CN110981910B - 一种用于治疗丙肝的无引湿性低变异性新晶型 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种用于治疗丙肝的无引湿性低变异性新晶型，新晶型T结晶工艺简便，易于工业化生产，无引湿性。使用该晶型T进一步制备成合适的制剂后，能够显著降低受试者餐后Cmax的变异系数，使药品的安全性有效性得到更可靠的保障。

Description

一种用于治疗丙肝的无引湿性低变异性新晶型

技术领域

本发明涉及生物医药领域，具体为一种治疗HCV的药物的新晶型。

背景技术

丙型肝炎病毒(HCV)感染是世界范围内流行的疾病，全球慢性感染者已超过2亿，埃及的慢性感染率为15％，巴基斯坦为4.8％，中国为3.2％，位列世界前三。丙型肝炎病毒感染的临床表现多样，轻至炎症，重至肝硬化、肝癌。慢性丙型肝炎还可以并发某些肝外表现，包括类风湿性关节炎、干燥性结膜角膜炎、扁平苔藓、肾小球肾炎、混合型冷球蛋白血症、B细胞淋巴瘤和迟发性皮肤卟啉症等，可能是机体异常免疫反应所致。且丙肝肝硬化失代偿期时，可以出现各种并发症，如腹水腹腔感染，上消化道出血，肝性脑病，肝肾综合征，肝衰竭等表现。

索磷布韦，英文名为Sofosbuvir，是吉利德科学公司开发用于治疗慢性丙型肝炎的突破性药物，2013年12月经美国食品药品监督管理局批准在美国上市，2014年1月经欧洲药品管理局批准在欧盟上市。索非布韦单独使用或复方(联合Ledipasvir或Velpatasvir)能治疗全基因型丙肝，治愈率在95％以上。

高变异药物是指当某一药物的个体内变异系数CV(以AUC和C_max计算的个体内变异系数)≥30％时，该药物被定义为高变异性的药物(highly variable drugs，HVD)。如果受试制剂和参比制剂之间是生物等效的，那么两种制剂的生物等效性指标(即AUC和Cmax)的几何均数比例(the geometric mean ratio，GMR)的90％置信区间(CI)必须落入80％～125％的生物等效性范围内。据不完全统计，FDA申报的仿制药中大约有15％～20％的药物属于高变异性药物。高变异性药物即使采用参比制剂自身比较，也会存在生物不等效的风险，因此，高变异药物的生物等效性研究，是药学研究者们一直困扰的难题。

世界卫生组织(WHO)对索氟布韦片

的生物等效性研究指南推荐进行索氟布韦片餐后状态下的生物等效性试验，给药剂量为400mg，受试人群为健康受试者，检测的成分为原形药物，结果显示，餐后状态下索氟布韦的C_max显示出高变异，变异系数高达54％。

发明内容

一方面，本发明提供了一种化合物I的晶型T，所述晶型T在使用CuKa射线得到的粉末X射线衍射图谱中的2θ角包含特征峰：5.0°±0.2°、7.2°±0.2°、9.7°±0.2°、10.0°±0.2°、10.3°±0.2°和19.1°±0.2°，其中所述化合物I结构为：

在一些实施方案中，所述晶型T在使用CuKa射线得到的粉末X射线衍射图谱中的2θ角包含特征峰：5.0°±0.2°、7.2°±0.2°、9.7°±0.2°、10.0°±0.2°、10.3°±0.2°、19.1°±0.2°、21.0°±0.2°和25.2°±0.2°。

在一些实施方案中，所述晶型T在使用CuKa射线得到的粉末X射线衍射图谱中的2θ角包含特征峰：5.0°±0.2°、7.2°±0.2°、9.7°±0.2°、10.0°±0.2°、10.3°±0.2°、16.1°±0.2°、16.9°±0.2°、18.3°±0.2°、19.1°±0.2°、20.1°±0.2°、20.6°±0.2°、21.0°±0.2°、23.2°±0.2°、24.6°±0.2°和25.2°±0.2°。

在一些实施方案中，所述晶型T具有使用CuKa射线得到的如图1所示的X射线衍射图谱。

另一方面，本发明提供了一种晶型T的制备方法：将化合物I加入至选自4-甲基-2-戊酮、环己酮或2-丁酮的一种溶剂中，升温溶解，保温搅拌，缓慢滴加少量反溶剂，缓慢降温，搅拌，再快速滴加大量反溶剂，进一步缓慢降温，搅拌析晶，过滤，得白色固体，即为化合物I晶型T，其中所述反溶剂选自乙酸乙酯、乙酸丁酯或乙酸异丙酯中的一种。

在一些实施方案中，所述升温溶解的温度为45-55℃，优选为45℃、50℃或55℃。

在一些实施方案中，所述第一次缓慢降温为降至20-25℃；优选为20℃或25℃。

在一些实施方案中，所述进一步缓慢降温为降至10-15℃；优选为10℃或15℃。

在一些实施方案中，所述搅拌的速度均为200-300转/分钟；优选为200转/分钟、250转/分钟或300转/分钟。

在一些实施方案中，所述少量反溶剂的体积为溶解化合物I溶剂体积的20～40％，优选为20％、25％、30％、35％或40％。

在一些实施方案中，所述大量反溶剂的体积为溶解化合物I溶剂体积的3-5倍，优选为3倍、3.5倍、4倍、4.5倍或5倍。

另一方面，本发明提供了一种药物组合物，所述药物组合物含有化合物I晶型T和药学上可接受的辅料。

在一些实施方案中，所述药物组合物含有化合物I晶型T、甘露醇、微晶纤维素、交联羧甲基纤维素钠、胶态二氧化硅和硬脂酸镁。

在一些实施方案中，所述药物组合物，按重量计，含有20-40％的化合物I晶型T、20-40％的甘露醇、20-40％的微晶纤维素、2-8％的交联羧甲基纤维素钠、0.2-2％的胶态二氧化硅和1-3％的硬脂酸镁。

在一些实施方案中，所述药物组合物，按重量计，含有33.33％的化合物I晶型T、30.00％的甘露醇、29.67％的微晶纤维素、5.00％的交联羧甲基纤维素钠、0.50％的胶态二氧化硅和1.50％的硬脂酸镁。

本发明记载的新晶型T，结晶工艺简便，易于工业化生产，无引湿性。使用该晶型T进一步制备成合适的制剂后，能够显著降低受试者餐后Cmax的变异系数，使药品的安全性有效性得到更可靠的保障。

附图说明

图1为化合物I晶型T使用CuKa射线得到的X射线衍射图谱。

具体实施方式

晶型制备例1

将化合物I 4.0g加入至10ml环己酮溶液中，升温至55℃溶解，保温搅拌，搅拌速度为200r/min，缓慢滴加乙酸乙酯2ml，再缓慢降温至20℃，保温搅拌2h后，再快速加入乙酸乙酯35ml，缓慢降温至10℃，保温搅拌析晶2h后，过滤，所得滤饼50℃下真空干燥，得白色固体，即化合物I晶型T，共计3.69g，纯度大于为99.5％。经过检测，该晶型产物具有使用CuKa射线得到的如图1所示的X射线衍射图谱(X-射线粉末衍射图谱在下列设备上进行收集：D8Advance粉末衍射仪，所述衍射仪使用CuKα射线(40kV,40mA),theta-theta测角仪，0.6mm发散狭缝，2.5mm索拉狭缝，0.02mm镍片，一维阵列探测器。所述装置使用认证的刚玉标准(SRM1976b)来进行性能检查。用于数据收集的软件是DIFFRAC.COMMANDER，检测数据使用DIFFRAC.EVAV4.3.221CFR Part11进行分析和呈现)。

晶型制备例2

将化合物I 4.0g加入至10ml 2-丁酮溶液中，升温至45℃溶解，保温搅拌，搅拌速度为300r/min，缓慢滴加乙酸丁酯3ml，再缓慢降温至25℃，保温搅拌2h后，再快速加入乙酸丁酯30ml，缓慢降温至15℃，保温搅拌析晶2h后，过滤，所得滤饼50℃下真空干燥，得白色固体，即化合物I晶型T，共计3.62g，纯度大于为99.5％。经X射线粉末衍射分析，其图谱与制备例1所得样品的图谱一致。

晶型制备例3

将化合物I 4.0g加入至10ml 4-甲基-2-戊酮溶液中，升温至50℃溶解，保温搅拌，搅拌速度为250r/min，缓慢滴加乙酸异丙酯4ml，再缓慢降温至20℃，保温搅拌2h后，再快速加入乙酸异丙酯40ml，缓慢降温至10℃，保温搅拌析晶2h后，过滤，所得滤饼50℃下真空干燥，得白色固体，即化合物I晶型T，共计3.74g，纯度大于为99.5％。经X射线粉末衍射分析，其图谱与制备例1所得样品的图谱一致。

晶型制备例4

将化合物I 4.0g加入至10ml环己酮溶液中，升温至50℃溶解，保温搅拌，搅拌速度为250r/min，缓慢滴加乙酸异丙酯3ml，再缓慢降温至20℃，保温搅拌2h后，再快速加入乙酸异丙酯50ml，缓慢降温至10℃，保温搅拌析晶2h后，过滤，所得滤饼50℃下真空干燥，得白色固体，即化合物I晶型T，共计3.66g，纯度大于为99.5％。经X射线粉末衍射分析，其图谱与制备例1所得样品的图谱一致。

晶型制备例5

将化合物I 4.0g加入至10ml环己酮溶液中，升温至50℃溶解，保温搅拌，搅拌速度为250r/min，缓慢滴加乙酸异丙酯4ml，再缓慢降温至20℃，保温搅拌2h后，再快速加入乙酸乙酯45ml，缓慢降温至10℃，保温搅拌析晶2h后，过滤，所得滤饼50℃下真空干燥，得白色固体，即化合物I晶型T，共计3.79g，纯度大于为99.5％。经X射线粉末衍射分析，其图谱与制备例1所得样品的图谱一致。

晶型制备例6

将化合物I 4.0g加入至10ml环己酮溶液中，升温至55℃溶解，保温搅拌，搅拌速度为200r/min，缓慢滴加乙酸乙酯40ml，缓慢降温至25℃，保温搅拌析晶析晶，过滤，所得滤饼50℃下真空干燥，得白色固体，经检测，该产物XRPD图谱与晶型T的XRPD谱图差异较大。

晶型制备例7

将化合物I 4.0g加入至10ml 4-甲基-2-戊酮溶液中，升温至55℃溶解，保温搅拌，搅拌速度为250r/min，缓慢滴加乙酸异丙酯35ml，缓慢降温至10℃，保温搅拌析晶析晶，过滤，所得滤饼50℃下真空干燥，得白色固体，经检测，该产物XRPD图谱与晶型T的XRPD谱图差异较大。

晶型制备例8

将化合物I 4.0g加入至10ml丙酮溶液中，升温至50℃溶解，保温搅拌，搅拌速度为250r/min，缓慢滴加乙酸乙酯4ml，再缓慢降温至20℃，保温搅拌2h后，再快速加入乙酸乙酯40ml，缓慢降温至10℃，保温搅拌析晶2h后，过滤，所得滤饼50℃下真空干燥，得白色固体，经检测，该产物XRPD图谱与晶型T的XRPD谱图差异较大。

引湿性研究

按照如下方法研究晶型T、晶型I和晶型VI的引湿性。其中晶型I和晶型VI经由公开号为CN104039319B的专利记载的方法制备而来。

取干燥的具塞玻璃称量瓶(外径为50mm，高为15mm)，于试验前一天置于人工气候箱(设定温度为25℃±1℃，相对湿度为80％±2％)内，精密称定，重量记为m₁。取供试品适量，平铺于上述称量瓶中，供试品厚度约为1mm，精密称定，重量记为m₂。将称量瓶敞口，并与瓶盖同置于上述恒温恒湿条件下24小时。盖好称量瓶盖子，精密称定，重量记为m₃。增重百分率(M)＝(m₃-m₂)/(m₂-m₁)×100％。

制剂制备例1

混合：化合物I晶型T 40kg、甘露醇36kg、微晶纤维素29.6kg、交联羧甲基纤维素钠3kg、胶态二氧化硅0.54kg加入混合料斗内，设置混合转速10r/min，混合时间30min。

过筛I：混合结束后将混合物采用粉碎整粒机过筛，筛网孔径2.0mm，整粒机转速500r/min。

过筛II：将胶态二氧化硅0.06kg、微晶纤维素6kg按顺序加入到粉碎整粒机料斗中过筛，筛网孔径2.0mm，整粒机转速500r/min。

预混：在混合料斗中加入预处理后的内加物料混合物(即过筛II得到的产物)和硬脂酸镁0.9kg，设置混合转速10r/min，混合时间10min。

干法制粒：将预混后的混合物加入干法制粒机进行制粒，制粒参数送料转速(8～12)r/min，挤压转速(8～12)r/min，制粒转速(95～125)r/min，挤压压力(8～12)kN，侧封压力(10～20)kN，筛网目数为24目。

总混：在混合料斗内加入干法制粒后物料、预处理后的外加辅料、交联羧甲基纤维素3kg、硬脂酸镁0.9kg，设置混合转速10r/min，混合时间15min。

总混结束后取样检测中间产品含量和水分，合格标准：含量31.7％～34.9％，水分≤4.0％。

压片：根据中间体含量测定计算标准片重。压片模具为专用异形冲，调整充填深度、预压片厚和主压片厚，使预压压力≤7.0KN，主机压力为(13.0～24.0)kN，生产速度为(45±5)kT/h，过程中控制外观、平均片重、片重差异、硬度与崩解时限符合要求。

素片外观应片形一致，表面完整光洁，边缘整齐，色泽均匀，不得有变色、色斑或麻点等现象；片重差异控制±3.5％，每片重量均在片重控制范围内；硬度控制范围为200N～300N；崩解时限控制水中6片15min内全部崩解。

包衣：配制浓度为15％(w/w)的薄膜包衣液(胃溶型欧巴代)，溶胀分散1h后使用。

开机预热，控制主机转速在1.6r/min～5.0r/min范围，负压在40Pa～100Pa范围，调整热风柜温度使入口温度达到55℃～80℃，将压片中间产品加入包衣锅内，片芯预热并自动除粉，至片床温度合格后开始包衣操作。

开启包衣操作，控制主机转速1.6r/min～11.0r/min，蠕动泵流量300ml/min～800ml/min，雾化压力0.45MPa～0.50MPa，片床温度37℃～43℃，负压40Pa～100Pa。包衣过程中随时检查外观。

喷液结束时，主机转速控制在1.6r/min～5.0r/min，干燥10min后停止吹热风，待温度降至室温时，停机出片。

包衣中间产品外观应色泽均匀，表面光滑，无粘连、无包衣液脱落等现象，包衣增重控制在2.0％～4.0％。终产品每片含化合物I 400mg。

制剂制备例2

采用与制剂制备例1相同制备方法，分别制备主药为化合物I晶型1的制剂，各辅料用量与制剂制备例1相同。其中晶型1经由公开号为CN104039319B的专利记载的方法制备而来。

制剂制备例3

采用与制剂制备例1相同制备方法，分别制备主药为化合物I晶型6的制剂，各辅料用量与制剂制备例1相同。其中晶型6经由公开号为CN104039319B的专利记载的方法制备而来。

不同化合物I晶型变异系数的测定

将45名健康受试者随机分为3组(n＝15)，每组受试者在餐后状态下分别服用制剂制备例1-3制备得到的片剂1片(每片含化合物I 400mg)。在给药前于受试者前臂放置静脉留置针，每次采集血样前，需要弃去约0.5mL血液后再采集血样，并用适量肝素钠溶液封管。

受试者的采血时间点为：每周期服药前0h(服药前1h内，进食前)和服药后0.25、0.5、0.75、1、1.25、1.5、1.75、2、2.5、3、3.5、4、5、6、8、12、24、48h和72h共20个采血点采集静脉血3mL。

取静脉血并测定血浆中化合物I的含量，得到C_max值并计算每组个体内变异系数CV，结果如下表。

组别	C<sub>max</sub>变异系数CV
		制剂制备例1	24.6％
制剂制备例2	56.4％
		制剂制备例3	55.9％

实验结果显示，受试者服用制剂制备例1制得的片剂(即采用化合物I晶型T作为原料药)餐后C_max的变异系数CV仅为24.6％，低于30％。而采用化合物晶型I或晶型VI制备得到的片剂，受试者餐后_max的变异系数CV均高于50％，该实验结果与受试者服用FDA上市药物

得到的结果一致。/>

Claims (11)

1.一种化合物I的晶型T，所述晶型T在使用CuKa射线得到的粉末X射线衍射图谱中的2θ角有特征峰：5.0°、7.2°、9.7°、10.0°、10.3°、16.1°、16.9°、18.3°、19.1°、20.1°、20.6°、21.0°、23.2°、24.6°和25.2°，每个2θ值有±0.2°(2θ)的误差，其中所述化合物I结构为：

2.如权利要求1所述的晶型T，具有使用CuKa射线得到的如图1所示的衍射图谱。

3.一种如权利要求1或2所述的晶型T的制备方法，其特征在于将化合物I加入至选自4-甲基-2-戊酮、环己酮或2-丁酮的一种溶剂中，升温溶解，保温搅拌，缓慢滴加少量反溶剂，缓慢降温，搅拌，再快速滴加大量反溶剂，进一步缓慢降温，搅拌析晶，过滤，得白色固体，即为化合物I晶型T，其中所述反溶剂选自乙酸乙酯、乙酸丁酯或乙酸异丙酯的一种。

4.如权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述升温溶解的温度为45-55℃；所述第一次缓慢降温的温度范围为20-25℃；所述进一步缓慢降温的温度范围为10-15℃。

5.如权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述升温溶解的温度为45℃、50℃或55℃；所述第一次缓慢降温的温度范围为20℃或25℃；所述进一步缓慢降温的温度范围为10℃或15℃。

6.如权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述搅拌的速度均为200-300转/分钟。

7.如权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述搅拌的速度均为200转/分钟、250转/分钟或300转/分钟。

8.如权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述少量反溶剂的体积为溶解化合物I溶剂体积的20～40％。

9.如权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述少量反溶剂的体积为溶解化合物I溶剂体积的20％、25％、30％、35％或40％。

10.如权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述大量反溶剂的体积为溶解化合物I溶剂体积的3-5倍。

11.如权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述大量反溶剂的体积为溶解化合物I溶剂体积的3倍、3.5倍、4倍、4.5倍或5倍。

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