JP6925688B2 - 水痘帯状疱疹ウイルス(vzv)のための核酸ワクチン - Google Patents
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- Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
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Description
本出願は、米国特許法第119条(e)に基づき、2015年10月22日に出願された米国特許仮出願第62/245,234号、2015年10月28日に出願された米国特許仮出願第62/247,697号、2016年5月12日に出願された米国特許仮出願第62/335348号及び2015年10月22日に出願された米国特許仮出願第62/245,031号の利益を主張するものであり、各出願は、その全体が参照により本明細書に援用される。
有効性=(ARU−ARV)/ARU×100、及び
有効性=(1−RR)×100
有効率=(1−OR)×100
本明細書で提供される水痘帯状疱疹ウイルス(VZV)ワクチンは、少なくとも1つのVZV抗原性ポリペプチドをコードするオープンリーディングフレームを有する少なくとも1つの(1つ以上の)リボ核酸(RNA、例えば、mRNA)ポリヌクレオチドを含む。「核酸」という用語は、その最も広い意味で、ヌクレオチドの重合体を含む任意の化合物及び/または物質を含む。これらの重合体は、ポリヌクレオチドと呼ばれる。
いくつかの実施形態において、抗原性ポリペプチドは、VZV糖タンパク質である。例えば、VZV糖タンパク質は、VZV gE、gI、gB、gH、gK、gL、gC、gNもしくはgMまたはその免疫原性断片もしくはエピトープであり得る。いくつかの実施形態において、抗原性ポリペプチドは、VZV gEポリペプチドである。いくつかの実施形態において、抗原性ポリペプチドは、VZV gIポリペプチドである。いくつかの実施形態において、抗原性ポリペプチドは、VZV gBポリペプチドである。いくつかの実施形態において、抗原性ポリペプチドは、VZV gHポリペプチドである。いくつかの実施形態において、抗原性ポリペプチドは、VZV gKポリペプチドである。いくつかの実施形態において、抗原性ポリペプチドは、VZV gLポリペプチドである。いくつかの実施形態において、抗原性ポリペプチドは、VZV gCポリペプチドである。いくつかの実施形態において、抗原性ポリペプチドは、VZV gNポリペプチドである。いくつかの実施形態において、抗原性ポリペプチドは、VZV gMポリペプチドである。
本開示は、単一の抗原性ポリペプチドをそれぞれコードする複数のRNA(例えば、mRNA)ポリヌクレオチドを含むVZVワクチン、及び1つを超える抗原性ポリペプチドを(例えば、融合ポリペプチドとして)コードする単一のRNAポリヌクレオチドを含むVZVワクチンを包含する。したがって、第1のVZV抗原性ポリペプチドをコードするオープンリーディングフレームを有するRNA(例えば、mRNA)ポリヌクレオチドと、第2のVZV抗原性ポリペプチドをコードするオープンリーディングフレームを有するRNAポリヌクレオチド(例えば、mRNA)とを含むワクチン組成物は、(a)第1のVZV抗原性ポリペプチドをコードする第1のRNAポリヌクレオチドと、第2のVZV抗原性ポリペプチドをコードする第2のRNAポリヌクレオチドとを含むワクチン、ならびに(b)第1及び第2のVZV抗原性ポリペプチドを(例えば、融合ポリペプチドとして)コードする単一のRNAポリヌクレオチドを含むワクチンを包含することを理解されたい。本開示のVZV RNAワクチンは、いくつかの実施形態において、それぞれが異なるVZV抗原性ポリペプチドをコードするオープンリーディングフレームを有する2〜10個(例えば、2、3、4、5、6、7、8、9または10個)またはそれ以上のRNAポリヌクレオチド(または2〜10個もしくはそれ以上の異なるVZV抗原性ポリペプチドをコードする単一のRNAポリヌクレオチド)を含む。いくつかの実施形態において、VZV RNAワクチンは、VZV gEタンパク質をコードするオープンリーディングフレームを有するRNAポリヌクレオチド、VZV gIタンパク質をコードするオープンリーディングフレームを有するRNAポリヌクレオチド、VZV gBタンパク質をコードするオープンリーディングフレームを有するRNAポリヌクレオチド、VZV gHタンパク質をコードするオープンリーディングフレームを有するRNAポリヌクレオチド、VZV gKタンパク質をコードするオープンリーディングフレームを有するRNAポリヌクレオチド、VZV gLタンパク質をコードするオープンリーディングフレームを有するRNAポリヌクレオチド、VZV gCタンパク質をコードするオープンリーディングフレームを有するRNAポリヌクレオチド、VZV gNタンパク質をコードするオープンリーディングフレームを有するRNAポリヌクレオチド、及びVZV gMタンパク質をコードするオープンリーディングフレームを有するRNAポリヌクレオチドを含む。いくつかの実施形態において、VZV RNAワクチンは、VZV gEをコードするオープンリーディングフレームを有するRNAポリヌクレオチドと、VZV gIタンパク質をコードするオープンリーディングフレームを有するRNAポリヌクレオチドとを含む。いくつかの実施形態において、VZV RNAワクチンは、VZV gEタンパク質またはgEバリアントをコードするオープンリーディングフレームを有するRNAポリヌクレオチドを含む。
いくつかの実施形態において、VZVポリヌクレオチドによってコードされる抗原性ポリペプチドは、シグナルペプチドを含む。シグナルペプチドは、N末端の15〜60アミノ酸タンパク質を含み、典型的に、分泌経路において膜を通過する移行に必要であり、したがって、真核生物及び原核生物の両生物において、大部分のタンパク質が分泌経路へ入ることを普遍的に制御している。シグナルペプチドは、一般に、長さの異なるN末端領域(通常、正に荷電したアミノ酸を含む)と、疎水性領域と、短いカルボキシ末端ペプチド領域の3つの領域からなる。真核生物において、新生前駆タンパク質(プレタンパク質)のシグナルペプチドは、リボソームを粗面小胞体(ER)膜に向かわせ、膜を通過して伸長するペプチド鎖の輸送を開始する。しかしながら、シグナルペプチドは、成熟タンパク質の最終目的地に関与しない。配列中に更なるアドレスタグを欠いている分泌タンパク質は、普通は外部環境に分泌される。シグナルペプチドは、小胞体(ER)に存在するシグナルペプチダーゼによって前駆タンパク質から切断されるか、切断されないまま膜アンカーとして機能する。近年、シグナルペプチドのより進んだ見解が導き出されており、ある特定のシグナルペプチドの機能及び免疫優性は、これまで予想されていたよりも極めて多岐にわたることが示されている。
本開示のRNA(例えば、mRNA)ワクチンは、いくつかの実施形態において、少なくとも1つの呼吸器合胞体ウイルス(VZV)抗原性ポリペプチドをコードするオープンリーディングフレームを有する少なくとも1つのリボ核酸(RNA)ポリヌクレオチドを含み、当該RNAは、少なくとも1つの化学修飾を含む。
b−チオメトキシグアノシンTP、4’−アジドグアノシンTP、4’−炭素環式グアノシンTP、4’−エチニルグアノシンTP、5’−ホモ−グアノシンTP、8−ブロモ−グアノシンTP、9−デアザグアノシンTP、N2−イソブチル−グアノシンTP、1−メチルイノシン、イノシン、1,2’−O−ジメチルイノシン、2’−O−メチルイノシン、7−メチルイノシン、2’−O−メチルイノシン、エポキシクエオシン、ガラクトシル−クエオシン、マンノシルクエオシン、クエオシン、アリルアミノ−チミジン、アザチミジン、デアザチミジン、デオキシ−チミジン、2’−O−メチルウリジン、2−チオウリジン、3−メチルウリジン、5−カルボキシメチルウリジン、5−ヒドロキシウリジン、5−メチルウリジン、5−タウリノメチル−2−チオウリジン、5−タウリノメチルウリジン、ジヒドロウリジン、プソイドウリジン、(3−(3−アミノ−3−カルボキシプロピル)ウリジン、1−メチル−3−(3−アミノ−5−カルボキシプロピル)プソイドウリジン、1−メチルプソイドウリジン、1−エチル−プソイドウリジン、2’−O−メチルウリジン、2’−O−メチルプソイドウリジン、2’−O−メチルウリジン、2−チオ−2’−O−メチルウリジン、3−(3−アミノ−3−カルボキシプロピル)ウリジン、3,2’−O−ジメチルウリジン、3−メチル−プソイド−ウリジンTP、4−チオウリジン、5−(カルボキシヒドロキシメチル)ウリジン、5−(カルボキシヒドロキシメチル)ウリジンメチルエステル、5,2’−O−ジメチルウリジン、5,6−ジヒドロ−ウリジン、5−アミノメチル−2−チオウリジン、5−カルバモイルメチル−2’−O−メチルウリジン、5−カルバモイルメチルウリジン、5−カルボキシヒドロキシメチルウリジン、5−カルボキシヒドロキシメチルウリジンメチルエステル、5−カルボキシメチルアミノメチル−2’−O−メチルウリジン、5−カルボキシメチルアミノメチル−2−チオウリジン、5−カルボキシメチルアミノメチル−2−チオウリジン、5−カルボキシメチルアミノメチルウリジン、5−カルボキシメチルアミノメチルウリジン、5−カルバモイルメチルウリジンTP、5−メトキシカルボニルメチル−2’−O−メチルウリジン、5−メトキシカルボニルメチル−2−チオウリジン、5−メトキシカルボニルメチルウリジン、5−メチルウリジン,)、5−メトキシウリジン、5−メチル−2−チオウリジン、5−メチルアミノメチル−2−セレノウリジン、5−メチルアミノメチル−2−チオウリジン、5−メチルアミノメチルウリジン、5−メチルジヒドロウリジン、5−オキシ酢酸−ウリジンTP、5−オキシ酢酸−メチルエステル−ウリジンTP、N1−メチル−プソイド−ウラシル、N1−エチル−プソイド−ウラシル、ウリジン5−オキシ酢酸、ウリジン5−オキシ酢酸メチルエステル、3−(3−アミノ−3−カルボキシプロピル)−ウリジンTP、5−(イソ−ペンテニルアミノメチル)−2−チオウリジンTP、5−(イソ−ペンテニルアミノメチル)−2’−O−メチルウリジンTP、5−(イソ−ペンテニルアミノメチル)ウリジンTP、5−プロピニルウラシル、α−チオ−ウリジン、1(アミノアルキルアミノ−カルボニルエチルエニル)−2(チオ)−プソイドウラシル、1(アミノアルキルアミノカルボニルエチルエニル)−2,4−(ジチオ)プソイドウラシル、1(アミノアルキルアミノカルボニルエチルエニル)−4(チオ)プソイドウラシル、1(アミノアルキルアミノカルボニルエチルエニル)−プソイドウラシル、1(アミノカルボニルエチルエニル)−2(チオ)−プソイドウラシル、1(アミノカルボニルエチルエニル)−2,4−(ジチオ)プソイドウラシル、1(アミノカルボニルエチルエニル)−4(チオ)プソイドウラシル、1(アミノカルボニルエチルエニル)−プソイドウラシル、1置換2(チオ)−プソイドウラシル、1置換2,4−(ジチオ)プソイドウラシル、1置換4(チオ)プソイドウラシル、1置換プソイドウラシル、1−(アミノアルキルアミノ−カルボニルエチルエニル)−2−(チオ)−プソイドウラシル、1−メチル−3−(3−アミノ−3−カルボキシプロピル)プソイドウリジンTP、1−メチル−3−(3−アミノ−3−カルボキシプロピル)プソイド−UTP、1−メチル−プソイド−UTP、1−エチル−プソイド−UTP、2(チオ)プソイドウラシル、2’デオキシウリジン、2’フルオロウリジン、2−(チオ)ウラシル、2,4−(ジチオ)プソイドウラシル、2’メチル、2’アミノ、2’アジド、2’フルロ−グアノシン、2’−アミノ−2’−デオキシ−UTP、2’−アジド−2’−デオキシ−UTP、2’−アジド−デオキシウリジンTP、2’−O−メチルプソイドウリジン、2’デオキシウリジン、2’フルオロウリジン、2’−デオキシ−2’−a−アミノウリジンTP、2’−デオキシ−2’−a−アジドウリジンTP、2−メチルプソイドウリジン、3(3アミノ−3カルボキシプロピル)ウラシル、4(チオ)プソイドウラシル、4−(チオ)プソイドウラシル、4−(チオ)ウラシル、4−チオウラシル、5(1,3−ジアゾール−1−アルキル)ウラシル、5(2−アミノプロピル)ウラシル、5(アミノアルキル)ウラシル、5(ジメチルアミノアルキル)ウラシル、5(グアニジニウムアルキル)ウラシル、5(メトキシカルボニルメチル)−2−(チオ)ウラシル、5(メトキシカルボニル−メチル)ウラシル、5(メチル)2(チオ)ウラシル、5(メチル)2,4(ジチオ)ウラシル、5(メチル)4(チオ)ウラシル、5(メチルアミノメチル)−2(チオ)ウラシル、5(メチルアミノメチル)−2,4(ジチオ)ウラシル、5(メチルアミノメチル)−4(チオ)ウラシル、5(プロピニル)ウラシル、5(トリフルオロメチル)ウラシル、5−(2−アミノプロピル)ウラシル、5−(アルキル)−2−(チオ)プソイドウラシル、5−(アルキル)−2,4(ジチオ)プソイドウラシル、5−(アルキル)−4(チオ)プソイドウラシル、5−(アルキル)プソイドウラシル、5−(アルキル)ウラシル、5−(アルキニル)ウラシル、5−(アリルアミノ)ウラシル、5−(シアノアルキル)ウラシル、5−(ジアルキルアミノアルキル)ウラシル、5−(ジメチルアミノアルキル)ウラシル、5−(グアニジニウムアルキル)ウラシル、5−(ハロ)ウラシル、5−(l,3−ジアゾール−l−アルキル)ウラシル、5−(メトキシ)ウラシル、5−(メトキシカルボニルメチル)−2−(チオ)ウラシル、5−(メトキシカルボニル−メチル)ウラシル、5−(メチル)2(チオ)ウラシル、5−(メチル)2,4(ジチオ)ウラシル、5−(メチル)4(チオ)ウラシル、5−(メチル)−2−(チオ)プソイドウラシル、5−(メチル)−2,4(ジチオ)プソイドウラシル、5−(メチル)−4(チオ)プソイドウラシル、5−(メチル)プソイドウラシル、5−(メチルアミノメチル)−2(チオ)ウラシル、5−(メチルアミノメチル)−2,4(ジチオ)ウラシル、5−(メチルアミノメチル)−4−(チオ)ウラシル、5−(プロピニル)ウラシル、5−(トリフルオロメチル)ウラシル、5−アミノアリル−ウリジン、5−ブロモ−ウリジン、5−ヨード−ウリジン、5−ウラシル、6(アゾ)ウラシル、6−(アゾ)ウラシル、6−アザ−ウリジン、アリルアミノ−ウラシル、アザウラシル、デアザウラシル、N3(メチル)ウラシル、プソイド−UTP−1−2−エタン酸、プソイドウラシル、4−チオ−プソイド−UTP、1−カルボキシメチル−プソイドウリジン、1−メチル−1−デアザ−プソイドウリジン、1−プロピニル−ウリジン、1−タウリノメチル−1−メチル−ウリジン、1−タウリノメチル−4−チオ−ウリジン、1−タウリノメチル−プソイドウリジン、2−メトキシ−4−チオ−プソイドウリジン、2−チオ−1−メチル−1−デアザ−プソイドウリジン、2−チオ−1−メチル−プソイドウリジン、2−チオ−5−アザ−ウリジン、2−チオ−ジヒドロプソイドウリジン、2−チオ−ジヒドロウリジン、2−チオ−プソイドウリジン、4−メトキシ−2−チオ−プソイドウリジン、4−メトキシ−プソイドウリジン、4−チオ−1−メチル−プソイドウリジン、4−チオ−プソイドウリジン、5−アザ−ウリジン、ジヒドロプソイドウリジン、(±)1−(2−ヒドロキシプロピル)プソイドウリジンTP、(2R)−1−(2−ヒドロキシプロピル)プソイドウリジンTP、(2S)−1−(2−ヒドロキシプロピル)プソイドウリジンTP、(E)−5−(2−ブロモ−ビニル)アラ−ウリジンTP、(E)−5−(2−ブロモ−ビニル)ウリジンTP、(Z)−5−(2−ブロモ−ビニル)アラ−ウリジンTP、(Z)−5−(2−ブロモ−ビニル)ウリジンTP、1−(2,2,2−トリフルオロエチル)−プソイド−UTP、1−(2,2,3,3,3−ペンタフルオロプロピル)プソイドウリジンTP、1−(2,2−ジエトキシエチル)プソイドウリジンTP、1−(2,4,6−トリメチルベンジル)プソイドウリジンTP、1−(2,4,6−トリメチル−ベンジル)プソイド−UTP、1−(2,4,6−トリメチル−フェニル)プソイド−UTP、1−(2−アミノ−2−カルボキシエチル)プソイド−UTP、1−(2−アミノ−エチル)プソイド−UTP、1−(2−ヒドロキシエチル)プソイドウリジンTP、1−(2−Mエトキシエチル)プソイドウリジンTP、1−(3,4−ビス−トリフルオロメトキシベンジル)プソイドウリジンTP、1−(3,4−ジメトキシベンジル)プソイドウリジンTP、1−(3−アミノ−3−カルボキシプロピル)プソイド−UTP、1−(3−アミノ−プロピル)プソイド−UTP、1−(3−シクロプロピル−プロパ−2−イニル)プソイドウリジンTP、1−(4−アミノ−4−カルボキシブチル)プソイド−UTP、1−(4−アミノ−ベンジル)プソイド−UTP、1−(4−アミノ−ブチル)プソイド−UTP、1−(4−アミノ−フェニル)プソイド−UTP、1−(4−アジドベンジル)プソイドウリジンTP、1−(4−ブロモベンジル)プソイドウリジンTP、1−(4−クロロベンジル)プソイドウリジンTP、1−(4−フルオロベンジル)プソイドウリジンTP、1−(4−ヨードベンジル)プソイドウリジンTP、1−(4−メタンスルホニルベンジル)プソイドウリジンTP、1−(4−メトキシベンジル)プソイドウリジンTP、1−(4−メトキシ−ベンジル)プソイド−UTP、1−(4−メトキシ−フェニル)プソイド−UTP、1−(4−メチルベンジル)プソイドウリジンTP、1−(4−メチル−ベンジル)プソイド−UTP、1−(4−ニトロベンジル)プソイドウリジンTP、1−(4−ニトロ−ベンジル)プソイド−UTP、1(4−ニトロ−フェニル)プソイド−UTP、1−(4−チオメトキシベンジル)プソイドウリジンTP、1−(4−トリフルオロメトキシベンジル)プソイドウリジンTP、1−(4−トリフルオロメチルベンジル)プソイドウリジンTP、1−(5−アミノ−ペンチル)プソイド−UTP、1−(6−アミノ−ヘキシル)プソイド−UTP、1,6−ジメチル−プソイド−UTP、1−[3−(2−{2−[2−(2−アミノエトキシ)−エトキシ]−エトキシ}−エトキシ)−プロピオニル]プソイドウリジンTP、1−{3−[2−(2−アミノエトキシ)−エトキシ]−プロピオニル}プソイドウリジンTP、1−アセチルプソイドウリジンTP、1−アルキル−6−(1−プロピニル)−プソイド−UTP、1−アルキル−6−(2−プロピニル)−プソイド−UTP、1−アルキル−6−アリル−プソイド−UTP、1−アルキル−6−エチニル−プソイド−UTP、1−アルキル−6−ホモアリル−プソイド−UTP、1−アルキル−6−ビニル−プソイド−UTP、1−アリルプソイドウリジンTP、1−アミノメチル−プソイド−UTP、1−ベンゾイルプソイドウリジンTP、1−ベンジルオキシメチルプソイドウリジンTP、1−ベンジル−プソイド−UTP、1−ビオチニル−
PEG2−プソイドウリジンTP、1−ビオチニルプソイドウリジンTP、1−ブチル−プソイド−UTP、1−シアノメチルプソイドウリジンTP、1−シクロブチルメチル−プソイド−UTP、1−シクロブチル−プソイド−UTP、1−シクロヘプチルメチル−プソイド−UTP、1−シクロヘプチル−プソイド−UTP、1−シクロヘキシルメチル−プソイド−UTP、1−シクロヘキシル−プソイド−UTP、1−シクロオクチルメチル−プソイド−UTP、1−シクロオクチル−プソイド−UTP、1−シクロペンチルメチル−プソイド−UTP、1−シクロペンチル−プソイド−UTP、1−シクロプロピルメチル−プソイド−UTP、1−シクロプロピル−プソイド−UTP、1−エチル−プソイド−UTP、1−ヘキシル−プソイド−UTP、1−ホモアリルプソイドウリジンTP、1−ヒドロキシメチルプソイドウリジンTP、1−イソ−プロピル−プソイド−UTP、1−Me−2−チオ−プソイド−UTP、1−Me−4−チオ−プソイド−UTP、1−Me−アルファ−チオ−プソイド−UTP、1−メタンスルホニルメチルプソイドウリジンTP、1−メトキシメチルプソイドウリジンTP、1−メチル−6−(2,2,2−トリフルオロエチル)プソイド−UTP、1−メチル−6−(4−モルホリノ)−プソイド−UTP、1−メチル−6−(4−チオモルホリノ)−プソイド−UTP、1−メチル−6−(置換フェニル)プソイド−UTP、1−メチル−6−アミノ−プソイド−UTP、1−メチル−6−アジド−プソイド−UTP、1−メチル−6−ブロモ−プソイド−UTP、1−メチル−6−ブチル−プソイド−UTP、1−メチル−6−クロロ−プソイド−UTP、1−メチル−6−シアノ−プソイド−UTP、1−メチル−6−ジメチルアミノ−プソイド−UTP、1−メチル−6−エトキシ−プソイド−UTP、1−メチル−6−エチルカルボキシレート−プソイド−UTP、1−メチル−6−エチル−プソイド−UTP、1−メチル−6−フルオロ−プソイド−UTP、1−メチル−6−ホルミル−プソイド−UTP、1−メチル−6−ヒドロキシアミノ−プソイド−UTP、1−メチル−6−ヒドロキシ−プソイド−UTP、1−メチル−6−ヨード−プソイド−UTP、1−メチル−6−イソ−プロピル−プソイド−UTP、1−メチル−6−メトキシ−プソイド−UTP、1−メチル−6−メチルアミノ−プソイド−UTP、1−メチル−6−フェニル−プソイド−UTP、1−メチル−6−プロピル−プソイド−UTP、1−メチル−6−tert−ブチル−プソイド−UTP、1−メチル−6−トリフルオロメトキシ−プソイド−UTP、1−メチル−6−トリフルオロメチル−プソイド−UTP、1−モルホリノメチルプソイドウリジンTP、1−ペンチル−プソイド−UTP、1−フェニル−プソイド−UTP、1−ピバロイルプソイドウリジンTP、1−プロパルギルプソイドウリジンTP、1−プロピル−プソイド−UTP、1−プロピニル−プソイドウリジン、1−p−トリル−プソイド−UTP、1−tert−ブチル−プソイド−UTP、1−チオメトキシメチルプソイドウリジンTP、1−チオモルホリノメチルプソイドウリジンTP、1−トリフルオロアセチルプソイドウリジンTP、1−トリフルオロメチル−プソイド−UTP、1−ビニルプソイドウリジンTP、2,2’−無水−ウリジンTP、2’−ブロモ−デオキシウリジンTP、2’−F−5−メチル−2’−デオキシ−UTP、2’−OMe−5−Me−UTP、2’−OMe−プソイド−UTP、2’−a−エチニルウリジンTP、2’−a−トリフルオロメチルウリジンTP、2’−b−エチニルウリジンTP、2’−b−トリフルオロメチルウリジンTP、2’−デオキシ−2’,2’−ジフルオロウリジンTP、2’−デオキシ−2’−a−メルカプトウリジンTP、2’−デオキシ−2’−a−チオメトキシウリジンTP、2’−デオキシ−2’−b−アミノウリジンTP、2’−デオキシ−2’−b−アジドウリジンTP、2’−デオキシ−2’−b−ブロモウリジンTP、2’−デオキシ−2’−b−クロロウリジンTP、2’−デオキシ−2’−b−フルオロウリジンTP、2’−デオキシ−2’−b−ヨードウリジンTP、2’−デオキシ−2’−b−メルカプトウリジンTP、2’−デオキシ−2’−b−チオメトキシウリジンTP、2−メトキシ−4−チオ−ウリジン、2−メトキシウリジン、2’−O−メチル−5−(1−プロピニル)ウリジンTP、3−アルキル−プソイド−UTP、4’−アジドウリジンTP、4’−炭素環式ウリジンTP、4’−エチニルウリジンTP、5−(1−プロピニル)アラ−ウリジンTP、5−(2−フラニル)ウリジンTP、5−シアノウリジンTP、5−ジメチルアミノウリジンTP、5’−ホモ−ウリジンTP、5−ヨード−2’−フルオロ−デオキシウリジンTP、5−フェニルエチニルウリジンTP、5−トリ重水素メチル−6−重水素ウリジンTP、5−トリフルオロメチル−ウリジンTP、5−ビニルアラウリジンTP、6−(2,2,2−トリフルオロエチル)−プソイド−UTP、6−(4−モルホリノ)−プソイド−UTP、6−(4−チオモルホリノ)−プソイド−UTP、6−(置換フェニル)−プソイド−UTP、6−アミノ−プソイド−UTP、6−アジド−プソイド−UTP、6−ブロモ−プソイド−UTP、6−ブチル−プソイド−UTP、6−クロロ−プソイド−UTP、6−シアノ−プソイド−UTP、6−ジメチルアミノ−プソイド−UTP、6−エトキシ−プソイド−UTP、6−エチルカルボキシレート−プソイド−UTP、6−エチル−プソイド−UTP、6−フルオロ−プソイド−UTP、6−ホルミル−プソイド−UTP、6−ヒドロキシアミノ−プソイド−UTP、6−ヒドロキシ−プソイド−UTP、6−ヨード−プソイド−UTP、6−イソ−プロピル−プソイド−UTP、6−メトキシ−プソイド−UTP、6−メチルアミノ−プソイド−UTP、6−メチル−プソイド−UTP、6−フェニル−プソイド−UTP、6−フェニル−プソイド−UTP、6−プロピル−プソイド−UTP、6−tert−ブチル−プソイド−UTP、6−トリフルオロメトキシ−プソイド−UTP、6−トリフルオロメチル−プソイド−UTP、アルファ−チオ−プソイド−UTP、プソイドウリジン1−(4−メチルベンゼンスルホン酸)TP、プソイドウリジン1−(4−メチル安息香酸)TP、プソイドウリジンTP1−[3−(2−エトキシ)]プロピオン酸、プソイドウリジンTP1−[3−{2−(2−[2−(2−エトキシ)−エトキシ]−エトキシ)−エトキシ}]プロピオン酸、プソイドウリジンTP1−[3−{2−(2−[2−{2(2−エトキシ)−エトキシ}−エトキシ]−エトキシ)−エトキシ}]プロピオン酸、プソイドウリジンTP1−[3−{2−(2−[2−エトキシ]−エトキシ)−エトキシ}]プロピオン酸、プソイドウリジンTP1−[3−{2−(2−エトキシ)−エトキシ}]プロピオン酸、プソイドウリジンTP1−メチルホスホン酸、プソイドウリジンTP1−メチルホスホン酸ジエチルエステル、プソイド−UTP−N1−3−プロピオン酸、プソイド−UTP−N1−4−ブタン酸、プソイド−UTP−N1−5−ペンタン酸、プソイド−UTP−N1−6−ヘキサン酸、プソイド−UTP−N1−7−ヘプタン酸、プソイド−UTP−N1−メチル−p−安息香酸、プソイド−UTP−N1−p−安息香酸、ワイブトシン、ヒドロキシワイブトシン、イソワイオシン、ペルオキシワイブトシン、低修飾(undermodified)ヒドロキシワイブトシン、4−デメチルワイオシン、2,6−(ジアミノ)プリン、1−(アザ)−2−(チオ)−3−(アザ)−フェノキサジン−1−イル:1,3−(ジアザ)−2−(オキソ)−フェノチアジン−l−イル、1,3−(ジアザ)−2−(オキソ)−フェノキサジン−1−イル、1,3,5−(トリアザ)−2,6−(ジオキサ)−ナフタレン、2(アミノ)プリン、2,4,5−(トリメチル)フェニル、2’メチル、2’アミノ、2’アジド、2’フルロ−シチジン、2’メチル、2’アミノ、2’アジド、2’フルロ−アデニン、2’メチル、2’アミノ、2’アジド、2’フルロ−ウリジン、2’−アミノ−2’−デオキシリボース、2−アミノ−6−クロロ−プリン、2−アザ−イノシニル、2’−アジド−2’−デオキシリボース、2’フルオロ−2’−デオキシリボース、2’−フルオロ−修飾塩基、2’−O−メチル−リボース、2−オキソ−7−アミノピリドピリミジン−3−イル、2−オキソ−ピリドピリミジン−3−イル、2−ピリジノン、3ニトロピロール、3−(メチル)−7−(プロピニル)イソカルボスチリリル、3−(メチル)イソカルボスチリリル、4−(フルオロ)−6−(メチル)ベンゾイミダゾール、4−(メチル)ベンゾイミダゾール、4−(メチル)インドリル、4,6−(ジメチル)インドリル、5ニトロインドール、5置換ピリミジン、5−(メチル)イソカルボスチリリル、5−ニトロインドール、6−(アザ)ピリミジン、6−(アゾ)チミン、6−(メチル)−7−(アザ)インドリル、6−クロロ−プリン、6−フェニル−ピロロ−ピリミジン−2−オン−3−イル、7−(アミノアルキルヒドロキシ)−1−(アザ)−2−(チオ)−3−(アザ)−フェノチアジン−1−イル、7−(アミノアルキルヒドロキシ)−1−(アザ)−2−(チオ)−3−(アザ)−フェノキサジン−1−イル、7−(アミノアルキルヒドロキシ)−1,3−(ジアザ)−2−(オキソ)−フェノキサジン−1−イル、7−(アミノアルキルヒドロキシ)−1,3−(ジアザ)−2−(オキソ)−フェノチアジン−1−イル、7−(アミノアルキルヒドロキシ)−1,3−(ジアザ)−2−(オキソ)−フェノキサジン−1−イル、7−(アザ)インドリル、7−(グアニジニウムアルキルヒドロキシ)−1−(アザ)−2−(チオ)−3−(アザ)−フェノキサジン1−イル、7−(グアニジニウムアルキルヒドロキシ)−1−(アザ)−2−(チオ)−3−(アザ)−フェノチアジン−1−イル、7−(グアニジニウムアルキルヒドロキシ)−1−(アザ)−2−(チオ)−3−(アザ)−フェノキサジン−1−イル、7−(グアニジニウムアルキルヒドロキシ)−1,3−(ジアザ)−2−(オキソ)−フェノキサジン−1−イル、7−(グアニジニウムアルキル−ヒドロキシ)−1,3−(ジアザ)−2−(オキソ)−フェノチアジン−1−イル、7−(グアニジニウムアルキルヒドロキシ)−1,3−(ジアザ)−2−(オキソ)−フェノキサジン−1−イル、7−(プロピニル)イソカルボスチリリル、7−(プロピニル)イソカルボスチリリル、プロピニル−7−(アザ)インドリル、7−デアザ−イノシニル、7−置換1−(アザ)−2−(チオ)−3−(アザ)−フェノキサジン−1−イル、7−置換1,3−(ジアザ)−2−(オキソ)−フェノキサジン−1−イル、9−(メチル)−イミジゾピリジニル、アミノインドリル、アントラセニル、ビス−オルト−(アミノアルキルヒドロキシ)−6−フェニル−ピロロ−ピリミジン−2−オン−3−イル、ビス−オルト−置換−6−フェニル−ピロロ−ピリミジン−2−オン−3−イル、ジフルオロトリル、ヒポキサンチン、イミジゾピリジニル、イノシニル、イソカルボスチリリル、イソグアニシン、N2−置換プリン、N6−メチル−2−アミノ−プリン、N6−置換プリン、N−アルキル化誘導体、ナフタレニル、ニトロベンゾイミダゾリル、ニトロイミダゾリル、ニトロインダゾリル、ニトロピラゾリル、ヌブラリン、O6−置換プリン、O−アルキル化誘導体、オルト−(アミノアルキルヒドロキシ)−6−フェニル−ピロロ−ピリミジン−2−オン−3−イル、オルト−置換−6−フェニル−ピロロ−ピリミジン−2−オン−3−イル、オキソホルミシンTP、パラ−(アミノアルキルヒドロキシ)−6−フェニル−ピロロ−ピリミジン−2−オン−3−イル、パラ−置換−6−フェニル−ピロロ−ピリミジン−2−オン−3−イル、ペンタセニル、フェナントラセニル、フェニル
、プロピニル−7−(アザ)インドリル、ピレニル、ピリドピリミジン−3−イル、ピリドピリミジン−3−イル、2−オキソ−7−アミノ−ピリドピリミジン−3−イル、ピロロ−ピリミジン−2−オン−3−イル、ピロロピリミジニル、ピロロピリジニル、スチルベンジル、置換1,2,4−トリアゾール、テトラセニル、ツベルシジン、キサンチン、キサントシン−5’−TP、2−チオ−ゼブラリン、5−アザ−2−チオ−ゼブラリン、7−デアザ−2−アミノ−プリン、ピリジン−4−オンリボヌクレオシド、2−アミノ−リボシド−TP、ホルマイシンATP、ホルマイシンBTP、ピロロシンTP、2’−OH−アラ−アデノシンTP、2’−OH−アラ−シチジンTP、2’−OH−アラ−ウリジンTP、2’−OH−アラ−グアノシンTP、5−(2−カルボメトキシビニル)ウリジンTP、及びN6−(19−アミノ−ペンタオキサノンアデシル)アデノシンTP。
本開示のVZVワクチンは、mRNA(例えば、修飾されたmRNA)などの少なくとも1つのRNAポリヌクレオチドを含む。mRNAは、例えば、「in vitro転写鋳型」と呼ばれる鋳型DNAからin vitroで転写される。いくつかの実施形態において、少なくとも1つのRNAポリヌクレオチドは、少なくとも1つの化学修飾を有する。少なくとも1つの化学修飾には、明示的に限定されるものではないが、本明細書に記載の任意の修飾が含まれ得る。
ヒト及び他の動物におけるVZVの予防及び/または治療のための組成物(例えば、医薬組成物)、方法、キット及び試薬が本明細書で提供される。VZV RNAワクチンは、治療薬または予防薬として使用することができる。これは、感染症の予防及び/または治療のための薬剤として使用することができる。例示的な態様において、本発明のVZV RNAワクチンは、水痘及び帯状ヘルペスからの予防的保護を提供するために使用される。水痘は、VZVによって引き起こされる急性感染症である。水疱瘡(水痘)をもたらす水痘帯状疱疹ウイルスの一次感染は、ウイルス性肺炎または二次性細菌性肺炎を含む合併症に至る場合もある。水疱瘡の臨床症状が解消された場合でも、VZVは、感染者の三叉神経及び脊髄後根神経節の神経系に潜伏し続け、後年に活性化し、知覚神経節から皮膚に戻り、そこで帯状疱疹または帯状ヘルペスとして知られる疾患(発疹)を引き起こすことがあり、また、無菌性髄膜炎から脳炎に至るまでのいくつかの神経学的病態を引き起こすことがある。本開示のVZVワクチンは、一次感染(水疱瘡)と再活性化したウイルス感染(帯状疱疹または帯状ヘルペス)の両方を予防及び/または治療するために使用することができ、免疫不全状態及び高齢の患者に対する、帯状ヘルペスを予防し、またはその重症度及び/もしくは期間を軽減するための予防及び/または治療に特に有用であり得る。
2種以上のVZV株に感染するリスクのある状況が想定される。RNA(例えば、mRNA)治療用ワクチンは、限定するものではないが、製造スピード、認められた地理的脅威に適合するようにワクチンを迅速に調整できる能力などを含むいくつかの因子により、混合ワクチン手法に特に適している。更に、当該ワクチンは、人体を利用して抗原性タンパク質を産生するので、より大きくより複雑な抗原性タンパク質の産生に適しており、これにより、ヒト対象における適切な折り畳み、表面発現、抗原提示などが可能となる。2種以上のVZV株から保護するために、第1のVZVの少なくとも1つの抗原性ポリペプチドタンパク質(またはその抗原性部分)をコードするRNAを含み、第2のVZVの少なくとも1つの抗原性ポリペプチドタンパク質(またはその抗原性部分)をコードするRNAを更に含む、混合ワクチンを投与することができる。RNA(mRNA)は、例えば、単一の脂質ナノ粒子(LNP)中に一緒に製剤化されてもよいし、共投与が予定されている別々のLNP中に製剤化されてもよい。
フラジェリンは、約500アミノ酸の単量体タンパク質であり、重合することにより、細菌の動きに関与する鞭毛を形成する。フラジェリンは、種々の有鞭毛型細菌(例えばSalmonella typhimurium)及び無鞭毛型細菌(Escherichia coliなど)によって発現されている。自然免疫系細胞(樹状細胞、マクロファージなど)によるフラジェリンの感知は、Toll様受容体5(TLR5)ならびにNod様受容体(NLR)Ipaf及びNaip5によって媒介される。TLR及びNLRは、自然免疫応答及び適応免疫応答を活性化する役割を担うことが特定されている。したがって、フラジェリンは、ワクチンにおいて、アジュバント効果をもたらす。
例えば、ヒト及び他の動物におけるVZVの予防、治療及び/または診断のための組成物(例えば、医薬組成物)、方法、キット及び試薬が本明細書で提供される。VZV RNA(例えば、mRNA)ワクチンは、治療薬または予防薬として使用することができる。これは、感染症の予防及び/または治療のための薬剤として使用することができる。いくつかの実施形態において、本発明のVZVワクチンは、免疫エフェクター細胞のプライミングにおける使用が想定され得、例えば、末梢血単核細胞(PBMC)をex vivoで活性化させた後、対象に注入(再注入)する。
真核生物の天然mRNA分子は、5’キャップ構造または3’ポリ(A)テールなどの他の構造的特徴に加えて、安定化要素、例えば、限定するものではないが、その5’端にある非翻訳領域(UTR)(5’UTR)及び/またはその3’端にあるUTR(3’UTR)を含有することがわかっている。5’UTR及び3’UTRはいずれも、典型的に、ゲノムDNAから転写されるものであり、未成熟mRNAの要素である。5’キャップ及び3’ポリ(A)テールなどの成熟mRNAの特徴的な構造特徴は、通常、mRNAプロセシング中に、転写された(未成熟)mRNAに付加される。3’ポリ(A)テールは、典型的に、転写されたmRNAの3’端に付加される一続きのアデニンヌクレオチドであり、最大約400個のアデニンヌクレオチドを含み得る。いくつかの実施形態において、3’ポリ(A)テールの長さは、個々のmRNAの安定性に関して必須の要素であり得る。
いくつかの実施形態において、VZV RNA(例えば、mRNA)ワクチンは、ナノ粒子中に製剤化される。いくつかの実施形態において、VZV RNAワクチンは、脂質ナノ粒子中に製剤化される。いくつかの実施形態において、VZV RNAワクチンは、カチオン性脂質ナノ粒子と呼ばれる脂質−ポリカチオン複合体中に製剤化される。脂質ナノ粒子の形成は、当該技術分野において知られている方法及び/または米国特許出願公開第20120178702号(その全体を参照により本明細書に援用する)に記載されている方法によって達成することができる。非限定的な例として、ポリカチオンには、カチオン性のペプチドまたはポリペプチドを挙げることができ、限定するものではないが、ポリリジン、ポリオルニチン及び/またはポリアルギニンならびに国際公開第WO2012013326号または米国特許出願公開第US20130142818号(そのそれぞれの全体を参照により本明細書に援用する)に記載されているカチオン性ペプチドなどがある。いくつかの実施形態において、VZV RNAワクチンは、限定するものではないが、コレステロールまたはジオレオイルホスファチジルエタノールアミン(DOPE)などの非カチオン性脂質を含む脂質ナノ粒子中に製剤化される。
いくつかの実施形態において、RNAワクチン医薬組成物は、限定するものではないが、DiLa2リポソーム(Marina Biotech(Bothell,WA))、SMARTICLES(登録商標)(Marina Biotech(Bothell,WA))、中性DOPC(1,2−ジオレオイル−sn−グリセロ−3−ホスホコリン)系リポソーム(例えば、卵巣癌のためのsiRNA送達(Landen et al.Cancer Biology&Therapy 2006 5(12)1708−1713)、その全体を参照により本明細書に援用する)及びヒアルロナン被覆リポソーム(Quiet Therapeutics(Israel))などのリポソーム中に製剤化されてもよい。
VZV RNA(例えば、mRNA)ワクチンは、治療上有効な成果をもたらす任意の経路によって投与され得る。これらには、皮内、筋肉内、鼻腔内及び/または皮下投与が含まれるが、これらに限定されない。本開示は、それを必要とする対象にRNAワクチンを投与することを含む方法を提供する。正確な必要量は、対象の種、年齢及び全身状態、疾患の重症度、特定の組成物、その投与様式、その活性様式などに応じて、対象ごとに変化し得る。VZV RNA(例えば、mRNA)ワクチン組成物は、典型的に、投与の容易性及び用量の均一性のために単位剤形で製剤化される。しかしながら、VZV RNA(例えば、mRNA)ワクチン組成物の一日の総用量は、堅実な医学的判断の範囲内で主治医によって決定され得ることが理解されるであろう。任意の特定の患者に対する具体的な治療上有効な用量レベル、予防上有効な用量レベル、適切なイメージング用量レベルは、治療対象の疾病及び疾病の重症度、採用される特定の化合物の活性、採用される特定の組成物、患者の年齢、体重、全身状態、性別及び食生活、採用される特定の化合物の投与の時間、投与経路及び排泄速度、治療の継続期間、採用される特定の化合物と組み合わせてまたは同時に使用される薬物、ならびに医学分野でよく知られている同様の因子を含む、種々の因子に依存し得る。
本開示のいくつかの態様は、VZV RNA(例えば、mRNA)ワクチンの製剤を提供し、ここで、VZV RNAワクチンは、対象において抗原特異的免疫応答(例えば、抗VZV抗原性ポリペプチドに特異的な抗体の産生)をもたらすのに有効な量で製剤化される。「有効量」は、抗原特異的免疫応答をもたらすのに有効なVZV RNA(例えば、mRNA)ワクチンの用量である。また、対象の抗原特異的免疫応答を誘導する方法も本明細書で提供される。
1.5’末端キャップと、少なくとも1つの水痘帯状疱疹ウイルス(VZV)抗原性ポリペプチドをコードするオープンリーディングフレームと、3’ポリAテールとを有する少なくとも1つのメッセンジャーリボ核酸(mRNA)ポリヌクレオチドを含む、VZVワクチン。
本開示によれば,ポリヌクレオチド及び/またはその部分もしくは領域の製造は、「Manufacturing Methods for Production of RNA Transcripts」と題された国際公開第WO2014/152027号(その内容全体を参照により本明細書に援用する)に教示されている方法を利用して達成することができる。
本開示によれば、三リン酸化学反応を使用して、キメラポリヌクレオチドの2つの領域または部分を連結またはライゲートすることができる。例えば、100ヌクレオチド以下の第1の領域または部分は、5’リン酸及び末端3’desOHまたは遮断OHにより、化学的に合成される。領域が80ヌクレオチドよりも長い場合、ライゲーション用の2つの鎖として合成することができる。
一連の出発セグメントを使用してキメラポリヌクレオチドを作製することができる。かかるセグメントには、
(a)通常の3’OHを含む、キャップ及び保護された5’セグメント(SEG.1)、
(b)ポリペプチドのコーディング領域及び通常の3’OHを含み得る、5’三リン酸セグメント(SEG.2)、
(c)コルジセピンを含み、または3’OHを含まない、キメラポリヌクレオチドの3’端(例えばテール)用の5’リン酸セグメント(SEG.3)
が含まれる。
cDNAを調製するためのPCR工程は、Kapa Biosystems(Woburn,MA)による2× KAPA HIFI(商標)HotStart ReadyMixを使用して実施することができる。このシステムは、2× KAPA ReadyMix 12.5μl、フォワードプライマー(10μM)0.75μl、リバースプライマー(10μM)0.75μl、鋳型cDNA 100ngを含み、dH2Oで25.0μlに希釈される。反応条件は、95℃で5分であってよく、98℃で20秒、次に58℃で15秒、次に72℃で45秒を25サイクル、次に72℃で5分、次に終了まで4℃で反応を実施することができる。
in vitro転写反応により、RNAポリヌクレオチドが生成される。かかるポリヌクレオチドは、化学修飾RNA(例えば、mRNA)ポリヌクレオチドを含む、本開示のポリヌクレオチドの領域または部分を含み得る。化学修飾RNAポリヌクレオチドは、均一に修飾されたポリヌクレオチドであり得る。in vitro転写反応は、カスタムのヌクレオチド三リン酸(NTP)混合物を利用する。NTPは、化学修飾NTP、または天然NTPと化学修飾NTPの混合物を含み得る。
1)鋳型cDNA 1.0μg
2)10×転写バッファー 2.0μl
(400mM Tris−HCl(pH8.0)、190mM MgCl2、50mM DTT、10mM スペルミジン)
3)カスタムNTP(各25mM) 0.2μl
4)RNase阻害剤 20U
5)T7 RNAポリメラーゼ 3000U
6)dH2O 最大20.0μl、及び
7)37℃で3〜5時間のインキュベーション。
RNAポリヌクレオチドのキャッピングは、以下のとおりに実施される。この場合、混合物は、IVT RNA 60μg〜180μg及びdH2Oの最大72μlを含む。混合物を65℃で5分間インキュベートしてRNAを変性させた後、これを直ちに氷に移す。
cDNA中にポリTがない場合は、最終産物のクリーニング前にポリAテーリング反応を実施する必要がある。これは、キャップされたIVT RNA(100μl)、RNase阻害剤(20U)、10×テーリングバッファー(0.5M トリス−HCl(pH8.0)、2.5M NaCl、100mM MgCl2)(12.0μl)、20mM ATP(6.0μl)、ポリAポリメラーゼ(20U)、dH2O 最大123.5μlを混合し、37℃で30分間インキュベートすることによって行われる。ポリAテールが転写産物中に既に存在する場合には、テーリング反応を飛ばして、AmbionのMEGACLEAR(商標)キット(Austin,TX)によるクリーンアップ(500μgまで)に直接進むことができる。ポリ−Aポリメラーゼは、酵母中で発現された組み換え酵素であってよい。
タンパク質発現アッセイ
本明細書で教示されるキャップのいずれかを含有し、ポリペプチドをコードするポリヌクレオチド(例えば、mRNA)を、等しい濃度で細胞にトランスフェクトすることができる。トランスフェクションから6、12、24及び/または36時間後に、培養培地中に分泌されたタンパク質の量を、ELISAによってアッセイすることができる。より高いレベルのタンパク質を培地中に分泌する合成ポリヌクレオチドは、より高い翻訳能力のあるキャップ構造を有する合成ポリヌクレオチドに該当する。
本明細書で教示されるキャップのいずれかを含有し、ポリペプチドをコードするRNA(例えば、mRNA)ポリヌクレオチドは、変性アガロース尿素ゲル電気泳動またはHPLC分析を使用して、純度について比較することができる。電気泳動で単一の統合されたバンドを有するRNAポリヌクレオチドは、複数のバンドまたは縞状のバンドを有するポリヌクレオチドと比較して、純度の高い生成物に該当する。単一のHPLCピークを有する化学修飾RNAポリヌクレオチドも、純度の高い生成物に該当する。キャッピング反応の効率が高いほど、より純粋なポリヌクレオチド集団を与える。
本明細書で教示されるキャップのいずれかを含有し、ポリペプチドをコードするRNA(例えば、mRNA)ポリヌクレオチドは、複数の濃度で細胞にトランスフェクトすることができる。トランスフェクションから6、12、24及び/または36時間後に、培養培地中に分泌されたTNF−α及びIFN−βなどの炎症促進性サイトカインの量を、ELISAによってアッセイすることができる。より高いレベルの炎症誘発性サイトカインを培地中に分泌させるRNAポリヌクレオチドは、免疫活性化キャップ構造を含有するポリヌクレオチドに該当する。
本明細書で教示されるキャップのいずれかを含有し、ポリペプチドをコードするRNA(例えば、mRNA)ポリヌクレオチドは、ヌクレアーゼ処理後にLC−MSによって、キャッピング反応効率について分析することができる。キャップされたポリヌクレオチドのヌクレアーゼ処理により、LC−MSによって検出可能である、遊離ヌクレオチドとキャップされた5’−5−三リン酸キャップ構造との混合物が得られる。LC−MSスペクトルにおけるキャップされた生成物の量は、反応からの総ポリヌクレオチドのパーセントとして表すことができ、キャッピング反応効率に対応する。キャッピング反応効率の高いキャップ構造は、LC−MSによると、キャップされた生成物の量が多い。
個々のRNAポリヌクレオチド(体積20μl中200〜400ng)または逆転写されたPCR産物(200〜400ng)を、非変性1.2%アガロースE−Gel(Invitrogen(Carlsbad,CA))上のウェルにローディングし、製造元のプロトコールに従って12〜15分間、泳動する。
TEバッファー(1μl)中の化学修飾RNAポリヌクレオチドをNanodrop(商標)UV吸光度測定に使用して、化学合成またはin vitro転写反応からの各ポリヌクレオチドの収率を定量する。
RNA(例えば、mRNA)ポリヌクレオチドは、細胞に加える前に、設定した比で、ポリヌクレオチドをリピドイドと混合しすることにより、in vitro実験用に製剤化することができる。in vivo製剤は、全身循環を促進するために追加成分の添加を必要とすることがある。これらのリピドイドのin vivo作用に好適な粒子を形成する能力を試験するために、siRNA−リピドイド製剤に使用される標準的な製剤化プロセスを出発点として使用することができる。粒子の形成後に、ポリヌクレオチドを加え、複合体と一体化させる。封入効率は標準的な色素排除アッセイを使用して決定される。
以下の配列は、VZVワクチンに使用するためのVZV RNAポリヌクレオチドgEをコードするのに使用することができる例示的な配列である。VZVワクチンは、例えば、以下の配列のうちの少なくとも1つまたは以下の配列のうちの少なくとも1つの断片によってコードされる少なくとも1つのRNAポリヌクレオチドを含み得る。いくつかの実施形態において、mRNAは、5’キャップ、例えば、本明細書で開示されるキャップのいずれか、例えば、配列m7G(5’)ppp(5’)G−2’−O−メチルを有するキャップを更に含む。いくつかの実施形態において、mRNAは、キャップ配列を有しない。いくつかの実施形態において、mRNAは、少なくとも1つの化学修飾、例えば、本明細書で開示される化学修飾のいずれか、例えば、N1−メチルプソイドウリジン修飾またはN1−エチルプソイドウリジン修飾を有する。他の実施形態において、mRNAは、化学修飾を有しない。
VZV gE完全長Oka株:
TCAAGCTTTTGGACCCTCGTACAGAAGCTAATACGACTCACTATAGGGAAATAAGAGAGAAAAGAAGAGTAAGAAGAAATATAAGAGCCACCATGGGGACAGTGAATAAGCCGGTTGTGGGCGTGCTTATGGGCTTTGGGATTATTACCGGTACATTACGAATTACCAATCCAGTGCGCGCCAGTGTGCTGCGTTACGACGACTTTCACATTGACGAGGATAAGCTGGATACTAACAGCGTGTACGAACCTTATTACCACTCAGATCATGCCGAATCAAGCTGGGTTAATAGAGGAGAAAGCAGCCGAAAAGCCTACGACCACAACTCACCTTATATTTGGCCCAGAAACGATTATGACGGTTTCCTGGAAAACGCACATGAACACCATGGAGTCTACAACCAAGGCAGGGGAATCGACAGTGGCGAGCGTCTTATGCAGCCAACACAGATGTCGGCACAGGAGGATCTCGGTGATGACACCGGCATACACGTGATTCCCACATTAAACGGCGACGACAGACATAAGATCGTCAATGTGGATCAGCGTCAGTATGGGGATGTCTTTAAAGGCGATTTGAATCCAAAGCCCCAAGGACAGAGACTGATCGAGGTCTCTGTAGAAGAAAATCACCCCTTCACTTTGCGCGCTCCAATCCAGAGGATTTACGGGGTGCGTTATACCGAAACTTGGAGTTTCTTGCCGTCACTGACGTGTACGGGGGATGCCGCCCCCGCAATCCAGCACATCTGTCTGAAACACACCACATGCTTTCAGGACGTGGTTGTGGATGTGGATTGCGCGGAAAACACAAAAGAAGACCAACTCGCCGAAATCAGCTATCGTTTTCAGGGTAAAAAAGAGGCCGACCAACCGTGGATTGTTGTGAATACGAGCACGCTCTTCGATGAGCTTGAACTCGATCCCCCGGAAATCGAGCCTGGGGTTCTAAAAGTGTTGAGGACCGAGAAGCAGTACCTCGGGGTTTATATCTGGAATATGAGAGGCTCCGATGGCACCTCTACCTACGCAACGTTTCTGGTTACCTGGAAGGGAGACGAGAAGACACGGAATCCAACGCCCGCTGTGACCCCTCAGCCTAGGGGAGCCGAATTCCACATGTGGAACTATCACTCCCATGTATTCAGTGTGGGTGACACTTTCAGCCTGGCCATGCACCTGCAGTATAAGATTCACGAGGCACCCTTCGACCTCCTGCTGGAGTGGTTGTACGTACCTATTGATCCCACTTGTCAGCCCATGCGCCTGTACTCCACTTGCTTGTACCACCCCAATGCACCACAGTGTCTATCACACATGAACTCCGGGTGTACCTTTACTTCACCCCATCTTGCCCAGCGGGTCGCCAGCACAGTGTATCAGAACTGTGAGCATGCTGACAACTATACTGCTTATTGCCTCGGAATATCCCATATGGAGCCAAGCTTCGGGCTCATACTGCACGATGGTGGTACGACACTCAAGTTCGTGGACACCCCCGAAAGCCTTTCTGGCTTGTACGTGTTCGTGGTCTACTTCAATGGACATGTGGAGGCAGTGGCTTACACAGTGGTTTCGACAGTTGATCACTTTGTAAATGCCATTGAGGAACGCGGCTTCCCGCCTACAGCGGGCCAGCCCCCTGCGACAACAAAACCAAAAGAGATTACGCCCGTTAATCCTGGGACTAGTCCATTGCTGAGGTATGCCGCCTGGACTGGCGGTCTGGCGGCCGTGGTACTTCTGTGTTTAGTCATATTTCTGATCTGTACCGCTAAACGTATGCGGGTCAAGGCTTACCGTGTTGACAAGTCTCCTTACAATCAGTCAATGTACTATGCAGGACTCCCTGTTGACGATTTCGAAGACTCAGAGAGTACAGACACAGAAGAAGAATTCGGAAACGCTATAGGTGGCTCTCACGGAGGTAGCTCGTATACAGTGTACATCGATAAAACCAGATGATAATAGGCTGGAGCCTCGGTGGCCATGCTTCTTGCCCCTTGGGCCTCCCCCCAGCCCCTCCTCCCCTTCCTGCACCCGTACCCCCGTGGTCTTTGAATAAAGTCTGAGTGGGCGGC(配列番号1)
VZV gE完全長Oka株(mRNA):
UCAAGCUUUUGGACCCUCGUACAGAAGCUAAUACGACUCACUAUAGGGAAAUAAGAGAGAAAAGAAGAGUAAGAAGAAAUAUAAGAGCCACCAUGGGGACAGUGAAUAAGCCGGUUGUGGGCGUGCUUAUGGGCUUUGGGAUUAUUACCGGUACAUUACGAAUUACCAAUCCAGUGCGCGCCAGUGUGCUGCGUUACGACGACUUUCACAUUGACGAGGAUAAGCUGGAUACUAACAGCGUGUACGAACCUUAUUACCACUCAGAUCAUGCCGAAUCAAGCUGGGUUAAUAGAGGAGAAAGCAGCCGAAAAGCCUACGACCACAACUCACCUUAUAUUUGGCCCAGAAACGAUUAUGACGGUUUCCUGGAAAACGCACAUGAACACCAUGGAGUCUACAACCAAGGCAGGGGAAUCGACAGUGGCGAGCGUCUUAUGCAGCCAACACAGAUGUCGGCACAGGAGGAUCUCGGUGAUGACACCGGCAUACACGUGAUUCCCACAUUAAACGGCGACGACAGACAUAAGAUCGUCAAUGUGGAUCAGCGUCAGUAUGGGGAUGUCUUUAAAGGCGAUUUGAAUCCAAAGCCCCAAGGACAGAGACUGAUCGAGGUCUCUGUAGAAGAAAAUCACCCCUUCACUUUGCGCGCUCCAAUCCAGAGGAUUUACGGGGUGCGUUAUACCGAAACUUGGAGUUUCUUGCCGUCACUGACGUGUACGGGGGAUGCCGCCCCCGCAAUCCAGCACAUCUGUCUGAAACACACCACAUGCUUUCAGGACGUGGUUGUGGAUGUGGAUUGCGCGGAAAACACAAAAGAAGACCAACUCGCCGAAAUCAGCUAUCGUUUUCAGGGUAAAAAAGAGGCCGACCAACCGUGGAUUGUUGUGAAUACGAGCACGCUCUUCGAUGAGCUUGAACUCGAUCCCCCGGAAAUCGAGCCUGGGGUUCUAAAAGUGUUGAGGACCGAGAAGCAGUACCUCGGGGUUUAUAUCUGGAAUAUGAGAGGCUCCGAUGGCACCUCUACCUACGCAACGUUUCUGGUUACCUGGAAGGGAGACGAGAAGACACGGAAUCCAACGCCCGCUGUGACCCCUCAGCCUAGGGGAGCCGAAUUCCACAUGUGGAACUAUCACUCCCAUGUAUUCAGUGUGGGUGACACUUUCAGCCUGGCCAUGCACCUGCAGUAUAAGAUUCACGAGGCACCCUUCGACCUCCUGCUGGAGUGGUUGUACGUACCUAUUGAUCCCACUUGUCAGCCCAUGCGCCUGUACUCCACUUGCUUGUACCACCCCAAUGCACCACAGUGUCUAUCACACAUGAACUCCGGGUGUACCUUUACUUCACCCCAUCUUGCCCAGCGGGUCGCCAGCACAGUGUAUCAGAACUGUGAGCAUGCUGACAACUAUACUGCUUAUUGCCUCGGAAUAUCCCAUAUGGAGCCAAGCUUCGGGCUCAUACUGCACGAUGGUGGUACGACACUCAAGUUCGUGGACACCCCCGAAAGCCUUUCUGGCUUGUACGUGUUCGUGGUCUACUUCAAUGGACAUGUGGAGGCAGUGGCUUACACAGUGGUUUCGACAGUUGAUCACUUUGUAAAUGCCAUUGAGGAACGCGGCUUCCCGCCUACAGCGGGCCAGCCCCCUGCGACAACAAAACCAAAAGAGAUUACGCCCGUUAAUCCUGGGACUAGUCCAUUGCUGAGGUAUGCCGCCUGGACUGGCGGUCUGGCGGCCGUGGUACUUCUGUGUUUAGUCAUAUUUCUGAUCUGUACCGCUAAACGUAUGCGGGUCAAGGCUUACCGUGUUGACAAGUCUCCUUACAAUCAGUCAAUGUACUAUGCAGGACUCCCUGUUGACGAUUUCGAAGACUCAGAGAGUACAGACACAGAAGAAGAAUUCGGAAACGCUAUAGGUGGCUCUCACGGAGGUAGCUCGUAUACAGUGUACAUCGAUAAAACCAGAUGAUAAUAGGCUGGAGCCUCGGUGGCCAUGCUUCUUGCCCCUUGGGCCUCCCCCCAGCCCCUCCUCCCCUUCCUGCACCCGUACCCCCGUGGUCUUUGAAUAAAGUCUGAGUGGGCGGC(配列番号123)
以下の配列は、VZV RNA(例えば、mRNA)ワクチンに使用するためのVZV RNAポリヌクレオチドgIをコードするのに使用することができる例示的な配列である。gIポリペプチドは、感染細胞中でgEと複合体を形成する。この複合体は、両糖タンパク質のエンドサイトーシスを促進し、最終的なウイルスエンベロープを獲得する場であるトランスゴルジ網(TGN)に両糖タンパク質を誘導する。VZVワクチンは、例えば、以下の配列のうちの少なくとも1つまたは以下の配列のうちの少なくとも1つの断片によってコードされる少なくとも1つのRNA(例えば、mRNA)ポリヌクレオチドを含み得る。いくつかの実施形態において、mRNAは、5’キャップ、例えば、本明細書で開示されるキャップのいずれか、例えば、配列m7G(5’)ppp(5’)G−2’−O−メチルを有するキャップを更に含む。他の実施形態において、mRNAは、キャップ配列を有しない。いくつかの実施形態において、mRNAは、少なくとも1つの化学修飾、例えば、本明細書で開示される化学修飾のいずれか、例えば、N1−メチルプソイドウリジン修飾またはN1−エチルプソイドウリジン修飾を有する。他の実施形態において、mRNAは、化学修飾を有しない。
VZV−GI完全長(Oka株):
TCAAGCTTTTGGACCCTCGTACAGAAGCTAATACGACTCACTATAGGGAAATAAGAGAGAAAAGAAGAGTAAGAAGAAATATAAGAGCCACCATGTTTTTAATCCAATGTTTGATATCGGCCGTTATATTTTACATACAAGTGACCAACGCTTTGATCTTCAAGGGCGACCACGTGAGCTTGCAAGTTAACAGCAGTCTCACGTCTATCCTTATTCCCATGCAAAATGATAATTATACAGAGATAAAAGGACAGCTTGTCTTTATTGGAGAGCAACTACCTACCGGGACAAACTATAGCGGAACACTGGAACTGTTATACGCGGATACGGTGGCGTTTTGTTTCCGGTCAGTACAAGTAATAAGATACGACGGATGTCCCCGGATTAGAACGAGCGCTTTTATTTCGTGTAGGTACAAACATTCGTGGCATTATGGTAACTCAACGGATCGGATATCAACAGAGCCGGATGCTGGTGTAATGTTGAAAATTACCAAACCGGGAATAAATGATGCTGGTGTGTATGTACTTCTTGTTCGGTTAGACCATAGCAGATCCACCGATGGTTTCATTCTTGGTGTAAATGTATATACAGCGGGCTCGCATCACAACATTCACGGGGTTATCTACACTTCTCCATCTCTACAGAATGGATATTCTACAAGAGCCCTTTTTCAACAAGCTCGTTTGTGTGATTTACCCGCGACACCCAAAGGGTCCGGTACCTCCCTGTTTCAACATATGCTTGATCTTCGTGCCGGTAAATCGTTAGAGGATAACCCTTGGTTACATGAGGACGTTGTTACGACAGAAACTAAGTCCGTTGTTAAGGAGGGGATAGAAAATCACGTATATCCAACGGATATGTCCACGTTACCCGAAAAGTCCCTTAATGATCCTCCAGAAAATCTACTTATAATTATTCCTATAGTAGCGTCTGTCATGATCCTCACCGCCATGGTTATTGTTATTGTAATAAGCGTTAAGCGACGTAGAATTAAAAAACATCCAATTTATCGCCCAAATACAAAAACAAGAAGGGGCATACAAAATGCGACACCAGAATCCGATGTGATGTTGGAGGCCGCCATTGCACAACTAGCAACGATTCGCGAAGAATCCCCCCCACATTCCGTTGTAAACCCGTTTGTTAAATAGTGATAATAGGCTGGAGCCTCGGTGGCCATGCTTCTTGCCCCTTGGGCCTCCCCCCAGCCCCTCCTCCCCTTCCTGCACCCGTACCCCCGTGGTCTTTGAATAAAGTCTGAGTGGGCGGC(配列番号2)
VZV−GI完全長(Oka株)(mRNA):
UCAAGCUUUUGGACCCUCGUACAGAAGCUAAUACGACUCACUAUAGGGAAAUAAGAGAGAAAAGAAGAGUAAGAAGAAAUAUAAGAGCCACCAUGUUUUUAAUCCAAUGUUUGAUAUCGGCCGUUAUAUUUUACAUACAAGUGACCAACGCUUUGAUCUUCAAGGGCGACCACGUGAGCUUGCAAGUUAACAGCAGUCUCACGUCUAUCCUUAUUCCCAUGCAAAAUGAUAAUUAUACAGAGAUAAAAGGACAGCUUGUCUUUAUUGGAGAGCAACUACCUACCGGGACAAACUAUAGCGGAACACUGGAACUGUUAUACGCGGAUACGGUGGCGUUUUGUUUCCGGUCAGUACAAGUAAUAAGAUACGACGGAUGUCCCCGGAUUAGAACGAGCGCUUUUAUUUCGUGUAGGUACAAACAUUCGUGGCAUUAUGGUAACUCAACGGAUCGGAUAUCAACAGAGCCGGAUGCUGGUGUAAUGUUGAAAAUUACCAAACCGGGAAUAAAUGAUGCUGGUGUGUAUGUACUUCUUGUUCGGUUAGACCAUAGCAGAUCCACCGAUGGUUUCAUUCUUGGUGUAAAUGUAUAUACAGCGGGCUCGCAUCACAACAUUCACGGGGUUAUCUACACUUCUCCAUCUCUACAGAAUGGAUAUUCUACAAGAGCCCUUUUUCAACAAGCUCGUUUGUGUGAUUUACCCGCGACACCCAAAGGGUCCGGUACCUCCCUGUUUCAACAUAUGCUUGAUCUUCGUGCCGGUAAAUCGUUAGAGGAUAACCCUUGGUUACAUGAGGACGUUGUUACGACAGAAACUAAGUCCGUUGUUAAGGAGGGGAUAGAAAAUCACGUAUAUCCAACGGAUAUGUCCACGUUACCCGAAAAGUCCCUUAAUGAUCCUCCAGAAAAUCUACUUAUAAUUAUUCCUAUAGUAGCGUCUGUCAUGAUCCUCACCGCCAUGGUUAUUGUUAUUGUAAUAAGCGUUAAGCGACGUAGAAUUAAAAAACAUCCAAUUUAUCGCCCAAAUACAAAAACAAGAAGGGGCAUACAAAAUGCGACACCAGAAUCCGAUGUGAUGUUGGAGGCCGCCAUUGCACAACUAGCAACGAUUCGCGAAGAAUCCCCCCCACAUUCCGUUGUAAACCCGUUUGUUAAAUAGUGAUAAUAGGCUGGAGCCUCGGUGGCCAUGCUUCUUGCCCCUUGGGCCUCCCCCCAGCCCCUCCUCCCCUUCCUGCACCCGUACCCCCGUGGUCUUUGAAUAAAGUCUGAGUGGGCGGC(配列番号124)
VZVは、トランスゴルジ網でエンベロープ化される。糖タンパク質I(gI)は、感染細胞中でgEと複合体を形成する。この複合体は、両糖タンパク質のエンドサイトーシスを促進し、最終的なウイルスエンベロープを獲得する場であるトランスゴルジ網(TGN)に両糖タンパク質を誘導する。gEがER/ゴルジ体/TGNに捕捉されるのを回避し、gE抗原の形質膜への局在化を増加させ、免疫刺激能力が改善するように、種々のC末端バリアント配列を有するgE抗原をコードするmRNAを設計した。gE抗原の模式図を図4に示す。
(1)C末端領域の末端の62アミノ酸が欠失した切断型ポリペプチドをコードするgEバリアントmRNA(配列番号17〜20)。得られるポリペプチドは、トランスゴルジ網への局在化が減少し、エンドサイトーシスが減少する。
(2)C末端領域の末端の62アミノ酸が欠失しており、かつシグナルペプチドがIgκに置き換えられた(これにより分泌型の切断型gEポリペプチドとなる)切断型ポリペプチドをコードするgEバリアントmRNA(配列番号21〜24)。得られるポリペプチドは、トランスゴルジ網への局在化が減少し、エンドサイトーシスが減少する。
(3)C末端領域の末端の50アミノ酸が欠失した切断型ポリペプチドをコードするgEバリアントmRNA(配列番号33〜36)。得られるポリペプチドは、トランスゴルジ網への局在化が減少し、エンドサイトーシスが減少する。
(4)C末端領域の末端の50アミノ酸が欠失しており、かつ点変異Y569Aを有する切断型ポリペプチドをコードするgEバリアントmRNA(配列番号37〜40)。「AYRV」モチーフ(配列番号119)は、gEポリペプチドをトランスゴルジ網に標的化する輸送モチーフである。したがって、配列番号120のAARV配列を配列番号119のAYRVに変えると、gEポリペプチドのトランスゴルジ網への局在化が減少する。
(5)AEAADA(配列番号58)配列を含む完全長gEポリペプチドをコードするgEバリアントmRNA(配列番号25〜28)。A−E−A−A−D−A(配列番号58)配列は、SESTDT(配列番号59)に代わるものであり、これは、Ser/Thrに富む「SSTT」(配列番号122)酸性クラスターをAlaに富む配列に置き換えるものである。これによりCKIIリン酸化が減少し、その結果、gEポリペプチドのトランスゴルジ網への局在化が減少する。
(6)AEAADA(配列番号58)配列を含み、かつ点変異Y582Gを有する完全長gEポリペプチドをコードするgEバリアントmRNA(配列番号29〜32)。「YAGL」(配列番号121)モチーフは、gEポリペプチドのトランスゴルジ網への局在化を促進するエンドサイトーシスモチーフである。したがって、GAGL配列(配列番号132)をYAGL(配列番号121)に変えると、得られるポリペプチドのエンドサイトーシスが減少する。
TCAAGCTTTTGGACCCTCGTACAGAAGCTAATACGACTCACTATAGGGAAATAAGAGAGAAAAGAAGAGTAAGAAGAAATATAAGAGCCACCATGGGGACAGTTAATAAACCTGTGGTGGGGGTATTGATGGGGTTCGGAATTATCACGGGAACGTTGCGTATAACGAATCCGGTCAGAGCATCCGTCTTGCGATACGATGATTTTCACATCGATGAAGACAAACTGGATACAAACTCCGTATATGAGCCTTACTACCATTCAGATCATGCGGAGTCTTCATGGGTAAATCGGGGAGAGTCTTCGCGAAAAGCGTACGATCATAACTCACCTTATATATGGCCACGTAATGATTATGATGGATTTTTAGAGAACGCACACGAACACCATGGGGTGTATAATCAGGGCCGTGGTATCGATAGCGGGGAACGGTTAATGCAACCCACACAAATGTCTGCACAGGAGGATCTTGGGGACGATACGGGCATCCACGTTATCCCTACGTTAAACGGCGATGACAGACATAAAATTGTAAATGTGGACCAACGTCAATACGGTGACGTGTTTAAAGGAGATCTTAATCCAAAACCCCAAGGCCAAAGACTCATTGAGGTGTCAGTGGAAGAAAATCACCCGTTTACTTTACGCGCACCGATTCAGCGGATTTATGGAGTCCGGTACACCGAGACTTGGAGCTTTTTGCCGTCATTAACCTGTACGGGAGACGCAGCGCCCGCCATCCAGCATATATGTTTAAAACATACAACATGCTTTCAAGACGTGGTGGTGGATGTGGATTGCGCGGAAAATACTAAAGAGGATCAGTTGGCCGAAATCAGTTACCGTTTTCAAGGTAAGAAGGAAGCGGACCAACCGTGGATTGTTGTAAACACGAGCACACTGTTTGATGAACTCGAATTAGACCCCCCCGAGATTGAACCGGGTGTCTTGAAAGTACTTCGGACAGAAAAACAATACTTGGGTGTGTACATTTGGAACATGCGCGGCTCCGATGGTACGTCTACCTACGCCACGTTTTTGGTCACCTGGAAAGGGGATGAAAAAACAAGAAACCCTACGCCCGCAGTAACTCCTCAACCAAGAGGGGCTGAGTTTCATATGTGGAATTACCACTCGCATGTATTTTCAGTTGGTGATACGTTTAGCTTGGCAATGCATCTTCAGTATAAGATACATGAAGCGCCATTTGATTTGCTGTTAGAGTGGTTGTATGTCCCCATCGATCCTACATGTCAACCAATGCGGTTATATTCTACGTGTTTGTATCATCCCAACGCACCCCAATGCCTCTCTCATATGAATTCCGGTTGTACATTTACCTCGCCACATTTAGCCCAGCGTGTTGCAAGCACAGTGTATCAAAATTGTGAACATGCAGATAACTACACCGCATATTGTCTGGGAATATCTCATATGGAGCCTAGCTTTGGTCTAATCTTACACGACGGGGGCACCACGTTAAAGTTTGTAGATACACCCGAGAGTTTGTCGGGATTATACGTTTTTGTGGTGTATTTTAACGGGCATGTTGAAGCCGTAGCATACACTGTTGTATCCACAGTAGATCATTTTGTAAACGCAATTGAAGAGCGTGGATTTCCGCCAACGGCCGGTCAGCCACCGGCGACTACTAAACCCAAGGAAATTACCCCCGTAAACCCCGGAACGTCACCACTTCTACGATATGCCGCATGGACCGGAGGGCTTGCAGCAGTAGTACTTTTATGTCTCGTAATATTTTTAATCTGTACGGCTTGATGATAATAGGCTGGAGCCTCGGTGGCCATGCTTCTTGCCCCTTGGGCCTCCCCCCAGCCCCTCCTCCCCTTCCTGCACCCGTACCCCCGTGGTCTTTGAATAAAGTCTGAGTGGGCGGC(配列番号3)
VZV−GE−欠失562(mRNA)
UCAAGCUUUUGGACCCUCGUACAGAAGCUAAUACGACUCACUAUAGGGAAAUAAGAGAGAAAAGAAGAGUAAGAAGAAAUAUAAGAGCCACCAUGGGGACAGUUAAUAAACCUGUGGUGGGGGUAUUGAUGGGGUUCGGAAUUAUCACGGGAACGUUGCGUAUAACGAAUCCGGUCAGAGCAUCCGUCUUGCGAUACGAUGAUUUUCACAUCGAUGAAGACAAACUGGAUACAAACUCCGUAUAUGAGCCUUACUACCAUUCAGAUCAUGCGGAGUCUUCAUGGGUAAAUCGGGGAGAGUCUUCGCGAAAAGCGUACGAUCAUAACUCACCUUAUAUAUGGCCACGUAAUGAUUAUGAUGGAUUUUUAGAGAACGCACACGAACACCAUGGGGUGUAUAAUCAGGGCCGUGGUAUCGAUAGCGGGGAACGGUUAAUGCAACCCACACAAAUGUCUGCACAGGAGGAUCUUGGGGACGAUACGGGCAUCCACGUUAUCCCUACGUUAAACGGCGAUGACAGACAUAAAAUUGUAAAUGUGGACCAACGUCAAUACGGUGACGUGUUUAAAGGAGAUCUUAAUCCAAAACCCCAAGGCCAAAGACUCAUUGAGGUGUCAGUGGAAGAAAAUCACCCGUUUACUUUACGCGCACCGAUUCAGCGGAUUUAUGGAGUCCGGUACACCGAGACUUGGAGCUUUUUGCCGUCAUUAACCUGUACGGGAGACGCAGCGCCCGCCAUCCAGCAUAUAUGUUUAAAACAUACAACAUGCUUUCAAGACGUGGUGGUGGAUGUGGAUUGCGCGGAAAAUACUAAAGAGGAUCAGUUGGCCGAAAUCAGUUACCGUUUUCAAGGUAAGAAGGAAGCGGACCAACCGUGGAUUGUUGUAAACACGAGCACACUGUUUGAUGAACUCGAAUUAGACCCCCCCGAGAUUGAACCGGGUGUCUUGAAAGUACUUCGGACAGAAAAACAAUACUUGGGUGUGUACAUUUGGAACAUGCGCGGCUCCGAUGGUACGUCUACCUACGCCACGUUUUUGGUCACCUGGAAAGGGGAUGAAAAAACAAGAAACCCUACGCCCGCAGUAACUCCUCAACCAAGAGGGGCUGAGUUUCAUAUGUGGAAUUACCACUCGCAUGUAUUUUCAGUUGGUGAUACGUUUAGCUUGGCAAUGCAUCUUCAGUAUAAGAUACAUGAAGCGCCAUUUGAUUUGCUGUUAGAGUGGUUGUAUGUCCCCAUCGAUCCUACAUGUCAACCAAUGCGGUUAUAUUCUACGUGUUUGUAUCAUCCCAACGCACCCCAAUGCCUCUCUCAUAUGAAUUCCGGUUGUACAUUUACCUCGCCACAUUUAGCCCAGCGUGUUGCAAGCACAGUGUAUCAAAAUUGUGAACAUGCAGAUAACUACACCGCAUAUUGUCUGGGAAUAUCUCAUAUGGAGCCUAGCUUUGGUCUAAUCUUACACGACGGGGGCACCACGUUAAAGUUUGUAGAUACACCCGAGAGUUUGUCGGGAUUAUACGUUUUUGUGGUGUAUUUUAACGGGCAUGUUGAAGCCGUAGCAUACACUGUUGUAUCCACAGUAGAUCAUUUUGUAAACGCAAUUGAAGAGCGUGGAUUUCCGCCAACGGCCGGUCAGCCACCGGCGACUACUAAACCCAAGGAAAUUACCCCCGUAAACCCCGGAACGUCACCACUUCUACGAUAUGCCGCAUGGACCGGAGGGCUUGCAGCAGUAGUACUUUUAUGUCUCGUAAUAUUUUUAAUCUGUACGGCUUGAUGAUAAUAGGCUGGAGCCUCGGUGGCCAUGCUUCUUGCCCCUUGGGCCUCCCCCCAGCCCCUCCUCCCCUUCCUGCACCCGUACCCCCGUGGUCUUUGAAUAAAGUCUGAGUGGGCGGC(配列番号125)
VZV−GE−欠失562−Igκ
TCAAGCTTTTGGACCCTCGTACAGAAGCTAATACGACTCACTATAGGGAAATAAGAGAGAAAAGAAGAGTAAGAAGAAATATAAGAGCCACCATGGAAACCCCGGCGCAGCTGCTGTTTCTGCTGCTGCTGTGGCTGCCGGATACCACCGGCTCCGTCTTGCGATACGATGATTTTCACATCGATGAAGACAAACTGGATACAAACTCCGTATATGAGCCTTACTACCATTCAGATCATGCGGAGTCTTCATGGGTAAATCGGGGAGAGTCTTCGCGAAAAGCGTACGATCATAACTCACCTTATATATGGCCACGTAATGATTATGATGGATTTTTAGAGAACGCACACGAACACCATGGGGTGTATAATCAGGGCCGTGGTATCGATAGCGGGGAACGGTTAATGCAACCCACACAAATGTCTGCACAGGAGGATCTTGGGGACGATACGGGCATCCACGTTATCCCTACGTTAAACGGCGATGACAGACATAAAATTGTAAATGTGGACCAACGTCAATACGGTGACGTGTTTAAAGGAGATCTTAATCCAAAACCCCAAGGCCAAAGACTCATTGAGGTGTCAGTGGAAGAAAATCACCCGTTTACTTTACGCGCACCGATTCAGCGGATTTATGGAGTCCGGTACACCGAGACTTGGAGCTTTTTGCCGTCATTAACCTGTACGGGAGACGCAGCGCCCGCCATCCAGCATATATGTTTAAAACATACAACATGCTTTCAAGACGTGGTGGTGGATGTGGATTGCGCGGAAAATACTAAAGAGGATCAGTTGGCCGAAATCAGTTACCGTTTTCAAGGTAAGAAGGAAGCGGACCAACCGTGGATTGTTGTAAACACGAGCACACTGTTTGATGAACTCGAATTAGACCCCCCCGAGATTGAACCGGGTGTCTTGAAAGTACTTCGGACAGAAAAACAATACTTGGGTGTGTACATTTGGAACATGCGCGGCTCCGATGGTACGTCTACCTACGCCACGTTTTTGGTCACCTGGAAAGGGGATGAAAAAACAAGAAACCCTACGCCCGCAGTAACTCCTCAACCAAGAGGGGCTGAGTTTCATATGTGGAATTACCACTCGCATGTATTTTCAGTTGGTGATACGTTTAGCTTGGCAATGCATCTTCAGTATAAGATACATGAAGCGCCATTTGATTTGCTGTTAGAGTGGTTGTATGTCCCCATCGATCCTACATGTCAACCAATGCGGTTATATTCTACGTGTTTGTATCATCCCAACGCACCCCAATGCCTCTCTCATATGAATTCCGGTTGTACATTTACCTCGCCACATTTAGCCCAGCGTGTTGCAAGCACAGTGTATCAAAATTGTGAACATGCAGATAACTACACCGCATATTGTCTGGGAATATCTCATATGGAGCCTAGCTTTGGTCTAATCTTACACGACGGGGGCACCACGTTAAAGTTTGTAGATACACCCGAGAGTTTGTCGGGATTATACGTTTTTGTGGTGTATTTTAACGGGCATGTTGAAGCCGTAGCATACACTGTTGTATCCACAGTAGATCATTTTGTAAACGCAATTGAAGAGCGTGGATTTCCGCCAACGGCCGGTCAGCCACCGGCGACTACTAAACCCAAGGAAATTACCCCCGTAAACCCCGGAACGTCACCACTTCTACGATATGCCGCATGGACCGGAGGGCTTGCAGCAGTAGTACTTTTATGTCTCGTAATATTTTTAATCTGTACGGCTTGATGATAATAGGCTGGAGCCTCGGTGGCCATGCTTCTTGCCCCTTGGGCCTCCCCCCAGCCCCTCCTCCCCTTCCTGCACCCGTACCCCCGTGGTCTTTGAATAAAGTCTGAGTGGGCGGC(配列番号4)
VZV−GE−欠失562−Igκ(mRNA)
UCAAGCUUUUGGACCCUCGUACAGAAGCUAAUACGACUCACUAUAGGGAAAUAAGAGAGAAAAGAAGAGUAAGAAGAAAUAUAAGAGCCACCAUGGAAACCCCGGCGCAGCUGCUGUUUCUGCUGCUGCUGUGGCUGCCGGAUACCACCGGCUCCGUCUUGCGAUACGAUGAUUUUCACAUCGAUGAAGACAAACUGGAUACAAACUCCGUAUAUGAGCCUUACUACCAUUCAGAUCAUGCGGAGUCUUCAUGGGUAAAUCGGGGAGAGUCUUCGCGAAAAGCGUACGAUCAUAACUCACCUUAUAUAUGGCCACGUAAUGAUUAUGAUGGAUUUUUAGAGAACGCACACGAACACCAUGGGGUGUAUAAUCAGGGCCGUGGUAUCGAUAGCGGGGAACGGUUAAUGCAACCCACACAAAUGUCUGCACAGGAGGAUCUUGGGGACGAUACGGGCAUCCACGUUAUCCCUACGUUAAACGGCGAUGACAGACAUAAAAUUGUAAAUGUGGACCAACGUCAAUACGGUGACGUGUUUAAAGGAGAUCUUAAUCCAAAACCCCAAGGCCAAAGACUCAUUGAGGUGUCAGUGGAAGAAAAUCACCCGUUUACUUUACGCGCACCGAUUCAGCGGAUUUAUGGAGUCCGGUACACCGAGACUUGGAGCUUUUUGCCGUCAUUAACCUGUACGGGAGACGCAGCGCCCGCCAUCCAGCAUAUAUGUUUAAAACAUACAACAUGCUUUCAAGACGUGGUGGUGGAUGUGGAUUGCGCGGAAAAUACUAAAGAGGAUCAGUUGGCCGAAAUCAGUUACCGUUUUCAAGGUAAGAAGGAAGCGGACCAACCGUGGAUUGUUGUAAACACGAGCACACUGUUUGAUGAACUCGAAUUAGACCCCCCCGAGAUUGAACCGGGUGUCUUGAAAGUACUUCGGACAGAAAAACAAUACUUGGGUGUGUACAUUUGGAACAUGCGCGGCUCCGAUGGUACGUCUACCUACGCCACGUUUUUGGUCACCUGGAAAGGGGAUGAAAAAACAAGAAACCCUACGCCCGCAGUAACUCCUCAACCAAGAGGGGCUGAGUUUCAUAUGUGGAAUUACCACUCGCAUGUAUUUUCAGUUGGUGAUACGUUUAGCUUGGCAAUGCAUCUUCAGUAUAAGAUACAUGAAGCGCCAUUUGAUUUGCUGUUAGAGUGGUUGUAUGUCCCCAUCGAUCCUACAUGUCAACCAAUGCGGUUAUAUUCUACGUGUUUGUAUCAUCCCAACGCACCCCAAUGCCUCUCUCAUAUGAAUUCCGGUUGUACAUUUACCUCGCCACAUUUAGCCCAGCGUGUUGCAAGCACAGUGUAUCAAAAUUGUGAACAUGCAGAUAACUACACCGCAUAUUGUCUGGGAAUAUCUCAUAUGGAGCCUAGCUUUGGUCUAAUCUUACACGACGGGGGCACCACGUUAAAGUUUGUAGAUACACCCGAGAGUUUGUCGGGAUUAUACGUUUUUGUGGUGUAUUUUAACGGGCAUGUUGAAGCCGUAGCAUACACUGUUGUAUCCACAGUAGAUCAUUUUGUAAACGCAAUUGAAGAGCGUGGAUUUCCGCCAACGGCCGGUCAGCCACCGGCGACUACUAAACCCAAGGAAAUUACCCCCGUAAACCCCGGAACGUCACCACUUCUACGAUAUGCCGCAUGGACCGGAGGGCUUGCAGCAGUAGUACUUUUAUGUCUCGUAAUAUUUUUAAUCUGUACGGCUUGAUGAUAAUAGGCUGGAGCCUCGGUGGCCAUGCUUCUUGCCCCUUGGGCCUCCCCCCAGCCCCUCCUCCCCUUCCUGCACCCGUACCCCCGUGGUCUUUGAAUAAAGUCUGAGUGGGCGGC(配列番号126)
VZV−GE−欠失574
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VZV−GE−欠失574(mRNA)
UCAAGCUUUUGGACCCUCGUACAGAAGCUAAUACGACUCACUAUAGGGAAAUAAGAGAGAAAAGAAGAGUAAGAAGAAAUAUAAGAGCCACCAUGGGGACAGUUAAUAAACCUGUGGUGGGGGUAUUGAUGGGGUUCGGAAUUAUCACGGGAACGUUGCGUAUAACGAAUCCGGUCAGAGCAUCCGUCUUGCGAUACGAUGAUUUUCACAUCGAUGAAGACAAACUGGAUACAAACUCCGUAUAUGAGCCUUACUACCAUUCAGAUCAUGCGGAGUCUUCAUGGGUAAAUCGGGGAGAGUCUUCGCGAAAAGCGUACGAUCAUAACUCACCUUAUAUAUGGCCACGUAAUGAUUAUGAUGGAUUUUUAGAGAACGCACACGAACACCAUGGGGUGUAUAAUCAGGGCCGUGGUAUCGAUAGCGGGGAACGGUUAAUGCAACCCACACAAAUGUCUGCACAGGAGGAUCUUGGGGACGAUACGGGCAUCCACGUUAUCCCUACGUUAAACGGCGAUGACAGACAUAAAAUUGUAAAUGUGGACCAACGUCAAUACGGUGACGUGUUUAAAGGAGAUCUUAAUCCAAAACCCCAAGGCCAAAGACUCAUUGAGGUGUCAGUGGAAGAAAAUCACCCGUUUACUUUACGCGCACCGAUUCAGCGGAUUUAUGGAGUCCGGUACACCGAGACUUGGAGCUUUUUGCCGUCAUUAACCUGUACGGGAGACGCAGCGCCCGCCAUCCAGCAUAUAUGUUUAAAACAUACAACAUGCUUUCAAGACGUGGUGGUGGAUGUGGAUUGCGCGGAAAAUACUAAAGAGGAUCAGUUGGCCGAAAUCAGUUACCGUUUUCAAGGUAAGAAGGAAGCGGACCAACCGUGGAUUGUUGUAAACACGAGCACACUGUUUGAUGAACUCGAAUUAGACCCCCCCGAGAUUGAACCGGGUGUCUUGAAAGUACUUCGGACAGAAAAACAAUACUUGGGUGUGUACAUUUGGAACAUGCGCGGCUCCGAUGGUACGUCUACCUACGCCACGUUUUUGGUCACCUGGAAAGGGGAUGAAAAAACAAGAAACCCUACGCCCGCAGUAACUCCUCAACCAAGAGGGGCUGAGUUUCAUAUGUGGAAUUACCACUCGCAUGUAUUUUCAGUUGGUGAUACGUUUAGCUUGGCAAUGCAUCUUCAGUAUAAGAUACAUGAAGCGCCAUUUGAUUUGCUGUUAGAGUGGUUGUAUGUCCCCAUCGAUCCUACAUGUCAACCAAUGCGGUUAUAUUCUACGUGUUUGUAUCAUCCCAACGCACCCCAAUGCCUCUCUCAUAUGAAUUCCGGUUGUACAUUUACCUCGCCACAUUUAGCCCAGCGUGUUGCAAGCACAGUGUAUCAAAAUUGUGAACAUGCAGAUAACUACACCGCAUAUUGUCUGGGAAUAUCUCAUAUGGAGCCUAGCUUUGGUCUAAUCUUACACGACGGGGGCACCACGUUAAAGUUUGUAGAUACACCCGAGAGUUUGUCGGGAUUAUACGUUUUUGUGGUGUAUUUUAACGGGCAUGUUGAAGCCGUAGCAUACACUGUUGUAUCCACAGUAGAUCAUUUUGUAAACGCAAUUGAAGAGCGUGGAUUUCCGCCAACGGCCGGUCAGCCACCGGCGACUACUAAACCCAAGGAAAUUACCCCCGUAAACCCCGGAACGUCACCACUUCUACGAUAUGCCGCAUGGACCGGAGGGCUUGCAGCAGUAGUACUUUUAUGUCUCGUAAUAUUUUUAAUCUGUACGGCUAAACGAAUGAGGGUUAAAGCCUAUAGGGUAGACAAGUGAUGAUAAUAGGCUGGAGCCUCGGUGGCCAUGCUUCUUGCCCCUUGGGCCUCCCCCCAGCCCCUCCUCCCCUUCCUGCACCCGUACCCCCGUGGUCUUUGAAUAAAGUCUGAGUGGGCGGC(配列番号127)
VZV−GE−欠失574−Y569A
TCAAGCTTTTGGACCCTCGTACAGAAGCTAATACGACTCACTATAGGGAAATAAGAGAGAAAAGAAGAGTAAGAAGAAATATAAGAGCCACCATGGGGACAGTTAATAAACCTGTGGTGGGGGTATTGATGGGGTTCGGAATTATCACGGGAACGTTGCGTATAACGAATCCGGTCAGAGCATCCGTCTTGCGATACGATGATTTTCACATCGATGAAGACAAACTGGATACAAACTCCGTATATGAGCCTTACTACCATTCAGATCATGCGGAGTCTTCATGGGTAAATCGGGGAGAGTCTTCGCGAAAAGCGTACGATCATAACTCACCTTATATATGGCCACGTAATGATTATGATGGATTTTTAGAGAACGCACACGAACACCATGGGGTGTATAATCAGGGCCGTGGTATCGATAGCGGGGAACGGTTAATGCAACCCACACAAATGTCTGCACAGGAGGATCTTGGGGACGATACGGGCATCCACGTTATCCCTACGTTAAACGGCGATGACAGACATAAAATTGTAAATGTGGACCAACGTCAATACGGTGACGTGTTTAAAGGAGATCTTAATCCAAAACCCCAAGGCCAAAGACTCATTGAGGTGTCAGTGGAAGAAAATCACCCGTTTACTTTACGCGCACCGATTCAGCGGATTTATGGAGTCCGGTACACCGAGACTTGGAGCTTTTTGCCGTCATTAACCTGTACGGGAGACGCAGCGCCCGCCATCCAGCATATATGTTTAAAACATACAACATGCTTTCAAGACGTGGTGGTGGATGTGGATTGCGCGGAAAATACTAAAGAGGATCAGTTGGCCGAAATCAGTTACCGTTTTCAAGGTAAGAAGGAAGCGGACCAACCGTGGATTGTTGTAAACACGAGCACACTGTTTGATGAACTCGAATTAGACCCCCCCGAGATTGAACCGGGTGTCTTGAAAGTACTTCGGACAGAAAAACAATACTTGGGTGTGTACATTTGGAACATGCGCGGCTCCGATGGTACGTCTACCTACGCCACGTTTTTGGTCACCTGGAAAGGGGATGAAAAAACAAGAAACCCTACGCCCGCAGTAACTCCTCAACCAAGAGGGGCTGAGTTTCATATGTGGAATTACCACTCGCATGTATTTTCAGTTGGTGATACGTTTAGCTTGGCAATGCATCTTCAGTATAAGATACATGAAGCGCCATTTGATTTGCTGTTAGAGTGGTTGTATGTCCCCATCGATCCTACATGTCAACCAATGCGGTTATATTCTACGTGTTTGTATCATCCCAACGCACCCCAATGCCTCTCTCATATGAATTCCGGTTGTACATTTACCTCGCCACATTTAGCCCAGCGTGTTGCAAGCACAGTGTATCAAAATTGTGAACATGCAGATAACTACACCGCATATTGTCTGGGAATATCTCATATGGAGCCTAGCTTTGGTCTAATCTTACACGACGGGGGCACCACGTTAAAGTTTGTAGATACACCCGAGAGTTTGTCGGGATTATACGTTTTTGTGGTGTATTTTAACGGGCATGTTGAAGCCGTAGCATACACTGTTGTATCCACAGTAGATCATTTTGTAAACGCAATTGAAGAGCGTGGATTTCCGCCAACGGCCGGTCAGCCACCGGCGACTACTAAACCCAAGGAAATTACCCCCGTAAACCCCGGAACGTCACCACTTCTACGATATGCCGCATGGACCGGAGGGCTTGCAGCAGTAGTACTTTTATGTCTCGTAATATTTTTAATCTGTACGGCTAAACGAATGAGGGTTAAAGCCGCCAGGGTAGACAAGTGATGATAATAGGCTGGAGCCTCGGTGGCCATGCTTCTTGCCCCTTGGGCCTCCCCCCAGCCCCTCCTCCCCTTCCTGCACCCGTACCCCCGTGGTCTTTGAATAAAGTCTGAGTGGGCGGC(配列番号6)
VZV−GE−欠失574−Y569A(mRNA)
UCAAGCUUUUGGACCCUCGUACAGAAGCUAAUACGACUCACUAUAGGGAAAUAAGAGAGAAAAGAAGAGUAAGAAGAAAUAUAAGAGCCACCAUGGGGACAGUUAAUAAACCUGUGGUGGGGGUAUUGAUGGGGUUCGGAAUUAUCACGGGAACGUUGCGUAUAACGAAUCCGGUCAGAGCAUCCGUCUUGCGAUACGAUGAUUUUCACAUCGAUGAAGACAAACUGGAUACAAACUCCGUAUAUGAGCCUUACUACCAUUCAGAUCAUGCGGAGUCUUCAUGGGUAAAUCGGGGAGAGUCUUCGCGAAAAGCGUACGAUCAUAACUCACCUUAUAUAUGGCCACGUAAUGAUUAUGAUGGAUUUUUAGAGAACGCACACGAACACCAUGGGGUGUAUAAUCAGGGCCGUGGUAUCGAUAGCGGGGAACGGUUAAUGCAACCCACACAAAUGUCUGCACAGGAGGAUCUUGGGGACGAUACGGGCAUCCACGUUAUCCCUACGUUAAACGGCGAUGACAGACAUAAAAUUGUAAAUGUGGACCAACGUCAAUACGGUGACGUGUUUAAAGGAGAUCUUAAUCCAAAACCCCAAGGCCAAAGACUCAUUGAGGUGUCAGUGGAAGAAAAUCACCCGUUUACUUUACGCGCACCGAUUCAGCGGAUUUAUGGAGUCCGGUACACCGAGACUUGGAGCUUUUUGCCGUCAUUAACCUGUACGGGAGACGCAGCGCCCGCCAUCCAGCAUAUAUGUUUAAAACAUACAACAUGCUUUCAAGACGUGGUGGUGGAUGUGGAUUGCGCGGAAAAUACUAAAGAGGAUCAGUUGGCCGAAAUCAGUUACCGUUUUCAAGGUAAGAAGGAAGCGGACCAACCGUGGAUUGUUGUAAACACGAGCACACUGUUUGAUGAACUCGAAUUAGACCCCCCCGAGAUUGAACCGGGUGUCUUGAAAGUACUUCGGACAGAAAAACAAUACUUGGGUGUGUACAUUUGGAACAUGCGCGGCUCCGAUGGUACGUCUACCUACGCCACGUUUUUGGUCACCUGGAAAGGGGAUGAAAAAACAAGAAACCCUACGCCCGCAGUAACUCCUCAACCAAGAGGGGCUGAGUUUCAUAUGUGGAAUUACCACUCGCAUGUAUUUUCAGUUGGUGAUACGUUUAGCUUGGCAAUGCAUCUUCAGUAUAAGAUACAUGAAGCGCCAUUUGAUUUGCUGUUAGAGUGGUUGUAUGUCCCCAUCGAUCCUACAUGUCAACCAAUGCGGUUAUAUUCUACGUGUUUGUAUCAUCCCAACGCACCCCAAUGCCUCUCUCAUAUGAAUUCCGGUUGUACAUUUACCUCGCCACAUUUAGCCCAGCGUGUUGCAAGCACAGUGUAUCAAAAUUGUGAACAUGCAGAUAACUACACCGCAUAUUGUCUGGGAAUAUCUCAUAUGGAGCCUAGCUUUGGUCUAAUCUUACACGACGGGGGCACCACGUUAAAGUUUGUAGAUACACCCGAGAGUUUGUCGGGAUUAUACGUUUUUGUGGUGUAUUUUAACGGGCAUGUUGAAGCCGUAGCAUACACUGUUGUAUCCACAGUAGAUCAUUUUGUAAACGCAAUUGAAGAGCGUGGAUUUCCGCCAACGGCCGGUCAGCCACCGGCGACUACUAAACCCAAGGAAAUUACCCCCGUAAACCCCGGAACGUCACCACUUCUACGAUAUGCCGCAUGGACCGGAGGGCUUGCAGCAGUAGUACUUUUAUGUCUCGUAAUAUUUUUAAUCUGUACGGCUAAACGAAUGAGGGUUAAAGCCGCCAGGGUAGACAAGUGAUGAUAAUAGGCUGGAGCCUCGGUGGCCAUGCUUCUUGCCCCUUGGGCCUCCCCCCAGCCCCUCCUCCCCUUCCUGCACCCGUACCCCCGUGGUCUUUGAAUAAAGUCUGAGUGGGCGGC(配列番号128)
VZV−gE−完全長−AEAADA(配列番号58)
TCAAGCTTTTGGACCCTCGTACAGAAGCTAATACGACTCACTATAGGGAAATAAGAGAGAAAAGAAGAGTAAGAAGAAATATAAGAGCCACCATGGGGACAGTTAATAAACCTGTGGTGGGGGTATTGATGGGGTTCGGAATTATCACGGGAACGTTGCGTATAACGAATCCGGTCAGAGCATCCGTCTTGCGATACGATGATTTTCACATCGATGAAGACAAACTGGATACAAACTCCGTATATGAGCCTTACTACCATTCAGATCATGCGGAGTCTTCATGGGTAAATCGGGGAGAGTCTTCGCGAAAAGCGTACGATCATAACTCACCTTATATATGGCCACGTAATGATTATGATGGATTTTTAGAGAACGCACACGAACACCATGGGGTGTATAATCAGGGCCGTGGTATCGATAGCGGGGAACGGTTAATGCAACCCACACAAATGTCTGCACAGGAGGATCTTGGGGACGATACGGGCATCCACGTTATCCCTACGTTAAACGGCGATGACAGACATAAAATTGTAAATGTGGACCAACGTCAATACGGTGACGTGTTTAAAGGAGATCTTAATCCAAAACCCCAAGGCCAAAGACTCATTGAGGTGTCAGTGGAAGAAAATCACCCGTTTACTTTACGCGCACCGATTCAGCGGATTTATGGAGTCCGGTACACCGAGACTTGGAGCTTTTTGCCGTCATTAACCTGTACGGGAGACGCAGCGCCCGCCATCCAGCATATATGTTTAAAACATACAACATGCTTTCAAGACGTGGTGGTGGATGTGGATTGCGCGGAAAATACTAAAGAGGATCAGTTGGCCGAAATCAGTTACCGTTTTCAAGGTAAGAAGGAAGCGGACCAACCGTGGATTGTTGTAAACACGAGCACACTGTTTGATGAACTCGAATTAGACCCCCCCGAGATTGAACCGGGTGTCTTGAAAGTACTTCGGACAGAAAAACAATACTTGGGTGTGTACATTTGGAACATGCGCGGCTCCGATGGTACGTCTACCTACGCCACGTTTTTGGTCACCTGGAAAGGGGATGAAAAAACAAGAAACCCTACGCCCGCAGTAACTCCTCAACCAAGAGGGGCTGAGTTTCATATGTGGAATTACCACTCGCATGTATTTTCAGTTGGTGATACGTTTAGCTTGGCAATGCATCTTCAGTATAAGATACATGAAGCGCCATTTGATTTGCTGTTAGAGTGGTTGTATGTCCCCATCGATCCTACATGTCAACCAATGCGGTTATATTCTACGTGTTTGTATCATCCCAACGCACCCCAATGCCTCTCTCATATGAATTCCGGTTGTACATTTACCTCGCCACATTTAGCCCAGCGTGTTGCAAGCACAGTGTATCAAAATTGTGAACATGCAGATAACTACACCGCATATTGTCTGGGAATATCTCATATGGAGCCTAGCTTTGGTCTAATCTTACACGACGGGGGCACCACGTTAAAGTTTGTAGATACACCCGAGAGTTTGTCGGGATTATACGTTTTTGTGGTGTATTTTAACGGGCATGTTGAAGCCGTAGCATACACTGTTGTATCCACAGTAGATCATTTTGTAAACGCAATTGAAGAGCGTGGATTTCCGCCAACGGCCGGTCAGCCACCGGCGACTACTAAACCCAAGGAAATTACCCCCGTAAACCCCGGAACGTCACCACTTCTACGATATGCCGCATGGACCGGAGGGCTTGCAGCAGTAGTACTTTTATGTCTCGTAATATTTTTAATCTGTACGGCTAAACGAATGAGGGTTAAAGCCTATAGGGTAGACAAGTCCCCGTATAACCAAAGCATGTATTACGCTGGCCTTCCAGTGGACGATTTCGAGGACGCCGAAGCCGCCGATGCCGAAGAAGAGTTTGGTAACGCGATTGGAGGGAGTCACGGGGGTTCGAGTTACACGGTGTATATAGATAAGACCCGGTGATGATAATAGGCTGGAGCCTCGGTGGCCATGCTTCTTGCCCCTTGGGCCTCCCCCCAGCCCCTCCTCCCCTTCCTGCACCCGTACCCCCGTGGTCTTTGAATAAAGTCTGAGTGGGCGGC(配列番号7)
VZV−gE−完全長−AEAADA(配列番号58)(mRNA)
UCAAGCUUUUGGACCCUCGUACAGAAGCUAAUACGACUCACUAUAGGGAAAUAAGAGAGAAAAGAAGAGUAAGAAGAAAUAUAAGAGCCACCAUGGGGACAGUUAAUAAACCUGUGGUGGGGGUAUUGAUGGGGUUCGGAAUUAUCACGGGAACGUUGCGUAUAACGAAUCCGGUCAGAGCAUCCGUCUUGCGAUACGAUGAUUUUCACAUCGAUGAAGACAAACUGGAUACAAACUCCGUAUAUGAGCCUUACUACCAUUCAGAUCAUGCGGAGUCUUCAUGGGUAAAUCGGGGAGAGUCUUCGCGAAAAGCGUACGAUCAUAACUCACCUUAUAUAUGGCCACGUAAUGAUUAUGAUGGAUUUUUAGAGAACGCACACGAACACCAUGGGGUGUAUAAUCAGGGCCGUGGUAUCGAUAGCGGGGAACGGUUAAUGCAACCCACACAAAUGUCUGCACAGGAGGAUCUUGGGGACGAUACGGGCAUCCACGUUAUCCCUACGUUAAACGGCGAUGACAGACAUAAAAUUGUAAAUGUGGACCAACGUCAAUACGGUGACGUGUUUAAAGGAGAUCUUAAUCCAAAACCCCAAGGCCAAAGACUCAUUGAGGUGUCAGUGGAAGAAAAUCACCCGUUUACUUUACGCGCACCGAUUCAGCGGAUUUAUGGAGUCCGGUACACCGAGACUUGGAGCUUUUUGCCGUCAUUAACCUGUACGGGAGACGCAGCGCCCGCCAUCCAGCAUAUAUGUUUAAAACAUACAACAUGCUUUCAAGACGUGGUGGUGGAUGUGGAUUGCGCGGAAAAUACUAAAGAGGAUCAGUUGGCCGAAAUCAGUUACCGUUUUCAAGGUAAGAAGGAAGCGGACCAACCGUGGAUUGUUGUAAACACGAGCACACUGUUUGAUGAACUCGAAUUAGACCCCCCCGAGAUUGAACCGGGUGUCUUGAAAGUACUUCGGACAGAAAAACAAUACUUGGGUGUGUACAUUUGGAACAUGCGCGGCUCCGAUGGUACGUCUACCUACGCCACGUUUUUGGUCACCUGGAAAGGGGAUGAAAAAACAAGAAACCCUACGCCCGCAGUAACUCCUCAACCAAGAGGGGCUGAGUUUCAUAUGUGGAAUUACCACUCGCAUGUAUUUUCAGUUGGUGAUACGUUUAGCUUGGCAAUGCAUCUUCAGUAUAAGAUACAUGAAGCGCCAUUUGAUUUGCUGUUAGAGUGGUUGUAUGUCCCCAUCGAUCCUACAUGUCAACCAAUGCGGUUAUAUUCUACGUGUUUGUAUCAUCCCAACGCACCCCAAUGCCUCUCUCAUAUGAAUUCCGGUUGUACAUUUACCUCGCCACAUUUAGCCCAGCGUGUUGCAAGCACAGUGUAUCAAAAUUGUGAACAUGCAGAUAACUACACCGCAUAUUGUCUGGGAAUAUCUCAUAUGGAGCCUAGCUUUGGUCUAAUCUUACACGACGGGGGCACCACGUUAAAGUUUGUAGAUACACCCGAGAGUUUGUCGGGAUUAUACGUUUUUGUGGUGUAUUUUAACGGGCAUGUUGAAGCCGUAGCAUACACUGUUGUAUCCACAGUAGAUCAUUUUGUAAACGCAAUUGAAGAGCGUGGAUUUCCGCCAACGGCCGGUCAGCCACCGGCGACUACUAAACCCAAGGAAAUUACCCCCGUAAACCCCGGAACGUCACCACUUCUACGAUAUGCCGCAUGGACCGGAGGGCUUGCAGCAGUAGUACUUUUAUGUCUCGUAAUAUUUUUAAUCUGUACGGCUAAACGAAUGAGGGUUAAAGCCUAUAGGGUAGACAAGUCCCCGUAUAACCAAAGCAUGUAUUACGCUGGCCUUCCAGUGGACGAUUUCGAGGACGCCGAAGCCGCCGAUGCCGAAGAAGAGUUUGGUAACGCGAUUGGAGGGAGUCACGGGGGUUCGAGUUACACGGUGUAUAUAGAUAAGACCCGGUGAUGAUAAUAGGCUGGAGCCUCGGUGGCCAUGCUUCUUGCCCCUUGGGCCUCCCCCCAGCCCCUCCUCCCCUUCCUGCACCCGUACCCCCGUGGUCUUUGAAUAAAGUCUGAGUGGGCGGC(配列番号129)
VZV−GE−完全−AEAADA(配列番号58)−Y582G
TCAAGCTTTTGGACCCTCGTACAGAAGCTAATACGACTCACTATAGGGAAATAAGAGAGAAAAGAAGAGTAAGAAGAAATATAAGAGCCACCATGGGGACAGTTAATAAACCTGTGGTGGGGGTATTGATGGGGTTCGGAATTATCACGGGAACGTTGCGTATAACGAATCCGGTCAGAGCATCCGTCTTGCGATACGATGATTTTCACATCGATGAAGACAAACTGGATACAAACTCCGTATATGAGCCTTACTACCATTCAGATCATGCGGAGTCTTCATGGGTAAATCGGGGAGAGTCTTCGCGAAAAGCGTACGATCATAACTCACCTTATATATGGCCACGTAATGATTATGATGGATTTTTAGAGAACGCACACGAACACCATGGGGTGTATAATCAGGGCCGTGGTATCGATAGCGGGGAACGGTTAATGCAACCCACACAAATGTCTGCACAGGAGGATCTTGGGGACGATACGGGCATCCACGTTATCCCTACGTTAAACGGCGATGACAGACATAAAATTGTAAATGTGGACCAACGTCAATACGGTGACGTGTTTAAAGGAGATCTTAATCCAAAACCCCAAGGCCAAAGACTCATTGAGGTGTCAGTGGAAGAAAATCACCCGTTTACTTTACGCGCACCGATTCAGCGGATTTATGGAGTCCGGTACACCGAGACTTGGAGCTTTTTGCCGTCATTAACCTGTACGGGAGACGCAGCGCCCGCCATCCAGCATATATGTTTAAAACATACAACATGCTTTCAAGACGTGGTGGTGGATGTGGATTGCGCGGAAAATACTAAAGAGGATCAGTTGGCCGAAATCAGTTACCGTTTTCAAGGTAAGAAGGAAGCGGACCAACCGTGGATTGTTGTAAACACGAGCACACTGTTTGATGAACTCGAATTAGACCCCCCCGAGATTGAACCGGGTGTCTTGAAAGTACTTCGGACAGAAAAACAATACTTGGGTGTGTACATTTGGAACATGCGCGGCTCCGATGGTACGTCTACCTACGCCACGTTTTTGGTCACCTGGAAAGGGGATGAAAAAACAAGAAACCCTACGCCCGCAGTAACTCCTCAACCAAGAGGGGCTGAGTTTCATATGTGGAATTACCACTCGCATGTATTTTCAGTTGGTGATACGTTTAGCTTGGCAATGCATCTTCAGTATAAGATACATGAAGCGCCATTTGATTTGCTGTTAGAGTGGTTGTATGTCCCCATCGATCCTACATGTCAACCAATGCGGTTATATTCTACGTGTTTGTATCATCCCAACGCACCCCAATGCCTCTCTCATATGAATTCCGGTTGTACATTTACCTCGCCACATTTAGCCCAGCGTGTTGCAAGCACAGTGTATCAAAATTGTGAACATGCAGATAACTACACCGCATATTGTCTGGGAATATCTCATATGGAGCCTAGCTTTGGTCTAATCTTACACGACGGGGGCACCACGTTAAAGTTTGTAGATACACCCGAGAGTTTGTCGGGATTATACGTTTTTGTGGTGTATTTTAACGGGCATGTTGAAGCCGTAGCATACACTGTTGTATCCACAGTAGATCATTTTGTAAACGCAATTGAAGAGCGTGGATTTCCGCCAACGGCCGGTCAGCCACCGGCGACTACTAAACCCAAGGAAATTACCCCCGTAAACCCCGGAACGTCACCACTTCTACGATATGCCGCATGGACCGGAGGGCTTGCAGCAGTAGTACTTTTATGTCTCGTAATATTTTTAATCTGTACGGCTAAACGAATGAGGGTTAAAGCCTATAGGGTAGACAAGTCCCCGTATAACCAAAGCATGTATGGCGCTGGCCTTCCAGTGGACGATTTCGAGGACGCCGAAGCCGCCGATGCCGAAGAAGAGTTTGGTAACGCGATTGGAGGGAGTCACGGGGGTTCGAGTTACACGGTGTATATAGATAAGACCCGGTGATGATAATAGGCTGGAGCCTCGGTGGCCATGCTTCTTGCCCCTTGGGCCTCCCCCCAGCCCCTCCTCCCCTTCCTGCACCCGTACCCCCGTGGTCTTTGAATAAAGTCTGAGTGGGCGGC(配列番号8)
VZV−GE−完全−AEAADA(配列番号58)−Y582G(mRNA)
UCAAGCUUUUGGACCCUCGUACAGAAGCUAAUACGACUCACUAUAGGGAAAUAAGAGAGAAAAGAAGAGUAAGAAGAAAUAUAAGAGCCACCAUGGGGACAGUUAAUAAACCUGUGGUGGGGGUAUUGAUGGGGUUCGGAAUUAUCACGGGAACGUUGCGUAUAACGAAUCCGGUCAGAGCAUCCGUCUUGCGAUACGAUGAUUUUCACAUCGAUGAAGACAAACUGGAUACAAACUCCGUAUAUGAGCCUUACUACCAUUCAGAUCAUGCGGAGUCUUCAUGGGUAAAUCGGGGAGAGUCUUCGCGAAAAGCGUACGAUCAUAACUCACCUUAUAUAUGGCCACGUAAUGAUUAUGAUGGAUUUUUAGAGAACGCACACGAACACCAUGGGGUGUAUAAUCAGGGCCGUGGUAUCGAUAGCGGGGAACGGUUAAUGCAACCCACACAAAUGUCUGCACAGGAGGAUCUUGGGGACGAUACGGGCAUCCACGUUAUCCCUACGUUAAACGGCGAUGACAGACAUAAAAUUGUAAAUGUGGACCAACGUCAAUACGGUGACGUGUUUAAAGGAGAUCUUAAUCCAAAACCCCAAGGCCAAAGACUCAUUGAGGUGUCAGUGGAAGAAAAUCACCCGUUUACUUUACGCGCACCGAUUCAGCGGAUUUAUGGAGUCCGGUACACCGAGACUUGGAGCUUUUUGCCGUCAUUAACCUGUACGGGAGACGCAGCGCCCGCCAUCCAGCAUAUAUGUUUAAAACAUACAACAUGCUUUCAAGACGUGGUGGUGGAUGUGGAUUGCGCGGAAAAUACUAAAGAGGAUCAGUUGGCCGAAAUCAGUUACCGUUUUCAAGGUAAGAAGGAAGCGGACCAACCGUGGAUUGUUGUAAACACGAGCACACUGUUUGAUGAACUCGAAUUAGACCCCCCCGAGAUUGAACCGGGUGUCUUGAAAGUACUUCGGACAGAAAAACAAUACUUGGGUGUGUACAUUUGGAACAUGCGCGGCUCCGAUGGUACGUCUACCUACGCCACGUUUUUGGUCACCUGGAAAGGGGAUGAAAAAACAAGAAACCCUACGCCCGCAGUAACUCCUCAACCAAGAGGGGCUGAGUUUCAUAUGUGGAAUUACCACUCGCAUGUAUUUUCAGUUGGUGAUACGUUUAGCUUGGCAAUGCAUCUUCAGUAUAAGAUACAUGAAGCGCCAUUUGAUUUGCUGUUAGAGUGGUUGUAUGUCCCCAUCGAUCCUACAUGUCAACCAAUGCGGUUAUAUUCUACGUGUUUGUAUCAUCCCAACGCACCCCAAUGCCUCUCUCAUAUGAAUUCCGGUUGUACAUUUACCUCGCCACAUUUAGCCCAGCGUGUUGCAAGCACAGUGUAUCAAAAUUGUGAACAUGCAGAUAACUACACCGCAUAUUGUCUGGGAAUAUCUCAUAUGGAGCCUAGCUUUGGUCUAAUCUUACACGACGGGGGCACCACGUUAAAGUUUGUAGAUACACCCGAGAGUUUGUCGGGAUUAUACGUUUUUGUGGUGUAUUUUAACGGGCAUGUUGAAGCCGUAGCAUACACUGUUGUAUCCACAGUAGAUCAUUUUGUAAACGCAAUUGAAGAGCGUGGAUUUCCGCCAACGGCCGGUCAGCCACCGGCGACUACUAAACCCAAGGAAAUUACCCCCGUAAACCCCGGAACGUCACCACUUCUACGAUAUGCCGCAUGGACCGGAGGGCUUGCAGCAGUAGUACUUUUAUGUCUCGUAAUAUUUUUAAUCUGUACGGCUAAACGAAUGAGGGUUAAAGCCUAUAGGGUAGACAAGUCCCCGUAUAACCAAAGCAUGUAUGGCGCUGGCCUUCCAGUGGACGAUUUCGAGGACGCCGAAGCCGCCGAUGCCGAAGAAGAGUUUGGUAACGCGAUUGGAGGGAGUCACGGGGGUUCGAGUUACACGGUGUAUAUAGAUAAGACCCGGUGAUGAUAAUAGGCUGGAGCCUCGGUGGCCAUGCUUCUUGCCCCUUGGGCCUCCCCCCAGCCCCUCCUCCCCUUCCUGCACCCGUACCCCCGUGGUCUUUGAAUAAAGUCUGAGUGGGCGGC(配列番号130)
VZV_gE_Oka_hIgκ
TCAAGCTTTTGGACCCTCGTACAGAAGCTAATACGACTCACTATAGGGAAATAAGAGAGAAAAGAAGAGTAAGAAGAAATATAAGAGCCACCATGGAGACTCCCGCTCAGCTACTGTTCCTCCTGCTCCTTTGGCTGCCTGATACTACAGGCTCTGTTTTGCGGTACGACGACTTTCACATCGATGAGGACAAGCTCGACACTAATAGCGTGTATGAGCCCTACTACCATTCAGATCACGCCGAGTCCTCTTGGGTGAACAGGGGTGAAAGTTCTAGGAAAGCCTATGATCACAACAGCCCTTATATTTGGCCACGGAATGATTACGACGGATTTCTCGAAAATGCCCACGAGCATCACGGAGTGTACAACCAGGGCCGTGGAATCGACTCTGGGGAGAGATTGATGCAACCTACACAGATGAGCGCCCAGGAAGATCTCGGGGATGATACAGGAATTCACGTTATCCCTACATTAAACGGAGATGACCGCCACAAAATCGTCAATGTCGATCAAAGACAGTATGGAGATGTGTTCAAAGGCGATCTCAACCCTAAGCCGCAGGGCCAGAGACTCATTGAGGTGTCTGTCGAAGAGAACCACCCTTTCACTCTGCGCGCTCCCATTCAGAGAATCTATGGAGTTCGCTATACGGAGACTTGGTCATTCCTTCCTTCCCTGACATGCACCGGAGACGCCGCCCCTGCCATTCAGCACATATGCCTGAAACATACCACCTGTTTCCAGGATGTGGTGGTTGATGTTGATTGTGCTGAAAATACCAAGGAAGACCAACTGGCCGAGATTAGTTACCGGTTCCAAGGGAAAAAGGAAGCCGACCAGCCATGGATTGTGGTTAATACAAGCACTCTGTTCGATGAGCTCGAGCTGGATCCCCCCGAGATAGAACCCGGAGTTCTGAAAGTGCTCCGGACAGAAAAACAATATCTGGGAGTCTACATATGGAACATGCGCGGTTCCGATGGGACCTCCACTTATGCAACCTTTCTCGTCACGTGGAAGGGAGATGAGAAAACTAGGAATCCCACACCCGCTGTCACACCACAGCCAAGAGGGGCTGAGTTCCATATGTGGAACTATCATAGTCACGTGTTTAGTGTCGGAGATACGTTTTCATTGGCTATGCATCTCCAGTACAAGATTCATGAGGCTCCCTTCGATCTGTTGCTTGAGTGGTTGTACGTCCCGATTGACCCGACCTGCCAGCCCATGCGACTGTACAGCACCTGTCTCTACCATCCAAACGCTCCGCAATGTCTGAGCCACATGAACTCTGGGTGTACTTTCACCAGTCCCCACCTCGCCCAGCGGGTGGCCTCTACTGTTTACCAGAACTGTGAGCACGCCGACAACTACACCGCATACTGCCTCGGTATTTCTCACATGGAACCCTCCTTCGGACTCATCCTGCACGATGGGGGCACTACCCTGAAGTTCGTTGATACGCCAGAATCTCTGTCTGGGCTCTATGTTTTCGTGGTCTACTTCAATGGCCATGTCGAGGCCGTGGCCTATACTGTCGTTTCTACCGTGGATCATTTTGTGAACGCCATCGAAGAACGGGGATTCCCCCCTACGGCAGGCCAGCCGCCTGCAACCACCAAGCCCAAGGAAATAACACCAGTGAACCCTGGCACCTCACCTCTCCTAAGATATGCCGCGTGGACAGGGGGACTGGCGGCAGTGGTGCTCCTCTGTCTCGTGATCTTTCTGATCTGTACAGCCAAGAGGATGAGGGTCAAGGCTTATAGAGTGGACAAGTCCCCCTACAATCAGTCAATGTACTACGCCGGCCTTCCCGTTGATGATTTTGAGGATTCCGAGTCCACAGATACTGAGGAAGAGTTCGGTAACGCTATAGGCGGCTCTCACGGGGGTTCAAGCTACACGGTTTACATTGACAAGACACGCTGATAATAGGCTGGAGCCTCGGTGGCCATGCTTCTTGCCCCTTGGGCCTCCCCCCAGCCCCTCCTCCCCTTCCTGCACCCGTACCCCCGTGGTCTTTGAATAAAGTCTGAGTGGGCGGC(配列番号41)
VZV_gE_Oka_hIgκ(mRNA)
UCAAGCUUUUGGACCCUCGUACAGAAGCUAAUACGACUCACUAUAGGGAAAUAAGAGAGAAAAGAAGAGUAAGAAGAAAUAUAAGAGCCACCAUGGAGACUCCCGCUCAGCUACUGUUCCUCCUGCUCCUUUGGCUGCCUGAUACUACAGGCUCUGUUUUGCGGUACGACGACUUUCACAUCGAUGAGGACAAGCUCGACACUAAUAGCGUGUAUGAGCCCUACUACCAUUCAGAUCACGCCGAGUCCUCUUGGGUGAACAGGGGUGAAAGUUCUAGGAAAGCCUAUGAUCACAACAGCCCUUAUAUUUGGCCACGGAAUGAUUACGACGGAUUUCUCGAAAAUGCCCACGAGCAUCACGGAGUGUACAACCAGGGCCGUGGAAUCGACUCUGGGGAGAGAUUGAUGCAACCUACACAGAUGAGCGCCCAGGAAGAUCUCGGGGAUGAUACAGGAAUUCACGUUAUCCCUACAUUAAACGGAGAUGACCGCCACAAAAUCGUCAAUGUCGAUCAAAGACAGUAUGGAGAUGUGUUCAAAGGCGAUCUCAACCCUAAGCCGCAGGGCCAGAGACUCAUUGAGGUGUCUGUCGAAGAGAACCACCCUUUCACUCUGCGCGCUCCCAUUCAGAGAAUCUAUGGAGUUCGCUAUACGGAGACUUGGUCAUUCCUUCCUUCCCUGACAUGCACCGGAGACGCCGCCCCUGCCAUUCAGCACAUAUGCCUGAAACAUACCACCUGUUUCCAGGAUGUGGUGGUUGAUGUUGAUUGUGCUGAAAAUACCAAGGAAGACCAACUGGCCGAGAUUAGUUACCGGUUCCAAGGGAAAAAGGAAGCCGACCAGCCAUGGAUUGUGGUUAAUACAAGCACUCUGUUCGAUGAGCUCGAGCUGGAUCCCCCCGAGAUAGAACCCGGAGUUCUGAAAGUGCUCCGGACAGAAAAACAAUAUCUGGGAGUCUACAUAUGGAACAUGCGCGGUUCCGAUGGGACCUCCACUUAUGCAACCUUUCUCGUCACGUGGAAGGGAGAUGAGAAAACUAGGAAUCCCACACCCGCUGUCACACCACAGCCAAGAGGGGCUGAGUUCCAUAUGUGGAACUAUCAUAGUCACGUGUUUAGUGUCGGAGAUACGUUUUCAUUGGCUAUGCAUCUCCAGUACAAGAUUCAUGAGGCUCCCUUCGAUCUGUUGCUUGAGUGGUUGUACGUCCCGAUUGACCCGACCUGCCAGCCCAUGCGACUGUACAGCACCUGUCUCUACCAUCCAAACGCUCCGCAAUGUCUGAGCCACAUGAACUCUGGGUGUACUUUCACCAGUCCCCACCUCGCCCAGCGGGUGGCCUCUACUGUUUACCAGAACUGUGAGCACGCCGACAACUACACCGCAUACUGCCUCGGUAUUUCUCACAUGGAACCCUCCUUCGGACUCAUCCUGCACGAUGGGGGCACUACCCUGAAGUUCGUUGAUACGCCAGAAUCUCUGUCUGGGCUCUAUGUUUUCGUGGUCUACUUCAAUGGCCAUGUCGAGGCCGUGGCCUAUACUGUCGUUUCUACCGUGGAUCAUUUUGUGAACGCCAUCGAAGAACGGGGAUUCCCCCCUACGGCAGGCCAGCCGCCUGCAACCACCAAGCCCAAGGAAAUAACACCAGUGAACCCUGGCACCUCACCUCUCCUAAGAUAUGCCGCGUGGACAGGGGGACUGGCGGCAGUGGUGCUCCUCUGUCUCGUGAUCUUUCUGAUCUGUACAGCCAAGAGGAUGAGGGUCAAGGCUUAUAGAGUGGACAAGUCCCCCUACAAUCAGUCAAUGUACUACGCCGGCCUUCCCGUUGAUGAUUUUGAGGAUUCCGAGUCCACAGAUACUGAGGAAGAGUUCGGUAACGCUAUAGGCGGCUCUCACGGGGGUUCAAGCUACACGGUUUACAUUGACAAGACACGCUGAUAAUAGGCUGGAGCCUCGGUGGCCAUGCUUCUUGCCCCUUGGGCCUCCCCCCAGCCCCUCCUCCCCUUCCUGCACCCGUACCCCCGUGGUCUUUGAAUAAAGUCUGAGUGGGCGGC(配列番号131)
種々のC末端バリアントを有するVZV gE抗原の発現及び輸送をVero細胞及びMewo細胞で調べた。
筋肉内投与または皮内投与後のBALB/Cマウスにおいて免疫付与を達成するワクチンの候補である、MC3で製剤化したVZV抗原をコードするmRNAの作用の初期評価として、免疫付与試験を実施した。
(1)5’キャップ:m7G(5’)ppp(5’)G−2’−O−メチル、N1−メチルプソイドウリジン化学修飾及び追加のhIgκ配列を有する、MC3製剤化VZVgE−hIgκ mRNA
(2)5’キャップ:m7G(5’)ppp(5’)G−2’−O−メチル及びN1−メチルプソイドウリジン化学修飾を有する、MC3製剤化VZV gE mRNA
(3)5’キャップ:m7G(5’)ppp(5’)G−2’−O−メチルを有し、化学修飾のない、MC3製剤化VZV gE mRNA。
本試験は、VZV由来の糖タンパク質gEをコードするmRNAポリヌクレオチドを含む候補VZVワクチンのBALB/Cマウスにおける免疫原性を試験するように設計した。種々のVZV mRNAワクチン製剤による免疫付与を指定間隔でマウスに行い、各免疫付与後に血清を採取した。免疫化スケジュールを実施例15の表2に記載する。血清採取スケジュールを実施例15の表4に示す。
標準法を使用した酵素結合免疫吸着法(ELISA)によって、VZV糖タンパク質Eに対する血清抗体力価を決定した。一試験において、抗VZV gEマウスIgGの量を、前採血と、(1)5’キャップ:m7G(5’)ppp(5’)G−2’−O−メチル及びN1−メチルプソイドウリジン化学修飾を有するVZV−gE−hIgκ(表2及び3の1番目)、(2)5’キャップ:m7G(5’)ppp(5’)G−2’−O−メチルを有し、化学修飾のないVZV−gE(表2及び3の6番目)、(3)5’キャップ:m7G(5’)ppp(5’)G−2’−O−メチル及びN1−メチルプソイドウリジン化学修飾を有するVZV−gE(表2及び3の10番目)、(4)VARIVAX(登録商標)ワクチン(陽性対照)、または(5)PBS(陰性対照)のいずれかの10μg用量2回を筋肉内にワクチン投与したマウスにおけるワクチン接種後14日目及び42日目に採取した血清とで測定した。
本試験は、VZV由来の糖タンパク質gEをコードするmRNAポリヌクレオチドを含む候補VZVワクチンのBALB/Cマウスにおける免疫原性を試験するように設計した。種々のVZV mRNAワクチン製剤による免疫付与を指定間隔でマウスに行い、各免疫付与後に血清を採取した。免疫化スケジュールを実施例15の表4に記載する。血清採取スケジュールを実施例15の表5に示す。
本試験は、VZV由来のバリアント糖タンパク質gEをコードするmRNAポリヌクレオチドを含む候補VZVワクチンのBALB/Cマウスにおける免疫原性を試験するように設計する。種々のVZV mRNAワクチン製剤による免疫付与を指定間隔でマウスに行い、各免疫付与後の指定時点で血清を採取した。免疫化スケジュールを以下の表6に記載する。血清採取スケジュールを以下の表7に示す。
VZVのin vitro中和アッセイを実施して,VZVの中和における抗VZV gE抗体を評価した。抗VZV gE抗体は、VZV gEバリアントmRNAワクチンを投与したマウスの血清を採取することによって得た。マウスには、表6に記載のとおり、10μgまたは2μgの用量でVZV gEバリアントmRNAワクチンを投与し、血清を2回目の免疫付与から2週間後に採取した。
帯状ヘルペス(HZ)または帯状疱疹は小水疱性発疹を特徴とする衰弱性疾患であり、最も一般的な合併症は帯状疱疹後神経痛(PHN)である。PHNは、皮膚での発生が解消された後に発症する継続的かつ重度の痛みであり、数年続くこともあるため、罹患した個体の高罹患状態の一因となっている。HZは、知覚神経節から潜伏性水痘帯状疱疹ウイルス(VZV)が再活性化することによって引き起こされる。VZV一次感染(水疱瘡)中に起こる免疫応答は、潜伏性VZVの再活性化を防ぐことが示されている。しかしながら、HZの発生率は、加齢と強い関連性がある。いくつかの調査により、T細胞媒介性免疫応答は、加齢とともに、また免疫抑制中に低下し、VZVの再活性化をもたらすことが示されている。しかし、抗VZV抗体レベルは、年齢を重ねても比較的安定したままであることから、体液性免疫応答がHZの予防に十分ではない可能性が示されている。いくつかの研究は、VZV特異的CD4+及びCD8+T細胞の誘導を報告しており、CD4+T細胞が記憶応答を支配している。
実施例20のデータに基づき、mRNA構築物VZV−gE−欠失574_Y569Aの免疫原性を非ヒト霊長類において更に評価した。以下の表12に示すように、アカゲザル3群にmRNA(VZV−gE−欠失574_Y569A)またはZOSTAVAX(登録商標)の初回投与及び追加投与を行った。血清及びT細胞分析のために、0日目、14日目、28日目及び42日目に動物から採血した。T細胞分析を0日目、28日目及び42日目に実施した。図16A及び16Bに示されるように、mRNAの初回投与及び追加投与(第1群)が最も高い抗gE力価を与え、それに続いて、ZOSTAVAX(登録商標)の初回投与mRNAの追加投与(第2群)となった。後者の群(第2群)の抗gE力価は、ZOSTAVAX(登録商標)初回投与/ZOSTAVAX(登録商標)追加投与(第3群)よりも約10倍良好であった。図16C及び16Dに示されるように、ZOSTAVAX(登録商標)初回投与/ZOSTAVAX(登録商標)追加投与群(第3群)では、IFNγ、IL−2またはTNFαを産生するCD4−T細胞は検出されなかった。対照的に、図16C及び16Dに示されるように、mRNA初回投与/mRNA追加投与群(第1群)では、IFNγ、IL−2またはTNFαを産生するCD4 T細胞が妥当な頻度で検出され、ZOSTAVAX(登録商標)初回投与/mRNA追加投与群(第2群)は統計的差異を認めなかった。これらのデータは、Zostavax曝露後のmRNAワクチン単回投与が、類似のT細胞応答を誘導することにおいて、mRNAワクチンの2回投与と同等であることを示している。
当業者であれば、通常の実験を用いるだけで、本明細書に記載される本発明の具体的な実施形態の等価物を数多く認識しまたは確認できるであろう。そのような等価物は、以下の特許請求の範囲に包含されることが意図される。
Claims (17)
- 脂質ナノ粒子内に製剤化された水痘帯状疱疹ウイルス(VZV)抗原性ポリペプチドをコードするオープンリーディングフレームを有するリボ核酸(RNA)ポリヌクレオチドを含む、VZVワクチンであって、
前記抗原性ポリペプチドが、VZV糖タンパク質E(gE)ポリペプチドであり、
前記脂質ナノ粒子が、40〜50モル%のイオン性カチオン性脂質と、5〜15モル%の1,2−ジステアロイル−sn−グリセロ−3−ホスホコリン(DSPC)脂質と、20〜40モル%のコレステロールと、0.5〜3モル%のポリエチレングリコール(PEG)修飾脂質とを含み、
前記RNAポリヌクレオチドがメッセンジャーリボ核酸(mRNA)である、VZVワクチン。 - 前記オープンリーディングフレームが2つ以上のVZV抗原性ポリペプチドをコードする、請求項1に記載のVZVワクチン。
- 前記VZV gEポリペプチドが、バリアントVZV gEポリペプチドであり、ER保持、エンドサイトーシス及び/またはゴルジ体もしくはトランスゴルジ網への局在化に関連するモチーフ中に変異を有する、請求項1に記載のVZVワクチン。
- (i)前記バリアントVZV gEポリペプチドが、少なくとも1つのリン酸化酸性モチーフ中に少なくとも1つの変異を有する、
(ii)前記バリアントVZV gEポリペプチドが、配列番号10に対してY582G変異を有する、
(iii)前記バリアントVZV gEポリペプチドが、配列番号10に対してY569A変異を有する、
(iv)前記バリアントVZV gEポリペプチドが、配列番号10に対してY582G変異及びY569A変異を有する、あるいは
(v)前記VZV抗原性断片が、配列番号10に対してY569A変異を有する、
請求項3に記載のVZVワクチン。 - 前記VZV gEポリペプチドが、A−E−A−A−D−A配列(配列番号58)を有する、またはC末端にIgκ配列を有する、請求項1に記載のVZVワクチン。
- 前記ポリヌクレオチドがコードされるオープンリーディングフレームがコドン最適化された、請求項1〜5のいずれか一項に記載のVZVワクチン。
- 前記RNAポリヌクレオチドが少なくとも1つの化学修飾を含む、請求項1〜6のいずれか一項に記載のVZVワクチン。
- 前記化学修飾が、プソイドウリジン、N1−メチルプソイドウリジン、N1−エチルプソイドウリジン、2−チオウリジン、4’−チオウリジン、5−メチルシトシン、2−チオ−1−メチル−1−デアザ−プソイドウリジン、2−チオ−1−メチル−プソイドウリジン、2−チオ−5−アザ−ウリジン、2−チオ−ジヒドロプソイドウリジン、2−チオ−ジヒドロウリジン、2−チオ−プソイドウリジン、4−メトキシ−2−チオ−プソイドウリジン、4−メトキシ−プソイドウリジン、4−チオ−1−メチル−プソイドウリジン、4−チオ−プソイドウリジン、5−アザ−ウリジン、ジヒドロプソイドウリジン、5−メトキシウリジン及び2’−O−メチルウリジンからなる群から選択される、請求項7に記載のVZVワクチン。
- 前記オープンリーディングフレーム中のウラシルの100%が化学修飾を有する、請求項8に記載のVZVワクチン。
- 前記化学修飾がウラシルの5位にある、請求項7〜9のいずれか一項に記載のVZVワクチン。
- 前記化学修飾がN1−メチルプソイドウリジンである、請求項7〜10のいずれか一項に記載のVZVワクチン。
- 前記RNAポリヌクレオチドは、
(i)場合により7mG(5’)ppp(5’)N1mpNpであるか、これを含む、5’末端キャップと、
(ii)少なくとも1つのVZV抗原性ポリペプチドをコードするオープンリーディングフレームと、
(iii)3’ポリAテールと
を有する、請求項1〜11のいずれか一項VZVワクチン。 - 対象において抗原特異的免疫応答を誘導する方法にて使用するための請求項1〜12のいずれか一項に記載のVZVワクチンであって、前記方法は、抗原特異的免疫応答をもたらすのに有効な量で前記ワクチンを投与することを含む、前記VZVワクチン。
- 前記抗原特異的免疫応答がT細胞の応答またはB細胞の応答を含む、請求項13に記載のVZVワクチン。
- 前記方法が前記ワクチンの単回用量、または前記ワクチンの初回用量及び2回目(ブースター)用量の投与を含む、請求項13または14に記載のVZVワクチン。
- 前記ワクチンが、筋肉注射によって投与される、請求項13〜15のいずれか一項に記載のVZVワクチン。
- 前記有効量が50μg〜1000μgの総用量である、請求項13〜16のいずれか一項に記載のVZVワクチン。
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MA52262A (fr) | 2017-03-15 | 2020-02-19 | Modernatx Inc | Vaccin à large spectre contre le virus de la grippe |
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MA48047A (fr) | 2017-04-05 | 2020-02-12 | Modernatx Inc | Réduction ou élimination de réponses immunitaires à des protéines thérapeutiques administrées par voie non intraveineuse, par exemple par voie sous-cutanée |
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CN109602901B (zh) * | 2019-01-08 | 2022-05-27 | 成都迈科康生物科技有限公司 | 一种带状疱疹病毒疫苗及其制备方法和应用 |
US11351242B1 (en) | 2019-02-12 | 2022-06-07 | Modernatx, Inc. | HMPV/hPIV3 mRNA vaccine composition |
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US11851694B1 (en) | 2019-02-20 | 2023-12-26 | Modernatx, Inc. | High fidelity in vitro transcription |
CN115177724A (zh) * | 2019-06-28 | 2022-10-14 | 怡道生物科技(苏州)有限公司 | 一种重组带状疱疹疫苗组合物及其用途 |
CN112142829B (zh) * | 2019-06-28 | 2022-02-22 | 怡道生物科技(苏州)有限公司 | 水痘-带状疱疹病毒gE蛋白突变体及其表达方法 |
CN112870344B (zh) * | 2019-11-29 | 2022-07-19 | 北京绿竹生物技术股份有限公司 | 一种重组水痘带状疱疹病毒疫苗 |
CN113045670B (zh) * | 2019-12-27 | 2022-11-01 | 华南农业大学 | 一种可溶性鸡α干扰素融合蛋白及其生产方法与应用 |
CN113521268A (zh) | 2020-04-22 | 2021-10-22 | 生物技术Rna制药有限公司 | 冠状病毒疫苗 |
CN111840538A (zh) * | 2020-05-29 | 2020-10-30 | 中山大学 | 一种水痘-带状疱疹病毒亚单位纳米疫苗的制备方法和应用 |
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US11406703B2 (en) | 2020-08-25 | 2022-08-09 | Modernatx, Inc. | Human cytomegalovirus vaccine |
CN112386688B (zh) * | 2021-01-20 | 2021-09-24 | 广东新征程生命科学有限公司 | 一种用于病毒治疗的含有免疫细胞的药物组合物 |
CN113144186B (zh) * | 2021-02-09 | 2023-09-29 | 中国医学科学院医学生物学研究所 | 一种水痘-带状疱疹疫苗组合物及其制备方法和应用 |
US11524023B2 (en) | 2021-02-19 | 2022-12-13 | Modernatx, Inc. | Lipid nanoparticle compositions and methods of formulating the same |
CN113372453B (zh) * | 2021-06-11 | 2022-03-04 | 湖南兀邦生物科技有限公司 | 一种融合蛋白及猪流行性腹泻病毒s1蛋白重组亚单位疫苗 |
IL309505A (en) | 2021-09-03 | 2024-02-01 | CureVac SE | Lipid nanoparticles for nucleic acid delivery |
WO2023056912A1 (en) * | 2021-10-08 | 2023-04-13 | Suzhou Abogen Biosciences Co., Ltd. | Nucleic acid vaccines for vzv |
TW202327646A (zh) * | 2021-10-15 | 2023-07-16 | 美商輝瑞大藥廠 | Rna分子 |
WO2023073228A1 (en) | 2021-10-29 | 2023-05-04 | CureVac SE | Improved circular rna for expressing therapeutic proteins |
CN114081943B (zh) * | 2021-11-08 | 2024-04-02 | 中国医学科学院医学生物学研究所 | 一种水痘-带状疱疹mRNA疫苗组合物及其制备方法和应用 |
WO2023096963A1 (en) | 2021-11-24 | 2023-06-01 | Flagship Pioneering Innovations Vi, Llc | Varicella-zoster virus immunogen compositions and their uses |
WO2023145755A1 (ja) * | 2022-01-25 | 2023-08-03 | 公益財団法人川崎市産業振興財団 | 経皮投与用のrnaを含む組成物および当該組成物の投与方法 |
WO2023144330A1 (en) | 2022-01-28 | 2023-08-03 | CureVac SE | Nucleic acid encoded transcription factor inhibitors |
WO2023179588A1 (zh) * | 2022-03-21 | 2023-09-28 | 厦门大学 | 截短的水痘-带状疱疹病毒囊膜糖蛋白gE |
WO2023227608A1 (en) | 2022-05-25 | 2023-11-30 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | Nucleic acid based vaccine encoding an escherichia coli fimh antigenic polypeptide |
US11878055B1 (en) | 2022-06-26 | 2024-01-23 | BioNTech SE | Coronavirus vaccine |
CN117660494A (zh) * | 2022-09-07 | 2024-03-08 | 远大赛威信生命科学(南京)有限公司 | 用于表达水痘-带状疱疹病毒抗原蛋白的mRNA及其用途 |
CN116023510B (zh) * | 2022-12-01 | 2023-09-22 | 北京吉诺卫生物科技有限公司 | 双佐剂重组带状疱疹疫苗 |
CN116355917B (zh) * | 2023-02-15 | 2023-12-01 | 上海臻上医药科技有限公司 | 一种水痘-带状疱疹病毒mRNA疫苗及其应用 |
Family Cites Families (257)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
ES2200016T3 (es) | 1989-03-21 | 2004-03-01 | Vical Incorporated | Expresion de secuencias polinucleotidicas exogenas en un vertebrado. |
US6867195B1 (en) | 1989-03-21 | 2005-03-15 | Vical Incorporated | Lipid-mediated polynucleotide administration to reduce likelihood of subject's becoming infected |
FR2676072B1 (fr) | 1991-05-03 | 1994-11-18 | Transgene Sa | Vecteur de delivrance d'arn. |
US5795587A (en) | 1995-01-23 | 1998-08-18 | University Of Pittsburgh | Stable lipid-comprising drug delivery complexes and methods for their production |
US6214966B1 (en) | 1996-09-26 | 2001-04-10 | Shearwater Corporation | Soluble, degradable poly(ethylene glycol) derivatives for controllable release of bound molecules into solution |
EP0855184A1 (en) | 1997-01-23 | 1998-07-29 | Grayson B. Dr. Lipford | Pharmaceutical composition comprising a polynucleotide and an antigen especially for vaccination |
US6251665B1 (en) | 1997-02-07 | 2001-06-26 | Cem Cezayirli | Directed maturation of stem cells and production of programmable antigen presenting dentritic cells therefrom |
US6261281B1 (en) | 1997-04-03 | 2001-07-17 | Electrofect As | Method for genetic immunization and introduction of molecules into skeletal muscle and immune cells |
JP2001519162A (ja) | 1997-10-07 | 2001-10-23 | ユニバーシティ・オブ・メリーランド・バイオテクノロジー・インスティチュート | 動物細胞にrnaを導入して発現させる方法 |
US6432925B1 (en) | 1998-04-16 | 2002-08-13 | John Wayne Cancer Institute | RNA cancer vaccine and methods for its use |
CA2363141C (en) | 1999-02-26 | 2010-04-06 | Chiron Corporation | Microemulsions with adsorbed macromolecules and microparticles |
US6514948B1 (en) | 1999-07-02 | 2003-02-04 | The Regents Of The University Of California | Method for enhancing an immune response |
EP1619254B1 (en) | 1999-09-09 | 2010-12-22 | CureVac GmbH | Transfer of mRNA using polycationic compounds |
AU7398200A (en) | 1999-09-17 | 2001-04-24 | Aventis Pasteur Limited | Chlamydia antigens and corresponding dna fragments and uses thereof |
US7060291B1 (en) | 1999-11-24 | 2006-06-13 | Transave, Inc. | Modular targeted liposomal delivery system |
EP1301614B1 (en) | 2000-07-21 | 2006-11-29 | Glaxo Group Limited | Codon-optimized papilloma virus sequences |
US6998115B2 (en) | 2000-10-10 | 2006-02-14 | Massachusetts Institute Of Technology | Biodegradable poly(β-amino esters) and uses thereof |
US7708915B2 (en) | 2004-05-06 | 2010-05-04 | Castor Trevor P | Polymer microspheres/nanospheres and encapsulating therapeutic proteins therein |
ATE376434T1 (de) | 2001-04-21 | 2007-11-15 | Curevac Gmbh | Injektionsgerät für mrna applikation |
ES2340532T3 (es) | 2001-06-05 | 2010-06-04 | Curevac Gmbh | Arnm con un contenido g/c aumentado que codifica para un antigeno bacteriano y utilizacion del mismo. |
AU2002319668A1 (en) | 2001-07-27 | 2003-02-17 | President And Fellows Of Harvard College | Laminar mixing apparatus and methods |
CA2462593A1 (en) | 2001-10-03 | 2003-04-10 | Kam W. Leong | Compositions for oral gene therapy and methods of using same |
DE10162480A1 (de) | 2001-12-19 | 2003-08-07 | Ingmar Hoerr | Die Applikation von mRNA für den Einsatz als Therapeutikum gegen Tumorerkrankungen |
EP3006043B1 (en) | 2002-04-04 | 2019-05-29 | Zoetis Belgium S.A. | Immunostimulatory g,u-containing oligoribonucleotides |
AU2003217531A1 (en) | 2002-05-02 | 2003-11-17 | Massachusetts Eye And Ear Infirmary | Ocular drug delivery systems and use thereof |
DE10229872A1 (de) | 2002-07-03 | 2004-01-29 | Curevac Gmbh | Immunstimulation durch chemisch modifizierte RNA |
AU2003301148A1 (en) | 2002-12-23 | 2004-07-22 | Vical Incorporated | Codon-optimized polynucleotide-based vaccines against human cytomegalovirus infection |
DE602004021260D1 (de) | 2003-07-11 | 2009-07-09 | Alphavax Inc | Cytomegalovirusimpfstoffe, die auf dem alphavirus basieren |
DE10347710B4 (de) | 2003-10-14 | 2006-03-30 | Johannes-Gutenberg-Universität Mainz | Rekombinante Impfstoffe und deren Verwendung |
WO2005072710A2 (en) | 2004-01-28 | 2005-08-11 | Johns Hopkins University | Drugs and gene carrier particles that rapidly move through mucous barriers |
WO2006097793A2 (en) | 2004-04-15 | 2006-09-21 | Chiasma, Ltd. | Compositions capable of facilitating penetration across a biological barrier |
WO2006063249A2 (en) | 2004-12-10 | 2006-06-15 | Justin Hanes | Functionalized poly (ether-anhydride) block copolymers |
GB0504436D0 (en) * | 2005-03-03 | 2005-04-06 | Glaxosmithkline Biolog Sa | Vaccine |
ES2332062T3 (es) | 2005-04-01 | 2010-01-25 | Intezyne Technologies Incorporated | Micelas polimericas para el suministro de farmacos. |
WO2006110776A2 (en) | 2005-04-12 | 2006-10-19 | Nektar Therapeutics Al, Corporation | Polyethylene glycol cojugates of antimicrobial agents |
EP2279758B1 (en) | 2005-06-16 | 2015-02-25 | Nektar Therapeutics | Conjugates having a degradable linkage and polymeric reagents useful in preparing such conjugates |
ES2937245T3 (es) | 2005-08-23 | 2023-03-27 | Univ Pennsylvania | ARN que contiene nucleósidos modificados y métodos de uso del mismo |
DE102006007433A1 (de) | 2006-02-17 | 2007-08-23 | Curevac Gmbh | Adjuvanz in Form einer Lipid-modifizierten Nukleinsäure |
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AU2007280690C1 (en) | 2006-07-31 | 2012-08-23 | Curevac Gmbh | Nucleic acid of formula (I): GIXmGn, or (II): CIXmCn, in particular as an immune-stimulating agent/adjuvant |
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DE102006051516A1 (de) | 2006-10-31 | 2008-05-08 | Curevac Gmbh | (Basen-)modifizierte RNA zur Expressionssteigerung eines Proteins |
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DE102007001370A1 (de) | 2007-01-09 | 2008-07-10 | Curevac Gmbh | RNA-kodierte Antikörper |
EP2136788B1 (en) | 2007-03-30 | 2011-10-26 | Bind Biosciences, Inc. | Cancer cell targeting using nanoparticles |
CA2729011A1 (en) * | 2007-07-19 | 2009-01-22 | Novavax, Inc. | Varicella zoster virus-virus like particles (vlps) and antigens |
WO2009030254A1 (en) | 2007-09-04 | 2009-03-12 | Curevac Gmbh | Complexes of rna and cationic peptides for transfection and for immunostimulation |
US10736848B2 (en) | 2007-10-12 | 2020-08-11 | Massachusetts Institute Of Technology | Vaccine nanotechnology |
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WO2010005726A2 (en) | 2008-06-16 | 2010-01-14 | Bind Biosciences Inc. | Therapeutic polymeric nanoparticles with mtor inhibitors and methods of making and using same |
AU2009268923B2 (en) | 2008-06-16 | 2015-09-17 | Pfizer Inc. | Drug loaded polymeric nanoparticles and methods of making and using same |
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JP2012501966A (ja) | 2008-06-16 | 2012-01-26 | バインド バイオサイエンシズ インコーポレイテッド | ビンカアルカロイド含有治療用ポリマーナノ粒子並びにその製造方法及び使用方法 |
WO2010030763A2 (en) | 2008-09-10 | 2010-03-18 | Bind Biosciences, Inc. | High throughput fabrication of nanoparticles |
WO2010037408A1 (en) | 2008-09-30 | 2010-04-08 | Curevac Gmbh | Composition comprising a complexed (m)rna and a naked mrna for providing or enhancing an immunostimulatory response in a mammal and uses thereof |
AU2009303345B2 (en) | 2008-10-09 | 2015-08-20 | Arbutus Biopharma Corporation | Improved amino lipids and methods for the delivery of nucleic acids |
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CA2780482A1 (en) | 2008-11-17 | 2010-05-10 | Anil K. Sood | Hdl particles for delivery of nucleic acids |
JP2012512175A (ja) | 2008-12-15 | 2012-05-31 | バインド バイオサイエンシズ インコーポレイテッド | 治療薬を徐放するための長時間循環性ナノ粒子 |
WO2010088927A1 (en) | 2009-02-09 | 2010-08-12 | Curevac Gmbh | Use of pei for the improvement of endosomal release and expression of transfected nucleic acids, complexed with cationic or polycationic compounds |
JP5622254B2 (ja) | 2009-03-31 | 2014-11-12 | 国立大学法人東京大学 | 二本鎖リボ核酸ポリイオンコンプレックス |
EP2413964B1 (en) | 2009-04-01 | 2019-11-13 | University of Miami | Vaccine compositions and methods of use thereof |
WO2010127159A2 (en) | 2009-04-30 | 2010-11-04 | Intezyne Technologies, Incorporated | Polymeric micelles for polynucleotide encapsulation |
WO2011000106A1 (en) | 2009-07-01 | 2011-01-06 | Protiva Biotherapeutics, Inc. | Improved cationic lipids and methods for the delivery of therapeutic agents |
US20110300205A1 (en) | 2009-07-06 | 2011-12-08 | Novartis Ag | Self replicating rna molecules and uses thereof |
RU2573409C2 (ru) | 2009-11-04 | 2016-01-20 | Дзе Юниверсити Оф Бритиш Коламбиа | Содержащие нуклеиновые кислоты липидные частицы и относящиеся к ним способы |
WO2011069529A1 (en) | 2009-12-09 | 2011-06-16 | Curevac Gmbh | Mannose-containing solution for lyophilization, transfection and/or injection of nucleic acids |
EP2512487A4 (en) | 2009-12-15 | 2013-08-07 | THERAPEUTIC POLYMERNANOPARTICLES WITH CORTICOSTEROIDS AND METHOD FOR THE PRODUCTION AND USE THEREOF | |
JP5898627B2 (ja) | 2009-12-15 | 2016-04-06 | バインド セラピューティックス インコーポレイテッド | エポチロンを含む治療用ポリマーナノ粒子ならびにそれを製造および使用する方法 |
WO2011084513A2 (en) | 2009-12-15 | 2011-07-14 | Bind Biosciences, Inc. | Therapeutic polymeric nanoparticle compositions with high glass transition temperature or high molecular weight copolymers |
JP5988435B2 (ja) | 2010-01-24 | 2016-09-07 | ノバルティス アーゲー | 放射線照射された生分解性微粒子 |
WO2011119262A1 (en) | 2010-03-26 | 2011-09-29 | Cerulean Pharma Inc. | Methods and systems for generating nanoparticles |
US20110262491A1 (en) | 2010-04-12 | 2011-10-27 | Selecta Biosciences, Inc. | Emulsions and methods of making nanocarriers |
EP2387999A1 (en) | 2010-05-21 | 2011-11-23 | CureVac GmbH | Histidine-containing solution for transfection and/or injection of nucleic acids and uses thereof |
WO2011149733A2 (en) | 2010-05-24 | 2011-12-01 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Novel amino alcohol cationic lipids for oligonucleotide delivery |
US20130196948A1 (en) | 2010-06-25 | 2013-08-01 | Massachusetts Insitute Of Technology | Polymers for biomaterials and therapeutics |
NZ606591A (en) | 2010-07-06 | 2015-02-27 | Novartis Ag | Cationic oil-in-water emulsions |
DK2591114T3 (en) * | 2010-07-06 | 2016-08-29 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | Immunization of large mammals with low doses of RNA |
LT2590676T (lt) | 2010-07-06 | 2016-10-25 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | Viriono tipo išnešiojančios dalelės, skirtos besireplikuojančioms rnr molekulėms |
US9192661B2 (en) | 2010-07-06 | 2015-11-24 | Novartis Ag | Delivery of self-replicating RNA using biodegradable polymer particles |
US20130171241A1 (en) | 2010-07-06 | 2013-07-04 | Novartis Ag | Liposomes with lipids having an advantageous pka-value for rna delivery |
EP2449113B8 (en) | 2010-07-30 | 2015-11-25 | CureVac AG | Complexation of nucleic acids with disulfide-crosslinked cationic components for transfection and immunostimulation |
EP3578205A1 (en) | 2010-08-06 | 2019-12-11 | ModernaTX, Inc. | A pharmaceutical formulation comprising engineered nucleic acids and medical use thereof |
WO2012019630A1 (en) | 2010-08-13 | 2012-02-16 | Curevac Gmbh | Nucleic acid comprising or coding for a histone stem-loop and a poly(a) sequence or a polyadenylation signal for increasing the expression of an encoded protein |
US20120058154A1 (en) | 2010-08-20 | 2012-03-08 | Selecta Biosciences, Inc. | Synthetic nanocarrier vaccines comprising peptides obtained or derived from human influenza a virus m2e |
ES2918649T3 (es) | 2010-08-31 | 2022-07-19 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | Liposomas pegilados para el suministro de ARN que codifica un inmunógeno |
MX341989B (es) | 2010-08-31 | 2016-09-09 | Novartis Ag * | Liposomas pequeños para el suministro de arn que codifica el inmunogeno. |
RU2577983C2 (ru) | 2010-08-31 | 2016-03-20 | Новартис Аг | Липиды, подходящие для липосомной доставки кодирующей белок рнк |
WO2012039979A2 (en) | 2010-09-10 | 2012-03-29 | The Johns Hopkins University | Rapid diffusion of large polymeric nanoparticles in the mammalian brain |
US20120237975A1 (en) | 2010-10-01 | 2012-09-20 | Jason Schrum | Engineered nucleic acids and methods of use thereof |
BR112013008700B8 (pt) * | 2010-10-11 | 2022-10-04 | Novartis Ag | Molécula de rna auto-replicante, partícula de replicon de alfavírus, composição, molécula de dna recombinante, uso da molécula de rna auto-replicante |
US20150056300A1 (en) | 2010-10-22 | 2015-02-26 | Bind Therapeutics, Inc. | Therapeutic nanoparticles with high molecular weight copolymers |
EP2635254B1 (en) | 2010-11-05 | 2019-05-15 | The John Hopkins University | Compositions and methods relating to reduced mucoadhesion |
WO2012075040A2 (en) | 2010-11-30 | 2012-06-07 | Shire Human Genetic Therapies, Inc. | mRNA FOR USE IN TREATMENT OF HUMAN GENETIC DISEASES |
WO2012089225A1 (en) | 2010-12-29 | 2012-07-05 | Curevac Gmbh | Combination of vaccination and inhibition of mhc class i restricted antigen presentation |
WO2012099805A2 (en) | 2011-01-19 | 2012-07-26 | Ocean Nanotech, Llc | Nanoparticle based immunological stimulation |
JP6099573B2 (ja) * | 2011-01-31 | 2017-03-22 | ザ トラスティーズ オブ ザ ユニバーシティ オブ ペンシルバニア | 新規なヘルペス抗原をコードする核酸分子、それを含むワクチン及びその使用方法 |
US20140066363A1 (en) | 2011-02-07 | 2014-03-06 | Arun K. Bhunia | Carbohydrate nanoparticles for prolonged efficacy of antimicrobial peptide |
WO2012116715A1 (en) | 2011-03-02 | 2012-09-07 | Curevac Gmbh | Vaccination in newborns and infants |
WO2012113413A1 (en) | 2011-02-21 | 2012-08-30 | Curevac Gmbh | Vaccine composition comprising complexed immunostimulatory nucleic acids and antigens packaged with disulfide-linked polyethyleneglycol/peptide conjugates |
WO2012116714A1 (en) | 2011-03-02 | 2012-09-07 | Curevac Gmbh | Vaccination in elderly patients |
WO2012131106A1 (en) | 2011-03-31 | 2012-10-04 | Ingell Technologies Holding B.V. | Biodegradable compositions suitable for controlled release |
EP2691101A2 (en) | 2011-03-31 | 2014-02-05 | Moderna Therapeutics, Inc. | Delivery and formulation of engineered nucleic acids |
EP2691079B1 (en) | 2011-03-31 | 2020-06-24 | Ingell Technologies Holding B.V. | Biodegradable compositions suitable for controlled release |
US8691750B2 (en) | 2011-05-17 | 2014-04-08 | Axolabs Gmbh | Lipids and compositions for intracellular delivery of biologically active compounds |
CA2835428A1 (en) | 2011-05-17 | 2012-11-22 | Moderna Therapeutics, Inc. | Engineered nucleic acids and methods of use thereof for non-human vertebrates |
WO2012166923A2 (en) | 2011-05-31 | 2012-12-06 | Bind Biosciences | Drug loaded polymeric nanoparticles and methods of making and using same |
CN107115314B (zh) | 2011-06-02 | 2022-04-29 | 加利福尼亚大学董事会 | 膜包封的纳米颗粒及使用方法 |
WO2013006838A1 (en) | 2011-07-06 | 2013-01-10 | Novartis Ag | Immunogenic combination compositions and uses thereof |
EP2729168A2 (en) | 2011-07-06 | 2014-05-14 | Novartis AG | Immunogenic compositions and uses thereof |
ES2861428T3 (es) | 2011-07-06 | 2021-10-06 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | Liposomas que presentan una relación N:P útil para suministro de moléculas de ARN |
MX350258B (es) | 2011-07-06 | 2017-08-31 | Novartis Ag | Emulsiones cationicas de aceite en agua. |
ES2670944T3 (es) | 2011-07-21 | 2018-06-04 | Croda International Plc | Copolímeros de bloques de poliéter-poliamida ramificados y métodos de preparación y uso de los mismos |
KR20140051357A (ko) | 2011-08-26 | 2014-04-30 | 애로우헤드 리서치 코오포레이션 | In Vivo 핵산 전달용 폴리(비닐 에스테르) 고분자 |
KR20140067070A (ko) | 2011-08-31 | 2014-06-03 | 말린크로트 엘엘씨 | H-포스포네이트에 의한 나노입자 peg 개질 |
WO2013030778A2 (en) | 2011-09-02 | 2013-03-07 | Novartis Ag | Organic compositions to treat hsf1-related diseases |
WO2013039861A2 (en) | 2011-09-12 | 2013-03-21 | modeRNA Therapeutics | Engineered nucleic acids and methods of use thereof |
US9464124B2 (en) | 2011-09-12 | 2016-10-11 | Moderna Therapeutics, Inc. | Engineered nucleic acids and methods of use thereof |
WO2013044219A1 (en) | 2011-09-22 | 2013-03-28 | Bind Biosciences | Methods of treating cancers with therapeutic nanoparticles |
US9375388B2 (en) | 2011-09-23 | 2016-06-28 | Indian Institute Of Technology, Bombay | Nanoparticle based cosmetic composition |
CA2872033A1 (en) | 2011-10-11 | 2013-04-18 | Novartis Ag | Recombinant self-replicating polycistronic rna molecules |
WO2013056132A2 (en) | 2011-10-14 | 2013-04-18 | Stc.Unm | Porous nanoparticle-supported lipid bilayers (protocells) for targeted delivery including transdermal delivery of cargo and methods thereof |
PT3597644T (pt) | 2011-10-18 | 2021-11-03 | Dicerna Pharmaceuticals Inc | Lípidos catiónicos de amina e suas utilizações |
AU2012328570B2 (en) | 2011-10-27 | 2017-08-31 | Massachusetts Institute Of Technology | Amino acid derivatives functionalized on the n-terminus capable of forming drug encapsulating microspheres and uses thereof |
WO2013078199A2 (en) | 2011-11-23 | 2013-05-30 | Children's Medical Center Corporation | Methods for enhanced in vivo delivery of synthetic, modified rnas |
WO2013086373A1 (en) | 2011-12-07 | 2013-06-13 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Lipids for the delivery of active agents |
US20140378538A1 (en) | 2011-12-14 | 2014-12-25 | Moderma Therapeutics, Inc. | Methods of responding to a biothreat |
KR20140102759A (ko) | 2011-12-16 | 2014-08-22 | 모더나 세라퓨틱스, 인코포레이티드 | 변형된 뉴클레오사이드, 뉴클레오타이드 및 핵산 조성물 |
AU2012358384A1 (en) | 2011-12-21 | 2014-07-31 | Moderna Therapeutics, Inc. | Methods of increasing the viability or longevity of an organ or organ explant |
KR101811917B1 (ko) | 2012-01-19 | 2017-12-22 | 더 존스 홉킨스 유니버시티 | 점액 침투 강화를 나타내는 나노 입자 제형 |
WO2013113325A1 (en) | 2012-01-31 | 2013-08-08 | Curevac Gmbh | Negatively charged nucleic acid comprising complexes for immunostimulation |
EP3312155B1 (en) | 2012-02-03 | 2020-08-05 | Rutgers, The State University of New Jersey | Polymeric biomaterials derived from phenolic monomers and their medical uses |
JP2015513788A (ja) | 2012-02-10 | 2015-05-14 | イー・アイ・デュポン・ドウ・ヌムール・アンド・カンパニーE.I.Du Pont De Nemours And Company | 高度xジブロックコポリマーの製造、精製及び使用 |
US10501513B2 (en) | 2012-04-02 | 2019-12-10 | Modernatx, Inc. | Modified polynucleotides for the production of oncology-related proteins and peptides |
US9878056B2 (en) | 2012-04-02 | 2018-01-30 | Modernatx, Inc. | Modified polynucleotides for the production of cosmetic proteins and peptides |
CA2868398A1 (en) | 2012-04-02 | 2013-10-10 | Moderna Therapeutics, Inc. | Modified polynucleotides for the production of cosmetic proteins and peptides |
US9283287B2 (en) | 2012-04-02 | 2016-03-15 | Moderna Therapeutics, Inc. | Modified polynucleotides for the production of nuclear proteins |
US20150306249A1 (en) | 2012-05-25 | 2015-10-29 | Curevac Gmbh | Reversible immobilization and/or controlled release of nucleic acid containing nanoparticles by (biodegradable) polymer coatings |
EP3884949A1 (en) * | 2012-06-08 | 2021-09-29 | Translate Bio, Inc. | Pulmonary delivery of mrna to non-lung target cells |
US9512456B2 (en) | 2012-08-14 | 2016-12-06 | Modernatx, Inc. | Enzymes and polymerases for the synthesis of RNA |
US20150307542A1 (en) | 2012-10-03 | 2015-10-29 | Moderna Therapeutics, Inc. | Modified nucleic acid molecules and uses thereof |
WO2014071963A1 (en) | 2012-11-09 | 2014-05-15 | Biontech Ag | Method for cellular rna expression |
ES2676470T3 (es) | 2012-11-09 | 2018-07-19 | Biontech Rna Pharmaceuticals Gmbh | Método para la expresión de ARN en células |
JP6144355B2 (ja) | 2012-11-26 | 2017-06-07 | モデルナティエックス インコーポレイテッドModernaTX,Inc. | 化学修飾mRNA |
US9687448B2 (en) | 2012-12-07 | 2017-06-27 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Nucleic acid lipid particle formulations |
WO2014089486A1 (en) * | 2012-12-07 | 2014-06-12 | Shire Human Genetic Therapies, Inc. | Lipidic nanoparticles for mrna delivering |
WO2014093574A1 (en) | 2012-12-13 | 2014-06-19 | Moderna Therapeutics, Inc. | Modified polynucleotides for altering cell phenotype |
CN109045289A (zh) | 2013-02-22 | 2018-12-21 | 库瑞瓦格股份公司 | 疫苗接种和抑制pd-1途径的组合 |
JP6352950B2 (ja) * | 2013-03-08 | 2018-07-04 | ノバルティス アーゲー | 活性薬物の送達のための脂質と脂質組成物 |
WO2014160243A1 (en) | 2013-03-14 | 2014-10-02 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Purification and purity assessment of rna molecules synthesized with modified nucleosides |
US10258698B2 (en) | 2013-03-14 | 2019-04-16 | Modernatx, Inc. | Formulation and delivery of modified nucleoside, nucleotide, and nucleic acid compositions |
HUE055044T2 (hu) | 2013-03-14 | 2021-10-28 | Translate Bio Inc | MRNS-kódolt ellenanyagok bejuttatására szolgáló eljárások és készítmények |
US10138507B2 (en) | 2013-03-15 | 2018-11-27 | Modernatx, Inc. | Manufacturing methods for production of RNA transcripts |
US10077439B2 (en) | 2013-03-15 | 2018-09-18 | Modernatx, Inc. | Removal of DNA fragments in mRNA production process |
US20160032273A1 (en) | 2013-03-15 | 2016-02-04 | Moderna Therapeutics, Inc. | Characterization of mrna molecules |
US11377470B2 (en) | 2013-03-15 | 2022-07-05 | Modernatx, Inc. | Ribonucleic acid purification |
EP3388834B1 (en) * | 2013-03-15 | 2020-04-15 | Translate Bio, Inc. | Synergistic enhancement of the delivery of nucleic acids via blended formulations |
WO2014144711A1 (en) | 2013-03-15 | 2014-09-18 | Moderna Therapeutics, Inc. | Analysis of mrna heterogeneity and stability |
EP2983804A4 (en) | 2013-03-15 | 2017-03-01 | Moderna Therapeutics, Inc. | Ion exchange purification of mrna |
TW201534578A (zh) | 2013-07-08 | 2015-09-16 | Daiichi Sankyo Co Ltd | 新穎脂質 |
EP3677279A1 (en) | 2013-07-25 | 2020-07-08 | Calder Biosciences Inc. | Conformationally stabilized rsv pre-fusion f proteins |
JP6896421B2 (ja) | 2013-08-21 | 2021-06-30 | キュアバック アーゲー | 呼吸器合胞体ウイルス(rsv)ワクチン |
WO2015024667A1 (en) | 2013-08-21 | 2015-02-26 | Curevac Gmbh | Method for increasing expression of rna-encoded proteins |
US10385088B2 (en) | 2013-10-02 | 2019-08-20 | Modernatx, Inc. | Polynucleotide molecules and uses thereof |
EP3058082A4 (en) | 2013-10-18 | 2017-04-26 | ModernaTX, Inc. | Compositions and methods for tolerizing cellular systems |
US10821175B2 (en) * | 2014-02-25 | 2020-11-03 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Lipid nanoparticle vaccine adjuvants and antigen delivery systems |
CA2946751A1 (en) | 2014-04-23 | 2015-10-29 | Modernatx, Inc. | Nucleic acid vaccines |
EP3154576A1 (en) | 2014-06-13 | 2017-04-19 | GlaxoSmithKline Biologicals S.A. | Immunogenic combinations |
WO2015196128A2 (en) | 2014-06-19 | 2015-12-23 | Moderna Therapeutics, Inc. | Alternative nucleic acid molecules and uses thereof |
AU2015289573A1 (en) | 2014-07-17 | 2017-02-02 | Modernatx, Inc | Terminal modifications of polynucleotides |
BR112017012647A2 (pt) * | 2014-12-18 | 2018-01-09 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | composição imunogênica, método para proteção contra ou prevenção de herpes zoster (hz) e/ou neuralgia pós-herpética, e, método para proteção contra, prevenção ou redução da incidência de herpes zoster e/ou neuralgia pós-herpética. |
US20180000953A1 (en) | 2015-01-21 | 2018-01-04 | Moderna Therapeutics, Inc. | Lipid nanoparticle compositions |
WO2016164762A1 (en) | 2015-04-08 | 2016-10-13 | Moderna Therapeutics, Inc. | Polynucleotides encoding low density lipoprotein receptor egf-a and intracellular domain mutants and methods of using the same |
CA2984125A1 (en) | 2015-04-27 | 2016-11-03 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Nucleoside-modified rna for inducing an adaptive immune response |
WO2016201377A1 (en) | 2015-06-10 | 2016-12-15 | Moderna Therapeutics, Inc. | Targeted adaptive vaccines |
WO2016203025A1 (en) | 2015-06-17 | 2016-12-22 | Curevac Ag | Vaccine composition |
WO2017015457A1 (en) | 2015-07-21 | 2017-01-26 | Modernatx, Inc. | Ebola vaccine |
ES2937963T3 (es) | 2015-07-21 | 2023-04-03 | Modernatx Inc | Vacunas de enfermedad infecciosa |
US20190008887A1 (en) | 2015-07-30 | 2019-01-10 | ModernaTX Inc. | Multimeric mrna |
WO2017020026A1 (en) | 2015-07-30 | 2017-02-02 | Modernatx, Inc. | Concatemeric peptide epitopes rnas |
WO2017031232A1 (en) | 2015-08-17 | 2017-02-23 | Modernatx, Inc. | Methods for preparing particles and related compositions |
US20180237849A1 (en) | 2015-08-17 | 2018-08-23 | Modernatx, Inc. | Rna mapping/fingerprinting |
AU2016324310B2 (en) | 2015-09-17 | 2021-04-08 | Modernatx, Inc. | Compounds and compositions for intracellular delivery of therapeutic agents |
WO2017062513A1 (en) | 2015-10-05 | 2017-04-13 | Modernatx, Inc. | Methods for therapeutic administration of messenger ribonucleic acid drugs |
WO2017066789A1 (en) | 2015-10-16 | 2017-04-20 | Modernatx, Inc. | Mrna cap analogs with modified sugar |
PL3718565T3 (pl) | 2015-10-22 | 2022-09-19 | Modernatx, Inc. | Szczepionki przeciwko wirusom układu oddechowego |
MA46255A (fr) | 2015-10-22 | 2019-07-31 | Modernatx Inc | Vaccins anticancéreux |
EP3364981A4 (en) | 2015-10-22 | 2019-08-07 | ModernaTX, Inc. | VACCINE AGAINST THE HUMAN CYTOMEGALOVIRUS |
MA46024A (fr) | 2015-10-22 | 2019-07-03 | Modernatx Inc | Vaccin contre le virus de l'herpès simplex |
CN108472354A (zh) | 2015-10-22 | 2018-08-31 | 摩登纳特斯有限公司 | 呼吸道合胞病毒疫苗 |
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WO2017127750A1 (en) | 2016-01-22 | 2017-07-27 | Modernatx, Inc. | Messenger ribonucleic acids for the production of intracellular binding polypeptides and methods of use thereof |
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MA45053A (fr) | 2016-05-18 | 2019-03-27 | Modernatx Inc | Polynucléotides codant pour un régulateur de conductance transmembranaire de fibrose kystique pour le traitement de la fibrose kystique |
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MA45037A (fr) | 2016-05-18 | 2019-03-27 | Modernatx Inc | Polythérapie à base d'arnm pour le traitement du cancer |
MA45032A (fr) | 2016-05-18 | 2019-03-27 | Fundacion Para La Investig Medica Aplicada | Polynucléotides codant pour la porphobilinogène désaminase destinés au traitement de la porphyrie intermittente aiguë |
CA3024500A1 (en) | 2016-05-18 | 2017-11-23 | Modernatx, Inc. | Polynucleotides encoding relaxin |
WO2017201332A1 (en) | 2016-05-18 | 2017-11-23 | Modernatx, Inc. | Polynucleotides encoding acyl-coa dehydrogenase, very long-chain for the treatment of very long-chain acyl-coa dehydrogenase deficiency |
WO2017201348A1 (en) | 2016-05-18 | 2017-11-23 | Modernatx, Inc. | Polynucleotides encoding galactose-1-phosphate uridylyltransferase for the treatment of galactosemia type 1 |
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CN116837052A (zh) | 2016-09-14 | 2023-10-03 | 摩登纳特斯有限公司 | 高纯度rna组合物及其制备方法 |
JP6980780B2 (ja) | 2016-10-21 | 2021-12-15 | モデルナティーエックス, インコーポレイテッド | ヒトサイトメガロウイルスワクチン |
BR112019008481A2 (pt) | 2016-10-26 | 2020-03-03 | Curevac Ag | Vacinas de mrna de nanopartículas lipídicas |
WO2018081462A1 (en) | 2016-10-26 | 2018-05-03 | Modernatx, Inc. | Methods and compositions for rna mapping |
BR112019008369A2 (pt) | 2016-10-26 | 2019-10-01 | Modernatx Inc | ácidos ribonucleicos mensageiros para intensificar respostas imunes e métodos para uso dos mesmos |
WO2018089851A2 (en) | 2016-11-11 | 2018-05-17 | Modernatx, Inc. | Influenza vaccine |
MA50335A (fr) | 2016-12-08 | 2020-08-19 | Modernatx Inc | Vaccins à acide nucléique contre des virus respiratoires |
WO2018111967A1 (en) | 2016-12-13 | 2018-06-21 | Modernatx, Inc. | Rna affinity purification |
US20180243225A1 (en) | 2017-01-25 | 2018-08-30 | Modernatx, Inc. | Ebola/marburg vaccines |
MA47438A (fr) | 2017-02-01 | 2019-12-11 | Modernatx Inc | Structure secondaire de polynucléotide |
KR20190110612A (ko) | 2017-02-01 | 2019-09-30 | 모더나티엑스, 인크. | 활성화 종양유전자 돌연변이 펩티드를 인코드하는 면역조절 치료 mrna 조성물 |
KR20190120233A (ko) | 2017-02-01 | 2019-10-23 | 모더나티엑스, 인크. | Rna 암 백신 |
MA47515A (fr) | 2017-02-16 | 2019-12-25 | Modernatx Inc | Compositions immunogènes très puissantes |
US20200368162A1 (en) | 2017-02-24 | 2020-11-26 | Modernatx, Inc. | Nucleic Acid-Based Therapy of Muscular Dystrophies |
WO2018170256A1 (en) | 2017-03-15 | 2018-09-20 | Modernatx, Inc. | Herpes simplex virus vaccine |
HUE060693T2 (hu) | 2017-03-15 | 2023-04-28 | Modernatx Inc | Vegyület és készítmények terápiás szerek intracelluláris bejuttatására |
US11045540B2 (en) | 2017-03-15 | 2021-06-29 | Modernatx, Inc. | Varicella zoster virus (VZV) vaccine |
WO2018170260A1 (en) | 2017-03-15 | 2018-09-20 | Modernatx, Inc. | Respiratory syncytial virus vaccine |
MA52262A (fr) | 2017-03-15 | 2020-02-19 | Modernatx Inc | Vaccin à large spectre contre le virus de la grippe |
US20200030432A1 (en) | 2017-03-17 | 2020-01-30 | Modernatx, Inc. | Zoonotic disease rna vaccines |
US20200038499A1 (en) | 2017-03-22 | 2020-02-06 | Modernatx, Inc. | Rna bacterial vaccines |
MA48047A (fr) | 2017-04-05 | 2020-02-12 | Modernatx Inc | Réduction ou élimination de réponses immunitaires à des protéines thérapeutiques administrées par voie non intraveineuse, par exemple par voie sous-cutanée |
MA49463A (fr) | 2017-04-26 | 2021-05-05 | Modernatx Inc | Vaccin contre le virus de l'herpès simplex |
WO2018232357A1 (en) | 2017-06-15 | 2018-12-20 | Modernatx, Inc. | Rna formulations |
WO2018232355A1 (en) | 2017-06-15 | 2018-12-20 | Modernatx, Inc. | Rna antibodies |
MA49922A (fr) | 2017-08-18 | 2021-06-02 | Modernatx Inc | Procédés pour analyse par clhp |
EP3668522A4 (en) | 2017-08-18 | 2021-04-21 | Modernatx, Inc. | EFFECTIVE RNA-BASED VACCINES |
JP7408098B2 (ja) | 2017-08-18 | 2024-01-05 | モデルナティエックス インコーポレイテッド | Rnaポリメラーゼバリアント |
US11866696B2 (en) | 2017-08-18 | 2024-01-09 | Modernatx, Inc. | Analytical HPLC methods |
US10653767B2 (en) | 2017-09-14 | 2020-05-19 | Modernatx, Inc. | Zika virus MRNA vaccines |
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AU2019293244A1 (en) | 2018-06-27 | 2021-02-11 | Modernatx, Inc. | Personalized cancer vaccine epitope selection |
US20220054653A1 (en) | 2018-09-13 | 2022-02-24 | Modernatx, Inc. | Modified mrna for the treatment of progressive familial intrahepatic cholestasis disorders |
EP3852732A1 (en) | 2018-09-19 | 2021-07-28 | ModernaTX, Inc. | Peg lipids and uses thereof |
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WO2020190750A1 (en) | 2019-03-15 | 2020-09-24 | Modernatx, Inc. | Hiv rna vaccines |
EP3976057A4 (en) | 2019-05-31 | 2023-08-30 | ModernaTX, Inc. | EXPANDED T LYMPHOCYTE ASSAY |
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