JP2015501844A - 修飾ヌクレオシド、ヌクレオチドおよび核酸組成物 - Google Patents
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Abstract
Description
OMG、PEG−DMGから選択され得る。融合性脂質は、DSPCであり得る。
修飾mRNAの製剤は、サイズが4から20μmのPLGAマイクロスフェアであり得る。修飾mRNAは、48時間内に製剤から50%未満放出され得る。PLGAマイクロスフェア製剤は、血清中で安定であり得る。安定性は、製剤されていない修飾mRNAに対し90%で決定され得る。
哺乳動物細胞または組織は、限定ではなく、静脈内、筋肉内、硝子体内、くも膜下腔内、腫瘍内、肺および皮下などの投与経路により接触され得る。哺乳動物細胞または組織は、分割投与スケジュールを使用して接触され得る。哺乳動物細胞または組織は、注入により接触され得る。注入は、皮内スペース、表皮、皮下組織および筋肉からなる群より選択される組織に対し行われ得る。目的のポリペプチドは、接触場所から全身に位置する細胞または組織において産生され得る。
修飾mRNAを含む製剤は、脂質ナノ粒子(reLNP)、融合性脂質、コレステロールおよびPEG脂質をモル比50:10:38.5:1.5(reLNP脂質:融合性脂質:コレステロール:PEG脂質)で含み得る速やかに排出されるreLNP脂質を含み得る。融合性脂質は、DSPCであり得、PEG脂質はPEG−c−DOMGであり得る。reLNP脂質内部もしくは末端エステルを含むDLin−DMA内部もしくは末端エステルを含むDLin−MC3−DMAであり得る。全脂質の修飾mRNAに対する重量比は、10:1から30:1であり得る。
修飾mRNAを含む製剤は、脂質がC12−200と98N12−5からなる群より選択されるリピドイドを含み得る。
酸リンゲル液から選択され得る。緩衝製剤は、1から10mMのカルシウム濃度を含み得る。緩衝製剤中の修飾mRNAは、精製されたIVT転写物を含み得る。
セチルシチジン、5−ホルミルシチジン、N4−メチルシチジン、5−ヒドロキシメチルシチジン、1−メチル−シュードイソシチジン、ピロロ−シチジン、ピロロ−シュードイソシチジン、2−チオ−シチジン、2−チオ−5−メチル−シチジン、4−チオ−シュードイソシチジン、4−チオ−1−メチル−シュードイソシチジン、4−チオ−1−メチル−1−デアザ−シュードイソシチジン、1−メチル−1−デアザ−シュードイソシチジン、ゼブラリン、5−アザ−ゼブラリン、5−メチル−ゼブラリン、5−アザ−2−チオ−ゼブラリン、2−チオ−ゼブラリン、2−メトキシ−シチジン、2−メトキシ−5−メチル−シチジン、4−メトキシ−シュードイソシチジン、4−メトキシ−1−メチル−シュードイソシチジン、2−アミノプリン、2、6−ジアミノプリン、7−デアザ−アデニン、7−デアザ−8−アザ−アデニン、7−デアザ−2−アミノプリン、7−デアザ−8−アザ−2−アミノプリン、7−デアザ−2,6−ジアミノプリン、7−デアザ−8−アザ−2,6−ジアミノプリン、1−メチルアデノシン、N6−メチルアデノシン、N6−イソペンテニルアデノシン、N6−(シス−ヒドロキシイソペンテニル)アデノシン、2−メチルチオ−N6−(シス−ヒドロキシイソペンテニル)アデノシン、N6−グリシニルカルバモイルアデノシン、N6−スレオニルカルバモイルアデノシン、2−メチルチオ−N6−スレオニルカルバモイルアデノシン、N6,N6−ジメチルアデノシン、7−メチルアデニン、2−メチルチオ−アデニン、2−メトキシ−アデニン、イノシン、1−メチル−イノシン、ワイオシン、ワイブトシン、7−デアザ−グアノシン、7−デアザ−8−アザ−グアノシン、6−チオ−グアノシン、6−チオ−7−デアザ−グアノシン、6−チオ−7−デアザ−8−アザ−グアノシン、7−メチル−グアノシン、6−チオ−7−メチル−グアノシン、7−メチルイノシン、6−メトキシ−グアノシン、1−メチルグアノシン、N2−メチルグアノシン、N2,N2−ジメチルグアノシン、8−オキソ−グアノシン、7−メチル−8−オキソ−グアノシン、1−メチル−6−チオ−グアノシン、N2−メチル−6−チオ−グアノシンおよびN2,N2−ジメチル−6−チオ−グアノシンからなる群より選択される化合物を含み得る。別の実施形態では、修飾は、5−メチルシトシン、シュードウリジンおよび1−メチルシュードウリジンからなる群より独立して選択される。
1つの実施形態では、修飾核酸分子の2つの修飾がヌクレオチドまたはヌクレオシドに位置し得る。1つの実施形態では、本開示は、限定ではなく、配列番号6、配列番号7、配列番号9および配列番号10などの核酸分子と送達剤を含む製剤を提供する。核酸分子は、長さ約160ヌクレオチドのポリAテールを含み得る。さらに、核酸分子は、限定ではなく、キャップ0、キャップ1、ARCA、イノシン、N1−メチル−グアノシン、2’フルオロ−グアノシン、7−デアザ−グアノシン、8−オキソ−グアノシン、2−アミノ−グアノシン、LNA−グアノシンおよび2−アジド−グアノシンなどの少なくとも1つの5’末端キャップを含み得る。
1つの実施形態では、本開示は、配列番号7の核酸、キャップ1である5’末端キャップ、長さ約160ヌクレオチドのポリAテールおよび送達剤を提供する。
1つの実施形態では、本開示は、配列番号10の核酸、キャップ1である5’末端キャップ、長さ約160ヌクレオチドのポリAテールおよび送達剤を提供する。
1つの実施形態では、脂質ナノ粒子は、PEG、コレステロール、カチオン性脂質および融合性脂質のうち少なくとも1つを含み得る。
れ得る。1つの実施形態では、本発明の修飾核酸は、終止コドンTGAおよび1つの追加の終止コドンを含む。さらなる実施形態では、追加の終止コドンはTAAであり得る。別の実施形態では、本発明の修飾核酸は、3つの終止コドンを含む。
ク質産生効率が高まる。さらに、本開示の核酸およびタンパク質の1つ以上の追加の有利な活性および/または特徴が本明細書に記載される。
本開示は、本明細書に記載されるような1つ以上の修飾ヌクレオシドまたはヌクレオチド(「修飾核酸分子」、「修飾mRNA」または「修飾mRNA分子」と称される)を含む、mRNAなどのRNAを含む核酸を提供する。本発明の核酸分子の修飾は、限定ではないが修飾mRNAが導入される細胞の自然免疫反応の大幅な低下またはその実質的誘導の欠如を含む有用な特徴を有し得る。修飾核酸分子は、非修飾核酸分子と比べて、タンパク質産生の効率増、核酸の細胞内保持および被接触細胞の生存性を示し得、ならびに低い免疫原性を有し得る。
照により本明細書に組み込まれる国際公開第2012138530号に記載のO保護化合物を用いて合成され得る。
非翻訳領域(UTR)
遺伝子の非翻訳領域(UTR)は転写されるが翻訳されない。5’UTRは転写開始部位から始まり開始コドンへと続くが、開始コドンは含まない。それに対して3’UTRは、終止コドンの直後から始まって転写終結シグナルまで続く。核酸分子の安定性と翻訳という点で、UTRが果たす調節的役割に関する根拠が強くなっている。UTRの調節的特徴は、分子の安定性を増大させるために本発明の修飾mRNA分子に組み込まれ得る。特定の特徴は、望まれない器官の部位に誤って向けられた場合に転写の発現低下の制御を確保するために組み込んでもよい。
天然の5’UTRは、翻訳開始において役割を果たす特徴をもつ。それらは、リボソームが多くの遺伝子の翻訳を開始するプロセスに関与することが一般に知られているコザック配列に似た特徴を有する。コザック配列は、CCR(A/G)CCAUGG(配列番号1)の配列を有し、ここでRは、別のGが続いている開始コドン(AUG)上流のプリン(アデニンまたはグアニン)の3つの基である。5’UTRは、伸長因子の結合に関与する二次構造を形成することでも知られている。
/D)において可能である。
3’UTRは、そこに埋め込まれたアデノシン(A)とウリジン(U)の配列を有することが知られている。これらのAUに富む特徴は、代謝率の高い遺伝子に特によく見られる。配列特徴と機能特性に基づき、AUリッチ領域(ARE)は3つのクラスに分類できる(Chenetal, 1995):クラスIのAREはUリッチ領域内にAUUUAモチーフのいくつかの分散した複製を含む。C−MycとMyoDは、クラスIのAREを含む。クラスIIのAREは、2つ以上の重複するUUAUUUA(U/A)(U/A)(配列番号2)九量体を有する。このタイプのAREを含む分子は、GM−CSFとTNF−aを含む。クラスIIIのAREはあまり記述されていない。これらのUリッチ領域はAUUUAモチーフを含んでいない。c−Junとミオゲニンはこのクラスのよく研究された2例である。AREに結合するほとんどのタンパク質がメッセンジャーを不安定化させることがわかっているが、ELAVファミリーのメンバーは、もっとも特記すべきはHuRであるが、mRNAの安定性を増加させることが記載されている。HuRは、全て3つのクラスのAREに結合する。HuR特異的結合部位を核酸分子の3’UTR内に設計すると、HuR結合がもたらされ、インビボでのメッセージが安定しよう。
マイクロRNA(またはmiRNA)は、19〜25ヌクレオチド長の非翻訳RNAであり、核酸分子の3’UTRに結合し、核酸分子の安定性を低下させるかまたは翻訳を阻害することのいずれかにより遺伝子発現を低下させる。本発明の修飾mRNAは、1つ以上のマイクロRNA標的配列、マイクロRNA配列またはマイクロRNAシードを含み得る。そのような配列は、その全容が参照として本明細書に組み込まれる米国特許公報第2005/0261218号および米国特許公報第2005/0059005号に教示されているような、あらゆる既知のマイクロRNAに対応し得る。
相補部位はマイクロRNAの1位の反対のアデニン(A)に隣接している。いくつかの実施形態では、マイクロRNAシードは、6ヌクレオチド(例えば成熟マイクロRNAの2〜7のヌクレオチド)を含み得、対応するmiRNA標的内のシード相補部位はマイクロRNAの1位の反対のアデニン(A)に隣接している。たとえば、いずれもその全容が参照により本明細書に組み込まれる、Grimson A, Farh KK, Johnston WK, Garrett−Engele P, Lim LP, Bartel DPおよびMol Cell. 2007 Jul 6;27(1):91−105を参照されたい。マイクロRNAシードの塩基は標的配列と完全な相補性を有する。目的のマイクロRNAが入手可能であれば、マイクロRNA標的配列を本発明の修飾mRNAの3’UTRに設計することで、分子を分解または翻訳低下の標的にできる。このプロセスは、核酸分子送達後のオフターゲット効果の危険性を低減させよう。マイクロRNA、マイクロRNA標的領域およびそれらの発現パターンと生物学における役割の特定が報告されている(Bonauer et al., Curr Drug Targets 2010 11:943−949; Anand and Cheresh Curr Opin Hematol 2011 18:171−176; Contreras and Rao Leukemia 2012 26:404−413 (2011 Dec 20. doi: 10.1038/leu.2011.356); Bartel Cell 2009 136:215−233; Landgraf et al,
Cell, 2007 129:1401−1414; 全てその全容を参照により本明細書に組み込む)。
まれる)。本発明の修飾mRNAにおいては、そのような過程に関与するマイクロRNAの結合部位は除去または導入され得、修飾mRNAの発現を生物学的に適切な細胞タイプまたは適切な生物学的過程のコンテクストに合わせる。
mRNAの5’キャップ構造は核酸搬出に関与し、mRNAの安定性を増加させ、mRNAキャップ結合タンパク質(CBP)に結合するが、これはCBPとポリ(A)結合タンパク質の結合を通じて細胞内のmRNA安定性と翻訳能力を担い、成熟環状mRNA種を形成する。キャップは、mRNAのスライシングの間、5’近位イントロンの除去をさらに補助する。
ら、その化学構造は天然の(すなわち内因性、野生型または生理学的)5’−キャップとは異なる。キャップ類似体は、化学的(すなわち非酵素的)または酵素的に合成され、および/または核酸分子に結合され得る。
NA−グアノシンおよび2−アジド−グアノシンが含まれる。
限定ではないがオオムギ黄萎ウイルス(BYDV−PAV)の翻訳促進配列などの追加のウイルス配列が設計され本発明の修飾mRNAの3’UTRに挿入され得、mRNAの翻訳をインビトロとインビボで刺激し得る。トランスフェクション実験は、適切な細胞株において実施され得、タンパク質産生はELISAでトランスフェクション後12時間、24時間、48時間、72時間および7日目にアッセイされ得る。
さらに、配列内リボソーム進入部位(IRES)を含み得る修飾mRNAが提供される。最初に特徴的ピコルナウイルスRNAとして同定されたIRESは、5’キャップ構造の非存在下でタンパク質合成開始における重要な役割を果たす。IRESは、唯一のリボソーム結合部位として作用し得るか、またはmRNAの複数のリボソーム結合部位の1つとして働き得る。2以上の機能リボソーム結合部位を含む修飾mRNAは、リボソームにより独立して翻訳されるいくつかのペプチドまたはポリペプチドをコードし得る(「複数シストロン核酸分子」)。修飾mRNAにIRESが与えられると、さらに所望により第2翻訳可能領域が与えられる。本発明にしたがい使用され得るIRES配列の例には、限定ではなく、ピコナウイルス(例えばFMDV)、ペストウイルス(CFFV)、ポリオウイルス(PV)、脳心筋炎ウイルス(ECMV)、口蹄疫ウイルス(FMDV)、C型肝炎ウイルス(HCV)、ブタコレラウイルス(CSFV)、マウス白血病ウイルス(MLV)、サル免疫不全ウイルス(SIV)またはコオロギ麻痺ウイルス(cricket
paralysis viruses)(CrPV)由来のものが含まれる。
RNAプロセスの間、安定性を増加させるために、アデニンヌクレオチドの長鎖(ポリAテール)が修飾mRNA分子などの修飾核酸分子に付加され得る。転写直後、転写物の3’末端が切断され3’ヒドロキシルを離し得る。次いでポリAポリメラーゼがアデニンヌクレオチドの鎖をRNAに付加する。このプロセスはポリアデニル化と呼ばれ、例えば、およそ100から250残基長であり得るポリAテールを付加する。
一般に、本発明のポリAテールの長さは、30ヌクレオチドよりも長い。別の実施形態では、ポリAテールは、35ヌクレオチドよりも長い(例えば、少なくとも約35、40、45、50、55、60、70、80、90、100、120、140、160、180、200、250、300、350、400、450、500、600、700、800、900、1,000、1,100、1,200、1,300、1,400、1,500、1,600、1,700、1,800、1,900、2,000、2,500および3,000ヌクレオチドであるか、これらよりも長い)。いくつかの実施形態では、修飾mRNAは、約30から約3,000のヌクレオチド(例えば、30から50、30から100、30から250、30から500、30から750、30から1,000、30から1,500、30から2,000、30から2,500、50から100、50から250、50から500、50から750、50から1,000、50から1,500、50から2,000、50から2,500、50から3,000、100から500、100から750、100から1,000、100から1,500、100から2,000、100から2,500、100から3,000、500から750、500から1,000、500から1,500、500から2,000、500から2,500、500から3,000、1,000から1,500、1,000から2,000、1,000から2,500、1,000から3,000、1,500から2,000、1,500から2
,500、1,500から3,000、2,000から3,000、2,000から2,500および2,500から3,000)を含む。
本発明の修飾核酸と修飾mRNA(mmRNA)は、1、2、またはそれより多くの異なる修飾を含み得る。いくつかの実施形態では、修飾核酸とmmRNAは、1、2、またはそれより多くの異なるヌクレオシドまたはヌクレオチド修飾を含み得る。いくつかの実施形態では、細胞に導入された修飾核酸またはmmRNA(例えば1つ以上のmmRNA分子を有する)は、非修飾核酸またはmmRNAと比べると、細胞内での分解の低減を示す。
た修飾核酸分子または修飾核酸分子を細胞内で分解することが望ましい場合がある。例えば、タンパク質産生の精密なタイミングが望ましい場合は、修飾核酸分子または修飾mRNAの分解が好ましい場合がある。したがって、いくつかの実施形態では、本発明は細胞内で定方向の作用を受けることができる、分解ドメインを含む修飾核酸分子を提供する。別の態様では、本開示は、主溝相互作用たとえば結合パートナーの核酸との結合を破壊し得るヌクレオシドまたはヌクレオチドを含む核酸を提供する(たとえば、修飾ヌクレオチドの主溝相互作用パートナーへの結合親和性が、非修飾ヌクレオチドと比べて低下している)。
本発明の修飾核酸またはmmRNAは、目的のポリペプチドをコードする連結ヌクレオシドの第1領域、第1領域の5’末端に位置する第1隣接領域、および第1領域の3’末端に位置する第2隣接領域を含み得る。
Uは、O、S、N(RU)nuまたはC(RU)nuであり、ここでnuは0から2の整数であり、各RUは、独立して、H、ハロまたは所望により置換されているアルキルであり;
R1’、R2’、R1”、R2”、R1、R2、R3、R4とR5はそれぞれ、存在する場合は、独立して、H、ハロ、ヒドロキシ、チオール、所望により置換されているアルキル、所望により置換されているアルコキシ、所望により置換されているアルケニルオキシ、所望により置換されているアルキニルオキシ、所望により置換されているアミノアルコキシ、所望により置換されているアルコキシアルコキシ、所望により置換されているヒドロキシアルコキシ、所望により置換されているアミノ、アジド、所望により置換されているアリール、所望により置換されているアミノアルキル、所望により置換されているアミノアルケニル、所望により置換されているアミノアルキニルまたは不存在であり;ここでR3とR1’、R1”、R2’、R2”またはR5のうち1つ以上との組合せ(例えばR1’とR3の組合せ、R1”とR3の組合せ、R2’とR3の組合せ、R2”とR3の組合せ、またはR5とR3の組合せ)は、一緒に、所望により置換されているアルキレンまたは所望により置換されているヘテロアルキレンを形成し得、それらが結合している炭素とともに、所望により置換されているヘテロシクリル(例えば、二環、三環または四環ヘテロシクリル)を提供し;ここで、R5とR1’、R1”、R2’またはR2”のうち1つ以上との組合せ(例えばR1’とR5の組合せ、R1”とR5の組合せ、R2’とR5の組合せ、またはR2”とR5の組合せ)は、一緒に、所望により置換されているアルキレンまたは所望により置換されているヘテロアルキレンを形成し得、それらが結合している炭素とともに、所望により置換されているヘテロシクリル(例えば、二環、三環または四環ヘテロシクリル)を提供し;ここでR4とR1’、R1”、R2’、R2”、R3またはR5のうち1つ以上との組合せは、一緒に、所望により置換されているアルキレンまたは所望により置換されているヘテロアルキレンを形成し得、それらが結合している炭素とともに、所望により置換されているヘテロシクリル(例えば、二環、三環または四環ヘテロシクリル)を提供し;
m’とm’’はそれぞれ、独立して、0から3の整数(例えば、0から2、0から1、1から3または1から2)であり;
Y1、Y2およびY3はそれぞれ、独立して、O、S、Se、−NRN1−、所望により置換されているアルキレンまたは所望により置換されているヘテロアルキレンであり、ここでRN1はH、所望により置換されているアルキル、所望により置換されているアルケニル、所望により置換されているアルキニル、所望により置換されているアリールまたは不存在であり;
各Y4は独立して、H、ヒドロキシ、チオール、ボラニル(boranyl)、所望により置換されているアルキル、所望により置換されているアルケニル、所望により置換されているアルキニル、所望により置換されているアルコキシ、所望により置換されているアルケニルオキシ、所望により置換されているアルキニルオキシ、所望により置換されているチオアルコキシ、所望により置換されているアルコキシアルコキシまたは所望により置換されているアミノであり;
各Y5は独立して、O、S、Se、所望により置換されているアルキレン(例えば、メチレン)または所望により置換されているヘテロアルキレンであり;
nは1から100,000の整数であり;
Bは、核酸塩基(例えばプリン、ピリミジンまたはその誘導体)であり、ここでBとR1’の組合せ、BとR2’の組合せ、BとR1”の組合せ、またはBとR2”の組合せは、それらが結合している炭素とともに、所望により二環基(例えば二環ヘテロシクリル)を形成し得、またはここでB、R1”とR3の組合せ、またはB、R2”とR3の組合せは、所望により、本明細書の式(IIo)〜(IIp)などにある三環基または四環基(例えば三環または四環ヘテロシクリル)を形成し得る)。いくつかの実施形態では、修飾核酸またはmmRNAは修飾リボースを含む。
を含む。
Uは、O、S、N(RU)nuまたはC(RU)nuであり、ここでnuは0から2の整数であり、各RUは、独立して、H、ハロまたは所望により置換されているアルキルであり;
R1、R3’、R3”およびR4はそれぞれ、独立して、H、ハロ、ヒドロキシ、所望により置換されているアルキル、所望により置換されているアルコキシ、所望により置換されているアルケニルオキシ、所望により置換されているアルキニルオキシ、所望により置換されているアミノアルコキシ、所望により置換されているアルコキシアルコキシ、所望により置換されているヒドロキシアルコキシ、所望により置換されているアミノ、アジド、所望により置換されているアリール、所望により置換されているアミノアルキル、所望により置換されているアミノアルケニル、所望により置換されているアミノアルキニルまたは不存在であり;ここでR1とR3’の組合せまたはR1とR3”の組合せは、一緒に、所望により置換されているアルキレンまたは所望により置換されているヘテロアルキレンを形成し得(例えばロックド核酸を産生する);
各R5は、独立して、H、ハロ、ヒドロキシ、所望により置換されているアルキル、所望により置換されているアルコキシ、所望により置換されているアルケニルオキシ、所望により置換されているアルキニルオキシ、所望により置換されているアミノアルコキシ、所望により置換されているアルコキシアルコキシまたは不存在であり;
Y1、Y2およびY3はそれぞれ、独立して、O、S、Se、−NRN1−、所望により置換されているアルキレンまたは所望により置換されているヘテロアルキレンであり、ここでRN1はH、所望により置換されているアルキル、所望により置換されているアルケニル、所望により置換されているアルキニル、または所望により置換されているアリールであり;
各Y4は独立して、H、ヒドロキシ、チオール、ボラニル、所望により置換されているアルキル、所望により置換されているアルケニル、所望により置換されているアルキニル、所望により置換されているアルコキシ、所望により置換されているアルケニルオキシ、所望により置換されているアルキニルオキシ、所望により置換されているアルコキシアルコキシまたは所望により置換されているアミノであり;
nは1から100,000の整数であり;
Bは核酸塩基である。
Uは、O、S、N(RU)nuまたはC(RU)nuであり、ここでnuは0から2の整数であり、各RUは、独立して、H、ハロまたは所望により置換されているアルキルであり;
B1、B2およびB3はそれぞれ、独立して、核酸塩基(例えばプリン、ピリミジン、または本明細書に記載されるようなその誘導体)、H、ハロ、ヒドロキシ、チオール、所望により置換されているアルキル、所望により置換されているアルコキシ、所望により置換されているアルケニルオキシ、所望により置換されているアルキニルオキシ、所望により置換されているアミノアルコキシ、所望により置換されているアルコキシアルコキシ、所望により置換されているヒドロキシアルコキシ、所望により置換されているアミノ、アジド、所望により置換されているアリール、所望により置換されているアミノアルキル、所望により置換されているアミノアルケニルまたは所望により置換されているアミノアルキニルであり、ここでB1、B2とB3のうち1つだけが核酸塩基であり;
Rb1、Rb2、Rb3、R3およびR5はそれぞれ、独立して、H、ハロ、ヒドロキシ、チオール、所望により置換されているアルキル、所望により置換されているアルコキシ、所望により置換されているアルケニルオキシ、所望により置換されているアルキニルオキシ、所望により置換されているアミノアルコキシ、所望により置換されているアルコキシアルコキシ、所望により置換されているヒドロキシアルコキシ、所望により置換されているアミノ、アジド、所望により置換されているアリール、所望により置換されているアミノアルキル、所望により置換されているアミノアルケニルまたは所望により置換されているアミノアルキニルであり;
Y1、Y2およびY3はそれぞれ、独立して、O、S、Se、−NRN1−、所望により置換されているアルキレンまたは所望により置換されているヘテロアルキレンであり、ここでRN1はH、所望により置換されているアルキル、所望により置換されているアルケニル、所望により置換されているアルキニル、または所望により置換されているアリールであり;
各Y4は独立して、H、ヒドロキシ、チオール、ボラニル、所望により置換されているアルキル、所望により置換されているアルケニル、所望により置換されているアルキニル、所望により置換されているアルコキシ、所望により置換されているアルケニルオキシ、所望により置換されているアルキニルオキシ、所望により置換されているアルコキシアルコキシまたは所望により置換されているアミノであり;
各Y5は独立して、O、S、Se、所望により置換されているアルキレン(例えば、メチレン)または所望により置換されているヘテロアルキレンであり;
nは1から100,000の整数であり;
ここでUを含む環は1つ以上の二重結合を含み得る。
いくつかの実施形態では、修飾核酸またはmmRNAは、式(Id):
Uは、O、S、N(RU)nuまたはC(RU)nuであり、ここでnuは0から2の整数であり、各RUは、独立して、H、ハロまたは所望により置換されているアルキルであり;
各R3は、独立して、H、ハロ、ヒドロキシ、チオール、所望により置換されているアルキル、所望により置換されているアルコキシ、所望により置換されているアルケニルオキシ、所望により置換されているアルキニルオキシ、所望により置換されているアミノアルコキシ、所望により置換されているアルコキシアルコキシ、所望により置換されているヒドロキシアルコキシ、所望により置換されているアミノ、アジド、所望により置換されているアリール、所望により置換されているアミノアルキル、所望により置換されているアミノアルケニルまたは所望により置換されているアミノアルキニルであり;
Y1、Y2およびY3はそれぞれ、独立して、O、S、Se、−NRN1−、所望により置換されているアルキレンまたは所望により置換されているヘテロアルキレンであり、ここでRN1はH、所望により置換されているアルキル、所望により置換されているアルケニル、所望により置換されているアルキニル、または所望により置換されているアリールであり;
各Y4は独立して、H、ヒドロキシ、チオール、ボラニル、所望により置換されているアルキル、所望により置換されているアルケニル、所望により置換されているアルキニル、所望により置換されているアルコキシ、所望により置換されているアルケニルオキシ、所望により置換されているアルキニルオキシ、所望により置換されているアルコキシアルコキシまたは所望により置換されているアミノであり;
各Y5は独立して、O、S、所望により置換されているアルキレン(例えば、メチレン)または所望により置換されているヘテロアルキレンであり;
nは1から100,000の整数であり;
Bは、核酸塩基(例えばプリン、ピリミジン、またはその誘導体)である。
U’とU”はそれぞれ、独立して、O、S、N(RU)nu、またはC(RU)nuであり、ここでnuは0から2の整数であり、各RUは、独立して、H、ハロまたは所望により置換されているアルキルであり;
各R6は、独立して、H、ハロ、ヒドロキシ、チオール、所望により置換されているアルキル、所望により置換されているアルコキシ、所望により置換されているアルケニルオキシ、所望により置換されているアルキニルオキシ、所望により置換されているアミノアルコキシ、所望により置換されているアルコキシアルコキシ、所望により置換されているヒドロキシアルコキシ、所望により置換されているアミノ、アジド、所望により置換されているアリール、所望により置換されているアミノアルキル、所望により置換されているアミノアルケニルまたは所望により置換されているアミノアルキニルであり;
各Y5’は独立して、O、S、所望により置換されているアルキレン(例えば、メチレンまたはエチレン)であるか、または所望により置換されているヘテロアルキレンであり;
nは1から100,000の整数であり;
Bは、核酸塩基(例えばプリン、ピリミジン、またはその誘導体)である。
U’とU”はそれぞれ、独立して、O、S、N、N(RU)nuまたはC(RU)nuであり、ここでnuは0から2の整数であり、各RUは、独立して、H、ハロまたは所望により置換されているアルキルであり(例えば、U’はOでありU”はNである);
R1’、R2’、R1”、R2”、R3およびR4はそれぞれ、独立して、H、ハロ、ヒドロキシ、チオール、所望により置換されているアルキル、所望により置換されているアルコキシ、所望により置換されているアルケニルオキシ、所望により置換されているアルキニルオキシ、所望により置換されているアミノアルコキシ、所望により置換されているアルコキシアルコキシ、所望により置換されているヒドロキシアルコキシ、所望により置換されているアミノ、アジド、所望により置換されているアリール、所望により置換されているアミノアルキル、所望により置換されているアミノアルケニル、所望により置換されているアミノアルキニルまたは不存在であり;ここでR1’とR3の組合せ、R1”とR3の組合せ、R2’とR3の組合せまたはR2”とR3の組合せは、一緒に、所望により置換されているアルキレンまたは所望により置換されているヘテロアルキレンを形成し得(例えばロックド核酸を産生する);m’とm”はそれぞれ、独立して、0から3の整数(例えば、0から2、0から1、1から3または1から2)であり;
Y1、Y2およびY3はそれぞれ、独立して、O、S、Se、−NRN1−、所望により置換されているアルキレンまたは所望により置換されているヘテロアルキレンであり、ここでRN1はH、所望により置換されているアルキル、所望により置換されているアルケニル、所望により置換されているアルキニル、所望により置換されているアリールまたは不存在であり;
各Y4は独立して、H、ヒドロキシ、チオール、ボラニル、所望により置換されているアルキル、所望により置換されているアルケニル、所望により置換されているアルキニル、所望により置換されているアルコキシ、所望により置換されているアルケニルオキシ、所望により置換されているアルキニルオキシ、所望により置換されているアルコキシアルコキシまたは所望により置換されているアミノであり;
各Y5は独立して、O、S、Se、所望により置換されているアルキレン(例えば、メチレン)または所望により置換されているヘテロアルキレンであり;
nは1から100,000の整数であり;
Bは、核酸塩基(例えばプリン、ピリミジン、またはその誘導体)である。
ら10の整数(例えば、1から6または1から4)であり、s2とs3はそれぞれ、独立して、0から10の整数(例えば、0から4、0から6、1から4、1から6または1から10)であり、R’はHまたはC1〜20アルキルである)。いくつかの実施形態では、s2は0であり、s1は1または2であり、s3は0または1であり、R’はC1〜6アルキルである。
により置換されているヘテロアルキレンを形成し、それらが結合している炭素とともに、所望により置換されているヘテロシクリル(例えば、二環、三環または四環ヘテロシクリルを与え、R3とR1’、R1”、R2’、R2”またはR5のうちの1つ以上が、一緒に、ヘテロアルキレン(例えば、−(CH2)b1O(CH2)b2O(CH2)b3−、ここでb1、b2およびb3はそれぞれ、独立して、0から3の整数である)を形成する。
、フルオロ)、ヒドロキシ、所望により置換されているアルキル、所望により置換されているアルコキシ(例えば、メトキシまたはエトキシ)または所望により置換されているアルコキシアルコキシである。さらなる実施形態では、各Y1は、独立して、Oまたは−NRN1−であり、ここでRN1は、H、所望により置換されているアルキル、所望により置換されているアルケニル、所望により置換されているアルキニルまたは所望により置換されているアリール(例えば,ここでRN1はHまたは所望により置換されているアルキル(例えば、メチル、エチル、イソプロピルまたはn−プロピルなどのC1〜6アルキル)である)であり;各Y4は、独立して、H、ヒドロキシ、チオール、所望により置換されているアルキル、所望により置換されているアルコキシ、所望により置換されているチオアルコキシ、所望により置換されているアルコキシアルコキシまたは所望により置換されているアミノである。
IVl)および(IXa)〜(IXr))では、Uを含む環は、α−L(例えばα−L−リボ)立体配置である。
望により置換されているアミノアルケニル、所望により置換されているアミノアルキニルまたは存在せず(例えば、R1とR2はそれぞれ、独立して、H、ハロ、ヒドロキシ、所望により置換されているアルキルまたは所望により置換されているアルコキシであり;R3とR4はそれぞれ、独立して、Hまたは所望により置換されているアルキルであり;R5はHまたはヒドロキシである)、
特定の実施形態では、修飾核酸またはmmRNAは、式(IIb−1)〜(IIb−2):
いくつかの実施形態では、修飾核酸またはmmRNAは、非環式修飾ヘキシトールを含む。いくつかの実施形態では、修飾核酸またはmmRNAは、式(IIg)〜(IIj):
いくつかの実施形態では、修飾核酸またはmmRNAは、収縮または拡大リボース環を有する糖部分を含む。いくつかの実施形態では、修飾核酸またはmmRNAは、式(IIk)〜(IIm):
1つの実施形態では、本発明は、少なくとも1つのヌクレオチド(例えばmmRNA分子)を含む修飾核酸またはmmRNAを調製する方法を提供し、ここで修飾核酸は、ここで定義される式(Ia):
さらなる実施形態では、本発明は、少なくとも1つのヌクレオチド(例えばmmRNA分子)を含む修飾核酸またはmmRNAを増幅する方法を提供し、該方法は、ここで定義される式(IIIa)の化合物を、プライマー、cDNA鋳型およびRNAポリメラーゼと反応させることを含む。
さらなる実施形態では、本発明は、少なくとも1つのヌクレオチド(例えばmmRNA分子)を含む修飾核酸またはmmRNAを増幅する方法を提供し、該方法は、ここで定義される式(IIIa−1)の化合物を、プライマー、cDNA鋳型およびRNAポリメラーゼと反応させることを含む。
さらなる実施形態では、本発明は、少なくとも1つのヌクレオチド(例えばmmRNA分子)を含む修飾核酸またはmRNAを増幅する方法を提供し、該方法は、
ここで定義される式(IIIa−2)の化合物を、プライマー、cDNA鋳型およびRNAポリメラーゼと反応させることを含む。
修飾核酸およびmmRNAは、所望により、本明細書に記載される5’および/または3’隣接領域を含み得る。
本発明は、例えば、修飾リボヌクレオシド、修飾リボヌクレオチドなどの修飾RNA(mmRNA)分子の構成要素も含む。例えば、これらのmmRNAは、本発明の修飾核酸またはmmRNAの調製に有用であり得る。
、式(IVc)〜(IVk):
(例えば、式(b10)〜(b14)、(b24)、(b25)および(b32)〜(b36)のいずれか1つ、たとえば式(b10)または(b32))。特定の実施形態では、式(IVc)〜(IVk)のうち1つは、修飾グアニンと組み合わされる(例えば、式(b15)〜(b17)および(b37)〜(b40)のいずれか1つ)。特定の実施形態では、式(IVc)〜(IVk)のうち1つは、修飾アデニンと組み合わされる(例えば、式(b18)〜(b20)および(b41)〜(b43)のいずれか1つ)。
他の実施形態では、修飾核酸またはmmRNAに組み込まれ得る構成要素分子は、式(IXa)または(IXd):
(例えば、式(b10)〜(b14)、(b24)、(b25)および(b32)〜(b36)のいずれか1つ、たとえば式(b10)または(b32))。特定の実施形態では、式(IXa)〜(IXd)のうち1つは、修飾グアニンと組み合わされる(例えば、式(b15)〜(b17)および(b37)〜(b40)のいずれか1つ)。特定の実施形態では、式(IXa)〜(IXd)のうち1つは、修飾アデニンと組み合わされる(例えば、式(b18)〜(b20)および(b41)〜(b43)のいずれか1つ)。
り、s1は本明細書に記載されるとおりである。
いくつかの実施形態では、修飾核酸分子またはmmRNAに組み込まれ得る構成要素分子は、修飾アデノシン(例えば、
の>CH基を>NRN1基で置換し、ここでRN1はHまたは所望により置換されているアルキルである)。例えば、修飾核酸分子またはmmRNAに組み込まれ得るmmRNA分子は、
別の実施形態では、化学修飾は、シトシンのC−5の水素をハロ(例えば、Br、Cl、FまたはI)または所望により置換されているアルキル(例えば、メチル)で置換することを含み得る。例えば、修飾核酸またはmmRNAに組み込まれ得るmmRNA分子は、
さらなる実施形態では、化学修飾は、C−4位のNH2とC−5位の炭素原子で形成される縮合環を含み得る。例えば、修飾核酸分子またはmmRNAに組み込まれ得る構成要素分子は、
糖の修飾
修飾核酸またはmmRNA(例えば、本明細書に記載されるRNAまたはmRNA)に組み込まれ得る修飾ヌクレオシドおよびヌクレオチド(例えば、構成要素分子)は、リボ核酸の糖上の修飾であり得る。例えば、2’ヒドロキシル基(OH)は、ある数の異なる
置換基で修飾または置換され得る。2’位の例となる置換基は、限定ではなく、H、ハロ、所望により置換されているC1〜6アルキル;所望により置換されているC1〜6アルコキシ;所望により置換されているC6〜10アリールオキシ;所望により置換されているC3〜8シクロアルキル;所望により置換されているC3〜8シクロアルコキシ;所望により置換されているC6〜10アリールオキシ;所望により置換されているC6〜10アリール−C1〜6アルコキシ、所望により置換されているC1〜12(ヘテロシクリル)オキシ;糖(例えば、リボース、ペントースまたは本明細書に記載されるいずれか);ポリエチレングリコール(PEG)、−O(CH2CH2O)nCH2CH2OR(ここでRはHまたは所望により置換されているアルキルであり、nは0から20の整数(例えば、0から4、0から8、0から10、0から16、1から4、1から8、1から10、1から16、1から20、2から4、2から8、2から10、2から16、2から20、4から8、4から10、4から16および4から20)である);2’−ヒドロキシルがC1〜6アルキレンまたはC1〜6ヘテロアルキレン架橋により同じリボース糖の4’−炭素に結合している「ロックされた(架橋型)」核酸(LNA)(例示的架橋はメチレン、プロピレン、エーテルまたはアミノ架橋;ここで定義されるアミノアルキル;ここで定義されるアミノアルコキシ;ここで定義されるアミノ;およびここで定義されるアミノ酸を含んだ)を含む。
本開示は、修飾ヌクレオシドおよびヌクレオチドを提供する。ここでは「ヌクレオシド」は、糖分子(例えばペントースまたはリボース)またはその誘導体と有機塩基(例えばプリンまたはピリミジン)またはその誘導体の組合せを含む化合物として定義される。ここでは「ヌクレオチド」はリン酸基を含むヌクレオシドとして定義される。修飾ヌクレオチド(例えば修飾mRNA)は、本明細書に記載されるあらゆる便利な方法で合成され得る(例えば,化学的、酵素的または組替え的に1つ以上の修飾または非天然ヌクレオシドを含む)。
T1’、T1”、T2’およびT2”はそれぞれ、独立して、H、所望により置換されているアルキル、所望により置換されているアルコキシまたは所望により置換されているチオアルコキシであり、またはT1’とT1”の組合せまたはT2’とT2”の組合せは一緒に(例えばT2のように)O(オキソ)、S(チオ)またはSe(セレノ)を形成し;
V1とV2はそれぞれ、独立して、O、S、N(RVb)nv、またはC(RVb)nvであり、ここでnvは0から2の整数であり、各RVbは、独立して、H、ハロ、所望により置換されているアミノ酸、所望により置換されているアルキル、所望により置換されているハロアルキル、所望により置換されているアルケニル、所望により置換されているアルキニル、所望により置換されているアルコキシ、所望により置換されているアルケニルオキシ、所望により置換されているアルキニルオキシ、所望により置換されているヒドロキシアルキル、所望により置換されているヒドロキシアルケニル、所望により置換されているヒドロキシアルキニル、所望により置換されているアミノアルキル(例えば、本明細書に記載されるいずれかの、例えば、トリフルオロアセチルなどのN−保護基で置換されている)、所望により置換されているアミノアルケニル、所望により置換されているアミノアルキニル、所望により置換されているアシルアミノアルキル(例えば、本明細書に記載されるいずれかの、例えば、トリフルオロアセチルなどのN−保護基で置換されている)、所望により置換されているアルコキシカルボニルアルキル、所望により置換されているアルコキシカルボニルアルケニル、所望により置換されているアルコキシカルボニルアルキニルまたは所望により置換されているアルコキシカルボニルアルコキシ(例えば、所望により、アルキルについて(1)〜(21)から選択されるものなどの、本明細書に記載されるいずれかの置換基で置換されている)であり;
R10は、H、ハロ、所望により置換されているアミノ酸、ヒドロキシ、所望により置換されているアルキル、所望により置換されているアルケニル、所望により置換されているアルキニル、所望により置換されているアミノアルキル、所望により置換されているヒドロキシアルキル、所望により置換されているヒドロキシアルケニル、所望により置換さ
れているヒドロキシアルキニル、所望により置換されているアミノアルケニル、所望により置換されているアミノアルキニル、所望により置換されているアルコキシ、所望により置換されているアルコキシカルボニルアルキル、所望により置換されているアルコキシカルボニルアルケニル、所望により置換されているアルコキシカルボニルアルキニル、所望により置換されているアルコキシカルボニルアルコキシ、所望により置換されているカルボキシアルコキシ、所望により置換されているカルボキシアルキルまたは所望により置換されているカルバモイルアルキルであり;
R11はHまたは所望により置換されているアルキルであり;
R12aは、H、所望により置換されているアルキル、所望により置換されているヒドロキシアルキル、所望により置換されているヒドロキシアルケニル、所望により置換されているヒドロキシアルキニル、所望により置換されているアミノアルキル、所望により置換されているアミノアルケニル、または所望により置換されているアミノアルキニル、所望により置換されているカルボキシアルキル(例えば、所望によりヒドロキシで置換されている)、所望により置換されているカルボキシアルコキシ、所望により置換されているカルボキシアミノアルキル、または所望により置換されているカルバモイルアルキルであり;
R12cは、H、ハロ、所望により置換されているアルキル、所望により置換されているアルコキシ、所望により置換されているチオアルコキシ、所望により置換されているアミノ、所望により置換されているヒドロキシアルキル、所望により置換されているヒドロキシアルケニル、所望により置換されているヒドロキシアルキニル、所望により置換されているアミノアルキル、所望により置換されているアミノアルケニルまたは所望により置換されているアミノアルキニルである。
T1’、T1”、T2’およびT2”はそれぞれ、独立して、H、所望により置換されているアルキル、所望により置換されているアルコキシまたは所望により置換されているチオアルコキシであるか、またはT1’とT1”の組合せは一緒に(例えばT1のように)またはT2’とT2”の組合せは一緒に(例えばT2のように)O(オキソ)、S(チオ)、またはSe(セレノ)を形成するか、またはT1とT2はそれぞれ、独立して、O(オキソ)、S(チオ)またはSe(セレノ)であり;
W1とW2はそれぞれ、独立して、N(RWa)nwまたはC(RWa)nwであり、ここでnwは0から2の整数であり、各RWaは、独立して、H、所望により置換されているアルキルまたは所望により置換されているアルコキシであり;
各V3は、独立して、O、S、N(RVa)nvまたはC(RVa)nvであり、ここでnvは0から2の整数であり、各RVaは、独立して、H、ハロ、所望により置換されているアミノ酸、所望により置換されているアルキル、所望により置換されているヒドロキシアルキル、所望により置換されているヒドロキシアルケニル、所望により置換されているヒドロキシアルキニル、所望により置換されているアルケニル、所望により置換されているアルキニル、所望により置換されているヘテロシクリル、所望により置換されているアルケテロシクリル(alkheterocyclyl)、所望により置換されているアルコキシ、所望により置換されているアルケニルオキシ、または所望により置換されているアルキニルオキシ、所望により置換されているアミノアルキル(例えば、本明細書に記載されるいずれかの、例えば、トリフルオロアセチルまたはスルホアルキルなどのN−保護基で置換されている)、所望により置換されているアミノアルケニル、所望により置換されているアミノアルキニル、所望により置換されているアシルアミノアルキル(例えば、本明細書に記載されるいずれかの、例えば、トリフルオロアセチルなどのN−保護基で置換されている)、所望により置換されているアルコキシカルボニルアルキル、所望により置換されているアルコキシカルボニルアルケニル、所望により置換されているアルコキシカルボニルアルキニル、所望により置換されているアルコキシカルボニルアシル、所望により置換されているアルコキシカルボニルアルコキシ、所望により置換されているカルボキシアルキル(例えば、所望によりヒドロキシおよび/またはO−保護基で置換されている)、所望により置換されているカルボキシアルコキシ、所望により置換されているカルボキシアミノアルキル、または所望により置換されているカルバモイルアルキル(例えば、所望により、アルキルについて(1)〜(21)から選択されるものなどの本明細書に記載されるいずれかの置換基で置換されている)であり、ここでRVaとR12cは、所望により、それらが結合している炭素原子と一緒に、所望により置換されているシクロアルキル、所望により置換されているアリールまたは所望により置換されているヘテロシクリル(例えば5または6員環)を形成し得;
R12aは、H、所望により置換されているアルキル、所望により置換されているヒドロキシアルキル、所望により置換されているヒドロキシアルケニル、所望により置換されているヒドロキシアルキニル、所望により置換されているアミノアルキル、所望により置換されているアミノアルケニル、所望により置換されているアミノアルキニル、所望により置換されているカルボキシアルキル(例えば、所望によりヒドロキシおよび/またはO−保護基で置換されている)、所望により置換されているカルボキシアルコキシ、所望により置換されているカルボキシアミノアルキル、所望により置換されているカルバモイルアルキルまたは不存在であり;
R12bは、H、所望により置換されているアルキル、所望により置換されているアルケニル、所望により置換されているアルキニル、所望により置換されているヒドロキシアルキル、所望により置換されているヒドロキシアルケニル、所望により置換されているヒドロキシアルキニル、所望により置換されているアミノアルキル、所望により置換されているアミノアルケニル、所望により置換されているアミノアルキニル、所望により置換されているアルカリール、所望により置換されているヘテロシクリル、所望により置換されているアルケテロシクリル(alkheterocyclyl)、所望により置換されているアミノ酸、所望により置換されているアルコキシカルボニルアシル、所望により置換されているアルコキシカルボニルアルコキシ、所望により置換されているアルコキシカルボニルアルキル、所望により置換されているアルコキシカルボニルアルケニル、所望により置換されているアルコキシカルボニルアルキニル、所望により置換されているアルコキシカルボニルアルコキシ、所望により置換されているカルボキシアルキル(例えば、所望によりヒドロキシおよび/またはO−保護基で置換されている)、所望により置換されているカルボキシアルコキシ、所望により置換されているカルボキシアミノアルキルまたは
所望により置換されているカルバモイルアルキルであり、
ここでR12bとT1’の組合せまたはR12bとR12cの組合せは、一緒に、所望により置換されているヘテロシクリルを形成し得;
R12cは、H、ハロ、所望により置換されているアルキル、所望により置換されているアルコキシ、所望により置換されているチオアルコキシ、所望により置換されているアミノ、所望により置換されているアミノアルキル、所望により置換されているアミノアルケニルまたは所望により置換されているアミノアルキニルである。
T1とT2はそれぞれ、独立して、O(オキソ)、S(チオ)、またはSe(セレノ)であり;
RVb’とRVb”はそれぞれ、独立して、H、ハロ、所望により置換されているアミノ酸、所望により置換されているアルキル、所望により置換されているハロアルキル、所望により置換されているヒドロキシアルキル、所望により置換されているヒドロキシアルケニル、所望により置換されているヒドロキシアルキニル、所望により置換されているアルケニル、所望により置換されているアルキニル、所望により置換されているアルコキシ、所望により置換されているアルケニルオキシ、所望により置換されているアルキニルオキシ、所望により置換されているアミノアルキル(例えば、本明細書に記載されるいずれかの、例えば、トリフルオロアセチルまたはスルホアルキルなどのN−保護基で置換されている)、所望により置換されているアミノアルケニル、所望により置換されているアミノアルキニル、所望により置換されているアシルアミノアルキル(例えば,本明細書に記載されるいずれかの、例えば、トリフルオロアセチルなどのN−保護基で置換されている)、所望により置換されているアルコキシカルボニルアルキル、所望により置換されているアルコキシカルボニルアルケニル、所望により置換されているアルコキシカルボニルアルキニル、所望により置換されているアルコキシカルボニルアシル、所望により置換されているアルコキシカルボニルアルコキシ、所望により置換されているカルボキシアルキル(例えば、所望によりヒドロキシおよび/またはO−保護基で置換されている)、所望により置換されているカルボキシアルコキシ、所望により置換されているカルボキシアミノアルキル、または所望により置換されているカルバモイルアルキル(例えば、所望により、アルキルについて(1)〜(21)から選択されるものなどの本明細書に記載されるいずれかの置換基で置換されている)(例えば、RVb’は、所望により置換されているア
ルキル、所望により置換されているアルケニルまたは所望により置換されているアミノアルキルであり、例えば、本明細書に記載されるいずれかの、例えば、トリフルオロアセチルまたはスルホアルキルなどのN−保護基で置換されている)であり;
R12aは、H、所望により置換されているアルキル、所望により置換されているカルボキシアミノアルキル、所望により置換されているアミノアルキル(例えば、本明細書に記載されるいずれかの、例えば、トリフルオロアセチルまたはスルホアルキルなどのN−保護基で置換されている)、所望により置換されているアミノアルケニルまたは所望により置換されているアミノアルキニルであり;
R12bは、H、所望により置換されているアルキル、所望により置換されているアルケニル、所望により置換されているアルキニル、所望により置換されているヒドロキシアルキル、所望により置換されているヒドロキシアルケニル、所望により置換されているヒドロキシアルキニル、所望により置換されているアミノアルキル、所望により置換されているアミノアルケニル、所望により置換されているアミノアルキニル(例えば,本明細書に記載されるいずれかの、例えば、トリフルオロアセチルまたはスルホアルキルなどのN−保護基で置換されている)、
所望により置換されているアルコキシカルボニルアシル、所望により置換されているアルコキシカルボニルアルコキシ、所望により置換されているアルコキシカルボニルアルキル、所望により置換されているアルコキシカルボニルアルケニル、所望により置換されているアルコキシカルボニルアルキニル、所望により置換されているアルコキシカルボニルアルコキシ、所望により置換されているカルボキシアルコキシ、所望により置換されているカルボキシアルキルまたは所望により置換されているカルバモイルアルキルである。
特定の実施形態では、R12a、R12b、R12cまたはRVaの所望による置換基は、ポリエチレングリコール基(例えば、−(CH2)s2(OCH2CH2)s1(CH2)s3OR’であり、ここでs1は1から10の整数(例えば、1から6または1から4)であり、s2とs3はそれぞれ、独立して、0から10の整数(例えば、0から4、0から6、1から4、1から6または1から10)であり、R’はHまたはC1−20アルキルである);またはアミノ−ポリエチレングリコール基(例えば、−NRN1(CH2)s2(CH2CH2O)s1(CH2)s3NRN1であり、ここでs1は1から10の整数(例えば、1から6または1から4)であり、s2とs3はそれぞれ、独立して、0から10の整数(例えば、0から4、0から6、1から4、1から6または1から10)であり、各RN1は、独立して、水素または所望により置換されているC1〜6アルキルである)である。
T3’とT3”はそれぞれ、独立して、H、所望により置換されているアルキル、所望により置換されているアルコキシまたは所望により置換されているチオアルコキシであり、またはT3とT3”の組合せは、一緒に(例えばT3のように)、O(オキソ)、S(チオ)またはSe(セレノ)を形成し;
各V4は、独立して、O、S、N(RVc)nvまたはC(RVc)nvであり、ここでnvは0から2の整数であり、各RVcは、独立して、H、ハロ、所望により置換されているアミノ酸、所望により置換されているアルキル、所望により置換されているアルケニル、所望により置換されているアルキニル、所望により置換されているアルコキシ、所望により置換されているアルケニルオキシ、所望により置換されているヘテロシクリル、所望により置換されているアルケテロシクリル(alkheterocyclyl)または所望により置換されているアルキニルオキシ(例えば、所望により、アルキルについて(1)〜(21)から選択されるものなどの、本明細書に記載されるいずれかの置換基で置換されている)であり、ここでR13bとRVcは、一緒に、所望により置換されているヘテロシクリルを形成し得;
各V5は、独立して、N(RVd)nvまたはC(RVd)nvであり、ここでnvは0から2の整数であり、各RVdは、独立して、H、ハロ、所望により置換されているアミノ酸、所望により置換されているアルキル、所望により置換されているアルケニル、所望により置換されているアルキニル、所望により置換されているアルコキシ、所望により
置換されているアルケニルオキシ、所望により置換されているヘテロシクリル、所望により置換されているアルケテロシクリル(alkheterocyclyl)または所望により置換されているアルキニルオキシ(例えば、所望により、アルキルについて(1)〜(21)から選択されるものなどの、本明細書に記載されるいずれかの置換基で置換されている)であり(例えば、V5は−CHまたはNである);
R13aとR13bはそれぞれ、独立して、H、所望により置換されているアシル、所望により置換されているアシルオキシアルキル、所望により置換されているアルキルまたは所望により置換されているアルコキシであり、ここでR13bとR14の組合せは、一緒に、所望により置換されているヘテロシクリルを形成し得;
各R14は、独立して、H、ハロ、ヒドロキシ、チオール、所望により置換されているアシル、所望により置換されているアミノ酸、所望により置換されているアルキル、所望により置換されているハロアルキル、所望により置換されているアルケニル、所望により置換されているアルキニル、所望により置換されているヒドロキシアルキル(例えば、O−保護基で置換されている)、所望により置換されているヒドロキシアルケニル、所望により置換されているヒドロキシアルキニル、所望により置換されているアルコキシ、所望により置換されているアルケニルオキシ、所望により置換されているアルキニルオキシ、所望により置換されているアミノアルコキシ、所望により置換されているアルコキシアルコキシ、所望により置換されているアシルオキシアルキル、所望により置換されているアミノ(例えば、−NHR、ここでRはH、アルキル、アリールまたはホスホリルである)、アジド、所望により置換されているアリール、所望により置換されているヘテロシクリル、所望により置換されているアルケテロシクリル(alkheterocyclyl)、所望により置換されているアミノアルキル、所望により置換されているアミノアルケニルまたは所望により置換されているアミノアルキルであり;
R15とR16はそれぞれ、独立して、H、所望により置換されているアルキル、所望により置換されているアルケニルまたは所望により置換されているアルキニルである。
T1とT3はそれぞれ、独立して、O(オキソ)、S(チオ)またはSe(セレノ)であり;
R13aとR13bはそれぞれ、独立して、H、所望により置換されているアシル、所望により置換されているアシルオキシアルキル、所望により置換されているアルキルまたは所望により置換されているアルコキシであり、ここでR13bとR14の組合せは、一緒に、所望により置換されているヘテロシクリルを形成し得;
各R14は、独立して、H、ハロ、ヒドロキシ、チオール、所望により置換されているアシル、所望により置換されているアミノ酸、所望により置換されているアルキル、所望により置換されているハロアルキル、所望により置換されているアルケニル、所望により置換されているアルキニル、所望により置換されているヒドロキシアルキル(例えば、O−保護基で置換されている)、所望により置換されているヒドロキシアルケニル、所望に
より置換されているヒドロキシアルキニル、所望により置換されているアルコキシ、所望により置換されているアルケニルオキシ、所望により置換されているアルキニルオキシ、所望により置換されているアミノアルコキシ、所望により置換されているアルコキシアルコキシ、所望により置換されているアシルオキシアルキル、所望により置換されているアミノ(例えば、−NHR、ここでRはH、アルキル、アリールまたはホスホリルである)、アジド、所望により置換されているアリール、所望により置換されているヘテロシクリル、所望により置換されているアルケテロシクリル(alkheterocyclyl)、所望により置換されているアミノアルキル(例えば、ヒドロキシアルキル、アルキル、アルケニルまたはアルキニル)、所望により置換されているアミノアルケニルまたは所望により置換されているアミノアルキニルであり;
R15とR16はそれぞれ、独立して、H、所望により置換されているアルキル、所望により置換されているアルケニルまたは所望により置換されているアルキニル(例えば、R15はHであり、R16はHまたは所望により置換されているアルキルである)である。
各R13bは、独立して、H、所望により置換されているアシル、所望により置換されているアシルオキシアルキル、所望により置換されているアルキルまたは所望により置換されているアルコキシであり、ここでR13bとR14bの組合せは、一緒に、所望により置換されているヘテロシクリルを形成し得;
各R14aとR14bは、独立して、H、ハロ、ヒドロキシ、チオール、所望により置換されているアシル、所望により置換されているアミノ酸、所望により置換されているアルキル、所望により置換されているハロアルキル、所望により置換されているアルケニル、所望により置換されているアルキニル、所望により置換されているヒドロキシアルキル(例えば、O−保護基で置換されている)、所望により置換されているヒドロキシアルケニル、所望により置換されているアルコキシ、所望により置換されているアルケニルオキシ、所望により置換されているアルキニルオキシ、所望により置換されているアミノアルコキシ、所望により置換されているアルコキシアルコキシ、所望により置換されているアシルオキシアルキル、所望により置換されているアミノ(例えば、−NHR、ここでRは
H、アルキル、アリール、ホスホリル、所望により置換されているアミノアルキルまたは所望により置換されているカルボキシアミノアルキルである)、アジド、所望により置換されているアリール、所望により置換されているヘテロシクリル、所望により置換されているアルケテロシクリル(alkheterocyclyl)、所望により置換されているアミノアルキル、所望により置換されているアミノアルケニルまたは所望により置換されているアミノアルキニルであり;
R15はそれぞれ、独立して、H、所望により置換されているアルキル、所望により置換されているアルケニルまたは所望により置換されているアルキニルである。
いくつかの実施形態では、Bは修飾グアニンである。例となる修飾グアニンは、式(b15)〜(b17):
T4’、T4”、T5’、T5”、T6’およびT6”はそれぞれ、独立して、H、所望により置換されているアルキルまたは所望により置換されているアルコキシであり、ここでT4’とT4”の組合せ(例えばT4のように)またはT5’とT5”の組合せ(例えば、T5のように)またはT6’とT6”の組合せは一緒に(例えば、T6のように)、O(オキソ)、S(チオ)またはSe(セレノ)を形成し;
V5とV6はそれぞれ、独立して、O、S、N(RVd)nvまたはC(RVd)nvであり、ここでnvは0から2の整数であり、各RVdは、独立して、H、ハロ、チオール、所望により置換されているアミノ酸、シアノ、アミジン、所望により置換されているアミノアルキル、所望により置換されているアミノアルケニル、所望により置換されているアミノアルキニル、所望により置換されているアルキル、所望により置換されているアルケニル、所望により置換されているアルキニル、所望により置換されているアルコキシ、所望により置換されているアルケニルオキシ、所望により置換されているアルキニルオキシ(例えば、所望により、アルキルについて(1)〜(21)から選択されるものなどの、本明細書に記載されるいずれかの置換基で置換されている)、所望により置換されているチオアルコキシまたは所望により置換されているアミノであり;
R17、R18、R19a、R19b、R21、R22、R23およびR24はそれぞれ、独立して、H、ハロ、チオール、所望により置換されているアルキル、所望により置換されているアルケニル、所望により置換されているアルキニル、所望により置換されているチオアルコキシ、所望により置換されているアミノまたは所望により置換されているアミノ酸である。
T4’はそれぞれ、独立して、H、所望により置換されているアルキルまたは所望により置換されているアルコキシであり、各T4は、独立して、O(オキソ)、S(チオ)またはSe(セレノ)であり;
R18、R19a、R19bおよびR21はそれぞれ、独立して、H、ハロ、チオール、所望により置換されているアルキル、所望により置換されているアルケニル、所望により置換されているアルキニル、所望により置換されているチオアルコキシ、所望により置換されているアミノまたは所望により置換されているアミノ酸である。
各V7は、独立して、O、S、N(RVe)nvまたはC(RVe)nvであり、ここでnvは0から2の整数であり、各RVeは、独立して、H、ハロ、所望により置換されているアミノ酸、所望により置換されているアルキル、所望により置換されているアルケニル、所望により置換されているアルキニル、所望により置換されているアルコキシ、所望により置換されているアルケニルオキシまたは所望により置換されているアルキニルオ
キシ(例えば、所望により、アルキルについて(1)〜(21)から選択されるものなどの、本明細書に記載されるいずれかの置換基で置換されている)であり;
各R25は、独立して、H、ハロ、チオール、所望により置換されているアルキル、所望により置換されているアルケニル、所望により置換されているアルキニル、所望により置換されているチオアルコキシまたは所望により置換されているアミノであり;
R26aとR26bはそれぞれ、独立して、H、所望により置換されているアシル、所望により置換されているアミノ酸、所望により置換されているカルバモイルアルキル、所望により置換されているアルキル、所望により置換されているアルケニル、所望により置換されているアルキニル、所望により置換されているヒドロキシアルキル、所望により置換されているヒドロキシアルケニル、所望により置換されているヒドロキシアルキニル、所望により置換されているアルコキシまたはポリエチレングリコール基(例えば、−(CH2)s2(OCH2CH2)s1(CH2)s3OR’、ここでs1は1から10の整数(例えば、1から6または1から4)であり、s2とs3はそれぞれ、独立して、0から10の整数(例えば、0から4、0から6、1から4、1から6または1から10)であり、R’はHまたはC1〜20アルキルである);またはアミノ−ポリエチレングリコール基(例えば、−NRN1(CH2)s2(CH2CH2O)s1(CH2)s3NRN1、ここでs1は1から10の整数(例えば、1から6または1から4)であり、s2とs3はそれぞれ、、独立して、0から10の整数(例えば、0から4、0から6、1から4、1から6または1から10)であり、各RN1は、独立して、水素または所望により置換されているC1〜6アルキルである)であり;
各R27は、独立して、H、所望により置換されているアルキル、所望により置換されているアルケニル、所望により置換されているアルキニル、所望により置換されているアルコキシ、所望により置換されているチオアルコキシまたは所望により置換されているアミノであり;
各R28は、独立して、H、所望により置換されているアルキル、所望により置換されているアルケニル、または所望により置換されているアルキニルであり;
各R29は、独立して、H、所望により置換されているアシル、所望により置換されているアミノ酸、所望により置換されているカルバモイルアルキル、所望により置換されているアルキル、所望により置換されているアルケニル、所望により置換されているアルキニル、所望により置換されているヒドロキシアルキル、所望により置換されているヒドロキシアルケニル、所望により置換されているアルコキシまたは所望により置換されているアミノである。
各R25は、独立して、H、ハロ、チオール、所望により置換されているアルキル、所望により置換されているアルケニル、所望により置換されているアルキニル、所望により置換されているチオアルコキシまたは所望により置換されているアミノであり;
R26aとR26bはそれぞれ、独立して、H、所望により置換されているアシル、所望により置換されているアミノ酸、所望により置換されているカルバモイルアルキル、所望により置換されているアルキル、所望により置換されているアルケニル、所望により置換されているアルキニル、所望により置換されているヒドロキシアルキル、所望により置換されているヒドロキシアルケニル、所望により置換されているヒドロキシアルキニル、所望により置換されているアルコキシまたはポリエチレングリコール基(例えば、−(CH2)s2(OCH2CH2)s1(CH2)s3OR’、ここでs1は1から10の整数(例えば、1から6または1から4)であり、s2とs3はそれぞれ、独立して、0から10の整数(例えば、0から4、0から6、1から4、1から6または1から10)であり、R’はHまたはC1〜20アルキルである);またはアミノ−ポリエチレングリコール基(例えば、−NRN1(CH2)s2(CH2CH2O)s1(CH2)s3NRN1、ここでs1は1から10の整数(例えば、1から6または1から4)であり、s2とs3はそれぞれ、独立して、0から10の整数(例えば、0から4、0から6、1から4、1から6または1から10)であり、各RN1は、独立して、水素または所望により置換されているC1〜6アルキルである)であり;
各R27は、独立して、H、所望により置換されているアルキル、所望により置換されているアルケニル、所望により置換されているアルキニル、所望により置換されているアルコキシ、所望により置換されているチオアルコキシまたは所望により置換されているアミノである。
れているフェニルまたは所望により置換されているナフチル)または本明細書に記載されるいずれかの置換基(例えば、R14またはR14’について)であり;ここでR13a(例えば、Hまたは本明細書に記載されるいずれかの置換基)、R13b(例えば、Hまたは本明細書に記載されるいずれかの置換基)、R15(例えば、Hまたは本明細書に記載されるいずれかの置換基)およびT3(例えば、オキソまたは本明細書に記載されるいずれかの置換基)は本明細書に記載されるとおりである。
いくつかの実施形態では、修飾核酸塩基は修飾ウラシルである。修飾ウラシルを有する例となる核酸塩基およびヌクレオシドは、シュードウリジン(ψ)、ピリジン−4−オンリボヌクレオシド、5−アザ−ウリジン、6−アザ−ウリジン、2−チオ−5−アザ−ウリジン、2−チオ−ウリジン(s2U)、4−チオ−ウリジン(s4U)、4−チオ−シュードウリジン、2−チオ−シュードウリジン、5−ヒドロキシ−ウリジン(ho5U)、5−アミノアリル−ウリジン、5−ハロ−ウリジン(例えば、5−ヨード−ウリジンまたは5−ブロモ−ウリジン)、3−メチル−ウリジン(m3U)、5−メトキシ−ウリジン(mo5U)、ウリジン5−オキシ酢酸(cmo5U)、ウリジン5−オキシ酢酸メチルエステル(mcmo5U)、5−カルボキシメチル−ウリジン(cm5U)、1−カルボキシメチル−シュードウリジン、5−カルボキシヒドロキシメチル−ウリジン(chm5U)、5−カルボキシヒドロキシメチル−ウリジンメチルエステル(mchm5U)、5−メトキシカルボニルメチル−ウリジン(mcm5U)、5−メトキシカルボニルメチル−2−チオ−ウリジン(mcm5s2U)、5−アミノメチル−2−チオ−ウリジン(nm5s2U)、5−メチルアミノメチル−ウリジン(mnm5U)、5−メチルアミノメチル−2−チオ−ウリジン(mnm5s2U)、5−メチルアミノメチル−2−セレノ−ウリジン(mnm5se2U)、5−カルバモイルメチル−ウリジン(ncm5U)、5−カルボキシメチルアミノメチル−ウリジン(cmnm5U)、5−カルボキシメチルアミノメチル−2−チオ−ウリジン(cmnm5s2U)、5−プロピニル−ウリジン、1−プロピニル−シュードウリジン、5−タウリノメチル−ウリジン(τm5U)、1−タウリノメチル−シュードウリジン、5−タウリノメチル−2−チオ−ウリジン(τm5s2U)、1−タウリノメチル−4−チオ−シュードウリジン、5−メチル−ウリジン(m5U、すなわち、核酸塩基デオキシチミンを有する)、1−メチル−シュードウリジン(m1ψ)、5−メチル−2−チオ−ウリジン(m5s2U)、1−メチル−4−チオ−シュードウリジン(m1s4ψ)、4−チオ−1−メチル−シュードウリジン、3−メチル−シュードウリジン(m3ψ)、2−チオ−1−メチル−シュードウリジン、1−メチル−1−デアザ−シュードウリジン、2−チオ−1−メチル−1−デアザ−シュードウリジン、ジヒドロウリジン(D)、ジヒドロシュードウリジン、5,6−ジヒドロウリジン、5−メチル−ジヒドロウリジン(m5D)、2−チオ−ジヒドロウリジン、2−チオ−
ジヒドロシュードウリジン、2−メトキシ−ウリジン、2−メトキシ−4−チオ−ウリジン、4−メトキシ−シュードウリジン、4−メトキシ−2−チオ−シュードウリジン、N1−メチル−シュードウリジン、3−(3−アミノ−3−カルボキシプロピル)ウリジン(acp3U)、1−メチル−3−(3−アミノ−3−カルボキシプロピル)シュードウリジン(acp3ψ)、5−(イソペンテニルアミノメチル)ウリジン(inm5U)、5−(イソペンテニルアミノメチル)−2−チオ−ウリジン(inm5s2U)、α−チオ−ウリジン、2’−O−メチル−ウリジン(Um)、5,2’−O−ジメチル−ウリジン(m5Um)、2’−O−メチル−シュードウリジン(ψm)、2−チオ−2’−O−メチル−ウリジン(s2Um)、5−メトキシカルボニルメチル−2’−O−メチル−ウリジン(mcm5Um)、5−カルバモイルメチル−2’−O−メチル−ウリジン(ncm5Um)、5−カルボキシメチルアミノメチル−2’−O−メチル−ウリジン(cmnm5Um)、3,2’−O−ジメチル−ウリジン(m3Um)、5−(イソペンテニルアミノメチル)−2’−O−メチル−ウリジン(inm5Um)、1−チオ−ウリジン、デオキシチミジン、2’‐F‐アラ‐ウリジン、2’‐F‐ウリジン、2’‐OH‐アラ‐ウリジン、5‐(2‐カルボメトキシビニル)ウリジンおよび5‐[3‐(1‐E‐プロペニルアミノ)ウリジンを含む。
バモイル−アデノシン(t6A)、N6−メチル−N6−スレオニルカルバモイル−アデノシン(m6t6A)、2−メチルチオ−N6−スレオニルカルバモイル−アデノシン(ms2g6A)、N6,N6−ジメチル−アデノシン(m6 2A)、N6−ヒドロキシノルバリルカルバモイル−アデノシン(hn6A)、2−メチルチオ−N6−ヒドロキシノルバリルカルバモイル−アデノシン(ms2hn6A)、N6−アセチル−アデノシン(ac6A)、7−メチル−アデニン、2−メチルチオ−アデニン、2−メトキシ−アデニン、α−チオ−アデノシン、2’−O−メチル−アデノシン(Am)、N6,2’−O−ジメチル−アデノシン(m6Am)、N6,N6,2’−O−トリメチル−アデノシン(m6 2Am)、1,2’−O−ジメチル−アデノシン(m1Am)、2’−O−リボシルアデノシン(リン酸)(Ar(p))、2−アミノ−N6−メチル−プリン、1−チオ−アデノシン、8−アジド−アデノシン、2’‐F‐アラ‐アデノシン、2’‐F‐アデノシン、2’‐OH‐アラ‐アデノシンおよびN6‐(19‐アミノ‐ペンタオキサノナデシル)−アデノシンを含む。
および他の5−置換ウラシルおよびシトシン、7−メチルグアニンおよび7−メチルアデニン、8−アザグアニンおよび8−アザアデニン、デアザグアニン、7−デアザグアニン、3−デアザグアニン、デアザアデニン、7−デアザアデニン、3−デアザアデニン、ピアゾロ[3,4−d]ピリミジン、イミダゾ[1,5−a]1,3,5トリアジノン、9−デアザプリン、イミダゾ[4,5−d]ピラジン、チアゾロ[4,5−d]ピリミジン、ピラジン−2−オン、1,2,4−トリアジン、ピリダジンおよび1,3,5トリアジンを含む、塩基の天然および合成の誘導体も含み得る。ヌクレオチドを省略表記のA、G、C、TまたはUで表す場合、各文字は、それを示す塩基および/またはその誘導体を指し、例えば、Aは、アデニンまたはアデニン類似体例えば、7−デアザアデニンを含む。
修飾核酸またはmmRNA分子に組み込まれ得る修飾ヌクレオシドとヌクレオチドは、ヌクレオシド間結合(例えば、リン酸主鎖)上に修飾され得る。主鎖のリン酸基は、酸素原子の1つ以上を異なる置換基で置換することで修飾され得る。さらに、修飾ヌクレオシドおよびヌクレオチドは、非置換リン酸部分の、本明細書に記載される修飾リン酸による大幅な置換を含み得る。修飾リン酸基の例には、限定ではなく、ホスホロチオエート、ホスホロセレネート、ボラノリン酸、ボラノリン酸エステル、水素ホスホネート、ホスホロアミデート、ホスホロジアミデート、アルキルまたはアリールホスホネートおよびホスホトリエステルが含まれる。ホスホロジチオエートは、非結合酸素がいずれも硫黄で置換されている。リン酸リンカーは、結合する酸素を窒素で置換することにより(架橋ホスホロアミデート)、硫黄で置換することにより(架橋ホスホロチオエート)、および炭素で置換することにより(架橋メチレン−ホスホネート)修飾されることもできる。
本発明の修飾核酸とmmRNAは、糖、核酸塩基および/またはヌクレオシド間結合への修飾の組合せを含み得る。これらの組合せは、本明細書に記載されるいずれかの1つ以上の修飾を含み得る。例えば、本明細書に記載される式(Ia)、(Ia−1)〜(Ia−3)、(Ib)〜(If)、(IIa)〜(IIp)、(IIb−1)、(IIb−2)、(IIc−1)〜(IIc−2)、(IIn−1)、(IIn−2)、(IVa)〜(IVl)および(IXa)〜(IXr)のいずれかのヌクレオチドを、本明細書に記載される核酸塩基(例えば、式(b1)〜(b43)のものまたはその他本明細書に記載されるいずれか)のいずれかと組み合わせることができる。
本発明により使用する修飾核酸とmmRNA分子は、本明細書に記載されるような任意の便利な技法にしたがい調製され得る。本明細書に開示の修飾核酸およびmmRNA分子の合成に使用される修飾ヌクレオシドおよびヌクレオチドは、容易に入手可能な出発材料から、以下の一般的な方法と手順を用いて、調製できる。典型的なまたは好ましい作業条件(例えば、反応温度と時間、反応物のモル比、溶媒、圧力など)が整えば、当業者であ
ればさらなる作業条件の最適化と開発が可能であろう。最適反応条件は、使用される反応物や溶媒により異なり得るが、そのような条件は当業者による日常的な最適化手順により決定され得る。
a)式(IV−1):
式(V−1):
(式中Y9はH、ヒドロキシ、ホスホリル、ピロリン酸、硫酸、アミノ、チオール、所望により置換されているアミノ酸またはペプチド(例えば、2から12アミノ酸を含む)であり;各P1、P2とP3は、独立して、適切な保護基であり;
式(VI−1):
b)式(V)の修飾核酸またはmmRNAを酸化または硫化して式(VII−1):
c)保護基を除去して式(Ia)の修飾核酸またはmmRNAを得るステップを含む。
いくつかの実施形態では、ステップa)とb)は、1回から約10,000回反復される。いくつかの実施形態では、方法は、アデノシン、シトシン、グアノシン、およびウラシルからなる群より選択されるヌクレオチド(例えば、構成要素分子)をさらに含む。いくつかの実施形態では、核酸塩基は、ピリミジンまたはその誘導体であり得る。いくつか
の実施形態では、修飾核酸またはmmRNAは翻訳可能である。
スキーム8
修飾ヌクレオチドと修飾ヌクレオチドの組合せのさらなる例を以下表2に示す。これらの修飾ヌクレオチドの組合せは、本発明の修飾核酸またはmmRNAを形成するのに使用され得る。特に断らない限り、修飾ヌクレオチドは、本発明の修飾核酸またはmmRNAの天然ヌクレオチドを完全に置き換えてよい。非限定的な例として、天然ヌクレオチドのウリジンは、本明細書に記載される修飾ヌクレオシドで置換されてよい。別の非限定的な例では、天然ヌクレオチドウリジンは、本明細書に開示される修飾ヌクレオシドの少なくとも1つで部分的に(例えば、約0.1%、1%、5%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、95%または99.9%)置換されていてよい。
本開示により使用される修飾核酸分子は、限定ではなく, 化学合成および酵素的合成などのインビトロの転写、または長い前駆物質の酵素的および化学的切断などを含む、任意入手可能な技法により調製され得る。RNAを合成する方法は、当技術分野で既知である(例えば、それらの全容が参照として本明細書に組み込まれるGait, M.J. (ed.) Oligonucleotide synthesis: a practical approach, Oxford [Oxfordshire], Washington, DC: IRL Press, 1984; and Herdewijn, P. (ed.) Oligonucleotide synthesis:
methods and applications, Methods in Molecular Biology, v. 288 (Clifton, N.J.) Totowa, N.J.: Humana Press, 2005を参照)。
合物中で行われ得る。特定の反応ステップに応じて、特定の反応ステップに適した溶媒が選択され得る。
さらなる実施形態では、mRNAは30ヌクレオチドを超える長さであり得る。別の実施形態では、mRNAは35ヌクレオチドを超える長さであり得る(例えば、少なくとも約35、40、45、50、55、60、70、80、90、100、120、140、160、180、200、250、300、350、400、450、500、600、700、800、900、1,000、1,100、1,200、1,300、1,400、1,500、1,600、1,700、1,800、1,900、2,000、2,
500、3,000、4,000および5,000ヌクレオチドであるか、これらよりも長い)。
主溝相互作用パートナー
本明細書に記載される修飾核酸分子、例えば、修飾mRNA(mmRNA)は、ヌクレオチドまたは核酸の主溝面との相互作用、例えば結合を介してRNAリガンドを検出し応答する認識受容体との相互作用を攪乱し得る。したがって、本明細書に記載される修飾ヌクレオチドまたは修飾核酸分子を含むRNAリガンドは、主溝結合パートナーとの相互作用を低下させ、したがって、自然免疫反応または炎症促進性サイトカインの発現と分泌、またはその両方を低下させる。
本明細書に記載される修飾核酸分子、例えば、mmRNAは、細胞内の自然免疫反応を低下させる。「自然免疫反応」という用語は、限定ではないが一般にはウイルスまたは細菌由来の単鎖核酸を含む外因性核酸に対する細胞反応を含み、サイトカイン、特にインターフェロンの発現と放出、および細胞死の誘導を含む。タンパク質合成も自然細胞免疫反応中に低下し得る。細胞内の自然免疫反応を排除することは有利であるが、本開示は、そのような反応全てを除去することなく、インターフェロンシグナル伝達を含む免疫反応を大幅に低下させる修飾mRNAを提供する。いくつかの実施形態では、免疫反応は、対応する非修飾核酸分子に誘導される免疫反応と比べ、10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、95%、99%、99.9%または99.9%以上低下し得る。そのような低下は、インターフェロン1型の発現または活性レベル、またはToll様受容体(例えば、TLR7およびTLR8)などのインターフェロンが調節する遺伝子の発現により測定され得る。自然免疫反応の低下は、細胞集団に対する修飾RNAの1回または複数の投与後の細胞死の低下によっても測定され得、たとえば、細胞死は、対応する非修飾核酸分子で観察されるよりも10%、25%、50%、75%、85%、90%、95%または95%以上少ない細胞死頻度である。さらに、細胞死は、修飾核酸分子が接触した細胞の50%、40%、30%、20%、10%、5%、1%、0.1%よりも少ないか、0.01%以下に、影響し得る。
当分野の「全か無か」のモデルは、修飾mRNAの治療的利用に関連づけられる生物学的現象を記述するのにまったく不十分であることが確認されている。発明者らは、タンパク質産生を向上するためには、修飾または修飾の組合せの性質、修飾パーセントを考慮し、2以上のサイトカインまたは測定基準を調査して特定の修飾mRNAの有効性とリスクのプロファイルを決定し得る、と定めている。
本発明の1つの実施形態では、mRNA分子は生物の免疫反応を引き出すかまたは誘発するために使用され得る。送達されるmRNA分子は、免疫原性ペプチドまたはポリペプチドをコードし得、2以上のそのようなペプチドまたはポリペプチドをコードし得る。
1つの実施形態では、本発明の修飾核酸分子またはmmRNAの製剤は、両親媒性および/または免疫原性両親媒性ペプチドをさらに含み得る。非限定的な例として、両親媒性および/または免疫原性両親媒性ペプチドを含む修飾核酸分子またはmmRNAは、それらの全容が参照によりそれぞれ本明細書に組み込まれる米国出願公開第20110250237号ならびに国際公開第2010009277号および同第2010009065号に記載されるように製剤され得る。
は、MHCII結合ペプチドまたはMHCII結合ペプチドに類似の配列を有するペプチドを含み得る(それらの全容が参照によりそれぞれ本明細書に組み込まれる国際公開第2012027365号、同第2011031298号および米国出願公開第20120070493号、同第US20110110965号を参照)。別の例として、ワクチン製剤は、対象におけるニコチン残基に対する抗体反応を生成し得る修飾ニコチン化合物を含み得る(それらの全容が参照によりそれぞれ本明細書に組み込まれる国際公開第2012061717号および米国出願公開第20120114677号を参照)。
修飾核酸分子は、基準ポリペプチド配列と特定の同一性のあるポリペプチド、例えば変異体ポリペプチドをコードする。「同一性」という用語は、当技術分野で知られるように、2以上のペプチドの配列間で配列を比較して決定される関係を指す。当分野では、「同一性」は、2以上のアミノ酸残基の鎖間の一致数により決定されるペプチド同士の配列関連性の度合いも指す。同一性は、特定の数学モデルまたはコンピュータープログラム(すなわち「アルゴリズム」)に指定される、(存在する場合は)ギャップアラインメントを有する2以上の配列の小さい方の間の同一整合のパーセントを測る。関連ペプチドの同一性は、既知の方法で容易に計算できる。そのような方法は、限定ではなく、その全容がすべて参照により本明細書に組み込まれるComputational Molecular Biology, Lesk, A. M., ed., Oxford University Press, New York, 1988; Biocomputing: Informatics and Genome Projects, Smith, D. W., ed., Academic Press, New York, 1993; Computer Analysis of Sequence Data, Part 1, Griffin, A. M., and Griffin,
H. G., eds., Humana Press, New Jersey, 1994; Sequence Analysis in Molecular Biology, von Heinje, G., Academic Press, 1987; Sequence Analysis Primer, Gribskov, M. and Devereux, J., eds., M. Stockton Press, New York, 1991;およびCarillo et al., SIAM J. Applied Math. 48, 1073 (1988)に記載されるものを含む。
利用され得る。特定の実施形態では、本開示にしたがい利用されるタンパク質配列は、本明細書に提供または参照されるいずれかの配列に示されるような、2、3、4、5、6、7、8、9、10または11以上の突然変異(mutations)を含む。
適切なタンパク質翻訳は、mRNAに関連するある数のポリペプチドと核酸の物理的集合を含む。本開示は、1つ以上のヌクレオシド修飾(例えば、少なくとも2つの異なるヌクレオシド修飾)とmRNAに結合した1つ以上のポリペプチドを有する翻訳可能mRNAを含むタンパク質−核酸複合体を提供する。一般に、タンパク質は、この複合体が導入される細胞の自然免疫反応を回避または低下させるのに有効な量で提供される。
本明細書に記載されるように、実質的に翻訳不可能な配列を有するmRNAが提供される。そのようなmRNAは、対象に投与される場合ワクチンとして有効であり得る。ワクチンを投与される対象が哺乳動物であり得、より好ましくはヒトであり、最も好ましくは患者であることがさらに提供される。
製剤、投与、送達および投薬
本発明は、修飾核酸およびmmRNA組成物ならびに1つ以上の薬剤的に許容可能な賦形剤と組み合わせた複合体を提供する。医薬組成物は、1つ以上の追加の活性物質、例えば治療的および/または予防的活性物質を所望により含んでよい。製剤および/または薬剤の製造における一般的考察は、例えば、Remington: The Science and Practice of Pharmacy 21st ed., Lippincott Williams & Wilkins, 2005(その全容が参照により本明細書に組み込まれる)に見出され得る。
発される方法で調製され得る。一般に、そのような調製方法は、活性成分を賦形剤および/または1つ以上の他の副成分と結合させるステップ、次いで必要および/または所望される場合は、製品の分割、成形および/または所望の単回または反復投与単位に包装するステップを含む。
本発明の修飾核酸およびmmRNAは、1つ以上の賦形剤を用いて製剤され得、(1)安定性が増加する;(2)細胞トランスフェクションが増加する;(3)(例えば、修飾核酸またはmmRNAのデポ剤からの)徐放性または遅効型放出を可能にする;(4)体内分布を変える(例えば、修飾核酸またはmmRNAを特定の組織または細胞種に向ける);(5)コードされたタンパク質のインビボでの翻訳を増加させる;および/または(6)コードされたタンパク質のインビボでの放出特性を変える。溶媒、分散媒、希釈物または他の液体ビヒクル、分散または懸濁補助剤、界面活性剤、等張剤、増粘または乳化剤、保存料のいずれかまたは全てなどの従来からの賦形剤に加えて、本発明の賦形剤は、限定ではなく、リピドイド、リポソーム、脂質ナノ粒子、ポリマー、リポプレックス、コアシェルナノ粒子、ペプチド、タンパク質、修飾核酸またはmmRNAトランスフェクションされた細胞(例えば対象への移植のため)、ヒアルロニダーゼ、ナノ粒子模倣体およびそれらの組合せを含み得る。したがって、本発明の製剤は、1つ以上の賦形剤を、それぞれ、ともに修飾核酸またはmmRNAの安定性を増加させ、修飾核酸またはmmRNAによる細胞のトランスフェクションを増加させ、修飾核酸またはmmRNAにコードされるタンパク質の発現を増加させ、および/または修飾核酸またはmmRNAにコードされるタンパク質の放出特性を変える量で、含み得る。さらに、本発明の修飾核酸およびmmRNAは、自己会合核酸ナノ粒子を用いて製剤してもよい。
リピドイドの合成は広く記載されており、これらの化合物を含む製剤は特に修飾核酸分子またはmmRNAの送達に適している(その全容がすべて参照により本明細書に組み込まれるMahon et al., Bioconjug Chem. 2010 21:1448−1454; Schroeder et al., J Intern Med. 2010 267:9−21; Akinc et al., Nat Biotechnol. 2008 26:561−569; Love et al., Proc Natl Acad Sci U S A. 2010 107:1864−1869; Siegwart et al., Proc Natl Acad Sci U S A. 2011 108:12996−3001を参照)。
Natl Acad Sci U S A. 2008 105:11915−11920; Akinc et al., Mol Ther. 2009 17:872−879; Love et al., Proc Natl Acad Sci U S
A. 2010 107:1864−1869; Leuschner et al., Nat Biotechnol. 2011 29:1005−1010を参照)、本開示は、それらの製剤と、1本鎖修飾核酸分子またはmmRNAの送達における使用を記述する。複合体、ミセル、リポソームまたは粒子はこれらのリピドイドを含んで調製さ
れ得るので、局所および/または全身投与経路によるリピドイド製剤注入後のコードされたタンパク質の産生により判断すると、修飾核酸分子またはmmRNAが効果的に送達される結果になる。修飾核酸分子またはmmRNAのリピドイド複合体は、限定ではなく、静脈内、筋肉内または皮下経路を含む様々な方法により投与され得る。
Mol Ther. 2009 17:872−879に開示されており、その全容が参照により本明細書に組み込まれる(図1参照)。
Mol Ther. 2009 17:872−879を参照)。別の例では、C12−200(その全容が参照によりそれぞれ本明細書に組み込まれる米国特許仮出願第61/175,770号および国際公開公報第2010129709号を参照)リピドイドを用いた静脈内製剤は、C12−200/ジステロイルホスファチジルコリン/コレステロール/PEG−DMGのモル比50/10/38.5/1.5を有し得、約7対1の全脂質対修飾核酸またはmmRNAの重量比を有し得、平均粒子径が80nmであり、修飾核酸分子またはmmRNAを肝細胞に送達するのに有効であり得る(その全容が参照により本明細書に組み込まれるLove et al., Proc Natl Acad Sci U S A. 2010 107:1864−1869を参照)。別の実施形態で
は、MD1リピドイド含有製剤は、修飾核酸分子またはmmRNAを肝細胞にインビボで有効送達するのに使用され得る。筋肉内または皮下経路の最適化リピドイド製剤の特徴は、標的の細胞種および製剤が細胞外マトリックスを通って血流に拡散する能力により大きく異なり得る。内皮窓のサイズにより、肝細胞への有効送達には150nm未満の粒子径が望ましい場合があるが(その全容が参照により本明細書に組み込まれるAkinc et al., Mol Ther. 2009 17:872−879を参照)、限定ではなく、内皮細胞、骨髄系細胞および筋肉細胞を含む他の細胞種に製剤を送達する場合のリピドイド製剤修飾核酸分子またはmmRNAの使用は、同様にサイズが限定されない可能性がある。siRNAを骨髄系細胞および内皮などの他の非肝細胞にインビボで送達する場合のリピドイド製剤の使用が報告されている(その全容が参照によりそれぞれ本明細書に組み込まれるAkinc et al., Nat Biotechnol. 2008 26:561−569; Leuschner et al., Nat Biotechnol. 2011 29:1005−1010; Cho et al. Adv. Funct. Mater. 2009 19:3112−3118; 8th
International Judah Folkman Conference,
Cambridge, MA October 8−9, 2010を参照)。単球などの骨髄系細胞への有効送達、リピドイド製剤は同様の成分モル比を有し得る。リピドイドと、限定ではなくジステロイルホスファチジルコリン、コレステロールおよびPEG−DMGを含む他の成分の異なる比率が、限定ではなく肝細胞、骨髄系細胞、筋肉細胞などを含む異なる細胞種に送達される修飾核酸またはmmRNAの製剤を最適化するのに使用され得る。例えば、成分モル比は、限定ではなく、50%のC12−200、10%のジステロイルホスファチジルコリン、38.5%のコレステロール、および%1.5のPEG−DMGを含み得る(その全容が参照により本明細書に組み込まれるLeuschner et al., Nat Biotechnol 2011 29:1005−1010を参照)。皮下または筋肉内送達による、細胞(限定ではなく、脂肪細胞および筋肉細胞など)への核酸の局所送達へのリピドイド製剤の使用は、全身送達に所望される全ての製剤成分を要しないことがあり、リピドイドと修飾核酸分子またはmmRNAだけを含み得る。
19:1688−1694を参照)。
本発明の修飾核酸分子およびmmRNAは、1つ以上のリポソーム、リポプレックスまたは脂質ナノ粒子を用いて製剤され得る。1つの実施形態では、修飾核酸分子またはmmRNAの医薬組成物は、リポソームを含む。リポソームは、人工的に調製される小胞で、主として脂質二重層で構成され得、栄養剤と医薬製剤の投与用の送達ビヒクルとして使用され得る。リポソームは異なる寸法であり得、例えば、限定ではなく、多ラメラ小胞(MLV)は直径が数百ナノメートルであり得、狭い水性コンパートメントで分離された一連の同心二重層を含み得、小単細胞小胞(SUV)は直径50nm未満であり得、大単ラメラ小胞(LUV)は直径50〜500nmであり得る。リポソームの設計は、リポソームの不健康な組織への結合を向上させるか、または限定ではなく飲食作用などのイベントを活性化するため、限定ではなく、オプソニンまたはリガンドを含み得る。リポソームは、医薬製剤の送達を向上させるために低いかまたは高いpHを含み得る。
小胞が分散される媒体の性質、封入される物質の有効濃度とその潜在的毒性、小胞の適用および/または送達中に関与するあらゆる追加の工程、最適化サイズ、多分散性および意図される適用での小胞の有効期間、ならびにバッチ間の再現性および安全かつ高効率のリポソーム製品の大規模生産の可能性などの物理化学的特徴により得る。
Zhang et al. Gene Therapy. 1999 6:1438−1447; Jeffs et al. Pharm Res. 2005 22:362−372; Morrissey et al., Nat Biotechnol.
2005 2:1002−1007; Zimmermann et al., Nature. 2006 441:111−114; Heyes et al. J Contr Rel. 2005 107:276−287; Semple et al. Nature Biotech. 2010 28:172−176; Judge et al. J Clin Invest. 2009 119:661−673; deFougerolles Hum Gene Ther. 2008 19:125−132を参照)。Wheelerらの元々の方法は、界面活性剤透析法であったが、後にJeffsらが改良を加え、自発小胞形成法と呼ばれている。リポソーム製剤は、修飾核酸分子またはmmRNAに加えて3〜4つの脂質成分で構成される。一例として、リポソームは、Jeffsらに記述されるように、限定ではなく、55%のコレステロール、20%のジステロイルホスファチジルコリン(DSPC)、10%のPEG−S−DSGおよび15%の1,2−ジオレイルオキシ−N,N−ジメチルアミノプロパン(DODMA)を含み得る。別の例としては、特定のリポソーム製剤は、Heyesらに記述されるように、限定ではなく、48%のコレステロール、20%のDSPC、2%のPEG−c−DMAおよび30%のカチオン性脂質を含み得、ここでカチオン性脂質は1,2−ジステアルオキシ−N,N−ジメチルアミノプロパン(1,2−distearloxy−N,N−dimethylaminopropane)(DSDMA)、DODMA、DLin−DMAまたは1,2−ジリノレニルオキシ−3−ジメチルアミノプロパン(DLenDMA)を含み得る。
れる国際公開第2012006380号を参照)。さらに別の実施形態では、脂質製剤は、少なくともトランスフェクションを増強し得る脂質であるカチオン性脂質と、脂質部分に連結した親水性頭部基を含む少なくとも1種類の脂質を含み得る(その全容が参照によりそれぞれ本明細書に組み込まれる国際公開第2011076807号および米国出願公開第20110200582号を参照)。別の実施形態では、免疫原をコードする修飾mRNAは、官能性脂質二重層間に架橋結合を有し得る脂質小胞内で製剤され得る(その全容が参照により本明細書に組み込まれる米国出願公開第20120177724号を参照)。
1つの実施形態では、修飾mRNAは脂質−ポリカチオン複合体内で製剤され得る。脂質−ポリカチオン複合体の形成は、当技術分野で既知の方法で達成され得、および/またはその全容が参照により本明細書に組み込まれる米国出願公開第20120178702号に記載されるように達成され得る。非限定的な例として、ポリカチオンは、限定ではなく、ポリリジン、ポリオルニチンおよび/またはポリアルギニンなどのカチオン性ペプチドまたはポリペプチド、およびその全容が参照により本明細書に組み込まれる国際公開第2012013326号に記載されるカチオン性ペプチドを含み得る。別の実施形態では、修飾mRNAは、限定ではなく、コレステロールまたはジオレオイルホスファチジルエタノールアミン(DOPE)などの中性脂質をさらに含み得る脂質−ポリカチオン複合体内で製剤され得る。
特許第7,893,302号、同第7,404,969号および同第8,283,333号、ならびに米国出願公開第20100036115号および同第20120202871号(その全容が参照によりそれぞれ本明細書に組み込まれる)に記載されるカチオン性脂質から選択され得る。別の実施形態では、カチオン性脂質は、限定ではなく国際公開第2012040184号、同第2011153120号、同第2011149733号、同第2011090965号、同第2011043913号、同第2011022460号、同第2012061259号、同第2012054365号および同第2012044638号(その全容が参照によりそれぞれ本明細書に組み込まれる)に記載される式Aから選択され得る。さらに別の実施形態では、カチオン性脂質は、限定ではなく国際公開第2008103276号の式CLI〜CLXXIX、米国特許第7,893,302号の式CLI〜CLXXIX、米国特許第7,404,969号の式CLI〜CLXXXXIIおよび米国出願公開第20100036115号の式I〜VI(その全容が参照によりそれぞれ本明細書に組み込まれる)から選択され得る。非限定的な例として、カチオン性脂質は、(20Z,23Z)−N,N−ジメチルノナコサ−20,23−ジエン−10−アミン、(17Z,20Z)−N,N−ジメチルヘキサコサ−17,20−ジエン−9−アミン、(1Z,19Z)−N5N−ジメチルペンタコサ−l6、19−ジエン−8−アミン、(13Z,16Z)−N,N−ジメチルドコサ−13,16−ジエン−5−アミン、(12Z,15Z)−N,N−ジメチルヘンイコサ−12,15−ジエン−4−アミン、(14Z,17Z)−N,N−ジメチルトリコサ−14,17−ジエン−6−アミン、(15Z,18Z)−N,N−ジメチルテトラコサ−15,18−ジエン−7−アミン、(18Z,21Z)−N,N−ジメチルヘプタコサ−18,21−ジエン−10−アミン、(15Ζ,18Ζ)−Ν,Ν−ジメチルテトラコサ−15,18−ジエン−5−アミン、(14Z,17Z)−N,N−ジメチルトリコサ−14,17−ジエン−4−アミン、(19Z,22Z)−N,N−ジメチルオクタコサ−19,22−ジエン−9−アミン、(18Z,21Z)−N,N−ジメチルヘプタコサ−18,21−ジエン−8−アミン、(17Z,20Z)−N,N−ジメチルヘキサコサ−17,20−ジエン−7−アミン、(16Z,19Z)−N,N−ジメチルペンタコサ−16,19−ジエン−6−アミン、(22Z,25Z)−N,N−ジメチルヘントリアコンタ−22,25−ジエン−10−アミン、(21Z,24Z)−N,N−ジメチルトリアコンタ−21,24−ジエン−9−アミン、(18Z)−N,N−ジメチルヘプタコサ−18−エン−10−アミン、(17Z)−N,N−ジメチルヘキサコサ−17−エン−9−アミン、(19Z,22Z)−N,N−ジメチルオクタコサ−19,22−ジエン−7−アミン、N,N−ジメチルヘプタコサン−10−アミン、(20Z,23Z)−N−エチル−N−メチルノナコサ−20,23−ジエン−l0−アミン、1−[(11Z,14Z)−l−ノニルイコサ−11,14−ジエン−l−yl]ピロリジン、(20Z)−N,N−ジメチルヘプタコサ−20−エン−l0−アミン、(15Z)−N,N−ジメチルエプタコサ−15−エン−l0−アミン、(14Z)−N,N−ジメチルノナコサ−14−エン−l0−アミン、(17Z)−N,N−ジメチルノナコサ−17−エン−l0−アミン、(24Z)−N,N−ジメチルトリトリアコンタ−24−エン−l0−アミン、(20Z)−N,N−ジメチルノナコサ−20−エン−l0−アミン、(22Z)−N,N−ジメチルヘントリアコンタ−22−エン−l0−アミン、(16Z)−N,N−ジメチルペンタコサ−16−エン−8−アミン、(12Z,15Z)−N,N−ジメチル−2−ノニルヘンイコサ−12,15−ジエン−1−アミン、(13Z,16Z)−N,N−ジメチル−3−ノニルドコサ−l3,16−ジエン−l−アミン、N,N−ジメチル−l−[(lS,2R)−2−オクチルシクロプロピル]エプタデカン−8−アミン、1−[(1S,2R)−2−ヘキシルシクロプロピル]−N,N−ジメチルノナデカン−10−アミン、Ν,Ν−ジメチル−1−[(1S,2R)−2−オクチルシクロプロピル]ノナデカン−10−アミン、N,N−ジメチル−21−[(lS,2R)−2−オクチルシクロプロピル]ヘンイコサン−l0−アミン,Ν,Ν−ジメチル−1−[(1S,2S)−2−{[(lR,2R)−2−ペンチルシクロプロピル]メチル}シクロプロピル]ノナデカン−10−アミン,Ν,Ν−
ジメチル−1−[(1S,2R)−2−オクチルシクロプロピル]ヘキサデカン−8−アミン、Ν,Ν−ジメチル−[(lR,2S)−2−ウンデシルシクロプロピル]テトラデカン−5−アミン、N,N−ジメチル−3−{7−[(1S,2R)−2−オクチルシクロプロピル]ヘプチル}ドデカン−1−アミン、1−[(1R,2S)−2−ヘプチルシクロプロピル]−Ν,Ν−ジメチルオクタデカン−9−アミン、1−[(1S,2R)−2−デシルシクロプロピル]−N,N−ジメチルペンタデカン−6−アミン、N,N−ジメチル−l−[(lS,2R)−2−オクチルシクロプロピル]ペンタデカン−8−アミン、R−N,N−ジメチル−1−[(9Z,12Z)−オクタデカ−9,12−ジエン−1−イルオキシ]−3−(オクチルオキシ)プロパン−2−アミン、S−N,N−ジメチル−1−[(9Z,12Z)−オクタデカ−9,12−ジエン−1−イルオキシ]−3−(オクチルオキシ)プロパン−2−アミン、1−{2−[(9Z,12Z)−オクタデカ−9,12−ジエン−1−イルオキシ]−1−[(オクチルオキシ)メチル]エチル}ピロリジン、(2S)−N,N−ジメチル−1−[(9Z,12Z)−オクタデカ−9,12−ジエン−1−イルオキシ]−3−[(5Z)−オクタ−5−エン−1−イルオキシ]プロパン−2−アミン、1−{2−[(9Z,12Z)−オクタデカ−9,12−ジエン−1−イルオキシ]−1−[(オクチルオキシ)メチル]エチル}アゼチジン、(2S)−1−(ヘキシルオキシ)−N,N−ジメチル−3−[(9Z,12Z)−オクタデカ−9,12−ジエン−1−イルオキシ]プロパン−2−アミン、(2S)−1−(ヘプチルオキシ)−N,N−ジメチル−3−[(9Z,12Z)−オクタデカ−9,12−ジエン−1−イルオキシ]プロパン−2−アミン、Ν,Ν−ジメチル−1−(ノニルオキシ)−3−[(9Z,12Z)−オクタデカ−9,12−ジエン−1−イルオキシ]プロパン−2−アミン、Ν,Ν−ジメチル−1−[(9Z)−オクタデカ−9−エン−1−イルオキシ]−3−(オクチルオキシ)プロパン−2−アミン;(2S)−N,N−ジメチル−1−[(6Z,9Z,12Z)−オクタデカ−6,9,12−トリエン−1−イルオキシ]−3−(オクチルオキシ)プロパン−2−アミン、(2S)−1−[(11Z,14Z)−イコサ−11,14−ジエン−1−イルオキシ]−N,N−ジメチル−3−(ペンチルオキシ)プロパン−2−アミン、(2S)−1−(ヘキシルオキシ)−3−[(11Z,14Z)−イコサ−11,14−ジエン−1−イルオキシ]−N,N−ジメチルプロパン−2−アミン、1−[(11Z,14Z)−イコサ−11,14−ジエン−1−イルオキシ]−Ν,Ν−ジメチル−3−(オクチルオキシ)プロパン−2−アミン、1−[(13Z,16Z)−ドコサ−l3,16−ジエン−l−イルオキシ]−N,N−ジメチル−3−(オクチルオキシ)プロパン−2−アミン、(2S)−1−[(13Z,16Z)−ドコサ−13,16−ジエン−1−イルオキシ]−3−(ヘキシルオキシ)−N,N−ジメチルプロパン−2−アミン、(2S)−1−[(13Z)−ドコサ−13−エン−1−イルオキシ]−3−(ヘキシルオキシ)−N,N−ジメチルプロパン−2−アミン、1−[(13Z)−ドコサ−13−エン−1−イルオキシ]−N,N−ジメチル−3−(オクチルオキシ)プロパン−2−アミン、1−[(9Z)−ヘキサデカ−9−エン−1−イルオキシ]−N,N−ジメチル−3−(オクチルオキシ)プロパン−2−アミン、(2R)−N,N−ジメチル−H(1−メトイルオクチル)オキシ]−3−[(9Z,12Z)−オクタデカ−9,12−ジエン−1−イルオキシ]プロパン−2−アミン、(2R)−1−[(3,7−ジメチルオクチル)オキシ]−N,N−ジメチル−3−[(9Z,12Z)−オクタデカ−9,12−ジエン−1−イルオキシ]プロパン−2−アミン、N,N−ジメチル−1−(オクチルオキシ)−3−({8−[(1S,2S)−2−{[(1R,2R)−2−ペンチルシクロプロピル]メチル}シクロプロピル]オクチル}オキシ)プロパン−2−アミン、N,N−ジメチル−1−{[8−(2−オクリルシクロプロピル)オクチル]オキシ}−3−(オクチルオキシ)プロパン−2−アミンおよび(1lE,20Z,23Z)−N,N−ジメチルノナコサ−l1,20,2−トリエン−10−アミンまたはその薬剤的に許容可能な塩もしくは立体異性体から選択され得る。
国際公開第2012040184号、同第2011153120号、同第2011149733号、同第2011090965号、同第2011043913号、同第2011022460号、同第2012061259号、同第2012054365号、同第2012044638号、同第2010080724号および同第201021865号(その全容が参照によりそれぞれ本明細書に組み込まれる)に記載されるように合成され得る。
RNA vaccines, PNAS 2012; PMID: 22908294を参照)。
erapeutics、イスラエル)などのリポソーム内で製剤され得る。
1つの実施形態では、免疫反応は、ナノ種、ポリマーおよび免疫原を含み得る脂質ナノ粒子の送達により誘発され得る。(米国出願公開第20120189700号および国際公開第2012099805号;その全容が参照によりそれぞれ本明細書に組み込まれる)。ポリマーは、ナノ種を封入し得るか、または部分的にナノ種を封入し得る。免疫原は、組換えタンパク質、本明細書に記載される修飾RNAであり得る。1つの実施形態では、脂質ナノ粒子は、限定ではないが病原体に対するワクチンでの使用のため製剤される。
は大きすぎると考えられている。粘液は絶えず分泌され、流れ、排出または消化され、回収されるので、捕捉された粒子のほとんどは数秒または数時間内に粘膜組織から除去され得る。低分子量のポリエチレングリコール(PEG)で密にコーティングされている大きい高分子ナノ粒子(直径200nm〜500nm)の粘液中の拡散率は、水中に拡散した同じ粒子の4〜6倍低いだけであった(Lai et al. PNAS 2007 104(5):1482−487; Lai et al. Adv Drug Deliv Rev. 2009 61(2): 158−171;その全容が参照によりそれぞれ本明細書に組み込まれる)。ナノ粒子の輸送は、透過速度および/または限定ではなく蛍光退色後回復測定(FRAP)および高解像度の多粒子追跡(MPT)を含む蛍光顕微鏡技法を用いて判定され得る。非限定的な例として、粘膜バリアを貫通できる組成物は、米国特許第8,241,670号(その全容が参照により本明細書に組み込まれる)に記載されるように作製され得る。
クトン)、およびトリメチレンカルボネート、ポリビニルピロリドンを含む。脂質ナノ粒子は、限定ではなくブロックコポリマーおよび(ポリ(エチレングリコール))−(ポリ(酸化プロピレン))−(ポリ(エチレングリコール))トリブロックコポリマー(例えば、その全容が参照によりそれぞれ本明細書に組み込まれる米国出願公開第20120121718号および米国出願公開第20100003337号および米国特許第8,263,665号を参照)などのコポリマーでコーティングされるかまたは結合されていてよい。コポリマーは、安全と認められる(GRAS)ポリマーであり得、脂質ナノ粒子の形成は、新規の化学成分が生成しないように行われ得る。例えば、脂質ナノ粒子は、新規の化学成分を生じることなく、尚もヒト粘液を速やかに透過することができる、PLGAナノ粒子をコーティングするポロクサマーを含み得る(Yang et al. Angew. Chem. Int. Ed. 2011 50:2597−2600;その全容が参照により本明細書に組み込まれる)。
2008 68:9788−9798; Strumberg et al. Int
J Clin Pharmacol Ther 2012 50:76−78; Santel et al., Gene Ther 2006 13:1222−1234; Santel et al., Gene Ther 2006 13:1360−
1370; Gutbier et al., Pulm Pharmacol. Ther. 2010 23:334−344; Kaufmann et al. Microvasc Res 2010 80:286−293Weide et al. J
Immunother. 2009 32:498−507; Weide et al. J Immunother. 2008 31:180−188; Pascolo Expert Opin. Biol. Ther. 4:1285−1294; Fotin−Mleczek et al., 2011 J. Immunother. 34:1−15; Song et al., Nature Biotechnol. 2005, 23:709−717; Peer et al., Proc Natl Acad Sci U S A. 2007 6;104:4095−4100; deFougerolles Hum Gene Ther. 2008 19:125−132;全てその全容が参照により本明細書に組み込まれる)。
et al. Mol Ther. 2010 18:1357−1364; Song et al., Nat Biotechnol. 2005 23:709−717; Judge et al., J Clin Invest. 2009 119:661−673; Kaufmann et al., Microvasc Res
2010 80:286−293; Santel et al., Gene Ther 2006 13:1222−1234; Santel et al., Gene Ther 2006 13:1360−1370; Gutbier et al., Pulm Pharmacol. Ther. 2010 23:334−344;
Basha et al., Mol. Ther. 2011 19:2186−2200; Fenske and Cullis, Expert Opin Drug
Deliv. 2008 5:25−44; Peer et al., Science. 2008 319:627−630; Peer and Lieberman, Gene Ther. 2011 18:1127−1133;全てその全容が参照により本明細書に組み込まれる)。製剤の肝臓細胞受動的標的化の1つの例は、アポリポプロテインEに結合し、これらの製剤がインビボで肝細胞に結合し吸収されるのを促進することが示されている、DLin−DMA、DLin−KC2−DMAおよびDLin−MC3−DMAベースの脂質ナノ粒子製剤を含む(Akinc et al. Mol Ther. 2010 18:1357−1364;その全容が参照により本明細書に組み込まれる)。製剤は、限定ではなく葉酸、トランスフェリン、N−アセチルガラクトサミン(GalNAc)および抗体標的化アプローチに例示されるように、それらの表面の異なるリガンドの発現を通じて選択的に標的化することもできる(Kolhatkar et al., Curr Drug Discov Technol. 2011 8:197−206; Musacchio and Torchilin, Front
Biosci. 2011 16:1388−1412; Yu et al., Mol Membr Biol. 2010 27:286−298; Patil et
al., Crit Rev Ther Drug Carrier Syst. 2008 25:1−61; Benoit et al., Biomacromolecules. 2011 12:2708−2714; Zhao et al., Expert Opin Drug Deliv. 2008 5:309−319; Akinc et al., Mol Ther. 2010 18:1357−1364; Srinivasan et al., Methods Mol Biol. 2012 820:105−116; Ben−Arie et al., Methods Mol Biol. 2012 757:497−507; Peer 2010 J Control Release. 20:63−68; Peer et al.
, Proc Natl Acad Sci U S A. 2007 104:4095−4100; Kim et al., Methods Mol Biol. 2011 721:339−353; Subramanya et al., Mol Ther. 2010 18:2028−2037; Song et al., Nat
Biotechnol. 2005 23:709−717; Peer et al., Science. 2008 319:627−630; Peer and Lieberman, Gene Ther. 2011 18:1127−1133;全てその全容が参照により本明細書に組み込まれる)。
15:713−720; その全容が参照により本明細書に組み込まれる)。リポソーム、リポプレックスまたは脂質ナノ粒子は、修飾核酸分子またはmmRNAの安定性を増加させるのにも使用され得る。
は、限定ではなく、本発明の修飾核酸分子およびmmRNAなどのポリマーおよび治療剤を含み得る(その全容が参照によりそれぞれ本明細書に組み込まれる国際公開第2010075072号および米国出願公開第20100216804号および同第20110217377号および同第20120201859号を参照)。
1つの実施形態では、治療用ナノ粒子は、少なくとも1つの、限定ではなくポリリジン、ポリエチレンイミン、ポリ(アミドアミン)デンドリマー、ポリ(β−アミノエステル)(例えばその全容が参照により本明細書に組み込まれる米国特許第8,287,849号を参照)およびそれらの組合せなどのアミン含有ポリマーを含み得る。
1つの実施形態では、癌を標的とするのに使用され得る治療用ナノ粒子は、水溶液中で製剤され得る(その全容が参照によりそれぞれ本明細書に組み込まれる国際公開第2011084513号および米国出願公開第20110294717号を参照)。
/またはmmRNAを放出するための反応基を有し得る(その全容が参照によりそれぞれ本明細書に組み込まれる国際公開第20120952552号および米国出願公開第20120171229号を参照)。
号、同第201202629号、同第2012024632号および米国出願公開第20120064110号、同第20120058153号および同第20120058154号(その全容が参照によりそれぞれ本明細書に組み込まれる)に記載のナノキャリアを含み得る。
本発明の修飾核酸分子およびmmRNAは、天然および/または合成ポリマーを用いて製剤され得る。送達に使用され得るポリマーの非限定的な例は、限定ではなくMIRUS(登録商標)Bio(ウィスコンシン州マディソン)およびRoche Madison(ウィスコンシン州マディソン)のDYNAMIC POLYCONJUGATE(登録商標)(Arrowhead Research Corp.、カリフォルニア州パサデナ)製剤、PHASERX(商標)ポリマー製剤、たとえば限定ではなくSMARTT POLYMER TECHNOLOGY(商標)(ワシントン州シアトル)、DMRI/DOPE、ポロクサマー、VAXFECTIN(登録商標)Vical(カリフォルニア州サンディエゴ)のアジュバント、キトサン、Calando Pharmaceuticals(カリフォルニア州パサデナ)のシクロデキストリン、デンドリマーとポリ(乳酸−グリコール酸共重合体)(PLGA)のポリマー、RONDEL(商標)(RNAi/オリゴヌクレオチドナノ粒子送達)ポリマー(Arrowhead Research
Corporation、カリフォルニア州パサデナ)および限定ではなく、PHASERX(商標)(ワシントン州シアトル)などのpH反応性co−ブロックポリマーを含む。
Ther. 2008 19:125−132に概説;その全容が参照により本明細書に組み込まれる)。この場合は低分子干渉RNA(siRNA)での核酸のロバストなインビボ送達を得ている2つのポリマーアプローチは、ダイナミックポリコンジュゲートと、シクロデキストリンベースのナノ粒子である。これらの送達アプローチの第1は、ダイ
ナミックポリコンジュゲートを用い、マウスのインビボでsiRNAを有効送達して肝細胞中の内因性標的mRNAの発現を停止させることが示されている(Rozema et
al., Proc Natl Acad Sci U S A. 2007 104:12982−12887;その全容が参照により本明細書に組み込まれる)。この特定のアプローチは、マルチコンポーネント・ポリマーシステムであり、その主要な特徴は、核酸、この場合はsiRNAが、ジスルフィド結合により共有結合する膜活性ポリマーを含み、PEG(電荷マスキングのため)基とN−アセチルガラクトサミン基(肝細胞の標的化のため)の両方が、pH感受性結合により連結されている(Rozema et al., Proc Natl Acad Sci U S A. 2007 104:12982−12887;その全容が参照により本明細書に組み込まれる)。肝細胞に結合してエンドソーム内に入ると、ポリマー複合体は低pH環境で分解してポリマーがその正電荷を露出し、エンドソーム脱出とポリマーからのsiRNAの細胞質内放出がもたらされる。N−アセチルガラクトサミン基をマンノース基で置換することで、アシアログリコプロテイン受容体を発現する肝細胞から洞様内皮とクッパー細胞に標的を変えられることが示されている。別のポリマーアプローチは、トランスフェリンを標的とするシクロデキストリンを含有するポリカチオンナノ粒子の使用を含む。これらのナノ粒子は、トランスフェリン受容体を発現するユーイング肉腫腫瘍細胞においてEWS−FLI1遺伝子産物の発現を標的化して停止させることが示されており(Hu−Lieskovan et al., Cancer Res.2005 65: 8984−8982;その全容が参照により本明細書に組み込まれる)、これらのナノ粒子内で製剤されたsiRNAは非ヒト霊長類において良好に忍容された(Heidel et al., Proc Natl Acad Sci USA 2007 104:5715−21;その全容が参照により本明細書に組み込まれる)。これらの送達戦略はいずれも標的化送達とエンドソーム脱出機構の両方を用いた論理的アプローチを組み込んでいる。
1; Chu et al., Acc Chem Res. 2012 Jan 13; Manganiello et al., Biomaterials. 2012 33:2301−2309; Benoit et al., Biomacromolecules. 2011 12:2708−2714; Singha et al., Nucleic Acid Ther. 2011 2:133−147; deFougerolles Hum Gene Ther. 2008 19:125−132; Schaffert and Wagner, Gene Ther. 2008 16:1131−1138; Chaturvedi et al., Expert Opin Drug Deliv. 2011 8:1455−1468; Davis, Mol Pharm. 2009 6:659−668; Davis, Nature 2010 464:1067−1070;その全容が参照によりそれぞれ本明細書に組み込まれる)。
、エチレン酢酸ビニル(EVAc)、ポロクサマー、GELSITE(登録商標)(Nanotherapeutics, Inc.、フロリダ州アラチュア)、HYLENEX(登録商標)(Halozyme Therapeutics、カリフォルニア州サンディエゴ)、外科用シーラント、たとえばフィブリノゲンポリマー(Ethicon Inc.、ジョージア州コーネリア)、TISSELL(登録商標)(Baxter International, Inc、イリノイ州ディアフィールド)、PEGベースのシーラントおよびCOSEAL(登録商標)(Baxter International,
Inc、イリノイ州ディアフィールド)を含み得る。
Davis, Nature 2010 464:1067−1070;その全容が参照によりそれぞれ本明細書に組み込まれる)。
テル)、ポリ(L−ラクチド−co−L−リジン)、ポリ(4−ヒドロキシ−L−プロリンエステル)、アクリルポリマー、アミン含有ポリマー、デキストランポリマー、デキストランポリマー誘導体またはそれらの組合せなどの少なくとも1つのポリマーを含み得る。
献の全体が本明細書に組み込まれる)に記載されている式Z、Z’、またはZ”のポリマーと共に製剤化してよい。本発明の修飾核酸および/または修飾mRNAと共に製剤化されるポリマーは、国際公開第2012082574号または国際公開第2012068187号(参照により、これらの各文献の全体が本明細書に組み込まれる)に記載されている方法で合成してよい。
ルボキサミド)エチル]−N,N−ジメチル−1−プロパンアミニウムトリフルオロアセテート(DOSPA)、3B−[N-(N’,N’−ジメチルアミノエタン)−カルバモ
イル]コレステロールヒドロクロリド(DC−コレステロールHCl)ジヘプタデシルアミドグリシルスペルミジン(DOGS)、N,N−ジステアリル−N,N−ジメチルアンモニウムブロミド(DDAB)、N−(1,2−ジミリスチルオキシプロパ−3−イル)−N,N−ジメチル−N−ヒドロキシエチルアンモニウムブロミド(DMRIE)、N,N−ジオレイル−N,N−ジメチルアンモニウムクロリド(DODAC)、およびこれらの組み合わせが挙げられるが、これらに限定されない。
Nat Mater. 2006 5:791−796; Fuller et al., Biomaterials. 2008 29:1526−1532; DeKoker et al., Adv Drug Deliv Rev. 2011 63:748−761; Endres et al., Biomaterials. 2011 32:7721−7731; Su et al., Mol Pharm. 2011 Jun 6;8(3):774−87(参照により、これらの各文献の全体が本明細書に組み込まれる))。非限定的な例として、ナノ粒子は複数のポリマーを含んでよく、このポリマーの例として親水性−疎水性ポリマー(例えばPEG−PLGA)、疎水性ポリマー(例えばPEG)、および/または親水性ポリマーが挙げられるが、これらに限定されない(国際公開第20120225129号;参照により、この文献の全体が本明細書に組み込まれる)。
J Contr Rel. 2010 142: 416−421; Li et al., J Contr Rel. 2012 158:108−114; Yang et al., Mol Ther. 2012 20:609−615。参照により、これらの文献の全体が本明細書に組み込まれる)。この送達システムは、siRNAの送達を改善する目的で、標的化されるナノ粒子と、エンドソーム回避を亢進する成分であるリン酸カルシウムの両方を組み合わせたものである。
参照により、この文献の全体が本明細書に組み込まれる)。
Natl Acad Sci U S A. 2011 108:12996−13001)。ナノ粒子のコア成分とシェル成分の両方の化学組成を変更することにより、ポリマーナノ粒子の複合体形成、送達、および内部移行を精密に制御できる。例えば、コアシェル型ナノ粒子は、コレステロールをナノ粒子に共有結合させた後、siRNAを効率的にマウス肝細胞に送達することができる。
ペプチドおよびタンパク質
本発明の修飾核酸分子およびmmRNAによる細胞のトランスフェクションを増加させる目的で、修飾核酸分子およびmmRNAをペプチドおよび/またはタンパク質と共に製剤化することができる。一実施形態では、例えば細胞透過性ペプチド(ただしこれに限定されない)等のペプチドと、細胞内送達を可能にするタンパク質およびペプチドを使用して、医薬製剤を送達してよい。本発明の医薬製剤で使用してよい細胞透過性ペプチドの非限定的な一例として、ポリカチオンと結合して細胞内空間への送達を促進する細胞透過性ペプチド(例えば、HIV由来TATペプチド、ペネトラチン、トランスポータン、またはhCT由来の細胞透過性ペプチド)が挙げられる(例えばCaron et al.,
Mol. Ther. 3(3):310−8 (2001); Langel, Cell−Penetrating Peptides: Processes and Applications (CRC Press, Boca Raton FL, 2002); El−Andaloussi et al., Curr. Pharm. Des. 11(28):3597−611 (2003); Deshayes
et al., Cell. Mol. Life Sci. 62(16):1839−49 (2005)を参照。これらの文献はすべて、参照により本明細書に組み込まれる)。細胞内空間への組成物の送達を亢進する細胞透過性剤(例えばリポソーム)を含むように、組成物を製剤化することもできる。細胞内送達を可能にする目的で、本発明の修飾核酸分子およびmmRNAを、例えばAileron Therapeutics(マサチューセッツ州ケンブリッジ)およびPermeon Biologics(マサチューセッツ州ケンブリッジ)が提供するペプチドおよび/またはタンパク質と結合させて複合体を形成してよい(Cronican et al., ACS Chem. Biol. 2010 5:747−752; McNaughton et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 2009 106:6111−6116; Sawyer, Chem Biol Drug Des. 2009 73:3−6; Verdine and Hilinski, Methods Enzymol. 2012;503:3−33;これらの文献はすべて、その全体が参照により本明細書に組み込まれる)。
細胞
本発明の修飾核酸分子およびmmRNAをエキソビボで細胞にトランスフェクトし、続いてこの細胞を対象に移植することができる。非限定的な例として、医薬組成物には、修飾RNAを肝細胞および骨髄細胞に送達するための赤血球、修飾核酸分子およびmmRNAをウイルス様粒子(VLP)にして送達するためのビロソーム、修飾RNAを送達するために電気穿孔処理された細胞、例えばMAXCYTE(登録商標)(メリーランド州ゲーサーズバーグ)やERYTECH(登録商標)(フランス、リヨン)(これらに限定されない)から提供される細胞が含まれてよい。mmRNA以外のペイロードを送達するための赤血球、ウイルス粒子、および電気穿孔処理された細胞の使用例が、文献に記載されている(Godfrin et al., Expert Opin Biol Ther. 2012 12:127−133; Fang et al., Expert Opin Biol Ther. 2012 12:385−389; Hu et al., Proc Natl Acad Sci U S A. 2011 108:10980−10985; Lund et al., Pharm Res. 2010
27:400−420; Huckriede et al., J Liposome Res. 2007;17:39−47; Cusi, Hum Vaccin. 2006 2:1−7; de Jonge et al., Gene Ther. 2006 13:400−411;これらの全文献の全体が参照により本明細書に組み込まれる)。国際公開第2011085231号および米国特許出願公開第20110171248号(参照により、これらの各文献の全体が本明細書に組み込まれる)に記載の方
法で合成された合成VLPの状態にして、修飾核酸分子およびmmRNAを送達してよい。
細胞への導入
ウイルス介在性および非ウイルス介在性の手法をはじめ、種々の方法が当技術分野において公知であり、核酸を細胞に導入するのに適している。代表的な非ウイルス介在性手法の例として、電気穿孔法、リン酸カルシウム介在性移入、ヌクレオフェクション、ソノポレーション、熱ショック、マグネトフェクション、リポソーム介在性移入、マイクロインジェクション、微小噴出物介在性移入(ナノ粒子)、カチオン性ポリマー介在性移入(DEAE−デキストラン、ポリエチレンイミン、ポリエチレングリコール(PEG)等)、または細胞融合が挙げられるが、これらに限定されない。
ヒアルロニダーゼ
本発明の修飾核酸分子またはmmRNAを筋肉内または皮下に局所注射する場合、ヒアルロナンの加水分解を触媒するヒアルロニダーゼを含めてよい。ヒアルロナンの加水分解を触媒することにより、間質バリアの一成分であるヒドロゲナーゼがヒアルロナンの粘性を下げるので、組織の透過性が上昇する(Frost, Expert Opin. Drug Deliv. (2007) 4:427−440;参照により、この文献の全体が本明細書に組み込まれる)。トランスフェクトされた細胞が産生するコード化タンパク質を急速に分散させ全身に分布させることは、有用である。あるいは、筋肉内または皮下に投与された本発明の修飾核酸分子またはmmRNAに曝される細胞数を増加させる目的で、ヒアルロニダーゼを使用してもよい。
ナノ粒子模倣体
本発明の修飾核酸分子およびmmRNAを、ナノ粒子模倣体内に封入し、かつ/またはナノ粒子模倣体に吸収させてよい。ナノ粒子模倣体は、送達機能する生体または粒子、例えば病原体、ウイルス、細菌、真菌、寄生体、プリオン、および細胞(ただしこれらに限定されない)を模倣することができる。非限定的な例として、本発明の修飾mRNAを、ウイルスの送達機能を模倣できる非ウイルス性(non−viron)粒子内に封入してよい(国際公開第2012006376号を参照。参照により、この文献の全体が本明細書に組み込まれる)。
ナノチューブ
本発明の修飾核酸分子またはmmRNAを、少なくとも1つのナノチューブに付着等により結合させてよい。ナノチューブの例として、ロゼットナノチューブ、リンカーを伴うツインベースを有するロゼットナノチューブ、カーボンナノチューブ、および/または単一壁カーボンナノチューブが挙げられるが、これらに限定されない。修飾核酸分子またはmmRNAをナノチューブに結合するには、立体性、イオン性、共有結合性等の力(これらに限定されない)、および/または他の力を用いてよい。
コンジュゲート
本発明の修飾核酸分子およびmmRNAには、コンジュゲートが含まれ、例えば、担体もしくはターゲティンググループと共有結合している修飾核酸分子もしくはmmRNA、あるいは、一緒になって融合タンパク質を産生する2つのコード化領域を含む修飾核酸分子もしくはmmRNA(例えば、標的化グループと治療用タンパク質もしくはペプチドを有する)が含まれる。
タクリルアミドコポリマー(HMPA)、ポリエチレングリコール(PEG)、ポリビニルアルコール(PVA)、ポリウレタン、ポリ(2−エチルアクリル酸)、N−イソプロピルアクリルアミドポリマー、またはポリホスファジン(polyphosphazine)が挙げられる。ポリアミンの例として、ポリエチレンイミン、ポリリジン(PLL)、スペルミン、スペルミジン、ポリアミン、シュードペプチド−ポリアミン、ペプチド模倣ポリアミン、デンドリマーポリアミン、アルギニン、アミジン、プロタミン、カチオン性脂質、カチオン性ポルフィリン、ポリアミンの第4級塩、αヘリカルペプチドが挙げられる。
サンタリスから提供されているロックド核酸(LNA)等のLNAの調製を教示している代表的な米国特許の例として、米国特許第6,268,490号、第6,670,461号、第6,794,499号、第6,998,484号、第7,053,207号、第7,084,125号、および第7,399,845号(参照により、これらの各文献の全体が本明細書に組み込まれる)が挙げられるが、これらに限定されない。
)2−O−CH2−で表される]、ならびに上記で参照している米国特許第5,602,240号のアミド主鎖を有するオリゴヌクレオシドを含む。いくつかの実施形態では、本明細書に記載のポリヌクレオチドは、上記で参照している米国特許第5,034,506号のモルホリノ主鎖構造を有する。
キニルは、C1〜C10のアルキル、またはC2〜C10のアルケニルおよびアルキニルに置換されても置換されなくてもよい)。代表的な適切な修飾の例として、O[(CH2)nO]mCH3、O(CH2).nOCH3、O(CH2)nNH2、O(CH2)nCH3、O(CH2)nONH2、およびO(CH2)nON[(CH2)nCH3)]2が挙げられる(式中、nとmは1〜約10である)。他の実施形態では、修飾核酸またはmmRNAは、2’位置に以下のうちの1つを含む:C1〜C10の低級アルキル、置換低級アルキル、アルカリル、アラルキル、O−アルカリルもしくはO−アラルキル、SH、SCH3、OCN、Cl、Br、CN、CF3、OCF3、SOCH3、SO2CH3、ONO2、NO2、N3、NH2、ヘテロシクロアルキル、ヘテロシクロアルカリル、アミノアルキルアミノ、ポリアルキルアミノ、置換シリル、RNA切断基、レポーター基、インターカレーター、薬物動態特性を改良するための基、薬力学特性を改良するための基、類似の特性を有する他の置換基。いくつかの実施形態では、修飾には2’−メトキシエトキシ(2’−O−CH2CH2OCH3、別名2’−O−(2−メトキシエチル)または2’−MOE(Martin et al., Helv. Chim. Acta, 1995, 78:486−504)すなわちアルコキシ−アルコキシ基が含まれる。別の代表的な修飾として、下記実施例に記載の2’−ジメチルアミノオキシエトキシ、すなわちO(CH2)2ON(CH3)2基(下記実施例に記載の通り別名2’−DMAOE、および2’−ジメチルアミノエトキシエトキシ(当技術分野で2’−O−ジメチルアミノエトキシエチル、2’−DMAEOEとも呼ばれる)、すなわち、同様に下記実施例に記載の通り2’−O−CH2−O−CH2−N(CH2)2が挙げられる。他の修飾として、2’−メトキシ(2’−OCH3)、2’−アミノプロポキシ(2’−OCH2CH2CH2NH2)、および2’−フルオロ(2’−F)が挙げられる。他の位置、特に、3’末端ヌクレオチド上または2’−5’連結dsRNA内の糖の3’位置、および5’末端ヌクレオチドの5’位置に、類似の修飾を行ってもよい。本発明のポリヌクレオチドは、ペントフラノシル糖の代わりにシクロブチル部分等の糖模倣体を有してもよい。そのような修飾糖構造の調製を教示している代表的な米国特許の例として、米国特許第4,981,957号、第5,118,800号、第5,319,080号、第5,359,044号、第5,393,878号、第5,446,137号、第5,466,786号、第5,514,785号、第5,519,134号、第5,567,811号、第5,576,427号、第5,591,722号、第5,597,909号、第5,610,300号、第5,627,053号、第5,639,873号、第5,646,265号、第5,658,873号、第5,670,633号、および第5,700,920号が挙げられるが、これらに限定されない(参照により、これらの各文献が本明細書に組み込まれる)。
自己組織化ナノ粒子
核酸の自己組織化ナノ粒子
自己組織化ナノ粒子のサイズは明確に定義されており、核酸の鎖は容易に再プログラムできるので、自己組織化ナノ粒子のサイズを精密に制御できる。例えば、癌標的化ナノ送達担体の最適粒子サイズは20〜100nmであり、その理由は、20nmを超える直径は腎クリアランスを回避し、透過性および保持の亢進効果により特定の腫瘍への送達を亢進するからである。自己組織化核酸ナノ粒子を使用することにより、サイズおよび形状が均一な単一集団は、癌標的化リガンドの空間定位および密度が精密に制御され、送達が亢進される。非限定的な一例として、短いDNA断片および治療用siRNAの再プログラム可能な自己組織化を用いて、オリゴヌクレオチドナノ粒子が調製された。これらのナノ
粒子は分子的に同一であり、粒子サイズおよび標的リガンドの位置と密度が制御可能である。DNA断片およびsiRNAは自己組織化して1ステップの反応物となり、DNA/siRNA四面体ナノ粒子を生成してインビボの標的化送達に使用される(Lee et
al., Nature Nanotechnology 2012 7:389−393;参照により、この文献の全体が本明細書に組み込まれる)。
ポリマー系自己組織化ナノ粒子
ポリマーを用いて、ナノ粒子へと自己組織するシートを形成してよい。このようなナノ粒子を使用して、本発明の修飾核酸およびmmRNAを送達してよい。一実施形態では、このような自己組織化ナノ粒子は、RNAヘアピンの長いポリマーで形成されたマイクロスポンジであってよい。このポリマーは、結晶性の「プリーツ」シートを形成してからマイクロスポンジへと自己組織化する。このようなマイクロスポンジは、密に充填されたスポンジ様のマイクロ粒子であり、効率的な担体として機能でき、細胞にカーゴ(積荷)を送達する能力を有し得る。マイクロスポンジの直径は1μm〜300mnであってよい。マイクロスポンジは、当技術分野で公知の他の薬剤と複合体を形成して、より大きなマイクロスポンジを形成してよい。非限定的な一例として、マイクロスポンジは、ポリカチオン性ポリエチレンイミン(polycation polyethyleneime)(PEI)等の薬剤と複合体を形成して外層を形成し、細胞取り込みを促進することができる。この複合体は、高温(150℃)時に安定状態を維持できる直径250nmの粒子を形成できる(Grabow and Jaegar, Nature Materials 2012, 11:269−269;参照により、この文献の全体が本明細書に組み込まれる)。加えて、このようなマイクロスポンジは、リボヌクレアーゼよる分解に対して並外れた程度の保護を示すことができ得る。
無機ナノ粒子
本発明の修飾核酸分子またはmmRNAを、無機ナノ粒子中に製剤化してよい(米国特許第8,257,745号;参照により、この文献の全体が本明細書に組み込まれる)。無機ナノ粒子には、水膨張性の粘土物質が含まれていてよい(ただしこれに限定されない
)。非限定的な一例として、無機ナノ粒子には、単純ケイ酸塩で作られた合成スメクタイト粘土が含まれていてよい(例えば、米国特許第5,585,108号および第8,257,745号を参照。参照により、これらの各文献の全体が本明細書に組み込まれる)。
半導体性および金属製のナノ粒子
本発明の修飾核酸分子またはmmRNAを、半導体性または金属製の材料を含む水分散性ナノ粒子中に製剤化してよく(米国特許出願公開第20120228565号;参照により、この文献の全体が本明細書に組み込まれる)、あるいは磁性ナノ粒子中に製剤化してよい(米国特許出願公開第20120265001号および第20120283503号;参照により、これらの各文献の全体が本明細書に組み込まれる)。水分散性ナノ粒子は、疎水性ナノ粒子、親水性ナノ粒子のどちらであってもよい。
ゲルおよびヒドロゲル
一実施形態では、本明細書に開示される修飾mRNAを封入して、当技術分野で公知の、対象に注入されたときにゲルを形成できるヒドロゲルを形成してよい。ヒドロゲルとは、親水性ポリマー鎖が網状組織となったものであり、水を分散媒とするコロイド状ゲルの形で見られることもある。ヒドロゲルは、吸水性の高い(99%超の水を含有できる)天然ポリマーまたは合成ポリマーである。ヒドロゲルは含水量が高いので、天然組織によく似た一定程度の柔軟性も有する。本明細書に記載のヒドロゲルを使用して、生体適合性、生分解性、および/または多孔性の脂質ナノ粒子を封入してよい。
一実施形態では、本明細書に開示される修飾mRNAを封入して、当技術分野で公知の任意のゲルにしてよい。非限定的な一例として、このゲルは、フルオロウラシル注入可能ゲルであってよく、あるいは、当技術分野で公知の化合物および/または薬剤を含有するフルオロウラシル注入可能ゲルであってよい。別の一例では、修飾mRNAを、エピネフリン含有フルオロウラシルゲル内に封入してよい(例えば、Smith et al. Cancer Chemotherapty and Pharmacology, 1999 44(4):267−274を参照。参照により、この文献の全体が本明細書に組み込まれる)。
陽イオンと陰イオン
本明細書に開示される修飾核酸分子の製剤は、陽イオンまたは陰イオンを含んでよい。一実施形態では、製剤は、Zn2+、Ca2+、Cu2+、Mg+、およびこれらの組み合わせ等(ただしこれらに限定されない)の金属陽イオンを含む。非限定的な一例として、製剤は、ポリマーを含み、金属陽イオンと複合体を形成した修飾mRNAを含む(例えば、米国特許第6,265,389号および第6,555,525号を参照。参照により、これらの各文献の全体が本明細書に組み込まれる)。
成形されたナノ粒子およびマイクロ粒子
本明細書に開示される修飾核酸分子および/またはmmRNAを、ナノ粒子および/またはマイクロ粒子中に製剤化してよい。このようなナノ粒子および/またはマイクロ粒子は、任意のサイズ、形状、および化学構造に成形してよい。一例として、LIQUIDA
TECHNOLOGIES(登録商標)(ノースカロライナ州モリスビル)が提供するPRINT(登録商標)技術を用いてナノ粒子および/またはマイクロ粒子を作製してよい(例えば、国際公開第2007024323号を参照。参照により、この文献の全体が
本明細書に組み込まれる)。
ナノジャケットおよびナノリポソーム
本明細書に開示される修飾核酸分子および/またはmmRNAを、Keystone Nano(ペンシルベニア州ステートカレッジ)が提供するナノジャケットおよびナノリポソーム中に製剤化してよい。ナノジャケットは、体内で天然に存在する化合物(カルシウム、リン酸を含む)で作られ、少量のケイ酸塩を含むこともある。ナノジャケットのサイズは5〜50nmの範囲に及び、修飾核酸分子および/またはmmRNA等(ただしこれらに限定されない)の親水性および疎水性化合物の送達に使用できる。
賦形剤
医薬製剤は、薬剤的に許容可能な賦形剤を追加的に含んでよい。本明細書で使用する「賦形剤」には、所望される特定の剤形に適したすべての溶剤、分散媒、希釈剤、その他の液体ビヒクル、分散補助剤もしくは懸濁補助剤、表面活性剤、等張剤、増粘剤もしくは乳化剤、保存剤、固体結合剤、滑沢剤等が含まれるが、これらに限定されない。医薬組成物を製剤化するための種々の賦形剤、および医薬組成物の種々の調製手法が、当技術分野において公知である(Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 21st Edition, A. R. Gennaro, Lippincott, Williams & Wilkins, Baltimore, MD, 2006を参照。参照により、この文献の全体が本明細書に組み込まれる)。望ましくない生物学的効果が生じる等により、医薬組成物の他の成分と有害な方法で相互作用するなどして、従来の賦形剤媒体が物質またはその誘導体と不適合である場合を除き、従来の賦形剤媒体の使用は、本開示の範囲内で企図され得る。
クトース、ラクチトール、マンニトール);天然ガムおよび合成ガム(例えばアカシア、アルギン酸ナトリウム、アイリッシュモス抽出物、パンワール(panwar)ガム、ガッチ(ghatti)ガム、イサポール皮(isapol husk)の粘液、カルボキシメチルセルロース、メチルセルロース、エチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、微結晶性セルロース、酢酸セルロース、ポリ(ビニル−ピロリドン)、ケイ酸アルミニウムマグネシウム(VEEGUM(登録商標))、カラマツアラビノガラクタン(arabogalactan));アルギン酸塩;ポリエチレンオキシド;ポリエチレングリコール;無機カルシウム塩;ケイ酸;ポリメタクリル酸;ロウ類;水;アルコール等;およびこれらの組み合わせが挙げられるが、これらに限定されない。
ウム、酢酸カリウム、塩化カリウム、グルコン酸カリウム、カリウム混合物、二塩基性リン酸カリウム、一塩基性リン酸カリウム、リン酸カリウム混合物、酢酸ナトリウム、炭酸水素ナトリウム、塩化ナトリウム、クエン酸ナトリウム、乳酸ナトリウム、二塩基酸リン酸ナトリウム、一塩基性リン酸ナトリウム、リン酸ナトリウム混合物、トロメタミン、水酸化マグネシウム、水酸化アルミニウム、アルギン酸、発熱物質を含まない水、等張食塩水、リンゲル液、エチルアルコール等、および/またはこれらの組み合わせが挙げられるが、これらに限定されない。
送達
本開示は、治療、製薬、診断、または画像化の目的で、薬剤送達の科学研究において想定される進歩を考慮に入れた任意の経路を用いて修飾核酸分子またはmmRNAを送達することを包含している。送達は、「裸」または製剤化した状態で実施してよい。
「裸」の状態での送達
本発明の修飾核酸分子またはmmRNAは、裸の状態で細胞に送達してよい。本明細書で使用する「裸の状態」という語句は、トランスフェクションを促進する薬剤がない状態で、修飾核酸分子またはmmRNAを送達することを指す。例えば、細胞に送達される修飾核酸分子またはmmRNAは、修飾をまったく含まなくてもよい。裸の状態の修飾核酸分子またはmmRNAは、当技術分野で公知の投与経路または本明細書に記載の投与経路を用いて細胞に送達してよい。
製剤化された状態での送達
本発明の修飾核酸分子またはmmRNAは、本明細書に記載の方法を用いて製剤化してよい。製剤は、修飾核酸分子または修飾および/もしくは非修飾のmmRNAを含有してよい。製剤には、細胞透過剤、薬剤的に許容可能な担体、送達剤、生分解性または生体適合性のポリマー、溶媒、および徐放性送達デポ剤(ただしこれらに限定されない)をさら
に含んでよい。製剤化された状態の修飾核酸分子またはmmRNAは、当技術分野で公知の投与経路または本明細書に記載の投与経路を用いて細胞に送達してよい。
投与
本発明の修飾核酸分子またはmmRNAは、治療上有効な結果をもたらす任意の経路で送達してよい。具体的な経路として、腸内、経胃腸、硬膜外、経口、経皮、硬膜外(硬膜上)、脳内(大脳に送達)、脳室内(脳室に送達)、皮膚上(皮膚に塗布)、皮内(皮膚自体に送達)、皮下(皮膚の下)、経鼻投与(鼻を通じて送達)、静脈内(静脈に送達)、動脈内(動脈に送達)、筋肉内(筋肉に送達)、心臓内(心臓に送達)、骨髄内注入(骨髄に送達)、髄腔内(脊柱管に送達)、腹腔内(腹膜に注入または注射)、膀胱腔内注入、硝子体内(眼を通じて送達)、陰茎海綿体注射(陰茎の底部に送達)、膣内投与、子宮内、羊膜外投与、経皮(表皮を通じて拡散させ全身に分配)、経粘膜(粘膜を通じて拡散)、ガス注入(吸飲)、舌下、唇下、浣腸、点眼(結膜に送達)、点耳が挙げられるが、これらに限定されない。特定の実施形態では、組成物が血液脳関門、血管関門、その他の上皮性関門を通過できる方法で組成物を投与してよい。本発明の修飾核酸またはmmRNAの非限定的な投与経路例を以下に示す。
非経口投与および注射剤投与
非経口投与用の液体剤形として、薬剤的に許容可能なエマルション、マイクロエマルション、液剤、懸濁液、シロップ剤、および/またはエリキシル剤が挙げられるが、これらに限定されない。液体剤形は、活性成分に加えて、当技術分野で一般に使用される不活性希釈剤を含んでもよい。この不活性希釈剤の例として、水または他の溶媒、可溶化剤および乳化剤、例えば、エチルアルコール、イソプロピルアルコール、炭酸エチル、酢酸エチル、ベンジルアルコール、安息香酸ベンジル、プロピレングリコール、1,3−ブチレングリコール、ジメチルホルムアミド、油(特に、綿実油、ラッカセイ油、トウモロコシ油、胚芽油、オリーブ油、ヒマシ油およびゴマ油)、グリセロール、テトラヒドロフルフリルアルコール、ポリエチレングリコール、およびソルビタン脂肪酸エステル、ならびにこれらの混合物が挙げられる。経口組成物の場合、不活性希釈剤の他に、湿潤剤、乳化および懸濁剤、甘味剤、風味剤、および/または香料等のアジュバントを含んでいてもよい。非経口投与用の特定の実施形態では、組成物を、CREMOPHOR(登録商標)、アルコール、油、改質油、グリコール、ポリソルベート、シクロデキストリン、ポリマー、および/またはこれらの組み合わせ等の可溶化剤と混合する。
直腸内および膣内投与
直腸内投与または膣内投与用の組成物は、典型的には坐剤である。この坐剤は、周囲温度では固体であるが体温時は液体となり、よって腸腔または膣腔で融解して活性成分を放出する適切な非刺激性賦形剤(例えばココアバター、ポリエチレングリコール、坐剤用ワックス)と、組成物とを混合することにより調製できる。
経口投与
経口投与用の液体剤形として、薬剤的に許容可能なエマルション、マイクロエマルション、液剤、懸濁液、シロップ剤、および/またはエリキシル剤が挙げられるが、これらに限定されない。液体剤形は、活性成分に加えて、当技術分野で一般に使用される不活性希釈剤を含んでもよい。この不活性希釈剤の例として、水または他の溶媒、可溶化剤および乳化剤、例えば、エチルアルコール、イソプロピルアルコール、炭酸エチル、酢酸エチル、ベンジルアルコール、安息香酸ベンジル、プロピレングリコール、1,3−ブチレングリコール、ジメチルホルムアミド、油(特に、綿実油、ラッカセイ油、トウモロコシ油、胚芽油、オリーブ油、ヒマシ油およびゴマ油)、グリセロール、テトラヒドロフルフリルアルコール、ポリエチレングリコール、およびソルビタン脂肪酸エステル、ならびにこれらの混合物が挙げられる。経口組成物の場合、不活性希釈剤の他に、湿潤剤、乳化および懸濁剤、甘味剤、風味剤、および/または香料等のアジュバントを含んでいてもよい。非経口投与用のある特定の実施形態では、組成物を、CREMOPHOR(登録商標)、アルコール、油、改質油、グリコール、ポリソルベート、シクロデキストリン、ポリマー、および/またはこれらの組み合わせ等の可溶化剤と混合する。
局所または経皮投与
本明細書に記載の通り、本発明の修飾核酸分子またはmmRNAを含有する組成物は、局所投与用に製剤化してよい。皮膚は容易にアクセスできるので、理想的な送達標的部位であり得る。遺伝子発現が皮膚に制限され、非特異的毒性を回避できる可能性があるだけ
でなく、皮膚内の特定の層および細胞型にも遺伝子発現が制限される。
一実施形態では、局所および/または経皮投与の前に、組織の少なくとも1つの領域(例えば皮膚)に、透過性を高めることのできる装置および/または溶液を供してよい。一実施形態では、皮膚の透過性を高めるため、組織を剥離装置(abrasion device)に供してよい(米国特許出願公開第20080275468号を参照。参照により、この文献の全体が本明細書に組み込まれる)。別の一実施形態では、組織を超音波強化装置に供してよい。超音波強化装置の例として、米国特許出願公開第20040236268号、ならびに米国特許第6,491,657号および第6,234,990号(参照により、これらの各文献の全体が本明細書に組み込まれる)に記載の装置が挙げられるが、これらに限定されない。組織の透過性を増強する方法は、米国特許出願公開第20040171980号および第20040236268号、ならびに米国特許第6,190,315号(参照により、これらの各文献の全体が本明細書に組み込まれる)に記載されている。
デポ剤の投与
本明細書に記載の通り、いくつかの実施形態では、持続放出するように組成物をデポ剤の形で製剤化する。一般に、ある特定の器官または組織(「標的組織」)を投与の標的とする。
おり、この方法は、組成物が標的組織(1つ以上の標的細胞を含む組織)内に実質的に保持される条件下で、組成物を標的組織に接触させることにより行う。この組成物は、関心のポリペプチドが少なくとも1つの標的細胞内で産生されるように、有効量の核酸分子またはmmRNAを含有する。一般に組成物は、細胞透過剤および薬剤的に許容可能な担体を含有するが、「裸」の核酸(例えば、細胞透過剤等の薬剤を伴わない核酸)も企図されている。
一実施形態では、小さな使い捨て型の薬剤リザーバー、パッチポンプ、または浸透圧ポンプを用いて、本発明を標的組織の近くに保持してよい。パッチポンプの非限定的な例として、BD(登録商標)(ニュージャージー州フランクリンレイクス)、Insulet
Corporation(マサチューセッツ州ベッドフォード)、SteadyMed
Therapeutics(カリフォルニア州サンフランシスコ)、Medtronic(ミネソタ州ミネアポリス)(例えばMiniMed)、UniLife(ペンシルベニア州ヨーク)、Valeritas(ニュージャージー州ブリッジウォーター)、SpringLeaf Therapeutics(マサチューセッツ州ボストン)が製造および/または販売しているパッチポンプが挙げられる。浸透圧ポンプの非限定的な例として、DURECT(登録商標)(カリフォルニア州クパチーノ)が製造している浸透圧ポンプ(例えばDUROS(登録商標)、ALZET(登録商標))が挙げられる。
肺内投与
頬側口腔を介する肺内投与に適した医薬組成物を調製し、包装し、かつ/または販売してよい。このような製剤は、活性成分を含む乾燥粉末を含んでよく、この乾燥粉末は、直径が約0.5nm〜約7nmまたは約1nm〜約6nmの範囲にある。このような組成物は、投与用に適切に乾燥粉末の形態にされる。投与するには、粉末を分配するために噴射剤流が向けられる乾燥粉末容器を備える装置を使用し、かつ/または、自己噴射する溶媒/粉末分配容器(例えば、密閉容器内の低沸点噴射剤に溶解および/または懸濁した活性成分を含む装置)を使用する。このような粉末は、粒子の少なくとも98重量%が0.5nm超の直径を有し、粒子の少なくとも95%の数が7mn未満の直径を有する粒子を含む。あるいは、粒子の少なくとも95重量%が1nm超の直径を有し、粒子の少なくとも90%の数が6mn未満の直径を有する粒子を含む。乾燥粉末組成物は、固体の微粉末希釈剤(例えば糖)を含んでよく、簡便には、単位用量形態で提供される。
0.1%〜20%(w/w)を構成してよい。噴射剤は、追加的な成分、例えば液体非イオン性および/または固体陰イオン性表面活性剤、および/または固体の希釈剤をさらに含んでいてもよい(これらの追加的成分の粒子サイズは、活性成分を含む粒子と同じ桁のサイズであってよい)。
鼻腔内、経鼻、および口腔投与
肺内投与に有用な本明細書に記載の製剤は、医薬組成物の鼻腔内送達に有用である。鼻腔内投与に適した別の製剤は、活性成分を含む粗粉末であり、この粗粉末の平均粒径は約0.2μm〜500μmである。このような製剤は、嗅ぎ薬を摂取する方法で投与する。すなわち、粉末容器を鼻に近づけ、鼻腔を通じて急速に吸入することにより投与される。
医薬組成物を眼内投与に適した製剤の形で調製し、包装し、かつ/または販売してよい。このような製剤は、例えば点眼薬の形態であってよく、例えば、水性または油性の液体賦形剤中、活性成分が0.1/1.0%(w/w)溶液および/または懸濁液である点眼薬であってよい。このような点眼薬は、緩衝剤、塩類、および/または本明細書に記載の他の追加的成分の1つ以上をさらに含んでよい。他の有用な眼内投与製剤の例として、微結晶形態および/またはリポソーム調製物の形で活性成分を含む製剤が挙げられる。点耳薬および/または点眼薬は、本発明の範囲内にあることが企図されている。眼および/または周囲組織に送達する医薬組成物を格納するための多層薄膜装置を作製してよい。
ペイロード投与:検出可能剤および治療剤
本明細書に記載の修飾核酸分子またはmmRNAは、生体標的に物質(「ペイロード」)を送達することが望まれる多数の異なるシナリオで使用できる。例えば、標的を検出するための検出可能物質の送達や、治療薬の送達に使用できる。検出方法の例として、インビトロ、インビボ両方の画像化、例えば、免疫組織化学検査、生物発光画像法(BLI)、磁気共鳴画像法(MRI)、陽電子放射型断層撮影法(PET)、電子顕微鏡法、X線
コンピュータ断層撮影、ラマンイメージング、光干渉断層法、吸収画像法、赤外線画像法、蛍光反射画像法、蛍光顕微鏡法、蛍光分子断層画像法、磁気共鳴画像法、X線画像法、超音波画像法、光音響画像法、実験室アッセイ、または、標識/染色/画像化が必要とされる任意の状況が挙げられるが、これらに限定されない。
スキーム12
逆的な薬剤送達に修飾核酸分子またはmmRNAを使用することが挙げられるが、これに限定されない。
テストステロン、グルココルチコイド、プロカイン、テトラカイン、リドカイン、プロプラノロール、ピューロマイシン、マイタンシノイド、例えばマイタンシノール(米国特許第5,208,020号を参照。この文献の全体が本明細書に組み込まれる)、ラシェルマイシン(CC−1065、米国特許第5,475,092号、第5,585,499号、および第5,846,545号を参照。参照により、これらの全文献が本明細書に組み込まれる)、およびこれらの類似体または同族体が挙げられるが、これらに限定されない。放射性イオンの例として、ヨウ素(例えばヨウ素125、ヨウ素131)、ストロンチウム89、リン、パラジウム、セシウム、イリジウム、ホスフェート、コバルト、イットリウム90、サマリウム153、プラセオジムが挙げられるが、これらに限定されない。その他の治療剤の例として、代謝拮抗剤(例えばメトトレキサート、6−メルカプトプリン、6−チオグアニン、シタラビン、5−フルオロウラシルダカルバジン)、アルキル化剤(例えばメクロレタミン、チオテパクロラムブシル、ラケルマイシン(CC−1065)、メルファラン、カルムスチン(BSNU)、ロムスチン(CCNU)、シクロホスフ
ァミド、ブスルファン、ジブロモマンニトール、ストレプトゾトシン、マイトマイシンC、cis−ジクロロジアミン白金(II)(DDP)シスプラチン)、アントラサイクリン系薬剤(例えばダウノルビシン(以前のダウノマイシン)、ドキソルビシン)、抗生剤(例えばダクチノマイシン(以前のアクチノマイシン)、ブレオマイシン、ミトラマイシン、アントラマイシン(AMC))、および有糸分裂阻害剤(例えばビンクリスチン、ビンブラスチン、タキソール、マイタンシノイド)が挙げられるが、これらに限定されない。
o−フタルジアルデヒド;ピレンおよび誘導体(例えばピレン、ピレンブチレート、スクシンイミジル1−ピレン);酪酸量子ドット;リアクティブレッド(Cibacron(商標)ブリリアント・レッド3B−A);ローダミンおよび誘導体(例えば6−カルボキシ−X−ローダミン(ROX)、6−カルボキシローダミン(R6G)、リサミンローダミンB、塩化スルホニルローダミン(Rhod)、ローダミンB、ローダミン123、ローダミンXイソチオシアネート、スルホローダミンB、スルホローダミン101、スルホローダミン101の塩化スルホニル誘導体(テキサスレッド)、N,N,N’,N’テトラメチル−6−カルボキシローダミン(TAMRA)テトラメチルローダミン、テトラメチルローダミンイソチオシアネート(TRITC));リボフラビン;ロゾール酸;テルビウムキレート誘導体;シアニン−3(Cy3);シアニン−5(Cy5);シアニン−5.5(Cy5.5)、シアニン−7(Cy7);IRD700;IRD800;Alexa647;La Jolta Blue;フタロシアニン;ならびにナフタロシアニンが挙げられるが、これらに限定されない。
併用
核酸分子またはmmRNAは、1つ以上の他の治療薬、予防薬、診断薬、または造影剤と組み合わせて使用してよい。「〜と組み合わせて」という表現は、上記薬剤を同時に投与しなければならず、かつ/または、一緒に送達するように製剤化されなければならないことを意図していないが、このような送達方法は本開示の範囲内にある。1つ以上の他の所望される治療剤または医療手技と同時またはその前後に、組成物を投与してよい。一般に、各薬剤は、当該薬剤に対して決定される用量および/またはタイムスケジュールに基づいて投与される。いくつかの実施形態では、本開示は、医薬組成物、予防用組成物、診断用組成物、または画像化用組成物を、その生物学的利用能を改善でき、その代謝作用を低下および/または改変でき、その排出を阻害でき、かつ/またはその体内分布を改変できる薬剤と組み合わせて送達することを包含している。非限定的な一例として、核酸分子またはmmRNAを、癌治療または過剰増殖細胞の制御のための医薬品と組み合わせて使用してよい。米国特許第7,964,571号(参照により、この文献の全体が本明細書に組み込まれる)に記載されている固体原発腫瘍または転移腫瘍の併用療法では、インターロイキン−12をコードするDNAプラスミドを含む医薬組成物をリポポリマーと共に使用し、さらに少なくとも1つの抗癌剤または化学療法剤を投与する。さらに、抗増殖性分子をコードする本発明の核酸分子またはmmRNAは、リポポリマーを有する医薬組成物中に存在してよく(例えば、抗増殖性分子をコードするDNAプラスミドおよびリポポリマーを含む医薬組成物をクレームしている米国特許出願公開第20110218231号を参照。参照により、この文献の全体が本明細書に組み込まれる)、この組成物を、少なくとも1つの化学療法剤または抗癌剤と共に投与してよい。
細胞透過性ペイロード
いくつかの実施形態では、例えばRNA、mRNA等の核酸に取り込まれる修飾ヌクレオチドおよび修飾核酸分子は、細胞透過性部分であり得るペイロードや、組成物の細胞内送達を亢進する薬剤を含むこともできる。例えば、組成物に含めてよいものの例として、細胞内空間への送達を促進する細胞透過性ペプチド配列、例えばHIV由来TATペプチド、ペネトラチン、トランスポータン、またはhCT由来の細胞透過性ペプチドが挙げられるが、これらに限定されない。例えばCaron et al., (2001) M
ol Ther. 3(3):310−8; Langel, Cell−Penetrating Peptides: Processes and Applications (CRC Press, Boca Raton FL 2002); El−Andaloussi et al., (2005) Curr Pharm Des.
11(28):3597−611; Deshayes et al., (2005) Cell Mol Life Sci. 62(16):1839−49を参照(参照により、これらの全文献は本明細書に組み込まれる)。細胞内空間への組成物の送達を亢進する細胞透過性剤(例えばリポソーム)を含むように、組成物を製剤化することもできる。
生物標的
例えばRNA、mRNA等の核酸に取り込まれる本明細書に記載の修飾ヌクレオチドおよび修飾核酸分子を用いて、特定のリガンドが存在するか特定のリガンドを生成可能な任意の生物標的にペイロードを送達することができる。リガンドは、共有結合または非共有結合により生物標的と結合できる。
投薬
本発明は、本発明の修飾mRNAおよびそのコード化タンパク質または複合体を、これを必要とする対象に投与することを含んでなる方法を提供する。核酸、タンパク質、もしくは複合体、またはその医薬組成物、画像化用組成物、診断用組成物、もしくは予防用組成物は、疾患、障害、および/または状態(例えば作業記憶欠損に関連する疾患、障害、および/または状態)を予防、治療、診断、または画像化する上で効果的な、任意の量および投与経路を用いて対象に投与してよい。正確な必要量は、対象の種、年齢、全般的状態、疾患の重症度、個々の組成物、その投与様式、その活性様式等に応じて、対象ごとに異なる。本発明の組成物は、投与を簡易化し用量を均一にする目的で、通常は単位投与剤形で製剤化される。しかし、本発明の組成物の1日の総使用量は、健全な医療判断の範囲内で主治医が決定することが理解されるであろう。ある特定の患者に対する具体的な治療有効投与量、予防有効投与量、または適切な画像化投与量のレベルは、様々な要因によって決まる。こうした様々な要因の例として、治療対象の障害、および障害の重症度;使用する特定の化合物の活性;使用する特定の組成物;患者の年齢、体重、全体的な健康状態、性別、および食事;使用する特定の化合物の投与時間、投与経路、および排出速度;治療期間;使用する特定の化合物と併用または同時使用する薬物;ならびに、医療分野でよく知られている同類の要因が挙げられる。
る特定の実施形態では、所望される投与量を、多回投与(例えば2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、またはそれ以上の回数の投与)を用いて送達してよい。
剤形
本明細書に記載の医薬組成物は、本明細書に記載の剤形に製剤化してよい。例えば、局所投与、鼻腔内投与、気管支内投与、注射投与(例えば静脈内、眼内、硝子体内、筋肉内、心臓内、腹腔内、皮下投与)用として製剤化してよい。
液体剤形
非経口投与用の液体剤形として、薬剤的に許容可能なエマルション、マイクロエマルション、液剤、懸濁液、シロップ剤、および/またはエリキシル剤が挙げられるが、これらに限定されない。液体剤形は、活性成分に加えて、当技術分野で一般に使用される不活性希釈剤を含んでもよい。こうした不活性希釈剤の例として、水または他の溶媒、可溶化剤および乳化剤、例えば、エチルアルコール、イソプロピルアルコール、炭酸エチル、酢酸エチル、ベンジルアルコール、安息香酸ベンジル、プロピレングリコール、1,3−ブチレングリコール、ジメチルホルムアミド、油(特に、綿実油、ラッカセイ油、トウモロコシ油、胚芽油、オリーブ油、ヒマシ油およびゴマ油)、グリセロール、テトラヒドロフルフリルアルコール、ポリエチレングリコール、およびソルビタン脂肪酸エステル、ならびにこれらの混合物が挙げられるが、これらに限定されない。非経口投与用のある特定の実施形態では、組成物を、CREMOPHOR(登録商標)、アルコール、油、改質油、グリコール、ポリソルベート、シクロデキストリン、ポリマー、および/またはこれらの組み合わせ等の可溶化剤と混合してよい。
注射剤
例えば水性または油性の滅菌注射懸濁液等の注射用調製物を、公知の技術に従って製剤化してよく、この注射用調製物には、適切な分散剤、湿潤剤、および/または懸濁剤が含まれていてよい。滅菌注射用調製物は、毒性がなく非経口用として許容可能な希釈剤および/または溶媒中の、滅菌した注射用液剤、懸濁液、および/またはエマルションであってよい(例えば、1,3−ブタンジオール溶液)。許容可能なビヒクルおよび溶媒の中でも、特に、水、リンゲル液、U.S.P.、および等張性塩化ナトリウム溶液(ただしこれらに限定されない)を使用してよい。従来、溶媒または懸濁媒体として、滅菌不揮発性油が使われている。この目的で、合成モノグリセリドまたはジグリセリドを含む、任意の無刺激性不揮発油を使用してよい。オレイン酸等の脂肪酸を注射剤の調製に使用してよい。
材料の懸濁液を用いることによって達成できる。この場合、修飾mRNAの吸収速度は薬剤の溶解速度に依存し、薬剤の溶解速度は、結晶サイズおよび結晶形態に依存し得る。あるいは、油ビヒクル中に修飾mRNAを溶解または懸濁させることにより、非経口投与される修飾mRNAの吸収を遅らせることもできる。ポリラクチド−ポリグリコリド等の生分解性ポリマー中で修飾mRNAのマイクロ封入マトリクスを形成することにより、注射用デポ剤形が製造される。修飾mRNAとポリマーの比率、および使用する特定ポリマーの性質に応じて、修飾mRNAの放出速度を制御することができる。他の生分解性ポリマーの例として、ポリ(オルトエステル)およびポリ(無水物)が挙げられるが、これらに限定されない。注射用デポ製剤は、生体組織と適合するリポソームまたはマイクロエマルション中に修飾mRNAを封入することにより調製してよい。
肺投与剤
肺内投与に有用な本明細書に記載の製剤は、医薬組成物の鼻腔内送達にも使用してよい。鼻腔内投与に適した別の製剤は、活性成分を含む粗粉末であってよく、この粗粉末の平均粒径は約0.2μm〜500μmである。このような製剤は、嗅ぎ薬を摂取する方法で投与してよい。すなわち、粉末容器を鼻に近づけ、鼻腔を通じて急速に吸入することにより投与してよい。
錠剤、糖衣錠、カプセル剤、丸剤、および顆粒剤という固体剤形は、コーティングおよびシェル(例えば腸溶コーティング、その他、医薬製剤分野で周知のコーティング)を用いて調製してよい。このような剤形は、随意に乳白剤を含んでもよく、活性成分だけを放出する組成にすることができ、優先的には、腸管の特定部位で、かつ随意に徐放的に、活性成分だけを放出する組成にすることができる。使用可能な包埋組成物の例として、ポリマー物質およびワックスが挙げられる。ラクトース、乳糖や高分子ポリエチレングリコール等の賦形剤を使用して、類似タイプの固体組成物を軟ゼラチンカプセルおよび硬ゼラチンカプセルの充填材として用いてよい。
医薬組成物の特性
本明細書に記載の医薬組成物は、下記の1つ以上の特性で特徴付けることができる。
生物学的利用能
修飾核酸分子およびmmRNAは、本明細書に記載の送達剤を用いて組成物に製剤化した場合、本明細書に記載の送達剤がない組成物と比べて、生物学的利用能の上昇を示し得る。本明細書で使用する「生物学的利用能」という用語は、哺乳動物に投与された所定用量の修飾核酸分子の全身利用度を指す。生物学的利用能の評価は、曲線下面積(AUC)
を測定するか、哺乳動物に化合物を投与した後に形態が変化していない化合物の最大血清濃度または最大血漿濃度(Cmax)を測定することにより行うことができる。AUCとは、横軸(X軸)に時間を示し縦軸(Y軸)に化合物の血清濃度または血漿濃度を示したグラフの、曲線下の面積を測定するものである。一般に、特定の化合物のAUCは、当業者に対して公知の方法を用いて計算でき、これらの方法はG. S. Banker, Modern Pharmaceutics, Drugs and the Pharmaceutical Sciences, v. 72, Marcel Dekker, New York, Inc., 1996(参照により、この文献の全体が本明細書に組み込まれる)に記載されている。
治療濃度域
本発明の修飾核酸分子およびmmRNAは、本明細書に記載の送達剤と共に組成物に製剤化された場合、本明細書に記載の送達剤がない修飾核酸分子組成物を投与後の治療濃度域と比べて、修飾核酸分子組成物の投与後の治療濃度域の拡大を示し得る。本明細書で使用する「治療濃度域」という用語は、高い確率で治療効果を誘発する作用部位における、血漿濃度範囲または治療的活性物質のレベルの範囲を指す。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の送達剤と同時投与した場合の修飾核酸分子の治療濃度域は、少なくとも約2%、少なくとも約5%、少なくとも約10%、少なくとも約15%、少なくとも約20%、少なくとも約25%、少なくとも約30%、少なくとも約35%、少なくとも約40%、少なくとも約45%、少なくとも約50%、少なくとも約55%、少なくとも約60%、少なくとも約65%、少なくとも約70%、少なくとも約75%、少なくとも約80%、少なくとも約85%、少なくとも約90%、少なくとも約95%、または約100%上昇し得る。
分布容積
本発明の修飾核酸分子は、本明細書に記載の送達剤と共に組成物に製剤化された場合、本明細書に記載の送達剤がない修飾核酸分子組成物と比べて、分布容積(Vdist)の改善(例えば減少または標的化)を示し得る。分布容積(Vdist)とは、体内の薬物量を、血中または血漿中の薬物濃度と関連付けたものである。本明細書で使用する「分布容積」という用語は、体内の薬物濃度が血中濃度または血漿中濃度と同一であると仮定した場合に、体内薬物総量を含有するのに必要な液量を指す。すなわち、Vdistは、体内薬物量を薬物の血中または血漿中濃度で割った値に等しい。例えば、用量10mgで血漿中濃度が10mg/Lの場合、分布容積は1リットルとなる。分布容積は、血管外組織にどの程度薬物が存在するかを表す。分布容積が大量である場合、化合物が血漿タンパク結合よりも組織成分と結合する傾向があることを表す。臨床環境では、Vdistを使用することにより、定常状態の濃度を達成するための負荷投与量を決定することができる。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の送達剤と同時投与した場合の修飾核酸分子の分布容積は、少なくとも約2%、少なくとも約5%、少なくとも約10%、少なくとも約15%、少なくとも約20%、少なくとも約25%、少なくとも約30%、少なくとも約
35%、少なくとも約40%、少なくとも約45%、少なくとも約50%、少なくとも約55%、少なくとも約60%、少なくとも約65%、少なくとも約70%低下し得る。
生物学的効果
一実施形態では、動物におけるタンパク質発現を分析することにより、当該動物に送達した修飾mRNAの生物学的効果を分類してよい。本発明の修飾mRNAを投与した哺乳動物から生体試料を回収し、この試料を分析することにより、タンパク質発現を測定することができる。一実施形態では、哺乳動物に投与した修飾mRNAでコードされる発現タンパク質が少なくとも50pg/mlであることが好適であり得る。例えば、哺乳動物に送達された修飾mRNAがコードするタンパク質の発現が50〜200pg/mlである場合、当該哺乳動物における治療有効量のタンパク質とみなすことができる。
マススペクトロメトリーによる修飾核酸の検出
マススペクトロメトリー(MS)(質量分析法)とは、イオンに変換した後の分子に関する構造情報および分子質量/濃度情報を提供できる分析手法である。分子が最初にイオン化されて正または負の電荷を得た後、質量分析器内を通過して、各々の質量電荷(m/z)比に応じて様々な分析器領域に到達する。
析計、フーリエ変換型質量分析計が挙げられる。
修飾核酸分子の使用
治療剤
本明細書に記載の修飾核酸分子、および本明細書に記載の修飾核酸分子から翻訳されたタンパク質は、治療剤として使用することができる。例えば、本明細書に記載の修飾核酸分子を対象に投与することができる。この場合、修飾核酸分子がインビボで翻訳されて、対象内に治療用ペプチドが産生される。したがって、本明細書において、ヒトその他の哺乳動物の疾患または状態を治療または防止するための組成物、方法、キット、および試薬が提供される。本開示の活性治療剤の例として、修飾核酸分子、修飾核酸分子を含有する、または当該修飾核酸分子から翻訳されたポリペプチドを含有する細胞、修飾核酸分子から翻訳されたポリペプチド、および修飾核酸分子を含有する、または当該修飾核酸分子から翻訳されたポリペプチドを含有する細胞と接触する細胞が挙げられるが、これらに限定されない。
触させてよく、この核酸から細胞内で組換えポリペプチドが翻訳され得る。
疾患および状態の治療法
タンパク質活性の欠損または異常を特徴とする疾患症状を、欠損しているタンパク質活性を供給するか、または異常なタンパク質活性を克服することにより治療または予防する方法を、本明細書において提供する。ウイルスDNAベクターと比較して、修飾mRNAは導入後のタンパク質産生が急速に開始するので、本開示の化合物は、急性疾患(例えば敗血症、脳卒中、心筋梗塞)の治療で特に有利である。さらに、本開示の修飾mRNAは転写速度を変更でき、よって遺伝子発現に変化を起こすことができるので、この修飾mRNAを使用すれば、タンパク質の正確な用量調節が達成可能となる。
より近年特徴付けされたタンパク質)をコードする修飾mRNA分子を導入することにより、対象の高脂血症を治療し、これにより対象の高脂血症を寛解させる方法を提供する。SORT1遺伝子は、Sortilinと呼ばれるトランスゴルジ網(TGN)膜貫通タンパク質をコードする。遺伝学研究により、5人に1人がSORT1遺伝子の1p13遺伝子座に一塩基多型rs12740374を有し、低レベルの低密度リポタンパク質(LDL)および超低密度リポタンパク質(VLDL)を有する傾向があることが示されている。約30%の人々に存在するマイナー対立遺伝子の各コピーがLDLコレステロールを8mg/dL変化させるのに対し、母集団の約5%に存在するマイナー遺伝子の2つのコピーは、LDLコレステロールを16mg/dL低下させる。マイナー対立遺伝子の保有者は、心筋梗塞のリスクが40%低下していることも示されている。マウスにおけるインビボの機能研究では、マウスの肝組織でSORT1を過剰発現させた結果、LDLコレステロールレベルが80%もの有意な割合で低下し、SORT1を発現停止すると、LDLコレステロールが約200%増加したと記されている(Musunuru K et al. From noncoding variant to phenotype via SORT1 at the 1p13 cholesterol locus. Nature 2010; 466: 714−721;参照により、この文献の全体が本明細書に組み込まれる)。
細胞性核酸の送達方法
本開示の方法は、細胞集団へのインビボ、エキソビボ、または培養下での核酸の送達を亢進する。例えば、複数の宿主細胞(例えば酵母細胞や哺乳類細胞等の真核細胞)を含有する細胞培養液を、少なくとも1つのヌクレオシド修飾を有し、かつ随意に翻訳可能領域を有する修飾核酸分子を含有する組成物と接触させてよい。また組成物は、一般に、トランスフェクション試薬等、宿主細胞への修飾核酸分子の取り込み効率を高め得る化合物を含有してもよい。修飾核酸分子は、対応する非修飾の核酸分子と比べて、細胞集団における高い保持率を示し得る。修飾核酸分子は、非修飾核酸分子よりも高い保持率を有し得る。いくつかの実施形態では、修飾核酸分子の保持率は、非修飾核酸分子より少なくとも約50%、75%、90%、95%、100%、150%、200%、または200%超高い。そのような保持率の優位性は、修飾核酸分子による1ラウンドのトランスフェクションで達成でき、あるいは、後続の反復ラウンドのトランスフェクションで得ることができる。
標的部分
いくつかの実施形態では、修飾核酸分子を提供することにより、細胞表面にタンパク質結合パートナーまたは受容体が発現する。このパートナーまたは受容体は、細胞の標的を特定の組織空間に向けるか、特定の部分と相互作用するようにインビボまたはインビトロで機能することができる。適切なタンパク質結合パートナーの例として、抗体およびその機能性断片、足場タンパク質、またはペプチドが挙げられるが、これらに限定されない。加えて、脂質、炭水化物、または他の生物的部分の合成および細胞外局在化を指示する目的で、修飾核酸分子を使用してよい。
遺伝子発現の永久停止
哺乳類対象においてエピジェネティック(後成的)に遺伝子発現を停止する、核酸を含む方法。この場合、遺伝子をサイレンシングする目的で、配列特異的なヒストンH3メチ
ル化を指示することのできる単一または複数のポリペプチドを翻訳可能領域がコードして、ヘテロクロマチンの形成を開始し、特定遺伝子周辺の遺伝子転写を減少させる。例えば、ヤヌスキナーゼ2遺伝子における機能獲得型変異は、骨髄増殖性疾患ファミリーの原因である。
細胞表面でのリガンドまたは受容体の発現
いくつかの態様および本明細書に記載の態様の実施形態では、修飾RNAを使用して、細胞表面にリガンドまたはリガンド受容体を発現することができる(例えばホーミング部分)。細胞表面にリガンドまたはリガンド受容体部分が結合すると、細胞は、組織または薬剤との間で所望の生物相互作用をインビボで有することが可能になる。リガンドは、抗体、抗体断片、アプタマー、ペプチド、ビタミン、炭水化物、タンパク質もしくはポリペプチド、受容体(例えば細胞表面受容体)、接着分子、糖タンパク質、糖残基、治療薬、薬剤、グリコサミノグリカン、またはこれらの組み合わせであり得る。例えば、リガンドは、癌細胞に特異的な抗原を認識することにより、細胞が腫瘍細胞と優先的に相互作用できるようにして、改変細胞の腫瘍特異的な局在化を可能にする抗体であり得る。好ましいリガンドは治療対象組織の外面にある標的分子と相互作用できるので、リガンドにより、細胞組成物は治療対象組織に蓄積できるようになる。他の組織に対しては限られた交差反応性を有するリガンドが、一般的に好ましい。
細胞死介在物質
一実施形態では、修飾核酸分子組成物を用いて、細胞死受容体、細胞死受容体のリガンド、またはこれらの組み合わせの発現を増加させることにより、細胞(例えば癌細胞)にアポトーシスを誘発することができる。この方法は、所望される任意の細胞に細胞死を誘発する目的で使用でき、細胞が自然のアポトーシスシグナルを回避する癌の治療において特に有用である。
キットおよび装置
キット
本発明は、本発明の方法を簡便および/または効果的に実施するための種々のキットを提供する。典型的には、キットは、使用者が対象の複数の治療を実施し、かつ/または複数の実験を実施するに足る、十分な量および/または数の構成要素を含む。
装置
本発明は、関心のポリペプチドをコードする修飾核酸分子またはmmRNAを組み込むことのできる装置を提供する。この装置は、上記核酸を必要とする対象(例えばヒト患者)に直ちに送達できる製剤の形で核酸を合成するための、安定した製剤にされた試薬を格納する。上記関心のポリペプチドの非限定的な例として、創傷治癒のための増殖因子および/または血管形成促進因子、感染制御を促進するためのペプチド抗生物質、および、新たに特定されたウイルスに対する免疫反応を急速に刺激するための抗原が挙げられる。
または机上に収まるように拡大/縮小される。他の実施形態では、この装置は、スーツケース、バックパック、または類似サイズの物体に収まるように拡大/縮小される。
3,851号、第5,893,397号、第5,466,220号、第5,339,163号、第5,312,335号、第5,503,627号、第5,064,413号、第5,520,639号、第4,596,556号、第4,790,824号、第4,941,880号、第4,940,460号、ならびにPCT国際公開第97/37705号および第97/13537号(参照により、これらの各文献の全体が本明細書に組み込まれる)に記載されている。圧縮ガスを用いて粉末形態ワクチンの皮膚外層から真皮への送達を加速するバリスティック粉末/粒子送達装置が、好適である。上記に追加または代替して、古典的な皮内投与マントゥー法において従来の注射器を使用してもよい。
治療剤を固形組織に送達する方法は、Bahramiらにより説明されており、例えば米国特許出願公開第20110230839号(参照により、この文献の内容全体が本明細書に組み込まれる)に教示されている。Bahramiによれば、規則的に並んだ針が装置に組み込まれ、各針の長さに沿って、上記固形組織の任意の場所に、実質的に均等量の流体が送達される。
に教示されている。Assafによれば、複数の針が装置に組み込まれ、この装置は、1本以上の針に接続したチャンバーを有し、各注射の後にチャンバーに医療流体を連続的に補充する手段を有する。
ており、例えば米国特許出願公開第20080140061号(参照により、この文献の内容全体が本明細書に組み込まれる)に教示されている。Toubiaによれば、活性薬剤をチャンバーへと受け取るプローブに複数の針が組み込まれ、このプローブから組織に薬剤が送達される。
中実のマイクロ針を1cm2あたり300〜1500本有し得る。このマイクロ針は角質層を貫通して、短時間(例えば20秒〜15分)皮膚に残る。別の例では、中空のマイクロ針システムは最大3mLの容量を有し、約950μm高さのマイクロ針1cm2あたり15〜20本を用いて液体製剤を送達する。このマイクロ針は皮膚を貫通して、液体製剤を装置から皮膚内に流入させる。この中空マイクロ針システムは、製剤の容積と粘度に応じて1〜30分間装着してよい。
け先表面の剛性を高め変形性を下げることのできる装置に、複数のマイクロ針を組み込む。
カテーテルおよび/またはルーメンを利用した方法および装置
カテーテルおよびルーメンを用いた方法および装置を使用して、本発明のmmRNAを単回投与、多回投与、または分割投与スケジュールで投与してよい。このような方法および装置について、以下に記載する。
治療剤が分配される。この装置は、特に経心筋的血行再建術によく適している。
nらにより説明されており、例えば米国特許第5,464,395号(参照により、この文献の内容全体が本明細書に組み込まれる)に教示されている。Faxonによれば、少なくとも1本のニードルカニューレがカテーテルに組み込まれ、カテーテルから外に突き出る針を通じて、所望の薬剤が組織に送達される。
電流を利用した方法および装置
電流を利用した方法および装置を使用して、本発明のmmRNAを、本明細書で教示される単回投与、多回投与、または分割投与計画に従って投与してよい。このような方法および装置について、以下に記載する。
カテーテルに組み込む。このカテーテルを体管腔内に配置した後、針電極を伸長させ、体管腔周辺の組織内に貫入させる。次に、この装置は、上記針電極の少なくとも一方を通じて薬剤を導入し、上記一対の針電極により電場をかける。これにより、薬剤が細胞膜を通過して治療部位の細胞に到達できる。
定義
本明細書の様々な箇所で、本発明の化合物の置換基が、群で、または範囲で開示されている。本開示は、そのような群および範囲の構成要素の個々の別の組み合わせの1つ1つを含むことが具体的に意図されている。たとえば、「C1−6アルキル」という用語は、メチル、エチル、C3アルキル、C4アルキル、C5アルキルおよびC6アルキルが個々に開示されることが具体的に意図される。
約:本明細書で使用する「約」という用語は、列挙された値の±10%を意味する。
組み合わせて投与される:本明細書で使用する「組み合わせて投与される」または「併用投与」という用語は、2つ以上の剤(たとえば、本明細書に記述される抗微生物ポリペプチド等の抗微生物ポリペプチド(たとえば、抗細菌ポリペプチド)をコードする修飾核酸またはmmRNA、および抗微生物剤(たとえば、抗微生物ポリペプチドまたは本明細書に記述される小分子抗微生物化合物等))を、対象に同時に投与するか、または、患者に各剤の効果が重複しうるような間隔以内で投与することを意味する。いくつかの実施態様において、それらはお互いに約60、30、15、10、5または1分以内に投与される。いくつかの実施形態において、剤の投与は、組み合わせ効果(例えば相乗効果)が得るのに十分に近い間隔を互いに置く。
動物:本明細書で使用する「動物」という用語は、動物界の任意の構成員を指す。いくつかの実施態様において、「動物」とは、任意の発達段階にあるヒトを指す。いくつかの実施態様において、「動物」とは、任意の発達段階にある非ヒト動物を指す。ある特定の実施態様において、非ヒト動物は、哺乳類(たとえば、げっ歯類、マウス、ラット、ウサギ、サル、イヌ、ネコ、ヒツジ、ウシ、霊長類またはブタ等)である。いくつかの実施態様において、動物とは、哺乳類、鳥類、爬虫類、両生類、魚類および昆虫を含むが、これらに限定されない。いくつかの実施態様において、動物は、遺伝子操作された動物であるトランスジェニック動物、またはクローンである。
対象抗原または所望の抗原:本明細書で使用する「対象の抗原」または「所望の抗原」という用語には、抗体および断片、突然変異体、変異体および本明細書に記述されるそれらの改変物に免疫特異的に結合される、本明細書に提示されるタンパク質および他の生体分子を含む。対象抗原の例としては、インスリン、インスリン様成長因子、hGH、tPA、サイトカイン類(たとえば、IL−1、IL−2、IL−3、IL−4、IL−5、IL−6、IL−7、IL−8、IL−9、IL−10、IL−11、IL−12、IL−13、IL−14、IL−15、IL−16、IL−17、IL−18等のインターロイキン類(IL)、インターフェロン(IFN)α、IFNβ、IFNγ、IFNωまたはIFNτ、TNFαおよびTNFβ、TNFγ、TRAIL等の腫瘍壊死因子(TNF)
;G−CSF、GM−CSF、M−CSF、MCP−1およびVEGF等)が挙げられるが、これらに限定されない。
およそ:本明細書で使用する対象の1つ以上の値へ適用させた「およそ」または「約」という用語は、規定された参照値に類似である値を指す。ある特定の実施態様において、「およそ」または「約」という用語は、他で定義または他で文脈上明らかでない限りは、規定された参照値いずれかの方向(大きいか、小さいか)で、25%、20%、19%、18%、17%、16%、15%、14%、13%、12%、11%、10%、9%、8%、7%、6%、5%、4%、3%、2%、1%または1%未満以内にある値の範囲を指す(そのような数値が可能値の100%を超える場合を除く)。
関連する:本明細書で使用する「関連する」「結合される」「結び付けられる」「付着される」および「繋がれる」という用語は、2つ以上の部分に対して用いられる場合、その部分が物理的に他方と、直接的に関連もしくは結合し、または、結合剤として機能する1つ以上の追加の部分を介して関連もしくは結合し、十分に安定な構造を形成し、その構造が用いられる条件下(たとえば、生理学的条件下)で、物理的にそれら部分が関連したままでいることを意味する。「関連」は、必ずしも直接的な共有化学結合を厳密に介する必要性はない。また、「関連した」実体が物理的に関連したままの状態であるように、十分に安定な結合性に基づいたイオン結合または水素結合またはハイブリダイゼーションを意味しても良い。
二機能性:本明細書で使用する「二機能性」という用語は、少なくとも2つの機能を有する、または維持している任意の物質、分子または部分を指す。その機能は、同じ結果をもたらすものでも、異なる結果をもたらすものであってもよい。機能を生み出す構造は、同じであっても異なっていても良い。たとえば、本発明の二機能性に修飾されたRNAは、細胞毒性のペプチドをコードし(第一の機能)、一方で、コードRNAを含有するそれらヌクレオチドは、それ自体で細胞毒性である(第二の機能)。この例において、二機能性に修飾されたRNAの癌細胞への送達は、癌を改善もしくは治療しうるペプチドまたはタンパク質を生み出すだけでなく、ヌクレオチドの細胞毒性ペイロードを運搬し、修飾RNAの翻訳が無くとも、その細胞の分解は必ず発生する。
生体適合性:本明細書で使用する「生体適合性」という用語は、損傷、毒性または免疫システムによる拒絶をほとんどもたらさずに、または全くもたらさずに、生細胞、組織、器官またはシステムと適合可能であることを意味する。
生分解性:本明細書で使用する「生分解性」という用語は、生物の作用により、無害な産物に分解されることができることを意味する。
生物活性のある:本明細書で使用する「生物活性のある」という文言は、生物学的システムおよび/または生命体の中で、活性を有する任意の物質の特性を指す。たとえば、生命体に投与された際に、その生命体に生物学的な影響を与える物質は、生物活性があるとみなされる。特定の実施態様において、修飾核酸または、本発明のmmRNAは、修飾核酸またはmmRNAの部分の一部分に生物活性があれば、または生物学的に関連があるとみなされている活性をミミックすれば、生物活性があるとみなされうる。
化学的用語:以下に、「アシル」〜「チオール」までの様々な化学用語の定義を提示する。
で、RはHまたは任意選択的に置換されたC1−6、C1−10またはC1−20アルキル基であり、RN1は本明細書に定義される)、本明細書に定義されるアシル基を表す。例となる非置換アシルアミノ基は、1〜41炭素(たとえば、1〜7、1〜13、1〜21、2〜7、2〜13、2〜21または2〜41炭素)を含む。いくつかの実施形態において、アルキル基はさらに、本明細書に記述されるように1、2、3または4の置換基で置換され、および/または、アミノ基は、−NH2または−NHRN1であり、ここで、RN1は、独立して、OH、NO2、NH2、NRN2 2、SO2ORN2、SO2RN2、SORN2、アルキルまたはアリールであり、各RN2はH、アルキルまたはアリールであってもよい。
れる;(16)−SO2RD´であり、RD´は、(a)C1−6アルキル、(b)C6−10アリール、(c)C1−6アルク−C6−10アリール、および(d)ヒドロキシ、からなる群から選択される;(17)−SO2NRE´RF´であり、RE´およびRF´のそれぞれは、独立して、(a)水素、(b)C1−6アルキル、(c)C6−10アリールおよび(d)C1−6アルク−C6−10アリール、からなる群から選択される;(18)−C(O)RG´であり、ここで、RG´は、(a)C1−20アルキル(たとえば、C1−6アルキル)、(b)C2−20アルケニル(たとえば、C2−6アルケニル)、(c)C6−10アリール、(d)水素、(e)C1−6アルク−C6−10アリール、(f)アミノ−C1−20アルキル、(g)−(CH2)s2(OCH2CH2)s1(CH2)s3OR’のポリエチレングリコールであり、s1は、1〜10の整数(たとえば、1〜6または1〜4)で、s2およびs3のそれぞれは、独立して、0〜10の整数(たとえば、0〜4、0〜6、1〜4、1〜6または1〜10)であり、および、R´は、HまたはC1−20アルキル、(h)−NRN1(CH2)s2(CH2CH2O)s1(CH2)s3NRN1のアミノ−ポリエチレングリコールであり、s1は、1〜10の整数(たとえば、1〜6または1〜4)であり、s2およびs3のそれぞれは、独立して、0〜10の整数(たとえば、0〜4、0〜6、1〜4、1〜6または1〜10)であり、および、各RN1は、独立して、水素または任意選択的に置換C1−6アルキル、からなる群から選択される;(19)−NRH’C(O)RI’であり、ここで、RH´は、(a1)水素および(b1)C1−6アルキルからなる群から選択され、RI´は、(a2)C1−20アルキル(たとえば、C1−6アルキル)、(b2)C2−20アルケニル(たとえば、C2−6アルケニル)、(c2)C6−10アリール、(d2)水素、(e2)C1−6アルク−C6−10アリール、(f2)アミノ−C1−20アルキル、(g2)−(CH2)s2(OCH2CH2)s1(CH2)s3OR’のポリエチレングリコール(ここで、s1は、1〜10の整数(たとえば、1〜6または1〜4)で、s2およびs3のそれぞれは、独立して、0〜10の整数(たとえば、0〜4、0〜6、1〜4、1〜6または1〜10)であり、および、R´は、HまたはC1−20アルキル)、(h2)−NRN1(CH2)s2(CH2CH2O)s1(CH2)s3NRN1のアミノ−ポリエチレングリコールであり、s1は、1〜10の整数(たとえば、1〜6または1〜4)であり、s2およびs3のそれぞれは、独立して、0〜10の整数(たとえば、0〜4、0〜6、1〜4、1〜6または1〜10)であり、および、各RN1は、独立して、水素または任意選択的に置換されたC1−6アルキル、からなる群から選択される;(20)NRJ´C(O)ORK´であり、ここで、RJ´は、(a1)水素および(b1)C1−6アルキルからなる群から選択され、RK´は、(a2)C1−20アルキル(たとえば、C1−6アルキル)、(b2)C2−20アルケニル(たとえば、C2−6アルケニル)、(c2)C6−10アリール、(d2)水素、(e2)C1−6アルク−C6−10アリール、(f2)アミノ−C1−20アルキル、(g2)−(CH2)s2(OCH2CH2)s1(CH2)s3OR’のポリエチレングリコール(ここで、s1は、1〜10の整数(たとえば、1〜6または1〜4)で、s2およびs3のそれぞれは、独立して、0〜10の整数(たとえば、0〜4、0〜6、1〜4、1〜6または1〜10)であり、および、R´は、HまたはC1−20アルキル)、(h2)−NRN1(CH2)s2(CH2CH2O)s1(CH2)s3NRN1のアミノ−ポリエチレングリコールであり、s1は、1〜10の整数(たとえば、1〜6または1〜4)であり、s2およびs3のそれぞれは、独立して、0〜10の整数(たとえば、0〜4、0〜6、1〜4、1〜6または1〜10)であり、および、各RN1は、独立して、水素または任意選択的に置換C1−6アルキル、からなる群から選択される;および、(21)アミジン、からなる群から選択される。いくつかの実施形態において、これらの基のそれぞれは、本明細書に記述されるようにさらに置換されてもよい。たとえば、C1−アルカリルのアルキレン基は、オキソ基でさらに置換され、各アリーロイル置換基を放出してもよい。
本明細書で使用する「アミノ」という用語は、−N(RN1)2を表し、ここで、各RN1は、独立して、H、OH、NO2、N(RN2)2、SO2ORN2、SO2RN2、SORN2、N−保護基、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、アリール、アルカリル、シクロアルキル、アルクシクロアルキル、カルボキシアルキル、スルホアルキル、ヘテロシクリル(たとえば、ヘテロアリール)、またはアルクヘテロシクリル(たとえば、アルクヘテロアリール)であり、ここで、これら列挙されたRN1基のそれぞれは、本明細書に定義されるように、各基を任意選択的に置換してもよく;または、2つのRN1を結合させ、ヘテロシクリルまたはN−保護基を形成しても良く、および、各RN2は、独立して、H、アルキルまたはアリールである。本発明のアミノ基は、非置換アミノ(すなわち、−NH2)または置換アミノ(すなわち、−N(RN1)2)であっても良い。好ましい態様としては、アミノは、−NH2または、−NHRN1であり、RN1は、独立して、OH、NO2、NH2、NRN2 2、SO2ORN2、SO2RN2、SORN2、アルキル、カルボキシアルキル、スルホアルキルまたはアリールであり、各
RN2は、H、C1−20アルキル(たとえば、C1−6アルキル)またはC6−10アリールであっても良い。
)s3NRN1のアミノ−ポリエチレングリコールであり、s1は、1〜10の整数(たとえば、1〜6または1〜4)であり、s2およびs3のそれぞれは、独立して、0〜10の整数(たとえば、0〜4、0〜6、1〜4、1〜6または1〜10)であり、および、各RN1は、独立して、水素または任意選択的に置換されたC1−6アルキル)からなる群から選択される);(19)−NRH’C(O)RI’であり、ここで、RH´は、(a1)水素および(b1)C1−6アルキルからなる群から選択され、RI´は、(a2)C1−20アルキル(たとえば、C1−6アルキル)、(b2)C2−20アルケニル(たとえば、C2−6アルケニル)、(c2)C6−10アリール、(d2)水素、(e2)C1−6アルク−C6−10アリール、(f2)アミノ−C1−20アルキル、(g2)−(CH2)s2(OCH2CH2)s1(CH2)s3OR’のポリエチレングリコール(ここで、s1は、1〜10の整数(たとえば、1〜6または1〜4)で、s2およびs3のそれぞれは、独立して、0〜10の整数(たとえば、0〜4、0〜6、1〜4、1〜6または1〜10)であり、および、R´は、HまたはC1−20アルキル)、(h2)−NRN1(CH2)s2(CH2CH2O)s1(CH2)s3NRN1のアミノ−ポリエチレングリコールであり、s1は、1〜10の整数(たとえば、1〜6または1〜4)であり、s2およびs3のそれぞれは、独立して、0〜10の整数(たとえば、0〜4、0〜6、1〜4、1〜6または1〜10)であり、および、各RN1は、独立して、水素または任意選択的に置換C1−6アルキル、からなる群から選択される、からなる群から選択される;(20)NRJ´C(O)ORK´であり、ここで、RJ´は、(a1)水素および(b1)C1−6アルキルからなる群から選択され、RK´は、(a2)C1−20アルキル(たとえば、C1−6アルキル)、(b2)C2−20アルケニル(たとえば、C2−6アルケニル)、(c2)C6−10アリール、(d2)水素、(e2)C1−6アルク−C6−10アリール、(f2)アミノ−C1−20アルキル、(g2)−(CH2)s2(OCH2CH2)s1(CH2)s3OR’のポリエチレングリコール(ここで、s1は、1〜10の整数(たとえば、1〜6または1〜4)で、s2およびs3のそれぞれは、独立して、0〜10の整数(たとえば、0〜4、0〜6、1〜4、1〜6または1〜10)であり、および、R´は、HまたはC1−20アルキル)、(h2)−NRN1(CH2)s2(CH2CH2O)s1(CH2)s3NRN1のアミノ−ポリエチレングリコールであり、s1は、1〜10の整数(たとえば、1〜6または1〜4)であり、s2およびs3のそれぞれは、独立して、0〜10の整数(たとえば、0〜4、0〜6、1〜4、1〜6または1〜10)であり、および、各RN1は、独立して、水素または任意選択的に置換されたC1−6アルキル、からなる群から選択される;(21)アミジン、からなる群から独立して選択される置換基)で、任意選択的に置換されてもよい。いくつかの実施形態において、これらの基の各々は、本明細書に記述されるようにさらに置換されてもよい。
本明細書で使用する「二環」という用語は、2つの環を有する構造を指し、当該環は、芳香族でも、非芳香族でも良い。二環構造としては、本明細書に定義されるスピロシクリル基、および1つ以上の架橋を共有する2つの環(そのような架橋は、1つの原子または鎖(2、3またはそれ以上の原子を含む)を含むことができる)が挙げられる。例となる二環基としては、二環炭素環基(第一と第二の環は、本明細書に定義される炭素環基である);二環アリール基(第一と第二の環は、本明細書に定義されるアリール基);二環ヘテロシクリル基(第一の環はヘテロシクリル基であり、第二の環は炭素環(たとえばアリール)またはヘテロシクリル(たとえばヘテロアリール)基である);二環ヘテロアリール基(第一の環はヘテロアリール基であり、第二の環は炭素環(たとえばアリール)またはヘテロシクリル(たとえばヘテロアリール)基である)が挙げられる。いくつかの実施形態において、二環基は、シクロアルキル基、ヘテロシクリル基およびアリール基に対して本明細書に定義されるように、1、2、3または4の置換基で置換されていても良い。
本明細書で使用する「カルバモイルアルキル」という用語は、本明細書に定義されるカルバモイル基で置換された、本明細書に定義されるアルキル基を表す。アルキル基はさらに、本明細書に記述されるように、1、2、3または4の置換基で置換されていてもよい。
「カルボキシアルデヒド」という用語は、−CHOという構造を有するアシル基を表す。
本明細書で使用する「カルボキシアルコキシ」という用語は、本明細書に定義されるカルボキシ基により置換された、本明細書に定義されるアルコキシ基を表す。アルコキシ基は、本明細書にアルキル基に対して記述されるように、1、2、3または4の置換基でさらに置換されていても良い。
ボキシ基で置換された、本明細書に定義されるように、アルキル基を表す。アルキル基は、本明細書に記述される、1、2、3または4の置換基でさらに置換されていても良い。
「シクロアルコキシ」という用語は、式−ORの化学置換基を表し、Rは、他で特定されない限り、本明細書に定義されるC3−8シクロアルキル基である。シクロアルキル基は、本明細書に記述されるように、1、2、3または4の置換基でさらに置換されていても良い。例となる非置換シクロアルコキシ基は、3〜8炭素である。
本明細書で使用する剤の「有効量」という用語は、有益なまたは所望された結果(たとえば、臨床結果)をもたらすのに十分な量であり、「有効量」は、それが適用される状況に依存する。たとえば、癌の治療剤の投与という状況では、剤の有効量は、その剤の投与が無い場合の反応性と比較して、本明細書に定義されるような癌の治療を得るのに十分な量である。
本明細書で使用する「ハロアルコキシ」という用語は、ハロゲン基(すなわち、F、Cl、BrまたはI)で置換された、本明細書に定義されるアルコキシ基を表す。ハロアルコキシは、1つ、2つ、3つ、またはアルキル基が2以上の炭素の場合には、4つのハロゲンで置換されても良い。ハロアルコキシ基としては、ペルフルオロアルコキシ類(たとえば、−OCF3)、−OCHF2、−OCH2F、−OCCl3、−OCH2CH2Br、−OCH2CH(CH2CH2Br)CH3、および−OCHICH3が挙げられる。いくつかの実施形態において、ハロアルコキシ基は、本明細書でアルキル基に対して記述されるように、1、2、3または4の置換基で、さらに置換されていても良い。
0、2〜9)炭素のものが挙げられる。「ヘテロシクリル」という用語はまた、架橋された多環構造を有する複素環化合物を表し、1つ以上の炭素および/またはヘテロ原子が、単環の2つの非隣接員を架橋する(たとえば、キヌクリジニル基)。「ヘテロシクリル」という用語は、二環、三環および四環基を含み、上述の任意の複素環が、1、2、または3の炭素環に縮合されている(たとえば、アリール環、シクロヘキサン環、シクロヘキセン環、シクロペンタン環または他の単環複素環(たとえば、インドリル、キノリル、イソキノリル、テトラヒドロキノリル、ベンゾフリル、ベンゾチエニル等))。縮合複素環の例示としては、トロパン類および1,2,3,5,8,8a−ヘキサヒドロインドリジンが挙げられる。複素環としては、ピロリル、ピロリニル、ピロリジニル、ピラゾリル、ピラゾリニル、ピラゾリジニル、イミダゾリル、イミダゾリニル、イミダゾリジニル、ピリジル、ピペリジニル、ホモピペリジニル、ピラジニル、ピペラジニル、ピリミジニル、ピリダジニル、オキサゾリル、オキサゾリジニル、イソキサゾリル、イソキサゾリジニル、モルホリニル、チオモルホリニル、チアゾリル、チアゾリジニル、イソチアゾリル、イソチアゾリジニル、インドリル、インダゾリル、キノリル、イソキノリル、キノキサリニル、ジヒドロキノキサリニル、キナゾリニル、シンノリニル、フタラジニル、ベンジミダゾリル、ベンゾチアゾリル、ベンゾキサゾリル、ベンゾチアジアゾリル、フリル、チエニル、チアゾリジニル、イソチアゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、オキサジアゾリル(たとえば、1,2,3−オキサジアゾリル)、プリニル、チアジアゾリル(たとえば、1,2,3−チアジアゾリル)、テトラヒドロフラニル、ジヒドロフラニル、テトラヒドロチエニル、ジヒドロチエニル、ジヒドロインドリル、ジヒドロキノリル、テトラヒドロキノリル、テトラヒドロイソキノリル、ジヒドロイソキノリル、ピラニル、ジヒドロピラニル、ジチアゾリル、ベンゾフラニル、イソベンゾフラニル、ベンゾチエニル等(それらのジヒドロ体およびテトラヒドロ体を含み、1つ以上の二重結合が還元され、水素で置き換えられている)が挙げられる。さらに他の例となる複素環としては、2,3,4,5−テトラヒドロ−2−オキソ−オキサゾリル;2,3−ジヒドロ−2−オキソ−1H−イミダゾリル;2,3,4,5−テトラヒドロ−5−オキソ−1H−ピラゾリル(たとえば、2,3,4,5−テトラヒドロ−2−フェニル−5−オキソ−1H−ピラゾリル);2,3,4,5−テトラヒドロ−2,4−ジオキソ−1H−イミダゾリル(たとえば、2,3,4,5−テトラヒドロ−2,4−ジオキソ−5−メチル−5−フェニル−1H−イミダゾリル);2,3−ジヒドロ−2−チオキソ−1,3,4−オキサジアゾリル(たとえば、2,3−ジヒドロ−2−チオキソ−5−フェニル−1,3,4−オキサジアゾリル);4,5−ジヒドロ−5−オキソ−1H−トリアゾリル(たとえば、4,5−ジヒドロ−3−メチル−4−アミノ 5−オキソ−1H−トリアゾリル);1,2,3,4−テトラヒドロ−2,4−ジオキソピリジニル(たとえば、1,2,3,4−テトラヒドロ−2,4−ジオキソ−3,3−ジエチルピリジニル);2,6−ジオキソ−ピペリジニル(たとえば、2,6−ジオキソ−3−エチル−3−フェニルピペリジニル);1,6−ジヒドロ−6−オキソピリジミニル;1,6−ジヒドロ−4−オキソピリミジニル(たとえば、2−(メチルチオ)−1,6−ジヒドロ−4−オキソ−5−メチルピリミジン−1−イル);1,2,3,4−テトラヒドロ−2,4−ジオキソピリミジニル(たとえば、1,2,3,4−テトラヒドロ−2,4−ジオキソ−3−エチルピリミジニル);1,6−ジヒドロ−6−オキソ−ピリダジニル(たとえば、1,6−ジヒドロ−6−オキソ−3−エチルピリダジニル);1,6−ジヒドロ−6−オキソ−1,2,4−トリアジニル(たとえば、1,6−ジヒドロ−5−イソプロピル−6−オキソ−1,2,4−トリアジニル);2,3−ジヒドロ−2−オキソ−1H−インドリル(たとえば、3,3−ジメチル−2,3−ジヒドロ−2−オキソ−1H−インドリルおよび2,3−ジヒドロ−2−オキソ−3,3’−スピロプロパン−1H−インドール−1−イル);1,3−ジヒドロ−1−オキソ−2H−イソ−インドリル;1,3−ジヒドロ−1,3−ジオキソ−2H−イソ−インドリル;1H−ベンゾピラゾリル(たとえば、1−(エトキシカルボニル)−1H−ベンゾピラゾリル);2,3−ジヒドロ−2−オキソ−1H−ベンゾイミダゾリル(たとえば、3−エチル−2,3−ジヒドロ−2−オキソ−1H−ベンゾイミダゾリル);2,3−ジヒド
ロ−2−オキソ−ベンゾキサゾリル(たとえば、5−クロロ−2,3−ジヒドロ−2−オキソ−ベンゾキサゾリル);2,3−ジヒドロ−2−オキソ−ベンゾキサゾリル;2−オキソ−2H−ベンゾピラニル;1,4−ベンゾジオキサニル;1,3−ベンゾジオキサニル;2,3−ジヒドロ−3−オキソ,4H−1,3−ベンゾチアジニル;3,4−ジヒドロ−4−オキソ−3H−キナゾリニル(たとえば、2−メチル−3,4−ジヒドロ−4−オキソ−3H−キナゾリニル);1,2,3,4−テトラヒドロ−2,4−ジオキソ−3H−キナゾリル(たとえば、1−エチル−1,2,3,4−テトラヒドロ−2,4−ジオキソ−3H−キナゾリル);1,2,3,6−テトラヒドロ−2,6−ジオキソ−7H−プリニル(たとえば、1,2,3,6−テトラヒドロ−1,3−ジメチル−2,6−ジオキソ−7H −プリニル);1,2,3,6−テトラヒドロ−2,6−ジオキソ−1H−プリニル(たとえば、1,2,3,6−テトラヒドロ−3,7−ジメチル−2,6−ジオキソ−1H−プリニル);2−オキソベンズ[c,d]インドリル;1,1−ジオキソ−2H−ナフト[1,8−c,d]イソチアゾリル;および、1,8−ナフチレンジカルボキサミドが挙げられる。さらなる複素環としては、3,3a,4,5,6,6a−ヘキサヒドロ−ピロロ[3,4−b]ピロール−(2H)−イルおよび、2,5−ジアザビシクロ[2.2.1]ヘプタン−2−イル、ホモピペラジニル(または、ジアゼパニル)、テトラヒドロピラニル、ジチアゾリル、ベンゾフラニル、ベンゾチエニル、オキセパニル、チエパニル、アゾカニル、オキセカニル、およびチオカニルが挙げられる。複素環基としてはまた、式:
ル、および(d)C1−6アルク−C6−10アリール、からなる群から独立して選択される);(19)−(CH2)qSO2RD´(qは、0〜4の整数であり、RD´は、(a)C1−6アルキル、(b)C6−10アリール、(c)C1−6アルク−C6−10アリール、からなる群から選択される);(20)−(CH2)qSO2NRE´RF´(qは、0〜4の整数であり、RE´およびRF´はそれぞれ、(a)水素、(b)C1−6アルキル、(c)C6−10アリール、および(d)C1−6アルク−C6−10アリール、からなる群から独立して選択される);(21)チオール;(22)C6−10アリールオキシ;(23)C3−8シクロアルコキシ;(24)アリールアルコキシ;(25)C1−6アルク−C1−12ヘテロシクリル(たとえば、C1−6アルク−C1−12ヘテロアリール);(26)オキソ;(27)(C1−12ヘテロシクリル)イミノ;(28)C2−20アルケニル;および(29)C2−20アルキニルからなる群から独立して選択される1、2、3、4または5の置換基で、任意選択的に置換されてもよい。いくつかの実施形態において、これらの基のそれぞれは、本明細書に記述されるようにさらに置換されても良い。たとえば、C1−アルカリルまたはC1−アルクヘテロシクリルのアルキレン基は、オキソ基でさらに置換され、それぞれおアリーロイルおよび(ヘテロシクリル)オイル置換基を放出しても良い。
本明細書で使用する「ヒドロキシ」という用語は、−OH基を表す。
学異性体(すなわち、(+)または(−))またはシス/トランス異性体)等)として存在しうることが認識される。本発明に従い、本明細書に描写される化学構造および、ゆえに本発明の化合物は、すべての対応する立体異性体を包含し、すなわち、立体異性的に純粋な形態(たとえば、幾何異性体的に純粋、光学異性体的に純粋、またはジアステレオマー的に純粋)、および光学異性体および立体異性体の混合物(たとえば、ラセミ体)の両方を包含する。本発明の化合物の光学異性体および立体異性体の混合物は、たとえばキラル相ガスクロマトグラフィー、キラル相高速液体クロマトグラフィー、キラル塩複合体としての化合物の結晶化、またはキラル溶媒中での化合物の結晶化等の公知の方法により、通常、光学異性体成分または立体異性体成分へと分解することができる。光学異性体および立体異性体はまた、公知の不斉合成方法により、立体異性的または光学異性体的に純粋な中間体、試薬および触媒から得ることができる。
本明細書で使用する「N−保護基」という用語は、合成手順の間、アミノ基を望ましくない反応から保護することを意図した基を表す。広く用いられているN−保護基は、Greene, “Protective Groups in Organic Synthesis,” 3rd Edition (John Wiley & Sons, New York, 1999)(参照により本明細書に援用される)に開示されている。N−保護基としては、アシル基、アリーロイル基またはカルバミル基(たとえば、ホルミル)、アセチル、プロピニル、ピバロイル、t−ブチルアセチル、2−クロロアセチル、2−ブロモアセチル、トリフルオロアセチル、トリクロロアセチル、フタリル、o−ニトロフェノキシアセチル、α−クロロブチリル、ベンゾイル、4−クロロベンゾイル、4−ブロモベンゾイル、4−ニトロベンゾイル、およびキラル補助基(たとえば、アラニン、ロイシン、フェニルアラニン等の保護もしくは非保護D、LまたはD、L−アミノ酸等);スルホニル含有基(たとえば、ベンゼンスルホニル、p−トルエンスルホニル等);カルバマート形成基(たとえば、ベンジルオキシカルボニル、p−クロロベンジルオキシカルボニル、p−メトキシベンジルオキシカルボニル、p−ニトロベンジルオキシカルボニル、2−ニトロベンジルオキシカルボニル、p−ブロモベンジルオキシカルボニル、3,4−ジメトキシベンジルオキシカルボニル、3,5−ジメトキシベンジルオキシカルボニル、2,4−ジメトキシベンジルオキシカルボニル、4−メトキシベンジルオキシカルボニル、2−ニトロ−4,5−ジメトキシベンジルオキシカルボニル、3,4,5−トリメトキシベンジルオキシカルボニル、1−(p−ビフェニルイル)−1−メチルエトキシカルボニル、α,α−ジメチル−3,5−ジメトキシベンジルオキシカルボニル、ベンズヒドリルオキシカルボニル、t−ブチルオキシカルボニル、ジイソプロピルメトキシカルボニル、イソプロピルオキシカルボニル、エトキシカルボニル、メトキシカルボニル、アリルオキシカルボニル、2,2,2−トリクロロエトキシカルボニル、フェノキシカルボニル、4−ニトロフェノキシカルボニル、フルオレニル−9−メトキシカルボニル、シクロペンチルオキシカルボニル、アダマンチルオキシカルボニル、シクロヘキシルオキシカルボニル、フェニルチオカルボニル等)、アルカリル基(たとえば、ベンジル、トリフェニルメチル、ベンジルオキシメチル等)およびシリル基(たとえば、トリメチルシリル等)が挙げられる。好ましいN−保護基は、ホルミル、アセチル、ベンゾイル、ピバロイル、t−ブチルアセチル、アラニル、フェニルスルホニル、ベンジル、t−ブチルオキシカルボニル(Boc)およびベンジルオキシカルボニル(Cbz)である。
本明細書で使用する「オキソ」という用語は、=Oを表す。
本明細書で使用する「ペルフルオロアルキル」という用語は、本明細書に定義されるアルキル基であって、アルキル基に結合された各水素ラジカルが、フッ化物ラジカルで置き換えられているアルキル基を表す。ペルフルオロアルキル基は、トリフルオロメチル、ペ
ンタフルオロエチル等に例示される。
本明細書で使用する「チオアルカリル」という用語は、化学式−SRの化学置換基を表し、Rは、アルカリル基である。いくつかの実施形態において、アルカリル基は、本明細書に記述されるように、1、2、3または4の置換基でさらに置換されても良い。
化合物:本明細書で使用する「化合物」という用語は、すべての立体異性体、幾何異性体、互変異性体および描写される構造の同位体を含むことが意図される。
アステレオマー等)が意図される。非対称で置換された炭素を含有する本開示の化合物は、光学的に活性な状態またはラセミ体で単離することができる。光学的に活性な開始材料から光学的に活性な型を調製する方法は、当分野で公知であり、たとえば、ラセミ混合物の分解または立体選択的合成などによるものがある。オレフィン、C=N二重結合等の多くの幾何異性体もまた、本開示の化合物中に含まれ、そのような安定な異性体はすべて、本開示で予期されるものである。本開示化合物のシスおよびトランス幾何異性体が記述され、異性体の混合物として単離または、分離異性型として単離されても良い。
保存された:本明細書で使用する「保存された」という用語は、ポリヌクレオチド配列またはポリペプチド配列のヌクレオチドまたはアミノ酸のそれぞれで、比較される2以上の配列の同じ位置で変化せずに存在するものである。相対的に保存されたヌクレオチドまたはアミノ酸とは、配列の他の場所に現れるヌクレオチドまたはアミノ酸よりも、多くの関連配列中で保存されているものである。
放出制御:本明細書で使用する「放出制御」とは、特定の放出パターンに従い、治療結果をもたらす医薬組成物または化合物の放出プロファイルを指す。
環状の、または環化:本明細書で使用する「環状の」という用語は、連続的なループの存
在を指す。環状分子は、ただ連結し、サブユニットの切れ目のない鎖を形成するものであり、必ずしも円形である必要は無い。たとえば本発明の操作されたRNAまたはmRNA等の環状分子は、単一ユニットもしくは多量体であっても良く、または1つ以上の成分の複合体または高次構造を含有しても良い。
細胞増殖抑制:本明細書で使用する「細胞増殖抑制」とは、細胞(たとえば、哺乳類細胞(たとえば、ヒト細胞))、細菌、ウイルス、真菌、原生動物、寄生虫、プリオンまたはそれらの組み合わせの増殖、分裂または繁殖を阻害、減少、抑制することを指す。
細胞毒性:本明細書で使用する「細胞毒性」とは、細胞(たとえば、哺乳類細胞(たとえば、ヒト細胞))、細菌、ウイルス、真菌、原生動物、寄生虫、プリオンまたはそれらの組み合わせに対する、殺傷効果もしくは有害作用、毒性効果もしくは死に至る作用を指す。
送達:本明細書で使用する「送達」とは、化合物、物質、実体、部分、カーゴ(積荷)、またはペイロードを送達させる作用または方法を指す。
送達剤:本明細書で使用する「送達剤」とは、修飾核酸またはmmRNAの標的細胞へのインビボ送達を、少なくとも部分的に促進する任意の物質を指す。
不安定化:本明細書で使用する「不安定な」「不安定にする」または「不安定化領域」という用語は、開始時、野生型または同じ領域もしくは分子の天然型よりも安定性に欠ける領域または分子を意味する。
検出可能標識:本明細書で使用する「検出可能標識」とは、当分野公知の方法(X線撮影、蛍光、化学発光、酵素活性、吸光等を含む)により容易に検出可能な、他の実体に付着される、組み込まれる、もしくは結合される、1以上のマーカー、シグナルまたは部分を指す。検出可能標識としては、放射性同位体、フルオロフォア、クロモフォア、酵素、色素、金属イオン、リガンド(たとえば、ビオチン、アビジン、ストレプトアビジンおよびハプテン等)、量子ドット等が挙げられる。検出可能標識は、本明細書に記述されるペプチドまたはタンパク質の任意の部位に位置しても良い。それらは、アミノ酸、ペプチドもしくはタンパク質内、または、N末端もしくはC末端に位置しても良い。
消化:本明細書で使用する「消化」という用語は、小さな小片または成分にバラバラに壊すことを意味する。ポリペプチドまたはタンパク質に関する場合、消化により、ペプチドがもたらされる。
遠位:本明細書で使用する「遠位」という用語は、対象の点または領域から離れた位置、または中心から離れた位置を意味する。
用量分割因子(DSF):総1日用量または単回単位用量のPUDで割られた、用量分割処置のPUDの比率。値は、投与レジメン群の比較から得られる。
封入:本明細書で使用する「封入」とは、囲包する、囲む、包み込むことを意味する。
操作された:本明細書において、本発明の実施態様が、開始時点、野生型もしくは天然型分子から変化した特性または性質(構造的または化学的のいずれでも)を有する様に設計される場合、それらは「操作されている」。
エキソソーム:本明細書で使用する「エキソソーム」は、哺乳類細胞から分泌される小胞である。
発現:本明細書において、核酸配列の「発現」とは、以下の事象の1つ以上を指す:(1)DNA配列からのRNA鋳型産生(たとえば、転写による);(2)RNA転写物のプロセッシング(たとえば、スプライシング、エディティング、5´キャップの形成および/または3´末端のプロセッシング等);(3)ポリペプチドまたはタンパク質へのRNAの翻訳;および(4)ポリペプチドまたはタンパク質の翻訳後修飾。
特性:本明細書で使用する「特性」とは、特徴、性質または独特の要素を指す。
製剤:本明細書で使用する「製剤」には、少なくとも修飾核酸またはmmRNAおよび送達剤が含まれる。
断片:本明細書で使用する「断片」とは、部分を指す。たとえば、タンパク質の断片には、培養細胞から単離された全長タンパク質の消化により得られたポリペプチドが含有されても良い。
機能的:本明細書で使用する「機能的」な生体分子は、それが特徴付けられる特性および/または活性を示す形態にある生体分子である。
相同性:本明細書で使用する「相同性」という用語は、高分子の間(たとえば、核酸分子(たとえば、DNA分子および/またはRNA分子)の間、および/または、ポリペプチド分子の間)の全体的な関連性を指す。いくつかの実施形態において、複数の高分子配列が少なくとも25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、95%、または99%同一または類似である場合、それらは互いに「相同性である」とみなされる。「相同性である」という用語は、必然的に、少なくとも2つの配列(ポリヌクレオチド配列またはポリペプチド配列)の間の比較を指す。本発明に基づくと、ポリヌクレオチドがコードするポリペプチドが、少なくとも約20アミノ酸の少なくとも1つの連続配列に対し、少なくとも約50%、60%、70%、80%、90%、95%またはさらに99%である場合、2つのポリヌクレオチド配列は、相同性であるとみなされる。いくつかの実施形態において、相同なポリヌクレオチド配列は、少なくとも4〜5の独自の特定アミノ酸の連続配列をコードする能力により特徴付けられる。60ヌクレオチド未満の長さのポリヌクレオチド配列に対しては、相同性は、少なくとも4〜5の独自の特定アミノ酸の連続配列をコードする能力により決定づけられる。本発明に基づくと、2つのタンパク質が少なくとも約20アミノ酸の少なくとも1つの連続配列に対して少なくとも約50%、60%、70%、80%または90%同一である場合、その2つのタンパク質配列は、相同であるとみなされる。
同一性:本明細書で使用する「同一性」という用語は、高分子の間(たとえば、オリゴヌクレオチド分子(たとえば、DNA分子および/またはRNA分子)の間、および/または、ポリペプチド分子の間)の全体的な関連性を指す。2つのポリヌクレオチド配列の同一性パーセントの算出は、たとえば、最適比較の目的で2つの配列を並べることにより行うことができる(最適並列のために、たとえば、ギャップを第一および第二の核酸配列のうちの1つまたは両方に導入することができ、非同一の配列は、比較対象に対し無視することができる)。ある実施態様において、比較目的のために並べられた配列の長さは、参照配列の長さの少なくとも30%、少なくとも40%、少なくとも50%、少なくとも60%、少なくとも70%、少なくとも80%、少なくとも90%、少なくとも95%または100%である。次いで、対応するヌクレオチドの位置でヌクレオチドが比較される。第一の配列の位置が、第二の配列の対応する位置と同じヌクレオチドで占められている場合、その分子はその位置で同一である。2つの配列の間の同一性パーセントは、配列により共有されている同一の位置数の関数であり、2つの配列の最適配列のために導入する必要のあった各ギャップの長さ、およびギャップの数を考慮している。配列の比較および2つの配列の間の同一性パーセントの決定は、数学アルゴリズムを用いて得ることができる。たとえば、2つのヌクレオチド配列の間の同一性パーセントは、たとえばComputational Molecular Biology, Lesk, A. M., ed., Oxford University Press, New York, 1988;Biocomputing: Informatics and Genome Projects, Smith, D. W., ed., Academic Press, New York, 1993;Sequence Analysis in Molecular Biology, von Heinje, G., Academic Press, 1987;Computer Analysis of Sequence Data, Part I, Griffin, A. M., and Griffin, H. G., eds., Humana Press, New Jersey, 1994;および、Sequence Analysis Primer, Gribskov, M. and Devereux, J., eds., M Stockton Press, New York, 1991(これらはそれぞれ参照により本明細書に援用される)に記述されている方法を用いて決定することができる。たとえば、2つのヌクレオチド配列の間の同一性パーセントは、PAM120残基重量表(weight residue table)、12のギャップ長ペナルテ
ィ(gap length penalty)および4のギャップペナルティを用いたALIGNプログラム(バージョン2.0)に組み込まれたMeyersとMillerのアルゴリズム(CABIOS, 1989, 4:11−17)を用いて決定することができる。あるいは、2つのヌクレオチド配列の間の同一性パーセントを、NWSgapdna.CMP matrixを用いたGCGソフトウェアパッケージのGAPプログラムを用いて決定することができる。配列間の同一性パーセントを決定するために普遍的に用いられている方法としては、Carillo, H., and Lipman, D., SIAM J Applied Math., 48:1073 (1988)(参照により本明細書に援用される)に開示されている方法が挙げられるが、これに限定されない。同一性決定の技術は、公的に利用可能なコンピュータープログラムにおいて体系化されている。2つの配列の間の相同性を決定するためのコンピューターソフトウェアの例としては、GCG program package, Devereux, J., et al., Nucleic Acids Research, 12(1), 387 (1984)、BLASTP、BLASTNおよび、FASTA Altschul, S. F. et al., J. Molec. Biol., 215, 403 (1990)が挙げられるが、これらに限定されない。
インビトロ:本明細書で使用する「インビトロ」という用語は、生物体(動物、植物、微生物)内ではなく、たとえば、試験管中または反応槽中、細胞培養中、ペトリ皿の中等、人工的な環境で発生する事象を指す。
インビボ:本明細書で使用する「インビボ」という用語は、生物体(たとえば、動物、植物もしくは微生物またはそれらの細胞もしくは組織)内で発生する事象を指す。
単離された:本明細書で使用する「単離された」という用語は、関連構成要素(天然または実験上の設定のいずれでも)の少なくとも一部から分離された物質または実体を指す。単離された物質は、それらが関連していた物質に対して、純度レベルが変化していてもよい。単離された物質および/または実体は、それらが当初関連していた他の構成要素の少なくとも約10%、約20%、約30%、約40%、約50%、約60%、約70%、約80%、約90%かそれ以上から分離されても良い。いくつかの実施形態において、単離された剤は、約80%、約85%、約90%、約91%、約92%、約93%、約94%、約95%、約96%、約97%、約98%、約99%、または約99%超の純度である。本明細書において、実質的に他の成分が無い場合、その物質は、「純粋」である。実質的に単離された:「実質的に単離された」とは、成分が、それが形成された、または検出された環境から実質的に分離されていることを意味する。部分的分離には、たとえば、本開示の化合物が富化された組成物を含むことができる。実質的な分離には、本開示の化合物、またはその塩を少なくとも約50重量%、少なくとも約60重量%、少なくとも約70重量%、少なくとも約80重量%、少なくとも約90重量%、少なくとも約95重量%、少なくとも約97重量%、少なくとも約99重量%含有する組成物を含むことができる。化合物およびその塩を単離する方法は当分野の日常的な作業である。
リンカー:本明細書において、リンカーは、たとえば10〜1,000原子の原子群を指し、原子または群(たとえば、限定されないが、炭素、アミノ、アルキルアミノ、酸素、硫黄、スルホキシド、スルホニル、カルボニルおよびイミン等)から構成されることができる。リンカーは、第一の末端で核酸塩基もしくは糖鎖部分上の修飾ヌクレオシドまたはヌクレオチドに付着することができ、第二の末端で検出可能な剤または治療剤等のペイロードに付着することができる。リンカーは、核酸配列への組み込みに干渉しないような長
さのものであってもよい。リンカーは、たとえばmmRNA多量体の形成(たとえば、2以上の修飾核酸分子またはmmRNA分子の結合を介する)、またはmmRNAの形成、ならびに本明細書に記述されるペイロードの投与等の任意の有用な目的のために用いられても良い。リンカーに組み込むことができる化学基の例としては、限定されないが、アルキル、アルケニル、アルキニル、アミド、アミノ、エーテル、チオエーテル、エステル、アルキレン、ヘテロアルキレン、アリールまたはヘテロシクリル(それらは各々、本明細書に記述されるように任意選択的に置換されることができる)が挙げられる。リンカーの例としては、限定されないが、不飽和アルカン類、ポリエチレングリコール類(たとえば、エチレンまたはプロピレングリコール単量体(たとえば、ジエチレングリコール、ジプロピレングリコール、トリエチレングリコール、トリプロピレングリコール、テトラエチレングリコール、またはテトラエチレングリコール等))、およびデキストランポリマー類ならびにそれらの誘導体が挙げられる。他の例としては、限定されないが、リンカー内の開裂可能な部分(たとえば、ジスルフィド結合(−S−S−)またはアゾ結合(−N=N−)(それらは、還元剤または光分解により開裂することができる))が挙げられる。選択的開裂可能な結合の非限定的な例示としては、たとえばトリス(2−カルボキシエチル)ホスフィン(TCEP)または他の還元剤および/もしくは光分解の使用により開裂することができるアミド結合、ならびに、たとえば酸性加水分解または塩基性加水分解により開裂することができるエステル結合が挙げられる。
マイクロRNA(miRNA)結合部位:本明細書において、マイクロRNA(miRNA)結合部位は、少なくともmiRNAの「シード」領域に結合する核酸転写物のヌクレオチド位置または領域を表す。
修飾された:本明細書で使用する「修飾された」とは、変化した本発明の分子構造または状態を指す。分子は、化学的、構造的および機能的を含む、様々な状態で修飾されうる。一実施態様において、本発明のmRNA分子は、非天然ヌクレオシドおよび/またはヌクレオチドの導入により修飾されている。
粘液:本明細書で使用する「粘液」とは、粘性で、ムチン糖タンパク質を含有する天然物質を指す。
天然の:本明細書で使用する「天然の」とは、人工的な補助無しに、自然に存在していることを意味する。
非ヒト脊椎動物:本明細書で使用する「非ヒト脊椎動物」には、ホモサピエンスを除くすべての脊椎動物が含まれる(野生種および家畜化された種も含まれる)。非ヒト脊椎動物の例としては、限定されないが、たとえば、アルパカ、バンテン、バイソン、ラクダ、ネコ、ウシ、シカ、イヌ、ロバ、ガヤル、ヤギ、モルモット、ウマ、リャマ、ラバ、ブタ、ウサギ、トナカイ、ヒツジ、水牛およびヤク等の哺乳類が挙げられる。
オフ−ターゲット:本明細書で使用する「オフ−ターゲット」とは、任意の1つ以上の標的、遺伝子、または細胞転写物に対する任意の意図されない効果を指す。
オープンリーディングフレーム:本明細書で使用する「オープンリーディングフレーム」または「ORF」とは、所与のリーディングフレーム中に、終止コドンを含まない配列を指す。
操作可能に結合された:本明細書で使用する「操作可能に結合された」という文言は、2以上の分子、構築物、転写物、実体、部分等の間の機能的な結合を指す。
パラトープ:本明細書で使用する「パラトープ」とは、抗体の抗原結合部位を指す。
患者:本明細書で使用する「患者」とは、治療を求める可能性のある対象、もしくは治療を必要とする可能性のある対象、治療を必要とする対象、治療を受けている対象、治療を受けるであろう対象、または特定の疾患または状態に対して訓練された専門家によるケアを受けている対象を指す。
ペプチド:本明細書で使用する「ペプチド」は、50の長さ以下のアミノ酸(たとえば、約5、10、15、20、25、30、35、40、45、または50の長さのアミノ酸)である。
薬剤的に許容可能な:「薬剤的に許容可能な」という文言は、本明細書において、妥当な
医学的判断の範囲内で、過剰な毒性、刺激、アレルギー反応または他の問題もしくは合併症を伴うことなく、合理的な利益/リスク比に見合った、ヒトおよび動物の組織に接触する使用に適した化合物、物質、組成物および/または剤型を指すために用いられる。
薬剤的に許容可能な賦形剤:本明細書で使用する「薬剤的に許容可能な賦形剤」とは、本明細書に記述される化合物以外の任意の構成要素(たとえば、活性化合物を懸濁または溶解することができる媒体)を指し、患者に実質的に非毒性および非炎症性である特性を有する。賦形剤としては、たとえば、抗接着剤、抗酸化剤、結合剤、コーティング剤、圧縮補助剤、崩壊剤、色素(染料)、皮膚軟化剤、乳化剤、増量剤(希釈剤)、塗膜形成剤またはコーティング剤、香味料、香料、流動促進剤(流量増強剤)、潤滑剤、保存料、印刷用インク、吸着剤、懸濁剤または溶解剤、甘味料および水和水を含めても良い。例となる賦形剤としては、限定されないが、ブチル化ヒドロキシトルエン(BHT)、炭酸カルシウム、リン酸カルシウム(二塩基)、ステアリン酸カルシウム、クロスカルメロース、架橋ポリビニルピロリドン、クエン酸、クロスポビドン、システイン、エチルセルロース、ゼラチン、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ラクトース、ステアリン酸マグネシウム、マルチトール、マンニトール、メチオニン、メチルセルロース、メチルパラベン、微晶質セルロース、ポリエチレングリコール、ポリビニルピロリドン、ポビドン、α化澱粉、プロピルパラベン、パルミチン酸レチニル、セラック、二酸化シリコン、カルボキシメチルセルロースナトリウム、クエン酸ナトリウム、デンプングリコール酸ナトリウム、ソルビトール、澱粉(トウモロコシ)、ステアリン酸、スクロース、滑石、二酸化チタニウム、ビタミンA、ビタミンE、ビタミンCおよびキシリトールが挙げられる。
薬剤的に許容可能な塩:本発明には、本明細書に開示される化合物の薬剤的に許容可能な塩もまた含まれる。本明細書で使用する「薬剤的に許容可能な塩」とは、本開示化合物の誘導体を指し、既存の酸または塩基部分が塩の形態に転換されることにより(たとえば、遊離塩基と適切な有機酸を反応させることにより)、元の化合物が修飾されている。薬剤的に許容可能な塩としては、限定されないが、アミン等の塩基性残基の鉱酸塩または有機酸塩、カルボン酸等の酸性残基のアルカリ塩または有機塩等が例示される。代表的な酸付加塩としては、酢酸塩、アジピン酸塩、アルギン酸塩、アスコルビン酸塩、アスパラギン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、安息香酸塩、重硫酸塩、ホウ酸塩、酪酸塩、樟脳酸塩、樟脳スルホン酸塩、クエン酸塩、シクロペンタンプロピオン酸塩、ジグルコン酸塩、ドデシル硫酸塩、エタンスルホン酸塩、フマル酸塩、グルコヘプトン酸塩、グリセロリン酸塩、ヘミ硫酸塩、ヘプトネート、ヘキサノエート、臭化水素酸塩、塩酸塩、ヨウ化水素酸塩、2−ヒドロキシ−エタンスルホン酸塩、ラクトビオン酸塩、乳酸塩、ラウリン酸塩、ラウリル硫酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、マロン酸塩、メタンスルホン酸塩、2−ナフタレンスルホン酸塩、ニコチン酸塩、硝酸塩、オレイン酸塩、シュウ酸塩、パルミチン酸塩、パモ酸塩、ペクチン酸塩、過硫酸塩、3−フェニルプロピオン酸塩、リン酸塩、ピクリン酸塩、ピバル酸塩、プロピオン酸塩、ステアリン酸塩、コハク酸塩、硫酸塩、酒石酸塩、チオシアン酸塩、トルエンスルホン酸塩、ウンデカノエート、吉草酸塩等が挙げられる。代表的なアルカリ塩またはアルカリ土類金属塩としては、ナトリウム、リチウム、カリウム、カルシウム、マグネシウム等、ならびに、非毒性のアンモニウム、4級アンモニウムおよびアミンカチオン(限定されないが、アンモニウム、テトラメチルアンモニウム、テトラエチルアンモニウム、メチルアミン、ジメチルアミン、トリメチルアミン、トリエチルアミン、エチルアミン等が挙げられる)が挙げられる。本開示の薬剤的に許容可能な塩としては、たとえば、非毒性の無機酸または有機酸から形成された、元の化合物の従来的な非毒性塩が挙げられる。本開示の薬剤的に許容可能な塩は、従来的な化学法により、塩基性部分または酸性部分を含有する元の化合物から合成することができる。一般的に、そのような塩は、これらの化合物の遊離酸型または遊離塩基型と、水もしくは有機溶媒またはその2つの混合物(通常、エーテル、酢酸エチル、エタノール、イソプロパノール、またはアセトニトリル等の非水性溶媒が好ましい)に溶解した適切な塩基または酸の化学量論量とを反応させることにより調製することができる。適切な塩のリストは、Remi
ngton’s Pharmaceutical Sciences, 17th ed., Mack Publishing Company, Easton, Pa.,
1985, p. 1418, Pharmaceutical Salts: Properties, Selection, and Use, P.H. Stahl
and C.G. Wermuth (eds.), Wiley−VCH, 2008、および、Berge et al., Journal of Pharmaceutical Science, 66, 1−19 (1977)に記載されている(これらの各々は、参照によりその全体が本明細書に援用される)。
薬剤的に許容可能な溶媒和物:本明細書で使用する「薬剤的に許容可能な溶媒和物」という用語は、適切な溶媒分子が結晶格子中に組み込まれている本発明の化合物を意味する。適切な溶媒は、投与される用量で生理学的に耐容できるものである。たとえば、溶媒和物は、結晶化、再結晶化、または、有機溶媒、水もしくはそれらの混合物を含む溶液からの沈殿により調製されてもよい。適切な溶媒の例としては、エタノール、水(たとえば、モノ−、ジ−、およびトリ−水和物)、N−メチルピロリドン(NMP)、ジメチルスルホキシド(DMSO)、N,N´−ジメチルホルムアミド(DMF)、N,N´−ジメチルアセトアミド(DMAC)、1,3−ジメチル−2−イミダゾリジノン(DMEU)、1,3−ジメチル−3,4,5,6−テトラヒドロ−2−(1H)−ピリミジノン(DMPU)、アセトニトリル(ACN)、プロピレングリコール、酢酸エチル、ベンジルアルコール、2−ピロリドン、安息香酸ベンジル等が挙げられる。水が溶媒の場合、溶媒和物は、「水和物」と呼称される。
薬物動態:本明細書で使用する「薬物動態」とは、生物体へと投与された物質の運命の決定に関連する、分子または化合物の任意の1つ以上の特性を指す。薬物動態は、吸収、分布、代謝および排出の比率および程度を含む、数種の領域に分けられる。これは通常、ADMEと呼ばれており、(A)吸収は、血液循環に入る物質のプロセスである;(D)分布は、身体の組織および体液を巡る物質の分散または伝達である;(M)代謝(または、生体内変化)は、親となる化合物の、娘の化合物への不可逆的な変化である;(E)排出(または除去)は、身体からの物質の除去、を指す。稀なケースとして、一部の薬物は、身体組織中に不可逆的に蓄積する。
薬理作用:本明細書で使用する「薬理作用」は、外因的な物質に生命体またはシステムが接触または曝された後に発生する、生命体またはシステムの中の、計測可能な生物学的な現象である。薬理作用は、たとえば、治療、1つ以上の症状の改善、診断、予防、および疾患、障害、疾病もしくは感染の発生の遅延等の、治療上有効な結果をもたらすものであっても良い。そのような生物学的な現象の測定は、定量的、定性的、または他の生物学的現象と相対的なものであってもよい。定量的測定は、統計的に有意なものであっても良い。定量的な測定は、程度または種類によるものであっても良く、少なくとも、10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%またはそれ以上の差であっても良い。それらは存在または非存在、より良いまたはより悪い、多いまたは少ない、として観察可能なものであっても良い。薬理作用に言及する場合の外因的な物質とは、生命体またはシステムに対して、全体的または部分的のいずれでも、異物である物質である。たとえば、野生型の生体分子に対する修飾は、構造的なものであれ化学的なものであれ、外因的な物質を生み出すであろう。同様に、天然には生命体またはシステム中に見出されない化合物、分子または物質中への野生型分子への組み込み(もしくは野生型分子との組み合わせ)もまた、外因的な物質を生み出すであろう。本発明の修飾mRNAは、外因的な物質を含有する。薬理作用の例としては、限定されないが、好中球、網状赤血球、顆粒球、赤血球(赤色血液細胞)、巨核球、血小板、単球、結合組織マクロファージ、表皮ランゲルハンス細胞、破骨細胞、樹状細胞、ミクログリア細胞、好中球、好酸球、好塩基球、肥満細胞、ヘルパーT細胞、サプレッサーT細胞、細胞傷害性T細胞、ナチュラルキラーT細胞、B細胞、ナチュラルキラー細胞もしくは網状赤血球の増加または減少等の、細胞数の変化が挙げられる。薬理作用には、血液化学所見、pH、ヘモグロビン、ヘマトクリット、酵素(たとえば、限定されないが肝臓酵素のASTおよびALT)のレベル
の変化、脂質プロファイルの変化、電解質、代謝マーカー、ホルモンまたは、当業者に公知の他のマーカーもしくはプロファイルにおける変化も含まれる。
物理化学:本明細書で使用する「物理化学」は、物理的な、および/または化学的な特性に関連すること、またはそのような特性を意味する。
予防:本明細書で使用する「予防」という用語は、感染、疾病、障害および/または疾患の発生の部分的または完全な遅延;特定の感染、疾病、および/または疾患の1つ以上の兆候、特性または臨床症状の発生の部分的または完全な遅延;特定の感染、疾病、障害および/もしくは疾患の1つ以上の兆候、特性または症状の発生の部分的または完全な遅延;ならびに/または、感染、疾病、障害および/もしくは疾患に関連した症状発生リスクの減少を指す。
プロドラッグ:本開示には、本明細書に記述される化合物のプロドラッグもまた含まれる。本明細書で使用する「プロドラッグ」とは、化学的または物理的変化により治療剤として振る舞う物質、分子または実体の基礎となる形態にある任意の物質、分子または実体を指す。プロドラッグは、何らかの方法で共有結合または隔離されていても良く、および哺乳類対象への投与の前に、投与により、または投与の後に、活性薬剤部分を放出、または活性薬剤部分へと変化するものであってもよい。プロドラッグは、化合物中に存在する官能基を修飾することにより調製されても良く、その修飾物は、日常的な操作またはインビボのいずれかで、元の化合物へと開裂される。プロドラッグには、ヒドロキシル基、アミノ基、スルフヒドリル基またはカルボキシル基が、哺乳類対象に投与された際に、それぞれ遊離ヒドロキシル基、遊離アミノ基、遊離スルフヒドリル基または遊離カルボキシル基を形成するように開裂する任意の基に結合している化合物が含まれる。プロドラッグの調製および使用については、T. Higuchi and V. Stella, “Pro−drugs as Novel Delivery Systems,” Vol. 14 of the A.C.S. Symposium Series、および、Bioreversible Carriers in Drug Design, ed. Edward B. Roche, American Pharmaceutical Association and Pergamon Press, 1987(それら両方とも、参照により、その全体で本明細書に援用される)において考察がなされている。
増殖:本明細書で使用する「増殖」という用語は、速やかに成長、拡大もしくは増加する、または、成長、拡大もしくは増加をもたらすことを意味する。「増殖性」とは、増殖することが出来る能力を有することを意味する。「抗増殖性」とは、増殖特性とは逆または、増殖特性とは適合しない特性を有することを意味する。
対象のタンパク質:本明細書で使用する「対象のタンパク質」または「所望のタンパク質」という用語には、本明細書に提示されるもの、ならびに、それらの断片、変異体、突然変異体および変化物が含まれる。
隣接:本明細書で使用する「隣接」という用語は、対象の点または領域に対して、または対象の中心に対してより近い場所に位置づくことを意味する。
シュードウリジン:本明細書において、シュードウリジンは、ウリジンヌクレオシドのC−グリコシド異性体を指す。「シュードウリジンアナログ」は、シュードウリジンの任意の修飾体、変異体、異性体または誘導体である。たとえば、シュードウリジンアナログには、限定されないが、1−カルボキシメチル−シュードウリジン、1−プロピニル−シュードウリジン、1−タウリノメチル−シュードウリジン、1−タウリノメチル−4−チオ−シュードウリジン、1−メチル−シュードウリジン(m1Ψ)、1−メチル−4−チオ−シュードウリジン(m1s4Ψ)、4−チオ−1−メチル−シュードウリジン、3−メチル−シュードウリジン(m3Ψ)、2−チオ−1−メチル−シュードウリジン、1−メチル−1−デアザ−シュードウリジン、2−チオ−1−メチル−1−デアザ−シュードウリジン、ジヒドロシュードウリジン、2−チオ−ジヒドロシュードウリジン、2−メトキシウリジン、2−メトキシ−4−チオ−ウリジン、4−メトキシ−シュードウリジン、4−メトキシ−2−チオ−シュードウリジン、N1−メチル−シュードウリジン、1−メチ
ル−3−(3−アミノ−3−カルボキシプロピル)シュードウリジン(acp3Ψ)、および2´−O−メチル−シュードウリジン(Ψm)が含まれる。
精製された:本明細書で使用する「精製する」、「精製された」、「精製」は、不用な構成要素、汚染物質、混合物または欠陥物から実質的に純粋にする、またはそれらを清浄化することを意味する。
試料:本明細書で使用する「試料」または「生物学的試料」という用語は、その組織、細胞または構成成分(たとえば、限定されないが、血液、粘液、リンパ液、滑液、脳脊髄液、唾液、羊水、臍帯血、尿、膣液、および精液を含む体液等)のサブセットを指す。試料はさらに、生命体全体、またはその組織、細胞もしくは構成成分、またはその分画もしくは部分(限定されないが、たとえば、血漿、血清、髄液、ならびに、リンパ液、皮膚、呼吸器、腸管および尿生殖器の外部断片、涙、唾液、乳、血液細胞、腫瘍、器官等を含む)から調製された、ホモジネート、溶解物または抽出物を含んでも良い。さらに、試料は、たとえば栄養成分を含む培養液(broth)またはゲル(たとえばタンパク質または核酸等の細胞成分を含有しても良い)等の培地を指す。
シグナル配列:本明細書で使用する「シグナル配列」という文言は、タンパク質の運搬または局在性を指示することができる配列を指す。
単回単位用量:本明細書で使用する「単回単位用量」という語は、1用量/1回/単一経路/単一接点(すなわち単一の投与事象)において投与される治療剤の用量を指す。
類似性:本明細書で使用する「類似性」という用語は、高分子の間(たとえば、ポリヌクレオチド分子(たとえば、DNA分子および/またはRNA分子)の間、および/または、ポリペプチド分子の間)の全体的な関連性を指す。高分子の、他の高分子に対する類似性パーセントの算出は、同一性パーセントの算出と同じような方法で行うことができる(当分野で理解される、保存的置換を考慮する類似性パーセントの算出は除く)。
分割用量:本明細書で使用する「分割用量」という語は、単回単位用量または総1日用量を2回以上の用量に分割することを指す
安定:本明細書で使用する「安定」とは、有用な程度の純度までの、反応混合物からの単離の間、存在し続けるのに十分に頑健である化合物、および、好ましくは有効な治療剤へと製剤化することができる化合物を指す。
安定化した:本明細書で使用する「安定化する」、「安定化した」、「安定化領域」という用語は、安定にする、または安定になることを意味する。
対象:本明細書で使用する「対象」または「患者」という用語は、たとえば実験目的で、診断目的で、予防目的で、および/または治療目的で、本発明に従う組成物が投与されうる任意の生物体を指す。典型的な対象としては、動物(たとえば、マウス、ラット、ウサギ、非ヒト霊長類およびヒト等)および/または植物が挙げられる。
実質的に:本明細書で使用する「実質的に」という用語は、対象の特徴または特性を、全てもしくはほぼ全ての程度または範囲で示す定性的な状態を指す。生物学分野の当業者であれば、生物学的現象および化学的現象は、あったとしても、めったに完了までいかない、および/または、完了もしくは達成にまでは進展しない、または、完全な結果を回避することを理解するであろう。それゆえ、「実質的に」という用語は、本明細書において、多くの生物学的現象および化学的現象において、本来的に、完全性が欠落している可能性を捉えるために用いられる。
実質的に同等:本明細書においては、投与の間の時間差に関しており、この用語は、+/− 2%を意味する。
実質的に等しい:本明細書において、複数回投与に関連しており、この用語は2秒以内を意味する。
罹患している:疾病、障害および/または疾患に「罹患」している個々人は、疾病、障害および/または疾患の1つ以上の兆候を示しているか、またはそれにより診断される。
罹患しやすい:疾病、障害および/または疾患に対して「罹患しやすい」個々人は、疾病、障害および/または疾患の兆候を示していない、および/または、それで診断されていないが、疾患またはその兆候を発現する傾向を有している。いくつかの実施形態において
、疾病、障害および/または疾患(たとえば、癌)に罹患しやすい個々人は、以下の1つ以上で特徴づけられてもよい:(1)疾病、障害および/または疾患の発現に関連した遺伝的変異;(2)疾病、障害および/または疾患の発現に関連した遺伝的ポリモルフィズム;(3)疾病、障害および/または疾患の発現に関連した、タンパク質および/もしくは核酸の発現ならびに/または活性の増加ならびに/または減少;(4)疾病、障害および/または疾患の発現に関連したライフスタイルおよび/または習慣;(5)疾病、障害および/または疾患の家族歴;(6)疾病、障害および/または疾患の発現に関連した微生物への露出および/または感染。いくつかの実施形態において、疾病、障害および/または疾患に罹患しやすい個々人は、疾病、障害および/または疾患を発症する。いくつかの実施形態において、疾病、障害および/または疾患に罹患しやすい個々人は、疾病、障害および/または疾患を発症しない。
徐放:本明細書で使用する「徐放」という用語は、特定の期間にわたる放出率に従う医薬組成物または化合物の放出プロファイルを指す。
合成:本明細書で使用する「合成」という用語は、ヒトの手により生産、調整および/または製造されたことを意味する。本発明のポリヌクレオチドまたはポリペプチドまたは他の分子の合成は、化学的または酵素的であっても良い。
標的細胞:本明細書で使用する「標的細胞」とは、対象の1つ以上の任意の細胞を指す。細胞は、インビトロ、インビボ、インサイツまたは生命体の組織または器官中で見いだされても良い。生命体は、動物であっても良く、好ましくは哺乳類、より好ましくはヒト、最も好ましくは患者であってもよい。
治療剤:「治療剤」という用語は、対象に投与された際に、治療的効果、診断的効果および/もしくは予防的効果を有する任意の剤、ならびに/または、望ましい生物学的作用および/もしくは薬理学的作用を引き起こす任意の剤を指す。
治療有効量:本明細書で使用する「治療有効量」という用語は、疾病、障害および/または疾患に罹患した、または罹患しやすい対象に投与された際に、疾病、障害および/もしくは疾患の症状を、治療ならびに/または改善する、ならびに/または、疾病、障害および/もしくは疾患の発現を診断する、予防する、ならびに/または遅延させるために十分である、送達される剤(たとえば、核酸、薬剤、治療剤、診断剤、予防剤等)の量を意味する。
治療上有効な結果:本明細書で使用する「治療上有効な結果」は、疾病、障害および/または疾患に罹患している、または罹患しやすい対象において、疾病、障害および/もしく疾患の症状を、治療ならびに/または改善する、ならびに/または、疾病、障害および/もしくは疾患の発現を診断する、予防する、ならびに/または遅延させるために十分である結果を意味する。
総1日用量:本明細書で使用する「総1日用量」という語は、24時間の期間に投与または処方される量を指す。総1日用量を単回単位用量として投与してよい。
転写因子:本明細書で使用する「転写因子」という用語は、たとえば転写の活性化または抑制によって、DNAのRNAへの転写を制御するDNA結合タンパク質を指す。一部の転写因子は、単独で転写制御に作用する一方で、他は、他のタンパク質と協調して作用する。一部の転写因子は、ある条件下で、転写活性化または転写抑制の両方を行うことができる。通常、転写因子は、標的遺伝子の制御領域中の特定のコンセンサス配列に高度に類似した配列、または特定の標的配列に結合する。転写因子は、単独で、または他の分子と複合体化して、標的遺伝子の転写を制御してもよい。
治療:本明細書で使用する「治療」という用語は、完全にまたは部分的に、特定の感染、疾病、障害および/または疾患の1つ以上の症状または特性の発生を減少させること、それらの重篤度を減少させること、それらの進行を阻害すること、ならびに/または、それらの発現を緩和、改善、好転、軽減および/もしくは遅延させること、を指す。たとえば、癌の「治療」は、腫瘍の存続、増殖および/または核酸を阻害することを指し得る。治療は、疾病、障害および/または疾患と関連した病理の発現リスクを減少させる目的で、疾病、障害および/または疾患の兆候を示していない対象に投与されてもよく、および/
または、疾病、障害および/もしくは疾患の早期兆候のみを示している対象に投与されてもよい。
非修飾:本明細書で使用する「非修飾」とは、形はどうあれ、変化する前の任意の物質、化合物または分子を指す。常にではないが、非修飾とは、野生型または天然型の生体分子を指す。分子は、一連の修飾を受けるかもしれず、それによって、各修飾分子は、次なる修飾のための「非修飾」開始分子として供される可能性もある。
均等および範囲
当業者であれば、日常的な実験を超えることなく、本明細書に記述される本発明に従う特定の実施態様に対する多くの均等物を認識または確認するであろう。本発明の範囲は、上記の記述に限定される意図は無く、添付のクレームに明記される。
範囲が与えられる場合、端点が含まれる。さらに、他で示されるか、または文脈および当業者の理解から明らかでない限り、範囲として表される値は、任意の特定の値または、本発明の異なる実施態様で述べられた範囲内の副次的な値を、文脈上、他で明確に規定されない限り、範囲の低限の単位の10分の1まで取ることが可能である。
実施例1.修飾mRNAの産生
本発明に従う修飾mRNA(mmRNA)は、標準的な実験法および材料を用いて作製されてもよい。対象遺伝子のオープンリーディングフレーム(ORF)は、強力なKozak翻訳開始シグナルを含有しうる5´非翻訳領域(UTR)に隣接していてもよく、お
よび/または、ポリAテールの鋳型付加のためのoligo(dT)配列を含み得るα−グロビン3´UTRに隣接していてもよい。修飾mRNAは、細胞性自然免疫反応を減少させるために修飾されていても良い。細胞性応答を減少させるための修飾には、シュードウリジン(Ψ)および5−メチル−シチジン(5meCまたはm5C)を含んでも良い(Kariko K et al. Immunity 23:165−75 (2005)、Kariko K et al. Mol Ther 16:1833−40 (2008)、Anderson BR et al. NAR (2010)(それらは各々、参照により本明細書にその全体で援用される)を参照のこと)。
Park,CA)等の最適化サービスに発注しても良く、および、XbaI認識を有するマルチプルクローニングサイトを含有しても良い。プラスミドDNAを受け取ると、再構成され、化学的にコンピテントな大腸菌へと形質転換されうる。
1.氷上で10分間、NEB 5−α コンピテント大腸菌のチューブを溶かす。
2.1pg〜100ngのプラスミドDNAを含有する1〜5μlを、細胞混合物に添加する。注意深くチューブを4〜5回弾き、細胞とDNAを混合する。ボルテックスを行ってはいけない。
3.混合物を氷上に30分間静置する。混合してはいけない。
4.正確に30秒間、42℃でヒートショックを与える。混合してはいけない。
5.氷上に5分間、静置する。混合してはいけない。
6.950μlの室温のSOCをピペットで取り、混合物に入れる。
7.60分間、37℃で静置する。強く揺する(250rpm)か、回転させる。
8.選択プレートを37℃まで温める。
9.チューブを弾き、転倒混和することで完全に細胞を混合する。
製は、より大きな負荷容量を有する、たとえばInvitrogenの標準PURELINK(登録商標) PCR Kit(カリフォルニア州カールスバッド)等の製品で行う必要がある可能性がある。クリーンアップの後、直線化したベクターは、NanoDropを用いて定量し、アガロースゲル電気泳動を用いて直線化を分析して確認する。
cDNA調製のためのPCR手順は、Kapa Biosystems(マサチューセッツ州ウォーバーン)の2×KAPA HIFI(登録商標)HotStart ReadyMixを用いて行う。このシステムには、2×KAPA ReadyMixは12.5μl;フォワードプライマー(10uM)は0.75μl;リバースプライマー(10uM)は0.75μl;鋳型cDNAは100ng、含まれ、dH20で25.0μlに希釈される。反応条件は、95℃で5分、および98℃で20秒、次いで58℃で15秒、次いで72℃で45秒を25サイクル、そして72℃で5分、そして4℃で終了である
。
Kit(カリフォルニア州カールスバッド)(5μgまで)を、メーカーの説明書に従い用いて、クリーンアップする。より多量の反応物には、より大きな容量の製品を用いてクリーンアップする必要がある。クリーンアップの後、cDNAを、NANODROP(登録商標)を用いて定量し、アガロースゲル電気泳動で分析して、cDNAが予測サイズであることを確認する。次いで、インビトロの転写反応へと進む前に、cDNAの配列解析を行う。
実施例3.インビトロ転写
インビトロ転写反応により、修飾ヌクレオチドまたは修飾RNAを含有するmRNAが生成される。入力ヌクレオチド三リン酸(NTP)ミックスを、天然NTPおよび非天然NTPを用いて組織内で作製する。
1.鋳型cDNA 1.0 μg
2.10×転写緩衝液 (400mM Tris−HCl pH8.0、190mM MgCl2、50mM DTT、10mMスペルミジン) 2.0μl
3.カスタムNTP(各々25mM) 7.2μl
4.RNase阻害剤 20U
5.T7 RNAポリメラーゼ 3000U
6.dH20 最大20.0μl。そして、
7.37℃で3〜5時間インキュベーション。
mRNAのキャッピングは、以下のように実施する:混合物には以下を含む:IVT RNA60〜180μgおよびdH2Oで72μlまで。混合物を、65℃で5分間インキュベートし、RNAを変性させ、次いで、直ちに氷へと移す。
州オースティン)を用いてメーカーの説明書に従い精製する。クリーンアップの後、RNAを、NANODROP(登録商標)(ThermoFisher、マサチューセッツ州ウォルサム)を用いて定量し、アガロースゲル電気泳動により分析して、RNAが適正なサイズであり、RNAの分解が発生していないことを確認する。RNA産物はまた、逆転写PCRを実行し、配列解析のためのcDNAを生成することにより、配列解析されてもよい。
実施例5.ポリAテール反応
cDNAにはpoly−Tが無いので、最終産物精製の前にポリAテール反応を必ず実施しなければならない。これは、キャップ化IVT RNA(100μl);RNase阻害剤(20U);10×Tailing緩衝液(0.5M Tris−HCl(pH 8.0)、2.5M NaCl、100mM MgCl2)(12.0μl);20mM
ATP(6.0μl);ポリAポリメラーゼ(20U)を混合し、dH20で123.5μlまで、37℃で30分間インキュベートすることにより行う。もしポリAテールがすでに転写物にある場合、tail反応は飛ばして、直接、AmbionのMEGACLEAR(登録商標)キット(テキサス州オースティン)(500μgまで)での精製へと進んでも良い。ポリAポリメラーゼは、酵母で発現された組換え酵素が好ましい。
実施例6.天然5´キャップおよび5´キャップ類似体
修飾RNAの5´キャッピングは、5´−グアノシンキャップを生成するための以下の化学的RNAキャップ類似体をメーカーのプロトコールに従い用いて、インビトロ転写反応の間に同時に完了させても良い:3´−O−Me−m7G(5’)ppp(5’)G[ARCAキャップ];G(5’)ppp(5’)A;G(5’)ppp(5’)G;m7G(5’)ppp(5’)A;m7G(5’)ppp(5’)G(New England BioLabs、マサチューセッツ州イプスウィッチ)。修飾RNAの5´−キャッピングは、「キャップ0」構造:m7G(5’)ppp(5’)G(New England BioLabs、マサチューセッツ州イプスウィッチ)を生成するためのワクシニアウイルスキャッピング酵素を用いて、転写の後で完了させても良い。キャップ1構造は、ワクシニアウイルスキャッピング酵素および、m7G(5’)ppp(5’)G−2′−O−メチルを生成するための2´−Oメチルトランスフェラーゼの両方を用いて生成しても良い。キャップ2構造は、2´−O−メチルトランスフェラーゼを用いた5´−終わりから3番目のヌクレオチドの2´−O−メチル化により、キャップ1構造から生成されてもよい。キャップ3構造は、2´−Oメチルトランスフェラーゼを用いた5´−終わりから4番目のヌクレオチドの2´−O−メチル化により、キャップ2構造から生成されても良い。酵素は、組換え物質由来のものが好ましい。
実施例7.キャッピング
A.タンパク質発現アッセイ
ARCA(3´O−Me−m7G(5’)ppp(5’)G)キャップ類似体またはキャップ1構造を含有するヒトG−CSF(配列番号5に示されるcDNA;およそ160ヌクレオチドの長さのポリAテール(配列は示さず)を有する、各シトシンで5−メチルシトシンに完全に修飾、および各ウリジン部位でのシュードウリジン置換で完全に修飾さ
れたmRNA配列を配列番号6に示す)をコードする合成mRNAは、等濃度で、ヒト初代角化細胞へとトランスフェクションすることができる。トランスフェクション後、6、12、24、36時間で、培養培地中に分泌されるG−CSFの量を、ELISAで分析することができる。培地中に高レベルのG−CSFを分泌する合成mRNAは、高度に翻訳的に有能なキャップ構造を有する合成mRNAに対応する。
ARCAキャップ類似体またはキャップ1構造粗合成産物を含有する、ヒトG−CSF(配列番号5に示されるcDNA;およそ160ヌクレオチドの長さのポリAテール(配列は示さず)を有する、各シトシンで5−メチルシトシンに完全に修飾、および各ウリジン部位でのシュードウリジン置換で完全に修飾されたmRNA配列を配列番号6に示す)をコードする合成mRNAは、変性アガロース−尿素ゲル電気泳動またはHPLC分析を用いて、純度を比較することができる。電気泳動で、単一の、確固としたバンドを有する合成mRNAは、複数のバンドまたは縞状のバンドを有する合成mRNAと比較して、高純度の産物に対応する。単一のHPLCピークを有する合成mRNAもまた、高純度の産物に対応する。高効率でのキャッピング反応により、より純粋なmRNA群がもたらされる。
ARCAキャップ類似体またはキャップ1構造を含有する、ヒトG−CSF(配列番号5に示されるcDNA;およそ160ヌクレオチドの長さのポリAテール(配列は示さず)を有する、各シトシンで5−メチルシトシンに完全に修飾、および各ウリジン部位でのシュードウリジン置換で完全に修飾されたmRNA配列を配列番号6に示す)をコードする合成mRNAは、複数の濃度で、ヒト初代角化細胞へとトランスフェクションすることができる。トランスフェクション後、6、12、24、36時間で、たとえばTNFαおよびIFNβ等の培養培地中へと分泌された炎症性サイトカインの量を、ELISAにより分析することができる。培地中へ高レベルの炎症性サイトカインを分泌する合成mRNAは、免疫活性化キャップ構造を含有する合成mRNAに対応する。
ARCAキャップ類似体またはキャップ1構造を含有する、ヒトG−CSF(配列番号5に示されるcDNA;およそ160ヌクレオチドの長さのポリAテール(配列は示さず)を有する、各シトシンで5−メチルシトシンに完全に修飾、および各ウリジン部位でのシュードウリジン置換で完全に修飾されたmRNA配列を配列番号6に示す)をコードする合成mRNAは、キャップ化mRNAヌクレアーゼ処置の後、LC−MSによりキャッピング反応効率を分析することができる。キャップ化mRNAのヌクレアーゼ処理により、LC−MSで検出可能な、遊離ヌクレオチド、そしてキャップ化5´−5−三リン酸キャップ構造の混合物が得られる。LC−MSスペクトル上で、キャップ化産物の量は、反応物由来の総mRNAのパーセントとして表され、キャッピング反応効率に対応する。高いキャッピング反応効率を伴うキャップ構造は、LC−MSによるキャップ化産物をより多量に有する。
実施例8.修飾RNAまたはRT PCR産物のアガロースゲル電気泳動
個々の修飾RNA(20μl体積中で、200〜400ng)または逆転写PCR産物(200〜400ng)を、非変性1.2%アガロースE−ゲル(Invitrogen、カリフォルニア州カールスバッド)上のウェル内にロードし、メーカーのプロトコールに従い、12〜15分間、泳動する。
実施例9.リピドイド(Lipidoids)を用いた修飾mRNAの製剤化
修飾mRNA(mmRNA)は、細胞に添加する前に、規定の比率でリピドイドとmmRNAを混合することにより、インビトロ実験に対して製剤化される。インビボの製剤は、身体中の循環を促進するための、追加成分の添加を必要し得る。これらのリピドイドの
インビボでの作用に適した粒子形成の能力を検証するために、siRNAリピドイドに用いられる標準処方プロセスを、開始点として用いた。当初のmmRNA−リピドイドの製剤は、42%リピドイド、48%コレステロールおよび10%PEGから構成される粒子からなり得、可能性のある比率の最適化をさらに行っても良い。粒子の形成の後、mmRNAを添加し、複合体と結合させる。封入効率は、標準的な色素排除アッセイを用いて測定する。
実施例10〜14の材料と方法
A.脂質合成
6つの脂質(DLin−DMA、DLin−K−DMA、DLin−KC2−DMA、98N12−5、C12−200およびDLin−MC3−DMA)が、修飾RNAとの製剤化のために、当分野で概説される方法により合成された。DLin−DMAおよび前駆体は、Heyes et. al, J. Control Release, 2005, 107, 276−287に記述されるように合成した。DLin−K−DMAおよびDLin−KC2−DMAおよび前駆体は、Semple et. al, Nature Biotechnology, 2010, 28, 172−176.に記述されるように合成され、98N12−5および前駆体は、Akinc et. al,
Nature Biotechnology, 2008, 26, 561−569に記述されるように合成した。
107, 1864−1869に概説される方法に従い合成した。2−エポキシドデカン(5.10g、27.7mmol、8.2eq)を、Amine200(0.723g、3.36 mmol、1eq)および攪拌棒を含有するバイアルに添加した。バイアルを密封し、80℃まで加熱した。反応物を、80℃で4日間、攪拌した。次いで、混合物を、純粋ジクロロメタン(DCM)〜DCM:MeOH 98:2の勾配を用いたシリカゲルクロマトグラフィーにより精製した。標的化合物を、RP−HPLCでさらに精製し、所望の化合物を得た。
合成脂質、1,2−ジステアロイル−3−ホスファチジルコリン(DSPC)(Avanti Polar Lipids、アラバマ州アラバスター)、コレステロール(Sigma−Aldrich、ドイツ、タウフカーシェン)、およびα−[3’−(1,2−ジミリストイル−3−プロパノキシ)−カルボキサミド−プロピル]−ω−メトキシ−ポリオキシエチレン(PEG−c−DOMG)(NOF、ベルギー、Bouwelven)の溶液を、エタノール中で、50mMの濃度で調製し、−20℃で保存した。脂質を、モル比が50:10:38.5:1.5(脂質:DSPC:コレステロール:PEG−c−DOMG)となるように組み合わせて、エタノールで最終脂質濃度25mMまで希釈した。水に溶解した1〜2mg/mL濃度の修飾mRNAの溶液を、50mMのクエン酸ナトリウム緩衝液(pH3)で希釈し、修飾mRNA原溶液を形成した。脂質および修飾mR
NAの製剤は、合成脂質溶液と修飾mRNA溶液を、総脂質対修飾mRNA重量の比率が、10:1、15:1、20:1および30:1になるように組み合わせて調製した。脂質エタノール溶液を、水性修飾mRNA溶液に速やかに注入し、33%エタノールを含有する懸濁液を得た。溶液を、手動(MI)またはシリンジポンプの補助(SP)(Harvard Pump 33 Dual Syringe Pump Harvard Apparatus マサチューセッツ州ホリストン)のいずれかで注入した。
イリノイ州ロックフォード)を用いて、分子量カットオフ(MWCO)は10kDで、2度、透析した。最初の透析は、室温で3時間行い、次いで、製剤を4℃で一晩透析した。得られたナノ粒子懸濁液を、0.2μmの滅菌フィルター(Sarstedt,ドイツ、ニュームブレヒト)を介してろ過してガラスバイアルに入れ、圧着閉鎖で密封した。
Zetasizer Nano ZS (Malvern Instruments Ltd, Malvern, イギリス、ウスターシャー)を用いて、修飾mRNAナノ粒子の粒子サイズ、多分散性インデックス(PDI)およびゼータ電位を測定した(粒子サイズ測定には1×PBSに溶解、ゼータ電位測定には15mMPBSに溶解)。
ヒト胚腎上皮細胞(HEK293)および肝細胞癌上皮細胞(HepG2)(LGC standards GmbH, ドイツ、ヴェーゼル)を96ウェルプレート(Greiner Bio−one GmbH, ドイツ、フリッケンハウゼン)上に播種し、HEK293細胞のプレートは、1型コラーゲンで前もってコートした。HEK293細胞
を、30,000細胞/ウェルの密度で、100μlの細胞培養培地で播種し、HepG2細胞を、35,000細胞/ウェルの密度で、100μlの細胞培養培地で播種した。HEK293細胞に対しては、細胞培養培地は、DMEM、10%FCS(2mM L−グルタミン、1mM ピルビン酸ナトリウム、および1×非必須アミノ酸(Biochrom AG, ドイツ、ベルリン)および1.2mg/ml炭酸ナトリウム(Sigma−Aldrich, ドイツ、ミュンヘン)の添加)で、HepG2に対しては、細胞培養培地は、MEM(Gibco Life Technologies,ドイツ、ダルムシュタット)、10%FCS(2mM L−グルタミン、1mM ピルビン酸ナトリウムおよび1×非必須アミノ酸(Biochrom AG, ドイツ、ベルリン)の添加)であった。mCherry mRNA(mRNA配列は、配列番号7に示す;およそ160ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示さない;5´キャップ、キャップ1)を含有する製剤を、細胞播種の後に、直接、四重で加え、インキュベートした。インビトロ転写(IVT)で用いられた、T7プロモーター、5´非翻訳領域(UTR)および3´UTRを有するmCherry cDNAを、配列番号8に示す。mCherry mRNAは、各シトシンで5meCで修飾され、各ウリジン部位で、シュードウリジン置換で修飾された。
実施例10.ナノ粒子製剤の精製
HEK293およびHepG2中の、DLin−KC2−DMAおよび98N12−5のナノ粒子製剤を、修飾RNAに対する脂質の比率および/または精製に平均蛍光強度(MFI)が依存していたかを測定するために検証した。3つのDLin−KC2−DMA製剤および、2つの98N12−5製剤を、表5に記述される仕様でシリンジポンプを用いて製造した。精製試料は、SEPHADEX(登録商標)G−25 DNAグレード(GE Healthcare, スウェーデン)で精製した。精製前後(aP)の各製剤を、24ウェルプレート中の修飾RNA250ng/ウェルの濃度で検証した。各製剤およびバックグラウンド試料に対するフローサイトメーターで分析した際の、FL4チャンネルに対するマーカーが陽性である細胞の割合(%FL4−陽性)、ならびに、各製剤およびバックグランド試料のFL4チャンネルに対するマーカーのMFIを表6に示す。精製された製剤は、精製前に検証した製剤よりも、やや高いMFIであった。
98N12−5(NPA−005)および、DLin−KC2−DMA(NPA−003)のナノ粒子製剤を、様々な濃度で検証して、FL4またはmCherry(mRNA配列は、配列番号7に示す;およそ160ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない;5´キャップ、キャップ1;5メチルシトシンおよびシュードウリジンで完全に修飾されている)のMFIを用量の範囲にわたり測定した。検証された製剤の概要を表7に示す。98N12−5のナノ粒子製剤の最適濃度を決定するために、修飾RNAの製剤の様々な濃度(100ng、10ng、1.0ng、0.1ngおよび0.01ng/ウェル)を、HEK293の24ウェルプレートで検証し、得られた各用量のFL4 MFIの結果を表8に示す。同様に、DLin−KC2−DMAのナノ粒子製剤の最適濃度を決定するために、修飾RNAの製剤の様々な濃度(250ng、100ng、10ng、1.0ng、0.1ngおよび0.01ng/ウェル)を、HEK293の24ウェルプレートで検証し、得られた各用量のFL4 MFIの結果を表9に示す。DLin−KC2−DMAのナノ粒子製剤はまた、修飾RNAの製剤の様々な濃度(250ng、100ngおよび30ng/ウェル)を、HEK293の24ウェルプレートで検証され、得られた各用量のFL4 MFIの結果を表10に示す。98N12−5に対する1ng/ウェルの用量、およびDLin−KC2−DMAに対する10ng/ウェルの用量は、バックグラウンドのFL4 MFIに似ていることが見出された。
)およびDLin−KC2−DMA(NPA−003)に対して分析し、mCherryのMFIを決定した。表11に示されるように、0.025ng/ウェルの濃度およびそれより低い濃度は、mCherryのバックグラウンドMFIレベルに類似している(約386.125)。
DLin−KC2−DMAおよび98N12−5の2つの製剤は、手動注入(MI)およびシリンジポンプ注入(SP)により調製され、バックグラウンド試料と共に分析し、異なる製剤のmCherry(mRNA配列は、配列番号7に示す。およそ160ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない;5´キャップ、キャップ1;5メチルシトシンおよびシュードウリジンで完全に修飾されている)のMFIと比較した。表12に、同じ脂質および脂質/RNA比率の手動注入製剤と比較して、シリンジポンプ製剤がより高いMFIを有していたことを示す。
DLin−DMA、DLin−K−DMA、DLin−KC2−DMA、98N12−5、C12−200およびDLin−MC3−DMAの製剤を、60ng/ウェルまたは62.5ng/ウェルの濃度(HEK293細胞のプレート)、および62.5ng/ウェルの濃度(HepG2細胞のプレート)で、24時間、インキュベートして、各製剤に対するmCherry(mRNA配列は、配列番号7に示す。およそ160ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない;5´キャップ、キャップ1;5メチルシトシンおよびシュードウリジンで完全に修飾されている)のMFIを測定した。検証された製剤
の概要を以下の表13に示す。60ng/ウェルに対する表14、および、62.5ng/ウェルに対する表15、16、17および18に示されるように、NPA−003およびNPA−018の製剤が、もっとも高いmCherryのMFIを有し、NPA−008、NPA−010およびNPA−013の製剤が、バックグラウンド試料のmCherryのMFIの値ともっとも類似している。
げっ歯類(n=5)に、少なくとも1つの修飾mRNAおよび脂質を含有する製剤の単回用量を、静脈内、皮下、筋肉内に投与する。げっ歯類に投与される修飾mRNAは、G−CSF(mRNA配列は、配列番号6に示す。およそ160ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない;5´キャップ、キャップ1)、エリスロポエチン(EPO)(mRNA配列は、配列番号9に示す。およそ160ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない;5´キャップ、キャップ1)、IX因子(mRNA配列は、配列番号10に示す。およそ160ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない;5´キャップ、キャップ1)またはmCherry(mRNA配列は、配列番号7に示す。およそ160ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない;5´キャップ、キャップ1)から選択される。インビトロ転写(IVT)で用いられた、T7プロモーター、5´非翻訳領域(UTR)および3´UTRを有するエリスロポエチンcDNAは、配列番号11および配列番号12に示す。
A.経時的変化
げっ歯類は、投与された製剤に対するタンパク質発現の経時的変化を試験するために、少なくとも1つの修飾mRNAを含有する製剤を投与される。げっ歯類は、タンパク質発現および全血球数を測定するために、修飾mRNA製剤の投与の前後に、特定の時間間隔で採血される。また、試料を、修飾mRNA製剤が皮下および筋肉内に投与されたげっ歯類の投与部位から採取し、その組織内のタンパク質発現を測定する。
B.用量応答性
げっ歯類は、各製剤の用量応答性を測定するため、少なくとも1つの修飾mRNAを含有する製剤が投与される。げっ歯類は、タンパク質発現および全血球数を測定するために、修飾mRNA製剤の投与の前後に、特定の時間間隔で採血される。また、げっ歯類を殺処分し、内部組織に対する修飾mRNA製剤の作用を分析する。また、試料を、修飾mRNA製剤が皮下および筋肉内に投与されたげっ歯類の投与部位から採取し、その組織内のタンパク質発現を測定する。
C.毒性
げっ歯類は、各製剤の毒性を試験するため、少なくとも1つの修飾mRNAを含有する製剤が投与される。げっ歯類は、タンパク質発現および全血球数を測定するために、修飾mRNA製剤の投与の前後に、特定の時間間隔で採血される。また、げっ歯類を殺処分し、内部組織に対する修飾mRNA製剤の作用を分析する。また、試料を、修飾mRNA製剤が皮下および筋肉内に投与されたげっ歯類の投与部位から採取し、その組織内のタンパク質発現を測定する。
実施例15.PLGAマイクロスフェア製剤
PLGAマイクロスフェアの製剤化に用いられたパラメータの最適化により、マイクロスフェア内に封入される修飾mRNAの完全性を維持したまま、高い封入効率および放出率の調節が可能になりうる。たとえば、限定されないが、粒子サイズ、回収率および封入効率等のパラメータを、最適な製剤を得るために、最適化しても良い。
A.PLGAマイクロスフェアの合成
ポリラクチックグリコール酸(PLGA)マイクロスフェアが、当分野で公知の水/油/水の二重乳化法を用いて、PLGA(Lactel、Cat# B6010−2、固有粘度0.55−0.75、50:50 LA:GA)、ポリビニルアルコール(PVA)(Sigma、Cat# 348406−25G、MW 13−23k)ジクロロメタンおよび水を用いて、合成された。簡潔に言うと、0.1mlの水(W1)を、ジクロロメタン(DCM)に溶解した2mlのPLGA(濃度範囲は、PLGA50〜200mg/ml)(O1)に、添加した。W1/O1のエマルションを、スピード4(約15,000rpm)で30秒間、ホモジナイズした(IKA Ultra−Turrax Homogenizer、T18)。次いで、W1/O1エマルションに、100〜200mlの0.3〜1%PVA(W2)を加え、様々なスピードで、1分間、ホモジナイズした。製剤を、3時間、攪拌したままにして、次いで、遠心(20〜25分間、4,000rpm、4℃)により洗浄した。上清を棄て、PLGAペレットを、5〜10mlの水に再懸濁し、これを2回繰り返した。各製剤に対する平均粒子サイズ(20〜30の粒子を象徴する)を、洗浄後、顕微鏡により測定した。表19に、PLGA濃度の増加により、より大きなサイズのマイクロスフェアがもたらされたことを示す。200mg/mLのPLGA濃度からは、平均粒子サイズは14.8μm、100mg/mLでは8.7μm、そして50mg/mLのPLGAでは、平均粒子サイズは4.0μmであった。
修飾G−CSFmRNA(配列番号6。およそ160ヌクレオチドのポリAテールは配
列中に示していない;5´キャップ、キャップ1;5メチルシトシンおよびシュードウリジンで完全に修飾されている)を、2mg/mlの濃度で水に溶解した(W3)。PLGAマイクロスフェア製剤の3つのバッチを、以下のパラメータで上述のように作製した:2mg/mlで、0.1mlのW3、200mg/mlで1.6mlのO1、1%で160mlのW2。そしてそれらを、第一のエマルション(W3/O1)に対してはスピード4でホモジナイズし、第二のエマルション(W3/O1/W2)に対してはスピード5でホモジナイズした。遠心による洗浄の後、製剤を液体窒素中で凍結させ、次いで、3日間、凍結乾燥させた。製剤の封入効率を検証するために、凍結乾燥材料を、DCM中で6時間、脱製剤化(deformulate)させ、次いで、一晩、水中で抽出した。次いで、試料中の修飾RNA濃度を、OD260により測定した。封入効率は、修飾RNAの実際の量を測り、修飾RNAの開始量で割ることにより算出した。検証した3つのバッチにおいて、封入効率は、59.2、49.8および61.3であった。
修飾IX因子mRNA(配列番号10。およそ160ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない;5´キャップ、キャップ1;5メチルシトシンおよびシュードウリジンで完全に修飾されている)を、様々な濃度で水に溶解し(W4)、製剤中に含まれる重量パーセントを変え(mg 修飾RNA/mg *100)そして、封入効率を測定した。表22に示すパラメータを用いて、PLGAマイクロスフェア製剤の4つの異なるバッチを作製した(ホモジナイズスピードは、第一のエマルション(W4/O1)に対してはスピード4、第二のエマルション(W4/O1/W2)に対してはスピード5)。
IX因子修飾RNA(配列番号10)で製剤化されたPLGAマイクロスフェアを、上述のように脱製剤化させ、抽出された修飾RNAの完全性を、自動化電気泳動(Bio−Rad Experion)で測定した。抽出修飾mRNAは、非製剤化修飾mRNAおよび脱製剤化対照に対して比較し、封入修飾mRNAの完全性を検証した。図3に示すように、modRNAの大部分は、脱製剤化対照(Deform対照)および非製剤化対照(Unform対照)に対して、バッチ番号A、B、CおよびDで損なわれていなかった。
IX因子修飾RNA(配列番号10。およそ160ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない;5´キャップ、キャップ1;5メチルシトシンおよびシュードウリジンで完全に修飾されている)で製剤化されたPLGAマイクロスフェアを、上述のように脱製剤化させ、抽出された修飾RNAのタンパク質発現を、インビトロトランスフェクションアッセイにより測定した。HEK293細胞を、三重で、RNAiMAX(Invitrogen)により複合体化させたIX因子修飾RNA(250ng)で逆向きトランスフェクションさせた。
IX因子修飾RNA(配列番号10。およそ160ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない;5´キャップ、キャップ1;5メチルシトシンおよびシュードウリジンで完全に修飾されている)で製剤化されたPLGAマイクロスフェアを、24mg/mlのマイクロスフェア濃度まで水で再懸濁させた。再懸濁の後、150μlのPLGAマイクロスフェア懸濁液を、エッペンドルフチューブへと分注した。試験を行う間、37℃で試料をインキュベートし、振とうさせ続けた。0.2、1、2、8、14および21日目で、三重で試料を得た。PLGAマイクロスフェアから放出された修飾RNAの量を測定するために、試料を遠心し、上清を除去し、上清中の修飾RNA濃度をOD260で測定した。表25に、各試料中の修飾RNA総量に基づき算出された放出割合を示す。31日後、IX因子修飾RNAの96%が、PLGAマイクロスフェアから放出された。
IX因子修飾RNA(配列番号10。およそ160ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない;5´キャップ、キャップ1;5メチルシトシンおよびシュードウリジンで完全に修飾されている)PLGAマイクロスフェアの3つのバッチを、バッチDに対して上述のものと同一の条件を用いて作製した(4mg/mlで0.4mlのW4、200mg/mlで2.0mlのO1、1%で200mlのW2、および、W4/O1/W2エマルションに対しては、スピード5でホモジナイズ)(表22に示す)。PLGAマイクロスフェア懸濁液の均質性を改善するために、遠心の前にろ過を取り入れた。遠心の前に3時間、攪拌した後、すべての製剤化材料を、100μmのナイロンメッシュろ過器(Fisherbrand Cell Strainer, Cat # 22−363−549)に通して、大きな塊を除去した。洗浄および水での再懸濁の後、PLGAマイクロスフェア試料100〜200μlを用いて、レーザー回析(Malvern Mastersizer2000)により製剤の粒子サイズを計測した。試料の粒子サイズを表26に示す。
緩衝液(TE)もしくは90%血清(Se)に溶解した、IX因子mRNA RNA(配列番号10。およそ160ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない;5´キャップ、キャップ1;5メチルシトシンおよびシュードウリジンで完全に修飾されている)または、緩衝液、90%血清もしくは1%血清に溶解したPLGA中のIX因子mRNAを、緩衝液、90%血清または1%血清中で、mRNA濃度50ng/μl(総量は70μl)で、インキュベートした。0、30、60または120分で試料を取り除いた。RNaseは、20分間、55℃で、25ulの4xプロテナーゼK緩衝液(0.4ml 1Mトリス−HCl pH 7.5、0.1ml 0.5M EDTA、0.12ml 5M NaCl、および0.4ml 10%SDS)、および8μlのプロテナーゼK(20mg/ml)を添加することにより、プロテナーゼK消化で不活化させた。IX因子mRNAは、バイオアナライザーによる分析の前に、沈殿(1時間、250μlの95%エタノールを添加し、13k rpmで10分間遠心し、上清を除去し、沈殿物に2
00μlの70%エタノールを添加し、5分間、13k rpmで再遠心し、上清を除去し、70uμlの水で沈殿物を再懸濁)または、PLGAマイクロスフェアから抽出した(13k rpmで5分遠心し、上清を除去し、1mlの水で沈殿物を洗浄し、13k rpmで5分遠心し、上清を除去し、沈殿物に280μlのジクロロメタンを添加し、15分間振とうし、70ulの水を添加し、次いで、2時間振とうし、水層を除去)。PLGAマイクロスフェアにより、2時間にわたり、90%血清および1%血清中での分解からIX因子修飾mRNAが守られた。90%血清中では、IX因子修飾mRNAは最初の時点で完全に分解される。
実施例16.脂質ナノ粒子のインビボ試験
G−CSF(インビトロ転写実験に用いられた、T7プロモーター、5´非翻訳領域(UTR)および3´UTRを有するcDNAを配列番号5に示す。mRNA配列は、配列番号6に示す。およそ160ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない;5´キャップ、キャップ1;5メチルシトシンおよびシュードウリジンで完全に修飾されている)および、IX因子(インビトロ転写実験に用いられた、T7プロモーター、5´非翻訳領域(UTR)および3´UTRを有するcDNAを配列番号13に示す。mRNA配列は配列番号10に示す。およそ160ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない;5´キャップ、キャップ1;5メチルシトシンおよびシュードウリジンで完全に修飾されている)の修飾mRNAを、シリンジポンプ法を用いて、脂質ナノ粒子(LNP)として製剤化した。LNPは、最終脂質モル比 50:10:38.5:1.5(DLin−KC2−DMA: DSPC:コレステロール:PEG−c−DOMG)で、修飾mRNAに対する総脂質の重量比 20:1で製剤化された。表27に、製剤の粒子サイズ、ゼータ電位および封入による特徴付けを示す。
X因子タンパク質発現は、1、10および100ug投与群に対して、それぞれおよそ36,380および3000〜11000ng/mlであった。
G−CSF(mRNA配列は配列番号6に示す。およそ160ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない;5´キャップ、キャップ1;5メチルシトシンおよびシュードウリジンで完全に修飾されている)およびEPO(mRNA配列は配列番号9に示す。およそ160ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない;5´キャップ、キャップ1;5メチルシトシンおよびシュードウリジンで完全に修飾されている)の修飾mRNAを、シリンジポンプ法を用いて、脂質ナノ粒子(LNP)として製剤化した。LNPは、最終脂質モル比 50:10:38.5:1.5(DLin−KC2−DMA: DSPC:コレステロール:PEG−c−DOMG)で、修飾mRNAに対する総脂質の重量比20:1で製剤化された。表31に、製剤の粒子サイズ、ゼータ電位および封入による特徴付けを示す。
表31(上述)に示すLNP製剤を、ラット(n=5)に静脈内(IV)、筋肉内(IM)または皮下(SC)に、0.05mg/kgの修飾mRNA単回用量で投与した。ラットの対照群(n=4)には何も処置しなかった。G−CSF修飾mRNA製剤またはEPO修飾mRNA製剤を投与された2時間、8時間、24時間、48時間および96時間以降に、ラットから採血し、ELISAを用いてタンパク質発現を測定した。EPO修飾mRNAを静脈内投与されたラットは、7日目でも採血された。
表31(上述)に示されるLNP製剤を、マウス(n=5)に静脈内(IV)に、0.5、0.05または0.005mg/kgの修飾mRNA単回用量で投与した。G−CSF修飾mRNA製剤またはEPO修飾mRNA製剤を投与された8時間、24時間、72時間および6日後に、マウスから採血し、ELISAを用いてタンパク質発現を測定した。
A.マウスにおけるLNP製剤
表31(上述)に示されるLNP製剤を、マウス(n=4)に静脈内(IV)に、0.05mg/kgまたは0.005mg/kgの修飾mRNA単回用量で投与した。また、未処置の対照マウスの3群(n=4)も用意した。G−CSF修飾mRNA製剤またはEPO修飾mRNA製剤を投与された2時間、8時間、24時間、48時間、および72時間後に、マウスから採血し、タンパク質発現を測定した。G−CSFおよびEPOのタンパク質発現は、ELISAを用いて測定された。
表31(上述)に示されるLNP製剤を、ラット(n=4)に静脈内(IV)に、0.05mg/kgの修飾mRNA単回用量で投与する。また、未処置の対照ラット群(n=4)も用意する。G−CSF修飾mRNA製剤またはEPO修飾mRNA製剤を投与された2時間、8時間、24時間、48時間、72時間、7日および14日後に、ラットから採血し、タンパク質発現を測定する。G−CSFおよびEPOのタンパク質発現を、ELISAを用いて測定する。
実施例20.LNPの早期の経時的変化試験
表31(上述)に示されるLNP製剤を、哺乳類に静脈内(IV)、筋肉内(IM)または皮下(SC)に、0.5mg/kg、0.05mg/kgまたは0.005mg/kgの修飾mRNA単回用量で投与する。哺乳類対照群は未処置とする。哺乳類は、修飾mRNA LNP製剤を投与された5分、10分、20分、30分、45分、1時間、1.5時間および/または2時間後に哺乳類から採血し、タンパク質発現を、ELISAを用いて測定する。また、顆粒球レベルおよび赤血球数等の全血球数を測定するために哺乳類から採血する。
実施例21.非ヒト霊長類のインビボ試験
表31(上述)に示されるLNP製剤を、非ヒト霊長類(NHP)(カニクイザル)(n=2)に、静脈内ボーラス投与として、およそ30秒間にわたり、皮下注射針(必要であれば、シリンジ/abbocathまたは翼状針に付着されても良い)を用いて投与した。0.05mg/kgのEPOもしくはG−CSF、または0.005mg/kgのEPOを、修飾mRNA単回用量として、0.5mL/kgの投与体積で、NHPに投与した。修飾mRNA LNP製剤の投与の5〜6日前に、NHPから採血し、血清中のタンパク質発現およびベースラインの全血球数を測定した。修飾mRNA製剤の投与後、8、24、48および72時間でNHPから採血し、タンパク質発現を測定した。投与の24時間および72時間後で、NHPの全血球数も測定した。G−CSFおよびEPOのタンパク質発現を、ELISAにより測定した。すべての実験の経過中に、尿もNHPから採
取し、臨床的安全性を評価した。G−CSFおよびEPOの修飾mRNA製剤の投与後に、NHPから試料を採取し、ELISAを用いてタンパク質発現を測定した。非ヒト霊長類の臨床化学的所見、血液学的所見、尿検査およびサイトカインもまた分析された。
表31(上述)に示されるLNP製剤を、静脈内投与(IV)として、非ヒト霊長類(NHP)(カニクイザル)(n=2)に投与した。0.5mg/kg、0.05mg/kgもしくは0.005mg/kgのEPO、またはG−CSFを、修飾mRNA単回IV投与として、0.5mL/kgの投与体積で、NHPに投与した。修飾mRNA LNP製剤の投与前にNHPから採血し、血清中のタンパク質発現と、全血球数のベースライン
を測定した。G−CSF修飾mRNA製剤の投与後、8、24、48および72時間で、NHPから採血し、タンパク質発現を測定した。EPO修飾mRNA製剤の投与後、8、24、48、72時間および7日で、NHPから採血し、タンパク質発現を測定した。
修飾EPO mRNA(配列番号9。およそ160ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない;5´キャップ、キャップ1;5メチルシトシンおよびシュードウリジンで完全に修飾されている)または修飾G−CSF mRNA(配列番号6。およそ160ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない;5´キャップ、キャップ1;5メチルシトシンおよびシュードウリジンで完全に修飾されている)を含有する製剤(生理食塩水に溶解)を、非ヒト霊長類(カニクイザル)(NHP)に、筋肉内(IM)または皮下(SC)投与した。0.05mg/kgまたは0.005mg/kgの修飾mRNA単回用量を、投与体積0.5mL/kgとした。投与の5〜6日前に非ヒト霊長類から採血し、血清タンパク質濃度およびベースラインの全血球数を測定する。修飾mRNA製剤の投与後、8時間、24時間、48時間、72時間、7日および14日で、NHPから採血し、タンパク質発現を測定する。G−CSFおよびEPOのタンパク質発現は、ELISAにより測定される。投与後24時間、72時間、7日および14日で、NHPの全血球数も測定される。NHPから全実験の過程にわたり尿を採取し、臨床的安全性を評価するために分析する。投与部位に近い組織もまた採取し、タンパク質発現を測定するために分析する。
実施例24.修飾mRNAの輸送
修飾mRNAの局在および/または輸送を測定するために、以下のように試験を行っても良い。
とえば、限定されないが炎症等の生物学的反応に対する影響を分析しても良い。哺乳類は、血清中に存在する、投与された修飾mRNAによりコードされるタンパク質の発現、および/または哺乳類の全血球数を測定するために、異なる時点で採血されても良い。
実施例25.複合的な修飾mRNAの製剤
修飾mRNAのLNP製剤は、当分野に公知の方法および/または本明細書に記述される方法に従い、製剤化される。LNP製剤は、たとえばG−CSF、EPO、トロンボポエチンおよび/または当分野に公知もしくは本明細書に記述の任意のタンパク質等のタンパク質をコードしうる修飾mRNAを少なくとも1つ含んでも良い。修飾mRNAの少なくとも1つは、1、2、3、4または5つの修飾mRNA分子を含んでも良い。修飾mRNAを少なくとも1つ含有する製剤を、単回投与レジメンまたは複数回投与レジメンで、静脈内、筋肉内または皮下に投与されてもよい。たとえば、限定されないが、血液および/または血清等の生物学的試料を、少なくとも1つの修飾mRNA製剤の投与前後の異なる時点で採取および分析してもよい。前記タンパク質をコードする修飾mRNAの少なくとも1つを含有する製剤を哺乳類に投与した後の、50〜200pg/mlの生物学的試料中のタンパク質の発現は、生物学的に有効であるとみなされる。
実施例26.ポリエチレングリコール比率の試験
A.PEG LNPの製剤化および特徴付け
脂質ナノ粒子(LNP)を、シリンジポンプ法を用いて製剤化した。修飾G−CSF(配列番号6。およそ160ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない;5´キャップ、キャップ1;5メチルシトシンおよびシュードウリジンで完全に修飾されている)に対する総脂質の重量比20:1で、LNPが製剤された。製剤のモル比の範囲を表46に示す。
表40に記述されるPEG LNP製剤をマウス(n=5)に0.5mg/kgの用量で静脈内投与した。製剤の投与後、2時間、8時間、24時間、48時間、72時間および8日でマウスから血清を採取した。血清をELISAにより分析し、G−CSFのタンパク質発現を測定し、その発現レベルを表48に示す。PEG−DMGを用いたLNP製剤は、PEG−DSAでのLNP製剤よりもタンパク質発現が大幅に高いレベルにあった。
A.カチオン性脂質ナノ粒子の製剤化および特徴付け
脂質ナノ粒子(LNP)を、シリンジポンプ法を用いて製剤化した。修飾mRNAに対
する総脂質の重量比20:1でLNPを製剤化した。カチオン性脂質、DSPC、コレステロールおよびPEG−c−DOMGの最終脂質モル比の範囲の概要を、表49に示す。
表42に記述されるカチオン性脂質製剤の処方を、0.5mg/kgの用量で、マウス(n=5)に静脈内投与した。製剤の投与後、2時間、24時間、72時間および/または7日でマウスから血清を採取した。血清をELISAにより分析し、EPOまたはG−CSFのタンパク質発現を測定し、その発現レベルを表51に示す。
実施例28.タンパク質発現のスクリーニング方法
A.エレクトロスプレーイオン化
対象に投与された修飾RNAによりコードされるタンパク質を含有し得る生物学的試料を調製し、1、2、3または4質量分析器を用いて、エレクトロスプレーイオン化(ESI)のメーカーのプロトコールに従い、分析する。生物学的試料はまた、タンデムのESI質量分析法システムを用いて分析されてもよい。
B.マトリックス支援レーザー脱離イオン化
対象に投与された修飾RNAによりコードされるタンパク質を含有し得る生物学的試料を調製し、マトリックス支援レーザー脱離イオン化(MALDI)に対するメーカーのプ
ロトコールに従って、分析する。
C.液体クロマトグラフィー−質量分析−質量分析
修飾RNAによりコードされるタンパク質を含有し得る生物学的試料を、トリプシン酵素で処理して、その中に含有されるタンパク質を消化しても良い。得られたペプチドを、液体クロマトグラフィー−質量分析−質量分析(LC/MS/MS)により分析する。ペプチドを、質量分析器で断片化し、コンピューターアルゴリズムを介して、タンパク質配列データベースと合致しうる特徴的なパターンを得る。消化された試料を希釈して、規定のタンパク質に対する開始材料(1ng以下)を得ても良い。単純な緩衝液バックグラウンド(たとえば、水または揮発性塩)を含有する生物学的試料は、溶液内消化を行いやすい;より複雑なバックグラウンド(たとえば、洗剤、非揮発性塩、グリセロール)は、試料分析を促進するための追加のクリーンアップステップを必要とする。
実施例29.LNP インビボ試験
mCherry mRNA(配列番号14。およそ160ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない;5´キャップ、キャップ1;5メチルシトシンおよびシュードウリジンで完全に修飾されている)を脂質ナノ粒子(LNP)として、シリンジポンプ法を用いて製剤化した。最終脂質モル比 50:10:38.5:1.5(DLin−KC2−DMA:DSPC:コレステロール:PEG−c−DOMG)で、修飾mRNAに対する総脂質の重量比 20:1で、LNPを製剤化した。mCherry製剤の粒子サイズ、ゼータ電位および封入による特徴付けを、表52に示す。
方で検出したことから、肝臓細胞の正常なタンパク質発現は影響を受けなかったことが示唆される。
実施例30.シリンジポンプ インビボ試験
mCherry修飾mRNAを、シリンジポンプ法を用いて脂質ナノ粒子(LNP)として製剤化する。最終脂質モル比 50:10:38.5:1.5(DLin−KC2−DMA:DSPC:コレステロール:PEG−c−DOMG)で、修飾mRNAに対する総脂質の重量比 20:1で、LNPを製剤化する。mCherry製剤を粒子サイズ、ゼータ電位および封入で特徴付けする。
実施例31.インビトロおよびインビボ発現
A.リピドイド製剤を用いたヒト細胞におけるインビトロ発現
インビトロトランスフェクションの検証のために用いられるリピドイドに対するmmRNAの比率を、異なるリピドイド:mmRNAの比率で経験的に検証する。siRNAおよびリピドイドを用いた従前の研究では、2.5:1、5:1、10:1および15:1のリピドイド:siRNA wt:wt比率である。siRNAと比較してmmRNAは長いことを考慮すると、mmRNAに対するリピドイドのwt:wtは低い方が効果的である可能性がある。さらにまた、比較のために、mmRNAをRNAIMAX(登録商標)(Invitrogen、カリフォルニア州カールスバッド)またはTRANSIT−mRNA(Mirus Bio、ウィスコンシン州マディソン)カチオン性脂質送達ビヒクルを用いて、製剤化する。リピドイド−製剤化ルシフェラーゼ(配列番号15に示されるIVT cDNA配列;mRNA配列は、配列番号16に示す。およそ160ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない;5´キャップ、キャップ1、各シトシンで5−メチルシトシンに完全に修飾され、各ウリジン部位でシュードウリジンに置換されている)、緑の蛍光タンパク質(GFP)(配列番号17に示されるIVT cDNA野生型配列;mRNA配列は、配列番号18に示す。およそ160ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない、5´キャップ、キャップ1)、G−CSF(mRNA配列は、配列番号6に示す。およそ160ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない;5´キャップ、キャップ1)、およびEPO mRNA(mRNA配列は、配列番号9に示す。およそ160ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない;5´キャップ、キャップ1)の、所望のタンパク質産物を発現する能力は、ルシフェラーゼ発現に対する発光、GFP発現に対するフローサイトメトリー、ならびにG−CSFおよびエリスロポエチン(EPO)分泌に対するELISAにより確認することができる。
限定されないが、98N12−5、C12−200およびMD1を含む、様々な異なるリピドイドを用いて、製剤の静脈内全身投与を行う。
た、分析することができる。
筋肉内注射の経路または皮下注射の経路を介した、mRNAを含むオリゴヌクレオチドを送達するためのリピドイド製剤の使用について、従前には報告が無いため、評価を行う必要がある。mmRNAの筋肉内注射および/または皮下注射について、mmRNA含有リピドイド製剤が、所望のタンパク質の局所および全身の両方の発現を行うことができるかどうかを決定するために評価を行う。
実施例32.リポプレックスを用いたインビボ送達
A.ヒトEPO修飾RNAリポプレックス
修飾ヒトエリスロポエチン(EPO)mRNA(mRNA配列は、配列番号9に示す。およそ160ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない;5´キャップ、キャップ1)(EPO;完全に5−メチルシトシン修飾;N1−メチルシュードウリジン)を100μg含有する製剤を、50〜70μL中、30%体積のRNAIMAX(登録商標)(Lipoplex−h−Epo−46;Generation 2またはGen2)でリポプレックス化し、4匹のC57/BL6マウスに筋肉内へ送達した。他の群は、30%体積のRNAiMAX(登録商標)でリポプレックス化された、修飾ルシフェラーゼmRNA100μgを含有する対照として、リポプレックス化修飾ルシフェラーゼmRNA(Lipoplex−luc)(配列番号15にIVT cDNA配列を示す。mRNAの配列は配列番号16に示す;およそ160ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない;5´キャップ、キャップ1。各シトシンで5−メチルシトシンで完全に修飾され、各ウリジン部位でシュードウリジン置換されている)の投与を受けたマウス、または陰性対照として65μglの投与体積で製剤緩衝液の注射を受けたマウスからなる。筋肉内注射の13時間後、血清を各マウスから採取し、ヒトEPO ELISAにより、マウス血清中のヒトEPOタンパク質の量を測定し、表53にその結果を示す。
修飾ヒトG−CSF mRNA(配列番号6にmRNA配列を示す。およそ160ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない;5´キャップ、キャップ1。)(G−CSFは、5−メチルシトシンおよびシュードウリジンで完全に修飾され(G−CSF)、または、G−CSFは、5−メチルシトシンおよびN1−メチル−シュードウリジンで完全に修飾されている(G−CSF−N1))の2つのバージョンのうちの1つの100μgを含有する製剤を、30%体積のRNAIMAX(登録商標)でリポプレックス化し、C57/BL6マウスに、150uLで筋肉内送達(I.M)、150μLで皮下送達(S.C)、および225uLで静脈内送達(I.V)した。
cDNA配列を示す。配列番号16にmRNA配列を示す。およそ160ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない;5´キャップ、キャップ1。各シトシンで5−メチルシトシンで完全に修飾され、各ウリジン部位でシュードウリジン置換されている)を筋肉内(Luc−unsp I.M.)、または、150μgの修飾ルシフェラーゼmRNAを静脈内(Luc−unsp I.V.)、または、150μLの製剤緩衝液を筋肉内(Buffer I.M.)、のいずれかで投与した。製剤の投与6時間後、血清を各マウスから採取し、ヒトG−CSF ELISAによりマウス血清中のヒトG−CSFタンパク質の量を測定し、その結果を表54に示す。
5−メチルシトシン(5mc)およびシュードウリジン(Ψ)修飾を有する、RNAIMAX(登録商標)の30%体積でリポプレックス化された修飾ヒトG−CSF mRNA(G−CSF−Gen1−Lipoplex)、生理食塩水に溶解した、5mcおよびΨ修飾を有する修飾ヒトG−CSF mRNA(G−CSF−Gen1−Saline)、N1−5−メチルシトシン(N1−5mc)およびΨ修飾を有する、RNAIMAX(登録商標)の30%体積でリポプレックス化された修飾ヒトG−CSF(G−CSF−Gen2−Lipoplex)、N1−5mcおよびΨ修飾を有する、生理食塩水に溶解した、修飾ヒトG−CSF mRNA(G−CSF−Gen2−Saline)、5mcおよびΨ修飾を有する、RNAIMAX(登録商標)の30%体積でリポプレックス化された修飾ルシフェラーゼ(Luc−Lipoplex)、または、生理食塩水に溶解した、5mcおよびΨ修飾を有する修飾ルシフェラーゼmRNA(Luc−Saline)のいずれか100μgを含有する製剤を、筋肉内注射(I.M.)または皮下注射(S.C.)で投与し、そして、各投与法の対照群は、C57/BL6マウスに製剤緩衝液(F.Buffer)80μLの用量を与えた。注射の13時間後、血清および注射部位からの組織を各マウスから採取し、G−CSF ELISAにより分析して、ヒトG−CSFタンパク質レベルを比較した。筋肉内投与および皮下投与のマウス血清におけるヒトG−CSFタンパク質の結果を、表55に示す。
筋肉内投与と皮下投与
RNAIMAX(登録商標)の30%体積でリポプレックス化された修飾mCherry mRNA(配列番号7にmRNA配列を示す。およそ160ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない;5´キャップ、キャップ1)、または、生理食塩水に溶解した修飾mCherry mRNAのいずれか100μgを含有する製剤を、マウスに筋肉内投与または皮下投与する。製剤緩衝液をまた、筋肉内または皮下のいずれかで、対照群のマウスに投与する。マウスの注射部位を、切片作成のために注射の17時間後に採取して、タンパク質産生の原因となる細胞型(複数含む)の測定を行っても良い。
RNAIMAX(登録商標)でリポプレックス化された修飾mCherry mRNA、製剤緩衝液に溶解した修飾mCherry mRNA、RNAIMAX(登録商標)でリポプレックス化された修飾ルシフェラーゼmRNA、製剤緩衝液に溶解した修飾ルシフェラーゼmRNAのいずれか10μgを含有する製剤を、5μl/目の用量体積で、ラットに硝子体内投与(IVT)で投与することができる。製剤緩衝液はまた、IVTにより、5μl/目の用量体積で、ラットの対照群に投与される。切片作成および溶解のために注射後18時間で処置ラットから目を採取して、mmRNAがインビボで目に効率的に送達されたかどうか、およびタンパク質産生をもたらしたかどうかを測定、またならびに、インビボでタンパク質産生の原因となる細胞型(複数含む)を測定することができる。
RNAIMAX(登録商標)の30%体積でリポプレックス化された修飾mCherry mRNA、生理食塩水に溶解した修飾mCherry mRNA、RNAIMAX(登録商標)の30%体積でリポプレックス化された修飾ルシフェラーゼmRNA、または生理食塩水に溶解した修飾ルシフェラーゼmRNAのいずれか100μgを含有する製剤を、鼻腔内投与する。製剤緩衝液がまた、対照群に鼻腔内投与される。切片作成(mCherry mRNA投与群に対して)またはホモジナイゼーション(ルシフェラーゼmRNA投与群に対して)のために、注射後およそ13時間で肺を採取してもよい。これらの試料を用いて、mmRNAがインビボで肺に効率的に送達されたかどうか、およびタンパ
ク質産生をもたらしたかどうかを測定、またならびに、インビボでタンパク質産生の原因となる細胞型(複数含む)を測定する。
実施例33.様々な脂質比を用いたインビボ送達
修飾mRNAを、C57/BL6マウスに送達させ、様々な脂質比および得られるタンパク質発現を評価した。RNAIMAX(登録商標)の10%、30%または50%でリポプレックス化された、修飾ヒトEPO mRNA(配列番号9にmRNA配列を示す。およそ160ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない;5´キャップ、キャップ1。5−メチルシトシンおよびシュードウリジンで完全に修飾されている)100μgの製剤、RNAIMAX(登録商標)の10%、30%、または50%でリポプレックス化された、修飾ルシフェラーゼmRNA(配列番号15にIVT cDNA配列を示す。配列番号16にmRNA配列を示す。およそ160ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない;5´キャップ、キャップ1。各シトシンで5−メチルシトシンで完全に修飾され、各ウリジン部位でシュードウリジン置換されている)100μgの製剤、または製剤緩衝液を、単回70μlの用量で、マウスに筋肉内投与した。血清を注射後13時間で採取して、ヒトEPO ELISAを行い、各マウスのヒトEPOタンパク質レベルを測定した。表56に示されるヒトEPO ELISAの結果から、異なる割合のRNAIMAX(登録商標)のそれぞれに対し、筋肉内で発現された修飾ヒトEPOが、血清中に分泌されていることが示される。
製剤緩衝液中で製剤化された修飾ヒトEPO mRNA(配列番号9にmRNA配列を示す。およそ160ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない;5´キャップ、キャップ1。5−メチルシトシンおよびシュードウリジンで完全に修飾されている)を、C57/BL6マウスまたはSprague−Dawleyラットのいずれかに送達させ、ヒトEPO産生の用量依存性を評価した。表57の投与チャートに記載されるように、ラットに、修飾ヒトEPO mRNA(h−EPO)50μl、修飾ルシフェラーゼmRNA(Luc)(配列番号15にIVT cDNA配列を示す。配列番号16にmRNA配列を示す。およそ160ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない;5´キャップ、キャップ1。各シトシンで5−メチルシトシンで完全に修飾され、各ウリジン部位でシュードウリジン置換されている)を50μl、または製剤緩衝液(F.Buffer)50μlを筋肉内注射した。
製剤緩衝液中で製剤化された修飾ヒトEPO mRNA(配列番号9にmRNA配列を示す。およそ160ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない;5´キャップ、キャップ1。5−メチルシトシンおよびシュードウリジンで完全に修飾されている)を、Sprague−Dawleyラットに送達させ、用量応答性の持続期間を測定した。表59の投与チャートに記述されているように、修飾ヒトEPO mRNA(h−EPO)、修飾ルシフェラーゼmRNA(配列番号15にIVT cDNA配列を示す。配列番号16にmRNA配列を示す。およそ160ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない;5´キャップ、キャップ1。各シトシンで5−メチルシトシンで完全に修飾され、各ウリジン部位でシュードウリジン置換されている)(Luc)または製剤緩衝液(F.Buffer)の50μlを、ラットに筋肉内注射した。筋肉内注射の2、6、12、24、48および72時間後にラットから採血し、所与の時間での血清中のヒトEPO濃度を測定した。また、本試験に対する平均および幾何平均(pg/ml)を、表59に示す。
異なる投与経路を用いた分割投与を調査するための試験を行った。一度に複数の皮下注射部位または筋肉内注射部位を用いた試験を設計し、mmRNA薬剤曝露を増加させ、タンパク質産生を改善する方法を調査した。発現タンパク質産生の検出に加えて、検証された動物由来の試料を分析することで、タンパク質の生理学的機能評価もまた測定された。
)で製剤化され、投与された、ヒトエリスロポエチン(EPO)mmRNA(配列番号9にmRNA配列を示す。およそ160ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない;5´キャップ、キャップ1)または、ルシフェラーゼmRNA(配列番号16にmRNA配列を示す。およそ160ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない;5´キャップ、キャップ1)の使用を分割用量実験の設計に含めた。投与媒体(製剤緩衝液)は、150mM NaCl、2 mM CaCl2、2mM Na+リン酸塩(1.4mM リン酸一ナトリウム、;0.6mM リン酸二ナトリウム)、および0.5mM EDTA(pH6.5)から構成された。pHは、水酸化ナトリウムで調製され、最終溶液は滅菌ろ過された。mmRNAは、各シトシンで5meCで修飾され、各ウリジン部位でシュードウリジン置換で修飾された。
A.修飾RNA reLNPの処方
合成脂質、1,2−ジステアロイル−3−ホスファチジルコリン(DSPC)(Avanti Polar Lipids、アラバマ州アラバスター)、コレステロール(Sigma−Aldrich、ドイツ、タウフカーシェン)、および、α−[3’−(1,2−ジミリストイル−3−プロパノキシ)−カルボキサミド−プロピル]−ω−メトキシ−ポリオキシエチレン(PEG−c−DOMG)(NOF、ベルギー、Bouwelven)の溶液を調製し、−20℃で保存する。合成脂質は、内部エステルを有するDLin−DMA、末端エステルを有するDLin−DMA、DLin−MC3−DMA−内部エステル、および末端エステルを有するDLin−MC3−DMAから選択される。reLNPは、50:10:38.5:1.5(reLNP:DSPC:コレステロール:PEG−c−DOMG)のモル比となるように組み合わされる。reLNPおよび修飾mRNAの製剤は、修飾mRNAに対する総脂質の重量比が10:1、15:1、20:1および30:1で、修飾mRNA溶液と脂質溶液とを混合することにより調製される。
Zetasizer Nano ZS(Malvern Instruments Ltd, Malvern, イギリス、ウスターシャー)を用いて、修飾mRNAナノ粒子の粒子サイズ、多分散性インデックス(PDI)およびゼータ電位を測定する(粒子サイズ測定には1× PBSに溶解、ゼータ電位測定には15mM PBSに溶解)。
ー(Wallac Victor 1420 Multilablel Counter; Perkin Elmer, マサチューセッツ州ウォルサム)を用いて測定する。試薬ブランクの蛍光値を、各試料から差し引き、遊離修飾RNAの割合を、生の試料の蛍光強度を、撹乱された試料の蛍光値で割ることにより測定する。
ヒト胚腎上皮細胞(HEK293)および肝細胞癌上皮細胞(HepG2)(LGC standards GmbH, ドイツ、ヴェーゼル)を96ウェルプレート(Greiner Bio−one GmbH, ドイツ、フリッケンハウゼン)上に播種し、HEK293細胞のプレートは、I型コラーゲンで前もってコートする。HEK293細胞を、30,000細胞/ウェル・100μl細胞培養培地の密度で播種し、HepG2細胞を、35,000細胞/ウェル・100μl細胞培養培地の密度で播種する。mCherry mRNA(mRNA配列は、配列番号7に示す;およそ160ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示さない;5´キャップ、キャップ1)を含有する製剤を、細胞播種の後に、直接加え、インキュベートする。インビトロ転写(IVT)で用いられた、T7プロモーター、5´非翻訳領域(UTR)および3´UTRを有するmCherry cDNAを、配列番号8に示す。
マウスに、修飾mRNAおよびreLNPを含有する製剤の単回用量を静脈内投与する。マウスに投与された修飾mRNAは、G−CSF(配列番号9にmRNA配列を示す。およそ160ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない;5´キャップ、キャップ1)、IX因子(配列番号10にmRNA配列を示す。およそ160ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない;5´キャップ、キャップ1)またはmCherry(配列番号7にmRNA配列を示す。およそ160ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない;5´キャップ、キャップ1)から選択される。
実施例38.インビトロのVEGF−Aのトランスフェクション
ヒト血管内皮増殖因子アイソフォームA(VEGF−A)修飾mRNA(配列番号19にmRNA配列を示す。およそ160ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない;5´キャップ、キャップ1)を、逆向きトランスフェクションを介して、24マルチ
ウェルプレート中のヒト角化細胞にトランスフェクションした。インビトロ転写(IVT)に用いられたT7プロモーター、5´非翻訳領域(UTR)および3´UTRを有するVEGF−AのcDNAは、配列番号20に示す。ヒト角化細胞は、50〜70%コンフルエンスに達するまで、Invitrogen(カリフォルニア州カールスバッド)から入手されるSupplement S7を入れたEPILIFE(登録商標)培地中で増殖させた。Invitrogen(カリフォルニア州カールスバッド)から入手されるRNAIMAX(登録商標)と複合体化されたVEGF−Aをコードする修飾mRNA(mmRNA)の0、46.875、93.75、187.5、375、750、および1500ngを、細胞にトランスフェクションさせた。RNA:RNAIMAX(登録商標)複合体は、第一に、室温で10分間、5×体積希釈でサプリメントフリーのEPILIFE(登録商標)培地でRNAをインキュベートすることによって形成された。第二のバイアル中で、RNAIMAX(登録商標)試薬を、室温で10分間、10X体積希釈でサプリメントフリーのEPILIFE(登録商標)培地とインキュベートした。次いで、RNAバイアルを、RNAIMAX(登録商標)バイアルと混合し、細胞を滴下させて加える前に、室温で20〜30分間、インキュベートさせた。
製剤緩衝液中で製剤化されたヒトIX因子mmRNA(Gen1;5−メチルシトシンおよびシュードウリジンで完全に修飾)を、筋肉内注射を介してマウスに送達させた。結
果より、IX因子タンパク質は、投与後13時間で計測した際に、血清中で増加していたことが示される。
実施例40.複数部位への投与:筋肉内および皮下
Gen1またはGen2(5−メチルシトシン(5mc)およびシュードウリジン(Ψ)修飾、G−CSF−Gen1;またはN1−5−メチルシトシン(N1−5mc)およびΨ修飾、G−CSF−Gen2)のいずれかとして修飾され、製剤緩衝液中で製剤化されたヒトG−CSF修飾mRNA(配列番号6にmRNA配列を示す。およそ160ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない;5´キャップ、キャップ1)を、筋肉内注射(IM)または皮下注射(SC)を介してマウスに送達させた。3日間(24時間隔)、毎日、4回の投与または2×50ug(2つの部位)に注射を行った。4回目の投与が、採血およびCBC分析の6時間前に行われた。ルシフェラーゼ(IVTに対するcDNA配列は配列番号15に示す。配列番号16にmRNA配列を示す。およそ160ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない;5´キャップ、キャップ1。各シトシンで5メチルシトシンに完全に修飾され、各ウリジン部位でシュードウリジン置換)または製剤緩衝液(F.Buffer)を対照とした。最初のmRNA注射の72時間後(最後のmRNA投与の6時間後)にマウスから採血し、好中球数におけるmRNAにコードされたヒトG−CSFの作用を測定した。投与レジメン、得られた好中球数(千/uL)を表63に示す。表63において、アスタリスク(*)は、統計的有意差(p<0.05)を示す。
5−メチルシトシン(5mc)およびシュードウリジン(Ψ)修飾(Gen1)で修飾されたヒトG−CSF修飾mRNA(配列番号6にmRNA配列を示す。およそ160ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない;5´キャップ、キャップ1);または何も修飾されていないもの、および10%リポプレックス(RNAiMax)で製剤化されたものを、100μlの体積中、50μg RNAの用量でマウスに静脈内(IV)注射で、0、2、および4日目で送達させた。1、5、8日目で好中球を測定した。対照は、非特異的哺乳類RNAまたは製剤緩衝液単独(F.Buffer)とした。1、5および8日目でマウスから採血し、好中球数増加に対するmRNAにコードされたヒトG−CSFの作用を測定した。投与レジメン、得られた好中球数(千/uL;K/uL)を表64に示す。
これらのデータより、リポプレックスで製剤化した5−メチルシチジン/シュードウリジン修飾mRNAは、血中好中球数の特異的増加により明らかなように、I.V.投与経路を介して送達された場合、生物学的に活性であることが示される。他の細胞サブセットには有意な変化はなかった。同様に、非修飾G−CSF mRNAの投与は、好中球数に何も薬理学的な作用は示さなかった。
A.タンパク質発現
ヒトG−CSF修飾mRNA(配列番号6にmRNA配列を示す。およそ160ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない;5´キャップ、キャップ1)およびヒトEPO mmRNA(配列番号9にmRNA配列を示す。およそ160ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない;5´キャップ、キャップ1);G−CSF修飾mRNA(5−メチルシトシン(5mc)およびシュードウリジン(Ψ)で修飾)およびEPO修飾mRNA(N1−5−メチルシトシン(N1−5mc)およびΨで修飾)を、製剤緩衝液(150mM塩化ナトリウム、2mM塩化カルシウム、2mMリン酸塩、0.5mM EDTA(pH6.5))中で製剤化し、100μgの用量で、筋肉内(IM)投与を介してマウスに送達させた。
た。投与の13時間後にマウスから採血し、血清中のヒトポリペプチドの濃度(pg/mL)を測定した(G−CSF群はマウス血清中のヒトG−CSFを測定し、EPO群はマウス血清中のヒトEPOを測定した)。データを表65に示す。
ヒトEPO修飾mRNA(配列番号9にmRNA配列を示す。およそ160ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない;5´キャップ、キャップ1;5−メチルシトシンおよびシュードウリジンで完全に修飾)を、製剤緩衝液中で製剤化し、筋肉内(IM)注射を介してマウスに送達させた。
一度で複数の筋肉内注射部位を用いる試験を設定し、行った。
単回複数用量実験の設計には、製剤緩衝液に溶解したヒトエリスロポエチン(EPO)mmRNA(配列番号9にmRNA配列を示す。およそ160ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない;5´キャップ、キャップ1)、またはG−CSF(配列番号6にmRNA配列を示す。およそ160ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない;5´キャップ、キャップ1)を用いた投与を含めた。投与媒体(F.Buffer)を対照として用いた。EPOおよびG−CSF mmRNAは、各シトシンで5−メチルシトシンで修飾され、各ウリジン部位でシュードウリジン置換されていた。
ヒト顆粒球コロニー刺激因子(G−CSF)(配列番号6にmRNA配列を示す。およそ160ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない;5´キャップ、キャップ1)をコードするmmRNAの変異体をいくつか、修飾ヌクレオチドシュードウリジンおよび5−メチルシトシン(シュードU/5mC)を用いて合成した。これらの変異体には、野生型N末端分泌シグナルペプチド配列(MAGPATQSPMKLMALQLLLWHSALWTVQEA;配列番号21)、分泌シグナルペプチド無し、または他のmRNA由来の分泌シグナルペプチド配列のいずれかをコードするG−CSF構築物が含まれた。これらには、野生型GCSFシグナルペプチド配列が、ヒトα−1−抗トリプシン(AAT)(MMPSSVSWGILLLAGLCCLVPVSLA;配列番号22)、ヒトIX因子(FIX)(MQRVNMIMAESPSLITICLLGYLLSAECTVFLDHENANKILNRPKR;配列番号23)、ヒトプロラクチン(Prolac)(MKGSLLLLLVSNLLLCQSVAP;配列番号24)、またはヒトアルブ
ミン(Alb)(MKWVTFISLLFLFSSAYSRGVFRR;配列番号25)のいずれかのシグナルペプチド配列と置換されている配列が含まれた。
PBMC単離および培養:ナトリウムヘパリンチューブに入った2人のドナー由来のヒト血液50mLを、Research Blood Components(ロットはKP30928およびKP30931)から入手した。各ドナーに対し、血液をプールし、DPBS(SAFC Bioscience 59331C、ロットは071M8408)で70mLまで希釈し、2本の50mLコニカルチューブで均等に分割した。Ficoll Paque (GE Healthcare 17−5442−03、ロットは10074400)の10mLを血液層の下に静かに注入した。チューブを、ゆっくりとした加速およびブレーキで、30分間、2000rpmで遠心した。チューブを取り出し、軟膜PBMC層を静かに、新しい50mLのコニカルチューブへ写し、DPBSで洗浄した。チューブを、10分間、1450rpmで遠心した。
びN1−メチルシュードウリジン100%置換を含有するG−CSF mRNAで、ヒト末梢血単核球によるヒトG−CSFタンパク質の明確な産生が示された。G−CSF産生は、非修飾mRNAと比較して、修飾mRNAの使用により有意に増加し、5−メチルシチジンおよびN1−メチルシュードウリジン含有G−CSF mmRNAが、最も高いレベルのG−CSF産生を示した。自然免疫認識に関しては、非修飾mRNAが相当量のIFNα産生をもたらした一方で、修飾mRNAはIFNαの産生を大きく阻害した。5−メチルシチジンおよびN1−メチルシュードウリジンで完全に修飾されたG−CSF mRNAは、サイトカインを有意には増加させなかった一方で、5−メチルシチジンおよびシュードウリジンで完全に置換されたG−CSF mRNAは、IFNα、TNFαおよびIP10を誘導した。他の多くのサイトカインは、いずれの修飾でも影響を受けなかった。
たとえば、限定されないが、5−メチルシトシンおよびシュードウリジンの化学的修飾等の修飾ヌクレオチドは、哺乳類細胞における自然免疫応答を減少させ、RNAの発現を増加させることが示されている。驚くことに、そして従前には知られていなかったことに、化学的修飾が100%未満である場合、化学的修飾による作用を、漸増させることができる。以前は、化学的修飾の有益な効果を発揮するためには完全な修飾が必要十分条件であり、100%未満のmRNAの修飾はほとんど作用しないと信じられていた。しかしながら、化学的修飾の効果は、完全な修飾ではなくても誘導することができ、その効果は、標的、濃度および修飾に依存するものであることが今回、示された。
5−メチルシトシン(5mC)およびシュードウリジン(シュードU)で修飾されたG−CSF mRNAまたは非修飾G−CSF mRNAの960ngを、3人の健常な血液ドナー(D1、D2、D3)由来の末梢血単核球(PBMC)へLipofectamine 2000 0.8uLでトランスフェクションした。G−CSF mRNA(配列番号6にmRNA配列を示す。およそ160ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない;5´キャップ、キャップ1)は、5mCおよびシュードUで完全に修飾され(100%修飾)、または5mCおよびシュードUで修飾されず(0%修飾)、または5mCおよびシュードUで部分的に修飾された(mRNAは50%修飾、25%修飾、10%修飾、5%修飾、1%修飾または0.1%修飾を含有)。ルシフェラーゼ(配列番号16にmRNA配列を示す。およそ160ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない;5´キャップ、キャップ1。5meCおよびシュードUで完全修飾)の対照試料もまた、G−CSF発現に対して分析された。TNFαおよびIFNαに対しては、Lipofectamine2000、LPS、R−848、ルシフェラーゼ(配列番号16にmRNA配列を示す。およそ160ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない;5´キャップ、キャップ1。5meCおよびシュードUで完全修飾)およびP(I)P
(C)の対照試料がまた分析された。上清を回収し、トランスフェクションの22時間後にELISAを実施し、タンパク質発現を測定した。G−CSF発現を表71に示し、IFNαおよびTNFα発現は、表72に示す。IFNαおよびTNFαの発現は、G−CSF mRNAトランスフェクションによる二次的な作用である可能性がある。mRNAが完全には修飾されていない場合には、G−CSF、IFNαおよびTNFαの化学的修飾量は漸増し得、その変化の傾向は、各標的で同じではないことが表から示される。
ヒト胚腎上皮細胞(HEK293)を、100μlの細胞培養培地中、30,000細胞/ウェルの密度で、96ウェルプレートに播種した。RNAiMAX(登録商標)(Invitrogen、カリフォルニア州カールスバッド)で製剤化された修飾G−CSF mRNA(配列番号6にmRNA配列を示す。およそ160ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない;5´キャップ、キャップ1)の250ngを、ウェルに添加した。G−CSFは、5mCおよびシュードUで完全に修飾され(100%修飾)、または5mCおよびシュードUで修飾されず(0%修飾)、または5mCおよびシュードUで部分的に修飾されている(75%修飾、50%修飾または25%修飾を含有するmRNA)。対照試料(AK5/2、mCherry(配列番号7にmRNA配列を示す。およそ160ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない;5´キャップ、キャップ1;5mCおよびシュードUで完全に修飾)および未処置)もまた分析した。5−メチルシトシンおよびシュードウリジンで完全に修飾されたG−CSF mRNAの半減期は、およそ8〜10時間である。16時間後に上清を回収し、分泌型G−CSFタンパク質をELISAで分析した。表73に、mRNAが完全には修飾していない場合、G−CSFの化学的修飾の量が漸増できることを示す。
修飾RNAを、C57/BL6マウスに筋肉内、皮下、または静脈内で送達させ、ルシフェラーゼを用いた修飾RNAの生体分布を評価した。すべての送達法に用いられた製剤緩衝液には、150mM塩化ナトリウム、2mM塩化カルシウム、2mM Na+リン酸塩(1.4mMリン酸一ナトリウムおよび0.6mMのリン酸二ナトリウムを含む)そして0.5mMエチレンジアミンテトラ酢酸(EDTA)を含有し、水酸化ナトリウムを用いて、ろ過および滅菌される前に、最終pH6.5に調節された。1×濃度を、送達緩衝液として用いた。マウスに送達されるリポプレックス化溶液を作製するために、第一のバイアルで、50μgのRNAを、室温で10分間、送達緩衝液中で平衡化させ、第二のバイアルで、10μlのRNAiMAX(登録商標)を、室温で10分間、送達緩衝液中で平衡化させた。平衡化の後、バイアルを組み合わせ、送達緩衝液を、最終体積100μlになるように加え、次いで、室温で20分間、インキュベートした。ルシフェリンを、150mg/kgで、各マウスに腹腔内投与(IP)し、15分〜30分の間、ルシフェリン露出曲線のプラトー層の間に画像撮影を行った。ルシフェリンを作製するために、1gのD−ルシフェリンカリウム塩またはナトリウム塩を、66.6mlの滅菌リン酸緩衝溶液(DPBS)(Mg2+またはCa2+を含有しない)に溶解させ、15mg/mlの溶液を作製した。可能な限り遮光しながら、溶液を静かに混合し、窒素でパージする前に0.2μmのシリンジフィルターを通し、分注し、そして−80℃で凍結させた。投与の日、もしルシフェリンが溶解していなければ、水浴を用いて溶かし、ゆっくりと混合し、氷上に置いた。
マウスに、5−メチルシトシンおよびシュードウリジンで完全に修飾された修飾ルシフェラーゼmRNA(Naked−Luc)、5−メチルシトシンおよびシュードウリジンで完全修飾されたリポプレックス化修飾ルシフェラーゼmRNA(リポプレックス−luc)(IVT cDNA配列は配列番号15に示す。配列番号16にmRNA配列を示す。およそ160ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない;5´キャップ、キャップ1;各シトシンで5−メチルシトシンで完全に置換、および各ウリジン部位でシュードウリジンで置換)、リポプレックス化修飾顆粒球コロニー刺激因子(G−CSF)mRNA(配列番号6にmRNA配列を示す。およそ160ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない;5´キャップ、キャップ1;5−メチルシトシンおよびシュードウリジンで完全に修飾)(リポプレックス−サイトカイン)、または製剤緩衝液のいずれかを、各製剤に対し、50μgの修飾RNA(50μlの注射体積)の単回用量で、右後肢に、5μgの修飾RNA(50μlの注射体積)の単回用量で、左後肢に、筋肉内(I.M.)投与した。投与後2、8および24時間での各群のルシフェラーゼ発現シグナルの平均生物発光を、表74に示す。5μgおよび50μgの修飾RNA製剤(リポプレックス含有および非含有)の注射部位で、生物発光は陽性シグナルを示した。
修飾ルシフェラーゼmRNA(Naked−Luc)、リポプレックス化修飾ルシフェラーゼmRNA(リポプレックス−luc)、リポプレックス化修飾G−CSF mRNA(リポプレックス−G−CSF)または製剤緩衝液のいずれかを、50μgの修飾mRNAの単回用量(各製剤に対し100μlの注射体積)で、皮下(S.C.)投与した。投与2時間、8時間、および24時間後での、各群のルシフェラーゼ発現シグナルに対する生物発光平均を、表75に示す。50μgの修飾mRNA製剤(リポプレックス含有および非含有)の注射部位で、生物発光は陽性シグナルを示した。
修飾ルシフェラーゼmRNA(Naked−Luc)、リポプレックス化修飾ルシフェラーゼmRNA(リポプレックス−luc)、リポプレックス化修飾G−CSF mRNA(リポプレックス−G−CSF)または製剤緩衝液のいずれかを、50μgの修飾mRNAの単回用量(各製剤に対し100μlの注射体積)で、静脈内(I.V.)投与した。投与2時間後での、各群の脾臓におけるルシフェラーゼ発現シグナルに対する生物発光平均を、表76に示す。50μgの修飾mRNA製剤(リポプレックス含有)の脾臓において、生物発光は陽性シグナルを示した。
一度に複数の皮下注射または筋肉内注射を用いた試験を設計し、mmRNA薬剤曝露を増加させ、タンパク質産生を改善する方法を調査した。発現タンパク質産生の検出に加えて、検証された動物由来の試料を分析することで、タンパク質の生理学的機能評価もまた測定された。
mRNA)あたりの産物(EPO)が、単位薬剤あたりの単回用量産物(0.14)で割られる。その結果、2となる。同様に、処置群4に対しては、1.1の値または単位薬剤(mmRNA)あたりの産物(EPO)は、単位薬剤あたりの単回用量産物(0.14)で割られる。その結果、7.9となる。結果として、投与分割係数(DSF)を、分割用量レジメンの有効性の指標として用いてもよい。総1日用量の任意の単回投与に対しては、DSFは、1と等しくなるはずである。それゆえ、分割用量レジメンにおいて、この値より大きいDSFはいずれも、有効性が増加したことを示す。
実施例49.エキソソームの定量化
本発明のmmRNAの量および局在性を、単離エキソソームにおける量(当初、経時的または残留基準)を測定することにより、決定することができる。本試験において、通常、mmRNAはコドン最適化されており、内因性mRNA由来の配列が明らかであるため、GibbingsらのPCT/IB2009/005878(参照によりその全体で本明細書に援用される)の方法を用いて、天然または野生型の内因性mRNAのレベルと比較して、mmRNAのレベルを定量する。
実施例50.修飾mRNAトランスフェクション
A.逆向きトランスフェクション
コラーゲンコートされた24ウェルの組織培養プレート中での実験実施のために、角化細胞を、1×105の細胞密度で播種する。コラーゲンコートされた96ウェルの組織培養プレート中での実験実施のために、角化細胞を、0.5×105の細胞密度で播種する。トランスフェクションされる各修飾mRNA(mmRNA)のために、修飾mRNA:RNAIMAX(登録商標)を、上述のように調製し、時間内(たとえば、細胞が組織培養プレートに付着する前、細胞播種から6時間)に、マルチウェルのプレート中の細胞と混合する。
コラーゲンコートされた24ウェルの組織培養プレート中では、角化細胞を、0.7×105の細胞密度で播種する。コラーゲンコートされた96ウェルの組織培養プレート中での実験実施のためには、角化細胞を、0.3×105の細胞密度で播種する。角化細胞は、24時間以上で、70%を超えるコンフルエンスの状態にまで増殖する。トランスフェクションされる各修飾mRNA(mmRNA)のために、修飾mRNA:RNAIMA
X(登録商標)を、上述のように調製し、細胞播種し組織培養プレートに付着してから24時間後、マルチウェルのプレートの細胞にトランスフェクションする。
角化細胞を、Invitrogen(カリフォルニア州カールスバッド)から入手されるSupplement S7を補充したEPILIFE培地中で、70%を超えるコンフルエンスで増殖させる。角化細胞の1セットを、RNAIMAX(Invitrogenから入手)で複合体化された化学的修飾mRNA(mmRNA)の300ngで逆向きトランスフェクションさせた。角化細胞の他のセットは、RNAIMAX(登録商標)(Invitrogenから入手)で複合体化された修飾mRNAの300ngで前向きトランスフェクションさせる。修飾mRNA:RNAIMAX(登録商標)複合体は、最初にRNAを、Supplement無しのEPILIFE(登録商標)培地と、5×の体積希釈で、室温で10分間、インキュベートすることにより形成される。
角化細胞を、Invitrogen(カリフォルニア州カールスバッド)から入手されるSupplement S7を補充したEPILIFE(登録商標)培地中で、70%を超えるコンフルエンスで増殖させる。Invitrogen(カリフォルニア州カールスバッド)から入手されるRNAIMAX(登録商標)で複合体化された、修飾mRNAの0ng、46.875ng、93.75ng、187.5ng、375ng、750ngまたは、1500ngのいずれかで、角化細胞を逆向きトランスフェクションする。修飾mRNA:RNAIMAX(登録商標)複合体は上述のように形成される。培養培地中の分泌型ヒトG−CSF濃度は、各修飾mRNAの各濃度に対し、3重で、トランスフェクションの0、6、12、24および48時間後で測定される。トランスフェクションされたヒト角化細胞からのヒトG−CSFの分泌は、InvitrogenまたはR&D Systemsから入手されるELISAキットを用いて、メーカーの推奨説明書に従い、定量する。
実施例51.ELISAアッセイを用いた、修飾mRNAに対する細胞性自然免疫応答の検出
インビトロトランスフェクションされたヒト角化細胞から分泌されたヒト腫瘍壊死因子α(TNFα)、ヒトインターフェロンβ(IFNβ)およびヒト顆粒球コロニー刺激因子(G−CSF)に対する酵素結合免疫吸着測定法(ELISA)を、細胞性自然免疫応答の検出のために検証する。角化細胞を、Invitrogen(カリフォルニア州カールスバッド)から入手されるヒト角化細胞増殖サプリメントを補充されたEPILIFE(登録商標)中(ヒドロコルチゾンは非存在)で、70%を超えるコンフルエンスで増殖させる。分泌型TNFα角化細胞を、0ng、93.75ng、l87.5ng、375ng、750ng、1500ngまたは3000ngの化学的修飾mRNA(Invitrogenから入手されるRNAIMAX(登録商標)で、複合体化されている)で、上述のように3重で、逆向きトランスフェクションする。Invitrogenから入手さ
れるELISAキットを用いて、メーカーのプロトコールに従い、化学的修飾mRNAのそれぞれに対し、トランスフェクションの24時間後の培養培地中の分泌型TNFαを測定する。
実施例52.ヒト顆粒球コロニー刺激因子(G−CSF)修飾mRNAにより誘導される細胞増殖の分析
ヒト角化細胞を、24ウェルのコラーゲンコートされたTRANSWELL(登録商標)(Coming, マサチューセッツ州ローウェル)共培養組織培養プレート中で、70%を超えるコンフルエンスで、Invitrogenから入手されるSupplement S7を補充されたEPILIFE(登録商標)培地で増殖させる。Invitrogenから入手されるRNAIMAXで複合体化された、指定の化学的修飾mRNA(mmRNA)の750ngで、上述のように、3重で、逆向きトランスフェクションを行う。修飾mRNA:RNAIMAX:複合体は、上述のように形成される。角化細胞培地は、トランスフェクション後、6〜8時間で交換する。トランスフェクションの42時間後、0.4μm孔の半透過性ポリエステル膜を備えた、24ウェルTRANSWELL(登録商標)プレートインサートを、ヒトGCSF修飾mRNAをトランスフェクションした角化細胞を含有する培養プレート内に静置する。
実施例53.緩衝液製剤の試験
緩衝液に溶解した、G−CSF修飾mRNA(配列番号6。およそ160ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない;5´キャップ、キャップ1。N1−シュードウリジンおよび5−メチルシトシンで完全に修飾)または、IX因子修飾mRNA(配列番号10。およそ160ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない;5´キャップ、キャップ1。N1−シュードウリジンおよび5−メチルシトシンで完全に修飾)を、修飾mRNA用量200ug/ラット、50ulの注射体積で、ラット(n=5)に筋肉内投与する(表78に記述される)。修飾mRNAは、水中で1〜2日間、凍結乾燥される。次いで、以下に列挙される緩衝液中で再構成され、6mg/mlの標的濃度にする。OD260で濃度を測定する。投与の前に、試料を適切な緩衝液で4mg/mlまで希釈する。
Sprague−Dawleyラット(n=8、メス4、オス4)に、28日にわたり、8回(週に2回)、静脈内注射する。ラットに、脂質ナノ粒子で製剤化されたルシフェラーゼ修飾mRNAのヒトG−CSF修飾mRNAを0.5mg/kg、0.05mg/
kg、0.005mg/kgもしくは0.0005 mg/kg、生理食塩水に溶解したヒトG−CSF修飾mRNAを0.5mg/kg、ヒトG−CSFタンパク質 Neupogenを0.2mg/kg、または、脂質ナノ粒子で製剤化された翻訳不可能なヒトG−CSF修飾mRNAを注射する。血清を、前もって決定された時間間隔の間で採取し、G−CSFタンパク質発現(週の最初の投与の8、24および72時間後)、全血球数および白血球数(週の最初の投与の24および72時間後)ならびに、臨床化学的所見(週の最初の投与の24および72時間後)を評価する。29日目(最後の投与の4日後)で、ラットを殺処分し、全血球数、白血球数、臨床化学所見、タンパク質発現を測定し、組織病理学および解剖により、主要器官への作用を評価する。さらに、抗体アッセイを、29日目でラットに実施する。
実施例55.ルシフェラーゼLNP インビボ試験
ルシフェラーゼ修飾mRNA(配列番号16。およそ160ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない;5´キャップ、キャップ1。N1−シュードウリジンおよび5−メチルシトシンで完全に修飾)を、シリンジポンプ法を用いて、脂質ナノ粒子(LNP)として製剤化した。LNPは、修飾mRNAに対する総脂質の重量比20:1、最終脂質モル比50:10:38.5:1.5(DLin−KC2−DMA:DSPC:コレステロール:PEG−DMG)で製剤化された。表79に示されるように、ルシフェラーゼLNP製剤を、粒子サイズ、ゼータ電位および封入で特徴付けた。
5−メチルシトシン(5mC)およびシュードウリジン(シュードU)で修飾されたG−CSF mRNA、または非修飾G−CSF mRNAを480ng、0.4μLのLipofectamine2000を用いて、3人の健常な血液ドナー(D1、D2およびD3)由来の末梢血単核球(PBMC)へトランスフェクションした。G−CSF mRNA(配列番号6;およそ160ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない;5´キャップ、キャップ1)は、5mCおよびシュードUで完全に修飾され(100%修飾)、または5mCおよびシュードUで修飾されず(0%修飾)、または5mCおよびシュードUで部分的に修飾された(mRNAは75%修飾、50%修飾、または25%修飾を含有)。ルシフェラーゼ(配列番号16にmRNA配列を示す。およそ160ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない;5´キャップ、キャップ1。5meCおよびシュードUで完全修飾)の対照試料もまた、G−CSF発現に対して分析された。TNFαおよびIFNαに対しては、Lipofectamine2000、LPS、R−848、ルシフェラーゼ(配列番号16にmRNA配列を示す。およそ160ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない;5´キャップ、キャップ1。5meCおよびシュードUで完全修飾)およびP(I)P(C)の対照試料がまた分析された。上清を回収し、トランスフェクションの22時間後にELISAを実施し、タンパク質発現を測定した。G−CSF発現を表83に示し、IFNαおよびTNFαの発現を、表84に示す。IFNαおよびTNFαの発現は、G−CSF mRNAトランスフェクションによる二次的な作用である可能性がある。表83および84より、mRNAが完全には修飾されていない場合、G−CSF、インターフェロンα(IFNα)および腫瘍壊死因子α(TNFα)の化学的修飾の量が徐々に変化し、その変化傾向は、各標的で同じではないことが示される。
かなり上昇することが示されている(IFNαに対しては100倍、TNFαに対しては27倍)。部分的な修飾では、修飾が次第に低下すると直線的な関係性が現れ、タンパク質/サイトカイン比率の低下をもたらすことが示されている。
5−メチルシトシン(5mC)およびシュードウリジン(シュードU)で修飾されたG−CSF mRNA、または非修飾G−CSF mRNAの500ngを、0.4μLのLipofectamine2000で、3人の健常な血液ドナー(D1、D2およびD3)由来の末梢血単核球(PBMC)へとトランスフェクションした。G−CSF mRNA(配列番号6。およそ160ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない;5´キャップ、キャップ1)は、5mCおよびシュードUで完全に修飾され(100%修飾)、または5mCおよびシュードUで修飾されず(0%修飾)、または5mCおよびシュードUで部分的に修飾された(mRNAは50%修飾、25%修飾、10%修飾、5%修飾、1%修飾または0.1%修飾を含有)。mCherry(配列番号7にmRNA配列を示す。およそ160ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない;5´キャップ、キャップ1。5meCおよびシュードUで完全修飾)、および5−メチルシトシンおよびシュードウリジンで完全に修飾されたG−CSF(対照G−CSF)の対照試料もまた、G−CSF発現に対して分析された。腫瘍壊死因子(TNFα)およびインターフェロンα(IFNα)に対しては、Lipofectamine2000、LPS、R−848、ルシフェラーゼ(配列番号16にmRNA配列を示す。およそ160ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない;5´キャップ、キャップ1。5meCおよびシュードUで完全修飾)およびP(I)P(C)の対照試料がまた分析された。上清をトランスフェクションの6時間および18時間後に回収し、ELISAを実施して、タンパク質発現を測定した。ドナー1のG−CSF、IFNα、およびTNFαの発現は、表86に示し、ドナー2は表87、ドナー3は表88に示す。
A.単一トランスフェクション
ヒト初代包皮線維芽細胞(BJ線維芽細胞)を、American Type Culture Collection (ATCC)(カタログ# CRL−2522)より得て、10%ウシ胎児血清を補充したEagle’s Minimum Essential Medium(ATCC、カタログ# 30−2003)中で、37℃、5%CO2下で増殖させた。BJ線維芽細胞を、0.5mlの培養培地中、300,000細胞/ウェルの密度で、24ウェルプレート上に播種した。5−メチルシトシンおよびシュードウリジンで完全に修飾された、修飾G−CSF mRNA(配列番号6にmRNA配列を示す。およそ140ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない;5´キャップ、キャップ1)(Gen1)、または、キャップ0、キャップ1もしくはキャップの無い、5−メチルシトシンおよびN1−メチルシュードウリジンで完全に修飾された、修飾G−CSF mRNA(Gen2)の250ngを、Lipofectamin2000(Invitrogen、カタログ# 11668−019)を用いて、メーカーのプロトコールに従い、トランスフェクションした。polyI:C(PIC)、Lipofectamine2000(Lipo)、天然ルシフェラーゼmRNA(配列番号16にmRNA配列を示す。およそ160ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない;5´キャップ、キャップ1)および天然G−CSF mRNAの対照試料もまた、トランスフェクションした。18時間後に細胞を回収し、総RNAを単離し、メーカーのプロトコールに従い、RNeasyマイクロキット(カタログ #74004)を用いて、DNASE(登録商標)で処理した。総RNAの100ngを、メーカーのプロトコールに従い、High capacity cDNA Reverse Transcriptionキット(カタログ #4368814)を用いた、cDNA合成に用いた。次いで、c
DNAを、メーカーのプロトコールに従い、Biorad CFX384機器のSybrGreenを用いて、定量リアルタイムPCRにより、自然免疫応答遺伝子の発現に対して分析した。表89に、ハウスキーピング遺伝子HPRT(ヒポキサンチンホスホリボシルトランスフェラーゼ)と比較した、自然免疫応答転写物の発現レベルを示し、HPRTに対し相対的な誘導の倍数として表す。表において、標準的測定基準のパネルには、以下が含まれる:RIG−Iは、レチノイン酸誘導遺伝子1(retinoic acid inducible gene 1)、IL6は、インターロイキン−6、OAS−1は、オリゴアデニレート合成酵素1(oligoadenylate synthetase 1)、IFNbは、インターフェロン−β、AIM2は、absent in melanoma−2、IFIT−1は、interferon−induced protein with tetratricopeptide repeats 1、PKRは、タンパク質キナーゼR(protein kinase R)、TNFaは、腫瘍壊死因子α、およびIFNaは、インターフェロンαである。
ヒト初代包皮線維芽細胞(BJ線維芽細胞)を、American Type Culture Collection (ATCC)(カタログ# CRL−2522)より得て、10%ウシ胎児血清を補充したEagle’s Minimum Essential Medium(ATCC、カタログ# 30−2003)中で、37℃、5%CO
2下で増殖させた。BJ線維芽細胞を、0.5mlの培養培地中、300,000細胞/ウェルの密度で、24ウェルプレート上に播種した。修飾していない修飾G−CSF mRNA(配列番号6にmRNA配列を示す。およそ140ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない;5´キャップ、キャップ1)、5−メチルシトシンおよびシュードウリジンで完全に修飾された、修飾G−CSF mRNA(Gen1)、または、5−メチルシトシンおよびN1−メチルシュードウリジンで完全に修飾された、修飾G−CSF mRNA(Gen2)の250ngを、メーカーのプロトコールに従い、5日間、毎日、トランスフェクションした。Lipofectamine2000(L2000)およびmCherry mRNA(配列番号7にmRNA配列を示す。およそ160ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない;5´キャップ、キャップ1。5−メチルシチジンおよびシュードウリジンで完全に修飾)の対照試料もまた、5日間、毎日、トランスフェクションした。表90に結果を示す。
メスBALB/Cマウス(n=5)に、5´キャップ、キャップ1を有するG−CSF
mRNA(GCSF mRNA unmod)(配列番号6にmRNA配列を示す。およそ160ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない)、5−メチルシトシンおよびシュードウリジンで完全に修飾されたG−CSF mRNA(GCSF mRNA
5mc/pU)、5−メチルシトシンおよびN1−メチルシュードウリジンで完全に修
飾され、5´キャップを有するG−CSF mRNA(GCSF mRNA 5mc/N1pU)、または5−メチルシトシンおよびN1−メチルシュードウリジンで完全に修飾され、5´キャップの無いG−CSF mRNA(GCSF mRNA 5mc/N1 pU no cap)、またはR848もしくは5%スクロースのいずれかの対照で、筋肉内注射を行った(表91に記述される)。投与の8時間後で血液を採取し、ELISAを用いてG−CSFおよびインターフェロンα(IFNα)のタンパク質レベルを測定し、その結果を表81に示す。
修飾mRNAのタンパク質産生を、修飾G−CSF mRNAもしくは修飾IX因子mRNAの、メスSprague Dawleyラット(n=6)への送達により評価した。5−メチルシトシンおよびシュードウリジンで完全に修飾されたG−CSF mRNA(配列番号6にmRNA配列を示す。およそ160ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない;5´キャップ、キャップ1)(G−CSF Gen1)、5−メチルシトシンおよびN1−メチルシュードウリジンで完全に修飾されたG−CSF mRNA(G−CSF Gen2)、または、5−メチルシトシンおよびシュードウリジンで完全に修飾されたIX因子mRNA(配列番号10にmRNA配列を示す。およそ160ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない)(IX因子 Gen1)、を400μg(100μl)、凍結乾燥形態から5%スクロース中で再構成させ、ラットに注射した。注射の8時間後に血液を採取し、血清中のG−CSFタンパク質レベルをELISAにより測定した。表92に8時間後の血清G−CSFタンパク質レベルを示す。
修飾RNAの完全性を維持するための保存条件をより良く把握するために、安定性実験を実施した。非修飾G−CSF mRNA(配列番号6にmRNA配列を示す。およそ160ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない;5´キャップ、キャップ1)、5−メチルシトシンおよびシュードウリジンで完全に修飾されたG−CSF mRNA(配列番号6にmRNA配列を示す。およそ160ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない;5´キャップ、キャップ1)、および5−メチルシトシンおよびシュードウリジンで完全に修飾され、0.75%体積のRNAIMAX(登録商標)でリポプレックス化されたG−CSF mRNAを、50℃、40℃、37℃、25℃、4℃、または−20℃で保存した。0時間、2時間、6時間、24時間、48時間、5日間および14日間、mRNAを保存した後、そのmRNAを、Bio−Rad EXPERION(登録商標)システムを用いた電気泳動により分析した。また、修飾、非修飾、およびリポプレックス化されたG−CSF mRNAを、RNASTABLE(登録商標)(Biomatrica, Inc. カリフォルニア州サンディエゴ)中で40℃、または、水中で−80℃もしくは40℃で、35日間、保存し、電気泳動により分析した。
実施例62.製剤化mRNAの発現に対する化学的修飾の影響
5−メチルシトシンおよび2´フルオロウリジンで完全に修飾されたルシフェラーゼm
RNA(配列番号16。およそ140ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない;5´キャップ、キャップ1)を、生理食塩水またはDLin−MC3−DMA中で製剤化し、げっ歯類に、0.5mg/kg、0.05mg/kg、0.005mg/kgおよび/または0.0005mg/kgの用量で、静脈内、筋肉内または皮下に投与する。5−メチルシトシンおよびシュードウリジンで完全に修飾されたルシフェラーゼmRNA(配列番号16。およそ160ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない;5´キャップ、キャップ1)を、DLin−MC3−DMA中で製剤化し、げっ歯類に、0.5mg/kg、0.05mg/kg、0.005mg/kgおよび/または0.0005mg/kgの用量で、筋肉内または皮下に投与する。DLin−MC3−DMA製剤は、投与の前に分析し、平均サイズとゼータ電位を測定する。投与の2時間後、8時間後、24時間後、72時間後、96時間後、144時間後および168時間後にげっ歯類を撮像し、生物発光を、光子/秒で、各製剤および投与経路に対して、測定する。
実施例63.PLGA製剤化mRNAの発現
A.ルシフェラーゼPLGAマイクロスフェアの合成および特徴付け
5−メチルシトシンおよびN1−メチルシュードウリジンで完全に修飾されたルシフェラーゼmRNA(配列番号16。およそ140ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない;5´キャップ、キャップ1)、2−チオウリジンで置換されたウリジンの25%で修飾されたルシフェラーゼmRNA、および5−メチルシトシンで置換されたシトシンの25%で修飾されたルシフェラーゼmRNA、N1−メチルシュードウリジンで完全に修飾されたルシフェラーゼmRNA、またはシュードウリジンで完全に修飾されたルシフェラーゼmRNAを、1×TE緩衝液中で再構成し、次いで、PLGAマイクロスフェア中で製剤化した。PLGAマイクロスフェアは、PLGAエステルキャップ(Lactel、Cat# B6010−2、固有粘度0.55−0.75、 50:50 LA:GA)、ポリビニルアルコール(PVA)(Sigma、Cat# 348406−25G、MW 13−23k)ジクロロメタンおよび水を用いた、当分野で公知の方法である、水/油/水の二重乳状化法を用いて合成された。簡潔に述べると、TE緩衝液に4mg/mlで溶解したmRNA0.4ml(W1)を、200mg/mlのPLGAの濃度でジクロロメタン(DCM)に溶解したPLGA(O1)を2ml添加した。W1/O1エマルションを、30秒、スピード5(約19,000rpm)でホモジナイズ(IKA
Ultra−Turrax Homogenizer、T18)した。次いで、W1/O1エマルションに、250mlの1%PVA(W2)を加え、1分、スピード5(約19,000rpm)でホモジナイズした。製剤を3時間、攪拌し続け、次いで、100μmのナイロンメッシュストレイナー(Fisherbrand Cell Strainer, Cat # 22−363−549)に通して大きな凝集物を除去し、最後に、遠心により洗浄した(10分、9,250rpm、4℃)。上清を棄て、PLGAペレットを、5〜10mlの水に再懸濁し、これを2回繰り返した。洗浄後、水で再懸濁し、100〜200μlのPLGAマイクロスフェア試料を用いて、レーザー回析(Malvern Mastersizer2000)により製剤の粒子サイズを計測した。洗浄された製剤を、液体窒素中で凍結させ、次いで、2〜3日間、凍結乾燥させた。
トランスフェクションの前日、20,000のHeLa細胞(ATCC no. CCL−2;ヴァージニア州マナサス)を、トリプシン−EDTA溶液(LifeTechnologies, ニューヨーク州グランドアイランド)での処置により回収して、1ウェルあたり、総量で100μlのEMEM培地(10%FCSおよび1×Glutamaxを補充)の96ウェルの細胞培養プレート(Corning,ヴァージニア州マナサス)に播種した。細胞を、一晩、5%CO2雰囲気下、37oCで増殖させた。翌日、83ngの脱製剤化ルシフェラーゼmRNA PLGAマイクロスフェア試料、脱製剤化ルシフェラーゼmRNA対照(Deform対照)または、非製剤化ルシフェラーゼmRNA対照(Unfomul対照)を、OPTI−MEM(LifeTechnologies, ニューヨーク州グランドアイランド)の最終量10ulで希釈した。Lipofectamine 2000 (LifeTechnologies, ニューヨーク州グランドアイランド)をトランスフェクション試薬として用いて、0.2μlを、最終量10ulのOPTI−MEM中で希釈した。室温での5分間のインキュベーションの後、両溶液を混合し、さらに室温で15分、インキュベートした。次いで、20μlの混合溶液を、HeLa細胞を含有する細胞培養培地100μlに添加した。次いで、前述のようにプレートをインキュベートした。
A.無血清培地
ヒトIX因子mRNA(配列番号10にmRNA配列を示す。およそ160ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない;5´キャップ、キャップ1;5−メチルシトシンおよびシュードウリジンで完全に修飾)を、無血清培地にトランスフェクションした。細胞培養上清を回収し、ペプチドの2次元HPLC分離を行う前に、トリプシン消化に供した。マトリックス支援レーザー脱離イオン法を用いて、ペプチドを検出した。8つのペプチドが検出され、その検出されたペプチドのうち7つが、IX因子に特有のものである。これらの結果より、無血清培地にトランスフェクションされたmRNAが、完全長のIX因子タンパク質を発現できたことが示唆される。
250ngのコドン最適化ヒトIX因子mRNA(配列番号10にmRNA配列を示す。5−メチルシトシンおよびシュードウリジンで完全に修飾;およそ160ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない;5´キャップ、キャップ1)を、10%FBSの存在下、DMEM中で、Lipofectamine2000を用いて、HEK293A細胞にトランスフェクションした(150,000細胞/ウェル)。トランスフェクション複合体を、トランスフェクションの3時間後、除去した。トランスフェクション後、3、6、9、12、24、48および72時間で、細胞を回収した。総RNAを単離し、cDNA合成に用いた。cDNAを、コドン最適化IX因子特異的プライマーセットを用いた定量リアルタイムPCRによる分析に供した。ヒトヒポキサンチンホスホリボシルトランスフェラーゼ1(HPRT)レベルを、正規化に用いた。データは、3時間の時点でのmRNAレベルを100%として考慮して、検出できたmRNAのパーセントとしてプロットした。5−メチルシトシンおよびシュードウリジンで完全に修飾されたIX因子修飾mRNAのヒト胚腎293(HEK293)細胞中の半減期は、約8〜10時間である。
実施例65.生理食塩水製剤:皮下投与
ヒトG−CSF修飾mRNA(配列番号6にmRNA配列を示す;およそ160ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない;5´キャップ、キャップ1;5−メチルシトシンおよびシュードウリジンで完全に修飾)、およびヒトEPO修飾mRNA(配列番号9にmRNA配列を示す;およそ160ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない;5´キャップ、キャップ1;5−メチルシトシンおよびシュードウリジンで完全に修飾)を、生理食塩水中で製剤化し、筋肉内(IM)注射、100ugの用量で、マウスに送達させた。
DLin−KC2−DMA、Teta−5−Lap、DLin−DMA、DLin−K−DMA、C12−200、DLin−MC3−DMAの製剤(脂質:mRNA比は20:1)を、安定性に対する、粒子サイズ、多分散性指標および封入効率を、室温で評価した。ほとんどのナノ粒子は、室温で少なくとも1か月、安定である(表96および97に示す)。
生理食塩水中で製剤化された、mCherry修飾mRNA(配列番号7にmRNA配列を示す;およそ160ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない;5´キャップ、キャップ1;5−メチルシトシンおよびシュードウリジンで完全に修飾)、およびルシフェラーゼ修飾mRNA(配列番号16にmRNA配列を示す;およそ160ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない;5´キャップ、キャップ1;5−メチルシトシンおよびシュードウリジンで完全に修飾)を、ラットの硝子体内に送達させた(表98に記述される)。試料は、生理食塩水のみを硝子体内に送達させた対照と比較された。
マウスに、200μgのG−CSF修飾mRNA(配列番号6にmRNA配列を示す;およそ160ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない)(5´キャップで修飾されていない、キャップ1(非修飾)、5−メチルシトシンおよびシュードウリジンおよび5´キャップ、キャップ1で完全に修飾された(Gen1)、または5−メチルシトシンおよびN1−メチルシュードウリジン、および5´キャップ、キャップ1で完全に修飾された(Gen2 キャップ)、または、キャップ無し(Gen2 非キャップ))を筋肉内注射した。R−848、5%スクロースおよび非処置マウスの対照もまた分析された。8時間後に血清をマウスから採取し、インターフェロンα(IFNα)発現を分析した。結果を表99に示す。
HEK293細胞を、修飾mRNA(mmRNA)VEGF−A(配列番号19にmRNA配列を示す;およそ160ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない;5´キャップ、キャップ1;5−メチルシトシンおよびシュードウリジンで完全に修飾)(表100に示される濃度で、Lipofeatamine2000(Invitrogen(カリフォルニア州カールスバッド)より入手)で複合体化されている)でトランスフェクションした。タンパク質発現をELISAにより検出し、タンパク質(pg/ml)を表100に示す。
トランスフェクションの前日、20,000個のHeLa細胞(ATCC no. CCL−2;ヴァージニア州マナサス)を、トリプシン/EDTA溶液(LifeTechnologies, ニューヨーク州グランドアイランド)での処理により回収し、1ウェルあたり総量100μlのEMEM培地(10%FCSおよび1×Glutamaxを補充)の96ウェル細胞培養プレート(Corning,ヴァージニア州マナサス)に播種した。細胞は、37℃、5%CO2雰囲気下で、一晩増殖させた。翌日、表101に記述される化学的修飾を受けた緑蛍光タンパク質(GFP)(配列番号18にmRNA配列を示す;およそ160ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない;5´キャップ、キャップ1)修飾mRNAの37.5ngまたは75ngを、OPTI−MEM(LifeTechnologies, ニューヨーク州グランドアイランド)で最終体積10μlに希釈した。Lipofectamine 2000(LifeTechnologies, ニューヨーク州グランドアイランド)をトランスフェクション試薬として用いて、0.2ulをOPTI−MEMで最終体積10μlに希釈した。室温で5分間のインキュベーションの後、両溶液を混合して、室温でさらに15分インキュベートした。次いで、HeLa細胞を含有する100μlの細胞培養培地に20μlの混合溶液を添加し、室温でインキュベートした。
A.試験設計
Sprague−Dawleyラット(n=8、メス4、オス4)に、修飾ルシフェラーゼmRNA(配列番号16にmRNA配列を示す;およそ160ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない;5´キャップ、キャップ1;5−メチルシトシンおよびシュードウリジンで完全に修飾)を、表102の投与チャートに概略があるように、注射により投与した。対照群には、製剤緩衝液(F.Buffer)を投与した。7日後、ラットを殺処分した。
mRNAの投与の前、および投与の7日後にラットの体重を計測した。表103に、性別で分けて検証した群当たりの平均体重増加と体重増加率を示す。すべての動物は体重が増加し続け、振る舞いも正常であった。分析した各群は、試験の経過中、およそ同じ量の食物を摂取した。
7日後、ラットを殺処分し、電解質を測定するために試料を採取した。各群のカルシウム、重炭酸、カリウム、リン、塩素およびナトリウムのレベルを分析した。結果を表104に示す。7日後、ラットの電解質に変化は認められなかった。
7日後、ラットを殺処分し、血液学的レベルを測定するために試料を採取した。赤血球(RBC)、ヘマトクリット(HGT)、平均赤血球容積(MCV)、ヘモグロビン(HGB)、平均赤血球ヘモグロビン(MCH)および平均赤血球ヘモグロビン濃度(MCHC)を、各群に対し測定した。結果を表105に示す。投与の7日後において、血球数または血液凝固因子に変化は無かった。
7日後、ラットを殺処分し、白血球数を測定するために試料を採取した。好中球(分葉核好中球の割合)、単球、好塩基球、リンパ球、好酸球および白血球(WBC)を各群に対し測定した。結果を表106に示す。表106において、「NT」は、検証しなかった子をと意味する。投与の7日後、白血球数の増加は無く、このことから、炎症は無かったことが示唆される。
7日後、ラットを殺処分し、血清化学分析を行うために試料を採取した。アルカリホスファターゼ(ALP)、アスパラギン酸トランスアミナーゼ(AST)、アラニントランスアミナーゼ(ALT)およびクレアチニンホスホキナーゼ(CPK)を各群に対して測定した。結果を表107に示す。
7日後、ラットを殺処分し、肝臓タンパク質レベルを測定するために試料を採取した。アルブミン、グロブリンおよび総タンパク質のレベルを各群に対し測定した。結果を表108に示す。修飾mRNAを投与された7日後の肝酵素または肝臓タンパク質に変化は認められなかった。
修飾mRNAを投与された7日後のラットの分析より、高用量のmRNAの投与による副作用は発生していない。この分析からは、有効量の30倍もの高用量でも、安全であると思われる。組織病理学的所見からは、注射部位に最小限の炎症が認められたが、注射部位には注射に伴う変化のみが認められ、用量に関連した問題は示唆されない。さらに、筋酵素に変化は無く、筋肉への損傷は無かったことが示唆される。
実施例72.修飾RNAの保管条件
A.有機物質
有機的環境に対するmRNAの耐容性を評価するために、ルシフェラーゼmRNA(配列番号16にmRNA配列を示す;およそ160ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない;5´キャップ、キャップ1;5−メチルシトシンおよびシュードウリジンで完全に修飾)を、室温で、エタノール、メタノールまたはジクロロメタンの溶液中、1mg/mlの濃度で保存した。1時間、6時間、および1日で試料を採取した。試料を水で200ng/μlまで希釈し、ドラフト内で、室温で一晩インキュベートして有機溶媒
を蒸発させた。対照試料は、水に溶解したmRNAで平行して行われた(水対照、有機物質)。バイオアナライザーによる試料の測定では、3つの溶液のそれぞれにおいて、1日間、室温でmRNAは安定であった。
ルシフェラーゼmRNA(配列番号16にmRNA配列を示す;およそ160ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない;5´キャップ、キャップ1;5−メチルシトシンおよびシュードウリジンで完全に修飾)を、3つの異なる緩衝液および水に添加し、mRNA安定性に対する水性溶媒の影響を評価した。mRNAは、クエン酸緩衝液(pH3、100mMクエン酸)、リン酸緩衝生理食塩水(PBS)緩衝液(pH7.4、6.7mリン酸塩および154mM塩化ナトリウム)、TE緩衝液(pH8、10mM トリス−塩酸および1mMエチレンジアミン四酢酸)または水(pH5.5、注射用水(WFI))に、1mg/mlの濃度で、添加した。1時間、6時間および1日で試料を採取し、水で200ng/ulの濃度まで希釈した。対照試料は、水に溶解したmRNAで平行して行われた(水対照、水性物質)。PBS緩衝液、TE緩衝液、および水でのmRNAのインキュベーションでは、1日後のmRNAの完全性には影響はなかった。クエン酸でインキュベートされた試料は、バイオアナライザーにより検出されなかった。
mRNAの安定性に対するpHの影響を調べるために、ルシフェラーゼmRNA(配列番号16にmRNA配列を示す;およそ160ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない;5´キャップ、キャップ1;5−メチルシトシンおよびシュードウリジンで完全に修飾)を、pH5.8、6.5または7.2の水性緩衝液中で、室温で保存した。mRNAをpH試料に加えてから1時間後、1日後および1週間後で試料を採取した。採取後、試料を、1mg/mlの濃度でインキュベートし、次いで、凍結およびバイオアナライザーによる分析の前に水で200ng/ulまで希釈した。評価した5.8〜7.2のpH範囲における室温での保管では、mRNAは1週間後でも安定であった。
mRNA安定性に対する、凍結/融解サイクルの影響を評価するために、製剤緩衝液に溶解したルシフェラーゼmRNA(配列番号16にmRNA配列を示す;およそ160ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない;5´キャップ、キャップ1;5−メチルシトシンおよびシュードウリジンで完全に修飾)を、複数回の凍結/融解サイクルに供した。mRNAは、少なくとも18サイクルの間、安定であることが判明した。
RNAおよび水に製剤で平行して行い、同じ凍結および融解のサイクルを行った。mRNAは、200ng/ulで、バイオアナライザーによる分析を行った際には、3サイクルの凍結乾燥の後でも安定であることが判明した。
mRNAの完全性に対する遠心の影響を評価するために、1mg/mlで水に溶解したルシフェラーゼmRNA(配列番号16にmRNA配列を示す;およそ160ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない;5´キャップ、キャップ1;5−メチルシトシンおよびシュードウリジン)に、4℃で10分間、10kRPM(13.3k xg)を10サイクル行った。対照試料として、mRNAおよび水の試料を、遠心の間、4℃で保存した。200ng/ulで、バイオアナライザーによる分析を行った際には、10サイクルの遠心の後でもmRNAは安定であることが判明した。
トランスフェクションの前日、20,000のHeLa細胞(ATCC no. CCL−2;ヴァージニア州マナサス)を、トリプシン−EDTA溶液(LifeTechnologies, ニューヨーク州グランドアイランド)での処理により回収して、1ウェルあたり、総量で100μlのEMEM培地(10%FCSおよび1×Glutamaxを補充)の96ウェルの細胞培養プレート(Corning,ヴァージニア州マナサス)に播種した。細胞を、一晩、5%CO2雰囲気下、37oCで増殖させた。翌日、凍結乾燥、遠心させた製剤由来のルシフェラーゼmRNAの250ng、ならびに、水性溶媒および有機溶媒試料を最終量10μlのOPTI−MEM(LifeTechnologies, ニューヨーク州グランドアイランド)に希釈した。Lipofectamine 2000 (LifeTechnologies, ニューヨーク州グランドアイランド)をトランスフェクション試薬として用いて、0.2μlを、10μlの最終量のOPTI−MEM中で希釈した。室温での5分間のインキュベーションの後、両溶液を混合し、さらに室温で15分、インキュベートした。次いで、20μlの混合溶液を、HeLa細胞を含有する細胞培養培地100ulに添加した。次いで、前述のようにプレートをインキュベートした。
異なるルシフェラーゼmRNA溶液(表110に記述。「X」は、その成分を含有する溶液を指す)(配列番号16にmRNA配列を示す;およそ160ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない;5´キャップ、キャップ1;5−メチルシトシンおよびシュードウリジンで完全に修飾)を評価して、異なる溶液の産生率、mRNAの完全性をバイオアナライザーにより検証し、mRNAのタンパク質発現をインビトロトランスフェクションにより検証した。mRNA溶液は、水、1×TE緩衝液中で、表110に示さ
れるように、4mg/mlで調製され、ジクロロメタン(DCM)、または乳酸・グリコール酸共重合体(PLGA)(Lactel、Cat# B6010−2、固有粘度 0.55−0.75、50:50 LA:GA)の200mg/mlを含有するDCMのいずれかに添加し、0.8mg/mlの最終mRNA濃度を得た。均質化を必要とする溶液は、30秒間、スピード5(およそ19,000rpm)(IKA Ultra−Turrax Homogenizer, T18)で均質化した。水、ジクロロメタンおよび乳酸・グリコール酸共重合体(PLGA)に溶解したmRNAは、回復不能(NR)であった。NR試料を除くすべての試料は、バイオアナライザー(Bio−rad Experion)による測定で、mRNAの完全性が維持された。
ニューヨーク州グランドアイランド)をトランスフェクション試薬として用いて、0.2μlを、最終量10ulのOPTI−MEM中で希釈した。室温での5分間のインキュベーションの後、両溶液を混合し、さらに室温で15分、インキュベートした。次いで、20μlの混合溶液を、HeLa細胞を含有する細胞培養培地100μlに添加した。次いで、前述のようにプレートをインキュベートした。対照ルシフェラーゼmRNA(生理食塩水中で製剤化したルシフェラーゼmRNA)(対照)および未処置細胞(未処置)もまた、評価した。細胞を回収し、各シグナルに対する生体発光平均(光子/秒)(生体発光、(p/s))も表110に示す。分析した際、回復可能試料はすべて、ルシフェラーゼmRNAの活性を示した。
ルシフェラーゼmRNA(配列番号16にmRNA配列を示す;およそ160ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない;5´キャップ、キャップ1;5−メチルシトシンおよびシュードウリジンで完全に修飾)を水またはTE緩衝液中で、表111に概略があるように再構成し、次いで、PLGAマイクロスフェア中で製剤化した。PLGAマイクロスフェアは、当分野で公知の水/油/水の二重乳化法を用いて、PLGA(Lactel、Cat# B6010−2、固有粘度0.55−0.75、50:50 LA:GA)、ポリビニルアルコール(PVA)(Sigma、Cat# 348406−25G、MW 13−23k)ジクロロメタンおよび水を用いて、合成された。簡潔に言うと、水またはTE緩衝液に2〜6mg/mlの濃度で溶解したmRNAの0.2〜0.6ml(W1)を、ジクロロメタン(DCM)に100mg/mlのPLGA濃度で溶解したPLGAの2ml(O1)に加えた。W1/O1のエマルションを、スピード5(約19,000rpm)で30秒間、均質化した(IKA Ultra−Turrax Homogenizer、T18)。次いで、W1/O1エマルションを、250mlの1%PVA(W2)に加え、スピード5(約19,000rpm)で、1分間、均質化した。製剤を、3時間、攪拌したままにして、次いで、100μmのナイロンメッシュストレイナー(Fisherbrand Cell Strainer, Cat # 22−363−549)を通して大きな凝集塊を除去し、最後に遠心(10分、9250rpm、4℃)により洗浄した。上清を棄て、PLGAペレットを、5〜10mlの水に再懸濁し、これを2回繰り返した。洗浄された製剤を液体窒素中で凍結させ、次いで、2〜3日間凍結乾燥させた。凍結乾燥後、約10mgのPLGA MSを、2mlのエッペンドルフチューブ内で計量し、1mlのDCMを添加することにより脱製剤化させ、2〜6時間、
試料を振とうさせた。0.5mlの水を添加し、一晩試料を振とうすることにより、脱製剤化したPLGAマイクロスフェアからmRNAを抽出した。水またはTE緩衝液に溶解した非製剤化ルシフェラーゼmRNA(脱製剤化対照)を、DCMに加え、脱製剤化プロセスを経て、トランスフェクションアッセイにおける対照として用いた。
トランスフェクションの前日、20,000のHeLa細胞(ATCC no. CCL−2;ヴァージニア州マナサス)を、トリプシン−EDTA溶液(LifeTechnologies, ニューヨーク州グランドアイランド)での処理により回収して、1ウェルあたり、総量で100μlのEMEM培地(10%FCSおよび1×Glutamaxを補充)の96ウェルの細胞培養プレート(Corning,ヴァージニア州マナサス)に播種した。細胞を、一晩、5%CO2雰囲気下、37℃で増殖させた。翌日、表112に記述される化学的修飾を受けたルシフェラーゼ修飾RNA(配列番号16にmRNA配列を示す;およそ140ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない;5´キャップ、キャップ1)の83ngを、最終量10ulのOPTI−MEM(LifeTechnologies, ニューヨーク州グランドアイランド)で希釈した。Lipofectamine 2000 (LifeTechnologies, ニューヨーク州グランドアイランド)をトランスフェクション試薬として用いて、0.2μlを、最終量10μlのOPTI−MEM中で希釈した。室温での5分間のインキュベーションの後、両溶液を混合し、さらに室温で15分、インキュベートした。次いで、20μlの混合溶液を、HeLa細胞を含有する細胞培養培地100μlに添加し、室温でインキュベートした。
Synergy H1 (BioTek, ヴァーモント州ウィノースキー)であった。試薬無しのプレートのバックグラウンドシグナルは、1ウェルあたり、約200の相対光単位であった。
5−メチルシトシンおよびシュードウリジンで完全に修飾されたルシフェラーゼ修飾RNA(配列番号16にmRNA配列を示す;およそ140ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない;5´キャップ、キャップ1)(5mc/pU)、5−メチルシトシンおよびN1−メチルシュードウリジンで完全に修飾されたルシフェラーゼ修飾mRNA(5mC/N1mpU)、シュードウリジンで完全に修飾されたルシフェラーゼ修飾mRNA(pU)、N1−メチルシュードウリジンで完全に修飾されたルシフェラーゼ修飾mRNA(N1mpU)または、5−メチルシトシンで置換されたシトシンが25%、および2−チオウリジンで置換されたウリジンが25%で修飾されたルシフェラーゼ修飾mRNA(5mC/s2U)を、PBS(pH7.4)中で製剤化し、2.5mg/kgの用量で、Balb−Cマウスに筋肉内投与または皮下投与した。筋肉内送達に対しては、2時間、8時間、24時間、48時間、72時間、96時間、120時間および144時間でマウスを撮像し、皮下送達に対しては、2時間、8時間、24時間、48時間、72時間、96時間、および120時間で撮像した。撮像の20分前に、D−ルシフェリン溶液を150mg/kgでマウスに腹腔内注射した。次いで、動物を麻酔し、IVIS Lumina II imaging system (Perkin Elmer)で画像撮影を行った。生体発光は、マウス全体の総流量(光子/秒)として測定された。筋肉内投与に対する平均総流量(光子/秒)を表113に示し、皮下投与に対する平均総流量(光子/秒)を表114に示す。バックグラウンドシグナルは、3.79E+05(p/s)であった。筋肉内投与のピーク発現は、全ての化学物質に対して24〜48時間の間で見られ、発現は144時間でもまだ検出された。皮下送達に対しては、ピーク発現は2〜8時間の間に見られ、発現は72時間でも検出された。
移植の前に、浸透圧ポンプ(ALZET(登録商標)Osmotic Pump 2001D, DURECT Corp. Cupertino, CA)に0.2mlの1×PBS(pH7.4)をロードし(PBSをロードしたポンプ)、または、1×PBS(pH7.4)に1mg/mlで溶解したルシフェラーゼ修飾mRNA(配列番号16にmRNA配列を示す;およそ140ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない;5´キャップ、キャップ1;5−メチルシトシンおよびN1−メチルシュードウリジンで完全に修飾)を0.2ml、ロードして(ルシフェラーゼをロードしたポンプ)、一晩
、37℃で、1×PBS(pH7.4)中でインキュベートする。
外部浸透圧ポンプ(ALZET(登録商標)Osmotic Pump 2001D,
DURECT Corp. Cupertino, CA)に、0.2mlの1×PBS(pH7.4)をロードし(PBSをロードしたポンプ)、または、1×PBS(pH7.4)に1mg/mlで溶解したルシフェラーゼ修飾mRNA(配列番号16にmRNA配列を示す;およそ140ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない;5´キャップ、キャップ1;5−メチルシトシンおよびN1−メチルシュードウリジンで完全に修飾)を0.2ml、ロードし(ルシフェラーゼをロードしたポンプ)、一晩、37℃で、1×PBS(pH7.4)中でインキュベートする。
たとえばTisseel(Baxter Healthcare Corp., Deerfield,IL)等のフィブリンシーラントは、二連型シリンジ中のフィブリノーゲンおよびトロンビンから構成される。混合すると、フィブリノーゲンはフィブリンに転換され、約10〜30秒でフィブリン塊を形成する。この塊は、身体の自然凝固メカニズムを模すことができる。さらに、フィブリンヒドロゲルは3次元構造であり、徐放性の放出送達に用いることが出来る可能性がある。現在、フィブリンシーラントは、たとえば縫合、結紮、焼灼等の従来的な外科的手技に代わるための、止血およびシーリングへの適用が承認されている。
A.修飾mRNAおよび塩化カルシウム
再構成の前に、5−メチルシトシンおよびN1−メチルシュードウリジンで完全に修飾された、または、N1−メチルシュードウリジンで完全に修飾されたルシフェラーゼmRNA(配列番号16にmRNA配列を示す;およそ140ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない;5´キャップ、キャップ1)を、塩化カルシウムに加える。次いで、塩化カルシウムを用いてトロンビンを再構成する。フィブリノーゲンは、メーカーの説明書に従い、線維素溶解阻害剤で再構成する。再構成されたトロンビン(修飾mRNAを含有)およびフィブリノーゲンを、二連型シリンジに負荷する。50μlのフィブリノーゲンおよび50μlのトロンビン(修飾mRNA含有)をマウスに皮下注射するか、または、50μlのPBS(等量の修飾ルシフェラーゼmRNAを含有)をマウスに注射する。未処置マウスの対照群もまた、評価する。前もって決定されていた間隔でマウスを撮像し、平均総流量(光子/秒)を測定する。
再構成の前に、5−メチルシトシンおよびN1−メチルシュードウリジンで完全に修飾された、または、N1−メチルシュードウリジンで完全に修飾されたルシフェラーゼmRNA(配列番号16にmRNA配列を示す;およそ140ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない;5´キャップ、キャップ1)を、脂質ナノ粒子中で製剤化し、塩化カルシウムに加える。次いで、塩化カルシウムを用いてトロンビンを再構成する。フィブリノーゲンは、メーカーの説明書に従い、線維素溶解阻害剤で再構成する。再構成され
たトロンビン(修飾mRNAを含有)およびフィブリノーゲンを、二連型シリンジに負荷する。50μlのフィブリノーゲンおよび50μlのトロンビン(修飾mRNA含有)をマウスに皮下注射するか、または、50μlのPBS(等量の修飾ルシフェラーゼmRNAを含有)をマウスに注射する。未処置マウスの対照群もまた、評価する。前もって決定されていた間隔でマウスを撮像し、平均総流量(光子/秒)を測定する。
再構成の前に、5−メチルシトシンおよびN1−メチルシュードウリジンで完全に修飾された、または、N1−メチルシュードウリジンで完全に修飾されたルシフェラーゼmRNA(配列番号16にmRNA配列を示す;およそ140ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない;5´キャップ、キャップ1)を、線維素溶解阻害剤に加える。次いで、線維素溶解阻害剤溶液を用いてフィブリノーゲンを再構成する。トロンビンは、メーカーの説明書に従い、塩化カルシウム溶液で再構成する。再構成されたフィブリノーゲン(修飾mRNAを含有)およびトロンビンを、二連型シリンジに負荷する。50μlのトロンビンおよび50μlのフィブリノーゲン(修飾mRNA含有)をマウスに皮下注射するか、または、50μlのPBS(等量の修飾ルシフェラーゼmRNAを含有)をマウスに注射した。未処置マウスの対照群もまた、評価する。前もって決定されていた間隔でマウスを撮像し、平均総流量(光子/秒)を測定する。
再構成の前に、5−メチルシトシンおよびN1−メチルシュードウリジンで完全に修飾された、または、N1−メチルシュードウリジンで完全に修飾されたルシフェラーゼmRNA(配列番号16にmRNA配列を示す;およそ140ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない;5´キャップ、キャップ1)を、脂質ナノ粒子中で製剤化し、線維素溶解阻害剤に加える。次いで、線維素溶解阻害剤溶液を用いてフィブリノーゲンを再構成する。トロンビンは、メーカーの説明書に従い、塩化カルシウム溶液で再構成する。再構成されたフィブリノーゲン(修飾mRNAを含有)およびトロンビンを、二連型シリンジに負荷する。50μlのトロンビンおよび50μlのフィブリノーゲン(修飾mRNA含有)をマウスに皮下注射するか、または、50μlのPBS(等量の修飾ルシフェラーゼmRNAを含有)をマウスに注射した。未処置マウスの対照群もまた、評価する。前もって決定されていた間隔でマウスを撮像し、平均総流量(光子/秒)を測定する。
再構成の前に、5−メチルシトシンおよびN1−メチルシュードウリジンで完全に修飾された、または、N1−メチルシュードウリジンで完全に修飾されたルシフェラーゼmRNA(配列番号16にmRNA配列を示す;およそ140ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない;5´キャップ、キャップ1)を、再構成されたトロンビン(メーカーの説明書に従い、塩化カルシウムでトロンビンが再構成された)に加える。次いで、線維素溶解阻害剤溶液を用いて、メーカーの説明書に従い、フィブリノーゲンを再構成する。再構成されたフィブリノーゲンおよびトロンビン(修飾mRNAを含有)を、二連型シリンジに負荷する。50μlのトロンビン(修飾mRNA含有)および50μlのフィブリノーゲンをマウスに皮下注射するか、または、50μlのPBS(等量の修飾ルシフェラーゼmRNAを含有)をマウスに注射した。未処置マウスの対照群もまた、評価する。前もって決定されていた間隔でマウスを撮像し、平均総流量(光子/秒)を測定する。
再構成の前に、5−メチルシトシンおよびN1−メチルシュードウリジンで完全に修飾された、または、N1−メチルシュードウリジンで完全に修飾されたルシフェラーゼmRNA(配列番号16にmRNA配列を示す;およそ140ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない;5´キャップ、キャップ1)を、脂質ナノ粒子中で製剤化し、再
構成されたトロンビン(メーカーの説明書に従い、塩化カルシウムで再構成された)に加える。次いで、線維素溶解阻害剤溶液を、メーカーの説明書に従い用いて、フィブリノーゲンを再構成する。再構成されたフィブリノーゲンおよびトロンビン(修飾mRNAを含有)を、二連型シリンジに負荷する。50μlのトロンビン(修飾mRNA含有)および50μlのフィブリノーゲンをマウスに皮下注射するか、または、50μlのPBS(等量の修飾ルシフェラーゼmRNAを含有)をマウスに注射した。未処置マウスの対照群もまた、評価する。前もって決定されていた間隔でマウスを撮像し、平均総流量(光子/秒)を測定する。
実施例81.5−メチルシトシンおよびN1−メチルシュードウリジン修飾mRNAのカチオン性脂質製剤
5−メチルシトシンおよびN1−メチルシュードウリジンで完全に修飾されたルシフェラーゼmRNA(配列番号16にmRNA配列を示す;およそ140ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない;5´キャップ、キャップ1)を、表119に記述されるカチオン性脂質で製剤化した。その製剤を、0.05mg/kgで、Balb−Cマウスに、静脈内(I.V.)、筋肉内(I.M.)、または皮下(S.C.)投与した。
ルシフェラーゼmRNA(配列番号16にmRNA配列を示す;およそ160ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない;5´キャップ、キャップ1;5−メチルシトシンおよびシュードウリジンで完全に修飾された)を、表121に記述されるように、50%のDLin−MC3−DMAまたは、DLin−KC2−DMA、ならびに、38.5%のコレステロール、10%のDSPC、および1.5%のPEGを含有する脂質ナノ粒子中で製剤化した。その製剤を、0.5mg/kg、0.05mg/kg、0.005mg/kgまたは0.0005mg/kgの用量で、Balb−Cマウスに静脈内(I.V.)投与した。撮像の20分前に、D−ルシフェリン溶液を150mg/kgでマウスに腹腔内注射した。次いで、動物を麻酔し、IVIS Lumina II imaging system (Perkin Elmer)で画像撮影を行った。生体発光を、マウス全体の総流量(光子/秒)として測定した。
ルシフェラーゼmRNA(配列番号16にmRNA配列を示す;およそ160ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない;5´キャップ、キャップ1;5−メチルシトシンおよびシュードウリジンで完全に修飾された)を、表126に記述されるように、50%のDLin−KC2−DMA、ならびに、38.5%のコレステロール、10%のDSPC、および1.5%のPEGを含有する脂質ナノ粒子中で製剤化した。その製剤を、0.5mg/kg、0.05mg/kg、または0.005mg/kgの用量で、Balb−Cマウスに皮下(S.C.)投与した。
間、および144時間後にマウスを撮像し、各投与経路およびカチオン性脂質製剤に対して平均総流量(光子/秒)を測定した。検出の低限値は約3E+05p/sであった。画像撮影の結果を表127に示す。器官を8時目に撮像し、平均総流量(光子/秒)を、肝臓、脾臓、肺および腎臓に対して測定した。各器官に対する対照もまた分析された。その結果を表128に示す。すべての投与レベルに対するピークシグナルは、投与の8時間後であった。また、様々な器官(肝臓、脾臓、肺および腎臓)への配分は、LNP用量の増加または減少により制御できる可能性がある。高用量では、LNP製剤は皮下注射部位の外側へと移動する(高レベルのルシフェラーゼ発現が肝臓、脾臓、肺および腎臓で検出される)。
ルシフェラーゼmRNA(配列番号16にmRNA配列を示す;およそ160ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない;5´キャップ、キャップ1;5−メチルシ
トシンおよびシュードウリジンで完全に修飾された)を、50%のDLin−MC3−DMA、38.5%のコレステロール、10%のDSPC、および1.5%のPEGを含有する脂質ナノ粒子中で製剤化する。その製剤を、0.5mg/kg、0.05mg/kg、または0.005mg/kgの用量で、Balb−Cマウスに皮下(S.C.)投与する。
実施例85.リポプレックス試験
5−メチルシトシンおよびシュードウリジンで完全に修飾されたルシフェラーゼRNA(配列番号16にmRNA配列を示す;およそ140ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない;5´キャップ、キャップ1)(5mc/pU)、5−メチルシトシンおよびN1−メチルシュードウリジンで完全に修飾されたルシフェラーゼmRNA(5mC/N1mpU)、または、5−メチルシトシンで置換されたシトシンが25%、および2−チオウリジンで置換されたウリジンが25%で修飾されたルシフェラーゼmRNA(5mC/s2U)を、リポプレックス化した。その製剤を、0.10mg/kgの用量で、Balb−Cマウスに静脈内(I.V.)、筋肉内(I.M.)または皮下(I.C.)投与した。
25%のシトシンが5−メチルシトシンで置換され、25%のウリジンが2−チオウリジンで置換され、修飾された、ルシフェラーゼmRNA(配列番号16にmRNA配列を示す;およそ140ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない;5´キャップ、キャップ1)(5mC/s2U)を、表131に記述されるカチオン性脂質中で製剤化した。その製剤を、0.05mg/kgの用量で、Balb−Cマウスに静脈内(I.V.)、筋肉内(I.M.)または皮下(I.C.)投与した。
5−メチルシトシンおよびN1−メチルシュードウリジンで完全に修飾されたルシフェラーゼRNA(配列番号16にmRNA配列を示す;およそ140ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない;5´キャップ、キャップ1)を、PBS(pH7.4)中で製剤化した。その製剤を、2.5mg/kgの用量で、Balb−Cマウスに筋肉内(I.M.)または皮下(I.C.)投与した。
N4−アセチルシチジンで完全に修飾されたルシフェラーゼ修飾mRNA(配列番号16にmRNA配列を示す;およそ140ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない;5´キャップ、キャップ1)、5−メトキシウリジンで完全に修飾されたルシフェラーゼ修飾mRNA、N4−アセチルシチジンおよびN1−メチルシュードウリジンで完全に修飾されたルシフェラーゼ修飾mRNA、または、5−メチルシトシンおよび5−メトキシウリジンで完全に修飾されたルシフェラーゼ修飾mRNAを、PBS(pH7.4)中で製剤化し、2.5mg/kgの用量で、Balb−Cマウスに筋肉内または皮下投与した。撮像の20分前に、D−ルシフェリン溶液を150mg/kgでマウスに腹腔内注射した。次いで、動物を麻酔し、IVIS Lumina II imaging system (Perkin Elmer)で画像撮影を行った。生体発光を、マウス全体の総流量(光子/秒)として測定した。2時間、8時間および24時間でマウスを撮像した。筋肉内投与に対する平均総流量(光子/秒)を表134に示し、皮下投与に対する平均総流量(光子/秒)を表135に示す。バックグラウンドシグナルは約3.84E+05(p/s)であった。筋肉内投与に対するピーク発現は、全ての化学物質に対して24〜48時間の間で見られ、120時間でもまだ発現が検出された。皮下送達に対しては、ピーク発現は2〜8時間で見られ、発現は72時間でも検出された。
少なくとも1つの化学的修飾を含有するルシフェラーゼ修飾mRNAを、シリンジポンプ法を用いて脂質ナノ粒子(LNP)として製剤化し、その粒子サイズ、ゼータ電位、および封入の特性を明らかにする。
実施例90.化学的修飾mRNAのカチオン性脂質製剤試験
5−メチルシトシンおよびシュードウリジンで完全に修飾されたルシフェラーゼmRNA(配列番号16にmRNA配列を示す;およそ140ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない;5´キャップ、キャップ1)(5mC/pU)、またはシュードウリジンで完全に修飾されたルシフェラーゼmRNA(pU)、またはN1−メチルシュードウリジンで完全に修飾されたルシフェラーゼmRNA(N1mpU)を、表137に記述されるカチオン性脂質中で製剤化した。その製剤を、0.05mg/kgの用量で、Balb−Cマウスに静脈内(I.V.)、筋肉内(I.M.)または皮下(I.C.)投与した。
N4−アセチルシチジンで完全に修飾されたルシフェラーゼmRNA(配列番号16にmRNA配列を示す;およそ140ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない;5´キャップ、キャップ1)(N4−acetyl)、5−メトキシウリジンで完全に修飾されたルシフェラーゼmRNA(5meth)、N4−アセチルシチジンおよびN1−メチルシュードウリジンで完全に修飾されたルシフェラーゼmRNA(N4−aceryl/N1mpU)、または、5−メチルシトシンおよび5−メトキシウリジンで完全に修飾されたルシフェラーゼmRNA(5mC/5−meth)を、表139に記述されるようにDLin−MC3−DMA中で製剤化した。その製剤を、0.05mg/kgの用量で、Balb−Cマウスに静脈内(I.V.)、筋肉内(I.M.)または皮下(I.C.)投与した。
A.PLGAマイクロスフェアの合成
ポリラクチックグリコール酸(PLGA)マイクロスフェアを、当分野で公知の水/油/水の二重乳化法を用いて、PLGA−エステルキャップ(Lactel、Cat# B6010−2、固有粘度0.55−0.75、50:50 LA:GA)、またはPLGA−酸キャップ(Lactel、Cat#B6013−2、固有粘度0.55−0.75、50:50 LA:GA)、ポリビニルアルコール(PVA)(Sigma、Cat#
348406−25G、MW 13−23k)ジクロロメタンおよび水を用いて、合成した。簡潔に言うと、水に4mg/mlで溶解したmRNA(W1)の0.4mlを、ジクロロメタン(DCM)に50〜200mg/mlのPLGAの濃度範囲で溶解したPLGA(O1)の2mlに添加した。W1/O1のエマルションを、スピード4(約15,000rpm)で30秒間、均質化した(IKA Ultra−Turrax Homogenizer、T18)。次いで、W1/O1エマルションに、250mlの1%PVA(W2)を加え、スピード5(約19,000rpm)で、1分間、均質化した。製剤を、3時間、攪拌させ、次いで、100μmのナイロンメッシュストレイナー(Fisherbrand Cell Strainer, Cat # 22−363−549)を通して、大きな凝集塊を除去し、最後に、遠心(10分間、9,250rpm、4℃)により洗浄した。上清を棄て、PLGAペレットを、5〜10mlの水に再懸濁し、これを2回繰り返した。洗浄された製剤を、液体窒素中で凍結させ、次いで、2〜3日間、凍結乾燥させた。
PLGAルシフェラーゼマイクロスフェア(配列番号16にmRNA配列を示す;およそ160ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない;5´キャップ、キャップ1;5−メチルシトシンおよびシュードウリジンで完全に修飾)を、上述の条件を用いて
、エステルキャップされたPLGAで作製した。水での洗浄および再懸濁の後、100〜200μlのPLGAマイクロスフェア試料を用いて、レーザー回析(Malvern Mastersizer2000)により製剤の粒子サイズを計測した。200mg/mlのPLGA濃度で、第一のエマルションを第二のエマルションに添加する間の均質化スピードを下げることにより作製されたマイクロスフェアの粒子サイズを、表141に示し、第一のエマルションを第二のエマルションに添加する間の均質化のスピードは5で、ジクロロメタン(DCM)に溶解したPLGAの濃度を下げることにより作製されたマイクロスフェアの粒子サイズを表142に示す。
ルシフェラーゼ修飾RNA(配列番号16にmRNA配列を示す;およそ160ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない;5´キャップ、キャップ1;5−メチルシトシンおよびシュードウリジンで完全に修飾)で製剤化されたPLGAマイクロスフェアを脱製剤化し、抽出された修飾RNAの完全性を、自動化電気泳動(Bio−Rad Experion)により測定した。凍結乾燥の後、約10mgのPLGA MSを2mlのエッペンドルフチューブ内に量り入れ、1mlのDCMを添加し、2〜6時間、試料を振とうさせることにより脱製剤化した。0.5mlの水を添加し、一晩、試料を振とうさせることにより脱製剤化PLGAマイクロスフェアからmRNAを抽出した。水に溶解した非製剤化ルシフェラーゼmRNA(Deform対照)を、DCMに注ぎ、脱製剤化プロセスを経て、対照として用いた。抽出された修飾mRNAを、非製剤化修飾mRNAおよび脱製剤化対照に対して比較し、封入修飾mRNAの完全性を検証した。脱製剤化対照(Deform対照)および非製剤化対照(Unform対照)と比較して、修飾RNAの大部分は、バッチID A、B、C、D、Eに対して損なわれていなかった。
ルシフェラーゼ修飾RNA(配列番号16にmRNA配列を示す;およそ160ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない;5´キャップ、キャップ1;5−メチルシトシンおよびシュードウリジンで完全に修飾)で製剤化されたPLGAマイクロスフェアを、2重、または3重で、80mg/mlのPLGAマイクロスフェア濃度まで、TE緩衝液中で再懸濁した。再懸濁の後、試料を、試験を行う間、37℃でインキュベートおよび振とうさせ続けた。各時点(0.04、0.25、1.2、4および7日)で、チューブを遠心し、上清を除去し、ペレットを0.25mlの新しいTE緩衝液中に再懸濁した。PLGAマイクロスフェアから放出された修飾RNAの量を測定するために、上清中の修飾RNA濃度をOD260で測定した。表144に示す放出%は、各試料中の修飾RNAの総量に基づき算出された。mRNA製剤の放出率は、粒子サイズ、PLGA濃度、およびエステル末端キャップ対する酸末端キャップの変化で調整することができる。
5−メチルシトシンおよびN1−メチルシュードウリジンで完全に修飾されたルシフェラーゼmRNA(配列番号16にmRNA配列を示す;およそ140ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない;5´キャップ、キャップ1)、またはN1−メチルシュードウリジンで完全に修飾されたルシフェラーゼmRNAを含有するPLGAマイクロスフェアを、表145に記述されるように製剤化し、マウスに皮下注射する。撮像の20分前に、D−ルシフェリン溶液を150mg/kgでマウスに腹腔内注射する。次いで、動物を麻酔し、IVIS Lumina II imaging system (Perkin Elmer)で画像撮影を行う。生体発光を、マウス全体の総流量(光子/秒)として測定する。
修飾mRNAを水ベースの緩衝液中で製剤化してもよい。生物系に類似している緩衝液は、伝統的に等張のものである。そのような緩衝剤および緩衝溶液は、以下のガイドラインに従い調製されてもよい。例となる成分を表146に示す。
EPOmRNA(配列番号9;およそ140ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない;5´キャップ、キャップ1;5−メチルシトシンおよびN1−メチルシュードウリジンで完全に修飾)、G−CSFmRNA(配列番号6;およそ140ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない;5´キャップ、キャップ1;5−メチルシトシンおよびN1−メチルシュードウリジンで完全に修飾)、およびIX因子mRNA(配列番号10;およそ140ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない;5´キャップ、キャップ1;5−メチルシトシンおよびN1−メチルシュードウリジンで完全に修飾)を、表147に記述されるようにDLin−MC3−DMA中で製剤化する。その製剤を、0.05mg/kgの用量で、Balb−Cマウスに静脈内(I.V.)、筋肉内(I.M.)または皮下(I.C.)に投与する。対照LNP製剤(1つのmRNAのみを含有)もまた、等量を投与する。
実施例95.5−メチルシトシンおよびN1−メチルシュードウリジン修飾mRNAのカチオン性脂質製剤試験
EPOmRNA(配列番号9;およそ140ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない;5´キャップ、キャップ1;5−メチルシトシンおよびN1−メチルシュードウリジンで完全に修飾)、または、G−CSFmRNA(配列番号6;およそ140ヌクレオチドのポリAテールは配列中に示していない;5´キャップ、キャップ1;5−メチルシトシンおよびN1−メチルシュードウリジンで完全に修飾)を、表148に記述されるように、DLin−MC3−DMAおよびDLin−KC2−DMA中で製剤化する。その製剤を、0.05mg/kgの用量で、Balb−Cマウスに静脈内(I.V.)、筋肉内(I.M.)または皮下(I.C.)に投与する。
実施例96.シュードウリジンおよびN1−メチルシュードウリジンの指向性SAR
近年、ピリミジンヌクレオシドシュードウリジンに注目が集まり、シュードウリジンまたはN1−メチルシュードウリジンへの修飾を含有するmRNAを調べるための一連の構造活性試験が設計されている。
調査される。アルキル化の程度は、通常、C1−C6である。化学的修飾の例を、表149および表150に列挙する。
天然のヌクレオシドおよび非天然のヌクレオシドを、対象のポリペプチドをコードしているmRNAへと組み込む。これらの例として、表151および152を示す。ある種の市販ヌクレオシド三リン酸(NTP)を、本発明のポリヌクレオチドで調査する。これらの選択を、表152に示す。次いで、得られたmRNAについて、タンパク質産生、サイトカイン誘導、および/または治療効果を生み出す能力を検証する。
天然のヌクレオシドおよび非天然のヌクレオシドを、対象のポリペプチドをコードしているmRNAへと組み込む。核酸塩基および炭水化物(糖)の両方への修飾を有する市販のヌクレオシドおよびNTPを、mRNAへと組み込まれる能力、タンパク質を産生する能力、サイトカインを誘導する能力、および/または治療効果を生み出す能力に対して検証する。これらのヌクレオシドの例を表153および表154に示す。
定の実施態様に限定される意図はなく、先行技術を考慮して、最も広く、可能性のある解釈を提示し、本発明の意図される範囲を有効に包含する、添付のクレームに本発明は準拠するとみなされる。
Claims (63)
- 哺乳動物細胞または組織において目的のポリペプチドを産生する方法であって、前記哺乳動物細胞または組織を目的のポリペプチドをコードする修飾mRNAを含む製剤に接触させることを含み、製剤はナノ粒子、ポリ(酪酸−グリコール酸共重合体)(PLGA)マイクロスフェア、リピドイド、リポプレックス、リポソーム、ポリマー、(単糖を含む)炭水化物、カチオン性脂質、フィブリンゲル、フィブリンヒドロゲル、フィブリン糊、フィブリンシーラント、フィブリノゲン、トロンビン、速やかに排出される脂質ナノ粒子(reLNPs)およびそれらの組合せからなる群より選択される、方法。
- 修飾mRNAが精製されたIVT転写物を含む、請求項1に記載の方法。
- 修飾mRNAを含む製剤がナノ粒子であり、前記ナノ粒子は少なくとも1つの脂質を含む、請求項1に記載の方法。
- 脂質がDLin−DMA、DLin−K−DMA、98N12−5、C12−200、DLin−MC3−DMA、DLin−KC2−DMA、DODMA、PLGA、PEG、PEG−DMGおよびペグ化脂質からなる群より選択される、請求項3に記載の方法。
- 脂質がカチオン性脂質である、請求項3に記載の方法。
- カチオン性脂質がDLin−DMA、DLin−K−DMA、DLin−MC3−DMA、DLin−KC2−DMAおよびDODMAからなる群より選択される、請求項5に記載の方法。
- 脂質の修飾mRNAに対する重量比が10:1から30:1である、請求項3に記載の方法。
- 修飾mRNAを含むナノ粒子製剤の平均寸法が60〜225nmである、請求項7に記載の方法。
- 修飾mRNAを含むナノ粒子製剤のPDIが0.03〜0.15である、請求項8に記載の方法。
- 脂質のゼータ電位がpH7.4で−10〜+10である、請求項3に記載の方法。
- 修飾mRNAを含むナノ粒子製剤が融合性脂質、コレステロールおよびPEG脂質をさらに含む、請求項7に記載の方法。
- 修飾mRNAを含むナノ粒子製剤がモル比50:10:38.5:1.5〜3.0(カチオン性脂質:融合性脂質:コレステロール:PEG脂質)を有する、請求項11に記載の方法。
- PEG脂質がPEG−c−DOMGおよびPEG−DMGから選択され、融合性脂質がDSPCである、請求項12に記載の方法。
- 接触させることが、シリンジポンプ、内部浸透圧ポンプおよび外部浸透圧ポンプからなる群より選択される装置の使用による、請求項1に記載の方法。
- 修飾mRNAを含む製剤がポリ(酪酸−グリコール酸共重合体)(PLGA)マイクロ
スフェアである、請求項1に記載の方法。 - 修飾mRNAを含むPLGAマイクロスフェア製剤のマイクロスフェアの寸法が4〜20μmである、請求項15に記載の方法。
- 修飾mRNAを含むPLGAマイクロスフェア製剤が、48時間で修飾mRNAの50%未満を放出する、請求項15に記載の方法。
- 修飾mRNAを含むPLGAマイクロスフェア製剤が血清中で安定である、請求項15に記載の方法。
- 安定性が90%血清中の非製剤の修飾mRNAに対し決定される、請求項18に記載の方法。
- 負荷重量パーセントが少なくとも0.05%、少なくとも0.1%、少なくとも0.2%、少なくとも0.3%または少なくとも0.4%である、請求項15に記載の方法。
- PLGAマイクロスフェア中修飾mRNAの封入効率が少なくとも50%である、請求項15に記載の方法。
- PLGAマイクロスフェア中修飾mRNAの封入効率が少なくとも70%である、請求項15に記載の方法。
- PLGAマイクロスフェア中修飾mRNAの封入効率が少なくとも90%である、請求項15に記載の方法。
- PLGAマイクロスフェア中修飾mRNAの封入効率が少なくとも97%である、請求項15に記載の方法。
- 前記哺乳動物細胞または組織を接触させることが、静脈内、筋肉内、硝子体内、くも膜下腔内、腫瘍内、肺および皮下からなる群より選択される投与経路により生じる、請求項11に記載の方法。
- 目的のポリペプチドが、接触後72時間まで、接触前よりも高いレベルで血清中に検出可能である、請求項25に記載の方法。
- 目的のポリペプチドが、男性対象の血清中よりも高レベルで女性対象の血清中に検出可能である、請求項26に記載の方法。
- 製剤が第2修飾mRNAをさらに含む、請求項1に記載の方法。
- 製剤が第3修飾mRNAをさらに含む、請求項28に記載の方法。
- 修飾mRNAを含む製剤が、速やかに排出される脂質ナノ粒子を含む、請求項1に記載の方法。
- 速やかに排出される脂質ナノ粒子が、reLNP脂質、融合性脂質、コレステロールおよびPEG脂質をモル比50:10:38.5:1.5(reLNP脂質:融合性脂質:コレステロール:PEG脂質)で含む、請求項30に記載の方法。
- 融合性脂質がDSPCであり、PEG脂質がPEG−c−DOMGである、請求項31に記載の方法。
- reLNP脂質が、内部エステルを有するDLin−DMA、末端エステルを有するDLin−DMA、内部エステルを有するDLin−MC3−DMA、および末端エステルを有するDLin−MC3−DMAからなる群より選択される、請求項31に記載の方法。
- 全脂質の修飾mRNAに対する重量比が10:1から30:1である、請求項30に記載の方法。
- 接触させることが、分割投与スケジュールを用いる注入により生じる、請求項1に記載の方法。
- 注入が、皮内スペース、表皮、皮下組織および筋肉からなる群より選択される組織に対し行われる、請求項35に記載の方法。
- 修飾mRNAを含む製剤がフィブリンシーラントを含む、請求項1に記載の方法。
- 修飾mRNAを含む製剤がリピドイドを含み、脂質がC12−200および98N12−5からなる群より選択される、請求項1に記載の方法。
- 修飾mRNAを含む製剤がポリマーであり、前記ポリマーは、ヒドロゲルまたは外科用シーラントの層でコーティングされ、被覆され、囲包され、封入され、またはそれを含む、請求項1に記載の方法。
- ポリマーがPLGA、エチレン酢酸ビニル、ポロクサマーおよびGELSITE(登録商標)からなる群より選択される、請求項39に記載の方法。
- ポリマー、ヒドロゲルまたは外科用シーラントの追加の層をさらに含む、請求項40に記載の方法。
- 修飾mRNAが、キャップ0、キャップ1、ARCA、イノシン、N1−メチル−グアノシン、2’フルオロ−グアノシン、7−デアザ−グアノシン、8−オキソ−グアノシン、2−アミノ−グアノシン、LNA−グアノシンおよび2−アジド−グアノシンからなる群より選択される少なくとも1つの5’末端キャップを含む、請求項2に記載の方法。
- 5’末端キャップがキャップ1である、請求項42に記載の方法。
- 修飾mRNAが少なくとも2つの修飾を含む、請求項43に記載の方法。
- 少なくとも2つの修飾が、5−メチルシチジン、シュードウリジンおよび1−メチル−シュードウリジンからなる群より独立して選択される、請求項44に記載の方法。
- 目的のポリペプチドを哺乳動物細胞または組織において産生する方法であって、前記哺乳動物細胞または組織を目的のポリペプチドをコードする修飾mRNAを含む緩衝製剤と接触させることを含む、方法。
- 緩衝製剤が、食塩水、リン酸緩衝食塩水および乳酸リンゲル液からなる群より選択される、請求項46に記載の方法。
- 緩衝製剤が、1〜10mMのカルシウム濃度を有する、請求項46に記載の方法。
- 修飾mRNAが精製されたIVT転写物を含む、請求項46に記載の方法。
- 前記哺乳動物細胞または組織を接触させることが、静脈内、筋肉内、硝子体内、くも膜下腔内、腫瘍内、肺および皮下からなる群より選択される投与経路により生じる、請求項46に記載の方法。
- 前記目的のポリペプチドが、接触部位から全身的部位の前記細胞または組織において産生される、請求項25から50のいずれか一項に記載の方法。
- 投与経路が筋肉内または皮下のいずれかである、請求項51に記載の方法。
- 脂質ナノ粒子製剤がシーラント内でさらに製剤される、請求項3に記載の方法。
- 前記シーラントがフィブリンシーラントである、請求項53に記載の方法。
- 霊長類において薬理効果を生じる方法であって、前記霊長類を製剤された目的のポリペプチドをコードする修飾mRNAを含む組成物と接触させることを含む、方法。
- 修飾mRNAが精製されたIVT転写物を含む、請求項55に記載の方法。
- 製剤が、ナノ粒子、ポリ(乳酸−グリコール酸共重合体)(PLGA)マイクロスフェア、リピドイド、リポプレックス、リポソーム、ポリマー、(単糖を含む)炭水化物、カチオン性脂質、フィブリンゲル、フィブリンヒドロゲル、フィブリン糊、フィブリンシーラント、フィブリノゲン、トロンビン、速やかに排出される脂質ナノ粒子(reLNP)およびそれらの組合せからなる群より選択される、請求項56に記載の方法。
- 薬理効果が、薬理効果を生ずることが知られている治療剤に関連する前記薬理効果よりも高い、請求項57に記載の方法。
- 薬理効果が、目的のポリペプチドをコードする製剤されていない修飾mRNAを含む組成物が生じる薬理効果よりも高い、請求項57に記載の方法。
- 薬理効果が、目的のポリペプチドをコードする製剤の非修飾mRNAを含む組成物が生じる薬理効果よりも高い、請求項57に記載の方法。
- 薬理効果が、疾患、障害、病状または感染の治療上有効な結果をもたらす、請求項57に記載の方法。
- 薬理効果が、細胞数の変化、血清化学の改変、酵素活性の改変、ヘモグロビンの増加およびヘマトクリットの増加からなる群より選択される、請求項61に記載の方法。
- 治療上有効な結果が、治療、1つ以上の症状の改善、診断、予防および発症の遅延からなる群より選択される、請求項62に記載の方法。
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Cited By (8)
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JP2018529738A (ja) * | 2015-10-05 | 2018-10-11 | モデルナティーエックス, インコーポレイテッド | メッセンジャーリボ核酸薬物の治療投与のための方法 |
JP2018532721A (ja) * | 2015-09-17 | 2018-11-08 | モデルナティエックス インコーポレイテッドModernaTX,Inc. | 治療剤の細胞内送達のための化合物および組成物 |
JP2019514979A (ja) * | 2016-05-09 | 2019-06-06 | アストラゼネカ・アクチエボラーグAstrazeneca Aktiebolag | 親油性抗炎症剤を含む脂質ナノ粒子およびその使用方法 |
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US9180081B2 (en) * | 2005-03-03 | 2015-11-10 | Revance Therapeutics, Inc. | Compositions and methods for topical application and transdermal delivery of botulinum toxins |
US8153435B1 (en) | 2005-03-30 | 2012-04-10 | Tracer Detection Technology Corp. | Methods and articles for identifying objects using encapsulated perfluorocarbon tracers |
DE102005046490A1 (de) | 2005-09-28 | 2007-03-29 | Johannes-Gutenberg-Universität Mainz | Modifikationen von RNA, die zu einer erhöhten Transkriptstabilität und Translationseffizienz führen |
AU2009238175C1 (en) | 2008-04-15 | 2023-11-30 | Arbutus Biopharma Corporation | Novel lipid formulations for nucleic acid delivery |
CA2767127A1 (en) | 2009-07-01 | 2011-01-06 | Protiva Biotherapeutics, Inc. | Novel lipid formulations for delivery of therapeutic agents to solid tumors |
PL3338765T3 (pl) | 2009-12-01 | 2019-06-28 | Translate Bio, Inc. | Pochodna steroidowa dla dostarczania mrna w ludzkich chorobach genetycznych |
EP3072961A1 (en) | 2010-04-16 | 2016-09-28 | Children's Medical Center Corporation | Sustained polypeptide expression from synthetic, modified rnas and uses thereof |
AU2011248108B2 (en) | 2010-05-04 | 2016-05-26 | Corium Pharma Solutions, Inc. | Method and device for transdermal delivery of parathyroid hormone using a microprojection array |
WO2012000104A1 (en) | 2010-06-30 | 2012-01-05 | Protiva Biotherapeutics, Inc. | Non-liposomal systems for nucleic acid delivery |
US20130171241A1 (en) | 2010-07-06 | 2013-07-04 | Novartis Ag | Liposomes with lipids having an advantageous pka-value for rna delivery |
LT3243526T (lt) | 2010-07-06 | 2020-02-10 | Glaxosmithkline Biologicals S.A. | Rnr pristatymas, skirtas keleto imuninio atsako paleidimui |
DK2591114T3 (en) | 2010-07-06 | 2016-08-29 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | Immunization of large mammals with low doses of RNA |
EP3578205A1 (en) | 2010-08-06 | 2019-12-11 | ModernaTX, Inc. | A pharmaceutical formulation comprising engineered nucleic acids and medical use thereof |
ES2918649T3 (es) | 2010-08-31 | 2022-07-19 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | Liposomas pegilados para el suministro de ARN que codifica un inmunógeno |
US20120237975A1 (en) | 2010-10-01 | 2012-09-20 | Jason Schrum | Engineered nucleic acids and methods of use thereof |
BR112013008700B8 (pt) | 2010-10-11 | 2022-10-04 | Novartis Ag | Molécula de rna auto-replicante, partícula de replicon de alfavírus, composição, molécula de dna recombinante, uso da molécula de rna auto-replicante |
CA2816420C (en) * | 2010-10-29 | 2018-01-16 | Najib Babul | Compositions of (-)-17-(cyclobutylmethyl)morphinan-3,14-diol |
WO2012075040A2 (en) | 2010-11-30 | 2012-06-07 | Shire Human Genetic Therapies, Inc. | mRNA FOR USE IN TREATMENT OF HUMAN GENETIC DISEASES |
EP2691101A2 (en) | 2011-03-31 | 2014-02-05 | Moderna Therapeutics, Inc. | Delivery and formulation of engineered nucleic acids |
HRP20211595T1 (hr) | 2011-05-24 | 2022-01-21 | BioNTech SE | Individualizirana cjepiva protiv raka |
EP4043025A1 (en) | 2011-06-08 | 2022-08-17 | Translate Bio, Inc. | Lipid nanoparticle compositions and methods for mrna delivery |
WO2013006838A1 (en) | 2011-07-06 | 2013-01-10 | Novartis Ag | Immunogenic combination compositions and uses thereof |
EP3613852A3 (en) | 2011-07-22 | 2020-04-22 | President and Fellows of Harvard College | Evaluation and improvement of nuclease cleavage specificity |
US9464124B2 (en) | 2011-09-12 | 2016-10-11 | Moderna Therapeutics, Inc. | Engineered nucleic acids and methods of use thereof |
CA2850624A1 (en) | 2011-10-03 | 2013-04-11 | Moderna Therapeutics, Inc. | Modified nucleosides, nucleotides, and nucleic acids, and uses thereof |
JP6073916B2 (ja) | 2011-12-05 | 2017-02-01 | ファクター バイオサイエンス インコーポレイテッド | 細胞に形質移入するための方法および製品 |
ES2921724T1 (es) | 2011-12-07 | 2022-08-31 | Alnylam Pharmaceuticals Inc | Lípidos biodegradables para la administración de agentes activos |
KR20140102759A (ko) | 2011-12-16 | 2014-08-22 | 모더나 세라퓨틱스, 인코포레이티드 | 변형된 뉴클레오사이드, 뉴클레오타이드 및 핵산 조성물 |
WO2013143555A1 (en) | 2012-03-26 | 2013-10-03 | Biontech Ag | Rna formulation for immunotherapy |
US10501513B2 (en) | 2012-04-02 | 2019-12-10 | Modernatx, Inc. | Modified polynucleotides for the production of oncology-related proteins and peptides |
US9878056B2 (en) | 2012-04-02 | 2018-01-30 | Modernatx, Inc. | Modified polynucleotides for the production of cosmetic proteins and peptides |
US9572897B2 (en) | 2012-04-02 | 2017-02-21 | Modernatx, Inc. | Modified polynucleotides for the production of cytoplasmic and cytoskeletal proteins |
CA2868398A1 (en) | 2012-04-02 | 2013-10-10 | Moderna Therapeutics, Inc. | Modified polynucleotides for the production of cosmetic proteins and peptides |
US9283287B2 (en) | 2012-04-02 | 2016-03-15 | Moderna Therapeutics, Inc. | Modified polynucleotides for the production of nuclear proteins |
EP2859102A4 (en) | 2012-06-08 | 2016-05-11 | Shire Human Genetic Therapies | NUCLEASE RESISTANT POLYNUCLEOTIDES AND USES THEREOF |
EP3884949A1 (en) | 2012-06-08 | 2021-09-29 | Translate Bio, Inc. | Pulmonary delivery of mrna to non-lung target cells |
US9512456B2 (en) | 2012-08-14 | 2016-12-06 | Modernatx, Inc. | Enzymes and polymerases for the synthesis of RNA |
US9095625B2 (en) * | 2012-08-31 | 2015-08-04 | University Of Massachusetts | Graft-copolymer stabilized metal nanoparticles |
US20150246138A1 (en) * | 2012-09-04 | 2015-09-03 | Lauren Sciences Llc | Bolaamphiphilic compounds, compositions and uses thereof |
US20140284270A1 (en) * | 2012-09-21 | 2014-09-25 | George Fox | RNA pores and methods and compositions for making and using same |
US20150307542A1 (en) * | 2012-10-03 | 2015-10-29 | Moderna Therapeutics, Inc. | Modified nucleic acid molecules and uses thereof |
UA116217C2 (uk) | 2012-10-09 | 2018-02-26 | Санофі | Пептидна сполука як подвійний агоніст рецепторів glp1-1 та глюкагону |
KR20230154283A (ko) | 2012-11-01 | 2023-11-07 | 팩터 바이오사이언스 인크. | 세포에서 단백질을 발현시키는 방법들과 생성물들 |
JP6144355B2 (ja) * | 2012-11-26 | 2017-06-07 | モデルナティエックス インコーポレイテッドModernaTX,Inc. | 化学修飾mRNA |
CA2892391C (en) | 2012-11-28 | 2023-10-17 | Biontech Rna Pharmaceuticals Gmbh | Individualized vaccines for cancer |
ES2883590T3 (es) | 2012-12-12 | 2021-12-09 | Broad Inst Inc | Suministro, modificación y optimización de sistemas, métodos y composiciones para la manipulación de secuencias y aplicaciones terapéuticas |
WO2014096150A1 (en) | 2012-12-21 | 2014-06-26 | Sanofi | Dual glp1/gip or trigonal glp1/gip/glucagon agonists |
CN105073178B (zh) * | 2012-12-21 | 2019-07-30 | 考里安国际公司 | 用于治疗剂递送的微阵列及其使用方法 |
CA2897941A1 (en) | 2013-01-17 | 2014-07-24 | Moderna Therapeutics, Inc. | Signal-sensor polynucleotides for the alteration of cellular phenotypes |
PT2959005T (pt) | 2013-02-22 | 2021-12-30 | Univ Leland Stanford Junior | Utilização médica relacionada com extensão de telómero |
US20160024181A1 (en) | 2013-03-13 | 2016-01-28 | Moderna Therapeutics, Inc. | Long-lived polynucleotide molecules |
EP2970955B1 (en) | 2013-03-14 | 2018-11-14 | Translate Bio, Inc. | Methods for purification of messenger rna |
HUE055044T2 (hu) | 2013-03-14 | 2021-10-28 | Translate Bio Inc | MRNS-kódolt ellenanyagok bejuttatására szolgáló eljárások és készítmények |
US10258698B2 (en) | 2013-03-14 | 2019-04-16 | Modernatx, Inc. | Formulation and delivery of modified nucleoside, nucleotide, and nucleic acid compositions |
PT2968586T (pt) | 2013-03-14 | 2018-11-13 | Ethris Gmbh | Composições de arnm de cftr e métodos e utilizações relacionados |
US10138507B2 (en) | 2013-03-15 | 2018-11-27 | Modernatx, Inc. | Manufacturing methods for production of RNA transcripts |
EP3388834B1 (en) * | 2013-03-15 | 2020-04-15 | Translate Bio, Inc. | Synergistic enhancement of the delivery of nucleic acids via blended formulations |
EP2968118B1 (en) | 2013-03-15 | 2022-02-09 | Corium, Inc. | Microarray for delivery of therapeutic agent and methods of use |
US11377470B2 (en) | 2013-03-15 | 2022-07-05 | Modernatx, Inc. | Ribonucleic acid purification |
EP2983804A4 (en) | 2013-03-15 | 2017-03-01 | Moderna Therapeutics, Inc. | Ion exchange purification of mrna |
US8980864B2 (en) | 2013-03-15 | 2015-03-17 | Moderna Therapeutics, Inc. | Compositions and methods of altering cholesterol levels |
US10077439B2 (en) | 2013-03-15 | 2018-09-18 | Modernatx, Inc. | Removal of DNA fragments in mRNA production process |
CN115261411A (zh) | 2013-04-04 | 2022-11-01 | 哈佛学院校长同事会 | 利用CRISPR/Cas系统的基因组编辑的治疗性用途 |
WO2014180490A1 (en) | 2013-05-10 | 2014-11-13 | Biontech Ag | Predicting immunogenicity of t cell epitopes |
RU2725502C2 (ru) | 2013-06-17 | 2020-07-02 | Те Брод Инститьют Инк. | Доставка, конструирование и оптимизация систем, способы и композиции для целенаправленного воздействия и моделирования заболеваний и нарушений постмитотических клеток |
RU2716420C2 (ru) | 2013-06-17 | 2020-03-11 | Те Брод Инститьют Инк. | Доставка и применение систем crispr-cas, векторов и композиций для целенаправленного воздействия и терапии в печени |
CN105793425B (zh) | 2013-06-17 | 2021-10-26 | 布罗德研究所有限公司 | 使用病毒组分靶向障碍和疾病的crispr-cas系统和组合物的递送、用途和治疗应用 |
EP3019595A4 (en) | 2013-07-09 | 2016-11-30 | THERAPEUTIC USES OF A GENERIC CHANGE WITH CRISPR / CAS SYSTEMS | |
DK3019619T3 (da) | 2013-07-11 | 2021-10-11 | Modernatx Inc | Sammensætninger, der omfatter syntetiske polynukleotider, som koder for crispr-beslægtede proteiner, og syntetiske sgrna'er, og anvendelsesfremgangsmåder |
JP6620093B2 (ja) * | 2013-07-23 | 2019-12-11 | アービュートゥス バイオファーマ コーポレイションArbutus Biopharma Corporation | メッセンジャーrnaを送達するための組成物及び方法 |
US20150044192A1 (en) | 2013-08-09 | 2015-02-12 | President And Fellows Of Harvard College | Methods for identifying a target site of a cas9 nuclease |
US9359599B2 (en) | 2013-08-22 | 2016-06-07 | President And Fellows Of Harvard College | Engineered transcription activator-like effector (TALE) domains and uses thereof |
WO2015034928A1 (en) | 2013-09-03 | 2015-03-12 | Moderna Therapeutics, Inc. | Chimeric polynucleotides |
US20160194368A1 (en) | 2013-09-03 | 2016-07-07 | Moderna Therapeutics, Inc. | Circular polynucleotides |
US9322037B2 (en) | 2013-09-06 | 2016-04-26 | President And Fellows Of Harvard College | Cas9-FokI fusion proteins and uses thereof |
US9340799B2 (en) | 2013-09-06 | 2016-05-17 | President And Fellows Of Harvard College | MRNA-sensing switchable gRNAs |
US9737604B2 (en) | 2013-09-06 | 2017-08-22 | President And Fellows Of Harvard College | Use of cationic lipids to deliver CAS9 |
EP3052106A4 (en) | 2013-09-30 | 2017-07-19 | ModernaTX, Inc. | Polynucleotides encoding immune modulating polypeptides |
US10385088B2 (en) | 2013-10-02 | 2019-08-20 | Modernatx, Inc. | Polynucleotide molecules and uses thereof |
JP2016538829A (ja) | 2013-10-03 | 2016-12-15 | モデルナ セラピューティクス インコーポレイテッドModerna Therapeutics,Inc. | 低密度リポタンパク質受容体をコードするポリヌクレオチド |
AU2014340092B2 (en) | 2013-10-22 | 2019-09-19 | Translate Bio, Inc. | mRNA therapy for Argininosuccinate Synthetase Deficiency |
US9629804B2 (en) | 2013-10-22 | 2017-04-25 | Shire Human Genetic Therapies, Inc. | Lipid formulations for delivery of messenger RNA |
WO2015061491A1 (en) | 2013-10-22 | 2015-04-30 | Shire Human Genetic Therapies, Inc. | Mrna therapy for phenylketonuria |
WO2015061461A1 (en) | 2013-10-22 | 2015-04-30 | Shire Human Genetic Therapies, Inc. | Cns delivery of mrna and uses thereof |
DK3066201T3 (en) | 2013-11-07 | 2018-06-06 | Editas Medicine Inc | CRISPR-RELATED PROCEDURES AND COMPOSITIONS WITH LEADING GRADES |
US10098982B2 (en) | 2013-11-20 | 2018-10-16 | Drexel University | Compositions and methods for macrophage conversion |
CA2930973A1 (en) | 2013-11-22 | 2015-05-28 | Pal SAERTROM | C/ebp alpha short activating rna compositions and methods of use |
JP6712948B2 (ja) | 2013-12-12 | 2020-06-24 | ザ・ブロード・インスティテュート・インコーポレイテッド | 組成物、及びヌクレオチドリピート障害におけるcrispr−cas系の使用方法 |
BR112016013207A2 (pt) | 2013-12-12 | 2017-09-26 | Massachusetts Inst Technology | administração, uso e aplicações terapêuticas dos sistemas crispr-cas e composições para o hbv e distúrbios e doenças virais |
WO2015089473A1 (en) | 2013-12-12 | 2015-06-18 | The Broad Institute Inc. | Engineering of systems, methods and optimized guide compositions with new architectures for sequence manipulation |
US20150166982A1 (en) | 2013-12-12 | 2015-06-18 | President And Fellows Of Harvard College | Methods for correcting pi3k point mutations |
WO2015089486A2 (en) | 2013-12-12 | 2015-06-18 | The Broad Institute Inc. | Systems, methods and compositions for sequence manipulation with optimized functional crispr-cas systems |
MX2016007327A (es) | 2013-12-12 | 2017-03-06 | Broad Inst Inc | Suministro, uso y aplicaciones terapeuticas de sistemas y composiciones crispr-cas para dirigirlos a trastornos y enfermedades usando componentes para suministro de particulas. |
AU2014361781B2 (en) | 2013-12-12 | 2021-04-01 | Massachusetts Institute Of Technology | Delivery, use and therapeutic applications of the CRISPR -Cas systems and compositions for genome editing |
WO2015086733A1 (en) | 2013-12-13 | 2015-06-18 | Sanofi | Dual glp-1/glucagon receptor agonists |
EP2918275B1 (en) * | 2013-12-13 | 2016-05-18 | Moderna Therapeutics, Inc. | Alternative nucleic acid molecules and uses thereof |
WO2015086730A1 (en) | 2013-12-13 | 2015-06-18 | Sanofi | Non-acylated exendin-4 peptide analogues |
EP3080154B1 (en) | 2013-12-13 | 2018-02-07 | Sanofi | Dual glp-1/gip receptor agonists |
TW201609795A (zh) | 2013-12-13 | 2016-03-16 | 賽諾菲公司 | 作為雙重glp-1/gip受體促效劑的艾塞那肽-4(exendin-4)胜肽類似物 |
MX2016009771A (es) * | 2014-01-31 | 2016-11-14 | Factor Bioscience Inc | Metodos y productos para la produccion y administracion de acido nucleico. |
EP3104889B1 (en) | 2014-02-10 | 2021-10-13 | The Board of Trustees of the Leland Stanford Junior University | Activation of innate immunity for enhanced nuclear reprogramming of somatic cells with mrna |
EP3699274A1 (en) * | 2014-03-24 | 2020-08-26 | Translate Bio, Inc. | Mrna therapy for the treatment of ocular diseases |
WO2015151048A1 (en) * | 2014-04-01 | 2015-10-08 | Institut National De La Sante Et De La Recherche Medicale (Inserm) | Capped and uncapped rna molecules and block copolymers for intracellular delivery of rna |
TW201625669A (zh) | 2014-04-07 | 2016-07-16 | 賽諾菲公司 | 衍生自艾塞那肽-4(Exendin-4)之肽類雙重GLP-1/升糖素受體促效劑 |
TW201625668A (zh) | 2014-04-07 | 2016-07-16 | 賽諾菲公司 | 作為胜肽性雙重glp-1/昇糖素受體激動劑之艾塞那肽-4衍生物 |
TW201625670A (zh) | 2014-04-07 | 2016-07-16 | 賽諾菲公司 | 衍生自exendin-4之雙重glp-1/升糖素受體促效劑 |
CA2946751A1 (en) * | 2014-04-23 | 2015-10-29 | Modernatx, Inc. | Nucleic acid vaccines |
SG11201608725YA (en) | 2014-04-25 | 2016-11-29 | Shire Human Genetic Therapies | Methods for purification of messenger rna |
WO2015175748A1 (en) * | 2014-05-14 | 2015-11-19 | Evorx Technologies, Inc. | Methods and compositions for controlling gene expression and treating cancer |
MA48050A (fr) | 2014-05-30 | 2020-02-12 | Translate Bio Inc | Lipides biodégradables pour l'administration d'acides nucléiques |
US9932381B2 (en) | 2014-06-18 | 2018-04-03 | Sanofi | Exendin-4 derivatives as selective glucagon receptor agonists |
WO2015196128A2 (en) | 2014-06-19 | 2015-12-23 | Moderna Therapeutics, Inc. | Alternative nucleic acid molecules and uses thereof |
WO2015200465A1 (en) | 2014-06-24 | 2015-12-30 | Shire Human Genetic Therapies, Inc. | Stereochemically enriched compositions for delivery of nucleic acids |
SI3766916T1 (sl) | 2014-06-25 | 2023-01-31 | Acuitas Therapeutics Inc. | Formulacije novih lipidov in lipidnih nanodelcev za dostavo nukleinskih kislin |
WO2015198326A1 (en) * | 2014-06-26 | 2015-12-30 | Ramot At Tel-Aviv University Ltd. | Liposomal formulations for delivery of nucleic acids |
US9668980B2 (en) * | 2014-07-02 | 2017-06-06 | Rana Therapeutics, Inc. | Encapsulation of messenger RNA |
FR3023483A1 (fr) * | 2014-07-09 | 2016-01-15 | Jerome Lemoine | Procede de preparation de nanoparticules d'arn messager et composition aqueuse hypotonique comprenant les nanoparticules d'arnm |
EP3169335B8 (en) | 2014-07-16 | 2019-10-09 | ModernaTX, Inc. | Circular polynucleotides |
EP3169693B1 (en) | 2014-07-16 | 2022-03-09 | ModernaTX, Inc. | Chimeric polynucleotides |
EP3171895A1 (en) | 2014-07-23 | 2017-05-31 | Modernatx, Inc. | Modified polynucleotides for the production of intrabodies |
WO2016022363A2 (en) | 2014-07-30 | 2016-02-11 | President And Fellows Of Harvard College | Cas9 proteins including ligand-dependent inteins |
US20180085391A1 (en) * | 2014-08-08 | 2018-03-29 | Modernatx, Inc. | Compositions and methods for the treatment of ophthalmic diseases and conditions |
WO2016028682A1 (en) | 2014-08-17 | 2016-02-25 | The Broad Institute Inc. | Genome editing using cas9 nickases |
WO2016049163A2 (en) | 2014-09-24 | 2016-03-31 | The Broad Institute Inc. | Use and production of chd8+/- transgenic animals with behavioral phenotypes characteristic of autism spectrum disorder |
WO2016049258A2 (en) | 2014-09-25 | 2016-03-31 | The Broad Institute Inc. | Functional screening with optimized functional crispr-cas systems |
WO2016045732A1 (en) | 2014-09-25 | 2016-03-31 | Biontech Rna Pharmaceuticals Gmbh | Stable formulations of lipids and liposomes |
KR101776368B1 (ko) * | 2014-10-02 | 2017-09-07 | 서울시립대학교 산학협력단 | 전령 rna 나노입자 및 그 제조방법 |
US9816080B2 (en) | 2014-10-31 | 2017-11-14 | President And Fellows Of Harvard College | Delivery of CAS9 via ARRDC1-mediated microvesicles (ARMMs) |
EP3218508A4 (en) * | 2014-11-10 | 2018-04-18 | Modernatx, Inc. | Multiparametric nucleic acid optimization |
GB201420139D0 (en) | 2014-11-12 | 2014-12-24 | Ucl Business Plc | Factor IX gene therapy |
JP6767976B2 (ja) | 2014-12-05 | 2020-10-14 | トランスレイト バイオ, インコーポレイテッド | 関節疾患の治療のためのメッセンジャーrna治療法 |
EP3230452A1 (en) | 2014-12-12 | 2017-10-18 | The Broad Institute Inc. | Dead guides for crispr transcription factors |
WO2016094880A1 (en) | 2014-12-12 | 2016-06-16 | The Broad Institute Inc. | Delivery, use and therapeutic applications of crispr systems and compositions for genome editing as to hematopoietic stem cells (hscs) |
EP3985115A1 (en) | 2014-12-12 | 2022-04-20 | The Broad Institute, Inc. | Protected guide rnas (pgrnas) |
DE202015010000U1 (de) | 2014-12-12 | 2023-07-03 | CureVac SE | Artifizielle Nukleinsäuremoleküle für eine verbesserte Proteinexpression |
WO2016094874A1 (en) | 2014-12-12 | 2016-06-16 | The Broad Institute Inc. | Escorted and functionalized guides for crispr-cas systems |
WO2016100974A1 (en) | 2014-12-19 | 2016-06-23 | The Broad Institute Inc. | Unbiased identification of double-strand breaks and genomic rearrangement by genome-wide insert capture sequencing |
WO2016106236A1 (en) | 2014-12-23 | 2016-06-30 | The Broad Institute Inc. | Rna-targeting system |
WO2016106244A1 (en) | 2014-12-24 | 2016-06-30 | The Broad Institute Inc. | Crispr having or associated with destabilization domains |
KR20170093254A (ko) | 2014-12-29 | 2017-08-14 | 노파르티스 아게 | 키메라 항원 수용체-발현 세포를 제조하는 방법 |
US20180000953A1 (en) * | 2015-01-21 | 2018-01-04 | Moderna Therapeutics, Inc. | Lipid nanoparticle compositions |
CN114642735A (zh) | 2015-01-21 | 2022-06-21 | 菲泽尔克斯公司 | 用于将治疗剂和诊断剂递送到细胞中的方法、组合物和系统 |
EP3247398A4 (en) * | 2015-01-23 | 2018-09-26 | Moderna Therapeutics, Inc. | Lipid nanoparticle compositions |
WO2016128060A1 (en) | 2015-02-12 | 2016-08-18 | Biontech Ag | Predicting t cell epitopes useful for vaccination |
JP7199809B2 (ja) * | 2015-02-13 | 2023-01-06 | ファクター バイオサイエンス インコーポレイテッド | 核酸製品及びその投与方法 |
AU2016233135B2 (en) | 2015-03-19 | 2021-07-08 | Translate Bio, Inc. | mRNA therapy for pompe disease |
JP7114457B2 (ja) | 2015-04-17 | 2022-08-08 | ザ トラスティーズ オブ ザ ユニバーシティ オブ ペンシルバニア | キメラ抗原受容体発現細胞の有効性および増殖を改善するための方法 |
US10682401B2 (en) | 2015-05-19 | 2020-06-16 | Morphogenesis, Inc. | Multi-indication mRNA cancer immunotherapy |
US10920246B2 (en) * | 2015-05-26 | 2021-02-16 | Ramot At Tel-Aviv University Ltd. | Targeted lipid particles for systemic delivery of nucleic acid molecules to leukocytes |
AR105319A1 (es) | 2015-06-05 | 2017-09-27 | Sanofi Sa | Profármacos que comprenden un conjugado agonista dual de glp-1 / glucagón conector ácido hialurónico |
US9790490B2 (en) | 2015-06-18 | 2017-10-17 | The Broad Institute Inc. | CRISPR enzymes and systems |
FI3430134T3 (fi) | 2015-06-18 | 2023-01-13 | Uusia CRISPR-entsyymejä ja järjestelmiä | |
WO2016205745A2 (en) | 2015-06-18 | 2016-12-22 | The Broad Institute Inc. | Cell sorting |
CN108290933A (zh) | 2015-06-18 | 2018-07-17 | 布罗德研究所有限公司 | 降低脱靶效应的crispr酶突变 |
WO2016205749A1 (en) | 2015-06-18 | 2016-12-22 | The Broad Institute Inc. | Novel crispr enzymes and systems |
WO2017004067A1 (en) | 2015-06-29 | 2017-01-05 | Corium International, Inc. | Microarray for delivery of therapeutic agent, methods of use, and methods of making |
WO2017004143A1 (en) | 2015-06-29 | 2017-01-05 | Acuitas Therapeutics Inc. | Lipids and lipid nanoparticle formulations for delivery of nucleic acids |
TW201706291A (zh) | 2015-07-10 | 2017-02-16 | 賽諾菲公司 | 作為選擇性肽雙重glp-1/升糖素受體促效劑之新毒蜥外泌肽(exendin-4)衍生物 |
AR105433A1 (es) | 2015-07-21 | 2017-10-04 | Novartis Ag | Métodos para mejorar la eficacia y expansión de las células inmunes |
ES2937963T3 (es) | 2015-07-21 | 2023-04-03 | Modernatx Inc | Vacunas de enfermedad infecciosa |
US11364292B2 (en) | 2015-07-21 | 2022-06-21 | Modernatx, Inc. | CHIKV RNA vaccines |
WO2017019568A1 (en) * | 2015-07-24 | 2017-02-02 | Fibralign Corporation | Composition for targeted delivery of nucleic acid-based therapeutics |
WO2017020026A1 (en) * | 2015-07-30 | 2017-02-02 | Modernatx, Inc. | Concatemeric peptide epitopes rnas |
WO2017031232A1 (en) | 2015-08-17 | 2017-02-23 | Modernatx, Inc. | Methods for preparing particles and related compositions |
WO2017031370A1 (en) | 2015-08-18 | 2017-02-23 | The Broad Institute, Inc. | Methods and compositions for altering function and structure of chromatin loops and/or domains |
US11434486B2 (en) | 2015-09-17 | 2022-09-06 | Modernatx, Inc. | Polynucleotides containing a morpholino linker |
EP3349730B1 (en) | 2015-09-18 | 2020-12-02 | Dnarx | Systems for nucleic acid expression in vivo |
WO2017059902A1 (en) | 2015-10-07 | 2017-04-13 | Biontech Rna Pharmaceuticals Gmbh | 3' utr sequences for stabilization of rna |
WO2017062990A1 (en) * | 2015-10-09 | 2017-04-13 | Case Western Reserve University | Compositions and methods for the delivery of nucleic acids |
US20190255107A1 (en) | 2015-10-09 | 2019-08-22 | The Brigham And Women's Hospital, Inc. | Modulation of novel immune checkpoint targets |
EP3878955A1 (en) | 2015-10-14 | 2021-09-15 | Translate Bio, Inc. | Modification of rna-related enzymes for enhanced production |
CN108472354A (zh) | 2015-10-22 | 2018-08-31 | 摩登纳特斯有限公司 | 呼吸道合胞病毒疫苗 |
EA201891001A1 (ru) | 2015-10-22 | 2018-11-30 | МОДЕРНАТиЭкс, ИНК. | Вакцины на основе нуклеиновых кислот против вируса ветряной оспы (vzv) |
CA3002819A1 (en) * | 2015-10-22 | 2017-04-27 | Modernatx, Inc. | Sexually transmitted disease vaccines |
PL3718565T3 (pl) | 2015-10-22 | 2022-09-19 | Modernatx, Inc. | Szczepionki przeciwko wirusom układu oddechowego |
CA3024543A1 (en) | 2015-10-22 | 2017-04-27 | The Broad Institute, Inc. | Type vi-b crispr enzymes and systems |
EP3364981A4 (en) * | 2015-10-22 | 2019-08-07 | ModernaTX, Inc. | VACCINE AGAINST THE HUMAN CYTOMEGALOVIRUS |
MA46024A (fr) * | 2015-10-22 | 2019-07-03 | Modernatx Inc | Vaccin contre le virus de l'herpès simplex |
WO2017070624A1 (en) * | 2015-10-22 | 2017-04-27 | Modernatx, Inc. | Tropical disease vaccines |
MA46255A (fr) * | 2015-10-22 | 2019-07-31 | Modernatx Inc | Vaccins anticancéreux |
CN109310751A (zh) * | 2015-10-22 | 2019-02-05 | 摩登纳特斯有限公司 | 广谱流感病毒疫苗 |
JP7109784B2 (ja) | 2015-10-23 | 2022-08-01 | プレジデント アンド フェローズ オブ ハーバード カレッジ | 遺伝子編集のための進化したCas9蛋白質 |
WO2017075038A1 (en) * | 2015-10-26 | 2017-05-04 | Rana Therapeutics, Inc. | Nanoparticle formulations for delivery of nucleic acid complexes |
EP3368687B1 (en) | 2015-10-27 | 2021-09-29 | The Broad Institute, Inc. | Compositions and methods for targeting cancer-specific sequence variations |
CN113636947A (zh) | 2015-10-28 | 2021-11-12 | 爱康泰生治疗公司 | 用于递送核酸的新型脂质和脂质纳米颗粒制剂 |
WO2017075451A1 (en) | 2015-10-28 | 2017-05-04 | The Broad Institute Inc. | Compositions and methods for evaluating and modulating immune responses by detecting and targeting pou2af1 |
EP3368689B1 (en) | 2015-10-28 | 2020-06-17 | The Broad Institute, Inc. | Composition for modulating immune responses by use of immune cell gene signature |
WO2017075465A1 (en) | 2015-10-28 | 2017-05-04 | The Broad Institute Inc. | Compositions and methods for evaluating and modulating immune responses by detecting and targeting gata3 |
WO2017081110A1 (en) * | 2015-11-09 | 2017-05-18 | Curevac Ag | Rotavirus vaccines |
US20190307857A1 (en) | 2015-12-09 | 2019-10-10 | Modernatx, Inc. | MODIFIED mRNA ENCODING A URIDINE DIPHOPSPHATE GLUCURONOSYL TRANSFERASE AND USES THEREOF |
WO2017100551A1 (en) | 2015-12-09 | 2017-06-15 | Alexion Pharmaceuticals, Inc. | HETEROLOGOUS UTR SEQUENCES FOR ENHANCED mRNA EXPRESSION |
CA3007955A1 (en) | 2015-12-10 | 2017-06-15 | Modernatx, Inc. | Lipid nanoparticles for delivery of therapeutic agents |
US20190233814A1 (en) | 2015-12-18 | 2019-08-01 | The Broad Institute, Inc. | Novel crispr enzymes and systems |
PL3394030T3 (pl) | 2015-12-22 | 2022-04-11 | Modernatx, Inc. | Związki i kompozycje do wewnątrzkomórkowego dostarczania środków |
DK3394093T3 (da) | 2015-12-23 | 2022-04-19 | Modernatx Inc | Fremgangsmåder til anvendelse af ox40-ligand-kodende polynukleotider |
US10465190B1 (en) | 2015-12-23 | 2019-11-05 | Modernatx, Inc. | In vitro transcription methods and constructs |
US10793898B2 (en) * | 2015-12-23 | 2020-10-06 | The Regents Of The University Of California | Nano-sensors for nucleic acid detection and discrimination |
CN117025539A (zh) | 2015-12-28 | 2023-11-10 | 诺华股份有限公司 | 制备嵌合抗原受体表达细胞的方法 |
US20190241658A1 (en) | 2016-01-10 | 2019-08-08 | Modernatx, Inc. | Therapeutic mRNAs encoding anti CTLA-4 antibodies |
WO2017127750A1 (en) | 2016-01-22 | 2017-07-27 | Modernatx, Inc. | Messenger ribonucleic acids for the production of intracellular binding polypeptides and methods of use thereof |
US11780934B2 (en) | 2016-02-05 | 2023-10-10 | Institut Pasteur | Use of inhibitors of ADAM12 as adjuvants in tumor therapies |
US20210189062A1 (en) | 2016-03-01 | 2021-06-24 | Alexion Pharmaceuticals, Inc. | Biodegradable activated polymers for therapeutic delivery |
CA3020343A1 (en) | 2016-04-08 | 2017-10-12 | Translate Bio, Inc. | Multimeric coding nucleic acid and uses thereof |
WO2017180917A2 (en) | 2016-04-13 | 2017-10-19 | Modernatx, Inc. | Lipid compositions and their uses for intratumoral polynucleotide delivery |
AU2017253107B2 (en) | 2016-04-19 | 2023-07-20 | Massachusetts Institute Of Technology | CPF1 complexes with reduced indel activity |
CA3026110A1 (en) | 2016-04-19 | 2017-11-02 | The Broad Institute, Inc. | Novel crispr enzymes and systems |
KR102424476B1 (ko) | 2016-04-19 | 2022-07-25 | 더 브로드 인스티튜트, 인코퍼레이티드 | 신규한 crispr 효소 및 시스템 |
WO2017192544A1 (en) | 2016-05-02 | 2017-11-09 | Massachusetts Institute Of Technology | AMPHIPHILIC NANOPARTICLES FOR CODELIVERY OF WATER-INSOLUBLE SMALL MOLECULES AND RNAi |
CA3024500A1 (en) | 2016-05-18 | 2017-11-23 | Modernatx, Inc. | Polynucleotides encoding relaxin |
RU2756313C2 (ru) | 2016-06-07 | 2021-09-29 | Модернатикс, Инк. | Модифицированная РНК, кодирующая полипептиды VEGF-A, составы, содержащие ее, и пути их применения |
CN109312313A (zh) | 2016-06-13 | 2019-02-05 | 川斯勒佰尔公司 | 用于治疗鸟氨酸转氨甲酰酶缺乏症的信使rna疗法 |
AU2017286606A1 (en) * | 2016-06-14 | 2018-12-13 | Modernatx, Inc. | Stabilized formulations of lipid nanoparticles |
EP3455357A1 (en) | 2016-06-17 | 2019-03-20 | The Broad Institute Inc. | Type vi crispr orthologs and systems |
WO2018005873A1 (en) | 2016-06-29 | 2018-01-04 | The Broad Institute Inc. | Crispr-cas systems having destabilization domain |
CA3029119A1 (en) | 2016-06-29 | 2018-01-04 | Crispr Therapeutics Ag | Materials and methods for treatment of friedreich ataxia and other related disorders |
MX2018016389A (es) | 2016-06-30 | 2019-08-16 | Arbutus Biopharma Corp | Composiciones y metodos para suministro de arn mensajero. |
BR112019000195A2 (pt) | 2016-07-07 | 2019-04-24 | Rubius Therapeutics, Inc. | composições e métodos relacionados a sistemas celulares terapêuticos que expressam rna exógeno |
WO2018027078A1 (en) | 2016-08-03 | 2018-02-08 | President And Fellows Of Harard College | Adenosine nucleobase editors and uses thereof |
EP3493834A1 (en) | 2016-08-07 | 2019-06-12 | Novartis AG | Mrna-mediated immunization methods |
US11661590B2 (en) | 2016-08-09 | 2023-05-30 | President And Fellows Of Harvard College | Programmable CAS9-recombinase fusion proteins and uses thereof |
WO2018035388A1 (en) | 2016-08-17 | 2018-02-22 | The Broad Institute, Inc. | Novel crispr enzymes and systems |
WO2018035377A1 (en) | 2016-08-17 | 2018-02-22 | Factor Bioscience Inc. | Nucleic acid products and methods of administration thereof |
US20200283743A1 (en) | 2016-08-17 | 2020-09-10 | The Broad Institute, Inc. | Novel crispr enzymes and systems |
CN107177598B (zh) * | 2016-08-18 | 2019-12-27 | 广州市锐博生物科技有限公司 | 用于抑制BIRC5靶基因mRNA表达的寡核酸分子及其成套组合物 |
US11542509B2 (en) | 2016-08-24 | 2023-01-03 | President And Fellows Of Harvard College | Incorporation of unnatural amino acids into proteins using base editing |
WO2018049025A2 (en) | 2016-09-07 | 2018-03-15 | The Broad Institute Inc. | Compositions and methods for evaluating and modulating immune responses |
CN116837052A (zh) | 2016-09-14 | 2023-10-03 | 摩登纳特斯有限公司 | 高纯度rna组合物及其制备方法 |
EP3518981A4 (en) | 2016-10-03 | 2020-06-10 | President and Fellows of Harvard College | DELIVERING THERAPEUTIC RNAS VIA ARRDC1-MEDIATED MICROVESICLES |
WO2018067991A1 (en) | 2016-10-07 | 2018-04-12 | The Brigham And Women's Hospital, Inc. | Modulation of novel immune checkpoint targets |
KR101896615B1 (ko) * | 2016-10-13 | 2018-09-07 | 한국과학기술연구원 | 핵산 물질의 팩킹방법 |
WO2018071868A1 (en) | 2016-10-14 | 2018-04-19 | President And Fellows Of Harvard College | Aav delivery of nucleobase editors |
JP6980780B2 (ja) | 2016-10-21 | 2021-12-15 | モデルナティーエックス, インコーポレイテッド | ヒトサイトメガロウイルスワクチン |
EP3532103A1 (en) | 2016-10-26 | 2019-09-04 | Acuitas Therapeutics, Inc. | Lipid nanoparticle formulations |
US20190274968A1 (en) * | 2016-10-27 | 2019-09-12 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Nucleoside-modified rna for inducing an adaptive immune response |
WO2018089540A1 (en) | 2016-11-08 | 2018-05-17 | Modernatx, Inc. | Stabilized formulations of lipid nanoparticles |
US11400109B2 (en) * | 2016-11-10 | 2022-08-02 | Translate Bio, Inc. | Subcutaneous delivery of messenger RNA |
WO2018089851A2 (en) | 2016-11-11 | 2018-05-17 | Modernatx, Inc. | Influenza vaccine |
MA50335A (fr) | 2016-12-08 | 2020-08-19 | Modernatx Inc | Vaccins à acide nucléique contre des virus respiratoires |
US20180185516A1 (en) * | 2016-12-09 | 2018-07-05 | Sangamo Therapeutics, Inc. | Delivery of target specific nucleases |
WO2018111967A1 (en) | 2016-12-13 | 2018-06-21 | Modernatx, Inc. | Rna affinity purification |
WO2018115973A2 (en) * | 2016-12-22 | 2018-06-28 | Avectas Limited | Vector-free intracellular delivery by reversible permeabilisation |
WO2018119359A1 (en) | 2016-12-23 | 2018-06-28 | President And Fellows Of Harvard College | Editing of ccr5 receptor gene to protect against hiv infection |
KR20190110612A (ko) * | 2017-02-01 | 2019-09-30 | 모더나티엑스, 인크. | 활성화 종양유전자 돌연변이 펩티드를 인코드하는 면역조절 치료 mrna 조성물 |
MA47515A (fr) | 2017-02-16 | 2019-12-25 | Modernatx Inc | Compositions immunogènes très puissantes |
JP2020508056A (ja) | 2017-02-22 | 2020-03-19 | クリスパー・セラピューティクス・アクチェンゲゼルシャフトCRISPR Therapeutics AG | 遺伝子編集のための組成物および方法 |
WO2018154439A1 (en) | 2017-02-22 | 2018-08-30 | Crispr Therapeutics Ag | Materials and methods for treatment of spinocerebellar ataxia type 1 (sca1) and other spinocerebellar ataxia type 1 protein (atxn1) gene related conditions or disorders |
WO2018154459A1 (en) | 2017-02-22 | 2018-08-30 | Crispr Therapeutics Ag | Materials and methods for treatment of primary hyperoxaluria type 1 (ph1) and other alanine-glyoxylate aminotransferase (agxt) gene related conditions or disorders |
WO2018157154A2 (en) | 2017-02-27 | 2018-08-30 | Translate Bio, Inc. | Novel codon-optimized cftr mrna |
WO2018165504A1 (en) | 2017-03-09 | 2018-09-13 | President And Fellows Of Harvard College | Suppression of pain by gene editing |
KR20190127797A (ko) | 2017-03-10 | 2019-11-13 | 프레지던트 앤드 펠로우즈 오브 하바드 칼리지 | 시토신에서 구아닌으로의 염기 편집제 |
EP3596042B1 (en) | 2017-03-15 | 2022-01-12 | Modernatx, Inc. | Crystal forms of amino lipids |
WO2018170260A1 (en) | 2017-03-15 | 2018-09-20 | Modernatx, Inc. | Respiratory syncytial virus vaccine |
MA52262A (fr) | 2017-03-15 | 2020-02-19 | Modernatx Inc | Vaccin à large spectre contre le virus de la grippe |
WO2018170256A1 (en) | 2017-03-15 | 2018-09-20 | Modernatx, Inc. | Herpes simplex virus vaccine |
KR102185464B1 (ko) | 2017-03-15 | 2020-12-03 | 매사추세츠 인스티튜트 오브 테크놀로지 | 신규 cas13b 오르소로그 crispr 효소 및 시스템 |
HUE060693T2 (hu) | 2017-03-15 | 2023-04-28 | Modernatx Inc | Vegyület és készítmények terápiás szerek intracelluláris bejuttatására |
US11045540B2 (en) | 2017-03-15 | 2021-06-29 | Modernatx, Inc. | Varicella zoster virus (VZV) vaccine |
US20200030432A1 (en) * | 2017-03-17 | 2020-01-30 | Modernatx, Inc. | Zoonotic disease rna vaccines |
CA3057192A1 (en) | 2017-03-23 | 2018-09-27 | President And Fellows Of Harvard College | Nucleobase editors comprising nucleic acid programmable dna binding proteins |
MA48047A (fr) | 2017-04-05 | 2020-02-12 | Modernatx Inc | Réduction ou élimination de réponses immunitaires à des protéines thérapeutiques administrées par voie non intraveineuse, par exemple par voie sous-cutanée |
WO2018191388A1 (en) | 2017-04-12 | 2018-10-18 | The Broad Institute, Inc. | Novel type vi crispr orthologs and systems |
US11357856B2 (en) | 2017-04-13 | 2022-06-14 | Acuitas Therapeutics, Inc. | Lipids for delivery of active agents |
WO2018191719A1 (en) | 2017-04-13 | 2018-10-18 | Acuitas Therapeutics, Inc. | Lipid delivery of therapeutic agents to adipose tissue |
JP2020517638A (ja) | 2017-04-20 | 2020-06-18 | エータイアー ファーマ, インコーポレイテッド | 肺の炎症を治療するための組成物および方法 |
AU2018256867A1 (en) | 2017-04-27 | 2019-11-14 | The Johns Hopkins University | Nucleoside-modified mRNA-lipid nanoparticle lineage vaccine for hepatitis C virus |
CN110799492B (zh) | 2017-04-28 | 2023-06-27 | 爱康泰生治疗公司 | 用于递送核酸的新型羰基脂质和脂质纳米颗粒制剂 |
WO2018204777A2 (en) | 2017-05-05 | 2018-11-08 | The Broad Institute, Inc. | Methods for identification and modification of lncrna associated with target genotypes and phenotypes |
US11560566B2 (en) | 2017-05-12 | 2023-01-24 | President And Fellows Of Harvard College | Aptazyme-embedded guide RNAs for use with CRISPR-Cas9 in genome editing and transcriptional activation |
EP3624824A1 (en) | 2017-05-16 | 2020-03-25 | Translate Bio, Inc. | Treatment of cystic fibrosis by delivery of codon-optimized mrna encoding cftr |
WO2018213731A1 (en) | 2017-05-18 | 2018-11-22 | Modernatx, Inc. | Polynucleotides encoding tethered interleukin-12 (il12) polypeptides and uses thereof |
US10842853B2 (en) * | 2017-05-22 | 2020-11-24 | Baxalta Incorporated | Viral vectors encoding recombinant fix with increased expression for gene therapy of hemophilia B |
WO2018232357A1 (en) | 2017-06-15 | 2018-12-20 | Modernatx, Inc. | Rna formulations |
US10034951B1 (en) | 2017-06-21 | 2018-07-31 | New England Biolabs, Inc. | Use of thermostable RNA polymerases to produce RNAs having reduced immunogenicity |
US20200165593A1 (en) | 2017-07-21 | 2020-05-28 | Modernatx, Inc. | Modified mRNA Encoding a Propionyl-CoA Carboxylase and Uses Thereof |
EP3658672A1 (en) | 2017-07-24 | 2020-06-03 | Modernatx, Inc. | Modified mrna encoding a glucose-6-phosphatase and uses thereof |
US11732274B2 (en) | 2017-07-28 | 2023-08-22 | President And Fellows Of Harvard College | Methods and compositions for evolving base editors using phage-assisted continuous evolution (PACE) |
EP3668833A1 (en) | 2017-08-16 | 2020-06-24 | Acuitas Therapeutics, Inc. | Lipids for use in lipid nanoparticle formulations |
WO2019036028A1 (en) | 2017-08-17 | 2019-02-21 | Acuitas Therapeutics, Inc. | LIPIDS FOR USE IN LIPID NANOPARTICULAR FORMULATIONS |
WO2019036030A1 (en) | 2017-08-17 | 2019-02-21 | Acuitas Therapeutics, Inc. | LIPIDS FOR USE IN LIPID NANOPARTICLE FORMULATIONS |
US11866696B2 (en) | 2017-08-18 | 2024-01-09 | Modernatx, Inc. | Analytical HPLC methods |
JP7408098B2 (ja) | 2017-08-18 | 2024-01-05 | モデルナティエックス インコーポレイテッド | Rnaポリメラーゼバリアント |
MA49922A (fr) | 2017-08-18 | 2021-06-02 | Modernatx Inc | Procédés pour analyse par clhp |
US11319532B2 (en) | 2017-08-30 | 2022-05-03 | President And Fellows Of Harvard College | High efficiency base editors comprising Gam |
JP7275111B2 (ja) | 2017-08-31 | 2023-05-17 | モデルナティエックス インコーポレイテッド | 脂質ナノ粒子の生成方法 |
GB201714430D0 (en) * | 2017-09-07 | 2017-10-25 | Micol Romain | Compositions and processes for targeted delivery and expression and modulation of therapeutic components in tissue |
WO2019048631A1 (en) | 2017-09-08 | 2019-03-14 | Mina Therapeutics Limited | SMALL HNF4A ACTIVATOR RNA COMPOSITIONS AND METHODS OF USE |
EP4219715A3 (en) | 2017-09-08 | 2023-09-06 | MiNA Therapeutics Limited | Stabilized cebpa sarna compositions and methods of use |
US10653767B2 (en) | 2017-09-14 | 2020-05-19 | Modernatx, Inc. | Zika virus MRNA vaccines |
AU2018338318B2 (en) | 2017-09-21 | 2022-12-22 | Massachusetts Institute Of Technology | Systems, methods, and compositions for targeted nucleic acid editing |
JP2021500863A (ja) * | 2017-09-29 | 2021-01-14 | インテリア セラピューティクス,インコーポレイテッド | ゲノム編集用のポリヌクレオチド、組成物および方法 |
US20200255828A1 (en) | 2017-10-04 | 2020-08-13 | The Broad Institute, Inc. | Methods and compositions for altering function and structure of chromatin loops and/or domains |
CA3082251A1 (en) | 2017-10-16 | 2019-04-25 | The Broad Institute, Inc. | Uses of adenosine base editors |
AU2018355427A1 (en) | 2017-10-25 | 2020-04-30 | Novartis Ag | Methods of making chimeric antigen receptor-expressing cells |
WO2019089828A1 (en) | 2017-10-31 | 2019-05-09 | Acuitas Therapeutics, Inc. | Lamellar lipid nanoparticles |
IL274230B2 (en) * | 2017-10-31 | 2023-12-01 | Modernatx Inc | Lipid nanoparticles for delivery of modified RNA encoding VEGF-A polypeptide |
US11547614B2 (en) | 2017-10-31 | 2023-01-10 | The Broad Institute, Inc. | Methods and compositions for studying cell evolution |
EP3710039A4 (en) | 2017-11-13 | 2021-08-04 | The Broad Institute, Inc. | METHODS AND COMPOSITIONS FOR CANCER TREATMENT BY TARGETING THE CLEC2D-KLRB1 PATH |
EP3727428A1 (en) | 2017-12-20 | 2020-10-28 | Translate Bio, Inc. | Improved composition and methods for treatment of ornithine transcarbamylase deficiency |
WO2019131770A1 (ja) * | 2017-12-27 | 2019-07-04 | 武田薬品工業株式会社 | 核酸含有脂質ナノ粒子及びその用途 |
CN109988777A (zh) * | 2017-12-29 | 2019-07-09 | 南京金斯瑞生物科技有限公司 | 谷氨酰胺合成酶基因以及应用 |
US11911453B2 (en) | 2018-01-29 | 2024-02-27 | Modernatx, Inc. | RSV RNA vaccines |
WO2019158720A1 (en) | 2018-02-16 | 2019-08-22 | Mina Therapeutics Limited | C/ebp alpha sarna compositions and methods of use |
US20190292596A1 (en) * | 2018-03-21 | 2019-09-26 | Roche Molecular Systems, Inc. | Modified nucleoside phosphates with high thermal stability |
KR102114787B1 (ko) * | 2018-04-02 | 2020-05-26 | 중앙대학교 산학협력단 | 리보핵산분해효소 5 고발현된 각막 내피세포를 포함하는 3차원 각막 내피 이식체 제조방법 |
US10968257B2 (en) | 2018-04-03 | 2021-04-06 | The Broad Institute, Inc. | Target recognition motifs and uses thereof |
WO2019197845A1 (en) | 2018-04-12 | 2019-10-17 | Mina Therapeutics Limited | Sirt1-sarna compositions and methods of use |
US20200149070A1 (en) * | 2018-04-24 | 2020-05-14 | Ligandal, Inc. | Methods and compositions for genome editing |
EP4311541A3 (en) * | 2018-04-25 | 2024-02-07 | Ethris GmbH | Cryoprotective agents for particulate formulations |
CA3102334A1 (en) | 2018-06-15 | 2019-12-19 | Mina Therapeutics Limited | Combination therapies comprising c/ebp alpha sarna |
JP7241782B2 (ja) | 2018-06-22 | 2023-03-17 | ザ トラスティーズ オブ コロンビア ユニバーシティ イン ザ シティ オブ ニューヨーク | 顎関節変性疾患の治療用の持続放出性組成物およびその方法 |
EP3821003A4 (en) | 2018-07-09 | 2022-07-20 | Gro Biosciences Inc. | COMPOSITIONS CONTAINING NON-STANDARD AMINO ACIDS AND USES THEREOF |
EP3821012A4 (en) | 2018-07-13 | 2022-04-20 | The Regents of The University of California | RETROTRANSPOSON-BASED DELIVERY VEHICLE AND METHOD OF USE THEREOF |
WO2020028133A1 (en) | 2018-07-30 | 2020-02-06 | Trucode Gene Repair, Inc. | Lipid nanoparticle formulations comprising nucleic acid mimics |
WO2020028830A1 (en) * | 2018-08-03 | 2020-02-06 | Sangamo Therapeutics, Inc. | Improved clinical parameters by expression of factor viii |
JP2021532815A (ja) | 2018-08-07 | 2021-12-02 | ザ・ブロード・インスティテュート・インコーポレイテッド | 新規Cas12b酵素およびシステム |
US10842885B2 (en) | 2018-08-20 | 2020-11-24 | Ucl Business Ltd | Factor IX encoding nucleotides |
US20210317429A1 (en) | 2018-08-20 | 2021-10-14 | The Broad Institute, Inc. | Methods and compositions for optochemical control of crispr-cas9 |
AU2019325702A1 (en) | 2018-08-24 | 2021-02-25 | Translate Bio, Inc. | Methods for purification of messenger RNA |
JP7450945B2 (ja) | 2018-08-30 | 2024-03-18 | テナヤ セラピューティクス, インコーポレイテッド | ミオカルディンおよびascl1を用いた心細胞リプログラミング |
WO2020047449A2 (en) | 2018-08-31 | 2020-03-05 | Novartis Ag | Methods of making chimeric antigen receptor-expressing cells |
EP3844267A2 (en) | 2018-08-31 | 2021-07-07 | Novartis AG | Methods of making chimeric antigen receptor-expressing cells |
US10724052B2 (en) | 2018-09-07 | 2020-07-28 | Crispr Therapeutics Ag | Universal donor cells |
EP3849594A2 (en) * | 2018-09-13 | 2021-07-21 | Modernatx, Inc. | Polynucleotides encoding branched-chain alpha-ketoacid dehydrogenase complex e1-alpha, e1-beta, and e2 subunits for the treatment of maple syrup urine disease |
CA3113449A1 (en) | 2018-09-21 | 2020-03-26 | Acuitas Therapeutics, Inc. | Systems and methods for manufacturing lipid nanoparticles and liposomes |
US11072808B2 (en) | 2018-10-04 | 2021-07-27 | New England Biolabs, Inc. | Methods and compositions for increasing capping efficiency of transcribed RNA |
EP3861108A1 (en) | 2018-10-04 | 2021-08-11 | New England Biolabs, Inc. | Methods and compositions for increasing capping efficiency of transcribed rna |
BR112021006539A2 (pt) | 2018-10-09 | 2021-07-06 | Univ British Columbia | composições e sistemas competentes de vesículas competentes para transfecção isentas de solventes e detergentes orgânicos e métodos relacionados às mesmas |
WO2020080475A1 (ja) * | 2018-10-18 | 2020-04-23 | 武田薬品工業株式会社 | T細胞の活性化/増殖方法 |
US20210395721A1 (en) | 2018-10-24 | 2021-12-23 | Codiak Biosciences, Inc. | Methods to improve potency of electroporation |
EP3908568A1 (en) | 2019-01-11 | 2021-11-17 | Acuitas Therapeutics, Inc. | Lipids for lipid nanoparticle delivery of active agents |
CN109810184B (zh) * | 2019-01-17 | 2022-07-12 | 武汉明德生物科技股份有限公司 | 人nf155抗原、人nf155抗体检测试剂盒及其制备方法与应用 |
US11351242B1 (en) | 2019-02-12 | 2022-06-07 | Modernatx, Inc. | HMPV/hPIV3 mRNA vaccine composition |
WO2020168362A1 (en) | 2019-02-15 | 2020-08-20 | Crispr Therapeutics Ag | Gene editing for hemophilia a with improved factor viii expression |
US11851694B1 (en) | 2019-02-20 | 2023-12-26 | Modernatx, Inc. | High fidelity in vitro transcription |
CN113795579A (zh) | 2019-02-20 | 2021-12-14 | 摩登纳特斯有限公司 | 用于共转录加帽的rna聚合酶变体 |
AU2020231349A1 (en) * | 2019-03-01 | 2021-09-23 | Flagship Pioneering Innovations Vi, Llc | Compositions, methods, and kits for delivery of polyribonucleotides |
MX2021010559A (es) | 2019-03-07 | 2021-12-15 | Univ California | Polipéptidos efectores de crispr-cas y métodos de uso de estos. |
US20220177863A1 (en) | 2019-03-18 | 2022-06-09 | The Broad Institute, Inc. | Type vii crispr proteins and systems |
MX2021011426A (es) | 2019-03-19 | 2022-03-11 | Broad Inst Inc | Metodos y composiciones para editar secuencias de nucleótidos. |
EP3947646A1 (en) * | 2019-04-05 | 2022-02-09 | Precision BioSciences, Inc. | Methods of preparing populations of genetically-modified immune cells |
EP3953473A1 (en) | 2019-04-12 | 2022-02-16 | MiNA Therapeutics Limited | Sirt1-sarna compositions and methods of use |
EP3953455A1 (en) | 2019-04-12 | 2022-02-16 | Novartis AG | Methods of making chimeric antigen receptor-expressing cells |
US11490453B2 (en) * | 2019-05-16 | 2022-11-01 | Apple Inc. | Self-organizing device |
US20220220469A1 (en) | 2019-05-20 | 2022-07-14 | The Broad Institute, Inc. | Non-class i multi-component nucleic acid targeting systems |
RU2721562C1 (ru) * | 2019-06-04 | 2020-05-20 | Автономная некоммерческая образовательная организация высшего образования "Сколковский институт науки и технологий" | Способ загрузки неорганических наночастиц или органических молекул в пористые частицы микронного или субмикронного размера |
JP2022536112A (ja) * | 2019-06-05 | 2022-08-12 | ガイド セラピューティクス,インコーポレーテッド | 組織送達のための材料の分析 |
US20230137971A1 (en) | 2019-07-11 | 2023-05-04 | Tenaya Therapeutics Inc. | Cardiac cell reprogramming with micrornas and other factors |
US10501404B1 (en) | 2019-07-30 | 2019-12-10 | Factor Bioscience Inc. | Cationic lipids and transfection methods |
CN214973877U (zh) | 2019-08-09 | 2021-12-03 | 胡桃钳医疗公司 | 用于形成治疗性多核苷酸的微流体设备及微流体路径装置 |
US20230097090A1 (en) | 2019-08-14 | 2023-03-30 | Acuitas Therapeutics, Inc. | Improved lipid nanoparticles for delivery of nucleic acids |
WO2021032777A1 (en) | 2019-08-19 | 2021-02-25 | Mina Therapeutics Limited | Oligonucleotide conjugate compositions and methods of use |
CN114375300A (zh) | 2019-09-05 | 2022-04-19 | 克里斯珀医疗股份公司 | 通用供体细胞 |
CA3150233A1 (en) | 2019-09-05 | 2021-03-11 | Alireza Rezania | UNIVERSAL DONOR CELLS |
JP2022548304A (ja) | 2019-09-19 | 2022-11-17 | モデルナティエックス インコーポレイテッド | 治療薬の細胞内送達のための分岐状尾部脂質化合物及び組成物 |
WO2021061594A1 (en) * | 2019-09-27 | 2021-04-01 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Method for measuring nucleic acid content in lipid nanoprticles using ultraviolet spectrometry |
KR20220082885A (ko) | 2019-11-15 | 2022-06-17 | 후지필름 가부시키가이샤 | 지질 조성물 |
EP4065158A2 (en) | 2019-11-26 | 2022-10-05 | Novartis AG | Chimeric antigen receptors binding bcma and cd19 and uses thereof |
CN111041025B (zh) | 2019-12-17 | 2021-06-18 | 深圳市瑞吉生物科技有限公司 | 基于结合N-乙酰半乳糖胺多肽的mRNA靶向分子及其制备方法 |
US11576966B2 (en) | 2020-02-04 | 2023-02-14 | CureVac SE | Coronavirus vaccine |
CN111217867B (zh) * | 2020-02-18 | 2024-03-22 | 福建瑞博奥科技有限公司 | 一种制备曲氟尿苷的方法 |
CN112121180B (zh) * | 2020-02-19 | 2023-08-25 | 深圳厚存纳米药业有限公司 | 泊洛沙姆和或泊洛沙胺与peg脂质组合的复合物纳米粒 |
CN111944157B (zh) * | 2020-02-21 | 2022-02-11 | 武汉中科先进技术研究院有限公司 | 一种纳米磁珠及其在2019新型冠状病毒核酸提取、扩增、检测中的应用 |
EP4110377A2 (en) | 2020-02-27 | 2023-01-04 | Novartis AG | Methods of making chimeric antigen receptor-expressing cells |
AU2021230476A1 (en) | 2020-03-02 | 2022-10-20 | Tenaya Therapeutics, Inc. | Gene vector control by cardiomyocyte-expressed microRNAs |
CN115397856A (zh) | 2020-03-30 | 2022-11-25 | 生物技术公司 | 靶向密蛋白-18.2的rna组合物 |
WO2021205077A1 (en) | 2020-04-09 | 2021-10-14 | Finncure Oy | Mimetic nanoparticles for preventing the spreading and lowering the infection rate of novel coronaviruses |
CN113521268A (zh) | 2020-04-22 | 2021-10-22 | 生物技术Rna制药有限公司 | 冠状病毒疫苗 |
IL297761A (en) | 2020-05-08 | 2022-12-01 | Broad Inst Inc | Methods and compositions for simultaneously editing two helices of a designated double-helix nucleotide sequence |
WO2021257595A1 (en) | 2020-06-15 | 2021-12-23 | Research Institute At Nationwide Children's Hospital | Adeno-associated virus vector delivery for muscular dystrophies |
CN111744019B (zh) | 2020-07-01 | 2023-08-04 | 深圳瑞吉生物科技有限公司 | 基于甘露糖的mRNA靶向递送系统及其应用 |
US20240024451A1 (en) | 2020-07-31 | 2024-01-25 | Combined Therapeutics, Inc. | Compositions and methods for improved vaccination |
US11406703B2 (en) | 2020-08-25 | 2022-08-09 | Modernatx, Inc. | Human cytomegalovirus vaccine |
CN112076149B (zh) * | 2020-09-09 | 2022-03-01 | 上海交通大学 | 香豆素靶向控释纳米凝胶及其制备方法 |
WO2022054955A1 (ja) | 2020-09-14 | 2022-03-17 | 富士フイルム株式会社 | 脂質組成物 |
US11459372B2 (en) | 2020-11-30 | 2022-10-04 | Crispr Therapeutics Ag | Gene-edited natural killer cells |
AU2021405281A1 (en) | 2020-12-22 | 2023-07-06 | CureVac SE | Rna vaccine against sars-cov-2 variants |
AU2021414617A1 (en) | 2020-12-31 | 2023-08-10 | Crispr Therapeutics Ag | Universal donor cells |
US11524023B2 (en) | 2021-02-19 | 2022-12-13 | Modernatx, Inc. | Lipid nanoparticle compositions and methods of formulating the same |
EP4314292A1 (en) | 2021-03-26 | 2024-02-07 | MiNA Therapeutics Limited | Tmem173 sarna compositions and methods of use |
EP4319803A1 (en) | 2021-04-08 | 2024-02-14 | Vaxthera SAS | Coronavirus vaccine comprising a mosaic protein |
WO2022229644A1 (en) | 2021-04-28 | 2022-11-03 | Mina Therapeutics Limited | Combination therapies comprising c/ebp alpha sarna |
KR20240021170A (ko) | 2021-05-12 | 2024-02-16 | 더 브로드 인스티튜트, 인코퍼레이티드 | 변형된 mRNA, 변형된 비-코딩 RNA, 및 그의 용도 |
KR20230008627A (ko) | 2021-07-07 | 2023-01-16 | 주식회사 제넥신 | 히알루론산-지질 유도체, 이를 포함하는 지질나노입자 및 그 용도 |
WO2023003826A2 (en) * | 2021-07-20 | 2023-01-26 | The Regents Of The University Of California | Single- and multi-epitope peptide and mrna vaccines to generate tolerogenic effects for allergic and autoimmune disease by targeting liver sinusoidal endothelial cells |
WO2023023055A1 (en) | 2021-08-16 | 2023-02-23 | Renagade Therapeutics Management Inc. | Compositions and methods for optimizing tropism of delivery systems for rna |
IL309505A (en) | 2021-09-03 | 2024-02-01 | CureVac SE | Lipid nanoparticles for nucleic acid delivery |
TW202325263A (zh) | 2021-09-14 | 2023-07-01 | 美商雷納嘉德醫療管理公司 | 非環狀脂質及其使用方法 |
TW202328067A (zh) | 2021-09-14 | 2023-07-16 | 美商雷納嘉德醫療管理公司 | 環狀脂質及其使用方法 |
WO2023064469A1 (en) | 2021-10-13 | 2023-04-20 | Modernatx, Inc. | Compositions of mrna-encoded il15 fusion proteins and methods of use thereof |
WO2023069498A1 (en) | 2021-10-22 | 2023-04-27 | Senda Biosciences, Inc. | Mrna vaccine composition |
WO2023073228A1 (en) | 2021-10-29 | 2023-05-04 | CureVac SE | Improved circular rna for expressing therapeutic proteins |
WO2023081756A1 (en) | 2021-11-03 | 2023-05-11 | The J. David Gladstone Institutes, A Testamentary Trust Established Under The Will Of J. David Gladstone | Precise genome editing using retrons |
WO2023091490A1 (en) | 2021-11-16 | 2023-05-25 | Senda Biosciences, Inc. | Novel ionizable lipids and lipid nanoparticles and methods of using the same |
WO2023091787A1 (en) | 2021-11-22 | 2023-05-25 | Senda Biosciences, Inc. | Novel ionizable lipids and lipid nanoparticles and methods of using the same |
WO2023096858A1 (en) | 2021-11-23 | 2023-06-01 | Senda Biosciences, Inc. | A bacteria-derived lipid composition and use thereof |
WO2023099884A1 (en) | 2021-12-01 | 2023-06-08 | Mina Therapeutics Limited | Pax6 sarna compositions and methods of use |
WO2023122080A1 (en) | 2021-12-20 | 2023-06-29 | Senda Biosciences, Inc. | Compositions comprising mrna and lipid reconstructed plant messenger packs |
WO2023122752A1 (en) | 2021-12-23 | 2023-06-29 | Renagade Therapeutics Management Inc. | Constrained lipids and methods of use thereof |
WO2023131254A1 (zh) * | 2022-01-06 | 2023-07-13 | 上海吉量医药工程有限公司 | N1位修饰假尿嘧啶核苷及其在mRNA合成中的应用 |
WO2023141602A2 (en) | 2022-01-21 | 2023-07-27 | Renagade Therapeutics Management Inc. | Engineered retrons and methods of use |
WO2023147090A1 (en) | 2022-01-27 | 2023-08-03 | BioNTech SE | Pharmaceutical compositions for delivery of herpes simplex virus antigens and related methods |
WO2023144330A1 (en) | 2022-01-28 | 2023-08-03 | CureVac SE | Nucleic acid encoded transcription factor inhibitors |
WO2023149775A1 (ko) * | 2022-02-07 | 2023-08-10 | 한국과학기술원 | 유전자 전달용 올리고뉴클레오티드 및 이를 포함하는 유전자 전달용 지질나노입자 |
WO2023170435A1 (en) | 2022-03-07 | 2023-09-14 | Mina Therapeutics Limited | Il10 sarna compositions and methods of use |
WO2023172747A1 (en) * | 2022-03-11 | 2023-09-14 | W. L. Gore & Associates, Inc. | Bioabsorbable particles and method of use |
WO2023183616A1 (en) | 2022-03-25 | 2023-09-28 | Senda Biosciences, Inc. | Novel ionizable lipids and lipid nanoparticles and methods of using the same |
WO2023196818A1 (en) | 2022-04-04 | 2023-10-12 | The Regents Of The University Of California | Genetic complementation compositions and methods |
WO2023196931A1 (en) | 2022-04-07 | 2023-10-12 | Renagade Therapeutics Management Inc. | Cyclic lipids and lipid nanoparticles (lnp) for the delivery of nucleic acids or peptides for use in vaccinating against infectious agents |
WO2023218431A1 (en) | 2022-05-13 | 2023-11-16 | BioNTech SE | Rna compositions targeting hiv |
WO2023227608A1 (en) | 2022-05-25 | 2023-11-30 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | Nucleic acid based vaccine encoding an escherichia coli fimh antigenic polypeptide |
WO2023230295A1 (en) | 2022-05-25 | 2023-11-30 | BioNTech SE | Rna compositions for delivery of monkeypox antigens and related methods |
WO2023232747A1 (en) | 2022-05-30 | 2023-12-07 | BioNTech SE | Complexes for delivery of nucleic acids |
WO2023239593A1 (en) * | 2022-06-08 | 2023-12-14 | Merck Sharp & Dohme Llc | Method for sustained delivery of mrna vaccines |
US11878055B1 (en) | 2022-06-26 | 2024-01-23 | BioNTech SE | Coronavirus vaccine |
EP4327829A1 (en) | 2022-08-26 | 2024-02-28 | Ethris GmbH | Stabilization of lipid or lipidoid nanoparticle suspensions |
WO2024042236A1 (en) | 2022-08-26 | 2024-02-29 | Ethris Gmbh | Stable lipid or lipidoid nanoparticle suspensions |
WO2024049979A2 (en) | 2022-08-31 | 2024-03-07 | Senda Biosciences, Inc. | Novel ionizable lipids and lipid nanoparticles and methods of using the same |
WO2024056809A1 (en) | 2022-09-15 | 2024-03-21 | Novartis Ag | Treatment of autoimmune disorders using chimeric antigen receptor therapy |
WO2024064934A1 (en) | 2022-09-23 | 2024-03-28 | BioNTech SE | Compositions for delivery of plasmodium csp antigens and related methods |
WO2024063788A1 (en) | 2022-09-23 | 2024-03-28 | BioNTech SE | Compositions for delivery of malaria antigens and related methods |
WO2024063789A1 (en) | 2022-09-23 | 2024-03-28 | BioNTech SE | Compositions for delivery of malaria antigens and related methods |
WO2024064931A1 (en) | 2022-09-23 | 2024-03-28 | BioNTech SE | Compositions for delivery of liver stage antigens and related methods |
WO2024074211A1 (en) | 2022-10-06 | 2024-04-11 | BioNTech SE | Rna compositions targeting claudin-18.2 |
WO2024074634A1 (en) | 2022-10-06 | 2024-04-11 | BioNTech SE | Rna compositions targeting claudin-18.2 |
CN115671045B (zh) * | 2022-12-30 | 2023-04-07 | 华南理工大学 | 非肝靶向的核酸纳米制剂及其制备方法和应用 |
Citations (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20090286852A1 (en) * | 2005-08-23 | 2009-11-19 | Katalin Kariko | RNA containing modified nucleosides and methods of use thereof |
WO2010129687A1 (en) * | 2009-05-05 | 2010-11-11 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc | Methods of delivering oligonucleotides to immune cells |
JP2011500671A (ja) * | 2007-10-17 | 2011-01-06 | 韓国科学技術院 | 核酸遺伝子伝達用低密度リポタンパク質類似(LDL−like)陽イオン性ナノ粒子、その製造方法、及びこれを用いた核酸遺伝子の伝達方法 |
JP2011516586A (ja) * | 2008-04-15 | 2011-05-26 | プロチバ バイオセラピューティクス インコーポレイティッド | 核酸送達用の脂質製剤 |
WO2011068810A1 (en) * | 2009-12-01 | 2011-06-09 | Shire Human Genetic Therapies | Delivery of mrna for the augmentation of proteins and enzymes in human genetic diseases |
WO2011119887A1 (en) * | 2010-03-24 | 2011-09-29 | Rxi Pharmaceuticals Corporation | Rna interference in dermal and fibrotic indications |
Family Cites Families (1395)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US618885A (en) | 1899-02-07 | Railway-car brake | ||
US618862A (en) | 1899-02-07 | Automatic stoker | ||
US533554A (en) | 1895-02-05 | Henry d | ||
US618957A (en) | 1899-02-07 | Inda may kelly | ||
US618953A (en) | 1899-02-07 | Apparatus for preventing pounding or water-hammering in circulating-pipes of heating | ||
US618896A (en) | 1899-02-07 | Potato-bug gatherer | ||
US618873A (en) | 1899-02-07 | Oyster-tongs | ||
US533537A (en) | 1895-02-05 | Watchmakers calipers | ||
US576705A (en) | 1897-02-09 | Vegetable cutter and grater | ||
US681712A (en) | 1898-03-26 | 1901-09-03 | American Railway Electric Light Co | Means for controlling electric currents. |
US648244A (en) | 1899-04-28 | 1900-04-24 | Orrin A Dever | Tank-mold. |
US696381A (en) | 1900-03-01 | 1902-03-25 | Hugo Loewenbach | Paper-feeding machine. |
US709303A (en) | 1901-11-19 | 1902-09-16 | Edward Chester & Company Ltd | Construction of tanks. |
US712490A (en) | 1902-01-13 | 1902-11-04 | Francis Blossom | Economizer system. |
US2008526A (en) | 1932-11-03 | 1935-07-16 | Wappler Frederick Charles | Method and means for treating living tissue |
US2588623A (en) | 1948-05-10 | 1952-03-11 | Eliscu Frank | Surgical instrument for intradermal injection of fluids |
US3467096A (en) | 1966-04-12 | 1969-09-16 | Ferrell S Horn | Multiple hypodermic syringe arrangement |
US3572336A (en) | 1968-04-30 | 1971-03-23 | Daniel R Hershberg | Syringe |
BE757653A (fr) | 1969-10-21 | 1971-04-16 | Ugine Kuhlmann | Nouveaux medicaments derives d'acides nucleiques et procedes pour leur preparation |
BE786542A (fr) | 1971-07-22 | 1973-01-22 | Dow Corning | Dispositif d'aspiration permettant d'obtenir des echantillons de cellules |
US3906092A (en) | 1971-11-26 | 1975-09-16 | Merck & Co Inc | Stimulation of antibody response |
US4270537A (en) | 1979-11-19 | 1981-06-02 | Romaine Richard A | Automatic hypodermic syringe |
US4399216A (en) | 1980-02-25 | 1983-08-16 | The Trustees Of Columbia University | Processes for inserting DNA into eucaryotic cells and for producing proteinaceous materials |
US5132418A (en) | 1980-02-29 | 1992-07-21 | University Patents, Inc. | Process for preparing polynucleotides |
US4458066A (en) | 1980-02-29 | 1984-07-03 | University Patents, Inc. | Process for preparing polynucleotides |
US4500707A (en) | 1980-02-29 | 1985-02-19 | University Patents, Inc. | Nucleosides useful in the preparation of polynucleotides |
US4411657A (en) | 1980-05-19 | 1983-10-25 | Anibal Galindo | Hypodermic needle |
US4668777A (en) | 1981-03-27 | 1987-05-26 | University Patents, Inc. | Phosphoramidite nucleoside compounds |
US4415732A (en) | 1981-03-27 | 1983-11-15 | University Patents, Inc. | Phosphoramidite compounds and processes |
US4973679A (en) | 1981-03-27 | 1990-11-27 | University Patents, Inc. | Process for oligonucleo tide synthesis using phosphormidite intermediates |
US4401796A (en) | 1981-04-30 | 1983-08-30 | City Of Hope Research Institute | Solid-phase synthesis of polynucleotides |
US4373071A (en) | 1981-04-30 | 1983-02-08 | City Of Hope Research Institute | Solid-phase synthesis of polynucleotides |
US4474569A (en) | 1982-06-28 | 1984-10-02 | Denver Surgical Developments, Inc. | Antenatal shunt |
JPS5927900A (ja) | 1982-08-09 | 1984-02-14 | Wakunaga Seiyaku Kk | 固定化オリゴヌクレオチド |
US4588585A (en) | 1982-10-19 | 1986-05-13 | Cetus Corporation | Human recombinant cysteine depleted interferon-β muteins |
US4737462A (en) | 1982-10-19 | 1988-04-12 | Cetus Corporation | Structural genes, plasmids and transformed cells for producing cysteine depleted muteins of interferon-β |
FR2540122B1 (fr) | 1983-01-27 | 1985-11-29 | Centre Nat Rech Scient | Nouveaux composes comportant une sequence d'oligonucleotide liee a un agent d'intercalation, leur procede de synthese et leur application |
US4605735A (en) | 1983-02-14 | 1986-08-12 | Wakunaga Seiyaku Kabushiki Kaisha | Oligonucleotide derivatives |
US4948882A (en) | 1983-02-22 | 1990-08-14 | Syngene, Inc. | Single-stranded labelled oligonucleotides, reactive monomers and methods of synthesis |
US4824941A (en) | 1983-03-10 | 1989-04-25 | Julian Gordon | Specific antibody to the native form of 2'5'-oligonucleotides, the method of preparation and the use as reagents in immunoassays or for binding 2'5'-oligonucleotides in biological systems |
US4816567A (en) | 1983-04-08 | 1989-03-28 | Genentech, Inc. | Recombinant immunoglobin preparations |
US4587044A (en) | 1983-09-01 | 1986-05-06 | The Johns Hopkins University | Linkage of proteins to nucleic acids |
US5118800A (en) | 1983-12-20 | 1992-06-02 | California Institute Of Technology | Oligonucleotides possessing a primary amino group in the terminal nucleotide |
US5118802A (en) | 1983-12-20 | 1992-06-02 | California Institute Of Technology | DNA-reporter conjugates linked via the 2' or 5'-primary amino group of the 5'-terminal nucleoside |
US4579849A (en) | 1984-04-06 | 1986-04-01 | Merck & Co., Inc. | N-alkylguanine acyclonucleosides as antiviral agents |
US4957735A (en) | 1984-06-12 | 1990-09-18 | The University Of Tennessee Research Corporation | Target-sensitive immunoliposomes- preparation and characterization |
FR2567892B1 (fr) | 1984-07-19 | 1989-02-17 | Centre Nat Rech Scient | Nouveaux oligonucleotides, leur procede de preparation et leurs applications comme mediateurs dans le developpement des effets des interferons |
US5258506A (en) | 1984-10-16 | 1993-11-02 | Chiron Corporation | Photolabile reagents for incorporation into oligonucleotide chains |
US5430136A (en) | 1984-10-16 | 1995-07-04 | Chiron Corporation | Oligonucleotides having selectably cleavable and/or abasic sites |
US4828979A (en) | 1984-11-08 | 1989-05-09 | Life Technologies, Inc. | Nucleotide analogs for nucleic acid labeling and detection |
US4959314A (en) | 1984-11-09 | 1990-09-25 | Cetus Corporation | Cysteine-depleted muteins of biologically active proteins |
US5036006A (en) | 1984-11-13 | 1991-07-30 | Cornell Research Foundation, Inc. | Method for transporting substances into living cells and tissues and apparatus therefor |
US5116943A (en) | 1985-01-18 | 1992-05-26 | Cetus Corporation | Oxidation-resistant muteins of Il-2 and other protein |
CA1288073C (en) | 1985-03-07 | 1991-08-27 | Paul G. Ahlquist | Rna transformation vector |
US5034506A (en) | 1985-03-15 | 1991-07-23 | Anti-Gene Development Group | Uncharged morpholino-based polymers having achiral intersubunit linkages |
US4596556A (en) | 1985-03-25 | 1986-06-24 | Bioject, Inc. | Hypodermic injection apparatus |
EP0204401A1 (en) | 1985-04-09 | 1986-12-10 | Biogen, Inc. | Method of improving the yield of polypeptides produced in a host cell by stabilizing mRNA |
US4762779A (en) | 1985-06-13 | 1988-08-09 | Amgen Inc. | Compositions and methods for functionalizing nucleic acids |
US5017691A (en) | 1986-07-03 | 1991-05-21 | Schering Corporation | Mammalian interleukin-4 |
US5317098A (en) | 1986-03-17 | 1994-05-31 | Hiroaki Shizuya | Non-radioisotope tagging of fragments |
US5153319A (en) | 1986-03-31 | 1992-10-06 | University Patents, Inc. | Process for preparing polynucleotides |
US4695273A (en) | 1986-04-08 | 1987-09-22 | I-Flow Corporation | Multiple needle holder and subcutaneous multiple channel infusion port |
US4879111A (en) | 1986-04-17 | 1989-11-07 | Cetus Corporation | Treatment of infections with lymphokines |
JPS638396A (ja) | 1986-06-30 | 1988-01-14 | Wakunaga Pharmaceut Co Ltd | ポリ標識化オリゴヌクレオチド誘導体 |
US4886499A (en) | 1986-12-18 | 1989-12-12 | Hoffmann-La Roche Inc. | Portable injection appliance |
GB8704027D0 (en) | 1987-02-20 | 1987-03-25 | Owen Mumford Ltd | Syringe needle combination |
US4904582A (en) | 1987-06-11 | 1990-02-27 | Synthetic Genetics | Novel amphiphilic nucleic acid conjugates |
US4941880A (en) | 1987-06-19 | 1990-07-17 | Bioject, Inc. | Pre-filled ampule and non-invasive hypodermic injection device assembly |
US4940460A (en) | 1987-06-19 | 1990-07-10 | Bioject, Inc. | Patient-fillable and non-invasive hypodermic injection device assembly |
US4790824A (en) | 1987-06-19 | 1988-12-13 | Bioject, Inc. | Non-invasive hypodermic injection device |
CA1340843C (en) | 1987-07-31 | 1999-12-07 | J. Lawrence Burg | Selective amplification of target polynucleotide sequences |
US6090591A (en) | 1987-07-31 | 2000-07-18 | The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University | Selective amplification of target polynucleotide sequences |
US5585481A (en) | 1987-09-21 | 1996-12-17 | Gen-Probe Incorporated | Linking reagents for nucleotide probes |
US5525465A (en) | 1987-10-28 | 1996-06-11 | Howard Florey Institute Of Experimental Physiology And Medicine | Oligonucleotide-polyamide conjugates and methods of production and applications of the same |
DE3738460A1 (de) | 1987-11-12 | 1989-05-24 | Max Planck Gesellschaft | Modifizierte oligonukleotide |
AU624601B2 (en) | 1988-01-21 | 1992-06-18 | Genentech Inc. | Amplification and detection of nucleic acid sequences |
CA1340807C (en) | 1988-02-24 | 1999-11-02 | Lawrence T. Malek | Nucleic acid amplification process |
JP2650159B2 (ja) | 1988-02-24 | 1997-09-03 | アクゾ・ノベル・エヌ・ベー | 核酸増幅方法 |
US5082830A (en) | 1988-02-26 | 1992-01-21 | Enzo Biochem, Inc. | End labeled nucleotide probe |
WO1989007947A1 (en) | 1988-03-04 | 1989-09-08 | Cancer Research Campaign Technology Limited | Improvements relating to antigens |
US5339163A (en) | 1988-03-16 | 1994-08-16 | Canon Kabushiki Kaisha | Automatic exposure control device using plural image plane detection areas |
WO1989009622A1 (en) | 1988-04-15 | 1989-10-19 | Protein Design Labs, Inc. | Il-2 receptor-specific chimeric antibodies |
US5109124A (en) | 1988-06-01 | 1992-04-28 | Biogen, Inc. | Nucleic acid probe linked to a label having a terminal cysteine |
US5021335A (en) | 1988-06-17 | 1991-06-04 | The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University | In situ transcription in cells and tissues |
US5168038A (en) | 1988-06-17 | 1992-12-01 | The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University | In situ transcription in cells and tissues |
US5130238A (en) | 1988-06-24 | 1992-07-14 | Cangene Corporation | Enhanced nucleic acid amplification process |
US5262536A (en) | 1988-09-15 | 1993-11-16 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | Reagents for the preparation of 5'-tagged oligonucleotides |
US5759802A (en) | 1988-10-26 | 1998-06-02 | Tonen Corporation | Production of human serum alubumin A |
FR2638359A1 (fr) | 1988-11-03 | 1990-05-04 | Tino Dalto | Guide de seringue avec reglage de la profondeur de penetration de l'aiguille dans la peau |
US5512439A (en) | 1988-11-21 | 1996-04-30 | Dynal As | Oligonucleotide-linked magnetic particles and uses thereof |
US5262530A (en) | 1988-12-21 | 1993-11-16 | Applied Biosystems, Inc. | Automated system for polynucleotide synthesis and purification |
US5047524A (en) | 1988-12-21 | 1991-09-10 | Applied Biosystems, Inc. | Automated system for polynucleotide synthesis and purification |
US5530101A (en) | 1988-12-28 | 1996-06-25 | Protein Design Labs, Inc. | Humanized immunoglobulins |
US5457183A (en) | 1989-03-06 | 1995-10-10 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Hydroxylated texaphyrins |
US5599923A (en) | 1989-03-06 | 1997-02-04 | Board Of Regents, University Of Tx | Texaphyrin metal complexes having improved functionalization |
US5693622A (en) | 1989-03-21 | 1997-12-02 | Vical Incorporated | Expression of exogenous polynucleotide sequences cardiac muscle of a mammal |
US5703055A (en) | 1989-03-21 | 1997-12-30 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Generation of antibodies through lipid mediated DNA delivery |
US6214804B1 (en) | 1989-03-21 | 2001-04-10 | Vical Incorporated | Induction of a protective immune response in a mammal by injecting a DNA sequence |
ES2200016T3 (es) | 1989-03-21 | 2004-03-01 | Vical Incorporated | Expresion de secuencias polinucleotidicas exogenas en un vertebrado. |
US6867195B1 (en) | 1989-03-21 | 2005-03-15 | Vical Incorporated | Lipid-mediated polynucleotide administration to reduce likelihood of subject's becoming infected |
US6673776B1 (en) | 1989-03-21 | 2004-01-06 | Vical Incorporated | Expression of exogenous polynucleotide sequences in a vertebrate, mammal, fish, bird or human |
US5012818A (en) | 1989-05-04 | 1991-05-07 | Joishy Suresh K | Two in one bone marrow surgical needle |
IE66597B1 (en) | 1989-05-10 | 1996-01-24 | Akzo Nv | Method for the synthesis of ribonucleic acid (RNA) |
US5240855A (en) | 1989-05-12 | 1993-08-31 | Pioneer Hi-Bred International, Inc. | Particle gun |
US5332671A (en) | 1989-05-12 | 1994-07-26 | Genetech, Inc. | Production of vascular endothelial cell growth factor and DNA encoding same |
US5391723A (en) | 1989-05-31 | 1995-02-21 | Neorx Corporation | Oligonucleotide conjugates |
US4958013A (en) | 1989-06-06 | 1990-09-18 | Northwestern University | Cholesteryl modified oligonucleotides |
CA2020958C (en) | 1989-07-11 | 2005-01-11 | Daniel L. Kacian | Nucleic acid sequence amplification methods |
US5451463A (en) | 1989-08-28 | 1995-09-19 | Clontech Laboratories, Inc. | Non-nucleoside 1,3-diol reagents for labeling synthetic oligonucleotides |
US5254469A (en) | 1989-09-12 | 1993-10-19 | Eastman Kodak Company | Oligonucleotide-enzyme conjugate that can be used as a probe in hybridization assays and polymerase chain reaction procedures |
US5591722A (en) | 1989-09-15 | 1997-01-07 | Southern Research Institute | 2'-deoxy-4'-thioribonucleosides and their antiviral activity |
US5545522A (en) | 1989-09-22 | 1996-08-13 | Van Gelder; Russell N. | Process for amplifying a target polynucleotide sequence using a single primer-promoter complex |
EP0942000B1 (en) | 1989-10-24 | 2004-06-23 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | 2'-Modified oligonucleotides |
US5208020A (en) | 1989-10-25 | 1993-05-04 | Immunogen Inc. | Cytotoxic agents comprising maytansinoids and their therapeutic use |
NO904633L (no) | 1989-11-09 | 1991-05-10 | Molecular Diagnostics Inc | Amplifikasjon av nukleinsyrer ved transkriberbar haarnaalsprobe. |
US5312335A (en) | 1989-11-09 | 1994-05-17 | Bioject Inc. | Needleless hypodermic injection device |
US5215899A (en) | 1989-11-09 | 1993-06-01 | Miles Inc. | Nucleic acid amplification employing ligatable hairpin probe and transcription |
US5064413A (en) | 1989-11-09 | 1991-11-12 | Bioject, Inc. | Needleless hypodermic injection device |
US5292873A (en) | 1989-11-29 | 1994-03-08 | The Research Foundation Of State University Of New York | Nucleic acids labeled with naphthoquinone probe |
US5633076A (en) | 1989-12-01 | 1997-05-27 | Pharming Bv | Method of producing a transgenic bovine or transgenic bovine embryo |
US5697901A (en) | 1989-12-14 | 1997-12-16 | Elof Eriksson | Gene delivery by microneedle injection |
US5486603A (en) | 1990-01-08 | 1996-01-23 | Gilead Sciences, Inc. | Oligonucleotide having enhanced binding affinity |
US5670633A (en) | 1990-01-11 | 1997-09-23 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Sugar modified oligonucleotides that detect and modulate gene expression |
US5646265A (en) | 1990-01-11 | 1997-07-08 | Isis Pharmceuticals, Inc. | Process for the preparation of 2'-O-alkyl purine phosphoramidites |
US5578718A (en) | 1990-01-11 | 1996-11-26 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Thiol-derivatized nucleosides |
US6783931B1 (en) | 1990-01-11 | 2004-08-31 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Amine-derivatized nucleosides and oligonucleosides |
US7037646B1 (en) | 1990-01-11 | 2006-05-02 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Amine-derivatized nucleosides and oligonucleosides |
US5214136A (en) | 1990-02-20 | 1993-05-25 | Gilead Sciences, Inc. | Anthraquinone-derivatives oligonucleotides |
AU7579991A (en) | 1990-02-20 | 1991-09-18 | Gilead Sciences, Inc. | Pseudonucleosides and pseudonucleotides and their polymers |
US5264618A (en) * | 1990-04-19 | 1993-11-23 | Vical, Inc. | Cationic lipids for intracellular delivery of biologically active molecules |
GB9009980D0 (en) | 1990-05-03 | 1990-06-27 | Amersham Int Plc | Phosphoramidite derivatives,their preparation and the use thereof in the incorporation of reporter groups on synthetic oligonucleotides |
ES2116977T3 (es) | 1990-05-11 | 1998-08-01 | Microprobe Corp | Soportes solidos para ensayos de hibridacion de acidos nucleicos y metodos para inmovilizar oligonucleotidos de modo covalente. |
US5194370A (en) | 1990-05-16 | 1993-03-16 | Life Technologies, Inc. | Promoter ligation activated transcription amplification of nucleic acid sequences |
EP0542874A4 (en) | 1990-07-25 | 1994-05-11 | Syngene Inc | Circular extension for generating multiple nucleic acid complements |
US5489677A (en) | 1990-07-27 | 1996-02-06 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Oligonucleoside linkages containing adjacent oxygen and nitrogen atoms |
US5138045A (en) | 1990-07-27 | 1992-08-11 | Isis Pharmaceuticals | Polyamine conjugated oligonucleotides |
US5602240A (en) | 1990-07-27 | 1997-02-11 | Ciba Geigy Ag. | Backbone modified oligonucleotide analogs |
US5218105A (en) | 1990-07-27 | 1993-06-08 | Isis Pharmaceuticals | Polyamine conjugated oligonucleotides |
US5608046A (en) | 1990-07-27 | 1997-03-04 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Conjugated 4'-desmethyl nucleoside analog compounds |
US5688941A (en) | 1990-07-27 | 1997-11-18 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Methods of making conjugated 4' desmethyl nucleoside analog compounds |
US5245022A (en) | 1990-08-03 | 1993-09-14 | Sterling Drug, Inc. | Exonuclease resistant terminally substituted oligonucleotides |
US5190521A (en) | 1990-08-22 | 1993-03-02 | Tecnol Medical Products, Inc. | Apparatus and method for raising a skin wheal and anesthetizing skin |
US5512667A (en) | 1990-08-28 | 1996-04-30 | Reed; Michael W. | Trifunctional intermediates for preparing 3'-tailed oligonucleotides |
US6140496A (en) | 1990-10-09 | 2000-10-31 | Benner; Steven Albert | Precursors for deoxyribonucleotides containing non-standard nucleosides |
ATE198598T1 (de) | 1990-11-08 | 2001-01-15 | Hybridon Inc | Verbindung von mehrfachreportergruppen auf synthetischen oligonukleotiden |
US5527288A (en) | 1990-12-13 | 1996-06-18 | Elan Medical Technologies Limited | Intradermal drug delivery device and method for intradermal delivery of drugs |
US6100024A (en) | 1991-02-08 | 2000-08-08 | Promega Corporation | Methods and compositions for nucleic acid detection by target extension and probe amplification |
DK0610201T4 (da) | 1991-03-18 | 2008-02-04 | Centocor Inc | Monoklonale og kimære antistoffer, der er specifikke for human tumornekrosefaktor |
US5426180A (en) | 1991-03-27 | 1995-06-20 | Research Corporation Technologies, Inc. | Methods of making single-stranded circular oligonucleotides |
ES2134212T3 (es) | 1991-04-25 | 1999-10-01 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Anticuerpo humano reconstituido contra el receptor de la interleuquina 6 humano. |
US5539082A (en) | 1993-04-26 | 1996-07-23 | Nielsen; Peter E. | Peptide nucleic acids |
US5714331A (en) | 1991-05-24 | 1998-02-03 | Buchardt, Deceased; Ole | Peptide nucleic acids having enhanced binding affinity, sequence specificity and solubility |
US5719262A (en) | 1993-11-22 | 1998-02-17 | Buchardt, Deceased; Ole | Peptide nucleic acids having amino acid side chains |
US5169766A (en) | 1991-06-14 | 1992-12-08 | Life Technologies, Inc. | Amplification of nucleic acid molecules |
US5371241A (en) | 1991-07-19 | 1994-12-06 | Pharmacia P-L Biochemicals Inc. | Fluorescein labelled phosphoramidites |
US5199441A (en) | 1991-08-20 | 1993-04-06 | Hogle Hugh H | Fine needle aspiration biopsy apparatus and method |
GB9118204D0 (en) | 1991-08-23 | 1991-10-09 | Weston Terence E | Needle-less injector |
SE9102652D0 (sv) | 1991-09-13 | 1991-09-13 | Kabi Pharmacia Ab | Injection needle arrangement |
DE59208572D1 (de) | 1991-10-17 | 1997-07-10 | Ciba Geigy Ag | Bicyclische Nukleoside, Oligonukleotide, Verfahren zu deren Herstellung und Zwischenprodukte |
US5298422A (en) | 1991-11-06 | 1994-03-29 | Baylor College Of Medicine | Myogenic vector systems |
US5359044A (en) | 1991-12-13 | 1994-10-25 | Isis Pharmaceuticals | Cyclobutyl oligonucleotide surrogates |
US5824307A (en) | 1991-12-23 | 1998-10-20 | Medimmune, Inc. | Human-murine chimeric antibodies against respiratory syncytial virus |
US5565552A (en) | 1992-01-21 | 1996-10-15 | Pharmacyclics, Inc. | Method of expanded porphyrin-oligonucleotide conjugate synthesis |
US5595726A (en) | 1992-01-21 | 1997-01-21 | Pharmacyclics, Inc. | Chromophore probe for detection of nucleic acid |
JPH07503372A (ja) | 1992-01-23 | 1995-04-13 | バイカル・インコーポレイテッド | 生体外遺伝子導入 |
FR2687679B1 (fr) | 1992-02-05 | 1994-10-28 | Centre Nat Rech Scient | Oligothionucleotides. |
US5328483A (en) | 1992-02-27 | 1994-07-12 | Jacoby Richard M | Intradermal injection device with medication and needle guard |
JP3368603B2 (ja) | 1992-02-28 | 2003-01-20 | オリンパス光学工業株式会社 | 遺伝子治療用処置具 |
ES2149768T3 (es) | 1992-03-25 | 2000-11-16 | Immunogen Inc | Conjugados de agentes enlazantes de celulas derivados de cc-1065. |
US6174666B1 (en) | 1992-03-27 | 2001-01-16 | The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services | Method of eliminating inhibitory/instability regions from mRNA |
US6132419A (en) | 1992-05-22 | 2000-10-17 | Genetronics, Inc. | Electroporetic gene and drug therapy |
US5514545A (en) | 1992-06-11 | 1996-05-07 | Trustees Of The University Of Pennsylvania | Method for characterizing single cells based on RNA amplification for diagnostics and therapeutics |
EP0577558A2 (de) | 1992-07-01 | 1994-01-05 | Ciba-Geigy Ag | Carbocyclische Nukleoside mit bicyclischen Ringen, Oligonukleotide daraus, Verfahren zu deren Herstellung, deren Verwendung und Zwischenproduckte |
US6670178B1 (en) | 1992-07-10 | 2003-12-30 | Transkaryotic Therapies, Inc. | In Vivo production and delivery of insulinotropin for gene therapy |
US5272250A (en) | 1992-07-10 | 1993-12-21 | Spielvogel Bernard F | Boronated phosphoramidate compounds |
US5383851A (en) | 1992-07-24 | 1995-01-24 | Bioject Inc. | Needleless hypodermic injection device |
DE69310179T2 (de) | 1992-07-31 | 1997-07-31 | Behringwerke Ag | Verfahren zur einführung von definierten sequenzen am 3' ende von polynukleotiden |
US5273525A (en) | 1992-08-13 | 1993-12-28 | Btx Inc. | Injection and electroporation apparatus for drug and gene delivery |
US5240885A (en) | 1992-09-21 | 1993-08-31 | Corning Incorporated | Rare earth-doped, stabilized cadmium halide glasses |
US5569189A (en) | 1992-09-28 | 1996-10-29 | Equidyne Systems, Inc. | hypodermic jet injector |
US5334144A (en) | 1992-10-30 | 1994-08-02 | Becton, Dickinson And Company | Single use disposable needleless injector |
AU5665694A (en) | 1992-11-04 | 1994-05-24 | Denver Biomaterials Inc. | Apparatus for removal of pleural effusion fluid |
CA2149329C (en) | 1992-11-13 | 2008-07-15 | Darrell R. Anderson | Therapeutic application of chimeric and radiolabeled antibodies to human b lymphocyte restricted differentiation antigen for treatment of b cell lymphoma |
US5736137A (en) | 1992-11-13 | 1998-04-07 | Idec Pharmaceuticals Corporation | Therapeutic application of chimeric and radiolabeled antibodies to human B lymphocyte restricted differentiation antigen for treatment of B cell lymphoma |
US5574142A (en) | 1992-12-15 | 1996-11-12 | Microprobe Corporation | Peptide linkers for improved oligonucleotide delivery |
CA2153692C (en) | 1993-01-12 | 2011-11-08 | Roy R. Lobb | Recombinant anti-vla4 antibody molecules |
CA2159631A1 (en) | 1993-03-30 | 1994-10-13 | Sanofi | Acyclic nucleoside analogs and oligonucleotide sequences containing them |
FR2703253B1 (fr) | 1993-03-30 | 1995-06-23 | Centre Nat Rech Scient | Applicateur d'impulsions electriques pour traitement de tissus biologiques. |
DE4311944A1 (de) | 1993-04-10 | 1994-10-13 | Degussa | Umhüllte Natriumpercarbonatpartikel, Verfahren zu deren Herstellung und sie enthaltende Wasch-, Reinigungs- und Bleichmittelzusammensetzungen |
US7135312B2 (en) | 1993-04-15 | 2006-11-14 | University Of Rochester | Circular DNA vectors for synthesis of RNA and DNA |
US5773244A (en) | 1993-05-19 | 1998-06-30 | Regents Of The University Of California | Methods of making circular RNA |
US5851829A (en) | 1993-07-16 | 1998-12-22 | Dana-Farber Cancer Institute | Method of intracellular binding of target molecules |
US6294664B1 (en) | 1993-07-29 | 2001-09-25 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Synthesis of oligonucleotides |
US5672491A (en) | 1993-09-20 | 1997-09-30 | The Leland Stanford Junior University | Recombinant production of novel polyketides |
US6432711B1 (en) | 1993-11-03 | 2002-08-13 | Diacrin, Inc. | Embryonic stem cells capable of differentiating into desired cell lines |
US6096503A (en) | 1993-11-12 | 2000-08-01 | The Scripps Research Institute | Method for simultaneous identification of differentially expresses mRNAs and measurement of relative concentrations |
US5446137B1 (en) | 1993-12-09 | 1998-10-06 | Behringwerke Ag | Oligonucleotides containing 4'-substituted nucleotides |
US5519134A (en) | 1994-01-11 | 1996-05-21 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Pyrrolidine-containing monomers and oligomers |
US7435802B2 (en) | 1994-01-25 | 2008-10-14 | Elan Pharaceuticals, Inc. | Humanized anti-VLA4 immunoglobulins |
US5840299A (en) | 1994-01-25 | 1998-11-24 | Athena Neurosciences, Inc. | Humanized antibodies against leukocyte adhesion molecule VLA-4 |
ES2224113T5 (es) | 1994-02-16 | 2009-05-01 | The Government Of The Usa, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services | Polipeptido antigenico asociado al melanoma, epitopos del mismo y vacunas contra melanoma. |
DE69530914T2 (de) * | 1994-02-17 | 2004-03-11 | New York Blood Center, Inc. | Biologische bioadhäsive präparate, die fibrinkleber und liposomen enthalten, verfahren für ihre herstellung und verwendung |
WO1995024176A1 (en) | 1994-03-07 | 1995-09-14 | Bioject, Inc. | Ampule filling device |
IL112820A0 (en) | 1994-03-07 | 1995-05-26 | Merck & Co Inc | Coordinate in vivo gene expression |
US5466220A (en) | 1994-03-08 | 1995-11-14 | Bioject, Inc. | Drug vial mixing and transfer device |
CA2184375C (en) | 1994-03-18 | 2006-05-02 | Sergei M. Gryaznov | Oligonucleotide n3'-p5' phosphoramidates: synthesis and compounds; hybridization and nuclease resistance properties |
WO1995026204A1 (en) | 1994-03-25 | 1995-10-05 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Immune stimulation by phosphorothioate oligonucleotide analogs |
US5457041A (en) | 1994-03-25 | 1995-10-10 | Science Applications International Corporation | Needle array and method of introducing biological substances into living cells using the needle array |
US5627053A (en) | 1994-03-29 | 1997-05-06 | Ribozyme Pharmaceuticals, Inc. | 2'deoxy-2'-alkylnucleotide containing nucleic acid |
US5464395A (en) | 1994-04-05 | 1995-11-07 | Faxon; David P. | Catheter for delivering therapeutic and/or diagnostic agents to the tissue surrounding a bodily passageway |
US6074642A (en) | 1994-05-02 | 2000-06-13 | Alexion Pharmaceuticals, Inc. | Use of antibodies specific to human complement component C5 for the treatment of glomerulonephritis |
ATE368118T1 (de) | 1994-05-18 | 2007-08-15 | Bayer Bioscience Gmbh | Für enzyme, die die fähigkeit besitzen lineare alpha 1,4-glucane in pflanzen, pilzen und mikroorganismen zu synthesieren, kodierende dna sequenzen |
CA2191362A1 (en) | 1994-06-02 | 1995-12-14 | Mark Selby | Nucleic acid immunization using a virus-based infection/transfection system |
GB9412230D0 (en) | 1994-06-17 | 1994-08-10 | Celltech Ltd | Interleukin-5 specific recombiant antibodies |
US6239116B1 (en) | 1994-07-15 | 2001-05-29 | University Of Iowa Research Foundation | Immunostimulatory nucleic acid molecules |
US5597696A (en) | 1994-07-18 | 1997-01-28 | Becton Dickinson And Company | Covalent cyanine dye oligonucleotide conjugates |
ATE306930T1 (de) | 1994-08-12 | 2005-11-15 | Immunomedics Inc | Für b-zell-lymphom und leukämiezellen spezifische immunkonjugate und humane antikörper |
US5580731A (en) | 1994-08-25 | 1996-12-03 | Chiron Corporation | N-4 modified pyrimidine deoxynucleotides and oligonucleotide probes synthesized therewith |
US5597909A (en) | 1994-08-25 | 1997-01-28 | Chiron Corporation | Polynucleotide reagents containing modified deoxyribose moieties, and associated methods of synthesis and use |
US5665545A (en) | 1994-11-28 | 1997-09-09 | Akzo Nobel N.V. | Terminal repeat amplification method |
US5641665A (en) | 1994-11-28 | 1997-06-24 | Vical Incorporated | Plasmids suitable for IL-2 expression |
US5588960A (en) | 1994-12-01 | 1996-12-31 | Vidamed, Inc. | Transurethral needle delivery device with cystoscope and method for treatment of urinary incontinence |
US5807718A (en) | 1994-12-02 | 1998-09-15 | The Scripps Research Institute | Enzymatic DNA molecules |
US5585108A (en) | 1994-12-30 | 1996-12-17 | Nanosystems L.L.C. | Formulations of oral gastrointestinal therapeutic agents in combination with pharmaceutically acceptable clays |
DE69637239T2 (de) | 1995-01-06 | 2008-05-29 | Plant Research International B.V. | Für kohlenhydratpolymere-bildende enzyme-kodierende dna-sequenzen und verfahren zur herstellung transgener pflanzen |
US5599302A (en) | 1995-01-09 | 1997-02-04 | Medi-Ject Corporation | Medical injection system and method, gas spring thereof and launching device using gas spring |
US5795587A (en) | 1995-01-23 | 1998-08-18 | University Of Pittsburgh | Stable lipid-comprising drug delivery complexes and methods for their production |
US5824497A (en) | 1995-02-10 | 1998-10-20 | Mcmaster University | High efficiency translation of mRNA molecules |
EP0727187B1 (en) | 1995-02-15 | 2003-08-06 | Joseph Eldor | Multiple hole spinal needle |
EP0735144B1 (en) | 1995-03-28 | 2002-06-05 | Japan Science and Technology Corporation | Method for molecular indexing of genes using restriction enzymes |
US5869230A (en) | 1995-03-30 | 1999-02-09 | Beth Israel Hospital Association | Gene transfer into the kidney |
US5986054A (en) | 1995-04-28 | 1999-11-16 | The Hospital For Sick Children, Hsc Research And Development Limited Partnership | Genetic sequences and proteins related to alzheimer's disease |
FR2733762B1 (fr) | 1995-05-02 | 1997-08-01 | Genset Sa | Methode de couplage specifique de la coiffe de l'extremite 5' d'un fragment d'arnm et preparation d'arnm et d'adnc complet |
US5700642A (en) | 1995-05-22 | 1997-12-23 | Sri International | Oligonucleotide sizing using immobilized cleavable primers |
US5730723A (en) | 1995-10-10 | 1998-03-24 | Visionary Medical Products Corporation, Inc. | Gas pressured needle-less injection device and method |
US6051429A (en) | 1995-06-07 | 2000-04-18 | Life Technologies, Inc. | Peptide-enhanced cationic lipid transfections |
US6111095A (en) | 1995-06-07 | 2000-08-29 | Merck & Co., Inc. | Capped synthetic RNA, analogs, and aptamers |
US5889136A (en) | 1995-06-09 | 1999-03-30 | The Regents Of The University Of Colorado | Orthoester protecting groups in RNA synthesis |
US5713863A (en) | 1996-01-11 | 1998-02-03 | Interventional Technologies Inc. | Catheter with fluid medication injectors |
US5766903A (en) | 1995-08-23 | 1998-06-16 | University Technology Corporation | Circular RNA and uses thereof |
US6265389B1 (en) | 1995-08-31 | 2001-07-24 | Alkermes Controlled Therapeutics, Inc. | Microencapsulation and sustained release of oligonucleotides |
WO1997011085A1 (en) | 1995-09-19 | 1997-03-27 | University Of Massachusetts | Inhibited biological degradation of oligodeoxynucleotides |
US5830879A (en) | 1995-10-02 | 1998-11-03 | St. Elizabeth's Medical Center Of Boston, Inc. | Treatment of vascular injury using vascular endothelial growth factor |
US6265387B1 (en) | 1995-10-11 | 2001-07-24 | Mirus, Inc. | Process of delivering naked DNA into a hepatocyte via bile duct |
EP0771873A3 (en) | 1995-10-27 | 1998-03-04 | Takeda Chemical Industries, Ltd. | Neuronal cell-specific receptor protein |
CU22584A1 (es) | 1995-11-17 | 1999-11-03 | Centro Inmunologia Molecular | Composiciones farmacéuticas que contienen un anticuerpo monoclonal que reconoce el antígeno de diferenciación leucocitario humano cd6 y sus usos para el diagnóstico y tratamiento de la psoriasis |
US6090382A (en) | 1996-02-09 | 2000-07-18 | Basf Aktiengesellschaft | Human antibodies that bind human TNFα |
US5962271A (en) | 1996-01-03 | 1999-10-05 | Cloutech Laboratories, Inc. | Methods and compositions for generating full-length cDNA having arbitrary nucleotide sequence at the 3'-end |
US5893397A (en) | 1996-01-12 | 1999-04-13 | Bioject Inc. | Medication vial/syringe liquid-transfer apparatus |
US6261584B1 (en) | 1996-02-02 | 2001-07-17 | Alza Corporation | Sustained delivery of an active agent using an implantable system |
US6395292B2 (en) | 1996-02-02 | 2002-05-28 | Alza Corporation | Sustained delivery of an active agent using an implantable system |
WO1997030064A1 (en) | 1996-02-16 | 1997-08-21 | Stichting Rega Vzw | Hexitol containing oligonucleotides and their use in antisense strategies |
US6534312B1 (en) | 1996-02-22 | 2003-03-18 | Merck & Co., Inc. | Vaccines comprising synthetic genes |
US6090391A (en) | 1996-02-23 | 2000-07-18 | Aviron | Recombinant tryptophan mutants of influenza |
SE9601245D0 (sv) | 1996-03-29 | 1996-03-29 | Pharmacia Ab | Chimeric superantigens and their use |
US6300487B1 (en) | 1996-03-19 | 2001-10-09 | Cell Therapuetics, Inc. | Mammalian lysophosphatidic acid acyltransferase |
TW517061B (en) | 1996-03-29 | 2003-01-11 | Pharmacia & Amp Upjohn Ab | Modified/chimeric superantigens and their use |
GB9607549D0 (en) | 1996-04-11 | 1996-06-12 | Weston Medical Ltd | Spring-powered dispensing device |
US20030073908A1 (en) | 1996-04-26 | 2003-04-17 | 2000 Injectx, Inc. | Method and apparatus for delivery of genes, enzymes and biological agents to tissue cells |
US5712127A (en) | 1996-04-29 | 1998-01-27 | Genescape Inc. | Subtractive amplification |
US5853719A (en) | 1996-04-30 | 1998-12-29 | Duke University | Methods for treating cancers and pathogen infections using antigen-presenting cells loaded with RNA |
ATE438717T1 (de) | 1996-06-05 | 2009-08-15 | Novartis Vaccines & Diagnostic | Dp-75 kodierende dna und verfahren zu ihrer verwendung |
US7329741B2 (en) | 1996-06-05 | 2008-02-12 | Chiron Corporation | Polynucleotides that hybridize to DP-75 and their use |
WO1997048370A2 (en) | 1996-06-21 | 1997-12-24 | Merck & Co., Inc. | Vaccines comprising synthetic genes |
JP2002515786A (ja) | 1996-06-28 | 2002-05-28 | ソントラ メディカル,エル.ピー. | 経皮輸送の超音波増強 |
US5939262A (en) | 1996-07-03 | 1999-08-17 | Ambion, Inc. | Ribonuclease resistant RNA preparation and utilization |
US5677124A (en) | 1996-07-03 | 1997-10-14 | Ambion, Inc. | Ribonuclease resistant viral RNA standards |
US7288266B2 (en) | 1996-08-19 | 2007-10-30 | United States Of America As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services | Liposome complexes for increased systemic delivery |
US5849546A (en) | 1996-09-13 | 1998-12-15 | Epicentre Technologies Corporation | Methods for using mutant RNA polymerases with reduced discrimination between non-canonical and canonical nucleoside triphosphates |
US6114148C1 (en) | 1996-09-20 | 2012-05-01 | Gen Hospital Corp | High level expression of proteins |
WO1998013493A2 (en) | 1996-09-24 | 1998-04-02 | Lxr Biotechnology, Inc. | A family of genes encoding apoptosis-related peptides, peptides encoded thereby and methods of use thereof |
US6214966B1 (en) | 1996-09-26 | 2001-04-10 | Shearwater Corporation | Soluble, degradable poly(ethylene glycol) derivatives for controllable release of bound molecules into solution |
ATE292980T1 (de) | 1996-10-11 | 2005-04-15 | Univ California | Immunostimulierende oligonucleotidekonjugate |
EP0839912A1 (en) | 1996-10-30 | 1998-05-06 | Instituut Voor Dierhouderij En Diergezondheid (Id-Dlo) | Infectious clones of RNA viruses and vaccines and diagnostic assays derived thereof |
GB9623051D0 (en) | 1996-11-06 | 1997-01-08 | Schacht Etienne H | Delivery of DNA to target cells in biological systems |
US5980887A (en) | 1996-11-08 | 1999-11-09 | St. Elizabeth's Medical Center Of Boston | Methods for enhancing angiogenesis with endothelial progenitor cells |
US5759179A (en) | 1996-12-31 | 1998-06-02 | Johnson & Johnson Medical, Inc. | Needle and valve assembly for use with a catheter |
WO1998031700A1 (en) | 1997-01-21 | 1998-07-23 | The General Hospital Corporation | Selection of proteins using rna-protein fusions |
EP0855184A1 (en) | 1997-01-23 | 1998-07-29 | Grayson B. Dr. Lipford | Pharmaceutical composition comprising a polynucleotide and an antigen especially for vaccination |
ES2274566T3 (es) | 1997-02-07 | 2007-05-16 | MERCK & CO., INC. | Genes gag del vih sinteticos. |
US6251665B1 (en) | 1997-02-07 | 2001-06-26 | Cem Cezayirli | Directed maturation of stem cells and production of programmable antigen presenting dentritic cells therefrom |
US6228640B1 (en) | 1997-02-07 | 2001-05-08 | Cem Cezayirli | Programmable antigen presenting cell of CD34 lineage |
US6696291B2 (en) | 1997-02-07 | 2004-02-24 | Merck & Co., Inc. | Synthetic HIV gag genes |
US6576752B1 (en) | 1997-02-14 | 2003-06-10 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Aminooxy functionalized oligomers |
JP3756313B2 (ja) | 1997-03-07 | 2006-03-15 | 武 今西 | 新規ビシクロヌクレオシド及びオリゴヌクレオチド類縁体 |
US6406705B1 (en) | 1997-03-10 | 2002-06-18 | University Of Iowa Research Foundation | Use of nucleic acids containing unmethylated CpG dinucleotide as an adjuvant |
US6306393B1 (en) | 1997-03-24 | 2001-10-23 | Immunomedics, Inc. | Immunotherapy of B-cell malignancies using anti-CD22 antibodies |
US6261281B1 (en) | 1997-04-03 | 2001-07-17 | Electrofect As | Method for genetic immunization and introduction of molecules into skeletal muscle and immune cells |
US5914269A (en) | 1997-04-04 | 1999-06-22 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Oligonucleotide inhibition of epidermal growth factor receptor expression |
WO1998047913A2 (en) | 1997-04-18 | 1998-10-29 | The University Of Medicine And Dentistry Of New Jersey | Inhibition of hiv-1 replication by a tat rna-binding domain peptide analog |
US5958688A (en) | 1997-04-28 | 1999-09-28 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Characterization of mRNA patterns in neurites and single cells for medical diagnosis and therapeutics |
US6235883B1 (en) | 1997-05-05 | 2001-05-22 | Abgenix, Inc. | Human monoclonal antibodies to epidermal growth factor receptor |
US5989911A (en) | 1997-05-09 | 1999-11-23 | University Of Massachusetts | Site-specific synthesis of pseudouridine in RNA |
US6761726B1 (en) | 1998-05-15 | 2004-07-13 | Pyng Medical Corp. | Method and apparatus for the intraosseous introduction of a device such as an infusion tube |
US5993412A (en) | 1997-05-19 | 1999-11-30 | Bioject, Inc. | Injection apparatus |
US6124091A (en) | 1997-05-30 | 2000-09-26 | Research Corporation Technologies, Inc. | Cell growth-controlling oligonucleotides |
CA2291483C (en) | 1997-06-06 | 2012-09-18 | Dynavax Technologies Corporation | Immunostimulatory oligonucleotides, compositions thereof and methods of use thereof |
US6589940B1 (en) | 1997-06-06 | 2003-07-08 | Dynavax Technologies Corporation | Immunostimulatory oligonucleotides, compositions thereof and methods of use thereof |
AU731909B2 (en) | 1997-07-01 | 2001-04-05 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Compositions and methods for the delivery of oligonucleotides via the alimentary canal |
US5994511A (en) | 1997-07-02 | 1999-11-30 | Genentech, Inc. | Anti-IgE antibodies and methods of improving polypeptides |
CN1275085A (zh) | 1997-07-21 | 2000-11-29 | 法玛西雅和厄普约翰公司 | 靶细胞的定向细胞溶解、引起细胞溶解的试剂和组合物以及可用于制备这些试剂的化合物 |
US20030073640A1 (en) | 1997-07-23 | 2003-04-17 | Ribozyme Pharmaceuticals, Inc. | Novel compositions for the delivery of negatively charged molecules |
CA2298811A1 (en) | 1997-07-31 | 1999-02-11 | St. Elizabeth's Medical Center Of Boston, Inc. | Method for the treatment of grafts |
US6794499B2 (en) | 1997-09-12 | 2004-09-21 | Exiqon A/S | Oligonucleotide analogues |
ES2389519T3 (es) | 1997-09-18 | 2012-10-26 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Casetes de inmunización de ADN de vif atenuados para vacunas genéticas |
AU9319398A (en) | 1997-09-19 | 1999-04-05 | Sequitur, Inc. | Sense mrna therapy |
US6004573A (en) | 1997-10-03 | 1999-12-21 | Macromed, Inc. | Biodegradable low molecular weight triblock poly(lactide-co-glycolide) polyethylene glycol copolymers having reverse thermal gelation properties |
JP2001519162A (ja) | 1997-10-07 | 2001-10-23 | ユニバーシティ・オブ・メリーランド・バイオテクノロジー・インスティチュート | 動物細胞にrnaを導入して発現させる方法 |
CA2306796A1 (en) | 1997-10-20 | 1999-04-29 | Genzyme Transgenics Corporation | Novel modified msp-1 nucleic acid sequences and methods for increasing mrna levels and protein expression in cell systems |
US6019747A (en) | 1997-10-21 | 2000-02-01 | I-Flow Corporation | Spring-actuated infusion syringe |
AU1275899A (en) * | 1997-10-24 | 1999-05-17 | Megabios Corporation | Methods for preparing polynucleotide transfection complexes |
US6077251A (en) | 1997-10-30 | 2000-06-20 | Ting; Windsor | Medicinal agent administration system |
EP1987845B1 (en) | 1997-11-20 | 2012-03-21 | Vical Incorporated | Treatment of cancer using cytokine-expressing polynucleotides and compositions therefor. |
US7655777B2 (en) | 1997-11-24 | 2010-02-02 | Monsanto Technology Llc | Nucleic acid molecules associated with the tocopherol pathway |
ZA9811377B (en) | 1997-12-12 | 1999-08-27 | Expression Genetics Inc | Positively charged poly[alpha-(omega-aminoalkyl) glycolic acid[ for the delivery of a bioactive agent via tissue and cellular uptake. |
US6517869B1 (en) | 1997-12-12 | 2003-02-11 | Expression Genetics, Inc. | Positively charged poly(alpha-(omega-aminoalkyl)lycolic acid) for the delivery of a bioactive agent via tissue and cellular uptake |
US6320017B1 (en) | 1997-12-23 | 2001-11-20 | Inex Pharmaceuticals Corp. | Polyamide oligomers |
WO1999033982A2 (en) | 1997-12-23 | 1999-07-08 | Chiron Corporation | Human genes and gene expression products i |
US6383811B2 (en) | 1997-12-30 | 2002-05-07 | Mirus Corporation | Polyampholytes for delivering polyions to a cell |
EP2138191A1 (en) | 1998-01-05 | 2009-12-30 | University Of Washington | Enhanced transport using membrane disruptive agents |
US8287483B2 (en) | 1998-01-08 | 2012-10-16 | Echo Therapeutics, Inc. | Method and apparatus for enhancement of transdermal transport |
CA2317777C (en) | 1998-01-08 | 2005-05-03 | Sontra Medical, Inc. | Sonophoretic enhanced transdermal transport |
IT1298087B1 (it) | 1998-01-08 | 1999-12-20 | Fiderm S R L | Dispositivo per il controllo della profondita' di penetrazione di un ago, in particolare applicabile ad una siringa per iniezioni |
US6365346B1 (en) | 1998-02-18 | 2002-04-02 | Dade Behring Inc. | Quantitative determination of nucleic acid amplification products |
US5955310A (en) | 1998-02-26 | 1999-09-21 | Novo Nordisk Biotech, Inc. | Methods for producing a polypeptide in a bacillus cell |
US6432925B1 (en) | 1998-04-16 | 2002-08-13 | John Wayne Cancer Institute | RNA cancer vaccine and methods for its use |
US6429301B1 (en) | 1998-04-17 | 2002-08-06 | Whitehead Institute For Biomedical Research | Use of a ribozyme to join nucleic acids and peptides |
GB9808327D0 (en) | 1998-04-20 | 1998-06-17 | Chiron Spa | Antidiotypic compounds |
US6395253B2 (en) | 1998-04-23 | 2002-05-28 | The Regents Of The University Of Michigan | Microspheres containing condensed polyanionic bioactive agents and methods for their production |
US7521178B1 (en) | 1998-04-23 | 2009-04-21 | Takara Bio Inc. | Method for synthesizing DNA |
US20020064517A1 (en) * | 1998-04-30 | 2002-05-30 | Stewart A. Cederholm-Williams | Fibrin sealant as a transfection/transformation vehicle for gene therapy |
US20090208418A1 (en) | 2005-04-29 | 2009-08-20 | Innexus Biotechnology Internaltional Ltd. | Superantibody synthesis and use in detection, prevention and treatment of disease |
MXPA00011312A (es) | 1998-05-20 | 2003-04-22 | Expression Genetics Inc | Un vehiculo de gen polimerico de poli-l.lisina injertada con polietilenglicol con porcion de enfoque hepatocitos. |
US6503231B1 (en) | 1998-06-10 | 2003-01-07 | Georgia Tech Research Corporation | Microneedle device for transport of molecules across tissue |
US7091192B1 (en) | 1998-07-01 | 2006-08-15 | California Institute Of Technology | Linear cyclodextrin copolymers |
CN1313873A (zh) | 1998-07-13 | 2001-09-19 | 表达遗传学公司 | 作为可溶性,生物可降解基因送递载体的聚-l-赖氨酸的聚酯类似物 |
EP2428249B1 (en) | 1998-07-13 | 2015-10-07 | Inovio Pharmaceuticals, Inc. | Skin and muscle-targeted gene therapy by pulsed electrical field |
US6222030B1 (en) | 1998-08-03 | 2001-04-24 | Agilent Technologies, Inc. | Solid phase synthesis of oligonucleotides using carbonate protecting groups and alpha-effect nucleophile deprotection |
EP1112084B2 (en) | 1998-08-11 | 2012-04-25 | Biogen Idec Inc. | Combination therapies for b-cell lymphomas comprising administration of anti-cd20 antibody |
GB9817662D0 (en) | 1998-08-13 | 1998-10-07 | Crocker Peter J | Substance delivery |
US20020065236A1 (en) | 1998-09-09 | 2002-05-30 | Yew Nelson S. | CpG reduced plasmids and viral vectors |
US20090017533A1 (en) | 1998-09-29 | 2009-01-15 | Shire Human Genetic Therapies, Inc., A Delaware Corporation | Optimized messenger rna |
US6924365B1 (en) | 1998-09-29 | 2005-08-02 | Transkaryotic Therapies, Inc. | Optimized messenger RNA |
CA2348779A1 (en) | 1998-11-03 | 2000-05-11 | Yale University | Multidomain polynucleotide molecular sensors |
MY155913A (en) | 1998-11-09 | 2015-12-15 | Biogen Inc | Chimeric anti-cd20 antibody treatment of patients receiving bmt or pbsc transpants |
WO2000027428A1 (en) | 1998-11-09 | 2000-05-18 | Idec Pharmaceuticals Corporation | Treatment of hematologic malignancies associated with circulating tumor cells using chimeric anti-cd20 antibody |
WO2000027340A2 (en) | 1998-11-12 | 2000-05-18 | The Children's Medical Center Corporation | USE OF t-RNA AND FRAGMENTS FOR INHIBITING ANGIOGENESIS AND COMPOSITIONS THEREOF |
JP4854853B2 (ja) | 1998-11-12 | 2012-01-18 | ライフ テクノロジーズ コーポレーション | トランスフェクション薬剤 |
US6210931B1 (en) | 1998-11-30 | 2001-04-03 | The United States Of America As Represented By The Secretary Of Agriculture | Ribozyme-mediated synthesis of circular RNA |
US20040171980A1 (en) | 1998-12-18 | 2004-09-02 | Sontra Medical, Inc. | Method and apparatus for enhancement of transdermal transport |
AU3128000A (en) | 1998-12-23 | 2000-07-31 | Human Genome Sciences, Inc. | Peptidoglycan recognition proteins |
GB9902000D0 (en) | 1999-01-30 | 1999-03-17 | Delta Biotechnology Ltd | Process |
US6255476B1 (en) | 1999-02-22 | 2001-07-03 | Pe Corporation (Ny) | Methods and compositions for synthesis of labelled oligonucleotides and analogs on solid-supports |
EP1155124A2 (en) | 1999-02-22 | 2001-11-21 | European Molecular Biology Laboratory | In vitro translation system |
US7629311B2 (en) | 1999-02-24 | 2009-12-08 | Edward Lewis Tobinick | Methods to facilitate transmission of large molecules across the blood-brain, blood-eye, and blood-nerve barriers |
CA2363141C (en) | 1999-02-26 | 2010-04-06 | Chiron Corporation | Microemulsions with adsorbed macromolecules and microparticles |
AU763173B2 (en) | 1999-03-01 | 2003-07-17 | Atossa Genetics, Inc. | Apparatus, methods and kits for simultaneous delivery of a substance to multiple breast milk ducts |
US7084125B2 (en) | 1999-03-18 | 2006-08-01 | Exiqon A/S | Xylo-LNA analogues |
AU778809B2 (en) | 1999-03-29 | 2004-12-23 | Statens Serum Institut | Method for producing a nucleotide sequence construct with optimised codons for an HIV genetic vaccine based on primary, early HIV isolate and synthetic envelope BX08 constructs |
CN1311005C (zh) | 1999-04-09 | 2007-04-18 | 迪纳尔生物技术公司 | 用于制备单分散聚合物颗粒的方法 |
KR100782896B1 (ko) | 1999-05-04 | 2007-12-06 | 엑시콘 에이/에스 | L-리보-lna 유사체 |
WO2000067796A1 (en) | 1999-05-07 | 2000-11-16 | Genentech, Inc. | Treatment of autoimmune diseases with antagonists which bind to b cell surface markers |
US8663692B1 (en) | 1999-05-07 | 2014-03-04 | Pharmasol Gmbh | Lipid particles on the basis of mixtures of liquid and solid lipids and method for producing same |
US7171264B1 (en) | 1999-05-10 | 2007-01-30 | Genetronics, Inc. | Intradermal delivery of active agents by needle-free injection and electroporation |
US7074403B1 (en) | 1999-06-09 | 2006-07-11 | Immunomedics, Inc. | Immunotherapy of autoimmune disorders using antibodies which target B-cells |
US6346382B1 (en) | 1999-06-01 | 2002-02-12 | Vanderbilt University | Human carbamyl phosphate synthetase I polymorphism and diagnostic methods related thereto |
AU4332399A (en) | 1999-06-04 | 2000-12-28 | Cheng-Ming Chuong | Rna polymerase chain reaction |
US6611707B1 (en) | 1999-06-04 | 2003-08-26 | Georgia Tech Research Corporation | Microneedle drug delivery device |
US6743211B1 (en) | 1999-11-23 | 2004-06-01 | Georgia Tech Research Corporation | Devices and methods for enhanced microneedle penetration of biological barriers |
US6303573B1 (en) | 1999-06-07 | 2001-10-16 | The Burnham Institute | Heart homing peptides and methods of using same |
WO2000075304A1 (fr) | 1999-06-08 | 2000-12-14 | Aventis Pasteur | Oligonucleotide immunostimulant |
US6949245B1 (en) | 1999-06-25 | 2005-09-27 | Genentech, Inc. | Humanized anti-ErbB2 antibodies and treatment with anti-ErbB2 antibodies |
JP2003503071A (ja) | 1999-06-30 | 2003-01-28 | アドバンスド セル テクノロジー、インコーポレイテッド | 脱分化レシピエント細胞への細胞質移入 |
US6514948B1 (en) | 1999-07-02 | 2003-02-04 | The Regents Of The University Of California | Method for enhancing an immune response |
CN1360631A (zh) | 1999-07-09 | 2002-07-24 | 美国家用产品公司 | 在质粒序列转录过程中防止畸变rna形成的方法和组合物 |
US8557244B1 (en) | 1999-08-11 | 2013-10-15 | Biogen Idec Inc. | Treatment of aggressive non-Hodgkins lymphoma with anti-CD20 antibody |
EP2829609A1 (en) | 1999-08-24 | 2015-01-28 | E. R. Squibb & Sons, L.L.C. | Human CTLA-4 antibodies and their uses |
US20050112141A1 (en) | 2000-08-30 | 2005-05-26 | Terman David S. | Compositions and methods for treatment of neoplastic disease |
US6551338B1 (en) | 1999-09-01 | 2003-04-22 | Mcgill University | Method and device for myogenesis and angiogenesis of the heart |
US20040106567A1 (en) | 1999-09-07 | 2004-06-03 | Hagstrom James E. | Intravascular delivery of non-viral nucleic acid |
EP1619254B1 (en) | 1999-09-09 | 2010-12-22 | CureVac GmbH | Transfer of mRNA using polycationic compounds |
AU7398200A (en) | 1999-09-17 | 2001-04-24 | Aventis Pasteur Limited | Chlamydia antigens and corresponding dna fragments and uses thereof |
US6623457B1 (en) | 1999-09-22 | 2003-09-23 | Becton, Dickinson And Company | Method and apparatus for the transdermal administration of a substance |
WO2002064799A2 (en) | 1999-09-28 | 2002-08-22 | Transkaryotic Therapies, Inc. | Optimized messenger rna |
WO2001025488A2 (en) | 1999-10-06 | 2001-04-12 | Quark Biotech, Inc. | Method for enrichment of natural antisense messenger rna |
US7060291B1 (en) | 1999-11-24 | 2006-06-13 | Transave, Inc. | Modular targeted liposomal delivery system |
US6613026B1 (en) | 1999-12-08 | 2003-09-02 | Scimed Life Systems, Inc. | Lateral needle-less injection apparatus and method |
US6277974B1 (en) | 1999-12-14 | 2001-08-21 | Cogent Neuroscience, Inc. | Compositions and methods for diagnosing and treating conditions, disorders, or diseases involving cell death |
US6245929B1 (en) | 1999-12-20 | 2001-06-12 | General Electric Company | Catalyst composition and method for producing diaryl carbonates, using bisphosphines |
EP1157045B1 (en) | 1999-12-22 | 2004-10-20 | Basell Poliolefine Italia S.p.A. | Alpha-olefin polymerization catalyst system which contains an aromatic silane compound |
SE515932C2 (sv) | 1999-12-23 | 2001-10-29 | Prostalund Operations Ab | Sätt och anordning vid behandling av prostata |
US7737108B1 (en) | 2000-01-07 | 2010-06-15 | University Of Washington | Enhanced transport using membrane disruptive agents |
WO2001051661A2 (en) | 2000-01-13 | 2001-07-19 | Amsterdam Support Diagnostics B.V. | A universal nucleic acid amplification system for nucleic acids in a sample |
US6552006B2 (en) | 2000-01-31 | 2003-04-22 | The Regents Of The University Of California | Immunomodulatory polynucleotides in treatment of an infection by an intracellular pathogen |
CA2395811A1 (en) | 2000-01-31 | 2001-08-02 | Human Genome Sciences, Inc. | Nucleic acids, proteins, and antibodies |
US7833992B2 (en) | 2001-05-18 | 2010-11-16 | Merck Sharpe & Dohme | Conjugates and compositions for cellular delivery |
US7491805B2 (en) | 2001-05-18 | 2009-02-17 | Sirna Therapeutics, Inc. | Conjugates and compositions for cellular delivery |
WO2001062827A2 (en) | 2000-02-22 | 2001-08-30 | Shearwater Corporation | N-maleimidyl polymer derivatives |
TR200202799T3 (tr) | 2000-02-24 | 2003-03-21 | Washington University St.Louis | AB peptidini sekanslayan insanlaştırılmış antikorlar |
DK1259265T3 (da) | 2000-03-03 | 2011-07-11 | Genetronics Inc | Nukleinsyre-formuleringer til afgivelse af gener |
EP1276702A2 (en) | 2000-03-31 | 2003-01-22 | Genentech, Inc. | Compositions and methods for detecting and quantifying gene expression |
KR20020091170A (ko) | 2000-03-31 | 2002-12-05 | 아이덱 파마슈티칼즈 코포레이션 | B 세포 림프종의 치료를 위한 항-사이토카인 항체 또는길항제 및 항-cd20의 조합된 사용 |
US6565572B2 (en) | 2000-04-10 | 2003-05-20 | Sdgi Holdings, Inc. | Fenestrated surgical screw and method |
US6368801B1 (en) | 2000-04-12 | 2002-04-09 | Molecular Staging, Inc. | Detection and amplification of RNA using target-mediated ligation of DNA by RNA ligase |
EP1276849A4 (en) | 2000-04-12 | 2004-06-09 | Human Genome Sciences Inc | ALBUMIN FUSION PROTEINS |
US20010046496A1 (en) | 2000-04-14 | 2001-11-29 | Brettman Lee R. | Method of administering an antibody |
US6468247B1 (en) | 2000-04-21 | 2002-10-22 | Mark Zamoyski | Perfusion device for localized drug delivery |
US6375972B1 (en) | 2000-04-26 | 2002-04-23 | Control Delivery Systems, Inc. | Sustained release drug delivery devices, methods of use, and methods of manufacturing thereof |
US7871598B1 (en) | 2000-05-10 | 2011-01-18 | Novartis Ag | Stable metal ion-lipid powdered pharmaceutical compositions for drug delivery and methods of use |
US20040229271A1 (en) | 2000-05-19 | 2004-11-18 | Williams Richard B. | Compositions and methods for the identification and selection of nucleic acids and polypeptides |
WO2001092523A2 (en) | 2000-05-30 | 2001-12-06 | Curagen Corporation | Human polynucleotides and polypeptides encoded thereby |
US6537242B1 (en) | 2000-06-06 | 2003-03-25 | Becton, Dickinson And Company | Method and apparatus for enhancing penetration of a member for the intradermal sampling or administration of a substance |
EP1292331A2 (en) | 2000-06-07 | 2003-03-19 | Biosynexus Incorporated | Immunostimulatory rna/dna hybrid molecules |
US6607513B1 (en) | 2000-06-08 | 2003-08-19 | Becton, Dickinson And Company | Device for withdrawing or administering a substance and method of manufacturing a device |
CN1298738C (zh) | 2000-06-23 | 2007-02-07 | 惠氏控股有限公司 | 修饰的麻疹病毒v蛋白 |
US20050181033A1 (en) | 2000-06-29 | 2005-08-18 | Dekker John P.Iii | Method for delivering interferons to the intradermal compartment |
DE60139690D1 (de) | 2000-07-03 | 2009-10-08 | Novartis Vaccines & Diagnostic | Immunisierung gegen chlamydia pneumoniae |
US6440096B1 (en) | 2000-07-14 | 2002-08-27 | Becton, Dickinson And Co. | Microdevice and method of manufacturing a microdevice |
EP1301614B1 (en) | 2000-07-21 | 2006-11-29 | Glaxo Group Limited | Codon-optimized papilloma virus sequences |
US6902734B2 (en) | 2000-08-07 | 2005-06-07 | Centocor, Inc. | Anti-IL-12 antibodies and compositions thereof |
US20040142474A1 (en) | 2000-09-14 | 2004-07-22 | Expression Genetics, Inc. | Novel cationic lipopolymer as a biocompatible gene delivery agent |
US6696038B1 (en) | 2000-09-14 | 2004-02-24 | Expression Genetics, Inc. | Cationic lipopolymer as biocompatible gene delivery agent |
UA83458C2 (uk) * | 2000-09-18 | 2008-07-25 | Байоджен Айдек Ма Інк. | Виділений поліпептид baff-r (рецептор фактора активації в-клітин сімейства tnf) |
AU2001290078A1 (en) | 2000-09-20 | 2002-04-02 | Ruggero Della Bitta | Stem cell therapy |
EP1334109B1 (en) | 2000-10-04 | 2006-05-10 | Santaris Pharma A/S | Improved synthesis of purine locked nucleic acid analogues |
WO2002029088A2 (en) | 2000-10-04 | 2002-04-11 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Highly expressible genes |
US6998115B2 (en) | 2000-10-10 | 2006-02-14 | Massachusetts Institute Of Technology | Biodegradable poly(β-amino esters) and uses thereof |
US6649138B2 (en) | 2000-10-13 | 2003-11-18 | Quantum Dot Corporation | Surface-modified semiconductive and metallic nanoparticles having enhanced dispersibility in aqueous media |
US7202226B2 (en) | 2000-10-23 | 2007-04-10 | Detroit R & D | Augmentation of wound healing by elF-4E mRNA and EGF mRNA |
US20030077604A1 (en) | 2000-10-27 | 2003-04-24 | Yongming Sun | Compositions and methods relating to breast specific genes and proteins |
CN1507357A (zh) * | 2000-10-31 | 2004-06-23 | PRҩƷ����˾ | 提高生物活性分子传递的方法和组合物 |
US20020132788A1 (en) | 2000-11-06 | 2002-09-19 | David Lewis | Inhibition of gene expression by delivery of small interfering RNA to post-embryonic animal cells in vivo |
WO2002040545A2 (en) | 2000-11-17 | 2002-05-23 | The Government Of The United States, As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services | Reduction of the nonspecific animal toxicity of immunotoxins by mutating the framework regions of the fv to lower the isoelectric point |
JP2004535765A (ja) | 2000-12-07 | 2004-12-02 | カイロン コーポレイション | 前立腺癌においてアップレギュレートされた内因性レトロウイルス |
US7708915B2 (en) | 2004-05-06 | 2010-05-04 | Castor Trevor P | Polymer microspheres/nanospheres and encapsulating therapeutic proteins therein |
US20020130430A1 (en) * | 2000-12-29 | 2002-09-19 | Castor Trevor Percival | Methods for making polymer microspheres/nanospheres and encapsulating therapeutic proteins and other products |
US7628780B2 (en) | 2001-01-13 | 2009-12-08 | Medtronic, Inc. | Devices and methods for interstitial injection of biologic agents into tissue |
SG149684A1 (en) | 2001-01-19 | 2009-02-27 | Vironovative Bv | A virus causing respiratory tract illness in susceptible animals |
EP1224943A1 (en) | 2001-01-19 | 2002-07-24 | Crucell Holland B.V. | Fibronectin as a tumor marker detected by phage antibodies |
US20040110191A1 (en) | 2001-01-31 | 2004-06-10 | Winkler Matthew M. | Comparative analysis of nucleic acids using population tagging |
JP2004527236A (ja) | 2001-02-14 | 2004-09-09 | ベイラー カレッジ オブ メディスン | Rna増幅の方法及び組成物 |
US6652886B2 (en) | 2001-02-16 | 2003-11-25 | Expression Genetics | Biodegradable cationic copolymers of poly (alkylenimine) and poly (ethylene glycol) for the delivery of bioactive agents |
DE10109897A1 (de) | 2001-02-21 | 2002-11-07 | Novosom Ag | Fakultativ kationische Liposomen und Verwendung dieser |
US7232425B2 (en) | 2001-03-02 | 2007-06-19 | Sorenson Development, Inc. | Apparatus and method for specific interstitial or subcutaneous diffusion and dispersion of medication |
DE60228212D1 (de) | 2001-03-09 | 2008-09-25 | Gene Stream Pty Ltd | Neue expressionsvektoren |
JP2002262882A (ja) | 2001-03-12 | 2002-09-17 | Nisshinbo Ind Inc | Rnaの増幅法 |
FR2822164B1 (fr) | 2001-03-19 | 2004-06-18 | Centre Nat Rech Scient | Polypeptides derives des arn polymerases, et leurs utilisations |
US6520949B2 (en) | 2001-04-02 | 2003-02-18 | Martin St. Germain | Method and apparatus for administering fluid to animals subcutaneously |
US6625486B2 (en) | 2001-04-11 | 2003-09-23 | Advanced Cardiovascular Systems, Inc. | Method and apparatus for intracellular delivery of an agent |
DE10119005A1 (de) | 2001-04-18 | 2002-10-24 | Roche Diagnostics Gmbh | Verfahren zur Proteinexpression ausgehend von stabilisierter linearer kurzer DNA in zellfreien in vitro-Transkription/Translations-Systemen mit Exonuklease-haltigen Lysaten oder in einem zellulären System enthaltend Exonukleasen |
US20030171253A1 (en) | 2001-04-19 | 2003-09-11 | Averil Ma | Methods and compositions relating to modulation of A20 |
ATE376434T1 (de) | 2001-04-21 | 2007-11-15 | Curevac Gmbh | Injektionsgerät für mrna applikation |
IL158514A0 (en) | 2001-04-23 | 2004-05-12 | Amaxa Gmbh | Buffer solution for electroporation and a method comprising the use of the same |
US7560424B2 (en) | 2001-04-30 | 2009-07-14 | Zystor Therapeutics, Inc. | Targeted therapeutic proteins |
US6777187B2 (en) | 2001-05-02 | 2004-08-17 | Rubicon Genomics, Inc. | Genome walking by selective amplification of nick-translate DNA library and amplification from complex mixtures of templates |
EP1392587A4 (en) | 2001-05-08 | 2009-03-18 | Magnatech International L P | WIRE RUNNING SYSTEM AND METHOD WITH ELECTRONIC LENGTH CONTROL |
US20050137155A1 (en) | 2001-05-18 | 2005-06-23 | Sirna Therapeutics, Inc. | RNA interference mediated treatment of Parkinson disease using short interfering nucleic acid (siNA) |
US8137911B2 (en) | 2001-05-22 | 2012-03-20 | Cellscript, Inc. | Preparation and use of single-stranded transcription substrates for synthesis of transcription products corresponding to target sequences |
WO2002097116A2 (en) | 2001-05-30 | 2002-12-05 | The Scripps Research Institute | Delivery system for nucleic acids |
ES2340532T3 (es) | 2001-06-05 | 2010-06-04 | Curevac Gmbh | Arnm con un contenido g/c aumentado que codifica para un antigeno bacteriano y utilizacion del mismo. |
US20040175787A1 (en) | 2001-06-18 | 2004-09-09 | Klemens Kaupmann | Novel g-protein coupled receptors and dna sequences thereof |
EP1270732A1 (en) | 2001-06-21 | 2003-01-02 | Schuler, Gerold | Improved transfection of eukaryontic cells with linear polynucleotides by electroporation |
US7785610B2 (en) | 2001-06-21 | 2010-08-31 | Dynavax Technologies Corporation | Chimeric immunomodulatory compounds and methods of using the same—III |
US7547551B2 (en) | 2001-06-21 | 2009-06-16 | University Of Antwerp. | Transfection of eukaryontic cells with linear polynucleotides by electroporation |
EP1404716A2 (en) | 2001-06-26 | 2004-04-07 | Novartis AG | Novel g protein-coupled receptors and dna sequences thereof |
SE0102327D0 (sv) | 2001-06-28 | 2001-06-28 | Active Biotech Ab | A novel engineered superantigen for human therapy |
CN1253220C (zh) | 2001-06-29 | 2006-04-26 | 贝克顿迪肯森公司 | 通过微管在真皮内输入疫苗和基因治疗剂 |
US20040236092A1 (en) | 2001-07-13 | 2004-11-25 | Roman Dziarski | Peptidologlycan recognition protein encoding nucleic acids and methods of use thereof |
US6586524B2 (en) | 2001-07-19 | 2003-07-01 | Expression Genetics, Inc. | Cellular targeting poly(ethylene glycol)-grafted polymeric gene carrier |
US7169750B2 (en) | 2001-07-31 | 2007-01-30 | Anormed, Inc. | Methods to mobilize progenitor/stem cells |
EP1430140B1 (en) | 2001-08-01 | 2010-09-15 | University of Utah | N-terminally truncated isoforms of pde3a cyclic phosphodiesterases |
WO2003018798A2 (en) | 2001-08-27 | 2003-03-06 | Novartis Ag | G-protein coupled receptor and dna sequences thereof |
US20040142325A1 (en) | 2001-09-14 | 2004-07-22 | Liat Mintz | Methods and systems for annotating biomolecular sequences |
EP2428571B1 (en) | 2001-09-28 | 2018-07-18 | Max-Planck-Gesellschaft zur Förderung der Wissenschaften e.V. | MicroRNA molecules |
CA2462593A1 (en) | 2001-10-03 | 2003-04-10 | Kam W. Leong | Compositions for oral gene therapy and methods of using same |
AR045702A1 (es) | 2001-10-03 | 2005-11-09 | Chiron Corp | Composiciones de adyuvantes. |
DE10148886A1 (de) | 2001-10-04 | 2003-04-30 | Avontec Gmbh | Inhibition von STAT-1 |
US7276489B2 (en) | 2002-10-24 | 2007-10-02 | Idera Pharmaceuticals, Inc. | Modulation of immunostimulatory properties of oligonucleotide-based compounds by optimal presentation of 5′ ends |
US7429258B2 (en) | 2001-10-26 | 2008-09-30 | Massachusetts Institute Of Technology | Microneedle transport device |
EP1452593B1 (en) | 2001-11-14 | 2009-04-08 | Toyo Boseki Kabushiki Kaisha | Dna synthesis promoters, dna polymerase-associated factors and utilization thereof |
US20030138419A1 (en) | 2001-11-16 | 2003-07-24 | The University Of Tennessee Research Corporation | Recombinant antibody fusion proteins and methods for detection of apoptotic cells |
WO2003046578A2 (en) | 2001-11-29 | 2003-06-05 | Novartis Ag | Method for the assessment and prognosis of sarcoidosis |
CA2409775C (en) | 2001-12-03 | 2010-07-13 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Reversibly modified thermostable enzymes for dna synthesis and amplification in vitro |
DE60235413D1 (de) | 2001-12-07 | 2010-04-01 | Novartis Vaccines & Diagnostic | Bei prostatakrebs hochreguliertes endogenes retrovirus |
US20060275747A1 (en) | 2001-12-07 | 2006-12-07 | Hardy Stephen F | Endogenous retrovirus up-regulated in prostate cancer |
JP4822490B2 (ja) | 2001-12-07 | 2011-11-24 | ノバルティス バクシンズ アンド ダイアグノスティックス,インコーポレーテッド | 腫瘍形成形質転換に関連する内因性レトロウイルスポリペプチド |
AU2002361429A1 (en) | 2001-12-17 | 2003-06-30 | Novartis Ag | Novel g-protein coupled receptors and dna sequences thereof |
DE10162480A1 (de) | 2001-12-19 | 2003-08-07 | Ingmar Hoerr | Die Applikation von mRNA für den Einsatz als Therapeutikum gegen Tumorerkrankungen |
SI1474109T1 (sl) | 2001-12-21 | 2010-11-30 | Alcon Inc | Uporaba sintetičnih anorganskih nanodelcev kot nosilcev za oftalmična zdravila |
AU2003235707A1 (en) | 2002-01-18 | 2003-07-30 | Curevac Gmbh | Immunogenic preparations and vaccines on the basis of mrna |
US7741297B2 (en) | 2002-02-04 | 2010-06-22 | Oncothyreon Inc. | Immunostimulatory, covalently lipidated oligonucleotides |
AU2003210802B2 (en) | 2002-02-05 | 2009-09-10 | Genentech Inc. | Protein purification |
FR2835749B1 (fr) | 2002-02-08 | 2006-04-14 | Inst Nat Sante Rech Med | Composition pharmaceutique ameliorant le transfert de gene in vivo |
DE10207178A1 (de) | 2002-02-19 | 2003-09-04 | Novosom Ag | Komponenten für die Herstellung amphoterer Liposomen |
AR038568A1 (es) | 2002-02-20 | 2005-01-19 | Hoffmann La Roche | Anticuerpos anti-a beta y su uso |
US20050222064A1 (en) | 2002-02-20 | 2005-10-06 | Sirna Therapeutics, Inc. | Polycationic compositions for cellular delivery of polynucleotides |
US7354742B2 (en) | 2002-02-22 | 2008-04-08 | Ortho-Mcneil Pharmaceutical, Inc. | Method for generating amplified RNA |
CA2481479C (en) | 2002-02-26 | 2012-12-11 | Maxygen, Inc. | Novel flavivirus antigens |
ATE475431T1 (de) | 2002-03-04 | 2010-08-15 | Imclone Llc | Kdr-spezifische humane antikörper und deren anwendung |
WO2003075892A1 (en) | 2002-03-13 | 2003-09-18 | Novartis Ag | Pharmaceutical microparticles |
US7074596B2 (en) | 2002-03-25 | 2006-07-11 | Board Of Supervisors Of Louisiana State University And Agricultural And Mechanical College | Synthesis and use of anti-reverse mRNA cap analogues |
EP3006043B1 (en) | 2002-04-04 | 2019-05-29 | Zoetis Belgium S.A. | Immunostimulatory g,u-containing oligoribonucleotides |
WO2003087815A2 (en) | 2002-04-17 | 2003-10-23 | Novartis Ag | Method for the identification of inhibitors of the binding of are-containing mrn a and an hur protein |
GB0209539D0 (en) | 2002-04-26 | 2002-06-05 | Avecia Ltd | Monomer Polymer and process |
EP1361277A1 (en) | 2002-04-30 | 2003-11-12 | Centre National De La Recherche Scientifique (Cnrs) | Optimization of transgene expression in mammalian cells |
HUE030806T2 (hu) | 2002-05-02 | 2017-05-29 | Wyeth Holdings Llc | Calicheamicin származék-hordozó konjugátumok |
AU2003217531A1 (en) | 2002-05-02 | 2003-11-17 | Massachusetts Eye And Ear Infirmary | Ocular drug delivery systems and use thereof |
WO2003094995A1 (en) | 2002-05-06 | 2003-11-20 | Becton, Dickinson And Company | Method and device for controlling drug pharmacokinetics |
AU2003237824B9 (en) | 2002-05-08 | 2008-06-19 | The Regents Of The University Of California | System and method for treating cardiac arrhythmias with fibroblast cells |
US20040018525A1 (en) | 2002-05-21 | 2004-01-29 | Bayer Aktiengesellschaft | Methods and compositions for the prediction, diagnosis, prognosis, prevention and treatment of malignant neoplasma |
US7374930B2 (en) | 2002-05-21 | 2008-05-20 | Expression Genetics, Inc. | GLP-1 gene delivery for the treatment of type 2 diabetes |
DE10224200C1 (de) | 2002-05-31 | 2003-08-21 | Artus Ges Fuer Molekularbiolog | Vermehrung von Ribonukleinsäuren |
WO2003101401A2 (en) | 2002-06-03 | 2003-12-11 | Chiron Corporation | Use of nrg4, or inhibitors thereof, in the treatment of colon and pancreatic cancer |
SE0201907D0 (sv) | 2002-06-19 | 2002-06-19 | Atos Medical Ab | Plaster for tracheostoma valves |
WO2004002453A1 (en) | 2002-06-28 | 2004-01-08 | Protiva Biotherapeutics Ltd. | Method and apparatus for producing liposomes |
CA2491567A1 (en) | 2002-07-01 | 2004-01-08 | The Kenneth S. Warren Institute, Inc. | Recombinant tissue protective cytokines and encoding nucleic acids thereof for protection, restoration, and enhancement of responsive cells, tissues, and organs |
DE10229872A1 (de) | 2002-07-03 | 2004-01-29 | Curevac Gmbh | Immunstimulation durch chemisch modifizierte RNA |
GB0215509D0 (en) | 2002-07-04 | 2002-08-14 | Novartis Ag | Marker genes |
US20040009180A1 (en) | 2002-07-11 | 2004-01-15 | Allergan, Inc. | Transdermal botulinum toxin compositions |
DE60336736D1 (de) | 2002-07-16 | 2011-05-26 | VGX Pharmaceuticals LLC | Codon-optimierte synthetische plasmide |
EP1543157A4 (en) | 2002-07-24 | 2006-11-15 | Ptc Therapeutics Inc | METHODS FOR IDENTIFYING SMALL MOLECULES MODULATING PREMATURE TRANSLATION TERMINATION AND DEGRADATION OF INDUCED MRNA BY NON-SENSE MUTATION |
EP1393745A1 (en) | 2002-07-29 | 2004-03-03 | Hybridon, Inc. | Modulation of immunostimulatory properties of oligonucleotide-based compounds by optimal presentation of 5'ends |
EP1386925A1 (en) | 2002-07-31 | 2004-02-04 | Girindus AG | Method for preparing oligonucleotides |
US6653468B1 (en) | 2002-07-31 | 2003-11-25 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Universal support media for synthesis of oligomeric compounds |
JP2005534389A (ja) | 2002-08-01 | 2005-11-17 | アボット ラボラトリーズ バスキュラー エンタープライゼズ リミテッド | 穿刺孔の周長を減少させることにより穿刺孔をシールする装置 |
EP1873180B1 (en) | 2002-08-14 | 2014-05-07 | Novartis AG | Ophthalmic device made from a radiation-curable prepolymer |
BR0313890A (pt) | 2002-08-30 | 2005-07-26 | Becton Dickinson Co | Método de controle da farmacocinética de compostos imunomoduladores |
KR20120104412A (ko) | 2002-09-06 | 2012-09-20 | 인설트 테라페틱스, 인코퍼레이티드 | 공유결합된 치료제 전달을 위한 사이클로덱스트린-기초 중합체 |
ES2315526T3 (es) | 2002-09-09 | 2009-04-01 | Nektar Therapeutics Al, Corporation | Metodo para preparar derivados polimericos solubles en agua que llevan un acido carboxilico terminal. |
AU2003278776A1 (en) | 2002-09-10 | 2004-04-30 | Vical Incorporated | Codon-optimized polynucleotide-based vaccines against bacillus anthracis infection |
US7534872B2 (en) | 2002-09-27 | 2009-05-19 | Syngen, Inc. | Compositions and methods for the use of FMOC derivatives in DNA/RNA synthesis |
SI1558648T1 (sl) | 2002-10-17 | 2012-05-31 | Genmab As | Človeška monoklonalna protitelesa proti CD |
US7622270B2 (en) | 2002-10-22 | 2009-11-24 | Eisai R&D Management Co., Ltd. | Methods of isolating dopaminergic neuron precursor cells |
US6896666B2 (en) | 2002-11-08 | 2005-05-24 | Kochamba Family Trust | Cutaneous injection delivery under suction |
AU2003294447A1 (en) | 2002-11-21 | 2004-06-18 | Epicentre Technologies | Preparation and use of single-stranded transcription substrates for synthesis of transcription products corresponding to target sequences |
US7491234B2 (en) | 2002-12-03 | 2009-02-17 | Boston Scientific Scimed, Inc. | Medical devices for delivery of therapeutic agents |
EP1575454A4 (en) | 2002-12-09 | 2006-11-29 | Medtronic Vascular Inc | MODULAR STENT WITH POLYMER BRIDGES ON MODULAR CONTACT POINTS |
DE60332957D1 (de) | 2002-12-16 | 2010-07-22 | Genentech Inc | Immunoglobulinvarianten und deren verwendungen |
US7625872B2 (en) | 2002-12-23 | 2009-12-01 | Dynavax Technologies Corporation | Branched immunomodulatory compounds and methods of using the same |
US7169892B2 (en) | 2003-01-10 | 2007-01-30 | Astellas Pharma Inc. | Lipid-peptide-polymer conjugates for long blood circulation and tumor specific drug delivery systems |
US20080227085A1 (en) | 2003-01-17 | 2008-09-18 | Pellegrini Matthew C | Methods and Systems for the Identification of Rna Regulatory Sequences and Compounds that Modulate their Function |
US9068234B2 (en) | 2003-01-21 | 2015-06-30 | Ptc Therapeutics, Inc. | Methods and agents for screening for compounds capable of modulating gene expression |
EP1604011A4 (en) | 2003-01-21 | 2009-12-09 | Ptc Therapeutics Inc | METHODS FOR IDENTIFYING COMPOUNDS THAT MODULATE THE EXPRESSION OF DEPENDENT GENES FROM A NON-TRANSLATED REGION, AND METHODS OF USING SAME |
US8426194B2 (en) | 2003-01-21 | 2013-04-23 | Ptc Therapeutics, Inc. | Methods and agents for screening for compounds capable of modulating VEGF expression |
US20040147027A1 (en) | 2003-01-28 | 2004-07-29 | Troy Carol M. | Complex for facilitating delivery of dsRNA into a cell and uses thereof |
ZA200506159B (en) | 2003-02-10 | 2006-10-25 | Elan Pharm Inc | Immunoglobulin formulation and method of preparation thereof |
US20040167090A1 (en) | 2003-02-21 | 2004-08-26 | Monahan Sean D. | Covalent modification of RNA for in vitro and in vivo delivery |
CA2450289A1 (en) | 2003-03-20 | 2005-05-19 | Imclone Systems Incorporated | Method of producing an antibody to epidermal growth factor receptor |
US7320961B2 (en) | 2003-03-24 | 2008-01-22 | Abbott Laboratories | Method for treating a disease, disorder or adverse effect caused by an elevated serum concentration of an UGT1A1 substrate |
ATE459710T1 (de) | 2003-03-25 | 2010-03-15 | Stratagene California | Dna-polymerasefusionen und deren verwendungen |
CA2522213A1 (en) | 2003-04-08 | 2004-10-28 | Dante J. Marciani | Semi-synthetic saponin analogs with carrier and immune stimulatory activities for dna and rna vaccines |
ES2322267T3 (es) | 2003-04-09 | 2009-06-18 | Genentech, Inc. | Terapia de una enfermedad autoinmunologica en un paciente que presenta una respuesta inadecuada a un inhibidor de tnf-alfa. |
JP2006525405A (ja) | 2003-05-05 | 2006-11-09 | ベン‐グリオン ユニバーシティ オブ ザ ネゲヴ リサーチ アンド デベロップメント オーソリティ | 注入可能な架橋されたポリマー調製物およびその使用 |
TWI353991B (en) | 2003-05-06 | 2011-12-11 | Syntonix Pharmaceuticals Inc | Immunoglobulin chimeric monomer-dimer hybrids |
SI2298347T1 (sl) | 2003-05-06 | 2016-03-31 | Biogen Hemophilia Inc. | Himerni proteini s faktorjem strjevanja krvi za zdravljenje hemostatske motnje |
US7348004B2 (en) | 2003-05-06 | 2008-03-25 | Syntonix Pharmaceuticals, Inc. | Immunoglobulin chimeric monomer-dimer hybrids |
US20040226556A1 (en) | 2003-05-13 | 2004-11-18 | Deem Mark E. | Apparatus for treating asthma using neurotoxin |
US9567591B2 (en) | 2003-05-15 | 2017-02-14 | Mello Biotechnology, Inc. | Generation of human embryonic stem-like cells using intronic RNA |
GB0313132D0 (en) | 2003-06-06 | 2003-07-09 | Ich Productions Ltd | Peptide ligands |
WO2005009346A2 (en) | 2003-06-24 | 2005-02-03 | Mirus Corporation | Inhibition of gene function by delivery of polynucleotide-based gene expression inhibitors to mammalian cells in vivo |
GB0316089D0 (en) | 2003-07-09 | 2003-08-13 | Xo Bioscience Ltd | Differentiation method |
US8592197B2 (en) | 2003-07-11 | 2013-11-26 | Novavax, Inc. | Functional influenza virus-like particles (VLPs) |
US7575572B2 (en) | 2003-07-15 | 2009-08-18 | Spinal Generations, Llc | Method and device for delivering medicine to bone |
US20050013870A1 (en) | 2003-07-17 | 2005-01-20 | Toby Freyman | Decellularized extracellular matrix of conditioned body tissues and uses thereof |
JP5105874B2 (ja) | 2003-07-18 | 2012-12-26 | アムジエン・インコーポレーテツド | 肝細胞増殖因子に対する特異的結合因子 |
CA2533701A1 (en) | 2003-07-31 | 2005-02-17 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Oligomeric compounds and compositions for use in modulation of small non-coding rnas |
DE10335833A1 (de) | 2003-08-05 | 2005-03-03 | Curevac Gmbh | Transfektion von Blutzellen mit mRNA zur Immunstimulation und Gentherapie |
US8668926B1 (en) | 2003-09-15 | 2014-03-11 | Shaker A. Mousa | Nanoparticle and polymer formulations for thyroid hormone analogs, antagonists, and formulations thereof |
US7135010B2 (en) | 2003-09-30 | 2006-11-14 | Damage Control Surgical Technologies, Inc. | Method and apparatus for rapid deployment chest drainage |
EP1673473B1 (en) | 2003-10-06 | 2011-07-06 | Novartis AG | Use of genetic polymorphisms that associate with efficacy of treatment of inflammatory disease |
US20050130201A1 (en) | 2003-10-14 | 2005-06-16 | Dharmacon, Inc. | Splint-assisted enzymatic synthesis of polyribounucleotides |
DE10347710B4 (de) | 2003-10-14 | 2006-03-30 | Johannes-Gutenberg-Universität Mainz | Rekombinante Impfstoffe und deren Verwendung |
EA036531B1 (ru) | 2003-11-05 | 2020-11-19 | Роше Гликарт Аг | Гуманизированное антитело типа ii к cd20 (варианты), фармацевтическая композиция, содержащая эти варианты антитела, и их применение |
WO2005047536A2 (en) | 2003-11-13 | 2005-05-26 | Novartis Ag | Detection of genomic amplification and deletion in cancer |
US7998119B2 (en) | 2003-11-18 | 2011-08-16 | Nano Pass Technologies Ltd. | System and method for delivering fluid into flexible biological barrier |
US20070054278A1 (en) | 2003-11-18 | 2007-03-08 | Applera Corporation | Polymorphisms in nucleic acid molecules encoding human enzyme proteins, methods of detection and uses thereof |
US7699852B2 (en) | 2003-11-19 | 2010-04-20 | Zimmer Spine, Inc. | Fenestrated bone tap and method |
US20050153333A1 (en) | 2003-12-02 | 2005-07-14 | Sooknanan Roy R. | Selective terminal tagging of nucleic acids |
US8529939B2 (en) | 2003-12-08 | 2013-09-10 | Gel-Del Technologies, Inc. | Mucoadhesive drug delivery devices and methods of making and using thereof |
US7674884B2 (en) | 2003-12-10 | 2010-03-09 | Novimmune S.A. | Neutralizing antibodies and methods of use thereof |
US8034619B2 (en) | 2003-12-19 | 2011-10-11 | University Of Cincinnati | Polyamides for nucleic acid delivery |
JP4943161B2 (ja) | 2003-12-23 | 2012-05-30 | ジェネンテック, インコーポレイテッド | 新規抗il13モノクローナル抗体での癌の処置 |
US20050143336A1 (en) | 2003-12-30 | 2005-06-30 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Methods and compositions for improved non-viral gene therapy |
US7150726B2 (en) | 2004-01-23 | 2006-12-19 | Norfolk Medical | Device for subcutaneous infusion of fluids |
WO2005072710A2 (en) | 2004-01-28 | 2005-08-11 | Johns Hopkins University | Drugs and gene carrier particles that rapidly move through mucous barriers |
ATE440949T1 (de) | 2004-01-30 | 2009-09-15 | Maxygen Holdings Ltd | Gesteuertes überlesen von stopcodons |
US7309487B2 (en) | 2004-02-09 | 2007-12-18 | George Inana | Methods and compositions for detecting and treating retinal diseases |
AU2005214331B2 (en) | 2004-02-12 | 2011-09-15 | Eisai, Inc. | Monoclonal antibodies that specifically bind to folate receptor alpha |
US20070265220A1 (en) | 2004-03-15 | 2007-11-15 | City Of Hope | Methods and compositions for the specific inhibition of gene expression by double-stranded RNA |
EP3736295A1 (en) | 2004-03-24 | 2020-11-11 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Subtypes of humanized antibody against interleukin-6 receptor |
WO2005098433A2 (en) | 2004-04-01 | 2005-10-20 | Novartis Ag | Diagnostic assays for alzheimer’s disease |
BRPI0509806A (pt) | 2004-04-12 | 2007-09-18 | Allergan Inc | sistema de injeção em múltiplos locais |
WO2006097793A2 (en) | 2004-04-15 | 2006-09-21 | Chiasma, Ltd. | Compositions capable of facilitating penetration across a biological barrier |
JP5848861B2 (ja) | 2004-04-20 | 2016-01-27 | ジェンマブ エー/エスGenmab A/S | Cd20に対するヒトモノクローナル抗体 |
ES2246694B1 (es) | 2004-04-29 | 2007-05-01 | Instituto Cientifico Y Tecnologico De Navarra, S.A. | Nanoparticulas pegiladas. |
US20080119645A1 (en) | 2004-05-05 | 2008-05-22 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Amidites and Methods of Rna Synthesis |
EP1765294B1 (en) * | 2004-05-12 | 2008-09-24 | Baxter International Inc. | Nucleic acid microspheres, production and delivery thereof |
CN1980640A (zh) * | 2004-05-12 | 2007-06-13 | 巴克斯特国际公司 | 核酸微球体,其制备和递送 |
US20080103053A1 (en) | 2005-11-22 | 2008-05-01 | Helicos Biosciences Corporation | Methods and compositions for sequencing a nucleic acid |
US20060020329A1 (en) | 2004-05-26 | 2006-01-26 | Medtronic Vascular, Inc. | Semi-directional drug delivering stents |
US8012747B2 (en) | 2004-06-01 | 2011-09-06 | San Diego State University Foundation | Expression system |
ATE536418T1 (de) | 2004-06-07 | 2011-12-15 | Protiva Biotherapeutics Inc | Lipidverkapselte interferenz-rna |
EP1781593B1 (en) * | 2004-06-07 | 2011-12-14 | Protiva Biotherapeutics Inc. | Cationic lipids and methods of use |
WO2005123114A2 (en) | 2004-06-11 | 2005-12-29 | Trustees Of Tufts College | Silk-based drug delivery system |
US8338648B2 (en) | 2004-06-12 | 2012-12-25 | Signum Biosciences, Inc. | Topical compositions and methods for epithelial-related conditions |
WO2006046978A2 (en) | 2004-06-28 | 2006-05-04 | Argos Therapeutics, Inc. | Cationic peptide-mediated transformation |
KR101100059B1 (ko) | 2004-06-30 | 2011-12-29 | 넥타르 테라퓨틱스 | 중합체인자 ix 부분의 접합체 |
EP1768742A4 (en) | 2004-07-06 | 2007-10-17 | Transpharma Medical Ltd | ADMINISTRATION SYSTEM FOR TRANSDERMAL IMMUNIZATION |
DE102004035227A1 (de) * | 2004-07-21 | 2006-02-16 | Curevac Gmbh | mRNA-Gemisch zur Vakzinierung gegen Tumorerkrankungen |
WO2006093526A2 (en) | 2004-07-21 | 2006-09-08 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Oligonucleotides comprising a modified or non-natural nucleobase |
US7603349B1 (en) | 2004-07-29 | 2009-10-13 | Yahoo! Inc. | User interfaces for search systems using in-line contextual queries |
GB0417487D0 (en) | 2004-08-05 | 2004-09-08 | Novartis Ag | Organic compound |
US7291208B2 (en) | 2004-08-13 | 2007-11-06 | Gore Enterprise Holdings, Inc. | Grooved active and passive adsorbent filters |
SE0402025D0 (sv) | 2004-08-13 | 2004-08-13 | Active Biotech Ab | Treatment of hyperproliferative disease with superantigens in combination with another anticancer agent |
CA2478458A1 (en) | 2004-08-20 | 2006-02-20 | Michael Panzara | Treatment of pediatric multiple sclerosis |
JP4965447B2 (ja) | 2004-08-26 | 2012-07-04 | エンジーンアイシー モレキュラー デリバリー ピーティーワイ リミテッド | 細菌由来のインタクトなミニセルを介した哺乳動物細胞への機能性核酸の送達 |
DE102004042546A1 (de) | 2004-09-02 | 2006-03-09 | Curevac Gmbh | Kombinationstherapie zur Immunstimulation |
US7501486B2 (en) | 2004-09-07 | 2009-03-10 | Burnham Institute For Medical Research | Peptides that selectively home to heart vasculature and related conjugates and methods |
US8396548B2 (en) | 2008-11-14 | 2013-03-12 | Vessix Vascular, Inc. | Selective drug delivery in a lumen |
US8663599B1 (en) | 2004-10-05 | 2014-03-04 | Gp Medical, Inc. | Pharmaceutical composition of nanoparticles |
EP1811018A4 (en) | 2004-10-12 | 2007-11-28 | Tissue Targeting Japan Inc | PROGENITOR FOR BRAIN DISPOSAL FROM BONE MARROW |
BRPI0516110A (pt) | 2004-10-13 | 2008-08-26 | Ptc Therapeutics Inc | compostos para supressão sem sentido e métodos para seu uso |
US8057821B2 (en) | 2004-11-03 | 2011-11-15 | Egen, Inc. | Biodegradable cross-linked cationic multi-block copolymers for gene delivery and methods of making thereof |
US20080261905A1 (en) | 2004-11-08 | 2008-10-23 | K.U. Leuven Research And Development | Modified Nucleosides for Rna Interference |
US8007466B2 (en) | 2004-11-18 | 2011-08-30 | Nanopass Technologies Ltd. | System and method for delivering fluid into flexible biological barrier |
CA2588389A1 (en) | 2004-11-23 | 2006-06-22 | Ptc Therapeutics, Inc. | Substituted phenols as active agents inhibiting vegf production |
US7964571B2 (en) | 2004-12-09 | 2011-06-21 | Egen, Inc. | Combination of immuno gene therapy and chemotherapy for treatment of cancer and hyperproliferative diseases |
WO2006063249A2 (en) | 2004-12-10 | 2006-06-15 | Justin Hanes | Functionalized poly (ether-anhydride) block copolymers |
US9068969B2 (en) | 2004-12-28 | 2015-06-30 | Ptc Therapeutics, Inc. | Cell based methods and systems for the identification of RNA regulatory sequences and compounds that modulate their functions |
US8187570B1 (en) | 2005-01-04 | 2012-05-29 | Gp Medical, Inc. | Nanoparticles for protein drug delivery |
US8192718B1 (en) | 2005-01-04 | 2012-06-05 | Gp Medical, Inc. | Pharmaceutical composition of nanoparticles |
US8535702B2 (en) | 2005-02-01 | 2013-09-17 | Boston Scientific Scimed, Inc. | Medical devices having porous polymeric regions for controlled drug delivery and regulated biocompatibility |
WO2007086883A2 (en) | 2005-02-14 | 2007-08-02 | Sirna Therapeutics, Inc. | Cationic lipids and formulated molecular compositions containing them |
US7404969B2 (en) | 2005-02-14 | 2008-07-29 | Sirna Therapeutics, Inc. | Lipid nanoparticle based compositions and methods for the delivery of biologically active molecules |
US20060263338A1 (en) | 2005-03-04 | 2006-11-23 | Jacoby Douglas B | Catheter-based delivery of Skeletal Myoblasts to the Myocardium of Damaged Hearts |
US20100221186A1 (en) | 2005-03-11 | 2010-09-02 | Hueseyin Firat | Biomarkers for cardiovascular side-effects induced by cox-2 inhibitory compounds |
JP4793806B2 (ja) | 2005-03-22 | 2011-10-12 | Tti・エルビュー株式会社 | イオントフォレーシス装置 |
US8415325B2 (en) | 2005-03-31 | 2013-04-09 | University Of Delaware | Cell-mediated delivery and targeted erosion of noncovalently crosslinked hydrogels |
ES2332062T3 (es) | 2005-04-01 | 2010-01-25 | Intezyne Technologies Incorporated | Micelas polimericas para el suministro de farmacos. |
EP1871911A2 (en) | 2005-04-07 | 2008-01-02 | Chiron Corporation | Cancer-related genes (prlr) |
EP1865981A2 (en) | 2005-04-07 | 2007-12-19 | Chiron Corporation | Cacna1e in cancer diagnosis, detection and treatment |
WO2006110776A2 (en) | 2005-04-12 | 2006-10-19 | Nektar Therapeutics Al, Corporation | Polyethylene glycol cojugates of antimicrobial agents |
WO2006116458A2 (en) | 2005-04-26 | 2006-11-02 | Coley Pharmaceutical Gmbh | Modified oligoribonucleotide analogs with enhances immunostimulatory activity |
US7850656B2 (en) | 2005-04-29 | 2010-12-14 | Warsaw Orthopedic, Inc. | Devices and methods for delivering medical agents |
LT2439273T (lt) | 2005-05-09 | 2019-05-10 | Ono Pharmaceutical Co., Ltd. | Žmogaus monokloniniai antikūnai prieš programuotos mirties 1(pd-1) baltymą, ir vėžio gydymo būdai, naudojant vien tik anti-pd-1 antikūnus arba derinyje su kitais imunoterapiniais vaistais |
US8246995B2 (en) | 2005-05-10 | 2012-08-21 | The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University | Hydrophobic nanotubes and nanoparticles as transporters for the delivery of drugs into cells |
US20070072175A1 (en) | 2005-05-13 | 2007-03-29 | Biogen Idec Ma Inc. | Nucleotide array containing polynucleotide probes complementary to, or fragments of, cynomolgus monkey genes and the use thereof |
US20060265771A1 (en) | 2005-05-17 | 2006-11-23 | Lewis David L | Monitoring microrna expression and function |
DE102005023170A1 (de) | 2005-05-19 | 2006-11-23 | Curevac Gmbh | Optimierte Formulierung für mRNA |
WO2006133148A2 (en) | 2005-06-03 | 2006-12-14 | Genentech, Inc. | Method of producing antibodies with modified fucosylation level |
US7550264B2 (en) | 2005-06-10 | 2009-06-23 | Datascope Investment Corporation | Methods and kits for sense RNA synthesis |
US7691086B2 (en) | 2005-06-14 | 2010-04-06 | Tengiz Tkebuchava | Catheter for introduction of medications to the tissues of a heart or other organ |
EP2279758B1 (en) | 2005-06-16 | 2015-02-25 | Nektar Therapeutics | Conjugates having a degradable linkage and polymeric reagents useful in preparing such conjugates |
US8202835B2 (en) | 2005-06-17 | 2012-06-19 | Yitzchak Hillman | Disease treatment via antimicrobial peptides or their inhibitors |
CA2611985C (en) | 2005-06-17 | 2016-08-16 | The University Of North Carolina At Chapel Hill | Nanoparticle fabrication methods, systems, and materials |
US8101385B2 (en) | 2005-06-30 | 2012-01-24 | Archemix Corp. | Materials and methods for the generation of transcripts comprising modified nucleotides |
CA2613442C (en) | 2005-06-30 | 2016-08-23 | Archemix Corp. | Materials and methods for the generation of fully 2'-modified nucleic acid transcripts |
WO2007014363A2 (en) | 2005-07-27 | 2007-02-01 | Genentech, Inc. | Vectors for inducible expression of hairpin rna and use thereof |
US9012219B2 (en) | 2005-08-23 | 2015-04-21 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | RNA preparations comprising purified modified RNA for reprogramming cells |
US20070048741A1 (en) | 2005-08-24 | 2007-03-01 | Getts Robert C | Methods and kits for sense RNA synthesis |
RU2457858C2 (ru) | 2005-09-01 | 2012-08-10 | Новартис Вэксинес Энд Дайэгностикс Гмбх Унд Ко Кг | Множественная вакцинация, включающая менингококки серогруппы с |
RS51840B (en) | 2005-09-01 | 2012-02-29 | Celgene Corporation | IMMUNOLOGICAL APPLICATIONS OF IMMUNOMODULATORY UNITS FOR VACCINE AND FOR INFECTIOUS DISEASE THERAPY |
WO2007029361A1 (ja) * | 2005-09-02 | 2007-03-15 | Takeda Pharmaceutical Company Limited | 短鎖デオキシリボ核酸又は短鎖リボ核酸含有徐放性マイクロスフェア及びその製造法 |
US8420605B2 (en) | 2005-09-07 | 2013-04-16 | The University Of Strathclyde | Hydrogel compositions |
US20120021042A1 (en) | 2005-09-15 | 2012-01-26 | Steffen Panzner | Efficient Method For Loading Amphoteric Liposomes With Nucleic Acid Active Substances |
US20070185432A1 (en) | 2005-09-19 | 2007-08-09 | Transport Pharmaceuticals, Inc. | Electrokinetic system and method for delivering methotrexate |
DE102005046490A1 (de) | 2005-09-28 | 2007-03-29 | Johannes-Gutenberg-Universität Mainz | Modifikationen von RNA, die zu einer erhöhten Transkriptstabilität und Translationseffizienz führen |
US20070087437A1 (en) | 2005-10-14 | 2007-04-19 | Jifan Hu | Methods for rejuvenating cells in vitro and in vivo |
US8012096B2 (en) | 2005-10-17 | 2011-09-06 | Cardiogenesis Corporation | Surgical device and method for performing combination revascularization and therapeutic substance delivery to tissue |
PT1951299E (pt) | 2005-11-04 | 2012-02-28 | Novartis Vaccines & Diagnostic | Vacinas contra a gripe que incluem combinações de adjuvantes particulados e imuno-potenciadores |
US20070105124A1 (en) | 2005-11-08 | 2007-05-10 | Getts Robert C | Methods and kits for nucleic acid amplification |
WO2007057167A2 (en) | 2005-11-18 | 2007-05-24 | Bioline Limited | A method for enhancing enzymatic dna polymerase reactions |
EP1973576B1 (en) | 2005-11-28 | 2019-05-15 | Genmab A/S | Recombinant monovalent antibodies and methods for production thereof |
CA2639819C (en) | 2005-11-30 | 2012-10-23 | Epicentre Technologies Corporation | Selective terminal tagging of nucleic acids |
TWI389709B (zh) | 2005-12-01 | 2013-03-21 | Novartis Ag | 經皮治療系統 |
ES2564241T3 (es) | 2005-12-02 | 2016-03-21 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | Nanopartículas para su uso en composiciones inmunogénicas |
US8603457B2 (en) | 2005-12-02 | 2013-12-10 | University Of Rochester | Nonsense suppression and genetic codon alteration by targeted modification |
US7579318B2 (en) | 2005-12-06 | 2009-08-25 | Centre De La Recherche De La Scientifique | Cell penetrating peptides for intracellular delivery of molecules |
US8242081B2 (en) | 2005-12-06 | 2012-08-14 | Centre National De La Recherche Scientifique | Cell penetrating peptides for intracellular delivery of molecules |
CA2630597A1 (en) | 2005-12-08 | 2007-06-14 | Novartis Ag | Effects of inhibitors of fgfr3 on gene transcription |
EP4223769A3 (en) | 2005-12-13 | 2023-11-01 | Kyoto University | Nuclear reprogramming factor |
CA2633063A1 (en) | 2005-12-16 | 2007-06-21 | Diatos | Cell penetrating peptide conjugates for delivering of nucleic acids intocells |
AU2007204617A1 (en) | 2006-01-12 | 2007-07-19 | Massachusetts Institute Of Technology | Biodegradable elastomers |
CA2636867C (en) | 2006-01-13 | 2015-12-01 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Vaccines and immunotherapeutics using codon optimized il-15 and methods for using the same |
CN103215293B (zh) | 2006-01-27 | 2015-10-28 | 比奥根Ma公司 | Nogo受体拮抗剂 |
KR20130042043A (ko) | 2006-01-27 | 2013-04-25 | 아이시스 파마수티컬즈 인코포레이티드 | 6-변형된 바이시클릭 핵산 유사체 |
US20070178103A1 (en) | 2006-01-30 | 2007-08-02 | Fey Georg H | CD19-specific immunotoxin and treatment method |
US8476234B2 (en) | 2006-02-03 | 2013-07-02 | Prolor Biotech Inc. | Long-acting coagulation factors and methods of producing same |
US8946155B2 (en) | 2006-02-03 | 2015-02-03 | Opko Biologics Ltd. | Long-acting polypeptides and methods of producing and administering same |
US9458444B2 (en) | 2006-02-03 | 2016-10-04 | Opko Biologics Ltd. | Long-acting coagulation factors and methods of producing same |
DE102006007433A1 (de) | 2006-02-17 | 2007-08-23 | Curevac Gmbh | Adjuvanz in Form einer Lipid-modifizierten Nukleinsäure |
WO2007097561A1 (en) | 2006-02-20 | 2007-08-30 | Ewha University - Industry Collaboration Foundation | Peptide having cell membrane penetrating activity |
EP2319542B1 (en) | 2006-02-21 | 2018-03-21 | Nektar Therapeutics | Segmented degradable polymers and conjugates made therefrom |
WO2007100789A2 (en) | 2006-02-24 | 2007-09-07 | Wyeth | Gpat3 encodes a mammalian, microsomal acyl-coa:glycerol 3-phosphate acyltransferase |
CA2643322C (en) | 2006-02-24 | 2015-07-21 | Novartis Ag | Microparticles containing biodegradable polymer and cationic polysaccharide for use in immunogenic compositions |
EP3620469A1 (en) | 2006-02-28 | 2020-03-11 | Biogen MA Inc. | Methods of treating inflammatory and autoimmune diseases with natalizumab |
US7910152B2 (en) | 2006-02-28 | 2011-03-22 | Advanced Cardiovascular Systems, Inc. | Poly(ester amide)-based drug delivery systems with controlled release rate and morphology |
GB0605217D0 (en) | 2006-03-15 | 2006-04-26 | Novartis Ag | Method and compositions for assessing acute rejection |
WO2007109244A2 (en) | 2006-03-21 | 2007-09-27 | Morehouse School Of Medicine | Novel nanoparticles for delivery of active agents |
ES2776100T3 (es) | 2006-03-31 | 2020-07-29 | Massachusetts Inst Technology | Sistema para el suministro dirigido de agentes terapéuticos |
WO2007123793A2 (en) | 2006-04-04 | 2007-11-01 | Stc.Unm | Swellable particles for drug delivery |
US20070281336A1 (en) | 2006-04-14 | 2007-12-06 | Epicentre Technologies | Kits and methods for generating 5' capped RNA |
EP1852127A1 (en) | 2006-05-02 | 2007-11-07 | Charité - Universitätsmedizin Berlin | Use of a B-cell-depleting antibody for treatment of polyoma virus infections |
WO2007133807A2 (en) | 2006-05-15 | 2007-11-22 | Massachusetts Institute Of Technology | Polymers for functional particles |
MX2008014971A (es) | 2006-05-24 | 2008-12-05 | Serono Lab | Regimen de cladribine para tratar esclerosis multiple. |
WO2007143574A1 (en) | 2006-06-02 | 2007-12-13 | President And Fellows Of Harvard College | Protein surface remodeling |
EP2046383B1 (en) | 2006-07-04 | 2014-11-19 | Genmab A/S | Cd20 binding molecules for the treatment of copd |
ES2362376T3 (es) * | 2006-07-07 | 2011-07-04 | Aarhus Universitet | Nanopartículas para la administración de ácido nucleico. |
WO2008008752A2 (en) | 2006-07-12 | 2008-01-17 | Novartis Ag | Actinically crosslinkable copolymers for manufacturing contact lenses |
KR20090039748A (ko) | 2006-07-20 | 2009-04-22 | 노파르티스 아게 | 암의 치료, 진단 또는 검출을 위한 amigo-2 억제제 |
US8728527B2 (en) | 2006-07-24 | 2014-05-20 | Luminus Biosciences, Inc. | Solid nanoparticle formulation of water insoluble pharmaceutical substances with reduced ostwald ripening |
JP2009544754A (ja) | 2006-07-28 | 2009-12-17 | アプライド バイオシステムズ, エルエルシー | ジヌクレオチドmrnaキャップアナログ |
AU2007280690C1 (en) | 2006-07-31 | 2012-08-23 | Curevac Gmbh | Nucleic acid of formula (I): GIXmGn, or (II): CIXmCn, in particular as an immune-stimulating agent/adjuvant |
DE102006035618A1 (de) | 2006-07-31 | 2008-02-07 | Curevac Gmbh | Nukleinsäure der Formel (I): GlXmGn, insbesondere als immunstimulierendes Adjuvanz |
JP2010507567A (ja) | 2006-08-07 | 2010-03-11 | ジェンザイム・コーポレーション | 併用療法 |
US8658211B2 (en) | 2006-08-18 | 2014-02-25 | Arrowhead Madison Inc. | Polyconjugates for in vivo delivery of polynucleotides |
CA2661093A1 (en) | 2006-08-18 | 2008-02-21 | Nastech Pharmaceutical Company Inc. | Dicer substrate rna peptide conjugates and methods for rna therapeutics |
WO2008030988A2 (en) | 2006-09-06 | 2008-03-13 | The Regents Of The University Of California | Selectively targeted antimicrobial peptides and the use thereof |
PL2059532T3 (pl) | 2006-09-07 | 2013-05-31 | Crucell Holland Bv | Ludzkie cząsteczki wiążące zdolne do neutralizowania wirusa grypy H5N1 i ich zastosowania |
WO2008030557A2 (en) | 2006-09-08 | 2008-03-13 | Johns Hopkins University | Compositions and methods for enhancing transport through mucus |
ATE489048T1 (de) | 2006-09-08 | 2010-12-15 | Arbel Medical Ltd | Vorrichtung für kombinierte behandlung |
US8454948B2 (en) | 2006-09-14 | 2013-06-04 | Medgenics Medical Israel Ltd. | Long lasting drug formulations |
GB0619182D0 (en) | 2006-09-29 | 2006-11-08 | Leuven K U Res & Dev | Oligonucleotide arrays |
DK2068886T3 (da) | 2006-10-03 | 2013-11-18 | Tekmira Pharmaceuticals Corp | Lipidholdige præparater |
CN101583379B (zh) | 2006-10-05 | 2013-04-03 | 约翰斯霍普金斯大学 | 使用优良聚合物纳米粒子的水溶性差药物的水可分散性口服,肠胃外和局部制剂 |
DE102006051516A1 (de) * | 2006-10-31 | 2008-05-08 | Curevac Gmbh | (Basen-)modifizierte RNA zur Expressionssteigerung eines Proteins |
US8414927B2 (en) | 2006-11-03 | 2013-04-09 | Boston Scientific Scimed, Inc. | Cross-linked polymer particles |
US7999087B2 (en) | 2006-11-15 | 2011-08-16 | Agilent Technologies, Inc. | 2′-silyl containing thiocarbonate protecting groups for RNA synthesis |
US8242258B2 (en) | 2006-12-03 | 2012-08-14 | Agilent Technologies, Inc. | Protecting groups for RNA synthesis |
US8399007B2 (en) | 2006-12-05 | 2013-03-19 | Landec Corporation | Method for formulating a controlled-release pharmaceutical formulation |
ES2480491T3 (es) | 2006-12-06 | 2014-07-28 | Novartis Ag | Vacunas incluyendo antígeno de cuatro cepas de virus de la gripe |
US9034348B2 (en) | 2006-12-11 | 2015-05-19 | Chi2Gel Ltd. | Injectable chitosan mixtures forming hydrogels |
NZ707292A (en) | 2006-12-18 | 2017-06-30 | Acceleron Pharma Inc | Activin-actrii antagonists and uses for increasing red blood cell levels |
ES2447516T3 (es) | 2006-12-21 | 2014-03-12 | Stryker Corporation | Formulaciones de liberación sostenida que comprenden cristales BMP-7 |
DK2104739T3 (da) | 2006-12-21 | 2013-10-07 | Novozymes Inc | Modificerede messenger-RNA-stabiliseringssekvenser til ekspression af gener i bakterieceller |
CA2673029C (en) | 2006-12-22 | 2017-03-28 | Archemix Corp. | Materials and methods for the generation of transcripts comprising modified nucleotides |
DE102006061015A1 (de) | 2006-12-22 | 2008-06-26 | Curevac Gmbh | Verfahren zur Reinigung von RNA im präparativen Maßstab mittels HPLC |
US8057426B2 (en) | 2007-01-03 | 2011-11-15 | Medtronic Vascular, Inc. | Devices and methods for injection of multiple-component therapies |
US8338166B2 (en) | 2007-01-04 | 2012-12-25 | Lawrence Livermore National Security, Llc | Sorting, amplification, detection, and identification of nucleic acid subsequences in a complex mixture |
DE102007001370A1 (de) | 2007-01-09 | 2008-07-10 | Curevac Gmbh | RNA-kodierte Antikörper |
WO2008091799A2 (en) | 2007-01-22 | 2008-07-31 | The Trustees Of Columbia University In The City Of New York | Cell-based methods for identifying inhibitors of parkinson's disease-associated lrrk2 mutants |
US7884184B2 (en) | 2007-01-30 | 2011-02-08 | Epivax, Inc. | Regulatory T cell epitopes, compositions and uses thereof |
TW202021980A (zh) | 2007-02-02 | 2020-06-16 | 美商艾瑟勒朗法瑪公司 | 衍生自ActRIIB的變體與其用途 |
US8859229B2 (en) | 2007-02-02 | 2014-10-14 | Yale University | Transient transfection with RNA |
WO2008096370A2 (en) | 2007-02-05 | 2008-08-14 | Natco Pharma Limited | An efficient and novel purification method of recombinant hg-csf |
US8333799B2 (en) | 2007-02-12 | 2012-12-18 | C. R. Bard, Inc. | Highly flexible stent and method of manufacture |
WO2008103276A2 (en) | 2007-02-16 | 2008-08-28 | Merck & Co., Inc. | Compositions and methods for potentiated activity of biologicaly active molecules |
US8242087B2 (en) | 2007-02-27 | 2012-08-14 | K.U.Leuven Research & Development | Phosphate modified nucleosides useful as substrates for polymerases and as antiviral agents |
MY148472A (en) | 2007-03-02 | 2013-04-30 | Boehringer Ingelheim Pharma | Improvement of protein production |
EP1964922A1 (en) | 2007-03-02 | 2008-09-03 | Boehringer Ingelheim Pharma GmbH & Co. KG | Improvement of protein production |
US8029496B2 (en) | 2007-03-05 | 2011-10-04 | Ebrahim Versi | Method and device for delivering drug to the trigone of the bladder |
JP5249248B2 (ja) | 2007-03-05 | 2013-07-31 | ワシントン ユニバーシティー | 膜組み込みペプチドのためのナノ粒子輸送システム |
US20100297699A1 (en) | 2007-03-20 | 2010-11-25 | Millennium Pharmaceuticals, Inc. | Nucleic Acids Encoding Humanized Immunoglobulin That Binds Alpha4Beta7 Integrin |
EP2136788B1 (en) | 2007-03-30 | 2011-10-26 | Bind Biosciences, Inc. | Cancer cell targeting using nanoparticles |
WO2014064687A1 (en) | 2012-10-22 | 2014-05-01 | Deliversir Ltd | A system for delivering therapeutic agents into living cells and cells nuclei |
EP2152358B1 (en) | 2007-04-27 | 2011-03-02 | Echo Therapeutics, Inc. | Skin permeation device for analyte sensing or transdermal drug delivery |
WO2008134724A2 (en) | 2007-04-30 | 2008-11-06 | Smithkline Beecham Corporation | Methods for administering anti-il-5 antibodies |
WO2008135855A2 (en) | 2007-05-03 | 2008-11-13 | Pfizer Products Inc. | Nanoparticles comprising a cholesteryl ester transfer protein inhibitor and a nonionizable polymer |
HUE040417T2 (hu) | 2007-05-04 | 2019-03-28 | Marina Biotech Inc | Aminosavlipidek és alkalmazásuk |
US7682789B2 (en) * | 2007-05-04 | 2010-03-23 | Ventana Medical Systems, Inc. | Method for quantifying biomolecules conjugated to a nanoparticle |
WO2009023311A2 (en) | 2007-05-07 | 2009-02-19 | Alba Therapeutics Corporation | Transcutaneous delivery of therapeutic agents |
JP5296328B2 (ja) | 2007-05-09 | 2013-09-25 | 独立行政法人理化学研究所 | 1本鎖環状rnaおよびその製造方法 |
EP2160396B1 (en) | 2007-05-10 | 2018-11-21 | Agilent Technologies, Inc. | Thiocarbon-protecting groups for rna synthesis |
EP2068927B1 (en) | 2007-05-14 | 2015-10-21 | MedImmune, LLC | Methods of reducing eosinophil levels |
WO2008144365A2 (en) | 2007-05-17 | 2008-11-27 | Novartis Ag | Method for making dry powder compositions containing ds-rna based on supercritical fluid technology |
US20110002845A1 (en) | 2007-05-22 | 2011-01-06 | Novartis Ag | Methods of treating, diagnosing or detecting fgf21-associated disorders |
AU2008259907B2 (en) | 2007-05-30 | 2014-12-04 | Northwestern University | Nucleic acid functionalized nanoparticles for therapeutic applications |
US20100184051A1 (en) | 2007-05-30 | 2010-07-22 | The General Hospital Corporation | Methods of generating pluripotent cells from somatic cells |
ES2500515T3 (es) | 2007-06-19 | 2014-09-30 | Board Of Supervisors Of Louisiana State University And Agricultural And Mechanical College | Síntesis y utilización de análogos de fosforotioato antiinversos de la caperuza de ARN mensajero |
EP2173872B1 (en) | 2007-06-29 | 2014-04-02 | CellScript, Inc. | Copy dna and sense rna |
US8367318B2 (en) | 2007-07-23 | 2013-02-05 | Dharmacon, Inc. | Screening of micro-RNA cluster inhibitor pools |
US9144546B2 (en) | 2007-08-06 | 2015-09-29 | Clsn Laboratories, Inc. | Nucleic acid-lipopolymer compositions |
US20090042825A1 (en) | 2007-08-06 | 2009-02-12 | Majed Matar | Composition, method of preparation & application of concentrated formulations of condensed nucleic acids with a cationic lipopolymer |
CN101801445B (zh) | 2007-08-14 | 2013-04-17 | 弗雷德哈钦森癌症研究中心 | 用于递送治疗药物的针阵列组件 |
WO2009023770A1 (en) | 2007-08-15 | 2009-02-19 | Avellanet Francisco J | Biologically engineered stent |
EP2183390A1 (en) | 2007-08-23 | 2010-05-12 | Novartis Ag | Methods for detecting oligonucleotides |
WO2009030254A1 (en) | 2007-09-04 | 2009-03-12 | Curevac Gmbh | Complexes of rna and cationic peptides for transfection and for immunostimulation |
KR101234436B1 (ko) | 2007-09-05 | 2013-02-18 | 로슈 글리카트 아게 | 유형 ⅰ 및 유형 ⅱ 항-cd20 항체를 사용하는 병용 치료요법 |
US8506928B2 (en) | 2007-09-07 | 2013-08-13 | The Regents Of The University Of California | Methods and compounds for targeting tissues |
US20110086904A1 (en) | 2007-09-17 | 2011-04-14 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | GENERATION OF HYPERSTABLE mRNAs |
AU2008304313B2 (en) | 2007-09-26 | 2013-01-10 | Oregon Health & Science University | Cyclic undecapeptides and derivatives as multiple sclerosis therapies |
KR101541935B1 (ko) | 2007-09-26 | 2015-08-05 | 인트렉손 코포레이션 | 합성 5'utr, 발현 벡터, 및 전이유전자 발현의 증가방법 |
EP2042193A1 (en) | 2007-09-28 | 2009-04-01 | Biomay AG | RNA Vaccines |
US8470560B2 (en) | 2007-10-03 | 2013-06-25 | The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Army | CR-2 binding peptide P28 as molecular adjuvant for DNA vaccines |
WO2009046739A1 (en) | 2007-10-09 | 2009-04-16 | Curevac Gmbh | Composition for treating prostate cancer (pca) |
WO2009046738A1 (en) | 2007-10-09 | 2009-04-16 | Curevac Gmbh | Composition for treating lung cancer, particularly of non-small lung cancers (nsclc) |
US10736848B2 (en) * | 2007-10-12 | 2020-08-11 | Massachusetts Institute Of Technology | Vaccine nanotechnology |
US20090098118A1 (en) | 2007-10-15 | 2009-04-16 | Thomas Friess | Combination therapy of a type ii anti-cd20 antibody with an anti-bcl-2 active agent |
US20110091473A1 (en) | 2007-10-22 | 2011-04-21 | Genmab A/S | Novel antibody therapies |
WO2009058446A1 (en) | 2007-11-01 | 2009-05-07 | University Of Rochester | Recombinant factor viii having increased stability |
JP5559695B2 (ja) | 2007-11-09 | 2014-07-23 | ノバルティス アーゲー | 抗cd40抗体の使用 |
US8470771B2 (en) | 2007-11-14 | 2013-06-25 | Institute Of Microbiology, Chinese Academy Of Sciences | Method and medicament for inhibiting the infection of influenza virus |
US20090137945A1 (en) | 2007-11-28 | 2009-05-28 | Claire Marquez | Electro Collagen Induction Therapy Device |
TW200944231A (en) | 2007-11-30 | 2009-11-01 | Glaxo Group Ltd | Antigen-binding constructs |
EP2245159A2 (en) * | 2007-12-10 | 2010-11-03 | Alnylam Pharmaceuticals Inc. | Compositions and methods for inhibiting expression of factor vii gene |
EP2610340B1 (en) | 2007-12-11 | 2014-10-01 | The Scripps Research Institute | Compositions and methods related to mRNA translational enhancer elements |
US20090238772A1 (en) | 2007-12-13 | 2009-09-24 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Methods and compositions for prevention or treatment of rsv infection |
EP2072618A1 (en) | 2007-12-14 | 2009-06-24 | Johannes Gutenberg-Universität Mainz | Use of RNA for reprogramming somatic cells |
JP2011507897A (ja) | 2007-12-21 | 2011-03-10 | ジェネンテック, インコーポレイテッド | リツキシマブ抵抗性関節リウマチ患者の治療 |
EP2248906A4 (en) | 2008-01-23 | 2012-07-11 | Ajinomoto Kk | PROCESS FOR THE PREPARATION OF L-AMINO ACID |
EP2246422A4 (en) | 2008-01-24 | 2012-07-25 | Nat Inst Of Advanced Ind Scien | POLYNUCLEOTIDE OR ITS ANALOGUE, AND METHOD OF REGULATING GENE EXPRESSION USING THE POLYNUCLEOTIDE OR ITS ANALOGUE |
CA2710534C (en) | 2008-01-31 | 2018-09-04 | Curevac Gmbh | Nucleic acids of formula (i) (nuglxmgnnv)a and derivatives thereof as an immunostimulating agent/adjuvant |
EP2250252A2 (en) | 2008-02-11 | 2010-11-17 | Cambridge Enterprise Limited | Improved reprogramming of mammalian cells, and the cells obtained |
EP2240155B1 (en) | 2008-02-13 | 2012-06-06 | Intarcia Therapeutics, Inc | Devices, formulations, and methods for delivery of multiple beneficial agents |
DE102008009920A1 (de) | 2008-02-15 | 2009-08-20 | Aj Innuscreen Gmbh | Mobiles Gerät für die Nukleinsäureisolierung |
US20120027813A1 (en) | 2008-02-22 | 2012-02-02 | Novartis Vaccines And Diagnostics Srl | Adjuvanted influenza vaccines for pediatric use |
US8506966B2 (en) | 2008-02-22 | 2013-08-13 | Novartis Ag | Adjuvanted influenza vaccines for pediatric use |
US20100004313A1 (en) | 2008-02-29 | 2010-01-07 | Tbd | Modified Poloxamers for Gene Expression and Associated Methods |
PL2993186T3 (pl) | 2008-03-14 | 2020-02-28 | Biocon Limited | Przeciwciało monoklonalne i sposób jego otrzymywania |
US20100004315A1 (en) | 2008-03-14 | 2010-01-07 | Gregory Slobodkin | Biodegradable Cross-Linked Branched Poly(Alkylene Imines) |
EP2274009B1 (en) | 2008-03-28 | 2013-11-13 | GlaxoSmithKline LLC | Methods of treatment |
WO2009127230A1 (en) * | 2008-04-16 | 2009-10-22 | Curevac Gmbh | MODIFIED (m)RNA FOR SUPPRESSING OR AVOIDING AN IMMUNOSTIMULATORY RESPONSE AND IMMUNOSUPPRESSIVE COMPOSITION |
JP5539962B2 (ja) | 2008-04-25 | 2014-07-02 | ノースウェスタン、ユニバーシティ | コレステロールを隔離するのに適したナノ構造体 |
AU2009243187C1 (en) | 2008-04-28 | 2015-12-24 | President And Fellows Of Harvard College | Supercharged proteins for cell penetration |
WO2009134717A1 (en) | 2008-04-30 | 2009-11-05 | The Government Of The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services, Centers For Disease Control And Prevention | Chimeric west nile/dengue viruses |
US9394538B2 (en) | 2008-05-07 | 2016-07-19 | Shi-Lung Lin | Development of universal cancer drugs and vaccines |
US8231609B2 (en) | 2008-05-08 | 2012-07-31 | Minipumps, Llc | Drug-delivery pumps and methods of manufacture |
US8697098B2 (en) | 2011-02-25 | 2014-04-15 | South Dakota State University | Polymer conjugated protein micelles |
KR101661636B1 (ko) | 2008-05-13 | 2016-09-30 | 유니버시티 오브 워싱톤 | 세포로의 전달을 위한 이블록 공중합체 및 그의 폴리뉴클레오티드 복합체 |
US9738680B2 (en) | 2008-05-21 | 2017-08-22 | Rheinische Friedrich-Wilhelms-Universität Bonn | 5′ triphosphate oligonucleotide with blunt end and uses thereof |
EP2306993B1 (en) | 2008-05-26 | 2014-03-12 | Universität Zürich | Protamine/rna nanoparticles for immunostimulation |
KR101275950B1 (ko) | 2008-05-29 | 2013-06-25 | 한올바이오파마주식회사 | 증가된 단백질분해효소 저항성을 나타내는 변형된 에리스로포이에틴(epo) 폴리펩티드 및 이의 약제학적 조성물 |
FR2931824B1 (fr) | 2008-05-29 | 2014-11-28 | Centre Nat Rech Scient | Procede de synthese d'arn par voie chimique. |
US20100086922A1 (en) | 2008-05-30 | 2010-04-08 | Millennium Pharmaceuticals, Inc. | Assessment of chromosomal alterations to predict clinical outcome of bortezomib treatment |
EP2433664B1 (en) | 2008-06-06 | 2016-08-10 | Wockhardt Limited | A device for delivery of biological material |
PL215513B1 (pl) | 2008-06-06 | 2013-12-31 | Univ Warszawski | Nowe boranofosforanowe analogi dinukleotydów, ich zastosowanie, czasteczka RNA, sposób otrzymywania RNA oraz sposób otrzymywania peptydów lub bialka |
TWI451876B (zh) | 2008-06-13 | 2014-09-11 | Lilly Co Eli | 聚乙二醇化之離脯胰島素化合物 |
WO2010005726A2 (en) | 2008-06-16 | 2010-01-14 | Bind Biosciences Inc. | Therapeutic polymeric nanoparticles with mtor inhibitors and methods of making and using same |
EP2285350B1 (en) | 2008-06-16 | 2017-11-15 | Pfizer Inc | Methods for the preparation of targeting agent functionalized diblock copolymers for use in fabrication of therapeutic nanoparticles |
JP2012501966A (ja) | 2008-06-16 | 2012-01-26 | バインド バイオサイエンシズ インコーポレイテッド | ビンカアルカロイド含有治療用ポリマーナノ粒子並びにその製造方法及び使用方法 |
AU2009268923B2 (en) | 2008-06-16 | 2015-09-17 | Pfizer Inc. | Drug loaded polymeric nanoparticles and methods of making and using same |
US7799016B2 (en) | 2008-06-20 | 2010-09-21 | Pharmaco-Kinesis Corporation | Magnetic breather pump and a method for treating a brain tumor using the same |
JP2011525916A (ja) | 2008-06-25 | 2011-09-29 | エフイー3 メディカル, インコーポレイテッド | 治療有効量の鉄の経皮送達用のパッチおよび方法 |
US20100009424A1 (en) | 2008-07-14 | 2010-01-14 | Natasha Forde | Sonoporation systems and methods |
WO2010009065A2 (en) | 2008-07-15 | 2010-01-21 | Novartis Ag | Amphipathic peptide compositions |
US20110250237A1 (en) | 2008-07-15 | 2011-10-13 | O'hagan Derek | Immunogenic amphipathic peptide compositions |
US20110224447A1 (en) | 2008-08-18 | 2011-09-15 | Bowman Keith A | Novel Lipid Nanoparticles and Novel Components for Delivery of Nucleic Acids |
WO2010024871A1 (en) | 2008-08-26 | 2010-03-04 | Med Institute, Inc. | Balloon catheters having a plurality of needles for the injection of one or more therapeutic agents |
US20110172126A1 (en) | 2008-09-03 | 2011-07-14 | Xenome Ltd | Libraries of peptide conjugates and methods for making them |
JP5714490B2 (ja) | 2008-09-06 | 2015-05-07 | ケムジーンズ コーポレーション | Rna合成、リバース方向での合成rnaためのホスホラミダイト、及びrnaオリゴマーの合成のための5’から3’方向に対する結合形成によるオリゴヌクレオチドを調製する方法 |
WO2010027903A2 (en) | 2008-09-08 | 2010-03-11 | Fred Hutchinson Cancer Research Center | Lung cancer diagnosis |
WO2010030763A2 (en) | 2008-09-10 | 2010-03-18 | Bind Biosciences, Inc. | High throughput fabrication of nanoparticles |
TW201014605A (en) | 2008-09-16 | 2010-04-16 | Genentech Inc | Methods for treating progressive multiple sclerosis |
US20120021519A1 (en) | 2008-09-19 | 2012-01-26 | Presidents And Fellows Of Harvard College | Efficient induction of pluripotent stem cells using small molecule compounds |
WO2010037408A1 (en) | 2008-09-30 | 2010-04-08 | Curevac Gmbh | Composition comprising a complexed (m)rna and a naked mrna for providing or enhancing an immunostimulatory response in a mammal and uses thereof |
WO2010042490A1 (en) | 2008-10-06 | 2010-04-15 | Boston Medical Center Corporation | A single lentiviral vector system for induced pluripotent (ips) stem cells derivation |
AU2009303345B2 (en) | 2008-10-09 | 2015-08-20 | Arbutus Biopharma Corporation | Improved amino lipids and methods for the delivery of nucleic acids |
US9801722B2 (en) | 2008-10-10 | 2017-10-31 | Peter Forsell | Infusion of drugs |
US8535655B2 (en) | 2008-10-10 | 2013-09-17 | Polyactiva Pty Ltd. | Biodegradable polymer—bioactive moiety conjugates |
US8343498B2 (en) | 2008-10-12 | 2013-01-01 | Massachusetts Institute Of Technology | Adjuvant incorporation in immunonanotherapeutics |
ITVI20080239A1 (it) | 2008-10-14 | 2010-04-15 | Antoine Assaf | Apparato medicale per iniezioni multiple. |
WO2010047765A2 (en) | 2008-10-20 | 2010-04-29 | Massachussetts Institute Of Technology | Nanostructures for drug delivery |
US20120015899A1 (en) | 2008-10-25 | 2012-01-19 | Plant Bioscience, Limited | Modified plant virus particles and uses therefor |
JP6087504B2 (ja) | 2008-11-07 | 2017-03-01 | マサチューセッツ インスティテュート オブ テクノロジー | アミノアルコールリピドイドおよびその使用 |
HUE037082T2 (hu) | 2008-11-10 | 2018-08-28 | Arbutus Biopharma Corp | Új lipidek és készítmények terápiás hatóanyagok szállítására |
WO2010057160A1 (en) | 2008-11-17 | 2010-05-20 | Enzon Pharmaceuticals, Inc. | Releasable fusogenic lipids for nucleic acids delivery systems |
CA2780482A1 (en) | 2008-11-17 | 2010-05-10 | Anil K. Sood | Hdl particles for delivery of nucleic acids |
KR101073875B1 (ko) | 2008-11-28 | 2011-10-14 | 한국생명공학연구원 | 대장암 진단 마커 및 이를 이용한 대장암 진단방법 |
EP2191840A1 (en) | 2008-11-28 | 2010-06-02 | Sanofi-Aventis | Antitumor combinations containing antibodies recognizing specifically CD38 and melphalan |
AU2009324534B2 (en) | 2008-12-10 | 2015-07-30 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | GNAQ targeted dsRNA compositions and methods for inhibiting expression |
EP2196476A1 (en) | 2008-12-10 | 2010-06-16 | Novartis Ag | Antibody formulation |
WO2010068866A2 (en) | 2008-12-12 | 2010-06-17 | Bind Biosciences | Therapeutic particles suitable for parenteral administration and methods of making and using same |
EP2376091A4 (en) | 2008-12-12 | 2012-08-01 | Univ California | NEW TARGETS FOR THE TREATMENT OF HYPERCHOLESTEROLEMIA |
JP2012512175A (ja) | 2008-12-15 | 2012-05-31 | バインド バイオサイエンシズ インコーポレイテッド | 治療薬を徐放するための長時間循環性ナノ粒子 |
CN102137713A (zh) * | 2008-12-24 | 2011-07-27 | 生物制药开发股份有限公司 | 脂质体的制备方法及胆固醇溶解方法 |
WO2010080724A1 (en) | 2009-01-12 | 2010-07-15 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Novel lipid nanoparticles and novel components for delivery of nucleic acids |
EP2405937A4 (en) | 2009-01-16 | 2012-06-20 | Glaxosmithkline Llc | CANCER THERAPY USING A COMBINATION OF BENDAMUSTIN AND AN ANTIBODY AGAINST CD20 |
WO2010084371A1 (en) | 2009-01-26 | 2010-07-29 | Mitoprod | Novel circular interfering rna molecules |
US20120101148A1 (en) | 2009-01-29 | 2012-04-26 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | lipid formulation |
US8669085B2 (en) | 2009-02-05 | 2014-03-11 | Ut-Battelle, Llc | Transformation of gram positive bacteria by sonoporation |
WO2010088927A1 (en) | 2009-02-09 | 2010-08-12 | Curevac Gmbh | Use of pei for the improvement of endosomal release and expression of transfected nucleic acids, complexed with cationic or polycationic compounds |
US20140141089A1 (en) | 2009-02-11 | 2014-05-22 | Colorado School Of Mines | Nanoparticles, Compositions Thereof, and Methods of Use, and Methods of Making the Same |
SG174150A1 (en) | 2009-02-24 | 2011-10-28 | Scripps Research Inst | Reengineering mrna primary structure for enhanced protein production |
WO2010141135A2 (en) | 2009-03-05 | 2010-12-09 | Trustees Of Boston University | Bacteriophages expressing antimicrobial peptides and uses thereof |
WO2010102065A1 (en) | 2009-03-05 | 2010-09-10 | Bend Research, Inc. | Pharmaceutical compositions of dextran polymer derivatives |
AU2010223888A1 (en) | 2009-03-13 | 2011-10-06 | Egen, Inc. | Compositions and methods for the delivery of biologically active RNAs |
CN104922676B (zh) | 2009-03-20 | 2019-03-12 | Clsn实验室股份有限公司 | 聚胺衍生物 |
WO2010111290A1 (en) | 2009-03-23 | 2010-09-30 | University Of Utah Research Foundation | Methods and compositions related to modified guanine bases for controlling off-target effects in rna interference |
JP5622254B2 (ja) | 2009-03-31 | 2014-11-12 | 国立大学法人東京大学 | 二本鎖リボ核酸ポリイオンコンプレックス |
EP3281947B1 (en) | 2009-04-03 | 2020-02-12 | The University of Chicago | Compositions and methods related to protein a (spa) variants |
WO2010120266A1 (en) | 2009-04-13 | 2010-10-21 | Inserm, Institut National De La Sante Et De La Recherche Medicale | Hpv particles and uses thereof |
AU2010236257A1 (en) | 2009-04-17 | 2011-11-03 | Biogen Idec Ma Inc. | Compositions and methods to treat acute myelogenous leukemia |
US20110223201A1 (en) | 2009-04-21 | 2011-09-15 | Selecta Biosciences, Inc. | Immunonanotherapeutics Providing a Th1-Biased Response |
WO2010123501A1 (en) | 2009-04-22 | 2010-10-28 | Massachusetts Institute Of Technology | Innate immune suppression enables repeated delivery of long rna molecules |
JP5766179B2 (ja) | 2009-04-27 | 2015-08-19 | ノバルティス アーゲー | 筋肉増殖を増加させるための組成物および方法 |
US8715736B2 (en) | 2009-04-30 | 2014-05-06 | Florida Agricultural And Mechanical University | Nanoparticle formulations for skin delivery |
WO2010127159A2 (en) | 2009-04-30 | 2010-11-04 | Intezyne Technologies, Incorporated | Polymeric micelles for polynucleotide encapsulation |
JP5769701B2 (ja) | 2009-05-05 | 2015-08-26 | テクミラ ファーマシューティカルズ コーポレイションTekmira Pharmaceuticals Corporation | 脂質組成物 |
DE202009007116U1 (de) | 2009-05-18 | 2010-10-14 | Amoena Medizin-Orthopädie-Technik GmbH | Antidekubituskissen |
AU2010254550B2 (en) | 2009-05-27 | 2015-10-15 | Selecta Biosciences, Inc. | Targeted synthetic nanocarriers with pH sensitive release of immunomodulatory agents |
US8574835B2 (en) | 2009-05-29 | 2013-11-05 | Life Technologies Corporation | Scaffolded nucleic acid polymer particles and methods of making and using |
DK2440183T3 (en) | 2009-06-10 | 2018-10-01 | Arbutus Biopharma Corp | Improved lipid formulation |
EP2440556A1 (en) | 2009-06-10 | 2012-04-18 | Vertex Pharmaceuticals Incorporated | Inhibitors of phosphatidylinositol 3-kinase |
EA201270019A1 (ru) | 2009-06-15 | 2012-06-29 | Элнилэм Фармасьютикалз, Инк. | Двуцепочечная рнк, включенная в липидный состав и мишенью которой является ген pcsk9 |
US20110097329A1 (en) | 2009-06-26 | 2011-04-28 | Massachusetts Institute Of Technology | Compositions and methods for treating cancer and modulating stress granule formation |
WO2011000106A1 (en) | 2009-07-01 | 2011-01-06 | Protiva Biotherapeutics, Inc. | Improved cationic lipids and methods for the delivery of therapeutic agents |
CA2767127A1 (en) | 2009-07-01 | 2011-01-06 | Protiva Biotherapeutics, Inc. | Novel lipid formulations for delivery of therapeutic agents to solid tumors |
US20110300205A1 (en) | 2009-07-06 | 2011-12-08 | Novartis Ag | Self replicating rna molecules and uses thereof |
EP2459231B1 (de) | 2009-07-31 | 2016-06-08 | Ethris Gmbh | Rna mit einer kombination aus unmodifizierten und modifizierten nucleotiden zur proteinexpression |
EP2281579A1 (en) | 2009-08-05 | 2011-02-09 | BioNTech AG | Vaccine composition comprising 5'-Cap modified RNA |
WO2011022460A1 (en) | 2009-08-20 | 2011-02-24 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Novel cationic lipids with various head groups for oligonucleotide delivery |
EP2470554B1 (en) | 2009-08-26 | 2017-06-28 | Selecta Biosciences, Inc. | Compositions that induce t cell help |
US20110053829A1 (en) | 2009-09-03 | 2011-03-03 | Curevac Gmbh | Disulfide-linked polyethyleneglycol/peptide conjugates for the transfection of nucleic acids |
US20110070227A1 (en) | 2009-09-18 | 2011-03-24 | Anna-Marie Novotney-Barry | Treatment of Autoimmune and Inflammatory Diseases |
EP2485770A4 (en) | 2009-10-08 | 2013-04-10 | Merck Sharp & Dohme | NEW CATIONIC LIPIDS WITH SHORT LIPID CHAINS FOR ADMINISTRATION OF OLIGONUCLEOTIDES |
US8859284B2 (en) | 2009-10-22 | 2014-10-14 | The United States Of America, As Represented By The Secretary Of The Navy | Delivery of nanoparticles to neurons |
RU2573409C2 (ru) | 2009-11-04 | 2016-01-20 | Дзе Юниверсити Оф Бритиш Коламбиа | Содержащие нуклеиновые кислоты липидные частицы и относящиеся к ним способы |
US8449916B1 (en) | 2009-11-06 | 2013-05-28 | Iowa State University Research Foundation, Inc. | Antimicrobial compositions and methods |
WO2011060250A1 (en) | 2009-11-13 | 2011-05-19 | Bend Research, Inc. | Cationic dextran polymer derivatives |
US9415113B2 (en) | 2009-11-18 | 2016-08-16 | University Of Washington | Targeting monomers and polymers having targeting blocks |
US8530429B2 (en) | 2009-11-24 | 2013-09-10 | Arch Cancer Therapeutics, Inc. | Brain tumor targeting peptides and methods |
US20110245756A1 (en) | 2009-12-03 | 2011-10-06 | Rishi Arora | Devices for material delivery, electroporation, sonoporation, and/or monitoring electrophysiological activity |
DE102009056884B4 (de) | 2009-12-03 | 2021-03-18 | Novartis Ag | Impfstoff-Adjuvantien und verbesserte Verfahren zur Herstellung derselben |
CN102791285A (zh) | 2009-12-06 | 2012-11-21 | 比奥根艾迪克依蒙菲利亚公司 | 因子VIII-Fc嵌合多肽和杂交多肽及其使用方法 |
US20130189741A1 (en) | 2009-12-07 | 2013-07-25 | Cellscript, Inc. | Compositions and methods for reprogramming mammalian cells |
KR102505097B1 (ko) | 2009-12-07 | 2023-03-02 | 더 트러스티스 오브 더 유니버시티 오브 펜실베니아 | 세포 리프로그래밍을 위한 정제된 변형 rna를 포함하는 rna 제제 |
US9687550B2 (en) | 2009-12-07 | 2017-06-27 | Arbutus Biopharma Corporation | Compositions for nucleic acid delivery |
WO2011069529A1 (en) | 2009-12-09 | 2011-06-16 | Curevac Gmbh | Mannose-containing solution for lyophilization, transfection and/or injection of nucleic acids |
WO2011069528A1 (en) | 2009-12-09 | 2011-06-16 | Curevac Gmbh | Lyophilization of nucleic acids in lactate-containing solutions |
ES2721898T3 (es) | 2009-12-11 | 2019-08-06 | Pfizer | Formulaciones estables para liofilizar partículas terapéuticas |
WO2011084513A2 (en) | 2009-12-15 | 2011-07-14 | Bind Biosciences, Inc. | Therapeutic polymeric nanoparticle compositions with high glass transition temperature or high molecular weight copolymers |
JP5898627B2 (ja) | 2009-12-15 | 2016-04-06 | バインド セラピューティックス インコーポレイテッド | エポチロンを含む治療用ポリマーナノ粒子ならびにそれを製造および使用する方法 |
EP2512487A4 (en) | 2009-12-15 | 2013-08-07 | THERAPEUTIC POLYMERNANOPARTICLES WITH CORTICOSTEROIDS AND METHOD FOR THE PRODUCTION AND USE THEREOF | |
EP2512522A4 (en) | 2009-12-16 | 2013-09-25 | Brigham & Womens Hospital | PARTICULARS FOR THE DELIVERY OF SEVERAL ACTIVE SUBSTANCES |
DE102009058769A1 (de) | 2009-12-16 | 2011-06-22 | MagForce Nanotechnologies AG, 10589 | Temperaturabhängige Aktivierung von katalytischen Nukleinsäuren zur kontrollierten Wirkstofffreisetzung |
ES2749426T3 (es) | 2009-12-18 | 2020-03-20 | Univ British Columbia | Métodos y composiciones para administración de ácidos nucleicos |
EP2338520A1 (de) | 2009-12-21 | 2011-06-29 | Ludwig Maximilians Universität | Konjugat mit Zielfindungsligand und dessen Verwendung |
EP2516010A2 (en) | 2009-12-23 | 2012-10-31 | Novartis AG | Lipids, lipid compositions, and methods of using them |
WO2011085231A2 (en) | 2010-01-08 | 2011-07-14 | Selecta Biosciences, Inc. | Synthetic virus-like particles conjugated to human papillomavirus capsid peptides for use as vaccines |
WO2011088309A1 (en) | 2010-01-14 | 2011-07-21 | Regulus Therapeutics Inc. | Microrna compositions and methods |
EP2525781A1 (en) | 2010-01-22 | 2012-11-28 | Schering Corporation | Novel cationic lipids for oligonucleotide delivery |
JP5988435B2 (ja) | 2010-01-24 | 2016-09-07 | ノバルティス アーゲー | 放射線照射された生分解性微粒子 |
NZ601737A (en) | 2010-02-24 | 2013-06-28 | Arrowhead Res Corp | Compositions for targeted delivery of sirna |
US8889193B2 (en) | 2010-02-25 | 2014-11-18 | The Johns Hopkins University | Sustained delivery of therapeutic agents to an eye compartment |
US20130133483A1 (en) | 2010-03-08 | 2013-05-30 | University Of Rochester | Synthesis of Nanoparticles Using Reducing Gases |
WO2011116072A1 (en) | 2010-03-16 | 2011-09-22 | Escape Therapeutics, Inc. | Hybrid hydrogel scaffold compositions and methods of use |
WO2011116107A2 (en) | 2010-03-16 | 2011-09-22 | University Of Utah Research Foundation | Cleavable modifications to reducible poly (amido ethylenimines)s to enhance nucleotide delivery |
US20130005797A1 (en) | 2010-03-18 | 2013-01-03 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Endosomolytic poly(amidoamine) disulfide polymers for the delivery of oligonucleotides |
US20110230816A1 (en) | 2010-03-18 | 2011-09-22 | Tyco Healthcare Group Lp | Gels for Transdermal Delivery |
US9149432B2 (en) | 2010-03-19 | 2015-10-06 | Massachusetts Institute Of Technology | Lipid vesicle compositions and methods of use |
GB201005005D0 (en) | 2010-03-25 | 2010-05-12 | Angeletti P Ist Richerche Bio | New vaccine |
WO2011120053A1 (en) | 2010-03-26 | 2011-09-29 | Mersana Therapeutics, Inc. | Modified polymers for delivery of polynucleotides, method of manufacture, and methods of use thereof |
WO2011119262A1 (en) | 2010-03-26 | 2011-09-29 | Cerulean Pharma Inc. | Methods and systems for generating nanoparticles |
US20110247090A1 (en) | 2010-04-02 | 2011-10-06 | Intrexon Corporation | Synthetic 5'UTRs, Expression Vectors, and Methods for Increasing Transgene Expression |
US8808699B2 (en) | 2010-04-05 | 2014-08-19 | The University Of Chicago | Compositions and methods related to protein A (SpA) antibodies as an enhancer of immune response |
JP2013529894A (ja) | 2010-04-07 | 2013-07-25 | ノバルティス アーゲー | パルボウイルスb19のウイルス様粒子を生成するための方法 |
WO2011127255A1 (en) | 2010-04-08 | 2011-10-13 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Preparation of lipid nanoparticles |
WO2011127456A2 (en) | 2010-04-09 | 2011-10-13 | Pacira Pharmaceuticals, Inc. | Method for formulating large diameter synthetic membrane vesicles |
CA2795695A1 (en) | 2010-04-09 | 2011-10-13 | The University Of Tokyo | Microrna-controlled recombinant vaccinia virus and use thereof |
US20110262491A1 (en) | 2010-04-12 | 2011-10-27 | Selecta Biosciences, Inc. | Emulsions and methods of making nanocarriers |
KR101196667B1 (ko) | 2010-04-15 | 2012-11-02 | 포항공과대학교 산학협력단 | 피에이치 민감성 금속 나노 입자를 이용한 항암제 전달 시스템 |
US11225655B2 (en) | 2010-04-16 | 2022-01-18 | Nuevolution A/S | Bi-functional complexes and methods for making and using such complexes |
EP2377938A1 (en) | 2010-04-16 | 2011-10-19 | Eukarys | Capping-prone RNA polymerase enzymes and their applications |
EP3072961A1 (en) | 2010-04-16 | 2016-09-28 | Children's Medical Center Corporation | Sustained polypeptide expression from synthetic, modified rnas and uses thereof |
US20130260460A1 (en) | 2010-04-22 | 2013-10-03 | Isis Pharmaceuticals Inc | Conformationally restricted dinucleotide monomers and oligonucleotides |
MX2012012567A (es) | 2010-04-28 | 2012-11-21 | Kimberly Clark Co | Metodo para aumentar la permeabilidad de una barrera epitelial. |
US9629979B2 (en) | 2010-04-28 | 2017-04-25 | Sanovas, Inc. | Pressure/Vacuum actuated catheter drug delivery probe |
US20130156845A1 (en) | 2010-04-29 | 2013-06-20 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Lipid formulated single stranded rna |
JP2013524840A (ja) | 2010-04-30 | 2013-06-20 | ノバルティス アーゲー | 脆弱x症候群(fxs)の治療において有用な予測マーカー |
WO2011143230A1 (en) | 2010-05-10 | 2011-11-17 | Alnylam Pharmaceuticals | Methods and compositions for delivery of active agents |
JP2013527856A (ja) | 2010-05-12 | 2013-07-04 | プロチバ バイオセラピューティクス インコーポレイティッド | 陽イオン性脂質およびその使用方法 |
WO2011141704A1 (en) | 2010-05-12 | 2011-11-17 | Protiva Biotherapeutics, Inc | Novel cyclic cationic lipids and methods of use |
EP2387999A1 (en) | 2010-05-21 | 2011-11-23 | CureVac GmbH | Histidine-containing solution for transfection and/or injection of nucleic acids and uses thereof |
WO2011149733A2 (en) | 2010-05-24 | 2011-12-01 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Novel amino alcohol cationic lipids for oligonucleotide delivery |
AU2011258156B2 (en) | 2010-05-26 | 2016-11-24 | Selecta Biosciences, Inc. | Multivalent synthetic nanocarrier vaccines |
JP5957646B2 (ja) | 2010-06-04 | 2016-07-27 | サーナ・セラピューティクス・インコーポレイテッドSirna Therapeutics,Inc. | オリゴヌクレオチド送達のための新規な低分子量カチオン性脂質 |
AU2011267078B2 (en) | 2010-06-14 | 2014-09-25 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Cell-penetrating peptides and uses therof |
WO2011163264A2 (en) | 2010-06-21 | 2011-12-29 | Candela Corporation | Driving microneedle arrays into skin and delivering rf energy |
WO2011163121A1 (en) | 2010-06-21 | 2011-12-29 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Multifunctional copolymers for nucleic acid delivery |
CA2803239A1 (en) | 2010-06-25 | 2011-12-29 | Novartis Ag | Combinations of meningococcal factor h binding proteins |
KR101752506B1 (ko) | 2010-07-01 | 2017-06-30 | 포항공과대학교 산학협력단 | 세균유래 마이크로베시클을 이용한 암치료 및 암진단 방법 |
AU2011274367B2 (en) | 2010-07-02 | 2015-04-23 | The University Of Chicago | Compositions and methods related to protein A (SpA) variants |
KR101130137B1 (ko) | 2010-07-02 | 2012-03-28 | 연세대학교 산학협력단 | 발광다이오드 모듈 |
US8353871B2 (en) | 2010-07-05 | 2013-01-15 | Roller Jet Ltd. | Drug delivery device with needles and roller |
US20130171241A1 (en) | 2010-07-06 | 2013-07-04 | Novartis Ag | Liposomes with lipids having an advantageous pka-value for rna delivery |
US9770463B2 (en) | 2010-07-06 | 2017-09-26 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | Delivery of RNA to different cell types |
US9192661B2 (en) | 2010-07-06 | 2015-11-24 | Novartis Ag | Delivery of self-replicating RNA using biodegradable polymer particles |
NZ606591A (en) | 2010-07-06 | 2015-02-27 | Novartis Ag | Cationic oil-in-water emulsions |
DK2591114T3 (en) | 2010-07-06 | 2016-08-29 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | Immunization of large mammals with low doses of RNA |
LT2590676T (lt) | 2010-07-06 | 2016-10-25 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | Viriono tipo išnešiojančios dalelės, skirtos besireplikuojančioms rnr molekulėms |
LT3243526T (lt) | 2010-07-06 | 2020-02-10 | Glaxosmithkline Biologicals S.A. | Rnr pristatymas, skirtas keleto imuninio atsako paleidimui |
WO2012006623A1 (en) | 2010-07-09 | 2012-01-12 | Biogen Idec Hemophilia Inc. | Systems for factor viii processing and methods thereof |
CN103140237A (zh) | 2010-07-09 | 2013-06-05 | 比奥根艾迪克依蒙菲利亚公司 | 因子ix多肽及其使用方法 |
US20130177523A1 (en) | 2010-07-13 | 2013-07-11 | University Of Utah Research Foundation | Gold particles and methods of making and using the same in cancer treatment |
GB201012410D0 (en) | 2010-07-23 | 2010-09-08 | Medical Res Council | Intracellular immunity |
DE102010032758B4 (de) | 2010-07-29 | 2012-02-23 | Fujitsu Technology Solutions Intellectual Property Gmbh | Computersystem, Verfahren zum Programmieren einer Echtzeituhr und Computerprogrammprodukt |
EP2449113B8 (en) | 2010-07-30 | 2015-11-25 | CureVac AG | Complexation of nucleic acids with disulfide-crosslinked cationic components for transfection and immunostimulation |
US20130190626A1 (en) | 2010-08-02 | 2013-07-25 | Curtin University Of Technology | Determining location of, and imaging, a subsurface boundary |
EP3578205A1 (en) | 2010-08-06 | 2019-12-11 | ModernaTX, Inc. | A pharmaceutical formulation comprising engineered nucleic acids and medical use thereof |
WO2012021516A2 (en) | 2010-08-09 | 2012-02-16 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Nanoparticle-oligonucletide hybrid structures and methods of use thereof |
WO2012019630A1 (en) | 2010-08-13 | 2012-02-16 | Curevac Gmbh | Nucleic acid comprising or coding for a histone stem-loop and a poly(a) sequence or a polyadenylation signal for increasing the expression of an encoded protein |
ES2531577T3 (es) | 2010-08-20 | 2015-03-17 | Novartis Ag | Conjuntos de agujas para la administración de vacuna soluble contra la gripe |
CA2808901A1 (en) | 2010-08-20 | 2012-02-23 | Cerulean Pharma Inc. | Conjugates, particles, compositions, and related methods |
WO2012024595A2 (en) | 2010-08-20 | 2012-02-23 | University Of Washington | Circumferential aerosol device for delivering drugs to olfactory epithelium and brain |
US20120058154A1 (en) | 2010-08-20 | 2012-03-08 | Selecta Biosciences, Inc. | Synthetic nanocarrier vaccines comprising peptides obtained or derived from human influenza a virus m2e |
JP2013538211A (ja) | 2010-08-23 | 2013-10-10 | セレクタ バイオサイエンシーズ インコーポレーテッド | 抗原に対する免疫反応を誘発する標的マルチエピトープ剤形 |
WO2012025129A1 (en) | 2010-08-24 | 2012-03-01 | Gkn Driveline International Gmbh | Boot for joints, especially for constant velocity joints, with a transition area |
ES2918649T3 (es) | 2010-08-31 | 2022-07-19 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | Liposomas pegilados para el suministro de ARN que codifica un inmunógeno |
JP6165629B2 (ja) | 2010-08-31 | 2017-07-19 | キヤノン ユー.エス. ライフ サイエンシズ, インコーポレイテッドCanon U.S. Life Sciences, Inc. | 流体混合及びチップインターフェースのための方法、デバイス、及びシステム |
KR20130100278A (ko) | 2010-08-31 | 2013-09-10 | 머크 샤프 앤드 돔 코포레이션 | 올리고뉴클레오티드의 전달을 위한 신규 단일 화학 존재물 및 방법 |
PT3556396T (pt) | 2010-08-31 | 2022-07-04 | Scripps Research Inst | Anticorpos neutralizantes do vírus da imunodeficiência humana (vih) |
RU2577983C2 (ru) | 2010-08-31 | 2016-03-20 | Новартис Аг | Липиды, подходящие для липосомной доставки кодирующей белок рнк |
MX341989B (es) | 2010-08-31 | 2016-09-09 | Novartis Ag * | Liposomas pequeños para el suministro de arn que codifica el inmunogeno. |
WO2012031205A2 (en) | 2010-09-03 | 2012-03-08 | The Brigham And Women's Hospital, Inc. | Lipid-polymer hybrid particles |
WO2012034067A1 (en) | 2010-09-09 | 2012-03-15 | The University Of Chicago | Methods and compositions involving protective staphylococcal antigens |
WO2012034077A2 (en) | 2010-09-09 | 2012-03-15 | The University Of Chicago | Compositions and methods related to attenuated staphylococcal strains |
WO2012039979A2 (en) | 2010-09-10 | 2012-03-29 | The Johns Hopkins University | Rapid diffusion of large polymeric nanoparticles in the mammalian brain |
US8466122B2 (en) | 2010-09-17 | 2013-06-18 | Protiva Biotherapeutics, Inc. | Trialkyl cationic lipids and methods of use thereof |
EP2618847A4 (en) | 2010-09-20 | 2014-04-02 | Merck Sharp & Dohme | NOVEL CATIONIC LIPIDS WITH LOW MOLECULAR WEIGHT FOR OLIGONUCLEOTIDE DELIVERY |
WO2012038448A1 (en) | 2010-09-21 | 2012-03-29 | Riboxx Gmbh | Method for synthesizing rna using dna template |
EP3412279B1 (en) | 2010-09-24 | 2021-02-17 | The Brigham and Women's Hospital, Inc. | Nanostructured gels capable of controlled release of encapsulated agents |
WO2012050975A2 (en) | 2010-09-29 | 2012-04-19 | The University Of North Carolina At Chapel Hill | Novel circular mammalian rna molecules and uses thereof |
CN103260611A (zh) | 2010-09-30 | 2013-08-21 | 默沙东公司 | 用于寡核苷酸递送的低分子量阳离子脂质 |
US20120237975A1 (en) | 2010-10-01 | 2012-09-20 | Jason Schrum | Engineered nucleic acids and methods of use thereof |
US10078075B2 (en) | 2011-12-09 | 2018-09-18 | Vanderbilt University | Integrated organ-on-chip systems and applications of the same |
WO2012051220A1 (en) | 2010-10-11 | 2012-04-19 | Wichita State University | Composite magnetic nanoparticle drug delivery system |
BR112013008700B8 (pt) | 2010-10-11 | 2022-10-04 | Novartis Ag | Molécula de rna auto-replicante, partícula de replicon de alfavírus, composição, molécula de dna recombinante, uso da molécula de rna auto-replicante |
EP2629802B1 (en) | 2010-10-21 | 2019-12-04 | Sirna Therapeutics, Inc. | Low molecular weight cationic lipids for oligonucleotide delivery |
US20150056300A1 (en) | 2010-10-22 | 2015-02-26 | Bind Therapeutics, Inc. | Therapeutic nanoparticles with high molecular weight copolymers |
WO2012154202A1 (en) | 2010-10-29 | 2012-11-15 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Recombinant subunit dengue virus vaccine |
EP2635254B1 (en) | 2010-11-05 | 2019-05-15 | The John Hopkins University | Compositions and methods relating to reduced mucoadhesion |
WO2012061259A2 (en) | 2010-11-05 | 2012-05-10 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Novel low molecular weight cyclic amine containing cationic lipids for oligonucleotide delivery |
US9994443B2 (en) | 2010-11-05 | 2018-06-12 | Selecta Biosciences, Inc. | Modified nicotinic compounds and related methods |
EP2638162B1 (en) | 2010-11-09 | 2016-08-10 | The Regents of The University of California | Skin permeating and cell entering (space) peptides and methods of use thereof |
SI3536703T1 (sl) | 2010-11-12 | 2022-04-29 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Konsenzni prostatični antigeni, molekule nukleinske kisline, ki jih kodirajo in uporabe le-teh |
WO2012068295A1 (en) | 2010-11-16 | 2012-05-24 | Selecta Biosciences, Inc. | Immunostimulatory oligonucleotides |
CA2818353A1 (en) | 2010-11-17 | 2012-05-24 | Aduro Biotech | Methods and compositions for inducing an immune response to egfrviii |
EP3213770B1 (en) | 2010-11-19 | 2021-02-24 | Idera Pharmaceuticals, Inc. | Immune regulatory oligonucleotide (iro) compounds to modulate toll-like receptor based immune response |
WO2012068187A1 (en) | 2010-11-19 | 2012-05-24 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Poly(amide) polymers for the delivery of oligonucleotides |
WO2012075040A2 (en) | 2010-11-30 | 2012-06-07 | Shire Human Genetic Therapies, Inc. | mRNA FOR USE IN TREATMENT OF HUMAN GENETIC DISEASES |
WO2012072096A1 (en) | 2010-12-03 | 2012-06-07 | Biontech Ag | Method for cellular rna expression |
EP2651445A2 (en) | 2010-12-16 | 2013-10-23 | SPRNA GmbH | Pharmaceutical composition consisting of rna having alkali metal as counter ion and formulated with dications |
US8501930B2 (en) | 2010-12-17 | 2013-08-06 | Arrowhead Madison Inc. | Peptide-based in vivo siRNA delivery system |
US8901101B2 (en) | 2010-12-17 | 2014-12-02 | Sirna Therapeutics, Inc. | Membrane lytic poly(amido amine) polymers for the delivery of oligonucleotides |
WO2012088381A2 (en) | 2010-12-22 | 2012-06-28 | President And Fellows Of Harvard College | Continuous directed evolution |
WO2012089225A1 (en) | 2010-12-29 | 2012-07-05 | Curevac Gmbh | Combination of vaccination and inhibition of mhc class i restricted antigen presentation |
CA2976966C (en) | 2010-12-29 | 2021-11-09 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Small molecule conjugates for intracellular delivery of nucleic acids |
WO2012092552A1 (en) | 2010-12-30 | 2012-07-05 | Selecta Biosciences, Inc. | Synthetic nanocarriers with reactive groups that release biologically active agents |
WO2012092569A2 (en) | 2010-12-31 | 2012-07-05 | Selecta Biosciences, Inc. | Compositions comprising immunostimulatory nucleic acids and related methods |
US10364440B2 (en) | 2011-01-04 | 2019-07-30 | Brown University | Nanotubes as carriers of nucleic acids into cells |
WO2012094574A2 (en) | 2011-01-06 | 2012-07-12 | The Johns Hopkins University | Stabilized polyribonucleotide nanoparticles |
WO2012094653A2 (en) | 2011-01-07 | 2012-07-12 | Massachusetts Institute Of Technology | Compositions and methods for macromolecular drug delivery |
AU2012207606B2 (en) | 2011-01-11 | 2017-02-23 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Pegylated lipids and their use for drug delivery |
DE102011082231A1 (de) | 2011-01-12 | 2012-07-12 | Robert Bosch Gmbh | Zündspule, insbesondere für kleinbauende Motoren |
WO2012099805A2 (en) | 2011-01-19 | 2012-07-26 | Ocean Nanotech, Llc | Nanoparticle based immunological stimulation |
CA2825023A1 (en) | 2011-01-26 | 2012-08-02 | Cenix Bioscience Gmbh | Delivery system and conjugates for compound delivery via naturally occurring intracellular transport routes |
US10363309B2 (en) | 2011-02-04 | 2019-07-30 | Case Western Reserve University | Targeted nanoparticle conjugates |
US20140066363A1 (en) | 2011-02-07 | 2014-03-06 | Arun K. Bhunia | Carbohydrate nanoparticles for prolonged efficacy of antimicrobial peptide |
WO2012116715A1 (en) | 2011-03-02 | 2012-09-07 | Curevac Gmbh | Vaccination in newborns and infants |
US20120207840A1 (en) | 2011-02-10 | 2012-08-16 | Aura Biosciences, Inc. | Virion Derived Protein Nanoparticles For Delivering Diagnostic Or Therapeutic Agents For The Treatment Of Non-Melanoma Skin Cancer |
EP2675921A4 (en) | 2011-02-14 | 2014-12-03 | Swift Biosciences Inc | POLYNUCLEOTIDE PRIMERS AND SOLIDS |
US20140081012A1 (en) | 2011-02-15 | 2014-03-20 | The University Of North Carolina At Chapel Hill | Nanoparticle, liposomes, polymers, agents and proteins modified with reversible linkers |
EP2675918B1 (en) | 2011-02-15 | 2017-11-08 | Merrimack Pharmaceuticals, Inc. | Compositions and methods for delivering nucleic acid to a cell |
EP2489371A1 (en) | 2011-02-18 | 2012-08-22 | Instituto Nacional de Investigacion y Tecnologia Agraria y Alimentaria | Carrier peptides for drug delivery |
WO2012113413A1 (en) | 2011-02-21 | 2012-08-30 | Curevac Gmbh | Vaccine composition comprising complexed immunostimulatory nucleic acids and antigens packaged with disulfide-linked polyethyleneglycol/peptide conjugates |
JP6091435B2 (ja) | 2011-02-22 | 2017-03-08 | カリフォルニア インスティチュート オブ テクノロジー | アデノ随伴ウイルス(aav)ベクターを用いたタンパク質の送達 |
US8696637B2 (en) | 2011-02-28 | 2014-04-15 | Kimberly-Clark Worldwide | Transdermal patch containing microneedles |
WO2012116714A1 (en) | 2011-03-02 | 2012-09-07 | Curevac Gmbh | Vaccination in elderly patients |
RU2013144207A (ru) | 2011-03-02 | 2015-04-10 | Новартис Аг | Комбинированные вакцины с пониженными дозами антигена и/или адъюванта |
CN103502436A (zh) | 2011-03-07 | 2014-01-08 | 麻省理工学院 | 用核酸转染细胞的方法 |
US20120237565A1 (en) | 2011-03-14 | 2012-09-20 | Intezyne Technologies, Incorporated | Pegylated polyplexes containing two or more different polymers for polynucleotide delivery |
WO2012125680A1 (en) | 2011-03-16 | 2012-09-20 | Novartis Ag | Methods of treating vasculitis using an il-17 binding molecule |
US20140212503A1 (en) | 2011-03-17 | 2014-07-31 | Hyukjin Lee | Delivery system |
MA34966B1 (fr) | 2011-03-17 | 2014-03-01 | Novartis Ag | Fgfr et ses ligands utilisés comme biomarqueurs du cancer du sein chez des sujets rh positifs |
WO2012129483A1 (en) | 2011-03-24 | 2012-09-27 | Novartis Ag | Adjuvant nanoemulsions with phospholipids |
CA2830948A1 (en) | 2011-03-25 | 2012-10-04 | Selecta Biosciences, Inc. | Osmotic mediated release synthetic nanocarriers |
PL2691443T3 (pl) | 2011-03-28 | 2021-08-30 | Massachusetts Institute Of Technology | Sprzężone lipomery i ich zastosowania |
WO2012131594A1 (en) | 2011-03-28 | 2012-10-04 | Novartis Ag | Markers associated with cyclin-dependent kinase inhibitors |
WO2012131106A1 (en) | 2011-03-31 | 2012-10-04 | Ingell Technologies Holding B.V. | Biodegradable compositions suitable for controlled release |
EP2691101A2 (en) | 2011-03-31 | 2014-02-05 | Moderna Therapeutics, Inc. | Delivery and formulation of engineered nucleic acids |
EP2691079B1 (en) | 2011-03-31 | 2020-06-24 | Ingell Technologies Holding B.V. | Biodegradable compositions suitable for controlled release |
EP2694660B1 (en) | 2011-04-03 | 2018-08-08 | The General Hospital Corporation | Efficient protein expression in vivo using modified rna (mod-rna) |
EP2694524B1 (en) | 2011-04-04 | 2016-05-18 | The U.S.A. As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services | 2'-o-aminooxymethyl nucleoside derivatives for use in the synthesis and modification of nucleosides, nucleotides and oligonucleotides |
WO2012142132A1 (en) | 2011-04-11 | 2012-10-18 | Life Technologies Corporation | Polymer particles and methods of making and using same |
US11135174B2 (en) | 2011-04-13 | 2021-10-05 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Coated mesoporous nanoparticles |
WO2013158127A1 (en) | 2012-04-16 | 2013-10-24 | Molecular Transfer, Inc. | Agents for improved delivery of nucleic acids to eukaryotic cells |
US20140178894A1 (en) | 2011-04-20 | 2014-06-26 | Novartis Forschungsstiftung, Zweigniederlassung | Culture medium suitable for the culture of undifferentiated cells |
EA034702B1 (ru) | 2011-04-26 | 2020-03-10 | Молекулар Экспресс, Инк. | Липосомные композиции |
WO2012148684A1 (en) | 2011-04-27 | 2012-11-01 | President And Fellows Of Harvard College | Cell-friendly inverse opal hydrogels for cell encapsulation, drug and protein delivery, and functional nanoparticle encapsulation |
CA2834365A1 (en) | 2011-04-28 | 2012-11-01 | Sandia Corporation | Porous nanoparticle-supported lipid bilayers (protocells) for targeted delivery and methods of using same |
WO2012149536A1 (en) | 2011-04-28 | 2012-11-01 | The Henry M. Jackson Foundation For The Advancement Of Military Medicine, Inc. | Neutralizing antibodies to nipah and hendra virus |
WO2012149393A2 (en) | 2011-04-29 | 2012-11-01 | Selecta Biosciences, Inc. | Tolerogenic synthetic nanocarriers for antigen-specific deletion of t effector cells |
JP2014515759A (ja) | 2011-04-29 | 2014-07-03 | ノバルティス アーゲー | 扁平上皮がんを治療する方法関連出願 |
US20120283503A1 (en) | 2011-04-29 | 2012-11-08 | The Johns Hopkins University | Nanoparticle loaded stem cells and their use in mri guided hyperthermia |
DK2705143T3 (da) | 2011-05-02 | 2021-05-10 | Univ Wayne State | Protein-induceret pluripotent celleteknologi og anvendelse deraf |
UA116189C2 (uk) | 2011-05-02 | 2018-02-26 | Мілленніум Фармасьютікалз, Інк. | КОМПОЗИЦІЯ АНТИ-α4β7 АНТИТІЛА |
EP2704565B1 (en) | 2011-05-04 | 2018-08-22 | The University Of Nottingham | Novel polymers which resist bacterial attachment |
US9327029B2 (en) | 2011-05-05 | 2016-05-03 | Celacare Technologies, Llc | Antimicrobial silver hydrogel composition for the treatment of burns and wounds |
US8945588B2 (en) | 2011-05-06 | 2015-02-03 | The University Of Chicago | Methods and compositions involving protective staphylococcal antigens, such as EBH polypeptides |
WO2012152810A1 (de) | 2011-05-10 | 2012-11-15 | Basf Se | Öl-in-wasser-emulsionen |
US9283279B2 (en) | 2011-05-11 | 2016-03-15 | Ramot At Tel-Aviv University Ltd. | Targeted polymeric conjugates and uses thereof |
US20140072657A1 (en) | 2011-05-12 | 2014-03-13 | Helmut Vockner | Novel pharmaceutical formulation |
DK2706988T3 (da) | 2011-05-12 | 2020-01-20 | Yissum Res Dev Co Of Hebrew Univ Jerusalem Ltd | Liposomer omfattende polymer konjugerede lipider og relateret brug |
ES2651143T3 (es) | 2011-05-13 | 2018-01-24 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | Antígenos de F de prefusión del VRS |
US8691750B2 (en) | 2011-05-17 | 2014-04-08 | Axolabs Gmbh | Lipids and compositions for intracellular delivery of biologically active compounds |
CA2835428A1 (en) | 2011-05-17 | 2012-11-22 | Moderna Therapeutics, Inc. | Engineered nucleic acids and methods of use thereof for non-human vertebrates |
US8978170B2 (en) | 2011-05-20 | 2015-03-17 | Kohler Co. | Toilet installation system and method |
HRP20211595T1 (hr) | 2011-05-24 | 2022-01-21 | BioNTech SE | Individualizirana cjepiva protiv raka |
US20140227372A1 (en) | 2011-05-25 | 2014-08-14 | Novartis Ag | Biomarkers for lung cancer |
US20120302940A1 (en) | 2011-05-26 | 2012-11-29 | Jackson State University | Popcorn Shape Gold Nanoparticle For Targeted Diagnosis, Photothermal Treatment and In-Situ Monitoring Therapy Response for Cancer and Multiple Drug Resistance Bacteria |
WO2012166923A2 (en) | 2011-05-31 | 2012-12-06 | Bind Biosciences | Drug loaded polymeric nanoparticles and methods of making and using same |
CN107115314B (zh) | 2011-06-02 | 2022-04-29 | 加利福尼亚大学董事会 | 膜包封的纳米颗粒及使用方法 |
US20140094461A1 (en) | 2011-06-02 | 2014-04-03 | Novartis Ag | Biomarkers for hedgehog inhibitor therapy |
WO2012168259A1 (en) | 2011-06-06 | 2012-12-13 | Novartis Forschungsstiftung, Zweigniederlassung | Protein tyrosine phosphatase, non-receptor type 11 (ptpn11) and triple-negative breast cancer |
CN103748078B (zh) | 2011-06-08 | 2016-11-09 | 夏尔人类遗传性治疗公司 | 可裂解脂质 |
EP4043025A1 (en) | 2011-06-08 | 2022-08-17 | Translate Bio, Inc. | Lipid nanoparticle compositions and methods for mrna delivery |
WO2012168491A1 (en) | 2011-06-10 | 2012-12-13 | Novartis Ag | Pharmaceutical formulations of pcsk9 antagonists |
CA2836805C (en) | 2011-06-10 | 2023-03-07 | Novartis Ag | Bovine vaccines and methods |
WO2012170607A2 (en) | 2011-06-10 | 2012-12-13 | Novartis Ag | Use of pcsk9 antagonists |
US8636696B2 (en) | 2011-06-10 | 2014-01-28 | Kimberly-Clark Worldwide, Inc. | Transdermal device containing microneedles |
US8916696B2 (en) | 2011-06-12 | 2014-12-23 | City Of Hope | Aptamer-mRNA conjugates for targeted protein or peptide expression and methods for their use |
WO2012172495A1 (en) | 2011-06-14 | 2012-12-20 | Novartis Ag | Compositions and methods for antibodies targeting tem8 |
EP2720740A1 (en) | 2011-06-15 | 2014-04-23 | ChronTech Pharma AB | Injection needle and device |
JP2014519338A (ja) | 2011-06-16 | 2014-08-14 | ノバルティス アーゲー | 治療薬として使用される可溶性タンパク質 |
CA2839995A1 (en) | 2011-06-20 | 2012-12-27 | University Of Pittsburgh-Of The Commonwealth System Of Higher Education | Computationally optimized broadly reactive antigens for h1n1 influenza |
WO2013003475A1 (en) | 2011-06-27 | 2013-01-03 | Cellscript, Inc. | Inhibition of innate immune response |
KR102436439B1 (ko) | 2011-06-28 | 2022-08-25 | 이노비오 파마수티컬즈, 인크. | 최소 침습 피부 전기천공 장치 |
ES2692519T3 (es) | 2011-07-01 | 2018-12-04 | Novartis Ag | Método para tratar trastornos metabólicos |
AU2012278910A1 (en) | 2011-07-04 | 2014-01-16 | Commonwealth Scientific And Industrial Research Organisation | Nucleic acid complex |
WO2013006838A1 (en) | 2011-07-06 | 2013-01-10 | Novartis Ag | Immunogenic combination compositions and uses thereof |
EP2729168A2 (en) | 2011-07-06 | 2014-05-14 | Novartis AG | Immunogenic compositions and uses thereof |
MX350198B (es) | 2011-07-06 | 2017-08-30 | Novartis Ag | Emulsiones aceite en agua que contienen acidos nucleicos. |
MX350258B (es) | 2011-07-06 | 2017-08-31 | Novartis Ag | Emulsiones cationicas de aceite en agua. |
ES2861428T3 (es) | 2011-07-06 | 2021-10-06 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | Liposomas que presentan una relación N:P útil para suministro de moléculas de ARN |
US8975302B2 (en) | 2011-07-07 | 2015-03-10 | Life Technologies Corporation | Polymer particles, nucleic acid polymer particles and methods of making and using the same |
US20130012566A1 (en) | 2011-07-10 | 2013-01-10 | Aura Biosciences, Inc. | Virion Derived Protein Nanoparticles For Delivering Diagnostic Or Therapeutic Agents For The Treatment of Alopecia |
WO2013009717A1 (en) | 2011-07-10 | 2013-01-17 | Elisabet De Los Pinos | Virion derived protein nanoparticles for delivering diagnostic or therapeutic agents for the treatment of skin-related diseases |
EP2758458A4 (en) | 2011-07-10 | 2015-10-21 | Harvard College | COMPOSITIONS AND METHODS FOR SELF-ASSEMBLING POLYMERS WITH COMPLEMENTARY MACROSCOPIC AND MICROSCOPIC SCALE UNITS |
GB2492999A (en) | 2011-07-20 | 2013-01-23 | Univ Central Lancashire | Neutron detector |
US20140148503A1 (en) | 2011-07-20 | 2014-05-29 | University Of Iowa Research Foundation | Nucleic acid aptamers |
ES2670944T3 (es) | 2011-07-21 | 2018-06-04 | Croda International Plc | Copolímeros de bloques de poliéter-poliamida ramificados y métodos de preparación y uso de los mismos |
WO2013016460A1 (en) | 2011-07-25 | 2013-01-31 | Novartis Ag | Compositions and methods for assessing functional immunogenicity of parvovirus vaccines |
US9493549B2 (en) | 2011-07-25 | 2016-11-15 | The Rockefeller University | Antibodies directed toward the HIV-1 GP120 CD4 binding site with increased potency and breadth |
AU2012290306B2 (en) | 2011-07-29 | 2017-08-17 | Selecta Biosciences, Inc. | Synthetic nanocarriers that generate humoral and cytotoxic T lymphocyte (CTL) immune responses |
US9556281B2 (en) | 2011-08-15 | 2017-01-31 | The University Of Chicago | Compositions and methods related to antibodies to staphylococcal protein A |
KR20140051357A (ko) | 2011-08-26 | 2014-04-30 | 애로우헤드 리서치 코오포레이션 | In Vivo 핵산 전달용 폴리(비닐 에스테르) 고분자 |
TR201900264T4 (tr) | 2011-08-31 | 2019-02-21 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | İmmünojen şifreleyici rna'nın verilmesi için pegile edilmiş lipozomlar. |
KR20140067070A (ko) | 2011-08-31 | 2014-06-03 | 말린크로트 엘엘씨 | H-포스포네이트에 의한 나노입자 peg 개질 |
US9126966B2 (en) | 2011-08-31 | 2015-09-08 | Protiva Biotherapeutics, Inc. | Cationic lipids and methods of use thereof |
WO2013033620A1 (en) | 2011-09-01 | 2013-03-07 | Irm Llc | Compounds and compositions as pdgfr kinase inhibitors |
WO2013030778A2 (en) | 2011-09-02 | 2013-03-07 | Novartis Ag | Organic compositions to treat hsf1-related diseases |
WO2013039857A1 (en) * | 2011-09-12 | 2013-03-21 | modeRNA Therapeutics | Engineered nucleic acids and methods of use thereof |
WO2013039861A2 (en) * | 2011-09-12 | 2013-03-21 | modeRNA Therapeutics | Engineered nucleic acids and methods of use thereof |
US9464124B2 (en) | 2011-09-12 | 2016-10-11 | Moderna Therapeutics, Inc. | Engineered nucleic acids and methods of use thereof |
CN103917245B (zh) | 2011-09-14 | 2017-06-06 | 葛兰素史密丝克莱恩生物有限公司 | 用于制备糖‑蛋白质糖缀合物的方法 |
WO2013040557A2 (en) | 2011-09-16 | 2013-03-21 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Rna engineered t cells for the treatment of cancer |
WO2013044219A1 (en) | 2011-09-22 | 2013-03-28 | Bind Biosciences | Methods of treating cancers with therapeutic nanoparticles |
US9375388B2 (en) | 2011-09-23 | 2016-06-28 | Indian Institute Of Technology, Bombay | Nanoparticle based cosmetic composition |
US9006400B2 (en) | 2011-09-26 | 2015-04-14 | Novartis Ag | Fibroblast growth factor-21-Fc fusion proteins |
TW201315742A (zh) | 2011-09-26 | 2013-04-16 | Novartis Ag | 治療代謝病症之雙功能蛋白質 |
US9701623B2 (en) | 2011-09-27 | 2017-07-11 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Di-aliphatic substituted pegylated lipids |
WO2013045505A1 (en) | 2011-09-28 | 2013-04-04 | Novartis Ag | Biomarkers for raas combination therapy |
CA2850624A1 (en) | 2011-10-03 | 2013-04-11 | Moderna Therapeutics, Inc. | Modified nucleosides, nucleotides, and nucleic acids, and uses thereof |
CA2872033A1 (en) | 2011-10-11 | 2013-04-18 | Novartis Ag | Recombinant self-replicating polycistronic rna molecules |
WO2013055971A1 (en) | 2011-10-11 | 2013-04-18 | Arizona Board Of Regents For And On Behalf Of Arizona State University | Polymers for delivering a substance into a cell |
US20190209690A9 (en) | 2011-10-12 | 2019-07-11 | The Johns Hopkins University | Bioreducible Poly (Beta-Amino Ester)s For siRNA Delivery |
EP2766407B1 (en) | 2011-10-12 | 2018-06-27 | The Curators Of The University Of Missouri | Pentablock polymers |
JP2014530816A (ja) | 2011-10-14 | 2014-11-20 | ノバルティスアーゲー | Wnt経路関連疾患のための抗体および方法 |
WO2013056132A2 (en) | 2011-10-14 | 2013-04-18 | Stc.Unm | Porous nanoparticle-supported lipid bilayers (protocells) for targeted delivery including transdermal delivery of cargo and methods thereof |
PT3597644T (pt) | 2011-10-18 | 2021-11-03 | Dicerna Pharmaceuticals Inc | Lípidos catiónicos de amina e suas utilizações |
CA2852260C (en) | 2011-10-18 | 2020-09-22 | Micell Technologies, Inc. | Drug delivery medical device |
WO2013057715A1 (en) | 2011-10-20 | 2013-04-25 | Novartis Ag | Adjuvanted influenza b virus vaccines for pediatric priming |
KR102043077B1 (ko) | 2011-10-20 | 2019-11-11 | 노파르티스 아게 | 알파 7 니코틴성 아세틸콜린 수용체 활성화제 치료에 대한 반응성을 예측하는 바이오마커 |
EP3069785A1 (en) | 2011-10-25 | 2016-09-21 | The University Of British Columbia | Limit size lipid nanoparticles and related methods |
US20130110043A1 (en) | 2011-10-26 | 2013-05-02 | Nanopass Technologies Ltd. | Microneedle Intradermal Drug Delivery Device with Auto-Disable Functionality |
AU2012328037B2 (en) | 2011-10-27 | 2017-11-02 | Sorrento Therapeutics, Inc. | Transdermal delivery of high viscosity bioactive agents |
AU2012328570B2 (en) | 2011-10-27 | 2017-08-31 | Massachusetts Institute Of Technology | Amino acid derivatives functionalized on the n-terminus capable of forming drug encapsulating microspheres and uses thereof |
JP2014534864A (ja) | 2011-10-28 | 2014-12-25 | プレサージュ バイオサイエンシズ,インコーポレイテッド | 薬物デリバリー方法 |
WO2013062140A1 (en) | 2011-10-28 | 2013-05-02 | Kyoto University | Method for efficiently inducing differentiation of pluripotent stem cells into hepatic lineage cells |
CN108771655A (zh) | 2011-10-28 | 2018-11-09 | 诚信生物公司 | 含有氨基酸的蛋白质制剂 |
EP2773426B1 (en) | 2011-10-31 | 2018-08-22 | Mallinckrodt LLC | Combinational liposome compositions for cancer therapy |
MX363226B (es) | 2011-10-31 | 2019-03-15 | Genentech Inc | Formulaciones de anticuerpos. |
LT2773326T (lt) | 2011-11-04 | 2019-04-25 | Nitto Denko Corporation | Lipidų-nukleorūgščių dalelių sterilios gamybos būdas |
US9579338B2 (en) | 2011-11-04 | 2017-02-28 | Nitto Denko Corporation | Method of producing lipid nanoparticles for drug delivery |
SG11201401964TA (en) | 2011-11-04 | 2014-05-29 | Agency Science Tech & Res | Self-assembled composite ultrasmall peptide-polymer hydrogels |
WO2013067537A1 (en) | 2011-11-04 | 2013-05-10 | Univertiy Of Notre Dame Du Lac | Nanoparticle-based drug delivery |
EP2773669B1 (en) | 2011-11-04 | 2018-03-28 | Novartis AG | Low density lipoprotein-related protein 6 (lrp6) - half life extender constructs |
US20130116408A1 (en) | 2011-11-05 | 2013-05-09 | Aura Biosciences, Inc. | Virion Derived Protein Nanoparticles For Delivering Radioisotopes For The Diagnosis And Treatment Of Malignant And Systemic Disease And The Monitoring Of Therapy |
US20130115247A1 (en) | 2011-11-05 | 2013-05-09 | Aura Biosciences, Inc. | Virion Derived Protein Nanoparticles For Delivering Radioisotopes For The Diagnosis And Treatment Of Malignant And Systemic Disease And The Monitoring Of Therapy |
EP2776022A1 (en) | 2011-11-08 | 2014-09-17 | Novartis Forschungsstiftung, Zweigniederlassung Friedrich Miescher Institute For Biomedical Research | New treatment for neurodegenerative diseases |
EP2776838A1 (en) | 2011-11-08 | 2014-09-17 | Novartis Forschungsstiftung, Zweigniederlassung Friedrich Miescher Institute For Biomedical Research | Early diagnostic of neurodegenerative diseases |
US9849087B2 (en) | 2011-11-08 | 2017-12-26 | The Board Of Trustees Of The University Of Arkansas | Methods and compositions for X-ray induced release from pH sensitive liposomes |
EP2776459A1 (en) | 2011-11-08 | 2014-09-17 | Novartis Forschungsstiftung, Zweigniederlassung Friedrich Miescher Institute For Biomedical Research | Rod cell-specific promoter |
US10203325B2 (en) | 2011-11-09 | 2019-02-12 | Board Of Trustees Of Michigan State University | Metallic nanoparticle synthesis with carbohydrate capping agent |
DK2776567T3 (da) | 2011-11-11 | 2021-04-26 | Variation Biotechnologies Inc | Sammensætninger og fremgangsmåder til behandling af cytomegalovirus. |
WO2013071047A1 (en) | 2011-11-11 | 2013-05-16 | Children's Medical Center Corporation | Compositions and methods for in vitro transcription of rna |
JP2014533290A (ja) | 2011-11-14 | 2014-12-11 | ノバルティス アーゲー | ポリアニオン性カルボマーとEnvポリペプチドとの免疫原性複合体ならびにその製造法および使用法 |
KR20140091695A (ko) | 2011-11-15 | 2014-07-22 | 노파르티스 아게 | 포스포이노시티드 3-키나제 억제제와 야누스 키나제 2-신호 전달자 및 전사 활성화제 5 경로의 조절제의 조합물 |
EP2790681B9 (en) | 2011-11-18 | 2023-07-26 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Method of manufacturing an extended release pharmaceutical formulation comprising polymer coated protein microparticles using spray-drying |
BR112014012101A2 (pt) | 2011-11-21 | 2019-09-24 | Novartis Ag | métodos de tratamento de artrite psoriática (psa) usando os antagonistas de il- 17 e alelos de resposta ou não resposta à psa |
WO2013078199A2 (en) | 2011-11-23 | 2013-05-30 | Children's Medical Center Corporation | Methods for enhanced in vivo delivery of synthetic, modified rnas |
TR201111743A2 (tr) | 2011-11-28 | 2012-04-24 | Nesl�Han G�Rsoy Reyhan | Kanser tedavisinde kullanılmak üzere yağ bazlı nanotaşıyıcı sistemler. |
US20150037428A1 (en) | 2011-11-29 | 2015-02-05 | The University Of North Carolina At Chapel Hill | Geometrically engineered particles and methods for modulating macrophage or immune responses |
US9364549B2 (en) | 2011-11-30 | 2016-06-14 | Andreas Voigt | Hydrophobic drug-delivery material, method for manufacturing thereof and methods for delivery of a drug-delivery composition |
CN104080441B (zh) | 2011-11-30 | 2020-02-28 | 3M创新有限公司 | 包括肽治疗剂和氨基酸的微针装置、制备和使用其的方法 |
EP2785333A4 (en) | 2011-12-02 | 2015-04-01 | Pegasus Lab Inc | AMPHIPATIVE COMPOSITIONS WITH DELAYED RELIEF ON LIPID BASIS |
US20130142781A1 (en) | 2011-12-02 | 2013-06-06 | Invivo Therapeutics Corporation | Peg based hydrogel for peripheral nerve injury applications and compositions and method of use of synthetic hydrogel sealants |
WO2013082529A1 (en) | 2011-12-02 | 2013-06-06 | Yale University | Enzymatic synthesis of poly(amine-co-esters) and methods of use thereof for gene delivery |
JP6073916B2 (ja) | 2011-12-05 | 2017-02-01 | ファクター バイオサイエンス インコーポレイテッド | 細胞に形質移入するための方法および製品 |
KR102055772B1 (ko) | 2011-12-05 | 2019-12-13 | 나노 프리시전 메디컬, 인코포레이티드 | 약물 전달을 위한 티타니아 나노튜브 멤브레인을 갖는 디바이스 |
US8497124B2 (en) | 2011-12-05 | 2013-07-30 | Factor Bioscience Inc. | Methods and products for reprogramming cells to a less differentiated state |
ES2921724T1 (es) | 2011-12-07 | 2022-08-31 | Alnylam Pharmaceuticals Inc | Lípidos biodegradables para la administración de agentes activos |
WO2013086373A1 (en) | 2011-12-07 | 2013-06-13 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Lipids for the delivery of active agents |
GB201121070D0 (en) | 2011-12-07 | 2012-01-18 | Isis Innovation | composition for delivery of biotherapeutics |
EP2788316B1 (en) | 2011-12-07 | 2019-04-24 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Branched alkyl and cycloalkyl terminated biodegradable lipids for the delivery of active agents |
US10087422B2 (en) | 2011-12-09 | 2018-10-02 | President And Fellows Of Harvard College | Organ chips and uses thereof |
WO2013086526A1 (en) | 2011-12-09 | 2013-06-13 | The Regents Of The University Of California | Liposomal drug encapsulation |
WO2013086486A1 (en) | 2011-12-09 | 2013-06-13 | President And Fellows Of Harvard College | Integrated human organ-on-chip microphysiological systems |
WO2013089151A1 (ja) | 2011-12-12 | 2013-06-20 | 協和発酵キリン株式会社 | カチオン性脂質を含有するドラッグデリバリーシステムのための脂質ナノ粒子 |
US20140045913A1 (en) | 2011-12-12 | 2014-02-13 | Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd. | Lipid nano particles comprising combination of cationic lipid |
JP6407028B2 (ja) | 2011-12-12 | 2018-10-17 | ザ トラスティーズ オブ ザ ユニバーシティ オブ ペンシルバニア | MRSAのPBP2a及びその断片を含むタンパク質、それをコードする核酸、並びにMRSA感染を予防する及び治療するための組成物及びそれらの使用 |
EP2604253A1 (en) | 2011-12-13 | 2013-06-19 | Otto Glatter | Water-in-oil emulsions and methods for their preparation |
US20150000936A1 (en) | 2011-12-13 | 2015-01-01 | Schlumberger Technology Corporation | Energization of an element with a thermally expandable material |
MX359410B (es) | 2011-12-13 | 2018-09-27 | Engeneic Molecular Delivery Pty Ltd | Minicélulas intactas derivadas bacterialmente para suministro de agentes terapéuticos a tumores cerebrales. |
US20140378538A1 (en) | 2011-12-14 | 2014-12-25 | Moderma Therapeutics, Inc. | Methods of responding to a biothreat |
US20140343129A1 (en) | 2011-12-14 | 2014-11-20 | Moderna Therapeutics, Inc. | Modified nucleic acids, and acute care uses thereof |
US9636414B2 (en) | 2011-12-15 | 2017-05-02 | Biontech Ag | Particles comprising single stranded RNA and double stranded RNA for immunomodulation |
WO2013090897A1 (en) | 2011-12-15 | 2013-06-20 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Using adaptive immunity to detect drug resistance |
KR20140102759A (ko) | 2011-12-16 | 2014-08-22 | 모더나 세라퓨틱스, 인코포레이티드 | 변형된 뉴클레오사이드, 뉴클레오타이드 및 핵산 조성물 |
CA2859205A1 (en) | 2011-12-16 | 2013-06-20 | Massachusetts Institute Of Technology | Alpha-aminoamidine polymers and uses thereof |
RU2014129268A (ru) | 2011-12-16 | 2016-02-10 | Аллерган, Инк. | Офтальмологические составы, которые содержат привитые сополимеры поливинилкапролактам-поливинилацетат-полиэтиленгликоля |
AU2012351947B2 (en) | 2011-12-16 | 2017-08-17 | Novartis Ag | Aerosolization apparatus for inhalation profile-independent drug delivery |
WO2013090601A2 (en) | 2011-12-16 | 2013-06-20 | Massachusetts Institute Of Technology | Compact nanoparticles for biological applications |
WO2013087913A1 (en) | 2011-12-16 | 2013-06-20 | Synthon Biopharmaceuticals B.V. | Compounds and methods for treating inflammatory diseases |
US9546235B2 (en) | 2011-12-19 | 2017-01-17 | The University Of Sydney | Peptide-hydrogel composite |
US9241829B2 (en) | 2011-12-20 | 2016-01-26 | Abbott Medical Optics Inc. | Implantable intraocular drug delivery apparatus, system and method |
AU2012358384A1 (en) | 2011-12-21 | 2014-07-31 | Moderna Therapeutics, Inc. | Methods of increasing the viability or longevity of an organ or organ explant |
US20130195851A1 (en) | 2011-12-23 | 2013-08-01 | Genentech, Inc. | Articles of manufacture and methods for co-administration of antibodies |
WO2013101908A1 (en) | 2011-12-27 | 2013-07-04 | Massachusetts Institute Of Technology | Microneedle devices and uses thereof |
AU2011384634A1 (en) | 2011-12-29 | 2014-06-19 | Novartis Ag | Adjuvanted combinations of meningococcal factor H binding proteins |
US20140371302A1 (en) | 2011-12-29 | 2014-12-18 | Modema Therapeutics, Inc. | Modified mrnas encoding cell-penetrating polypeptides |
PL3421601T3 (pl) | 2011-12-30 | 2020-06-01 | Cellscript, Llc | Wytwarzanie i stosowanie zsyntetyzowanego in vitro ssRNA do wprowadzania do ssaczych komórek w celu indukcji efektu biologicznego lub biochemicznego |
CN110025608A (zh) | 2012-01-06 | 2019-07-19 | 燿石治疗公司 | 降低心血管疾病风险的方法 |
US20150030576A1 (en) | 2012-01-10 | 2015-01-29 | Moderna Therapeutics, Inc. | Methods and compositions for targeting agents into and across the blood-brain barrier |
US20150017703A1 (en) | 2012-01-26 | 2015-01-15 | Life Technologies Corporation | Methods for increasing the infectivity of viruses |
CN104245925A (zh) | 2012-01-26 | 2014-12-24 | 生命科技公司 | 用于提高病毒感染性的方法 |
WO2013113326A1 (en) | 2012-01-31 | 2013-08-08 | Curevac Gmbh | Pharmaceutical composition comprising a polymeric carrier cargo complex and at least one protein or peptide antigen |
EP2623121A1 (en) | 2012-01-31 | 2013-08-07 | Bayer Innovation GmbH | Pharmaceutical composition comprising a polymeric carrier cargo complex and an antigen |
WO2013113325A1 (en) | 2012-01-31 | 2013-08-08 | Curevac Gmbh | Negatively charged nucleic acid comprising complexes for immunostimulation |
KR102019297B1 (ko) | 2012-02-09 | 2019-09-06 | 라이프 테크놀로지스 코포레이션 | 친수성 중합체성 입자 및 그의 제조 방법 |
MX2014010161A (es) | 2012-02-22 | 2015-03-09 | Univ Northwestern | Nanoestructuras para tratar cancer y otras afecciones. |
EP2817345A1 (en) | 2012-02-22 | 2014-12-31 | Cerulean Pharma Inc. | Conjugates, particles, compositions, and related methods |
US20130243867A1 (en) | 2012-02-23 | 2013-09-19 | University Of South Florida (A Florida Non-Profit Corporation) | Micelle compositions and methods for their use |
WO2013129936A1 (en) | 2012-02-27 | 2013-09-06 | Epitarget As | Use of an antibody and a particulate immunomodulator in therapy |
WO2013130535A1 (en) | 2012-02-27 | 2013-09-06 | Newgen Biopharma Corporation | Topical delivery of hormonal and non hormonal nano formulations, methods of making and using the same |
WO2013129935A1 (en) | 2012-02-27 | 2013-09-06 | Epitarget As | Use of a particulate immunomodulator in cancer therapy |
JP6407726B2 (ja) | 2012-03-01 | 2018-10-24 | アムゲン リサーチ (ミュンヘン) ゲーエムベーハーAMGEN Research(Munich)GmbH | 長寿命ポリペプチド結合分子 |
US20130236504A1 (en) | 2012-03-06 | 2013-09-12 | Medical University Of South Carolina | Delivery System for Enhancing Drug Efficacy |
WO2013136234A1 (en) | 2012-03-13 | 2013-09-19 | University Of Kwazulu-Natal | Transdermal delivery devices |
US10322089B2 (en) | 2012-03-14 | 2019-06-18 | The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University | Nanoparticles, nanoparticle delivery methods, and systems of delivery |
US8962577B2 (en) | 2012-03-16 | 2015-02-24 | The Johns Hopkins University | Controlled release formulations for the delivery of HIF-1 inhibitors |
EA030318B1 (ru) | 2012-03-16 | 2018-07-31 | Дзе Джонс Хопкинс Юниверсити | Конъюгаты нелинейного мультиблочного сополимера с лекарственным средством для доставки активных агентов |
JP6527331B2 (ja) | 2012-03-16 | 2019-06-05 | メルク パテント ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツングMerck Patent Gesellschaft mit beschraenkter Haftung | 標的指向アミノ酸脂質 |
US9610346B2 (en) | 2012-03-23 | 2017-04-04 | International Aids Vaccine Initiative | Recombinant viral vectors |
WO2013142349A1 (en) | 2012-03-23 | 2013-09-26 | University Of Chicago | Compositions and methods related to staphylococcal sbi |
WO2013143555A1 (en) | 2012-03-26 | 2013-10-03 | Biontech Ag | Rna formulation for immunotherapy |
EP2830991A1 (en) | 2012-03-26 | 2015-02-04 | President and Fellows of Harvard College | Lipid-coated nucleic acid nanostructures of defined shape |
AU2013242404B2 (en) | 2012-03-27 | 2018-08-30 | CureVac SE | Artificial nucleic acid molecules for improved protein or peptide expression |
WO2013148541A1 (en) | 2012-03-27 | 2013-10-03 | Merck Sharp & Dohme Corp. | DIETHER BASED BIODEGRADABLE CATIONIC LIPIDS FOR siRNA DELIVERY |
ES2660459T3 (es) | 2012-03-27 | 2018-03-22 | Curevac Ag | Moléculas de ácido nucleico artificiales |
CN104321432B (zh) | 2012-03-27 | 2018-08-10 | 库瑞瓦格股份公司 | 包含5′top utr的人工核酸分子 |
CN104487055A (zh) | 2012-03-29 | 2015-04-01 | 夏尔人类遗传性治疗公司 | 脂质衍生的中性纳米颗粒 |
US20140275229A1 (en) | 2012-04-02 | 2014-09-18 | Moderna Therapeutics, Inc. | Modified polynucleotides encoding udp glucuronosyltransferase 1 family, polypeptide a1 |
AU2013243949A1 (en) | 2012-04-02 | 2014-10-30 | Moderna Therapeutics, Inc. | Modified polynucleotides for the production of biologics and proteins associated with human disease |
US9878056B2 (en) | 2012-04-02 | 2018-01-30 | Modernatx, Inc. | Modified polynucleotides for the production of cosmetic proteins and peptides |
CA2868398A1 (en) | 2012-04-02 | 2013-10-10 | Moderna Therapeutics, Inc. | Modified polynucleotides for the production of cosmetic proteins and peptides |
US20150050354A1 (en) | 2012-04-02 | 2015-02-19 | Moderna Therapeutics, Inc. | Modified polynucleotides for the treatment of otic diseases and conditions |
WO2013151650A1 (en) | 2012-04-05 | 2013-10-10 | University Of Florida Research Foundation, Inc. | Neurophilic nanoparticles |
EP3563872A1 (en) | 2012-04-05 | 2019-11-06 | Massachusetts Institute Of Technology | Immunostimulatory compositions and methods of use thereof |
WO2013152351A2 (en) | 2012-04-06 | 2013-10-10 | The Trustees Of Columbia University In The City Of New York | Fusion polypeptides and methods of use thereof |
ES2821098T3 (es) | 2012-04-08 | 2021-04-23 | Urogen Pharma Ltd | Preparaciones de hidrogel térmico reversible para su uso en el tratamiento de trastornos del urotelio |
WO2013154774A1 (en) | 2012-04-11 | 2013-10-17 | Intezyne Technologies, Inc. | Block copolymers for stable micelles |
JP6378170B2 (ja) | 2012-04-12 | 2018-08-22 | イェール ユニバーシティーYale University | 異なる医薬品の制御送達のためのビヒクル |
WO2013155513A1 (en) | 2012-04-13 | 2013-10-17 | President And Fellows Of Harvard College | Devices and methods for in vitro aerosol delivery |
WO2013154766A1 (en) | 2012-04-13 | 2013-10-17 | New York University | Microrna control of ldl receptor pathway |
AU2012377385A1 (en) | 2012-04-18 | 2014-01-23 | Arrowhead Research Corporation | Poly(acrylate) polymers for in vivo nucleic acid delivery |
EP3434667B1 (en) | 2012-04-19 | 2020-11-04 | Sirna Therapeutics, Inc. | Novel diester and triester based low molecular weight, biodegradable cationic lipids for oligonucleotide delivery |
EP2841056A4 (en) | 2012-04-23 | 2015-09-16 | Massachusetts Inst Technology | COATED PARTICLES LAYER BY LAYER STABLE |
NZ630591A (en) | 2012-04-25 | 2017-02-24 | Regulus Therapeutics Inc | Microrna compounds and methods for modulating mir-21 activity |
JP6360039B2 (ja) | 2012-05-03 | 2018-07-18 | カラ ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド | 複数の被覆された粒子を含む組成物、医薬組成物、医薬製剤、及び当該粒子の形成方法 |
CA2872519C (en) | 2012-05-04 | 2017-09-05 | The Johns Hopkins University | Lipid-based drug carriers for rapid penetration through mucus linings |
WO2013173657A1 (en) | 2012-05-16 | 2013-11-21 | Micell Technologies, Inc. | Low burst sustained release lipophilic and biologic agent compositions |
US9399672B2 (en) | 2012-05-17 | 2016-07-26 | The United States Of America, As Represented By The Secretary Department Of Health And Human Services | Hepatitis C virus neutralizing antibody |
WO2013173693A1 (en) | 2012-05-18 | 2013-11-21 | The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services | Nanoparticles with enhanced entry into cancer cells |
CN104582691A (zh) | 2012-05-23 | 2015-04-29 | 俄亥俄州立大学 | 脂膜白蛋白纳米颗粒组合物以及制备和使用其的方法 |
US20150306249A1 (en) | 2012-05-25 | 2015-10-29 | Curevac Gmbh | Reversible immobilization and/or controlled release of nucleic acid containing nanoparticles by (biodegradable) polymer coatings |
AU2013271548B2 (en) | 2012-06-06 | 2017-05-25 | Loma Vista Medical, Inc. | Inflatable medical devices |
EP3884949A1 (en) | 2012-06-08 | 2021-09-29 | Translate Bio, Inc. | Pulmonary delivery of mrna to non-lung target cells |
WO2013185116A1 (en) | 2012-06-08 | 2013-12-12 | Payne Joseph E | Lipids for therapeutic agent delivery formulations |
CA2873274C (en) | 2012-06-08 | 2021-06-01 | Ethris Gmbh | Pulmonary delivery of messenger rna |
US20150218252A1 (en) | 2012-06-20 | 2015-08-06 | President And Fellows Of Harvard College | Self-assembling peptides, peptide nanostructures and uses thereof |
ES2658972T3 (es) | 2012-06-20 | 2018-03-13 | University Of Waterloo | Sistema de administración de nanopartículas mucoadhesivas |
EP2866833B1 (en) | 2012-06-27 | 2019-05-15 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Crystalline anti-human il-23 antibodies |
US9150841B2 (en) | 2012-06-29 | 2015-10-06 | Shire Human Genetic Therapies, Inc. | Cells for producing recombinant iduronate-2-sulfatase |
US9956291B2 (en) | 2012-07-10 | 2018-05-01 | Shaker A. Mousa | Nanoformulation and methods of use of thyroid receptor beta1 agonists for liver targeting |
WO2014014890A1 (en) | 2012-07-16 | 2014-01-23 | Nanoderm Sciences, Inc. | Targeted therapeutic nanoparticles |
EP2687252A1 (en) | 2012-07-17 | 2014-01-22 | Sanofi-Aventis Deutschland GmbH | Drug delivery device |
EP2687251A1 (en) | 2012-07-17 | 2014-01-22 | Sanofi-Aventis Deutschland GmbH | Drug delivery device |
CN112587658A (zh) | 2012-07-18 | 2021-04-02 | 博笛生物科技有限公司 | 癌症的靶向免疫治疗 |
WO2014015334A1 (en) | 2012-07-20 | 2014-01-23 | Brown University | System and methods for nanostructure protected delivery of treatment agent and selective release thereof |
KR20160073936A (ko) | 2012-07-24 | 2016-06-27 | 프레지던트 앤드 펠로우즈 오브 하바드 칼리지 | 핵산 나노구조의 자기-조립 |
WO2014015422A1 (en) | 2012-07-27 | 2014-01-30 | Ontario Institute For Cancer Research | Cellulose-based nanoparticles for drug delivery |
GB201213624D0 (en) | 2012-07-27 | 2012-09-12 | Univ Ulster The | Method and system for production of conjugated nanoparticles |
US9931418B2 (en) | 2012-08-07 | 2018-04-03 | Northeastern University | Compositions for the delivery of RNA and drugs into cells |
WO2014024193A1 (en) | 2012-08-07 | 2014-02-13 | Prodel Pharma Ltd. | Compositions and methods for rapid transmucosal delivery of pharmaceutical ingredients |
AU2013299537A1 (en) | 2012-08-08 | 2015-02-19 | Presage Biosciences, Inc. | Extrusion methods and devices for drug delivery |
SG11201500188YA (en) | 2012-08-08 | 2015-02-27 | Univ Nanyang Tech | Methods of manufacturing hydrogel microparticles having living cells, and compositions for manufacturing a scaffold for tissue engineering |
WO2014025890A1 (en) | 2012-08-10 | 2014-02-13 | University Of North Texas Health Science Center | Drug delivery vehicle comprising conjugates between targeting polyamino acids and fatty acids |
WO2014027006A1 (en) | 2012-08-13 | 2014-02-20 | Edko Pazarlama Tanitim Ticaret Limited Sirketi | Bioadhesive formulations for use in drug delivery |
WO2014028487A1 (en) | 2012-08-13 | 2014-02-20 | Massachusetts Institute Of Technology | Amine-containing lipidoids and uses thereof |
US9512456B2 (en) | 2012-08-14 | 2016-12-06 | Modernatx, Inc. | Enzymes and polymerases for the synthesis of RNA |
US9775804B2 (en) | 2012-08-14 | 2017-10-03 | Aaron Froese | Internal structured self assembling liposomes |
US9827321B2 (en) | 2012-08-14 | 2017-11-28 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Stabilizing shear-thinning hydrogels |
CA2882248A1 (en) | 2012-08-15 | 2014-02-20 | The University Of Chicago | Exosome-based therapeutics against neurodegenerative disorders |
WO2014039185A1 (en) | 2012-09-05 | 2014-03-13 | Creighton University | Polymeric nanoparticles in a thermosensitive gel for coital-independent vaginal prophylaxis of hiv |
US8703197B2 (en) | 2012-09-13 | 2014-04-22 | International Business Machines Corporation | Branched polyamines for delivery of biologically active materials |
CN104812381B (zh) | 2012-09-17 | 2018-01-26 | 辉瑞大药厂 | 用于制备治疗性纳米颗粒的方法 |
WO2014047649A1 (en) | 2012-09-24 | 2014-03-27 | The Regents Of The University Of California | Methods for arranging and packing nucleic acids for unusual resistance to nucleases and targeted delivery for gene therapy |
US20150246137A1 (en) | 2012-09-27 | 2015-09-03 | The University Of North Carolina At Chapel Hill | Lipid coated nanoparticles containing agents having low aqueous and lipid solubilities and methods thereof |
US20150307542A1 (en) | 2012-10-03 | 2015-10-29 | Moderna Therapeutics, Inc. | Modified nucleic acid molecules and uses thereof |
WO2014053880A1 (en) | 2012-10-04 | 2014-04-10 | Centre National De La Recherche Scientifique | Cell penetrating peptides for intracellular delivery of molecules |
WO2014054026A1 (en) | 2012-10-04 | 2014-04-10 | University Of The Witwatersrand, Johannesburg | Liposomal drug delivery system |
US20140100178A1 (en) | 2012-10-04 | 2014-04-10 | Aslam Ansari | Composition and methods for site-specific drug delivery to treat malaria and other liver diseases |
EP2716655A1 (en) | 2012-10-04 | 2014-04-09 | Institut Pasteur | Neutralizing antibodies directed against Hepatitis C virus ectodomain glycoprotein E2 |
WO2014053879A1 (en) | 2012-10-04 | 2014-04-10 | Centre National De La Recherche Scientifique | Cell penetrating peptides for intracellular delivery of molecules |
WO2014053882A1 (en) | 2012-10-04 | 2014-04-10 | Centre National De La Recherche Scientifique | Cell penetrating peptides for intracellular delivery of molecules |
WO2014053881A1 (en) | 2012-10-04 | 2014-04-10 | Centre National De La Recherche Scientifique | Cell penetrating peptides for intracellular delivery of molecules |
WO2014064534A2 (en) | 2012-10-05 | 2014-05-01 | Chrontech Pharma Ab | Injection needle, device, immunogenic compositions and method of use |
EP2716689A1 (en) | 2012-10-05 | 2014-04-09 | National University of Ireland, Galway | Polymer comprising a plurality of branches having at least one disulfide group and/or at least one vinyl group |
US9931410B2 (en) | 2012-10-09 | 2018-04-03 | The Brigham And Women's Hospital, Inc. | Nanoparticles for targeted delivery of multiple therapeutic agents and methods of use |
US20140106260A1 (en) | 2012-10-11 | 2014-04-17 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Core-shell nanoparticulate compositions and methods |
EA201590622A1 (ru) | 2012-10-16 | 2015-10-30 | Эндосайт, Инк. | Конъюгаты для доставки лекарственного средства, содержащие не встречающиеся в природе аминокислоты, и способы применения |
PL2908912T3 (pl) | 2012-10-18 | 2021-05-17 | The Rockefeller University | Szeroko neutralizujące przeciwciała anty-hiv |
ES2912033T3 (es) * | 2012-10-23 | 2022-05-24 | Caris Science Inc | Aptámeros y usos de los mismos |
WO2014066912A1 (en) | 2012-10-26 | 2014-05-01 | Vanderbilt University | Polymeric nanoparticles |
US20140315795A1 (en) | 2012-10-26 | 2014-10-23 | Nlife Therapeutics, S.L. | Compositions and Methods for Selective Delivery of Oligonucleotide Molecules to Cell Types |
WO2014066898A1 (en) | 2012-10-26 | 2014-05-01 | The Johns Hopkins University | A layer-by-layer approach to co-deliver dna and sirna via aunps: a potential platform for modifying release kinetics |
US20150376581A1 (en) | 2012-10-29 | 2015-12-31 | Technische Universitaet Dortmund | T7 rna polymerase variants and methods of using the same |
KR20230154283A (ko) | 2012-11-01 | 2023-11-07 | 팩터 바이오사이언스 인크. | 세포에서 단백질을 발현시키는 방법들과 생성물들 |
WO2014071072A2 (en) | 2012-11-02 | 2014-05-08 | Pungente Michael D | Novel cationic carotenoid-based lipids for cellular nucleic acid uptake |
EP2914723B1 (en) | 2012-11-05 | 2018-06-13 | Fondazione Centro San Raffaele | Novel targets in multiple myeloma and other disorders |
AU2013341646B2 (en) | 2012-11-06 | 2017-08-31 | Rochal Technologies, Llc | Delivery of biologically-active agents using volatile, hydrophobic solvents |
US9975916B2 (en) | 2012-11-06 | 2018-05-22 | President And Fellows Of Harvard College | Compositions and methods relating to complex nucleic acid nanostructures |
US9669104B2 (en) | 2012-11-07 | 2017-06-06 | Council Of Scientific And Industrial Research | Nanocomplex containing amphipathic peptide useful for efficient transfection of biomolecules |
WO2014072999A1 (en) | 2012-11-07 | 2014-05-15 | Council Of Scientific And Industrial Research | Nanocomplex containing cationic peptide for biomolecule delivery |
KR20150083117A (ko) | 2012-11-08 | 2015-07-16 | 클리어사이드 바이오메디컬, 인코포레이드 | 인간 대상체에서 안구 질병을 치료하기 위한 방법 및 장치 |
TW201920677A (zh) | 2012-11-08 | 2019-06-01 | 美商武田疫苗股份有限公司 | 登革熱病毒血清型4型之建構物的組成物、方法及用途 |
SG10201608703SA (en) | 2012-11-08 | 2016-12-29 | Eleven Biotherapeutics Inc | Il-6 antagonists and uses thereof |
MX2015005363A (es) | 2012-11-08 | 2015-11-06 | Novozymes Biopharma Dk As | Variantes de albumina. |
ES2676470T3 (es) | 2012-11-09 | 2018-07-19 | Biontech Rna Pharmaceuticals Gmbh | Método para la expresión de ARN en células |
US9200119B2 (en) | 2012-11-09 | 2015-12-01 | Momentive Performance Materials Inc. | Silicon-containing zwitterionic linear copolymer composition |
WO2014072468A1 (en) | 2012-11-09 | 2014-05-15 | Velin-Pharma A/S | Compositions for pulmonary delivery |
WO2014071963A1 (en) | 2012-11-09 | 2014-05-15 | Biontech Ag | Method for cellular rna expression |
GB201220354D0 (en) | 2012-11-12 | 2012-12-26 | Medpharm Ltd | Dermal compositions |
WO2014075047A2 (en) | 2012-11-12 | 2014-05-15 | Genvec, Inc. | Malaria antigens and methods of use |
AU2013341711A1 (en) | 2012-11-12 | 2015-05-21 | Redwood Bioscience, Inc. | Compounds and methods for producing a conjugate |
WO2014078399A1 (en) | 2012-11-13 | 2014-05-22 | Baylor College Of Medicine | Multi-arm biodegradable polymers for nucleic acid delivery |
US9310374B2 (en) | 2012-11-16 | 2016-04-12 | Redwood Bioscience, Inc. | Hydrazinyl-indole compounds and methods for producing a conjugate |
WO2014078636A1 (en) | 2012-11-16 | 2014-05-22 | President And Fellows Of Harvard College | Nucleic acid hydrogel self-assembly |
US9655848B2 (en) | 2012-11-19 | 2017-05-23 | Technion Research & Development Foundation Limited | Liposomes for in-vivo delivery |
EP2732825B1 (en) | 2012-11-19 | 2015-07-01 | Invivogen | Conjugates of a TLR7 and/or TLR8 agonist and a TLR2 agonist |
US20150290328A1 (en) | 2012-11-20 | 2015-10-15 | Phasebio Pharmaceuticals, Inc. | Formulations of active agents for sustained release |
US20140141037A1 (en) | 2012-11-20 | 2014-05-22 | Novartis Ag | Rsv f prefusion trimers |
WO2014081299A1 (en) | 2012-11-22 | 2014-05-30 | Tagworks Pharmaceuticals B.V. | Activatable liposomes |
EP2922574B1 (en) | 2012-11-22 | 2023-05-17 | Tagworks Pharmaceuticals B.V. | Chemically cleavable group |
WO2014081300A1 (en) | 2012-11-22 | 2014-05-30 | Tagworks Pharmaceuticals B.V. | Channel protein activatable liposomes |
JP6144355B2 (ja) * | 2012-11-26 | 2017-06-07 | モデルナティエックス インコーポレイテッドModernaTX,Inc. | 化学修飾mRNA |
WO2014093574A1 (en) | 2012-12-13 | 2014-06-19 | Moderna Therapeutics, Inc. | Modified polynucleotides for altering cell phenotype |
MX2015008847A (es) | 2013-01-10 | 2015-10-30 | Novartis Ag | Composiciones inmunogenicas de virus de influenza y usos de las mismas. |
CA2897941A1 (en) | 2013-01-17 | 2014-07-24 | Moderna Therapeutics, Inc. | Signal-sensor polynucleotides for the alteration of cellular phenotypes |
EP2964234A4 (en) | 2013-03-09 | 2016-12-07 | Moderna Therapeutics Inc | NON-TRANSLATED HETEROLOGOUS REGIONS FOR MRNA |
WO2014158795A1 (en) | 2013-03-12 | 2014-10-02 | Moderna Therapeutics, Inc. | Diagnosis and treatment of fibrosis |
US20160024181A1 (en) | 2013-03-13 | 2016-01-28 | Moderna Therapeutics, Inc. | Long-lived polynucleotide molecules |
US10258698B2 (en) | 2013-03-14 | 2019-04-16 | Modernatx, Inc. | Formulation and delivery of modified nucleoside, nucleotide, and nucleic acid compositions |
EP2983804A4 (en) | 2013-03-15 | 2017-03-01 | Moderna Therapeutics, Inc. | Ion exchange purification of mrna |
WO2014144711A1 (en) | 2013-03-15 | 2014-09-18 | Moderna Therapeutics, Inc. | Analysis of mrna heterogeneity and stability |
US20160032273A1 (en) | 2013-03-15 | 2016-02-04 | Moderna Therapeutics, Inc. | Characterization of mrna molecules |
US8980864B2 (en) | 2013-03-15 | 2015-03-17 | Moderna Therapeutics, Inc. | Compositions and methods of altering cholesterol levels |
US10138507B2 (en) | 2013-03-15 | 2018-11-27 | Modernatx, Inc. | Manufacturing methods for production of RNA transcripts |
US11377470B2 (en) | 2013-03-15 | 2022-07-05 | Modernatx, Inc. | Ribonucleic acid purification |
US10077439B2 (en) | 2013-03-15 | 2018-09-18 | Modernatx, Inc. | Removal of DNA fragments in mRNA production process |
DK3019619T3 (da) | 2013-07-11 | 2021-10-11 | Modernatx Inc | Sammensætninger, der omfatter syntetiske polynukleotider, som koder for crispr-beslægtede proteiner, og syntetiske sgrna'er, og anvendelsesfremgangsmåder |
US20160194368A1 (en) | 2013-09-03 | 2016-07-07 | Moderna Therapeutics, Inc. | Circular polynucleotides |
WO2015034928A1 (en) | 2013-09-03 | 2015-03-12 | Moderna Therapeutics, Inc. | Chimeric polynucleotides |
WO2015038892A1 (en) | 2013-09-13 | 2015-03-19 | Moderna Therapeutics, Inc. | Polynucleotide compositions containing amino acids |
EP3052106A4 (en) | 2013-09-30 | 2017-07-19 | ModernaTX, Inc. | Polynucleotides encoding immune modulating polypeptides |
JP2016538829A (ja) | 2013-10-03 | 2016-12-15 | モデルナ セラピューティクス インコーポレイテッドModerna Therapeutics,Inc. | 低密度リポタンパク質受容体をコードするポリヌクレオチド |
EP3058082A4 (en) | 2013-10-18 | 2017-04-26 | ModernaTX, Inc. | Compositions and methods for tolerizing cellular systems |
EP3092250A4 (en) | 2014-01-08 | 2017-05-24 | Moderna Therapeutics, Inc. | Polynucleotides for the in vivo production of antibodies |
EP3159407A1 (en) * | 2015-10-23 | 2017-04-26 | Silence Therapeutics (London) Ltd | Guide rnas, methods and uses |
WO2017075038A1 (en) * | 2015-10-26 | 2017-05-04 | Rana Therapeutics, Inc. | Nanoparticle formulations for delivery of nucleic acid complexes |
CN110719954B (zh) | 2017-05-31 | 2023-12-26 | 奥特吉尼克斯制药公司 | 用于iii型糖原贮积病的治疗剂 |
BR112019028280A2 (pt) * | 2017-07-04 | 2020-07-14 | Curevac Ag | moléculas de ácido nucleico |
MX2021011565A (es) * | 2019-03-28 | 2021-11-12 | Intellia Therapeutics Inc | Composiciones y métodos que comprenden un arn guía de ttr y un polinucleótido que codifica un agente de fijacion a adn guiado por arn. |
CN116710079A (zh) * | 2020-07-24 | 2023-09-05 | 斯特兰德生物科技公司 | 包含经修饰的核苷酸的脂质纳米颗粒 |
-
2012
- 2012-12-14 KR KR1020147019601A patent/KR20140102759A/ko not_active Application Discontinuation
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-
2016
- 2016-03-22 US US15/077,705 patent/US20160193299A1/en not_active Abandoned
- 2016-09-20 AU AU2016231503A patent/AU2016231503A1/en not_active Abandoned
-
2017
- 2017-06-13 US US15/621,693 patent/US20180125937A1/en not_active Abandoned
-
2018
- 2018-07-23 AU AU2018207584A patent/AU2018207584A1/en not_active Abandoned
-
2019
- 2019-01-24 JP JP2019009835A patent/JP2019059793A/ja not_active Withdrawn
- 2019-07-29 US US16/525,145 patent/US20200164038A1/en not_active Abandoned
-
2023
- 2023-03-02 US US18/177,455 patent/US20240123035A1/en active Pending
Patent Citations (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20090286852A1 (en) * | 2005-08-23 | 2009-11-19 | Katalin Kariko | RNA containing modified nucleosides and methods of use thereof |
JP2011500671A (ja) * | 2007-10-17 | 2011-01-06 | 韓国科学技術院 | 核酸遺伝子伝達用低密度リポタンパク質類似(LDL−like)陽イオン性ナノ粒子、その製造方法、及びこれを用いた核酸遺伝子の伝達方法 |
JP2011516586A (ja) * | 2008-04-15 | 2011-05-26 | プロチバ バイオセラピューティクス インコーポレイティッド | 核酸送達用の脂質製剤 |
WO2010129687A1 (en) * | 2009-05-05 | 2010-11-11 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc | Methods of delivering oligonucleotides to immune cells |
WO2011068810A1 (en) * | 2009-12-01 | 2011-06-09 | Shire Human Genetic Therapies | Delivery of mrna for the augmentation of proteins and enzymes in human genetic diseases |
WO2011119887A1 (en) * | 2010-03-24 | 2011-09-29 | Rxi Pharmaceuticals Corporation | Rna interference in dermal and fibrotic indications |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
NATURE BIOTECHNOLOGY, vol. 28, JPN6016041544, 2010, pages 172 - 176, ISSN: 0003662748 * |
Cited By (14)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP6948313B6 (ja) | 2015-09-17 | 2022-02-08 | モデルナティエックス インコーポレイテッド | 治療剤の細胞内送達のための化合物および組成物 |
JP2018532721A (ja) * | 2015-09-17 | 2018-11-08 | モデルナティエックス インコーポレイテッドModernaTX,Inc. | 治療剤の細胞内送達のための化合物および組成物 |
JP2021175750A (ja) * | 2015-10-05 | 2021-11-04 | モデルナティーエックス, インコーポレイテッド | メッセンジャーリボ核酸薬物の治療投与のための方法 |
JP2018529738A (ja) * | 2015-10-05 | 2018-10-11 | モデルナティーエックス, インコーポレイテッド | メッセンジャーリボ核酸薬物の治療投与のための方法 |
JP6990176B2 (ja) | 2015-10-05 | 2022-02-03 | モデルナティエックス インコーポレイテッド | メッセンジャーリボ核酸薬物の治療投与のための方法 |
US10751426B2 (en) | 2015-10-30 | 2020-08-25 | Bonac Corporation | Composition stably containing single-stranded nucleic acid molecule that suppresses expression of TGF-β1 gene |
WO2017073767A1 (ja) * | 2015-10-30 | 2017-05-04 | 株式会社ボナック | TGF-β1遺伝子の発現を抑制する一本鎖核酸分子を安定に含有する組成物 |
JPWO2017073767A1 (ja) * | 2015-10-30 | 2018-10-04 | 株式会社ボナック | TGF−β1遺伝子の発現を抑制する一本鎖核酸分子を安定に含有する組成物 |
JP2019514979A (ja) * | 2016-05-09 | 2019-06-06 | アストラゼネカ・アクチエボラーグAstrazeneca Aktiebolag | 親油性抗炎症剤を含む脂質ナノ粒子およびその使用方法 |
JP2020500857A (ja) * | 2016-11-23 | 2020-01-16 | メイヨ・ファウンデーション・フォー・メディカル・エデュケーション・アンド・リサーチ | 生物学的製剤の粒子媒介送達 |
JP7121005B2 (ja) | 2016-11-23 | 2022-08-17 | メイヨ・ファウンデーション・フォー・メディカル・エデュケーション・アンド・リサーチ | 生物学的製剤の粒子媒介送達 |
JP2021514190A (ja) * | 2018-02-19 | 2021-06-10 | コンバインド セラピューティクス インコーポレイテッドCombined Therapeutics, Inc. | コード化リボ核酸の器官保護発現および調節のための組成物および方法 |
JP2021519595A (ja) * | 2018-04-17 | 2021-08-12 | キュアバック アーゲー | 新規rsv rna分子及びワクチン接種用組成物 |
JP2021528096A (ja) * | 2018-06-28 | 2021-10-21 | アストラゼネカ・アクチエボラーグAstrazeneca Aktiebolag | エキソソーム細胞外小胞及びその使用方法 |
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