EA014166B1 - Ядерный фактор перепрограммирования - Google Patents

Ядерный фактор перепрограммирования Download PDF

Info

Publication number
EA014166B1
EA014166B1 EA200870046A EA200870046A EA014166B1 EA 014166 B1 EA014166 B1 EA 014166B1 EA 200870046 A EA200870046 A EA 200870046A EA 200870046 A EA200870046 A EA 200870046A EA 014166 B1 EA014166 B1 EA 014166B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
cells
gene
genes
cell
factor
Prior art date
Application number
EA200870046A
Other languages
English (en)
Other versions
EA200870046A1 (ru
Inventor
Синиа Яманака
Original Assignee
Киото Юниверсити
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=38162968&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=EA014166(B1) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Киото Юниверсити filed Critical Киото Юниверсити
Publication of EA200870046A1 publication Critical patent/EA200870046A1/ru
Publication of EA014166B1 publication Critical patent/EA014166B1/ru

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/46—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates
    • C07K14/47—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals
    • C07K14/4701—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals not used
    • C07K14/4702—Regulators; Modulating activity
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/14—Drugs for disorders of the nervous system for treating abnormal movements, e.g. chorea, dyskinesia
    • A61P25/16—Anti-Parkinson drugs
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/04—Inotropic agents, i.e. stimulants of cardiac contraction; Drugs for heart failure
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/46—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates
    • C07K14/47—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
    • C12N5/06—Animal cells or tissues; Human cells or tissues
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
    • C12N5/06—Animal cells or tissues; Human cells or tissues
    • C12N5/0602—Vertebrate cells
    • C12N5/0696—Artificially induced pluripotent stem cells, e.g. iPS
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2501/00—Active agents used in cell culture processes, e.g. differentation
    • C12N2501/60—Transcription factors
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2501/00—Active agents used in cell culture processes, e.g. differentation
    • C12N2501/60—Transcription factors
    • C12N2501/602—Sox-2
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2501/00—Active agents used in cell culture processes, e.g. differentation
    • C12N2501/60—Transcription factors
    • C12N2501/603—Oct-3/4
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2501/00—Active agents used in cell culture processes, e.g. differentation
    • C12N2501/60—Transcription factors
    • C12N2501/604—Klf-4
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2501/00—Active agents used in cell culture processes, e.g. differentation
    • C12N2501/60—Transcription factors
    • C12N2501/605—Nanog
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2501/00—Active agents used in cell culture processes, e.g. differentation
    • C12N2501/60—Transcription factors
    • C12N2501/606—Transcription factors c-Myc
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2510/00—Genetically modified cells
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2799/00—Uses of viruses
    • C12N2799/02—Uses of viruses as vector
    • C12N2799/021—Uses of viruses as vector for the expression of a heterologous nucleic acid
    • C12N2799/027—Uses of viruses as vector for the expression of a heterologous nucleic acid where the vector is derived from a retrovirus

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Developmental Biology & Embryology (AREA)
  • Transplantation (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Psychology (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Hematology (AREA)

Abstract

В изобретении представлен ядерный фактор перепрограммирования для соматической клетки, содержащий продукт каждого из следующих трех типов генов: гена семейства Oct, гена семейства Klf и гена семейства Мус, в качестве средства для индукции перепрограммирования дифференцированной клетки для удобного и высоковоспроизводимого получения индуцированной плюрипотентной стволовой клетки, обладающей плюрипотентностью и способностью к росту, такими же, как у ES-клеток, без использования эмбриона или ES-клетки.

Description

Область техники
Настоящее изобретение относится к ядерному фактору перепрограммирования, обладающему способностью перепрограммирования дифференцированной соматической клетки для получения индуцированной плюрипотентной стволовой клетки.
Предшествующий уровень техники
Эмбриональные стволовые клетки (Е8-клетки) представляют собой стволовые клетки, полученные из ранних эмбрионов человека или мыши, обладающие тем характерным свойством, что их можно культивировать в течение длительного периода, поддерживая плюрипотентную способность к дифференцировке во все виды клеток, существующие в живых организмах. Считается, что эмбриональные стволовые клетки человека можно использовать в качестве ресурса для способов трансплантационной клеточной терапии различных заболеваний, таких как болезнь Паркинсона, юношеский диабет и лейкоз, пользуясь преимуществами вышеупомянутых свойств. Однако при трансплантации Е8-клеток существует проблема отторжения таким же образом, что и при трансплантации органов. Более того, с этической точки зрения существует много особых мнений против использования Е8-клеток, которые получают, разрушая эмбрионы человека. Если можно индуцировать дедифференцировку собственных дифференцированных соматических клеток пациента для получения клеток, обладающих плюрипотентностью и способностью к росту, такой же, как у Е8-клеток (в данном описании эти клетки обозначены как индуцированные плюрипотентные стволовые клетки (ίΡδ-клетки) , хотя иногда их называют клетками, подобными эмбриональным стволовым клеткам, или Е8-подобными клетками), полагают, что такие клетки можно использовать как идеальные плюрипотентные клетки, свободные от отторжения или этических проблем.
В качестве способа перепрограммирования соматического ядра опубликован, например, способ получения эмбриональной стволовой клетки из клонированного эмбриона, полученного путем трансплантации ядра соматической клетки в яйцеклетку (ν.8. Н^апд е! а1., 8с1епсе, 303, р. 1669-74, 2004; ν.8. Н^апд е! а1., 8с1епсе, 308, р. 1777-83, 2005; однако было доказано, что эти статьи являлись фальсификациями, и позднее они были отозваны). Однако этот способ получения клонированного эмбриона только с целью получения Е8-клеток обладает гораздо более серьезными этическими проблемами по сравнению с обычными Е8-клетками с использованием избыточных эмбрионов, полученных при терапии для оплодотворения. Опубликован также способ перепрограммирования ядра соматической клетки посредством слияния соматической клетки и Е8-клетки (М. Таба е! а1., Сигг. ΒίοΙ., 11, р. 1553-1558, 2001; С.А. Со\\ш1 е! а1., 8с1епсе, 309, р. 1369-73, 2005). Однако данный способ приводит к использованию Е8-клеток человека, что не дает возможности решения этических трудностей. Кроме того, опубликован способ перепрограммирования ядра клетки посредством реакции экстракта линии клеток, полученных из опухоли зародышевых клеток, развившейся у человека, с дифференцированной клеткой (С.К. Тагапдег е! а1., Мо1. Βίο1. Се11., 16, р. 5719-35, 2005). Однако оставалось совершенно неизвестным, какой компонент в экстракте индуцирует перепрограммирование по этому способу, и таким образом этот способ связан с проблемами технической надежности и безопасности.
Предложен способ скрининга ядерного фактора перепрограммирования, обладающего действием перепрограммирования дифференцированных соматических клеток для получения индуцированных плюрипотентных стволовых клеток (международная публикация νθ 2005/80598). Этот способ включает в себя стадии контактирования соматических клеток, содержащих ген, в которых маркерный ген расположен так, чтобы его экспрессия находилась под контролем области контроля экспрессии генов ЕСАТ (ассоциированных с Е8-клетками транскриптов) (т.е. класса генов, специфически экспрессирующихся в Е8-клетках), с каждым тестируемым веществом; проверки присутствия или отсутствия появления клетки, экспрессирующей маркерный ген; и выбора тестируемого соединения, индуцирующего появление указанной клетки, в качестве кандидата на роль ядерного фактора перепрограммирования соматических клеток. Способ перепрограммирования соматической клетки описан в примере 6 и т.п. вышеуказанной публикации. Однако в этой публикации не смогли опубликовать действительную идентификацию ядерного фактора перепрограммирования.
Патентный документ 1: международная публикация νθ 2005/80598.
Описание изобретения
Целью настоящего изобретения является предоставление ядерного фактора перепрограммирования. Более конкретно, целью настоящего изобретения является предоставление средств для индукции перепрограммирования дифференцированной клетки без использования яйцеклеток, эмбрионов или Е8-клеток для удобного и высоковоспроизводимого получения индуцированной плюрипотентной стволовой клетки, обладающей плюрипотентностью и способностью к росту, такими же, как у Е8-клеток.
Авторы настоящего изобретения проводили различные исследования для достижения вышеупомянутой цели и пытались идентифицировать ядерный фактор перепрограммирования с использованием способа скрининга ядерного фактора перепрограммирования, описанного в международной публикации νθ 2005/80598. В результате обнаружили 24 вида генов-кандидатов на роль генов, относящихся к перепрограммированию ядра, и среди них обнаружили три вида генов, необходимых для перепрограммирования ядра. Настоящее изобретение сделано на основе вышеупомянутых обнаружений.
- 1 014166
Таким образом, настоящее изобретение относится к ядерному фактору перепрограммирования для соматической клетки, который содержит продукт гена для каждого из следующих трех типов генов: гена семейства Ос1. гена семейства К1Г и гена семейства Мус. Согласно предпочтительному варианту осуществления изобретения здесь представлен вышеупомянутый фактор. содержащий продукт гена для каждого из трех следующих типов генов: Ос13/4. К1Г4 и с-Мус.
Согласно другому предпочтительному варианту осуществления представлен вышеупомянутый фактор. дополнительно содержащий продукт следующего гена: гена семейства 8ох. и в качестве более предпочтительного варианта осуществления представлен вышеупомянутый фактор. содержащий продукт гена 8ох2.
Согласно другому предпочтительному варианту осуществления представлен вышеупомянутый фактор. содержащий цитокин вместе с продуктом гена семейства Мус. или. альтернативно. вместо продукта гена семейства Мус. В качестве более предпочтительного варианта осуществления представлен вышеупомянутый фактор. где цитокин представляет собой основной фактор роста фибробластов (ЬЕСЕ) и/или фактор стволовых клеток (8СЕ).
Согласно особенно предпочтительным вариантам осуществления представлены ядерный фактор перепрограммирования для соматической клетки. содержащий продукт гена ТЕНТ в дополнение к продукту каждого из: гена семейства Ос1. гена семейства К1Г. гена семейства Мус и гена семейства 8ох; и вышеупомянутый фактор. содержащий продукт гена или продукты одного или нескольких типов генов. выбранных из группы. состоящей из следующих генов: для большого Т-антигена 8У40. НРУ16 Е6. НРУ16 Е7 и ВтЛ. в дополнение к продукту каждого из: гена семейства Ос1. гена семейства Κΐί. гена семейства Мус. гена семейства 8ох и гена ТЕНТ.
В дополнение к этим факторам представлен вышеупомянутый фактор. дополнительно содержащий продукт или продукты одного или нескольких типов генов. выбранных из группы. состоящей из следующих: ЕЬх15. Ыапод. ЕКак. ЕСАТ15-2. Тс11 и β-катенин.
Согласно другому предпочтительному варианту осуществления вышеупомянутого изобретения представлен также вышеупомянутый фактор. содержащий продукт или продукты одного или нескольких типов генов. выбранных из группы. состоящей из следующего: ЕСАТ1. Е§д1. Ппт13Ь. ЕСАТ8. С6Г3. 8ох15. ЕСАТ15-1. Е1Ы17. 8а114. Кех1. ИТЕ1. 81е11а. 81а13 и 0*2.
В другом аспекте настоящее изобретение относится к способу получения индуцированной плюрипотентной стволовой клетки посредством перепрограммирования ядра соматической клетки. который включает в себя стадию контактирования вышеупомянутого ядерного фактора перепрограммирования с соматической клеткой.
Согласно предпочтительному варианту осуществления изобретения представлен вышеупомянутый способ. который включает в себя стадию добавления вышеупомянутого ядерного фактора перепрограммирования к культуре соматической клетки; вышеупомянутый способ. который включает в себя стадию введения гена. кодирующего вышеупомянутый ядерный фактор перепрограммирования. в соматическую клетку; вышеупомянутый способ. который включает в себя стадию введения указанного гена в соматическую клетку с использованием рекомбинантного вектора. содержащего по меньшей мере один тип гена. кодирующего вышеупомянутый ядерный фактор перепрограммирования; и вышеупомянутый способ. где в качестве соматической клетки используют соматическую клетку. выделенную у пациента.
В другом аспекте настоящее изобретение относится к индуцированной плюрипотентной стволовой клетке. полученной посредством вышеупомянутого способа. Настоящее изобретение также относится к соматической клетке. полученной посредством индукции дифференцировки вышеупомянутой индуцированной плюрипотентной стволовой клетки.
Кроме того. настоящее изобретение относится к способу терапии стволовыми клетками. который включает в себя стадию трансплантации соматической клетки. где указанную клетку получают посредством индукции дифференцировки индуцированной плюрипотентной стволовой клетки. полученной посредством вышеупомянутого способа с использованием соматической клетки. выделенной и собранной у пациента. указанному пациенту.
Кроме того. настоящее изобретение относится к способу оценки физиологической функции или токсичности соединения. лекарственного средства. яда или т. п. с использованием различных клеток. полученных посредством индукции дифференцировки индуцированной плюрипотентной стволовой клетки. полученной вышеупомянутым способом.
Настоящее изобретение также относится к способу улучшения способности к дифференцировке и/или росту клетки. который включает в себя стадию контактирования вышеупомянутого ядерного фактора перепрограммирования с клеткой. и. кроме того. относится к клетке. которую можно получить посредством вышеупомянутого способа. и к соматической клетке. полученной посредством индукции дифференцировки клетки. полученной посредством вышеупомянутого способа.
Посредством использования ядерного фактора перепрограммирования. представленного по настоящему изобретению. перепрограммирование ядра дифференцированной клетки можно удобно и с высокой воспроизводимостью индуцировать без использования эмбрионов или Е8-клеток и можно получить индуцированную плюрипотентную стволовую клетку в форме недифференцированной клетки. об
- 2 014166 ладающей способностью к дифференцировке, плюрипотентностью и способностью к росту, такими же, как у Ξδ-клеток. Например, индуцированную плюрипотентную стволовую клетку, обладающую высокой способностью к росту и плюрипотентностью при дифференцировке, можно получить из собственной соматической клетки пациента с использованием ядерного фактора перепрограммирования по настоящему изобретению. Клетки, которые можно получить посредством дифференцировки указанной клетки (например, клетки сердечной мышцы, инсулинпродуцирующие клетки, нервные клетки и т.п.), являются необычайно полезными, поскольку их можно использовать для видов терапии трансплантацией стволовых клеток для множества заболеваний, таких как сердечная недостаточность, инсулинозависимый сахарный диабет, болезнь Паркинсона и повреждение спинного мозга; таким образом, можно избегать этических проблем, касающихся использования эмбриона человека, и отторжения после трансплантации. Кроме того, различные клетки, которые можно получить посредством дифференцировки индуцированной плюрипотентной стволовой клетки (например, клетки сердечной мышцы, клетки печени и т. п.), являются очень полезными в качестве систем для оценки эффективности или токсичности соединений, лекарственных средств, ядов и т. п.
Краткое описание чертежей
На фиг. 1 показан способ скрининга факторов перепрограммирования с использованием эмбриональных фибробластов (МЕЕ) мыши с нокином вдео в гене ЕЬх15.
На фиг. 2 показаны фотографии, изображающие морфологию ίΡδ-клеток, полученных посредством введения 24 генов, показанных в табл. 4. Морфология дифференцированных клеток (МЕЕ) и нормальных эмбриональных стволовых клеток (Е8) также показана в качестве контроля.
На фиг. 3 показаны профили экспрессии маркерных генов в ίΡδ-клетках. Показаны результаты КТ-РСК. с использованием тотальной РНК, выделенной из ίΡδ-клеток, Ξδ-клеток и МЕЕ-клеток в качестве матриц.
На фиг. 4 показан статус метилирования ДНК в ίΡδ-клетках. Геномную ДНК, выделенную из ίΡδ-клеток, Е8-клеток и МЕЕ-клеток, обрабатывали бисульфитом. ДНК-мишени амплифицировали ΡΟΚ и затем вставляли в плазмиду. Для каждого из генов выделяли и секвенировали десять клонов плазмиды. Метилированные СрС показаны сплошными кругами, а неметилированные СрС - незакрашенными кругами.
На фиг. 5 показано число колоний устойчивых к С418 клеток, полученных посредством трансдукции группы из 24 генов и групп из 23 генов, где каждый отдельный ген убирали из группы из 24 генов. На нижних частях графика показано число колоний, полученное через одну неделю после отбора с С418, а на верхних частях графика показано число клонов, полученных за три недели. Когда каждый из заключенных в рамку генов (идентификационный номер для каждого гена является таким же, как указано в табл. 1) удаляли, колоний не получали совсем, или через 3 недели наблюдали только небольшое число колоний.
На фиг. 6 показано число колоний устойчивых к С418 клеток, полученных посредством трансдукции группы из 10 генов и групп из 9 генов, где каждый отдельный ген убирали из группы из 10 генов. Когда убирали каждый из генов № 14, № 15 или № 20, колоний не получали. Когда удаляли ген № 22, получали немного устойчивых к С418 колоний. Однако клетки обладали дифференцированной морфологией, явно отличной от морфологии ίΡδ-клеток.
На фиг. 7 показано число появившихся устойчивых к 0418 колоний (перепрограммированных колоний) для группы из 10 генов, группы из 4 генов, групп из 3 генов или групп из 2 генов. Показаны типичные морфология и размеры колоний.
На фиг. 8 показаны фотографии, изображающие результаты окрашивания гематоксилином-эозином (Н и Е) опухолей, сформировавшихся после подкожной трансплантации ίΡδ-клеток, полученных из МЕЕ, мышам пийе. Наблюдали дифференцировку во многие ткани системы трех зародышевых листков.
На фиг. 9 показаны фотографии эмбрионов, полученных посредством трансплантации ίΡδ-клеток, полученных из фибробластов кожи взрослых, в бластоцисты мыши и трансплантации клеток в матки псевдобеременных мышей. Можно наблюдать, что в верхнем левом эмбрионе клетки, полученные из ίΡδ-клеток (испускающие зеленую флуоресценцию), распределены системно. На нижних фотографиях можно наблюдать, что почти все клетки сердца, печени и спинного мозга эмбриона являются ΟΡΡ-положительными и происходят из ίΡδ-клеток.
На фиг. 10 показаны фотографии, изображающие результаты КТ-ΡΟΚ, подтверждающие экспрессию маркерных генов Еδ-клетки. На фотографиях δοχ2 минус обозначает ίΡδ-клетки, полученные посредством трансдукции 3 генов в МЕЕ, 4ЕСАТ обозначает ίΡδ-клетки, полученные посредством трансдукции 4 генов в МЕЕ, 10ЕСАТ обозначает ίΡδ-клетки, полученные посредством трансдукции 10 генов в МЕЕ, фибробласт кожи с 10ЕСАТ обозначает ίΡδ-клетки, полученные посредством трансдукции 10 генов в фибробласты кожи, Еδ обозначает Еδ-клетки мыши и МЕЕ обозначает клетки МЕЕ без трансдукции гена. Числовые значения под символами обозначают номера клонов.
На фиг. 11 показано действие ЬЕОЕ на получение ίΡδ-клеток из МЕЕ. Четыре фактора (верхний ряд) или три фактора за исключением с-Мус (нижний ряд) с помощью ретровирусов трансдуцировали в МЕЕ,
- 3 014166 полученные у мышей ЕЬх15вдео/вдео, и культивировали на обычных клетках-фидерах (клетки 8ТО) (слева) и клетках 8ТО с введенным экспрессирующим ЬЕСЕ вектором (справа). Отбор с 0418 проводили в течение 2 недель, клетки окрашивали кристаллическим синим и фотографировали. Числовые значения обозначают число колоний.
На фиг. 12 показаны объяснения экспериментов с использованием мышей №шод-ЕСЕР-1КЕ8-Риго. А: выделяли искусственную хромосому Е. сой (ВАС), содержащую ген Ναηομ мыши в середине, и кассету Е0ЕР-1КЕ8-Риго вставляли выше кодирующей области Nаηοд посредством рекомбинации. В: получали трансгенных мышей с модифицированной ВАС. Наблюдали экспрессию СЕР, ограниченную внутренними массами клеток бластоцист и гонад.
На фиг. 13 показаны объяснения экспериментов с использованием мышей №шод-ЕСЕР-1КЕ8-Риго. Из эмбрионов мышей №шод-ЕСЕР-1КЕ8-Риго (13,5 суток после оплодотворения) извлекали головы, внутренние органы и гонады для получения МЕЕ. По результатам анализа на сортере клеток почти не присутствовало СЕР-положительных клеток в МЕЕ, полученных у мышей №шод-ЕСЕР-1КЕ8-Риго (№шод). а также в МЕЕ, полученных у мыши ЕЬх15вдео/|3део (ЕЬх15) или в МЕЕ, полученных у мыши дикого типа (дикий).
На фиг. 14 показаны фотографии 1Р8-клеток, полученных у МЕЕ мыши №шод-ЕСЕР-1КЕ8-Риго (слева) и у МЕЕ мыши ЕЬх15вдео/|3део (справа). Клетки отбирали с пуромицином и С418 соответственно.
На фиг. 15 показаны результаты роста 1Р8-клеток. 100000 клеток каждых из Е8-клеток, 1Р8-клеток, полученных у МЕЕ мыши №шод-ЕСЕР-1КЕ8-Риго (№под 1Р8, слева), и 1Р8-клеток, полученных у МЕЕ мыши ЕЬх15вдео/вдео (ЕЬх 1Р8), высевали на 24-луночные планшеты и пассировали каждые 3 суток. Показаны результаты подсчета клеток. Числовые значения представляют среднее время удвоения.
На фиг. 16 показаны профили экспрессии генов в 1Р8-клетках. Экспрессию маркерных генов в МЕЕ, Е8-клетках, 1Р8-клетках, полученных у МЕЕ мыши №шод-ЕСЕР-1КЕ8-Риго (№шод 1Р8, слева), и 1Р8клетках, полученных у МЕЕ мыши ЕЬх15вдео/|3део (ЕЬх 1Р8), анализировали посредством КТ-РСК. Числовые значения внизу указывают число пассажей.
На фиг. 17 показано формирование тератомы из №под 1Р8-клеток. 1000000 клеток каждых из Е8-клеток или №шод 1Р8-клеток подкожно инъецировали в спину мышей пийе, и показан внешний вид опухолей, сформированных через 3 недели (слева), и изображения тканей (справа, окрашенные Н и Е).
На фиг. 18 показано получение химерных мышей с помощью №шод 1Р8-клеток. Химерные мыши рождались после трансплантации №шод 1Р8-клеток (клон №МЕ4ЕК-24, пассированный 6 раз) в бластоцисты. Из 90 трансплантированных эмбрионов родилось четыре химерные мыши.
На фиг. 19 показан перенос зародышевой линии из №шод 1Р8-клеток. Анализом РСК. геномной ДНК мышей, рожденных благодаря скрещиванию химерных мышей, показанных на фиг. 18, и мышей С57ВЬ/6, выявили присутствие трансгенов Ос!3/4 и К1£4 у всех мышей, таким образом подтверждая перенос зародышевой линии.
На фиг. 20 показана индукция дифференцировки в нервные клетки из 1Р8-клеток. Показаны нервные клетки (сверху, βΙΙΙ-тубулинположительные), олигодендроциты (слева, 04-положительные) и астроциты (справа, СЕ АР-положительные), дифференцированные ш уйто из 1Р8-клеток, полученных из фибробластов кожи.
На фиг. 21 показано объяснение получения 1Р8-клеток без использования отбора с лекарственным средством. МЕЕ высевали до от 10000 до 100000 клеток на 10-см чашку, и 4 фактора трансдуцировали с помощью ретровирусов. В контроле (пустой, слева) не появилось колоний, в то время как на чашках с трансдукцией 4 факторов получили выпуклые колонии, сходные с колониями 1Р8-клеток (в центре), а также плоские колонии трансформантов. При пассировании клеток получили клетки, сходные с 1Р8-клетками (справа).
На фиг. 22 показаны профили экспрессии генов в клетках, полученных без использования отбора с лекарственным средством. РНК выделяли из полученных клеток, показанных на фиг. 21, и экспрессию маркерных генов Е8-клетки анализировали посредством КТ-РСК.
На фиг. 23 показаны клетки, подобные 1Р8-клеткам, полученные из фибробластов человека. Показаны колонии, полученные посредством трансдукции с помощью ретровирусов гомологичных генов человека для 4 факторов в фибробласты, полученные из эмбрионов человека (слева), и клетки после двух пассажей (справа).
На фиг. 24 показано получение 1Р8-клеток из фибробластов кожи взрослого человека. Факторы, упомянутые в левой колонке, трансдуцировали с помощью ретровирусов в фибробласты кожи взрослого человека, инфицированные рецептором для ретровирусов мыши с помощью лентивируса. На фотографиях показаны фазово-контрастные изображения (объектх10) на сутки 8 после вирусной инфекции.
Наилучший способ осуществления изобретения
Ядерный фактор перепрограммирования по настоящему изобретению характеризуется тем, что содержит продукт гена для каждого из следующих трех типов генов: гена семейства Ос!, гена семейства К1£ и гена семейства Мус; и согласно предпочтительному варианту осуществления он характеризуется тем, что содержит продукт гена семейства 8ох в дополнение к вышеупомянутым трем типам генов.
- 4 014166
В качестве средства для подтверждения ядерного фактора перепрограммирования по настоящему изобретению можно использовать, например, способ скрининга ядерных факторов перепрограммирования, описанный в международной публикации XVО 2005/80598. Полное содержание вышеупомянутой публикации включено в содержание данного описания посредством ссылки. С помощью ссылки на вышеупомянутую публикацию специалисты в данной области могут проводить скрининг ядерных факторов перепрограммирования для подтверждения присутствия и действия фактора перепрограммирования по настоящему изобретению.
Например, в качестве экспериментальной системы, позволяющей наблюдать феномен перепрограммирования, можно использовать мышь, у которой проведен нокин вдео (гена, слитого из гена β-галактозидазы и гена устойчивости к неомицину) в локусе ГЬх15. Подробности описаны в примерах данного описания. Ген ЕЬх15 мыши представляет собой ген, специфически экспрессирующийся в плюрипотентных при дифференцировке клетках, таких как Е8-клетки и ранние эмбрионы. В гомомутантной мыши, у которой проведен нокин вдео в гене ГЬх15 мыши, так что она является дефектной по функции ГЬх15, аномальных фенотипов, включая относящиеся к плюрипотентности при дифференцировке или размножении, как правило, не наблюдают. У этой мыши экспрессия вдео находится под контролем энхансера и промотора гена ГЬх15, и дифференцированные соматические клетки, в которых не экспрессируется вдео, обладают чувствительностью к 0418. В отличие от этого, гомомутантные Е8-клетки с нокином вдео обладают устойчивостью к 0418 в очень высокой концентрации (равной или превышающей 12 мг/мл). Посредством использования этого феномена можно сконструировать экспериментальную систему для визуализации перепрограммирования соматических клеток.
Посредством применения вышеупомянутой экспериментальной системы фибробласты (ГЬх15вдео,вдео МЕГ) можно сначала выделить из эмбриона гомомутантной мыши с нокином вдео (13,5 суток после оплодотворения). МЕГ не экспрессируют ген ГЬх15 и, соответственно, также не экспрессируют вдео, что приводит к чувствительности к 0418. Однако, когда МЕГ сливают со свободными от генетических манипуляций Е8-клетками (также обладающими чувствительностью к 0418), вдео экспрессируется, и клетки становятся устойчивыми к 0418 в результате перепрограммирования ядер МЕГ. Таким образом, посредством использования этой экспериментальной системы феномен перепрограммирования можно визуализировать как устойчивость к 0418.
Ядерные факторы перепрограммирования можно отбирать с использованием вышеупомянутой экспериментальной системы. В качестве кандидатов на роль генов, относящихся к ядерным факторам перепрограммирования, можно отобрать множество генов, которые обладают специфической экспрессией в Е8-клетках или для которых предполагают важную роль в поддержании плюрипотентности при дифференцировке Е8-клеток, и можно подтвердить, может ли каждый из генов-кандидатов индуцировать перепрограммирование ядра самостоятельно или в подходящем их сочетании. Например, подтвердили, что сочетание всех выбранных первичных генов-кандидатов способно индуцировать перепрограммирование дифференцированных клеток в состояние, близкое к состоянию Е8-клеток. Затем получали сочетания посредством удаления каждого отдельного гена из вышеупомянутого сочетания и подтверждали то же самое действие сочетаний, чтобы выбрать каждый из вторичных генов-кандидатов, отсутствие которых вызывает снижение способности к индукции перепрограммирования или потерю способности к индукции перепрограммирования. Посредством повтора таких же стадий для вторичных генов-кандидатов, выбранных, как описано выше, можно выбрать необходимые сочетания генов для перепрограммирования ядра и можно подтвердить, что сочетание продуктов каждого из трех типов генов, гена семейства Ое1. гена семейства К1Г и гена семейства Мус, действует как ядерный фактор перепрограммирования. Кроме того, можно подтвердить, что сочетание продукта гена семейства 8ох в дополнение к продуктам вышеупомянутых трех типов генов обладает необычайно превосходными характеристиками в качестве ядерного фактора перепрограммирования. Конкретные примеры способа отбора ядерных факторов перепрограммирования показаны в примерах данного описания. Таким образом, с помощью ссылки на приведенные выше общие объяснения и конкретные объяснения в примерах специалисты в данной области легко могут подтвердить, что сочетание указанных трех типов генов индуцирует перепрограммирование соматических клеток и что сочетание продуктов указанных трех типов генов является необходимым для перепрограммирования ядра.
Ядерный фактор перепрограммирования, представленный по настоящему изобретению, содержит, по меньшей мере, сочетание продуктов гена семейства Ос1, гена семейства К1Г и гена семейства Мус, например сочетание продуктов трех типов генов Ос13/4, К1Г4 и с-Мус. Примеры гена семейства Ос1 включают в себя, например, Ос13/4, Ос11Л, Ос16 и т.п. Ос13/4 представляет собой фактор транскрипции, принадлежащий к семейству РОИ, и опубликовано, что он является маркером недифференцированных клеток (К. Окато1о е1 а1., Се11., 60, р. 461-72, 1990).
Опубликовано, что Ос13/4 также участвует в поддержании плюрипотентности (1. №сйок е1 а1., Се11., 95, р. 379-91, 1998). Примеры гена семейства К1Г включают в себя К1Г1, К1Г2, К1Г4, К1Г5 и т.п. К1Г4 (Кгирре1-подобный фактор-4) опубликован в качестве фактора репрессии опухолей (А.М. 011а1еЬ е1 а1., Се11. Век., 15, р. 92-6, 2005). Примеры гена семейства Мус включают в себя с-Мус, Ν-Мус, Ь-Мус и т.п. с-Мус
- 5 014166 представляет собой фактор контроля транскрипции, вовлеченный в дифференцировку и пролиферацию клеток (8. АбЫкагу, М. Ейег§, Ναι. Кеу. Мо1. Се11. Вю1., 6, р. 635-45, 2005), и опубликовано также, что он вовлечен в поддержание плюрипотентности (Р. Саг1\упд111 е! а1., Веуе1оршеп!, 132, р. 885-96, 2005). Регистрационные номера в NСВI для генов из семейств, отличных от Ос!3/4, К114 и с-Мус, следующие:
Таблица 1
К1£1
Кгирре1-подобный фактор 1 (эритроид)
ΝΜ 010635
ΝΜ 006563
К1Г2
Кгирре1-подобный фактор 2 (легкое)
ΝΜ 008452
ΝΜ 016270
К1£5
КгирреТ-подобный фактор 5
ΝΜ_009769
ΝΜ 001730 с-Мус онкоген миелоцитоматоза
ΝΜ 010849
ΝΜ 002467
Ν-Мус онкоген, родственный онкогену νМус вируса миелоцитоматоза, полученный из нейробластомы (птичий)
ΝΜ 008709
ΝΜ 005378
Ь-Мус гомолог 1 онкогена вируса миелоцитоматоза ν-Мус, полученный из карциномы легкого (птичий)
ΝΜ 008506
ΝΜ 005376
Ос£1А домен РОС, класс 2, фактор транскрипции 1
ΝΜ 198934
ΝΜ 002697
ОсЬб домен РОС, класс 3, фактор транскрипции 1
ΝΜ 011141
ΝΜ 002699
Все эти гены являются широко распространенными у млекопитающих, включая человека, и для использования продуктов вышеупомянутых генов по настоящему изобретению можно использовать гены, полученные у любых млекопитающих (гены, полученные у таких млекопитающих, как мышь, крыса, бык, овца, лошадь, обезьяна и т.п.). Помимо продуктов генов дикого типа можно использовать также продукты мутантных генов, содержащие замену, вставку и/или делецию нескольких (например, 1-10, предпочтительно 1-6, более предпочтительно 1-4, еще более предпочтительно 1-3 и наиболее предпочтительно 1 или 2) аминокислот и обладающие сходной функцией с продуктами генов дикого типа. Например, в качестве продукта гена с-Мус можно использовать продукт стабильного типа (Т58А), также как продукт дикого типа. Приведенное выше объяснение можно сходным образом применять к продуктам других генов.
Ядерный фактор перепрограммирования по настоящему изобретению может содержать продукт гена, отличный от вышеупомянутых трех типов продуктов генов. Пример такого продукта гена включает в себя продукт гена семейства 8ох. Примеры гена семейства 8ох включают в себя, например, 8ох1, 8ох3, 8ох7, 8ох15, 8ох17 и 8ох18, и предпочтительный пример включает в себя 8ох2. Ядерный фактор перепрограммирования, содержащий, по меньшей мере, сочетание продуктов четырех типов генов, гена семейства Ос! (например, Ос13/4), гена семейства К1£ (например, К1£4), гена семейства Мус (например, с-Мус) и гена семейства 8ох (например, 8ох2), представляет собой предпочтительный вариант осуществления настоящего изобретения с точки зрения эффективности перепрограммирования, и, в частности, сочетание с продуктом гена семейства 8ох иногда является предпочтительным для получения плюрипотентности. 8ох2, экспрессирующийся в процессе раннего развития, представляет собой ген, кодирующий фактор транскрипции (А.А. АуШоп е! а1., Оепе§ Оеу., 17, р. 126-40, 2003). Регистрационные номера в NСВI для генов семейства 8ох, отличных от 8ох2, следующие:
Таблица 2
Зох1
Содержащий ЗКУ-бокс ген 1
ЗохЗ
Содержащий ЗКУ-бокс ген 3
Зох7
Содержащий ЗКУ-бокс ген 7
Мышь
Человек
Зох15
Содержащий ЗКУ-бокс ген 15
Зох17
Содержащий ЗКУ-бокс ген 17
Зох18
Содержащий ЗКУ-бокс ген 18
ΝΜ 009233
ΝΜ 009237
ΝΜ 011446
ΝΜ 009235
ΝΜ 011441
ΝΜ 009236
ΝΜ 005986
ΝΜ 005634
ΝΜ 031439
ΝΜ 006942
ΝΜ 022454
ΝΜ 018419
Кроме того, продукт гена семейства Мус можно заменять на цитокин. В качестве цитокина предпочтительными являются, например, 8СЕ, ЬЕОЕ или т.п. Однако данные примеры цитокинов не являют ся ограничивающими.
В качестве более предпочтительного варианта осуществления пример включает в себя фактор, индуцирующий иммортализацию клеток, в дополнение к вышеупомянутым трем типам продуктов генов, предпочтительно к четырем типам продуктов генов. Например, пример включает в себя сочетание фак
- 6 014166 тора, содержащего продукт гена ТЕКТ, с фактором, содержащим продукт или продукты одного или нескольких типов генов, выбранных из группы, состоящей из следующих генов: для большого Т-антигена 8У40, НРУ16 Е6, НРУ16 Е7 и Вт11. ТЕКТ является необходимым для поддержания структуры теломеры на конце хромосомы во время репликации ДНК, и ген экспрессируется в стволовых клетках или клетках опухоли человека, в то время как он не экспрессируется во многих соматических клетках (I. Нопка^а, е! а1., Ргос. Ха!1. Асаб. 8сЁ, ϋ8Ά, 102, р. 18437-442, 2005). Опубликовано, что большой Т-антиген 8У40, НРУ16 Е6, НРУ16 Е7 или Вш11 индуцируют иммортализацию соматических клеток человека в сочетании с большим Т-антигеном (8. Ак1шоу е! а1., 8!ет. Се11з., 23, р. 1423-1433, 2005; Р. 8а1топ е! а1., Мо1. Т11ег., 2, р. 404-414, 2000). Указанные факторы являются особенно полезными, в частности, когда 1Р8клетки являются индуцированными из клеток человека. Регистрационные номера в NСВI для генов ТЕКТ и Вт11 следующие:
Таблица 3
Мыть Человек
ΤΕΚΤ обратная транскриптаза теломеразы ΝΜ 009354 ΝΜ 198253
Вш11 область вставки 1 Μο-ΜΙΛΖ для Влимфомы ΝΜ_007552 ΝΜ_005180
Более того, продукт или продукты одного или нескольких типов генов, выбранных из группы, состоящей из следующих: ЕЬх15, Хапод, ЕКаз, ЕСАТ15-2, Тс11 и β-катенина, можно объединять. Пример особенно предпочтительного варианта осуществления с точки зрения эффективности перепрограммирования включает в себя ядерный фактор перепрограммирования, содержащий всего десять типов продуктов генов, где продукты генов ЕЬх15, Хапод, ЕКаз, ЕСАТ15-2, Те11 и β-катенина объединяют с вышеупомянутыми четырьмя типами продуктов генов. ЕЬх15 (Υ. Токи/а\уа е! а1., Мо1. Се11. Вю1., 23, р. 2699708, 2003), Хапод (К. МДзш е! а1., Се11., 113, р. 631-42, 2003), ЕКаз (К. ТакаЕазЕ1, К. МДзш, 8. Υатаηака, Ха1иге, 423, р. 541-5, 2003) и ЕСАТ15-2 (А. ВогМп е! а1., Оеуе1ортеп!, 130, р. 1673-80, 2003) представляют собой гены, специфически экспрессирующиеся в Е8-клетках. Те11 вовлечен в активацию Ак! (А. Вог!уш е! а1., Оеуе1ортеп!, 130, р. 1673-80, 2003), и β-катенин представляет собой важный фактор, приводящий в действие путь передачи сигнала \Хп1, и опубликовано также, что он вовлечен в поддержание плюрипотентности (Х. 8а!о е! а1., Ха!. Меб., 10, р. 55-63, 2004).
Кроме того, ядерный фактор перепрограммирования по настоящему изобретению может содержать, например, продукт или продукты одного или нескольких типов генов, выбранных из группы, состоящей из следующих: ЕСАТ1, Езд1, Опт!3Б, ЕСАТ8, Об13, 8ох15, ЕСАТ15-1, ЕШ117, 8а114, Кех1, иТЕ1, 8!е11а, 8!а!3 и ОгЬ2. ЕСАТ1, Езд1, ЕСАТ8, Об13 и ЕСАТ15-1 представляют собой гены, специфически экспрессирующиеся в Е8-клетках (К. МДзш е! а1., Се11., 113, р. 631-42, 2003). Ι)ιιιιιΐ3Ι, представляет собой фактор, связанный с метилирующим ДНК ферментом, и 8ох15 представляет собой класс генов, экспрессирующихся в процессе раннего развития и кодирующих факторы транскрипции (М. Магиуата е! а1., 3. Вю1. СЕет., 280, р. 24371-9, 2005). Е!Е117 кодирует подобный тяжелому полипептиду ферритина 17 (А. со1Бопо!, Т. Вооп, С. Не 8те!, Ιη!. 1. Сапсег, 105, р. 371-6, 2003), 8а114 кодирует белок с Ζη-пальцами, в большом количестве экспрессирующийся в эмбриональных стволовых клетках (1. КоЕ1Еазе е! а1., Су!одепе!. Оепоте Кез., 98, р. 274-7, 2002), и Кех1 кодирует фактор транскрипции, расположенный ниже Ос!3/4 (Е. Веп-8ЕизЕап, 1.К. ТЕотрзоп, БД. Оибаз, Υ. Вегдтап, Мо1. Се11. Вю1., 18, р. 1866-78, 1998). иТЕ1 представляет собой кофактор транскрипции, расположенный ниже Ос!3/4, и опубликовано, что супрессия пролиферации Е8-клеток индуцирована, когда данный фактор супрессирован (А. Окиба е! а1., ЕМВО 3., 17, р. 2019-32, 1998). 8!а!3 представляет собой сигнальный фактор для пролиферации и дифференцировки клеток. Активация 8!а!3 запускает действие Б1Е, и таким образом фактор играет важную роль в поддержании плюрипотентности (Н. Х1\\а, Т. Вигбоп, I. СЕатЬегз, А. 8тДЕ, Оепез Оеу., 12, р. 2048-60, 1998). ОгЬ2 кодирует белок, являющийся промежуточным звеном между различными рецепторами факторов роста, существующими на мембранах клетки, и каскадом Каз/МАРК (А.М. СЕепд е! а1., Се11., 95, р. 793803, 1998).
Однако продукты генов, которые можно включать в ядерный фактор перепрограммирования по настоящему изобретению, не являются ограниченными продуктами генов, конкретно указанных выше. Ядерный фактор перепрограммирования по настоящему изобретению может содержать один или несколько факторов, относящихся к дифференцировке, развитию, пролиферации или т.п., и факторов, обладающих другими видами физиологической активности, а также другие продукты генов, которые могут функционировать как ядерный фактор перепрограммирования. Понятно, что такие варианты осуществления попадают в объем настоящего изобретения. Посредством использования соматических клеток, в которых экспрессируются только один или два гена из трех типов генов Ос!3/4, К1£4 и с-Мус, можно идентифицировать продукты других генов, которые могут функционировать как ядерный фактор перепрограммирования, например, посредством скрининга продукта гена, который может индуцировать перепрограммирование ядер указанных клеток. В соответствии с настоящим изобретением вышеупомянутый способ скрининга также представлен как новый способ скрининга ядерного фактора перепрограммирования.
- 7 014166
Продукты генов, содержащиеся в ядерном факторе перепрограммирования по настоящему изобретению, могут представлять собой, например, белок, собственно полученный с помощью вышеупомянутого гена, или, альтернативно, в форме продукта слитного гена для указанного белка с другим белком, пептидом или т.п. Например, можно использовать также слитый белок с зеленым флуоресцентным белком (СЕР) или продукт слитого гена с таким пептидом, как гистидиновая метка. Кроме того, посредством получения и использования слитого белка с пептидом ТАТ, полученным из вируса Ηΐν, можно способствовать внутриклеточному поглощению ядерного фактора перепрограммирования через мембраны клеток, таким образом обеспечивая возможность индукции перепрограммирования посредством только добавления слитого белка в среду, таким образом исключая сложные операции, такие как трансдукция гена. Поскольку способы получения продуктов таких слитых генов хорошо известны специалистам в данной области, специалисты в данной области легко могут сконструировать и получить продукт соответствующего слитого гена в зависимости от цели.
Посредством использования ядерного фактора перепрограммирования по настоящему изобретению, ядро соматической клетки можно перепрограммировать для получения индуцированной плюрипотентной стволовой клетки. В данном описании термин индуцированные плюрипотентные стволовые клетки обозначает клетки, обладающие свойствами, сходными со свойствами Εδ-клеток, и более конкретно термин относится к недифференцированным клеткам, обладающим плюрипотентностью и способностью к росту. Однако термин не следует истолковывать узко в каком-либо смысле и следует истолковывать его в самом широком смысле. Способ получения индуцированных плюрипотентных стволовых клеток с использованием ядерного фактора перепрограммирования описан в международной публикации XVО 2005/80598 (в публикации используют термин Εδ-подобные клетки), и конкретно описаны также способы для выделения индуцированных плюрипотентных стволовых клеток. Таким образом, с помощью ссылки на вышеупомянутую публикацию специалисты в данной области могут легко получить индуцированные плюрипотентные стволовые клетки с использованием ядерного фактора перепрограммирования по настоящему изобретению.
Способ получения индуцированных плюрипотентных стволовых клеток из соматических клеток с использованием ядерного фактора перепрограммирования по настоящему изобретению не является ограниченным конкретно. Можно применять любой способ до тех пор, пока ядерный фактор перепрограммирования может контактировать с соматическими клетками в условиях, при которых возможна пролиферация соматических клеток и индуцированных плюрипотентных стволовых клеток. Например, продукт гена, содержащийся в ядерном факторе перепрограммирования по настоящему изобретению, можно добавлять в среду. Альтернативно, с использованием вектора, содержащего ген, с которого можно экспрессировать ядерный фактор перепрограммирования по настоящему изобретению, можно применять способы трансдукции указанного гена в соматическую клетку. При использовании такого вектора два или более типов генов можно вводить в вектор, и продукты каждого из генов можно одновременно экспрессировать в соматической клетке. Когда один или несколько из продуктов генов, содержащихся в ядерном факторе перепрограммирования по настоящему изобретению, уже экспрессируются в соматической клетке, подлежащей перепрограммированию, продукты указанных генов можно исключить из ядерного фактора перепрограммирования по настоящему изобретению. Понятно, что такой вариант осуществления попадает в объем настоящего изобретения.
При получении индуцированных плюрипотентных стволовых клеток с использованием ядерного фактора перепрограммирования по настоящему изобретению типы соматических клеток, подлежащих перепрограммированию, не являются ограниченными конкретно и можно использовать любые виды соматических клеток. Например, можно использовать зрелые соматические клетки, а также соматические клетки эмбрионального периода. Когда индуцированные плюрипотентные стволовые клетки используют для терапевтического лечения заболеваний, желательно использовать соматические клетки, выделенные у пациентов. Например, можно использовать соматические клетки, вовлеченные в заболевания, соматические клетки, участвующие в терапевтическом лечении заболеваний, и т. п. Способ для отбора индуцированных плюрипотентных стволовых клеток, которые присутствуют в среде согласно способу по настоящему изобретению, не является ограниченным конкретно, и, соответственно, можно использовать хорошо известные способы, например ген устойчивости к лекарственному средству или т.п. можно использовать в качестве маркерного гена для выделения индуцированных плюрипотентных стволовых клеток с использованием устойчивости к лекарственному средству в качестве показателя. Различные среды, которые могут поддерживать недифференцированное состояние и плюрипотентность Εδ-клеток, и различные среды, которые не могут поддерживать такие свойства, известны в данной области, и индуцированные плюрипотентные стволовые клетки можно эффективно выделить с использованием сочетания подходящей среды. Специалисты в данной области легко могут подтвердить способность к дифференцировке и пролиферации выделенных индуцированных плюрипотентных стволовых клеток с использованием способов подтверждения, широко применяемых для Εδ-клеток.
Применения индуцированных плюрипотентных стволовых клеток, полученных способом по настоящему изобретению, не являются ограниченными конкретно. Клетки можно использовать для любых
- 8 014166 экспериментов и исследований, проводимых с Εδ-клетками, видов терапевтического лечения с использованием Εδ-клеток и т.п. Например, желаемые дифференцированные клетки (например, нервные клетки, клетки сердечной мышцы, гемоциты и т.п.) можно получить посредством обработки индуцированных плюрипотентных стволовых клеток, полученных способом по настоящему изобретению, ретиноевой кислотой, факторами роста, такими как ЕСЕ, глюкокортикоид или т.п., и терапию стволовыми клетками, основанную на аутотрансплантации клеток, можно выполнять посредством возвращения пациенту дифференцированных клеток, полученных, как описано выше. Однако применения индуцированных плюрипотентных стволовых клеток по настоящему изобретению не являются ограниченными вышеупомянутыми конкретными вариантами осуществления.
Примеры
Настоящее изобретение будет более конкретно объяснено на примерах. Однако объем настоящего изобретения не является ограниченным следующими примерами.
Пример 1. Отбор фактора перепрограммирования.
Чтобы идентифицировать факторы перепрограммирования, требуется экспериментальная система для простого наблюдения феномена перепрограммирования. В качестве экспериментальной системы использовали мышь с нокином вдео (слитого гена из гена β-галактозидазы и гена устойчивости к неомицину) в локусе ЕЬх15. Ген ЕЬх15 мыши представляет собой ген, специфически экспрессирующийся при дифференцировке плюрипотентных клеток, таких как Εδ-клетки, и в ранних эмбрионах. Однако у гомомутантной мыши с нокином вдео в гене ЕЬх15 мыши, таким, что удалена функция ЕЬх15, не наблюдали аномальных фенотипов, включая фенотипы, относящиеся к плюрипотентности при дифференцировке или развитии. У этой мыши контроль экспрессии вдео осуществляют посредством энхансера и промотора гена ЕЬх15. Конкретно, вдео не экспрессируется в дифференцированных соматических клетках, и они являются чувствительными к С418. В отличие от этого, гомомутантные Εδ-клетки с нокином вдео обладают устойчивостью к С418 в необычайно высокой концентрации (равной или превышающей 12 мг/мл). Посредством использования вышеуказанного феномена сконструировали экспериментальную систему для визуализации перепрограммирования соматических клеток.
В вышеупомянутой экспериментальной системе фибробласты (РЬх15вдео/вдео ΜΕΕ) сначала выделяли из эмбриона гомомутантной мыши с нокином вдео (13,5 суток после оплодотворения). Поскольку ΜΕΕ не экспрессируют ген ЕЬх15, клетки также не экспрессируют вдео и таким образом обладают чувствительностью к С418. В то же время, когда ΜΕΕ слиты с Εδ-клетками, не подвергавшимися манипуляции с генами (также обладающими чувствительностью к С418), ядра ΜΕΕ являются перепрограммированными, и в результате вдео экспрессируется и придает устойчивость к С418. Феномен перепрограммирования можно таким образом визуализировать как устойчивость к С418 посредством использования этой экспериментальной системы (международная публикация XVО 2005/80598). Поиски факторов перепрограммирования проводили с использованием вышеупомянутой экспериментальной системы (фиг. 1), и всего 24 типа генов выбрали в качестве кандидатов на роль факторов перепрограммирования, включая гены, для которых показали специфическую экспрессию в Εδ-клетках, и гены, для которых предполагают важную роль в поддержании плюрипотентности при дифференцировке Εδ-клеток. Эти гены показаны в табл. 4 и 5 ниже. В случае в-катенина (№ 21) и с-Мус (№ 22) использовали мутанты активного типа (катенин: 833Υ, с-Мус: Т58А).
- 9 014166
Таблица 4
Номер Наименова ние гена Описание гена
1 ЕСАТ1 Ассоциированный с ЕЗ-клетками транскрипт 1 (ЕСАТ1)
2 ЕС АТ 2 Ассоциированный с плюрипотентностью при развитии 5 (ОРРА5), специфический для ЕЗклетки ген 1 (ЕЗС1)
3 ЕСАТЗ Е-бокс-белок 15 (ЕЬх15),
4 ЕС АТ 4 Фактор транскрипции с гомеобоксом Иапод
5 ЕС АТ 5 Экспрессирующийся в ЕЗ-клетке Раз (ЕКаз),
6 ЕСАТ7 ДНК (цитозин-5-)-метилтрансфераза 3-подобный (ЦптС31), вариант 1
7 ЕСАТ8 Ассоциированный с ЕЗ-клетками транскрипт 8 (ЕСАТ8)
8 ЕСАТ9 Фактор роста и дифференцировки 3 (СД£3),
9 ЕСАТ10 Содержащий ЗВУ-бокс ген 15 (Зох15),
10 ЕСАТ15-1 Ассоциированный с плюрипотентностью при развитии 4 (Эрра4), вариант 1
11 ЕСАТ15-2 Ассоциированный с плюрипотентностью при развитии 2 (Орра2)
12 ЕЕН117 Подобный тяжелому полипептиду ферритина 17 (ЕСЫ17)
13 За114 за1-подобный 4 (ЭгозорНИа) (За114), вариант транскрипта а
14 ОсСЗ/4 домен РОи, класс 5, фактор транскрипции 1 (Рои5£1)
15 Зох2 Содержащий ЗРУ-бокс ген 2 (Зох2)
16 Кех1 Белок с цинковыми пальцами 42 (Ζ£ρ42)
17 0Е£1 Фактор транскрипции недифференцированной эмбриональной клетки 1 (иС£1)
18 Тс11 Контрольная точка Т-клеточной лимфомы 1 (Тс11)
19 81е11а Ассоциированный с плюрипотентностью при развитии 3 (БрраЗ)
20 К1С4 Кгирре1-подобный фактор 4 (кишечник) (К1Е4)
21 β-катенин Катенин (кадгерин-ассоциированный белок), бета 1, 88 кДа (СЕппЫ)
22 с-Мус Онкоген миелоцитоматоза (Мус)
23 ЗЕаСЗ Передатчик сигнала и активатор транскрипции 3 (ЗЕаСЗ), вариант транскрипта 1
24 СгЬ2 Связанный с рецептором фактора роста белок 2 (СгЬ2)
- 10 014166 __________Таблица 5
Регистрационный номер в ΝΟΒΙ
Но мер Наимено вание гена Характерное свойство Мышь Человек
1 2 3 4 ЕСАТ1 ЕСАТ2 ЕСАТЗ ЕСАТ4 Ген, специфически экспрессирующийся в ЕЗклетке Ген, специфически экспрессирующийся в ЕЗклетке Ген, специфически экспрессирующийся в Е5клетке Фактор транскрипции, обладающий гомеодоменом, необходимый фактор для поддержания плюрипотентности при дифференцировке АВ211060 ΝΜ_025274 ΝΜ_015798 АВ093574 АВ211062 ΝΜ 0010252 90 ΝΜ_152676 ΝΜ_024865
5 ЕСАТ5 Белок семейства Раз, фактор, стимулирующий рост ЕЗ-клетки ΝΜ_181548 ΝΜ_181532
- 11 014166
6 ЕСАТ7 Фактор, связанный с ферментом метилирования ДНК, необходимый для импринтинга ΝΜ_019448 ΝΜ_013369
7 ЕСАТ8 Ген, специфически экспрессирующийся в Е8клетке, обладающий доменом Тис1ог АВ211061 ΑΒ211063
8 ЕСАТ9 Ген, специфически экспрессирующийся в ЕЗклетке, принадлежащий семейству ΤΟΕβ ΝΜ_008108 ΝΜ_020634
9 ЕСАТ10 Ген, специфически экспрессирующийся в ЕЗклетке, фактор транскрипции семейства 3ΚΥ ΝΜ_009235 ΝΜ_006942
10 ЕСАТ15- 1 Ген, специфически экспрессирующийся в ЕЗклетке ΝΜ_028610 ΝΜ_018189
11 ЕСАТ15- 2 Ген, специфически экспрессирующийся в ЕЗклетке ΝΜ_028615 ΝΜ 138815
12 ГЕЫ17 Ген, специфически экспрессирующийся в ЕЗклетке, подобный тяжелой цепи ферритина ΝΜ_031261 ΝΜ_031894
13 За114 Ген, специфически экспрессирующийся в ЕЗклетке, белок с Ζη-пальцами ΝΜ_175303 ΝΜ_020436
14 ОсбЗ/4 Фактор транскрипции семейства РОи, необходимый для поддержания плюрипотентности ΝΜ_013633 ΝΜ_002701
15 Зох2 Фактор транскрипции семейства 3ΒΥ, необходимый для поддержания плюрипотентности ΝΜ_011443 ΝΜ_003106
16 Кех1 Ген, специфически экспрессирующийся в ЕЗклетке, белок с Ζη-пальцами ΝΜ_009556 ΝΜ_174900
17 ис£1 Фактор регуляции транскрипции с высоким уровнем экспрессии в ЕЗклетке, стимулирующий рост ЕЗ ΝΜ_009482 ΝΜ_003577
- 12 014166
18 Тс11 Активирующий онкоген АКТ, в большом количестве экспрессирующийся в ЕЗклетке ΝΜ_009337 ΝΜ_021966
19 ЗбеПа Ген, специфически экспрессирующийся в ЕЗклетке ΝΜ_139218 ΝΜ_199286
20 К1£4 В большом количестве экспрессирующийся в ЕЗклетке, опубликовано действие как в качестве антионкогена, так и в качестве онкогена ΝΜ_010637 ΝΜ_004235
21 β- катенин Фактор транскрипции, активирующийся по сигналу Ипб, опубликовано вовлечение в поддержание плюрипотентности ΝΜ_007614 ΝΜ_001904
22 с-Мус Фактор контроля транскрипции, опубликован как участвующий в пролиферации и дифференцировке клетки, и как онкоген, вовлеченный в поддержание плюрипотентности ΝΜ_010849 ΝΜ_002467
23 ЗбабЗ Фактор транскрипции, активирующийся по сигналу ЫЕ, считается необходимым для поддержания плюрипотентности ЕЗ-клеток мыши ΝΜ_213659 ΝΜ_139276
24 СгЬ2 Адапторный белок, являющийся промежуточным звеном между рецепторами факторов роста и каскадом Ваз/МАРК ΝΜ_008163 ΝΜ 002086
кДНК указанных генов вставляли в ретровирусный вектор рМ.Х-д\у способом СкПехуау. Сначала каждым из 24 генов инфицировали ГЬх15вдео/вдео МЕГ и затем проводили отбор с С418 в условиях культивирования Е8-клеток. Однако не получили устойчивых к С418 колоний. Затем ретровирусными векторами для всех 24 генов одновременно инфицировали Гох15вдео вдео МЕГ. Когда проводили отбор с С418 в условиях культивирования Е8-клеток. получили множество колоний. устойчивых к лекарственному средству. Эти колонии выделяли и продолжали культивирование. Обнаружили. что культивирование этих клеток можно проводить в течение длительного периода времени и что эти клетки обладают морфологией. сходной с морфологией Е8-клеток (фиг. 2). На чертеже 1Р8-клетки представляют собой индуцированные плюрипотентные стволовые клетки (называемые также подобные Е8-клетки. Е8-подобные клетки или ЕЗЬ-клетки). Е8 представляют собой эмбриональные стволовые клетки и МЕГ представляют собой дифференцированные клетки (эмбриональные фибробласты).
Когда профили экспрессии маркерных генов исследовали посредством НТ-РСН. обнаружили экспрессию таких маркеров дедифференцировки. как Хапод и ОсВ/4 (фиг. 3). Обнаружили. что экспрессия Хапод являлось близкой к экспрессии в Е8-клетках. в то время как экспрессия ОсВ/4 была ниже. чем в Е8-клетках. Когда исследовали статус метилирования ДНК способом бисульфитного секвенирования. обнаружили. что ген Хапод и ген ГЬх15 являются высокометилированными в МЕГ. в то время как они являются деметилированными в 1Р8-клетках (фиг. 4).
Приблизительно 50% гена 1СГ2. гена импринтинга. являлось метилированным как в клетках МЕГ. так и в 1Р8-клетках. Поскольку известно. что память импринтинга удалена и ген 1СГ2 почти полностью деметилирован в примордиальных зародышевых клетках через 13.5 суток после оплодотворения. из которых выделены ГЬх15вдео/вдео МЕГ. заключили. что 1Р8-клетки не происходят из примордиальных зародышевых клеток. оставшихся в виде примеси в ГЬх15вдео/вдео МЕГ. Вышеуказанные результаты показали. что перепрограммирование дифференцированных клеток (МЕГ) до состояния. близкого к состоянию Е8-клеток. можно индуцировать с помощью сочетания 24 типов факторов.
Затем проводили исследования того. все ли из 24 типов генов являются необходимыми для перепрограммирования. 23 генами. с удалением каждого отдельного гена. трансфицировали ГЬх15вдео/вдео МЕГ. В результате для 10 генов обнаружили ингибирование формирования колоний при удалении каж
- 13 014166 дого из них (фиг. 5, номера генов соответствуют номерам генов, показанных в табл. 4, и гены представляют собой следующие 10 типов генов: №№ 3, 4, 5, 11, 14, 15, 18, 20, 21 и 22). Когда этими десятью генами одновременно трансфицировали ЕЬх15вдео/вдео МЕЕ, устойчивые к 0418 колонии получали со значительно большей эффективностью по сравнению с одновременной трансфекцией 24 генами.
Кроме того, 9 генами, с удалением каждого отдельного гена из 10 генов, трансфицировали ЕЬх15вдео/вдео МЕЕ. В результате обнаружили, что колонии устойчивых к 0418 1Р8-клеток не формировались, когда удаляли каждый из 4 типов генов (№№ 14, 15, 20 или 22) (фиг. 6). Таким образом, предположили, что эти четыре типа генов среди десяти генов играют особенно важные роли в индукции перепрограммирования.
Пример 2. Индукция перепрограммирования с помощью сочетания 4 типов генов.
Исследовали, можно ли достичь индукции перепрограммирования соматических клеток с помощью четырех типов генов, для которых предполагали особенную важность среди 10 генов. С использованием сочетания вышеупомянутых 10 типов генов, сочетания вышеупомянутых 4 типов генов, сочетаний только 3 типов генов среди 4 типов генов и сочетаний только 2 типов генов среди 4 типов генов эти наборы генов трансдуцировали с помощью ретровирусов в МЕЕ-клетки, как в соматические клетки, в которых проведен нокин гена вдео в гене ЕЬх15. В результате при трансдукции 4 типов генов получили 160 устойчивых к 0418 колоний. Хотя этот результат является почти таким же, как результат, полученный посредством трансдукции с 10 типами генов (179 колоний), колонии, полученные посредством трансдукции 4 генов, были меньше, чем колонии после трансдукции 10 генами. При пассировании этих колоний число колоний, обладающих морфологией 1Р8-клеток, составляло 9 клонов среди 12 клонов в случае трансдукции 10 генами, в то время как присутствовала тенденция к некоторому понижению - 7 клонов среди 12 клонов в случае трансдукции 4 генами. В случае 4 генов почти такое же число 1Р8-клеток получили как для клеток, полученных у мыши, так и для клеток, полученных у человека.
При трансдукции 3 генов, выбранных из вышеупомянутых 4 генов, получили 36 плоских колоний с одним из сочетаний (№№ 14, 15 и 20). Однако при их пассировании 1Р8-клеток не наблюдали. С другим сочетанием (№№ 14, 20 и 22) получили 54 небольшие колонии. При пассировании 6 относительно крупных колоний из этих колоний клетки, подобные Е8-клеткам, получили для всех этих 6 клонов. Однако, по-видимому, адгезия этих клеток между собой и к культуральной чашке была слабее, чем адгезия Е8клеток. Скорость пролиферации клеток также являлась более медленной, чем скорость, наблюдаемая в случае трансдукции 4 генами. Кроме того, по одной колонии сформировалось с каждым из двух других видов сочетаний 3 генов из 4 генов. Однако пролиферации клеток не наблюдали при пассировании клеток. С любым из сочетаний 2 генов, выбранных из 4 генов (6 сочетаний), не сформировалось устойчивых к 0418 колоний. Вышеуказанные результаты показаны на фиг. 7.
Кроме того, результаты наблюдения профилей экспрессии маркерных генов Е8-клетки посредством ЯТ-РСЯ показаны на фиг. 10. Подробности способа следующие. Из 1Р8-клеток, полученных посредством трансдукции 3 генов (Ос!3/4, К1Г4 и с-Мус: представлены как 8ох2 минус), 4 генов (8ох2 добавляли к трем генам: представлены как 4ЕСАТ) и 10 генов (№№3, 4, 5, 11, 18 и 21 в табл. 4 добавляли к четырем генам: представлены как 10ЕСАТ) в ЕЬх15вдео/вдео МЕЕ, 1Р8-клеток, полученных посредством трансдукции 10 генов в фибробласты, полученные из кончика хвоста взрослой мыши, у которой проведен нокин вдео в гене ЕЬх15 (представлены как фибробласты кожи с 10ЕСАТ), Е8-клеток мыши и МЕЕ-клеток без трансдукции генов выделяли тотальную РНК и обрабатывали ДНКазой I для удаления загрязнения геномной ДНК. Первые цепи кДНК получали реакцией обратной транскрипции и профили экспрессии маркерных генов Е8-клетки исследовали посредством РСЯ. В случае Ос!3/4, Иапод и ЕЯак, РСЯ проводили с использованием праймеров, которые амплифицируют только продукт транскрипции эндогенного гена, не с трансдуцированного ретровируса. Последовательности праймеров показаны в табл. 6.
- 14 014166
Таблица 6
ЕСАТ1 ЕСАТ1-КТ-3 ТОТ ССС ОСС СТО ААА ССС САС СТС АСА Т
ЕСАТ1-КТ-АЗ АТС ССС ССС САТ АСС АСС АСС СТС ААС Т
Езд1 РН34-Б38 САА СТС ТСС ТТС СТТ ССС АСС АТС
рН34-Ь394 АСТ ССА ТАС АСТ ССС СТА СС
Ыапод 6047-31 САС СТС ТТТ САС ССТ АСС ТС
6047-А31 ССС ТТС АТС АТС СТА САС ТС
ЕКаз 45328-3118 АСТ ССС ССТ САТ САС АСТ ССТ АСТ
ЕКаз-А3304 САС ТСС СТТ СТА СТС ССС ТАС СТС
СсИЗ Οά£3-υ253 СТТ ССА АСС ТСТ ССС тсс ССТ СТТ
СБЕЗ Б16914 АСС САС ССА ТСС АСА САС ССС АСС АС
Ед£4 Ед£4-КТ-3 ССТ ССТ САС САТ СТТ ССС АСТ СС
Ед£4-КТ-АЗ ССТ ТСТ ТСС ТСС ССС ССТ ТСТ ТА
Сг1р£о СггрБо-З АТС САС ССА АСТ СТС ААС АТС АТС ТТС ССА
Сг1р£о-А3 СТТ ТСА ССТ ССТ ССТ ССА ТСА ССТ САС САТ
Ζίρ296 Ζ£ρ296-367 ССА ТТА ССС ССС АТС АТС ССТ ТТС
Ζίρ296-Α3350 САС ТСС ТСА СТС САС ССС ССТ ТСС
Бах1 Бах1-31096 ТСС ТСС ССТ ССА ССС САТ САА САС
Бах1-А31305 ССС САС ТСТ ТСА СТТ САС ССС АТС
ОсЬЗ/4 ОсЪЗ/4-59 ТСТ ТТС САС САС ССС ССС ССС ТС
ОС53/4-А3210 ТСС ССС ССС АСА ТСС ССА САТ СС
ΝΑΤ1 ΝΆΤ1 Б283 АТТ СТТ ССТ ТСТ САА ССС ССС ААА СТС САС
ΝΑΤ1 Ъ476 АСТ ТСТ ТТС СТС ССС АСТ ТСТ САТ СТС СТС
Результаты, показанные на данном чертеже, показывают, что посредством трансдукции 3 генов эффективно индуцирована экспрессия каждого из ЕКа§ и Рд£4, однако экспрессия каждого из Ос13/4 и Хапод, факторов, необходимых для поддержания плюрипотентности, не являлась индуцированной или являлась очень слабой даже при индукции. Однако при трансдукции 4 генов присутствовал один клон (№ 7), в котором Ос13/4 и Хапод являлись относительно сильно индуцированными среди изучаемых 4 клонов. Кроме того, при трансдукции 10 генов сильную индукцию каждого из Ос13/4 и Хапод наблюдали в 3 клонах среди исследуемых 5 клонов.
Эти результаты показывают, что сочетание по меньшей мере 3 генов (№№ 14, 20 и 22) является необходимым для перепрограммирования, и в случае группы из 4 генов и группы из 10 генов, включая 3 типа генов, эффективность перепрограммирования увеличивалась пропорционально увеличению числа генов.
Пример 3. Анализ плюрипотентности перепрограммированных клеток.
Чтобы оценить плюрипотентность при дифференцировке полученных 1Р8-клеток, 1Р8-клетки, полученные с помощью 24 факторов, 10 факторов и 4 факторов, подкожно трансплантировали мышам пийе. В результате опухоли, обладающие размером, сходным с опухолями, наблюдаемыми в случае Е8-клеток, сформировались у всех животных. Гистологически опухоли состояли из множества типов клеток и наблюдали хрящевые ткани, нервные ткани, мышечные ткани, жировые ткани и ткани, подобные тканям кишечника (фиг. 8), что подтверждает плюрипотентность 1Р8-клеток. В отличие от этого, хотя опухоли формировались, когда клетки, полученные с помощью 3 факторов, трансплантировали мышам пийе, гистологически они являлись сформированными только из недифференцированных клеток. Таким образом, обнаружили, что ген семейства 8ох является необходимым для индукции плюрипотентности при диффе
- 15 014166 ренцировке.
Пример 4. Перепрограммирование фибробластов, полученных из хвостов взрослых мышей.
фактора, идентифицированные в эмбриональных фибробластах мыши (МЕЕ), трансдуцировали в фибробласты, полученные из хвостов взрослых мышей с нокином вдео ЕЬх15, с системной экспрессией зеленого флуоресцентного белка (СЕР). Затем клетки культивировали на фидерных клетках в тех же самых условиях, что и условия культивирования Е8-клеток, и проводили отбор по С418. Через приблизительно две недели после начала отбора с лекарственным средством получили множество колоний ίΡδ-клеток. Когда эти клетки подкожно трансплантировали мышам пнбе. формировались тератомы, состоящие из множества тканей из всех трех зародышевых листков. Кроме того, когда ίΡδ-клетки, полученные из фибробластов кожи взрослых, трансплантировали в бластоцисты и затем трансплантировали в матки псевдобеременных мышей, получили эмбрионы, в которых СЕР-положительные клетки являлись системно распределенными через 13,5 суток после оплодотворения (фиг. 9), что показывает, что ίΡδ-клетки обладают плюрипотентностью и способны вносить вклад в эмбриогенез мыши. Эти результаты показывают, что идентифицированный класс факторов обладает способностью индуцировать перепрограммирование не только соматических клеток в эмбриональном периоде, но также соматических клеток зрелой мыши. На практике является чрезвычайно важным, что перепрограммирование можно индуцировать в клетках, полученных из кожи взрослых.
Пример 5.
Исследовали действие цитокинов на получение ίΡδ-клеток. Экспрессирующий вектор (ретровирусный вектор рМХ) для основного фактора роста фибробластов (ЬЕСЕ) или фактора стволовых клеток (8СЕ) трансдуцировали в фидерные клетки (клетки δΤΟ) для получения клеток, постоянно экспрессирующих цитокины. МЕЕ, полученные у мыши ЕЬх15вдео/вдео (500000 клеток/100-мм чашку) культивировали на этих клетках δΤΟ, трансдуцировали 4 факторами и затем подвергали отбору с С418. В результате число сформированных колоний увеличивалось в 20 раз или выше на клетках δΤΟ, продуцирующих ЬЕСЕ (фиг. 11) или 8СЕ (данные не представлены), по сравнению с культивированием на нормальных клетках δΤΟ. Кроме того, хотя при трансдукции 3 факторов, отличных от с-Мус, не сформировалось колоний ίΡδ-клеток на нормальных клетках 8ΤΘ, формирование колоний наблюдали на клетках 8ΤΘ, продуцирующих ЬЕСЕ (фиг. 11) или 8СЕ (данные не представлены). Эти результаты показывают, что стимуляция цитокином увеличивает эффективность получения ίΡδ-клеток из МЕЕ, и перепрограммирования ядер можно достигать с использованием цитокина вместо с-Мус.
Пример 6.
Существуют семейства всех генов Ое13/4, Κ1ί4, с-Мус и δοχ2 (табл. 1 и 2). Соответственно, проводили исследования, можно ли получить ίΡδ-клетки с генами из семейств вместо этих 4 генов. В табл. 7 показаны объединенные экспериментальные результаты для двух параллелей. По отношению к семейству δοχ для δοχ1 получили почти такое же число сформированных устойчивых к С418 колоний и эффективность получения ίΡδ-клеток, как и полученные с δοχ2. Что касается δοχ3, число сформировавшихся устойчивых к С418 колоний составляло приблизительно 1/10 от числа колоний с δοχ2, однако эффективность получения ίΡδ-клеток из отобранных колоний фактически была выше, чем эффективность с δοχ2. Что касается δοχ15, как число сформировавшихся устойчивых к С418 колоний, так и эффективность получения ίΡδ-клеток были ниже, чем с δοχ2. Что касается δοχ17, число сформировавшихся устойчивых к С418 колоний являлось почти таким же, как с δοχ2, однако эффективность получения ίΡδ-клеток являлась низкой. Что касается семейства Κ1ί, для Κ1Ε2 получили меньшее число устойчивых к С418 колоний, чем с Κ1ί4, однако для них получили почти такую же эффективность получения ίΡδ-клеток. Что касается семейства Мус, обнаружили, что с-Мус дикого типа являлся почти таким же, как мутант Т58А, как по числу сформировавшихся устойчивых к С418 колоний, так и по эффективности получения ίΡδ-клеток. Кроме того, каждый из Ν-Мус и Ь-Мус (каждый дикого типа) являлся почти таким же, как с-Мус, как по числу сформировавшихся устойчивых к С418 колоний, так и по эффективности получения ίΡδ-клеток.
- 16 014166
Таблица 7
Трансдуцированный ген Число сформировавшихся колоний Число отобранных колоний Число полученных штаммов 1Р8-клеток Эффективность получения ΪΡ8клеток (%)
4 фактора (сМусТ58А) 85 12 5 42
5ох1 84 12 7 58
ЗохЗ 8 8 7 92
Зох15 11 11 1 8
Зох17 78 12 2 17
К1Е2 11 10 5 50
с-МусВДТ 53 11 8 72
Ν-МусИТ 40 12 7 58
Ъ-МусИТ 50 12 11 92
3 фактора (-Зох2) 6 6 2 17
Пример 7.
Проводили исследования, можно ли получить ίΡδ-клетки с репортером, отличным от ЕЬх15-вдео. Выделяли искусственную бактериальную хромосому (ВАС) ЕзсйепсЫа сой, содержащую ген Хапод в середине, и затем проводили нокин гена ΟΓΡ и гена устойчивости к пуромицину Е. сой посредством рекомбинации (фиг. 12А). Затем вышеуказанную модифицированную ВАС вводили в Еδ-клетки, чтобы подтвердить, что клетки становятся СИ-Т-положительными специфическим для недифференцированного состояния образом (данные не представлены). Затем эти Еδ-клетки трансплантировали в бластоцисты мыши для получения трансгенных мышей через химерных мышей. У этих мышей наблюдали специфические СЕТ-положительным клетки во внутренних клеточных массах бластоцист или гонад эмбрионов через 13,5 суток после оплодотворения (фиг. 12В). Гонады удаляли из эмбрионов через 13,5 суток после оплодотворения (гибрид мышей ΌΒΆ, 129 и С57ВЙ/6) и выделяли МЕЕ. Подтверждали, что МЕЕ являются СЕΡ-отрицательными (фиг. 13) посредством проточной цитометрии. Эти МЕЕ трансдуцировали с помощью ретровирусов с 4 факторами и подвергали отбору с пуромицином и в результате получили большое число устойчивых колоний. Только приблизительно 10-20% колоний являлись СЕΡ-положительными. При пассировании СЕΡ-положительных колоний для них получали морфологию (фиг. 14) и пролиферацию (фиг. 15), такие же, как и для Еδ-клеток. Исследование характера экспрессии генов показало, что характер экспрессии был ближе к характеру экспрессии в Еδ-клетках по сравнению с ΐΡδ-клетками, выделенными из ЕЬх15вдео/вдео МЕЕ посредством отбора с С418 (фиг. 16). При трансплантации этих клеток мышам пийе индуцировали формирование тератомы, таким образом подтверждали, что клетки являются ΐΡδ-клетками (фиг. 17). Кроме того, получали рождение химерных мышей посредством трансплантации ίΡδ-клеток, полученных посредством отбора по Хапод^'И-Т, в бластоцисты мышей С57ВЙ/6 (фиг. 18). При скрещивании этих химерных мышей наблюдали перенос зародышевой линии (фиг. 19). В этих ίΡδ-клетках, полученных посредством отбора с Nаηοд-СЕΡ, более близких к Еδ-клеткам, экспрессия 4 факторов из ретровирусов являлась почти полностью молчащей, что позволяет предполагать, что самовоспроизведение поддерживают эндогенные Ос13/4 и δοx2.
Пример 8.
ΐΡδ-клетки из 10-см конфлюэнтного слоя обрабатывали трипсином и суспендировали в среде для Еδ-клеток (клетки δ ТО удаляли посредством адгезии на покрытых желатином чашках в течение 10-20 мин после суспендирования). 2х106 клеток культивировали в течение четырех суток в покрытых НЕМА (2-гидроксиэтилметакрилатом) культуральных чашках для Е. сой в суспензионной культуре для формирования эмбриоидных телец (ЕВ) (сутки 1-4). На 4-е сутки формирования ЕВ (сутки 4), все ЕВ переносили в 10-см культуральную чашку и культивировали в среде для Еδ-клеток в течение 24 ч, чтобы обеспечить адгезию. Через 24 ч (сутки 5) среду меняли на среду, содержащую ΙΤδ/фибронектин. Культивирование проводили в течение 7 суток (среду меняли каждые 2 суток) и отбирали положительные по нестину клетки (клетки из других семейств погибали до определенной степени в условиях культивирования в бессывороточной среде) (сутки 5-12). Затем индуцировали А2В5-положительные клетки. Через 7 суток (сутки 12) клетки разделяли посредством обработки трипсином и удаляли оставшиеся ЕВ. 1х105 клеток высевали на покрытый поли-й-орнитином/фибронектином 24-луночный планшет и культивировали в течение 4 суток в среде, содержащей Х2/ЬЕСЕ (среду меняли каждые 2 суток) (сутки 12-16). Через 4 суток (сутки 16) среду меняли на среду, содержащую Х2/ЬЕСЕ/ЕСЕ, и продолжали культивирование в течение 4 суток (среду меняли каждые 2 суток) (сутки 16-20). Через 4 суток (сутки 20) среду меняли на среду, содержащую N2/ЬЕСЕ/Ρ^СЕ и продолжали культивирование в течение 4 суток (среду
- 17 014166 меняли каждые 2 суток) (сутки 20-24). В течение этого периода (сутки 12-24), когда клетки избыточно размножались и достигали конфлюэнтности, их пассировали соответствующее число раз и высевали по 1-2 х105 клеток (число клеток менялось в зависимости от интервалов времени пассирования). Через 4 суток (сутки 24) среду меняли на среду Ν2/Τ3 и продолжали культивирование в течение 7 суток (сутки 24-31) с заменой среды каждые 2 суток. На сутки 31 клетки фиксировали и подвергали иммуноокрашиванию. В результате наблюдали дифференцировку ίΡδ-клеток в положительные по βΙΙΙ-тубулину нервные клетки, 04-положительные олигодендроциты и ΟΡΆΡ-положительные астроциты (фиг. 20).
Пример 9.
Для получения ίΡδ-клеток из произвольно выбранных соматических клеток мыши, отличных от клеток, полученных у мыши с нокином РЬх15-вдео, разработали способ получения без использования отбора с лекарственным средством. Эмбриональные фибробласты мыши (МЕР) культивировали в 10-см чашке (на фидерных клетках δΤ0) в меньших количествах, чем используемые выше (10000, 50000 или 100000 клеток), и контрольную ДНК или 4 фактора трансдуцировали с помощью ретровирусов. Когда культивирование проводили в течение 2 недель в среде для Е8-клеток (без отбора с 0418), не наблюдали формирования колоний на чашке с трансдукцией контрольной ДНК, в то время как на чашке с трансдукцией 4 факторов сформировалось множество компактных колоний, а также плоских колоний, которые считали трансформированными (фиг. 21). Когда из этих колоний отбирали 24 колонии и продолжали культивирование, наблюдали морфологию, подобную морфологии Е8-клеток. Профили экспрессии их генов исследовали посредством КГ-РСК, и в результате экспрессию Е§д1, маркера Е8-клеток, наблюдали в 7 клонах. Индукцию многих маркеров Е8-клеток, таких как Ναηο§. ЕКак, ΟΌΡ3, 0с13/4 и 8ох2, наблюдали в клоне 4, и таким образом считали, что клетки являются ίΡδ-клетками (фиг. 22). Вышеуказанные результаты показали, что отбор с лекарственным средством с использованием нокина РЬх 15-вдео или т.п. не является обязательным для получения ίΡδ-клетки, и ίΡδ-клетки можно получать из соматических клеток, полученных из выбранной случайным образом мыши. Это также позволяет предполагать возможность того, что посредством вышеупомянутого способа ίΡδ-клетки можно получать из соматических клеток мыши, являющейся модельной для заболевания.
Пример 10.
В качестве клеток, из которых индуцировали ίΡδ-клетки, исследовали гепатоциты и клетки слизистой оболочки желудка, являющиеся клетками, отличными от фибробластов. Гепатоциты выделяли из печени мышей РЬх15|1део/1део посредством перфузии. В эти гепатоциты с помощью ретровирусов вводили 4 фактора и затем подвергали их отбору с 0418 для получения множества колоний ίΡδ-клеток. В качестве результата анализа характера экспрессии генов с использованием микрочипов ДНК, обнаружили, что ίΡδ-клетки, полученные из печени, являются более сходными с Εδ-клетками, чем ίΡδ-клетки, полученные из фибробластов кожи или эмбриональных фибробластов. ίΡδ-клетки получили также из клеток слизистой оболочки желудка таким же способом, как из гепатоцитов.
Пример 11.
ΡΌ98059 представляет собой ингибитор МАР-киназы, супрессирующий пролиферацию различных дифференцированных клеток. Однако известно, что он стимулирует поддержание недифференцированного статуса и пролиферации Εδ-клеток. Таким образом, изучали действия ΡΌ98059 на получение ίΡδ-клеток. В МЕР, полученные у мыши, обладающей селективными маркерами Nаηοд-Ε6ΡΡ-IКΕδ-Ρи^ο, с помощью ретровирусов вводили 4 фактора и подвергали отбору с пуромицином. Без добавления ΡΌ98059 процент ΟΡΡ-положительных колоний составлял 8% из полученных колоний ίΡδ-клеток. Однако в группе, в которой ΡΌ98059 (конечная концентрация: 25 мкМ) постоянно добавляли со следующих суток после ретровирусной трансфекции, 45% из полученных колоний являлись ΟΡΡ-положительными. Результаты интерпретировали как обусловленные тем, что ΡΌ98059 стимулирует пролиферацию ΟΡΡ-положительных ίΡδ-клеток, которые являются более близкими к Εδ-клеткам, в то время как ΡΌ98059 супрессирует пролиферацию ΟΡΡ-отрицательных ίΡδ-клеток или дифференцированных клеток. По этим результатам показали, что ΡΌ98059 можно использовать для получения ίΡδ-клеток, более близких к Εδ-клеткам, или получения ίΡδ-клеток без использования отбора с лекарственным средством.
Пример 12.
Плазмиду, содержащую ген красного флуоресцентного белка ниже промотора гена 0с1:3/4 мыши и ген устойчивости к гигромицину ниже промотора ΡΟΚ, вводили посредством нуклеофекции в эмбриональные фибробласты кожи человека (ΗΌΡ), в которых посредством лентивирусной трансдукции экспрессировали растворимый носитель семейства 7 (81с7а1, регистрационный номер в NСΒI ΝΜ_007513) в качестве рецептора экотропного вируса мыши. Проводили отбор с гигромицином для получения штаммов со стабильной экспрессией. 800000 клеток высевали на клетках δΤ0, обработанных митомицином, и на следующие сутки 0с13/4, δοx2, Κ1Γ4 и с-Мус (каждый получен у человека) с помощью ретровирусов трансдуцировали в клетки. Отбирали 24 колонии из полученных через 3 недели (фиг. 23, слева), переносили в 24-луночный планшет, на котором рассеяны клетки δΤ0, и затем культивировали. Через 2 недели один из выращиваемых клонов высевали в 6-луночном планшете, на котором высеяны клетки δΤ0, и культивировали. В результате получили клетки, морфологически сходные с Εδ-клетками (фиг. 23, спра
- 18 014166 ва), что позволяет предполагать, что клетки представляли собой ίΡδ-клетки. В качестве среды в каждом случае использовали среду для Е8-клеток мыши.
Пример 13.
Фибробласты кожи взрослого человека (взрослые ΗΌΕ) трансдуцировали §1с7а1 (рецептор для ретровирусов мыши) с использованием лентивируса и полученные клетки высевали на 800000 фидерных клеток (обработанные митомицином клетки §ТО). Гены трансдуцировали с помощью ретровирусов в виде следующих сочетаний.
1. Ос(3/4. 8ох2, К1Г4, с-Мус, ТЕКТ и большой Т антиген 8У40.
2. Ос13/4, 8ох2, К1Г4, с-Мус, ТЕКТ, НРУ16 Е6.
3. Ос13/4, 8ох2, К1Г4, с-Мус, ТЕКТ, НРУ16 Е7.
4. Ос13/4, 8ох2, К1Г4, с-Мус, ТЕКТ, НРУ16 Е6, НРУ16 Е7.
5. Ос13/4, 8ох2, К1Г4, с-Мус, ТЕКТ, ВтЛ.
(Ос13/4, 8ох2, К1Г4, с-Мус и ТЕКТ получены у человека, а ВтЛ получен у мыши)
Культивирование продолжали в условиях культивирования для Е8-клеток мыши без отбора с лекарственным средством. В результате колонии, которые сочли колониями ίΡδ-клеток, появились на 8-е сутки после вирусной трансфекции на чашке, на которую факторы вводили согласно сочетанию 1 (фиг. 24). Колонии ίΡδ-подобных-клеток появлялись также с другими сочетаниями (2-5), хотя они являлись не такими заметными по сравнению с сочетанием 1. При трансдукции только 4 факторами не появлялось колоний.
Промышленная применимость
С использованием ядерного фактора перепрограммирования, предоставленного по настоящему изобретению, можно удобно с высокой воспроизводимостью индуцировать перепрограммирование ядер дифференцированных клеток без использования эмбрионов или Е8-клеток и можно получать индуцированные плюрипотентные стволовые клетки в виде недифференцированных клеток, обладающих способностью к дифференцировке, плюрипотентностью и способностью к росту, сходными с Е8-клетками.
- 19 014166
Список последовательностей <110>
КуоЕо υηίνθΓδίϋγ <120>
ЯДЕРНЫЙ ФАКТОР ПЕРЕПРОГРАММИРОВАНИЯ <130>
А61682М <160>
<210>
<211>
<212>
<213>
ЕдЕддддссс Едаааддсда <400>
дсйдадаЬ <210>
<211>
<212>
<213>
ДНК искусственная аЕдддссдсс аЬасдасдас <400>
дсЕсаасЕ <210>
<211>
<212>
<213>
ДНК искусственная <400>
даадЕсЬддЬ ЕссЕЕддсад дайд <210>
<211>
<212>
<213>
ДНК искусственная асЬсдаЕаса сЕддссЕадс <400>
<210>
<211>
<212>
<213>
ДНК искусственная саддЕдЫЕд адддЕадсЕс <4 00>
<210> 6
<211> 20
<212> ДНК
<213> искусственная
<4 00> 6
сддЕЬсаЬса ЬддбасадЬс 20 <210>7 <211>24 <212> ДНК <213> искусственная <400>7 асЕдссссбс абсадасЬдс ЪасЬ 24 <210> 8 <211>24 <212> ДНК <213> искусственная <400>8 сасЕдссЕЕд ЬасЬсдддЬа дсЬд 24 <210>9 <211>24 <212> ДНК <213> искусственная <400>9 дЕЕссаассЕ дЪдссЕсдсд ЕсЕЕ 24 <210> 10 <211> 26 <212> ДНК <213> искусственная <400>10 адсдаддсай ддадададсд дадсад 26 <210> 11 <211>23 <212> ДНК <213> искусственная <400>11 сдЬддЬдадс аЬсЕЬсддад Ьдд 23 <210> 12 <211>23 <212> ДНК <213> искусственная <400>12 ссЫ/сЪЕддЕ ссдсссдЬБс ЬЬа 23 <210>13 <211>30 <212> ДНК <213> искусственная
- 21 014166
00>
сЬдГдаасаС
10>
12>
<213>
ДНК искусственная
00>
сГддксса'Сс асдкдассаГ
<21
ДНК искусственная
00>
ссаГсаГсдс
Шс
10>
ДНК искусственная
00>
сасСдсСсас Ьддадддддс
<210>
<211>
00>
ДНК искусственная
саддссакса
13>
ДНК искусственная
10>
11>
13>
ДНК искусственная
00>
ГсГккссасс
<210> 20 <211> 23
- 22 014166 <212>
<213>
ДНК искусственная <400>
Едсдддсдда саЕддддада
Есс <210>
<211>
<212>
<213>
ДНК искусственная <400> аЕЕсЕЕсдЕЕ дЕсаадссдс сааадЕддад <210>
<211>
<212>
<213>
ДНК искусственная <400> адЕЕдЕЕЕдс ЕдсддадЕЕд
ЕсаЕсЕсдЕс <210>
<211>
<212>
<213>
2127
ДНК вирус 5У4 0 ЬТ (ЗУ4 0 дрб) <400> аЕддаЕааад аддадЕдссЕ ЕЕЕсаЕссЕд ааааЕддаад асЕдадаЕЕс даааассЕдЕ саасаЕЕсЕа дааЕЕдсЕаа аЕЕЕасасса дЕаассЕЕЕа сасаддсаЕа ЕЕааЕЕЕдЕа ЕЕЕЕсЕдЕЕа даадсададд аааЕдЕдаЕд аЕдЕдЕЕЕаа ЕаЕдсаааЕд дЕЕдаЕасЕд ЕЕаасаааса ЕсЕдсЕдаса аЕддаЕЕсад ЕасЕддсЕдЕ дааЕЕаЕдЕд сЕаддадЕад дадЕссадад ЕЕддаЕддса ЕЕЕсссссЕд ЕЕЕдЕаааас дадЕЕЕЕЕдЕ ЕддЕасадас
ЕЕЕЕааасад дддддааЕаЕ аЕаааддадд аЕддадЕааа саассЕаЕдд ЕЕЕдсЕсада сЕссЕссааа дЕЕЕЕЕЕдад саааддаааа ЕаадЕаддса дадЕдЕсЕдс ааддддЕЕаа ЕааддааЕаЕ ЕЕдаддааад ааасЕаааса аЕдЕдЕЕдЕЕ ааЕдЕаЕЕаа сЕдсЕаЕаЕЕ ЕЕЕЕадсЕаа даЕЕЕааЕда ЕадаадааЕд ЕддЕдЕаЕда ЕЕаааддасс дддддааадс сЕаЕЕдасса аЕЕЕдссЕЕс дЕдЕЕааддЕ дааЕадЕсас аааЕадаЕЕЕ Еадаааадад сЕдЕддсЕда ададдааЕсЕ ЕссЕсЕдаЕд адаЕдаадаа аЕаЕдсЕсаЕ аасЕдаЕдаа адаааЕдсса ааадаадада ЕсаЕдсЕдЕд адсЕдсасЕд ЕаасадЕЕаЕ ЕаЕЕааЕаас
ЕЕЕдссаддЕ адЕдЕссЕдд аЕЕдсЕЕддд аааадаасад ЕдсЕдасадс ааадсдддЕЕ ЕсЕЕЕЕддаЕ даЕддсЕдда сЕЕЕЕЕаааа ааЕЕдаЕадЕ ЕЕЕаааЕдЕЕ дЕЕЕЕЕадЕа аддЕсаддда ааасЕЕадаа саЕдааЕдад Еаддсссааа ааЕааЕЕсаа дЕЕЕдсЕсаа
ЕЕдсадсЕаа адаааддсаЕ ааааЕдаада саассЕдасЕ ЕдддадсадЕ ЕсЕадЕдаЕд ааддЕадаад ЕЕЕадЕааЕа сЕаЕасаада ааЕсаЕааса ЕаЕдсЕсааа ЕЕдаЕдЕаЕа дддЕЕааадд аадсЕЕдЕаа аЕдЕасЕЕдд сссадссасЕ ааааассааа даЕадссЕас аддаЕддаЕа дЕЕдсЕЕддс ЕдсаЕддЕдЕ ддЕаааасЕа ааЕЕЕдсссЕ дЕЕЕЕЕдадд аЕЕааЕаасс аадааасасс ЕасадЕдЕдс даЕЕаЕЕЕаа адЕддсаЕЕд адЕаЕЕсада
ЕддассЕЕсЕ аЕЕЕаааааа аааЕдааЕас ЕЕддаддсЕЕ ддЕддааЕдс аЕдаддсЕас ассссаадда даасЕсЕЕдс аааЕЕаЕдда ЕасЕдЕЕЕЕЕ ааЕЕдЕдЕас дЕдссЕЕдас адсаЕдаЕЕЕ сададЕаЕдс ааЕЕЕсадЕа аЕаадЕасса ааассаЕаЕд ааЕЕаасЕад ЕааЕдЕЕЕдд ЕасасЕдЕЕЕ асаасаЕЕсс саЕЕадсадс ЕддасаддсЕ аЕдЕаааддд ЕддасааЕЕЕ ЕаааЕаааад сЕаааасасЕ адсаЕЕдссЕ сЕЕЕдсЕЕсЕ дсадааЕЕдЕ аддЕсЕЕдаа аЕдсааддад ЕсЕдЕасаад сЕдддаЕдса сЕЕЕааЕдад ЕдсЕдасЕсЕ сЕЕЕссЕЕса ЕЕдсЕЕЕдсЕ ааааЕаЕЕсЕ ЕсЕЕасЕсса сЕЕЕадсЕЕЕ ЕададаЕсса ЕааЕссадаа ааЕддаааса садЕЕЕЕдаа ЕдаааадсаЕ ссаасаддсЕ адаасаааЕд ЕЕсЕасаддс дЕЕдсссааа
Еааааааада 1260
ЕдсЕЕЕдсЕЕ даасЕЕЕдад сасЕддаддд аадддаЕЕаЕ аасЕсаааЕа дсаддссада ддаасдсадЕ ЕаЕдЕЕааЕЕ ддадЕддааа
120
180
240
300
360
420
480
540
600
660
720
780
840
900
960 1020 1080 1140 1200
1320
1380
1440
1500
1560
1620
1680
1740
1800
- 23 014166 дададаЪЕдд абдддааЪЕд даааабдсЕд асаддсаЕЕд саЕдаЕсаЬа асассксссс асааададЪЕ дадЕтада аЕаааааЪда аЪЕсасадЬс абсадссаба скдаассЬда
ЕадЕЕЕдЕса ЕЕддсЕаада адабддбддд ссааддсбса ссасабЬЕдЕ аасабаа дкдЬаЬсааа аасадЪдаЕд дадаадааса ЕЕЕсаддссс ададдЬЪЫза ааабдаадЕЕ аЬдаЕдаЕда Еддаадаскс сЕсадбссЪс сЪЬдсЬСЕаа
ЕааЬдбддсЕ адасадссад адддсабдаа асадСсЬдЕЬ аааассЕссс
1860
1920
1980
2040
2100
2127 <210>
<211>
<212>
<213>
456
ДНК вирус Η₽νΐ6 Еб <400> аЕдСЕЕсадд асаасСаРас даддЬаЕакд дсЕдЕаЕдЬд ЕабадЕЕЕдЕ аЕЕаддЕдЬа ааааадсааа адаСсабсаа асссасадда абда-бабаа!: асЫгЬдсЪЬЬ аЬаааЬдЬЬЬ абддаасаас СЬаасЕдЕса даЬЕссаЪаа даасасдбад дсдасссада аЕЬадаакд'Ь СсдддаСЬСа ааадЪЕЬЕаС аЬЬадаасад ааадссаскд СаЕааддддЕ адааасссад аадЕЕассас дбдЬасЬдса ЕдсаЬадЬаЪ ЕсЕааааЬЕа сааЕасааса ЬдЕссЕдаад сддбддассд сЬдбаа адЬкакдсас адсаасадЬЕ аЪададабдд дбдадЬаЪад аассдЕЬдЬд аааадсааад дЕсдаЬдЕа'Ь ададскдсаа асЕдсдасдЪ дааЕссабаЬ асаЕЕаЕЕдЬ ЬдаЫгЬд’ЬЪа асаксЕддас дСссЬдССдс
120
180
240
300
360
420
456 <210>
<211>
<212>
<213>
297
ДНК вирус Η₽ν16 Е7 <400> аЪдсакддад даксЕсЕасЕ ссадсбддас ЕдЕдасРсЕа дассЕдкЬаа акасассЕас дЬЕакдадса аадсадаасс сдсЕЕсддЫ: ЕдддсасасЕ аЕЕдсаЬдаа аЕЕаааЬдас ддасададсс дЬдсдбасаа аддааЬЬдЬд
ЬаЬаЕдЫгад адсЬсададд саЕЕасааЬа адсасасасд ЕдссссаЕсЕ аЪЫдсаасс аддаддабда ЕЕдкаассЕЕ ЕадасаЕЕсд дЬЕсЕсадаа ададасаасЕ аабадаЬддЕ ЫгдЕЕдсаад ЕасЕЕЬддаа ассаЬаа
120
180
240
297

Claims (16)

  1. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
    1. Ядерный фактор перепрограммирования для соматической клетки, содержащий продукт каждого из следующих трех типов генов: гена семейства Ос!, гена семейства К1£ и гена семейства Мус.
  2. 2. Фактор по п.1, содержащий продукт каждого из трех следующих типов генов: Ос!3/4, К1£4 и сМус.
  3. 3. Фактор по п.1 или 2, дополнительно содержащий продукт следующего гена: гена семейства 8ох.
  4. 4. Фактор по п.3, содержащий продукт гена 8ох2.
  5. 5. Фактор по любому из пп.1-4, содержащий цитокин вместе с продуктом гена семейства Мус или вместо продукта гена семейства Мус.
  6. 6. Фактор по п.5, где цитокин представляет собой ЬЕ0Е и/или 8СЕ.
  7. 7. Фактор по любому из пп.1-6, дополнительно содержащий продукт следующего гена: гена ТЕЯТ.
  8. 8. Фактор по любому из пп.1-7, дополнительно содержащий продукт одного гена или продукты нескольких типов генов, выбранных из группы, состоящей из следующих генов: гена большого Т-антигена 8У40, гена НРУ16 Е6, гена НРУ16 Е7 и гена Βηΐ1.
  9. 9. Фактор по любому из пп.1-8, дополнительно содержащий продукт одного гена или продукты нескольких типов генов, выбранных из группы, состоящей из генов ЕЬх15, Хапод, ЕЯаз, ЕСАТ15-2, Те11 и β-катенина.
  10. 10. Фактор по любому из пп.1-9, дополнительно содержащий продукт одного гена или продукты нескольких типов генов, выбранных из группы, состоящей из генов ЕСАТ1, Езд1, Ι)ηιηΐ3Ι,, ЕСАТ8, 0άί3, 8ох15, ЕСАТ15-1, ЕШ117, 8а114, Яех1, ЦТЕ1, 8!е11а, 8!а!3 и 0гЬ2.
  11. 11. Способ получения индуцированной плюрипотентной стволовой клетки посредством перепрограммирования ядра соматической клетки, включающий в себя стадию приведения в контакт ядерного фактора перепрограммирования по любому из пп.1-10 с соматической клеткой.
  12. 12. Способ по п.11, где соматическая клетка является клеткой человека.
  13. 13. Индуцированная плюрипотентная стволовая клетка, полученная способом по п.11 или 12.
  14. 14. Соматическая клетка, полученная посредством индукции дифференцировки индуцированной плюрипотентной стволовой клетки по п.13.
  15. 15. Способ улучшения способности к дифференцировке и/или способности роста клетки, который включает в себя стадию приведения в контакт ядерного фактора перепрограммирования по любому из пп.1-10 с клеткой.
  16. 16. Способ по п.15, где клетка является клеткой человека.
EA200870046A 2005-12-13 2006-12-06 Ядерный фактор перепрограммирования EA014166B1 (ru)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP2005359537 2005-12-13
PCT/JP2006/324881 WO2007069666A1 (ja) 2005-12-13 2006-12-06 核初期化因子

Publications (2)

Publication Number Publication Date
EA200870046A1 EA200870046A1 (ru) 2009-12-30
EA014166B1 true EA014166B1 (ru) 2010-10-29

Family

ID=38162968

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA200870046A EA014166B1 (ru) 2005-12-13 2006-12-06 Ядерный фактор перепрограммирования
EA201000858A EA018039B1 (ru) 2005-12-13 2006-12-06 Ядерный фактор перепрограммирования

Family Applications After (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA201000858A EA018039B1 (ru) 2005-12-13 2006-12-06 Ядерный фактор перепрограммирования

Country Status (18)

Country Link
US (1) US8048999B2 (ru)
EP (6) EP3418297B1 (ru)
JP (8) JP5098028B2 (ru)
KR (1) KR101420740B1 (ru)
CN (4) CN101356270B (ru)
AU (1) AU2006325975B2 (ru)
BR (1) BRPI0619794B8 (ru)
CA (1) CA2632142C (ru)
DK (1) DK1970446T3 (ru)
EA (2) EA014166B1 (ru)
ES (1) ES2367525T3 (ru)
HK (2) HK1125131A1 (ru)
IL (1) IL191903A (ru)
MX (2) MX2008007654A (ru)
NZ (1) NZ569530A (ru)
PT (1) PT1970446E (ru)
WO (1) WO2007069666A1 (ru)
ZA (1) ZA200804673B (ru)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2624139C2 (ru) * 2011-12-05 2017-06-30 Фэктор Байосайенс Инк. Способы и препараты для трансфекции клеток
RU2730034C2 (ru) * 2015-04-14 2020-08-14 Киото Юниверсити Способ получения клона стволовых клеток, пригодного для индуцирования дифференцировки в соматические клетки

Families Citing this family (580)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
ITRM20030376A1 (it) 2003-07-31 2005-02-01 Univ Roma Procedimento per l'isolamento e l'espansione di cellule staminali cardiache da biopsia.
US7682828B2 (en) 2003-11-26 2010-03-23 Whitehead Institute For Biomedical Research Methods for reprogramming somatic cells
EP1740945B1 (en) 2004-04-07 2018-09-19 Ncardia AG Non-invasive, in vitro functional tissue assay systems
US8318488B1 (en) 2004-05-11 2012-11-27 Axiogenesis Ag Assay for drug discovery based on in vitro differentiated cells
US11660317B2 (en) 2004-11-08 2023-05-30 The Johns Hopkins University Compositions comprising cardiosphere-derived cells for use in cell therapy
CA2659945C (en) * 2005-08-03 2014-12-16 Advanced Cell Technology, Inc. Improved methods of reprogramming animal somatic cells
US9012219B2 (en) * 2005-08-23 2015-04-21 The Trustees Of The University Of Pennsylvania RNA preparations comprising purified modified RNA for reprogramming cells
US8129187B2 (en) * 2005-12-13 2012-03-06 Kyoto University Somatic cell reprogramming by retroviral vectors encoding Oct3/4. Klf4, c-Myc and Sox2
US10647960B2 (en) * 2005-12-13 2020-05-12 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Transcriptome transfer produces cellular phenotype conversion
US9157066B2 (en) 2005-12-13 2015-10-13 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Transcriptome transfer produces cellular phenotype conversion
US8278104B2 (en) * 2005-12-13 2012-10-02 Kyoto University Induced pluripotent stem cells produced with Oct3/4, Klf4 and Sox2
DK1963514T3 (da) 2005-12-13 2013-11-04 Univ Pennsylvania Fremgangsmåder til fototransferering af nukleinsyre til levende celler
EP3418297B1 (en) 2005-12-13 2023-04-05 Kyoto University Nuclear reprogramming factor
US20090227032A1 (en) * 2005-12-13 2009-09-10 Kyoto University Nuclear reprogramming factor and induced pluripotent stem cells
JP5507086B2 (ja) 2006-03-06 2014-05-28 エージェンシー フォー サイエンス，テクノロジー アンド リサーチ ヒト胚性幹細胞の方法及びｐｏｄｘｌの発現
JPWO2008102602A1 (ja) * 2007-02-22 2010-05-27 国立大学法人 東京大学 Ｂｌａｓｔｏｃｙｓｔｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔａｔｉｏｎを利用した臓器再生法
CA2684242C (en) * 2007-03-23 2019-11-12 Wisconsin Alumni Research Foundation Somatic cell reprogramming
EP2145000A4 (en) * 2007-04-07 2010-05-05 Whitehead Biomedical Inst REPROGRAMMING SOMATIC CELLS
AU2016216711B2 (en) * 2007-04-07 2018-01-25 Whitehead Institute For Biomedical Research Reprogramming of somatic cells
JP2010528613A (ja) * 2007-05-29 2010-08-26 クリストファー ビー． リード， 多能細胞集団を産生する方法およびその使用
JP2008307007A (ja) * 2007-06-15 2008-12-25 Bayer Schering Pharma Ag 出生後のヒト組織由来未分化幹細胞から誘導したヒト多能性幹細胞
US9213999B2 (en) 2007-06-15 2015-12-15 Kyoto University Providing iPSCs to a customer
US9080145B2 (en) 2007-07-01 2015-07-14 Lifescan Corporation Single pluripotent stem cell culture
KR101617243B1 (ko) 2007-07-31 2016-05-02 라이프스캔, 인코포레이티드 인간 배아 줄기 세포의 분화
US20120282229A1 (en) * 2007-08-01 2012-11-08 Christian Kannemeier Non-viral delivery of transcription factors that reprogram human somatic cells into a stem cell-like state
ES2589122T3 (es) 2007-08-31 2016-11-10 Whitehead Institute For Biomedical Research Estimulación de la ruta de la Wnt en la reprogramación de células somáticas
CA2660123C (en) * 2007-10-31 2017-05-09 Kyoto University Nuclear reprogramming method
EP2229434B1 (en) 2007-11-27 2011-09-07 Lifescan, Inc. Differentiation of human embryonic stem cells
WO2009073523A2 (en) * 2007-11-29 2009-06-11 Children's Hospital Of Orange County De-differentiation of human cells
AU2008286249B2 (en) * 2007-12-10 2013-10-10 Kyoto University Efficient method for nuclear reprogramming
US9683232B2 (en) * 2007-12-10 2017-06-20 Kyoto University Efficient method for nuclear reprogramming
JP5626619B2 (ja) * 2008-12-08 2014-11-19 国立大学法人京都大学 効率的な核初期化方法
EP2235161A1 (en) 2007-12-11 2010-10-06 Research Development Foundation Small molecules for neuronal differentiation of embryonic stem cells
EP2072618A1 (en) * 2007-12-14 2009-06-24 Johannes Gutenberg-Universität Mainz Use of RNA for reprogramming somatic cells
KR101481164B1 (ko) 2008-01-30 2015-01-09 주식회사 미래셀바이오 체세포 유래 다능성 줄기세포의 제조 방법
WO2009096049A1 (ja) * 2008-02-01 2009-08-06 Kyoto University 人工多能性幹細胞由来分化細胞
CN102046779A (zh) 2008-02-21 2011-05-04 森托科尔奥索生物科技公司 用于细胞粘附、培养和分离的方法、表面改性培养板和组合物
US20110067125A1 (en) * 2008-02-22 2011-03-17 The University Of Tokyo Method for producing founder animal for reproducing animal having lethal phenotype caused by gene modification
JP2009215191A (ja) 2008-03-07 2009-09-24 Keio Gijuku 神経損傷治療剤及び神経損傷治療方法
EP2100954A1 (en) * 2008-03-10 2009-09-16 Assistance Publique - Hopitaux de Paris Method for generating primate cardiac progenitor cells for clinical use from primate embryonic stem cells, and their applications
KR101679082B1 (ko) 2008-03-17 2016-11-23 더 스크립스 리서치 인스티튜트 유도 만능 줄기 세포 생성을 위한 화학적 및 유전적 조합 접근법
AU2015201026B2 (en) * 2008-03-17 2017-03-16 The Scripps Research Institute Combined chemical and genetic approaches for generation of induced pluripotent stem cells
WO2009114949A1 (en) * 2008-03-20 2009-09-24 UNIVERSITé LAVAL Methods for deprogramming somatic cells and uses thereof
US8765465B2 (en) 2008-03-26 2014-07-01 Kyoto University Efficient production and use of highly cardiogenic progenitors and cardiomyocytes from embryonic and induced pluripotent stem cells
WO2009119105A1 (ja) * 2008-03-28 2009-10-01 国立大学法人東京大学 ＧＰＩｂα＋ＧＰＶ＋ＧＰＶＩ＋血小板のインビトロ調製法
JP5464443B2 (ja) * 2008-03-31 2014-04-09 オリエンタル酵母工業株式会社 多能性幹細胞を増殖させる方法
WO2009122747A1 (ja) * 2008-04-01 2009-10-08 国立大学法人東京大学 ｉＰＳ細胞からの血小板の調製方法
WO2009146098A2 (en) * 2008-04-02 2009-12-03 President And Fellows Of Harvard College Stem cells and uses thereof
CN102083982A (zh) * 2008-04-07 2011-06-01 纽珀滕索有限公司 通过rna干扰引入复能基因而重编程细胞
US20100021437A1 (en) * 2008-04-07 2010-01-28 The McLean Hospital Corporation Whitehead Institute for Biomedical Research Neural stem cells derived from induced pluripotent stem cells
US8623648B2 (en) * 2008-04-24 2014-01-07 Janssen Biotech, Inc. Treatment of pluripotent cells
WO2009131262A1 (en) * 2008-04-25 2009-10-29 Mirae Biotech Co., Ltd. Method of manufacturing induced pluripotent stem cell originated from human somatic cell
SG10201400329YA (en) * 2008-05-02 2014-05-29 Univ Kyoto Method of nuclear reprogramming
US9102920B2 (en) * 2008-05-06 2015-08-11 Agency For Science, Technology And Research Method of effecting de-differentiation of a cell
WO2009137844A2 (en) * 2008-05-09 2009-11-12 Vistagen Therapeutics, Inc. Pancreatic endocrine progenitor cells derived from pluripotent stem cells
WO2009142717A2 (en) * 2008-05-19 2009-11-26 President And Fellows Of Harvard College Methods and products for dedifferentiation of cells
EP2128245A1 (en) 2008-05-27 2009-12-02 Max-Planck-Gesellschaft zur Förderung der Wissenschaften e.V. Generation of induced pluripotent stem (iPS) cells
JP2011160661A (ja) * 2008-06-02 2011-08-25 Kyowa Hakko Kirin Co Ltd 血球細胞の初期化法
JP2011522540A (ja) * 2008-06-04 2011-08-04 セルラー ダイナミクス インターナショナル， インコーポレイテッド 非ウイルスアプローチを用いたｉＰＳ細胞の産生のための方法
EP2300611B1 (en) * 2008-06-13 2017-08-09 Whitehead Institute for Biomedical Research Programming and reprogramming of cells
AU2015202237B2 (en) * 2008-06-13 2017-09-28 Whitehead Institute For Biomedical Research Programming and reprogramming of cells
WO2010008486A2 (en) 2008-06-24 2010-01-21 Parkinsons Institute Pluripotent cell lines and methods of use thereof
JP2011525794A (ja) * 2008-06-26 2011-09-29 国立大学法人大阪大学 ｉＰＳ細胞の製造方法および製造キット
WO2009157610A1 (en) * 2008-06-26 2009-12-30 Pusan National University Industry-University Cooperation Foundation Selenium dedifferentiated cell, preparation method and usage thereof
JP5340265B2 (ja) 2008-06-27 2013-11-13 国立大学法人京都大学 効率的な人工多能性幹細胞の樹立方法
PL2310492T3 (pl) 2008-06-30 2015-12-31 Janssen Biotech Inc Różnocowanie pluripotencjalnych komórek macierzystych
US9127256B2 (en) 2008-07-16 2015-09-08 Dnavec Corporation Method for production of reprogrammed cell using chromosomally unintegrated virus vector
EP2307539B1 (en) * 2008-07-30 2014-11-19 Kyoto University Method of efficiently establishing induced pluripotent stem cells
AU2008360135A1 (en) * 2008-07-31 2010-02-04 Gifu University Efficient method for establishing induced pluripotent stem cells
US20110183350A1 (en) * 2008-08-05 2011-07-28 Kyoto University Method for selecting secondary neurosphere derived from differentiated cell-derived pluripotent stem cell, clone selected by the method and use of the clone
US10047346B2 (en) 2008-08-08 2018-08-14 Mayo Foundation For Medical Education And Research Method of treating heart tissue using induced pluripotent stem cells
JP2012500005A (ja) * 2008-08-12 2012-01-05 セルラー ダイナミクス インターナショナル， インコーポレイテッド ｉＰＳ細胞を生成するための方法
WO2010022304A1 (en) * 2008-08-21 2010-02-25 Forest Laboratories Holdings Limited Methods for treating cns disorders
JP5688800B2 (ja) * 2008-08-22 2015-03-25 国立大学法人 東京大学 ｉＰＳ細胞とＢＬＡＳＴＯＣＹＳＴＣＯＭＰＬＥＭＥＮＴＡＴＩＯＮを利用した臓器再生法
JPWO2010027062A1 (ja) 2008-09-04 2012-02-02 独立行政法人理化学研究所 Ｂ細胞由来ｉＰＳ細胞およびその用途
CN107095883A (zh) * 2008-09-04 2017-08-29 Abt控股公司 干细胞预防神经元顶梢枯死的用途
US8945922B2 (en) 2008-09-08 2015-02-03 Riken Generating a mature NKT cell from a reprogrammed somatic cell with a T-cell antigen receptor α-chain region rearranged to uniform Va-Ja in a NKT-cell specific way
US20110165680A1 (en) * 2008-09-12 2011-07-07 Scarab Genomics, Llc Clean genome bactofection
CN101492676B (zh) * 2008-09-16 2011-02-16 中国科学院广州生物医药与健康研究院 用脑膜细胞生成诱导的多能性干细胞的方法及其用途
SG160248A1 (en) * 2008-09-18 2010-04-29 Agency Science Tech & Res Use of novel monoclonal antibodies targeting human embryonic stem cells to characterize and kill induced pluripotent stem cells
WO2010033991A2 (en) * 2008-09-22 2010-03-25 Children's Medical Center Corporation Detection of human somatic cell reprogramming
KR101746864B1 (ko) * 2008-10-24 2017-06-14 주식회사 쿠라레 세포 보존 방법 및 세포 수송 방법
WO2010050626A1 (en) * 2008-10-30 2010-05-06 Kyoto University Method for producing induced pluripotent stem cells
KR102025158B1 (ko) 2008-10-31 2019-09-25 얀센 바이오테크 인코포레이티드 인간 배아 줄기 세포의 췌장 내분비 계통으로의 분화
AU2009308967C1 (en) 2008-10-31 2017-04-20 Janssen Biotech, Inc. Differentiation of human embryonic stem cells to the pancreatic endocrine lineage
JP5608645B2 (ja) 2008-11-05 2014-10-15 学校法人慶應義塾 神経幹細胞製造方法
MX356756B (es) 2008-11-20 2018-06-11 Centocor Ortho Biotech Inc Células madre pluripotentes en microportadores.
AU2009316583B2 (en) 2008-11-20 2016-04-21 Janssen Biotech, Inc. Methods and compositions for cell attachment and cultivation on planar substrates
EP2881461A1 (en) * 2008-11-21 2015-06-10 Fraunhofer-Gesellschaft zur Förderung der angewandten Forschung e.V. Reprogramming cells toward a pluripotent state
CA2688804A1 (en) 2008-12-17 2010-06-17 The Uab Research Foundation Polycistronic vector for human induced pluripotent stem cell production
CN102317442B (zh) * 2008-12-17 2014-08-13 斯克里普斯研究所 干细胞的产生和保持
CN102257133A (zh) * 2008-12-18 2011-11-23 公益财团法人新产业创造研究机构 软骨细胞样细胞及其制造方法
US8470308B2 (en) * 2009-01-03 2013-06-25 Ray C. Wasielewski Enhanced medical implant comprising disrupted tooth pulp and tooth particles
US10328103B2 (en) 2009-01-03 2019-06-25 Ray C. Wasielewski Medical treatment composition comprising mammalian dental pulp stem cells
JP6099867B2 (ja) 2009-02-03 2017-03-22 学校法人慶應義塾 ヒト分化細胞由来多能性幹細胞に由来する胚様体及び／又は神経幹細胞の培養方法
WO2010093655A2 (en) * 2009-02-10 2010-08-19 University Of Dayton Enhanced method for producing stem-like cells from somatic cells
US8951801B2 (en) 2009-02-27 2015-02-10 Kyoto University Method for making IPS cells
US9487756B2 (en) 2009-03-20 2016-11-08 Mesoblast, Inc. Production of reprogrammed pluripotent cells
JP5637354B2 (ja) * 2009-03-30 2014-12-10 独立行政法人産業技術総合研究所 精製転写因子の調製法と細胞導入技術
CN101613717B (zh) * 2009-04-17 2012-01-11 中国科学院广州生物医药与健康研究院 用猪成纤维细胞生成诱导的多能性干细胞的方法
WO2010119819A1 (ja) 2009-04-17 2010-10-21 国立大学法人東北大学 ヒト肺組織幹細胞の調製方法及びヒト肺胞上皮細胞への分化誘導方法
CN101580816B (zh) * 2009-04-23 2012-02-29 中国科学院广州生物医药与健康研究院 诱导多能性干细胞快速高效产生的新型无血清培养基以及使用其的方法
JP2010268789A (ja) 2009-04-24 2010-12-02 Kumamoto Univ 細胞医薬の製造方法
EP2253700A1 (en) 2009-05-13 2010-11-24 Helmholtz-Zentrum für Infektionsforschung GmbH A method for producing test systems from donors suffering from adverse effects of medicaments and /or medical treatments, and uses of said systems
NO2432881T3 (ru) * 2009-05-18 2018-04-14
US9045738B2 (en) 2009-05-29 2015-06-02 Kyoto University Method for producing induced pluripotent stem cells and method for culturing the same
JP5777113B2 (ja) 2009-05-29 2015-09-09 学校法人慶應義塾 人工多能性幹細胞のクローンの選択方法
US9365866B2 (en) 2009-06-03 2016-06-14 National Institute Of Advanced Industrial Science And Technology Vectors for generating pluripotent stem cells and methods of producing pluripotent stem cells using the same
WO2010144696A1 (en) 2009-06-11 2010-12-16 Burnham Institute For Medical Research Directed differentiation of stem cells
US9550975B2 (en) * 2009-07-15 2017-01-24 Mari Dezawa SSEA-3 pluripotent stem cell isolated from body tissue
US9399758B2 (en) 2009-07-15 2016-07-26 Mari Dezawa SSEA3(+) pluripotent stem cell that can be isolated from body tissue
EP2456862A4 (en) 2009-07-20 2013-02-27 Janssen Biotech Inc DIFFERENTIATION OF HUMAN EMBRYONIC STEM CELLS
CN102471744B (zh) 2009-07-21 2015-06-10 国立大学法人京都大学 图像处理装置、培养观察装置及图像处理方法
JP5751548B2 (ja) 2009-08-07 2015-07-22 国立大学法人京都大学 イヌｉＰＳ細胞及びその製造方法
WO2011016588A1 (en) 2009-08-07 2011-02-10 Kyoto University Method of efficiently establishing induced pluripotent stem cells
EP2464723B1 (en) 2009-08-12 2016-06-22 Kyoto University Method for inducing differentiation of pluripotent stem cells into neural precursor cells
CN101993495B (zh) 2009-08-12 2013-07-24 上海近岸科技有限公司 一种蛋白质混合物及其制备方法
EP2468312A4 (en) 2009-08-19 2014-05-14 Univ Tohoku SHEET FOR KERATOPLASTIES
EP2430454B1 (en) 2009-08-22 2013-01-23 The Board Of Trustees Of The University Of the Leland Stanford Junior University Imaging and evaluating embryos, oocytes, and stem cells
US20110052549A1 (en) * 2009-08-27 2011-03-03 The Regents Of The University Of California Cell culture device to differentiate stem cells in a specific orientation
JP5514215B2 (ja) 2009-08-31 2014-06-04 国立大学法人大阪大学 口腔粘膜由来細胞を利用した誘導多能性幹細胞の効率的な製造方法
EP2473598B1 (en) 2009-09-04 2017-03-22 The U.S.A. As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Methods for enhancing genome stability and telomere elongation in embryonic stem cells
GB0915523D0 (en) 2009-09-07 2009-10-07 Genome Res Ltd Cells and methods for obtaining them
EP2475767B1 (en) 2009-09-08 2017-04-19 Kyoto University Method for producing mast cells from pluripotent stem cells
WO2011032025A2 (en) * 2009-09-10 2011-03-17 The Salk Institute For Biological Studies Adipose-derived induced pluripotent stem cells
AU2014240253B2 (en) * 2009-09-15 2017-08-03 The University Of Tokyo Novel Method for Producing Differentiated Cells
ES2725688T3 (es) * 2009-09-15 2019-09-26 Univ Tokyo Método novedoso para la producción de células diferenciadas
US8993329B2 (en) 2009-09-24 2015-03-31 Kyoto University Method of efficiently establishing induced pluripotent stem cells
EP2483395B1 (en) 2009-09-30 2016-12-07 Agency For Science, Technology And Research A nuclear receptor and mutant thereof and the use of the same in the reprogramming of cells
CN113621576A (zh) 2009-10-16 2021-11-09 斯克里普斯研究所 多能细胞的诱导
EP2494032A4 (en) 2009-10-29 2013-06-05 Univ Mcmaster GENERATION OF INDUCED PLURIPOTENTER STEM CELLS AND FIBROBLAST PRECURSOR CELLS
ES2779048T3 (es) 2009-11-12 2020-08-13 Technion Res & Dev Foundation Medios de cultivo, cultivos celulares y métodos de cultivo de células madre pluripotentes en un estado indiferenciado
GB0919773D0 (en) 2009-11-12 2009-12-30 Univ Nottingham Induced pluripotent stem cell
WO2011058064A1 (en) 2009-11-13 2011-05-19 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Reprogrammation of eukaryotic cells with engineered microvesicles
SG10201407645YA (en) 2009-11-19 2015-01-29 Agency Science Tech & Res Methods of Enhancing Pluripotentcy
WO2011071118A1 (ja) 2009-12-09 2011-06-16 国立大学法人京都大学 ニトロビンを含む多能性幹細胞の心筋細胞への分化促進剤
JP2011121949A (ja) 2009-12-14 2011-06-23 Kyoto Univ 筋萎縮性側索硬化症の予防および治療用医薬組成物
CN102741395B (zh) 2009-12-23 2016-03-16 詹森生物科技公司 人胚胎干细胞的分化
JP2011135864A (ja) * 2009-12-30 2011-07-14 Korea Univ Research & Business Foundation Ｏｃｔ４及びＢｍｉ１、またはその上位調節子を用いて体細胞から胚幹細胞類似細胞への逆分化を誘導する組成物及びこれを用いた胚幹細胞類似細胞の製造方法
CA2786659C (en) 2010-01-06 2017-08-22 National University Corporation Tottori University Mouse artificial chromosome vector
WO2011090221A1 (en) 2010-01-22 2011-07-28 Kyoto University Method for improving induced pluripotent stem cell generation efficiency
CN102858958A (zh) 2010-02-03 2013-01-02 日本国立癌症研究中心 诱导肝干细胞及其制造方法、以及该细胞的用途
EP2536828B1 (en) 2010-02-16 2015-09-09 Kyoto University Method of efficiently establishing induced pluripotent stem cells
EP2537930A4 (en) 2010-02-18 2013-10-02 Univ Osaka METHOD FOR MANUFACTURING INDUCED PLURIPOTENT STRAIN CELL
RU2702198C2 (ru) 2010-03-01 2019-10-04 Янссен Байотек, Инк. Способы очистки клеток, производных от плюрипотентных стволовых клеток
EP2926821B1 (en) 2010-03-05 2019-12-25 Tissue Genesis, LLC Compositions to support tissue integration and inosculation of transplanted tissue and transplanted engineered penile tissue with adipose stromal cells
JP2013521760A (ja) * 2010-03-10 2013-06-13 国立大学法人京都大学 人工多能性幹細胞の選別方法
JP5909482B2 (ja) 2010-03-31 2016-04-26 ザ スクリプス リサーチ インスティテュート 細胞の再プログラム
CN103097521A (zh) 2010-04-16 2013-05-08 学校法人庆应义塾 人工多能性干细胞的制造方法
CA2796616A1 (en) 2010-04-21 2011-10-27 Research Development Foundation Methods and compositions related to dopaminergic neuronal cells
US9845457B2 (en) 2010-04-30 2017-12-19 Cedars-Sinai Medical Center Maintenance of genomic stability in cultured stem cells
US9249392B2 (en) 2010-04-30 2016-02-02 Cedars-Sinai Medical Center Methods and compositions for maintaining genomic stability in cultured stem cells
CN102242146B (zh) * 2010-05-10 2015-11-25 高丽大学校产学协力团 组合物和用其产生诱导全能干细胞的方法
RU2587634C2 (ru) 2010-05-12 2016-06-20 Янссен Байотек, Инк. Дифференцирование эмбриональных стволовых клеток человека
JP5920725B2 (ja) 2010-05-25 2016-05-18 国立研究開発法人国立がん研究センター 生体外で自己複製可能な誘導前がん幹細胞又は誘導悪性幹細胞、これらの製造方法、及び、これらの細胞の応用
EP4438734A2 (en) 2010-06-14 2024-10-02 The Scripps Research Institute Reprogramming of cells to a new fate
US8932857B2 (en) 2010-06-15 2015-01-13 Kyoto University Method for selecting reduced differentiation resistance human induced pluripotent stem cells
JP6039551B2 (ja) * 2010-06-18 2016-12-07 セルラー ダイナミクス インターナショナル， インコーポレイテッド 透析された血清を有する心筋細胞培地
JP5099571B2 (ja) 2010-07-12 2012-12-19 国立大学法人鳥取大学 ｍｉＲＮＡ導入による新規ｈｉＰＳＣ作製法
WO2012011610A1 (en) 2010-07-21 2012-01-26 Kyoto University Method for inducing differentiation of human pluripotent stem cell into intermediate mesoderm cell
WO2012019168A2 (en) 2010-08-06 2012-02-09 Moderna Therapeutics, Inc. Engineered nucleic acids and methods of use thereof
JP5892661B2 (ja) 2010-08-13 2016-03-23 国立大学法人京都大学 多能性幹細胞から生殖細胞への分化誘導方法
CN103168236B (zh) 2010-08-23 2016-01-20 哈佛大学管理委员会 用于膜电位测定的光遗传学探针
US9499790B2 (en) 2010-08-26 2016-11-22 Kyoto University Method for promoting differentiation of pluripotent stem cells into cardiac muscle cells
JP5930205B2 (ja) 2010-08-26 2016-06-08 国立大学法人京都大学 多能性幹細胞の心筋分化促進剤
CN103189508B (zh) 2010-08-30 2016-08-10 生物载体株式会社 用于诱导多能性干细胞的组合物及其用途
BR112013004614A2 (pt) 2010-08-31 2024-01-16 Janssen Biotech Inc Diferenciação de células-tronco pluripotentes
WO2012030539A2 (en) 2010-08-31 2012-03-08 Janssen Biotech, Inc. Differentiation of human embryonic stem cells
KR101851956B1 (ko) 2010-08-31 2018-04-25 얀센 바이오테크 인코포레이티드 인간 배아 줄기 세포의 분화
EP2611437B1 (en) 2010-09-02 2017-03-29 Kyoto University Pharmaceutical composition for prevention and treatment of amyotrophic lateral sclerosis
JP5794588B2 (ja) 2010-09-14 2015-10-14 国立大学法人京都大学 効率的な人工多能性幹細胞の樹立方法
CA2812194C (en) 2010-09-17 2022-12-13 President And Fellows Of Harvard College Functional genomics assay for characterizing pluripotent stem cell utility and safety
CA2821992A1 (en) 2010-10-01 2012-04-05 Moderna Therapeutics, Inc. Engineered nucleic acids and methods of use thereof
JP5921558B2 (ja) * 2010-10-14 2016-05-24 ユニバーシティ オブ セントラル フロリダ リサーチ ファウンデーション，インコーポレイテッド 心臓人工多能性幹細胞ならびに心筋の修復および再生に使用する方法
AU2011316830A1 (en) 2010-10-22 2013-05-02 Biotime Inc. Methods of modifying transcriptional regulatory networks in stem cells
JP6044932B2 (ja) * 2010-10-25 2016-12-14 公立大学法人横浜市立大学 幹細胞の安定的維持、複製を制御するためのペプチジルプロリルイソメラーゼＰｉｎ１の利用
CN103459591B (zh) 2010-11-02 2016-05-04 国立大学法人熊本大学 肠细胞的制造方法
US9637732B2 (en) 2010-11-04 2017-05-02 Kyoto University Method of efficiently establishing induced pluripotent stem cells
JP6021021B2 (ja) 2010-11-05 2016-11-02 国立大学法人京都大学 多発性嚢胞腎の検査方法および治療剤のスクリーニング方法
EP2639297B1 (en) * 2010-11-09 2018-01-03 National Institute of Advanced Industrial Science And Technology Method for producing peripheral blood monocyte-derived pluripotent stem cells
JP6090855B2 (ja) 2010-11-17 2017-03-08 国立大学法人京都大学 心筋細胞および／または心筋前駆細胞増殖剤ならびに心筋細胞および／または心筋前駆細胞の増殖方法
ES2675582T3 (es) 2010-12-02 2018-07-11 Riken Inmunoterapia utilizando células alo-NKT, células para inmunoterapia en las que la cadena alfa del gen del receptor de las células T (TCR) ha sido redistribuida a V alfa-J alfa uniforme, y banco de células NKT derivadas de dichas células
US9506039B2 (en) 2010-12-03 2016-11-29 Kyoto University Efficient method for establishing induced pluripotent stem cells
US9404082B2 (en) 2010-12-03 2016-08-02 Kyoto University Method for production of eosinophil from pluripotent stem cell
JP5888852B2 (ja) * 2010-12-08 2016-03-22 学校法人近畿大学 免疫不全動物を用いた細胞の製法
JP6182456B2 (ja) 2010-12-22 2017-08-23 フェイト セラピューティクス，インコーポレイテッド 単細胞選別のための細胞培養プラットホームおよびｉＰＳＣの再プログラミングの増強
EP2665811B1 (en) 2011-01-19 2017-10-18 The Regents of The University of California Somatic cells with innate potential for pluripotency
WO2012098260A1 (en) 2011-01-21 2012-07-26 Axiogenesis Ag A non-viral system for the generation of induced pluripotent stem (ips) cells
WO2012112458A2 (en) * 2011-02-14 2012-08-23 The Regents Of The University Of California Compositions and methods for increasing reprogramming efficiency
JP5995247B2 (ja) 2011-02-23 2016-09-21 国立大学法人京都大学 多能性幹細胞から樹状細胞を製造する方法
EP2678675B1 (en) 2011-02-23 2017-10-11 The Board of Trustees of the Leland Stanford Junior University Methods of detecting aneuploidy in human embryos
GB201103600D0 (en) 2011-03-01 2011-04-13 Isis Innovation Dendritic cells
US9353370B2 (en) 2011-03-30 2016-05-31 Riken Functional nucleic acid molecule and use thereof
DE12722942T1 (de) 2011-03-31 2021-09-30 Modernatx, Inc. Freisetzung und formulierung von manipulierten nukleinsäuren
US9164093B2 (en) 2011-03-31 2015-10-20 Iheart Japan Corporation Cardiomyocyte marker
US9156900B2 (en) 2011-03-31 2015-10-13 Riken Control agent for controlling undifferentiated state and use thereof
CN103562376B (zh) 2011-04-08 2017-12-29 国家医疗保健研究所 复壮细胞的方法
CN103649112B (zh) 2011-04-08 2017-07-18 国立大学法人大阪大学 改造层粘连蛋白及其利用
WO2012141181A1 (ja) * 2011-04-11 2012-10-18 国立大学法人京都大学 核初期化物質
EP2700709A4 (en) 2011-04-20 2014-11-19 Univ Osaka IPS CELL HAVING PREDISPOSITION FOR CORNEAL EPITHELIUM DIFFERENTIATION
JP6189829B2 (ja) 2011-05-13 2017-08-30 ザ・ユナイテッド・ステイツ・オブ・アメリカ・アズ・リプリゼンティド・バイ・ザ・セクレタリー・フォー・ザ・デパートメント・オブ・ヘルス・アンド・ヒューマン・サービシズ Ｚｓｃａｎ４とｚｓｃａｎ４依存性遺伝子を利用した体細胞の直接的な再プログラム化
WO2012168434A1 (en) 2011-06-08 2012-12-13 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Partial reprogramming of somatic cells to induced tissue stem (its) cells
GB201110331D0 (en) 2011-06-16 2011-08-03 Isis Innovation Method of cryopreserving pluripotent stem cells
US10865383B2 (en) 2011-07-12 2020-12-15 Lineage Cell Therapeutics, Inc. Methods and formulations for orthopedic cell therapy
US20130029416A1 (en) 2011-07-22 2013-01-31 Tayaramma Thatava Differentiating induced pluripotent stem cells into glucose-responsive, insulin-secreting progeny
JP6234924B2 (ja) 2011-07-22 2017-11-22 サントル ナショナル ドゥ ラ ルシェルシュ シアンティフィックＣｅｎｔｒｅ Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｄｅ Ｌａ Ｒｅｃｈｅｒｃｈｅ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｑｕｅ 多能性幹細胞を得るための細胞抽出物の使用
CN103703130A (zh) 2011-07-25 2014-04-02 国立大学法人京都大学 筛选诱导的多能干细胞的方法
WO2013031826A1 (ja) * 2011-08-29 2013-03-07 国立大学法人京都大学 核初期化物質
US9145547B2 (en) 2011-08-30 2015-09-29 Riken Nuclear reprogrammed cells generated by introduction of a histone H2aa or TH2A gene, a histone H2ba or TH2B gene, or a phosphorylation-mimic of histone chaperon Npm2 gene, an Oct family gene and a klf family gene into a mammalian somatic cell
WO2013039087A1 (ja) 2011-09-12 2013-03-21 国立大学法人 熊本大学 物質のスクリーニング方法
US9464124B2 (en) 2011-09-12 2016-10-11 Moderna Therapeutics, Inc. Engineered nucleic acids and methods of use thereof
WO2013047773A1 (ja) 2011-09-29 2013-04-04 国立大学法人 東京大学 オレキシンニューロンの誘導法
US9480695B2 (en) 2011-09-29 2016-11-01 The University Of Tokyo Methods for inducing orexin neurons and agent for treating narcolepsy or eating disorder
EP3492109B1 (en) 2011-10-03 2020-03-04 ModernaTX, Inc. Modified nucleosides, nucleotides, and nucleic acids, and uses thereof
WO2013058403A1 (ja) 2011-10-21 2013-04-25 国立大学法人京都大学 層流による多能性維持単一分散細胞培養法
GB2496375A (en) 2011-10-28 2013-05-15 Kymab Ltd A non-human assay vertebrate comprising human antibody loci and human epitope knock-in, and uses thereof
WO2013078433A1 (en) 2011-11-23 2013-05-30 University Of Hawaii Auto-processing domains for polypeptide expression
US20140329317A1 (en) 2011-11-25 2014-11-06 Kyoto University Method for culturing pluripotent stem cell
CN104080907A (zh) 2011-11-30 2014-10-01 日本国立癌症研究中心 诱导恶性干细胞
GB201122047D0 (en) 2011-12-21 2012-02-01 Kymab Ltd Transgenic animals
US8497124B2 (en) 2011-12-05 2013-07-30 Factor Bioscience Inc. Methods and products for reprogramming cells to a less differentiated state
JP2015501844A (ja) 2011-12-16 2015-01-19 モデルナ セラピューティクス インコーポレイテッドＭｏｄｅｒｎａ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，Ｉｎｃ． 修飾ヌクレオシド、ヌクレオチドおよび核酸組成物
WO2013094771A1 (en) 2011-12-19 2013-06-27 Kyoto University Method for inducing differentiation of human pluripotent stem cells into intermediate mesoderm cells
KR102203056B1 (ko) 2011-12-22 2021-01-14 얀센 바이오테크 인코포레이티드 인간 배아 줄기 세포의 단일 인슐린 호르몬 양성 세포로의 분화
EP2799538A4 (en) 2011-12-27 2015-06-03 Univ Osaka DIFFERENTIATION INDUCTION METHOD FOR PREVENTING TUMORIGENE TRANSFORMATION OF INDUCED PLURIPOTENT STEM CELLS (SPI)
WO2013105098A1 (en) 2012-01-15 2013-07-18 Yeda Research And Development Co. Ltd. Induction of dedifferentiation of mesenchymal stromal cells
KR101996343B1 (ko) 2012-01-27 2019-07-05 고쿠리츠 다이가쿠 호진 교토 다이가쿠 전능성 줄기세포의 심근분화 유도방법
SG11201405052RA (en) 2012-03-07 2014-10-30 Janssen Biotech Inc Defined media for expansion and maintenance of pluripotent stem cells
JP5920741B2 (ja) 2012-03-15 2016-05-18 ｉＨｅａｒｔ Ｊａｐａｎ株式会社 人工多能性幹細胞から心筋および血管系混合細胞群を製造する方法
JP6335117B2 (ja) 2012-03-21 2018-05-30 国立大学法人京都大学 アルツハイマー病の治療薬および／または予防薬のスクリーニング方法
WO2013139429A1 (en) 2012-03-21 2013-09-26 Merck Patent Gmbh Induced neural stem cells
US9878056B2 (en) 2012-04-02 2018-01-30 Modernatx, Inc. Modified polynucleotides for the production of cosmetic proteins and peptides
EP2833923A4 (en) 2012-04-02 2016-02-24 Moderna Therapeutics Inc MODIFIED POLYNUCLEOTIDES FOR THE PRODUCTION OF PROTEINS
US9572897B2 (en) 2012-04-02 2017-02-21 Modernatx, Inc. Modified polynucleotides for the production of cytoplasmic and cytoskeletal proteins
US9283287B2 (en) 2012-04-02 2016-03-15 Moderna Therapeutics, Inc. Modified polynucleotides for the production of nuclear proteins
EP2837681B1 (en) 2012-04-06 2018-02-21 Kyoto University Method for inducing erythropoietin-producing cell
WO2013158890A1 (en) * 2012-04-19 2013-10-24 Board Of Regents, The University Of Texas System Generation of induced pluripotent stem cells by modulation of δnp63 or dcgr8
WO2013176233A1 (ja) 2012-05-23 2013-11-28 国立大学法人京都大学 効率的な人工多能性幹細胞の樹立方法
DE202013012241U1 (de) 2012-05-25 2016-01-18 Emmanuelle Charpentier Zusammensetzungen für die durch RNA gesteuerte Modifikation einer Ziel-DNA und für die durch RNA gesteuerte Modulation der Transkription
WO2013181549A2 (en) 2012-05-31 2013-12-05 Auxogyn, Inc. In vitro embryo blastocyst prediction methods
WO2013184527A1 (en) 2012-06-05 2013-12-12 Capricor, Inc. Optimized methods for generation of cardiac stem cells from cardiac tissue and their use in cardiac therapy
CN108034633B (zh) 2012-06-08 2022-08-02 詹森生物科技公司 人胚胎干细胞向胰腺内分泌细胞的分化
CA2878163A1 (en) 2012-07-11 2014-01-16 Tissuetech, Inc. Compositions containing hc-ha/ptx3 complexes and methods of use thereof
JP6373253B2 (ja) 2012-07-17 2018-08-15 国立大学法人京都大学 新規心筋細胞マーカー
KR101923632B1 (ko) 2012-07-31 2018-12-03 이스케이프 테라퓨틱스, 인코퍼레이티드 Hla g-변형된 세포 및 방법
EP3563859B1 (en) 2012-08-13 2021-10-13 Cedars-Sinai Medical Center Cardiosphere-derived exosomes for tissue regeneration
WO2014027474A1 (ja) 2012-08-17 2014-02-20 株式会社Ｃｌｉｏ 心筋梗塞の修復再生を誘導する多能性幹細胞
WO2014057997A1 (ja) 2012-10-09 2014-04-17 Hayashi Nakanobu 初期化ペプチド及びその用途
JP2014082956A (ja) 2012-10-19 2014-05-12 Somar Corp 細胞培養基材、およびそれを用いた細胞培養方法並びに多能性幹細胞の分化誘導方法
SG11201503167XA (en) * 2012-10-23 2015-05-28 Univ Kyoto Method of efficiently establishing induced pluripotent stem cells
US20150353889A1 (en) 2012-10-30 2015-12-10 Daiichi Sankyo Company, Limited Mait-like Cells and Method for Manufacturing Same
WO2014071219A1 (en) 2012-11-01 2014-05-08 Factor Bioscience Inc. Methods and products for expressing proteins in cells
LT2922554T (lt) 2012-11-26 2022-06-27 Modernatx, Inc. Terminaliai modifikuota rnr
GB201222693D0 (en) * 2012-12-17 2013-01-30 Babraham Inst Novel method
JP6308134B2 (ja) 2012-12-27 2018-04-11 ソニー株式会社 細胞分析システム、細胞分析プログラム及び細胞分析方法
JP6312215B2 (ja) 2012-12-28 2018-04-18 国立大学法人京都大学 人工多能性幹細胞、心筋細胞又はその前駆細胞の製造方法
EP2938724B1 (en) 2012-12-31 2020-10-28 Janssen Biotech, Inc. Culturing of human embryonic stem cells at the air-liquid interface for differentiation into pancreatic endocrine cells
AU2013368224B2 (en) 2012-12-31 2018-09-27 Janssen Biotech, Inc. Differentiation of human embryonic stem cells into pancreatic endocrine cells using HB9 regulators
US10370644B2 (en) 2012-12-31 2019-08-06 Janssen Biotech, Inc. Method for making human pluripotent suspension cultures and cells derived therefrom
BR112015015714A2 (pt) 2012-12-31 2017-07-11 Janssen Biotech Inc suspensão e aglomeração de células pluripotentes humanas para diferenciação em célu-las endócrinas pancreáticas
US20160017441A1 (en) 2013-01-16 2016-01-21 Universal Bio Research Co., Ltd. Method for identifying cells
EP3323884A1 (en) 2013-02-01 2018-05-23 The United States Of America as Represented by the Secretary, Department of Health an Human Service Method for generating retinal pigment epithelium (rpe) cells from induced pluripotent stem cells (ipscs)
ES2755878T3 (es) 2013-02-01 2020-04-24 Ares Trading Sa Fenotipos anormales de singamia observados con obtención de imágenes a intervalos de tiempo preestablecidos para identificación precoz de embriones con potencial de desarrollo inferior
JP6541577B2 (ja) 2013-02-06 2019-07-10 ユニバーシティー オブ ロチェスター ミエリン障害の治療のための誘導多能性細胞由来オリゴデンドロサイト前駆細胞
US20160002599A1 (en) 2013-02-08 2016-01-07 Kyoto University Production methods for megakaryocytes and platelets
JP6494903B2 (ja) 2013-02-14 2019-04-03 ソニー株式会社 分析システム、分析プログラム及び分析方法
CA2903415C (en) 2013-03-01 2021-04-20 Clio, Inc. Pharmaceutical composition including migratory factor for guiding pluripotent stem cells to injury
EP2966163B1 (en) 2013-03-06 2018-01-17 Kyoto University Culture system for pluripotent stem cells and method for subculturing pluripotent stem cells
WO2014136519A1 (ja) 2013-03-08 2014-09-12 国立大学法人京都大学 Ｅｇｆ受容体阻害剤を含む多能性幹細胞の心筋分化促進剤
JP2016520291A (ja) 2013-03-14 2016-07-14 ザ リージェンツ オブ ザ ユニバーシティ オブ カリフォルニア ｉｎｖｉｔｒｏでの内側神経節隆起前駆細胞の作製
US8980864B2 (en) 2013-03-15 2015-03-17 Moderna Therapeutics, Inc. Compositions and methods of altering cholesterol levels
SG11201507829SA (en) 2013-03-21 2015-12-30 Univ Kyoto Pluripotent stem cell for neuronal differentiation induction
US10072242B2 (en) 2013-03-25 2018-09-11 Foundation For Biomedical Research And Innovation At Kobe Cell sorting method
GB201306589D0 (en) 2013-04-11 2013-05-29 Abeterno Ltd Live cell imaging
CA2909230C (en) 2013-04-12 2021-06-15 Kyoto University Method for inducing alveolar epithelial progenitor cells
EP2998391B1 (en) 2013-05-14 2020-02-19 Kyoto University Efficient myocardial cell induction method
CN105247041B (zh) 2013-05-31 2018-04-20 爱心细胞有限公司 组入有水凝胶的层叠细胞膜片
US11085067B2 (en) 2013-06-10 2021-08-10 President And Fellows Of Harvard College Early developmental genomic assay for characterizing pluripotent stem cell utility and safety
AU2014279065B2 (en) 2013-06-11 2020-04-09 Astellas Pharma Inc. Method for producing renal precursor cells, and drug containing renal precursor cells
WO2014200030A1 (ja) 2013-06-12 2014-12-18 国立大学法人京都大学 人工多能性幹細胞の選別方法および血球への分化誘導方法
EP3031905A4 (en) 2013-08-07 2017-04-26 Kyoto University Method for producing pancreatic hormone-producing cell
WO2015025959A1 (ja) 2013-08-23 2015-02-26 独立行政法人理化学研究所 蛍光特性を示すポリペプチド、およびその利用
JP6617231B2 (ja) 2013-08-28 2019-12-11 国立大学法人岐阜大学 人工多能性幹細胞の作製方法
WO2015030149A1 (ja) 2013-08-29 2015-03-05 国立大学法人鳥取大学 細胞のアンチエイジングに関連する生体分子群
US9587230B2 (en) 2013-09-05 2017-03-07 Tempo Bioscience, Inc. Human calcium binding domain biosensors
ES2721440T3 (es) 2013-09-05 2019-07-31 Univ Kyoto Nuevo método para inducir células precursoras neurales productoras de dopamina
WO2015037535A1 (ja) 2013-09-12 2015-03-19 株式会社カネカ 人工多能性幹細胞の分化誘導方法及び選別方法
JP6333830B2 (ja) 2013-09-13 2018-05-30 国立大学法人京都大学 多能性幹細胞の心筋分化を促進する化合物
US10975358B2 (en) 2013-09-24 2021-04-13 Id Pharma Co., Ltd. Method for improving efficiency of inducing pluripotent stem cell
WO2015048744A2 (en) 2013-09-30 2015-04-02 Moderna Therapeutics, Inc. Polynucleotides encoding immune modulating polypeptides
EP3052521A1 (en) 2013-10-03 2016-08-10 Moderna Therapeutics, Inc. Polynucleotides encoding low density lipoprotein receptor
JP6635505B2 (ja) 2013-11-01 2020-01-29 国立大学法人京都大学 新規軟骨細胞誘導方法
US20160304840A1 (en) 2013-11-01 2016-10-20 New England Biolabs, Inc. Method for Producing Induced Pluripotent Stem Cells
WO2015069736A1 (en) 2013-11-08 2015-05-14 The Mclean Hospital Corporation METHODS FOR EFFICIENT GENERATION OF GABAergic INTERNEURONS FROM PLURIPOTENT STEM CELLS
WO2015068329A1 (ja) 2013-11-08 2015-05-14 ソニー株式会社 細胞分析システム、細胞分析プログラム及び細胞分析方法
US9932607B2 (en) 2013-11-15 2018-04-03 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Site-specific integration of transgenes into human cells
CN104630136B (zh) * 2013-11-15 2019-10-01 中国科学院广州生物医药与健康研究院 一种制备诱导多能性干细胞的方法以及该方法中所使用的组合物及其应用
EP3071695A2 (en) 2013-11-18 2016-09-28 Crispr Therapeutics AG Crispr-cas system materials and methods
JP6536871B2 (ja) 2013-12-02 2019-07-03 国立大学法人京都大学 Ｆｇｆｒ３病の予防および治療剤ならびにそのスクリーニング方法
KR102070967B1 (ko) * 2013-12-10 2020-01-29 한국한의학연구원 사군자탕을 유효성분으로 포함하는, 세포의 유도만능줄기세포로의 리프로그래밍 촉진용 조성물 및 이를 이용한 유도만능줄기세포의 제조방법
AU2014363032A1 (en) 2013-12-11 2016-06-09 Pfizer Limited Method for producing retinal pigment epithelial cells
EP3835419A1 (en) 2013-12-12 2021-06-16 The Regents of The University of California Methods and compositions for modifying a single stranded target nucleic acid
EP3088415B1 (en) 2013-12-25 2019-11-06 Toagosei Co., Ltd. Method for inducing differentiation of pluripotent stem cells into endodermal cells
EP2896688A1 (en) 2014-01-20 2015-07-22 Centre National de la Recherche Scientifique (CNRS) A method of producing beta pancreatic cells from progenitor cells through the use of hydrogen peroxide
JP2017510542A (ja) 2014-01-31 2017-04-13 ファクター バイオサイエンス インコーポレイテッド 核酸生成及び送達のための方法及び製品
KR20240091064A (ko) 2014-03-04 2024-06-21 페이트 세러퓨틱스, 인코포레이티드 개선된 재프로그래밍 방법 및 세포 배양 플랫폼
US11066649B2 (en) 2014-03-19 2021-07-20 Institut National De La Sante Et De La Recherche Medicale (Inserm) Method for inducing human cholangiocyte differentiation
ES2837840T3 (es) 2014-03-20 2021-07-01 Ares Trading Sa Medida cuantitativa de la cinética de desarrollo de la morfología de mórula y blastocisto humanos
WO2015141827A1 (ja) 2014-03-20 2015-09-24 国立大学法人京都大学 心筋細胞の選別方法
WO2015151307A1 (ja) * 2014-03-31 2015-10-08 味の素株式会社 幹細胞用培地
EP3143127B1 (en) 2014-05-16 2021-07-14 Janssen Biotech, Inc. Use of small molecules to enhance mafa expression in pancreatic endocrine cells
US10472610B2 (en) 2014-05-21 2019-11-12 Kyoto University Method for generating pancreatic bud cells and therapeutic agent for pancreatic disease containing pancreatic bud cells
JP6651218B2 (ja) 2014-05-30 2020-02-19 国立大学法人京都大学 低分子化合物を用いた多能性幹細胞の心筋分化誘導法
WO2015195769A2 (en) 2014-06-18 2015-12-23 President And Fellows Of Harvard College Optogenetic probes for measuring membrane potential
JP6629725B2 (ja) 2014-06-23 2020-01-15 東亞合成株式会社 新規合成ペプチドおよびその利用
JP7012432B2 (ja) 2014-07-14 2022-01-28 中外製薬株式会社 タンパク質のエピトープを同定するための方法
US10570418B2 (en) 2014-09-02 2020-02-25 The Regents Of The University Of California Methods and compositions for RNA-directed target DNA modification
JP6452107B2 (ja) 2014-09-05 2019-01-16 国立大学法人 東京大学 糖尿病性皮膚潰瘍治療のための多能性幹細胞
JP6878274B2 (ja) 2014-10-03 2021-05-26 シーダーズ−サイナイ・メディカル・センターＣｅｄａｒｓ−Ｓｉｎａｉ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｃｅｎｔｅｒ 筋ジストロフィーの処置における心筋球由来細胞およびこのような細胞によって分泌されたエキソソーム
JP6598185B2 (ja) 2014-11-07 2019-10-30 国立大学法人京都大学 軟骨過形成疾患の予防および治療剤ならびにそのスクリーニング方法
AU2015353853B2 (en) 2014-11-25 2020-10-15 President And Fellows Of Harvard College Methods for generation of podocytes from pluripotent stem cells and cells produced by the same
IL252917B2 (en) 2014-12-17 2023-10-01 Fundacion Para La Investig Medica Aplicada Vectors and vectors for gene therapy for use in the treatment of Wilson's disease
SI3233129T1 (sl) 2014-12-17 2020-07-31 Fundacion Para La Investigacion Medica Aplicada Konstrukti nukleinske kisline in vektorji genske terapije za uporabo pri zdravljenju Wilsonove bolezni in drugih stanj
JP7253692B2 (ja) 2014-12-26 2023-04-07 国立大学法人京都大学 肝細胞誘導方法
US10077463B2 (en) 2015-01-15 2018-09-18 President And Fellows Of Harvard College Optical selection of cells
KR102459458B1 (ko) 2015-01-16 2022-10-25 고쿠리츠켄큐카이하츠호진 상교기쥬츠 소고켄큐쇼 스텔스성을 가지는 rna를 사용한 유전자 발현계 및 당해 rna를 포함하는 유전자 도입ㆍ발현벡터
EP4406585A3 (en) 2015-02-13 2024-10-23 Factor Bioscience Inc. Nucleic acid products and methods of administration thereof
WO2016131137A1 (en) 2015-02-17 2016-08-25 University Health Network Methods for making and using sinoatrial node-like pacemaker cardiomyocytes and ventricular-like cardiomyocytes
SI3059307T2 (sl) 2015-02-20 2022-08-31 Inserm(Institut National De La Sante Et De La Recherche Medicale) Uporaba laminina za diferenciacijo pluripotentnih celic v hepatocite
CA2978870C (en) 2015-03-06 2024-06-25 Kyoto University Method for inducing differentiation of alveolar epithelial cells
JP6719449B2 (ja) 2015-03-18 2020-07-08 小野薬品工業株式会社 ナイーブ型多能性幹細胞の製造方法
WO2016165788A1 (en) 2015-04-14 2016-10-20 Uab Ferentis Collagen mimetic peptide
EP3081638A1 (en) 2015-04-16 2016-10-19 Kyoto University Method for producing pseudo-islets
JP6935654B2 (ja) 2015-04-28 2021-09-15 東亞合成株式会社 合成ペプチドを用いた心筋細胞の生産方法
US9724432B2 (en) 2015-04-30 2017-08-08 University Of Rochester Non-human mammal model of human degenerative disorder, uses thereof, and method of treating human degenerative disorder
FR3037338B1 (fr) 2015-06-12 2020-02-28 Philippe Nirde Procede de greffe de cellule cardiaque sur la membrane choriallantoide d'œuf feconde
JP6746945B2 (ja) 2015-06-30 2020-08-26 ソニー株式会社 情報処理装置、情報処理システム及び情報処理方法
WO2017002300A1 (en) 2015-06-30 2017-01-05 Sony Corporation Information processing apparatus, information processing system, and information processing method
KR20180029976A (ko) 2015-07-10 2018-03-21 하트 시드 가부시키가이샤 고품질 iPS 세포의 제조 방법
WO2017014165A1 (ja) 2015-07-17 2017-01-26 国立大学法人京都大学 血管内皮細胞の誘導方法
CA2996582A1 (en) 2015-08-31 2017-03-09 I Peace, Inc. Pluripotent stem cell manufacturing system and method for producing induced pluripotent stem cells
ES2895676T3 (es) 2015-09-01 2022-02-22 Ncardia B V Un método in vitro para diferenciar una población de células madre pluripotentes humanas en una población de células cardiomiocitas
AU2016321170B2 (en) 2015-09-08 2022-09-01 Fujifilm Cellular Dynamics Method for reproducible differentiation of clinical-grade retinal pigment epithelium cells
AU2016318774B2 (en) 2015-09-08 2022-08-18 FUJIFILM Cellular Dynamics, Inc. MACS-based purification of stem cell-derived retinal pigment epithelium
WO2017043666A1 (ja) 2015-09-11 2017-03-16 アステラス製薬株式会社 腎前駆細胞を製造する方法
AU2016339053A1 (en) 2015-09-24 2018-04-12 Crispr Therapeutics Ag Novel family of RNA-programmable endonucleases and their uses in genome editing and other applications
JP6691756B2 (ja) 2015-09-29 2020-05-13 東亞合成株式会社 合成ペプチドを用いた神経幹細胞の生産方法
WO2017059241A1 (en) 2015-10-02 2017-04-06 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Lentiviral protein delivery system for rna-guided genome editing
KR20180055901A (ko) 2015-10-05 2018-05-25 오리그3엔, 인코포레이티드 간 기능장애의 확인 및 개선에 기반한 파킨슨병의 진단 및 치료
CN117737124A (zh) 2015-10-16 2024-03-22 菲特治疗公司 用于诱导和维护基态多能性的平台
US10865381B2 (en) 2015-10-20 2020-12-15 FUJIFILM Cellular Dynamics, Inc. Multi-lineage hematopoietic precursor cell production by genetic programming
JP2016011317A (ja) * 2015-10-21 2016-01-21 加治佐　功 ゲノム編集用クリスパーキャス９による老化遺伝子切り取り若返り経口不老不死薬７
SG11201804197RA (en) 2015-11-18 2018-06-28 Orbis Health Solutions Llc T7 alpha viral vector system
WO2017123662A1 (en) 2016-01-11 2017-07-20 Cedars-Sinai Medical Center Cardiosphere-derived cells and exosomes secreted by such cells in the treatment of heart failure with preserved ejection fraction
GB201601503D0 (en) 2016-01-27 2016-03-09 Isis Innovation Dendritic cells
WO2017143071A1 (en) 2016-02-18 2017-08-24 The Regents Of The University Of California Methods and compositions for gene editing in stem cells
WO2017159862A1 (ja) 2016-03-18 2017-09-21 国立大学法人京都大学 多能性幹細胞由来心筋細胞の凝集体の凍結方法
WO2017164746A1 (en) 2016-03-25 2017-09-28 Pluriomics B.V. In vivo method for differentiating human pluripotent stem cells into atrial cardiomyocytes
MA45479A (fr) 2016-04-14 2019-02-20 Janssen Biotech Inc Différenciation de cellules souches pluripotentes en cellules de l'endoderme de l'intestin moyen
HUE056387T2 (hu) 2016-04-15 2022-02-28 Univ Kyoto Eljárás antigénspecifikus CD8-pozitív T-sejtek indukálására
WO2017183736A1 (ja) 2016-04-22 2017-10-26 国立大学法人京都大学 ドーパミン産生神経前駆細胞の製造方法
KR20200127039A (ko) 2016-05-16 2020-11-09 고쿠리츠 다이가쿠 호우징 도우카이 고쿠리츠 다이가쿠 기코우 다능성 간세포에 의한 주산기 뇌장애의 개선 및 치료
WO2017210652A1 (en) 2016-06-03 2017-12-07 Cedars-Sinai Medical Center Cdc-derived exosomes for treatment of ventricular tachyarrythmias
WO2017216771A2 (en) 2016-06-17 2017-12-21 Genesis Technologies Limited Crispr-cas system, materials and methods
AU2017290805B2 (en) 2016-07-01 2023-11-16 Research Development Foundation Elimination of proliferating cells from stem cell-derived grafts
EP3491134B1 (en) 2016-08-01 2023-10-11 University of Pittsburgh - of The Commonwealth System of Higher Education Human induced pluripotent stem cells for high efficiency genetic engineering
KR102464099B1 (ko) 2016-08-03 2022-11-08 히로시 야부키 다능성 간세포에 의한 허혈재관류 폐장애의 경감 및 치료
JP7165352B2 (ja) 2016-08-03 2022-11-04 国立大学法人東海国立大学機構 多能性幹細胞による慢性肺疾患の改善及び治療
US10373109B2 (en) 2016-08-04 2019-08-06 Fanuc Corporation System and method for iPS cell bank using media
US10354218B2 (en) 2016-08-04 2019-07-16 Fanuc Corporation System and method for iPS cell bank using internet technology
US11259520B2 (en) 2016-08-04 2022-03-01 Fanuc Corporation Stem cell manufacturing system, stem cell information management system, cell transport apparatus, and stem cell frozen storage apparatus
CA3033788A1 (en) 2016-08-17 2018-02-22 Factor Bioscience Inc. Nucleic acid products and methods of administration thereof
CN109963940A (zh) 2016-09-02 2019-07-02 宝生物工程株式会社 从多能干细胞获得小胶质细胞的方法
US11541078B2 (en) 2016-09-20 2023-01-03 Cedars-Sinai Medical Center Cardiosphere-derived cells and their extracellular vesicles to retard or reverse aging and age-related disorders
US10961505B2 (en) 2016-10-05 2021-03-30 FUJIFILM Cellular Dynamics, Inc. Generating mature lineages from induced pluripotent stem cells with MECP2 disruption
JP7213799B2 (ja) 2016-10-10 2023-01-27 ザ ナショナル インスティチュート フォー バイオテクノロジー イン ザ ネゲヴ，リミテッド 非細胞傷害性改変細胞およびその使用
CN109906272A (zh) 2016-10-31 2019-06-18 国立大学法人鸟取大学 产生人抗体的非人动物和使用该非人动物的人抗体制作方法
US11458225B2 (en) 2016-11-09 2022-10-04 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services 3D vascularized human ocular tissue for cell therapy and drug discovery
US20200141921A1 (en) 2016-12-27 2020-05-07 Sumitomo Chemical Company, Limited Evaluation method and selection method for induced pluripotent stem cells, and production method for induced pluripotent stem cells
EP3572502B1 (en) 2017-01-20 2023-01-11 Kyoto University Method for producing cd8alpha +beta + cytotoxic t cells
WO2018139548A1 (ja) 2017-01-26 2018-08-02 国立大学法人大阪大学 幹細胞の中胚葉系細胞への分化誘導用培地および中胚葉系細胞の製造方法
WO2018139600A1 (ja) 2017-01-27 2018-08-02 株式会社カネカ 内胚葉系細胞集団、及び多能性細胞から三胚葉のいずれかの細胞集団を製造する方法
WO2018143454A1 (ja) 2017-02-06 2018-08-09 国立研究開発法人国立がん研究センター 新規ｔ細胞受容体
AU2018220843B2 (en) 2017-02-14 2023-09-21 University Of Pittsburgh - Of The Commonwealth System Of Higher Education Methods of engineering human induced pluripotent stem cells to produce liver tissue
US10828330B2 (en) 2017-02-22 2020-11-10 IO Bioscience, Inc. Nucleic acid constructs comprising gene editing multi-sites and uses thereof
JP6998018B2 (ja) 2017-02-24 2022-01-18 剛士 田邊 細胞処理装置、浮遊培養器、及び幹細胞の誘導方法
JP6480093B2 (ja) 2017-02-27 2019-03-06 剛士 田邊 体細胞製造システム
JP6530876B2 (ja) 2017-02-27 2019-06-12 剛士 田邊 細胞処理システム及び細胞処理装置
EP3591040A4 (en) 2017-03-03 2020-11-11 Kyoto University METHOD FOR PRODUCING PANCREATIC ANALYZER CELLS
WO2018168829A1 (ja) 2017-03-14 2018-09-20 国立大学法人京都大学 多能性幹細胞からヘルパーｔ細胞を製造する方法
EP3604503A4 (en) 2017-03-28 2020-12-30 Ajinomoto Co., Inc. ADDITIVE FOR DE-DIFFERENTIATION SUPPORT MEDIUM
DK3612557T3 (da) 2017-04-18 2022-04-19 Fujifilm Cellular Dynamics Inc Antigenspecifikke immuneffektorceller
US11759482B2 (en) 2017-04-19 2023-09-19 Cedars-Sinai Medical Center Methods and compositions for treating skeletal muscular dystrophy
KR20200021446A (ko) * 2017-04-26 2020-02-28 주식회사 툴젠 sRAGE를 분비하는 줄기세포를 포함하는 알츠하이머병의 예방 또는 치료용 약학 조성물
JP6647545B2 (ja) 2017-05-02 2020-02-14 剛士 田邊 医薬品組成物及び化粧品組成物
JP7457505B2 (ja) 2017-05-10 2024-03-28 ユニバーシティー オブ ロチェスター 神経精神障害を処置する方法
CA3064830A1 (en) 2017-05-25 2018-11-29 Kyoto University Method for inducing differentiation of intermediate mesodermal cell to renal progenitor cell, and method for inducing differentiation of pluripotent stem cell to renal progenitor cell
EP3406712A1 (en) 2017-05-26 2018-11-28 Fundación Centro Nacional De Investigaciones Oncológicas Carlos III Method for expanding stemness and differentiation potential of pluripotent cells
JPWO2018230588A1 (ja) 2017-06-14 2020-04-16 武田薬品工業株式会社 細胞封入デバイス
JP6758631B2 (ja) 2017-06-19 2020-09-23 国立大学法人大阪大学 角膜内皮細胞マーカー及びその利用
JP6736772B2 (ja) 2017-06-19 2020-08-05 公益財団法人神戸医療産業都市推進機構 多能性幹細胞の分化能の予測方法及びそのための試薬
JP7255805B2 (ja) 2017-06-20 2023-04-11 国立大学法人東海国立大学機構 多能性幹細胞による胎児発育不全に伴う脳障害の改善及び治療
US10660523B2 (en) 2017-07-07 2020-05-26 Hideo Ando Light-source unit, measurement apparatus, near-infrared microscopic apparatus, optical detection method, imaging method, calculation method, functional bio-related substance, state management method, and manufacturing method
JP7140400B2 (ja) 2017-10-17 2022-09-21 国立大学法人京都大学 多能性幹細胞から人工神経筋接合部を得る方法
WO2019078262A1 (ja) 2017-10-17 2019-04-25 国立大学法人広島大学 骨軟骨修復を誘導する多能性幹細胞
WO2019088257A1 (ja) 2017-11-02 2019-05-09 国立大学法人鳥取大学 哺乳類人工染色体ベクターを利用するタンパク質の高生産方法
EP3707256A1 (en) 2017-11-09 2020-09-16 CRISPR Therapeutics AG Self-inactivating (sin) crispr/cas or crispr/cpf1 systems and uses thereof
IL305391B2 (en) 2017-11-15 2024-09-01 Vertex Pharma Preparations for the production of islet cells and methods of use
CA3083253A1 (en) 2017-11-30 2019-06-06 Kyoto University Method for culture of cells
MA50942A (fr) 2017-12-01 2020-10-07 Encoded Therapeutics Inc Protéines de liaison à l'adn modifiées
CA3084825A1 (en) 2017-12-14 2019-06-20 Crispr Therapeutics Ag Novel rna-programmable endonuclease systems and their use in genome editing and other applications
US11660355B2 (en) 2017-12-20 2023-05-30 Cedars-Sinai Medical Center Engineered extracellular vesicles for enhanced tissue delivery
US11624049B2 (en) 2017-12-22 2023-04-11 Orizuru Therapeutics, Inc. Cell culturing apparatus, culture solution aspirator, and cell culturing method
EP3766980B1 (en) 2018-03-16 2024-08-07 National University Corporation Tottori University Mouse artificial chromosome vector and use thereof
JP7550648B2 (ja) 2018-03-19 2024-09-13 クリスパー セラピューティクス アーゲー 新規ｒｎａプログラム可能エンドヌクレアーゼ系およびその使用
TW201945536A (zh) 2018-03-19 2019-12-01 國立大學法人京都大學 水凝膠膠囊
US20210010030A1 (en) 2018-03-22 2021-01-14 Nserm (Institut National De La Santé Et De La Recherche Médicale) Method for reprogramming somatic cells
CN111918866B (zh) 2018-03-30 2023-07-04 千纸鹤治疗公司 杂环化合物
EP3789488A4 (en) 2018-03-30 2021-12-29 Ajinomoto Co., Inc. Composition that contains polylysine analog and promotes cell growth
CN111971392A (zh) 2018-03-30 2020-11-20 国立大学法人京都大学 细胞的制造方法
EP3778869A4 (en) 2018-03-30 2021-12-08 Kyoto University CARDIOMYOCYTE MATURATION PROMOTER
US11268070B2 (en) 2018-04-16 2022-03-08 Cellular Engineering Technologies, Inc. Methods for creating integration-free, virus-free, exogenous oncogene-free IPS cells and compositions for use in such methods
EP3781675A1 (en) 2018-04-20 2021-02-24 FUJIFILM Cellular Dynamics, Inc. Method for differentiation of ocular cells and use thereof
TW201945364A (zh) 2018-04-23 2019-12-01 國立大學法人京都大學 增殖抑制劑
JP7311116B2 (ja) 2018-04-27 2023-07-19 株式会社カネカ 膵臓β細胞の製造方法
US20210254006A1 (en) 2018-06-06 2021-08-19 Ideaya Biosciences, Inc. Methods of culturing and/or expanding stem cells and/or lineage committed progenitor cells using lactam compounds
US20210260002A1 (en) 2018-06-18 2021-08-26 University Of Rochester Methods of treating schizophrenia and other neuropsychiatric disorders
EP3810184A2 (en) 2018-06-21 2021-04-28 University of Rochester Methods of treating or inhibiting onset of huntington's disease
WO2020013315A1 (ja) 2018-07-13 2020-01-16 国立大学法人京都大学 γδＴ細胞の製造方法
EP3824912A4 (en) 2018-07-19 2022-04-20 Kyoto University PLATEFORM CARTILAGE DERIVED FROM PLURIPOTENTS STEM CELLS AND METHODS FOR PRODUCTION OF PLATEFORM CARTILAGE
JP7357369B2 (ja) 2018-07-23 2023-10-06 国立大学法人京都大学 新規腎前駆細胞マーカーおよびそれを利用した腎前駆細胞の濃縮方法
US20210292708A1 (en) 2018-08-03 2021-09-23 Kyoto University Cell production method
US20210301260A1 (en) 2018-08-10 2021-09-30 Kyoto University Method for producing cd3-positive cell
EP3833365A4 (en) 2018-08-10 2022-05-11 Vertex Pharmaceuticals Incorporated ISLE DIFFERENTIATION DERIVED FROM STEM CELLS
US20220145329A1 (en) 2018-08-10 2022-05-12 Kyoto University Method for transfection into cardiomyocytes using cationic lipid
CN112839667A (zh) 2018-08-14 2021-05-25 国立研究开发法人国立国际医疗研究中心 褐色脂肪细胞上清、其制备法及使用
CN112567016A (zh) 2018-08-20 2021-03-26 爱平世股份有限公司 细胞培养器
CN112601813A (zh) 2018-08-20 2021-04-02 田边刚士 细胞的培养或诱导方法
EP3842525A4 (en) 2018-08-22 2022-07-27 Kyoto University PROCEDURE FOR GENERATING A NERVE PROGENIOR CELL OF THE INTESTINAL TRACT
SG11202101930XA (en) 2018-08-31 2021-03-30 Noile Immune Biotech Inc Car-expressing t cells and car expression vector
US20210353686A1 (en) 2018-09-19 2021-11-18 Takeda Pharmaceutical Company Limited Insulin-producing cells
EP3800246A4 (en) 2018-10-10 2022-04-20 National University Corporation Tottori University METHOD FOR THE PRODUCTION OF HUMAN INDUCED PLURIPOTENT STEM CELLS CONTAINING AN EXOGENOUS CHROMOSOME
JP7010442B2 (ja) 2018-10-10 2022-01-26 国立大学法人鳥取大学 微小核細胞融合法による目的ｄｎａを含む動物細胞の作製方法
CA3116098A1 (en) 2018-10-12 2020-04-16 Vivet Therapeutics Codon-optimized transgene for the treatment of progressive familiar intrahepatic cholestasis type 3 (pfic3)
EP3868869A4 (en) 2018-10-15 2022-08-03 Public University Corporation Yokohama City University NUTRITIONAL COMPOSITION
WO2020090903A1 (ja) 2018-10-31 2020-05-07 国立大学法人京都大学 中内胚葉系への分化抵抗性が解除された多能性幹細胞の作製方法
WO2020095592A1 (ja) 2018-11-07 2020-05-14 剛士 田邊 医薬品組成物及び化粧品組成物
CN112955186A (zh) 2018-11-07 2021-06-11 维韦特治疗公司 用于治疗进行性家族性肝内胆汁淤积症2型(pfic2)的密码子优化的abcb11转基因
US20210369870A1 (en) 2018-11-16 2021-12-02 Encoded Therapeutics, Inc. Compositions and methods for treating wilson's disease
CN117982733A (zh) 2018-11-19 2024-05-07 美国政府(由卫生和人类服务部的部长所代表) 可生物降解的组织置换植入物及其用途
EA202191463A1 (ru) 2018-11-28 2021-10-13 Борд Оф Риджентс, Дзе Юниверсити Оф Техас Систем Мультиплексное редактирование генома иммунных клеток для повышения функциональности и устойчивости к подавляющей среде
WO2020116606A1 (ja) 2018-12-06 2020-06-11 キリンホールディングス株式会社 Ｔ細胞又はｎｋ細胞の製造方法、ｔ細胞又はｎｋ細胞の培養用培地、ｔ細胞又はｎｋ細胞の培養方法、未分化ｔ細胞の未分化状態を維持する方法及びｔ細胞又はｎｋ細胞の増殖促進剤
AU2019396450A1 (en) 2018-12-11 2021-06-24 University Of Rochester Methods of treating schizophrenia and other neuropsychiatric disorders
WO2020130147A1 (ja) 2018-12-21 2020-06-25 国立大学法人京都大学 ルブリシン局在軟骨様組織、その製造方法及びそれを含む関節軟骨損傷治療用組成物
EP3903884A4 (en) 2018-12-26 2023-01-25 Kirin Holdings Kabushiki Kaisha MODIFIED TCR AND MANUFACTURING PROCESS THEREOF
JP7542822B2 (ja) 2018-12-27 2024-09-02 国立大学法人京都大学 Ｔ細胞受容体の改変体
WO2020158914A1 (ja) 2019-02-01 2020-08-06 国立大学法人京都大学 細胞の検出方法
US20230057355A1 (en) 2019-02-13 2023-02-23 University Of Rochester Gene networks that mediate remyelination of the human brain
US20220145255A1 (en) 2019-02-26 2022-05-12 Tohoku University Method for producing osteoblast cluster using ips cells
JP7531170B2 (ja) 2019-03-05 2024-08-09 ファナック株式会社 細胞製造システム
MX2021010559A (es) 2019-03-07 2021-12-15 Univ California Polipéptidos efectores de crispr-cas y métodos de uso de estos.
WO2020209959A1 (en) 2019-03-08 2020-10-15 Crispr Therapeutics Ag Nucleobase-editing fusion protein systems, compositions, and uses thereof
EP3937963A2 (en) 2019-03-12 2022-01-19 CRISPR Therapeutics AG Novel high fidelity rna-programmable endonuclease systems and uses thereof
KR20210144793A (ko) 2019-03-29 2021-11-30 고리츠다이가쿠호진 요코하마시리츠다이가쿠 스크리닝 방법 및 독성 평가 방법
EP3950933A4 (en) 2019-03-29 2023-01-11 Kaneka Corporation CELL POPULATION COMPRISING PLURIPOTENT STEM CELLS AND METHOD FOR PRODUCING IT
TW202104590A (zh) 2019-04-10 2021-02-01 國立大學法人京都大學 類生體組織結構體的製造方法
CN113692442A (zh) 2019-04-17 2021-11-23 学校法人庆应义塾 诱导多能干细胞的制造方法以及试剂盒
WO2020225606A1 (en) 2019-05-08 2020-11-12 Crispr Therapeutics Ag Crispr/cas all-in-two vector systems for treatment of dmd
CN113811316A (zh) 2019-05-15 2021-12-17 味之素株式会社 神经嵴细胞或角膜上皮细胞的纯化方法
JPWO2020235319A1 (ru) 2019-05-20 2020-11-26
CN113874488A (zh) 2019-06-10 2021-12-31 爱平世股份有限公司 红细胞除去装置、单核细胞回收器、细胞培养装置、细胞培养系统、细胞培养方法及单核细胞的回收方法
WO2020250927A1 (ja) 2019-06-10 2020-12-17 アイ ピース， インコーポレイテッド 赤血球除去装置、単核球回収器、細胞培養装置、細胞培養システム、細胞培養方法、及び単核球の回収方法
US20220313733A1 (en) 2019-06-11 2022-10-06 Kyoto University Method for producing renal interstitial cell
EP3990624A1 (en) 2019-06-25 2022-05-04 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Enhanced differentiation of beta cells
CN113811597B (zh) 2019-06-28 2024-06-18 爱平世股份有限公司 细胞培养装置的应用
JP7037141B2 (ja) 2019-06-28 2022-03-16 アイ ピース，インコーポレイテッド 細胞塊分割器、細胞塊分割器の製造方法、及び細胞塊の分割方法
US20220260580A1 (en) 2019-07-19 2022-08-18 Tokyo Electron Limited Method for evaluating state of cell differentiation
US10501404B1 (en) 2019-07-30 2019-12-10 Factor Bioscience Inc. Cationic lipids and transfection methods
WO2021030424A1 (en) 2019-08-13 2021-02-18 Semma Therapeutics, Inc. Pancreatic differentiation
JP7541748B2 (ja) 2019-08-20 2024-08-29 オリヅルセラピューティクス株式会社 心筋細胞の富化方法
CN114341337A (zh) 2019-08-29 2022-04-12 发那科株式会社 细胞制造装置
CN114341340A (zh) 2019-08-29 2022-04-12 发那科株式会社 细胞制造装置及其系统
WO2021038996A1 (ja) 2019-08-29 2021-03-04 ファナック株式会社 細胞製造装置及びその製造方法
JPWO2021066076A1 (ru) 2019-10-01 2021-04-08
JPWO2021079874A1 (ru) 2019-10-21 2021-04-29
WO2021085639A1 (ja) 2019-10-31 2021-05-06 株式会社生命科学インスティテュート 多能性幹細胞による間質性膀胱炎の治療
WO2021085576A1 (ja) 2019-11-01 2021-05-06 国立大学法人京都大学 Ｔ細胞の製造方法
US20220403307A1 (en) 2019-11-06 2022-12-22 I Peace, Inc. Cell culture device
EP4060023A4 (en) 2019-11-12 2023-12-13 Juntendo Educational Foundation METHOD FOR DIRECT TRANSDIFFERENTIATION OF A SOMATIC CELL
US20230000915A1 (en) 2019-11-25 2023-01-05 Kyoto University T-cell master cell bank
JP7058431B2 (ja) 2019-12-12 2022-04-22 国立大学法人千葉大学 巨核球および血小板を含む凍結乾燥製剤
FR3105260A1 (fr) 2019-12-20 2021-06-25 Centre National De La Recherche Scientifique (Cnrs) Modèle organoïde cardiaque vascularisé apres incorporation de cardiomyocytes dérivés de cellules souches pluripotentes induites humaines
US20210292713A1 (en) 2020-02-28 2021-09-23 Millennium Pharmaceuticals, Inc. Method for producing natural killer cells from pluripotent stem cells
JP2023516484A (ja) 2020-03-11 2023-04-19 ビット バイオ リミテッド 肝細胞作製方法
IL296353A (en) 2020-03-13 2022-11-01 Goliver Therapeutics Hepatic stem-like cells and their uses in the treatment and or prevention of liver diseases
EP4123010A4 (en) 2020-03-18 2024-03-27 Fanuc Corporation MICROSCOPE OBSERVATION SYSTEM
CA3175573A1 (en) 2020-03-19 2021-09-23 Orizuru Therapeutics, Inc. Cardiomyocyte purification method
JPWO2021187602A1 (ru) 2020-03-19 2021-09-23
WO2021193360A1 (ja) 2020-03-24 2021-09-30 株式会社カネカ 膵臓α細胞への分化誘導方法
US20230159891A1 (en) 2020-03-31 2023-05-25 Kyoto University T cell progenitor production method
US20230134859A1 (en) 2020-03-31 2023-05-04 Sky Pharma Co., Ltd. Method for screening for, method for producing, and method for designing drug active ingredients
CN115551998A (zh) 2020-05-26 2022-12-30 希里欧斯株式会社 低免疫原性细胞
JPWO2021241668A1 (ru) 2020-05-28 2021-12-02
JP2023536210A (ja) 2020-05-29 2023-08-24 フジフィルム セルラー ダイナミクス，インコーポレイテッド 網膜色素上皮及び光受容体の二重層、並びにその使用
AU2021280343A1 (en) 2020-05-29 2022-12-08 FUJIFILM Cellular Dynamics, Inc. Retinal pigmented epithelium and photoreceptor dual cell aggregates and methods of use thereof
US20230235319A1 (en) 2020-06-12 2023-07-27 Bayer Aktiengesellschaft Crispr-cas12a directed random mutagenesis agents and methods
JPWO2021256522A1 (ru) 2020-06-17 2021-12-23
JP7429294B2 (ja) 2020-07-13 2024-02-07 国立大学法人京都大学 骨格筋前駆細胞及びその精製方法、筋原性疾患を治療するための組成物、並びに骨格筋前駆細胞を含む細胞群の製造方法
JPWO2022019152A1 (ru) 2020-07-20 2022-01-27
US20230265456A1 (en) 2020-08-10 2023-08-24 Fundacion Para La Investigacion Medica Aplicada Gene therapy vector expressing cyp27a1 for the treatment of cerebrotendinous xanthomatosis
CN116323917A (zh) 2020-08-18 2023-06-23 国立大学法人京都大学 人原始生殖细胞/人原始生殖细胞样细胞的维持扩增方法
JPWO2022050419A1 (ru) 2020-09-04 2022-03-10
JP2023542728A (ja) 2020-09-29 2023-10-11 ジェネトン ユートロフィン調節エレメント内に変異を誘導することによる細胞におけるユートロフィン発現の増強、及びその治療的使用
WO2022104109A1 (en) 2020-11-13 2022-05-19 Catamaran Bio, Inc. Genetically modified natural killer cells and methods of use thereof
WO2022107877A1 (ja) 2020-11-20 2022-05-27 オリヅルセラピューティクス株式会社 成熟化剤
US20220162288A1 (en) 2020-11-25 2022-05-26 Catamaran Bio, Inc. Cellular therapeutics engineered with signal modulators and methods of use thereof
EP4263818A1 (en) 2020-12-16 2023-10-25 Universitat Pompeu Fabra Therapeutic lama2 payload for treatment of congenital muscular dystrophy
JP2022099262A (ja) 2020-12-22 2022-07-04 アイ ピース，インコーポレイテッド 細胞の培養器及び細胞の培養方法
WO2022136616A1 (en) 2020-12-23 2022-06-30 Vivet Therapeutics Minimal bile acid inducible promoters for gene therapy
KR20230079442A (ko) 2020-12-23 2023-06-07 미쓰이 가가쿠 가부시키가이샤 배양 부재 및 그 용도
EP4269571A1 (en) 2020-12-25 2023-11-01 Kyoto University Method for producing naive human ips cells from somatic cells
JP7536245B2 (ja) 2021-01-26 2024-08-20 アイ ピース，インコーポレイテッド オリゴデンドロサイトの作製方法
CA3208794A1 (en) 2021-02-09 2022-08-18 Orizuru Therapeutics, Inc. Maturation agent
EP4306633A1 (en) 2021-03-09 2024-01-17 National University Corporation Tokyo Medical and Dental University Cell cluster production method
US20240182858A1 (en) 2021-03-17 2024-06-06 Astellas Pharma Inc. Pericyte having basic fibroblast growth factor (bfgf) gene introduced therein
EP4060026A1 (en) 2021-03-19 2022-09-21 Technische Universität Dresden Ex-vivo proliferation of human phagocytic cells
EP4308132A1 (en) 2021-03-19 2024-01-24 Technische Universität Dresden Human macrophages resistant to tumor-induced repolarization
EP4134086A1 (en) 2021-08-12 2023-02-15 Technische Universität Dresden Human macrophages resistant to tumor-induced repolarization
US20240279612A1 (en) 2021-04-01 2024-08-22 Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale Liver organoid manufacturing methods, liver organoids obtained with the same, and uses thereof
WO2022215718A1 (ja) 2021-04-08 2022-10-13 武田薬品工業株式会社 Ｔ細胞活性化方法
EP4332215A1 (en) 2021-04-28 2024-03-06 National University Corporation Tokyo Medical and Dental University Method for producing cells
WO2022230977A1 (ja) 2021-04-30 2022-11-03 国立研究開発法人理化学研究所 網膜色素上皮細胞のひも状凝集体、それを製造するためのデバイスおよび製造方法、ならびに該ひも状凝集体を含有する治療薬
WO2022236187A1 (en) 2021-05-07 2022-11-10 Children's Hospital Los Angeles Methods for making stem cell-derived enteric neural crest cells and their use in enteric neuropathy treatment
US20220389436A1 (en) 2021-05-26 2022-12-08 FUJIFILM Cellular Dynamics, Inc. Methods to prevent rapid silencing of genes in pluripotent stem cells
AU2022282379A1 (en) 2021-05-28 2023-11-30 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Biodegradable tissue scaffold with secondary matrix to host weakly adherent cells
EP4347795A1 (en) 2021-05-28 2024-04-10 The United States of America, as represented by The Secretary, Department of Health and Human Services Methods to generate macular, central and peripheral retinal pigment epithelial cells
EP4352205A1 (en) 2021-06-07 2024-04-17 Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale (INSERM) Method for generating highly functional hepatocytes by differentiating hepatoblasts
WO2022259721A1 (ja) 2021-06-10 2022-12-15 味の素株式会社 間葉系幹細胞の製造方法
US20240141312A1 (en) 2021-06-11 2024-05-02 Bayer Aktiengesellschaft Type v rna programmable endonuclease systems
EP4101928A1 (en) 2021-06-11 2022-12-14 Bayer AG Type v rna programmable endonuclease systems
JP2024523332A (ja) 2021-06-15 2024-06-28 武田薬品工業株式会社 多能性幹細胞からナチュラルキラー細胞を産生するための方法
JPWO2023277195A1 (ru) 2021-06-29 2023-01-05
JPWO2023286834A1 (ru) 2021-07-15 2023-01-19
WO2023286832A1 (ja) 2021-07-15 2023-01-19 アステラス製薬株式会社 血管内皮増殖因子（ｖｅｇｆ）高発現ペリサイト様細胞の製造方法
EP4374914A1 (en) 2021-07-21 2024-05-29 Kyoto University Method for producing retinal tissue
WO2023017848A1 (ja) 2021-08-11 2023-02-16 国立大学法人京都大学 腎間質前駆細胞の製造方法並びにエリスロポエチン産生細胞、およびレニン産生細胞の製造方法
EP4144841A1 (en) 2021-09-07 2023-03-08 Bayer AG Novel small rna programmable endonuclease systems with impoved pam specificity and uses thereof
US20230078230A1 (en) 2021-09-13 2023-03-16 FUJIFILM Cellular Dynamics, Inc. Methods for the production of committed cardiac progenitor cells
CN118056007A (zh) 2021-09-27 2024-05-17 国立大学法人京都大学 用于生产t细胞的方法
WO2023053220A1 (ja) 2021-09-28 2023-04-06 公益財団法人京都大学ｉＰＳ細胞研究財団 多能性幹細胞の製造方法
US20230292719A1 (en) 2021-10-20 2023-09-21 University Of Rochester Humanized chimeras for the prospective assessment of cell addition and replacement therapies
AU2022371414A1 (en) 2021-10-20 2024-05-02 University Of Copenhagen Isolated glial progenitor cells for use in the competition treatment of age-related white matter loss
EP4419654A1 (en) 2021-10-20 2024-08-28 University of Rochester Method for rejuvenating glial progenitor cells and rejuvenated glial progenitor cells per se
AU2022371442A1 (en) 2021-10-21 2024-04-18 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Hypoimmune cells
IL311636A (en) 2021-11-01 2024-05-01 Vertex Pharma Differentiation of stem cell-derived pancreatic islets
US20230270818A1 (en) 2021-11-02 2023-08-31 University Of Rochester Tcf7l2 mediated remyelination in the brain
CA3238206A1 (en) 2021-11-11 2023-05-19 Healios K.K. Gene-modified pluripotent stem cell, immunocompetent cell derived therefrom, method for producing said cells, and use thereof
JPWO2023085433A1 (ru) 2021-11-15 2023-05-19
KR20240099271A (ko) 2021-11-16 2024-06-28 각코 호진 도쿄 약카 다이가쿠 프로모터 활성화 서열, 그 프로모터 활성화 서열을 포함하는 발현 벡터, 및 그 발현 벡터를 포함하는 포유 동물 세포
WO2023090361A1 (ja) 2021-11-16 2023-05-25 国立大学法人鳥取大学 改変ｄ領域を含むヒト免疫グロブリン重鎖遺伝子座を有する哺乳動物人工染色体ベクター、及びそのベクターを保持する細胞又は非ヒト動物
WO2023118068A1 (en) 2021-12-23 2023-06-29 Bayer Aktiengesellschaft Novel small type v rna programmable endonuclease systems
WO2023150557A1 (en) 2022-02-01 2023-08-10 University Of Rochester Methods of generating a population of neurons from human glial progenitor cells and genetic constructs for carrying out such methods
JPWO2023149555A1 (ru) 2022-02-04 2023-08-10
CN118679244A (zh) 2022-02-09 2024-09-20 住友制药株式会社 判定培养液中的细胞在由多能干细胞向中脑底板区域的神经系统细胞的分化中的分化能力的方法
WO2023157727A1 (ja) 2022-02-15 2023-08-24 国立大学法人神戸大学 ヒト多能性幹細胞由来ライディッヒ様細胞の作製方法及びヒト多能性幹細胞由来ライディッヒ様細胞集団
JP7315184B2 (ja) 2022-02-16 2023-07-26 株式会社コーセー 多能性幹細胞から表皮角化細胞への分化誘導方法
WO2023167986A1 (en) 2022-03-02 2023-09-07 Lineage Cell Therapeutics, Inc. Methods and compositions for treating hearing loss
WO2023172514A1 (en) 2022-03-07 2023-09-14 Catamaran Bio, Inc. Engineered immune cell therapeutics targeted to her2 and methods of use thereof
WO2023171808A1 (ja) 2022-03-11 2023-09-14 慶應義塾 脊髄損傷治療剤
WO2023211857A1 (en) 2022-04-25 2023-11-02 Lineage Cell Therapeutics, Inc. Methods and compositions for treating vision loss
WO2023215455A1 (en) 2022-05-05 2023-11-09 University Of Rochester Dual macroglial-microglial approach towards therapeutic cell replacement in neurodegenerative and neuropsychiatric disease
WO2023237587A1 (en) 2022-06-10 2023-12-14 Bayer Aktiengesellschaft Novel small type v rna programmable endonuclease systems
WO2023247532A1 (en) 2022-06-21 2023-12-28 Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale A method for producing a bioengineered mammal induced pluripotent stem cell-derived cardiac organoid
US20240003871A1 (en) 2022-06-29 2024-01-04 FUJIFILM Cellular Dynamics, Inc. Ipsc-derived astrocytes and methods of use thereof
EP4338745A1 (en) 2022-09-14 2024-03-20 Technische Universität Dresden Allogeneic human macrophages for cell therapy
US20240139256A1 (en) 2022-09-30 2024-05-02 FUJIFILM Cellular Dynamics, Inc. Methods for the production of cardiac fibroblasts
WO2024129743A2 (en) 2022-12-13 2024-06-20 Bluerock Therapeutics Lp Engineered type v rna programmable endonucleases and their uses
WO2024163747A2 (en) 2023-02-02 2024-08-08 University Of Rochester Competitive replacement of glial cells
WO2024167814A1 (en) 2023-02-06 2024-08-15 Bluerock Therapeutics Lp Degron fusion proteins and methods of production and use thereof
WO2024192329A1 (en) 2023-03-16 2024-09-19 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Methods for producing stable human chondroctyes and their use for promoting cartillage growth and repair

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2002097090A1 (en) * 2001-05-31 2002-12-05 Sumitomo Pharmaceuticals Co., Ltd. Genes with es cell-specific expression
JP2004161682A (ja) * 2002-11-13 2004-06-10 Univ Kinki 体細胞核初期化因子
WO2005080598A1 (ja) * 2004-02-19 2005-09-01 Dainippon Sumitomo Pharma Co., Ltd. 体細胞核初期化物質のスクリーニング方法

Family Cites Families (154)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US70292A (en) * 1867-10-29 Petess
US4650761A (en) * 1981-11-27 1987-03-17 Eli Lilly And Company Method for stabilizing and selecting recombinant DNA containing host cell
US4650764A (en) 1983-04-12 1987-03-17 Wisconsin Alumni Research Foundation Helper cell
US4861719A (en) 1986-04-25 1989-08-29 Fred Hutchinson Cancer Research Center DNA constructs for retrovirus packaging cell lines
US4937190A (en) 1987-10-15 1990-06-26 Wisconsin Alumni Research Foundation Translation enhancer
US5192553A (en) 1987-11-12 1993-03-09 Biocyte Corporation Isolation and preservation of fetal and neonatal hematopoietic stem and progenitor cells of the blood and methods of therapeutic use
US6140111A (en) 1987-12-11 2000-10-31 Whitehead Institute For Biomedical Research Retroviral gene therapy vectors and therapeutic methods based thereon
US7070994B2 (en) 1988-03-21 2006-07-04 Oxford Biomedica (Uk) Ltd. Packaging cells
US5591624A (en) 1988-03-21 1997-01-07 Chiron Viagene, Inc. Retroviral packaging cell lines
JP2886547B2 (ja) 1988-07-26 1999-04-26 協和醗酵工業株式会社 ノイラミニダーゼの製造法
WO1990002806A1 (en) 1988-09-01 1990-03-22 Whitehead Institute For Biomedical Research Recombinant retroviruses with amphotropic and ecotropic host ranges
US5266491A (en) 1989-03-14 1993-11-30 Mochida Pharmaceutical Co., Ltd. DNA fragment and expression plasmid containing the DNA fragment
JP3051411B2 (ja) 1989-03-14 2000-06-12 持田製薬株式会社 新規ｄｎａならびにそれを含有する発現プラスミド
JP2897295B2 (ja) 1989-12-14 1999-05-31 味の素株式会社 レトロウィルス高生産用ｄｎａ構築物及びレトロウィルス高生産用細胞株
US5674980A (en) 1989-12-21 1997-10-07 Biogen Inc Fusion protein comprising tat-derived transport moiety
US5817491A (en) 1990-09-21 1998-10-06 The Regents Of The University Of California VSV G pseusdotyped retroviral vectors
US5288514A (en) 1992-09-14 1994-02-22 The Regents Of The University Of California Solid phase and combinatorial synthesis of benzodiazepine compounds on a solid support
US5834256A (en) 1993-06-11 1998-11-10 Cell Genesys, Inc. Method for production of high titer virus and high efficiency retroviral mediated transduction of mammalian cells
FR2707091B1 (fr) 1993-06-30 1997-04-04 Cohen Haguenauer Odile Vecteur rétroviral pour le transfert et l'expression de gènes dans des cellules eucaryotes.
US5534423A (en) 1993-10-08 1996-07-09 Regents Of The University Of Michigan Methods of increasing rates of infection by directing motion of vectors
US5519134A (en) 1994-01-11 1996-05-21 Isis Pharmaceuticals, Inc. Pyrrolidine-containing monomers and oligomers
US6013517A (en) 1994-05-09 2000-01-11 Chiron Corporation Crossless retroviral vectors
US5525735A (en) 1994-06-22 1996-06-11 Affymax Technologies Nv Methods for synthesizing diverse collections of pyrrolidine compounds
US5549974A (en) 1994-06-23 1996-08-27 Affymax Technologies Nv Methods for the solid phase synthesis of thiazolidinones, metathiazanones, and derivatives thereof
PT787200E (pt) 1994-10-28 2005-08-31 Univ Pennsylvania Adenovirus melhorado e metodos para a sua utilizacao
US5843780A (en) 1995-01-20 1998-12-01 Wisconsin Alumni Research Foundation Primate embryonic stem cells
US5637456A (en) 1995-02-17 1997-06-10 The University Of Texas, Board Of Regents Rapid test for determining the amount of functionally inactive gene in a gene therapy vector preparation
US5707618A (en) 1995-03-24 1998-01-13 Genzyme Corporation Adenovirus vectors for gene therapy
US5830725A (en) 1995-04-28 1998-11-03 The Board Of Trustees For The Leland Stanford Junior University Rapid, stable high-titre production of recombing retrovirus
US5744320A (en) 1995-06-07 1998-04-28 Promega Corporation Quenching reagents and assays for enzyme-mediated luminescence
ATE365808T1 (de) 1995-07-28 2007-07-15 Marie Curie Cancer Care Transportproteine und deren verwendungen
US6153745A (en) 1995-09-22 2000-11-28 Amersham Pharmacia Biotech Uk Limited Relating to mutagenesis of nucleic acids
US5910434A (en) 1995-12-15 1999-06-08 Systemix, Inc. Method for obtaining retroviral packaging cell lines producing high transducing efficiency retroviral supernatant
FR2751345B1 (fr) 1996-07-16 1998-09-18 Univ Paris Curie Lignees d'encapsidation hautement productrices
US6255071B1 (en) 1996-09-20 2001-07-03 Cold Spring Harbor Laboratory Mammalian viral vectors and their uses
US6025192A (en) 1996-09-20 2000-02-15 Cold Spring Harbor Laboratory Modified retroviral vectors
US6017735A (en) 1997-01-23 2000-01-25 Marie Curie Cancer Care Materials and methods for intracellular transport and their uses
US6416959B1 (en) 1997-02-27 2002-07-09 Kenneth Giuliano System for cell-based screening
WO1999010536A1 (en) 1997-08-22 1999-03-04 Yale University A process to study changes in gene expression in granulocytic cells
JPH11115328A (ja) * 1997-10-16 1999-04-27 Dainippon Printing Co Ltd 熱転写受像シート及びその製造方法
US6835567B1 (en) * 1998-04-14 2004-12-28 Signal Pharmaceuticals, Inc. PNS cell lines and methods of use therefor
US20020174013A1 (en) 1998-04-17 2002-11-21 Viztec Inc., A Florida Corporation Chip card advertising method and system
US6146874A (en) 1998-05-27 2000-11-14 University Of Florida Method of preparing recombinant adeno-associated virus compositions
KR20000006334A (ko) 1998-06-26 2000-01-25 이선경 바이러스코딩염기서열이전혀없는고효율레트로바이러스벡터
US6485959B1 (en) 1998-10-07 2002-11-26 Cedars Sinai Medical Center Cell preconditioning and cryopresevation medium
AU6339399A (en) 1998-10-16 2000-05-08 Novartis Ag Promotion of self-renewal and improved gene transduction of hematopoietic stem cells by histone deacetylase inhibitors
US6667176B1 (en) 2000-01-11 2003-12-23 Geron Corporation cDNA libraries reflecting gene expression during growth and differentiation of human pluripotent stem cells
JP2002529070A (ja) * 1998-11-09 2002-09-10 モナシュ・ユニヴァーシティ 胚性幹細胞
US6376246B1 (en) 1999-02-05 2002-04-23 Maxygen, Inc. Oligonucleotide mediated nucleic acid recombination
US6153432A (en) 1999-01-29 2000-11-28 Zen-Bio, Inc Methods for the differentiation of human preadipocytes into adipocytes
US6312949B1 (en) 1999-03-26 2001-11-06 The Salk Institute For Biological Studies Regulation of tyrosine hydroxylase expression
US6773920B1 (en) 1999-03-31 2004-08-10 Invitrogen Corporation Delivery of functional protein sequences by translocating polypeptides
AU4952500A (en) 1999-06-01 2000-12-18 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Packaging cell
US7015037B1 (en) 1999-08-05 2006-03-21 Regents Of The University Of Minnesota Multiponent adult stem cells and methods for isolation
US6881825B1 (en) 1999-09-01 2005-04-19 University Of Pittsburgh Of The Commonwealth System Of Higher Education Identication of peptides that facilitate uptake and cytoplasmic and/or nuclear transport of proteins, DNA and virues
WO2001021767A2 (en) 1999-09-24 2001-03-29 Morphogen Pharmaceuticals, Inc. Pluripotent embryonic-like stem cells, compositions, methods and uses thereof
US20030161817A1 (en) 2001-03-28 2003-08-28 Young Henry E. Pluripotent embryonic-like stem cells, compositions, methods and uses thereof
US6280718B1 (en) 1999-11-08 2001-08-28 Wisconsin Alumni Reasearch Foundation Hematopoietic differentiation of human pluripotent embryonic stem cells
US7544509B2 (en) 2000-01-24 2009-06-09 Mcgill University Method for preparing stem cell preparations
US6395546B1 (en) 2000-02-01 2002-05-28 Neurogeneration, Inc. Generation of dopaminergic neurons from human nervous system stem cells
US7439064B2 (en) 2000-03-09 2008-10-21 Wicell Research Institute, Inc. Cultivation of human embryonic stem cells in the absence of feeder cells or without conditioned medium
US6458589B1 (en) 2000-04-27 2002-10-01 Geron Corporation Hepatocyte lineage cells derived from pluripotent stem cells
CN100580079C (zh) 2000-05-17 2010-01-13 杰龙公司 神经祖细胞群体
WO2001096532A2 (en) 2000-06-15 2001-12-20 Tanja Dominko Method of generating pluripotent mammalian cells by fusion of a cytoplast fragment with a karyoplast
DE10031179A1 (de) 2000-06-27 2002-01-31 Amaxa Gmbh Verfahren zur Einbringung von Nukleinsäuren und anderen biologisch aktiven Molekülen in den Kern höherer eukaryontischer Zellen mit Hilfe elektrischen Stroms
CA2417454A1 (en) 2000-07-31 2002-02-07 Active Motif Peptide-mediated delivery of molecules into cells
JP2002065261A (ja) 2000-08-30 2002-03-05 Mitsubishi Kasei Institute Of Life Sciences 生殖細胞の取得方法
US6910434B2 (en) 2000-08-31 2005-06-28 Edwin Lundgren Control device for steering kite on a boat
US20020127715A1 (en) 2000-11-27 2002-09-12 Nissim Benvenisty Transfection of human embryonic stem cells
US20080268054A1 (en) 2000-12-04 2008-10-30 Eugene Bell Dermal derived human stem cells and compositions and methods thereof
RU2338544C2 (ru) 2001-01-02 2008-11-20 Стемрон Инк. Способ получения популяции гомозиготных стволовых клеток с предварительно отобранным иммунотипом и/или генотипом, клетки, подходящие для получения из них трансплантата, и материалы и способы их получения
EP1356024A2 (en) * 2001-01-31 2003-10-29 Interface Biotech A/S An improved in vitro method of culturing mammalian cells for autologous cell implantation/transplantation methods
JP2003009854A (ja) 2001-04-09 2003-01-14 Kyowa Hakko Kogyo Co Ltd エンブリオイドボディ形成方法及びその用途
DE10291734D2 (de) 2001-04-23 2004-05-27 Lorbach Elke Pufferlösung für die Elektroporation und Verfahren umfassend die Verwendung derselben
DE10119901A1 (de) 2001-04-23 2002-10-24 Amaxa Gmbh Schaltungsanordnung zur Einbringung von Nukleinsäuren und anderen biologisch aktiven Molekülen in den Kern höherer eukaryontischer Zellen mit Hilfe elektrischen Stroms
WO2003018780A1 (en) 2001-08-27 2003-03-06 Advanced Cell Technology, Inc. De-differentiation and re-differentiation of somatic cells and production of cells for cell therapies
JPWO2003027281A1 (ja) 2001-09-20 2005-01-06 協和醗酵工業株式会社 骨格筋間質由来多分化能幹細胞
EP1437403A4 (en) 2001-09-21 2004-10-27 Japan Science & Tech Corp METHOD FOR PATTERNING REPROGRAMMING FACTOR, METHOD OF PATTERNED REPROGRAMMING FACTOR, METHOD FOR USE OF REPROGRAMMING FACTOR, METHOD FOR DIFFERENTIATING AND SIFE-INGENATING FAN
JP2004248505A (ja) * 2001-09-21 2004-09-09 Norio Nakatsuji 移植抗原の一部または全てを欠除したｅｓ細胞由来の未分化な体細胞融合細胞およびその製造
US7588937B2 (en) 2001-10-03 2009-09-15 Wisconsin Alumni Research Foundation Method of in vitro differentiation of neural stem cells, motor neurons and dopamine neurons from primate embryonic stem cells
DE10162080A1 (de) 2001-12-10 2003-06-26 Albrecht Mueller Verfahren zur Herstellung von Stammzellen mit erhöhtem Entwicklungspotential
DE60236016D1 (de) * 2001-12-21 2010-05-27 Mount Sinai Hospital Corp Zelluläre zusammensetzungen und verfahren zur deren bereitung und verwendung
WO2003064634A1 (fr) 2002-01-31 2003-08-07 Asahi Techno Glass Corporation Liquide permettant le stockage a l'etat congele de cellules souches embryonnaires de primates et procede de stockage par congelation
JP2005517402A (ja) * 2002-02-13 2005-06-16 アンスロジェネシス コーポレーション 分娩後の哺乳動物胎盤由来の胚様幹細胞、ならびに該細胞の用途および該細胞を用いる治療法
ES2198216B1 (es) * 2002-07-02 2005-04-16 Juan Carlos Instituto Cientifico Y Tecnologico De Navarra, S.A.(67%). Medio de cultivo de celulas madre-progenitoras autologas humanas y sus aplicaciones.
US7422736B2 (en) 2002-07-26 2008-09-09 Food Industry Research And Development Institute Somatic pluripotent cells
US20040048297A1 (en) 2002-07-30 2004-03-11 Gene Logic, Inc. Nucleic acid detection assay control genes
AU2003901099A0 (en) 2003-03-11 2003-03-27 Es Cell International Pte Ltd. Methods of inducing differentiation of stem cells
EP1619242A4 (en) * 2003-03-25 2006-09-06 Japan Science & Tech Agency CONTROL OF INDUCTION OF DIFFERENTIATION OF STEM CELLS AND DIFFERENTIATION CAPACITY
CN1536076A (zh) * 2003-04-09 2004-10-13 中国人民解放军军事医学科学院野战输 成年人骨髓间充质干细胞体外扩增和定向诱导分化为心肌样细胞的方法
US9567591B2 (en) 2003-05-15 2017-02-14 Mello Biotechnology, Inc. Generation of human embryonic stem-like cells using intronic RNA
JPWO2004101775A1 (ja) 2003-05-16 2006-07-13 協和醗酵工業株式会社 新規な成体組織由来の幹細胞およびその用途
WO2005010524A1 (en) 2003-06-04 2005-02-03 Curis, Inc. Stem cell-based methods for identifying and characterizing agents
FR2859219B1 (fr) * 2003-09-02 2005-10-14 Alain Privat Procede de production de neurones a partir de cellules d'une lignee cellulaire
JP2005095027A (ja) 2003-09-22 2005-04-14 Reprocell Inc 細胞の未分化状態マーカープロモーターおよびその利用
WO2005035741A1 (ja) 2003-10-09 2005-04-21 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. ゲノムが改変された細胞
WO2005047524A2 (en) 2003-11-10 2005-05-26 The Scripps Research Institute Compositions and methods for inducing cell dedifferentiation
US7682828B2 (en) 2003-11-26 2010-03-23 Whitehead Institute For Biomedical Research Methods for reprogramming somatic cells
CA2549158A1 (en) 2003-12-01 2005-06-16 Technion Research And Development Foundation Ltd. Methods of generating stem cells and embryonic bodies carrying disease-causing mutations and methods of using same for studying genetic disorders
WO2005065354A2 (en) * 2003-12-31 2005-07-21 The Burnham Institute Defined media for pluripotent stem cell culture
CN1934245B (zh) 2004-03-23 2012-07-04 第一三共株式会社 多能干细胞的增殖方法
AU2004318461B9 (en) * 2004-03-30 2009-02-26 Kyoto University Process for producing multipotential stem cell originating in testoid cell
WO2005117557A2 (en) 2004-06-01 2005-12-15 San Diego State University Foundation Expression system
US20070202592A1 (en) 2004-07-08 2007-08-30 Yasuo Kitagawa Pluripotent Cells Distributed Ubiquitously In Animal Tissue, Which Proliferate Selectively In Lower-Serum Culture
WO2006084229A2 (en) 2004-07-15 2006-08-10 Primegen Biotech, Llc Use of nuclear material to therapeutically reprogram differentiated cells
US20060088599A1 (en) 2004-08-02 2006-04-27 Prasad Paras N Amino functionalized ORMOSIL nanoparticles as delivery vehicles
EP1811023A4 (en) 2004-09-29 2009-04-29 Dainippon Sumitomo Pharma Co SPECIFICALLY EXPRESSED IN ES CELLS AND USE THEREOF
US20060095319A1 (en) 2004-10-29 2006-05-04 Cardwell Carlzo B Marketing and compensation method
WO2006088867A2 (en) 2005-02-15 2006-08-24 Medistem Laboratories, Incorporated Method for expansion of stem cells
US20080085555A1 (en) 2005-02-28 2008-04-10 Takayuki Asahara Method For In Vitro Amplification Of Adult Stem Cells
US20070033061A1 (en) 2005-04-05 2007-02-08 Achaogen, Inc. Business methods for commercializing antimicrobial and cytotoxic compounds
WO2007026255A2 (en) 2005-06-22 2007-03-08 Universitetet I Oslo Dedifferentiated cells and methods of making and using dedifferentiated cells
CN101313065A (zh) * 2005-08-01 2008-11-26 纽珀滕索有限公司 具有恢复的潜能的重编程序细胞的生产
AU2006313518A1 (en) 2005-11-11 2007-05-18 The University Court Of University Of Edinburgh Reprogramming and genetic modification of cells
EP3418297B1 (en) 2005-12-13 2023-04-05 Kyoto University Nuclear reprogramming factor
US20090227032A1 (en) 2005-12-13 2009-09-10 Kyoto University Nuclear reprogramming factor and induced pluripotent stem cells
US8278104B2 (en) 2005-12-13 2012-10-02 Kyoto University Induced pluripotent stem cells produced with Oct3/4, Klf4 and Sox2
US8129187B2 (en) 2005-12-13 2012-03-06 Kyoto University Somatic cell reprogramming by retroviral vectors encoding Oct3/4. Klf4, c-Myc and Sox2
JP2009528050A (ja) 2006-02-27 2009-08-06 イムジェン カンパニー リミテッド Ｂｍｉ−１を用いた星状細胞の神経幹細胞への脱分化
US20090252711A1 (en) 2006-05-11 2009-10-08 Andrew Craig Boquest Stem Cells And Methods Of Making And Using Stem Cells
WO2008030610A2 (en) 2006-09-08 2008-03-13 Michigan State University Human transcriptome corresponding to human oocytes and use of said genes or the corresponding polypeptides to trans-differentiate somatic cells
JP2008099662A (ja) 2006-09-22 2008-05-01 Institute Of Physical & Chemical Research 幹細胞の培養方法
US20080132803A1 (en) 2006-11-30 2008-06-05 Hyman Friedlander Method and system for doing business by mining the placental-chord complex
WO2008089351A1 (en) 2007-01-17 2008-07-24 Wisconsin Alumni Research Foundation Improved culture of stem cells
EP2132225A4 (en) 2007-02-27 2010-06-09 Procell Therapeutics Inc COMBINED USE OF NANOG AND OCT4 PERMEABLE TO CELLS TO INCREASE SELF-RENEWAL AND DELETE DIFFERENTIATION OF STEM CELLS
WO2008105566A1 (en) 2007-02-27 2008-09-04 Korea Stem Cell Bank System for providing stem cell services using internet and method thereof
CA2684242C (en) 2007-03-23 2019-11-12 Wisconsin Alumni Research Foundation Somatic cell reprogramming
EP2145000A4 (en) 2007-04-07 2010-05-05 Whitehead Biomedical Inst REPROGRAMMING SOMATIC CELLS
JP2010528613A (ja) 2007-05-29 2010-08-26 クリストファー ビー． リード， 多能細胞集団を産生する方法およびその使用
EP2164951A2 (en) 2007-05-30 2010-03-24 The General Hospital Corporation Methods of generating pluripotent cells from somatic cells
JP2008307007A (ja) 2007-06-15 2008-12-25 Bayer Schering Pharma Ag 出生後のヒト組織由来未分化幹細胞から誘導したヒト多能性幹細胞
US9213999B2 (en) 2007-06-15 2015-12-15 Kyoto University Providing iPSCs to a customer
US20120282229A1 (en) 2007-08-01 2012-11-08 Christian Kannemeier Non-viral delivery of transcription factors that reprogram human somatic cells into a stem cell-like state
US20090191160A1 (en) 2007-08-10 2009-07-30 University Of Dayton Methods of producing pluripotent stem-like cells
ES2589122T3 (es) 2007-08-31 2016-11-10 Whitehead Institute For Biomedical Research Estimulación de la ruta de la Wnt en la reprogramación de células somáticas
CA2660123C (en) 2007-10-31 2017-05-09 Kyoto University Nuclear reprogramming method
WO2009061442A1 (en) 2007-11-06 2009-05-14 Children's Medical Center Corporation Method to produce induced pluripotent stem (ips) cells form non-embryonic human cells
WO2009067563A1 (en) 2007-11-19 2009-05-28 The Regents Of The University Of California Generation of pluripotent cells from fibroblasts
AU2008286249B2 (en) 2007-12-10 2013-10-10 Kyoto University Efficient method for nuclear reprogramming
US9683232B2 (en) 2007-12-10 2017-06-20 Kyoto University Efficient method for nuclear reprogramming
US20090191171A1 (en) 2008-01-18 2009-07-30 Yupo Ma Reprogramming of Differentiated Progenitor or Somatic Cells Using Homologous Recombination
KR101481164B1 (ko) 2008-01-30 2015-01-09 주식회사 미래셀바이오 체세포 유래 다능성 줄기세포의 제조 방법
US20110014164A1 (en) 2008-02-15 2011-01-20 President And Fellows Of Harvard College Efficient induction of pluripotent stem cells using small molecule compounds
WO2009115295A1 (en) 2008-03-17 2009-09-24 Helmholtz Zentrum München - Deutsches Forschungszentrum für Gesundheit und Umwelt (GmbH) Vectors and methods for generating vector-free induced pluripotent stem (ips) cells using site-specific recombination
KR101679082B1 (ko) 2008-03-17 2016-11-23 더 스크립스 리서치 인스티튜트 유도 만능 줄기 세포 생성을 위한 화학적 및 유전적 조합 접근법
CN101250502A (zh) 2008-04-01 2008-08-27 中国科学院上海生命科学研究院 一种诱导的多潜能干细胞的制备方法
CN101550406B (zh) 2008-04-03 2016-02-10 北京大学 制备多潜能干细胞的方法,试剂盒及用途
US20100021437A1 (en) 2008-04-07 2010-01-28 The McLean Hospital Corporation Whitehead Institute for Biomedical Research Neural stem cells derived from induced pluripotent stem cells
SG10201400329YA (en) 2008-05-02 2014-05-29 Univ Kyoto Method of nuclear reprogramming
EP2128245A1 (en) 2008-05-27 2009-12-02 Max-Planck-Gesellschaft zur Förderung der Wissenschaften e.V. Generation of induced pluripotent stem (iPS) cells
JP2011522540A (ja) 2008-06-04 2011-08-04 セルラー ダイナミクス インターナショナル， インコーポレイテッド 非ウイルスアプローチを用いたｉＰＳ細胞の産生のための方法
AU2008360135A1 (en) 2008-07-31 2010-02-04 Gifu University Efficient method for establishing induced pluripotent stem cells
US20100062534A1 (en) 2008-09-09 2010-03-11 The General Hospital Corporation Inducible lentiviral vectors for reprogramming somatic cells
CN105802917A (zh) 2008-10-24 2016-07-27 威斯康星校友研究基金会 通过非病毒重编程获得的多潜能干细胞

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2002097090A1 (en) * 2001-05-31 2002-12-05 Sumitomo Pharmaceuticals Co., Ltd. Genes with es cell-specific expression
JP2004161682A (ja) * 2002-11-13 2004-06-10 Univ Kinki 体細胞核初期化因子
WO2005080598A1 (ja) * 2004-02-19 2005-09-01 Dainippon Sumitomo Pharma Co., Ltd. 体細胞核初期化物質のスクリーニング方法

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Shin'ya YAMANAKA et al. "Mouse Sen'i Gasaibo Kara Yudo Tanosei Kansaibo o Tsukuru Tanpakushitsu Kakusan Koso", 01 December, 2006 (01.12.06), vol. 51, Ôäû 15, p. 2346-2351 *
TAKAHASHI, K. et al. Induction of pluripotent stem cells from mouse embryonic and adult fibroblast cultures by defined factors, Cell., 2006, vol. 126, Ôäû 4, p. 663-76 *
TOKUZAWA, Y. et al. Fbx15 is a novel target of Oct3/4 but is dispensable for embryonic stem cell self-renewal and mouse development, Mol. Cell. Biol., 2003, vol. 23, Ôäû 8, p. 2699-708 *

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2624139C2 (ru) * 2011-12-05 2017-06-30 Фэктор Байосайенс Инк. Способы и препараты для трансфекции клеток
RU2730034C2 (ru) * 2015-04-14 2020-08-14 Киото Юниверсити Способ получения клона стволовых клеток, пригодного для индуцирования дифференцировки в соматические клетки

Also Published As

Publication number Publication date
CN101864392A (zh) 2010-10-20
EP3418297A1 (en) 2018-12-26
AU2006325975A1 (en) 2007-06-21
BRPI0619794B1 (pt) 2020-09-15
CN101356270A (zh) 2009-01-28
PT1970446E (pt) 2011-09-01
IL191903A (en) 2011-11-30
NZ569530A (en) 2011-07-29
JP5248371B2 (ja) 2013-07-31
WO2007069666A1 (ja) 2007-06-21
ZA200804673B (en) 2009-11-25
HK1125967A1 (en) 2009-08-21
ES2367525T3 (es) 2011-11-04
EP4223769A2 (en) 2023-08-09
EA018039B1 (ru) 2013-05-30
JP5098028B2 (ja) 2012-12-12
JP2008283972A (ja) 2008-11-27
EP1970446A4 (en) 2009-04-08
EP2208786B1 (en) 2018-08-01
JP2009165479A (ja) 2009-07-30
KR20080095852A (ko) 2008-10-29
MX352337B (es) 2017-11-21
MX2008007654A (es) 2008-09-26
JP5467223B2 (ja) 2014-04-09
CN101864392B (zh) 2016-03-23
AU2006325975B2 (en) 2011-12-08
JP2014000083A (ja) 2014-01-09
EP1970446A1 (en) 2008-09-17
CA2632142C (en) 2013-08-06
EA201000858A1 (ru) 2011-02-28
EA200870046A1 (ru) 2009-12-30
EP4223769A3 (en) 2023-11-01
JP4411362B2 (ja) 2010-02-10
JP2009165480A (ja) 2009-07-30
CN103773804A (zh) 2014-05-07
BRPI0619794A2 (pt) 2011-10-18
JP2009165478A (ja) 2009-07-30
DK1970446T3 (da) 2011-10-24
JP4411363B2 (ja) 2010-02-10
CN103113463B (zh) 2015-02-18
KR101420740B1 (ko) 2014-07-17
CN103113463A (zh) 2013-05-22
EP1970446B1 (en) 2011-08-03
JP2009165481A (ja) 2009-07-30
JP5603282B2 (ja) 2014-10-08
HK1125131A1 (en) 2009-07-31
CN101356270B (zh) 2014-02-12
CA2632142A1 (en) 2007-06-21
US8048999B2 (en) 2011-11-01
JP4183742B1 (ja) 2008-11-19
EP2208786A1 (en) 2010-07-21
IL191903A0 (en) 2008-12-29
JP5943324B2 (ja) 2016-07-05
EP2206778A1 (en) 2010-07-14
EP3418297B1 (en) 2023-04-05
JP2011188860A (ja) 2011-09-29
EP2206724A1 (en) 2010-07-14
JPWO2007069666A1 (ja) 2009-05-21
EP2206778B1 (en) 2018-08-01
US20090068742A1 (en) 2009-03-12
BRPI0619794B8 (pt) 2022-06-14

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EA014166B1 (ru) Ядерный фактор перепрограммирования
JP6934501B2 (ja) 体細胞の再プログラミング
AU2024203525A1 (en) Reprogramming of somatic cells
AU2020213357B2 (en) Reprogramming of somatic cells

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): AM AZ BY KZ KG MD TJ TM