RU2764767C2 - β-D-2'-ДЕЗОКСИ-2'-α-ФТОР-2'-β-С-ЗАМЕЩЕННЫЕ-2-МОДИФИЦИРОВАННЫЕ-N6-ЗАМЕЩЕННЫЕ ПУРИНОВЫЕ НУКЛЕОТИДЫ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ВЫЗВАННЫХ HCV ЗАБОЛЕВАНИЙ - Google Patents

β-D-2'-ДЕЗОКСИ-2'-α-ФТОР-2'-β-С-ЗАМЕЩЕННЫЕ-2-МОДИФИЦИРОВАННЫЕ-N6-ЗАМЕЩЕННЫЕ ПУРИНОВЫЕ НУКЛЕОТИДЫ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ВЫЗВАННЫХ HCV ЗАБОЛЕВАНИЙ Download PDF

Info

Publication number
RU2764767C2
RU2764767C2 RU2017133011A RU2017133011A RU2764767C2 RU 2764767 C2 RU2764767 C2 RU 2764767C2 RU 2017133011 A RU2017133011 A RU 2017133011A RU 2017133011 A RU2017133011 A RU 2017133011A RU 2764767 C2 RU2764767 C2 RU 2764767C2
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
compound
alkyl
hcv
methyl
fluoro
Prior art date
Application number
RU2017133011A
Other languages
English (en)
Other versions
RU2017133011A3 (ru
RU2017133011A (ru
Inventor
Жан-Пьер Соммадосси
Адель МУССА
Original Assignee
Атеа Фармасьютикалс, Инк.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Атеа Фармасьютикалс, Инк. filed Critical Атеа Фармасьютикалс, Инк.
Publication of RU2017133011A publication Critical patent/RU2017133011A/ru
Publication of RU2017133011A3 publication Critical patent/RU2017133011A3/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2764767C2 publication Critical patent/RU2764767C2/ru

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
    • C07H19/02—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof sharing nitrogen
    • C07H19/04—Heterocyclic radicals containing only nitrogen atoms as ring hetero atom
    • C07H19/16—Purine radicals
    • C07H19/20—Purine radicals with the saccharide radical esterified by phosphoric or polyphosphoric acids
    • C07H19/207—Purine radicals with the saccharide radical esterified by phosphoric or polyphosphoric acids the phosphoric or polyphosphoric acids being esterified by a further hydroxylic compound, e.g. flavine adenine dinucleotide or nicotinamide-adenine dinucleotide
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
    • A61K31/7052—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides
    • A61K31/706—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom
    • A61K31/7064—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines
    • A61K31/7076—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines containing purines, e.g. adenosine, adenylic acid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
    • C07H19/02—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof sharing nitrogen
    • C07H19/04—Heterocyclic radicals containing only nitrogen atoms as ring hetero atom
    • C07H19/16—Purine radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
    • C07H19/02—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof sharing nitrogen
    • C07H19/04—Heterocyclic radicals containing only nitrogen atoms as ring hetero atom
    • C07H19/16—Purine radicals
    • C07H19/20—Purine radicals with the saccharide radical esterified by phosphoric or polyphosphoric acids

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Saccharide Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)

Abstract

Настоящее изобретение относится к соединению, выбранному из соединений формул:
Figure 00000301
Figure 00000302
Figure 00000303
, или к его фармацевтически приемлемой соли, к соединению
формулы:
Figure 00000304
или к его фармацевтически приемлемой соли, где соединение по меньшей мере на 90% свободно от противоположного R-энантиомера по фосфору, к соединению формулы:

Description

Ссылка на родственные заявки
Согласно настоящей заявке испрашивается приоритет в соответствии с заявкой на выдачу патента США с серийным №62/129319, поданной 6 марта 2015 года, заявкой на выдачу патента США с серийным №62/253958, поданной 11 ноября 2015 года, а также заявкой на выдачу патента США с серийным №62/276597, поданной 8 января 2015 года, каждая из которых включена в настоящий документ посредством отсылки во всей своей полноте.
Область техники, к которой относится настоящее изобретение
Настоящее изобретение относится к нуклеотидным соединениям и композициям, а также к их применениям для лечения вызванных вирусом гепатита С («HCV») заболеваний.
Предшествующий уровень техники настоящего изобретения
Вирус гепатита С (HCV) является содержащим однонитевую РНК вирусом и представителем рода Hepacivirus. По имеющимся оценкам, 75% всех случаев заболеваний печени вызываются HCV. Инфекция HCV может приводить к циррозу и злокачественной опухоли печени, а при прогрессировании к печеночной недостаточности, которая может потребовать трансплантации печени. Приблизительно 170-200 миллионов людей в мире являются инфицированными, при этом в Соединенных Штатах Америки насчитывают 3-4 миллиона случаев инфекции.
РНК-полимераза является ключевым компонентом в нацеливании на содержащие однонитевую РНК вирусы. РНК-зависимая РНК-полимераза -неструктурный белок NS5B - HCV является ключевым ферментом, отвечающим за инициацию и катализ синтеза вирусной РНК. По этой причине в настоящий момент NS5B HCV представляет собой привлекательную мишень для поиска и разработки лекарственных средств против HCV. Существуют два основных подкласса ингибиторов NS5B: нуклеозидные аналоги, которые анаболизируются до их активных трифосфатов, которые действуют как альтернативные субстраты для полимеразы, и ненуклеозидные ингибиторы (NNI), которые связываются с аллостерическими участками в белке. Нуклеозидные или нуклеотидные ингибиторы имитируют естественный субстрат полимеразы и действуют как терминаторы цепи. Они ингибируют инициацию транскрипции РНК и удлинение растущей цепи РНК.
Кроме того, при нацеливании на РНК-полимеразу другие белки содержащего РНК вируса также могут быть мишенью для комбинированных терапевтических средств. Например, белками HCV, которые также представляют собой мишени для терапевтических подходов, являются NS3/4A (серинпротеаза) и NS5A (неструктурный белок, который является незаменимым компонентом репликазы HCV и оказывает ряд эффектов на клеточные пути).
В декабре 2013 года был одобрен первый нуклеозидный ингибитор NS5B полимеразы софосбувир (Sovaldi®, Gilead Sciences). Sovaldi® представляет собой уридин-фосфорамидатное пролекарство, которое поглощается гепатоцитами и подвергается внутриклеточной активации с получением активного метаболита 2'-дезокси-2'-α-фтор-β-С-метилуридин-5'-трифосфата; см. приведенные ниже структуры:
Figure 00000001
Sovaldi®,
Figure 00000002
2'-дезокси-2'-α-фтор-α-С-метилуридин-5'-трифосфат.
Sovaldi® является первым лекарственным средством, которое продемонстрировало безопасность и эффективность в лечении некоторых типов инфекции HCV без потребности совместного введения интерферона. Sovaldi® является третьим лекарственным средством, получившим статус принципиально нового лекарственного средства при одобрении FDA.
В 2014 году FDA США одобрило Harvoni® (ледиспасвир, ингибитор NS5A, и софосбувир) для лечения хронической инфекции вируса гепатита С 1 генотипа. Harvoni® является первой комбинированной пилюлей, одобренной для лечения хронической инфекции HCV 1 генотипа. Это также первый одобренный режим, который не требует введения интерферона или рибавирина. Кроме того, FDA одобрило симепревир (Olysio™) в комбинации с софосбувиром (Sovaldi®) как не предусматривающее интерферон и рибавирин лечение один раз в сутки, все перорально, для взрослых с инфекцией HCV 1 генотипа.
В 2014 году FDA США также одобрило VIEKIRA Pak™ компании AbbVie, упаковку с множеством пилюль, содержащую дасабувир (ненуклеозидный ингибитор полимеразы NS5B), омбитасвир (ингибитор NS5A), паритапревир (ингибитор NS3/4A) и ритонавир. VIEKIRA Pak™ может быть использован с рибавирином или без него для лечения инфицированных HCV 1 генотипа больных, в том числе больных компенсированным циррозом. VIEKIRA Pak™ не требует совместного лечения интерфероном.
В 2015 году FDA США одобрило Technivie™ и Daklinza™ для лечения инфекции HCV 4 генотипа и HCV 3 генотипа, соответственно. Technivie™ (омбитасвир/паритапревир/ритонавир) был одобрен для применения в комбинации с рибавирином для лечения инфекции HCV 4 генотипа у больных без рубцевания и цирроза и является первым вариантом для инфицированных HCV-4 больных, который не требует совместного введения интерферона. Daklinza™ был одобрен для применения с Sovaldi® при лечении инфекций HCV 3 генотипа. Daklinza™ является первым лекарственным средством, которое продемонстрировало безопасность и эффективность в лечении инфекции HCV 3 генотипа без необходимости совместного введения интерферона или рибавирина.
В октябре 2015 года FDA США предупредило о том, что лечение инфекции HCV с помощью Viekira Раk и Technivie может вызывать серьезное поражение печени, прежде всего у больных с первопричинным запущенным заболеванием печени, и потребовало добавить дополнительную информацию о безопасности на этикетку.
Другие одобренные на данный момент терапевтические средства против HCV включают в себя интерферон альфа-2b или пегилированный интерферон альфа-2b (Pegintron®), который может быть введен с рибавирином (Rebetol®), NS3/4A телапревир (Incivek®, Vertex и Johnson & Johnson), боцепревир (Victrelis™, Merck), симепревир (Olysio™, Johnson & Johnson), паритапревир (AbbVie), омбитасвир (AbbVie), (NNI) дасабувир (ABT-333) и Zepatier™ компании Merck (комбинация в одной таблетке двух лекарственных средств гразопревира и элбасвира).
В настоящее время разрабатываются дополнительные ингибиторы NS5B полимеразы. Merck является разработчиком пролекарства нуклеотида уридина MK-3682 (ранее называвшегося Idenix IDX21437). Данное лекарственное средство в настоящее время проходит комбинированные испытания II фазы.
Патенты Соединенных Штатов Америки и WO заявки, которые описывают нуклеозидные ингибиторы полимеразы для лечения Flaviviridae, в том числе HCV, включают в себя поданные компаниями Idenix Pharmaceuticals (6812219; 6914054; 7105493; 7138376; 7148206; 7157441; 7163929; 7169766; 7192936; 7365057; 7384924; 7456155; 7547704; 7582618; 7608597; 7608600; 7625875; 7635689; 7662798; 7824851; 7902202; 7932240; 7951789; 8193372; 8299038; 8343937; 8362068; 8507460; 8637475; 8674085; 8680071; 8691788, 8742101, 8951985; 9109001; 9243025; US 2016/0002281; US 2013/0064794; WO 2015/095305; WO 2015/081133; WO 2015/061683; WO 2013/177219; WO 2013/039920; WO 2014137930; WO 2014/05263 8; WO 2012/154321); Merck (6777395; 7105499; 7125855; 7202224; 7323449; 7339054; 7534767; 7632821; 7879815; 8071568; 8148349; 8470834; 8481712; 8541434; 8697694; 8715638, 9061041; 9156872 и WO2013/009737); Emory University (6348587; 6911424; 7307065; 7495006; 7662938; 7772208; 8114994; 8168583; 8609627; US 2014/0212382 и WO 2014/1244430); Gilead Sciences/Pharmasset Inc. (7842672; 7973013; 8008264; 8012941; 8012942; 8318682; 8324179; 8415308; 8455451; 8563530; 8841275; 8853171; 8871785; 8877733; 8889159; 8906880; 8912321; 8957045; 8957046; 9045520; 9085573; 9090642 и 9139604) и (6908924; 6,949,522; 7094770; 7211570; 7429572; 7601820; 7638502; 7718790; 7772208; RE42015; 7919247; 7964580; 8093380; 8114997; 8173621; 8334270; 8415322; 8481713; 8492539; 8551973; 8580765; 8618076; 8629263; 8633309; 8642756; 8716262; 8716263; 8735345; 8735372; 8735569; 8759510 и 8765710); Hoffman La-Roche (6660721), Roche (6784166; 7608599, 7608601 и 8071567); Alios BioPharma Inc. (8895723; 8877731; 8871737, 8846896, 8772474; 8980865; 9012427; US 2015/0105341; US 2015/0011497; US 2010/0249068; US 2012/0070411; WO 2015/054465; WO 2014/209979; WO 2014/100505; WO 2014/100498; WO 2013/142159; WO 2013/142157; WO 2013/096680; WO 2013/088155; WO 2010/108135), Enanta Pharmaceuticals (US 8575119; 8846638; 9085599; WO 2013/044030; WO 2012/125900), Biota (7268119; 7285658; 7713941; 8119607; 8415309; 8501699 и 8802840), Biocryst Pharmaceuticals (7388002; 7429571; 7514410; 7560434; 7994139; 8133870; 8163703; 8242085 и 8440813), Alla Chem, LLC (8889701 и WO 2015/053662), Inhibitex (8759318 и WO 2012/092484), Janssen Products (8399429; 8431588, 8481510, 8552021, 8933052; 900629 и 9012428), University of Georgia Foundation (6348587; 7307065; 7662938; 8168583; 8673926, 8816074; 8921384 и 8946244), RFS Pharma, LLC (8895531; 8859595; 8815829; 8609627; 7560550; US 2014/0066395; US 2014/0235566; US 2010/0279969; WO 2010/091386 и WO 2012/158811) University College Cardiff Consultants Limited (WO 2014/076490, WO 2010/081082; WO 2008/062206), Achillion Pharmaceuticals, Inc. (WO 2014/169278 и WO 2014/169280), Cocrystal Pharma, Inc. (US 9173893), Katholieke Universiteit Leuven (WO 2015/158913), Catabasis (WO 2013/090420) и Regents из University of Minnesota (WO 2006/004637).
Тем не менее, в медицине сохраняется острая необходимость в разработке терапевтических средств против HCV, которые являлись бы безопасными, эффективными и хорошо переносимыми. Потребность усугубляется ожиданием устойчивости к тем лекарственным средствам. Более эффективные противовирусные средства прямого действия могут значительно сократить продолжительность лечения и улучшить соблюдение режима лечения и частоту SVR для больных, инфицированных всеми генотипами HCV.
Поэтому, целью настоящего изобретения является обеспечение соединений, фармацевтических композиций, а также способов и применений для лечения и/или предупреждения инфекций HCV.
Краткое раскрытие настоящего изобретения
Выяснили, что соединения формулы I, формулы II, формулы III, формулы IV, формулы V, формулы VI, формулы VII и в том числе β-D-2'-дезокси-2'-α-фтор-2'-β-С-замещенные-N6-(моно- или диметил)пуриновые нуклеотиды являются высокоактивными против вируса HCV при введении в эффективном количестве хозяину при необходимости этого. Хозяином может быть человек или любое животное, которые несут вирусную инфекцию.
Раскрываемые нуклеотиды включают в себя нуклеотиды с наномолярной активностью в отношении HCV in vitro и терапевтическими индексами, которые варьируют до 25000 или больше.
Удивительно, что исходные N6-(метил)пуриновые нуклеозиды раскрываемых соединений не были разработаны или конкретно раскрыты в качестве кандидатов на лекарственные средства до настоящего изобретения. Например, в 2010 году сообщалось, что 3'-азидо-N6-диметил-2,6-диаминопурин фактически не дезаминируется аденозиндезаминазой в течение длительного периода (120 минут), и по этой причине он считался несоответствующим соединением для дериватизации в качестве лекарственного средства (см., например, WO 2010/091386, страница 86, и соответствующий патент США №8609627).
Однако теперь обнаружили, что соединения в соответствии с настоящим изобретением анаболизируются до 5-монофосфата N6-замещенного-пурина без существенного N6-дезаминирования, а затем анаболизируются по 6-положению с образованием активных гуанинтрифосфатных соединений способом, который обеспечивает исключительные активность и терапевтический индекс.
В частности, выявили, что 5'-стабилизированное фосфатное пролекарство или производное β-D-2'-дезокси-2'-α-фтор-2'-β-метил-N6-метил-2,6-диаминопуринового нуклеотида, а также β-D-2'-дезокси-2'-α-фтор-2'-β-метил-N6-диметил-2,6-диаминопуринового нуклеотида и другие β-D-2'-D-2'-α-фтор-2'-β-С-замещенные-2-модифицированные-N6-замещенные пуриновые нуклеотиды, раскрываемые ниже, являются высокоактивными в отношении HCV. И это удивительно, поскольку активность исходного нуклеозида β-D-2'-дезокси-2'-α-фтор-2'-β-метил-N6-метил-2,6-диаминопурина а анализе репликонов (ЕС50=15,7 микромоль) указывает на то, что он не является приемлемым для применения в качестве лекарственного средства для человека из-за недостаточной активности (в комбинации со ссылкой на WO 2010/091386, страница 86, и соответствующим патентом США №8609627, в которых утверждается, что N6-метил-2,6-диаминопурины не дезаминируются in vivo), однако, стабилизированное рацемическое фосфатное пролекарство (фосфорамидат) демонстрирует ЕС50=26 наномоль (нМ) в анализе репликонов, что является повышением активности по меньшей мере в 600 раз. Соответствующий (S)-фосфорамидат демонстрирует ЕС50=4 нМ, что что является повышением активности по меньшей мере в 3900 раз; см. приведенную ниже структуру и соединение 5-2 в таблице 7. С ТС50, превышающей сто микромоль, соединение, таким образом, характеризуется терапевтическим индексом более 25000. Для сравнения, софосбувир характеризуется ЕС50=53 нМ, ТС50 более ста микромоль и терапевтическим индексом более 1920.
Figure 00000003
Соединение 5-2 (таблица 7)
Подобным образом, активность исходного нуклеозида β-D-2'-дезокси-2'-α-фтор-2'-β-метил-N6-диметил-2,6-диаминопурина в анализе репликонов (ЕС50=10,7 микромоль, «мкМ») указывает на то, что он также не подходит для применения в качестве лекарственного средства для человека из-за недостаточной активности, однако, стабилизированное рацемическое фосфатное пролекарство (фосфорамидат) демонстрирует ЕС50=12 нМ, в анализе репликонов, что является повышением активности более чем в 890 раз. Соответствующий (S)-фосфорамидат (соединение 25, таблица 7) также демонстрирует ЕС50=4 нМ, что является повышением активности по меньшей мере в 2600 раз; см. приведенную ниже структуру. Кроме того, соединение 25 также характеризуется терапевтическим индексом более 25000.
Figure 00000004
В другом примере соединение изопропил-((((R,S)-(2R,3R,4R,5R)-5-(2-амино-6-(N-метил-N-циклопропил-амино)-9H-пурин-9-ил)-4-фтор-3-гидрокси-4-метилтетрагидрофуран-2-ил)метокси)-фенокси-фосфорил)-L-аланинат демонстрировало ЕС50=7 нМ, и соответствующий (S)-фосфорамидат демонстрировал ЕС50=5 нМ в анализе репликонов; см. соединение 27 в таблице 7 и приведенную ниже структуру.
Figure 00000005
Как указано выше, метаболизм β-D-2'-дезокси-2'-α-фтор-2'-β-метил-N6-метил-2,6-диаминопуринового нуклеозида в виде фосфорамидата вовлекает продуцирование 5'-монофосфата и последующий анаболизм N6-метил-2,6-диаминопуринового основания с образованием β-D-2'-дезокси-2'-α-фтор-2'-β-метил-гуанинового нуклеозида в виде 5'-монофосфата. Затем монофосфат далее анаболизируется до активного соединения - 5'-трифосфата. β-D-2'-дезокси-2'-α-фтор-2'-β-метил-гуанинтрифосфат характеризуется IC50=0,15 мкМ в отношении NS5B полимеразы HCV 1b генотипа.
Таким образом, согласно одному варианту осуществления настоящее изобретение относится к:
Figure 00000006
где:
Y представляет собой NR1R2;
R1 представляет собой С1-С5алкил (включая метил, этил, н-пропил, изо-пропил, н-бутил, изо-бутил, втор-бутил, трет-бутил и пентил), C1-С5галогеналкил (включая CH2F, CHF2, CF3, CH2CF3, CF2CH3 и CF2CF3), С2-С6 алкенил, С2-С6 алкинил, -(С0-С2алкил)(С3-С6циклоалкил), -(С0-С2алкил)(гетероцикл), -(С0-С2алкил)(арил), -(С0-С2алкил)(гетероарил), -OR25, -C(O)R3C (включая -С(O)СН3, -С(O)СН2СН3-С(O)СН(СН3)2, -C(O)OCH3, -С(O)ОС2Н5, -С(O)ОС3Н7, -С(O)ОС4Н9 и -С(O)ОС5Н11), -C(S)R3D или -SO2R28, каждый из которых может быть необязательно замещен;
R2 представляет собой водород, С1-С5алкил (включая метил, этил, н-пропил, изо-пропил, н-бутил, изо-бутил, втор-бутил, трет-бутил и пентил), С1-С5галогеналкил (включая CHF2, CHF2, CF3, CH2CF3 и CF2CF3), -(С0-С2алкил)(С3-С6циклоалкил), -C(O)R3C (включая -С(O)СН3, -С(O)СН2СН3-С(O)СН(СН3)2, -С(O)ОСН3, -С(O)ОС2Н5, -С(O)ОС3Н7, -С(O)ОС4Н9 и -C(O)OC5H11), -(С0-С2алкил)(арил), -(С0-С2алкил)(гетероцикл), -(С0-С2алкил)(гетероарил); и
где по меньшей мере один из R1 и R2 представляет собой метил, CH2F, CHF2 или CF3;
R3 представляет собой водород,
Figure 00000007
, дифосфат, трифосфат, необязательно замещенную аминокислоту с карбонильной связью или -C(O)R3C;
R3A может быть выбран из О-, ОН, -О- необязательно замещенного арила, -О- необязательно замещенного гетероарила или необязательно замещенного гетероциклила;
R3B может быть выбран из О-, ОН, необязательно замещенной N-связанной аминокислоты или сложного эфира необязательно замещенной N-связанной аминокислоты;
R3C представляет собой алкил, алкенил, алкинил, -(С0-С2)(циклоалкил), -(С0-С2)(гетероцикло), -(С0-С2)(арил), -(С0-С2)(гетероарил), -О-алкил, -О-алкенил, -О-алкинил, -О-(С0-С2)(циклоалкил), -O-(С0-С2)(гетероцикло), -O-(С0-С2)(арил) или -O-(С0-С2)(гетероарил), каждый из которых может быть необязательно замещен;
R4 представляет собой монофосфат, дифосфат, трифосфат или стабилизированное фосфатное пролекарство, включающее в себя без ограничения фосфорамидат, тиофосфорамидат или любой другой фрагмент, который метаболизируется до монофосфата, дифосфата или трифосфата in vivo у человека-хозяина или животного-хозяина; или
R3 и R4 вместе с атомами кислорода, с которыми они связаны, могут образовывать 3',5'-циклическое пролекарство, включая в себя без ограничения 3',5'-циклическое пролекарство;
R12 представляет собой СН3, CH2F, CHF2, CF3 или этинил.
Согласно одному варианту осуществления настоящее изобретение относится к:
Figure 00000008
где:
Y представляет собой NR1R2;
R1 представляет собой С1-С5 алкил (включая метил, этил, н-пропил, изо-пропил, н-бутил, изо-бутил, втор-бутил, трет-бутил и пентил), С1-С5 галогеналкил (включая CH2F, CHF2, CF3, CH2CF3, CF2CH3 и CF2CF3), С2-С6 алкенил, С2-С6 алкинил, -(С0-С2алкил)(С3-С6циклоалкил), -(С0-С2алкил)(гетероцикл), -(С0-С2алкил)(арил), -(С0-С2алкил)(гетероарил), -OR25, -C(O)R3C (включая -С(O)СН3, -С(O)СН2СН3-С(O)СН(СН3)2, -С(O)ОСН3, -С(O)ОС2Н5, -С(O)ОС3Н7, -С(O)ОС4Н9 и -С(O)ОС5Н11), -C(S)R3D или -SO2R28, каждый из которых может быть необязательно замещен;
R2 представляет собой водород, необязательно замещенный С1-С5 алкил (включая метил, этил, н-пропил, изо-пропил, н-бутил, изо-бутил, втор-бутил, трет-бутил и пентил), C1-С5галогеналкил (включая CHF2, CHF2, CF3, CH2CF3 и CF2CF3), необязательно замещенный -(С0-С2алкил)(С3-С6циклоалкил), необязательно замещенный -(С0-С2алкил)(гетероцикл), необязательно замещенный -(С0-С2алкил)(арил), необязательно замещенный -(С0-С2алкил)(гетероарил), -C(O)R3C (включая -С(O)СН3, -С(O)СН2СН3-С(O)СН(СН3)2, -С(O)ОСН3, -С(O)ОС2Н5, -С(O)ОС3Н7, -С(O)ОС4Н9 и -C(O)OC5H11), -C(S)R3D или -SO2R28; и
где по меньшей мере один из R1 и R2 представляет собой метил, CH2F, CHF2 или CF3;
R3 представляет собой водород,
Figure 00000009
, дифосфат, трифосфат, необязательно замещенную аминокислоту с карбонильной связью или -C(O)R3C;
R3A может быть выбран из О-, ОН, -О- необязательно замещенного арила, -О- необязательно замещенного гетероарила или необязательно замещенного гетероциклила;
R3B может быть выбран из О-, ОН, необязательно замещенной N-связанной аминокислоты или сложного эфира необязательно замещенной N-связанной аминокислоты;
R3C представляет собой алкил, алкенил, алкинил, -(С0-С2)(циклоалкил), -(С0-С2)(гетероцикло), -(С0-С2)(арил), -(С0-С2)(гетероарил), -О-алкил, -О-алкенил, -О-алкинил, -О-(С0-С2)(циклоалкил), -O-(С0-С2)(гетероцикло), -O-(С0-С2)(арил), -O-(С0-С2)(гетероарил), -S-алкил, -S-алкенил, -S-алкинил, -S-(С0-С2)(циклоалкил), -S-(С0-С2)(гетероцикло), -S-(C0-С2)(арил) или -S-(С0-С2)(гетероарил), каждый из которых может быть необязательно замещен;
R3D представляет собой алкил, алкенил, алкинил, -(С0-С2)(циклоалкил), -(С0-С2)(гетероцикло), -(С0-С2)(арил), -(С0-С2)(гетероарил), -О-алкил, -О-алкенил, -О-алкинил, -О-(С0-С2)(циклоалкил), -O-(С0-С2)(гетероцикло), -O-(С0-С2)(арил) или -O-(С0-С2)(гетероарил), каждый из которых может быть необязательно замещен;
R4 представляет собой монофосфат, дифосфат, трифосфат или стабилизированное фосфатное пролекарство, включающее в себя без ограничения фосфорамидат, тиофосфорамидат или любой другой фрагмент, который метаболизируется до монофосфата, дифосфата или трифосфата in vivo у человека-хозяина или животного-хозяина; или
R3 и R4 вместе с атомами кислорода, с которыми они связаны, могут образовывать 3',5'-циклическое пролекарство, включая в себя без ограничения 3',5'-циклическое пролекарство;
R5 представляет собой С1-С5алкил (включая метил, этил, н-пропил, изо-пропил, н-бутил, изо-бутил, втор-бутил, трет-бутил и пентил), C1-С5галогеналкил (включая CHF2, CHF2, CF3, CH2CF3 и CF2CF3), С2-С6 алкенил, С2-С6 алкинил, -(С0-С2алкил)(С3-С6циклоалкил), -(С0-С2алкил)(гетероцикл), -(С0-С2алкил)(арил), -(С0-С2алкил)(гетероарил), -OR25, -C(O)R3C (включая -С(O)СН3, -С(O)СН2СН3-С(O)СН(СН3)2, -С(O)ОСН3, -С(O)ОС2Н5, -С(O)ОС3Н7, -С(O)ОС4Н9 и -C(O)OC5H11), -C(S)R3D или -SO2R28, каждый из которых может быть необязательно замещен;
R6 представляет собой водород, необязательно замещенный С1-С5алкил (включая метил, этил, н-пропил, изо-пропил, н-бутил, изо-бутил, втор-бутил, трет-бутил и пентил), C1-С5галогеналкил (включая CHF2, CHF2, CF3, CH2CF3 and CF2CF3), необязательно замещенный -(С0-С2алкил)(С3-С6циклоалкил), необязательно замещенный -(С0-С2алкил)(гетероцикл), необязательно замещенный -(С0-С2алкил)(арил), необязательно замещенный -(С0-С2алкил)(гетероарил), -C(O)R3C (включая -С(O)СН3, -С(O)СН2СН3-С(O)СН(СН3)2, -С(O)ОСН3, -С(O)ОС2Н5, -С(O)ОС3Н7, -С(O)ОС4Н9 и -С(O)ОС5Н11), -C(S)R3D или -SO2R28; или
R5 и R6 вместе с атомом азота, с которым они связаны, могут образовывать гетероциклическое кольцо;
R12 представляет собой СН3, CH2F, CHF2, CF3 или этинил;
R22 представляет собой Cl, Br, F, CN, N3, C1-С6 алкил, С2-С6 алкенил, С2-С6 алкинил, -(С1-С2алкил)(С3-С6циклоалкил), -(С0-С2алкил)(С3-С6гетероцикл), -(С0-С2алкил)(арил), -(С0-С2алкил)(гетероарил);
-ONHC(=O)OR23, -NHOR24, -OR25, -SR25, -NH(CH2)1-4N(R26)2, -NHNHR26, -N=NR27, -NHC(O)NHNHR27, -NHC(S)NHNHR27, -C(O)NHNHR27, -NR27SO2R28, -SO2NR27R29, -C(O)NR27R29, -CO2R29, -SO2R29,
Figure 00000010
, -P(O)H(OR29), -P(O)(OR29)(OR30), -P(O)(OR29)(NR29R30) или -NR5R6;
например, включая в себя без ограничения следующими вариантами осуществления, хлор, бром, фтор, циано, азидо, этил, н-пропил, изо-пропил, н-бутил, изо-бутил, втор-бутил, трет-бутил и н-пентил, 1,1-диметилпропил, 2,2-диметилпропил, 3-метилбутил, 1-метилбутила, 1-этилпропил, винил, аллил, 1-бутинил, 2-бутинил, ацетиленил, циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил, -(СН2)-циклопропил, -(СН2)-циклобутил, -(СН2)-циклопентил, -(СН2)-циклогексил, азиридин, оксиран, тииран, азетидин, оксетан, тиэтан, пирролидин, тетрагидрофуран, тиолан, пиразолидин, пиперидин, океан, тиан, -(CH2)-азиридин, -(СН2)-оксиран, -(СН2)-тииран, -(СН2)-азетидин, -(СН2)-оксетан, -(СН2)-тиэтан, -(СН2)-пирролидин, -(СН2)- тетрагидрофуран, -(СН2)-тиолан, -(СН2)-пиразолидин, -(СН2)-пиперидин, -(СН2)-оксан, -(СН2)-тиан, фенил, пиридил, -ONHC(=O)ОСН3, ONHC(=O)OCH2CH3, -NHOH, NHOCH3, -ОСН3, ОС2Н5, -OPh, OCH2Ph, -SCH3, -SC2H5, -SPh, SCH2Ph, -NH(CH2)2NH2, -NH(CH2)2N(CH3)2, -NHNH2, -NHNHCH3, -N=NH, -N=NCH3, -N=NCH2CH3, -NHC(O)NHNH2, -NHC(S)NHNH2, -C(O)NHNH2, -NHSO2CH3, -NHSO2CH2CH3, -SO2NHCH3, -SO2N(CH3)2, -C(O)NH2, -C(O)NHCH3, -C(O)N(CH3)2, -CO2CH3, -CO2CH2CH3, -CO2Ph, -CO2CH2Ph, -SO2CH3, -SO2CH2CH3, -SO2Ph, -SO2CH2Ph,
Figure 00000011
,
Figure 00000012
, -P(O)H(OH), -P(O)H(OCH3), -P(O)(OH)(OH), -P(O)(OH)(OCH3), -Р(O)(ОСН3)(ОСН3), -P(O)(OH)(NH2), -P(O)(OH)(NHCH3), -P(O)(OH)N(CH3)2, -NHC(O)CH3, -NHC(O)СН2СН3, -NHC(O)CH(CH3)2, -NHC(O)OCH3, -NHC(O)OCH2CH3, -NHC(O)OCH(CH3)2, NHC(O)OCH2CH2CH3, -NHC(O)OCH2CH2CH2CH3 и -NHC(O)OCH2CH2CH2CH2CH3;
R23 представляет собой C1-С5алкил, -(С0-С2алкил)(С3-С6циклоалкил), -(C0-С2алкил)(гетероцикл)-(С0-2алкил)(арил) или -(С0-С2алкил)(гетероарил), каждый из которых может быть необязательно замещен;
R24 представляет собой водород, C1-С6 алкил, -(С1-С2алкил)(С3-С6циклоалкил), -(C1-С2алкил)(С3-С6гетероцикл) -(С0-С2алкил)(арил) или -(С0-С2алкил)(гетероарил), где, за исключением водорода, каждый из которых может быть необязательно замещен;
R25 представляет собой водород, C1-С6 алкил, С2-С6 алкенил, С2-С6 алкинил, -(С0-С2алкил)(С3-С6циклоалкил), -(С0-С2алкил)(С3-С6гетероцикл), -(С0-С2алкил)(арил) или -(С0-С2алкил)(гетероарил), где, за исключением водорода, каждый из которых может быть необязательно замещен;
R26 независимо выбран из водорода, C1-С6алкил, -(С0-С2алкил)(С3-С6циклоалкил), -(С0-С2алкил)(гетероцикл), -(С0-С2алкил)(арил) или -(С0-С2алкил)(гетероарил), где, за исключением водорода, каждый из которых может быть необязательно замещен;
R27 представляет собой водород или необязательно замещенный C1-С6 алкил;
R28 представляет собой С1-С6 алкил, С2-С6 алкенил, С2-С6 алкинил, -(С0-С2алкил)(С3-С6циклоалкил), -(С0-С2алкил)(С3-С6гетероцикл), -(С0-С2алкил)(арил) или -(С0-С2алкил)(гетероарил), каждый из которых может быть необязательно замещен;
R29 представляет собой водород, C1-С6 алкил, С2-С6 алкенил, С2-С6 алкинил, -(С0-С2алкил)(С3-С6циклоалкил), -(С0-С2алкил)(С3-С6гетероцикл), -(С0-С2алкил)(арил) или -(С0-С2алкил)(гетероарил), где, за исключением водорода, каждый из которых может быть необязательно замещен; или
R27 и R29 вместе с атомом азота, с которым они связаны, могут образовывать гетероциклическое кольцо;
R30 представляет собой водород, C1-С6 алкил, С2-С6 алкенил, С2-С6 алкинил, -(С0-С2алкил)(С3С6циклоалкил), -(С0-С2алкил)(С3-С6гетероцикл), -(С0-С2алкил)(арил) или -(С0-С2алкил)(гетероарил), где, за исключением водорода, каждый из которых может быть необязательно замещен; или
R29 и R30 могут быть связаны вместе с образованием гетероциклического кольца;
х равно 1, 2 или 3.
Метаболизм β-D-2'-дезокси-2'-α-фтор-2'-β-метил-N6-диметил-2,6-диаминопуринового нуклеотида предусматривает как образование трифосфата β-D-2'-дезокси-2'-α-фтор-2'-β-метил-N6-диметил-2,6-диаминопуринового нуклеозида, так и образование соответствующего трифосфата гуанинового нуклеозида. См. схемы 2 и 3.
2'-Дезокси-2'-α-фтор-2'-β-С-замещенные-N6-замещенные-2,6-диаминопуриновые нуклеотиды могут быть далее замещены по N2-положению путем алкилирования или ацилированы, что может модифицировать липофильность, фармакокинетические показатели и/или нацеливание нуклеотида на печень. Выявили, что 2'-дезокси-2'-α-фтор-2'-β-С-замещенные-N6-замещенные-2,6-диаминопуриновые нуклеотиды, модифицированные по 2-положению диаминопурина, могут быть деалкилированы или деацилированы ферментами печени с дальнейшим повышением специфичности нуклеотидных производных как in vitro, так и in vivo, если только N2-аминогруппа не заменена другим фрагментом, как описывается в настоящем документе, таким как фтор. Например, фосфорамидат нуклеозида - фосфорамидат 2'-дезокси-2'-α-фтор-2'-β-метил-N2-метил-N6-метил-2,6-диаминопуринового нуклеозида деалкилируется до фосфорамидата 2'-дезокси-2'-α-фтор-2'-β-метил-N6-метил-2,6-диаминопуринового нуклеозида при инкубации с фракцией S9 печени человека in vitro до 60 минут, эти условия имитируют in vivo условия. Согласно одному варианту осуществления модификации N2 будут повышать клеточную проницаемость и нацеливание на печень.
Несмотря на объем литературы по противовирусным нуклеозидам и поданных патентных документов 5'-стабилизированное фосфатное производное 2'-дезокси-2'-α-фтор-2'-β-метил-N6-метил-2,6-диаминопуринового нуклеозида, 2'-дезокси-2'-α-фтор-2'-β-метил-N6-диметил-2,6-диаминопуриновый нуклеозид и другие производные β-D-2'-D-2'-α-фтор-2'-β-С-замещенного-2-модифицированного-N6-замещенного пуринового нуклеозида, описываемые в настоящем документе, не были конкретно раскрыты, а также не были описаны их положительные эффекты.
Если не указано иное, соединения, описываемые в настоящем документе, представлены в β-D-конфигурации. Подобным образом, при фосфорамидной или тиофосфорамидатной форме аминокислотная часть может иметь L- или D-конфигурацию. Согласно альтернативному варианту осуществления соединения могут быть представлены в β-L-конфигурации. Подобным образом, любая группа заместителей, которая обладает хиральностью, может быть представлена в рацемической, энантиомерной, диастереомерной форме или любой их смеси. Если фосфорамидат, тиофосфорамидат или другое стабилизированное содержащее фосфор пролекарство, в котором фосфор обладает хиральностью, используют в качестве R4-стабилизированного фосфатного пролекарства, то они могут быть обеспечены в виде R или S хирального фосфорного производного или его смеси, в том числе рацемической смеси. Все комбинации этих стереоконфигураций включены в настоящее изобретение, описываемое в настоящем документе.
Следовательно, настоящее изобретение относится к соединению формулы I-VII или его к фармацевтически приемлемой композиции, соли или пролекарству, описываемым в настоящем документе,
Figure 00000013
формула I.
Согласно одному конкретному варианту осуществления исходный нуклеозид, т.е. нуклеозид, в котором R4 представляет собой водород, и 5'-положение, таким образом, содержит гидроксильную группу, фактически не дезаминируется аденозиндезаминазой при условиях, которые имитируют in vivo окружение (например, окружающую температуру и водный физиологический рН), в течение периода 7 минут, 10 минут, 30 минут, 60 минут или 120 минут. Если не указано иное, временной период составляет 30 минут. Согласно данному варианту осуществления термин «фактически не дезаминируется» означает, что исходное соединение не превращается в соответствующее гуаниновое производное или 6-оксопроизводное в количестве, достаточном для обеспечения терапевтического эффекта in vivo.
Соединения, способы и композиции предназначены для лечения хозяина, инфицированного вирусом HCV, путем введения эффективного количества соединения или его фармацевтически приемлемой соли.
Соединения и композиции также могут быть использованы для лечения родственных состояний, таких как состояния, которые сопровождаются наличием антител против HCV и антигенов, вызванное вирусом хроническое воспаление печени, злокачественная опухоль печени, вызванная запущенным гепатитом С, цирроз, хронический или острый гепатит С, молниеносный гепатит С, хронический персистирующий гепатит С и утомление, вызванное образованием антител против HCV. Соединение или составы, которые включают в себя соединения, также могут быть использованы профилактически для предупреждения или ограничения прогрессирования клинической болезни у индивидуумов с наличием антител против HCV или наличием антигенов, или которые подверглись воздействию вируса гепатита С.
Согласно другому варианту осуществления раскрыты соединения формулы Ia:
Figure 00000014
где:
Y, R3 и R4 определены выше.
Согласно одному варианту осуществления формулы Ia R3 представляет собой водород.
Согласно одному варианту осуществления формулы Ia, если Y представляет собой NR1R2, R1 представляет собой метил и R2 представляет собой водород.
Согласно одному варианту осуществления формулы Ia, если Y представляет собой NR1R2, оба R1 и R2 представляют собой метил.
Согласно одному варианту осуществления формулы Ia, если Y представляет собой NR1R2, R1 представляет собой метил и R2 представляет собой циклопропил.
Согласно другому варианту осуществления раскрыты соединения формулы Ib:
Figure 00000015
где:
Y, R3 и R4 определены выше.
Согласно одному варианту осуществления формулы Ib R3 представляет собой водород.
Согласно одному варианту осуществления формулы Ib, если Y представляет собой NR1R2, R1 представляет собой метил и R2 представляет собой водород.
Согласно одному варианту осуществления формулы Ib, если Y представляет собой NR1R2, оба R1 и R2 представляют собой метил.
Согласно одному варианту осуществления раскрыты соединения формулы II:
Figure 00000016
где:
Y, R3, R4, R12 и R22 определены выше.
Согласно другому варианту осуществления раскрыты соединения формулы IIa:
Figure 00000017
где:
Y, R3, R4 и R22 определены выше.
Согласно другому варианту осуществления раскрыты соединения формулы IIb:
Figure 00000018
где:
Y, R3, R4 и R22 определены выше.
Согласно одному варианту осуществления раскрыты соединения формулы III:
Figure 00000019
где переменные Y, R3, R7, R8, R9a, R9b, R10, R12 и R22 раскрыты в настоящем описании.
Согласно одному варианту осуществления раскрыты соединения формулы IV:
Figure 00000020
где переменные Y, R3, R7, R8, R9a, R9b, R10 и R22 раскрыты в настоящем описании.
Согласно одному варианту осуществления раскрыты соединения формулы V:
Figure 00000021
где переменные Y, R3, R7, R8, R9a, R9b, R10 и R22 раскрыты в настоящем описании.
Согласно одному варианту осуществления раскрыты соединения формулы VI:
Figure 00000022
где:
R41 представляет собой галоген (в частности, F или Cl), OR3, N3, NH2 или CN; и
переменные Y, R3, R4 и R12 раскрыты в настоящем описании.
Согласно одному варианту осуществления раскрыты соединения формулы VII:
Figure 00000023
где переменные Y, R3, R4, R12 и R41 раскрыты в настоящем описании.
Фосфор в любой из приведенных выше формул может быть хиральным и, таким образом, может быть представлен в виде R- или S-энантиомера или их смеси, в том числе рацемической смеси.
Соединение 5 разделяли на энантиомерные соединения 5-1 и 5-2. Соединение 5-2 также получали с помощью хирального синтеза и обозначали как соединение 24.
Согласно одному варианту осуществления соединения, способы и композиции предназначены для лечения хозяина, инфицированного вирусом гепатита С или подвергнувшегося воздействию такового, как описывается в настоящем документе. Соединения в соответствии с настоящим изобретением могут быть введены в эффективном количестве отдельно или в комбинации с другим лекарственным средством против HCV для лечения инфицированного хозяина. Согласно некоторым вариантам осуществления полезно вводить комбинацию лекарственных средств, которые модулируют один и тот же путь или разные пути или ингибируют другую мишень в вирусе. Когда раскрываемое β-D-2'-D-2'-α-фтор-2'-β-С-замещенные-2-модифицированные-N6-замещенные пуриновые нуклеотиды являются ингибиторами NS5B полимеразы, полезно вводить соединение хозяину в комбинации с ингибитором протеазы, таким как ингибитор NS3/4A протеазы (например, телапревир (Incivek®), боцепревир (Victrelis™), симепревир (Olysio™) или паритапревир, или ингибитор NS5A (например, омбитасвир). Соединения в соответствии с настоящим изобретением также можно вводить в комбинации с структурно отличающимся ингибитором NS5B полимеразы, таким как другое соединение, описываемое в настоящем документе выше или ниже, в том числе Sovaldi® компании Gilead. Соединения в соответствии с настоящим изобретением также можно вводить в комбинации с интерфероном альфа-2а, который может быть пегилированным или иным образом модифицированным, и/или рибавирином.
β-D-2'-D-2'-α-фтор-2'-β-С-замещенные-2-модифицированные-N6-замещенные пуриновые нуклеотиды в соответствии с настоящим изобретением, как правило, вводятся перорально, например, в форме пилюли или таблетки, но могут вводиться другим путем, который определяет лечащий врач, в том числе внутривенным, чрескожным, подкожным, местным, парентеральным или другим приемлемым путем.
Краткое раскрытие графических материалов
На фиг. 1 представлена простая хроматограмма полупрепаративного хроматографирования, иллюстрирующая разделение стереоизомеров соединения 5 с использованием колонки Phenominex Luna, как раскрывается в примере 9. По оси у показаны mAU, а по оси х показаны измерения в минутах.
На фиг. 2 представлен график кривых ингибирования репликации HCV для соединения 5-2 (таблица 7) и софосбувира. Соединение 5-2 характеризуется ЕС50=4 нМ, ТС50, превышающей сто микромоль, и терапевтическим индексом более чем 25000. Софосбувир характеризуется ЕС50=53 нМ, ТС50, превышающей сто микромоль, и терапевтическим индексом более чем 1920. По оси у показан вирусный контроль, а по оси х -концентрация лекарственного средства в мкМ.
На фиг. 3 представлен график кривых ингибирования репликации HCV для соединения 25 (таблица 7) и софосбувира. Как описывается в примере 27, соединение 25 характеризуется ЕС50=4 нМ, ТС50, превышающей 100 мкМ, и терапевтическим индексом более чем 25000. Софосбувир характеризуется ЕС50=53 нМ, ТС50, превышающей сто микромоль, и терапевтическим индексом более чем 1920. По оси у показан вирусный контроль, а по оси х - концентрация лекарственного средства в мкМ.
На фиг. 4 представлено сравнение внутри анализа активности в отношении HCV для соединений 5-2, 25, 27 (таблица 7) и софосбувира. По оси у показан вирусный контроль, а по оси х - концентрация лекарственного средства в мкМ. См. пример 27.
На фиг. 5 представлен график, который показывает стабильность соединений 5-2, N2-ацетата соединения 5-2, N2-бутирата соединения 5-2, N2-метильного производного соединения 5-2 и N2-н-пентилкарбамата соединения 5-2 в организме человека. По оси х показано время инкубации, измеренное в минутах, а по оси у показано измерение оставшегося исходного соединения в процентах.
На фиг. 6 представлен график, демонстрирующий in vitro зависимость от времени деалкилирования фосфорамидата 2'-дезокси-2'-α-фтор-2'-β-метил-N2-метил-N6-метил-2,6-диаминопуринового нуклеозида до фосфорамидата 2'-дезокси-2'-α-фтор-2'-β-метил-N6-метил-2,6-диаминопуринового нуклеозида в присутствии фракции S9 печени человека. По оси х показаны измерения в минутах, а по оси у представлено измерение концентрации оставшегося соединения в нМ.
На фиг. 7 представлен график, который показывает стабильность соединений 5-2, N2-ацетата соединения 5-2, N2-бутирата соединения 5-2, N2-метильного производного соединения 5-2 и N2-н-пентилкарбамата соединения 5-2 в присутствии фракции S9 печени человека. По оси х показаны измерения в минутах, а по оси у показано измерение оставшегося исходного соединения в процентах.
На фиг. 8 показаны преобладающие метаболиты соединения 25, образовавшиеся в гепатоцитах человека. По оси х показано время инкубации в часах. По оси у показана внутриклеточная концентрация в пмоль/106 клеток. См. пример 33.
На фиг. 9 показаны преобладающие метаболиты соединения 27, образовавшиеся в гепатоцитах человека. По оси х показано время инкубации в часах. По оси у показана внутриклеточная концентрация в пмоль/106 клеток. См. пример 33.
На фиг. 10 показаны преобладающие метаболиты соединения 5-2, образовавшиеся в гепатоцитах человека. По оси х показано время инкубации в часах. По оси у показана внутриклеточная концентрация в пмоль/106 клеток. См. пример 33.
На фиг. 11 представлен график, который показывает пути активации для соединений 25, 27 и 5-2. Ка можно видеть, соединения 25, 27 и 5-2 превращаются в их соответствующие монофосфатные аналоги, которые затем метаболизируются до общего MP аналога - монофосфата β-D-2'-дезокси-2'-α-фтор-2'-β-метил-гуанина. Монофосфат затем постадийно фосфорилируется до активного трифосфата - трифосфата β-D-2'-дезокси-2'-α-фтор-2'-β-метил-гуанина. См. пример 33.
Подробное раскрытие настоящего изобретения
Настоящее изобретение, раскрываемое в настоящем документе, относится к соединению, способу и композиции для лечения инфекций у людей и других животных-хозяев вируса HCV или для воздействия на таковых, при этом предусматривается введение эффективного количества соединения формул I-VII, описываемых в настоящем документе, или его фармацевтически приемлемой соли или пролекарства, необязательно в фармацевтически приемлемом носителе. Соединения в соответствии с настоящим изобретением либо обладают противовирусной активностью, либо метаболизируются до соединения, которое проявляет такую активность.
Соединения и композиции также могут быть использованы для лечения состояний, связанных с воздействием вируса HCV или возникающих в результате такового. Например, активное соединение может быть использовано для лечения состояний, которые сопровождаются наличием антител против HCV и антигенов, вызванного вирусом хронического воспаления печени, злокачественной опухоли печени, вызванной запущенным гепатитом С, цирроза, хронического или острого гепатита С, молниеносного гепатита С, хронического персистирующего гепатита С и утомления, вызванного образованием антител против HCV. Согласно одному варианту осуществления соединения или составы, которые включают в себя соединения, также могут быть использованы профилактически для предупреждения или замедления прогрессирование прогрессирования клинической болезни у индивидуумов с наличием антител против HCV или наличием антигенов HCV, или которые подверглись воздействию вируса гепатита С.
В частности, выявили, что 5'-стабилизированное фосфатное пролекарство или производное β-D-2'-дезокси-2'-α-фтор-2'-β-метил-N6-метил-2,6-диаминопуринового нуклеотида, а также β-D-2'-дезокси-2'-α-фтор-2'-β-метил-N6-диметил-2,6-диаминопуриновый нуклеотид и другие β-D-2'-D-2'-α-фтор-2'-β-С-замещенные-2-модифицированные-N6-замещенные пуриновые нуклеотиды, раскрываемые ниже, являются высокоактивными в отношении HCV. И это удивительно, поскольку активность исходного нуклеозида β-D-2'-дезокси-2'-α-фтор-2'-β-метил-N6-метил-2,6-диаминопурина а анализе репликонов (ЕС50=15,7 микромоль) указывает на то, что он не является приемлемым для применения в качестве лекарственного средства для человека из-за недостаточной активности, однако, стабилизированное фосфатное пролекарство (фосфорамидат) демонстрирует ЕС50=26 наномоль в анализе репликонов, что является повышением активности по меньшей мере в 870 раз. Подобным образом, активность исходного нуклеозида β-D-2'-дезокси-2'-α-фтор-2'-β-метил-N6-диметил-2,6-диаминопурина в анализе репликонов (ЕС50=10,7 микромоль, «мкМ») указывает на то, что он также не подходит для применения в качестве лекарственного средства для человека из-за недостаточной активности, однако, стабилизированное фосфатное пролекарство (фосфорамидат) демонстрирует ЕС50=12 наномоль («нМ») в анализе репликонов, что является повышением активности более чем в 1300 раз.
Несмотря на объем литературы по противовирусным нуклеозидам и поданных патентных документов 5'-стабилизированное фосфатное производное 2'-дезокси-2'-α-фтор-2'-β-метил-N6-метил-2,6-диаминопуринового нуклеозида, 2'-дезокси-2'-α-фтор-2'-β-метил-N6-диметил-2,6-диаминопуриновый нуклеозид и другие производные β-D-2'-D-2'-α-фтор-2'-β-С-замещенного-2-модифицированного-N6-замещенного пуринового нуклеозида, описывамые в настоящем документе, не были конкретно раскрыты.
Если не указано иное, соединения, описываемые в настоящем документе, представлены в β-D-конфигурации. Согласно альтернативному варианту осуществления соединения могут быть представлены в β-L-конфигурации. Подобным образом, любая группа заместителей, которая обладает хиральностью, может быть представлена в рацемической, энантиомерной, диастереомерной форме или любой их смеси. Если фосфорамидат, тиофосфорамидат или другое стабилизированное содержащее фосфор пролекарство, в котором фосфор обладает хиральностью, используют в качестве R4-стабилизированного фосфатного пролекарства, оно может быть обеспечено в виде R или S хирального фосфорного производного или его смеси, в том числе рацемической смеси. Аминокислота фосфорамидата или тиофосфорамидата может быть в L- или D-конфигурации или их смеси, в том числе рацемической смеси. Все комбинации этих стереоконфигураций включены в настоящее изобретение, описываемое в настоящем документе.
Настоящее изобретение включает в себя следующие признаки:
(a) соединение формул I-VII, описываемое в настоящем документе, и его фармацевтически приемлемые соли и пролекарства;
(b) соединение формул I-VII, описываемое в настоящем документе, и его фармацевтически приемлемые соли и пролекарства для применения в лечении или профилактике инфекции вируса гепатита С;
(c) применение соединения формул I-VII, описываемого в настоящем документе, и его фармацевтически приемлемых солей и пролекарств в изготовлении медикамента для лечения инфекции вируса гепатита С;
(d) способ изготовления медикамента, предназначенного для терапевтического применения при лечении инфекции вируса гепатита С, характеризующийся тем, что в изготовлении используют соединение формул I-VII, описываемое в настоящем документе;
(e) фармацевтический состав, содержащий эффективное для лечения хозяина количество соединения формул I-VII или его фармацевтически приемлемой соли или пролекарства вместе с фармацевтически приемлемым носителем или разбавителем;
(f) соединение формул I-VII, описываемое в настоящем документе, при отсутствии, по сути, стереоизомеров описываемого соединения, или выделенное, по сути, из других химических соединений; и
(g) процессы получения терапевтических продуктов, которые содержат эффективное количество соединения формул I-VII, описываемого в настоящем документе.
I. 2'-Деокси-2'-α-фтор-2'-β-С-замещенные-2-модифицированные-N6-замещенные пуриновые нуклеотиды по настоящему изобретению
Активными соединениями по настоящему изобретению являются такие соединения, которые изображены, например, при помощи формулы I, которые могут быть обеспечены в виде их фармацевтически приемлемой композиции, соли или пролекарства:
Figure 00000024
где:
Y представляет собой NR1R2;
R1 представляет собой С1-С5алкил (включая метил, этил, н-пропил, изо-пропил, н-бутил, изо-бутил, втор-бутил, трет-бутил и пентил), С1-С5галогеналкил (включая CH2F, CH2F, CF3, CH2CF3, CF2CH3 и CF2CF3), С2-С6 алкенил, С2-С6 алкинил, -(С0-С2алкил)(С3-С6циклоалкил), -(С0-С2алкил)(гетероцикл), -(С0-С2алкил)(арил), -(С0-С2алкил)(гетероарил), -OR25, -C(O)R3C (включая -С(O)СН3, -С(O)СН2СН3-С(O)СН(СН3)2, -С(O)ОСН3, -С(O)ОС2Н5, -С(O)ОС3Н7, -С(O)ОС4Н9 и -С(O)ОС5Н11), -C(S)R3D или -SO2R28, каждый из которых может быть необязательно замещен;
R2 представляет собой водород, необязательно замещенный C1-С5алкил (включая метил, этил, н-пропил, изо-пропил, н-бутил, изо-бутил, втор-бутил, трет-бутил и пентил), C1-С5 галогеналкил (включая CHF2, CH2F, CF3, CH2CF3 и CF2CF3), необязательно замещенный -(С0-С2алкил)(С3-С6циклоалкил), необязательно замещенный -(С0-С2алкил)(гетероцикл), необязательно замещенный -(С0-С2алкил)(арил), необязательно замещенный -(С0-С2алкил)(гетероарил), -C(O)R3C (включая -С(O)СН3, -С(O)СН2СН3-С(O)СН(СН3)2, -С(O)ОСН3, -С(O)ОС2Н5, -С(O)ОС3Н7, -С(O)ОС4Н9 и -С(O)ОС5Н11), -C(S)R3D или -SO2R28; и
где по меньшей мере один из R1 и R2 представляет собой метил, CH2F, CHF2 или CF3;
R3 представляет собой водород,
Figure 00000025
, дифосфат, трифосфат, необязательно замещенную аминокислоту с карбонильной связью или -C(O)R3C;
R3A может быть выбран из О-, ОН, -О- необязательно замещенного арила, -О- необязательно замещенного гетероарила или необязательно замещенного гетероциклила;
R3B может быть выбран из О-, ОН, необязательно замещенной N-связанной аминокислоты или сложного эфира необязательно замещенной N-связанной аминокислоты;
R3C представляет собой алкил, алкенил, алкинил, -(С0-С2)(циклоалкил), -(С0-С2)(гетероцикло), -(С0-С2)(арил), -(С0-С2)(гетероарил), -О-алкил, -О-алкенил, -О-алкинил, -О-(С0-С2)(циклоалкил), -O-(С0-С2)(гетероцикло), -O-(С0-С2)(арил) или -O-(С0-С2)(гетероарил), каждый из которых может быть необязательно замещен;
R4 представляет собой монофосфат, дифосфат, трифосфат или стабилизированное фосфатное пролекарство, включающее в себя без ограничения фосфорамидат, тиофосфорамидат или любой другой фрагмент, который метаболизируется до монофосфата, дифосфата или трифосфата in vivo у человека-хозяина или животного-хозяина; или
R3 и R4 вместе с атомами кислорода, с которыми они связаны, могут образовывать 3',5'-циклическое пролекарство, включая в себя без ограничения 3',5'-циклическое пролекарство;
R12 представляет собой СН3, CH2F, CHF2, CF3 или этинил.
Стабилизированное фосфатное пролекарство представляет собой любой фрагмент, который может доставлять моно-, ди- или трифосфат.
Согласно другому варианту осуществления раскрыты соединения формулы Ia:
Figure 00000026
где:
Y, R3 и R4 определены выше.
Согласно другому варианту осуществления раскрыты соединения формулы Ib:
Figure 00000027
где:
Y, R3 и R4 определены выше.
Согласно другому варианту осуществления соединение представляет собой соединение формулы Ic:
Figure 00000028
где:
R7 представляет собой водород, C1-6алкил; С3-7циклоалкил; гетероарил, гетероциклический радикал или арил, который включает в себя без ограничения фенил или нафтил, где фенил или нафтил необязательно замещены C1-6алкилом, С2-6алкенилом, С2-6алкинилом, C1-6алкокси, F, Cl, Br, I, нитро, циано, C1-6галогеналкилом, -N(R7')2, C1-6ациламино, NHSO2C1-6алкилом, -SO2N(R7')2, COR7'' и -SO2C1-6алкил; (R7' независимо представляет собой водород или C1-6алкил; R7'' представляет собой -OR11 или -N(R7)2);
R8 представляет собой водород, C1-6алкил или R9a или R9b и R8 оба представляют собой (СН2)n таким образом, что образуют циклическое кольцо, которое содержит смежные атомы N и С; где n равно 2-4;
R9a и R9b (i) независимо выбраны из водорода, C1-6алкила, циклоалкила, -(CH2)c(NR9')2, C1-6гидроксиалкила, --CH2SH, -(CH2)2S(O)(Me, -(CH2)3NHC(=NH)NH2, (1Н-индол-3-ил)метила, (1Н-имидазол-4-ил)метила, -(CH2)cCOR9'', арила и арил(C1-3алкил)-, арильные группы необязательно могут быть замещены группой, выбранной из гидроксила, C1-6алкила, C1-6алкокси, галогена, нитро и циано; (ii) R9a и R9b оба представляют собой C1-6алкил; (iii) R9a и R9b оба представляют собой (СН2)r таким образом, что образуют спирокольцо; (iv) R9a представляет собой водород и R9b и R8 оба представляют собой (СН2)n таким образом, что образуют циклическое кольцо, которое содержит смежные атомы N и С (v) R9b представляет собой водород и R9a и R8 оба представляют собой (СН2)n таким образом, что образуют циклическое кольцо, которое содержит смежные атомы N и С, где с равно 1-6, n равно 2-4, r равно 2-5 и где R9' независимо представляет собой водород или C1-6 алкил и R9'' представляет собой -OR11 или -N(R11')2); (vi) R9a представляет собой водород и R9b представляет собой водород, СН3, СН2СН3, СН(СН3)2, СН2СН(СН3)2, СН(СН3)СН2СН3, CH2Ph, СН2-индол-3-ил, -CH2CH2SCH3, CH2CO2H, CH2C(O)NH2, СН2СН2СООН, CH2CH2C(O)NH2, CH2CH2CH2CH2NH2, -CH2CH2CH2NHC(NH)NH2, СН2-имидазол-4-ил, СН2ОН, СН(ОН)СН3, CH2((4'-OH)-Ph), CH2SH или низший циклоалкил; или (vii) R9a представляет собой СН3, СН2СН3, СН(СН3)2, СН2СН(СН3)2, СН(СН3)СН2СН3, CH2Ph, CH2-индол-3-ил, -CH2CH2SCH3, СН2СО2Н, CH2C(O)NH2, СН2СН2СООН, CH2CH2C(O)NH2, CH2CH2CH2CH2NH2, -CH2CH2CH2NHC(NH)NH2, СН2-имидазол-4-ил, CH2OH, СН(ОН)СН3, CH2((4'-OH)-Ph), CH2SH или низший циклоалкил и R9b представляет собой водород;
R10 представляет собой водород, C1-6алкил, необязательно замещенный алкокси, ди(низший алкил)амино или галогеном, C1-6галогеналкил, С3-7циклоалкил, гетероциклоалкил, аминоацил, арил, такой как фенил, гетероарил, такой как пиридинил, замещенный арил или замещенный гетероарил;
R11 представляет собой необязательно замещенный C1-6алкил, необязательно замещенный циклоалкил; необязательно замещенный С2-6алкинил, необязательно замещенный С2-6алкенил или необязательно замещенный ацил, который включает в себя без ограничения С(O)(С1-6 алкил); и
Y, R3 и R12 определены в настоящем описании.
Согласно одному варианту осуществления раскрыты соединения формулы II:
Figure 00000029
где:
Y представляет собой NR1R2;
R1 представляет собой С1-С5алкил (включая метил, этил, н-пропил, изо-пропил, н-бутил, изо-бутил, втор-бутил, трет-бутил и пентил), С1-С5галогеналкил (включая CH2F, CHF2, CF3, CH2CF3, CF2CH3 и CF2CF3), С2-С6 алкенил, С2-С6 алкинил, -(С0-С2алкил)(С3-С6циклоалкил), -(С0-С2алкил)(гетероцикл), -(С0-С2алкил)(арил), -(С0-С2алкил)(гетероарил), -OR25, -C(O)R3C (включая -С(O)СН3, -С(O)СН2СН3-С(O)СН(СН3)2, -С(O)ОСН3, -С(O)ОС2Н5, -С(O)ОС3Н7, -С(O)ОС4Н9 и -С(O)ОС5Н11), -C(S)R3D или -SO2R28, каждый из которых может быть необязательно замещен;
R2 представляет собой водород, необязательно замещенный C1-С5алкил (включая метил, этил, н-пропил, изо-пропил, н-бутил, изо-бутил, втор-бутил, трет-бутил и пентил), C1-С5 галогеналкил (включая CHF2, CHF2, CF3, CH2CF3 и CF2CF3), необязательно замещенный -(С0-С2алкил)(С3-С6циклоалкил), необязательно замещенный -(С0-С2алкил)(гетероцикл), необязательно замещенный -(С0-С2алкил)(арил), необязательно замещенный -(С0-С2алкил)(гетероарил), -C(O)R3C (включая -С(O)СН3, -С(O)СН2СН3-С(O)СН(СН3)2, -С(O)ОСН3, -С(O)ОС2Н5, -С(O)ОС3Н7, -С(O)ОС4Н9 и -С(O)ОС5Н11), -C(S)R3D или -SO2R28; и
где по меньшей мере один из R1 и R2 представляет собой метил, CH2F, CHF2 или CF3;
R3 представляет собой водород,
Figure 00000030
, дифосфат, трифосфат, необязательно замещенную аминокислоту с карбонильной связью или -C(O)R3C;
R3A может быть выбран из О-, ОН, -О- необязательно замещенного арила, -О- необязательно замещенного гетероарила или необязательно замещенного гетероциклила;
R3B может быть выбран из О-, ОН, необязательно замещенной N-связанной
аминокислоты или сложного эфира необязательно замещенной N-связанной аминокислоты;
R3C представляет собой алкил, алкенил, алкинил, -(С0-С2)(циклоалкил), -(С0-C2)(гетероцикло), -(С0-C2)(арил), -(С0-C2)(гетероарил), -О-алкил, -О-алкенил, -О-алкинил, -О-(С0-C2)(циклоалкил), -O-(С0-C2)(гетероцикло), -O-(С0-C2)(арил), -O-(С0-C2)(гетероарил), -S-алкил, -S-алкенил, -S-алкинил, -S-(С0-C2)(циклоалкил), -S-(С0-C2)(гетероцикло), -S-(С0-C2)(арил) или -S-(С0-C2)(гетероарил), каждый из которых может быть необязательно замещен;
R3D представляет собой алкил, алкенил, алкинил, -(С0-C2)(циклоалкил), -(С0-C2)(гетероцикло), -(С0-C2)(арил), -(С0-C2)(гетероарил), -О-алкил, -О-алкенил, -О-алкинил, -О-(С0-C2)(циклоалкил), -O-(С0-C2)(гетероцикло), -O-(С0-C2)(арил) или -O-(С0-C2)(гетероарил), каждый из которых может быть необязательно замещен;
R4 представляет собой монофосфат, дифосфат, трифосфат или стабилизированное фосфатное пролекарство, включающее в себя без ограничения фосфорамидат, тиофосфорамидат или любой другой фрагмент, который метаболизируется до монофосфата, дифосфата или трифосфата in vivo у человека-хозяина или животного-хозяина; или
R3 и R4 вместе с атомами кислорода, с которыми они связаны, могут образовывать 3',5'-циклическое пролекарство, включая в себя без ограничения 3',5'-циклическое пролекарство;
R5 представляет собой C1-С5алкил (включая метил, этил, н-пропил, изо-пропил, н-бутил, изо-бутил, втор-бутил, трет-бутил и пентил), С1-С5 галогеналкил (включая CHF2, CHF2, CF3, CH2CF3 и CF2CF3), С2-С6 алкенил, С2-С6 алкинил, -(С0-С2алкил)(С3-С6циклоалкил), -(С0-С2алкил)(гетероцикл), -(С0-С2алкил)(арил), -(С0-С2алкил)(гетероарил), -OR25, -C(O)R3C (включая -С(O)СН3, -С(O)СН2СН3-С(O)СН(СН3)2, -С(O)ОСН3, -С(O)ОС2Н5, -С(O)OС3Н7, -С(O)ОС4Н9 и -С(O)ОС5Н11), -C(S)R3D или -SO2R28, каждый из которых может быть необязательно замещен;
R6 представляет собой водород, необязательно замещенный С1-С5алкил (включая метил, этил, н-пропил, изо-пропил, н-бутил, изо-бутил, втор-бутил, трет-бутил и пентил), C1-С5галогеналкил (включая CHF2, CH2F, CF3, CH2CF3 и CF2CF3), необязательно замещенный -(С0-С2алкил)(С3-С6циклоалкил), необязательно замещенный -(С0-С2алкил)(гетероцикл), необязательно замещенный -(С0-С2алкил)(арил), необязательно замещенный -(С0-С2алкил)(гетероарил), -C(O)R3C (включая -С(O)СН3, -С(O)СН2СН3-С(O)СН(СН3)2, -С(O)ОСН3, -С(O)ОС2Н5, -С(O)ОС3Н7, -С(O)ОС4Н9 и -С(O)ОС5Н11), -C(S)R3D или -SO2R28; или
R5 и R6 вместе с атомом азота, с которым они связаны, могут образовывать гетероциклическое кольцо;
R12 представляет собой СН3, CH2F, CHF2, CF3 или этинил;
R22 представляет собой Cl, Br, F, CN, N3, C1-С6 алкил, С2-С6 алкенил, С2-С6 алкинил, -(C1-С2алкил)(С3-С6циклоалкил), -(С0-C2алкил)(С3-С6гетероцикл), -(С0-C2алкил)(арил), -(С0-С2алкил)(гетероарил); -ONHC(=O)OR23, -NHOR24, -OR25, -SR25, -NH(CH2)1-4N(R26)2, -NHNHR26, -N=NR27, -NHC(O)NHNHR27, -NHC(S)NHNHR27, -C(O)NHNHR27, -NR27SO2R28, -SO2NR27R29, -C(O)NR27R29, -CO2R29, -SO2R29,
Figure 00000031
, -P(O)H(OR29), -P(O)(OR29)(OR30), -P(O)(OR29)(NR29R30) или -NR5R6;
например, включая в себя без ограничения следующими вариантами осуществления, хлор, бром, фтор, циано, азидо, этил, н-пропил, изо-пропил, н-бутил, изо-бутил, втор-бутил, трет-бутил и н-пентил, 1,1-диметилпропил, 2,2-диметилпропил, 3-метилбутил, 1-метилбутил, 1-этилпропил, винил, аллил, 1-бутинил, 2-бутинил, ацетиленил, циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил, -(СН2)-циклопропил, -(CH2)-циклобутил, -(CH2)-циклопентил, -(CH2)-циклогексил, азиридин, оксиран, тииран, азетидин, оксетан, тиэтан, пирролидин, тетрагидрофуран, тиолан, пиразолидин, пиперидин, оксан, тиан, -(CH2)-азиридин, -(СH2)-оксиран, -(СН2)-тииран, -(CH2)-азетидин, -(CH2)-оксетан, -(CH2)-тиэтан, -(CH2)-пирролидин, -(СН2)-тетрагидрофуран, -(СН2)-тиолан, -(CH2)-пиразолидин, -(CH2)-пиперидин, -(CH2)-оксан, -(СН2)-тиан, фенил, пиридил, -ONHC(=O)OCH3, -ONHC(=O)OCH2CH3, -NHOH, NHOCH3, -ОСН3, OC2H5, -OPh, OCH2Ph, -SCH3, -SC2H5, -SPh, SCH2Ph, -NH(CH2)2NH2, -NH(CH2)2N(CH3)2, -NHNH2, -NHNHCH3, -N=NH, -N=NCH3, -N=NCH2CH3, -NHC(O)NHNH2, -NHC(S)NHNH2, -C(O)NHNH2, -NHSO2CH3, -NHSO2CH2CH3, -SO2NHCH3, -SO2N(CH3)2, -C(O)NH2, -C(O)NHCH3, -C(O)N(CH3)2, -CO2CH3, -CO2CH2CH3, -CO2Ph, -CO2CH2Ph, -SO2CH3, -SO2CH2CH3, -SO2Ph, -SO2CH2Ph,
Figure 00000032
,
Figure 00000033
, -P(O)H(OH), -P(O)H(OCH3), -P(O)(OH)(OH), -P(O)(OH)(OCH3), -Р(O)(ОСН3)(ОСН3), -P(O)(OH)(NH2), -P(O)(OH)(NHCH3), -P(O)(OH)N(CH3)2, -NHC(O)CH3, -NHC(O)CH2CH3, -NHC(O)CH(CH3)2, -NHC(O)OCH3, -NHC(O)OCH2CH3, -NHC(O)OCH(CH3)2, -NHC(O)OCH2CH2CH3, -NHC(O)OCH2CH2CH2CH3 и -NHC(O)OCH2CH2CH2CH2CH3;
R23 представляет собой C1-С5алкил, -(С0-C2алкил)(С3-С6циклоалкил), -(С0-С2алкил)(гетероцикл)-(С0-2алкил)(арил) или -(С0-С2алкил)(гетероарил), каждый из которых может быть необязательно замещен;
R24 представляет собой водород, C1-С6 алкил, -(С1-С2алкил)(С3-С6циклоалкил), -(C1-С2алкил)(С3-С6гетероцикл) -(С0-C2алкил)(арил) или -(С0-C2алкил)(гетероарил), где, за исключением водорода, каждый из которых может быть необязательно замещен;
R25 представляет собой водород, C1-С6 алкил, С2-С6 алкенил, С2-С6 алкинил, -(С0-C2алкил)(С3-С6циклоалкил), -(С0-C2алкил)(С3-С6гетероцикл), -(С0-С2алкил)(арил) или -(С0-C2алкил)(гетероарил), где, за исключением водорода, каждый из которых может быть необязательно замещен;
R26 независимо выбран из водорода, C1-С6алкил, -(С0-C2алкил)(С3-С6циклоалкил), -(С0-C2алкил)(гетероцикл), -(С0-C2алкил)(арил) или -(С0-С2алкил)(гетероарил), где, за исключением водорода, каждый из которых может быть необязательно замещен;
R27 представляет собой водород или необязательно замещенный C1-С6алкил;
R28 представляет собой C1-С6 алкил, С2-С6 алкенил, С2-С6 алкинил, -(С0-С2алкил)(С3-С6циклоалкил), -(С0-C2алкил)(С3-С6гетероцикл), -(С0-C2алкил)(арил) или -(С0-C2алкил)(гетероарил), каждый из которых может быть необязательно замещен;
R29 представляет собой водород, C1-С6 алкил, С2-С6 алкенил, С2-С6 алкинил, -(С0-C2алкил)(С3-С6циклоалкил), -(С0-C2алкил)(С3-С6гетероцикл), -(С0-C2алкил)(арил) или -(С0-C2алкил)(гетероарил), где, за исключением водорода, каждый из которых может быть необязательно замещен; или
R27 и R29 вместе с атомом азота, с которым они связаны, могут образовывать гетероциклическое кольцо;
R30 представляет собой водород, C1-С6 алкил, С2-С6 алкенил, С2-С6 алкинил, -(С0-С2алкил)(С3С6циклоалкил), -(С0-С2алкил)(С3-С6гетероцикл), -(С0-С2алкил)(арил) или -(С0-С2алкил)(гетероарил), где, за исключением водорода, каждый из которых может быть необязательно замещен; или
R29 и R30 могут быть связаны вместе с образованием гетероциклического кольца;
х равно 1, 2 или 3.
Согласно другому варианту осуществления раскрыты соединения формулы IIа:
Figure 00000034
где:
Y, R3, R4 и R22 определены выше.
Согласно другому варианту осуществления раскрыты соединения формулы IIb:
Figure 00000035
где:
Y, R3, R4 и R22 определены выше.
Согласно типичному варианту осуществления соединение представляет собой β-D изомер на основании соответствующего нуклеозида (т.е., во встречающейся в природе конфигурации). В альтернативной конфигурации соединение представлено в виде β-L изомера. Соединение типично по меньшей мере на 90% свободно от противоположного энантиомера и может быть по меньшей мере на 98%, 99% или даже на 100% свободно от противоположного энантиомера. Если не описано иное, соединение по меньшей мере на 90% свободно от противоположного энантиомера.
Согласно другому варианту осуществления соединение представляет собой соединение формулы III:
Figure 00000036
где:
R7 представляет собой водород, C1-6алкил; С3-7циклоалкил; гетероарил, гетероциклический радикал или арил, который включает в себя без ограничения фенил или нафтил, где фенил или нафтил необязательно замещены C1-6алкилом, С2-6алкенилом, C2-6алкинилом, C1-6алкокси, F, Cl, Br, I, нитро, циано, C1-6галогеналкилом, -N(R7')2, C1-6ациламино, NHSO2C1-6алкилом, -SO2N(R7')2, COR7'' и -SO2C1-6алкилом; (R7' независимо представляет собой водород или C1-6алкил; R7'' представляет собой -OR11 или -N(R7)2);
R8 представляет собой водород, C1-6алкил или R9a или R9b и R8 оба представляют собой (CH2)n таким образом, что образуют циклическое кольцо, которое содержит смежные атомы N и С; где n равно 2-4;
R9a и R9b (i) независимо выбраны из водорода, C1-6алкила, циклоалкила, -(CH2)c(NR9')2, C1-6гидроксиалкила, -CH2SH, -(CH2)2S(O)(Me, -(CH2)3NHC(=NH)NH2, (1H-индол-3-ил)метила, (1Н-имидазол-4-ил)метила, -(CH2)cCOR9'', арила и арил(C1-3алкил)-, арильные группы необязательно могут быть замещены группой, выбранной из гидроксила, C1-6алкила, C1-6алкокси, галогена, нитро и циано; (ii) R9a и R9b оба представляют собой C1-6алкил; (iii) R9a и R9b оба представляют собой (СH2)r таким образом, что образуют спирокольцо; (iv) R9a представляет собой водород и R9b и R8 оба представляют собой (CH2)n таким образом, что образуют циклическое кольцо, которое содержит смежные атомы N и С (v) R9b представляет собой водород и R9a и R8 оба представляют собой (CH2)n таким образом, что образуют циклическое кольцо, которое содержит смежные атомы N и С, где с равно 1-6, n равно 2-4, r равно 2-5 и где R9' независимо представляет собой водород или С1-6 алкил и R9'' представляет собой -OR11 или -N(R11')2); (vi) R9a представляет собой водород и R9b представляет собой водород, СН3, CH2CH3, СН(СН3)2, СН2СН(СН3)2, СН(СН3)СН2СН3, CH2Ph, СН2-индол-3-ил, -CH2CH2SCH3, CH2CO2H, CH2C(O)NH2, CH2CH2COOH, CH2CH2C(O)NH2, CH2CH2CH2CH2NH2, -CH2CH2CH2NHC(NH)NH2, СН2-имидазол-4-ил, CH2OH, CH(OH)CH3, CH2((4'-OH)-Ph), CH2SH или низший циклоалкил; или (vii) R9a представляет собой СН3, CH2CH3, СН(СН3)2, СН2СН(СН3)2, СН(СН3)СН2СН3, CH2Ph, СН2-индол-3-ил, -CH2CH2SCH3, CH2CO2H, CH2C(O)NH2, CH2CH2COOH, CH2CH2C(O)NH2, CH2CH2CH2CH2NH2, -CH2CH2CH2NHC(NH)NH2, СН2-имидазол-4-ил, СН2ОН, СН(ОН)СН3, CH2((4'-OH)-Ph), CH2SH или низший циклоалкил и R9b представляет собой водород;
R10 представляет собой водород, C1-6алкил, необязательно замещенный алкокси, ди(низший алкил)амино или галогеном, C1-6галогеналкил, С3-7циклоалкил, гетероциклоалкил, аминоацил, арил, такой как фенил, гетероарил, такой как пиридинил, замещенный арил или замещенный гетероарил;
R11 представляет собой необязательно замещенный C1-6алкил, необязательно замещенный циклоалкил; необязательно замещенный С2-6алкинил, необязательно замещенный С2-6алкенил или необязательно замещенный ацил, который включает в себя без ограничения C(O)(C1-6 алкил); и
Y, R3 R12 и R22 определены выше.
Согласно одному варианту осуществления раскрыты соединения формулы IV:
Figure 00000037
где переменные Y, R3, R7, R8, R9a, R9b, R10 и R22 раскрыты в настоящем описании. Согласно одному варианту осуществления раскрыты соединения формулы V:
Figure 00000038
где переменные Y, R3, R7, R8, R9a, R9b, R10 и R22 раскрыты в настоящем описании.
Согласно альтернативному варианту осуществления соединения, способы и композиции представлены для лечения хозяина, инфицированного или подвергнутого воздействию гепатита С.
Согласно одному варианту осуществления раскрыты соединения формулы VI:
Figure 00000039
где:
R41 представляет собой галоген (в частности, F или Cl), OR3 (включая ОН), N3, NH2 или CN; и
переменные Y, R3, R4 и R12 раскрыты в настоящем описании.
Согласно одному варианту осуществления раскрыты соединения формулы VII:
Figure 00000040
где переменные Y, R3, R4, R12 и R41 раскрыты в настоящем описании.
Метаболизм β-D-2'-дезокси-2'-α-фтор-2'-β-С-замещенных-N6-замещенных-2,6-диаминопуриновых нуклеотидов
Метаболизм фосфорамидата β-D-2'-дезокси-2'-α-фтор-2'-β-метил-N6-метил-2,6-диаминопуринового нуклеозида предусматривает продуцирование 5'-монофосфата и последующий анаболизм N6-метил-2,6-диаминопуринового основания с образованием β-D-2'-дезокси-2'-α-фтор-2'-β-метил-гуанинового нуклеозида в виде 5'-монофосфата. Затем монофосфат далее анаболизируется до активных соединений - 5'-трифосфата. Трифосфат β-D-2'-дезокси-2'-α-фтор-2'-β-метил-гуанина характеризуется IC50=0,15 мкМ в отношении NS5B полимеразы HCV 1b генотипа. Метаболический путь для фосфорамидата β-D-2'-дезокси-2'-α-фтор-2'-β-метил-N6-метил-2,6-диаминопуринового нуклеозида показан на приведенной ниже схеме 1.
Figure 00000041
Метаболизм β-D-2'-дезокси-2'-α-фтор-2'-β-метил-N6-диметил-2,6-диаминопуринового нуклеотида предусматривает как образование трифосфата β-D-2'-дезокси-2'-α-фтор-2'-β-метил-N6-диметил-2,6-диаминопуринового нуклеозида, так и образование соответствующего трифосфата гуанинового нуклеозида. Эти метаболические пути показаны на приведенных ниже схемах 2 и 3.
Figure 00000042
Figure 00000043
Стабилизированные фосфатные пролекарства
Стабилизированные фосфатные пролекарства являются фрагментами, которые могут доставлять моно-, ди- или трифосфат in vivo. Например, McGuigan раскрывал фосфорамидаты в патентах США №№8933053, 8759318, 8658616, 8263575, 8119779, 7951787 и 7115590. Alios раскрывал тиофосфорамидаты в патентах США №№8895723 и 8871737, включенных в настоящий документ посредством ссылки. Alios также раскрывал циклические нуклеотиды в патенте США №8772474, включенном в настоящий документ посредством ссылки. Idenix раскрывал циклические фосфорамидаты и фосфорамидатные/SATE производные в WO 2013/177219, включенной в настоящий документ посредством ссылки. Idenix также раскрывал замещенные карбонилоксиметилфосфорамидатные соединения в WO 2013/039920, включенной в настоящий документ посредством ссылки. Hostetler раскрывал пролекарства на основе фосфата липида, см., например, патент США №7517858. Hostetler также раскрывал липидные конъюгаты фосфонатных пролекарств, см., например, патенты США №№8889658, 8846643, 8710030, 8309565, 8008308 и 7790703. В WO 2014/124430 Emory University раскрываются нуклеотидные сфингоидные и липидные производные. В WO 2010/091386 RFS Pharma раскрываются пролекарства монофосфата пуринового нуклеозида. Cocrystal Pharma Inc. также раскрывали пролекарства монофосфата пуринового нуклеозида в патенте США №9173893, включенном в настоящий документ посредством ссылки. Технология HepDirect™ раскрывается в статье "Design, Synthesis, and Characterization of a Series of Cytochrome P(450) 3A-Activated Prodrugs (HepDirect Prodrugs) Useful for Targeting Phosph(on)ate-Based Drugs to the Liver," (J. Am. Chem. Soc. 126, 5154-5163 (2004). Дополнительные фосфатные пролекарства включают в себя без ограничения фосфаты сложных эфиров, 3',5'-циклические фосфаты, в том числе CycloSAL, SATE производные (сложные S-ацил-2-тиоэфиры) и DTE (дитиодиэтиловые) пролекарства. Для обзоров литературы, в которой раскрываются неограничивающие примеры, см. A. Ray and K. Hostetler, "Application of kinase bypass strategies to nucleoside antivirals," Antiviral Research (2011) 277-291; M. Sofia, "Nucleotide prodrugs for HCV therapy," Antiviral Chemistry and Chemotherapy 2011; 22-23-49; и S. Peyrottes et al., "SATE Pronucleotide Approaches: An Overview," Mini Reviews in Medicinal Chemistry 2004, 4, 395. Согласно одному варианту осуществления 5'-пролекарство, описанное в любом из этих поданных патентных документов или литературных источников, может быть использовано в R4-пoлoжeнии представленных соединений.
Согласно одному альтернативному варианту осуществления стабилизированные фосфатные пролекарства включают в себя без ограничения такие пролекарства, описанные в патенте США №9173893 и патенте США №8609627, которые включены путем ссылки, включая способы получения. Например, 5'-пролекарства формулы I-V могут быть представлены группой:
Figure 00000044
.
Согласно альтернативному варианту осуществления 3',5'-пролекарства формулы I-V могут быть представлены группой:
Figure 00000045
где:
если хиральность находится возле фосфорного центра, она может быть полностью или частично Rp или Sp или их смесью.
Z представляет собой О или S;
R33 выбран из OR34,
Figure 00000046
,
Figure 00000047
или
Figure 00000048
и производного жирного спирта (например, без исключения:
Figure 00000049
,
Figure 00000050
),
где R34, R35 и R36 определены ниже;
R31 и R32, при введении in vivo, способны обеспечивать нуклеозидный монофосфат или тиомонофосфат, который может быть или не быть частично или полностью устойчивым к 6-NH2 дезаминированию в биологической системе. Характерные R31 и R32 независимо выбраны из:
(a) OR34, где R34 выбран из Н, Li, Na, K, фенила и пиридинила; фенил и пиридинил замещены одним-тремя заместителями, независимо выбранными из группы, состоящей из (CH2)0-6CO2R37 и (CH2)0-6CON(R37)2;
R37 независимо представляет собой Н, C1-20 алкил, углеродную цепь, полученную из жирного спирта (такого как олеиловый спирт, октакозанол, триаконтанол, линолеиловый спирт и т.п.) или C1-20 алкил, замещенный низшим алкилом, алкокси, ди(низший алкил)-амино, фтором, С3-10 циклоалкилом, циклоалкилом, алкил, циклогетероалкил, арил, такой как фенил, гетероарил, такой как пиридинил, замещенный арил или замещенный гетероарил; где заместители представляют собой C1-5 алкил или C1-5 алкил, замещенный низшим алкилом, алкокси, ди(низший алкил)-амино, фтором, C3-10 циклоалкилом или циклоалкилом;
(b)
Figure 00000051
или
Figure 00000052
(c) сложного эфира D-аминокислоты или L-аминокислоты
Figure 00000053
,
где R36 ограничен такими боковыми цепями, которые встречаются в L-аминокислотах природного происхождения, и
R35 представляет собой Н, С1-20 алкил, углеродную цепь, полученную из жирного спирта (такого как олеиловый спирт, октакозанол, триаконтанол, линолеиловый спирт и т.п.) или С1-20 алкил, замещенный низшим алкилом, алкокси, ди(низший алкил)-амино, фтором, С3-10 циклоалкилом, циклоалкилом, алкил, циклогетероалкил, арил, такой как фенил, гетероарил, такой как пиридинил, замещенный арил или замещенный гетероарил; где заместители представляют собой С1-5 алкил или С1-5 алкил, замещенный низшим алкилом, алкокси, ди(низший алкил)-амино, фтором, С3-10 циклоалкилом или циклоалкилом;
(d) R31 и R32 могут быть соединены вместе с образованием кольца
Figure 00000054
где R38 представляет собой Н, С1-20 алкил, С1-20 алкенил, углеродную цепь, полученную из жирного спирта (такого как олеиловый спирт, октакозанол, триаконтанол, линолеиловый спирт и т.п.) или С1-20 алкил, замещенный низшим алкилом, алкокси, ди(низший алкил)-амино, фтором, С3-10 циклоалкилом, циклоалкилом, алкил, циклогетероалкил, арил, такой как фенил, гетероарил, такой как пиридинил, замещенный арил или замещенный гетероарил; где заместители представляют собой C1-5 алкил или C1-5 алкил, замещенный низшим алкилом, алкокси, ди(низший алкил)-амино, фтором, С3-10 циклоалкилом или циклоалкилом;
(e) R31 и R32 могут быть соединены вместе с образованием кольца, выбранного из
Figure 00000055
,
Figure 00000056
,
Figure 00000057
и
Figure 00000058
где R39 представляет собой О или NH, и
R40 выбран из Н, С1-20 алкила, С1-20 алкенила, углеродной цепи, полученной из жирной кислоты (такой как масляная кислота, линолевая кислота и т.п.), и С1-20 алкила, замещенного низшим алкилом, алкокси, ди(низший алкил)-амино, фтором, С3-10 циклоалкилом, циклоалкилом, алкила, циклогетероалкила, арила, такого как фенил, гетероарила, такого как пиридинил, замещенный арил или замещенный гетероарил; где заместители представляют собой C1-5 алкил или C1-5 алкил, замещенный низшим алкилом, алкокси, ди(низший алкил)-амино, фтором, С3-10 циклоалкилом или циклоалкилом.
Соединения могут быть получены, например, получением 5'-ОН аналогов, затем их превращением в монофосфатные аналоги.
Варианты осуществления
Согласно конкретным вариантам осуществления:
(i) в формуле Ia Y представляет собой NR1R2, R1 представляет собой метил, R2 представляет собой водород, R3 представляет собой водород, R4 представляет собой стабилизированное фосфатное пролекарство;
(ii) в формуле Ia Y представляет собой NR1R2, R1 представляет собой метил, R2 представляет собой водород, R3 представляет собой водород и R4 представляет собой стабилизированное тиофосфатное пролекарство;
(iii) в формуле Ia Y представляет собой NR1R2, R1 представляет собой метил, R2 представляет собой водород, R3 представляет собой водород и R4 представляет собой фосфорамидат;
(iv) в формуле Ia Y представляет собой NR1R2, R1 представляет собой метил, R2 представляет собой водород, R3 представляет собой водород и R4 представляет собой тиофосфорамидат;
(v) в формуле Ia Y представляет собой NR1R2, R1 представляет собой метил, R2 представляет собой водород, R3 представляет собой водород и R4 представляет собой монофосфат;
(vi) в формуле Ia Y представляет собой NR1R2, R1 представляет собой метил, R2 представляет собой водород, R3 представляет собой водород и R4 представляет собой дифосфат;
(vii) в формуле Ia Y представляет собой NR1R2, R1 представляет собой метил, R2 представляет собой водород, R3 представляет собой водород и R4 представляет собой трифосфат;
(viii) в формуле Ia Y представляет собой NR1R2, R1 представляет собой метил, R2 представляет собой метил, R3 представляет собой водород, R4 представляет собой стабилизированное фосфатное пролекарство;
(ix) в формуле Ia Y представляет собой NR1R2, R1 представляет собой метил, R2 представляет собой метил, R3 представляет собой водород и R4 представляет собой стабилизированное тиофосфатное пролекарство;
(x) в формуле Ia Y представляет собой NR1R2, R1 представляет собой метил, R2 представляет собой метил, R3 представляет собой водород и R4 представляет собой фосфорамидат;
(xi) в формуле Ia Y представляет собой NR1R2, R1 представляет собой метил, R2 представляет собой метил, R3 представляет собой водород и R4 представляет собой тиофосфорамидат;
(хii) в формуле Ia Y представляет собой NR1R2, R1 представляет собой метил, R2 представляет собой метил, R3 представляет собой водород и R4 представляет собой монофосфат;
(xiii) в формуле Ia Y представляет собой NR1R2, R1 представляет собой метил, R2 представляет собой метил, R3 представляет собой водород и R4 представляет собой дифосфат;
(xiv) в формуле Ia Y представляет собой NR1R2, R1 представляет собой метил, R2 представляет собой метил, R3 представляет собой водород и R4 представляет собой трифосфат;
(xv) в формуле Ia Y представляет собой NR1R2, R1 представляет собой метил, R2 представляет собой циклопропил, R3 представляет собой водород, R4 представляет собой стабилизированное фосфатное пролекарство;
(xvi) в формуле Ia Y представляет собой NR1R2, R1 представляет собой метил, R2 is циклопропил, R3 представляет собой водород и R4 представляет собой стабилизированное тиофосфатное пролекарство;
(xvii) в формуле Ia Y представляет собой NR1R2, R1 представляет собой метил, R2 is циклопропил, R3 представляет собой водород и R4 представляет собой фосфорамидат;
(xviii) в формуле Ia Y представляет собой NR1R2, R1 представляет собой метил, R2 представляет собой циклопропил, R3 представляет собой водород и R4 представляет собой тиофосфорамидат;
(xix) в формуле Ia Y представляет собой NR1R2, R1 представляет собой метил, R2 представляет собой циклопропил, R3 представляет собой водород и R4 представляет собой монофосфат;
(xx) в формуле Ia Y представляет собой NR1R2, R1 представляет собой метил, R2 представляет собой циклопропил, R3 представляет собой метил и R4 представляет собой дифосфат;
(xxi) в формуле Ia Y представляет собой NR1R2, R1 представляет собой метил, R2 представляет собой циклопропил, R3 представляет собой водород и R4 представляет собой трифосфат;
(xxii) в формуле Ia Y представляет собой NR1R2, R1 представляет собой метил, R2 представляет собой пропил, R3 представляет собой водород, R4 представляет собой стабилизированное фосфатное пролекарство;
(xxiii) в формуле Ia Y представляет собой NR1R2, R1 представляет собой метил, R2 представляет собой пропил, R3 представляет собой водород и R4 представляет собой стабилизированное тиофосфатное пролекарство;
(xxiv) в формуле Ia Y представляет собой NR1R2, R1 представляет собой метил, R2 представляет собой пропил, R3 представляет собой водород и R4 представляет собой фосфорамидат;
(xxv) в формуле Ia Y представляет собой NR1R2, R1 представляет собой метил, R2 представляет собой пропил, R3 представляет собой водород и R4 представляет собой тиофосфорамидат;
(xxvi) в формуле Ia Y представляет собой NR1R2, R1 представляет собой метил, R2 представляет собой пропил, R3 представляет собой водород и R4 представляет собой монофосфат;
(xxvii) в формуле Ia Y представляет собой NR1R2, R1 представляет собой метил, R2 представляет собой пропил, R3 представляет собой водород и R4 представляет собой дифосфат;
(xxviii) в формуле Ia Y представляет собой NR1R2, Y представляет собой NR1R2, R1 представляет собой метил, R2 представляет собой пропил, R3 представляет собой водород и R4 представляет собой трифосфат;
(xxix) в формуле Ia Y представляет собой NR1R2, R1 представляет собой метил, R2 представляет собой этил, R3 представляет собой водород, R4 представляет собой стабилизированное фосфатное пролекарство;
(xxx) в формуле Ia Y представляет собой NR1R2, R1 представляет собой метил, R2 представляет собой этил, R3 представляет собой водород и R4 представляет собой стабилизированное тиофосфатное пролекарство;
(xxxi) в формуле Ia Y представляет собой NR1R2, R1 представляет собой метил, R2 представляет собой этил, R3 представляет собой водород и R4 представляет собой фосфорамидат;
(xxxii) в формуле Ia Y представляет собой NR1R2, R1 представляет собой метил, R2 представляет собой этил, R3 представляет собой водород и R4 представляет собой тиофосфорамидат:
(хххiii) в формуле Ia Y представляет собой NR1R2, R1 представляет собой метил, R2 представляет собой этил, R3 представляет собой водород и R4 представляет собой монофосфат;
(xxxiv) в формуле Ia Y представляет собой NR1R2, R1 представляет собой метил, R2 представляет собой этил, R3 представляет собой водород и R4 представляет собой дифосфат;
(xxxv) в формуле Ia Y представляет собой NR1R2, R1 представляет собой метил, R2 представляет собой этил, R3 представляет собой водород и R4 представляет собой трифосфат;
(xxxvi) в формуле Ib Y представляет собой NR1R2, R1 представляет собой метил, R2 представляет собой метил, R3 представляет собой водород, R4 представляет собой стабилизированное фосфатное пролекарство;
(xxxvii) в формуле Ib Y представляет собой NR1R2, R1 представляет собой метил, R2 представляет собой метил, R3 представляет собой водород и R4 представляет собой стабилизированное тиофосфатное пролекарство;
(xxxviii) в формуле Ib Y представляет собой NR1R2, R1 представляет собой метил, R2 представляет собой метил, R3 представляет собой водород и R4 представляет собой фосфорамидат;
(xxxix) в формуле Ib Y представляет собой NR1R2, R1 представляет собой метил, R2 представляет собой метил, R3 представляет собой водород и R4 представляет собой тиофосфорамидат;
(xl) в формуле Ib Y представляет собой NR1R2, R1 представляет собой метил, R2 представляет собой метил, R3 представляет собой водород и R4 представляет собой монофосфат;
(xli) в формуле Ib Y представляет собой NR1R2, R1 представляет собой метил, R2 представляет собой метил, R3 представляет собой водород и R4 представляет собой дифосфат;
(xlii) в формуле Ib Y представляет собой NR1R2, R1 представляет собой метил, R2 представляет собой метил, R3 представляет собой водород и R4 представляет собой трифосфат;
(xliii) в формуле Ib Y представляет собой NR1R2, R1 представляет собой метил, R2 представляет собой водород, R3 представляет собой водород, R4 представляет собой стабилизированное фосфатное пролекарство;
(xliv) в формуле Ib Y представляет собой NR1R2, R1 представляет собой метил, R2 представляет собой водород, R3 представляет собой водород и R4 представляет собой стабилизированное тиофосфатное пролекарство;
(xlv) в формуле Ib Y представляет собой NR1R2, R1 представляет собой метил, R2 представляет собой водород, R3 представляет собой водород и R4 представляет собой фосфорамидат;
(xlvi) в формуле Ib Y представляет собой NR1R2, R1 представляет собой метил, R2 представляет собой водород, R3 представляет собой водород и R4 представляет собой тиофосфорамидат;
(xlvii) в формуле Ib Y представляет собой NR1R2, R1 представляет собой метил, R2 представляет собой водород, R3 представляет собой водород и R4 представляет собой монофосфат;
(xlviii) в формуле Ib Y представляет собой NR1R2, R1 представляет собой метил, R2 представляет собой водород, R3 представляет собой водород и R4 представляет собой дифосфат;
(xlix) в формуле Ib Y представляет собой NR1R2, R1 представляет собой метил, R2 представляет собой водород, R3 представляет собой водород и R4 представляет собой трифосфат;
(1) в формуле Ib Y представляет собой NR1R2, R1 представляет собой метил, R2 представляет собой циклопропил, R3 представляет собой водород, R4 представляет собой стабилизированное фосфатное пролекарство;
(li) в формуле Ib Y представляет собой NR1R2, R1 представляет собой метил, R2 представляет собой циклопропил, R3 представляет собой водород и R4 представляет собой стабилизированное тиофосфатное пролекарство;
(lii) в формуле Ib Y представляет собой NR1R2, R1 представляет собой метил, R2 представляет собой циклопропил, R3 представляет собой водород и R4 представляет собой фосфорамидат;
(liii) в формуле Ib Y представляет собой NR1R2, R1 представляет собой метил, R2 представляет собой циклопропил, R3 представляет собой водород и R4 представляет собой тиофосфорамидат;
(liv) в формуле Ib Y представляет собой NR1R2, R1 представляет собой метил, R2 представляет собой циклопропил, R3 представляет собой водород и R4 представляет собой монофосфат;
(lv) в формуле Ib Y представляет собой NR1R2, R1 представляет собой метил, R2 представляет собой циклопропил, R3 представляет собой метил и R4 представляет собой дифосфат;
(lvi) в формуле Ia Y представляет собой NR1R2, R1 представляет собой метил, R2 представляет собой циклопропил, R3 представляет собой водород и R4 представляет собой трифосфат.
Согласно любому из вышеуказанных альтернативных вариантов осуществления соединение содержит R22 заместитель. Согласно некоторым конкретным вариантам осуществления R22 представляет собой F, амид или карбамат. Согласно другим конкретным аспектам вышеуказанных вариантов осуществления R22 представляет собой хлор, бром, циано, азидо, этил, н-пропил, изо-пропил, н-бутил, изо-бутил, втор-бутил, трет-бутил и н-пентил, 1,1-диметилпропил, 2,2-диметилпропил, 3-метилбутил, 1-метилбутил, 1-этилпропил, винил, аллил, 1-бутинил, 2-бутинил, ацетиленил, циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил, -(CH2)-циклопропил, -(CH2)-циклобутил, -(СН2)-циклопентил, -(СH2)-циклогексил, азиридин, оксиран, тииран, азетидин, оксетан, тиэтан, пирролидин, тетрагидрофуран, тиолан, пиразолидин, пиперидин, оксан, тиан, -(СН2)-азиридин, -(СН2)-оксиран, -(СН2)-тииран, -(CH2)-азетидин, -(СH2)-оксетан, -(СН2)-тиэтан, -(СН2)-пирролидин, -(СН2)-тетрагидрофуран, -(CH2)-тиолан, -(СН2)-пиразолидин, -(СН2)-пиперидин, -(СН2)-оксан, -(СН2)-тиан, фенил, пиридил, -ONHC(=O)OCH3, -ONHC(=O)OCH2CH3, -NHOH, NHOCH3, -ОСН3, OC2H5, -OPh, OCH2Ph, -SCH3, -SC2H5, -SPh, SCH2Ph, -NH(CH2)2NH2, -NH(CH2)2N(CH3)2, -NHNH2, -NHNHCH3, -N=NH, -N=NCH3, -N=NCH2CH3, -NHC(O)NHNH2, -NHC(S)NHNH2, -C(O)NHNH2, -NHSO2CH3, -NHSO2CH2CH3, -SO2NHCH3, -SO2N(CH3)2, -C(O)NH2, -C(O)NHCH3, -C(O)N(CH3)2, -CO2CH3, -CO2CH2CH3, -CO2Ph, CO2CH2Ph, -SO2CH3, -SO2CH2CH3, -SO2Ph, -SO2CH2Ph,
Figure 00000059
,
Figure 00000060
,-P(O)H(OH), -Р(О)H(ОСН3), -P(O)(OH)(OH), -P(O)(OH)(OCH3), -P(O)(OCH3)(OCH3), -P(O)(OH)(NH2), -P(O)(OH)(NHCH3), -P(O)(OH)N(CH3)2, -NHC(O)CH3, -NHC(O)CH2CH3, -NHC(O)CH(CH3)2, -NHC(O)OCH3, -NHC(O)OCH2CH3, -NHC(O)OCH(CH3)2, -NHC(O)OCH2CH2CH3, -NHC(O)OCH2CH2CH2CH3 и -NHC(O)OCH2CH2CH2CH2CH3;
Согласно альтернативным вариантам осуществления соединений (i)-(lvi) L-нуклеозид использовали в формуле I-VII.
Согласно альтернативному варианту осуществления формулы I переменная R12 представляет собой CH2F.
Согласно альтернативному варианту осуществления формулы I переменная R12 представляет собой CHF2.
Согласно альтернативному варианту осуществления формулы I переменная R12 представляет собой CF3.
Согласно одному варианту осуществления представлено соединение формулы Iа. Неограничивающие примеры соединений формулы Iа включают в себя:
Figure 00000061
Figure 00000062
Figure 00000063
Figure 00000064
Figure 00000065
Figure 00000066
Figure 00000067
Figure 00000068
Figure 00000069
Figure 00000070
Figure 00000071
Figure 00000072
Figure 00000073
Figure 00000074
Figure 00000075
Figure 00000076
Figure 00000077
Figure 00000078
Figure 00000079
Figure 00000080
Figure 00000081
Figure 00000082
Figure 00000083
Figure 00000084
Figure 00000085
Figure 00000086
Figure 00000087
Figure 00000088
Figure 00000089
Figure 00000090
Figure 00000091
Figure 00000092
и
Figure 00000093
Согласно одному варианту осуществления представлен тиофосфорамидат формулы Iа. Неограничивающие примеры тиофосфорамидатов формулы Iа включают в себя без ограничения:
Figure 00000094
Figure 00000095
Figure 00000096
Figure 00000097
Figure 00000098
Figure 00000099
Figure 00000100
Figure 00000101
Figure 00000102
Figure 00000103
Figure 00000104
Figure 00000105
Figure 00000106
Figure 00000107
Figure 00000108
Figure 00000109
Figure 00000110
Figure 00000111
Figure 00000112
Figure 00000113
Figure 00000114
Figure 00000115
Figure 00000116
Figure 00000117
Figure 00000118
Figure 00000119
Figure 00000120
Figure 00000121
Figure 00000122
и
Figure 00000123
Согласно одному варианту осуществления представлено стабилизированное фосфатное пролекарство формулы Ia. Неограничивающие примеры стабилизированных фосфатных пролекарств формулы Iа представлены ниже:
Figure 00000124
Figure 00000125
Figure 00000126
Figure 00000127
Figure 00000128
Figure 00000129
и
Figure 00000130
Согласно другому варианту осуществления представлено соединение формулы Iа. Неограничивающие примеры соединений формулы Iа включают в себя:
Figure 00000131
Figure 00000132
Figure 00000133
Figure 00000134
Figure 00000135
Figure 00000136
Figure 00000137
Figure 00000138
Figure 00000139
Figure 00000140
Figure 00000141
Figure 00000142
Figure 00000143
Figure 00000144
Figure 00000145
Figure 00000146
Figure 00000147
Figure 00000148
Figure 00000149
Figure 00000150
Figure 00000151
Figure 00000152
Figure 00000153
и
Figure 00000154
.
Согласно одному варианту осуществления представлен тиофосфорамидат формулы Ia. Неограничивающие примеры тиофосфорамидатов формулы Ia включают в себя без ограничения:
Figure 00000155
Figure 00000156
Figure 00000157
Figure 00000158
Figure 00000159
и
Figure 00000160
.
Согласно одному варианту осуществления представлено стабилизированное фосфатное пролекарство формулы Ia. Неограничивающие примеры стабилизированных фосфатных пролекарств формулы Ia представлены ниже:
Figure 00000161
Figure 00000162
и
Figure 00000163
.
Согласно одному варианту осуществления представлено соединение формулы II. Неограничивающие примеры соединений формулы II включают в себя:
Figure 00000164
Figure 00000165
Figure 00000166
Figure 00000167
Figure 00000168
Figure 00000169
Figure 00000170
.
Согласно одному варианту осуществления представлено соединение формулы I. Неограничивающие примеры соединений формулы I включают в себя:
Figure 00000171
Figure 00000172
Согласно одному варианту осуществления представлено соединение формулы II. Неограничивающие примеры соединений формулы II включают в себя:
Figure 00000173
Figure 00000174
и
Figure 00000175
.
Согласно одному варианту осуществления R4 представляет собой
Figure 00000176
Согласно одному варианту осуществления представлено соединение формулы II. Неограничивающие примеры соединений формулы II включают в себя:
Figure 00000177
Figure 00000178
Figure 00000179
Figure 00000180
и
Figure 00000181
.
Согласно некоторым вариантам осуществления R3 представляет собой Н и R4 представляет собой
Figure 00000182
.
Согласно некоторым вариантам осуществления R3 представляет собой Н и R4 представляет собой
Figure 00000183
.
Согласно некоторым вариантам осуществления R3 представляет собой Н и R4 представляет собой
Figure 00000184
.
Согласно одному варианту осуществления представлено соединение формулы II. Неограничивающие примеры соединений формулы II включают в себя:
Figure 00000185
Figure 00000186
Figure 00000187
Figure 00000188
Figure 00000189
Figure 00000190
Figure 00000191
Figure 00000192
Figure 00000193
Figure 00000194
и
Figure 00000195
.
Согласно некоторым вариантам осуществления R3 представляет собой Н и R4 представляет собой
Figure 00000196
.
Согласно некоторым вариантам осуществления R3 представляет собой Н и R4 представляет собой
Figure 00000197
.
Согласно некоторым вариантам осуществления R3 представляет собой Н и R4 представляет собой
Figure 00000198
.
Согласно некоторым вариантам осуществления R1 представляет собой СН3, R2 представляет собой Н, R3 представляет собой Н и R4 представляет собой
Figure 00000199
.
Согласно некоторым вариантам осуществления R1 представляет собой СН3, R2 представляет собой Н, R3 представляет собой Н и R4 представляет собой
Figure 00000200
.
Согласно некоторым вариантам осуществления R1 представляет собой СН3, R2 представляет собой Н, R3 представляет собой Н и R4 представляет собой
Figure 00000201
.
Согласно некоторым вариантам осуществления R1 представляет собой СН3, R2 представляет собой СН3, R3 представляет собой Н и R4 представляет собой
Figure 00000202
.
Согласно некоторым вариантам осуществления R1 представляет собой СН3, R2 представляет собой СН3, R3 представляет собой Н и R4 представляет собой
Figure 00000203
.
Согласно некоторым вариантам осуществления R1 представляет собой СН3, R2 представляет собой СН3, R3 представляет собой Н и R4 представляет собой
Figure 00000204
.
Согласно некоторым вариантам осуществления R1 представляет собой циклопропил, R2 представляет собой СН3, R3 представляет собой Н и R4 представляет собой
Figure 00000205
Согласно некоторым вариантам осуществления R1 представляет собой циклопропил, R2 представляет собой CH3, R3 представляет собой Н и R4 представляет собой
Figure 00000206
Согласно некоторым вариантам осуществления R1 представляет собой циклопропил, R2 представляет собой CH3, R3 представляет собой Н и R4 представляет собой
Figure 00000207
II. Определения
Для описания настоящего изобретения использовали следующие термины. В случаях, если термин точно не определен в настоящем описании, такой термин представлен в принятом в данной области значении специалистом, использующим такой термин в контексте его применения при описании настоящего изобретения.
В контексте термина «алкил» следует понимать полностью насыщенный углеводородный радикал или алкильную группу с неразветвленной или разветвленной цепью, которые могут быть необязательно замещенными (например, галогеном, включая F). Например, алкильная группа может содержать 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 или 8 атомов углерода (т.е., C1-C8 алкил), 1, 2, 3, 4, 5 или 6 атомов углерода (т.е., C1-C6 алкил) или 1-4 атома углерода (т.е., С1-С4 алкил). Примеры подходящих алкильных групп включают в себя без ограничения метил, этил, н-пропил, изо-пропил, н-бутил, изобутил, втор-бутил, трет-бутил, пентил, изопентил, трет-пентил, неопентил, гексил, 2-метилпентил, 3-метилпентил, 2,2-диметилбутил и 2,3-диметилбутил.
Термин «алкенил» относится к неароматической углеводородной группе, которая содержит по меньшей мере одну двойную связь между смежными атомами углерода и характеризуется структурой, подобной алкильной группе, как иным образом описано в настоящем изобретении. Например, алкенильная группа может содержать от 2 до 8 атомов углерода (т.е., С2-С8 алкенил) или от 2 до 4 атомов углерода (т.е., С2-С4 алкенил). Примеры подходящих алкенильных групп включают в себя без ограничения этенил или винил (-СН=СН2), аллил (-СН2СН=СН2), 1-бутенил (-С=СН-СН2СН3) и 2-бутенил (-СН2СН=СНСН2). Алкенильная группа может быть необязательно замещенной, как описано в настоящем изобретении.
Термин «алкинил» относится к неароматической углеводородной группе, содержащей по меньшей мере одну тройную связь между смежными атомами углерода и характеризуется структурой, подобной алкильной группе, как иным образом описано в настоящем изобретении. Например, алкинильная группа может содержать от 2 до 8 атомов углерода (т.е., С2-С8 алкин) или от 2 до 4 атомов углерода (т.е., С2-С4 алкинил). Примеры алкинильных групп включают в себя без ограничения ацетилен или этинил и пропаргил. Алкинильная группа может быть необязательно замещена, как описано в настоящем изобретении.
Термин «ацил» относится к фрагменту -C(O)R, в котором карбонильный фрагмент связан с R, например, -С(O)алкил. R может быть выбран из алкокси, алкила, циклоалкила, низшего алкила (т.е., С1-С4); алкоксиалкила, включая метоксиметил; аралкил-, включая бензил, арилоксиалкил-, такой как феноксиметил; арила, включая фенил, необязательно замещенный галогеном, C1-С4 алкила или C1-С4 алкокси. Согласно одному варианту осуществления термин «ацил» относится к моно-, ди- или трифосфату.
Термин «низший ацил» относится к ацильной группе, в которой карбонильный фрагмент представляет собой низший алкил (т.е., С1-С4).
Термин «алкокси» относится к группе -OR', где -OR' представляет собой -O-алкил, -O-алкенил, -O-алкинил, -O-(C0-C2)(циклоалкил), -O-(C0-C2)(гетероцикло), -O-(C0-C2)(арил) или -O-(C0-C2)(гетероарил), каждый из которых может быть необязательно замещен.
Термин «амино» относится к группе -NH2.
Термин «аминокислота» или «остаток амонокислоты» относится к D- или L-аминокислоте природного или не природного происхождения. Характерные аминокислоты включают в себя без ограничения аланин, β-аланин, аргинин, аспарагин, аспарагиновую кислоту, цистеин, цистин, глутаминовую кислоту, глутамин, глицин, фенилаланин, гистидин, изолейцин, лизин, лейцин, метионин, пролин, серии, треонин, валин, триптофан или тирозин в том числе.
Термин «азидо» относится к группе -N3.
Термин «арил» или «ароматическое соединение» в контексте относится к замещенному (как описано далее в настоящем изобретении) или незамещенному моновалентному ароматическому радикалу, содержащему простое кольцо (например, фенил или бензил) или конденсированные кольца (например, нафтил, антраценил, фенантренил и т.п.), и он может быть связан с соединением по настоящему изобретению в любом доступном стабильном положении кольца(колец) или как иным образом обозначено в представленной химической структуре. Арильная группа необязательно может быть замещена, как описано в настоящем изобретении.
«Циклоалкил», «карбоцикл» или «карбоциклил» относится к насыщенному (т.е., циклоалкилу) или частично ненасыщенному (например, циклоалкенилу, циклоалкандиенилу и т.п.) кольцу, содержащему от 3 до 7 атомов углерода в виде моноцикла. Моноциклические карбоциклы содержат от 3 до 7 кольцевых атомов, еще более типично 5 или 6 кольцевых атомов. Неограничивающие примеры циклоалкильных групп включают в себя циклопропил, циклобутил, циклопентил, 1-циклопент-1-енил, 1-циклопент-2-енил, 1-циклопент-3-енил, циклогексил, 1-циклогекс-1-енил, 1-циклогекс-2-енил и 1-цикло-гекс-3-енил.
Термин «циано» относится к группе -CN.
Термин «галоген» или «гало» относится к хлору, брому, фтору или йоду.
Гетероарильная кольцевая система представляет собой насыщенное или ненасыщенное кольцо с одним или несколькими атомами азота, кислорода или серы в кольце (моноциклическом), включающем в себя без ограничения имидазол, фурил, пиррол, фуранил, тиен, тиазол, пиридин, пиримидин, пурин, пиразин, триазол, оксазол, или конденсированные кольцевые системы, такие как индол, хинолин и т.п., наряду с прочим, которые могут быть необязательно замещенными, как описано выше. Гетероарильные группы включают в себя азотсодержащие гетероарильные группы, такие как пиррол, пиридин, пиридон, пиридазин, пиримидин, пиразин, пиразол, имидазол, триазол, триазин, тетразол, индол, изоиндол, индолизин, пурин, индазол, хинолин, изохинолин, хинолизин, фталазин, нафтиридин, хиноксалин, хиназолин, циннолин, птеридин, имидазопиридин, имидазотриазин, пиразинопиридазин, акридин, фенантридин, карбазол, карбазолин, перимидин, фенантролин, фенацен, оксадиазол, бензимидазол, пирролопиридин, пирролопиримидин и пиридопиримидин; серосодержащие ароматические гетероциклы, такие как тиофен и бензтиофен; кислородсодержащие ароматические гетероциклы, такие как фуран, пиран, циклопентапиран, бензофуран и изобензофуран; и ароматические гетероциклы, содержащие два или более гетероатомов, выбранных среди атомов азота, серы и кислорода, такие как тиазол, тиадиазол, изотиазол, бензоксазол, бензотиазол, бензотиадиазол, фенотиазин, изоксазол, фуразан, феноксазин, пиразолоксазол, имидазотиазол, тиенофуран, фуропиррол, пиридоксазин, фуропиридин, фуропиримидин, тиенопиримидин и оксазол, наряду с прочим, все из которых могут быть необязательно замещенными.
Термин «гетероцикл» или «гетероцикло» относится к циклической группе, которая содержит по меньшей мере один гетероатом, т.е., О, N или S, и может быть ароматической (гетероарил) или неароматической. Приводимые в качестве примера неароматические гетероциклические группы для применения в настоящем изобретении включают в себя, например, пирролидинил, пиперидинил, пиперазинил, N-метилпиперазинил, имидазолинил, пиразолидинил, имидазолидинил, морфолинил, тетрагидропиранил, азетидинил, оксетанил, оксатиоланил, пиридон, 2-пирролидон, этиленмочевину, 1,3-диоксолан, 1,3-диоксан, 1,4-диоксан, фталимид и сукцинимид, наряду с прочим, все из которых могут быть необязательно замещенными.
Термин «гидроксил» относится к группе -ОН.
Термин «нитро» относится к группе -NO2.
Термин «фармацевтически приемлемая соль» или «пролекарство» использовали по всему описанию для описания любой фармацевтически приемлемой формы (такой как сложный эфир, фосфорамидат, тиофосфорамидат, фосфатный сложный эфир, соль сложного эфира или связанная группа) β-D-2'-D-2'-α-фтор-2'-β-С-замещенного-2-модифицированного-N6-замещенного пуринового нуклеотида, который после введения пациенту обеспечивает требуемое активное соединение. Примерами фармацевтически приемлемых солей являются органические кислотно-аддитивные соли, образованные с кислотами, которые образуют физиологически приемлемый анион, например, тозилат, метансульфонат, ацетат, цитрат, малонат, тартрат, сукцинат, бензоат, аскорбат, α-кетоглутарат и α-глицерофосфат. Подходящие неорганические соли также могут быть образованы, включая сульфатные, нитратные, бикарбонатные и карбонатные соли. Фармацевтически приемлемые соли могут быть получены с применением стандартных способов, хорошо известных из области техники, например, путем осуществления взаимодействия достаточно основного соединения, такого как амин, с подходящей кислотой с получением физиологически приемлемого аниона. Также могут быть получены соли щелочного металла (например, натрия, калия или лития) или соли щелочноземельного металла (например, кальция) карбоновой кислоты.
«Фармацевтически приемлемое пролекарство» относится к соединению, которое метаболизируется, например, гидролизуется или окисляется, у хозяина с образованием соединения по настоящему изобретению. Типичные примеры пролекарств включают в себя соединения, содержащие биологически лабильные защитные группы на функциональном фрагменте активного соединения. Пролекарства включают в себя соединения, которые могут быть окислены, восстановлены, аминированы, деаминированы, гидроксилированы, дигидроксилированы, гидролизированы, дегидролизированы, алкилированы, деалкилированы, ацилированы, деацилированы, фосфорилированы, дефосфорилированы, тиофосфорамидированы, детиофосфорамидированы, фосфорамидированы или дефосфорамидированы, с получением активного соединения. Соединения по настоящему изобретению обладают противовирусной активностью по отношению к HCV или метаболизированы в соединение, которое проявляет такую активность. β-D-2'-D-2'-α-фтор-2'-β-С-замещенный-2-модифицированный-N6-замещенный пуриновый нуклеозид также может быть введен в виде 5'-фосфоэфирного липида, бисфосфорамидата, 3',5'-циклического фосфорамидата, 3',5'-циклического тиофосфорамидата, конъюгата DTE, смешанного производного фосфорамидата-SATE или «производного SATE».
Термин «фосфоновая кислота» относится к группе -Р(O)(ОН)2.
Согласно одному варианту осуществления термин пурин или пиримидиновое основание включает в себя без ограничения аденин, N6-алкилпурины, N6-ацилпурины (где ацил представляет собой -С(O)алкил, -С(O)(арил)C0-C4алкил или -С(O)(C0-C4алкил)арил), N6-бензилпурин, N6-галогенпурин, N6-винилпурин, N6-ацетиленовый пурин, N6-ацилпурин, N6-гидроксиалкилпурин, N6-тиоалкилпурин, N2-алкилпурины, N2-алкил-6-тиопурины, тимин, цитозин, 5-фторцитозин, 5-метилцитозин, 6-азапиримидин, включая 6-азацитозин, 2- и/или 4-меркаптопиримидин, урацил, 5-галогенурацил, включая 5-фторурацил, С5-алкилпиримидины, С5-бензилпиримидины, С5-галогенпиримидины, С5-винилпиримидин, С5-ацетиленовый пиримидин, С5-ацилпиримидин, С5-гидроксиалкилпурин, С5-амидопиримидин, С5-цианопиримидин, С5-нитропиримидин, С5-аминопиримидин, N2-алкилпурины, N2-алкил-6-тиопурины, 5-азацитидинил, 5-азаурацилил, триазолопиридинил, имидазолопиридинил, пирролопиримидинил и пиразолопиримидинил. Пуриновые основания включают в себя без ограничения гуанин, аденин, гипоксантин, 2,6-диаминопурин и 6-хлорпурин. Кислородные и азотные функциональные группы на основании могут быть защищены при требовании или необходимости. Подходящие защитные группы хорошо известны специалистам настоящей области техники и включают в себя бензил, триметилсилил, диметилгексилсилил, трет-бутилдиметилсилил, трет-бутилдифенилсилил, тритил, алкильные группы и ацильные группы, такие как ацетил и пропионил; метансльфонил и пара-толуолсульфонил. Альтернативно, пуриновое или пиримидиновое основание необязательно может быть замещено таким образом, что образует эффективное пролекарство, которое может расщепляться in vivo. Примеры соответствующих заместителей включают в себя ацильный фрагмент.
Термин «замещенный» или «необязательно замещенный» означает, что фрагмент может содержать по меньшей мере один дополнительный заместитель, включая без ограничения галоген (F, Cl, Br, I), ОН, фенил, бензил, N3, CN, ацил, алкил, включая метил; алкенил, алкинил, алкокси, галогеналкил; включая CHF2, CH2F и CF3; и т.п. Согласно одному варианту осуществления термин «замещенный» или «необязательно замещенный» означает, что фрагмент может содержать по меньшей мере один дополнительный заместитель, включая без ограничения азидо, циано, галоген (фтор, хлор, бром или йод), алкил, алкенил, алкинил, циклоалкил, гетероцикл, арил, гетероарил, галогеналкил, гидроксил, алкокси, амино, -NH(C1-C6 незамещенный алкил), -NH(C1-C6 замещенный алкил), -NH-(C0-C2алкил)(С3-C8циклоалкил), -NH-(C0-C2алкил)(C3-C8гетероцикл), -NH-(C0-C2алкил)(арил), -N(C1-C6 незамещенный алкил)2, -N(C1-C6 незамещенный алкил)(C1-C6 замещенный алкил), -N(C1-C6 замещенный алкил)2, -NH-(C0-C2алкил)(C3-C8циклоалкил), -NH-(C0-C2алкил)(C3-С8гетероцикл), -NH-(C0-C2алкил)(арил), ацил, нитро, сульфоновую кислоту, сульфат, фосфоновую кислоту, фосфат, фосфонат или тиол.
Термин «сульфонатные сложные эфиры», представленные формулой R14S(O)2OR15, содержит R14, где R14 представляет собой алкил, галогеналкил, аралкил или арил. R15 представляет собой алкил, арил или аралкил.
Термин «сульфоновая кислота» относится к группе -SO2OH.
Термин «тиол» относится к группе -SH.
Используемый в настоящем описании термин «азотсодержащая группа» относится к фрагменту, который ковалентно присоединен к азоту и который может быть удален, и типично заменен водородом при необходимости. Например, азотсодержащая группа может быть группой, которую удаляли in vivo после введения хозяину, in vitro при помощи клетки или она может быть удалена в процессе производства. Подходящие азотсодержащие группы, применимые в настоящем изобретении, описаны у Greene and Wuts in Protective Groups in Organic Synthesis (1991) New York, John Wiley and Sons, Inc.
Используемый в настоящем описании термин «кислородсодержащая группа» относится к фрагменту, который ковалентно присоединен к кислороду и который может быть удален, и типично заменен водородом при необходимости. Например, кислородсодержащая группа может быть группой, которую удаляли in vivo после введения хозяину, in vitro при помощи клетки или она может быть удалена в процессе производства. Подходящие кислородсодержащие группы, применимые в настоящем изобретении, описаны у Greene and Wuts in Protective Groups in Organic Synthesis (1991) New York, John Wiley and Sons, Inc.
«Фосфат» относится к группе -ОР(O)(ОН)2.
«Фосфатный сложный эфир» относится к моно-, ди- и трифосфатам, если не отмечено иное.
Термин «фосфоамидат», «фосфорамидат» или «фосфороамидат» относится к фрагменту, который содержит фосфорную связь с тремя кислородными группами и амином (который может быть необязательно замещен). Подходящие фосфорамидаты, применимые в настоящем изобретении, описаны у Madela, Karolina and McGuigan in 2012, «Progress in the development of anti-hepatitis С virus nucleoside and nucleotide prodrugs», Future Medicinal Chemistry 4(5), pages 625-650 10:1021/jm300074y and Dominique, McGuigan and Balzarini in 2004, «Aryloxy Phosphoramidate Triesters as Pro-Tides», Mini Reviews in Medicinal Chemistry 4(4), pages 371-381. Дополнительные фосфорамидаты, применимые в настоящем изобретении, описаны в патентах США №№5233031, 7115590, 7547704, 7879815, 7888330, 7902202, 7951789, 7964580, 8071568; 8148349, 8263575, 8324179, 8334270, 8552021, 8563530, 8580765, 8735372, 8759318; ЕР 2120565; ЕР 1143995; 6455513 и 8334270. Другие фосфорамидаты описаны в нуклеозидных патентах в предпосылках изобретения.
Фосфорамидатные группы для применения в настоящем изобретении включают в себя такие структуры:
Figure 00000208
Figure 00000209
Figure 00000210
и
Figure 00000211
Другие фосфорамидаты для применения в настоящем изобретении включают в себя следующие структуры:
Figure 00000212
где:
RP1 представляет собой необязательно замещенную неразветвленную, разветвленную или циклическую алкильную группу или необязательно замещенную арильную, гетероарильную или гетероциклическую группу или их соединенную комбинацию; и
RP2 представляет собой группу -NRN1RN2 или группу В';
где:
RN1 и RN2 каждый независимо представляет собой H, C1-8алкил, (C3-C7циклоалкил)C0-C4алкил-, (арил)C0-C4алкил-, (C3-C6гетероцикло)C0-C4алкил- или (гетероарил)C0-C4алкил-; который может быть необязательно замещенным; или
RN1 и RN2 вместе с атомом азота, к которому они присоединены, связаны с образованием 3-7-членного гетероциклического кольца;
В' представляет собой группу
Figure 00000213
где:
R16 представляет собой водород, (С1-С8)алкил, (C2-C8)алкенил, (С2-С8)алкинил, (C3-C8циклоалкил)C0-C4алкил-, (арил)C0-C4алкил-, (C3-C6гетероцикло)C0-C4алкил-, (гетероарил)C0-C4алкил- или боковую цепь аминокислоты, например, боковую цепь аминокислоты (как далее описано в настоящем изобретении), часто выбранной из группы, состоящей из аланина, β-аланина, аргинина, аспарагина, аспарагиновой кислоты, цистеина, цистина, глутаминовой кислоты, глутамина, глицина, фенилаланина, гистидина, изолейцина, лизина, лейцина, метионина, пролина, серина, треонина, валина, триптофана или тирозина (часто R16 представляет собой водород, метил, изопропил или изобутил);
R17 представляет собой водород, (С1-С8)алкил, (C2-C8)алкенил, (C2-C8)алкинил, (C3-C8циклоалкил)C0-C4алкил-, (арил)C0-C4алкил-, (C3-C6гетероцикло)C0-C4алкил-, (гетероарил)C0-C4алкил- или боковую цепь аминокислоты, например, боковую цепь аминокислоты (как далее описано в настоящем изобретении), часто выбранной из группы, состоящей из аланина, β-аланина, аргинина, аспарагина, аспарагиновой кислоты, цистеина, цистина, глутаминовой кислоты, глутамина, глицина, фенилаланина, гистидина, изолейцина, лизина, лейцина, метионина, пролина, серина, треонина, валина, триптофана или тирозина (часто R17 представляет собой водород, метил, изопропил или изобутил);
R18 представляет собой водород или C1-C3алкил; или
R16 и R17 могут образовывать (C3-C7)циклоалкильную или (C3-C7)гетероциклическую группу; или
R18 и R16 или R17 могут образовывать (C3-C6)гетероциклическую группу; и
R19 представляет собой водород, (С1-С6)алкил, (C3-C6)алкенил, (C3-C6)алкинил, (C3-С8циклоалкил)C0-C4алкил-, (арил)C0-C4алкил-, (C3-C6гетероцикло)C0-C4алкил-, (гетероарил)C0-C4алкил-; или
В' представляет собой группу
Figure 00000214
где:
R20 представляет собой водород, (C1-C3)алкил, (C3-C8циклоалкил)C0-C4алкил-, (арил)C0-C4алкил-, (C3-C6гетероцикло)C0-C4алкил- или (гетероарил)C0-C4алкил-;
R21 представляет собой водород, (C1-C3)алкил, (C3-C8циклоалкил)C0-C4алкил-, (арил)C0-C4алкил-, (C3-C6гетероцикло)C0-C4алкил- или (гетероарил)C0-C4алкил-; и
R18 и R19 определены выше.
Предпочтительные группы RP1 включают в себя необязательно замещенные фенильные, нафтильные и моноциклические гетероарильные группы, особенно такие группы (в частности, липофильные группы), которые усиливают биологическую доступность соединений в клетки пациента и которые проявляют уменьшенную токсичность, улучшенный терапевтический индекс и улучшенную фармакокинетику (соединения метаболизировались и выделялись более медленно).
Термин фосфорамидат использовали по всему описанию для описания группы, которая встречается в 5' или 3' положении фуранозного кольца нуклеозидного соединения и образует пролекарственную форму нуклеозидного соединения. Согласно одному варианту осуществления фосфорамидаты могут встречаться в обоих 5' и 3' положениях фуранозного кольца нуклеозидного соединения и образовывать пролекарственную форму нуклеозидного соединения. Согласно другому варианту осуществления фосфорамидат, который встречается в 5' положении фуранозного кольца нуклеозида, может образовывать циклическое фосфорамидатное соединение путем образования связи с З'-гидроксильным заместителем в 3' положении фуранозного кольца нуклеозидного соединения и образует пролекарственную форму нуклеозидного соединения.
Термин «тиофосфоамидат», «тиофосфорамидат» или «тиофосфороамидат» представляет собой фрагмент, содержащий фосфорную связь с серой, двумя кислородными группами и амином (который может быть необязательно замещен). Тиофосфорамидаты, применимые в настоящем изобретении, описаны в патенте США №8772474 и WO 2012/040124.
Тиофосфорамидатные группы для применения в настоящем изобретении включают в себя структуры:
Figure 00000215
Figure 00000216
Figure 00000217
и
Figure 00000218
Другие тиофосфорамидаты включают в себя структуры:
Figure 00000219
где:
RP1 представляет собой необязательно замещенную неразветвленную, разветвленную или циклическую алкильную группу или необязательно замещенную арильную, гетероарильную или гетероциклическую группу или их связанную комбинацию; и
RP2 представляет собой группу -NRN1RN2 или группу В';
где:
RN1 и RN2 каждый независимо представляет собой Н, C1-C8 алкил, (C3-C7циклоалкил)C0-C4алкил-, (арил)C0-C4алкил-, (C3-C6гетероцикло)C0-C4алкил- или (гетероарил)C0-C4алкил-; или
RN1 и RN2 вместе с атомом азота, к которому они присоединены, связаны с образованием 3-7-членного гетероциклического кольца;
В' представляет собой группу
Figure 00000220
где:
R16 представляет собой водород, (С1-С8)алкил, (C2-C8)алкенил, (С2-С8)алкинил, (C3-C8циклоалкил)C0-C4алкил-, (арил)C0-C4алкил-, (C3-C6гетероцикло)C0-C4алкил-, (гетероарил)C0-C4алкил- или боковую цепь аминокислоты, например, боковую цепь аминокислоты (как далее описано в настоящем изобретении), часто выбранной из группы, состоящей из аланина, β-аланина, аргинина, аспарагина, аспарагиновой кислоты, цистеина, цистина, глутаминовой кислоты, глутамина, глицина, фенилаланина, гистидина, изолейцина, лизина, лейцина, метионина, пролина, серина, треонина, валина, триптофана или тирозина (часто R16 представляет собой водород, метил, изопропил или изобутил);
R17 представляет собой водород, (С1-С8)алкил, (C2-C8)алкенил, (С2-С8)алкинил, (C3-C8циклоалкил)C0-C4алкил-, (арил)C0-C4алкил-, (C3-C6гетероцикло)C0-C4алкил-, (гетероарил)C0-C4алкил- или боковую цепь аминокислоты, например, боковую цепь аминокислоты (как далее описано в настоящем изобретении), часто выбранной из группы, состоящей из аланина, β-аланина, аргинина, аспарагина, аспарагиновой кислоты, цистеина, цистина, глутаминовой кислоты, глутамина, глицина, фенилаланина, гистидина, изолейцина, лизина, лейцина, метионина, пролина, серина, треонина, валина, триптофана или тирозина (часто R17 представляет собой водород, метил, изопропил или изобутил);
R18 представляет собой водород или С1-С3алкил; или
R16 и R17 могут образовывать (С3-С7)циклоалкил или (С3-С7)гетероциклическую группу; или
R18 и R16 или R17 могут образовывать (C3-C6)гетероциклическую группу; и
R19 представляет собой водород, (С1-С6)алкил, (C3-C6)алкенил, (C3-C6)алкинил, (С3-С8циклоалкил)C0-C4алкил-, (арил)C0-C4алкил-, (C3-C6гетероцикло)C0-C4алкил-, (гетероарил)C0-C4алкил-; или
В' представляет собой группу
Figure 00000221
и
R18, R19, R20 и R21 определены выше.
Предпочтительные группы RP1 включают в себя необязательно замещенные фенильные, нафтильные и моноциклические гетероарильные группы, особенно такие группы (в частности, липофильные группы), которые усиливают биологическую доступность соединений в клетки пациента и которые проявляют уменьшенную токсичность, улучшенный терапевтический индекс и улучшенную фармакокинетику (соединения метаболизировались и выделялись более медленно).
Тиофосфорамидат может быть в 5' или 3' положении фуранозного кольца нуклеозидного соединения с образованием пролекарственной формы нуклеозидного соединения. Согласно одному варианту осуществления тиофосфорамидаты могут встречаться в обоих 5' и 3' положениях фуранозного кольца нуклеозидного соединения и образовывать пролекарственную форму нуклеозидного соединения. Согласно другому варианту осуществления, тиофосфорамидат, который встречается в 5' положении фуранозного кольца нуклеозида, может образовывать циклическое тиофосфорамидатное соединение путем образования связи с 3'-гидрокс ильным заместителем в 3' положении фуранозного кольца нуклеозидного соединения и образует пролекарственную форму нуклеозидного соединения.
Используемый в контексте настоящего изобретения термин «D-конфигурация» относится к основной конфигурации, которая имитирует природную конфигурацию сахарных фрагментов по сравнению с не встречающимися в природе нуклеозидами или «L» конфигурацией. Термин «β» или «β-аномер» используют для обозначения нуклеозидных аналогов, в которых нуклеозидное основание сконфигурировано (расположено) над плоскостью фуранозного фрагмента в нуклеозидном аналоге.
Термины «совместно вводить» и «совместное введение» или комбинированная терапия используют для описания введения по меньшей мере одного из 2'-дезокси-2'-α-фтор-2'-β-C-нуклеозидных соединений в соответствии с настоящим изобретением в комбинации по меньшей мере с одним другим активным средством, например, в случае необходимости, по меньшей мере с одним дополнительным средством против HCV, в том числе с другими 2'-дезокси-2'-α-фтор-2'-β-C-нуклеозидными средствами, которые раскрываются в настоящем документе. Время осуществления совместного введения лучше всего определять медицинскому специалисту, лечащему больного. Иногда предпочтительно вводить средства в одно и то же время. В качестве альтернативы, лекарственные средства, выбранные для комбинированной терапии, могут быть введены больному в разные моменты времени. Конечно, при наличии более чем одной вирусной или иной инфекции или другого состояния соединения в соответствии с настоящим изобретением при необходимости могут быть объединены с другими средствами для лечения этих других инфекции или состояния.
Используемый в настоящем документе термин «хозяин» относится к одноклеточному или многоклеточному организму, в котором вирус HCV может реплицироваться, в том числе к клеточным линиям, животным и, как правило, людям. Термин «хозяин», в частности, относится к инфицированным клеткам, клеткам, трансфицированным полным геномом HCV или его частью, и животным, в частности, приматам (в том числе шимпанзе) и людям. При большинстве применений для животных в соответствии с настоящим изобретением хозяином является больной человек. Тем не менее применения в ветеринарии, при определенных показаниях, явно предусматриваются настоящим изобретением (например, для шимпанзе). Хозяином могут быть, например, бычьи, лошадиные, птицы, собачьи, кошачьи и т.д.
1. Изотопное замещение
Настоящее изобретение включает в себя соединения и применение соединений с требуемыми изотопными замещениями атомов в количествах, что выше распространенности изотопа в природе, т.е., обогащенные. Изотопы представляют собой атомы с одинаковым атомным числом, но разными массовыми числами, т.е., одинаковое число протонов, но разное число нейтронов. В качестве общего примера и без ограничения, изотопы водорода, например, дейтерий (2Н) и тритий (3Н), могут быть использованы в любом месте в описанных структурах. Альтернативно или в дополнение, могут быть использованы изотопы углерода, например, 13С и 14С. Предпочтительным изотопным замещением является дейтерий для водорода в одном или нескольких местах молекулы для улучшения характеристики лекарственного средства. Дейтерий может быть связан в месте разрыва связи во время метаболизма (кинетический изотопный эффект α-дейтерия) или рядом с или возле места разрыва связи (кинетический изотопный эффект β-дейтерия). В Achillion Pharmaceuticals, Inc. (WO/2014/169278 и WO/2014/169280) описано дейтерирование нуклеотидов для улучшения их фармакокинетики или фармакодинамики, включая 5-положение в молекуле.
Замещение изотопами, такими как дейтерий, может позволять определенные терапевтические преимущества, возникающие вследствие большей устойчивости при метаболизме, такие как, например, увеличенный in vivo период полураспада или уменьшенные дозировки. Замещение дейтерия водородом на месте метаболического расщепления может уменьшать скорость или убирать метаболизм при такой связи. В любом положении соединения, в котором может присутствовать атом водорода, атом водорода может быть любым изотопом водорода, включая протий (1Н), дейтерий (2Н) и тритий (3Н). Таким образом, ссылка в настоящем изобретении на соединения охватывает все возможные изотопные формы, если в контексте четко не указано иное.
Термин «изотопно меченый» аналог относится к аналогу, который представляет собой «деитерированный аналог», «13С-меченый аналог» или «дейтерированный/13С-меченый аналог». Термин «дейтерированный аналог» означает описанное в настоящем изобретении соединение, в соответствии с чем Н-изотоп, т.е., водород/протий (1Н), замещен Н-изотопом, т.е., дейтерием (2Н). Замещение дейтерием может быть частичным или полным. Частичное замещение дейтерием означает, что по меньшей мере один атом водорода замещен по меньшей мере одним дейтерием. Согласно определенным вариантам осуществления изотоп на 90, 95 или 99% или более обогащен изотопом в любом нужном месте. Согласно некоторым вариантам осуществления он представляет собой дейтерий, который на 90, 95 или 99% обогащен в требуемом положении. Если не отмечено иное, дейтерирование занимает по меньшей мере 80% в выбранном положении. Дейтерирование нуклеозида может проходить при любом заменяемом атоме водорода, который обеспечивает требуемые результаты.
III. Способы лечения или профилактики
Используемый в настоящем документе термин «лечение» относится к введению активного соединения хозяину, который инфицирован вирусом HCV.
Используемый в настоящем документе термин «профилактическое» или «предупреждающее» относится к введению активного соединения для предупреждения или снижения вероятности возникновения вирусного нарушения. Настоящее изобретение относится как к лечебным, так и к профилактическим или предупреждающим терапевтическим средствам. Согласно одному варианту осуществления активное соединение вводят хозяину, который подвергся инфекции вируса гепатита С и, таким образом, рискует стать инфицированным таковым.
Настоящее изобретение относится к способу лечения или профилактики заболеваний, вызванных вирусом гепатита С, в том числе устойчивыми к лекарственному средству и устойчивыми к нескольким лекарственным средствам формами HCV, а также родственных болезненных состояний, состояний или осложнений инфекции HCV, в том числе цирроза и родственных гепатотоксичностей, а также других состояний, являющихся вторичными по отношению к инфекции HCV, таких как наряду с прочими слабость, потеря аппетита, потеря веса, увеличение молочной железы (особенно у мужчин), сыпь (особенно на ладонях), затруднение свертывания крови, звездчатые сосуды на коже, спутанность сознания, кома (энцефалопатия), накопление жидкости в брюшной полости (асциты), расширение вен пищевода, портальная гипертензия, почечная недостаточность, увеличение селезенки, уменьшение кровяных клеток, анемия, тромбоцитопения, желтуха и печеночноклеточная злокачественная опухоль. Способ включает введение хозяину при необходимости этого эффективного количества по меньшей мере одного β-D-2'-D-2'-α-фтор-2'-β-C-замещенного-2-модифицированного-N6-замещенного пуринового нуклеотида, описываемого в настоящем документе, необязательно в комбинации по меньшей мере с одним дополнительным биоактивным средством, например, дополнительным средством против HCV, дополнительно в комбинации с фармацевтически приемлемыми носителем, добавкой и/или вспомогательным веществом.
Согласно другому аспекту настоящее изобретение относится к способу предупреждения или профилактики инфекции HCV, или болезненного состояния, или родственного, или последующего болезненного состояния, состояния или осложнения инфекции HCV, в том числе цирроза и родственных гепатотоксичностей, также других состояний, являющихся вторичными по отношению к инфекции HCV, таких как наряду с прочими слабость, потеря аппетита, потеря веса, увеличение молочной железы (особенно у мужчин), сыпь (особенно на ладонях), затруднение свертывания крови, звездчатые сосуды на коже, спутанность сознания, кома (энцефалопатия), накопление жидкости в брюшной полости (асциты), расширение вен пищевода, портальная гипертензия, почечная недостаточность, увеличение селезенки, уменьшение кровяных клеток, анемия, тромбоцитопения, желтуха и печеночноклеточная злокачественная опухоль, при этом указанный способ включает введение больному с риском эффективного количества по меньшей мере одного соединения в соответствии с настоящим изобретением, как описывается выше, в комбинации с фармацевтически приемлемыми носителем, добавкой или вспомогательным веществом, необязательно в комбинации с другим средством против HCV. Согласно другому варианту осуществления активные соединения в соответствии с настоящим изобретением могут быть введены больному после связанной с гепатитом трансплантации печени для защиты нового органа.
5'-Стабилизированный β-D-2'-D-2'-α-фтор-2'-β-С-замещенный-2-модифицированный-N6-замещенный пуриновый нуклеотид может быть введен при необходимости в виде каких-либо соли или пролекарства, которые при введении реципиенту способны обеспечивать непосредственно или опосредованно исходное соединение или которые сами ингибируют активность. Неограничивающими примерами являются фармацевтически приемлемые соли и соединение, которые были модифицированы по функциональной группе, такой как функциональная гидроксильная или аминогруппа, для модификации биологической активности, фармакокинетических показателей, периода полувыведения, контролированной доставки, липофильности, кинетических показателей поглощения, облегчения фосфорилирования до активного 5'-трифосфата или эффективности доставки с использованием желаемого пути введения соединения. Способы модификации свойств активного соединения с целью достижения целевых свойств известны специалистам в данной области или могут быть легко оценены стандартными способами, например, ацилирование, фосфорилирование, тиофосфорамидирование, фосфорамидирование, фосфонирование, алкилирование или пегилирование.
IV. Фармацевтические композиции
Согласно аспекту настоящего изобретения фармацевтические композиции в соответствии с настоящим изобретением содержат эффективное против вируса HCV количество по меньшей мере одного из соединений 5'-стабилизированного β-D-2'-D-2'-α-фтор-2'-β-С-замещенного-2-модифицированного-N6-замещенного пуринового нуклеотида, описываемых в настоящем документе, необязательно в комбинации с фармацевтически приемлемыми носителем, добавкой или вспомогательным веществом, кроме того, необязательно в комбинации или при чередовании по меньшей мере с одним другим активным соединением.
Согласно аспекту настоящего изобретения фармацевтические композиции в соответствии с настоящим изобретением содержат эффективное против вируса HCV количество по меньшей мере одного из активных соединений β-D-2'-D-2'-α-фтор-2'-β-С-замещенного-2-модифицированного-N6-замещенного пуринового нуклеотида, описываемых в настоящем документе, необязательно в комбинации с фармацевтически приемлемыми носителем, добавкой или вспомогательным веществом, кроме того, необязательно в комбинации по меньшей мере с одним другим противовирусным средством, таким как средство против HCV.
Настоящее изобретение относится к фармацевтическим композициям, которые включают в себя количество, эффективное для лечения инфекции вируса гепатита С, одного из соединений β-D-2'-D-2'-α-фтор-2'-β-С-замещенного-2-модифицированного-N6-замещенного пуринового нуклеотида в соответствии с настоящим изобретением или их соли или пролекарства в фармацевтически приемлемом носителе или вспомогательном веществе. Согласно альтернативному варианту осуществления настоящее изобретение относится к фармацевтическим композициям, которые включают в себя количество, эффективное для предупреждения инфекции вируса гепатита С, одного из соединений β-D-2'-D-2'-α-фтор-2'-β-С-замещенного-2-модифицированного-N6-замещенного пуринового нуклеотида в соответствии с настоящим изобретением или их соли или пролекарства в фармацевтически приемлемом носителе или вспомогательном веществе.
Специалисту в данной области будет очевидно, что терапевтически эффективное количество будет варьировать в зависимости от инфекции или состояния, подлежащих лечению, их тяжести, применяемого режима лечения, фармакокинетических показателей используемого средства, а также больного или субъекта (животного или человека), подлежащего лечению, и такое терапевтическое количество может быть определено лечащим врачом или специалистом.
Соединения 5'-стабилизированного β-D-2'-D-2'-α-фтор-2'-β-С-замещенного-2-модифицированного-N6-замещенного пуринового нуклеотида в соответствии с настоящим изобретением могут быть составлены в смеси с фармацевтически приемлемым носителем. Как правило, предпочтительно вводить фармацевтическую композицию в перорально вводимой форме, но некоторые составы можно вводить парентеральным, внутривенным, внутримышечным, местным, чрескожным, буккальным, подкожным, с помощью суппозитория или другим путем, в том числе интраназальным распылением. Внутривенные и внутримышечные составы часто вводят в стерильном солевом растворе. Специалист в данной области может модифицировать составы, чтобы сделать их более растворимыми в воде или другой среде-носителе, например, это можно легко осуществить с помощью небольших модификаций (солеобразования, эстерификации и т.д.), которые хорошо известны специалисту в данной области. Также специалисту в данной области хорошо известно, как модифицировать путь введения и режим дозирования конкретного соединения для регулирования фармакокинетических показателей соединений в соответствии с настоящим изобретением для максимально полезного эффекта для больных.
В некоторых фармацевтических дозированных формах предпочтительной является пролекарственная форма соединений, в том числе ацилированные (ацетилированные или иные) и эфирные (алкиловые и родственные) производные, фосфатные сложные эфиры, тиофосфорамидаты, фосфорамидаты и различные солевые формы соединений в соответствии с настоящим изобретением. Специалисту в данной области будет понятно, как легко модифицировать соединения в соответствии с настоящим изобретением в пролекарственные формы с целью облегчения доставки активных соединений в целевой участок организма хозяина или больного. Специалист также сможет использовать благоприятные фармакокинетические параметры пролекарственных форм при применении в доставке соединений в соответствии с настоящим изобретением в целевой участок организма хозяина или больного для максимизации предполагаемого эффекта соединения.
Количество соединения, включенного в терапевтически активные составы в соответствии с настоящим изобретением, представляет собой количество, эффективное для лечения инфекции HCV, снижения вероятности возникновения инфекции HCV или ингибирования, снижения и/или устранения HCV или его вторичных эффектов, в том числе болезненных состояний, состояний и/или осложнений, которые являются вторичными по отношению к инфекции HCV. Как правило, терапевтически эффективное количество соединения в соответствии с настоящим изобретением в фармацевтической дозированной форме обычно варьирует от приблизительно 0,001 мг/кг до приблизительно 100 мг/кг в сутки или больше, чаще, от чуть менее приблизительно 0,1 мг/кг до более чем приблизительно 25 мг/кг массы тела больного в сутки или существенно больше, в зависимости от используемого соединения, подлежащих лечению состояния или инфекции и пути введения. Активное нуклеозидное соединение в соответствии с настоящим изобретением часто вводят в количествах, варьирующих от приблизительно 0,1 мг/кг до приблизительно 15 мг/кг массы тела больного в сутки, в зависимости от фармакокинетических показателей средства у больного. Данный диапазон дозировки, как правило, обеспечивает эффективные уровни концентраций активного соединения в крови, которые могут варьировать от приблизительно 0,001 до приблизительно 100, от приблизительно 0,05 до приблизительно 100 микрограммов/см3 крови у больного.
Часто для лечения, предупреждения или замедления начала этих инфекций и/или для снижения вероятности инфекции вируса HCV или вторичного болезненного состояния, состояния или осложнения инфекции HCV композиции будут вводить в пероральной дозированной форме в количествах, варьирующих от приблизительно 250 микрограммов до приблизительно 500 мг или больше по меньшей мере один раз в сутки, например, по меньшей мере 25, 50, 100, 150, 250 или 500 миллиграммов, до четырех раз в сутки. Соединения в соответствии с настоящим изобретением часто вводятся перорально, но могут быть введены парентерально, местным путем или в форме суппозитория, а также интраназально, в виде назального распыления, или иным описываемым в настоящем документе способом.
В случае совместного введения соединений в соответствии с настоящим изобретением в комбинации с другим соединением против HCV, как иным образом описывается в настоящем документе, количество соединения в соответствии с настоящим изобретением, подлежащее введению, варьирует от приблизительно 0,01 мг/кг массы тела больного до приблизительно 500 мг/кг массы тела больного или больше или значительно больше, в зависимости от второго средства, подлежащего совместному введению, и его эффективности против вируса, состояния больного и тяжести заболевания или инфекции, подлежащих лечению, а также от пути введения. Другое средство против HCV может быть введено, например, в количествах, варьирующих от приблизительно 0,01 мг/кг до приблизительно 500 мг/кг. Согласно некоторым предпочтительным вариантам осуществления эти соединения часто можно вводить в количестве, варьирующем от приблизительно 0,5 мг/кг до приблизительно 50 мг/кг или больше (как правило, до приблизительно 100 мг/кг), как правило, в зависимости от фармакокинетических показателей двух средств у больного. Такие диапазоны дозировки, как правило, обеспечивают эффективные уровни концентраций активного соединения в крови у больного.
Для целей настоящего изобретения профилактическое или превентивное эффективное количество композиций в соответствии с настоящим изобретением попадает в тот же диапазон концентраций, что изложен выше для терапевтически эффективного количества, и обычно является таким же, как и терапевтически эффективное количество.
Введение активного соединения может варьировать от непрерывного (внутривенного капельного введения) до нескольких пероральных или интраназальных введений в сутки (например, Q.I.D.) или чрескожного введения и может предусматривать пероральное, местное, парентеральное, внутримышечное, внутривенное, подкожное, чрескожное (которое может предусматривать усиливающее проницаемость средство), буккальное введение и введение с помощью суппозитория, среди прочих путей введения. Покрытые энтеросолюбильной оболочкой пероральные таблетки также могут быть использованы для усиления биодоступности соединений для перорального пути введения. Наиболее эффективная дозированная форма будет зависеть от биодоступности/фармакокинетических показателей конкретного выбранного средства, а также от тяжести заболевания у больного. Пероральные дозированные формы являются особенно предпочтительными из-за простоты введения и предполагаемого благоприятного соблюдения больным режима лечения.
Для получения фармацевтических композиций в соответствии с настоящим изобретением терапевтически эффективное количество одного или нескольких соединений в соответствии с настоящим изобретением зачастую тщательно смешивают с фармацевтически приемлемым носителем согласно традиционным методикам фармацевтического составления для получения дозы. Носитель может принимать разнообразные формы в зависимости от формы препарата, желаемой для введения, например, пероральной или парентеральной. При получении фармацевтических композиций в пероральной дозированной форме может быть использована любая из обычных фармацевтических сред. Таким образом, для жидких пероральных препаратов, таких как суспензии, эликсиры и растворы, могут быть использованы приемлемые носители и добавки, в том числе вода, гликоли, масла, спирты, ароматизаторы, консерванты, красители и т.п. Для твердых пероральных препаратов, таких как порошки, таблетки, капсулы, и для твердых препаратов, таких как суппозитории, могут быть использованы приемлемые носители и добавки, в том числе крахмалы, сахарные носители, такие как декстроза, manifold, лактоза, а также родственные носители, разбавители, гранулирующие средства, смазки, связующие, разрыхлители и т.п. При необходимости таблетки или капсулы могут быть покрыты энтеросолюбильным покрытием или обеспечены с замедленным высвобождением с помощью стандартных методик. Применение таких дозированных форм может существенно улучшить биодоступность соединений у больного.
В парентеральных составах носитель, как правило, будет содержать стерильную воду или водный раствор натрия хлорида, хотя также могут быть включены другие ингредиенты, в том числе те, которые обеспечивают дисперсию. Конечно, если должна быть использована стерильная вода при сохранении ее стерильности, композиции и носители также должны быть стерилизованными. Также могут быть получены инъекционные суспензии, и в этом случае могут быть использованы подходящие жидкие носители, суспендирующие средства и т.п.
Липосомные суспензии (в том числе липосомы, нацеленные на вирусные антигены) также могут быть получены традиционными способами получения фармацевтически приемлемых носителей. Они могут подходить для доставки свободных нуклеозидов, ацил/алкилнуклеозидов или пролекарственных форм фосфатов сложных эфиров нуклеозидных соединений в соответствии с настоящим изобретением.
Согласно типичным вариантам осуществления в соответствии с настоящим изобретением соединения и композиции используют для лечения, предупреждения или задержки инфекции HCV или вторичного болезненного состояния, состояния или осложнения HCV.
V. Комбинированная и чередующаяся терапия
Хорошо известно, что устойчивые к лекарственному средству варианты вирусов могут появляться после длительного лечения противовирусным средством. Чаще всего устойчивость к лекарственному средству, как правило, возникает из-за мутации гена, который кодирует фермент, используемый в вирусной репликации. Эффективность лекарственного средства против инфекции HCV может быть пролонгирована, усилена или восстановлена путем введения соединения в комбинации или при чередовании с другим, а возможно даже с двумя или тремя другими противовирусными соединениями, которые индуцируют другую мутацию или действуют через другой путь, по сравнению с основным лекарственным средством. В качестве альтернативы, фармакокинетические показатели, биораспределение, период полувыведения или другой параметр лекарственного средства могут быть изменены такой комбинированной терапией (которая может включать в себя чередующуюся терапию, если считается совместимой). Поскольку раскрываемые β-D-2'-D-2'-α-фтор-2'-β-С-замещенные-2-модифицированные-N6-замещенные пуриновые нуклеотиды являются ингибиторами NS5B полимеразы, может быть полезно вводить соединение хозяину в комбинации, например, с
(1) ингибитором протеазы, таким как ингибитор NS3/4A протеазы;
(2) ингибитором NS5A;
(3) другим ингибитором NS5B полимеразы;
(4) несубстратным ингибитором NS5B;
(5) интерфероном альфа-2а, который может быть пегилированным или иным образом модифицированным, и/или рибавирином;
(6) несубстратным ингибитором;
(7) ингибитором геликазы;
(8) антисмысловым олигодезоксинуклеотидом (S-ODN);
(9) аптамером;
(10) устойчивым к нуклеазе рибозимом;
(11) iRNA, в том числе microRNA и SiRNA;
(12) антителом, частичным антителом или доменным антителом против вируса или
(13) вирусным антигеном или частичным антигеном, который индуцирует образование антител у хозяина.
Неограничивающими примерами средств против HCV, которые можно вводить в комбинации с β-D-2'-D-2'-α-фтор-2'-β-С-замещенными-2-модифицированными-N6-замещенными пуриновыми нуклеотидами в соответствии с настоящим изобретением, являются
(i) ингибиторы протеазы, такие как телапревир (Incivek®), боцепревир (Victrelis™), симепревир (Olysio™), паритапревир (АВТ-450), АСН-2684, AZD-7295, BMS-791325, данопревир, филибувир, GS-9256, GS-9451, МК-5172, сетробувир, совапревир, тегобувир, VX-135, VX-222 и ALS-220;
(ii) ингибитор NS5A, такой как АСН-2928, АСН-3102, IDX-719, даклатасвир, ледиспасвир и омбитасвир (АВТ-267);
(iii) ингибиторы NS5B, такие как АСН-3422, AZD-7295, клемизол, ITX-5061, PPI-461, PPI-688, Sovaldi®, MK-3682 и мерицитабин;
(iv) ингибиторы NS5B, такие как АВТ-333, МВХ-700; и
(v) антитело, такое как GS-6624.
Если β-D-2'-D-2'-α-фтор-2'-β-С-замещенный-2-модифицированный-N6-замещенный пуриновый нуклеотид вводят для лечения запущенного вирусного гепатита С, приводящего к злокачественной опухоли печени или циррозу, согласно одному варианту осуществления соединение может быть введено в комбинации или при чередовании с другим лекарственным средством, которое, как правило, используют для лечения гепатоклеточной карциномы (НСС), например, как описано Andrew Zhu в "New Agents on the Horizon in Hepatocellular Carcinoma" Therapeutic Advances in Medical Oncology, V 5(1), January 2013, 41-50. Примеры приемлемых соединений для комбинированной терапии, если хозяин страдает НСС или рискует заболеть НСС, включают в себя противоангиогенные средства, сунитиниб, бриваниб, линифаниб, рамуцирумаб, бевацизумаб, цедираниб, пазопаниб, TSU-68, ленватиниб, антитела против EGFR, ингибиторы mTor, ингибиторы MEK и ингибиторы гистондеацетилазы.
Лекарственными средствами, которые на данный момент одобрены для гриппа, являются амантадин, римантадин и оселтамивир. Любые из этих лекарственных средств могут быть использованы в комбинации или при чередовании с активным соединением, представленным в настоящем документе, для лечения вирусной инфекции, восприимчивой к таковому. Рибавирин используются для лечения кори, гриппа А, гриппа В, парагриппа, тяжелого вызванного RSV бронхиолита и SARS, а также других вирусных инфекций, и, поэтому, особенно применимы в комбинации с соединением в соответствии с настоящим изобретением для лечения хозяина, инфицированного содержащим однонитевую РНК вирусом. Паливизумаб одобрен для применения детям с высоким риском инфекции RSV.
На данный момент имеются неодобренные лекарственные средства против вируса Западного Нила. Врачи рекомендуют проводить интенсивную поддерживающую терапию, которая может предусматривать госпитализацию, внутривенные жидкости, использование вентилятора для облегчения дыхания, лекарства для контроля приступов, отека головного мозга, тошноты и рвоты, а также применение антибиотиков для предотвращения бактериальных инфекций, осложняющих заболевание. Это подчеркивает важность соединений в соответствии с настоящим изобретением для противовирусной лекарственной терапии.
VI. Процесс получения β-D-2'-D-2'-α-фтор-2'-β-С-замещенных-2-модифицированных-N6-замещенных пуриновых нуклеотидов в соответствии с настоящим изобретением
Общие способы обеспечения соединений в соответствии с настоящим изобретением известны в уровне техники или описываются в настоящем документе. Синтез 2'-хлорнуклеотидов описывается в US 20150366888, WO 2014058801; WO 2015/066370 и WO 2015200219.
В схемах синтеза используют следующие сокращения.
CBr4: тетрабромид углерода.
DBU: 1,8-диазабицикло[5,4,0]ундец-7-ен.
DCM: дихлорметан.
THF: тетрагидрофуран (THF), безводный.
EtOAc: этилацетат.
EtOH: этанол.
Li(OtBu)3AlH: три-трет-бутоксиалюминия гидрид лития.
Na2SO4: сульфат натрия (безводный).
MeCN: ацетонитрил.
MeNH2: метиламин.
МеОН: метанол.
Na2SO4: сульфат натрия.
NaHCO3: бикарбонат натрия.
NH4Cl: хлорид аммония.
NH4OH: гидроксид аммония.
РЕ: петролейный эфир.
Ph3P: трифенилфосфин.
Силикагель (230-400 меш, Sorbent).
t-BuMgCl: хлорид трет-бутилмагния.
t-BuOK: трет-бутоксид натрия.
t-BuOH: трет-бутанол.
ПРИМЕРЫ
Общие способы
Спектры 1Н, 19F и 31Р ЯМР регистрировали при 300 МГц на спектрометре с преобразованием Фурье производства
Figure 00000222
. Спектры получали из образцов, полученных в пробирках диаметром 5 мм в CDCl3, CD3OD или DMSO-d6. Спиновые мультиплетности обозначали символами с (синглет), д (дублет), т (триплет), м (мультиплет) и ушир. (уширенный). Константы взаимодействия (J) выражали в Гц. Масс-спектры получали с использованием ионизации электрораспылением (ESI) на квадрупольном масс-спектрометре Agilent Technologies 6120. Реакции, как правило, проводили в атмосфере осушенного азота с использованием безводных растворителей производства Sigma-Aldrich. Все обычные химические вещества приобретали из коммерческих источников.
Figure 00000223
Пример 1. Получение изопропил-((((R,S)-(2R,3R,4R,5R)-5-(2-амино-6-(метиламино)-9H-пурин-9-ил)-4-фтор-3-гидрокси-4-метилтетрагидрофуран-2-ил)метокси)феноксифосфорил)-L-аланината
Стадия 1. Получение ((2R,3R,4R,5R)-3-(бензоилокси)-5-бром-4-фтор-4-метилтетрагидрофуран-2-ил)метилбензоата (2).
К раствору (2R)-3,5-ди-O-бензоил-2-фтор-2-С-метил-D-рибозо-γ-лактона (24,8 г, 66,6 ммоль) в безводном THF (333 мл), находящемуся в атмосфере азота и охлажденному до -30°C, по каплям добавляли три-трет-бутоксиалюмогидрид лития (1,0 М в THF, 22,6 мл, 22,6 ммоль). После завершения добавления, реакционную смесь медленно нагревали до -15°C в течение 90 мин, затем добавляли EtOAc (300 мл), и смесь гасили добавлением насыщенного водн. раствора NH4Cl (200 мл). Полученный раствор фильтровали на Celite®, и дважды экстрагировали фильтрат EtOAc. Объединенные органические фазы сушили (Na2SO4), фильтровали и концентрировали. Остаток поглощали безводным DCM (225 мл) в атмосфере азота, охлаждали до -20°C, а затем добавляли PPh3 (19,1 г, 72,8 ммоль). После 10 мин перемешивания при -20°C, добавляли CBr4 (26,0 г, 78,4 ммоль), и оставляли реакционную смесь медленно нагреваться до 0°C в течение 2 ч. Полученную смесь выливали на колонку с силикагелем и элюировали РЕ/EtOAc (градиент 100/0 → 80/20). Фракции, содержащие α-бромфуранозид, собирали и концентрировали с получением продукта 2 (18,1 г, 41,3 ммоль, 62% в два этапа) в виде плотного бесцветного масла. 1Н-ЯМР (300 МГц, CDCl3) δ 8,15-8,11 (м, 2Н), 8,04-8,01 (м, 2Н), 7,64-7,55 (м, 2Н), 7,51-7,41 (м, 4Н), 6,34 (д, J=1,6 Гц, 1Н), 5,29 (дд, J=5,5, 3,1 Гц, 1H), 4,89-4,85 (м, 1H), 4,78 (дд, J=12,5, 3,2 Гц, 1H), 4,63 (дд, J=12,5, 4,5 Гц, 1H), 1,72 (д, J=21,6 Гц, 3Н). 19F-ЯМР (282 МГц, CDCl3) δ - 150,0.
Стадия 2. Получение (2R,3R,4R,5R)-5-(2-амино-6-хлор-9H-пурин-9-ил)-2-(бензоилоксиметил)-4-фтор-4-метилтетрагидрофуран-3-илбензоата (3).
2-Амино-6-хлорпурин (2,63 г, 15,5 ммоль) суспендировали в трет-BuOH (54 мл) в атмосфере азота. Реакционную смесь нагревали до 30°C, а затем добавляли трет-бутоксид калия (1,69 г, 15,1 ммоль). Спустя 45 мин, добавляли раствор бромфуранозида 2 (2,24 г, 5,12 ммоль), растворенного в безводном MeCN (6 мл), реакционную смесь нагревали до 65°C в течение 16 ч, а затем охлаждали до комнатной температуры. Добавляли насыщенный водн. раствор NH4Cl (70 мл), и экстрагировали полученный раствор EtOAc (3×60 мл). Объединенные органические фазы сушили (Na2SO4), фильтровали и концентрировали. Остаток дважды очищали методом колоночной хроматографии (градиент PE/EtOAc 80/20 → 0/100, затем 60/40 → 20/80) с получением продукта 3 (1,56 г, 2,96 ммоль, 57%) в виде белого твердого вещества. 1Н-ЯМР (300 МГц, CDCl3) δ 8,05-8,02 (м, 2Н), 7,95-7,92 (м, 2Н), 7,88 (с, 1H), 7,63-7,57 (м, 1H), 7,53-7,41 (м, 3Н), 7,35-7,30 (м, 2Н), 6,43 (дд, J=22,6, 9,1 Гц, 1Н), 6,12 (д, J=18,3 Гц, 1Н), 5,34 (ушир. с, 2Н), 5,00 (дд, J=11,9, 4,5 Гц, 1H), 4,79-4,73 (м, 1Н), 4,60 (дд, J=11,9, 5,3 Гц, 1Н), 1,34 (д, J=22,6 Гц, 3H). 19F-ЯМР (282 МГц, CDCl3) δ - 157,0. MS (ESI) m/z рассчит. для C25H22FN5O5 [М+Н]+ 526,9; обнаружено 527,0.
Стадия 3. Получение (2R,3R,4R,5R)-5-(2-амино-6-(метиламино)-9H-пурин-9-ил)-4-фтор-2-(гидроксиметил)-4-метилтетрагидрофуран-3-ола (4).
К раствору соединения 3 (575 мг, 1,09 ммоль) в МеОН (9 мл) добавляли метиламин (33% в абсолютном EtOH, 1,7 мл, 1,81 ммоль). Реакционную смесь нагревали до 85°C в герметизированной пробирке в течение 16 ч, охлаждали до комнатной температуры и концентрировали. Остаток очищали методом колоночной хроматографии (градиент DCM/MeOH 100/0 → 85/15), а затем методом обращенно-фазовой колоночной хроматографии (градиент Н2О/МеОН 100/0 → 0/100) с получением продукта 4 (286 мг, 0,91 ммоль, 84%) в виде белого твердого вещества. 1Н-ЯМР (300 МГц, CD3OD) δ 8,06 (с, 1Н), 6,11 (д, J=18,1 Гц, 1H), 4,41 (дд, J=24,4, 9,1 Гц, 1H), 4,07-4,01 (м, 2Н), 3,86 (дд, J=12,9, 3,3 Гц, 1H), 3,04 (ушир. с, 3H), 1,16 (д, J=22,3 Гц, 3H). 19F-ЯМР (282 МГц, CD3OD) δ - 163,7. MS (ESI) m/z рассчит. для C12H19FN6O3 [М+Н]+ 313,1; обнаружено 313,2.
Стадия 4. Получение изопропил-((((R,S)-(2R,3R,4R,5R)-5-(2-амино-6-(метиламино)-9H-пурин-9-ил)-4-фтор-3-гидрокси-4-метилтетрагидрофуран-2-ил)метокси)феноксифосфорил)-L-аланината (5).
К раствору соединения 4 (114 мг, 365 мкмоль) в безводном THF (4 мл), находящемуся в атмосфере азота и охлажденному до 0°C, в течение 10 мин по каплям добавляли трет-бутилмагнийхлорид (1,0 М в THF, 0,66 мл, 660 мкмоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 15 мин при 0°C, а затем дополнительно в течение 15 мин при комнатной температуре. Реакционную смесь охлаждали до 0°C, а затем в течение 10 мин по каплям добавляли раствор изопропил-((R,S)-(пентафторфенокси)-феноксифосфорил)-L-аланината (Ross, B.S., Reddy, P.G., Zhang, H.R., Rachakonda, S., and Sofia, M.J., J. Org, Chem., (2011)) (253 мг, 558 мкмоль), растворенного в безводном THF (1 мл). Реакционную смесь перемешивали при 0°C в течение 30 мин, затем в течение 18 ч при комнатной температуре, затем гасили добавлением насыщенного водн. раствора NH4Cl (4 мл) и экстрагировали EtOAc (3×5 мл). Объединенные органические фазы сушили, фильтровали (Na2SO4) и концентрировали. Остаток очищали методом колоночной хроматографии (градиент DCM/MeOH 100/0 → 90/10), а затем методом обращенно-фазовой колоночной хроматографии (градиент H2O/МеОН 100/0 → 0/100) с получением продукта 5 (смесь диастереоизомеров, 101 мг, 174 мкмоль, 48%) в виде белого твердого вещества. 1Н-ЯМР (300 МГц, CD3OD) δ 7,83 (с, 0,55Н), 7,82 (с, 0,45Н), 7,38-7,16 (м, 5Н), 6,15 (д, J=18,5 Гц, 0,45Н), (д, J=18,8 Гц, 0,55Н), 4,99-4,88 (перекрывается с H2O, м, 1Н), 4,65-4,36 (м, 3H), 4,25-4,17 (м, 1Н), 3,97-3,85 (м, 1H), 3,05 (ушир. с, 3H), 1,32-1,28 (м, 3H), 1,25-1,15 (м, 9Н). 19F-ЯМР (282 МГц, CD3OD) δ - 162,8 (с), - 163,3 (с). 31Р-ЯМР (121 МГц, CD3OD) δ 4,10 (с), 3,99 (с). MS (ESI) m/z рассчит. для C24H34FN7O7P [М+Н]+ 582,2; обнаружено 582,2.
Figure 00000224
Пример 2. Получение изопропил-((((R,S)-(2R,3R,4R,5R)-5-(2-амино-6-(диметиламино)-9H-пурин-9-ил)-4-фтор-3-гидрокси-4-метилтетрагидрофуран-2-ил)метокси)феноксифосфорил)-L-аланината (7).
Стадия 1. Получение (2R,3R,4R,5R)-5-(2-амино-6-(диметиламино)-9Н-пурин-9-ил)-4-фтор-2-(гидроксиметил)-4-метилтетрагидрофуран-3-ола (6).
К раствору полученного в примере 1 соединения 3 (500 мг, 0,95 ммоль) в МеОН (6 мл) добавляли диметиламина гидрохлорид (783 мг, 9,6 ммоль) и 1,8-диазабицикло[5.4.0]ундец-7-ен (1,43 мл, 9,6 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 85°C в герметизированной пробирке в течение 6 ч, охлаждали до комнатной температуры и концентрировали. Остаток очищали методом колоночной хроматографии (градиент DCM/MeOH 100/0 → 85/15), а затем методом обращенно-фазовой колоночной хроматографии (градиент H2O/МеОН 100/0 → 0/100), с получением продукта 6 (200 мг, 0,61 ммоль, 64%) в виде белого твердого вещества. 1Н-ЯМР (300 МГц, CD3OD) δ 8,07 (с, 1H), 6,14 (д, J=18,1 Гц, 1Н), 4,41 (дд, J=24,4, 9,2 Гц, 1H), 4,08-4,02 (м, 2Н), 3,87 (дд, J=12,8, 2,9 Гц, 1Н), 3,42 (ушир. с, 6Н), 1,16 (д, J=22,0 Гц, 3H). 19F-ЯМР (282 МГц, CD3OD) δ - 163,8. MS (ESI) m/z рассчит. для C13H20FN6O3 [М+Н]+ 327,2; обнаружено 327,2.
Стадия 2. Получение изопропил-((((R,S)-(2R,3R,4R,5R)-5-(2-амино-6-(диметиламино)-9H-пурин-9-ил)-4-фтор-3-гидрокси-4-метилтетрагидрофуран-2-ил)метокси)феноксифосфорил)-L-аланината (7).
К раствору соединения 6 (80 мг, 245 мкмоль) в безводном THF (4 мл), находящемуся в атмосфере азота и охлажденному до 0°C, в течение 10 мин по каплям добавляли трет-бутилмагнийхлорид (1,0 М в THF, 0,64 мл, 640 мкмоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 15 мин при 0°C, а затем дополнительно в течение 15 мин при комнатной температуре. Реакционную смесь охлаждали до 0°C, а затем в течение 10 мин по каплям добавляли раствор изопропил-((R,S)-(пентафторфенокси)-феноксифосфорил)-L-аланината (167 мг, 367 мкмоль), растворенного в безводном THF (4 мл). Реакционную смесь перемешивали при 0°C в течение 30 мин и в течение 18 ч при комнатной температуре. Реакционную смесь гасили добавлением насыщенного водн. раствора NH4Cl (4 мл) и экстрагировали EtOAc (3×5 мл). Объединенные органические фазы сушили, фильтровали (Na2SO4) и концентрировали. Остаток очищали методом колоночной хроматографии (градиент DCM/MeOH 100/0 → 90/10), а затем методом обращенно-фазовой колоночной хроматографии (градиент H2O/МеОН 100/0 → 0/100) с получением продукта 7 (смесь диастереоизомеров, 35 мг, 58 мкмоль, 24%) в виде белого твердого вещества. 1Н-ЯМР (300 МГц, CD3OD) δ 7,83 (с, 0,5Н), 7,82 (с, 0,5Н), 7,34-7,16 (м, 5Н), 6,15 (д, J=18,7 Гц, 0.5Н), 6,13 (д, J=18,8 Гц, 0,5Н), 4,99-4,85 (перекрывается с H2O, м, 1Н), 4,65-4,26 (м, 3H), 4,27-4,12 (м, 1H), 3,99-3,81 (м, 1Н), 3,42, 3,41 (2 ушир. с, 6Н), 1,36-1,25 (м, 3H), 1,24-1,11 (м, 9Н). 19F-ЯМР (282 МГц, CD3OD) δ - 162,7 (с), - 163,2 (с). 31Р-ЯМР (121 МГц, CD3OD) δ 4,08 (с), 4,00 (с). MS (ESI) m/z рассчит. для C25H36FN7O7P [М+Н]+ 596,5; обнаружено 596,2.
Figure 00000225
Пример 3. Получение изопропил-((((R,S)-(2R,3R,4R,5R)-5-(2-амино-6-(N-метилциклопропиламино)-9H-пурин-9-ил)-4-фтор-3-гидрокси-4-метилтетрагидрофуран-2-ил)метокси)феноксифосфорил)-L-аланината (9).
Стадия 1. Получение (2R,3R,4R,5R)-5-(2-амино-6-(N-метилциклопропиламино)-9Н-пурин-9-ил)-4-фтор-2-(гидроксиметил)-4-метилтетрагидрофуран-3-ола (8).
К раствору соединения 3 (600 мг, 1,14 ммоль) в МеОН (10 мл) добавляли N-метилциклопропиламина гидрохлорид (366 мг, 3,40 ммоль) и триэтиламин (470 мкл, 3,40 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 100°С в герметизированной пробирке в течение 15 ч, и охлаждали до комнатной температуры. Добавляли 30% водный раствор NH4OH (4 мл), реакционную смесь нагревали при 100°С в герметизированной пробирке в течение 2 ч, охлаждали и концентрировали. Остаток очищали методом колоночной хроматографии (градиент DCM/MeOH 100/0 → 90/10) с получением продукта 8 (351 мг, 0,99 ммоль, 87%) в виде белого твердого вещества. 1Н-ЯМР (300 МГц, CD3OD) δ 8,13 (с, 1Н), 6,15 (д, J=18,0 Гц, 1H), 4,40 (дд, J=24,3, 9,0 Гц, 1Н), 4,06-4,02 (м, 2Н), 3,89-3,83 (м, 1H), 3,32 (м, 3Н), 3,18-3,11 (м, 1Н), 1,16 (д, J=22,2 Гц, 3Н), 0,96-0,89 (м, 2Н), 0,74-0,69 (м, 2Н). 19F-ЯМР (282 МГц, CD3OD) δ -163,8. MS (ESI) m/z рассчит. для C15H22FN6O3 [М+Н]+ 353,2; обнаружено 353,2.
Стадия 2. Получение изопропил-((((R,S)-(2R,3R,4R,5R)-5-(2-амино-6-(N-метилциклопропиламино)-9H-пурин-9-ил)-4-фтор-3-гидрокси-4-метилтетрагидрофуран-2-ил)метокси)феноксифосфорил)-L-аланината (9).
К раствору соединения 8 (200 мг, 0,57 ммоль) в безводном THF (15 мл) при 0°С в течение 10 мин по каплям добавляли трет-бутилмагнийхлорид (1,0 М в THF, 680 мкл, 0,68 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 15 мин при 0°С, а затем дополнительно в течение 15 мин при комнатной температуре. Реакционную смесь охлаждали до 0°С, и в течение 10 мин по каплям добавляли раствор изопропил-((R,S)-(пентафторфенокси)феноксифосфорил)-L-аланината (283 мг, 0,62 ммоль), растворенного в безводном THF (4 мл). Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 30 мин и в течение 18 ч при комнатной температуре. Реакционную смесь гасили добавлением насыщенного водн. раствора NH4Cl (4 мл) и экстрагировали EtOAc (3×5 мл). Объединенные органические фазы сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаток очищали методом колоночной хроматографии (градиент DCM/MeOH 100/0 → 90/10), а затем методом обращенно-фазовой колоночной хроматографии (градиент H2O/МеОН 100/0 → 0/100) с получением продукта 9 (смесь 2 диастереоизомеров, 160 мг, 0,26 ммоль, 45%) в виде белого твердого вещества. 1Н-ЯМР (300 МГц, CD3OD) δ 7,85 (м, 1Н), 7,38-7,16 (м, 5Н), 6,18 (д, J=18,6 Гц) и 6,16 (д, J=18,9 Гц, 1Н), 4,95-4,90 (перекрывается с H2O, м, 1Н), 4,58-4,47 (м, 3Н), 4,22-4,19 (м, 1Н), 3,95-3,87 (м, 1Н), 3,36-3,34 (перекрывается с МеОН, м, 3Н), 3,19-3,12 (м, 1Н), 1,32-1,22 (м, 12H), 0,96-0,89 (м, 2Н), 0,74-0,69 (м, 2Н). 31Р-ЯМР (121 МГц, CD3OD) δ 4,11 (с), 4,02 (с). MS (ESI) m/z рассчит. для C27H38FN7O7P [М+Н]+ 622,2; обнаружено 622,2.
Figure 00000226
Пример 4. Получение изопропил-((((R,S)-(2R,3R,4R,5R)-5-(2,6-бис-метиламино-9H-пурин-9-ил)-4-фтор-3-гидрокси-4-метилтетрагидрофуран-2-ил)метокси)феноксифосфорил)-L-аланината (12).
Стадия 1. Получение (2R,3R,4R,5R)-5-(2,6-дихлор-9H-пурин-9-ил)-2-(бензоилоксиметил)-4-фтор-4-метилтетрагидрофуран-3-илбензоата (10).
2,6-Дихлорпурин (1,30 г, 6,86 ммоль) суспендировали в трет-BuOH (25 мл) в атмосфере азота. Порциями добавляли трет-бутоксид калия (778 мг, 6,92 ммоль), а затем перемешивали реакционную смесь при комнатной температуре. Спустя 1 ч, добавляли раствор бромфуранозида 2 (1,0 г, 2,29 ммоль), растворенного в безводном MeCN (20 мл), реакционную смесь нагревали при 65°С в течение ночи, а затем охлаждали до комнатной температуры. Добавляли насыщенный водн. раствор NH4Cl, и экстрагировали полученный раствор EtOAc (трижды). Объединенные органические фазы сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаток очищали методом колоночной хроматографии (градиент РЕ/EtOAc 100/0 → 0/100) с получением продукта 10 (148 мг, 0,27 ммоль, 12%) в виде липкого твердого вещества. 1Н-ЯМР (300 МГц, CDCl3) δ 8,31 (с, 1H), 8,12-8,09 (м, 2Н), 8,02-7,99 (м, 2Н), 7,64-7,39 (м, 6Н), 6,38 (д, J=17,2 Гц, 1Н), 6,02 (дд, J=21,2, 8,9 Гц, 1H), 4,90-4,68 (м, 3Н), 1,33 (д, J=22,4 Гц, 3Н). 19F-ЯМР (282 МГц, CDCl3) δ -158,0. MS (ESI) m/z рассчит. для C25H20Cl2FN4O5 [М+Н]+ 546,4; обнаружено 546,3.
Стадия 2. Получение (2R,3R,4R,5R)-5-(2,6-бис-метиламино-9H-пурин-9-ил)-4-фтор-2-(гидроксиметил)-4-метилтетрагидрофуран-3-ола (11).
Раствор соединения 10 (148 мг, 0,27 ммоль) в метиламине (33% в EtOH, 30 мл) нагревали при 130°С в герметизированной пробирке в течение 4 суток, охлаждали до комнатной температуры и концентрировали. Остаток очищали методом колоночной хроматографии (градиент DCM/MeOH 100/0 → 50/50), а затем методом обращенно-фазовой колоночной хроматографии (градиент H2O/МеОН 100/0 → 0/100), с получением продукта 11 (33 мг, 0,10 ммоль, 37%) в виде белого твердого вещества. 1Н-ЯМР (300 МГц, CD3OD) δ 8,00 (с, 1Н), 6,12 (д, J=18,5 Гц, 1Н), 4,51 (дд, J=24,4, 9,5 Гц, 1Н), 4,06-3,85 (м, 3Н), 3,04 (с, 3Н), 2,93 (с, 3Н), 1,20 (д, J=22,4 Гц, 3Н). 19F-ЯМР (282 МГц, CD3OD) δ -163,2. MS (ESI) m/z рассчит. для C13H20FN6O3 [М+Н]+ 327,2; обнаружено 327,2.
Стадия 3. Получение изопропил-((((R,S)-(2R,3R,4R,5R)-5-(2,6-бис-метиламино-9Н-пурин-9-ил)-4-фтор-3-гидрокси-4-метилтетрагидрофуран-2-ил)метокси)феноксифосфорил)-L-аланината (12).
К раствору соединения 11 (55 мг, 0,17 ммоль) в безводном THF (2 мл) при 0°С в течение 10 мин по каплям добавляли трет-бутилмагнийхлорид (1 M в THF, 304 мкл, 0,30 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 15 мин при 0°С, а затем в течение 15 мин при комнатной температуре. Раствор охлаждали до 0°С, и в течение 10 мин по каплям добавляли раствор изопропил-((R,S)-(пентафторфенокси)-феноксифосфорил)-L-аланината (115 мг, 0,25 ммоль), растворенного в безводном THF (1 мл). Смесь медленно нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 4 суток. Реакционную смесь гасили добавлением насыщенного водн. раствора NH4Cl и экстрагировали EtOAc (трижды). Объединенные органические фазы сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаток очищали методом колоночной хроматографии (градиент DCM/MeOH 100/0 → 50/50) с получением продукта 12 (смесь диастереоизомеров, 13 мг, 0,02 ммоль, 13%) в виде белого твердого вещества. 1Н-ЯМР (300 МГц, CD3OD) δ 7,78 (с, 1Н), 7,35-7,12 (м, 5Н), 6,13 (д, J=19,1 Гц, 0,53Н), 6,10 (д, J=19,2 Гц, 0,47Н), 4,99-4,78 (перекрывается с H2O, м, 1Н), 4,72-4,46 (м, 3Н), 4,24-4,15 (м, 1H), 3,79-3,92 (м, 1Н), 3,02 (ушир. с, 3Н), 2,92 (с+с, 3Н), 1,29-1,11 (м, 12Н). 19F-ЯМР (282 МГц, CD3OD) δ -162,0 (с), -162,3 (с). 31Р-ЯМР (121 МГц, CD3OD) δ 3,97 (с), 3,89 (с). MS (ESI) m/z рассчит. для C25H36FN7O7P [М+Н]+ 596,6; обнаружено 596,2.
Figure 00000227
Пример 5. Получение изопропил-((((R,S)-(2R,3R,4R,5R)-5-(2-изобутирамидо-6-метиламино-9H-пурин-9-ил)-4-фтор-3-гидрокси-4-метилтетрагидрофуран-2-ил)метокси)феноксифосфорил)-L-аланината (16).
Стадия 1. Получение соединения 13.
К раствору соединения 4 (286 мг, 0,92 ммоль) и имидазола (370 мг, 5,43 ммоль) в безводном DMF (6 мл) при 0°С добавляли 1,3-дихлор-1,1,3,3-тетраизопропилдисилоксан (300 мкл, 0,94 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при к.т., разбавляли EtOAc (50 мл), и промывали суспензию насыщенным водн. раствором NH4Cl и солевым раствором (по 40 мл каждого). Органические фазы сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаток очищали методом колоночной хроматографии (градиент PE/EtOAc 7/3 → 3/7) с получением продукта 13 (283 мг, 0,51 ммоль, 56%) в виде белого твердого вещества. MS (ESI) m/z рассчит. для C24H44FN6O4Si2 [М+Н]+ 555,8; обнаружено 555,2.
Стадия 2. Получение соединения 14.
К раствору соединения 13 (200 мг, 0,36 ммоль) в безводном пиридине (3 мл) при 0°С добавляли изобутирилхлорид (38 мкл, 0,36 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при к.т. Реакционную смесь гасили добавлением воды (500 мкл). Смесь концентрировали и упаривали совместно с толуолом (3×10 мл). Остаток очищали методом колоночной хроматографии (градиент РЕ/EtOAc 1/0 → 1/1) с получением продукта 14 (99 мг, 0,16 ммоль, 44%) в виде белого твердого вещества. MS (ESI) m/z рассчит. для C28H50FN6O5Si2 [М+Н]+ 625,9; обнаружено 625,3.
Стадия 3. Получение (2R,3R,4R,5R)-5-(2-изобутирамидо-6-метиламино-9H-пурин-9-ил)-4-фтор-2-(гидроксиметил)-4-метилтетрагидрофуран-3-ола (15).
К раствору соединения 14 (90 мг, 0,14 ммоль) в безводном THF (2 мл) добавляли фторид тетрабутиламмония (1 M в THF, 38 мкл, 0,38 ммоль). Смесь перемешивали в течение 2 ч при к.т. и концентрировали. Остаток очищали методом колоночной хроматографии (градиент DCM/MeOH 10/0 → 9/1), а затем методом обращенно-фазовой колоночной хроматографии (градиент Н2О/МеОН 100/0 → 0/100) с получением продукта 15 (42 мг, 0,11 ммоль, 77%) в виде белого твердого вещества. 1Н-ЯМР (300 МГц, CD3OD) δ 8,31 (с, 1Н), 6,29 (д, J=17,9 Гц, 1Н), 4,70-4,60 (м, 1Н), 4,07-3,98 (м, 2Н), 3,89 (дд, J=12,5, 3,4 Гц, 1H), 3,10 (ушир. с, 3Н), 2,87 (ушир. с, 1H), 1,23-1,16 (м, 9Н). 19F-ЯМР (282 МГц, CD3OD) δ -163,8. MS (ESI) m/z рассчит. для C16H24FN6O4 [М+Н]+ 383,4; обнаружено 383,2.
Стадия 4. Получение изопропил-((((R,S)-(2R,3R,4R,5R)-5-(2-изобутирамидо-6-метиламино-9H-пурин-9-ил)-4-фтор-3-гидрокси-4-метилтетрагидрофуран-2-ил)метокси)феноксифосфорил)-L-аланината (16).
К раствору соединения 15 (27 мг, 0,07 ммоль) в безводном THF (1 мл) при 0°С в течение 10 мин по каплям добавляли трет-бутилмагнийхлорид (1,0 М в THF, 130 мкл, 0,13 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 15 мин при 0°С, а затем дополнительно в течение 15 мин при комнатной температуре. Реакционную смесь охлаждали до 0°С, и в течение 10 мин по каплям добавляли раствор изопропил-((R,S)-(пентафторфенокси)феноксифосфорил)-L-аланината (50 мг, 0,11 ммоль), растворенного в безводном THF (1 мл). Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 30 мин, затем в течение 18 ч при комнатной температуре, а затем гасили добавлением насыщенного водн. раствора NH4Cl (2 мл) и экстрагировали EtOAc (3×5 мл). Объединенные органические фазы сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаток очищали методом колоночной хроматографии (градиент DCM/MeOH 100/0 → 95/5), а затем методом обращенно-фазовой колоночной хроматографии (градиент H2O/МеОН 100/0 → 0/100) с получением продукта 16 (смесь 2 диастереоизомеров, 25 мг, 0,04 ммоль, 54%) в виде белого твердого вещества. 1Н-ЯМР (300 МГц, CD3OD) δ 8,05 (с, 1Н), 7,33-7,13 (м, 5Н), 6,27 (д, J=18,6 Гц) и 6,21 (д, J=19,1 Гц, 1Н), 5,10-4,95 (м, 1Н), 4,93-4,78 (перекрывается с H2O, м, 1H), 4,60-4,42 (м, 2Н), 4,26-4,18 (м, 1H), 3,90-3,80 (м, 1Н), 3,09 (ушир. с, 3Н), 2,84-2,80 (м, 1Н), 1,33-1,15 (м, 18Н). 31Р-ЯМР (121 МГц, CD3OD) δ 3,69 (с). 31Р-ЯМР (121 МГц, CD3OD) δ 4,11 (с), 3,99 (с). MS (ESI) m/z рассчит. для C28H40FN7O8P [М+Н]+ 652,6; обнаружено 652,3.
Figure 00000228
Пример 6. Получение изопропил-((((R,S)-(2R,3R,4R,5R)-5-(2-амино-6-(N-метилэтиламино)-9H-пурин-9-ил)-4-фтор-3-гидрокси-4-метилтетрагидрофуран-2-ил)метокси)феноксифосфорил)-L-аланината (18).
Стадия 1. Получение (2R,3R,4R,5R)-5-(2-амино-6-(N-метилэтиламино)-9Н-пурин-9-ил)-4-фтор-2-(гидроксиметил)-4-метилтетрагидрофуран-3-ола (17).
К раствору соединения 3 (150 мг, 0,29 ммоль) в МеОН (4 мл) добавляли N-метилэтиламин (245 мкл, 2,90 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 100°С в герметизированной пробирке в течение 15 ч, охлаждали до комнатной температуры и концентрировали. Остаток очищали методом колоночной хроматографии (градиент DCM/MeOH 100/0 → 90/10) с получением продукта 31 (89 мг, 0,26 ммоль, 89%) в виде белого твердого вещества. 1Н-ЯМР (300 МГц, CD3OD) δ 8,06 (с, 1H), 6,13 (д, J=18,0 Гц, 1Н), 4,40 (дд, J=24,9, 8,7 Гц, 1Н), 4,11-4,01 (м, 4Н), 3,98-3,83 (м, 1H), 3,34 (ушир. с, 3Н), 1,24-1,11 (м, 6Н). 19F-ЯМР (282 МГц, CD3OD) δ -163,7. MS (ESI) m/z рассчит. для C14H22FN6O3 [М+Н]+ 341,2; обнаружено 341,2.
Стадия 2. Получение изопропил-((((R,S-(2R,3R,4R,5R)-5-(2-амино-6-(N-метилэтиламино)-9H-пурин-9-ил)-4-фтор-3-гидрокси-4-метилтетрагидрофуран-2-ил)метокси)феноксифосфорил)-L-аланината (18).
К раствору соединения 17 (30 мг, 0,09 ммоль) в безводном THF (2 мл) при 0°С в течение 10 мин по каплям добавляли трет-бутилмагнийхлорид (1,0 М в THF, 110 мкл, 0,11 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 15 мин при 0°С, а затем дополнительно в течение 15 мин при комнатной температуре. Реакционную смесь охлаждали до 0°С, и в течение 10 мин по каплям добавляли раствор изопропил-((R,S)-(пентафторфенокси)феноксифосфорил)-L-аланинат (48 мг, 0,11 ммоль), растворенный в безводном THF (1 мл). Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 30 и в течение 18 ч при комнатной температуре. Реакционную смесь гасили добавлением насыщенного водн. раствора NH4Cl (4 мл) и экстрагировали EtOAc (3×5 мл). Объединенные органические фазы сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаток очищали методом колоночной хроматографии (градиент DCM/MeOH 100/0 → 90/10) с получением продукта 18 (смесь 2 диастереоизомеров, 22 мг, 0,04 ммоль, 40%) в виде белого твердого вещества. 1Н-ЯМР (300 МГц, CD3OD) δ 7,69 (м, 1Н), 7,26-7,04 (м, 5Н), 6,05 (д, J=18,6 Гц) и 6,03 (д, J=18,9 Гц, 1H), 4,86-4,79 (перекрывается с H2O, м, 1Н), 4,50-4,32 (м, 3Н), 4,12-4,06 (м, 1Н), 3,96-3,79 (м, 3Н), 3,25 (ушир. с, 3Н), 1,24-1,02 (м, 15Н). 31Р-ЯМР (121 МГц, CD3OD) δ 4,07 (с), 4,00 (с). MS (ESI) m/z рассчит. для C26H38FN7O7P [М+Н]+ 609,3; обнаружено 609,2.
Figure 00000229
Пример 7. Получение изопропил-((((R,S)-(2R,3R,4R,5R)-5-(2-амино-6-(N-метилпропиламино)-9H-пурин-9-ил)-4-фтор-3-гидрокси-4-метилтетрагидрофуран-2-ил)метокси)феноксифосфорил)-L-аланината (20).
Стадия 1. Получение (2R,3R,4R,5R)-5-(2-амино-6-(N-метилпропиламино)-9Н-пурин-9-ил)-4-фтор-2-(гидроксиметил)-4-метилтетрагидрофуран-3-ола (19).
К раствору соединения 3 (150 мг, 0,29 ммоль) в МеОН (4 мл) добавляли N-метилпропиламин (295 мкл, 2,90 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 100°С в герметизированной пробирке в течение 15 ч, охлаждали до комнатной температуры и концентрировали. Остаток очищали методом колоночной хроматографии (градиент DCM/MeOH 100/0 → 90/10), а затем методом обращенно-фазовой колоночной хроматографии (градиент H2O/МеОН 100/0 → 0/100) с получением продукта 19 (80 мг, 0,23 ммоль, 78%) в виде белого твердого вещества. 1Н-ЯМР (300 МГц, CD3OD) δ 8,04 (с, 1Н), 6,13 (д, J=18,3, 1H), 4,40 (дд, J=24,2, 9,2 Гц, 1H), м, 4,06-3,84 (м, 5Н), 1,68 (sept, J=7,5 Гц, 2Н), 1,15 (д, J=22,2 Гц, 3Н), 0,93 (т, J=7,5 Гц, 3Н). 19F-ЯМР (282 МГц, CD3OD) δ -163,8. MS (ESI) m/z рассчит. для C15H24FN6O3 [М+Н]+ 355,2; обнаружено 355,2.
Стадия 2. Получение изопропил-((((R,S)-(2R,3R,4R,5R)-5-(2-амино-6-(N-метилпропиламино)-9H-пурин-9-ил)-4-фтор-3-гидрокси-4-метилтетрагидрофуран-2-ил)метокси)феноксифосфорил)-L-аланината (20).
К раствору соединения 19 (30 мг, 0,09 ммоль) в безводном THF (2 мл) при 0°С в течение 10 мин по каплям добавляли трет-бутилмагнийхлорид (1,0 М в THF, 110 мкл, 0,11 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 15 мин при 0°С, а затем дополнительно в течение 15 мин при комнатной температуре. Реакционную смесь охлаждали до 0°С, и в течение 10 мин по каплям добавляли раствор изопропил-((R,S)-(пентафторфенокси)феноксифосфорил)-L-аланината (46 мг, 0,11 ммоль), растворенного в безводном THF (1 мл). Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 30 мин и в течение 18 ч при комнатной температуре. Реакционную смесь гасили добавлением насыщенного водн. раствора NH4Cl (4 мл) и экстрагировали EtOAc (3×5 мл). Объединенные органические фазы сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаток очищали методом колоночной хроматографии (градиент DCM/MeOH 100/0 → 90/10) с получением продукта 20 (смесь 2 диастереоизомеров, 22 мг, 0,03 ммоль, 33%) в виде белого твердого вещества. 1Н-ЯМР (300 МГц, CD3OD) δ 7,78, 7,77 (с+с, 1Н), 7,37-7,13 (м, 5Н), 6,15 (д, J=18,6 Гц) и 6,13 (д, J=18,9 Гц, 1Н), 4,97-4,89 (перекрывается с H2O, м, 1H), 4,63-4,30 (м, 3Н), 4,22-4,14 (м, 1Н), 4,02-3,84 (м, 2Н), 1,74-1,63 (3Н, m), 1,32-1,27 (м, 3Н), 1,23-1,13 (м, 9Н), 0,94 (т, J=7,4 Гц) и 0,93 (т, J=7,4 Гц, 3Н). 31Р-ЯМР (121 МГц, CD3OD) δ 4,05 (с), 4,00 (с). MS (ESI) m/z рассчит. для C27H40FN7O7P [М+Н]+ 623,3; обнаружено 623,2.
Figure 00000230
Пример 8. Получение изопропил-((((R,S)-(2R,3R,4R,5R)-5-(2-амино-6-(N-метилциклобутиламино)-9H-пурин-9-ил)-4-фтор-3-гидрокси-4-метилтетрагидрофуран-2-ил)метокси)феноксифосфорил)-L-аланината (22).
Стадия 1. Получение (2R,3R,4R,5R)-5-(2-амино-6-(N-метилциклобутиламино)-9Н-пурин-9-ил)-4-фтор-2-(гидроксиметил)-4-метилтетрагидрофуран-3-ола (21).
К раствору соединения 3 (150 мг, 0,29 ммоль) в МеОН (4 мл) добавляли N-метилциклобутиламина гидрохлорид (105 мг, 0,90 ммоль) и триэтиламин (190 мкл, 1,00 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 100°С в герметизированной пробирке в течение 15 ч и охлаждали до комнатной температуры. Добавляли 30% водный раствор NH4OH (1 мл), реакционную смесь нагревали при 100°С в герметизированной пробирке в течение 2 ч, охлаждали и концентрировали. Остаток очищали методом колоночной хроматографии (градиент DCM/MeOH 100/0 → 90/10) с получением продукта 21 (90 мг, 0,25 ммоль, 86%) в виде бледно-желтого твердого вещества. 1Н-ЯМР (300 МГц, CD3OD) δ 8,09 (с, 1Н), 6,14 (д, J=18,0 Гц, 1H), 5,80-5,70 (м, 1Н), 4,44-4,33 (м, 1Н), 4,06-4,02 (м, 2Н), 3,88-3,84 (м, 1Н), 3,34 (с, 3Н), 2,38-2,19 (м, 4Н), 1,79-1,71 (м, 2Н), 1,17 (д, J=22,2 Гц, 3Н). 19F-ЯМР (282 МГц, CD3OD) δ -163,8. MS (ESI) m/z рассчит. для C16H24FN6O3 [М+Н]+ 367,2; обнаружено 367,2.
Стадия 2. Получение изопропил-((((R,S)-(2R,3R,4R,5R)-5-(2-амино-6-(N-метилциклобутиламино)-9H-пурин-9-ил)-4-фтор-3-гидрокси-4-метилтетрагидрофуран-2-ил)метокси)феноксифосфорил)-L-аланината (22).
К раствору соединения 21 (50 мг, 0,14 ммоль) в безводном THF (2 мл) при 0°С в течение 10 мин по каплям добавляли трет-бутилмагнийхлорид (1,0 М в THF, 210 мкл, 0,21 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 15 мин при 0°С, а затем дополнительно в течение 15 мин при комнатной температуре. Реакционную смесь охлаждали до 0°С, и в течение 10 мин по каплям добавляли раствор изопропил-((R,S)-(пентафторфенокси)феноксифосфорил)-L-аланинат (74 мг, 0,16 ммоль), растворенного в безводном THF (2 мл). Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 30 мин и в течение 18 ч при комнатной температуре. Реакционную смесь гасили добавлением насыщенного водн. раствора NH4Cl (4 мл) и экстрагировали EtOAc (3×5 мл). Объединенные органические фазы сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаток очищали методом колоночной хроматографии (градиент DCM/MeOH 100/0 → 90/10), а затем методом обращенно-фазовой колоночной хроматографии (градиент H2O/МеОН 100/0 → 0/100) с получением продукта 22 (смесь 2 диастереоизомеров, 24 мг, 0,04 ммоль, 28%) в виде белого твердого вещества. 1Н-ЯМР (300 МГц, CD3OD) δ 7,79 (с, 0,2Н), 7,77 (с, 0,8Н), 7,38-7,12 (м, 5Н), 6,18 (д, J=17,6 Гц) и 6,16 (д, J=17,5 Гц, 1Н), 4,95-4,81 (м, 2Н), 4,62-4,43 (м, 3Н), 4,25-4,18 (м, 1H), 3,96-3,83 (м, 1Н), 3,38 (с) и 3,36 (с, 3Н), 2,38-2,21 (м, 4Н), 1,75-1,63 (м, 2Н), 1,32-1,16 (м, 12Н). 31Р-ЯМР (121 МГц, CD3OD) δ 4,04 (с), 3,97 (с). MS (ESI) m/z рассчит. для C28H40FN7O7P [М+Н]+ 636,3; обнаружено 636,2.
Модификация 2-аминогруппы активных соединений
Средний специалист в данной области техники может добавить заместитель 2-аминогруппы пуринового фрагмента способами, хорошо известными специалистам в данной области техники. Один неограничивающий способ представлен в настоящем документе, а другие могут быть легко адаптированы. ((2R,3R,4R,5R)-3-(бензоилокси)-5-бром-4-фтор-4-метилтетрагидрофуран-2-ил)метилбензоат обрабатывают коммерчески доступным 2,6-дихлорпурином, основанием и смесью органических растворителей при повышенной температуре с получением (2R,3R,4R,5R)-5-(2,6-дихлор-9H-пурин-9-ил)-2-(бензоилоксиметил)-4-фтор-4-метилтетрагидрофуран-3-илбензоата. Согласно одному варианту осуществления, основание представляет собой трет-бутоксид калия. Согласно другому варианту осуществления, смесь органических растворителей содержит трет-бутанол и ацетонитрил. Соединение, (2R,3R,4R,5R)-5-(2,6-дихлор-9H-пурин-9-ил)-2-(бензоилоксиметил)-4-фтор-4-метилтетрагидрофуран-3-илбензоат, обрабатывают амином, основанием и органическим растворителем при температуре окружающей среды с получением 2-хлор-N6-замещенных пуринов. Согласно одному варианту осуществления, амин представляет собой метиламин. Согласно одному варианту осуществления, основание представляет собой триэтиламин. Согласно одному варианту осуществления, органический растворитель представляет собой этанол. Специалисту в данной области техники следует понимать, что после обработки амином и основанием бензоатные группы нуклеозида будут одномоментно удалены с получением фуранозного фрагмента со снятой защитой. Затем, 2-хлор-N6-замещенные пурины могут быть обработаны амином и органическим растворителем в герметизированной пробирке при повышенной температуре около 100°С с получением N2,N6-дизамещенных пуриновых нуклеозидов согласно настоящему изобретению. Согласно одному варианту осуществления, амин представляет собой метиламин. Согласно одному варианту осуществления, органический растворитель представляет собой этанол. N2,N6-дизамещенные пуриновые нуклеозиды согласно настоящему изобретению могут быть обработаны основанием, изопропил-((R,S)-(пентафторфенокси)феноксифосфорил)-L-аланинатом и органическим растворителем при пониженной температуре с получением соединений формул I-V. Согласно одному варианту осуществления, основание представляет собой трет-бутилмагнийхлорид. Согласно одному варианту осуществления, органический растворитель представляет собой тетрагидрофуран.
Получение стереоспецифических энантиомеров по фосфору
Определенные активные соединения, описанные в настоящем документе, характеризуются наличием хирального фосфорсодержащего фрагмента. Любое из активных соединений, описанных в настоящем документе, может быть предоставлено в виде выделенной энантиомерной по фосфору формы, например, R- или S-энантиомера с чистотой, по меньшей мере, 80, 90, 95 или 98%, с использованием способов, известных специалистам в данной области техники. Например, существует целый ряд публикаций, в которых описано получение таких соединений с использованием без ограничения метода колоночной хроматографии, например, как описано ниже в примере 17 и патентах США №№8,859,756; 8,642,756 и 8,333,309, полученных Ross, et al.
Пример 9. Разделение стереоизомеров соединения 5.
Стереоизомеры соединения 5 разделяли на колонке Phenominex Luna с использованием следующих условий:
Колонка: Phenominex Luna 5 мкм С18 (2) 250×10 мм; кат. № OOG-4252-BO
Концентрация образца: приблизительно 50 мг/мл в ацетонитриле
Вводимый объем: 50 мкл
Подвижная фаза А: вода с чистотой «для HPLC»
Подвижная фаза В: ацетонитрил с чистотой «для HPLC»
Скорость потока: 5 мл/мин
УФ: 283 нм
Градиент:
Figure 00000231
Время прогона: 45 мин
Температура колонки: 40°С
Пример хроматограммы полупрепаративного прогона представлен на фигуре 1.
Объединенные фракции оценивали с использованием аналитической колонки в следующих условиях:
Колонка: Phenominex Luna 5 мкм С18 (2) 250×2 мм; кат. № OOG-4252-BO
Вводимый объем: 10 мкл
Подвижная фаза А: вода с чистотой «для HPLC»
Подвижная фаза В: ацетонитрил с чистотой «для HPLC»
Скорость потока: 0,2 мл/мин
УФ: 283 нм
Градиент:
Figure 00000232
Время прогона: 45 мин
Температура колонки: 40°С
Объединенные фракции для каждого стереоизомера упаривали досуха с использованием роторного испарителя с температурой бани 30°С. Полученные твердые вещества растворяли в 1 мл ацетонитрила, переносили в пробирки для микроцентрифугирования объемом 1,7 мл, и выпаривали растворитель на вакуумной центрифуге при температуре 30°С.
Данные для конечных образцов являются следующими:
1. Элюируемый первым пик: соединение 5 #1 (5-1) (21,7 мг - 97,8% э.и.).
2. Элюируемый вторым пик: соединение 5 #2 (5-2) (13,2 мг - 95,9% э.и.).
Окончательные массы для 1-го и 2-го пиков хорошо соотносятся с их процентным содержанием в начальной смеси (62,2% и 37,8%, соответственно).
Стереоспецифический синтез соединений формул I-VII
Figure 00000233
Пример 10. Получение (2R,3R,4R,5R)-5-(2-амино-6-хлор-9H-пурин-9-ил)-2-(гидроксиметил)-4-фтор-4-метилтетрагидрофуран-3-ола (23).
Стадия 1. Получение (2R,3R,4R,5R)-5-(2-амино-6-хлор-9H-пурин-9-ил)-2-(гидроксиметил)-4-фтор-4-метилтетрагидрофуран-3-ола (23).
Соединение (2R,3R,4R,5R)-5-(2-амино-6-хлор-9H-пурин-9-ил)-2-(бензоилоксиметил)-4-фтор-4-метилтетрагидрофуран-3-илбензоат (3, 80 г, 140 ммоль) добавляли к раствору триметиламина в метаноле (7 М, 800 мл), и перемешивали при к.т. в течение ночи. Смесь концентрировали, а затем очищали методом колоночной хроматографии (DCM/MeOH = 100/1) с получением (2R,3R,4R,5R)-5-(2-амино-6-хлор-9H-пурин-9-ил)-2-(гидроксиметил)-4-фтор-4-метилтетрагидрофуран-3-ола (23) (40 г, 90%).
Figure 00000234
Пример 11. Получение ((((S)-(2R,3R,4R,5R)-5-(2-амино-6-(метиламино)-9H-пурин-9-ил)-4-фтор-3-гидрокси-4-метилтетрагидрофуран-2-ил)метокси)феноксифосфорил)-L-аланината
Figure 00000235
Стадия 1. Получение (2R,3R,4R,5R)-5-(2-амино-6-(метиламино)-9H-пурин-9-ил)-4-фтор-3-гидрокси-4-метилтетрагидрофуран-3-ола (4).
К раствору (2R,3R,4R,5R)-5-(2-амино-6-хлор-9H-пурин-9-ил)-2-(гидроксиметил)-4-фтор-4-метилтетрагидрофуран-3-ола (2,0 г, 1,0 экв.) в диоксане (15 мл) добавляли вводный раствор MeNH2 (5,0 экв.). После перемешивания в течение ночи при к.т., методом TLC обнаруживали расходование исходного вещества. Смесь концентрировали и очищали методом колоночной хроматографии (DCM/MeOH = 40/1 → 30/1) с получением (2R,3R,4R,5R)-5-(2-амино-6-(метиламино)-9H-пурин-9-ил)-4-фтор-3-гидрокси-4-метилтетрагидрофуран-3-ола в виде белого порошка (1,6 г, 81,6%). [М+Н]+ = 313,5
Figure 00000236
Стадия 2. Получение ((((S)-(2R,3R,4R,5R)-5-(2-амино-6-(метиламино)-9H-пурин-9-ил)-4-фтор-3-гидрокси-4-метилтетрагидрофуран-2-ил)метокси)феноксифосфорил)-L-аланината
Соединение (2R,3R,4R,5R)-5-(2-амино-6-(метиламино)-9H-пурин-9-ил)-4-фтор-3-гидрокси-4-метилтетрагидрофуран-3-ол (1,47 г, 1,0 экв.) и PPAL-S (2,35 г, 1,1 экв.) растворяли в безводном THF (29 мл). После охлаждения смеси до -10°С, под слоем N2 медленно добавляли трет-BuMgCl (5,8 мл, 1,7 М, 2,1 экв.). После перемешивания при к.т. в течение 45 мин, смесь гасили добавлением насыщенного водн. NH4Cl, и экстрагировали EtOAc (20 мл × 3). Объединенные органические слои промывали водой, солевым раствором (30 мл), сушили над безводным Na2SO4 и концентрировали. Неочищенный продукт очищали методом колоночной хроматографии (DCM/MeOH = 50/1 → 20/1) с получением ((((S)-(2R,3R,4R,5R)-5-(2-амино-6-(метиламино)-9H-пурин-9-ил)-4-фтор-3-гидрокси-4-метилтетрагидрофуран-2-ил)метокси)феноксифосфорил)-L-аланината в виде белого порошка (1,1 г, 40,3%). 1Н-ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ 7,81 (с, 1Н), 7,33-7,16 (м, 5Н), 6,10 (д, J=18,4 Гц, 1H), 4,90-4,84 (м, 5Н), 4,55-4,46 (м, 3Н), 4,20-4,16 (м, 1Н), 3,91-3,87 (м, 1Н), 3,30 (м, 1Н), 3,03 (с, 3Н), 1,30-1,20 (м, 12Н). [М+Н]+ = 582,8.
Figure 00000237
Пример 12. Получение изопропил-((((S)-(2R,3R,4R,5R)-5-(2-амино-6-(диметиламино)-9H-пурин-9-ил)-4-фтор-3-гидрокси-4-метилтетрагидрофуран-2-ил)метокси)феноксифосфорил)-L-аланината (25).
Figure 00000238
Стадия 1. Получение (2R,3R,4R,5R)-5-(2-амино-6-(диметиламино)-9H-пурин-9-ил)-4-фтор-3-гидрокси-4-метилтетрагидрофуран-3-ола
К раствору (2R,3R,4R,5R)-5-(2-амино-6-хлор-9H-пурин-9-ил)-2-(гидроксиметил)-4-фтор-4-метилтетрагидрофуран-3-ола (2,8 г, 8 ммоль) в диоксане (20 мл) добавляли водный раствор диметиламина (5 мл). После перемешивания при к.т. в течение 3 ч, методом TLC обнаруживали расходование исходного вещества. Смесь концентрировали и очищали методом колоночной хроматографии (DCM/MeOH = 60/1) с получением (2R,3R,4R,5R)-5-(2-амино-6-(диметиламино)-9H-пурин-9-ил)-4-фтор-3-гидрокси-4-метилтетрагидрофуран-3-ола (2,2 г). 1Н-ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ 8,08 (с, 1Н), 6,13 (д, J=18,0 Гц, 1Н), 4,43 (дд, J=9,2, 9,2 Гц, 1Н), 4,06 (д, J=10,8 Гц, 2Н), 3,90 (м, 1Н), 3,37 (с, 3Н), 3,06 (с, 3Н), 1,18 (д, J=22 Гц, 3Н).
Figure 00000239
Стадия 2. Получение изопропил-((((S)-(2R,3R,4R,5R)-5-(2-амино-6-(диметиламино)-9H-пурин-9-ил)-4-фтор-3-гидрокси-4-метилтетрагидрофуран-2-ил)метокси)феноксифосфорил)-L-аланината (25).
Соединение (2R,3R,4R,5R)-5-(2-амино-6-(диметиламино)-9H-пурин-9-ил)-4-фтор-3-гидрокси-4-метилтетрагидрофуран-3-ол (8 г, 1,0 экв.) и PPAL-S (11,1 г, 1 экв.) растворяли в безводном THF (100 мл). Смесь охлаждали до -5 - 0°С, и в атмосфере N2 медленно добавляли трет-BuMgCl (30,5 мл, 1,7 М, 2,1 экв.). После перемешивания при к.т. в течение 2 ч, смесь гасили добавлением насыщенного водн. раствора NH4Cl и экстрагировали EtOAc (70 мл × 3). Объединенные органические слои промывали водой, солевым раствором (30 мл), сушили над безводным Na2SO4 и концентрировали. Неочищенный продукт очищали методом колоночной хроматографии (DCM/MeOH = 50/1) с получением изопропил-((((S)-(2R,3R,4R,5R)-5-(2-амино-6-(диметиламино)-9H-пурин-9-ил)-4-фтор-3-гидрокси-4-метилтетрагидрофуран-2-ил)метокси)-феноксифосфорил)-L-аланината в виде белого порошка (9,5 г, 65%). 1Н-ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ 7,81 (с, 1H), 7,35-7,19 (м, 5Н), 6,15 (д, J=18,8 Гц, 1Н), 4,90 (м, 1H), 4,54-4,49 (м, 3Н), 4,22-4,19 (м, 1Н), 3,90 (м, 1H), 3,43 (с, 3Н), 1,32 (д, J=7,2 Гц, 3Н), 1,24-1,17 (м, 9Н). 31Р-ЯМР (160 МГц, CD3OD) δ 3,89.
Figure 00000240
Пример 13. Получение изопропил-((((R)-(2R,3R,4R,5R)-5-(2-амино-6-(диметиламино)-9H-пурин-9-ил)-4-фтор-3-гидрокси-4-метилтетрагидрофуран-2-ил)метокси)феноксифосфорил)-L-аланината (26).
Соединение (2R,3R,4R,5R)-5-(2-амино-6-(диметиламино)-9H-пурин-9-ил)-4-фтор-3-гидрокси-4-метилтетрагидрофуран-3-ол (3 г, 1,0 экв.) и PPAL-R (4,17 г, 1 экв.) растворяли в безводном THF (60 мл). Смесь охлаждали до -5 - 0°С, и в атмосфере N2 медленно добавляли трет-BuMgCl (11,4 мл, 1,7 М, 2,1 экв.). После перемешивания при к.т. в течение 16 ч, смесь гасили добавлением насыщенного водн. раствора NH4Cl и экстрагировали EtOAc (50 мл × 3). Объединенные органические слои промывали водой, солевым раствором (30 мл), сушили над безводным Na2SO4 и концентрировали. Неочищенный продукт очищали методом колоночной хроматографии (DCM/MeOH = 50/1) с получением изопропил-((((R)-(2R,3R,4R,5R)-5-(2-амино-6-(диметиламино)-9H-пурин-9-ил)-4-фтор-3-гидрокси-4-метилтетрагидрофуран-2-ил)метокси)-феноксифосфорил)-L-аланинат в виде белого порошка (2,2 г, 41%). 1Н-ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ 7,8 (с, 1Н), 7,35-7,29 (м, 5Н), 6,18 (д, J=18,8 Гц, 1Н), 4,92 (м, 1Н), 4,60 (м, 1Н), 4,51-4,23 (м, 3Н), 3,90 (м, 1Н), 3,44 (с, 6Н), 1,29 (д, J=6 Гц, 3Н), 1,22-1,16 (м, 10Н). 31Р-ЯМР (160 МГц, CD3OD) δ 3,98.
Figure 00000241
Пример 14. Получение изопропил-((((S)-(2R,3R,4R,5R)-5-(2-амино-6-(метилциклопропанамино)-9H-пурин-9-ил)-4-фтор-3-гидрокси-4-метилтетрагидрофуран-2-ил)метокси)феноксифосфорил)-L-аланината
Figure 00000242
Стадия 1: Получение (2R,3R,4R,5R)-5-(2-амино-6-(метилциклопропанамино)-9H-пурин-9-ил)-4-фтор-3-гидрокси-4-метилтетрагидрофуран-3-ол (8).
К водному раствору N-метилциклопропанамина гидрохлорида (100 мл) добавляли К2СО3 (53 г, 500 ммоль). После перемешивания при к.т.в течение 10 мин, добавляли раствор (2R,3R,4R,5R)-5-(2-амино-6-хлор-9H-пурин-9-ил)-2-(гидроксиметил)-4-фтор-4-метилтетрагидрофуран-3-ола (35 г, 109 ммоль) в диоксане (300 мл). Смесь перемешивали при к.т. в течение 16 ч, и методом HPLC обнаруживали завершение реакции. Смесь концентрировали и очищали методом колоночной хроматографии (DCM/MeOH = 60/1) с получением (2R,3R,4R,5R)-5-(2-амино-6-(метилциклопропанамино)-9H-пурин-9-ил)-4-фтор-3-гидрокси-4-метилтетрагидрофуран-3-ола (30 г, 82%). 1Н-ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ 8,16 (с, 1H), 6,17 (д, J=18,0 Гц, 1Н), 4,41 (дд, J=9,2, 9,2 Гц, 1Н), 4,06 (м, 2Н), 3,90 (м, 1H), 3,37 (с, 3Н), 3,16 (м, 1H), 1,18 (д, J=22,4 Гц, 3Н), 0,94 (м, 2Н), 0,74 (м, 2Н). [М+Н]+ = 353,2.
Figure 00000243
Стадия 2: Получение изопропил-((((S)-(2R,3R,4R,5R)-5-(2-амино-6-(метилциклопропанамино)-9H-пурин-9-ил)-4-фтор-3-гидрокси-4-метилтетрагидрофуран-2-ил)метокси)феноксифосфорил)-L-аланината
Соединение (2R,3R,4R,5R)-5-(2-амино-6-(метилциклопропанамино)-9H-пурин-9-ил)-4-фтор-3-гидрокси-4-метилтетрагидрофуран-3-ол (8 г, 1,0 экв.) и PPAL-S (10,3 г, 1 экв.) растворяли в безводном THF (100 мл). После охлаждения смеси до -5 - 0°С, в атмосфере N2 медленно добавляли трет-BuMgCl (28 мл, 1,7 М, 2,1 экв.). Смесь перемешивали при к.т. в течение 1 ч, гасили добавлением насыщенного водн. раствора NH4Cl и экстрагировали EtOAc (70 мл × 3). Объединенные органические слои промывали водой, солевым раствором (30 мл), сушили над безводным Na2SO4 и концентрировали. Неочищенный продукт очищали методом колоночной хроматографии (DCM/MeOH = 100/1 → 50/1) с получением изопропил-((((S)-(2R,3R,4R,5R)-5-(2-амино-6-(метилциклопропанамино)-9H-пурин-9-ил)-4-фтор-3-гидрокси-4-метилтетрагидрофуран-2-ил)метокси)феноксифосфорил)-L-аланината в виде белого порошка (9,5 г, 65%). 1Н-ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ 7,86 (с, 1H), 7,35-7,19 (м, 5Н), 6,17 (д, J=19,2 Гц, 1Н), 4,91 (м, 1Н), 4,52 (м, 3Н), 4,21 (м, 1Н), 3,93 (м, 1Н), 3,35 (с, 3Н), 3,16 (м, 1Н), 2,0 (с, 1Н), 1,26-1,16 (м, 12Н), 0,93 (м, 2Н), 0,73 (м, 2Н). 31Р-ЯМР (160 МГц, CD3OD) δ 3,90
Figure 00000244
Пример 15. Получение изопропил-((((R)-(2R,3R,4R,5R)-5-(2-амино-6-(метилциклопропанамино)-9H-пурин-9-ил)-4-фтор-3-гидрокси-4-метилтетрагидрофуран-2-ил)метокси)феноксифосфорил)-L-аланината
Соединение (2R,3R,4R,5R)-5-(2-амино-6-(метилциклопропанамино)-9H-пурин-9-ил)-4-фтор-3-гидрокси-4-метилтетрагидрофуран-3-ол (3 г, 1,0 экв.) и PPAL-R (2,8 г, 1 экв.) растворяли в безводном THF (60 мл). После охлаждения смеси до -5 - 0°С, в атмосфере N2 медленно добавляли трет-BuMgCl (7,6 мл, 1,7 М, 2,1 экв.). Затем, смесь перемешивали при к.т. в течение 1 ч, гасили добавлением насыщенного водн. раствора NH4Cl и экстрагировали EtOAc (50 мл × 3). Объединенные органические слои промывали водой, солевым раствором (30 мл), сушили над безводным Na2SO4 и концентрировали. Неочищенный продукт очищали методом колоночной хроматографии (DCM/MeOH = 100/1 → 50/1) с получением продукта в виде белого порошка (3 г, 55%). 1Н-ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ 7,81 (с, 1H), 7,30-7,25 (м, 5Н), 6,16 (д, J=24,8 Гц, 1H), 4,84 (м, 1H), 4,84-4,50 (м, 3Н), 4,22-4,19 (м, 1Н), 3,88 (м, 1Н), 3,33 (с, 3Н), 3,14 (м, 1Н), 2,0 (с, 1H), 1,28-1,13 (м, 12Н), 0,92 (м, 2Н), 0,90 (м, 2Н). 31Р-ЯМР (160 МГц, CD3OD) δ 3,99.
Figure 00000245
Пример 16. Получение соединения 139.
Figure 00000246
Стадия 1. Получение соединения 29.
К раствору 6 (3,0 г, 1,0 экв.) в пиридине (30 мл) при 0°С добавляли TIPDSCl2 (4,35 г, 1,5 экв.). После перемешивания при к.т. в течение 4 ч, методом TLC обнаруживали расходование исходного вещества. Смесь разбавляли EtOAc, промывали 1М водн. раствором HCl, насыщенным водным раствором NaHCO3, солевым раствором, сушили над безводным Na2SO4 и концентрировали с получением 29 в виде желтого масла (6,3 г, 100%).
Figure 00000247
Стадия 2. Получение соединения 30.
К смеси соединения 29 (800 мг, 1,0 экв.), DMAP (16 мг, 0,1 экв.), пиридина (1,6 мл) и DCM (10 мл) при 0°С добавляли изобутирилхлорид (209 мг, 1,5 экв.). После перемешивания при к.т. в течение 2 ч, методом TLC обнаруживали расходование исходного вещества. Смесь гасили добавлением воды, промывали 1М водн. раствором HCl, насыщенным водным раствором NaHCO3, солевым раствором, сушили над безводным Na2SO4 и концентрировали. Неочищенный продукт очищали методом колоночной хроматографии с получением продукта 30 в виде белого масла (563 мг, 62,3%). 1Н-ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7,98 (с, 1Н), 787 (с, 1Н), 6,20 (д, J=16,0 Гц, 1Н), 4,32-4,07 (м, 4Н), 3,50 (с, 6Н), 2,3 (м, 1H), 1,29-1,05 (м, 45Н).
Figure 00000248
Стадия 3. Получение соединения 31.
К смеси соединения 30 (560 мг, 1,0 экв.) в THF (10 мл) при к.т. добавляли Et3N⋅3HF (706 мг, 5 экв.) и Et3N (890 мг, 10 экв.). После перемешивания при к.т. в течение 1,5 ч, методом TLC обнаруживали расходование исходного вещества. Смесь концентрировали и очищали методом колоночной хроматографии с получением соединения 31 в виде белого порошка (288 мг, 83%). 1Н-ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7,72 (с, 1Н), 5,96 (д, J=44,0 Гц, 1Н), 5,22 (м, 1Н), 4,13-3,99 (м, 4Н), 3,42 (с, 6Н), 2,83-2,63 (м, 2Н), 1,29-1,17 (м, 9Н).
Figure 00000249
Стадия 4. Получение соединения 32.
Соединение 31 (280 мг, 1,0 экв.) и PPAL-S (320 мг, 1 экв.) растворяли в безводном THF (10 мл). После охлаждения смеси до -5°С, в атмосфере N2 медленно добавляли трет-BuMgCl (0,87 мл, 1,7 М, 2,1 экв.). Смесь перемешивали при к.т. в течение 2 ч, гасили добавлением насыщенного водн. раствора NH4Cl, и экстрагировали EtOAc (10 мл × 3). Объединенные органические слои промывали водой, солевым раствором (20 мл), сушили над безводным Na2SO4 и концентрировали. Неочищенный продукт очищали методом колоночной хроматографии с получением продукта в виде белого порошка (260 мг, 50%). 1Н-ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ 7,98 (с, 1Н), 7,25 (м, 5Н), 6,23 (д, J=18,8 Гц, 1H), 4,52 (м, 3Н), 4,38 (м, 1H), 3,81 (м, 1Н), 3,75 (м, 1H), 3,48 (с, 6Н), 2,81 (м, 1Н), 1,32 (м, 18Н). [М+Н]+ = 666,9.
Figure 00000250
Пример 17. Получение соединения 35.
Figure 00000251
Стадия 1. Получение соединения 33.
К смеси соединения 29 (2,0 г, 1,0 экв.), DMAP (0,04 г, 0,1 экв.), пиридина (4 мл) и DCM (20 мл) при 0°С добавляли AcCl (0,414 г, 1,5 экв.). После перемешивания при к.т. в течение 2 ч, методом TLC обнаруживали расходование исходного вещества. Смесь гасили добавлением воды, промывали 1М водн. раствором HCl, насыщенным водным раствором NaHCO3, а затем солевым раствором, сушили над безводным Na2SO4 и концентрировали. Неочищенный продукт очищали методом колоночной хроматографии с получением продукта 33 в виде белого масла (1,73 г, 80,8%). 1Н-ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7,99 (с, 1H), 7,74 (с, 1H), 6,20 (д, J=20,0 Гц, 1H), 4,33-4,11 (м, 4Н), 3,50 (с, 6Н), 2,63 (с, 3Н), 2,3 (м, 1Н), 1,26-1,05 (м, 29Н). [М+Н]+ = 611,9.
Figure 00000252
Стадия 2. Получение соединения 34.
К смеси соединения 33 (1,58 г, 1,0 экв.) в THF (20 мл) при к.т. добавляли Et3N⋅3HF (2,1 г, 5 экв.) и Et3N (2,6 г, 10 экв.). После перемешивания при к.т.в течение 1,5 ч, методом TLC обнаруживали расходование исходного вещества. Смесь концентрировали и очищали методом колоночной хроматографии с получением соединения 34 в виде белого порошка (782 мг, 82%). [М+Н]+ = 369,6.
Figure 00000253
Стадия 3. Получение соединения 35.
Соединение 34 (136 мг, 1,0 экв.) и PPAL-S (184 мг, 1,1 экв.) растворяли в безводном THF (3 мл). После охлаждения смеси до -5°С, в атмосфере N2 медленно добавляли трет-BuMgCl (0,5 мл, 1,7 М, 2,1 экв.). Смесь перемешивали при к.т. в течение 30 мин, гасили добавлением насыщенного водн. раствора NH4Cl и экстрагировали EtOAc (10 мл × 3). Объединенные органические слои промывали водой, солевым раствором (20 мл), сушили над безводным Na2SO4 и концентрировали. Неочищенный продукт очищали методом колоночной хроматографии (DCM/MeOH = 50/1 → 20/1) с получением фосфорамидата 35 в виде белого порошка (150 мг, 63,8%). 1Н-ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ 7,81 (с, 1Н), 7,35-7,16 (м, 5Н), 6,10 (д, J=18,4 Гц, 1H), 4,87 (м, 1Н), 4,52-4,46 (м, 3Н), 4,21 (м, 1H), 3,91-3,87 (м, 1H), 3,03 (с, 3Н), 1,30-1,13 (м, 12Н). 31Р-ЯМР (160 МГц, CD3OD) δ 3,84. 19F-ЯМР (376 МГц, CD3OD) δ -162,79.
Синтез β-D-2'-дезокси-2'-α-фтор-2'-β-этинил-N6-замещенных-2,6-диаминопуриновых нуклеотидов
Figure 00000254
Пример 18. Общий путь получения β-D-2'-дезокси-2'-α-фтор-2'-β-этинил-N6-замещенных-2,6-диаминопуриновых нуклеотидов
Figure 00000255
Стадия 1. Получение соединения 36.
К раствору 6-хлоргуанозина (100 г, 332 ммоль) в пиридине (400 мл) при -5~5°С в атмосфере N2 по каплям добавляли TPDSCl2 (110 мл, 1,05 экв.). После перемешивания при указанной температуре в течение 2 ч, методом TLC обнаруживали расходование исходного вещества. Добавляли DCM (600 мл), а затем при 0-5°С по каплям добавляли TMSCl (85 мл, 2 экв.). После перемешивания при указанной температуре в течение 2 ч, методом TLC обнаруживали расходование промежуточного продукта.
При 0-5°С по каплям добавляли изобутирилхлорид. После перемешивания при указанной температуре в течение 2 ч, методом TLC обнаруживали расходование промежуточного продукта. Добавляли воду, и экстрагировали содержимое DCM. Органическую фазу затем промывали 0,5н HCl для удаления пиридина.
После корректировки содержимого до рН 5~6, при 0-5°С добавляли pTSA⋅Н2О (9,2 г, 484,5 ммоль). После перемешивания при указанной температуре в течение 1 ч, методом TLC обнаруживали расходование промежуточного продукта. Затем, добавляли воду, и промывали органическую фазу водой, насыщенным водным NaHCO3 и солевым раствором. После сушки над Na2SO4, растворитель удаляли в условиях вакуума. Затем, остаток очищали методом колоночной хроматографии (РЕ/ЕА = 100 → 10/1) с получением продукта в виде светло-желтого твердого вещества (82 г, 40%). 1Н-ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 10,88 (с, 1H), 8,55 (с, 1H), 5,91 (д, J=1,6 Гц, 1Н), 5,53 (д, J=4,6 Гц, 1Н), 4,72-4,58 (м, 2Н), 4,16 (дд, J=12,4, 4,8 Гц, 1H), 4,00 (ддд, J=7,7, 4,8, 2,6 Гц, 1Н), 3,93 (дд, J=12,4, 2,7 Гц, 1Н), 2,78 (h, J=6,9 Гц, 1Н), 1,26-1,12 (м, 3Н), 1,10 (д, J=6,7 Гц, 6Н), 1,09-0,88 (м, 24Н).
Figure 00000256
Стадия 2. Получение соединения 37.
К раствору соединения 36 (10,0 г, 16,3 ммоль) в DCM (100 мл) при к.т. добавляли перйодинан Десс-Мартина, и перемешивали реакционную смесь в течение 12 ч. Методом TLC обнаруживали расходование исходного вещества. Реакционную смесь затем разбавляли DCM (200 мл) и промывали насыщенным водным Na2S2O3 и солевым раствором. Органическую фазу затем сушили над Na2SO4 и концентрировали с получением неочищенного соединения 37 в виде светло-желтого твердого вещества (12 г). Неочищенное соединение 53 может быть использовано непосредственно на следующей стадии без очистки.
Figure 00000257
Стадия 3. Получение соединения 38.
К раствору этинилтриметилсилана (18,6 мл, 142,7 ммоль) в THF (240 мл) при -15~20°С в атмосфере N2 по каплям добавляли n-BuLi (46 мл, 2,5 М, 115,0 ммоль). После перемешивания в течение 30 мин, реакционную смесь охлаждали до -70°С, и при указанной температуре добавляли соединение 37 (неочищ., 16,3 ммоль) в THF (60 мл). Содержимое затем нагревали до 0°С. Методом TLC обнаруживали расходование исходного вещества. Добавляли насыщенный водный NH4Cl, и трижды экстрагировали реакционную смесь ЕА (100 мл). Органическую фазу объединяли, а затем промывали солевым раствором, а затем сушили над Na2SO4. После концентрирования в условиях вакуума, остаток очищали методом колоночной хроматографии (РЕ/ЕА = 100 → 10/1) с получением светло-желтого твердого вещества (6,0 г, 52%).
Figure 00000258
Стадия 4. Получение соединения 39.
К раствору соединения 38 (6,0 г, 8,4 ммоль) в DCM (240 мл) в атмосфере N2 добавляли пиридин (4,2 мл, 52,9 ммоль). Реакционную смесь охлаждали до -70°С, и добавляли DAST (12 мл, 90,4 ммоль). Содержимое затем нагревали до -30°С. Методом TLC обнаруживали расходование исходного вещества. Реакционную смесь вливали в насыщенный водный NaHCO3, а затем экстрагировали DCM (200 мл). Органическую фазу промывали солевым раствором и сушили над Na2SO4. После концентрирования в условиях вакуума, остаток очищали методом колоночной хроматографии (РЕ/ЕА = 100 → 10/1) с получением светло-желтого твердого вещества (3,8 г, 63%).
Figure 00000259
Стадия 5. Получение соединения 40.
К раствору соединения 39 (3,8 г, 5,3 ммоль) в THF (120 мл) при к.т. добавляли АсОН (1,3 г, 22 ммоль) и TBAF (4,2 г, 15,9 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при к.т. в течение 30 мин. Методом TLC обнаруживали расходование исходного вещества. После концентрирования в условиях вакуума, остаток очищали методом колоночной хроматографии (ЕА) с получением продукта в виде белого твердого вещества (2,0 г, 95%).
Figure 00000260
Общая методика замещения амином и снятия защиты с аминогруппы:
К раствору соединения 40 (350 мг, 0,88 ммоль) в диоксане (20 мл) при к.т. добавляли метанольный или водный раствор соответствующего амина (свободное основание или гидрохлорид плюс DIEA). Содержимое перемешивали при к.т.в течение 1-12 ч. Методом TLC обнаруживали расходование исходного вещества. После концентрирования в условиях вакуума, остаток использовали непосредственно на следующей стадии без очистки. Упомянутый выше остаток растворяли в метаноле (10 мл). Добавляли водный NaOH (2,5н, 10 мл). После перемешивания в течение ночи при к.т., методом TLC обнаруживали расходование исходного вещества. Значение рН содержимого корректировали до 7-8 добавлением 1н HCl. Раствор концентрировали и очищали методом колоночной хроматографии (DCM/MeOH = 100 → 20/1) с получением продукта в виде не совсем белого твердого вещества (выход: 40-80% в два этапа). В таблице 1 представлены структуры соединений 57-63 и соответствующие масс-спектры и спектры 1Н-ЯМР для соответствующих соединений.
Figure 00000261
Пример 19. Получение изопропил-((((R,S)-(2R,3R,4R,5R)-5-(2-амино-6-диметиламино-9H-пурин-9-ил)-4-фтор-3-гидрокси-4-этинилтетрагидрофуран-2-ил)метокси)феноксифосфорил)-L-аланината
Figure 00000262
Стадия 1. Получение изопропил-((((R,S)-(2R,3R,4R,5R)-5-(2-амино-6-диметиламино-9H-пурин-9-ил)-4-фтор-3-гидрокси-4-этинилтетрагидрофуран-2-ил)метокси)феноксифосфорил)-L-аланината
К раствору соединения 41 (30 мг, 0,09 ммоль) в безводном THF (2 мл) при 0°С в течение 10 мин по каплям добавляли трет-бутилмагнийхлорид (1,0 М в THF, 125 мкл, 0,13 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 15 мин при 0°С, а затем дополнительно в течение 15 мин при комнатной температуре. Реакционную смесь охлаждали до 0°С, и в течение 10 мин по каплям добавляли раствор изопропил-((R,S)-(пентафторфенокси)феноксифосфорил)-L-аланината (49 мг, 0,11 ммоль), растворенного в безводном THF (2 мл). Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 30 мин и в течение 18 ч при комнатной температуре. Реакционную смесь гасили добавлением насыщенного водн. раствора NH4Cl (4 мл) и экстрагировали EtOAc (3×5 мл). Объединенные органические фазы сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаток очищали методом колоночной хроматографии (градиент DCM/MeOH 100/0 → 90/10) с получением продукта (смесь 2 диастереоизомеров, 12 мг, 0,02 ммоль, 24%) в виде белого твердого вещества. 1Н-ЯМР (300 МГц, CD3OD) δ 7,79 (с, 0,45Н), 7,77 (с, 0,55Н), 7,36-7,14 (м, 5Н), 6,28 (д, J=17,4 Гц) и 6,26 (д, J=17,5 Гц, 1Н), 5,00-4,44 (м, 5Н), 4,23-4,16 (м, 1H), 3,69-3,81 (м, 1H), 3,42 (ушир. с, 3Н), 3,40 (ушир. с, 3Н), 1,32-1,26 (м, 3Н), 1,20-1,15 (м, 6Н). 31Р-ЯМР (121 МГц, CD3OD) δ 4,04 (с), 3,98 (с). MS (ESI) m/z рассчит. для C26H34FN7O7P [М+Н]+ 606,2; обнаружено 606,2.
Пример 20. Получение изопропил-((((R,S)-(2R,3R,4R,5R)-5-(2-амино-6-метиламино-9H-пурин-9-ил)-4-фтор-3-гидрокси-4-этинилтетрагидрофуран-2-ил)метокси)феноксифосфорил)-L-аланината
Figure 00000263
Стадия 1. Получение изопропил-((((R,S)-(2R,3R,4R,5R)-5-(2-амино-6-метиламино-9H-пурин-9-ил)-4-фтор-3-гидрокси-4-этинилтетрагидрофуран-2-ил)метокси)феноксифосфорил)-L-аланината
К раствору соединения 42 (30 мг, 0,09 ммоль) в безводном THF (2 мл) при 0°С в течение 10 мин по каплям добавляли трет-бутилмагнийхлорид (1,0 М в THF, 125 мкл, 0,13 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 15 мин при 0°С, а затем дополнительно в течение 15 мин при комнатной температуре. Реакционную смесь охлаждали до 0°С, и в течение 10 мин по каплям добавляли раствор изопропил-((R,S)-(пентафторфенокси)феноксифосфорил)-L-аланината (49 мг, 0,11 ммоль), растворенного в безводном THF (2 мл). Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 30 мин и в течение 18 ч при комнатной температуре. Реакционную смесь гасили добавлением насыщенного водн. раствора NH4Cl (4 мл) и экстрагировали EtOAc (3×5 мл). Объединенные органические фазы сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаток очищали методом колоночной хроматографии (градиент DCM/MeOH 100/0 → 90/10) с получением продукта (смесь 2 диастереоизомеров, 9 мг, 0,02 ммоль, 18%) в виде белого твердого вещества. 1Н-ЯМР (300 МГц, CD3OD) δ 7,81, 7,79 (0,9с+0,1с, 1H), 7,36-7,14 (м, 5Н), 6,26 (д, J=17,4 Гц, 0,1Н) и 6,24 (д, J=17,4 Гц, 0,9Н), 4,93-4,89 (перекрывается с H2O, м, 1Н), 4,80-4,78 (м, 1Н), 4,53-4,49 (м, 2Н), 4,21-4,18 (м, 1Н), 3,95-3,84 (м, 1Н), 3,23-3,20 (м, 1H), 3,04 (ушир. с, 1Н), 1,31-1,14 (м, 9Н). 31Р-ЯМР (121 МГц, CD3OD) δ 4,06 (с), 3,97 (с). MS (ESI) m/z рассчит. для C25H32FN7O7P [М+Н]+ 592,2; обнаружено 592,2.
Пример 21. Получение изопропил-((((R,S)-(2R,3R,4R,5R)-5-(2-амино-6-(N-метилциклопропиламино)-9H-пурин-9-ил)-4-фтор-3-гидрокси-4-этинилтетрагидрофуран-2-ил)метокси)феноксифосфорил)-L-аланината
Figure 00000264
Стадия 1. Получение изопропил-((((R,S)-(2R,3R,4R,5R)-5-(2-амино-6-(N-метилциклопропиламино)-9H-пурин-9-ил)-4-фтор-3-гидрокси-4-этинилтетрагидрофуран-2-ил)метокси)феноксифосфорил)-L-аланината
К раствору соединения 43 (40 мг, 0,11 ммоль) в безводном THF (2 мл) при 0°С в течение 10 мин по каплям добавляли трет-бутилмагнийхлорид (1,0 М в THF, 160 мкл, 0,16 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 15 мин при 0°С, а затем дополнительно в течение 15 мин при комнатной температуре. Реакционную смесь охлаждали до 0°С, и в течение 10 мин по каплям добавляли раствор изопропил-((R,S)-(пентафторфенокси)феноксифосфорил)-L-аланината (55 мг, 0,12 ммоль), растворенного в безводном THF (2 мл). Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 30 мин и в течение 18 ч при комнатной температуре. Реакционную смесь гасили добавлением насыщенного водн. раствора NH4Cl (4 мл) и экстрагировали EtOAc (3×5 мл). Объединенные органические фазы сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаток очищали методом колоночной хроматографии (градиент DCM/MeOH 100/0 → 90/10) с получением продукта (смесь 2 диастереоизомеров, 18 мг, 0,03 ммоль, 26%) в виде белого твердого вещества. 1Н-ЯМР (300 МГц, CD3OD) δ 7,84, 7,82 (с+с, 1Н), 7,35-7,14 (м, 5Н), 6,30 (д, J=17,4 Гц) и 6,26 (д, J=17,6 Гц, 1Н), 4,99-4,89 (перекрывается с H2O, м, 1Н), 4,82-4,69 (м, 1H), 4,59-4,46 (м, 2Н), 4,21 (м, 1H), 3,96-3,82 (м, 1Н), 3,24-3,22 (м, 1Н), 3,17-3,11 (м, 1H) 1,31-1,26 (м, 3Н), 1,20-1,15 (м, 6Н), 0,93-0,89 (м, 2Н), 0,75-0,68 (м, 2Н). 31Р-ЯМР (121 МГц, CD3OD) δ 4,06 (с), 3,98 (с). MS (ESI) m/z рассчит. для C28H36FN7O7P [М+Н]+ 632,2; обнаружено 632,2.
Пример 22. Получение PPAL-S
Figure 00000265
Стадия 1. Получение рацемического PPAL
К перемешанному раствору фенилдихлорфосфата (250 г) в EtOAc (800 мл) при -10°С добавляли изопропил-L-аланинат (200 г) в триэтиламине (120 г). Реакционную смесь перемешивали при -10°С в течение 1 ч. При -5°С добавляли соединение 2,3,4,5,6-пентафторфенол (220 г) в триэтиламине (120 г) и EtOAc (400 мл), и перемешивали при указанной температуре в течение 0,5 ч. Реакционную смесь оставляли нагреваться до 25°С и перемешивали при указанной температуре в течение 2 ч. Раствор фильтровали и промывали EtOAc (2×200 мл), и упаривали объединенные органические фазы в условиях вакуума с получением твердого PPAL-RS (рацемат).
Стадия 2. Получение PPAL-RS
К перемешанному раствору PPAL-RS в EtOAc (200 мл) и н-гептане (1,4 л) добавляли 2,3,4,5,6-пентафторфенол (10,1 г) в триэтиламине (6 г), и продолжали перемешивание приблизительно в течение 4-8 ч. После того, как R-изомера в твердом веществе становилось менее 0,5%, твердое вещество фильтровали. Твердое вещество растворяли в EtOAc (4 л), промывали водой (2×100 мл), солевым раствором (1 л), сушили над безводным Na2SO4 и фильтровали, растворитель удаляли в условиях вакуума с получением PPAL-S (350 г). 1Н-ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ = 7,42-7,40 (м, 2Н), 7,24-7,22 (м, 3Н), 6,87 (дд, J=14,1, 9,9 Гц, 1Н), 4,90-4,84 (м, 1Н), 3,94-3,88 (м, 1Н), 1,27 (дд, J=7,1, 1,1 Гц, 3Н), 1,15 (дд, J=6,2, 1,2 Гц, 6Н) м.д.. 13Р-ЯМР (160 МГц, DMSO-d6) δ=0,37 м.д..
Пример 23. Получение PPAL-R
Figure 00000266
В трехгорлую круглодонную колбу, оснащенную магнитной мешалкой, добавляли фенилдихлорфосфат (189,6 г, 0,90 моль) и безводный EtOAc (750 мл). Раствор охлаждали до -10°С в атмосфере азота. К полученному выше раствору добавляли изопропил L-аланинат (118 г, 0,90 ммоль) и триэтиламин (100 г, 1,1 экв.). предварительно охлажденную (ниже 10°С) смесь 2,3,4,5,6-пентафторфенола (165 г, 1 экв.) и триэтиламина (90,5 г, 1 экв.) в EtOAc (300 мл) добавляли при -5°С к смеси через капельную воронку, и перемешивали полученную смесь при 20-25°С в течение 1 часа. Белый осадок (TEA⋅HCl) отфильтровывали и промывали EtOAc. Фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления с получением приблизительно 280 г PPAL-RS (S/R=1/1) в виде белого твердого вещества. PPAL-RS (280 г) растирали с 300 мл смеси гептан/EtOAc (20/1) при комнатной температуре в течение 5 мин. Белую суспензию фильтровали, и промывали твердое вещество смесью гептан/EtOAc (20/1). Фильтрат охлаждали до 8°С, и собирали твердое вещество путем фильтрования. Неочищенный PPAL-R (10 г) получали с хиральной чистотой 95%. Неочищенный продукт очищали, следуя описанной выше процедуре. PPAL-R (5 г) получали с хиральной чистотой не менее 98%. 1Н-ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ=7,43-7,39 (м, 2Н), 7,27-7,22 (м, 3Н), 6,87 (дд, J=14,1, 9,9 Гц, 1Н), 4,89-4,85 (м, 1Н), 3,95-3,90 (м, 1Н), 1,27 (дд, J=7,1, 1,1 Гц, 3Н), 1,14 (дд, J=6,2, 1,2 Гц, 6Н). 13Р-ЯМР (160 МГц, DMSO-d6) δ=0,35.
Пример 24: Получение соединения 52.
Figure 00000267
Стадия 1. Получение соединения 49.
К раствору соединения 48 (1,81 г, 3,23 ммоль) в диоксане (18 мл) добавляли 40% водный раствор CH3NH2 (16,2 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 40°С в течение 2 ч. Смесь концентрировали, разбавляли EtOAc (50 мл), промывали водой и солевым раствором. Органический слой сушили над безводным Na2SO4, фильтровали и концентрировали с получением белого твердого соединения 49 (1,66 г, 92%).
Figure 00000268
Стадия 2. Получение соединения 50.
К раствору соединения 49 (1,34 г, 2,42 ммоль) и 1-метилимидазола (794 мг, 9,68 ммоль) в DCM (14 мл) при 0°С медленно добавляли пентилхлороформиат (547 мг, 3,63 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при к.т. в течение ночи. Смесь концентрировали и очищали методом колоночной хроматографии (PE/EtOAc = 5/1→2/1) с получением 50 (1,01 г, 62%) в виде белого твердого вещества. 1Н-ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 7,96 (с, 1Н), 6,73 (с, 1Н), 6,06-6,10 (д, J=16,0 Гц, 1Н), 4,09-4,30 (м, 2Н), 3,97-4,09 (м, 4Н), 3,28 (с, 3Н), 1,39-1,46 (м, 2Н), 1,0-1,2 (м, 35Н), 0,73-0,76 (т, J=8,0 Гц, 3Н).
Figure 00000269
Стадия 3. Получение соединения 51.
К раствору соединения 50 (1,00 г, 1,5 ммоль) в THF (11 мл) при 0°С добавляли Et3N (2,0 мл, 15 ммоль) и Et3N,3HF (1,21 г, 7,5 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при к.т. в течение 1,5 ч. Смесь концентрировали и очищали методом колоночной хроматографии (MeOH/CH2Cl2 = 50/1) с получением соединения 51 (460 мг, 72,2%) в виде белого порошка.
Figure 00000270
Стадия 4. Получение соединения 52.
К раствору соединения 51 (460 мг, 1,08 ммоль) и PPAL-S (538 мг, 1,19 ммоль) в безводном THF (9 мл) при 5-10°С в атмосфере N2 медленно добавляли трет-BuMgCl (2,27 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при к.т. в течение 40 мин. Смесь гасили добавлением насыщенного водн. раствора NH4Cl, экстрагировали EtOAc, промывали 5% водн. раствором K2CO3 и солевым раствором, сушили над безводным Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Неочищенный продукт очищали методом колоночной хроматографии (CH2Cl2/MeOH = 15/1) с получением соединения 52 (280 мг, 37,3%) в виде белого твердого вещества. 1Н-ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 8,12 (с, 1Н), 7,34-7,38 (м, 2Н), 7,18-7,23 (м, 3Н), 6,74 (с, 2Н), 6,11-6,16 (д, J=16,0 Гц, 1Н), 5,99-6,05 (м, 1Н), 5,84 (м, 1Н), 4,77-4,81 (м, 1Н), 4,30-4,41 (м, 3Н), 4,03-4,11 (м, 3Н), 3,78-3,80 (м, 1Н), 3,3 (с, 3Н), 1,44-1,51 (м, 2Н), 1,00-1,21 (м, 16Н), 0,76-0,80 (т, J=8,0 Гц, 3Н). [М+Н]+=696,6.
Пример 25: Получение соединения 56.
Figure 00000271
Стадия 1. Получение соединения 48.
К раствору соединения 23 (600 мг, 1 экв.) в пиридине (30 мл) при 0°С добавляли TIPDSCl2 (1,5 экв.). Полученный раствор оставляли отстаиваться при комнатной температуре в течение 2 ч. Смесь гасили добавлением воды со льдом и экстрагировали EtOAc. Органический слой промывали 1М водн. раствором HCl, насыщенным водным бикарбонатом натрия и насыщенным водным хлоридом натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, и концентрировали с получением неочищенного остатка. Остаток очищали методом хроматографии (MeOH/CH2Cl2 = 1/50) с получением соединения 48 (998 мг, 94,4%) в виде белой твердой пены.
Figure 00000272
Стадия 2. Получение соединения 53.
Смесь соединения 48 (800 мг, 1 экв.), пиридина (3,2 мл), DMAP (34,9 мг, 0,2 экв.) в DCM (20 мл) перемешивали при комнатной температуре. При 0°С по каплям добавляли N-амилхлороформиат (3,2 мл), и перемешивали смесь при комнатной температуре в течение 1 суток. Органический слой промывали 1М водным раствором HCl, насыщенным водным бикарбонатом натрия и насыщенным водным хлоридом натрия, сушили над безводным сульфатом натрия и evaporated в условиях вакуума. Остаток очищали методом хроматографии на силикагеле (МеОН/CH2Cl2 = 1/50) с получением соединения 53 (255 мг, 26%) в виде белой твердой пены.
Figure 00000273
Стадия 3. Получение соединения 54.
К раствору соединения 53 (270 мг, 1 экв.) в 1,4-диоксане (10 мл), по каплям добавляли 40% водный раствор CH3NH2 (225,7 мг, 5 экв.). Смесь перемешивали в течение 2 ч при комнатной температуре, а затем концентрировали в условиях вакуума. Остаток подвергали хроматографии на силикагеле (метанол/дихлорметан = 1/40) с получением соединения 54 (220 мг, 81,7%) в виде белой твердой пены.
Figure 00000274
Стадия 4. Получение соединения 55.
К охлажденному на льду раствору соединения 54 (668 мг, 1 экв.) в THF (10 мл) добавляли триэтиламин (1011,9 мг, 10 экв.) и Et3N⋅3HF (806,05 мг, 5 экв.), и перемешивали смесь в течение 2 ч при комнатной температуре. Смесь концентрировали и подвергали хроматографии на силикагеле (MeOH/CH2Cl2 = 1/30) с получением соединения 55 (492 мг, 84%) в виде белой твердой пены.
Figure 00000275
Стадия 5. Получение соединения 56.
К смеси соединения 55 (113 мг, 1 экв.) и PPAL-S (120 мг, 1 экв.) в THF (4 мл) при -10°С по каплям добавляли 1,7 М трет-BuMgCl в THF (0,327 мл, 2,1 экв.). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч, а затем гасили добавлением насыщенного води. раствора NH4Cl. Водную фазу экстрагировали EtOAc, органическую фазу промывали солевым раствором, сушили и концентрировали с получением неочищенного остатка. Остаток подвергали флэш-хроматографии с получением соединения 56 (126 мг, 68,5%) в виде белого твердого вещества. 1Н-ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 8,00 (с, 1Н), 7,10-7,45 (м, 5Н), 6,15-6,20 (д, J=20,0 Гц, 1Н), 5,00-5,25 (с, 1Н), 4,80-4,86 (м, 1Н), 4,45-4,70 (м, 2Н), 4,12-4,19 (м, 3Н), 3,80-3,85 (м, 1Н), 3,04 (с, 3Н), 1,60-1,75 (м, 2Н), 1,10-1,40 (м, 16Н), 0,76-0,80 (т, J=8,0 Гц, 3Н). 31Р-ЯМР (160 МГц, DMSO) δ 3,57. [М+Н]+=696,5.
Пример 26: Получение соединения 60.
Figure 00000276
Стадия 1. Получение соединения 57.
К раствору соединения 6 (20 г, 1 экв.) в CH3CN (100 мл) при 5±5°С последовательно добавляли имидазол (16,6 г) и TIPDSCl2 (28,9 г, 1,5 экв.). Полученный раствор оставляли отстаиваться при комнатной температуре в течение 4 ч. Смесь гасили добавлением воды со льдом и экстрагировали EtOAc. Органический слой промывали водой, насыщенным водным бикарбонатом натрия и насыщенным водным хлоридом натрия, сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали с получением неочищенного остатка (32 г).
Figure 00000277
Стадия 2. Получение соединения 58.
К раствору соединения 57 (9,8 г, 1 экв.) в THF (4 мл) при 0-5°С по каплям добавляли 1,7 М трет-BuMgCl в THF (50 мл, 4,8 экв.). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 0,5 ч, и медленно добавляли н-амилхлороформиат (2,7 г, 1,05 экв.). Смесь перемешивали при 0-5°С в течение 3-4 ч. Смесь гасили добавлением насыщенного води. раствора NH4Cl. Водную фазу экстрагировали EtOAc (200 мл), органическую фазу промывали солевым раствором, сушили и концентрировали с получением соединения 58 (10,7 г) в виде масла.
Figure 00000278
Стадия 3. Получение соединения 59.
К охлажденному на льду раствору соединения 58 (7,3 г, 1 экв.) в THF (100 мл) добавляли триэтиламин (10,119 г) и Et3N⋅3HF (8,6 г, 5 экв.), и перемешивали смесь в течение 1 ч при комнатной температуре. Смесь концентрировали и подвергали хроматографии на силикагеле (MeOH/CH2Cl2 = 1/30) с получением соединения 59 (4,3 г, 91%) в виде белого твердого вещества.
Figure 00000279
Стадия 4. Получение соединения 60.
К смеси соединения 59 (2 г, 1 экв.) и PPAL-S (2,3 г, 1,1 экв.) в THF (40 мл) при -5°С по каплям добавляли 1,7 М трет-BuMgCl в THF (5,6 мл, 2,1 экв.). Смесь перемешивали при -20±5°С в течение 1 ч, а затем гасили добавлением насыщенного водн. раствора NH4Cl. Водную фазу экстрагировали EtOAc, органическую фазу промывали солевым раствором, сушили и концентрировали с получением неочищенного остатка. Остаток подвергали флэш-хроматографии с получением соединения 60 (1,5 г, 47%) в виде белого твердого вещества. 1Н-ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ 7,9 (с, 1Н), 7,1~7,2 (м, 5Н), 6,2 (д, J=20 Гц, 1Н), 5,1 (ушир., 1Н), 4,84 (м, 1Н), 4,49 (м,, 2Н), 4,16 (м, 1Н), 4,13 (м, 2Н), 3,86 (м, 1Н), 3,45 (ушир., 6Н), 1,70 (м, 2Н), 1,26 (м, 4Н), 1,20 (м, 6Н), 1,14 (м, 6Н), 0,93 (м, 3Н). [М+Н]+=710,5.
Биологические данные
Пример 27. Методика анализа и дополнительные биологические данные
Клетки Huh-7 luc/neo ЕТ, несущие бицистронный репликон репортера люциферазы HCV 1b генотипа, высевали при 7,5×103 клеток/мл в дублированные 96-луночные планшеты для параллельного определения противовирусной эффективности (EC50) и цитотоксичности (TC50). Планшеты культивировали в течение 24 часов перед добавлением соединений. Готовили шесть серийных разбавлений в полулогарифмическом масштабе тестируемых изделий (высокая тестируемая концентрация 100,0 мкМ или высокая тестируемая концентрация 1,0 мкМ) и человеческого интерферона-альфа 2b (высокая тестируемая концентрация 10,0 ед./мл) в клеточной культуральной среде и добавляли культивируемые клетки в лунки в трех повторностях для каждого разведения. В шесть лунок тестируемых планшетов помещали среду отдельно в качестве необрабатываемого контроля. После 72 часов культивирования в присутствии соединения один из планшетов использовали для определения цитотоксичности путем окрашивания с помощью ХТТ, а другой - для противовирусной эффективности путем определения активности репортера люциферазы. Собирали данные цитотоксичности и эффективности и импортировали их в специализированную рабочую книгу Excel для определения значений TC50 и EC50. Данные для соединений формул I-VII показаны в приведенной ниже таблице 7. Кроме того, на фиг. 2 показаны кривые ингибирования репликации HCV для соединения 5-2 и софосбувира. Как можно видеть на фиг. 2, соединение 5-2 характеризуется ЕС50=4 нМ, тогда как софосбувир характеризуется ЕС50=53 нМ. По оси y показан вирусный контроль, а по оси x - концентрация лекарственного средства в мкМ. На фиг. 3 показаны кривые ингибирования репликации HCV для соединения 25 и софосбувира. Соединение 25 характеризуется ЕС50=4 нМ, а софосбувир характеризуется ЕС50=53 нМ. По оси y показан вирусный контроль, а по оси x - концентрация лекарственного средства в мкМ. На фиг. 4 показано сравнение внутри анализа активности против HCV для соединений 5-2, 25, 27 и софосбувира. По оси y показан вирусный контроль, а по оси x - концентрация лекарственного средства в мкМ.
Различные генотипы полученных от больных HCV, включающие в себя дикий тип и ассоциированные с устойчивостью варианты, использовали для определения их относительной чувствительности репликации к тестируемым соединениям. Получали репликоновые векторы для тестирования устойчивости (RTV), содержащие геномные области NS5B, с использованием вирусной РНК, выделенной из плазмы инфицированных HCV больных. Каждую область NS5B амплифицировали полимеразной цепной реакцией с обратной транскриптазой и клонировали в репликоновый RTV HCV, который затем переносили с помощью электропорации в клетки Huh-7. После инкубации в отсутствии и присутствии серийно разбавленных тестируемых соединений в течение 72-96 часов измеряли вирусную репликацию по активности люциферазы и определяли 50% ингибиторные концентрации (значения IC50).
В таблице 2 представлены значения IC50 и IC95 для соединений 25, 27, 5-2 и софосбувира в отношении различных клинических изолятов, включающих в себя дикий тип и ассоциированные с устойчивостью варианты.
Все соединения были существенно более эффективными против репликации HCV, чем софосбувир, и ни соединения 25, 27, ни соединение 5-2 не демонстрировали какой-либо признак перекрестной устойчивости у мутантов L159F, L159F и S282T, а также C316N.
Figure 00000280
Figure 00000281
Figure 00000282
Выполняли анализ временной трансфекции для определения чувствительности мутанта S282T дикого типа HCV к тестируемым соединениям. Клетки Huh-7 электропорировали в присутствии РНК, транскрибированной из плазмид с репликоном дикого типа или S282T HCV от промотора Т7. Трансфицированные клетки высевали в 96-луночные планшеты при 7,5×103 клеток на лунку на модифицированную по способу Дульбекко среду Игла. После 24 часов инкубации среду удаляли и заменяли свежей средой, не содержащей или содержащей различные концентрации тестируемых соединений. После дополнительной 96-часовой инкубации измеряли активность против HCV с помощью люциферазной конечной точки с набором для люминесцентного определения репортерного гена Britelite™ Plus (Perkin Elmer, Shelton, CT). дублированные планшеты обрабатывали и инкубировали параллельно для оценки клеточной токсичности с помощью окрашивания тетразолиевым красителем ХТТ.
В таблице 3 представлены значения IC50 и IC95 для соединений 25, 27, 5-2 и софосбувира в отношении репликонов дикого типа и S282T HCV.
Все соединения были существенно более эффективными против репликации HCV, чем софосбувир, и ни соединения 25, 27, ни соединение 5-2 не демонстрировали какой-либо признак перекрестной устойчивости у варианта S282T.
Figure 00000283
Стабильность выбранных соединений в свежей цельной крови человека и во фракции S9 печени человека определяли с помощью инкубации с 10 мкМ тестируемого соединения. После инкубации в течение 0, 30, 60 минут и до 120 минут аликвоты удаляли и сразу же экстрагировали с 3 объемами ледяного метанола/ацетонитрила (1:1, объем/объем). Экстракты центрифугировали, а супернатант анализировали с помощью LC-MS/MS по концентрациям не изменившегося тестируемого соединения и потенциальных метаболитов.
На фиг. 5 показана высокая стабильность соединения 5-2 и всех 2-аминопроизводных в крови человека.
Интересно отметить, что на фиг. 6 показана in vitro зависимость от времени деалкилирования фосфорамидата 2'-дезокси-2'-α-фтор-2'-β-метил-N2-метил-N6-метил-2,6-диаминопуринового нуклеозида до фосфорамидата 2'-дезокси-2'-α-фтор-2'-β-метил-N6-метил-2,6-диаминопуринового нуклеозида с фракцией S9 печени человека. Более того, наблюдали неожиданную более высокую и более экстенсивную скорость отщепления карбаматного фрагмента фракцией S9 печени человека по сравнению с соединением 5-2 и другими его 2-аминопроизводными (фиг. 7).
Пример 28. Анализ NS5B полимеразы HCV (gt1b)
Ингибирование NS5B полимеразы HCV (gt1b) определяли в трех повторностях путем измерения de novo полимеризации в реакционных смесях, содержащих серийные разбавления ТА, in vitro транскрибированную вирусную РНК, комплементарную (-) нитевой 3'UTR области HCV, полимеразу, меченный радиоактивным изотопом рибонуклеотид, 250 мкМ неконкурирующих rNTP и 1 мкМ конкурирующего rNTP. Концентрации ТА, которые обеспечивали 50% ингибирование (IC50), определяли по полученным в результате кривым ингибирования.
Пример 29. Анализ клеток-предшественников костного мозга
Добавляли свежие клетки-предшественники костного мозга (Invitrogen), суспендированные либо в BFU-E-, либо в GM-CSF-специфической культуральной среде, по 105 клеток/лунка в серийные разбавления ТА в трех повторностях в 6-луночных планшетах. После 14-суточных инкубации использовали подсчет колоний для определения значения СС50. Колонии BFU-E подтверждали с использованием бензидинового метода.
Соединения 25, 27 и 5-2 не показали цитотоксичность в отношении стволовых клеток костного мозга in vitro.
Пример 30. Анализ кардиомиоцитов iPS
Кардиомиоциты iPS (Cellular Dynamics) высевали в микролитровые планшеты при 1,5×104 клеток на лунку. После 48-часовой инкубации клетки промывали и добавляли поддерживающую среду, содержащую серийно разбавленный ТА в трех повторностях. После инкубации в течение дополнительных 3 суток измеряли жизнеспособность клеток с помощью окрашивания ХТТ и вычисляли значения CC50.
Соединения 25, 27 и 5-2 не демонстрировали цитотоксичность в отношении кардиомиоцитов iPS in vitro.
Пример 31. Анализы ДНК-полимеразы человека
Ингибирование ДНК-полимераз α, β и γ человека (CHIMERx) определяли в трех повторностях в реакционных смесях серийно разбавленного ТА, 0,05 мМ dCTP, dTTP и dATP, 10 мкКи [32P]-α-dGTP (800 Ки/ммоль), 20 мкг активированной ДНК из зобной железы теленка и дополнительных реагентов, специфических для каждой полимеразы. После 30-минутных инкубации измеряли включение [α-32P]-GTP, а полученные в результате кривые инкубации использовали для вычисления значений IC50.
Трифосфат, β-D-2'-дезокси-2'-α-фтор-2'-β-метил-гуанина трифосфат, а также трифосфатные аналоги соединений 25, 27 и 5-2 не ингибируют ДНК-полимеразы α, β или γ человека.
Пример 32. Совместные культуры гепатоцитов человека
Цитотоксичность и жизнеспособность гепатоцитов оценивали в трех повторностях путем измерения высвобождения ALT, продуцирования мочевины, секреции альбумина и содержания АТФ в клетках микроструктурированной совместной культуры гепатоцитов (HepatoPac®, Hepregen Corporation), полученных путем высевания криоконсервированных гепатоцитов женщины (один донор) и фибробластов мыши 3Т3 J2 в микротитрационные планшеты согласно процедурам, установленным Hepregen. Культуральные среды заменяли свежими средами, содержащими ТА, тестируемое изделие, (0, 1, 10 или 30 мкМ) каждые 2 или 3 суток до дня 16. Использованные культуральные среды анализировали на предмет ALT и содержания мочевины в дни 2, 5, 7, 9, 12, 16 и 21, а на предмет содержания альбумина в дни 2, 5, 7 и 9. Клеточные уровни АТФ измеряли в дни 9 и 21. Сигналы АТФ в содержащих только стромальные клетки контрольных культурах (мышиные фибробласты 3Т3) вычитали из сигналов совместных культур HepatoPac человека с получением гепатоцит-специфических эффектов. См. приведенные ниже таблицы 4, 5 и 6.
Соединение 5-2 при концентрациях до 30 мкМ не демонстрировало признаков цитотоксичности, измеряемой с помощью высвобождения ALT, секреции альбумина, продуцирования мочевины и содержания АТФ в клетках, при инкубировании до 12 суток с гепатоцитами человека в микроструктурированной совместной культуре. Небольшие признаки цитотоксичности, обнаруживаемые при длительном воздействии (до 21 суток культивирования), были значительно меньше, чем наблюдаемые с софосбувиром. См. приведенные ниже таблицы 4, 5 и 6.
INX-189 был высоко цитотоксичным по отношению к совместно культивируемым гепатоцитам человека, демонстрируя пониженную секрецию альбумина уже в день 2 и цитотоксичность по всем показателям. Софосбувир демонстрировал более высокую цитотоксичность, чем АТ-511 при тех же условиях.
Figure 00000284
Figure 00000285
Figure 00000286
Пример 33. Метаболические исследования
Метаболизм соединений 25, 27 и 5-2 при концентрации 10 мкМ изучали в свежих первичных культурах гепатоцитов человека, собаки и мыши. Высеянные гепатоциты людей (XenoTech, обоих полов, объединенные от 10 доноров), самца собаки породы бигль (BioreclamationIVT) и самцов мышей ICR/CD-1 (BioreclamationIVT, 8 доноров) в 6-луночных планшетах, покрытых матригелем, инкубировали в синглете с 10 мкМ ТА. Через 2, 4, 6, 8 или 24 часа количественно оценивали внутриклеточные уровни нуклеотидных пролекарств и их потенциальных метаболитов (пролекарств, монофосфатов, трифосфатов и нуклеозидов) с помощью LC-MS/MS. Концентрации ниже нижнего предела количественного определения (1,5 пмоль/106 клеток для пролекарств, монофосфатов и нуклеозидов и 12 пмоль/106 клеток для трифосфатов) экстраполировали из стандартных кривых.
Соединение трифосфат β-D-2'-дезокси-2'-α-фтор-2'-β-метил-гуанина является преобладающим метаболитом соединений 25, 27 и 5-2, наблюдаемым в культивируемых гепатоцитах человека, и является эффективным ингибитором NS5B полимеразы HCV (gt1b) с IC50 0,15 мкМ.
На фиг. 8 показаны преобладающие метаболиты соединения 25 в гепатоцитах человека.
На фиг. 9 показаны преобладающие метаболиты соединения 27 в гепатоцитах человека.
На фиг. 10 показаны преобладающие метаболиты соединения 5-2 в гепатоцитах человека.
На фиг. 11 показаны пути активации для соединений 25, 27 и 5-2. Как можно видеть, соединения 25, 27 и 5-2 превращаются в соответствующие им монофосфатные аналоги, которые затем метаболизируются в общий МР аналог - монофосфат β-D-2'-дезокси-2'-α-фтор-2'-β-метил-гуанина (соединение 61). Монофосфат затем постадийно фосфорилируется до активного трифосфата - трифосфата β-D-2'-дезокси-2'-α-фтор-2'-β-метил-гуанина (соединения 62).
Пример 34. Контроли
INX-189 (INX-08189/BMS-986094) и софосбувир использовали в качестве контролей в приведенных выше примерах.
Два наиболее эффективных нуклеотидных пролекарства - соединения 25 и 27 -демонстрировали высокую селективность со значениями СС50 более 100 мкМ в отношении клеток Huh-7, стволовых клеток костного мозга человека и кардиомиоцитов человека. Не наблюдали ингибирование ДНК-полимеразы α, β или γ человека, активность в отношении других содержащих РНК или ДНК вирусов и токсичность в отношении всех линий клеток-хозяев при концентрациях до 100 мкМ.
Таблица 7 представляет собой таблицу, иллюстрирующую тестируемые соединения в анализе репликонов HCV вместе с результатами EC50/EC95 (мкМ) и CC50 (мкМ).
Figure 00000287
Figure 00000288
Figure 00000289
Figure 00000290
Figure 00000291
Figure 00000292
Figure 00000293
Figure 00000294
Figure 00000295
β-D-2'-D-2'-α-фтор-2'-β-C-замещенные-2-модифицированные-N6-замещенные пуриновые нуклеотиды, описываемые в настоящем документе, демонстрируют значительную активность против вируса HCV. Соединения в соответствии с настоящим изобретением анализировали на предмет желаемой относительной активности с использованием хорошо известных и традиционных анализов, найденных в литературе.
Например, активность против HCV и цитотоксичность соединений могут быть измерены с помощью системы анализа репликонов субгеномной РНК HCV в клетках Huh7 ЕТ. (См. Korba, et al., Antiviral Research 2008, 77, 56). Результаты могут быть кратко описаны в сравнении с положительным контролем - 2'-С-Ме-цитозином {2'-С-Ме-С} (Pierra, et al., Journal of Medicinal Chemistry 2006, 49, 6614).
Другой in vitro анализ на предмет активности против вируса гепатита С описывается Stuyver, et al. в патенте США №7718790, принадлежащем Pharmasset, Inc.
Настоящее раскрытие описано со ссылкой на варианты осуществления настоящего изобретения. В соответствии с изложенным в настоящем документе специалист в данной области сможет модифицировать настоящее изобретение для достижения желаемой цели, и такие вариации рассматриваются в объеме настоящего изобретения.

Claims (39)

1. Соединение, выбранное из соединений формул:
Figure 00000296
,
Figure 00000297
и
Figure 00000298
или его фармацевтически приемлемая соль.
2. Фармацевтическая композиция для лечения HCV у хозяина, содержащая эффективное количество соединения по п. 1 в фармацевтически приемлемом носителе.
3. Фармацевтическая композиция по п. 2 в пероральной дозированной форме.
4. Фармацевтическая композиция по п. 3 в таблетке или капсуле.
5. Способ терапевтического лечения HCV у хозяина, включающий введение терапевтически эффективного количества соединения по п. 1.
6. Способ по п. 5, в котором хозяином является человек.
7. Применение соединения по п. 1 для лечения HCV у хозяина.
8. Применение по п. 7, в котором хозяином является человек.
9. Применение соединения по п. 1 в получении лекарственного средства для лечения HCV у хозяина.
10. Применение по п. 9, в котором хозяином является человек.
11. Соединение формулы:
Figure 00000299
или его фармацевтически приемлемая соль, где соединение по меньшей мере на 90% свободно от противоположного R-энантиомера по фосфору.
12. Соединение по п. 11 или его фармацевтически приемлемая соль, где соединение по меньшей мере на 98% свободно от противоположного R-энантиомера по фосфору.
13. Соединение по п. 11 или его фармацевтически приемлемая соль, где соединение по меньшей мере на 99% свободно от противоположного R-энантиомера по фосфору.
14. Соединение формулы:
Figure 00000300
или его фармацевтически приемлемая соль, где соединение по меньшей мере на 90% свободно от противоположного S-энантиомера по фосфору.
15. Соединение по п. 14 или его фармацевтически приемлемая соль, где соединение по меньшей мере на 98% свободно от противоположного S-энантиомера по фосфору.
16. Соединение по п. 14 или его фармацевтически приемлемая соль, где соединение по меньшей мере на 99% свободно от противоположного S-энантиомера по фосфору.
17. Фармацевтическая композиция для лечения HCV у хозяина, содержащая эффективное терапевтическое количество соединения по любому из пп. 11-13 или его фармацевтически приемлемой соли в фармацевтически приемлемом носителе.
18. Фармацевтическая композиция для лечения HCV у хозяина, содержащая эффективное терапевтическое количество соединения по любому из пп. 14-16 или его фармацевтически приемлемой соли в фармацевтически приемлемом носителе.
19. Фармацевтическая композиция по любому из пп. 17, 18, которая представлена в пероральной дозированной форме.
20. Фармацевтическая композиция по п. 19, где пероральная дозированная форма представляет собой твердую дозированную форму.
21. Фармацевтическая композиция по п. 20, где твердая дозированная форма представляет собой таблетку или капсулу.
22. Фармацевтическая композиция по п. 19, где пероральная дозированная форма представляет собой жидкую дозированную форму.
23. Фармацевтическая композиция по п. 22, где жидкая дозированная форма представляет собой суспензию или раствор.
24. Фармацевтическая композиция по любому из пп. 17, 18, которая представлена во внутривенном составе.
25. Фармацевтическая композиция по любому из пп. 17, 18, которая представлена в парентеральном составе.
26. Способ терапевтического лечения HCV у хозяина, включающий введение терапевтически эффективного количества соединения по любому из пп. 11-16.
27. Способ по п. 26, в котором хозяином является человек.
28. Применение соединения по любому из пп. 11-16 для лечения HCV у хозяина.
29. Применение по п. 28, в котором хозяином является человек.
30. Применение соединения по любому из пп. 11-16 в получении лекарственного средства для лечения HCV у хозяина.
31. Применение по п. 30, в котором хозяином является человек.
RU2017133011A 2015-03-06 2016-03-07 β-D-2'-ДЕЗОКСИ-2'-α-ФТОР-2'-β-С-ЗАМЕЩЕННЫЕ-2-МОДИФИЦИРОВАННЫЕ-N6-ЗАМЕЩЕННЫЕ ПУРИНОВЫЕ НУКЛЕОТИДЫ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ВЫЗВАННЫХ HCV ЗАБОЛЕВАНИЙ RU2764767C2 (ru)

Applications Claiming Priority (7)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201562129319P 2015-03-06 2015-03-06
US62/129,319 2015-03-06
US201562253958P 2015-11-11 2015-11-11
US62/253,958 2015-11-11
US201662276597P 2016-01-08 2016-01-08
US62/276,597 2016-01-08
PCT/US2016/021276 WO2016144918A1 (en) 2015-03-06 2016-03-07 β-D-2'-DEOXY-2'α-FLUORO-2'-β-C-SUBSTITUTED-2-MODIFIED-N6-SUBSTITUTED PURINE NUCLEOTIDES FOR HCV TREATMENT

Publications (3)

Publication Number Publication Date
RU2017133011A RU2017133011A (ru) 2019-04-09
RU2017133011A3 RU2017133011A3 (ru) 2019-09-13
RU2764767C2 true RU2764767C2 (ru) 2022-01-21

Family

ID=56850466

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2017133011A RU2764767C2 (ru) 2015-03-06 2016-03-07 β-D-2'-ДЕЗОКСИ-2'-α-ФТОР-2'-β-С-ЗАМЕЩЕННЫЕ-2-МОДИФИЦИРОВАННЫЕ-N6-ЗАМЕЩЕННЫЕ ПУРИНОВЫЕ НУКЛЕОТИДЫ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ВЫЗВАННЫХ HCV ЗАБОЛЕВАНИЙ

Country Status (21)

Country Link
US (11) US9828410B2 (ru)
EP (1) EP3265102A4 (ru)
JP (3) JP6776273B2 (ru)
KR (2) KR102363946B1 (ru)
CN (2) CN112209980B (ru)
AU (5) AU2016229966B2 (ru)
CA (2) CA3182565A1 (ru)
CO (1) CO2017010162A2 (ru)
EA (1) EA037098B1 (ru)
GE (3) GEP20217282B (ru)
HK (1) HK1247829A1 (ru)
IL (3) IL295418B2 (ru)
MX (2) MX2017011386A (ru)
MY (1) MY190867A (ru)
PH (1) PH12017501598A1 (ru)
RU (1) RU2764767C2 (ru)
SA (1) SA517382236B1 (ru)
SG (1) SG11201706841PA (ru)
UA (1) UA124966C2 (ru)
WO (1) WO2016144918A1 (ru)
ZA (1) ZA201705852B (ru)

Families Citing this family (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2015017713A1 (en) 2013-08-01 2015-02-05 Idenix Pharmaceuticals, Inc. D-amino acid phosphoramidate pronucleotides of halogeno pyrimidine compounds for liver disease
MY190867A (en) * 2015-03-06 2022-05-13 Atea Pharmaceuticals Inc ? -d-2'-deoxy-2'-?-fluoro-2'- ? -c-substituted-2-modified-n6-substituted purine nucleotides for hcv treatment
US10202412B2 (en) 2016-07-08 2019-02-12 Atea Pharmaceuticals, Inc. β-D-2′-deoxy-2′-substituted-4′-substituted-2-substituted-N6-substituted-6-aminopurinenucleotides for the treatment of paramyxovirus and orthomyxovirus infections
JP2019524795A (ja) * 2016-08-12 2019-09-05 ヤンセン バイオファーマ インク． 置換ヌクレオシド、ヌクレオチド、及びそのアナログ
EA037868B1 (ru) 2016-09-07 2021-05-28 Атеа Фармасьютикалс, Инк. 2'-замещенные-n6-замещенные пуриновые нуклеотиды для лечения вызванных рнк-вирусом заболеваний
CN106432327A (zh) * 2016-09-14 2017-02-22 江苏福瑞生物医药有限公司 一种索非布韦关键中间体的制备方法
JP7066728B2 (ja) 2017-02-01 2022-05-13 アテア ファーマシューティカルズ， インコーポレイテッド Ｃ型肝炎ウイルスの治療のためのヌクレオチドヘミ硫酸塩
CN112351799A (zh) * 2018-04-10 2021-02-09 阿堤亚制药公司 具有硬化的hcv感染患者的治疗
WO2021173713A1 (en) 2020-02-27 2021-09-02 Atea Pharmaceuticals, Inc. Highly active compounds against covid-19
US10874687B1 (en) 2020-02-27 2020-12-29 Atea Pharmaceuticals, Inc. Highly active compounds against COVID-19
KR20230053640A (ko) * 2020-08-19 2023-04-21 아테아 파마슈티컬즈, 인크. 선택된 퓨린 포스포르아미데이트의 입체선택적 제조
CN112961198B (zh) * 2021-02-24 2022-03-25 南京欧信医药技术有限公司 一种嘌呤核苷酸中间体的制备方法
TW202348228A (zh) 2022-02-24 2023-12-16 德商艾斯巴赫生物有限公司 病毒組合療法

Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20040063658A1 (en) * 2002-05-06 2004-04-01 Roberts Christopher Don Nucleoside derivatives for treating hepatitis C virus infection
WO2008121634A2 (en) * 2007-03-30 2008-10-09 Pharmasset, Inc. Nucleoside phosphoramidate prodrugs
RU2358979C2 (ru) * 2003-05-30 2009-06-20 Фармассет, Инк. Модифицированные фторированные аналоги нуклеозида
US20110257121A1 (en) * 2010-03-31 2011-10-20 Pharmasset, Inc. Purine nucleoside phosphoramidate
US20120135951A1 (en) * 2008-12-09 2012-05-31 Schinazi Ph D Raymond F 3'-azido purine nucleotide prodrugs for treatment of viral infections
WO2012158811A2 (en) * 2011-05-19 2012-11-22 Rfs Pharma, Llc Purine monophosphate prodrugs for treatment of viral infections
CN103980332A (zh) * 2013-12-09 2014-08-13 南京迈勒克生物技术研究中心 2′-氟-2′-(氟甲基)-2′-脱氧核苷类化合物及其磷酸酯潜药

Family Cites Families (220)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4924116A (en) 1988-01-19 1990-05-08 Honeywell Inc. Feedback source coupled FET logic
KR900702573A (ko) 1988-06-10 1990-12-07 버나드 엠. 길레스피에 개량된 태양전지용 접촉구의 제조방법
ATE114736T1 (de) 1988-07-08 1994-12-15 Famcy Steel Corp Anwendung von einer zweiphasigen eisen-mangan- aluminium-kohlenstofflegierung mit hoher dämpfungsfähigkeit.
WO1990012427A1 (en) 1989-03-30 1990-10-18 Tellio Joseph Grilli Energy monitor for storage cells
DE69015068T2 (de) 1989-04-04 1995-07-27 Koa Oil Co Ltd Luftbatterie.
CA2297294C (en) 1989-05-15 2005-11-08 Institute Of Organic Chemistry And Biochemistry Of The Academy Of Sciences Of The Czech Republic Phosphonomethoxymethylpurine/pyrimidine derivatives
US5015790A (en) 1989-12-13 1991-05-14 E. I. Du Pont De Nemours And Company 1,1,2-trifluoro-6-iodo-1-hexene, 1,1,2-trifluoro-1,5-hexadiene, and processes therefore
US5233031A (en) 1991-09-23 1993-08-03 University Of Rochester Phosphoramidate analogs of 2'-deoxyuridine
IT1249732B (it) 1991-11-26 1995-03-09 Angeletti P Ist Richerche Bio Oligonucleotidi antisenso.
US5977061A (en) 1995-04-21 1999-11-02 Institute Of Organic Chemistry And Biochemistry Of The Academy Of Sciences Of The Czech Republic N6 - substituted nucleotide analagues and their use
US7517858B1 (en) 1995-06-07 2009-04-14 The Regents Of The University Of California Prodrugs of pharmaceuticals with improved bioavailability
ATE271063T1 (de) 1996-10-16 2004-07-15 Icn Pharmaceuticals Purin-l-nukleoside, deren analoga und verwendungen
ZA986614B (en) 1997-07-25 1999-01-27 Gilead Sciences Nucleotide analog composition
BR9908270A (pt) 1998-02-25 2004-06-29 Univ Emory 2-fluoro-nucleosìdeos, composições farmacêuticas e seus usos
CA2352749A1 (en) 1998-11-30 2000-06-08 Novozymes A/S Anti-dandruff composition comprising an antifungal polypeptide
CA2362662A1 (en) 1999-02-12 2000-08-17 Glaxo Group Limited Phosphoramidate, and mono-, di-, and tri-phosphate esters of (1r, cis)-4-(6-amino-9h-purin-9-yl)-2-cyclopentene-1-methanol as antiviral agents
CN1414854B (zh) 1999-12-03 2015-08-19 加利福尼亚大学圣地亚哥分校董事会 膦酸酯化合物
DE60136620D1 (de) 2000-04-13 2009-01-02 Pharmasset Inc 3 oder 2 hydroxymethyl substituierte nucleoside derivate und ihre verwendung zur behandlung von virusinfektionen
MY164523A (en) 2000-05-23 2017-12-29 Univ Degli Studi Cagliari Methods and compositions for treating hepatitis c virus
NZ547204A (en) 2000-05-26 2008-01-31 Idenix Cayman Ltd Methods and compositions for treating flaviviruses and pestiviruses
EP2145965A1 (en) 2000-10-18 2010-01-20 Pharmasset, Inc. Multiplex quantification of nucleic acids in diseased cells
CN1646141B (zh) 2000-10-18 2014-06-25 吉利德制药有限责任公司 用于治疗病毒感染和异常细胞增殖的修饰核苷类化合物
US7105499B2 (en) 2001-01-22 2006-09-12 Merck & Co., Inc. Nucleoside derivatives as inhibitors of RNA-dependent RNA viral polymerase
MXPA03006514A (es) 2001-01-22 2004-12-02 Merck & Co Inc Derivados de nucleosidos como inhibidores de polimerasa de acido ribonucleico viral dependiente de acido ribonucleico.
US8481712B2 (en) 2001-01-22 2013-07-09 Merck Sharp & Dohme Corp. Nucleoside derivatives as inhibitors of RNA-dependent RNA viral polymerase
GB0112617D0 (en) 2001-05-23 2001-07-18 Hoffmann La Roche Antiviral nucleoside derivatives
GB0114286D0 (en) 2001-06-12 2001-08-01 Hoffmann La Roche Nucleoside Derivatives
EP1478322A4 (en) 2001-06-22 2007-08-08 Pharmasset Ltd Beta 2'-OR 3'-HALONUCLEOSIDE
AU2002330154A1 (en) 2001-09-28 2003-04-07 Centre National De La Recherche Scientifique Methods and compositions for treating hepatitis c virus using 4'-modified nucleosides
AU2002351077A1 (en) 2001-11-05 2003-05-19 Exiqon A/S Oligonucleotides modified with novel alpha-l-rna analogues
US7388002B2 (en) 2001-11-14 2008-06-17 Biocryst Pharmaceuticals, Inc. Nucleosides, preparation thereof and use as inhibitors of RNA viral polymerases
AU2002365234B2 (en) 2001-12-14 2009-01-29 Pharmasset Inc N4-acylcytosine nucleosides for treatment of viral infections
AU2002360697B2 (en) 2001-12-20 2009-04-23 Beth Israel Deaconess Medical Center Treatment of EBV and KHSV infection and associated abnormal cellular proliferation
WO2003062256A1 (en) 2002-01-17 2003-07-31 Ribapharm Inc. 2'-beta-modified-6-substituted adenosine analogs and their use as antiviral agents
AU2003217863B9 (en) 2002-02-28 2009-10-29 Biota Scientific Management Pty Ltd Nucleotide mimics and their prodrugs
NZ537662A (en) 2002-06-28 2007-10-26 Idenix Cayman Ltd 2'-C-methyl-3'-O-L-valine ester ribofuranosyl cytidine for treatment of flaviviridae infections
AU2003248748A1 (en) 2002-06-28 2004-01-19 Idenix (Cayman) Limited 2'-c-methyl-3'-o-l-valine ester ribofuranosyl cytidine for treatment of flaviviridae infections
WO2004002999A2 (en) 2002-06-28 2004-01-08 Idenix (Cayman) Limited Modified 2' and 3' -nucleoside produgs for treating flaviridae infections
PL374792A1 (en) 2002-06-28 2005-10-31 Idenix (Cayman) Limited 2' and 3'-nucleoside prodrugs for treating flaviviridae infections
US7608600B2 (en) 2002-06-28 2009-10-27 Idenix Pharmaceuticals, Inc. Modified 2′ and 3′-nucleoside prodrugs for treating Flaviviridae infections
WO2004009020A2 (en) 2002-07-24 2004-01-29 Merck & Co., Inc. Pyrrolopyrimidine thionucleoside analogs as antivirals
US20040067877A1 (en) 2002-08-01 2004-04-08 Schinazi Raymond F. 2', 3'-Dideoxynucleoside analogues for the treatment or prevention of Flaviviridae infections
CA2494340C (en) 2002-08-01 2012-01-24 Pharmasset Inc. Compounds with the bicyclo[4.2.1]nonane system for the treatment of flaviviridae infections
AU2003259735A1 (en) 2002-08-08 2004-02-25 Sirna Therapeutics, Inc. Small-mer compositions and methods of use
KR20050088079A (ko) 2002-11-15 2005-09-01 이데닉스 (케이만) 리미티드 2'-분지형 뉴클레오시드 및 플라비비리다에 돌연변이
TWI294882B (en) 2002-12-09 2008-03-21 Hoffmann La Roche Anhydrous crystalline azido cytosine hemisulfate derivative
AR043006A1 (es) 2003-02-12 2005-07-13 Merck & Co Inc Proceso para preparar ribonucleosidos ramificados
EP1613261A4 (en) 2003-04-09 2011-01-26 Novo Nordisk As INTRA-CELLULAR FORMATION OF PEPTIDE CONJUGATES
ATE490788T1 (de) 2003-04-25 2010-12-15 Gilead Sciences Inc Antivirale phosphonate analoge
US20040259934A1 (en) 2003-05-01 2004-12-23 Olsen David B. Inhibiting Coronaviridae viral replication and treating Coronaviridae viral infection with nucleoside compounds
US20040229839A1 (en) 2003-05-14 2004-11-18 Biocryst Pharmaceuticals, Inc. Substituted nucleosides, preparation thereof and use as inhibitors of RNA viral polymerases
WO2004106356A1 (en) 2003-05-27 2004-12-09 Syddansk Universitet Functionalized nucleotide derivatives
EP1644395B1 (en) 2003-06-19 2006-11-22 F. Hoffmann-La Roche Ag Processes for preparing 4'azido nucleoside derivatives
GB0317009D0 (en) 2003-07-21 2003-08-27 Univ Cardiff Chemical compounds
PL1658302T3 (pl) 2003-07-25 2011-03-31 Idenix Pharmaceuticals Inc Analogi nukleozydów purynowych do leczenia chorób spowodowanych przez Flaviviridae obejmujących zapalenie wątroby typu C
DE10335061B4 (de) 2003-07-31 2005-11-17 Wacker-Chemie Gmbh Verfahren zur Herstellung von OH-geschützten [4-(2,6-damino-9H-purin-9-yl)-1,3-dioxolan-2-yl]methanol-Derivaten
MXPA06002198A (es) 2003-08-27 2007-08-14 Biota Scient Management Nucleosidos o nucleotidos triciclicos novedosos como agentes terapeuticos.
GB0401088D0 (en) 2004-01-19 2004-02-18 Univ Cardiff Phosphoramidate derivatives
WO2005090370A1 (en) 2004-02-05 2005-09-29 The Regents Of The University Of California Pharmacologically active agents containing esterified phosphonates and methods for use thereof
US20050182252A1 (en) 2004-02-13 2005-08-18 Reddy K. R. Novel 2'-C-methyl nucleoside derivatives
WO2005123087A2 (en) 2004-06-15 2005-12-29 Merck & Co., Inc. C-purine nucleoside analogs as inhibitors of rna-dependent rna viral polymerase
US7560434B2 (en) 2004-06-22 2009-07-14 Biocryst Pharmaceuticals, Inc. AZA nucleosides, preparation thereof and use as inhibitors of RNA viral polymerases
US20070265222A1 (en) 2004-06-24 2007-11-15 Maccoss Malcolm Nucleoside Aryl Phosphoramidates for the Treatment of Rna-Dependent Rna Viral Infection
US20050287892A1 (en) 2004-06-29 2005-12-29 Willie Fouse Nonwoven-elastomeric laminate with improved bonding between elastomer and nonwoven web
CN101023094B (zh) 2004-07-21 2011-05-18 法莫赛特股份有限公司 烷基取代的2-脱氧-2-氟代-d-呋喃核糖基嘧啶和嘌呤及其衍生物的制备
RU2433124C2 (ru) 2004-09-14 2011-11-10 Фармассет, Инк. Способ получения 2'-фтор-2'-алкилзамещенных или других замещенных рибофуранозилпиримидинов и пуринов и их производных
WO2006050161A2 (en) 2004-10-29 2006-05-11 Biocryst Pharmaceuticals, Inc. Therapeutic furopyrimidines and thienopyrimidines
EP1827460A4 (en) 2004-12-09 2012-03-14 Univ Minnesota NUCLEOSIDE WITH ANTIVIRAL AND ANTI-CANCER EFFECT
BRPI0518984A2 (pt) 2004-12-10 2008-12-16 Univ Emory anÁlogos de nucleosÍdeo de ciclobutil substituÍdos em 2' e 3' para tratamento de infecÇÕes virais e proliferaÇço celular anormal
WO2006063717A2 (en) 2004-12-16 2006-06-22 Febit Biotech Gmbh Polymerase-independent analysis of the sequence of polynucleotides
US8802840B2 (en) 2005-03-08 2014-08-12 Biota Scientific Management Pty Ltd. Bicyclic nucleosides and nucleotides as therapeutic agents
GB0505781D0 (en) 2005-03-21 2005-04-27 Univ Cardiff Chemical compounds
WO2006102533A2 (en) 2005-03-23 2006-09-28 Neopharm, Inc. Pharmaceutically active lipid-based formulation of nucleoside-lipid conjugates
US7514410B2 (en) 2005-03-29 2009-04-07 Biocryst Pharmaceuticals, Inc. Hepatitis C therapies
WO2006130217A2 (en) 2005-04-01 2006-12-07 The Regents Of The University Of California Substituted phosphate esters of nucleoside phosphonates
WO2006121820A1 (en) 2005-05-05 2006-11-16 Valeant Research & Development Phosphoramidate prodrugs for treatment of viral infection
US7632821B2 (en) 2005-08-09 2009-12-15 Merck & Co., Inc. Ribonucleoside cyclic acetal derivatives for the treatment of RNA-dependent RNA viral infection
US20090118223A1 (en) 2005-08-12 2009-05-07 Erion Mark D Novel 2'-c-methyl and 4'c-methyl nucleoside derivatives
CN101287472B (zh) 2005-08-15 2011-10-12 弗·哈夫曼-拉罗切有限公司 抗病毒的4'-取代前核苷酸的氨基磷酸酯类化合物
US7888330B2 (en) 2005-11-09 2011-02-15 Wayne State University Phosphoramidate derivatives of FAU
WO2007095269A2 (en) 2006-02-14 2007-08-23 Merck & Co., Inc. Nucleoside aryl phosphoramidates for the treatment of rna-dependent rna viral infection
US8895531B2 (en) 2006-03-23 2014-11-25 Rfs Pharma Llc 2′-fluoronucleoside phosphonates as antiviral agents
WO2007130783A2 (en) 2006-05-03 2007-11-15 Chimerix, Inc. Metabolically stable alkoxyalkyl esters of antiviral or antiproliferative phosphonates, nucleoside phosphonates and nucleoside phosphates
WO2008005542A2 (en) 2006-07-07 2008-01-10 Gilead Sciences, Inc., Antiviral phosphinate compounds
GB0614947D0 (en) 2006-07-27 2006-09-06 Isis Innovation Epitope reduction therapy
CA2666098C (en) 2006-10-10 2012-09-25 Steven D. Axt Preparation of nucleosides ribofuranosyl pyrimidines
PL216525B1 (pl) 2006-10-17 2014-04-30 Ct Badań Molekularnych I Makromolekularnych Polskiej Akademii Nauk 5'-O-[(N-acylo)amidoditiofosforano] nukleozydy oraz sposób wytwarzania 5'-O-[(N-acylo)amidofosforano]-,5'-O-[(N-acylo)amidotiofosforano]-, 5'-O-[(N-acylo)amidoditiofosforano]nukleozydów
GB0623493D0 (en) 2006-11-24 2007-01-03 Univ Cardiff Chemical compounds
AU2007338899A1 (en) 2006-12-20 2008-07-03 Istituto Di Ricerche Di Biologia Molecolare P. Angeletti S.P.A. Nucleoside cyclic phosphoramidates for the treatment of RNA-dependent RNA viral infection
US20080261913A1 (en) 2006-12-28 2008-10-23 Idenix Pharmaceuticals, Inc. Compounds and pharmaceutical compositions for the treatment of liver disorders
EP2124555B1 (en) 2007-01-05 2015-07-08 Merck Sharp & Dohme Corp. Nucleoside aryl phosphoramidates for the treatment of rna-dependent rna viral infection
CA2674589A1 (en) 2007-01-12 2008-07-24 Biocryst Pharmaceuticals, Inc. Antiviral nucleoside analogs
AU2008210411A1 (en) 2007-01-31 2008-08-07 Alios Biopharma, Inc. 2-5A derivatives and their use as anti-cancer, anti-viral and anti-parasitic agents
WO2008100447A2 (en) 2007-02-09 2008-08-21 Gilead Sciences, Inc. Nucleoside analogs for antiviral treatment
ES2393038T3 (es) 2007-05-10 2012-12-18 Biocryst Pharmaceuticals, Inc. Compuestos de tretrahidrofuro[3,4-D]dioxolano para su utlilización en el tratamiento de las infecciones víricas y del cáncer
US20100279969A1 (en) 2007-05-14 2010-11-04 Rfs Pharma, Llc Azido purine nucleosides for treatment of viral infections
SI2014771T1 (sl) 2007-06-25 2015-04-30 Anadys Pharmaceuticals, Inc. Kontinuiran postopek encimske hidrolize
GB0712494D0 (en) 2007-06-27 2007-08-08 Isis Innovation Substrate reduction therapy
US20090060872A1 (en) 2007-08-31 2009-03-05 Idenix Pharmaceuticals, Inc. Phosphadiazine hcv polymerase inhibitors v
US20090318380A1 (en) 2007-11-20 2009-12-24 Pharmasset, Inc. 2',4'-substituted nucleosides as antiviral agents
US20090176732A1 (en) 2007-12-21 2009-07-09 Alios Biopharma Inc. Protected nucleotide analogs
WO2009086201A1 (en) 2007-12-21 2009-07-09 Alios Biopharma, Inc. 2-5a analogs and their use as anti-cancer, anti-viral and anti- paras iti c agents
TW200942243A (en) 2008-03-05 2009-10-16 Biocryst Pharm Inc Antiviral therapeutic agents
EP3042660A3 (en) 2008-04-15 2016-10-26 RFS Pharma, LLC. Nucleoside derivatives for treatment of caliciviridae infections, including norovirus infections
PT2280973E (pt) 2008-04-23 2013-02-04 Gilead Sciences Inc Análogos de carba-nucleósido para tratamento antiviral
US8173621B2 (en) * 2008-06-11 2012-05-08 Gilead Pharmasset Llc Nucleoside cyclicphosphates
AR072428A1 (es) 2008-07-01 2010-08-25 Medivir Ab Derivados de pirimidin nucleotidos inhibidores de polimerasas del virus de la hepatitis c (vhc), composiciones farmaceuticas que los contienen y metodo para prepararlos.
WO2010002877A2 (en) 2008-07-03 2010-01-07 Biota Scientific Management Bycyclic nucleosides and nucleotides as therapeutic agents
TW201020245A (en) 2008-08-20 2010-06-01 Schering Corp Ethynyl-substituted pyridine and pyrimidine derivatives and their use in treating viral infections
AU2009282574B2 (en) 2008-08-20 2014-08-21 Merck Sharp & Dohme Corp. Ethenyl-substituted pyridine and pyrimidine derivatives and their use in treating viral infections
US8470834B2 (en) 2008-08-20 2013-06-25 Merck Sharp & Dohme Corp. AZO-substituted pyridine and pyrimidine derivatives and their use in treating viral infections
AU2009282567B2 (en) 2008-08-20 2014-10-02 Merck Sharp & Dohme Corp. Substituted pyridine and pyrimidine derivatives and their use in treating viral infections
PA8852101A1 (es) 2008-12-08 2010-07-27 Medivir Ab Nucleótidos uracil ciclopropílicos
EA201100851A1 (ru) 2008-12-23 2012-04-30 Фармассет, Инк. Аналоги нуклеозидов
CL2009002206A1 (es) 2008-12-23 2011-08-26 Gilead Pharmasset Llc Compuestos derivados de pirrolo -(2-3-d]-pirimidin-7(6h)-tetrahidrofuran-2-il fosfonamidato, composicion farmaceutica; y su uso en el tratamiento de enfermedades virales.
NZ593648A (en) 2008-12-23 2013-09-27 Gilead Pharmasset Llc Nucleoside phosphoramidates
PE20120013A1 (es) * 2009-01-09 2012-02-02 Univ Cardiff Fosforamidato derivados de guanosina compuestos nucleosidos para tratamiento de infecciones virales
WO2010091386A2 (en) 2009-02-06 2010-08-12 Rfs Pharma, Llc Purine nucleoside monophosphate prodrugs for treatment of cancer and viral infections
EA025085B1 (ru) 2009-02-10 2016-11-30 Джилид Сайэнс, Инк. Карбануклеозидные аналоги для противовирусного лечения
AR075584A1 (es) 2009-02-27 2011-04-20 Intermune Inc COMPOSICIONES TERAPEUTICAS QUE COMPRENDEN beta-D-2'-DESOXI-2'-FLUORO-2'-C-METILCITIDINA Y UN DERIVADO DE ACIDO ISOINDOL CARBOXILICO Y SUS USOS. COMPUESTO.
JP5690286B2 (ja) 2009-03-04 2015-03-25 イデニク プハルマセウティカルス，インコーポレイテッド ホスホチオフェン及びホスホチアゾールｈｃｖポリメラーゼ阻害剤
KR20110128947A (ko) 2009-03-20 2011-11-30 앨리오스 바이오파마 인크. 치환된 뉴클레오시드 및 뉴클레오티드 유사체
WO2010108135A1 (en) 2009-03-20 2010-09-23 Alios Biopharma, Inc. Protected nucleotide analogs
JO3027B1 (ar) 2009-05-14 2016-09-05 Janssen Products Lp نيوكليوسيدات يوراسيل سبيرواوكسيتان
US8618076B2 (en) 2009-05-20 2013-12-31 Gilead Pharmasset Llc Nucleoside phosphoramidates
TWI576352B (zh) 2009-05-20 2017-04-01 基利法瑪席特有限責任公司 核苷磷醯胺
EP2264169A1 (en) 2009-06-15 2010-12-22 Qiagen GmbH Modified siNA
US20100331397A1 (en) 2009-06-24 2010-12-30 Alios Biopharma, Inc. 2-5a analogs and their methods of use
WO2011005860A2 (en) 2009-07-07 2011-01-13 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. 5' phosphate mimics
US8455451B2 (en) 2009-09-21 2013-06-04 Gilead Sciences, Inc. 2'-fluoro substituted carba-nucleoside analogs for antiviral treatment
US7973013B2 (en) 2009-09-21 2011-07-05 Gilead Sciences, Inc. 2'-fluoro substituted carba-nucleoside analogs for antiviral treatment
US8552021B2 (en) 2009-09-29 2013-10-08 Janssen Products, L.P. Phosphoramidate derivatives of nucleosides
JP5779799B2 (ja) 2009-11-16 2015-09-16 ユニバーシティ オブ ジョージア リサーチ ファウンデーション， インコーポレーテッド ２’−フルオロ−６’−メチレン炭素環ヌクレオシド類、及びウイルス感染の治療法
US8816074B2 (en) 2009-11-16 2014-08-26 University of Georgia Foundation, Inc. 2′-fluoro-6′-methylene carbocyclic nucleosides and methods of treating viral infections
MY159958A (en) 2009-12-18 2017-02-15 Idenix Pharmaceuticals Inc 5,5-fused arylene or heteroarylene hepatitis c virus inhibitors
US8333309B2 (en) 2010-03-02 2012-12-18 Kenneth Riddleberger Hunter's adjustable encapsulating scent adsorption system with combination pack and detachably securable flexible funnel for human odor adsorption
BR112012024884A2 (pt) 2010-03-31 2016-10-18 Gilead Pharmasset Llc síntese estereosseletiva de ativos contendo fósforo
MX2012011222A (es) * 2010-04-01 2013-01-18 Centre Nat Rech Scient Compuestos y composiciones farmaceuticas para el tratamiento de infecciones virales.
CN102939291B (zh) 2010-04-14 2016-09-07 加利福尼亚大学董事会 用于病毒感染治疗的具有降低的毒性的膦酸酯
TW201201815A (en) 2010-05-28 2012-01-16 Gilead Sciences Inc 1'-substituted-carba-nucleoside prodrugs for antiviral treatment
BR112013001267A2 (pt) 2010-07-19 2016-05-17 Gilead Sciences Inc métodos para a preparação de pró-fármacos de fosforamidato diasteromericamente puro
CA2809261A1 (en) 2010-08-26 2012-03-01 Rfs Pharma, Llc Potent and selective inhibitors of hepatitis c virus
WO2012040124A1 (en) 2010-09-22 2012-03-29 Alios Biopharma, Inc. Azido nucleosides and nucleotide analogs
WO2012040126A1 (en) 2010-09-22 2012-03-29 Alios Biopharma, Inc. Substituted nucleotide analogs
PE20140608A1 (es) 2010-09-22 2014-06-12 Alios Biopharma Inc Analogos de nucleotidos sustituidos
WO2012041965A1 (en) 2010-09-29 2012-04-05 Universidad Nacional De Quilmes Process for producing dialkylphosphotriesters of nucleosides by enzymatic transesterification and deprotection thereof for producing nucleoside monophosphates
WO2012048013A2 (en) 2010-10-06 2012-04-12 Inhibitex, Inc. Phosphorodiamidate derivatives of guanosine nucleoside compounds for treatment of viral injections
EP2638054B1 (en) 2010-11-10 2014-12-03 Janssen Products, L.P. Uracyl spirooxetane nucleoside phosphoramidates
AR084044A1 (es) 2010-11-30 2013-04-17 Pharmasset Inc Compuestos 2’-espiro-nucleosidos
TW201701876A (zh) * 2010-12-20 2017-01-16 吉李德科學股份有限公司 治療ｃ型肝炎病毒（ｈｃｖ）之方法
AU2011349278C1 (en) 2010-12-22 2017-01-19 Alios Biopharma, Inc. Cyclic nucleotide analogs
WO2012092484A2 (en) 2010-12-29 2012-07-05 Inhibitex, Inc. Substituted purine nucleosides, phosphoroamidate and phosphorodiamidate derivatives for treatment of viral infections
US9095599B2 (en) 2011-01-03 2015-08-04 Nanjing Molecular Research, Inc. O-(substituted benzyl) phosphoramidate compounds and therapeutic use
CN104974206B (zh) 2011-03-01 2019-08-23 努卡那生物医药有限责任公司 用于治疗癌症的5-氟-2’-脱氧尿苷的氨基磷酸酯衍生物
WO2012125900A1 (en) 2011-03-16 2012-09-20 Enanta Pharmaceuticals, Inc. 2'-allene-substituted nucleoside derivatives
WO2012154321A1 (en) 2011-03-31 2012-11-15 Idenix Pharmaceuticals, Inc. Compounds and pharmaceutical compositions for the treatment of viral infections
US9156872B2 (en) 2011-04-13 2015-10-13 Merck Sharp & Dohme Corp. 2′-azido substituted nucleoside derivatives and methods of use thereof for the treatment of viral diseases
US8877733B2 (en) 2011-04-13 2014-11-04 Gilead Sciences, Inc. 1′-substituted pyrimidine N-nucleoside analogs for antiviral treatment
BR112013026345A2 (pt) 2011-04-13 2019-04-24 Merck Sharp & Dohe Corp. composto, composição farmacêutica, uso de um composto, e, método para tratar um paciente infectado com hcv
EP2731433A4 (en) 2011-07-13 2014-12-31 Merck Sharp & Dohme 5'-SUBSTITUTED NUCLEOSIDE ANALOGUES AND METHODS OF USE FOR THE TREATMENT OF VIRAL DISEASES
AU2012290089B2 (en) 2011-08-01 2016-09-29 Mbc Pharma, Inc. Vitamin B6 derivatives of nucleotides, acyclonucleotides and acyclonucleoside phosphonates
AU2012308900A1 (en) 2011-09-12 2013-05-09 Idenix Pharmaceuticals, Inc. Compounds and pharmaceutical compositions for the treatment of viral infections
WO2013039920A1 (en) 2011-09-12 2013-03-21 Idenix Pharmaceuticals, Inc. Substituted carbonyloxymethylphosphoramidate compounds and pharmaceutical compositions for the treatment of viral infections
WO2013044030A1 (en) 2011-09-23 2013-03-28 Enanta Pharmaceuticals, Inc. 2'-chloroacetylenyl substituted nucleoside derivatives
EP2768838A1 (en) 2011-10-14 2014-08-27 IDENIX Pharmaceuticals, Inc. Substituted 3',5'-cyclic phosphates of purine nucleotide compounds and pharmaceutical compositions for the treatment of viral infections
US8889159B2 (en) 2011-11-29 2014-11-18 Gilead Pharmasset Llc Compositions and methods for treating hepatitis C virus
WO2013090420A2 (en) 2011-12-12 2013-06-20 Catabasis Pharmaceuticals, Inc. Fatty acid antiviral conjugates and their uses
GB2497580A (en) 2011-12-16 2013-06-19 Intercede Ltd Data transmission using a plurality of barcodes displayed in a loop
EP2794630A4 (en) 2011-12-22 2015-04-01 Alios Biopharma Inc SUBSTITUTED PHOSPHORTHIOAT NUCLEOTIDE ANALOGUE
CA2864098A1 (en) 2012-02-14 2013-08-22 University Of Georgia Research Foundation, Inc. Spiro[2.4]heptanes for treatment of flaviviridae infections
SI2820016T1 (sl) 2012-02-27 2017-11-30 Bristol-Myers Squibb Company N-(5s,6s,9r)-5-amino-6-(2,3-difluorofenil)-6,7,8,9-tetrahidro-5h- ciklohepta (b)piridin-9-il-4-(2-okso-2, 3-dihidro-1h-imidazo(4,5-b) piridin-1-il) piperidin-1-karboksilat, hemisulfatna sol
NZ630800A (en) 2012-03-21 2016-06-24 Alios Biopharma Inc Methods of preparing substituted nucleotide analogs
WO2013142159A1 (en) 2012-03-21 2013-09-26 Alios Biopharma, Inc. Pharmaceutical combinations comprising a thionucleotide analog
WO2013142157A1 (en) 2012-03-22 2013-09-26 Alios Biopharma, Inc. Pharmaceutical combinations comprising a thionucleotide analog
WO2013151975A1 (en) 2012-04-02 2013-10-10 Northeastern University Compositions and methods for the inhibition of methyltransferases
US9809616B2 (en) 2012-10-29 2017-11-07 Emory University Pyrimidine nucleosides and their monophosphate prodrugs for the treatment of viral infections and cancer
CN102659843B (zh) * 2012-04-24 2015-06-24 北京大学 D,l-鸟嘌呤核苷类似物单磷酸酯及其制备方法和应用
US8846638B2 (en) 2012-05-17 2014-09-30 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Macrocyclic nucleoside phosphoramidate derivatives
AP3913A (en) 2012-05-22 2016-11-26 Idenix Pharamaceuticals Inc D-amino acid compounds for liver disease
WO2013177188A1 (en) 2012-05-22 2013-11-28 Idenix Pharmaceuticals, Inc. 3',5'-cyclic phosphoramidate prodrugs for hcv infection
CN104640444B (zh) 2012-06-16 2016-12-14 河南美泰宝生物制药有限公司 双肝脏靶向氨基磷酸酯和氨基膦酸酯前药
EP2870169A1 (en) 2012-07-03 2015-05-13 Bristol-Myers Squibb Company Process for preparing diastereomerically enriched phosphoramidate derivatives of nucleoside compounds for treatment of viral infections
WO2014047117A1 (en) 2012-09-18 2014-03-27 Bristol-Myers Squibb Company Process for preparing phosphoramidate derivatives of nucleoside compounds for treatment of viral infections
EP2900682A1 (en) 2012-09-27 2015-08-05 IDENIX Pharmaceuticals, Inc. Esters and malonates of sate prodrugs
PE20151318A1 (es) 2012-10-08 2015-10-03 Idenix Pharmaceuticals Inc Analogos de 2'-cloro nucleosido para infeccion por vhc
WO2014063019A1 (en) 2012-10-19 2014-04-24 Idenix Pharmaceuticals, Inc. Dinucleotide compounds for hcv infection
MX2015006195A (es) * 2012-11-16 2015-12-08 Univ Cardiff Procedimiento para preparar profarmacos de nucleosidos.
US20140205566A1 (en) 2012-11-30 2014-07-24 Novartis Ag Cyclic nucleuoside derivatives and uses thereof
EP2935304A1 (en) 2012-12-19 2015-10-28 IDENIX Pharmaceuticals, Inc. 4'-fluoro nucleosides for the treatment of hcv
WO2014100498A1 (en) 2012-12-21 2014-06-26 Alios Biopharma, Inc. Substituted nucleosides, nucleotides and analogs thereof
KR102327888B1 (ko) 2012-12-21 2021-11-17 얀센 바이오파마, 인코퍼레이트. 치환된 뉴클레오사이드, 뉴클레오타이드 및 그것의 유사체
DK2950786T3 (da) 2013-01-31 2020-02-17 Gilead Pharmasset Llc Kombinationsformulering af to antivirale forbindelser
WO2014124430A1 (en) 2013-02-11 2014-08-14 Emory University Nucleotide and nucleoside therapeutic compositions and uses related thereto
US9339541B2 (en) 2013-03-04 2016-05-17 Merck Sharp & Dohme Corp. Thiophosphate nucleosides for the treatment of HCV
US9187515B2 (en) 2013-04-01 2015-11-17 Idenix Pharmaceuticals Llc 2′,4′-fluoro nucleosides for the treatment of HCV
CN105377868A (zh) 2013-04-12 2016-03-02 艾其林医药公司 用于治疗hcv的高活性核苷衍生物
CN103435672A (zh) 2013-04-25 2013-12-11 刘沛 含有取代苄基的新型核苷磷酸酯前药的结构与合成
EP3013340B9 (en) 2013-06-26 2023-10-04 Janssen Pharmaceuticals, Inc. Substituted nucleosides, nucleotides and analogs thereof
US20150011481A1 (en) 2013-07-02 2015-01-08 Abbvie Inc. Methods for Treating HCV
EP3043803B1 (en) 2013-09-11 2022-04-27 Emory University Nucleotide and nucleoside compositions and their uses
SG10201804835VA (en) 2013-10-11 2018-07-30 Alios Biopharma Inc Substituted nucleosides, nucleotides and analogs thereof
US8889701B1 (en) 2013-10-11 2014-11-18 Alla Chem, Llc Substituted (S)-(2R,3R,5R)-3-hydroxy-(5-pyrimidin-1-yl)tetrahydrofuran-2-ylmethyl aryl phosphoramidate
WO2015061683A1 (en) 2013-10-25 2015-04-30 Idenix Pharmaceuticals, Inc. D-amino acid phosphoramidate and d-alanine thiophosphoramidate pronucleotides of nucleoside compounds useful for the treatment of hcv
EP3063165A1 (en) 2013-11-01 2016-09-07 Idenix Pharmaceuticals LLC D-alanine phosphoramidate pronucleotides of 2'-methyl 2'-fluoro guanosine nucleoside compounds for the treatment of hcv
CN104211748B (zh) * 2013-11-15 2017-05-31 南京济群医药科技股份有限公司 6‑羟基双脱氧鸟嘌呤核苷磷酸酯制备和用途
US10030044B2 (en) 2013-11-27 2018-07-24 Idenix Pharmaceuticals Llc Nucleotides for the treatment of liver cancer
US20150150897A1 (en) 2013-12-02 2015-06-04 Gilead Pharmasset Llc Methods of treating hepatitis c virus infection in subjects with cirrhosis
WO2015095305A1 (en) 2013-12-17 2015-06-25 Idenix Pharmaceuticals, Inc. Production of cyclic phosphate, phosphoramidate, thiophosphate, and phosphonate nucleoside compounds
WO2015158913A1 (en) 2014-04-17 2015-10-22 Katholieke Universiteit Leuven Novel antiviral and antitumoral compounds
AU2015280234B2 (en) 2014-06-24 2021-04-01 Alios Biopharma, Inc. Substituted nucleosides, nucleotides and analogs thereof
HUE051986T2 (hu) 2014-06-24 2021-04-28 Janssen Biopharma Inc Helyettesített nukleozidok, nukleotidek és analógjaik virális fertõzés kezelésére való alkalmazásra
CN107108676A (zh) 2014-09-15 2017-08-29 美迪维尔公司 用于制备非对映异构纯的磷酰胺酯前药的方法
MA41441A (fr) 2014-12-19 2017-12-12 Alios Biopharma Inc Nucléosides substitués, nucléotides et analogues de ceux-ci
MA41213A (fr) 2014-12-19 2017-10-24 Alios Biopharma Inc Nucléosides substitués, nucléotides et analogues de ceux-ci
MY190867A (en) 2015-03-06 2022-05-13 Atea Pharmaceuticals Inc ? -d-2'-deoxy-2'-?-fluoro-2'- ? -c-substituted-2-modified-n6-substituted purine nucleotides for hcv treatment
WO2016145142A1 (en) 2015-03-10 2016-09-15 Emory University Nucleotide and nucleoside therapeutics compositions and uses related thereto
LU100724B1 (en) 2016-07-14 2018-07-31 Atea Pharmaceuticals Inc Beta-d-2'-deoxy-2'-alpha-fluoro-2'-beta-c-substituted-4'-fluoro-n6-substituted-6-amino-2-substituted purine nucleotides for the treatment of hepatitis c virus infection
EA037868B1 (ru) 2016-09-07 2021-05-28 Атеа Фармасьютикалс, Инк. 2'-замещенные-n6-замещенные пуриновые нуклеотиды для лечения вызванных рнк-вирусом заболеваний
JP7066728B2 (ja) * 2017-02-01 2022-05-13 アテア ファーマシューティカルズ， インコーポレイテッド Ｃ型肝炎ウイルスの治療のためのヌクレオチドヘミ硫酸塩
CN112351799A (zh) 2018-04-10 2021-02-09 阿堤亚制药公司 具有硬化的hcv感染患者的治疗

Patent Citations (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20040063658A1 (en) * 2002-05-06 2004-04-01 Roberts Christopher Don Nucleoside derivatives for treating hepatitis C virus infection
RU2358979C2 (ru) * 2003-05-30 2009-06-20 Фармассет, Инк. Модифицированные фторированные аналоги нуклеозида
WO2008121634A2 (en) * 2007-03-30 2008-10-09 Pharmasset, Inc. Nucleoside phosphoramidate prodrugs
US20100016251A1 (en) * 2007-03-30 2010-01-21 Pharmasset, Inc. Nucleoside phosphoramidate prodrugs
US20120135951A1 (en) * 2008-12-09 2012-05-31 Schinazi Ph D Raymond F 3'-azido purine nucleotide prodrugs for treatment of viral infections
US20110257121A1 (en) * 2010-03-31 2011-10-20 Pharmasset, Inc. Purine nucleoside phosphoramidate
WO2012158811A2 (en) * 2011-05-19 2012-11-22 Rfs Pharma, Llc Purine monophosphate prodrugs for treatment of viral infections
CN103980332A (zh) * 2013-12-09 2014-08-13 南京迈勒克生物技术研究中心 2′-氟-2′-(氟甲基)-2′-脱氧核苷类化合物及其磷酸酯潜药

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Freeman G.A. et al, "2`-amino-9-(3-azido-2,3-dideoxy-D-erythro-pentofuranosyl)-6-substituted-9h-purines: synthesis and anti-Hiv activity", Bioorganic and Medicinal Chemistry, 1995, vol 3, 447-458. *

Also Published As

Publication number Publication date
AU2020203055A1 (en) 2020-05-28
CO2017010162A2 (es) 2018-01-05
US20200308215A1 (en) 2020-10-01
MX2022015612A (es) 2023-02-13
CA2978085A1 (en) 2016-09-15
SG11201706841PA (en) 2017-09-28
IL254111A0 (en) 2017-10-31
GEP20247600B (en) 2024-02-26
US20220267366A1 (en) 2022-08-25
RU2017133011A3 (ru) 2019-09-13
US10870673B2 (en) 2020-12-22
CN107427530B (zh) 2020-09-08
US20240002426A1 (en) 2024-01-04
US9828410B2 (en) 2017-11-28
CN107427530A (zh) 2017-12-01
AU2018282469A1 (en) 2019-01-24
US20200331955A1 (en) 2020-10-22
US20180282364A1 (en) 2018-10-04
UA124966C2 (uk) 2021-12-22
US10239911B2 (en) 2019-03-26
US20160257706A1 (en) 2016-09-08
SA517382236B1 (ar) 2022-09-07
JP2018507261A (ja) 2018-03-15
CN112209980B (zh) 2023-12-05
US10875885B2 (en) 2020-12-29
EP3265102A4 (en) 2018-12-05
EA037098B1 (ru) 2021-02-05
AU2016229966A8 (en) 2017-10-12
US20190177356A1 (en) 2019-06-13
CA2978085C (en) 2023-01-17
US20180030082A1 (en) 2018-02-01
KR20220025914A (ko) 2022-03-03
AU2021204022A1 (en) 2021-07-08
GEP20237502B (en) 2023-04-25
IL295418B1 (en) 2023-06-01
US10870672B2 (en) 2020-12-22
CA3182565A1 (en) 2016-09-15
AU2016229966A1 (en) 2017-09-14
EA201791903A1 (ru) 2018-01-31
MX2017011386A (es) 2018-04-26
JP6776273B2 (ja) 2020-10-28
KR102363946B1 (ko) 2022-02-17
BR112017018977A2 (pt) 2018-05-22
WO2016144918A1 (en) 2016-09-15
IL295418B2 (en) 2023-10-01
IL254111B (en) 2021-04-29
EP3265102A1 (en) 2018-01-10
AU2020203055B2 (en) 2021-03-25
US20200331956A1 (en) 2020-10-22
NZ734908A (en) 2021-10-29
RU2017133011A (ru) 2019-04-09
AU2021204022B2 (en) 2023-05-18
AU2016229966B2 (en) 2018-09-27
MY190867A (en) 2022-05-13
US20180030081A1 (en) 2018-02-01
AU2023202634A1 (en) 2023-05-18
JP7053754B2 (ja) 2022-04-12
GEP20217282B (en) 2021-08-10
JP2021008494A (ja) 2021-01-28
CN112209980A (zh) 2021-01-12
PH12017501598A1 (en) 2018-02-12
AU2018282469B2 (en) 2020-02-13
ZA201705852B (en) 2019-11-27
JP2022088596A (ja) 2022-06-14
IL295418A (en) 2022-10-01
HK1247829A1 (zh) 2018-10-05
IL302877A (en) 2023-07-01
US10005811B2 (en) 2018-06-26
KR20170120700A (ko) 2017-10-31
US10000523B2 (en) 2018-06-19
US10815266B2 (en) 2020-10-27
US20210009628A1 (en) 2021-01-14

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RU2764767C2 (ru) β-D-2'-ДЕЗОКСИ-2'-α-ФТОР-2'-β-С-ЗАМЕЩЕННЫЕ-2-МОДИФИЦИРОВАННЫЕ-N6-ЗАМЕЩЕННЫЕ ПУРИНОВЫЕ НУКЛЕОТИДЫ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ВЫЗВАННЫХ HCV ЗАБОЛЕВАНИЙ
BR112017018977B1 (pt) Compostos nucleotídicos, composição farmacêutica, e, uso de um composto