CN106543220A - 氨基磷酸酯化合物及其制备方法和晶体 - Google Patents

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Abstract

本发明为氨基磷酸酯化合物及其制备方法和晶体，涉及一种富集了化合物61501b的组合物，其中化合物61501b的纯度不低于95%或者更高。该组合物在制备高纯的化合物Sp‑1时具有显著的优势。另外，本发明还提供了富集了化合物61501b的组合物的制备方法，所述方法采用结晶方法进行分离纯化，操作简便，重现性好，制备的组合物中化合物61501b的纯度高，质量好。其次，本发明还涉及化合物61501b的新晶型。

Description

氨基磷酸酯化合物及其制备方法和晶体
技术领域
本发明涉及药物化学领域，具体涉及氨基磷酸酯化合物及其制备方法和晶型，本发明还涉及含高纯度单一异构体的氨基磷酸酯化合物的组合物、其制备方法和晶型及其在制备抗HCV化合物中的用途。
背景技术
NUC-1031是吉西他滨前药，由NuCana BioMed公司开发，目前处于临床II期，用于治疗晚期实体瘤，胰腺癌，乳腺癌等癌症。NUC-1031的CAS为840506-29-8，具有如下式1所示的结构，下式Rp-1和Sp-1分别是NUC-1031的P的对映异构体：
，
，。
WO2005012327公开了大量氨基磷酸酯核苷前药，而这些氨基磷酸酯核苷前药多以P的对映异构体（R/S）混合物的形式存在。按照常规分离方法如手性柱分离或色谱柱分离等方法分离出高纯度的单一异构体比较困难，如“Application of ProTide Technology to Gemcitabine: A Successful Approach to Overcome the Key Cancer Resistance Mechanisms Leads to a New Agent (NUC-1031) in Clinical Development”（Journal of Medicinal Chemistry，Volume 57，Issue 4，Pages 1531-1542）的文献报道的通过硅胶柱纯化制备NUC-1031，最终得到异构体的含量分别为48%，52%。
目前现有技术中关于氨基磷酸酯核苷前药P单一对映异构体的制备方法报道比较少，由于该类分子结构中手性P的两个对映异构体结构非常相似，极性非常接近，通过从NUC-1031混旋体中分离出高纯度的单一异构体，变得非常困难，尤其要在纯化过程中同时兼顾纯度和收率，就更加困难了。
从对映异构体中分离单一异构体，并对其分别进行生物活性研究，对氨基磷酸酯核苷前药的药理作用、毒副作用或不良反应等进行研究，以开发出活性更好，毒副作用更小的类似药物将具备非常重要的意义。
化合物61501b作为关键中间体用于制备多种氨基磷酸酯核苷前药单一异构体时，能够显著提高单一异构体的纯度，并提高生产效率，降低生产成本，为临床研究氨基磷酸酯核苷前药单一异构体提供合格的原料。
化合物61501b的CAS为1392015-79-0，结构如下所示，
。
现有技术中关于化合物61501b的制备方法，晶型等研究比较少，仅在WO2012075140公开了化合物61501b结构，目前没有文献报道化合物61501b的制备方法及晶型等相关信息。因此，急需开发出能满足市场需求的含高纯度的化合物61501b的组合物，以及适合工业化生产的高纯度化合物61501b的制备方法。
发明内容
为解决上述问题，本发明一方面提供了一种富集了化合物61501b的组合物；
本发明另一方面提供了富集了化合物61501b的组合物的制备方法；
本发明另一方面还提供了化合物61501b的晶体；
本发明另一方面还提供了化合物61501b在制备化合物Sp-1中的用途，
；
首先，本发明提供了一种富集了化合物61501b的组合物，所述组合物中化合物61501b的纯度不低于90%，
， 。
进一步的，所述组合物中化合物61501b的纯度不低于95%；更进一步的，所述组合物中化合物61501b的纯度不低于99%。
另一方面，本发明提供了富集了化合物61501b的组合物的制备方法，包括以下步骤：
（1）、化合物（61501h）与化合物（61501g）在碱性条件下反应后，再与化合物（61501f）反应，得到化合物61502：
；
（2）、将化合物61502通过异构体分离，得到富集化合物61501b的组合物：
。
上述方法中，步骤（1）优选反应在N2保护下进行，将化合物（61501h）加入到合适的溶剂（如二氯甲烷、异丙醇、DMF、二氧六环等）中，在合适的温度（优选-80℃）下，加入化合物（61501g）和合适的碱（如三乙胺、DIPEA、NMM、吡啶、哌啶），滴加完毕后，优选在室温下反应过夜，然后，向反应液中加入化合物（61501f）和合适的碱（如三乙胺、DIPEA、NMM、吡啶、哌啶），反应结束后，蒸出溶剂，加入乙酸乙酯和水萃取，分离得到目标化合物（61502）。
上述方法中，步骤（2）所述的异构体分离方法包括：第一步，将化合物61502溶于有机溶剂中，搅拌溶解；第二步，向上述溶液系统中滴加反溶剂，析晶，得到化合物61501b。
其中，所述有机溶剂包含以下的至少一种：C1~8醇、C2~8醚、C3~7酮、C3~7酯、C1~2氯碳化合物和C2~7腈。更进一步的优选，所述有机溶剂选自乙酸乙酯，叔丁基甲醚，异丙醇或四氢呋喃。
其中，所述反溶剂包含以下的至少一种：C5~12饱和烃、C6~12芳香烃和石油醚；更优选所述反溶剂选自石油醚或己烷。
进一步的，上述方法中，有机溶剂与反溶剂的体积比为1:2~10（v/v），优选1:4~6（v/v）；化合物61502与有机溶剂的用量比为1:1~10（w/v），优选1:1.25~2.5（w/v）。
另一优选实施方式中，所述有机溶剂选自乙酸乙酯，所述反溶剂选自石油醚。
更优选的，上述方法中，步骤（2）所述的异构体分离方法包括：第一步，将化合物61502溶于乙酸乙酯中，室温搅拌溶解；第二步，向上述溶液系统中滴加石油醚，析晶，过滤，得到化合物61501b。优选化合物61502与乙酸乙酯的用量比为1:1.25~2.5（w/v），乙酸乙酯与石油醚的用量比为1:4~6（v/v）。
在另一优选例中，步骤（2）搅拌溶解及析晶温度为10℃~50℃；更优选温度为25℃~30℃。
优选，上述方法所制备的富集化合物61501b的组合物中，化合物61501b的纯度不低于90%，进一步的优选，所述组合物中化合物61501b的纯度不低于95%或99%。
本发明另一方面，提供了化合物61501b的晶体，所述晶体的X-射线粉末衍射图上在下述2θ角有峰：7.2°±0.3°，9.6°±0.3°和23.1°±0.3°。
本发明的另一优选例中，所述晶体的X-射线粉末衍射图上在下述2θ角,有峰：7.2°±0.3°，8.1°±0.3°，9.6°±0.3°，10.5°±0.3°，14.4°±0.3°和23.1°±0.3°。
本发明的另一优选例中，所述晶体的X-射线粉末衍射图上在下述2θ角有峰：5.3°±0.3°，7.2°±0.3°，8.1°±0.3°，9.6°±0.3°，10.5°±0.3°，11.6°±0.3°，14.4°±0.3°，19.4°±0.3°，21.1°±0.3°和23.1°±0.3°有吸收峰。
本发明的另一优选例中，所述晶体具有基本如附图1所示的X-射线粉末衍射图。
测定晶体的X射线粉末衍射的方法在本领域是已知的。例如使用Bruker D8Advanced型号的X射线粉末衍射仪，以2°每分钟的扫描速度，采用铜辐射靶获取图谱。
另一方面，上述化合物61501b的晶体，其具有的纯度相对于化合物61502b的总量而言为80%重量或更高。优选，其具有的纯度相对于化合物61502b的总量而言为90%重量或更高。
本发明另一方面，还提供了化合物61501b在制备化合物Sp-1中的用途，
。
具体的，将化合物（61501b）与化合物（61501c）反应，制备化合物（61501a），将化合物（61501a）脱去羟基保护基，得到化合物（Sp-1）：
；
上述方法中，优选在氮气保护下，将化合物61501c在合适的溶剂（如四氢呋喃、二氯甲烷）和合适的温度（如-10℃~5℃，优选0℃）条件下，加入格式试剂（如叔丁基氯化镁，优选叔丁基氯化镁的四氢呋喃溶液）反应约0.5~3小时后，加入步骤（2）分离得到的化合物61501b，反应至结束，向反应液中加入水，然后用乙酸乙酯萃取，得到粗品化合物61501a；上述粗品可通过常规方法如结晶、柱层析等进一步纯化，优选以二氯甲烷-甲醇作为洗脱剂，用硅胶柱层析纯化得到化合物61501a。优选在氮气保护下，将化合物61501a在合适的溶剂（例如二氯甲烷、乙酸乙酯）和适宜的温度（如-10℃~5℃，优选0℃）条件下，用酸（例如三氟醋酸、氯化氢/乙酸乙酯）催化脱去羟基保护基，反应结束后，加入弱碱水溶液（如饱和碳酸氢钠溶液）和有机溶剂（如乙酸乙酯），分离有机层，浓缩、干燥，得到粗品化合物Sp-1，进一步的优选将上述粗品纯化，如采用硅胶柱层析，以二氯甲烷-甲醇为洗脱剂。
所述化合物（61501c）可商业购买获得，或者由化合物61501d制备获得：
。
例如，化合物61501d在合适的溶剂（如四氢呋喃、二氯甲烷、异丙醇或其与水的混合溶液）中，在碱性（如碳酸钠、碳酸氢钠等）条件与二碳酸二叔丁酯反应，制备获得。其中化合物61501d（CAS：95058-81-4）可参考文献An efficient large-scale synthesis of gemcitabine employing a crystalline 2,2-difluoro-α-ribofuranosyl bromide（Tetrahedron [0040-4020] Chang, Young-Kil 年:2010 卷:66期:30页:5687-5691）公开的方法制备获得，或者通过市场购买获得。
本文中所述的术语" 纯化的" 是指给定化合物的纯度。例如，当给定化合物是组合物的主要组分时，所述化合物是" 纯化的"，即，至少50％ w/w 纯度。因此，" 纯化的" 包括至少50％ w/w 纯度、至少60％ w/w 纯度、至少70％纯度、至少80％纯度、至少85％纯度、至少90％纯度、至少92％纯度、至少94％纯度、至少96％纯度、至少97％纯度、至少98％纯度、至少99％纯度、至少99.5％纯度和至少99.9％纯度、其中" 基本上纯的" 包括至少97％纯度、至少98％纯度、至少99％纯度、至少99.5％纯度和至少99.9％纯度。
术语" 约"（也由~表示）是指引用的数值是在标准试验误差内变化的范围的一部分。
表述" 基本上如…中所示" 的特定XRPD 图谱是指XRPD 图谱中峰的位置在目视检查或借助于被选择的峰列表（±0.3°2θ) 的范围内基本上相同。普通技术人员理解，强度可以随着样品而改变。
本发明中所述的术语“纯度”、“纯化的”是指给定的化合物的纯度。例如，当给定的化合物是组合物的主要组分时，所述化合物是纯化的，所述化合物的纯度至少是80%w/w，至少是90%w/w，至少是95%w/w，至少是99%w/w。术语“富集”是指所限定的化合物是组合物的主要组分。例如“富集化合物61501b的组合物”是在所述组合物中化合物61501b是组要组分。
C1~8 醇是指具有所述碳原子数的直链/支链和/或环状/非环状醇。C1~8 醇包括（但不限于）甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇、异丁醇、己醇和环己醇。C2~8 醚是指具有所述碳原子数的直链/支链和/或环状/非环状醚。C2~8 醚包括（但不限于）二甲醚、二乙醚、二异丙醚、二正丁醚、甲基叔丁基醚（MTBE）、四氢呋喃和二噁烷。C3~7酮是指具有所述碳原子数的直链/支链和/或环状/非环状酮。C3~7 酮包括（但不限于）丙酮、甲基乙基酮、丙酮、丁酮、甲基异丁基酮、甲基丁基酮、和环己酮。C3~7 酯是指具有所述碳原子数的直链/支链和/或环状/非环状酯。C3~7 酯包括（但不限于）乙酸乙酯、乙酸丙酯、乙酸正丁酯等。C1~2 氯碳化合物指具有所述碳原子数的氯碳化合物。C1~2 氯碳化合物包括（但不限于）氯仿、二氯甲烷(DCM)、四氯化碳、1,2- 二氯乙烷、和四氯乙烷。C2~7腈指具有所述碳原子数的腈。C2~7腈包括（但不限于）乙腈、丙腈等。C6~12芳香烃指具有作为其主链的苯基基团的经取代的和未经取代的烃。优选的烃包括苯、二甲苯、甲苯、氯苯、邻二甲苯、间二甲苯、对二甲苯、二甲苯类，更优选甲苯。
本发明提供的富集了化合物61501b的组合物，尤其是其中化合物61501b的纯度不低于95%或者更高时，在制备高纯的化合物Sp-1时具有显著的优势。发明人通过大量实验发现，富集了化合物61501b的组合物中61501b的纯度越高，制备得到的化合物Sp-1纯度也越高。其次，本发明提供的富集化合物61501b的组合物的制备方法，操作简便，重现性好，制备的组合物中化合物61501b的纯度高，质量好。另外，本发明还提供的化合物61501b的新晶型。
附图说明：
图1显示按照实施例2方法制备的化合物61501b的X-射线粉末衍射（XRPD）谱图；其中：
Labe Position Intensity FWHM FWHM (sec) LHM Position LHM Intensity RHM Position RHM Intensity
1 5.2804 2979.8 0.5352 1926.8646 4.9427 1489.9214 5.4779 1489.9214
2 7.1823 18790 0.2104 757.3567 7.0672 9394.9969 7.2775 9394.9969
3 8.1302 11046 0.2162 778.4982 8.0101 5522.8734 8.2263 5522.8734
4 9.6044 27189 0.1916 689.8162 9.4976 13594.562 9.6893 13594.562
5 10.5144 11307 0.2104 757.349 10.3969 5653.3292 10.6072 5653.3292
6 11.6526 6440 0.2327 837.5713 11.5201 3219.999 11.7527 3219.999
7 13.7162 2308.4 0.3756 1352.2786 13.4872 1154.2135 13.8628 1154.2135
8 14.3802 10937 0.2233 803.8413 14.2503 5468.3332 14.4736 5468.3332
9 15.7764 3340.2 0.2985 1074.523 15.6113 1670.1175 15.9098 1670.1175
10 16.1325 3149.2 0.3581 1289.0177 15.927 1574.6181 16.2851 1574.6181
11 18.438 5503.7 0.2239 806.0012 18.3046 2751.8554 18.5285 2751.8554
12 19.4135 8377 0.234 842.2961 19.2702 4188.4999 19.5041 4188.4999
13 21.0649 6813.1 0.2356 848.0567 20.9271 3406.5369 21.1627 3406.5369
14 22.28 2369.7 0.3545 1276.1935 22.0567 1184.8381 22.4112 1184.8381
15 23.1413 14030 0.2224 800.8144 23.0087 7014.8613 23.2311 7014.8613
16 23.4262 2415.7 0.3011 1083.961 23.2757 1207.8268 23.5768 1207.8268
17 27.5688 2471.8 0.4659 1677.2255 27.3358 1235.8845 27.8017 1235.8845
18 32.3292 2274.1 0.4299 1547.5242 32.1143 1137.0724 32.5442 1137.0724
图2显示按照实施例2方法制备的化合物61501b的HPLC纯度检测谱图，其中化合物（61501b）的HPLC纯度为100%；其峰数据如下所示：
。
图3显示按照实施例4方法制备得到的化合物Sp-1的HPLC分析谱图，其中化合物Sp-1的HPLC纯度为100%，其峰数据如下所示：
。
图4显示按照实施例4方法制备得到的化合物Sp-1的31P-NMR谱图，其中，δP 3.64。
图5显示按照实施例4方法制备得到的化合物Sp-1的1H-NMR。
图6显示对比实施例1制备化合物1所采用的化合物（61502）的HPLC谱图，其异构体61501e与61501b的比率为26.25%:72.03%，其峰数据如下所示：
。
图7显示按照对比实施例1方法制备的化合物1的HPLC谱图，其异构体Rp-1与Sp-1的比例为10.82%:89.18%，其峰数据如下所示：
。
具体实施例
以下结合实施例对本发明的内容做进一步的阐释和说明，应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件或按照制造厂商所建议的条件。除非另外说明，否则所有的百分数、比率、比例、或份数按重量计。
本发明中的重量体积百分比中的单位是本领域技术人员所熟知的，例如是指在每毫升的溶液中溶质的重量（g）。除非另行定义，文中所使用的所有专业与科学用语与本领域熟练人员所熟悉的意义相同。此外，任何与所记载内容相似或均等的方法及材料皆可应用于本发明方法中。文中所述的较佳实施方法与材料仅作示范之用。
本发明中，化合物Sp-1的纯度通过HPLC方法测定，HPLC采用以下柱和条件进行：十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂（YMC-hydrosphere C18柱，150mm×4.6mm 3μm），以0.1%磷酸溶液为流动相A；以甲醇-乙腈（30∶70）为流动相B；必要时流动相A：流动相B以4:1~1:4梯度洗脱，1.0(ml/min)，运行46min，检测波长为220nm。
本发明化合物61501b的纯度也是通过HPLC方法测定，HPLC采用以下柱和条件进行：YMC hydrosphere 150*4.6mm，3um；流动相采用40%~85%甲醇，2‰磷酸/水，运行46min，各种线性梯度和在必要时的调节剂，1.0(ml/min)。
实施例 1 化合物61502的制备
在-80℃下向61501h（20g）的二氯甲烷（60ml）溶液中加入61501g（20.6g），接着加入19.3g三乙胺（20ml二氯甲烷稀释）溶液。将混合物在室温下搅拌过夜。向混合物中加入61501f，接着加入19.3g三乙胺（20ml二氯甲烷稀释）溶液，混合物在室温下搅拌4h。混合物直接脱溶，残余物溶解于乙酸乙酯（200ml）和水（400ml），分离乙酸乙酯后，用乙酸乙酯（2*100ml）洗水相，合并乙酸乙酯相，用盐水洗涤乙酸乙酯相，并用无水硫酸钠干燥。蒸除乙酸乙酯，得到目标化合物（61502），直接用于下一步纯化。
实施例 2化合物61501b的制备:
化合物61502（120g）用乙酸乙酯（240ml）溶解，不断搅拌，在室温下缓慢滴加石油醚（720ml），有晶体析出，过滤除去滤液，得到化合物61501b（49.5g），收率41.2%，其XRPD谱图如图1所示，HPLC为100%（如图2所示）。
实施例 3化合物61501c的制备:
室温下向化合物61501d（20g）于四氢呋喃（200ml）和水（100ml）的混合溶液中加入碳酸钠（35.4g），接着加入二碳酸二叔丁酯（17.5g），室温搅拌至反应完毕。用乙酸乙酯（3*200ml）萃取混合物，合并乙酸乙酯，并用食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥。蒸除溶剂后通过硅胶色谱法（2.5%~10%甲醇/二氯甲烷）纯化残余物，得到化合物（61501c） 18g，收率：67%。
实施例 4化合物Sp-1的制备
（1）、化合物61501a的制备：在0℃下向化合物61501c（5g）的四氢呋喃（25ml）溶液中加入叔丁基氯化镁溶液（1.0m 41.28ml），搅拌反应1h后，加入化合物61501b（12.42g），室温搅拌至反应完毕。向混合物中加入水（250ml），用乙酸乙酯（3*250ml）萃取水相，合并乙酸乙酯相，用食盐水洗涤，并用无水硫酸钠干燥，脱溶。通过硅胶柱层析（流动相：甲醇/二氯甲烷（甲醇所占比例由2.5%升至5%），梯度洗脱）纯化得化合物61501a（6.7g），收率71.3%。
（2）化合物Sp-1的制备：在0℃下向化合物61501a（6.7g）的二氯甲烷（33.5ml）溶液中加入三氟醋酸（20.1ml），保温搅拌至反应完毕。混合物脱溶后加入碳酸氢钠溶液（150ml），用乙酸乙酯萃取（3*150ml）合并乙酸乙酯相，用食盐水洗涤，并用无水硫酸钠干燥，脱溶后，通过硅胶柱层析（流动相：甲醇/二氯甲烷（甲醇所占比例由2.5%升至10%），梯度洗脱）纯化，得到化合物SP-1（2.7g，收率：47%），HPLC:100%（如图3所示）；31P-NMR (202MHz,MeOD): δP 3.64.（如图4所示）;1H-NMR(500MHz,MeOD):δH: 7.56,7.52 (2d,J=7.5Hz,1H,H-6), 7.38-7.33(m,7H,ArH), 7.26-7.19(m,3H,ArH), 6.25(apparent q, J=7.5Hz,1H,H-1’), 5.88,5.84 (2×d,J=7.5Hz,1H,H-5), 5.18-5.12(m,2H,OCH2Ph), 4.49-4.42(m,1H,H-5’), 4.38-4.31(m,1H,H-5’), 4.25-4.18(m,1H,H-3’), 4.07-4.01(m,2H,H-4’,CHCH3), 1.38 (apparent t,J=8.5Hz,3H,CHCH3)（如图5所示）。
实施例 5化合物61501b的制备:
化合物61502（120g）用乙酸乙酯（240ml）溶解，在20℃~30℃下不断搅拌，溶解，缓慢滴加石油醚（720ml），有晶体析出，过滤除去滤液，得到化合物61501b（61.3g），收率51%，其XRPD谱图如图1所示，HPLC:99.5%。
实施例 6化合物61501b的制备:
化合物61502（120g）用异丙醇（150ml）溶解，在40℃~50℃下不断搅拌，溶解，缓慢滴加石油醚（600ml），有晶体析出，过滤除去滤液，得到化合物61501b（54.08g），收率45%， HPLC:99.1%。
实施例 7化合物61501b的制备:
化合物61502（120g）用乙酸乙酯（300ml）溶解，在45℃~50℃下不断搅拌，溶解，缓慢滴加石油醚（1800ml），有晶体析出，过滤除去滤液，得到化合物61501b（57.7g），收率48%，，HPLC纯度显示为99.8%。
实施例 8化合物61501b的制备:
化合物61502（120g）用乙腈（1200ml）溶解，在10℃~20℃下不断搅拌，溶解，缓慢滴加己烷（2400ml），有晶体析出，过滤除去滤液，得到化合物61501b（36.1g），收率30%， HPLC：98.8%。
对比实施例 1 由化合物61502制备化合物Sp-1
（1）、化合物615012a的制备：在0℃下向化合物（61501c）（2g）的四氢呋喃（10ml）溶液中加入叔丁基氯化镁溶液（1.0m 16ml），搅拌反应1h后，加入化合物（61502）（5g）（其异构体61501e与61501b的比率为26.25%:72.03%，如图6所示），室温搅拌至反应完毕。向混合物中加入水（50ml），用乙酸乙酯（3*100ml）萃取水相，合并乙酸乙酯相，用食盐水洗涤，并用无水硫酸钠干燥，脱溶。通过硅胶柱层析（洗脱剂：甲醇/二氯甲烷2.5%~5%梯度洗脱）纯化得化合物（615012a）1.9g，收率53%。
（2）、化合物（Sp-1）的制备：在0℃下向化合物（615012a）（3.98g）的二氯甲烷（10ml）溶液中加入三氟醋酸（12ml），保温搅拌至反应完毕。混合物脱溶后加入碳酸氢钠溶液（100ml），用乙酸乙酯萃取（3*80ml）合并乙酸乙酯相，用食盐水洗涤，并用无水硫酸钠干燥，脱溶后，通过多次硅胶柱层析（流动相：甲醇/二氯甲烷（甲醇所占比例由2.5%升至10%），梯度洗脱）纯化，得到化合物（1）（1.1g），HPLC检测显示异构体Rp-1与Sp-1的比例为10.82%:89.18%（如图7所示）；31P-NMR (202MHz,MeOD): δP 3.81，3.64，其中δP 3.81是异构体Rp-1中P的吸收位置，δP 3.64是异构体Sp-1中P的吸收位置。

Claims (22)

1.一种富集了化合物61501b的组合物，其特征在于，所述化合物61501b的纯度不低于90%，
。
2.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述化合物61501b的纯度不低于95%。
3.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述化合物61501b的纯度不低于99%。
4.一种富集化合物61501b的组合物制备方法，包括以下步骤：
（1）、化合物（61501h）与化合物（61501g）在碱性条件下反应后，再与化合物（61501f）反应，得到化合物61502：
；
（2）、将化合物61502通过异构体分离，得到富集了化合物61501b的组合物：
。
5.根据权利要求4所述方法，其特征在于，步骤（2）所述的异构体分离包括将化合物61502进行萃取、色谱分析或结晶以获得化合物61501b。
6.根据权利要求4所述方法，其特征在于，步骤（2）所述的异构体分离包括：第一步，将化合物61502溶于有机溶剂中，搅拌溶解；第二步，向上述溶液系统中滴加反溶剂，析晶，得到化合物61501b。
7.根据权利要求6所述方法，其特征在于，所述有机溶剂包含以下的至少一种：C1~8醇、C2~8醚、C3~7酮、C3~7酯、C1~2氯碳化合物和C2~7腈。
8.根据权利要求7所述方法，其特征在于，所述有机溶剂选自乙酸乙酯，叔丁基甲醚，异丙醇或四氢呋喃。
9.根据权利要求6所述方法，其特征在于，所述反溶剂包含以下的至少一种：C5~12饱和烃、C6~12芳香烃和石油醚。
10.根据权利要求9所述方法，其特征在于，所述反溶剂选自石油醚或己烷。
11.根据权利要求6所述方法，其特征在于，有机溶剂与反溶剂的体积比为1:4~6（v/v）；化合物61502与有机溶剂的用量比为1:1.25~2.5（w/v）。
12.根据权利要求6所述方法，其特征在于，所述有机溶剂选自乙酸乙酯，所述反溶剂选自石油醚。
13.根据权利要求6所述方法，其特征在于，步骤（2）所述的异构体分离方法包括：第一步，将化合物61502溶于乙酸乙酯中，室温搅拌溶解；第二步，向上述溶液系统中滴加石油醚，析晶，过滤，得到化合物61501b。
14.根据权利要求13所述方法，其特征在于，化合物61502与乙酸乙酯的用量比为1:1.25~2.5（w/v），乙酸乙酯与石油醚的用量比为1:4~6（v/v）。
15.根据权利要求6~12任一项权利要求所述方法，其特征在于，步骤（2）搅拌溶解及析晶温度为10℃~50℃。
16.根据权利要求4~16任一项所述方法，其特征在于，所制备的富集化合物61501b的组合物中，化合物61501b的纯度不低于90%。
17.化合物61501b的晶体，其特征在于，所述晶体的X-射线粉末衍射图上在下述2θ角有峰：7.2°±0.3°，9.6°±0.3°和23.1°±0.3°。
18.根据权利要求17所述晶体，其特征在于，所述晶体的X-射线粉末衍射图上在下述2θ角,有峰：7.2°±0.3°，8.1°±0.3°，9.6°±0.3°，10.5°±0.3°，14.4°±0.3°和23.1°±0.3°。
19.根据权利要求17所述晶体，其特征在于，所述晶体的X-射线粉末衍射图上在下述2θ角有峰：5.3°±0.3°，7.2°±0.3°，8.1°±0.3°，9.6°±0.3°，10.5°±0.3°，11.6°±0.3°，14.4°±0.3°，19.4°±0.3°，21.1°±0.3°和23.1°±0.3°有吸收峰。
20.根据权利要求18所述晶体，其特征在于，所述晶体具有基本如附图1所示的X-射线粉末衍射图。
21.根据权利要求17~20任一项权利要求所述晶体，其特征在于，其具有的纯度相对于化合物61502b的总量为90%重量或更高。
22.化合物61501b在制备化合物Sp-1中的用途，
。
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