MX2012011171A - Fosforamidatos de nucleosido. - Google Patents

Fosforamidatos de nucleosido.

Info

Publication number
MX2012011171A
MX2012011171A MX2012011171A MX2012011171A MX2012011171A MX 2012011171 A MX2012011171 A MX 2012011171A MX 2012011171 A MX2012011171 A MX 2012011171A MX 2012011171 A MX2012011171 A MX 2012011171A MX 2012011171 A MX2012011171 A MX 2012011171A
Authority
MX
Mexico
Prior art keywords
phenoxy
isopropyl
process according
propanoate
amino
Prior art date
Application number
MX2012011171A
Other languages
English (en)
Inventor
Byoung-Kwon Chun
Suguna Rachakonda
Ganapati Reddy Pamulapati
Bruce S Ross
Michael Joseph Sofia
Hai-Ren Zhang
Peiyuan Wang
Original Assignee
Gilead Pharmasset Llc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=44354065&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=MX2012011171(A) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Priority claimed from US12/783,680 external-priority patent/US8642756B2/en
Application filed by Gilead Pharmasset Llc filed Critical Gilead Pharmasset Llc
Publication of MX2012011171A publication Critical patent/MX2012011171A/es

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
    • C07H19/02—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof sharing nitrogen
    • C07H19/04—Heterocyclic radicals containing only nitrogen atoms as ring hetero atom
    • C07H19/16—Purine radicals
    • C07H19/20—Purine radicals with the saccharide radical esterified by phosphoric or polyphosphoric acids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
    • A61K31/7052—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides
    • A61K31/706—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom
    • A61K31/7064—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines
    • A61K31/7068—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines having oxo groups directly attached to the pyrimidine ring, e.g. cytidine, cytidylic acid
    • A61K31/7072—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines having oxo groups directly attached to the pyrimidine ring, e.g. cytidine, cytidylic acid having two oxo groups directly attached to the pyrimidine ring, e.g. uridine, uridylic acid, thymidine, zidovudine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
    • A61K31/7052—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides
    • A61K31/706—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom
    • A61K31/7064—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines
    • A61K31/7076—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines containing purines, e.g. adenosine, adenylic acid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
    • C07F7/00—Compounds containing elements of Groups 4 or 14 of the Periodic System
    • C07F7/02—Silicon compounds
    • C07F7/08—Compounds having one or more C—Si linkages
    • C07F7/18—Compounds having one or more C—Si linkages as well as one or more C—O—Si linkages
    • C07F7/1804—Compounds having Si-O-C linkages
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
    • C07F9/00—Compounds containing elements of Groups 5 or 15 of the Periodic System
    • C07F9/02—Phosphorus compounds
    • C07F9/06—Phosphorus compounds without P—C bonds
    • C07F9/22—Amides of acids of phosphorus
    • C07F9/24—Esteramides
    • C07F9/2404—Esteramides the ester moiety containing a substituent or a structure which is considered as characteristic
    • C07F9/242—Esteramides the ester moiety containing a substituent or a structure which is considered as characteristic of hydroxyaryl compounds
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
    • C07F9/00—Compounds containing elements of Groups 5 or 15 of the Periodic System
    • C07F9/02—Phosphorus compounds
    • C07F9/06—Phosphorus compounds without P—C bonds
    • C07F9/22—Amides of acids of phosphorus
    • C07F9/24—Esteramides
    • C07F9/2454—Esteramides the amide moiety containing a substituent or a structure which is considered as characteristic
    • C07F9/2458—Esteramides the amide moiety containing a substituent or a structure which is considered as characteristic of aliphatic amines
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
    • C07F9/00—Compounds containing elements of Groups 5 or 15 of the Periodic System
    • C07F9/02—Phosphorus compounds
    • C07F9/547—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom
    • C07F9/655—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom having oxygen atoms, with or without sulfur, selenium, or tellurium atoms, as the only ring hetero atoms
    • C07F9/65515—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom having oxygen atoms, with or without sulfur, selenium, or tellurium atoms, as the only ring hetero atoms the oxygen atom being part of a five-membered ring
    • C07F9/65517—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom having oxygen atoms, with or without sulfur, selenium, or tellurium atoms, as the only ring hetero atoms the oxygen atom being part of a five-membered ring condensed with carbocyclic rings or carbocyclic ring systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
    • C07F9/00—Compounds containing elements of Groups 5 or 15 of the Periodic System
    • C07F9/02—Phosphorus compounds
    • C07F9/547—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom
    • C07F9/6558—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom containing at least two different or differently substituted hetero rings neither condensed among themselves nor condensed with a common carbocyclic ring or ring system
    • C07F9/65586—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom containing at least two different or differently substituted hetero rings neither condensed among themselves nor condensed with a common carbocyclic ring or ring system at least one of the hetero rings does not contain nitrogen as ring hetero atom
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
    • C07F9/00—Compounds containing elements of Groups 5 or 15 of the Periodic System
    • C07F9/02—Phosphorus compounds
    • C07F9/547—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom
    • C07F9/6561—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom containing systems of two or more relevant hetero rings condensed among themselves or condensed with a common carbocyclic ring or ring system, with or without other non-condensed hetero rings
    • C07F9/65616—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom containing systems of two or more relevant hetero rings condensed among themselves or condensed with a common carbocyclic ring or ring system, with or without other non-condensed hetero rings containing the ring system having three or more than three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members, e.g. purine or analogs
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
    • C07H19/02—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof sharing nitrogen
    • C07H19/04—Heterocyclic radicals containing only nitrogen atoms as ring hetero atom
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
    • C07H19/02—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof sharing nitrogen
    • C07H19/04—Heterocyclic radicals containing only nitrogen atoms as ring hetero atom
    • C07H19/044—Pyrrole radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
    • C07H19/02—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof sharing nitrogen
    • C07H19/04—Heterocyclic radicals containing only nitrogen atoms as ring hetero atom
    • C07H19/052—Imidazole radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
    • C07H19/02—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof sharing nitrogen
    • C07H19/04—Heterocyclic radicals containing only nitrogen atoms as ring hetero atom
    • C07H19/06—Pyrimidine radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
    • C07H19/02—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof sharing nitrogen
    • C07H19/04—Heterocyclic radicals containing only nitrogen atoms as ring hetero atom
    • C07H19/06—Pyrimidine radicals
    • C07H19/10—Pyrimidine radicals with the saccharide radical esterified by phosphoric or polyphosphoric acids
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
    • C07H19/02—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof sharing nitrogen
    • C07H19/04—Heterocyclic radicals containing only nitrogen atoms as ring hetero atom
    • C07H19/16—Purine radicals
    • C07H19/20—Purine radicals with the saccharide radical esterified by phosphoric or polyphosphoric acids
    • C07H19/207—Purine radicals with the saccharide radical esterified by phosphoric or polyphosphoric acids the phosphoric or polyphosphoric acids being esterified by a further hydroxylic compound, e.g. flavine adenine dinucleotide or nicotinamide-adenine dinucleotide
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
    • C07H19/02—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof sharing nitrogen
    • C07H19/24—Heterocyclic radicals containing oxygen or sulfur as ring hetero atom

Abstract

En la presente se describen fosforamidatos de nucleósido y su uso como agentes para el tratamiento de enfermedades virales. Estos compuestos son inhibidores de la replicación viral de ARN dependiente de ARN y son útiles como inhibidores de la polimerasa NS5B del VHC, como inhibidores de la replicación del VHC y para el tratamiento de la infección por hepatitis C en mamíferos.

Description

FOSFORAMIDATOS DE NUCLEOSIDO Campo de la Invención En la presente se describen fosforamidatos de nucleósido y su uso como agentes para el tratamiento de enfermedades virales. Estos compuestos son inhibidores de la replicación viral de ARN dependiente de ARN y son útiles como inhibidores de la polimerasa NS5B del VHC, como inhibidores de la replicación del VHC y para el tratamiento de la infección por hepatitis C en mamíferos.
Antecedentes de la Invención La infección por el virus de la hepatitis C (VHC) es un problema muy importante de la salud que lleva a enfermedades hepáticas crónicas, tales como cirrosis y carcinoma hepatocelular , en un número considerable de individuos infectados, que se estima representan el 2-15% de la población mundial. Solamente en Estados Unidos hay aproximadamente 4.5 millones de personas infectadas, de acuerdo con el U.S. Center for Disease Control [Centro de control de enfermedades de Estados Unidos] . Conforme a la Organización Mundial de la Salud, hay más de 200 millones de individuos infectados en todo el mundo y al menos 3 a 4 millones de personas se infectan cada año. Una vez infectadas, alrededor del 20% de las personas eliminan el virus, pero el resto puede alojar el VHC por el resto de sus Ref.: 235440 vidas. De diez a veinte por ciento de los individuos crónicamente infectados, con el tiempo desarrollan cirrosis que destruye el hígado o cáncer. La enfermedad viral se transmite parenteralmente por sangre contaminada o hemoderivados, agujas contaminadas o sexual y verticalmente desde madres infectadas o madres portadoras a sus hijos. Los tratamientos actuales para la infección por VHC, que se limitan a inmunoterapia con interferón-a recombinante solo o en combinación con el análogo de nucleósido ribavirina, tienen un beneficio clínico limitado. Además, no se ha establecido una vacuna contra el VHC. Por consiguiente, existe una urgente necesidad de agentes terapéuticos mejores que combatan de forma eficaz la infección crónica por VHC.
El virión del VHC es un virus de ARN de cadena positiva cubierto, con una secuencia genómica de un solo oligoribonucleót ido de alrededor de 9600 bases que codifica una poliproteína de alrededor de 3,010 aminoácidos. Los productos proteicos del gen del VHC consisten de las proteínas estructurales C, El y E2 y las proteínas no estructurales NS2 , NS3, NS4A y NS4B, y NS5A y NS5B. Se cree que las proteínas no estructurales (NS) proporcionan el mecanismo catalítico para la replicación viral. La proteasa NS3 libera NS5B, la ARN polimerasa dependiente de ARN de la cadena de poliproteína. La polimerasa NS5B del VHC es necesaria para la síntesis de un ARN de cadena doble a partir de un ARN viral de cadena simple que sirve como modelo en el ciclo de replicación del VHC. Por lo tanto, la polimerasa NS5B es considerada un componente esencial en el complejo de replicación del VHC (K. Ishi, et ál, Hepatology, 1999, 29: 1227-1235; V. Lohmann, et ál., Virology, 1998, 249: 108-118). La inhibición de la polimerasa NS5B del VHC previene la formación de ARN de cadena doble del VHC y por lo tanto constituye un enfoque interesante para el desarrollo de terapias antivirales especificas para el VHC.
El VHC pertenece a una familia mucho más grande de virus que comparten muchos rasgos comunes.
Virus Flavíviridae La familia de virus Flavíviridae comprende al menos tres géneros distintos: pestivirus, que causan enfermedades en el ganado y los cerdos; flavivirus , que son la principal causa de enfermedades tales como fiebre del dengue y fiebre amarilla y hepacivirus , cuyo único miembro es el VHC. El género flavivirus incluye más de 68 miembros separados en grupos basándose en relaciones serológicas (Calisher et ál., J. Gen. Vírol, 1993, 70, 37-43) . Los síntomas clínicos varían e incluyen fiebre, encefalitis y fiebre hemorrágica {Fields Virology, Editores: Fields, B. N., Knipe, D. M., y Howley, P. M., Lippincott-Raven Publishers, Filadelfia, PA, 1996, Capítulo 31, 931-959) . Los flavivirus de interés mundial que están asociados con enfermedades humanas incluyen el virus de la fiebre hemorrágica por dengue (DHF, por sus siglas en inglés) , virus de la fiebre amarilla, síndrome de choque y virus de la encefalitis japonesa (Halstead, S. B., Rev. Infect. Dis., 1984, 6, 251-264; Halstead, S. B., Science, 239:476-481, 1988; Monath, T. P., New Eng. J. Med, 1988,319, 64 1-643) .
La especie pestivirus incluye el virus de la diarrea viral bovina (BVDV, por sus siglas en inglés) , virus de la fiebre porcina clásica (CSFV, también llamado virus de cólera porcino) y virus de enfermedad de frontera (BDV, por sus siglas en inglés) de ovejas (Moennig, V. et ál. Adv. Vir. Res. 1992, 41, 53-98) . Las infecciones por pestivirus de ganado domesticado (bovinos, porcinos y ovinos) causan pérdidas económicas importantes en todo el mundo. El BVDV causa enfermedades mucosas en el ganado vacuno y es de importancia económica significativa para la industria del ganado doméstico (Meyers, G. and Thiel, H.J., Advances in Virus Research, 1996, 47, 53-118; Moennig V., et ál, Adv. Vir. Res. 1992, 41, 53-98) . Los pestivirus humanos todavía no han sido caracterizados tan exhaustivamente como los pestivirus animales. Sin embargo, los estudios serológicos indican una exposición considerable de los humanos al pestivirus .
Los pestivirus y los hepacivirus son grupos virales muy relacionadas dentro de la familia Flaviviridae . Otros virus muy relacionados en esta familia incluyen el virus GB A, agentes similares al virus GB A, el virus GB B y el virus GB C (también denominado virus de la hepatitis G, VHG) . El grupo hepacivirus (virus de la hepatitis C; VHC) consiste en un número de virus estrechamente relacionados pero distinguibles genotípicamente, que infectan a los humanos. Existen por lo menos 6 genotipos del VHC y más de 50 subtipos. Debido a las similitudes entre los pestivirus y los hepacivirus combinadas con la poca capacidad de crecer eficazmente en cultivos celulares por parte de los hepacivirus, a menudo se usa el virus de la diarrea viral bovina (BVDV) como sustituto para el estudio del virus VHC.
La organización genética de los pestivirus y los hepacivirus es muy similar. Estos virus de ARN de cadena positiva poseen un único marco abierto de lectura (ORF, por sus siglas en inglés) extenso que codifica todas las proteínas virales necesarias para la replicación viral. Estas proteínas se expresan como una poliproteína que se procesa durante y después de la traducción mediante proteinasas tanto celulares como codificadas por virus para proporcionar las proteínas virales maduras. Las proteínas virales responsables por la replicación del ARN del genoma viral están ubicadas aproximadamente dentro del extremo carboxi . Dos tercios del ORF se denominan proteínas no estructurales (NS) . La organización genética y el procesamiento de poliproteínas de la porción de proteína no estructural del ORF para los pestivirus y los hepacivirus es muy similar. Para tanto los pestivirus como para los hepacivirus, las proteínas no estructurales (NS) maduras, en orden secuencial desde el extremo amino de la región codificante de la proteína no estructural al extremo carboxi del ORF, consisten en p7, NS2, NS3, NS4A, NS4B, NS5A y NS5B.
Las proteínas NS de los pestivirus y hepacivirus comparten dominios de secuencias que son característicos de funciones específicas de las proteínas. Por ejemplo, las proteínas NS3 de virus en ambos grupos poseen motivos de secuencias de aminoácidos característicos de las serina proteinasas y de las helicasas (Gorbalenya et ál., Nature, 1988, 333, 22; Bazan and Fletterick Virology, 1989, 171, 637-639; Gorbalenya et ál., Nucleic Acid Res., 1989, 17, 3889-3897) . De manera similar, las proteínas NS5B de los pestivirus y hepacivirus tienen los motivos característicos de las ARN polimerasas dirigidas por ARN (Koonin, E.V. y Doha, V.V., Crit. Rev. Biochem. Molec. Biol. 1993, 28, 375-430) .
Los roles y funciones verdaderos de las proteínas NS de pestivirus y hepacivirus en el ciclo vital de los virus son directamente análogos. En ambos casos, la serina proteinasa NS3 es responsable de todo el procesamiento proteolítico de los precursores de poliproteína hacia abajo de su posición en el ORF (Wiskerchen and Collett, Virology, 1991, 184, 341-350; Bartenschlager et ál., J. Vírol. 1993,67, 3835-3844; Eckart et ál. Biochem. Biophys . Res. Comía. 1993, 192, 399-406; Grakoui et ál., J. Virol. 1993, 67, 2832-2843; Grakoui et ál., Proc. Nati. AcadSci. USA 1993, 90, 10583-10587; Hijikata et ál., J. Virol. 1993, 67, 4665-4675; Tome et ál., J. Virol., 1993, 67, 4017-4026) . En ambos casos, la proteina NS4A actúa como un cofactor con la serina proteasa NS3 (Bartenschlager et ál., J. Virol. 1994, 68, 5045-5055; Failla et ál., J. Virol. 1994, 68, 3753-3760; Xuetal., J. Virol., 1997,71:53 12-5322) . La proteina NS3 de ambos virus también funciona como una helicasa (Kim et ál., Biochem. Biophys. Res. Comm. , 1995, 215, 160-166; Jin y Peterson, Arch. Biochem. Biophys., 1995, 323, 47-53; Warrener y Collett, J. Virol. 1995, 69,1720-1726) . Finalmente, las proteínas NS5B de los pestivirus y hepacivirus tienen la actividad de ARN polimerasas dirigidas por ARN prela (Behrens et ál., EMBO, 1996, 15, 12-22; Lechmann et ál., J. Virol., 1997, 71, 8416-8428; Yuan et ál., Biochem. Biophys. Res. Comm. 1997, 232, 231-235; Hagedorn, PCT WO 97/12033; Zhong et ál, J. Virol., 1998, 72, 9365-9369) .
Actualmente, existen pocas opciones para el tratamiento de individuos infectados por el virus de la hepatitis C. La opción terapéutica actual aprobada es el uso de inmunoterapia con interferón-a recombinante solo o en combinación con el análogo de nucleósido, ribavirina. Este tratamiento está limitado en su eficacia clínica y solo el 50% de los pacientes tratados responden a éste. Por lo tanto, existe un importante necesidad de terapias más eficaces y novedosas para enfrentar la necesidad médica no satisfecha representada por la infección por VHC.
Actualmente se han identificado una cantidad de dianas moleculares potenciales para el desarrollo farmacológico de antivirales de acción directa como agentes terapéuticos antiVHC, incluyendo, de modo no taxativo, la autoproteasa NS2-NS3, la proteasa N3, la helicasa N3 y la polimerasa NS5B. La ARN polimerasa dependiente de ARN es absolutamente esencial para la replicación del genoma de ARN de cadena simple, de sentido positivo y esta enzima ha provocado un interés significativo entre los químicos médicos.
Se han analizado los inhibidores de la NS5B del VHC como terapias potenciales contra la infección por VHC: Tan, S.-L., et ál., Nature Rev. Drug Discov., 2002, 1, 867-881; Walker, M.P. et ál., Exp. Cpin. Investigational Drugs, 2003, 12, 1269-1280; Ni, Z-J. , et ál., Current Opinión in Drug Discovery and Development, 2004, 7, 446-459; Beaulieu, P. L. , et ál., Current Opinión in Investigational Drugs, 2004, 5, 838-850; Wu, J. , et ál., Current Drug Targets-Infectious Disorders, 2003, 3, 207-219; Griffith, R.C., et ál, Annual Reports in Medicinal Chemistry, 2004, 39, 223-237; Carrol, S., et ál., Infectious Disorders-Drug Targets, 2006, 6, 17-29. El potencial de la aparición de cepas de VHC resistentes y la necesidad de identificar agentes con amplia cobertura de genotipos apoya la necesidad de continuar los esfuerzos de identificar nucleósidos más eficaces como inhibidores de la NS5B del VHC.
Los inhibidores nucleósidos de la polimerasa NS5B pueden actuar ya sea como un sustrato no natural que da como resultado la interrupción de cadena o como un inhibidor competitivo que compite con la unión del nucleótido a la polimerasa. Para funcionar como un interruptor de cadena, el análogo de nucleósido debe ser absorbido por la célula y convertirse en un trifosfato in vivo para competir por el sitio de unión del nucleótido de la polimerasa. Esta conversión al trifosfato es mediada comúnmente por cinasas celulares que imparten requisitos estructurales adicionales a un inhibidor potencial de la polimerasa del nucleósido. Lamentablemente, esto limita la evaluación directa de los nucleósidos como inhibidores de la replicación del VHC a ensayos basados en células capaces de fosforilación in situ.
En algunos casos, la actividad biológica de un nucleósido es dificultada por su pobres características de sustrato con respecto a una o más cinasas necesitadas para convertirlo a la forma de trifosfato activa. En general, la formación del monofosfato mediante una cinasa de nucleósido se considera como una etapa limitativa de la proporción de los tres eventos de fosforilación. Se ha indicado la preparación de profármacos de fosfato estables, para evitar la necesidad de que la etapa inicial de fosforilación en el metabolismo de un nucleósido al análogo de trifosfato activo. Se ha mostrado que los profármacos de fosforamidato de nucleósido son precursores del trifosfato de nucleósido activo y que inhiben la replicación viral cuando se los administra a células enteras infectadas con virus ( cGuigan, C, et ál., J. Med. Chem. , 1996, 39, 1748-1753; Valette, G., et ál., J. Med. Chem., 1996, 39, 1981-1990; Balzarini, J. , et ál., Proc. National Acad Sci USA, 1996, 93, 7295-7299; Siddiqui, A. Q. , et ál., J. Med. Chem., 1999, 42, 4122-4128; Eisenberg, E. J., et ál., Nucleosides, Nucleotídes and Nucleic Acids, 2001, 20, 1091-1098; Lee, W.A. , et ál., Antimicrobial Agents and Chemotherapy, 2005, 49, 1898); US 2006/0241064; y WO 2007/095269.
Sus propiedades fisicoquímicas y farmacocinéticas, a veces pobres, también limitan la utilidad de los nucleósidos como agentes terapéuticos viables. Estas propiedades pobres pueden limitar la absorción intestinal de un agente y limitar la captación en el tejido o célula diana. Para mejorar sus propiedades, se utilizaron profármacos de nucleósidos. Se ha demostrado que la preparación de fosforamidatos de nucleósido mejora la absorción sistémica de un nucleósido y además, el resto de fosforamidato de estos "pronucleótidos" está enmascarado con grupos lipofílicos neutros para obtener un coeficiente de partición adecuado para optimizar la absorción y el transporte hacia la célula mejorando de forma drástica la concentración intracelular del análogo del monofosfato de nucleósido con respecto a la administración del nucleósido original solo. La hidrólisis mediada por enzimas del resto de éster de fosfato produce un monofosfato de nucleósido donde la fosforilación inicial que limita la velocidad es innecesaria. A estos efectos, la solicitud de patente estadounidense 12/053,015, que corresponde al documento WO 2008/121634 y US 2010/0016251, describe una cantidad de profármacos de nucleósido de fosforamidato, muchos de los cuales muestran actividad en un ensayo de VHC. Se analizaron diversos compuestos descritos en el documento US 2010/0016251 como candidatos clínicos potenciales a ser aprobados por la FDA.
Breve Descripción de la Invención En la presente se describe un compuesto representado por la fórmula 4 y sus respectivos diastereómeros basados en fósforo representados por las fórmulas Sp-4 y i¾,-4.
/?P-4 Breve Descripción de las Figuras Figura 1. Difractograma XRPD de alta resolución de 4.
Figura 2. Difractograma XRPD de alta resolución de Rp- 4.
Figura 3. Difractograma XRPD de alta resolución de Sp-4 (Forma 1) .
Figura 4. Difractograma XRPD de alta resolución de Sp-4 ( Forma 1 ) .
Figura 5. Difractograma XRPD de alta resolución de Sp-4 -CH2C12 (Forma 2) .
Figura 6. Difractograma XRPD de alta resolución de Sp-4 -CHC13 (Forma 3) .
Figura 7. Difractograma XRPD de alta resolución de Sp-4 (Forma 4 ) .
Figura 8. Difractograma XRPD de alta resolución de Sp-4 ( Forma 5) .
Figura 9. Difractograma XRPD de alta resolución de Sp-4 (amorfo) .
Figura 10. Estructura cristalina de rayos X para Sp-4 (Forma 1) Figura 11. Estructura cristalina de rayos X (isotrópica) para Sp-4 -CH2C12 (Forma 2) Figura 12. Estructura cristalina de rayos X (anisotrópica) para Sp-4 -CH2C12 (Forma 2) Figura 13. Estructura cristalina de rayos X para SP-4 -CHC13 (Forma 3) Figura 14. Espectro FT-IR de 4.
Figura 15. Espectro FT-IR de Rp-4.
Figura 16. Espectro FT-IR de Sp-4 Figura 17. Análisis TGA y DSC de 4.
Figura 18. Análisis TGA y DSC de i¾,-4.
Figura 19. Análisis TGA y DSC de SP-4.
Figura 20A. Estructura cristalina de rayos X para 8 (isómero Sp) (molécula N° 1 de la unidad asimétrica) .
Figura 20B. Estructura cristalina de rayos X para 8 (isómero Sp) (molécula N° 2 de la unidad asimétrica) .
Figura 21. Difractograma XRPD de alta resolución de Sp-4 (Forma 6) .
Figura 22A. Estructura cristalina de rayos X para 2-((( S )- (perfluorofenoxi ) ( fenoxi ) fosforil ) amino) propanoato de (S) -isopropilo (molécula N° 1 de la unidad asimétrica).
Figura 22B. Estructura cristalina de rayos X para 2-(( (S) - (perfluorofenoxi) ( fenoxi ) fosforil ) amino) propanoato de (S) -isopropilo (molécula N° 2 de la unidad asimétrica).
Descripción detallada de la invención Definiciones Tal como se utiliza en la presente, la frase "una" entidad, se refiere a una o más de esa entidad, por ejemplo, un compuesto se refiere a uno o más compuestos o al menos a un compuesto. Como tal, los términos "un" (o "una"), "uno o más" y "al menos uno" se pueden usar de manera intercambiable en la presente.
Los términos "opcional" u "opcionalmente" , tal como se usan en la presente, significan que un evento o circunstancia descrito posteriormente puede ocurrir pero no es necesario que ocurra y que la descripción incluye instancias donde el evento o circunstancia ocurre e instancias donde no lo hace. Por ejemplo, "enlace opcional" significa que el enlace puede estar presente o no y que la descripción incluye enlaces simples, dobles o triples.
El término "p*" significa que el átomo de fósforo es quiral y que tiene una designación de Cahn-Ingold-Prelog correspondiente de "R" o "S" que tiene su significado común aceptado .
Tal como se describe en la presente, el término "purificado" se refiere a la pureza de un compuesto dado. Por ejemplo, un compuesto está "purificado" cuando el compuesto dado es un componente principal de la composición, es decir, al menos 50% p/p puro. De este modo, "purificado" abarca al menos 50% p/p de pureza, al menos 60% p/p de pureza, al menos 70% de pureza, al menos 80% de pureza, al menos 85% de pureza, al menos 90% de pureza, al menos 92% de pureza, al menos 94% de pureza, al menos 96% de pureza, al menos 97% de pureza, al menos 98% de pureza, al menos 99% de pureza, al menos 99.5% de pureza y al menos 99.9% de pureza, donde "sustancialmente puro" abarca al menos 97% de pureza, al menos 98% de pureza, al menos 99% de pureza, al menos 99.5% de pureza y al menos 99.9% de pureza.
El término "metabolito" , como se describe en la presente, se refiere a un compuesto producido in vivo luego de su administración a un sujeto que lo necesita.
El término "alrededor de" (representado también por ~) significa que el valor numérico descrito forma parte de un intervalo que varia dentro del error experimental estándar.
La expresión "sustancialmente como se muestra en..." un patrón XRPD especificado significa que las posiciones de los picos mostradas en el patrón XRPD son sustancialmente las mismas, dentro de la inspección visual o recurriendo a listados de picos seleccionados (± 0.2 °2T) . El experto en la técnica entiende que las intensidades pueden variar dependiendo de la muestra.
El término "sustancialmente anhidro" significa que una sustancia contiene como máximo 10% en peso de agua, preferentemente como máximo 1% en peso de agua, más preferentemente como máximo 0.5% en peso de agua y aun más preferentemente como máximo 0.1% en peso de agua.
Un solvente o antisolvente (como se usa en reacciones, cristalización, etc. o solventes en red y/o adsorbidos) incluyendo al menos uno de un alcohol de Ci a C8, un éter de C2 a C8, una cetona de C3 a C7, un éster de C3 a C7/ un clorocarburo de Ci a C2, un nitrilo de C2 a C7, un solvente variado, un hidrocarburo saturado de C5 a Ci2 y un hidrocarburo aromático de C6 a Ci2.
El alcohol de Ci a Ce se refiere a un alcohol de lineal/ramificada y/o ciclico/aciclico que tiene la cantidad de carbonos. El alcohol de Ci a C8 incluye, de modo no taxativo, metanol, etanol, n-propanol, isopropanol, isobutanol, hexanol y ciclohexanol .
El éter de C2 a Ce se refiere a un éter de lineal/ramificada y/o ciclico/aciclico que tiene la cantidad de carbonos. El éter de C2 a C8 incluye, de modo no taxativo, éter dimetilico, éter dietilico, éter di-isopropilico, éter di-n-butilico, éter metil-t-butilico (MTBE) , tetrahidrofurano y dioxano.
La cetona de C3 a C7 se refiere a una cetona de lineal/ramificada y/o ciclica/aciclica que tiene la cantidad de carbonos. La cetona de C3 a C7 incluye, de modo no taxativo, acetona, metil etil cetona, propanona, butanona, metil isobutil cetona, metil butil cetona y ciclohexanona .
El éster de C3 a C7 se refiere a un éster de lineal/ramificada y/o ciclica/aciclica que tiene la cantidad de carbonos. El éster de C3 a C7 incluye, de modo no taxativo, acetato de etilo, acetato de propilo, acetato de n-butilo, etc .
El clorocarburo de Ci a C2 se refiere a un clorocarburo que tiene la cantidad de carbonos. El clorocarburo de Ci a C2 incluye, de modo no taxativo, cloroformo, cloruro de metileno (DCM), tetracloruro de carbono, 1 , 2-dicloroetano y tetracloroetano.
Un nitrilo de C2 a C7 se refiere a un nitrilo que tiene la cantidad de carbonos. El nitrilo de C2 a C7 incluye, de modo no taxativo, acetonitrilo, propionitrilo, etc.
Un solvente variado se refiere a un solvente comúnmente empleado en la química orgánica, que incluye, de modo no taxativo, dietilenglicol, diglima (dietilenglicol dimetil éter), 1, 2-dimetoxi-etano, dimetilformaraida, dimetilsulfóxido, etilenglicol, glicerina, hexametilfosforamida, triamida hexametilfosforosa, N-metil-2-pirrolidinona , nitrometano, piridina, trietilamina y ácido acético.
El término hidrocarburo saturado de C5 a Ci2 se refiere a un hidrocarburo de lineal/ramificada y/o cíclico/acíclico . El hidrocarburo saturado de C5 a C12 incluye, de modo no taxativo, n-pentano, éter de petróleo (ligroine), n-hexano, n-heptano, ciclohexano y cicloheptano.
El término aromático de C6 a C12 se refiere a hidrocarburos sustituidos y no sustituidos que tienen un grupo fenilo como cadena principal. Los hidrocarburos preferidos incluyen benceno, xileno, tolueno, clorbenceno, o-xileno, m-xileno, p-xileno, xilenos, siendo tolueno más preferido .
Tal como se utiliza en la presente, el término "halo" o "halógeno" incluye cloro, bromo, yodo y fluoro.
El término "grupo bloqueante" se refiere a un grupo químico que exhibe las siguientes características. El "grupo" deriva de un "compuesto protector". Los grupos que son selectivos para hidroxilos primarios sobre hidroxilos secundarios se pueden colocar en condiciones consistentes con la estabilidad del fosforamidato (pH 2-8) y otorgan al producto resultante propiedades físicas sustancialmente diferentes permitiendo una más fácil separación del producto del nuevo grupo 3 ' -fosforamidato-5 ' del compuesto deseado sin reaccionar. El grupo debe reaccionar selectivamente con buen rendimiento para proporcionar un sustrato protegido que es estable con respecto a las reacciones proyectadas (véase Protective Groups in Organic Synthesis, 3ra ed. T. W. Greene y P. G. M. Wuts, John iley & Sons, Nueva York, N.Y., 1999). Los ejemplos de grupos incluyen, de modo no taxativo: benzoílo, acetilo, benzoílo sustituido por fenilo, tetrahidropiranilo, tritilo, DMT ( 4 , 4 ' -dimetoxitritilo) , MT ( 4-monometoxitritilo) , trimetoxitritilo, grupo pixilo (9-fenilxanten-9-ilo) , tiopixilo ( 9-feniltioxanten-9-ilo) o 9-(p-metoxifenil) xantina-9-ilo (MOX) , etc.; C (O) -alquilo, C(0)Ph, C(0)arilo, CH20-alquilo, CH20-arilo, S02-alquilo, S02-arilo, terc-butildimetilsililo, terc-butildifenilsililo . Los acétales, tal como MOM o THP y similares, son considerados como grupos posibles. Los compuestos fluorinados también se contemplan en la medida en que puedan estar unidos al compuesto y se pueden quitar selectivamente pasándolos por un medio de extracción de fase sólida fluoroso ( FluoroFlash®) . Un ejemplo especifico incluye un análogo fluorado de tritilo, el análogo de tritilo 1- [ 4- ( 1H, IH, 2H, 2H-perfluorodecil ) fenil) -1 , 1-difenilmetanol . También se contemplan otros análogos fluorados de tritilo, BOC, FMOC, CBz, etc. Los cloruros de sulfonilo como cloruro de p-toluensulfonilo pueden reaccionar selectivamente en la posición 5'. Los ésteres se podrían formar selectivamente, tales como acetatos y benzoatos. Se pueden usar anhídridos dicarboxílieos tales como anhídrido succínico y sus derivados para generar un enlace de éster con un ácido carboxilico libre, tales ejemplos incluyen, de modo no taxativo, oxalilo, malonilo, succinilo, glutarilo, adipilo, pimelilo, superilo, azelailo, sebacilo, ftalilo, isoftalilo, tereftalilo, etc. El ácido carboxilico libre aumenta radicalmente la polaridad y también puede usarse como mango para extraer el producto de reacción en fases acuosas levemente básicas tales como soluciones de bicarbonato de sodio. El grupo fosforamidato es relativamente estable en un medio ácido, por lo que también se podrían utilizar grupos que requieren condiciones de reacción ácidas, tales como, tetrahidropiranilo .
El término "grupo protector", que deriva de un "compuesto protector", tiene su significado habitual, es decir, al menos un grupo protector o bloqueador se une a al menos un grupo funcional (por ej . , -OH, -NH2, etc.) que permite la modificación química de al menos un otro grupo funcional. Los ejemplos de grupos protectores, incluyen, de modo no taxativo, benzoílo, acetilo, benzoílo sustituido con fenilo, tetrahidropiranilo, trifilo, DMT (4,4'-dimetoxitritilo) , MMT (4-monometoxitritilo) , trimetoxitritilo, grupo pixilo ( 9-fenilxantan-9-ilo) , tiopixilo ( 9-feniltioxantan-9-ilo) o 9- (p-metoxifenil) xantina-9-ilo (MOX) , etc.; C (0) -alquilo, C(0)Ph, C(0)arilo, C (0) 0 (alquilo inferior), C (0) 0 (alquileno inferior) arilo (por ej . , -C (O) OCH2Ph) , C(0)0-arilo, CH20-alquilo, CH20-arilo, S02-alquilo, S02-arilo, un grupo protector que comprende al menos un átomo de silicio, tal como, terc-butildimetilsililo, terc-butildifenilsililo, Si (alquilo inferior) 20Si (alquilo inferior) 2OH (tal como, Si (¿Pr) 20Si (iPr)20H.
Tal como se utiliza en la presente y a menos que se defina de otra forma, el término "compuesto protector" se refiere a un compuesto que contiene un "grupo protector" y que es capaz de reaccionar con un compuesto que contiene grupos funcionales que son capaces de ser protegidos.
El término "grupo saliente", tal como se usa en la presente, tiene el mismo significado para el experto (Advanced Organic Chemistry: reactions, mechanisms and structure - Cuarta edición de Jerry March, John Wiley and Sons Ed. ; 1992 páginas 351-357) y representa un grupo que es parte de y está unido a una molécula de sustrato; en una reacción donde la molécula de sustrato se somete a una reacción de desplazamiento (por ejemplo con un nucleófilo) , luego el grupo saliente se desplaza. Ejemplos de grupos salientes incluyen, de modo no taxativo: halógeno (F, CI, Br e I), preferentemente CI, Br o I; tosilato, mesilato, triflato, acetato, camforsulfonato, arilóxido y arilóxido sustituido con al menos un grupo electroaceptor (por ej . , p-nitrofenóxido, 2-clorofenóxido, 4-clorofenóxido, 2,4-dinitrofenóxido, pentafluorofenóxido, etc.), etc. Al término "grupo electroaceptor" se le concede su significado habitual en la presente. Los ejemplos de grupos electroaceptores incluyen, de modo no taxativo, un halógeno, -N02, -C(0) (alquilo inferior), -C (O) (arilo) , -C (O) O (alquilo inferior), -C (O) O (arilo) , etc.
El término "reactivo básico", como se usa en la presente, significa un compuesto capaz de desprotonar un grupo hidroxilo. Ejemplos de reactivos básicos incluyen, de modo no taxativo, un alcóxido inferior ((alquilo inferior ) OM) en combinación con un solvente alcohólico, donde los alcóxidos inferiores, incluyen, de modo no taxativo, MeO", EtCT, nPrO~, iPrO", üBuO" zAmO" (iso-amilóxido) , etc., y donde M es un catión de metal alcalino tal como Li+, Na+, K+, etc. Los solventes alcohólicos incluyen (alquilo inferior) OH, , tal como, por ejemplo, MeOH, EtOH, nPrOH, ^-PrOH, tBuOH, ^OH, etc. Las bases no alcoxi también pueden utilizarse, tal como hidruro de sodio, hexametildisilazano de sodio, hexametildisilazano de litio, diisopropilamida de litio, hidruro de calcio, carbonato de sodio, carbonato de potasio, carbonato de cesio, DBU, DBN, reactivos de Grignard, tales como (alquilo inferior ) g (halógeno) , el cual incluye, de modo no taxativo, MeMgCl, MeMgBr, tBuMgCl, tBuMgBr, etc.
El término "base" abarca el término "reactivo básico" y se pretende sea un compuesto que es capaz de desprotonar un compuesto que contiene protones, es decir, una base de Br0nsted. Además de los ejemplos descritos anteriormente, ejemplos adicionales de una base incluyen, pero de modo no taxativo, piridina, colidina, 2, 6- (alquilo inferior) -piridina, dimetil-anilina, imidazol, N-metil-imidazol, pirazol, N-metil-pirazol, trietilamina, di-isopropiletilamina, etc.
El término "base no nucleofílica" significa un compuesto capaz de actuar como una base de Br0nsted, pero que tiene baja nucleofilicidad. Los ejemplos de bases no nucleofílicas incluyen, de modo no taxativo, carbonato de potasio, carbonato de cesio, di-isopropilamina, di-isopropiletilamina, trietilamina , quinuclidina, naftaleno-1,8-diamina, 2, 2, 6, 6-tetrametilpiperidina, 1,8-diazabicicloundec-7-eno, 4-dimetilamino-piridina, piridina, una 2 , 6-di-Cl-6-alquil-piridina, una 2, 4 , 6-tri-Cl-6-alquil-piridina, 1 , 5-diazabiciclo [ 4.3.0 ] ???-5-eno y 1, 4-diazabiciclo [2.2.2] octano.
Al término "grupo electroaceptor" se le otorga su significado común. Los ejemplos de grupos electroaceptores incluyen, de modo no taxativo, un halógeno (F, Cl, Br o I), -N02, -C (O) (alquilo inferior), -C (O) (arilo) , -C (O ) O ( alquilo inferior), -C (0) O (arilo) , etc.
El término "co-cristalatos" incluye co-cristalatos de 4, Rp-4 , o Sp-4 en combinación con sales, lo cual abarca sales farmacéuticamente aceptables.
Tal como se describe en la presente, el término "sales" se refiere a un compuesto que comprende un catión y un anión, que se puede producir mediante la protonacion de un resto aceptor de protones y/o la desprotonación de un resto donador de protones. Se debería observar que la protonacion del resto aceptor de protones resulta en la formación de una especie catiónica en la que la carga se equilibra mediante la presencia de un anión fisiológico, mientras que la desprotonación del resto donador de protones resulta en la formación de una especie aniónica en la que la carga se equilibra mediante la presencia de un catión fisiológico.
La frase "sal farmacéuticamente aceptable" significa una sal que es farmacéuticamente aceptable. Los ejemplos de sales farmacéuticamente aceptables incluyen, pero no se limitan a: (1) sales de adición de ácido, formadas con ácidos inorgánicos, tales como ácido clorhídrico, ácido bromhídrico, ácido sulfúrico, ácido nítrico, ácido fosfórico y similares, o formadas con ácidos orgánicos, tales como ácido glicólico, ácido pirúvico, ácido láctico, ácido malónico, ácido málico, ácido maleico, ácido fumárico, ácido tartárico, ácido cítrico, ácido 3- (4-hidroxibenzoil) benzoico, ácido cinámico, ácido mandélico, ácido metanosulfónico, ácido etanosulfónico, ácido 1 , 2-etano-disulfónico, ácido 2-hidroxietanosulfónico, ácido bencenosulfónico, ácido 4-clorobencenosulfónico, ácido 2-naftalenosulfónico, ácido 4-toluenosulfónico, ácido canforsulfónico, ácido lauril sulfúrico, ácido glucónico, ácido glutámico, ácido salicílico, ácido mucónico y similares o (2) sales de adición de bases formadas con las bases conjugadas de cualquiera de los ácidos inorgánicos enumerados anteriormente, donde las bases conjugadas comprenden un componente catióníco seleccionado de entre Na+, K+, Mg2+, Ca2+, NHgR' ' ' 4-g+ , en donde R' ' ' es un alquilo Ci-3 y g es un número seleccionado de entre 0, 1, 2, 3 o 4. Debería entenderse que todas las referencias a sales farmacéuticamente aceptables incluyen formas de adición de solventes (solvatos) o formas cristalinas (polimorfos), tal como se definen en la presente, de la misma sal de adición de ácido.
El término "alquilo" se refiere a un residuo de hidrocarburo monovalente, de cadena no ramificada o ramificada, saturado, que contiene de 1 a 30 átomos de carbono. El término "alquilo Ci_M " se refiere a un alquilo que comprende de 1 a M átomos de carbono, donde M es un número entero que tiene los siguientes valores: 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29 o 30. El término "alquilo Ci-4" se refiere a un alquilo que contiene de 1 a 4 átomos de carbono. El término "alquilo inferior" indica un residuo de hidrocarburo de lineal o ramificada que comprende de 1 a 6 átomos de carbono. "Alquilo C1-20"/ tal como se usa en la presente, se refiere a un alquilo que comprende de 1 a 20 átomos de carbono. "Alquilo C1-10", tal como se usa en la presente, se refiere a un alquilo que comprende de 1 a 10 carbonos. Los ejemplos de grupos alquilo incluyen, de modo no taxativo, grupos de alquilo inferior que incluyen metilo, etilo, propilo, i-propilo, n-butilo, i-butilo, t-butilo o pentilo, isopentilo, neopentilo, hexilo, heptilo y octilo. El término (ar) alquilo o (heteroaril ) alquilo indica que el grupo alquilo se sustituye opcionalmente con un grupo arilo o heteroarilo, respectivamente.
El término "alquenilo" se refiere a un radical de cadena de hidrocarburo no sustituida que tiene de 2 a 10 átomos de carbono que tiene uno o dos enlaces dobles olefinicos, preferentemente un enlace doble olefinico. El término "alquenilo C2-N" se refiere a un alquenilo que comprende de 2 a N átomos de carbono, donde N es un número entero que tiene los siguientes valores: 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 o 10. El término "alquenilo C2-io" se refiere a un alquilo que comprende de 2 a 10 átomos de carbono. El término "alquenilo C2-4 " se refiere a un alquenilo que comprende de 2 a 4 átomos de carbono. Los ejemplos incluyen, pero no se limitan a, vinilo, 1-propenilo, 2-propenilo (alilo) o 2-butenilo (crotilo) .
Tal como se utiliza en la presente y a menos que se especifique lo contrario, el término "arilo" se refiere a un fenilo (Ph) , bifenilo o naftilo sustituido o no sustituido, preferentemente el término arilo se refiere a un fenilo sustituido o no sustituido. El grupo arilo puede estar sustituido por uno o más restos seleccionados de entre hidroxilo, F, Cl, Br, I, amino, alquilamino, arilamino, alcoxi, ariloxi, nitro, ciano, ácido sulfónico, sulfato, ácido fosfónico, fosfato y fosfonato, ya sean desprotegidos o protegidos según sea necesario, tal como los conocen los expertos en la técnica, por ejemplo, como se describen en T.W. Greene and P.G. M. Wuts, "Protective Groups in Organic Synthesis," 3ra ed., John Wiley & Sons, 1999.
El término "arilóxido", tal como se usa en la presente y a menos que se especifique lo contrario, se refiere a fenóxido (PhO-) , p-fenil-fenóxido (p-Ph-PhO-) o naftóxido sustituido o insus t ituido , preferentemente el término arilóxido se refiere a fenóxido sustituido o insust ituido . El grupo arilóxido puede estar sustituido por uno o más restos seleccionados de entre hidroxilo, F, Cl, Br, I, -C (0) (alquilo inferior), -C (0) 0 (alquilo inferior) , amino, alquilamino, arilamino, alcoxi, ariloxi, nitro, ciano, ácido sulfónico, sulfato, ácido fosfónico, fosfato y fosfonato, ya sea desprot egidos o protegidos según sea necesario, tal como los conocen los expertos en la técnica, por ejemplo, tal como se describe en T.W Greene and P.G. M. Wuts, "Protective Groups in Organic Synthesis," 3ra ed., John Wiley & Sons, 1999.
El término "preparación" o "forma de dosificación" pretende incluir las formulaciones tanto liquidas como sólidas del compuesto activo y un experto en la técnica comprenderá que un ingrediente activo puede existir en diferentes preparaciones dependiendo de la dosis deseada y los parámetros farmacocinéticos .
El término "excipiente", tal como se usa en la presente, se refiere a un compuesto que se usa para preparar una composición farmacéutica y es generalmente seguro, no tóxico y ni biológicamente ni de otra forma indeseable e incluye excipientes que son aceptables para uso veterinario asi como para uso farmacéutico humano.
El término "cristalina" se refiere a una situación donde una muestra sólida de Sp-4 o #p-4 tiene características cristalinas cuando se determina por difracción de rayos X en polvo o una técnica de rayos X de cristales simple.
El término "pseudo cristalina" se refiere a una situación donde una muestra sólida de SP-4 o i¾>-4 tiene características cristalinas cuando se la determina por un medio, por ej . , visualmente o por microscopía óptica o de polarización, pero no tiene características cristalinas cuando se la determina por otro medio, por ej . , difracción de rayos x en polvo.
Los métodos para determinar visualmente la cristalinidad de una muestra sólida por microscopía visual u óptica o de polarización se describen en las USP <695> y <776>, ambas incorporadas a la presente mediante esta referencia. Una muestra sólida de ¾-4 o i¾-4 que es "pseudo-cristalina" puede ser cristalina en ciertas condiciones pero puede tornarse no cristalina cuando se la somete a otras condiciones .
El término "amorfo/a" se refiere a una situación en la cual una muestra sólida de Sp-4 o 2¾-4 no es cristalina ni pseudo-cristalina .
Modalidades Una primera modalidad se refiere a un compuesto representado por la fórmula 4: 4 donde P* representa un átomo de fósforo quiral. Debido al átomo de fósforo quiral, el compuesto representado por la fórmula 4 comprende dos diastereómeros designados f?p-4 y Sp-4. El compuesto representado por la fórmula 4 también puede ser parte de un solvato, un hidrato o una mezcla solvato/hidrato. El solvato se designa como 4»nS, mientras que el hidrato se designa como 4*mH20, donde S es un solvente en red, n varia de una cantidad entera a no entera de alrededor de 0 a alrededor de 3 y m varía entre una cantidad entera a no entera de alrededor de 0 a alrededor de 5. Finalmente, el compuesto representado por la fórmula 4 puede no existir como un solvato o hidrato, pero puede tener determinada cantidad ventajosa de solvente adsorbido (S) o agua. En ese caso, la cantidad de S o agua puede variar entre alrededor de 0% en peso a alrededor de 10% en peso en función del peso del compuesto representado por la fórmula 4. El compuesto representado por la fórmula 4 y sus solvatos e hidratos son cristalinos, pseudo cristalinos o amorfos.
Una segunda modalidad se refiere a un compuesto epresentado por ??- El compuesto representado por la fórmula Rp-4 también puede ser parte de un solvato, un hidrato o una mezcla de solvato/hidrato . El solvato se designa como Rp-4*nS, mientras que el hidrato se designa como Sp-4»mH20, donde 5 es un solvente en red, n varia de una cantidad entera a no entera de alrededor de 0 a alrededor de 3 y m varia entre una cantidad entera a no entera de alrededor de 0 a alrededor de 5. Finalmente, el compuesto representado por la fórmula í?p— puede no existir como un solvato, hidrato o mezcla de solvato/hidrato, pero puede tener determinada cantidad ventajosa de solvente adsorbido (S) , agua, o tanto S como agua. En el caso, la cantidad de S o agua puede variar entre alrededor de 0% en peso a alrededor de 10% en peso en función del peso del compuesto representado por la fórmula -Rp-4. El compuesto representado por la fórmula Rp-4 y sus solvatos e hidratos son cristalinos, pseudo cristalinos o amorfos.
Un primer aspecto de la segunda modalidad se refiere a Rp-4 cristalina.
Un segundo aspecto de la segunda modalidad se refiere a -Rp-4 cristalina que tiene reflexiones XRPD 2T (°) a alrededor de: 6.6, 7.1, 9.0, 11.6, 17.9, 20.7, 24.1, 24.4 y 26.2.
Un tercer aspecto de la segunda modalidad se refiere a Rp-A cristalina que tiene reflexiones XRPD 2T (°) a alrededor de: 6.6, 7.1, 9.0, 11.0, 11.6, 12.0, 16.0, 17.9, 19.6, 20.7, 21.0, 21.7, 21.9, 22.2, 23.1, 24.1, 24.4, 26.1, 27.3, 27.7 y 28.2.
Un cuarto aspecto de la segunda modalidad se refiere a ip-4 cristalina que tiene un patrón de difracción XRPD sustancialmente como el que se muestra en la Fig. 2.
Un quinto aspecto de la segunda modalidad se refiere a Rp-A que tiene los siguientes picos FT-IR (cm-1) : 1742, 1713, 1679, 1460, 1377, 1259, 1157 y 1079.
Un sexto aspecto de la segunda modalidad se refiere a Rp-A que tiene un espectro FT-IR sustancialmente como el que se muestra en la Fig. 15.
Un séptimo aspecto de la segunda modalidad se refiere a Rp-A sustancialmente pura.
Un octavo aspecto de la segunda modalidad se refiere a Rp-A cristalina sustancialmente pura.
Un noveno aspecto de la segunda modalidad se refiere a Rp-A amorfa sustancialmente pura.
Una tercera modalidad se refiere a un compuesto representado por la fórmula Sp-4: El compuesto representado por la fórmula Sp-4 también puede ser parte de un solvato, un hidrato o una mezcla solvato/hidrato . El solvato se designa como Sp-4*nS, mientras que el hidrato se designa como 5?-4·???20, donde S es un solvente en red, n varia de una cantidad entera a no entera de alrededor de 0 a alrededor de 3 y m varia entre una cantidad entera a no entera de alrededor de 0 a alrededor de 5. Finalmente, el compuesto representado por la fórmula Sp-4 puede no existir como un solvato o hidrato, pero puede tener determinada cantidad ventajosa de solvente adsorbido (S) o agua. En el caso, la cantidad de S o agua puede variar entre alrededor de 0% en peso a alrededor de 10% en peso en función del peso del compuesto representado por la fórmula Sp-4. El compuesto representado por la fórmula Sp-4 y sus solvatos e hidratos son cristalinos, pseudo cristalinos o amorfos.
Un primer aspecto de la tercera modalidad se refiere a Sp-4 cristalina.
Un segundo aspecto de la tercera modalidad se refiere a Sp-4 monoclinica cristalina, preferentemente con los siguientes parámetros de unidad celular a ~ 12.88 Á, b ~ 6.17 Á, c ~ 17.73 A, y ß ~ 92.05°.
Un tercer aspecto de la tercera modalidad se refiere a Sp-4 monoclinica cristalina, preferentemente con los siguientes parámetros de unidad celular a ~ 20.09 Á, b ~ 6.10 Á, c ~ 23.01 Á, y ß ~ 112.29° .
Un cuarto aspecto de la tercera modalidad se refiere a Sp-4 monoclinica cristalina, preferentemente con los siguientes parámetros de unidad celular a - 12.83 Á, b ~ 6.15 Á, c ~ 17.63 A, y ß ~ 91.75°.
Un quinto aspecto de la tercera modalidad se refiere a Sp-4 monoclinica cristalina, preferentemente con los siguientes parámetros de unidad celular a ~ 12.93 Á, b ~ 6.18 A, c ~ 18.01 A, y ß ~ 96.40°.
Un sexto aspecto de la tercera modalidad se refiere a Sp-4 cristalina que tiene reflexiones XRPD 2T (°) a alrededor de: 5.2, 7.5, 9.6, 16.7, 18.3, 22.2.
Un séptimo aspecto de la tercera modalidad se refiere a Sp-4 cristalina que tiene reflexiones XRPD 2T (°) a alrededor de: 5.0, 7.3, 9.4 y 18.1.
Un octavo aspecto de la tercera modalidad se refiere a Sp-4 cristalina que tiene reflexiones XRPD 2T (°) a alrededor de: 4.9, 6.9, 9.8, 19.8, 20.6, 24.7 y 26.1.
Un noveno aspecto de la tercera modalidad se refiere a Sp-4 cristalina que tiene reflexiones XRPD 2T (°) a alrededor de: 6.9, 9.8, 19.7, 20.6 y 24.6.
Un noveno aspecto de la tercera modalidad se refiere a Sp-4 cristalina que tiene reflexiones XRPD 2T (°) a alrededor de: 5.0, 6.8, 19.9, 20.6, 20.9 y 24.9.
Un décimo aspecto de la tercera modalidad se refiere a Sp-4 cristalina que tiene reflexiones XRPD 2T (°) a alrededor de: 5.2, 6.6, 7.1, 15.7, 19.1 y 25.0.
Un decimoprimero aspecto de la tercera modalidad se refiere a Sp-4 cristalina que tiene reflexiones XRPD 2T (°) a alrededor de: 6.1, 8.2, 10.4, 12.7, 17.2, 17.7, 18.0, 18.8, 19.4, 19.8, 20.1, 20.8, 21.8 y 23.3.
Un decimosegundo aspecto de la tercera modalidad se refiere a Sp-4 cristalina que tiene un patrón de difracción de XRPD sustancialmente como el mostrado en cualquiera de las Fig. 3, Fig. 4, Fig. 5, Fig. 6, Fig. 7, Fig. 8 y Fig. 21.
Un decimotercero aspecto de la tercera modalidad se refiere a Sp-4 que tiene los siguientes picos de FT-IR (cirf1) a alrededor de: 1743, 1713, 1688, 1454, 1378, 1208 y 1082.
Un decimocuarto aspecto de la tercera modalidad se refiere a Sp-4 que tiene un espectro de FT-IR sustancialmente como el que se muestra en la Fig. 7.
Un decimoquinto aspecto de la tercera modalidad se refiere a Sp-4 sustancialmente pura.
Un decimosexto aspecto de la tercera modalidad se refiere a Sp-4 cristalina sustancialmente pura.
Un decimoséptimo aspecto de la tercera modalidad se refiere a Sp-4 amorfa sustancialmente pura.
Dosificación , administración y uso Una cuarta modalidad se refiere a una composición para el tratamiento y/o profilaxis de cualquiera de los agentes virales usando cualquiera de los compuestos 4, Rp-4, o Sp-4. Los agentes virales posibles incluyen, de modo no taxativo: virus de la hepatitis C, virus de la hepatitis B, virus de la hepatitis A, virus del Nilo occidental, virus de la fiebre amarilla, virus del dengue, rinovirus, virus del polio, virus de la diarrea viral bovina, virus de la encefalitis japonesa o aquellos virus que corresponden a los grupos de pestivirus, hepacivirus o flavivirus.
Un aspecto de esta modalidad se refiere a una composición para tratar cualquiera de los agentes virales descritos en la presente, la composición comprende un medio farmacéuticamente aceptable seleccionado de entre un excipiente, portador, diluyente y medio equivalente y cualquiera de los compuestos 4, i?p-4, o Sp-4, que pretende incluir sus hidratos, solvatos y cualquier forma cristalina de cualquiera de los compuestos 4, Rp-4, o Sp-4 o los hidratos y solvatos de estos.
Los compuestos 4, ??- , o Sp-4 pueden formularse independientemente en una amplia variedad de formas de dosificación de administración oral y portadores. La administración oral puede estar en forma de comprimidos, comprimidos recubiertos, cápsulas de gelatina dura o blanda, soluciones, emulsiones, jarabes o suspensiones. Los compuestos 4, Rp-4, o Sp-4 son eficaces cuando se administran mediante administración por supositorio, entre otras vías de administración. La forma más conveniente de administración es generalmente oral, usando un régimen de dosificación diario conveniente que se puede ajustar de acuerdo con la gravedad de la enfermedad y la respuesta del paciente a la medicación antiviral .
Los compuestos 4, f?p-4, o Sp-4 junto con uno o más excipientes, portadores o diluyentes convencionales pueden colocarse en forma de composiciones farmacéuticas y dosificaciones unitarias. Las composiciones farmacéuticas y formas de dosificación unitaria pueden estar compuestas por ingredientes convencionales en proporciones convencionales, con o sin compuestos activos adicionales y las formas de dosificación unitaria pueden contener cualquier cantidad eficaz adecuada del ingrediente activo en proporción al intervalo de dosificación diario deseado a ser utilizado. Las composiciones farmacéuticas se pueden emplear como sólidos, tal como comprimidos o cápsulas rellenas, semisólidos, polvos, formulaciones de liberación sostenida o líquidos tales como suspensiones, emulsiones o cápsulas rellenas para uso oral o en forma de supositorios para la administración rectal o vaginal. Una preparación típica contendrá de alrededor de un 5% a alrededor de un 95% de compuesto o compuestos activos (p/p) .
Los compuestos 4, i?p-4, o Sp-4 pueden administrarse solos, pero generalmente se administrarán en una mezcla con uno o más excipientes, diluyentes o portadores farmacéuticos adecuados seleccionados según la vía de administración deseada y la práctica farmacéutica estándar.
Las preparaciones de forma sólida incluyen, por ejemplo, polvos, comprimidos, pildoras, cápsulas, supositorios y gránulos dispersables . Un portador sólido puede ser una o más sustancias que también pueden actuar como diluyentes, agentes saborizantes, solubilizantes, lubricantes, agentes de suspensión, aglutinantes, conservadores, agentes de desintegración de comprimidos o un material de encapsulación . En el caso de los polvos, el portador generalmente es un sólido finamente dividido que es una mezcla con el componente activo finamente dividido. En el caso de los comprimidos, el componente activo generalmente se mezcla con el portador que tiene la capacidad de unión necesaria en proporciones adecuadas y se comprime en la forma y tamaño deseados. Los portadores adecuados incluyen, de modo no taxativo, carbonato de magnesio, estearato de magnesio, talco, azúcar, lactosa, pectina, dextrina, almidón, gelatina, tragacanto, metilcelulosa, carboximetilcelulosa de sodio, una cera de baja fusión, manteca de cacao y similares. Las preparaciones de forma sólida puede contener, además del componente activo, colorantes, sabores, estabilizantes, amortiguadores, endulzantes artificiales y naturales, dispersantes, espesantes, agentes de solubilizacion y similares. Los ejemplos de formulaciones sólidas se ejemplifican en los documentos EP 0524579; US 2002/0142050; US 2004/0224917; US 2005/0048116; US 2005/0058710; US 2006/0034937; US 2006/0057196; US 2006/0188570; US 2007/0026073; US 2007/0059360; US 2007/0077295; US 2007/0099902; US 2008/0014228; US 6,267,985; US 6,294,192; US 6,383,471; US 6,395,300; US 6,569,463; US 6,635,278; US 6,645,528; US 6,923,988; US 6,932,983; US 7,060,294 y US 7,462,608, cada uno de los cuales se incorpora mediante esta referencia.
Las formulaciones liguidas también son adecuadas para administración oral e incluyen formulaciones liquidas que incluyen emulsiones, jarabes, elixires y suspensiones acuosas. Estas incluyen preparaciones de forma sólida que se pretende convertir en preparaciones de forma liquida poco antes de su uso. Los ejemplos de formulaciones liquidas se ejemplifican en las patentes estadounidenses N° 3,994,974, 5,695,784 y 6,977,257. Las emulsiones se pueden preparar en soluciones, por ejemplo, en soluciones de propilenglicol acuoso o pueden contener agentes emulsionantes tales como lecitina, monooleato de sorbitán o acacia. Las suspensiones acuosas se pueden preparar por medio de la dispersión del componente activo finamente dividido en agua con material viscoso, tal como gomas, resinas, metilcelulosa, carboximetilcelulosa de sodio naturales o sintéticos y otros agentes de suspensión bien conocidos.
Los compuestos 4, -Rp-4, o Sp-4 pueden formularse independientemente para administrarse como supositorios. Una cera de baja fusión, tal como una mezcla de glicéridos de ácido graso o manteca de cacao se derrite primero y el componente activo se dispersa homogéneamente, por ejemplo, por medio de agitación. La mezcla homogénea fundida luego se vierte en moldes con tamaño conveniente, se deja enfriar y solidificar .
Los compuestos 4, Rp-&, o Sp-A pueden formularse independientemente para administración vaginal. Los óvulos vaginales, tampones, cremas, geles, pastas, espumas o rociadores que contienen los portadores además del ingrediente activo se conocen en la técnica como apropiados. Algunas de estas formulaciones también pueden ser usadas junto con un condón con o sin un agente espermicida.
Las formulaciones adecuadas junto con portadores, diluyentes y excipientes farmacéuticos se describen en Remington: The Science and Practice of Pharmacy 1995, editado por E. W. Martin, Mack Publishing Company, 19a edición, Easton, Pensilvania, el cual se incorpora a la presente mediante esta referencia. Un científico de formulación experto puede modificar las formulaciones dentro de las descripciones de la invención para proporcionar numerosas formulaciones para una vía de administración particular sin hacer que las composiciones que contienen los compuestos contemplados en la presente sean inestables ni comprometer su actividad terapéutica.
Adicionalmente, los compuestos purificados 4, i?p-4 o Sp-4 pueden formularse independientemente en conjunto con liposomas o micelas. En cuanto a los liposomas, se contempla que los compuestos purificados pueden formularse en una manera como la que se describe en las patentes estadounidenses N°. 4,797,285; 5,013,556; 5,077,056; 5,077,057; 5,154,930; 5,192,549; 5,213,804; 5,225,212; 5,277,914; 5,316,771; 5,376,380; 5,549,910; 5,567,434; 5,736,155; 5,827,533; 5,882,679; 5,891,468; 6,060,080; 6,132,763; 6,143,321; 6,180,134; 6,200,598; 6,214,375; 6,224,903; 6,296,870; 6,653,455; 6,680,068; 6,726,925; 7, 060, 689 y 7, 070, 801, cada una de las cuales se incorpora mediante esta referencia. En cuanto a las micelas, se contempla que los compuestos purificados pueden formularse en una manera como la que se describe en las patentes estadounidenses N° 5,145,684 y 5,091,188, ambas incorporadas a la presente mediante esta referencia.
La quinta modalidad se refiere al uso de cualquiera de los compuestos 4, i?p-4, o Sp-4 en la elaboración de un medicamento para tratar cualquier afección que resulte de una infección por cualquiera de los siguientes agentes virales: virus de la hepatitis C, virus del Nilo occidental, virus de la fiebre amarilla, virus del dengue, rinovirus, virus del polio, virus de la hepatitis A, virus de la diarrea viral bovina y virus de la encefalitis japonesa.
El término "medicamento" significa una sustancia usada en un método de tratamiento y/o profilaxis de un sujeto que lo necesita, donde la sustancia incluye, de modo no taxativo, una composición, una formulación, una forma de dosificación y similares, que comprende cualquiera de los compuestos 4, Rp-4, o Sp-4. Se contempla el uso de cualquiera de los compuestos 4, Rp-Af o Sp-4 en la elaboración de un medicamento para tratar cualquiera de las afecciones virales descritas en la presente, solo o en combinación con otro compuesto descrito en la presente. Un medicamento incluye, de modo no taxativo, cualquiera de las composiciones contempladas por la cuarta modalidad descrita en la presente.
Una sexta modalidad se refiere a un método de tratamiento y/o profilaxis en un sujeto que lo necesita, el método comprende administrar una cantidad terapéuticamente eficaz de cualquiera de los compuestos 4, i¾p-4 , o Sp-4 al sujeto.
Se pretende que un sujeto que lo necesita sea uno que tiene cualquier afección que sea el resultado de una infección por cualquiera de los agentes virales descritos en la presente, que incluye, de modo no taxativo, virus de la hepatitis C, virus del Nilo occidental, virus de la fiebre amarilla, virus del dengue, rinovirus, virus del polio, virus de la hepatitis A, virus de la diarrea viral bovina o virus de la encefalitis japonesa, virus flaviviridae o pestivirus o hepacivirus o un agente viral que causa síntomas equivalentes o comparables a cualquiera de los virus mencionados anteriormente .
El término "sujeto" significa un mamífero, que incluye, de modo no taxativo, ganado, cerdos, ovejas, gallinas, pavos, búfalos, llamas, avestruces, perros, gatos y seres humanos, preferentemente el sujeto es un ser humano. Se contempla que en el método de tratamiento de un sujeto de la novena modalidad puede estar cualquiera de los compuestos contemplados en la presente, ya sea solo o combinado con otro compuesto descrito en la presente.
El término "cantidad terapéuticamente eficaz", tal como se usa en la presente, significa una cantidad requerida para reducir los síntomas de la enfermedad en un individuo. La dosis se ajustará a los requisitos individuales en cada caso particular. La dosis puede variar dentro de amplios límites dependiendo de numerosos factores tales como la gravedad de la enfermedad a ser tratada, la edad y el estado de salud general del paciente, otros medicamentos con los cuales se esté tratando al paciente, la vía y forma de administración y las preferencias y experiencia del médico involucrado. Para la administración oral, una dosis diaria de entre alrededor de 0.001 y alrededor de 10 g, incluyendo todos los valores comprendidos entremedio, tales como 0.001, 0.0025, 0.005, 0.0075, 0.01, 0.025, 0.050, 0.075, 0.1, 0.125, 0.150, 0.175, 0.2, 0.25, 0.5, 0.75, 1, 1.5, 2, 2.5, 3, 3.5, 4, 4.5, 5, 5.5, 6, 6.5, 7, 7.5, 8, 8.5, 9 y 9.5, por dia, debería ser apropiada en monoterapia y/o terapia combinada. Una dosis diaria particular es de entre alrededor de 0.01 y alrededor de 1 g por día, incluyendo todos los valores crecientes de 0.01 g (es decir, 10 mg) entremedio, una dosis diaria preferida de entre alrededor de 0.01 y alrededor de 0.8 g por día, más preferentemente entre alrededor de 0.01 y alrededor de 0.6 g por día y aun más preferentemente entre alrededor de 0.01 y alrededor de 0.25 g por día, cada una de las cuales incluye todos los valores crecientes de 0.01 g entremedio. Generalmente, el tratamiento comienza con una "dosis de carga" inicial alta para reducir o eliminar rápidamente el virus y después se reduce la dosis a un nivel suficiente como para prevenir el resurgimiento de la infección. Un experto en el tratamiento de enfermedades descritas en la presente será capaz, sin necesidad de una experimentación indebida y confiando en su conocimiento, experiencia y las descripciones de esta solicitud, determinar una cantidad terapéuticamente eficaz del compuesto descrito en la presente para una enfermedad y un paciente dados.
La eficacia terapéutica se puede determinar a partir de pruebas de las funciones hepáticas, incluyendo, de modo no taxativo, niveles de proteínas tales como proteínas en suero (por e . , albúmina, factores de coagulación, fosfatasa alcalina, aminotransferasas (por ej . , transaminasa de alanina, transaminasa de aspartato) , 5 ' -nucleosidasa, ?-glutaminiltranspeptidasa, etc.), síntesis de bilirrubina, síntesis de colesterol y síntesis de ácidos biliares; una función metabólica hepática, incluyendo, de modo no taxativo, metabolismo de carbohidrato, aminoácidos y metabolismo de amoníaco. De manera alternativa, la eficacia terapéutica puede monitorearse por medio de la medición de VHC-ARN. Los resultados de estas pruebas permitirán la optimización de la dosis .
Un primer aspecto de la sexta modalidad se refiere a un método de tratamiento y/o profilaxis en un sujeto que lo necesita; el método comprende administrarle al sujeto una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto representado por cualquiera de los compuestos 4, Rp-A , o Sp-4 y una cantidad terapéuticamente eficaz de otro agente antiviral; donde la administración es concomitante o alternativa. Se entiende que el tiempo entre las administraciones alternativas puede variar entre 1-24 horas, lo que incluye cualquier sub-intervalo entre medio, incluyendo 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22 y 23 horas.
Los ejemplos de "otro agente antiviral" incluyen, de modo no taxativo: inhibidores de la proteasa NS3 del VHC (véanse los documentos EP 1881001, US 2003187018, US 2005267018, WO 2003006490, WO 200364456, WO 2004094452, WO 2005028502, WO 2005037214, WO 2005095403, WO 2007014920, WO 2007014921, WO 2007014922, WO 2007014925, WO 2007014926, WO 2007015824, WO 2008010921 y WO 2008010921); inhibidores de NS5B del VHC (véanse los documentos US 2004229840, US 2005154056, US 2005-98125, US 20060194749, US 20060241064, US 20060293306, US 2006040890, US 2006040927, US 2006166964, US 2007275947, US 6784166, US20072759300 , WO 2002057287, WO 2002057425, WO 2003010141, WO 2003037895, WO 2003105770, WO 2004000858, WO 2004002940, WO 2004002944, WO 2004002977, WO 2004003138, WO 2004041201, WO 2004065367, WO 2004096210, WO 2005021568, WO 2005103045, WO 2005123087, WO 2006012078, WO 2006020082, WO 2006065335, WO 2006065590, WO 2006093801, WO 200702602, WO 2007039142, WO 2007039145, WO 2007076034, WO 2007088148, WO 2007092000 y WO2007095269) ; inhibidores de NS4 del VKC (véanse los documentos WO 2005067900 y WO 2007070556); inhibidores de NS5a de VHC (véanse los documentos US 2006276511, O 2006035061, O 2006100310, WO 2006120251 y WO 2006120252) ; agonistas del receptor tipo toll (véase el documento WO 2007093901) y otros inhibidores (véanse los documentos WO 2000006529, WO 2003101993, WO 2004009020, WO 2004014313, WO 2004014852 y WO 2004035571) y compuestos descritos en la solicitud de patente estadounidense N° 12/053,015, presentada el 21 de marzo de 2008 (US 2010/0016251) (cuyo contenido se incorpora a la presente mediante esta referencia) , interferón-a, interferón-ß, interferón- pegilado, ribavirina, levovirina, viramidina, otro inhibidor de polimerasa del VHC nucleósido, un inhibidor de polimerasa del VHC no nucleósido, un inhibidor de proteasa del VHC, un inhibidor de helicasa del VHC o un inhibidor de fusión del VHC.
Cuando cualquiera de los compuestos 4, Rp-4, o Sp-4 se administran en combinación con otro agente antiviral, la actividad puede aumentar sobre la del compuesto original. Cuando el tratamiento es una terapia combinada, la administración puede ser concomitante o consecutiva con respecto a aquella de los derivados de nucleósidos. "Administración concomitante", tal como se usa en la presente, incluye, por lo tanto, la administración de los agentes a la misma vez o en momentos diferentes. La administración de dos o más agentes a la misma vez se puede lograr por medio de una sola formulación que contiene dos o más ingredientes activos o por administración sustancialmente simultánea de dos o más formas de dosificación con un solo agente activo.
Se entenderá que las referencias en la presente al tratamiento alcanzan la profilaxis asi como el tratamiento de las afecciones existentes. Además, el término "tratamiento" de una infección por VHC, tal como se usa en la presente, también incluye el tratamiento o profilaxis de una enfermedad o afección asociada con o mediada por infección por VHC, o los síntomas clínicos de la misma.
Preparación Una séptima modalidad se refiere a un proceso para preparar cualquiera de los compuestos 4, Rp-4 , o Sp-A, el cual comprende: a) hacer reaccionar isopropil-alanato, A, un di-LG-fenilfosfato, B, 2 ' -desoxi-2' -fluoro-2 ' -C-metiluridina, 3 y una base para obtener una primera mezcla que comprende al menos uno de Rp-4 y Sp-4 donde X es una base conjugada de un ácido, n es 0 o 1 y LG es un grupo saliente; b) hacer reaccionar la primera mezcla con un compuesto protector para obtener una segunda mezcla que comprende al menos un 5p-4 protegido y un Rp-4 protegido; y c) someter opcionalmente la segunda mezcla a cristalización, cromatografía o extracción para obtener 4, J?p-4 o Sp-4.
En un primer aspecto de la séptima modalidad, el isopropil alanato está presente como su sal de ácido clorhídrico, que es preferentemente sustancialmente anhidra.
En un segundo aspecto de la séptima modalidad, la base es N-metilimidazol .
En un tercer aspecto de la séptima modalidad, la proporción molar de A-a-B-a-3 es de alrededor de 1.6-a-1.3-a-1.
En un cuarto aspecto de la séptima modalidad, el compuesto protector es t-butildimetilsilil cloruro.
Una octava modalidad se refiere a un proceso para preparar Rp-A o Sp-4, el cual comprende: a) hacer reaccionar isopropil-alanato, A, un di-LG-fenilfosfato, B, 2 ' -desoxi-2 ' -fluoro-2 ' -C-metiluridina, 3 y una base para obtener una primera mezcla que comprende al menos una de Rp-A y Sp-4 donde X es una base conjugada de un ácido, n es 0 o 1 y LG es un grupo saliente y b) opcionalmente someter la segunda mezcla a cristalización, cromatografía o extracción para obtener £p-4 o Sp-4 purificados.
Un primer aspecto de la octava modalidad para preparar Rp- incluye además purificar adicionalmente la segunda mezcla del Rp-4 purificado disolviendo o suspendiendo la segunda mezcla o la mezcla de Rp-4 purificada en un solvente; seguido opcionalmente del sembrado con Rp-4 cristalino/ y agregar suficiente antisolvente para obtener Rp-4 cristalino.
Un segundo aspecto de la octava modalidad para preparar Sp-4 además incluye purificar adicionalmente la segunda mezcla del Sp-4 purificado d) disolviendo o suspendiendo la segunda mezcla o el Sp-4 purificado en un solvente seguido por el sembrado con Sp-4 cristalino a alrededor de temperatura ambiente; recogiendo un primer sólido, la mayoría del cual comprende Sp-4; disolviendo el primer sólido en un solvente a su temperatura de reflujo; y enfriando o agregando un antisolvente para obtener un segundo sólido.
Un tercer aspecto de la octava modalidad para la preparación de Sp-4, además incluye purificar adicionalmente Sp-4 al d) disolver o suspender la segunda mezcla o la mezcla de Sp-4 purificada en un primer solvente seguido por la adición de un antisolvente para obtener una primera composición en la cual el solvente residual/antisolvente se retira mediante decantación para obtener un residuo; tratar el residuo con una solución que contiene el primer solvente y antisolvente para proporcionar una segunda composición por la cual la reducción de la presión proporciona un primer sólido; disolver o suspender el primer sólido usando un segundo solvente para obtener una tercera composición; agregar cristales de siembra de Sp-4 a la tercera composición; recoger un segundo sólido; disolver o suspender el segundo sólido en un tercer solvente, opcionalmente calentado a la temperatura de reflujo del tercer solvente para obtener una cuarta composición y, en caso de ser necesario, enfriar la cuarta composición para obtener un tercer sólido que comprende Sp-4 que se recoge por filtración.
En un cuarto aspecto de la octava modalidad para la preparación de Sp-4, Sp-4 se purifica adicionalmente mediante la segunda mezcla del Sp-4 purificado al d) agregar gel de sílice a la segunda mezcla o el Sp-4 purificado, seguido por la evaporación del solvente para proporcionar una lechada seca; agitar la lechada seca en una primera combinación de solvente/antisolvente para obtener una primera lechada húmeda; decantar la primera combinación de solvente/antisolvente de la primera lechada húmeda para obtener una segunda lechada húmeda y una primera composición; agregar a la segunda suspensión húmeda una segunda combinación de solvente/antisolvente seguido por agitación; decantar la segunda combinación de solvente/antisolvente de la segunda lechada húmeda para obtener una tercera lechada húmeda y una segunda composición; opcionalmente repetir las etapas g) -h) en la tercera lechada húmeda o lechadas húmedas adicionales; evaporar el solvente de la segunda composición y opcionalmente cualquier composición adicional obtenida de la etapa opcional i) para obtener un primer sólido; disolver o suspender el primer sólido en una solución que contiene un tercer solvente y opcionalmente un cuarto solvente para obtener una tercera composición; opcionalmente agregar cristales de siembra de Sp-4 a la tercera composición; obtener de la tercera composición un segundo sólido que comprende Sp-4; y opcionalmente volver a cristalizar el segundo sólido usando un tercer solvente para obtener un tercer sólido que comprende Sp-4.
Un experto comprenderá que los compuestos se pueden separar mediante extracción tradicional, cristalización tradicional o técnicas cromatográficas tradicionales. Las técnicas cromatográficas tradicionales incluyen, de modo no taxativo, cromatografía de gel de sílice (usando, por ej . , metanol al 3-5% en DCM o isopropanol al 4-6% en DCM) para producir niveles mejorados de un isómero (50-100%) y luego cristalizarlo. De manera alternativa, se podría usar cromatografía de fase inversa (usando, por ej . , acetonitrilo al 1-30%-fase móvil acuosa) . Además, los compuestos se pueden aislar por medio de cromatografía de fluidos supercríticos SFC con dióxido de carbono como el solvente principal y alcoholes tales como metanol como modificador, preferentemente usando el medio quiral apropiado, tal como Daicel Chiralpack IA. De manera alternativa, se puede emplear cromatografía SMB usando el medio quiral apropiado, tal como Daicel ChiralPack IA, usando una mezcla de solventes tales como hexanos/isopropanol o un único solvente tal como acetato de etilo.
Una novena modalidad se refiere a un proceso para preparar Sp-4, que comprende: a) hacer reaccionar un isopropil-alanil-fosforamidato con un 3, protegido por 3 ' -0 o desprotegido y un reactivo básico para obtener una composición que comprende Sp-4 protegido o desprotegido. reactivo básico Sp-4 + 4 (protegido o desprotegido) mezcla de diastereómeros donde el isopropil-alanil-fosforamidato está compuesto por una mezcla de diastereómeros representados por las siguientes estructuras: C C donde la proporción de C:C es de alrededor de 1:1.
En un primer aspecto, el reactivo básico es cloruro de t-butilmagnesio y la proporción de C:C es mayor o igual a alrededor de 1:1.
En un segundo aspecto, el reactivo básico es cloruro de t-butilmagnesio y la proporción de C:C es mayor a alrededor de 1:1.
En un tercer aspecto, el reactivo básico es cloruro de t-butilmagnesio y la proporción de C:C es al menos alrededor de 1.5:1, alrededor de 2.3:1, alrededor de 4:1, alrededor de 5.7:1, alrededor de 9:1, alrededor de 19:1, alrededor de 32.3:1, alrededor de 49:1 o alrededor de 99:1.
En un cuarto aspecto, LG' se selecciona de entre 2,4-dinitrofenóxido, 4-nitrofenóxido, 2-nitrofenóxido, 2-cloro-4-nitrofenóxido, 2, 4-diclorofenóxido y pentafluorofenóxido, el reactivo básico es cloruro de t-butilmagnesio y la proporción de C:C es al menos alrededor de 1.5:1, alrededor de 2.3:1, alrededor de 4:1, alrededor de 5.7:1, alrededor de 9:1, alrededor de 19:1, alrededor de 32.3:1, alrededor de 49:1 o alrededor de 99:1.
Un quinto aspecto para preparar Sp-4, comprende: a) hacer reaccionar un isopropil-alanil-fodforamidato (C) con un 3 protegido por 3'-0 o desprotegido, y un reactivo básico para obtener una composición que comprende Sp-4 protegido o desprotegido. 3 C donde Z es un grupo protector o hidrógeno; LG' es un grupo saliente y b) opcionalmente someter el Sp-4 protegido o desprotegido obtenido a cromatografía, extracción o cristalización para obtener un Sp-4 purificado protegido o desprotegido. En una sub-modalidad, LG' es tosilato, canforsulfonato o un arilóxido sustituido por al menos un grupo electroaceptor; más preferentemente, LG' se selecciona de entre 2, -dinitrofenóxido, 4-nitrofenóxido, 2-nitrofenóxido, 2-cloro-4-nitrofenóxido, 2, 4-diclorofenóxido o pentafluorofenóxido . En una sub-modalidad adicional, cuando Sp-4 está protegido, es decir, Z no es hidrógeno, el proceso de la novena modalidad se refiere además a desproteger el 5p-4 protegido. En otra sub-modalidad, la reacción se lleva a cabo en un solvente aprótico polar, tal como, tetrahidrofurano u otro solvente etéreo ya sea uno solo o los dos combinados o con un nitrilo de C2 a C7, tal como acetonitrilo.
El proceso de la novena modalidad también comprende 1) hacer reaccionar (LG ' ) P (0) (LG) 2, donde LG, independientemente de LG', es un grupo saliente, con (i) isopropil-alanato y una primera base para obtener (LG')P(O) (LG) (NHAla-iPr) seguido por hacer reaccionar (LG')P(O) (LG) (NHAla-1Pr) con fenol y una segunda base para obtener una mezcla que comprende C y C , (ii) fenol y una primera base para obtener (LG 1 ) P (0) (LG) (OPh) seguido por hacer reaccionar (LG ' ) P (0) (LG) (OPh) con isopropil-alanato y una segunda base para obtener una mezcla que comprende C y C , o (iii) combinar isopropil-alanato, fenol y al menos una base para obtener una mezcla que comprende C y C ; o 2) hacer reaccionar (PhO)P(O) (LG)2, donde LG es un grupo saliente, con (i) isopropil-alanato y una primera base para obtener (PhO)P(O) (LG) (NHAla-2Pr) seguido de hacer reaccionar (PhO)P(O) (LG) (NHAla-aPr) con un precursor de un grupo saliente (LG'H) y una segunda base para obtener una mezcla que comprende C y C , C C y someter la mezcla a cromatografía o cristalizar la mezcla para obtener C. En un aspecto de la novena modalidad, el isopropil alanato está presente como su sal de ácido clorhídrico, que preferentemente es sustancialmente anhidra.
Una décima modalidad se refiere a un proceso para preparar Rp -A , el cual comprende: a) hacer reaccionar un isopropil-alanil-fosforamidato con un 3 , desprotegido o protegido por 3 ' -0 y un reactivo básico para obtener una composición que comprende RP- protegido o desprotegido. reactivo básico _ . _ . * *- ^ + (protegido o desprotegido) mezcla de diíistereóineros donde el isopropil-alanil-fosforamidato está compuesto por una mezcla de diastereómeros , representados por las siguientes estructuras: C c donde la proporción de C :C es de alrededor de 1:1.
En un primer aspecto, el reactivo básico es cloruro de t-butilmagnesio y la proporción de C :C es mayor o igual a alrededor de 1:1.
En un segundo aspecto, el reactivo básico es cloruro de t-butilmagnesio y la proporción de C :C es mayor a alrededor de 1:1.
En un tercer aspecto, el reactivo básico es cloruro de t-butilmagnesio y la proporción de C :C es al menos alrededor de 1.5:1, alrededor de 2.3:1, alrededor de 4:1, alrededor de 5.7:1, 'alrededor de 9:1, alrededor de 19:1, alrededor de 32.3:1, alrededor de 49:1 o alrededor de 99:1.
En un cuarto aspecto, el LG ' es p-nitrofenóxido, el reactivo básico es cloruro de t-butilmagnesio y la proporción de C':C es al menos alrededor de 1.5:1, alrededor de 2.3:1, alrededor de 4:1, alrededor de 5.7:1, alrededor de 9:1, alrededor de 19:1, alrededor de 32.3:1, alrededor de 49:1 o alrededor de 99:1.
Un quinto aspecto para preparar Rp-4, comprende: a) hacer reaccionar un isopropil-alanil-fosforamidato (C ) con un 3 desprotegido o protegido por 3 ' -0 y un reactivo básico para obtener una composición que comprende Rp-4 protegido o desprotegido . c donde Z es un grupo protector o hidrógeno; LG' es un grupo saliente y b) opcionalmente someter el Rp-4 protegido o desprotegido obtenido a cromatografía, extracción o cristalización para obtener í?p-4 protegido o desprotegido. En una sub-modalidad, LG1 es tosilato, canforsulfonato o un arilóxido sustituido por al menos un grupo electroaceptor; más preferentemente, LG 1 se selecciona de p-nitrofenóxido, 2 , 4-dinitrofenóxido y pentafluorofenóxido . En una sub-modalidad adicional, cuando 2¾-4 está protegido, es decir, Z no es hidrógeno, el proceso de la novena modalidad se refiere además a desproteger el í?p-4 protegido. En otra sub-modalidad, la reacción se lleva a cabo en un solvente aprótico polar, tal como, tetrahidrofurano u otro solvente etéreo ya sea uno solo o los dos combinados o con un nitrilo de C2 a C7, tal como acetonitrilo .
El proceso de la décima modalidad también comprende 1) hacer reaccionar (LG ' ) P (0) (LG) 21 donde LG, independientemente de LG', es un grupo saliente, con (i) isopropil-alanato y una primera base para obtener (LG ' ) P (0) (LG) (NHAla-2Pr) seguido por hacer reaccionar (LG' ) P (0) (LG) (NHAla-iPr) con fenol y una segunda base para obtener una mezcla que comprende C y C , (ii) fenol y una primera base para obtener (LG' ) P (0) (LG) (OPh) seguido por hacer reaccionar (LG ' ) P (0) (LG) (OPh) con isopropil-alanato y una segunda base para obtener una mezcla que comprende C y C , o (iii) combinar isopropil-alanato, fenol y al menos una base para obtener una mezcla que comprende C y C ; o 2) hacer reaccionar (PhO) P(0) (LG) 2, donde LG', independiente de LG, es un grupo saliente, con (i) isopropil-alanato y una primera base para obtener (PhO)P(O) (LG) (NHAla-^Pr) seguido por hacer reaccionar (PhO)P(O) (LG) (NHAla-2Pr) con un precursor de un grupo saliente y una segunda base para obtener una mezcla que comprende C y C , C C y someter la mezcla a cromatografía o cristalizar la mezcla para obtener C . En un aspecto de la novena modalidad, el isopropil alanato está presente como su sal de ácido clorhídrico, que preferentemente es sustancialmente anhidra.
Una decimoprimera modalidad se refiere a una composición obtenida mediante los procesos descritos en la séptima modalidad, la octava modalidad, la novena modalidad, o la décima modalidad, asi como sus aspectos correspondientes. Un aspecto de la decimoprimera modalidad se refiere a una composición obtenida mediante cualquiera de las modalidades ejemplificadas que se describen a continuación. La composición asi obtenida puede ser cristalina, pseudo cristalina, amorfa o una · combinación de estas.
Una decimosegunda modalidad se refiere a un compuesto 3 3 donde Z es un grupo protector o hidrógeno; lo cual es útil para la preparación de J¾p-4 o Sp-4.
Un primer aspecto de la decimosegunda modalidad se selecciona de un compuesto que tiene la siguiente estructura 3a: Z = -C(O)CH2CH2C(0)CH3 3b: Z = -C(O)OCH2Ph 3c: Z - -S¡(Me)2'Bu 3d: Z = -Si('Pr)2OSi('Pr)2OH a decimotercera modalidad se refiere a un compuesto, hidrato, solvato o combinación de estos, representado por las siguientes estructuras C C donde LG' es un grupo saliente, lo cual es útil para la preparación de Sp-4 o ^p—4.
En un primer aspecto de la decimotercera modalidad, LG ' es tosilato, canforsulfonato, un arilóxido o un arilóxido sustituido por al menos un grupo electroaceptor .
En un segundo aspecto de la decimotercera modalidad, LG1 se selecciona de entre 2, 4-dinitrofenóxido, 4-nitrofenóxido, 2-nitrofenóxido, 2-cloro-4-nitrofenóxido, 2-4-diclorofenóxido y pentafluorofenóxido .
En un tercer aspecto de la decimotercera modalidad, LG ' es pentafluorofenóxido o 4-nitrofenóxido.
Un cuarto aspecto de la decimotercera modalidad se refiere al compuesto C, donde LG ' es 2 , 4-dinitrofenóxido, 4-nitrofenóxido, 2-nitrofenóxido, 2-cloro-4-nitrofenóxido, 2,4-diclorofenóxido o pentafluorofenóxido .
Un quinto aspecto de la decimotercera modalidad se refiere al compuesto C, donde LG' es 4-nitrofenóxido o pentafluorofenóxido .
Un sexto aspecto de la decimotercera modalidad se refiere al compuesto C, donde LG ' es 4-nitrofenóxido.
Un séptimo aspecto de la decimotercera modalidad se refiere al compuesto C cristalino, donde LG' es 4-nitrofenóxido .
Un octavo aspecto de la decimotercera modalidad se refiere al compuesto C, donde LG' es pentafluorofenóxido .
Un noveno aspecto de la decimotercera modalidad se refiere al compuesto C cristalino, donde LG' es pentafluorofenóxido .
Una decimocuarta modalidad se refiere a un proceso para preparar un compuesto representado por la fórmula estructural cristalizando el compuesto a partir de una composición, que comprende a) una primera composición; b) un segundo precursor de un grupo saliente; c) una base no nucleofilica ; y d) una composición liquida; donde la primera composición comprende el compuesto y su diastereómero de base P correspondiente.
En un primer aspecto de la decimocuarta modalidad, la cantidad molar del compuesto y la cantidad molar de su diastereómero de base P son iguales o diferentes.
En un segundo aspecto de la decimocuarta modalidad, la cantidad molar del compuesto es mayor a la cantidad molar de su diastereómero de base P correspondiente o viceversa.
En un tercer aspecto de la decimocuarta modalidad, el segundo precursor del grupo saliente es 2 , 4-dinitrofenol, 4-nitrofenol, 2-nitrofenol, 2-cloro-4-nitrofenol, 2,4-diclorofenol o pentafluorofenol .
En un cuarto aspecto de la decimocuarta modalidad, LG' es pentafluorofenóxido . En un primer sub-aspecto, el segundo precursor del grupo saliente es pentafluorofenol . En un segundo sub-aspecto, la cantidad de pentafluorofenol varia de alrededor de 0.01 equivalentes molares a alrededor de 10 equivalentes molares con relación a la cantidad molar del compuesto y su diastereómero con base P y todos los equivalentes molares entremedio. En un tercer sub-aspecto, la cantidad de pentafluorofenol varia de alrededor de 0.1 equivalentes molares a alrededor de 1 equivalentes molares con relación a la cantidad molar del compuesto y su diastereómero con base P y todos los equivalentes molares entremedio .
En un quinto aspecto de la decimocuarta modalidad, la cristalización ocurre a una temperatura que varia de alrededor de -10°C a alrededor de +40°C y todos los valores de temperaturas entremedio. En un primer sub-aspecto, la cristalización ocurre a alrededor de temperatura ambiente.
En un sexto aspecto de la decimocuarta modalidad, la base no nucleofilica se selecciona de carbonato de potasio, carbonato de cesio, di-isopropilamina, di-isopropiletilamina, trietilamina, quinuclidina, naftaleno-1, 8-diamina, 2,2,6,6-tetrametilpiperidina, 1 , 8-diazabicicloundec-7-eno, 4-dimetilamino-piridina , piridina, una 2 , 6-di-Ci_6-alquil-piridina, una 2 , 4 , 6-tri-Ci-6-alquil-piridina y mezclas de estos. En un primer sub-aspecto, la base no nucleofilica es trietilamina o 1, 8-diazabicicloundec-7-eno . En un segundo sub-aspecto, la base no nucleofilica es trietilamina.
En un séptimo aspecto de la decimocuarta modalidad, la base no nucleofilica se encuentra presente en una cantidad que varia de alrededor de 0.01 equivalentes molares a alrededor de 10 equivalentes molares y todos los equivalentes molares entremedio, con relación a la cantidad molar total del compuesto y su diastereómero con base P. En un primer sub-aspecto, la base no nucleofilica se encuentra presente en una cantidad que varia de alrededor de 0.1 equivalentes molares a alrededor de 1 equivalentes molares y todos los equivalentes molares entremedio, con relación a la cantidad molar total del compuesto y su diastereómero con base P.
En un octavo aspecto de la decimocuarta modalidad, la solubilidad del compuesto es menor a la solubilidad de su diastereómero de base P correspondiente en la composición liquida o viceversa.
En un noveno aspecto de la decimocuarta modalidad, la composición liquida comprende al menos uno de un solvente y un antisolvente. En un primer sub-aspecto, la composición liquida comprende al menos uno de un alcohol de Ci a Cs, un éter de C2 a C8, una cetona de C3 a C7, un éster de C3 a C7/ un clorocarburo de Ci a C2, un nitrilo de C2 a C7, un hidrocarburo saturado de C5 a Ci2 y un hidrocarburo aromático de C6 a Ci2. En un segundo sub-aspecto, la composición liquida comprende al menos uno de un éter de C2 a C8, un éster de C3 a C7, un hidrocarburo saturado de C5 a Ci2, y un hidrocarburo aromático de C6 a C12. En un tercer sub-aspecto, la composición liquida comprende al menos un éter de C2 a CQ, un éster de C3 a C7 y un hidrocarburo saturado de C5 a Ci2. En un cuarto sub-aspecto, la composición liquida comprende al menos uno de acetato de etilo, t-butil-metiléter y hexano. En un quinto sub-aspecto, la composición liquida comprende acetato de etilo y hexano. En un sexto sub-aspecto, la composición liquida comprende t-butil-metiléter y hexano.
En un décimo aspecto de la decimocuarta modalidad, la cantidad de composición liquida varia de alrededor de 1 mL a alrededor de 10 mL por cada gramo de la primer composición y todos los valores mL/g entremedio.
Un decimoprimero aspecto de la decimocuarta modalidad comprende además la adición de compuesto cristalino a la composición. Un primer sub-aspecto comprende además agregar alrededor de 0.1 a alrededor de 1 % en peso y todos los valores de % en peso entremedio, de compuesto cristalino a la primera composición.
Un decimosegundo aspecto de la decimocuarta modalidad comprende además a) hacer reaccionar PhOP(0) (LG)2 y iPr-Ala-NH2 · HC1 en presencia de una primera base para obtener (PhO)P(O) (LG) (NHAla- Pr) ; b) hacer reaccionar (PhO)P(O) (LG) (NHAla-iPr) con un primer precursor del grupo saliente (LG'H) en presencia de una segunda base para obtener la composición que comprende el compuesto y su diastereómero con base P; donde LG y LG ' , de forma independiente, son grupos salientes ; donde el primer precursor del grupo saliente y el segundo precursor del grupo saliente son iguales o diferentes; y donde la primera base y la segunda base son iguales o diferentes .
Una decimoquinta modalidad se refiere a un proceso para preparar 2- ( ( (S) - (perfluorofenoxi) (fenoxi) fosforil) amino) propanoato de (S)-isopropilo cristalino con la siguiente estructura, que comprende: cristalizar 2-(((S)- (perfluorofenoxi ) (fenoxi) fosforil) amino) propanoato de (S)-isopropilo a partir de una segunda composición que comprende a) una primera composición; b) pentafluorofenol ; c) una base no nucleofilica; y d) una composición liquida; donde la segunda composición comprende 2-(((S)- (perfluorofenoxi) (fenoxi) fosforil) amino) propanoato de (S)-isopropilo y 2-(((R)- (perfluorofenoxi ) (fenoxi) fosforil) amino) propanoato de (S)-isopropilo .
En un primer aspecto de la decimoquinta modalidad, la cantidad molar del 2-(((S)- (perfluorofenoxi) (fenoxi) fosforil) amino) propanoato de (S)-isopropilo y la cantidad molar del 2-(((R)- (perfluorofenoxi ) (fenoxi) fosforil) amino) propanoato de (S)-isopropilo son iguales o diferentes.
En un segundo aspecto de la decimoquinta modalidad, la cantidad molar del 2-(((S)- (perfluorofenoxi ) ( fenoxi) fosforil ) amino) propanoato de (S)-isopropilo es mayor que la cantidad molar del 2-(((R)-(perfluorofenoxi ) ( fenoxi) fosforil ) amino) propanoato de (S)-isopropilo.
En un tercer aspecto de la decimoquinta modalidad, la cantidad de pentafluorofenol varia de alrededor de 0.01 equivalentes molares a alrededor de 10 equivalentes molares (y todos los valores de equivalentes molares entremedio) con relación a la cantidad molar de 2-( ((S)- (perfluorofenoxi) (fenoxi) fosforil) amino) propanoato de (S)-isopropilo y 2-( ((R)- (perfluorofenoxi) (fenoxi) fosforil) amino) propanoato de (S)-isopropilo. En un primer sub-aspecto, la cantidad de pentafluorofenol varia de alrededor de 0.1 equivalentes molares a alrededor de 1 equivalentes molares (y todos los valores de equivalentes molares entremedio) con relación a la cantidad molar de 2-(((S)- (perfluorofenoxi ) ( fenoxi) fosforil ) amino) propanoato de (S)-isopropilo y 2- ( ( (R) perfluorofenoxi) ( fenoxi ) fosforil ) amino) propanoato de (S) -isopropilo.
En un cuarto aspecto de la decimoquinta modalidad, la cristalización ocurre a una temperatura que varia de alrededor de -10°C a alrededor de +40°C y todos los valores de temperaturas entremedio. En un primer sub-aspecto, la cristalización ocurre a alrededor de temperatura ambiente.
En un quinto aspecto de la decimoquinta modalidad, la base no nucleofilica se selecciona de carbonato de potasio, carbonato de cesio, di-isopropilamina, di-isopropiletilamina, trietilamina, quinuclidina, naftaleno-1, 8-diamina, 2,2,6,6-tetrametilpiperidina, 1, 8-diazabicicloundec-7-eno, 4-dimetilamino-piridina, piridina, una 2 , 6-di-Ci—6-alquil-piridina, una 2 , 4 , 6-tri-Ci_-6-alquil-piridina y mezclas de estos. En un primer sub-aspecto, la base no nucleofilica es trietilamina o 1 , 8-diazabicicloundec-7-eno . En un segundo sub-aspecto, la base no nucleofilica es trietilamina.
En un sexto aspecto de la decimoquinta modalidad, la base no nucleofilica se encuentra presente en una cantidad que varia de alrededor de 0.1 a alrededor de 1 equivalentes molares (y todos los valores de equivalentes molares entremedio) con relación a la cantidad molar total de 2-(((S)- (perfluorofenoxi) (fenoxi) fosforil) amino) propanoato de (S)-isopropilo y 2-(((R)- (perfluorofenoxi) (fenoxi) fosforil) amino) propanoato de (S)-isopropilo .
En un séptimo aspecto de la decimoquinta modalidad, la solubilidad del 2-({(S)- (perfluorofenoxi) (fenoxi) fosforil) amino) propanoato de (S)-isopropilo es menor a la solubilidad del 2-(((R)- (perfluorofenoxi) (fenoxi) fosforil) amino) propanoato de (S)-isopropilo en la composición liquida.
En un octavo aspecto de la decimoquinta modalidad, la composición liquida comprende al menos uno de un solvente y un antisolvente. En un primer sub-aspecto, la composición liquida comprende al menos uno de un alcohol de Ci a C8, un éter de C2 a Cs, una cetona de C3 a C7, un éster de C3 a C7, un clorocarburo de Ci a C2, un nitrilo de C2 a C7, un hidrocarburo saturado de C5 a C12 y un hidrocarburo aromático de C6 a C12. En un segundo sub-aspecto, la composición liquida comprende al menos uno de un éter de C2 a Ce, un éster de C3 a C7, un hidrocarburo saturado de C5 a Ci2 y un hidrocarburo aromático de C6 a C12. En un tercer sub-aspecto, la composición liquida comprende al menos uno de un éter de C2 a Ce, un éster de C3 a C7 y un hidrocarburo saturado C5 a Ci2. En un cuarto sub-aspecto, la composición liquida comprende al menos uno de acetato de etilo, t-butil-metiléter y hexano. En un quinto sub-aspecto, la composición liquida comprende acetato de etilo y hexano. En un sexto sub-aspecto, la composición liquida comprende t-butil-metiléter y hexano.
En un noveno aspecto de la decimoquinta modalidad, la cantidad de composición liquida varia de alrededor de 1 a alrededor de 10 mL por cada gramo (y todos los valores mL/g entremedio) de la primera composición.
Un décimo aspecto de la decimoquinta modalidad comprende además la adición de 2-(((S)- (perfluorofenoxi) (fenoxi) fosforil) amino) propanoato de (S)-isopropilo cristalino a la segunda composición.
Un decimoprimero aspecto de la decimoquinta modalidad comprende además la adición de alrededor de 0.1 a alrededor de 1 % en peso (y todos los valores de % en peso entremedio) de 2-(( (S) - (perfluorofenoxi) (fenoxi) fosforil) amino) propanoato de (S)-isopropilo cristalino en función del peso total del 2-(((S)-(perfluorofenoxi) (fenoxi) fosforil) amino) propanoato de (S)-isopropilo en la primera composición.
Una decimosexta modalidad se refiera a 2-(((S)-(perfluorofenoxi) (fenoxi) fosforil) amino) propanoato de (S)-isopropilo cristalino obtenido mediante el proceso de la decimoquinta modalidad.
Una decimoséptima modalidad se refiere a un proceso para preparar 2- ( ( (S) - ( ( (2R, 3R, 4R, 5R) -5- (2, -dioxo-3, 4-dihidropirimidin-1 (2H) -il) -4-fluoro-3-hidroxi-4-metiltetra hidrofuran-2-il)metoxi) (fenoxi) fosforil) amino) propanoato de (S)-isopropilo, el cual comprende: cristalizar 2- (( (S) - (perfluorofenoxi) (fenoxi) fosforil) amino) propanoato de (S) -isopropilo a partir de una segunda composición que comprende a) una primera composición; b) pentafluorofenol; c) una base no nucleofilica; y d) una composición liquida; donde la primera composición comprende 2-(((S)-(perfluorofenoxi) (fenoxi) fosforil) amino) propanoato de (S)-isopropilo y 2-(((R)- (perfluorofenoxi) (fenoxi) fosforil) amino) propanoato de (S)-isopropilo.
Un primer aspecto de la decimoséptima modalidad se refiere a un proceso para preparar 2- ( ( (S) - ( ( (2R, 3R, 4R, 5R) -5- (2, 4-dioxo-3, 4-dihidropirimidin-l (2H) -il) -4-fluoro-3-hidroxi-4-metiltetrahidrofuran-2-il)metoxi) (fenoxi) fosforil) amino) propanoato de (S) -isopropilo, el cual comprende: poner en contacto 2-(((S)- (perfluorofenoxi) (fenoxi) fosforil) amino) propanoato de (S)-isopropilo con un producto obtenido al hacer reaccionar haluro de t-butilmagnesio con 1- ( (2R, 3R, R, 5R) -3-fluoro-4-hidroxi-5- (hidroximetil) -3-metiltetrahidrofuran-2-il) pirimidina-2 ,4 ( 1H, 3H) -diona con un haluro de t-butilmagnesio [sic] .
En un segundo aspecto de la decimoquinta modalidad, el contacto ocurre en un medio con una temperatura que varia de alrededor de 0°C a alrededor de 40 °C y todos los valores de temperaturas entremedio.
En un tercer aspecto de la decimoquinta modalidad, el contacto ocurre en un medio con una temperatura que varia de alrededor de 0°C a alrededor de 30 °C y todos los valores de temperaturas entremedio.
En un cuarto aspecto de la decimoséptima modalidad, la relación molar de haluro de t-butilmagnesio a 1- ( (2R, 3R, 4R, 5R) -3-fluoro-4-hidroxi-5- (hidroximetil) -3-metiltetrahidrofuran-2-il) pirimidina-2, 4 (1H, 3H) -diona varia de alrededor de 2 a alrededor de 2.2. En un primer sub-aspecto, la relación molar de haluro de t-butilmagnesio a 1- ( (2R, 3R, 4R, 5R) -3-fluoro-4-hidroxi-5- (hidroximetil) -3-metiltetrahidrofuran-2-il) pirimidina-2, 4 (1H, 3H) -diona es de alrededor de 2.1.
En un quinto aspecto de la decimoséptima modalidad, el haluro de t-butilmagnesio es cloruro de t-butilmagnesio.
Una decimoctava modalidad se refiere a un proceso para preparar 2- ( ( (S) - ( ( (2R, 3R, 4R, 5R) -5- (2, 4-dioxo-3, 4-dihidropirimidin-1 (2H) -il) -4-fluoro-3-hidroxi-4-metiltetrahidrofuran-2-il)metoxi) (fenoxi) fosforil) amino) propanoato de (S) -isopropilo sustancialmente puro, el cual comprende: obtener 2- ( ( (S) - ( ( (2R, 3R, 4R, 5R) -5- (2, -dioxo-3, 4-dihidropirimidin-1 (2H) -il) -4-fluoro-3-hidroxi-4-metiltetrahidrofuran-2-il)metoxi) (fenoxi) fosforil) amino) propanoato de (S) -isopropilo de acuerdo con cualquiera de las modalidades relevantes descritas en la presente, y cristalizar el 2- ( ( (S) - ( ( (2R, 3R, 4R, 5R) -5- (2, 4-dioxo-3, -dihidropirimidin-1 (2H) -il) -4-fluoro-3-hidroxi-4-metiltetrahidrofuran-2-il)metoxi) (fenoxi) fosforil) amino) propanoato de (S) -isopropilo asi formado.
Una decimonovena modalidad se refiere un análogo marcado de forma isotópica de Rp-A o Sp- . El término análogo "marcado de forma isotópica" se refiere a un análogo de Rp-A o Sp-4 que es un "análogo deuterado", un "análogo marcado con 13C" o un "análogo deuterado/marcado con 13C". El término "análogo deuterado" significa un compuesto descrito en la presente, por el cual un isótopo 1H, es decir, hidrógeno (H) , está sustituido por un isótopo 2H, es decir, deuterio (D) . La sustitución con deuterio puede ser parcial o completa. La sustitución parcial con deuterio significa que al menos un hidrógeno está sustituido por al menos un deuterio. Por ejemplo, para Rp-A o Sp-A, un experto puede contemplar al menos los siguientes análogos parcialmente deuterados (donde "dn" representa una cantidad n de átomos de deuterio, tal como, para un grupo isopropilo n = 1-7, mientras que para un grupo fenilo, n = 1-5) , asi como los representados a continuación .
Pese a que los grupos metilo descritos anteriormente se muestran como completamente deuterados, se reconocerá que las variaciones parcialmente deuteradas también son posibles, tal como, -CDH2 y -CD2H. También se contemplan las etiquetas isotópicas en la furanosa y la base. Asimismo, los términos "análogo marcado con 13C" y "análogo deuterado/marcado con 13C" se refieren a un compuesto descrito en la presente, donde el átomo de carbono está enriquecido con un isótopo 13C, lo que significa que el grado de enriquecimiento excede la abundancia natural general de alrededor de 1.1%.
Ejemplos Sin pretender limitarse a modo de ejemplo, los siguientes ejemplos sirven para facilitar una mejor comprensión de la descripción.
Aspectos sintéticos Para preparar el nucleósido de uridina, se podría tomar ventaja de un intermedio de citidina tribenzoilada avanzado en la síntesis de determinados análogos 3 ' , 5 ' -diacilados de 3 (véase a continuación) ya producidos eficazmente en una escala de planta piloto (véase el documento O 2006/031725 o US 2006/0122146, ambos incorporados mediante esta referencia en su totalidad) . Se ha encontrado que el siguiente método es mensurable y rentable. 2 3 Se obtiene 3 ', 5 ' -0-dibenzoil-2 ' -desoxi-2 ' -fluoro-21 -C-metil-N -benzoilcitidina (1) mediante un método descrito en los documentos WO 2006/031725 y WO 2008/045419, los cuales se incorporan a la presente en su totalidad mediante esta referencia. 1 se trata con ácido acético acuoso al 70% para formar 3 ' , 5 ' -O-dibenzoil-21 -desoxi-2 ' -fluoro-2 ' -C-metil-uridina (2) . Los ésteres de benzoilo también se pueden hidrolizar a través de una cantidad de métodos, por ej . , alcóxidos en un solvente alcohólico, tal como metóxido de sodio en metanol, carbonato de potasio en metanol, o en análogos de etanol, alquilaminas, tales como metilamina en metanol, butilamina, etc. Se eligió amoniaco metanólico para el trabajo a mayor escala. El producto de uridina (3) puede purificarse mediante cristalización para proporcionar un 70% de rendimiento de la citidina tribenzoilada (1) .
Varios procedimientos de la bibliografía detallan diferentes vías y condiciones para fabricar fosforamidatos usando varios más equivalentes de reactivos. Véase, por ejemplo, McGuigan et ál. J. Med. Chem. 2005, 48, 3504-3515 y McGuigan et ál. J. Med. Chem. 2006, 49, 7215. Para el trabajo a escala de procesos, solo existe un ejemplo conocido en la actualidad, que se describe en Lehsten et ál., Org. Process Res. Dev. 2002, 6, 819-822 ("Lehsten") . En esta referencia, los autores introducen el concepto de "procedimiento de un solo recipiente", en el cual una sal de clorhidrato de aminoácido y fenil diclorofosfato reaccionan entre si con N-metilimidazol en diclorometano. Luego se agrega el nucleosido para formar el producto de 5'-0-fosforamidato deseado, que en este caso proporcionaría un compuesto representado por la fórmula 4. Lamentablemente, el procedimiento Lehsten tenía desventajas. Por ejemplo, el procedimiento Lehsten utilizaba un exceso mucho mayor de reactivos de lo necesario lo que hizo más costosa y difícil la purificación cromatográfica. Además, Lehsten sugirió que uno podría controlar la selectividad de la reacción en el 5'-hidroxilo sobre el 3'-hidroxilo comparado con una referencia a la bibliografía por medio del uso de temperaturas más bajas y la adición lenta del nucleosido. 4 5 6 5'-0-fosforamidato 3'-0-fosforamidato 3',5'-bis-0-fosforamidato (2 diastereómeros) (2 diastereómeros) (4 diastereómeros) El uso del procedimiento Lehsten para los compuestos descritos en la presente proporcionaron alrededor de 1-5% de diastereómeros 3 ' -0-fosforamidato monosustituidos (5) y alrededor de 10-30% del producto bis-sustituido (6) . Debido a que la polaridad de los 3 ' -diastereómeros era muy similar a los 5'-diastereómeros (4) , la separación cromatográfica fue muy exigente. El aumento proporcional del proceso era casi imposible sin descartar una porción considerable de los 5 ' -diastereómeros menos polares (4) o aceptar un nivel mayor de contaminación de los 3 ' -diastereómeros (5). En un aumento proporcional inicial de 50 g, el producto resultante contenia una contaminación del 3'-diastereómero (5) de alrededor de 3%, que se eluyó conjuntamente con el 5 ' -diastereómero (4) menos polar.
En la presente se describen condiciones de reacción que usan cantidades menores de reactivos y un método para quitar selectivamente la impureza de los diastereómeros 3 ' -0-fosforamidato (5) con una separación cromatográfica más fácil, proporcionando asi los diastereómeros 5 ' -O-fosforamidato deseados en una pureza mucho mayor (4) .
Para la estequiometria del reactivo, se realizó un estudio en el cual la estequiometria de los reactivos se cambió sistemáticamente y los resultados se monitorearon por NMR fosforosa de la reacción cruda tal como lo informó Lehsten. En las ejecuciones más exitosas se compararon el rendimiento y pureza aislados del producto deseado. Se observó que el 5'-hidroxilo primario reacciona a una velocidad más rápida que el 3'-hidroxilo secundario. Esto crea una situación conflictiva entre el progreso de reacción del consumo de todos los nucleósidos iniciales y la conversión de los productos 5'- y 3'-monosustituidos (4 y 5) a los productos 5 ',3 '-bis sustituidos (6). El producto 3 ' -monosustituido se convierte en el producto bis a una velocidad más rápida que el producto 51 -monosustituido, de forma que es posible reducir el nivel de contaminación del 3 ' -diastereómero empujando la reacción más a los productos bis-sustituidos. Sin embargo, con una forma eficaz de quitar los diastereómeros 3', la reacción se puede optimizar para producir más del diastereómero 5' deseado sin tener que sacrificar tanto diastereómero 5' que se convierte en el bis-sustituido (6). También se observó que el clorhidrato de aminoácido es muy higroscópico. Debido a que cualquier cantidad de agua presente consumiría una cantidad equivalente del reactivo de diclorofosfato de fenilo, se debe tener cuidado de mantener el aminoácido sustancialmente anhidro o se debe hacer sustancialmente anhidro antes de su uso. En resumen, Lehsten había informado que la relación óptima de aminoácido a diclorofosfato de fenilo a nucleósido era de 3.5:2.5:1 respectivamente. Se descubrió que la relación óptima de aminoácido a diclorofosfato de fenilo a nucleósido de alrededor de 1.6 a alrededor de 1,3 a alrededor de 1 es óptima en condiciones en las cuales el diastereómero 3' puede quitarse eficazmente y cuando el clorhidrato de aminoácido es sustancialmente anhidro. Por medio del uso de una cantidad menor de reactivos, se realiza un ahorro de costos junto con una simplificación de la separación cromatográfica del producto deseado de los productos derivados del reactivo y del nivel reducido de bis diastereómeros .
En un procedimiento alternativo, un derivado bloqueado por 3 ' -hidroxi de 3 se preparó usando un grupo bloqueante t-butildimetilsililo en dos etapas. Esto luego se convirtió en su derivado de 5 ' -fosforamidato . Se deseaba que el grupo sililo se pudiese quitar después y que no hubiese isómeros 3' (5) o 3', 5'-bis fosforamidatos (6) . Borch y Fríes (patente estadounidense 5.233.031) demostraron un enfoque similar en un rendimiento global bajo en un fosforamidato de alquilo.
Otro enfoque alternativo era usar la síntesis directa y luego usar química para ayudar a diferenciar las impurezas del diastereómero 3' 5 de los diastereómeros 5' deseados 4 para ayudar a la separación. Se deseaba un grupo que reaccionara selectivamente con el hidroxilo primario libre de la impureza del 31 -O-fosforamidato 5 sobre el hidroxilo secundario libre del 5'-O-fosforamidato 4 deseado. También se deseaba que el grupo bloqueante cambiara de manera significativa la polaridad del producto resultante de 31 -O-fosforamidato bloqueado por 5'-0 del 5 ' -0-fosforamidato deseado 4. No se necesitaría ninguna etapa adicional para quitar el grupo bloqueante ya que los diastereómeros 5' deseados 4 no se cambiarían. Los diastereómeros 31 químicamente alterados luego permitirían una separación cromatográfica o separación por medio de soportes de barrido especiales o por extracciones más fácil.
Específicamente, el grupo bloqueante terc-butildimetilsililo (tBDMS) cumplía con estos criterios y fue el primero en ser demostrado y utilizado posteriormente en una escala de multi-kilogramos . En ciertas condiciones, tales como piridina como solvente y base, el grupo tBDMS reacciona con alta selectividad en la posición de hidroxilo primaria sobre la posición de hidroxilo secundaria 3'. La reacción de fosforamidato usa N-metilimidazol (NMI) como base. En presencia de NMI, la silación es menos selectiva. Preferentemente, la cantidad de NMI debería reducirse. Esto se puede lograr fácilmente luego de la reacción de fosforamidato por medio del lavado de la solución de reacción con un ácido clorhídrico 1N. El NMI y el nucleósido inicial restante se eliminan, dejando una mezcla cruda de productos mono y bis sustituidos y productos derivados de reactivos. Luego esto se disuelve en piridina y se trata con cloruro de terc-butildimetilsililo . El producto 3 ' -monosustituido 5 se convierte en 5 ' -O-tBDMS-3 ' -0-fosforamidato 7 en unas pocas horas o menos . El progreso de reacción puede monitorearse por HPLC. La polaridad de este producto silado 7 es menor a la del bis-fosforamidato 6 y se quita fácilmente mediante cromatografía. Usando este método, fue posible reducir el nivel de 3'-monofosforamidato 5 a menos del 0.1% del producto 5 ' 4 comparado con el 1-3% sin el tratamiento con sililo. De manera similar, el tratamiento con cloruro de dimetoxitrifenilmetilo (DMT-C1) en las mismas condiciones funcionó de igual forma. También era más fácil identificar el producto de reacción de DMT por TLC, ya que las moléculas que contienen DMT se tiñen de anaranjado brillante luego del calentamiento o exposición a un ácido. También se pueden prever muchos otros grupos bloqueantes, tal como se describe anteriormente.
Tanto las condiciones de reacción como el barrido de la impureza 3' son métodos generales y se podrían aplicar a la mayoría de los fosforamidatos de nucleósido con un hidroxilo 3' libre. El resto de fosforamidato podría ser cualquier combinación de éster de aminoácido y alcohol aromático. El resto de nucleósido podría ser cualquier nucleósido donde un 5' fosforamidato llevaría a un 5 ' -monofosfato y podría ser metabolizado adicionalmente en su forma de 5 ' -trifosfato.
El siguiente esquema de reacción es el esquema de reacción principal ilustrado para elaborar isopropil L-alanato fenil fosforamidatos de 2 ' -desoxi-2 ' -fluoro-2 ' -C-metiluridina con el producto mayor como el 5 ' -O-fosforamidato deseado (4, dos diastereómeros) y el producto menor como el 3 ' -O-fosforamidato (5, dos diastereómeros) y el 3 ',5' -bis-O-fosforamidato (6, cuatro diastereómeros) . Los reactivos se agregan en las relaciones estoiquiométricas tal como se describe en la sección del método de preparación. Se deja continuar a la reacción hasta que alrededor del 5% del material de partida permanece según se juzga mediante visualización UV en cromatografía de capa fina (TLC) . Además, la UPLC/MS mostró que aproximadamente un 10% del 31 , 51 bis-fosforamidato 6 se había formado en comparación con el producto 5' deseado. Luego de la inactivación y un procesamiento acuoso ácido, el residuo crudo de la capa orgánica se preparó para la sililación. Conforme a las condiciones de reacción descritas, el grupo sililo preferencialmente reaccionó con el 5'-hidroxilo libre del 3 ' -O-fosforamidato para formar 7. La reacción se continuó hasta que el 3 ' -O-fosforamidato ya no se podía detectar mediante UPLC/MS. 5'-0-fosforamidato 3'-0-fosforamldato 3',5 -bis-O-fosforamidato (2 diastereómeros) (2 diastereómeros) (4 diastereómeros) tBDMS-Ci/piridina 4 7 6 í"-0-f osf ?? amidato-5'-0-tBD S (2 diastei eómei os) Luego del procesamiento de la reacción de sililación, el producto deseado se sometió a cromatografía de gel de sílice y se eluyó con un gradiente de metanol en diclorometano (1-4%). El 5 ' -monofosforamidato deseado 4 se eluye último.
Métodos de preparación Ejemplo 1. Preparación de 2' -desoxi-21 -fluoro-2 ' -C-metiluridina (3) En un matraz de 10 L, se agregó 3 ' , 5 ' -0-dibenzoil-2 ' -desoxi-2 ' -fluoro-2 ' -C-metil-N4-benzoilcitidina (500 g, 0.874 mol) y de ácido acético acuoso al 70% (7.5 L) . La solución se calentó a reflujo (110°C) durante 20 h. La TLC indicó que se había completado la reacción (Rf 0.6 en metanol al 5% en diclorometano (DCM) ) . La mezcla se enfrió hasta temperatura ambiente y se diluyó con agua (2 L) . Luego de agitar durante 2 h, el precipitado resultante se recolectó por filtración y el sólido se enjuagó con agua (5 L) y secó en la atmósfera a temperatura ambiente durante 12 h para proporcionar 360 g (88%). Este intermedio de dibenzoiluridina se usó directamente en la siguiente etapa al agregarlo a amoniaco metanólico recién preparado (5.4 L, ca 25%) a 0°C. Esta temperatura se mantuvo durante 3 h y luego se dejó calentar hasta 15°C durante 24 h. La TLC indicó gue la reacción se había completado (Rf 0.4 en 10% metanol en DCM) . La mezcla de reacción se filtró a través de un lecho de Celite y se concentró a presión reducida para proporcionar el producto crudo (216 g) . El producto crudo se agitó con acetato de etilo (325 mL) durante 3 h a temperatura ambiente. El sólido resultante se recolectó por filtración y se lavó con acetato de etilo (216 mL) . El sólido se secó al vacío a temperatura ambiente durante 4 h para proporcionar 160 g (78%) del producto deseado en 98.7% de pureza por HPLC. 1 H-NMR (DMSO-í¾) d 1 1.44 (br s, 1 H, NH), 7.95 (d, 1 H, C-6H), 5.97 (d, 1H, C-??), 5.64 (d, 1H, C-5H), 3.84-3.77 (m, 3H, 05'-Ha, C-3'?. C-4'?), 3.63 - 3.60 (m, 1H, C5'-Hb), 1.23 (d, 3H, C-2'-CH3). ES-MS M-l 259.
Ejemplo 2. Preparación de éster isopropilico del ácido (S) -2-{ [ (IR, 4R, 5R) -5- (2 , 4-Dioxo-3 , -dihidro-2H-pirimidin-l-il) -4- (R) -fluoro-3-hidroxi-4-metil-tetrahidro-furan-2-ilmetoxi] -fenoxi-fosforilamino} -propiónico (4) Sinónimo: Mezcla diastereomérica de 5 ' -O- ( Isopropil-L-alanato, fenil fosforamidil ) -2 ' -desoxi-2 ' -fluoro-2 ' -C-metil-uridina .
Un matraz de 3 cuellos de 5 L se equipó con un agitador mecánico, baño de hielo de salmuera, termómetro interno y una atmósfera de nitrógeno. El matraz se cargó con clorhidrato de éster isopropilico de L-alanina (82.0 g, 0.490 moles) y diclorometano anhidro (0.80 L) . Mientras esto se agitaba, se agregó diclorofosfato de fenilo (85.0 g, 0.40 moles) en una porción y se agitó. Mientras que se mantuvo la temperatura interna entre -5 a 5°C, se agregó una solución de N-metilimidazol (NMI, 250 g, 3.07 moles) en diclorometano (250 mL) durante un periodo de media hora. La solución se dejó agitar durante 1 h en este intervalo de temperatura. Se agregó 2 ' -desoxi-2 ' -fluoro-21 -C-metil-uridina (3, 80.0 g, 0.307 moles) a 0°C en una porción y luego el matraz de reacción se dejó calentar lentamente en el baño de salmuera. Luego de 1 h, la temperatura interna había alcanzado -2°C. La TLC (metanol al 5% en DCM) luego de 1 h mostró gue más del 50% del nucleósido se había consumido. Se retiró el baño y el matraz de reacción alcanzó temperatura ambiente durante 1 h más. La TLC luego de 3 h y en un total de 5 h mostró que el 95% del nucleósido de partida se había consumido. La mezcla de reacción se inactivo mediante la adición de metanol (100 mL) y la agitación de la reacción durante 5 minutos.
La mezcla de reacción se lavó con HC1 1N (500 mL, 2 veces) seguido de solución de bicarbonato de sodio saturada (500 mL, 2 veces) . La capa orgánica separada se secó sobre sulfato de sodio anhidro (50 g) y se filtró. La solución se evaporó a presión reducida y luego a alto vacio hasta sequedad para proporcionar el producto crudo como un aceite viscoso (170 g) . Se tomaron las NMR del producto crudo (31P y 1H) . La 31P-NMR indicó que alrededor de un 1% de la integración total de fósforo se debía a la presencia del isómero 3' 5.
Se agregó piridina anhidra (1700 mL) al producto crudo. El solvente se evaporó a presión reducida y luego a alto vacío para reducir el contenido de agua de la mezcla bruta mediante evaporación conjunta. El aceite resultante se volvió a disolver en piridina anhidra (500 mi) y luego se agregó exceso de cloruro de t-butildimetilsililo (9.0 g, 60 mM) . La reacción se agitó a temperatura ambiente. El progreso de la reacción se monitoreó por UPLC/ S. Después de 3 horas, la impureza de 3 ' 5 no se pudo detectar más y la reacción se inactivo mediante la adición de metanol (50 mL) .
La reacción se evaporó a presión reducida hasta convertirse en aceite. El residuo se disolvió en acetato de etilo (1.5 L) y se lavó con HC1 1N (500 mL, 2 veces), seguido por solución de bicarbonato de sodio saturado (500 mL, 2 veces) . La capa orgánica se secó sobre sulfato de sodio anhidro (50 g) , se filtró y evaporó a presión reducida para proporcionar el producto crudo como un aceite amarillo pálido .
El aceite crudo se diluyó con el mismo volumen de diclorometano y se cargó en un cartucho de gel de sílice de 2.5 Kg en un módulo de compresión radial a 100 psi de presión de aire. Usando una bomba de gradiente a 60 psi y una velocidad de flujo de 400 mL/min, el cartucho se lavó con cloruro de metileno (4L) seguido por un gradiente de metanol al 1-4% en cloruro de metileno (48 L) . La mayoría de las impurezas más importantes de fosfato de (di-( isopropilalanil ) fenilo, 3 ' , 5 ' -bis fosforamidato (6), aducto 31 -fosforamidato-51 -TBDMS (7)) se eluyeron con -3% de gradiente. El producto deseado eluyó entre 3 y 4% de metanol. Las fracciones que contenían el producto se clasificaron en dos porciones. La primera contenía pequeñas cantidades de impurezas superiores y la última era producto puro. El primer grupo de fracciones contenía pequeñas cantidades de impurezas menos polares (impurezas superiores) tales como 3 ',5 '-bis fosforamidato y fosfato de di-alanilfenilo y mayormente el diastereómero RP y requirió una segunda purificación de columna. (La terminología relativa, superior contra inferior, se refiere a la elución en cromatografía de gel de sílice en fase normal, donde el "isómero superior" significa el primer isómero eluyente). El segundo grupo de fracciones no tenía una cantidad importante de impurezas -solamente los diastereómeros RP y mayormente SP restantes. Luego se recombinó con las fracciones sometidas a cromatografía en columna dos veces. El solvente se evaporó a presión reducida y la espuma blanca resultante se secó adicionalmente (0.20 mmHg) durante 1 h para proporcionar 42 g de la porción impura (4:1 isómero superior contra inferior basado en 31P-NMR) y 38 g de la porción pura (1:3 isómero superior contra . inferior ) . La porción impura se volvió a someter a cromatografía en columna de manera similar para proporcionar 3.8 g de 97% de isómero superior puro (fracción apartada) y 36 g de producto puro en una relación 4:1. Las dos porciones principales se disolvieron en DCM, se combinaron, se evaporaron a presión reducida y se secaron (50°C, 0.2 mmHg, 24 h) para obtener 74 g (45.7%) de producto puro 4 con una relación diastereomérica de 48:51, como una espuma blanca, pf de alrededor de 75-85°C.
Para producir un sólido amorfo de la mezcla diastereomérica, se agitaron 74 g de la espuma blanca con éter t-butil metílico (750 mL) dando como resultado una solución parcial y un residuo sólido gomoso. Mientras se agitaba, se agregaron heptanos (750 mL) lentamente y la suspensión se agitó mecánicamente durante 1 hora hasta que la mayoría de la goma se convirtió en un sólido blanco. El sólido se reunió con una espátula y la lechada resultante se filtró. El sólido se lavó con heptanos (50 mL, 4 veces) y se secó al vacío (50°C, 0.2 mmHg, 24 h) para proporcionar un polvo amorfo blanco (64 g) con un amplio intervalo de fusión de ca 70-80°C. Las XH y 31P NMR se adaptaron a la estructura y la HPLC mostró una pureza de 99.8% con una relación diastereomérica de 46:54 (también confirmado por P NMR) .
Método alternativo para realizar la mezcla sólida de 4. Luego de la cromatografía, el residuo se evaporó conjuntamente con diclorometano dos veces (5 mL/g) y se secó durante 24 h a 35-40°C a 35-45 mTorr. El residuo espumoso se tamizó a través de una pantalla de 250 micrones y se secó adicionalmente en las mismas condiciones hasta que el diclorometano residual cayó por debajo de 400 ppm, según la medición del espacio de cabeza GC. El polvo fino blancuzco a blanco amorfo resultante tiene un intervalo de temperatura de transición vitrea de 53.7 a 63.5°C.
Caracterización de la mezcla de isómeros (4) : ?-NMR (CDC13) d 10.05 (br s, 1H, NH, S?), 10.00 (br s, 1H, NH, RP), 7.49 (d, 1H, C6-H, SP), 7.36 (m, 5H, C6-H, RP, aromático ), 7.23-7.14 (m, 6H, Rp Sp, aromático ), 6.18 (br d, 2H, Cl '-H, R?/SP), 5.63 (d, 1H, C5-H, SP), 5.58 (d, 1 H, C5 -H, RP), 5.01 (m, 2H, Ctf-(CH3)2, Rp/Sp), 4.46-4.33 (m, 8H, C-5'-H2, ala-NH, C3'-0 H, Rp/Sp), 4.12 (m, 2 H, ala-CH-GH3, RP/SP), 4.01-3.85 (m, 4H, C3'-H, C4'-H, Rp S?), 1.39-1.22 (m, 12H, all C¾, RP/SP). 31P-NMR (CDCI3) d 3.60 (RP) , 3.20 Sp relativo a trifenilfosfato a -17.80 ppm. ES-MS M+l 530.2. Análisis elemental: % calculado (incluyendo 0.29% de agua según se encontró mediante análisis de Karl Fisher) .
C, 49.75; H, 5.54; N, 7.90, F, 3.58, P, 5.84. % encontrado : C, 49.50; H, 5.44; N, 7.85; F, 3.62; P, 6.05.
Discusión acerca de la separación de isómeros El compuesto 4, debido a la quiralidad en fósforo, se compone de dos diastereómeros , los cuales se denominan ??-4 y Sp-4. La asignación estereoquímica se llevó a cabo según el análisis de rayos X de cristales simple de Sp-4. Tanto Rp-4 como Sp-4 proporcionaron un producto cristalino.
A continuación se resumen los procedimientos para la cristalización .
SP-4 ??-4 Ejemplo 3. Cristalización del isómero ¿¾j-4. La fracción cromatografiada que contenía el primer isómero RP-4 menos polar y eluyente (3.8 g, 97% puro) se disolvió en isopropanol (36 g) y se diluyó con heptanos hasta quedar turbia (72 g) . La solución se sembró y se agitó a temperatura ambiente durante 5 h. El sólido resultante se recolectó por filtración al vacío, se lavó con heptanos (20 mL, 2 veces) y se secó (50°C, 0.2 MI, 24 h) hasta conseguir 2.3 g de agujas blancas muy pequeñas pf 136.2-137.8 °C . Se descubrió que la pureza por HPLC del material resultante era del 99.02%.
RP-4: 1 H-NMR (CDC13) d 9.10 (br s, 1H, NH), 7.36 (m, 2H, o-aromático), 7.26-7.16 (m5 4 H, C6-H, /^-aromático), 6.16 (br d, I R Cl'-H), 5.58 (d, IH, C5-H), 5.01 (sept, 1H, CH-(CH3)2), 4.52-4.47 (m, 2H, C-5'-H2), 4.10 (d, 1H, C3'-H), 4.02-3.76 (m, 4H, ala-NH, C3'-OH, C4'-H5 ala-CH-CH3), 1.37-1.20 (m, 12H, Todo CH3) Ejemplo 4. Preparación y cristalización de Sp-4.
Método 1: Precipitación directa a partir del producto crudo 4: A una solución agitada de clorhidrato de éster isopropilico de L-alanina (10.5 g, 61.5 mmoles, secada azeotrópicamente, dos veces, con 50 mL de tolueno cada vez) en diclorometano (100 mL) se agregó fenil diclorofosfato (7.5 mL, 50 mmoles) a temperatura ambiente. La mezcla se enfrió hasta -10°C y luego se agregó una solución de NMI (30.5 mL, 384.3 mmoles) en 30 mL de diclorometano durante un periodo de 30 min. Luego de completar la adición, la mezcla se agitó entre -10 y -15°C durante 1 h. A la mezcla que precede se le agregó 2 ' -desoxi-2' -fluoro-2 ' -C-metiluridina (3) (10 g, 38.4 mmoles) en una porción y la mezcla se agitó por debajo de -10°C durante 3 h y luego se dejó calentar lentamente hasta 20°C (6 h) . La mezcla se agitó a esta temperatura durante la noche (15 h) y luego se inactivo con 10 mL de metanol . El solvente se evaporó y el residuo se volvió a disolver en EtOAc (200 mL) . La capa de EtOAc se lavó con agua (100 mL) , HC1 1N (75 mL, 3 veces), solución de NaHC03 acuosa al 2% (50 mL) y salmuera (50 mL) . La capa orgánica se lavó sobre a2SÜ4, se filtró y se concentró. El residuo se secó a alto vacío durante 2 h para proporcionar una espuma blanca (22 g) .
La espuma anterior se disolvió en 33 mL de DCM y luego se agregaron 65 mL de IPE (éter isopropilico) para proporcionar una solución saturada. La solución se filtró a través de una pequeña almohadilla de Celite y el filtrado se agitó con semillas de Sp-4 durante 72h a temperatura ambiente (alrededor de 22°C -cabe destacar que enfriar la suspensión hasta 0°C provocó la eliminación del aceite del producto crudo) . El sólido blanco se filtró, se lavó con IPE (20 mL) y se secó para proporcionar 4.58 g (~85:15 mezcla de Sp-4:Rp-4 respectivamente, determinado mediante 31P NMR) de un polvo blanco. El sólido anterior se suspendió en 23 mL de DC y luego se sometió a reflujo durante 3 h. La mezcla se enfrió hasta temperatura ambiente y se agitó durante 15 h. El sólido blanco se filtró, se lavó con 4.5 mL de DCM frío y se secó a alto vacio a 45°C para proporcionar Sp-4 puro, pf 93.9-104.7°C, pureza por HPLC 99.74% (3.11 g, 15.2 % del nucleósido de uridina) .
Sp- ?-NM (CDC ) d 8.63 (br s, IH, NH), 7.47 (d, IH, C6-H), 7.30 (m, 2H, o- aromático). 7.26-7.18 (m, 3H, m,p- aromático), 6.18 (br d, I H, Cl '-H), 5.70 (d, IH, C5-H), 5.02 (sept, C/Í-(CH3)2), 4.53 (m, 2H, C-5'-H2), 4.1 1 (d, IH, C3'-H), 3.97 (m, 3H, C3 -OH, C4'-H, ala-CH-CH3), 3.77 (br s, IH, ala-NH), 1.39 (d, 3H.C2'- CH3), 1.37 (d, 3H, ala-CF¾), 1.24 (d, 6H, CH-(C¾)2).
Método 2: Eliminación del aceite del producto crudo 4: A una solución agitada de clorhidrato de éster isopropilico de L-alanina (20.6 g, 123 mmoles, secada azeotrópicamente, dos veces con 75 mL de "tolueno cada vez) en diclorometano (200 mL) se agregó fenil diclorofosfato (14.9 mL, 100 mmoles) a temperatura ambiente. La mezcla se enfrió hasta -10°C y luego se agregó una solución de NMI (61.3 mL, 769 mmoles) en 60 mL de diclorometano durante un periodo de 30 min. Luego de completar la adición, la mezcla se agitó entre -10°C y -15°C durante lh. A la mezcla que precede se le agregó 2'-desoxi-2' -fluoro-2 ' -C-metiluridina (3) (20 g, 76.9 mmoles) en una porción y la mezcla se agitó por debajo de -10°C durante 3 h y luego se dejó calentar lentamente hasta 20°C (6 h) . La mezcla se agitó a esta temperatura durante la noche (15 h) y luego se inactivo con 10 mL de metanol. El solvente se evaporó y el residuo se volvió a disolver en EtOAc (400 mL) . La capa de EtOAc se lavó con agua (200 mL) , HC1 1N (100 mL, 3 veces), solución de NaHCC>3 acuoso al 2% (100 mL) y salmuera (50 mL) . La capa orgánica se secó sobre Na2S04, se filtró y se concentró. El residuo se secó a alto vacio durante 2 h para proporcionar una espuma blanca (43 g) . La espuma anterior se disolvió en 86 mL de EtOAc en un matraz de fondo redondo de dos cuellos equipado con un agitador mecánico. Mientras se agitaba, se agregaron 100 mL de heptano lentamente y la suspensión se agitó durante 1 h. La capa superior se decantó y el residuo se agitó nuevamente con 50 mL de 2:3 soluciones de EtOAc/heptanos durante 10 min y luego se decantó. El residuo se secó a alto vacio para proporcionar una espuma blanca [31 g) .
La espuma anterior se disolvió en 46 mL de DCM y luego se agregaron 95 mL de IPE para proporcionar una solución saturada. La solución se filtró con una pequeña almohadilla de Celite y el filtrado se agitó con semillas de Sp-4 durante 72 h a temperatura ambiente. El sólido blanco se filtró, se lavó con IPE (30 mL) y se secó para proporcionar 7.33 g (~85:15 mezcla de Sp-4 : i?p-4 respectivamente determinado mediante 31P NMR) de polvo blanco. El sólido anterior se suspendió en 36 mL de DCM y luego se sometió a reflujo durante 3 h. La mezcla se enfrió hasta temperatura ambiente y se agitó durante 15 h. El sólido blanco se filtró, se lavó con 7.5 mL de DCM frío y se secó a alto vacio a 45°C para proporcionar Sp-4, >99% puro (4.78 g, 11.6 % del nucleósido de uridina) .
Método 3: Carga de gel de sílice del producto crudo 4: Se produjeron 5.0 g de producto crudo 4 de la misma manera que la mezcla de diastereómeros justo antes de la etapa de cromatografía en columna, comenzando con aproximadamente 2.5 g de 21 -desoxi-2 ' -fluoro-2 ' -C-metiluridina (3) . El producto crudo se disolvió en 10 mL de DCM y se agregaron 10 g de gel de sílice a la solución. El solvente se evaporó para proporcionar una lechada seca. La lechada se agitó con 40 mL de EtOAc/hexanos al 50% durante 15 min y luego se filtró. El gel de sílice se lavó con 10 mL adicionales de EtOAc/hexanos al 50%. El gel de sílice se lavó luego con de MeOH/DCM al 15% (100 mL) y se recolectó por separado. El solvente se evaporó y se secó a alto vacío para proporcionar 4.0 g de residuo (espuma). El residuo se disolvió en DCM (6 mL) y luego se agregaron ~9 mL de IPE para realizar una solución saturada. La mezcla se agitó suavemente durante la noche con semillas de Sp-4 a temperatura ambiente. El sólido blanco se filtró y lavó con IPE (5 mL) para proporcionar 1.28 g del producto. La 31P NMR reveló que el producto que precede contiene una mezcla 77:23 de Sp-4 : i?p-4 respectivamente. Esto se volvió a cristalizar a partir de 20 mL de DCM para obtener 0.75 g de Sp-4 >99% puro (alrededor de 12% del nucleósido de uridina) . Esta preparación de Sp-4 no necesita la etapa de sililación de la mezcla, por lo que todo el proceso de reacción se mostró anteriormente. A continuación se presentan aspecto de formas polimórficas y cristalinas simples de Sp-4.
Método 4: Se disolvieron 40.0 g de mezcla 1:1 de 4 en 90 mL de diclorometano . Se agregó éter diisopropilico (70 mL) a la solución anterior para proporcionar una solución saturada. (La cantidad de éter diisopropilico puede basarse en la pureza del producto.) La solución se sembró con Sp-4 puro (> 99%) y la mezcla se agitó suavemente con una barra de agitación a temperatura ambiente durante 20 h (después de 2 h se observó la formación de un sólido) . El sólido se filtró, se lavó con 40 mL de la mezcla de diisopropiléter/diclorometano (1:1) y se secó para proporcionar un sólido blanco (16.6 g, Sp-4 89.35 % puro mediante NMR) . El sólido se suspendió en 83 mL de diclorometano y se sometió a reflujo durante 3 h. La suspensión se enfrió hasta temperatura ambiente y se agitó durante la noche. El sólido se filtró y se lavó con 10 mL de DCM frió. El sólido se secó al vacio para proporcionar Sp-4 (13.1 g, 99.48 % puro mediante HPLC) . llg de este sólido se volvieron a disolver en 330 mL de DCM en condiciones de calor. La solución se enfrió hasta temperatura ambiente y se dejó a esta temperatura durante la noche. El producto cristalino se filtró y se secó para proporcionar 10.5 g de Sp-4 (99.74 % mediante HPLC).
Los compuestos Sp-4 y Rp-A pueden preparase de manera alternativa, de acuerdo con la novena o décima modalidad, haciendo reaccionar un nucleósido (protegido o desprotegido) 3 con un isopropil-alanil-fosforamidato (mezcla de C y C ' , C o C), como se muestra en la siguiente ecuación. 3 P.D. Ho es et ál . Nucleosides , Nucleotides & Nucleic Acids 2003, Tomo 22, Nos. 5-8, págs. 687-689 ("Howes") describe 2'- y 5 ' -fosforamidatos obtenidos mediante una reacción con cloruro de t-butilmagnesio . Ahi, Howes describe que cuando un nucleósido de 3 ' -desoxi-citidina se hace reaccionar con éster metílico del ácido (S) -2- [cloro-fenoxi-fosforilamino] propiónico en presencia de 1.2 equivalentes de cloruro de t-butilmagnesio, ocurre la fosforilación selectiva en la posición 2 ' , pero ocurre la que tiene un equivalente adicional de la fosforilación selectiva de cloruro de t-butilmagnesio en la posición 5'. Esta descripción debería compararse con aquella descrita en el Esquema de reacción 1 de Howes.
Ejemplo 5-1. Preparación de éster isopropílico del ácido (S)-2- [ (4-nitro-fenoxi) -fenoxi-fosforilamino] propiónico A una solución agitada de fosforodicloridato de 4-nitrofenilo (12.8 g, 50 mmoles) en diclorometano (100 mL) se agregó una solución de fenol y trietilamina (7.7 mL, 55 mmoles) en diclorometano (100 mL) a -78°C durante un período de 20 min. La mezcla se agitó a esta temperatura durante 30 min y luego se transfirió a otro matraz de fondo redondo que contenía clorhidrato de éster isopropílico de L-alanina (8.38 g, 50 mmoles) en diclorometano (100 mL) a 0°C. A la mezcla se agregó una segunda porción de trietilamina (14.6 mL, 105 mmoles) durante un período de 15 min. La mezcla se agitó a 0°C durante 1 h y luego el solvente se evaporó. El residuo se trituró con acetato de etilo (150 mL) y el sólido blanco se retiró por filtración. El filtrado se concentró a presión reducida para proporcionar un aceite amarillo pálido. El compuesto crudo se sometió a cromatografía usando gradiente de acetato de etilo/hexanos al 0-20% para proporcionar el producto (17 g, 83% de rendimiento) como una mezcla de diastereómeros en una relación de alrededor de 1:1. 3,P NMR (162 MHz, DMSO-d6): d -0.31, -0.47;? NMR (400 MHz, DMSO-d6): d 8.31- 8.27 (m, 2H), 7.51-7.37(m, 4H), 7.27-7.19(ra, 3H), 6.70-6.63(m, 1 H), 4.85-4.78(m5 1H), 3.97-3.86(m, 1H), 1.21-1.19(m5 3H), 1.11-1.09 (m, 6H); MS (ESI) m/z 407 (M-l)+. 3IP NMR (162 MHz, CDC13): d -2.05, -2.10; 1H NMR (400 MHz, CDCb): 8 8.22 (d, J = 9.2Hz, 2H), 7.41-7.33(m, 4H), 7.26-7.18(m, 3H), 5.05- 4.96(m, 1H), 4.14-4.05(m, 1H), 3.93-3.88(m, 1H), 1.38(d, J = 6.8Hz, 3H), 1.22 (dd, J = 6.2 & 3.0Hz, 6H); MS (ESI) miz 407 (M-l)+.
Ejemplo 5-2. Preparación de SP-4/-P-4. 3 + mezcla de C y C (~1 :l) ^Bu gCl, THF ^ $^ + ^ TA , 48h ~3 ~» A una solución agitada de 1- ( ( 2R, 3R, 4R, 5R) -3-Fluoro-4-hidroxi-5-hidroximetil-3-metil-tetrahidro-furan-2-il ) -1H-pirimidina-2 , 4-diona (130 mg, 0.5 mmoles) en THF seco (1.5 mL) se agregó una solución 1.0 M de cloruro de terc-butilmagnesio (1.05 mL, 1.05 mmoles, 2.1 equiv) ) a temperatura ambiente durante un período de 5 min. Luego de 30 min, se agregó una solución de éster isopropílico del ácido (S) -2- [ ( -nitro-fenoxi ) -fenoxi-fosforilamino] propiónico (mezcla de isómeros 1:1, 408 mg, 1 mmoles) en THF (1.5 mL) gota a gota durante un período de 5 min. La mezcla se dejó agitar a temperatura ambiente durante 48 h y luego se inactivo con NH4C1 acuoso saturado (20 mL) . La mezcla se dividió entre acetato de etilo (50 mL) y agua (20 mL) . El extracto orgánico combinado se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se concentró a presión reducida para proporcionar un residuo amarillo pálido. La cromatografía en columna del residuo usando gradiente de MeOH/diclorometano al 0-2% proporcionó un sólido espumoso blanco (125 mg, 47% de rendimiento, mezcla de Sp-4/-p-4 en una relación de alrededor de 3.05: 1.0) .
Ejemplo 6. Preparación y aislamiento no cromatográfico de éster isopropilico del ácido (S) -2- [ (S) - (4-nitro-fenoxi) -fenoxi-fosforilamino] propiónico El clorhidrato del éster isopropilico de L-alanina (330 g, 1.97 mol) se secó previamente mediante evaporación conjunta con tolueno (400 mL, 2 veces) a presión reducida y luego se secó en un horno de vacío (50°C, 0.2 mmHg, 17 h) . A una solución saturada de fosforodicloridato de 4-nitrofenilo 500.0 g, 1.953 mol) en diclorometano anhidro (3.0 L) se agregó una solución de fenol (183.8 g, 1.953 mol) y trietilamina (300 mL, 2.15 mol) en diclorometano (900 mL) a una temperatura interna de -60 °C durante un período de 3 horas. La mezcla se agitó a esta temperatura durante 30 minutos adicionales y luego se dejó calentar hasta -5°C durante 2.5 horas. El éster de aminoácido previamente secado se agregó a -5~0°C en una atmósfera de nitrógeno durante 10 min. El residuo de sal de aminoéster en el matraz de adición se transfirió a la mezcla de reacción mediante un enjuague con diclorometano (100 mL, 2 veces). La mezcla se agitó a 0°C durante 40 min y se agregó una segunda porción de trietilamina (571 mL, 4.10 mol) durante un periodo de 40 min a 0°C. La mezcla se agitó a 0~10°C durante 3 h y luego el sólido blanco (clorhidrato de trietilamina) se retiró por filtración y se enjuagó con diclorometano (300 mL, 3 veces). El filtrado se concentró a presión reducida y el residuo se trituró con metil-t-butilico éter (MTBE, 4 L) . La sal de sólido adicional formada de esta manera se retiró por filtración y se enjuagó con MTBE (150 mL, 3 veces) . El filtrado se concentró a presión reducida para proporcionar un aceite de color pardo claro transparente. El residuo se evaporó conjuntamente con hexanos (140 mL, 2 veces) para eliminar todo MTBE residual y se secó adicionalmente al vacio a 40°C durante 2 horas. El residuo seco se mezcló con éter diisopropilico (IPE, 1.1 L) y se agitó a 5 °C en un baño de agua helada. Se agregó una pequeña cantidad de cristales de siembra del isómero Sp deseado del producto a la solución y la mezcla se agitó a 5°C durante más de 22 h para formar una lechada medianamente espesa. Esto se dejó reposar en un congelador (-10°C) durante 44 h. El producto precipitado se recolectó por filtración y se enjuagó con solventes de IPE y hexanos (1:1, 3 x 190 mL) mezclados y enfriados previamente. El sólido se secó al vacio (0.5 mm Hg) a temperatura ambiente hasta que se obtuvo un peso constante para proporcionar 227.23 g (rendimiento: 28.5%) como un sólido en polvo blanco. La relación de los dos diastereómeros SP:RP fue de 9.65/1 basándose en 31P NMR (162 MHz, DMSO-d6, d -0.31 (Sp), -0.47) . El producto se volvió a cristalizar disolviéndolo en IPE (840 mL) mientras se calentaba en un baño a 60°C. La solución anterior se agitó a temperatura ambiente durante 1 h y luego se agregó una pequeña cantidad de semillas de isómero Sp cristalizado. Se formó un sólido en polvo blanco en un periodo de 2 horas y el matraz se almacenó en un congelador (-10°C) durante 16 horas. Un sólido cristalino fino y blanco obtenido se filtró, se lavó con IPE previamente enfriado (50 mL, 3 veces) y se secó al vacio (temperatura ambiente, 0.5 mm Hg) hasta conseguir un peso constante para proporcionar un sólido blanco esponjoso (177.7 g, 22% de rendimiento total o 44% de rendimiento total basado en el rendimiento teórico del isómero Sp) con una relación diastereomérica 48/1 basada en 31P-NMR. Pf 62-66°C. 31P NMR (162 MHz, DMSO-dó): d -0.31 ; ? NMR (400 MHz, DMSO-d6): d 8.30-8.27 (m, 2H), 7.49(d, J=8.8Hz, 2H), 7.41-7.37(m, 2H), 7.23-7.19 (m, 3H), 6.66 (dd, J=13.6, 10.0Hz, 1H), 4.86-4.78 (m, 1H), 3.97-3.86 (m, 1H), 1.19 (d, J=7.2Hz, 3H), 1.10(d, J=6.4Hz, 6H); 3IP NMR (162 MHz, CDC13): 6 -2.05; (162 MHz, DMSO-d6): d -0.31; ? NMR (400 MHz, CDC13): d 8.22 (d, J=9.2Hz, 2H), 7.41 -7.33(m, 4H), 7.26-7.18(m, 3H), 5.05-4.96(m, 1H), 4.14-4.05(m, 1H), 3.93-3.88(m, 1H), 1.38(d, J=6.8Hz, 3H), 1.22 (dd, J=6.2 & 3.0Hz, 6H); ? NMR (400 MHz, DMSO-d6): d 8.30-8.27 (m, 2H), 7.49(d, J=8.8Hz, 2H), 7.41-7.37(m, 2H), 7.23-7.19 (m, 3H), 6.66 (dd, J=13.6, 10.0Hz, 1H), 4.86-4.78 (m, 1H), 3.97-3.86 (m, 1H), 1.19 (d, J=7.2Hz, 3H), 1.10(d, J=6.4Hz, 6H) MS (ESI) miz 407 (M-l)+.
La estereoquímica de 8 (isómero Sp) ha sido confirmada mediante cristalografía de rayos X cristales simples, véanse los detalles al respecto a continuación.
Ejemplo 7. Separación de la mezcla diastereomérica del éster Isopropílico del ácido (S) -2- [ (4-nitro-fenoxi) -fenoxi-fosforilamino]propiónico mediante SFC Una muestra de la mezcla de diastereómeros (4.8 g) enriquecidos con el isómero R? se sometió a SFC usando una columna ChiralPak AD-H (2x15 cm) y se eluyó con isopropanol al 35% en dióxido de carbono a 100 bar. Se usó una carga de inyección de 4 mL de muestra a una concentración de 17 mg/mL de metanol. El isómero R? de éster isopropílico del ácido [ (S) -2- [ (R) - (4-nitro-fenoxi) -fenoxi-fosforilamino] propiónico] se eluyó en primer lugar. Las fracciones adecuadas de múltiples ejecuciones se combinaron y concentraron a presión reducida para proporcionar 2.9 g del isómero í?P del éster isopropilico del ácido [ (S) -2- [ (R) - (4-nitro-fenoxi) -fenoxi-fosforilamino] propiónico] como un aceite viscoso amarillo claro y 1.9 g del isómero SP del éster isopropilico del ácido [ (S) -2- [ (S) - (4-nitro-fenoxi) -fenoxi-fosforilamino] propiónico] como un sólido blanco. Los datos analíticos del isómero RP son similares al producto aislado por el método de cristalización antes mencionado.
Datos analíticos para el éster isopropilico del ácido (S) -2- [ (R) - (4-nitro-fenoxi) -fenoxi-fosforilamino] propiónico (8, isómero _¾>) : 31P NMR (162 MHz, DMSO-d6): d - 0.47; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): d 8.30-8.27 (m, 2H), 7.46-7.38 (m, 4H), 7.27-7.20 (ra, 3H), 6.68 (dd, J=13.8, 10.2Hz, 1H), 4.86-4.77 (m, 1H), 3.97-3.86 (m, 1H), 1.20 (d, J=7.2Hz, 3H), 1.10(dd, J=6.2, 2.2Hz, 6H); MS (ESI) m/z 407 (M-l)+.
Ejemplo 8-1. Preparación del éster isopropilico del ácido 2- [ (4-cloro-fenoxi) -fenoxi-fosforilamino] propiónico racémico A una solución agitada de fosforodicloridato de 4-cloro-fenilo (2.45 g, 10.0 mmoles) en diclorometano (20 mL) se agregó una solución de fenol (0.94 g, 10 mmoles) y trietilamina (1.56 mL, 11 mmoles) en diclorometano (20 mL) a -78°C durante un período de 20 min. La mezcla se agitó a esta temperatura durante 30 min y luego se transfirió a otro matraz de fondo redondo que contenía clorhidrato de éster isopropílico de L-alanina (1.67 g, 10 mmoles) en diclorometano (50 mL) a 0°C. A la mezcla se agregó una segunda porción de trietilamina (2.92 mL, 21 mmoles) durante un período de 15 min. La mezcla se agitó a 0°C durante 1 h y luego el solvente se evaporó. El residuo se trituró con acetato de etilo (30 mL) y el sólido blanco se retiró por filtración. El filtrado se concentró a presión reducida para proporcionar un aceite amarillo pálido. El compuesto crudo se sometió a cromatografía usando gradiente de acetato de etilo/hexanos al 10-20% para proporcionar el producto (2.0 g, 50 % de rendimiento) como una mezcla de diastereómeros en una relación de alrededor de 1:1. 1P NMR (162 MHz, CDCfe): d -1.58, -1.62; ? NMR (400 MHz, CDC13): d 7.06-7.51 (m, 8H), 7.15-7.28 (m, 2H), 7.29-7.47(m, 2H), 4.0-4.10(m> 1H), 3.82-3.88 (m, 3H), 1.35-1.36 (dd, 6H); 1.19-1.22 (m, 3H). MS (ESI) miz 398 (M-l)+.
El producto resultante se purificó por extracción, cristalización o cromatografía, tal como se describe anteriormente .
Ejemplo 8-2. Preparación de 2- ( (2R, 3R, 4R, 5R) -5- (2 , 4-dioxo-3 , 4-dihidropirimidin-l (2H) -il) -4-fluoro-3-hidroxi-4-metiltetrahidrofuran-2-il)metoxi) (fenoxi) -fosforilamino)propanoato de (S) -Isopropilo (4).
A una solución agitada de 1- ( (2R, 3R, R, 5R) -3-Fluoro-4-hidroxi-5-hidroximetil-3-metil-tetrahidro-furan-2-il) -1H-pirimidina-2 , 4-diona (3, 2.6 g, 10 mmoles) en THF seco (50 mL) se agregó una solución 1.7 M de cloruro de terc-butilmagnesio (12.4 mL, 21 mmoles, 2.1 equiv) ) a temperatura ambiente durante un periodo de 15 min. Después de 30 min, se agregó una solución de éster isopropilico del ácido (2-[(4-cloro-fenoxi) -fenoxi-fosforilamino] propionico racémico (4.08 g, 10 mmoles) en THF (15mL) gota a gota durante un periodo de 10 min. La mezcla se dejó agitar a temperatura ambiente durante 72. El manchado de dos sustancias en TLC con producto auténtico mostró que alrededor de 5% del producto deseado se había formado en comparación con el nucleósido de partida. Ejemplo 9-1. Preparación de éster isopropilico del ácido 2-[ (2-cloro-fenoxi) -fenoxi-fosforilamino] propionico racémico (±) · A una solución agitada de fosforodicloridato de 2-cloro-fenilo (9.8 g, 40 mmoles) en diclorometano (80 mL) se agregó una solución de fenol (3.76 g, 40 mmoles) y trietilamina (6.16 mL, 44 mmoles) en diclorometano (80 mL) a -78°C durante un período de 20 min. La mezcla se agitó a esta temperatura durante 30 min y luego se transfirió a otro matraz de fondo redondo que contenía clorhidrato de éster isopropílico de L-alanina (6.7 g, 40 mmoles) en diclorometano (150 mL) a 0°C. A la mezcla se agregó una segunda porción de trietilamina (11.6 mL, 84 mmoles) durante un período de 15 min. La mezcla se agitó a 0°C durante 1 h y luego el solvente se evaporó. El residuo se trituró con acetato de etilo (100 mL) y el sólido blanco se retiró por filtración. El filtrado se concentró a presión reducida para proporcionar un aceite amarillo pálido. El compuesto crudo se sometió a cromatografía usando gradiente de acetato de etilo/hexanos al 10-20% para proporcionar el producto (11.3 g, 72 % de rendimiento) como una mezcla de diastereómeros en una relación de alrededor de 1:1. 31P NMR (162 MHz, CDC13): 6 -1.58, 1.61 ; ? NMR (400 MHz,CDCl3): d 7.06-7.51 (m, 8H), 5.02-5.94 (m, 1H), 4.10-4.16(m, 1H), 3.31-3.94(m, 1H), 1.18- 1.35(m, 3H), 1.38-1.40 (dd, 6H); MS (ESI) m/z 398 (M-l)*.
El producto resultante se purificó por extracción, cristalización o cromatografía, tal como se describe anteriormente .
Ejemplo 9-2. Preparación de 2- ( (2R, 3R, 4R, 5R) -5- (2 , 4-dioxo-3 , 4-dihidropirimidin-l (2H) -il) -4-fluoro-3-hidroxi-4-metiltetrahidrofuran-2-il)metoxi) (fenoxi) -fosforilamino)propanoato de (S) -isopropilo .
A una solución agitada de 1- ( (2R, 3R, 4R, 5R) -3-Fluoro-4-hidroxi-5-hidroximetil-3-metil-tetrahidro-furan-2-il) -1H-pirimidina-2, 4-diona (3, 2.6 g, 10 mmoles) en THF seco (50 mL) se agregó una solución 1.7 M de cloruro de terc-butilmagnesio (12.4 mL, 21 mmoles, 2.1 equiv) ) a temperatura ambiente durante un periodo de 15 min. Después de 30 min, se agregó una solución de éster isopropilico del ácido (2- [ (2-cloro-fenoxi) -fenoxi-fosforilamino] propiónico (4.08 g, 10 mmoles, racémico) en THF (15 mL) gota a gota durante un periodo de 10 min. La mezcla se dejó agitar a temperatura ambiente durante 72 h. El manchado de dos sustancias en TLC con producto auténtico mostró que alrededor de 5-10% del producto deseado se había formado en comparación con el nucleósido de partida.
Ejemplo 10-1. Preparación de éster isopropilico del ácido 2-[ (2,3,4,5, 6-pentafluoro-fenoxi) -fenoxi-fosforilamino] propiónico racémico (±) . solución agitada de fos forodicloridato pentafluorofenilo (6.0 g, 20 mmoles) en diclorometano (40 mL) se agregó una solución de fenol y triet ilamina (3.08 mL, 22 mmoles) en diclorometano (40 mL) a -78°C durante un periodo de 20 min. La mezcla se agitó a esta temperatura durante 30 min y luego se transfirió a otro matraz de fondo redondo que contenia clorhidrato de éster isopropilico de L-alanina (3.35 g, 20 mmoles) en diclorometano (100 mL) a 0°C. A la mezcla se agregó una segunda porción de trietilamina (5.84 mL, 42 mmoles) durante un periodo de 15 min. La mezcla se agitó a 0°C durante 1 h y luego se evaporó el solvente. El residuo se trituró con acetato de etilo (60 mL) y el sólido blanco se retiró por filtración. El filtrado se concentró a presión reducida para proporcionar un aceite amarillo pálido como una mezcla de diastereómeros en una relación de alrededor de 1:1. 31P NMR (162 MHz , CDC13) : d -0.49, -0.58. El producto resultante se purifica por extracción, cristalización o cromatografía, tal como se describe anteriormente .
Ejemplo 10-2. Preparación de la mezcla diastereomérica éster isopropilico del ácido (S) -2- [ (2 , 3 , 4 , 5 , 6-pentafluoro-fenoxi) -fenoxi-fosforilamino]propiónico y aislamiento del diastereómero único éster isopropilico del ácido (S)-2-[(S)-(2,3,4,5, 6-pentafluoro-fenoxi) -fenoxi-fosforilamino]propiónico mediante resolución dinámica inducida por cristalización con múltiples cosechas.
Heianos A un matraz de fondo redondo de tres cuellos de 2 L equipado con un agitador mecánico y un termómetro de temperatura baja, se agregaron 60 g (284 mmoles) de diclorofosfato de fenilo y 300 mL de diclorometano anhidro. La solución se enfrió hasta 0°C en una atmósfera de nitrógeno y se agregó sal de clorhidrato de iso-propil alanato (secada en un horno al vacio, 47.7 g, 284 mmoles) rápidamente como un sólido. La mezcla se agitó y se enfrió hasta -55°C en un baño de acetona-hielo seco. Se agregó una solución de 60.32 g de trietilamina (596 mmoles) en 300 mL de diclorometano a través de un embudo de adición durante 70 minutos. La mezcla blanca turbia se agitó a -55°C durante media hora y luego la temperatura se aumentó hasta -5°C lentamente durante 1.5 h. Se agregó una mezcla enfriada previamente (a temperatura ambiente) de pentafluorofenol (52.42 g, 284 mmoles) y trietilamina (32.11 g, 317 mmoles) en 180 mL de diclorometano a la mezcla a través de un embudo de adición durante 1 h a 0°C y la mezcla resultante se agitó a 0°C durante 4 horas. El precipitado blanco (TEA-HCl) se retiró por filtración y se enjuagó con diclorometano (50 mL, 3 veces) . El filtrado se concentró a presión reducida y el residuo sólido blanco se trituró en 880 mL de éter metil t-butilico (TBME) a temperatura ambiente durante una hora. La suspensión blanca se filtró y el sólido se enjuagó con TBME (150 mL, 3 veces). El sólido se distribuyó en una mezcla de acetato de etilo (600 mL) y agua (150 mL) . La capa orgánica se separó y se lavó con agua (100 mi, 3 veces) . La capa orgánica se secó sobre MgS04 y se concentró para proporcionar 29.92 g (66 mmoles) de producto (isómero 5P, confirmado por cristalografía de rayos X, infra) como un sólido blanco pluma.
El filtrado de la trituración con TBME que precede se concentró a presión reducida hasta conseguir un residuo sólido blanco y el sólido se trituró en 450 mL de acetato de etilo y hexanos mezclados (20:80 v/v) a temperatura ambiente durante 75 minutos. Se recogió sólido (sólido 1) por filtración y se enjuagó con acetato de etilo al 20% en hexanos (75 mL, 30 mL 2 veces) . El licor madre se concentró para proporcionar un sólido blancuzco que se trituró en acetato de etilo al 20% en hexanos (185 mL) a temperatura ambiente durante 17 horas. Se recogió un sólido blanco (sólido 2) por filtración y se enjuagó con acetato de etilo al 20% en hexanos (10 mL, 2 veces). El sólido 1 y el sólido 2 se combinaron y se disolvieron en 1.2 L de acetato de etilo. La solución se lavó con agua (150 mL, 3 veces), salmuera (50 mL) y se secó sobre MgS04. La solución se concentró a presión reducida para proporcionar 72.8 g (161 mmoles) de producto puro. La cantidad total de producto fue de 102.72 g (226 mmoles, 80%). 1H NMR (CDC13, 400 MHz) d:. 7.38-7.33 (m, 2 H), 7.27-7.24 (m, 2 H), 7.23-7.19 (m, 1 H), 5.04 (hept, 1 H), 4.18-4.09 (m, 1H), 4.01-3.96 (ra, 1 H), 1.45 (d, 3 H), 1.25 (dd, 6 H). 31 P NMR (CDCI3, 162 MHz) d: -0.50.
Ejemplo 10-3: Preparación de mezcla diastereomérica éster isopropilico del ácido (S) -2- [ (2 , 3 , 4 , 5, 6-pentafluoro-fenoxi) -fenoxi-fosforilamino] ropiónico y aislamiento del diastereómero único éster isopropilico del ácido (S)-2-[(S)- (2,3,4,5, 6-pentafluoro-fenoxi) -fenoxi-fosforilamino] propiónico mediante resolución dinámica inducida por cristalización en una sola cosecha.
A un matraz seco de tres cuellos de 1 L equipado con un termómetro de temperatura baja y un agitador mecánico, se cargó fosforodicloridato de fenilo (25 g, 118.5 minóles) . Se agregó diclorometano anhidro (125 mL) y la solución se enfrió hasta 0°C. La sal de éster de alanina (secada en horno) (19.86 g, 1 eq) se agregó rápidamente en N2 mientras se agitaba. La solución se enfrió hasta ca -50°C (temperatura interna (en un baño de acetona/hielo seco en N2) . Se agregó una solución de trietilamina (25.2 g, 2.1 eq) en DCM (125 mL) gota a gota con un embudo de adición durante 0.5 h a -50 °C y la lechada blanca se agitó a alrededor de -50 °C durante 0.5 h. La mezcla se dejó calentar hasta 0°C durante 1.5 h y luego se agregó una solución enfriada pre-mezclada de pentafluorofenol (21.82 g, 1 eq) y TEA (13.2 g, 1.1 eq) (cuidado: se libera calor cuando se mezclan el pentafluorofenol y la TEA) en 75 mL de DCM durante 0.5 h a 0°C mediante un embudo de adición. La mezcla se agitó a 0°C durante 4 h adicionales.
La mezcla se filtró a través de un embudo Büchner y el clorhidrato de trietilamina sólido recogido se enjuagó con DCM (40 mL, 3 veces) . El filtrado se verificó mediante 31P-NMR (la relación ca 1.14:1 favoreció al diastereómero Sp - pico campo abajo) y se dividió en dos partes de igual peso. Una de estas se concentró a presión reducida. El residuo sólido blanco (31 g) se trituró en una mezcla de EtOAc y hexanos (150 mL, 20:80, v/v) a TA durante 17 h dejando tiempo para la resolución dinámica del isómero Sp menos soluble. La lechada blanca se filtró y el sólido se enjuagó con EtOAc al 20% en hexanos (25 mL, 2 veces) . El sólido (22.58 g) se verificó mediante 1H-N R y 31P-NMR y contenia producto como un isómero contaminado con sal de clorhidrato de trietilamina . El sólido se disolvió y se dividió en 310 mL de EtOAc y 100 mL de agua. Luego de separar la capa orgánica, la capa acuosa se retroextrajo con EtOAc (50 mL) . La capa orgánica combinada se lavó con agua (80 mL, 3 veces), salmuera (50 mL) y se secó sobre MgSCj. La solución se concentró a presión reducida y luego se secó a alto vacio a TA hasta un peso constante para proporcionar 17.36 g de producto como un sólido blanco de la mitad de la reacción. El rendimiento fue de 64%. El licor madre anterior se concentró hasta proporcionar un residuo gomoso (7.89 g) que contenia los reactivos con una relación de 1 : 1.2 (deseado/indeseado) en función de 31P-NMR.
Ejemplo 10-4. Preparación de éster isopropílico del ácido (S) -2- [(2,3,4,5, 6-pentafluoro-fenoxi) -fenoxi-fosforilamino] propiónico .
Se cargó DCM (11.5 L) en el reactor de vidrio limpio y seco. Se cargó fenildiclorofosfato (2.3 kg, 10.9 mol) al reactor en nitrógeno. Luego la solución se enfrió hasta 0°C. Luego se agregó clorhidrato de éster isopropílico de L-alanina (1.83 kg, 10.9 mol) en una porción y se continuó agitando durante 30 min. La masa de reacción se enfrió hasta -50°C de temperatura interna usando un baño de hielo seco/acetona. Se agregó una mezcla de TEA (2.1 eq, 3.17 L) en DCM (11.5 L) a la solución de reacción anterior lentamente durante un periodo de 8 h para mantener la temperatura interna entre -40 y -50°C. Luego de completar la adición, la reacción se mantuvo en el mismo intervalo de temperatura durante alrededor de 1 h. La mezcla se dejó calentar hasta 0°C durante alrededor de 4 h.
Mientras tanto, en otro reactor, se cargó DCM (6.9 L) y luego se agregó pentafluorofenol (2.0 Kg, 10.9 mol) en nitrógeno. La solución se enfrió hasta 0°C, luego se agregó TEA (1.1 eq, 1.65 L) a la solución de pentafluorofenol (exotérmica) durante un periodo de alrededor de 2 h. A su vez, la solución resultante se agregó lentamente a la primera solución que contenia el diclorofosfato de fenilo y el éster de aminoácido mientras se mantenía la temperatura entre 0 y 5°C durante un período de alrededor de 7 h. Luego de completarse la adición, se continuó agitando en ese intervalo de temperatura durante alrededor de 4 h. El progreso de la reacción se monitoreó mediante HPLC. Cuando quedaba menos que el 5% del pentafluorofenol , la reacción se detuvo. Nótese que la HPLC quiral indicó una mezcla uniforme de diastereómeros del producto en este punto.
La suspensión de reacción se filtró a través de un filtro Nutsche para quitar la mayoría de la sal de clorhidrato de trietilamina suspendida. La torta de sal se lavó con cantidad en exceso de DCM (9 L) y este lavado se agregó al filtrado principal. El filtrado se concentró a presión reducida a 35°C para proporcionar un residuo sólido. El residuo sólido se evaporó conjuntamente con hexano (4 L) para reducir adicionalmente los niveles de DCM residual. A este sólido residual, se agregaron 6 L de MTBE/Hexano al 20% y la suspensión se agitó durante alrededor de 17 h a temperatura ambiente y se monitoreó mediante HPLC. El pH de la solución se mantuvo básico debido a la TEA residual. Durante este tiempo, se llevó a cabo una solución dinámica en la cual el sólido precipitado era el isómero Sp deseado y el sobrenadante se mantuvo en equilibrio entre Sp-4 y í?p-4.
La suspensión se pasó a través de un filtro Nutsche y el producto sólido deseado, todavía contaminado con clorhidrato de TEA, se lavó con MTBE/Hexano al 5% (1 L) . El sólido se disolvió en acetato de etilo (35 L) y la solución se lavó con agua (35 L, 3 veces) y salmuera (10 L) y luego la solución se secó sobre sulfato de sodio sólido, se filtró, se concentró a presión reducida, manteniendo la temperatura de reacción por debajo de 4 °C. El residuo sólido se evaporó conjuntamente con hexano (4 L) . El reactor se trajo a temperatura ambiente y se agregó MTBE/Hexano al 5% (5 L) . La suspensión espesa se agitó durante 15 min y luego el sólido se recogió a través de filtración. El sólido recogido se lavó con hexano (2.5 L) y se secó a alto vacío a temperatura ambiente hasta un peso constante para proporcionar el producto final (Sp-4) como un sólido blanco, 2.6 kg (53%); 99.5% puro por HPLC, 0.4% de otro i¾>-4.
Ejemplo 10-5. Preparación de 2- ( (2R, 3R, 4 ,5R) -5- (2 ,4-dioxo-3, 4-dihidropirimidin-1 (2H) -il) -4-fluoro-3-hidroxi-4-metil tetrahidrofuran-2-il)metoxi) (fenoxi) -fosforilamino)propanoato de (S) -isopropilo.
A una solución agitada de 1- ( ( 2R, 3R, 4R, 5R) -3-Fluoro-4-hidroxi-5-hidroximetil-3-metil-tetrahidro-furan-2-il ) -1H-pirimidina-2 , 4-diona (3, 2.6g, 10 mmoles) en THF seco (50 mL) se agregó una solución 1.7 M de cloruro de terc-butilmagnesio (12.4 mL, 21 mmoles, 2.1 equiv) ) a temperatura ambiente durante un periodo de 15 min. Después de 30 min, se agregó una solución de éster isopropilico del ácido (2- [ (2 , 3 , 4 , 5 , 6-pentafluoro fenoxi) -fenoxi-fosforilamino]propiónico crudo racémico (4.08 g, 10 mmoles) en THF (15 mL) gota a gota durante un periodo de 10 min. La mezcla se dejó agitar a temperatura ambiente durante 72 h. TLC co-spot con producto auténtico mostró que alrededor de 40-50% del producto deseado se había formado en comparación con el nucleósido de partida.
Ejemplo 10-6. Preparación de 2- ( (S) - ( ( (2R, 3R, 4R, 5R) -5- (2 , 4-dioxo-3 , 4-dihidropirimidin-l (2H) -il) -4-fluoro-3-hidroxi-4-metiltetrahidrofuran-2-il)metoxi) (fenoxi) fosforilamino) propanoato de (S) -Isopropilo (,Sp-4) usando éster isopropilico del ácido (S) -2- [ (S) - (2 , 3, 4 , 5 , 6-pentafluoro-fenoxi) -fenoxi- osforilamino]propiónico y purificación solo por cristalización .
A una solución agitada de 3 (10 g, 38.46 inmoles, secado al vacio a 50°C durante 20 h) en THF seco (165mL) se agregó una solución 1.7 M de cloruro de terc-butilmagnesio en THF (47.5 mL, 80.77 mmoles) durante un periodo de 20 min mientras se mantuvo el matraz en una baño de agua fría (5°C) en una atmósfera de nitrógeno. Luego de completar la adición, el baño frío se quitó y la suspensión blanca se agitó a temperatura ambiente (20°C) durante 30 min. Luego se agregó una solución de éster isopropilico del ácido (S)-2-[(S)-(2,3,4,5, 6-pentafluorofenoxi ) -fenoxifosforilamino] propiónico (20.9 g, 46.11 mmoles) en THF anhidro (165 mL) a la mezcla de reacción durante un periodo de 30 min. La mezcla se agitó a temperatura ambiente (20°C) durante 3.5 h. Se continuó agitando durante 1.5 h adicional, en cuyo momento la TLC indicó >95% de conversión y ninguna diferencia significativa en la intensidad de la impureza de 31 , 5 ' -£>is-fosforamidato de 2 h. La mezcla de reacción se inactivo con NH4C1 ac. saturado (10 mL) y luego el solvente se evaporó a 25°C. El residuo se dividió entre acetato de etilo (400 mL) y una mezcla de cloruro de amonio saturado (60 mL) /agua (20 mL) . La capa orgánica se separó, se lavó con cloruro de amonio saturado (80 mL) y agua (60 mL, 3 veces) . Hasta este momento, la capa acuosa se mantuvo separada. La capa orgánica se lavó con carbonato de sodio ac. al 5% (50 mL, 3 veces) y agua (60 mL, 2 veces) . La primera capa acuosa se extrajo con acetato de etilo adicional (100 mL) , se lavó con agua (20 mL, 2 veces) y luego la capa acuosa obtenida de los lavados con carbonato de sodio se extrajo con el mismo extracto de acetato de etilo. La capa orgánica se lavó con agua (20 mL, 2 veces) y se combinó con la porción principal. Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, se filtraron y se concentraron para proporcionar un sólido espumoso (19.32 g) . El residuo se disolvió en 60 mL de diclorometano (se retiró un sólido blanco por precipitación y se formó una torta en alrededor de cinco minutos) y luego se agregaron 25 mL de IPE. La suspensión se agitó a temperatura ambiente durante 2 h. El sólido blanco se filtró, se lavó con mezcla 1:1 de IPE frío /diclorometano (20 mL) (0°C) y se secó para proporcionar 11.77 g (58% de rendimiento) del producto como un sólido blanco amorfo. El sólido anterior se volvió a disolver en diclorometano (350 mL) , se filtró y se evaporó a presión atmosférica (temperatura de baño 45 °C) a un volumen de -120 mL . La solución se dejó reposar a temperatura ambiente (21°C) durante 20 h. El sólido blanco cristalino (solvato de diclorometano) se recogió por filtración, se lavó con diclorometano frío (0°C) (10 mL) y se secó a alto vacio durante 4 h a temperatura ambiente para proporcionar producto puro no solvatado (10.62 g, 52% de rendimiento) como agujas blancas. Pureza por HPLC de 99.8%. Las propiedades espectrales coinciden con los valores informados en la presente.
Ejemplo 10-7. Preparación de 2- ( (S) - ( ( (2R, 3R, 4R, 5R) -5- (2 , 4- dioxo-3, 4-dihidropirimidin-l (2H) -il) -4-fluoro-3-hidroxi-4- metiltetrahidrofuran-2-il) metoxi) (fenoxi) fosforilamino) propanoato de (S) -Isopropilo (Sp-4) usando éster isopropilico del ácido (S) -2- [ (S) - (2 , 3 , 4 ,5 , 6-pentafluoro-fenoxi) -fenoxi- fosforilamino] propiónico, condiciones de reacción modificadas y procesamiento y purificación solo por cristalización.
A una suspensión agitada de 1- ( (2R, 3R, 4R, 5R) -3-fluoro- 4-hidroxi-5- (hidroximetil) -3-metiltetrahidrofuran-2- il) pirimidina-2, 4 ( 1H, 3H) -diona (3,5.0 g, 19.1 mmoles, secado al vacio a 50°C durante 20 h) en THF seco (75 mL) se agregó una solución 1.7 M de cloruro de terc-butilmagnesio en THF (23.7 mL, 40.35 mmoles) usando un embudo de adición durante un periodo de 30 min a -5°C. La suspensión blanca se agitó a esta temperatura durante 30 min y luego se calentó hasta temperatura ambiente (20°C) , a la temperatura se agitó durante 30 min adicionales. La mezcla de reacción se enfrió hasta 5°C y luego se agregó una solución de éster isopropilico del ácido ( S ) -2- [ ( S ) - (2 , 3 , , 5 , 6- pentafluorofenoxi ) -fenoxifosforilamino] propiónico (10.45 g, 23.06 mmoles) en THF (50 mL) durante un período de 30 min. La mezcla se agitó a 5°C durante 18 h, se enfrió hasta -5°C y luego se inactivo con HC1 2N (25 mL) . Se agregó tolueno (100 mL) a la mezcla y se calentó hasta temperatura ambiente. Luego de 20 min, las capas se separaron. La capa orgánica se lavó con HC1 1N (10 mL, 2 veces), agua (10 mL) , Na2C03 acuoso al 5% (10 mL, 4 veces), agua (10 mL, 2 veces) y salmuera (10 mL) . Todas las capas acuosas se volvieron a extraer con tolueno (20 mL) , se lavaron con Na2C03 acuoso al 5% (5 mL, 2 veces), agua (10 mL) y salmuera (5 mL) . La capa orgánica combinada se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se evaporó hasta llegar a un volumen aproximado de 20 mL. Se agregó diclorometano (20 mL) a la solución y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 18 h. El sólido se filtró, se lavó con mezcla 1 : 1 de MTBE/DCM (10 mL, 2 veces) y se secó a alto vacío para proporcionar un sólido blanco (7.7 g) . La HPLC del sólido en este momento indicó un 98.21% de Sp-4, 0.18% de 3 sin reaccionar y 0.67% de impureza de 3'5'-bis-fosforamidato . El sólido anterior de Sp-4 se volvió a disolver en diclorometano (77 mL, calentado en un recipiente a presión a 55°C) y se dejó reposar a temperatura ambiente durante 20 h. El sólido cristalino se filtró, se lavó con diclorometano frío (5 mL, 0°C) y se secó a alto vacío para proporcionar producto puro como un sólido blanco (6.9 g, 68% de rendimiento, 99.79% puro por HPLC) .
La preparación y purificación de C o C proporciona acceso directo a Sp-4 o i?p-4, como se ilustra en los siguientes ejemplos. 8 (isómero SD) P Ejemplo 11. Preparación de 5p-4 (escala de 32 mg) : A una solución agitada de 1- ( (2R, 3R, R, 5R) -3-Fluoro-4-hidroxi-5-hidroximetil-3-metil-tetrahidro-furan-2-il ) -lH-pirimidina- 2,4-diona 3 (32 mg, 0,12 mmoles) en THF seco (1 mL) se agregó una solución 1M de cloruro de t-butilmagnesio (0.26 mL, 0.26 mmoles, 2.1 equiv) ) a temperatura ambiente durante un periodo de 3 min. Luego de 30 min, se agregó una solución de éster isopropilico del ácido (S) -2- [ (S) - (4-nitro-fenoxi) -fenoxi-fosforilamino] propiónico (8, isómero Sp) en THF (0.5mL) gota a gota durante un periodo de 3 min. La mezcla se dejó agitar a temperatura ambiente durante 42 h y luego se inactivo con NH4CI acuoso saturado (10 mL) . La mezcla se dividió entre acetato de etilo y agua. El extracto orgánico combinado se secó sobre sulfato de sodio anhidro y se concentró. El residuo se sometió a cromatografía usando gradiente de metanol/diclorometano al 0-4% para proporcionar Sp-4 como un sólido espumoso (29 mg, 44.5% de rendimiento). La XH y 31P NMR están de acuerdo con lo que se describe en la presente.
Ejemplo 12. Preparación de Sp-4 (escala de 2.6 g, sin cromatografía) : A una solución agitada de 1- ( (2R, 3R, 4R, 5R) -3-Fluoro-4-hidroxi-5-hidroximetil-3-metil-tetrahidro-furan-2-11 ) -lH-pirimidina-2 , 4-diona (2.6 g, 10 mmoles) en THF seco (50 mL) se agregó a una solución 1.7 M de cloruro de terc-butilmagnesio (12.4 mL, 21 mmoles, 2.1 equiv) ) a temperatura ambiente durante un período de 15 min. Luego de 30 min, se agregó una solución de éster isopropílico del ácido (S)-2-[ (S) - (4-nitro-fenoxi) -fenoxi-fosforilamino] propiónico (8, isómero Sp, 4.08g, 10 mmoles) en THF (15 mL) gota a gota durante un período de 10 min. La mezcla se dejó agitar a temperatura ambiente durante 6 Oh [sic] y luego se inactivo con NH4C1 acuoso saturado (20 mL) . La mezcla se dividió entre acetato de etilo (150 mL) y, secuencialmente, Na2CC>3 acuoso al 10% (20 mL, 3 veces) y agua (20 mL) . El extracto orgánico combinado se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se concentró a presión reducida para proporcionar un residuo amarillo pálido (3.8 g) . El residuo se disolvió en diclorometano (7.6 mL) y luego se agitó durante 20 h a temperatura ambiente. El sólido blanco se filtró, se lavó con IPE/diclorometano 1:1 (5 mL) y se secó al vacío para proporcionar el producto puro como un sólido blanco (1.85 g, 35% de rendimiento) .
Ejemplo 13. Preparación de SP-4 usando NaHMDS: A una solución agitada de 1- ( (2R, 3R, 4R, 5R) -3-Fluoro-4-hidroxi-5-hidroximetil-3-metil-tetrahidro-furan-2-il ) -??-pirimidina-2,4-diona (71 mg, 0.27 mmoles) en THF seco (2.0 mL) se agregó una solución 2.0 M de bis ( trimet ilsilil ) amida de sodio (NaHMDS) en THF (270 iLf 0.54 mmoles) a -78 °C durante un período de 2 min. Luego de 30 min, se agregó una solución de éster isopropílico del ácido (S) -2- [ (S) - (4-nitro-fenoxi ) -fenoxi-fosforilamino] propiónico (8, isómero Sp, 111 mg, 0.27 mmoles) en THF (1 mL) a la mezcla. La mezcla de reacción se dejó agitar a esta temperatura durante 2 h y luego se calentó hasta -20°C, temperatura a la cual se agitó por 20 h adicionales. La TLC indicó ~30% de material de partida de nucleósido sin reaccionar. Por consiguiente, se agregaron 0.5 equivalentes adicionales del reactivo (55 mg, 0.14 mmoles) en THF (0.5 mL) a la mezcla de reacción y se agitó durante otras 6 h. La mezcla de reacción se inactivo con solución de cloruro de amonio acuoso saturado y luego se dividió entre acetato de etilo y agua. El extracto orgánico combinado se secó sobre sulfato de sodio anhidro y se concentró para proporcionar un residuo pardo claro. La cromatografía en columna del producto crudo usando gradiente de metanol/diclorometano al 0-5% proporcionó Sp-4 (22 mg, 15% de rendimiento), 3 ' -fosforamidato (5, isómero Sp, 11.5 mg, 16% de rendimiento) y bis fosforamidato (6, Sp, isómero Sp, 12.6 mg) .
Ejemplo 14. Preparación de -Rp-4 (escala de 260 mg) : A una solución agitada de 1- ( ( 2R, 3R, 4 R, 5R) -3-Fluoro- 4 -hidroxi-5-hidroximetil-3-met il-tetrahidro-furan-2-il ) -1H-piriraidina-2 , 4-diona (260 mg, 1 mmoles) en THF seco (6 mL) se agregó a una solución 1.7 M de cloruro de terc-butilmagnesio (1.23 mL, 2.1 mmoles, 2.1 eguiv) a temperatura ambiente durante un periodo de 5 min. Luego de 30 min, se agregó una solución de éster isopropilico del ácido ( S ) -2 - [ ( R) - ( 4 -ni t ro-fenoxi ) - fenoxi-fosforilamino ] propiónico (8, isómero Rp) en THF (3 mL) gota a gota durante un periodo de 3 min. La mezcla se dejó agitar a temperatura ambiente durante 96 h y luego se inactivo con NH4C1 acuoso saturado (10 mL) . La mezcla se dividió entre acetato de etilo (50 mL) y agua (20 mL, 2 veces) . El extracto orgánico combinado se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y concentró a presión reducida para proporcionar un residuo amarillo pálido (490 mg) . El residuo se sometió a cromatografía usando gradiente de metanol/diclorometano al 0-5% para proporcionar el producto como un sólido blanco (160 mg, 30% de rendimiento) .
La preparación de Sp-4 o p—4 también puede lograrse haciendo reaccionar 3 protegido con 3' C o C o una mezcla que contiene C y C , como se ilustra en los siguientes ej emplos .
Ejemplo 15. Preparación de SP-4 con 3a como un intermedio sintético Ejemplo 15-1. Síntesis de 5 ' -O- erc-Butildimetilsilil-21 -desoxi-2 ' -fluoro-2 ' -C-metiluridina (9) : A una solución agitada de 2 ' -desoxi-21 -fluoro-2 ' -C-metiluridina (3, 81.1 g, 312 mraoles) en piridina seca (750 mL) se agregó gota a gota una solución de TBDMSC1 (103.19 g, 685.6 mmoles) en piridina seca (500 mL) durante un periodo de 45 min a temperatura ambiente. La reacción se dejó agitar a temperatura ambiente durante 24 h. Se agregó metanol (85 mL) a la mezcla de reacción y se dejó agitar durante 10 min y luego los solventes se destilaron a presión reducida. Se agregó agua caliente (45°C) (1 L) a la masa de reacción y la mezcla se extrajo con acetato de etilo (500 mL, 2 veces), se lavó con agua (500 mL, 1 vez) . La capa orgánica se secó sobre sulfato de sodio anhidro. El acetato de etilo se retiró por destilación y el residuo obtenido se evaporó con untamente con tolueno (500 mL, 2 veces) para proporcionar 9 crudo como una espuma blanca. Rendimiento = 116.9 g (cuantitativo).
? NMR (CDCI3, 300 Hz): d 0.1 (s,6H), 0.91 (s, 9H), 122 (d, 3H5 J = 21 Hz), 2.50 (s, 2H), 3.75-4.05 (m,4H), 5.54 (d, 1H, J = 9 Hz), 5.73 (s, 1H), 6.0 (d, 1H, J = 18 Hz), 7.81 (d, lH, J = 9 Hz), 8.57 (br, s, 1H), 11.1 (s, lH).
Ejemplo 15-2. Síntesis de 5 ' -O- ( erc-Butildimetilsilil) -3 ' -O-levulinil-2 ' -desoxi-2 ' -fluoro 21 -C-metil-uridina (10): A una solución agitada de nucleósido 9 (116.9 g, 312.1 mmoles) en DCM (1 L) se agregó DMAP (30.5 g, 249.7 mmoles) y esto se dejó agitar a TA durante 20 min. Se agregó una solución de anhídrido levulínico (133.6 g, 642.3 moles) en DC (200 mL) a la mezcla y se dejó agitar durante 24 h. La TLC de la mezcla indicó que la reacción estaba completa. Se agregó agua fría (500 mL) y la mezcla se agitó durante 20 min. Las capas se separaron y la capa orgánica se lavó con solución de bicarbonato de sodio saturado (2 x 250 mL) , se secó sobre sulfato de sodio anhidro y luego el solvente se destiló a presión reducida para proporcionar un aceite amarillo. Rendimiento crudo: 197.6 g (135 %). El material se usó tal como está para la próxima etapa.
!H NMR (CDC13, 300 Hz) d 0.11 (s, 6H), 0.94 (s, 9H), 1.34 (d, 3H, J = 21 Hz), 2.22 (s, 3H), 2.6-2.89 (m, 4H), 3.72 (m, 1H), 4.01 (d, 1H, J = 12 Hz), 4.23 (d, 1H, J = 9 Hz), 5.33 (dd, 1H, J = 15 Hz), 5.73 (d, 1H, J = 6 Hz), 6.26 (d, 1H, J = 15 Hz), 8.12 (d, 1H5 J = 12 Hz), 8.72 (br, s, 1H).
Ejemplo 15-3. Síntesis de 3 ' -O-levulinil-2 ' -desoxi-2 ' -fluoro 2 ' -C-metil-uridina (3a) : El 10 crudo (197.6 g, ~312.1 mmoles) se disolvió en DCM (1 L) a lo cual se agregó TEA.3HF (50.3 g, 312.1 mmoles) y se dejó agitar durante la noche a temperatura ambiente. TLC de la mezcla indicó aproximadamente el 50 % de finalización de la reacción. Se agregó otro equivalente de TEA.3HF (50.3 g, 312.1 mmoles) y la mezcla de reacción se dejó agitar durante 6 h. En este momento, TLC indicó aproximadamente 10 % del material de partida sin reaccionar. Se agregaron otros 0.25 eq de TEA.3HF (12.5 g, 78.0 mmoles) y la mezcla de reacción se dejó agitar durante la noche. Se concentró la mezcla de reacción hasta sequedad para proporcionar un aceite amarillo. Se purificó el producto crudo de todas los lotes mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice (MeOH al 0-2% en DCM) para proporcionar 124.1 g de 3' -levulinato como un sólido de espuma blanca (90% de rendimiento purificado en tres etapas a partir de 2 ' -desoxi-2 ' -fluoro-2 ' -C-metiluridina ) .
? NM : (CDC13, 400 MHz) 5 1.55 (d, 3H, CH3, J = 20 Hz), 2.36 (s, 3H, CH3), 2.8-3.03 (m, 5H, CH2CH3), 3.91-3.96 (dd, 1H, CH"), 4.2-4.25 (ra, 1H, CH'), 4.34 (dd, 1H, CH, J = 8 Hz), 5.25 (dd, 1H, J = 16 Hz), 5.93 (d, 1H, J = 8 Hz), 8.20 (d, 1H, J = 8 Hz), 9.18 (s, 1H).
Ejemplo 15-4. Síntesis estéreoselecti a de éster (S) -isopropílico del ácido (S) -2-{ [ (IR, 4R,5R) -5- (2 , 4-Dioxo-3 , 4-dihidro-2H-pirimidin-l-il) -4- (R) -fluoro-3- (4-oxopentanoil) -4-me il-tetrahidro-furan-2-ilmetoxi] -fenoxi-fosforilamino} -propiónico (11) : A una solución del nucleósido (3a, 1.00 mmol, 358 mg) en 5 mi de THF anhidro que se enfrió hasta 0°C se agregó tBuMgCl (1.7 M en THF, 2 eq) y se dejó calentar a temperatura ambiente y se agitó durante media hora. A esta mezcla se agregó el reactivo (ca. 97% de pureza quiral) éster isopropílico del ácido (S) -2- [ (S) - ( -nitro-fenoxi) -fenoxi-fosforilamino] propiónico ( 8 , isómero Sp) (408 mg, 1.00 mmol, 1.00 eq. ) en una porción y se dejó agitar a ta. Luego de 16 h, permaneció ~30% del material de partida. La mezcla de reacción se inactivo con 10 mL de solución de NH4C1 saturado y la fase acuosa se extrajo con acetato de etilo (25 mi, 3 veces) . La capa orgánica combinada se lavó con salmuera y se secó sobre sulfato de sodio anhidro y se evaporó hasta sequedad para proporcionar una espuma amarilla pálida (500 mg) . Esta se purificó mediante cromatografía en gel de sílice utilizando 2-5% de metanol en cloruro de metileno para proporcionar el producto como una espuma blanca (275 mg) de aproximadamente 97% de pureza quiral P y un material de partida sin reaccionar (162 mg) . Con base en el material de partida consumido, el rendimiento fue de 76%. 31P NMR (CDC13, 162 MHz): 3.7 ppm; ? NMR (CDC13, 400 MHz): d 1.22 (dd, 6H, J = 6.4 Hz), 1.37 (5, 3H), 1.58 (s, 3H), 2.18 (s, 3H), 2.63-2.9 (m, 4H), 4.0 (d, 1H, J = 8 Hz), 4.2-4.33 (m, IH), 4.57 (d, ??, J = 8Hz), 4.96-5.00 (sept, 1H), 5.2 (dd, 1H, J = 9 Hz), 5.42 (d, 1H, J = 8Hz), 6.19 (d, 1H, J = 18Hz), 7.15-7.35 (m, 5H), 7.5 (d, 1H, J = 5.6 Hz), 8.2 (br, s, 1H).
Ejemplo 15-5. Síntesis del éster (S) -isopropilico del ácido (S) -2-{ [ (1R,4R,5R) -5- (2 , 4-Dioxo-3 , 4-dihidro-2H-pirimidin-l-ii) -4- (R) -fluoro-3-hidroxi-4-metil-tetrahidro-furan-2-ilmetoxi] -fenoxi-fosforilamino} -propiónico (Sp-4) Se preparó una solución de sulfito de sodio agregando Na2S203 (1.51 g) y Na2S205 (0.57 g) en agua (25 mL) . A una solución de levulinato (11, 250 mg, 0.40 minóles) en THF anhidro (2.5 mL) se agregó 1.0 mi de solución de sulfito de sodio. Esta se dejó agitar a temperatura ambiente durante 4 h. La mezcla de la reacción se vertió en agua (15 mL) y se extrajo con acetato de etilo (25 mL, 3 veces), se secó y se evaporó para proporcionar cuantitativamente un producto sólido blanco con alrededor de 97% de pureza quiral P que coincidía con las propiedades físicas y espectrales de Sp-4 producido directamente a partir del nucleósido desprotegido. Ejemplo 16. Procedimiento alternativo para preparar Sp-4 a partir de 3a.
A una solución agitada del éster ( 2R, 3R, 4R, 5R) -5- ( 2 , 4-dioxo-3, -dihidro-2H-pirimidin-l-il) -4-fluoro-2-hidroximetil-4-metil-tetrahidro-furan-3-ilo del ácido 4-oxo-pentanoico (3a, 210 mg, 0.59 inmoles) en THF seco (1.5 mL) se agregó una solución 1.7 M de cloruro de terc-butilmagnesio (1.07 mL, 1.82 inmoles) a temperatura ambiente durante un período de 2 min. Inicialmente, se observó un precipitado blanco y luego de 10 min la mezcla de reacción se convirtió en una solución amarillo oscuro. Luego de 30 min, se agregó una solución de éster isopropílico del ácido (S) -2- [ (S) - ( 4-nitrofenoxi ) -fenoxi-fosforilamino] -propiónico (8 (isómero Sp) , 382 mg, 0.94 mmoles) en THF (1.5 mL) gota a gota durante un período de 3 min. La mezcla se calentó a 40°C durante 5 h, en el momento la TLC y 1H NMR indicaron menos de un 2% de material de partida sin reaccionar. La reacción se inactivo con cloruro de amonio saturado acuoso y luego se dividió entre acetato de etilo y agua. La capa orgánica combinada se lavó con solución de Na2C03 acuoso al 10% (10 mL, 3 veces), seguido de agua. La capa orgánica se secó sobre sulfato de sodio anhidro y se concentró para proporcionar un residuo de color pardo (410 mg) . El producto crudo se disolvió en tetrahidrofurano (1.0 mL) y luego se agregó una solución acuosa de la mezcla de sulfito de sodio (37 mg, 0.295 mmoles) y metabisulfito de sodio (224 mg, 1.18 mmoles) en 1 mL de agua. La mezcla se calentó a 45 °C durante 20 h, en la etapa se observó solo alrededor de 10% de conversión por TLC, por lo que se agregaron el sulfito de sodio (74 mg) y metabisulfito de sodio (448 mg) adicionales y se continuó calentando por 52 h adicionales. En este momento, se observó alrededor de 40% de conversión por TLC. La mezcla de reacción se dividió entre agua y acetato de etilo. La capa orgánica combinada se secó sobre sulfato de sodio anhidro y se concentró para proporcionar un residuo pardo (210 mg) . La cromatografía en columna del residuo utilizando gradiente de MeOH/DC al 0-5% proporcionó material de partida sin reaccionar (89 mg) y Sp-4 (57 mg, 18% de rendimiento, 24% basándose en material de partida recuperado) .
Ejemplo 17. Preparación de SP-4 con 3c como un intermedio sintético V Ejemplo 17-1. Preparación de 1- [ (2R, 3R, 4R, 5R) -4- (tere-butildimetilsilaniloxi) -3-fluoro-5-hidroximetil-3-metil-tetrahidro-furan-2-il] -lH-pirimidina-2 , 4-diona, 12.
A una solución de 3 (10.0 g, 38.43 mmoles) en piridina (50 mL) se agregó diclorometano (50 mL) . La solución se enfrió a 0°C. A la solución se agregó cloruro de 4,4'-dimetoxitritilo (14.32 g, 42.27 mmoles) y la solución se agitó a 0°C durante 5 h. Se agregó metanol (5 mL) para inactivar la reacción. La solución se concentró hasta sequedad a presión reducida y el residuo se dividió entre acetato de etilo (500 mL) y agua (50 mL) . La solución orgánica se lavó con salmuera (50 mL) y se secó (sulfato de sodio, 4 g) . El solvente se retiró a presión reducida y el residuo se disolvió en diclorometano (100 mL) . A la solución se le agregó imidazol (7.83 g, 115 mmoles) y cloruro de t- butildimetilsililo (8.68 g, 57.6 mmoles) . La solución se agitó a temperatura ambiente durante 16 h. Se agregó metanol para inactivar la reacción (5 mL) y el solvente se retiró a presión reducida y el residuo se dividió entre acetato de etilo (500 mL) y agua (50 mL) . La solución orgánica se secó (sulfato de sodio, 4 g) y se evaporó a presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna (EtOAc al 10-40% en hexano) para proporcionar el producto intermedio 5' -O-DMT-31 -O-tBDMS . A su vez, esto se trata con ácido trifluoroacético al 1% en diclorometano (200 mL) . La solución se agitó a temperatura ambiente durante 1 h. Se agregó agua (20 mL) y la solución se agitó a temperatura ambiente durante otra hora. Se agregó metanol (5 mL) lentamente y la solución se agitó a temperatura ambiente durante otra hora. Se agregó hidróxido de amonio para ajustar el pH de la solución a 7. La solución orgánica se separó, se secó (sulfato de sodio, 4 g) y se evaporó a sequedad a presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna con gel de sílice (metanol al 1-5% en diclorometano) para proporcionar 12 como un sólido blanco 7.5 g en 50% de rendimiento en las tres etapas .
? NMR (DMSO-d6) S (ppm) 11.48 (br s, 1H, NH), 7.94 (d, 1H» H-6), 6.00 (d, 1H, ?-G), 5.69 (d, 1H, H-5), 4.06 (dd, 1H, 3'- H), 3.85 (m, 2H, H-5 'a, H-4'), 3.58 < br d, 1H, ?-5'b), 1.27 (d, 3 H, 2-C¾), 0.89 (s, 9H, C(Ci¾)j), 0.12 (s, 6H, Si(C/¾)2).
Ejemplo 17-2. Preparación de Sp-4 usando 1- [ (2R, 3R, 4R, 5R) -4-(terc-butildimetilsilaniloxi) -3-fluoro-5-hidroximetil-3-metil-tetrahidro-furan-2-il] -lH-pirimidina-2 , 4-diona (3c) .
A una solución agitada de 1- [ (2R, 3R, 4R, 5R) -4- ( terc-butildimetilsilaniloxi ) -3-fluoro-5-hidroximetil-3-metil-tetrahidro-furan-2-il ] -lH-pirimidina-2 , -diona (12, 374 mg, 1 ramol) en THF seco (3 mL) se agregó una solución 1.7 M de cloruro de terc-butilmagnesio (1.8 mL, 3.1 mmoles) a temperatura ambiente durante un periodo de 2 min. Inicialmente, se observó un precipitado blanco y luego de 10 min, la mezcla de reacción se convirtió en una solución amarillo oscuro transparente. Después de 30 min, se agregó una solución de éster isopropilico del ácido (S) -2- [ (S) - (4-nitrofenoxi) -fenoxi-fosforilamino] -propiónico (8, isómero Sp, 653 mg, 1.6 mmoles) en THF (2.5 mL) gota a gota durante un periodo de 3 min. La mezcla se calentó a 40°C durante 20 h, en el momento la TLC y ?? NMR indicaron menos de un 5% de material de partida sin reaccionar. La mezcla de reacción se inactivo con cloruro de amonio saturado acuoso y luego se dividió entre acetato de etilo y agua. La capa orgánica se lavó con solución de Na2C03 acuoso al 10% (10 mL, 3 veces), seguido de agua (20 mL) . La capa orgánica se secó sobre sulfato de sodio anhidro y se concentró para proporcionar un residuo pardo que contenia 3c (850 mg) . El producto crudo se disolvió en tetrahidrofurano (2 mL) y se agregaron 0.8 mL de ácido acuoso al 80% a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se calentó a 50°C durante 96 h. Se observó alrededor de 70% de conversión por TLC. La mezcla de reacción se vertió en bicarbonato de sodio saturado acuoso frío y luego se dividió entre acetato de etilo y agua. La capa orgánica combinada se secó sobre sulfato de sodio anhidro y se concentró para proporcionar un residuo pardo (220 mg) . La cromatografía en columna del residuo utilizando gradiente de MeOH/DC al 0-5% proporcionó material de partida sin reaccionar (21 mg) y Sp-4 (77 mg, 35% de rendimiento, 39% de rendimiento basándose en el material de partida recuperado) .
Ejemplo 18. Preparación de «Sp-4 con 3d como un intermedio sintético Ejemplo 18-1. Preparación de 3d A una solución agitada de 3 en piridina (20 mL) a 0°C se agregó TIPDS-C1 gota a gota durante un período de 15 min. La mezcla se dejó calentar lentamente hasta temperatura ambiente, a la temperatura se agitó durante 16 h. La piridina se evaporó y el residuo se evaporó conjuntamente con tolueno (50 mL) . Luego el residuo fue triturado con hexanos y el precipitado blanco se retiró por filtración usando una almohadilla de Celite. El filtrado se concentró a presión reducida para proporcionar un sólido espumoso (12.97 g) . El producto crudo (13) se volvió a disolver en tetrahidrofurano (75 mL) y se agregó una solución acuosa de TFA (75 mL, 1:1 TFA/agua) a 0°C durante un periodo de 20 min. La mezcla se agitó a esta temperatura durante 6 h. La TLC indicó ~5% de material de partida. La mezcla de reacción se inactivo con una solución de NaHCC>3 acuosa saturada hasta llegar a pH 8 y luego se extrajo con acetato de etilo. El extracto orgánico combinado se lavó con agua, se secó y se concentró para proporcionar un sólido blanco cristalino. La trituración adicional del sólido con hexanos (30 mL) proporcionó un sólido blanco, el cual se filtró y se secó a alto vacio para proporcionar 3d (10.1 g, 84 % de rendimiento en 2 etapas).
'H NMR (400 MHz, CDCI3): d 8.83 (bs, 1H), 7.94 (bd, J=6.0Hz, 1H). 6.10(bd, J=18.4Hz, 1H), 5.71 (d, J=8.2Hz, 1H), 4.43 (bs, 1H), 4.36 (dd3 J=22.6, 9.0Hz, 1H), 4.27 (bs, 1H), 4.10(d, J=13.2HZ> 1H), 4.03 (d5 J=9.2Hz, 1H), 3.92 (d, J= 13.2Hz, 1H), 1.39 (d, J=22.0Hz, 3H), 1.11 -0.92 (m, 28H).
Ejemplo 18-2. Preparación de SP-4 A una solución agitada de 3d (520 mg, 1 mmol) en THF seco (5 mL) se agregó a una solución 1.7 de cloruro de terc-butilmagnesio (1.8 mL, 3.1 mmoles, 3.1 equiv) a temperatura ambiente durante un periodo de 15 min. Luego de 30 min, se agregó una solución de éster isopropilico del ácido ( S ) -2- [ ( S ) - ( 4 -nit ro-fenoxi ) - fenoxi-fos forilamino ] propiónico (8, isómero 5P, 653 mg, 1.6 mmoles) en THF (1 mL) gota a gota durante un período de 3 min. La mezcla se dejó agitar a temperatura ambiente durante 60 h. La 1H y 31P NMR se la muestra en crudo indicó una mezcla de diastereómeros en alrededor de 1:0.76. La mezcla de reacción se inactivo con NH4C1 acuoso saturado (20 mL) . La mezcla se dividió entre acetato de etilo (150 mL) y, secuencialmente , Na2CC>3 acuoso al 10% (20 mL, 3 veces) y agua (20 mL) . El extracto orgánico combinado se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se concentró a presión reducida para proporcionar un residuo amarillo pálido (14, 878 mg) .
El compuesto anterior, 14, se volvió a disolver en tetrahidrofurano (3 mL) y luego se agregó ácido fórmico acuoso al 80%. La mezcla se calentó a 55°C durante 20 h. La mezcla de reacción se enfrió a 0°C y luego se inactivo con bicarbonato de sodio saturado acuoso (pH 7.0) . Luego la mezcla de reacción se dividió entre acetato de etilo y agua. La capa orgánica combinada se secó sobre sulfato de sodio y se concentró para proporcionar 560 mg del residuo. El residuo se sometió a cromatografía usando gradiente de metanol /diclorometano al 0-5% para proporcionar material de partida sin reaccionar (14, 242 mg) y Sp-4 (80 mg, 15% de rendimiento) como un sólido blanco.
Ejemplo 19. Preparación de Sp-4 marcado isotópicamente 20 21 Ejemplo 19-1. Preparación de 1- ( (6aR, 8R, 9R, 9aS) -9-hidroxi -2,2,4, 4-tetraisopropiltetrahidro-6H-furo [3 , 2-f] [1,3,5,2,4] trioxadisilocin-8-il) pirimidina-2 , 4 (1H, 3H) -diona, 16 Se evaporó uridina (15, 100.0 g, 409.5 mmoles) a sequedad conjuntamente con piridina anhidra (600 mL) y se volvió a suspender en piridina anhidra (700 mL) . A esta suspensión fina agitada, se agregó 1 , 3-dicloro-l , 1 , 3 , 3-tetraisopropildisiloxano (135.7 g, 482.5 mmoles) durante 60 min a temperatura ambiente. Luego de agitar la suspensión fina durante 17 h a temperatura ambiente, la reacción se inactivo agregando metanol (20 mL) y luego se concentró a presión reducida. El residuo se dividió entre acetato de etilo (1.5 L) y agua (2 L) . La capa orgánica se lavó adicionalmente con ácido clorhídrico al 5% (1 L, 2 veces), salmuera (500 mL) , se secó sobre sulfato de sodio (50 g) , se filtró y se concentró a presión reducida hasta proporcionar el producto crudo, ca 250 g. El residuo se sometió a una columna de filtración usando gel de sílice (1.75 kg) y un gradiente de acetato de etilo en hexanos al 20-65%. Las fracciones de producto puro, según se determinó por TLC homogénea (Rf 0.55 in 1:1 hexanos-acetato de etilo), se combinaron a presión reducida y se secaron (40°C, 0.2 mm Hg, 24 h) para proporcionar 145.5 g (76%) de 16 como un sólido blanco espumoso. También se recogió una fracción adicional (35 g) de 16 ligeramente impuro.
]H NMR (DMSO-<¼) 5 (ppm) U .35 (s, IH, NH), 7.66 (d, 1?, J= 7.6 ??, H-6), 5.57 (d, IH, J = 4.8 Hz, 2'- OH), 5.50-5.49 (m, 2H, Y-H y H-$ 4.14-4.18 (m, 3H, 2', 3', 4'-H), 3.97-3.87 (m, 2H, S'-tfa y Hb), 1.02-0.95 (m, 28H, CH(CH3)2).
Ejemplo 19-2. Preparación de 1- ( (6aR,8R, 9aR) -2 ,2, 4 , 4-tetraisopropil-9-oxotetrahidro-6H-furo [3,2-f] [1,3,5,2,4] trioxadisilocin-8-il) irimidina-2 , 4 (IH, 3H) -diona, 17 A un matraz seco redondo de tres cuellos se agregó DCM anhidro (600 mL) y DIVISO (30.82 g, 394.5 mmoles) . La solución se enfrió hasta -78°C en un baño de hielo seco/acetona en una atmosfera de nitrógeno. Se agregó anhídrido trifluoroacético (puro, 77.7 g, 369.8 mmoles) con una jeringa durante 40 min y proporcionó una mezcla turbia. A la mezcla se agregó una solución de derivado de uridina 16 en DCM (600 mL) gota a gota durante 75 min a -78 °C mediante un embudo de adición. La mezcla heterogénea se agitó durante 2 h a -78—65°C y luego se agregó trietilamina anhidra (92 mL) rápidamente con una jeringa para formar una solución transparente amarillo claro. Luego de 1 h a baja temperatura, la reacción se completó como se mostró por TLC (EtOAC al 30% en hexanos). El baño de enfriamiento se quitó y la mezcla de reacción se calentó lentamente hasta temperatura ambiente durante 1 h. La reacción se inactivo mediante la adición de NH4C1 sat. (180 mL) . Se agregó agua (200 mL) y la capa orgánica se separó. La capa acuosa se volvió a extraer con DCM (300 mL) . La capa orgánica combinada se lavó con agua (400 mL, 3 veces), salmuera (150 mL) y se secó sobre Na2S04. Al quitar el solvente se obtuvo un residuo pardo pegajoso.
El residuo de aceite crudo (contenia rastros de DCM) se almacenó en el congelador durante la noche. Después de la noche se observó un poco de cristal sólido en el aceite. El aceite se disolvió en 500 mi de hexanos a temperatura ambiente. La solución se almacenó en el congelador durante 24 horas y se formó más sólido. El sólido se recogió mediante filtración y se enjuagó con DCM al 10% en hexanos (1 L) para quitar la mayoría del color anaranjado. El sólido (17) se secó al vacio durante 2 h y luego se secó al aire durante 24 h. El sólido pesaba 21 g luego de secarse a 50 °C al vacio. El filtrado se concentró y el residuo se purificó mediante cromatografía en columna (acetato de etilo al 10-70% en hexanos) para proporcionar 37 g adicionales (rendimiento combinado del 97%) de 17 como un sólido anaranjado claro.
Ejemplo 19-3. Preparación de 1- ( (2R, 3S , 4R, 5R) -3 , 4-dihidroxi-5- (hidroximetil) -3-13C-perdeuteriometiltetrahidrofuran-2-il)pirimidina-2,4 (1H,3H) -diona, 18 Magnesio (3.53 g, 147 mmoles) , lavado con ácido clorhídrico al 5% y secado (50°C, 0.2 mmHg, 24 h) , se colocó en una matraz de fondo redondo de dos cuellos equipado con un agitador magnético y un condensador. El recipiente se llenó con gas de argón y luego se agregó éter anhidro (80 mL) . Al magnesio en éter se le agregó yoduro de metilo - perdeuterio 13C (15.06 g, 110.3 mmoles) lentamente, lo cual generó o una reacción exotérmica. Luego de que la mezcla de reacción se enfrió, el sobrenadante se transfirió a una solución de compuesto 17 seco (50°C, 0.2 mmHg, 15 h) (10.0 g, 20.63 mmoles) en THF anhidro (1 L) a -50°C durante 20 min. La temperatura se dejó aumentar hasta -40°C y la mezcla se agitó a entre -40 y -25 °C durante 4 h. Luego de completada la reacción, la mezcla se diluyó con EtOAc (1 L) a -50 °C y luego se agregó salmuera (300 mL) lentamente. La capa orgánica se separó y luego se lavó con solución de cloruro de amonio saturado (300 mL, 2 veces) y se secó con sulfato de sodio. Luego de la filtración y concentración a presión reducida, el residuo se disolvió en MeOH (250 mL) . Se agregaron fluoruro de amonio (12 g) y TBAF (400 mg) . La mezcla resultante se agitó a 90°C durante 7 h y luego se concentró con gel de sílice (20 g) a presión reducida. Luego de secar al vacío rigurosamente, el residuo obtenido se purificó mediante cromatografía en columna ultrarrápida en gel de sílice (MeOH:CH2Cl2 = 1:20 a 1:10) para proporcionar el compuesto 18 (5 g, 46%) como un sólido blanco.
? NMR (DMSO-¿<¡) d (ppm) 11.26 (s, 1H, NH), 7.65 (d, 1H, J= 8.4 Hz, H-6), 5.77 (d, 1H, J = 2.4 Hz, H- G), 5.57 (d, 1H, J= 8.0 Hz, H-5), 5.46 (d, 1H, J = 5.2 Hz, HO-3'), 5.24 (d5 1H, J= 2.4 Hz, HO-2'), 5.14 (t, 1H, J= 5.6 Hz, HO-5'), 3.74-3.56 (m, 4H, H-3', 4', 5 5").
Ejemplo 19-4. Preparación de acetato de ( (2R, 3R, 4S , 5R) -3-acetoxi-5- (2 , 4-dioxo-3 , 4-dihidropirimidin-l (2H) -il) -4-hidroxi-4-13C-perdeuteriometiltetrahidrofuran-2-il)metilo , 19 A una solución del compuesto 18 (5.00 g, 19.1 mmoles) en piridina anhidra (100 mL) se agregó anhídrido acético (3 mL) a temperatura ambiente. La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 15 h, se diluyó con EtOAc (250 mL) , se lavó con agua (50 mL, 3 veces) y se secó con sulfato de sodio. Luego de la filtración y concentración, el residuo se purificó mediante cromatografía en columna ultrarrápida (MeOH de 0 a 5% en CH2C12) para proporcionar el compuesto 19 (4.0 g, 68%) como un sólido gris.
Ejemplo 19-5. Preparación de acetato de ( (2R, 3R, 4R, 5R) -3-acetoxi-5- (2 , -dioxo-3 , 4-dihidropirimidin-l (2H) -il) -4-fluoro-4-13C-perdeuteriometiltetrahidrofuran-2-il) metilo , 20 A una solución del compuesto 19 (2.33 g, 6.73 mmoles) en CH2C12 anhidro (60 mL) se agregó DAST (1.33 mL, 10.1 mmoles) lentamente a -78°C. La mezcla resultante se agitó durante 30 min y luego se expuso a temperatura ambiente. Se llevaron a cabo dos reacciones de escala de 2.33 g y una reacción de escala de 1.00 g adicionales exactamente de la misma forma. Las cuatro mezclas de reacción se combinaron, se diluyeron con CH2C12 (300 mL) y se lavaron con agua helada (100 mL, 2 veces) y luego solución de NaHC03 acuoso frío (100 mL, 2 veces). Luego del secado, filtración y concentración, el residuo se purificó mediante cromatografía en columna ultrarrápida en gel de sílice (EtOAc de 0% a 50% en hexanos, el compuesto salió a alrededor de 48%) para proporcionar el compuesto 20 (2.0 g, 24% de un total de 7.99 g del compuesto 19) como un sólido blanco.
? NMR (CDCI3) d (ppm) 8.27 (s, 1H, NH), 7.55 (d, 1H, J= 8.4 Hz, H-6), 6.17 (d, 1 H, J = 18.8 Hz, ?-G), 5.78 (dd, 1H, J= 1.2, 8.4 Hz, H-5), 5.12 (dd, 1H, J= 9.6, 21.6 Hz, ?-3·), 4.40-4.31 (m, 3H, H-4', 5'5 5"), 2.19 (s, 3H, CH3), 2.15 (s, 3H, CH3).
Ejemplo 19-6. Preparación de 1- ( (2R, 3R, 4R, 5R) -3-fluoro-4-hidroxi-5- (hidroximetil) -3-13C-perdeuteriometiltetrahidrofuran -2-il)pirimidina-2, (1H, 3H) -diona, 21 A una solución del compuesto 20 (2 g, 5.74 mmoles) en metanol (20 mL) se agregó n-butilamina (6 mL) . La mezcla resultante se agitó a ta durante 15 h y se concentró con gel de sílice al vacío. El residuo obtenido se purificó mediante cromatografía en columna ultrarrápida con gel de sílice (MeOH de 0 a 10% en CH2C12) para proporcionar el compuesto 21 (1.3 g, 85%) como un sólido blanco.
? NMR (CD3OD) d (ppm) 8.08 (d, 1H, J= 8.0 Hz, H-6), 6.13 (d, 1H, J = 18.4 Hz. ?-1·), 5.70 (d, 1H, J= 8.0 Hz, H-5), 3.99 (d, 1H,J= 13.6 Hz, H-5'), 3.97-3.91 (m, 2H, H-3', 4'), 3.80 (dd, 1H, J= 2.0, 12.8 Hz, H-5"), ESMS (M+1) estimado 265, observado 265.
Ejemplo 19-7. Preparación de 2- ( ( ( (2R, 3R, 4R, 5R) -5- (2 , 4-dioxo-3 , 4-dihidropirimidin-l (2H) -il) -4-fluoro-3-hidroxi-4-13C-perdeuteriometiltetrahidrofuran-2-il)metoxi) (fenoxi) fosforilamino)propanoato de (S) -Isopropilo, 22 A una solución del nucleósido desprotegido 21 (207 mg, 0.783 mmoles) y A7-metilimidazol (0.4 mi, 5 mmoles) en THF (4 mL) se agregó el fosforocloridato pre-fabricado en THF (1.0 M, 2.35 mi, 2.35 mmoles) a 0°C gota a gota. La reacción se calentó lentamente hasta temperatura ambiente durante 1 hora y luego se agregó agua (1 mL) y EtOAc (5 mL) . La solución orgánica se lavó con citrato de sodio monobásico ac. sat. (2 mi, 2 veces), NaHC03 ac. sat. (2 mi, 1 vez), se secó (MgS04) y se concentró a presión reducida. El producto crudo se purificó mediante cromatografía en columna de sílice usando 2PrOH de 0 a 5% en CH2CI2 como eluyentes para proporcionar el fosforamidato, 22 (216 mg, 52%, 1:1 mezcla de diastereómeros P) como un sólido blanco: ? NMR (400 MHz, DMSO-¿6) d 11.54 (s> 1H), 7.56 (d, J= 6.8 Hz, 1H), 7.40-7.35 (m, 2H), 7.23-7.18 (m, 3 H), 6.14-5.96 (m, 2H), 5.89 (dd, J= 5.6, 25.6 Hz, 1H), 5.55 (t,J= 8.4 Hz, 1H), 4.85 (dq, J= 1.6, .0 Hz, 1H), 4.44-4.32 (m, 1H), 4.25 (m, 1H), 4.06-3.98 (m, 1H), 3.86-3.70 (m, 2H)3 1.30-1.08 (m, 9H); 31P MR (162 MHz, DMSO-Í/6) d 4.90, 4.77; LRMS (ESI) [M + H]+ calculado para C2i13CH27D3FN309P 534.5, encontrado 534.4.
Ejemplo 19-8. Preparación de ácido (2S) -2- ( ( ( ( (2R, 3R, 4R, 5R) -5- (2 , -dioxo-3 , 4-dihidropirimidin-l (2H) -il) -4-fluoro-3-hidroxi-4-13C-perdeuteriometiltetrahidro furan-2-il)metoxi) (hidroxi) fosforil) amino) propanoico , 23 Se suspendió fosforamidato 22 (147 mg, 0.276 mmoles) en trietilamina (2 mL) y agua (0.5 mL) y se calentó a 60°C durante 30 h. Luego se evaporaron los componentes volátiles a presión reducida. El producto crudo se purificó mediante cromatografía en columna de sílice eluyendo con 2PrOH al 50- 70% en CH2C12 y luego, NH4OH al 0 a 20% en iPrOH para proporcionar 23 como un sólido blanco (95 mg, 83%): ? NMR (400 MHz, DMSO-rf6) d 8.00 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 5.98 (d, J= 19.2 Hz, 1H), 5.52 (d, J= 8-4 Hz, 1H), 4.02-3.81 (ra, 4H), 1.10 (d, J= 6.8 Hz, 3H); 31P NMR (162 MHz, DMSO-¿6) d 8.12; LRMS (ESI) [M + H]+ calculado para C1213CHi7D3FN309P 416.3, encontrado 416.4.
Propiedades de las muestras de Rp-4, A, y Sp-4 Se analizaron muestras de f?p-4, 4, y Sp-4 mediante difracción de rayos X en polvo (XRPD, por sus siglas en inglés), espectrometría de resonancia magnética nuclear (NMR, por sus siglas en inglés), espectroscopia infrarroja transformada de Fourier (FT-IR, por sus siglas en inglés), calorimetría por barrido diferencial (DSC, por sus siglas en inglés), análisis térmico gravimétrico (TGA, por sus siglas en inglés), adsorción gravimétrica de vapor (GVS, por sus siglas en inglés) , solubilidad acuosa termodinámica, y cromatografía líguida de alto rendimiento (HPLC, por sus siglas en inglés) .
Ejemplo 20. Difracción de Rayos X en polvo Se analizaron muestras de i¾-4, 4, y Sp-4 mediante difracción de rayos X en polvo (XRPD) bajo el siguiente régimen . a. Bruker AXS/Siemens D5000 Los patrones de difracción de rayos X en polvo se recogieron en un difractómetro Siemens D5000 usando radiación Cu ?a (40 kV, 40 mA) , goniómetro T-T, divergencia de V20 y rendijas receptoras, un monocromador secundario de grafito y un contador de centelleo. Se verifica el desempeño del instrumento usando un estándar Corundum certificado (NIST 1976) . El software utilizado para la recolección de datos fue Diffrac Plus XRPD Commander v2.3.1 y los datos se analizaron y presentaron usando Diffrac Plus EVA v 11.0.0.2 o v 13.0.0.2.
Condiciones ambientales Las muestras que se ejecutaron en condiciones ambientales se prepararon como especímenes de placa plana usando el polvo como se recibió. Se empaquetaron cuidadosamente aproximadamente 35 mg de la muestra en una cavidad perforada en una oblea de silicio zero-background (510). La muestra se rotó sobre su propio plano durante el análisis. Los detalles de la recolección de datos son: intervalo angular: 2 a 42°2T; tamaño de etapa: 0.05°2T; y tiempo de recolección: 4 s. etapa-1, b. Bruker AXS C2 GADDS Los patrones de difracción de rayos X en polvo se recogieron en un difractómetro Bruker AXS C2 GADDS usando radiación Cu Ka (40 kV, 40 mA) , etapa XYZ automatizada, microscopio de video láser para posicionamiento automático de muestras y un detector de área HiStar de dos dimensiones. La óptica de rayos X consiste en un único espejo de Gobel con múltiples capas acoplado con un colimador estenopeico de 0.3 mm.
La divergencia del haz, es decir, el tamaño eficaz del haz de rayos X en la muestra, fue de aproximadamente 4 mm. Se empleó un modo de análisis T-T continuo con una muestra -distancia de detector de 20 cm, lo cual proporciona una intervalo 2T eficaz de 3.2°-29.7°. Típicamente, la muestra estaría expuesta al haz de rayos X durante 120 segundos. El software utilizado para la recolección de datos fue GADDS para WNT 4.1.16 y los datos se analizaron y presentaron usando Diffrac Plus EVA v 9.0.0.2 o v 13.0.0.2.
Condiciones ambientales Las muestras que se ejecutaron en condiciones ambientales se prepararon como especímenes de placa plana usando el polvo como se recibió sin molerlo. Se presionaron suavemente aproximadamente 1-2 mg de la muestra en un portaobjetos de vidrio para obtener una superficie plana.
Difracción de Rayos X en polvo (XRPD) Se descubrió por XRPD que 4 era amorfo (véase la Fig. 1) . El análisis de XRPD de alta resolución de J?p-4 preparado de acuerdo con el Ejemplo 3 confirmó un sólido cristalino que exhibía un patrón de polvo diferente al de Sp-4 (preparado de acuerdo con el Ejemplo 4, Método 4), que también se confirmó era un sólido cristalino. La tabla de resultados de XRPD para Rp-4, y Sp-4 se muestra en la Tabla 1, excluyendo todos los picos que exhiben una intensidad de =5 % (Rp-4) y =3% (Sp-4) .
Tabla 1. Datos de XRPD para J¾,-4 y Sp-4. 10 20 25 Se molió una muestra de Sp-4 con un mortero y luego se pasó sucesivamente a través de tamices de 500 y 250 im para proporcionar la muestra como un polvo fino. Esta muestra volvió a analizarse mediante XRPD de alta resolución, confirmando que no había ocurrido ningún cambio en la forma. Ejemplo 21. Estudios de cristalización para Sp-4.
El Sp-4 cristalino exhibe polimorfismo. Por lo tanto, un aspecto se refiere al Sp-4 cristalino y sus formas polimórficas individuales. Sp-4 puede existir en al menos cinco formas polimórficas, designadas como Formas 1 a 5. Además, también puede prepararse Sp-4 amorfo. Una cristalización típica tiene prevista la disolución alrededor de 100 mg de Sp-4 en un volumen apropiado de solvente de cristalización (acetonitrilo (5 vol), cloroformo (5 vol) , acetato de n-butilo (7 vol), diclorometano (50 vol), anisol (7 vol) y 1:1 MTBE/heptano (50 vol)) y luego permitir la evaporación de la solución 5 °C. Se obtuvieron varias formas cristalinas, pero cada forma, al filtrarse y/o secarse, proporcionó la Forma 1.
Las Formas 1, 2 y 3 son formas no solvatadas, 1:1 solvato de DCM y 1:1 solvato de cloroformo, respectivamente, según se confirmó mediante análisis rayos X de un solo cristal y XRPD. Las Formas 4 y 5 se obtuvieron a partir de la cristalización de Sp-4 a partir de soluciones de acetonitrilo y anisol, respectivamente. No pudo recogerse suficientes datos para determinar si las Formas 4 y 5 son no solvatadas, hidratadas o solvatadas, ya que no se obtuvieron cristales simples de suficiente calidad. Las formas 4 y 5 se transforman en la Forma 1 al filtrarse. Se obtienen dos formas adicionales al cristalizar Sp-4 a partir de acetato de n-butilo (nBuAc) y una solución de éter metil-t-butilico (MTBE) y heptano; al filtrar ambas formas cristalinas se convierten en la Forma 1. Las Formas 2 y 3 se también se transforman en la Forma 1 al aislarse. La Forma 1 es una forma no solvatada que exhibe una endotermia de fusión amplia con una temperatura inicial de 94.3°C y AHfus de 24.0 kJ mol-1. Un patrón de XRPD de la Forma 1 de Sp-4 se representa en la Figura 4.
Conversión de la Forma 1 de Sp-4 a la Forma 6 de 5p-4 La Forma 1 puede convertirse en la Forma 6 de al menos dos formas.
Primero, dejando que los cristales finos de la Forma 1 se expongan a la humedad atmosférica durante varios días, se produce un monohidrato de la Forma 1 con la apariencia de una goma solidificada. Luego de moler el monohidrato sólido hasta convertirlo en un polvo fino, el patrón de XRPD permanece coherente con la Forma 1. Al dejar reposar en un recipiente abierto durante 6-10 semanas, el material molido cambia lentamente a la Forma 6 como un sólido anhidro. La Forma 1 es estable por al menos 2 años en un contenedor sellado.
De manera alternativa, la Forma 1 puede suspenderse en agua 5-50 mg/mL a temperatura ambiente y durante unas horas transformarse en la Forma 6. La eficacia del proceso de transformación en agua puede mejorarse calentando el agua hasta el punto que se disuelve más Forma 1 y aumentar la fluidez de la porción inmiscible de Sp-4 de una goma rígida a un aceite suspendido a alrededor o más [sic]. Con el tiempo, la Forma 6 puede comenzar a cristalizarse a 50°C. Enfriar adicionalmente la suspensión hasta 0-10°C lleva a una recuperación mayor de sólido. La cristalización a partir de agua también quita más rastros de impurezas polares, llevando a una pureza general mejorada.
Volver a disolver la Forma 6 en como [sic] un solvente orgánico tal como diclorometano o acetonitrilo seguido por cristalización proporciona la Forma 1, aun cuando se siembra con la Forma 6 cristalina.
A un matraz de fondo redondo de un cuello de 100 mL equipado con una membrana de goma y una barra de agitación magnética, se cargaron 1.04 gramos de Sp-4, Forma 1. Pureza por HPLC de 99.7%. Cargado con 40 mL de agua desionizada (DI) . Se comenzó a agitar la suspensión vigorosamente mientras se calentaba hasta 50°C. Cuando la temperatura llegó a los 50°C, la solución prácticamente homogénea se mantuvo durante 60 min, durante el tiempo los sólidos comenzaron a precipitar a partir de la solución, formando una lechada fina. La lechada se enfrió hasta 20 °C durante 90 min y se mantuvo durante 16 horas a 20 °C enfriando adicionalmente hasta 0-5°C durante 30 min y se mantuvo a 0-5 °C durante 2.5 horas. La lechada se filtró en un embudo de vidrio poroso de porosidad media y se lavó con 10 mL de agua helada. La torta mojada se secó por succión durante 2 horas antes de secar en un horno de vacio durante la noche durante 23 horas a 50°C. Se aislaron 0.88 g (84.6% de recuperación) de Sp-4, Forma 6.
La Forma 6 tiene un punto de fusión observado de alrededor de 124.5-126°C.
Ejemplo 21-1. Forma 1 de SP-4 Un listado de picos de la Forma 1 de Sp-4 se presenta en la Tabla 2. 5 10 15 20 25 Ejemplo 21-2. Forma 2 de Sp-4 Se exhibe un patrón de XRPD de la Forma 2 de Sp-4 en la Figura 5.
Un listado de picos de la Forma 2 de Sp-4 se presenta en la Tabla 3.
Ejemplo 21-3. Forma 3 de SP-4 Se exhibe un patrón de XRPD de la Forma 3 de Sp-4 en la Figura 6.
Un listado de picos de la Forma 3 de Sp-4 se presenta en la Tabla 4.
Ejemplo 21-4. Forma 4 de Sp-4 Se exhibe un patrón de XRPD de la Forma 4 de Sp-4 en la Figura 7.
Un listado de picos de la Forma 4 de Sp-4 se presenta en la Tabla 5.
Ejemplo 21-5. Forma 5 de SP-4 Se exhibe un patrón de XRPD de la Forma 5 de Sp-4 en la Figura 8.
Un listado de picos de la Forma 5 de Sp-4 se presenta en la Tabla 6.
Ejemplo 21-5. Forma 6 de SP-4 En la Figura 21 se exhibe un patrón de XRPD de la Forma 6 de Sp-4.
Un listado de picos de la Forma 6 de Sp-4 se presenta en la siguiente tabla.
Ejemplo 21-7. Sp-4 (amorfo) Se exhibe un patrón de XRPD de Sp-4 amorfo en la Figura 9.
Ejemplo 22 Cristalografía de rayos X de cristales simples de Sp-4 y sus solva os Ejemplo 22-1. Cristalografía de rayos X de cristales simples de Sp-4 (Forma 1) La Figura 10 muestra una estructura de rayos X cristalina para la Forma 1 de Sp-4. Allí, la figura muestra una vista de las moléculas de la Forma 1 a partir de la estructura cristalina, mostrando la disposición de numeración utilizada. Se muestran los elipsoides de desplazamiento atómico anisotrópico para los átomos que no son de hidrógeno en el nivel de probabilidad de 50%. Los átomos de hidrógeno se exhiben con un radio arbitrariamente pequeño.
La solución de la estructura se obtuvo mediante métodos directos, refinado de mínimos cuadrados de matriz completa en F2 con peso vf1 = o2 ( F ) + (0.0592P)2 + (0.6950P), donde P = F +2Fc )/3, parámetros de desplazamiento anisotrópico, corrección de absorción empírica usando armónicos esféricos, implementados en un algoritmo de interpolación SCALE3 ABSPACK. wR2 final = {? [ w( F - Fc2 ) 2] /? [ w{ F¿ ) 2 ] 1/2 } = 0.0871 para todos los datos, Ri convencional = 0.0329 en valores de F de 7090 reflexiones con F0 > Aa[F0) , S = 1.016 para todos los datos y 870 parámetros. A/o(máx) final 0.001, A/o(medio), 0.000. Mapa de diferencia final entre +0.534 y -0.36 e Á"3.
Tabla 7. Parámetros de cristales simples de la Forma Ejemplo 22-2. Cristalografía de rayos X de cristales simples de Sp-4 (Forma 2) La Figura 11 muestra una estructura de rayos X cristalina para la Forma 2 de Sp-4. Allí, esta figura muestra una vista de las moléculas de la Forma 2 a partir de la estructura cristalina, mostrando la disposición de numeración utilizada. Los heteroátomos se resolvieron de forma isotrópica debido a datos muy débiles. No se exhiben los átomos de hidrógeno.
La solución de la estructura se obtuvo mediante métodos directos, refinado de mínimos cuadrados de matriz completa en F2 con peso w'1 = o2 (F02 ) + (0.0975P)2 + (10.6969P), donde P = (F +2F )/3, parámetros de desplazamiento anisotrópicos , corrección de absorción empírica usando armónicos esféricos, implementados en un algoritmo de interpolación SCALE3 ABSPACK. wR2 final = {?[w(F02- Fc2 ) 2] / ? [w ( F02 ) 2 }1/2 } = 0.1883 para todos los datos, Ri convencional = 0.0741 en los valores de F de 2525 reflexiones con F0 > 4a{F0), S = 1.05 para todos los datos y 158 parámetros. A/o(máx) final 0.000, ?/s (medio), 0.000. Mapa de diferencia final entre +1.388 y -0.967 e Á"3.
Tabla 8. Parámetros de cristales simples de la Forma 2 Ejemplo 22-3. Cristalografía de rayos X de cristales simples 5 de Sp-4 (Forma 2) La Figura 12 representa una estructura cristalina de rayos X (ORTEP - anisotrópico) Sp-4 (Forma 2) . Una estructura cristalina del solvato de cloruro de metileno de Sp-4 (Forma 2), C23H31N3P09FCl2, proporciona un grupo espacial monoclinico Q P2i (ausencias sistemáticas OkO: k=primo) con a=12.8822 ( 14 ) Á, b=6.1690(7) Á, c=17.733(2) Á, ß=92.045 (3 ) ° , V=1408.4 ( 3 )Á3, Z=2 y dcaic= 1.449 g/cm3. Los datos de intensidad de rayos X se recogieron en un detector de área Rigaku Mercury CCD que utiliza radiación ??-?a monocromada de grafito (?=0.71073 Á) ^ a una temperatura de 143K. El indexado preliminar se realizó a partir de una serie de doce imágenes rotadas 0.5° con exposiciones de 30 segundos. Se recogió un total de 648 imágenes de rotación con un a distancia de cristal a detector de 35 mm, un ángulo de giro 2T de -12°, anchos de rotación de 0.5° y exposiciones de 30 segundos: el análisis N° 1 fue un análisis F de 315° a 525° a ?= 10° y ? = 20°; el análisis N° 2 fue un análisis ? de -20° a 5° a ? = -90° y F = 315°; el análisis N° 3 fue un análisis ? de -20° a 4° a ? = -90° y F = 135°; el análisis N° 4 fue un análisis ? de -20° a 5° a ?= - 90° y F = 225°; el análisis N° 5 fue un análisis ? de -20° a 20° a ? = -90° y F = 45°. Las imágenes de rotación se procesaron usando CrystalClear (CrystalClear : Rigaku Corporation, 1999) , produciendo un listado de valores F2 y o(F2) sin promediar que luego se pasaron al paquete de programas CrystalStructure (CrystalStructure : Crystal Structure Analysis Package, Rigaku Corp. Rigaku/MSC (2002)) para procesamiento adicional y solución de estructura en una computadora Dell Pentium III. Se midieron un total de 7707 reflexiones en los intervalos de 5.48 < 2T < 50.04°, -14 < h < 15, -7 < k = 6, -19 < 1 < 21, proporcionando 4253 reflexiones únicas (Rint = 0.0180). Los datos de intensidad se corrigieron para efectos Lorentz y de polarización y para la absorción usando REQAB (transmisión mínima y máxima 0.824, 1.000).
La estructura se resolvió por métodos directos (SIR97, SIR97 : Altomare, A., M. Burla, M. Camalli, G. Cascarano, C. Giacovazzo, A. Guagliardi, A. Moliterni, G. Polidori & R. Spagna (1999). J. Appl. Cryst. , 32, 115-119). El refinado se realizó mediante mínimos cuadrados de matriz completa basados en F2 usando SHELXL-97 (SHELXL-97 : Sheldrick, G.M. (2008) Acta Cryst, A64, 112-122). Todas las reflexiones se usaron durante el refinado. El plan de peso usado fue w=l/ [o2 ( 02 ) + 0.0472P2 + 0.4960P] donde P = ( F„2 + 2 Fc2 )/3. Los átomos que no eran de hidrógeno se retinaron anisotrópicamente y los átomos de hidrógeno se refinaron usando un modelo de "anclaje". El refinado convergió a Ri^O.0328 y wR2=0.0817 para 4046 reflexiones para las cuales F > 4o(F) y Ri=0.0348, wR2=0.0838 y GOF = 1.056 para todas las 4253 reflexiones únicas que no son cero y las 358 variables (RI =?||F0|- |FC||/?| F0| ; WR2 = {? w (F2 - F2)2 I ?u ( F02 )2}1/ ; GOF = {? w (F2 - Fc2) / (n - p) }1 2 ; donde n = la cantidad de reflexiones y p = la cantidad de parámetros refinados) . El ?/s máximo en el ciclo final de mínimos cuadrados fue 0.000 y los dos picos más prominentes en la diferencia final de Fourier fueron +0.312 y -0.389 e/Á3. El parámetro de estructura absoluta Flack se refino hasta -0.06(6), corroborando, por lo tanto, la estereoquímica del compuesto del título.
La Tabla 1 enumera la información celular, los parámetros de recolección de datos y los datos de refinado. Los parámetros térmicos isotrópicos equivalentes y posicionales finales se proporcionan en la Tabla 2. Los parámetros térmicos anisotrópicos se encuentran en la Tabla 3. ("ORTEP-II: A Fortran Thermal Ellipsoid Plot Program for Crystal Structure Illustrations" . C.K. Johnson (1976) ORNL-5138.) representación de la molécula con 30% de probabilidad de que se exhiban los elipsoides térmicos.
Tabla 9. Resumen de la determinación de la estructura del compuesto Sp-4'CH2C12.
Ejemplo 22-4. Cristalografía de rayos X de cristales simples de Sp-4 (Forma 3) La Figura 13 muestra una estructura de rayos X cristalina para la Forma 3 de Sp-4. Allí, esta figura muestra una vista de las moléculas de la Forma 3 a partir de la estructura cristalina, mostrando la disposición de numeración utilizada. Se muestran los elipsoides de desplazamiento atómico anisotrópico para los átomos que no son de hidrógeno en el nivel de probabilidad de 50 % . Los átomos de hidrógeno se exhiben con un radio arbitrariamente pequeño.
La solución de la estructura se obtuvo mediante métodos directos, mínimos cuadrados con matriz completa en F2 con peso w'1 = o2(F02 ) + ( 0 . 05 12 PJ 2 + ( 0 . 68 10 P) , donde P = (F +2F )/3, parámetros de desplazamiento anisotrópico, corrección de absorción empírica usando armónicos esféricos, implementado en un algoritmo de interpolación SCALE3 ABSPACK. wR2 final = {? [ w{ F02 - Fc2 ) 2] /? [ w( Fa2 ) 2] 1 2 } = 0.0796 para todos los datos, Ri convencional = 0.0294 en valores de F de 2486 reflexiones con F0 > Ao[F0) , S = 1.068 para todos los datos y 377 parámetros. A/o(máx) final 0.001, A/o(medio) , 0.000. Mapa de diferencia final entre +0.211 y -0.334 e Á"3.
Tabla 10. Parámetros de cristales simples de la Forma 3 Ejemplo 23. Estabilidad a temperaturas elevadas y humedad relativa Se almacenó una muestra de Rp -4 en una cámara de humedad a 40°C y 75% de humedad relativa durante una semana y la muestra se volvió a analizar mediante XRPD. El patrón de polvo obtenido para Rp-4 no mostró un cambio sustancial durante el curso del experimento, lo que quiere decir que no se observó ningún cambio en la forma del sólido. Esto debe contrastarse con una muestra de 4, que se tornó líquida dentro de alrededor de 16 horas de almacenarse a 40°C y 75 % de humedad relativa. Efectivamente, una ilustración de la naturaleza delicuescente de 4 se ilustra a continuación. Una muestra de 4 se pasó a través de un tamiz de 250 µ?? y luego se almacenaron muestras a 40°C / 75 % de HR y 25°C / 53 % de humedad relativa y se realizaron observaciones visuales en intervalos regulares. Los resultados se proporcionan en la Tabla 4.
Tabla 11. Estabilidad de 4 a humedad relativa elevada.
Condiciones t = 1.5h t= 4.Sh t = 6.Sh t = 8.5h t = 73 h 40°C / Delicuescencia 75% HR Delicuescencia 25°C / Sin Sólido Delicuescencia casi Delicuescencia 53% HR delicuescencia pegajoso parcial completa Al almacenar a 40 °C y 75 % de humedad relativa, una muestra de Sp-4 se tornó líquida dentro de 16 horas. Por ejemplo, se molió una muestra de Sp-4 con un mortero y luego se pasó sucesivamente a través de tamices de 500 y 250 m para proporcionar la muestra como un polvo fino. Las muestras de este material se almacenaron a 40 °C y 75% de humedad relativa y 25°C y 53 % de HR y se realizaron observaciones visuales en intervalos regulares. Los resultados se proporcionan en la Tabla 5.
Tabla 12. Estabilidad de Sp -4 a humedad relativa elevada.
Condiciones t = 1.5 h t = 4.5 h t = 104 h 40 *0 / 75 % Sin HR delicuescencia Delicuescencia - 25 °C / 53 % Sin delicuescencia Sin delicuescencia Sin delicuescencia HR El análisis XRPD de la muestra luego del almacenamiento a 25°C y 53% de HR durante 104 horas no mostró cambios significativos en los difractogramas producidos, indicando que no había ocurrido un cambio en la forma.
Ejemplo 24. Espectrometría de infrarrojo transformado de Fourier (FT-I ) Los datos se recogieron en un Spectrum One de Perkin-Elmer equipado con un accesorio de muestreo de Reflectancia Total Atenuada (ATR, por sus siglas en inglés) universal. Los datos se recogieron y analizaron usando software Spectrum v5.0.1.
El espectro IR obtenido para 4, Rp -4 y Sp -4 se muestra en las Figs. 5-7, respectivamente. A continuación se presentan picos seleccionados en números de onda (cm ) : 4: -1680, -1454, -1376, -1205, -1092, -1023 (Fig. 14) ; RP-4: -1742, -1713, -1679, -1460, -1377, -1259, -1157, -1079 (Fig. 15); y Sp-4 (Forma 1) : -1743, -1713, -1688, -1454, -1378, -1208, -1082 (Fig. 16) .
Ejemplo 25. Calirometria de barrido diferencial (DSC) . Análisis gravimétrico térmico (TGA, por sus siglas en inglés) .
Los datos de DSC se recogieron en un TA Instruments Q2000 equipado con un procesador de muestras automático de 50 posiciones. La calibración para la capacidad térmica se llevó a cabo usando zafiro y la calibración de energía y temperatura se llevó a cabo usando indio certificado.
La DSC de temperatura modulada se llevó a cabo típicamente en 0.8-1.2 mg de cada muestra, en un platillo de aluminio perforado, usando una tasa de calentamiento subyacente de 2°C.min~1 y parámetros de modulación de temperatura de ± 0.2 °C.min_1 y 40 segundos. Se mantuvo una purga de nitrógeno seco a 50 ml.min"1 sobre la muestra.
El software de control de instrumentos fue Advantage for Q Series v2.8.0.392 y Thermal Advantage v4.8.3 y los datos se analizaron usando Universal Analysis v4.3A.
Los datos de DSC se recogieron en un Mettler DSC 823e equipado con un procesador de muestras automático de 34 posiciones. El instrumento se calibró en cuanto a energía y temperatura usando indio certificado. Típicamente, se calentaron 0.8-1.2 mg de cada muestra, en un platillo de aluminio perforado, a 10°C.min_1 desde 25°C a 250°C. Se mantuvo una purga de nitrógeno a 50 mi. min-1 sobre la muestra. El software de control de instrumentos y análisis de datos fue STARe v9.20.
Los datos de DSC para Sp -4 (Forma 6) se recogieron usando un instrumento DSC (TA Q2000), usando una tasa de calentamiento de 10 °C/ min bajo un flujo continuo de gas de nitrógeno seco (100 ml/min) . Se pesaron aproximadamente 2.2 mg de muestra con precisión y se calentaron en un platillo 'Tzero' no sellada herméticamente con una tapa holgada. El instrumento se calibró (entalpia y temperatura) con un indio estándar y (capacidad de calor) con un zafiro estándar. Las incertidumbres se estiman en ±0.1 °C para temperaturas y ±5 % para entalpias medidas. Se utilizó software TA Universal Analysis para medir las temperaturas iniciales.
Los datos de TGA se recogieron en un Mettler TGA/SDTA 851 e equipado con un procesador de muestras automático de 34 posiciones. Se calibró la temperatura del instrumento usando indio certificado. Típicamente, se cargaron 8-12 mg de cada muestra en un crisol de aluminio pesado previamente y se calentaron a 10°C.min"1 desde temperatura ambiente hasta 350°C. Se mantuvo una purga de nitrógeno a 50 ml.min"1 sobre la muestra. El software de control de instrumentos y análisis de datos fue STARe v9.20.
El análisis DSC de 4 mostró una única endotermia amplia con una temperatura inicial de 58.7°C (?? 14 J.g) que se confirmó se debía a la relajación molecular durante la transición del vidrio por análisis DSC modulado adicionalmente (Fig. 17) . El análisis de TGA 4 no exhibió pérdida de peso antes de la descomposición por encima de los 240°C, confirmando que el material no es solvatado. Como el análisis de XRPD de 4 confirmó que el material era amorfo, se llevó a cabo un análisis de DSC modulado en un intento de calcular la temperatura de transición del vidrio, la que se descubrió fue de 57°C.
El análisis de DSC mostró una única endotermia aguda con una temperatura inicial de 136.2 °C (?? 76 J.g"1) que se confirmó es una fusión mediante microscopía de etapa caliente. Véase la Fig. 18. El análisis de TGA de Kp—4 no mostró pérdida de peso antes de la descomposición por encima de los 240 °C, confirmando que el material no es solvatado.
El análisis de DSC de Sp-4 mostró una única endotermia amplia con una temperatura inicial de 93.9°C (?? 43 J.g"1) que se confirmó es una fusión mediante microscopía de etapa caliente. Véase la Fig. 19. El análisis de TGA de 5p-4 no mostró pérdida de peso antes de la descomposición por encima de los 240°C, confirmando que el material no es solvatado.
El análisis de DSC de Sp-4 (Forma 6) mostró una única endotermia amplia con una temperatura inicial de 120.7 °C (?? 79 J.g-1) .
Ejemplo 26. Adsorción gravimétrica de vapor (GVS) SMS DVS Intrinsic Los isotermos de adsorción se obtuvieron usando un analizador de absorción de humedad SMS DVS Intrinsic controlado mediante software SMS Analysis Suite. La temperatura de la muestra se mantuvo a 25 °C mediante los controles de instrumentos. La humedad se controló mezclando corrientes de nitrógeno seco y húmedo con una velocidad de flujo total de 200 ml.min"1. La humedad relativa se midió mediante una sonda Rotronic calibrada (intervalo dinámico de 1.0-100 % de HR) , ubicado cerca de la muestra. El cambio de peso (relajación de masa) de la muestra como una función del % de HR se monitoreó constantemente mediante la microbalanza (precisión ±0.005 mg) .
Típicamente, se colocaron 5-20 mg de la muestra en una cesta de acero inoxidable con malla tarada en condiciones ambientales. La muestra se cargó y se descargó a 40% de HR y 25°C (condiciones ambientales típicas). Se realizó un isotermo de adsorción de humedad como se resume a continuación (2 análisis proporcionando 1 ciclo completo) . El isotermo estándar se llevó a cabo a 25°C en intervalos de 10% de HR sobre un intervalo de 0.5-90 % de HR.
Tabla 13. Parámetros de método para experimentos con SMS DVS Intrinsic La muestra se recuperó luego de completar el isotermo y se volvió a analizar por XRPD.
El análisis de GVS mostró que í?p—4 no era higroscópico y que exhibía captación reversible de aproximadamente 0.2% en peso de agua desde 0 hasta 90 % de humedad relativa. El segundo análisis de la muestra por XRPD luego del experimento de GVS no exhibió cambios en la forma.
Se molió una muestra de Sp-4 con un mortero y luego se pasó sucesivamente a través de tamices de 500 y 250 µp\ para proporcionar la muestra como un polvo fino que luego se analizó utilizando un método modificado de un único ciclo. La muestra se tomó desde 40 % de HR (aproximadamente ambiente) hasta 60 % de HR, en vez del 90 % para el método estándar, y luego se cicló hasta 0 % y devuelta a 40 % de HR. Este análisis mostró que Sp-4 no es higroscópico hasta 60 % de HR, con captación reversible de -0.2 % en peso de agua desde 0 hasta 60 % de HR.
Ejemplo 27. Solubilidad acuosa termodinámica La solubilidad acuosa se determinó suspendiendo una cantidad suficiente de compuesto en agua para proporcionar una concentración máxima final de =10 mg.ml-1 de la forma libre original del compuesto. La suspensión se equilibró a 25 °C durante 24 y luego se midió el pH. Luego la suspensión se filtró a través de un filtro de fibra de vidrio C hacia una placa de 96 pocilios. Luego el filtrado se diluyó por un factor de 101. La cuantificación se realizó mediante HPLC con referencia a una solución estándar de aproximadamente 0.1 mg.ml-1 en DMSO. Se inyectaron diferentes volúmenes de soluciones de muestra estándar, diluidas y no diluidas. La solubilidad se calculó utilizando las áreas de los picos determinadas por integración del pico encontrado en el mismo tiempo de retención que el pico principal de la inyección estándar .
Tabla 14. Parámetros de método de HPLC para mediciones de solubilidad El análisis se llevó a cabo en las condiciones antes mencionadas en un sistema Agilent serie HP1100 equipado con un detector de haz de diodos y usando software ChemStation vB.02.01-SRI .
Tabla 15. Resultado de solubilidad acuosa para -Rp-4, 4, y Sp-4.
ID de la pH de la mezcla solubilidad / Comentarios muestra sin filtrar mg.ml 1 RP-4 7.12 1.58 Suspensión 4 7.03 6.1 1 Sólido residual SP-4 6.88 5.65 Sólido residual Ejemplo 28. Determinación de pureza química por HPLC Pueden usarse diversas condiciones de HPLC para determinar la pureza química de los compuestos descritos en la presente. Un ejemplo de estas se describió anteriormente en relación con los estudios de solubilidad acuosa termodinámica. Otros ejemplos se describen a continuación: Condiciones de HPLC: LC: Waters Alliance 2695 Separations Module, detector Waters 2996 PDA y software Waters Empower 2 (Versión 6.00) Columna: Phenomenex Luna C18(2); 4.6 x 50 mm; 3 um Velocidad de flujo: 1.2 mL/min Volumen de inyección: 10 uL Fase móvil: Solvente A: 95% de agua con 5% de metanol y 10 mM Acetato de amonio; pH~5.3 Solvente B: MeOH con acetato de amonio 10 mM Gradiente: mantener a O % de B 3 min 0-47% de B 3-4 min mantener a 47 % de B 4-10 min 47%-74% de B 10-llmin mantener a 74 % de B 11-13.5min volver a 0% de B 13.5-13.6 min mantener a 0 % de B 13.6-15.5 min En estas condiciones, se determinó que la pureza de 4, i?P-4, y Sp-4 era de un -99.6, -99%, y -99.5%, respectivamente. Nótese que las purezas más altas pueden conseguirse optimizando los métodos descritos anteriormente .
La inspección de los difractogramas de XRPD muestra que los dos diastereómeros cristalinos simples proporcionaron patrones de XRPD claramente diferentes. Adicionalmente, había una clara diferencia en el punto de fusión de los dos diastereómeros cristalinos, teniendo ip-4 una temperatura inicial considerablemente mayor que Sp-4 (136°C contra 94°C) .
Ejemplo 29. Métodos de separación adicionales La siguiente separación por SFC (condiciones establecidas a continuación) proporcionó la separación adecuada de una mezcla de diastereómeros, i¾p—4 y Sp-4.
La siguiente separación por SFC (condiciones establecidas a continuación) proporcionó la separación adecuada de una mezcla de diastereómeros , Rp-4 y Sp-4.
Tabla 16. Resumen de los resultados de la caracterización del lote de i?p-4, 4, y Sp-4.
Análisis ??-4 Sr4 1 :1 Mezcla de NMR de Protón Diastereoisómero único Diastereoisómero único diastereoisómeros Cristalino - diferente de X PD Cristalino - diferente de Sr4 Amorfo ??-4 Endotermia; fusión - DSC Endotermia; 59°C Endotermia; fusión - 94°C 136°C TGA Sin pérdida de peso Sin pérdida de peso Sin pérdida de peso descomposicón > 240°C descomposicón > 240°C descomposicón > 240°C IR Véase arriba Véase arriba Véase arriba Solubilidad ac 1.58 (mg-mr1) 6.1 ) 5.65 Pureza de HPLC 96.9 % 99.6 % 99.5 % Delicuescencia dentro de 1.5 40°C / 75 % HR Delicuescencia dentro de 4.5 Sin cambio de forma h h 25°C / 53 % HR Delicuescencia Sin cambio de forma No higroscópico hasta No higroscópico hasta GVS 90% de HR 60% de HR Ejemplo 30. Cristalografía de rayos X de 8 (isómero Sp) El compuesto 8 (isómero Sp) , Ci8H2iN2 P07 , se cristaliza en el grupo espacial monoclínico ?2?, (ausencias sistemáticas OkO: k=primo) con a=5.3312 (4 )A, b=15.3388 ( 8 )Á, c=23.7807 (13)Á, ß=92.891 (3) °, V=1942.2 (2)Á3, Z=4, y dcalc=1.397 g/cm3. Los datos de intensidad de rayos X se recogieron en un detector de área Bruker APEXII CCD que emplea radiación Mo-Ka monocromada de grafito (?=0.71073 Á) a una temperatura de 100 (1)K. Las Figuras 20A y 20B muestran moléculas de la unidad asimétrica numeradas como 1 y 2, respectivamente.
El indexado preliminar se realizó a partir de una serie de treinta y seis marcos rotados 0.5° con exposiciones de 30 segundos. Se recogió un total de 3608 marcos con una distancia de cristal a detector de 70.00 mm, anchos de rotación de 0.5° y exposiciones de 20 segundos: Los marcos de rotación se integraron utilizando SAINT (Bruker (2009) SAINT. Bruker AXS Inc., Madison, Wisconsin, USA.) produciendo un listado de valores F2 y o(F2) sin promediar que luego se pasaron al paquete de programas SHELXTL (Bruker (2009) SHELXTL. Bruker AXS Inc., Madison, Wisconsin, USA. ) para procesamiento adicional y solución de estructura en una computadora Dell Pentium . Se midieron un total de 6909 reflexiones en los intervalos de 1.58 = T = 25.09°, -6 < h < 6, -18 < k < 18, -28 < 1 < 28, proporcionando 6909 reflexiones únicas (Rint = 0.0581) . Los datos de intensidad se corrigieron para efectos Lorentz y de polarización y para la absorción usando REQAB (Sheldrick, G.M. (2007) SADABS. Universidad de Gotinga, Alemania.) (transmisión mínima y máxima 0.6093, 0.7452) .
La estructura se resolvió por métodos directos (SHELXS-97 (Sheldrick, G.M. (2008) Acta Cryst. A64, 112-122.)). El refinado se hizo mediante mínimos cuadrados de matriz completa basados en F2 usando SHELXL-97 (Sheldrick, G.M. (2008) Acta Cryst. A64, 112-122.). Todas las reflexiones se usaron durante el refinado. El plan de peso utilizado fue w=l/ [s2 (F02) + (O.OOOOP)2 + 14.0738P] donde P = (F02 + 2Fc )/3. Los átomos que no eran de hidrógeno se retinaron anisotrópicamente y los átomos de hidrógeno se retinaron usando un modelo de anclaje. El refinado convergió a Rl = 0.0847 y wR2 = 0.1899 para 6173 reflexiones observadas para las cuales F > 4o(F) y Rl=0.0963 y wR2=0.1963 y GOF =1.119 para todas las 6909 reflexiones únicas que no son cero y las 512 variables (Rl = ?||F01 - 1 Fc||/ ? | F01 ; wR2 = [?w(F02 - ^c2)2/?w(E02)2]1/2; GOF = [?w(E02 - Fc2)2/(n - p)]1/2; donde n = la cantidad de reflexiones y p = la cantidad de parámetros refinados) . El ?/s máximo en el ciclo final de los mínimos cuadrados fue de 0.000 y los dos picos más prominentes en la diferencia final de Fourier fueron +0.402 y -0.559 e/Á3. Las Figs 20A y 20B son ORTEP (30% de probabilidad de elipsoides térmicos) de las moléculas 1 y 2 de la unidad asimétrica.
Tabla 17. Resumen de la determinación de la estructura del compuesto 8 (isómero SU) Ejemplo 32. Cristalografía de rayos X de 2-(((S)-(perfluorofenoxi) (fenoxi) fosforil) amino) propanoato de (S) -isopropilo El 2- ( ( (S) - (perfluorofenoxi ) (fenoxi) fosforil) -amino) propanoato de (S) -isopropilo, C18H17N PO5 F5 , se cristaliza en el grupo espacial triclínico Pl con a = 5.2641(6) Á, b = 12.0548(13) Á, c = 16.4307(15) Á, = 74.960(4)°, ß = 83.959(4)°, ? = 80.275(4)°, V = 990.40(18) Á3, Z - 2 y dcaic=l .520 g/cm3. Los datos de intensidad de rayos X se recogieron en un detector de área Bruker APEXII CCD que emplea radiación Mo-?a monocromada de grafito (X = 0.71073 Á) a una temperatura de 143 (1)K. El indexado preliminar se llevó a cabo a partir de una serie de treinta y seis marcos de rotación 0.5° con exposiciones de 20 segundos. Se recogió un total de 3593 marcos con una distancia de cristal a detector de 37.600 mm, anchos de rotación de 0.5° y exposiciones de 20 segundos : tipo de 2T ? <? X marcos análisis f -15.50 258.48 -351.72 19.46 739 <P -20.50 -17.45 -37.67 -73.06 725 ? -10.50 -53.05 -87.93 99.72 80 <P 19.50 -32.21 -88.94 36.30 219 ? -10.50 -14.33 80.80 -60.33 122 ? 17.00 -38.90 -41.64 83.36 116 ? 17.00 -37.89 -175.56 82.07 114 f 19.50 59.55 -11.29 -26.26 739 9 -10.50 318.39 -335.56 52.47 739 Los marcos de rotación se integraron utilizando SAINT (Bruker (2009) SAINT. Bruker AXS Inc., Madison, isconsin, USA.) produciendo un listado de valores F2 y o(F2) sin promediar que luego se pasaron al paquete de programas SHELXTL (Bruker (2009) SHELXTL. Bruker AXS Inc., adison, Wisconsin, USA. ) para procesamiento adicional y solución de estructura en una computadora Dell Pentium 4. Se midieron un total de 17880 reflexiones en los intervalos de 1.77 < ? > 25.12°, -6 < h < 6, -14 < k < 14, -19 < 1 < 19, proporcionando 6897 reflexiones únicas (Rint = 0.0212) . Los datos de intensidad se corrigieron para efectos Lorentz y de polarización y para la absorción usando SADABS (Sheldrick, G . M . (2007) SADABS. Universidad de Gotinga, Alemania.) (transmisión mínima y máxima 0.6887, 0.7452) .
La estructura se resolvió por métodos directos (SHELXS-97 (Sheldrick, G.M. (2008) Acta Cryst. A64, 112-122.)) . El refinado se hizo mediante mínimos cuadrados de matriz completa basados en F2 usando SHELXL-97 (Sheldrick, G.M. (2008) Acta Cryst. A64, 112-122.) . Todas las reflexiones se usaron durante el refinado. El plan de peso utilizado fue w=l/[a2(F02 )+ (0.0344P)2 + 0.1102P] donde P = (FQ2 + 2Fc2)/3. Los átomos que no eran de hidrógeno se retinaron anisotrópicamente y los átomos de hidrógeno se refinaron usando un modelo de anclaje. El refinado convergió a Rl =0.0259 y wR2=0.0609 para 6527 reflexiones observadas para las cuales F > 4o(F) y Rl = 0.0284 y wR2 = 0.0621 y GOF = 1.040 para todas 6897 las reflexiones únicas que no son cero y las 548 variables. (Rl = ?|| FG| - | Fc|| /? | FG | ; wR2 = [?w( Q2- Ec2)2/?w(F02)2]1/2; GOF = [?w( E02 - Ec2)2/(n - p)]1 2; donde n = la cantidad de reflexiones y p = la cantidad de parámetros refinados.) El ?/s máximo en el ciclo final de los mínimos cuadrados fue de 0.001 y los dos picos más prominentes en la diferencia final de Fourier fueron +0.254 y -0.236 e/Á3. Las Figs. 22A y 22B son ORTEP (30% de probabilidad de elipsoides térmicas) de las moléculas 1 y 2 de la unidad asimétrica.
Tabla 18. Resumen de la determinación de la estructura de 2-(( (S) - (perfluorofenoxi) (fenoxi) fosforil) amino)propanoato de (S)-isopropilo Ejemplo 33. Actividad biológica Se sembraron células que contenían replicón tanto a 3, 000 células/pocilio (50 µ?,) en placas blancas/opacas de 96 pocilios como a 1,500 células/pocilio (25 µ?,) en placas blancas/opacas de 384 pocilios. Se agregaron 50 del compuesto 2X a la placa de 96 pocilios o se agregaron 25 pL del compuesto 2X a la placa de 384 pocilios. Las placas se incubaron a 37°C en una atmósfera de CO2 humificada al 5% durante 4 días. Luego de la incubación, se agregó un reactivo Bright-Glo (50 L para una placa de 96 pocilios o 25 pL para una placa de 384 pocilios) para medir un indicador de la luciferasa de luciérnaga para la replicación del VHC . Se calculó la inhibición porcentual contra la ausencia de control de fármacos.
Se ha demostrado que RF-4 y SF-4 tienen una amplia cobertura de genotipo. Por ejemplo, se ha demostrado que ambos son activos contra los genotipos 1-4 del virus de la hepatitis C.
Esta solicitud es una continuación parcial de la patente estadounidense N° 12/783, 680, presentada el 20 de mayo de 2012, que reivindican prioridad de las solicitudes provisionales de patente estadounidense N° 61/179.923, presentada el 20 de mayo de 2009 y 61/319.513, presentada el 31 de marzo de 2010, la materia de las cuales se incorpora a la presente mediante esta referencia en su totalidad.
La materia de las patentes estadounidenses N° 12/783,680 y 12/053,015 y de las solicitudes provisionales de patente estadounidense N° 61/179.923, presentada el 20 de mayo de 2009 y 61/319.513, presentada el 31 de marzo de 2010, se incorpora a la presente mediante esta referencia en su totalidad. La materia de todas las referencias citadas se incorpora a la presente mediante esta referencia. En el caso en que el significado de un término incorporado entre en conflicto con el significado de un término definido en la presente, prevalece el significado de los términos contenido en la presente descripción sobre el significado de los términos incorporados.
Se hace constar que con relación a esta fecha, el mejor método conocido por la solicitante para llevar a la práctica la citada invención, es el que resulta claro de la presente descripción de la invención.

Claims (61)

REIVINDICACIONES Habiéndose descrito la invención como antecede, se reclama como propiedad lo contenido en las siguientes reivindicaciones:
1. El 2-( ( (S)-( ( (2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-dioxo-3,4-dihidro pirimidin-1 (2H) -il) -4-fluoro-3-hidroxi-4-metiltetrahidrofuran 2-il)metoxi) (fenoxi) fosforil) amino) propanoato de (S) -isopropilo cristalino caracterizado porque tiene sustancialmente un patrón de difracción XRPD como se muestra en la figura 21.
2. El 2-( ( (S)-( ( (2R,3R,4R, 5R) -5- (2, 4-dioxo-3, -dihidro pirimidin-1 (2H) -il) -4-fluoro-3-hidroxi-4-metiltetrahidrofuran 2-il)metoxi) (fenoxi) fosforil) amino) propanoato de (S) -isopropilo cristalino caracterizado porque tiene reflexiones XRPD 2T(°) a alrededor de: 6.1, 8.2, 10.4, 12.7, 17.2, 17.7, 18.0, 18.8, 19.4, 19.8, 20.1, 20.8, 21.8 y 23.3.
3. Una composición caracterizada porque comprende el 2- ( ( (S) - ( ( (2R, 3R, 4R, 5R) -5- (2, 4-dioxo-3, -dihidropirimidin-l (2H) -il) -4-fluoro-3-hidroxi-4-metiltetrahidrofuran-2-il ) metoxi ) (fenoxi) fosforil) amino) propanoato de (S) -isopropilo cristalino de conformidad con las reivindicaciones 1 y 2.
4. Una composición farmacéutica caracterizada porque comprende el 2- ( ( (S) - ( ( (2R, 3R, 4R, 5R) -5- (2, 4-dioxo-3, 4-dihidropirimidin-1 (2H) -il) -4-fluoro-3-hidroxi-4-metiltetrahidrofuran-2-il)metoxi) (fenoxi) fosforil) amino) propanoato de (S) -isopropilo cristalino de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 y 2, y un medio farmacéuticamente aceptable.
5. Un método para tratar una infección por virus de la hepatitis C en un sujeto que lo necesita, caracterizado porque comprende : administrarle al sujeto una cantidad eficaz del 2-(((S)- ( ( (2R, 3R, R, 5R) -5- (2, 4-dioxo-3, 4-dihidropirimidin-l (2H) -il) -4-fluoro-3-hidroxi-4-metiltetrahidrofuran-2-il ) metoxi) ( fenoxi) fosforil) amino) propanoato de (S) -isopropilo cristalino de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 y 2.
6. Un compuesto representado por la fórmula estructural: caracterizado porque LG' es un grupo saliente del grupo que consiste de benzo [d] tiazolido-2 (3H) -tiona, 2-nitrofenoxido, 2-cloro-4-nitrofenoxido y 2, 4-diclorofenoxido .
7. El 2- (( (S) - (perfluorofenoxi) (fenoxi) fosforil) amino) propanoato de (S) -isopropilo.
8. El 2- ( ( (S) - (perfluorofenoxi) (fenoxi) fosforil ) amino) propanoato de (S) -isopropilo cristalino.
9. Un proceso para preparar el compuesto de un compuesto representado por la formula estructural: caracterizado porque LG' es un grupo saliente que comprende: cristalizar el compuesto a partir de una composición, que comprende a) una primera composición; b) un segundo precursor de un grupo saliente; c) una base no nucleofilica; y d) una composición liquida; donde la primera composición comprende el compuesto y su diastereómero de base P correspondiente.
10. El proceso de conformidad con la reivindicación 9, caracterizado porque la cantidad molar del compuesto es mayor a la cantidad molar de su diastereómero de base P.
11. El proceso de conformidad con la reivindicación 9, caracterizado porque el segundo precursor del grupo saliente es 2, -dinitrofenol, 4-nitrofenol, 2-nitrofenol, 2-cloro-4-nitrofenol, 2, 4-diclorofenol o pentafluorofenol .
12. El proceso de conformidad con la reivindicación 9, caracterizado porque la cantidad de pentafluorofenol varia de alrededor de 0.01 equivalentes molares a alrededor de 10 equivalentes molares con relación a la cantidad molar del compuesto y su diastereómero con base P.
13. El proceso de conformidad con la reivindicación 12, caracterizado porque la cantidad de pentafluorofenol varia de alrededor de 0.1 equivalentes molares a alrededor de 1 equivalentes molares con relación a la cantidad molar del compuesto y su diastereomero con base P.
14. El proceso de conformidad con la reivindicación 9, caracterizado porque la cristalización ocurre a una temperatura que varia de alrededor de -10°C a alrededor de +40°C.
15. El proceso de conformidad con la reivindicación 9, caracterizado porque la cristalización ocurre a alrededor de temperatura ambiente.
16. El proceso de conformidad con la reivindicación 9, caracterizado porque la base no nucleofilica se selecciona de entre carbonato de potasio, carbonato de cesio, di-isopropilamina, di-isopropiletilamina, trietilamina, quinuclidina, naftaleno-1 , 8-diamina, 2,2,6,6-tetrametilpiperidina, 1, 8-diazabicicloundec-7-eno, 4-dimetilamino-piridina, piridina, una 2 , 6-di-Ci-6-alquil-piridina, una 2, 4 , 6-tri-Ci_6-alquil-piridina y mezclas de los mismos.
17. El proceso de conformidad con la reivindicación 9, caracterizado porque la base no nucleofilica es trietilamina.
18. El proceso de conformidad con la reivindicación 9, caracterizado porque la base no nucleofilica se encuentra presente en una cantidad que varia de alrededor de 0.01 equivalentes molares a alrededor de 10 equivalentes molares, con relación a la cantidad molar total del compuesto y su diastereómero con base P.
19. El proceso de conformidad con la reivindicación 9, caracterizado porque la base no nucleofílica se encuentra presente en una cantidad que varia de alrededor de 0.1 equivalentes molares a alrededor de 1 equivalentes molares, con relación a la cantidad molar total del compuesto y su diastereómero con base P.
20. El proceso de conformidad con la reivindicación 9, caracterizado porque la solubilidad del compuesto es menor a la solubilidad de su diastereómero de base P correspondiente en la composición liquida.
21. El proceso de conformidad con la reivindicación 9, caracterizado porque la composición liquida comprende al menos uno de un solvente y un antisolvente.
22. El proceso de conformidad con la reivindicación 9, caracterizado porque la composición liquida comprende al menos uno de un alcohol de Ci a C8, un éter de C2 a Cg, una cetona de C3 a C7, un éster de C3 a C7, un clorocarburo de Ci a C2, un nitrilo de C2 a C / un hidrocarburo saturado de C5 a Ci2 y un hidrocarburo aromático de C6 a Ci2.
23. El proceso de conformidad con la reivindicación 9, caracterizado porque la composición liquida comprende al menos uno de un éter de C2 a C8, un éster de C3 a C , un hidrocarburo saturado de C5 a Ci2 y un hidrocarburo aromático de C6 a Ci2.
24. El proceso de conformidad con la reivindicación 9, caracterizado porque la composición liquida comprende al menos uno de un éter de C2 a C8, un éster de C3 a C7 y un hidrocarburo saturado de C5 a Ci2.
25. El proceso de conformidad con la reivindicación 24, caracterizado porque la composición líquida comprende al menos uno de acetato de etilo, t-butil-metiléter y hexano.
26. El proceso de conformidad con la reivindicación 24, caracterizado porque la composición líquida comprende acetato de etilo y hexano.
27. El proceso de conformidad con la reivindicación 24, caracterizado porque la composición líquida comprende t-butil-metiléter y hexano.
28. El proceso de conformidad con la reivindicación 9, caracterizado porque la cantidad de composición líquida varía de alrededor de 1 mL a alrededor de 10 mL por cada gramo de la primera composición.
29. El proceso de conformidad con la reivindicación 9, caracterizado porque comprende además la adición de compuesto cristalino a la composición.
30. El proceso de conformidad con la reivindicación 9, caracterizado porque comprende además agregar alrededor de 0.1 a alrededor de 1% en peso de compuesto cristalino a la primera composición.
31. El proceso de conformidad con la reivindicación 9, caracterizado porque comprende adicionalmente : a) hacer reaccionar PhOP(0) (LG)2 y iPr-Ala-NH2 · HC1 en presencia de una primera base para obtener (PhO)P(O) (LG) (NHAla-¿Pr) ; b) hacer reaccionar (PhO)P(O) (LG) (NHAla-2Pr) con un primer precursor del grupo saliente (LG'H) en presencia de una segunda base para obtener la composición que comprende el compuesto y su diastereómero con base P; donde LG y LG', independientemente uno del otro, son grupos salientes; donde el primer precursor del grupo saliente y el segundo precursor del grupo saliente son iguales o diferentes; y donde la primera base y la segunda base son iguales o diferentes .
32. Un proceso para preparar 2-(((S)- (perfluorofenoxi ) (fenoxi) fosforil) amino) propanoato de (S)-isopropilo cristalino caracterizado porque comprende: cristalizar 2- ( ( (S) - (perfluorofenoxi) (fenoxi) fosforil) amino) propanoato de (S) -isopropilo a partir de una segunda composición que comprende a) una primera composición; b) pentafluorofenol; c) una base no nucleofílica; y d) una composición liquida; donde la segunda composición comprende 2-(((S)- (perfluorofenoxi) (fenoxi) fosforil) amino) propanoato de (S)-isopropilo y 2- (( (R) - (perfluorofenoxi) (fenoxi) fosforil) amino) propanoato de (S) -isopropilo.
33. El proceso de conformidad con la reivindicación 32, caracterizado porque la cantidad molar del 2-(((S)-(perfluorofenoxi) (fenoxi) fosforil) amino) propanoato de (S)-isopropilo es mayor que la cantidad molar del 2-(((R)-(perfluorofenoxi ) (fenoxi) fosforil) amino) propanoato de (S)-isopropilo .
34. El proceso de conformidad con la reivindicación 32, caracterizado porque la cantidad de pentafluorofenol varia de alrededor de 0.01 equivalentes molares a alrededor de 10 equivalentes molares con relación a la cantidad molar de 2-(( (S) - (perfluorofenoxi) (fenoxi) fosforil) amino) propanoato de (S)-isopropilo y 2- (( (R) - (perfluorofenoxi) (fenoxi) fosforil) amino) propanoato de (S) -isopropilo.
35. El proceso de conformidad con la reivindicación 32, caracterizado porque la cristalización ocurre a una temperatura que varia de alrededor de -10°C a alrededor de +40°C.
36. El proceso de conformidad con la reivindicación 32, caracterizado porque la cristalización ocurre a alrededor de temperatura ambiente.
37. El proceso de conformidad con la reivindicación 32, caracterizado porque la base no nucleofilica se selecciona de carbonato de potasio, carbonato de cesio, di-isopropilamina , di-isopropiletilamina, trietilamina, quinuclidina, naftaleno-1 , 8-diamina, 2, 2, 6, 6-tetrametilpiperidina, 1, 8-diazabicicloundec-7-eno, 4-dimetilamino-piridina, piridina, una 2, 6-di-Ci-6-alquil-piridina, 1, 5-diazcbiciclo [4.3.0] non-5eno, 1-4-diazabiciclo [2.2.2] octano y mezclas de los mismos.
38. El proceso de conformidad con la reivindicación 32, caracterizado porque la base no nucleofilica es trietilamina.
39. El proceso de conformidad con la reivindicación 32, caracterizado porque la base no nucleofilica se encuentra presente en una cantidad que varia de alrededor de 0.1 a alrededor de 1 equivalentes molares con relación a la cantidad molar total de 2-(((S)- (perfluorofenoxi) (fenoxi) fosforil) amino) propanoato de (S)-isopropilo y 2- (( (R) - (perfluorofenoxi) (fenoxi) fosforil) amino) propanoato de (S) -isopropilo.
40. El proceso de conformidad con la reivindicación 32, caracterizado porque la solubilidad del 2-(((S)- (perfluorofenoxi) (fenoxi) fosforil) amino) propanoato de (S)-isopropilo es menor a la solubilidad del 2-(((R)- (perfluorofenoxi ) (fenoxi) fosforil) amino) propanoato de (S)-isopropilo en la composición liquida.
41. El proceso de conformidad con la reivindicación 32, caracterizado porque la composición liquida comprende al menos uno de un solvente y un antisolvente.
42. El proceso de conformidad con la reivindicación 32, caracterizado porque la composición liquida comprende al menos uno de un alcohol de un alcohol de Ci a CQ, un éter de C2 a Ce, una cetona de C3 a C , un éster de C3 a C7, un clorocarburo de Ci a C2, un nitrilo de C2 a C7, un hidrocarburo saturado de C5 a Ci2 y un hidrocarburo aromático de C6 a Ci2.
43. El proceso de conformidad con la reivindicación 32, caracterizado porque la composición liquida comprende al menos uno de un éter de C2 a CQ, un éster de C3 a C7, un hidrocarburo saturado de C5 a Ci2 y un hidrocarburo aromático de e a Ci2.
44. El proceso de conformidad con la reivindicación 32, caracterizado porque la composición liquida comprende al menos uno de un éter de C2 a C8, un éster de C3 a C7 y un hidrocarburo saturado de C5 a Ci2.
45. El proceso de conformidad con la reivindicación 44, caracterizado porque la composición liquida comprende al menos uno de acetato de etilo, t-butil-metiléter y hexano.
46. El proceso de conformidad con la reivindicación 44, caracterizado porque la composición liquida comprende acetato de etilo y hexano.
47. El proceso de conformidad con la reivindicación 44, caracterizado porque la composición liquida comprende t-butil-metiléter y hexano.
48. El proceso de conformidad con la reivindicación 32, caracterizado porque la cantidad de composición liquida varia de alrededor de 1 a alrededor de 10 mL por cada gramo de la primera composición.
49. El proceso de conformidad con la reivindicación 32, caracterizado porque comprende además la adición de 2-(((S)-(perfluorofenoxi) (fenoxi) fosforil) amino) propanoato de (S)-isopropilo cristalino a la segunda composición.
50. El proceso de conformidad con la reivindicación 32, caracterizado porque comprende además la adición de alrededor de 0.1 a alrededor de 1 % en peso de 2-(((S)- (perfluorofenoxi) (fenoxi) fosforil) amino) propanoato de (S)-isopropilo cristalino en función del peso total del 2-(((S)- (perfluorofenoxi) (fenoxi) fosforil) amino) propanoato de (S)-isopropilo en la primera composición.
51. El 2- (( (S) - (perfluorofenoxi) (fenoxi) fosforil) amino) propanoato de (S) -isopropilo cristalino caracterizado porque es obtenido mediante el proceso de conformidad con la reivindicación 32.
52. Un proceso para preparar 2- ( ( (S) - ( ( (2R, 3R, 4R, 5R) -5- (2, 4-dioxo-3, 4-dihidropirimidin-l (2H) -il) -4-fluoro-3-hidroxi-4-metiltetrahidrofuran-2-il)metoxi) (fenoxi) fosforil) amino) propanoato de (S) -isopropilo sustancialmente puro, caracterizado porque comprende: cristalizar 2- (( (S) - (perfluorofenoxi ) (fenoxi) fosforil) amino) propanoato de (S) -isopropilo a partir de una segunda composición que comprende a) una primera composición; b) pentafluorofenol; c) una base no nucleofilica; y d) una composición liquida; donde la primera composición comprende 2-(((S)-(perfluorofenoxi) (fenoxi) fosforil) amino) propanoato de (S)-isopropilo y 2- (( (R) - (perfluorofenoxi ) (fenoxi) fosforil) amino) propanoato de (S) -isopropilo.
53. Un proceso para preparar [2- ( ( (S) - ( ( (2R, 3R, 4R, 5R) -5- (2, 4-dioxo-3, -dihidropirimidin-l (2H) -il) -4-fluoro-3-hidroxi-4-metiltetrahidrofuran-2-il) metoxi) (fenoxi) fosforil) amino) propanoato de (S) -isopropilo] , caracterizado porque comprende: poner en contacto 2- (( (S) - (perfluorofenoxi) (fenoxi) fosforil ) amino) propanoato de (S) -isopropilo con un producto obtenido al hacer reaccionar un haluro de t-butilmagnesio con 1- ( (2R, 3R, R, 5R) -3-fluoro-4-hidroxi-5- (hidroximetil) -3-metiltetrahidrofuran-2-il) pirimidina-2, 4 (1H, 3H) -diona con un haluro de t-butilmagnesio [sic] .
54. El proceso de conformidad con la reivindicación 53, caracterizado porque el contacto ocurre en un medio que tiene una temperatura que varia de alrededor de 0°C a alrededor de 40°C.
55. El proceso de conformidad con la reivindicación 53, caracterizado porque el contacto ocurre en un medio que tiene una temperatura que varia de alrededor de 0°C a alrededor de 30°C.
56. El proceso de conformidad con la reivindicación 53, caracterizado porque la relación molar de haluro de t-butilmagnesio a 1- ( (2R, 3R, R, 5R) -3-fluoro-4-hidroxi-5-(hidroximetil) -3-metiltetrahidrofuran-2-il) pirimidina- 2, 4 (1H, 3H) -diona varia de alrededor de 2 a alrededor de 2.2.
57. El proceso de conformidad con la reivindicación 53, caracterizado porque la relación molar de haluro de t-butilmagnesio a 1- ( (2R, 3R, 4R, 5R) -3-fluoro-4-hidroxi-5-(hidroximetil) -3-metiltetrahidrofuran-2-il) pirimidina- 2, 4 (1H, 3H) -diona es de alrededor de 2.1.
58. El proceso de conformidad con la reivindicación 53, caracterizado porque el haluro de t-butilmagnesio es cloruro de t-butilmagnesio .
59. Un proceso para preparar 2- ( ( (S) - ( ( (2R, 3R, R, 5R) -5- (2, 4-dioxo-3, 4-dihidropirimidin-l (2H) -il) -4-fluoro-3-hidroxi-4-metiltetrahidrofuran-2-il)metoxi) (fenoxi) fosforil) amino) propanoato de (S) -isopropilo sustancialmente puro, caracterizado porque comprende: obtener 2- ( ( (S)-( ( (2R, 3R, 4R, 5R) -5- (2, 4-dioxo-3, 4-dihidropirimidin-1 (2H) -il) -4-fluoro-3-hidroxi-4-metiltetrahidrofuran-2-il)metoxi) (fenoxi) fosforil) amino) propanoato de (S) -isopropilo de acuerdo con el proceso de conformidad con la reivindicación 52 y cristalizar el 2- ( ( (S) - ( ( (2R, 3R, 4R, 5R) -5- (2, 4-dioxo-3, 4-dihidropirimidin-1 (2H) -il) -4-fluoro-3-hidroxi-4- metiltetrahidrofuran-2-il)metoxi) (fenoxi) fosforil) amino) propanoato de (S) -isopropilo así formado.
60. El proceso de conformidad con la reivindicación 32, caracterizado porque la base no nucleofilica esta presentada en una cantidad que varía de 0.01 moles a aproximadamente 10 equivalentes del mol relativos a la cantidad total de moles de 2- (( (S) - (perfluorofenoxi) (fenoxi) fosforil) amino) propanoato de (S) isopropil y 2- (( (R) perfluorofenoxi) (fenoxi) fosforil) amino) propanoato de (S) isopropilo.
61. Un proceso para preparar 2- ( ( (S) - ( ( (2R, 3R, 4R, 5R) -5- (2, 4-dioxo-3, 4-dihifropirimidin-1 (2H) -il) -4-fluoro-3-hidroxi-4-metiltetrahidrofuran-2-il)metoxi) (fenoxi) fosforil) amino) propanoato de (S) -isopropilo sustancialmente puro, caracterizado porque comprende: Obtener 2- ( ( (S) - ( ( (2R, 3R, 4R, 5R) -5- (2, 4-dioxo-3, 4-dihidropirimidin-1 (2H) -il) -4-fluoro-3-hidroxi-4-metiltetrahidrofuran-2-ll)metoxi) (fenoxi) fosforil) amino) propanoato de (S) -isopropilo de conformidad con el proceso de la reivindicación 53, y cristalizar el ya formado 2- ( ( (S ) - ( ( (2R, 3R, 4R, 5R) -5- (2, -dioxo-3, 4-dihidropirimidin-l (2H) -il) -4-fluoro-3-hidroxi-4-metiltetrahidrofuran-2- 1 ) metoxi ) (fenoxi) fosforil) amino) propanoato de (S) -isopropilo.
MX2012011171A 2010-03-31 2011-03-31 Fosforamidatos de nucleosido. MX2012011171A (es)

Applications Claiming Priority (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US31954810P 2010-03-31 2010-03-31
US31951310P 2010-03-31 2010-03-31
US12/783,680 US8642756B2 (en) 2009-05-20 2010-05-20 Nucleoside phosphoramidates
PCT/US2011/030725 WO2011123645A2 (en) 2010-03-31 2011-03-31 Nucleoside phosphoramidates

Publications (1)

Publication Number Publication Date
MX2012011171A true MX2012011171A (es) 2013-02-01

Family

ID=44354065

Family Applications (3)

Application Number Title Priority Date Filing Date
MX2014005752A MX350725B (es) 2010-03-31 2011-03-31 Fosforamidatos de nucleosido.
MX2012011324A MX2012011324A (es) 2010-03-31 2011-03-31 Sintesis estereoselectiva de activos que contienen fosforo.
MX2012011171A MX2012011171A (es) 2010-03-31 2011-03-31 Fosforamidatos de nucleosido.

Family Applications Before (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
MX2014005752A MX350725B (es) 2010-03-31 2011-03-31 Fosforamidatos de nucleosido.
MX2012011324A MX2012011324A (es) 2010-03-31 2011-03-31 Sintesis estereoselectiva de activos que contienen fosforo.

Country Status (37)

Country Link
US (1) US8859756B2 (es)
EP (3) EP2752422B1 (es)
JP (3) JP6058528B2 (es)
KR (2) KR101759369B1 (es)
CN (3) CN102906102A (es)
AP (2) AP3515A (es)
AR (2) AR080870A1 (es)
AU (2) AU2011235112B2 (es)
BR (2) BR112012024884A2 (es)
CA (1) CA2794671C (es)
CL (2) CL2011000716A1 (es)
CO (2) CO6630167A2 (es)
CR (2) CR20120532A (es)
CY (1) CY1119273T1 (es)
DK (2) DK2552930T3 (es)
EA (2) EA026341B9 (es)
EC (1) ECSP12012282A (es)
ES (5) ES2900773T3 (es)
HK (4) HK1178171A1 (es)
HR (2) HRP20151075T1 (es)
HU (2) HUE034239T2 (es)
IL (2) IL222099A (es)
LT (1) LT2609923T (es)
MX (3) MX350725B (es)
NZ (1) NZ603232A (es)
PE (2) PE20130183A1 (es)
PL (1) PL2552930T3 (es)
PT (4) PT2752422T (es)
RS (1) RS54368B1 (es)
SG (3) SG184323A1 (es)
SI (1) SI3290428T1 (es)
SM (1) SMT201500285B (es)
TW (2) TW201139457A (es)
UA (1) UA122959C2 (es)
UY (1) UY33311A (es)
WO (2) WO2011123645A2 (es)
ZA (3) ZA201207800B (es)

Families Citing this family (159)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
MY164523A (en) 2000-05-23 2017-12-29 Univ Degli Studi Cagliari Methods and compositions for treating hepatitis c virus
CN1849142A (zh) 2002-11-15 2006-10-18 埃迪尼克斯(开曼)有限公司 2′－支链核苷和黄病毒突变
EP2345661A1 (en) 2003-05-30 2011-07-20 Pharmasset, Inc. Modified fluorinated nucleoside analogues
US7964580B2 (en) 2007-03-30 2011-06-21 Pharmasset, Inc. Nucleoside phosphoramidate prodrugs
US8173621B2 (en) 2008-06-11 2012-05-08 Gilead Pharmasset Llc Nucleoside cyclicphosphates
AU2009329872B2 (en) 2008-12-23 2016-07-07 Gilead Pharmasset Llc Synthesis of purine nucleosides
AR074897A1 (es) 2008-12-23 2011-02-23 Pharmasset Inc Fosforamidatos de nucleosidos
SG172361A1 (en) 2008-12-23 2011-07-28 Pharmasset Inc Nucleoside analogs
US8618076B2 (en) 2009-05-20 2013-12-31 Gilead Pharmasset Llc Nucleoside phosphoramidates
TWI583692B (zh) * 2009-05-20 2017-05-21 基利法瑪席特有限責任公司 核苷磷醯胺
SI2480559T1 (sl) 2009-09-21 2013-10-30 Gilead Sciences, Inc. Postopki in intermediati za pripravo 1'-ciano-karbanukleozidnih analogov
EP2752422B1 (en) 2010-03-31 2017-08-16 Gilead Pharmasset LLC Stereoselective synthesis of phosphorus containing actives
KR20200052384A (ko) * 2010-07-19 2020-05-14 길리애드 사이언시즈, 인코포레이티드 부분입체 이성질성으로 순수한 포스포라미데이트 전구약물의 제조 방법
PT2595980E (pt) 2010-07-22 2014-11-27 Gilead Sciences Inc Métodos e compostos para tratar infeções pelo vírus da família paramyxoviridae
ES2716158T3 (es) 2010-11-30 2019-06-10 Gilead Pharmasset Llc 2'-spiro-nucleótidos para el tratamiento de hepatitis C
CA2822037A1 (en) 2010-12-20 2012-06-28 Gilead Sciences, Inc. Methods for treating hcv
WO2012154321A1 (en) * 2011-03-31 2012-11-15 Idenix Pharmaceuticals, Inc. Compounds and pharmaceutical compositions for the treatment of viral infections
TW201329096A (zh) 2011-09-12 2013-07-16 Idenix Pharmaceuticals Inc 經取代羰氧基甲基磷酸醯胺化合物及用於治療病毒感染之藥學組成物
MD4589C1 (ro) 2011-09-16 2019-03-31 Gilead Pharmasset Llc Compoziţie farmaceutică cu conţinut de sofosbuvir şi utilizarea acesteia în tratamentul hepatitei virale C
EP2768838A1 (en) 2011-10-14 2014-08-27 IDENIX Pharmaceuticals, Inc. Substituted 3',5'-cyclic phosphates of purine nucleotide compounds and pharmaceutical compositions for the treatment of viral infections
GB2515942A (en) * 2011-10-21 2015-01-07 Abbvie Inc Combination treatment (e.g. with ABT-072 or ABT-333) of DAAs for use in treating HCV
US8492386B2 (en) 2011-10-21 2013-07-23 Abbvie Inc. Methods for treating HCV
US8466159B2 (en) 2011-10-21 2013-06-18 Abbvie Inc. Methods for treating HCV
US8853176B2 (en) 2011-10-21 2014-10-07 Abbvie Inc. Methods for treating HCV
US8889159B2 (en) 2011-11-29 2014-11-18 Gilead Pharmasset Llc Compositions and methods for treating hepatitis C virus
JP5899327B2 (ja) 2011-11-29 2016-04-06 ギリアド ファーマセット エルエルシー Ｃ型肝炎ウイルスを処置するための組成物および方法
WO2013177195A1 (en) 2012-05-22 2013-11-28 Idenix Pharmaceuticals, Inc. 3',5'-cyclic phosphate prodrugs for hcv infection
EP2852604B1 (en) 2012-05-22 2017-04-12 Idenix Pharmaceuticals LLC 3',5'-cyclic phosphoramidate prodrugs for hcv infection
NZ702744A (en) 2012-05-22 2016-12-23 Idenix Pharmaceuticals Llc D-amino acid compounds for liver disease
UY34824A (es) 2012-05-25 2013-11-29 Janssen R & D Ireland Nucleósidos de espirooxetano de uracilo
KR20150027155A (ko) 2012-07-03 2015-03-11 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 바이러스 감염의 치료를 위한 뉴클레오시드 화합물의 부분입체이성질체적으로 풍부한 포스포르아미데이트 유도체의 제조 방법
US9192621B2 (en) 2012-09-27 2015-11-24 Idenix Pharmaceuticals Llc Esters and malonates of SATE prodrugs
EA030189B8 (ru) 2012-10-08 2018-10-31 Иденикс Фармасьютикалз Ллс Аналоги 2'-хлоронуклеозидов для инфекции вгс
US10723754B2 (en) 2012-10-22 2020-07-28 Idenix Pharmaceuticals Llc 2′,4′-bridged nucleosides for HCV infection
WO2014099941A1 (en) 2012-12-19 2014-06-26 Idenix Pharmaceuticals, Inc. 4'-fluoro nucleosides for the treatment of hcv
NZ625087A (en) 2013-01-31 2017-05-26 Gilead Pharmasset Llc Combination formulation of two antiviral compounds
US9309275B2 (en) 2013-03-04 2016-04-12 Idenix Pharmaceuticals Llc 3′-deoxy nucleosides for the treatment of HCV
US9339541B2 (en) 2013-03-04 2016-05-17 Merck Sharp & Dohme Corp. Thiophosphate nucleosides for the treatment of HCV
EP2970357A1 (en) 2013-03-13 2016-01-20 IDENIX Pharmaceuticals, Inc. Amino acid phosphoramidate pronucleotides of 2'-cyano, azido and amino nucleosides for the treatment of hcv
US9187515B2 (en) 2013-04-01 2015-11-17 Idenix Pharmaceuticals Llc 2′,4′-fluoro nucleosides for the treatment of HCV
US20140309164A1 (en) 2013-04-12 2014-10-16 Achillion Pharmaceuticals, Inc. Deuterated nucleoside prodrugs useful for treating hcv
US10005779B2 (en) 2013-06-05 2018-06-26 Idenix Pharmaceuticals Llc 1′,4′-thio nucleosides for the treatment of HCV
WO2015017713A1 (en) 2013-08-01 2015-02-05 Idenix Pharmaceuticals, Inc. D-amino acid phosphoramidate pronucleotides of halogeno pyrimidine compounds for liver disease
ES2900570T3 (es) 2013-08-27 2022-03-17 Gilead Pharmasset Llc Formulación de combinación de dos compuestos antivirales
CN104650171A (zh) * 2013-11-25 2015-05-27 天津市汉康医药生物技术有限公司 索氟布韦倍半水合物化合物
TW201609785A (zh) * 2013-12-23 2016-03-16 吉李德製藥公司 固體型之抗病毒化合物
WO2015126995A1 (en) 2014-02-20 2015-08-27 Ratiopharm Gmbh Solid state forms of sofosbuvir
CN103804446A (zh) * 2014-02-27 2014-05-21 苏州东南药业股份有限公司 一种3,5-二苯甲酰基-2-去氧-2-氟-2甲基-D-核糖-γ-内酯的制备方法
RU2016142819A (ru) 2014-04-03 2018-05-10 Сандоз Аг Твердая композиция, содержащая аморфный софосбувир
CZ307789B6 (cs) * 2014-04-15 2019-05-09 Zentiva, K.S. Způsob výroby biologicky účinných fosforamidátových léčiv
WO2015161137A1 (en) 2014-04-16 2015-10-22 Idenix Pharmaceuticals, Inc. 3'-substituted methyl or alkynyl nucleosides for the treatment of hcv
EP3845221B1 (en) 2014-06-13 2023-12-13 Ratiopharm GmbH Solid state forms of sofosbuvir
CN105273022A (zh) * 2014-06-16 2016-01-27 深圳翰宇药业股份有限公司 一种索非布韦中间体以及由其制备索非布韦的方法
CN105267232A (zh) * 2014-06-30 2016-01-27 康普药业股份有限公司 一种用于治疗丙型肝炎的药物制剂及其制备方法
CZ2014502A3 (cs) 2014-07-17 2016-01-27 Zentiva, K.S. Nová forma sofosbuviru a způsob její přípravy
CN104151352B (zh) * 2014-07-23 2017-05-10 上海彩迩文生化科技有限公司 一种索非布韦的中间体的制备方法
MX2017001459A (es) * 2014-07-31 2017-05-23 Sandoz Ag Sintesis de fosforamidatos.
TW201609709A (zh) * 2014-08-01 2016-03-16 Ｈｃ製藥公司 呈晶形之索非布弗（Ｓｏｆｏｓｂｕｖｉｒ）及其製備方法
CN104130302B (zh) * 2014-08-08 2017-02-15 乳源东阳光药业有限公司 一种核苷药物的晶型及其制备方法
WO2016023906A1 (en) * 2014-08-13 2016-02-18 Sandoz Ag A crystalline form of sofosbuvir
WO2016023905A1 (en) * 2014-08-13 2016-02-18 Sandoz Ag New and efficient process for the preparation of crystalline form 6 of sofosbuvir
CN104230985B (zh) * 2014-09-01 2017-01-18 北京天弘天达医药科技有限公司 (s)‑2‑[(s)‑(4‑硝基‑苯氧基)‑苯氧基‑磷酰基氨基]丙酸异丙酯的制备方法
WO2016042576A1 (en) 2014-09-16 2016-03-24 Cadila Healthcare Limited Co-crystal of sofosbuvir and amino acid and process for preparation thereof
CN104974205A (zh) * 2014-09-19 2015-10-14 苏州晶云药物科技有限公司 索非布韦的晶型a及其制备方法
CN105461774B (zh) * 2014-09-30 2020-11-24 江苏豪森药业集团有限公司 索非布韦的制备方法
CN105461773B (zh) * 2014-09-30 2020-12-01 江苏豪森药业集团有限公司 索非布韦的制备方法及其中间体
US10251903B2 (en) * 2014-10-20 2019-04-09 Merck Sharp & Dohme Corp. Process for making nucleoside phosphoramidate compounds
TWI698444B (zh) 2014-10-29 2020-07-11 美商基利科學股份有限公司 製備核糖苷的方法
CN104447924B (zh) * 2014-11-07 2016-09-28 南京旗昌医药科技有限公司 索氟布韦的晶型及其制备方法
CN104478976A (zh) * 2014-11-12 2015-04-01 苏州明锐医药科技有限公司 索非布韦的制备方法
CN105732751A (zh) * 2014-12-09 2016-07-06 北京万生药业有限责任公司 索非布韦新晶体
JP6735751B2 (ja) * 2014-12-15 2020-08-05 エモリー ユニバーシティー Ｂ型肝炎ウイルスの治療のためのホスホルアミデート
WO2016098123A2 (en) * 2014-12-16 2016-06-23 Laurus Labs Private Ltd A recycling process for preparing (s)-2-[(substituted-phenoxy)-phenoxy- phosphorylamino] propionic acid isopropyl ester diastereomers
WO2016097173A1 (en) * 2014-12-17 2016-06-23 Sandoz Ag A process for preparing a crystalline form of sofosbuvir
CN105801645B (zh) * 2014-12-29 2019-01-04 浙江海正药业股份有限公司 制备索非布韦晶型6的方法
CN104558079B (zh) * 2015-01-30 2017-06-16 南京正大天晴制药有限公司 一种高纯度索氟布韦化合物及有关物质的制备方法
CN106132972B (zh) * 2015-02-06 2018-08-31 银杏树药业(苏州)有限公司 用于治疗hcv感染的氨基磷酸酯
WO2016128453A1 (en) 2015-02-13 2016-08-18 Sandoz Ag Pharmaceutical compositions comprising ledipasvir and sofosbuvir
CN105985394B (zh) * 2015-02-26 2020-09-22 石药集团中奇制药技术（石家庄）有限公司 一种索非布韦新晶型及其制备方法
RU2764767C2 (ru) 2015-03-06 2022-01-21 Атеа Фармасьютикалс, Инк. β-D-2'-ДЕЗОКСИ-2'-α-ФТОР-2'-β-С-ЗАМЕЩЕННЫЕ-2-МОДИФИЦИРОВАННЫЕ-N6-ЗАМЕЩЕННЫЕ ПУРИНОВЫЕ НУКЛЕОТИДЫ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ВЫЗВАННЫХ HCV ЗАБОЛЕВАНИЙ
CN104829673B (zh) * 2015-03-12 2017-10-27 南京旗昌医药科技有限公司 一种索氟布韦晶型6的制备方法
CN106146588A (zh) * 2015-03-26 2016-11-23 常州制药厂有限公司 一种索非布韦的制备方法
WO2016151542A1 (en) 2015-03-26 2016-09-29 Quimica Sintetica, S.A. Nucleoside phosphoramidates useful for the treatment of viral infections and preparation thereof
WO2016156512A1 (en) 2015-04-01 2016-10-06 Sandoz Ag A process for preparing a crystalline form of sofosbuvir
WO2016181313A1 (en) 2015-05-11 2016-11-17 Lupin Limited A process for the preparation of sofosbuvir intermediates & its polymorph
CN104829668B (zh) * 2015-05-19 2017-05-31 江苏福瑞生物医药有限公司 一种核苷氨基磷酸酯类药物母液回收的方法
CN107646037A (zh) 2015-05-26 2018-01-30 桑多斯股份公司 选择性合成核苷氨基磷酸酯类化合物的方法
US10676498B2 (en) 2015-06-03 2020-06-09 Teva Pharmaceuticals International Gmbh Processes for the preparation of sofosbuvir and intermediates thereof
CN107771179A (zh) 2015-06-22 2018-03-06 桑多斯股份公司 氨基磷酸酯的合成
CZ2015443A3 (cs) 2015-06-26 2017-01-04 Zentiva, K.S. Farmaceutická formulace sofosbuviru
CN106397515B (zh) * 2015-07-28 2021-05-11 广东东阳光药业有限公司 一种改良的索菲布韦制备方法
WO2017029408A1 (en) 2015-08-20 2017-02-23 Ratiopharm Gmbh Solid state forms of sofosbuvir
CN108350016B (zh) * 2015-09-02 2021-07-27 艾伯维公司 抗病毒四氢呋喃衍生物
CN106543220A (zh) * 2015-09-16 2017-03-29 博瑞生物医药（苏州）股份有限公司 氨基磷酸酯化合物及其制备方法和晶体
CN105218607A (zh) * 2015-09-16 2016-01-06 重庆康施恩化工有限公司 抗丙肝病毒药物索氟布韦中间体制备方法
CN106543252A (zh) * 2015-09-16 2017-03-29 博瑞生物医药（苏州）股份有限公司 核苷氨基磷酸酯类前药的制备方法及其中间体
CN106539810B (zh) * 2015-09-16 2021-03-09 济南高合医疗科技有限公司 一种富集了nuc-1031单一异构体的组合物及其制备方法和用途
CA2998189C (en) 2015-09-16 2021-08-03 Gilead Sciences, Inc. Methods for treating arenaviridae and coronaviridae virus infections
US20180271890A1 (en) 2015-10-07 2018-09-27 Sandoz Ag Solid Pharmaceutical Composition Comprising Amorphous Sofosbuvir
CN106674320B (zh) * 2015-11-06 2020-04-21 博瑞生物医药（苏州）股份有限公司 一种hcv的治疗药物
CN106674319B (zh) * 2015-11-06 2020-04-21 博瑞生物医药（苏州）股份有限公司 一种治疗丙肝的化合物
CN106674318B (zh) * 2015-11-06 2020-04-21 博瑞生物医药（苏州）股份有限公司 一种ns5b聚合酶抑制剂
RS62593B1 (sr) 2015-12-11 2021-12-31 NuCana plc Dijastereoselektivna sinteza derivata fosfata i proleka gemcitabina nuc-1031
US10738071B2 (en) * 2016-03-17 2020-08-11 Mylan Laboratories Limited Polymorphic forms of sofosbuvir
WO2017189978A1 (en) 2016-04-28 2017-11-02 Emory University Alkyne containing nucleotide and nucleoside therapeutic compositions and uses related thereto
CN107337702B (zh) * 2016-04-29 2021-11-05 江苏豪森药业集团有限公司 结晶型hcv抑制剂及其制备方法和应用
CZ2016257A3 (cs) 2016-05-05 2017-11-15 Zentiva, K.S. Amorfní forma sofosbuviru, způsob její přípravy a její stabilizace
MX2018014377A (es) 2016-05-27 2019-03-14 Gilead Sciences Inc Metodos para tratar infecciones por virus de hepatitis b usando inhibidores de proteina no estructural 5a (ns5a), proteina no estructural 5b (ns5b) o proteina no estructural 3 (ns3).
BR102017011025A2 (pt) 2016-06-02 2017-12-19 Gilead Pharmasset Llc Formulation of combination of three antiviral compounds
CN106083963A (zh) * 2016-06-08 2016-11-09 上海现代制药海门有限公司 一种索非布韦晶型6的制备方法
CN107522763B (zh) * 2016-06-22 2020-10-02 博瑞生物医药（苏州）股份有限公司 (2′r)-2′-脱氧-2′-氟-2′-甲基脲苷的制备方法
US11364257B2 (en) 2016-06-24 2022-06-21 Emory University Phosphoramidates for the treatment of hepatitis B virus
US10239910B2 (en) 2016-07-20 2019-03-26 Optimus Drugs (P) Limited Process for the preparation of sofosbuvir
JP2019530645A (ja) 2016-08-12 2019-10-24 サンド・アクチエンゲゼルシヤフト 非晶質ソホスブビルを含む固体医薬組成物
US20190169221A1 (en) * 2016-08-12 2019-06-06 Janssen Biopharma, Inc. Substituted nucleosides, nucleotides and analogs thereof
US20190185507A1 (en) 2016-08-19 2019-06-20 Sandoz Ag Sofosbuvir Derivatives for the Treatment of Hepatitis C
PL3512863T3 (pl) 2016-09-07 2022-04-04 Atea Pharmaceuticals, Inc. 2'-Podstawione-N6-podstawione nukleotydy purynowe do leczenia zakażeń wirusem RNA
CN106432328B (zh) * 2016-09-14 2019-03-22 江苏福瑞生物医药有限公司 一种索非布韦中间体的制备方法
CN110114071B (zh) 2016-11-07 2023-07-04 爱彼特生物制药公司 含有取代的吡啶酮的三环化合物以及使用其的方法
MA46839A (fr) * 2016-11-18 2021-03-24 Neurovive Pharmaceutical Ab Promédicaments hépatiques d'ionophores de protons mitochondriaux
CN108084237A (zh) * 2016-11-23 2018-05-29 广东东阳光药业有限公司 索非布韦的一水合物及其制备方法
CN106674321A (zh) * 2016-12-19 2017-05-17 上海博志研新药物技术有限公司 索非布韦晶型6的制备方法
CN106699740A (zh) * 2016-12-26 2017-05-24 上海博志研新药物技术有限公司 一种雷迪帕韦和索非布韦复方片剂及其制备方法和应用
SG10202012214WA (en) 2017-02-01 2021-01-28 Atea Pharmaceuticals Inc Nucleotide hemi-sulfate salt for the treatment of hepatitis c virus
CN110869028B (zh) 2017-03-14 2023-01-20 吉利德科学公司 治疗猫冠状病毒感染的方法
WO2018172852A1 (en) 2017-03-21 2018-09-27 Arbutus Biopharma Corporation Substituted dihydroindene-4-carboxamides and analogs thereof, and methods using same
CN115403626A (zh) 2017-05-01 2022-11-29 吉利德科学公司 新结晶形式
GB201709471D0 (en) 2017-06-14 2017-07-26 Nucana Biomed Ltd Diastereoselective synthesis of hosphate derivatives
CN107200757B (zh) * 2017-06-29 2020-06-02 上海泓博智源医药股份有限公司 一种桥环氟代酯及其制备方法和应用
US10675296B2 (en) 2017-07-11 2020-06-09 Gilead Sciences, Inc. Compositions comprising an RNA polymerase inhibitor and cyclodextrin for treating viral infections
CN107253971A (zh) * 2017-07-18 2017-10-17 江苏正济药业股份有限公司 一种索非布韦的制备方法
CN107449842A (zh) * 2017-07-25 2017-12-08 江苏工程职业技术学院 一种正相高效液相色谱法测定索氟布韦原料药对映异构体含量的方法
CN107402267A (zh) * 2017-07-25 2017-11-28 江苏工程职业技术学院 一种正相高效液相色谱法测定索氟布韦原料药非对映异构体及杂质含量的方法
EP3661944A1 (en) 2017-08-03 2020-06-10 Sandoz AG Sofosbuvir hydrate
WO2019030387A1 (en) 2017-08-11 2019-02-14 Sandoz Ag SOLID COMPOSITION COMPRISING AMORPHOUS SOFOSBUVIR AND AMORPHOUS DACLATASVIR
WO2019200005A1 (en) 2018-04-10 2019-10-17 Atea Pharmaceuticals, Inc. Treatment of hcv infected patients with cirrhosis
CN108840908A (zh) * 2018-07-10 2018-11-20 刘凤娟 特拉匹韦的一种新晶型及其制备方法
CN109369757B (zh) * 2018-11-12 2020-12-29 浙江外国语学院 一种制备索非布韦晶型6的方法
CN111233956B (zh) * 2018-11-29 2023-04-28 北京凯因科技股份有限公司 索非布韦的晶型及其制备方法
TWI827760B (zh) 2018-12-12 2024-01-01 加拿大商愛彼特生物製藥公司 經取代之芳基甲基脲類及雜芳基甲基脲類、其類似物及其使用方法
GB2580963B (en) 2019-02-01 2021-03-31 Hemispherian As Cancer therapies
PE20220563A1 (es) 2019-07-10 2022-04-13 Cybrexa 2 Inc Conjugados peptidicos de citotoxinas como terapeuticos
CR20220057A (es) 2019-07-10 2022-07-19 Cybrexa 3 Inc Conjugados peptídicos de agentes dirigidos a microtúbulos como terapéuticos
CN110981910B (zh) * 2019-12-23 2023-03-24 南京正大天晴制药有限公司 一种用于治疗丙肝的无引湿性低变异性新晶型
CN111072742B (zh) * 2019-12-23 2022-12-02 南京正大天晴制药有限公司 一种治疗丙肝药物的新晶型及其组合物
CN111040010A (zh) * 2019-12-23 2020-04-21 上海红蓝医药科技有限公司 一种索非布韦中间体的合成方法
RU2745293C1 (ru) * 2019-12-26 2021-03-23 Общество С Ограниченной Ответственностью "Технология Лекарств" Способ получения кристаллической формы 8 софосбувира (варианты)
WO2021154687A1 (en) 2020-01-27 2021-08-05 Gilead Sciences, Inc. Methods for treating sars cov-2 infections
TWI775313B (zh) 2020-02-18 2022-08-21 美商基利科學股份有限公司 抗病毒化合物
TWI791193B (zh) 2020-02-18 2023-02-01 美商基利科學股份有限公司 抗病毒化合物
CN111303226B (zh) * 2020-02-25 2021-11-23 石家庄四药有限公司 利用索非布韦晶型i制备索非布韦晶型vi的方法
US10874687B1 (en) 2020-02-27 2020-12-29 Atea Pharmaceuticals, Inc. Highly active compounds against COVID-19
CN115298181A (zh) 2020-03-12 2022-11-04 吉利德科学公司 制备1’-氰基核苷的方法
EP4132651A1 (en) 2020-04-06 2023-02-15 Gilead Sciences, Inc. Inhalation formulations of 1'-cyano substituted carbanucleoside analogs
WO2021203409A1 (zh) * 2020-04-10 2021-10-14 南京正大天晴制药有限公司 一种用于治疗丙肝的无引湿性低变异性新晶型
CA3179226A1 (en) 2020-05-29 2021-12-02 Tomas Cihlar Remdesivir treatment methods
CN115996928A (zh) 2020-06-24 2023-04-21 吉利德科学公司 1’-氰基核苷类似物及其用途
PE20231983A1 (es) 2020-08-27 2023-12-12 Gilead Sciences Inc Compuestos y metodos para el tratamiento de infecciones virales
WO2023167944A1 (en) 2022-03-02 2023-09-07 Gilead Sciences, Inc. Compounds and methods for treatment of viral infections

Family Cites Families (446)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US2512572A (en) 1950-06-20 Substituted pteridines and method
US2563707A (en) 1947-12-12 1951-08-07 American Cyanamid Co Process for preparing pteridines
GB768821A (en) 1954-05-17 1957-02-20 Gruenenthal Chemie Novel products of the amino-piperidine-2, 6-dione series
US2759300A (en) 1954-08-11 1956-08-21 Pest Control Ltd Method and means for introducing a predetermined amount of a poisonous material beneath the surface of the soil
US3053865A (en) 1958-03-19 1962-09-11 Merck & Co Inc Novel 16-alkyl and 16-alkylene steroids and processes
US3116282A (en) 1960-04-27 1963-12-31 Upjohn Co Pyrimidine nucleosides and process
US3097137A (en) 1960-05-19 1963-07-09 Canadian Patents Dev Vincaleukoblastine
US3104246A (en) 1961-08-18 1963-09-17 Roussel Uclaf Process of preparation of beta-methasone
FR1533151A (fr) 1962-05-18 1968-07-19 Rhone Poulenc Sa Nouvel antibiotique et sa préparation
NL6613143A (es) 1965-09-21 1967-03-22
YU33730B (en) 1967-04-18 1978-02-28 Farmaceutici Italia Process for preparing a novel antibiotic substance and salts thereof
US3480613A (en) 1967-07-03 1969-11-25 Merck & Co Inc 2-c or 3-c-alkylribofuranosyl - 1-substituted compounds and the nucleosides thereof
CH514578A (de) 1968-02-27 1971-10-31 Sandoz Ag Verfahren zur Herstellung von Glucosiden
JPS5246150Y2 (es) 1971-03-23 1977-10-20
US3798209A (en) 1971-06-01 1974-03-19 Icn Pharmaceuticals 1,2,4-triazole nucleosides
USRE29835E (en) 1971-06-01 1978-11-14 Icn Pharmaceuticals 1,2,4-Triazole nucleosides
US3994974A (en) 1972-02-05 1976-11-30 Yamanouchi Pharmaceutical Co., Ltd. α-Aminomethylbenzyl alcohol derivatives
US3852267A (en) 1972-08-04 1974-12-03 Icn Pharmaceuticals Phosphoramidates of 3{40 ,5{40 -cyclic purine nucleotides
ZA737247B (en) 1972-09-29 1975-04-30 Ayerst Mckenna & Harrison Rapamycin and process of preparation
BE799805A (fr) 1973-05-23 1973-11-21 Toyo Jozo Kk Nouvel agent immunosuppresseur et sa preparation
US3991045A (en) 1973-05-30 1976-11-09 Asahi Kasei Kogyo Kabushiki Kaisha N4 -acylarabinonucleosides
JPS535678B2 (es) 1973-05-30 1978-03-01
US3888843A (en) 1973-06-12 1975-06-10 Toyo Jozo Kk 4-carbamoyl-1-' -d-ribofuranosylimidazolium-5-olate
SU508076A1 (ru) 1973-07-05 1976-10-05 Институт По Изысканию Новых Антибиотиков Амн Ссср Способ получени карминомицина 1
GB1457632A (en) 1974-03-22 1976-12-08 Farmaceutici Italia Adriamycins
US3923785A (en) 1974-04-22 1975-12-02 Parke Davis & Co (R)-3-(2-deoxy-{62 -D-erythro-pentofuranosyl)-3,6,7,8-tetrahydroimidazo{8 4,5-d{9 {8 1,3{9 diazepin-8-ol
GB1467383A (en) 1974-06-12 1977-03-16 Farmaceutici Italia Daunomycin analogues
US4199574A (en) 1974-09-02 1980-04-22 Burroughs Wellcome Co. Methods and compositions for treating viral infections and guanine acyclic nucleosides
GB1523865A (en) 1974-09-02 1978-09-06 Wellcome Found Purine compunds and salts thereof
GB1509875A (en) 1976-06-14 1978-05-04 Farmaceutici Italia Optically active anthracyclinones and anthracycline glycosides
SE445996B (sv) 1977-08-15 1986-08-04 American Cyanamid Co Nya atrakinonderivat
US4197249A (en) 1977-08-15 1980-04-08 American Cyanamid Company 1,4-Bis(substituted-amino)-5,8-dihydroxyanthraquinones and leuco bases thereof
US4203898A (en) 1977-08-29 1980-05-20 Eli Lilly And Company Amide derivatives of VLB, leurosidine, leurocristine and related dimeric alkaloids
US4210745A (en) 1978-01-04 1980-07-01 The United States Of America As Represented By The Department Of Health, Education And Welfare Procedure for the preparation of 9-β-D-arabinofuranosyl-2-fluoroadenine
US4303785A (en) 1978-08-05 1981-12-01 Zaidan Hojin Biseibutsu Kagaku Kenkyu Kai Antitumor anthracycline antibiotics
US4307100A (en) 1978-08-24 1981-12-22 Agence Nationale De Valorisation De La Recherche (Anvar) Nor bis-indole compounds usable as medicaments
DK160616C (da) 1979-02-03 1991-09-02 Zaidan Hojin Biseibutsu Fremgangsmaade til fremstilling af anthracyclinderivater eller syreadditionssalte deraf
EP0062503A1 (en) 1981-04-03 1982-10-13 Eli Lilly And Company Benzothiophene compounds and process for preparing them
US4418068A (en) 1981-04-03 1983-11-29 Eli Lilly And Company Antiestrogenic and antiandrugenic benzothiophenes
US4355032B2 (en) 1981-05-21 1990-10-30 9-(1,3-dihydroxy-2-propoxymethyl)guanine as antiviral agent
JPS58219196A (ja) 1982-06-15 1983-12-20 Nippon Kayaku Co Ltd ４′−デメチル−エピポドフイロトキシン−β−Ｄ−エチリデングルコシドの製造法
JPS5976099A (ja) 1982-10-22 1984-04-28 Sumitomo Chem Co Ltd アミノナフタセン誘導体とその製造方法
IT1155446B (it) 1982-12-23 1987-01-28 Erba Farmitalia Procedimento per la purificazione di glucosidi antraciclinonici mediante adsobimento selettivo su resine
US4526988A (en) 1983-03-10 1985-07-02 Eli Lilly And Company Difluoro antivirals and intermediate therefor
JPS6019790A (ja) 1983-07-14 1985-01-31 Yakult Honsha Co Ltd 新規なカンプトテシン誘導体
EP0141927B1 (en) 1983-08-18 1991-10-30 Beecham Group Plc Antiviral guanine derivatives
JPS6051189A (ja) 1983-08-30 1985-03-22 Sankyo Co Ltd チアゾリジン誘導体およびその製造法
US4894366A (en) 1984-12-03 1990-01-16 Fujisawa Pharmaceutical Company, Ltd. Tricyclo compounds, a process for their production and a pharmaceutical composition containing the same
CA1269659A (en) 1984-08-06 1990-05-29 Brigham Young University Method for the production of 2'-deoxyadenosine compounds
US4760137A (en) 1984-08-06 1988-07-26 Brigham Young University Method for the production of 2'-deoxyadenosine compounds
US5736155A (en) 1984-08-08 1998-04-07 The Liposome Company, Inc. Encapsulation of antineoplastic agents in liposomes
US5077056A (en) 1984-08-08 1991-12-31 The Liposome Company, Inc. Encapsulation of antineoplastic agents in liposomes
NL8403224A (nl) 1984-10-24 1986-05-16 Oce Andeno Bv Dioxafosforinanen, de bereiding ervan en de toepassing voor het splitsen van optisch actieve verbindingen.
DK173350B1 (da) 1985-02-26 2000-08-07 Sankyo Co Thiazolidinderivater, deres fremstilling og farmaceutisk paæparat indeholdende dem
US5223263A (en) 1988-07-07 1993-06-29 Vical, Inc. Liponucleotide-containing liposomes
US4724232A (en) 1985-03-16 1988-02-09 Burroughs Wellcome Co. Treatment of human viral infections
CS263951B1 (en) 1985-04-25 1989-05-12 Antonin Holy 9-(phosponylmethoxyalkyl)adenines and method of their preparation
HU196607B (en) 1985-05-15 1988-12-28 Wellcome Found Process for producing dideoxy-nucleosides and pharmaceutics comprising such compounds
US5246937A (en) 1985-09-18 1993-09-21 Beecham Group P.L.C. Purine derivatives
US4751221A (en) 1985-10-18 1988-06-14 Sloan-Kettering Institute For Cancer Research 2-fluoro-arabinofuranosyl purine nucleosides
US4797285A (en) 1985-12-06 1989-01-10 Yissum Research And Development Company Of The Hebrew University Of Jerusalem Lipsome/anthraquinone drug composition and method
NZ219974A (en) 1986-04-22 1989-08-29 Goedecke Ag N-(2'-aminophenyl)-benzamide derivatives, process for their preparation and their use in the control of neoplastic diseases
FR2601675B1 (fr) 1986-07-17 1988-09-23 Rhone Poulenc Sante Derives du taxol, leur preparation et les compositions pharmaceutiques qui les contiennent
US4753935A (en) 1987-01-30 1988-06-28 Syntex (U.S.A.) Inc. Morpholinoethylesters of mycophenolic acid and pharmaceutical compositions
US5154930A (en) 1987-03-05 1992-10-13 The Liposome Company, Inc. Pharmacological agent-lipid solution preparation
EP0303697B1 (en) 1987-03-09 1997-10-01 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Derivatives of physiologically active substance k-252
GB8719367D0 (en) 1987-08-15 1987-09-23 Wellcome Found Therapeutic compounds
AU2526188A (en) 1987-09-22 1989-04-18 Regents Of The University Of California, The Liposomal nucleoside analogues for treating aids
US5004758A (en) 1987-12-01 1991-04-02 Smithkline Beecham Corporation Water soluble camptothecin analogs useful for inhibiting the growth of animal tumor cells
US5041426A (en) 1987-12-21 1991-08-20 Brigham Young University Immune system enhancing 3-β-d-ribofuranosylthiazolo[4,5-d]pyridimine nucleosides and nucleotides
US4880784A (en) 1987-12-21 1989-11-14 Brigham Young University Antiviral methods utilizing ribofuranosylthiazolo[4,5-d]pyrimdine derivatives
US5130421A (en) 1988-03-24 1992-07-14 Bristol-Myers Company Production of 2',3'-dideoxy-2',3'-didehydronucleosides
GB8815265D0 (en) 1988-06-27 1988-08-03 Wellcome Found Therapeutic nucleosides
IL91664A (en) 1988-09-28 1993-05-13 Yissum Res Dev Co Ammonium transmembrane gradient system for efficient loading of liposomes with amphipathic drugs and their controlled release
US6132763A (en) 1988-10-20 2000-10-17 Polymasc Pharmaceuticals Plc Liposomes
US5705363A (en) 1989-03-02 1998-01-06 The Women's Research Institute Recombinant production of human interferon τ polypeptides and nucleic acids
US5277914A (en) 1989-03-31 1994-01-11 The Regents Of The University Of California Preparation of liposome and lipid complex compositions
US5077057A (en) 1989-04-05 1991-12-31 The Regents Of The University Of California Preparation of liposome and lipid complex compositions
US5549910A (en) 1989-03-31 1996-08-27 The Regents Of The University Of California Preparation of liposome and lipid complex compositions
US5194654A (en) 1989-11-22 1993-03-16 Vical, Inc. Lipid derivatives of phosphonoacids for liposomal incorporation and method of use
US5411947A (en) 1989-06-28 1995-05-02 Vestar, Inc. Method of converting a drug to an orally available form by covalently bonding a lipid to the drug
US5013556A (en) 1989-10-20 1991-05-07 Liposome Technology, Inc. Liposomes with enhanced circulation time
US5225212A (en) 1989-10-20 1993-07-06 Liposome Technology, Inc. Microreservoir liposome composition and method
US5463092A (en) 1989-11-22 1995-10-31 Vestar, Inc. Lipid derivatives of phosphonacids for liposomal incorporation and method of use
GB8927913D0 (en) 1989-12-11 1990-02-14 Hoffmann La Roche Amino acid derivatives
US5026687A (en) 1990-01-03 1991-06-25 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services Treatment of human retroviral infections with 2',3'-dideoxyinosine alone and in combination with other antiviral compounds
US5041246A (en) 1990-03-26 1991-08-20 The Babcock & Wilcox Company Two stage variable annulus spray attemperator method and apparatus
DK0527815T3 (da) 1990-04-06 2000-11-06 Genelabs Tech Inc Hepatitis C-virus-epitop
US5091188A (en) 1990-04-26 1992-02-25 Haynes Duncan H Phospholipid-coated microcrystals: injectable formulations of water-insoluble drugs
GB9009861D0 (en) 1990-05-02 1990-06-27 Glaxo Group Ltd Chemical compounds
WO1991016920A1 (en) 1990-05-07 1991-11-14 Vical, Inc. Lipid prodrugs of salicylate and nonsteroidal anti-inflammatory drugs
KR100188801B1 (ko) 1990-05-18 1999-06-01 엥겔하르트 라피체 이속사졸-4카복스아미드 및 하이드록시알킬리덴 시아노아세트아미드 및 이들 화합물을 함유하는 약제학적 조성물
EP0531452A4 (en) 1990-05-29 1993-06-09 Vical, Inc. Synthesis of glycerol di- and triphosphate derivatives
CA2083386C (en) 1990-06-13 1999-02-16 Arnold Glazier Phosphorous prodrugs
US6060080A (en) 1990-07-16 2000-05-09 Daiichi Pharmaceutical Co., Ltd. Liposomal products
JP2599492B2 (ja) 1990-08-21 1997-04-09 第一製薬株式会社 リポソーム製剤の製造法
US5372808A (en) 1990-10-17 1994-12-13 Amgen Inc. Methods and compositions for the treatment of diseases with consensus interferon while reducing side effect
US5206244A (en) 1990-10-18 1993-04-27 E. R. Squibb & Sons, Inc. Hydroxymethyl (methylenecyclopentyl) purines and pyrimidines
US5256641A (en) 1990-11-01 1993-10-26 State Of Oregon Covalent polar lipid-peptide conjugates for immunological targeting
US5543389A (en) 1990-11-01 1996-08-06 State Of Oregon, Acting By And Through The Oregon State Board Of Higher Education On Behalf Of The Oregon Health Sciences University, A Non Profit Organization Covalent polar lipid-peptide conjugates for use in salves
US5149794A (en) 1990-11-01 1992-09-22 State Of Oregon Covalent lipid-drug conjugates for drug targeting
US5543390A (en) 1990-11-01 1996-08-06 State Of Oregon, Acting By And Through The Oregon State Board Of Higher Education, Acting For And On Behalf Of The Oregon Health Sciences University Covalent microparticle-drug conjugates for biological targeting
US5925643A (en) 1990-12-05 1999-07-20 Emory University Enantiomerically pure β-D-dioxolane-nucleosides
US5179104A (en) 1990-12-05 1993-01-12 University Of Georgia Research Foundation, Inc. Process for the preparation of enantiomerically pure β-D-(-)-dioxolane-nucleosides
JP3008226B2 (ja) 1991-01-16 2000-02-14 第一製薬株式会社 六環性化合物
US5145684A (en) 1991-01-25 1992-09-08 Sterling Drug Inc. Surface modified drug nanoparticles
IL100965A (en) 1991-02-22 1999-12-31 Univ Emory 2 - Hydroxymethyl - 5 -) 5 - Fluorocytocin - 1 - Eyal (- 1, 3 - Oxathiolane, its resolution and pharmaceuticals containing it
NZ241868A (en) 1991-03-08 1995-05-26 Univ Vermont 6,9-bis(substituted-amino)benzo[g]isoquinoline-5,10-diones, preparation and pharmaceutical compositions thereof
US5595732A (en) 1991-03-25 1997-01-21 Hoffmann-La Roche Inc. Polyethylene-protein conjugates
US5157027A (en) 1991-05-13 1992-10-20 E. R. Squibb & Sons, Inc. Bisphosphonate squalene synthetase inhibitors and method
CA2112803A1 (en) 1991-07-12 1993-01-21 Karl Y. Hostetler Antiviral liponucleosides: treatment of hepatitis b
HU9202318D0 (en) 1991-07-22 1992-10-28 Bristol Myers Squibb Co Method for preparing medical preparatives containing didesoxi-purine nucleoside
US5554728A (en) 1991-07-23 1996-09-10 Nexstar Pharmaceuticals, Inc. Lipid conjugates of therapeutic peptides and protease inhibitors
GB9116601D0 (en) 1991-08-01 1991-09-18 Iaf Biochem Int 1,3-oxathiolane nucleoside analogues
TW224053B (es) 1991-09-13 1994-05-21 Paul B Chretien
US5233031A (en) 1991-09-23 1993-08-03 University Of Rochester Phosphoramidate analogs of 2'-deoxyuridine
US5369108A (en) 1991-10-04 1994-11-29 Sloan-Kettering Institute For Cancer Research Potent inducers of terminal differentiation and methods of use thereof
US5700811A (en) 1991-10-04 1997-12-23 Sloan-Kettering Institute For Cancer Research Potent inducers of terminal differentiation and method of use thereof
DE4200821A1 (de) 1992-01-15 1993-07-22 Bayer Ag Geschmacksmaskierte pharmazeutische mittel
US5676942A (en) 1992-02-10 1997-10-14 Interferon Sciences, Inc. Composition containing human alpha interferon species proteins and method for use thereof
US5405598A (en) 1992-02-24 1995-04-11 Schinazi; Raymond F. Sensitizing agents for use in boron neutron capture therapy
JP3102945B2 (ja) 1992-02-27 2000-10-23 財団法人野田産業科学研究所 肝炎治療剤
US5610054A (en) 1992-05-14 1997-03-11 Ribozyme Pharmaceuticals, Inc. Enzymatic RNA molecule targeted against Hepatitis C virus
KR940000475A (ko) 1992-06-22 1994-01-03 리로이 휘테커 알파-아노머가 풍부한 1-할로-2-데옥시-2, 2-디플루오로-d-리보푸라노실 유도체의 제조방법
US5426183A (en) 1992-06-22 1995-06-20 Eli Lilly And Company Catalytic stereoselective glycosylation process for preparing 2'-deoxy-2',2'-difluoronucleosides and 2'-deoxy-2'-fluoronucleosides
US5256798A (en) 1992-06-22 1993-10-26 Eli Lilly And Company Process for preparing alpha-anomer enriched 2-deoxy-2,2-difluoro-D-ribofuranosyl sulfonates
US5719147A (en) 1992-06-29 1998-02-17 Merck & Co., Inc. Morpholine and thiomorpholine tachykinin receptor antagonists
US5301508A (en) 1992-08-14 1994-04-12 Rubbermaid Incorporated Thermoelectric portable container
KR100252451B1 (ko) 1992-09-01 2000-04-15 피터 지. 스트링거 뉴클레오사이드의아노머화방법
GB9221220D0 (en) 1992-10-09 1992-11-25 Sandoz Ag Organic componds
US5484926A (en) 1993-10-07 1996-01-16 Agouron Pharmaceuticals, Inc. HIV protease inhibitors
GB9226729D0 (en) 1992-12-22 1993-02-17 Wellcome Found Therapeutic combination
WO1994019012A2 (en) 1993-02-24 1994-09-01 Wang Jui H Compositions and methods of application of reactive antiviral polymers
US6180134B1 (en) 1993-03-23 2001-01-30 Sequus Pharmaceuticals, Inc. Enhanced ciruclation effector composition and method
WO1994026273A1 (en) 1993-05-12 1994-11-24 Hostetler Karl Y Acyclovir derivatives for topical use
WO1995003056A1 (fr) 1993-07-19 1995-02-02 Tokyo Tanabe Company Limited Inhibiteur de proliferation du virus de l'hepatite c
FR2707988B1 (fr) 1993-07-21 1995-10-13 Pf Medicament Nouveaux dérivés antimitotiques des alcaloïdes binaires du catharantus rosesus, leur procédé de préparation et les compositions pharmaceutiques les comprenant.
US6156501A (en) 1993-10-26 2000-12-05 Affymetrix, Inc. Arrays of modified nucleic acid probes and methods of use
US7375198B2 (en) 1993-10-26 2008-05-20 Affymetrix, Inc. Modified nucleic acid probes
US5951974A (en) 1993-11-10 1999-09-14 Enzon, Inc. Interferon polymer conjugates
PT730470E (pt) 1993-11-10 2002-08-30 Enzon Inc Conjugados melhorados de interferao-polimero
GB9324864D0 (en) 1993-12-03 1994-01-19 Minnesota Mining & Mfg Joint implants
IL111960A (en) 1993-12-17 1999-12-22 Merck & Co Inc Morpholines and thiomorpholines their preparation and pharmaceutical compositions containing them
AU6550394A (en) 1994-03-11 1995-09-25 Isis Pharmaceuticals, Inc. Novel pyrimidine nucleosides
DE4415539C2 (de) 1994-05-03 1996-08-01 Osama Dr Dr Med Omer Pflanzen mit virustatischer und antiviraler Wirkung
IL129871A (en) 1994-05-06 2003-11-23 Pharmacia & Upjohn Inc Process for preparing 4-phenyl-substituted octanoyl-oxazolidin-2-one intermediates that are useful for preparing pyran-2-ones useful for treating retroviral infections
JPH10501809A (ja) 1994-06-22 1998-02-17 ネクスター ファーマスーティカルズ，インコーポレイテッド 分子内求核置換による公知および新規２′−ヌクレオシドの新規製造方法
DE4432623A1 (de) 1994-09-14 1996-03-21 Huels Chemische Werke Ag Verfahren zur Bleichung von wäßrigen Tensidlösungen
US5738846A (en) 1994-11-10 1998-04-14 Enzon, Inc. Interferon polymer conjugates and process for preparing the same
US6391859B1 (en) 1995-01-27 2002-05-21 Emory University [5-Carboxamido or 5-fluoro]-[2′,3′-unsaturated or 3′-modified]-pyrimidine nucleosides
US5703058A (en) 1995-01-27 1997-12-30 Emory University Compositions containing 5-fluoro-2',3'-didehydro-2',3'-dideoxycytidine or a mono-, di-, or triphosphate thereof and a second antiviral agent
GB9505025D0 (en) 1995-03-13 1995-05-03 Medical Res Council Chemical compounds
GB9618952D0 (en) 1996-09-11 1996-10-23 Sandoz Ltd Process
US6504029B1 (en) 1995-04-10 2003-01-07 Daiichi Pharmaceutical Co., Ltd. Condensed-hexacyclic compounds and a process therefor
DE19514523A1 (de) 1995-04-12 1996-10-17 Schering Ag Neue Cytosin- und Cytidinderivate
AU719122B2 (en) 1995-09-27 2000-05-04 Emory University Recombinant hepatitis C virus RNA replicase
US5908621A (en) 1995-11-02 1999-06-01 Schering Corporation Polyethylene glycol modified interferon therapy
US5767097A (en) 1996-01-23 1998-06-16 Icn Pharmaceuticals, Inc. Specific modulation of Th1/Th2 cytokine expression by ribavirin in activated T-lymphocytes
GB9602028D0 (en) 1996-02-01 1996-04-03 Amersham Int Plc Nucleoside analogues
US5980884A (en) 1996-02-05 1999-11-09 Amgen, Inc. Methods for retreatment of patients afflicted with Hepatitis C using consensus interferon
AU2064297A (en) 1996-02-29 1997-09-16 Immusol, Inc Hepatitis c virus ribozymes
US5633388A (en) 1996-03-29 1997-05-27 Viropharma Incorporated Compounds, compositions and methods for treatment of hepatitis C
US5830905A (en) 1996-03-29 1998-11-03 Viropharma Incorporated Compounds, compositions and methods for treatment of hepatitis C
US5990276A (en) 1996-05-10 1999-11-23 Schering Corporation Synthetic inhibitors of hepatitis C virus NS3 protease
US5849733A (en) 1996-05-10 1998-12-15 Bristol-Myers Squibb Co. 2-thio or 2-oxo flavopiridol analogs
GB9609932D0 (en) 1996-05-13 1996-07-17 Hoffmann La Roche Use of IL-12 and IFN alpha for the treatment of infectious diseases
US5891874A (en) 1996-06-05 1999-04-06 Eli Lilly And Company Anti-viral compound
US5837257A (en) 1996-07-09 1998-11-17 Sage R&D Use of plant extracts for treatment of HIV, HCV and HBV infections
US6214375B1 (en) 1996-07-16 2001-04-10 Generex Pharmaceuticals, Inc. Phospholipid formulations
US5635517B1 (en) 1996-07-24 1999-06-29 Celgene Corp Method of reducing TNFalpha levels with amino substituted 2-(2,6-dioxopiperidin-3-YL)-1-oxo-and 1,3-dioxoisoindolines
AU4090697A (en) 1996-09-03 1998-03-26 Bristol-Myers Squibb Company Improved process for preparing the antiviral agent {1s-(1alpha, 3alpha, 4beta)}-2-amino-1,9-dihydro-9-{4-hydroxy-3-(hydroxymethyl)-2 -methylenecyclopentyl}-6h-purin-6-one
US5908934A (en) 1996-09-26 1999-06-01 Bristol-Myers Squibb Company Process for the preparation of chiral ketone intermediates useful for the preparation of flavopiridol and analogs
US6174905B1 (en) 1996-09-30 2001-01-16 Mitsui Chemicals, Inc. Cell differentiation inducer
US5922757A (en) 1996-09-30 1999-07-13 The Regents Of The University Of California Treatment and prevention of hepatic disorders
US6224903B1 (en) 1996-10-11 2001-05-01 Sequus Pharmaceuticals, Inc. Polymer-lipid conjugate for fusion of target membranes
TW520297B (en) 1996-10-11 2003-02-11 Sequus Pharm Inc Fusogenic liposome composition and method
PT1132393E (pt) 1996-10-16 2003-08-29 Ribapharm Inc L-ribavirina e usos da mesma
US6509320B1 (en) 1996-10-16 2003-01-21 Icn Pharmaceuticals, Inc. Purine L-nucleosides, analogs and uses thereof
CA2266889A1 (en) 1996-10-16 1998-04-23 Guangyi Wang Purine l-nucleosides, analogs and uses thereof
US6455690B1 (en) 1996-10-16 2002-09-24 Robert Tam L-8-oxo-7-propyl-7,8-dihydro-(9H)-guanosine
BR9712544B1 (pt) 1996-10-18 2013-10-22 Inibidores de proteases de serina, composição farmacêutica compreendendo os mesmos e seus usos
GB9623908D0 (en) 1996-11-18 1997-01-08 Hoffmann La Roche Amino acid derivatives
IL119833A (en) 1996-12-15 2001-01-11 Lavie David Hypericum perforatum extracts for the preparation of pharmaceutical compositions for the treatment of hepatitis
US5827533A (en) 1997-02-06 1998-10-27 Duke University Liposomes containing active agents aggregated with lipid surfactants
US20020127371A1 (en) 2001-03-06 2002-09-12 Weder Donald E. Decorative elements provided with a circular or crimped configuration at point of sale or point of use
US6004933A (en) 1997-04-25 1999-12-21 Cortech Inc. Cysteine protease inhibitors
AU8210798A (en) 1997-05-29 1998-12-30 Novartis Ag 2-amino-7-(1-substituted-2-hydroxyethyl)-3,5-dihydro-pyrrolo (3,2-d)pyrimidin-4-ones
KR100630506B1 (ko) 1997-06-30 2006-09-29 메르츠 파마 게엠베하 운트 코. 카가아 Ｎｍｄａ 수용체 길항물질로서의 1-아미노-알킬시클로헥산 화합물, 이를 함유하는 제약학적 조성물 및 이것으로 치료하는 방법
EP1012180B1 (en) 1997-08-11 2004-12-01 Boehringer Ingelheim (Canada) Ltd. Hepatitis c inhibitor peptide analogues
PT903148E (pt) 1997-09-21 2002-02-28 Schering Corp Terapia de combinacao para a erradicacao de rna de hcv detectavel em doentes tendo infeccao cronica pelo virus da hepatite c
US6703374B1 (en) 1997-10-30 2004-03-09 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services Nucleosides for imaging and treatment applications
US5981709A (en) 1997-12-19 1999-11-09 Enzon, Inc. α-interferon-polymer-conjugates having enhanced biological activity and methods of preparing the same
CN1192102C (zh) 1998-01-23 2005-03-09 新生物生物公司 酶催化的治疗剂
EP1058686B1 (en) 1998-02-25 2006-11-02 Emory University 2'-fluoronucleosides
US6787305B1 (en) 1998-03-13 2004-09-07 Invitrogen Corporation Compositions and methods for enhanced synthesis of nucleic acid molecules
US6475985B1 (en) 1998-03-27 2002-11-05 Regents Of The University Of Minnesota Nucleosides with antiviral and anticancer activity
GB9806815D0 (en) 1998-03-30 1998-05-27 Hoffmann La Roche Amino acid derivatives
WO1999059621A1 (en) 1998-05-15 1999-11-25 Schering Corporation Combination therapy comprising ribavirin and interferon alpha in antiviral treatment naive patients having g chronic hepatitis c infection
US20010014352A1 (en) 1998-05-27 2001-08-16 Udit Batra Compressed tablet formulation
IL139786A0 (en) 1998-06-08 2002-02-10 Hoffmann La Roche Use of peg-ifn-alpha and ribavirin for the treatment of chronic hepatitis c
US6726925B1 (en) 1998-06-18 2004-04-27 Duke University Temperature-sensitive liposomal formulation
US6200598B1 (en) 1998-06-18 2001-03-13 Duke University Temperature-sensitive liposomal formulation
US6320078B1 (en) 1998-07-24 2001-11-20 Mitsui Chemicals, Inc. Method of producing benzamide derivatives
WO2000006529A1 (en) 1998-07-27 2000-02-10 Istituto Di Ricerche Di Biologia Molecolare P Angeletti S.P.A. Diketoacid-derivatives as inhibitors of polymerases
US6323180B1 (en) 1998-08-10 2001-11-27 Boehringer Ingelheim (Canada) Ltd Hepatitis C inhibitor tri-peptides
WO2000009531A2 (en) 1998-08-10 2000-02-24 Novirio Pharmaceuticals Limited β-L-2'-DEOXY-NUCLEOSIDES FOR THE TREATMENT OF HEPATITIS B
ATE284893T1 (de) 1998-10-16 2005-01-15 Mercian Corp Kristallisation von doxorubicin-hydrochlorid
FR2784892B1 (fr) 1998-10-23 2001-04-06 Smith & Nephew Kinetec Sa Attelle de mobilisation passive repliable pour membre inferieur
GB9826555D0 (en) 1998-12-03 1999-01-27 Univ Nottingham Microemulsion compositions
US6635278B1 (en) 1998-12-15 2003-10-21 Gilead Sciences, Inc. Pharmaceutical formulations
JP2003507322A (ja) 1998-12-18 2003-02-25 シェリング・コーポレーション リバビリン−ＰＥＧ化インターフェロン−α誘発ＨＣＶ併用治療
US6267985B1 (en) 1999-06-30 2001-07-31 Lipocine Inc. Clear oil-containing pharmaceutical compositions
US6294192B1 (en) 1999-02-26 2001-09-25 Lipocine, Inc. Triglyceride-free compositions and methods for improved delivery of hydrophobic therapeutic agents
US6248363B1 (en) 1999-11-23 2001-06-19 Lipocine, Inc. Solid carriers for improved delivery of active ingredients in pharmaceutical compositions
US6383471B1 (en) 1999-04-06 2002-05-07 Lipocine, Inc. Compositions and methods for improved delivery of ionizable hydrophobic therapeutic agents
US7919119B2 (en) 1999-05-27 2011-04-05 Acusphere, Inc. Porous drug matrices and methods of manufacture thereof
US6395300B1 (en) 1999-05-27 2002-05-28 Acusphere, Inc. Porous drug matrices and methods of manufacture thereof
AU5905400A (en) 1999-07-14 2001-02-05 Board Of Regents, The University Of Texas System Methods and compositions for delivery and retention of active agents to lymph nodes
IL147757A0 (en) 1999-07-30 2002-08-14 Abbott Gmbh & Co Kg 2-pyrazolin-5-ones
US6566365B1 (en) 1999-11-04 2003-05-20 Biochem Pharma Inc. Method for the treatment of Flaviviridea viral infection using nucleoside analogues
TR200601783T2 (tr) 1999-11-12 2007-01-22 Pharmasset Ltd 2'-Deoksi-L-nükleositlerin sentezi
US20060034937A1 (en) 1999-11-23 2006-02-16 Mahesh Patel Solid carriers for improved delivery of active ingredients in pharmaceutical compositions
US6495677B1 (en) 2000-02-15 2002-12-17 Kanda S. Ramasamy Nucleoside compounds
EA200200778A1 (ru) 2000-02-18 2003-06-26 Шайре Байокем Инк. СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ ИЛИ ПРОФИЛАКТИКИ ИНФЕКЦИИ ГЕПАТИТА С В ОРГАНИЗМЕ ХОЗЯИНА, ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ ПРОТИВ ФЛАВИВИРУСА, СОЕДИНЕНИЕ ФОРМУЛЫ Ib - АКТИВНЫЙ АГЕНТ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ИЛИ ПРОФИЛАКТИКИ ИНФЕКЦИИ ГЕПАТИТА С ИЛИ ФЛАВИВИРУСА (ВАРИАНТЫ)
BR0110023A (pt) 2000-04-13 2003-12-30 Pharmasset Ltd Derivados de nucleosìdeo 3'-ou-2' substituìdos para tratamento de infecções por vìrus da hepatite
AU2001255495A1 (en) 2000-04-20 2001-11-07 Schering Corporation Ribavirin-interferon alfa combination therapy for eradicating detectable hcv-rnain patients having chronic hepatitis c infection
MY164523A (en) 2000-05-23 2017-12-29 Univ Degli Studi Cagliari Methods and compositions for treating hepatitis c virus
EP1294735A2 (en) 2000-05-26 2003-03-26 Novirio Pharmaceuticals Limited Methods and compositions for treating flaviviruses and pestiviruses
US6787526B1 (en) 2000-05-26 2004-09-07 Idenix Pharmaceuticals, Inc. Methods of treating hepatitis delta virus infection with β-L-2′-deoxy-nucleosides
TR200402565T4 (tr) 2000-05-26 2004-12-21 Idenix (Cayman) Limited Hepatit delta virüsü enfeksiyonunun tedavi edilmesinde ß-L-2'-deoksi-nükleosidlerin kullanımı
FR2810322B1 (fr) 2000-06-14 2006-11-10 Pasteur Institut PRODUCTION COMBINATOIRE D'ANALOGUES DE NUCLEOTIDES ET NUCLEOTIDES (XiTP)
MY141594A (en) 2000-06-15 2010-05-14 Novirio Pharmaceuticals Ltd 3'-PRODRUGS OF 2'-DEOXY-ß-L-NUCLEOSIDES
US6815542B2 (en) 2000-06-16 2004-11-09 Ribapharm, Inc. Nucleoside compounds and uses thereof
UA72612C2 (en) 2000-07-06 2005-03-15 Pyrido[2.3-d]pyrimidine and pyrimido[4.5-d]pyrimidine nucleoside analogues, prodrugs and method for inhibiting growth of neoplastic cells
US6680068B2 (en) 2000-07-06 2004-01-20 The General Hospital Corporation Drug delivery formulations and targeting
AR029851A1 (es) 2000-07-21 2003-07-16 Dendreon Corp Nuevos peptidos como inhibidores de ns3-serina proteasa del virus de hepatitis c
AR034127A1 (es) 2000-07-21 2004-02-04 Schering Corp Imidazolidinonas como inhibidores de ns3-serina proteasa del virus de hepatitis c, composicion farmaceutica, un metodo para su preparacion, y el uso de las mismas para la manufactura de un medicamento
RU2003105221A (ru) 2000-07-21 2004-09-20 Шеринг Корпорейшн (US) Новые пептиды, как ингибиторы ns3-серинпротеазы вируса гепатита с
EP1301527A2 (en) 2000-07-21 2003-04-16 Corvas International, Inc. Peptides as ns3-serine protease inhibitors of hepatitis c virus
CZ304734B6 (cs) 2000-07-21 2014-09-10 Gilead Sciences, Inc. Způsob přípravy 9-[2-(fosfonomethoxy)propyl]adeninu a 9-[2-(fosfonomethoxy)ethyl]adeninu
US6897201B2 (en) 2000-08-21 2005-05-24 Inspire Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for the treatment of glaucoma or ocular hypertension
AR039558A1 (es) 2000-08-21 2005-02-23 Inspire Pharmaceuticals Inc Composiciones y metodo para el tratamiento de glaucoma o hipertension ocular
US7018985B1 (en) 2000-08-21 2006-03-28 Inspire Pharmaceuticals, Inc. Composition and method for inhibiting platelet aggregation
US20030008841A1 (en) 2000-08-30 2003-01-09 Rene Devos Anti-HCV nucleoside derivatives
US20020127203A1 (en) 2000-10-18 2002-09-12 Albrecht Janice K. Ribavirin-pegylated interferon alfa HCV combination therapy
KR101201552B1 (ko) 2000-10-18 2012-11-15 파마셋 인코포레이티드 바이러스 감염 및 비정상적인 세포 증식의 치료를 위한 변형된 뉴클레오시드
US6555677B2 (en) 2000-10-31 2003-04-29 Merck & Co., Inc. Phase transfer catalyzed glycosidation of an indolocarbazole
BR0115447A (pt) 2000-11-20 2005-10-18 Bristol Myers Squibb Co Inibidores de tripeptìdeo de hepatite c
DE20019797U1 (de) 2000-11-21 2001-04-05 Mala Verschlussysteme Gmbh Verschlußkappe
WO2002048172A2 (en) 2000-12-12 2002-06-20 Schering Corporation Diaryl peptides as ns3-serine protease inhibitors of hepatits c virus
AU2002230763A1 (en) 2000-12-13 2008-01-03 Bristol-Myers Squibb Pharma Company Inhibitors of hepatitis c virus ns3 protease
US6727366B2 (en) 2000-12-13 2004-04-27 Bristol-Myers Squibb Pharma Company Imidazolidinones and their related derivatives as hepatitis C virus NS3 protease inhibitors
US6750396B2 (en) 2000-12-15 2004-06-15 Di/Dt, Inc. I-channel surface-mount connector
AU2002232660A1 (en) 2000-12-15 2002-06-24 Pharmasset Ltd. Antiviral agents for treatment of flaviviridae infections
US7105499B2 (en) 2001-01-22 2006-09-12 Merck & Co., Inc. Nucleoside derivatives as inhibitors of RNA-dependent RNA viral polymerase
RS50236B (sr) 2001-01-22 2009-07-15 Merck & Co.Inc., Nukleozidni derivati kao inhibitori rnk-zavisne rnk virusne polimeraze
MY129350A (en) 2001-04-25 2007-03-30 Bristol Myers Squibb Co Aripiprazole oral solution
GB0112617D0 (en) 2001-05-23 2001-07-18 Hoffmann La Roche Antiviral nucleoside derivatives
GB0114286D0 (en) 2001-06-12 2001-08-01 Hoffmann La Roche Nucleoside Derivatives
JP2004534830A (ja) 2001-06-21 2004-11-18 グラクソ　グループ　リミテッド Ｈｃｖにおけるヌクレオシド化合物
NZ530000A (en) 2001-07-11 2007-03-30 Vertex Pharma Peptidomimetic bridged bicyclic serine protease inhibitors
EP2335700A1 (en) 2001-07-25 2011-06-22 Boehringer Ingelheim (Canada) Ltd. Hepatitis C virus polymerase inhibitors with a heterobicylic structure
DE60226447D1 (de) 2001-08-02 2008-06-19 Ilex Oncology Inc Verfahren zur herstellung von purinnukleosiden
US6962991B2 (en) 2001-09-12 2005-11-08 Epoch Biosciences, Inc. Process for the synthesis of pyrazolopyrimidines
WO2003022861A1 (en) 2001-09-13 2003-03-20 Bristol-Myers Squibb Company Process for the preparation of rebeccamycin and analogs thereof
WO2003024461A1 (en) 2001-09-20 2003-03-27 Schering Corporation Hcv combination therapy
EP1435974A4 (en) 2001-09-28 2006-09-06 Idenix Cayman Ltd METHOD AND COMPOSITIONS FOR TREATING HEPATITIS C VIRUS WITH 4'-MODIFIED NUCLEOSIDES
WO2003037895A1 (en) 2001-11-02 2003-05-08 Glaxo Group Limited 4-(6-membered)-heteroaryl acyl pyrrolidine derivatives as hcv inhibitors
WO2003045327A2 (en) 2001-11-27 2003-06-05 Bristol-Myers Squibb Company Efavirenz tablet formulation having unique biopharmaceutical characteristics
GB0129945D0 (en) 2001-12-13 2002-02-06 Mrc Technology Ltd Chemical compounds
CN100560073C (zh) 2001-12-14 2009-11-18 法玛塞特公司 用于治疗病毒感染的n4-酰基胞嘧啶核苷
WO2003051899A1 (en) 2001-12-17 2003-06-26 Ribapharm Inc. Deazapurine nucleoside libraries and compounds
JP2005514401A (ja) 2001-12-21 2005-05-19 マイクロロジックス　バイオテック，インコーポレイテッド 抗ウイルス性７−デアザｌ−ヌクレオシド
WO2003062256A1 (en) 2002-01-17 2003-07-31 Ribapharm Inc. 2'-beta-modified-6-substituted adenosine analogs and their use as antiviral agents
US7070801B2 (en) 2002-01-30 2006-07-04 National Institute Of Advanced Industrial Science And Technology Sugar-modified liposome and products comprising the liposome
US6642204B2 (en) 2002-02-01 2003-11-04 Boehringer Ingelheim International Gmbh Hepatitis C inhibitor tri-peptides
CA2370396A1 (en) 2002-02-01 2003-08-01 Boehringer Ingelheim (Canada) Ltd. Hepatitis c inhibitor tri-peptides
JP2006505241A (ja) 2002-02-08 2006-02-16 ノバルティス アクチエンゲゼルシャフト Ｈｄａｃ阻害活性を有する化合物のスクリーニング法
US7323453B2 (en) 2002-02-13 2008-01-29 Merck & Co., Inc. Methods of inhibiting orthopoxvirus replication with nucleoside compounds
AU2003213628A1 (en) 2002-02-28 2003-09-16 Biota, Inc. Nucleoside 5'-monophosphate mimics and their prodrugs
AU2003217863B9 (en) 2002-02-28 2009-10-29 Biota Scientific Management Pty Ltd Nucleotide mimics and their prodrugs
CA2481449A1 (en) 2002-04-26 2003-11-06 Gilead Sciences, Inc. Method and compositions for identifying anti-hiv therapeutic compounds
AU2003241621A1 (en) 2002-05-24 2003-12-12 Isis Pharmaceuticals, Inc. Oligonucleotides having modified nucleoside units
ES2304511T3 (es) 2002-06-04 2008-10-16 Schering Corporation Compuestos de pirazolo(1,5-a)pirimidina como agentes antivirales.
CA2488611C (en) 2002-06-07 2011-11-15 Kylix, B.V. Compounds for modulating the activity of exchange proteins directly activated by camp (epacs)
WO2003105770A2 (en) 2002-06-17 2003-12-24 Merck & Co., Inc. Carbocyclic nucleoside derivatives as inhibitors of rna-dependent rna viral polymerase
AU2003248708A1 (en) 2002-06-17 2003-12-31 Isis Pharmaceuticals, Inc. Oligomeric compounds that include carbocyclic nucleosides and their use in gene modulation
AU2003269890A1 (en) 2002-06-21 2004-01-06 Isis Pharmaceuticals, Inc. Nucleoside derivatives as inhibitors of rna-dependent rna viral polymerase
US20060234962A1 (en) 2002-06-27 2006-10-19 Olsen David B Nucleoside derivatives as inhibitors of rna-dependent rna viral polymerase
MXPA04012779A (es) 2002-06-28 2005-08-19 Idenix Cayman Ltd Profarmacos de 2'- y 3'-nucleosido para tratar infecciones por flaviviridae.
KR20050035194A (ko) 2002-06-28 2005-04-15 이데닉스 (케이만) 리미티드 플라비비리다에 감염 치료용 2'-ｃ-메틸-3'-ｏ-ｌ-발린에스테르 리보푸라노실 사이티딘
RS114004A (en) 2002-06-28 2007-02-05 Idenix (Cayman) Limited, Modified 2' and 3'-nucleoside produgs for treating flaviridae infections
US7608600B2 (en) 2002-06-28 2009-10-27 Idenix Pharmaceuticals, Inc. Modified 2′ and 3′-nucleoside prodrugs for treating Flaviviridae infections
BR0305259A (pt) 2002-07-01 2004-10-05 Upjohn Co Inibidores de hcv ns5b polimerase
US6973905B2 (en) 2002-07-01 2005-12-13 Cinetic Automation Corporation Valve lash adjustment apparatus and method
US7041690B2 (en) 2002-07-01 2006-05-09 Pharmacia & Upjohn Company, Llc Inhibitors of HCV NS5B polymerase
JP2005533108A (ja) 2002-07-16 2005-11-04 メルク　エンド　カムパニー　インコーポレーテッド Ｒｎａ依存性ｒｎａウイルスポリメラーゼの阻害剤としてのヌクレオシド誘導体
CA2493816A1 (en) 2002-07-24 2004-01-29 Ptc Therapeutics, Inc. Use of nucleoside compounds for nonsense suppression and the treatment of genetic diseases
AU2003256619A1 (en) 2002-07-24 2004-02-09 Isis Pharmaceuticals, Inc. Pyrrolopyrimidine thionucleoside analogs as antivirals
CN1671727A (zh) 2002-07-25 2005-09-21 麦克洛基克斯生物技术有限公司 抗病毒7－脱氮－d－核苷及其用途
AU2003261434A1 (en) 2002-08-12 2004-02-25 Bristol-Myers Squibb Company Iminothiazolidinones as inhibitors of hcv replication
AU2003278816A1 (en) 2002-09-13 2004-04-30 Idenix (Cayman) Limited ss-L-2'-DEOXYNUCLEOSIDES FOR THE TREATMENT OF RESISTANT HBV STRAINS AND COMBINATION THERAPIES
JP2006505571A (ja) 2002-10-15 2006-02-16 リゲル ファーマシューテイカルズ、インコーポレイテッド 置換されたインドール及びｈｃｖ阻害剤としてのその使用
US20040229840A1 (en) 2002-10-29 2004-11-18 Balkrishen Bhat Nucleoside derivatives as inhibitors of RNA-dependent RNA viral polymerase
CA2504344A1 (en) 2002-11-01 2004-05-21 Viropharma Incorporated Benzofuran compounds, compositions and methods for treatment and prophylaxis of hepatitis c viral infections and associated diseases
CN1849142A (zh) 2002-11-15 2006-10-18 埃迪尼克斯(开曼)有限公司 2′－支链核苷和黄病毒突变
TWI332507B (en) 2002-11-19 2010-11-01 Hoffmann La Roche Antiviral nucleoside derivatives
US7598373B2 (en) 2002-12-12 2009-10-06 Idenix Pharmaceuticals, Inc. Process for the production of 2-C-methyl-D-ribonolactone
AU2003300434A1 (en) 2002-12-23 2004-07-22 Idenix (Cayman) Limited Process for the production of 3'-nucleoside prodrugs
EP1923063A3 (en) 2003-01-14 2009-04-08 Gilead Sciences, Inc. Compositions and methods for combination antiviral therapy
US7223785B2 (en) 2003-01-22 2007-05-29 Boehringer Ingelheim International Gmbh Viral polymerase inhibitors
NZ523970A (en) 2003-02-04 2005-02-25 Ind Res Ltd Process for preparing inhibitors of nucleoside phoshorylases and nucleosidases
WO2004080466A1 (en) 2003-03-07 2004-09-23 Ribapharm Inc. Cytidine analogs and methods of use
EP1745573A4 (en) 2003-03-20 2010-05-26 Microbiol Quimica Farmaceutica PROCESS FOR PREPARING 2-DEOXY-BETA-L-NUCLEOSIDES
US20040202993A1 (en) 2003-04-10 2004-10-14 Poo Ramon E. Apparatus and method for organ preservation and transportation
WO2004094452A2 (en) 2003-04-16 2004-11-04 Bristol-Myers Squibb Company Macrocyclic isoquinoline peptide inhibitors of hepatitis c virus
EP1620109A2 (en) 2003-04-25 2006-02-01 Gilead Sciences, Inc. Kinase inhibitor phosphonate conjugates
US7470724B2 (en) 2003-04-25 2008-12-30 Gilead Sciences, Inc. Phosphonate compounds having immuno-modulatory activity
NZ542342A (en) 2003-04-25 2009-05-31 Gilead Sciences Inc Antiviral phosphonate analogs
EP1617848A2 (en) 2003-04-25 2006-01-25 Gilead Sciences, Inc. Anti-cancer phosphonate conjugates
US20050261237A1 (en) 2003-04-25 2005-11-24 Boojamra Constantine G Nucleoside phosphonate analogs
WO2005002626A2 (en) 2003-04-25 2005-01-13 Gilead Sciences, Inc. Therapeutic phosphonate compounds
US7407965B2 (en) 2003-04-25 2008-08-05 Gilead Sciences, Inc. Phosphonate analogs for treating metabolic diseases
US7452901B2 (en) 2003-04-25 2008-11-18 Gilead Sciences, Inc. Anti-cancer phosphonate analogs
US20040259934A1 (en) 2003-05-01 2004-12-23 Olsen David B. Inhibiting Coronaviridae viral replication and treating Coronaviridae viral infection with nucleoside compounds
WO2004096210A1 (en) 2003-05-01 2004-11-11 Glaxo Group Limited Acylated indoline and tetrahydroquinoline derivatives as hcv inhibitors
US20040229839A1 (en) 2003-05-14 2004-11-18 Biocryst Pharmaceuticals, Inc. Substituted nucleosides, preparation thereof and use as inhibitors of RNA viral polymerases
WO2005020884A2 (en) 2003-05-14 2005-03-10 Idenix (Cayman) Limited Nucleosides for treatment of infection by corona viruses, toga viruses and picorna viruses
WO2004106356A1 (en) 2003-05-27 2004-12-09 Syddansk Universitet Functionalized nucleotide derivatives
EP2345661A1 (en) 2003-05-30 2011-07-20 Pharmasset, Inc. Modified fluorinated nucleoside analogues
WO2005007810A2 (en) 2003-06-16 2005-01-27 Grinstaff Mark W Functional synthetic molecules and macromolecules for gene delivery
DE602004003389T2 (de) 2003-06-19 2007-09-13 F. Hoffmann-La Roche Ag Verfahren zur herstellung von 4'-azidonukleosidderivaten
DE10331239A1 (de) 2003-07-10 2005-02-03 Robert Bosch Gmbh Überwachungselektronik für einen Elektromotor und Verfahren zur Überwachung eines Elektromotors
GB0317009D0 (en) 2003-07-21 2003-08-27 Univ Cardiff Chemical compounds
DK1658302T3 (da) 2003-07-25 2010-11-22 Idenix Pharmaceuticals Inc Purinnukleosidanaloge til behandling af sygdomme forårsaget af Flavirividae, herunder hepatitis C
BRPI0414019A (pt) 2003-08-27 2006-10-24 Biota Inc nucleosìdios ou nucleotìdio tricìclicos como agentes terapêuticos
TW200526686A (en) 2003-09-18 2005-08-16 Vertex Pharma Inhibitors of serine proteases, particularly HCV NS3-NS4A protease
US20050148534A1 (en) 2003-09-22 2005-07-07 Castellino Angelo J. Small molecule compositions and methods for increasing drug efficiency using compositions thereof
RS20060259A (en) 2003-10-14 2008-08-07 Intermune Inc., Macrocyclic carboxylic acids and acylsulfonamides as inhibitors of hcv replication
US7491794B2 (en) 2003-10-14 2009-02-17 Intermune, Inc. Macrocyclic compounds as inhibitors of viral replication
US7026339B2 (en) 2003-11-07 2006-04-11 Fan Yang Inhibitors of HCV NS5B polymerase
TW200528459A (en) 2004-01-06 2005-09-01 Achillion Pharmaceuticals Inc Azabenzofuran substituted thioureas; inhibitors of viral replication
JP2007519734A (ja) 2004-01-28 2007-07-19 メルク　エンド　カムパニー　インコーポレーテッド アミノシクロペンチルピリドピラジノン系ケモカイン受容体活性調節剤
EP1718150A1 (en) 2004-02-25 2006-11-08 The Government of the United States of America, represented by the Secretary, Department of Health and Human Services Methylation inhibitor compounds
CN100384237C (zh) 2004-02-28 2008-04-23 鸿富锦精密工业（深圳）有限公司 音量调整装置及方法
WO2005087788A2 (en) 2004-03-04 2005-09-22 The Regents Of The University Of California Methods for preparation of nucleoside phosphonate esters
EA012389B1 (ru) 2004-03-30 2009-10-30 Интермун, Инк. Макроциклические соединения в качестве ингибиторов вирусной репликации
GB0408995D0 (en) 2004-04-22 2004-05-26 Glaxo Group Ltd Compounds
EP1758453B1 (en) 2004-06-15 2014-07-16 Merck Sharp & Dohme Corp. C-purine nucleoside analogs as inhibitors of rna-dependent rna viral polymerase
EP1912643A2 (en) 2004-06-23 2008-04-23 Idenix (Cayman) Limited 5-aza-7-deazapurine derivatives for treating infections with flaviviridae
CA2571079A1 (en) 2004-06-24 2006-02-02 Merck & Co., Inc. Nucleoside aryl phosphoramidates for the treatment of rna-dependent rna viral infection
US7217523B2 (en) 2004-07-02 2007-05-15 Regents Of The University Of Minnesota Nucleoside phosphoramidates and nucleoside phosphoramidases
CN101023094B (zh) 2004-07-21 2011-05-18 法莫赛特股份有限公司 烷基取代的2-脱氧-2-氟代-d-呋喃核糖基嘧啶和嘌呤及其衍生物的制备
CN102199181B (zh) 2004-07-21 2014-09-17 吉利德制药有限责任公司 烷基取代的2-脱氧-2-氟代-d-呋喃核糖基嘧啶和嘌呤及其衍生物的制备
AU2005330489B2 (en) 2004-07-27 2011-08-25 Gilead Sciences, Inc. Nucleoside phosphonate conjugates as anti HIV agents
US7153848B2 (en) 2004-08-09 2006-12-26 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of HCV replication
US7348425B2 (en) 2004-08-09 2008-03-25 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of HCV replication
RU2007110531A (ru) 2004-08-23 2008-09-27 Ф.Хоффманн-Ля Рош Аг (Ch) Гетероциклические противовирусные соединения
EP1794172B1 (en) 2004-08-23 2009-07-15 F.Hoffmann-La Roche Ag Antiviral 4'-azido-nucleosides
WO2006029081A2 (en) 2004-09-02 2006-03-16 Neopharm, Inc. Nucleoside-lipid conjugates, their method of preparation and uses thereof
AU2005285045B2 (en) 2004-09-14 2011-10-13 Gilead Pharmasset Llc Preparation of 2'fluoro-2'- alkyl- substituted or other optionally substituted ribofuranosyl pyrimidines and purines and their derivatives
CN101072570A (zh) 2004-09-24 2007-11-14 埃迪尼克斯(开曼)有限公司 用于治疗黄病毒、瘟病毒和肝炎病毒的方法和组合物
TW200626157A (en) 2004-09-30 2006-08-01 Tibotec Pharm Ltd HCV inhibiting bi-cyclic pyrimidines
CA2584367A1 (en) 2004-10-21 2006-06-22 Merck & Co., Inc. Fluorinated pyrrolo[2,3-d]pyrimidine nucleosides for the treatment of rna-dependent rna viral infection
JP5089395B2 (ja) * 2004-10-29 2012-12-05 バイオクライスト ファーマシューティカルズ， インコーポレイテッド 治療用フロピリミジンおよびチエノピリミジン
US8399428B2 (en) 2004-12-09 2013-03-19 Regents Of The University Of Minnesota Nucleosides with antiviral and anticancer activity
GB0427123D0 (en) 2004-12-11 2005-01-12 Apv Systems Ltd Food item coating apparatus and method
WO2006065590A2 (en) 2004-12-16 2006-06-22 Xtl Biopharmaceuticals Inc. Pyridine and pyrimidine antiviral compositions
WO2006063717A2 (en) 2004-12-16 2006-06-22 Febit Biotech Gmbh Polymerase-independent analysis of the sequence of polynucleotides
WO2006093801A1 (en) 2005-02-25 2006-09-08 Abbott Laboratories Thiadiazine derivatives useful as anti-infective agents
EP1853617A1 (en) 2005-02-28 2007-11-14 Genelabs Technologies, Inc. Tricyclic-nucleoside prodrugs for treating viral infections
GB0505781D0 (en) 2005-03-21 2005-04-27 Univ Cardiff Chemical compounds
MX2007011850A (es) 2005-03-25 2007-10-03 Tibotec Pharm Ltd Inhibidores heterobiciclicos de virus de hepatitis c.
WO2006116557A1 (en) 2005-04-25 2006-11-02 Genelabs Technologies, Inc. Nucleoside compounds for treating viral infections
WO2006121820A1 (en) 2005-05-05 2006-11-16 Valeant Research & Development Phosphoramidate prodrugs for treatment of viral infection
AR056347A1 (es) 2005-05-12 2007-10-03 Tibotec Pharm Ltd Uso de compuestos de pteridina para fabricar medicamentos y composiciones farmaceuticas
AR054122A1 (es) 2005-05-12 2007-06-06 Tibotec Pharm Ltd Pirido[2,3-d]pirimidas utiles como inhibidores de hcv, y metodos para la preparacion de las mismas
WO2007027248A2 (en) 2005-05-16 2007-03-08 Valeant Research & Development 3', 5' - cyclic nucleoside analogues for treatment of hcv
US8143288B2 (en) 2005-06-06 2012-03-27 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of HCV replication
TWI471145B (zh) 2005-06-13 2015-02-01 Bristol Myers Squibb & Gilead Sciences Llc 單一式藥學劑量型
TWI375560B (en) 2005-06-13 2012-11-01 Gilead Sciences Inc Composition comprising dry granulated emtricitabine and tenofovir df and method for making the same
CA2610484A1 (en) 2005-06-22 2007-01-04 Biocryst Pharmaceuticals, Inc. Methods for the preparation of 9-deazapurine derivatives
US20060293752A1 (en) 2005-06-27 2006-12-28 Missoum Moumene Intervertebral disc prosthesis and associated methods
EP2305695A3 (en) 2005-07-25 2011-07-27 Intermune, Inc. Macrocyclic inhibitors of Hepatitis C virus replication
WO2007014393A2 (en) 2005-07-28 2007-02-01 Isp Investments Inc. Amorphous efavirenz and the production thereof
DK1919898T3 (da) 2005-07-29 2011-05-02 Tibotec Pharm Ltd Makrocykliske inhibitorer af hepatitis-C-virus
JP5230417B2 (ja) 2005-07-29 2013-07-10 テイボテク・フアーマシユーチカルズ Ｃ型肝炎ウイルスの大員環インヒビター
WO2007013047A2 (en) 2005-07-29 2007-02-01 Ranbaxy Laboratories Limited Water-dispersible anti-retroviral pharmaceutical compositions
TWI383980B (zh) 2005-07-29 2013-02-01 Tibotec Pharm Ltd Ｃ型肝炎病毒之大環抑制劑
CN101273030B (zh) 2005-07-29 2012-07-18 泰博特克药品有限公司 丙型肝炎病毒的大环抑制剂
PE20070211A1 (es) 2005-07-29 2007-05-12 Medivir Ab Compuestos macrociclicos como inhibidores del virus de hepatitis c
CN101287472B (zh) * 2005-08-15 2011-10-12 弗·哈夫曼-拉罗切有限公司 抗病毒的4'-取代前核苷酸的氨基磷酸酯类化合物
GB0519488D0 (en) 2005-09-23 2005-11-02 Glaxo Group Ltd Compounds
GB0519478D0 (en) 2005-09-23 2005-11-02 Glaxo Group Ltd Compounds
EA200800932A1 (ru) 2005-09-26 2008-10-30 Фармассет, Инк. Модифицированные 4`-нуклеозиды в качестве противовирусных агентов
RU2422454C2 (ru) 2005-12-09 2011-06-27 Ф. Хоффманн-Ля Рош Аг Антивирусные нуклеозиды
EP1976829A2 (en) 2005-12-12 2008-10-08 Genelabs Technologies, Inc. N-(6-membered aromatic ring)-amido anti-viral compounds
NZ544187A (en) 2005-12-15 2008-07-31 Ind Res Ltd Deazapurine analogs of 1'-aza-l-nucleosides
WO2007076034A2 (en) 2005-12-21 2007-07-05 Abbott Laboratories Anti-viral compounds
GB0602046D0 (en) 2006-02-01 2006-03-15 Smithkline Beecham Corp Compounds
WO2007092000A1 (en) 2006-02-06 2007-08-16 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of hcv replication
CA2637879A1 (en) * 2006-02-14 2007-08-23 Merck & Co., Inc. Nucleoside aryl phosphoramidates for the treatment of rna-dependent rna viral infection
CN101384609A (zh) * 2006-02-14 2009-03-11 默克公司 用于治疗rna依赖性rna病毒感染的氨基磷酸（核苷）（芳基）酯
CA2640672A1 (en) 2006-02-17 2007-08-23 Pfizer Limited 3 -deazapurine derivatives as tlr7 modulators
US8895531B2 (en) 2006-03-23 2014-11-25 Rfs Pharma Llc 2′-fluoronucleoside phosphonates as antiviral agents
EP2029606B1 (en) 2006-05-25 2010-05-26 Brystol-Myers Squibb Company Cyclopropyl fused indolobenzazepine hcv ns5b inhibitors
CN103275033B (zh) 2006-07-07 2015-04-29 吉里德科学公司 治疗剂的药代动力学特性调节剂
US20080014228A1 (en) 2006-07-14 2008-01-17 Olivia Darmuzey Solid form
EP1881001A1 (en) 2006-07-20 2008-01-23 Tibotec Pharmaceuticals Ltd. HCV NS-3 serine protease inhibitors
TW200815384A (en) 2006-08-25 2008-04-01 Viropharma Inc Combination therapy method for treating hepatitis C virus infection and pharmaceutical compositions for use therein
WO2008045419A1 (en) 2006-10-10 2008-04-17 Pharmasset, Inc. Preparation of nucleosides ribofuranosyl pyrimidines
PL216525B1 (pl) 2006-10-17 2014-04-30 Ct Badań Molekularnych I Makromolekularnych Polskiej Akademii Nauk 5'-O-[(N-acylo)amidoditiofosforano] nukleozydy oraz sposób wytwarzania 5'-O-[(N-acylo)amidofosforano]-,5'-O-[(N-acylo)amidotiofosforano]-, 5'-O-[(N-acylo)amidoditiofosforano]nukleozydów
GB0623493D0 (en) 2006-11-24 2007-01-03 Univ Cardiff Chemical compounds
WO2008079206A1 (en) 2006-12-20 2008-07-03 Merck & Co., Inc. Nucleoside cyclic phosphoramidates for the treatment of rna-dependent rna viral infection
US7951789B2 (en) 2006-12-28 2011-05-31 Idenix Pharmaceuticals, Inc. Compounds and pharmaceutical compositions for the treatment of viral infections
JP2010515680A (ja) 2007-01-05 2010-05-13 メルク・シャープ・エンド・ドーム・コーポレイション Ｒｎａ依存性ｒｎａウイルス感染症の治療用としてのヌクレオシドアリールホスホロアミデート
JP5513135B2 (ja) 2007-03-19 2014-06-04 カスケード プロドラッグ インコーポレイテッド マンニッヒ塩基ｎ−オキシド薬物
US7964580B2 (en) 2007-03-30 2011-06-21 Pharmasset, Inc. Nucleoside phosphoramidate prodrugs
GB0709791D0 (en) 2007-05-22 2007-06-27 Angeletti P Ist Richerche Bio Antiviral agents
CN100532388C (zh) 2007-07-16 2009-08-26 郑州大学 2’-氟-4’-取代-核苷类似物、其制备方法及应用
CN101108870A (zh) * 2007-08-03 2008-01-23 冷一欣 核苷磷酸酯类化合物及制备方法和应用
US20100256098A1 (en) 2007-08-31 2010-10-07 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Dept. Of Health And Human Services Compounds for inhibiting wip1, prodrugs and compositions thereof, and related methods
JO2778B1 (en) 2007-10-16 2014-03-15 ايساي انك Certain vehicles, installations and methods
US20090318380A1 (en) 2007-11-20 2009-12-24 Pharmasset, Inc. 2',4'-substituted nucleosides as antiviral agents
US20090176732A1 (en) 2007-12-21 2009-07-09 Alios Biopharma Inc. Protected nucleotide analogs
US8227431B2 (en) 2008-03-17 2012-07-24 Hetero Drugs Limited Nucleoside derivatives
WO2009120878A2 (en) 2008-03-26 2009-10-01 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Non-natural ribonucleotides, and methods of use thereof
CA2722308C (en) 2008-04-15 2024-02-27 Rfs Pharma, Llc. Nucleoside derivatives for treatment of caliciviridae infections, including norovirus infections
BRPI0911410A2 (pt) 2008-04-23 2015-10-06 Gilead Sciences Inc análogos de carba-nucleosídeo para tratamento antiviral
US7964560B2 (en) 2008-05-29 2011-06-21 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US8173621B2 (en) 2008-06-11 2012-05-08 Gilead Pharmasset Llc Nucleoside cyclicphosphates
WO2010042834A1 (en) 2008-10-09 2010-04-15 Anadys Pharmaceuticals, Inc. A method of inhibiting hepatitis c virus by combination of a 5,6-dihydro-1h-pyridin-2-one and one or more additional antiviral compounds
AU2009329872B2 (en) 2008-12-23 2016-07-07 Gilead Pharmasset Llc Synthesis of purine nucleosides
SG172361A1 (en) * 2008-12-23 2011-07-28 Pharmasset Inc Nucleoside analogs
AR074897A1 (es) 2008-12-23 2011-02-23 Pharmasset Inc Fosforamidatos de nucleosidos
MX2011007194A (es) 2009-01-07 2013-07-12 Scynexis Inc Combinacion de un derivado ciclosporina y nucleosidos para tratar virus de hepatitis c (vhc).
CA2749394A1 (en) * 2009-01-09 2010-07-15 University College Of Cardiff Consultants Limited Phosphoramidate derivatives of guanosine nucleoside compounds for treatment of viral infections
US8618076B2 (en) 2009-05-20 2013-12-31 Gilead Pharmasset Llc Nucleoside phosphoramidates
WO2010133569A1 (en) * 2009-05-20 2010-11-25 Glaxo Group Limited Azabicyclo[4.1.0]heptane derivatives
TWI583692B (zh) * 2009-05-20 2017-05-21 基利法瑪席特有限責任公司 核苷磷醯胺
US8719767B2 (en) 2011-03-31 2014-05-06 Commvault Systems, Inc. Utilizing snapshots to provide builds to developer computing devices
PE20210668A1 (es) 2009-09-21 2021-04-05 Gilead Sciences Inc Analogos de carba-nucleosidos sustituidos con 2'-fluoro antivirales
US7973013B2 (en) 2009-09-21 2011-07-05 Gilead Sciences, Inc. 2'-fluoro substituted carba-nucleoside analogs for antiviral treatment
EP2752422B1 (en) 2010-03-31 2017-08-16 Gilead Pharmasset LLC Stereoselective synthesis of phosphorus containing actives
US8563530B2 (en) 2010-03-31 2013-10-22 Gilead Pharmassel LLC Purine nucleoside phosphoramidate
US20120107278A1 (en) 2010-10-29 2012-05-03 Pharmasset, Inc. Abbreviated hcv therapy for hcv infected patients with il28b c/c genotype

Also Published As

Publication number Publication date
EP2552931B1 (en) 2014-07-23
EA201290993A1 (ru) 2013-04-30
KR20120138242A (ko) 2012-12-24
MX2012011324A (es) 2013-02-21
HRP20171267T1 (hr) 2017-10-20
BR112012024923A2 (pt) 2016-06-14
EA201290988A1 (ru) 2013-04-30
PL2552930T3 (pl) 2016-02-29
ZA201207800B (en) 2013-05-29
EA026341B1 (ru) 2017-03-31
EP2752422B1 (en) 2017-08-16
KR101759369B1 (ko) 2017-07-18
HUE034239T2 (en) 2018-02-28
JP2013523767A (ja) 2013-06-17
US20110245484A1 (en) 2011-10-06
CY1119273T1 (el) 2018-02-14
WO2011123645A2 (en) 2011-10-06
TW201136593A (en) 2011-11-01
CO6630166A2 (es) 2013-03-01
SG184323A1 (en) 2012-11-29
CL2011000718A1 (es) 2012-04-09
JP2015205903A (ja) 2015-11-19
JP6106716B2 (ja) 2017-04-05
IL222099A (en) 2017-09-28
HK1199645A1 (en) 2015-07-10
SG10201702025SA (en) 2017-04-27
AU2011235044A1 (en) 2012-11-22
CO6630167A2 (es) 2013-03-01
CN104017020B (zh) 2017-04-12
PE20130151A1 (es) 2013-02-21
HK1251578A1 (zh) 2019-02-01
AR080819A1 (es) 2012-05-09
JP2013527145A (ja) 2013-06-27
PT3290428T (pt) 2021-12-27
UA122959C2 (uk) 2021-01-27
PT2552930E (pt) 2015-11-17
BR112012024884A2 (pt) 2016-10-18
SI3290428T1 (sl) 2022-01-31
TWI498117B (zh) 2015-09-01
HK1178171A1 (en) 2013-09-06
WO2011123668A3 (en) 2012-05-24
PE20130183A1 (es) 2013-02-21
AP3515A (en) 2016-01-11
CR20120534A (es) 2013-02-05
ES2900773T3 (es) 2022-03-18
WO2011123645A3 (en) 2011-12-29
ES2638350T3 (es) 2017-10-19
KR101715981B1 (ko) 2017-03-13
AP2012006535A0 (en) 2012-10-31
DK2609923T3 (en) 2017-09-18
KR20130064064A (ko) 2013-06-17
AP2012006543A0 (en) 2012-10-31
HUE026235T2 (en) 2016-06-28
CN102906102A (zh) 2013-01-30
HK1181775A1 (en) 2013-11-15
WO2011123668A2 (en) 2011-10-06
CA2794671A1 (en) 2011-10-06
EP2552930B1 (en) 2015-08-26
PT2752422T (pt) 2017-11-07
UY33311A (es) 2011-10-31
RS54368B1 (en) 2016-04-28
LT2609923T (lt) 2017-09-11
ZA201400249B (en) 2016-08-31
CR20120532A (es) 2013-02-05
CA2794671C (en) 2018-05-01
CN102858790A (zh) 2013-01-02
EP2752422A1 (en) 2014-07-09
ES2516466T3 (es) 2014-10-30
EP2552930A2 (en) 2013-02-06
HRP20151075T1 (hr) 2015-12-04
ES2644990T3 (es) 2017-12-01
IL222174A (en) 2016-06-30
JP6058528B2 (ja) 2017-01-11
AR080870A1 (es) 2012-05-16
SMT201500285B (it) 2016-01-08
CL2011000716A1 (es) 2012-04-20
CN104017020A (zh) 2014-09-03
SG184324A1 (en) 2012-11-29
ES2551944T3 (es) 2015-11-24
US8859756B2 (en) 2014-10-14
EA026341B9 (ru) 2021-12-27
MX350725B (es) 2017-09-14
DK2552930T3 (en) 2015-12-07
TW201139457A (en) 2011-11-16
ECSP12012282A (es) 2013-05-31
PT2609923T (pt) 2017-08-30
EP2552931A2 (en) 2013-02-06
AU2011235112B2 (en) 2015-07-09
NZ603232A (en) 2015-02-27
ZA201207799B (en) 2014-03-26

Similar Documents

Publication Publication Date Title
DK2552930T3 (en) Crystalline (S) -isopropyl 2 - (((S) - (((2R, 3R, 4R, 5R) -5- (2,4-dioxo-3,4-DIHYDROPYRIMIDIN- 1- (2 H) -yl) - 4-fluoro-3-hydroxy-4-methyltetrahydrofuran-2-yl) methoxy) (phenoxy) phosphoryl) amino) propanoate
JP6355605B2 (ja) Ｎ−［（２’ｒ）−２’−デオキシ−２’−フルオロ−２’−メチル−ｐ−フェニル−５’−ウリジリル］−ｌ−アラニン１−メチルエチルエステルおよびその製造のためのプロセス
EP3290428B1 (en) Tablet comprising crystalline (s)-isopropyl 2-(((s)-(((2r,3r,4r,5r)-5-(2,4-dioxo-3,4-dihydropyrimidin-1 (2h)-yl)-4-fluoro-3-hydroxy-4-methyltetrahydrofuran-2-yl)methoxy)(phenoxy)phosphoryl)amino)propanoate
AU2011235112A1 (en) Nucleoside phosphoramidates
CA2849694C (en) Nucleoside phosphoramidates
AU2016200676B2 (en) N-[(2&#39;R)-2 &#39;-deoxy-2&#39;-fluoro-2&#39;-methyl-p-phenyl-5&#39;-uridylyl] -L-alanine 1-methylethyl ester and process for its production
BR122013004621A2 (pt) fosforamidatos de nucleosídeo, seus processos de preparação, sua composição e seu uso

Legal Events

Date Code Title Description
FA Abandonment or withdrawal