TW201000132A - Immunoglobulin variants and uses thereof - Google Patents

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TW201000132A
TW201000132A TW098128310A TW98128310A TW201000132A TW 201000132 A TW201000132 A TW 201000132A TW 098128310 A TW098128310 A TW 098128310A TW 98128310 A TW98128310 A TW 98128310A TW 201000132 A TW201000132 A TW 201000132A
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thr
leu
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TW098128310A
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Camellia W Adams
Andrew C Chan
Craig W Crowley
Henry B Lowman
Gerald R Nakamura
Leonard G Presta
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Genentech Inc
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201000132 六、發明說明： 【發明所屬之技術領域】 本發明係關於抗_CD20抗體’及其在治療B-細胞相關疾 病上之用途。 【先前技術】 淋巴球是數群白血球細胞中的一群；其可專一性辨識外 來的抗原，並產生反應。主要三類的淋巴球為B淋巴球（B 細胞）、T淋巴球（T細胞）及自然殺手（NK)細胞。B淋巴球是 負責產生抗體的細胞，及提供體液免疫作用。B細胞在骨 髓中進行熟化，並使其細胞表面上留下骨髓表面抗原-鍵 結抗體，當天然B細胞首次遇到與其膜-鍵結抗體具有專一 性的抗原時，細胞便開始快速分裂，而其子細胞可分化成 記憶B細胞及所謂漿細胞之效應子細胞。記憶B細胞具有 較長的生命週期，並且可以持續表現出與原來母細胞具有 相同專一性之膜-鍵結抗體，但漿細胞則不會產生膜·鍵結 抗體，而是產生分泌形式的抗體。分泌型抗體是體液免疫 的主要效應子分子。 CD20抗原（亦稱為人類B-淋巴球-限制性分化抗原， Bp3 5)是位於前-B細胞及成熟B淋巴球上之疏水性穿膜蛋 白，分子量約 35 kD(Valentine 等人，《/·所〇/. C/zew. 264(19):11282-11287 (1989);及 Einfeld等人，EMBO J. 7(3):711-717 (1988))，該抗原亦表現於90%以上的非-何傑金氏淋巴 瘤（NHL)B 細胞上（Anderson 等人，63(6):1424-1433 (1984))，但造血幹細胞、前-B細胞、正常漿細胞或其他正 142593.doc 201000132 常組織均未發現該抗原（Tedder等人，《/./讲《1««〇/· 135(2):973-979(1985))。CD20被認為可調節細胞週期啟動 及分化作用之活化過程的早期步驟（Tedder等人.，#逑），並 可能是作為飼離子通道的功能（Tedder等人，,CW人 Biochem. 14D:195 (1990)) 〇 由於CD20在B細胞淋巴瘤上的表現，此抗原業已成為此 類淋巴瘤一個有用的治療標靶。在美國超過300,000人罹 患B-細胞NHL，且每年超過56,000診斷出為新病例。例 如，利特西馬（rituximab)(RITUXAN®)抗體（係以遺傳工程 方式生產之抗人類CD20抗原之老鼠/人類嵌合性單株抗 體，購自Genentech公司，南三蕃市，加州，美國）可用以 治療罹患CD20陽性之復發性或低惡性度或濾泡性非-何傑 金氏B細胞淋巴瘤。利特西馬係1998年4月7日公佈之美國 專利5,736，137號（Anderson等人）中所指之"C2B8"抗體。活 體外作用研究機制已證明RITUXAN®可與人類補體鍵結， 並經由補體-依賴性細胞毒性（CDC)溶解淋巴B細胞株（Reff 等人。5/ooi/ 83(2):435-445(1994))，除此之外，其在抗體-依賴性細胞媒介細胞毒性（ADCC)分析上具有顯著的活 性。活體内臨床前研究已證明RITUXAN®可能會藉由補體 及細胞-媒介過程來減損食蟹猴週邊血液、淋巴結及骨髓 中的 B細胞（Reff等人，5/oW 83(2):435-445(1994))。其他 用來治療NHL的抗-CD20抗體包括老鼠抗體ZevalinTM(其鍵 結放射性同位素釔-90 ; IDEC藥廠、聖地牙哥，加州）、 BexxarTM(另一種共軛1-131的完全老鼠抗體（卡利西城，華 142593.doc 201000132 盛頓州））。 在人類治療上使用老鼠抗體的主要限制是人類抗-老鼠 抗體（human anti-mouse antibody ; HAMA)反應（參見，例 如，Miller, R.A.等人，"七位罹患T-細胞淋巴瘤中進行的 單株抗體治療試驗62:988-995，1983 ;及 Schroff， R.W.，等人，”病患接受單株抗體治療之人類抗-老鼠免疫球 蛋白反應"Career及以·，45:879-885，1985)。即使是其中墙 齒動物抗體之可變區域（V)融合至人類固定區域（C)之嵌合 性分子，其仍會引發明顯的免疫反應（人類抗-嵌合性抗體 (HACA ; human anti-chimeric antibody))(Neuberger等人， iVWwre(倫敦），314:268-270，（1985)。克服這些於臨床使 用單株抗體的限制性之有利方法是將老鼠抗體或源自非-人類物種之抗體進行”人源化作用"（Jones等人，(倫 敦），321:522-525，1986 ; Riechman等人，(倫敦）， 332:323- 327 (1988) ° 據此，製備當投與病患時（特別是慢性治療）會產生最低 或不具有抗原性之抗CD20抗原之治療性抗體是有益處 的，本發明即可滿足此一需求及其他的需求。本發明提供 抗-CD20抗體，其可克服近來治療用組合物之限制性，及 具有後文將詳述之其他額外優點。 【發明内容】 本發明提供CD20鍵結抗體或其具有功能性的片段，及 其在治療Β-細胞相關疾病上的用途，這些抗體為單株抗 體。在特定的具體實例中，鍵結CD20的抗體是人源彳匕或 142593.doc 201000132 嵌合性抗體。人源化2H7變異體包括在FR具有胺基酸取代 作用的變異體，及在移植CDRs上具有經改變親和力熟化 變異體。CDR或FR中的取代胺基酸不侷限於本發明供體抗 體或接受抗體中所含有者。在其他具體實例中，本發明 抗-CD20抗體另外包括改變Fc區域中的胺基酸殘基（其可增 進效應子功能，包括增強CDC及/或ADCC功能及殺死B-細 胞（亦係本專利說明所稱B-細胞減損））。本發明其他抗-CD20抗體包括具有能增進穩定性之特殊變化者。在一個 特定具體實例中，具有較高穩定性的人源化2H7變異體揭 示於後文實例6中。在一個具體實例中，嵌合性抗-CD20抗 體係具有老鼠的V區域及人類的C區域，此一種之特定嵌 合性抗-CD20抗體為Rituxan®(利特西馬® ; Genentech公 司）。 在本發明所用之所有抗體組合物及方法中一個較佳的具 體實例中，人源化CD20鍵結抗體2H7.V16，其具有分別示 於圖6(8£(^10 1^0.21)及圖7(8£〇1〇]^0.22)之輕鏈及重鏈 胺基酸序列。除了本專利說明書所揭示之胺基酸取代作用 位置外，所有以16變異體為基礎之其他變異體均具有vl6 的胺基酸序列。除非另有所指，2H7變異體具有與vl6相同 的L鏈。 本發明提供一可鍵結人類CD20的人源化抗體，或其抗 原-鍵結片段，其中該抗體可有效地減損靈長動物活體内 的B細胞，該抗體包括在Η鏈可變區域（VH)至少有一源自 抗-人類CD20抗體之CDR3序列（SEQ ID N0.12)，及實質上 142593.doc 201000132 人類亞型III重鏈（VHIII)的人類一致性架構（FR)殘基。在一 個具體實例中，靈長動物B細胞係來自人類及食蟹猴。在 一個具體實例中，該抗體另外包括重鏈CDR1序列（SEQ ID NO·10)及CDR2序列（SEQIDNO·11)。在另一個具體實例 中，前述抗體包括輕鏈CDR1序列（SEQ ID N0.4)、CDR2序 列（SEQ ID NO.5)、CDR3序列（SEQ ID NO.6)，及實質地人 類輕鏈κ亞型I(VkI)的人類一致性架構（FR)殘基。本專利說 明書中"實質地"係指包含某些胺基酸取代作用之序列，例 如，每一 FR序列（FR1、FR2等）具有不同於原始序列的一 或兩個胺基酸取代作用。 前述具體實例之抗體包括示於圖1B中vl6之VH序列（SEQ ID NO.8)，在前述的另一個具體實例中，抗體另外包括示 於圖 1A 中 vl6之 VL序列（SEQ ID NO.2)。 在其他具體實例中，人源化抗體是具有分別示於圖6 (8£(^10 1^0.2)及圖8(8£(5 10]^0.：23)之輕鏈及重鏈胺基酸 序列之2^17^31;2117^31具有示於圖8中3£(5 10 1^0.23之 胺基酸序列的重鏈；2H7.V96則在vl6之Η鏈的D56A及 Ν100Α及L鏈的S92A具有胺基酸取代作用。 在另一個具體實例中，任何前述具體實例之抗體另外包 括至少在Fc區域有一個胺基酸取代作用，其可使ADCC及/ 或CDC活性超越原衍生的原始或親本抗體者。v. 16是最常 用以比較之親本抗體例子。一種具有此改良活性之抗體係 包括在Fc區域具有8298八化3 33人/1<：334八之三個丙胺酸取代 作用者。一種具有S298A/E333A/K334A取代作用之抗體為 142593.doc 201000132 具有SEQ ID ΝΟ·23重鏈胺基酸序列之2H7.V31。抗體 2H7.V114及2H7.V115與Rituxan相較顯示至少有10倍強的 ADCC活性。 在另一個具體實例中，該抗體包括至少在Fc區域有一個 胺基酸取代作用’其較所源自的親本抗體之CDC活性低， vl 6是最常用以比較之抗體例子。一種具有較vl6低cdc活 性之此抗體包括至少在重鏈上包含K3 22 A取代作用者。 ADCC及CDC活性的比較可以實例中所揭示者分析之。 在一較佳的具體實例中，本發明抗體為全長抗體，其中 VH區域接合至人類IgG重鏈固定區域上，在一個較佳的具 體實例中’ IgG為人類的igG14IgG3。 在一個具體實例中’ CD20鍵結抗體鍵結至一細胞毒性 劑上’在較佳的具體實例中，該細胞毒性劑為毒素或放射 性活性同位素。 在一個具體實例中，作為治療或診斷目的所用之本發明 抗體係於CHO細胞中產生。 本發明亦提供一包括前述具體實例中之任一抗體及載劑 之組合物。在一個具體實例中，該載劑為醫藥學上可接受 之載劑。這些組合物可為產品中的一物品或套組。 本發明亦提供一編碼本專利說明書所揭示任一抗體之經 分離核酸，包括用以表現該抗體之表現載體。 本發明另一方面係包括前述核酸之宿主細胞，及用以產 生該抗體之宿主細胞’後者較佳的具體實例中，該宿主細 胞為CHO細胞。本發明亦提供製備這些抗體的方法，該方 142593.doc 201000132 法包括培養可產生該抗體之宿主細胞，及自細胞培養中回 收該抗體。 本發明另一個方面係一製造產品，其包括容器及其内含 的組合物’其中該組合物包括前述具體實例中任一抗體。 以治療NHL用途而言，該製造產品另外包括用以說明該組 合物係為治療非-何傑金氏淋巴瘤用之包裝插頁。 本發明另一方面係誘發活體内B細胞凋零作用的方法， 包括將B細胞與前述任一抗體接觸反應，藉此殺死8細 胞。 本發明亦提供治療本專利說明書中所揭示的疾病之方 法’其係藉投與患病哺乳動物（諸如人類病患）CD2〇鍵結抗 體或其功能性片段。在任一治療自體免疫疾病或(：1)2〇陽 性癌症之方法中，在一個具體實例中，抗體為具有分別示 於圖6及圖7中SEQ ID NO.21及22之輕鏈及重鏈胺基酸序列 之2H7.V16。據此，一個具體實例係一治療CD2〇陽性癌症 ❹ 之方法，其包括投與癌症病患一有效治療量之本發明人源 化CD20鍵結抗體。在較佳的具體實例中，CD20陽性癌症 為B細胞淋巴瘤或白血症，包括非何傑金氏淋巴瘤（NHL) 或淋巴球優勢何傑金氏疾病（LPHp)、慢性淋巴球性白血_病 (CLL)或SLL。在一個治療B細胞淋巴瘤或白血症之具體實 例方法中，該抗體投與劑量範圍約275-375毫克/平方米。 在另一具體實例中’治療方法另外包括投與病患至少一種 化學治療劑’其中以非-何傑金氏淋巴瘤而言，該化學治療劑 選自由杜瑟陸負辛（doxorubicin)、環磷酿胺（CyCi〇ph〇sphamide)、 142593.doc 201000132 威利司汀（vincristine)及去氫可體醇（prednis〇1〇ne)所組之 群。 本發明亦提供一種治療自體免疫疾病之方法，其包括投 與罹患自體免疫疾病病患一治療有效量之前述任一聲明之 人源化CD20鍵結抗體。自體免疫疾病係選自類風濕性關 節炎、青少年類風濕性關節炎、全身性紅斑性狼瘡 (SLE)、緯格納氏疾病、發炎性腸疾病、特發性血小板低 下篡斑症（ITP)、血栓性血小板低下紫斑症（ττρ)、自體免 疫企小板減少、多發性硬皮症、牛皮癖、IgA腎病變、IgM 多發性神經病變、重症肌無力、血管炎、糖尿病、雷諾氏 症候、修格連氏症候及腎絲球腎炎所組之群。當自體免疫 疾病為類風濕性關節炎時，該抗體可另—種治療劑合併投 用’較佳者為甲胺喋呤。 在這些治療方法中，CD20鍵結抗體可單獨投用，或與 另一種治療劑（諸如另一種抗體）或化學治療劑或免疫抑制 劑合併投用。另一種抗體可以是為與CD20鍵結的抗體或 與不同B細胞抗原，或NK或T細胞抗原鍵結的抗體。在一 個具體實例中，另一種抗體為放射性標記的抗_CD2(u^ 體。在另一個具體實例中，該CD20鍵結抗體係共軛至一 細胞毒性劑上’包括毒素或放射性活性同位素。 另一方面’本發明提供一種治療自體免疫疾病的方法， 該自體免疫疾病選自由皮肌炎、瑋格納氏肉芽腫、 ANCA、再生障礙性貧血症、自體免疫溶血貧血症 (AIHA)、因子vih缺少、a型血友病、自體免疫嗜中性白 142593.doc -10- 201000132 血球缺乏症、卡斯特萊曼氏症候、古德巴斯德氏症候、固 形器官移植排斥作用、移植物抗宿主疾病（GVHD)、IgM媒 介之血栓性血小板低下紫斑症（TTP)、橋本氏甲狀腺炎、 自體免疫肝炎、淋巴細胞間質性肺炎（HIV)、阻塞性支氣 管炎（非移植）相對NSIP、居揚-巴赫症候、大血管血管炎、 巨細胞（高安氏）動脈炎、中血管血管炎、川涛氏疾病、結 節性多動脈炎所組之群，其包括投與患病者一治療有效量 之CD20鍵結抗體。在此方法一個具體實例中，CD20鍵結 參 抗體為Rituxan®。 揚-巴赫症候、大血管血管炎、巨細胞（高安氏）動脈炎、 中jk管血管炎、川琦氏疾病、結節性多動脈炎所組之群， 其包括投與患病者一治療有效量之CD20鍵結抗體。在此 方法一個具體實例中，CD20鍵結抗體為Rituxan®。 本發明亦提供一包括食蟹猴CD20之核苷酸序列SEQ ID NO. : 24之經分離核酸（圖19所示），或此序列之退化變異體。 φ 一個具體實例是包括編碼具有經保守性胺基酸取代作用之 胺基酸序列SEQ ID N0.25(圖20所示）或SEQ ID ΝΟ·25(圖 20所示）之聚肽序列之經分離核酸。另一具體實例是包括 前述核酸之載體，其包括於宿主細胞中表現的表現載體。 本發明亦包括該載體之宿主細胞。本發明亦提供一包括食 蟹猴CD20胺基酸序列[SEQ ID NO.25 ;圖20]之經分離聚 肽。 【實施方式】 "CD20”抗原係一分子量約35 kD之非-醣化、穿膜磷蛋 142593.doc 201000132 白，90%以上源自週邊血液或淋巴器官之B細胞表面上均 發現有其存在。CD20係在前-B細胞發育的早期表現，且 直至漿細胞分化作用仍存在；但其在人類幹細胞、淋巴母 細胞或正常漿細胞上並未發現，正常B細胞及惡性B細胞 兩者均存在著CD20。文獻中CD20的其他名稱包括"B-淋巴 球-限制性分化抗原"及”Bp35"。CD20抗原係由，例如， ClarkA Ledbetter > Can. Res. 52:81-149 (1989)^. Valentine 等人/·价264(19):11282-11287 (1989)所揭示。 所用"抗體”一詞係指最廣泛的定義，明確言之，是涵蓋 單株抗體（包括全長的單株抗體）、多專一性抗體（例如，雙 專一性抗體），及抗體片段，只要這些抗體呈現所要的生 物活性或功能即可。 本發明CD20鍵結抗體及人源化CD20鍵結抗體之生物活 性包括至少該抗體可鍵結至人類CD20上，更佳者係可鍵 結至人類及其他靈長動物之CD20(包括，食蟹猴、恆河 猴、黑猩猩）。該抗體鍵結CD20的1^值不高於1χ10_8，較 佳地是{^值不高於1χ10_9，且當與適當未經此一抗體處理 之陰性控制組比較時，較佳至少能夠殺死或減損活體内 20%的B細胞，B細胞減損是一或多種ADCC、CDC、細胞 凋零，或其他機制所造成的結果。在本專利說明書中某些 疾病治療的具體實例中，所要的特定效應子功能或機制需 求高過其他者，且人源化2H7的某些變異體較佳具有該等 生物功能，諸如ADCC。 "抗體片段"包括全長抗體的一部分，通常係其抗原鍵結 142593.doc -12- 201000132 區域或可變區域。抗體片段的實例包括Fab、Fab,、 F(ab’)2，及Fv片段；雙抗體；直線抗體；單鏈抗體分子丨 及由抗體片段所形成之多專一性抗體。 ’ "Fv"係包含一完整的抗原_辨識及抗原-鍵結位置之最小 抗體片段’此片段係由一個重鏈及一個輕鏈的可變區域以 緊密、非-共價鍵方式所結合之雙體。此兩個1域的交疊 產生六個超變化曲環（每個H&L鏈各有3個曲環），此曲環 ❹提供抗原鍵結之絲酸殘基及料與抗體之抗原鍵結專一 性。然而’即使是一個單一可變區域（或包括僅有對抗原 有專一性之三個CDRs之Fv的一半）仍具有辨識及鍵結抗原 之能力，雖然其較完整鍵結位置的親和力低。 本專利說明書中所用，，單株抗體，，係指自一群實質同源抗 體所獲得之抗體，換言之，除了可能存在有自然發生之少 里突變作用外，抗體群中所包括之個別抗體均等同。單株 抗體具有高度專一性，其對抗單一抗原位置，除此之外， ❹ 與典型地包括對抗不同抗原決定子（抗原子）之傳統抗體（多 株抗體）製劑相異之處是，每一單株抗體係對抗抗原上單 一抗原決定子。修飾語”單株”係指實質上獲自均質抗體群 之抗體的特性，並不能解釋為以任何特定方法所需製備之 抗體。例如，根據本發明所用的單株抗體可為以K〇hler等 人，256495 (1975)首次揭示的融合瘤方法製備 者，或以重組DNA方法（參考，例如，美國專利第4,816,567 號）製備者，例如，亦可利用ciackson等人352:624_ 628 (1991)及Marks等人 ’/· Μο/· 222 : 581-597 (1991)所 142593.doc -13- 201000132 揭不之技術從嗜菌體抗體庫中分離出"單株抗體”。 本發明CD20鍵結抗體之”功能片段”係指仍以與完整全長 抗體鏈分子實質性相同親和力鍵結至CD2〇，並衍生自全 長抗體鏈分子之片段者，且其顯#包括具有以活體外或活 體内分析法（諸如本專利說明書中所揭示者）所測定之減損 B細胞的生物活性。 ”可變區"一詞係指抗體間某些可變區域片段之序列普遍 不相同，V區域會媒介抗原鍵結，且界定了特定抗體對其 特定抗原的專一性，然而，可變性並非平均地分布在可變 區域的110胺基酸範圍中，取而代之的是，v區域係由數個 15-30個胺基酸相當恆定片段之架構區域（framew〇rk regions ’· FRs)所組成，該等恆定片段則被稱為"超變化區 域"之9-12個胺基酸長度之極度變化性短區域區隔開，天 然的重鏈及輕鏈之可變區域各包括四個FRs(大部分係採卜 疊板架構）’其被三個超變化區域連接起來（其形成曲環接 合）’而在某些情況下會形成部分的卜疊板架構。每_蛋白 鏈的超變化區域緊密的以FRs靠在一起，且與其他蛋白鏈 的超變化區域形成抗體之抗原-鍵結位置（參考，〖北奴等 人，感興趣免疫蛋白序列，第五版，公共衛生院，國家徤 康局，畢士大，馬里蘭州（1991))。固定區域並未直接參與 抗體與抗原的鍵結，但卻呈現各種的效應子功能，諸如抗 體依賴性細胞毒性（ADCC)中抗體的參與作用。 當本專利說明書使用"超變化區域”一詞時，其係指抗體 上負責抗原鍵結之胺基酸殘基。超變化區域通常包括源自 142593.doc •14- 201000132 ”互補決定區"或"CDR"的胺基酸殘基（例如，在VL中約24- 34(L1)、50-56(L2)及 89-97(L3)之殘基及 VH 中約 31-35B (HI)、50-65(H2)及 95-102(H3)之殘基）(Kabat等人，感興趣 免疫蛋白序列，第五版，公共健康院，國家健康局，畢士 大’馬里蘭州（1991))，及/或源自"超變化曲環"的殘基者 (例如，在 VL 中約 26-32(Ll)、50-52(L2)及 91-96(L3)之殘基 及 Vh 中約 26-32(Η1)、52A-55(H2)及 96-101(H3)之殘基 (Chothia及 Lesk /· Mo/. 196:901-917 (1987))。 當本專利說明書提及"一致性序列"或一致性V區域序列 時’係指源自已知人類免疫球蛋白可變區域序列之胺基酸 序列比較後之人工序列。根據這些比較結果，可製備編碼 源自人類κ及人類Η鏈亞型III V區域上一致性序列之ν區域 胺基酸之重組性核酸序列，該一致性ν序列不具任何已知 抗體的鍵結專一性或親和力。 嵌合性"抗體（免疫球蛋白）具有與源自特定物種或屬於 〇 特定抗體群或亞型之抗體之對應序列相同或同質性的重鏈 及/或輕鏈之一部分，而所剩下的蛋白鏈則與源自另一物 種或屬於另一抗體群或亞型之對應序列相同或與其具有同 質性，以及該等抗體的片段，只要其仍具有所要的生物活 性即可（美國專利第4 816 567號及M〇rris〇n等人， jcd· &ζ··仍义 81:6851_6855 (1984))。本專利說明書 所用人源化抗體係一群嵌合性抗體。 非-人類（例如，鼠類）抗體之"人源化"形式係指所含源自 非-人類免疫球蛋白序列為最少之嵌合性抗體。大部分而 142593.doc •15- 201000132 言’人源化抗體為人類免疫球蛋白（接受抗體或受體抗 體）’其中接受抗體的超變化區域之殘基經非-人類物種（諸 如，具有所要專一性、親和力及能力之老鼠、大鼠、兔子 或非人類靈長類）之供體抗體的超變化區域殘基取代。在 某些情況下，人類免疫球蛋白的Fv架構區域（FR)殘基經對 應的非-人類物種之殘基取代，除此之外，人源化抗體可 包括未曾發現於接受抗體或供體抗體的殘基，這些修飾作 用可進一步的界定抗體的效率表現（諸如鍵結的親和力）。 一般而言，人源化抗體包括實質上所有至少一種及典型地 ❿ 兩種可變區域’其十所有或實質上所有的超變化曲環對應 至非-人類免疫球蛋白者，且所有或實質上所有的FR區域 為人類免疫球蛋白者’雖然，FR可包括一或多個可增進鍵 結親和力之胺基酸取代作用。這些在FR上胺基酸取代作用 之數目典型地在Η鏈不超過6個，而在L鍵則不超過3個。 人源化抗體亦可選擇性地包括至少一免疫球蛋白固定區域 (Fc)之部分’典型地為人類免疫球蛋白。進一步詳細内 容’參考 Jones等人，編㈣ 321:522_525 (1986) ; Reichmann ❹ 等人，332:323-329 (1988);及 Presta，Cm""· 〇ρ· S/rwci. 2:593-596 (1992)。 抗體"效應子功能”係指導因於抗體Fc區域（天然序列之Fc 區域或胺基酸序列變異體Fc區域）的生物活性者，且其會 隨著抗體同種型而有所不同。抗體效應子功能的實例包 括：Clq鍵結及補體依賴性細胞毒性；Fc受體鍵結；抗體_ 依賴性細胞媒介細胞毒性（ADcc);吞噬作用；細胞表面 142593.doc -16· 201000132 受體（例如B細胞受體）的逆調控；及B細胞活化作用。 "抗體-依賴性細胞媒介細胞毒性"或”ADCC"係指一種細 胞毒性形式，其中鍵結至存於某些細胞毒性細胞（例如天 然殺手（NK)細胞、嗜中性細胞及巨嗜細胞）Fc受體（FcRs)上 之分泌的Ig能使細胞毒性效應子專一性鍵結至帶有抗原標 靶細胞，並隨後以細胞毒素殺死標靶細胞。抗體會”臂抱” 細胞毒性細胞，且是此獵殺作用絕對需要的。媒介ADCC 的主要細胞（NK細胞）只表現FcyRIII，而單核細胞則表現 FcyRI、FcyRII及FcyRIII。造血細胞上FcR的表現摘錄於 Ravetch及 Kinet，/mmwwo/ 9:457-92 (1991)第 464頁的表3中。為評估感興趣分子之ADCC活性，可以（諸 如）揭示於美國專利第5,500,362號或第5,82 1,337號中之活 體外ADCC分析法進行評估。此種分析法所用用的效應子 細胞包括周邊血液單核細胞（PBMC)及天然殺手（NK)細 胞，另一種方式是，或除此之外，可以（諸如）Clynes等 ❷ 人，尸95: 652-656 (1998)中所揭示的動物模式 以活體内方法評估感興趣分子的ADCC活性。 ”Fc受體”或”FcR”係指可鍵結至抗體Fc區域之受體，較 佳的FcR為天然序列之人類FcR。另外，較佳的FcR是一種 可鍵結至IgG抗體（珈瑪受體）者，及包括FcyRI、FcyRII及 FcyRIII亞型之受體，包括對偶基因變異體及這些受體另一 種的移接形式。FcyRII受體包括FcyRIIA(”活化受體"：)及 FcyRIIB(”抑制受體"），其具有相似的胺基酸序列，主要差 異在其細胞質區域。活化受體FcyRIIA在其細胞質區域中 142593.doc -17- 201000132 含有一免疫受體酪胺酸-基礎活化位置（ΙΤΑΜ)，而抑制受 體FcyRIIB則在其細胞質區域中含有一免疫受體酪胺酸-基 礎抑制位置（ITIM)(參考，M. in Daeron, Annu. Rev. Jmwwwo/.15: 203-234 (1997))。FcRs於RavetchAKinet，yi«nM· /mmw«o/:457-92 (1991) ; Capel等人，4: 25-34 (1994);及 de Haas 等人，《/. Cm Med. 126:330-41 (1995)等文獻中有總評論。其他的FcRs(包括未來所鑑 定者）均包含於本專利說明書"FcR" —詞中。該術語亦包括 新生兒受體（FcRn)，其負責將母體IgGs移轉至胎兒（Guyer © 等人，《/· /mwwwo/. 117:587 (1976)及 Kim等人，·/· 24:249 (1994)) ° 世界專利00/42072(Presta)揭示具有增強或消減與FcRs鍵 結之抗體變異體，該專利申請案之内文具體地併入本專利 說明書參考，亦參考Shields等人乂价〇/. C/iem· 9(2):6591-6604 (2001)。 "人類效應子細胞"係為可表現一或多種FcRs及扮演效應 〇 子功能之白血球細胞，較佳地，該細胞表現至少FcyRIII， 並進行ADCC效應子功能。媒介ADCC之人類白血球細胞包 括週邊血液單核細胞（PBMC)、天然殺手（NK)細胞、單核 細胞、細胞毒性T細胞及嗜中性白血球；其中以PBMCs及 NK細胞較佳。效應子細胞可自天然來源（例如，血液）中分 離出來。 ”補體依賴性細胞毒性"或"CDC"係指在補體存在下溶解 標靶細胞。傳統補體流程的活化作用係在補體系統中第一 142593.doc •18- 201000132 個補體（Clq)鍵結至已鍵結同族抗原之（適當亞型）抗體上而 啟動的。例如，Gazzano-Santoro 等人，·/· /wwwwo/· 202:163 (996)中所述之CDC方法進行評估補體活化作用。 具有變更Fc區域胺基酸序列及較強或較弱Clq鍵結能力 之聚肽變異體揭示於美國專利第6,194,551B1號及世界專利 99/51642中。這些專利發表案具體地併入本專利說明書參 考，亦可參考 Idusogie 等人《/. 164:4178-4184 (2000)。
IgG的N-醣化作用係在CH2區域之Asn297處。本發明亦 提供可與CD20鍵結及具有Fc區域之人源化抗體之k合 物，其中組合物中有80-100%(較佳者約90-99%)之抗體包 括接合至醣蛋白F c區域之熟化中心碳水化合物結構（其不 含岩藻糖）。本專利說明書所揭示之彼等組合物與Fc -RIIIA(F158)的鍵結具有令人驚訝地改進效果，其與人類 IgG的交互反應上不如Fc^RIIIA(V158)有效，因此，本專 利說明書組合物預期優於先前所揭示之抗-CD20抗體缸合 物，特別是治療能表現Fc^RIII(F158)之人類病患。在正常 健康的非裔美國人及高加索人中Fc^RIIIA(F158)較FC。 RIIIA(V158)更為普遍，參考，Lehrnbecher等人，肌w 94:4220 (1999)。本申請案另外證實FkRiil鍵結及^ADCC 功能之加乘性增加係因本專利說明書醣化作用變異及在酿 化蛋白Fc區域胺基酸序列修飾作用的合併作用所造成的。 "經分離"抗體係指一經確認的抗體，且是從天然環境成 分中所分離及/或回收出來的。其天然環境的致污成分係 142593.doc -19- 201000132 指會干擾該抗體診斷或治疼~ 巧脣用途之物質，包括酵素、激素 及其他蛋白性或非蛋白性的、资睹 f生的/合質。在較佳的具體實例中， 該抗體所純化的條件需要⑴以路易士（Lowry)方法測定該 抗趙純度同於95%重量比，而最佳者高於99%重量比， (2)純化至足以以旋轉杯定序儀獲得至少⑸㈣端或内部 胺基酸序列之殘基的程度，或（3)利用sds_page在還原或 非還原條件下，利用卡麻薩蘭，或較佳以銀染劑染色顯示 為均質性。經分離抗體包括重組細胞中原位抗體，因為至 少-種天然環境之成分不存在m經分離抗體係 以至少一種純化步驟製備之。 ”經分離"核酸分子係為一經確認之核酸分子，並分離自 至少一種正常下與抗體核酸自然來源有關之致污核酸分子 中。經分離核酸有別於自然界所發現的形式或背景。經分 離核酸分子因此可與天然細胞所存在的核酸分子區分，然 而，一經分離核酸分子包括通常可表現該抗體之細胞中所 含有之核酸，例如，核酸分子位在不同於天然細胞之染色 體位置。 表現”控制序列"係指用以表現特定有機體中以人工方式 連接編碼序列所需之DNA序列。適合原核細胞之控制序 列，例如，包括啟動子、視情況操縱子序列，及核糖體鍵 結位置。真核細胞已知係使用啟動子、聚腺苷酸訊息及促 進子。 核酸以’’人工方式連結”係指與其他核酸序列置放在具有 功能性的關係。例如，假若DNA係以參與分泌的聚肽之前 142593.doc -20- 201000132 蛋白方式表現，則該DNA係以前序列或分泌性前導序列以 人工方式連結至一聚肽的DNA上；假若啟動子或促進子係 影響續序列的轉錄作用，則其係以人工方式結結至一編鳴 序列上；或假若一核糖體鍵結位置所在位置可輔助轉譯作 用’則其係以人工方式連結至一編瑪序列上。一般而言， "以人工方式連結，，係指所連結的DNA序列係連續性的，且 以分泌性前導序列而言，其為連續性且順讀方式，然而， 促進子無須為連續性。在方便的限制酶切割位置進行接合 作用可完成連結’如果不存在此種位置，根據慣用實務可 使用合成性的募核苷酸接頭子或連結子。 載體"包括穿梭載體及表現載體。典型地，質體構築體 亦包括細菌中質體之複製源（例如，複製之C〇1E1源）及筛 擇性標gfe (例如，安皮西林或四環素抗性）’以便進行複製 作用及篩選。”表現載體"係指在細菌或真核細胞中含有用 以表現包括本發明抗體片段之抗體之必須控制序列或調控 元素之載體。適當的載體揭示如下。 產生本發明人源化CD20鍵結抗體之細胞包括編碼業已 入之抗體核酸之細菌性細胞及真核宿主細胞。適當之宿主 細胞揭示如下。 本專利說明書所用，，標記物，，係指直接或間接共軛至抗體 之可偵測之化合物或組合物。該標記物本身能被偵測到 (例如，放射性同位素或螢光標記物），以酵素性標記物的 情況而言，或該標記物可催化改變具有偵測性受質化合物 或組合物之化學作用。 142593.doc •21 - 201000132 本專利說明書所用”自體免疫疾病"係指源自並對抗個體 自己（本身）抗原及/或組織之非-惡性疾病或失調症。 本專利說明書所用"B細胞減損"係指動物或人類經過藥 劑或抗體治療後，其B細胞數量與治療前的B細胞數量比 較後減少。利用熟知的分析法（諸如實驗實例中所揭示者） 可測定B細胞數量。B細胞減損可為完全減損或部分減 損，在一個具體實例中，減損CD20表現細胞至少25%。 本專利說明書所用”細胞毒性劑"係指可抑制或預防細胞 功能或造成細胞壞死的物質。此名詞意欲包括放射線活性 同位素（例如，I131，I125，Y90及Re186)、化療劑，及毒素， 諸如具有酵素活性之細菌性 '真菌性、植物或動物來源之 毒素，或其片段。 "化療劑"係一可用於治療癌症之化學化合物，化療劑的 實例包括烷化分解劑或烷化劑（諸如，赛替派（thiotepa)及 環磷醯胺（細特森TM(CYTOXANtm));烷基磺酸酯類（諸 如，白血福恩（busulfan)、英丙舒凡（丨111卩1*〇8111€&11)及0底泊舒 凡（piposulfan));氣丙。定類（aziridines)(諸如，苯并多巴 (benzodopa)、卡波酿（carboquone)、米特多巴（meturedopa) 及優利多巴（uredopa));次亞胺類及曱基拉胺類 (methylamelamines)(包括六曱蜜胺（altretamine)、曲他胺 (triethylenemelamine) 、 三伸 乙基磷·醯胺 (trietylenephosphor amide)、三伸乙基硫磷胺 (triethylenethiophosphaor amide)及三曱基羅拉胺 (trimethylolomelamine));氮芥類（nitrogen mustards)(諸 142593.doc -22- 201000132 如，苯丁 酸氮芥（chlorambucil)、萘氮芬（chlornaphazine)、 克洛磷醯胺（cholophosphamide);雌莫司 ^f(estramustine)、異 環填酿胺（ifosfamide)、二氣甲基二乙酸（mechlorethamine)、 氧化二氣甲基二乙酸氫氯酸、.美法舍（melphalan)、諾威拜 辛（novembichin)、盼斯特利（phenesterine)、潑尼莫司汀 (prednimustine)、曲鱗胺（trofosfamide)、尿鳴咬氮芥 (uracil mustard));硝腺類（nitrosureas)(諸如，卡莫司汀 (carmustine)、氯》坐特辛（chlorozotocin)、莫司 if (fotemustine)、 洛莫司汀（lomustine)、尼莫司ίτ (nimustine)、雷莫司汀 (ranimustine));抗生素（諸如，阿勒西諾黴素（aclacinomysins)、 放線菌素、歐若黴素（authramycin)、重氮乙醢絲氡酸 (azaserine)、平陽徽素（bleomycins)、卡替諾黴素 (cactinomycin)、卡奇黴素（calicheamicin)、卡洛皮辛 (carabicin)、洋紅黴素（carminomycin)、卡井諾芬林 (carzinophilin)、色黴素（chromomycins)、更生黴素 (dactinomycin)、柔紅黴素（daunorubicin)、迪特洛匹辛 (detorubicin)、6-二氮-5-氧-L-正白胺酸、阿黴素 (Adriamycin) ' 表柔比辛（epirubicin)、依索比辛 (esorubicin)、伊達比辛（idarubicin)、馬瑟洛黴素 (marcellomycin)、絲裂黴素、麥考盼酸（mycophenolic acid)、 諾加黴素（nogalamycin)、奥利佛黴素（olivomycins)、匹來 黴素（peplomycin)、波福洛黴素（potHromycin)、嗓吟數素 (puromycin)、格勒黴素（quelamycin)、羅德比辛（rodorubicin)、 鏈黑菌素（streptonigrin)、鏈佐星（streptozocin)、特伯西丁 142593.doc -23- 201000132 (tubercidin)、烏苯美司（ubenimex)、淨司 ί丁（zinostatin)、 佐柔比辛（zorubicin));抗-代謝物（諸如，甲胺嗓呤及5-氟 尿嘧啶（5-FU));葉酸類似物（諸如，迪諾特利 (denopterin)、甲胺嗓呤、蝶囉呤（pteropterin)、三甲曲沙 (trimetrexate)) 票吟類似物（諸如，氟達拉賓（fludarabine)、 6-巯基°票吟、塞米普林（thiamiprine)、硫鳥嘌吟（thioguanine)); 鳴咬類似物（諸如，安西他濱（ancitabine)、阿扎胞苷 (azacitidine)、6-氮尿苷（azauridine)、卡莫氟（carmofur)、 阿糖胞苷（cytarabine)、二去氧尿°密咬、去氧氟尿苷 (doxifluridine)、依諾他濱（enocitabine)、敗尿苷（floxuridine)、 5-FU)；雄性激素類（諸如，卡路思酮（calusterone)、德洛 斯特酮丙酸（dromostanolone propionate)、表替歐思酮 (epitiostanol)、美雄院（mepitiostane)、睪内酷·（testolactone)); 抗腎臟腺皮質類固醇（諸如，胺魯米特（aminoglutethimide)、 米托坦（mitotane)、環氧雄烧（trilostane));葉酸補充劑（諸 如，福洛尼酸（frolinic acid));阿熙樂酮（aceglatone);阿 德碟醢胺（aldophosphamide glycodie);胺基果糖酸 (aminolevulinic acid);阿姆薩利（amsacrine);貝斯洛布希 (bestrabucil);比生群（bisantrene);伊德洛特（edatraxate);迪 福夫明（defofamine);秋水仙胺（demecolcine);地 α丫酿 (diaziquone)；依氟鳥氨酸（elfornithine);依利醋錢 (elliptinium acetate);依託格魯（etoglucid);石肖酸鎵（gallium nitrate);經基尿（hydroxyurea);磨益多糖（lentinan);氣尼 達明（lonidamine);米托胍腺（mitoguazone)、米托蒽酿 142593.doc -24- 201000132 (mitoxantrone);模皮德莫（mopidamol);尼特利 (nitracrine);喷特司汀（pentostatin);芬納麥（phenamet); 皮柔比辛（pirarubicin);足葉草酸（podophyllinic acid) ; 2-乙基耕；丙卡巴肼（procarbazine) ; PSK® ;雷佐生 (razoxane);西佐糖（sizof*iran);鍺螺胺（spirogermanium); 替諾吐酸（tenuazonic acid);三亞胺酿j (triaziquone); 2,2'，2"-三氯三乙基胺；尿烧（urethan);長春地辛 (vindesine);達卡巴°秦（dacarbazine);甘露酵氮芥 (mannomustine);二演甘露醇（mitobronitol);二漠衛矛醇 (mitolactol);旅泊溴烧（pipobroman);格胞普（gacytosine); 阿糖腺苷（arabinoside)("Ara-C");塞替派（thiotepa);類毒 素（例如，太平洋紫杉醇（paclitaxel) (TAXOL®，Bristol-Myers Squibb Oncology ， 普林 斯頓城 ，紐澤 西州）及多西 特爾（doxetaxel)(TAXOTERE®，Rhone- Poulenc Rorer，安東尼 城，法國）；苯丁 酸氮芥（chlorambucil)擇賓（gemcitabine); 6-硫鳥嘌呤；酼基嘌呤；甲胺喋呤；鉑類似物（諸如，西斯 翻（cisplatin)及碳銘（carboplatin));銘；依託泊苦 (etoposide)(VP-16);異環填醯胺；絲裂黴素C (mitomycin C)；米托蒽酿i (mitoxantrone);威利司、汀；長春花驗 (vinblastine);長春瑞賓（vinorelbine);諾溫平（navelbine); 諾貝嗣（novantrone);替尼泊苷（teniposide);柔紅黴素 (daunomycin);胺基蝶咬（aminopterin);截瘤達（xeloda); 伊班膦酸鹽（ibandronate) ; CPT-11 ;托樸異構酶 (topoisomerase)抑制劑RFS 2000 ;二氟甲基鳥氨酸 I42593.doc -25- 201000132 (DMFO) ’維A酸，又斯柏黴素（eSperamicins);截瘤達 (capecitabine)及上述任一物質之醫藥學上可接受之鹽類； 酸類或衍生物。在此定義亦包括可作用調控或抑制腫瘤上 激素作用之抗-激素藥劑，諸如抗雌激素類（諸如，包括他 莫西芬（tamoxifen);雷諾西芬（ral〇xifene)、芳香酶 (aromatase)抑制劑4(5)-咪唑、4-羥基他莫西芬、特例西芬 (trioxifene)、奇歐西芬（keoxifene)、LY117〇18、奥那司綱 (onapristone)及特利米芬（toremifene)(Farest〇n);抗雄激素 類（諸如，氟他胺（flutamide)、尼魯米特（nilutamide)、白卡 ❹ 羅他邁（bicalutamide)、亮丙瑞林（leupr〇lide)及戈舍瑞林 (goserelin));其他化學治療劑（諸如，去氫可體醇）。上述 任一藥劑之醫藥學上可接受鹽類、酸類或衍生物均包括在 内。 "醫治”或"治療，，或"舒緩，，係指治療及預防性或阻礙性措 施兩者，其中的目的係為避免或減緩（舒緩）標的病理疾病 或失調症。假若當個體接受治療含量之根據本發明方法之 CD20鍵結抗體後，顯現出特定疾病的一或多種病徵及症❹ 狀可觀察性及/或可測量性的減少或消失，則表示該個體 係成功地"治療"CD20陽性癌症或自體性免疫疾病。例如， 以癌症而言，癌症細胞數目的減少或癌症細胞的消失丨減 二腫瘤的大小；抑制（換言之’減低至某種程度及較佳地 是停止）腫瘤的移轉；抑制腫瘤生長至某種程度；增加疾 病舒緩期的時間，及/或舒緩與特定癌症相關之一或多種 症狀至某種程度；減低發病率及死亡率。病患亦會感受到 142593.doc -26- 201000132 疾病病徵或錄的舒緩。治療可以達衫㈣反應（其界 疋為所有癌症的病徵均消失)或部分反應(其中腫瘤大小減 少，佳超過50百分比，更佳者75%)。假若病患經歷感受到 穩定狀態的疾病，_患亦被視為經治療改善。在一較佳 具體實例中’癌症病患在一年後（較佳為15個月後）其癌症 仍不具有前進性。這些用以評估成功治療及改善疾病的參 數可輕易地以熟知技藝醫師所精通的例行性方法測定之。 "具療效含量"係指可有效用以"治療"個體疾病或失調症 之抗體或藥劑含量。以癌症情況而言，具療效含量之藥劑 可減少癌症細胞的數目；減小腫瘤的大小；抑制（換言 之減緩至某種程度及較佳地是停止）癌症細胞浸透至週 邊器官；抑制（換言之，減緩至某種程度及較佳地是停止） ，瘤的移轉；抑制腔瘤生長至某種程度；及/或舒緩—或 多種與癌症相關症狀。參考前述"治療"之定義。
漫f生投藥係指與急性模式相反的持續性投用藥劑，以 便維持初期治療效果（活性）一段長時間。"間歇性"投藥係 指非中》Η生的非連貫性治療，但在特性上卻是具有週朗性 的0 本發明組合物及方法 本發明提供可鍵結至人類CD20及較佳為靈長動物CD2〇 之人源化抗體，其包括含有至少一個（較佳兩個）非人類物 種抗-人類CD20抗體（供體抗體）之CDR^H鏈，及實質上 所有人類一致性抗體（接受抗體）之架構殘基。在一個具體 實例中’供體抗體為老鼠2H7抗體。包括每一 m2H7、人類 142593.doc • 27- 201000132 Η鏈亞型III及人類κ之Η及L鏈CDR及FR序列之V區域序列 示於圖1A及1B中。本發明人源化2H7抗體具有至少老鼠供 體抗體Η鏈的CDRs。在一特定的具體實例中，在一個具體 實例中，鍵結人類CD20之人源化抗體包括供體抗體Η及L 鏈兩者的CDRs。在一個具體實例中，人源化抗體包括供 體Η及L鏈兩者的CDRs。供體抗體可來自各種非-人類物種 者，包括，老鼠、大老鼠、天竺鼠、山羊、兔子、馬、靈 長類動物，但常為老鼠抗體。在一個特定的具體實例中， 供體抗體為老鼠抗體。 在一個具體實例中，人類Fab架構的殘基相當於人類Vk 亞型I及VH亞型III的一致性序列，這些一致性序列分別示 於圖1A及1B中。 在一個全長的抗體中，本發明人源化CD20鍵結抗體包 括鍵結至人類免疫球蛋白C區域之人源化V區域。在一個 較佳的具體實例中，Η鏈C區域係來自人類IgG，較佳者為 IgGl或IgG3。L鏈C區域較佳來自人類κ鏈。 除非另有所指，除了在後文實驗範例中所指的胺基酸取 代或改變位置外，本專利說明書所指的人源化2H7抗體變 異體具有2H7.vl6 L鏈（圖6，SEQ ID N0.21)及Η鏈（圖7， 8£〇10>?0.22)的¥及(：區域序列。 人源化CD20鍵結抗體至少可與人類CD20鍵結，及較佳 可與其他靈長動物CD20鍵結，諸如猴子（包括，食蟹猴及 獼猴）及黑猩猩。食蟹猴CD20的序列揭示於實例15及圖19 中〇 142593.doc -28 - 201000132 CD20鍵結抗體及本發明人源化cd2〇鍵結抗體的生物活 性包括至少該抗體係以不高於ΐχίο·8之Kd值（較佳者不高於 約1x10之Kd值，更佳者不高於1χ1〇·1()之Kd值）鍵結至人類 CD20上’更佳者係可鍵結至人類及靈長動物⑶包括食 蟹猴、獼猴、黑猩猩）’且可殺死或減損活體外或活體内 的B細胞，較佳者係當與未經此一抗體處理之適當陰性控 制組比較時，減損的量為20%。 ❹ #要減損❹細胞程度端視疾病而定1治療CD20陽性 癌症而言，咸欲減損本發明抗_CD2〇抗體標靶之B細胞至 最大程度。據此，以治療CD2G陽性B細胞腫瘤而言，咸欲 減損的B細胞係足以至少避免該疾病的進展’熟識技藝醫 事人員例如可藉由監控腫瘤生長（大小）、癌症細胞種類的 增生、移轉、其他特定癌症的病徵及症狀來評估疾病的進 展。較佳地，B細胞減損係足以避免疾病的進展至少之個 月，更佳者3個月，更佳者4個月，更佳者5個月，更佳者6 ❹冑月或更多月份。在更佳的具體實例中，B細胞減損係足 以增加疾病緩和期至少6個月，更佳者9個月，更佳者工 年，更佳者2年，更佳者3年，更佳者5年或更多年。在一 最佳的具體實例中，B細胞減損係足以治癒該疾病，在較 佳的具體實例中，癌症病患中之3細胞減損至少約75〇/〇 , 及更佳者為治療前治療水平的8〇%、85%、9〇%、、 99%，甚至 1〇〇%。 以治療-自體免疫疾病而言，咸欲調控B細胞減損端視 個體病患的疾病及/或病症嚴重性來調整CD2〇鍵結抗體的 142593.doc •29· 201000132 劑量。據此，不一定要完全的胞減損，或者是，在最 初的治療需要完全的B細胞減損，但在後續的治療則調整 劑量至可達部分減損即可。在一個具體實例令，當與治療 前的基礎水準相較，B細胞減損至少為2〇%(例如，8〇%)或 更低CD20陽性B細胞殘留。在另一個具體實例中，b細胞 減損為 25。/。、30%、40%、50%、60%、70% 或更多。較佳 地，B細胞減損至足以停止疾病的進展，更佳者係舒緩治 療下特定疾病的病徵及症狀，更佳者係治癒該疾病。 本發明亦提供雙專一性CD20鍵結抗體，其中該抗體的 一支臂手具有本發明人源化CD2〇鍵結抗體之人源化1^及[ 鏈，而另一支臂手則具有與另一抗原具有鍵結專一性的v 區域。在特定的具體實例中，另一抗原為選自CD3、 CD64、CD32A、CD16、NKG2D或NK活化配位體組成之 群。 病患在第一次灌注治療抗體時會經歷灌注反應或與灌注 相關的症狀，這些症狀嚴重性各異，通常以醫藥干預性做 法可以恢復。這些症狀包括（但不侷限於）類似感冒的發 燒、發寒/發冷、反胃、出療、頭痛、支氣管癌擎、血管 性水腫。本發明疾病治療方法咸欲將灌注反應減至最小。 據此，本發明另依方面係藉投用人源化CD2〇鍵結抗體來 治療所揭示疾病的方法’其中該抗體具有減弱或無補體依 賴性細胞毒性，且與以Rituxan@治療相較會產生較低的灌 注相關症狀。在一個具體實例中，人源化(：〇2〇鍵結抗體 為 2Η7·ν116。 142593.doc •30- 201000132 載體、宿主細胞及重組方法 办本發明亦提供一編碼人源化CD2〇鍵結抗體之經分離核 酸、包括該核酸之載體及宿主細胞，及製備該等抗體之重 組技術。 以重組方式製備該抗體而言，分離編碼該抗體之核酸， 並將其插入可複製之載體中’以進一步選殖（dna增幅）或 纟現。利用傳統的流程（例如’利用可專—性鍵結至編碼 ❹抗體重鏈及輕鏈基因之寡核普酸）可輕易地分離及定序出 編碼單株抗體之DNA。許多的載體係可以利用的。載體構 成要素一般包括（但不侷限於）下列一或多項：訊息序列、 複製源、一或多種標誌、基因、促進子元素、啟動子，及轉 錄作用終止序列。 (i)訊息序列構成要素 本發明CD20鍵結抗體不只可以直接以重組方式製備 之，亦可製備成帶有異質性聚肽之融合聚肽，其較佳係在 〇 成熟的蛋白或聚肽的N -端處具有特異性切割處之訊息序列 或其他聚肽。所選的異質性訊息序列較佳地係可被宿主細 胞變識及處理（換言之，被訊息肽酶切割）^由於原核宿主 細胞不能辨識及處理天然的CD20鍵結抗體訊息序列，故 訊息序列需經選自，例如’鹼性磷酸酶、青黴素酶、lpp 或熱-穩疋腸毒素II刖導序列之群的原核性訊息序列取代。 以酵母菌分泌而言，該天然訊息序列可經，例如，酵母菌 轉化酶前導序列、a-因子前導序列（包括心及 尺α-因子前導序列），或酸磷酸酶前導序列、 142593.doc -31- 201000132 白色念珠菌（C. 葡萄糖澱粉酶前導序列’或世界 專利90/13646中所揭示之訊息序列所取代。在哺乳細胞表 現作用中，則可利用哺乳動物訊息序列及病毒性分泌前導 序列’例如，單純泡疹病毒gD訊息序列。 該等先驅區域之DNA係以順讀架構方式連結至編碼 CD20鍵結抗體之dna上。 (ii)複製源 表現載體及選殖載體兩者均包括可使該載體於一或多種 所選疋之宿主細胞中複製之核酸序列。一般而言，選殖載 體中的此種序列使載體的複製作用獨立於染色體dna之 外’並包括複製源或獨立自主之複製序列。此種序列在許 多細菌、酵母菌及病毒是熟知的。質體沖们^複製源適 合大部分之革蘭氏陰性細菌，2μ質體源適合酵母菌，而各 種的病毒源（SV40、多瘤病毒、腺病毒、vsv或Βρν)可作 為哺乳動物細胞之選殖載體。一般而言，複製源構成要素
並非哺乳動物表現載體所需（典型地使用SV4〇源僅係因為 其含有早期啟動子）。 ” (Hi)篩選基因構成要素 表現載體及選殖載體可含有篩選基因，其又稱為可筛遇 標諸。典型地筛選基因所編碼的蛋白質⑷可提供對抗生意 或其他毒素（例如，安皮西献、並也主 故四林新黴素、甲胺喋呤或四環 素）之抗性，（b)互補缺乏營基妞 • 養性的缺失，或（c)提供不能獲 自複合性培養基t的重要总盖本 要營養素，例如，芽孢捍菌 編碼D-丙胺酸消旋酶的基因。 I42593.doc • 32 · 201000132 一個篩選流程的實例係利用藥物來抑制宿主細胞生長， 由於成功經異質性基因轉型的這些細胞會產生提供藥物抗 性的蛋白質，故在篩選流程中可以存活。此種優勢篩選的 實例係使用藥物新黴素、黴酚酸及潮黴素。 另一種適合哺乳動物細胞的可篩選標誌實例是能夠確認 細胞攝入CD20鍵結抗體核酸者，諸如DHFR、胸嘧啶激 酶、金屬硫蛋白-I及-II，較佳者為靈長動物金屬硫蛋白基 因、腺苷去胺酶、鳥胺酸去羧基酶等。 例如，將所有的轉型細胞培養在含有甲胺喋呤（Mtx)(其 為DHFR的競爭性拮抗劑）培養基中，先鑑定出帶有DHFR 篩選基因的轉型細胞。當採用野生型DHFR時，適當的宿 主細胞為缺乏DHFR活性之中國倉鼠卵（CHO)細胞株（ATCC CRL-9096)。 另一種方式是，將經編碼CD20鍵結抗體、野生型DHFR 蛋白及另一可篩選標誌（諸如胺基配糖苷3·-磷酸移轉酶 φ (ΑΡΗ))之DNA序列轉型或共同轉型之宿主細胞（特別是包 括内因性DHFR之野生型宿主）培養在含有可篩選標誌之篩 選劑之培養基中（諸如，胺基配糖苦抗生素，例如，卡那 黴素、新黴素或G41 8)，利用細胞生長來篩選之。參考美 國專利第4,965，199號。 適合酵母菌使用之篩選基因是酵母菌質體YRp7中存在 的 基因（Stinchcomb 等人，TVaiwre，282:39 (1979))。 irpl基因可提供缺乏可生長在色胺酸能力之酵母菌突變株 之篩選標誌，例如，ATCC No. 44076 或PEP4-1。Jones， 142593.doc -33- 201000132
Gewei/cs，85:12 (1977)。藉由可生長於不含有色胺酸下’ 酵母菌宿主細胞基因體中以；?1損傷的存在可提供有效偵測 轉型作用的環境。相似性地，Zew2-缺乏性酵母菌株（ATCC 20,622或3 8,626)可以帶有基因的已知質體互補之。 除此之外，源自1,6微米環狀質體PKD1之載體可用以進 行尺/«>^^0772少£^15酵母菌的轉型作用。另一種方式是所報導 的大量製備乳酸克魯維酵母（尺· 重組性牛凝酪酵素 之表孩肩.統，Van den Berg，B/o/rec/mo/o^y，8:135 (1990)。 亦已&示利用尺/«yveromyces的工業株以穩定性多倍數表現 載體分泌出成熟重組性人類血清白蛋白。Fleer等人 Bio/Technology 5 9:968-975 (1991) ° (iv)啟動子構成要素 表現載體及選殖載體通常包含一宿主有機體可辨識之啟 動子，且係以人工方式連接至編碼CD20鍵結抗體的核酸 上。適合原核宿主使用的啟動子包括ρ/ϊ〇Α啟動子、β-内酿 胺酶及乳酸啟動子系統、鹼性磷酸酶啟動子、色胺酸（trp) 啟動子系統，及雜合啟動子（諸如tac啟動子）。然而，其他 已知細菌性啟動子亦適合。細菌系統所使用之啟動子亦含 有Shine-Dalgarno(S.D.)序列，其係以人工方式連接至編碼 CD20鍵結抗體之DNA上。 真核細胞的啟動子序列係已知的。事實上所有的真核細 胞基因具有一富含AT的區域，其位於轉錄作用起始位置約 25至3 0鹼基上游處，在許多基因轉錄作用起始處70至80鹼 基上游處發現的另一序列為CNCAAT區域，其中N係指任 142593.doc -34- 201000132 何的核苷酸。大部分真核細胞基因的3,端為aataaa序 列’其為將聚Α尾部加成至編碼序列3,端的訊息。將所有 的這些序列適當地插入至真核細胞表現載體中。 適合使用在酵母菌宿主的啟動子序列之實例包括3-鱗酸 甘油酸激酶或其他醣解酵素的啟動子，諸如，烯醇酶、甘 油醛-3—磷酸去氫酶、六碳醣激酶、丙酮酸去羧基酶、磷酸 果糖激酶、葡萄糖-6-磷酸異構物酶、3_磷酸甘油酸變位 酶、丙酮酸激酶、三碳醣磷酸異構酶、磷酸葡萄糖異構物 酶，及葡萄糖激酶。 其他酵母菌啟動子（具有藉由生長條件控制轉錄作用之 額外優點之誘導性啟動子）為乙醇去氫酶2、異細胞色素 C、酸磷酸酶、氮代謝相關的分解酵素、金屬硫蛋白、甘 油醛-3-磷酸去氫酶，及負責利用麥芽糖及半乳糖之酵素之 啟動子區域。用於酵母菌表現之適合載體及啟動子進一步 揭示於EP 73,657中。酵母菌促進子與酵母菌啟動子一起使 用亦是有助益的。 在哺乳動物宿主細胞中載體的CD2〇鍵結抗體之轉錄作 用係受到，例如，源自病毒基因體的啟動子之控制，諸 如，多瘤病毒、雞痘病毒、腺病毒（諸如，腺病毒2)、牛肉 瘤病毒、鳥肉瘤病毒、細胞巨病毒、反轉錄病毒、B型肝 炎病毒及最佳是猴病毒4〇(SV40)的啟動子、源自異質性哺 乳動物啟動子（例如，肌動蛋白啟動子或免疫球蛋白啟動 子）、源自熱激蛋白啟動子，假若這些啟動子是與宿主細 胞系統相容的條件下。 142593.doc •35- 201000132 SV40病毒之早期及晚期啟動子可方便地以SV40限制酶 片段形式取得，該片段中亦含有SV40病毒之複製源。人類 細胞巨病毒之極早期啟動子則係以方便地以Hindlll E限制 酶獲得之。利用牛肉瘤病毒為載體於哺乳動物中表現DNA 之系統揭示於美國專利第4,419,446號中，此系統的變更型 式揭示於美國專利第4,601,978號中，亦可參考Reyes等 人，TVfliwre 297:598-601 (1982)所著人類 β-干擾素 cDNA在 老鼠細胞中於單純泡疹病毒之胸嘧啶激酶啟動子控制下的 表現作用。另一種方式是，以羅斯（Rous)肉瘤病毒長端重 複序列作為啟動子。 促進子元素構成要素 將促進子序列插入至載體中常可增強高等真核細胞進行 編碼本發明CD20鍵結抗體DNA之轉錄作用。現在已經知 道許多哺乳動物基因的促進子序列（球蛋白、彈性酵素、 白蛋白、α-胎兒蛋白及胰島素）。然而，典型地的是，吾人 可使用真核細胞病毒之促進子，實例包括SV40促進子（位 於複製源的遠邊處（bp 100-270))、細胞巨病毒早期啟動子 促進子、多瘤病毒促進子（位於複製源的遠端邊）及腺病毒 促進子），參考 Yaniv，iVaiwre，297:17-18 (1982)所著活化 真核細胞啟動子之促進元素。促進子可移接至位於編碼 CD20鍵結抗體序列之5'或3'端之載體上，但是較佳是位於 啟動子的5'端處。 (vi)轉錄作用終止構成要素 真核宿主細胞（酵母菌、真菌、昆蟲、植物、動物、人 142593.doc -36- 201000132 Ο 類或其他多細胞有機體的有核細胞）所用的表現載體亦含 有終止轉錄作用及穩smRNA時所需之序列，該等序列通 吊係利用來自真核細胞或病毒DNA或cDNA之未轉譯區域 的5端序列，及有時候是3,端序列。這些區域含有轉譯成 編碼CD20鍵結抗體mRNA未轉譯部分之經聚腺苦化片段之 核苷酸片段。其中一種有用的轉錄作用終止構成要素是牛 生長激素聚腺苷作用區域，參考世界專利94/11〇26及本專 利說明書所揭示之表現載體。 (Wi)篩選及轉型宿主細胞 適合選殖或表現本發明專利說明書載體tDNA之適當宿 主細胞為原核細胞、酵母菌，或上述較高等的真核細胞。 本目的之適當原核生物包括真細菌，諸如，革蘭氏陰性或 革蘭氏陽性細菌，例如，腸道菌科，諸如 (例如，大腸桿菌)、腸菌屬、伊文氏菌屬 '克：白= 屬、變形菌屬、沙門氏菌屬(例如，副傷寒桿菌）、沙雷氏 菌屬(例如，黏質沙雷氏菌）’及志賀氏菌屬，及芽孢桿菌 屬，諸如，枯草芽孢桿菌及蘚苔桿菌（例如，^的年仞以 曰發表之DD 266,710中所揭示的蘚苔桿菌4ip)、甲單孢桿 菌屬（諸如’綠膿桿菌）及鏈黴菌。其中—種較佳的大腸桿 讀選造宿主為大腸桿g 294(ATCC 31，446)，雖然其他的菌 株（諸如大腸桿菌B、大腸桿gX1776(ATCc 31 537)及大腸 桿菌则0(ATCC 27,325))亦可使用。這些實例係用以說 明’非作限制之用。 全長的抗體、抗體片段及抗體融合蛋白可以在細"生 142593.doc -37- 201000132 產，特別是當該等抗體無須進行醣化作用及Fe效應子功能 時，諸如，當治療用的抗體共軛至細胞毒性劑（例如，毒 素）上，而該免疫共軛物本身即具有腫瘤細胞破壞性效果 的時候。全長的抗體在循環時具有較長的半衰期。在大腸 桿菌中製備較快，且更具有經濟效能。在細菌中表現抗體 片段及聚肽而言，可參考美國專利第5,648,237號（Carter等 人）、美國專利第5,789,199號（Joly等人）及美國專利第 5,840,523號（Simmon等人），其揭示轉譯作用起始區域 (TIR)及最大化表現及分泌之訊息序列，這些專利案一併 ® 併入本專利說明書參考。表現之後，從大腸桿菌細胞糊狀 物之可溶分液中分離出抗體，並經根據同種型的（例如）蛋 白A或G管柱純化，所進行的最終純化作用與純化表現於 (例如）CHO細胞中的抗體之流程相似。 除了原核生物外，真核微生物（諸如，絲狀真菌或酵母 菌）適合作為選殖或表現編碼CD20鍵結抗體載體之宿主。 在較低等的真核宿主微生物中，單釀酒酵母 cerevzWize)或一般的烘培酵母菌是最常使用者，然而，一些 其他科、種及株亦可並可使用於本專利說明書中，諸如裂 殖酵母（Schizosaccharomyces pombe) ·，先魯維酵母屬 (A'/ifyveromyce·?)宿主，諸如，乳酸克魯維酵母（尺· /aciz's)、 脆壁克魯維酵母（尺./>^gi/b)(ATCC 12,424)、保加利亞克 魯維酵母（AT. Z>w/gar/cMS)(ATCC 16,045)、威克洛米埃克魯 維酵母(尺· 24，178)、瓦替克魯維酵母（K. waltii) (ATCC 56,500)、得洛非樂克魯維酵母（火· i/rosop/n’/arwm) 142593.doc -38 - 201000132 (ATCC 36,906)、而ί 熱克魯維酵母(K. 及馬 勒那斯克魯維酵母（尺.;優洛瓦亞哮母 (>>arrowz_iz)(歐洲專利第402,226號）；畢赤巴斯德酵母 (Pic/π'α (歐洲專利第183,070號）；念珠菌屬 ;利希亞木徽菌（TWc/zoi/ermar reesz’a)(歐洲專利 第244,234號）；頭孢真菌cMMa);許瓦諾黴菌 屬（Schwanniomyces)，綠如，Schwanniomyces occidentalis ’，反綠、 狀真菌，諸如，鍵抱黴菌C/VeMrajpora)、青黴菌（Penicillium)、 彎頸孢霉（Tb/ypoc/ai/iww)，及曲黴（daergH/M·?)宿主，諸 如，構巢曲黴«iWaws)及黑曲黴〇4. m々er)。 適合表現經醣化CD20鍵結抗體之宿主細胞係源自多細 胞有機體，無脊椎動物細胞的實例包括植物及昆蟲。多種 桿病毒株及變異體及對應允許的昆蟲宿主細胞，諸如，草 地夜蛾（处毛毛蟲）、埃及斑蚊（^心5 aeg少/>"·)(蚊子）、白線斑蚊（Aedes albopictus)(蚊子）、黃果 ❿ 竭（Ζ>〇ί〇/?/π7α 所e/awogflWer)(果鱗）及家蠶（5〇mZ>3；jc won*)業 已鑑定出來了。轉染作用的各式的病毒株是公開可利用 的，例如，加州苜蓿夜蛾（dMiograp/m ca/f/ornica) NPV的 L-1變異株及家蠶NPV的Bm-5株，而該等病毒株可作為根 據本發明專利說明書之病毒，特別是轉染草地夜蛾細胞。 棉花、玉米、馬鈐薯、大豆、矮牽牛、番茄及菸草之植 物細胞培養亦可作為宿主。 然而，脊椎動物細胞係令人感到最大的興趣，而以培養 方式製備脊椎動物細胞（組織培養）儼已成為例行性的方 142593.doc -39- 201000132 法。有用的哺乳動物宿主細胞之實例為經SV40轉型之猴子 腎臟CV1細胞株（COS-7、ATCC CRL 1651);人類胚胎腎臟 細胞株（293或生長於懸浮培養液經轉代之293細胞細胞， Graham等人，J· Ge»· h>o/. 36:59 (1977));小倉鼠腎臟細 胞（BHK，ATCC CCL 10);中國倉鼠卵巢細胞/-DHFR(CHO， Urlaub等人，Proc. iVa". Jcai 5W. 77:4216 (1980)); 老鼠赛托利（Sertoli)細胞（TM4, Mather,价〇/. 23:243- 251 (1980));猴腎臟細胞（CV1 ATCC CCL 70);非洲綠猴 腎臟細胞（VERO-76、ATCC CRL-1587);人類子宮頸癌細 胞（HELA，ATCC CCL 2);狗腎臟細胞（MDCK，ATCC CCL 34) ； buffalo rat 肝細胞（BRL 3A，ATCC CRL 1442);人類肺細胞（W138，ATCC CCL 75);人類肝細胞 (Hep G2，HB 8065);老鼠乳房腫瘤（MMT 060562，ATCC CCL 51) ; TRI細胞（Mather，等人，_4«”《/1?.见7!4〇<2^/.8(^· 383:44-68 (1982)) ; MRC 5細胞；FS4細胞；及人類肝癌細 胞株（Hep G2)。 宿主細胞經上述用以產生CD20鍵結抗體的表現載體或 選殖載體轉型，並培養在經修飾成適合誘發性啟動子、篩 選轉型體，或增幅編碼所要序列之基因之慣用營養培養基 中。 (viii)培養宿主細胞 用以製備本發明CD20鍵結抗體之宿主細胞可培養於多 種的培養基中，市售可用的培養基（諸如Harris FlO(Sigma)、最低必須培養基（MEM)(Sigma)、RPMI-1640 142593.doc -40- 201000132 (Sigma)及 Dulbecco's 改質培養基（DMEM，Sigma))適合培 養宿主細胞，除此之外，揭示於Ham等人，Afei/z.五/7ζ· 58:44 (1979) ; Barnes等人，召z’oc/zew. 102:255 (1980)、 美國專利第 4,767,704 號、第 4,657,866 號、第 4,927,762 號、第4,560,655號或第5，122,469號；世界專利90/03430; 世界專利87/00 195或美國專利修正第30,985號中任一培養 基均可作為宿主細胞之培養基。這些任一培養基可依需要 補充激素及/或其他生長因子（諸如，胰島素、運鐵蛋白或 〇 表皮生長因子）、鹽類（諸如，氣化鈉、鈣、鎂及磷酸）、缓 衝物（HEPES)、核苷酸（諸如，腺苷及胸苷）、抗生素（諸 如，見大黴素tm(GENTAMYCINtm))、微量元素（其定義係 指存在最終濃度為微莫耳範圍的無機化合物），及葡萄糖 或等同能量來源者。亦可包含熟識技藝者所熟知之任一其 他需要的補充物。培養條件（諸如，溫度、pH及類似的條 件）則是前所選以作為表現用之宿主細胞的培養條件，其 φ 是一般熟識技藝者所知者。 (ix)純化CD20鍵結抗體 當利用重組技術時，抗體可以產生在細胞内、胞質間隙 間，或直接分泌至培養基中。假若抗體係產生在細胞内， 則第一步驟係（例如）藉離心作用或超過濾作用去除顆粒狀 的殘潰、宿主細胞或所分解的片段。Carter等人，价〇/ 10:163-167 (1992)中揭示分離分泌至大腸桿菌 胞質間隙間之抗體之步驟，簡而言之，將細胞糊狀物於醋 酸鈉（pH3.5)、EDTA及苯基曱基磺醯基氟（PMSF)存在下解 142593.doc -41 - 201000132 凍約30分鐘，以離心作用去除細胞殘渣。當抗體係分泌至 培養基時，則先利用市售可用的蛋白質濃縮膜（例如，
Armcon* Mi出p〇re pelHc〇n超過濾單位）濃縮此表現系統的 澄清液。任—前述的步驟中均包含以抑制蛋白分解作用之 蛋白酶抑制劑（諸如，PMSF)，及避免外來污染物滋長的抗 生素。 從細胞所製備之抗體組合物可利用，諸如，羥基磷灰石 層析法、膠片電泳法、透析法及親和力層析法純化之，其 中以親和力層析法為較佳的純化技術。作為親和力配位體 ❹ 的合適蛋白質A端視物種及存於抗體上任一免疫球蛋白Fc 區域之同種型而定。蛋白質A可用以純化以人類γ1、？2或 Y4重鏈為基礎之抗體（Lindmark等人，乂 ⑽/抓汍 62:1_13 (1983))’蛋白質G則建議用於所有老鼠同種型及人 類 Y3(GUSS 等人，五細〇 乂 5:1567 1575 (1986))。連結至親 和力配位體上的基質最常者為洋菜膠，但其他基質亦可使 用。機械式穩定基質（諸如，孔徑經控制的玻璃或聚（苯乙 稀乙稀基）笨可使流速較快，而使得所需的處理時間較 © 使用洋菜膠短。當抗體包括Ch3區域時，係使用触^〇以 ABX樹脂（J.T.Baker，菲力匹茲堡城，紐澤西州）進行純 化其他蛋白純化作用之技術（諸如，離子交換管柱之分 館作用、乙醇沉澱作用、逆相HpLC、石夕膠層析法、以陰 離子或陽離子交換樹脂（諸如聚天門冬胺酸管柱）進行之層 析法或肝素賽法洛斯TM層析法、色層焦集法' SDS-PAGE 及硫酸銨沉澱法）亦可使用，端視所要回收的抗體而定。 142593.doc -42- 201000132 下列任一先期純化步驟、包括感興趣抗體及致污物之混 合物均係利用沖堤緩衝液（pH值介於約2.5-4.5之間）較佳於 低鹽濃度下（例如，約0-0.25 Μ鹽）進行低pH疏水性交互作 用層析法。 抗艎共軛物
抗體可共輕至細胞毒性劑（諸如，毒素或放射性活性同 位素）上。該毒素為卡奇黴素、類美坦生（maytansinoid)、 多樂司汀（dolastatin)及其類似物或衍生物之某具體實例為 較佳者。 較佳的藥劑/毒素包括DNA破壞劑、微管聚合作用或去 聚合作用的抑制劑及抗代謝物。較佳的細胞毒素劑種類包 括，例如，酵素抑制劑，諸如二氫葉酸還原酶抑制劑及胸 腺化合成酶抑制劑、DNA插入劑、DNA切割劑、拓樸酶抑 制劑、蒽環素族藥劑、長春花藥劑、絲裂黴素、平陽黴素 (bleomycins)、細胞毒素核苷、蝶咬（pteridine)族藥劑、代 恩（diynenes)、鬼臼毒素（podophyllotoxins)及分化誘發 劑。這類藥劑中特別有用者，例如，曱胺喋呤、曱胺喋 呤、二氯甲胺喋呤、5-氟尿嘧啶、6-酼基嘌呤、胞嘧啶阿 拉伯糖苷（cytosine arabinoside)、美法余（melphalan)、環氧 長春驗（leurosine)、長春驗丁（leurosideine)、放線菌素 (actinomycin)、柔紅黴素（daunorubicin)、阿黴素、N-(5,5-二乙醯氧戊基）阿黴素、嗎啉基-阿黴素、1-(2-氯乙基基）-1,2-二甲烷磺醯基肼、N8-乙醯基精脒、胺基喋啶曱胺喋呤 (aminopterin methopterin)、伊斯洛米辛（esperamicin)、絲裂 142593.doc -43- 201000132 黴素C(mitomycin C)、絲裂黴素A(mitomycin A)、放射菌素 (actinomycin)、平陽黴素（bleomycin)、洋紅黴素 (carminomycin)、胺基嗓咬（aminopterin)、托利索徵素 (tallysomycin)、鬼臼毒素（podophyllotoxin)及鬼臼毒素衍 生物（諸如，伊托普西（etoposide)或伊托普苦構酸、長春新 鹼（vinblastine)、威利司汀、長春地辛（vindesine)、紫杉醇 (taxol)、特西替爾（taxotere)、維 A 酸（retinoic acid)、丁 酸、N8-乙醯基精脒、喜樹驗（caniptothecin)、卡奇黴素 (calicheamicin)、草苔蟲素（bryostatins)、西法斯坦丁 ® (cephalostatins)、安絲菌素（ansamitocin)、阿特辛（actosin)、 類美坦生（maytansinoids)(諸如 DM-1、美坦生（maytansine)、 美坦西醇（maytansinol)、N-去甲基-4,5-去環氧基美坦西 醇、C-19-去氣美坦西醇、C-20-經基美坦西醇、C-20-去甲 氧基美坦西醇、C-9-SH美坦西醇、C-14-烷氧基曱基美坦 西醇、C14-羥基或乙醯基氧基美坦西醇、C15_羥基/乙醯. 基氧基美坦西醇、C15-曱氧基美坦西醇、C_18_N_去曱基 美坦西醇及4,5-去氧基美坦西醇、奥力斯汀類 Θ (audstatinsX諸如奥力斯汀E、M、四£及pE);多樂司汀類 (dolostatins)(諸如，多樂司汀A '多樂司汀B、多樂司汀 C、多樂司汀D、？樂司、汀E(2〇_表及u_表）、多樂司；丁〇、 多樂司汀Η、彡樂司、、多樂司汁！、多樂司汀2、多樂司 汀3、多樂司汀4、多樂司汀5、多樂司；了 6、多樂司；丁 7、 多樂司汀8、多樂司汀9、多樂司汀1〇、多樂司汀u、多樂 司ί丁 12、多樂司汀13、多樂司汀14、多樂司汀15、多樂司 142593.doc 44 - 201000132 汀16、多樂司汀17、多樂司汀18 ;西法司汀類 (cephalostatins)(諸如，西法司汀1、西法司丁 2、西法司汀 3、西法司汀4、西法司汀5、西法司汀6、西法司汀7、25’-表-西法司汀7、20-表-西法司汀7、西法司丁 8、西法司ί丁 9、西法司汀1 0、西法司汀11、西法司汀12、西法司汀 13、西法司汀14、西法司汀15、西法司汀16、西法司：?丁 17、西法司汀18及西法司汀19。 類美坦生係藉抑制微管蛋白聚合作用之有絲分裂抑制 劑。美坦生首次係從東非灌木κπαία(美國專利 第3,896，111號）中分離出來的，而後，咸已發現某些微生 物亦產生類美坦生（諸如，美坦生西醇及C-3美坦生西醇酯 (美國專利第4，151，042號）。在，例如，美國專利第 4，137,230號；第 4,248,870號；第 4,256,746號；第 4,260,608 號；第 4,265,814 號；第 4,294,757 號；第 4,307,016 號； 4,308,268 號；4,308,269 號；4,309,428 號；4,313,946 號； 第 4,315,929 號；第 4,317,821 號；第 4,322,348 號；第 4,331，598 號；第 4,361，650 號；第 4,364,866 號；第 4,424,219 號；第 4,450,254 號；第 4,362,663 號及第 4,3 71，5 3 3號中揭示合成性美坦生西醇及其衍生物與類似 物’該等揭示專利案一併併入本專利說明書參考。 美坦生及類美坦生可與能專一性鍵結至腫瘤細胞抗原之 抗體共扼。含有類美坦生之免疫共輛物及其治療上的罔途 業已揭示於’例如，美國專利第5,2〇8,020號、第5,416,064 號及歐洲專利案〇 425 235 Β1中，該等揭示專利案一併併 142593.doc • 45· 201000132 入本專利說明書參考。Liu等人，Proc. Nat丨.Acad. Sci. USA 93:8618-8623 (1996)中說明包括將名為DM1之類美坦 生連結至可對抗人類結直腸癌之單株抗體C242上之免疫共 輕物，咸發現該共軛物對經培養的結腸癌細胞具有高度的 細胞毒性’且其在活體内腫瘤生長分析上具有抗腫瘤的活 性。Chari等人 ’ Cancer Research 52:127-131 (1992)說明 在免疫共輛物中的類美坦生係經雙硫連結子共軛至老鼠抗 體A7(其可鍵結至人類結腸癌細胞株的抗原上）或其他老鼠 單株抗體ΤΑ. 1 (其可與HER-2/nw致癌基因鍵結）。 技藝中有許多已知的連結基團可用以製造抗體_類美坦 生共軛物，包括於，例如，美國專利第5,2〇8,〇2〇號或歐洲 專利案 0 425 235 B1 及Chari等人，Cancer Researeh 52:127_ 131 (1992)中所揭示者。連結基團包括於上述經確認專利 案中所揭示之雙硫基團、硫醚基團、酸不安定基團、光不 安定基團、肽酶不安定基團或酯酶不安定基團，其中以雙 硫及硫醚者較佳。 抗體及類美坦生之共軛物可利用各式具有雙功能蛋白偶 合劑（諸如，N-琥珀醯亞胺基_3_(2_咄啶基二硫）丙酸 (SPDP)、拍酿亞胺基-4_(义馬來酿亞胺甲基）環己炫小 羧、Μ醇亞胺（IT))、亞胺酯類雙功能衍生物（諸如阿迪皮 酸二甲酯HCL)、活化酯（辛二酸二琥珀醯亞胺酯）、醛類 (諸如，戊二醛）、雙-重氮基化合物（諸如，雙（對-重氮苯曱 醯基）己烷二胺）、雙-二重氮鹽衍生物（諸如，雙對-二重 氮苯曱醯基）-伸乙基二胺）、雙異氰酸（甲笨2,6二異氰酸) 142593.doc -46- 201000132 及雙-活性氟化合物（諸如，1，5-雙氟-2,4-二硝基苯）。提供 一雙硫鏈結者之特佳偶合劑包括N-琥珀醯亞胺基-3·(2-吡 σ定基二硫）丙酸（SPDP) (Carlsson 等人 Aochm. 乂 173:723-737 [1978])及N-破珀醯亞胺-4-(2->»比咬基硫）戊酸（SPP)， 連結子可連結至類美坦生分子不同位置處，端視連結的 種類而定。例如，利用慣用偶合技術與羥基反應可以形成 醋連結，該反應可發生在具有羥基的C-3位置、經羥基曱 基修飾之C-14位置、經羥基修飾之C-15位置及具有羥基的 C-20位置。在一較佳的具體實例，該連結發生在美坦生西 醇或美坦生西醇類似物的C-3位置處。 卡奇黴素 另一種令人感興趣的免疫共軛物包括共軛至一或多個卡 奇黴素分子之CD20鍵結抗體。抗生素卡奇黴素族在低於 微微克濃度下能夠使雙股DNA產生壞損。以製備卡奇黴素 族的共軛物而言，參見美國專利第5,712,374號、第5,714,586 ❹ 號、第 5,739，116號 '第 5,767,285號、第 5,770,701 號、第 5,770,710號、第5,773,001號、第5,877,296號（所有的專利 案皆屬美國Cyanamid公司）。可使用的卡奇黴素結構類似 物包括（但不偈限於）γ/、（X2丨、々I、N_乙醯基、pSAG及 Θ i(Hinman等人，Ca/icer 53 : 3336-3342(1993)、
Lode等人，Cancer Research 58:2925-2928 (1998)及前述屬 於美國Cyanamid公司的美國專利其他可與抗體共軛的 .抗腫瘤藥劑為抗葉酸之QFAe由於卡奇黴素及QFA作用的 位置係在細胞内’且不能輕易地穿越細胞膜，因此，細胞 142593.doc -47- 201000132 經由抗體媒介的胞飲作用吸收這些藥劑可大大增加其細胞 毒性效果。 放射性活性同位素 為了選擇性破壞腫瘤，抗體可以包括一具有高度放射性 活性原子。各種的放射性活性同位素可用以製備放射性共 輛之抗-CD20抗體’實例包括At211、J131、！125、γ90、
Re186、Sm153、Bim、p32、pb212及Lu的放射性活性同位 素。當共軛物係作為診斷之用時，其可包括閃爍描繪研究 用之放射性活性原子（例如，tc"m或少3)，或核磁共振 (NMR)顯影（亦為磁共振影像，mH)之旋轉標記時，可使用 碘 123、碘-131、銦-lu、氟 _19、碳 _13、氮 _15、氧 _17、 亂、鎮或鐵。 放射性-或其他標記可以已知的方法併入共軛物中，例 如’利用適當的胺基酸先驅物以化學性胺基酸合成作用 (涉及，例如以氟-19取代氫）進行生物合成或合成肽，標記 物（例如，tC99H123、Re186、Re188及Inm可經由肽上的半 胱胺酸殘基連接上去。釔-90可經由離胺酸進行連接。 IODOGEN 方法（Fraker 等人（1978) Biochem. Biophys. Res. (：〇1111111111.80:49-57可用以併入碘_123。"免疫科學中之單株 抗體"（Chatal，CRC印行1989)詳細說明了其他方法。 可利用各式的具有雙功能蛋白偶合劑製造抗體及細胞毒 性劑之共輕物（諸如’ N-琥珀醯亞胺基-3-(2-吡啶基二硫）丙 酸（SPDP)、琥珀醯亞胺基_4_(N•馬來醯亞胺甲基）環已 烧_1_羧酸、巯醇亞胺（IT))、亞胺酯類雙功能衍生物（諸如 142593.doc •48· 201000132 阿迪皮酸二甲酯HCL)、活化酯（辛二酸二琥珀醯亞胺酯）、 醛類（諸如，戊二醛）、雙·重氮化合物（諸如，雙（對_重氮苯 甲醯基）己烷二胺）、雙-二重氮鹽衍生物（諸如，雙_(對-二 重氮苯甲基）-伸乙基二胺）、雙異氰酸（甲苯2,6-二異氰酸） 及雙-活性氟化合物（諸如，1，5-雙氟-2,4-二硝基苯）。例 如，可用Vitetta等人，238:1098 (1987)所揭示者製 備蓖麻毒蛋白免疫毒素。經碳-14-標記之1-異硫氰基节 基-3-甲基二伸乙基三胺戊乙酸（Μχ-DTPA)係一個將放射性 核音酸共輛至抗體之螯合劑實例，參見世界專利 94/11 026。連接子可以是幫助細胞毒性劑於細胞中釋放 之"可切除之連結子"，例如，可以使用酸不安定連接子 (Chari等人 ’ Cawcer 52:127-131 (1992);美國專 利第 5,208,020號）。 CD20鍵結抗體的治療用途 本發明鍵結抗體可用以治療許多惡性及非惡性疾病（包 括自體滿意疾病及相關的病症），及CD20陽性癌症（包括b 細胞淋巴瘤及白血症）。骨髓中的幹細胞（B_細胞親本細胞） 缺少CD20抗原’因此，治療後健康的B_細胞可以再生， 並在數個月之内恢復到正常的數量。 自體免疫疾病或自體免疫相關病症包括關節炎（類風濕 性關節炎、青少年類風濕性關節炎、骨關節炎、乾癖性關 節炎）、牛皮癖、皮膚炎（包括異位性皮膚炎）；慢性自體免 疫麻疹、多發性肌炎/皮膚肌炎、毒性表皮壞死松解癥、 全身性硬皮症及硬化症、與發炎性腸疾病相關之反應（庫 142593.doc -49- 201000132 氏疾病、潰瘍性大腸炎）、呼吸窘迫症候群、成人呼吸窘 迫症候群（ARDS)、腦膜炎、過敏性鼻炎、腦炎、葡萄膜 炎、大腸炎、腎絲球腎炎、過敏病、溼疹、氣喘、與τ細 胞ί心漏有關之疾病及慢性發炎疾病、動脈硬化、自體免疫 心肌炎、白血球細胞吸附缺陷、全身性紅斑性狼瘡 (SLE)、狼瘡（包括腎臟炎、非-腎臟、盤狀紅斑狼瘡、禿 髮）、青少年發生之糖尿病、多發性硬化症、過敏性腦脊 髓炎、由細胞素及Τ-淋巴細胞媒介與急性或延遲過敏性 有關之免疫反應、肺結核、結節病、肉牙腫病（包括瑋格 ❽ 納氏肉牙腫病、顆粒性白企球減少症、血管炎（包括 ANCA)、再生障礙性貧血、庫姆斯陽性貧血、戴莫-布來 芬氏貧血、免疫溶企性貧血（包括自體免疫溶血貧血 (ΑΙΗΑ)、惡性貧血、純紅血球不全（pRCA)、因子νιιι缺 乏、血友病A、自體免疫中性粒細胞減少症、全血球減少 症、白血球減少症、與白血球滲出血管壁有關之疾病、 CNS發炎疾病、多重器官受損症候群、重症肌無力 '抗原_ 抗體媒介之疾病、抗-腎小球基礎膜疾病、抗-磷脂質抗體❹ 症候群 '過敏性神經炎、貝雪疾病、卡斯曼氏症狀、固特 巴斯德氏症候群、拉姆伯特_伊頓肌無力症候群、雷諾氏 =候群、修格連氏症候群、史蒂芬_強生症候群、固體器 吕移植排斥（包括尚反應抗體校價之_先處理，¥沉積在 組織等）、移植物對抗宿主疾病（GVHD)、大皰性類天皰 天皰療（所有的均包括痤瘡、面皰）、自體免疫多重内 刀泌疾病I特氏疾病、僵硬人症候群、巨細胞動脈炎、 H2593.doc -50- 201000132 免疫複合物腎臟炎、IgA腎病變、IgM多重腎病變或IgM媒 介神經病變、特發性血小板低下紫斑症（ITp)、自體免疫血 小板減少、睪丸及卵巢自體免疫疾病（包括自體免疫睪丸 炎及卵巢炎）、原發性初級甲腺低能症；自體免疫内分泌 疾病（包括自體免疫曱狀腺炎、慢性甲狀腺炎（橋本氏曱狀 腺炎）、次急性曱狀腺炎、特發性甲腺低能症）、艾迪生氏 疾病、格雷夫氏疾病、自體免疫多發性腺體症候群（或多 發性腺體内分泌病症候群）、第I型糖尿病（亦稱為胰島素依 賴性糖尿病（IDDM))及席漢氏症候群；自體免疫肝炎、淋 巴樣間質性肺炎（HI V)、阻塞性細支氣管炎（非_移植）對抗 NSIP)、格萊恩-巴爾氏症候群、大血管血管炎（包括風濕性 多肌痛病症及巨細胞（高安氏）動脈炎）、中企管企管炎（包 括川崎氏病及結節性多動脈炎）、僵直性脊髓炎、伯格氏 疾病（IgA腎病變）、快速進展腎絲球腎炎、原發性膽汁性 肝硬化、乳靡渴（麵質腸病變）、冷凝球蛋白血症、Als、 冠狀動脈疾病。 CD20陽性癌症為包括在細胞表面上表現CD20之細胞異 常增生者。CD20陽性B細胞腫瘤包括CD20陽性何傑金氏疾 病（包括淋巴細胞優勢何傑金氏疾病（LPHD));非-何傑金 氏淋巴瘤（NHL);濾泡性中心細胞（FCC)淋巴瘤；急性淋巴 細胞性白血病（ALL);慢性淋巴細胞性白血病（CLL);毛細 胞細胞白血病。非-何傑金氏淋巴瘤包括低度/濾泡性非_何 傑金氏淋巴瘤（NHL)、小淋巴細胞性淋巴瘤（SLL)、中度/ 濾泡NHL、中度擴散性NHL、高度免疫母細胞性NHL、高 142593.doc -51- 201000132 度免疫母細胞性NHL、高度小非凹陷細胞淋巴瘤及瓦爾登 斯特倫氏巨球蛋白血病。治療這些癌症的復發亦包括在 内》LPHD是一種類型的何傑金氏疾病，雖然經過放射線 或化學治療，其常常會有復發的傾向，且其特徵是CD2•陽 性惡性細胞小琳巴細胞性淋巴瘤（SLL)。CLL是四種主要 白血病中的一種，稱之為淋巴細胞之成熟B-細癌症之癌 症’ CLL的特徵是細胞會在血液、骨髓及淋巴性組織中進 行性累積。 在特定性具體實例中，CD20鍵結抗體及其功能性片段 ❹ 可用以治療非-何傑金氏淋巴瘤（NHL)、淋巴細胞優勢何傑 金氏疾病（LPHD)、小淋巴細胞性淋巴瘤（SLL)、慢性淋巴 細胞性白血病、類風濕性關節炎及青少年類風濕性關節 炎、全身性紅斑性狼瘡（SLE)(包括紅斑性狼瘡腎炎）、瑋格 納氏疾病、發炎性腸疾病、特發性血小板低下紫斑症 (itp)、血拴性血小板低下紫斑症（ττρ)、自體免疫血小板 減少、多發性硬皮症、牛皮癬、IgA腎病變、IgM多發性神 經病變、重症肌無力、血管炎' 糖尿病 '雷諾氏症候群、© 修格連氏症候群及腎絲球腎炎。 人源化CD20鍵結抗體或其功能性片段可作為單一藥劑 治療，例如用於治療復發性或低頑固度或濾泡、CD2〇_陽 性、B-細胞NHL上，或可與其他藥劑合併以多重藥劑療程 投與病患。 頑固淋巴瘤係一生長速度慢、無法治癒的疾病，其中平 均病患經過多次舒緩期及復發期後之存活期介於6至1〇年 142593.doc •52- 201000132 之間。在一個具體實例中，人源化CD20鍵結抗體或其功 能性片段可用以治療頑固淋巴瘤。 評估治療腫瘤的效果或成功與否之參數係熟識適當疾病 之醫事人員所熟知的。通常而言，熟練的醫事人員會檢視 特定疾病的病徵及症狀的減少狀況，參數包括疾病進行的 中段時間、疾病穩定舒緩期的時間。 下列參考文獻說明淋巴瘤及CLL、其診斷、治療及其測 量治療效果之標準醫事步驟。 下列參考文獻說明淋巴瘤及CLL、其診斷、治療及其測 量治療效果之標準醫事步驟。Canellos GP，Lister, TA, Sklar JL: TTie W.B. Saunders公司，費城， 1998 ; van Besien K及Cabanillas, F :臨床表現，非傑金氏 淋巴瘤之病程期與治療，第七章，1293-1338頁，in : ，基本原理及實務，第三版Hoffman等人（出版 者），Churchill Livingstone，費城，2000 ;及 Rai, K 及 Patel, D :慢性淋巴細胞性白血病，第72章，1350-1362頁，in : ，基本原理及實務，第三版Hoffman等人（出版 者），Churchill Livingstone，費城，2000。 評估治療自體免疫或自體免疫疾病相關疾病的效果或成 功與否之參數係熟識適當疾病之醫事人員所熟知的。通常 而言，熟練的醫事人員會檢視特定疾病的病徵及症狀之減 少狀況。下列係以實例說明之。 在一個具體實例中，本發明抗體可用以治療類風濕性關 節炎。RA的特徵是多處關節處發炎、軟骨流失及骨骼侵 142593.doc -53- 201000132 蝕’導致關節破壞，最終降低關節的功能。除此之外，由 於RA為全身性疾病，所以其會影響其他的組織，諸如肺 臟、眼睛及骨髓。罹患RA十年以上病患中，低於5〇%者在 每曰基礎生活上可持續工作或功能仍正常。 抗體可作為罹患早期R A病患的第一線治療（例如，未接 受甲胺D棠吟（MTX)者），並可為單一藥劑治療，或與（例 如）MTX或環鱗醢胺合併投用，或者是，該抗體可作為無 法以DMARD及/或MTX治療之病患之第二線治療，並可為 單一藥劑治療或與（例如）MTX合併投用。人源化CD2〇鍵結 抗體可用以預防或控制關節損壞、延遲結構的破壞、減少 與RA發炎相關的疼痛，並通常可減少中度至重度RA的病 徵及症狀。RA病患可於以其他治療ra藥劑之前、之後或 一起使用人源化CD20抗體治療（參見下列組合治療）。在一 個具體貫例中，前已以疾病修飾抗風濕性藥劑治療而失敗 之病患及/或無法對單以甲胺喋呤治療有充分反應之病患 可以本發明人源化CD20鍵結抗體治療之。在此治療的一 個具體貫例中，s亥病患於17-天的治療療程中只接受人源 化CD20鍵結抗體（在第1天及第u天靜脈灌注i公克”接受 CD20鍵結抗體加上環磷醯胺（在第3天及丨7天靜脈灌注75〇 宅克），或接受CD20鍵結抗體加上曱胺π業吟。 評估RA治療效果的一個方法係根據美國風濕學學院 (ACR)標準，其在許多事宜中，測量脆弱及腫脹關節改良 的百分比。RA病患可與未經抗體處理（例如，治療前的基 礎線）或以安慰劑治療後比較計以例如ACR 2〇(2〇%的改 142593.doc -54· 201000132 善），其他評估抗體治療的效果包括用以評分結構破壞（諸 如骨骼侵蝕及關節空間窄化）之X_光評分法（諸如Sharp 光計分法）。亦可根據健康評估問卷[HAQ]計分法、AIMs s十分法、SF-36等於治療期間或治療之後，來評估病患不 良於行的預防或改善》ACR 20標準包括於脆弱（疼痛）關節 數目及腫脹關節數目兩者上有20%的改善及至少於5項測 量上有至少有3項為20%改善： K藉由視覺類比表（visual analog scale ; VAS)評估病来 疼痛， u 2. 病患對疾病活性之整體評估（VAS)， 3. 醫事人員對疾病活性之整體評估（VAS)， 4. 病患藉由健康評估問卷自行評估失能狀況，及 5. 急性期反應物、CRP或ESR。 ACR50及70係以相似的方式定義之。較佳地，病患係投 與可達至少ACR20計分劑量之本發明（：〇2〇鍵結抗體，較佳 φ 者至少為ACR30之劑量，更佳者至少為ACR5〇之劑量，甚 至至少為ACR70之劑量，最佳者至少為ACR75劑量及更高 的劑量。 乾癬性關節炎具有獨特及不同的顯影圖。以乾癖性關節 炎而言，關節侵蝕及關節空間窄化亦可以Shan^f分法評 估之。本發明人源化CD20鍵結抗體可用以預防關節壞 損’及減少疾病病徵及失調症之症狀。 本發明另一方面係治療狼瘡或SLE之方法，其係投與罹 患SLE病患一有效治療量之本發明人源化cD2〇鍵結抗體。 142593.doc -55- 201000132 SLEDAI計分法提供可提供疾病活性之數值定量法。 SLEDAI是將24個已知與疾病活性相關，而數值範圍介於 0-130之臨床及實驗室參數經加權後所得之指數，參見
Bryan Gescuk & John Davis，現今風濕學觀念"全身性紅斑 性狼瘡之新穎治療藥劑"2002，14:515-521。咸信對抗雙股 DNA的抗體會造成腎臟病灶惡化及狼瘡其他的症狀顯現。 進行抗體治療的病患要監控腎臟病灶擴展狀況（其定義為 明顯、重複性的增加血清肌酸、尿蛋白或血尿）。另一種 方式或除此之外，病患可監控抗核抗體及抗雙股〇>^八抗體 的含量。SLE的治療包括高劑量皮質類固醇及/或環磷醯胺 (HDCC)。 脊柱關節病疋一群關節的失調症’包括僵直性脊椎炎 乾癬性關節炎及庫氏疾病。利用有效的病患及醫事人員整 體評估測量工具可決定治療成功與否。 各種的醫藥可用以治療牛皮癬；治療方式的不同直接地 與疾病嚴重性有關。罹患比輕度稍㈣式牛㈣的病患典 型地係利用局部治療法（諸如，局部類固醇、蒽林 (amhralin)、妈泊三醇（calcipotrene)、氣倍他索⑷⑽ 及他佐羅汀（tazarotene))，以調控該疾病，然而，罹患中 度及重度牛皮癬病患則更可能採用全身性的治療法胺 喋呤，類A酸、環孢素、PUVA及UVB)， 亦可使用煙油， 這些治療法综合了安全性、 程等考量，除此之外，某些 昂貴的設備及專用的空間。 所需療程時間，或治療不便流 治療在工作場所背景方面需要 全身性用藥會產生嚴重的副作 142593.doc -56- 201000132 用’包括南血壓、高脂血症、 病、 、骨髓無法正常生長、肝臟疾
期循％，並因為其副作用而需要終身監控暴露。 膚癌 外， 藉由監控臨床病徵及疾病症狀相較與基礎線狀況下的變 化來評估牛皮癖的治療效果，包括醫事人員整體評估 (PGA)變化及牛皮癖面積及嚴重性指數（pAsi)計分法、牛 皮癖症狀評估（PSA)。病患可利用於特定時間點表示播疼 程度之視覺類比表定期測量整個治療過程。 根據欲治療的疾病及與劑量有關之因素（此事熟識該領 域之醫事人員所熟悉者）’本發明投與的劑量對治療疾病 疋有效果的，然而具有最低的毒性及副作用。以治療 CD20陽性癌症或自體免疫疾病而言，治療有效劑量範圍 〇 為約250毫克/平方米至約4〇〇毫克/平方米，較佳者約250-375毫克/平方米。在一個具體實例中，劑量範圍為275 375 毫克/平方米。在一個治療CD20陽性B細胞腫瘤的具體實 例中’抗體投用範圍300—375毫克/平方米，以治療罹患B_ 細胞淋巴瘤（諸如非_何傑金氏淋巴瘤）而言，在一特定的具 體實例中，本發明抗_CD20抗體及人源化抗_CD2〇抗體投 與人類病患的劑量為10毫克/公斤或375毫克/平方米。以治 療NHL而言’一個劑量療程係在治療首週投與丨〇毫克/公 斤劑篁之抗體組合物，而後經過兩週間隔再投與第二削相 142593.doc -57- 201000132 同劑量的抗體。一般而言，NHL於一年期間接受一次的此 種冶療’但淋巴瘤復發後，此種治療可以重複。在另一種 劑量療程中，罹患低度NHL之病患接受四週的人源化 變異體，較佳者為V16變異體（每週為375毫克/平方米），而 後在第五週，接受額外三次抗體加上標準CH〇p療程（環磷 醯胺、阿黴素、威利斯丁及腎上皮質素）或cvp(環磷醯 胺、威利司汀、腎上皮質素）化學療法，每三週投與一 次，共三個循環。 在治療疾病，本發明CD20鍵結抗體可根據熟識疾病醫 事人員以慢性方式或間歇性方式投與病患。 病患以靜脈灌注法或皮下方式投與藥劑時可能會有不良 反應出現，諸如，發燒、畏寒、灼熱感、虛弱及頭痛。為 了舒緩或減少此種不良反應，病患可接受初始調整劑量抗 體，而後再接受治療劑量。調製劑量比治療劑量低，以便 將病患調整至可以对受較高的劑量。 投藥途徑 CD20鍵結抗體係根據已知的方法投與人類病患，諸如 靜脈投藥法（例如，全劑）或持續一段時間的灌注法、皮 下、肌肉内、腹膜内、腦脊髓内、滑液體内、脊椎内或吸 入途徑，通常係以靜脈或皮下方式投藥法。 在治療上述之B-細胞腫瘤中，病患可以本發明CD2〇鍵 結抗體併與一或多種治療藥劑治療之，諸如，多重藥劑療 法中之化學治療劑。CD20鍵結抗體可與化學治療劑同 142593.doc •58- 201000132 :巴=交互投用，或經其他治療法未有反應後投用。 =紅療的標準化學治療包括環鱗醢胺、阿刪、美 法W及f胺喋呤加上美法余 dfc , & m CHOP是—種最常用以治療 十、金氏淋巴瘤之化學治療療程。下列為用於CHOP療 知之樂劑：環磷醯胺（商品名細特森，尼薩㈣咖)）；阿 擻素（杜瑟陸賓辛墙基杜瑟陸賓辛）；威利司杯 及去氫可體醇（有時候稱之為迪特松（Dew—或歐洛松 ❹（〇_ne)) m的具體實财，C⑽鍵結抗體係與下 列一或多種化學治療藥劑··杜瑟陸賓辛 '環鱗酿胺、威利 司;丁及去氫可體醇合併投與有需要之病患。在一特定具體 實例中，罹患淋巴瘤（諸如，非-何傑金氏淋巴瘤）病患係以 本發明抗-CD20抗體併與（：11〇1>(環磷醯胺、杜瑟陸賓辛、 威利司>丁及腎上皮質素）治療。在另一個具體實例中，癌 症病患可用本發明人源化CD2〇鍵結抗體併與cvp(環磷醯 胺威利司》丁及腎上皮質素）治療。在一特定具體實例 φ 中，罹患CD20-陽性NHL病患係以人源化2H7.V16抗體併與 CVP冶療。在一特定治療CLL的具體實例中，CD20鍵結抗 體係與化學治療藥劑氟達拉賓及細特森之一或兩者合併投 藥。 在治療上述自體免疫疾病或自體免疫相關疾病時，病患 係以本發明CD2〇鍵結抗體併與多重藥劑治療療程之另一 種’台療藥劑（諸如’免疫抑制劑）治療之。CD20鍵結抗體可 與免疫抑制劑同時、依序或交互投用，或於以其他治療時 未發生反應時投用。所投用的免疫抑制劑可與技藝中所訂 142593.doc •59· 201000132 之劑量相同或較低。較佳的輔助性免疫抑制劑端視許多因 子而定’包括欲治療的疾病及病患病史。 本專利說明書中所用輔助治療用"免疫抑制劑"係指作用 為抑制或遮蔽病患免疫系統之物質，此種藥劑包括可抑制 細胞素產生、逆調節或抑制自體抗原表現，或遮蔽MHC抗 原之物質。此種藥劑的實例包括類固醇（諸如，腎上腺糖 皮質類固醇，例如：腎上皮質素、曱基去氫可體醇及迪瑟 美沙松（dexamethasone) ; 2-胺基-6-芳基-5-經取代嘧咬（參 見’美國專利第4,665,077號）、硫。坐嗓吟（azathioprine)(或 ® 假若對硫唑嘌呤有不良反應者，則為環磷醯胺）；溴隱汀 (bromocriptine);戊二醛（其可遮蔽MHC抗原，如美國專利 第4，120,649號中所述）；抗MHC抗原及MHC片段之抗-獨特 型抗體；環抱素A ;細胞素或細胞素受體拮抗劑（包括抗-干擾素-γ、-β或-α抗體；抗-腫瘤壞疽因子-α抗體；抗-腫瘤 壞疽因子-β抗體；抗-白介素-2-抗體及抗-IL-2受體抗體； 抗-L3T4抗體；異質性抗-淋巴細胞球蛋白；泛-Τ抗體（較佳 者為抗_CD3或抗-CD4/CD4a抗體）；含有LFA-3鍵結區域之 © 可溶性肽（7/26/90發表之世界專利案90/08187)，鏈激酶； TGF-β ;鏈道酶；宿主得來之RNA或DNA ; FK506 ; RS-61443 ;脫氧司加林（deoxyspergualin);納巴黴素 (rapamycin) ; T-細胞受體（美國專利第5，114,721號）；T-細 胞受體片段（Offner等人.’Science 251 : 430-432(1991);世 界專利案90/11294及世界專利案91/01133);及T-細胞受體 (歐洲專利第340,109)(諸如，T10B9)。 142593.doc •60- 201000132 以治療類風濕性關節炎而言，病患可以本發明CD20抗 體併與一或多種下列藥劑治療之：DMARDS(疾病修飾抗 風濕性藥劑（例如，甲胺喋呤）、NSAI或NSAID(非-類固醇 性抗-發炎性藥劑）、HUMIRAtm(阿達利馬（adalimumab); Abbott 實驗室）、ARAVA®(利氟諾胺（leflunomide))、 REMICADE®(伊氟西馬（infliximab) ; Centocor公司，莫爾 文城，賓夕法尼亞州）、ENBREL® (伊特諾特（etanercept); Immunex，華盛頓）、COX-2抑制劑。RA常用的DMARDs為 幾基氯奎寧、硫氮績°比咬（sulfasalazine)、甲胺嗓吟、利氟 諾胺、伊特諾特、伊氟西馬、硫唑嘌呤、D-青黴素胺、金 (口月艮）' 金（肌肉内）、美滿黴素（minocycline)、環孢素、葡 萄球菌蛋白A免疫吸附。阿達利馬為人類的單株抗體，其 可鍵結至TNFa上。伊特諾特為"免疫吸附"融合蛋白，其係 由人類75kD(p75)腫瘤壞疽因子受體（TNFR)胞外配位體鍵 結部份連結至人類IgG 1的Fc部分所組成的。以傳統治療RA φ 而言，參見，例如，”管理類風濕性關節炎的準則 cfe 46(2): 328-346 (2002年 2月）。在 一個特定具體實例中，RA病患係以本發明CD20抗體併與 甲胺喋呤（MTX)治療之，MTX例示性劑量約7.5-25毫克/公 斤/週。可以口服方式或皮下方式投用MTX。 以治療僵直性脊椎炎、乾癖性關節炎及庫氏疾病而言， 病患可以本發明CD20鍵結抗體併與（例如）Remicade®(伊氟 西馬；Centocor公司，莫爾文城，賓夕法尼亞州）、 ENBREL (伊特諾特，Immunex，華盛頓州）治療之。 142593.doc -61 - 201000132 SLE 療包括高劑量的皮質類固醇及/或環磷醯胺 (HDCC)。 以治療牛皮癣而言，病患投用CD20鍵結抗體併與局部 /σ療諸如，局部類固醇、蒽林、妈泊三醇、氯倍他索及 他佐羅汀，或併與甲胺喋呤、類Α酸、環孢素、PUVA及 PUVB療法。在—個具體實例中，牛皮癬病患係以CD20鍵 結抗體以依序方式或同時併以環孢素治療之。 醫藥調配物 製備保存用之根據本發明所用的CD2〇_鍵結抗體之治療 調配物係將具有所要純度知抗體與選擇性醫藥學上可接受 載劑、賦形劑或安定劑混合在一起，以形成冷凍乾燥調配 物或水溶液。可接受的載劑、賦形劑，或穩定劑於採用的 劑量及濃度時對受體是不具毒性的，且包括緩衝劑（諸 如，磷酸、檸檬酸及其他有機酸）；抗氧化劑包括抗壞血 酸及曱硫胺酸；保存劑（諸如十八基二甲基苄基氣化銨； 氣化己曱敍（hexamethonium chloride);氣化苯二甲經錄 (benzalkonium chloride)、苄索氣銨（benzeth〇nium ehl〇ride); 盼、丁基或 > 醇，對經基苯曱酸烧酯類（諸如，對經基笨 甲酸曱醋或丙醋）；鄰笨二酚；間苯二酚；環己醇；3_戍醇 及間-曱酚）；低分子量（少於約10個殘基）聚肽；蛋白質（諸 如，血清白蛋白、動物膠，或免疫球蛋白）；親水性聚合 物（諸如聚乙稀基洛烧鲷）；胺基酸（諸如，甘胺酸、麵胺酿 胺、天門冬醯胺、組胺酸、精胺酸或離胺酸）；單藤、雙 醣及其他碳水化合物（包括，葡萄糖、甘露糖、糊精）；聲 142593.doc -62· 201000132 合劑（諸如’ edta);醣類（蔗糖、甘露醇、海薄糖或山梨 糖醇）；形成鹽類的反向離子（諸如，鈉）；金屬複合物（例 如，辞-蛋白複合物）；及/或非-離子性表面活性劑（諸如， TWEENtm、pluronicstm 或聚乙烯丙二醇(PEG)。 例示性抗-CD20抗體調配物揭示於世界專利98/56418 中’該申請案明確地併入本專利說明書參考。另一調配物 係液態複劑量調配物，其包括40毫克/毫升抗_cd2〇、25 ❹ mM醋酸、15〇 mM海藻糖、0.9%苄醇、0 02%山梨醇醋 20，Ph 5.0，其保存在2-8 °C下最少有兩年的上架期。另一 感興趣的抗-CD20調配物係包括溶於9 〇毫克/毫升氣化 鈉、7.35毫克/毫升檸檬酸鈉二水合、〇7毫克/毫升聚山梨 醇酯80及無菌注射用水（pH 6.5)之1〇毫克/毫升抗體。另一 種水溶液醫藥調配物包括1〇_30 mM醋酸鈉（約pH 48至約 pH 5.5，較佳者為PH 5.5)、作為表面活性劑之聚山梨醇酯 (含量約0.01-0.1%重量比）、海藻糖（含量約2_1〇%重量體積 _ 比）及作為防腐劑之节醇（美國專利第6，171，586號）。適合皮 下投藥之冷凍乾燥調配物揭示於世界專利世界專利 97/04801中，此等冷;東乾燥調配物可以適當之稀釋劑復水 成具有高蛋白濃度，@復水之調配物τ以皮下方式投與本 專利說明書欲治療之哺乳動物。 種人源化2Η7變異體之調配物係、含有溶於i〇 组胺 酸’抓嚴糖、0.02%聚山梨醇醋2〇，pH 58之12_14毫克/ 毫升抗體。 本專利說明書調配物為了所欲治療的特定適應症亦可如 142593.doc • 63 - 201000132 需要含有超過一種之活性化合物，較佳係具有互補活性而 不會彼此有不良影響者。例如，咸意欲另外提供一細胞毒 性劑、化療劑、細胞素或免疫抑制劑（例如，一種作用在τ 細胞上者，諸如環孢素，或一可鍵結τ細胞之抗體，例如 一種鍵結LFA-1者）。該等其他藥劑之有效含量端視調配物 中所含有的抗體含量、所欲治療的疾病及失調症，及前所 討論的因子而定。這些通常使用相同的劑量，並使用本專 利說明書所揭示相同的投藥法，或使用前所採用劑量之約 1 至 99%。 活性成分亦可置入於’例如，藉由凝聚作用或藉由界面 聚合作用所製備之微膠囊中，例如分別在膠體藥物傳送系 統中之經基甲基纖維素或動物膠_微膠囊及聚_(甲基甲基丙 基酸）微膠囊（例如，脂小體、白蛋白微球、微乳液、奈_顆 粒及奈膠囊）或巨乳液中。該種技術係揭示於Remingt〇nis
Pharmaceutical Sciences 16th edition，Osol，A. Ed. (1980)。 可製備持續性-釋放製劑。適當的持續性-釋放製劑之實 例包括含有拮抗劑之固態疏水性聚合物半滲透基質，該基 質係為成形物體，例如，濾膜，或微膠囊。持續性-釋放 基質包括聚酯類、水凝膠（例如，聚（2-羥基乙基-曱基丙基 酸）、或聚（乙烯基醇））、聚交酯類（美國專利第3,773,919 號）、L-麵胺酸及乙基-L-翅胺酸之共聚物、非生解性乙烯-醋酸乙烯酯、分解性乳酸-甘醇酸共聚物，諸如LUPRON DEPOTtm(注射性微球，係由乳酸_甘酵酸共聚物及醋酸亮 丙瑞來（leuprolide acetate)，及聚-D-(-)-3-經基 丁酸。 142593.doc -64 - 201000132 作為活體內投藥用之調配物必須為無菌狀態，此藉由無 菌濾膜之過濾作用可輕易完成。 製造產品及套组 本發明另-個具體實例係、包含用以治療自體免疫疾病及 相關病症及CD20陽性癌症（諸如非_何傑金氏淋巴瘤）物質
之製造產品，該製造產品包括一容器及在容器上之標籤或 伴隨容器所附之包裝插頁。適當的容器包括（但不偈限於） 瓶子、小瓶、針筒等，容器可以各種不同的材料形成，諸 如玻璃或塑膠Hi内含财效治療病徵之組合物，並具 有無菌的進人π(例如’容器為__具有可以皮下注射針筒 穿刺而過之栓塞之靜脈用溶液袋或小瓶子）。組合物令至 少一種活性劑為本發明（：〇2〇鍵結抗體。標籤或包裝插頁 說明該組合物係用以治療特定的病症，標籤或包裝插頁另 外包括將該抗體組合物投與病患之說明書，包裝插頁通常 係指了售治療產品包裝中所包含之說明書，其包含關於使 用該等治療產品在適應症、用途、劑量、投藥、禁忌及/ 或警語有關之資訊。在—個具體實例中，包裝插頁說明該 組合物係用以治療非-何傑金氏淋巴瘤。 陈此之外，本發明製造產品可另外包括第二個容器，其 包括一醫藥學上可接受之緩衝劑，諸如抑菌性注射用^ (Β·)、磷酸鹽'緩衝性食鹽水、雷氏溶液及葡萄糖溶 液。其可另外包括商業上及❹者觀點所想要之其他物 質，包括其他緩衝劑、稀釋劑、濾膜、注射針、針筒。 本發明亦提供用於各種目的之套組，例如，殺死Β_細胞 142593.doc 65. 201000132 之分析法、作為細胞凋零分析法之陽性控制組、從細胞中 純化或免疫沉澱出CD20。以分離及純化CD20而言，該套 組可含有偶合至小珠（例如，賽法洛斯（sepharose)小珠）之 抗-CD20抗體，所提供之套組中含有，例如，ELISA或西 方墨潰法中用以偵測及定量活體外CD20之抗體。一如製 造產品，該套組包括一容器及在容器上之一標籤或伴隨容 器所附之包裝插頁。容器中内裝有包括至少一種本發明 抗-CD20抗體之組合物，本發明可另附含有，例如，稀釋 劑及缓衝劑，控制組抗體之容器。標籤或包裝插頁可提供 組合物之敘述及意欲作為活體外或診斷用途上之說明。 食蟹猴CD20 本發明亦提供一經分離核酸，其包括圖19中所示之食蟹 猴之SEQ ID NO : 24核苷酸序列。在一個具體實例中，該 核酸為cDNA。在一個具體實例中，編碼猴子CD20之該核 酸係在一表現載體中，以便在宿主細胞中表現。表現載體 中SEQ ID NO : 24之核苷酸序列係以人工方式連接至表現 控制序列上，諸如啟動子或啟動子及促進子。表現控制序 列可為正常下與食蟹CD20基因結合之天然序列，或為異 質性與該基因結合者。本發明亦提供一包括食蟹猴CD20 之胺基酸序列[SEQ ID NO : 25 ;圖19&20]之經分離聚 肽，及含有食蟹CD20核酸之宿主細胞。在一個方面，宿 主細胞為真核細胞，例如，CHO細胞。包括食蟹CD20胺 基酸序列或該序列片段之融合蛋白亦包含於本發明之中。 實驗性實例 142593.doc -66- 201000132 實例1 2H7抗-CD20老鼠單株抗體的人源化作用 以一系列的位置引導突變步驟進行老鼠抗_人類CD20抗 體2H7(本專利說明書亦稱之為m2H7，m係指老鼠）的人源 化作用。將老鼠2H7可變區域（如美國專利第5,846,818號中 所揭示者）的胺基酸序列與已知的抗體序列（Kabat等人’感 興趣免疫蛋白序列，第五版，公共衛生院’國家健康局， 畢士大，馬里蘭州（1991))比較後，確認出2H7的CDR殘 基。根據序列的超變化區域界定出輕鏈及重鏈的CDR區域 (Kabat等人，同上），並分別示於圖1A及圖1B中。利用合 成性寡核苷酸，以位置引導突變作用（Kunke卜Proc. #如/· Jcai 5W· 82:488-492 (1985))可將所有六個老鼠 2H7 CDR 區域引入至對應於包含於質體pVX4(圖2)上之一致性序列 VKI、VHIII(VL卡巴亞型I、VH亞型III)之完整人類Fab架構 上。 嗜菌質體pVX4(圖2)係在大腸桿菌中進行突變及作為表 現F(ab)s之用》以嗜菌質體pb0720(pB0475衍生物）為基礎 (Cunningham等人，Sciewce 243:1330-1336 (1989))，pVX4 含有編碼人源化一致性κ-亞型I輕鏈（VlkI-Cl)及人源化一 致性亞型III重鏈（VHIII-CH1)抗-IFN-oc(干擾素〇〇抗體之 DNA片段。pVX4亦具有鹼性磷酸酶的啟動子及Shine-Dalgamo序列（此兩者均是衍生自另一前所揭示以pUC 119 為基礎之質體，pAK2(Carter等人，roc. iVa". Zcao?. Sci. USA 89:4285 (1992))。在編碼F(ab)輕鏈及重鏈的DNA間 142593.doc -67- 201000132 引入了一個獨特的Spel限制酶切割位置。在抗-IFN-α重鏈 及輕鏈兩者的前23個胺基酸為Sill分泌訊號序列（Chang等 人，55:189-196 (1987))。 為了構築2H7的CDR-交換變異體（2H7.V2)，在含有去氧 尿嘧啶的pVX4模板上進行位置引導突變作用；將抗-IFN-α上所有的六個CDRs改變成老鼠2H7 CDRs。所產生的分 子稱為人源化2H7 2變異體（2H7.V2)，或稱為2H7的” CDR-交換變異體”，其具有一致性人類FR殘基之m2H7 CDR殘基 (如圖1A及圖1B所示）。人源化2Η7·ν2可進一步進行人源化 作用。 表1所示係在Η鏈及L鏈產生每個老鼠2H7(m2H7)CDR時 所用之寡核苷酸序列，例如，CDR-H1寡核苷酸係用來改 造 m2H7 Η鏈 CDR1，CDR-H1、CDR-H2 及 CDR-H3 分別係 指用以改造Η鏈上的CDR1、CDR2及CDR3者；同理地， CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3係指改造各L鏈的CDRs所用 者。CDR-H2上的取代作用係用兩個寡核苷酸（CDR-H2A及 CDR-H2B)以兩步驟進行。 表1.將老鼠2H7 CDRs的CDR-交換變異體構築至pVX4 上之人類架構區域中時所用之寡核苷酸。被各募核苷酸改 變的殘基畫底線表示之。
取代作用 寡核苷酸序列 CDR-H1 C TAC ACC TTC ACG AGC TAT AAC ATG CAC TGG GTC CG (SEQ ID NO. 27) CDR-H2A G ATT AAT CCT GAC AAC GGC GAC ACG AGC TAT AAC CAG AAG TTC AAG GGC CG 142593.doc • 68 - 201000132 (SEQ IN NO. 28) CDR-H2B GAA TGG GTT GCA GCG ATC TAT CCT GGC AAC GGC GAC AC (SEQ ID NO. 29) CDR-H3 AT TAT TGT GCT CGA GTG GTC TAC TAT AGC AAC AGC TAC TGG TAC TTC GAC GTC TGG GGT CAA GGA (SEQ ID NO. 30) CDR-L1 C TGC ACA GCC AGC TCT TCT GTC AGC TAT ATG CAT TG (SEQ ID NO. 31) CDR-L2 AA CTA CTG ATT TAC GCT CCA TCG AAC CTC GCG.TCT GGA GTC C (SEQ ID NO. 32) CDR-L3 TAT TAC TGT CAA CAG TGG AGC TTC AAT CCG CCC ACA TTT GGA CAG (SEQ ID NO. 33) 為與人源化構築體比較，利用位置引導突變作用 (Kunkel，同上），以合成性寡核苷酸構築可表現嵌合性 2H7 Fab(含有老鼠VL及VH區域，及人類CL及CH!區域）之質 體，以便將老鼠架構殘基引入至2H7.V2中。所得可表現嵌 合性Fab(已知為2H7.V6.8)之質體構築體序列示於圖。 每一 Fab編碼鍵具有如前pVX4(圖2)所述之23個胺基酸Sill 分泌訊號序列。 以老鼠2H7架構殘基與人類VKI、VHIII—致性架構區域 (圖1A及圖1B)及先前的人源化抗體的序列（carter等人， /Voc· iVai/· dcai/. iScz·· USA 89:4285-4289 (1992))t匕車交结果 為基礎，利用位置引導突變作用將數個架構突變引人至 2H7.v2 Fab構築體中，這些突變作用會將某些人類一致性 架構區域殘基改變成老鼠2H7架構區域上所發現者，這些 位置可能會影響CDR結構或抗原的接觸。3變異體含有 VH(R71 V、N73K)、4變異體含有VH(R71 V)、5變異體含有 142593.doc -69- 201000132 VH(R71V、N73K)及 Vl(L46P)，而 6變異體含有 Vh(R71v、 N73K)及 Vl(L46P、L47W)。 m2H7抗體之人源化及嵌合性pab版變異體可以在大腸桿 菌中表現，並可以下列方式純化。將質體轉型至大腸桿菌 株XL-1藍（Stratagene，聖地牙哥，加州），以製備雙股及單 股DNA。對每個變異體而言，利用二去氧核苷酸方法可完 全將輕鏈及重鏈兩者定序（定序酶，美國生化公司）。將質 體轉型至大腸桿菌株16C9(MM294的衍生物），平盤#養在 含有5微克/毫升羧苄青黴素（carbeniciiiin)之lB培養盤上， ◎ 並且篩選出單一菌落進行蛋白表現之用。將單一菌落生長 在5毫升LB-100微克/毫升羧苄青黴素中，在37t：培養58 小時。將5毫升的培養液加至含有100微克/毫升幾节青徽 素之500毫升AP5中，並讓其在4公升長頸振盪燒瓶中於 37°C生長I6小時。APS培養基係將υ克葡萄糖、11〇路 蛋白水解物SF、0.6克酵母萃取物（認證過）、〇 19克無水 硫酸錢、1.07 克NH4C1、3.73 KC1、1.2 克 NaCl、120毫升 1M的三乙醇胺（ΡΗ7·4)加水至1公升，而後通過〇1微米 〇 Sealkeen慮膜進行無菌化。 將細胞置於1公升離心瓶中以3000 xg速度離心並丢棄澄 清液，以回收細胞’冷凍1小時後’將沉殺物重新懸浮於 25 毫升冷的 10 mM MES-10 mM EDTA，pH 5.0(緩衝液 A) 中，加入250微升0.1 M PMSF(以抑制蛋白分解作用），及 3.5毫升10毫克/毫升母雞蛋白溶解酶（以助細菌細胞壁的溶 解）’在冰上和地振盈後’將樣品以4 〇, 〇 〇 〇 X g的速度離 142593.doc -70· 201000132 心15分鐘。將澄清液以緩衝液A稀釋至50毫升，並加至業 經緩衝液A平衡之2毫升DEAE管柱中，而後將所流出的液 體加至業經緩衝液A平衡之蛋白質G-賽法洛斯CL-4B(Pharmacia)管柱（0.5毫升基床體積）中，用10毫升的緩衝 液A清洗管柱，並以3毫升0.3 Μ甘胺酸（pH 3.0)於1.25毫升 1 M Tris pH 8.0之液體沖堤。利用濃縮器Centricon-30(Amicon)將F(ab)的緩衝液換成PBS，並將最終體積濃縮 成0·5毫升。所有的F(ab)s進行SDS-PAGE膠片電泳作用以 確認純度，並以電灑式質譜術確認每一變異體的分子量。 在以細胞為基礎的ELISA鍵結分析法（如下所述）中， Fabs(包括2H7 Fab)與CD20的鍵結難以偵測，因此，2H7 Fab變異體需再次轉型為全長的igGl抗體，以利分析及進 一步的突變作用。 將嵌合性2H7(v6.8)Fab及人源化Fab變異體2至6的VL及 VH區域次選殖至前所述用以哺乳動物細胞表現作用之pRK 載體（Gorman等人，见4 五《君.2:3-10 (1990)) 中，以構築能表現全長IgG's的質體。簡而言之，每個Fab 構築體以五及501消化，以切割VL片段，將其選殖至 能表現完整輕鏈（VL-CL)的質體pDRl (圖4)之心的 位置上，除此之外，每個Fab構築體以尸vwll及消化， 以切割VH片段，將其選殖至能表現完整重鏈（VH-CH^CHr CH3區域）之殖體pDR2(圖5)之PvwII/Jpal位置上。以每個 IgG變異體而言，將輕鏈表現質體及重鏈表現質體共同轉 染至經腺病毒轉型之人類胚胎腎臟細胞株293(Graham等 142593.doc -71 · 201000132 人，·/. Gen. Wro/·, 36:59-74 (1977))進行暫時性轉染作 用，簡而言之，在進行轉染作用的前一天，將2 9 3細胞分 盤並種植培養在含有血清的培養基中。次日，加入以製備 成磷酸鈣沉澱物的雙股DNA，而後加入pAdV AntageTM DNA(Promega，麥迪遜，威斯康辛州），將細胞置於37°C 下隔夜培養，細胞培養在不含有血清的培養基中，並在4 天後回收細胞。利用蛋白質A-賽法洛斯CL-4B自細胞培養 澄清液中純化出抗體，而後將缓衝液置換成10 mM NaCl, pH 6.0，並利用Centricon-10 (Amicon)濃縮之。利用定量性 胺基酸分析法測定蛋白質濃度。 為了測定與CD20抗原的相對鍵結親和力，需建立以細 胞為基礎之ELISA分析法。人類B-淋巴母細胞WIL2-S細胞 (ATCC CRL 8 885，美國型細胞培養收集中心，洛克菲洛， 馬里蘭州）係以RPMI培養基（添加有2 mM L-麩胺醯胺、20 mM HEPES, pH 7.2及10%熱失活胎牛血清）生長培養於潮 濕化5% C02培養箱中。細胞用含有1% FBS(分析緩衝液）的 PBS清洗，並以250-300,000細胞/槽孔的密度種植在圓底96 槽孔盤（Nunc，羅斯奇城，丹麥）中，將溶於分析緩衝液中 的兩倍連續稀釋標準品（15.6-1000奈克/毫升之2H7 v6.8嵌 合性IgG)及3倍連續稀釋之樣品（2.7-2000奈克/毫升）加至培 養盤中，將培養盤埋入冰中，並培養45分鐘。為了去除未 鍵結的抗體，將0.1毫升的分析緩衝液加至槽孔中，將培 養盤離心並去除澄清液，再用兩次0.2毫升分析缓衝液清 洗細胞，將過氧化酶共輥山羊抗-人類Fc抗體（Jackson 142593.doc •72- 201000132
ImmunoResearch，西格洛福城，賓夕法尼亞州）加至培養 盤中以偵測鍵結至培養盤的抗體。經過45分鐘的培養後， 以前述方法清洗細胞，將TMB受質（3,3'，5,5'-四甲基聯苯 胺；Kirkegaard & Perry Laboratories，蓋士堡，馬里蘭州） 加至培養盤中，加入1 Μ的磷酸終止反應。滴定曲線符合 四參數非直線回歸曲線符合程式（KaleidaGraph，Synergy軟 體，雷丁城，賓州）。求出滴定曲線中點的吸收值（mid-OD)及其對應標準品，而後求出每個變異體在此mid-OD的 濃度，將標準品濃度除以每個變異體的濃度’據此所得數 值即為每個變異體相對於標準品的的鍵結比例。實驗間相 對親和力的標準偏差通常為+/-10%。 如表2所示，與嵌合性2Η7(ν·6·8)相較之，CDR-交換的 變異體（V)之鍵結減少的相當大，然而，變異體3至變異體 6則顯示鍵結有改善。為了測定需要保有嵌合性2Η7鍵結之 鍵結親和力之最低突變作用，利用位置引導突變作用構築 另外的突變及突變組合，而產生表2中所示之變異體7至變 異體17。明確言之，這些包括了 VH的突變A49G、F67A、 I69L、N73K及 L78A ;及 VL突變 M4L、M33I及 F71Y。變異 體16及變異體17顯示具有最佳的相對鍵結親和力，其親和 力係在嵌合性變異體的2倍間，而兩者之間沒有明顯的差 異（s.d.=+/-10%)。為了將突變數目減至最少，因此選定變 異體16(只有4個人類架構區域殘基為老鼠架構區域殘基（表 2))為另外定性之人源化型式。 表2.利用細胞-基礎ELISA比較人源化2H7 IgG變異體與 142593.doc -73- 201000132 嵌合性2H7對CD20的相對鍵結親和力。相對鍵結力係以嵌 合性2H7濃度比上需要相等鍵結力之變異體濃度表示；因 此，比例<1表示變異體具有較弱的親和力。相對測定值的 標準偏差平均為+/-10%。相對CDR-交換變異體可變區域 的架構區域取代作用係根據Kabat編碼系統（Kabat等人，廣· 述、。 2H7 變異體 重鏈(VH) 取代作用 輕鏈(VL) 取代作用 相對 鍵結 6.8 (嵌合性） (嵌合性） -1- 2 (CDR-交換） (CDR-交換） 0.01 3 R71V、N73K (CDR-交換） 0.21 4 R71V (CDR-交換） 0.21 5 R71V、N73K L46P 0.50 6 R71V、N73K L46P、L47W 0.58 7 R71V L46P 0.33 8 R71V > L78A L46P 0.19 9 R71V、F67A L46P 0.07 10 R71V、F67A、I69L L46P 0.12 11 R71V、F67A、L78A L46P 0.19 12 R71V L46P、M4L 0.32 13 R71V L46PM33I 0.31 14 R71V L46PF71Y 0.25 15 R71V L46P、M4L、M33I 0.26 16 R71V、N73K、A49G L46P 0.65 17 R71V、N73K、A49G L46P ' L47W 0.67 142593.doc •74- 201000132 表3.用以構築人源化2H7變異體16(2Η7·ν16)中突變 Vh(A49G 、R71V、N73K)及Vl(L46)之寡核苷酸序列。畫 底線者係編碼所示胺基酸之取代作用。以VH(R71V、 N73K)及Vl(L46P)而言，所示的寡核苷酸為正向股，因為 這些係用以在Fab模板上的突變作用，而VH(A49G)所示之 寡核苷酸則為反向股，因為此係用於pRK(IgG重鏈）模板。 變異體16的蛋白質序列示於圖6及圖7中。 取代作用 寡核苷酸序列 VH(R71V、 N73K) GT TTC ACT ΑΤΑ AGT GTC GAC AAG TCC AAA AAC ACA TT (SEQ ID NO. 34) Vh(A49G) GCCAGGATAGATGGCGCCAACCCATTC CAGGCC (SEQ ID NO. 35) Vl(L46P) AAGCTCCGAAACCACTGATTTACGCT (SEQ ID NO. 36) 實例2 2H7的抗原鍵結決定子（互補位） 在2H7.V16或2Η7·ν17變異體上進行丙胺酸取代作用 (Cunningham & Wells, 244:1081-1085 (1989))，以 便試驗鍵結至CD20上之抗體個別側鏈之分布。IgG變異體 係pDRl及pDR2載體在293細胞表現所產生者，經純化，並 以上述方法分析相對鍵結親和力。數個丙胺酸取代作用會 明顯降低與WIL2-S細胞上CD20相對的鍵結力（表4)。 表4.以細胞-基礎ELISA(WIL2-S細胞）測定人源、化 2H7.V16上CDR區域上丙胺酸取代作用的效應。相對鍵結 係以2H7.V16親本抗體濃度比上需要相等鍵結力之變異體 142593.doc -75- 201000132 濃度來表示；因此，比例<ι表示變異體具有較弱的親和 力；比例>1表示變異體的親和力較高。相對測定值的標準 偏差平均為+/-10%。相對2H7.vl6可變區域的架構區域取 代作用係根據Kabat編碼系統（Kabat等人，前述）。NBD意 指沒有可偵測性鍵結。45變異體的兩個數值係來自個別的 實驗。 2H7 CDR 重鏈 輕鏈 相對鍵結 變異體 位置 取代作用 取代作用 16 - - - -1- 140 H1 G26A - 0.63 141 H1 Y27A - 0.47 34 H1 T28A - 0.86 35 H1 F29A - 0.07 36 H1 T30A - 0.81 37 H1 S31A - 0.97 142 H1 Y32A - 0.63 143 H1 N33A - NDB 144 H1 M34A - 1.2 145 H1 H35A - <0.25 146 H2 A50G - 0.31 147 H2 I51A - 0.65 38 H2 Y52A 0.01 148 H2 P52Aa - 0.66 39 H2 G53A - 0.89 142593.doc -76- 201000132
67 H2 N54A - 1.4 40 H2 G55A - 0.79 41 H2 D56A - 2.0 89 H2 T57A 一 0.61 90 H2 S58A - 0.92 91 H2 Y59A - 0.74 92 H2 N60A - 0.80 93 H2 Q61A - 0.83 94 H2 K62A - 0.44 95 H2 F63A - 0.51 83 H2 V71A - 0.96 149 H2 K64A 0.82 150 H2 G65A - 1.2 153 H3 V95A - 0.89 42 H3 V96A - 0.98 43 H3 Y97A 两 0.63 44 H3 Y98A - 0.40 45 H3 S99A - 0.84; 0.92 46 H3 N100A - 0.81 47 H3 SlOOaA - 0.85 48 H3 YlOObA - 0.78 49 H3 WlOOcA 0.02 59 H3 YlOOdA - 0.98 60 H3 FlOOeA - NDB 61 H3 D101A - 0.31 151 H3 V102A - 1.1 142593.doc -77- 201000132 117 LI - R24A 0.85 118 LI - A25G 0.86 119 LI - S26A 0.98 120 LI - S27A 0.98 121 LI - S28A 1.0 122 LI - V29A 0.41 50 LI - S30A 0.96 51 LI - Y32A 1.0 123 LI - M33A 1.0 124 LI H34A 0.21 125 L2 - A50G 0.92 126 L2 - P51A 0.88 52 L2 - S52A 0.80 53 L2 N53A 0.76 54 L2 - L54A 0.60 127 L2 - A55G 1.1 128 L2 - S56A 1.1 129 L3 Q89A 0.46 130 L3 - Q90A <0.22 55 L3 - W91A 0.88 56 L3 - S92A 1.1 57 L3 - F93A 0.36 58 L3 - N94A 0.61 131 L3 P95A NDB 132 L3 - P96A 0.18 133 L3 - T97A <0.22 142593.doc -78 - 201000132 實例3 2H7 CDR區域内額外的突變作用 亦測試CDR位置的其他另外殘基的取代作用及取代作用 的組合，這些取代作用經Ala-掃描確認相當重要。數種組 合變異體（特別是v_96)顯示比v. 16變異體鍵結的更為緊密。 表5.利用細胞-基礎ELISA(WIL2-S細胞）測定人源化 2H7.V16上CDR區域上突變作用及非-丙胺酸取代作用的組 合效應。相對鍵結力係以2H7.V16親本抗體濃度比上需要 相等鍵結力之變異濃度來表示；因此，比例<1表示變異體 具有較弱的親和力；比例> 1表示變異體的親和力較高。相 對測定值的標準偏差平均為+/-10%。相對2H7.V16可變區 域的架構區域取代作用係根據Kabat編碼系統（Kabat等人， 前述、。 2H7 變異體 重鏈 取代作用 輕鏈 取代作用 相對 鍵結 16 - - -1- 96 D56A、N100A S92A 3.5 97 S99T、N100G、YlOObI - 0.99 98 S99G、N100S、YlOObI - 1.6 99 N100G、YlOObI 0.80 101 N54S > D56A - 1.7 102 N54K > D56A - 0.48 103 D56A、N100A - 2.1 142593.doc -79- 201000132 104 S99T、N100G - 0.81 105 S99G、N100S - 1.1 106 N100G - 〜1 167 SlOOaG、YlOObS - 136 D56A、N100A S56A、S92A 2.6 137 D56A、N100A A55G、S92A 2.1 156 D56A、N100A S26A、S56A、 S92A 2.1 107 D56A、N100A、YlOObI S92A 未表現 182 Y27W - 183 Y27F - 184 F29Y - 185 F29W - 186 Y32F - 187 Y32W - 188 N33Q - 189 N33D - 190 N33Y - 191 N33S - 208 H35S - 209 A50S - 210 A50R - 211 A50V - 212 A50L - 142593.doc -80 - 201000132
168 Y52W - 169 Y52F - 0.75 170 N54D - 0.25 171 N54S - 1.2 172 D56K - 1 173 D56R - 174 D56H - 1.5 175 D56E - 1.2 213 D56S - 214 D56G 215 D56N - 216 D56Y - 176 Y59W - 177 Y59F - 180 K62R - 181 K62D - 178 F63W 179 F63Y - 157 Y97W - 0.64 158 Y97F 1.2 159 Y98W - 0.64 160 Y97F - 0.88 106 N100G - 161 WlOOcY 0.05 162 WlOOcF - 0.27 163 FlOOeY - 0.59 142593.doc •81- 201000132
164 FlOlEw - 0.71 165 D101N - 0.64 166 S99G、N100G、SlOOaD、 YlOOb刪除 - 0.99 217 V102Y - 1.0 207 H34Y 192 - Q89E 193 - Q89N 194 - Q90E 195 - Q90N 196 - W91Y 197 - W91F 205 - S92N 206 - S92G 198 - F93Y 199 - F93W 204 - F93S、N94Y 200 - P96L 201 - P96Y 202 - P96W 203 - P96R 實例4 人源化作用架構區域取代作用之突變 亦測試具有2H7.V16背景變異體架構位置上其他另外殘 142593.doc -82- 201000132 基的取代作用（係在人源化作用期間改變的）。明確言之， 係於VL(P46)及VH(G49，V71及K73)位置上產生既未發現 於老鼠2H7親本抗體亦未發現於人類一致性架構區域上的 另一種架構區域取代作用。 這些取代作用在相對鍵結上通常會導致小量的改變（表 6)，此表示這些位置上的架構區域殘基具有某些彈性。
表6.以細胞-基礎（WIL2-S細胞）分析架構區域取代作用之 相對鍵結。IgG變異體顯示具有與2H7.V16相關背景的突變 作用，相對鍵結係以2H7.V6.8嵌合體濃度比上需要相等鍵 結力之變異體濃度表示；因此’比例< 1表示變異體具有較 弱的親和力·，比例>1表示變異體的親和力較高。相對測定 值的標準偏差平均為+/-10%。相對2H7 vl6可變區域的架 構區域取代作用係根據〖讣以編碼系統（Kabat等人，前
述）（）變異體係以2H7 ·ν 16為標準比較者分析之；相對的 數值經與該嵌合體之數值標準化。
142593.doc -83- 201000132 83 V71A 84 G49S - 0.32 85 G49L - 86 - P46E 0.22 87 - P46V 0.51 88 - P46T 108 G49A、V71T、K73R S92A、M32L、P46T 0.026* 109 G49A、A49G、 V71T、K73R S92A、M32L、P46T 0.026* 110 K73R、D56A、N100A S92A、M32L 未表現 111 G49A、V71T、K73R - 0.46* 112 G49A、A50G、 V71T、K73R - 0.12* (*)變異艎係以2H7.V16為標準比較體分析之； 相對的數值經與該嵌合體的數值標準化。 實例5 具有較強效應子功能之人源化2H7變異體 因為經由補體-依賴性細胞毒性（CDC)及抗體-依賴性細 胞媒介細胞毒性（ADCC)兩者均可媒介溶解B·細胞，因 此，吾人欲探索具有較高CDC及ADCC活性之人源化 2H7.V16變異體。發生在Fc區域中的某些殘基之突變作用 已揭示（Idusogie等人，J. /mmMno/· 166:2571-2575 (2001)) 可藉增強鍵結至補體成分Clq上，而增強CDC。業已揭示 經由增強IgG鍵結至活化Fey受體及減低IgG鍵結至抑制性 FcY受體，以增強ADCC之突變作用（Shields等人， 276: 6591-6604 (2001) ; Presta等人，价oc/zew. Soc. I42593.doc -84- 201000132 7>α«·?· 30:487-490 (2002))。明確言之，已經確定有三個突 變作用可增進CDC及ADCC活性：如所述S298A/E333A/ K334A(Idusogie 等人，廣·逑（2001) ; Shields 等人，# 逑）（本專利說明書亦稱為三丙胺酸突變體或變異體；Fc上 的編號係根據EU編號系統；Kabat等人，#遽）。 為了增強2H7的CDC及ADCC活性，構築2H7 Fc的三丙胺 酸突變異體。已經製備出具有S298A/E333A/K334A突變之 抗-HER2抗體4d5之人源化變異體，亦稱為4D5FC110(換言 之，抗-p185HER2 IgGl(S298A/E333A/K334A) ; Shields 等 人，#逑）。編碼抗體4D5FcllO(Shields等人·，廣遮）之質體 p4D5FcllO經及//ζ·«ίΠΙΙ消化後，將Fc片段（含有突變 S298A/E333A/K334A)接合至 2H7 重鏈·載體 pDR2-vl6 的 位置上，以產生pDR2-v31。完整的31變異體 之Η鏈胺基酸序列示於圖8中，而L鏈則與vl6變異體者相 同。 雖然IgGl抗體的Fc區域的固定區域在某特定物種中相當 的保守，但是仍存有對偶基因變異（Lefranc及Lefranc總 論，於人類IgG亞型：結構分子分析、功能及調節，43-78 頁，F. Shakib(出版），Pergammon印行，牛津（1990))。 表7· Fc區域的取代作用對CD20鍵結的效應。與CD20相 對鍵結力係以細胞-基礎（WIL2-S細胞）分析法測定架構區 域取代作用。Fc突變（*)係以EU編碼系統（Kabat，#避·）所 示，並相對於2H7.V16親本抗體。v.31變異體的Fc區域上三 個丙胺酸改變的組合係以"FcllO"表示，IgG變異體顯示具 142593.doc •85· 201000132 有與2H7.V16相關背景的突變作用，相對鍵結力係以 2H7.V6.8嵌合體濃度比上需要相等鍵結力之變異體濃度表 示；因此’比例<1表示變異體具有較弱的親和力。相對測 定值的標準偏差平均為+/_ 1 〇%。 2H7 變異體 Fc 取代作用* 相對 鍵結 6.8 -1- 16 - 0.65 31 S298A、E333A、K334A 0.62 實例6 具有較高穩定性的人源化2H7變異體 為了開發治療性蛋白質’咸欲在有關氧化作用、去醯胺 作用或其他可以影響產物品質的流程上，選擇出於適當調 配物緩衝液中仍保有穩定性的變異體。在2H7.V16中，已 鑑疋出數種的殘基（VL(M32)及Vh(M34、N100))可能是不穩 疋性的來源。因此，在這些位置處引入突變以便與v 1 6變 異體比較。 表8.以細胞-基礎（WIL2-S細胞）分析用以增強穩定性及/ 或效應子功能之2H7變異體對CD20之相對鍵結力。IgG變 異體顯示具有與2H7.vl6相關背景的突變作用，相對鍵会士 力係以2H7.V6.8嵌合體濃度比上需要相等鍵結力之變異體 濃度表示；因此，比例<1表示變異體具有較弱的親和力； 比例>1表示變異體的親和力較高。相對測定值的標準偏差 平均為+/-10%。相對2H7.vl 6可變區域的架構區域取代作 142593.doc -86 - 201000132 用係根據Kabat編碼系統，而Fc突變（*)則係以EU編碼系統 所示（Kabat等人，#遂·）。（**)變異體係以2Η7·ν16為標準 比較者分析之；相對的數值經與該嵌合體之數值標準化。 額外的Fc突變與穩定性或增強親和力突變組合，以改變 或增強根據前所報導突變作用效應子功能（Idusogie等人 (2000) ; Idusogie等人，（2001) ; Shields 等人（2001))。這些 改變包括實例5中所述的S298A、E333A、K334A ;降低 CDC活性的K322A;降低ADCC活性的D265A;增強CDC活 ^ 性的K326A或K326W ;及試驗Fc區域上同種異型變化效應 的E356D/M358L。這些突變在CD20鍵結親和力上均未造 成明顯的差異。 2H7 變異體 重鏈(vH) 變化 輕鏈(Vl) 變化 Fc變化* 相對 鍵結 6.8 (嵌合體） (嵌合體） - -1- 16 - - 0.65 62 M32I - 0.46 63 M34I - - 0.49 64 N100A - - 65 N100A L47W 0.74 66 S99A L47W - 0.62 67 N54A - - 68 M32I - 0.48 69 - M32L 0.52 70 N100A - S298A、E333A、 K334A 0.80 142593.doc -87- 201000132 71 N100D - S298A、E333A、 K334A 0.44 72 N100A M32I 0.58 73 N100A M32L - 0.53 74 N100A M32I S298A、E333A、 K334A 0.61 75 N100A M32L S298A、E333A、 K334A 0.60 113 - - E356D、M358L 0.60** 114 D56A、N100A M32L、S92A S298A、E333A、 K334A 1.2** 115 D56A、N100A M32L、S92A S298A、E333A、 K334A、E356D、 M358L 1.4** 116 D56A、N100A M32L ' S92A S298A、K334A、 K322A 1.2** 134 D56A、N100A M32L、S92A E356D、M358L、 D265A 1.5** 135 D56A、N100A M32L、S92A E356D、M358L、 D265A ' K326W 0.95** 138 D56A、N100A M32L、S92A S298A、E333A、 K334A、K326A 1.2** 139 D56A、N100A M32L、S92A S298A、E333A、 K334A、K326A、 E356N、M358L 1.1** 154 - D265A 0.70** 155 - - S298A、K322A、 K334A 0.70** (**)變異體係以2H7.V16為比較者測定之； 相對鍵結數值經與嵌合體數值標準化。 為了試驗穩定性突變對蛋白質分解速率的效應，將 142593.doc 88- 201000132 2H7.V16及2H7.V73以濃度12-14毫克/毫升調配於10 mM組 胺酸、6%蔗糖、0.02%聚山梨醇20，pH 5.8中，並在40°C 下培養16天，而後將經培養的樣品經離子交換層析、凝集 及藉由分子量大小排除層析之分片作用後，分析變異體的 變化’並以細胞-基礎（WIL2-S)分析相對鍵結。 ❹ ❷ 結果（圖9)顯示在加速穩定性條件下，以離子交換層析流 失主峰分液後，2H7.V73的穩定性較2Η7·ν16大。有關凝 集、分片作用或鍵結親和力並無明顯差異。 實例7 抗體鍵結至WIL2-S細胞上CD20的史氏分析 利用放射性標記的2Η7 IgG來測定2Η7 IgG變異體鍵結至 WIL2-S細胞的平衡解離常數（Kd)。IgG變異體係在CHO細 胞中產生，Rituxan®(所有實驗的來源為Genentech，南三 蕃市’加州），而老鼠2H7(BD PharMingen，聖地牙哥，加 州）則用來與人源化變異體做比較。老鼠2H7抗體亦獲自其 他來源’例如：eBioscience及Calbiochem(兩者均位於聖地 牙哥’加州）、Accurate Chemical & Scientific公司（威斯特 柏利城’紐約州）、Ancell(培伯特城，明尼蘇達州）及 Vinci-Bi〇chem(文西城，義大利）。所有的稀釋均在鍵結分 析緩衝液（含有l%牛血清白蛋白、25mMHEPESpH7.2及 0.01%疊氮鈉之DMEM培養基）中進行。將濃度為0.8 nM的 125Ι·2Η7·νΐ6(用乳酸過氧化酶進行碘化作用）分液（0.025毫 升）分裝至96槽孔V底的微量分析盤中，並加入連續稀釋的 冷抗體（0.05毫升）及混合，而後加入WIL2-S細胞（0.025毫 142593.doc • 89- 201000132 升有60,000個細胞），將微量分析盤封起來，置於室溫下培 養24小時，而後以3,500 RPM速度離心15分鐘，吸掉澄清 液，並清洗細胞沉澱物並離心，再次抽掉澄清液，將沉澱 物溶解於IN NaOH中，並移至試管中進行珈瑪計數。將數 據利用程式Ligand(McPherson，Compwi. /Vograms 丄 17: 107-1 14 (1983))作史氏分析（Munson及 Rodbard，/如/. 107:220-239 (1980))。結果（如表 9 所示）顯示，人 源化2H7變異體與老鼠2H7比較，具有相似的CD20鍵結親 和力，與Rituxan®具有相似的鍵結親和力。根據上述表7所 述的鍵結，咸預期2H7.V31與vl6具有非常相似的Kd。 表9.以史氏分析之2H7變異體平衡鍵結親和力 抗體變異體 Kd(nM) η Rituxan 0.99 ±0.49 3 2H7(老鼠） 1.23 ± 0.29 3 2H7.V16 0.84 ± 0.37 4 2H7.V73 1.22 ± 0.39 4 2H7.V75 1.09 ± 0.17 4 實例8 補體依賴性細胞毒性（CDC)分析 本質地如（Idusogie 等人，乂 Immunol. 164:41 78-4 184 (2000) ; Isusogie等人，J. 166:2571-2575 (2001)) 所述，來分析2H7 IgG變異體媒介補體依賴性溶解WIL2-S 細胞（一種表現CD20淋巴母細胞B-細胞株）的能力。將0.1 毫克/毫升的抗體儲備溶液以1 : 3稀釋比例進行連續稀 142593.doc -90- 201000132 釋。將0.05毫升各稀釋度分液加至96槽孔的組織培養盤（内 含0.05毫升正常人類補體（Quide卜聖地牙哥城，加州）的 溶液）中，在此混合物中，加入0.05毫升體積内含50,000個 WIL2-S細胞，置於37°C下培養2小時後，加入0.05毫升的 Alamar藍溶液（Accumed International，威斯雷克城，俄亥 俄州），並於37°C下再連續培養1 8小時，取下培養盤的蓋 子，於室溫下，將培養盤置於圓形旋轉器上振盪15分鐘， 利用530奈米激發濾片及590奈米發射濾片讀取相對螢光單 ® 位（RFU)，利用KaleidaGraph軟體，將RFU對應各抗體濃度 做繪出函數圖形求出EC50。 結果（表10)顯示，人源化2H7抗體在CDC上具有令人驚 If的增加，v.73變異體的相對效價與Rituxan®相似，v.75變 異體則比Rituxan®高3倍，而v.16比Rituxan®低3倍。 表10. 2H7與Rituxan的CDC活性比較。數值>1表示比 Rituxan®的CDC活性效價低，而數值<1則表示比Rituxan® φ 的CDC活性效價高。抗體係從穩定的CHO細胞株所產生 的，而以（*)表示者除外，其係為暫時性轉染細胞產生的抗 體。 抗體變異體 η EC5〇(變異體)/EC5〇(Rituxan) Rituxan® 4 -1- 2H7.V16 4 3.72 ； 4.08 2H7.V31* 4 2.21 2H7.V73 4 1.05 142593.doc -91 - 201000132 2H7.V75 4 0.33 2H7.V96* 4 0.956 2H7.V114* 4 0.378 2H7.V115* 4 0.475 2H7.V116* 1 >100 2H7.V135* 2 0.42 實例9 抗體依賴性細胞毒性（ADCC)分析 本質地如（Shields等人，J. Biol.Chem. 276:6591-6604 (2001))所述，以乳酸去氫酶（LDH)解析來分析2H7 IgG變 異體媒介天然殺手細胞（NK細胞）溶解WIL2-S細胞（一種表 現CD20淋巴母細胞B-細胞株）的能力。從取自正常人類供 體（其對FcyRIII(亦稱為CD16)具有同種型）(Koene等人， 90:1109-1114 (1997)之100毫升經肝素處理之血液中 製備出ΝΚ細胞，以100毫升PBS(磷酸緩衝鹽液）稀釋之。 在此實驗中，得自人類供體的ΝΚ細胞為CD16的異合體 (F158/V158)。將稀釋的血液舖層在15毫升的淋巴細胞分 離培養基（ICN Biochemical，奥羅拉城，俄亥俄州）上，並 以2000 RPM轉速離心20分鐘。將介於液層間的白血球分 裝注入至4支乾淨的50-毫升試管中，該試管中裝有内含 15%胎牛血清之RPMI培養基。試管以1400 RPM轉速離心5 分鐘，並丟棄澄清液，將沉澱物重新懸浮於MACS緩衝液 (0.5% BSA、2 mM EDTA)中，而NK細胞係根據製造商的 步驟（Miltenyi Biotech)以小珠（NK細胞分離套組，130-046- 142593.doc -92- 201000132 502)純化之。NK細胞在MACS緩衝液中稀釋至2χ 106個細 胞/毫升。 在96槽孔的圓底組織培養盤中加入溶於分析培養基 (F12/DMEM 50:50，不含甘胺酸、1 mM HEPES緩衝液pH 7.2、青黴素/鏈黴素（100單位/毫升；Gibco)、麩胺醯胺及 1%熱失活胎牛血清）之連續稀釋抗體（0.05毫升）。用分析緩 衝液將WIL2-S細胞稀釋成4xl05個細胞/毫升，將WIL2-S細 胞（每個槽孔0.05毫升）與96槽孔培養盤中的抗體混合，並 在室溫下培養30分鐘，使抗體可以鍵結至CD20上（調理作 用）。 在每個槽孔中加入0.1毫升的NK細胞開始啟動ADCC反 應，控制組的槽孔中則加入Triton X-100，而後將培養盤 置於37°C下培養4小時，利用細胞毒性（LDH)偵測套組（套 組#1644793，Roche Diagnostics，印第安納波里，印第安 納州），根據製造商的說明測定所釋放的LDH含量。在每 個槽孔中加入0.1毫升的顯色劑，而後混合10秒鐘，用鋁 箔將培養盤蓋上，於室溫暗室下培養15分鐘，後讀取490 奈米處的讀值，除以控制組槽孔中所測定的LDH值，求出 溶解的百分比。將溶解作用對應抗體濃度繪出函數圖形， 並以4-參數曲線圖（KaleidaGraph)求出EC50濃度。 結果顯示，人源化2H7抗體在ADCC上具有活性，v.31及 v.75變異體的相對效價比Rituxan®高20倍，v.16變異體的效 價比Rituxan®高5倍，而ν·73變異體的效價幾乎是Rituxan®4 倍。 142593.doc -93- 201000132 表11.根據η次的實驗結果，2H7抗體相較2H7.V16變異體 對WIL2-S細胞的ADCC活性之結果（數值>1表示比2H7.V16 的效價低，而數值<1則表示具有較高的效價） 抗體變異體 N EC50(變異體)/EC50(2H7.v16) Rituxan® 4 5.3 2H7.V16 5 1 2H7.V31 1 0.24 2H7.V73 5 1.4 2H7.V75 4 0.25 進行另外的ADCC分析，以比較2Η7組合式變異體與 Rituxan®。這些分析結果顯示，2H7.V114及2H7.V115之 ADCC效價比Rituxan®增加10倍以上（表12)。 表12.根據η次的實驗結果，2H7抗體相較Rituxan®對 WIL2-S細胞的ADCC活性之結果（數值>1表示比Rituxan®的 效價低，而數值<1則表示具有較高的效價） 抗體變異體 EC5Q(變異體)/EC5〇(Rituxan) Rituxan® 2 -1- 2H7.V16 2 0.52 2H7.V96 2 0.58 2H7.V114 2 0.093 2H7.V115 2 0.083 2H7.V116 2 0.30 142593.doc •94- 201000132 實例ίο 2H7變異體在食蟹猴活體内試驗性研究中的效應 為評估2H7變異體（暫時轉染CHO細胞所產生者）在活體 内的活性’將其於正常雄性食蟹猴中 試驗之。其他抗-CO20抗體（諸如C2B8(Rituxan®))業已證明 在正常靈長動物中具有減損B-細胞的能力（Reff等人， Blood 83:435-445 (1994)) 〇 在一個研究中，比較人源化2H7變異體。在平行對等的 研究中，Rituxan®亦在食蟹猴中進行試驗。在五組投藥中 每一組用了四隻猴子：（1)媒劑，⑺0·05毫克/公斤 hu2H7.vl6，（3)10 毫克/公斤 hu2H7.vl6，（4)0.05 毫克/公斤 hu2H7.v3 1 ’及（5)10毫克/公斤hu2H7.v3 1。以靜脈内方式 投與濃度為0、0.2或20毫克/毫升的抗體，在研究的第1天 及第8天各施與1劑，共施與兩劑。投藥的首日定為天1， 而前一日則定為天-1 ;恢復的首曰（每組有兩隻動物）定為 天11。在天-19、_12、1(投藥前）及首劑後第6小時、24小 時及72小時後，收集血液樣品，另外在天8(投藥前）、天 1 〇(殺死每組2隻動物前）及天36及67(恢復動物）取出樣品。 利用計數CD3-/CD40+細胞的FACS方法來測定週邊8_細 胞濃度。猴子樣品中總淋巴細胞的CD3-CD40+B細胞的百 分比係利用下列的限制參數獲得。淋巴細胞群標記在向前 掃描/側光掃描，以界定區域1(R1)，利用R1的結果，登光 強度點圖係為CD40及CD3的標記’經螢光標記同種型控制 組係用以測定CD40及CD3為陽性反應之相對臨界值點。 142593.doc •95- 201000132 結果顯示，2H7.V16及2H7.v31兩者在10毫克/公斤濃度 時均能產生完全的週邊B-細胞減損，而為〇·〇5毫克/公斤濃 度時則為部份的Β-細胞減損（圖11)。此兩種抗體在投藥後 的前72小時間所測定的時間點及Β_細胞減損程度相似，從 恢復的動物續後的分析顯示，經2Η7.ν3 1處理的動物相較 經2Η7·ν 16處理者’顯示具有較長的Β_細胞減損時間，明 確言之’經以10毫克/公斤2Η7ν16處理後之恢復動物顯 示’實質上B-細胞恢復的時間點介於天10及天36的取樣時 間。然而’經以10毫克/公斤2H7.v31處理之恢復細胞而 言’一直到天36及天67天間，其B-細胞並未顯示恢復。此 推論2H7.V31較2H7.V16的完全減損期間長約1個月。 不論低或高劑量均未在動物中發現毒性現象，且整體的 病理是正常的。 以2H7.V16對Rituxan®處理食蟹猴的數據推論減少5倍的 CDC活性不會有負面的影響效果。關於首次的灌注反應而 言，具有ADCC活性但較低CDC活性的抗體與具有較高的 CDC之抗體比較’其更具有利的安全性效果， 實例11 缺乏岩藻糖2H7變異抗體具有較強的效應子功能 將岩藻糖加至正常的CHO及HEK293細胞的IgG募醣上至 相當咼的程度（97-98%) ’血清中的ig〇亦相當高度岩藻糖 化。 使用DP12(缺乏二氫葉酸還原酶⑴册⑺的CH〇細胞株， 該細胞係可以進行岩藻糖化作用）及Lec 13(無法進行蛋白質 142593.doc -96- 201000132 岩藻糖化作用的細胞株）來生產本研究用抗體。CHO細胞 株Pro-Lecl3.6a(Lecl3)得自猶太大學愛因斯坦醫學院的 Pamela Stanley教授，親本細胞株為Pro-(脯胺酸營養缺陷 型）及Gat-(甘胺酸、腺苷及胸腺嘧啶營養缺陷型）。CHO-DP12細胞株係為CHO-K1細胞株（ATCC#CCL-61)的衍生 株，其缺乏二氫葉酸還原酶，且對胰島素需求較低。利用 Superfect方法（Qiagen，瓦倫西亞城，加州）用cDNA轉染細 胞株。利用含有10微克/毫升嘌呤黴素二氣化氫 (Calbiochem，聖地牙哥城，加州）之生長培養基篩選出可 表現轉染抗體之Lecl3細胞，該生長培養基為：具有麩胺 醯胺、核醣核苷及去氧核醣核苷之MEM阿爾法培養基 (GIBCO-BRL，蓋士堡城，馬里蘭州），並添加10%失活 FBS(GIBCO)、10 mM HEPES 及 IX 青黴素 / 鏈徽素 (GIBCO)。以相似的方式在含有Ham's FA12(沒有GHT)之 生長培養基（即沒有甘胺酸、含有NaHC03、添加5% FBS(GIBCO)、10 mM HEPES、2 mM L-麩胺醯胺、1X GHT(甘胺酸、次黃嘌呤、胸腺嘧啶）及ιχ青黴素/鏈黴素之 低葡萄糖DMEM)來篩選CHO細胞 細胞群落會在兩至三週内形成，將其混在一起以便進行 細胞增幅及蛋白質表現。開始時將3 X106個細胞混合液種 植於10公分的培養盤中，以小批次進行蛋白質表現。一旦 細胞生長至90-95%的滿度，則將細胞轉換至不含血清的培 養基中，且於3-5天後，收集細胞澄清液，並以Fc IgG-及 完整的IgG-ELISA測試蛋白質表現量。在轉換至PS24生產 142593.doc -97· 201000132 培養基（添加ίο毫克/升重組人類胰島素及i毫克/升微量元 素）的前一天，將大約8χ106個細胞之Leci3及CH〇細胞種植 在15公分的培養盤中。 將Lecl3細胞及DP12細胞保持在不含血清的生產培養基 中3-5天’收集澄清液，並置於15〇毫升的錐底管中，以離 心方式淨化去除細胞及細胞殘渣。加入蛋白酶抑制劑 PMSF及抑肽酵素（Sigma，聖路易士城，蒙大拿州），在以 蛋白質G層析法（Amersham Pharmacia Biotech，匹兹卡特 威城，紐澤西州）進行純化作用之前，先利用MWCO30遽 膜（Amicon，比佛利城，麻薩諸塞州）將澄清液於攪拌槽中 濃縮5倍’利用Centripriep-30濃縮器（Amicon)將所有蛋白 質的緩衝液置換成磷酸緩衝鹽液（PBS)，並以SDS-聚丙稀 醯胺膠片電泳法分析之。利用A280測定蛋白質濃度，並利 用胺基酸組成分析確認之。 CHO細胞經可表現人源化2Η7ν· 16、2Η7ν·3 1之載體轉 染’並以上述方式篩選之。2Η7ν. 16抗體保留野生型的Fc 區域’而v.3 1(參見前述實例5，表7)所具有的Fc區域其中 有3個胺基酸改變（S298A、E333A、K334A)，其會導致對 FcyRIIIa受體具有較高的親和力（Shields等人，J. Biol. Chem. 276(9):6591-6604 (2001))。經過轉染作用及篩選作 用後，分離個別的細胞群落，並評估蛋白質表現量，並將 最高產生量的細胞群落經曱氨蝶吟篩選，以篩選出經增幅 質體拷貝數量的細胞’經此可以生產出高量的抗體。培養 細胞’將細胞轉換至不含有血清的培養基中7天，而後收 142593.doc -98- 201000132 集培養基，加至蛋白質A管柱上，利用標準技術沖堤抗 體。利用測定完整抗體的Elisa方法測定抗體的最終濃度， 利用Centripriep-30濃縮器（Amicon)將所有蛋白質的緩衝液 轉換成磷酸緩衝鹽液（PBS)，並以SDS-聚丙烯醯胺膠片電 泳法分析之。 天冬胺酸-連結寡醣之基質輔助雷射脫附/游離飛行時間 (MALDI-TOF)質譜分析：利用 Papac 等人，Gbcobioiogy 8, 445-454 (1998)中所述的步驟釋放出重組醣蛋白中的N-連 結寡醣。簡而言之，以100微升甲醇將襯有PVDF的96槽孔 之微量盤（Millipore，比德福城，麻薩諸塞州）調整至良好 狀態，藉由對Millipore Multiscreen真空歧管抽取真空，將 甲醇經PDVF膜抽掉。用3x250微升的水清洗經調整的 PVDF膜。在所有的清洗步驟之間，對歧管輕輕施與柚真 空來完全抽掉槽孔中的水分。以由6 Μ胍氫氯酸、360 mM Tris、2 mM EDTA，pH 8·6所組成之還原及羧基甲基化作 用緩衝液（RCM)清洗該膜。在每個個別槽孔中加入醣蛋白 樣品（50微克），輕輕的抽真空經PVDF膜將其抽乾，並用 2x50微升的RCM缓衝液清洗槽孔。每個槽孔中加入50微升 的0.1 Μ二硫蘇糖醇（DTT)溶液以還原固定樣品，將微量盤 置於37°C下培養1小時。真空抽氣去除DTT，用4x250微升 水清洗槽孔，加入50微升的0.1 Μ碘乙酸（IAA)溶液（新鮮配 製於1 M NaOH中，並以RCM稀釋至0.1 Μ)將半胱胺酸羧基 曱基化，培養在暗室室溫下30分鐘後，完成羧基曱基化作 用，對培養盤施與真空抽氣去除IAA溶液，並以4x250微升 142593.doc -99- 201000132 純水清洗槽孔’添加100微升的}% PVP360(聚乙烯吡咯烷 酮360,000分子量）（sigma)溶液’並置於室溫下培養1小時 阻斷PVDF膜’輕輕地抽真空去除pvp_36〇溶液，並以 4><25〇微升水清洗槽孔’每個槽孔中加入pNGase F(New Enlgand Biolabs，比佛利城，麻薩諸塞州）消化溶液（溶於 10 mM Tris乙酸，25微升之25單位/毫升溶液），並於37t 下進行3小時消化作用。消化後，將樣品移至5〇〇微升的離 〜小管中’每個樣品中加入2.5微升之丨·5 μ乙酸溶液，酸 化的樣品置於室溫下培養3小時，以便將寡糖從糖苷胺轉 ❹ 換成羥基形式。在進行MALDI_T〇F質譜分析之前，利用 0.7毫升厚床的陽離子交換樹脂（氫型態的AG5〇w_x8樹 脂）（Bio_Rad，赫丘力士城，加州）混水裝載至緊密反應管 柱（US Biochemica卜克利夫蘭城，俄亥俄州）中，以便將 所釋放的寡醣去鹽化。 以陽性模式樣品的MALDI_T〇F質譜分析而言，去鹽化 寡醣（0.5微升分液）加至具有〇5微升2,5二經基苯曱酸基質 (SDHB)(其係將2毫克2,5二羥基笨甲酸與〇」毫克的5·甲氧❹ 基水楊酸溶解於體積比為1 : 1之1毫升曱醇Π0 mM氣化鈉 混σ令液中而製備的）不鏽鋼標的上。以真空來乾燥樣品/ 土質混〇物以陰性模式的分析作用而言，將去鹽化n-連 結募醣（0.5微升分液）混與〇 5微升2，，4，，6|_三羥基苯乙酮基 質（ΤΗΑΡ)(以體積比為1:3之乙/133囊檸檬酸錄緩衝液 製備之）施與不鏽鋼標的上。樣品/基質混合物經真空乾 燥’而後於分析前吸收大氣中的溼氣，於 142593.doc •100- 201000132
BioSystems Voyager-DE質譜儀上，以MALDI_T〇F分析所 釋放的募聽。質譜儀係在20 kV下，以直線架構的陽性或 陰性模式，並利用延遲萃取方式進行操作。數據需要使用 1300雷射力量及數據合計模式（240掃描），以改善對雜訊的 訊號。用標準募醋的混合物來校正儀器，在指定質量之 前’利用19點Savitsky-Golay計算法求出最佳數據，利用 Caesar 7.0數據分析軟體套組（SciBridge軟體）完成質譜數據 的積分。 天然殺手（NK)細胞抗體依賴性細胞毒性分析 一如實例9中所述者進行ADCC的分析。NK與標的細胞 (WIL2-S)的比例為4比1，分析進行4小時，毒性係以前所 利用的乳糖去氫酶分析法測定之。在添加NK細胞之前， 標的細胞以所指濃度之抗體調理30分鐘，所用的Rituxan® 為Genentech(南三蕃市，加州）者。圖12所示為代表性 ADCC分析的結果。 結果顯示，岩藻糖化程度較低之抗體與完全岩藻糖化之 抗體相較’其所媒介殺死NK細胞標的細胞上更為有效 率。在媒介殺死標的細胞上，岩藻糖化程度較低的抗體， 2H7.V3 1，是最有效率的，此抗體在較低的濃度就有效 果’且其在較高濃度下與其他的抗體相較，所媒介殺死標 的細胞之能力具有較高的百分比。抗體的活性如下： Lecl3-衍生 2H7.v31>Lec 13 衍生 2H7.vl6>Dpl2 衍生 2117^31>0?12衍生2117^16>或=1^1^&11。蛋白質及碳水化 合物的改變具有加成的效果，比較Lecl3-所產生的天然 142593.doc •10卜 201000132
IgG及CHO-產生的IgG上所發現的碳水化合物，發現半乳 糖化作用的程度上並無明顯的差異，因此，此結果只能歸 因於岩藻糖的存在/缺乏有關。 實例12
缺乏岩藻糖2H7變異體抗體在活體内具較高的ADCC 本實例係說明比較以Lec 13產生之缺少岩藻糖人源化2H7 變異體（包括v. 16及v.31)與以DPI 2產生之具正常岩藻糖化 對應部分在可以表現人類CD16[FcRyIII]及人類CD20之老 鼠中的ADCC活性。 Θ 產生 huCD20Tg+huCD16Tg+mCDI6 "老鼠 從人類CD20 BAC DNA(Invitrogen，卡斯柏城，加州）產 生人類CD20轉基因老鼠。先根據FACS分析篩選出能表現人類 CD20的老鼠，而後將huCD20Tg+老鼠與huCD16Tg+mCD16-/-老 鼠交配，以產生huCDlOTg+huCDWTg+mCD：^-"老鼠。 活體内處理方式 經由腹腔内注射法，投與huCD20Tg+huCD16Tg+mCD16-/-老鼠10至100微克之2H7變異體或Ritιιxan®。等量的同種型 ® 相符的抗體以相似的方法投與陰性控制組的動物。 老鼠淋巴細胞的製備 根據"免疫學現今步驟，John Coligan，Ada Jruisbeek，
David Margulies 出版，Ethan Shevach及 Warren Strober 印 行，1994"中所述的標準步驟，自老鼠的全血、胰臟、淋 巴結及骨髓中製備老鼠的淋巴細胞。 FACS分析法 142593.doc -102- 201000132 清洗五十萬個細胞，並重新懸浮於100微升（其含有5微 升著色抗體或控制抗體）之FACS緩衝液中，該緩衝液為含 有1°/。BSA的磷酸缓衝鹽液。所有的著色抗體（包括同種型 抗體控制組）係得自PharMingen，聖地牙哥城，加州。藉 由與Rituxan®及FITC-共軛抗-人類IgGl第二種抗體的染色 作用來評估人類CD20的表現作用。FACS分析法係以 FACScan及 Cell Quest(Becton Dickinson Immunocytometry Systems，聖約瑟城，加州）進行的。所有的淋巴細胞均界 定在向前及側光的掃描面，而所有的B淋巴細胞則係指細 胞表面上表現B220者。 動物注射後首週及其後的每週，利用FACS每曰分析胰 臟、淋巴結及骨髓中週邊B細胞數目及分析hCD20+B細 胞，以評估B細胞減損及回復量。 此活體内分析的結果證實活體外的發現，即缺乏岩藻糖 2H7變異體比經相對醣化的野生型（係指岩藻糖化作用）具 有較高的ADCC活性及較大的B細胞減損。 實例13 細胞凋零活性 業已證明抗-CD20抗體（包括Rituxan®)經另一抗體或化學 方式交錯連結後，可誘發活體外的細胞凋零（Shan等人， Blood 9:1644-1652 (1998) ; Byrd等人，Blood 99:1038-43 (2002) ; Pederson等人，Blood 99:1314-19 (2002))。當以 化學方式交錯連結時，老鼠2H7雙體可誘發Daudi細胞的細 胞凋零（Ghetie等人，Proc Natl Acad Sci USA 94:7509-14 142593.doc -103- 201000132 (1997))。老鼠2H7抗體與另一抗體交錯連結後亦可誘發細 胞凋零（Shan等人，1998)。咸信這些活性是與生理學上具 有關聯性的，因為許多的機制會導致活體内抗-CD20抗體 鍵結至細胞表面CD20上之交錯連結。 利用另一種交錯連結的抗體，在活體外以細胞凋零分析 法來比較rhuMAb 2H7.V16[人源化 2H7.V16 ; rhuMAb 代表 重組性人類單株抗體]及Rituxan®。用一種可表現CD20的 人類B淋巴細胞株（Rain〇s細胞，CRL-1596，ATCC，馬納 薩斯城，佛吉尼亞州）經由膜聯蛋白V及碘化丙啶染劑排放 方法（Vybrant®，細胞调零分析套組，Molecular Probes， 西雅圖城，華盛頓州）來測量抗-CD20單株抗體rhuMAb 2117.乂16及利特西馬（11^1^丨11^13)相較陰性控制組抗體-特茲 如馬（Trastuzumab)(Herceptin®，Genentech，南三蕃市，加 州）誘發細胞凋零的能力。將Ramos細胞培養在含有10%胎 牛血清（Biosource International ’卡馬利歐城，加州）及2 mM 麩胺醯胺（Gibco)之RMI-1640培養基（Gibco，洛克菲洛，馬 里蘭州）中，在進行分析之前，以新鮮的培養基清洗細胞 兩次，並將細胞濃度調整至每毫升為2xl06個，將細胞（150 微升）加至含有150微升混有F(ab)'2山羊抗-人類Fc抗體 (Pierce Biotechnology，羅克福德城，伊利諾州）之事先定 量之控制IgGl、rhuMAb 2H7.V16，或利特西馬之96槽孔的 分析盤（Becton Dickinson，帕洛阿爾托城，加州）。最終 IgG 濃度為 100、10、1_0、0.1、0.01 及 0.001 nM，而 F(ab)’2山羊抗-人類Fc抗體的濃度則為個別樣品抗體濃度 142593.doc 104 201000132 的兩倍。每個稀釋度進行三重複。在37°C下培養24小時 後，用PBS清洗細胞兩次，而後根據製造商的建議說明以 膜聯蛋白V及块化丙。定染色，用FACscan流動細胞儀 (Becton Dickinson，聖約瑟城，加州）以流動細胞學來分析 Ramos細胞的染色型態，而收集1 0秒段的數據，利用 Cellquest Pro 軟體（Becton Dickinson)推導據數。計算（1)膜 聯蛋白V染色、（2)膜聯蛋白V及碘化丙啶雙重染色為陽性 反應的Ramos細胞，及（3)未經染色之活細胞數目，並以 KaleidaGraph軟體（協同軟體，雷丁城，賓夕法尼亞州）繪 圖。 相較與不相關的IgGl控制抗體交錯連結，當rhuMAb 2H7.V16及利特西馬兩者與抗-人類Fc抗體交錯連結後均可 誘發Ramos細胞的細胞;周零（圖13 -1 5)。rhu.MAb 2H7的細胞 >周零活性稍微比利特西馬低。當交錯連結rhuMAb 2H7、 利特西馬及控制IgGl抗體濃度為10 nM時，經膜聯蛋白V 染色細胞部分分別為18.5、16.5、2.5%，經雙重標記的細 胞部分為29、38及16%，而每10秒鐘所計算的活細胞則為 5200、3100及 8600 ° 這些活體外的數據證明細胞凋零係造成活體内B細胞減 損的一種可能機制。活體内rhuMAb 2H7或利特西馬交錯 連結鍵結至細胞表面CD20上可能係經由免疫效應子細胞 表面上的FcyR發生的。 實例14 活體内抑制腫瘤生長 142593.doc -105- 201000132 在Balb/c裸鼠（無胸腺）中評估rhuMAb 2H7.vl6抑制Raji 人類B-細胞（淋巴瘤細胞株（ATCC CCL 86))的生長能力。 Raji細胞能表現CD20，其經報導可在裸鼠中生長，產生轉 移性的疾病；且Rituxan®可抑制腫瘤生長（Clynes等人， ^/\^以"6^/^心£^；7^6，443-446 (2000))。將56隻8-10週大的 Balb/c裸鼠分為7組（A-G)，每組由8隻老鼠組成。在第0天 時，每隻老鼠以皮下注射方式於側腹接受5x1 06個Raji B-淋巴瘤細胞。在第0天開始時，每隻老鼠分別接受100微升 的陰性控制組溶液（PBS ;磷酸缓衝液）、Rituxan®或 2H7.V16，劑量端視體重而定，並經尾巴靜脈以靜脈内方 式傳送藥劑。A組老鼠接受PBS，B-D組老鼠分別接受5.0 毫克/公斤、0.5毫克/公斤及0.05毫克/公斤的Rituxan®，E-G組老鼠分別接受5.0毫克/公斤、0.5毫克/公斤及0.05毫克/ 公斤的2H7.V16，每週重複注射共達6週。治療期間於每週 間隔時以觸診方式檢查每隻老鼠在注射位置處所存在之腫 瘤，倘若有腫瘤的存在，測量及紀錄腫瘤的體積。最後的 檢查是在第8週（未治療後兩週間隔）。 此研究的結果顯示rhuMAb 2H7.V 16及Rituxan®在抑制裸 鼠皮下Raji-細胞腫瘤生長是有效果的（圖16-18)。PBS控制 組開始於第4週時發現腫瘤生長，然而，在研究8週期間經 以5毫克/公斤及0·5毫克/公斤的Rituxan®或2H7.V16處理者 均未發現有腫瘤的生長，以低劑量0.05毫克/公斤處理組 中，在2H7組中有一隻動物及在Rituxan®組中有一隻動物 發現腫瘤（圖18)。 142593.doc •106- 201000132 實例is 選殖食蟹猴CD20及抗體鍵結 從食蟹猴胰臟cDNA庫中分離出編碼CD20的cDNA，測 定食蟹猴（Macaca fascicularis)CD20 DNA之序列。將cDNA 合成及質體選殖之SUPERSCRIPTtm質體系統（目錄編號 # 18248-013，Invitrogen，卡斯柏城，加州）稱做改良來構 築核酸庫，利用限制酶切割位置Xho I-及Not I，將cDNA 庫接合至PRK5E載體上。從胰臟組織中分離出mRNA(加州 區域研究靈長動物中心，戴維斯，加州）。根據人類CD20 的非編碼序列設計出用以增幅編碼CD20的cDNA的引子， 利用聚合酶鏈反應（PCR)，使用N-端區域引子5^ AGTTTTGAGAGCAAAATG-3'及 C-端區域引子 5·-AAGCTATGAACACTAATG-3'選殖編碼食蟹猴 CD20 的 cDNA。根據製造商的建議（Gibco，洛克菲洛城，馬里蘭 州），使用鉑Taq DNA高忠誠度之聚合酶進行PCR反應，將 PCR產物次選殖至pCR®2.1-T0P0®載體（Invitrogen)中，並 轉型至XL-1藍色大腸桿菌（Stratagene，拉霍亞城，加州） 中，從個別選殖體中分離出含有經接合PCR產物之質體 DNA，並定序之。 食蟹猴CD20胺基酸序列示於圖19中，圖20為食蟹猴與 人類0020的比較，食蟹猴0020中有97.3%與人類。020相 似，而有8處不同，胞外區域含有一個變異（在VI57A)，而 其餘7個殘基係在細胞質或穿膜區域中發現。 分析對抗人類CD20之抗體於鍵結及取代可鍵結至能表 142593.doc •107· 201000132 現CD20之食蟹猴之FITC-共軛老鼠2H7的能力。從2隻食蟹 猴（加州區域研究靈長動物中心，戴維斯，加州）抽取2 0毫 升的血液，混與肝素納，並直接運送至Genentech公司。 同一天，將血液樣品倒在一起，並添加40毫升的磷酸緩衝 液（PBS)以1:1稀釋之。將20毫升的稀釋血液分層累積於20 毫升飛克爾-沛克溶液襯墊（Ficoll-PaqueTM Plus)之50毫升 錐底管（目錄編號#352098，Falcon，福蘭克林湖城，新澤 西州）中（共進行了 4管），並於室溫下，於Sorval 7離心機 (杜邦，新城，康乃迪格州）以1300 rpm的轉速離心30分 鐘。分離PBMC層，並於PBS中清洗。將紅血球細胞在 0.2% NaCl溶液中溶解，用等體積的1.6% NaCl溶液使其恢 復成等張性，並以1〇〇〇 RPM的轉速離心10分鐘。將PBMC 沉澱物重新懸浮於内含5%胎牛血清（FBS)之RPMI 1640(Gibco，洛克菲洛市，馬里蘭州）中，並配散至直徑10 公分的組織培養盤中1小時（37°C下），以抽取方式去除未吸 附的B及T細胞群，離心及計算數目，共回收2·4χ 107個細 胞。將重新懸浮的PBMC分散在20支12x75毫米的培養試管 (目錄編號#352053，Falcon)中，每支試管於0.25毫升含有 lxlO6個細胞，將這些培養試管分成四組，每組5支試管， 每一組分別加入培養基（RPMI 1640，5%胎牛血清）、定量 之控制人類 IgGl 抗體、Rituxan®、2Η7·ν16 或 2H7.V31，每 種抗體的最終濃度為30、10、3.3及1.1 nM，除此之外，每 支培養試管中另加20微升的經螢光異硫氰酸（FITC)共軛之 抗-人類CD20(目錄編號#555622，BD Bioscience，聖地牙 142593.doc •108· 201000132 哥，加州）。細胞經溫和地混合後，培養在冰上1小時，而 後用冷的PBS清洗兩次，於Epic XL-MCL(Coulter，邁阿 密，佛羅里達州）分析細胞表面的染色，推導出幾何平均 值，針對抗體濃度晝出函數圖形（KaleidaGraphTM，協同軟 體，雷丁城，賓夕法尼亞州）。 圖21中的數據顯示2H7.V16及2H7.V31可以競爭性方式取 代FITC-老鼠2H7與食蟹狼細胞的鍵結，除此之外， Ritumax®亦可取代FITC-老鼠2H7鍵結，因此證明2H7及 Ritumax®兩者可鍵結至CD20上的重疊抗原決定子，另外， 該數據顯示2H7.V16、2H7.V31及Ritumax的IC5。數值相近， 且落在4-6nM範圍内。 結論 上述數據證明製備人源化CD20鍵結抗體（特別是人源化 2H7抗體變異體）是成功的，該抗體仍保有其生物特性，甚 至是更為增強。可鍵結至CD20之本發明人源化2H7抗體在 親和力方面與老鼠供體抗體及嵌合性2H7抗體相似，且可 有效的殺死靈長動物中的B細胞，而導致B細胞的減損。 某些變異體顯示具有比現今用以治療NHL的嵌合性抗-CD20抗體為高之ADCC，此有利病患使用較低劑量之治療 抗體，除此之外，為了預防對抗具有老鼠FR殘基之嵌合性 抗體的抗體反應，故所投用之嵌合性抗體必須達到完全B 細胞減損的劑量，而本發明人源化抗體則可投與達到部分 或完全B細胞減損之劑量，及根據特定疾病及病患所需在 不同的時間投藥，另外，這些抗體業經證明在溶液中係穩 142593.doc -109- 201000132 定的。這些人源化2H7抗體的特性使得這些抗體成為治療 CD20陽性癌症及自體免疫疾病的理想免疫治療劑；這些 抗體預期在人體是不具有免疫抗原特性的，或至少比全長 的老鼠抗體或嵌合性抗-CD20抗體之免疫抗原性低。 參考文獻 本申請案中所列舉的參考文獻，包括專利案、公開發表 申請案及其他出版刊物，一併併入本專利說明書參考。 除非另有所指，本發明實務係採用屬於技藝中技能之分 子生物學及類似科學之慣用技術，該等技術在文獻中均有 詳盡的說明，參見，例如，分子選殖：實驗室手冊（J. Sambrook等人，冷泉灣實驗室，冷泉灣，紐約，1989); 分子生物學現今步驟（F.Ausubel等人出版，1987再版）；1 本分子生物學（T. Brown出版，IRL印行1991);基因表現技 術（Goeddel出版，學院印行1991);真核細胞基因選殖方法 及基因分析（A.Bothwell等人出版，Bartlett印行1 990);基 因移轉及表現（M. Kriegler Stockton印行1990);重組DNA 方法學II(R.Wu等人出版，學院印行1995) ; PCR :實務方 法（M.McPherson等人，IRL印行，牛津大學印行1991);寡 核苷酸合成作用（M.Gait出版，1984);生物化學家之細胞 培養（R.Adam出版，Elsevier科學出版社1990);哺乳動物 細胞之基因移轉載體（J.Miller & M.Calos出版，1987);哺 乳動物細胞生物技術（M.Butler出版，1991);動物細胞培 養（J.Pollard等人出版，人類出版社印行1990);培養動物 細胞第二版（R.Freshney等人出版，Alan R.Liss 1987);流 142593.doc -110- 201000132 動細胞學及分類（M.Melamed等人出版，Wiley-Liss 1990) ;酵素學叢刊（學院印行）；Wirth Μ及Hauser Η.(1993);實務免疫化學，第三版，A.Johnstone & R. Thorpe, Blackwell科學，康橋，麻塞諸塞州，1996 ;免疫 細胞化學技術（G. Bullock & P.Petrusz出版，學院印行 1982、1983、1985、1989);實驗免疫學手冊（D. Weir & C.Blackwell出版）；免疫學現今步^_(J. Coligan等人出版 1991) ;免疫分析法（E.P_ Diamandis & T.K_ Christopoulos 出 版，學院印行1996) ; Goding (1986)單株抗體：原理及實 務（第二版）學院印行，紐約；Ed Harlow及David Lane，抗 饉A實驗室手冊，冷泉灣實驗室，冷泉灣，紐約，1988 ; 抗體工程，第二版（C. Borrebaeck出版，牛津大學印行， 1995);及免疫年度評論叢刊；免疫學進階叢刊。 【圖式簡單說明】 圖1A為老鼠2H7(SEQ ID ΝΟ·1)、人源化2H7.V16變異體 (SEQIDN0.2)及人類卡巴（κ)亞型輕鏈I(SEQIDN0.3)之 輕鏈可變區域（VL)的胺基酸排列比較。2H7及hu2H7.vl6的 VL 之 CDRs 如下：CDR1(SEQ ID NO.4)、CDR2(SEQ ID N0.5)&CDR3(SEQIDN0.6); 圖IB為老鼠2H7(SEQ ID NO.7)、人源化2Η7·ν16變異體 (SEQ ID NO.8)及人類重鏈亞型III一致性序列（SEQ ID >10.9)之¥11序列的序列排列比較。2117及1^2117^16的¥}1之 CDRs如下：CDR1(SEQ ID NO.10)、CDR2(SEQ ID N0.11) 及 CDR3(SEQ ID N0.12); 142593.doc -Ill - 201000132 在圖1A及圖1B中，每個鏈中的CDRl、CDR2及CDR3係 於括弧中，兩旁為所示的FR1-FR4架構區域。2H7表示老 鼠2H7抗體。兩排序列間的星號是指兩個序列不同處。殘 基的編號係根據Kabat等人，免疫學感興趣之序列，第五 版，公共衛生院，國家健康局，畢士大，馬里蘭州， 1991，插頁a、b、e、d及e戶斤示； 圖2所示為構築2H7 Fab質體（參見實例1)所用之嗜菌質體 pVX4之序列（SEQ ID NO.13)，及CDR-移植抗-IFN-α人源 化抗體之 Fab 之 L鏈（SEQ ID NO.14)及 Η鏈（SEQ ID NO.15) 之胺基酸序列； 圖3所示為編碼嵌合性2H7.v6.8 Fab之表現質體之序列 (SEQ ID N0.16)。並顯示 L鏈（SEQ ID 1^0.17)及11鏈（8丑9 ID NO. 18)之胺基酸序列； 圖4所示為用以表現實例1所述之免疫球蛋白輕鏈之質體 pDRl之序列（SEQ ID NO_19 ; 5391鹼基對）。pDRl含有編 碼不相關抗體之序列（人源化抗-CD3抗體之輕鏈（Shalaby等 人，J. Exp. Med. 175:217-225 (1992))，其起始密碼及終止 密碼以粗體及底線表示之； 圖5所示為用以表現實例1所述之免疫球蛋白重鏈之質體 卩〇112之序列（8£()1〇1^〇.20;6135鹼基對）。？〇112含有編 碼不相關抗體之序列（人源化抗-CD3抗體之輕鏈（Shalaby等 人，如#)，其起始密碼及終止密碼以粗體及底線表示 之；
圖6所示為2H7.V16完整L鏈的胺基酸序列（SEQ ID 142593.doc • 112· 201000132 NO.21)； 圖7所示為2H7.V16完整H鏈的胺基酸序列（SEQ ID N0.22)。將圖1B(SEQ ID ΝΟ·8)的VH序列與完整的Η鏈序 列排列比較，人類γΐ固定區域係位於SEQ ID ΝΟ·22的胺基 酸位置114-471 ; 圖8所示為2H7.v3 1完整Η鏈的胺基酸序列（SEQ ID ΝΟ·23)，L鏈與2Η7·ν16者相同（參見圖6); 圖9所示為2H7.V16與2H7.V73 IgG變異體的相對穩定 ® 性，分析結果經與培養前的數值標準化，且係以培養後所 剩餘之百分比報告； 圖10所示為從老鼠2H7胺基酸改變成一群人源化變異體 (至v75變異體）之流程綜合圖； 圖11如實例10中所述，所有實驗組（2H7研究紅及 Rituxan研究）之平均絕對B-細胞數目總合[CD3-/CD40+]; 圖12係以實例11所述，以缺乏岩藻糖2H7變異體進行之 ^ 代表性ADCC分析結果； 圖13為聯膜蛋白V染色結果相對抗體濃度所做函數圖 形。Ramos細胞在有交錯連結的另一個抗體存在下，以不 相關IgGl控制組抗體（Herceptin® ;圓形）、利特西馬抗體 (方形）或rhuMAb 2Η7·ν16(三角形）處理，並以FACS分析 之。圖13-15於實例13中說明； 圖14為膜聯蛋白V及碘化丙啶雙重染色結果相對抗體濃 度所做的函數圖形。Ramos細胞在有交錯連結的另一個抗 體存在下，以不相關IgGl控制組抗體（Herceptin® ;圓 142593.doc -113- 201000132 形）、利特西馬抗體（方形）或rhuMAb 2H7.vl6(三角形）處 理，並以FACS分析之； 圖15為每10秒鐘之活的未經染色細胞數目對應抗體濃度 所做之函數圖形。Ramos細胞在有交錯連結的另一個抗體 存在下，以不相關IgGl控制組抗體（Herceptin® ;圓形）、 利特西馬抗體（方形）或rhuMab 2Η7·ν16(三角形）處理，並 以FACS分析之； 圖16、17、18所示者為實例14中所述裸鼠中Raji細胞腫 瘤生長的抑制作用。動物每週以PBS(控制組）或5毫克/公 斤（圖16)、0.5毫克/公斤（圖17)或0.05毫克/公斤（圖 18)Rituxan®或rhuMab 2Η7·ν16處理6週（如垂直箭頭所示； 每組實驗老鼠數目n=8); 圖19所示為食蟹猴CD20的核苷序列（SEQ ID NO.24)及胺 基酸序列（SEQ ID NO.25)，如實例15中所述； 圖20所示為食蟹猴CD20的胺基酸序列（SEQ ID NO. 25)，不同於人類CD20(SEQ ID NO. 26)的殘基晝有底線， 而人類的殘基則直接示於猴子殘基下方，所推定的猴子 CD20細胞外區域以粗體表示之；及 圖21所示者為實例15中所述，能表現食蟹猴CD20的細 胞與hu2H7.vl6、·ν31及Rituxan的鍵結結果，分析抗體鍵 結至食蟹猴CD20的能力，及置換FITC-共軛老鼠2H7鍵結 的能力（以FACS進行FITC-2H7之競爭分析）。 142593.doc -114- 201000132 序列表 <110>美商建南德克公司 <120>免疫球蛋白變異體及其用途 <130>P1990R3C1 <140 092135563 <141> 2003-12-16 <150>US 60/434,115 <151> 2002-12-16 <150>US 60/526,163 <151〉 2003-12-01 © <160> 53 <210〉 1 <211> 107 <212〉PRT <213>小鼠 <400> 1
Gin lie Val Leu Ser Gin Ser Pro Ala lie Leu Ser Ala Ser Pro 1 5 10
Gly Glu Lys Val Thr Met Thr Cys Arg Ala Ser Ser Ser Veil Ser 20 25
Tjrr Met His Trp Tyr Gin Gin Lys Pro Gly Ser Ser Pro Lys Pro 35 40
Trp lie Tyr Ala Pro Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro Ala Arg 50 55
Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Ser Tyr Ser Leu Thr lie Ser 65 70
Arg Val Glu Ala Glu Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Gin Gin Trp 80 85
Ser Phe Asn Pro Pro Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Leu 95 100
Lys Arg 142593-序列表.doc 201000132 <210 2 <211> 107 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>本序列係為合成 <400> 2
Asp lie Gin Met Thr Gin Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val 1 5 10
Gly Asp Arg Val Thr lie Thr Cys Arg Ala Ser Ser Ser Val Ser 20 25
Tyr Met His Trp Tyr Gin Gin Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Pro 35 40
Leu lie Tyr Ala Pro Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg 50 55
Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr lie Ser 65 70
Ser Leu Gin Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gin Gin Trp 80 85
Ser Phe Asn Pro Pro Thr Phe Gly Gin Gly Thr Lys Val Glu lie 95 100
Lys Arg <210> 3 <211> 108 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>本序列係為合成 <400> 3
Asp lie Gin Met Thr Gin Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val 1 5 10
Gly Asp Arg Val Thr lie Thr Cys Arg Ala Ser Gin Ser He Ser 20 25
Asn Tyr Leu Ala Trp Tyr Gin Gin Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys 35 40 2- 142593-序列表.doc 201000132
Leu Leu lie Tyr Ala Ala Ser Ser Leu Glu Ser Gly Val Pro Ser 50 55
Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr lie 65 70
Ser Ser Leu Gin Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tjt Cys Gin Gin 80 85
Tyr Asn Ser Leu Pro Trp Thr Phe Gly Gin Gly Thr Lys Val Glu 95 100 lie Lys Arg
<210>4 <211>10 <212>PRT <213>小鼠 <400〉4
Arg Ala Ser Ser Ser Val Ser Tyr Met His 5 10 <210> 5 <211>7 <212> PRT <213>小鼠 <400〉5
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Gin Gin Trp Ser Phe Asn Pro Pro Thr 5 <210>7 <211>122 <212> PRT <213>小鼠 <400> 7
Gin Ala Tyr Leu Gin Gin Ser Gly Ala Glu Leu Val Arg Pro Gly 1 5 10 142593-序列表.doc 201000132
Ala Ser Val Lys Met Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr 20 25
Ser Tyr Asn Met His Trp Val Lys Gin Thr Pro Arg Gin Gly Leu 35 40
Glu Trp lie Gly Ala He Tyr Pro Gly Asn Gly Asp Thr Ser Tyr 50 55
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Ser Ser Thr Ala Tyr Met Gin Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp 80 85
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Ser Ser <210>8 <211> 122 <212>PRT <213>人工序列 <220> <223>本序列係為合成 <400> 8
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Ser Tyr Asn Met His Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu 35 40
Glu Trp Val Gly Ala lie Tyr Pro Gly Asn Gly Asp Thr Ser Tyr 50 55
Asn Gin Lys Phe Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Val Asp Lys Ser 65 70 4- 142593-序列表.doc 201000132
Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp 80 85
Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Val Val Tyr Tyr Ser Asn Ser 95 100
Tyr Trp Tyr Phe Asp Val Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr Val 110 115
Ser Ser <210〉 9 <211> 119 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>本序列係為合成 <400〉 9
Glu Val Gin Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly 1 5 10
Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser 20 25
Ser Tyr Ala Met Ser Trp Val Aig Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu 35 40
Glu Trp Val Ala Val He Ser Gly Asp Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr 50 55
Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ser 65 70
Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp 80 85
Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Gly Arg Val Gly Tyr Ser Leu 95 100
Tyr Asp Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 110 115 <210> 10 <211>10 <212>PRT <213>小鼠 142593-序列表.doc 201000132 <400〉10
Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr Asn Met His 5 10 <210> 11 <211>17 <212> PRT <213〉小鼠 <400〉11
Ala lie Tyr Pro Gly Asn Gly Asp Thr Ser Tyr Asn Gin Lys Phe 1 5 10
Lys Gly <210> 12 <211> 13 <212> PRT <213>小鼠 <400> 12
Val Val Tyr Tyr Ser Asn Ser Tyr Trp Tyr Phe Asp Val 5 10 <210> 13 <211>5679 <212>DNA <213>人工序列 <220> <223>本序列係為合成 <400〉13 gaattcaact tctccatact ttggataagg aaatacagac atgaaaaatc 50 tcattgctga gttgttattt aagcttgccc aaaaagaaga agagtcgaat 100 gaactgtgtg cgcaggtaga agctttggag attatcgtca ctgcaatgct 150 tcgcaatatg gcgcaaaatg accaacagcg gttgattgat caggtagagg 200 gggcgctgta cgaggtaaag cccgatgcca gcattcctga cgacgatacg 250 gagctgctgc gcgattacgt aaagaagtta ttgaagcatc ctcgtcagta 300 aaaagttaat cttttcaaca gctgtcataa agttgtcacg gccgagactt 350 atagtcgctt tgtttttatt ttttaatgta tttgtaacta gaattcgagc 400 -6- 142593-序列表.doc 201000132
❹ tcggtacccg gggatcctct agaggttgag gtgattttat gaaaaagaat 450 atcgcatttc ttcttgcatc tatgttcgtt ttttctattg ctacaaacgc 500 gtacgctgat atccagatga cccagtcccc gagctccctg tccgcctctg 550 tgggcgatag ggtcaccatc acctgcagag ccagtcagag cgtgtcgact 600 agctcttata gctatatgca ctggtatcaa cagaaaccag gaaaagctcc 650 gaaactactg atttactatg ctagcaacct cgagtctgga gtcccttctc 700 gcttctctgg atccggttct gggacggatt tcactctgac catcagcagt 750 ctgcagccag aagacttcgc aacttattac tgtcaacact cttggggtat 800 tccgcgcaca tttggacagg gtaccaaggt ggagatcaaa cgaactgtgg 850 ctgcaccatc tgtcttcatc ttcccgccat ctgatgagca gttgaaatct 900 ggaactgctt ctgttgtgtg cctgctgaat aacttctatc ccagagaggc 950 caaagtacag tggaaggtgg ataacgccct ccaatcgggt aactcccagg 1000 agagtgtcac agagcaggac agcaaggaca gcacctacag cctcagcagc 1050 accctgacgc tgagcaaagc agactacgag aaacacaaag tctacgcctg 1100 cgaagtcacc catcagggcc tgagctcgcc cgtcacaaag agcttcaaca 1150 ggggagagtg ttaagctgat cctctacgcc ggacgcatcg tggccctagt 1200 acgcaagttc acgtaaaaag ggtatctaga ggttgaggtg attttatgaa 1250 aaagaatatc gcatttcttc ttgcatctat gttcgttttt tctattgcta 1300 caaacgcgta cgctgaggtt cagctggtgg agtctggcgg tggcctggtg 1350 cagccagggg gctcactccg tttgtcctgt gcagcttctg gctacacctt 1400 caccgaatat atcatccact gggtccgtca ggccccgggt aagggcctgg 1450 aatgggttgc atcgattaat cctgactacg acatcacgaa ctataaccag 1500 cgcttcaagg gccgtttcac tataagtcgc gacgattcca aaaacacatt 1550 atacctgcag atgaacagcc tgcgtgctga ggacactgcc gtctattatt 1600 gtgctcgatg gatcagcgat ttcttcgact actggggtca aggaaccctg 1650 142593-序列表.doc 201000132 gtcaccgtct cctcggcctc caccaagggc ccatcggtct tccccctggc 1700 accctcctcc aagagcacct ctgggggcac agcggccctg ggctgcctgg 1750 tcaaggacta cttccccgaa ccggtgacgg tgtcgtggaa ctcaggcgcc 1800 ctgaccagcg gcgtgcacac cttcccggct gtcctacagt cctcaggact 1850 ctactccctc agcagcgtgg tgaccgtgcc ctccagcagc ttgggcaccc 1900 agacctacat ctgcaacgtg aatcacaagc ccagcaacac caaggtggac 1950 aagaaagttg agcccaaatc ttgtgacaaa actcacacat gaccaccgca 2000 tgcaccagta tcgtccattc cgacagcatc gccagtcact atggcgtgct 2050 gctagcgccg ccctatacct tgtctgcctc cccgcgttgc gtcgcggtgc 2100 atggagccgg gccacctcga cctgaatgga agccggcggc acctcgctaa 2150 cggattcacc actccaagaa ttggagccaa tcaattcttg cggagaactg 2200 tgaatgegca aaccaaccct tggcagaaca tatccategc gtccgccatc 2250 tccagcagcc gcacgcggcg catctcgggc agcgttgggt cctggccacg 2300 ggtgcgcatg atcgtgctcc tgtcgttgag gacccggcta ggctggcggg 2350 gttgccttac tggttagcag aatgaatcac cgatacgcga gcgaacgtga 2400 agcgactgct gctgcaaaac gtctgcgacc tgagcaacaa catgaatggt 2450 cttcggtttc cgtgtttcgt aaagtctgga aacgcggaag tcagcgccct 2500 gcaccattat gttccggatc tgcatcgcag gatgctgctg gctaccctgt 2550 ggaacaccta catctgtatt aacgaagcgc tggcattgac cctgagtgat 2600 ttttctctgg tcccgccgca tccataccgc cagttgttta ccctcacaac 2650 gttccagtaa ccgggcatgt tcatcatcag taacccgtat cgtgagcatc 2700 ctctctcgtt tcatcggtat cattaccccc atgaacagaa attccccctt 2750 acacggaggc atcaagtgac caaacaggaa aaaaccgccc ttaacatggc 2800 ccgctttatc agaagccaga cattaacgct tctggagaaa ctcaacgagc 2850 tggacgcgga tgaacaggca gacatctgtg aatcgcttca cgaccacgct 2900 -8 - 142593-序列表.doc 201000132 ❹ ❹ gatgagcttt accgcagcat ccggaaattg taaacgttaa tattttgtta 2950 aaattcgcgt taaatttttg ttaaatcagc tcatttttta accaataggc 3000 cgaaatcggc aaaatccctt ataaatcaaa agaatagacc gagatagggt 3050 tgagtgttgt tccagtttgg aacaagagtc cactattaaa gaacgtggac 3100 tccaacgtca aagggcgaaa aaccgtctat cagggctatg gcccactacg 3150 tgaaccatca ccctaatcaa gttttttggg gtcgaggtgc cgtaaagcac 3200 taaatcggaa ccctaaaggg agcccccgat ttagagcttg acggggaaag 3250 ccggcgaacg tggcgagaaa ggaagggaag aaagcgaaag gagcgggcgc 3300 tagggcgctg gcaagtgtag cggtcacgct gcgcgtaacc accacacccg 3350 ccgcgcttaa tgcgccgcta cagggcgcgt ccgcatcctg cctcgcgcgt 3400 ttcggtgatg acggtgaaaa cctctgacac atgcagctcc cggagacggt 3450 cacagcttgt ctgtaagcgg atgccgggag cagacaagcc cgtcagggcg 3500 cgtcagcggg tgttggcggg tgtcggggcg cagccatgac ccagtcacgt 3550 agcgatagcg gagtgtatac tggcttaact atgcggcatc agagcagatt 3600 gtactgagag tgcaccatat gcggtgtgaa ataccgcaca gatgcgtaag 3650 gagaaaatac cgcatcaggc gctcttccgc ttcctcgctc actgactcgc 3700 tgcgctcggt cgttcggctg cggcgagcgg tatcagctca ctcaaaggcg 3750 gtaatacggt tatccacaga atcaggggat aacgcaggaa agaacatgtg 3800 agcaaaaggc cagcaaaagg ccaggaaccg taaaaaggcc gcgttgctgg 3850 cgtttttcca taggctccgc ccccctgacg agcatcacaa aaatcgacgc 3900 tcaagtcaga ggtggcgaaa cccgacagga ctataaagat accaggcgtt 3950 tccccctgga agctccctcg tgcgctctcc tgttccgacc ctgccgctta 4000 ccggatacct gtccgccttt ctcccttcgg gaagcgtggc gctttctcat 4050 agctcacgct gtaggtatct cagttcggtg taggtcgttc gctccaagct 4100 gggctgtgtg cacgaacccc ccgttcagcc cgaccgctgc gccttatccg 4150 142593-序列表.doc 201000132 gtaactatcg tcttgagtcc aacccggtaa gacacgactt atcgccactg 4200 gcagcagcca ctggtaacag gattagcaga gcgaggtatg taggcggtgc 4250 tacagagttc ttgaagtggt ggcctaacta cggctacact agaaggacag 4300 tatttggtat ctgcgctctg ctgaagccag ttaccttcgg aaaaagagtt 4350 ggtagctctt gatccggcaa acaaaccacc gctggtagcg gtggtttttt 4400 tgtttgcaag cagcagatta cgcgcagaaa aaaaggatct caagaagatc 4450 ctttgatctt ttctacgggg tctgacgctc agtggaacga aaactcacgt 4500 taagggattt tggtcatgag attatcaaaa aggatcttca cctagatcct 4550 tttaaattaa aaatgaagtt ttaaatcaat ctaaagtata tatgagtaaa 4600 cttggtctga cagttaccaa tgcttaatca gtgaggcacc tatctcagcg 4650 atctgtctat ttcgttcatc catagttgcc tgactccccg tcgtgtagat 4700 aactacgata cgggagggct taccatctgg ccccagtgct gcaatgatac 4750 cgcgagaccc acgctcaccg gctccagatt tatcagcaat aaaccagcca 4800 gccggaaggg ccgagcgcag aagtggtcct gcaactttat ccgcctccat 4850 ccagtctatt aattgttgcc gggaagctag agtaagtagt tcgccagtta 4900 atagtttgcg caacgttgtt gccattgctg caggcatcgt ggtgtcacgc 4950 tcgtcgtttg gtatggcttc attcagctcc ggttcccaac gatcaaggcg 5000 agttacatga tcccccatgt tgtgcaaaaa agcggttagc tccttcggtc 5050 ctccgatcgt tgtcagaagt aagttggccg cagtgttatc actcatggtt 5100 atggcagcac tgcataattc tcttactgtc atgccatccg taagatgctt 5150 ttctgtgact ggtgagtact caaccaagtc attctgagaa tagtgtatgc 5200 ggcgaccgag ttgctcttgc ccggcgtcaa cacgggataa taccgcgcca 5250 catagcagaa ctttaaaagt gctcatcatt ggaaaacgtt cttcggggcg 5300 aaaactctca aggatcttac cgctgttgag atccagttcg atgtaaccca 5350 ctcgtgcacc caactgatct tcagcatctt ttactttcac cagcgtttct 5400 -10- 142593-序列表.doc 201000132 gggtgagcaa aaacaggaag gcaaaatgcc gcaaaaaagg gaataagggc 5450 gacacggaaa tgttgaatac tcatactctt cctttttcaa tattattgaa 5500 gcatttatca gggttattgt ctcatgagcg gatacatatt tgaatgtatt 5550 tagaaaaata aacaaatagg ggttccgcgc acatttcccc gaaaagtgcc 5600 acctgacgtc taagaaacca ttattatcat gacattaacc tataaaaata 5650 ggcgtatcac gaggcccttt cgtcttcaa 5679 <210> 14 <211〉241 <212>PRT <213>人工序列 ❹ <220> <223>本序列係為合成 <400〉14
Met Lys Lys Asn lie Ala Phe Leu Leu Ala Ser Met Phe Val Phe 1 5 10
Ser lie Ala Thr Asn Ala Tyr Ala Asp lie Gin Met Thr Gin Ser 20 25
Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr lie Thr 35 40
Cys Arg Ala Ser Gin Ser Val Ser Thr Ser Ser Tyr Ser Tyr Met
His Trp Tyr Gin Gin Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu lie 65 70
Tyr Tyr Ala Ser Asn Leu Glu Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser 80 85
Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr lie Ser Ser Leu 95 100
Gin Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gin His Ser Trp Gly 110 115 lie Pro Arg Thr Phe Gly Gin Gly Thr Lys Val Glu lie Lys Arg 125 130 -11 - 142593-序列表.doc 201000132
Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe lie Phe Pro Pro Ser Asp Glu 140 145 150
Gin Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn 155 160 165
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Cys <210> 15 <211>248 <212>PRT <213>人工序列 <220> <223>本序列係為合成 <400> 15
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Ser lie Ala Thr Asn Ala Tyr Ala Glu Val Gin Leu Val Glu Ser 20 25 30
Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys 35 40 45
Ala Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Glu Tyr lie lie His Trp Val 50 55 60
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Pro Asp Tyr Asp lie Thr Asn Tyr Asn Gin Arg Phe Lys Gly Arg 80 85 90 -12-
142593-序列表.doc 105 201000132
Phe Thr lie Ser Arg Asp Asp Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gin 95 100
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Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser
Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala 185 190
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Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr 245 〇 <21016 <211> 5678 <212>DNA <213>人工序列 <220 <223>本序列係為嵌合型 <400> 16 gaattcaact tctccatact ttggataagg aaatacagac atgaaaaatc 50 tcattgctga gttgttattt aagcttgccc aaaaagaaga agagtcgaat 100 gaactgtgtg cgcaggtaga agctttggag attatcgtca ctgcaatgct 150 tcgcaatatg gcgcaaaatg accaacagcg gttgattgat caggtagagg 200 142593-序列表.doc -13- 120 135 150 165 180 195 210 225 240 201000132 gggcgctgta cgaggtaaag cccgatgcca gcattcctga cgacgatacg 250 gagctgctgc gcgattacgt aaagaagtta ttgaagcatc ctcgtcagta 300 aaaagttaat cttttcaaca gctgtcataa agttgtcacg gccgagactt 350 atagtcgctt tgtttttatt ttttaatgta tttgtaacta gaattcgagc 400 tcggtacccg gggatcctct agaggttgag gtgatttatg aaaaagaata 450 tcgcatttct tcttgcatct atgttcgttt tttctattgc tacaaacgcg 500 tacgctcaga tagtactgtc ccagtccccg gctatcctgt ccgcctctcc 550 tggcgagaag gtcactatga cctgcagagc cagctcttct gtgagctata 600 tgcattggta tcaacagaaa ccaggaagct ctccgaaacc atggatttac 650 gctccatcga acctcgcgtc tggagtccct gcgcgcttct ctggatccgg 700 ttctgggact agttactctc tgaccatcag cagagtggag gcagaagacg 750 ccgcaactta ttactgtcaa cagtggagct tcaatccgcc cacatttgga 800 gccggcacca agctggagct caaacgaact gtggctgcac catctgtctt 850 catcttcccg ccatctgatg agcagttgaa atctggaact gcttctgttg 900 tgtgcctgct gaataacttc tatcccagag aggccaaagt acagtggaag 950 gtggataacg ccctccaatc gggtaactcc caggagagtg tcacagagca 1000 ggacagcaag gacagcacct acagcctcag cagcaccctg acgctgagca 1050 aagcagacta cgagaaacac aaagtctacg cctgcgaagt cacccatcag 1100 ggcctgagct cgcccgtcac aaagagcttc aacaggggag agtgttaagc 1150 tgatcctcta cgccggacgc atcgtggccc tagtacgcaa gttcacgtaa 1200 aaagggtatc tagaggttga ggtgatttta tgaaaaagaa tatcgcattt 1250 cttcttgcat ctatgttcgt tttttctatt gctacaaacg cgtacgctca 1300 ggcttatctg cagcagtctg gcgccgagct ggtgcggcca ggagctagcg 1350 tcaagatgtc ctgtaaagct tctggctaca ccttcaccag ctataacatg 1400 cattgggtca agcagacacc gaggcaaggc ctggaatggattggagcgat 1450 -14- 142593·序列表.doc 201000132
❹ ctatcctggc aacggcgaca cgagctataa ccagaagttc aagggcaagg 1500 ccactctgac tgtggacaag tccagcagta ctgcctacat gcaactgagc 1550 agcctgactt ctgaggacag cgctgtctac ttttgtgctc gcgtggtcta 1600 ctatagcaac agctactggt acttcgacgt ctggggtacc ggaaccacag 1650 tcaccgtctc ctcggcctcc accaagggcc catcggtctt ccccctggca 1700 ccctcctcca agagcacctc tgggggcaca gcggccctgg gctgcctggt 1750 caaggactac ttccccgaac cggtgacggt gtcgtggaac tcaggcgccc 1800 tgaccagcgg cgtgcacacc ttcccggctg tcctacagtc ctcaggactc 1850 tactccctca gcagcgtggt gaccgtgccc tccagcagct tgggcaccca 1900 gacctacatc tgcaacgtga atcacaagcc cagcaacacc aaggtggaca 1950 agaaagttga gcccaaatct tgtgacaaaa ctcacacatg accaccgcat 2000 gcaccagtat cgtccattcc gacagcatcg ccagtcacta tggcgtgctg 2050 ctagcgccgc cctatacctt gtctgcctcc ccgcgttgcg tcgcggtgca 2100 tggagccggg ccacctcgac ctgaatggaa gccggcggca cctcgctaac 2150 ggattcacca ctccaagaat tggagccaat caattcttgc ggagaactgt 2200 gaatgcgcaa accaaccctt ggcagaacat atccatcgcg tccgccatct 2250 ccagcagccg cacgcggcgc atctcgggca gcgttgggtc ctggccacgg 2300 gtgcgcatga tcgtgctcct gtcgttgagg acccggctag gctggcgggg 2350 ttgccttact ggttagcaga atgaatcacc gatacgcgag cgaacgtgaa 2400 gcgactgctg ctgcaaaacg tctgcgacct gagcaacaac atgaatggtc 2450 ttcggtttcc gtgtttcgta aagtctggaa acgcggaagt cagcgccctg 2500 caccattatg ttccggatct gcatcgcagg atgctgctgg ctaccctgtg 2550 gaacacctac atctgtatta acgaagcgct ggcattgacc ctgagtgatt 2600 tttctctggt cccgccgcat ccataccgcc agttgtttac cctcacaacg 2650 ttccagtaac cgggcatgtt catcatcagt aacccgtatc gtgagcatcc 2700 •15· 142593-序列表.doc 201000132 tctctcgttt catcggtatc attaccccca tgaacagaaa ttccccctta 2750 cacggaggca tcaagtgacc aaacaggaaa aaaccgccct taacatggcc 2800 cgctttatca gaagccagac attaacgctt ctggagaaac tcaacgagct 2850 ggacgcggat gaacaggcag acatctgtga atcgcttcac gaccacgctg 2900 atgagcttta ccgcagcatc cggaaattgt aaacgttaat attttgttaa 2950 aattcgcgtt aaatttttgt taaatcagct cattttttaa ccaataggcc 3000 gaaatcggca aaatccctta taaatcaaaa gaatagaccg agatagggtt 3050 gagtgttgtt ccagtttgga acaagagtcc actattaaag aacgtggact 3100 ccaacgtcaa agggcgaaaa accgtctatc agggctatgg cccactacgt 3150 gaaccatcac cctaatcaag ttttttgggg tcgaggtgcc gtaaagcact 3200 aaatcggaac cctaaaggga gcccccgatt tagagcttga cggggaaagc 3250 cggcgaacgt ggcgagaaag gaagggaaga aagcgaaagg agcgggcgct 3300 agggcgctgg caagtgtagc ggtcacgctg cgcgtaacca ccacacccgc 3350 cgcgcttaat gcgccgctac agggcgcgtc cgcatcctgc ctcgcgcgtt 3400 tcggtgatga cggtgaaaac ctctgacaca tgcagctccc ggagacggtc 3450 acagcttgtc tgtaagcgga tgccgggagc agacaagccc gtcagggcgc 3500 gtcagcgggt gttggcgggt gtcggggcgc agccatgacc cagtcacgta 3550 gcgatagcgg agtgtatact ggcttaacta tgcggcatca gagcagattg 3600 tactgagagt gcaccatatg cggtgtgaaa taccgcacag atgcgtaagg 3650 agaaaatacc gcatcaggcg ctcttccgct tcctcgctca ctgactcgct 3700 gcgctcggtc gttcggctgc ggcgagcggt atcagctcac tcaaaggcgg 3750 taatacggtt atccacagaa tcaggggata acgcaggaaa gaacatgtga 3800 gcaaaaggcc agcaaaaggc caggaaccgt aaaaaggccg cgttgctggc 3850 gtttttccat aggctccgcc cccctgacga gcatcacaaa aatcgacgct 3900 caagtcagag gtggcgaaac ccgacaggac tataaagata ccaggcgttt 3950 • 16 - 142593·序列表.doc 201000132 ccccctggaa gctccctcgt gcgctctcct gttccgaccc tgccgcttac 4000 cggatacctg tccgcctttc tcccttcggg aagcgtggcg ctttctcata 4050 gctcacgctg taggtatctc agttcggtgt aggtcgttcg ctccaagctg 4100 ggctgtgtgc acgaaccccc cgttcagccc gaccgctgcg ccttatccgg 4150 taactatcgt cttgagtcca acccggtaag acacgactta tcgccactgg 4200 cagcagccac tggtaacagg attagcagag cgaggtatgt aggcggtgct 4250 acagagttct tgaagtggtg gcctaactac ggctacacta gaaggacagt 4300 atttggtatc tgcgctctgc tgaagccagt taccttcgga aaaagagttg 4350 ❿ gtagctcttgatccgg一一 g Ctggta_gttttttt 4- gtttgcaagc agcagattac gcgcagaaaa aaaggatctc aagaagatcc 4450 tttgatcttt tctacggggt ctgacgctca gtggaacgaa aactcacgtt 4500 aagggatttt ggtcatgaga ttatcaaaaa ggatcttcac ctagatcctt 4550 ttaaattaaa aatgaagttt taaatcaatc taaagtatat atgagtaaac 4600 ttggtctgac agttaccaat gcttaatcag tgaggcacct atctcagcga 4650 tctgtctatt tcgttcatcc atagttgcct gactccccgt cgtgtagata 4700 actacgatac gggagggctt accatctggc cccagtgctg caatgatacc 4750 gcgagaccca cgctcaccgg ctccagattt atcagcaata aaccagccag 4800 ccggaagggc cgagcgcaga agtggtcctg caactttatc cgcctccatc 4850 cagtctatta attgttgccg ggaagctaga gtaagtagtt cgccagttaa 4900 tagtttgcgc aacgttgttg ccattgctgc aggcatcgtg gtgtcacgct 4950 cgtcgtttgg tatggcttca ttcagctccg gttcccaacg atcaaggcga 5000 gttacatgat cccccatgtt gtgcaaaaaa gcggttagct ccttcggtcc 5050 tccgatcgtt gtcagaagta agttggccgc agtgttatca ctcatggtta 5100 tggcagcact gcataattct cttactgtca tgccatccgt aagatgcttt 5150 tctgtgactg gtgagtactc aaccaagtca ttctgagaat agtgtatgcg 5200 -17· 142593-序列表.doc 201000132 gcgaccgagt tgctcttgcc cggcgtcaac acgggataat accgcgccac 5250 atagcagaac tttaaaagtg ctcatcattg gaaaacgttc ttcggggcga 5300 aaactctcaa ggatcttacc gctgttgaga tccagttcga tgtaacccac 5350 tcgtgcaccc aactgatctt cagcatcttt tactttcacc agcgtttctg 5400 ggtgagcaaa aacaggaagg caaaatgccg caaaaaaggg aataagggcg 5450 acacggaaat gttgaatact catactcttc ctttttcaat attattgaag 5500 catttatcag ggttattgtc tcatgagcgg atacatattt gaatgtattt 5550 agaaaaataa acaaataggg gttccgcgca catttccccg aaaagtgcca 5600 cctgacgtct aagaaaccat tattatcatg acattaacct ataaaaatag 5650 gcgtatcacg aggccctttc gtcttcaa 5678 <210> 17 <211> 236 <212>PRT <213>人工序列 <220> <223>本序列係為嵌合型 <400〉17
Met Lys Lys Asn lie Ala Phe Leu Leu Ala Ser Met Phe Val Phe 1 5 10
Ser lie Ala Thr Asn Ala Tyr Ala Gin lie Val Leu Ser Gin Ser 20 25
Pro Ala lie Leu Ser Ala Ser Pro Gly Glu Lys Val Thr Met Thr 35 40
Cys Arg Ala Ser Ser Ser Val Ser Tyr Met His Trp Tyr Gin Gin 50 55
Lys Pro Gly Ser Ser Pro Lys Pro Trp lie Tyr Ala Pro Ser Asn 65 70
Leu Ala Ser Gly Val Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly 80 85
Thr Ser Tyr Ser Leu Thr lie Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Ala 95 100 18- 142593-序列表.doc 120201000132
Ala Thr Tyr Tyr Cys Gin Gin Trp Ser Phe Asn Pro Pro Thr Phe 110 115 Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro 125 130 Ser Val Phe lie Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gin Leu Lys Ser Gly 140 145 Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu 155 160 Ala Lys Val Gin Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gin Ser Gly Asn 170 175 Ser Gin Glu Ser Val Thr Glu Gin Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr ❹ 185 190 Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys 200 205 His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gin Gly Leu Ser Ser 215 220 Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 230 235 135 150 165 180 195 210 225
<210> 18 <211>253 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>本序列係為嵌合型 <400> 18 Met Lys Lys Asn lie Ala Phe Leu Leu Ala Ser Met Phe Val Phe 1 5 10
Ser lie Ala Thr Asn Ala Tyr Ala Gin Ala Tyr Leu Gin Gin Ser 20 25
Gly Ala Glu Leu Val Arg Pro Gly Ala Ser Val Lys Met Ser Cys 35 40 15 30 45
Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr Asn Met His Trp Val 50 55 142593-序列表.doc 19- 60 201000132
Lys Gin Thr Pro Arg Gin Gly Leu Glu Trp lie Gly Ala lie Tyr 65 70 75
Pro Gly Asn Gly Asp Thr Ser Tyr Asn Gin Lys Phe Lys Gly Lys 80 85 90
Ala TTir Leu Ήιτ Val Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala "Tyr Met Gin 95 100 105
Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Phe Cys Ala 110 115 120
Arg Val Val Tyr Tyr Ser Asn Ser Tyr Trp Tyr Phe Asp Val Trp 125 130 135
Gly Thr Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly 140 145 150
Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly 155 160 165
Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu 170 175 180
Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val 185 190 195
His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gin Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu 200 205 210
Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gin Thr 215 220 225
Tyr lie Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp 230 235 240
Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr 245 250 <210> 19 <211> 5391 <212> DNA <213>人工序列 <220> <223>本序列係為合成 <400〉19 ttcgagctcg cccgacattg attattgact agttattaait agtaatcaat 50 tacggggtca ttagttcata gcccatatat ggagttccgc gttacataac 100 -20-
142593-序列表.doc 201000132
ttacggtaaa tggcccgcct ggctgaccgc ccaacgaccc ccgcccattg 150 acgtcaataa igacgtatgt tcccatagta acgccaatag ggactttcca 200 ttgacgtcaa tgggtggagt atttacggta aactgcccac ttggcagtac 250 atcaagtgta tcatatgcca agtacgcccc ctattgacgt caatgacggt 300 aaatggcccg cctggcatta tgcccagtac atgaccttat gggactttcc 350 tacttggcag tacatctacg tattagtcat cgctattacc atggtgatgc 400 ggttttggca gtacatcaat gggcgtggat agcggtttga ctcacgggga 450 tttccaagtc tccaccccat tgacgtcaat gggagtttgt tttggcacca 500 aaatcaacgg gactttccaa aatgtcgtaa caactccgcc ccattgacgc 550 aaatgggcgg taggcgtgta cggtgggagg tctatataag cagagctcgt 600 ttagtgaacc gtcagatcgc ctggagacgc catccacgct gttttgacct 650 ccatagaaga caccgggacc gatccagcct ccgcggccgg gaacggtgca 700 ttggaacgcg gattccccgt gccaagagtg acgtaagtac cgcctataga 750 gtctataggc ccaccccctt ggcttcgtta gaacgcggct acaattaata 800 cataacctta tgtatcatac acatacgatt taggtgacac tatagaataa 850 catccacttt gcctttctct ccacaggtgt ccactcccag gtccaactgc 900 acctcggttc tatcgattga attccaccat gggatggtca tgtatcatcc 950 tttttctagt agcaactgca actggagtac attcagatat ccagatgacc 1000 cagtccccga gctccctgtc cgcctctgtg ggcgataggg tcaccatcac 1050 ctgccgtgcc agtcaggaca tccgtaatta tttgaactgg tatcaacaga 1100 aaccaggaaa agctccgaaa ctactgattt actatacctc ccgcctggag 1150 tctggagtcc cttctcgctt ctctggttct ggttctggga cggattacac 1200 tctgaccatc agtagtctgc aaccggagga cttcgcaact tattactgtc 1250 agcaaggtaa tactctgccg tggacgttcg gacagggcac caaggtggag 1300 atcaaacgaa ctgtggctgc accatctgtc ttcatcttcc cgccatctga 1350 -21- 142593·序列表.doc 201000132 tgagcagttg aaatctggaa ctgcctctgt tgtgtgcctg ctgaataact 1400 tctatcccag agaggccaaa gtacagtgga aggtggataa cgccctccaa 1450 tcgggtaact cccaggagag tgtcacagag caggacagca aggacagcac 1500 ctacagcctc agcagcaccc tgacgctgag caaagcagac tacgagaaac 1550 acaaagtcta cgcctgcgaa gtcacccatc agggcctgag ctcgcccgtc 1600 acaaagagct tcaacagggg agagtgttaa gcttggccgc catggcccaa 1650 cttgtttatt gcagcttata atggttacaa ataaagcaat agcatcacaa 1700 atttcacaaa taaagcattt ttttcactgc attctagttg tggtttgtcc 1750 aaactcatca atgtatctta tcatgtctgg atcgatcggg aattaattcg 1800 gcgcagcacc atggcctgaa ataacctctg aaagaggaac ttggttaggt 1850 accttctgag gcggaaagaa ccagctgtgg aatgtgtgtc agttagggtg 1900 tggaaagtcc ccaggctccc cagcaggcag aagtatgcaa agcatgcatc 1950 tcaattagtc agcaaccagg tgtggaaagt ccccaggctc cccagcaggc 2000 agaagtatgc aaagcatgca tctcaattag tcagcaacca tagtcccgcc 2050 cctaactccg cccatcccgc ccctaactcc gcccagttcc gcccattctc 2100 cgccccatgg ctgactaatt ttttttattt atgcagaggc cgaggccgcc 2150 tcggcctctg agctattcca gaagtagtga ggaggctttt ttggaggcct 2200 aggcttttgc aaaaagctgt taacagcttg gcactggccg tcgttttaca 2250 acgtcgtgac tgggaaaacc ctggcgttac ccaacttaat cgccttgcag 2300 cacatccccc cttcgccagc tggcgtaata gcgaagaggc ccgcaccgat 2350 cgcccttccc aacagttgcg tagcctgaat ggcgaatggc gcctgatgcg 2400 gtattttctc cttacgcatc tgtgcggtat ttcacaccgc atacgtcaaa 2450 gcaaccatag tacgcgccct gtagcggcgc attaagcgcg gcgggtgtgg 2500 tggttacgcg cagcgtgacc gctacacttg ccagcgccct agcgcccgct 2550 cctttcgctt tcttcccttc ctttctcgcc acgttcgccg gctttccccg 2600 •22· 142593-序列表.doc 201000132
tcaagctcta aatcgggggc tccctttagg gttccgattt agtgctttac 2650 ggcacctcga ccccaaaaaa cttgatttgg gtgatggttc acgtagtggg 2700 ccatcgccct gatagacggt ttttcgccct ttgacgttgg agtccacgtt 2750 ctttaatagt ggactcttgt tccaaactgg aacaacactc aaccctatct 2800 cgggctattc ttttgattta taagggattt tgccgatttc ggcctattgg 2850 ttaaaaaatg agctgattta acaaaaattt aacgcgaatt ttaacaaaat 2900 attaacgttt acaattttat ggtgcactct cagtacaatc tgctctgatg 2950 ccgcatagtt aagccaactc cgctatcgct acgtgactgg gtcatggctg 3000 cgccccgaca cccgccaaca cccgctgacg cgccctgacg ggcttgtctg 3050 ctcccggcat ccgcttacag acaagctgtg accgtctccg ggagctgcat 3100 gtgtcagagg ttttcaccgt catcaccgaa acgcgcgagg cagtattctt 3150 gaagacgaaa gggcctcgtg atacgcctat ttttataggt taatgtcatg 3200 ataataatgg tttcttagac gtcaggtggc acttttcggg gaaatgtgcg 3250 cggaacccct atttgtttat ttttctaaat acattcaaat atgtatccgc 3300 tcatgagaca ataaccctga taaatgcttc aataatattg aaaaaggaag 3350 agtatgagta ttcaacattt ccgtgtcgcc cttattccct tttttgcggc 3400 attttgcctt cctgtttttg ctcacccaga aacgctggtg aaagtaaaag 3450 atgctgaaga tcagttgggt gcacgagtgg gttacatcga actggatctc 3500 aacagcggta agatccttga gagttttcgc cccgaagaac gttttccaat 3550 gatgagcact tttaaagttc tgctatgtgg cgcggtatta tcccgtgatg 3600 acgccgggca agagcaactc ggtcgccgca tacactattc tcagaatgac 3650 ttggttgagt actcaccagt cacagaaaag catcttacgg atggcatgac 3700 agtaagagaa ttatgcagtg ctgccataac catgagtgat aacactgcgg 3750 ccaacttact tctgacaacg atcggaggac cgaaggagct aaccgctttt 3800 ttgcacaaca tgggggatca tgtaactcgc cttgatcgtt gggaaccgga 3850 •23- 142593-序列表.doc 201000132 gctgaatgaa gccataccaa acgacgagcg tgacaccacg atgccagcag 3900 caatggcaac aacgttgcgc aaactattaa ctggcgaact acttactcta 3950 gcttcccggc aacaattaat agactggatg gaggcggata aagttgcagg 4000 accacttctg cgctcggccc ttccggctgg ctggtttatt gctgataaat 4050 ctggagccgg tgagcgtggg tctcgcggta tcattgcagc actggggcca 4100 gatggtaagc cctcccgtat cgtagttatc tacacgacgg ggagtcaggc 4150 aactatggat gaacgaaata gacagatcgc tgagataggt gcctcactga 4200 ttaagcattg gtaactgtca gaccaagttt actcatatat actttagatt 4250 gatttaaaac ttcattttta atttaaaagg atctaggtga agatcctttt 4300 tgataatctc atgaccaaaa tcccttaacg tgagttttcg ttccactgag 4350 cgtcagaccc cgtagaaaag atcaaaggat cttcttgaga tccttttttt 4400 ctgcgcgtaa tctgctgctt gcaaacaaaa aaaccaccgc taccagcggt 4450 ggtttgtttg ccggatcaag agctaccaac tctttttccg aaggtaactg 4500 gcttcagcag agcgcagata ccaaatactg tccttctagt gtagccgtag 4550 ttaggccacc acttcaagaa ctctgtagca ccgcctacat acctcgctct 4600 gctaatcctg ttaccagtgg ctgctgccag tggcgataag tcgtgtctta 4650 ccgggttgga ctcaagacga tagttaccgg ataaggcgca gcggtcgggc 4700 tgaacggggg gttcgtgcac acagcccagc ttggagcgaa cgacctacac 4750 cgaactgaga tacctacagc gtgagcattg agaaagcgcc acgcttcccg 4800 aagggagaaa ggcggacagg tatccggtaa gcggcagggt cggaacagga 4850 gagcgcacga gggagcttcc agggggaaac gcctggtatc tttatagtcc 4900 tgtcgggttt cgccacctct gacttgagcg tcgatttttg tgatgctcgt 4950 caggggggcg gagcctatgg aaaaacgcca gcaacgcggc ctttttacgg 5000 ttcctggcct tttgctggcc ttttgctcac atgttctttc ctgcgttatc 5050 ccctgattct gtggataacc gtattaccgc ctttgagtga gctgataccg 5100 • 24· 142593-序列表 _doc 201000132 ctcgccgcag ccgaacgacc gagcgcagcg agtcagtgag cgaggaagcg 5150 gaagagcgcc caatacgcaa accgcctctc cccgcgcgtt ggccgattca 5200 ttaatccagc tggcacgaca ggtttcccga ctggaaagcg ggcagtgagc 5250 gcaacgcaat taatgtgagt tacctcactc attaggcacc ccaggcttta 5300 cactttatgc ttccggctcg tatgttgtgt ggaattgtga gcggataaca 5350 atttcacaca ggaaacagct atgaccatga ttacgaatta a 5391 <210 20 <211>6135 <212〉DNA <213>人工序列
<220> <223>本序列係為合成 <400> 20 attcgagctc gcccgacatt gattattgac tagttattaa tagtaatcaa 50 ttacggggtc attagttcat agcccatata tggagttccg cgttacataa 100 cttacggtaa atggcccgcc tggctgaccg cccaacgacc cccgcccatt 150 gacgtcaata atgacgtatg ttcccatagt aacgccaata gggactttcc 200 attgacgtca atgggtggag tatttacggt aaactgccca cttggcagta 250 catcaagtgt atcatatgcc aagtacgccc cctattgacg tcaatgacgg 300 taaatggccc gcctggcatt atgcccagta catgacctta tgggactttc 350 ctacttggca gtacatctac gtattagtca tcgctattac catggtgatg 400 cggttttggc agtacatcaa tgggcgtgga tagcggtttg actcacgggg 450 atttccaagt ctccacccca ttgacgtcaa tgggagtttg ttttggcacc 500 aaaatcaacg ggactttcca aaatgtcgta acaactccgc cccattgacg 550 caaatgggcg gtaggcgtgt acggtgggag gtctatataa gcagagctcg 600 tttagtgaac cgtcagatcg cctggagacg ccatccacgc tgttttgacc 650 tccatagaag acaccgggac cgatccagcc tccgcggccg ggaacggtgc 700 attggaacgc ggattccccg tgccaagagt gacgtaagta ccgcctatag 750 -25- 142593·序列表.doc 201000132 agtctatagg cccaccccct tggcttcgtt agaacgcggc tacaattaat 800 acataacctt atgtatcata cacatacgat ttaggtgaca ctatagaata 850 acatccactt tgcctttctc tccacaggtg tecactccca ggtccaactg 900 cacctcggtt ctatcgattg aattccacca tgggatggtc atgtatcatc 950 ctttttctag tagcaactgc aactggagta cattcagaag ttcagctggt 1000 ggagtctggc ggtggcctgg tgcagccagg gggctcactc cgtttgtcct 1050 gtgcagcttc tggctactcc tttaccggct acactatgaa ctgggtgcgt 1100 caggccccag gtaagggcct ggaatgggtt gcactgatta atccttataa 1150 aggtgttact acctatgccg atagcgtcaa gggccgtttc actataagcg 1200 tagataaatc caaaaacaca gcctacctgc aaatgaacag cctgcgtgct 1250 gaggacactg ccgtctatta ttgtgctaga agcggatact acggcgatag 1300 cgactggtat tttgacgtct ggggtcaagg aaccctggtc accgtctcct 1350 cggcctccac caagggccca tcggtcttcc ccctggcacc ctcctccaag 1400 agcacctctg ggggcacagc ggccctgggc tgcctggtca aggactactt 1450 ccccgaaccg gtgacggtgt cgtggaactc aggcgccctg accagcggcg 1500 tgcacacctt cccggctgtc ctacagtcct caggactcta ctccctcagc 1550 agcgtggtga ctgtgccctc tagcagcttg ggcacccaga cctacatctg 1600 caacgtgaat cacaagccca gcaacaccaa ggtggacaag aaagttgagc 1650 ccaaatcttg tgacaaaact cacacatgcc caccgtgccc agcacctgaa 1700 ctcctggggg gaccgtcagt cttcctcttc cccccaaaac ccaaggacac 1750 cctcatgatc tcccggaccc ctgaggtcac atgcgtggtg gtggacgtga 1800 gccacgaaga ccctgaggtc aagttcaact ggtacgtgga cggcgtggag 1850 gtgcataatg ccaagacaaa gccgcgggag gagcagtaca acagcacgta 1900 ccgtgtggtc agcgtcctca ccgtcctgca ccaggactgg ctgaatggca 1950 aggagtacaa gtgcaaggtc tccaacaaag ccctcccagc ccccatcgag 2000 •26- 142593·序列表.doc 201000132 ❻ ❹ aaaaccatct ccaaagccaa agggcagccc cgagaaccac aggtgtacac 2050 cctgccccca tcccgggaag agatgaccaa gaaccaggtc agcctgacct 2100 gcctggtcaa aggcttctat cccagcgaca tcgccgtgga gtgggagagc 2150 cggagaacaa ctacaagacc acgcctcccg tgctggactc 2200 cgacggctcc ttcttcctct acagcaagct caccgtggac aagagcaggt 2250 ggcagcaggg gaacgtcttc tcatgctccg tgatgcatga ggctctgcac 2300 aaccactaca cgcagaagag cctctccctg tctccgggta aatgagtgcg 2350 acggccctag agtcgacctg cagaagcttg gccgccatgg cccaacttgt 2400 ttattgcagc ttataatggt tacaaataaa gcaatagcat cacaaatttc 2450 acaaataaag catttttttc actgcattct agttgtggtt tgtccaaact 2500 catcaatgta tcttatcatg tctggatcga tcgggaatta attcggcgca 2550 gcaccatggc ctgaaataac ctctgaaaga ggaacttggt taggtacctt 2600 ctgaggcgga aagaaccatc tgtggaatgt gtgtcagtta gggtgtggaa 265G agtccccagg ctccccagca ggcagaagta tgcaaagcat gcatctcaat 2700 tagtcagcaa ccaggtgtgg aaagtcccca ggctccccag caggcagaag 2750 tatgcaaagc atgcatctca attagtcagc aaccatagtc ccgcccctaa 2800 ctccgcccat cccgccccta actccgccca gttccgccca ttctccgccc 2850 catggctgac taattttttt tatttatgca gaggccgagg ccgcctcggc 2900 ctctgagcta ttccagaagt agtgaggagg cttttttgga ggcctaggct 2950 tttgcaaaaa gctgttaaca gcttggcact ggccgtcgtt ttacaacgtc 3000 gtgactggga aaaccctggc gttacccaac ttaatcgcct tgcagcacat 3050 ccccccttcg ccagttggcg taatagcgaa gaggcccgca ccgatcgccc 3100 ttcccaacag ttgcgtagcc tgaatggcga atggcgcctg atgcggtatt 3150 ttctccttac gcatctgtgc ggtatttcac accgcatacg tcaaagcaac 3200 catagtacgc gccctgtagc ggcgcattaa gcgcggcggg tgtggtggtt 3250 -27· 142593-序列表.doc 201000132 acgcgcagcg tgaccgctac acttgccagc gccctagcgc ccgctccttt 3300 cgctttcttc ccttcctttc tcgccacgtt cgccggcttt ccccgtcaag 3350 ctctaaatcg ggggctccct ttagggttcc gatttagtgc tttacggcac 3400 ctcgacccca aaaaacttga tttgggtgat ggttcacgta gtgggccatc 3450 gccctgatag acggtttttc gccctttgac gttggagtcc acgttcttta 3500 atagtggact cttgttccaa actggaacaa cactcaaccc tatctcgggc 3550 tattcttttg atttataagg gattttgccg atttcggcct attggttaaa 3600 aaatgagctg atttaacaaa aatttaacgc gaattttaac aaaatattaa 3650 cgtttacaat tttatggtgc actctcagta caatctgctc tgatgccgca 3700 tagttaagcc aactccgcta tcgctacgtg actgggtcat ggctgcgccc 3750 cgacacccgc caacacccgc tgacgcgccc tgacgggctt gtctgctccc 3800 ggcatccgct tacagacaag ctgtgaccgt ctccgggagc tgcatgtgtc 3850 agaggttttc accgtcatca ccgaaacgcg cgaggcagta ttcttgaaga 3900 cgaaagggcc tcgtgatacg cctattttta taggttaatg tcatgataat 3950 aatggtttct tagacgtcag gtggcacttt tcggggaaat gtgcgcggaa 4000 cccctatttg tttatttttc taaatacatt caaatatgta tccgctcatg 4050 agacaataac cctgataaat gcttcaataa tattgaaaaa ggaagagtat 4100 gagtattcaa catttccgtg tcgcccttat tccctttttt gcggcatttt 4150 gccttcctgt ttttgctcac ccagaaacgc tggtgaaagt aaaagatgct 4200 gaagatcagt tgggtgcacg agtgggttac atcgaactgg atctcaacag 4250 cggtaagatc cttgagagtt ttcgccccga agaacgtttt ccaatgatga 4300 gcacttttaa agttctgcta tgtggcgcgg tattatcccg tgatgacgcc 4350 gggcaagagc aactcggtcg ccgcatacac tattctcaga atgacttggt 4400 tgagtactca ccagtcacag aaaagcatct tacggatggc atgacagtaa 4450 gagaattatg cagtgctgcc ataaccatga gtgataacac tgcggccaac 4500 -28 - 142593-序列表.doc 201000132 ttacttctga caacgatcgg aggaccgaag gagctaaccg cttttttgca 4550 caacatgggg gatcatgtaa ctcgccttga tcgttgggaa ccggagctga 4600 atgaagccat accaaacgac gagcgtgaca ccacgatgcc agcagcaatg 4650 gcaacaacgt tgcgcaaact attaactggc gaactactta ctctagcttc 4700 ccggcaacaa ttaatagact ggatggaggc ggataaagtt gcaggaccac 4750 ttctgcgctc ggcccttccg gctggctggt ttattgctga taaatctgga 4800 gccggtgagc gtgggtctcg cggtatcatt gcagcactgg ggccagatgg 4850 taagccctcc cgtatcgtag ttatctacac gacggggagt caggcaacta 4900 魯 tggatgaacg aaatagacag atcgctgaga taggtgcctc actgattaag 4950 cattggtaac tgtcagacca agtttactca tatatacttt agattgattt 5000 aaaacttcat ttttaattta aaaggatcta ggtgaagatc ctttttgata 5050 atctcatgac caaaatccct taacgtgagt tttcgttcca ctgagcgtca 5100 gaccccgtag aaaagatcaa aggatcttct tgagatcctt tttttctgcg 5150 cgtaatctgc tgcttgcaaa caaaaaaacc accgctacca gcggtggttt 5200 gtttgccgga tcaagagcta ccaactcttt ttccgaaggt aactggcttc 5250 agcagagcgc agataccaaa tactgtcctt ctagtgtagc cgtagttagg 5300 ccaccacttc aagaactctg tagcaccgcc tacatacctc gctctgctaa 5350
O tcctgttacc agtggctgct gccagtggcg ataagtcgtg tcttaccggg 5400 ttggactcaa gacgatagtt accggataag gcgcagcggt cgggctgaac 5450 ggggggttcg tgcacacagc ccagcttgga gcgaacgacc tacaccgaac 5500 tgagatacct acagcgtgag cattgagaaa gcgccacgct tcccgaaggg 5550 agaaaggcgg acaggtatcc ggtaagcggc agggtcggaa caggagagcg 5600 cacgagggag cttccagggg gaaacgcctg gtatctttat agtcctgtcg 5650 ggtttcgcca cctctgactt gagcgtcgat ttttgtgatg ctcgtcaggg 5700 gggcggagcc tatggaaaaa cgccagcaac gcggcctttt tacggttcct 5750 -29- 142593-序列表.doc 201000132 ggccttttgc tggccttttg ctcacatgtt ctttcctgcg ttatcccctg 5800 attctgtgga taaccgtatt accgcctttg agtgagctga taccgctcgc 5850 cgcagccgaa cgaccgagcg cagcgagtca gtgagcgagg aagcggaaga 5900 gcgcccaata cgcaaaccgc ctctccccgc gcgttggccg attcattaat 5950 ccaactggca cgacaggttt cccgactgga aagcgggcag tgagcgcaac 6000 gcaattaatg tgagttacct cactcattag gcaccccagg ctttacactt 6050 tatgcttccg gctcgtatgt tgtgtggaat tgtgagcgga taacaatttc 6100 acacaggaaa cagctatgac catgattacg aatta 6135 <210>21 <211〉232 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>本序列係為合成 <400 21
Met Gly Trp Ser Cys lie lie Leu Phe Leu Val Ala Thr Ala Thr 1 5 10
Gly Val His Ser Asp lie Gin Met Thr Gin Ser Pro Ser Ser Leu 20 25
Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr lie Thr Cys Arg Ala Ser 35 40
Ser Ser Val Ser Tyr Met His Trp Tyr Gin Gin Lys Pro Gly Lys 50 55
Ala Pro Lys Pro Leu lie Tyr Ala Pro Ser Asn Leu Ala Ser Gly 65 70
Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr 80 85
Leu Thr He Ser Ser Leu Gin Pro Glu Asp Phe Ala ΊΤιτ Tyr Tyr 95 100
Cys Gin Gin Trp Ser Phe Asn Pro Pro Thr Phe Gly Gin Gly Thr 110 115 30- 142593-序列表.doc 201000132
Lys Val Glu lie Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe lie 125 130
Phc Pro Pro Scr Asp Glu Gin Leu Lys Scr Gly Thr Ala Sar Val 140 145
Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gin 155 160
Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gin Ser Gly Asn Ser Gin Glu Ser 170 175
Val Thr Glu Gin Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser 185 190
Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr 200 205
Ala Cys Glu Val Thr His Gin Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys 215 220
Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 230 <210 22 <211>471 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>本序列係為合成 <400〉22
Met Gly Trp Ser Cys lie lie Leu Phe Leu Val Ala Thr Ala Thr 1 5 10
Gly Val His Ser Glu Val Gin Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu 20 25
Val Gin Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly 35 40
Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr Asn Met His Trp Val Arg Gin Ala Pro 50 55
Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val Gly Ala lie Tyr Pro Gly Asn Gly 65 70
Asp Thr Ser Tyr Asn Gin Lys Phe Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser 80 85 -31 - 142593-序列表.doc 201000132
Val Asp Lys Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gin Met Asn Ser Leu 95 100 105
Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Val Val Tyr 110 115 120
Tyr Ser Asn Ser Tyr Trp Tyr Phe Asp Val Trp Gly Gin Gly Thr 125 130 135
Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe 140 145 150
Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala 155 160 165
Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val 170 175 180
Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro 185 190 195
Ala Val Leu Gin Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val 200 205 210
Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gin Thr Tyr lie Cys Asn 215 220 225
Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu 230 235 240
Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala 245 250 255
Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys 260 265 270
Pro Lys Asp Thr Leu Met lie Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys 275 280 285
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn 290 295 300
Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ale Lys Thr Lys Pro 305 310 315
Arg Glu Glu Gin Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu 320 325 330 -32·
G 142593-序列表.doc 345201000132
Thr Val Leu His Gin Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys 335 340
Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro lie Glu Lys Thr lie 350 355
Ser Lys Ala Lys Gly Gin Pro Arg Glu Pro Gin Val Tyr Thr Leu 365 370 Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gin Val Ser Leu Thr 380 385 Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp lie Ala Val Glu Trp 395 400
Glu Ser Asn Gly Gin Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro 410 415 Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr 425 430 Val Asp Lys Ser Arg Trp Gin Gin Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser 440 445
Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gin Lys Ser Leu 455 460 360 375 390 405 420 435 450 465
Ser Leu Ser Pro Gly Lys 470 <210> 23 <211>471 <212〉PRT <213>人工序列 <220> <223>本序列係為合成 <400> 23 Met Gly Trp Ser Cys lie lie Leu Phe Leu Val Ala Thr Ala Thr 1 5 10 Gly Val His Ser Glu Val Gin Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu 20 25 Val Gin Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly 35 40 Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr Asn Met His Trp Val Arg Gin Ala Pro 50 55 15 30 45 142593-序列表.doc 33- 60 201000132
Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val Gly Ala lie Tyr Pro Gly Asn Gly 65 70 75
Asp Thr Ser Tyr Asn Gin Lys Phe Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser 80 85 90
Val Asp Lys Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gin Met Asn Ser Leu 95 100 105
Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Val Val Tyr 110 115 120
Tyr Ser Asn Ser Tyr Trp Tyr Phe Asp Val Trp Gly Gin Gly Thr 125 130 135
Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe 140 145 150
Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala 155 160 165
Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val 170 175 180
Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro 185 190 195
Ala Val Leu Gin Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val 200 205 210
Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gin Thr Tyr He Cys Asn 215 220 225
Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu 230 235 240
Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala 245 250 255
Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys 260 265 270
Pro Lys Asp Thr Leu Met lie Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys 275 280 285
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn 290 295 300
Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro 305 310 315 34-
142593-序列表.doc 330 330
201000132
Arg Glu Glu Gin Tyr Asn Ala Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu 320 325
Thr Val Leu His Gin Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys 335 340
Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro lie Ala Ala Thr He 350 355
Ser Lys Ala Lys Gly Gin Pro Arg Glu Pro Gin Val Tyr Thr Leu 365 370
Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gin Val Ser Leu Thr 380 385
Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp lie Ala Val Glu Trp 395 400
Glu Ser Asn Gly Gin Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro 410 415
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr 425 430
Val Asp Lys Ser Arg Trp Gin Gin Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser 440 445
Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gin Lys Ser Leu 455 460
Ser Leu Ser Pro Gly Lys 470 <210〉24 <211>891 <212>DNA <213>長尾猴 <400> 24 atgacaacac ccagaaattc agtaaatggg actttcccag cagagccaat 50 gaaaggccct attgctatgc aacctggtcc aaaaccactc ctcaggagga 100 tgtcttcact ggtgggtccc acgcaaagct tcttcatgag ggaatctaag 150 gctttggggg ctgtccagat tatgaatggg ctcttccaca ttgccctggg 200 gggtcttctg atgatcccag cagggatcta tgcacccatc tgtgtgactg 250 345 360 375 390 405 420 435 450 465 142593-序列表.doc -35- 201000132 tgtggtaccc tctgtgggga ggcattatgt atattatttc cggatcactc 300 ctggcagcaa cggagaaaaa ctccaggaag tgtttggtca aaggaaaaat 350 gataatgaat tcattgagec tctttgctgc catttctgga atgattcttt 400 caatcatgga catacttaat attaaaattt cccatttttt aaaaatggag 450 agtctgaatt ttatcagagt tcacacacca tatattaaca tatacaactg 500 tgaaccagct aatccctctg agaaaaactc tccatctact caatactgtt 550 acagcataca atctctgttc ctgggcattt tgtcagtgat gctgatcttt 600 gccttcttcc aggaacttgt aatagctggc atcgttgaga atgaatggag 650 aagaacatgc tccagaccca aatctagcgt agttctcctg tcagctgaag 700 aaaaaaaaga acaagtcatt gaaataaaag aagaagtggt tgggctaact 750 gaaacatctt cccaaccaaa gaatgaagaa gccattgaaa ttattccaat 800 ccaagaagag gaagaagaag aaacagagac aaactttcca gaacctcccc 850 aagatcagga atcttcacca atagaaaatg acagctctcc t 891 <210〉25 <211>297 <212> PRT <213>長尾猴 <400> 25
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201000132
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Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser 155 160
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Ser Ser Leu Gly Thr Gin Thr Tyr lie Cys Asn Val Asn His Lys 200 205
Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys 215 220
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Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr 245 250
Leu Met lie Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp 260 265
Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp 275 280
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Tyr Asn Ala Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His 305 310
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Gly Asp Arg Val Thr lie Thr Cys Arg Ala Ser Ser Ser Val Ser 20 25
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Leu lie Tyr Ala Pro Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg 50 55
Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr lie Ser 65 70
Ser Leu Gin Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gin Gin Trp 80 85 〇 Ala Phe Asn Pro Pro Thr Phe Gly Gin Gly Thr Lys Val Glu lie 95 100
Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe He Phe Pro Pro Ser 110 115
Asp Glu Gin Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu 125 130
Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gin Trp Lys Val Asp 140 145
Asn Ala Leu Gin Ser Gly Asn Ser Gin Glu Ser Val Thr Glu Gin 155 160
Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu 170 175 142593-序列表.doc 55- 15 30 45 60 75 90 105 120 135 150 165 180 201000132
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Tyr Trp Tyr Phe Asp Val Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr Val 110 115
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Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu 140 145
Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser 155 160 56- 142593·序列表.doc 180 201000132
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Leu Met lie Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp 260 265
Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp 275 280
Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gin 290 295
Tyr Asn Ala Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His 305 310
Gin Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn 320 325
Lys Ala Leu Pro Ala Pro lie Ala Ala Thr lie Ser Lys Ala Lys 335 340
Gly Gin Pro Arg Glu Pro Gin Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg 350 355
Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gin Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys 365 370
Gly Phe Tyr Pro Ser Asp lie Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly 380 385
Gin Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser 395 400
Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser 410 415 142593-序列表.doc 57- 195 210 225 240 255 270 285 300 315 330 345 360 375 390 405 420 201000132
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Asn Gin Lys Phe Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Val Asp Lys Ser 65 70
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Tyr Trp Tyr Phe Asp Val Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr Val 110 115
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Ser Ser Leu Gly Thr Gin Thr Tyr lie Cys Asn Val Asn His Lys 200 205
Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys 215 220
Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu 230 235
Gly Gly Pro Ser Yal Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr 245 250
Leu Met lie Ser Axg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp 260 265
Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp 275 280
Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gin 290 295
Tyr Asn Ala Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His 305 310
Gin Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Ala Val Ser Asn 320 325
Lys Ala Leu Pro Ala Pro lie Glu Ala Thr lie Ser Lys Ala Lys 335 340
Gly Gin Pro Arg Glu Pro Gin Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg 350 355
Glu Glu Met Thr Lys Asn Gin Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys 365 370
Gly Phe Tyr Pro Ser Asp lie Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly 380 385
Gin Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser 395 400 142593-序列表.doc 59- 180 195 210 225 240 255 270 285 300 315 330 345 360 375 390 405 201000132
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Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gin Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro 440 445
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Ala Ala Leu Pro Ala Pro lie Ala Ala Thr lie Ser Lys Ala Lys 335 340
Gly Gin Pro Arg Glu Pro Gin Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg 350 355
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Gly Phe Tyr Pro Ser Asp lie Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly 380 385 142593-序列表.doc 61- 165 180 195 210 225 240 255 270 285 300 315 330 345 360 375 390 201000132
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Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gin Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro 440 445 450
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Asn Gin Lys Phe Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Val Asp Lys Ser 65 70 75
Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp 80 85 90
Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Val Val Tyr Tyr Ser Ala Ser 95 100 105
Tyr Trp Tyr Phe Asp Val Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr Val 110 115 120
Ser Ser •62-
❹ 142593-序列表.doc 201000132 <210> 52 <211> 107 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>本序列係為合成 <400> 52
Asp He Gin Met Thr Gin Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val 1 5 10
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Ser Leu Gin Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gin Gin Trp 80 85
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Ser Leu Gin Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gin Gin Trp 80 85
Ala Phe Asn Pro Pro Thr Phe Gly Gin Gly Thr Lys Val Glu lie 95 100
Lys Arg -64- 142593-序列表.doc

Claims (1)

  1. 201000132 七、申請專利範圍·· 1. 一種可鍵結人類CD20之人源化抗體或其抗原鍵結片段， 其中該抗體可有效減損靈長動物活體内B細胞，該抗體 包括在Η鏈有至少一源自抗·人類CD20抗體重鏈可變區域 (Vh)之CDR3序列（SEQ ID Ν0.12) ’及實質上人類亞型in 重鍵（VHIII)的人類一致性架構（FR)殘基。 2. 根據申請專利範圍第1項之抗體，其另外包括在η鏈有 SEQIDNO.10之CDRl序列及SEQIDNO·ll之CDR2序 歹 |J β 3. 根據申請專利範圍第2項之抗體，其另外包括在l鏈有 SEQ ID ΝΟ·4之CDR1序列、SEQ ID N0.5之CDR2序列、 SEQ ID N0.6之CDR3序列，及實質上人類輕鏈κ亞型 I(VKI)的人類一致性架構（FR)殘基。 4. 根據前列申請專利範圍中之抗體，其包括SEq id NO.8 之VH序列（vl6變異體，如圖1B中所示）。 5·根據申請專利範圍第4項之抗體，其包括SEQ ID N0.2之 W VL序列（vl6變異體，如圖1A中所示）。 6. 根據申請專利範圍第3項之抗體，其中vH區域係連結至 人類IgG鏈固定區域。 7. 根據申請專利範圍第6項之抗體，其中人類IgG為IgGl或 IgG3。 8. 根據申請專利範圍第丨項之抗體，其中該抗體為 2117.¥16’其分別具有把(^1〇1^0.21及8£(5 10 1^0.22之 輕鏈及重鏈胺基酸序列，[如圖6及圖7所示]。 142593.doc 201000132 9. 根據申請專利範圍第1項之抗體，其中該抗體為 2H7_v31 ’ 其分別具有 SEQ ID NO.2 及 SEQ ID ΝΟ·23 之輕 鏈及重鏈胺基酸序列，[如圖6及圖8所示]。 10. 根據申請專利範圍第5項之抗體，其在η鏈具有D56A及 Ν100Α’及在L鏈具有S92A之胺基酸取代作用。[ν·96] 11 ·根據前列申請專利範圍任一項中之抗體，其另外包括在 Fe區域至少具有一個可增進adcC及/或CDC活性之胺基 酸取代作用。 12. 根據申請專利範圍第丨丨項之抗體，其中胺基酸取代作用 為 S298A/E333A/K334A。 13. 根據申請專利範圍第12項之抗體，其中該抗體為 2H7.V31 ’其具有SEq id NO.23之重鏈胺基酸序列[如圖 8所示]。 14. 根據申請專利範圍第1至丨〇項中任一項之抗體，其另外 包括在Fc區域至少具有一個可降低cdc活性之胺基酸取 代作用。 15. 根據申請專利範圍第丨4項之抗體，其包括至少K322A取 代作用。 16. 根據申請專利範圍第！至1〇項中任一項之抗體，其中該 抗體為2H7.V114或2H7.V115，相較於Rituxan，其具有至 少1 0倍強的ADCC活性。 17. 根據申請專利範圍第1項之抗體，其中靈長動物b細胞係 來自人類或食蟹猴。 18. 根據前列申請專利範圍中任一項之抗體，其共輛至細胞 142593.doc 201000132 毒性劑上。 19.根據申請專利範圍第18項之抗體，其中細胞毒性劑為放 射性活性同位素或毒素。 20·根據前列申請專利範圍中任一項之抗體，該抗體係在 CHO細胞中產生。 21. 種經分離之核酸，其編碼前列申請專利範圍中任一項 之抗體。 22. 種表現載體，其編碼前列申請專利範圍中任一項之抗 23. —種侣主，其包括根據申請專利範圍第以項之核酸。 24. 根據申請專利範圍第23項之宿主，其可產生前列申請專 利範圍中任一項之抗體。 25. 根據申請專利範圍第24項之宿主，其&ch〇細胞。 26. —種製備根據前列申請專利範圍中任一項之抗體之方 法’其包括培養可產生中請專利範圍第24項之抗體之細 胞，及回收細胞培養中之抗體。 27. 種組口物’其包括申請專利範圍第】項之抗體及一載 劑。 28. 根據申請專利範圍第27項之組合物，其中該抗體為 2H7.V16，而載劑為一醫藥上可接受之載劑。 29. -種包括容器及其内所含組合物之製造產品，其中該組 合物包括根據前列申請專利範圍中任一項之抗體。 30. 根據申請專利範圍第29項之製造產品，其另外包括說明 該組合物可用以治療非-何傑金氏淋巴瘤之插頁。 142593.doc 201000132 3 1. —種誘發活體内B細胞凋零作用之方法，其包括將b細胞 與根據前列申請專利範圍中任一項之抗體接觸，藉此殺 死B細胞。 32· —種治療CD20陽性癌症之方法，其包括投與罹患該癌症 病患一有效治療量之根據前列申請專利範圍中任一項之 人源化CD20鍵結抗體。 33. 根據申請專利範圍第32項之方法，其中CD2〇陽性癌症為 B細胞淋巴瘤或白血病。 34. 根據申請專利範圍第33項之方法，其中CD2〇陽性癌症為 非-何傑金氏淋巴瘤（NHL)或淋巴細胞佔優勢之何傑金氏 疾病（LPHD)。 35·根據申請專利範圍第33項之方法，其中該癌症為慢性淋 巴細胞白血病或SLL。 36. 根據申請專利範圍第34或35項之方法，其中該抗體係選 自由2H7.V16、v31、v96、vU4、川5所組之群，其個別 的胺基酸序列如圖示及表中所所示。 37. 根據巾請專利範圍第34或35項之方法，其中該抗體為 2H7.V16分別具有SEQ m N〇2l及。之輕鍵及 重鏈胺基酸 序列，如圖6及圖7所示。 3 8.根據申睛專利範圍第3 3 jg >· +、i 孕固弟項之方法，其中該抗體投用劑量 範圍約275-375毫克/平方米。 3 9.根據申請專利範圍第3 2項 .〇 ,,, 乐項之方法，其另外包括投與病患 至少一種化學治療劑。 40.根據申請專利範圍篦 項之方法，其中癌症為非-何傑金 142593.doc 201000132 氏淋巴瘤（NHL)，且該化學治療劑係選自由杜瑟陸賓辛 (doxorubicin)、環磷醯胺（cycl〇ph〇sphamide)、威利司汀 (vincristine)、及去氫可體醇（prednis〇1〇ne)。 41. -種治療自體免疫疾病之方法，其包括投與自體免疫病 患一有效治療量之根據前列申請專利範圍中任一項之人 源化CD20鍵結抗體。 42. 根據申請專利範圍第41項之方法，其中自體免疫疾病係 選自由類風濕性關節炎、青少年類風濕性關節炎、全身 性紅斑性狼瘡（SLE)、球格納氏疾病、發炎性腸疾病、 特發性血小板低下紫斑症（ΙΤρ)、血栓性血小板低下紫斑 症(ΤΤΡ)、自體免疫血小板減少、多發性硬皮症、牛皮 癣、IgA腎病變、IgM多發性神經病變、重症肌無力、血 管炎、糖尿病、雷諾氏症候、修格連氏症候及腎絲球腎 炎所組之群。 43. 根據申請專利範圍第42項之方法，其中自體免疫疾病為 類風濕性關節炎》 44. 根據申請專利範圍第43項之方法，另外包括投與病患另 一種治療劑。 45. 根射請專利範圍第44項之方法，其中另—種治療劑為 免疫抑制劑。 46. 根據申請專利範圍第45項之方法，其中免疫抑制劑為甲 胺喋呤。 47. 種…療自體免疫疾病之方法，該自體免疫疾病係選自 由皮肌炎、璋格納氏肉芽腫、ANCA、再生障礙性貧企 142593.doc 201000132 症、自體免疫溶血貧血症（AIHA)、因子VIII缺少、八型 血友病、自體免疫嗜中性白血球缺乏症、卡斯特萊曼氏 症候、古德巴斯德氏症候、固形器官移植排斥作用、移 植物抗宿主疾病（GVHD)、IgM媒介之血栓性血小板低下 紫斑症（TTP)、橋本氏曱狀腺炎、自體免疫肝炎、淋巴 細胞間質性肺炎（HIV)、阻塞性支氣管炎（非移植）相對 NSIP、居楊-巴赫症候、大血管血管炎、巨細胞（高安氏） 動脈炎、中血管血管炎 '川琦氏疾病、結節性多動脈炎 所組之群，其包括投與罹患該疾病病患一有效治療量之 CD20鍵結抗體或其功能性片段。 48. 49. 50. 51. 52. 53. 根據申請專利範圍第48項之方法’其中CD2〇鍵結抗體為 Rituxan®。 一種經分離之核酸，其包括食蟹猴CD2〇(如圖丨9所示）之 SEQ ID NO.-之核普酸序列，或此序列之退化變異 體。 ’、 一種經分離之核酸，其包括編碼具有SEQ ID N〇 一(如 圖20所示）或具有保守性胺基酸取代作用之seqidn〇 一(圖20)之聚肽序列。 一種載體，其包括根據申請專利範圍第5〇項之核酸。 根據申請專利範圍第51項之載體，其為包括將根據申請 專利範圍第49項之核酸以人工方式連結至表現控制序列 之表現載體。 一種宿主細胞，其包括根據申請專利範圍第5〇項之核 酸。 142593.doc 201000132 54_ —種經分離之聚肽，其包括食蟹猴CD20之胺基酸序列 [SEQ ID NO.—;圖 20]。
    142593.doc
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BR (2) BRPI0316779B1 (zh)
CA (1) CA2507898C (zh)
CL (1) CL2008003323A1 (zh)
CR (2) CR7875A (zh)
CY (2) CY1110759T1 (zh)
DE (1) DE60332957D1 (zh)
DK (2) DK1572744T3 (zh)
ES (2) ES2347241T3 (zh)
FR (1) FR18C1023I2 (zh)
HK (2) HK1074208A1 (zh)
HR (1) HRP20050649B1 (zh)
HU (3) HU227217B1 (zh)
IL (2) IL168754A (zh)
MA (1) MA27704A1 (zh)
MX (1) MXPA05006511A (zh)
NO (1) NO338402B1 (zh)
NZ (1) NZ566907A (zh)
PL (1) PL212899B1 (zh)
PT (1) PT1572744E (zh)
RS (2) RS51318B (zh)
RU (1) RU2326127C2 (zh)
SG (1) SG2013036975A (zh)
SI (2) SI1572744T1 (zh)
TW (2) TW201000132A (zh)
UA (1) UA89350C2 (zh)
WO (1) WO2004056312A2 (zh)

Families Citing this family (963)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE69329503T2 (de) 1992-11-13 2001-05-03 Idec Pharma Corp Therapeutische Verwendung von chimerischen und markierten Antikörpern, die gegen ein Differenzierung-Antigen gerichtet sind, dessen Expression auf menschliche B Lymphozyt beschränkt ist, für die Behandlung von B-Zell-Lymphoma
US7744877B2 (en) 1992-11-13 2010-06-29 Biogen Idec Inc. Expression and use of anti-CD20 Antibodies
CN100409898C (zh) * 1998-08-11 2008-08-13 拜奥根Idec公司 包括施用抗-cd20抗体的b-细胞淋巴瘤联合疗法
MXPA01004648A (es) 1998-11-09 2002-05-06 Idec Pharma Corp Tratamientro de enfermedades hematologicas malignas asociadas con celulas tumorales de la circulacion usando el anticuerpo quimerico anti-cd20.
TR200101302T2 (tr) * 1998-11-09 2001-10-22 Idec Pharmaceuticals Corporation BMT yada PBSC transplantı alan hastalarda in vitro ya da in vivo temizleyici madde olarak kimerik anti-CD20 antikorunun kullanımı.
US7183387B1 (en) 1999-01-15 2007-02-27 Genentech, Inc. Polypeptide variants with altered effector function
CA2944644C (en) 1999-05-07 2017-08-22 Genentech, Inc. Use of rituximab to treat pemphigus
KR20080075044A (ko) * 1999-07-12 2008-08-13 제넨테크, 인크. Ｃｄ20에 결합하는 길항제를 사용한 외래 항원에 대한 면역반응 차단 방법
US8557244B1 (en) 1999-08-11 2013-10-15 Biogen Idec Inc. Treatment of aggressive non-Hodgkins lymphoma with anti-CD20 antibody
KR20040023565A (ko) * 2000-09-18 2004-03-18 아이덱 파마슈티칼즈 코포레이션 Ｂ 세포 고갈/면역조절 항체 조합을 이용한 자가면역질환의 치료를 위한 조합 요법
US7754208B2 (en) 2001-01-17 2010-07-13 Trubion Pharmaceuticals, Inc. Binding domain-immunoglobulin fusion proteins
CA2463879C (en) * 2001-10-25 2012-12-04 Genentech, Inc. Glycoprotein compositions
US7662925B2 (en) 2002-03-01 2010-02-16 Xencor, Inc. Optimized Fc variants and methods for their generation
US7317091B2 (en) 2002-03-01 2008-01-08 Xencor, Inc. Optimized Fc variants
US20040132101A1 (en) 2002-09-27 2004-07-08 Xencor Optimized Fc variants and methods for their generation
US8188231B2 (en) 2002-09-27 2012-05-29 Xencor, Inc. Optimized FC variants
AU2003222664A1 (en) * 2002-04-18 2003-11-03 Genencor International, Inc. Production of functional antibodies in filamentous fungi
DK1572744T3 (da) * 2002-12-16 2010-09-20 Genentech Inc Immunoglobulinvarianter og deres anvendelser
US20090010920A1 (en) 2003-03-03 2009-01-08 Xencor, Inc. Fc Variants Having Decreased Affinity for FcyRIIb
US8388955B2 (en) 2003-03-03 2013-03-05 Xencor, Inc. Fc variants
US8084582B2 (en) 2003-03-03 2011-12-27 Xencor, Inc. Optimized anti-CD20 monoclonal antibodies having Fc variants
US20060104968A1 (en) 2003-03-05 2006-05-18 Halozyme, Inc. Soluble glycosaminoglycanases and methods of preparing and using soluble glycosaminogly ycanases
PL1613350T3 (pl) * 2003-04-09 2009-08-31 Genentech Inc Leczenie choroby autoimmunologicznej u pacjenta z nieodpowiednią odpowiedzią na leczenie inhibitorem TNFα
US9051373B2 (en) 2003-05-02 2015-06-09 Xencor, Inc. Optimized Fc variants
PT1631313E (pt) * 2003-06-05 2015-07-02 Genentech Inc Terapêutica de combinação para distúrbios de células b
US8883147B2 (en) 2004-10-21 2014-11-11 Xencor, Inc. Immunoglobulins insertions, deletions, and substitutions
US9714282B2 (en) 2003-09-26 2017-07-25 Xencor, Inc. Optimized Fc variants and methods for their generation
US8399618B2 (en) 2004-10-21 2013-03-19 Xencor, Inc. Immunoglobulin insertions, deletions, and substitutions
ME03330B (me) 2003-11-05 2019-10-20 Roche Glycart Ag Cd20 antitijela sa povećanim afinitetom za vezivanje fc receptora i efektornom funkcijom
WO2005063815A2 (en) * 2003-11-12 2005-07-14 Biogen Idec Ma Inc. Fcϝ receptor-binding polypeptide variants and methods related thereto
KR20130099228A (ko) 2004-06-04 2013-09-05 제넨테크, 인크. 다발성 경화증의 치료 방법
RU2396980C2 (ru) * 2004-06-04 2010-08-20 Дженентек, Инк. Способ лечения волчанки
JP2008504289A (ja) * 2004-06-25 2008-02-14 メディミューン，インコーポレーテッド 部位特異的突然変異誘発による哺乳動物細胞における組換え抗体の産生の増加
WO2006085967A2 (en) * 2004-07-09 2006-08-17 Xencor, Inc. OPTIMIZED ANTI-CD20 MONOCONAL ANTIBODIES HAVING Fc VARIANTS
US20150010550A1 (en) 2004-07-15 2015-01-08 Xencor, Inc. OPTIMIZED Fc VARIANTS
CN101027100A (zh) * 2004-07-22 2007-08-29 健泰科生物技术公司 治疗干燥综合征的方法
EP2213683B1 (en) 2004-08-04 2013-06-05 Mentrik Biotech, LLC Variant Fc regions
AU2005285347A1 (en) * 2004-08-19 2006-03-23 Genentech, Inc. Polypeptide variants with altered effector function
AU2005294666A1 (en) 2004-10-05 2006-04-20 Genentech, Inc. Method for treating vasculitis
AR052774A1 (es) * 2004-10-08 2007-04-04 Wyeth Corp Inmunoterapia para trastornos autoinmunes
JO3000B1 (ar) * 2004-10-20 2016-09-05 Genentech Inc مركبات أجسام مضادة .
US8367805B2 (en) 2004-11-12 2013-02-05 Xencor, Inc. Fc variants with altered binding to FcRn
US8546543B2 (en) 2004-11-12 2013-10-01 Xencor, Inc. Fc variants that extend antibody half-life
EP1817340B1 (en) 2004-11-12 2012-05-16 Xencor, Inc. Fc variants with altered binding to fcrn
US8802820B2 (en) 2004-11-12 2014-08-12 Xencor, Inc. Fc variants with altered binding to FcRn
FR2879204B1 (fr) * 2004-12-15 2007-02-16 Lab Francais Du Fractionnement Anticorps cytotoxique dirige contre les proliferations hematopoietiques lymphoides de type b.
MX2007007935A (es) 2004-12-28 2007-12-06 Innate Pharma Sa Anticuerpos monoclonales contra nkg2a.
EP1841454A4 (en) * 2005-01-13 2009-07-22 Genentech Inc PROCESSING METHOD
DOP2006000029A (es) * 2005-02-07 2006-08-15 Genentech Inc Antibody variants and uses thereof. (variantes de un anticuerpo y usos de las mismas)
TW200714289A (en) * 2005-02-28 2007-04-16 Genentech Inc Treatment of bone disorders
AR053579A1 (es) * 2005-04-15 2007-05-09 Genentech Inc Tratamiento de la enfermedad inflamatoria intestinal (eii)
CA2605697A1 (en) * 2005-04-26 2006-11-02 Bioren, Inc. Method of producing human igg antibodies with enhanced effector functions
US20110129412A1 (en) * 2005-06-02 2011-06-02 Astrazeneca Ab Antibodies Directed to CD20 and Uses Thereof
EP2586798A3 (en) 2005-07-25 2013-08-07 Emergent Product Development Seattle, LLC B-cell reduction using CD37-specific and CD20-specific binding molecules
EP1924286A4 (en) * 2005-08-12 2010-01-13 Garvan Inst Med Res PROPHYLACTIC AND / OR THERAPEUTIC METHOD FOR THE TREATMENT OF AUTOIMMUNE DISEASES
US7612181B2 (en) 2005-08-19 2009-11-03 Abbott Laboratories Dual variable domain immunoglobulin and uses thereof
WO2007041635A2 (en) 2005-10-03 2007-04-12 Xencor, Inc. Fc variants with optimized fc receptor binding properties
EP1951757B1 (en) 2005-10-06 2014-05-14 Xencor, Inc. Optimized anti-cd30 antibodies
EP1940881B1 (en) * 2005-10-11 2016-11-30 Amgen Research (Munich) GmbH Compositions comprising cross-species-specific antibodies and uses thereof
MY149159A (en) * 2005-11-15 2013-07-31 Hoffmann La Roche Method for treating joint damage
ES2618543T3 (es) 2005-11-23 2017-06-21 Genentech, Inc. Métodos y composiciones relacionados con ensayos de linfocitos B
EP1954719A2 (en) 2005-12-02 2008-08-13 Genentech Inc. Compositions and methods for the treatment of diseases and disorders associated with cytokine signaling involving antibodies that bind to il-22 and il-22r
EP1973950B1 (en) 2006-01-05 2014-09-17 Genentech, Inc. Anti-ephb4 antibodies and methods using the same
AU2007243132B2 (en) 2006-01-20 2012-09-13 Genentech, Inc. Anti-EphrinB2 antibodies and methods using same
AR059851A1 (es) 2006-03-16 2008-04-30 Genentech Inc Anticuerpos de la egfl7 y metodos de uso
SG172656A1 (en) 2006-05-30 2011-07-28 Genentech Inc Antibodies and immunoconjugates and uses therefor
MX2008015541A (es) 2006-06-06 2008-12-18 Genentech Inc Anticuerpos anti-dll4 y metodos que los usan.
FR2902799B1 (fr) 2006-06-27 2012-10-26 Millipore Corp Procede et unite de preparation d'un echantillon pour l'analyse microbiologique d'un liquide
EP2038306B1 (en) 2006-06-30 2014-12-03 Novo Nordisk A/S Anti-nkg2a antibodies and uses thereof
EP2046383B1 (en) 2006-07-04 2014-11-19 Genmab A/S Cd20 binding molecules for the treatment of copd
EP1878747A1 (en) 2006-07-11 2008-01-16 greenovation Biotech GmbH Glyco-engineered antibodies
US20100166741A1 (en) * 2006-07-13 2010-07-01 Genentech , Inc. Altered br-3 binding polypeptides
AU2007275654A1 (en) 2006-07-19 2008-01-24 The Trustees Of The University Of Pennsylvania WSX-1/p28 as a target for anti-inflammatory responses
SI2383297T1 (sl) 2006-08-14 2013-06-28 Xencor Inc. Optimizirana antitelesa, ki ciljajo cd19
WO2008034076A2 (en) * 2006-09-15 2008-03-20 The Johns Hopkins University Cyclophosphamide in combination with immune therapeutics
JP5562031B2 (ja) 2006-09-18 2014-07-30 ゼンコー・インコーポレイテッド Ｈｍ１．２４を標的とする最適化抗体
US7923011B2 (en) 2006-10-12 2011-04-12 Genentech, Inc. Antibodies to lymphotoxin-alpha
DK2845866T3 (en) 2006-10-27 2017-07-10 Genentech Inc Antibodies and immunoconjugates and their applications
EP3501538A1 (en) * 2006-12-01 2019-06-26 Novartis AG Anti-p-selectin antibodies and methods of using the same to treat inflammatory diseases
US8362217B2 (en) 2006-12-21 2013-01-29 Emd Millipore Corporation Purification of proteins
US8569464B2 (en) 2006-12-21 2013-10-29 Emd Millipore Corporation Purification of proteins
US8163886B2 (en) 2006-12-21 2012-04-24 Emd Millipore Corporation Purification of proteins
CA2673851C (en) 2007-01-22 2016-05-03 Genentech, Inc. Polyelectrolyte precipitation and purification of proteins
US7834154B2 (en) 2007-02-09 2010-11-16 Genentech, Inc. Anti-ROBO4 antibodies and uses therefor
US7960139B2 (en) 2007-03-23 2011-06-14 Academia Sinica Alkynyl sugar analogs for the labeling and visualization of glycoconjugates in cells
PE20090321A1 (es) 2007-06-04 2009-04-20 Genentech Inc Anticuerpos anti-notch1 nrr, metodo de preparacion y composicion farmaceutica
ES2566737T3 (es) * 2007-06-25 2016-04-15 Esbatech, An Alcon Biomedical Research Unit Llc Métodos de modificación de anticuerpos y anticuerpos modificados con propiedades funcionales mejoradas
EP2197914A1 (en) 2007-09-13 2010-06-23 Delenex Therapeutics AG HUMANIZED ANTIBODIES AGAINST THE ß-AMYLOYD PEPTIDE
GB0718684D0 (en) * 2007-09-24 2007-10-31 Roche Products Ltd Treatment method
KR101680906B1 (ko) 2007-09-26 2016-11-30 추가이 세이야쿠 가부시키가이샤 항체 정상영역 개변체
US20090098118A1 (en) 2007-10-15 2009-04-16 Thomas Friess Combination therapy of a type ii anti-cd20 antibody with an anti-bcl-2 active agent
US8536310B2 (en) 2007-10-17 2013-09-17 Arca Biopharma, Inc. Antibodies to CLL-1
ME02101B (me) 2007-10-30 2015-10-20 Genentech Inc Pročišćavanje antitijela hromatografijom izmjene katjona
CN102172395A (zh) 2007-11-07 2011-09-07 健泰科生物技术公司 用于治疗微生物病症的组合物和方法
TWI468417B (zh) 2007-11-30 2015-01-11 Genentech Inc 抗－ｖｅｇｆ抗體
CN105418762B (zh) 2007-12-26 2019-11-05 Xencor公司 与FcRn结合改变的Fc变体
KR20100110864A (ko) 2008-01-24 2010-10-13 노보 노르디스크 에이/에스 인간화된 항-인간 ｎｋｇ2ａ 모노클로날 항체
TWI532498B (zh) 2008-03-17 2016-05-11 巴克斯特保健公司 供免疫球蛋白及玻尿酸酶之皮下投藥之用的組合及方法
MY163544A (en) * 2008-03-25 2017-09-29 Roche Glycart Ag Use of a type ii anti-cd20 antibody with increased antibody dependent cellular cytotoxicity (adcc) in combination with cyclophosphamide, vincristine and doxorubicine for treating non-hodgkin's lymphomas
CN102099377A (zh) 2008-04-11 2011-06-15 新兴产品开发西雅图有限公司 Cd37免疫治疗剂及其与双功能化学治疗剂的联合
EP2899209A1 (en) * 2008-04-29 2015-07-29 Abbvie Inc. Dual Variable Domain Immunoglobulins and uses thereof
US20100260668A1 (en) * 2008-04-29 2010-10-14 Abbott Laboratories Dual Variable Domain Immunoglobulins and Uses Thereof
BRPI0913406A2 (pt) * 2008-06-03 2018-01-09 Abbott Lab imunoglobulinas de domínio variável duplo e usos das mesmas
JP5723769B2 (ja) * 2008-06-03 2015-05-27 アッヴィ・インコーポレイテッド 二重可変ドメイン免疫グロブリン及びその使用
WO2009151514A1 (en) 2008-06-11 2009-12-17 Millipore Corporation Stirred tank bioreactor
CA2729949A1 (en) * 2008-07-08 2010-01-14 Abbott Laboratories Prostaglandin e2 dual variable domain immunoglobulins and uses thereof
ES2442024T3 (es) 2008-07-15 2014-02-07 Academia Sinica Matrices de glucano sobre portaobjetos de vidrio revestidos con aluminio de tipo PTFE y métodos relacionados
MX2011001506A (es) 2008-08-14 2011-03-15 Genentech Inc Metodos para eliminar un contaminante utilizado cromatografia de membrana de intercambio de ion en desplazamiento de proteina indigena.
CA2734275A1 (en) 2008-09-10 2010-03-18 Genentech, Inc. Compositions and methods for the prevention of oxidative degradation of proteins
TW201438738A (zh) 2008-09-16 2014-10-16 Genentech Inc 治療進展型多發性硬化症之方法
TWI572359B (zh) 2008-10-14 2017-03-01 建南德克公司 免疫球蛋白變異體及其用途
JP2012509270A (ja) * 2008-11-17 2012-04-19 ジェネンテック， インコーポレイテッド 生理的条件下での高分子の凝集を低減するための方法及び製剤
WO2010077297A1 (en) 2008-12-09 2010-07-08 Halozyme, Inc. Extended soluble ph20 polypeptides and uses thereof
DK2370561T3 (da) 2008-12-16 2019-10-21 Emd Millipore Corp Omrøringstankreaktor og fremgangsmåde
CA2747248A1 (en) 2008-12-17 2010-07-15 Sharookh Kapadia Hepatitis c virus combination therapy
WO2010075249A2 (en) 2008-12-22 2010-07-01 Genentech, Inc. A method for treating rheumatoid arthritis with b-cell antagonists
WO2010075548A2 (en) 2008-12-23 2010-07-01 Genentech, Inc. Immunoglobulin variants with altered binding to protein a
MX2011008611A (es) * 2009-02-16 2011-10-21 Biolex Therapeutics Inc Anticuerpos anti-cd20 humanizados y metodos de uso.
ES2547712T3 (es) 2009-02-27 2015-10-08 Genentech, Inc. Métodos y composiciones para el marcado de proteínas
CA2755640C (en) 2009-03-20 2018-05-22 Genentech, Inc. Bispecific antibody with a single antigen-binding domain specific for both her3 and egfr
TWI504409B (zh) 2009-03-25 2015-10-21 Genentech Inc 新穎抗－α５β１抗體及其用途
KR101830024B1 (ko) 2009-03-25 2018-02-19 제넨테크, 인크. 항-ｆｇｆｒ３ 항체 및 그의 사용 방법
AR075982A1 (es) 2009-03-31 2011-05-11 Roche Glycart Ag Terapia de combinacion de un anticuerpo afucosilado y una o mas de las citoquinas seleccionadas de gm- csf humano, m -csf humano y/o il-3 humano y composicion
WO2010115589A1 (en) 2009-04-07 2010-10-14 Roche Glycart Ag Trivalent, bispecific antibodies
US9309325B2 (en) 2009-05-07 2016-04-12 The Regents Of The University Of California Antibodies and methods of use thereof
US20120121578A1 (en) * 2009-05-13 2012-05-17 Gliknik Inc. Methods of using immunoglobulin aggregates
US8815242B2 (en) * 2009-05-27 2014-08-26 Synageva Biopharma Corp. Avian derived antibodies
WO2010146059A2 (en) 2009-06-16 2010-12-23 F. Hoffmann-La Roche Ag Biomarkers for igf-1r inhibitor therapy
US9676845B2 (en) 2009-06-16 2017-06-13 Hoffmann-La Roche, Inc. Bispecific antigen binding proteins
WO2011014457A1 (en) 2009-07-27 2011-02-03 Genentech, Inc. Combination treatments
TW201109438A (en) * 2009-07-29 2011-03-16 Abbott Lab Dual variable domain immunoglobulins and uses thereof
KR20120089253A (ko) 2009-07-31 2012-08-09 제넨테크, 인크. Ｂｖ８? 또는 ｇ?ｃｓｆ?길항제를 이용한 종양 전이의 억제
CN102470172B (zh) 2009-08-14 2014-09-24 罗切格利卡特公司 无岩藻糖基化cd20抗体与氟达拉滨和/或米托蒽醌的联合疗法
TWI409079B (zh) 2009-08-14 2013-09-21 Roche Glycart Ag 非典型岩藻醣化ｃｄ２０抗體與苯達莫斯汀（ｂｅｎｄａｍｕｓｔｉｎｅ）之組合療法
RU2012112550A (ru) * 2009-09-01 2013-10-10 Эбботт Лэборетриз Иммуноглобулины с двумя вариабельными доменами и их применение
US9321823B2 (en) 2009-09-02 2016-04-26 Genentech, Inc. Mutant smoothened and methods of using the same
WO2011028952A1 (en) 2009-09-02 2011-03-10 Xencor, Inc. Compositions and methods for simultaneous bivalent and monovalent co-engagement of antigens
MX2012002766A (es) 2009-09-03 2012-04-02 Genentech Inc Metodos para el tratamiento, diagnosis y monitoreo de artritis reumatoide.
AR078161A1 (es) * 2009-09-11 2011-10-19 Hoffmann La Roche Formulaciones farmaceuticas muy concentradas de un anticuerpo anti cd20. uso de la formulacion. metodo de tratamiento.
EP2478110B1 (en) 2009-09-16 2016-01-06 Immunomedics, Inc. Class i anti-cea antibodies and uses thereof
EA026112B1 (ru) 2009-09-17 2017-03-31 Бакстер Хелскэа, С.А. Стабильная композиция, содержащая гиалуронидазу и иммуноглобулин, и способы ее применения
CA2775959A1 (en) * 2009-10-15 2011-04-21 Abbott Laboratories Dual variable domain immunoglobulins and uses thereof
ES2534646T3 (es) 2009-10-22 2015-04-27 F. Hoffmann-La Roche Ag Anticuerpos anti-hepsina y métodos de uso de los mismos
WO2011056494A1 (en) 2009-10-26 2011-05-12 Genentech, Inc. Activin receptor-like kinase-1 antagonist and vegfr3 antagonist combinations
WO2011056502A1 (en) 2009-10-26 2011-05-12 Genentech, Inc. Bone morphogenetic protein receptor type ii compositions and methods of use
WO2011056497A1 (en) 2009-10-26 2011-05-12 Genentech, Inc. Activin receptor type iib compositions and methods of use
UY32979A (es) 2009-10-28 2011-02-28 Abbott Lab Inmunoglobulinas con dominio variable dual y usos de las mismas
EP2496600A1 (en) 2009-11-04 2012-09-12 Fabrus LLC Methods for affinity maturation-based antibody optimization
WO2011057120A1 (en) 2009-11-05 2011-05-12 Genentech, Inc. Methods and composition for secretion of heterologous polypeptides
EP2470208A1 (en) * 2009-11-30 2012-07-04 Biotest AG Humanized anti-il-10 antibodies for the treatment of systemic lupus erythematosus (sle)
RU2012127383A (ru) 2009-12-02 2014-01-10 Акселерон Фарма Инк. Композиции и способы для увеличения времени полужизни fc-слитых белков в сыворотке
US11377485B2 (en) 2009-12-02 2022-07-05 Academia Sinica Methods for modifying human antibodies by glycan engineering
US10087236B2 (en) 2009-12-02 2018-10-02 Academia Sinica Methods for modifying human antibodies by glycan engineering
TWI505836B (zh) 2009-12-11 2015-11-01 Genentech Inc 抗－ｖｅｇｆ－ｃ抗體及其使用方法
SG181905A1 (en) 2009-12-23 2012-07-30 Genentech Inc Anti-bv8 antibodies and uses thereof
US8362210B2 (en) 2010-01-19 2013-01-29 Xencor, Inc. Antibody variants with enhanced complement activity
MX341687B (es) 2010-02-10 2016-08-30 Immunogen Inc "anticuerpos cd20 y su utilización".
CA2784211C (en) 2010-02-18 2019-12-24 Genentech, Inc. Neuregulin antagonists and use thereof in treating cancer
WO2011101328A2 (en) 2010-02-18 2011-08-25 Roche Glycart Ag Treatment with a humanized igg class anti egfr antibody and an antibody against insulin like growth factor 1 receptor
EP2550018B1 (en) 2010-03-22 2019-02-27 F.Hoffmann-La Roche Ag Compositions and methods useful for stabilizing protein-containing formulations
TW201138823A (en) 2010-03-24 2011-11-16 Genentech Inc Anti-LRP6 antibodies
WO2011130332A1 (en) 2010-04-12 2011-10-20 Academia Sinica Glycan arrays for high throughput screening of viruses
RU2585489C2 (ru) 2010-04-27 2016-05-27 Рош Гликарт Аг КОМБИНИРОВАННАЯ ТЕРАПИЯ АФУКОЗИЛИРОВАННЫМ АНТИТЕЛОМ CD20 И ИНГИБИТОРОМ mTOR
BR112012027828A2 (pt) 2010-05-03 2016-08-09 Genentech Inc composição de matéria, artigo de fabricação e método de redução da viscosidade de uma formulação contendo proteína e de preparação de uma formulação aquosa contendo proteína
CA2835489C (en) 2010-05-10 2018-03-06 Chi-Huey Wong Zanamivir phosphonate congeners with anti-influenza activity and determining oseltamivir susceptibility of influenza viruses
TWI500427B (zh) 2010-05-14 2015-09-21 Abbvie Inc Ｉｌ－１結合蛋白
KR101551295B1 (ko) 2010-05-17 2015-09-08 이엠디 밀리포어 코포레이션 생체분자 정제용 자극 반응성 중합체
WO2011147834A1 (en) 2010-05-26 2011-12-01 Roche Glycart Ag Antibodies against cd19 and uses thereof
WO2011153346A1 (en) 2010-06-03 2011-12-08 Genentech, Inc. Immuno-pet imaging of antibodies and immunoconjugates and uses therefor
CA2794731C (en) 2010-06-18 2019-03-19 Genentech, Inc. Anti-axl antibodies and methods of use
WO2011161119A1 (en) 2010-06-22 2011-12-29 F. Hoffmann-La Roche Ag Antibodies against insulin-like growth factor i receptor and uses thereof
PL3586826T3 (pl) 2010-06-24 2021-10-25 F. Hoffmann-La Roche Ag Kompozycje i sposoby stabilizowania preparatów zawierających białka
WO2011161189A1 (en) 2010-06-24 2011-12-29 F. Hoffmann-La Roche Ag Anti-hepsin antibodies and methods of use
CN103097418A (zh) 2010-07-09 2013-05-08 霍夫曼-拉罗奇有限公司 抗神经毡蛋白抗体及使用方法
WO2012010582A1 (en) 2010-07-21 2012-01-26 Roche Glycart Ag Anti-cxcr5 antibodies and methods of use
CA2806252C (en) 2010-07-29 2019-05-14 Xencor, Inc. Antibodies with modified isoelectric points
BR112013002535A2 (pt) 2010-08-03 2019-09-24 Hoffmann La Roche biomarcadores de leucemia linfocítica crônica (cll)
WO2012018790A2 (en) 2010-08-03 2012-02-09 Abbott Laboratories Dual variable domain immunoglobulins and uses thereof
EP2600898A1 (en) 2010-08-05 2013-06-12 F.Hoffmann-La Roche Ag Anti-mhc antibody anti-viral cytokine fusion protein
CA2807552A1 (en) 2010-08-06 2012-02-09 Moderna Therapeutics, Inc. Engineered nucleic acids and methods of use thereof
MX358859B (es) 2010-08-13 2018-09-05 Roche Glycart Ag Anticuerpos anti-fap y métodos de utilización.
JP5841149B2 (ja) 2010-08-13 2016-01-13 ロシュ グリクアート アーゲー 抗テネイシンｃａ２抗体及び使用の方法
AR082693A1 (es) 2010-08-17 2012-12-26 Roche Glycart Ag Terapia de combinacion de un anticuerpo anti-cd20 afucosilado con un anticuerpo anti-vegf
KR101603001B1 (ko) 2010-08-25 2016-03-11 에프. 호프만-라 로슈 아게 Il-18r1에 대한 항체 및 그의 용도
JP2013539364A (ja) 2010-08-26 2013-10-24 アッヴィ・インコーポレイテッド 二重可変ドメイン免疫グロブリンおよびその使用
JP2013537966A (ja) 2010-08-31 2013-10-07 ジェネンテック， インコーポレイテッド バイオマーカー及び治療の方法
EP3431485B1 (en) 2010-10-01 2020-12-30 ModernaTX, Inc. Engineered nucleic acids and methods of use thereof
CA2813738A1 (en) 2010-10-05 2012-04-12 Genentech, Inc. Mutant smoothened and methods of using the same
KR20200059320A (ko) 2010-11-08 2020-05-28 제넨테크, 인크. 피하 투여용 항―ｉｌ―6 수용체 항체
JP6163429B2 (ja) 2010-11-10 2017-07-12 ジェネンテック， インコーポレイテッド 神経疾患免疫治療のための方法及び組成物
KR20130088170A (ko) 2010-12-16 2013-08-07 로슈 글리카트 아게 비푸코실화 ｃｄ20 항체와 ｍｄｍ2 저해제와의 조합 치료
KR101923282B1 (ko) 2010-12-16 2018-11-28 제넨테크, 인크. Th2 억제에 관한 진단 및 치료
NZ610976A (en) 2010-12-20 2015-07-31 Genentech Inc Anti-mesothelin antibodies and immunoconjugates
WO2012088313A1 (en) 2010-12-22 2012-06-28 Genentech, Inc. Anti-pcsk9 antibodies and methods of use
WO2012092539A2 (en) 2010-12-31 2012-07-05 Takeda Pharmaceutical Company Limited Antibodies to dll4 and uses thereof
EP2482074A1 (en) * 2011-01-27 2012-08-01 Medizinische Hochschule Hannover Methods and means for diagnosing vasculitis
US10689447B2 (en) 2011-02-04 2020-06-23 Genentech, Inc. Fc variants and methods for their production
CN103476433A (zh) 2011-02-10 2013-12-25 罗切格利卡特公司 改良的免疫疗法
ES2549638T3 (es) 2011-02-28 2015-10-30 F. Hoffmann-La Roche Ag Proteínas de unión a antígeno
RU2013141078A (ru) 2011-02-28 2015-04-10 Ф. Хоффманн-Ля Рош Аг Одновалентные антигенсвязывающие белки
KR20140022815A (ko) 2011-02-28 2014-02-25 제넨테크, 인크. B-세포 길항제에 대한 반응을 예측하기 위한 생물학적 마커 및 방법
US20120222851A1 (en) * 2011-03-04 2012-09-06 GM Global Technology Operations LLC Hvac system damper
CN105949313B (zh) 2011-03-29 2021-06-15 罗切格利卡特公司 抗体Fc变体
WO2012135805A2 (en) 2011-03-31 2012-10-04 modeRNA Therapeutics Delivery and formulation of engineered nucleic acids
CA2828890A1 (en) 2011-04-07 2012-10-11 Genentech, Inc. Anti-fgfr4 antibodies and methods of use
EA201892619A1 (ru) 2011-04-29 2019-04-30 Роше Гликарт Аг Иммуноконъюгаты, содержащие мутантные полипептиды интерлейкина-2
WO2012146630A1 (en) 2011-04-29 2012-11-01 F. Hoffmann-La Roche Ag N-terminal acylated polypeptides, methods for their production and uses thereof
ES2567276T3 (es) 2011-05-12 2016-04-21 Genentech, Inc. Método de LC-MS/MS de monitoreo de múltiples reacciones para detectar anticuerpos terapéuticos en muestras de animales usando péptidos de cambio de marco
SG194917A1 (en) 2011-05-16 2013-12-30 Genentech Inc Fgfr1 agonists and methods of use
SG10201703425RA (en) 2011-05-21 2017-05-30 Macrogenics Inc Cd3-binding molecules capable of binding to human and non-human cd3
CN103596984B (zh) 2011-06-15 2016-04-13 霍夫曼-拉罗奇有限公司 抗-人epo受体的抗体及使用方法
KR102047248B1 (ko) 2011-06-17 2019-11-21 노보 노르디스크 에이/에스 침식성 세포의 선택적 제거
ES2667864T3 (es) 2011-06-22 2018-05-14 F. Hoffmann-La Roche Ag Eliminación de células diana mediante linfocitos T citotóxicos específicos de virus en circulación usando complejos que comprenden MHC de clase I
CN107090038A (zh) 2011-06-30 2017-08-25 霍夫曼-拉罗奇有限公司 抗c‑met抗体配制剂
BR112014003431A2 (pt) 2011-08-17 2017-06-13 Genentech Inc anticorpo, ácido nucleico, célula hospedeira, método de produção de um anticorpo, imunoconjugado, formulação farmacêutica, agente farmacêutico, uso do anticorpo, método de tratamento de um indivíduo que tem câncer e método de aumento de tempo para recorrência de tumor
WO2013025944A1 (en) 2011-08-17 2013-02-21 Genentech, Inc. Inhibition of angiogenesis in refractory tumors
CA2844141A1 (en) 2011-08-23 2013-02-28 Roche Glycart Ag Anti-mcsp antibodies
ES2686327T3 (es) 2011-08-23 2018-10-17 Roche Glycart Ag Moléculas de unión a antígeno biespecíficas
US9464124B2 (en) 2011-09-12 2016-10-11 Moderna Therapeutics, Inc. Engineered nucleic acids and methods of use thereof
CN103930781A (zh) 2011-09-15 2014-07-16 霍夫曼-拉罗奇有限公司 促进分化的方法
EP2758055A1 (en) 2011-09-19 2014-07-30 F.Hoffmann-La Roche Ag Combination treatments comprising c-met antagonists and b-raf antagonists
AU2012318752B2 (en) 2011-10-03 2017-08-31 Modernatx, Inc. Modified nucleosides, nucleotides, and nucleic acids, and uses thereof
AU2012319150B2 (en) 2011-10-05 2017-08-17 Genentech, Inc. Methods of treating liver conditions using Notch2 antagonists
JP6532678B2 (ja) 2011-10-14 2019-06-19 ジェネンテック， インコーポレイテッド 抗ＨｔｒＡ１抗体及び使用方法
BR112014008590A2 (pt) 2011-10-15 2017-10-24 Genentech Inc métodos de uso de antagonistas de scd1
WO2013059531A1 (en) 2011-10-20 2013-04-25 Genentech, Inc. Anti-gcgr antibodies and uses thereof
AU2012328739B2 (en) 2011-10-25 2017-11-30 Prothena Biosciences Limited Antibody formulations and methods
EP2776051A4 (en) 2011-10-28 2015-06-17 Hoffmann La Roche THERAPEUTIC COMBINATIONS AND METHOD FOR THE TREATMENT OF MELANOMA
TR201904882T4 (tr) * 2011-11-17 2019-05-21 Gundram Jung Tıbbi kullanım için bispesifik antikorlar.
AU2012340826A1 (en) 2011-11-21 2014-05-29 Genentech, Inc. Purification of anti-c-met antibodies
US20130302274A1 (en) 2011-11-25 2013-11-14 Roche Glycart Ag Combination therapy
US20140335084A1 (en) 2011-12-06 2014-11-13 Hoffmann-La Roche Inc. Antibody formulation
WO2013101509A2 (en) 2011-12-15 2013-07-04 Alternative Innovative Technologies Llc Hsp70 fusion protein conjugates and uses thereof
CN104114572A (zh) 2011-12-16 2014-10-22 现代治疗公司 经修饰的核苷、核苷酸和核酸组合物
BR112014014239B1 (pt) 2011-12-22 2021-10-13 F. Hoffmann-La Roche Ag Método para selecionar uma célula recombinante de mamífero transfectada estável, método para produzir um anticorpo e vetor de expressão
IL267585B (en) 2011-12-22 2022-09-01 Genentech Inc Ion exchange membrane chromatography
EP3816284A1 (en) 2011-12-22 2021-05-05 F. Hoffmann-La Roche AG Expression vector for antibody production in eukaryotic cells
WO2013092720A1 (en) 2011-12-22 2013-06-27 F. Hoffmann-La Roche Ag Full length antibody display system for eukaryotic cells and its use
AR089434A1 (es) 2011-12-23 2014-08-20 Genentech Inc Procedimiento para preparar formulaciones con alta concentracion de proteinas
MX361727B (es) 2011-12-30 2018-12-14 Halozyme Inc Variantes de polipeptido ph20, formulaciones y usos de las mismas.
WO2013101771A2 (en) 2011-12-30 2013-07-04 Genentech, Inc. Compositions and method for treating autoimmune diseases
BR112014015851A2 (pt) 2011-12-30 2019-09-24 Abbvie Inc proteínas de ligação específicas duplas direcionadas contra il-13 e/ou il-17
EP2802601B1 (en) 2012-01-09 2019-11-13 The Scripps Research Institute Humanized antibodies with ultralong cdr3s
CN104520321A (zh) 2012-01-09 2015-04-15 斯克利普斯研究所 超长互补决定区及其用途
CA2862424A1 (en) 2012-01-18 2013-07-25 Genentech, Inc. Methods of using fgf19 modulators
JP6242813B2 (ja) 2012-01-18 2017-12-06 ジェネンテック， インコーポレイテッド 抗ｌｒｐ５抗体及び使用方法
CN104204217A (zh) * 2012-01-19 2014-12-10 医用蛋白国际有限责任公司 抗cd20抗体利妥昔单抗的稳定化
AU2013215332A1 (en) 2012-01-31 2014-09-04 Genentech, Inc. Anti-Ig-E M1' antibodies and methods using same
AU2013216753B2 (en) 2012-02-11 2017-09-21 Genentech, Inc. R-spondin translocations and methods using the same
KR102069397B1 (ko) 2012-02-15 2020-01-22 에프. 호프만-라 로슈 아게 Ｆｃ-수용체 기재 친화성 크로마토그래피
RU2014136886A (ru) 2012-03-27 2016-05-20 Дженентек, Инк. Диагностика и виды лечения, связанные с ингибиторами her3
BR112014023176B1 (pt) 2012-03-27 2021-09-28 Genentech, Inc. Métodos de produção de uma proteína recombinante
AR090549A1 (es) 2012-03-30 2014-11-19 Genentech Inc Anticuerpos anti-lgr5 e inmunoconjugados
US10501512B2 (en) 2012-04-02 2019-12-10 Modernatx, Inc. Modified polynucleotides
EP2833923A4 (en) 2012-04-02 2016-02-24 Moderna Therapeutics Inc MODIFIED POLYNUCLEOTIDES FOR THE PRODUCTION OF PROTEINS
US9572897B2 (en) 2012-04-02 2017-02-21 Modernatx, Inc. Modified polynucleotides for the production of cytoplasmic and cytoskeletal proteins
US9283287B2 (en) 2012-04-02 2016-03-15 Moderna Therapeutics, Inc. Modified polynucleotides for the production of nuclear proteins
AU2013243861A1 (en) 2012-04-05 2014-10-23 Ac Immune S.A. Humanized Tau antibody
US10130714B2 (en) 2012-04-14 2018-11-20 Academia Sinica Enhanced anti-influenza agents conjugated with anti-inflammatory activity
AU2013256596A1 (en) 2012-05-01 2014-10-09 Genentech, Inc. Anti-PMEL17 antibodies and immunoconjugates
WO2013170191A1 (en) 2012-05-11 2013-11-14 Genentech, Inc. Methods of using antagonists of nad biosynthesis from nicotinamide
RU2625771C2 (ru) 2012-05-23 2017-07-18 Дженентек, Инк. Способ отбора терапевтических средств
RU2015101113A (ru) 2012-06-15 2016-08-10 Дженентек, Инк. Антитела против pcsk9, составы, дозы и способы применения
KR20150030755A (ko) 2012-07-04 2015-03-20 에프. 호프만-라 로슈 아게 항-바이오틴 항체 및 사용 방법
CN104394886B (zh) 2012-07-04 2017-05-24 弗·哈夫曼-拉罗切有限公司 抗茶碱抗体及使用方法
MX357043B (es) 2012-07-04 2018-06-25 Rhizen Pharmaceuticals Sa Inhibidores selectivos de pi3k delta.
JP6148729B2 (ja) 2012-07-04 2017-06-14 エフ．ホフマン−ラ ロシュ アーゲーＦ． Ｈｏｆｆｍａｎｎ−Ｌａ Ｒｏｃｈｅ Ａｋｔｉｅｎｇｅｓｅｌｌｓｃｈａｆｔ 共有結合している抗原−抗体結合体
KR20150030693A (ko) 2012-07-05 2015-03-20 제넨테크, 인크. 발현 및 분비 시스템
WO2014011521A1 (en) 2012-07-09 2014-01-16 Genentech, Inc. Immunoconjugates comprising anti - cd79b antibodies
SG11201500142RA (en) 2012-07-09 2015-02-27 Genentech Inc Immunoconjugates comprising anti-cd22 antibodies
BR112015000437A2 (pt) 2012-07-09 2017-06-27 Genentech Inc imunoconjugados, formulação farmacêutica, métodos de tratamento e de inbir a proliferação de uma célula
TW201406785A (zh) 2012-07-09 2014-02-16 Genentech Inc 抗ｃｄ２２抗體及免疫結合物
AR091755A1 (es) 2012-07-12 2015-02-25 Abbvie Inc Proteinas de union a il-1
KR101774121B1 (ko) 2012-07-13 2017-09-01 로슈 글리카트 아게 이중특이적 항-vegf/항-ang-2 항체 및 안 혈관 질환의 치료에 있어서 이의 용도
MX2015000681A (es) 2012-08-02 2015-04-10 Hoffmann La Roche Metodo para producir receptores de fc (fcr) solubles como fusion de fc con region de fc de inmunoglobulina inerte y uso de las mismas.
AU2013301582B2 (en) 2012-08-07 2018-09-06 Roche Glycart Ag Composition comprising two antibodies engineered to have reduced and increased effector function
WO2014031498A1 (en) 2012-08-18 2014-02-27 Academia Sinica Cell-permeable probes for identification and imaging of sialidases
EP2888238A4 (en) 2012-08-21 2016-01-27 Academia Sinica BENZOCYCLO-OCTYNE COMPOUNDS AND USES THEREOF
WO2014052713A2 (en) 2012-09-27 2014-04-03 Massachusetts Institute Of Technology Her2-and vegf-a-binding proteins with enhanced stability
TW202210507A (zh) 2012-11-01 2022-03-16 美商艾伯維有限公司 抗-vegf/dll4雙重可變區域免疫球蛋白及其用途
BR112015009879A8 (pt) 2012-11-02 2019-09-17 Lab Francais Du Fractionnement método in vitro de inibição da proliferação de uma população de células, composto, kit e composição farmacêutica
EP2914621B1 (en) 2012-11-05 2023-06-07 Foundation Medicine, Inc. Novel ntrk1 fusion molecules and uses thereof
MA38165A1 (fr) 2012-11-08 2018-07-31 Hoffmann La Roche Protéines de liaison à l'antigène her3 se liant à l'épingle à cheveux beta de her3
PE20150945A1 (es) 2012-11-13 2015-06-26 Genentech Inc Anticuerpos de antihemaglutinina y metodos de uso
WO2014076292A1 (en) 2012-11-19 2014-05-22 Baliopharm Ag Recombinant bispecific antibody binding to cd20 and cd95
US9597380B2 (en) 2012-11-26 2017-03-21 Modernatx, Inc. Terminally modified RNA
EP2934602B1 (en) 2012-12-19 2019-02-27 Genentech, Inc. Methods and compositions for radiohalogen protein labeling
AU2013360775B2 (en) 2012-12-21 2018-04-12 F. Hoffmann-La Roche Ag Disulfide-linked multivalent MHC class I comprising multi-function proteins
US10980804B2 (en) 2013-01-18 2021-04-20 Foundation Medicine, Inc. Methods of treating cholangiocarcinoma
WO2014116749A1 (en) 2013-01-23 2014-07-31 Genentech, Inc. Anti-hcv antibodies and methods of using thereof
WO2014120555A1 (en) 2013-01-31 2014-08-07 The Regents Of The University Of California Antibodies specific for urokinase-type plasminogen activator and methods of use thereof
BR112015018418A2 (pt) 2013-02-22 2017-07-18 Hoffmann La Roche métodos para tratar câncer, para aumentar a eficácia de um tratamento, para adiar e/ou prevenir o desenvolvimento de câncer, para aumentar a sensibilidade a um terapêutico direcionado, para estender o período de sensibilidade, para estender a duração de resposta a um terapêutico direcionado e produto farmacêutico
KR20150123811A (ko) 2013-02-26 2015-11-04 로슈 글리카트 아게 항-mcsp 항체
MX2015011428A (es) 2013-03-06 2016-02-03 Genentech Inc Metodos para tratar y prevenir la resistencia a los farmacos para el cancer.
EP2970478B1 (en) * 2013-03-12 2020-05-06 Molecular Templates, Inc. Cd20-binding immunotoxins for inducing cellular internalization and methods using same
MY185551A (en) 2013-03-13 2021-05-19 Genentech Inc Antibody formulations
EP3299391B1 (en) 2013-03-14 2019-12-04 Genentech, Inc. Anti-b7-h4 antibodies and immunoconjugates
SG11201507477XA (en) 2013-03-14 2015-10-29 Genentech Inc Combinations of a mek inhibitor compound with an her3/egfr inhibitor compound and methods of use
EP2968565A2 (en) 2013-03-14 2016-01-20 Genentech, Inc. Methods of treating cancer and preventing cancer drug resistance
US9562099B2 (en) 2013-03-14 2017-02-07 Genentech, Inc. Anti-B7-H4 antibodies and immunoconjugates
TR201809571T4 (tr) 2013-03-15 2018-07-23 Hoffmann La Roche Ll-22 polipeptidleri ile ıl-22 fc füzyon proteinleri ve kullanım yöntemleri.
KR102233349B1 (ko) 2013-03-15 2021-03-31 에이씨 이뮨 에스.에이. 항-타우(tau) 항체 및 사용 방법
MX2015011444A (es) 2013-03-15 2015-12-16 Genentech Inc Composiciones y metodos para el diagnostico y tratamiento del cancer hepatico.
US8980864B2 (en) 2013-03-15 2015-03-17 Moderna Therapeutics, Inc. Compositions and methods of altering cholesterol levels
CA2905798C (en) 2013-03-15 2023-01-24 Genentech, Inc. Biomarkers and methods of treating pd-1 and pd-l1 related conditions
US20140328849A1 (en) 2013-03-15 2014-11-06 Genentech, Inc. Anti-crth2 antibodies and methods of use
CA2904448A1 (en) 2013-03-15 2014-09-18 Tariq Ghayur Dual specific binding proteins directed against il-1.beta. and/or il-17
EP2968537A1 (en) 2013-03-15 2016-01-20 Genentech, Inc. Methods of treating cancer and preventing cancer drug resistance
AU2014233393B2 (en) * 2013-03-15 2020-05-28 Genentech, Inc. Cell culture compositions with antioxidants and methods for polypeptide production
UA118028C2 (uk) 2013-04-03 2018-11-12 Рош Глікарт Аг Біспецифічне антитіло, специфічне щодо fap і dr5, антитіло, специфічне щодо dr5, і спосіб їх застосування
RU2687043C2 (ru) 2013-04-29 2019-05-06 Ф. Хоффманн-Ля Рош Аг МОДИФИЦИРОВАННЫЕ АСИММЕТРИЧНЫЕ АНТИТЕЛА, СВЯЗЫВАЮЩИЕ Fc-РЕЦЕПТОР, И СПОСОБЫ ИХ ПРИМЕНЕНИЯ
PE20151807A1 (es) 2013-04-29 2015-12-02 Hoffmann La Roche Anticuerpos modificados de union a fcrn humano y metodo de utilizacion
EP3327034A1 (en) 2013-04-29 2018-05-30 F. Hoffmann-La Roche AG Fcrn-binding abolished anti-igf-1r antibodies and their use in the treatment of vascular eye diseases
MX2015015970A (es) 2013-05-20 2016-09-08 Genentech Inc Anticuerpos receptores de antitransferina y metodos de uso.
CA2910029A1 (en) 2013-05-31 2014-12-04 Genentech, Inc. Anti-wall teichoic antibodies and conjugates
US9884126B2 (en) 2013-05-31 2018-02-06 Genentech, Inc. Anti-wall teichoic antibodies and conjugates
EP3013365B1 (en) 2013-06-26 2019-06-05 Academia Sinica Rm2 antigens and use thereof
WO2014210564A1 (en) 2013-06-27 2014-12-31 Academia Sinica Glycan conjugates and use thereof
TW201534726A (zh) 2013-07-03 2015-09-16 Halozyme Inc 熱穩定ｐｈ２０玻尿酸酶變異體及其用途
WO2015017146A2 (en) 2013-07-18 2015-02-05 Fabrus, Inc. Antibodies with ultralong complementarity determining regions
JP6687520B2 (ja) 2013-07-18 2020-04-22 トーラス バイオサイエンシズ リミテッド ライアビリティ カンパニー 極めて長い相補性決定領域を有するヒト化抗体
TWI679021B (zh) 2013-08-01 2019-12-11 美商戊瑞治療有限公司 無海藻糖基化抗fgfr2iiib抗體
KR20160042438A (ko) 2013-08-12 2016-04-19 제넨테크, 인크. 보체-연관 상태의 치료를 위한 조성물 및 방법
JP6486368B2 (ja) 2013-09-06 2019-03-20 アカデミア シニカＡｃａｄｅｍｉａ Ｓｉｎｉｃａ 改変されたグリコシル基を含む糖脂質を用いたヒトｉＮＫＴ細胞の活性化
RU2016109247A (ru) 2013-09-17 2017-10-19 Дженентек, Инк. Способы применения антител к lgr5
CN103524621B (zh) * 2013-09-27 2015-04-01 北京济福霖生物技术有限公司 一种抗人cd20嵌合单克隆抗体
WO2015048744A2 (en) 2013-09-30 2015-04-02 Moderna Therapeutics, Inc. Polynucleotides encoding immune modulating polypeptides
JP2016538829A (ja) 2013-10-03 2016-12-15 モデルナ セラピューティクス インコーポレイテッドＭｏｄｅｒｎａ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，Ｉｎｃ． 低密度リポタンパク質受容体をコードするポリヌクレオチド
CN105612182B (zh) 2013-10-11 2019-12-10 豪夫迈·罗氏有限公司 多特异性结构域交换共有可变轻链抗体
KR20160068855A (ko) 2013-10-11 2016-06-15 제넨테크, 인크. Nsp4 억제제 및 사용 방법
CN105813654B (zh) 2013-10-11 2019-05-31 美国政府(由卫生和人类服务部的部长所代表) Tem8抗体及其用途
CN105744954B (zh) 2013-10-18 2021-03-05 豪夫迈·罗氏有限公司 抗rspo2和/或抗rspo3抗体及其用途
MX2016005159A (es) 2013-10-23 2016-07-05 Genentech Inc Metodos de diagnostico y tratamiento de trastornos eosinofilicos.
CN104623637A (zh) 2013-11-07 2015-05-20 健能隆医药技术（上海）有限公司 Il-22二聚体在制备静脉注射药物中的应用
CA2924268C (en) 2013-11-21 2021-05-18 F. Hoffmann-La Roche Ag Anti-alpha-synuclein antibodies and methods of use
CA2930886C (en) 2013-12-09 2024-05-21 Christopher R. Bebbington Anti-siglec-8 antibodies and methods of use thereof
KR20160098328A (ko) 2013-12-13 2016-08-18 제넨테크, 인크. 항-cd33 항체 및 면역접합체
SG11201604979WA (en) 2013-12-17 2016-07-28 Genentech Inc Combination therapy comprising ox40 binding agonists and pd-1 axis binding antagonists
ES2763429T5 (es) 2013-12-17 2023-06-21 Hoffmann La Roche Procedimientos de tratamiento de cánceres usando antagonistas de la unión al eje de PD-1 y taxanos
PE20210648A1 (es) 2013-12-17 2021-03-26 Genentech Inc Anticuerpos anti-cd3 y metodos de uso
CN105899535A (zh) 2013-12-17 2016-08-24 豪夫迈·罗氏有限公司 用pd-1轴结合拮抗剂和抗cd20抗体治疗癌症的方法
JP6608827B2 (ja) 2013-12-20 2019-11-20 エフ．ホフマン−ラ ロシュ アーゲー ヒト化抗タウ（ｐＳ４２２）抗体及び使用方法
TWI670283B (zh) 2013-12-23 2019-09-01 美商建南德克公司 抗體及使用方法
BR112016014945A2 (pt) 2014-01-03 2018-01-23 F. Hoffmann-La Roche Ag conjugado, formulação farmacêutica e uso
KR102278979B1 (ko) 2014-01-03 2021-07-19 에프. 호프만-라 로슈 아게 공유적으로 연결된 헬리카-항-헬리카 항체 접합체 및 그의 용도
CA2933384A1 (en) 2014-01-03 2015-07-09 F. Hoffmann-La Roche Ag Bispecific anti-hapten/anti-blood brain barrier receptor antibodies, complexes thereof and their use as blood brain barrier shuttles
WO2015103549A1 (en) 2014-01-03 2015-07-09 The United States Of America, As Represented By The Secretary Department Of Health And Human Services Neutralizing antibodies to hiv-1 env and their use
CN111057151B (zh) 2014-01-06 2022-05-03 豪夫迈·罗氏有限公司 单价血脑屏障穿梭模块
RU2727639C2 (ru) 2014-01-15 2020-07-22 Ф.Хоффманн-Ля Рош Аг Варианты fc-области с модифицированной способностью связываться с fcrn и с сохраненной способностью связываться с белком а
AU2015206370A1 (en) 2014-01-16 2016-07-07 Academia Sinica Compositions and methods for treatment and detection of cancers
US10150818B2 (en) 2014-01-16 2018-12-11 Academia Sinica Compositions and methods for treatment and detection of cancers
CA2935393A1 (en) 2014-01-24 2015-07-30 Genentech, Inc. Methods of using anti-steap1 antibodies and immunoconjugates
WO2015113007A1 (en) 2014-01-27 2015-07-30 Molecular Templates, Inc. De-immunized shiga toxin a subunit effector polypeptides for applications in mammals
DK3102197T3 (en) 2014-02-04 2018-11-19 Genentech Inc Smoothened mutant and methods for its use
AU2015213741B2 (en) 2014-02-08 2020-10-08 Genentech, Inc. Methods of treating Alzheimer's Disease
KR20160111039A (ko) 2014-02-08 2016-09-23 제넨테크, 인크. 알츠하이머 질환을 치료하는 방법
US9518121B2 (en) 2014-02-12 2016-12-13 Genentech, Inc. Anti-Jagged1 antibodies and methods of use
EA201691473A1 (ru) 2014-02-21 2016-12-30 Дженентек, Инк. Биспецифические анти-il-13/il-17 антитела и их применение
TWI558399B (zh) 2014-02-26 2016-11-21 美國禮來大藥廠 癌症之組合療法
EP4014995A1 (en) 2014-02-28 2022-06-22 Allakos Inc. Methods and compositions for treating siglec-8 associated diseases
TW201622744A (zh) 2014-03-04 2016-07-01 美國禮來大藥廠 癌症之組合療法
US11142584B2 (en) 2014-03-11 2021-10-12 Molecular Templates, Inc. CD20-binding proteins comprising Shiga toxin A subunit effector regions for inducing cellular internalization and methods using same
SI3116999T1 (sl) 2014-03-14 2021-12-31 F. Hoffmann - La Roche Ag Postopki in sestavki za izločanje heterolognih polipeptidov
US20170107294A1 (en) 2014-03-21 2017-04-20 Nordlandssykehuset Hf Anti-cd14 antibodies and uses thereof
MX2016012285A (es) 2014-03-24 2017-01-23 Genentech Inc Tratamiento de cáncer con antagonista de c-met y correlación de estos con la expresión de hgf.
TWI797430B (zh) 2014-03-27 2023-04-01 中央研究院 反應性標記化合物及其用途
SG11201607969XA (en) 2014-03-31 2016-10-28 Genentech Inc Anti-ox40 antibodies and methods of use
WO2015153514A1 (en) 2014-03-31 2015-10-08 Genentech, Inc. Combination therapy comprising anti-angiogenesis agents and ox40 binding agonists
WO2015164615A1 (en) 2014-04-24 2015-10-29 University Of Oslo Anti-gluten antibodies and uses thereof
JP2017522861A (ja) 2014-05-22 2017-08-17 ジェネンテック， インコーポレイテッド 抗ｇｐｃ３抗体及びイムノコンジュゲート
JP2017524371A (ja) 2014-05-23 2017-08-31 ジェネンテック， インコーポレイテッド Ｍｉｔバイオマーカーとその使用方法
JP2017518989A (ja) 2014-05-27 2017-07-13 アカデミア シニカＡｃａｄｅｍｉａ Ｓｉｎｉｃａ 抗ｃｄ２０糖操作抗体群およびその使用
CN107074945B (zh) 2014-05-27 2021-08-24 中央研究院 增进抗体功效的通用糖型的组合物及方法
US10118969B2 (en) 2014-05-27 2018-11-06 Academia Sinica Compositions and methods relating to universal glycoforms for enhanced antibody efficacy
TWI679020B (zh) 2014-05-27 2019-12-11 中央研究院 抗ｈｅｒ２醣抗體及其用途
EP3149000B1 (en) 2014-05-27 2021-06-30 Rhizen Pharmaceuticals S.A. Crystalline tosylate salt of a pi3k delta selective inhibitor for use in pharmaceutical formulations
TWI732738B (zh) 2014-05-28 2021-07-11 中央研究院 抗TNF-α醣抗體及其用途
EP3155015A1 (en) 2014-06-11 2017-04-19 F. Hoffmann-La Roche AG Anti-lgr5 antibodies and uses thereof
JP6735237B2 (ja) 2014-06-11 2020-08-05 モレキュラー テンプレーツ, インク.Molecular Templates, Inc. プロテアーゼ切断耐性、志賀毒素ａサブユニットエフェクターポリペプチド及びそれを含む細胞標的化分子
JP2017517552A (ja) 2014-06-13 2017-06-29 ジェネンテック， インコーポレイテッド 抗癌剤耐性の治療及び防止方法
CN106687476B (zh) 2014-06-26 2020-11-13 豪夫迈·罗氏有限公司 抗brdu抗体及使用方法
AR100978A1 (es) 2014-06-26 2016-11-16 Hoffmann La Roche LANZADERAS CEREBRALES DE ANTICUERPO HUMANIZADO ANTI-Tau(pS422) Y USOS DE LAS MISMAS
EP3309174B1 (en) 2014-07-11 2022-05-11 Ventana Medical Systems, Inc. Anti-pd-l1 antibodies and diagnostic uses thereof
US9914774B2 (en) 2014-07-11 2018-03-13 Genentech, Inc. Notch pathway inhibition
WO2016019969A1 (en) 2014-08-08 2016-02-11 Ludwig-Maximilians-Universität München Subcutaneously administered bispecific antibodies for use in the treatment of cancer
TWI805109B (zh) 2014-08-28 2023-06-11 美商奇諾治療有限公司 對cd19具專一性之抗體及嵌合抗原受體
ES2913865T3 (es) 2014-08-28 2022-06-06 Bioatla Inc Receptores de antígeno quimérico condicionalmente activos para células T modificadas
WO2016037123A2 (en) 2014-09-05 2016-03-10 Opexa Therapeutics, Inc. Compositions and methods for treating b cell mediated autoimmune disorders
US9879042B2 (en) 2014-09-08 2018-01-30 Academia Sinica Human iNKT cell activation using glycolipids
SI3191135T1 (sl) 2014-09-12 2021-01-29 Genentech, Inc. Anti-HER2 protitelesa in imunokonjugati
CA2957354A1 (en) 2014-09-12 2016-03-17 Genentech, Inc. Cysteine engineered antibodies and conjugates
MA40579A (fr) 2014-09-12 2016-03-17 Genentech Inc Anticorps anti-cll-1 et immunoconjugués
AR101848A1 (es) 2014-09-12 2017-01-18 Genentech Inc Anticuerpos de anti-b7-h4 e inmunoconjugados
WO2016044334A1 (en) 2014-09-15 2016-03-24 Genentech, Inc. Antibody formulations
MX2017003472A (es) 2014-09-17 2017-10-31 Genentech Inc Inmunoconjugados que comprenden anticuerpos anti-her2.
PT3262071T (pt) 2014-09-23 2020-06-16 H Hoffnabb La Roche Ag Métodos de utilização de imunoconjugados anti-cd79b
JP2017536102A (ja) 2014-10-16 2017-12-07 ジェネンテック， インコーポレイテッド 抗アルファ−シヌクレイン抗体及び使用方法
WO2016070001A1 (en) 2014-10-31 2016-05-06 Jounce Therapeutics, Inc. Methods of treating conditions with antibodies that bind b7-h4
SG11201703521UA (en) 2014-11-03 2017-05-30 Genentech Inc Methods and biomarkers for predicting efficacy and evaluation of an ox40 agonist treatment
SG11201703448QA (en) 2014-11-03 2017-05-30 Genentech Inc Assays for detecting t cell immune subsets and methods of use thereof
CN107108740B (zh) 2014-11-05 2021-09-17 豪夫迈·罗氏有限公司 抗fgfr2/3抗体及其使用方法
MX2017005930A (es) 2014-11-05 2017-06-30 Genentech Inc Metodo de produccion de proteinas de cadena doble en bacterias.
WO2016073794A1 (en) 2014-11-05 2016-05-12 Genentech, Inc. Methods of producing two chain proteins in bacteria
KR20170072343A (ko) 2014-11-06 2017-06-26 제넨테크, 인크. Ox40 결합 효능제 및 tigit 억제제를 포함하는 병용 요법
MX2017005150A (es) 2014-11-06 2017-08-08 Hoffmann La Roche Variantes de region fc con propiedades modificadas de union a receptor neonatal fc (fcrn) y proteina a.
WO2016073157A1 (en) 2014-11-06 2016-05-12 Genentech, Inc. Anti-ang2 antibodies and methods of use thereof
CA2960797A1 (en) 2014-11-06 2016-05-12 F. Hoffmann-La Roche Ag Fc-region variants with modified fcrn-binding and methods of use
CN107105632A (zh) 2014-11-10 2017-08-29 豪夫迈·罗氏有限公司 肾病动物模型及其治疗剂
CR20170240A (es) 2014-11-10 2018-04-03 Genentech Inc Anticuerpos anti-interleucina-33 y sus usos
EP3875481A1 (en) 2014-11-14 2021-09-08 The U.S.A. as represented by the Secretary, Department of Health and Human Services Neutralizing antibodies to ebola virus glycoprotein and their use
SG11201703605QA (en) 2014-11-17 2017-06-29 Genentech Inc Combination therapy comprising ox40 binding agonists and pd-1 axis binding antagonists
JP6779876B2 (ja) 2014-11-19 2020-11-04 ジェネンテック， インコーポレイテッド 抗トランスフェリン受容体抗体及びその使用方法
JP6859259B2 (ja) 2014-11-19 2021-04-14 ジェネンテック， インコーポレイテッド ＢＡＣＥｌに対する抗体及び神経疾患免疫療法のためのその使用
US11008403B2 (en) 2014-11-19 2021-05-18 Genentech, Inc. Anti-transferrin receptor / anti-BACE1 multispecific antibodies and methods of use
ES2835823T3 (es) 2014-11-20 2021-06-23 Hoffmann La Roche Politerapia de moléculas de unión a antígeno biespecíficas activadoras de linfocitos T para CD3 y para el receptor de folato 1 (FolR1) y antagonistas de la unión al eje de PD-1
JP6721590B2 (ja) 2014-12-03 2020-07-15 エフ．ホフマン−ラ ロシュ アーゲーＦ． Ｈｏｆｆｍａｎｎ−Ｌａ Ｒｏｃｈｅ Ａｋｔｉｅｎｇｅｓｅｌｌｓｃｈａｆｔ 多重特異性抗体
MX2017007055A (es) 2014-12-03 2017-11-08 Genentech Inc Conjugados de anticuerpo rifamicina anti-staphylococcus aureus y usos de estos.
BR112017011478A2 (pt) 2014-12-03 2018-02-27 Genentech, Inc. composto de conjugado anticorpo-antibiótico, conjugado anticorpo-antibiótico, composição farmacêutica, métodos de tratamento de uma infecção bacteriana e para exterminar staph aureus, processo para a preparação do composto, kit e intermediário antibiótico-ligante
CR20170230A (es) 2014-12-05 2017-11-07 Genentech Inc Anticuerpos anti-cd79b y métodos de uso
WO2016094566A2 (en) 2014-12-10 2016-06-16 Genentech, Inc. Blood brain barrier receptor antibodies and methods of use
US10093733B2 (en) 2014-12-11 2018-10-09 Abbvie Inc. LRP-8 binding dual variable domain immunoglobulin proteins
CN107278206B (zh) 2014-12-19 2021-04-02 雷根尼桑斯公司 结合人c6的抗体及其用途
MY183415A (en) 2014-12-19 2021-02-18 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Anti-c5 antibodies and methods of use
WO2016111947A2 (en) 2015-01-05 2016-07-14 Jounce Therapeutics, Inc. Antibodies that inhibit tim-3:lilrb2 interactions and uses thereof
CN107428833B (zh) 2015-01-16 2021-11-02 朱诺治疗学股份有限公司 Ror1特异性抗体和嵌合抗原受体
US9975965B2 (en) 2015-01-16 2018-05-22 Academia Sinica Compositions and methods for treatment and detection of cancers
US10495645B2 (en) 2015-01-16 2019-12-03 Academia Sinica Cancer markers and methods of use thereof
US20180016327A1 (en) 2015-01-22 2018-01-18 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha A Combination of Two or More Anti-C5 Antibodies and Methods of Use
EP3789766A1 (en) 2015-01-24 2021-03-10 Academia Sinica Novel glycan conjugates and methods of use thereof
BR112017014547A2 (pt) * 2015-01-26 2018-01-16 Cellectis sistemas de receptor de antígeno quimérico dirigidos por mab para classificação/depleção de células imunes engenheiradas
WO2016126972A1 (en) 2015-02-04 2016-08-11 Genentech, Inc. Mutant smoothened and methods of using the same
US10392425B2 (en) 2015-02-05 2019-08-27 Molecular Templates, Inc. Multivalent CD20-binding molecules comprising Shiga toxin A subunit effector regions and enriched compositions thereof
EP3253778A1 (en) 2015-02-05 2017-12-13 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Antibodies comprising an ion concentration dependent antigen-binding domain, fc region variants, il-8-binding antibodies, and uses therof
US10301377B2 (en) 2015-02-24 2019-05-28 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Middle east respiratory syndrome coronavirus immunogens, antibodies, and their use
JP2018511797A (ja) 2015-03-16 2018-04-26 ジェネンテック， インコーポレイテッド ＩＬ−１３の検出方法及び定量方法並びにＴｈ２関連疾患の診断及び治療における使用
WO2016146833A1 (en) 2015-03-19 2016-09-22 F. Hoffmann-La Roche Ag Biomarkers for nad(+)-diphthamide adp ribosyltransferase resistance
DK3271389T3 (da) 2015-03-20 2020-04-27 Us Health Neutraliserende antistoffer mod gp120 og anvendelse deraf
KR20230164243A (ko) 2015-03-23 2023-12-01 조운스 테라퓨틱스, 인크. Icos에 대한 항체
US10584167B2 (en) 2015-03-23 2020-03-10 Bayer Pharma Aktiengesellschaft Anti-CEACAM6 antibodies and uses thereof
US10472412B2 (en) 2015-03-25 2019-11-12 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Bispecific multivalent fusion proteins
CA2979732A1 (en) 2015-04-03 2016-10-06 Eureka Therapeutics, Inc. Constructs targeting afp peptide/mhc complexes and uses thereof
WO2016164480A1 (en) 2015-04-07 2016-10-13 Genentech, Inc. Antigen binding complex having agonistic activity and methods of use
CA2982246A1 (en) 2015-04-17 2016-10-20 Alpine Immune Sciences, Inc. Immunomodulatory proteins with tunable affinities
CN115932273A (zh) 2015-04-24 2023-04-07 豪夫迈·罗氏有限公司 鉴定包含结合多肽的细菌的方法
CN107709363A (zh) 2015-05-01 2018-02-16 基因泰克公司 掩蔽抗cd3抗体和使用方法
WO2016179194A1 (en) 2015-05-04 2016-11-10 Jounce Therapeutics, Inc. Lilra3 and method of using the same
US20160346387A1 (en) 2015-05-11 2016-12-01 Genentech, Inc. Compositions and methods of treating lupus nephritis
EP3294770B2 (en) 2015-05-12 2024-03-20 F. Hoffmann-La Roche AG Therapeutic and diagnostic methods for cancer
AU2016271142A1 (en) 2015-05-29 2017-11-23 Genentech, Inc. PD-L1 promoter methylation in cancer
WO2016196343A1 (en) 2015-05-29 2016-12-08 Genentech, Inc. Humanized anti-ebola virus glycoprotein antibodies and methods of use
AU2016270625B2 (en) 2015-05-29 2022-10-06 Genentech, Inc. Therapeutic and diagnostic methods for cancer
LT3303373T (lt) 2015-05-30 2020-07-10 Molecular Templates, Inc. Deimunizuoto shiga toksino a subvieneto karkasai ir juos apimančios ląstelės taikinio molekulės
WO2016196679A1 (en) 2015-06-02 2016-12-08 Genentech, Inc. Compositions and methods for using anti-il-34 antibodies to treat neurological diseases
WO2016196975A1 (en) 2015-06-03 2016-12-08 The United States Of America, As Represented By The Secretary Department Of Health & Human Services Neutralizing antibodies to hiv-1 env and their use
CN107849124B (zh) 2015-06-05 2021-09-24 基因泰克公司 抗tau抗体及使用方法
CA2988420A1 (en) 2015-06-08 2016-12-15 Genentech, Inc. Methods of treating cancer using anti-ox40 antibodies and pd-1 axis binding antagonists
JP2018521019A (ja) 2015-06-08 2018-08-02 ジェネンテック， インコーポレイテッド 抗ｏｘ４０抗体を使用して癌を治療する方法
US10017577B2 (en) 2015-06-15 2018-07-10 Genentech, Inc. Antibodies and immunoconjugates
TW201710286A (zh) 2015-06-15 2017-03-16 艾伯維有限公司 抗ｖｅｇｆ、ｐｄｇｆ及／或其受體之結合蛋白
CN107849145B (zh) 2015-06-16 2021-10-26 基因泰克公司 抗cd3抗体及其使用方法
JP6996983B2 (ja) 2015-06-16 2022-02-21 ジェネンテック， インコーポレイテッド 抗ｃｌｌ－１抗体及び使用方法
RU2748943C2 (ru) 2015-06-16 2021-06-02 Дженентек, Инк. ГУМАНИЗИРОВАННЫЕ АНТИТЕЛА И АНТИТЕЛА С СОЗРЕВШЕЙ АФФИННОСТЬЮ ПРОТИВ FcRH5 И СПОСОБЫ ИХ ПРИМЕНЕНИЯ
JP2018524312A (ja) 2015-06-17 2018-08-30 ジェネンテック， インコーポレイテッド 抗ｈｅｒ２抗体及び使用方法
US10774145B2 (en) 2015-06-17 2020-09-15 Allakos Inc. Methods and compositions for treating fibrotic diseases
EP3310815A1 (en) 2015-06-17 2018-04-25 F. Hoffmann-La Roche AG Methods of treating locally advanced or metastatic breast cancers using pd-1 axis binding antagonists and taxanes
EP3313877B1 (en) 2015-06-24 2020-06-03 H. Hoffnabb-La Roche Ag Humanized anti-tau(ps422) antibodies and methods of use
HUE057952T2 (hu) 2015-06-24 2022-06-28 Hoffmann La Roche Anti-transzferrin receptor antitestek testreszabott affinitással
EP3108897A1 (en) 2015-06-24 2016-12-28 F. Hoffmann-La Roche AG Antibodies against human csf-1r for use in inducing lymphocytosis in lymphomas or leukemias
BR112017027736A2 (pt) 2015-06-29 2018-10-09 Genentech Inc anticorpo anti-cd20 tipo ii para uso no transplante de órgãos
ES2898065T3 (es) 2015-06-29 2022-03-03 Ventana Med Syst Inc Materiales y procedimientos para realizar ensayos histoquímicos para proepirregulina y anfirregulina humanas
CN105384825B (zh) 2015-08-11 2018-06-01 南京传奇生物科技有限公司 一种基于单域抗体的双特异性嵌合抗原受体及其应用
PE20181275A1 (es) 2015-08-28 2018-08-03 Amunix Operating Inc Ensamble de polipeptido quimerico y metodos para hacer y usar el mismo
EP3341415B1 (en) 2015-08-28 2021-03-24 H. Hoffnabb-La Roche Ag Anti-hypusine antibodies and uses thereof
TW202342532A (zh) 2015-09-18 2023-11-01 日商中外製藥股份有限公司 Il-8結合抗體及其用途
WO2017050729A1 (en) 2015-09-22 2017-03-30 Spring Bioscience Corporation Anti-ox40 antibodies and diagnostic uses thereof
IL257565B1 (en) 2015-09-23 2024-04-01 Genentech Inc Improved variants of anti-VEGF antibodies
US11142565B2 (en) 2015-09-24 2021-10-12 Abvitro Llc Broadly neutralizing anti-HIV-1 antibodies that bind to an N-glycan epitope on the envelope
US10017572B2 (en) 2015-09-25 2018-07-10 Genentech, Inc. Anti-tigit antibodies and methods of use
AR106188A1 (es) 2015-10-01 2017-12-20 Hoffmann La Roche Anticuerpos anti-cd19 humano humanizados y métodos de utilización
MA43028B1 (fr) 2015-10-02 2021-09-30 Hoffmann La Roche Anticorps bispécifiques pour pd1 et tim3
JP6657392B2 (ja) 2015-10-02 2020-03-04 エフ・ホフマン−ラ・ロシュ・アクチェンゲゼルシャフト 二重特異性抗ヒトｃｄ２０／ヒトトランスフェリン受容体抗体及び使用方法
UA125962C2 (uk) 2015-10-02 2022-07-20 Ф. Хоффманн-Ля Рош Аг Біспецифічна антигензв'язуюча молекула до ox40 та фібробласт-активуючого білка (fap)
MA43345A (fr) 2015-10-02 2018-08-08 Hoffmann La Roche Conjugués anticorps-médicaments de pyrrolobenzodiazépine et méthodes d'utilisation
EP3150636A1 (en) 2015-10-02 2017-04-05 F. Hoffmann-La Roche AG Tetravalent multispecific antibodies
AR106189A1 (es) 2015-10-02 2017-12-20 Hoffmann La Roche ANTICUERPOS BIESPECÍFICOS CONTRA EL A-b HUMANO Y EL RECEPTOR DE TRANSFERRINA HUMANO Y MÉTODOS DE USO
MY190297A (en) 2015-10-02 2022-04-12 Hoffmann La Roche Anti-pd1 antibodies and methods of use
JP2018529747A (ja) 2015-10-06 2018-10-11 ジェネンテック， インコーポレイテッド 多発性硬化症を治療するための方法
JP7074665B2 (ja) 2015-10-07 2022-05-24 エフ・ホフマン－ラ・ロシュ・アクチェンゲゼルシャフト 共刺激ｔｎｆ受容体に対する四価の二重特異性抗体発明の分野
CA2997809A1 (en) 2015-10-07 2017-04-13 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Il-7r-alpha specific antibodies for treating acute lymphoblastic leukemia
MA43354A (fr) 2015-10-16 2018-08-22 Genentech Inc Conjugués médicamenteux à pont disulfure encombré
MA45326A (fr) 2015-10-20 2018-08-29 Genentech Inc Conjugués calichéamicine-anticorps-médicament et procédés d'utilisation
US10604577B2 (en) 2015-10-22 2020-03-31 Allakos Inc. Methods and compositions for treating systemic mastocytosis
KR20180066236A (ko) 2015-10-22 2018-06-18 조운스 테라퓨틱스, 인크. Icos 발현을 계측하기 위한 유전자 특질
WO2017072210A1 (en) 2015-10-29 2017-05-04 F. Hoffmann-La Roche Ag Anti-variant fc-region antibodies and methods of use
EP3184547A1 (en) 2015-10-29 2017-06-28 F. Hoffmann-La Roche AG Anti-tpbg antibodies and methods of use
BR112018007703A2 (pt) 2015-10-30 2018-11-06 Genentech Inc anticorpos, ácido nucleico isolado, métodos de produção de um anticorpo e de tratamento de um distúrbio, composição farmacêutica, terapia de combinação e uso do anticorpo
JP2018534930A (ja) 2015-10-30 2018-11-29 ジェネンテック， インコーポレイテッド 抗ｄ因子抗体及びコンジュゲート
CA3003878A1 (en) 2015-11-03 2017-05-11 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Neutralizing antibodies to hiv-1 gp41 and their use
WO2017079768A1 (en) 2015-11-08 2017-05-11 Genentech, Inc. Methods of screening for multispecific antibodies
CN108368174B (zh) 2015-11-23 2023-04-14 戊瑞治疗有限公司 用于癌症治疗的单独fgfr2抑制剂或与免疫刺激剂的组合
MX2018005229A (es) 2015-12-09 2019-04-29 F Hoffmann­La Roche Ag Anticuerpo anti-cd20 de tipo ii y usos del mismo.
EP3178848A1 (en) 2015-12-09 2017-06-14 F. Hoffmann-La Roche AG Type ii anti-cd20 antibody for reducing formation of anti-drug antibodies
PE20240365A1 (es) 2015-12-18 2024-03-04 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Anticuerpos anti-c5 y metodos de uso
WO2017117311A1 (en) 2015-12-30 2017-07-06 Genentech, Inc. Formulations with reduced degradation of polysorbate
KR20180097615A (ko) 2016-01-08 2018-08-31 에프. 호프만-라 로슈 아게 Pd-1 축 결합 길항물질 및 항-cea/항-cd3 이중특이성 항체를 사용하는 cea-양성 암의 치료 방법
CN108602883A (zh) 2016-01-20 2018-09-28 基因泰克公司 用于阿尔茨海默氏病的高剂量治疗
CN109071625A (zh) 2016-02-04 2018-12-21 柯瑞斯公司 平滑化突变体和其使用方法
CN114395624A (zh) 2016-02-29 2022-04-26 基因泰克公司 用于癌症的治疗和诊断方法
WO2017148880A1 (en) 2016-03-01 2017-09-08 F. Hoffmann-La Roche Ag Obinutuzumab variants having altered cell death induction
JP2019515876A (ja) 2016-03-08 2019-06-13 アカデミア シニカＡｃａｄｅｍｉａ Ｓｉｎｉｃａ Ｎ−グリカンおよびそのアレイのモジュール合成のための方法
CA3016552A1 (en) 2016-03-15 2017-09-21 Genentech, Inc. Methods of treating cancers using pd-1 axis binding antagonists and anti-gpc3 antibodies
US20170315132A1 (en) 2016-03-25 2017-11-02 Genentech, Inc. Multiplexed total antibody and antibody-conjugated drug quantification assay
AU2017242031B2 (en) 2016-03-29 2023-07-27 Geltor, Inc. Expression of proteins in gram-negative bacteria wherein the ratio of periplasmic volume to cytoplasmic volume is between 0.5:1 and 10:1
KR101796277B1 (ko) * 2016-04-12 2017-11-13 앱클론(주) 안정성이 개선된 ｈｅｒ２에 특이적으로 결합하는 항체
US20170319688A1 (en) 2016-04-14 2017-11-09 Genentech, Inc. Anti-rspo3 antibodies and methods of use
EP3443120A2 (en) 2016-04-15 2019-02-20 H. Hoffnabb-La Roche Ag Methods for monitoring and treating cancer
BR112018070934A2 (pt) 2016-04-15 2019-02-26 Alpine Immune Sciences, Inc. proteínas imunomoduladoras variantes ligantes de icos e usos das mesmas
KR20190003958A (ko) 2016-04-15 2019-01-10 제넨테크, 인크. 암의 치료 및 모니터링 방법
EP3442562B1 (en) 2016-04-15 2022-09-21 Evive Biotechnology (Shanghai) Ltd An il-22 dimer for use in treating necrotizing enterocolitis
WO2017180842A1 (en) 2016-04-15 2017-10-19 Bioatla, Llc Anti-axl antibodies, antibody fragments and their immunoconjugates and uses thereof
MA43552A (fr) 2016-04-15 2018-11-07 Alpine Immune Sciences Inc Protéines immunomodulatrices à variants de cd80 et leurs utilisations
EP3889175A1 (en) 2016-05-02 2021-10-06 F. Hoffmann-La Roche AG The contorsbody - a single chain target binder
WO2017192589A1 (en) 2016-05-02 2017-11-09 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Neutralizing antibodies to influenza ha and their use and identification
EP3455252B1 (en) 2016-05-11 2022-02-23 F. Hoffmann-La Roche AG Modified anti-tenascin antibodies and methods of use
PT3455261T (pt) 2016-05-13 2022-11-11 Bioatla Llc Anticorpos anti-ror2, fragmentos de anticorpo, seus imunoconjugados e suas utilizações
JP2019522633A (ja) 2016-05-20 2019-08-15 ジェネンテック， インコーポレイテッド Ｐｒｏｔａｃ抗体コンジュゲート及び使用方法
US11623958B2 (en) 2016-05-20 2023-04-11 Harpoon Therapeutics, Inc. Single chain variable fragment CD3 binding proteins
US10966977B2 (en) 2016-05-27 2021-04-06 Tg Therapeutics, Inc. Combination of anti-CD20 antibody, P13 kinase-delta selective inhibitor, and BTK inhibitor to treat b-cell proliferative disorders
WO2017205741A1 (en) 2016-05-27 2017-11-30 Genentech, Inc. Bioanalytical method for the characterization of site-specific antibody-drug conjugates
TW201902512A (zh) 2016-06-02 2019-01-16 瑞士商赫孚孟拉羅股份公司 治療方法
EP3252078A1 (en) 2016-06-02 2017-12-06 F. Hoffmann-La Roche AG Type ii anti-cd20 antibody and anti-cd20/cd3 bispecific antibody for treatment of cancer
EP3464280B1 (en) 2016-06-06 2021-10-06 F. Hoffmann-La Roche AG Silvestrol antibody-drug conjugates and methods of use
EP3475298A1 (en) 2016-06-24 2019-05-01 H. Hoffnabb-La Roche Ag Anti-polyubiquitin multispecific antibodies
CN109415435B (zh) 2016-07-04 2024-01-16 豪夫迈·罗氏有限公司 新型抗体形式
WO2018014260A1 (en) 2016-07-20 2018-01-25 Nanjing Legend Biotech Co., Ltd. Multispecific antigen binding proteins and methods of use thereof
US11834490B2 (en) 2016-07-28 2023-12-05 Alpine Immune Sciences, Inc. CD112 variant immunomodulatory proteins and uses thereof
EP3491013A1 (en) 2016-07-28 2019-06-05 Alpine Immune Sciences, Inc. Cd155 variant immunomodulatory proteins and uses thereof
US11471488B2 (en) 2016-07-28 2022-10-18 Alpine Immune Sciences, Inc. CD155 variant immunomodulatory proteins and uses thereof
JP7062640B2 (ja) 2016-07-29 2022-05-06 ジュノー セラピューティクス インコーポレイテッド 抗ｃｄ１９抗体に対する抗イディオタイプ抗体
MX2018015721A (es) 2016-07-29 2019-05-27 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Anticuerpos biespecificos que exhiben actividad de funcion de cofactor fviii alternativa mejorada.
WO2018022438A1 (en) 2016-07-29 2018-02-01 Eli Lilly And Company Combination therapy with merestinib and anti-pd-l1 or anti-pd-1 inhibitors for use in the treatment of cancer
CN109963871A (zh) 2016-08-05 2019-07-02 豪夫迈·罗氏有限公司 具有激动活性的多价及多表位抗体以及使用方法
CA3026050A1 (en) 2016-08-05 2018-02-08 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Composition for prophylaxis or treatment of il-8 related diseases
WO2018029124A1 (en) 2016-08-08 2018-02-15 F. Hoffmann-La Roche Ag Therapeutic and diagnostic methods for cancer
CN109689111B (zh) 2016-08-11 2024-04-05 基因泰克公司 吡咯并苯并二氮杂䓬前药及其抗体缀合物
CA3034057A1 (en) 2016-08-22 2018-03-01 CHO Pharma Inc. Antibodies, binding fragments, and methods of use
EP3507305A1 (en) 2016-09-02 2019-07-10 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Composition and methods of treating b cell disorders
EP3510046A4 (en) 2016-09-07 2020-05-06 The Regents of the University of California ANTIBODIES AGAINST OXIDATION-SPECIFIC EPITOPES
KR20190068521A (ko) 2016-09-09 2019-06-18 티지 쎄라퓨틱스, 인코포레이티드 혈액암을 치료하기 위한 항-cd20 항체, pi3 키나아제-델타 억제제, 및 항-pd-1 또는 항-pd-l1 항체의 조합
SG10201607778XA (en) 2016-09-16 2018-04-27 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Anti-Dengue Virus Antibodies, Polypeptides Containing Variant Fc Regions, And Methods Of Use
WO2018050878A1 (en) 2016-09-19 2018-03-22 F. Hoffmann-La Roche Ag Complement factor based affinity chromatography
RU2752785C2 (ru) 2016-09-23 2021-08-04 Дженентек, Инк. Применение антагонистов il-13 для лечения атопического дерматита
CA3037086A1 (en) 2016-10-03 2018-04-12 Juno Therapeutics, Inc. Hpv-specific binding molecules
CN110139674B (zh) 2016-10-05 2023-05-16 豪夫迈·罗氏有限公司 制备抗体药物缀合物的方法
CN110418851A (zh) 2016-10-06 2019-11-05 基因泰克公司 癌症的治疗和诊断方法
WO2018068201A1 (en) 2016-10-11 2018-04-19 Nanjing Legend Biotech Co., Ltd. Single-domain antibodies and variants thereof against ctla-4
CN110267678A (zh) 2016-10-29 2019-09-20 霍夫曼-拉罗奇有限公司 抗mic抗体和使用方法
EP3535298B1 (en) 2016-11-02 2021-09-08 Jounce Therapeutics, Inc. Antibodies to pd-1 and uses thereof
KR20210117359A (ko) * 2016-11-07 2021-09-28 더 위스타 인스티튜트 오브 아나토미 앤드 바이올로지 라임병에 사용하기 위한 dna 항체 작제물
KR20190074300A (ko) 2016-11-15 2019-06-27 제넨테크, 인크. 항-cd20/항-cd3 이중특이적 항체에 의한 치료를 위한 투약
WO2018093669A1 (en) 2016-11-16 2018-05-24 Eli Lilly And Company Combination therapy for cancer with exon 14 skipping mutation(s) or exon 14 skipping phenotype
TW201829463A (zh) 2016-11-18 2018-08-16 瑞士商赫孚孟拉羅股份公司 抗hla-g抗體及其用途
JOP20190100A1 (ar) 2016-11-19 2019-05-01 Potenza Therapeutics Inc بروتينات ربط مولد ضد مضاد لـ gitr وطرق استخدامها
KR102532256B1 (ko) 2016-11-21 2023-05-12 쿠레아브 게엠베하 항-gp73　항체　및　면역접합체
WO2018106781A1 (en) 2016-12-07 2018-06-14 Genentech, Inc Anti-tau antibodies and methods of use
KR20240035636A (ko) 2016-12-07 2024-03-15 제넨테크, 인크. 항-타우 항체 및 이의 이용 방법
CN110494443A (zh) 2016-12-07 2019-11-22 分子模板公司 用于位点特异性缀合的志贺毒素a亚基效应子多肽、志贺毒素效应子支架和细胞靶向分子
JP2020511408A (ja) 2016-12-12 2020-04-16 ジェネンテック， インコーポレイテッド 抗ｐｄ−ｌ１抗体及び抗アンドロゲン薬を使用してがんを治療する方法
BR112019007267A2 (pt) 2016-12-20 2019-07-09 Hoffmann La Roche anticorpo biespecífico anti-cd20/anti-cd3, produto farmacêutico, composição farmacêutica que compreende um anticorpo biespecífico anti-cd20/anti-cd3, uso de combinação de anticorpo biespecífico anti-cd20/anti-cd3 e um agonista de 4-1bb e método de tratamento ou retardamento da progressão de câncer em pacientes
JOP20190134A1 (ar) 2016-12-23 2019-06-02 Potenza Therapeutics Inc بروتينات رابطة لمولد ضد مضادة لنيوروبيلين وطرق استخدامها
CA3047070A1 (en) 2017-01-03 2018-07-12 F.Hoffmann-La Roche Ag Bispecific antigen binding molecules comprising anti-4-1bb clone 20h4.9
WO2018129029A1 (en) 2017-01-04 2018-07-12 Immunogen, Inc. Met antibodies and immunoconjugates and uses thereof
US11274157B2 (en) 2017-01-12 2022-03-15 Eureka Therapeutics, Inc. Constructs targeting histone H3 peptide/MHC complexes and uses thereof
CN110536695B (zh) 2017-01-25 2024-05-10 分子模板公司 包括去免疫化的志贺毒素a亚基效应子和cd8+ t细胞表位的细胞靶向分子
MY201148A (en) 2017-01-31 2024-02-07 Hoffmann La Roche A pharmaceutical composition for use in the treatment or prevention of a c5-related disease and a method for treating or preventing a c5-related disease
EP3580235B1 (en) 2017-02-10 2024-05-01 The United States of America, as represented by the Secretary, Department of Health and Human Services Neutralizing antibodies to plasmodium falciparum circumsporozoite protein and their use
MY197534A (en) 2017-02-10 2023-06-21 Genentech Inc Anti-tryptase antibodies, compositions thereof, and uses thereof
ES2953595T3 (es) 2017-03-01 2023-11-14 Hoffmann La Roche Procedimientos diagnósticos y terapéuticos para el cáncer
SI3596116T1 (sl) 2017-03-16 2024-02-29 Alpine Immune Sciences, Inc., Imunomodulatorni proteini različice pd-l1 in njihove uporabe
WO2018170023A1 (en) 2017-03-16 2018-09-20 Alpine Immune Sciences, Inc. Pd-l2 variant immunomodulatory proteins and uses thereof
EP3596114A2 (en) 2017-03-16 2020-01-22 Alpine Immune Sciences, Inc. Cd80 variant immunomodulatory proteins and uses thereof
MX2019011141A (es) 2017-03-22 2019-11-05 Genentech Inc Composiciones de anticuerpo optimizadas para el tratamiento de trastornos oculares.
EP3600407A1 (en) 2017-03-27 2020-02-05 H. Hoffnabb-La Roche Ag Improved antigen binding receptors
TW201836640A (zh) 2017-03-28 2018-10-16 美商建南德克公司 治療神經退化性疾病之方法
CN110573528B (zh) 2017-03-29 2023-06-09 豪夫迈·罗氏有限公司 针对共刺激性tnf受体的双特异性抗原结合分子
CN110382542B (zh) 2017-03-29 2023-06-09 豪夫迈·罗氏有限公司 针对共刺激性tnf受体的双特异性抗原结合分子
JOP20190203A1 (ar) 2017-03-30 2019-09-03 Potenza Therapeutics Inc بروتينات رابطة لمولد ضد مضادة لـ tigit وطرق استخدامها
MX2019011769A (es) 2017-04-03 2019-11-07 Hoffmann La Roche Anticuerpos que se unen a steap-1.
CN110402255B (zh) 2017-04-04 2022-12-02 豪夫迈·罗氏有限公司 新颖的能够特异性结合cd40和fap的双特异性抗原结合分子
LT3606954T (lt) 2017-04-05 2022-09-26 F. Hoffmann-La Roche Ag Anti-lag3 antikūnai
JP6997212B2 (ja) 2017-04-05 2022-02-04 エフ・ホフマン－ラ・ロシュ・アクチェンゲゼルシャフト Ｐｄ１及びｌａｇ３に特異的に結合する二重特異性抗体
CA3058478A1 (en) 2017-04-14 2018-10-18 Genentech, Inc. Diagnostic and therapeutic methods for cancer
WO2018195472A1 (en) 2017-04-21 2018-10-25 Genentech, Inc. Use of klk5 antagonists for treatment of a disease
KR20240067275A (ko) 2017-04-26 2024-05-16 유레카 쎄라퓨틱스, 인코포레이티드 글리피칸 3을 특이적으로 인식하는 구축물 및 그의 용도
KR20200003843A (ko) 2017-04-27 2020-01-10 테사로, 인코포레이티드 림프구 활성화 유전자-3 (lag-3)에 대한 항체 작용제 및 그의 용도
CN110831628A (zh) 2017-05-05 2020-02-21 爱乐科斯公司 用于治疗过敏性眼病的方法和组合物
US10543271B2 (en) 2017-05-12 2020-01-28 Harpoon Therapeutics, Inc. Mesothelin binding proteins
JP7299842B2 (ja) 2017-05-16 2023-06-28 ファイヴ プライム セラピューティクス インク がん治療における化学療法剤と組み合わせた抗ｆｇｆｒ２抗体
AU2018288854A1 (en) 2017-06-20 2019-11-21 Amgen Inc. Method of treating or ameliorating metabolic disorders using binding proteins for gastric inhibitory peptide receptor (GIPR) in combination with GLP-1 agonists
EP3655034A1 (en) 2017-07-21 2020-05-27 Genentech, Inc. Therapeutic and diagnostic methods for cancer
CA3071193A1 (en) 2017-07-26 2019-01-31 Forty Seven, Inc. Anti-sirp-alpha antibodies and related methods
CN110869391A (zh) 2017-07-26 2020-03-06 豪夫迈·罗氏有限公司 用BET抑制剂,Bcl-2抑制剂和抗CD20抗体的组合疗法
WO2019036855A1 (en) 2017-08-21 2019-02-28 Adagene Inc. ANTI-CD137 MOLECULES AND THEIR USE
WO2019059411A1 (en) 2017-09-20 2019-03-28 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha DOSAGE FOR POLYTHERAPY USING PD-1 AXIS BINDING ANTAGONISTS AND GPC3 TARGETING AGENT
US11180541B2 (en) 2017-09-28 2021-11-23 Geltor, Inc. Recombinant collagen and elastin molecules and uses thereof
AR113142A1 (es) 2017-09-29 2020-01-29 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Moléculas de unión al antígeno multiespecíficas que tienen actividad de sustitución de la función de cofactor del factor viii de coagulación de sangre (fviii), y formulaciones farmacéuticas que contienen dicha molécula como ingrediente activo
US11952408B2 (en) 2017-10-03 2024-04-09 Juno Therapeutics, Inc. HPV-specific binding molecules
JP2020536552A (ja) 2017-10-10 2020-12-17 アルパイン イミューン サイエンシズ インコーポレイテッド Ｃｔｌａ−４変異型免疫調節タンパク質およびそれらの使用
CA3185107A1 (en) 2017-10-12 2019-04-18 Immunowake Inc. Vegfr-antibody light chain fusion protein
CA3078799A1 (en) 2017-10-13 2019-04-18 Harpoon Therapeutics, Inc. B cell maturation antigen binding proteins
JP2020537655A (ja) 2017-10-17 2020-12-24 ルヒゼン ファーマスティカルズ エスエー 食道癌の処置のためのｃｒａｃチャネルモジュレーター
MA50404A (fr) 2017-10-18 2020-08-26 Alpine Immune Sciences Inc Protéines immunomodulatrices à variants de ligand de icos variant, compositions et méthodes associées
WO2019077092A1 (en) 2017-10-20 2019-04-25 F. Hoffmann-La Roche Ag METHOD FOR GENERATING MULTISPECIFIC ANTIBODIES FROM MONOSPECIFIC ANTIBODIES
WO2019082124A1 (en) 2017-10-26 2019-05-02 Rhizen Pharmaceuticals Sa COMPOSITION AND METHOD FOR THE TREATMENT OF LARGE B-CELL DIFFUSED LYMPHOMA
EA202090682A1 (ru) 2017-10-30 2020-10-15 Ризен Фармасьютикалз Са Модуляторы кальциевых каналов, активируемых высвобождением кальция, для лечения гематологических и солидных раковых заболеваний
CA3078676A1 (en) 2017-10-30 2019-05-09 F. Hoffmann-La Roche Ag Method for in vivo generation of multispecific antibodies from monospecific antibodies
KR20200074997A (ko) 2017-11-01 2020-06-25 주노 쎄러퓨티크스 인코퍼레이티드 B-세포 성숙 항원에 특이적인 항체 및 키메릭 항원 수용체
TW201923089A (zh) 2017-11-06 2019-06-16 美商建南德克公司 癌症之診斷及治療方法
TWI830711B (zh) 2017-12-01 2024-02-01 美商輝瑞大藥廠 抗cxcr5抗體及組合物及其用途
WO2019111185A1 (en) 2017-12-06 2019-06-13 Rhizen Pharmaceuticals Sa Composition and method for treating peripheral t-cell lymphoma and cutaneous t-cell lymphoma
MX2020006125A (es) 2017-12-14 2020-08-24 Hoffmann La Roche Uso de un anticuerpo biespecifico de cea cd3 y un antagonista de la union al eje de pd-1 en un regimen de dosificacion para tratar el cancer.
CN112204048A (zh) 2017-12-15 2021-01-08 朱诺治疗学股份有限公司 抗cct5结合分子及其使用方法
MA51302A (fr) 2017-12-21 2021-03-31 Hoffmann La Roche Anticorps se liant à hla-a2/wt1
US20190211098A1 (en) 2017-12-22 2019-07-11 Genentech, Inc. Use of pilra binding agents for treatment of a disease
US10723798B2 (en) 2017-12-22 2020-07-28 Jounce Therapeutics, Inc. Antibodies to LILRB2
CA3078849A1 (en) 2017-12-28 2019-07-04 Nanjing Legend Biotech Co., Ltd. Antibodies and variants thereof against pd-l1
JP7369127B2 (ja) 2017-12-28 2023-10-25 ナンジン レジェンド バイオテック カンパニー，リミテッド Ｔｉｇｉｔに対する単一ドメイン抗体及びその変異体
WO2019129679A1 (en) 2017-12-29 2019-07-04 F. Hoffmann-La Roche Ag Method for improving vegf-receptor blocking selectivity of an anti-vegf antibody
WO2019136029A1 (en) 2018-01-02 2019-07-11 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Neutralizing antibodies to ebola virus glycoprotein and their use
BR112020013236A2 (pt) 2018-01-03 2020-12-01 Alpine Immune Sciences, Inc. proteínas imunomoduladoras de múltiplos domínios e métodos de seu uso
MX2020007077A (es) 2018-01-04 2020-10-28 Iconic Therapeutics Inc Anticuerpos anti-factor tisular, conjugados anticuerpo-farmaco y metodos relacionados.
BR112020013663A2 (pt) 2018-01-05 2020-12-01 Ac Immune Sa moléculas de ligação ao tdp-43 dobrado incorretamente
SG11202004233UA (en) 2018-01-15 2020-06-29 Nanjing Legend Biotech Co Ltd Single-domain antibodies and variants thereof against pd-1
WO2019143636A1 (en) 2018-01-16 2019-07-25 Lakepharma, Inc. Bispecific antibody that binds cd3 and another target
MA51676A (fr) 2018-01-26 2021-05-05 Hoffmann La Roche Protéines de fusion il-22 fc et procédés d'utilisation
BR112020015016A2 (pt) 2018-01-26 2020-12-29 Genentech, Inc. Composições farmacêuticas, métodos de tratamento da doença inflamatória intestinal, de inibição da infecção microbiana no intestino e de aceleração ou melhora da cicatrização de feridas
US11807663B2 (en) 2018-02-01 2023-11-07 Innovent Biologics (Suzhou) Co., Ltd. Fully humanized anti-B cell maturation antigen (BCMA) single-chain antibody and use thereof
WO2019148445A1 (en) 2018-02-02 2019-08-08 Adagene Inc. Precision/context-dependent activatable antibodies, and methods of making and using the same
PE20211116A1 (es) 2018-02-08 2021-06-23 Genentech Inc Moleculas biespecificas de union al antigeno y metodos de uso
TWI829667B (zh) 2018-02-09 2024-01-21 瑞士商赫孚孟拉羅股份公司 結合gprc5d之抗體
CA3088557C (en) 2018-02-09 2024-02-27 Genentech, Inc. Therapeutic and diagnostic methods for mast cell-mediated inflammatory diseases
EP3752530A1 (en) 2018-02-14 2020-12-23 ABBA Therapeutics AG Anti-human pd-l2 antibodies
KR20200123118A (ko) 2018-02-21 2020-10-28 제넨테크, 인크. IL-22 Fc 융합 단백질로 치료를 위한 투약
EP3755713A1 (en) 2018-02-21 2020-12-30 The United States of America, as represented by the Secretary, Department of Health and Human Services Neutralizing antibodies to hiv-1 env and their use
EP3759141A1 (en) 2018-02-26 2021-01-06 F. Hoffmann-La Roche AG Dosing for treatment with anti-tigit and anti-pd-l1 antagonist antibodies
CN111683961A (zh) 2018-03-13 2020-09-18 豪夫迈·罗氏有限公司 4-1bb激动剂与抗cd20抗体的治疗剂组合
US20200040103A1 (en) 2018-03-14 2020-02-06 Genentech, Inc. Anti-klk5 antibodies and methods of use
KR20200130831A (ko) 2018-03-14 2020-11-20 베이징 슈안이 파마사이언시스 컴퍼니, 리미티드 항-클라우딘 18.2 항체
KR20200132938A (ko) 2018-03-15 2020-11-25 추가이 세이야쿠 가부시키가이샤 지카 바이러스에 대해 교차-반응성을 갖는 항-뎅기 바이러스 항체 및 사용 방법
SG11202009542PA (en) 2018-03-29 2020-10-29 Genentech Inc Modulating lactogenic activity in mammalian cells
JP7346790B2 (ja) 2018-03-30 2023-09-20 ナンジン レジェンド バイオテック カンパニー，リミテッド Ｌａｇ‐３に対する単一ドメイン抗体およびその使用
TW202011029A (zh) 2018-04-04 2020-03-16 美商建南德克公司 偵測及定量fgf21之方法
WO2019195486A1 (en) 2018-04-05 2019-10-10 Juno Therapeutics, Inc. T cell receptors and engineered cells expressing same
IL268443B1 (en) 2018-04-17 2024-03-01 Molecular Templates Inc HER2-targeted molecules containing Shiga toxin subunit A scaffolds, without vaccination
AR115052A1 (es) 2018-04-18 2020-11-25 Hoffmann La Roche Anticuerpos multiespecíficos y utilización de los mismos
AR114789A1 (es) 2018-04-18 2020-10-14 Hoffmann La Roche Anticuerpos anti-hla-g y uso de los mismos
CN110464842B (zh) 2018-05-11 2022-10-14 信达生物制药(苏州)有限公司 包含抗pcsk9抗体的制剂及其用途
AU2019271148B2 (en) 2018-05-14 2023-07-06 Werewolf Therapeutics, Inc. Activatable interleukin-2 polypeptides and methods of use thereof
SG11202011309SA (en) 2018-05-14 2020-12-30 Werewolf Therapeutics Inc Activatable interleukin 12 polypeptides and methods of use thereof
AU2019275737A1 (en) 2018-06-01 2021-01-21 Tayu Huaxia Biotech Medical Group Co., Ltd. Compositions and uses thereof for treating disease or condition
WO2019235426A1 (ja) 2018-06-04 2019-12-12 中外製薬株式会社 細胞質内での半減期が変化した抗原結合分子
WO2019241758A1 (en) 2018-06-15 2019-12-19 Alpine Immune Sciences, Inc. Pd-1 variant immunomodulatory proteins and uses thereof
CA3103936A1 (en) 2018-06-18 2019-12-26 Eureka Therapeutics, Inc. Constructs targeting prostate-specific membrane antigen (psma) and uses thereof
CA3103017A1 (en) 2018-06-23 2019-12-26 Genentech, Inc. Methods of treating lung cancer with a pd-1 axis binding antagonist, a platinum agent, and a topoisomerase ii inhibitor
WO2020007817A1 (en) 2018-07-04 2020-01-09 F. Hoffmann-La Roche Ag Novel bispecific agonistic 4-1bb antigen binding molecules
WO2020014306A1 (en) 2018-07-10 2020-01-16 Immunogen, Inc. Met antibodies and immunoconjugates and uses thereof
US20200171146A1 (en) 2018-07-18 2020-06-04 Genentech, Inc. Methods of treating lung cancer with a pd-1 axis binding antagonist, an antimetabolite, and a platinum agent
MX2021000745A (es) 2018-07-20 2021-03-26 Surface Oncology Inc Composiciones anti-cd112r y metodos.
CN112512563A (zh) 2018-08-01 2021-03-16 中外制药株式会社 用于治疗或预防c5相关疾病的药物组合物和治疗或预防c5相关疾病的方法
WO2020027330A1 (ja) 2018-08-03 2020-02-06 中外製薬株式会社 互いに連結された２つの抗原結合ドメインを含む抗原結合分子
US20200047085A1 (en) 2018-08-09 2020-02-13 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods for assessing binding affinity of an antibody variant to the neonatal fc receptor
JP6718560B1 (ja) 2018-08-10 2020-07-08 中外製薬株式会社 抗ｃｄ１３７抗原結合分子およびその使用
TW202021618A (zh) 2018-08-17 2020-06-16 美商２３與我有限公司 抗ｉｌ１ｒａｐ抗體及其使用方法
GB201814281D0 (en) 2018-09-03 2018-10-17 Femtogenix Ltd Cytotoxic agents
MX2021003214A (es) 2018-09-19 2021-05-12 Genentech Inc Metodos terapeuticos y de diagnostico para el cancer de vejiga.
SG11202102644XA (en) 2018-09-19 2021-04-29 Alpine Immune Sciences Inc Methods and uses of variant cd80 fusion proteins and related constructs
PL3857230T3 (pl) 2018-09-21 2023-10-16 F. Hoffmann-La Roche Ag Sposoby diagnostyczne dla potrójnie ujemnego raka piersi
JP7425049B2 (ja) 2018-09-25 2024-01-30 ハープーン セラピューティクス，インク． Ｄｌｌ３結合タンパク質および使用方法
US20220002370A1 (en) 2018-09-27 2022-01-06 Xilio Development, Inc. Masked cytokine polypeptides
EP3861026A1 (en) 2018-10-01 2021-08-11 F. Hoffmann-La Roche AG Bispecific antigen binding molecules comprising anti-fap clone 212
JP2022511396A (ja) 2018-10-01 2022-01-31 エフ・ホフマン－ラ・ロシュ・アクチェンゲゼルシャフト Ｃｄ４０への三価結合を伴う二重特異性抗原結合分子
US20220010020A1 (en) 2018-10-05 2022-01-13 Five Prime Therapeutics, Inc. Anti-FGFR2 Antibody Formulations
KR102262012B1 (ko) 2018-10-15 2021-06-09 연세대학교 산학협력단 생산성이 향상된 항체 및 이의 제조방법
WO2020081493A1 (en) 2018-10-16 2020-04-23 Molecular Templates, Inc. Pd-l1 binding proteins
KR20210079311A (ko) 2018-10-18 2021-06-29 제넨테크, 인크. 육종성 신장암에 대한 진단과 치료 방법
RU2724469C2 (ru) 2018-10-31 2020-06-23 Закрытое Акционерное Общество "Биокад" Моноклональное антитело, которое специфически связывается с cd20
EP3873944A1 (en) 2018-10-31 2021-09-08 Bayer Aktiengesellschaft Reversal agents for neutralizing the therapeutic activity of anti-fxia antibodies
CN113260626A (zh) 2018-11-05 2021-08-13 豪夫迈·罗氏有限公司 在原核宿主细胞中产生双链蛋白质的方法
BR112021009373A2 (pt) 2018-11-16 2021-08-17 Memorial Sloan Kettering Cancer Center anticorpos para mucina-16 e métodos de uso dos mesmos
AU2019386021B2 (en) 2018-11-27 2024-02-15 Innovent Biologics (Suzhou) Co., Ltd. Anti-il-23p19 antibody and uses thereof
US20220372106A1 (en) 2018-11-30 2022-11-24 Alpine Immune Sciences, Inc. Cd86 variant immunomodulatory proteins and uses thereof
EP3891185A2 (en) 2018-12-05 2021-10-13 F. Hoffmann-La Roche AG Diagnostic methods and compositions for cancer immunotherapy
WO2020117257A1 (en) 2018-12-06 2020-06-11 Genentech, Inc. Combination therapy of diffuse large b-cell lymphoma comprising an anti-cd79b immunoconjugates, an alkylating agent and an anti-cd20 antibody
JP2022513198A (ja) 2018-12-10 2022-02-07 ジェネンテック， インコーポレイテッド Ｆｃ含有タンパク質への部位特異的コンジュゲーションのための光架橋性ペプチド
WO2020132230A2 (en) 2018-12-20 2020-06-25 Genentech, Inc. Modified antibody fcs and methods of use
AR117327A1 (es) 2018-12-20 2021-07-28 23Andme Inc Anticuerpos anti-cd96 y métodos de uso de estos
US20220089694A1 (en) 2018-12-20 2022-03-24 The U.S.A., As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Ebola virus glycoprotein-specific monoclonal antibodies and uses thereof
SG11202106116QA (en) 2018-12-21 2021-07-29 Genentech Inc Methods of producing polypeptides using a cell line resistant to apoptosis
CA3120474A1 (en) 2018-12-21 2020-06-25 23Andme, Inc. Anti-il-36 antibodies and methods of use thereof
EP3898671A1 (en) 2018-12-21 2021-10-27 F. Hoffmann-La Roche AG Antibody that binds to vegf and il-1beta and methods of use
AR117727A1 (es) 2018-12-21 2021-08-25 Hoffmann La Roche Anticuerpos que se unen a cd3
EP3902832A2 (en) 2018-12-26 2021-11-03 Xilio Development, Inc. Anti-ctla4 antibodies and methods of use thereof
JP2022515543A (ja) 2018-12-30 2022-02-18 エフ．ホフマン－ラ ロシュ アーゲー 抗ウサギｃｄ１９抗体および使用方法
KR20210116525A (ko) 2019-01-14 2021-09-27 제넨테크, 인크. Pd-1 축 결합 길항제 및 rna 백신으로 암을 치료하는 방법
EP3911675A1 (en) 2019-01-17 2021-11-24 Bayer Aktiengesellschaft Methods to determine whether a subject is suitable of being treated with an agonist of soluble guanylyl cyclase (sgc)
CN113329763A (zh) 2019-01-22 2021-08-31 豪夫迈·罗氏有限公司 免疫球蛋白a抗体以及制备和使用方法
KR20210118115A (ko) 2019-01-23 2021-09-29 제넨테크, 인크. 진핵 숙주 세포에서 다합체 단백질을 생산하는 방법
WO2020153467A1 (ja) 2019-01-24 2020-07-30 中外製薬株式会社 新規がん抗原及びそれらの抗原に対する抗体
CA3123303A1 (en) 2019-01-29 2020-08-06 Juno Therapeutics, Inc. Antibodies and chimeric antigen receptors specific for receptor tyrosine kinase like orphan receptor 1 (ror1)
GB201901197D0 (en) 2019-01-29 2019-03-20 Femtogenix Ltd G-A Crosslinking cytotoxic agents
KR20210133237A (ko) 2019-02-27 2021-11-05 제넨테크, 인크. 항-tigit 및 항-cd20 또는 항-cd38 항체로 치료를 위한 투약
MX2021010565A (es) 2019-03-08 2021-10-13 Genentech Inc Metodos para detectar y cuantificar proteinas asociadas a la membrana en vesiculas extracelulares.
KR20210141555A (ko) 2019-03-14 2021-11-23 제넨테크, 인크. Her2xcd3 이중특이적 항체 및 항-her2 mab를 병용한 암의 치료
EP3946457A1 (en) 2019-04-01 2022-02-09 Genentech, Inc. Compositions and methods for stabilizing protein-containing formulations
SG11202111349QA (en) 2019-04-12 2021-11-29 Geltor Inc Recombinant elastin and production thereof
US20220218785A1 (en) 2019-04-17 2022-07-14 Alpine Immune Sciences, Inc. Methods and uses of variant icos ligand (icosl) fusion proteins
US20220298231A1 (en) 2019-04-18 2022-09-22 Ac Immune Sa Novel Molecules for Therapy and Diagnosis
CA3137397A1 (en) 2019-04-19 2020-10-22 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Chimeric receptor that recognizes engineered site in antibody
JP2022529154A (ja) 2019-04-19 2022-06-17 ジェネンテック， インコーポレイテッド 抗ｍｅｒｔｋ抗体及びその使用方法
JP2022530674A (ja) 2019-05-03 2022-06-30 ジェネンテック， インコーポレイテッド 抗ｐｄ－ｌ１抗体を用いたがんの処置方法
US20220227853A1 (en) 2019-05-03 2022-07-21 The United States Of America,As Represented By The Secretary,Department Of Health And Human Services Neutralizing antibodies to plasmodium falciparum circumsporozoite protein and their use
KR20220007136A (ko) 2019-05-14 2022-01-18 제넨테크, 인크. 소포 림프종을 치료하기 위한 항-CD79b 면역접합체의 사용 방법
CN114450022A (zh) 2019-05-14 2022-05-06 狼人治疗公司 分离部分及其使用方法
US20230085439A1 (en) 2019-05-21 2023-03-16 University Of Georgia Research Foundation, Inc. Antibodies that bind human metapneumovirus fusion protein and their use
AU2020278907A1 (en) 2019-05-23 2022-01-20 Ac Immune Sa Anti-TDP-43 binding molecules and uses thereof
KR102486064B1 (ko) 2019-06-10 2023-01-06 추가이 세이야쿠 가부시키가이샤 사이토카인 저해제와 조합하여 사용하기 위한 항t세포 항원 결합 분자
JP2022539589A (ja) 2019-07-02 2022-09-12 ザ ユナイテッド ステイツ オブ アメリカ アズ リプリゼンテッド バイ ザ セクレタリー、デパートメント オブ ヘルス アンド ヒューマン サービシーズ ＥＧＦＲｖＩＩＩと結合するモノクローナル抗体およびその使用
AR119382A1 (es) 2019-07-12 2021-12-15 Hoffmann La Roche Anticuerpos de pre-direccionamiento y métodos de uso
US20220267452A1 (en) 2019-07-12 2022-08-25 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Anti-mutation type fgfr3 antibody and use therefor
AR119393A1 (es) 2019-07-15 2021-12-15 Hoffmann La Roche Anticuerpos que se unen a nkg2d
CA3144524A1 (en) 2019-07-31 2021-02-04 F. Hoffmann-La Roche Ag Antibodies binding to gprc5d
CN114174338A (zh) 2019-07-31 2022-03-11 豪夫迈·罗氏有限公司 与gprc5d结合的抗体
CA3144923A1 (en) 2019-07-31 2021-02-04 Alexandre Antoine Bernard SOSTELLY Dosage and administration regimen for the treatment or prevention of c5-related diseases by the use of the anti-c5 antibody crovalimab
AU2020319677A1 (en) 2019-07-31 2022-01-06 F. Hoffmann-La Roche Ag Dosage and administration regimen for the treatment or prevention of C5-related diseases by the use of the anti-C5 antibody Crovalimab
JP7181438B2 (ja) 2019-08-06 2022-11-30 アプリノイア セラピューティクス リミテッド 病理学的タウ種に結合する抗体及びその使用
WO2021024020A1 (en) 2019-08-06 2021-02-11 Astellas Pharma Inc. Combination therapy involving antibodies against claudin 18.2 and immune checkpoint inhibitors for treatment of cancer
AU2020345913A1 (en) 2019-09-12 2022-02-24 Genentech, Inc. Compositions and methods of treating lupus nephritis
WO2021047599A1 (en) * 2019-09-13 2021-03-18 Beijing Xuanyi Pharmasciences Co., Ltd. Humanized anti-claudin 18.2 (cldn18.2) antibodies
CN114423791A (zh) 2019-09-18 2022-04-29 豪夫迈·罗氏有限公司 抗klk7抗体、抗klk5抗体、多特异性抗klk5/klk7抗体及使用方法
CR20220149A (es) 2019-09-20 2022-05-23 Genentech Inc Dosis para anticuerpos anti-triptasa
AU2020351734A1 (en) 2019-09-27 2022-04-14 Genentech, Inc. Dosing for treatment with anti-TIGIT and anti-PD-L1 antagonist antibodies
EP4034160A1 (en) 2019-09-27 2022-08-03 Janssen Biotech, Inc. Anti-ceacam antibodies and uses thereof
CA3153880A1 (en) 2019-10-18 2020-06-09 Juana Elva HERNANDEZ MONTALVO Methods of using anti-cd79b immunoconjugates to treat diffuse large b-cell lymphoma
EP4048251A1 (en) 2019-10-21 2022-08-31 Rhizen Pharmaceuticals AG Compositions comprising a dhodh inhibitor for the treatment of acute myeloid leukemia
AU2020378330A1 (en) 2019-11-06 2022-05-12 F. Hoffmann-La Roche Ag Diagnostic and therapeutic methods for treatment of hematologic cancers
KR20220110539A (ko) 2019-12-04 2022-08-08 에이씨 이뮨 에스에이 치료 및 진단용 신규 분자
IL293430A (en) 2019-12-06 2022-07-01 Juno Therapeutics Inc Anti-idiotic antibodies to bcma-targeted binding domains and related compositions and methods
WO2021113780A1 (en) 2019-12-06 2021-06-10 Juno Therapeutics, Inc. Anti-idiotypic antibodies to gprc5d-targeted binding domains and related compositions and methods
IL293423A (en) 2019-12-13 2022-07-01 Genentech Inc Anti-ly6g6d antibodies and methods of use
CA3161390A1 (en) 2019-12-18 2021-06-24 Tina WEINZIERL Antibodies binding to hla-a2/mage-a4
CN113045655A (zh) 2019-12-27 2021-06-29 高诚生物医药(香港)有限公司 抗ox40抗体及其用途
US20230058982A1 (en) 2019-12-27 2023-02-23 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Anti-ctla-4 antibody and use thereof
MX2022008341A (es) 2020-01-06 2022-08-10 Vaccinex Inc Anticuerpos anti-ccr8 y usos de estos.
CN110818795B (zh) 2020-01-10 2020-04-24 上海复宏汉霖生物技术股份有限公司 抗tigit抗体和使用方法
WO2022050954A1 (en) 2020-09-04 2022-03-10 Genentech, Inc. Dosing for treatment with anti-tigit and anti-pd-l1 antagonist antibodies
WO2021194481A1 (en) 2020-03-24 2021-09-30 Genentech, Inc. Dosing for treatment with anti-tigit and anti-pd-l1 antagonist antibodies
CN116650628A (zh) 2020-01-31 2023-08-29 基因泰克公司 用pd-1轴结合拮抗剂和rna疫苗诱导新表位特异性t细胞的方法
US20230078601A1 (en) 2020-01-31 2023-03-16 The Cleveland Clinic Foundation Anti-mullerian hormone receptor 2 antibodies and methods of use
TW202144395A (zh) 2020-02-12 2021-12-01 日商中外製藥股份有限公司 用於癌症之治療的抗cd137抗原結合分子
CN115087488A (zh) 2020-02-14 2022-09-20 震动疗法股份有限公司 与ccr8结合的抗体和融合蛋白及其用途
EP4093762A1 (en) 2020-02-20 2022-11-30 The United States of America, as represented by the Secretary, Department of Health and Human Services Epstein-barr virus monoclonal antibodies and uses thereof
KR20220145859A (ko) 2020-02-28 2022-10-31 상하이 헨리우스 바이오테크, 인크. 항cd137 작제물, 다중 특이적 항체 및 그 용도
BR112022016491A2 (pt) 2020-02-28 2022-10-11 Shanghai Henlius Biotech Inc Construto anti-cd137 e usos do mesmo
AU2021232158A1 (en) 2020-03-06 2022-09-29 Ona Therapeutics, S.L. Anti-CD36 antibodies and their use to treat cancer
CR20220461A (es) 2020-03-13 2022-10-21 Genentech Inc Anticuerpos anti-interleucina-33 y usos de estos
BR112022018657A2 (pt) 2020-03-19 2022-11-01 Genentech Inc Anticorpos, ácido nucleico, célula hospedeira, imunoconjugado, formulação farmacêutica, usos de um anticorpo, métodos de produção de um anticorpo e de tratamento de um indivíduo, métodos para inibir a sinalização de smad e para diagnosticar um indivíduo como tendo ssc e kit
CR20220489A (es) 2020-03-24 2022-10-31 Genentech Inc Agentes de fijación a tie2 y métodos de uso.
CN115315512A (zh) 2020-03-26 2022-11-08 基因泰克公司 具有降低的宿主细胞蛋白质的经修饰的哺乳动物细胞
WO2021198034A1 (en) 2020-03-30 2021-10-07 F. Hoffmann-La Roche Ag Antibody that binds to vegf and pdgf-b and methods of use
AR121706A1 (es) 2020-04-01 2022-06-29 Hoffmann La Roche Moléculas de unión a antígeno biespecíficas dirigidas a ox40 y fap
CN115698717A (zh) 2020-04-03 2023-02-03 基因泰克公司 癌症的治疗和诊断方法
WO2021207662A1 (en) 2020-04-10 2021-10-14 Genentech, Inc. Use of il-22fc for the treatment or prevention of pneumonia, acute respiratory distress syndrome, or cytokine release syndrome
CA3175530A1 (en) 2020-04-24 2021-10-28 Genentech, Inc. Methods of using anti-cd79b immunoconjugates
KR20230005172A (ko) 2020-04-24 2023-01-09 에프. 호프만-라 로슈 아게 설프히드릴 화합물 및 이의 유도체를 사용한 효소 및 경로 조절
AU2021262744A1 (en) 2020-04-27 2022-10-06 The Regents Of The University Of California Isoform-independent antibodies to lipoprotein(a)
EP4143345A1 (en) 2020-04-28 2023-03-08 Genentech, Inc. Methods and compositions for non-small cell lung cancer immunotherapy
CN116963782A (zh) 2020-05-03 2023-10-27 联宁（苏州）生物制药有限公司 包含抗trop-2抗体的抗体药物偶联物
IL297980A (en) 2020-05-08 2023-01-01 Alpine Immune Sciences Inc Immunomodulatory proteins that inhibit april and baff and methods of using them
WO2021238886A1 (en) 2020-05-27 2021-12-02 Staidson (Beijing) Biopharmaceuticals Co., Ltd. Antibodies specifically recognizing nerve growth factor and uses thereof
US11787861B2 (en) 2020-05-29 2023-10-17 23Andme, Inc. Anti-CD200R1 antibodies and methods of use thereof
JP2023529842A (ja) 2020-06-02 2023-07-12 ダイナミキュア バイオテクノロジー エルエルシー 抗ｃｄ９３構築物およびその使用
CN116529260A (zh) 2020-06-02 2023-08-01 当康生物技术有限责任公司 抗cd93构建体及其用途
CN115697489A (zh) 2020-06-08 2023-02-03 豪夫迈·罗氏有限公司 抗hbv抗体及其使用方法
CN115698719A (zh) 2020-06-12 2023-02-03 基因泰克公司 用于癌症免疫疗法的方法和组合物
MX2022015877A (es) 2020-06-16 2023-01-24 Genentech Inc Metodos y composiciones para tratar cancer de mama triple negativo.
JP2023531200A (ja) 2020-06-18 2023-07-21 ジェネンテック， インコーポレイテッド 抗ｔｉｇｉｔ抗体及びｐｄ－１軸結合アンタゴニストを用いた治療
WO2021255146A1 (en) 2020-06-19 2021-12-23 F. Hoffmann-La Roche Ag Antibodies binding to cd3 and cea
MX2022015887A (es) 2020-06-19 2023-01-24 Hoffmann La Roche Anticuerpos que se unen a cd3 y folr1.
AU2021291011A1 (en) 2020-06-19 2023-01-05 F. Hoffmann-La Roche Ag Antibodies binding to CD3 and CD19
AU2021292932A1 (en) 2020-06-19 2023-01-05 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Anti-T cell antigen-binding molecule for use in combination with angiogenesis inhibitor
CA3176579A1 (en) 2020-06-19 2021-12-23 F. Hoffmann-La Roche Ag Antibodies binding to cd3
WO2021259880A1 (en) 2020-06-22 2021-12-30 Almirall, S.A. Anti-il-36 antibodies and methods of use thereof
EP4169948A1 (en) 2020-06-22 2023-04-26 Innovent Biologics (Suzhou) Co., Ltd. Anti-cd73 antibody and use thereof
IL299161A (en) 2020-06-24 2023-02-01 Genentech Inc Cell lines resistant to apoptosis
JP2023532768A (ja) 2020-07-07 2023-07-31 バイオエヌテック エスエー Ｈｐｖ陽性癌の治療用ｒｎａ
MX2023000339A (es) 2020-07-10 2023-02-09 Hoffmann La Roche Anticuerpos que se unen a celulas cancerosas y dirigen radionucleotidos a dichas celulas.
KR20230038735A (ko) 2020-07-17 2023-03-21 제넨테크, 인크. 항-notch2 항체 및 이용 방법
GB2597532A (en) 2020-07-28 2022-02-02 Femtogenix Ltd Cytotoxic compounds
KR20230133832A (ko) 2020-07-29 2023-09-19 다이내믹큐어 바이오테크놀로지 엘엘씨 항-cd93 구축물 및 그의 용도
CN116568824A (zh) 2020-08-03 2023-08-08 基因泰克公司 淋巴瘤的诊断和治疗方法
EP4192868A1 (en) 2020-08-05 2023-06-14 Juno Therapeutics, Inc. Anti-idiotypic antibodies to ror1-targeted binding domains and related compositions and methods
KR20230042596A (ko) 2020-08-07 2023-03-28 제넨테크, 인크. Flt3 리간드 융합 단백질 및 이용 방법
AU2021324842A1 (en) 2020-08-14 2023-03-02 F. Hoffmann-La Roche Ag Methods for treating multiple sclerosis with ocrelizumab
US20230322908A1 (en) 2020-08-14 2023-10-12 Ac Immune Sa Humanized Anti-TDP-43 Binding Molecules and Uses Thereof
EP4204448A2 (en) 2020-08-27 2023-07-05 cureab GmbH Anti-golph2 antibodies for macrophage and dendritic cell differentiation
US20230303665A1 (en) 2020-08-28 2023-09-28 Sana Biotechnology, Inc. Modified anti-viral binding agents
WO2022047222A2 (en) 2020-08-28 2022-03-03 Genentech, Inc. Crispr/cas9 multiplex knockout of host cell proteins
CN116323663A (zh) 2020-09-04 2023-06-23 豪夫迈·罗氏有限公司 与vegf-a和ang2结合的抗体及其使用方法
EP4211165A1 (en) 2020-09-14 2023-07-19 Ichnos Sciences SA Antibodies that bind to il1rap and uses thereof
JP7454106B2 (ja) 2020-09-15 2024-03-21 バイエル・アクチエンゲゼルシヤフト 新規な抗ａ２ａｐ抗体およびその使用
WO2022072508A1 (en) 2020-09-30 2022-04-07 Dren Bio, Inc. Anti-cd94 antibodies and methods of use thereof
CA3193952A1 (en) 2020-10-05 2022-04-14 Bernard Martin Fine Dosing for treatment with anti-fcrh5/anti-cd3 bispecific antibodies
WO2022079297A1 (en) 2020-10-16 2022-04-21 Ac Immune Sa Antibodies binding to alpha-synuclein for therapy and diagnosis
IL300024A (en) 2020-10-20 2023-03-01 Hoffmann La Roche Combination therapy of PD-1 axis binding antagonists and LRRK2 inhibitors
TW202233671A (zh) 2020-10-20 2022-09-01 美商建南德克公司 Ｐｅｇ結合抗ｍｅｒｔｋ抗體及其使用方法
CA3192306A1 (en) 2020-10-20 2022-04-28 Burkhard Ludewig Antibodies or antigen-binding fragments specifically binding to gremlin-1 and uses thereof
WO2022093981A1 (en) 2020-10-28 2022-05-05 Genentech, Inc. Combination therapy comprising ptpn22 inhibitors and pd-l1 binding antagonists
JP7402381B2 (ja) 2020-11-04 2023-12-20 ジェネンテック， インコーポレイテッド 抗ｃｄ２０／抗ｃｄ３二重特異性抗体による処置のための投与
TW202225191A (zh) 2020-11-04 2022-07-01 美商建南德克公司 抗ｃｄ２０／抗ｃｄ３雙特異性抗體之皮下給藥
EP4240493A2 (en) 2020-11-04 2023-09-13 Genentech, Inc. Dosing for treatment with anti-cd20/anti-cd3 bispecific antibodies and anti-cd79b antibody drug conjugates
US20220143026A1 (en) 2020-11-12 2022-05-12 Tg Therapeutics, Inc. Triple combination to treat b-cell malignancies
IL303294A (en) 2020-12-07 2023-07-01 UCB Biopharma SRL Antibodies against interleukin-22
US20240067758A1 (en) 2020-12-07 2024-02-29 UCB Biopharma SRL Multi-specific antibodies and antibody combinations
TW202237638A (zh) 2020-12-09 2022-10-01 日商武田藥品工業股份有限公司 烏苷酸環化酶ｃ（ｇｃｃ）抗原結合劑之組成物及其使用方法
TW202237639A (zh) 2020-12-09 2022-10-01 日商武田藥品工業股份有限公司 鳥苷酸環化酶ｃ（ｇｃｃ）抗原結合劑之組成物及其使用方法
PE20240819A1 (es) 2020-12-17 2024-04-18 Hoffmann La Roche Anticuerpos anti-hla-g y uso de estos
WO2022132904A1 (en) 2020-12-17 2022-06-23 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Human monoclonal antibodies targeting sars-cov-2
WO2022135667A1 (en) 2020-12-21 2022-06-30 BioNTech SE Therapeutic rna for treating cancer
WO2022135666A1 (en) 2020-12-21 2022-06-30 BioNTech SE Treatment schedule for cytokine proteins
TW202245808A (zh) 2020-12-21 2022-12-01 德商拜恩迪克公司 用於治療癌症之治療性ｒｎａ
CA3203257A1 (en) 2020-12-23 2022-06-30 Li Li Anti-b7-h3 antibody and uses thereof
WO2022140797A1 (en) 2020-12-23 2022-06-30 Immunowake Inc. Immunocytokines and uses thereof
CN116829598A (zh) 2021-01-06 2023-09-29 豪夫迈·罗氏有限公司 采用pd1-lag3双特异性抗体和cd20 t细胞双特异性抗体的组合疗法
CR20230385A (es) 2021-01-12 2023-09-25 F Hoffmann La Roche Ag [ Anticuerpos split que se unen a células cancerosas y dirigen radionúclidos a dichas células
US20240173442A1 (en) 2021-01-13 2024-05-30 Hoffmann-La Roche Inc. Combination therapy
WO2022162203A1 (en) 2021-01-28 2022-08-04 Vaccinvent Gmbh Method and means for modulating b-cell mediated immune responses
WO2022162201A1 (en) 2021-01-28 2022-08-04 Vaccinvent Gmbh Method and means for modulating b-cell mediated immune responses
CN117120084A (zh) 2021-01-28 2023-11-24 维肯芬特有限责任公司 用于调节b细胞介导的免疫应答的方法和手段
JP2024505600A (ja) 2021-02-03 2024-02-06 モーツァルト セラピューティクス， インコーポレイテッド 結合剤およびそれを使用する方法
JP2024509695A (ja) 2021-02-03 2024-03-05 ジェネンテック， インコーポレイテッド 多重特異性結合タンパク質分解プラットフォームおよび使用方法
AU2022220611A1 (en) 2021-02-09 2023-08-24 University Of Georgia Research Foundation, Inc. Human monoclonal antibodies against pneumococcal antigens
AU2022221297A1 (en) 2021-02-09 2023-08-03 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Antibodies targeting the spike protein of coronaviruses
IL305181A (en) 2021-02-15 2023-10-01 Takeda Pharmaceuticals Co Cell therapy compositions and methods for modulating TGF-B signaling
WO2022180145A2 (en) 2021-02-26 2022-09-01 Bayer Aktiengesellschaft Inhibitors of il-11 or il-11ra for use in the treatment of abnormal uterine bleeding
WO2022187272A1 (en) 2021-03-01 2022-09-09 Xilio Development, Inc. Combination of masked ctla4 and pd1/pdl1 antibodies for treating cancer
EP4301467A1 (en) 2021-03-01 2024-01-10 Xilio Development, Inc. Combination of ctla4 and pd1/pdl1 antibodies for treating cancer
WO2022184082A1 (en) 2021-03-03 2022-09-09 Sorrento Therapeutics, Inc. Antibody-drug conjugates comprising an anti-bcma antibody
WO2022187863A1 (en) 2021-03-05 2022-09-09 Dynamicure Biotechnology Llc Anti-vista constructs and uses thereof
CA3211581A1 (en) 2021-03-10 2022-09-15 Ellen WU Immunomodulatory molecules and uses thereof
CN117062839A (zh) 2021-03-12 2023-11-14 基因泰克公司 抗klk7抗体、抗klk5抗体、多特异性抗klk5/klk7抗体和使用方法
CA3213599A1 (en) 2021-03-15 2022-09-22 Genentech, Inc. Compositions and methods of treating lupus nephritis
WO2022197877A1 (en) 2021-03-19 2022-09-22 Genentech, Inc. Methods and compositions for time delayed bio-orthogonal release of cytotoxic agents
EP4314049A1 (en) 2021-03-25 2024-02-07 Dynamicure Biotechnology LLC Anti-igfbp7 constructs and uses thereof
KR20230162800A (ko) 2021-03-30 2023-11-28 바이엘 악티엔게젤샤프트 항-sema3a 항체 및 그의 용도
CA3215049A1 (en) 2021-04-10 2022-10-13 Baiteng ZHAO Folr1 binding agents, conjugates thereof and methods of using the same
AR125344A1 (es) 2021-04-15 2023-07-05 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Anticuerpo anti-c1s
TW202305122A (zh) 2021-04-19 2023-02-01 美商建南德克公司 經修飾之哺乳動物細胞
WO2022226317A1 (en) 2021-04-23 2022-10-27 Profoundbio Us Co. Anti-cd70 antibodies, conjugates thereof and methods of using the same
WO2022223651A1 (en) 2021-04-23 2022-10-27 F. Hoffmann-La Roche Ag Prevention or mitigation of nk cell engaging agent-related adverse effects
AU2021443863A1 (en) 2021-04-30 2023-10-26 F. Hoffmann-La Roche Ag Dosing for treatment with anti-cd20/anti-cd3 bispecific antibody
KR20240005691A (ko) 2021-04-30 2024-01-12 에프. 호프만-라 로슈 아게 항-cd20/항-cd3 이중특이적 항체 및 항-cd79b 항체 약물 접합체를 이용한 병용 치료를 위한 투약
AU2022268545A1 (en) 2021-05-03 2023-11-02 UCB Biopharma SRL Antibodies
JP2024518410A (ja) 2021-05-07 2024-05-01 ビエラ バイオ インコーポレイテッド 重症筋無力症を治療するための抗ｃｄ１９抗体の使用
IL308336A (en) 2021-05-07 2024-01-01 Alpine Immune Sciences Inc Methods of dosing and treatment with TACI-FC modulatory fusion protein
WO2022241446A1 (en) 2021-05-12 2022-11-17 Genentech, Inc. Methods of using anti-cd79b immunoconjugates to treat diffuse large b-cell lymphoma
EP4337317A1 (en) 2021-05-14 2024-03-20 Genentech, Inc. Agonists of trem2
KR20240010020A (ko) * 2021-05-18 2024-01-23 크리스티안-알브레히츠-우니버지태트 추 킬 공동-자극 다중 특이성 항체
WO2022243261A1 (en) 2021-05-19 2022-11-24 F. Hoffmann-La Roche Ag Agonistic cd40 antigen binding molecules targeting cea
CN117396599A (zh) 2021-05-21 2024-01-12 基因泰克公司 用于生产目的重组产物的经修饰的细胞
AR126054A1 (es) 2021-06-04 2023-09-06 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Anticuerpos anti-ddr2 y usos de estos
WO2022258600A1 (en) 2021-06-09 2022-12-15 F. Hoffmann-La Roche Ag Combination of a particular braf inhibitor (paradox breaker) and a pd-1 axis binding antagonist for use in the treatment of cancer
CN114990128A (zh) * 2021-06-16 2022-09-02 百奥赛图(北京)医药科技股份有限公司 Cd20基因人源化非人动物的构建方法及应用
WO2022266660A1 (en) 2021-06-17 2022-12-22 Amberstone Biosciences, Inc. Anti-cd3 constructs and uses thereof
CA3221833A1 (en) 2021-06-25 2022-12-29 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Anti-ctla-4 antibody
EP4361176A1 (en) 2021-06-25 2024-05-01 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Use of anti-ctla-4 antibody
AU2022302170A1 (en) 2021-07-02 2023-12-21 F. Hoffmann-La Roche Ag Methods and compositions for treating cancer
TW202320857A (zh) 2021-07-06 2023-06-01 美商普方生物製藥美國公司 連接子、藥物連接子及其結合物及其使用方法
CN118103397A (zh) 2021-07-08 2024-05-28 舒泰神(加州)生物科技有限公司 特异性识别tnfr2的抗体及其用途
EP4370545A1 (en) 2021-07-12 2024-05-22 Genentech, Inc. Structures for reducing antibody-lipase binding
IL309831A (en) 2021-07-13 2024-02-01 BioNTech SE Multispecific binding agents against CD40 and CD137 in combined cancer therapy
CA3224853A1 (en) 2021-07-14 2023-01-19 Gautham GAMPA Anti-c-c motif chemokine receptor 8 (ccr8) antibodies and methods of use
CN115812082A (zh) 2021-07-14 2023-03-17 舒泰神（北京）生物制药股份有限公司 特异性识别cd40的抗体及其应用
WO2023004386A1 (en) 2021-07-22 2023-01-26 Genentech, Inc. Brain targeting compositions and methods of use thereof
CA3219606A1 (en) 2021-07-22 2023-01-26 F. Hoffmann-La Roche Ag Heterodimeric fc domain antibodies
IL309120A (en) 2021-07-28 2024-02-01 Hoffmann La Roche Methods and compositions for the treatment of cancer
CA3226281A1 (en) 2021-07-30 2023-02-02 ONA Therapeutics S.L. Anti-cd36 antibodies and their use to treat cancer
AU2022324406A1 (en) 2021-08-02 2024-03-14 Innovent Biologics (Suzhou) Co., Ltd. Anti-cd79b×cd3 bispecific antibody and use thereof
EP4380980A1 (en) 2021-08-03 2024-06-12 F. Hoffmann-La Roche AG Bispecific antibodies and methods of use
KR20240046524A (ko) 2021-08-07 2024-04-09 제넨테크, 인크. 미만성 거대 b-세포 림프종을 치료하기 위해 항-cd79b 면역접합체를 사용하는 방법
EP4384553A1 (en) 2021-08-13 2024-06-19 Genentech, Inc. Dosing for anti-tryptase antibodies
CN117858905A (zh) 2021-08-19 2024-04-09 豪夫迈·罗氏有限公司 多价抗变体fc区抗体及使用方法
GB202111905D0 (en) 2021-08-19 2021-10-06 UCB Biopharma SRL Antibodies
AU2022332285A1 (en) 2021-08-23 2024-02-15 Immunitas Therapeutics, Inc. Anti-cd161 antibodies and uses thereof
TW202328177A (zh) 2021-08-27 2023-07-16 美商建南德克公司 治療ｔａｕ病理學之方法
WO2023034750A1 (en) 2021-08-30 2023-03-09 Genentech, Inc. Anti-polyubiquitin multispecific antibodies
CA3232223A1 (en) 2021-09-17 2023-03-23 Ying Fu Synthetic humanized llama nanobody library and use thereof to identify sars-cov-2 neutralizing antibodies
TW202321308A (zh) 2021-09-30 2023-06-01 美商建南德克公司 使用抗ｔｉｇｉｔ抗體、抗ｃｄ３８抗體及ｐｄ—１軸結合拮抗劑治療血液癌症的方法
WO2023056069A1 (en) 2021-09-30 2023-04-06 Angiex, Inc. Degrader-antibody conjugates and methods of using same
TW202323810A (zh) 2021-10-08 2023-06-16 日商中外製藥股份有限公司 預填充式注射器製劑的調製方法
TW202333802A (zh) 2021-10-11 2023-09-01 德商拜恩迪克公司 用於肺癌之治療性rna(二)
WO2023076876A1 (en) 2021-10-26 2023-05-04 Mozart Therapeutics, Inc. Modulation of immune responses to viral vectors
AU2022379952A1 (en) 2021-11-05 2024-05-16 American Diagnostics & Therapy, Llc (Adxrx) Monoclonal antibodies against carcinoembryonic antigens, and their uses
WO2023086807A1 (en) 2021-11-10 2023-05-19 Genentech, Inc. Anti-interleukin-33 antibodies and uses thereof
TW202337494A (zh) 2021-11-16 2023-10-01 美商建南德克公司 用莫蘇妥珠單抗治療全身性紅斑狼瘡（ｓｌｅ）之方法及組成物
WO2023088959A1 (en) 2021-11-16 2023-05-25 Ac Immune Sa Novel molecules for therapy and diagnosis
WO2023094569A1 (en) 2021-11-26 2023-06-01 F. Hoffmann-La Roche Ag Combination therapy of anti-tyrp1/anti-cd3 bispecific antibodies and tyrp1-specific antibodies
AR127887A1 (es) 2021-12-10 2024-03-06 Hoffmann La Roche Anticuerpos que se unen a cd3 y plap
TW202330582A (zh) 2021-12-15 2023-08-01 美商建南德克公司 穩定的ｉｌ－１８多肽及其用途
WO2023109901A1 (en) 2021-12-17 2023-06-22 Shanghai Henlius Biotech, Inc. Anti-ox40 antibodies and methods of use
WO2023109900A1 (en) 2021-12-17 2023-06-22 Shanghai Henlius Biotech, Inc. Anti-ox40 antibodies, multispecific antibodies and methods of use
TW202340248A (zh) 2021-12-20 2023-10-16 瑞士商赫孚孟拉羅股份公司 促效性ｌｔｂｒ抗體及包含其之雙特異性抗體
WO2023131901A1 (en) 2022-01-07 2023-07-13 Johnson & Johnson Enterprise Innovation Inc. Materials and methods of il-1beta binding proteins
WO2023141445A1 (en) 2022-01-19 2023-07-27 Genentech, Inc. Anti-notch2 antibodies and conjugates and methods of use
WO2023154678A1 (en) * 2022-02-08 2023-08-17 Amgen Inc. Codon-optimized nucleic acids encoding ocrelizumab
WO2023154824A1 (en) 2022-02-10 2023-08-17 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Human monoclonal antibodies that broadly target coronaviruses
TW202342519A (zh) 2022-02-16 2023-11-01 瑞士商Ａｃ 免疫有限公司 人源化抗ｔｄｐ－４３結合分子及其用途
WO2023159182A1 (en) 2022-02-18 2023-08-24 Rakuten Medical, Inc. Anti-programmed death-ligand 1 (pd-l1) antibody molecules, encoding polynucleotides, and methods of use
WO2023172883A1 (en) 2022-03-07 2023-09-14 Alpine Immune Sciences, Inc. Immunomodulatory proteins of variant cd80 polypeptides, cell therapies thereof and related methods and uses
WO2023173026A1 (en) 2022-03-10 2023-09-14 Sorrento Therapeutics, Inc. Antibody-drug conjugates and uses thereof
WO2023178357A1 (en) 2022-03-18 2023-09-21 Evolveimmune Therapeutics, Inc. Bispecific antibody fusion molecules and methods of use thereof
WO2023180353A1 (en) 2022-03-23 2023-09-28 F. Hoffmann-La Roche Ag Combination treatment of an anti-cd20/anti-cd3 bispecific antibody and chemotherapy
WO2023192827A1 (en) 2022-03-26 2023-10-05 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Bispecific antibodies to hiv-1 env and their use
WO2023192881A1 (en) 2022-03-28 2023-10-05 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Neutralizing antibodies to hiv-1 env and their use
WO2023186756A1 (en) 2022-03-28 2023-10-05 F. Hoffmann-La Roche Ag Interferon gamma variants and antigen binding molecules comprising these
WO2023191816A1 (en) 2022-04-01 2023-10-05 Genentech, Inc. Dosing for treatment with anti-fcrh5/anti-cd3 bispecific antibodies
WO2023194565A1 (en) 2022-04-08 2023-10-12 Ac Immune Sa Anti-tdp-43 binding molecules
JP2024517042A (ja) 2022-04-13 2024-04-19 エフ・ホフマン－ラ・ロシュ・アクチェンゲゼルシャフト 抗ｃｄ２０／抗ｃｄ３二重特異性抗体の薬学的組成物及び使用方法
TW202408562A (zh) 2022-04-13 2024-03-01 美商建南德克公司 治療性蛋白質之醫藥組成物及使用方法
WO2023203177A1 (en) 2022-04-20 2023-10-26 Kantonsspital St. Gallen Antibodies or antigen-binding fragments pan-specifically binding to gremlin-1 and gremlin-2 and uses thereof
WO2023215737A1 (en) 2022-05-03 2023-11-09 Genentech, Inc. Anti-ly6e antibodies, immunoconjugates, and uses thereof
WO2023219613A1 (en) 2022-05-11 2023-11-16 Genentech, Inc. Dosing for treatment with anti-fcrh5/anti-cd3 bispecific antibodies
TW202402810A (zh) 2022-05-11 2024-01-16 瑞士商赫孚孟拉羅股份公司 與ｖｅｇｆ—ａ及ｉｌ６結合之抗體及其使用方法
WO2023235699A1 (en) 2022-05-31 2023-12-07 Jounce Therapeutics, Inc. Antibodies to lilrb4 and uses thereof
US11884740B1 (en) 2022-06-01 2024-01-30 Tg Therapeutics, Inc. Anti-CD20 antibody compositions
US11807689B1 (en) 2022-06-01 2023-11-07 Tg Therapeutics, Inc. Anti-CD20 antibody compositions
US11814439B1 (en) 2022-06-01 2023-11-14 Tg Therapeutics, Inc. Anti-CD20 antibody compositions
US11965032B1 (en) 2022-06-01 2024-04-23 Tg Therapeutics, Inc. Anti-CD20 antibody compositions
WO2023240058A2 (en) 2022-06-07 2023-12-14 Genentech, Inc. Prognostic and therapeutic methods for cancer
WO2023239803A1 (en) 2022-06-08 2023-12-14 Angiex, Inc. Anti-tm4sf1 antibody-drug conjugates comprising cleavable linkers and methods of using same
WO2023237706A2 (en) 2022-06-08 2023-12-14 Institute For Research In Biomedicine (Irb) Cross-specific antibodies, uses and methods for discovery thereof
WO2024015897A1 (en) 2022-07-13 2024-01-18 Genentech, Inc. Dosing for treatment with anti-fcrh5/anti-cd3 bispecific antibodies
WO2024020432A1 (en) 2022-07-19 2024-01-25 Genentech, Inc. Dosing for treatment with anti-fcrh5/anti-cd3 bispecific antibodies
WO2024020407A1 (en) 2022-07-19 2024-01-25 Staidson Biopharma Inc. Antibodies specifically recognizing b- and t-lymphocyte attenuator (btla) and uses thereof
WO2024020564A1 (en) 2022-07-22 2024-01-25 Genentech, Inc. Anti-steap1 antigen-binding molecules and uses thereof
WO2024030829A1 (en) 2022-08-01 2024-02-08 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Monoclonal antibodies that bind to the underside of influenza viral neuraminidase
WO2024030956A2 (en) 2022-08-03 2024-02-08 Mozart Therapeutics, Inc. Cd39-specific binding agents and methods of using the same
WO2024028732A1 (en) 2022-08-05 2024-02-08 Janssen Biotech, Inc. Cd98 binding constructs for treating brain tumors
WO2024028731A1 (en) 2022-08-05 2024-02-08 Janssen Biotech, Inc. Transferrin receptor binding proteins for treating brain tumors
WO2024037633A2 (en) 2022-08-19 2024-02-22 Evive Biotechnology (Shanghai) Ltd Formulations comprising g-csf and uses thereof
WO2024044779A2 (en) 2022-08-26 2024-02-29 Juno Therapeutics, Inc. Antibodies and chimeric antigen receptors specific for delta-like ligand 3 (dll3)
WO2024049949A1 (en) 2022-09-01 2024-03-07 Genentech, Inc. Therapeutic and diagnostic methods for bladder cancer
WO2024054929A1 (en) 2022-09-07 2024-03-14 Dynamicure Biotechnology Llc Anti-vista constructs and uses thereof
WO2024054822A1 (en) 2022-09-07 2024-03-14 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Engineered sars-cov-2 antibodies with increased neutralization breadth
WO2024064826A1 (en) 2022-09-22 2024-03-28 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Neutralizing antibodies to plasmodium falciparum circumsporozoite protein and their use
WO2024077018A2 (en) 2022-10-04 2024-04-11 Alpine Immune Sciences, Inc. Methods and uses of taci-fc fusion immunomodulatory protein
WO2024077239A1 (en) 2022-10-07 2024-04-11 Genentech, Inc. Methods of treating cancer with anti-c-c motif chemokine receptor 8 (ccr8) antibodies
WO2024091991A1 (en) 2022-10-25 2024-05-02 Genentech, Inc. Therapeutic and diagnostic methods for multiple myeloma
WO2024094741A1 (en) 2022-11-03 2024-05-10 F. Hoffmann-La Roche Ag Combination therapy with anti-cd19/anti-cd28 bispecific antibody
US20240165227A1 (en) 2022-11-04 2024-05-23 Gilead Sciences, Inc. Anticancer therapies using anti-ccr8 antibody, chemo and immunotherapy combinations
WO2024102734A1 (en) 2022-11-08 2024-05-16 Genentech, Inc. Compositions and methods of treating childhood onset idiopathic nephrotic syndrome
WO2024100200A1 (en) 2022-11-09 2024-05-16 Cis Pharma Ag Anti-l1-cam antibodies and their uses for diagnostic and therapeutic applications
WO2024100170A1 (en) 2022-11-11 2024-05-16 F. Hoffmann-La Roche Ag Antibodies binding to hla-a*02/foxp3
WO2024108053A1 (en) 2022-11-17 2024-05-23 Sanofi Ceacam5 antibody-drug conjugates and methods of use thereof

Family Cites Families (105)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US2002128A (en) * 1934-02-19 1935-05-21 Ray A Reidenbaugh Display rack
IL47062A (en) 1975-04-10 1979-07-25 Yeda Res & Dev Process for diminishing antigenicity of tissues to be usedas transplants by treatment with glutaraldehyde
US4665077A (en) 1979-03-19 1987-05-12 The Upjohn Company Method for treating rejection of organ or skin grafts with 6-aryl pyrimidine compounds
US4816567A (en) 1983-04-08 1989-03-28 Genentech, Inc. Recombinant immunoglobin preparations
DD266710A3 (de) 1983-06-06 1989-04-12 Ve Forschungszentrum Biotechnologie Verfahren zur biotechnischen Herstellung van alkalischer Phosphatase
US4879231A (en) 1984-10-30 1989-11-07 Phillips Petroleum Company Transformation of yeasts of the genus pichia
US5618920A (en) 1985-11-01 1997-04-08 Xoma Corporation Modular assembly of antibody genes, antibodies prepared thereby and use
US5576195A (en) * 1985-11-01 1996-11-19 Xoma Corporation Vectors with pectate lyase signal sequence
GB8610600D0 (en) 1986-04-30 1986-06-04 Novo Industri As Transformation of trichoderma
US5567610A (en) 1986-09-04 1996-10-22 Bioinvent International Ab Method of producing human monoclonal antibodies and kit therefor
US6893625B1 (en) 1986-10-27 2005-05-17 Royalty Pharma Finance Trust Chimeric antibody with specificity to human B cell surface antigen
IL85035A0 (en) * 1987-01-08 1988-06-30 Int Genetic Eng Polynucleotide molecule,a chimeric antibody with specificity for human b cell surface antigen,a process for the preparation and methods utilizing the same
HUT53672A (en) 1988-02-25 1990-11-28 Gen Hospital Corp Quick immunoselective cloning process
US5506126A (en) 1988-02-25 1996-04-09 The General Hospital Corporation Rapid immunoselection cloning method
IL85746A (en) 1988-03-15 1994-05-30 Yeda Res & Dev Preparations comprising t-lymphocyte cells treated with 8-methoxypsoralen or cell membranes separated therefrom for preventing or treating autoimmune diseases
US4861579A (en) 1988-03-17 1989-08-29 American Cyanamid Company Suppression of B-lymphocytes in mammals by administration of anti-B-lymphocyte antibodies
FI891226A (fi) 1988-04-28 1989-10-29 Univ Leland Stanford Junior Reseptordeterminanter i anti-t-celler foer behandling av autoimmunsjukdom.
IL162181A (en) 1988-12-28 2006-04-10 Pdl Biopharma Inc A method of producing humanized immunoglubulin, and polynucleotides encoding the same
US5530101A (en) * 1988-12-28 1996-06-25 Protein Design Labs, Inc. Humanized immunoglobulins
WO1990008187A1 (en) 1989-01-19 1990-07-26 Dana Farber Cancer Institute Soluble two domain cd2 protein
RO110397B1 (ro) 1989-03-21 1996-01-30 Immune Response Corp San Diego Vaccin pentru prevenirea sau tratarea unor boli care rezulta din raspunsuri patogene, prin populatii de celule t specifice, procedeu de obtinere si metode de diagnostic si tratament cu acesta
EP0402226A1 (en) 1989-06-06 1990-12-12 Institut National De La Recherche Agronomique Transformation vectors for yeast yarrowia
ES2112838T5 (es) 1989-07-19 2004-09-01 Connetics Corporation Peptidos receptores de celulas t como agentes terapeuticos para enfermedades autoinmunitarias y malignas.
US5859205A (en) * 1989-12-21 1999-01-12 Celltech Limited Humanised antibodies
US5229275A (en) 1990-04-26 1993-07-20 Akzo N.V. In-vitro method for producing antigen-specific human monoclonal antibodies
EP0940468A1 (en) * 1991-06-14 1999-09-08 Genentech, Inc. Humanized antibody variable domain
WO1993006217A1 (en) 1991-09-19 1993-04-01 Genentech, Inc. EXPRESSION IN E. COLI OF ANTIBODY FRAGMENTS HAVING AT LEAST A CYSTEINE PRESENT AS A FREE THIOL, USE FOR THE PRODUCTION OF BIFUNCTIONAL F(ab')2 ANTIBODIES
US5565332A (en) 1991-09-23 1996-10-15 Medical Research Council Production of chimeric antibodies - a combinatorial approach
US5573905A (en) 1992-03-30 1996-11-12 The Scripps Research Institute Encoded combinatorial chemical libraries
US7744877B2 (en) 1992-11-13 2010-06-29 Biogen Idec Inc. Expression and use of anti-CD20 Antibodies
DE69329503T2 (de) 1992-11-13 2001-05-03 Idec Pharma Corp Therapeutische Verwendung von chimerischen und markierten Antikörpern, die gegen ein Differenzierung-Antigen gerichtet sind, dessen Expression auf menschliche B Lymphozyt beschränkt ist, für die Behandlung von B-Zell-Lymphoma
US5736137A (en) 1992-11-13 1998-04-07 Idec Pharmaceuticals Corporation Therapeutic application of chimeric and radiolabeled antibodies to human B lymphocyte restricted differentiation antigen for treatment of B cell lymphoma
US5417972A (en) 1993-08-02 1995-05-23 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Method of killing B-cells in a complement independent and an ADCC independent manner using antibodies which specifically bind CDIM
US5595721A (en) 1993-09-16 1997-01-21 Coulter Pharmaceutical, Inc. Radioimmunotherapy of lymphoma using anti-CD20
US5789199A (en) 1994-11-03 1998-08-04 Genentech, Inc. Process for bacterial production of polypeptides
US5840523A (en) 1995-03-01 1998-11-24 Genetech, Inc. Methods and compositions for secretion of heterologous polypeptides
US6267958B1 (en) * 1995-07-27 2001-07-31 Genentech, Inc. Protein formulation
US20010056066A1 (en) 1996-07-26 2001-12-27 Smithkline Beecham Corporation Method of treating immune cell mediated systemic diseases
US6306393B1 (en) 1997-03-24 2001-10-23 Immunomedics, Inc. Immunotherapy of B-cell malignancies using anti-CD22 antibodies
US6171586B1 (en) 1997-06-13 2001-01-09 Genentech, Inc. Antibody formulation
AU740284B2 (en) 1997-06-13 2001-11-01 Genentech Inc. Stabilized antibody formulation
DE69830315T2 (de) 1997-06-24 2006-02-02 Genentech Inc., San Francisco Galactosylierte glykoproteine enthaltende zusammensetzungen und verfahren zur deren herstellung
AU8296098A (en) 1997-07-08 1999-02-08 Board Of Regents, The University Of Texas System Compositions and methods for homoconjugates of antibodies which induce growth arrest or apoptosis of tumor cells
ATE419009T1 (de) 1997-10-31 2009-01-15 Genentech Inc Methoden und zusammensetzungen bestehend aus glykoprotein-glykoformen
WO1999051642A1 (en) 1998-04-02 1999-10-14 Genentech, Inc. Antibody variants and fragments thereof
US6528624B1 (en) 1998-04-02 2003-03-04 Genentech, Inc. Polypeptide variants
US6194551B1 (en) 1998-04-02 2001-02-27 Genentech, Inc. Polypeptide variants
US6242195B1 (en) 1998-04-02 2001-06-05 Genentech, Inc. Methods for determining binding of an analyte to a receptor
CN100409898C (zh) 1998-08-11 2008-08-13 拜奥根Idec公司 包括施用抗-cd20抗体的b-细胞淋巴瘤联合疗法
US6224866B1 (en) 1998-10-07 2001-05-01 Biocrystal Ltd. Immunotherapy of B cell involvement in progression of solid, nonlymphoid tumors
TR200101302T2 (tr) 1998-11-09 2001-10-22 Idec Pharmaceuticals Corporation BMT yada PBSC transplantı alan hastalarda in vitro ya da in vivo temizleyici madde olarak kimerik anti-CD20 antikorunun kullanımı.
MXPA01004648A (es) 1998-11-09 2002-05-06 Idec Pharma Corp Tratamientro de enfermedades hematologicas malignas asociadas con celulas tumorales de la circulacion usando el anticuerpo quimerico anti-cd20.
KR100887482B1 (ko) 1999-01-15 2009-03-10 제넨테크, 인크. 효과기 기능이 변화된 폴리펩티드 변이체
US6737056B1 (en) 1999-01-15 2004-05-18 Genentech, Inc. Polypeptide variants with altered effector function
US6897044B1 (en) 1999-01-28 2005-05-24 Biogen Idec, Inc. Production of tetravalent antibodies
US6383276B1 (en) 1999-03-12 2002-05-07 Fuji Photo Film Co., Ltd. Azomethine compound and oily magenta ink
CA2944644C (en) 1999-05-07 2017-08-22 Genentech, Inc. Use of rituximab to treat pemphigus
CA2375912C (en) 1999-06-09 2014-03-11 Immunomedics, Inc. Immunotherapy of autoimmune disorders using antibodies which target b-cells
ITMI991299A1 (it) * 1999-06-11 2000-12-11 Consiglio Nazionale Ricerche Uso di anticorpi contro antigeni di superficie per il trattamento della malattia trapianto contro ospite
DE19930748C2 (de) 1999-07-02 2001-05-17 Infineon Technologies Ag Verfahren zur Herstellung von EEPROM- und DRAM-Grabenspeicherzellbereichen auf einem Chip
KR20080075044A (ko) 1999-07-12 2008-08-13 제넨테크, 인크. Ｃｄ20에 결합하는 길항제를 사용한 외래 항원에 대한 면역반응 차단 방법
US6451284B1 (en) 1999-08-11 2002-09-17 Idec Pharmaceuticals Corporation Clinical parameters for determining hematologic toxicity prior to radioimmunotheraphy
US8557244B1 (en) 1999-08-11 2013-10-15 Biogen Idec Inc. Treatment of aggressive non-Hodgkins lymphoma with anti-CD20 antibody
CA2378646A1 (en) 1999-08-11 2001-02-15 Idec Pharmaceuticals Corporation Treatment of patients having non-hodgkins lymphoma with bone marrow involvement with anti-cd20 antibodies
AU6929100A (en) * 1999-08-23 2001-03-19 Biocrystal Limited Methods and compositions for immunotherapy of b cell involvement in promotion ofa disease condition comprising multiple sclerosis
CN1407901A (zh) 1999-11-08 2003-04-02 Idec药物公司 使用抗cd40l抗体并联合抗cd20抗体和/或化疗剂和放疗治疗b细胞恶性瘤
US20020006404A1 (en) 1999-11-08 2002-01-17 Idec Pharmaceuticals Corporation Treatment of cell malignancies using combination of B cell depleting antibody and immune modulating antibody related applications
WO2002004021A1 (en) 2000-07-12 2002-01-17 Idec Pharmaceuticals Corporation Treatment of b cell malignancies using combination of b cell depleting antibody and immune modulating antibody related applications
US20030185796A1 (en) 2000-03-24 2003-10-02 Chiron Corporation Methods of therapy for non-hodgkin's lymphoma
AU2001247737A1 (en) 2000-03-24 2001-10-08 Chiron Corporation Methods of therapy for non-hodgkin's lymphoma using a combination of an antibodyto cd20 and interleuking-2
CA2404365A1 (en) 2000-03-31 2001-10-11 Idec Pharmaceutical Corporation Combined use of anti-cytokine antibodies or antagonists and anti-cd20 for the treatment of b cell lymphoma
AU2001247616B2 (en) 2000-04-11 2007-06-14 Genentech, Inc. Multivalent antibodies and uses therefor
MXPA02010507A (es) 2000-04-25 2003-05-14 Idec Pharma Corp Administracion intratecal de rituximab para el tratamiento de linfomas del sistema nervioso central.
AU2001268363B2 (en) 2000-06-20 2006-08-17 Biogen Idec Inc. Treatment of B cell associated diseases
WO2001097843A2 (en) 2000-06-22 2001-12-27 University Of Iowa Research Foundation Methods for enhancing antibody-induced cell lysis and treating cancer
KR20040023565A (ko) * 2000-09-18 2004-03-18 아이덱 파마슈티칼즈 코포레이션 Ｂ 세포 고갈/면역조절 항체 조합을 이용한 자가면역질환의 치료를 위한 조합 요법
US20020128448A1 (en) * 2000-10-20 2002-09-12 Idec Pharmaceuticals Corporation Variant IgG3 Rituxan and therapeutic use thereof
EP1345968A2 (en) 2000-12-28 2003-09-24 Altus Biologics Inc. Crystals of whole antibodies and fragments thereof and methods for making and using them
AU2002327164A1 (en) 2001-01-29 2002-12-09 Idec Pharmaceuticals Corporation Engineered tetravalent antibodies and methods of use
EA007388B1 (ru) 2001-01-29 2006-10-27 Идек Фармасьютикалз Корпорейшн Модифицированные антитела и способы применения
US20030103971A1 (en) 2001-11-09 2003-06-05 Kandasamy Hariharan Immunoregulatory antibodies and uses thereof
DE60239931D1 (de) 2001-04-02 2011-06-16 Genentech Inc Kombinationstherapie
AU2002307037B2 (en) 2001-04-02 2008-08-07 Biogen Idec Inc. Recombinant antibodies coexpressed with GnTIII
WO2003061694A1 (en) 2001-05-10 2003-07-31 Seattle Genetics, Inc. Immunosuppression of the humoral immune response by anti-cd20 antibodies
AU2002315168A1 (en) 2001-06-14 2003-01-02 Intermune, Inc. Combination therapy of gamma-interferon and b cell specific antibodies
US7321026B2 (en) 2001-06-27 2008-01-22 Skytech Technology Limited Framework-patched immunoglobulins
US7718387B2 (en) 2001-09-20 2010-05-18 Board Of Regents, The University Of Texas System Measuring circulating therapeutic antibody, antigen and antigen/antibody complexes using ELISA assays
CA2463879C (en) 2001-10-25 2012-12-04 Genentech, Inc. Glycoprotein compositions
US7127096B2 (en) * 2001-11-20 2006-10-24 Accuimage Diagnostics Corp. Method and software for improving coronary calcium scoring consistency
WO2003049694A2 (en) 2001-12-07 2003-06-19 Chiron Corporation Methods of therapy for non-hodgkin's lymphoma
US20040093621A1 (en) 2001-12-25 2004-05-13 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd Antibody composition which specifically binds to CD20
WO2003068821A2 (en) 2002-02-14 2003-08-21 Immunomedics, Inc. Anti-cd20 antibodies and fusion proteins thereof and methods of use
US20040002587A1 (en) * 2002-02-20 2004-01-01 Watkins Jeffry D. Fc region variants
US20030180292A1 (en) 2002-03-14 2003-09-25 Idec Pharmaceuticals Treatment of B cell malignancies using anti-CD40L antibodies in combination with anti-CD20 antibodies and/or chemotherapeutics and radiotherapy
US20030219818A1 (en) 2002-05-10 2003-11-27 Bohen Sean P. Methods and compositions for determining neoplastic disease responsiveness to antibody therapy
US20050180972A1 (en) 2002-07-31 2005-08-18 Wahl Alan F. Anti-CD20 antibody-drug conjugates for the treatment of cancer and immune disorders
EP3284753B1 (en) 2002-10-17 2019-06-05 Genmab A/S Human monoclonal antibodies against cd20 for use in the treatment of multiple sclerosis
DK1572744T3 (da) 2002-12-16 2010-09-20 Genentech Inc Immunoglobulinvarianter og deres anvendelser
PL1613350T3 (pl) * 2003-04-09 2009-08-31 Genentech Inc Leczenie choroby autoimmunologicznej u pacjenta z nieodpowiednią odpowiedzią na leczenie inhibitorem TNFα
AR044388A1 (es) 2003-05-20 2005-09-07 Applied Molecular Evolution Moleculas de union a cd20
KR20130099228A (ko) 2004-06-04 2013-09-05 제넨테크, 인크. 다발성 경화증의 치료 방법
MX2007014497A (es) * 2005-05-20 2008-02-07 Genentech Inc Pretratamiento de una muestra biologica de un sujeto con enfermedad autoinmune.
US8144978B2 (en) 2007-08-01 2012-03-27 Tandent Vision Science, Inc. System and method for identifying complex tokens in an image
KR101041914B1 (ko) * 2008-06-26 2011-06-15 부산대학교 산학협력단 셀레늄에 의해 탈분화된 세포, 이의 제조방법 및 이의 용도
TW201438738A (zh) 2008-09-16 2014-10-16 Genentech Inc 治療進展型多發性硬化症之方法

Also Published As

Publication number Publication date
RU2326127C2 (ru) 2008-06-10
JP2009159950A (ja) 2009-07-23
EP1572744A2 (en) 2005-09-14
HK1248731A1 (zh) 2018-10-19
KR20050086913A (ko) 2005-08-30
US20190071511A1 (en) 2019-03-07
IL214083A0 (en) 2011-08-31
UA89350C2 (uk) 2010-01-25
WO2004056312A3 (en) 2005-05-26
EP2301966A1 (en) 2011-03-30
EP1572744B1 (en) 2010-06-09
AU2003301079C1 (en) 2018-03-08
HUS1800030I1 (hu) 2018-07-30
NO338402B1 (no) 2016-08-15
MXPA05006511A (es) 2006-02-17
MA27704A1 (fr) 2006-01-02
CL2008003323A1 (es) 2009-03-06
EP3263596A1 (en) 2018-01-03
CY2018009I2 (el) 2018-06-27
BRPI0316779B1 (pt) 2020-04-28
PL212899B1 (pl) 2012-12-31
US20060034835A1 (en) 2006-02-16
US20170158773A1 (en) 2017-06-08
RS51318B (sr) 2010-12-31
SG2013036975A (en) 2016-07-28
IL168754A (en) 2011-09-27
RS20050467A (en) 2007-08-03
JP2012044997A (ja) 2012-03-08
CA2507898A1 (en) 2004-07-08
KR20070055625A (ko) 2007-05-30
SI2289936T1 (sl) 2017-10-30
AR072523A2 (es) 2010-09-01
KR100910433B1 (ko) 2009-08-04
CY1110759T1 (el) 2015-06-10
HRP20050649B1 (hr) 2016-06-17
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US20220002430A1 (en) 2022-01-06
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HUP0500954A2 (en) 2007-09-28

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