulation |
NZ621981A (en) | 2009-05-05 | 2015-09-25 | Tekmira Pharmaceuticals Corp | Lipid compositions |
US20120264626A1 (en) | 2009-05-08 | 2012-10-18 | The Ohio State University Research Foundation | MicroRNA Expression Profiling and Targeting in Chronic Obstructive Pulmonary Disease (COPD) Lung Tissue and Methods of Use Thereof |
DE202009007116U1 (de) | 2009-05-18 | 2010-10-14 | Amoena Medizin-Orthopädie-Technik GmbH | Antidekubituskissen |
EP2435092A2 (en) | 2009-05-27 | 2012-04-04 | Selecta Biosciences, Inc. | Nanocarriers possessing components with different rates of release |
US8574835B2 (en) | 2009-05-29 | 2013-11-05 | Life Technologies Corporation | Scaffolded nucleic acid polymer particles and methods of making and using |
EA201791744A3 (ru) | 2009-06-10 | 2018-07-31 | Арбутус Биофарма Корпорэйшн | Улучшенная липидная композиция |
EP2440556A1 (en) | 2009-06-10 | 2012-04-18 | Vertex Pharmaceuticals Incorporated | Inhibitors of phosphatidylinositol 3-kinase |
US8273869B2 (en) | 2009-06-15 | 2012-09-25 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Lipid formulated dsRNA targeting the PCSK9 gene |
WO2010151664A2 (en) | 2009-06-26 | 2010-12-29 | Massachusetts Institute Of Technology | Compositions and methods for treating cancer and modulating stress granule formation |
WO2011000106A1 (en) | 2009-07-01 | 2011-01-06 | Protiva Biotherapeutics, Inc. | Improved cationic lipids and methods for the delivery of therapeutic agents |
CA2767127A1 (en) | 2009-07-01 | 2011-01-06 | Protiva Biotherapeutics, Inc. | Novel lipid formulations for delivery of therapeutic agents to solid tumors |
CA2766907A1 (en) | 2009-07-06 | 2011-01-13 | Novartis Ag | Self replicating rna molecules and uses thereof |
US20140099666A1 (en) * | 2009-07-06 | 2014-04-10 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Compositions and methods for enhancing production of a biological product |
EP2281579A1 (en) | 2009-08-05 | 2011-02-09 | BioNTech AG | Vaccine composition comprising 5'-Cap modified RNA |
ES2579936T3 (es) | 2009-08-20 | 2016-08-17 | Sirna Therapeutics, Inc. | Nuevos lípidos catiónicos con diversos grupos de cabeza para el suministro oligonucleotídico |
WO2011028175A1 (en) | 2009-09-01 | 2011-03-10 | Agency For Science, Technology And Research | Terminal device and method for processing an encrypted bit stream |
US20110053829A1 (en) | 2009-09-03 | 2011-03-03 | Curevac Gmbh | Disulfide-linked polyethyleneglycol/peptide conjugates for the transfection of nucleic acids |
US20110070227A1 (en) | 2009-09-18 | 2011-03-24 | Anna-Marie Novotney-Barry | Treatment of Autoimmune and Inflammatory Diseases |
EP2485770A4 (en) | 2009-10-08 | 2013-04-10 | Merck Sharp & Dohme | NEW CATIONIC LIPIDS WITH SHORT LIPID CHAINS FOR ADMINISTRATION OF OLIGONUCLEOTIDES |
US8859284B2 (en) | 2009-10-22 | 2014-10-14 | The United States Of America, As Represented By The Secretary Of The Navy | Delivery of nanoparticles to neurons |
US8449916B1 (en) | 2009-11-06 | 2013-05-28 | Iowa State University Research Foundation, Inc. | Antimicrobial compositions and methods |
WO2011060250A1 (en) | 2009-11-13 | 2011-05-19 | Bend Research, Inc. | Cationic dextran polymer derivatives |
US9415113B2 (en) | 2009-11-18 | 2016-08-16 | University Of Washington | Targeting monomers and polymers having targeting blocks |
US8530429B2 (en) | 2009-11-24 | 2013-09-10 | Arch Cancer Therapeutics, Inc. | Brain tumor targeting peptides and methods |
NZ700688A (en) | 2009-12-01 | 2016-02-26 | Shire Human Genetic Therapies | Delivery of mrna for the augmentation of proteins and enzymes in human genetic diseases |
US20110245756A1 (en) | 2009-12-03 | 2011-10-06 | Rishi Arora | Devices for material delivery, electroporation, sonoporation, and/or monitoring electrophysiological activity |
DE102009056884B4 (de) | 2009-12-03 | 2021-03-18 | Novartis Ag | Impfstoff-Adjuvantien und verbesserte Verfahren zur Herstellung derselben |
ES2880038T3 (es) | 2009-12-06 | 2021-11-23 | Bioverativ Therapeutics Inc | Polipéptidos quiméricos e híbridos de factor VIII-Fc, y métodos de uso de los mismos |
US9687550B2 (en) | 2009-12-07 | 2017-06-27 | Arbutus Biopharma Corporation | Compositions for nucleic acid delivery |
EP3623474A1 (en) | 2009-12-07 | 2020-03-18 | The Trustees of The University of Pennsylvania | Rna preparations comprising purified modified rna for reprogramming cells |
US20130189741A1 (en) | 2009-12-07 | 2013-07-25 | Cellscript, Inc. | Compositions and methods for reprogramming mammalian cells |
WO2011069528A1 (en) | 2009-12-09 | 2011-06-16 | Curevac Gmbh | Lyophilization of nucleic acids in lactate-containing solutions |
WO2011069529A1 (en) | 2009-12-09 | 2011-06-16 | Curevac Gmbh | Mannose-containing solution for lyophilization, transfection and/or injection of nucleic acids |
JP5891175B2 (ja) | 2009-12-11 | 2016-03-22 | バインド セラピューティックス インコーポレイテッド | 治療用粒子の凍結乾燥に対する安定製剤 |
WO2011084521A2 (en) | 2009-12-15 | 2011-07-14 | Bind Biosciences, Inc. | Therapeutic polymeric nanoparticles comprising epothilone and methods of making and using same |
ES2780156T3 (es) | 2009-12-15 | 2020-08-24 | Pfizer | Composiciones terapéuticas de nanopartículas poliméricas con alta temperatura de transición vítrea o copolímeros de alto peso molecular |
EA201290497A1 (ru) | 2009-12-15 | 2013-01-30 | Байнд Байосайенсиз, Инк. | Терапевтические полимерные наночастицы, включающие кортикостероиды, и способы получения таковых |
DE102009058769A1 (de) | 2009-12-16 | 2011-06-22 | MagForce Nanotechnologies AG, 10589 | Temperaturabhängige Aktivierung von katalytischen Nukleinsäuren zur kontrollierten Wirkstofffreisetzung |
WO2011084620A2 (en) | 2009-12-16 | 2011-07-14 | Brigham And Women's Hospital, Inc. | Particles for multiple agent delivery |
ES2749426T3 (es) | 2009-12-18 | 2020-03-20 | Univ British Columbia | Métodos y composiciones para administración de ácidos nucleicos |
EP2338520A1 (de) | 2009-12-21 | 2011-06-29 | Ludwig Maximilians Universität | Konjugat mit Zielfindungsligand und dessen Verwendung |
AU2010334911A1 (en) | 2009-12-23 | 2012-07-12 | Novartis Ag | Lipids, lipid compositions, and methods of using them |
WO2011076143A1 (en) | 2009-12-24 | 2011-06-30 | Fudan University | Compositions and methods for microrna expression profiling of lung cancer |
WO2011076142A1 (en) | 2009-12-24 | 2011-06-30 | Fudan University | Compositions and methods for microrna expession profiling in plasma of colorectal cancer |
EP2341145A1 (en) | 2009-12-30 | 2011-07-06 | febit holding GmbH | miRNA fingerprint in the diagnosis of diseases |
US20110171248A1 (en) | 2010-01-08 | 2011-07-14 | Selecta Biosciences, Inc. | Synthetic virus-like particles conjugated to human papillomavirus capsid peptides for use as vaccines |
US8846631B2 (en) | 2010-01-14 | 2014-09-30 | Regulus Therapeutics Inc. | MicroRNA compositions and methods |
EP2525781A1 (en) | 2010-01-22 | 2012-11-28 | Schering Corporation | Novel cationic lipids for oligonucleotide delivery |
WO2011094683A2 (en) | 2010-01-29 | 2011-08-04 | H. Lee Moffitt Cancer Center And Research Institute, Inc. | Method of identifying myelodysplastic syndromes |
EP2354246A1 (en) | 2010-02-05 | 2011-08-10 | febit holding GmbH | miRNA in the diagnosis of ovarian cancer |
EP3023495B1 (en) | 2010-02-24 | 2019-05-08 | Arrowhead Pharmaceuticals, Inc. | Compositions for targeted delivery of sirna |
WO2011106702A2 (en) | 2010-02-25 | 2011-09-01 | The Johns Hopkins University | Sustained delivery of therapeutic agents to an eye compartment |
US20130133483A1 (en) | 2010-03-08 | 2013-05-30 | University Of Rochester | Synthesis of Nanoparticles Using Reducing Gases |
WO2011113030A2 (en) | 2010-03-11 | 2011-09-15 | H.Lee Moffitt Cancer Center & Research Institute | Human cancer micro-rna expression profiles predictive of chemo-response |
WO2011116072A1 (en) | 2010-03-16 | 2011-09-22 | Escape Therapeutics, Inc. | Hybrid hydrogel scaffold compositions and methods of use |
KR20130006663A (ko) | 2010-03-16 | 2013-01-17 | 유니버시티 오브 유타 리서치 파운데이션 | 뉴클레오티드 전달을 높이기 위한 환원가능한 폴리(아미도 에틸렌이민)으로의 절단성 변형법 |
US20130005797A1 (en) | 2010-03-18 | 2013-01-03 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Endosomolytic poly(amidoamine) disulfide polymers for the delivery of oligonucleotides |
US20110230816A1 (en) | 2010-03-18 | 2011-09-22 | Tyco Healthcare Group Lp | Gels for Transdermal Delivery |
US9149432B2 (en) | 2010-03-19 | 2015-10-06 | Massachusetts Institute Of Technology | Lipid vesicle compositions and methods of use |
GB201005005D0 (en) | 2010-03-25 | 2010-05-12 | Angeletti P Ist Richerche Bio | New vaccine |
WO2011119262A1 (en) | 2010-03-26 | 2011-09-29 | Cerulean Pharma Inc. | Methods and systems for generating nanoparticles |
JP2013528665A (ja) | 2010-03-26 | 2013-07-11 | メルサナ セラピューティックス, インコーポレイテッド | ポリヌクレオチドの送達のための修飾ポリマー、その製造方法、およびその使用方法 |
US20110247090A1 (en) | 2010-04-02 | 2011-10-06 | Intrexon Corporation | Synthetic 5'UTRs, Expression Vectors, and Methods for Increasing Transgene Expression |
JP2013523818A (ja) | 2010-04-05 | 2013-06-17 | ザ・ユニバーシティー・オブ・シカゴ | 免疫反応のエンハンサーとしてのプロテインA(SpA)抗体に関連する組成物および方法 |
JP2013529894A (ja) | 2010-04-07 | 2013-07-25 | ノバルティス アーゲー | パルボウイルスb19のウイルス様粒子を生成するための方法 |
EP3391877A1 (en) | 2010-04-08 | 2018-10-24 | The Trustees of Princeton University | Preparation of lipid nanoparticles |
US20130071430A1 (en) | 2010-04-09 | 2013-03-21 | The University Of Tokyo | Microrna-controlled recombinant vaccinia virus and use thereof |
CN104959087B (zh) | 2010-04-09 | 2017-08-15 | 帕西拉制药有限公司 | 用于配制大直径合成膜囊泡的方法 |
US20110262491A1 (en) | 2010-04-12 | 2011-10-27 | Selecta Biosciences, Inc. | Emulsions and methods of making nanocarriers |
KR101196667B1 (ko) | 2010-04-15 | 2012-11-02 | 포항공과대학교 산학협력단 | 피에이치 민감성 금속 나노 입자를 이용한 항암제 전달 시스템 |
LT2558577T (lt) | 2010-04-16 | 2019-03-12 | Nuevolution A/S | Bifunkciniai kompleksai ir tokių kompleksų gamybos ir naudojimo būdai |
EP2377938A1 (en) | 2010-04-16 | 2011-10-19 | Eukarys | Capping-prone RNA polymerase enzymes and their applications |
CA2796464C (en) | 2010-04-16 | 2021-08-03 | Immune Disease Institute, Inc. | Sustained polypeptide expression from synthetic, modified rnas and uses thereof |
US20130260460A1 (en) | 2010-04-22 | 2013-10-03 | Isis Pharmaceuticals Inc | Conformationally restricted dinucleotide monomers and oligonucleotides |
DK2561073T3 (en) * | 2010-04-23 | 2016-12-12 | Univ Massachusetts | Aav vectors targeted to central nervous system and methods of use thereof |
MX2012012567A (es) | 2010-04-28 | 2012-11-21 | Kimberly Clark Co | Metodo para aumentar la permeabilidad de una barrera epitelial. |
US9629979B2 (en) | 2010-04-28 | 2017-04-25 | Sanovas, Inc. | Pressure/Vacuum actuated catheter drug delivery probe |
WO2011139911A2 (en) | 2010-04-29 | 2011-11-10 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Lipid formulated single stranded rna |
AU2011245372A1 (en) | 2010-04-30 | 2012-11-29 | Novartis Ag | Predictive markers useful in the treatment of Fragile X Syndrome (FXS) |
US9254327B2 (en) | 2010-05-10 | 2016-02-09 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Methods and compositions for delivery of active agents |
US20130123338A1 (en) | 2010-05-12 | 2013-05-16 | Protiva Biotherapeutics, Inc. | Novel cationic lipids and methods of use thereof |
US10077232B2 (en) | 2010-05-12 | 2018-09-18 | Arbutus Biopharma Corporation | Cyclic cationic lipids and methods of use |
EP2387999A1 (en) | 2010-05-21 | 2011-11-23 | CureVac GmbH | Histidine-containing solution for transfection and/or injection of nucleic acids and uses thereof |
US8802863B2 (en) | 2010-05-24 | 2014-08-12 | Sirna Therapeutics, Inc. | Amino alcohol cationic lipids for oligonucleotide delivery |
ES2661978T3 (es) | 2010-05-26 | 2018-04-04 | Selecta Biosciences, Inc. | Vacunas multivalentes de nanovehículos sintéticos |
EP2575767B1 (en) | 2010-06-04 | 2017-01-04 | Sirna Therapeutics, Inc. | Novel low molecular weight cationic lipids for oligonucleotide delivery |
EP2579899B1 (en) | 2010-06-14 | 2017-03-15 | F. Hoffmann-La Roche AG | Cell-penetrating peptides and uses thereof |
WO2011157294A1 (en) | 2010-06-16 | 2011-12-22 | Universita' Degli Studi Di Padova | Compositions for use in treating or preventing cancer, breast cancer, lung cancer, ovarian cancer, metastasis, heart failure, cardiac remodelling, dilated cardiomyopathy, autoimmune diseases, or diseases or disorders related thereto |
US20120158100A1 (en) | 2010-06-21 | 2012-06-21 | Kevin Schomacker | Driving Microneedle Arrays into Skin and Delivering RF Energy |
US20130236968A1 (en) | 2010-06-21 | 2013-09-12 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Multifunctional copolymers for nucleic acid delivery |
US10478483B2 (en) | 2010-06-25 | 2019-11-19 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | Combinations of meningococcal factor H binding proteins |
EP2589391B1 (en) | 2010-07-01 | 2018-11-14 | Rosetta Exosome Co., Ltd. | Bacterial cell-derived microvesicles for use in a method of treating cancer |
KR101130137B1 (ko) | 2010-07-02 | 2012-03-28 | 연세대학교 산학협력단 | 발광다이오드 모듈 |
KR20130093084A (ko) | 2010-07-02 | 2013-08-21 | 더 유니버시티 오브 시카고 | 단백질 A(SpA) 변이체와 관련된 조성물 및 방법 |
US8353871B2 (en) | 2010-07-05 | 2013-01-15 | Roller Jet Ltd. | Drug delivery device with needles and roller |
EP2590626B1 (en) | 2010-07-06 | 2015-10-28 | GlaxoSmithKline Biologicals SA | Liposomes with lipids having an advantageous pka-value for rna delivery |
WO2012006369A2 (en) | 2010-07-06 | 2012-01-12 | Novartis Ag | Immunisation of large mammals with low doses of rna |
US9770463B2 (en) | 2010-07-06 | 2017-09-26 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | Delivery of RNA to different cell types |
JP6025721B2 (ja) | 2010-07-06 | 2016-11-16 | ノバルティス アーゲー | カチオン性水中油型エマルジョン |
US9192661B2 (en) | 2010-07-06 | 2015-11-24 | Novartis Ag | Delivery of self-replicating RNA using biodegradable polymer particles |
DK3243526T3 (da) | 2010-07-06 | 2020-02-17 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | Levering af rna til at udløse flere immunsignalveje |
RS63817B1 (sr) | 2010-07-06 | 2023-01-31 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | Čestice za isporuku slične virionu za molekule samoreplicirajuće rnk |
CN103140237A (zh) | 2010-07-09 | 2013-06-05 | 比奥根艾迪克依蒙菲利亚公司 | 因子ix多肽及其使用方法 |
WO2012006623A1 (en) | 2010-07-09 | 2012-01-12 | Biogen Idec Hemophilia Inc. | Systems for factor viii processing and methods thereof |
US20130177523A1 (en) | 2010-07-13 | 2013-07-11 | University Of Utah Research Foundation | Gold particles and methods of making and using the same in cancer treatment |
GB201012410D0 (en) | 2010-07-23 | 2010-09-08 | Medical Res Council | Intracellular immunity |
EP2449113B8 (en) | 2010-07-30 | 2015-11-25 | CureVac AG | Complexation of nucleic acids with disulfide-crosslinked cationic components for transfection and immunostimulation |
US8822663B2 (en) | 2010-08-06 | 2014-09-02 | Moderna Therapeutics, Inc. | Engineered nucleic acids and methods of use thereof |
WO2012021516A2 (en) | 2010-08-09 | 2012-02-16 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Nanoparticle-oligonucletide hybrid structures and methods of use thereof |
WO2012019630A1 (en) * | 2010-08-13 | 2012-02-16 | Curevac Gmbh | Nucleic acid comprising or coding for a histone stem-loop and a poly(a) sequence or a polyadenylation signal for increasing the expression of an encoded protein |
AU2011291519A1 (en) | 2010-08-20 | 2013-01-24 | Selecta Biosciences, Inc. | Synthetic nanocarrier vaccines comprising proteins obtained or derived from human influenza A virus hemagglutinin |
EP2605816B1 (en) | 2010-08-20 | 2019-01-23 | University Of Washington | Circumferential aerosol device for delivering drugs to olfactory epithelium and brain |
EP2605799A4 (en) | 2010-08-20 | 2014-02-26 | Cerulean Pharma Inc | CONJUGATES, PARTICLES, COMPOSITIONS AND RELATED METHODS |
ES2531577T3 (es) | 2010-08-20 | 2015-03-17 | Novartis Ag | Conjuntos de agujas para la administración de vacuna soluble contra la gripe |
BR112013004865A2 (pt) | 2010-08-31 | 2016-06-07 | Novartis Ag | lípidos adequados para entrega lipossomal de codificadores de proteínas rna |
CN103221549A (zh) | 2010-08-31 | 2013-07-24 | 默沙东公司 | 用于递送寡核苷酸的新型简单化学实体和方法 |
PL2611467T3 (pl) | 2010-08-31 | 2022-08-16 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | Małe liposomy do dostarczania rna kodującego immunogen |
EP4119155A1 (en) | 2010-08-31 | 2023-01-18 | GlaxoSmithKline Biologicals S.A. | Pegylated liposomes for delivery of immunogen-encoding rna |
EP2926830B1 (en) | 2010-08-31 | 2017-08-02 | Theraclone Sciences, Inc. | Human immunodeficiency virus (hiv)-neutralizing antibodies |
WO2012031205A2 (en) | 2010-09-03 | 2012-03-08 | The Brigham And Women's Hospital, Inc. | Lipid-polymer hybrid particles |
WO2012034077A2 (en) | 2010-09-09 | 2012-03-15 | The University Of Chicago | Compositions and methods related to attenuated staphylococcal strains |
US9095540B2 (en) | 2010-09-09 | 2015-08-04 | The University Of Chicago | Methods and compositions involving protective staphylococcal antigens |
WO2012039979A2 (en) | 2010-09-10 | 2012-03-29 | The Johns Hopkins University | Rapid diffusion of large polymeric nanoparticles in the mammalian brain |
US8466122B2 (en) | 2010-09-17 | 2013-06-18 | Protiva Biotherapeutics, Inc. | Trialkyl cationic lipids and methods of use thereof |
ES2888231T3 (es) | 2010-09-20 | 2022-01-03 | Sirna Therapeutics Inc | Lípidos catiónicos de bajo peso molecular para el suministro de oligonucleótidos |
WO2012038448A1 (en) | 2010-09-21 | 2012-03-29 | Riboxx Gmbh | Method for synthesizing rna using dna template |
EP4079292A1 (en) | 2010-09-24 | 2022-10-26 | The Brigham and Women's Hospital, Inc. | Nanostructured gels capable of controlled release of encapsulated agents |
WO2012050975A2 (en) | 2010-09-29 | 2012-04-19 | The University Of North Carolina At Chapel Hill | Novel circular mammalian rna molecules and uses thereof |
JP2013545723A (ja) | 2010-09-30 | 2013-12-26 | メルク・シャープ・エンド・ドーム・コーポレイション | オリゴヌクレオチドの送達のための低分子量カチオン性脂質 |
HUE058896T2 (hu) | 2010-10-01 | 2022-09-28 | Modernatx Inc | N1-metil-pszeudo-uracilt tartalmazó ribonukleinsavak és azok felhasználásai |
US10078075B2 (en) | 2011-12-09 | 2018-09-18 | Vanderbilt University | Integrated organ-on-chip systems and applications of the same |
TR201903651T4 (tr) | 2010-10-11 | 2019-04-22 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | Antijen uygulama platformları. |
JP2013545727A (ja) | 2010-10-21 | 2013-12-26 | メルク・シャープ・アンド・ドーム・コーポレーション | オリゴヌクレオチド送達用の新規低分子量カチオン性脂質 |
EP2629760A4 (en) | 2010-10-22 | 2014-04-02 | Bind Therapeutics Inc | THERAPEUTIC NANOPARTICLES CONTAINING COPOLYMERS OF HIGH MOLECULAR WEIGHT |
SG189048A1 (en) | 2010-10-29 | 2013-05-31 | Merck Sharp & Dohme | Recombinant subunit dengue virus vaccine |
WO2012061703A1 (en) | 2010-11-05 | 2012-05-10 | The Johns Hopkins University | Compositions and methods relating to reduced mucoadhesion |
DK2635265T3 (en) | 2010-11-05 | 2018-07-16 | Sirna Therapeutics Inc | New low molecular weight cyclic amine-containing cationic lipids for oligonucleotide delivery |
CN103201386A (zh) | 2010-11-09 | 2013-07-10 | 加利福尼亚大学董事会 | 皮肤穿透及细胞进入(space)肽及其使用方法 |
JP6077450B2 (ja) | 2010-11-12 | 2017-02-08 | ザ トラスティーズ オブ ザ ユニバーシティ オブ ペンシルバニア | コンセンサス前立腺抗原、それをコードする核酸分子、ならびにそれを含むワクチンおよび用途 |
AU2011329850B2 (en) | 2010-11-16 | 2017-03-02 | Selecta Biosciences, Inc. | Immunostimulatory oligonucleotides |
HUE039747T2 (hu) | 2010-11-17 | 2019-02-28 | Aduro Biotech Inc | Eljárások és kompozíciók EGFRVIII-ra való immunválasz indukálására |
CN107012149A (zh) | 2010-11-19 | 2017-08-04 | 艾德拉药物股份有限公司 | 调控基于toll‑样受体的免疫应答的免疫调节寡核苷酸(iro)化合物 |
WO2012068187A1 (en) | 2010-11-19 | 2012-05-24 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Poly(amide) polymers for the delivery of oligonucleotides |
US8853377B2 (en) | 2010-11-30 | 2014-10-07 | Shire Human Genetic Therapies, Inc. | mRNA for use in treatment of human genetic diseases |
WO2012072096A1 (en) | 2010-12-03 | 2012-06-07 | Biontech Ag | Method for cellular rna expression |
EP2651445A2 (en) | 2010-12-16 | 2013-10-23 | SPRNA GmbH | Pharmaceutical composition consisting of rna having alkali metal as counter ion and formulated with dications |
US8501930B2 (en) | 2010-12-17 | 2013-08-06 | Arrowhead Madison Inc. | Peptide-based in vivo siRNA delivery system |
US8901101B2 (en) | 2010-12-17 | 2014-12-02 | Sirna Therapeutics, Inc. | Membrane lytic poly(amido amine) polymers for the delivery of oligonucleotides |
US9394537B2 (en) | 2010-12-22 | 2016-07-19 | President And Fellows Of Harvard College | Continuous directed evolution |
CA3131967A1 (en) | 2010-12-29 | 2012-07-05 | F. Hoffman-La Roche Ag | Small molecule conjugates for intracellular delivery of nucleic acids |
WO2012089225A1 (en) | 2010-12-29 | 2012-07-05 | Curevac Gmbh | Combination of vaccination and inhibition of mhc class i restricted antigen presentation |
WO2012092552A1 (en) | 2010-12-30 | 2012-07-05 | Selecta Biosciences, Inc. | Synthetic nanocarriers with reactive groups that release biologically active agents |
CA2862765A1 (en) | 2011-01-04 | 2012-07-12 | Brown University | Nanotubes as carriers of nucleic acids into cells |
WO2012094574A2 (en) | 2011-01-06 | 2012-07-12 | The Johns Hopkins University | Stabilized polyribonucleotide nanoparticles |
WO2012094653A2 (en) | 2011-01-07 | 2012-07-12 | Massachusetts Institute Of Technology | Compositions and methods for macromolecular drug delivery |
EP2663548B1 (en) | 2011-01-11 | 2017-04-05 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Pegylated lipids and their use for drug delivery |
DE102011082231A1 (de) | 2011-01-12 | 2012-07-12 | Robert Bosch Gmbh | Zündspule, insbesondere für kleinbauende Motoren |
US20120189700A1 (en) | 2011-01-19 | 2012-07-26 | Zoraida Aguilar | Nanoparticle Based Immunological Stimulation |
JP2014505064A (ja) | 2011-01-26 | 2014-02-27 | セニックス バイオサイエンス ゲーエムベーハー | 自然に存在する細胞内輸送経路を介して化合物を送達するための送達システム及びコンジュゲート |
US10363309B2 (en) | 2011-02-04 | 2019-07-30 | Case Western Reserve University | Targeted nanoparticle conjugates |
US20140066363A1 (en) | 2011-02-07 | 2014-03-06 | Arun K. Bhunia | Carbohydrate nanoparticles for prolonged efficacy of antimicrobial peptide |
WO2012116715A1 (en) | 2011-03-02 | 2012-09-07 | Curevac Gmbh | Vaccination in newborns and infants |
US20120207840A1 (en) | 2011-02-10 | 2012-08-16 | Aura Biosciences, Inc. | Virion Derived Protein Nanoparticles For Delivering Diagnostic Or Therapeutic Agents For The Treatment Of Non-Melanoma Skin Cancer |
CN103703013A (zh) | 2011-02-14 | 2014-04-02 | 斯威夫特生物科学公司 | 多核苷酸引物和探针 |
WO2012112689A1 (en) | 2011-02-15 | 2012-08-23 | The University Of North Carolina At Chapel Hill | Nanoparticle, liposomes, polymers, agents and proteins modified with reversible linkers |
JP6054308B2 (ja) | 2011-02-15 | 2016-12-27 | メリマック ファーマシューティカルズ, インコーポレイテッドMerrimack Pharmaceuticals, Inc. | 核酸を細胞へ送達する組成物及び方法 |
EP2489371A1 (en) | 2011-02-18 | 2012-08-22 | Instituto Nacional de Investigacion y Tecnologia Agraria y Alimentaria | Carrier peptides for drug delivery |
WO2012113413A1 (en) | 2011-02-21 | 2012-08-30 | Curevac Gmbh | Vaccine composition comprising complexed immunostimulatory nucleic acids and antigens packaged with disulfide-linked polyethyleneglycol/peptide conjugates |
JP6091435B2 (ja) | 2011-02-22 | 2017-03-08 | カリフォルニア インスティチュート オブ テクノロジー | アデノ随伴ウイルス(aav)ベクターを用いたタンパク質の送達 |
US8696637B2 (en) | 2011-02-28 | 2014-04-15 | Kimberly-Clark Worldwide | Transdermal patch containing microneedles |
WO2012116714A1 (en) | 2011-03-02 | 2012-09-07 | Curevac Gmbh | Vaccination in elderly patients |
BR112013022397A2 (pt) | 2011-03-02 | 2017-09-26 | Derek OHagan | vacinas combinadas com doses menores de antígeno e/ou adjuvante |
WO2012122318A2 (en) | 2011-03-07 | 2012-09-13 | Massachusetts Institute Of Technology | Methods for transfecting cells with nucleic acids |
WO2012125680A1 (en) | 2011-03-16 | 2012-09-20 | Novartis Ag | Methods of treating vasculitis using an il-17 binding molecule |
EP2686442A1 (en) | 2011-03-17 | 2014-01-22 | Novartis AG | Fgfr and ligands thereof as biomarkers for breast cancer in hr positive subjects |
US20140212503A1 (en) | 2011-03-17 | 2014-07-31 | Hyukjin Lee | Delivery system |
ES2785108T3 (es) | 2011-03-24 | 2020-10-05 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | Nanoemulsiones adyuvantes con fosfolípidos |
WO2012131594A1 (en) | 2011-03-28 | 2012-10-04 | Novartis Ag | Markers associated with cyclin-dependent kinase inhibitors |
EP2691443B1 (en) | 2011-03-28 | 2021-02-17 | Massachusetts Institute of Technology | Conjugated lipomers and uses thereof |
US9284343B2 (en) | 2011-04-04 | 2016-03-15 | The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services | 2′-O-aminooxymethyl nucleoside derivatives for use in the synthesis and modification of nucleosides, nucleotides and oligonucleotides |
WO2012142132A1 (en) | 2011-04-11 | 2012-10-18 | Life Technologies Corporation | Polymer particles and methods of making and using same |
WO2012142240A1 (en) | 2011-04-13 | 2012-10-18 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Coated mesoporous nanoparticles |
WO2013158127A1 (en) | 2012-04-16 | 2013-10-24 | Molecular Transfer, Inc. | Agents for improved delivery of nucleic acids to eukaryotic cells |
US20140178894A1 (en) | 2011-04-20 | 2014-06-26 | Novartis Forschungsstiftung, Zweigniederlassung | Culture medium suitable for the culture of undifferentiated cells |
EA034702B1 (ru) | 2011-04-26 | 2020-03-10 | Молекулар Экспресс, Инк. | Липосомные композиции |
US20160272697A2 (en) | 2011-04-28 | 2016-09-22 | The Henry M. Jackson Foundation For The Advancement Of Military Medicine, Inc. | Neutralizing Antibodies to Nipah and Hendra Virus |
AU2012249474A1 (en) | 2011-04-28 | 2013-11-07 | Stc.Unm | Porous nanoparticle-supported lipid bilayers (protocells) for targeted delivery and methods of using same |
CN107261154A (zh) | 2011-04-29 | 2017-10-20 | 西莱克塔生物科技公司 | 致耐受性合成纳米载体 |
JP2014515759A (ja) | 2011-04-29 | 2014-07-03 | ノバルティス アーゲー | 扁平上皮がんを治療する方法関連出願 |
WO2012151212A1 (en) | 2011-05-01 | 2012-11-08 | University Of Rochester | Multifocal hepatocellular carcinoma microrna expression patterns and uses thereof |
EP3777538B1 (en) | 2011-05-02 | 2023-06-28 | Wayne State University | A protein-induced pluripotent cell technology and uses thereof |
UA116189C2 (uk) | 2011-05-02 | 2018-02-26 | Мілленніум Фармасьютікалз, Інк. | КОМПОЗИЦІЯ АНТИ-α4β7 АНТИТІЛА |
US8945588B2 (en) | 2011-05-06 | 2015-02-03 | The University Of Chicago | Methods and compositions involving protective staphylococcal antigens, such as EBH polypeptides |
US20130042333A1 (en) | 2011-05-06 | 2013-02-14 | Jean-Gabriel JUDDE | Markers for cancer prognosis and therapy and methods of use |
CN103547350A (zh) | 2011-05-10 | 2014-01-29 | 巴斯夫欧洲公司 | 水包油乳液 |
EP2707033A1 (en) | 2011-05-11 | 2014-03-19 | Ramot at Tel Aviv University, Ltd. | Targeted polymeric conjugates and uses thereof |
WO2012152910A1 (en) | 2011-05-12 | 2012-11-15 | Helmut Vockner | Novel pharmaceutical formulation |
DK2706988T3 (da) | 2011-05-12 | 2020-01-20 | Yissum Res Dev Co Of Hebrew Univ Jerusalem Ltd | Liposomer omfattende polymer konjugerede lipider og relateret brug |
CA2835644C (en) | 2011-05-13 | 2021-06-15 | Novartis Ag | Pre-fusion rsv f antigens |
US8691750B2 (en) | 2011-05-17 | 2014-04-08 | Axolabs Gmbh | Lipids and compositions for intracellular delivery of biologically active compounds |
CN103687957A (zh) | 2011-05-17 | 2014-03-26 | 现代治疗公司 | 工程化核酸及其用于非人类脊椎动物的方法 |
US8978170B2 (en) | 2011-05-20 | 2015-03-17 | Kohler Co. | Toilet installation system and method |
SI3892295T1 (sl) | 2011-05-24 | 2023-09-29 | BioNTech SE | Individualizirana cepiva proti raku |
JP2014516531A (ja) | 2011-05-25 | 2014-07-17 | ノバルティス アーゲー | 肺癌に対するバイオマーカー |
WO2012166923A2 (en) | 2011-05-31 | 2012-12-06 | Bind Biosciences | Drug loaded polymeric nanoparticles and methods of making and using same |
KR20140026537A (ko) | 2011-06-02 | 2014-03-05 | 노파르티스 아게 | 헤지호그 억제제 요법을 위한 바이오마커 |
EP2714017B1 (en) | 2011-06-02 | 2018-08-01 | The Regents of The University of California | Membrane encapsulated nanoparticles and method of use |
EP2717911A1 (en) | 2011-06-06 | 2014-04-16 | Novartis Forschungsstiftung, Zweigniederlassung | Protein tyrosine phosphatase, non-receptor type 11 (ptpn11) and triple-negative breast cancer |
AU2012267578B2 (en) | 2011-06-08 | 2017-04-20 | Translate Bio, Inc. | Cleavable lipids |
JP6184945B2 (ja) | 2011-06-08 | 2017-08-23 | シャイアー ヒューマン ジェネティック セラピーズ インコーポレイテッド | mRNA送達のための脂質ナノ粒子組成物および方法 |
WO2012170607A2 (en) | 2011-06-10 | 2012-12-13 | Novartis Ag | Use of pcsk9 antagonists |
WO2012168491A1 (en) | 2011-06-10 | 2012-12-13 | Novartis Ag | Pharmaceutical formulations of pcsk9 antagonists |
CA2836805C (en) | 2011-06-10 | 2023-03-07 | Novartis Ag | Bovine vaccines and methods |
US8636696B2 (en) | 2011-06-10 | 2014-01-28 | Kimberly-Clark Worldwide, Inc. | Transdermal device containing microneedles |
US8916696B2 (en) | 2011-06-12 | 2014-12-23 | City Of Hope | Aptamer-mRNA conjugates for targeted protein or peptide expression and methods for their use |
WO2012172495A1 (en) | 2011-06-14 | 2012-12-20 | Novartis Ag | Compositions and methods for antibodies targeting tem8 |
CN103717249B (zh) | 2011-06-15 | 2017-03-22 | 克洛恩泰克制药股份公司 | 注射针和装置 |
BR112013031762A2 (pt) | 2011-06-16 | 2016-09-13 | Novartis Ag | proteínas solúveis para utilização como terapêuticos |
JP6113155B2 (ja) | 2011-06-20 | 2017-04-12 | ユニバーシティ オブ ピッツバーグ − オブ ザ コモンウェルス システム オブ ハイヤー エデュケイション | 計算で最適化した広い反応性を示すh1n1インフルエンザの抗原 |
WO2013003475A1 (en) | 2011-06-27 | 2013-01-03 | Cellscript, Inc. | Inhibition of innate immune response |
KR102436439B1 (ko) | 2011-06-28 | 2022-08-25 | 이노비오 파마수티컬즈, 인크. | 최소 침습 피부 전기천공 장치 |
JP6472999B2 (ja) | 2011-07-01 | 2019-02-20 | ノバルティス アーゲー | 代謝障害を治療するための方法 |
EP2729182A4 (en) | 2011-07-04 | 2014-12-24 | Commw Scient Ind Res Org | NUCLEIC COMPLEX |
CA2840989A1 (en) | 2011-07-06 | 2013-01-10 | Novartis Ag | Immunogenic combination compositions and uses thereof |
RU2606846C2 (ru) | 2011-07-06 | 2017-01-10 | Новартис Аг | Эмульсии типа "масло в воде", которые содержат нуклеиновые кислоты |
CA2841047A1 (en) | 2011-07-06 | 2013-01-10 | Novartis Ag | Immunogenic compositions and uses thereof |
JP2014520806A (ja) | 2011-07-06 | 2014-08-25 | ノバルティス アーゲー | Rna分子の送達のための有用なn:p比を有するリポソーム |
ES2702318T3 (es) | 2011-07-06 | 2019-02-28 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | Emulsiones catiónicas de aceite en agua |
WO2013006824A2 (en) | 2011-07-07 | 2013-01-10 | Life Technologies Corporation | Polymer particles, nucleic acid polymer particles and methods of making and using the same |
WO2013009717A1 (en) | 2011-07-10 | 2013-01-17 | Elisabet De Los Pinos | Virion derived protein nanoparticles for delivering diagnostic or therapeutic agents for the treatment of skin-related diseases |
US20130012566A1 (en) | 2011-07-10 | 2013-01-10 | Aura Biosciences, Inc. | Virion Derived Protein Nanoparticles For Delivering Diagnostic Or Therapeutic Agents For The Treatment of Alopecia |
WO2013009736A2 (en) | 2011-07-10 | 2013-01-17 | President And Fellows Of Harvard College | Compositions and methods for self-assembly of polymers with complementary macroscopic and microscopic scale units |
JP5965481B2 (ja) | 2011-07-15 | 2016-08-03 | レオ ファーマ アクティーゼルスカブ | 皮膚t細胞リンパ腫(ctcl)の診断用マイクロrnaプロファイリング |
US20140148503A1 (en) | 2011-07-20 | 2014-05-29 | University Of Iowa Research Foundation | Nucleic acid aptamers |
GB2492999A (en) | 2011-07-20 | 2013-01-23 | Univ Central Lancashire | Neutron detector |
CN103732211B (zh) | 2011-07-21 | 2017-03-01 | 禾大国际股份公开有限公司 | 支化的聚醚‑聚酰胺嵌段共聚物及其制造与使用方法 |
US9493549B2 (en) | 2011-07-25 | 2016-11-15 | The Rockefeller University | Antibodies directed toward the HIV-1 GP120 CD4 binding site with increased potency and breadth |
EP2736921B1 (en) | 2011-07-25 | 2018-06-27 | GlaxoSmithKline Biologicals SA | Compositions and methods for assessing functional immunogenicity of parvovirus vaccines |
CN109172819A (zh) | 2011-07-29 | 2019-01-11 | 西莱克塔生物科技公司 | 产生体液和细胞毒性t淋巴细胞(ctl)免疫应答的合成纳米载体 |
EP2744517B1 (en) | 2011-08-15 | 2019-03-13 | The University of Chicago | Compositions and methods related to antibodies to staphylococcal protein a |
US8932572B2 (en) | 2011-08-26 | 2015-01-13 | Arrowhead Madison Inc. | Poly(vinyl ester) polymers for in vivo nucleic acid delivery |
US9126966B2 (en) | 2011-08-31 | 2015-09-08 | Protiva Biotherapeutics, Inc. | Cationic lipids and methods of use thereof |
MX366055B (es) | 2011-08-31 | 2019-06-26 | Novartis Ag | Liposomas pegilados para admistracion de acido ribonucleico (arn) que codifica para inmunogeno. |
CN103930135A (zh) | 2011-08-31 | 2014-07-16 | 马林克罗特有限公司 | 使用h-膦酸酯的纳米颗粒peg修饰 |
EP2751292A4 (en) | 2011-09-01 | 2015-05-20 | Allegro Diagnostics Corp | METHOD AND COMPOSITIONS FOR DETECTING CANCER BASED ON MIRNA EXPRESSION PROFILES |
WO2013033620A1 (en) | 2011-09-01 | 2013-03-07 | Irm Llc | Compounds and compositions as pdgfr kinase inhibitors |
EP3521432A1 (en) | 2011-09-02 | 2019-08-07 | Arrowhead Pharmaceuticals, Inc. | Organic compositions to treat hsf1-related diseases |
EP3384938A1 (en) | 2011-09-12 | 2018-10-10 | Moderna Therapeutics, Inc. | Engineered nucleic acids and methods of use thereof |
WO2013039857A1 (en) | 2011-09-12 | 2013-03-21 | modeRNA Therapeutics | Engineered nucleic acids and methods of use thereof |
US9464124B2 (en) | 2011-09-12 | 2016-10-11 | Moderna Therapeutics, Inc. | Engineered nucleic acids and methods of use thereof |
TR201909110T4 (tr) | 2011-09-14 | 2019-07-22 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | Sakarit-protein glikokonjugatları yapmaya yönelik yöntemler. |
KR20140060541A (ko) | 2011-09-16 | 2014-05-20 | 더 트러스티스 오브 더 유니버시티 오브 펜실바니아 | 암을 치료하기 위한 rna 조작된 t 세포 |
US20150017245A1 (en) | 2011-09-22 | 2015-01-15 | Bind Therapeutics, Inc. | Methods of treating cancers with therapeutic nanoparticles |
US9375388B2 (en) | 2011-09-23 | 2016-06-28 | Indian Institute Of Technology, Bombay | Nanoparticle based cosmetic composition |
TWI593708B (zh) | 2011-09-26 | 2017-08-01 | 諾華公司 | 治療代謝病症之融合蛋白質 |
TW201315742A (zh) | 2011-09-26 | 2013-04-16 | Novartis Ag | 治療代謝病症之雙功能蛋白質 |
EP2760477B1 (en) | 2011-09-27 | 2018-08-08 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Di-aliphatic substituted pegylated lipids |
WO2013045505A1 (en) | 2011-09-28 | 2013-04-04 | Novartis Ag | Biomarkers for raas combination therapy |
RS62993B1 (sr) | 2011-10-03 | 2022-03-31 | Modernatx Inc | Modifikovani nukleozidi, nukleotidi, i nukleinske kiseline, i njihove upotrebe |
WO2013055971A1 (en) | 2011-10-11 | 2013-04-18 | Arizona Board Of Regents For And On Behalf Of Arizona State University | Polymers for delivering a substance into a cell |
AU2012322704B2 (en) | 2011-10-11 | 2017-09-07 | Novartis Ag | Recombinant self-replicating polycistronic RNA molecules |
US20190209690A9 (en) | 2011-10-12 | 2019-07-11 | The Johns Hopkins University | Bioreducible Poly (Beta-Amino Ester)s For siRNA Delivery |
EP2766407B1 (en) | 2011-10-12 | 2018-06-27 | The Curators Of The University Of Missouri | Pentablock polymers |
US9296826B2 (en) | 2011-10-14 | 2016-03-29 | Novartis Ag | Antibodies and methods for WNT pathway-related diseases |
SG11201401499XA (en) | 2011-10-14 | 2014-09-26 | Stc Unm | Porous nanoparticle-supported lipid bilayers (protocells) for targeted delivery including transdermal delivery of cargo and methods thereof |
CA2852917C (en) | 2011-10-18 | 2020-07-07 | Dicerna Pharmaceuticals, Inc. | Amine cationic lipids and uses thereof |
US20140371717A1 (en) | 2011-10-18 | 2014-12-18 | Micell Technologies, Inc. | Drug delivery medical device |
US20140248320A1 (en) | 2011-10-20 | 2014-09-04 | Novartis Ag | Adjuvanted influenza b virus vaccines for pediatric priming |
CN103930112B (zh) | 2011-10-20 | 2018-11-09 | 诺华股份有限公司 | 预测对α7烟碱型乙酰胆碱受体激活剂疗法的响应的生物标志物 |
EP2770980A4 (en) | 2011-10-25 | 2015-11-04 | Univ British Columbia | LOW SIZE LIPID NANOPARTICLES AND METHODS THEREOF |
WO2013061290A1 (en) | 2011-10-26 | 2013-05-02 | Nanopass Technologies Ltd. | Microneedle intradermal drug delivery device with auto-disable functionality |
US20140243240A1 (en) | 2011-10-26 | 2014-08-28 | Georgetown University | microRNA EXPRESSION PROFILING OF THYROID CANCER |
KR102265775B1 (ko) | 2011-10-27 | 2021-06-16 | 소렌토 쎄라퓨틱스, 인코포레이티드 | 고점도 생체활성 제제의 경피 전달 방법 |
AU2012328570B2 (en) | 2011-10-27 | 2017-08-31 | Massachusetts Institute Of Technology | Amino acid derivatives functionalized on the n-terminus capable of forming drug encapsulating microspheres and uses thereof |
US20140323907A1 (en) | 2011-10-28 | 2014-10-30 | Jason Frazier | Methods for drug delivery |
MX352823B (es) | 2011-10-28 | 2017-12-04 | Integritybio Inc | Formulaciones de proteinas que contienen aminoacidos. |
WO2013062140A1 (en) | 2011-10-28 | 2013-05-02 | Kyoto University | Method for efficiently inducing differentiation of pluripotent stem cells into hepatic lineage cells |
SI3091029T1 (sl) | 2011-10-31 | 2023-03-31 | F. Hoffmann - La Roche Ag | Pripravki protiteles proti IL13 |
EP2773426B1 (en) | 2011-10-31 | 2018-08-22 | Mallinckrodt LLC | Combinational liposome compositions for cancer therapy |
US9579338B2 (en) | 2011-11-04 | 2017-02-28 | Nitto Denko Corporation | Method of producing lipid nanoparticles for drug delivery |
TW201323442A (zh) | 2011-11-04 | 2013-06-16 | Novartis Ag | 低密度脂蛋白相關蛋白6(lrp6)-半衰期延長構築體 |
EP2773328A2 (en) | 2011-11-04 | 2014-09-10 | Nitto Denko Corporation | Method of producing lipid nanoparticles for drug delivery |
WO2013067537A1 (en) | 2011-11-04 | 2013-05-10 | Univertiy Of Notre Dame Du Lac | Nanoparticle-based drug delivery |
SG11201401964TA (en) | 2011-11-04 | 2014-05-29 | Agency Science Tech & Res | Self-assembled composite ultrasmall peptide-polymer hydrogels |
US20130115247A1 (en) | 2011-11-05 | 2013-05-09 | Aura Biosciences, Inc. | Virion Derived Protein Nanoparticles For Delivering Radioisotopes For The Diagnosis And Treatment Of Malignant And Systemic Disease And The Monitoring Of Therapy |
US20130116408A1 (en) | 2011-11-05 | 2013-05-09 | Aura Biosciences, Inc. | Virion Derived Protein Nanoparticles For Delivering Radioisotopes For The Diagnosis And Treatment Of Malignant And Systemic Disease And The Monitoring Of Therapy |
US20140314787A1 (en) | 2011-11-08 | 2014-10-23 | Novartis Forschungsstiftung, Zweigniederlassung, Friedrich Miescher Institute | Treatment for neurodegenerative diseases |
US20140287510A1 (en) | 2011-11-08 | 2014-09-25 | Novartis Forschungsstiftung, Zweigniederlassung Friedrich Miescher Institute | Rod cell-specific promoter |
WO2013070872A1 (en) | 2011-11-08 | 2013-05-16 | The Board Of Trustees Of The University Of Arkansas | Methods and compositions for x-ray induced release from ph sensitive liposomes |
WO2013068432A1 (en) | 2011-11-08 | 2013-05-16 | Novartis Forschungsstiftung, Zweigniederlassung, Friedrich Miescher Institute For Biomedical Research | Early diagnostic of neurodegenerative diseases |
US9581590B2 (en) | 2011-11-09 | 2017-02-28 | Board Of Trustees Of Michigan State University | Metallic nanoparticle synthesis with carbohydrate capping agent |
US9777043B2 (en) | 2011-11-11 | 2017-10-03 | Variation Biotechnologies Inc. | Compositions and methods for treatment of cytomegalovirus |
WO2013071047A1 (en) | 2011-11-11 | 2013-05-16 | Children's Medical Center Corporation | Compositions and methods for in vitro transcription of rna |
EP2780035A1 (en) | 2011-11-14 | 2014-09-24 | Novartis AG | Immunogenic complexes of polyanionic carbomers and env polypeptides and methods of manufacture and use thereof |
JP2014533294A (ja) | 2011-11-15 | 2014-12-11 | ノバルティス アーゲー | ホスホイノシチド3−キナーゼ阻害剤およびヤヌスキナーゼ2−シグナル伝達兼転写活性化因子5経路の調節剤の組合せ |
DK2790681T4 (da) | 2011-11-18 | 2023-05-01 | Regeneron Pharma | Fremgangsmåde til fremstilling af en farmaceutisk formulering med langvarig frigivelse omfattende polymercoatede proteinmikropartikler ved anvendelse af spraytørring |
JP2015504430A (ja) | 2011-11-21 | 2015-02-12 | ノバルティス アーゲー | Il−7アンタゴニスト及びpsa応答又は非応答対立遺伝子を用いた乾癬性関節炎(psa)を治療する方法 |
WO2013078199A2 (en) | 2011-11-23 | 2013-05-30 | Children's Medical Center Corporation | Methods for enhanced in vivo delivery of synthetic, modified rnas |
TR201111743A2 (tr) | 2011-11-28 | 2012-04-24 | Nesl�Han G�Rsoy Reyhan | Kanser tedavisinde kullanılmak üzere yağ bazlı nanotaşıyıcı sistemler. |
EP2785326A2 (en) | 2011-11-29 | 2014-10-08 | The University of North Carolina at Chapel Hill | Geometrically engineered particles and methods for modulating macrophage or immune responses |
US9364549B2 (en) | 2011-11-30 | 2016-06-14 | Andreas Voigt | Hydrophobic drug-delivery material, method for manufacturing thereof and methods for delivery of a drug-delivery composition |
KR102143435B1 (ko) | 2011-11-30 | 2020-08-11 | 쓰리엠 이노베이티브 프로퍼티즈 컴파니 | 펩티드 치료제 및 아미노산을 포함하는 마이크로니들 장치 및 이의 제조 및 사용 방법 |
MX351453B (es) | 2011-12-02 | 2017-10-16 | Pegasus Laboratories Inc | Composiciones de liberacion sostenida a base de lipidos anfipaticos. |
WO2013082529A1 (en) | 2011-12-02 | 2013-06-06 | Yale University | Enzymatic synthesis of poly(amine-co-esters) and methods of use thereof for gene delivery |
US20130142781A1 (en) | 2011-12-02 | 2013-06-06 | Invivo Therapeutics Corporation | Peg based hydrogel for peripheral nerve injury applications and compositions and method of use of synthetic hydrogel sealants |
US8497124B2 (en) | 2011-12-05 | 2013-07-30 | Factor Bioscience Inc. | Methods and products for reprogramming cells to a less differentiated state |
WO2013085951A1 (en) | 2011-12-05 | 2013-06-13 | Nano Precision Medical, Inc. | Device having titania nanotube membrane for drug delivery |
RU2691027C2 (ru) | 2011-12-05 | 2019-06-07 | Фэктор Байосайенс Инк. | Способы и препараты для трансфекции клеток |
ES2921724T1 (es) | 2011-12-07 | 2022-08-31 | Alnylam Pharmaceuticals Inc | Lípidos biodegradables para la administración de agentes activos |
US20140308304A1 (en) | 2011-12-07 | 2014-10-16 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Lipids for the delivery of active agents |
GB201121070D0 (en) | 2011-12-07 | 2012-01-18 | Isis Innovation | composition for delivery of biotherapeutics |
WO2013086322A1 (en) | 2011-12-07 | 2013-06-13 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Branched alkyl and cycloalkyl terminated biodegradable lipids for the delivery of active agents |
US9725687B2 (en) | 2011-12-09 | 2017-08-08 | President And Fellows Of Harvard College | Integrated human organ-on-chip microphysiological systems |
WO2013086502A1 (en) | 2011-12-09 | 2013-06-13 | President And Fellows Of Harvard College | Organ chips and uses thereof |
EP2787977A4 (en) | 2011-12-09 | 2015-05-06 | Univ California | LIPOSOMAL ACTIVE INVERTING |
JP6182457B2 (ja) | 2011-12-12 | 2017-08-16 | 協和発酵キリン株式会社 | カチオン性脂質を含有するドラックデリバリーシステムのための脂質ナノ粒子 |
CA2858884A1 (en) | 2011-12-12 | 2013-06-20 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Proteins comprising mrsa pbp2a and fragments thereof, nucleic acids encoding the same, and compositions and their use to prevent and treat mrsa infections |
CA2858694A1 (en) | 2011-12-12 | 2013-06-20 | Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd. | Lipid nano particles comprising combination of cationic lipids |
US20150000936A1 (en) | 2011-12-13 | 2015-01-01 | Schlumberger Technology Corporation | Energization of an element with a thermally expandable material |
EP2604253A1 (en) | 2011-12-13 | 2013-06-19 | Otto Glatter | Water-in-oil emulsions and methods for their preparation |
RS61161B1 (sr) | 2011-12-13 | 2021-01-29 | Engeneic Molecular Delivery Pty Ltd | Intaktne minićelije poreklom iz bakterija za isporuku terapijskih agenasa tumorima mozga |
EP2791364A4 (en) | 2011-12-14 | 2015-11-11 | Moderna Therapeutics Inc | METHODS OF RESPONSE TO A BIOLOGICAL THREAT |
WO2013090186A1 (en) | 2011-12-14 | 2013-06-20 | modeRNA Therapeutics | Modified nucleic acids, and acute care uses thereof |
WO2013087083A1 (en) | 2011-12-15 | 2013-06-20 | Biontech Ag | Particles comprising single stranded rna and double stranded rna for immunomodulation |
US20140349320A1 (en) | 2011-12-15 | 2014-11-27 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Using Adaptive Immunity to Detect Drug Resistance |
AU2012351947B2 (en) | 2011-12-16 | 2017-08-17 | Novartis Ag | Aerosolization apparatus for inhalation profile-independent drug delivery |
WO2013090601A2 (en) | 2011-12-16 | 2013-06-20 | Massachusetts Institute Of Technology | Compact nanoparticles for biological applications |
EA201491185A1 (ru) | 2011-12-16 | 2015-05-29 | Массачусетс Инститьют Оф Текнолоджи | Полимеры альфа-аминоамидинов и их применение |
CN104114572A (zh) | 2011-12-16 | 2014-10-22 | 现代治疗公司 | 经修饰的核苷、核苷酸和核酸组合物 |
US9580501B2 (en) | 2011-12-16 | 2017-02-28 | Synthon Biopharmaceuticals B.V. | Anti-TNF alpha monoclonal secretory IgA antibodies and methods for treating inflammatory diseases |
CA2859583C (en) | 2011-12-16 | 2020-02-18 | Allergan, Inc. | Ophthalmic compositions comprising polyvinyl capralactam-polyvinyl acetate-polyethylene glycol graft copolymer |
EP2794701B1 (en) | 2011-12-19 | 2017-03-08 | The University Of Sydney | A peptide-hydrogel composite |
US9241829B2 (en) | 2011-12-20 | 2016-01-26 | Abbott Medical Optics Inc. | Implantable intraocular drug delivery apparatus, system and method |
CA2859691A1 (en) | 2011-12-21 | 2013-06-27 | Moderna Therapeutics, Inc. | Methods of increasing the viability or longevity of an organ or organ explant |
US20130195851A1 (en) | 2011-12-23 | 2013-08-01 | Genentech, Inc. | Articles of manufacture and methods for co-administration of antibodies |
WO2013101908A1 (en) | 2011-12-27 | 2013-07-04 | Massachusetts Institute Of Technology | Microneedle devices and uses thereof |
WO2013098589A1 (en) | 2011-12-29 | 2013-07-04 | Novartis Ag | Adjuvanted combinations of meningococcal factor h binding proteins |
US20140371302A1 (en) | 2011-12-29 | 2014-12-18 | Modema Therapeutics, Inc. | Modified mrnas encoding cell-penetrating polypeptides |
EP4372081A2 (en) | 2011-12-30 | 2024-05-22 | Cellscript, Llc | Making and using in vitro-synthesized ssrna for introducing into mammalian cells to induce a biological or biochemical effect |
WO2013103842A1 (en) | 2012-01-06 | 2013-07-11 | Michigan Life Therapeutics, Llc | Methods of reducing risk of cardiovascular disease |
US20150030576A1 (en) | 2012-01-10 | 2015-01-29 | Moderna Therapeutics, Inc. | Methods and compositions for targeting agents into and across the blood-brain barrier |
WO2013109713A1 (en) | 2012-01-18 | 2013-07-25 | The General Hospital Corporation | Targeting rnas to microvesicles |
KR20140128966A (ko) | 2012-01-26 | 2014-11-06 | 라이프 테크놀로지스 코포레이션 | 바이러스의 감염성을 증가시키는 방법 |
CN108977412A (zh) | 2012-01-26 | 2018-12-11 | 生命科技公司 | 用于提高病毒感染性的方法 |
WO2013113325A1 (en) | 2012-01-31 | 2013-08-08 | Curevac Gmbh | Negatively charged nucleic acid comprising complexes for immunostimulation |
EP2623121A1 (en) | 2012-01-31 | 2013-08-07 | Bayer Innovation GmbH | Pharmaceutical composition comprising a polymeric carrier cargo complex and an antigen |
WO2013113326A1 (en) | 2012-01-31 | 2013-08-08 | Curevac Gmbh | Pharmaceutical composition comprising a polymeric carrier cargo complex and at least one protein or peptide antigen |
KR102081560B1 (ko) | 2012-02-09 | 2020-02-25 | 라이프 테크놀로지스 코포레이션 | 친수성 중합체성 입자 및 그의 제조 방법 |
WO2013120500A1 (en) | 2012-02-15 | 2013-08-22 | Curevac Gmbh | Nucleic acid comprising or coding for a histone stem-loop and a poly(a) sequence or a polyadenylation signal for increasing the expression of an encoded tumour antigen |
WO2013120498A1 (en) | 2012-02-15 | 2013-08-22 | Curevac Gmbh | Nucleic acid comprising or coding for a histone stem-loop and a poly(a) sequence or a polyadenylation signal for increasing the expression of an encoded allergenic antigen or an autoimmune self-antigen |
WO2013120499A1 (en) | 2012-02-15 | 2013-08-22 | Curevac Gmbh | Nucleic acid comprising or coding for a histone stem-loop and a poly (a) sequence or a polyadenylation signal for increasing the expression of an encoded pathogenic antigen |
WO2013120497A1 (en) | 2012-02-15 | 2013-08-22 | Curevac Gmbh | Nucleic acid comprising or coding for a histone stem-loop and a poly(a) sequence or a polyadenylation signal for increasing the expression of an encoded therapeutic protein |
WO2013126564A1 (en) | 2012-02-22 | 2013-08-29 | Cerulean Pharma Inc. | Conjugates, particles, compositions, and related methods |
JP2015513543A (ja) | 2012-02-22 | 2015-05-14 | ノースウェスタン ユニバーシティ | 癌および他の状態を処置するためのナノ構造体 |
US20130243867A1 (en) | 2012-02-23 | 2013-09-19 | University Of South Florida (A Florida Non-Profit Corporation) | Micelle compositions and methods for their use |
WO2013129936A1 (en) | 2012-02-27 | 2013-09-06 | Epitarget As | Use of an antibody and a particulate immunomodulator in therapy |
WO2013130535A1 (en) | 2012-02-27 | 2013-09-06 | Newgen Biopharma Corporation | Topical delivery of hormonal and non hormonal nano formulations, methods of making and using the same |
EP2819652A1 (en) | 2012-02-27 | 2015-01-07 | Epitarget As | Use of a particulate immunomodulator in cancer therapy |
WO2013128027A1 (en) | 2012-03-01 | 2013-09-06 | Amgen Research (Munich) Gmbh | Long life polypeptide binding molecules |
US20130236504A1 (en) | 2012-03-06 | 2013-09-12 | Medical University Of South Carolina | Delivery System for Enhancing Drug Efficacy |
WO2013136234A1 (en) | 2012-03-13 | 2013-09-19 | University Of Kwazulu-Natal | Transdermal delivery devices |
US10322089B2 (en) | 2012-03-14 | 2019-06-18 | The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University | Nanoparticles, nanoparticle delivery methods, and systems of delivery |
CA2867381C (en) | 2012-03-16 | 2016-09-20 | The Johns Hopkins University | Controlled release formulations for the delivery of hif-1 inhibitors |
EP2825156B1 (en) | 2012-03-16 | 2017-07-26 | Merck Patent GmbH | Targeting aminoacid lipids |
CN104394891B (zh) | 2012-03-16 | 2019-04-16 | 约翰霍普金斯大学 | 用于递送活性剂的非线性多嵌段共聚物-药物结合物 |
WO2013142349A1 (en) | 2012-03-23 | 2013-09-26 | University Of Chicago | Compositions and methods related to staphylococcal sbi |
US9610346B2 (en) | 2012-03-23 | 2017-04-04 | International Aids Vaccine Initiative | Recombinant viral vectors |
WO2013143555A1 (en) | 2012-03-26 | 2013-10-03 | Biontech Ag | Rna formulation for immunotherapy |
US9717685B2 (en) | 2012-03-26 | 2017-08-01 | President And Fellows Of Harvard College | Lipid-coated nucleic acid nanostructures of defined shape |
DK3578659T3 (da) | 2012-03-27 | 2024-02-05 | CureVac SE | Kunstige nukelinsyremolekyler til forbedret protein- eller peptidekspression |
WO2013148541A1 (en) | 2012-03-27 | 2013-10-03 | Merck Sharp & Dohme Corp. | DIETHER BASED BIODEGRADABLE CATIONIC LIPIDS FOR siRNA DELIVERY |
SG10201607962RA (en) | 2012-03-27 | 2016-11-29 | Curevac Ag | Artificial nucleic acid molecules |
MX358706B (es) | 2012-03-27 | 2018-08-31 | Curevac Ag | Moleculas de acido nucleico artificiales que comprenden un top 5´utr. |
US9877919B2 (en) | 2012-03-29 | 2018-01-30 | Translate Bio, Inc. | Lipid-derived neutral nanoparticles |
US20140275229A1 (en) | 2012-04-02 | 2014-09-18 | Moderna Therapeutics, Inc. | Modified polynucleotides encoding udp glucuronosyltransferase 1 family, polypeptide a1 |
US20150050354A1 (en) | 2012-04-02 | 2015-02-19 | Moderna Therapeutics, Inc. | Modified polynucleotides for the treatment of otic diseases and conditions |
DE18200782T1 (de) | 2012-04-02 | 2021-10-21 | Modernatx, Inc. | Modifizierte polynukleotide zur herstellung von proteinen im zusammenhang mit erkrankungen beim menschen |
JP2015518705A (ja) | 2012-04-02 | 2015-07-06 | モデルナ セラピューティクス インコーポレイテッドModerna Therapeutics,Inc. | ヒト疾患に関連する生物製剤およびタンパク質の産生のための修飾ポリヌクレオチド |
US9303079B2 (en) | 2012-04-02 | 2016-04-05 | Moderna Therapeutics, Inc. | Modified polynucleotides for the production of cytoplasmic and cytoskeletal proteins |
WO2013151771A1 (en) | 2012-04-05 | 2013-10-10 | Massachusetts Institute Of Technology | Immunostimulatory compositions and methods of use thereof |
WO2013151650A1 (en) | 2012-04-05 | 2013-10-10 | University Of Florida Research Foundation, Inc. | Neurophilic nanoparticles |
WO2013152351A2 (en) | 2012-04-06 | 2013-10-10 | The Trustees Of Columbia University In The City Of New York | Fusion polypeptides and methods of use thereof |
CN104379127A (zh) | 2012-04-08 | 2015-02-25 | 席拉蔻公司 | 制备用于治疗泌尿上皮失调的热可逆凝胶制剂 |
US20130296531A1 (en) | 2012-04-11 | 2013-11-07 | Intezyne Technologies, Inc. | Block copolymers for stable micelles |
WO2013155493A1 (en) | 2012-04-12 | 2013-10-17 | Yale University | Methods of treating inflammatory and autoimmune diseases and disorders |
WO2013154766A1 (en) | 2012-04-13 | 2013-10-17 | New York University | Microrna control of ldl receptor pathway |
US11001797B2 (en) | 2012-04-13 | 2021-05-11 | President And Fellows Of Harvard College | Devices and methods for in vitro aerosol delivery |
CN103764153A (zh) | 2012-04-18 | 2014-04-30 | 箭头研究公司 | 用于体内核酸递送的聚(丙烯酸酯)聚合物 |
AU2013249548A1 (en) | 2012-04-19 | 2014-11-06 | Sirna Therapeutics, Inc. | Novel diester and triester based low molecular weight, biodegradable cationic lipids for oligonucleotide delivery |
US10278927B2 (en) | 2012-04-23 | 2019-05-07 | Massachusetts Institute Of Technology | Stable layer-by-layer coated particles |
EA030211B1 (ru) | 2012-04-25 | 2018-07-31 | Регьюлэс Терапьютикс Инк. | Соединения на основе микрорнк и способы модулирования активности mir-21 |
KR102140989B1 (ko) | 2012-05-03 | 2020-08-04 | 칼라 파마슈티컬스, 인크. | 개선된 점막 수송을 나타내는 제약 나노입자 |
US9889208B2 (en) | 2012-05-04 | 2018-02-13 | The Johns Hopkins University | Lipid-based drug carriers for rapid penetration through mucus linings |
US20150087671A1 (en) | 2012-05-16 | 2015-03-26 | Micell Technologies, Inc. | Low burst sustained release lipophilic and biologic agent compositions |
US9399672B2 (en) | 2012-05-17 | 2016-07-26 | The United States Of America, As Represented By The Secretary Department Of Health And Human Services | Hepatitis C virus neutralizing antibody |
WO2013173693A1 (en) | 2012-05-18 | 2013-11-21 | The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services | Nanoparticles with enhanced entry into cancer cells |
KR102169891B1 (ko) | 2012-05-23 | 2020-10-26 | 더 오하이오 스테이트 유니버시티 | 지질 나노입자 조성물 및 이를 제조하는 방법 및 사용하는 방법 |
EP2854857B1 (en) | 2012-05-25 | 2018-11-28 | CureVac AG | Reversible immobilization and/or controlled release of nucleic acid containing nanoparticles by (biodegradable) polymer coatings |
WO2013184945A1 (en) | 2012-06-06 | 2013-12-12 | Loma Vista Medical, Inc. | Inflatable medical devices |
EA201492055A1 (ru) | 2012-06-08 | 2015-11-30 | Шир Хьюман Дженетик Терапис, Инк. | ИНГАЛЯЦИОННАЯ ДОСТАВКА мРНК В НЕЛЕГОЧНЫЕ КЛЕТКИ-МИШЕНИ |
PT2858974T (pt) | 2012-06-08 | 2018-11-29 | Nitto Denko Corp | Lípidos para formulações de administração de agentes terapêuticos |
BR112014029807A2 (pt) | 2012-06-08 | 2017-06-27 | Ethris Gmbh | administração pulmonar de rna mensageiro |
US20150218252A1 (en) | 2012-06-20 | 2015-08-06 | President And Fellows Of Harvard College | Self-assembling peptides, peptide nanostructures and uses thereof |
JP6275707B2 (ja) | 2012-06-20 | 2018-02-07 | フランク・グー | 粘膜付着性ナノ粒子送達系 |
US9803010B2 (en) | 2012-06-27 | 2017-10-31 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Crystalline anti-human IL-23p19 antibodies |
US9150841B2 (en) | 2012-06-29 | 2015-10-06 | Shire Human Genetic Therapies, Inc. | Cells for producing recombinant iduronate-2-sulfatase |
US9956291B2 (en) | 2012-07-10 | 2018-05-01 | Shaker A. Mousa | Nanoformulation and methods of use of thyroid receptor beta1 agonists for liver targeting |
EP2872120B1 (en) | 2012-07-16 | 2017-05-03 | Nanoderm Sciences, Inc. | Therapeutic nanoparticles with a polymyxin b as targeting agent |
EP2687252A1 (en) | 2012-07-17 | 2014-01-22 | Sanofi-Aventis Deutschland GmbH | Drug delivery device |
EP2687251A1 (en) | 2012-07-17 | 2014-01-22 | Sanofi-Aventis Deutschland GmbH | Drug delivery device |
CN112587671A (zh) | 2012-07-18 | 2021-04-02 | 博笛生物科技有限公司 | 癌症的靶向免疫治疗 |
WO2014015334A1 (en) | 2012-07-20 | 2014-01-23 | Brown University | System and methods for nanostructure protected delivery of treatment agent and selective release thereof |
KR20160073936A (ko) | 2012-07-24 | 2016-06-27 | 프레지던트 앤드 펠로우즈 오브 하바드 칼리지 | 핵산 나노구조의 자기-조립 |
GB201213624D0 (en) | 2012-07-27 | 2012-09-12 | Univ Ulster The | Method and system for production of conjugated nanoparticles |
WO2014015422A1 (en) | 2012-07-27 | 2014-01-30 | Ontario Institute For Cancer Research | Cellulose-based nanoparticles for drug delivery |
US9931418B2 (en) | 2012-08-07 | 2018-04-03 | Northeastern University | Compositions for the delivery of RNA and drugs into cells |
WO2014024193A1 (en) | 2012-08-07 | 2014-02-13 | Prodel Pharma Ltd. | Compositions and methods for rapid transmucosal delivery of pharmaceutical ingredients |
AU2013299537A1 (en) | 2012-08-08 | 2015-02-19 | Presage Biosciences, Inc. | Extrusion methods and devices for drug delivery |
WO2014025312A1 (en) | 2012-08-08 | 2014-02-13 | Nanyang Technological University | Methods of manufacturing hydrogel microparticles having living cells, and compositions for manufacturing a scaffold for tissue engineering |
EP2882459A1 (en) | 2012-08-10 | 2015-06-17 | University of North Texas Health Science Center | Drug delivery vehicle comprising conjugates between targeting polyamino acids and fatty acids |
WO2014027006A1 (en) | 2012-08-13 | 2014-02-20 | Edko Pazarlama Tanitim Ticaret Limited Sirketi | Bioadhesive formulations for use in drug delivery |
CA2884870C (en) | 2012-08-13 | 2022-03-29 | Massachusetts Institute Of Technology | Amine-containing lipidoids and uses thereof |
US9775804B2 (en) | 2012-08-14 | 2017-10-03 | Aaron Froese | Internal structured self assembling liposomes |
US9827321B2 (en) | 2012-08-14 | 2017-11-28 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Stabilizing shear-thinning hydrogels |
WO2014028429A2 (en) | 2012-08-14 | 2014-02-20 | Moderna Therapeutics, Inc. | Enzymes and polymerases for the synthesis of rna |
EP2885414B1 (en) | 2012-08-15 | 2020-09-23 | The University of Chicago | Exosome-based therapeutics against neurodegenerative disorders |
WO2014039185A1 (en) | 2012-09-05 | 2014-03-13 | Creighton University | Polymeric nanoparticles in a thermosensitive gel for coital-independent vaginal prophylaxis of hiv |
US8703197B2 (en) | 2012-09-13 | 2014-04-22 | International Business Machines Corporation | Branched polyamines for delivery of biologically active materials |
CN104812381B (zh) | 2012-09-17 | 2018-01-26 | 辉瑞大药厂 | 用于制备治疗性纳米颗粒的方法 |
WO2014047649A1 (en) | 2012-09-24 | 2014-03-27 | The Regents Of The University Of California | Methods for arranging and packing nucleic acids for unusual resistance to nucleases and targeted delivery for gene therapy |
WO2014052634A1 (en) | 2012-09-27 | 2014-04-03 | The University Of North Carolina At Chapel Hill | Lipid coated nanoparticles containing agents having low aqueous and lipid solubilities and methods thereof |
WO2014053881A1 (en) | 2012-10-04 | 2014-04-10 | Centre National De La Recherche Scientifique | Cell penetrating peptides for intracellular delivery of molecules |
US20140100178A1 (en) | 2012-10-04 | 2014-04-10 | Aslam Ansari | Composition and methods for site-specific drug delivery to treat malaria and other liver diseases |
US20150202153A1 (en) | 2012-10-04 | 2015-07-23 | University Of The Witwatersrand, Johannesburg | Liposomal drug delivery system |
WO2014053879A1 (en) | 2012-10-04 | 2014-04-10 | Centre National De La Recherche Scientifique | Cell penetrating peptides for intracellular delivery of molecules |
EP2716655A1 (en) | 2012-10-04 | 2014-04-09 | Institut Pasteur | Neutralizing antibodies directed against Hepatitis C virus ectodomain glycoprotein E2 |
WO2014053882A1 (en) | 2012-10-04 | 2014-04-10 | Centre National De La Recherche Scientifique | Cell penetrating peptides for intracellular delivery of molecules |
WO2014053880A1 (en) | 2012-10-04 | 2014-04-10 | Centre National De La Recherche Scientifique | Cell penetrating peptides for intracellular delivery of molecules |
EP2716689A1 (en) | 2012-10-05 | 2014-04-09 | National University of Ireland, Galway | Polymer comprising a plurality of branches having at least one disulfide group and/or at least one vinyl group |
WO2014064534A2 (en) | 2012-10-05 | 2014-05-01 | Chrontech Pharma Ab | Injection needle, device, immunogenic compositions and method of use |
WO2014059022A1 (en) | 2012-10-09 | 2014-04-17 | The Brigham And Women's Hospital, Inc. | Nanoparticles for targeted delivery of multiple therapeutic agents and methods of use |
US20140106260A1 (en) | 2012-10-11 | 2014-04-17 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Core-shell nanoparticulate compositions and methods |
WO2014062697A2 (en) | 2012-10-16 | 2014-04-24 | Endocyte, Inc. | Drug delivery conjugates containing unnatural amino acids and methods for using |
HUE051577T2 (hu) | 2012-10-18 | 2021-03-01 | Univ Rockefeller | Széleskörû semlegesítést biztosító anti-HIV ellenanyagok |
AU2013336237A1 (en) | 2012-10-22 | 2015-06-11 | Sabag-Rfa Ltd | A system for delivering therapeutic agents into living cells and cells nuclei |
EP2911697A1 (en) | 2012-10-26 | 2015-09-02 | Nlife Therapeutics S.L. | Compositions and methods for selective delivery of oligonucleotide molecules to cell types |
US20150272900A1 (en) | 2012-10-26 | 2015-10-01 | The Johns Hopkins University | Layer-By-Layer Approach to Co-Deliver DNA and siRNA via AuNPs: A Potential Platform for Modifying Release Kinetics |
WO2014066912A1 (en) | 2012-10-26 | 2014-05-01 | Vanderbilt University | Polymeric nanoparticles |
US20150376581A1 (en) | 2012-10-29 | 2015-12-31 | Technische Universitaet Dortmund | T7 rna polymerase variants and methods of using the same |
RU2711249C2 (ru) | 2012-11-01 | 2020-01-15 | Фэктор Байосайенс Инк. | Способы и продукты для экспрессии белков в клетках |
WO2014071072A2 (en) | 2012-11-02 | 2014-05-08 | Pungente Michael D | Novel cationic carotenoid-based lipids for cellular nucleic acid uptake |
US10017767B2 (en) | 2012-11-05 | 2018-07-10 | Fondazione Centro San Raffaele | Targets in multiple myeloma and other disorders |
WO2014074597A1 (en) | 2012-11-06 | 2014-05-15 | President And Fellows Of Harvard College | Compositions and methods relating to complex nucleic acid nanostructures |
AU2013341646B2 (en) | 2012-11-06 | 2017-08-31 | Rochal Technologies, Llc | Delivery of biologically-active agents using volatile, hydrophobic solvents |
WO2014072999A1 (en) | 2012-11-07 | 2014-05-15 | Council Of Scientific And Industrial Research | Nanocomplex containing cationic peptide for biomolecule delivery |
EP2916873B1 (en) | 2012-11-07 | 2017-07-26 | Council of Scientific & Industrial Research | Nanocomplex containing amphipathic peptide useful for efficient transfection of biomolecules |
TW201428101A (zh) | 2012-11-08 | 2014-07-16 | Inviragen Inc | 登革熱病毒血清型4型之建構物的組成物、方法及用途 |
CN104884049A (zh) | 2012-11-08 | 2015-09-02 | 克莱尔塞德生物医学股份有限公司 | 用于在人类受试者中治疗眼部疾病的方法和装置 |
MX2015005363A (es) | 2012-11-08 | 2015-11-06 | Novozymes Biopharma Dk As | Variantes de albumina. |
CA2886987C (en) | 2012-11-08 | 2022-07-12 | Eleven Biotherapeutics, Inc. | Il-6 antagonists and uses thereof |
TR201809547T4 (tr) | 2012-11-09 | 2018-07-23 | Biontech Rna Pharmaceuticals Gmbh | Hücresel RNA ifadesine yönelik yöntem. |
WO2014072468A1 (en) | 2012-11-09 | 2014-05-15 | Velin-Pharma A/S | Compositions for pulmonary delivery |
WO2014071963A1 (en) | 2012-11-09 | 2014-05-15 | Biontech Ag | Method for cellular rna expression |
US9200119B2 (en) | 2012-11-09 | 2015-12-01 | Momentive Performance Materials Inc. | Silicon-containing zwitterionic linear copolymer composition |
CA2890190A1 (en) | 2012-11-12 | 2014-05-15 | Redwood Bioscience, Inc. | Compounds and methods for producing a conjugate |
EP2916862B1 (en) | 2012-11-12 | 2020-01-08 | GenVec, Inc. | Malaria antigens and methods of use |
GB201220354D0 (en) | 2012-11-12 | 2012-12-26 | Medpharm Ltd | Dermal compositions |
WO2014078399A1 (en) | 2012-11-13 | 2014-05-22 | Baylor College Of Medicine | Multi-arm biodegradable polymers for nucleic acid delivery |
WO2014078636A1 (en) | 2012-11-16 | 2014-05-22 | President And Fellows Of Harvard College | Nucleic acid hydrogel self-assembly |
US9310374B2 (en) | 2012-11-16 | 2016-04-12 | Redwood Bioscience, Inc. | Hydrazinyl-indole compounds and methods for producing a conjugate |
EP2732825B1 (en) | 2012-11-19 | 2015-07-01 | Invivogen | Conjugates of a TLR7 and/or TLR8 agonist and a TLR2 agonist |
US9655848B2 (en) | 2012-11-19 | 2017-05-23 | Technion Research & Development Foundation Limited | Liposomes for in-vivo delivery |
WO2014081849A1 (en) | 2012-11-20 | 2014-05-30 | Phasebio Pharmaceuticals, Inc. | Formulations of active agents for sustained release |
US20140141037A1 (en) | 2012-11-20 | 2014-05-22 | Novartis Ag | Rsv f prefusion trimers |
EP2922574B1 (en) | 2012-11-22 | 2023-05-17 | Tagworks Pharmaceuticals B.V. | Chemically cleavable group |
WO2014081300A1 (en) | 2012-11-22 | 2014-05-30 | Tagworks Pharmaceuticals B.V. | Channel protein activatable liposomes |
WO2014081299A1 (en) | 2012-11-22 | 2014-05-30 | Tagworks Pharmaceuticals B.V. | Activatable liposomes |
US20150315541A1 (en) | 2012-12-13 | 2015-11-05 | Moderna Therapeutics, Inc. | Modified polynucleotides for altering cell phenotype |
EP2931319B1 (en) | 2012-12-13 | 2019-08-21 | ModernaTX, Inc. | Modified nucleic acid molecules and uses thereof |
WO2014108515A1 (en) | 2013-01-10 | 2014-07-17 | Novartis Ag | Influenza virus immunogenic compositions and uses thereof |
JP2016504050A (ja) | 2013-01-17 | 2016-02-12 | モデルナ セラピューティクス インコーポレイテッドModerna Therapeutics,Inc. | 細胞表現型の改変のためのシグナルセンサーポリヌクレオチド |
WO2014164253A1 (en) | 2013-03-09 | 2014-10-09 | Moderna Therapeutics, Inc. | Heterologous untranslated regions for mrna |
WO2014158795A1 (en) | 2013-03-12 | 2014-10-02 | Moderna Therapeutics, Inc. | Diagnosis and treatment of fibrosis |
EP2968391A1 (en) | 2013-03-13 | 2016-01-20 | Moderna Therapeutics, Inc. | Long-lived polynucleotide molecules |
EP2971010B1 (en) | 2013-03-14 | 2020-06-10 | ModernaTX, Inc. | Formulation and delivery of modified nucleoside, nucleotide, and nucleic acid compositions |
US20160032273A1 (en) | 2013-03-15 | 2016-02-04 | Moderna Therapeutics, Inc. | Characterization of mrna molecules |
WO2014144711A1 (en) | 2013-03-15 | 2014-09-18 | Moderna Therapeutics, Inc. | Analysis of mrna heterogeneity and stability |
EP2971165A4 (en) | 2013-03-15 | 2016-11-23 | Moderna Therapeutics Inc | DISSOLUTION OF DNA FRAGMENTS IN MRNA MANUFACTURING METHODS |
US8980864B2 (en) | 2013-03-15 | 2015-03-17 | Moderna Therapeutics, Inc. | Compositions and methods of altering cholesterol levels |
WO2014144767A1 (en) | 2013-03-15 | 2014-09-18 | Moderna Therapeutics, Inc. | Ion exchange purification of mrna |
WO2014152027A1 (en) | 2013-03-15 | 2014-09-25 | Moderna Therapeutics, Inc. | Manufacturing methods for production of rna transcripts |
US11377470B2 (en) | 2013-03-15 | 2022-07-05 | Modernatx, Inc. | Ribonucleic acid purification |
EP3971287A1 (en) | 2013-07-11 | 2022-03-23 | ModernaTX, Inc. | Compositions comprising synthetic polynucleotides encoding crispr related proteins and synthetic sgrnas and methods of use |
WO2015007871A2 (en) | 2013-07-17 | 2015-01-22 | Ospedale San Raffaele S.R.L. | Micrornas and autoimmune-immune mediated inflammatory disease |
EP3041938A1 (en) | 2013-09-03 | 2016-07-13 | Moderna Therapeutics, Inc. | Circular polynucleotides |
AU2014315287A1 (en) | 2013-09-03 | 2015-03-12 | Moderna Therapeutics, Inc. | Chimeric polynucleotides |
EP3043826A4 (en) | 2013-09-13 | 2017-05-24 | Moderna Therapeutics, Inc. | Polynucleotide compositions containing amino acids |
EP3052106A4 (en) | 2013-09-30 | 2017-07-19 | ModernaTX, Inc. | Polynucleotides encoding immune modulating polypeptides |
MX2016004249A (es) | 2013-10-03 | 2016-11-08 | Moderna Therapeutics Inc | Polinulcleotidos que codifican el receptor de lipoproteina de baja densidad. |
WO2015058069A1 (en) | 2013-10-18 | 2015-04-23 | Moderna Therapeutics, Inc. | Compositions and methods for tolerizing cellular systems |
US20170202979A1 (en) | 2014-07-17 | 2017-07-20 | Modernatx, Inc. | Terminal modifications of polynucleotides |
WO2016077125A1 (en) * | 2014-11-10 | 2016-05-19 | Moderna Therapeutics, Inc. | Alternative nucleic acid molecules containing reduced uracil content and uses thereof |
US10293058B2 (en) | 2015-04-22 | 2019-05-21 | Curevac Ag | RNA containing composition for treatment of tumor diseases |
PT3394093T (pt) | 2015-12-23 | 2022-05-30 | Modernatx Inc | Métodos de utilização de polinucleotídeos que codificam ligandos ox40 |
-
2013
- 2013-10-02 EP EP22157965.9A patent/EP4074834A1/en active Pending
- 2013-10-02 PL PL13779667T patent/PL2922554T3/pl unknown
- 2013-10-02 RS RS20220477A patent/RS63237B1/sr unknown
- 2013-10-02 SI SI201331984T patent/SI2922554T1/sl unknown
- 2013-10-02 EP EP13779667.8A patent/EP2922554B1/en active Active
- 2013-10-02 US US14/043,927 patent/US9597380B2/en active Active
- 2013-10-02 JP JP2015544065A patent/JP6144355B2/ja active Active
- 2013-10-02 DK DK13779667.8T patent/DK2922554T3/da active
- 2013-10-02 LT LTEPPCT/US2013/062943T patent/LT2922554T/lt unknown
- 2013-10-02 ES ES13779667T patent/ES2921623T3/es active Active
- 2013-10-02 WO PCT/US2013/062943 patent/WO2014081507A1/en active Application Filing
- 2013-10-02 HR HRP20220607TT patent/HRP20220607T1/hr unknown
- 2013-10-02 PT PT137796678T patent/PT2922554T/pt unknown
- 2013-10-02 CA CA2892529A patent/CA2892529C/en active Active
-
2016
- 2016-03-04 HK HK16102487.8A patent/HK1214515A1/zh unknown
-
2017
- 2017-02-10 US US15/429,532 patent/US10155029B2/en active Active
- 2017-04-04 AU AU2017202228A patent/AU2017202228B2/en active Active
- 2017-05-10 JP JP2017093692A patent/JP6377804B2/ja active Active
-
2018
- 2018-07-25 JP JP2018138949A patent/JP6666391B2/ja active Active
- 2018-10-05 US US16/152,945 patent/US10925935B2/en active Active
-
2019
- 2019-06-03 AU AU2019203876A patent/AU2019203876A1/en not_active Abandoned
-
2020
- 2020-02-20 JP JP2020026728A patent/JP7047002B2/ja active Active
- 2020-12-18 US US17/127,435 patent/US12023371B2/en active Active
-
2021
- 2021-05-03 AU AU2021202758A patent/AU2021202758A1/en not_active Abandoned
-
2022
- 2022-03-23 JP JP2022046812A patent/JP2022093332A/ja active Pending
Patent Citations (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2007024708A2 (en) * | 2005-08-23 | 2007-03-01 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Rna containing modified nucleosides and methods of use thereof |
WO2011012316A2 (de) * | 2009-07-31 | 2011-02-03 | Ludwig-Maximilians-Universität | Rna mit einer kombination aus unmodifizierten und modifizierten nucleotiden zur proteinexpression |
WO2012009644A2 (en) * | 2010-07-16 | 2012-01-19 | Arizona Board Of Regents | Methods to identify synthetic and natural rna elements that enhance protein translation |
WO2012135805A2 (en) * | 2011-03-31 | 2012-10-04 | modeRNA Therapeutics | Delivery and formulation of engineered nucleic acids |
WO2012138453A1 (en) * | 2011-04-03 | 2012-10-11 | The General Hospital Corporation | Efficient protein expression in vivo using modified rna (mod-rna) |
WO2013103659A1 (en) * | 2012-01-04 | 2013-07-11 | Board Of Supervisors Of Louisiana State University And Agricultural And Mechanical College | Stabilizing rna by incorporating chain-terminating nucleosides at the 3'-terminus |
JP6377804B2 (ja) * | 2012-11-26 | 2018-08-22 | モデルナティエックス インコーポレイテッドModernaTX,Inc. | 末端修飾rna |
Also Published As
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP7047002B2 (ja) | 化学修飾mRNA | |
JP6726711B2 (ja) | 細胞表現型の改変のためのシグナルセンサーポリヌクレオチド | |
US20170252461A1 (en) | Heterologous untranslated regions for mrna | |
JP2019059793A (ja) | 修飾ヌクレオシド、ヌクレオチドおよび核酸組成物 | |
AU2016202985A1 (en) | Methods of increasing the viability or longevity of an organ or organ explant | |
JP2017523777A (ja) | ポリヌクレオチドの末端修飾 | |
EP2791364A1 (en) | Methods of responding to a biothreat | |
EP2791159A1 (en) | Modified nucleic acids, and acute care uses thereof | |
JP2015518816A (ja) | 腫瘍学関連タンパク質およびペプチドの産生のための修飾ポリヌクレオチド | |
WO2013106496A1 (en) | Methods and compositions for targeting agents into and across the blood-brain barrier |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20180824 |
|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20180824 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20190201 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A132 Effective date: 20190625 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20190911 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20200121 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20200220 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 6666391 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |